Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの固体形態
本発明は、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの固体状態の形態、例えば、結晶形態、その薬学的組成物、およびそれを用いる方法に関する。１つの態様においては、化合物１は、実質的に結晶状の、純粋な遊離の形態の形態Ａである。本明細書中に記載されるプロセスは、形態Ａを含む本発明の組成物を調製するために使用できる。これらのプロセスで使用される成分の量と特徴は以下に記載されるとおりである。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本出願は、２００８年１０月２３日に出願された、米国仮特許出願第６１／１０７，８１３号（発明の名称「ＳＯＬＩＤ ＦＯＲＭＳ ＯＦ Ｎ−（４−（７−ＡＺＡＢＩＣＹＣＬＯ［２．２．１］ＨＥＰＴＡＮ−７−ＹＬ）−２−（ＴＲＩＦＬＵＯＲＯＭＥＴＨＹＬ）ＰＨＥＮＹＬ）−４−ＯＸＯ−５−（ＴＲＩＦＬＵＯＲＯＭＥＴＨＹＬ）−１，４−ＤＩＨＹＤＲＯＱＵＩＮＯＬＩＮＥ−３−ＣＡＲＢＯＸＡＭＩＤＥ」）の利益を主張し、この仮特許出願の全内容は、本明細書において参照として援用される。
【０００２】
（発明の技術分野）
本発明は、嚢胞性線維症経膜コンダクタンス制御因子（「ＣＦＴＲ」）の調節因子である、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの固体状態の形態、例えば、結晶形態に関する。本発明はまた、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの結晶形態を含有する薬学的組成物とそれを用いる方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
ＡＴＰカセットトランスポーターは、多種多様な薬理学的因子、潜在的に毒性の薬物、および生体異物、ならびに陰イオンの輸送を制御する膜トランスポータータンパク質の１つのファミリーである。これらは、それらの特定の活性のために、細胞のアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）を結合し、これを使用する相同な膜タンパク質である。これらのトランスポーターのうちのいくつかは、多剤耐性タンパク質（ＭＤＲ１−Ｐ糖タンパク質、もしくは多剤耐性タンパク質ＭＲＰ１のようなもの）として発見され、化学療法剤から悪性ガン細胞を防御する。現在までのところ、４８個のそのようなトランスポーターが同定されており、それらの配列同一性および機能に基づいて、７つのファミリーに分類されている。
【０００４】
疾患と一般的に関係があるＡＴＰカセットトランスポーターファミリーの１つのメンバーは、ｃＡＭＰ／ＡＴＰ媒介性陰イオンチャネル、ＣＦＴＲである。ＣＦＴＲは、様々な細胞型（吸収性および分泌性上皮細胞を含む）の中で発現される。ここでは、ＣＦＴＲは、上記膜を横切る陰イオンの流れ、ならびに他のイオンチャネルおよびタンパク質の活性を制御する。上皮細胞においては、ＣＦＴＲの正常な機能は、呼吸組織および消化組織を含む全身の電解質輸送の維持に重要である。ＣＦＴＲは、膜貫通ドメインの縦列反復から形成されるタンパク質をコードするおよそ１４８０個のアミノ酸から構成され、各々の膜貫通ドメインは、６つの膜貫通ヘリックスと１つのヌクレオチド結合ドメインを含む。２つの膜貫通ドメインは、大きな、極性の、制御性（Ｒ）ドメインによって、チャネル活性および細胞の輸送を制御する複数のリン酸化部位と連結される。
【０００５】
ＣＦＴＲをコードする遺伝子は同定され、配列決定されている（非特許文献１；非特許文献２）、非特許文献３を参照のこと）。この遺伝子の欠損は、嚢胞性線維症（「ＣＦ」）（ヒトにおける最も一般的な致死的遺伝的疾患）を生じるＣＦＴＲ中の突然変異を引き起こす。米国では、２，５００人の乳児のうちのおよそ１人が嚢胞性線維症を発症する。一般的な米国の集団内では、最大１０００万人の人々が、明らかな病的影響を伴わずに上記欠損遺伝子を１コピー持つ。対照的に、上記ＣＦ関連遺伝子を２コピー持つ個体は、慢性肺疾患を含む、ＣＦの衰弱および致死的影響に見舞われる。
【０００６】
嚢胞性線維症の患者では、呼吸器上皮内で内因的に発現されるＣＦＴＲの突然変異が、イオンおよび流体の輸送において不均衡を引き起こす頂端（ａｐｉｃａｌ）の陰イオン分泌の減少をもたらす。陰イオン輸送において生じたこの減少は、肺における粘液蓄積の増大およびそれに付随する微生物感染の一因となり、これらはＣＦ患者において最終的に死を招くことになる。呼吸器疾患に加えて、ＣＦ患者は、消化器の問題および膵不全を患うことが典型的であり、処置しないまま放置した場合は、死に至ることになる。さらに、嚢胞性線維症の男性の大多数は生殖能力がなく、嚢胞性線維症の女性は生殖能力が低下している。２コピーのＣＦ関連遺伝子の深刻な影響とは対照的に、１コピーのＣＦ関連遺伝子を持つ個体は、コレラおよび下痢による脱水症に対して高い耐性を示し、このことは、この集団における比較的高頻度のＣＦ遺伝子を説明していると考えられる。
【０００７】
ＣＦ染色体のＣＦＴＲ遺伝子の配列分析により、病因となる様々な突然変異が明らかにされた（非特許文献４；非特許文献５；および非特許文献６；非特許文献７）。今日までに、ＣＦ遺伝子について１０００を超える病因となる突然変異が同定されている（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｅｎｅｔ．ｓｉｃｋｋｉｄｓ．ｏｎ．ｃａ／ｃｆｔｒ／）。最も優勢な突然変異は、ＣＦＴＲアミノ酸配列の５０８位のフェニルアラニンの欠失であり、これは、一般的にはΔＦ５０８−ＣＦＴＲと呼ばれている。この突然変異は、嚢胞性線維症の症例のおよそ７０％に存在しており、これは重篤な疾患と関連がある。
【０００８】
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲにおける残基５０８の欠失は、形成されつつあるタンパク質の正確な折りたたみを妨げる。この結果、突然変異体タンパク質はＥＲを出られなくなり、原形質膜へ輸送されなくなる。結果として、膜中に存在するチャネルの数は、野生型ＣＦＴＲを発現する細胞中で観察される数よりはるかに少ない。損なわれた輸送機構に加えて、この突然変異はチャネルの開閉にも欠陥を生じる。まとめて考えると、膜中のチャネル数の減少と開閉の欠陥が、上皮を横断する陰イオンの輸送の減少を導き、これは、イオンおよび流体の輸送の欠陥を導く。（非特許文献８）。しかしながら、複数の研究により、野生型ＣＦＴＲより少ないが、膜中のこの少ない数のΔＦ５０８−ＣＦＴＲが機能的であることが示された（非特許文献９；Ｄｅｎｎｉｎｇら、前出；非特許文献１０）。ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ、Ｒ１１７Ｈ−ＣＦＴＲ、およびＧ５５１Ｄ−ＣＦＴＲに加えて、輸送、合成、および／またはチャネル開閉の欠陥を生じる、ＣＦＴＲ中の他の病因となる突然変異は、アップレギュレーションまたはダウンレギュレーションされて、陰イオンの分泌を変化させ得、疾患の進行および／または重症度を変え得る。
【０００９】
ＣＦＴＲは陰イオンに加えて様々な分子を輸送するが、この役割（陰イオン、塩化物、および重炭酸塩の輸送）が、上皮を横断してイオンおよび水を輸送する重要な機構における１つの要素を表すことは明らかである。他の要素としては、上皮Ｎａ＋チャネル、ＥＮａＣ、Ｎａ＋／２Ｃｌ−／Ｋ＋共トランスポーター、Ｎａ＋−Ｋ＋−ＡＴＰａｓｅポンプ、および基底側膜Ｋ＋チャネルが挙げられ、これらは細胞への塩化物の取り込みを担う。
【００１０】
これらの要素が一緒に作用して、細胞内でのそれらの選択的発現および局在により上皮を横断する方向性をもつ輸送を達成する。塩化物の吸収は、頂端膜上に存在するＥＮａＣとＣＦＴＲ、および細胞の基底膜側表面で発現されるＮａ＋−Ｋ＋−ＡＴＰａｓｅポンプおよびＣｌチャネルの協調活性により起こる。管腔側からの塩化物の二次的な能動輸送は細胞内塩化物の蓄積を導き、これが次いで、Ｃｌ−イオンチャネルを介して受動的に細胞から離れることにより、ベクトル輸送が生じ得る。基底膜側表面上のＮａ＋／２Ｃｌ−／Ｋ＋共トランスポーター、Ｎａ＋−Ｋ＋−ＡＴＰａｓｅポンプおよび基底膜Ｋ＋チャネル、そして管腔側上のＣＦＴＲの配置が、管腔側でのＣＦＴＲを介した塩化物の分泌を調和する。水はそれ自体は決して能動的には輸送されないと思われるので、上皮を横切るその流れは、ナトリウムおよび塩化物の大きな流れにより生じた小さな経上皮浸透圧勾配に左右される。
【００１１】
ＣＦＴＲ中の突然変異が原因である重炭酸塩の輸送の機能不全は、特定の分泌機能に障害を引き起こすと仮説が立てられている。例えば、非特許文献１１を参照のこと。
【００１２】
中等度のＣＦＴＲ機能不全と関連があるＣＦＴＲ中の突然変異はまた、ＣＦと共通する特定の疾患の兆候を有する症状があるが、ＣＦについての診断基準を満たさない患者においても明らかである。これらには、先天性両側精管欠損症、特発性慢性膵炎、慢性気管支炎、および慢性副鼻腔炎が含まれる。突然変異体ＣＦＴＲが修飾因子遺伝子または環境因子と並んでリスクファクターであると考えられる他の疾患としては、原発性硬化性胆管炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、および喘息が挙げられる。
【００１３】
タバコの喫煙、低酸素症状態、および環境因子（低酸素シグナル伝達を誘導する）もまた、ＣＦＴＲ機能を低下させることが実証されており、慢性気管支炎のような特定の形態の呼吸器疾患の一因となり得る。ＣＦＴＲ機能障害が原因であり得るが、ＣＦについての診断基準を満たさない疾患は、ＣＦＴＲ関連疾患として特性決定される。
【００１４】
嚢胞性線維症に加えて、ＣＦＴＲ活性の調節は、ＣＦＴＲ中の突然変異により直接引き起こされるのではない他の疾患（例えば、分泌性疾患）およびＣＦＴＲにより媒介される他のタンパク質ミスフォールディング病（ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｏｌｄｉｎｇ ｄｉｓｅａｓｅ）に有効であり得る。ＣＦＴＲは、多くの細胞の上皮を横断する塩化物および重炭酸塩の流れを制御して、流体の移動、タンパク質の可溶化、粘膜の粘性、および酵素活性をコントロールする。ＣＦＴＲの機能不全は、気道、あるいは肝臓および膵臓を含む多くの臓器中の管の遮断を引き起こす可能性がある。増強剤（ｐｏｔｅｎｔｉａｔｏｒ）は、細胞膜中に存在するＣＦＴＲの開閉活性を増強する化合物である。粘膜の肥厚、流体の調節の障害、粘膜クリアランスの障害、または炎症および組織破壊をもたらす管の遮断を伴う任意の疾患が、増強剤についての候補であり得る。
【００１５】
これらには、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、喫煙が原因であるＣＯＰＤ、慢性気管支炎、副鼻腔炎、便秘、ドライアイ疾患、およびシェーグレン症候群、胃食道逆流疾患、胆石、直腸脱、および炎症性腸疾患が含まれるが、これらに限定はされない。ＣＯＰＤは、進行性であり、完全には可逆性でない空気流制限を特徴とする。上記空気流制限は、粘液過剰分泌、気腫、および細気管支炎が原因である。突然変異体ＣＦＴＲまたは野生型ＣＦＴＲの活性化因子は、ＣＯＰＤにおいて一般的である粘液過剰分泌および粘膜絨毛クリアランスの障害を処置できる可能性を示す。具体的には、ＣＦＴＲを横断する陰イオン分泌の増大が、気道表面液体への流体の輸送を促進して粘液を水和し、繊毛周囲の流体の粘性を最適化し得る。このことは、粘液線毛クリアランスの増強およびＣＯＰＤと関連がある症状の軽減をもたらすであろう。加えて、気道クリアランスの改善の結果として進行中の感染および炎症を防ぐことにより、ＣＦＴＲ調節因子は、気腫の特徴である気道の肺実質破壊を防ぐかもしくは遅らせ、そして気道疾患における粘液過剰分泌の根底にある粘液分泌細胞（ｍｕｃｕｓ ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ｃｅｌｌ）の数および大きさの増大を小さくするかまたは反転させ得る。ドライアイ疾患は、涙液の房水産生の低下と、異常な涙膜脂質、タンパク質、およびムチンプロフィールを特徴とする。ドライアイの原因は数多く存在し、そのうちのいくつかとしては、年齢、眼のレーシック手術、関節炎、薬物療法、化学熱傷／熱傷（ｃｈｅｍｉｃａｌ／ｔｈｅｒｍａｌ ｂｕｒｎｓ）、アレルギー、および疾患（例えば、嚢胞性線維症およびシェーグレン症候群）が挙げられる。ＣＦＴＲを介する陰イオン分泌の増大は、角膜内皮細胞および眼を取り囲む分泌腺からの流体輸送を促進して、角膜水和を増大させるであろう。このことは、ドライアイ疾患と関連がある症状を緩和するために役立つであろう。シェーグレン症候群は、免疫系が全身（眼、口、皮膚、呼吸組織、肝臓、膣、および腸を含む）の水分を産生する腺を攻撃する自己免疫疾患である。症状としては、眼、口、および膣の乾燥、ならびに肺疾患が挙げられる。この疾患はまた、関節リウマチ、全身性紅斑、全身性硬化症、および多発性筋炎／皮膚筋炎とも関連がある。タンパク質輸送の機能障害がこの疾患を引き起こすと考えられ、その処置の選択肢は限られている。ＣＦＴＲ活性の調節因子は、上記疾患に罹患した様々な臓器を水和し得、関連する症状の緩和に役立ち得る。嚢胞性線維症を有する個体は、腸閉塞の再発エピソードと、直腸脱、胆石、胃食道逆流疾患、ＧＩ悪性腫瘍、および炎症性腸疾患の高発症率とを有し、これは、ＣＦＴＲ機能がそのような疾患の予防において重要な役割を果たし得ることを示している。
【００１６】
上記で議論されるように、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲにおける残基５０８の欠失は、形成されつつあるタンパク質の正確な折りたたみを妨げ、その結果、突然変異体タンパク質は、ＥＲを出られなくなり、原形質膜へ輸送されなくなると考えられている。結果として、成熟タンパク質は不十分な量しか、原形質膜に存在せず、上皮組織内の塩化物の輸送は、顕著に低下させられる。実際に、ＥＲ機構によるＣＦＴＲのＥＲプロセシングの機能不全というこの細胞性の表現形は、ＣＦ疾患についてのみならず、他の広範囲の孤立性疾患および遺伝性疾患についても、基調であることが示されている。ＥＲ機構が正常に機能できない２つの事項は、上記タンパク質のＥＲ輸出のためのカップリングが行われず、これにより分解が生じること、またはこれらの不完全な／誤って折り畳まれたタンパク質のＥＲ蓄積のいずれかによる（非特許文献１２；非特許文献１３；非特許文献１４；非特許文献１５；非特許文献１６）。第１のクラスのＥＲ機能不全と関連がある疾患は以下である：嚢胞性線維症（上記で議論されるような誤って折り畳まれたΔＦ５０８−ＣＦＴＲが原因である）、遺伝性気腫（ａ１−抗トリプシン；非Ｐｉｚ変異体が原因である）、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固線溶機能不全（ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ−ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓ）（例えば、プロテインＣ欠乏症）、１型遺伝性血管浮腫、脂質プロセシングの機能不全（例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症）、リソソーム蓄積症（例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー症）、ムコ多糖症（リソソームプロセシング酵素が原因である）、サンドホッフ病／テイ−サックス病（Ｓａｎｄｈｏｆ／Ｔａｙ−Ｓａｃｈｓ）（β−ヘキソサミニダーゼが原因である）、クリグラー−ナジャーＩＩ型（ＵＤＰ−グルクロニル−シアリック−トランスフェラーゼが原因である）、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病（インスリン受容体が原因である）、ラロン型小人症（成長ホルモン受容体が原因である）、ミエロペルオキシダーゼ（ｍｙｌｅｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）欠損症、原発性上皮小体機能低下症（プレプロ副甲状腺ホルモンが原因である）、黒色腫（チロシナーゼが原因である）。後者のクラスのＥＲ機能不全と関連がある疾患は以下である：グリカノーシスＣＤＧ１型（ｇｌｙｃａｎｏｓｉｓ ＣＤＧ ｔｙｐｅ １）、遺伝性気腫（α１−抗トリプシン（ＰｉＺ変異体）が原因である）、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症（Ｉ型、ＩＩ型、ＩＶ型プロコラーゲンが原因である）、遺伝性低フィブリノーゲン血症（フィブリノーゲンが原因である）、ＡＣＴ欠損症（α１−抗キモトリプシンが原因である）、尿崩症（ＤＩ）、ニューロフィジン性ＤＩ（ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｅａｌ ＤＩ）（バソプレッシン（ｖａｓｏｐｖｅｓｓｉｎ）ホルモン／Ｖ２受容体が原因である）、腎性（neprogenic）ＤＩ（アクアポリンＩＩが原因である）、シャルコー・マリー・トゥース症候群（末梢ミエリンタンパク質２２が原因である）、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病（βＡＰＰおよびプレセニリンが原因である）、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺（ｐｌａｓｙ）、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害（例えば、ハンチントン病、脊髄小脳失調症Ｉ型、脊髄および延髄性筋萎縮症（ｓｐｉｎａｌ ａｎｄ ｂｕｌｂａｒ ｍｕｓｃｕｌａｒ ａｔｒｏｐｈｙ）、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症（ｄｅｎｔａｔｏｒｕｂａｌ ｐａｌｌｉｄｏｌｕｙｓｉａｎ）、および筋緊張性ジストロフィー）、ならびに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病（プリオンタンパク質のプロセシングの機能不全が原因である）、ファブリー病（リソソームα−ガラクトシダーゼＡが原因である）、シュトロイスラー・シャインカー症候群（Ｐｒｐのプロセシングの機能不全が原因である））、不妊症、膵炎、膵不全、骨粗鬆症、骨減少症、ゴーハム症候群、塩素イオン症（ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｃｈａｎｎｅｌｏｐａｔｈｉｅｓ）、先天性筋緊張症（トムソンおよびベッカー型（Ｔｈｏｍｓｏｎ ａｎｄ Ｂｅｃｋｅｒ ｆｏｒｍ））、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病（Ｄｅｎｔ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、過剰驚愕症、癲癇、過剰驚愕症、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、内臓逆位症を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群としても知られている）、内臓逆位症と毛様体無形成を伴わないＰＣＤ（ｃｉｌｉａｒｙ ａｐｌａｓｉａ）、ならびに肝臓病。
【００１７】
ＣＦＴＲ中の突然変異が関係している他の疾患としては、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）が原因で起こる男性不妊、軽度の肺疾患、特発性膵炎、およびアレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）が挙げられる。非特許文献１７（引用により本明細書中に組み入れられる）を参照のこと。
【００１８】
ＣＦＴＲ活性のアップレギュレーションに加えて、ＣＦＴＲ調節因子による陰イオンの分泌の減少は、上皮の水輸送が、分泌促進剤により活性化された塩化物輸送の結果として劇的に増大する分泌性下痢の処置に有効であり得る。上記機構は、ｃＡＭＰの上昇およびＣＦＴＲの刺激を伴う。
【００１９】
下痢には多くの原因が存在するが、下痢症の主要な結果は、過剰な塩化物輸送から生じることが全てに共通しており、脱水、アシドーシス、発達障害、および死亡が含まれる。急性下痢および慢性下痢は、世界の多くの地域で主要な医療的課題になっている。下痢は、５歳未満の小児における低栄養状態の重大な原因であり、死亡の主原因でもある（５，０００，０００人が死亡／年）。
【００２０】
分泌性下痢はまた、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）および慢性炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の患者においては危険な症状である。先進工業国から新興国への毎年１６００万人の旅行者が下痢を発症し、下痢の重篤度および症例数は、旅行先の国および地域により様々である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２１】
【非特許文献１】Ｇｒｅｇｏｒｙ，Ｒ．Ｊ．ら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ ３４７：３８２−３８６
【非特許文献２】Ｒｉｃｈ，Ｄ．Ｐ．ら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ ３４７：３５８−３６２
【非特許文献３】Ｒｉｏｒｄａｎ，Ｊ．Ｒ．ら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４５：１０６６−１０７３
【非特許文献４】Ｃｕｔｔｉｎｇ，Ｇ．Ｒ．ら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ ３４６：３６６−３６９
【非特許文献５】Ｄｅａｎ，Ｍ．ら（１９９０）Ｃｅｌｌ ６１：８６３：８７０
【非特許文献６】Ｋｅｒｅｍ，Ｂ−Ｓ．ら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４５：１０７３−１０８０
【非特許文献７】Ｋｅｒｅｍ，Ｂ−Ｓら（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８７：８４４７−８４５１
【非特許文献８】Ｑｕｉｎｔｏｎ，Ｐ．Ｍ．（１９９０），ＦＡＳＥＢ Ｊ．４：２７０９−２７２７
【非特許文献９】Ｄｏｌｅｍａｎｓら（１９９１），Ｎａｔｕｒｅ Ｌｏｎｄ．３５４：５２６−５２８
【非特許文献１０】Ｐａｓｙｋ ａｎｄ Ｆｏｓｋｅｔｔ（１９９５），Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：１２３４７−５０
【非特許文献１１】「Ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ：ｉｍｐａｉｒｅｄ ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｕｃｏｖｉｓｃｉｄｏｓｉｓ」，Ｐａｕｌ Ｍ．Ｑｕｉｎｔｏｎ，Ｌａｎｃｅｔ ２００８；３７２：４１５−４１７
【非特許文献１２】Ａｒｉｄｏｒ Ｍ，ら、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．，５（７），ｐｐ．７４５−７５１（１９９９）
【非特許文献１３】Ｓｈａｓｔｒｙ，Ｂ．Ｓ．，ら、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，４３，ｐｐ．１−７（２００３）
【非特許文献１４】Ｒｕｔｉｓｈａｕｓｅｒ，Ｊ．ら、Ｓｗｉｓｓ Ｍｅｄ Ｗｋｌｙ，１３２，ｐｐ．２１１−２２２（２００２）
【非特許文献１５】Ｍｏｒｅｌｌｏ，ＪＰら、ＴＩＰＳ，２１，ｐｐ．４６６−４６９（２０００）
【非特許文献１６】Ｂｒｏｓｓ Ｐ．ら、Ｈｕｍａｎ Ｍｕｔ．，１４，ｐｐ．１８６−１９８（１９９９）
【非特許文献１７】「ＣＦＴＲ−ｏｐａｔｈｉｅｓ：ｄｉｓｅａｓｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ｇｅｎｅ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ」，Ｐｅａｄｅｒ Ｇ．Ｎｏｏｎｅ ａｎｄ Ｍｉｃｈａｅｌ Ｒ．Ｋｎｏｗｌｅｓ，Ｒｅｓｐｉｒ．Ｒｅｓ．２００１，２：３２８−３３２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２２】
したがって、ヒトＣＦＴＲの野生型形態および突然変異形態の強力な選択的ＣＦＴＲ増強剤が必要である。これらの突然変異ＣＦＴＲ形態としては、ΔＦ５０８ｄｅｌ、Ｇ５５１Ｄ、Ｒ１１７Ｈ、２７８９＋５Ｇ−＞Ａが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２３】
哺乳動物の細胞膜中のＣＦＴＲの活性を調節するために使用できるＣＦＴＲ活性の調節因子およびその組成物も必要である。
【００２４】
そのようなＣＦＴＲ活性の調節因子を使用して、ＣＦＴＲ中の突然変異により引き起こされる疾患を処置する方法が必要である。
【００２５】
エクスビボで哺乳動物の細胞膜中のＣＦＴＲ活性を調節する方法が必要である。
【００２６】
加えて、治療薬としての使用に適している薬学的組成物中で容易に使用できる上記化合物の安定な固体形態が必要である。
【課題を解決するための手段】
【００２７】
（発明の要旨）
本発明は、以下の構造を有するＮ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（本明細書中以後、「化合物１」）の固体形態に関する：
【００２８】
【化１】
化合物１およびその薬学的に許容される組成物は、以下を含むがこれらに限定されない様々な疾患、障害、もしくは症状を処置するかまたはその重篤度を低下させるために有用である：嚢胞性線維症、膵炎、副鼻腔炎、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固線溶機能不全（例えば、プロテインＣ欠乏症）、１型遺伝性血管浮腫、脂質プロセシングの機能不全（例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症）、リソソーム蓄積症（例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー症）、ムコ多糖症、サンドホッフ病／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーＩＩ型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性上皮小体機能低下症、黒色腫、グリカノーシスＣＤＧ１型、遺伝性気腫、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、ニューロフィジン性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース症候群、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害（例えば、ハンチントン病、脊髄小脳失調症Ｉ型、脊髄および延髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー）、ならびに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病、ファブリー病、シュトロイスラー・シャインカー症候群））、ＣＯＰＤ、ドライアイ疾患、膵不全、骨粗鬆症、骨減少症、ゴーハム症候群、塩素イオン症、先天性筋緊張症（トムソンおよびベッカー型）、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病、過剰驚愕症、癲癇、過剰驚愕症、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、内臓逆位症を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群としても知られている）、内臓逆位症と毛様体無形成を伴わないＰＣＤ、ならびにシェーグレン症候群。
【００２９】
１つの態様においては、化合物１は、実質的に結晶状の、純粋な遊離の形態の形態Ａである。
【００３０】
本明細書中に記載されるプロセスは、形態Ａを含む本発明の組成物を調製するために使用できる。これらのプロセスで使用される成分の量と特徴は以下に記載されるとおりである。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】図１は、形態ＡのＸ線粉末回折パターンである。
【図２】図２は、１回のＸ線結晶分析に基づく形態Ａの立体構造の図である。
【図３】図３は、形態ＡのＦＴＩＲスペクトルを提供する。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
（発明の詳細な説明）
（定義）
本明細書中で使用される場合、別段の明記がない限りは、以下の定義を適用するものとする。
【００３３】
用語「ＡＢＣ−トランスポーター」は、本明細書中で使用される場合、ＡＢＣ−トランスポータータンパク質もしくは少なくとも１つの結合ドメインを含むその断片を意味する。ここでは、上記タンパク質もしくはその断片は、インビボまたはインビトロで存在するものを意味する。用語「結合ドメイン」は、本明細書中で使用される場合、調節因子に結合できる上記ＡＢＣ−トランスポーター上の１つのドメインを意味する。例えば、Ｈｗａｎｇ，Ｔ．Ｃ．ら、Ｊ．Ｇｅｎ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．（１９９８）：１１１（３），４７７−９０を参照のこと。
【００３４】
用語「ＣＦＴＲ」は、本明細書中で使用される場合、嚢胞性線維症経膜コンダクタンス制御因子もしくは制御因子活性の能力があるその突然変異体（ΔＦ５０８ ＣＦＴＲ、Ｒ１１７Ｈ ＣＦＴＲ、およびＧ５５１Ｄ ＣＦＴＲを含むがこれらに限定されない）を意味する（ＣＦＴＲ突然変異体については、例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｅｎｅｔ．ｓｉｃｋｋｉｄｓ．ｏｎ．ｃａ／ｃｆｔｒ／を参照のこと）。
【００３５】
用語「調節する」は、本明細書中で使用される場合、測定可能な量の増大または減少を意味する。
【００３６】
用語「正常なＣＦＴＲ」または「正常なＣＦＴＲ機能」は、本明細書中で使用される場合、環境因子（例えば、喫煙、汚染、または肺の炎症を生じるあらゆるもの）が原因である障害を全く有さない、野生型様のＣＦＴＲを意味する。
【００３７】
用語「低下したＣＦＴＲ」または「低下したＣＦＴＲ機能」は、本明細書中で使用される場合、正常なＣＦＴＲより低いか、または正常なＣＦＴＲ機能よりも低いことを意味する。
【００３８】
本明細書中で使用される場合、「結晶」は、構造単位が一定の幾何学的パターンまたは格子状に配置され、結果として結晶状の固体が厳格な長距離秩序を有する化合物あるいは組成物をいう。結晶構造を構成する上記構造単位は、原子、分子、またはイオンであり得る。結晶状固体は、明確な融点を示す。
【００３９】
本明細書中で使用される場合、表現「実質的に結晶状」は、厳格な長距離秩序を有する一定の幾何学的パターンまたは格子状に配置される固体物質を意味する。例えば、実質的に結晶状の物質は、約８５％を上回る結晶化度（例えば、約９０％を上回る結晶化度または約９５％を上回る結晶化度）を有する。用語「実質的に結晶状」が、先の段落で定義された記述子「結晶」を含むことにも留意されたい。
【００４０】
１つの態様においては、本発明は、形態Ａとして特性決定された、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの１つの形態を特徴とする。
【００４１】
いくつかの実施形態においては、形態Ａは、Ｃｕ Ｋα線を使用して得られたＸ線粉末回折における、約７．７〜約８．１度（例えば、約７．９度）；約１１．７〜約１２．１度（例えば、約１１．９度）；約１４．２〜約１４．６度（例えば、約１４．４度）；および約１５．６〜約１６．０度（例えば、約１５．８度）での１つまたは複数のピークを特徴とする。
【００４２】
いくつかの実施形態においては、形態Ａは、Ｃｕ Ｋα線を使用して得られたＸ線粉末回折における、約７．８〜約８．０度（例えば、約７．９度）；約１１．８〜約１２．０度（例えば、約１１．９度）；約１４．３〜約１４．５度（例えば、約１４．４度）；および約１５．７〜約１５．９度（例えば、約１５．８度）での１つまたは複数のピークを特徴とする。
【００４３】
他の実施形態においては、形態Ａは、Ｃｕ Ｋα線を使用して得られたＸ線粉末回折における、約７．７〜約８．１度（例えば、約７．９度）；約２１．６〜約２２．０度（例えば、約２１．８度）；および約２３．６〜約２４．０度（例えば、約２３．８度）での１つまたは複数のピークを特徴とする。
【００４４】
なお他の実施形態においては、形態Ａは、Ｃｕ Ｋα線を使用して得られたＸ線粉末回折における、約７．８〜約８．０度（例えば、約７．９度）；約２１．７〜約２１．９度（例えば、約２１．８度）；および約２３．７〜約２３．９度（例えば、約２３．８度）での１つまたは複数のピークを特徴とする。
【００４５】
いくつかの実施形態においては、形態Ａは、Ｘ線粉末回折パターンにおいて度として測定される以下のピークの１つまたは複数を特徴とする：約７．７〜約８．１度（例えば、約７．９度）での１つのピーク；約９．１〜約９．５度（例えば、約９．３度）での１つのピーク；約１１．７〜約１２．１度（例えば、約１１．９度）での１つのピーク；約１４．２〜約１４．６度（例えば、約１４．４度）での１つのピーク；約１４．９〜約１５．３度（例えば、約１５．１度）での１つのピーク；約１５．６〜約１６．０度（例えば、約１５．８度）での１つのピーク；約１６．８〜約１７．２度（例えば、約１７．０度）での１つのピーク；約１７．５〜約１７．９度（例えば、約１７．７度）での１つのピーク；約１９．１〜約１９．５度（例えば、約１９．３度）での１つのピーク；約１９．９〜約２０．３度（例えば、約２０．１度）での１つのピーク；約２１．２〜約２１．６度（例えば、約２１．４度）での１つのピーク；約２１．６〜約２２．０度（例えば、約２１．８度）での１つのピーク；約２３．２〜約２３．６度（例えば、約２３．４度）での１つのピーク；約２３．６〜約２４．０度（例えば、約２３．８度）での１つのピーク；約２５．４〜約２５．８度（例えば、約２５．６度）での１つのピーク；約２６．６〜約２７．０度（例えば、約２６．８度）での１つのピーク；約２９．２〜約２９．６度（例えば、約２９．４度）での１つのピーク；約２９．５〜約２９．９度（例えば、約２９．７度）での１つのピーク；約２９．９〜約３０．３度（例えば、約３０．１度）での１つのピーク；および約３１．０〜約３１．４度（例えば、約３１．２度）での１つのピーク。
【００４６】
いくつかの実施形態においては、形態Ａは、Ｘ線粉末回折パターンにおいて度として測定される以下のピークの１つまたは複数を特徴とする：約７．８〜約８．０度（例えば、約７．９度）での１つのピーク；約９．２〜約９．４度（例えば、約９．３度）での１つのピーク；約１１．８〜約１２．０度（例えば、約１１．９度）での１つのピーク；約１４．３〜約１４．５度（例えば、約１４．４度）での１つのピーク；約１５．０〜約１５．２度（例えば、約１５．１度）での１つのピーク；約１５．７〜約１５．９度（例えば、約１５．８度）での１つのピーク；約１６．９〜約１７．１度（例えば、約１７．０度）での１つのピーク；約１７．６〜約１７．８度（例えば、約１７．７度）での１つのピーク；約１９．２〜約１９．４度（例えば、約１９．３度）での１つのピーク；約２０．０〜約２０．２度（例えば、約２０．１度）での１つのピーク；約２１．３〜約２１．５度（例えば、約２１．４度）での１つのピーク；約２１．７〜約２１．９度（例えば、約２１．８度）での１つのピーク；約２３．３〜約２３．５度（例えば、約２３．４度）での１つのピーク；約２３．７〜約２３．９度（例えば、約２３．８度）での１つのピーク；約２５．５〜約２５．７度（例えば、約２５．６度）での１つのピーク；約２６．７〜約２６．９度（例えば、約２６．８度）での１つのピーク；約２９．３〜約２９．５度（例えば、約２９．４度）での１つのピーク；約２９．６〜約２９．８度（例えば、約２９．７度）での１つのピーク；約３０．０〜約３０．２度（例えば、約３０．１度）での１つのピーク；および約３１．１〜約３１．３度（例えば、約３１．２度）での１つのピーク。
【００４７】
いくつかの実施形態においては、形態Ａは、図１に提供されるような回折パターンを特徴とする。
【００４８】
１つの態様においては、本発明は、形態Ａと薬学的に許容されるアジュバントまたは担体を含む薬学的組成物を特徴とする。
【００４９】
１つの態様においては、本発明は、形態Ａの有効量をヒトに投与する工程を含む、ヒトにおいてＣＦＴＲ媒介性疾患を処置する方法を特徴とする。
【００５０】
いくつかの実施形態においては、上記方法は、さらなる治療薬を投与する工程を含む。
【００５１】
いくつかの実施形態においては、疾患は、以下から選択される：嚢胞性線維症、膵炎、副鼻腔炎、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固線溶機能不全（例えば、プロテインＣ欠乏症）、１型遺伝性血管浮腫、脂質プロセシングの機能不全（例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症）、リソソーム蓄積症（例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー症）、ムコ多糖症、サンドホッフ病／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーＩＩ型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性上皮小体機能低下症、黒色腫、グリカノーシスＣＤＧ１型、遺伝性気腫、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、ニューロフィジン性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース症候群、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害（例えば、ハンチントン病、脊髄小脳失調症Ｉ型、脊髄および延髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー）、ならびに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病、ファブリー病、シュトロイスラー・シャインカー症候群））、ＣＯＰＤ、ドライアイ疾患、膵不全、骨粗鬆症、骨減少症、ゴーハム症候群、塩素イオン症、先天性筋緊張症（トムソンおよびベッカー型）、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病、過剰驚愕症、癲癇、過剰驚愕症、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、内臓逆位症を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群としても知られている）、内臓逆位症と毛様体無形成を伴わないＰＣＤ、ならびにシェーグレン症候群。
【００５２】
１つの実施形態において、本発明は、ヒトにおいて嚢胞性線維症を処置する方法を提供する。この方法は、形態Ａの有効量を上記ヒトに投与する工程を含む。
【００５３】
１つの態様において、本発明は、形態Ａと薬学的に許容される担体を含む医薬パック（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｐａｃｋ）またはキットを特徴とする。
【００５４】
１つの態様において、本発明は、三方晶系、Ｒ−３空間群、および以下の単位格子サイズを有している、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの結晶形態を特徴とする：ａ＝１９．１６７０（４）Å、ｂ＝１９．１６７０（４）Å、ｃ＝３３．６５７２（１２）Å、α＝９０°、β＝９０°、およびγ＝１２０°。
【００５５】
１つの実施形態において、本発明は、以下の単位格子サイズを有している、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの結晶形態を提供する：ａ＝１９．１６７０（４）Å、ｂ＝１９．１６７０（４）Å、ｃ＝３３．６５７２（１２）Å。
【００５６】
（使用、処方物、および投与）
（薬学的に許容される組成物）
本発明の１つの態様において、薬学的に許容される組成物が提供される。ここでは、これらの組成物は、本明細書中に記載されるような形態Ａを含み、状況に応じて、薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含む。特定の実施形態においては、これらの組成物は、状況に応じてさらに１種類以上のさらなる治療薬を含む。
【００５７】
上記のように、本発明の薬学的に許容される組成物はさらに、薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含む。本明細書中で使用される場合、薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルには、所望される特定の投薬形態に適している限りは、任意の、および全ての溶媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散補助剤もしくは懸濁補助剤、表面活性剤、等張化剤、増粘剤もしくは乳化剤、保存剤、固体結合剤、潤沢剤などが含まれる。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１６版、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８０）には、薬学的に許容される組成物の処方に使用される様々な担体と、その調製のための公知の技術が開示されている。任意の従来の担体媒体が本発明の化合物と不適合である（例えば、何らかの望ましくない生物学的作用を生じるか、または別の方法で薬学的に許容される組成物の任意の他の成分（単数または複数）と有害な方法で相互作用することによる）場合を除き、その使用は本発明の範囲に含まれるものとする。薬学的に許容される担体とすることができる物質のいくつかの例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）、緩衝物質（例えば、リン酸塩）、グリシン、ソルビン酸、またはソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩類または電解質、例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、蜜蝋、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、羊毛脂、糖（例えば、ラクトース、グルコース、およびスクロース）、澱粉（例えば、コーンスターチおよびジャガイモ澱粉）、セルロースおよびその誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、および酢酸セルロース）、粉末状トラガカント、麦芽、ゼラチン、タルク、賦形剤（例えば、ココアバターおよび坐薬ワックス）、油（例えば、ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油、および大豆油）、グリコール類（例えば、プロピレングリコールまたはポリエチレングリコール）、エステル類（例えば、エチルオレエートおよびエチルラウレート）、寒天、緩衝剤（例えば、水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム）、アルギン酸、発熱物質を含まない水、等張性生理食塩水、リンゲル液、エチルアルコール、およびリン酸緩衝液。さらに、他の適合し得る非毒性潤沢剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム）、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味料、調味料および香料、保存剤および酸化防止剤も、調剤者の判断にしたがって、組成物中に存在させることができる。
【００５８】
（化合物および薬学的に許容される組成物の使用）
なお別の態様において、本発明は、ＣＦＴＲの突然変異が関係している症状、疾患、もしくは障害を処置するか、またはその重篤度を低下させる方法を提供する。特定の実施形態において、本発明は、ＣＦＴＲ活性の機能不全が関係している症状、疾患、もしくは障害を処置する方法を提供する。この方法は、化合物１形態Ａを含む組成物を、その必要がある被験体（好ましくは、哺乳動物）に投与する工程を含む。
【００５９】
特定の実施形態において、本発明は、ＣＦＴＲまたは環境因子（例えば、喫煙）をコードする遺伝子の突然変異が原因で低下したＣＦＴＲ機能と関係がある疾患を処置する方法を提供する。これらの疾患としては、嚢胞性線維症、慢性気管支炎、反復性気管支炎、急性気管支炎、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）が原因で起こる男性不妊、先天的な子宮と膣の欠損（ＣＡＵＶ）が原因で起こる女性不妊、特発性慢性膵炎（ＩＣＰ）、特発性再発性膵炎、特発性急性膵炎、慢性副鼻腔炎、原発性硬化性胆管炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、糖尿病、ドライアイ、便秘、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、骨疾患（例えば、骨粗鬆症）、および喘息が挙げられる。
【００６０】
特定の実施形態において、本発明は、正常なＣＦＴＲ機能と関係がある疾患を処置するための方法を提供する。これらの疾患としては、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、慢性気管支炎、反復性気管支炎、急性気管支炎、副鼻腔炎、便秘、膵炎（慢性膵炎、再発性膵炎、および急性膵炎を含む）、膵不全、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）が原因で起こる男性不妊、軽度の肺疾患、特発性膵炎、肝臓病、遺伝性気腫、胆石、胃食道逆流症、消化管悪性腫瘍、炎症性腸疾患、便秘、糖尿病、関節炎、骨粗鬆症、ならびに骨減少症が挙げられる。
【００６１】
特定の実施形態では、本発明は、以下を含む正常なＣＦＴＲ機能と関連がある疾患を処置するための方法を提供する：遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固線溶機能不全（例えば、プロテインＣ欠乏症）、１型遺伝性血管浮腫、脂質プロセシングの機能不全（例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症）、リソソーム蓄積症（例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー症）、ムコ多糖症、サンドホッフ病／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーＩＩ型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性上皮小体機能低下症、黒色腫、グリカノーシスＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、ニューロフィジン性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース症候群、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害（例えば、ハンチントン病、脊髄小脳失調症Ｉ型、脊髄および延髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー）、ならびに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病（プリオンタンパク質のプロセシングの機能不全が原因である）、ファブリー病、シュトロイスラー・シャインカー症候群））、ゴーハム症候群、塩素イオン症、先天性筋緊張症（トムソンおよびベッカー型）、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病、過剰驚愕症、癲癇、過剰驚愕症、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、内臓逆位症を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群としても知られている）、内臓逆位症と毛様体無形成を伴わないＰＣＤ、またはシェーグレン症候群。この方法は、本明細書中に記載される形態Ａを含む組成物の有効量を上記哺乳動物に投与する工程を含む。
【００６２】
代替の好ましい実施形態によれば、本発明は、嚢胞性線維症を処置する方法を提供し、この方法は、本明細書中に記載される形態Ａを含む組成物の有効量を上記哺乳動物に投与する工程を含む、上記哺乳動物に組成物を投与する工程を含む。
【００６３】
本発明によれば、形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物の「有効量」は、上記に列挙された疾患、障害、もしくは症状の１つ以上を処置するか、またはその重篤度を低下させるために有効な量である。
【００６４】
形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物は、上記に列挙された疾患、障害、もしくは症状の１つ以上を処置するか、またはその重篤度を低下させるために有効な任意の量および任意の投与経路を使用して投与され得る。
【００６５】
特定の実施形態において、形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物は、呼吸器上皮および非呼吸器上皮の頂端膜において残留ＣＦＴＲ活性を示す患者において、嚢胞性線維症を処置するか、またはその重篤度を低下させるために有用である。上皮表面における残留ＣＦＴＲ活性の存在は、当該分野で公知の方法（例えば、標準的な電気生理学的技術、生化学的技術、または組織化学的技術）を使用して容易に検出され得る。このような方法は、インビボもしくはエクスビボでの電気生理学的技術、汗もしくは唾液のＣｌ−濃度の測定、または細胞表面密度をモニターするためのエクスビボでの生化学的もしくは組織化学的技術を使用して、ＣＦＴＲ活性を同定する。このような方法を使用して、残留ＣＦＴＲ活性が、様々な異なる突然変異についてヘテロ接合性であるかもしくはホモ接合性である患者（最も一般的な突然変異であるΔＦ５０８についてホモ接合性であるかもしくはヘテロ接合性である患者を含む）において容易に検出され得る。
【００６６】
別の実施形態において、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物は、薬理学的方法または遺伝子治療を使用して、誘導されたかもしくは増大させられた残留ＣＦＴＲ活性を有する患者において嚢胞性線維症を処置するか、あるいはその重篤度を低下させるために有用である。このような方法は、細胞表面に存在するＣＦＴＲの量を増加させ、それにより、患者に通常は存在しないＣＦＴＲ活性を誘導するか、または患者の既存の残留ＣＦＴＲ活性レベルを増強する。
【００６７】
１つの実施形態においては、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物は、残留ＣＦＴＲ活性を示す特定の遺伝子型（例えば、クラスＩＩＩ突然変異（調節または開閉が損なわれている）、クラスＩＶ突然変異（伝導性が変化している）、またはクラスＶ突然変異（合成が低下している））の患者において嚢胞性線維症を処置するか、またはその重篤度を低下させるために有用である（Ｌｅｅ Ｒ．Ｃｈｏｏ−Ｋａｎｇ，Ｐａｍｅｌａ Ｌ．，Ｚｅｉｔｌｉｎ，Ｔｙｐｅ Ｉ，ＩＩ，ＩＩＩ，ＩＶ，ａｎｄ Ｖ ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ Ｔａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ Ｃｏｎｄｕｃｔａｎｃｅ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒ Ｄｅｆｅｃｔｓ ａｎｄ Ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｙ；Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ６：５２１−５２９，２０００）。残留ＣＦＴＲ活性を示す他の患者の遺伝子型には、これらのクラスのうちの１つについてホモ接合性であるか、あるいは、クラスＩ突然変異、クラスＩＩ突然変異、または分類されない突然変異を含む任意の他のクラスの突然変異を持つヘテロ接合性である患者が含まれる。
【００６８】
１つの実施形態においては、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物は、特定の臨床的表現型（例えば、代表的には、上皮の頂端膜中の残留ＣＦＴＲ活性の量と典型的に相関関係がある中等度から軽度の臨床的表現型）の患者において嚢胞性線維症を処置するか、またはその重篤度を低下させるために有用である。このような表現型には、膵不全を示している患者、または特発性膵炎および先天性両側精管欠損症と診断された、もしくは軽度の肺疾患と診断された患者が含まれる。
【００６９】
必要とされる正確な量は、被験体の種、年齢、および全身状態、感染症の重篤度、特定の薬剤、その投与様式などに応じて、被験体一人ひとりについて変化するであろう。本発明の化合物は、好ましくは、投与し易さ、投薬量の均一性が保たれる単位投薬形態に処方される。表現「単位投薬形態」は、本明細書中で使用される場合、処置される患者に適している薬剤の物理的に別個の単位をいう。しかし、本発明の化合物および組成物の１日の総投薬量が、信頼できる医学的判断の範囲内で、担当医によって決定されることが理解されるであろう。任意の特定の患者または生物についての特定の有効用量レベルは、処置される障害およびその障害の重篤度；使用される特定の化合物の活性；使用される特定の組成物；患者の年齢、体重、全般的な健康状態、性別、および食事療法；投与時間、投与経路、および使用される特定の化合物の排泄速度；処置の継続時間；使用される特定の化合物と併用または同時使用される薬物、ならびに、医学の分野で周知の同様の要因を含む様々な要因により変わるであろう。用語「患者」は、本明細書中で使用される場合、動物、好ましくは、哺乳動物、そして最も好ましくは、ヒトを意味する。
【００７０】
本発明の薬学的に許容される組成物は、処置される感染の重篤度に応じて、ヒトおよび他の動物に、経口投与、直腸投与、非経口投与、槽内投与、膣内投与、腹腔内投与、局所投与（散剤、軟膏剤、点滴剤、もしくはパッチによるなど）、口内投与（経口スプレーもしくは鼻スプレーなどによる）することができる。特定の実施形態において、本発明の化合物は、所望される治療効果を得るために、１日あたり被験体の体重で、１日に１回以上、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇの投薬量レベルで経口投与または非経口投与され得る。
【００７１】
経口投与のための液体投薬形態としては、薬学的に許容されるエマルジョン、マイクロエマルジョン、液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤が挙げられるが、これらに限定されない。活性化合物に加えて、液体投薬形態には、当該分野で一般的に使用される不活性な希釈剤（例えば、水または他の溶媒）、可溶化剤、および乳化剤（例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド）、油（特に、綿実油、ラッカセイ油、コーン油、小麦胚芽油、オリーブ油、ひまし油、およびごま油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物を含めることができる。不活性希釈剤に加えて、経口用組成物にはまた、アジュバント（例えば、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤、甘味料、調味料ならびに香料）も含めることができる。
【００７２】
注射用調製物（例えば、滅菌の注射用の水性懸濁物または油性懸濁物）は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して、公知の技術にしたがって処方され得る。上記滅菌の注射用調製物はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤もしくは溶媒中の滅菌の注射用溶液、懸濁物、またはエマルジョン（例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液として）でもあり得る。使用され得る上記許容されるビヒクルおよび溶媒の中には、水、リンゲル溶液（米国薬局方）および等張性塩化ナトリウム溶液がある。加えて、滅菌の不揮発性油が、通常、溶媒もしくは懸濁媒体として使用される。この目的のために、合成のモノグリセリドまたはジグリセリドを含む無刺激性の任意の不揮発性油が使用され得る。加えて、脂肪酸（例えば、オレイン酸）は、注射用物質の調製に使用される。
【００７３】
上記注射用処方物は、例えば、細菌保持フィルター（ｂａｃｔｅｒｉａｌ−ｒｅｔａｉｎｉｎｇ ｆｉｌｔｅｒ）を通す濾過によって、または使用前に滅菌水もしくは他の滅菌の注射用媒体中に溶解もしくは分散させることができる滅菌の固体組成物の形態で、滅菌薬剤を組み込むことによって、滅菌することができる。
【００７４】
本発明の化合物の効果を持続させるためには、皮下注射もしくは筋肉内注射による化合物の吸収を遅らせることが、頻繁に望まれる。これは、水溶性が低い結晶性または不定形の物質の液体懸濁物の使用によって達成され得る。これにより、上記化合物の吸収速度は、その溶解速度に依存し、次に、結晶の大きさおよび結晶形態に依存し得る。あるいは、非経口投与される化合物形態の吸収の遅延は、油性ビヒクル中に上記化合物を溶解または懸濁することによって達成される。注射用のデポー形態は、生分解性ポリマー（例えば、ポリラクチド−ポリグリコリド）中に上記化合物のマイクロカプセルマトリックスを形成させることにより作製される。ポリマーに対する化合物の比および使用される特定のポリマーの性質に応じて、化合物放出の速度が制御され得る。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射用処方物はまた、上記化合物を、身体組織と適合性のリポソームまたはマイクロエマルジョン中に捕捉することによっても調製される。
【００７５】
直腸投与または膣投与のための組成物は、好ましくは、本発明の化合物を、室温では固体であるが、体温では液体であり、したがって、直腸内腔もしくは膣内腔で溶解して活性化合物を放出する適切な非刺激性賦形剤または担体（例えば、ココアバター、ポリエチレングリコール、または坐剤ワックス）と混合することにより調製され得る坐剤である。
【００７６】
経口投与のための固体の投薬形態としては、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、および顆粒剤が挙げられる。そのような固体の投薬形態においては、上記活性化合物は、少なくとも１種類の不活性な薬学的に許容される賦形剤または担体（例えば、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウム、および／またはａ）充填剤もしくは増量剤（例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびシアル酸）、ｂ）結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース、およびアカシア）、ｃ）湿潤剤（例えば、グリセロール）、ｄ）崩壊剤（例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプンもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩、および炭酸ナトリウム）、ｅ）溶液遅延剤（ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｒｅｔａｒｄｉｎｇ ａｇｅｎｔ）（例えば、パラフィン）、ｆ）吸収促進剤（例えば、四級アンモニウム化合物）、ｇ）湿潤剤（例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール）、ｈ）吸収剤（例えば、カオリンおよびベントナイトクレイ）、ならびにｉ）滑沢剤（例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム）、ならびにこれらの混合物）と混合される。カプセル剤、錠剤、および丸剤の場合には、上記投薬形態にはまた、緩衝化剤も含めることができる。
【００７７】
類似のタイプの固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖、ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して、ソフト充填ゼラチンカプセル剤およびハード充填ゼラチンカプセル剤中で充填剤として使用され得る。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤の固体投薬形態は、薬学処方の分野で周知のコーティングおよび殻（例えば、腸溶性コーティングおよび他のコーティング）を持たせて調製され得る。これらには、状況に応じて、不透明化剤を含めることができ、そしてまた、それらが上記活性成分（単数または複数）のみを、または上記活性成分（単数または複数）を優先的に、腸管の特定の部分で、状況に応じて、遅延させられた様式で放出する組成物でもあり得る。使用できる埋め込み型組成物（ｅｍｂｅｄｄｉｎｇ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）の例としては、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。類似のタイプの固体組成物はまた、ラクトースもしくは乳糖、ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して、ソフト充填ゼラチンカプセル剤およびハード充填ゼラチンカプセル剤中の充填剤としても使用され得る。
【００７８】
上記活性化合物はまた、上記のような１種類以上の賦形剤とともにマイクロカプセル化された形態でも存在し得る。錠剤、糖衣剤、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤の上記固体投薬形態は、薬学処方の分野で周知のコーティングおよび殻（例えば、腸溶性コーティング、徐放コーティング、および他のコーティング）を持たせて調製され得る。そのような固体投薬形態において、上記活性化合物は、少なくとも１種類の不活性な希釈剤（例えば、スクロース、ラクトース、もしくはデンプン）と混合され得る。このような投薬形態にはまた、通常行われるように、不活性希釈剤以外のさらなる物質（例えば、錠剤化滑沢剤および他の錠剤化補助剤（例えば、ステアリン酸マグネシウムおよび微結晶性セルロース））を含めることができる。カプセル剤、錠剤、および丸剤の場合は、上記投薬形態には緩衝化剤も含めることができる。これらは、状況に応じて不透明化剤を含み得、それらが上記活性成分（単数または複数）のみを、または上記活性成分（単数または複数）を優先的に、腸管の特定の部分で、状況に応じて、遅延させられた様式で放出する組成物でもあり得る。使用できる埋め込み型組成物の例としては、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。
【００７９】
本発明の化合物の局所投与もしくは経皮投与のための投薬形態としては、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル、散剤、液剤、スプレー、吸入剤、またはパッチが挙げられる。上記活性成分は、薬学的に許容される担体と任意の必要な保存剤、または必要とされ得る場合には緩衝化剤と、滅菌条件下で混合される。眼用の処方物、点耳薬、および点眼薬もまた本発明の範囲内に入ると考えられる。さらに、本発明は、身体への化合物の制御された送達を提供するという追加の利点を有する経皮的パッチの使用を企図する。このような投薬形態は、適切な媒体中に上記化合物を溶解または分散させることにより調製される。吸収促進剤がまた、皮膚を横断する上記化合物の流れを増大させるために使用され得る。この速度は、速度制御膜を提供するか、またはポリマーマトリクスもしくはゲル中に上記化合物を分散させるかのいずれかにより制御され得る。
【００８０】
本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物が、併用療法において使用され得る。すなわち、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物が、１種類以上の他の望ましい治療薬もしくは医療的手順と同時に、またはその前に、またはその後に投与され得ることもまた理解されるであろう。併用レジメンにおいて使用するための治療（治療薬または手順）の特定の組み合わせは、所望される治療薬および／または手順と、達成されるべき所望される治療効果の適合性が考慮されるであろう。使用される治療は、同じ障害について望ましい効果をもたらし得る（例えば、本発明の化合物は、同じ障害を処置するために使用される別の薬剤と同時に投与され得る）場合があり、また、それらが異なる効果（例えば、任意の有害な効果の制御）をもたらし得る場合もあることも理解されるであろう。本明細書中で使用される場合、特定の疾患もしくは症状を処置または予防するために通常投与されるさらなる治療薬は、「処置される疾患もしくは症状に適している」として公知である。
【００８１】
１つの実施形態においては、上記さらなる薬剤は、粘液溶解薬、気管支拡張薬、抗生物質、抗感染症薬、抗炎症薬、本発明の化合物以外のＣＦＴＲ調節因子、または栄養剤から選択される。
【００８２】
１つの実施形態においては、上記さらなる薬剤は抗生物質である。本明細書において有用な例示的な抗生物質としては、トブラマイシン（トブラマイシン吸入用粉末（ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ ｉｎｈａｌｅｄ ｐｏｗｄｅｒ）（ＴＩＰ）を含む）、アジスロマイシン、アズトレオナム（アズトレオナムのエアゾール化形態を含む）、アミカシン（そのリポソーム処方物を含む）、シプロフロキサシン（吸入による投与に適しているその処方物を含む）、レボフロキサシン（そのエアゾール化処方物を含む）、および２種類の抗生物質（例えば、ホスホマイシンとトブラマイシン）の組み合わせが挙げられる。
【００８３】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は粘液溶解薬である。本明細書において有用な例示的な粘液溶解薬としては、Ｐｕｌｍｏｚｙｍｅ（登録商標）が挙げられる。
【００８４】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は気管支拡張薬である。例示的な気管支拡張薬としては、アルブテロール、硫酸メタプロテレノール、酢酸ピルブテロール、サルメテロール、または硫酸テトラブリン（ｔｅｔｒａｂｕｌｉｎｅ ｓｕｌｆａｔｅ）が挙げられる。
【００８５】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は、肺気道表面の液体の回復に効果的である。そのような薬剤は、細胞内外での塩の移動を改善して、肺気道中の粘膜がより水和されるようにし、したがってより容易に除去されるようにする。例示的なそのような薬剤としては、高張食塩水、デヌホゾールテトラナトリウム（ｄｅｎｕｆｏｓｏｌ ｔｅｔｒａｓｏｄｉｕｍ）（［［（３Ｓ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１−イル）−３−ヒドロキシオキソラン−２−イル］メトキシ−ヒドロキシホスホリル］［［［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソピリミジン−１−イル）−３，４−ジヒドロキシオキソラン−２−イル］メトキシ−ヒドロキシホスホリル］オキシ−ヒドロキシホスホリル］ハイドロゲンホスフェート）、またはブロンキトール（ｂｒｏｎｃｈｉｔｏｌ）（マンニトールの吸入型処方物）が挙げられる。
【００８６】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は抗炎症薬、すなわち、肺の炎症を軽減できる薬剤である。本明細書において有用な例示的なそのような薬剤としては、イブプロフェン、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、シルデナフィル、吸入型グルタチオン、ピオグリタゾン、ヒドロキシクロロキン、またはシンバスタチンが挙げられる。
【００８７】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は、上皮型ナトリウムチャネルブロッカー（ＥＮａＣ）の活性を、このチャネルをブロックすることにより直接、またはＥＮａＣ活性の増大をもたらすプロテアーゼ（例えば、セリンプロテアーゼ（ｓｅｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅｓ）、チャネル活性化プロテアーゼ）の調節により間接的にのいずれかにより低下させる。例示的なそのような薬剤としては、カモスタット（トリプシン様プロテアーゼ阻害剤）、ＱＡＵ１４５、５５２−０２、ＧＳ−９４１１、ＩＮＯ−４９９５、エアロリティック（Ａｅｒｏｌｙｔｉｃ）、およびアミロライドが挙げられる。上皮型ナトリウムチャネルブロッカー（ＥＮａＣ）の活性を低下させるさらなる薬剤は、例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００９／０７４５７５（そのあらゆる内容が、その全体において引用により本明細書中に組み入れられる）に見ることができる。
【００８８】
本明細書中に記載される他の疾患のうち、ＣＦＴＲ調節因子（例えば、形態Ａ）と、ＥＮａＣの活性を低下させる薬剤の組み合わせが、リドル症候群、嚢胞性線維症を含む炎症またはアレルギー症状、原発性線毛ジスキネジア、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道感染、肺癌腫、口内乾燥症、および乾性角結膜炎（ｋｅｒａｔｏｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖｉｔｉｓ ｓｉｒｅ）、気道感染（急性および慢性；ウイルス性および細菌性）、ならびに肺癌腫の処置に使用される。
【００８９】
ＣＦＴＲ調節因子（例えば、形態Ａ）とＥＮａＣの活性を低下させる薬剤の組み合わせはまた、上皮型ナトリウムチャネルの遮断により媒介される疾患（これには、おそらくはその表面上の保護用の表面液体の異常な生理機能が関与している、上皮を横切る異常な流体の調節と関連がある呼吸器疾患以外の疾患（例えば、口内乾燥症（ｄｒｙ ｍｏｕｔｈ）または乾性角結膜炎（ドライアイ））も含まれる）の処置にも有用である。さらに、腎臓での上皮型ナトリウムチャネルの遮断が利尿を促進し、それにより血圧低下作用を誘導するために使用され得る。
【００９０】
喘息には、内因性（非アレルギー性）喘息と外因性（アレルギー性）喘息の両方、軽症の喘息、中等度の喘息、重症の喘息、気管支喘息、運動誘発性喘息、職業性喘息、および細菌感染後に誘導される喘息が含まれる。喘息の処置はまた、喘鳴症状を示しており、重大な医学的関心の確立された患者カテゴリーである「喘鳴乳幼児」と診断されたかまたはそのように診断することができ、現在は多くの場合に初期または初期段階の喘息患者として同定された被験体（例えば、４歳または５歳未満の被験体）の処置を包括すると理解される。（便宜上、この特定の喘息症状は、喘鳴幼児症候群（ｗｈｅｅｚｙ ｉｎｆａｎｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）と呼ばれる）。喘息の処置における予防効果は、症候性発作（例えば、急性喘息または気管支収縮発作）の頻度の減少または重篤度の低下、肺機能の改善または気道反応性亢進の改善により証明されるであろう。これはさらに、他の対症治療、すなわち、症候性発作が起こったときにそれを限定するか中止させるためのまたはそれを意図した治療（例えば、抗炎症薬（例えば、コルチコステロイド）または気管支拡張剤）の必要性の減少により証明され得る。喘息の予防的利点は、特に、「早朝悪化（ｍｏｒｎｉｎｇ ｄｉｐｐｉｎｇ）」の傾向がある被験体において明白であり得る。「早朝悪化」は認識されている喘息症候群であり、喘息患者のかなりの割合に共通し、例えば、およそ午前４時〜６時の間の数時間の間、すなわち、通常何らかの前に投与した喘息の対症治療から相当離れた時間での喘息発作を特徴とする。
【００９１】
慢性閉塞性肺疾患には、慢性気管支炎またはそれに伴う呼吸困難、気腫、ならびに、他の薬物療法、特に他の吸入型の薬物療法により生じる気道過敏症の悪化が含まれる。いくつかの実施形態においては、ＣＦＴＲ調節因子（例えば、形態Ａ）と、ＥＮａＣの活性を低下させる薬剤の組み合わせが、急性、アラキン酸（ａｒａｃｈｉｄｉｃ）、カタル性、クループ（ｃｒｏｕｐｕｓ）、慢性またはフチノイド（ｐｈｔｈｉｎｏｉｄ）の気管支炎を含むあらゆるタイプまたは原因の気管支炎の処置に有用である。
【００９２】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は、化合物１形態Ａ以外のＣＦＴＲ調節因子、すなわち、ＣＦＴＲ活性を調節する作用を有する薬剤である。例示的なそのような薬剤としては、アタルレン（ａｔａｌｕｒｅｎ）（「ＰＴＣ１２４（登録商標）」；安息香酸３−［５−（２−フルオロフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］）、シナプルチド、ランコブチド（ｌａｎｃｏｖｕｔｉｄｅ）、デペレスタット（ｄｅｐｅｌｅｓｔａｔ）（ヒト組み換え体好中球エラスターゼ阻害剤）、コビプロストン（ｃｏｂｉｐｒｏｓｔｏｎｅ）（７−｛（２Ｒ，４ａＲ，５Ｒ，７ａＲ）−２−［（３Ｓ）−１，１−ジフルオロ−３−メチルペンチル］−２−ヒドロキシ−６−オキソオクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル｝ヘプタン酸）、または安息香酸（３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）が挙げられる。別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は、安息香酸（３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）である。
【００９３】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は栄養剤である。例示的なそのような薬剤としては、パンクレリパーゼ（膵臓酵素代用物）（Ｐａｎｃｒｅａｓｅ（登録商標）、Ｐａｎｃｒｅａｃａｒｂ（登録商標）、Ｕｌｔｒａｓｅ（登録商標）、またはＣｒｅｏｎ（登録商標）を含む）、Ｌｉｐｒｏｔｏｍａｓｅ（登録商標）（以前はＴｒｉｚｙｔｅｋ（登録商標））、Ａｑｕａｄｅｋｓ（登録商標）、あるいはグルタチオン吸入薬（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ）が挙げられる。１つの実施形態においては、上記さらなる栄養剤はパンクレリパーゼである。
【００９４】
１つの実施形態においては、上記さらなる薬剤は、本発明の化合物以外のＣＦＴＲ調節因子である。
【００９５】
本発明の組成物中に存在するさらなる治療薬の量は、唯一の活性薬剤としてその治療薬を含む組成物において通常投与されるであろう量を上回ることはないであろう。好ましくは、本明細書で開示される組成物中のさらなる治療薬の量は、唯一の治療用の活性薬剤としてその薬剤を含む組成物中に通常存在する量の約５０％〜１００％の範囲であろう。
【００９６】
本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物は、移植可能な医療用デバイス（例えば、プロテーゼ、人工弁、血管グラフト、ステントおよびカテーテル）をコーティングするための組成物に組み込まれ得る。したがって、本発明は、別の態様において、上記で一般的に、そして本明細書中でクラスでおよびサブクラスで記載されるような本発明の化合物と上記移植可能なデバイスのコーティングに適している担体を含む、移植可能なデバイスをコーティングするための組成物を含む。なお別の態様において、本発明は、上記で一般的に、そして本明細書中でクラスでおよびサブクラスで記載されるような本発明の化合物と上記移植可能なデバイスのコーティングに適している担体を含む組成物でコーティングされた移植可能なデバイスを含む。適切なコーティングおよびコーティングされた移植可能なデバイスの一般的な調製は、米国特許第６，０９９，５６２号；同第５，８８６，０２６号；および同第５，３０４，１２１号に記載されている。上記コーティングは、典型的には、生体適合性ポリマー物質（例えば、ヒドロゲルポリマー、ポリメチルジシロキサン、ポリカプロラクトン、ポリエチレングリコール、ポリ乳酸、エチレンビニルアセテート、およびこれらの混合物）である。上記コーティングは、上記組成物において制御放出特性を付与するために、必要に応じて、フルオロシリコーン、ポリサッカライド、ポリエチレングリコール、リン脂質、またはこれらの組み合わせの適切なトップコートによりさらにコーティングされ得る。
【００９７】
本発明の別の態様は、生物学的試料または患者において（例えば、インビトロまたはインビボで）ＣＦＴＲ活性を調節することに関し、上記方法は、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物を上記患者に投与する工程、あるいはこれらを生物学的試料と接触させる工程を含む。用語「生物学的試料」としては、本明細書中で使用される場合、細胞培養物またはその抽出物；哺乳動物から得られた生検物質またはその抽出物；および血液、唾液、尿、糞便、精液、涙液、もしくは他の流体またはそれらの抽出物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９８】
生物学的試料中のＣＦＴＲの調節は、当業者に公知の様々な目的のために有用である。このような目的の例としては、生物学的および病理学的現象におけるＣＦＴＲの研究；ならびにＣＦＴＲの新規の調節因子の比較評価が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９９】
なお別の実施形態において、インビトロまたはインビボで陰イオンチャネルの活性を調節する方法が提供される。上記方法は、上記チャネルを、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物と接触させる工程を含む。好ましい実施形態においては、上記陰イオンチャネルは、塩化物イオンチャネルまたは炭酸水素イオンチャネルである。他の好ましい実施形態においては、上記陰イオンチャネルは、塩化物イオンチャネルである。
【０１００】
代替の実施形態にしたがって、本発明は、細胞の膜中の機能的ＣＦＴＲの数を増加させる方法を提供し、上記方法は、上記細胞を、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物と接触させる工程を含む。
【０１０１】
別の好ましい実施形態によれば、ＣＦＴＲの活性は、膜電位差を測定することにより測定される。生物学的試料中の膜を横断する電位差を測定するための手法は、当該分野で公知の方法のいずれか（例えば、光学的膜電位アッセイまたは他の電気生理学的方法）を使用し得る。
【０１０２】
上記光学的膜電位アッセイは、ＧｏｎｚａｌｅｚおよびＴｓｉｅｎによって記載された電圧感受性のＦＲＥＴセンサー（Ｇｏｎｚａｌｅｚ，Ｊ．Ｅ．ａｎｄ Ｒ．Ｙ．Ｔｓｉｅｎ（１９９５）「Ｖｏｌｔａｇｅ ｓｅｎｓｉｎｇ ｂｙ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ｅｎｅｒｇｙ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｉｎ ｓｉｎｇｌｅ ｃｅｌｌｓ」Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｊ ６９（４）：１２７２−８０、およびＧｏｎｚａｌｅｚ，Ｊ．Ｅ．ａｎｄ Ｒ．Ｙ．Ｔｓｉｅｎ（１９９７）「Ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ ｏｆ ｃｅｌｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｔｈａｔ ｕｓｅ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ｅｎｅｒｇｙ ｔｒａｎｓｆｅｒ」Ｃｈｅｍ Ｂｉｏｌ ４（４）：２６９−７７を参照のこと）を、電圧／イオンプローブリーダー（ＶＩＰＲ）のような蛍光変化を測定するための計測器（Ｇｏｎｚａｌｅｚ，Ｊ．Ｅ．，Ｋ．Ｏａｄｅｓら（１９９９）「Ｃｅｌｌ−ｂａｓｅｄ ａｓｓａｙｓ ａｎｄ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｉｏｎ−ｃｈａｎｎｅｌ ｔａｒｇｅｔｓ」Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙ ４（９）：４３１−４３９を参照のこと）と組み合わせて利用する。
【０１０３】
これらの電圧感受性アッセイは、膜可溶性の電圧感受性色素であるＤｉＳＢＡＣ２（３）と蛍光性リン脂質であるＣＣ２−ＤＭＰＥとの間での蛍光共鳴エネルギー転移（ＦＲＥＴ）の変化に基づく。ＣＣ２−ＤＭＰＥは、原形質膜の外側のリーフレット（ｏｕｔｅｒ ｌｅａｆｌｅｔ）に結合され、そしてＦＲＥＴ供与体となる。膜電位（Ｖｍ）の変化は、負に荷電したＤｉＳＢＡＣ２（３）を原形質膜を横切って再分布させ、それにしたがってＣＣ２−ＤＭＰＥからのエネルギー転移の量が変化する。蛍光放射の変化は、ＶＩＰＲ（商標）ＩＩを使用してモニターすることができる。ＶＩＰＲ（商標）ＩＩは、９６ウェルマイクロタイタープレートまたは３８４ウェルマイクロタイタープレートの中で細胞をベースとするスクリーニングを行うために設計された、一体型の液体ハンドラー（ｈａｎｄｌｅｒ）および蛍光検出器である。
【０１０４】
別の態様において、本発明は、インビトロまたはインビボで生物学的試料中のＣＦＴＲまたはその断片の活性の測定に使用するためのキットを提供する。上記キットは、（ｉ）形態Ａまたは上記の実施形態のいずれかを含む組成物；ならびに（ｉｉ）ａ）上記組成物を、上記生物学的試料と接触させ、そしてｂ）上記ＣＦＴＲまたはその断片の活性を測定するための説明書を含む。１つの実施形態において、上記キットは、ａ）さらなる組成物を、上記生物学的試料とを接触させ；ｂ）上記ＣＦＴＲまたはその断片の活性を、上記さらなる化合物の存在下で測定し、そしてｃ）上記さらなる化合物の存在下でのＣＦＴＲの活性を、本明細書中に記載される形態Ａの存在下でのＣＦＴＲの密度と比較するための説明書をさらに含む。好ましい実施形態において、上記キットは、ＣＦＴＲの密度を測定するために使用される。
【０１０５】
本明細書中に記載される発明がより十分に理解され得るように、以下の実施例が記載される。これらの実施例は、例示のためのものに過ぎず、いかなる様式においても本発明を限定するとは解釈されるべきではないことが理解されるべきである。
【実施例】
【０１０６】
（方法および材料）
ＸＲＰＤ（Ｘ線粉末回折）
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）データを、Ｒｉｇａｋｕ／ＭＳＣ ＭｉｎｉＦｌｅｘ Ｄｅｓｋｔｏｐ Ｐｏｗｄｅｒ Ｘ−ｒａｙ Ｄｉｆｆｒａｃｔｏｍｅｔｅｒ（Ｒｉｇａｋｕ，Ｔｈｅ Ｗｏｏｄｌａｎｄｓ，ＴＸ）を使用して室温で記録した。Ｘ線は、Ｋβ除去フィルターを用いて、３０ｋＶおよび１５ｍＡで操作したＣｕ管を使用して発生させた。発散スリットは動かすことができ、それぞれ、４．２度、および０．３ｍｍの切り込みに設定した、散乱スリットと受光スリットを持つ。走査モードは一定時間（ＦＴ）であり、０．０２度のステップ幅と２．０秒のカウント時間（ｃｏｕｎｔ ｔｉｍｅ）を用いた。粉末Ｘ線回折計（Ｐｏｗｄｅｒ Ｘ−ｒａｙ Ｄｉｆｆｒａｃｔｏｍｅｔｅｒ）を参照標準物：７５％のソーダライト（Ｓｏｄａｌｉｔｅ）（Ｎａ３Ａｌ４Ｓｉ４Ｏ１２Ｃｌ）および２５％の珪素（Ｓｉｌｉｃｏｎ）（Ｒｉｇａｋｕ、カタログ番号２１００／ＡＬＳ）を使用して較正した。６つのサンプルステージ（ｓａｍｐｌｅｓ ｓｔａｇｅ）をゼロバックグラウンドサンプルホルダー（ｚｅｒｏ ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ ｓａｍｐｌｅ ｈｏｌｄｅｒｓ）（ＳＨ−ＬＢＳＩ５１１−ＲＮＤＢ）とともに使用した。粉末試料を意図した領域に置き、ガラススライドをぴったりと取り付けた。
【０１０７】
（ＦＴＩＲ（フーリエ変換赤外）分光法）
ＦＴＩＲスペクトルを、スマートオービット試料室（ｓｍａｒｔ ｏｒｂｉｔ ｓａｍｐｌｉｎｇ ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔ）、ダイヤモンドウィンドウ（ｄｉａｍｏｎｄ ｗｉｎｄｏｗ）を持つＴｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｎｉｃｏｌｅｔ ６７００ ＦＴ−ＩＲ分光光度計から、ソフトウェア：Ｏｍｎｉｃ，７．４を使用して取得した。粉末試料をダイヤモンド結晶上に直接置き、試料の表面をダイヤモンド結晶の表面に合わせるために圧力をかけた。バックグラウンドスペクトルを取得し、次いで、この試料のスペクトルを取得した。取得の設定は以下のとおりとした：
検出器：ＤＴＧＳ ＫＢｒ；
ビーム分割器：ＫＢｒ；
線源：ＩＲ；
スキャン範囲：４０００〜４００ｃｍ−１；
Ｇａｉｎ：８．０；
光速度：０．６３２９ｃｍ／ｓｅｃ；
アパーチャー（Ａｐｅｒｔｕｒｅ）：１００；
スキャン数：３２；および
分解能：４ｃｍ−１。
【０１０８】
（実施例１）
４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（７）の調製
【０１０９】
【化２】
２−クロロ−５−（トリフルオロメチル）アニリン２（２００ｇ、１．０２３ｍｏｌ）、ジエチル２−（エトキシメチレン）マロナート３（２７６ｇ、１．３ｍｏｌ）、およびトルエン（１００ｍＬ）を、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋコンデンサーを取り付けた三口の１Ｌの丸底フラスコの中で、窒素雰囲気下で混合した。この溶液を撹拌しながら１４０℃に加熱し、この温度を４時間維持した。反応混合物を７０℃に冷却し、ヘキサン（６００ｍＬ）をゆっくりと添加した。得られたスラリーを撹拌し、室温に温めた。固体を濾過によって収集し、ヘキサン中の１０％の酢酸エチルで洗浄し（２回×４００ｍＬ）、その後、減圧下で乾燥させて、所望される縮合産物であるジエチル２−（（２−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニルアミノ）メチレン）マロナート４として白色固体（３５０ｇ、９４％の収率）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ １１．２８（ｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ，１Ｈ），８．６３（ｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２４（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），４．１７（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），１．２７（ｍ，６Ｈ）。
【０１１０】
エチル８−クロロ−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート（５）の調製。三口の１Ｌのフラスコに、ダウサム（Ｄｏｗｔｈｅｒｍ（登録商標））（２００ｍＬ、８ｍＬ／ｇ）をチャージし、これを２００℃で１時間脱気した。溶媒を２６０℃に加熱し、これに、１０分間かけて少量ずつジエチル２−（（２−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニルアミノ）メチレン）マロナート４（２５ｇ、０．０７ｍｏｌ）をチャージした。得られた混合物を２６０℃で６．５時間（ｈ）撹拌し、得られたエタノール副産物（ｅｔｈａｎｏｌ ｂｙｐｒｏｄｕｃｔ）を蒸留により除去した。この混合物をゆっくりと８０℃に冷却した。ヘキサン（１５０ｍＬ）を、３０分（ｍｉｎ）かけてゆっくりと添加し、続いてさらに２００ｍＬのヘキサンを一度に添加した。スラリーを、これが室温に到達するまで撹拌した。固体を濾過し、ヘキサンで洗浄し（３回×１５０ｍＬ）、その後、減圧下で乾燥させてエチル８−クロロ−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート５を褐色の固体（１３．９ｇ、６５％の収率）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ １１．９１（ｓ，１Ｈ），８．３９（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２４（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），１．２９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１１１】
エチル４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−キノリン−３−カルボキシラート（６）の調製。三口の５Ｌのフラスコに、エチル８−クロロ−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート５（１００ｇ、０．３ｍｏｌ）、エタノール（１２５０ｍＬ、１２．５ｍＬ／ｇ）、およびトリエチルアミン（２２０ｍＬ、１．６ｍｏｌ）をチャージした。その後、この容器に、１０ｇの１０％ Ｐｄ／Ｃ（５０％ｗｅｔ）を５℃でチャージした。この反応物を、水素雰囲気下で２０時間、５℃で激しく撹拌した。その後、反応混合物をおよそ１５０ｍＬの容量に濃縮した。Ｐｄ／Ｃを含むスラリーとしての生成物であるエチル４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−キノリン−３−カルボキシラート６を、次の工程に直接用いた。
【０１１２】
４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（７）の調製。エチル４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−キノリン−３−カルボキシラート６（５８ｇ、０．２ｍｏｌ、Ｐｄ／Ｃを含有する粗反応物のスラリー）を、環流冷却器を持つ１Ｌのフラスコ中のＮａＯＨ（８１４ｍＬの５Ｍ、４．１ｍｏｌ）中に懸濁し、８０℃で１８時間加熱し、続いて１００℃で５時間、さらに加熱した。この反応物を、充填したＣｅｌｉｔｅを通して保温濾過（ｆｉｌｔｅｒｅｄ ｗａｒｍ）してＰｄ／Ｃを除去し、Ｃｅｌｉｔｅを１ＮのＮａＯＨでリンスした。濾液を約ｐＨ１に酸性化して、高粘度の白色沈殿を得た。この沈殿を濾過し、その後、水および冷アセトニトリルでリンスした。その後、固体を減圧下で乾燥させて、４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸７を白色固体（４８ｇ、９２％の収率）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００．０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ １５．２６（ｓ，１Ｈ），１３．６６（ｓ，１Ｈ），８．９８（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｄｄ，Ｊ＝１．６，７．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０６−７．９９（ｍ，２Ｈ）。
【０１１３】
（実施例２）
４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）アニリンの調製
【０１１４】
【化３】
７−［４−ニトロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン（２０）の調製。窒素雰囲気下から得た７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタンヒドロクロリド９（４．６ｇ、３４．４３ｍｍｏｌ）を含むフラスコに、アセトニトリル（５０ｍＬ）中の４−フルオロ−１−ニトロ−２−（トリフルオロメチル）ベンゼン８（６．０ｇ、２８．６９ｍｏｌ）とトリエチルアミン（８．７ｇ、１２．００ｍＬ、８６．０７ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。この反応フラスコを窒素雰囲気下で１６時間、８０℃で加熱した。この反応混合物を冷却し、その後、水とジクロロメタンとの間に分配した。有機層を１ＭのＨＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して乾燥させた。シリカゲルクロマトグラフィーによる精製（ヘキサン中の０〜１０％の酢酸エチル）により、７−［４−ニトロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン１０（７．２ｇ、８８％の収率）を黄色い固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００．０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．０３（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２５（ｄｄ，Ｊ＝２．６，９．１Ｈｚ，１Ｈ），４．５９（ｓ，２Ｈ），１．６９−１．６７（ｍ，４Ｈ），１．５０（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，４Ｈ）。
【０１１５】
４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）アニリン（１１）の調製
７−［４−ニトロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン１０（７．０７ｇ、２４．７０ｍｍｏｌ）および１０％のＰｄ／Ｃ（０．７１ｇ、６．６４ｍｍｏｌ）をチャージしたフラスコを空にし（ｅｖａｃｕａｔｅｄ）、その後、窒素をフラッシュした。エタノール（２２ｍＬ）を添加し、反応フラスコに水素バルーン（ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｂａｌｌｏｏｎ）を取り付けた。１２時間激しく撹拌した後、この反応混合物に窒素をパージし、Ｐｄ／Ｃを濾過により除去した。濾液を減圧下で暗色の油になるまで濃縮し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜１５％の酢酸エチル）により精製して、４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）アニリン１１を紫色の固体として得た（５．７６ｇ、９１％の収率）。１Ｈ ＮＭＲ（４００．０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ６．９５（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．７９（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），４．８９（ｓ，２Ｈ），４．０９（ｓ，２Ｈ），１．６１−１．５９（ｍ．４Ｈ）および１．３５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）。
【０１１６】
（実施例３）
Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（化合物１）の調製。
【０１１７】
【化４】
２−メチルテトラヒドロフラン（９１．００ｍＬ）中の４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−キノリン−３−カルボン酸７（９．１ｇ、３５．３９ｍｍｏｌ）および４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）アニリン１１（９．２ｇ、３５．７４ｍｍｏｌ）の溶液に、プロピルホスホン酸環状無水物（酢酸エチル中の５０％溶液、５２．６８ｍＬ、８８．４８ｍｍｏｌ）とピリジン（５．６ｇ、５．７３ｍＬ、７０．７８ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応フラスコを、窒素雰囲気下で１０時間、６５℃で加熱した。次いで、室温に冷却した後、反応物を酢酸エチルで希釈し、飽和Ｎａ２ＣＯ３溶液（５０ｍＬ）でクエンチした。層を分離させ、水層を酢酸エチルでさらに２回抽出した。合わせて１つにした有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して褐色の固体とした。この粗固体生成物を酢酸エチル／ジエチルエーテル（２：１）中でスラリーにし、減圧濾過により収集し、酢酸エチル／ジエチルエーテル（２：１）でさらに２回洗浄して、生成物を明るい黄色の結晶状の粉末として得た。この粉末を温かい酢酸エチルに溶解させ、Ｃｅｌｉｔｅに吸着させた。シリカゲルクロマトグラフィーによる精製（ジクロロメタン中の０〜５０％の酢酸エチル）により、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（化合物１）を白色の結晶状の固体（形態Ａ）として得た（１３．５ｇ、７６％の収率）。ＬＣ／ＭＳ ｍ／ｚ ４９６．０［Ｍ＋Ｈ］＋、保持時間１．４８分（ＲＰ−Ｃ１８、３分間かけた１０〜９９％のＣＨ３ＣＮ／０．０５％のＴＦＡ）。１Ｈ ＮＭＲ（４００．０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ １３．０８（ｓ，１Ｈ），１２．１６（ｓ，１Ｈ），８．８８（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｄｄ，Ｊ＝２．１，７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９５−７．８８（ｍ，３Ｈ），７．２２（ｄｄ，２．５，８．９Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），４．３３（ｓ，２Ｈ），１．６７（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，４Ｈ），１．４４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，４Ｈ）。
【０１１８】
形態Ａの粉末回折図形を図１に示す。
【０１１９】
以下の表１は、形態Ａの典型的なＸＲＰＤピークを提供する。
【０１２０】
【表１】
単晶Ｘ線分析に基づく形態Ａの立体配置の絵を図２に示す。回折データは、シール管ＣｕＫ−α線源（ＣｕＫ−ａｌｐｈａ ｓｏｕｒｃｅ）およびＡｐｅｘ ＩＩ ＣＣＤ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ Ａｐｅｘ ＩＩ Ｄｉｆｆｒａｃｔｏｍｅｔｅｒで獲得した。構造を解明し、ＳＨＥＬＸプログラム（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ｇ．Ｍ．，Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．Ａ６４，ｐｐ．１１２−１２２（２００８））を使用して精緻化した。強度、統計学、および対称性に基づき、構造を解明し、三方晶系およびＲ−３空間群において精緻化した。形態Ａは以下の単位格子サイズを有する：ａ＝１９．１６７０（４）Å、ｂ＝１９．１６７０（４）Å、ｃ＝３３．６５７２（１２）Å、α＝９０°、β＝９０°、およびγ＝１２０°。
【０１２１】
形態ＡのＦＴＩＲスペクトルが図３に提供される。
【０１２２】
以下の表２は、形態Ａの典型的なＦＴＩＲピークを提供する。
【０１２３】
【表２−１】
【０１２４】
【表２−２】
（化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強特性を検出し、測定するためのアッセイ）
（化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ調節特性をアッセイするための膜電位光学方法）
このアッセイは、ＮＩＨ ３Ｔ３細胞中の機能性ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの増加についての読み出しとして蛍光プレートリーダー（例えば、ＦＬＩＰＲ ＩＩＩ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｉｎｃ．）を使用し、蛍光電圧検知色素を利用して、膜電位の変化を測定する。応答のための駆動力は、細胞を予め化合物で処理し、続いて電圧検知色素を含ませた後の、１回の液体添加工程によるチャネル活性化と組み合わせた塩素イオン勾配の作成である。
【０１２５】
増強剤化合物の同定
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの増強剤を同定するために、二重付加ＨＴＳアッセイ形式を開発した。このＨＴＳアッセイは、蛍光電圧検知色素を利用して、温度修正したΔＦ５０８ＣＦＴＲ ＮＩＨ３Ｔ３細胞中でのΔＦ５０８ＣＦＴＲの開閉（コンダクタンス）の増加についての測定値として、ＦＬＩＰＲ ＩＩＩ上の膜電位の変化を測定する。応答のための駆動力は、細胞を予め増強剤化合物（またはＤＭＳＯビヒクル対照）で処理し、続いて再分布色素を含ませた後の、ＦＬＩＰＲ ＩＩＩのような蛍光プレートリーダーを使用する１回の液体添加工程におけるフォルスコリンでのチャネル活性化と組み合わせたＣｌ−イオン勾配である。
【０１２６】
（溶液）
浴溶液＃１：（単位：ｍＭ）ＮａＣｌ １６０、ＫＣｌ ４．５、ＣａＣｌ２ ２、ＭｇＣｌ２ １、ＨＥＰＥＳ １０、ＮａＯＨでｐＨ７．４。
【０１２７】
塩化物を含まない浴溶液：浴溶液＃１中の塩化物塩をグルコン酸塩に置き換える。
【０１２８】
（細胞培養）
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、膜電位の光学的測定に使用する。細胞を、１７５ｃｍ２の培養フラスコ中の、２ｍＭのグルタミン、１０％のウシ胎仔血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ペニシリン／ストレプトマイシン（ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ）、および２５ｍＭのＨＥＰＥＳを補充したダルベッコ改変イーグル培地中で、５％のＣＯ２および９０％の湿度で、３７℃で維持する。全ての光学的アッセイについて、細胞を、３８４ウェルのマトリゲルをコーティングしたプレートに約２０，０００個／ウェルで播種し、３７℃で２時間培養し、その後、増強剤アッセイについては、２７℃で２４時間培養した。修正アッセイ（ｃｏｒｒｅｃｔｉｏｎ ａｓｓａｙ）については、細胞を２７℃または３７℃で、化合物とともにおよび化合物を含めずに、１６〜２４時間培養する。化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ調節特性をアッセイするための電気生理学的アッセイ。
【０１２９】
（ウッシングチャンバーアッセイ）
ウッシングチャンバー実験を、光学的アッセイにおいて同定したΔＦ５０８−ＣＦＴＲ調節因子をさらに特性決定するために、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを発現している分極した気管上皮細胞上で行った。非ＣＦおよびＣＦ気管上皮を気管支組織から単離し、先に記載したように培養し（Ｇａｌｉｅｔｔａ，Ｌ．Ｊ．Ｖ．，Ｌａｎｔｅｒｏ，Ｓ．，Ｇａｚｚｏｌｏ，Ａ．，Ｓａｃｃｏ，Ｏ．，Ｒｏｍａｎｏ，Ｌ．，Ｒｏｓｓｉ，Ｇ．Ａ．，＆ Ｚｅｇａｒｒａ−Ｍｏｒａｎ，Ｏ．（１９９８）Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｃｅｌｌ．Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．３４，４７８−４８１）、ＮＩＨ３Ｔ３馴化培地をプレコートしたＣｏｓｔａｒ（登録商標）Ｓｎａｐｗｅｌｌ（商標）フィルター上にプレートした。４日後、頂端膜用培地（ａｐｉｃａｌ ｍｅｄｉａ）を除去し、細胞を、使用する前に１４日間以上、空気液体界面で増殖させた。これにより、繊毛のある（これは、気管上皮に典型的な特徴である）完全に分化した円筒状の細胞の単層を得た。非ＣＦ ＨＢＥは、いかなる肺疾患も明らかになっていない非喫煙者から単離した。ＣＦ−ＨＢＥは、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲについてホモ接合性の患者から単離した。
【０１３０】
Ｃｏｓｔａｒ（登録商標）Ｓｎａｐｗｅｌｌ（商標）細胞培養挿入物上で増殖させたＨＢＥを、ウッシングチャンバー（Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）に固定し、経上皮抵抗および短絡回路電流を、基底膜から頂端膜までのＣｌ−勾配（ＩＳＣ）の存在下で、電圧−クランプシステム（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｉｏｗａ，ＩＡ）を使用して測定した。簡単に説明すると、ＨＢＥを、電圧−クランプ記録条件（Ｖｈｏｌｄ＝０ｍＶ）下で、３７℃で試験した。基底膜用溶液には、１４５のＮａＣｌ、０．８３のＫ２ＨＰＯ４、３．３のＫＨ２ＰＯ４、１．２のＭｇＣｌ２、１．２のＣａＣｌ２、１０のグルコース、１０のＨＥＰＥＳ（ｐＨはＮａＯＨで７．３５に調整した）（単位：ｍＭ）を含め、頂端膜用溶液には、１４５のグルコン酸Ｎａ、１．２のＭｇＣｌ２、１．２のＣａＣｌ２、１０のグルコース、１０のＨＥＰＥＳ（ｐＨはＮａＯＨで７．３５に調整した）（単位：ｍＭ）を含めた。
【０１３１】
（増強剤化合物の同定）
典型的なプロトコールでは、基底膜から頂端膜へのＣｌ−濃度勾配を利用した。この勾配を設定するために、通常のリンガー液を基底膜上で使用し、一方、頂端膜のＮａＣｌを、等モルのグルコン酸ナトリウム（ＮａＯＨでｐＨ７．４に滴定した）に置き換えて、上皮を横切る大きなＣｌ−濃度勾配を得た。フォルスコリン（１０μＭ）および全ての試験化合物を、この細胞培養挿入物の頂端膜側に添加した。推定のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強剤の有効性を、公知の増強剤であるゲニステインの有効性と比較した。
【０１３２】
（パッチ−クランプ記録）
ΔＦ５０８−ＮＩＨ３Ｔ３細胞中の総Ｃｌ−電流を、これまでに記載されているように穿孔パッチ記録形状を使用してモニターした（Ｒａｅ，Ｊ．，Ｃｏｏｐｅｒ，Ｋ．，Ｇａｔｅｓ，Ｐ．，＆ Ｗａｔｓｋｙ，Ｍ．（１９９１）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ３７，１５−２６）。電圧−クランプ記録を、Ａｘｏｐａｔｃｈ ２００Ｂパッチ−クランプ増幅器（Ａｘｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ）を使用して２２℃で行った。ピペット溶液には、１５０のＮ−メチル−Ｄ−グルカミン（ＮＭＤＧ）−Ｃｌ、２のＭｇＣｌ２、２のＣａＣｌ２、１０のＥＧＴＡ、１０のＨＥＰＥＳ（単位：ｍＭ）、および２４０μｇ／ｍｌのアンホテリシン−Ｂ（ｐＨをＨＣｌで７．３５に調整した）を含めた。細胞外培地には、１５０のＮＭＤＧ−Ｃｌ、２のＭｇＣｌ２、２のＣａＣｌ２、１０のＨＥＰＥＳ（ｐＨをＨＣｌで７．３５に調整した）（単位：ｍＭ）を含めた。パルスの発生、データ取得、および分析は、Ｃｌａｍｐｅｘ ８（Ａｘｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．）とともに、Ｄｉｇｉｄａｔａ １３２０Ａ／Ｄインターフェースを取り付けたＰＣを使用して行った。ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを活性化するために、１０μＭのフォルスコリンと２０μＭのゲニステインを浴に添加し、電流−電圧関係を３０秒ごとにモニターした。
【０１３３】
（増強剤化合物の同定）
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定的に発現する、ＮＩＨ３Ｔ３細胞中の巨視的なΔＦ５０８−ＣＦＴＲ Ｃｌ−電流（ＩΔＦ５０８）を増大させるΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強剤の能力もまた、穿孔パッチ記録技術を使用して調べた。光学的アッセイにより同定した増強剤は、光学的アッセイにおいて観察されたものと類似の効力および有効性でＩΔＦ５０８の用量依存性増加を誘起した。試験した全ての細胞において、増強剤の添加前および添加の間の逆転電位は、およそ−３０ｍＶであった。これは、計算したＥＣｌ（−２８ｍＶ）である。
【０１３４】
（細胞培養）
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定的に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、ホールセル記録に使用する。これらの細胞を、１７５ｃｍ２の培養フラスコ中の、２ｍＭのグルタミン、１０％のウシ胎仔血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ペニシリン／ストレプトマイシン、および２５ｍＭのＨＥＰＥＳを補充したダルベッコ改変イーグル培地中で、５％のＣＯ２および９０％の湿度で、３７℃で維持した。ホールセル記録については、２，５００〜５，０００個の細胞を、ポリ−Ｌ−リジンをコーティングしたガラスカバースリップ上に播種し、増強剤の活性を試験するための使用の前に、２７℃で２４〜４８時間培養し、そして矯正因子の活性を測定するために、３７℃で、矯正化合物とともに、または矯正化合物を含めずにインキュベーションした。
【０１３５】
（単一チャネル記録）
ＮＩＨ３Ｔ３細胞中で発現されたｗｔ−ＣＦＴＲと温度矯正ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの開閉活性を、Ａｘｏｐａｔｃｈ ２００Ｂパッチ−クランプ増幅器（Ａｘｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．）を使用して、これまでに記載されたているように（Ｄａｌｅｍａｎｓ，Ｗ．，Ｂａｒｂｒｙ，Ｐ．，Ｃｈａｍｐｉｇｎｙ，Ｇ．，Ｊａｌｌａｔ，Ｓ．，Ｄｏｔｔ，Ｋ．，Ｄｒｅｙｅｒ，Ｄ．，Ｃｒｙｓｔａｌ，Ｒ．Ｇ．，Ｐａｖｉｒａｎｉ，Ａ．，Ｌｅｃｏｃｑ，Ｊ−Ｐ．，Ｌａｚｄｕｎｓｋｉ，Ｍ．（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ３５４，５２６−５２８）、切り取った（ｅｘｃｉｓｅｄ）インサイドアウト膜パッチ記録を使用して観察した。ピペットには、１５０のＮＭＤＧ、１５０のアスパラギン酸、５のＣａＣｌ２、２のＭｇＣｌ２、および１０のＨＥＰＥＳ（ｐＨはＴｒｉｓ塩基で７．３５に調整した）（単位：ｍＭ）を含めた。浴には、１５０のＮＭＤＧ−Ｃｌ、２のＭｇＣｌ２、５のＥＧＴＡ、１０のＴＥＳ、および１４のＴｒｉｓ塩基（ｐＨはＨＣｌで７．３５に調整した）（単位：ｍＭ）を含めた。切除後に、ｗｔ−ＣＦＴＲおよびΔＦ５０８−ＣＦＴＲの両方を、１ｍＭのＭｇ−ＡＴＰ、７５ｎＭのｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼの触媒サブユニット（ＰＫＡ；Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐ．Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）、および電流のランダウンを妨害するプロテインホスファターゼを阻害するための１０ｍＭのＮａＦを添加することによって活性化させた。ピペット電位は８０ｍＶに維持した。チャネル活性を、２以下の活性チャネルを含む膜パッチから分析した。同時に開口する最大数から、実験過程の間の活性チャネルの数を決定した。単一チャネルの電流振幅を決定するために、１２０秒間のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ活性により記録したデータを、１００Ｈｚにて「オフライン」でフィルターにかけ、次いでＢｉｏ−Ｐａｔｃｈ Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェア（Ｂｉｏ−Ｌｏｇｉｃ Ｃｏｍｐ．Ｆｒａｎｃｅ）を使用して多重ガウス関数に適合した全点振幅ヒストグラムを構築するために使用した。微小電流の合計および開口確率（ＰＯ）を、１２０秒のチャネル活性から決定した。このＰＯを、Ｂｉｏ−Ｐａｔｃｈソフトウェアを使用して、またはＰＯ＝Ｉ／ｉ（Ｎ）の関係から決定した（ここでは、Ｉ＝平均電流、ｉ＝単一チャネル電流振幅、そしてＮ＝パッチ中の活性チャネルの数）。
【０１３６】
（細胞培養）
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定的に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、切り取った膜パッチ−クランプ記録に使用した。これらの細胞を、１７５ｃｍ２の培養フラスコ中の、２ｍＭのグルタミン、１０％のウシ胎仔血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ペニシリン／ストレプトマイシン、および２５ｍＭのＨＥＰＥＳを補充したダルベッコ改変イーグル培地中で、５％のＣＯ２および９０％の湿度で、３７℃で維持した。単一チャネル記録のために、２，５００〜５，０００個の細胞を、ポリ−Ｌ−リジンをコーティングしたガラスカバースリップ上に播種し、そして使用前に２４〜４８時間、２７℃で培養した。
【０１３７】
化合物１形態Ａは、ＡＴＰ結合カセットトランスポーターの調節因子として有用である。化合物１形態ＡのＥＣ５０（μｍ）は、２．０μＭ未満であると測定した。化合物１形態Ａの有効性は、１００％から２５％と計算した。１００％の有効性が、４−メチル−２−（５−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）フェノールを用いて得られる最大応答であることに留意されたい。
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本出願は、２００８年１０月２３日に出願された、米国仮特許出願第６１／１０７，８１３号（発明の名称「ＳＯＬＩＤ ＦＯＲＭＳ ＯＦ Ｎ−（４−（７−ＡＺＡＢＩＣＹＣＬＯ［２．２．１］ＨＥＰＴＡＮ−７−ＹＬ）−２−（ＴＲＩＦＬＵＯＲＯＭＥＴＨＹＬ）ＰＨＥＮＹＬ）−４−ＯＸＯ−５−（ＴＲＩＦＬＵＯＲＯＭＥＴＨＹＬ）−１，４−ＤＩＨＹＤＲＯＱＵＩＮＯＬＩＮＥ−３−ＣＡＲＢＯＸＡＭＩＤＥ」）の利益を主張し、この仮特許出願の全内容は、本明細書において参照として援用される。
【０００２】
（発明の技術分野）
本発明は、嚢胞性線維症経膜コンダクタンス制御因子（「ＣＦＴＲ」）の調節因子である、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの固体状態の形態、例えば、結晶形態に関する。本発明はまた、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの結晶形態を含有する薬学的組成物とそれを用いる方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
ＡＴＰカセットトランスポーターは、多種多様な薬理学的因子、潜在的に毒性の薬物、および生体異物、ならびに陰イオンの輸送を制御する膜トランスポータータンパク質の１つのファミリーである。これらは、それらの特定の活性のために、細胞のアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）を結合し、これを使用する相同な膜タンパク質である。これらのトランスポーターのうちのいくつかは、多剤耐性タンパク質（ＭＤＲ１−Ｐ糖タンパク質、もしくは多剤耐性タンパク質ＭＲＰ１のようなもの）として発見され、化学療法剤から悪性ガン細胞を防御する。現在までのところ、４８個のそのようなトランスポーターが同定されており、それらの配列同一性および機能に基づいて、７つのファミリーに分類されている。
【０００４】
疾患と一般的に関係があるＡＴＰカセットトランスポーターファミリーの１つのメンバーは、ｃＡＭＰ／ＡＴＰ媒介性陰イオンチャネル、ＣＦＴＲである。ＣＦＴＲは、様々な細胞型（吸収性および分泌性上皮細胞を含む）の中で発現される。ここでは、ＣＦＴＲは、上記膜を横切る陰イオンの流れ、ならびに他のイオンチャネルおよびタンパク質の活性を制御する。上皮細胞においては、ＣＦＴＲの正常な機能は、呼吸組織および消化組織を含む全身の電解質輸送の維持に重要である。ＣＦＴＲは、膜貫通ドメインの縦列反復から形成されるタンパク質をコードするおよそ１４８０個のアミノ酸から構成され、各々の膜貫通ドメインは、６つの膜貫通ヘリックスと１つのヌクレオチド結合ドメインを含む。２つの膜貫通ドメインは、大きな、極性の、制御性（Ｒ）ドメインによって、チャネル活性および細胞の輸送を制御する複数のリン酸化部位と連結される。
【０００５】
ＣＦＴＲをコードする遺伝子は同定され、配列決定されている（非特許文献１；非特許文献２）、非特許文献３を参照のこと）。この遺伝子の欠損は、嚢胞性線維症（「ＣＦ」）（ヒトにおける最も一般的な致死的遺伝的疾患）を生じるＣＦＴＲ中の突然変異を引き起こす。米国では、２，５００人の乳児のうちのおよそ１人が嚢胞性線維症を発症する。一般的な米国の集団内では、最大１０００万人の人々が、明らかな病的影響を伴わずに上記欠損遺伝子を１コピー持つ。対照的に、上記ＣＦ関連遺伝子を２コピー持つ個体は、慢性肺疾患を含む、ＣＦの衰弱および致死的影響に見舞われる。
【０００６】
嚢胞性線維症の患者では、呼吸器上皮内で内因的に発現されるＣＦＴＲの突然変異が、イオンおよび流体の輸送において不均衡を引き起こす頂端（ａｐｉｃａｌ）の陰イオン分泌の減少をもたらす。陰イオン輸送において生じたこの減少は、肺における粘液蓄積の増大およびそれに付随する微生物感染の一因となり、これらはＣＦ患者において最終的に死を招くことになる。呼吸器疾患に加えて、ＣＦ患者は、消化器の問題および膵不全を患うことが典型的であり、処置しないまま放置した場合は、死に至ることになる。さらに、嚢胞性線維症の男性の大多数は生殖能力がなく、嚢胞性線維症の女性は生殖能力が低下している。２コピーのＣＦ関連遺伝子の深刻な影響とは対照的に、１コピーのＣＦ関連遺伝子を持つ個体は、コレラおよび下痢による脱水症に対して高い耐性を示し、このことは、この集団における比較的高頻度のＣＦ遺伝子を説明していると考えられる。
【０００７】
ＣＦ染色体のＣＦＴＲ遺伝子の配列分析により、病因となる様々な突然変異が明らかにされた（非特許文献４；非特許文献５；および非特許文献６；非特許文献７）。今日までに、ＣＦ遺伝子について１０００を超える病因となる突然変異が同定されている（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｅｎｅｔ．ｓｉｃｋｋｉｄｓ．ｏｎ．ｃａ／ｃｆｔｒ／）。最も優勢な突然変異は、ＣＦＴＲアミノ酸配列の５０８位のフェニルアラニンの欠失であり、これは、一般的にはΔＦ５０８−ＣＦＴＲと呼ばれている。この突然変異は、嚢胞性線維症の症例のおよそ７０％に存在しており、これは重篤な疾患と関連がある。
【０００８】
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲにおける残基５０８の欠失は、形成されつつあるタンパク質の正確な折りたたみを妨げる。この結果、突然変異体タンパク質はＥＲを出られなくなり、原形質膜へ輸送されなくなる。結果として、膜中に存在するチャネルの数は、野生型ＣＦＴＲを発現する細胞中で観察される数よりはるかに少ない。損なわれた輸送機構に加えて、この突然変異はチャネルの開閉にも欠陥を生じる。まとめて考えると、膜中のチャネル数の減少と開閉の欠陥が、上皮を横断する陰イオンの輸送の減少を導き、これは、イオンおよび流体の輸送の欠陥を導く。（非特許文献８）。しかしながら、複数の研究により、野生型ＣＦＴＲより少ないが、膜中のこの少ない数のΔＦ５０８−ＣＦＴＲが機能的であることが示された（非特許文献９；Ｄｅｎｎｉｎｇら、前出；非特許文献１０）。ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ、Ｒ１１７Ｈ−ＣＦＴＲ、およびＧ５５１Ｄ−ＣＦＴＲに加えて、輸送、合成、および／またはチャネル開閉の欠陥を生じる、ＣＦＴＲ中の他の病因となる突然変異は、アップレギュレーションまたはダウンレギュレーションされて、陰イオンの分泌を変化させ得、疾患の進行および／または重症度を変え得る。
【０００９】
ＣＦＴＲは陰イオンに加えて様々な分子を輸送するが、この役割（陰イオン、塩化物、および重炭酸塩の輸送）が、上皮を横断してイオンおよび水を輸送する重要な機構における１つの要素を表すことは明らかである。他の要素としては、上皮Ｎａ＋チャネル、ＥＮａＣ、Ｎａ＋／２Ｃｌ−／Ｋ＋共トランスポーター、Ｎａ＋−Ｋ＋−ＡＴＰａｓｅポンプ、および基底側膜Ｋ＋チャネルが挙げられ、これらは細胞への塩化物の取り込みを担う。
【００１０】
これらの要素が一緒に作用して、細胞内でのそれらの選択的発現および局在により上皮を横断する方向性をもつ輸送を達成する。塩化物の吸収は、頂端膜上に存在するＥＮａＣとＣＦＴＲ、および細胞の基底膜側表面で発現されるＮａ＋−Ｋ＋−ＡＴＰａｓｅポンプおよびＣｌチャネルの協調活性により起こる。管腔側からの塩化物の二次的な能動輸送は細胞内塩化物の蓄積を導き、これが次いで、Ｃｌ−イオンチャネルを介して受動的に細胞から離れることにより、ベクトル輸送が生じ得る。基底膜側表面上のＮａ＋／２Ｃｌ−／Ｋ＋共トランスポーター、Ｎａ＋−Ｋ＋−ＡＴＰａｓｅポンプおよび基底膜Ｋ＋チャネル、そして管腔側上のＣＦＴＲの配置が、管腔側でのＣＦＴＲを介した塩化物の分泌を調和する。水はそれ自体は決して能動的には輸送されないと思われるので、上皮を横切るその流れは、ナトリウムおよび塩化物の大きな流れにより生じた小さな経上皮浸透圧勾配に左右される。
【００１１】
ＣＦＴＲ中の突然変異が原因である重炭酸塩の輸送の機能不全は、特定の分泌機能に障害を引き起こすと仮説が立てられている。例えば、非特許文献１１を参照のこと。
【００１２】
中等度のＣＦＴＲ機能不全と関連があるＣＦＴＲ中の突然変異はまた、ＣＦと共通する特定の疾患の兆候を有する症状があるが、ＣＦについての診断基準を満たさない患者においても明らかである。これらには、先天性両側精管欠損症、特発性慢性膵炎、慢性気管支炎、および慢性副鼻腔炎が含まれる。突然変異体ＣＦＴＲが修飾因子遺伝子または環境因子と並んでリスクファクターであると考えられる他の疾患としては、原発性硬化性胆管炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、および喘息が挙げられる。
【００１３】
タバコの喫煙、低酸素症状態、および環境因子（低酸素シグナル伝達を誘導する）もまた、ＣＦＴＲ機能を低下させることが実証されており、慢性気管支炎のような特定の形態の呼吸器疾患の一因となり得る。ＣＦＴＲ機能障害が原因であり得るが、ＣＦについての診断基準を満たさない疾患は、ＣＦＴＲ関連疾患として特性決定される。
【００１４】
嚢胞性線維症に加えて、ＣＦＴＲ活性の調節は、ＣＦＴＲ中の突然変異により直接引き起こされるのではない他の疾患（例えば、分泌性疾患）およびＣＦＴＲにより媒介される他のタンパク質ミスフォールディング病（ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｏｌｄｉｎｇ ｄｉｓｅａｓｅ）に有効であり得る。ＣＦＴＲは、多くの細胞の上皮を横断する塩化物および重炭酸塩の流れを制御して、流体の移動、タンパク質の可溶化、粘膜の粘性、および酵素活性をコントロールする。ＣＦＴＲの機能不全は、気道、あるいは肝臓および膵臓を含む多くの臓器中の管の遮断を引き起こす可能性がある。増強剤（ｐｏｔｅｎｔｉａｔｏｒ）は、細胞膜中に存在するＣＦＴＲの開閉活性を増強する化合物である。粘膜の肥厚、流体の調節の障害、粘膜クリアランスの障害、または炎症および組織破壊をもたらす管の遮断を伴う任意の疾患が、増強剤についての候補であり得る。
【００１５】
これらには、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、喫煙が原因であるＣＯＰＤ、慢性気管支炎、副鼻腔炎、便秘、ドライアイ疾患、およびシェーグレン症候群、胃食道逆流疾患、胆石、直腸脱、および炎症性腸疾患が含まれるが、これらに限定はされない。ＣＯＰＤは、進行性であり、完全には可逆性でない空気流制限を特徴とする。上記空気流制限は、粘液過剰分泌、気腫、および細気管支炎が原因である。突然変異体ＣＦＴＲまたは野生型ＣＦＴＲの活性化因子は、ＣＯＰＤにおいて一般的である粘液過剰分泌および粘膜絨毛クリアランスの障害を処置できる可能性を示す。具体的には、ＣＦＴＲを横断する陰イオン分泌の増大が、気道表面液体への流体の輸送を促進して粘液を水和し、繊毛周囲の流体の粘性を最適化し得る。このことは、粘液線毛クリアランスの増強およびＣＯＰＤと関連がある症状の軽減をもたらすであろう。加えて、気道クリアランスの改善の結果として進行中の感染および炎症を防ぐことにより、ＣＦＴＲ調節因子は、気腫の特徴である気道の肺実質破壊を防ぐかもしくは遅らせ、そして気道疾患における粘液過剰分泌の根底にある粘液分泌細胞（ｍｕｃｕｓ ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ｃｅｌｌ）の数および大きさの増大を小さくするかまたは反転させ得る。ドライアイ疾患は、涙液の房水産生の低下と、異常な涙膜脂質、タンパク質、およびムチンプロフィールを特徴とする。ドライアイの原因は数多く存在し、そのうちのいくつかとしては、年齢、眼のレーシック手術、関節炎、薬物療法、化学熱傷／熱傷（ｃｈｅｍｉｃａｌ／ｔｈｅｒｍａｌ ｂｕｒｎｓ）、アレルギー、および疾患（例えば、嚢胞性線維症およびシェーグレン症候群）が挙げられる。ＣＦＴＲを介する陰イオン分泌の増大は、角膜内皮細胞および眼を取り囲む分泌腺からの流体輸送を促進して、角膜水和を増大させるであろう。このことは、ドライアイ疾患と関連がある症状を緩和するために役立つであろう。シェーグレン症候群は、免疫系が全身（眼、口、皮膚、呼吸組織、肝臓、膣、および腸を含む）の水分を産生する腺を攻撃する自己免疫疾患である。症状としては、眼、口、および膣の乾燥、ならびに肺疾患が挙げられる。この疾患はまた、関節リウマチ、全身性紅斑、全身性硬化症、および多発性筋炎／皮膚筋炎とも関連がある。タンパク質輸送の機能障害がこの疾患を引き起こすと考えられ、その処置の選択肢は限られている。ＣＦＴＲ活性の調節因子は、上記疾患に罹患した様々な臓器を水和し得、関連する症状の緩和に役立ち得る。嚢胞性線維症を有する個体は、腸閉塞の再発エピソードと、直腸脱、胆石、胃食道逆流疾患、ＧＩ悪性腫瘍、および炎症性腸疾患の高発症率とを有し、これは、ＣＦＴＲ機能がそのような疾患の予防において重要な役割を果たし得ることを示している。
【００１６】
上記で議論されるように、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲにおける残基５０８の欠失は、形成されつつあるタンパク質の正確な折りたたみを妨げ、その結果、突然変異体タンパク質は、ＥＲを出られなくなり、原形質膜へ輸送されなくなると考えられている。結果として、成熟タンパク質は不十分な量しか、原形質膜に存在せず、上皮組織内の塩化物の輸送は、顕著に低下させられる。実際に、ＥＲ機構によるＣＦＴＲのＥＲプロセシングの機能不全というこの細胞性の表現形は、ＣＦ疾患についてのみならず、他の広範囲の孤立性疾患および遺伝性疾患についても、基調であることが示されている。ＥＲ機構が正常に機能できない２つの事項は、上記タンパク質のＥＲ輸出のためのカップリングが行われず、これにより分解が生じること、またはこれらの不完全な／誤って折り畳まれたタンパク質のＥＲ蓄積のいずれかによる（非特許文献１２；非特許文献１３；非特許文献１４；非特許文献１５；非特許文献１６）。第１のクラスのＥＲ機能不全と関連がある疾患は以下である：嚢胞性線維症（上記で議論されるような誤って折り畳まれたΔＦ５０８−ＣＦＴＲが原因である）、遺伝性気腫（ａ１−抗トリプシン；非Ｐｉｚ変異体が原因である）、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固線溶機能不全（ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ−ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓ）（例えば、プロテインＣ欠乏症）、１型遺伝性血管浮腫、脂質プロセシングの機能不全（例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症）、リソソーム蓄積症（例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー症）、ムコ多糖症（リソソームプロセシング酵素が原因である）、サンドホッフ病／テイ−サックス病（Ｓａｎｄｈｏｆ／Ｔａｙ−Ｓａｃｈｓ）（β−ヘキソサミニダーゼが原因である）、クリグラー−ナジャーＩＩ型（ＵＤＰ−グルクロニル−シアリック−トランスフェラーゼが原因である）、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病（インスリン受容体が原因である）、ラロン型小人症（成長ホルモン受容体が原因である）、ミエロペルオキシダーゼ（ｍｙｌｅｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）欠損症、原発性上皮小体機能低下症（プレプロ副甲状腺ホルモンが原因である）、黒色腫（チロシナーゼが原因である）。後者のクラスのＥＲ機能不全と関連がある疾患は以下である：グリカノーシスＣＤＧ１型（ｇｌｙｃａｎｏｓｉｓ ＣＤＧ ｔｙｐｅ １）、遺伝性気腫（α１−抗トリプシン（ＰｉＺ変異体）が原因である）、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症（Ｉ型、ＩＩ型、ＩＶ型プロコラーゲンが原因である）、遺伝性低フィブリノーゲン血症（フィブリノーゲンが原因である）、ＡＣＴ欠損症（α１−抗キモトリプシンが原因である）、尿崩症（ＤＩ）、ニューロフィジン性ＤＩ（ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｅａｌ ＤＩ）（バソプレッシン（ｖａｓｏｐｖｅｓｓｉｎ）ホルモン／Ｖ２受容体が原因である）、腎性（neprogenic）ＤＩ（アクアポリンＩＩが原因である）、シャルコー・マリー・トゥース症候群（末梢ミエリンタンパク質２２が原因である）、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病（βＡＰＰおよびプレセニリンが原因である）、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺（ｐｌａｓｙ）、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害（例えば、ハンチントン病、脊髄小脳失調症Ｉ型、脊髄および延髄性筋萎縮症（ｓｐｉｎａｌ ａｎｄ ｂｕｌｂａｒ ｍｕｓｃｕｌａｒ ａｔｒｏｐｈｙ）、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症（ｄｅｎｔａｔｏｒｕｂａｌ ｐａｌｌｉｄｏｌｕｙｓｉａｎ）、および筋緊張性ジストロフィー）、ならびに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病（プリオンタンパク質のプロセシングの機能不全が原因である）、ファブリー病（リソソームα−ガラクトシダーゼＡが原因である）、シュトロイスラー・シャインカー症候群（Ｐｒｐのプロセシングの機能不全が原因である））、不妊症、膵炎、膵不全、骨粗鬆症、骨減少症、ゴーハム症候群、塩素イオン症（ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｃｈａｎｎｅｌｏｐａｔｈｉｅｓ）、先天性筋緊張症（トムソンおよびベッカー型（Ｔｈｏｍｓｏｎ ａｎｄ Ｂｅｃｋｅｒ ｆｏｒｍ））、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病（Ｄｅｎｔ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、過剰驚愕症、癲癇、過剰驚愕症、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、内臓逆位症を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群としても知られている）、内臓逆位症と毛様体無形成を伴わないＰＣＤ（ｃｉｌｉａｒｙ ａｐｌａｓｉａ）、ならびに肝臓病。
【００１７】
ＣＦＴＲ中の突然変異が関係している他の疾患としては、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）が原因で起こる男性不妊、軽度の肺疾患、特発性膵炎、およびアレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）が挙げられる。非特許文献１７（引用により本明細書中に組み入れられる）を参照のこと。
【００１８】
ＣＦＴＲ活性のアップレギュレーションに加えて、ＣＦＴＲ調節因子による陰イオンの分泌の減少は、上皮の水輸送が、分泌促進剤により活性化された塩化物輸送の結果として劇的に増大する分泌性下痢の処置に有効であり得る。上記機構は、ｃＡＭＰの上昇およびＣＦＴＲの刺激を伴う。
【００１９】
下痢には多くの原因が存在するが、下痢症の主要な結果は、過剰な塩化物輸送から生じることが全てに共通しており、脱水、アシドーシス、発達障害、および死亡が含まれる。急性下痢および慢性下痢は、世界の多くの地域で主要な医療的課題になっている。下痢は、５歳未満の小児における低栄養状態の重大な原因であり、死亡の主原因でもある（５，０００，０００人が死亡／年）。
【００２０】
分泌性下痢はまた、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）および慢性炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の患者においては危険な症状である。先進工業国から新興国への毎年１６００万人の旅行者が下痢を発症し、下痢の重篤度および症例数は、旅行先の国および地域により様々である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２１】
【非特許文献１】Ｇｒｅｇｏｒｙ，Ｒ．Ｊ．ら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ ３４７：３８２−３８６
【非特許文献２】Ｒｉｃｈ，Ｄ．Ｐ．ら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ ３４７：３５８−３６２
【非特許文献３】Ｒｉｏｒｄａｎ，Ｊ．Ｒ．ら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４５：１０６６−１０７３
【非特許文献４】Ｃｕｔｔｉｎｇ，Ｇ．Ｒ．ら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ ３４６：３６６−３６９
【非特許文献５】Ｄｅａｎ，Ｍ．ら（１９９０）Ｃｅｌｌ ６１：８６３：８７０
【非特許文献６】Ｋｅｒｅｍ，Ｂ−Ｓ．ら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４５：１０７３−１０８０
【非特許文献７】Ｋｅｒｅｍ，Ｂ−Ｓら（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８７：８４４７−８４５１
【非特許文献８】Ｑｕｉｎｔｏｎ，Ｐ．Ｍ．（１９９０），ＦＡＳＥＢ Ｊ．４：２７０９−２７２７
【非特許文献９】Ｄｏｌｅｍａｎｓら（１９９１），Ｎａｔｕｒｅ Ｌｏｎｄ．３５４：５２６−５２８
【非特許文献１０】Ｐａｓｙｋ ａｎｄ Ｆｏｓｋｅｔｔ（１９９５），Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：１２３４７−５０
【非特許文献１１】「Ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ：ｉｍｐａｉｒｅｄ ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｕｃｏｖｉｓｃｉｄｏｓｉｓ」，Ｐａｕｌ Ｍ．Ｑｕｉｎｔｏｎ，Ｌａｎｃｅｔ ２００８；３７２：４１５−４１７
【非特許文献１２】Ａｒｉｄｏｒ Ｍ，ら、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．，５（７），ｐｐ．７４５−７５１（１９９９）
【非特許文献１３】Ｓｈａｓｔｒｙ，Ｂ．Ｓ．，ら、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，４３，ｐｐ．１−７（２００３）
【非特許文献１４】Ｒｕｔｉｓｈａｕｓｅｒ，Ｊ．ら、Ｓｗｉｓｓ Ｍｅｄ Ｗｋｌｙ，１３２，ｐｐ．２１１−２２２（２００２）
【非特許文献１５】Ｍｏｒｅｌｌｏ，ＪＰら、ＴＩＰＳ，２１，ｐｐ．４６６−４６９（２０００）
【非特許文献１６】Ｂｒｏｓｓ Ｐ．ら、Ｈｕｍａｎ Ｍｕｔ．，１４，ｐｐ．１８６−１９８（１９９９）
【非特許文献１７】「ＣＦＴＲ−ｏｐａｔｈｉｅｓ：ｄｉｓｅａｓｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ｇｅｎｅ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ」，Ｐｅａｄｅｒ Ｇ．Ｎｏｏｎｅ ａｎｄ Ｍｉｃｈａｅｌ Ｒ．Ｋｎｏｗｌｅｓ，Ｒｅｓｐｉｒ．Ｒｅｓ．２００１，２：３２８−３３２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２２】
したがって、ヒトＣＦＴＲの野生型形態および突然変異形態の強力な選択的ＣＦＴＲ増強剤が必要である。これらの突然変異ＣＦＴＲ形態としては、ΔＦ５０８ｄｅｌ、Ｇ５５１Ｄ、Ｒ１１７Ｈ、２７８９＋５Ｇ−＞Ａが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２３】
哺乳動物の細胞膜中のＣＦＴＲの活性を調節するために使用できるＣＦＴＲ活性の調節因子およびその組成物も必要である。
【００２４】
そのようなＣＦＴＲ活性の調節因子を使用して、ＣＦＴＲ中の突然変異により引き起こされる疾患を処置する方法が必要である。
【００２５】
エクスビボで哺乳動物の細胞膜中のＣＦＴＲ活性を調節する方法が必要である。
【００２６】
加えて、治療薬としての使用に適している薬学的組成物中で容易に使用できる上記化合物の安定な固体形態が必要である。
【課題を解決するための手段】
【００２７】
（発明の要旨）
本発明は、以下の構造を有するＮ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（本明細書中以後、「化合物１」）の固体形態に関する：
【００２８】
【化１】
化合物１およびその薬学的に許容される組成物は、以下を含むがこれらに限定されない様々な疾患、障害、もしくは症状を処置するかまたはその重篤度を低下させるために有用である：嚢胞性線維症、膵炎、副鼻腔炎、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固線溶機能不全（例えば、プロテインＣ欠乏症）、１型遺伝性血管浮腫、脂質プロセシングの機能不全（例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症）、リソソーム蓄積症（例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー症）、ムコ多糖症、サンドホッフ病／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーＩＩ型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性上皮小体機能低下症、黒色腫、グリカノーシスＣＤＧ１型、遺伝性気腫、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、ニューロフィジン性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース症候群、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害（例えば、ハンチントン病、脊髄小脳失調症Ｉ型、脊髄および延髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー）、ならびに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病、ファブリー病、シュトロイスラー・シャインカー症候群））、ＣＯＰＤ、ドライアイ疾患、膵不全、骨粗鬆症、骨減少症、ゴーハム症候群、塩素イオン症、先天性筋緊張症（トムソンおよびベッカー型）、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病、過剰驚愕症、癲癇、過剰驚愕症、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、内臓逆位症を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群としても知られている）、内臓逆位症と毛様体無形成を伴わないＰＣＤ、ならびにシェーグレン症候群。
【００２９】
１つの態様においては、化合物１は、実質的に結晶状の、純粋な遊離の形態の形態Ａである。
【００３０】
本明細書中に記載されるプロセスは、形態Ａを含む本発明の組成物を調製するために使用できる。これらのプロセスで使用される成分の量と特徴は以下に記載されるとおりである。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】図１は、形態ＡのＸ線粉末回折パターンである。
【図２】図２は、１回のＸ線結晶分析に基づく形態Ａの立体構造の図である。
【図３】図３は、形態ＡのＦＴＩＲスペクトルを提供する。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
（発明の詳細な説明）
（定義）
本明細書中で使用される場合、別段の明記がない限りは、以下の定義を適用するものとする。
【００３３】
用語「ＡＢＣ−トランスポーター」は、本明細書中で使用される場合、ＡＢＣ−トランスポータータンパク質もしくは少なくとも１つの結合ドメインを含むその断片を意味する。ここでは、上記タンパク質もしくはその断片は、インビボまたはインビトロで存在するものを意味する。用語「結合ドメイン」は、本明細書中で使用される場合、調節因子に結合できる上記ＡＢＣ−トランスポーター上の１つのドメインを意味する。例えば、Ｈｗａｎｇ，Ｔ．Ｃ．ら、Ｊ．Ｇｅｎ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．（１９９８）：１１１（３），４７７−９０を参照のこと。
【００３４】
用語「ＣＦＴＲ」は、本明細書中で使用される場合、嚢胞性線維症経膜コンダクタンス制御因子もしくは制御因子活性の能力があるその突然変異体（ΔＦ５０８ ＣＦＴＲ、Ｒ１１７Ｈ ＣＦＴＲ、およびＧ５５１Ｄ ＣＦＴＲを含むがこれらに限定されない）を意味する（ＣＦＴＲ突然変異体については、例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｅｎｅｔ．ｓｉｃｋｋｉｄｓ．ｏｎ．ｃａ／ｃｆｔｒ／を参照のこと）。
【００３５】
用語「調節する」は、本明細書中で使用される場合、測定可能な量の増大または減少を意味する。
【００３６】
用語「正常なＣＦＴＲ」または「正常なＣＦＴＲ機能」は、本明細書中で使用される場合、環境因子（例えば、喫煙、汚染、または肺の炎症を生じるあらゆるもの）が原因である障害を全く有さない、野生型様のＣＦＴＲを意味する。
【００３７】
用語「低下したＣＦＴＲ」または「低下したＣＦＴＲ機能」は、本明細書中で使用される場合、正常なＣＦＴＲより低いか、または正常なＣＦＴＲ機能よりも低いことを意味する。
【００３８】
本明細書中で使用される場合、「結晶」は、構造単位が一定の幾何学的パターンまたは格子状に配置され、結果として結晶状の固体が厳格な長距離秩序を有する化合物あるいは組成物をいう。結晶構造を構成する上記構造単位は、原子、分子、またはイオンであり得る。結晶状固体は、明確な融点を示す。
【００３９】
本明細書中で使用される場合、表現「実質的に結晶状」は、厳格な長距離秩序を有する一定の幾何学的パターンまたは格子状に配置される固体物質を意味する。例えば、実質的に結晶状の物質は、約８５％を上回る結晶化度（例えば、約９０％を上回る結晶化度または約９５％を上回る結晶化度）を有する。用語「実質的に結晶状」が、先の段落で定義された記述子「結晶」を含むことにも留意されたい。
【００４０】
１つの態様においては、本発明は、形態Ａとして特性決定された、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの１つの形態を特徴とする。
【００４１】
いくつかの実施形態においては、形態Ａは、Ｃｕ Ｋα線を使用して得られたＸ線粉末回折における、約７．７〜約８．１度（例えば、約７．９度）；約１１．７〜約１２．１度（例えば、約１１．９度）；約１４．２〜約１４．６度（例えば、約１４．４度）；および約１５．６〜約１６．０度（例えば、約１５．８度）での１つまたは複数のピークを特徴とする。
【００４２】
いくつかの実施形態においては、形態Ａは、Ｃｕ Ｋα線を使用して得られたＸ線粉末回折における、約７．８〜約８．０度（例えば、約７．９度）；約１１．８〜約１２．０度（例えば、約１１．９度）；約１４．３〜約１４．５度（例えば、約１４．４度）；および約１５．７〜約１５．９度（例えば、約１５．８度）での１つまたは複数のピークを特徴とする。
【００４３】
他の実施形態においては、形態Ａは、Ｃｕ Ｋα線を使用して得られたＸ線粉末回折における、約７．７〜約８．１度（例えば、約７．９度）；約２１．６〜約２２．０度（例えば、約２１．８度）；および約２３．６〜約２４．０度（例えば、約２３．８度）での１つまたは複数のピークを特徴とする。
【００４４】
なお他の実施形態においては、形態Ａは、Ｃｕ Ｋα線を使用して得られたＸ線粉末回折における、約７．８〜約８．０度（例えば、約７．９度）；約２１．７〜約２１．９度（例えば、約２１．８度）；および約２３．７〜約２３．９度（例えば、約２３．８度）での１つまたは複数のピークを特徴とする。
【００４５】
いくつかの実施形態においては、形態Ａは、Ｘ線粉末回折パターンにおいて度として測定される以下のピークの１つまたは複数を特徴とする：約７．７〜約８．１度（例えば、約７．９度）での１つのピーク；約９．１〜約９．５度（例えば、約９．３度）での１つのピーク；約１１．７〜約１２．１度（例えば、約１１．９度）での１つのピーク；約１４．２〜約１４．６度（例えば、約１４．４度）での１つのピーク；約１４．９〜約１５．３度（例えば、約１５．１度）での１つのピーク；約１５．６〜約１６．０度（例えば、約１５．８度）での１つのピーク；約１６．８〜約１７．２度（例えば、約１７．０度）での１つのピーク；約１７．５〜約１７．９度（例えば、約１７．７度）での１つのピーク；約１９．１〜約１９．５度（例えば、約１９．３度）での１つのピーク；約１９．９〜約２０．３度（例えば、約２０．１度）での１つのピーク；約２１．２〜約２１．６度（例えば、約２１．４度）での１つのピーク；約２１．６〜約２２．０度（例えば、約２１．８度）での１つのピーク；約２３．２〜約２３．６度（例えば、約２３．４度）での１つのピーク；約２３．６〜約２４．０度（例えば、約２３．８度）での１つのピーク；約２５．４〜約２５．８度（例えば、約２５．６度）での１つのピーク；約２６．６〜約２７．０度（例えば、約２６．８度）での１つのピーク；約２９．２〜約２９．６度（例えば、約２９．４度）での１つのピーク；約２９．５〜約２９．９度（例えば、約２９．７度）での１つのピーク；約２９．９〜約３０．３度（例えば、約３０．１度）での１つのピーク；および約３１．０〜約３１．４度（例えば、約３１．２度）での１つのピーク。
【００４６】
いくつかの実施形態においては、形態Ａは、Ｘ線粉末回折パターンにおいて度として測定される以下のピークの１つまたは複数を特徴とする：約７．８〜約８．０度（例えば、約７．９度）での１つのピーク；約９．２〜約９．４度（例えば、約９．３度）での１つのピーク；約１１．８〜約１２．０度（例えば、約１１．９度）での１つのピーク；約１４．３〜約１４．５度（例えば、約１４．４度）での１つのピーク；約１５．０〜約１５．２度（例えば、約１５．１度）での１つのピーク；約１５．７〜約１５．９度（例えば、約１５．８度）での１つのピーク；約１６．９〜約１７．１度（例えば、約１７．０度）での１つのピーク；約１７．６〜約１７．８度（例えば、約１７．７度）での１つのピーク；約１９．２〜約１９．４度（例えば、約１９．３度）での１つのピーク；約２０．０〜約２０．２度（例えば、約２０．１度）での１つのピーク；約２１．３〜約２１．５度（例えば、約２１．４度）での１つのピーク；約２１．７〜約２１．９度（例えば、約２１．８度）での１つのピーク；約２３．３〜約２３．５度（例えば、約２３．４度）での１つのピーク；約２３．７〜約２３．９度（例えば、約２３．８度）での１つのピーク；約２５．５〜約２５．７度（例えば、約２５．６度）での１つのピーク；約２６．７〜約２６．９度（例えば、約２６．８度）での１つのピーク；約２９．３〜約２９．５度（例えば、約２９．４度）での１つのピーク；約２９．６〜約２９．８度（例えば、約２９．７度）での１つのピーク；約３０．０〜約３０．２度（例えば、約３０．１度）での１つのピーク；および約３１．１〜約３１．３度（例えば、約３１．２度）での１つのピーク。
【００４７】
いくつかの実施形態においては、形態Ａは、図１に提供されるような回折パターンを特徴とする。
【００４８】
１つの態様においては、本発明は、形態Ａと薬学的に許容されるアジュバントまたは担体を含む薬学的組成物を特徴とする。
【００４９】
１つの態様においては、本発明は、形態Ａの有効量をヒトに投与する工程を含む、ヒトにおいてＣＦＴＲ媒介性疾患を処置する方法を特徴とする。
【００５０】
いくつかの実施形態においては、上記方法は、さらなる治療薬を投与する工程を含む。
【００５１】
いくつかの実施形態においては、疾患は、以下から選択される：嚢胞性線維症、膵炎、副鼻腔炎、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固線溶機能不全（例えば、プロテインＣ欠乏症）、１型遺伝性血管浮腫、脂質プロセシングの機能不全（例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症）、リソソーム蓄積症（例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー症）、ムコ多糖症、サンドホッフ病／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーＩＩ型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性上皮小体機能低下症、黒色腫、グリカノーシスＣＤＧ１型、遺伝性気腫、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、ニューロフィジン性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース症候群、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害（例えば、ハンチントン病、脊髄小脳失調症Ｉ型、脊髄および延髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー）、ならびに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病、ファブリー病、シュトロイスラー・シャインカー症候群））、ＣＯＰＤ、ドライアイ疾患、膵不全、骨粗鬆症、骨減少症、ゴーハム症候群、塩素イオン症、先天性筋緊張症（トムソンおよびベッカー型）、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病、過剰驚愕症、癲癇、過剰驚愕症、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、内臓逆位症を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群としても知られている）、内臓逆位症と毛様体無形成を伴わないＰＣＤ、ならびにシェーグレン症候群。
【００５２】
１つの実施形態において、本発明は、ヒトにおいて嚢胞性線維症を処置する方法を提供する。この方法は、形態Ａの有効量を上記ヒトに投与する工程を含む。
【００５３】
１つの態様において、本発明は、形態Ａと薬学的に許容される担体を含む医薬パック（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｐａｃｋ）またはキットを特徴とする。
【００５４】
１つの態様において、本発明は、三方晶系、Ｒ−３空間群、および以下の単位格子サイズを有している、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの結晶形態を特徴とする：ａ＝１９．１６７０（４）Å、ｂ＝１９．１６７０（４）Å、ｃ＝３３．６５７２（１２）Å、α＝９０°、β＝９０°、およびγ＝１２０°。
【００５５】
１つの実施形態において、本発明は、以下の単位格子サイズを有している、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの結晶形態を提供する：ａ＝１９．１６７０（４）Å、ｂ＝１９．１６７０（４）Å、ｃ＝３３．６５７２（１２）Å。
【００５６】
（使用、処方物、および投与）
（薬学的に許容される組成物）
本発明の１つの態様において、薬学的に許容される組成物が提供される。ここでは、これらの組成物は、本明細書中に記載されるような形態Ａを含み、状況に応じて、薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含む。特定の実施形態においては、これらの組成物は、状況に応じてさらに１種類以上のさらなる治療薬を含む。
【００５７】
上記のように、本発明の薬学的に許容される組成物はさらに、薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含む。本明細書中で使用される場合、薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルには、所望される特定の投薬形態に適している限りは、任意の、および全ての溶媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散補助剤もしくは懸濁補助剤、表面活性剤、等張化剤、増粘剤もしくは乳化剤、保存剤、固体結合剤、潤沢剤などが含まれる。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１６版、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８０）には、薬学的に許容される組成物の処方に使用される様々な担体と、その調製のための公知の技術が開示されている。任意の従来の担体媒体が本発明の化合物と不適合である（例えば、何らかの望ましくない生物学的作用を生じるか、または別の方法で薬学的に許容される組成物の任意の他の成分（単数または複数）と有害な方法で相互作用することによる）場合を除き、その使用は本発明の範囲に含まれるものとする。薬学的に許容される担体とすることができる物質のいくつかの例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）、緩衝物質（例えば、リン酸塩）、グリシン、ソルビン酸、またはソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩類または電解質、例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、蜜蝋、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、羊毛脂、糖（例えば、ラクトース、グルコース、およびスクロース）、澱粉（例えば、コーンスターチおよびジャガイモ澱粉）、セルロースおよびその誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、および酢酸セルロース）、粉末状トラガカント、麦芽、ゼラチン、タルク、賦形剤（例えば、ココアバターおよび坐薬ワックス）、油（例えば、ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油、および大豆油）、グリコール類（例えば、プロピレングリコールまたはポリエチレングリコール）、エステル類（例えば、エチルオレエートおよびエチルラウレート）、寒天、緩衝剤（例えば、水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム）、アルギン酸、発熱物質を含まない水、等張性生理食塩水、リンゲル液、エチルアルコール、およびリン酸緩衝液。さらに、他の適合し得る非毒性潤沢剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム）、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味料、調味料および香料、保存剤および酸化防止剤も、調剤者の判断にしたがって、組成物中に存在させることができる。
【００５８】
（化合物および薬学的に許容される組成物の使用）
なお別の態様において、本発明は、ＣＦＴＲの突然変異が関係している症状、疾患、もしくは障害を処置するか、またはその重篤度を低下させる方法を提供する。特定の実施形態において、本発明は、ＣＦＴＲ活性の機能不全が関係している症状、疾患、もしくは障害を処置する方法を提供する。この方法は、化合物１形態Ａを含む組成物を、その必要がある被験体（好ましくは、哺乳動物）に投与する工程を含む。
【００５９】
特定の実施形態において、本発明は、ＣＦＴＲまたは環境因子（例えば、喫煙）をコードする遺伝子の突然変異が原因で低下したＣＦＴＲ機能と関係がある疾患を処置する方法を提供する。これらの疾患としては、嚢胞性線維症、慢性気管支炎、反復性気管支炎、急性気管支炎、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）が原因で起こる男性不妊、先天的な子宮と膣の欠損（ＣＡＵＶ）が原因で起こる女性不妊、特発性慢性膵炎（ＩＣＰ）、特発性再発性膵炎、特発性急性膵炎、慢性副鼻腔炎、原発性硬化性胆管炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、糖尿病、ドライアイ、便秘、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、骨疾患（例えば、骨粗鬆症）、および喘息が挙げられる。
【００６０】
特定の実施形態において、本発明は、正常なＣＦＴＲ機能と関係がある疾患を処置するための方法を提供する。これらの疾患としては、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、慢性気管支炎、反復性気管支炎、急性気管支炎、副鼻腔炎、便秘、膵炎（慢性膵炎、再発性膵炎、および急性膵炎を含む）、膵不全、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）が原因で起こる男性不妊、軽度の肺疾患、特発性膵炎、肝臓病、遺伝性気腫、胆石、胃食道逆流症、消化管悪性腫瘍、炎症性腸疾患、便秘、糖尿病、関節炎、骨粗鬆症、ならびに骨減少症が挙げられる。
【００６１】
特定の実施形態では、本発明は、以下を含む正常なＣＦＴＲ機能と関連がある疾患を処置するための方法を提供する：遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固線溶機能不全（例えば、プロテインＣ欠乏症）、１型遺伝性血管浮腫、脂質プロセシングの機能不全（例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症）、リソソーム蓄積症（例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー症）、ムコ多糖症、サンドホッフ病／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーＩＩ型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性上皮小体機能低下症、黒色腫、グリカノーシスＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、ニューロフィジン性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース症候群、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害（例えば、ハンチントン病、脊髄小脳失調症Ｉ型、脊髄および延髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー）、ならびに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病（プリオンタンパク質のプロセシングの機能不全が原因である）、ファブリー病、シュトロイスラー・シャインカー症候群））、ゴーハム症候群、塩素イオン症、先天性筋緊張症（トムソンおよびベッカー型）、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病、過剰驚愕症、癲癇、過剰驚愕症、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、内臓逆位症を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群としても知られている）、内臓逆位症と毛様体無形成を伴わないＰＣＤ、またはシェーグレン症候群。この方法は、本明細書中に記載される形態Ａを含む組成物の有効量を上記哺乳動物に投与する工程を含む。
【００６２】
代替の好ましい実施形態によれば、本発明は、嚢胞性線維症を処置する方法を提供し、この方法は、本明細書中に記載される形態Ａを含む組成物の有効量を上記哺乳動物に投与する工程を含む、上記哺乳動物に組成物を投与する工程を含む。
【００６３】
本発明によれば、形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物の「有効量」は、上記に列挙された疾患、障害、もしくは症状の１つ以上を処置するか、またはその重篤度を低下させるために有効な量である。
【００６４】
形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物は、上記に列挙された疾患、障害、もしくは症状の１つ以上を処置するか、またはその重篤度を低下させるために有効な任意の量および任意の投与経路を使用して投与され得る。
【００６５】
特定の実施形態において、形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物は、呼吸器上皮および非呼吸器上皮の頂端膜において残留ＣＦＴＲ活性を示す患者において、嚢胞性線維症を処置するか、またはその重篤度を低下させるために有用である。上皮表面における残留ＣＦＴＲ活性の存在は、当該分野で公知の方法（例えば、標準的な電気生理学的技術、生化学的技術、または組織化学的技術）を使用して容易に検出され得る。このような方法は、インビボもしくはエクスビボでの電気生理学的技術、汗もしくは唾液のＣｌ−濃度の測定、または細胞表面密度をモニターするためのエクスビボでの生化学的もしくは組織化学的技術を使用して、ＣＦＴＲ活性を同定する。このような方法を使用して、残留ＣＦＴＲ活性が、様々な異なる突然変異についてヘテロ接合性であるかもしくはホモ接合性である患者（最も一般的な突然変異であるΔＦ５０８についてホモ接合性であるかもしくはヘテロ接合性である患者を含む）において容易に検出され得る。
【００６６】
別の実施形態において、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物は、薬理学的方法または遺伝子治療を使用して、誘導されたかもしくは増大させられた残留ＣＦＴＲ活性を有する患者において嚢胞性線維症を処置するか、あるいはその重篤度を低下させるために有用である。このような方法は、細胞表面に存在するＣＦＴＲの量を増加させ、それにより、患者に通常は存在しないＣＦＴＲ活性を誘導するか、または患者の既存の残留ＣＦＴＲ活性レベルを増強する。
【００６７】
１つの実施形態においては、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物は、残留ＣＦＴＲ活性を示す特定の遺伝子型（例えば、クラスＩＩＩ突然変異（調節または開閉が損なわれている）、クラスＩＶ突然変異（伝導性が変化している）、またはクラスＶ突然変異（合成が低下している））の患者において嚢胞性線維症を処置するか、またはその重篤度を低下させるために有用である（Ｌｅｅ Ｒ．Ｃｈｏｏ−Ｋａｎｇ，Ｐａｍｅｌａ Ｌ．，Ｚｅｉｔｌｉｎ，Ｔｙｐｅ Ｉ，ＩＩ，ＩＩＩ，ＩＶ，ａｎｄ Ｖ ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ Ｔａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ Ｃｏｎｄｕｃｔａｎｃｅ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒ Ｄｅｆｅｃｔｓ ａｎｄ Ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｙ；Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ６：５２１−５２９，２０００）。残留ＣＦＴＲ活性を示す他の患者の遺伝子型には、これらのクラスのうちの１つについてホモ接合性であるか、あるいは、クラスＩ突然変異、クラスＩＩ突然変異、または分類されない突然変異を含む任意の他のクラスの突然変異を持つヘテロ接合性である患者が含まれる。
【００６８】
１つの実施形態においては、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物は、特定の臨床的表現型（例えば、代表的には、上皮の頂端膜中の残留ＣＦＴＲ活性の量と典型的に相関関係がある中等度から軽度の臨床的表現型）の患者において嚢胞性線維症を処置するか、またはその重篤度を低下させるために有用である。このような表現型には、膵不全を示している患者、または特発性膵炎および先天性両側精管欠損症と診断された、もしくは軽度の肺疾患と診断された患者が含まれる。
【００６９】
必要とされる正確な量は、被験体の種、年齢、および全身状態、感染症の重篤度、特定の薬剤、その投与様式などに応じて、被験体一人ひとりについて変化するであろう。本発明の化合物は、好ましくは、投与し易さ、投薬量の均一性が保たれる単位投薬形態に処方される。表現「単位投薬形態」は、本明細書中で使用される場合、処置される患者に適している薬剤の物理的に別個の単位をいう。しかし、本発明の化合物および組成物の１日の総投薬量が、信頼できる医学的判断の範囲内で、担当医によって決定されることが理解されるであろう。任意の特定の患者または生物についての特定の有効用量レベルは、処置される障害およびその障害の重篤度；使用される特定の化合物の活性；使用される特定の組成物；患者の年齢、体重、全般的な健康状態、性別、および食事療法；投与時間、投与経路、および使用される特定の化合物の排泄速度；処置の継続時間；使用される特定の化合物と併用または同時使用される薬物、ならびに、医学の分野で周知の同様の要因を含む様々な要因により変わるであろう。用語「患者」は、本明細書中で使用される場合、動物、好ましくは、哺乳動物、そして最も好ましくは、ヒトを意味する。
【００７０】
本発明の薬学的に許容される組成物は、処置される感染の重篤度に応じて、ヒトおよび他の動物に、経口投与、直腸投与、非経口投与、槽内投与、膣内投与、腹腔内投与、局所投与（散剤、軟膏剤、点滴剤、もしくはパッチによるなど）、口内投与（経口スプレーもしくは鼻スプレーなどによる）することができる。特定の実施形態において、本発明の化合物は、所望される治療効果を得るために、１日あたり被験体の体重で、１日に１回以上、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇの投薬量レベルで経口投与または非経口投与され得る。
【００７１】
経口投与のための液体投薬形態としては、薬学的に許容されるエマルジョン、マイクロエマルジョン、液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤が挙げられるが、これらに限定されない。活性化合物に加えて、液体投薬形態には、当該分野で一般的に使用される不活性な希釈剤（例えば、水または他の溶媒）、可溶化剤、および乳化剤（例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド）、油（特に、綿実油、ラッカセイ油、コーン油、小麦胚芽油、オリーブ油、ひまし油、およびごま油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物を含めることができる。不活性希釈剤に加えて、経口用組成物にはまた、アジュバント（例えば、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤、甘味料、調味料ならびに香料）も含めることができる。
【００７２】
注射用調製物（例えば、滅菌の注射用の水性懸濁物または油性懸濁物）は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して、公知の技術にしたがって処方され得る。上記滅菌の注射用調製物はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤もしくは溶媒中の滅菌の注射用溶液、懸濁物、またはエマルジョン（例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液として）でもあり得る。使用され得る上記許容されるビヒクルおよび溶媒の中には、水、リンゲル溶液（米国薬局方）および等張性塩化ナトリウム溶液がある。加えて、滅菌の不揮発性油が、通常、溶媒もしくは懸濁媒体として使用される。この目的のために、合成のモノグリセリドまたはジグリセリドを含む無刺激性の任意の不揮発性油が使用され得る。加えて、脂肪酸（例えば、オレイン酸）は、注射用物質の調製に使用される。
【００７３】
上記注射用処方物は、例えば、細菌保持フィルター（ｂａｃｔｅｒｉａｌ−ｒｅｔａｉｎｉｎｇ ｆｉｌｔｅｒ）を通す濾過によって、または使用前に滅菌水もしくは他の滅菌の注射用媒体中に溶解もしくは分散させることができる滅菌の固体組成物の形態で、滅菌薬剤を組み込むことによって、滅菌することができる。
【００７４】
本発明の化合物の効果を持続させるためには、皮下注射もしくは筋肉内注射による化合物の吸収を遅らせることが、頻繁に望まれる。これは、水溶性が低い結晶性または不定形の物質の液体懸濁物の使用によって達成され得る。これにより、上記化合物の吸収速度は、その溶解速度に依存し、次に、結晶の大きさおよび結晶形態に依存し得る。あるいは、非経口投与される化合物形態の吸収の遅延は、油性ビヒクル中に上記化合物を溶解または懸濁することによって達成される。注射用のデポー形態は、生分解性ポリマー（例えば、ポリラクチド−ポリグリコリド）中に上記化合物のマイクロカプセルマトリックスを形成させることにより作製される。ポリマーに対する化合物の比および使用される特定のポリマーの性質に応じて、化合物放出の速度が制御され得る。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射用処方物はまた、上記化合物を、身体組織と適合性のリポソームまたはマイクロエマルジョン中に捕捉することによっても調製される。
【００７５】
直腸投与または膣投与のための組成物は、好ましくは、本発明の化合物を、室温では固体であるが、体温では液体であり、したがって、直腸内腔もしくは膣内腔で溶解して活性化合物を放出する適切な非刺激性賦形剤または担体（例えば、ココアバター、ポリエチレングリコール、または坐剤ワックス）と混合することにより調製され得る坐剤である。
【００７６】
経口投与のための固体の投薬形態としては、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、および顆粒剤が挙げられる。そのような固体の投薬形態においては、上記活性化合物は、少なくとも１種類の不活性な薬学的に許容される賦形剤または担体（例えば、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウム、および／またはａ）充填剤もしくは増量剤（例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびシアル酸）、ｂ）結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース、およびアカシア）、ｃ）湿潤剤（例えば、グリセロール）、ｄ）崩壊剤（例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプンもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩、および炭酸ナトリウム）、ｅ）溶液遅延剤（ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｒｅｔａｒｄｉｎｇ ａｇｅｎｔ）（例えば、パラフィン）、ｆ）吸収促進剤（例えば、四級アンモニウム化合物）、ｇ）湿潤剤（例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール）、ｈ）吸収剤（例えば、カオリンおよびベントナイトクレイ）、ならびにｉ）滑沢剤（例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム）、ならびにこれらの混合物）と混合される。カプセル剤、錠剤、および丸剤の場合には、上記投薬形態にはまた、緩衝化剤も含めることができる。
【００７７】
類似のタイプの固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖、ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して、ソフト充填ゼラチンカプセル剤およびハード充填ゼラチンカプセル剤中で充填剤として使用され得る。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤の固体投薬形態は、薬学処方の分野で周知のコーティングおよび殻（例えば、腸溶性コーティングおよび他のコーティング）を持たせて調製され得る。これらには、状況に応じて、不透明化剤を含めることができ、そしてまた、それらが上記活性成分（単数または複数）のみを、または上記活性成分（単数または複数）を優先的に、腸管の特定の部分で、状況に応じて、遅延させられた様式で放出する組成物でもあり得る。使用できる埋め込み型組成物（ｅｍｂｅｄｄｉｎｇ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）の例としては、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。類似のタイプの固体組成物はまた、ラクトースもしくは乳糖、ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して、ソフト充填ゼラチンカプセル剤およびハード充填ゼラチンカプセル剤中の充填剤としても使用され得る。
【００７８】
上記活性化合物はまた、上記のような１種類以上の賦形剤とともにマイクロカプセル化された形態でも存在し得る。錠剤、糖衣剤、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤の上記固体投薬形態は、薬学処方の分野で周知のコーティングおよび殻（例えば、腸溶性コーティング、徐放コーティング、および他のコーティング）を持たせて調製され得る。そのような固体投薬形態において、上記活性化合物は、少なくとも１種類の不活性な希釈剤（例えば、スクロース、ラクトース、もしくはデンプン）と混合され得る。このような投薬形態にはまた、通常行われるように、不活性希釈剤以外のさらなる物質（例えば、錠剤化滑沢剤および他の錠剤化補助剤（例えば、ステアリン酸マグネシウムおよび微結晶性セルロース））を含めることができる。カプセル剤、錠剤、および丸剤の場合は、上記投薬形態には緩衝化剤も含めることができる。これらは、状況に応じて不透明化剤を含み得、それらが上記活性成分（単数または複数）のみを、または上記活性成分（単数または複数）を優先的に、腸管の特定の部分で、状況に応じて、遅延させられた様式で放出する組成物でもあり得る。使用できる埋め込み型組成物の例としては、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。
【００７９】
本発明の化合物の局所投与もしくは経皮投与のための投薬形態としては、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル、散剤、液剤、スプレー、吸入剤、またはパッチが挙げられる。上記活性成分は、薬学的に許容される担体と任意の必要な保存剤、または必要とされ得る場合には緩衝化剤と、滅菌条件下で混合される。眼用の処方物、点耳薬、および点眼薬もまた本発明の範囲内に入ると考えられる。さらに、本発明は、身体への化合物の制御された送達を提供するという追加の利点を有する経皮的パッチの使用を企図する。このような投薬形態は、適切な媒体中に上記化合物を溶解または分散させることにより調製される。吸収促進剤がまた、皮膚を横断する上記化合物の流れを増大させるために使用され得る。この速度は、速度制御膜を提供するか、またはポリマーマトリクスもしくはゲル中に上記化合物を分散させるかのいずれかにより制御され得る。
【００８０】
本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物が、併用療法において使用され得る。すなわち、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物が、１種類以上の他の望ましい治療薬もしくは医療的手順と同時に、またはその前に、またはその後に投与され得ることもまた理解されるであろう。併用レジメンにおいて使用するための治療（治療薬または手順）の特定の組み合わせは、所望される治療薬および／または手順と、達成されるべき所望される治療効果の適合性が考慮されるであろう。使用される治療は、同じ障害について望ましい効果をもたらし得る（例えば、本発明の化合物は、同じ障害を処置するために使用される別の薬剤と同時に投与され得る）場合があり、また、それらが異なる効果（例えば、任意の有害な効果の制御）をもたらし得る場合もあることも理解されるであろう。本明細書中で使用される場合、特定の疾患もしくは症状を処置または予防するために通常投与されるさらなる治療薬は、「処置される疾患もしくは症状に適している」として公知である。
【００８１】
１つの実施形態においては、上記さらなる薬剤は、粘液溶解薬、気管支拡張薬、抗生物質、抗感染症薬、抗炎症薬、本発明の化合物以外のＣＦＴＲ調節因子、または栄養剤から選択される。
【００８２】
１つの実施形態においては、上記さらなる薬剤は抗生物質である。本明細書において有用な例示的な抗生物質としては、トブラマイシン（トブラマイシン吸入用粉末（ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ ｉｎｈａｌｅｄ ｐｏｗｄｅｒ）（ＴＩＰ）を含む）、アジスロマイシン、アズトレオナム（アズトレオナムのエアゾール化形態を含む）、アミカシン（そのリポソーム処方物を含む）、シプロフロキサシン（吸入による投与に適しているその処方物を含む）、レボフロキサシン（そのエアゾール化処方物を含む）、および２種類の抗生物質（例えば、ホスホマイシンとトブラマイシン）の組み合わせが挙げられる。
【００８３】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は粘液溶解薬である。本明細書において有用な例示的な粘液溶解薬としては、Ｐｕｌｍｏｚｙｍｅ（登録商標）が挙げられる。
【００８４】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は気管支拡張薬である。例示的な気管支拡張薬としては、アルブテロール、硫酸メタプロテレノール、酢酸ピルブテロール、サルメテロール、または硫酸テトラブリン（ｔｅｔｒａｂｕｌｉｎｅ ｓｕｌｆａｔｅ）が挙げられる。
【００８５】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は、肺気道表面の液体の回復に効果的である。そのような薬剤は、細胞内外での塩の移動を改善して、肺気道中の粘膜がより水和されるようにし、したがってより容易に除去されるようにする。例示的なそのような薬剤としては、高張食塩水、デヌホゾールテトラナトリウム（ｄｅｎｕｆｏｓｏｌ ｔｅｔｒａｓｏｄｉｕｍ）（［［（３Ｓ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１−イル）−３−ヒドロキシオキソラン−２−イル］メトキシ−ヒドロキシホスホリル］［［［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソピリミジン−１−イル）−３，４−ジヒドロキシオキソラン−２−イル］メトキシ−ヒドロキシホスホリル］オキシ−ヒドロキシホスホリル］ハイドロゲンホスフェート）、またはブロンキトール（ｂｒｏｎｃｈｉｔｏｌ）（マンニトールの吸入型処方物）が挙げられる。
【００８６】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は抗炎症薬、すなわち、肺の炎症を軽減できる薬剤である。本明細書において有用な例示的なそのような薬剤としては、イブプロフェン、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、シルデナフィル、吸入型グルタチオン、ピオグリタゾン、ヒドロキシクロロキン、またはシンバスタチンが挙げられる。
【００８７】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は、上皮型ナトリウムチャネルブロッカー（ＥＮａＣ）の活性を、このチャネルをブロックすることにより直接、またはＥＮａＣ活性の増大をもたらすプロテアーゼ（例えば、セリンプロテアーゼ（ｓｅｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅｓ）、チャネル活性化プロテアーゼ）の調節により間接的にのいずれかにより低下させる。例示的なそのような薬剤としては、カモスタット（トリプシン様プロテアーゼ阻害剤）、ＱＡＵ１４５、５５２−０２、ＧＳ−９４１１、ＩＮＯ−４９９５、エアロリティック（Ａｅｒｏｌｙｔｉｃ）、およびアミロライドが挙げられる。上皮型ナトリウムチャネルブロッカー（ＥＮａＣ）の活性を低下させるさらなる薬剤は、例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００９／０７４５７５（そのあらゆる内容が、その全体において引用により本明細書中に組み入れられる）に見ることができる。
【００８８】
本明細書中に記載される他の疾患のうち、ＣＦＴＲ調節因子（例えば、形態Ａ）と、ＥＮａＣの活性を低下させる薬剤の組み合わせが、リドル症候群、嚢胞性線維症を含む炎症またはアレルギー症状、原発性線毛ジスキネジア、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道感染、肺癌腫、口内乾燥症、および乾性角結膜炎（ｋｅｒａｔｏｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖｉｔｉｓ ｓｉｒｅ）、気道感染（急性および慢性；ウイルス性および細菌性）、ならびに肺癌腫の処置に使用される。
【００８９】
ＣＦＴＲ調節因子（例えば、形態Ａ）とＥＮａＣの活性を低下させる薬剤の組み合わせはまた、上皮型ナトリウムチャネルの遮断により媒介される疾患（これには、おそらくはその表面上の保護用の表面液体の異常な生理機能が関与している、上皮を横切る異常な流体の調節と関連がある呼吸器疾患以外の疾患（例えば、口内乾燥症（ｄｒｙ ｍｏｕｔｈ）または乾性角結膜炎（ドライアイ））も含まれる）の処置にも有用である。さらに、腎臓での上皮型ナトリウムチャネルの遮断が利尿を促進し、それにより血圧低下作用を誘導するために使用され得る。
【００９０】
喘息には、内因性（非アレルギー性）喘息と外因性（アレルギー性）喘息の両方、軽症の喘息、中等度の喘息、重症の喘息、気管支喘息、運動誘発性喘息、職業性喘息、および細菌感染後に誘導される喘息が含まれる。喘息の処置はまた、喘鳴症状を示しており、重大な医学的関心の確立された患者カテゴリーである「喘鳴乳幼児」と診断されたかまたはそのように診断することができ、現在は多くの場合に初期または初期段階の喘息患者として同定された被験体（例えば、４歳または５歳未満の被験体）の処置を包括すると理解される。（便宜上、この特定の喘息症状は、喘鳴幼児症候群（ｗｈｅｅｚｙ ｉｎｆａｎｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）と呼ばれる）。喘息の処置における予防効果は、症候性発作（例えば、急性喘息または気管支収縮発作）の頻度の減少または重篤度の低下、肺機能の改善または気道反応性亢進の改善により証明されるであろう。これはさらに、他の対症治療、すなわち、症候性発作が起こったときにそれを限定するか中止させるためのまたはそれを意図した治療（例えば、抗炎症薬（例えば、コルチコステロイド）または気管支拡張剤）の必要性の減少により証明され得る。喘息の予防的利点は、特に、「早朝悪化（ｍｏｒｎｉｎｇ ｄｉｐｐｉｎｇ）」の傾向がある被験体において明白であり得る。「早朝悪化」は認識されている喘息症候群であり、喘息患者のかなりの割合に共通し、例えば、およそ午前４時〜６時の間の数時間の間、すなわち、通常何らかの前に投与した喘息の対症治療から相当離れた時間での喘息発作を特徴とする。
【００９１】
慢性閉塞性肺疾患には、慢性気管支炎またはそれに伴う呼吸困難、気腫、ならびに、他の薬物療法、特に他の吸入型の薬物療法により生じる気道過敏症の悪化が含まれる。いくつかの実施形態においては、ＣＦＴＲ調節因子（例えば、形態Ａ）と、ＥＮａＣの活性を低下させる薬剤の組み合わせが、急性、アラキン酸（ａｒａｃｈｉｄｉｃ）、カタル性、クループ（ｃｒｏｕｐｕｓ）、慢性またはフチノイド（ｐｈｔｈｉｎｏｉｄ）の気管支炎を含むあらゆるタイプまたは原因の気管支炎の処置に有用である。
【００９２】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は、化合物１形態Ａ以外のＣＦＴＲ調節因子、すなわち、ＣＦＴＲ活性を調節する作用を有する薬剤である。例示的なそのような薬剤としては、アタルレン（ａｔａｌｕｒｅｎ）（「ＰＴＣ１２４（登録商標）」；安息香酸３−［５−（２−フルオロフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］）、シナプルチド、ランコブチド（ｌａｎｃｏｖｕｔｉｄｅ）、デペレスタット（ｄｅｐｅｌｅｓｔａｔ）（ヒト組み換え体好中球エラスターゼ阻害剤）、コビプロストン（ｃｏｂｉｐｒｏｓｔｏｎｅ）（７−｛（２Ｒ，４ａＲ，５Ｒ，７ａＲ）−２−［（３Ｓ）−１，１−ジフルオロ−３−メチルペンチル］−２−ヒドロキシ−６−オキソオクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル｝ヘプタン酸）、または安息香酸（３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）が挙げられる。別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は、安息香酸（３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）である。
【００９３】
別の実施形態においては、上記さらなる薬剤は栄養剤である。例示的なそのような薬剤としては、パンクレリパーゼ（膵臓酵素代用物）（Ｐａｎｃｒｅａｓｅ（登録商標）、Ｐａｎｃｒｅａｃａｒｂ（登録商標）、Ｕｌｔｒａｓｅ（登録商標）、またはＣｒｅｏｎ（登録商標）を含む）、Ｌｉｐｒｏｔｏｍａｓｅ（登録商標）（以前はＴｒｉｚｙｔｅｋ（登録商標））、Ａｑｕａｄｅｋｓ（登録商標）、あるいはグルタチオン吸入薬（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ）が挙げられる。１つの実施形態においては、上記さらなる栄養剤はパンクレリパーゼである。
【００９４】
１つの実施形態においては、上記さらなる薬剤は、本発明の化合物以外のＣＦＴＲ調節因子である。
【００９５】
本発明の組成物中に存在するさらなる治療薬の量は、唯一の活性薬剤としてその治療薬を含む組成物において通常投与されるであろう量を上回ることはないであろう。好ましくは、本明細書で開示される組成物中のさらなる治療薬の量は、唯一の治療用の活性薬剤としてその薬剤を含む組成物中に通常存在する量の約５０％〜１００％の範囲であろう。
【００９６】
本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物は、移植可能な医療用デバイス（例えば、プロテーゼ、人工弁、血管グラフト、ステントおよびカテーテル）をコーティングするための組成物に組み込まれ得る。したがって、本発明は、別の態様において、上記で一般的に、そして本明細書中でクラスでおよびサブクラスで記載されるような本発明の化合物と上記移植可能なデバイスのコーティングに適している担体を含む、移植可能なデバイスをコーティングするための組成物を含む。なお別の態様において、本発明は、上記で一般的に、そして本明細書中でクラスでおよびサブクラスで記載されるような本発明の化合物と上記移植可能なデバイスのコーティングに適している担体を含む組成物でコーティングされた移植可能なデバイスを含む。適切なコーティングおよびコーティングされた移植可能なデバイスの一般的な調製は、米国特許第６，０９９，５６２号；同第５，８８６，０２６号；および同第５，３０４，１２１号に記載されている。上記コーティングは、典型的には、生体適合性ポリマー物質（例えば、ヒドロゲルポリマー、ポリメチルジシロキサン、ポリカプロラクトン、ポリエチレングリコール、ポリ乳酸、エチレンビニルアセテート、およびこれらの混合物）である。上記コーティングは、上記組成物において制御放出特性を付与するために、必要に応じて、フルオロシリコーン、ポリサッカライド、ポリエチレングリコール、リン脂質、またはこれらの組み合わせの適切なトップコートによりさらにコーティングされ得る。
【００９７】
本発明の別の態様は、生物学的試料または患者において（例えば、インビトロまたはインビボで）ＣＦＴＲ活性を調節することに関し、上記方法は、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物を上記患者に投与する工程、あるいはこれらを生物学的試料と接触させる工程を含む。用語「生物学的試料」としては、本明細書中で使用される場合、細胞培養物またはその抽出物；哺乳動物から得られた生検物質またはその抽出物；および血液、唾液、尿、糞便、精液、涙液、もしくは他の流体またはそれらの抽出物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９８】
生物学的試料中のＣＦＴＲの調節は、当業者に公知の様々な目的のために有用である。このような目的の例としては、生物学的および病理学的現象におけるＣＦＴＲの研究；ならびにＣＦＴＲの新規の調節因子の比較評価が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９９】
なお別の実施形態において、インビトロまたはインビボで陰イオンチャネルの活性を調節する方法が提供される。上記方法は、上記チャネルを、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物と接触させる工程を含む。好ましい実施形態においては、上記陰イオンチャネルは、塩化物イオンチャネルまたは炭酸水素イオンチャネルである。他の好ましい実施形態においては、上記陰イオンチャネルは、塩化物イオンチャネルである。
【０１００】
代替の実施形態にしたがって、本発明は、細胞の膜中の機能的ＣＦＴＲの数を増加させる方法を提供し、上記方法は、上記細胞を、本明細書中に記載される形態Ａまたはその薬学的に許容される組成物と接触させる工程を含む。
【０１０１】
別の好ましい実施形態によれば、ＣＦＴＲの活性は、膜電位差を測定することにより測定される。生物学的試料中の膜を横断する電位差を測定するための手法は、当該分野で公知の方法のいずれか（例えば、光学的膜電位アッセイまたは他の電気生理学的方法）を使用し得る。
【０１０２】
上記光学的膜電位アッセイは、ＧｏｎｚａｌｅｚおよびＴｓｉｅｎによって記載された電圧感受性のＦＲＥＴセンサー（Ｇｏｎｚａｌｅｚ，Ｊ．Ｅ．ａｎｄ Ｒ．Ｙ．Ｔｓｉｅｎ（１９９５）「Ｖｏｌｔａｇｅ ｓｅｎｓｉｎｇ ｂｙ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ｅｎｅｒｇｙ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｉｎ ｓｉｎｇｌｅ ｃｅｌｌｓ」Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｊ ６９（４）：１２７２−８０、およびＧｏｎｚａｌｅｚ，Ｊ．Ｅ．ａｎｄ Ｒ．Ｙ．Ｔｓｉｅｎ（１９９７）「Ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ ｏｆ ｃｅｌｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｔｈａｔ ｕｓｅ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ｅｎｅｒｇｙ ｔｒａｎｓｆｅｒ」Ｃｈｅｍ Ｂｉｏｌ ４（４）：２６９−７７を参照のこと）を、電圧／イオンプローブリーダー（ＶＩＰＲ）のような蛍光変化を測定するための計測器（Ｇｏｎｚａｌｅｚ，Ｊ．Ｅ．，Ｋ．Ｏａｄｅｓら（１９９９）「Ｃｅｌｌ−ｂａｓｅｄ ａｓｓａｙｓ ａｎｄ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｉｏｎ−ｃｈａｎｎｅｌ ｔａｒｇｅｔｓ」Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙ ４（９）：４３１−４３９を参照のこと）と組み合わせて利用する。
【０１０３】
これらの電圧感受性アッセイは、膜可溶性の電圧感受性色素であるＤｉＳＢＡＣ２（３）と蛍光性リン脂質であるＣＣ２−ＤＭＰＥとの間での蛍光共鳴エネルギー転移（ＦＲＥＴ）の変化に基づく。ＣＣ２−ＤＭＰＥは、原形質膜の外側のリーフレット（ｏｕｔｅｒ ｌｅａｆｌｅｔ）に結合され、そしてＦＲＥＴ供与体となる。膜電位（Ｖｍ）の変化は、負に荷電したＤｉＳＢＡＣ２（３）を原形質膜を横切って再分布させ、それにしたがってＣＣ２−ＤＭＰＥからのエネルギー転移の量が変化する。蛍光放射の変化は、ＶＩＰＲ（商標）ＩＩを使用してモニターすることができる。ＶＩＰＲ（商標）ＩＩは、９６ウェルマイクロタイタープレートまたは３８４ウェルマイクロタイタープレートの中で細胞をベースとするスクリーニングを行うために設計された、一体型の液体ハンドラー（ｈａｎｄｌｅｒ）および蛍光検出器である。
【０１０４】
別の態様において、本発明は、インビトロまたはインビボで生物学的試料中のＣＦＴＲまたはその断片の活性の測定に使用するためのキットを提供する。上記キットは、（ｉ）形態Ａまたは上記の実施形態のいずれかを含む組成物；ならびに（ｉｉ）ａ）上記組成物を、上記生物学的試料と接触させ、そしてｂ）上記ＣＦＴＲまたはその断片の活性を測定するための説明書を含む。１つの実施形態において、上記キットは、ａ）さらなる組成物を、上記生物学的試料とを接触させ；ｂ）上記ＣＦＴＲまたはその断片の活性を、上記さらなる化合物の存在下で測定し、そしてｃ）上記さらなる化合物の存在下でのＣＦＴＲの活性を、本明細書中に記載される形態Ａの存在下でのＣＦＴＲの密度と比較するための説明書をさらに含む。好ましい実施形態において、上記キットは、ＣＦＴＲの密度を測定するために使用される。
【０１０５】
本明細書中に記載される発明がより十分に理解され得るように、以下の実施例が記載される。これらの実施例は、例示のためのものに過ぎず、いかなる様式においても本発明を限定するとは解釈されるべきではないことが理解されるべきである。
【実施例】
【０１０６】
（方法および材料）
ＸＲＰＤ（Ｘ線粉末回折）
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）データを、Ｒｉｇａｋｕ／ＭＳＣ ＭｉｎｉＦｌｅｘ Ｄｅｓｋｔｏｐ Ｐｏｗｄｅｒ Ｘ−ｒａｙ Ｄｉｆｆｒａｃｔｏｍｅｔｅｒ（Ｒｉｇａｋｕ，Ｔｈｅ Ｗｏｏｄｌａｎｄｓ，ＴＸ）を使用して室温で記録した。Ｘ線は、Ｋβ除去フィルターを用いて、３０ｋＶおよび１５ｍＡで操作したＣｕ管を使用して発生させた。発散スリットは動かすことができ、それぞれ、４．２度、および０．３ｍｍの切り込みに設定した、散乱スリットと受光スリットを持つ。走査モードは一定時間（ＦＴ）であり、０．０２度のステップ幅と２．０秒のカウント時間（ｃｏｕｎｔ ｔｉｍｅ）を用いた。粉末Ｘ線回折計（Ｐｏｗｄｅｒ Ｘ−ｒａｙ Ｄｉｆｆｒａｃｔｏｍｅｔｅｒ）を参照標準物：７５％のソーダライト（Ｓｏｄａｌｉｔｅ）（Ｎａ３Ａｌ４Ｓｉ４Ｏ１２Ｃｌ）および２５％の珪素（Ｓｉｌｉｃｏｎ）（Ｒｉｇａｋｕ、カタログ番号２１００／ＡＬＳ）を使用して較正した。６つのサンプルステージ（ｓａｍｐｌｅｓ ｓｔａｇｅ）をゼロバックグラウンドサンプルホルダー（ｚｅｒｏ ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ ｓａｍｐｌｅ ｈｏｌｄｅｒｓ）（ＳＨ−ＬＢＳＩ５１１−ＲＮＤＢ）とともに使用した。粉末試料を意図した領域に置き、ガラススライドをぴったりと取り付けた。
【０１０７】
（ＦＴＩＲ（フーリエ変換赤外）分光法）
ＦＴＩＲスペクトルを、スマートオービット試料室（ｓｍａｒｔ ｏｒｂｉｔ ｓａｍｐｌｉｎｇ ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔ）、ダイヤモンドウィンドウ（ｄｉａｍｏｎｄ ｗｉｎｄｏｗ）を持つＴｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｎｉｃｏｌｅｔ ６７００ ＦＴ−ＩＲ分光光度計から、ソフトウェア：Ｏｍｎｉｃ，７．４を使用して取得した。粉末試料をダイヤモンド結晶上に直接置き、試料の表面をダイヤモンド結晶の表面に合わせるために圧力をかけた。バックグラウンドスペクトルを取得し、次いで、この試料のスペクトルを取得した。取得の設定は以下のとおりとした：
検出器：ＤＴＧＳ ＫＢｒ；
ビーム分割器：ＫＢｒ；
線源：ＩＲ；
スキャン範囲：４０００〜４００ｃｍ−１；
Ｇａｉｎ：８．０；
光速度：０．６３２９ｃｍ／ｓｅｃ；
アパーチャー（Ａｐｅｒｔｕｒｅ）：１００；
スキャン数：３２；および
分解能：４ｃｍ−１。
【０１０８】
（実施例１）
４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（７）の調製
【０１０９】
【化２】
２−クロロ−５−（トリフルオロメチル）アニリン２（２００ｇ、１．０２３ｍｏｌ）、ジエチル２−（エトキシメチレン）マロナート３（２７６ｇ、１．３ｍｏｌ）、およびトルエン（１００ｍＬ）を、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋコンデンサーを取り付けた三口の１Ｌの丸底フラスコの中で、窒素雰囲気下で混合した。この溶液を撹拌しながら１４０℃に加熱し、この温度を４時間維持した。反応混合物を７０℃に冷却し、ヘキサン（６００ｍＬ）をゆっくりと添加した。得られたスラリーを撹拌し、室温に温めた。固体を濾過によって収集し、ヘキサン中の１０％の酢酸エチルで洗浄し（２回×４００ｍＬ）、その後、減圧下で乾燥させて、所望される縮合産物であるジエチル２−（（２−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニルアミノ）メチレン）マロナート４として白色固体（３５０ｇ、９４％の収率）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ １１．２８（ｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ，１Ｈ），８．６３（ｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄｄ，Ｊ＝１．５，８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２４（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），４．１７（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），１．２７（ｍ，６Ｈ）。
【０１１０】
エチル８−クロロ−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート（５）の調製。三口の１Ｌのフラスコに、ダウサム（Ｄｏｗｔｈｅｒｍ（登録商標））（２００ｍＬ、８ｍＬ／ｇ）をチャージし、これを２００℃で１時間脱気した。溶媒を２６０℃に加熱し、これに、１０分間かけて少量ずつジエチル２−（（２−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニルアミノ）メチレン）マロナート４（２５ｇ、０．０７ｍｏｌ）をチャージした。得られた混合物を２６０℃で６．５時間（ｈ）撹拌し、得られたエタノール副産物（ｅｔｈａｎｏｌ ｂｙｐｒｏｄｕｃｔ）を蒸留により除去した。この混合物をゆっくりと８０℃に冷却した。ヘキサン（１５０ｍＬ）を、３０分（ｍｉｎ）かけてゆっくりと添加し、続いてさらに２００ｍＬのヘキサンを一度に添加した。スラリーを、これが室温に到達するまで撹拌した。固体を濾過し、ヘキサンで洗浄し（３回×１５０ｍＬ）、その後、減圧下で乾燥させてエチル８−クロロ−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート５を褐色の固体（１３．９ｇ、６５％の収率）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ １１．９１（ｓ，１Ｈ），８．３９（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２４（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），１．２９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１１１】
エチル４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−キノリン−３−カルボキシラート（６）の調製。三口の５Ｌのフラスコに、エチル８−クロロ−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキシラート５（１００ｇ、０．３ｍｏｌ）、エタノール（１２５０ｍＬ、１２．５ｍＬ／ｇ）、およびトリエチルアミン（２２０ｍＬ、１．６ｍｏｌ）をチャージした。その後、この容器に、１０ｇの１０％ Ｐｄ／Ｃ（５０％ｗｅｔ）を５℃でチャージした。この反応物を、水素雰囲気下で２０時間、５℃で激しく撹拌した。その後、反応混合物をおよそ１５０ｍＬの容量に濃縮した。Ｐｄ／Ｃを含むスラリーとしての生成物であるエチル４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−キノリン−３−カルボキシラート６を、次の工程に直接用いた。
【０１１２】
４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（７）の調製。エチル４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−キノリン−３−カルボキシラート６（５８ｇ、０．２ｍｏｌ、Ｐｄ／Ｃを含有する粗反応物のスラリー）を、環流冷却器を持つ１Ｌのフラスコ中のＮａＯＨ（８１４ｍＬの５Ｍ、４．１ｍｏｌ）中に懸濁し、８０℃で１８時間加熱し、続いて１００℃で５時間、さらに加熱した。この反応物を、充填したＣｅｌｉｔｅを通して保温濾過（ｆｉｌｔｅｒｅｄ ｗａｒｍ）してＰｄ／Ｃを除去し、Ｃｅｌｉｔｅを１ＮのＮａＯＨでリンスした。濾液を約ｐＨ１に酸性化して、高粘度の白色沈殿を得た。この沈殿を濾過し、その後、水および冷アセトニトリルでリンスした。その後、固体を減圧下で乾燥させて、４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸７を白色固体（４８ｇ、９２％の収率）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００．０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ １５．２６（ｓ，１Ｈ），１３．６６（ｓ，１Ｈ），８．９８（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｄｄ，Ｊ＝１．６，７．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０６−７．９９（ｍ，２Ｈ）。
【０１１３】
（実施例２）
４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）アニリンの調製
【０１１４】
【化３】
７−［４−ニトロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン（２０）の調製。窒素雰囲気下から得た７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタンヒドロクロリド９（４．６ｇ、３４．４３ｍｍｏｌ）を含むフラスコに、アセトニトリル（５０ｍＬ）中の４−フルオロ−１−ニトロ−２−（トリフルオロメチル）ベンゼン８（６．０ｇ、２８．６９ｍｏｌ）とトリエチルアミン（８．７ｇ、１２．００ｍＬ、８６．０７ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。この反応フラスコを窒素雰囲気下で１６時間、８０℃で加熱した。この反応混合物を冷却し、その後、水とジクロロメタンとの間に分配した。有機層を１ＭのＨＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して乾燥させた。シリカゲルクロマトグラフィーによる精製（ヘキサン中の０〜１０％の酢酸エチル）により、７−［４−ニトロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン１０（７．２ｇ、８８％の収率）を黄色い固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００．０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．０３（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２５（ｄｄ，Ｊ＝２．６，９．１Ｈｚ，１Ｈ），４．５９（ｓ，２Ｈ），１．６９−１．６７（ｍ，４Ｈ），１．５０（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，４Ｈ）。
【０１１５】
４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）アニリン（１１）の調製
７−［４−ニトロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン１０（７．０７ｇ、２４．７０ｍｍｏｌ）および１０％のＰｄ／Ｃ（０．７１ｇ、６．６４ｍｍｏｌ）をチャージしたフラスコを空にし（ｅｖａｃｕａｔｅｄ）、その後、窒素をフラッシュした。エタノール（２２ｍＬ）を添加し、反応フラスコに水素バルーン（ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｂａｌｌｏｏｎ）を取り付けた。１２時間激しく撹拌した後、この反応混合物に窒素をパージし、Ｐｄ／Ｃを濾過により除去した。濾液を減圧下で暗色の油になるまで濃縮し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜１５％の酢酸エチル）により精製して、４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）アニリン１１を紫色の固体として得た（５．７６ｇ、９１％の収率）。１Ｈ ＮＭＲ（４００．０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ６．９５（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．７９（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），４．８９（ｓ，２Ｈ），４．０９（ｓ，２Ｈ），１．６１−１．５９（ｍ．４Ｈ）および１．３５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）。
【０１１６】
（実施例３）
Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（化合物１）の調製。
【０１１７】
【化４】
２−メチルテトラヒドロフラン（９１．００ｍＬ）中の４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−キノリン−３−カルボン酸７（９．１ｇ、３５．３９ｍｍｏｌ）および４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）アニリン１１（９．２ｇ、３５．７４ｍｍｏｌ）の溶液に、プロピルホスホン酸環状無水物（酢酸エチル中の５０％溶液、５２．６８ｍＬ、８８．４８ｍｍｏｌ）とピリジン（５．６ｇ、５．７３ｍＬ、７０．７８ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応フラスコを、窒素雰囲気下で１０時間、６５℃で加熱した。次いで、室温に冷却した後、反応物を酢酸エチルで希釈し、飽和Ｎａ２ＣＯ３溶液（５０ｍＬ）でクエンチした。層を分離させ、水層を酢酸エチルでさらに２回抽出した。合わせて１つにした有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して褐色の固体とした。この粗固体生成物を酢酸エチル／ジエチルエーテル（２：１）中でスラリーにし、減圧濾過により収集し、酢酸エチル／ジエチルエーテル（２：１）でさらに２回洗浄して、生成物を明るい黄色の結晶状の粉末として得た。この粉末を温かい酢酸エチルに溶解させ、Ｃｅｌｉｔｅに吸着させた。シリカゲルクロマトグラフィーによる精製（ジクロロメタン中の０〜５０％の酢酸エチル）により、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（化合物１）を白色の結晶状の固体（形態Ａ）として得た（１３．５ｇ、７６％の収率）。ＬＣ／ＭＳ ｍ／ｚ ４９６．０［Ｍ＋Ｈ］＋、保持時間１．４８分（ＲＰ−Ｃ１８、３分間かけた１０〜９９％のＣＨ３ＣＮ／０．０５％のＴＦＡ）。１Ｈ ＮＭＲ（４００．０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ １３．０８（ｓ，１Ｈ），１２．１６（ｓ，１Ｈ），８．８８（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｄｄ，Ｊ＝２．１，７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９５−７．８８（ｍ，３Ｈ），７．２２（ｄｄ，２．５，８．９Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），４．３３（ｓ，２Ｈ），１．６７（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，４Ｈ），１．４４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，４Ｈ）。
【０１１８】
形態Ａの粉末回折図形を図１に示す。
【０１１９】
以下の表１は、形態Ａの典型的なＸＲＰＤピークを提供する。
【０１２０】
【表１】
単晶Ｘ線分析に基づく形態Ａの立体配置の絵を図２に示す。回折データは、シール管ＣｕＫ−α線源（ＣｕＫ−ａｌｐｈａ ｓｏｕｒｃｅ）およびＡｐｅｘ ＩＩ ＣＣＤ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ Ａｐｅｘ ＩＩ Ｄｉｆｆｒａｃｔｏｍｅｔｅｒで獲得した。構造を解明し、ＳＨＥＬＸプログラム（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ｇ．Ｍ．，Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．Ａ６４，ｐｐ．１１２−１２２（２００８））を使用して精緻化した。強度、統計学、および対称性に基づき、構造を解明し、三方晶系およびＲ−３空間群において精緻化した。形態Ａは以下の単位格子サイズを有する：ａ＝１９．１６７０（４）Å、ｂ＝１９．１６７０（４）Å、ｃ＝３３．６５７２（１２）Å、α＝９０°、β＝９０°、およびγ＝１２０°。
【０１２１】
形態ＡのＦＴＩＲスペクトルが図３に提供される。
【０１２２】
以下の表２は、形態Ａの典型的なＦＴＩＲピークを提供する。
【０１２３】
【表２−１】
【０１２４】
【表２−２】
（化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強特性を検出し、測定するためのアッセイ）
（化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ調節特性をアッセイするための膜電位光学方法）
このアッセイは、ＮＩＨ ３Ｔ３細胞中の機能性ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの増加についての読み出しとして蛍光プレートリーダー（例えば、ＦＬＩＰＲ ＩＩＩ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｉｎｃ．）を使用し、蛍光電圧検知色素を利用して、膜電位の変化を測定する。応答のための駆動力は、細胞を予め化合物で処理し、続いて電圧検知色素を含ませた後の、１回の液体添加工程によるチャネル活性化と組み合わせた塩素イオン勾配の作成である。
【０１２５】
増強剤化合物の同定
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの増強剤を同定するために、二重付加ＨＴＳアッセイ形式を開発した。このＨＴＳアッセイは、蛍光電圧検知色素を利用して、温度修正したΔＦ５０８ＣＦＴＲ ＮＩＨ３Ｔ３細胞中でのΔＦ５０８ＣＦＴＲの開閉（コンダクタンス）の増加についての測定値として、ＦＬＩＰＲ ＩＩＩ上の膜電位の変化を測定する。応答のための駆動力は、細胞を予め増強剤化合物（またはＤＭＳＯビヒクル対照）で処理し、続いて再分布色素を含ませた後の、ＦＬＩＰＲ ＩＩＩのような蛍光プレートリーダーを使用する１回の液体添加工程におけるフォルスコリンでのチャネル活性化と組み合わせたＣｌ−イオン勾配である。
【０１２６】
（溶液）
浴溶液＃１：（単位：ｍＭ）ＮａＣｌ １６０、ＫＣｌ ４．５、ＣａＣｌ２ ２、ＭｇＣｌ２ １、ＨＥＰＥＳ １０、ＮａＯＨでｐＨ７．４。
【０１２７】
塩化物を含まない浴溶液：浴溶液＃１中の塩化物塩をグルコン酸塩に置き換える。
【０１２８】
（細胞培養）
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、膜電位の光学的測定に使用する。細胞を、１７５ｃｍ２の培養フラスコ中の、２ｍＭのグルタミン、１０％のウシ胎仔血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ペニシリン／ストレプトマイシン（ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ）、および２５ｍＭのＨＥＰＥＳを補充したダルベッコ改変イーグル培地中で、５％のＣＯ２および９０％の湿度で、３７℃で維持する。全ての光学的アッセイについて、細胞を、３８４ウェルのマトリゲルをコーティングしたプレートに約２０，０００個／ウェルで播種し、３７℃で２時間培養し、その後、増強剤アッセイについては、２７℃で２４時間培養した。修正アッセイ（ｃｏｒｒｅｃｔｉｏｎ ａｓｓａｙ）については、細胞を２７℃または３７℃で、化合物とともにおよび化合物を含めずに、１６〜２４時間培養する。化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ調節特性をアッセイするための電気生理学的アッセイ。
【０１２９】
（ウッシングチャンバーアッセイ）
ウッシングチャンバー実験を、光学的アッセイにおいて同定したΔＦ５０８−ＣＦＴＲ調節因子をさらに特性決定するために、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを発現している分極した気管上皮細胞上で行った。非ＣＦおよびＣＦ気管上皮を気管支組織から単離し、先に記載したように培養し（Ｇａｌｉｅｔｔａ，Ｌ．Ｊ．Ｖ．，Ｌａｎｔｅｒｏ，Ｓ．，Ｇａｚｚｏｌｏ，Ａ．，Ｓａｃｃｏ，Ｏ．，Ｒｏｍａｎｏ，Ｌ．，Ｒｏｓｓｉ，Ｇ．Ａ．，＆ Ｚｅｇａｒｒａ−Ｍｏｒａｎ，Ｏ．（１９９８）Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｃｅｌｌ．Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．３４，４７８−４８１）、ＮＩＨ３Ｔ３馴化培地をプレコートしたＣｏｓｔａｒ（登録商標）Ｓｎａｐｗｅｌｌ（商標）フィルター上にプレートした。４日後、頂端膜用培地（ａｐｉｃａｌ ｍｅｄｉａ）を除去し、細胞を、使用する前に１４日間以上、空気液体界面で増殖させた。これにより、繊毛のある（これは、気管上皮に典型的な特徴である）完全に分化した円筒状の細胞の単層を得た。非ＣＦ ＨＢＥは、いかなる肺疾患も明らかになっていない非喫煙者から単離した。ＣＦ−ＨＢＥは、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲについてホモ接合性の患者から単離した。
【０１３０】
Ｃｏｓｔａｒ（登録商標）Ｓｎａｐｗｅｌｌ（商標）細胞培養挿入物上で増殖させたＨＢＥを、ウッシングチャンバー（Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）に固定し、経上皮抵抗および短絡回路電流を、基底膜から頂端膜までのＣｌ−勾配（ＩＳＣ）の存在下で、電圧−クランプシステム（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｉｏｗａ，ＩＡ）を使用して測定した。簡単に説明すると、ＨＢＥを、電圧−クランプ記録条件（Ｖｈｏｌｄ＝０ｍＶ）下で、３７℃で試験した。基底膜用溶液には、１４５のＮａＣｌ、０．８３のＫ２ＨＰＯ４、３．３のＫＨ２ＰＯ４、１．２のＭｇＣｌ２、１．２のＣａＣｌ２、１０のグルコース、１０のＨＥＰＥＳ（ｐＨはＮａＯＨで７．３５に調整した）（単位：ｍＭ）を含め、頂端膜用溶液には、１４５のグルコン酸Ｎａ、１．２のＭｇＣｌ２、１．２のＣａＣｌ２、１０のグルコース、１０のＨＥＰＥＳ（ｐＨはＮａＯＨで７．３５に調整した）（単位：ｍＭ）を含めた。
【０１３１】
（増強剤化合物の同定）
典型的なプロトコールでは、基底膜から頂端膜へのＣｌ−濃度勾配を利用した。この勾配を設定するために、通常のリンガー液を基底膜上で使用し、一方、頂端膜のＮａＣｌを、等モルのグルコン酸ナトリウム（ＮａＯＨでｐＨ７．４に滴定した）に置き換えて、上皮を横切る大きなＣｌ−濃度勾配を得た。フォルスコリン（１０μＭ）および全ての試験化合物を、この細胞培養挿入物の頂端膜側に添加した。推定のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強剤の有効性を、公知の増強剤であるゲニステインの有効性と比較した。
【０１３２】
（パッチ−クランプ記録）
ΔＦ５０８−ＮＩＨ３Ｔ３細胞中の総Ｃｌ−電流を、これまでに記載されているように穿孔パッチ記録形状を使用してモニターした（Ｒａｅ，Ｊ．，Ｃｏｏｐｅｒ，Ｋ．，Ｇａｔｅｓ，Ｐ．，＆ Ｗａｔｓｋｙ，Ｍ．（１９９１）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ３７，１５−２６）。電圧−クランプ記録を、Ａｘｏｐａｔｃｈ ２００Ｂパッチ−クランプ増幅器（Ａｘｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ）を使用して２２℃で行った。ピペット溶液には、１５０のＮ−メチル−Ｄ−グルカミン（ＮＭＤＧ）−Ｃｌ、２のＭｇＣｌ２、２のＣａＣｌ２、１０のＥＧＴＡ、１０のＨＥＰＥＳ（単位：ｍＭ）、および２４０μｇ／ｍｌのアンホテリシン−Ｂ（ｐＨをＨＣｌで７．３５に調整した）を含めた。細胞外培地には、１５０のＮＭＤＧ−Ｃｌ、２のＭｇＣｌ２、２のＣａＣｌ２、１０のＨＥＰＥＳ（ｐＨをＨＣｌで７．３５に調整した）（単位：ｍＭ）を含めた。パルスの発生、データ取得、および分析は、Ｃｌａｍｐｅｘ ８（Ａｘｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．）とともに、Ｄｉｇｉｄａｔａ １３２０Ａ／Ｄインターフェースを取り付けたＰＣを使用して行った。ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを活性化するために、１０μＭのフォルスコリンと２０μＭのゲニステインを浴に添加し、電流−電圧関係を３０秒ごとにモニターした。
【０１３３】
（増強剤化合物の同定）
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定的に発現する、ＮＩＨ３Ｔ３細胞中の巨視的なΔＦ５０８−ＣＦＴＲ Ｃｌ−電流（ＩΔＦ５０８）を増大させるΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強剤の能力もまた、穿孔パッチ記録技術を使用して調べた。光学的アッセイにより同定した増強剤は、光学的アッセイにおいて観察されたものと類似の効力および有効性でＩΔＦ５０８の用量依存性増加を誘起した。試験した全ての細胞において、増強剤の添加前および添加の間の逆転電位は、およそ−３０ｍＶであった。これは、計算したＥＣｌ（−２８ｍＶ）である。
【０１３４】
（細胞培養）
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定的に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、ホールセル記録に使用する。これらの細胞を、１７５ｃｍ２の培養フラスコ中の、２ｍＭのグルタミン、１０％のウシ胎仔血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ペニシリン／ストレプトマイシン、および２５ｍＭのＨＥＰＥＳを補充したダルベッコ改変イーグル培地中で、５％のＣＯ２および９０％の湿度で、３７℃で維持した。ホールセル記録については、２，５００〜５，０００個の細胞を、ポリ−Ｌ−リジンをコーティングしたガラスカバースリップ上に播種し、増強剤の活性を試験するための使用の前に、２７℃で２４〜４８時間培養し、そして矯正因子の活性を測定するために、３７℃で、矯正化合物とともに、または矯正化合物を含めずにインキュベーションした。
【０１３５】
（単一チャネル記録）
ＮＩＨ３Ｔ３細胞中で発現されたｗｔ−ＣＦＴＲと温度矯正ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの開閉活性を、Ａｘｏｐａｔｃｈ ２００Ｂパッチ−クランプ増幅器（Ａｘｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．）を使用して、これまでに記載されたているように（Ｄａｌｅｍａｎｓ，Ｗ．，Ｂａｒｂｒｙ，Ｐ．，Ｃｈａｍｐｉｇｎｙ，Ｇ．，Ｊａｌｌａｔ，Ｓ．，Ｄｏｔｔ，Ｋ．，Ｄｒｅｙｅｒ，Ｄ．，Ｃｒｙｓｔａｌ，Ｒ．Ｇ．，Ｐａｖｉｒａｎｉ，Ａ．，Ｌｅｃｏｃｑ，Ｊ−Ｐ．，Ｌａｚｄｕｎｓｋｉ，Ｍ．（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ３５４，５２６−５２８）、切り取った（ｅｘｃｉｓｅｄ）インサイドアウト膜パッチ記録を使用して観察した。ピペットには、１５０のＮＭＤＧ、１５０のアスパラギン酸、５のＣａＣｌ２、２のＭｇＣｌ２、および１０のＨＥＰＥＳ（ｐＨはＴｒｉｓ塩基で７．３５に調整した）（単位：ｍＭ）を含めた。浴には、１５０のＮＭＤＧ−Ｃｌ、２のＭｇＣｌ２、５のＥＧＴＡ、１０のＴＥＳ、および１４のＴｒｉｓ塩基（ｐＨはＨＣｌで７．３５に調整した）（単位：ｍＭ）を含めた。切除後に、ｗｔ−ＣＦＴＲおよびΔＦ５０８−ＣＦＴＲの両方を、１ｍＭのＭｇ−ＡＴＰ、７５ｎＭのｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼの触媒サブユニット（ＰＫＡ；Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐ．Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）、および電流のランダウンを妨害するプロテインホスファターゼを阻害するための１０ｍＭのＮａＦを添加することによって活性化させた。ピペット電位は８０ｍＶに維持した。チャネル活性を、２以下の活性チャネルを含む膜パッチから分析した。同時に開口する最大数から、実験過程の間の活性チャネルの数を決定した。単一チャネルの電流振幅を決定するために、１２０秒間のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ活性により記録したデータを、１００Ｈｚにて「オフライン」でフィルターにかけ、次いでＢｉｏ−Ｐａｔｃｈ Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェア（Ｂｉｏ−Ｌｏｇｉｃ Ｃｏｍｐ．Ｆｒａｎｃｅ）を使用して多重ガウス関数に適合した全点振幅ヒストグラムを構築するために使用した。微小電流の合計および開口確率（ＰＯ）を、１２０秒のチャネル活性から決定した。このＰＯを、Ｂｉｏ−Ｐａｔｃｈソフトウェアを使用して、またはＰＯ＝Ｉ／ｉ（Ｎ）の関係から決定した（ここでは、Ｉ＝平均電流、ｉ＝単一チャネル電流振幅、そしてＮ＝パッチ中の活性チャネルの数）。
【０１３６】
（細胞培養）
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定的に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、切り取った膜パッチ−クランプ記録に使用した。これらの細胞を、１７５ｃｍ２の培養フラスコ中の、２ｍＭのグルタミン、１０％のウシ胎仔血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ペニシリン／ストレプトマイシン、および２５ｍＭのＨＥＰＥＳを補充したダルベッコ改変イーグル培地中で、５％のＣＯ２および９０％の湿度で、３７℃で維持した。単一チャネル記録のために、２，５００〜５，０００個の細胞を、ポリ−Ｌ−リジンをコーティングしたガラスカバースリップ上に播種し、そして使用前に２４〜４８時間、２７℃で培養した。
【０１３７】
化合物１形態Ａは、ＡＴＰ結合カセットトランスポーターの調節因子として有用である。化合物１形態ＡのＥＣ５０（μｍ）は、２．０μＭ未満であると測定した。化合物１形態Ａの有効性は、１００％から２５％と計算した。１００％の有効性が、４−メチル−２−（５−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）フェノールを用いて得られる最大応答であることに留意されたい。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
形態Ａとして特性決定される、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド。
【請求項２】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約７．９度での１つのピークを特徴とする、請求項１に記載の形態Ａ。
【請求項３】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約９．３度での１つのピークを特徴とする、請求項１または２に記載の形態Ａ。
【請求項４】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１１．９度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項５】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１４．４度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項６】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１５．１度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項７】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１５．８度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項８】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１７．０度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項９】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１７．７度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１０】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１９．３度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜９のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１１】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２０．１度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１２】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２１．４度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１３】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２１．８度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１４】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２３．４度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１５】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２３．８度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１６】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２５．６度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１７】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２６．８度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１８】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２９．４度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１９】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２９．７度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項２０】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約３０．１度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項２１】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約３１．２度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項２２】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約７．９度での１つのピーク、約１１．９度での１つのピーク、約１４．４度での１つのピーク、および約１５．８度での１つのピークを特徴とする、請求項１に記載の形態Ａ。
【請求項２３】
前記形態Ａが図１に示した回折パターンを特徴とする、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項２４】
請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａと、薬学的に許容されるアジュバントまたは担体を含む、薬学的組成物。
【請求項２５】
粘液溶解薬、気管支拡張薬、抗生物質、抗感染症薬、抗炎症剤、形態Ａ以外のＣＦＴＲ調節因子、または栄養剤から選択されるさらなる薬剤をさらに含む、請求項２４に記載の薬学的組成物。
【請求項２６】
前記さらなる薬剤が形態Ａ以外のＣＦＴＲ調節因子である、請求項２５に記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
患者において疾患を処置するかまたは疾患の重篤度を低下させる方法であって、前記疾患が、嚢胞性線維症、喘息、喫煙が原因であるＣＯＰＤ、慢性気管支炎、副鼻腔炎、便秘、膵炎、膵不全、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）が原因で起こる男性不妊、軽度の肺疾患、特発性膵炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、肝臓病、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固線溶機能不全（例えば、プロテインＣ欠乏症）、１型遺伝性血管浮腫、脂質プロセシングの機能不全（例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症）、リソソーム蓄積症（例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー症）、ムコ多糖症、サンドホッフ病／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーＩＩ型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性上皮小体機能低下症、黒色腫、グリカノーシスＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、ニューロフィジン性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース症候群、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害（例えば、ハンチントン病、脊髄小脳失調症Ｉ型、脊髄および延髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー）、ならびに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病（プリオンタンパク質のプロセシングの機能不全が原因である））、ファブリー病、シュトロイスラー・シャインカー症候群（Ｐｒｐプロセシングの機能不全が原因である））、不妊症、膵炎、膵不全、骨粗鬆症、骨減少症、ゴーハム症候群、塩素イオン症、先天性筋緊張症（トムソンおよびベッカー型）、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病、過剰驚愕症、癲癇、過剰驚愕症、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、内臓逆位症を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群としても知られている）、内臓逆位症と毛様体無形成を伴わないＰＣＤ、ならびに肝臓病から選択され、前記方法が、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａの有効量を前記患者に投与する工程を含む、方法。
【請求項２８】
前記疾患が嚢胞性線維症である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
患者において疾患を処置するかまたは疾患の重篤度を低下させる方法であって、前記疾患は、ＣＦＴＲまたは環境因子をコードする遺伝子の突然変異が原因で低下したＣＦＴＲ機能と関係があり、前記方法が、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａの有効量を前記患者に投与する工程を含む、方法。
【請求項３０】
前記疾患が、嚢胞性線維症、慢性気管支炎、反復性気管支炎、急性気管支炎、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）が原因で起こる男性不妊、先天的な子宮と膣の欠損（ＣＡＵＶ）が原因で起こる女性不妊、特発性慢性膵炎（ＩＣＰ）、特発性再発性膵炎、特発性急性膵炎、慢性副鼻腔炎、原発性硬化性胆管炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、糖尿病、ドライアイ、便秘、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、骨疾患、および喘息である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
患者において疾患を処置するかまたは疾患の重篤度を低下させる方法であって、前記疾患が正常なＣＦＴＲ機能と関係があり、前記方法が、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａの有効量を前記患者に投与する工程を含む、方法。
【請求項３２】
前記疾患が、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、慢性気管支炎、反復性気管支炎、急性気管支炎、副鼻腔炎、便秘、慢性膵炎、再発性膵炎、および急性膵炎、膵不全、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）が原因で起こる男性不妊、軽度の肺疾患、特発性膵炎、肝臓病、遺伝性気腫、胆石、胃食道逆流症、消化管悪性腫瘍、炎症性腸疾患、便秘、糖尿病、関節炎、骨粗鬆症、ならびに骨減少症である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記疾患が、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固線溶機能不全（例えば、プロテインＣ欠乏症）、１型遺伝性血管浮腫、脂質プロセシングの機能不全（例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症）、リソソーム蓄積症（例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー症）、ムコ多糖症、サンドホッフ病／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーＩＩ型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性上皮小体機能低下症、黒色腫、グリカノーシスＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、ニューロフィジン性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース症候群、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害（例えば、ハンチントン病、脊髄小脳失調症Ｉ型、脊髄および延髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー）、ならびに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病（プリオンタンパク質のプロセシングの機能不全が原因である））、ファブリー病、シュトロイスラー・シャインカー症候群））、ゴーハム症候群、塩素イオン症、先天性筋緊張症（トムソンおよびベッカー型）、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病、過剰驚愕症、癲癇、過剰驚愕症、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、内臓逆位症を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群としても知られている）、内臓逆位症と毛様体無形成を伴わないＰＣＤ、またはシェーグレン症候群である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
インビトロまたはインビボでの生物学的試料中のＣＦＴＲあるいはその断片の活性の測定に使用するためのキットであって：
（ｉ）請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａを含む組成物；
（ｉｉ）ａ）前記組成物を前記生物学的試料と接触させる工程；
ｂ）前記ＣＦＴＲまたはその断片の活性を測定する工程
のための説明書
を含む、キット。
【請求項３５】
ａ）さらなる組成物を前記生物学的試料と接触させる工程；
ｂ）前記さらなる化合物の存在下で、前記ＣＦＴＲまたはその断片の活性を測定する工程；そして
ｃ）前記さらなる化合物の存在下でのＣＦＴＲの活性を形態Ａの存在下でのＣＦＴＲの密度と比較する工程
のための説明書をさらに含む、請求項３４に記載のキット。
【請求項３６】
ＣＦＴＲを請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａと接触させる工程を含む、生物学的試料中のＣＦＴＲ活性を調節する方法。
【請求項３７】
以下の単位格子サイズを有している、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａ：
ａ＝１９．２Å；ｂ＝１９．２Å；およびｃ＝３３．７Å。
【請求項３８】
三方晶系、Ｒ−３空間群、および以下の単位格子サイズ：
ａ＝１９．２Å；ｂ＝１９．２Å；ｃ＝３３．７Å；α＝９０°；β＝９０°；およびγ＝１２０°
を有している、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの結晶形態。
【請求項１】
形態Ａとして特性決定される、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド。
【請求項２】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約７．９度での１つのピークを特徴とする、請求項１に記載の形態Ａ。
【請求項３】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約９．３度での１つのピークを特徴とする、請求項１または２に記載の形態Ａ。
【請求項４】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１１．９度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項５】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１４．４度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項６】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１５．１度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項７】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１５．８度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項８】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１７．０度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項９】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１７．７度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１０】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約１９．３度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜９のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１１】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２０．１度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１２】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２１．４度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１３】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２１．８度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１４】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２３．４度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１５】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２３．８度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１６】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２５．６度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１７】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２６．８度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１８】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２９．４度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項１９】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約２９．７度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項２０】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約３０．１度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項２１】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約３１．２度での１つのピークを特徴とする、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項２２】
前記形態ＡがＸ線粉末回折パターンにおける約７．９度での１つのピーク、約１１．９度での１つのピーク、約１４．４度での１つのピーク、および約１５．８度での１つのピークを特徴とする、請求項１に記載の形態Ａ。
【請求項２３】
前記形態Ａが図１に示した回折パターンを特徴とする、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の形態Ａ。
【請求項２４】
請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａと、薬学的に許容されるアジュバントまたは担体を含む、薬学的組成物。
【請求項２５】
粘液溶解薬、気管支拡張薬、抗生物質、抗感染症薬、抗炎症剤、形態Ａ以外のＣＦＴＲ調節因子、または栄養剤から選択されるさらなる薬剤をさらに含む、請求項２４に記載の薬学的組成物。
【請求項２６】
前記さらなる薬剤が形態Ａ以外のＣＦＴＲ調節因子である、請求項２５に記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
患者において疾患を処置するかまたは疾患の重篤度を低下させる方法であって、前記疾患が、嚢胞性線維症、喘息、喫煙が原因であるＣＯＰＤ、慢性気管支炎、副鼻腔炎、便秘、膵炎、膵不全、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）が原因で起こる男性不妊、軽度の肺疾患、特発性膵炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、肝臓病、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固線溶機能不全（例えば、プロテインＣ欠乏症）、１型遺伝性血管浮腫、脂質プロセシングの機能不全（例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症）、リソソーム蓄積症（例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー症）、ムコ多糖症、サンドホッフ病／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーＩＩ型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性上皮小体機能低下症、黒色腫、グリカノーシスＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、ニューロフィジン性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース症候群、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害（例えば、ハンチントン病、脊髄小脳失調症Ｉ型、脊髄および延髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー）、ならびに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病（プリオンタンパク質のプロセシングの機能不全が原因である））、ファブリー病、シュトロイスラー・シャインカー症候群（Ｐｒｐプロセシングの機能不全が原因である））、不妊症、膵炎、膵不全、骨粗鬆症、骨減少症、ゴーハム症候群、塩素イオン症、先天性筋緊張症（トムソンおよびベッカー型）、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病、過剰驚愕症、癲癇、過剰驚愕症、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、内臓逆位症を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群としても知られている）、内臓逆位症と毛様体無形成を伴わないＰＣＤ、ならびに肝臓病から選択され、前記方法が、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａの有効量を前記患者に投与する工程を含む、方法。
【請求項２８】
前記疾患が嚢胞性線維症である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
患者において疾患を処置するかまたは疾患の重篤度を低下させる方法であって、前記疾患は、ＣＦＴＲまたは環境因子をコードする遺伝子の突然変異が原因で低下したＣＦＴＲ機能と関係があり、前記方法が、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａの有効量を前記患者に投与する工程を含む、方法。
【請求項３０】
前記疾患が、嚢胞性線維症、慢性気管支炎、反復性気管支炎、急性気管支炎、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）が原因で起こる男性不妊、先天的な子宮と膣の欠損（ＣＡＵＶ）が原因で起こる女性不妊、特発性慢性膵炎（ＩＣＰ）、特発性再発性膵炎、特発性急性膵炎、慢性副鼻腔炎、原発性硬化性胆管炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、糖尿病、ドライアイ、便秘、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、骨疾患、および喘息である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
患者において疾患を処置するかまたは疾患の重篤度を低下させる方法であって、前記疾患が正常なＣＦＴＲ機能と関係があり、前記方法が、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａの有効量を前記患者に投与する工程を含む、方法。
【請求項３２】
前記疾患が、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、慢性気管支炎、反復性気管支炎、急性気管支炎、副鼻腔炎、便秘、慢性膵炎、再発性膵炎、および急性膵炎、膵不全、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）が原因で起こる男性不妊、軽度の肺疾患、特発性膵炎、肝臓病、遺伝性気腫、胆石、胃食道逆流症、消化管悪性腫瘍、炎症性腸疾患、便秘、糖尿病、関節炎、骨粗鬆症、ならびに骨減少症である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記疾患が、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固線溶機能不全（例えば、プロテインＣ欠乏症）、１型遺伝性血管浮腫、脂質プロセシングの機能不全（例えば、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症）、リソソーム蓄積症（例えば、Ｉ細胞病／偽性ハーラー症）、ムコ多糖症、サンドホッフ病／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーＩＩ型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性上皮小体機能低下症、黒色腫、グリカノーシスＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、ニューロフィジン性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース症候群、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害（例えば、ハンチントン病、脊髄小脳失調症Ｉ型、脊髄および延髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー）、ならびに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病（プリオンタンパク質のプロセシングの機能不全が原因である））、ファブリー病、シュトロイスラー・シャインカー症候群））、ゴーハム症候群、塩素イオン症、先天性筋緊張症（トムソンおよびベッカー型）、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病、過剰驚愕症、癲癇、過剰驚愕症、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、内臓逆位症を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群としても知られている）、内臓逆位症と毛様体無形成を伴わないＰＣＤ、またはシェーグレン症候群である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
インビトロまたはインビボでの生物学的試料中のＣＦＴＲあるいはその断片の活性の測定に使用するためのキットであって：
（ｉ）請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａを含む組成物；
（ｉｉ）ａ）前記組成物を前記生物学的試料と接触させる工程；
ｂ）前記ＣＦＴＲまたはその断片の活性を測定する工程
のための説明書
を含む、キット。
【請求項３５】
ａ）さらなる組成物を前記生物学的試料と接触させる工程；
ｂ）前記さらなる化合物の存在下で、前記ＣＦＴＲまたはその断片の活性を測定する工程；そして
ｃ）前記さらなる化合物の存在下でのＣＦＴＲの活性を形態Ａの存在下でのＣＦＴＲの密度と比較する工程
のための説明書をさらに含む、請求項３４に記載のキット。
【請求項３６】
ＣＦＴＲを請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａと接触させる工程を含む、生物学的試料中のＣＦＴＲ活性を調節する方法。
【請求項３７】
以下の単位格子サイズを有している、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の形態Ａ：
ａ＝１９．２Å；ｂ＝１９．２Å；およびｃ＝３３．７Å。
【請求項３８】
三方晶系、Ｒ−３空間群、および以下の単位格子サイズ：
ａ＝１９．２Å；ｂ＝１９．２Å；ｃ＝３３．７Å；α＝９０°；β＝９０°；およびγ＝１２０°
を有している、Ｎ−（４−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）−２−（トリフルオロメチル）フェニル）−４−オキソ−５−（トリフルオロメチル）−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミドの結晶形態。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公表番号】特表２０１２−５０６８６８（Ｐ２０１２−５０６８６８Ａ）
【公表日】平成２４年３月２２日（２０１２．３．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５３３３８６（Ｐ２０１１−５３３３８６）
【出願日】平成２１年１０月２３日（２００９．１０．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０６１９４２
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０４８５７３
【国際公開日】平成２２年４月２９日（２０１０．４．２９）
【出願人】（５９８０３２１０６）バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド (414)
【氏名又は名称原語表記】ＶＥＲＴＥＸ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＩＮＣＯＲＰＯＲＡＴＥＤ
【住所又は居所原語表記】１３０ Ｗａｖｅｒｌｙ Ｓｔｒｅｅｔ， Ｃａｍｒｉｄｇｅ， Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ ０２１３９−４２４２， Ｕ．Ｓ．Ａ．
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年３月２２日（２０１２．３．２２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１０月２３日（２００９．１０．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０６１９４２
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０４８５７３
【国際公開日】平成２２年４月２９日（２０１０．４．２９）
【出願人】（５９８０３２１０６）バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド (414)
【氏名又は名称原語表記】ＶＥＲＴＥＸ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＩＮＣＯＲＰＯＲＡＴＥＤ
【住所又は居所原語表記】１３０ Ｗａｖｅｒｌｙ Ｓｔｒｅｅｔ， Ｃａｍｒｉｄｇｅ， Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ ０２１３９−４２４２， Ｕ．Ｓ．Ａ．
【Ｆターム（参考）】
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