TREM-1リガンドが同定される。これは、TREM-1受容体に結合することが可能である様々な誘導体が、提供/同定されることを可能にする。TREM-1リガンド又は誘導体は、薬剤/候補薬剤のスクリーニングに使用されることができる。TREM-1リガンド/誘導体のTREM-1受容体への結合を遮断又は低下する物質は、敗血症、特に細菌又は真菌起源の敗血症の治療に有用であり得る。このリガンドに対する抗体は、敗血症、特に細菌又は真菌起源の敗血症の診断に有用であり得る。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
TREM-1リガンド又はその誘導体を提供する工程、並びに被験化合物が：
a)TREM-1受容体に対する若しくはその誘導体に対するリガンド若しくはその誘導体の結合；並びに/又は
b)TREM-1リガンドのTREM-1受容体への結合により調節された活性；に、影響を及ぼすかどうかを決定する工程を含む、方法。
【請求項２】
前記TREM-1受容体又はその誘導体を発現する1種以上の細胞を使用する、請求項1記載の方法。
【請求項３】
前記細胞が、好中球又は単球である、請求項2記載の方法。
【請求項４】
前記細胞が、TREM-1受容体又はその誘導体を通常発現しないが、発現するように修飾されている細胞である、請求項2記載の方法。
【請求項５】
前記化合物が、該結合又は活性を遮断又は減少させるかどうかを決定する工程を含む、請求項1〜4のいずれか1項記載の方法。
【請求項６】
前記被験化合物の存在に起因する結合又は活性の差異を定量する工程を含む、請求項1〜5のいずれか1項記載の方法。
【請求項７】
検出可能な標識を使用する、請求項1〜6のいずれか1項記載の方法。
【請求項８】
前記リガンド又はその誘導体が、抗体R33により結合されることが可能である、請求項1〜7のいずれか1項記載の方法。
【請求項９】
前記リガンドが、CD177(例えば、アミノ酸1-437、若しくはアミノ酸22-437などのそれらの断片、特に図18のアミノ酸22-408により定義されている)であるか、又はTREM-1受容体に結合することが可能であるその誘導体である、請求項1〜8のいずれか1項記載の方法。
【請求項１０】
前記リガンドの誘導体及び/又は前記受容体の誘導体が、可溶性である、請求項1〜9のいずれか1項記載の方法。
【請求項１１】
前記リガンドの誘導体及び/又は前記受容体の誘導体が、多価である、請求項10記載の方法。
【請求項１２】
前記リガンドの誘導体が、足場に付着された複数のTREM-1受容体結合領域を含む、請求項1〜11のいずれか1項記載の方法。
【請求項１３】
前記受容体の誘導体が、足場に付着された複数のTREM-1リガンド結合領域を含む、請求項1〜12のいずれか1項記載の方法。
【請求項１４】
請求項1の工程b)を含む、請求項1〜13のいずれか1項記載の方法。
【請求項１５】
請求項1の工程b)に記された活性が、前炎症性サイトカイン若しくはケモカインの放出、サイトゾルCa²⁺動態化、又はタンパク質チロシン-リン酸化である、請求項14記載の方法。
【請求項１６】
前記活性が、レポーターシステムを用いてアッセイされる、請求項14又は15記載の方法。
【請求項１７】
前記レポーターシステムが、融合タンパク質を利用する、請求項16記載の方法。
【請求項１８】
前記レポーターシステムが、細胞内カルシウムの変化を測定する、請求項17記載の方法。
【請求項１９】
更なる分析のために関心対象の化合物を同定又は選択するための薬剤スクリーニングプログラムの一部として使用される、請求項1〜18のいずれか1項記載の方法。
【請求項２０】
被験化合物が、TREM-1リガンド/誘導体のTREM-1受容体/誘導体への結合を低下させるかどうか、及び/又は該結合により調節される活性を低下させるかどうかの更なる分析のための関心対象であると結論づけられる、請求項1〜19のいずれか1項記載の方法。
【請求項２１】
前記薬剤スクリーニングプログラムが、敗血症などの炎症障害の治療において有用である化合物のスクリーニングのためのものである、請求項19又は20記載の方法。
【請求項２２】
前記薬剤スクリーニングプログラムが、微生物性敗血症の治療において有用である化合物のスクリーニングのためのものである、請求項21記載の方法。
【請求項２３】
前記敗血症が、細菌性又は真菌性の敗血症である、請求項21記載の方法。
【請求項２４】
1種以上の前炎症性サイトカイン又はケモカインの放出により特徴付けられる障害を治療するための医薬品の製造における、TREM-1リガンドのTREM-1受容体への結合を遮断又は減少させることが可能である化合物の使用。
【請求項２５】
敗血症などの炎症障害を治療するための医薬品の製造における、TREM-1リガンドのTREM-1受容体への結合を遮断又は減少させることが可能である化合物の使用。
【請求項２６】
前記障害が、微生物性敗血症である、請求項25記載の使用。
【請求項２７】
前記障害が、細菌性又は真菌性の敗血症である、請求項25記載の使用。
【請求項２８】
前記化合物が、CD177に結合する、請求項24〜27のいずれか1項記載の使用。
【請求項２９】
前記化合物が、抗体である、請求項24〜28のいずれか1項記載の使用。
【請求項３０】
前記化合物が、CD177の可溶性型であるか、又はその可溶性誘導体である、請求項24〜27のいずれか1項記載の使用。
【請求項３１】
前記化合物が、TREM-1受容体への結合に関して多価である、請求項30記載の使用。
【請求項３２】
前記化合物が、融合タンパク質である、請求項24〜31のいずれか1項記載の使用。
【請求項３３】
前記融合タンパク質が、免疫グロブリンの少なくとも一部を含む、請求項32記載の使用。
【請求項３４】
前記融合タンパク質が、Fc受容体に結合しない、請求項33記載の使用。
【請求項３５】
1種以上の前炎症性サイトカイン又はケモカインの放出により特徴付けられる障害を治療するための医薬品の製造における、TREM-1リガンドの発現を遮断又は減少させる化合物の使用。
【請求項３６】
敗血症などの炎症障害を治療するための医薬品の製造における、TREM-1リガンドの発現を遮断又は低下させる化合物の使用。
【請求項３７】
前記障害が、微生物性敗血症である、請求項36記載の使用。
【請求項３８】
前記障害が、細菌性又は真菌性の敗血症である、請求項36記載の使用。
【請求項３９】
前記化合物が、CD177の発現を遮断又は低下させる、請求項35〜38のいずれか1項記載の使用。
【請求項４０】
前記化合物が、アンチセンス分子、RNAi分子又はリボザイムである、請求項35〜39のいずれか1項記載の使用。
【請求項４１】
前記化合物が、TREM-1リガンド転写のダウンレギュレーター又はTREM-1リガンド遺伝子の破壊因子である、請求項35〜39のいずれか1項記載の使用。
【請求項４２】
請求項24〜41のいずれか1項記載の化合物及び医薬として許容し得る担体を含有する、医薬組成物。
【請求項４３】
TREM-1受容体への結合又はTREM-1リガンドへの結合に関して多価である、化合物。
【請求項４４】
足場に付着された、TREM-1リガンドの可溶性型、又はその可溶性誘導体を複数含む、請求項43記載の化合物。
【請求項４５】
前記足場が、免疫グロブリンに由来する、請求項44記載の化合物。
【請求項４６】
足場に付着された、複数のTREM-1受容体の可溶性型、又はそれらの可溶性誘導体を含む、請求項43記載の化合物。
【請求項４７】
前記足場が、ストレプトアビジンに由来する、請求項46記載の化合物。
【請求項４８】
前記動物が、野生型動物と比べ、TREM-1又はTREM-1リガンドの発現を低下するように遺伝子修飾されている、非ヒト動物。
【請求項４９】
TREM-1リガンド又はTREM-1受容体についてノックアウトされている、請求項48記載の非ヒト動物。
【請求項５０】
前記動物が、TREM-3の発現を低下するように遺伝子操作されている、請求項48又は49記載の非ヒト動物。
【請求項５１】
TREM-1/TREM-3二重ノックアウト齧歯類である、請求項50記載の非ヒト動物。
【請求項５２】
生物試料を得る工程、及びTREM-1リガンド又はTREM-1リガンドRNAに関して該試料を分析する工程を含む、方法。
【請求項５３】
TREM-1リガンドを定量する工程、又はTREM-1リガンドのmRNA若しくはcDNAを定量する工程を含む、請求項52記載の方法。
【請求項５４】
前記レベルを、健常な個体から予想され得るものに相当する対照レベル又は範囲と比較する工程を含む、請求項53記載の方法。
【請求項５５】
前記レベルを、1種以上の前炎症性サイトカイン又はケモカインの放出により特徴付けられる障害を持つ個体から予想され得るものに相当する対照レベル又は範囲と比較する工程を含む、請求項53又は54記載の方法。
【請求項５６】
前記レベルを、敗血症などの炎症障害を持つ個体から予想され得るものに相当する対照レベル又は範囲と比較する工程を含む、請求項53又は54記載の方法。
【請求項５７】
前記障害が、微生物性敗血症である、請求項56記載の方法。
【請求項５８】
前記微生物性敗血症が、細菌性又は真菌性の敗血症である、請求項57記載の方法。
【請求項５９】
TREM-1リガンドに対する抗体を使用する、請求項52〜58のいずれか1項記載の方法。
【請求項６０】
TREM-1リガンドのRNA又はcDNAにハイブリダイズする核酸分子を使用する、請求項52〜58のいずれか1項記載の方法。
【請求項６１】
前記方法が、TREM-1リガンドの可溶性型を分析するために使用され、該方法が、細胞外液を含む試料に対して実行される、請求項52〜59のいずれか1項記載の方法。
【請求項６２】
前記方法が、膜結合型TREM-1リガンドを分析するために使用され、該方法が、好中球及び/又は単球を含む試料に対して実行される、請求項52〜60のいずれか1項記載の方法。
【請求項６３】
生物試料を得る工程、及び該試料をTREM-1受容体の存在に関して分析する工程を含む方法であり、ここでTREM-1リガンドの可溶性型又はその可溶性変種が提供され、かつ該試料が、該可溶性型又は可溶性変種のTREM-1受容体への結合について分析される、前記方法。
【請求項６４】
前記可溶性型又は可溶性変種が、CD177の可溶性型又は可溶性変種である、請求項63記載の方法。
【請求項６５】
前記可溶性型又は可溶性変種が、請求項43〜47のいずれか1項に記載された化合物である、請求項63又は64記載の方法。
【請求項６６】
前記リガンドのTREM-1受容体への結合を妨害するか又はそのような結合の効率を低下させるためにTREM-1リガンドに結合する抗体。
【請求項６７】
TREM-1リガンドには結合するが、敗血症性の好中球又は単球上の他のいずれの細胞表面タンパク質にも結合しない抗体。
【請求項６８】
TREM-1リガンドに特異的である抗体。
【請求項６９】
TREM-1受容体に結合するTREM-1リガンドの一部に特異的である抗体。
【請求項７０】
野生型TREM-1リガンドと比べ、TREM-1リガンドの変異型に優先的に結合する抗体。
【請求項７１】
TREM-1リガンドの変異型に特異的である抗体。
【請求項７２】
細胞の表面上にTREM-1リガンド又はその誘導体を提示する細胞に特異的である抗体。
【請求項７３】
前記TREM-1リガンドが、CD177である、請求項66〜72のいずれか1項記載の抗体。
【請求項７４】
1種以上の前炎症性サイトカイン又はケモカインのインビボ放出により特徴付けられる障害を診断するためのキットであり、ここで該キットが、TREM-1リガンドへ若しくは該リガンドをコードしている核酸へ結合する化合物を備えているか、又はここで該キットが、TREM-1受容体に結合するTREM-1リガンド若しくはその誘導体を備えている、前記キット。
【請求項７５】
敗血症などの炎症障害を診断するためのキットであり、ここで該キットが、TREM-1リガンドへ若しくは該リガンドをコードしている核酸へ結合する化合物を備えているか、又はここで該キットが、TREM-1受容体に結合するTREM-1リガンド又はその誘導体を備えている、前記キット。
【請求項７６】
前記障害が、微生物性敗血症である、請求項75記載のキット。
【請求項７７】
前記敗血症が、細菌性又は真菌性の敗血症である、請求項76記載のキット。
【請求項７８】
結合を検出する手段を更に備えている、請求項74〜77のいずれか1項記載のキット。
【請求項７９】
結合を定量する手段を更に備えている、請求項74〜77のいずれか1項記載のキット。
【請求項８０】
前記障害が存在する場合に、可視できる変化を提供する指標を1種以上備えている、請求項74〜79のいずれか1項記載のキット。
【請求項８１】
前記1種以上の指標が、色の変化又はマーキングの変化を提供する、請求項80記載のキット。
【請求項８２】
1種以上の対照を更に備えている、請求項74〜81のいずれか1項記載のキット。
【請求項８３】
前記TREM-1リガンドに対する抗体を備えている、請求項74〜82のいずれか1項記載のキット。
【請求項８４】
TREM-1 mRNA又はTREM-1 cDNAにハイブリダイズする核酸を備える、請求項74〜82のいずれか1項記載のキット。
【請求項８５】
TREM-1リガンドの変異型の存在を同定するためのキットであり、ここで該キットが、該リガンドの野生型よりも該変異型により強力に結合する抗体を備えているか、又はここで該キットが、該野生型をコードしている核酸よりも該変異型をコードしている核酸へより強力にハイブリダイズする核酸を備えている、前記キット。
【請求項８６】
前記抗体が、前記TREM-1リガンドの変異型に特異的であるか、又はここで該化合物が、該TREM-1リガンドの変異型をコードしている核酸に特異的である、請求項85記載のキット。
【請求項８７】
前記TREM-1リガンドの野生型への結合又は該リガンドをコードしている核酸への結合との比較を可能にする対照を更に備えている、請求項85又は86記載のキット。
【請求項８８】
TREM-1リガンド又はその誘導体を提供する工程、及び非ヒト宿主において抗体を産生するためにこれを使用する工程を含む、抗-TREM-1リガンド抗体を得るための方法。
【請求項８９】
細胞の表面上にTREM-1リガンド又はその誘導体を提示する細胞を提供する工程、及び非ヒト宿主において抗体を産生するためにこれらを使用する工程を含む、抗-TREM-1リガンド抗体を得るための方法。
【請求項９０】
前記抗体を精製する工程を更に含む、請求項88又は89記載の方法。
【請求項９１】
a)TREM-1リガンド又はその誘導体を提供する工程；
b)非ヒト宿主において抗-TREM-1リガンド抗体を産生するB細胞を作出するために該リガンド又は誘導体を使用する工程；
c)ハイブリドーマを作製するために、該B細胞を腫瘍細胞と融合する工程：を含む、抗-TREM-1リガンド抗体を産生するハイブリドーマを得る方法。
【請求項９２】
前記TREM-1リガンド又は誘導体が、実質的に純粋型である、請求項88、90又は91のいずれか1項記載の方法。
【請求項９３】
前記TREM-1リガンドが、CD177である、請求項88〜92のいずれか1項記載の方法。
【請求項９４】
抗-TREM-1リガンド抗体を作製するハイブリドーマであり、ここで該抗体が、請求項66〜73のいずれか1項に記載されているものである、前記ハイブリドーマ。
【請求項９５】
キメラ抗体の鎖をコードしている核酸分子を1種以上提供する工程、及び好適な発現系において該キメラ抗体を発現する該核酸分子を1種以上使用する工程を含む、TREM-1リガンドに対するキメラ抗体を作製する方法。
【請求項９６】
前記発現系が、哺乳類の細胞培養物である、請求項95記載の方法。
【請求項９７】
添付されている実施例及び図面を参照し、実質的に本明細書において先に記載されている発明。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４Ａ−Ｂ】

【図５】

【図６】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１Ａ（ｉ）】

【図２１Ａ（ｉｉ）】

【図２１Ｂ（ｉ）】

【図２１Ｂ（ｉｉ）】

【図２１Ｂ（ｉｉｉ）】

【図２２】

【図２３】

【図２４Ａ−Ｂ】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【公表番号】特表２０１０−５３４８２８（Ｐ２０１０−５３４８２８Ａ）
【公表日】平成２２年１１月１１日（２０１０．１１．１１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５１７３９９（Ｐ２０１０−５１７３９９）
【出願日】平成２０年７月２３日（２００８．７．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０５９６６８
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０１３３１９
【国際公開日】平成２１年１月２９日（２００９．１．２９）
【出願人】（５０５１８４７６８）
【氏名又は名称原語表記】ＢｉｏＸｅｌｌ　ＳｐＡ
【Ｆターム（参考）】