チロシナーゼ阻害剤としてのヒドロキシベンジル又はヒドロキシピラノンメチルエステル
皮膚美白化エステル化合物の製造方法並びにエステル化合物を含む皮膚美白化組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メラニン形成を減少させる置換ヒドロキシアリール又はヒドロキシピラノンメタノールのエステルを基材とする組成物に関する。本発明の別の態様は前記組成物及びエステルの製造方法並びに前記組成物の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の高色素沈着は、チロシンから形成される黒色色素であるメラニンの形成に直接関係する。チロシンからメラニンへの転化の最初の工程には、酵素チロシナーゼが介在する。チロシナーゼの有効な阻害剤は、メラニン形成を阻害することができ、皮膚の不所望な色素沈着の減少（例えば皮膚美白化(skin brightening)、肌の色合い(tone)の均一化又はしみの発生の減少）に有用である。現在のところ、ヒドロキノン、コウジ酸及びアルブチンを含むいくつかのチロシナーゼ阻害剤が市場に出回っている。しかし、これらの製品はいずれにも欠点がある。例えばコウジ酸はバイオアベイラビリティが低いので、効果が充分とは言えない。別の例であるヒドロキノンは空気、光及びチロシナーゼ自体で酸化される。ヒドロキノンのこのような酸化生成物は皮膚炎、そしておそらくは細胞毒性に関係している。
【０００３】
コウジ酸は、皮膚美白化成分としてよく使用される。これは、安全であり且つ局所使用に有効であることがわかっている真菌代謝産物である（非特許文献１に概説されている）。コウジ酸のモノエステル及びジエステルも文献記載されており（特許文献１）、皮膚のメラニン形成を阻害するような優れたチロシナーゼ阻害活性を有するようである。この阻害作用は、皮膚の美白化に優れた効果をもたらすことができる。
【０００４】
親分子がエノールアルコール（又はフェノール）と第一アルコールを共に有するので、コウジ酸又は４−ヒドロキシベンジルアルコールからは２つの異なるモノエステルが製造される可能性がある。特許文献１に報告されているコウジ酸のモノエステルは、高温条件下で化学的方法によって製造され、第一アルコールのエステルを生じた。使用する激しい条件は、熱的に不安定な反応相手には適さないであろう。コウジ酸はエノール酸素で特異的に酵素的にアシル化されることが報告されている（非特許文献２）。矛盾した報告であるが、特許文献２は、コウジ酸が、アシル化剤として酸又はビニルエステルを用いる場合に、ヒドロキシメチル酸素で酵素的にアシル化されることを示した。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第４，３６９，１７４号（Ｎａｇａｉ，Ｓ．；Ｉｚｕｍｉ，Ｔ．）
【特許文献２】特願２００２−２５７７０４（特開２００３−１５５２８３）
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｂｕｒｄｏｃｋ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ３３：８０−１０１
【非特許文献２】Ｌｉｕ，Ｋ．−Ｊ．；Ｓｈａｗ，Ｊ．−Ｆ．Ｊ．Ａｍ．Ｏｉｌ Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９８，７５，１５０７−１５１１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
バイオアベイラビリティがより高く且つより有効な阻害剤は皮膚炎を起こさずに顕著な美白化のメリットを与える可能性を更に増す。他のメリットとしては、使いやすさ、改善された保存寿命及び減少した適用頻度が挙げられる。本発明の目的は、このような化合物及び組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の一態様は、酵素の存在下で及び有機溶媒の存在下又は不存在下において、式２：
【０００９】
【化１】
【００１０】
で表されるアルコールを式３：
【００１１】
【化２】
【００１２】
の酸誘導体と反応させることを含んでなる式１：
【００１３】
【化３】
【００１４】
で表されるエステル化合物の製造方法に関する。ＲはＣ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、置換ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル［置換基はＣ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2はフェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）からなる群から選ばれる］、及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれる。Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物から選ばれる。更に、Ｒ4は水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキル及びＣ2〜Ｃ4アルケニルからなる群から選ばれる。
【００１５】
別の態様は、酵素の存在下で及び有機溶媒の存在下又は不存在下において、式４：
【００１６】
【化４】
【００１７】
で表されるエステルを式３：
【００１８】
【化５】
【００１９】
の酸誘導体と反応させることを含んでなる式１：
【００２０】
【化６】
【００２１】
で表されるエステル化合物の製造方法に関する。ＲはＣ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれる。Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物からなる群から選ばれる。更に、Ｒ4が水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキル及びＣ2〜Ｃ4アルケニルからなる群から選ばれ、Ｒ5が水素又はＣ1〜Ｃ4アルキルである。
【００２２】
更に別の態様は、酵素の存在下で及び有機溶媒の存在下又は不存在下において、式２：
【００２３】
【化７】
【００２４】
で表されるアルコールを式５：
【００２５】
【化８】
【００２６】
で表される酸無水物と反応させることを含んでなる式１：
【００２７】
【化９】
【００２８】
で表されるエステル化合物の製造方法に関する。ＲはＣ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、Ｒ1はＣ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物からなる群から選ばれる。更に、Ｒ6がＣ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物から選ばれる。
【００２９】
更に別の態様は、式１：
【００３０】
【化１０】
【００３１】
で表されるエステル化合物及び化粧品用として許容され得る担体を含んでなる皮膚の美白化組成物に関する。Ｒは、Ｃ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物からなる群から選ばれる。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
本発明の一態様は、コウジ酸及びヒドロキシベンジルアルコールモノエステル並びにエステルがエノール酸素ではなく一級酸素において形成された関連物質を製造するための穏やかで、簡単で且つ新規な生体触媒による方法に関する。これらの化合物は、極めて有効なチロシナーゼ阻害剤としてとして作用する。
【００３３】
本発明の一態様は、一般式１：
【００３４】
【化１１】
【００３５】
［式中、ＲはＣ6〜Ｃ22炭素環式ヒドロキシアリール、置換ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及び置換若しくは非置換のＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）から選ばれ、及び
Ｒ1は置換及び非置換の分岐及び直鎖飽和Ｃ1〜Ｃ22アルキル、置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ6〜Ｃ22トリエニル並びに置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル又はそれらの混合物から選ばれる］
で表されるエステル化合物の製造方法に関する。
【００３６】
Ｒが表すことができるアリール基としては、フェニル、ナフチル又はアントラセニル、並びにヒドロキシル基及び１〜３個の追加置換基で置換されたフェニル、ナフチル又はアントラセニルが挙げられ、前記追加置換基はＣ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2はフェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）から選ばれる。
【００３７】
Ｒが表すことができるヘテロアリール基としては、酸素、硫黄及び窒素から選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５員又は６員ヒドロキシ置換芳香環が挙げられる。このようなヘテロアリール基の例はヒドロキシチエニル、ヒドロキシフリル、ヒドロキシピロリル、ヒドロキシイミダゾリル、ヒドロキシピラゾリル、ヒドロキシチアゾリル、ヒドロキシイソチアゾリル、ヒドロキシオキサゾリル、ヒドロキシイソオキサゾリル、ヒドロキシトリアゾリル、ヒドロキシチアジアゾリル、ヒドロキシオキサジアゾリル、ヒドロキシテトラゾリル、ヒドロキシピリジル、ヒドロキシピリミジル、ヒドロキシベンゾオキサゾリル、ヒドロキシベンゾチアゾリル、ヒドロキシベンズイミダゾリル、ヒドロキシインドリルなどである。ヘテロアリール基は、例えばＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノのような３個以下の追加の基で置換されることができる。ヘテロアリール基はまた、縮合環系、例えばベンゾ又はナフト残基で置換されることができ、前記ベンゾ又はナフト残基は例えば、前記文中に記載した基３個以下で置換されていても非置換でもよい。
【００３８】
用語「ハロゲン」はフッ素、塩素、臭素及びヨウ素を含めるために用いる。
【００３９】
Ｒ1が表すことができるアルキル、アルケニル、ジエニル、トリエニル及びテトラエニル基は、炭素原子が約２０以下の直鎖又は分岐鎖脂肪族炭化水素基であることができ、例えば、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、シアノ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルオキシ、ヒドロキシ、アリール、ヘテロアリール、チオール、チオエーテル、ジチオラン及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されることができる。用語「Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ」、「Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル」及び「Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルオキシ」は、それぞれ、構造−ＯＲ3、−ＣＯ2Ｒ3及び−ＯＣＯＲ3（Ｒ3はＣ1〜Ｃ6アルキル又は置換Ｃ1〜Ｃ6アルキルである）に対応する基を示すのに用いる。
【００４０】
現在好ましい本発明の化合物はＲがフェノール及び置換ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルから選ばれる式１の化合物である。特に好ましい化合物はＲが４−ヒドロキシフェニルであり且つＲ1がＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基から選ばれる構造１並びにＲが５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルであり且つＲ1がＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基及び４−（１，２−ジチオラン−３−イル）−１−ブチルから選ばれる構造１で表される。
【００４１】
この方法は、酵素の存在下で及び有機溶媒の存在下又は不存在下において、アルコール２：
【００４２】
【化１２】
【００４３】
を式３：
【００４４】
【化１３】
【００４５】
の酸誘導体と反応させて望ましいエステル１を形成することを含む。前記アルコール２の置換基Ｒ及び前記酸誘導体３のＲ1は前に定義した通りであり、前記酸誘導体の置換基Ｒ2は水素、Ｃ1〜Ｃ4置換又は非置換アルキル基及びＣ2〜Ｃ4アルケニル基から選ばれる。Ｃ1〜Ｃ4アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチルなどが挙げられる。Ｃ2〜Ｃ4アルケニル基の例としては、ビニル、１−プロペニル、１−イソプロペニル、１−ブテニルなどが挙げられる。好ましい置換基Ｒ4としては、水素、メチル、エチル及びビニルが挙げられ、水素及びビニルが最も好ましい。
【００４６】
この方法は、更なる溶媒を用いずに、或いは任意的に環状若しくは非環状エーテル溶媒（例えばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル若しくはテトラヒドロフラン）、芳香族炭化水素（例えばベンゼン、トルエン若しくはキシレン）、脂肪族若しくは脂環式飽和若しくは不飽和炭化水素（例えばヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン若しくはリモネン）、ハロゲン化炭化水素（例えばジクロロメタン、ジクロロエタン、ジブロモエタン、テトラクロロエチレン若しくはクロロベンゼン）、極性非プロトン性溶媒（例えばアセトニトリル、ジメチルホルムアミド若しくはジメチルスルホキシド）又はそれらの混合物から選ばれた不活性溶媒中で実施できる。好ましい溶媒はトルエン及びアセトニトリルである。この方法は、約−１００℃〜溶媒の沸点、好ましくは約０〜７０℃、最も好ましくは２０〜６０℃の温度において実施できる。酸誘導体３の量は、２に基づき、０．８５〜２０当量であることができ、好ましくは１〜１０当量である。この方法に使用する酵素はプロテアーゼ、リパーゼ又はエステラーゼから選ばれる。好ましい酵素はリパーゼである。これらのリパーゼは細胞全体、単離天然酵素の形態であることもできるし、担体に固定させることもできる。これらのリパーゼの例としては、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ−Ｃ（セラミックに固定されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ−Ｄ（珪藻土に固定されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐｏｐｒｉｍｅ ５０Ｔ、Ｌｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ又はＮｏｖｏｚｙｍ ４３５（アクリル樹脂に固定されたＣａｎｄｉｄａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａに由来）が挙げられるが、これらに限定するものではない。
【００４７】
この方法は、任意的に、分子篩（モレキュラーシープ）又はイオン交換樹脂から選ばれた種々の追加物の存在下で、実施できる。特に好ましいのは分子篩である。これは、これらの材料が反応の間に発生する水又は低級鎖アルコールのような副生成物を除去できるからである。これらの例には、３Ａ、４Ａ及び５Ａ分子篩がある。
【００４８】
この方法の生成物は、当業者に知られた方法、例えば抽出、濾過又は結晶化を用いて単離できる。生成物１は、必要ならば、当業者に知られた方法、例えば抽出、クロマトグラフィー、蒸留又は結晶化を用いて精製できる。
【００４９】
本発明の別の態様は、酸素の存在下で及び有機溶媒の存在下又は不存在下において、エステル４：
【００５０】
【化１４】
【００５１】
を式３：
【００５２】
【化１５】
【００５３】
の酸誘導体とエステル交換して所望のエステル１を形成することを含む。前記エステル４の置換基Ｒ並びに前記酸誘導体のＲ1及びＲ4は前に定義した通りであり、前記エステル４の置換基Ｒ5は水素及びＣ1〜Ｃ4置換又は非置換アルキル基から選ばれる。Ｃ1〜Ｃ4アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチルなどが挙げられる。好ましい置換基Ｒ5としては、水素、メチル及びエチルが挙げられる。
【００５４】
この方法は、更なる溶媒を用いずに、或いは任意的に環状若しくは非環状エーテル溶媒（例えばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル若しくはテトラヒドロフラン）、芳香族炭化水素（例えばベンゼン、トルエン若しくはキシレン）、脂肪族若しくは脂環式飽和若しくは不飽和炭化水素（例えばヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン若しくはリモネン）、ハロゲン化炭化水素（例えばジクロロメタン、ジクロロエタン、ジブロモエタン、テトラクロロエチレン若しくはクロロベンゼン）、極性非プロトン性溶媒（例えばアセトニトリル、ジメチルホルムアミド若しくはジメチルスルホキシド）又はそれらの混合物から選ばれた不活性溶媒中で実施できる。好ましい溶媒はトルエン及びアセトニトリルである。この方法は、約−１００℃〜溶媒の沸点、好ましくは約０〜７０℃、最も好ましくは２０〜６０℃の温度において実施できる。酸誘導体３の量は、４に基づき、０．８５〜２０当量であることができ、好ましくは１〜１０当量である。この方法に使用する酵素はプロテアーゼ、リパーゼ又はエステラーゼから選ばれる。好ましい酵素はリパーゼである。これらのリパーゼは細胞全体、単離天然酵素の形態であることもできるし、担体に固定させることもできる。これらのリパーゼの例としては、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ−Ｃ（セラミックに固定されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ−Ｄ（珪藻土に固定されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐｏｐｒｉｍｅ ５０Ｔ、Ｌｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ又はＮｏｖｏｚｙｍ ４３５（アクリル樹脂に固定されたＣａｎｄｉｄａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａに由来）が挙げられるが、これらに限定するものではない。
【００５５】
この方法は任意的に、分子篩又はイオン交換樹脂から選ばれた種々の追加物の存在下で実施できる。特に好ましいのはイオン交換樹脂である。これらの樹脂の例は、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）又はＡｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）弱塩基性樹脂、例えばＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ−９５、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ−９４及びＡｍｂｅｒｌｙｓｔ Ａ−２１であるが、任意の弱塩基性樹脂が許容され得るようである。
【００５６】
この方法の生成物は、当業者に知られた方法、例えば抽出、濾過又は結晶化を用いて単離できる。生成物１は、必要ならば、当業者に知られた方法、例えば抽出、クロマトグラフィー、蒸留又は結晶化を用いて精製できる。
【００５７】
本発明の別の実施態様は、酸素の存在下で及び有機溶媒の存在下又は不存在下において、アルコール２：
【００５８】
【化１６】
【００５９】
を式５：
【００６０】
【化１７】
【００６１】
の酸無水物と反応させて、所望のエステル１を形成することを含む。前記アルコール２の置換基Ｒ及び前記酸無水物５のＲ1は前に定義した通りであり、前記酸無水物の置換基Ｒ6は、置換及び非置換の分岐及び直鎖飽和Ｃ1〜Ｃ22アルキル、置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、置換及び非置換分岐及び直鎖Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、並びに置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル又はそれらの混合物から選ばれる。好ましい酸無水物としてはＲ1とＲ6が同一のものが挙げられる。
【００６２】
この方法は、更なる溶媒を用いずに、或いは任意的に環状若しくは非環状エーテル溶媒（例えばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル若しくはテトラヒドロフラン）、芳香族炭化水素（例えばベンゼン、トルエン若しくはキシレン）、脂肪族若しくは脂環式飽和若しくは不飽和炭化水素（例えばヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン若しくはリモネン）、ハロゲン化炭化水素（例えばジクロロメタン、ジクロロエタン、ジブロモエタン、テトラクロロエチレン若しくはクロロベンゼン）、極性非プロトン性溶媒（例えばアセトニトリル若しくはジメチルホルムアミド）又はそれらの混合物から選ばれた不活性溶媒中で実施できる。好ましい溶媒はトルエン及びアセトニトリルである。この方法は、約−１００℃〜溶媒の沸点、好ましくは約０〜７０℃、最も好ましくは２０〜６０℃の温度において実施できる。酸無水物の量は、２に基づき、０．８５〜２０当量であることができ、好ましくは１〜５当量である。この方法に使用する酵素はプロテアーゼ、リパーゼ又はエステラーゼから選ばれる。好ましい酵素はリパーゼである。これらのリパーゼは細胞全体、単離天然酵素の形態であることもできるし、担体に固定させることもできる。これらのリパーゼの例としては、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ−Ｃ（セラミックに固定されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ−Ｄ（珪藻土に固定されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐｏｐｒｉｍｅ ５０Ｔ、Ｌｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ又はＮｏｖｏｚｙｍ ４３５（アクリル樹脂に固定されたＣａｎｄｉｄａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａに由来）が挙げられるが、これらに限定するものではない。
【００６３】
この方法の生成物は、当業者に知られた方法、例えば抽出、濾過又は結晶化を用いて単離できる。生成物１は、必要ならば、当業者に知られた方法、例えば抽出、クロマトグラフィー、蒸留又は結晶化を用いて精製できる。
【００６４】
哺乳類の皮膚におけるチロシンからのメラニン生合成の初期工程は、酵素チロシナーゼによって触媒される。チロシナーゼを阻害する化合物は皮膚色素沈着の減少に有効である。化合物が皮膚色素沈着を減少させる能力は、インビトロ・アッセイでチロシナーゼ阻害活性を測定することによって非常に効果的に予測できる。精製されたチロシナーゼ（通常はマッシュルーム(mushroom)に由来）をチロシナーゼの基質（Ｌ−ＤＯＰＡ）と種々の濃度の被験化合物の存在下でインキュベートする。試験化合物の濃度依存性活性を、比色反応であるＬ−ＤＯＰＡのチロシナーゼ触媒酸化の阻害度として測定する。皮膚美白化合物の活性の他の試験方法は、培養された初代又は継代(immortalized)メラノサイト細胞培養物（多くの場合、ネズミ科動物又はヒト由来）を化合物に暴露し、メラニン産生を測定し、共培養されたメラノサイト、ケラチノサイト及び／若しくは繊維芽細胞を含む再構成皮膚モデルを暴露し、又は皮膚の色又は反射率を監視しながら、ヒト被検者の皮膚に化合物を適用することを含む（例えばVirador et al.Analytical Biochemistry 1999,270,207;Boissy et al.Experimental Dematology 2005,14,601）。
【００６５】
チロシナーゼ阻害アッセイは、試験化合物の潜在的皮膚美白化活性を測定するための一般に認められている方法である（例えば、Um et al.Bioorganic & Medicinal Chemistr 2003,11,5345）。本発明のエステルは酵素チロシナーゼを阻害する強力な能力を示す。
【００６６】
本発明の典型的な皮膚美白化組成物は、本発明に係るエステルを少なくとも０．０００１重量％含む。例えば、この組成物は本発明に係るエステルを約０．０００１％〜約１０．０重量％又は約０．００１％〜約２．０重量％含むことができる。高色素沈着状態がそれほど顕著でない場合並びに皮膚美白化処理後に使用されるサンスクリーン及びサンブロック中にはこれより低濃度も使用でき、より急性の色素沈着状態の場合にはより高濃度も使用できる。推奨範囲は、組成物中に使用される全ての補助成分と使用者の肌色及び肌質並びに高色素沈着問題の重症度によっても異なる。
【００６７】
本発明の皮膚美白化組成物は、エステルに加えて他の皮膚美白化成分を含むこともできる。このような他の成分は当業者に知られている。
【００６８】
典型的には、皮膚部位への局所適用は担体と共に行う。使用する場合には、担体は活性若しくは補助成分の失活又は酸化を引き起こさないという意味において、また、適用皮膚領域に対して副作用を起こさないという意味において不活性である。例えば、本発明に係る化合物は、局所適用を容易にするために、及び場合によっては、もたらされるかもしれない更なる有益な効果（例えば皮膚患部の保湿によって）を提供するように、皮膚科学的に許容され得る担体又は賦形剤と混合して（例えばローション剤、クリーム、軟膏、石けん、スティックなどとして）適用する。多くの製剤が当業界で知られており、その例としては、油及び／若しくはアルコールを含むローション剤並びに皮膚軟化剤、例えばオリーブ油、炭化水素油及びワックス、シリコーン油、他の植物、動物若しくは海産脂肪若しくは油、グリセリド誘導体、脂肪酸若しくは脂肪酸エステル又はアルコール若しくはアルコールエーテル、レシチン、ラノリン及び誘導体、多価アルコール若しくはエステル、ワックスエステル、ステロール、リン脂質など、一般には更にまた乳化剤（非イオン性、陽イオン性又は陰イオン性）が挙げられるが、皮膚軟化剤の一部は本質的に乳化性を有する。これらの同じ一般的成分をローション剤ではなくクリーム中に、又はゲル中に、又は固体スティック中に、成分を種々の割合で用いることによって及び／又はガム若しくは他の形態の親水性コロイドのような増粘剤を含ませることによって、配合することができる。
【実施例】
【００６９】
本発明が提供する方法を以下の例によって更に説明する。
実施例１
５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルアセテート（１ａ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；５００ｍｇ；３．５２ミリモル）をアセトニトリル１０ｍＬ中でスラリー化した。酢酸ビニル（３２４μＬ；３．５２ミリモル；１．０当量）を、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５ １２０ｍｇを添加した。混合物を５０℃まで６時間加熱した。その時点でｔｌｃ分析は１ａへのかなりの転化を示す。酢酸ビニルを更に０．２当量添加し、混合物を一晩加熱して、少量の残留２ａが得られた。酢酸ビニルを更に０．２当量添加し、混合物を５０℃において１２時間加熱した。ｔｌｃ分析によれば、２ａは完全に消費されていた。混合物を温かいうちに濾過して、酵素を除去し、濾液をストリッピングして１ａを０．６４ｇ（９９％）得た。この化合物は、２ａ（ＥＣ50 ０．０１５ｍＭ）よりもかなり優れたチロシナーゼの強力な阻害剤であった（ＥＣ50 ０．００４９ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００７０】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．２４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；８．０８（ｓ，１Ｈ）；６．４７（ｓ，１Ｈ）；４．９３（ｓ，２Ｈ）；２．１０（ｓ，３Ｈ）。
【００７１】
比較例１
２−ヒドロキシメチル−４Ｈ−ピラン−４−オン−５−イルアセテート（６ａ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；１．００ｇ；７．０４ミリモル）をジクロロメタン３０ｍＬ中でスラリー化した。トリエチルアミン（１．４７ｍＬ；１０．６ミリモル；１．５当量）を添加し、次いで無水酢酸（０．６９ｍＬ；７．０４ミリモル；１．０当量）を滴加した。不均一混合物が３０分かけて均一になり、それを一晩撹拌した。ｔｌｃ分析（酢酸エチル溶離剤）によって、中間極性の大きいスポットと無極性スポットを得た。反応混合物を濃縮し、フラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、４：１酢酸エチル：ヘプタン〜１００％酢酸エチルの溶媒勾配を用いて溶離させた。中間スポットのセンターカットを収集し、６ａを４１５ｍｇ（３２％）得た。この化合物は２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）に比較してそれほど強力でないチロシナーゼの阻害剤であった（ＥＣ50０．０８４ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００７２】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ８．４６（ｓ，１Ｈ）；６．４２（ｓ，１Ｈ）；５．７７（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；４．３４（ｂｒ ｓ，２Ｈ）；２．２５（ｓ，３Ｈ）。
【００７３】
実施例２
５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルプロピオネート（１ｂ）の製造
Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（１２０ｍｇ）及び乾燥させた４Ａ分子篩（１ｇ）を５０ｍＬフラスコに加えた。２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；５００ｍｇ；３．５２ミリモル）を加え、アセトニトリル１０ｍＬで洗浄した。プロピオン酸（５２５μＬ；７．０４ミリモル；２当量）を加え、混合物を一晩５０℃まで加熱した。その時点でｔｌｃ分析（酢酸エチル溶離剤）は１ｂへの転化を示した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。粗製生成物をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、４：１酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、１ｂを２８５ｍｇ（４１％）得た。この化合物はチロシナーゼの強力な阻害剤であり（ＥＣ50０．００４６ｍＭ）、２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）よりもかなり優れていた（表Ｉ参照）。
【００７４】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．２５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；８．０９（ｓ，１Ｈ）；６．４６（ｓ，１Ｈ）；４．９５（ｓ，２Ｈ）；２．４２（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．０４（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）。
【００７５】
実施例３
無水プロピオン酸を用いた酵素的エステル化による５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルプロピオネート（１ｂ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；５００ｍｇ；３．５２ミリモル）をアセトニトリル１０ｍＬ中でスラリー化し、無水プロピオン酸（０．５４ｍＬ；４．２ミリモル；１．２当量）を添加した。Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（１２０ｍｇ）を添加し、混合物を周囲温度で５．５時間撹拌した。ＨＰＬＣ及びｔｌｃ分析（酢酸エチル溶離剤）によれば、２ａは１ｂにほとんど完全に転化されていた。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。粗製生成物を酢酸エチルに溶解させ、ヘプタンで稀釈して沈殿物を得た。この沈殿物を収集し、ヘプタンで洗浄し、乾燥させた。この濾液を濃縮乾固し、得られた固体をヘプタンで磨砕し、濾過し、ヘプタンで洗浄し、乾燥させた。合した固形分（５７６ｍｇ；８３％）は1Ｈ ＮＭＲによって純粋な１ｂと分析された。
【００７６】
比較例２
２−ヒドロキシメチル−４Ｈ−ピラン−４−オン−５−イルプロピオネート（６ｂ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；８５２ｍｇ；６．００ミリモル）をジクロロメタン３０ｍＬ中でスラリー化した。周囲温度でトリエチルアミン（１．２５ｍＬ；９．０ミリモル；１．５当量）を添加し、次いで無水プロピオン酸（０．７７ｍＬ；６．０ミリモル；１．０当量）を滴加した。反応混合物が１分以内で均一になり、それを一晩撹拌した。ｔｌｃ（酢酸エチル溶離剤）によって、１つの大きいスポットを得た。揮発分をストリッピングし、残渣を酢酸エチルで稀釈し、１Ｍ ＨＣｌ（１５ｍＬ）及び飽和炭酸水素ナトリウム（１５ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、粗製生成物０．９２ｇを得た。1Ｈ ＮＭＲによるこの粗製生成物の分析は、少量の２ａ、少量の２ａのジプロピオネート（７ｂ）及び９０：１０の比で６ｂ及び１ｂを示した。混合物をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、１：１酢酸エチル：ヘプタン〜４：１酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、６ｂを４７６ｍｇ（４０％）得た。この化合物は２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）に比較してそれほど強力でないチロシナーゼの阻害剤であった（ＥＣ50０．１０ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００７７】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ８．４６（ｓ，１Ｈ）；６．４２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝０．８２Ｈｚ）；５．７６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０５Ｈｚ）；４．３４（ｄｄ，２Ｈ；Ｊ＝０．８２，６．０５Ｈｚ）；２．５８（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．１１（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）。
【００７８】
比較例３
２−プロピオニルオキシメチル−４Ｈ−ピラン−４−オン−５−イルプロピオネート（７ｂ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；８５２ｍｇ；６．００ミリモル）をジクロロメタン３０ｍＬ中でスラリー化した。周囲温度で、トリエチルアミン（２．５１ｍＬ；１８．０ミリモル；３当量）を添加し、次いで無水プロピオン酸（１．６９ｍＬ；１３．２ミリモル；２．２当量）を滴加した。反応混合物が１分以内で均一になり、それを一晩撹拌した。ｔｌｃ（酢酸エチル溶離剤）によって、１つの大きいスポットを得た。揮発分をストリッピングし、残渣を酢酸エチルで稀釈し、１Ｍ ＨＣｌ（１５ｍＬ）及び飽和炭酸水素ナトリウム（１５ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、粗製生成物２．３０ｇを得た。これをフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、１：１酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、７ｂを１．３９ｇ（９７％）得た。この化合物は２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）に比較してそれほど強力でないチロシナーゼの阻害剤であった（ＥＣ50０．０９７ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００７９】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ８．５２（ｓ，１Ｈ）；６．５９（ｓ，１Ｈ）；５．０１（ｓ，１Ｈ）；２．５９（ｑ，２Ｈ；Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；２．４４（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．１１（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．０５（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）。
【００８０】
実施例４
ヘキサン酸無水物を用いた酵素的エステル化による５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルヘキサノエート（１ｃ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；５００ｍｇ；３．５２ミリモル）をアセトニトリル１０ｍＬ中でスラリー化し、ヘキサン酸無水物（０．８１ｍＬ；３．５２ミリモル；１．０当量）を添加した。Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（１２０ｍｇ）を添加し、混合物を周囲温度で一晩撹拌した。ＨＰＬＣ分析によれば、２ａは１ｃに８５％転化されていた。追加のヘキサン酸無水物（０．１２ｍＬ；０．５３ミリモル；０．１５当量）を添加し、混合物を一晩撹拌して、２ａを１ｃに９８％転化させた。反応混合物を濾過し、濾液を周囲温度で減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、水（１０ｍＬ）及び炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（３×１０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、１ｃ（７６１ｍｇ；９０％）をオフホワイトの固体として得た。この化合物はチロシナーゼの極めて強力な阻害剤であり（ＥＣ50０．０００９８ｍＭ）であり、２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）よりもかなり優れていた（表Ｉ参照）。
【００８１】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．２５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；８．０８（ｓ，１Ｈ）；６．４５（ｓ，１Ｈ）；４．９５（ｓ，２Ｈ）；２．３９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．５９〜１．４９（ｍ，２Ｈ）；１．３１〜１．２０（ｍ，４Ｈ）；０．８５（ｍ，３Ｈ）。
【００８２】
実施例５
５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルオクタノエート（１ｄ）の製造
Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（５００ｍｇ；５０重量％）及び乾燥４Ａ分子篩（２ｇ；２重量当量）をフラスコに加えた。２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；１．００ｇ；７．０４ミリモル）を加え、アセトニトリル２０ｍＬで洗浄した。オクタン酸（２．２３ｍＬ；１４．０７ミリモル；２当量）を加え、混合物を一晩５０℃まで加熱した。その時点でｔｌｃ分析（酢酸エチル溶離剤）は１ｄへの転化を示した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。粗製生成物を酢酸エチルに溶解させ、水（１０ｍＬ）及び飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍＬ)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、無色油１．８１ｇを得た。この油をヘプタンに溶解させ、濃縮して、ワックス状固体を得た。固体をヘプタンで磨砕し、濾過し、ヘプタンで洗浄し、乾燥させて、１ｄを０．７９ｇ（４２％）得た。この化合物はチロシナーゼの非常に強力な阻害剤であり（ＥＣ50０．０００３９ｍＭ）、２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）よりもかなり優れていた（表Ｉ参照）。
【００８３】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．２４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；８．０７（ｓ，１Ｈ）；６．４５（ｓ，１Ｈ）；４．９５（ｓ，２Ｈ）；２．３９０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ）；１．５３（ｍ，２Ｈ）；１．２４（ｍ，８Ｈ）；０．８５（ｍ，３Ｈ）。
【００８４】
実施例６
オクタン酸無水物を用いた酵素的エステル化による５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルオクタノエート（１ｄ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；１．０４ｇ；７．３２ミリモル）をアセトニトリル２０ｍＬ中でスラリー化し、オクタン酸無水物（２．９０ｇ；８．０５ミリモル；１．１当量）を添加した。Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（０．３３ｇ）を添加し、混合物を周囲温度で１２時間撹拌した。ＨＰＬＣ分析によれば、２ａは１ｃに完全に消費されていた。反応混合物を濾過し、濾液を周囲温度で減圧濃縮した。残渣をヘプタンに溶解させ、水：炭酸水素ナトリウム飽和水溶液：メタノールの１：１：１混合物（３×３０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮し、フラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、２：１酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、１ｄとオクタン酸の混合物１．９１ｇを得た。この物質を最小容量の熱ヘプタンから周囲温度まで冷却されることによって再結晶化させて１ｄを１．３８ｇ（７０％）得た。
【００８５】
比較例４
２−ヒドロキシメチル−４Ｈ−ピラン−４−オン−５−イルオクタノエート（６ｄ）の製造
２−クロロ−１−メチルピリジニウムヨージド（１．８４ｇ；７．１９ミリモル；１．２当量）及びオクタン酸（０．９５ｍＬ；６．００ミリモル；１．０当量）をジクロロメタン１０ｍＬ中でスラリー化した。トリエチルアミン（２．０１ｍＬ；１４．３９ミリモル；２．４当量）を添加し、混合物を周囲温度で１５分間撹拌した。２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；８５２ｍｇ；６．００ミリモル）を添加し、ジクロロメタン５ｍＬで洗浄した。混合物は約３０分かけて黄色から淡褐色の(tan)スラリーへと脱色された。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。ｔｌｃ（３：２酢酸エチル：ヘプタン）によって、大きいスポット１つと小さいスポット１つが得られた。この混合物を濾過し、沈殿物をジクロロメタンで洗浄した。合した濾液を濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、３：２〜４：１の酢酸エチル：ヘプタンの溶媒勾配によって溶離させて、６ｄを８６４ｍｇ（５４％）得た。この化合物は、２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）に比較してそれほど強力でないチロシナーゼの阻害剤であった（ＥＣ50０．１８ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００８６】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ８．４５（ｓ，１Ｈ）；６．４２（ｓ，１Ｈ）；５．７６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０５Ｈｚ）；４．３４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．５０Ｈｚ）；２．５４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ）；１．６５〜１．５５（ｍ，２Ｈ）；１．３８〜１．２５（ｍ，８Ｈ）；０．８６（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ）。
【００８７】
比較例５
２−オクタノイルオキシメチル−４Ｈ−ピラン−４−オン−５−イルオクタノエート（７ｄ）の製造
２−クロロ−１−メチルピリジニウムヨージド（２．１６ｇ；８．４４ミリモル；２．４当量）及びオクタン酸（１．２８ｍＬ；８．４４ミリモル；２．４当量）をジクロロメタン１０ｍＬ中でスラリー化した。トリエチルアミン（２．３５ｍＬ；１６．９ミリモル；４．８当量）を添加し、混合物を周囲温度で１５分間撹拌した。２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；５００ｍｇ；３．５２ミリモル）を添加し、ジクロロメタン５ｍＬで洗浄した。混合物は最初はほとんど均一な黄色溶液になり、次いで約３０分かけて淡褐色のスラリーに変化した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。ｔｌｃ（３：２酢酸エチル：ヘプタン）によって、単一のスポットが得られた。この混合物を濾過し、沈殿物をジクロロメタンで洗浄した。合した濾液を濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、２：１酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、７ｄを１．０７ｇ（８３％）得た。この化合物は、弱いチロシナーゼ阻害剤であった（ＥＣ50＞１．０ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００８８】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ８．５１（ｓ，１Ｈ）；６．５７（ｓ，１Ｈ）；５．００（ｓ，２Ｈ）；２．５５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；２．４１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．６２〜１．４９（ｍ，４Ｈ）；１．３０〜１．２５（ｍ，１６Ｈ）；０．８８〜０．８３（ｍ，６Ｈ）。
【００８９】
実施例７
５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルリポエート（１ｅ）の製造
Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（４００ｍｇ；８０重量％）及び乾燥４Ａ分子篩（１ｇ；２重量当量）をフラスコに加えた。２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；５００ｍｇ；３．５２ミリモル）を添加し、アセトニトリル１０ｍＬで洗浄した。リポ酸（１．０ｇ；４．８５ミリモル；１．３８当量）を添加し、混合物を一晩５０℃まで加熱した。その時点でｔｌｃ分析（酢酸エチル溶離剤）は１ｅへの転化を示した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。粗製生成物を酢酸エチルに溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。粗製生成物をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、４：１酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、１ｅを３５０ｍｇ（３０％）得た。この化合物はチロシナーゼの極めて強力な阻害剤であり（ＥＣ50０．０００９３ｍＭ）、２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）よりもかなり優れていた（表Ｉ参照）。
【００９０】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．２０（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；８．０８（ｓ，１Ｈ）；６．４６（ｓ，１Ｈ）；４．９５（ｓ，２Ｈ）；３．６５〜３．５６（ｍ，１Ｈ）；３．２３〜３．０６（ｍ，２Ｈ）；２．４６〜２．３５（ｍ，１Ｈ）；２．２１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ）；１．９２〜１．８０（ｍ，１Ｈ）；１．６８〜１．４６（ｍ，４Ｈ）；１．４２〜１．３２（ｍ，２Ｈ）。
【００９１】
実施例８
４−ヒドロキシベンジルアセテート（１ｆ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（３．５ｇ；２８．２ミリモル）をアセトニトリル２０ｍＬ中でスラリー化した。酢酸ビニル（３．６４ｍＬ；３９．５ミリモル；１．４当量）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（５００ｍｇ；１４重量％）を添加した。反応混合物を周囲温度で６時間撹拌した。その時点でｔｌｃ分析（１：１酢酸エチル：ヘプタン溶離剤）は２ｂを示さず、大きい単一の無極性スポットを示した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮して、１ｆを４．６７ｇ（９９％）得た。この化合物はチロシナーゼの阻害剤であり（ＥＣ50０．０３８ｍＭ）、２ｂ（ＥＣ50０．１９ｍＭ）よりも強力であった（表Ｉ参照）。
【００９２】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；７．１７（ｍ，２Ｈ）；６．７４（ｍ，２Ｈ）；４．９３（ｓ，２Ｈ）；２．０１（ｓ，３Ｈ）。
【００９３】
比較例６
４−アセトキシベンジルアルコール（６ｆ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５００ｍｇ；４．０３ミリモル）をジクロロメタン１５ｍＬ中でスラリー化した。トリエチルアミン（０．８４ｍＬ；６．０４ミリモル；１．５当量）を添加し、次いで無水酢酸（０．３９ｍＬ；４．０３ミリモル；１．０当量）を滴加した。不均一な混合物が３０分かけて均一になり、それを周囲温度で一晩撹拌した。ｔｌｃ分析（１：１酢酸エチル：ヘプタン）によれば、６ｆに部分転化されていた。反応混合物を濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、３：２ヘプタン：酢酸エチルで溶離させて、６ｆを３９０ｍｇ（５８％）得た。この化合物は２ｂ（ＥＣ50０．１９ｍＭ）に比較してそれほど強力でないチロシナーゼの阻害剤であった（ＥＣ50０．９２ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００９４】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ７．３４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．９７Ｈｚ）；７．０６（ｍ，２Ｈ）；５．２１５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．７７Ｈｚ）；４．４９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．７７Ｈｚ）；２．２６（ｓ，３Ｈ）。
【００９５】
実施例９
４−ヒドロキシベンジルプロピオネート（１ｇ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５３０ｍｇ；４．２７ミリモル）をアセトニトリル１４ｍＬに溶解させた。プロピオン酸（２．０ｍＬ；２６．８ミリモル；６．３当量）を添加し、Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（６２５ｍｇ；１．１７重量当量）及び乾燥４Ａ分子篩（９００ｍｇ；１．７重量当量）を添加した。反応混合物を一晩撹拌し且つ５０℃まで加熱した。その時点でＨＰＬＣ分析は１ｇへの約３０％の転化を示した。反応混合物を濾過し、沈殿物をアセトニトリル及びトルエンで洗浄した。合した濾液／洗液を濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、１：４酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、１ｇを１８５ｍｇ（２４％）を無色油として得た。この化合物はチロシナーゼの強力な阻害剤であり（ＥＣ50０．０１７ｍＭ）、２ｂ（ＥＣ50０．１９ｍＭ）よりもはるかに優れていた（表Ｉ参照）。
【００９６】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．５０（ｓ，１Ｈ）；７．１７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２５Ｈｚ）；６．７４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．９７Ｈｚ）；４．９４（ｓ，２Ｈ）；２．３１（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．０２（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）。
【００９７】
実施例１０
プロピオン酸無水物を用いた酵素的エステル化による４−ヒドロキシベンジルプロピオネート（１ｇ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５．００ｇ；４０．３ミリモル）をアセトニトリル１００ｍＬに溶解させた。無水プロピオン酸（６．２０ｍＬ；４８．３ミリモル；１．２当量）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（０．２５ｇ）を添加した。混合物を周囲温度で１８時間撹拌した。ＨＰＬＣ分析によれば、２ｂはほとんど完全に１ｇに転化されていた。反応混合物を濾過し、濾液を周囲温度で減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（２×２５ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮し、粗製生成物をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過して、１ｈ（５．８４ｇ；８０％）を無色油として得た。
【００９８】
比較例７
４−プロピオニルオキシベンジルアルコール（６ｇ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５００ｍｇ；４．０３ミリモル）をジクロロメタン１５ｍＬ中でスラリー化した。トリエチルアミン（０．８４ｍＬ；６．０４ミリモル；１．５当量）を添加し、次いで無水プロピオン酸（０．５２ｍＬ；４．０３ミリモル；１．０当量）を滴加した。不均一混合物が１分以内に均一になった。反応混合物をＲＴで一晩撹拌した。ｔｌｃ分析（１：１酢酸エチル：ヘプタン）によって、大きいスポット１つ及び小さいスポット１つが得られた。混合物を濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、３：２ヘプタン：酢酸エチルで溶離させて、６ｇを４４２ｍｇ（６１％）得た。この化合物は２ｂ（ＥＣ50０．１９ｍＭ）に比較してそれほど強力でないチロシナーゼの阻害剤であった（ＥＣ50１．０１ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００９９】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ７．３４（ｍ，２Ｈ）；７．０６（ｍ，２Ｈ）；５．２２（ｂｒ ｔ，１Ｈ）；４．４９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．９４Ｈｚ）；２．５９（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．１３（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）。
【０１００】
比較例８
４−プロピオニルオキシベンジルプロピオネート（６ｇ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５００ｍｇ；４．０３ミリモル）をジクロロメタン１５ｍＬ中でスラリー化した。トリエチルアミン（１．４０ｍＬ；１０．１ミリモル；２．５当量）を添加し、次いで無水プロピオン酸（１．１４ｍＬ；８．９ミリモル；２．２当量）を滴加した。不均一混合物が１５分かけて均一になり、これを周囲温度で一晩撹拌した。ｔｌｃ分析（１：１酢酸エチル：ヘプタン）によって、単一の無極性スポットが得られた。反応混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解させた。有機溶液を１．５Ｍ ＨＣｌ（２０ｍＬ)及び飽和炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。この有機溶液の濃縮により、７ｇが９２３ｍｇ（９７％）得られた。この化合物は弱いチロシナーゼ阻害剤であった（ＥＣ50＞１０ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【０１０１】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ７．４０（ｍ，２Ｈ）；７．１２（ｍ，２Ｈ）；５．０８（ｓ，２Ｈ）；２．６０（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；２．３７（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．１３（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．０４（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）。
【０１０２】
実施例１１
ヘキサン酸無水物を用いた酵素的エステル化による４−ヒドロキシベンジルヘキサノエート（１ｈ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５００ｍｇ；４．０３ミリモル）をアセトニトリル１０ｍＬに溶解させた。無水ヘキサン酸（１．１２ｍＬ；４．８３ミリモル；１．２当量）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（１２０ｍｇ）を添加した。混合物を周囲温度で７．５時間撹拌した。ＨＰＬＣ分析によれば、２ｂはほとんど完全に１ｈに転化されていた。混合物を濾過し、濾液を周囲温度で減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（３×１０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、１ｈ（８３２ｍｇ；９３％）を無色油として得た。この化合物はチロシナーゼの強力な阻害剤であり（ＥＣ50０．０４９ｍＭ）、２ｂ（ＥＣ50０．１９ｍＭ）よりも優れていた（表Ｉ参照）。
【０１０３】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．４９（ｓ，１Ｈ）；７．１７〜７．１４（ｍ，２Ｈ）；６．７６〜６．７１（ｍ，２Ｈ）；４．９４（ｓ，２Ｈ）；２．２８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．５６〜１．４６（ｍ，２Ｈ）；１．３１〜１．２１（ｍ，４Ｈ）；０．８３（ｍ，３Ｈ）。
【０１０４】
実施例１２
４−ヒドロキシベンジルオクタノエート（１ｉ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（２５０ｍｇ；２．０２ミリモル）をアセトニトリル５ｍＬに溶解させた。オクタン酸（５００μＬ；３．３ミリモル；１．６３当量）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（２００ｍｇ；８０重量％）及び４Ａ分子篩（５００ｍｇ；２重量当量）を添加した。混合物を一晩、撹拌及び５０℃まで加熱した。混合物を周囲温度に冷却し、濾過し、沈殿物をアセトニトリルで洗浄した。合した濾液を濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を乾燥させ（硫酸マグネシウム）、濃縮し、粗製生成物をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、１：４酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、若干の残留オクタン酸を含む１ｉを９６０ｍｇ得た。
【０１０５】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．４８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；７．１８〜７．１３（ｍ，２Ｈ）；６．７５〜６．７１（ｍ，２Ｈ）；４．９４（ｓ，２Ｈ）；２．２８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．５１（ｍ，２Ｈ）；１．２２（ｍ，８Ｈ）；０．８４（ｍ，３Ｈ）。
【０１０６】
実施例１３
エステル交換による４−ヒドロキシベンジルオクタノエート（１ｉ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアセテート（１ｆ）（８３ｍｇ；０．５０ミリモル）をトルエン１．５ｍＬに溶解させた。オクタン酸（１５８μＬ；１．０ミリモル；２．０当量）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（６０ｍｇ）を添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌した。この時点でＨＰＬＣ分析は１ｉへの５８．１％の転化を示した（１ｆ ４０．４％及び４−ヒドロキシベンジルアルコール１．４％も観察された）。
【０１０７】
実施例１４
Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ Ａ−２１の存在下におけるエステル交換による４−ヒドロキシベンジルオクタノエート（１ｉ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアセテート（１ｆ）（８３ｍｇ；０．５０ミリモル）及び乾燥Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ Ａ−２１（８３ｍｇ；１重量当量）をトルエン１．５ｍＬ中で合した。オクタン酸（１５８μＬ；１．０ミリモル；２．０当量）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（６０ｍｇ）を添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌した。この時点でＨＰＬＣ分析は１ｉへの８８．２％の転化を示した（１ｆ １１．１％及び４−ヒドロキシベンジルアルコール０．８％も観察された）。
【０１０８】
実施例１５
４−ヒドロキシベンジルリポエート（１ｊ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５２０ｍｇ；４．１９ミリモル；１．２４当量）をアセトニトリル１０ｍＬに溶解させた。リポ酸（０．７０ｇ；３．３９ミリモル）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（１５０ｍｇ）及び４Ａ分子篩（１ｇ）を添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌した。混合物を周囲温度に冷却し、濾過し、沈殿物をアセトニトリルで洗浄した。合した濾液を濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濃縮し、粗製生成物をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、１：４酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、１ｊを１８４ｍｇ（１６％）得た。
【０１０９】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．５０（ｓ，１Ｈ）；７．１８〜７．１４（ｍ，２Ｈ）；６．７５〜６．７０（ｍ，２Ｈ）；４．９４（ｓ，２Ｈ）；３．６２〜３．５２（ｍ，１Ｈ）；３．２７〜３．０６（ｍ，２Ｈ）；２．４３〜２．３５（ｍ，１Ｈ）；２．３１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ）；１．８９〜１．７８（ｍ，１Ｈ）；１．６８〜１．４６（ｍ，４Ｈ）；１．３９〜１．２３（ｍ，２Ｈ）。
【０１１０】
実施例１６
溶媒を用いない混合脂肪酸エステルからの２−アシルオキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（１ｋ）の製造
Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（１００ｍｇ）及び２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；１００ｍｇ；０．７７７０ミリモル）をバイアルに加え、パッションフルーツ油からの混合エチルエステル２ｍＬを添加した。混合物を一晩６０℃まで加熱した。その時点でｔｌｃ分析（酢酸エチル溶離剤）は１ｋへのかなりの転化を示した。
【０１１１】
チロシナーゼは、チロシンからメラニンに至る生合成経路における最初の２つの工程を触媒する役割を担っている。チロシナーゼはチロシンをジヒドロキシフェニルアラニン（Ｌ−ＤＯＰＡ）へとヒドロキシル化し、続いてＬ−ＤＯＰＡをドーパキノンへと酸化する。種々の化合物のチロシナーゼ阻害活性を測定するための本発明者らの方法は、４７５ｎｍにおけるドーパキノンの分光光度の出現によってＬ−ＤＯＰＡのドーパキノンへの酸化工程に目を向ける。酵素アッセイは主としてＺｈａｎｇ，ＪＰ．，Ｃｈｅｎ，ＱＸ．，Ｓｏｎｇ，ＫＫ．，＆Ｘｉｅ，ＪＪ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２００６，９５，５７９−５８４に記載された方法に基づいた。
【０１１２】
問題の化合物を、水性環境への溶解度について評価する。水若しくはジメチルスルホキシド中の適当な稀釈液を調製する。広範囲の稀釈液を原液から調製して、典型的には１０ｎＭ〜１０ｍＭの最終阻害剤濃度を測定する。
【０１１３】
アッセイ混合物は、５０ｍＭ Ｎａ2ＨＰＯ4／ＮａＨ2ＰＯ4（ｐＨ７．０）及び０．５ｍＭ Ｌ−ＤＯＰＡからなる。酵素反応は、マッシュルームのチロシナーゼ（Ｓｉｇｍａ Ｔ３８２４）を１８単位添加することによって開始する。チロシナーゼ活性のベースライン初速度を、１ｍｌの反応様式で３０℃においてＢｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ ＤＵ ８００ ＵＶ／Ｖｉｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒを用いて４７５ｎｍで測定し、次いで阻害剤溶液の２５μｌアリコートを添加／混合し、速度の変化を記録する。速度の変化は、阻害剤の存在によるチロシナーゼの％阻害に関係する。存在する全てのＤＭＳＯの阻害作用は、最終濃度を２．５％まで制限し且つ各アッセイに関してＤＭＳＯブランクを用いて全てのバックグラウンド阻害を明らかにすることによって、最小にする。
【０１１４】
チロシナーゼ阻害度は、チロシナーゼを５０％阻害するのに必要な阻害剤の濃度、ＥＣ50値に換算して判定した。これは、阻害剤濃度の対数(log)を速度応答(rate response)（％阻害）に対してプロットすることによってＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｚｍ（登録商標）Ｖｅｒｓｉｏｎ ４に生じたＳ字形用量反応曲線によって求めた。本発明の種々の実施例及び他の比較例に関するデータを以下の表Ｉに記載する。
【０１１５】
【表１】
【０１１６】
本発明を特にその好ましい態様に関して詳述したが、本発明の精神及び範囲内で変形及び変更が可能なことがわかるであろう。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メラニン形成を減少させる置換ヒドロキシアリール又はヒドロキシピラノンメタノールのエステルを基材とする組成物に関する。本発明の別の態様は前記組成物及びエステルの製造方法並びに前記組成物の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の高色素沈着は、チロシンから形成される黒色色素であるメラニンの形成に直接関係する。チロシンからメラニンへの転化の最初の工程には、酵素チロシナーゼが介在する。チロシナーゼの有効な阻害剤は、メラニン形成を阻害することができ、皮膚の不所望な色素沈着の減少（例えば皮膚美白化(skin brightening)、肌の色合い(tone)の均一化又はしみの発生の減少）に有用である。現在のところ、ヒドロキノン、コウジ酸及びアルブチンを含むいくつかのチロシナーゼ阻害剤が市場に出回っている。しかし、これらの製品はいずれにも欠点がある。例えばコウジ酸はバイオアベイラビリティが低いので、効果が充分とは言えない。別の例であるヒドロキノンは空気、光及びチロシナーゼ自体で酸化される。ヒドロキノンのこのような酸化生成物は皮膚炎、そしておそらくは細胞毒性に関係している。
【０００３】
コウジ酸は、皮膚美白化成分としてよく使用される。これは、安全であり且つ局所使用に有効であることがわかっている真菌代謝産物である（非特許文献１に概説されている）。コウジ酸のモノエステル及びジエステルも文献記載されており（特許文献１）、皮膚のメラニン形成を阻害するような優れたチロシナーゼ阻害活性を有するようである。この阻害作用は、皮膚の美白化に優れた効果をもたらすことができる。
【０００４】
親分子がエノールアルコール（又はフェノール）と第一アルコールを共に有するので、コウジ酸又は４−ヒドロキシベンジルアルコールからは２つの異なるモノエステルが製造される可能性がある。特許文献１に報告されているコウジ酸のモノエステルは、高温条件下で化学的方法によって製造され、第一アルコールのエステルを生じた。使用する激しい条件は、熱的に不安定な反応相手には適さないであろう。コウジ酸はエノール酸素で特異的に酵素的にアシル化されることが報告されている（非特許文献２）。矛盾した報告であるが、特許文献２は、コウジ酸が、アシル化剤として酸又はビニルエステルを用いる場合に、ヒドロキシメチル酸素で酵素的にアシル化されることを示した。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第４，３６９，１７４号（Ｎａｇａｉ，Ｓ．；Ｉｚｕｍｉ，Ｔ．）
【特許文献２】特願２００２−２５７７０４（特開２００３−１５５２８３）
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｂｕｒｄｏｃｋ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ３３：８０−１０１
【非特許文献２】Ｌｉｕ，Ｋ．−Ｊ．；Ｓｈａｗ，Ｊ．−Ｆ．Ｊ．Ａｍ．Ｏｉｌ Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９８，７５，１５０７−１５１１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
バイオアベイラビリティがより高く且つより有効な阻害剤は皮膚炎を起こさずに顕著な美白化のメリットを与える可能性を更に増す。他のメリットとしては、使いやすさ、改善された保存寿命及び減少した適用頻度が挙げられる。本発明の目的は、このような化合物及び組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の一態様は、酵素の存在下で及び有機溶媒の存在下又は不存在下において、式２：
【０００９】
【化１】
【００１０】
で表されるアルコールを式３：
【００１１】
【化２】
【００１２】
の酸誘導体と反応させることを含んでなる式１：
【００１３】
【化３】
【００１４】
で表されるエステル化合物の製造方法に関する。ＲはＣ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、置換ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル［置換基はＣ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2はフェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）からなる群から選ばれる］、及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれる。Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物から選ばれる。更に、Ｒ4は水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキル及びＣ2〜Ｃ4アルケニルからなる群から選ばれる。
【００１５】
別の態様は、酵素の存在下で及び有機溶媒の存在下又は不存在下において、式４：
【００１６】
【化４】
【００１７】
で表されるエステルを式３：
【００１８】
【化５】
【００１９】
の酸誘導体と反応させることを含んでなる式１：
【００２０】
【化６】
【００２１】
で表されるエステル化合物の製造方法に関する。ＲはＣ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれる。Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物からなる群から選ばれる。更に、Ｒ4が水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキル及びＣ2〜Ｃ4アルケニルからなる群から選ばれ、Ｒ5が水素又はＣ1〜Ｃ4アルキルである。
【００２２】
更に別の態様は、酵素の存在下で及び有機溶媒の存在下又は不存在下において、式２：
【００２３】
【化７】
【００２４】
で表されるアルコールを式５：
【００２５】
【化８】
【００２６】
で表される酸無水物と反応させることを含んでなる式１：
【００２７】
【化９】
【００２８】
で表されるエステル化合物の製造方法に関する。ＲはＣ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、Ｒ1はＣ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物からなる群から選ばれる。更に、Ｒ6がＣ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物から選ばれる。
【００２９】
更に別の態様は、式１：
【００３０】
【化１０】
【００３１】
で表されるエステル化合物及び化粧品用として許容され得る担体を含んでなる皮膚の美白化組成物に関する。Ｒは、Ｃ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物からなる群から選ばれる。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
本発明の一態様は、コウジ酸及びヒドロキシベンジルアルコールモノエステル並びにエステルがエノール酸素ではなく一級酸素において形成された関連物質を製造するための穏やかで、簡単で且つ新規な生体触媒による方法に関する。これらの化合物は、極めて有効なチロシナーゼ阻害剤としてとして作用する。
【００３３】
本発明の一態様は、一般式１：
【００３４】
【化１１】
【００３５】
［式中、ＲはＣ6〜Ｃ22炭素環式ヒドロキシアリール、置換ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及び置換若しくは非置換のＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）から選ばれ、及び
Ｒ1は置換及び非置換の分岐及び直鎖飽和Ｃ1〜Ｃ22アルキル、置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ6〜Ｃ22トリエニル並びに置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル又はそれらの混合物から選ばれる］
で表されるエステル化合物の製造方法に関する。
【００３６】
Ｒが表すことができるアリール基としては、フェニル、ナフチル又はアントラセニル、並びにヒドロキシル基及び１〜３個の追加置換基で置換されたフェニル、ナフチル又はアントラセニルが挙げられ、前記追加置換基はＣ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2はフェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）から選ばれる。
【００３７】
Ｒが表すことができるヘテロアリール基としては、酸素、硫黄及び窒素から選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５員又は６員ヒドロキシ置換芳香環が挙げられる。このようなヘテロアリール基の例はヒドロキシチエニル、ヒドロキシフリル、ヒドロキシピロリル、ヒドロキシイミダゾリル、ヒドロキシピラゾリル、ヒドロキシチアゾリル、ヒドロキシイソチアゾリル、ヒドロキシオキサゾリル、ヒドロキシイソオキサゾリル、ヒドロキシトリアゾリル、ヒドロキシチアジアゾリル、ヒドロキシオキサジアゾリル、ヒドロキシテトラゾリル、ヒドロキシピリジル、ヒドロキシピリミジル、ヒドロキシベンゾオキサゾリル、ヒドロキシベンゾチアゾリル、ヒドロキシベンズイミダゾリル、ヒドロキシインドリルなどである。ヘテロアリール基は、例えばＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノのような３個以下の追加の基で置換されることができる。ヘテロアリール基はまた、縮合環系、例えばベンゾ又はナフト残基で置換されることができ、前記ベンゾ又はナフト残基は例えば、前記文中に記載した基３個以下で置換されていても非置換でもよい。
【００３８】
用語「ハロゲン」はフッ素、塩素、臭素及びヨウ素を含めるために用いる。
【００３９】
Ｒ1が表すことができるアルキル、アルケニル、ジエニル、トリエニル及びテトラエニル基は、炭素原子が約２０以下の直鎖又は分岐鎖脂肪族炭化水素基であることができ、例えば、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、シアノ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルオキシ、ヒドロキシ、アリール、ヘテロアリール、チオール、チオエーテル、ジチオラン及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されることができる。用語「Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ」、「Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル」及び「Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルオキシ」は、それぞれ、構造−ＯＲ3、−ＣＯ2Ｒ3及び−ＯＣＯＲ3（Ｒ3はＣ1〜Ｃ6アルキル又は置換Ｃ1〜Ｃ6アルキルである）に対応する基を示すのに用いる。
【００４０】
現在好ましい本発明の化合物はＲがフェノール及び置換ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルから選ばれる式１の化合物である。特に好ましい化合物はＲが４−ヒドロキシフェニルであり且つＲ1がＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基から選ばれる構造１並びにＲが５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルであり且つＲ1がＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基及び４−（１，２−ジチオラン−３−イル）−１−ブチルから選ばれる構造１で表される。
【００４１】
この方法は、酵素の存在下で及び有機溶媒の存在下又は不存在下において、アルコール２：
【００４２】
【化１２】
【００４３】
を式３：
【００４４】
【化１３】
【００４５】
の酸誘導体と反応させて望ましいエステル１を形成することを含む。前記アルコール２の置換基Ｒ及び前記酸誘導体３のＲ1は前に定義した通りであり、前記酸誘導体の置換基Ｒ2は水素、Ｃ1〜Ｃ4置換又は非置換アルキル基及びＣ2〜Ｃ4アルケニル基から選ばれる。Ｃ1〜Ｃ4アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチルなどが挙げられる。Ｃ2〜Ｃ4アルケニル基の例としては、ビニル、１−プロペニル、１−イソプロペニル、１−ブテニルなどが挙げられる。好ましい置換基Ｒ4としては、水素、メチル、エチル及びビニルが挙げられ、水素及びビニルが最も好ましい。
【００４６】
この方法は、更なる溶媒を用いずに、或いは任意的に環状若しくは非環状エーテル溶媒（例えばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル若しくはテトラヒドロフラン）、芳香族炭化水素（例えばベンゼン、トルエン若しくはキシレン）、脂肪族若しくは脂環式飽和若しくは不飽和炭化水素（例えばヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン若しくはリモネン）、ハロゲン化炭化水素（例えばジクロロメタン、ジクロロエタン、ジブロモエタン、テトラクロロエチレン若しくはクロロベンゼン）、極性非プロトン性溶媒（例えばアセトニトリル、ジメチルホルムアミド若しくはジメチルスルホキシド）又はそれらの混合物から選ばれた不活性溶媒中で実施できる。好ましい溶媒はトルエン及びアセトニトリルである。この方法は、約−１００℃〜溶媒の沸点、好ましくは約０〜７０℃、最も好ましくは２０〜６０℃の温度において実施できる。酸誘導体３の量は、２に基づき、０．８５〜２０当量であることができ、好ましくは１〜１０当量である。この方法に使用する酵素はプロテアーゼ、リパーゼ又はエステラーゼから選ばれる。好ましい酵素はリパーゼである。これらのリパーゼは細胞全体、単離天然酵素の形態であることもできるし、担体に固定させることもできる。これらのリパーゼの例としては、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ−Ｃ（セラミックに固定されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ−Ｄ（珪藻土に固定されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐｏｐｒｉｍｅ ５０Ｔ、Ｌｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ又はＮｏｖｏｚｙｍ ４３５（アクリル樹脂に固定されたＣａｎｄｉｄａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａに由来）が挙げられるが、これらに限定するものではない。
【００４７】
この方法は、任意的に、分子篩（モレキュラーシープ）又はイオン交換樹脂から選ばれた種々の追加物の存在下で、実施できる。特に好ましいのは分子篩である。これは、これらの材料が反応の間に発生する水又は低級鎖アルコールのような副生成物を除去できるからである。これらの例には、３Ａ、４Ａ及び５Ａ分子篩がある。
【００４８】
この方法の生成物は、当業者に知られた方法、例えば抽出、濾過又は結晶化を用いて単離できる。生成物１は、必要ならば、当業者に知られた方法、例えば抽出、クロマトグラフィー、蒸留又は結晶化を用いて精製できる。
【００４９】
本発明の別の態様は、酸素の存在下で及び有機溶媒の存在下又は不存在下において、エステル４：
【００５０】
【化１４】
【００５１】
を式３：
【００５２】
【化１５】
【００５３】
の酸誘導体とエステル交換して所望のエステル１を形成することを含む。前記エステル４の置換基Ｒ並びに前記酸誘導体のＲ1及びＲ4は前に定義した通りであり、前記エステル４の置換基Ｒ5は水素及びＣ1〜Ｃ4置換又は非置換アルキル基から選ばれる。Ｃ1〜Ｃ4アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチルなどが挙げられる。好ましい置換基Ｒ5としては、水素、メチル及びエチルが挙げられる。
【００５４】
この方法は、更なる溶媒を用いずに、或いは任意的に環状若しくは非環状エーテル溶媒（例えばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル若しくはテトラヒドロフラン）、芳香族炭化水素（例えばベンゼン、トルエン若しくはキシレン）、脂肪族若しくは脂環式飽和若しくは不飽和炭化水素（例えばヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン若しくはリモネン）、ハロゲン化炭化水素（例えばジクロロメタン、ジクロロエタン、ジブロモエタン、テトラクロロエチレン若しくはクロロベンゼン）、極性非プロトン性溶媒（例えばアセトニトリル、ジメチルホルムアミド若しくはジメチルスルホキシド）又はそれらの混合物から選ばれた不活性溶媒中で実施できる。好ましい溶媒はトルエン及びアセトニトリルである。この方法は、約−１００℃〜溶媒の沸点、好ましくは約０〜７０℃、最も好ましくは２０〜６０℃の温度において実施できる。酸誘導体３の量は、４に基づき、０．８５〜２０当量であることができ、好ましくは１〜１０当量である。この方法に使用する酵素はプロテアーゼ、リパーゼ又はエステラーゼから選ばれる。好ましい酵素はリパーゼである。これらのリパーゼは細胞全体、単離天然酵素の形態であることもできるし、担体に固定させることもできる。これらのリパーゼの例としては、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ−Ｃ（セラミックに固定されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ−Ｄ（珪藻土に固定されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐｏｐｒｉｍｅ ５０Ｔ、Ｌｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ又はＮｏｖｏｚｙｍ ４３５（アクリル樹脂に固定されたＣａｎｄｉｄａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａに由来）が挙げられるが、これらに限定するものではない。
【００５５】
この方法は任意的に、分子篩又はイオン交換樹脂から選ばれた種々の追加物の存在下で実施できる。特に好ましいのはイオン交換樹脂である。これらの樹脂の例は、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）又はＡｍｂｅｒｌｙｓｔ（登録商標）弱塩基性樹脂、例えばＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ−９５、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ−９４及びＡｍｂｅｒｌｙｓｔ Ａ−２１であるが、任意の弱塩基性樹脂が許容され得るようである。
【００５６】
この方法の生成物は、当業者に知られた方法、例えば抽出、濾過又は結晶化を用いて単離できる。生成物１は、必要ならば、当業者に知られた方法、例えば抽出、クロマトグラフィー、蒸留又は結晶化を用いて精製できる。
【００５７】
本発明の別の実施態様は、酸素の存在下で及び有機溶媒の存在下又は不存在下において、アルコール２：
【００５８】
【化１６】
【００５９】
を式５：
【００６０】
【化１７】
【００６１】
の酸無水物と反応させて、所望のエステル１を形成することを含む。前記アルコール２の置換基Ｒ及び前記酸無水物５のＲ1は前に定義した通りであり、前記酸無水物の置換基Ｒ6は、置換及び非置換の分岐及び直鎖飽和Ｃ1〜Ｃ22アルキル、置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、置換及び非置換分岐及び直鎖Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、並びに置換及び非置換の分岐及び直鎖Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル又はそれらの混合物から選ばれる。好ましい酸無水物としてはＲ1とＲ6が同一のものが挙げられる。
【００６２】
この方法は、更なる溶媒を用いずに、或いは任意的に環状若しくは非環状エーテル溶媒（例えばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル若しくはテトラヒドロフラン）、芳香族炭化水素（例えばベンゼン、トルエン若しくはキシレン）、脂肪族若しくは脂環式飽和若しくは不飽和炭化水素（例えばヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン若しくはリモネン）、ハロゲン化炭化水素（例えばジクロロメタン、ジクロロエタン、ジブロモエタン、テトラクロロエチレン若しくはクロロベンゼン）、極性非プロトン性溶媒（例えばアセトニトリル若しくはジメチルホルムアミド）又はそれらの混合物から選ばれた不活性溶媒中で実施できる。好ましい溶媒はトルエン及びアセトニトリルである。この方法は、約−１００℃〜溶媒の沸点、好ましくは約０〜７０℃、最も好ましくは２０〜６０℃の温度において実施できる。酸無水物の量は、２に基づき、０．８５〜２０当量であることができ、好ましくは１〜５当量である。この方法に使用する酵素はプロテアーゼ、リパーゼ又はエステラーゼから選ばれる。好ましい酵素はリパーゼである。これらのリパーゼは細胞全体、単離天然酵素の形態であることもできるし、担体に固定させることもできる。これらのリパーゼの例としては、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ−Ｃ（セラミックに固定されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐａｓｅ ＰＳ−Ｄ（珪藻土に固定されたＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓの種に由来）、Ｌｉｐｏｐｒｉｍｅ ５０Ｔ、Ｌｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ又はＮｏｖｏｚｙｍ ４３５（アクリル樹脂に固定されたＣａｎｄｉｄａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａに由来）が挙げられるが、これらに限定するものではない。
【００６３】
この方法の生成物は、当業者に知られた方法、例えば抽出、濾過又は結晶化を用いて単離できる。生成物１は、必要ならば、当業者に知られた方法、例えば抽出、クロマトグラフィー、蒸留又は結晶化を用いて精製できる。
【００６４】
哺乳類の皮膚におけるチロシンからのメラニン生合成の初期工程は、酵素チロシナーゼによって触媒される。チロシナーゼを阻害する化合物は皮膚色素沈着の減少に有効である。化合物が皮膚色素沈着を減少させる能力は、インビトロ・アッセイでチロシナーゼ阻害活性を測定することによって非常に効果的に予測できる。精製されたチロシナーゼ（通常はマッシュルーム(mushroom)に由来）をチロシナーゼの基質（Ｌ−ＤＯＰＡ）と種々の濃度の被験化合物の存在下でインキュベートする。試験化合物の濃度依存性活性を、比色反応であるＬ−ＤＯＰＡのチロシナーゼ触媒酸化の阻害度として測定する。皮膚美白化合物の活性の他の試験方法は、培養された初代又は継代(immortalized)メラノサイト細胞培養物（多くの場合、ネズミ科動物又はヒト由来）を化合物に暴露し、メラニン産生を測定し、共培養されたメラノサイト、ケラチノサイト及び／若しくは繊維芽細胞を含む再構成皮膚モデルを暴露し、又は皮膚の色又は反射率を監視しながら、ヒト被検者の皮膚に化合物を適用することを含む（例えばVirador et al.Analytical Biochemistry 1999,270,207;Boissy et al.Experimental Dematology 2005,14,601）。
【００６５】
チロシナーゼ阻害アッセイは、試験化合物の潜在的皮膚美白化活性を測定するための一般に認められている方法である（例えば、Um et al.Bioorganic & Medicinal Chemistr 2003,11,5345）。本発明のエステルは酵素チロシナーゼを阻害する強力な能力を示す。
【００６６】
本発明の典型的な皮膚美白化組成物は、本発明に係るエステルを少なくとも０．０００１重量％含む。例えば、この組成物は本発明に係るエステルを約０．０００１％〜約１０．０重量％又は約０．００１％〜約２．０重量％含むことができる。高色素沈着状態がそれほど顕著でない場合並びに皮膚美白化処理後に使用されるサンスクリーン及びサンブロック中にはこれより低濃度も使用でき、より急性の色素沈着状態の場合にはより高濃度も使用できる。推奨範囲は、組成物中に使用される全ての補助成分と使用者の肌色及び肌質並びに高色素沈着問題の重症度によっても異なる。
【００６７】
本発明の皮膚美白化組成物は、エステルに加えて他の皮膚美白化成分を含むこともできる。このような他の成分は当業者に知られている。
【００６８】
典型的には、皮膚部位への局所適用は担体と共に行う。使用する場合には、担体は活性若しくは補助成分の失活又は酸化を引き起こさないという意味において、また、適用皮膚領域に対して副作用を起こさないという意味において不活性である。例えば、本発明に係る化合物は、局所適用を容易にするために、及び場合によっては、もたらされるかもしれない更なる有益な効果（例えば皮膚患部の保湿によって）を提供するように、皮膚科学的に許容され得る担体又は賦形剤と混合して（例えばローション剤、クリーム、軟膏、石けん、スティックなどとして）適用する。多くの製剤が当業界で知られており、その例としては、油及び／若しくはアルコールを含むローション剤並びに皮膚軟化剤、例えばオリーブ油、炭化水素油及びワックス、シリコーン油、他の植物、動物若しくは海産脂肪若しくは油、グリセリド誘導体、脂肪酸若しくは脂肪酸エステル又はアルコール若しくはアルコールエーテル、レシチン、ラノリン及び誘導体、多価アルコール若しくはエステル、ワックスエステル、ステロール、リン脂質など、一般には更にまた乳化剤（非イオン性、陽イオン性又は陰イオン性）が挙げられるが、皮膚軟化剤の一部は本質的に乳化性を有する。これらの同じ一般的成分をローション剤ではなくクリーム中に、又はゲル中に、又は固体スティック中に、成分を種々の割合で用いることによって及び／又はガム若しくは他の形態の親水性コロイドのような増粘剤を含ませることによって、配合することができる。
【実施例】
【００６９】
本発明が提供する方法を以下の例によって更に説明する。
実施例１
５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルアセテート（１ａ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；５００ｍｇ；３．５２ミリモル）をアセトニトリル１０ｍＬ中でスラリー化した。酢酸ビニル（３２４μＬ；３．５２ミリモル；１．０当量）を、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５ １２０ｍｇを添加した。混合物を５０℃まで６時間加熱した。その時点でｔｌｃ分析は１ａへのかなりの転化を示す。酢酸ビニルを更に０．２当量添加し、混合物を一晩加熱して、少量の残留２ａが得られた。酢酸ビニルを更に０．２当量添加し、混合物を５０℃において１２時間加熱した。ｔｌｃ分析によれば、２ａは完全に消費されていた。混合物を温かいうちに濾過して、酵素を除去し、濾液をストリッピングして１ａを０．６４ｇ（９９％）得た。この化合物は、２ａ（ＥＣ50 ０．０１５ｍＭ）よりもかなり優れたチロシナーゼの強力な阻害剤であった（ＥＣ50 ０．００４９ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００７０】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．２４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；８．０８（ｓ，１Ｈ）；６．４７（ｓ，１Ｈ）；４．９３（ｓ，２Ｈ）；２．１０（ｓ，３Ｈ）。
【００７１】
比較例１
２−ヒドロキシメチル−４Ｈ−ピラン−４−オン−５−イルアセテート（６ａ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；１．００ｇ；７．０４ミリモル）をジクロロメタン３０ｍＬ中でスラリー化した。トリエチルアミン（１．４７ｍＬ；１０．６ミリモル；１．５当量）を添加し、次いで無水酢酸（０．６９ｍＬ；７．０４ミリモル；１．０当量）を滴加した。不均一混合物が３０分かけて均一になり、それを一晩撹拌した。ｔｌｃ分析（酢酸エチル溶離剤）によって、中間極性の大きいスポットと無極性スポットを得た。反応混合物を濃縮し、フラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、４：１酢酸エチル：ヘプタン〜１００％酢酸エチルの溶媒勾配を用いて溶離させた。中間スポットのセンターカットを収集し、６ａを４１５ｍｇ（３２％）得た。この化合物は２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）に比較してそれほど強力でないチロシナーゼの阻害剤であった（ＥＣ50０．０８４ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００７２】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ８．４６（ｓ，１Ｈ）；６．４２（ｓ，１Ｈ）；５．７７（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；４．３４（ｂｒ ｓ，２Ｈ）；２．２５（ｓ，３Ｈ）。
【００７３】
実施例２
５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルプロピオネート（１ｂ）の製造
Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（１２０ｍｇ）及び乾燥させた４Ａ分子篩（１ｇ）を５０ｍＬフラスコに加えた。２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；５００ｍｇ；３．５２ミリモル）を加え、アセトニトリル１０ｍＬで洗浄した。プロピオン酸（５２５μＬ；７．０４ミリモル；２当量）を加え、混合物を一晩５０℃まで加熱した。その時点でｔｌｃ分析（酢酸エチル溶離剤）は１ｂへの転化を示した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。粗製生成物をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、４：１酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、１ｂを２８５ｍｇ（４１％）得た。この化合物はチロシナーゼの強力な阻害剤であり（ＥＣ50０．００４６ｍＭ）、２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）よりもかなり優れていた（表Ｉ参照）。
【００７４】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．２５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；８．０９（ｓ，１Ｈ）；６．４６（ｓ，１Ｈ）；４．９５（ｓ，２Ｈ）；２．４２（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．０４（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）。
【００７５】
実施例３
無水プロピオン酸を用いた酵素的エステル化による５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルプロピオネート（１ｂ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；５００ｍｇ；３．５２ミリモル）をアセトニトリル１０ｍＬ中でスラリー化し、無水プロピオン酸（０．５４ｍＬ；４．２ミリモル；１．２当量）を添加した。Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（１２０ｍｇ）を添加し、混合物を周囲温度で５．５時間撹拌した。ＨＰＬＣ及びｔｌｃ分析（酢酸エチル溶離剤）によれば、２ａは１ｂにほとんど完全に転化されていた。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。粗製生成物を酢酸エチルに溶解させ、ヘプタンで稀釈して沈殿物を得た。この沈殿物を収集し、ヘプタンで洗浄し、乾燥させた。この濾液を濃縮乾固し、得られた固体をヘプタンで磨砕し、濾過し、ヘプタンで洗浄し、乾燥させた。合した固形分（５７６ｍｇ；８３％）は1Ｈ ＮＭＲによって純粋な１ｂと分析された。
【００７６】
比較例２
２−ヒドロキシメチル−４Ｈ−ピラン−４−オン−５−イルプロピオネート（６ｂ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；８５２ｍｇ；６．００ミリモル）をジクロロメタン３０ｍＬ中でスラリー化した。周囲温度でトリエチルアミン（１．２５ｍＬ；９．０ミリモル；１．５当量）を添加し、次いで無水プロピオン酸（０．７７ｍＬ；６．０ミリモル；１．０当量）を滴加した。反応混合物が１分以内で均一になり、それを一晩撹拌した。ｔｌｃ（酢酸エチル溶離剤）によって、１つの大きいスポットを得た。揮発分をストリッピングし、残渣を酢酸エチルで稀釈し、１Ｍ ＨＣｌ（１５ｍＬ）及び飽和炭酸水素ナトリウム（１５ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、粗製生成物０．９２ｇを得た。1Ｈ ＮＭＲによるこの粗製生成物の分析は、少量の２ａ、少量の２ａのジプロピオネート（７ｂ）及び９０：１０の比で６ｂ及び１ｂを示した。混合物をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、１：１酢酸エチル：ヘプタン〜４：１酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、６ｂを４７６ｍｇ（４０％）得た。この化合物は２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）に比較してそれほど強力でないチロシナーゼの阻害剤であった（ＥＣ50０．１０ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００７７】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ８．４６（ｓ，１Ｈ）；６．４２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝０．８２Ｈｚ）；５．７６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０５Ｈｚ）；４．３４（ｄｄ，２Ｈ；Ｊ＝０．８２，６．０５Ｈｚ）；２．５８（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．１１（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）。
【００７８】
比較例３
２−プロピオニルオキシメチル−４Ｈ−ピラン−４−オン−５−イルプロピオネート（７ｂ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；８５２ｍｇ；６．００ミリモル）をジクロロメタン３０ｍＬ中でスラリー化した。周囲温度で、トリエチルアミン（２．５１ｍＬ；１８．０ミリモル；３当量）を添加し、次いで無水プロピオン酸（１．６９ｍＬ；１３．２ミリモル；２．２当量）を滴加した。反応混合物が１分以内で均一になり、それを一晩撹拌した。ｔｌｃ（酢酸エチル溶離剤）によって、１つの大きいスポットを得た。揮発分をストリッピングし、残渣を酢酸エチルで稀釈し、１Ｍ ＨＣｌ（１５ｍＬ）及び飽和炭酸水素ナトリウム（１５ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、粗製生成物２．３０ｇを得た。これをフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、１：１酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、７ｂを１．３９ｇ（９７％）得た。この化合物は２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）に比較してそれほど強力でないチロシナーゼの阻害剤であった（ＥＣ50０．０９７ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００７９】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ８．５２（ｓ，１Ｈ）；６．５９（ｓ，１Ｈ）；５．０１（ｓ，１Ｈ）；２．５９（ｑ，２Ｈ；Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；２．４４（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．１１（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．０５（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）。
【００８０】
実施例４
ヘキサン酸無水物を用いた酵素的エステル化による５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルヘキサノエート（１ｃ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；５００ｍｇ；３．５２ミリモル）をアセトニトリル１０ｍＬ中でスラリー化し、ヘキサン酸無水物（０．８１ｍＬ；３．５２ミリモル；１．０当量）を添加した。Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（１２０ｍｇ）を添加し、混合物を周囲温度で一晩撹拌した。ＨＰＬＣ分析によれば、２ａは１ｃに８５％転化されていた。追加のヘキサン酸無水物（０．１２ｍＬ；０．５３ミリモル；０．１５当量）を添加し、混合物を一晩撹拌して、２ａを１ｃに９８％転化させた。反応混合物を濾過し、濾液を周囲温度で減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、水（１０ｍＬ）及び炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（３×１０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、１ｃ（７６１ｍｇ；９０％）をオフホワイトの固体として得た。この化合物はチロシナーゼの極めて強力な阻害剤であり（ＥＣ50０．０００９８ｍＭ）であり、２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）よりもかなり優れていた（表Ｉ参照）。
【００８１】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．２５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；８．０８（ｓ，１Ｈ）；６．４５（ｓ，１Ｈ）；４．９５（ｓ，２Ｈ）；２．３９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．５９〜１．４９（ｍ，２Ｈ）；１．３１〜１．２０（ｍ，４Ｈ）；０．８５（ｍ，３Ｈ）。
【００８２】
実施例５
５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルオクタノエート（１ｄ）の製造
Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（５００ｍｇ；５０重量％）及び乾燥４Ａ分子篩（２ｇ；２重量当量）をフラスコに加えた。２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；１．００ｇ；７．０４ミリモル）を加え、アセトニトリル２０ｍＬで洗浄した。オクタン酸（２．２３ｍＬ；１４．０７ミリモル；２当量）を加え、混合物を一晩５０℃まで加熱した。その時点でｔｌｃ分析（酢酸エチル溶離剤）は１ｄへの転化を示した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。粗製生成物を酢酸エチルに溶解させ、水（１０ｍＬ）及び飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍＬ)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、無色油１．８１ｇを得た。この油をヘプタンに溶解させ、濃縮して、ワックス状固体を得た。固体をヘプタンで磨砕し、濾過し、ヘプタンで洗浄し、乾燥させて、１ｄを０．７９ｇ（４２％）得た。この化合物はチロシナーゼの非常に強力な阻害剤であり（ＥＣ50０．０００３９ｍＭ）、２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）よりもかなり優れていた（表Ｉ参照）。
【００８３】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．２４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；８．０７（ｓ，１Ｈ）；６．４５（ｓ，１Ｈ）；４．９５（ｓ，２Ｈ）；２．３９０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ）；１．５３（ｍ，２Ｈ）；１．２４（ｍ，８Ｈ）；０．８５（ｍ，３Ｈ）。
【００８４】
実施例６
オクタン酸無水物を用いた酵素的エステル化による５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルオクタノエート（１ｄ）の製造
２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；１．０４ｇ；７．３２ミリモル）をアセトニトリル２０ｍＬ中でスラリー化し、オクタン酸無水物（２．９０ｇ；８．０５ミリモル；１．１当量）を添加した。Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（０．３３ｇ）を添加し、混合物を周囲温度で１２時間撹拌した。ＨＰＬＣ分析によれば、２ａは１ｃに完全に消費されていた。反応混合物を濾過し、濾液を周囲温度で減圧濃縮した。残渣をヘプタンに溶解させ、水：炭酸水素ナトリウム飽和水溶液：メタノールの１：１：１混合物（３×３０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮し、フラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、２：１酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、１ｄとオクタン酸の混合物１．９１ｇを得た。この物質を最小容量の熱ヘプタンから周囲温度まで冷却されることによって再結晶化させて１ｄを１．３８ｇ（７０％）得た。
【００８５】
比較例４
２−ヒドロキシメチル−４Ｈ−ピラン−４−オン−５−イルオクタノエート（６ｄ）の製造
２−クロロ−１−メチルピリジニウムヨージド（１．８４ｇ；７．１９ミリモル；１．２当量）及びオクタン酸（０．９５ｍＬ；６．００ミリモル；１．０当量）をジクロロメタン１０ｍＬ中でスラリー化した。トリエチルアミン（２．０１ｍＬ；１４．３９ミリモル；２．４当量）を添加し、混合物を周囲温度で１５分間撹拌した。２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；８５２ｍｇ；６．００ミリモル）を添加し、ジクロロメタン５ｍＬで洗浄した。混合物は約３０分かけて黄色から淡褐色の(tan)スラリーへと脱色された。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。ｔｌｃ（３：２酢酸エチル：ヘプタン）によって、大きいスポット１つと小さいスポット１つが得られた。この混合物を濾過し、沈殿物をジクロロメタンで洗浄した。合した濾液を濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、３：２〜４：１の酢酸エチル：ヘプタンの溶媒勾配によって溶離させて、６ｄを８６４ｍｇ（５４％）得た。この化合物は、２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）に比較してそれほど強力でないチロシナーゼの阻害剤であった（ＥＣ50０．１８ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００８６】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ８．４５（ｓ，１Ｈ）；６．４２（ｓ，１Ｈ）；５．７６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０５Ｈｚ）；４．３４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．５０Ｈｚ）；２．５４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ）；１．６５〜１．５５（ｍ，２Ｈ）；１．３８〜１．２５（ｍ，８Ｈ）；０．８６（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．６０Ｈｚ）。
【００８７】
比較例５
２−オクタノイルオキシメチル−４Ｈ−ピラン−４−オン−５−イルオクタノエート（７ｄ）の製造
２−クロロ−１−メチルピリジニウムヨージド（２．１６ｇ；８．４４ミリモル；２．４当量）及びオクタン酸（１．２８ｍＬ；８．４４ミリモル；２．４当量）をジクロロメタン１０ｍＬ中でスラリー化した。トリエチルアミン（２．３５ｍＬ；１６．９ミリモル；４．８当量）を添加し、混合物を周囲温度で１５分間撹拌した。２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；５００ｍｇ；３．５２ミリモル）を添加し、ジクロロメタン５ｍＬで洗浄した。混合物は最初はほとんど均一な黄色溶液になり、次いで約３０分かけて淡褐色のスラリーに変化した。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。ｔｌｃ（３：２酢酸エチル：ヘプタン）によって、単一のスポットが得られた。この混合物を濾過し、沈殿物をジクロロメタンで洗浄した。合した濾液を濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、２：１酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、７ｄを１．０７ｇ（８３％）得た。この化合物は、弱いチロシナーゼ阻害剤であった（ＥＣ50＞１．０ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００８８】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ８．５１（ｓ，１Ｈ）；６．５７（ｓ，１Ｈ）；５．００（ｓ，２Ｈ）；２．５５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；２．４１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．６２〜１．４９（ｍ，４Ｈ）；１．３０〜１．２５（ｍ，１６Ｈ）；０．８８〜０．８３（ｍ，６Ｈ）。
【００８９】
実施例７
５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−メチルリポエート（１ｅ）の製造
Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（４００ｍｇ；８０重量％）及び乾燥４Ａ分子篩（１ｇ；２重量当量）をフラスコに加えた。２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；５００ｍｇ；３．５２ミリモル）を添加し、アセトニトリル１０ｍＬで洗浄した。リポ酸（１．０ｇ；４．８５ミリモル；１．３８当量）を添加し、混合物を一晩５０℃まで加熱した。その時点でｔｌｃ分析（酢酸エチル溶離剤）は１ｅへの転化を示した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。粗製生成物を酢酸エチルに溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。粗製生成物をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、４：１酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、１ｅを３５０ｍｇ（３０％）得た。この化合物はチロシナーゼの極めて強力な阻害剤であり（ＥＣ50０．０００９３ｍＭ）、２ａ（ＥＣ50０．０１５ｍＭ）よりもかなり優れていた（表Ｉ参照）。
【００９０】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．２０（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；８．０８（ｓ，１Ｈ）；６．４６（ｓ，１Ｈ）；４．９５（ｓ，２Ｈ）；３．６５〜３．５６（ｍ，１Ｈ）；３．２３〜３．０６（ｍ，２Ｈ）；２．４６〜２．３５（ｍ，１Ｈ）；２．２１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ）；１．９２〜１．８０（ｍ，１Ｈ）；１．６８〜１．４６（ｍ，４Ｈ）；１．４２〜１．３２（ｍ，２Ｈ）。
【００９１】
実施例８
４−ヒドロキシベンジルアセテート（１ｆ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（３．５ｇ；２８．２ミリモル）をアセトニトリル２０ｍＬ中でスラリー化した。酢酸ビニル（３．６４ｍＬ；３９．５ミリモル；１．４当量）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（５００ｍｇ；１４重量％）を添加した。反応混合物を周囲温度で６時間撹拌した。その時点でｔｌｃ分析（１：１酢酸エチル：ヘプタン溶離剤）は２ｂを示さず、大きい単一の無極性スポットを示した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮して、１ｆを４．６７ｇ（９９％）得た。この化合物はチロシナーゼの阻害剤であり（ＥＣ50０．０３８ｍＭ）、２ｂ（ＥＣ50０．１９ｍＭ）よりも強力であった（表Ｉ参照）。
【００９２】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；７．１７（ｍ，２Ｈ）；６．７４（ｍ，２Ｈ）；４．９３（ｓ，２Ｈ）；２．０１（ｓ，３Ｈ）。
【００９３】
比較例６
４−アセトキシベンジルアルコール（６ｆ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５００ｍｇ；４．０３ミリモル）をジクロロメタン１５ｍＬ中でスラリー化した。トリエチルアミン（０．８４ｍＬ；６．０４ミリモル；１．５当量）を添加し、次いで無水酢酸（０．３９ｍＬ；４．０３ミリモル；１．０当量）を滴加した。不均一な混合物が３０分かけて均一になり、それを周囲温度で一晩撹拌した。ｔｌｃ分析（１：１酢酸エチル：ヘプタン）によれば、６ｆに部分転化されていた。反応混合物を濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、３：２ヘプタン：酢酸エチルで溶離させて、６ｆを３９０ｍｇ（５８％）得た。この化合物は２ｂ（ＥＣ50０．１９ｍＭ）に比較してそれほど強力でないチロシナーゼの阻害剤であった（ＥＣ50０．９２ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００９４】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ７．３４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．９７Ｈｚ）；７．０６（ｍ，２Ｈ）；５．２１５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．７７Ｈｚ）；４．４９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．７７Ｈｚ）；２．２６（ｓ，３Ｈ）。
【００９５】
実施例９
４−ヒドロキシベンジルプロピオネート（１ｇ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５３０ｍｇ；４．２７ミリモル）をアセトニトリル１４ｍＬに溶解させた。プロピオン酸（２．０ｍＬ；２６．８ミリモル；６．３当量）を添加し、Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（６２５ｍｇ；１．１７重量当量）及び乾燥４Ａ分子篩（９００ｍｇ；１．７重量当量）を添加した。反応混合物を一晩撹拌し且つ５０℃まで加熱した。その時点でＨＰＬＣ分析は１ｇへの約３０％の転化を示した。反応混合物を濾過し、沈殿物をアセトニトリル及びトルエンで洗浄した。合した濾液／洗液を濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、１：４酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、１ｇを１８５ｍｇ（２４％）を無色油として得た。この化合物はチロシナーゼの強力な阻害剤であり（ＥＣ50０．０１７ｍＭ）、２ｂ（ＥＣ50０．１９ｍＭ）よりもはるかに優れていた（表Ｉ参照）。
【００９６】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．５０（ｓ，１Ｈ）；７．１７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２５Ｈｚ）；６．７４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．９７Ｈｚ）；４．９４（ｓ，２Ｈ）；２．３１（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．０２（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）。
【００９７】
実施例１０
プロピオン酸無水物を用いた酵素的エステル化による４−ヒドロキシベンジルプロピオネート（１ｇ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５．００ｇ；４０．３ミリモル）をアセトニトリル１００ｍＬに溶解させた。無水プロピオン酸（６．２０ｍＬ；４８．３ミリモル；１．２当量）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（０．２５ｇ）を添加した。混合物を周囲温度で１８時間撹拌した。ＨＰＬＣ分析によれば、２ｂはほとんど完全に１ｇに転化されていた。反応混合物を濾過し、濾液を周囲温度で減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（２×２５ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮し、粗製生成物をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過して、１ｈ（５．８４ｇ；８０％）を無色油として得た。
【００９８】
比較例７
４−プロピオニルオキシベンジルアルコール（６ｇ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５００ｍｇ；４．０３ミリモル）をジクロロメタン１５ｍＬ中でスラリー化した。トリエチルアミン（０．８４ｍＬ；６．０４ミリモル；１．５当量）を添加し、次いで無水プロピオン酸（０．５２ｍＬ；４．０３ミリモル；１．０当量）を滴加した。不均一混合物が１分以内に均一になった。反応混合物をＲＴで一晩撹拌した。ｔｌｃ分析（１：１酢酸エチル：ヘプタン）によって、大きいスポット１つ及び小さいスポット１つが得られた。混合物を濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、３：２ヘプタン：酢酸エチルで溶離させて、６ｇを４４２ｍｇ（６１％）得た。この化合物は２ｂ（ＥＣ50０．１９ｍＭ）に比較してそれほど強力でないチロシナーゼの阻害剤であった（ＥＣ50１．０１ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【００９９】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ７．３４（ｍ，２Ｈ）；７．０６（ｍ，２Ｈ）；５．２２（ｂｒ ｔ，１Ｈ）；４．４９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．９４Ｈｚ）；２．５９（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．１３（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）。
【０１００】
比較例８
４−プロピオニルオキシベンジルプロピオネート（６ｇ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５００ｍｇ；４．０３ミリモル）をジクロロメタン１５ｍＬ中でスラリー化した。トリエチルアミン（１．４０ｍＬ；１０．１ミリモル；２．５当量）を添加し、次いで無水プロピオン酸（１．１４ｍＬ；８．９ミリモル；２．２当量）を滴加した。不均一混合物が１５分かけて均一になり、これを周囲温度で一晩撹拌した。ｔｌｃ分析（１：１酢酸エチル：ヘプタン）によって、単一の無極性スポットが得られた。反応混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解させた。有機溶液を１．５Ｍ ＨＣｌ（２０ｍＬ)及び飽和炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。この有機溶液の濃縮により、７ｇが９２３ｍｇ（９７％）得られた。この化合物は弱いチロシナーゼ阻害剤であった（ＥＣ50＞１０ｍＭ）（表Ｉ参照）。
【０１０１】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ７．４０（ｍ，２Ｈ）；７．１２（ｍ，２Ｈ）；５．０８（ｓ，２Ｈ）；２．６０（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；２．３７（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．１３（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．０４（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）。
【０１０２】
実施例１１
ヘキサン酸無水物を用いた酵素的エステル化による４−ヒドロキシベンジルヘキサノエート（１ｈ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５００ｍｇ；４．０３ミリモル）をアセトニトリル１０ｍＬに溶解させた。無水ヘキサン酸（１．１２ｍＬ；４．８３ミリモル；１．２当量）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（１２０ｍｇ）を添加した。混合物を周囲温度で７．５時間撹拌した。ＨＰＬＣ分析によれば、２ｂはほとんど完全に１ｈに転化されていた。混合物を濾過し、濾液を周囲温度で減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（３×１０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、１ｈ（８３２ｍｇ；９３％）を無色油として得た。この化合物はチロシナーゼの強力な阻害剤であり（ＥＣ50０．０４９ｍＭ）、２ｂ（ＥＣ50０．１９ｍＭ）よりも優れていた（表Ｉ参照）。
【０１０３】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．４９（ｓ，１Ｈ）；７．１７〜７．１４（ｍ，２Ｈ）；６．７６〜６．７１（ｍ，２Ｈ）；４．９４（ｓ，２Ｈ）；２．２８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．５６〜１．４６（ｍ，２Ｈ）；１．３１〜１．２１（ｍ，４Ｈ）；０．８３（ｍ，３Ｈ）。
【０１０４】
実施例１２
４−ヒドロキシベンジルオクタノエート（１ｉ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（２５０ｍｇ；２．０２ミリモル）をアセトニトリル５ｍＬに溶解させた。オクタン酸（５００μＬ；３．３ミリモル；１．６３当量）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（２００ｍｇ；８０重量％）及び４Ａ分子篩（５００ｍｇ；２重量当量）を添加した。混合物を一晩、撹拌及び５０℃まで加熱した。混合物を周囲温度に冷却し、濾過し、沈殿物をアセトニトリルで洗浄した。合した濾液を濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を乾燥させ（硫酸マグネシウム）、濃縮し、粗製生成物をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、１：４酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、若干の残留オクタン酸を含む１ｉを９６０ｍｇ得た。
【０１０５】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．４８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；７．１８〜７．１３（ｍ，２Ｈ）；６．７５〜６．７１（ｍ，２Ｈ）；４．９４（ｓ，２Ｈ）；２．２８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ）；１．５１（ｍ，２Ｈ）；１．２２（ｍ，８Ｈ）；０．８４（ｍ，３Ｈ）。
【０１０６】
実施例１３
エステル交換による４−ヒドロキシベンジルオクタノエート（１ｉ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアセテート（１ｆ）（８３ｍｇ；０．５０ミリモル）をトルエン１．５ｍＬに溶解させた。オクタン酸（１５８μＬ；１．０ミリモル；２．０当量）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（６０ｍｇ）を添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌した。この時点でＨＰＬＣ分析は１ｉへの５８．１％の転化を示した（１ｆ ４０．４％及び４−ヒドロキシベンジルアルコール１．４％も観察された）。
【０１０７】
実施例１４
Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ Ａ−２１の存在下におけるエステル交換による４−ヒドロキシベンジルオクタノエート（１ｉ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアセテート（１ｆ）（８３ｍｇ；０．５０ミリモル）及び乾燥Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ Ａ−２１（８３ｍｇ；１重量当量）をトルエン１．５ｍＬ中で合した。オクタン酸（１５８μＬ；１．０ミリモル；２．０当量）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（６０ｍｇ）を添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌した。この時点でＨＰＬＣ分析は１ｉへの８８．２％の転化を示した（１ｆ １１．１％及び４−ヒドロキシベンジルアルコール０．８％も観察された）。
【０１０８】
実施例１５
４−ヒドロキシベンジルリポエート（１ｊ）の製造
４−ヒドロキシベンジルアルコール（２ｂ）（５２０ｍｇ；４．１９ミリモル；１．２４当量）をアセトニトリル１０ｍＬに溶解させた。リポ酸（０．７０ｇ；３．３９ミリモル）、次いでＮｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（１５０ｍｇ）及び４Ａ分子篩（１ｇ）を添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌した。混合物を周囲温度に冷却し、濾過し、沈殿物をアセトニトリルで洗浄した。合した濾液を濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濃縮し、粗製生成物をフラッシュシリカゲルのパッドに通して濾過し、１：４酢酸エチル：ヘプタンで溶離させて、１ｊを１８４ｍｇ（１６％）得た。
【０１０９】
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．５０（ｓ，１Ｈ）；７．１８〜７．１４（ｍ，２Ｈ）；６．７５〜６．７０（ｍ，２Ｈ）；４．９４（ｓ，２Ｈ）；３．６２〜３．５２（ｍ，１Ｈ）；３．２７〜３．０６（ｍ，２Ｈ）；２．４３〜２．３５（ｍ，１Ｈ）；２．３１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ）；１．８９〜１．７８（ｍ，１Ｈ）；１．６８〜１．４６（ｍ，４Ｈ）；１．３９〜１．２３（ｍ，２Ｈ）。
【０１１０】
実施例１６
溶媒を用いない混合脂肪酸エステルからの２−アシルオキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（１ｋ）の製造
Ｎｏｖｏｚｙｍｅ ４３５（１００ｍｇ）及び２−ヒドロキシメチル−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン（２ａ；１００ｍｇ；０．７７７０ミリモル）をバイアルに加え、パッションフルーツ油からの混合エチルエステル２ｍＬを添加した。混合物を一晩６０℃まで加熱した。その時点でｔｌｃ分析（酢酸エチル溶離剤）は１ｋへのかなりの転化を示した。
【０１１１】
チロシナーゼは、チロシンからメラニンに至る生合成経路における最初の２つの工程を触媒する役割を担っている。チロシナーゼはチロシンをジヒドロキシフェニルアラニン（Ｌ−ＤＯＰＡ）へとヒドロキシル化し、続いてＬ−ＤＯＰＡをドーパキノンへと酸化する。種々の化合物のチロシナーゼ阻害活性を測定するための本発明者らの方法は、４７５ｎｍにおけるドーパキノンの分光光度の出現によってＬ−ＤＯＰＡのドーパキノンへの酸化工程に目を向ける。酵素アッセイは主としてＺｈａｎｇ，ＪＰ．，Ｃｈｅｎ，ＱＸ．，Ｓｏｎｇ，ＫＫ．，＆Ｘｉｅ，ＪＪ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２００６，９５，５７９−５８４に記載された方法に基づいた。
【０１１２】
問題の化合物を、水性環境への溶解度について評価する。水若しくはジメチルスルホキシド中の適当な稀釈液を調製する。広範囲の稀釈液を原液から調製して、典型的には１０ｎＭ〜１０ｍＭの最終阻害剤濃度を測定する。
【０１１３】
アッセイ混合物は、５０ｍＭ Ｎａ2ＨＰＯ4／ＮａＨ2ＰＯ4（ｐＨ７．０）及び０．５ｍＭ Ｌ−ＤＯＰＡからなる。酵素反応は、マッシュルームのチロシナーゼ（Ｓｉｇｍａ Ｔ３８２４）を１８単位添加することによって開始する。チロシナーゼ活性のベースライン初速度を、１ｍｌの反応様式で３０℃においてＢｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ ＤＵ ８００ ＵＶ／Ｖｉｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒを用いて４７５ｎｍで測定し、次いで阻害剤溶液の２５μｌアリコートを添加／混合し、速度の変化を記録する。速度の変化は、阻害剤の存在によるチロシナーゼの％阻害に関係する。存在する全てのＤＭＳＯの阻害作用は、最終濃度を２．５％まで制限し且つ各アッセイに関してＤＭＳＯブランクを用いて全てのバックグラウンド阻害を明らかにすることによって、最小にする。
【０１１４】
チロシナーゼ阻害度は、チロシナーゼを５０％阻害するのに必要な阻害剤の濃度、ＥＣ50値に換算して判定した。これは、阻害剤濃度の対数(log)を速度応答(rate response)（％阻害）に対してプロットすることによってＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｚｍ（登録商標）Ｖｅｒｓｉｏｎ ４に生じたＳ字形用量反応曲線によって求めた。本発明の種々の実施例及び他の比較例に関するデータを以下の表Ｉに記載する。
【０１１５】
【表１】
【０１１６】
本発明を特にその好ましい態様に関して詳述したが、本発明の精神及び範囲内で変形及び変更が可能なことがわかるであろう。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
酵素の存在下で式２：
【化１】
で表されるアルコールを式３：
【化２】
の酸誘導体と反応させることを含んでなる式１：
【化３】
［式中、ＲはＣ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、置換ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル（置換基は、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2は、フェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）からなる群から選ばれる）及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、
Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物から選ばれ、そして
Ｒ4は、水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキル及びＣ2〜Ｃ4アルケニルからなる群から選ばれる］
で表されるエステル化合物の製造方法。
【請求項２】
前記アルコール及び誘導体を酵素及び有機溶媒の存在下で反応させる請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｒのアリールがヒドロキシル基及び１〜３個の追加置換基で置換されたフェニル、ナフチル又はアントラセニルであり、前記追加置換基が、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2は、フェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）からなる群から選ばれる請求項１に記載の方法。
【請求項４】
Ｒのヘテロアリール部分が酸素、硫黄及び窒素からなる群から選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５員又は６員ヒドロキシ置換芳香環である請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ヘテロアリール部分がヒドロキシチエニル、ヒドロキシフリル、ヒドロキシピロリル、ヒドロキシイミダゾリル、ヒドロキシピラゾリル、ヒドロキシチアゾリル、ヒドロキシイソチアゾリル、ヒドロキシオキサゾリル、ヒドロキシイソオキサゾリル、ヒドロキシトリアゾリル、ヒドロキシチアジアゾリル、ヒドロキシオキサジアゾリル、ヒドロキシテトラゾリル、ヒドロキシピリジル、ヒドロキシピリミジル、ヒドロキシベンゾオキサゾリル、ヒドロキシベンゾチアゾリル、ヒドロキシベンズイミダゾリル及びヒドロキシインドリルからなる群から選ばれる請求項３に記載の方法。
【請求項６】
ヘテロアリール部分がＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノからなる群から選ばれた３個以下の追加の基で置換されている請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記ヘテロアリール部分がベンゾ残基又はナフト残基で置換されており、前記ベンゾ残基又はナフト残基が任意的に、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノからなる群から選ばれた３個以下の基で置換されている請求項４に記載の方法。
【請求項８】
Ｒ1が、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、シアノ、Ｃ2〜Ｃ6アルキルカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルオキシ、ヒドロキシ、アリール、ヘテロアリール、チオール、チオエーテル、ジチオラン及びハロゲンからなる群から選ばれた１〜３個の基で任意的に置換された炭素数約２２以下の脂肪族炭化水素である請求項１に記載の方法。
【請求項９】
Ｒがフェノール又は置換ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルである請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
Ｒが４−ヒドロキシフェニルであり且つＲ1が少なくとも１つのＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基である請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
酵素の存在下で式４：
【化４】
で表されるエステルを式３：
【化５】
の酸誘導体と反応させることを含んでなる式１：
【化６】
［式中、ＲはＣ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、Ｒ1はＣ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物からなる群から選ばれ、
Ｒ4は水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキル及びＣ2〜Ｃ4アルケニルからなる群から選ばれ、そして
Ｒ5は水素又はＣ1〜Ｃ4アルキルである］
で表されるエステル化合物の製造方法。
【請求項１２】
前記エステル及び誘導体を酵素及び有機溶媒の存在下で反応させる請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
Ｒのアリールがヒドロキシル基及び１〜３個の追加置換基で置換されたフェニル、ナフチル又はアントラセニルであり、前記追加置換基がＣ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6−アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2はフェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）からなる群から選ばれる請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
Ｒのヘテロアリール部分が酸素、硫黄及び窒素からなる群から選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５員又は６員ヒドロキシ置換芳香環である請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記ヘテロアリール部分がヒドロキシチエニル、ヒドロキシフリル、ヒドロキシピロリル、ヒドロキシイミダゾリル、ヒドロキシピラゾリル、ヒドロキシチアゾリル、ヒドロキシイソチアゾリル、ヒドロキシオキサゾリル、ヒドロキシイソオキサゾリル、ヒドロキシトリアゾリル、ヒドロキシチアジアゾリル、ヒドロキシオキサジアゾリル、ヒドロキシテトラゾリル、ヒドロキシピリジル、ヒドロキシピリミジル、ヒドロキシベンゾオキサゾリル、ヒドロキシベンゾチアゾリル、ヒドロキシベンズイミダゾリル及びヒドロキシインドリルからなる群から選ばれる請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ヘテロアリール部分がＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノからなる群から選ばれた３個以下の追加の基で置換されている請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記ヘテロアリール部分がベンゾ残基又はナフト残基で置換されており、前記ベンゾ残基又はナフト残基が任意的に、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノからなる群から選ばれた３個以下の基で置換されている請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルが、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2は、フェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）、並びにＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれた１又は２個の置換基を有する請求項１1に記載の方法。
【請求項１９】
Ｒ1が、Ｃ1〜Ｃ6−アルコキシ、シアノ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルオキシ、ヒドロキシ、アリール、ヘテロアリール、チオール、チオエーテル、ジチオラン及びハロゲンからなる群から選ばれた１〜３個の基で任意的に置換された炭素数約２２以下の脂肪族炭化水素である請求項１１に記載の方法。
【請求項２０】
Ｒがフェノール又はヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルである請求項１１に記載の方法。
【請求項２１】
Ｒが４−ヒドロキシフェニルであり且つＲ1が少なくとも１つのＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基であるか、又はＲが５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルであり且つＲ1が少なくとも１つのＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基及び４−（１，２−ジチオラン−３−イル）−１−ブチルである請求項１１に記載の方法。
【請求項２２】
酵素の存在下で式２：
【化７】
で表されるアルコールを式５：
【化８】
で表される酸無水物と反応させることを含んでなる式１：
【化９】
［式中、Ｒは、Ｃ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物からなる群から選ばれ、そして
Ｒ6はＣ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物からなる群から選ばれる］
で表されるエステル化合物の製造方法。
【請求項２３】
前記アルコール及び酸無水物を酵素及び有機溶媒の存在下で反応させる請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
Ｒのアリールがヒドロキシル基及び１〜３個の追加置換基で置換されたフェニル、ナフチル又はアントラセニルであり、前記追加置換基がＣ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2はフェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）からなる群から選ばれる請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
Ｒのヘテロアリール部分が酸素、硫黄及び窒素からなる群から選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５員又は６員ヒドロキシ置換芳香環である請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
前記ヘテロアリール部分がヒドロキシチエニル、ヒドロキシフリル、ヒドロキシピロリル、ヒドロキシイミダゾリル、ヒドロキシピラゾリル、ヒドロキシチアゾリル、ヒドロキシイソチアゾリル、ヒドロキシオキサゾリル、ヒドロキシイソオキサゾリル、ヒドロキシトリアゾリル、ヒドロキシチアジアゾリル、ヒドロキシオキサジアゾリル、ヒドロキシテトラゾリル、ヒドロキシピリジル、ヒドロキシピリミジル、ヒドロキシベンゾオキサゾリル、ヒドロキシベンゾチアゾリル、ヒドロキシベンズイミダゾリル及びヒドロキシインドリルからなる群から選ばれる請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
ヘテロアリール部分がＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノからなる群から選ばれた３個以下の追加の基で置換されている請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記ヘテロアリール部分がベンゾ残基又はナフト残基で置換されており、前記ベンゾ残基又はナフト残基が任意的に、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノからなる群から選ばれた３個以下の基で任意的に置換されている請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルが、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2はフェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）並びにＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれた１又は２個の置換基を有する請求項２２に記載の方法。
【請求項３０】
Ｒ1が、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、シアノ、Ｃ2〜Ｃ6アルキルカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルオキシ、ヒドロキシ、アリール、ヘテロアリール、チオール、チオエーテル、ジチオラン及びハロゲンからなる群から選ばれた１〜３個の基で任意的に置換された炭素数約２０以下の脂肪族炭化水素である請求項２２に記載の方法。
【請求項３１】
Ｒがフェノール又はヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルである請求項２２に記載の方法。
【請求項３２】
Ｒが４−ヒドロキシフェニルであり且つＲ1が少なくとも１つのＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基であるか、又はＲが５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルであり且つＲ1が少なくとも１つのＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基及び４−（１，２−ジチオラン−３−イル）−１−ブチルである請求項２２に記載の方法。
【請求項３３】
式１：
【化１０】
［式中、Ｒは、Ｃ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、そして
Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物から選ばれる］
で表されるエステル化合物及び化粧品用として許容され得る担体を含んでなる皮膚美白化組成物。
【請求項１】
酵素の存在下で式２：
【化１】
で表されるアルコールを式３：
【化２】
の酸誘導体と反応させることを含んでなる式１：
【化３】
［式中、ＲはＣ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、置換ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル（置換基は、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2は、フェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）からなる群から選ばれる）及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、
Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物から選ばれ、そして
Ｒ4は、水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキル及びＣ2〜Ｃ4アルケニルからなる群から選ばれる］
で表されるエステル化合物の製造方法。
【請求項２】
前記アルコール及び誘導体を酵素及び有機溶媒の存在下で反応させる請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｒのアリールがヒドロキシル基及び１〜３個の追加置換基で置換されたフェニル、ナフチル又はアントラセニルであり、前記追加置換基が、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2は、フェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）からなる群から選ばれる請求項１に記載の方法。
【請求項４】
Ｒのヘテロアリール部分が酸素、硫黄及び窒素からなる群から選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５員又は６員ヒドロキシ置換芳香環である請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ヘテロアリール部分がヒドロキシチエニル、ヒドロキシフリル、ヒドロキシピロリル、ヒドロキシイミダゾリル、ヒドロキシピラゾリル、ヒドロキシチアゾリル、ヒドロキシイソチアゾリル、ヒドロキシオキサゾリル、ヒドロキシイソオキサゾリル、ヒドロキシトリアゾリル、ヒドロキシチアジアゾリル、ヒドロキシオキサジアゾリル、ヒドロキシテトラゾリル、ヒドロキシピリジル、ヒドロキシピリミジル、ヒドロキシベンゾオキサゾリル、ヒドロキシベンゾチアゾリル、ヒドロキシベンズイミダゾリル及びヒドロキシインドリルからなる群から選ばれる請求項３に記載の方法。
【請求項６】
ヘテロアリール部分がＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノからなる群から選ばれた３個以下の追加の基で置換されている請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記ヘテロアリール部分がベンゾ残基又はナフト残基で置換されており、前記ベンゾ残基又はナフト残基が任意的に、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノからなる群から選ばれた３個以下の基で置換されている請求項４に記載の方法。
【請求項８】
Ｒ1が、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、シアノ、Ｃ2〜Ｃ6アルキルカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルオキシ、ヒドロキシ、アリール、ヘテロアリール、チオール、チオエーテル、ジチオラン及びハロゲンからなる群から選ばれた１〜３個の基で任意的に置換された炭素数約２２以下の脂肪族炭化水素である請求項１に記載の方法。
【請求項９】
Ｒがフェノール又は置換ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルである請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
Ｒが４−ヒドロキシフェニルであり且つＲ1が少なくとも１つのＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基である請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
酵素の存在下で式４：
【化４】
で表されるエステルを式３：
【化５】
の酸誘導体と反応させることを含んでなる式１：
【化６】
［式中、ＲはＣ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、Ｒ1はＣ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物からなる群から選ばれ、
Ｒ4は水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキル及びＣ2〜Ｃ4アルケニルからなる群から選ばれ、そして
Ｒ5は水素又はＣ1〜Ｃ4アルキルである］
で表されるエステル化合物の製造方法。
【請求項１２】
前記エステル及び誘導体を酵素及び有機溶媒の存在下で反応させる請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
Ｒのアリールがヒドロキシル基及び１〜３個の追加置換基で置換されたフェニル、ナフチル又はアントラセニルであり、前記追加置換基がＣ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6−アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2はフェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）からなる群から選ばれる請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
Ｒのヘテロアリール部分が酸素、硫黄及び窒素からなる群から選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５員又は６員ヒドロキシ置換芳香環である請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記ヘテロアリール部分がヒドロキシチエニル、ヒドロキシフリル、ヒドロキシピロリル、ヒドロキシイミダゾリル、ヒドロキシピラゾリル、ヒドロキシチアゾリル、ヒドロキシイソチアゾリル、ヒドロキシオキサゾリル、ヒドロキシイソオキサゾリル、ヒドロキシトリアゾリル、ヒドロキシチアジアゾリル、ヒドロキシオキサジアゾリル、ヒドロキシテトラゾリル、ヒドロキシピリジル、ヒドロキシピリミジル、ヒドロキシベンゾオキサゾリル、ヒドロキシベンゾチアゾリル、ヒドロキシベンズイミダゾリル及びヒドロキシインドリルからなる群から選ばれる請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ヘテロアリール部分がＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノからなる群から選ばれた３個以下の追加の基で置換されている請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記ヘテロアリール部分がベンゾ残基又はナフト残基で置換されており、前記ベンゾ残基又はナフト残基が任意的に、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノからなる群から選ばれた３個以下の基で置換されている請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルが、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2は、フェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）、並びにＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれた１又は２個の置換基を有する請求項１1に記載の方法。
【請求項１９】
Ｒ1が、Ｃ1〜Ｃ6−アルコキシ、シアノ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルオキシ、ヒドロキシ、アリール、ヘテロアリール、チオール、チオエーテル、ジチオラン及びハロゲンからなる群から選ばれた１〜３個の基で任意的に置換された炭素数約２２以下の脂肪族炭化水素である請求項１１に記載の方法。
【請求項２０】
Ｒがフェノール又はヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルである請求項１１に記載の方法。
【請求項２１】
Ｒが４−ヒドロキシフェニルであり且つＲ1が少なくとも１つのＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基であるか、又はＲが５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルであり且つＲ1が少なくとも１つのＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基及び４−（１，２−ジチオラン−３−イル）−１−ブチルである請求項１１に記載の方法。
【請求項２２】
酵素の存在下で式２：
【化７】
で表されるアルコールを式５：
【化８】
で表される酸無水物と反応させることを含んでなる式１：
【化９】
［式中、Ｒは、Ｃ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物からなる群から選ばれ、そして
Ｒ6はＣ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物からなる群から選ばれる］
で表されるエステル化合物の製造方法。
【請求項２３】
前記アルコール及び酸無水物を酵素及び有機溶媒の存在下で反応させる請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
Ｒのアリールがヒドロキシル基及び１〜３個の追加置換基で置換されたフェニル、ナフチル又はアントラセニルであり、前記追加置換基がＣ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2はフェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）からなる群から選ばれる請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
Ｒのヘテロアリール部分が酸素、硫黄及び窒素からなる群から選ばれた１〜３個のヘテロ原子を含む５員又は６員ヒドロキシ置換芳香環である請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
前記ヘテロアリール部分がヒドロキシチエニル、ヒドロキシフリル、ヒドロキシピロリル、ヒドロキシイミダゾリル、ヒドロキシピラゾリル、ヒドロキシチアゾリル、ヒドロキシイソチアゾリル、ヒドロキシオキサゾリル、ヒドロキシイソオキサゾリル、ヒドロキシトリアゾリル、ヒドロキシチアジアゾリル、ヒドロキシオキサジアゾリル、ヒドロキシテトラゾリル、ヒドロキシピリジル、ヒドロキシピリミジル、ヒドロキシベンゾオキサゾリル、ヒドロキシベンゾチアゾリル、ヒドロキシベンズイミダゾリル及びヒドロキシインドリルからなる群から選ばれる請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
ヘテロアリール部分がＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノからなる群から選ばれた３個以下の追加の基で置換されている請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記ヘテロアリール部分がベンゾ残基又はナフト残基で置換されており、前記ベンゾ残基又はナフト残基が任意的に、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、ハロゲン、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、アリール、アリールチオ、アリールオキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル及びＣ2〜Ｃ6アルカノイルアミノからなる群から選ばれた３個以下の基で任意的に置換されている請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルが、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、置換Ｃ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、置換Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ6アルカノイルオキシ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルチオ、Ｃ1〜Ｃ6アルキルスルホニル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ2〜Ｃ6アルコキシカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルアミノ、−Ｏ−Ｒ2、Ｓ−Ｒ2、−ＳＯ2−Ｒ2、−ＮＨＳＯ2Ｒ2及び−ＮＨＣＯ2Ｒ2（Ｒ2はフェニル、ナフチル、又はＣ1〜Ｃ6アルキル、Ｃ6〜Ｃ10アリール、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ及びハロゲンから選ばれた１〜３個の基で置換されたフェニル若しくはナフチルである）並びにＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれた１又は２個の置換基を有する請求項２２に記載の方法。
【請求項３０】
Ｒ1が、Ｃ1〜Ｃ6アルコキシ、シアノ、Ｃ2〜Ｃ6アルキルカルボニル、Ｃ2〜Ｃ6アルカノイルオキシ、ヒドロキシ、アリール、ヘテロアリール、チオール、チオエーテル、ジチオラン及びハロゲンからなる群から選ばれた１〜３個の基で任意的に置換された炭素数約２０以下の脂肪族炭化水素である請求項２２に記載の方法。
【請求項３１】
Ｒがフェノール又はヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルである請求項２２に記載の方法。
【請求項３２】
Ｒが４−ヒドロキシフェニルであり且つＲ1が少なくとも１つのＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基であるか、又はＲが５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イルであり且つＲ1が少なくとも１つのＣ1〜Ｃ16直鎖アルキル基及び４−（１，２−ジチオラン−３−イル）−１−ブチルである請求項２２に記載の方法。
【請求項３３】
式１：
【化１０】
［式中、Ｒは、Ｃ6〜Ｃ20炭素環式ヒドロキシアリール、ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン−２−イル及びＣ4〜Ｃ20ヒドロキシへテロアリール（ヘテロ原子は硫黄、窒素及び酸素からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、そして
Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22アルキル、Ｃ2〜Ｃ22アルケニル、Ｃ4〜Ｃ22ジエニル、Ｃ6〜Ｃ22トリエニル、Ｃ8〜Ｃ22テトラエニル及びそれらの混合物から選ばれる］
で表されるエステル化合物及び化粧品用として許容され得る担体を含んでなる皮膚美白化組成物。
【公表番号】特表２０１０−５２８６５４（Ｐ２０１０−５２８６５４Ａ）
【公表日】平成２２年８月２６日（２０１０．８．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５１１１５９（Ｐ２０１０−５１１１５９）
【出願日】平成２０年５月２７日（２００８．５．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／００６６９９
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１５３７８４
【国際公開日】平成２０年１２月１８日（２００８．１２．１８）
【出願人】（５９４０５５１５８）イーストマン ケミカル カンパニー (391)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年８月２６日（２０１０．８．２６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年５月２７日（２００８．５．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／００６６９９
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１５３７８４
【国際公開日】平成２０年１２月１８日（２００８．１２．１８）
【出願人】（５９４０５５１５８）イーストマン ケミカル カンパニー (391)
【Ｆターム（参考）】
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