非選択的Ｐ４５０阻害剤
【課題】
医薬品の薬物代謝酵素P450による分解を評価するための有用な新規化合物又はその塩を提供すること。さらに詳しくは薬物代謝酵素P450の各サブタイプに対して非特異的に阻害作用を示す新規化合物又はその塩を提供すること。
【解決手段】
式（１）
で表されるピラゾール誘導体、又はその塩。
医薬品の薬物代謝酵素P450による分解を評価するための有用な新規化合物又はその塩を提供すること。さらに詳しくは薬物代謝酵素P450の各サブタイプに対して非特異的に阻害作用を示す新規化合物又はその塩を提供すること。
【解決手段】
式（１）
で表されるピラゾール誘導体、又はその塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬の分野における、薬物代謝酵素P450による医薬の分解を評価する化合物に関する。詳しくは、非特異的薬物代謝酵素P450阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
医薬品の多くは体内で薬物代謝酵素による分解を受け、解毒化されてから対外に排泄される。薬物の代謝には主に薬物代謝酵素P450（cytochrome P450、以下P450）が関与しており、この薬物代謝酵素には複数のサブタイプが存在する（非特許文献１）。特にP450サブタイプの中でもCYP3A4及びCYP2D6だけで約50%の医薬品が基質となることが知られている。多くの医薬品は併用して用いられることから、P450を介した複雑な薬物間相互作用に基づく、医薬品の効果減弱や副作用の発現を避けるため、医薬品が代謝されるP450サブタイプを知ることは重要である（非特許文献２）。そのため、医薬品の添付文書に代謝分子種が記載されるようになった。また、FDAガイダンスでは臨床において薬物の消失にP450の寄与が25%以上の場合に、その分子種(サブタイプ)同定を勧めている(非特許文献3）。
【０００３】
P450サブタイプを明らかにする方法としては、肝ミクロソームにおける医薬品の代謝反応に対する各P450サブタイプ選択的阻害剤の代謝阻害効果を検討し、各P450サブタイプの医薬品代謝への寄与度を判断する方法が挙げられる。その際に、すべてのP450サブタイプが阻害された場合の医薬品の代謝量を測定する必要があり、この目的のために非選択的P450阻害剤が使用されている。非選択的P450阻害剤としては、ベンゾトリアゾール骨格をもつ１−アミノベンゾトリアゾール(ABT)、イミダゾール骨格をもつ１−ベンジルイミダゾールやSKF-525Aなどが知られておいるが、ピラゾール骨格を基本骨格とする化合物は知られていない。このP450のサブタイプ選択性の影響に関する試験では、一般的にABTが広く用いられてきたが、ABTのP450サブタイプへの阻害作用は十分に非選択的とは言えず、特にCYP2C9に対する阻害活性が低いことが明らかとなってきた（非特許文献４）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】A.Parkinson and B.W.Ogilvie, : Cahpter 6 biotransformation of Xenobiotics : in Casarett & Doull's Toxicology, The Basic Science of Poisons, seventh edition. ed. by C.D.Klaassen, New York: McGraw-Hill, pp.161-304, 2008.
【非特許文献２】B.Ogilvie, E.Usuki, P.Yerino, A.Parkinson, Chapter 7 In vitro approaches for studying the inhibition of drug-metabolizing enzymes and identifying the drug-metabolizing enzymes responsible for the metabolism of drugs(reaction phenotyping) with emphasis on cytochrome P450. : in Drug-Drug Interactions. second edition, ed. A.D.Rodrigues, Marcel Dekker Inc., New York, 231-358, 2008.
【非特許文献３】U.S. Food and Drug Administration. ``Drug Interaction Studies Study Design, Data Analysis, and Implications for Dosing and Labeling (Draft Guidance)''. 2006.
【非特許文献４】C.Emoto, S.Murase, Y.Sawada, K.Iwasaki, : In vitro inhibitory effect of 1-aminoabenzotriazole on drug oxidations in human liver microsomes: a comparison with SKF-525A. Drug Metab.Pharmacokinet., 20, 351-357, 2005.
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
医薬品のP450による分解を評価するための有用な新規化合物又はその塩を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは鋭意検討した結果、ピラゾール誘導体がP450の各サブタイプに対して非特異的なP450阻害活性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
すなわち、本発明は、
（I）式（１）
【０００８】
【化１】
【０００９】
（式（１）において、Ｒ1a、Ｒ1b及びＲ1cは、同一又は異なって、水素原子、Ｃ1〜Ｃ6アルキル（該Ｃ1〜Ｃ6アルキルは、ヒドロキシ、ハロゲン原子、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、アミノ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルアミノ又は、Ｃ2〜Ｃ12ジアルキルアミノで置換されてもよい）Ｃ2〜Ｃ7アルケニル、Ｃ2〜Ｃ7アルキニル、Ｃ3〜Ｃ7環状アルキル、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ（該Ｃ1〜Ｃ6アルコキシは、ハロゲン原子で置換されてもよい）、ハロゲン原子、Ｃ2〜Ｃ7アルカノイル（該Ｃ2〜Ｃ7アルカノイルは、ハロゲン原子で置換されてもよい）、Ｃ2〜Ｃ7アルコキシカルボニル、カルボキシ、カルバモイル又は、ヒドロキシを示し、
Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ6アルキル又は、Ｃ3〜Ｃ7環状アルキルを示し、
Ｒ3及びＲ4は、同一又は異なって、水素原子、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン原子、又はＣ1〜Ｃ6アルコキシを示す。）
で表されるピラゾール誘導体、又はその塩、
【００１０】
（II）式（１）において、Ｒ1a、Ｒ1b及びＲ1cが、同一又は異なって、水素原子、Ｃ1〜Ｃ6アルキル（該Ｃ1〜Ｃ6アルキルは、ヒドロキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、Ｃ2〜Ｃ12ジアルキルアミノで置換されてもよい）ハロゲン原子又は、Ｃ2〜Ｃ7アルコキシカルボニルであり、
Ｒ2が、Ｃ1〜Ｃ6アルキルであり、
Ｒ3が、ハロゲン原子又は、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシであり、
Ｒ4が、水素原子である、（I）に記載のピラゾール誘導体、又はその塩、及び
【００１１】
（III）（I）又は（II）に記載のピラゾ−ル誘導体、又はその塩を含有する、薬物代謝酵素P450阻害剤である。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の化合物は、P450の各サブタイプに対し低濃度で強力な阻害作用を示した。また、本発明の化合物は、従来の非特異的阻害剤により阻害されなかった分子種も阻害することを見出した。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本明細書で用いられる用語は、以下に定義される通りである。
【００１４】
本発明において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を示す。
【００１５】
「Ｃ1〜Ｃ6アルキル」とは、炭素数１〜６個の直鎖状又は分枝状のアルキル基を示し、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル又はｎ−ヘキシル等の基を示す。
【００１６】
「Ｃ2〜Ｃ7アルケニル」とは、炭素原子数２〜７個の直鎖状又は分枝状のアルケニル基を示し、例えば、ビニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−ブテニル、１,３−ブタジエニル、２−ペンテニル、２−ヘキセニル等の基を示す。
【００１７】
「Ｃ2〜Ｃ7アルキニル」とは、炭素原子数２〜７個の直鎖状又は分枝状のアルキニル基を示し、例えば、エチニル、１−プロピオニル、２−プロピオニル等の基を示す。
「Ｃ3〜Ｃ7環状アルキル」とは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチル基を示す。
【００１８】
「Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ」とは、炭素数１〜６個の直鎖状又は分枝状のアルコキシ基を示し、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペンチルオキシ、イソペンチルオキシ、ネオペンチルオキシ又はｎ−ヘキシルオキシ等の基を示す。
【００１９】
「Ｃ2〜Ｃ7アルコキシカルボニル」とは、炭素数１〜６個の直鎖状又は分枝状のアルコキシ基が結合したカルボニル基を示し、例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ｎ−ペンチルオキシカルボニル、イソペンチルオキシカルボニル、ネオペンチルオキシカルボニル又はｎ−ヘキシルオキシカルボニル等の基を示す。
【００２０】
「Ｃ1〜Ｃ6アルキルアミノ」とは、炭素数１〜６個の直鎖状又は分枝状のアルキル基で置換されたアミノ基を示し、例えば、メチルアミノ、エチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｎ−ブチルアミノ、イソブチルアミノ、ｓｅｃ−ブチルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ、ｎ−ペンチルアミノ、イソペンチルアミノ、ネオペンチルアミノ又はｎ−ヘキシルアミノ等の基を示す。
【００２１】
「Ｃ2〜Ｃ12ジアルキルアミノ」とは、２つの炭素数１〜６個の直鎖状又は分枝状のアルキル基で置換されたアミノ基を示し、例えば、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ，Ｎ−イソプロピルメチルアミノ、ジ−ｎ−ブチルアミノ、ジイソブチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ｓｅｃ−ブチルエチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルメチルアミノ、ジ−ｎ−ペンチルアミノ、Ｎ，Ｎ−イソペンチルメチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ネオペンチルメチルアミノ又はジ−ｎ−ヘキシルアミノ等の基を示す。
【００２２】
「Ｃ2〜Ｃ7アルカノイル」とは、炭素数１〜６個のアルキル基が結合したカルボニル基を示し、例えば、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリル、ピバロイル、ペンタノイル、３−メチルブチリル、４，４−ジメチルペンタノイル又はヘプタノイル等の基を示す。
【００２３】
本発明において、塩とは、例えば、硫酸、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸などの無機酸との塩、酢酸、シュウ酸、乳酸、酒石酸、フマル酸、マレイン酸、クエン酸、ベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、エタンスルホン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、ガラクタル酸、ナフタレン−２−スルホン酸などの有機酸との塩、リチウムイオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、亜鉛イオン、アルミニウムイオンなどの１種又は複数の金属イオンとの塩、アンモニア、アルギニン、リシン、ピペラジン、コリン、ジエチルアミン、４−フェニルシクロヘキシルアミン、２−アミノエタノール、ベンザチンなどのアミンとの塩が含まれる。
【００２４】
本発明の化合物は、各種溶媒和物としても存在し得る。また、医薬としての適用性の面から水和物の場合もある。
【００２５】
本発明の化合物は、エナンチオマー、ジアステレオマー、平衡化合物、これらの任意の割合の混合物、ラセミ体等を全て含む。
【００２６】
本発明の化合物には、一つ以上の水素原子、炭素原子、窒素原子、酸素原子、硫黄原子が放射性同位元素や安定同位元素と置換された化合物も含まれる。これらの標識化合物は、例えば代謝や薬物動態研究、受容体のリガンドとして生物学的分析等に有用である。
本発明の化合物は、下記の方法により製造できる。
【００２７】
本発明の化合物は、公知の有機化学的手法によって製造することができ、例えば、下記の反応式による方法に従って製造できる。下記反応式１〜３において、Ｒ1a、Ｒ1b、Ｒ1c、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、は前記と同義である。Ｚは、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ又は、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等のハロゲン原子を示し、Ｙ1、Ｙ2、Ｙ3は同一又は異なってフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等のハロゲン原子又はメタンスルホニルオキシ基、フェニルスルホニルオキシ基、ｐ−トルエンスルホニルオキシ基、トリフルオロメタンスルホニルオキシ基等の有機スルホニルオキシ基等の脱離基を示し、Ｘは、カップリング反応に一般的に用いられる置換基（例えばホウ素、スズ、亜鉛、珪素等の原子を含む基が挙げられ、より好ましくはホウ酸基、ジエチルボリル基、４，４，５，５−テトラメチル−[１，３，２]ジオキサボロラニル基、トリ−ｎ−ブチルスタニル基等が挙げられる）を示し、Ｗ1、Ｗ2、Ｗ3及びＷ4は同一又は異なってＣ1〜Ｃ6アルキルを示し、Ｖは塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等のハロゲン原子を示す
以下、反応式１で示される本発明の化合物の製造方法について説明する。この製造工程は、化合物（２）から本発明の化合物（１−１）を製造するための工程である。
（反応式１）
【００２８】
【化２】
【００２９】
（工程１）
工程１は、化合物（２）と化合物（３）をカップリング反応により化合物（４）を得るための工程である。化合物（２）及び化合物（３）は、公知化合物であるか、公知化合物から容易に合成できる化合物である。
【００３０】
カップリング反応は、塩基の存在下、溶媒中又は無溶媒で化合物（２）と化合物（３）から１,3-ジケトン（化合物４）を得る一般的な方法により実施できる。本反応で用いられる塩基としては、例えば、ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基類；ｔｅｒｔ−ブトキシカリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化ナトリウム等の無機塩基類が挙げられる。本反応で用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類；トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等のアミド類；アセトン、２−ブタノン等のケトン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；水又はこれらの混合溶媒が挙げられる。本反応における反応温度は、通常０℃〜２００℃、好ましくは、１５℃〜１２０℃であり、反応時間は、通常１〜４８時間、好ましくは、１〜１２時間である。
【００３１】
（工程２）
工程２は、化合物（４）の環化反応により化合物（５）を得るための工程である。環化反応は、塩基又は酸の存在下又は非存在下、溶媒中又は無溶媒で化合物（４）とヒドラジンを反応させることにより実施できる。本反応で用いられる塩基としては、例えば、ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基類；ｔｅｒｔ−ブトキシカリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化ナトリウム等の無機塩基類が挙げられる。本反応で用いられる酸としては、例えば、塩酸、酢酸、硫酸等が挙げられる。本反応で用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類；トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等のアミド類；アセトン、２−ブタノン等のケトン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；水又はこれらの混合溶媒が挙げられる。本反応における反応温度は、通常０℃〜２００℃、好ましくは、１５℃〜１２０℃である。
【００３２】
（工程３）
工程３は、化合物（５）のピラゾール環のハロゲン化により化合物（６）を得るための工程である。本工程は、（山中宏、日野亨、中川昌子、坂本尚夫 新編ヘテロ環化合物応用編 講談社サイエンティフィック）に記載の一般的なピラゾール環のハロゲン化の方法により実施できる。具体例としては、例えば、クロロホルム溶媒中、臭素を用いたハロゲン化反応を行うことにより実施できる。
【００３３】
（工程４）
工程４は、化合物（６）と化合物（７）をカップリング反応により縮合して化合物（８）を得るための工程である。カップリング反応としては、鈴木−宮浦カップリング反応、Stilleカップリング反応等の一般的なパラジウム触媒等を用いたカップリング反応条件が挙げられ、例えば(Danishefskyら、Angew. Chem. Int. Ed., 40, 4544-4568, 2001)に記載の方法に従って実施できる。
【００３４】
（工程５）
工程５は、化合物（８）と化合物（９）をカップリング反応により縮合して本発明の化合物（１−１）を得るための工程である。カップリング反応としては塩基の存在下、溶媒中で化合物（８）と化合物（９）を反応させる方法が挙げられる。本反応で用いられる塩基としては、例えば、ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基類；ｔｅｒｔ−ブトキシカリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化ナトリウム等の無機塩基類が挙げられる。本反応で用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類；トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等のアミド類；アセトン、２−ブタノン等のケトン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；水又はこれらの混合溶媒が挙げられる。本反応における反応温度は、通常０℃〜２００℃、好ましくは、１５℃〜１２０℃であり、反応時間は、通常１〜４８時間、好ましくは、１〜１２時間である。
【００３５】
以下、反応式２で示される本発明の化合物の製造方法について説明する。この製造工程は、化合物（１−２）から本発明の化合物（１−３）、（１−４）、（１−５）及び（１−６）を製造するための工程である。
（反応式２）
【００３６】
【化３】
【００３７】
（工程９）
工程９は、本発明の化合物（１−２）から本発明の化合物（１−３）を得るための工程である。溶媒中、還元剤を用いたエステルからアルコールへの一般的な還元反応により実施できる。本反応で用いられる還元剤としては、水素化リチウムアルミニウム、水素化ジイソプロピルアルミニウム、水素化ホウ素リチウム等が挙げられる。本反応で用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類；トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等のアミド類；アセトン、２−ブタノン等のケトン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；水又はこれらの混合溶媒が挙げられる。
【００３８】
（工程１０）
工程１０は、本発明の化合物（１−３）から本発明の化合物化合物（１−４）を得るための工程である。溶媒中、酸化剤を用いたアルコールからアルデヒドへの一般的な酸化反応により実施できる。本反応で用いられる酸化剤としては、二酸化マンガン、2-ヨードキシ安息香酸、1,1,1-トリアセトキシ-1,1-ジヒドロ-1,2-ベンズヨードキソール-3(1H)-オン等が挙げられる。本反応で用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類；トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等のアミド類；アセトン、２−ブタノン等のケトン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；水又はこれらの混合溶媒が挙げられる。
【００３９】
また、本発明の化合物（１−４）は、本発明の化合物（１−２）から１段階の反応によって製造することもできる。
【００４０】
（工程１１）
工程１１は、本発明の化合物（１−４）と化合物（１０）を還元的アミノ化反応により本発明の化合物（１−５）を得るための工程である。化合物（１０）は、公知化合物であるか、公知化合物から容易に合成できる化合物である。ここで還元的アミノ化反応の条件とは、アミンとアルデヒドとを、酸の存在下又は非存在下、還元剤を加え、溶媒中で縮合させる一般的な還元的アミノ化を示し、例えば、還元剤として水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム等が挙げられる。
【００４１】
（工程１２）
工程１２は、本発明の化合物（１−３）と化合物（１１）から本発明の化合物（１−６）を得るための工程である。塩基の存在下、溶媒中、化合物（１１）を用いた一般的なエーテル化により実施できる。また、必要に応じて、例えば、ヨウ化カリウム、臭化ナトリウム等の添加物を加えることができる。本反応で用いられる塩基としては、例えば、ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基類；ｔｅｒｔ−ブトキシカリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化ナトリウム等の無機塩基類が挙げられる。本反応で用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類；トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等のアミド類；アセトン、２−ブタノン等のケトン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；水又はこれらの混合溶媒が挙げられ、これらのうち、テトラヒドロフラン、トルエン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、２−ブタノン又はアセトニトリルが好ましい。本反応における反応温度は、通常０℃〜２００℃、好ましくは、１５℃〜１２０℃であり、反応時間は、通常１〜４８時間、好ましくは、１〜１２時間である。
【００４２】
以下、反応式３で示される本発明の化合物の製造方法について説明する。この製造工程は、本発明の化合物（１−７）から本発明の化合物（１−８）を製造するための工程である。
（反応式３）
【００４３】
【化４】
【００４４】
（工程１３）
工程１３は、本発明の化合物（１−７）から本発明の化合物（１−８）を得るための工程である。本工程はハロゲン原子を水素原子に還元する一般的還元反応により実施でき、例えばパラジウム−炭素、白金等の触媒を用いた水素添加による接触還元反応を行うことにより実施できる。
【実施例】
【００４５】
以下に実施例及び試験例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
（実施例１）
３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］安息香酸メチル（化合物番号１）の製造
（１）１−（ピリジン−４−イル）ブタン−１，３−ジオンの製造
【００４６】
【化５】
【００４７】
イソニコチン酸メチル（２００ｇ）アセトン（１６９ｇ）のジエチルエーテル（１５００ｍｌ）溶液に、ナトリウムメトキシド（７８．７ｇ）を加え、５０℃にて３時間攪拌した。反応液に酢酸（８７．６ｇ）及び水を加え、ジエチルエーテルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下濃縮した。ジイソプロピルエーテル（１００ｍｌ）を加え、氷浴下、３０分間攪拌後、結晶をろ取し、黄色個体の表題化合物（６６．０ｇ、２８％）を得た。
（２）４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリジンの製造
【００４８】
【化６】
【００４９】
実施例１−（１）で製造した１−（ピリジン−４−イル）ブタン−１，３−ジオン（６６．０ｇ）のエタノール（２５０ｍｌ）溶液にヒドラジン１水和物（４０．０ｇ）を加え、１時間攪拌した。反応液を塩−氷浴下、１時間攪拌後、析出した結晶をろ取し、無色固体の表題化合物（３３ｇ、５１％）を得た。
（３）４−（４−ブロモ−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリジンの製造
【００５０】
【化７】
【００５１】
実施例１−（２）で製造した４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリジン（２７．０ｇ）のクロロホルム（２５００ｍｌ）溶液に臭素（２７．２ｇ）のクロロホルム（５００ｍｌ）溶液を滴下した。室温にて１時間攪拌後、反応液に飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下濃縮した。得られた固体を酢酸エチルにて洗浄し、表題化合物（２５．６ｇ、６３％）を得た。
【００５２】
（４）４−（４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリジンの製造
【００５３】
【化８】
【００５４】
実施例１−（３）で製造した４−（４−ブロモ−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリジン（４．００ｇ）、４クロロフェニルボロン酸（５．２８ｇ）、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（３．９０ｇ）、２．０Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（３０ｍｌ）、トルエン（３０ｍｌ）及びエタノール（２０ｍｌ）の混合液を１６０℃にて一晩攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝９８：２〜９５：５）にて精製して、薄黄色アモルファスの表題化合物（２．００ｇ，４４％）を得た。
【００５５】
（５）３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］安息香酸メチル（化合物番号１）の製造
【００５６】
【化９】
【００５７】
実施例１−（４）で製造した４−（４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリジン（１．００ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液に水素化ナトリウム（０．１４８ｇ）を加え、室温にて１０分間攪拌後、３−クロロ−２−フルオロ安息香酸メチル（１．４０ｇ）を加え、１１０℃にて４時間攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝９８：２〜９６：４）にて精製して、無色油状の表題化合物（０．１８０ｇ，１１％）を得た。
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.11 (s, 3 H) 3.71 (s, 3 H) 7.22 - 7.27 (m, 2 H) 7.35 - 7.42 (m, 4 H) 7.54 - 7.59 (m, 1 H) 7.74 - 7.78 (m, 1 H) 7.94 - 7.98 (m, 1 H) 8.47 - 8.51 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 438(M+H)+
【００５８】
（実施例２）
｛３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝メタノール（化合物番号２）の製造
【００５９】
【化１０】
【００６０】
実施例１−（５）で製造した３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］安息香酸メチル（０．１７０ｇ）のテトラヒドロフラン（２．０ｍＬ）溶液に氷浴下、１．０Ｍジイソブチルアルミニウム水素化物のトルエン溶液（１．４７ｍｌ）加え、氷浴下４時間攪拌した。反応液に飽和ロッシェル塩水溶液を加え、室温にて２時間攪拌後、酢酸エチルで抽出し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝１００：０〜９７：３）にて精製して、無色アモルファスの表題化合物（０．０７０ｇ，４４％）を得た。
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.11 (s, 3 H) 3.11 (br. s., 1 H) 4.33 - 4.42 (m, 2 H) 7.21 - 7.25 (m, 2 H) 7.34 - 7.44 (m, 4 H) 7.47 - 7.58 (m, 3 H) 8.48 - 8.54 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 410(M+H)+
【００６１】
（実施例３）
１−｛３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルメタンアミン（化合物番号３）の製造
（１）３−クロロ−２−（４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ベンズアルデヒドの製造
【００６２】
【化１１】
【００６３】
２−ヨードキシ安息香酸（０．０４２ｇ）にジメチルスルホキシド（２．０ｍｌ）を加え、室温にて３０分間攪拌して溶解させた。反応液に実施例２で製造した｛３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝メタノール（０．０６０ｇ）を加え、室温にて一晩攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下濃縮した。無色油状の表題化合物（０．０７０ｇ）を得た。
【００６４】
（２）１−｛３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルメタンアミンの製造
【００６５】
【化１２】
【００６６】
実施例３−（１）で製造した（３−クロロ−２−（４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ベンズアルデヒド（０．０７０ｇ）のクロロホルム（１．０ｍｌ）溶液に酢酸（０．０４５ｇ）、２．０Ｍジメチルアミンのテトラヒドロフラン溶液（０．３６ｍｌ）及びトリアセトキシホウ水素化ナトリウム（０．１６０ｇ）を加え、室温にて一晩攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、減圧下濃縮した。濃縮残査を分取型薄層クロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝１８：１）にて精製して、無色固体の表題化合物（０．０４０ｇ，６１％）を得た。
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.04 (s, 3 H) 2.14 (s, 6 H) 3.12 (d, J=13.75 Hz, 1 H) 3.26 (d, J=13.75 Hz, 1 H) 7.22 - 7.25 (m, 2 H) 7.37 - 7.56 (m, 7 H) 8.48 - 8.52 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 437(M+H)+
【００６７】
次に示す化合物は、実施例１−実施例３に示した方法で合成した。
化合物番号４ ４−［４−（４−クロロフェニル）−１−（２，６−ジクロロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］ピリジン
【００６８】
【化１３】
【００６９】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.08 (s, 3 H) 7.22 - 7.27 (m, 2 H) 7.37 - 7.45 (m, 5 H) 7.51 - 7.55 (m, 2 H) 8.48 - 8.52 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 414(M+H)+
【００７０】
化合物番号５ 3,5-ジクロロ-4-[4-(4-クロロフェニル)-5-メチル-3-(ピリジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル]安息香酸メチル
【００７１】
【化１４】
【００７２】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.07 (s, 3 H), 3.99 (s, 3 H), 7.17 - 7.27 (m, 2 H), 7.32 - 7.45 (m, 4 H), 8.16 (s, 2 H), 8.41 - 8.59 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 472(M+H)+
【００７３】
化合物番号６ ｛３，５−ジクロロ−４−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝メタノール
【００７４】
【化１５】
【００７５】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.06 (s, 3 H) 4.75 (s, 2 H) 7.21 - 7.25 (m, 2 H) 7.38 - 7.43 (m, 4 H) 7.48 (s, 2 H) 8.49 - 8.54 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 444(M+H)+
【００７６】
化合物番号７ １−｛３，５−ジクロロ−４−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルメタンアミン
【００７７】
【化１６】
【００７８】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.07 (s, 3 H), 2.29 (s, 6 H), 3.45 (s, 2 H), 7.19 - 7.28 (m, 2 H), 7.34 - 7.44 (m, 4 H), 7.49 (s, 2 H), 8.45 - 8.53 (m, 2 H)
HRMS (ESI)(Positive) m/z; 471（M+H）+
【００７９】
化合物番号８ ｛３−ブロモ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝メタノール
【００８０】
【化１７】
【００８１】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.11 (s, 3 H) 4.31 - 4.46 (m, 2 H) 7.22 - 7.25 (m, 2 H) 7.34 - 7.46 (m, 5 H) 7.58 - 7.64 (m, 1 H) 7.70 - 7.75 (m, 1 H) 8.48 - 8.55 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 454(M+H)+
【００８２】
化合物番号９ ｛２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ベンゼン−１，３−ジイル｝ジメタノール
【００８３】
【化１８】
【００８４】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.04 (s, 3 H) 4.30 - 4.45 (m, 4 H) 7.19 - 7.24 (m, 2 H) 7.32 - 7.36 (m, 2 H) 7.39 - 7.44 (m, 2 H) 7.57 - 7.65 (m, 3 H) 8.45 - 8.53 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 406(M+H)+
【００８５】
化合物番号１０ ｛２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロフェニル｝メタノール
【００８６】
【化１９】
【００８７】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.17 (s, 3 H) 4.34 - 4.53 (m, 2 H) 7.19 - 7.56 (m, 9 H) 8.52 (br. s., 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 394(M+H)+
【００８８】
化合物番号１１ {3-クロロ-2-[4-(4-メトキシフェニル)-5-メチル-3-(ピリジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル]フェニル}メタノール
【００８９】
【化２０】
【００９０】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.11 (s, 3 H) 3.88 (s, 3 H) 4.33 - 4.43 (m, 2 H) 6.95 - 7.01 (m, 2 H) 7.18 - 7.24 (m, 2 H) 7.39 - 7.72 (m, 6 H) 8.43 - 8.54 (m, 1 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 406(M+H)+
【００９１】
（実施例４）
４−｛１−［２−ブロモ−６−（メトキシメチル）フェニル］−４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル｝ピリジン（化合物番号１２）の製造
【００９２】
【化２１】
【００９３】
３−ブロモ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝メタノール（化合物番号８）（０．０９０ｇ）のＮ，Ｎジメチルホルムアミド（１．０ｍｌ）溶液に水素化ナトリウム（０．００８ｇ）を加え、室温にて１０分間攪拌した。反応液にメチルヨージド（０．０４３ｇ）を加え、室温にて１時間攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルにて抽出し、減圧下濃縮した。濃縮残査を分取型薄層クロマトグラフィー展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝１８：１）にて精製して、薄黄色固体の表題化合物（０．０２５ｇ，２７％）を得た。
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.06 (s, 3 H) 3.32 (s, 3 H) 4.17 (d, J=12.84 Hz, 1 H) 4.32 (d, J=12.84 Hz, 1 H) 7.22 - 7.26 (m, 2 H) 7.38 - 7.44 (m, 5 H) 7.58 - 7.61 (m, 1 H) 7.68 - 7.71 (m, 1 H) 8.49 - 8.52 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 468(M+H)+
【００９４】
（実施例５）
４−｛４−（４−クロロフェニル）−１−［２−（メトキシメチル）フェニル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル｝ピリジン（化合物番号１３）の製造
【００９５】
【化２２】
【００９６】
実施例４で製造した４−｛１−［２−ブロモ−６−（メトキシメチル）フェニル］−４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル｝ピリジン（０．０２０ｇ）のエタノール（１．０ｍｌ）溶液に１０％パラジウムカーボン（０．０１０ｇ）を加え、水素雰囲気下室温にて８時間攪拌した。セライト濾過後、減圧下濃縮した。濃縮残査を分取型薄層クロマトグラフィー展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝１８：１）にて精製して、薄黄色アモルファスの表題化合物（０．０１０ｇ，６４％）を得た。
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.09 (s, 3 H) 3.33 (s, 3 H) 4.33 (s, 2 H) 7.20 - 7.25 (m, 2 H) 7.33 - 7.57 (m, 6 H) 7.63 - 7.70 (m, 1 H) 8.48 - 8.53 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 390(M+H)+
次に示す化合物は、実施例４−実施例５に示した方法で合成した。
【００９７】
化合物番号１４ ４−｛１−［２−ブロモ−６−（エトキシメチル）フェニル］−４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル｝ピリジン
【００９８】
【化２３】
【００９９】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.16 (br. s., 3 H) 2.02 - 2.12 (m, 3 H) 3.33 - 3.58 (m, 2 H) 4.19 - 4.39 (m, 2 H) 7.18 - 7.37 (m, 2 H) 7.42 - 7.79 (m, 5 H) 8.00 (br. s., 2 H) 8.55 (br. s., 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 482(M+H)+
【０１００】
化合物番号１５ 4-{4-(4-クロロフェニル)-1-[2-(エトキシメチル)フェニル]-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル}ピリジン
【０１０１】
【化２４】
【０１０２】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.07 - 1.36 (m, 3 H) 2.10 (br. s., 3 H) 3.41 - 3.74 (m, 2 H) 4.31 - 4.63 (m, 2 H) 7.29 - 9.10 (m, 12 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 404(M+H)+
【０１０３】
化合物番号１６ {2-[4-(4-クロロフェニル)-5-メチル-3-(ピリジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル]フェニル}メタノール
【０１０４】
【化２５】
【０１０５】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.22 (s, 3 H) 4.44 (s, 2 H) 7.19 - 7.25 (m, 2 H) 7.31 - 7.55 (m, 7 H) 7.61 - 7.68 (m, 1 H) 8.47 - 8.57 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 376(M+H)+
【０１０６】
（試験例）
＜ヒト肝ミクロソームにおける本発明化合物のP450サブタイプ阻害作用＞
本発明化合物はアセトニトリルに溶解して試験に用いた。1.4 mL のポリプロピレン製チューブに、pH 7.4 リン酸緩衝液(100 mM), 塩化カリウム (100 mM)、 グルコース６リン酸(1.4 mM)、グルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ (0.17 units/mL)、塩化マグネシウム(2.4 mM)、ヒト肝ミクロソーム(0.1mg/mL)、本発明化合物(化合物番号３：10μM)及び各P450サブタイプに対する基質を加え、37℃でインキュベートした。インキュベート溶液の容積は0.3 mL とし、β-ニコチンアデニンジヌクレオチドリン酸(0.16 mM)添加により反応を開始した。内標を含むアセトニトリ溶液を0.3 mL加えて反応を停止した。混和後、約3,000x g、10分間、4℃で遠心し、得られた上清中における各基質の代謝物量をLC/MS/MSにより分析した。なお、反応時間は代謝物の生成が直線性を示す条件とした。
【０１０７】
なお、上記反応で使用した各P450サブタイプの基質の種類、反応時の濃度、及び反応後の代謝物の種類を表１に示す。
【０１０８】
【表１】
【０１０９】
LC/MS/MSの測定条件は以下である。HPLC：Shimadzu LC-20AD system、MS:API4000 Sciex.カラム：Shimadzu Shim-pack XR-ODS 3x30 mm、グラジエント：移動相Ａ［0.1% HCOOH水溶液］、移動相Ｂ［CH3CN］、条件［移動相の流量1.5 mL/分、Ａ：Ｂ＝98：2からＡ：Ｂ＝5：95まで移動相の組成を変化させ、その後、Ａ：Ｂ＝98：2の組成で流す。］ MS/MSの検出：acetaminophen=152.1/110.0、4'-hydroxydiclofenac=312.2/231.2、4'-hydroxymephenytoin=235.2/150.2、1'-hydroxybufuralol=278.3/186.1、1'-hydroxymidazolam=342.1/203.1、6β-Hydroxytestosterone=305.3/269.2。
【０１１０】
LC/MS/MSデータより各基質代謝物濃度を測定し、下記の式より阻害率を算出した。
【０１１１】
阻害率(percent inhibition(%))の算出法
Percent inhibition (%) = 100-（評価化合物存在下での基質の代謝物濃度/評価化合物非存在下での基質の代謝物濃度）ｘ 100
【０１１２】
＜ヒト肝ミクロソームにおける１−アミノベンゾトリアゾール(ABT)のP450サブタイプ阻害作用＞
ABTについては、代謝依存的なP450阻害剤であるため、あらかじめABTのみをヒト肝ミクロソーム濃度0.5 mg/mL濃度で30分間インキュベート後に各P450分子種に対する阻害活性を測定した。
【０１１３】
ABTはアセトニトリルに溶解して試験に用いた。1.4 mL のポリプロピレン製チューブに、pH 7.4 リン酸緩衝液(100 mM)、塩化カリウム (100 mM)、グルコース６リン酸(1.9 mM)、グルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ (0.18 units/mL), 塩化マグネシウム(2.4 mM)、ヒト肝ミクロソーム(0.5mg/mL)、を加え、ABT(1000μM) を加え、37℃でインキュベートした。インキュベート溶液の容積は0.3 mL とし、β-ニコチンアデニンジヌクレオチドリン酸(0.17 mM)添加により反応を開始した。30分インキュベート後、反応溶液30μLをあらかじめ暖めた1.4 mL ポリプロピレンチューブ中の各基質(表１記載の濃度の5倍濃度)、pH7.4 リン酸緩衝液 (100 mM)、グルコース６リン酸(1.8 mM)、グルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ(0.17 units/mL)、塩化マグネシウム(2.4 mM)、β-ニコチンアデニンジヌクレオチドリン(0.19 mM)を含む270μL のインキュベーション溶液に加えた。さらに、所定時間37℃でインキュベート後、直接阻害と同様に処理した。
【０１１４】
LC/MS/MSにより各基質代謝物濃度を測定し、下記の式より阻害率を算出した。
阻害率(percent inhibition(%))の算出法
Percent inhibition (%) = 100-（ABT存在下での基質の代謝物濃度/ABT非存在下での基質の代謝物濃度）ｘ 100
【０１１５】
試験結果を表２に示す。
【０１１６】
【表２】
【０１１７】
化合物番号３の化合物は、P450の各サブタイプに対し低濃度（10μM）で強力な阻害作用を示した。また、本発明の化合物は、従来の非特異的阻害剤であるABTにより十分に阻害されなかった分子種（2C9）を阻害した。
【産業上の利用可能性】
【０１１８】
本発明化合物を用いることにより、医薬品のP450による代謝の影響を明らかにすることができ、P450との相互作用に起因する医薬品の効果減弱又は副作用増大を効果的に防止することが可能となる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬の分野における、薬物代謝酵素P450による医薬の分解を評価する化合物に関する。詳しくは、非特異的薬物代謝酵素P450阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
医薬品の多くは体内で薬物代謝酵素による分解を受け、解毒化されてから対外に排泄される。薬物の代謝には主に薬物代謝酵素P450（cytochrome P450、以下P450）が関与しており、この薬物代謝酵素には複数のサブタイプが存在する（非特許文献１）。特にP450サブタイプの中でもCYP3A4及びCYP2D6だけで約50%の医薬品が基質となることが知られている。多くの医薬品は併用して用いられることから、P450を介した複雑な薬物間相互作用に基づく、医薬品の効果減弱や副作用の発現を避けるため、医薬品が代謝されるP450サブタイプを知ることは重要である（非特許文献２）。そのため、医薬品の添付文書に代謝分子種が記載されるようになった。また、FDAガイダンスでは臨床において薬物の消失にP450の寄与が25%以上の場合に、その分子種(サブタイプ)同定を勧めている(非特許文献3）。
【０００３】
P450サブタイプを明らかにする方法としては、肝ミクロソームにおける医薬品の代謝反応に対する各P450サブタイプ選択的阻害剤の代謝阻害効果を検討し、各P450サブタイプの医薬品代謝への寄与度を判断する方法が挙げられる。その際に、すべてのP450サブタイプが阻害された場合の医薬品の代謝量を測定する必要があり、この目的のために非選択的P450阻害剤が使用されている。非選択的P450阻害剤としては、ベンゾトリアゾール骨格をもつ１−アミノベンゾトリアゾール(ABT)、イミダゾール骨格をもつ１−ベンジルイミダゾールやSKF-525Aなどが知られておいるが、ピラゾール骨格を基本骨格とする化合物は知られていない。このP450のサブタイプ選択性の影響に関する試験では、一般的にABTが広く用いられてきたが、ABTのP450サブタイプへの阻害作用は十分に非選択的とは言えず、特にCYP2C9に対する阻害活性が低いことが明らかとなってきた（非特許文献４）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】A.Parkinson and B.W.Ogilvie, : Cahpter 6 biotransformation of Xenobiotics : in Casarett & Doull's Toxicology, The Basic Science of Poisons, seventh edition. ed. by C.D.Klaassen, New York: McGraw-Hill, pp.161-304, 2008.
【非特許文献２】B.Ogilvie, E.Usuki, P.Yerino, A.Parkinson, Chapter 7 In vitro approaches for studying the inhibition of drug-metabolizing enzymes and identifying the drug-metabolizing enzymes responsible for the metabolism of drugs(reaction phenotyping) with emphasis on cytochrome P450. : in Drug-Drug Interactions. second edition, ed. A.D.Rodrigues, Marcel Dekker Inc., New York, 231-358, 2008.
【非特許文献３】U.S. Food and Drug Administration. ``Drug Interaction Studies Study Design, Data Analysis, and Implications for Dosing and Labeling (Draft Guidance)''. 2006.
【非特許文献４】C.Emoto, S.Murase, Y.Sawada, K.Iwasaki, : In vitro inhibitory effect of 1-aminoabenzotriazole on drug oxidations in human liver microsomes: a comparison with SKF-525A. Drug Metab.Pharmacokinet., 20, 351-357, 2005.
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
医薬品のP450による分解を評価するための有用な新規化合物又はその塩を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは鋭意検討した結果、ピラゾール誘導体がP450の各サブタイプに対して非特異的なP450阻害活性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
すなわち、本発明は、
（I）式（１）
【０００８】
【化１】
【０００９】
（式（１）において、Ｒ1a、Ｒ1b及びＲ1cは、同一又は異なって、水素原子、Ｃ1〜Ｃ6アルキル（該Ｃ1〜Ｃ6アルキルは、ヒドロキシ、ハロゲン原子、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、アミノ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルアミノ又は、Ｃ2〜Ｃ12ジアルキルアミノで置換されてもよい）Ｃ2〜Ｃ7アルケニル、Ｃ2〜Ｃ7アルキニル、Ｃ3〜Ｃ7環状アルキル、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ（該Ｃ1〜Ｃ6アルコキシは、ハロゲン原子で置換されてもよい）、ハロゲン原子、Ｃ2〜Ｃ7アルカノイル（該Ｃ2〜Ｃ7アルカノイルは、ハロゲン原子で置換されてもよい）、Ｃ2〜Ｃ7アルコキシカルボニル、カルボキシ、カルバモイル又は、ヒドロキシを示し、
Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ6アルキル又は、Ｃ3〜Ｃ7環状アルキルを示し、
Ｒ3及びＲ4は、同一又は異なって、水素原子、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン原子、又はＣ1〜Ｃ6アルコキシを示す。）
で表されるピラゾール誘導体、又はその塩、
【００１０】
（II）式（１）において、Ｒ1a、Ｒ1b及びＲ1cが、同一又は異なって、水素原子、Ｃ1〜Ｃ6アルキル（該Ｃ1〜Ｃ6アルキルは、ヒドロキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、Ｃ2〜Ｃ12ジアルキルアミノで置換されてもよい）ハロゲン原子又は、Ｃ2〜Ｃ7アルコキシカルボニルであり、
Ｒ2が、Ｃ1〜Ｃ6アルキルであり、
Ｒ3が、ハロゲン原子又は、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシであり、
Ｒ4が、水素原子である、（I）に記載のピラゾール誘導体、又はその塩、及び
【００１１】
（III）（I）又は（II）に記載のピラゾ−ル誘導体、又はその塩を含有する、薬物代謝酵素P450阻害剤である。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の化合物は、P450の各サブタイプに対し低濃度で強力な阻害作用を示した。また、本発明の化合物は、従来の非特異的阻害剤により阻害されなかった分子種も阻害することを見出した。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本明細書で用いられる用語は、以下に定義される通りである。
【００１４】
本発明において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を示す。
【００１５】
「Ｃ1〜Ｃ6アルキル」とは、炭素数１〜６個の直鎖状又は分枝状のアルキル基を示し、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル又はｎ−ヘキシル等の基を示す。
【００１６】
「Ｃ2〜Ｃ7アルケニル」とは、炭素原子数２〜７個の直鎖状又は分枝状のアルケニル基を示し、例えば、ビニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−ブテニル、１,３−ブタジエニル、２−ペンテニル、２−ヘキセニル等の基を示す。
【００１７】
「Ｃ2〜Ｃ7アルキニル」とは、炭素原子数２〜７個の直鎖状又は分枝状のアルキニル基を示し、例えば、エチニル、１−プロピオニル、２−プロピオニル等の基を示す。
「Ｃ3〜Ｃ7環状アルキル」とは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチル基を示す。
【００１８】
「Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ」とは、炭素数１〜６個の直鎖状又は分枝状のアルコキシ基を示し、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペンチルオキシ、イソペンチルオキシ、ネオペンチルオキシ又はｎ−ヘキシルオキシ等の基を示す。
【００１９】
「Ｃ2〜Ｃ7アルコキシカルボニル」とは、炭素数１〜６個の直鎖状又は分枝状のアルコキシ基が結合したカルボニル基を示し、例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ｎ−ペンチルオキシカルボニル、イソペンチルオキシカルボニル、ネオペンチルオキシカルボニル又はｎ−ヘキシルオキシカルボニル等の基を示す。
【００２０】
「Ｃ1〜Ｃ6アルキルアミノ」とは、炭素数１〜６個の直鎖状又は分枝状のアルキル基で置換されたアミノ基を示し、例えば、メチルアミノ、エチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｎ−ブチルアミノ、イソブチルアミノ、ｓｅｃ−ブチルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ、ｎ−ペンチルアミノ、イソペンチルアミノ、ネオペンチルアミノ又はｎ−ヘキシルアミノ等の基を示す。
【００２１】
「Ｃ2〜Ｃ12ジアルキルアミノ」とは、２つの炭素数１〜６個の直鎖状又は分枝状のアルキル基で置換されたアミノ基を示し、例えば、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ，Ｎ−イソプロピルメチルアミノ、ジ−ｎ−ブチルアミノ、ジイソブチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ｓｅｃ−ブチルエチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルメチルアミノ、ジ−ｎ−ペンチルアミノ、Ｎ，Ｎ−イソペンチルメチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ネオペンチルメチルアミノ又はジ−ｎ−ヘキシルアミノ等の基を示す。
【００２２】
「Ｃ2〜Ｃ7アルカノイル」とは、炭素数１〜６個のアルキル基が結合したカルボニル基を示し、例えば、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリル、ピバロイル、ペンタノイル、３−メチルブチリル、４，４−ジメチルペンタノイル又はヘプタノイル等の基を示す。
【００２３】
本発明において、塩とは、例えば、硫酸、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸などの無機酸との塩、酢酸、シュウ酸、乳酸、酒石酸、フマル酸、マレイン酸、クエン酸、ベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、エタンスルホン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、ガラクタル酸、ナフタレン−２−スルホン酸などの有機酸との塩、リチウムイオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、亜鉛イオン、アルミニウムイオンなどの１種又は複数の金属イオンとの塩、アンモニア、アルギニン、リシン、ピペラジン、コリン、ジエチルアミン、４−フェニルシクロヘキシルアミン、２−アミノエタノール、ベンザチンなどのアミンとの塩が含まれる。
【００２４】
本発明の化合物は、各種溶媒和物としても存在し得る。また、医薬としての適用性の面から水和物の場合もある。
【００２５】
本発明の化合物は、エナンチオマー、ジアステレオマー、平衡化合物、これらの任意の割合の混合物、ラセミ体等を全て含む。
【００２６】
本発明の化合物には、一つ以上の水素原子、炭素原子、窒素原子、酸素原子、硫黄原子が放射性同位元素や安定同位元素と置換された化合物も含まれる。これらの標識化合物は、例えば代謝や薬物動態研究、受容体のリガンドとして生物学的分析等に有用である。
本発明の化合物は、下記の方法により製造できる。
【００２７】
本発明の化合物は、公知の有機化学的手法によって製造することができ、例えば、下記の反応式による方法に従って製造できる。下記反応式１〜３において、Ｒ1a、Ｒ1b、Ｒ1c、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、は前記と同義である。Ｚは、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ又は、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等のハロゲン原子を示し、Ｙ1、Ｙ2、Ｙ3は同一又は異なってフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等のハロゲン原子又はメタンスルホニルオキシ基、フェニルスルホニルオキシ基、ｐ−トルエンスルホニルオキシ基、トリフルオロメタンスルホニルオキシ基等の有機スルホニルオキシ基等の脱離基を示し、Ｘは、カップリング反応に一般的に用いられる置換基（例えばホウ素、スズ、亜鉛、珪素等の原子を含む基が挙げられ、より好ましくはホウ酸基、ジエチルボリル基、４，４，５，５−テトラメチル−[１，３，２]ジオキサボロラニル基、トリ−ｎ−ブチルスタニル基等が挙げられる）を示し、Ｗ1、Ｗ2、Ｗ3及びＷ4は同一又は異なってＣ1〜Ｃ6アルキルを示し、Ｖは塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等のハロゲン原子を示す
以下、反応式１で示される本発明の化合物の製造方法について説明する。この製造工程は、化合物（２）から本発明の化合物（１−１）を製造するための工程である。
（反応式１）
【００２８】
【化２】
【００２９】
（工程１）
工程１は、化合物（２）と化合物（３）をカップリング反応により化合物（４）を得るための工程である。化合物（２）及び化合物（３）は、公知化合物であるか、公知化合物から容易に合成できる化合物である。
【００３０】
カップリング反応は、塩基の存在下、溶媒中又は無溶媒で化合物（２）と化合物（３）から１,3-ジケトン（化合物４）を得る一般的な方法により実施できる。本反応で用いられる塩基としては、例えば、ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基類；ｔｅｒｔ−ブトキシカリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化ナトリウム等の無機塩基類が挙げられる。本反応で用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類；トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等のアミド類；アセトン、２−ブタノン等のケトン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；水又はこれらの混合溶媒が挙げられる。本反応における反応温度は、通常０℃〜２００℃、好ましくは、１５℃〜１２０℃であり、反応時間は、通常１〜４８時間、好ましくは、１〜１２時間である。
【００３１】
（工程２）
工程２は、化合物（４）の環化反応により化合物（５）を得るための工程である。環化反応は、塩基又は酸の存在下又は非存在下、溶媒中又は無溶媒で化合物（４）とヒドラジンを反応させることにより実施できる。本反応で用いられる塩基としては、例えば、ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基類；ｔｅｒｔ−ブトキシカリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化ナトリウム等の無機塩基類が挙げられる。本反応で用いられる酸としては、例えば、塩酸、酢酸、硫酸等が挙げられる。本反応で用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類；トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等のアミド類；アセトン、２−ブタノン等のケトン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；水又はこれらの混合溶媒が挙げられる。本反応における反応温度は、通常０℃〜２００℃、好ましくは、１５℃〜１２０℃である。
【００３２】
（工程３）
工程３は、化合物（５）のピラゾール環のハロゲン化により化合物（６）を得るための工程である。本工程は、（山中宏、日野亨、中川昌子、坂本尚夫 新編ヘテロ環化合物応用編 講談社サイエンティフィック）に記載の一般的なピラゾール環のハロゲン化の方法により実施できる。具体例としては、例えば、クロロホルム溶媒中、臭素を用いたハロゲン化反応を行うことにより実施できる。
【００３３】
（工程４）
工程４は、化合物（６）と化合物（７）をカップリング反応により縮合して化合物（８）を得るための工程である。カップリング反応としては、鈴木−宮浦カップリング反応、Stilleカップリング反応等の一般的なパラジウム触媒等を用いたカップリング反応条件が挙げられ、例えば(Danishefskyら、Angew. Chem. Int. Ed., 40, 4544-4568, 2001)に記載の方法に従って実施できる。
【００３４】
（工程５）
工程５は、化合物（８）と化合物（９）をカップリング反応により縮合して本発明の化合物（１−１）を得るための工程である。カップリング反応としては塩基の存在下、溶媒中で化合物（８）と化合物（９）を反応させる方法が挙げられる。本反応で用いられる塩基としては、例えば、ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基類；ｔｅｒｔ−ブトキシカリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化ナトリウム等の無機塩基類が挙げられる。本反応で用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類；トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等のアミド類；アセトン、２−ブタノン等のケトン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；水又はこれらの混合溶媒が挙げられる。本反応における反応温度は、通常０℃〜２００℃、好ましくは、１５℃〜１２０℃であり、反応時間は、通常１〜４８時間、好ましくは、１〜１２時間である。
【００３５】
以下、反応式２で示される本発明の化合物の製造方法について説明する。この製造工程は、化合物（１−２）から本発明の化合物（１−３）、（１−４）、（１−５）及び（１−６）を製造するための工程である。
（反応式２）
【００３６】
【化３】
【００３７】
（工程９）
工程９は、本発明の化合物（１−２）から本発明の化合物（１−３）を得るための工程である。溶媒中、還元剤を用いたエステルからアルコールへの一般的な還元反応により実施できる。本反応で用いられる還元剤としては、水素化リチウムアルミニウム、水素化ジイソプロピルアルミニウム、水素化ホウ素リチウム等が挙げられる。本反応で用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類；トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等のアミド類；アセトン、２−ブタノン等のケトン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；水又はこれらの混合溶媒が挙げられる。
【００３８】
（工程１０）
工程１０は、本発明の化合物（１−３）から本発明の化合物化合物（１−４）を得るための工程である。溶媒中、酸化剤を用いたアルコールからアルデヒドへの一般的な酸化反応により実施できる。本反応で用いられる酸化剤としては、二酸化マンガン、2-ヨードキシ安息香酸、1,1,1-トリアセトキシ-1,1-ジヒドロ-1,2-ベンズヨードキソール-3(1H)-オン等が挙げられる。本反応で用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類；トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等のアミド類；アセトン、２−ブタノン等のケトン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；水又はこれらの混合溶媒が挙げられる。
【００３９】
また、本発明の化合物（１−４）は、本発明の化合物（１−２）から１段階の反応によって製造することもできる。
【００４０】
（工程１１）
工程１１は、本発明の化合物（１−４）と化合物（１０）を還元的アミノ化反応により本発明の化合物（１−５）を得るための工程である。化合物（１０）は、公知化合物であるか、公知化合物から容易に合成できる化合物である。ここで還元的アミノ化反応の条件とは、アミンとアルデヒドとを、酸の存在下又は非存在下、還元剤を加え、溶媒中で縮合させる一般的な還元的アミノ化を示し、例えば、還元剤として水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム等が挙げられる。
【００４１】
（工程１２）
工程１２は、本発明の化合物（１−３）と化合物（１１）から本発明の化合物（１−６）を得るための工程である。塩基の存在下、溶媒中、化合物（１１）を用いた一般的なエーテル化により実施できる。また、必要に応じて、例えば、ヨウ化カリウム、臭化ナトリウム等の添加物を加えることができる。本反応で用いられる塩基としては、例えば、ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基類；ｔｅｒｔ−ブトキシカリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化ナトリウム等の無機塩基類が挙げられる。本反応で用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類；トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等のアミド類；アセトン、２−ブタノン等のケトン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；水又はこれらの混合溶媒が挙げられ、これらのうち、テトラヒドロフラン、トルエン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、２−ブタノン又はアセトニトリルが好ましい。本反応における反応温度は、通常０℃〜２００℃、好ましくは、１５℃〜１２０℃であり、反応時間は、通常１〜４８時間、好ましくは、１〜１２時間である。
【００４２】
以下、反応式３で示される本発明の化合物の製造方法について説明する。この製造工程は、本発明の化合物（１−７）から本発明の化合物（１−８）を製造するための工程である。
（反応式３）
【００４３】
【化４】
【００４４】
（工程１３）
工程１３は、本発明の化合物（１−７）から本発明の化合物（１−８）を得るための工程である。本工程はハロゲン原子を水素原子に還元する一般的還元反応により実施でき、例えばパラジウム−炭素、白金等の触媒を用いた水素添加による接触還元反応を行うことにより実施できる。
【実施例】
【００４５】
以下に実施例及び試験例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
（実施例１）
３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］安息香酸メチル（化合物番号１）の製造
（１）１−（ピリジン−４−イル）ブタン−１，３−ジオンの製造
【００４６】
【化５】
【００４７】
イソニコチン酸メチル（２００ｇ）アセトン（１６９ｇ）のジエチルエーテル（１５００ｍｌ）溶液に、ナトリウムメトキシド（７８．７ｇ）を加え、５０℃にて３時間攪拌した。反応液に酢酸（８７．６ｇ）及び水を加え、ジエチルエーテルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下濃縮した。ジイソプロピルエーテル（１００ｍｌ）を加え、氷浴下、３０分間攪拌後、結晶をろ取し、黄色個体の表題化合物（６６．０ｇ、２８％）を得た。
（２）４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリジンの製造
【００４８】
【化６】
【００４９】
実施例１−（１）で製造した１−（ピリジン−４−イル）ブタン−１，３−ジオン（６６．０ｇ）のエタノール（２５０ｍｌ）溶液にヒドラジン１水和物（４０．０ｇ）を加え、１時間攪拌した。反応液を塩−氷浴下、１時間攪拌後、析出した結晶をろ取し、無色固体の表題化合物（３３ｇ、５１％）を得た。
（３）４−（４−ブロモ−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリジンの製造
【００５０】
【化７】
【００５１】
実施例１−（２）で製造した４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリジン（２７．０ｇ）のクロロホルム（２５００ｍｌ）溶液に臭素（２７．２ｇ）のクロロホルム（５００ｍｌ）溶液を滴下した。室温にて１時間攪拌後、反応液に飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下濃縮した。得られた固体を酢酸エチルにて洗浄し、表題化合物（２５．６ｇ、６３％）を得た。
【００５２】
（４）４−（４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリジンの製造
【００５３】
【化８】
【００５４】
実施例１−（３）で製造した４−（４−ブロモ−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリジン（４．００ｇ）、４クロロフェニルボロン酸（５．２８ｇ）、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（３．９０ｇ）、２．０Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（３０ｍｌ）、トルエン（３０ｍｌ）及びエタノール（２０ｍｌ）の混合液を１６０℃にて一晩攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝９８：２〜９５：５）にて精製して、薄黄色アモルファスの表題化合物（２．００ｇ，４４％）を得た。
【００５５】
（５）３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］安息香酸メチル（化合物番号１）の製造
【００５６】
【化９】
【００５７】
実施例１−（４）で製造した４−（４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ピリジン（１．００ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液に水素化ナトリウム（０．１４８ｇ）を加え、室温にて１０分間攪拌後、３−クロロ−２−フルオロ安息香酸メチル（１．４０ｇ）を加え、１１０℃にて４時間攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝９８：２〜９６：４）にて精製して、無色油状の表題化合物（０．１８０ｇ，１１％）を得た。
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.11 (s, 3 H) 3.71 (s, 3 H) 7.22 - 7.27 (m, 2 H) 7.35 - 7.42 (m, 4 H) 7.54 - 7.59 (m, 1 H) 7.74 - 7.78 (m, 1 H) 7.94 - 7.98 (m, 1 H) 8.47 - 8.51 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 438(M+H)+
【００５８】
（実施例２）
｛３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝メタノール（化合物番号２）の製造
【００５９】
【化１０】
【００６０】
実施例１−（５）で製造した３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］安息香酸メチル（０．１７０ｇ）のテトラヒドロフラン（２．０ｍＬ）溶液に氷浴下、１．０Ｍジイソブチルアルミニウム水素化物のトルエン溶液（１．４７ｍｌ）加え、氷浴下４時間攪拌した。反応液に飽和ロッシェル塩水溶液を加え、室温にて２時間攪拌後、酢酸エチルで抽出し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝１００：０〜９７：３）にて精製して、無色アモルファスの表題化合物（０．０７０ｇ，４４％）を得た。
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.11 (s, 3 H) 3.11 (br. s., 1 H) 4.33 - 4.42 (m, 2 H) 7.21 - 7.25 (m, 2 H) 7.34 - 7.44 (m, 4 H) 7.47 - 7.58 (m, 3 H) 8.48 - 8.54 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 410(M+H)+
【００６１】
（実施例３）
１−｛３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルメタンアミン（化合物番号３）の製造
（１）３−クロロ−２−（４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ベンズアルデヒドの製造
【００６２】
【化１１】
【００６３】
２−ヨードキシ安息香酸（０．０４２ｇ）にジメチルスルホキシド（２．０ｍｌ）を加え、室温にて３０分間攪拌して溶解させた。反応液に実施例２で製造した｛３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝メタノール（０．０６０ｇ）を加え、室温にて一晩攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下濃縮した。無色油状の表題化合物（０．０７０ｇ）を得た。
【００６４】
（２）１−｛３−クロロ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルメタンアミンの製造
【００６５】
【化１２】
【００６６】
実施例３−（１）で製造した（３−クロロ−２−（４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ベンズアルデヒド（０．０７０ｇ）のクロロホルム（１．０ｍｌ）溶液に酢酸（０．０４５ｇ）、２．０Ｍジメチルアミンのテトラヒドロフラン溶液（０．３６ｍｌ）及びトリアセトキシホウ水素化ナトリウム（０．１６０ｇ）を加え、室温にて一晩攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、減圧下濃縮した。濃縮残査を分取型薄層クロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝１８：１）にて精製して、無色固体の表題化合物（０．０４０ｇ，６１％）を得た。
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.04 (s, 3 H) 2.14 (s, 6 H) 3.12 (d, J=13.75 Hz, 1 H) 3.26 (d, J=13.75 Hz, 1 H) 7.22 - 7.25 (m, 2 H) 7.37 - 7.56 (m, 7 H) 8.48 - 8.52 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 437(M+H)+
【００６７】
次に示す化合物は、実施例１−実施例３に示した方法で合成した。
化合物番号４ ４−［４−（４−クロロフェニル）−１−（２，６−ジクロロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］ピリジン
【００６８】
【化１３】
【００６９】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.08 (s, 3 H) 7.22 - 7.27 (m, 2 H) 7.37 - 7.45 (m, 5 H) 7.51 - 7.55 (m, 2 H) 8.48 - 8.52 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 414(M+H)+
【００７０】
化合物番号５ 3,5-ジクロロ-4-[4-(4-クロロフェニル)-5-メチル-3-(ピリジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル]安息香酸メチル
【００７１】
【化１４】
【００７２】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.07 (s, 3 H), 3.99 (s, 3 H), 7.17 - 7.27 (m, 2 H), 7.32 - 7.45 (m, 4 H), 8.16 (s, 2 H), 8.41 - 8.59 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 472(M+H)+
【００７３】
化合物番号６ ｛３，５−ジクロロ−４−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝メタノール
【００７４】
【化１５】
【００７５】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.06 (s, 3 H) 4.75 (s, 2 H) 7.21 - 7.25 (m, 2 H) 7.38 - 7.43 (m, 4 H) 7.48 (s, 2 H) 8.49 - 8.54 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 444(M+H)+
【００７６】
化合物番号７ １−｛３，５−ジクロロ−４−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルメタンアミン
【００７７】
【化１６】
【００７８】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.07 (s, 3 H), 2.29 (s, 6 H), 3.45 (s, 2 H), 7.19 - 7.28 (m, 2 H), 7.34 - 7.44 (m, 4 H), 7.49 (s, 2 H), 8.45 - 8.53 (m, 2 H)
HRMS (ESI)(Positive) m/z; 471（M+H）+
【００７９】
化合物番号８ ｛３−ブロモ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝メタノール
【００８０】
【化１７】
【００８１】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.11 (s, 3 H) 4.31 - 4.46 (m, 2 H) 7.22 - 7.25 (m, 2 H) 7.34 - 7.46 (m, 5 H) 7.58 - 7.64 (m, 1 H) 7.70 - 7.75 (m, 1 H) 8.48 - 8.55 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 454(M+H)+
【００８２】
化合物番号９ ｛２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ベンゼン−１，３−ジイル｝ジメタノール
【００８３】
【化１８】
【００８４】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.04 (s, 3 H) 4.30 - 4.45 (m, 4 H) 7.19 - 7.24 (m, 2 H) 7.32 - 7.36 (m, 2 H) 7.39 - 7.44 (m, 2 H) 7.57 - 7.65 (m, 3 H) 8.45 - 8.53 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 406(M+H)+
【００８５】
化合物番号１０ ｛２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−３−フルオロフェニル｝メタノール
【００８６】
【化１９】
【００８７】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.17 (s, 3 H) 4.34 - 4.53 (m, 2 H) 7.19 - 7.56 (m, 9 H) 8.52 (br. s., 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 394(M+H)+
【００８８】
化合物番号１１ {3-クロロ-2-[4-(4-メトキシフェニル)-5-メチル-3-(ピリジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル]フェニル}メタノール
【００８９】
【化２０】
【００９０】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.11 (s, 3 H) 3.88 (s, 3 H) 4.33 - 4.43 (m, 2 H) 6.95 - 7.01 (m, 2 H) 7.18 - 7.24 (m, 2 H) 7.39 - 7.72 (m, 6 H) 8.43 - 8.54 (m, 1 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 406(M+H)+
【００９１】
（実施例４）
４−｛１−［２−ブロモ−６−（メトキシメチル）フェニル］−４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル｝ピリジン（化合物番号１２）の製造
【００９２】
【化２１】
【００９３】
３−ブロモ−２−［４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−３−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル｝メタノール（化合物番号８）（０．０９０ｇ）のＮ，Ｎジメチルホルムアミド（１．０ｍｌ）溶液に水素化ナトリウム（０．００８ｇ）を加え、室温にて１０分間攪拌した。反応液にメチルヨージド（０．０４３ｇ）を加え、室温にて１時間攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルにて抽出し、減圧下濃縮した。濃縮残査を分取型薄層クロマトグラフィー展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝１８：１）にて精製して、薄黄色固体の表題化合物（０．０２５ｇ，２７％）を得た。
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.06 (s, 3 H) 3.32 (s, 3 H) 4.17 (d, J=12.84 Hz, 1 H) 4.32 (d, J=12.84 Hz, 1 H) 7.22 - 7.26 (m, 2 H) 7.38 - 7.44 (m, 5 H) 7.58 - 7.61 (m, 1 H) 7.68 - 7.71 (m, 1 H) 8.49 - 8.52 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 468(M+H)+
【００９４】
（実施例５）
４−｛４−（４−クロロフェニル）−１−［２−（メトキシメチル）フェニル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル｝ピリジン（化合物番号１３）の製造
【００９５】
【化２２】
【００９６】
実施例４で製造した４−｛１−［２−ブロモ−６−（メトキシメチル）フェニル］−４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル｝ピリジン（０．０２０ｇ）のエタノール（１．０ｍｌ）溶液に１０％パラジウムカーボン（０．０１０ｇ）を加え、水素雰囲気下室温にて８時間攪拌した。セライト濾過後、減圧下濃縮した。濃縮残査を分取型薄層クロマトグラフィー展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝１８：１）にて精製して、薄黄色アモルファスの表題化合物（０．０１０ｇ，６４％）を得た。
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.09 (s, 3 H) 3.33 (s, 3 H) 4.33 (s, 2 H) 7.20 - 7.25 (m, 2 H) 7.33 - 7.57 (m, 6 H) 7.63 - 7.70 (m, 1 H) 8.48 - 8.53 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 390(M+H)+
次に示す化合物は、実施例４−実施例５に示した方法で合成した。
【００９７】
化合物番号１４ ４−｛１−［２−ブロモ−６−（エトキシメチル）フェニル］−４−（４−クロロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル｝ピリジン
【００９８】
【化２３】
【００９９】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.16 (br. s., 3 H) 2.02 - 2.12 (m, 3 H) 3.33 - 3.58 (m, 2 H) 4.19 - 4.39 (m, 2 H) 7.18 - 7.37 (m, 2 H) 7.42 - 7.79 (m, 5 H) 8.00 (br. s., 2 H) 8.55 (br. s., 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 482(M+H)+
【０１００】
化合物番号１５ 4-{4-(4-クロロフェニル)-1-[2-(エトキシメチル)フェニル]-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル}ピリジン
【０１０１】
【化２４】
【０１０２】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.07 - 1.36 (m, 3 H) 2.10 (br. s., 3 H) 3.41 - 3.74 (m, 2 H) 4.31 - 4.63 (m, 2 H) 7.29 - 9.10 (m, 12 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 404(M+H)+
【０１０３】
化合物番号１６ {2-[4-(4-クロロフェニル)-5-メチル-3-(ピリジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル]フェニル}メタノール
【０１０４】
【化２５】
【０１０５】
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 2.22 (s, 3 H) 4.44 (s, 2 H) 7.19 - 7.25 (m, 2 H) 7.31 - 7.55 (m, 7 H) 7.61 - 7.68 (m, 1 H) 8.47 - 8.57 (m, 2 H)
MS (ESI/APCI Dual) (Positive) m/z; 376(M+H)+
【０１０６】
（試験例）
＜ヒト肝ミクロソームにおける本発明化合物のP450サブタイプ阻害作用＞
本発明化合物はアセトニトリルに溶解して試験に用いた。1.4 mL のポリプロピレン製チューブに、pH 7.4 リン酸緩衝液(100 mM), 塩化カリウム (100 mM)、 グルコース６リン酸(1.4 mM)、グルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ (0.17 units/mL)、塩化マグネシウム(2.4 mM)、ヒト肝ミクロソーム(0.1mg/mL)、本発明化合物(化合物番号３：10μM)及び各P450サブタイプに対する基質を加え、37℃でインキュベートした。インキュベート溶液の容積は0.3 mL とし、β-ニコチンアデニンジヌクレオチドリン酸(0.16 mM)添加により反応を開始した。内標を含むアセトニトリ溶液を0.3 mL加えて反応を停止した。混和後、約3,000x g、10分間、4℃で遠心し、得られた上清中における各基質の代謝物量をLC/MS/MSにより分析した。なお、反応時間は代謝物の生成が直線性を示す条件とした。
【０１０７】
なお、上記反応で使用した各P450サブタイプの基質の種類、反応時の濃度、及び反応後の代謝物の種類を表１に示す。
【０１０８】
【表１】
【０１０９】
LC/MS/MSの測定条件は以下である。HPLC：Shimadzu LC-20AD system、MS:API4000 Sciex.カラム：Shimadzu Shim-pack XR-ODS 3x30 mm、グラジエント：移動相Ａ［0.1% HCOOH水溶液］、移動相Ｂ［CH3CN］、条件［移動相の流量1.5 mL/分、Ａ：Ｂ＝98：2からＡ：Ｂ＝5：95まで移動相の組成を変化させ、その後、Ａ：Ｂ＝98：2の組成で流す。］ MS/MSの検出：acetaminophen=152.1/110.0、4'-hydroxydiclofenac=312.2/231.2、4'-hydroxymephenytoin=235.2/150.2、1'-hydroxybufuralol=278.3/186.1、1'-hydroxymidazolam=342.1/203.1、6β-Hydroxytestosterone=305.3/269.2。
【０１１０】
LC/MS/MSデータより各基質代謝物濃度を測定し、下記の式より阻害率を算出した。
【０１１１】
阻害率(percent inhibition(%))の算出法
Percent inhibition (%) = 100-（評価化合物存在下での基質の代謝物濃度/評価化合物非存在下での基質の代謝物濃度）ｘ 100
【０１１２】
＜ヒト肝ミクロソームにおける１−アミノベンゾトリアゾール(ABT)のP450サブタイプ阻害作用＞
ABTについては、代謝依存的なP450阻害剤であるため、あらかじめABTのみをヒト肝ミクロソーム濃度0.5 mg/mL濃度で30分間インキュベート後に各P450分子種に対する阻害活性を測定した。
【０１１３】
ABTはアセトニトリルに溶解して試験に用いた。1.4 mL のポリプロピレン製チューブに、pH 7.4 リン酸緩衝液(100 mM)、塩化カリウム (100 mM)、グルコース６リン酸(1.9 mM)、グルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ (0.18 units/mL), 塩化マグネシウム(2.4 mM)、ヒト肝ミクロソーム(0.5mg/mL)、を加え、ABT(1000μM) を加え、37℃でインキュベートした。インキュベート溶液の容積は0.3 mL とし、β-ニコチンアデニンジヌクレオチドリン酸(0.17 mM)添加により反応を開始した。30分インキュベート後、反応溶液30μLをあらかじめ暖めた1.4 mL ポリプロピレンチューブ中の各基質(表１記載の濃度の5倍濃度)、pH7.4 リン酸緩衝液 (100 mM)、グルコース６リン酸(1.8 mM)、グルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ(0.17 units/mL)、塩化マグネシウム(2.4 mM)、β-ニコチンアデニンジヌクレオチドリン(0.19 mM)を含む270μL のインキュベーション溶液に加えた。さらに、所定時間37℃でインキュベート後、直接阻害と同様に処理した。
【０１１４】
LC/MS/MSにより各基質代謝物濃度を測定し、下記の式より阻害率を算出した。
阻害率(percent inhibition(%))の算出法
Percent inhibition (%) = 100-（ABT存在下での基質の代謝物濃度/ABT非存在下での基質の代謝物濃度）ｘ 100
【０１１５】
試験結果を表２に示す。
【０１１６】
【表２】
【０１１７】
化合物番号３の化合物は、P450の各サブタイプに対し低濃度（10μM）で強力な阻害作用を示した。また、本発明の化合物は、従来の非特異的阻害剤であるABTにより十分に阻害されなかった分子種（2C9）を阻害した。
【産業上の利用可能性】
【０１１８】
本発明化合物を用いることにより、医薬品のP450による代謝の影響を明らかにすることができ、P450との相互作用に起因する医薬品の効果減弱又は副作用増大を効果的に防止することが可能となる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）
【化１】
（式（１）において、Ｒ1a、Ｒ1b及びＲ1cは、同一又は異なって、水素原子、Ｃ1〜Ｃ6アルキル（該Ｃ1〜Ｃ6アルキルは、ヒドロキシ、ハロゲン原子、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、アミノ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルアミノ又は、Ｃ2〜Ｃ12ジアルキルアミノで置換されてもよい）Ｃ2〜Ｃ7アルケニル、Ｃ2〜Ｃ7アルキニル、Ｃ3〜Ｃ7環状アルキル、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ（該Ｃ1〜Ｃ6アルコキシは、ハロゲン原子で置換されてもよい）、ハロゲン原子、Ｃ2〜Ｃ7アルカノイル（該Ｃ2〜Ｃ7アルカノイルは、ハロゲン原子で置換されてもよい）、Ｃ2〜Ｃ7アルコキシカルボニル、カルボキシ、カルバモイル又は、ヒドロキシを示し、
Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ6アルキル又は、Ｃ3〜Ｃ7環状アルキルを示し、
Ｒ3及びＲ4は、同一又は異なって、水素原子、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン原子、又はＣ1〜Ｃ6アルコキシを示す。）
で表されるピラゾール誘導体、又はその塩。
【請求項２】
式（１）において、Ｒ1a、Ｒ1b及びＲ1cが、同一又は異なって、水素原子、Ｃ1〜Ｃ6アルキル（該Ｃ1〜Ｃ6アルキルは、ヒドロキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、Ｃ2〜Ｃ12ジアルキルアミノで置換されてもよい）ハロゲン原子又は、Ｃ2〜Ｃ7アルコキシカルボニルであり、
Ｒ2が、Ｃ1〜Ｃ6アルキルであり、
Ｒ3が、ハロゲン原子又は、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシであり、
Ｒ4が、水素原子である、請求項１に記載のピラゾール誘導体、又はその塩。
【請求項３】
請求項１又は請求項２に記載のピラゾ−ル誘導体、又はその塩を含有する、薬物代謝酵素P450阻害剤。
【請求項１】
式（１）
【化１】
（式（１）において、Ｒ1a、Ｒ1b及びＲ1cは、同一又は異なって、水素原子、Ｃ1〜Ｃ6アルキル（該Ｃ1〜Ｃ6アルキルは、ヒドロキシ、ハロゲン原子、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、アミノ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルアミノ又は、Ｃ2〜Ｃ12ジアルキルアミノで置換されてもよい）Ｃ2〜Ｃ7アルケニル、Ｃ2〜Ｃ7アルキニル、Ｃ3〜Ｃ7環状アルキル、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ（該Ｃ1〜Ｃ6アルコキシは、ハロゲン原子で置換されてもよい）、ハロゲン原子、Ｃ2〜Ｃ7アルカノイル（該Ｃ2〜Ｃ7アルカノイルは、ハロゲン原子で置換されてもよい）、Ｃ2〜Ｃ7アルコキシカルボニル、カルボキシ、カルバモイル又は、ヒドロキシを示し、
Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ6アルキル又は、Ｃ3〜Ｃ7環状アルキルを示し、
Ｒ3及びＲ4は、同一又は異なって、水素原子、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン原子、又はＣ1〜Ｃ6アルコキシを示す。）
で表されるピラゾール誘導体、又はその塩。
【請求項２】
式（１）において、Ｒ1a、Ｒ1b及びＲ1cが、同一又は異なって、水素原子、Ｃ1〜Ｃ6アルキル（該Ｃ1〜Ｃ6アルキルは、ヒドロキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、Ｃ2〜Ｃ12ジアルキルアミノで置換されてもよい）ハロゲン原子又は、Ｃ2〜Ｃ7アルコキシカルボニルであり、
Ｒ2が、Ｃ1〜Ｃ6アルキルであり、
Ｒ3が、ハロゲン原子又は、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシであり、
Ｒ4が、水素原子である、請求項１に記載のピラゾール誘導体、又はその塩。
【請求項３】
請求項１又は請求項２に記載のピラゾ−ル誘導体、又はその塩を含有する、薬物代謝酵素P450阻害剤。
【公開番号】特開２０１０−２４８１１４（Ｐ２０１０−２４８１１４Ａ）
【公開日】平成２２年１１月４日（２０１０．１１．４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−９８５１８（Ｐ２００９−９８５１８）
【出願日】平成２１年４月１５日（２００９．４．１５）
【出願人】（０００００２８１９）大正製薬株式会社 (437)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１１月４日（２０１０．１１．４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年４月１５日（２００９．４．１５）
【出願人】（０００００２８１９）大正製薬株式会社 (437)
【Ｆターム（参考）】
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