（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールなどの（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの調製方法
本発明は、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの調製の新規方法に関する。この化合物は、ＣＣＲ２アンタゴニストを含む薬理学的活性を有する化合物の合成における中間体として有用である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
キラル化合物（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オール、及び特に（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールは、有用な種類の治療剤の製造において重要な中間体である。しかし、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール及び他の（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの調製について当分野において開示されている方法は、望ましい生成物は比較的低い収量であり、及び一貫しない収量、ならびに比較的低い光学活性純度を有する生成物になる。さらに、これらの方法のいくつかは、高価な遷移金属触媒の使用に依存する。（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール及び他の（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの調製方法を開発することも要望されている。であるので、開発は容易に拡大することができ、費用のかかる遷移金属触媒の使用を避け、費用効果があり容易に入手可能な試薬を使用する。したがって、大規模な製造への実用的な適用が可能である。
【０００２】
以前より公知の方法と対照的に、本発明は、比較的高収量で光学活性的に純粋な（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール及び他の（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールを調製する有効な方法論を提供する。したがって、主題発明は、非常に簡素な、短時間の及び高効率な合成による、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール及び他の（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの調製方法を提供する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明は、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール及び他の（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの、効率的及び費用効果のある調製方法に関する。（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールは、ある種の治療剤の調製において、中間体として有用である。特に本発明は、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの調製方法を提供する。（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールは、医薬化合物の合成における中間体である。
【０００４】
本発明の新規方法は、（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オール：
【０００５】
【化７】
の合成に関する。
【０００６】
特に本発明は、式：
【０００７】
【化８】
の化合物（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの調製の新規方法に関する。
【０００８】
これらの化合物は、薬理学的活性を有する他の化合物の合成における中間体である。特に、これらの他の化合物は、ＷＯ０３／０９２５８６、ＷＯ０４／０９２１２４及び他の公報に記載されているようなＣＣＲ２アンタゴニストを含むが、これらに限定されない。ＣＣＲ２アンタゴニストは、例えば、炎症性疾患及び状態の治療、並びに他の疾患及び状態の治療において有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明は、式：
【００１０】
【化９】
の化合物（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを含む、（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの調製方法を対象とする。
【００１１】
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの好ましい調製方法は、以下のスキームに記載されている。
【００１２】
【化１０】
【００１３】
本発明のこの実施形態によると、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）及び補助因子再循環系の存在下におけるケトン還元酵素による４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンの処理は、当分野において開示された方法よりも高い収量、高い光学活性純度及びより効率的な経路で、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを提供する。
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの一般的な調製方法のもう１つの実施形態は、以下のスキーム：
【００１４】
【化１１】
に記載されている。
【００１５】
本発明のこの実施形態によると、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）の存在下、並びにグルコース供給源及びグルコース脱水素酵素と結合しているグルコースを含む補助因子再循環系の存在下におけるケトン還元酵素による４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンの処理は、当分野において開示された方法よりも高い収量、高い光学活性純度及びより効率的な経路で（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを提供する。
【００１６】
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの一般的な調製方法の更なる実施形態は、以下のスキーム：
【００１７】
【化１２】
に記載されている。
【００１８】
本発明のこの実施形態によると、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）の存在下、並びにグルコース供給源及びグルコース脱水素酵素と結合しているグルコースを含む補助因子再循環系の存在下におけるケトン還元酵素による４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンの処理は、当分野に開示された方法よりも高い収量、高い光学活性純度及びより効率的な経路で（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを提供する。
【００１９】
もう１つの実施形態において、本発明は、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを調製するための、ＮＡＤＰＨ並びにグルコース供給源及びグルコース脱水素酵素の存在下におけるケトン還元酵素による４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンの処理を含む、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの調製方法を対象とする。
【００２０】
本発明の具体的な実施形態は、式：
【００２１】
【化１３】
の（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの調製方法に関し、この方法は、式：
【００２２】
【化１４】
の４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンを、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸及び補助因子再循環系の存在下において、ケトン還元酵素により処理し、式：
【００２３】
【化１５】
の（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを得ることを含む。
【００２４】
（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの他のもの、例えば、（Ｒ）−４，４−ジエトキシ−ピラン−３−オール、（Ｒ）−４，４−ジプロピルオキシ−ピラン−３−オール及び（Ｒ）−４，４−ジブチルオキシ−ピラン−３−オールは、類似のスキームを使用して合成され得る。
【００２５】
本発明において、補助因子再循環系には、グルコース及びグルコース脱水素酵素、ギ酸及びギ酸脱水素酵素、グルコース−６−リン酸及びグルコース−６−リン酸脱水素酵素、グルコース−６−硫酸及びグルコース−６−硫酸脱水素酵素、アルコール及びアルコール脱水素酵素、を含むものが挙げられる。本発明に関連して使用できる他の再循環法は、電気化学法、光化学法、還元剤、過剰ＮＡＤＰＨ、又は結合基質手法における補基質としてのアルコールを含む。
【００２６】
本発明において、ケトン還元酵素は、Ｂｉｏｃａｔａｌｙｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．から市販されている、Ｋｅｔｏｎｅ ＲＥＤｕｃｔａｓｅ １０１（ＫＲＥＤ１０１）、Ｋｅｔｏｎｅ ＲＥＤｕｃｔａｓｅ １０２（ＫＲＥＤ１０２）、Ｋｅｔｏｎｅ ＲＥＤｕｃｔａｓｅ １０５（ＫＲＥＤ１０５）、Ｋｅｔｏｎｅ ＲＥＤｕｃｔａｓｅ １０７（ＫＲＥＤ１０７）及びＫｅｔｏｎｅ ＲＥＤｕｃｔａｓｅ １０８（ＫＲＥＤ１０８）、並びに他のケトン還元酵素を含む。
【００２７】
本発明において、基質４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンは、約９５から１０５ｇ／Ｌ（０．６９Ｍから０．６６Ｍ）の濃度で存在することができる。本発明の具体的な実施形態において、４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンは、約１００ｇ／Ｌ（０．６３Ｍ）の濃度で存在することができる。
【００２８】
本発明において、ケトン還元酵素は、約０．０９５から０．１０５ｇ／Ｌの濃度｛９００Ｕから１０００Ｕ（１０ｍＭのエチル−４−クロロアセトアセテートを使用して決定した活性）｝で存在することができる。本発明の具体的な実施形態において、ケトン還元酵素は、約０．１ｇ／Ｌの濃度｛９５０Ｕ（１０ｍＭのエチル−４−クロロアセトアセテートを使用して決定した活性）｝で存在することができる。
【００２９】
本発明において、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸酸化型（ＮＡＤＰ＋）は、約０．１１から０．１４ｇ／Ｌ（０．１４から０．１８ｍＭ）の濃度で存在することができる。本発明の具体的な実施形態において、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸は、約０．１２ｇ／Ｌ（０．１５ｍＭ）の濃度で存在することができる。
【００３０】
本発明において、グルコース源は、約１２０から１４０ｇ／Ｌ（０．６６から０．７７Ｍ）の濃度で存在することができる。
【００３１】
本発明の実施形態において、グルコース脱水素酵素は、グルコース脱水素酵素１０１、グルコース脱水素酵素１０２、グルコース脱水素酵素１０３（Ｂｉｏｃａｔａｌｙｔｉｃｓ）及びこれらの変異体、又は次の会社：Ａｍａｎｏ、Ｃｏｄｅｘｉｓ、Ｓｉｇｍａからのグルコース脱水素酵素及びこの変異体を含む。本発明において、グルコース脱水素酵素は、約０．２８から０．３３ｇ／Ｌの濃度｛５．６から６．６ＭＵ（１００ｍＭのＤ−グルコースを使用して決定した活性）｝で存在することができる。本発明の具体的な実施形態において、グルコース脱水素酵素は、約０．３ｇ／Ｌの濃度｛６ＭＵ（１００ｍＭのＤ−グルコースを使用して決定した活性）｝で存在することができる。
【００３２】
本発明において、反応混合物は、リン酸緩衝液などの水性緩衝液を含むことができる。本発明に関連して使用できるそれらのｐＨ緩衝液は、ＫＨ２ＰＯ４、並びにＭＥＳ、Ｂｉｓ−ｔｒｉｓ、ＰＩＰＥＳ、ＡＣＥＳ、ＢＥＳ、ＭＯＰＳ、ＴＥＳ、ＨＥＰＥＳ及びＴｒｉｓなどの６から８の範囲の緩衝液を含むが、これらに限定されない。したがって、本発明の実施形態において、反応混合物のｐＨは、ｐＨ６から８の間に維持される。本発明のこの実施形態の態様において、反応混合物のｐＨは、約ｐＨ６．５に維持される。本発明の実施形態のもう１つの態様において、反応混合物のｐＨは、酸又は塩基の添加などにより、ｐＨ６から７の間に維持される。
【００３３】
本発明において、反応混合物は、メタノール、エタノール、ＩＰＡ、アセトニトリル、ＤＭＳＯなどの溶媒を更に含むことができる。本発明の実施形態において、溶媒は、約１０％ｖ／ｖ以下の濃度で存在することができる。本発明の実施形態において、反応混合物の温度は、約３０から３８℃に維持される。本発明の更なる実施形態において、反応混合物の温度は、約３５℃に維持される。
【００３４】
便宜上、ケトン還元酵素、ＮＡＤＰ、及びグルコース供給源並びにグルコース脱水素酵素を、４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンとの反応の前に、インサイチュで一緒に接触させることができる。同様に、便宜上、ケトン還元酵素、ＮＡＤＰ、グルコース源及びグルコース脱水素酵素を、４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンとの反応の前に、インサイチュで一緒に接触させることができる。
【００３５】
本発明に従って得た（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールは、出発物質として、更なる反応において直接に又は精製した後で使用され得る。
【００３６】
更なる実施形態において、本発明は、アセトニトリル、トルエン、アルコール（メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールを含むが、これらに限定されない）、メチルエチルケトン、酢酸エチル、酢酸イソプロピル及びＴＨＦの１つまたはそれ以上から選択される溶媒により反応混合物を抽出することを含む、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの精製方法を対象とする。次に有機抽出物を真空蒸留により濃縮する。
【００３７】
この更なる実施形態の態様において、アセトニトリルを含む溶媒による反応混合物の抽出は、約２０から３０℃の温度で実施される。
【００３８】
この更なる実施形態の別の態様において、反応混合物は、２Ｍ無機塩（ＮａＣｌ、ＫＣｌなど）により飽和され、その後、生成物をアセトニトリルにより抽出し、トルエンを加えて、有機抽出物における水の水準を低減する。この更なる実施形態の態様において、溶媒の濃縮は、約５０から６０℃のジャケット温度で真空蒸留により実施される。
【００３９】
後に続く各サイクルにおいて、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの収量を更に向上させるために、抽出が反復する方法で繰り返され得ることは、当業者に理解されよう。
【００４０】
本発明のもう１つの態様は、９０％を超し、９５％を超し、９８％を超し、９９％を超し、９９．５％を超し（鏡像異性体過剰率）、又は９９．９％を超す（鏡像異性体過剰率）鏡像異性体純度（鏡像異性体過剰率）において存在する、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを対象とする。
【００４１】
主題の方法のための出発物質及び試薬は、市販されているもしくは文献において公知であるもののいずれか、又は類似の化合物のために記載されている文献の方法に従って調製され得る。反応及び得られた反応生成物の精製を実行することにおいて要求される技能は、当業者に公知である。精製手順は、結晶化、蒸留、順相又は逆相クロマトグラフィーを含む。
【００４２】
以下の実施例は、更なる例示の目的のためにのみ提供され、開示された発明を制限することを意図しない。
【実施例１】
【００４３】
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール：以下の物質を調製した：ジメトキシピラノン０．６２ｋｇ（３．８８ｍｏｌ）を含むジメトキシピラノン水溶液３．１８ｋｇ（２．９Ｌ）、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）６２ｍｌ中のＫＲＥＤ１０１ ０．６２ｇ（５．９ＭＵ）の溶液、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）６２ｍｌ中のＧＤＨ １．８６ｇ（３７．２ＭＵ）の溶液、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）６２ｍｌ中のＮＡＤＰ＋二ナトリウム塩０．７４ｇ（０．９４ｍｍｏｌ）の溶液、及び１．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）２Ｌ中のグルコース０．８ｋｇ（４．４８ｍｏｌ）の溶液。グルコース溶液を容器の中に入れ、ジメトキシピラノン水溶液３．１８ｋｇを加えて、０．５Ｍの最終緩衝液濃度を得た。反応を３５℃で維持した。ＮＡＤＰ＋の溶液及び２つの酵素を加えた。最終反応容量は、７．５ｋｇ（６．２Ｌ）であった。反応をｐＨ低下によりモニターし、６．０から６．５へのｐＨの段階的な調整を、２．５時間毎に２．５Ｍ ＫＨＣＯ３溶液の約０．５Ｌを添加することにより行った。反応の終了は、１４時間以内に起きた（１００％ＡＹ、ｅｅ＞９８％）。ｐＨを、２．５Ｍ ＫＨＣＯ３を使用し７．０に上昇させて、単離の準備を整えた。得られた反応混合物９．７Ｌは、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを６２０ｇまで含有する。
【実施例２】
【００４４】
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール：以下の物質を調製した：ジメトキシピラノン３８．３ｋｇ（２３９ｍｏｌ）を含むジメトキシピラノン水溶液２０４ｋｇ（１９３Ｌ）、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）３．８５Ｌ中のＫＲＥＤ１０１ ３８．４ｇ（３６５ＭＵ）の溶液、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）３．８５Ｌ中のＧＤＨ １１５．５ｇ（２３１０ＭＵ）の溶液、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）３．８５Ｌ中のＮＡＤＰ＋二ナトリウム塩４７．６ｇ（６０ｍｍｏｌ）、及び１．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）３２Ｌ中のグルコース４９．８ｋｇ（２７７ｍｏｌ）の溶液。グルコース溶液を容器の中に入れ、ジメトキシピラノン水溶液２０４ｋｇを加えて、０．５Ｍの最終緩衝液濃度を得た。反応を３５℃に維持した。ＮＡＤＰ＋の溶液及び２つの酵素を加えた。反応をｐＨ低下によりモニターし、６．０から６．５へのｐＨの段階的な調整を、反応の間、２．５Ｍ ＫＨＣＯ３溶液の約８３Ｌを添加して行った。反応の終了は、１８時間以内に起きた（１００％ＡＹ、ｅｅ＞９９％）。ｐＨを、２．５Ｍ ＫＨＣＯ３を使用し７．０に上昇させて、単離の準備を整えた。得られた反応混合物５７０Ｌは、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを３８．３ｋｇまで含有する。
【実施例３】
【００４５】
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの抽出：ＫＣｌ １．４６ｋｇ（約２Ｍ）を実施例１からの反応混合物（（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを、６２０ｇまで含有する、およそ９．７Ｌ）に加えた。その後、１．５バッチ容量（ＢＶ）のアセトニトリルを加えて、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール生成物を抽出し、続いてトルエン０．５ＢＶを加え、有機層を乾燥した。有機及び水層を、別々のドラムに切り分けた。次に、水層を、更なるアセトニトリル１．５ＢＶ及びトルエン０．５ＢＶにより逆抽出した。（ＦｉｓｈｅｒＰａｋ溶媒を、全ての抽出のために使用した。）２回の抽出に対する投入及び容量分布を、下記の表にまとめる。
【００４６】
【表１】
【００４７】
【表２】
【００４８】
【表３】
【００４９】
【表４】
【実施例４】
【００５０】
真空濃縮、溶媒交換、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール：有機抽出物（実施例３）を合わせた（４０．４Ｌ）。約２８″Ｈｇ真空、５５℃の浴での真空蒸留を、容量が約１Ｌ（およそ４０倍の濃縮）になるまで実施した。その後、トルエン約１０Ｌを加えた。濃縮物を濾過して残留塩を除去し、フィルターをトルエン約３００ｍＬですすいだ。元の濃縮物に洗浄を加えて、約１．３２の最終濃縮物を得た。最終濃縮物をＧＣにより分析したところ、４４９．３ｇ／Ｌの（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール生成物を含有していた。したがって、単離した収量は５９３．１ｇであり、９５．６％の全体的な収率であった。
【実施例５】
【００５１】
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの抽出：ＫＣｌ ９０．３ｋｇを、実施例２からの反応混合物（（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを約４０ｋｇまで含有する、およそ５７０Ｌ）に加えた。その後、１．５バッチ容量（ＢＶ）のアセトニトリルを加えて、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール生成物を抽出し、続いてトルエン０．５ＢＶを加え、有機層を乾燥した。有機及び水層を、別々のドラムに切り分けた。次に、水層を、更なるアセトニトリル１．５ＢＶ及びトルエン０．５ＢＶにより逆抽出した。
【実施例６】
【００５２】
真空濃縮、溶媒交換、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール：有機抽出物（実施例５）を合わせ、次に、約２８″Ｈｇ真空、５５℃の浴での真空蒸留を実施して、バッチを濃縮し、その後トルエンを加え、トルエンへの溶媒交換を完了した。トルエン中のＲ−ジメトキシアルコール溶液の合計７２．５ｋｇを、ドラムを叩いて、ラインフィルターを介してＰＴＦＥ裏打ちドラムの中に送った。ドラムの内容物をＧＣにより分析したところ、５５１ｇ／ｌであり、１．００９ｋｇ／Ｌの密度であった。これは、Ｒ−ジメトキシアルコール３９．６ｋｇと等しい。トルエン中のＲ−ジメトキシアルコール溶液の合計６８．０ｋｇを、ドラムを叩いて、ＰＴＦＥ裏打ちドラムの中に送った。ドラムの内容物をＧＣにより分析したところ、５５１．５ｇ／ｌであり、１．０１９８ｋｇ／Ｌの密度であった。これはＲ−ジメトキシアルコール３９．５ｋｇと等しい。
【実施例７】
【００５３】
（Ｒ）−４，４−ジプロピルオキシ−ピラン−３−オール：以下の物質を調製した：ジプロピルオキシピラノン５０．５ｇ（０．２３ｍｏｌ）、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）５０ｍｌ中のＫＲＥＤ１０１ ０．１３ｇ（１．２ＭＵ）の溶液、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）１３ｍｌ中のＧＤＨ ０．３９ｇ（７．８ＭＵ）の溶液、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）３５ｍｌ中のＮＡＤＰ＋二ナトリウム塩０．１４ｇ（０．１８ｍｍｏｌ）の溶液、及びＤＩ水２００ｍｌ中のグルコース８０ｇ（０．４ｍｏｌ）の溶液。グルコース溶液を容器に入れ、ジプロピルピラノン５０．５ｇを加えた。反応を３０℃に維持した。ＮＡＤＰ＋の溶液及び２つの酵素を加えた。最終反応容量は１Ｌであった。反応をｐＨ低下によりモニターし、６．０から６．５へのｐＨの段階的な調整を、反応の間、２．５Ｍ ＫＨＣＯ３溶液の約１００ｍｌを添加して行った。反応の終了は、５時間以内に起きた（１００％ＡＹ、ｅｅ＞９８％）。得られた反応混合物１．１Ｌは、（Ｒ）−４，４−ジプロピルオキシ−ピラン−３−オールを５０ｇまで含有する。
【実施例８】
【００５４】
（Ｒ）−４，４−ジプロピルオキシ−ピラン−３−オールの抽出：半分のバッチ容量（ＢＶ）のアセトニトリル、次に、別の半分のバッチ容量のＩＰＡｃを、実施例７からの反応混合物（１０００ｍＬ）に加えて、（Ｒ）−４，４−ジプロピルオキシ−ピラン−３−オール生成物を抽出した。有機及び水層を、別々のボトルに切り分け、その後、水層を、更なるアセトニトリル０．５ＢＶ及びＩＰＡｃ ０．５ＢＶで逆抽出した。
【実施例９】
【００５５】
真空濃縮、（Ｒ）−４，４−ジプロピルオキシ−ピラン−３−オール：有機抽出物を合わせ、次に、約２８″Ｈｇ真空、５５℃の浴での真空蒸留を実施して、バッチを油状物に濃縮した。合計４６ｇのＲ−アルコールのアルコール油（このアルコール油は、生成物４５ｇを含有したと分析）を回収した。
【００５６】
本発明は、ある特定の実施形態を参照して説明及び、例示したが、本発明の精神及び範囲を逸脱することなく手順及びプロトコールの様々な応用、変更、修正、置換、削除又は追加が、可能であることを当業者は理解されるであろう。例えば、上記で示された本発明の手順によって化合物を調製する試薬又は方法論に違いがあるその結果として、上記で記載された特定の条件以外の反応条件を、使用することができる。同様に、出発物質の具体的な反応性は、存在する特定の置換基又は製造の条件に従属し、及び依存して異なることもあり、このような想定内の変化又は結果の違いは、本発明の目的及び実施に合致すると考えられる。したがって、本発明は、特許請求の範囲により定義され、このような特許請求の範囲は、妥当な限り広く解釈されるべきである。
【技術分野】
【０００１】
キラル化合物（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オール、及び特に（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールは、有用な種類の治療剤の製造において重要な中間体である。しかし、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール及び他の（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの調製について当分野において開示されている方法は、望ましい生成物は比較的低い収量であり、及び一貫しない収量、ならびに比較的低い光学活性純度を有する生成物になる。さらに、これらの方法のいくつかは、高価な遷移金属触媒の使用に依存する。（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール及び他の（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの調製方法を開発することも要望されている。であるので、開発は容易に拡大することができ、費用のかかる遷移金属触媒の使用を避け、費用効果があり容易に入手可能な試薬を使用する。したがって、大規模な製造への実用的な適用が可能である。
【０００２】
以前より公知の方法と対照的に、本発明は、比較的高収量で光学活性的に純粋な（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール及び他の（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールを調製する有効な方法論を提供する。したがって、主題発明は、非常に簡素な、短時間の及び高効率な合成による、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール及び他の（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの調製方法を提供する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明は、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール及び他の（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの、効率的及び費用効果のある調製方法に関する。（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールは、ある種の治療剤の調製において、中間体として有用である。特に本発明は、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの調製方法を提供する。（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールは、医薬化合物の合成における中間体である。
【０００４】
本発明の新規方法は、（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オール：
【０００５】
【化７】
の合成に関する。
【０００６】
特に本発明は、式：
【０００７】
【化８】
の化合物（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの調製の新規方法に関する。
【０００８】
これらの化合物は、薬理学的活性を有する他の化合物の合成における中間体である。特に、これらの他の化合物は、ＷＯ０３／０９２５８６、ＷＯ０４／０９２１２４及び他の公報に記載されているようなＣＣＲ２アンタゴニストを含むが、これらに限定されない。ＣＣＲ２アンタゴニストは、例えば、炎症性疾患及び状態の治療、並びに他の疾患及び状態の治療において有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明は、式：
【００１０】
【化９】
の化合物（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを含む、（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの調製方法を対象とする。
【００１１】
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの好ましい調製方法は、以下のスキームに記載されている。
【００１２】
【化１０】
【００１３】
本発明のこの実施形態によると、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）及び補助因子再循環系の存在下におけるケトン還元酵素による４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンの処理は、当分野において開示された方法よりも高い収量、高い光学活性純度及びより効率的な経路で、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを提供する。
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの一般的な調製方法のもう１つの実施形態は、以下のスキーム：
【００１４】
【化１１】
に記載されている。
【００１５】
本発明のこの実施形態によると、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）の存在下、並びにグルコース供給源及びグルコース脱水素酵素と結合しているグルコースを含む補助因子再循環系の存在下におけるケトン還元酵素による４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンの処理は、当分野において開示された方法よりも高い収量、高い光学活性純度及びより効率的な経路で（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを提供する。
【００１６】
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの一般的な調製方法の更なる実施形態は、以下のスキーム：
【００１７】
【化１２】
に記載されている。
【００１８】
本発明のこの実施形態によると、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）の存在下、並びにグルコース供給源及びグルコース脱水素酵素と結合しているグルコースを含む補助因子再循環系の存在下におけるケトン還元酵素による４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンの処理は、当分野に開示された方法よりも高い収量、高い光学活性純度及びより効率的な経路で（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを提供する。
【００１９】
もう１つの実施形態において、本発明は、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを調製するための、ＮＡＤＰＨ並びにグルコース供給源及びグルコース脱水素酵素の存在下におけるケトン還元酵素による４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンの処理を含む、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの調製方法を対象とする。
【００２０】
本発明の具体的な実施形態は、式：
【００２１】
【化１３】
の（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの調製方法に関し、この方法は、式：
【００２２】
【化１４】
の４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンを、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸及び補助因子再循環系の存在下において、ケトン還元酵素により処理し、式：
【００２３】
【化１５】
の（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを得ることを含む。
【００２４】
（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールの他のもの、例えば、（Ｒ）−４，４−ジエトキシ−ピラン−３−オール、（Ｒ）−４，４−ジプロピルオキシ−ピラン−３−オール及び（Ｒ）−４，４−ジブチルオキシ−ピラン−３−オールは、類似のスキームを使用して合成され得る。
【００２５】
本発明において、補助因子再循環系には、グルコース及びグルコース脱水素酵素、ギ酸及びギ酸脱水素酵素、グルコース−６−リン酸及びグルコース−６−リン酸脱水素酵素、グルコース−６−硫酸及びグルコース−６−硫酸脱水素酵素、アルコール及びアルコール脱水素酵素、を含むものが挙げられる。本発明に関連して使用できる他の再循環法は、電気化学法、光化学法、還元剤、過剰ＮＡＤＰＨ、又は結合基質手法における補基質としてのアルコールを含む。
【００２６】
本発明において、ケトン還元酵素は、Ｂｉｏｃａｔａｌｙｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．から市販されている、Ｋｅｔｏｎｅ ＲＥＤｕｃｔａｓｅ １０１（ＫＲＥＤ１０１）、Ｋｅｔｏｎｅ ＲＥＤｕｃｔａｓｅ １０２（ＫＲＥＤ１０２）、Ｋｅｔｏｎｅ ＲＥＤｕｃｔａｓｅ １０５（ＫＲＥＤ１０５）、Ｋｅｔｏｎｅ ＲＥＤｕｃｔａｓｅ １０７（ＫＲＥＤ１０７）及びＫｅｔｏｎｅ ＲＥＤｕｃｔａｓｅ １０８（ＫＲＥＤ１０８）、並びに他のケトン還元酵素を含む。
【００２７】
本発明において、基質４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンは、約９５から１０５ｇ／Ｌ（０．６９Ｍから０．６６Ｍ）の濃度で存在することができる。本発明の具体的な実施形態において、４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンは、約１００ｇ／Ｌ（０．６３Ｍ）の濃度で存在することができる。
【００２８】
本発明において、ケトン還元酵素は、約０．０９５から０．１０５ｇ／Ｌの濃度｛９００Ｕから１０００Ｕ（１０ｍＭのエチル−４−クロロアセトアセテートを使用して決定した活性）｝で存在することができる。本発明の具体的な実施形態において、ケトン還元酵素は、約０．１ｇ／Ｌの濃度｛９５０Ｕ（１０ｍＭのエチル−４−クロロアセトアセテートを使用して決定した活性）｝で存在することができる。
【００２９】
本発明において、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸酸化型（ＮＡＤＰ＋）は、約０．１１から０．１４ｇ／Ｌ（０．１４から０．１８ｍＭ）の濃度で存在することができる。本発明の具体的な実施形態において、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸は、約０．１２ｇ／Ｌ（０．１５ｍＭ）の濃度で存在することができる。
【００３０】
本発明において、グルコース源は、約１２０から１４０ｇ／Ｌ（０．６６から０．７７Ｍ）の濃度で存在することができる。
【００３１】
本発明の実施形態において、グルコース脱水素酵素は、グルコース脱水素酵素１０１、グルコース脱水素酵素１０２、グルコース脱水素酵素１０３（Ｂｉｏｃａｔａｌｙｔｉｃｓ）及びこれらの変異体、又は次の会社：Ａｍａｎｏ、Ｃｏｄｅｘｉｓ、Ｓｉｇｍａからのグルコース脱水素酵素及びこの変異体を含む。本発明において、グルコース脱水素酵素は、約０．２８から０．３３ｇ／Ｌの濃度｛５．６から６．６ＭＵ（１００ｍＭのＤ−グルコースを使用して決定した活性）｝で存在することができる。本発明の具体的な実施形態において、グルコース脱水素酵素は、約０．３ｇ／Ｌの濃度｛６ＭＵ（１００ｍＭのＤ−グルコースを使用して決定した活性）｝で存在することができる。
【００３２】
本発明において、反応混合物は、リン酸緩衝液などの水性緩衝液を含むことができる。本発明に関連して使用できるそれらのｐＨ緩衝液は、ＫＨ２ＰＯ４、並びにＭＥＳ、Ｂｉｓ−ｔｒｉｓ、ＰＩＰＥＳ、ＡＣＥＳ、ＢＥＳ、ＭＯＰＳ、ＴＥＳ、ＨＥＰＥＳ及びＴｒｉｓなどの６から８の範囲の緩衝液を含むが、これらに限定されない。したがって、本発明の実施形態において、反応混合物のｐＨは、ｐＨ６から８の間に維持される。本発明のこの実施形態の態様において、反応混合物のｐＨは、約ｐＨ６．５に維持される。本発明の実施形態のもう１つの態様において、反応混合物のｐＨは、酸又は塩基の添加などにより、ｐＨ６から７の間に維持される。
【００３３】
本発明において、反応混合物は、メタノール、エタノール、ＩＰＡ、アセトニトリル、ＤＭＳＯなどの溶媒を更に含むことができる。本発明の実施形態において、溶媒は、約１０％ｖ／ｖ以下の濃度で存在することができる。本発明の実施形態において、反応混合物の温度は、約３０から３８℃に維持される。本発明の更なる実施形態において、反応混合物の温度は、約３５℃に維持される。
【００３４】
便宜上、ケトン還元酵素、ＮＡＤＰ、及びグルコース供給源並びにグルコース脱水素酵素を、４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンとの反応の前に、インサイチュで一緒に接触させることができる。同様に、便宜上、ケトン還元酵素、ＮＡＤＰ、グルコース源及びグルコース脱水素酵素を、４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンとの反応の前に、インサイチュで一緒に接触させることができる。
【００３５】
本発明に従って得た（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールは、出発物質として、更なる反応において直接に又は精製した後で使用され得る。
【００３６】
更なる実施形態において、本発明は、アセトニトリル、トルエン、アルコール（メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールを含むが、これらに限定されない）、メチルエチルケトン、酢酸エチル、酢酸イソプロピル及びＴＨＦの１つまたはそれ以上から選択される溶媒により反応混合物を抽出することを含む、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの精製方法を対象とする。次に有機抽出物を真空蒸留により濃縮する。
【００３７】
この更なる実施形態の態様において、アセトニトリルを含む溶媒による反応混合物の抽出は、約２０から３０℃の温度で実施される。
【００３８】
この更なる実施形態の別の態様において、反応混合物は、２Ｍ無機塩（ＮａＣｌ、ＫＣｌなど）により飽和され、その後、生成物をアセトニトリルにより抽出し、トルエンを加えて、有機抽出物における水の水準を低減する。この更なる実施形態の態様において、溶媒の濃縮は、約５０から６０℃のジャケット温度で真空蒸留により実施される。
【００３９】
後に続く各サイクルにおいて、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの収量を更に向上させるために、抽出が反復する方法で繰り返され得ることは、当業者に理解されよう。
【００４０】
本発明のもう１つの態様は、９０％を超し、９５％を超し、９８％を超し、９９％を超し、９９．５％を超し（鏡像異性体過剰率）、又は９９．９％を超す（鏡像異性体過剰率）鏡像異性体純度（鏡像異性体過剰率）において存在する、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを対象とする。
【００４１】
主題の方法のための出発物質及び試薬は、市販されているもしくは文献において公知であるもののいずれか、又は類似の化合物のために記載されている文献の方法に従って調製され得る。反応及び得られた反応生成物の精製を実行することにおいて要求される技能は、当業者に公知である。精製手順は、結晶化、蒸留、順相又は逆相クロマトグラフィーを含む。
【００４２】
以下の実施例は、更なる例示の目的のためにのみ提供され、開示された発明を制限することを意図しない。
【実施例１】
【００４３】
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール：以下の物質を調製した：ジメトキシピラノン０．６２ｋｇ（３．８８ｍｏｌ）を含むジメトキシピラノン水溶液３．１８ｋｇ（２．９Ｌ）、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）６２ｍｌ中のＫＲＥＤ１０１ ０．６２ｇ（５．９ＭＵ）の溶液、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）６２ｍｌ中のＧＤＨ １．８６ｇ（３７．２ＭＵ）の溶液、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）６２ｍｌ中のＮＡＤＰ＋二ナトリウム塩０．７４ｇ（０．９４ｍｍｏｌ）の溶液、及び１．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）２Ｌ中のグルコース０．８ｋｇ（４．４８ｍｏｌ）の溶液。グルコース溶液を容器の中に入れ、ジメトキシピラノン水溶液３．１８ｋｇを加えて、０．５Ｍの最終緩衝液濃度を得た。反応を３５℃で維持した。ＮＡＤＰ＋の溶液及び２つの酵素を加えた。最終反応容量は、７．５ｋｇ（６．２Ｌ）であった。反応をｐＨ低下によりモニターし、６．０から６．５へのｐＨの段階的な調整を、２．５時間毎に２．５Ｍ ＫＨＣＯ３溶液の約０．５Ｌを添加することにより行った。反応の終了は、１４時間以内に起きた（１００％ＡＹ、ｅｅ＞９８％）。ｐＨを、２．５Ｍ ＫＨＣＯ３を使用し７．０に上昇させて、単離の準備を整えた。得られた反応混合物９．７Ｌは、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを６２０ｇまで含有する。
【実施例２】
【００４４】
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール：以下の物質を調製した：ジメトキシピラノン３８．３ｋｇ（２３９ｍｏｌ）を含むジメトキシピラノン水溶液２０４ｋｇ（１９３Ｌ）、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）３．８５Ｌ中のＫＲＥＤ１０１ ３８．４ｇ（３６５ＭＵ）の溶液、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）３．８５Ｌ中のＧＤＨ １１５．５ｇ（２３１０ＭＵ）の溶液、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）３．８５Ｌ中のＮＡＤＰ＋二ナトリウム塩４７．６ｇ（６０ｍｍｏｌ）、及び１．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）３２Ｌ中のグルコース４９．８ｋｇ（２７７ｍｏｌ）の溶液。グルコース溶液を容器の中に入れ、ジメトキシピラノン水溶液２０４ｋｇを加えて、０．５Ｍの最終緩衝液濃度を得た。反応を３５℃に維持した。ＮＡＤＰ＋の溶液及び２つの酵素を加えた。反応をｐＨ低下によりモニターし、６．０から６．５へのｐＨの段階的な調整を、反応の間、２．５Ｍ ＫＨＣＯ３溶液の約８３Ｌを添加して行った。反応の終了は、１８時間以内に起きた（１００％ＡＹ、ｅｅ＞９９％）。ｐＨを、２．５Ｍ ＫＨＣＯ３を使用し７．０に上昇させて、単離の準備を整えた。得られた反応混合物５７０Ｌは、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを３８．３ｋｇまで含有する。
【実施例３】
【００４５】
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの抽出：ＫＣｌ １．４６ｋｇ（約２Ｍ）を実施例１からの反応混合物（（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを、６２０ｇまで含有する、およそ９．７Ｌ）に加えた。その後、１．５バッチ容量（ＢＶ）のアセトニトリルを加えて、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール生成物を抽出し、続いてトルエン０．５ＢＶを加え、有機層を乾燥した。有機及び水層を、別々のドラムに切り分けた。次に、水層を、更なるアセトニトリル１．５ＢＶ及びトルエン０．５ＢＶにより逆抽出した。（ＦｉｓｈｅｒＰａｋ溶媒を、全ての抽出のために使用した。）２回の抽出に対する投入及び容量分布を、下記の表にまとめる。
【００４６】
【表１】
【００４７】
【表２】
【００４８】
【表３】
【００４９】
【表４】
【実施例４】
【００５０】
真空濃縮、溶媒交換、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール：有機抽出物（実施例３）を合わせた（４０．４Ｌ）。約２８″Ｈｇ真空、５５℃の浴での真空蒸留を、容量が約１Ｌ（およそ４０倍の濃縮）になるまで実施した。その後、トルエン約１０Ｌを加えた。濃縮物を濾過して残留塩を除去し、フィルターをトルエン約３００ｍＬですすいだ。元の濃縮物に洗浄を加えて、約１．３２の最終濃縮物を得た。最終濃縮物をＧＣにより分析したところ、４４９．３ｇ／Ｌの（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール生成物を含有していた。したがって、単離した収量は５９３．１ｇであり、９５．６％の全体的な収率であった。
【実施例５】
【００５１】
（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの抽出：ＫＣｌ ９０．３ｋｇを、実施例２からの反応混合物（（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを約４０ｋｇまで含有する、およそ５７０Ｌ）に加えた。その後、１．５バッチ容量（ＢＶ）のアセトニトリルを加えて、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール生成物を抽出し、続いてトルエン０．５ＢＶを加え、有機層を乾燥した。有機及び水層を、別々のドラムに切り分けた。次に、水層を、更なるアセトニトリル１．５ＢＶ及びトルエン０．５ＢＶにより逆抽出した。
【実施例６】
【００５２】
真空濃縮、溶媒交換、（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オール：有機抽出物（実施例５）を合わせ、次に、約２８″Ｈｇ真空、５５℃の浴での真空蒸留を実施して、バッチを濃縮し、その後トルエンを加え、トルエンへの溶媒交換を完了した。トルエン中のＲ−ジメトキシアルコール溶液の合計７２．５ｋｇを、ドラムを叩いて、ラインフィルターを介してＰＴＦＥ裏打ちドラムの中に送った。ドラムの内容物をＧＣにより分析したところ、５５１ｇ／ｌであり、１．００９ｋｇ／Ｌの密度であった。これは、Ｒ−ジメトキシアルコール３９．６ｋｇと等しい。トルエン中のＲ−ジメトキシアルコール溶液の合計６８．０ｋｇを、ドラムを叩いて、ＰＴＦＥ裏打ちドラムの中に送った。ドラムの内容物をＧＣにより分析したところ、５５１．５ｇ／ｌであり、１．０１９８ｋｇ／Ｌの密度であった。これはＲ−ジメトキシアルコール３９．５ｋｇと等しい。
【実施例７】
【００５３】
（Ｒ）−４，４−ジプロピルオキシ−ピラン−３−オール：以下の物質を調製した：ジプロピルオキシピラノン５０．５ｇ（０．２３ｍｏｌ）、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）５０ｍｌ中のＫＲＥＤ１０１ ０．１３ｇ（１．２ＭＵ）の溶液、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）１３ｍｌ中のＧＤＨ ０．３９ｇ（７．８ＭＵ）の溶液、０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）３５ｍｌ中のＮＡＤＰ＋二ナトリウム塩０．１４ｇ（０．１８ｍｍｏｌ）の溶液、及びＤＩ水２００ｍｌ中のグルコース８０ｇ（０．４ｍｏｌ）の溶液。グルコース溶液を容器に入れ、ジプロピルピラノン５０．５ｇを加えた。反応を３０℃に維持した。ＮＡＤＰ＋の溶液及び２つの酵素を加えた。最終反応容量は１Ｌであった。反応をｐＨ低下によりモニターし、６．０から６．５へのｐＨの段階的な調整を、反応の間、２．５Ｍ ＫＨＣＯ３溶液の約１００ｍｌを添加して行った。反応の終了は、５時間以内に起きた（１００％ＡＹ、ｅｅ＞９８％）。得られた反応混合物１．１Ｌは、（Ｒ）−４，４−ジプロピルオキシ−ピラン−３−オールを５０ｇまで含有する。
【実施例８】
【００５４】
（Ｒ）−４，４−ジプロピルオキシ−ピラン−３−オールの抽出：半分のバッチ容量（ＢＶ）のアセトニトリル、次に、別の半分のバッチ容量のＩＰＡｃを、実施例７からの反応混合物（１０００ｍＬ）に加えて、（Ｒ）−４，４−ジプロピルオキシ−ピラン−３−オール生成物を抽出した。有機及び水層を、別々のボトルに切り分け、その後、水層を、更なるアセトニトリル０．５ＢＶ及びＩＰＡｃ ０．５ＢＶで逆抽出した。
【実施例９】
【００５５】
真空濃縮、（Ｒ）−４，４−ジプロピルオキシ−ピラン−３−オール：有機抽出物を合わせ、次に、約２８″Ｈｇ真空、５５℃の浴での真空蒸留を実施して、バッチを油状物に濃縮した。合計４６ｇのＲ−アルコールのアルコール油（このアルコール油は、生成物４５ｇを含有したと分析）を回収した。
【００５６】
本発明は、ある特定の実施形態を参照して説明及び、例示したが、本発明の精神及び範囲を逸脱することなく手順及びプロトコールの様々な応用、変更、修正、置換、削除又は追加が、可能であることを当業者は理解されるであろう。例えば、上記で示された本発明の手順によって化合物を調製する試薬又は方法論に違いがあるその結果として、上記で記載された特定の条件以外の反応条件を、使用することができる。同様に、出発物質の具体的な反応性は、存在する特定の置換基又は製造の条件に従属し、及び依存して異なることもあり、このような想定内の変化又は結果の違いは、本発明の目的及び実施に合致すると考えられる。したがって、本発明は、特許請求の範囲により定義され、このような特許請求の範囲は、妥当な限り広く解釈されるべきである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
の（Ｒ）−４，４−アルコキシ−ピラン−３−オールの調製方法であり、
式：
【化２】
（式中、Ｒ１は、独立してＣ１−４アルキルであり、及びＲ２は、独立してＣ１−４アルキルである。）の４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オンを、
ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸及び補助因子再循環系の存在下において、ケトン還元酵素と反応させて、式：
【化３】
の（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールを得ることを含む、前記方法。
【請求項２】
式：
【化４】
で示される（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの調製方法であり、
式：
【化５】
の４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンを、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸及び補助因子再循環系の存在下において、ケトン還元酵素と反応させて、式：
【化６】
の（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを得ることを含む、前記方法。
【請求項３】
前記ケトン還元酵素が、ＫＲＥＤ１０１、ＫＲＥＤ１０２、ＫＲＥＤ１０５、ＫＲＥＤ１０７及びＫＲＥＤ１０８から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ケトン還元酵素が、ＫＲＥＤ１０１である、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
ケトン還元酵素が、約０．０９５から０．１０５ｇ／Ｌの濃度で存在する、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
ケトン還元酵素が、約９００Ｕから１０００Ｕの活性で存在する、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
基質４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンが、約９５から１０５ｇ／Ｌの濃度で存在する、請求項２に記載の方法。
【請求項８】
補助因子再循環系が、グルコース及びグルコース脱水素酵素を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
補助因子再循環系が、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸を更に含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸が、約０．１２ｇ／Ｌの濃度で存在する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
グルコースが、約１２０から１４０ｇ／Ｌの濃度で存在する、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
グルコース脱水素酵素が、約０．２８から０．３３ｇ／Ｌの濃度で存在する、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
反応混合物が、リン酸緩衝液を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項１４】
反応混合物が、メタノール、エタノール、ＩＰＡ、アセトニトリル及びＤＭＳＯから選択される溶媒を更に含む、請求項２に記載の方法。
【請求項１５】
反応混合物を、トルエン、アルコール、アセトニトリル、メチルエチルケトン、酢酸エチル、酢酸イソプロピル及びＴＨＦから選択される溶媒により抽出する段階を更に含む、請求項２に記載の方法。
【請求項１６】
反応混合物が、アセトニトリルにより約２０℃から３０℃の温度で抽出される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
反応物がアセトニトリルにより抽出され、及び有機相がトルエンにより乾燥される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
溶媒を真空蒸留を用いて濃縮する段階を更に含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１】
式：
【化１】
の（Ｒ）−４，４−アルコキシ−ピラン−３−オールの調製方法であり、
式：
【化２】
（式中、Ｒ１は、独立してＣ１−４アルキルであり、及びＲ２は、独立してＣ１−４アルキルである。）の４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オンを、
ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸及び補助因子再循環系の存在下において、ケトン還元酵素と反応させて、式：
【化３】
の（Ｒ）−４，４−ジアルコキシ−ピラン−３−オールを得ることを含む、前記方法。
【請求項２】
式：
【化４】
で示される（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールの調製方法であり、
式：
【化５】
の４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンを、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸及び補助因子再循環系の存在下において、ケトン還元酵素と反応させて、式：
【化６】
の（Ｒ）−４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オールを得ることを含む、前記方法。
【請求項３】
前記ケトン還元酵素が、ＫＲＥＤ１０１、ＫＲＥＤ１０２、ＫＲＥＤ１０５、ＫＲＥＤ１０７及びＫＲＥＤ１０８から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ケトン還元酵素が、ＫＲＥＤ１０１である、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
ケトン還元酵素が、約０．０９５から０．１０５ｇ／Ｌの濃度で存在する、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
ケトン還元酵素が、約９００Ｕから１０００Ｕの活性で存在する、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
基質４，４−ジメトキシ−ピラン−３−オンが、約９５から１０５ｇ／Ｌの濃度で存在する、請求項２に記載の方法。
【請求項８】
補助因子再循環系が、グルコース及びグルコース脱水素酵素を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
補助因子再循環系が、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸を更に含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸が、約０．１２ｇ／Ｌの濃度で存在する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
グルコースが、約１２０から１４０ｇ／Ｌの濃度で存在する、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
グルコース脱水素酵素が、約０．２８から０．３３ｇ／Ｌの濃度で存在する、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
反応混合物が、リン酸緩衝液を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項１４】
反応混合物が、メタノール、エタノール、ＩＰＡ、アセトニトリル及びＤＭＳＯから選択される溶媒を更に含む、請求項２に記載の方法。
【請求項１５】
反応混合物を、トルエン、アルコール、アセトニトリル、メチルエチルケトン、酢酸エチル、酢酸イソプロピル及びＴＨＦから選択される溶媒により抽出する段階を更に含む、請求項２に記載の方法。
【請求項１６】
反応混合物が、アセトニトリルにより約２０℃から３０℃の温度で抽出される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
反応物がアセトニトリルにより抽出され、及び有機相がトルエンにより乾燥される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
溶媒を真空蒸留を用いて濃縮する段階を更に含む、請求項１５に記載の方法。
【公表番号】特表２００８−５３６４８４（Ｐ２００８−５３６４８４Ａ）
【公表日】平成２０年９月１１日（２００８．９．１１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５００８４８（Ｐ２００８−５００８４８）
【出願日】平成１８年３月７日（２００６．３．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００８１３３
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０９８９５９
【国際公開日】平成１８年９月２１日（２００６．９．２１）
【出願人】（３９００２３５２６）メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド (924)
【氏名又は名称原語表記】ＭＥＲＣＫ ＆ ＣＯＭＰＡＮＹ ＩＮＣＯＰＯＲＡＴＥＤ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年９月１１日（２００８．９．１１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年３月７日（２００６．３．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００８１３３
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０９８９５９
【国際公開日】平成１８年９月２１日（２００６．９．２１）
【出願人】（３９００２３５２６）メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド (924)
【氏名又は名称原語表記】ＭＥＲＣＫ ＆ ＣＯＭＰＡＮＹ ＩＮＣＯＰＯＲＡＴＥＤ
【Ｆターム（参考）】
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