肥料、土壌改良剤又は下水処理調整剤の製造方法
【課題】鶏糞焼却灰を有効利用することにより、安全性が高く、かつ、植物の成長促進に欠かせない燐を供給する堆肥等の肥料、栽培土壌の改良剤又は工場排水、下水排水等の下水処理調整剤の製造方法を提供する。
【解決手段】好気性菌群５５％と嫌気性菌群４５％とよりなる有効微生物群をオカラに混入して、４０〜２００℃の温度にて２４時間一次発酵させてなる床材と、鶏糞焼却灰とを混合し、これに好アルカリ性のバチルス属タテヤマ剣と、好アルカリ性のバチルス属タテヤマ薬師と、好塩性のバチルス属タテヤマ浄土と、嫌気性菌のアトポスティペス属タテヤマ女汝と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属タテヤマ竜王とよりなる有効微生物群を混入し、更に、これを６０〜８０℃の温度にて４８時間二次発酵させることを特徴とする肥料、土壌改良剤又は下水処理調整剤の製造方法。
【解決手段】好気性菌群５５％と嫌気性菌群４５％とよりなる有効微生物群をオカラに混入して、４０〜２００℃の温度にて２４時間一次発酵させてなる床材と、鶏糞焼却灰とを混合し、これに好アルカリ性のバチルス属タテヤマ剣と、好アルカリ性のバチルス属タテヤマ薬師と、好塩性のバチルス属タテヤマ浄土と、嫌気性菌のアトポスティペス属タテヤマ女汝と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属タテヤマ竜王とよりなる有効微生物群を混入し、更に、これを６０〜８０℃の温度にて４８時間二次発酵させることを特徴とする肥料、土壌改良剤又は下水処理調整剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、環境基準値を超える鉛、六価クロム又はセレンを含む廃棄することができない鶏糞焼却灰を環境基準値以内の安全な状態まで改良し、鶏糞焼却灰の強アルカリ性を中性まで改良し、米、野菜、果物等の各種農作物の栽培に用いられる堆肥等の肥料、栽培土壌の改良剤又は工場排水、下水排水等の下水処理調整剤の製造方法に関するものである。
なお、本発明における「肥料」には、残留農薬等の農薬、硝酸塩ないし硝酸態窒素濃度を減少し、無害化する有機肥料が含まれるものとする。
【背景技術】
【０００２】
生鶏糞は水分含有率が高く、燐を多く含むため、生鶏糞の処理方法としては、生鶏糞を発酵させて堆肥として利用し、或いは焼却して廃棄するという方法が行なわれている。
【０００３】
しかしながら、鳥インフルエンザの社会問題に対処すると共に鶏飼料の長期保存性を向上させるために、鶏飼料に消毒剤、防腐剤等が使用されている結果、化学物質が鶏飼料中に残留して鶏の健康被害が生じ、加えて鶏の病害被害予防のために鶏に抗生物質等も使用されている。したがって、鶏糞は、熱処理又は焼却しなければ堆肥としても利用できない。また、鶏糞の減量化の観点からも、鶏糞は焼却されることが多い。
【０００４】
本発明者は、特許第３７１０４２４号公報に示すように、配合株数の割合が好気性菌群５５％と嫌気性菌群４５％とよりなる有効微生物群を有機廃棄物に混入して４０〜２００℃の温度にて２４時間一次発酵させ、更にこれに配合株数の割合が好気性菌群５５％と嫌気性菌群４５％とよりなる有効微生物群を混入し、これを被処理物と共に１００〜２００℃の温度にて２４〜４８時間二次発酵させることにより、該被処理物に含まれる重金属、ダイオキシン類又は農薬を分解させる方法を提供している。
【特許文献１】特許第３７１０４２４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
鶏糞を焼却処分した場合、その焼却灰には鉛、六価クロム、セレン等が環境基準を超えて含まれているため、該焼却灰はそのまま廃棄することができないものである。しかるに、鶏糞焼却灰が不法投棄されるという事件も多発している。
【０００６】
このような状況に鑑み、本発明は、鶏糞焼却灰を有効利用することにより、安全性が高く、かつ、植物の成長促進に欠かせない燐を供給する堆肥等の肥料、栽培土壌の改良剤又は工場排水、下水排水等の下水処理調整剤の製造方法を提供しようとしてなされたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するために、本発明は、下記の肥料、土壌改良剤又は下水処理調整剤の製造方法を提供する。
【０００８】
（１）好気性菌群５５％と嫌気性菌群４５％とよりなる有効微生物群をオカラに混入し、４０〜２００℃の温度にて２４時間一次発酵させてなる床材と、鶏糞焼却灰とを混合し、
これに好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９１と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師ＦＥＲＭ ＢＰ−１０６９２と、好塩性のバチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ浄土ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９３と、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９０と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９４とよりなる有効微生物群を混入し、
更に、これを６０〜８０℃の温度にて４８時間二次発酵させることを特徴とする肥料、土壌改良剤又は下水処理調整剤の製造方法。
【０００９】
（２）前記鶏糞焼却灰に含まれる環境基準値を超える鉛、六価クロム又はセレンを環境基準値以内の安全な状態まで改良する（請求項２）。
【００１０】
（３）前記鶏糞焼却灰の強アルカリ性（pH１３）を中性まで改良する（請求項３）。
【００１１】
（４）前記鶏糞焼却灰を改良することにより該鶏糞焼却灰の再利用ないし再資源化をする（請求項４）。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、好気性菌群５５％と嫌気性菌群４５％とよりなる有効微生物群をオカラに混入し、４０〜２００℃の温度にて２４時間一次発酵させてなる床材と、鶏糞焼却灰とを混合し、これに好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９１と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師ＦＥＲＭ ＢＰ−１０６９２と、好塩性のバチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ浄土ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９３と、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９０と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９４とよりなる有効微生物群を混入し、更に、これを６０〜８０℃の温度にて４８時間二次発酵させることにより、鶏糞焼却灰の再利用ないし再資源化を図ることができ、安全性が高く、かつ、植物の成長促進に欠かせない燐を含む堆肥等の肥料、栽培土壌の改良剤又は工場排水、下水排水等の下水処理調整剤を得ることができる。
【００１３】
本発明による肥料、土壌改良剤又は下水処理調整剤の製造方法は、鶏糞焼却灰に含まれる環境基準値を超える鉛、六価クロム又はセレンを環境基準値以内の安全な状態まで改良し、鶏糞焼却灰の強アルカリ性ないしアルカリ性を中性まで改良するものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
本発明においては、配合菌数の割合が好気性菌群約５５％と嫌気性菌群約４５％とよりなる有用微生物群を使用する。
【００１５】
有効微生物群には次のものが含まれる。
酵母菌、セルロース分解菌、窒素固定菌、乳酸菌、糸状菌（芳香族化合物分解菌）、マンガン還元菌（クロカビ属群−原生担子菌類）、マンガン酸化菌（有機栄養菌）、アンモニア酸化菌（亜硝酸菌）、放線菌（キチン分解菌）、硝酸菌（硝化生成細菌）、硫黄細菌（硫化水素を水素供与体として利用する細菌群）、メタン酸化菌、セルロース放線菌、セルロース糸状菌、納豆菌、リグニン分解菌、鉄酸化菌、鉄還元菌、硫酸還元菌、酢酸菌、バチルス属（Bacillus sp.）、スポロサルシナ属（Sporosarcina sp.）、ペニバチルス属（Paenibacillus sp.）、オーシャノバチルス属（Oceanobacillus sp.）。
【００１６】
上記有効微生物群をオカラに混入して約４０〜２００℃の温度にて約２４時間一次発酵させて床材となす。
【００１７】
有効微生物群は、オカラ１,０００kg（湿重量）に対し、１kg（湿重量）の割合で混合し、床材となす。
【００１８】
上記の如く一次発酵させてなる床材に鶏糞焼却灰を混合し、これに好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９１と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師ＦＥＲＭ ＢＰ−１０６９２と、好塩性のバチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ浄土ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９３と、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９０と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９４とよりなる有効微生物群を混入し、更に、これを６０〜８０℃の温度にて４８時間二次発酵（二次強制発酵）させる。
【００１９】
なお、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝（ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９０）と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣（ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９１）と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０６９２）と、好塩性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ浄土（ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９３）と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王（ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９４）は、それぞれ独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託されている。
【００２０】
二次発酵における鶏糞焼却灰は、例えば、床材３０kg（湿重量）に対して約１２kg（湿重量）の割合で混合する。
【００２１】
二次発酵における好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９１と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師ＦＥＲＭ ＢＰ−１０６９２と、好塩性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ浄土ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９３と、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９０と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９４とよりなる有効微生物群は、例えば、床材と鶏糞焼却灰との混合物４２kg（湿重量）に対して、培養物を約１kg（湿重量）の割合で使用する。
【００２２】
以上により、環境基準値を超える鉛、六価クロム又はセレンを含む廃棄することができない鶏糞焼却灰を環境基準値以内の安全な状態まで改良し、鶏糞焼却灰の強アルカリ性を中性まで改良し、かつ、植物の成長促進に欠かせない燐を供給する堆肥等の肥料、栽培土壌の改良剤又は工場排水、下水排水等の下水処理調整剤を製造することができる。
【実施例１】
【００２３】
好気性細菌と嫌気性細菌と好アルカリ性細菌と好塩性細菌とを含む有用微生物群１重量部（湿重量）をオカラ１,０００重量部（湿重量）に混入し、これを４０〜２００℃の温度にて２４時間一次発酵させてなる床材３０kg（湿重量）と鶏糞焼却灰１２kg（湿重量）とを混合し、更にこれに好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ薬師と、好塩性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ浄土と嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王とよりなる有効微生物群の培養物１ｋｇ（湿重量）を混入し、６０〜８０℃の温度にて４８時間二次発酵させて水分含有率を５０％にした。
元の鶏糞焼却灰に含まれていた鉛又はその化合物、六価クロム化合物、ひ素又はその化合物、セレン又はその化合物、水素イオン濃度（ｐＨ）、並びに製造後における鉛又はその化合物、六価クロム化合物、ひ素又はその化合物、セレン又はその化合物、水素イオン濃度（ｐＨ）について溶出試験を実施した。
【００２４】
溶出試験は、平成３年環境庁告示第４６号「土壌の汚染に関わる環境基準について」による。表１は、元の鶏糞焼却灰に含まれていた鉛又はその化合物、六価クロム化合物、ひ素又はその化合物、セレン又はその化合物、水素イオン濃度（pH）を示す。表２は、製造後における鉛又はその化合物、六価クロム化合物、ひ素又はその化合物、セレン又はその化合物、水素イオン濃度（pH）を示す。
【００２５】
元の鶏糞焼却灰においては、環境基準を超える鉛又はその化合物、六価クロム化合物、セレン又はその化合物が存在していたが、製造後には、全ての濃度が環境基準以下に改良されたことが確認された。
【００２６】
水素イオン濃度（pH）は、元の鶏糞焼却灰で１３とアルカリ性であったが、製造後には６.５と中性域へと改良されていたことが確認された。
【００２７】
【表１】
【００２８】
【表２】
【００２９】
好アルカリ性のバチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ剣と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師と、好塩性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ浄土と、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王とについて、同定を実施した。以下、同定方法及び微生物試験結果を示す。
【００３０】
細菌第一段階試験として、光学顕微鏡U-LH１,０００（オリンパス，日本）により、細胞形態、グラム染色性、胞子の有無及び鞭毛による運動性の有無を観察した。NUTRIENT AGAR （OXOID, HAMPSHIRE, ENGLAND）（以下「NT」という。）又はGAM寒天培地（ニッスイ, 東京）（以下「GAM」という。）でのコロニー形態を観察した。カタラーゼ反応、オキシダーゼ反応、グルコースからの酸／ガス産生及びブドウ糖の酸化／発酵（O／F）について試験を行った。
菌学的性状試験結果を表３に示す。
【００３１】
【表３】
【００３２】
次に１６S rDNA塩基配列の遺伝子解析を実施した。ゲノムDNAの抽出には、INSTAGENE MATRIX（BIO RAD, CA, USA）を使用した。抽出したゲノムＤＮＡを鋳型として、PCRにより全塩基配列約１,５００〜１,６００塩基対の領域を増幅した。その後、増幅された１６S rDNAをシーケンスし、塩基配列を得た。PCR産物の精製、サイクルシークエンスにはBIGDYE TERMINATOR V３.１ CYCLE SEQUENCING KIT（APPLIED BIOSYSTEMS, CA, U.S.A.）を使用した。サーマルサイクラーにはPRIMESTAR HS DNA POLYMERASE（タカラバイオ, 滋賀）、DNAシーケンサーにはABI PRISM ３１００ GENETIC ANALYZER SYSTEM（APPLIED BIOSYSTEMS,
CA, U.S.A.）を使用した。なおプライマーは、文献「放線菌の同定と分類, p８８-１１７, 日本学会事務センター, ２００１.」に従った。
【００３３】
１６S rDNAの塩基配列の解析結果を、バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣については表４に、バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師については表５に、バチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ浄土については表６に、アトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝については表７に、クロストリディウム属（Clostridium
sp.）タテヤマ竜王については表８に、それぞれ示す。
【００３４】
【表４】
【００３５】
【表５】
【００３６】
【表６】
【００３７】
【表７】
【００３８】
【表８】
【００３９】
上記塩基配列をアポロンDB細菌基準株データベース（テクノスルガ, 静岡） を用いて相同性検索を行い、得られた１６S rDNAの塩基配列から検体と近縁と考えられる種の相同性検索を行い、上位５株を決定した。
相同性検索結果を、バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣については表９に、バチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ薬師については表１０に、バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ浄土については表１１に、アトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝については表１２に、クロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王については表１３に、それぞれ示す。
【００４０】
【表９】
【００４１】
【表１０】
【００４２】
【表１１】
【００４３】
【表１２】
【００４４】
【表１３】
【００４５】
これまで得られた情報をもとにCLUSTAL
WとMEGA VER３.１を用いて、１６S rDNA塩基配列とこれに近縁と考えられる菌群の１６S rDNA塩基配列とを用いて分子系統樹を構築した。分子系統樹の推定には近隣結合法を用い、樹型の妥当性を示すブートストラップは１０００回発生させた。
なお、CLUSTAL Wは文献「Nucleic Acids Research, １９９４, ２２:４６７３-４６８０.」、MEGAは文献「Briefings in Bioinformatics, ２００４, ５, １５０-１６３.」に従った。
分子系統解析結果を、バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣とバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師とについては図１に、バチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ浄土については図２に、アトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝については図３に、クロストリディウム属（Clostridium
sp.）については図４に、それぞれ示す。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣とバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師の分子系統樹である。
【図２】バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ浄土の分子系統樹である。
【図３】アトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝の分子系統樹である。
【図４】アトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝の分子系統樹である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、環境基準値を超える鉛、六価クロム又はセレンを含む廃棄することができない鶏糞焼却灰を環境基準値以内の安全な状態まで改良し、鶏糞焼却灰の強アルカリ性を中性まで改良し、米、野菜、果物等の各種農作物の栽培に用いられる堆肥等の肥料、栽培土壌の改良剤又は工場排水、下水排水等の下水処理調整剤の製造方法に関するものである。
なお、本発明における「肥料」には、残留農薬等の農薬、硝酸塩ないし硝酸態窒素濃度を減少し、無害化する有機肥料が含まれるものとする。
【背景技術】
【０００２】
生鶏糞は水分含有率が高く、燐を多く含むため、生鶏糞の処理方法としては、生鶏糞を発酵させて堆肥として利用し、或いは焼却して廃棄するという方法が行なわれている。
【０００３】
しかしながら、鳥インフルエンザの社会問題に対処すると共に鶏飼料の長期保存性を向上させるために、鶏飼料に消毒剤、防腐剤等が使用されている結果、化学物質が鶏飼料中に残留して鶏の健康被害が生じ、加えて鶏の病害被害予防のために鶏に抗生物質等も使用されている。したがって、鶏糞は、熱処理又は焼却しなければ堆肥としても利用できない。また、鶏糞の減量化の観点からも、鶏糞は焼却されることが多い。
【０００４】
本発明者は、特許第３７１０４２４号公報に示すように、配合株数の割合が好気性菌群５５％と嫌気性菌群４５％とよりなる有効微生物群を有機廃棄物に混入して４０〜２００℃の温度にて２４時間一次発酵させ、更にこれに配合株数の割合が好気性菌群５５％と嫌気性菌群４５％とよりなる有効微生物群を混入し、これを被処理物と共に１００〜２００℃の温度にて２４〜４８時間二次発酵させることにより、該被処理物に含まれる重金属、ダイオキシン類又は農薬を分解させる方法を提供している。
【特許文献１】特許第３７１０４２４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
鶏糞を焼却処分した場合、その焼却灰には鉛、六価クロム、セレン等が環境基準を超えて含まれているため、該焼却灰はそのまま廃棄することができないものである。しかるに、鶏糞焼却灰が不法投棄されるという事件も多発している。
【０００６】
このような状況に鑑み、本発明は、鶏糞焼却灰を有効利用することにより、安全性が高く、かつ、植物の成長促進に欠かせない燐を供給する堆肥等の肥料、栽培土壌の改良剤又は工場排水、下水排水等の下水処理調整剤の製造方法を提供しようとしてなされたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するために、本発明は、下記の肥料、土壌改良剤又は下水処理調整剤の製造方法を提供する。
【０００８】
（１）好気性菌群５５％と嫌気性菌群４５％とよりなる有効微生物群をオカラに混入し、４０〜２００℃の温度にて２４時間一次発酵させてなる床材と、鶏糞焼却灰とを混合し、
これに好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９１と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師ＦＥＲＭ ＢＰ−１０６９２と、好塩性のバチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ浄土ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９３と、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９０と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９４とよりなる有効微生物群を混入し、
更に、これを６０〜８０℃の温度にて４８時間二次発酵させることを特徴とする肥料、土壌改良剤又は下水処理調整剤の製造方法。
【０００９】
（２）前記鶏糞焼却灰に含まれる環境基準値を超える鉛、六価クロム又はセレンを環境基準値以内の安全な状態まで改良する（請求項２）。
【００１０】
（３）前記鶏糞焼却灰の強アルカリ性（pH１３）を中性まで改良する（請求項３）。
【００１１】
（４）前記鶏糞焼却灰を改良することにより該鶏糞焼却灰の再利用ないし再資源化をする（請求項４）。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、好気性菌群５５％と嫌気性菌群４５％とよりなる有効微生物群をオカラに混入し、４０〜２００℃の温度にて２４時間一次発酵させてなる床材と、鶏糞焼却灰とを混合し、これに好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９１と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師ＦＥＲＭ ＢＰ−１０６９２と、好塩性のバチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ浄土ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９３と、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９０と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９４とよりなる有効微生物群を混入し、更に、これを６０〜８０℃の温度にて４８時間二次発酵させることにより、鶏糞焼却灰の再利用ないし再資源化を図ることができ、安全性が高く、かつ、植物の成長促進に欠かせない燐を含む堆肥等の肥料、栽培土壌の改良剤又は工場排水、下水排水等の下水処理調整剤を得ることができる。
【００１３】
本発明による肥料、土壌改良剤又は下水処理調整剤の製造方法は、鶏糞焼却灰に含まれる環境基準値を超える鉛、六価クロム又はセレンを環境基準値以内の安全な状態まで改良し、鶏糞焼却灰の強アルカリ性ないしアルカリ性を中性まで改良するものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
本発明においては、配合菌数の割合が好気性菌群約５５％と嫌気性菌群約４５％とよりなる有用微生物群を使用する。
【００１５】
有効微生物群には次のものが含まれる。
酵母菌、セルロース分解菌、窒素固定菌、乳酸菌、糸状菌（芳香族化合物分解菌）、マンガン還元菌（クロカビ属群−原生担子菌類）、マンガン酸化菌（有機栄養菌）、アンモニア酸化菌（亜硝酸菌）、放線菌（キチン分解菌）、硝酸菌（硝化生成細菌）、硫黄細菌（硫化水素を水素供与体として利用する細菌群）、メタン酸化菌、セルロース放線菌、セルロース糸状菌、納豆菌、リグニン分解菌、鉄酸化菌、鉄還元菌、硫酸還元菌、酢酸菌、バチルス属（Bacillus sp.）、スポロサルシナ属（Sporosarcina sp.）、ペニバチルス属（Paenibacillus sp.）、オーシャノバチルス属（Oceanobacillus sp.）。
【００１６】
上記有効微生物群をオカラに混入して約４０〜２００℃の温度にて約２４時間一次発酵させて床材となす。
【００１７】
有効微生物群は、オカラ１,０００kg（湿重量）に対し、１kg（湿重量）の割合で混合し、床材となす。
【００１８】
上記の如く一次発酵させてなる床材に鶏糞焼却灰を混合し、これに好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９１と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師ＦＥＲＭ ＢＰ−１０６９２と、好塩性のバチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ浄土ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９３と、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９０と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９４とよりなる有効微生物群を混入し、更に、これを６０〜８０℃の温度にて４８時間二次発酵（二次強制発酵）させる。
【００１９】
なお、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝（ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９０）と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣（ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９１）と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０６９２）と、好塩性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ浄土（ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９３）と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王（ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９４）は、それぞれ独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託されている。
【００２０】
二次発酵における鶏糞焼却灰は、例えば、床材３０kg（湿重量）に対して約１２kg（湿重量）の割合で混合する。
【００２１】
二次発酵における好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９１と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師ＦＥＲＭ ＢＰ−１０６９２と、好塩性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ浄土ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９３と、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９０と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９４とよりなる有効微生物群は、例えば、床材と鶏糞焼却灰との混合物４２kg（湿重量）に対して、培養物を約１kg（湿重量）の割合で使用する。
【００２２】
以上により、環境基準値を超える鉛、六価クロム又はセレンを含む廃棄することができない鶏糞焼却灰を環境基準値以内の安全な状態まで改良し、鶏糞焼却灰の強アルカリ性を中性まで改良し、かつ、植物の成長促進に欠かせない燐を供給する堆肥等の肥料、栽培土壌の改良剤又は工場排水、下水排水等の下水処理調整剤を製造することができる。
【実施例１】
【００２３】
好気性細菌と嫌気性細菌と好アルカリ性細菌と好塩性細菌とを含む有用微生物群１重量部（湿重量）をオカラ１,０００重量部（湿重量）に混入し、これを４０〜２００℃の温度にて２４時間一次発酵させてなる床材３０kg（湿重量）と鶏糞焼却灰１２kg（湿重量）とを混合し、更にこれに好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ薬師と、好塩性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ浄土と嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王とよりなる有効微生物群の培養物１ｋｇ（湿重量）を混入し、６０〜８０℃の温度にて４８時間二次発酵させて水分含有率を５０％にした。
元の鶏糞焼却灰に含まれていた鉛又はその化合物、六価クロム化合物、ひ素又はその化合物、セレン又はその化合物、水素イオン濃度（ｐＨ）、並びに製造後における鉛又はその化合物、六価クロム化合物、ひ素又はその化合物、セレン又はその化合物、水素イオン濃度（ｐＨ）について溶出試験を実施した。
【００２４】
溶出試験は、平成３年環境庁告示第４６号「土壌の汚染に関わる環境基準について」による。表１は、元の鶏糞焼却灰に含まれていた鉛又はその化合物、六価クロム化合物、ひ素又はその化合物、セレン又はその化合物、水素イオン濃度（pH）を示す。表２は、製造後における鉛又はその化合物、六価クロム化合物、ひ素又はその化合物、セレン又はその化合物、水素イオン濃度（pH）を示す。
【００２５】
元の鶏糞焼却灰においては、環境基準を超える鉛又はその化合物、六価クロム化合物、セレン又はその化合物が存在していたが、製造後には、全ての濃度が環境基準以下に改良されたことが確認された。
【００２６】
水素イオン濃度（pH）は、元の鶏糞焼却灰で１３とアルカリ性であったが、製造後には６.５と中性域へと改良されていたことが確認された。
【００２７】
【表１】
【００２８】
【表２】
【００２９】
好アルカリ性のバチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ剣と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師と、好塩性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ浄土と、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王とについて、同定を実施した。以下、同定方法及び微生物試験結果を示す。
【００３０】
細菌第一段階試験として、光学顕微鏡U-LH１,０００（オリンパス，日本）により、細胞形態、グラム染色性、胞子の有無及び鞭毛による運動性の有無を観察した。NUTRIENT AGAR （OXOID, HAMPSHIRE, ENGLAND）（以下「NT」という。）又はGAM寒天培地（ニッスイ, 東京）（以下「GAM」という。）でのコロニー形態を観察した。カタラーゼ反応、オキシダーゼ反応、グルコースからの酸／ガス産生及びブドウ糖の酸化／発酵（O／F）について試験を行った。
菌学的性状試験結果を表３に示す。
【００３１】
【表３】
【００３２】
次に１６S rDNA塩基配列の遺伝子解析を実施した。ゲノムDNAの抽出には、INSTAGENE MATRIX（BIO RAD, CA, USA）を使用した。抽出したゲノムＤＮＡを鋳型として、PCRにより全塩基配列約１,５００〜１,６００塩基対の領域を増幅した。その後、増幅された１６S rDNAをシーケンスし、塩基配列を得た。PCR産物の精製、サイクルシークエンスにはBIGDYE TERMINATOR V３.１ CYCLE SEQUENCING KIT（APPLIED BIOSYSTEMS, CA, U.S.A.）を使用した。サーマルサイクラーにはPRIMESTAR HS DNA POLYMERASE（タカラバイオ, 滋賀）、DNAシーケンサーにはABI PRISM ３１００ GENETIC ANALYZER SYSTEM（APPLIED BIOSYSTEMS,
CA, U.S.A.）を使用した。なおプライマーは、文献「放線菌の同定と分類, p８８-１１７, 日本学会事務センター, ２００１.」に従った。
【００３３】
１６S rDNAの塩基配列の解析結果を、バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣については表４に、バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師については表５に、バチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ浄土については表６に、アトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝については表７に、クロストリディウム属（Clostridium
sp.）タテヤマ竜王については表８に、それぞれ示す。
【００３４】
【表４】
【００３５】
【表５】
【００３６】
【表６】
【００３７】
【表７】
【００３８】
【表８】
【００３９】
上記塩基配列をアポロンDB細菌基準株データベース（テクノスルガ, 静岡） を用いて相同性検索を行い、得られた１６S rDNAの塩基配列から検体と近縁と考えられる種の相同性検索を行い、上位５株を決定した。
相同性検索結果を、バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣については表９に、バチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ薬師については表１０に、バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ浄土については表１１に、アトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝については表１２に、クロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王については表１３に、それぞれ示す。
【００４０】
【表９】
【００４１】
【表１０】
【００４２】
【表１１】
【００４３】
【表１２】
【００４４】
【表１３】
【００４５】
これまで得られた情報をもとにCLUSTAL
WとMEGA VER３.１を用いて、１６S rDNA塩基配列とこれに近縁と考えられる菌群の１６S rDNA塩基配列とを用いて分子系統樹を構築した。分子系統樹の推定には近隣結合法を用い、樹型の妥当性を示すブートストラップは１０００回発生させた。
なお、CLUSTAL Wは文献「Nucleic Acids Research, １９９４, ２２:４６７３-４６８０.」、MEGAは文献「Briefings in Bioinformatics, ２００４, ５, １５０-１６３.」に従った。
分子系統解析結果を、バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣とバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師とについては図１に、バチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ浄土については図２に、アトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝については図３に、クロストリディウム属（Clostridium
sp.）については図４に、それぞれ示す。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣とバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師の分子系統樹である。
【図２】バチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ浄土の分子系統樹である。
【図３】アトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝の分子系統樹である。
【図４】アトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝の分子系統樹である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
好気性菌群５５％と嫌気性菌群４５％とよりなる有効微生物群をオカラに混入し、４０〜２００℃の温度にて２４時間一次発酵させてなる床材と、鶏糞焼却灰とを混合し、
これに好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９１と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師ＦＥＲＭ ＢＰ−１０６９２と、好塩性のバチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ浄土ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９３と、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９０と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９４とよりなる有効微生物群を混入し、
更に、これを６０〜８０℃の温度にて４８時間二次発酵させることを特徴とする肥料、土壌改良剤又は下水処理調整剤の製造方法。
【請求項２】
前記鶏糞焼却灰に含まれる環境基準値を超える鉛、六価クロム又はセレンを環境基準値以内の安全な状態まで改良することを特徴とする請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
前記鶏糞焼却灰の強アルカリ性を中性まで改良することを特徴とする請求項１に記載の製造方法。
【請求項４】
前記鶏糞焼却灰を改良することにより該鶏糞焼却灰の再利用ないし再資源化をすることができることを特徴とする請求項２又は３に記載の製造方法。
【請求項１】
好気性菌群５５％と嫌気性菌群４５％とよりなる有効微生物群をオカラに混入し、４０〜２００℃の温度にて２４時間一次発酵させてなる床材と、鶏糞焼却灰とを混合し、
これに好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ剣ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９１と、好アルカリ性のバチルス属（Bacillus sp.）タテヤマ薬師ＦＥＲＭ ＢＰ−１０６９２と、好塩性のバチルス属（Bacillus
sp.）タテヤマ浄土ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９３と、嫌気性菌のアトポスティペス属（Atopostipes sp.）タテヤマ女汝ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９０と、嫌気性かつ好塩性のクロストリディウム属（Clostridium sp.）タテヤマ竜王ＦＥＲＭ ＢＰ-１０６９４とよりなる有効微生物群を混入し、
更に、これを６０〜８０℃の温度にて４８時間二次発酵させることを特徴とする肥料、土壌改良剤又は下水処理調整剤の製造方法。
【請求項２】
前記鶏糞焼却灰に含まれる環境基準値を超える鉛、六価クロム又はセレンを環境基準値以内の安全な状態まで改良することを特徴とする請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
前記鶏糞焼却灰の強アルカリ性を中性まで改良することを特徴とする請求項１に記載の製造方法。
【請求項４】
前記鶏糞焼却灰を改良することにより該鶏糞焼却灰の再利用ないし再資源化をすることができることを特徴とする請求項２又は３に記載の製造方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図２】
【図３】
【図４】
【公開番号】特開２００８−２３０９１９（Ｐ２００８−２３０９１９Ａ）
【公開日】平成２０年１０月２日（２００８．１０．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−７３９２９（Ｐ２００７−７３９２９）
【出願日】平成１９年３月２２日（２００７．３．２２）
【出願人】（５０２３０６４５３）株式会社スズキファーム (10)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年１０月２日（２００８．１０．２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年３月２２日（２００７．３．２２）
【出願人】（５０２３０６４５３）株式会社スズキファーム (10)
【Ｆターム（参考）】
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