肥満や糖尿病などの代謝性障害の治療において使用するニューロメジンＵ受容体アゴニストを開示する。

【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は２００６年３月２０日に出願された米国仮特許出願第６０／７８３，９３３号の利益を主張するものである。
【０００２】
本発明は、肥満などの代謝性障害の治療において使用するニューロメジンＵ受容体アゴニストに関する。
【背景技術】
【０００３】
ニューロメジンＵ（ＮＭＵ）は、元来、ラット子宮平滑筋を収縮する能力に基づいて、ブタの脊髄から単離され、それ以後、ストレス、侵害知覚、炎症、心臓血管機能、及びエネルギー恒常性を含む他のさまざまな生理学的過程に関与しているとされてきた。ＮＭＵの特性は、同様の生理活性を有する３つのペプチドである、ヒト、ブタ、及びイヌの完全長ＮＭＵ（２５量体（ＮＭＵ−２５））、ラット及びマウスの２３量体（ＮＭＵ−２３）、及び８量体（ＮＭＵ−８）であると同定された。ＮＭＵ−８は、完全長ＮＭＵの開裂に由来し、完全長の前駆体と同じＣ−末端を共有する。ＮＭＵ−８は、脊髄動物で高度に保存され、調査されたすべての種において同一である７つのＣ−末端残基を含む。すなわち、これらの残基は生理活性に対して重要である（Ｂｒｉｇｈｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｒｅｖ． ５６： ２３１−２４８ （２００４））。
【０００４】
エネルギー恒常性の調節におけるＮＭＵの役割は、薬理データと遺伝子データの両方によって支持されている。ＮＭＵが中枢投与される場合に見られるＮＭＵの特性としては、食物摂取の阻害及びエネルギー消費量の増大が挙げられる（Ｈｏｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ４０６：７０−７４（２０００）；Ｎａｋａｚａｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２７７：１９１−１９４（２０００）； Ｉｖａｎｏｖ ｅｔ ａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１４３：３８１３−３８２１（２００２）；及びＷｒｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．，１４３：４２２７−４２３４（２００２））。ＮＭＵ欠損マウスは、過食及びエネルギー消費量の減少を特徴とする肥満を発症し（Ｈａｎａｄａ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，１０：１０６７−１０７３（２００４））、そしてＮＭＵを過剰発現するトランスジェニックマウスは、痩せて食物摂取が低下する（ｈｙｐｏｐｈａｇｉｃ）（Ｋｏｗａｌｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１８５：１５１−１６４（２００５））。動物の内部エネルギー状態は、ＮＭＵの発現と放出にも影響を及ぼす（Ｗｒｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｉｂｉｄ）。
【０００５】
２つの高親和性ＮＭＵ受容体であるＮＭＵＲ１（国際出願ＰＣＴ／ＵＳ９９／１５９４１号）及びＮＭＵＲ２（ＵＳ７１６３７９９号）が同定されている。ＮＭＵＲ１は、主に末梢において発現するが、ＮＭＵＲ２は主に脳で発現する。薬理実験は、ＮＭＵのエネルギー恒常性に関する短期及び長期の効果をより明確にし、どのＮＭＵ受容体がこれらの活性に関与しているか同定するのに役立った。中枢又は末梢のいずれかへのＮＭＵの急性投与は、投与量に依存して、マウスの食物摂取を減少させることがわかっている。中枢へのＮＭＵ投与による食欲抑制作用は、ＮＭＵＲ２欠損（Ｎｍｕｒ２^-/-）マウスでは生じないが、ＮＭＵＲ１欠損（Ｎｍｕｒ１^-/-）マウスでは生じる。対照的に、末梢へのＮＭＵ投与による食欲抑制作用は、Ｎｍｕｒ１^-/-では生じないが、Ｎｍｕｒ２^-/-では生じる。更
に、ＮＭＵの急性末梢投与は、投与量に応じてマウスの中核温を上昇させ、このことは、ＮＭＵ１がエネルギー消費も制御し得ることを示している。
ＮＭＵの中枢又は末梢の慢性投与は、やはり投与量に応じて、マウスの食物摂取、体重、及び脂肪を減少させる。Ｎｍｕｒ２^-/-トランスジェニックマウスでは、体重、体組成、体温、及び食物摂取は、ラットＮＭＵ−２３の慢性的な中枢投与によって、影響をほとんど受けない。Ｎｍｕｒ１^-/-トランスジェニックマウスでは、体重、体組成、及び食物摂取は、ラットＮＭＵ−２３の長期の末梢投与の影響をほとんど受けない。
【０００６】
ＮＭＵＲ１−媒介作用とＮＭＵＲ２−媒介作用に対する活性部位は異なっており、お互いに独立しているようであるが、肥満においてある役割を担っているため、ＮＭＵＲ１−選択的アゴニスト及びＮＭＵＲ２−選択的アゴニストの両方並びにＮＭＵＲ１／２−非選択的アゴニストが、肥満の治療に有用であり得ることが示唆されている。したがって、代謝性障害の治療において有用なニューロメジンＵ受容体アゴニストが必要とされている。
【０００７】
本発明は、ニューロメジンＵ受容体アゴニストを提供する。ある態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、ある受容体サブタイプに対して特異的であり、別の態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、ＮＭＵＲ１受容体又はＮＭＵＲ２受容体の両方を結合させ、刺激することができる。更なる態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、血液−脳関門を通過して脳内でＮＭＵ受容体と相互作用できるように誘導体化されている。ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、治療のため及び研究手段として使用することができる。
【０００８】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストの治療への応用は、個体を苦しめている代謝性障害を治療するために、ニューロメジンＵ受容体アゴニストを投与することを包含する。そのような障害としては、これに限定されるものではないが、肥満、メタボリックシンドローム又はＸ症候群、及びＩＩ型糖尿病が挙げられる。網膜症などの糖尿病の合併症も明らかに影響を受ける場合がある。肥満は、糖尿病、高血圧症、脂質異常症、心臓血管疾患、胆石、変形性関節症、及びある特定の形態の癌などの疾病状態の併発症であり、そのような疾病状態を助長させる場合がある。また、個体における体重減少に効果を及ぼす、本明細書で開示された１種以上のニューロメジンＵ受容体アゴニストの投与は、そのような疾病の予防において、並びに上記の状態の任意の１つ及び他のもののための治療の一部として、有用であり得る。他の実施態様において、個体において代謝性障害を治療するための方法であって、上記のニューロメジンＵ受容体アゴニストの１種以上をその個体に投与することを包含する方法が提供される。代謝性障害は、糖尿病、メタボリックシンドローム、高血糖、及び肥満からなる群から選択されてもよく、例えば、経口、粘膜、口腔内、経舌下、経鼻、直腸、皮下、経皮、静脈内、筋肉内、又は腹腔内のルートなどの末梢神経から脳へのルートによって投与されてもよい。最後に、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、個体による食物摂取を減少させるため、個体の体重増加を減少させるため、個体の体重増加を防ぐため、個体の体重を減少させるため、及び／又は個体の体重の再増加を防ぐために、その個体に投与することができる。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
従って、本発明は、式（Ｉ）
Ｚ¹−ペプチド−Ｚ²
［式中、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号２７）（ここで、アミノ酸１〜１７は、任意のアミノ酸又は欠失であってもよく；アミノ酸Ｘ¹⁸は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰は、欠失、Ｌ、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹は、Ｆ、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ²²は、Ｒ、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³は、Ｐ、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴は、Ｒ、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ²⁵は、Ｎ、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、又はＡであり；Ｚ¹は、存在してもよい保護基であり、存在する場合には、Ｎ−末端アミノ基に結合しており；Ｚ²は、ＮＨ₂、又は、存在してもよい保護基であり、存在する場合には、その保護基はＣ−末端カルボキシ基に結合している］
を有する単離されたニューロメジンＵ受容体アゴニストおよびその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１０】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストの特定の態様において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｆ−Ｌ−Ｆ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｎ（配列番号１）（ここで、アミノ酸１〜１７は、任意のアミノ酸又は欠失であってよい）を有し、特定の態様においては、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、及び配列番号６からなる群から選択されたアミノ酸配列を有する。現在の好ましい態様において、ペプチドは、配列番号２に示されたアミノ酸配列を有する。
【００１１】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストの別の態様において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｆ−Ｒ−Ｖ−Ｄ−Ｅ−Ｅ−Ｆ−Ｑ−Ｓ−Ｐ−Ｆ−Ａ−Ｓ−Ｑ−Ｓ−Ｒ−Ｇ−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号７）（ここで、アミノ酸Ｘ¹⁸は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰は、欠失、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹は、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ²²は、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³は、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴は、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ²⁵は、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ又はＤ−Ｎｌｅ、あるいはＡである）を有し、特定の態様においては、配列番号１４、配列番号１５、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、及び配列番号２５からなる群から選択されたアミノ酸配列を有する。
【００１２】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストの更なる態様において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸（配列番号８）（ここで、アミノ酸Ｘ¹は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ²は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ³は、欠失、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ⁴は、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ⁵は、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ⁶は、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ⁷は、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ⁸は、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ又はＤ−Ｎｌｅ、あるいはＡである）を有し、特定の態様においては、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、及び配列番号２１からなる群から選択されたアミノ酸配列を有する。
【００１３】
上記のニューロメジンＵ受容体アゴニストの更なる態様において、Ｎ−末端アミノ酸は、ＰＥＧ、コレステロール、Ｎ−エチルマレイミジル、及びパルミトイルからなる群から選択された１つ以上の分子と共有結合している。ニューロメジンＵ受容体アゴニストの更なる態様において、ペプチドは更にＮ−末端アミノ基にシステイン残基を有し、保護基が存在してもよく、存在する場合には、その保護基はシステイン残基のＮ−末端アミノ基に結合している。ニューロメジンＵ受容体アゴニストの特定の態様において、Ｎ−末端のシステイン残基のチオール基は、ＰＥＧ、コレステロール、Ｎ−エチルマレイミジル、及びパルミトイルからなる群から選択された１つ以上の分子に共有結合している。現在の好適な実施態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、配列番号２のアミノ酸を有し、更にペプチドのＮ−末端にシステイン残基を有し、システイン残基のＮ−末端アミノ基に結合した保護基とチオール基に結合したＰＥＧ分子が存在する。
【００１４】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、更に、遠位末端と近位末端を有するリンカー基を有することができる。リンカー基は、その遠位末端でペプチドのＮ−末端に共有結合し、近位末端でシステイン残基のカルボキシル末端に共有結合しており、保護基が存在してもよく、存在する場合には、その保護基はシステイン残基のＮ−末端アミノ基に結合している。特定の態様において、システイン残基のチオール基は、ＰＥＧ、コレステロール、Ｎ−エチルマレイミジル、及びパルミトイルからなる群から選択された１つ以上の分子に結合している。
【００１５】
本発明は更に、代謝性障害の治療のための医薬の製造におけるニューロメジンＵ受容体アゴニストの任意の１つ以上の実施態様及び態様の使用を提供する。障害としては、これに限定されるものではないが、肥満、メタボリックシンドローム又はＸ症候群、並びにＩＩ型糖尿病が挙げられる。網膜障害などの糖尿病の合併症も、それによって確実に影響を受ける場合がある。肥満は、糖尿病、高血圧症、脂質異常症、心臓血管疾患、胆石、変形性関節症、及びある特定の形態の癌などの疾病状態の併発症であり、そのような疾病状態を助長させる場合がある。したがって、本発明は、上記任意のニューロメジンＵ受容体アゴニストの１種以上と薬学的に許容される担体とを含有する医薬組成物を提供する。
【００１６】
本発明は更に、血液−脳関門を通過することができるニューロメジンＵ受容体アゴニストを製造するための方法であって、ペプチドが血液−脳関門を通過することを可能にする１つ以上のＰＥＧ分子にペプチドを共有結合させる工程を含む方法を提供する。したがって、特定の態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、式（Ｉ）
Ｚ¹−ペプチド−Ｚ²
［式中、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号２７）（ここで、アミノ酸１〜１７は、任意のアミノ酸又は欠失であってもよく；アミノ酸Ｘ¹⁸は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰は、欠失、Ｌ，Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹は、Ｆ、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ²²は、Ｒ、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³は、Ｐ、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴は、Ｒ、Ｈａｒｇ、又はＫであり；および、アミノ酸Ｘ²⁵は、Ｎ、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、又はＡであり、；Ｚ¹は、存在してもよい保護基であり、存在する場合には、その保護基はＮ−末端アミノ基に結合しており；Ｚ²は、ＮＨ₂、又は、存在してもよい保護基であり、存在する場合には、その保護基はＣ−末端カルボキシ基に結合している）を有する］
及びその薬学的に許容される塩である。
【００１７】
更に、ペプチドのＣ−末端の７つのアミノ酸の１つ以上をヒトＮＭＵ−２５ペプチドに生来あるものではないアミノ酸又はアミノ酸類似体に修飾する工程を包含する、ニューロメジンＵ受容体アゴニストのサブタイプに特有のＮＭＵ−２５ペプチドの全て又は一部を含むニューロメジンＵ受容体アゴニストを製造するための方法を提供する。
【００１８】
したがって、ある態様において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｆ−Ｒ−Ｖ−Ｄ−Ｅ−Ｅ−Ｆ−Ｑ−Ｓ−Ｐ−Ｆ−Ａ−Ｓ−Ｑ−Ｓ−Ｒ−Ｇ−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号７）（ここで、アミノ酸Ｘ¹⁸は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰は、欠失、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹は、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ²²は、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³は、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴は、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ²⁵は、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ又はＤ−Ｎｌｅ、あるいはＡである）をからなり、特定の態様においては、配列番号１４、配列番号１５、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、及び配列番号２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する。
【００１９】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストの別の態様において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸（配列番号８）（ここで、アミノ酸Ｘ¹は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ²は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ³は、欠失、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ⁴は、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ⁵は、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ⁶は、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ⁷は、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ⁸は、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ又はＤ−Ｎｌｅ、あるいはＡである）からなり、特定の態様においては、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、及び配列番号２１からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する。
【００２０】
更に、代謝性障害を治療するために、式（Ｉ）
Ｚ¹−ペプチド−Ｚ²
［式中、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号２７）（ここで、アミノ酸１〜１７は、任意のアミノ酸又は欠失であってもよく；アミノ酸Ｘ¹⁸は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰は、欠失、Ｌ，Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹は、Ｆ、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；Ｘ²²は、Ｒ、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³は、Ｐ、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴は、Ｒ、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ²⁵は、Ｎ、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、又はＡであり；Ｚ¹は、存在してもよい保護基であり、存在する場合には、その保護基はＮ−末端アミノ基に結合しており；Ｚ²は、ＮＨ₂、又は存在してもよい保護基であり、存在する場合には、その保護基はＣ−末端カルボキシ基に結合している］
を有するニューロメジンＵ受容体アゴニストの治療有効量を個体に投与することを包む、個体において代謝性障害を治療するための方法を提供する。
【００２１】
この方法は、肥満、メタボリックシンドローム又はＸ症候群、ＩＩ型糖尿病、糖尿病の合併症、高血圧症、脂質異常症、心臓血管疾患、胆石、変形性関節症、及びある特定の形態の癌からなる群から選択された代謝性障害を治療するために特に有用である。
【００２２】
この方法の特定の態様において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｆ−Ｌ−Ｆ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｎ（配列番号１）（ここで、アミノ酸１〜１７は、任意のアミノ酸又は欠失であってもよい）を有し、特定の態様においては、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、及び配列番号６からなる群から選択されたアミノ酸配列を有する。現在の好ましい態様において、ペプチドは、配列番号２に示されたアミノ酸配列を有する。
【００２３】
この方法の別の態様において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｆ−Ｒ−Ｖ−Ｄ−Ｅ−Ｅ−Ｆ−Ｑ−Ｓ−Ｐ−Ｆ−Ａ−Ｓ−Ｑ−Ｓ−Ｒ−Ｇ−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号７）（ここで、アミノ酸Ｘ¹⁸は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰は、欠失、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹は、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ²²は、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³は、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴は、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ²⁵は、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ又はＤ−Ｎｌｅ、あるいはＡである）を有し、特定の態様においては、配列番号１４、配列番号１５、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、及び配列番号２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する。
【００２４】
本方法のさらに別の態様において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸（配列番号８）（ここで、アミノ酸Ｘ¹は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ²は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ³は、欠失、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ⁴は、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ⁵は、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ⁶は、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ⁷は、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ⁸は、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ又はＤ−Ｎｌｅ、あるいはＡである）を有し、特定の態様においては、配列番号９，配列番号１０，配列番号１１，配列番号１２，配列番号１３，配列番号１６，配列番号１７，配列番号１８，配列番号１９，配列番号２０，及び配列番号２１からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する。
【００２５】
上記の方法の更なる態様において、Ｎ−末端アミノ酸は、ＰＥＧ、コレステロール、Ｎ−エチルマレイミジル、及びパルミトイルからなる群から選択された１つ以上の分子と共有結合している。ニューロメジンＵ受容体アゴニストの更なる態様において、ペプチドは更に、ペプチドのＮ−末端にシステイン残基を有し、保護基が存在してもよく、存在する場合には、その保護基はシステイン残基のＮ−末端アミノ基に結合している。この方法の特定の態様において、Ｎ−末端のシステイン残基のチオール基は、ＰＥＧ、コレステロール、Ｎ−エチルマレイミジル、及びパルミトイルからなる群から選択される１つ以上の分子に共有結合している。現在の好適な実施形態において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、配列番号２のアミノ酸を有し、更にペプチドのＮ−末端にシステイン残基を有し、システイン残基のＮ−末端アミノ基に結合した保護基が存在し、システイン残基のチオール基に結合したＰＥＧ分子が存在する。
【００２６】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、遠位末端および近位末端を有するリンカー基を更に有することができ、このリンカー基は、その遠位末端でペプチドのＮ−末端に共有結合し、リンカー基の近位末端は、システイン残基のカルボキシル末端に共有結合し、任意選択により保護基が存在してもよく、存在する場合には、その保護基はシステイン残基のＮ−末端アミノ基に結合している。特定の態様において、システイン残基のチオール基は、ＰＥＧ、コレステロール、Ｎ−エチルマレイミジル、及びパルミトイルからなる群から選択された１つ以上の分子に結合している。本方法の現在の好適な実施態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは式：Ａｃ−Ｃ₂−ペプチド−ＣＯＮＨ₂（式中、Ａｃはアシル基、Ｃ₂はＣｙｓ（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａであり、そのペプチドは配列番号２で表されるアミノ酸配列を有する。
【００２７】
本発明は、ニューロメジンＵ受容体アゴニストを提供する。本明細書に記載されたニューロメジンＵ受容体アゴニストは、ＮＭＵ受容体で作用し、ＮＭＵ受容体を結合し、ＮＭＵ受容体活性を刺激する。ある態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、ある受容体サブタイプに対して特異的であり、そのような特異性は、対応するＮＭＵＲ１又はＮＭＵＲ２受容体の結合アッセイにおいて約２００ｎＭ未満であるＩＣ₅₀値を有するものとして定義される。選択性は、ＮＭＵ１選択的ペプチドに対するヒトＮＭＵＲ２／ヒトＮＭＵＲ１での機能活性又はＥＣ₅₀比、及びＮＭＵ２選択的ペプチドに対するヒトＮＭＵＲ１／ヒトＮＭＵＲ２での機能活性又はＥＣ₅₀比に基づいている。更に、本明細書に記載された選択的ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、ＮＭＵＲ１に対して約２１〜９０９倍、選択的であり、またＮＭＵＲ２に対して約２〜２００倍選択的である。別の態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、ＮＭＵＲ１及びＮＭＵＲ２受容体の両方を結合及び刺激することができ、ニューロメジンＵ受容体アゴニストが血液−脳関門を通過して脳内でＮＭＵ受容体と相互作用できるように誘導体化されている。ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、治療のため及び研究手段として使用することができる。
【００２８】
個体を苦しめている代謝性障害を治療するために、１種以上のニューロメジンＵ受容体アゴニストをその個体に投与することも可能である。そのような障害としては、これに限定されるものではないが、肥満、メタボリックシンドローム又はＸ症候群、及びＩＩ型糖尿病が挙げられる。網膜障害などの糖尿病の合併症も、明確に影響を受ける場合がある。肥満は、糖尿病、高血圧症、脂質異常症、心臓血管疾患、胆石、変形性関節症、及びある特定の形態の癌などの疾病状態の併発症であり、そのような疾病状態を助長させる場合がある。また、個体における体重減少に効果を及ぼす、本明細書で開示された１種以上のニューロメジンＵ受容体アゴニストの投与は、そのような疾病及び上述の状態の任意の１つ及び他のもののための治療の一部としての疾病の予防においても有用な場合がある。他の実施態様において、上記のニューロメジンＵ受容体アゴニストの１つ以上を個体に投与することを包む、個体の代謝性障害を治療するための方法が提供される。代謝性障害は、糖尿病、メタボリックシンドローム、高血糖、及び肥満からなる群から選択されてもよく、例えば、経口、粘膜、口腔内、経舌下、経鼻、直腸、皮下、経皮、静脈内、筋肉内、又は腹腔内のルートなどの末梢神経から脳へのルートによって投与されてもよい。特定の実施態様において、個体の複合障害を治療するために、ニューロメジンＵ受容体アゴニストを使用することも可能である。本明細書の開示に鑑みて当業者に容易に明らかであるように、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、個体による食物摂取を減少させるため、個体の体重増加を減少させるため、個体の体重増加を防ぐため、個体の体重を減少させるため、及び／又は個体の体重の再増加を防ぐため、個体に投与することができる。
【００２９】
研究手段の用途は、ニューロメジンＵ受容体アゴニスト並びにＮＭＵ受容体又はその断片の存在を含んでいてもよい。研究手段の用途の例としては、ＮＭＵ受容体において活性な化合物に対するスクリーニング、サンプル又は調製におけるＮＭＵ受容体の存在の決定、ＮＭＵの役割又は効果の試験が挙げられる。更に、試験化合物による競合実験においてニューロメジンＵ受容体アゴニストを使用することにより、ニューロメジンＵ受容体アゴニストをＮＭＵ結合化合物（アゴニスト又はアンタゴニスト）に対するスクリーニングに使用することが可能である。
【００３０】
本発明のニューロメジンＵ受容体アゴニストは、一般式（Ｉ）
Ｚ¹−ペプチド−Ｚ²
［式中、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号２７）（ここで、アミノ酸１〜１７は、任意のアミノ酸又は欠失であってもよく；アミノ酸Ｘ¹⁸は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰は、欠失、Ｌ，Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹は、Ｆ、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；Ｘ²²は、Ｒ、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³は、Ｐ、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴は、Ｒ、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ²⁵は、Ｎ、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、又はＡであり；Ｚ¹は、存在してもよい保護基であり、存在する場合には、その保護基はＮ−末端アミノ基に結合しており；Ｚ²は、ＮＨ₂、又は存在してもよい保護基であり、存在する場合には、その保護基はＣ−末端カルボキシ基に結合している）を有する］
及びその薬学的に許容される塩を含む。
【００３１】
特定の実施態様において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｆ−Ｌ−Ｆ Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｎ（配列番号１）（ここで、アミノ酸１〜１７は、任意のアミノ酸又は欠失であってもよい）を有する。上記のアミノ酸配列を有する特定のニューロメジンＵ受容体アゴニストのアミノ酸配列を表１に示す。
【００３２】
更なる実施態様において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｆ−Ｒ−Ｖ−Ｄ−Ｅ−Ｅ−Ｆ−Ｑ−Ｓ−Ｐ−Ｆ−Ａ−Ｓ−Ｑ−Ｓ−Ｒ−Ｇ−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号７）（ここで、アミノ酸Ｘ¹⁸は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰は、欠失、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹は、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ²²は、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³は、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴は、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ²⁵は、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、あるいはＡである）を有する。上記のアミノ酸配列を有するペプチドの例を表２に示す。
【００３３】
更なる別の実施態様において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸（配列番号８）（ここで、アミノ酸Ｘ¹は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ²は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ³は、欠失、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ⁴は、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ⁵は、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ⁶は、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ⁷は、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ⁸は、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、あるいはＡである）を有する。上記のアミノ酸配列を有するペプチドの例を表２に示す。
【００３４】
特定の態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、Ｎ−末端アミノ基に共有結合した保護基を有してもよい。ニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端アミノ基に共有結合した保護基は、インビボ条件下でアミノ末端の反応性を低下させる。アミノ保護基としては、−Ｃ_1-10アルキル、−Ｃ_1-10置換アルキル、−Ｃ_2-10アルケニル、−Ｃ_2-10置換アルケニル、アリール、−Ｃ_1-6アルキルアリール、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_1-6−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ_1-6アルキル、−Ｃ（Ｏ）−アリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ_1-6アルキル、又は−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−アリールが挙げられる。特定の実施態様において、アミノ末端保護基は、アセチル、プロピル、サクシニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、及びｔ−ブチルオキシカルボニルからなる群から選択される。Ｎ−末端アミノ酸の脱アミノ化は、別の修飾であり、インビボ条件下でアミノ末端の反応性を低下させることが想定される。
【００３５】
また、ニューロメジンＵ受容体アゴニスト誘導体がポリマーに結合しているニューロメジンＵ受容体アゴニストを化学修飾した組成物も、本発明の範囲に包含される。選択されたポリマーは、通常、単一の反応性基（例えば、アシル化のための活性エステル又はアルキル化のためのアルデヒド）を有するように修飾されており、それにより、本方法において提供されるように重合度を制御することができる。ポリマーの混合物も、ポリマーの範囲の中に包含される。最終生成物の製剤を治療に用いる場合、そのポリマーは薬学的に許容されることが好ましい。
【００３６】
ポリマー又はその混合物は、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、モノメトキシ−ポリエチレングリコール、デキストラン、セルロース、又は他の炭水化物を主体とするポリマー、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシド共重合体、ポリオキシエチル化ポリオール（例えばグリセロール）、及びポリビニルアルコールからなる群から選択され得る。
【００３７】
更なる実施態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、ペグ化、コレステロイル化（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｙｌａｔｉｏｎ）、又はパルミトイル化によって修飾される。修飾は、ニューロメジンＵ受容体アゴニストにおける任意のアミノ酸残基に対して行うことができるが、現在の好適な実施態様では、修飾は、ニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端アミノ酸に対して、Ｎ−末端アミノ酸に直接結合するか、あるいはシステイン残基に結合したチオール基か又はＴｔｄｓなどのようなＮ−末端へ追加された結合基のチオール基のいずれかにカップリングする方法による。更なる実施態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端は、保護基がシステイン残基のＮ−末端アミノ基に結合しそのシステインのチオール基がＮ−エチルマレイミド、ＰＥＧ基、コレステロール基、又はパルミトイル基で誘導体化されているステイン残基を有する。更なる実施態様において、アセチル化されたシステイン残基が、ニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ末端に結合し、システインのチオール基がＮ−エチルマレイミド、ＰＥＧ基、コレステロール基、又はパルミトイル基で誘導体化されている。
【００３８】
特定のタンパク質の特性は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ポリマーの結合によって調節可能であることがよく知られており、それによって、タンパク質の流体力学的容積が増大し、従って、腎臓濾過によるそのクリアランスが遅くなる（例えば、Ｃｌａｒｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２１９６９−２１９７７（１９９６）を参照）。したがって、コアペプチド残基は、高められた治療効果（例えば、インビボでの半減期を伸ばすことによって効果を増加させるなど）を提供するためにペグ化され得ることが想定される。ニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端にＰＥＧ基を有することにより、天然のＮＭＵ−２５ペプチドと比較して、ペグ化されたニューロメジンＵ受容体アゴニストの血漿半減期が延びるだけでなく、ＮＭＵ１２などの特定のニューロメジンＵ受容体アゴニストが血液−脳関門を通過して脳内でＮＭＵＲ２と相互作用することが可能になることを、本発明者は発見した。一般に、静脈内投与の後、天然のＮＭＵ−２５は、全身循環から急速に消失する。図７に示されているように、ＮＭＵ−２５分子のＮ−末端フェニルアラニン残基におけるアミノ基に、又はアミド結合によりＮＭＵ−２５（ＮＭＵ１２））のＮ−末端フェニルアラニン残基に共有結合したシステイン残基のチオール基に、ポリエチレングリコール分子を共有結合させることにより、３７℃での完全なヒトＮＭＵ−２５（ＮＭＵ１）の半減期を著しく増加させる。したがって、ニューロメジンＵ受容体アゴニストをペグ化は、ニューロメジンＵ受容体アゴニストの薬物動態と薬力学を改善する。
【００３９】
ペプチドのペグ化の方法は、文献でよく知られており、また以下の参考文献に記載されている。なお、各文献は参照として本明細書に組み込まれる：Ｌｕ ｅｔ ａｌ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓ．４３：１２７−３８（１９９４）；Ｌｕ ｅｔ ａｌ．，Ｐｅｐｔ．Ｒｅｓ．６：１４０−６（１９９３）；Ｆｅｌｉｘ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓ．４６：２５３−６４（１９９５）；Ｇａｅｒｔｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．７：３８−４４（１９９６）；Ｔｓｕｔｓｕｍｉ ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．７７：１６８−７３（１９９７）；Ｆｒａｎｃｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｈｅｍａｔｏｌ．６８：１−１８（１９９８）；Ｒｏｂｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．８７：１４４０−４５（１９９８）；及びＴａｎ ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒ．Ｐｕｒｉｆ．１２：４５−５２（１９９８）。ポリエチレングリコール又はＰＥＧは、モノ−（Ｃ_1-10）アルコキシ又はアリールオキシ−ポリエチレングリコールなどの（ただし、これらに限定されるものではない）他のタンパク質を誘導体化するために使用された任意の形態のＰＥＧを包含することを意味する。好適なＰＥＧ部分としては、例えば、４０ｋＤａメトキシポリ（エチレングリコール）プロピオンアルデヒド（Ｄｏｗ、Ｍｉｄｌａｎｄ、Ｍｉｃｈｉｇａｎ）；６０ｋＤａメトキシポリ（エチレングリコール）プロピオンアルデヒド（Ｄｏｗ、Ｍｉｄｌａｎｄ、Ｍｉｃｈｉｇａｎ）；４０ｋＤａメトキシポリ（エチレングリコール）マレイミド−プロピオンアミド（Ｄｏｗ、Ｍｉｄｌａｎｄ、Ｍｉｃｈｉｇａｎ）；３１ｋＤａ α−メチル−ｗ−（３−オキソプロポキシ）、ポリオキシエチレン（ＮＯＦ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｔｏｋｙｏ）；ｍＰＥＧ₂−ＮＨＳ−４０ｋ（Ｎｅｋｔａｒ）；ｍＰＥＧ₂−ＭＡＬ−４０ｋ（Ｎｅｋｔａｒ）、ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＧＬ２−４００ＭＡ（（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａ）（ＮＯＦ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｔｏｋｙｏ）、ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＭＥ−２００ＭＡ（ＰＥＧ２０ｋＤａ）（ＮＯＦ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｔｏｋｙｏ）が挙げられる。ＰＥＧ基は、一般的に、ＰＥＧ部分の反応基（例えば、アルデヒド、アミノ、チオール、又はエステル基）を介して、ニューロメジンＵ受容体アゴニストの反応基（例えば、アルデヒド、アミノ、チオール、又はエステル基）へのアシル化又は還元的アルキル化によりニューロメジンＵ受容体アゴニストに付加する。
【００４０】
ＰＥＧ分子は、ニューロメジンＵ受容体アゴニストの任意の位置において、任意のＬｙｓ、Ｃｙｓ、又はＫ（ＣＯ（ＣＨ₂）₂ＳＨ）残基に共有結合してもよい。本明細書に記載されたニューロメジンＵ受容体アゴニストは、Ｎ−末端アミノ基を介して、Ｎ−末端において任意のアミノ酸に直接ペグ化することができる。ペグ化を促進するためにニューロメジンＵ受容体アゴニストに「リンカーアーム」を付加してもよい。システインのチオール側鎖でのペグ化は広く報告されている（例えば、Ｃａｌｉｃｅｔｉ ＆ Ｖｅｒｏｎｅｓｅ， Ａｄｖ． Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ． Ｒｅｖ． ５５： １２６１−７７ （２００３）を参照）。ペプチドにシステイン残基が無い場合は、置換により又はＮ−末端アミノ酸へのシステインの付加によって、システイン残基を導入することができる。ペグ化されているニューロメジンＵ受容体アゴニストは、Ｎ−末端アミノ酸に付加したシステイン残基の側鎖を通じてペグ化されている。
【００４１】
あるいは、ＰＥＧ分子は、ニューロメジンＵ受容体アゴニストのＣ−末端においてアミド基に共有結合していてもよい。一般的に、少なくとも１つのＰＥＧ分子がニューロメジンＵ受容体アゴニストに共有結合している。特定の態様において、ＰＥＧ分子は分岐していてもよいし、別の態様においては、直鎖状であってもよい。特定の態様において、ＰＥＧ分子は、１ｋＤａ〜１００ｋＤａの間の分子量である。更なる態様において、ＰＥＧ分子は、１０、２０、３０、４０、５０、及び６０ｋＤａから選択される。また、更なる態様において、ＰＥＧ分子は、２０、４０、又は６０ｋＤａから選択される。２つのＰＥＧ分子が、本発明のニューロメジンＵ受容体アゴニストに共有結合している場合、それぞれが１〜４０ｋＤａであり、特定の態様において、それらは２０ｋＤａと２０ｋＤａ、１０ｋＤａと３０ｋＤａ、３０ｋＤａと３０ｋＤａ、２０ｋＤａと４０ｋＤａ、又は４０ｋＤａと４０ｋＤａの分子量を有する。特定の態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストはｍＰＥＧ−システインを含む。ｍＰＥＧ−システインのｍＰＥＧは様々な分子量を持つことができる。分子量の範囲は、好ましくは５ｋＤａ〜２００ｋＤａであり、より好ましくは５ｋＤａ〜１００ｋＤａであり、更に好ましくは２０ｋＤａ〜６０ｋＤａである。ｍＰＥＧは、直鎖状又は分岐状であってよい。
【００４２】
現在、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、Ｎ−末端アミノ酸に結合したシステインの側鎖を通じてペグ化されていることが望ましい。現在、アゴニストは、ｍＰＥＧ−システインを含むことが好ましい。ｍＰＥＧ−システイン中のｍＰＥＧは、様々な分子量を持つことができる。分子量の範囲は、好ましくは５ｋＤａ〜２００ｋＤａであり、より好ましくは５ｋＤａ〜１００ｋＤａであり、更に好ましくは２０ｋＤａ〜６０ｋＤａである。ｍＰＥＧは、直鎖状又は分岐状であってよい。
【００４３】
合成したニューロメジンＵ受容体アゴニストのペグ化に有用なストラテジーは、溶液中で共役結合を形成することにより、相互に反応性である特別の官能基をそれぞれが有するペプチドとＰＥＧ部分を結合することから成る。ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、従来の固相合成法により容易に調製することができる。ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、特定部位において適当な官能基によって「予備活性化」される。ＰＥＧ部分と反応させる前に、前駆体を精製し、完全に同定する。ペプチドとＰＥＧの結合は、通常は水相で行い、逆相の分析用ＨＰＬＣにより容易にモニターすることができる。ペグ化されたニューロメジンＵ受容体アゴニストは、カチオン交換クロマトグラフィー又は分取ＨＰＬＣにより容易に精製することができ、分析用ＨＰＬＣ、アミノ酸分析及びレーザー脱離質量分析により同定することができる。
【００４４】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、例えば、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸エステル化、カルボキシル化、メチル化、あるいは他の任意の操作又は修飾（例えば、標識成分との接合など）などの他の非配列性修飾を含むことができる。一方、特定の態様において、本明細書のニューロメジンＵ受容体アゴニストは、天然アミノ酸、又は天然アミノ酸のＤイソ型、非天然のアミノ酸（例えば、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウム、ノルロイシン、ε−アミノカプロン酸、４−アミノブタン酸、テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸、８−アミノカプリル酸、４アミノ酪酸、Ｌｙｓ（Ｎ（ε）−トリフルオロアセチル）又は合成類似体（例えば、ｏ−アミノイソ酪酸、ｐ−又はｙ−アミノ酸、並びに環状類似体））を利用する。さらなる態様において、本ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、ニューロメジンＵ受容体アゴニストである第一の部分、及び異種ペプチドである第二の部分を有する融合タンパク質を含む。
【００４５】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、修飾されていないニューロメジンＵ受容体アゴニストと本質的に同じ活性を有する誘導体、及び／又は他の望ましい特性を有する誘導体を生成するために、様々な化学的手法により修飾されてもよい。Ｃ−末端カルボキシル基に共有結合した保護基は、インビボ条件下でカルボキシ末端の反応性を低下させる。例えば、ペプチドのカルボン酸基は、カルボキシル末端であるか側鎖であるかにかかわらず、薬理学的に許容されるカチオンの塩の形態で提供されてもよく、又はＣ_1-6エステルを形成するためにエステル化されてもよく、又は式ＮＲＲ₂（式中、Ｒ及びＲ₂は、それぞれ独立して、Ｈ、又はＣ_1-6アルキルであるか、又は一緒になって、例えば、５又は６員の複素環を形成する）のアミドに変換されてもよい。カルボキシ末端保護基は、好ましくは、最後のアミノ酸のα−カルボニル基に結合する。カルボキシ末端保護基としては、アミド、メチルアミド、及びエチルアミドが挙げられるが、これに限定されるものではない。ペプチドのアミノ基は、Ｎ−末端であるか側鎖であるかにかかわらず、薬理学的に許容される酸付加塩（例えば、ＨＣｌ塩、ＨＢｒ塩、酢酸塩、ベンゼン酸塩、トルエンスルホン酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、及び他の有機塩）の形態であってもよく、又はＣ_1-6アルキル又はジアルキルアミノに修飾されてもよく、あるいは、更にアミドに変換されてもよい。
【００４６】
ニューロメジンＵ受容体アゴニスト側鎖の水酸基は、周知の手法を使用してＣ_1-6アルコキシ又はＣ_1-6エステルへ変換してもよい。ペプチド側鎖のフェニル及びフェノール環は、フッ素、塩素、ホウ素、又はヨウ素などの１つ以上のハロゲン原子、あるいはＣ_1-6アルキル、Ｃ_1-6アルコキシ、カルボン酸、及びそれらのエステル、あるいはそのようなカルボン酸のアミドで置換されていてもよい。ニューロメジンＵ受容体アゴニストの側鎖のメチレン基は、相同のＣ_2-4アルキレンに延長することができる。チオールは、アセトアミド基などの周知の多くの保護基のいずれか１つによって保護することができる。また、当業者は、構造の安定性を高めるために、構造的制約を選択し、構造に構造的制約を与え、それによって構造の安定性を高めるため、本発明のペプチドに環状構造を導入する方法も周知である。例えば、酸化されたペプチドがジスルフィド結合を含む場合、それによって環状ペプチドが生成されるように、カルボキシ末端システイン残基又はアミノ末端システイン残基をペプチドに付加することができる。他のペプチドを環化する方法としては、チオエーテルあるいはカルボキシ−末端又はアミノ末端のアミド及びエステルの形成が挙げられる。
【００４７】
多糖ポリマーは、タンパク質修飾に使用できる別のタイプの水溶性ポリマーである。デキストランは、主にα１−６結合によって結合されたグルコースの個々のサブユニットから構成された多糖ポリマーである。デキストラン自体は、多くの分子量のものが入手可能であり、約１ｋＤａ〜約７０ｋＤａの分子量のものが容易に入手可能である。デキストランは、単独で媒体（ｖｅｈｉｃｌｅ）として使用する、又は別の媒体（ｖｅｈｉｃｌｅ）と組み合わせて使用するのに好適な水溶性ポリマーである（例えば、ＷＯ９６／１１９５３号及び同第９６／０５３０９号を参照のこと）。治療用又は診断用の免疫グロブリンと結合したデキストランの使用について報告されている（例えば、欧州特許公開第０３１５４５６号を参照のこと）。デキストランを、本発明による媒体（ｖｅｈｉｃｌｅ）として使用する場合、約１ｋＤａ〜約２０ｋＤａのデキストランが好ましい。
【００４８】
上記で説明したように、「リンカー」基が存在してもよい。存在する場合、これは、主としてスペーサーとして機能するため、化学構造は重要ではない。しかしながら、ある特定の実施態様において、リンカー自体が本発明の組成物の特性を向上させる場合もある。このリンカーは、好ましくはペプチド結合によって結合されたアミノ酸から構成される。従って、特定の実施態様において、リンカーは、ペプチド結合によって連結された１〜２０個のアミノ酸（アミノ酸は、２０個の天然に存在するアミノ酸より選択される）から構成される。当業者にはよく理解されるように、これらのアミノ酸のいくつかは、グリコシル化されてもよい。より好ましい実施態様において、１〜２０個のアミノ酸は、グリシン、アラニン、プロリン、アスパラギン、グルタミン、及びリジンから選択される。更により好ましくは、リンカーは、グリシン及びアラニンのような立体障害を受けない多くのアミノ酸で構成される。従って、好ましいリンカーは、ポリグリシン（特に、（Ｇｌｙ）₄、（Ｇｌｙ）₅）、ポリ（Ｇｌｙ−Ａｌａ）及びポリアラニンである。リンカーの他の具体例としては、（Ｇｌｙ）₃Ｌｙｓ（Ｇｌｙ）₄；（Ｇｌｙ）₃ＡｓｎＧｌｙＳｅｒ（Ｇｌｙ）₂；（Ｇｌｙ）₃Ｃｙｓ（Ｇｌｙ）₄；及びＧｌｙＰｒｏＡｓｎＧｌｙＧｌｙが挙げられる。
【００４９】
また、非ペプチド型リンカーも使用することができる。例えば、−ＮＨ−（ＣＨ₂）_s−Ｃ（Ｏ）−［式中、ｓ＝２〜２０］のようなアルキルリンカーを使用することができる。これらのアルキルリンカーは、更に、例えば、低級アルキル（例えば、Ｃ_1-6）低級アシル、ハロゲン（例えば、Ｃｌ、Ｂｒ）、ＣＮ、ＮＨ₂、フェニル等のような任意の立体障害を生じない基によって置換されていてもよい。例示的な非ペプチドリンカーは、ＰＥＧリンカー［ここで、ｎは、リンカーの分子量が１００〜５０００ｋＤａ、好ましくは１００〜５００ｋＤａであるような値である。ペプチドリンカーは、上記と同様の方法によって誘導体を形成するため修飾されてもよい。他のリンカーとしては、Ｔｔｄｓ（１−アミノ−４，７，１０−トリオキサ−１３−トリデカンアミンスクシンイミド酸）が挙げられる。
【００５０】
本発明は、ジアステレオマー、及びそれらのラセミ体、並びに分割されたエナンチオマー的に純粋な形態を含む。ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、Ｄ−アミノ酸、Ｌ−アミノ酸、又はそれらの組み合わせを含む。一般的に、アミノ酸は、Ｄ体の特定のアミノ酸を含有するＬ体である。当該技術分野で知られているように、個々のアミノ酸は、以下のように表すことができる：Ａ＝Ａｌａ＝アラニン；Ｃ＝Ｃｙｓ＝システイン；Ｄ＝Ａｓｐ＝アスパラギン酸；Ｅ＝Ｇｌｕ＝グルタミン酸；Ｆ＝Ｐｈｅ＝フェニルアラニン；Ｇ＝Ｇｌｙ＝グリシン；Ｈ＝Ｈｉｓ＝ヒスチジン；Ｉ＝Ｉｌｅ＝イソロイシン；Ｋ＝Ｌｙｓ＝リシン；Ｌ＝Ｌｅｕ＝ロイシン；Ｍ＝Ｍｅｔ＝メチオニン；Ｎ＝Ａｓｎ＝アスパラギン；Ｐ＝Ｐｒｏ＝プロリン；Ｑ＝Ｇｌｎ＝グルタミン；Ｒ＝Ａｒｇ＝アルギニン；Ｓ＝Ｓｅｒ＝セリン；Ｔ＝Ｔｈｒ＝トレオニン；Ｖ＝Ｖａｌ＝バリン；Ｗ＝Ｔｒｐ＝トリプトファン；及びＹ＝Ｔｙｒ＝チロシン。
【００５１】
アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｆ−Ｌ−Ｆ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｎ（配列番号１）（ここで、アミノ酸１〜１７は、任意のアミノ酸又は欠失であってよい）を含む本発明のニューロメジンＵ受容体アゴニストの例を表１に示す。ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、Ｃ−末端においてアミノ基によって保護され、Ｎ−末端においてアセチル基によって保護されている（ニューロメジンＵ受容体アゴニストＮＭＵ１を除く）。ニューロメジンＵ受容体アゴニストＮＭＵ２を除いて、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、更に、Ｎ−末端においてシステイン残基を有しており、そのシステイン残基のアミノ基にアセチル基が共有結合している。表に示すように、多くのニューロメジンＵ受容体アゴニストでは、システイン残基のチオール基が、第二の基と反応する。例えば、Ｎ−末端においてＣ₁で示された表中のニューロメジンＵ受容体アゴニストでは、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、チオール基を介してＮ−エチルマレイミジルに結合したニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端においてＮ−アセチル化されたシステイン残基を有し；Ｎ−末端においてＣ₂で示された表中のニューロメジンＵ受容体アゴニストでは、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、チオール基を介して（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａに結合したニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端においてＮ−アセチル化されたシステイン残基を有し；ニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端においてＣ₄で示された表中のニューロメジンＵ受容体アゴニストでは、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、チオール基を介して（ＰＥＧ）２０ｋＤａに結合したニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端においてＮ−アセチル化されたシステイン残基を有し；ニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端においてＣ₅で示された表中のニューロメジンＵ受容体アゴニストでは、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、チオール基を介して（ＰＥＧ）₂２０ｋＤａに結合したニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端においてＮ−アセチル化されたシステイン残基を有し；ニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端においてＣ₆で示された表中のニューロメジンＵ受容体アゴニストでは、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、チオール基を介して（ＰＥＧ）４０ｋＤａに結合したニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端においてＮ−アセチル化されたシステイン残基を有し；ニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端においてＣ₃で示された表中のニューロメジンＵ受容体アゴニストでは、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、チオール基を介してコレステロールに結合したニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ−末端においてＮ−アセチル化されたシステイン残基を有する。
【００５２】
【表１−１】

【００５３】
【表１−２】

【００５４】
【表１−３】

【００５５】
配列番号２５のアミノ酸配列を含むニューロメジンＵ受容体アゴニストを除いて、表１に示したニューロメジンＵ受容体アゴニストは、ＮＭＵＲ１受容体又はＮＭＵＲ２受容体のどちらでも結合及び活性化することができるという点で二重特異性である。配列番号２５を含むニューロメジンＵ受容体アゴニストは、ＮＭＵＲ１特異的であることがわかっている。表１に示したニューロメジンＵ受容体アゴニストのペグ化は、ニューロメジンＵ受容体アゴニストの血中半減期を伸ばすようであり、そして重要なことに、ＮＭＵ１２のような特定のニューロメジンＵ受容体アゴニストが血液−脳関門を通過することを可能にするようである。例えば、実施例４並びに図６Ａ及び６Ｂに示すように、ＮＭＵ１２は、Ｎｍｕｒ１ノックアウトマウスにおいて、食物摂取を減少させ、体重増を減少させることが可能のようであった。結果は、末梢投与されたペグ化ペプチドＮＭＵ１２は、血液−脳関門を通過することが可能であることを示している。ペグ化は、ＮＭＵ１、ＮＭＵ９、及びＮＭＵ２０の血中半減期を３日間、ＮＭＵ１及びＮＭＵ１８を２日間延ばすようであった。ＮＭＵ９及びＮＭＵ１２は、Ｎ−末端システイン残基のチオール基に共有結合した（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａの供給源が異なっている。
【００５６】
アミノ酸配列Ｆ−Ｒ−Ｖ−Ｄ−Ｅ−Ｅ−Ｆ−Ｑ−Ｓ−Ｐ−Ｆ−Ａ−Ｓ−Ｑ−Ｓ−Ｒ−Ｇ−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号７）又はＸ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸（配列番号８）（ここで、アミノ酸Ｘ¹⁸又はＸ¹は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹又はＸ²は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰又はＸ³は、欠失、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹又はＸ⁴は、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ²²又はＸ⁵は、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³又はＸ⁶は、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴又はＸ⁷は、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ²⁵又はＸ⁸は、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、又はＡである）を含む本発明のニューロメジンＵ受容体アゴニストの例。上記のアミノ酸配列を有するペプチドの例を表２に示す。一般的に、配列番号７又は配列番号８を含むペプチドは、ＮＭＵＲ１受容体に対して特異的であるが、実施例に示すように、ニューロメジンＵ受容体アゴニストのＮ、Ｏ、及びＰは二重特異性である。
【００５７】
【表２】

【００５８】
更に、個体における代謝性障害の治療のための、本明細書で開示された１つ以上のニューロメジンＵ受容体アゴニストの治療有効量を含む医薬組成物を提供する。そのような障害としては、これに限定されるものではないが、肥満、メタボリックシンドローム又はＸ症候群、ＩＩ型糖尿病、網膜障害などの糖尿病の合併症、高血圧症、脂質異常症、心臓血管疾患、胆石、変形性関節症、及びある特定の形態の癌が挙げられる。本明細書の肥満関連障害は、肥満に関連するか、肥満を原因とするか、又は肥満の結果である。
【００５９】
「肥満」とは、過剰の体脂肪が存在する状態である。肥満の運用上の定義は、身長に対する平方当たりの体重（ｋｇ／ｍ²）として計算される肥満指数（ＢＭＩ）に基づいたものである。「肥満」とは、他の点では、健康な被験者が３０ｋｇ／ｍ²以上の肥満指数（ＢＭＩ）を有する状態、又は少なくとも一つの併発症を有する被験者が２７ｋｇ／ｍ²以上のＢＭＩを有する状態を指す。「肥満被験者」は、肥満指数（ＢＭＩ）が３０ｋｇ／ｍ²以上の他の点では健康な被験者又はＢＭＩが２７ｋｇ／ｍ^２以上の少なくとも一つの併発症を有する被験者である。「肥満の危険性がある被験者」とは、ＢＭＩが２５ｋｇ／ｍ^２から３０ｋｇ／ｍ^２未満の、他の面では健常な被験者、又はＢＭＩが２５ｋｇ／ｍ^２から２７ｋｇ／ｍ^２未満の、少なくとも一つの併発症を有する被験者である。
【００６０】
肥満に関連するリスクの増加は、アジア人の場合、比較的低い肥満指数（ＢＭＩ）で起こる。日本などのアジア諸国では、「肥満」とは、減量を必要とする、あるいは減量によって改善されると考えられる、少なくとも一つの肥満誘発又は肥満関連の併発症を有する被験者が、２５ｋｇ／ｍ^２以上のＢＭＩを有する状態を意味する。日本などのアジア諸国では、「肥満被験者」とは、２５ｋｇ／ｍ^２以上のＢＭＩを有し、減量を必要とするあるいは減量によって改善されると考えられる少なくとも一つの肥満誘発又は肥満関連の併発症を有する被験者を指す。アジア諸国では、「肥満の危険性がある被験者」とは、ＢＭＩが２３ｋｇ／ｍ^２より大きく、２５ｋｇ／ｍ^２未満である被験者である。
【００６１】
本明細書で使用される場合、「肥満」という用語は、上記の肥満の定義の全てを包含するものである。
【００６２】
肥満誘発又は肥満関連の併発症としては、糖尿病、非インシュリン依存型糖尿病−ＩＩ型、耐糖能障害、空腹時血糖障害、インシュリン耐性症候群、脂質異常症、高血圧、高尿酸血症、痛風、冠動脈疾患、心筋梗塞、狭心症、睡眠無呼吸症候群、ピックウィック症候群、脂肪肝；脳梗塞、脳血栓症、一過性虚血発作、整形外科障害、変形性関節炎、ルンボジニア（ｌｕｍｂｏｄｙｎｉａ）、月経異常、及び不妊症が挙げられるが、これらに限定されるものではない。特に、併発症には高血圧、高脂血症、脂質異常症、耐糖能異常、心臓血管疾患、睡眠時無呼吸、糖尿病及び他の肥満関連状態などがある。
【００６３】
「（肥満及び肥満関連疾患の）治療」とは、肥満被験者の体重を減少又は維持するために、本発明の化合物を投与することを意味する。治療の一つの結果は、本発明の化合物の投与直前の被験者の体重と比較して肥満被験者の体重が減少することであってもよい。治療の別の結果は、食事、運動又は薬物療法の結果として以前失われた体重の再獲得であってもよい。治療のさらなる別の結果は、肥満関連疾患の発生及び／又は重症度の低下であってもよい。治療は、総食物摂取の低下、あるいは炭水化物もしくは脂肪などの食事の具体的な成分の摂取の減少などの被験者による食物又はカロリー摂取の減少；及び／又は栄養素吸収の阻害；及び／又は代謝速度低下の阻害；並びにそれらを必要とする患者における体重の減少、を適度に生じさせるものであってよい。また、その治療は、代謝速度低下を阻害しないか、あるいは代謝速度低下の阻害に加えて、代謝速度の上昇などの代謝速度変化；及び／又は通常は減少によって生じる代謝抵抗性の低減を生じさせ得る。
【００６４】
「（肥満及び肥満関連疾患の）予防」とは、肥満の危険性がある被験者の体重を低減又は維持するために、本発明の化合物を投与することを意味する。予防の一つの結果は、本発明の化合物の投与直前の被験者の体重と比較して、肥満の危険性がある被験者の体重が減少することであってもよい。予防の別の結果は、食事、運動又は薬物療法の結果としての以前失われた体重の再獲得であってもよい。予防の更に別の結果としては、肥満の危険性がある被験者に対して肥満発症前に投与を行った場合における肥満発生の防止であってもよい。予防の別の結果としては、肥満の危険性がある被験者に対して肥満発症前に投与を行った場合における肥満関連疾患の発生及び／又は重症度の低下であってもよい。更に、すでに糖尿病である被験者において治療を開始する場合、そのような治療は、アテローム性動脈硬症、ＩＩ型糖尿病、多嚢胞卵巣、心臓血管疾患、変形性関節症、皮膚障害、高血圧、インシュリン耐性、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症及び胆石症などの肥満関連疾患の発生、進行又は重症化を予防することができる。
【００６５】
本明細書での肥満関連疾患は、肥満に関連しているか、それを原因としているか、あるいはそれの結果である。肥満関連疾患の例としては、過食及び大食、高血圧、糖尿病、血漿インシュリン濃度上昇及びインシュリン耐性上昇、脂質異常症、高脂血症、子宮内膜癌、乳癌、前立腺癌及び結腸癌、変形性関節症、閉塞性睡眠時無呼吸、胆石症、胆石、心臓疾患、異常心臓リズム及び不整脈、心筋梗塞、鬱血性心不全、冠性心疾患、突然死、卒中、多嚢胞性卵巣、頭蓋咽頭腫、プラダー−ウィリ症候群、フレーリッヒ症候群、ＧＨ欠乏被験者、ノーマルバリアント低身長、ターナー症候群、並びに急性リンパ芽球性白血病小児などの代謝活性の低下又は総非脂肪重量の比率として休止時エネルギー消費における減少を示す他の病的状態が挙げられる。肥満関連疾患の更に別の例としては、Ｘ症候群とも称される代謝症候群、インシュリン耐性症候群、不妊などの性的及び生殖機能不全、男性における性腺機能低下症及び女性における男性型多毛症、肥満関連胃食道逆流などの消化管運動性障害、肥満性低換気症候群などの呼吸器障害（ピックウィック症候群）、心血管障害、血管系の全身炎症などの炎症、アテローム性動脈硬化、高コレステロール血症、高尿酸血症、腰痛、胆嚢疾患、痛風及び腎臓癌が挙げられる。また、本発明の組成物は、左心室肥大のリスク低下などの肥満の二次的結果のリスクの低下にも有用である。
【００６６】
本明細書で使用される「糖尿病」という用語は、インシュリン依存型糖尿病（ＩＤＤＭ、また、Ｉ型糖尿病とも称される）及び非インシュリン依存型糖尿病（ＮＩＤＤＭ、また、ＩＩ型糖尿病とも称される）の両方を包含する。Ｉ型糖尿病、すなわちインシュリン依存型糖尿病は、グルコース利用を調節するホルモンであるインシュリンの完全欠乏の結果である。ＩＩ型糖尿病、すなわち非インシュリン依存型糖尿病（すなわち、インシュリン依存型ではない糖尿病）は多くの場合、インシュリンレベルが正常又は高いにも拘わらず起こるものであり、組織がインシュリンに対して適切に応答できないことの結果であるように思われる。また、ＩＩ型糖尿病患者のほとんどが肥満でもある。本発明の化合物は、Ｉ型及びＩＩ型の両方の糖尿病の治療に対して有用である。この化合物は、特にＩＩ型糖尿病の治療において有用である。また、本発明の化合物は、妊娠性糖尿病の治療及び／又は予防においても有用である。
【００６７】
本明細書で開示されたニューロメジンＵ受容体アゴニストは、薬学的に許容される担体と組み合わせた場合に、医薬組成物に使用してもよい。そのような組成物は、治療有効量のニューロメジンＵ受容体アゴニスト及び薬学的に許容される担体を含む。また、そのような組成物は、（ニューロメジンＵ受容体アゴニスト及び担体に加え）当該技術分野で周知の稀釈剤、充てん剤（ｆｉｌｌｅｒｓ）、塩、緩衝剤、安定剤、可溶化剤、及び他の物質を含んでもよい。ニューロメジンＵ受容体アゴニストを含む組成物は、所望であれば、塩の形態（ただし、その塩は薬学的に許容されるものである）で投与することができる。塩は、合成有機化学の当業者に既知の標準的な手法を用いて調製されてもよい。
【００６８】
用語「個体」は、ヒト並びにイヌ、ネコ、ウマなどのペット又は家畜を含むことが意図される。したがって、式（Ｉ）を有する組成物は、ネコ及びイヌにおける肥満及び肥満関連障害の治療又は予防に有用でもある。そういうものとして、用語「哺乳動物」は、ネコ及びイヌなどのペットを含む。
【００６９】
「薬学的に許容される塩」という語は、無機塩基又は有機塩基、並びに無機酸又は有機酸、を含む薬学的に許容される非毒性の塩基又は酸から調製した塩を意味する。無機塩基から得られる塩としては、アルミニウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、銅塩、第二鉄塩、第一鉄塩、リチウム塩、マグネシウム塩、第二マンガン塩、第一マンガン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、亜鉛塩等が挙げられる。特に好ましいのは、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩及びナトリウム塩である。薬学的に許容される非毒性の有機塩基から得られる塩としては、第一級、第二級、及び第三級アミン、天然置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、並びに塩基性イオン交換樹脂、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ、Ｎ′−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミン等の塩が挙げられる。「薬学的に許容される塩」という用語には更に、溶解度又は加水分解特性を修飾するための製剤として、あるいは徐放製剤又はプロドラッグ製剤において使用することができる酢酸塩、ラクトビオン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ラウリル酸塩、安息香酸塩、リンゴ酸塩、重炭酸塩、マレイン酸塩、重硫酸塩、マンデル酸塩、重酒石酸塩、メシル酸塩、ホウ酸塩、臭化メチル塩、臭化物、硝酸メチル塩、カルシウムエデト酸塩、メチル硫酸塩、カムシル酸塩、ムコ酸塩、炭酸塩、ナプシル酸塩、塩化物、硝酸塩、クラブラン酸塩、Ｎ−メチルグルカミン塩、クエン酸塩、アンモニウム塩、２塩酸塩、オレイン酸塩、エデト酸塩、シュウ酸塩、エジシル酸塩、パモ酸塩（エンボン酸塩）、エストレート、パルミチン酸塩、エシル酸塩、パントテン酸塩、フマル酸塩、リン酸塩／２リン酸塩、グルセプト酸塩、ポリガラクツロン酸塩、グルコン酸塩、サリチル酸塩、グルタミン酸塩、ステアリン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、硫酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、塩基性酢酸塩、ヒドラバミン、コハク酸塩、臭化水素酸塩、タンニン酸塩、塩酸塩、酒石酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、テオクル酸塩、ヨウ化物、トシル酸塩、イソチオン酸塩、トリエチオジド、乳酸塩、パノエート（ｐａｎｏａｔｅ）、吉草酸塩などの全ての許容される塩が含まれる。本明細書で使用される場合、一般式（Ｉ）のニューロメジンＵ受容体アゴニストについての言及は、薬学的に許容される塩を含むことが意図されると理解される。
【００７０】
本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される」とは、連邦政府又は州政府の規制当局により承認されているか、動物及び特にヒトにおいての使用のために米国薬局方又は一般的に認可された他の薬局方に一覧されている、活性成分の生物学的活性の有効性を妨げない非毒性の物質を意味する。用語「担体」は、薬剤と共に投与される稀釈剤、補助剤、賦形剤、又は媒体（ｖｅｈｉｃｌｅ）を意味し、そして、水及び油のような滅菌した液体を含むが、これらに限定されるものではない。担体の特徴は、投与経路に依存する。ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、多量体（例えば、ヘテロダイマー又はホモダイマー）又はそれ自身と他のペプチドとの複合体であってもよい。その結果、本発明の医薬組成物は、多量体又は複合体の形態で１種以上のニューロメジンＵ受容体アゴニストを含んでもよい。
【００７１】
本明細書中で使用される場合、用語「治療有効量」とは、患者にとって意味のある利益（例えば、関連する病状の治療、治癒、予防、又はそのような状態の改善、又は治療、治癒、予防、又は改善率の上昇）を示すのに十分である、医薬組成物又は方法の各活性成分の総量を意味する。単独で投与される個々の活性成分に適用される場合、この用語は、その成分単独を意味する。組み合わせて適用される場合、この用語は、組み合わせで投与されるか、逐次投与されるか、又は同時に投与されるかにかかわらず、治療効果をもたらす活性成分の合計量を意味する。
【００７２】
医薬組成物は、１種以上のニューロメジンＵ受容体アゴニスト；１種以上のニューロメジンＵ受容体アゴニスト及び代謝性障害の治療のための１種以上の他の薬剤を含むことができるか、又は１種以上のニューロメジンＵ受容体アゴニストを含む医薬組成物は、代謝性障害を治療するための薬剤を含む医薬組成物と同時に使用することができる。そのような障害としては、これに限定されるものではないが、肥満、メタボリックシンドローム又はＸ症候群、ＩＩ型糖尿病、糖尿病の合併症、高血圧症、脂質異常症、心臓血管疾患、胆石、変形性関節症、及びある特定の型の癌が挙げられる。
【００７３】
医薬組成物が、代謝性障害を治療するための他の薬剤を含む場合、又は、治療が代謝性障害を治療するための薬剤を含む第二の医薬組成物を包含する場合、その薬剤としては、これに限定されるものではないが、カンナビノイド（ＣＢｌ）受容体アンタゴニスト、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）受容体アゴニスト、リパーゼインヒビター、レプチン、テトラヒドロリプスタチン、２−４−ジニトロフェノール、アカルボース、シブトラミン、フェンタミン、脂肪吸収遮断薬、シンバスタチン、メバスタチン、エゼチミブ、アトルバスタチン、シタグリプチン、メトホルミン、オーリスタット（ｏｒｌｉｓｔａｔ）、Ｑｎｅｘａ、トピラメート、ナルトレキソン、ブプロピオン、フェンテルミン、ロサルタン、ロサルタン／ヒドロクロロチアジドなどが挙げられる。
【００７４】
本発明の化合物と併用される好適な薬剤を以下に挙げるが、これに限定されるものではない。
【００７５】
（ａ）抗糖尿病医薬品、例えば、（１）グリタゾン（ｇｌｉｔａｚｏｎｅ）などのＰＰＡＲγアゴニスト（例えば、シグリタゾン；ダルグリタゾン（ｄａｒｇｌｉｔａｚｏｎｅ）；エングリタゾン；イサグリタゾン（ｉｓａｇｌｉｔａｚｏｎｅ）（ＭＣＣ−５５５）；ピオグリタゾン（ＡＣＴＯＳ）；ロシグリタゾン（ｒｏｓｉｇｌｉｔａｚｏｎｅ）（ＡＶＡＮＤＬＡ）；トログリタゾン；リボグリタゾン（ｒｉｖｏｇｌｉｔａｚｏｎｅ）、ＢＲＬ４９６５３；ＣＬＸ−０９２１；５−ＢＴＺＤ、ＧＷ−０２０７、ＬＧ−１００６４１、Ｒ４８３、及びＬＹ−３００５１２など、並びにＷＯ９７／１０８１３号、同第９７／２７８５７号、同第９７／２８１１５号、同第９７／２８１３７号、同第９７／２７８４７号、同第０３／０００６８５号、及び同第０３／０２７１１２号で開示された化合物、並びに、Ｔ１３１（Ａｍｇｅｎ）、ＦＫ６１４（Ｆｕｊｉｓａｗａ）、ネトグリタゾン（ｎｅｔｏｇｌｉｔａｚｏｎｅ）、及びメタグリダセン（ｍｅｔａｇｌｉｄａｓｅｎ）などのＳＰＰＡＲＭＳ（選択的ＰＰＡＲガンマモジュレーター）；（２）ブホルミン、メトホルミン、フェンホルミンなどのビグアニド；（３）タンパク質チロシンホスファターゼ１Ｂ（ＰＴＰ−ＩＢ）インヒビター、例えば、ＩＳＩＳ １１３７１５、Ａ−４０１６７４、Ａ−３６４５０４、ＩＤＤ−３、ＩＤＤ ２８４６、ＫＰ−４００４６、ＫＲ６１６３９、ＭＣ５２４４５、ＭＣ５２４５３、Ｃ７、ＯＣ−０６００６２、ＯＣ−８６８３９、ＯＣ２９７９６、ＴＴＰ−２７７ＢＣ１、並びに、ＷＯ０４／０４１７９９号、同第０４／０５０６４６号、同第０２／２６７０７号、同第０２／２６７４３号、同第０４／０９２１４６号、同第０３／０４８１４０号、同第０４／０８９９１８号、同第０３／００２５６９号、同第０４／０６５３８７号、同第０４／１２７５７０号、及びＵＳ２００４／１６７１８３号で開示された薬剤；（４）アセトヘキサミドなどのスルホニル尿素；クロルプロパミド；ジアビネース；グリベンクラミド；グリピジド； グリブリド； グリメピリド； グリクラジド； グリペンジド（ｇｌｉｐｅｎｔｉｄｅ）； グリキドン； グリソラミド（ｇｌｉｓｏｌａｍｉｄｅ）； トラザミド、及びトルブタミドなど；（５）レパグリニドや、メチグリニド（ｍｅｔｉｇｌｉｎｉｄｅ）（グルファスト）、及びナテグリニドなどのメグリチニド；（６）アカルボースなどのアルファグルコシドヒドロラーゼインヒビター；アジポシン（ａｄｉｐｏｓｉｎｅ）；カミグリボース（ｃａｍｉｇｌｉｂｏｓｅ）；エミグリタート；ミグリトール；ボグリボース；プラディマイシン−Ｑ；サルボスタチン；ＣＫＤ−７１１；ＭＤＬ−２５，６３７；ＭＤＬ−７３，９４５；及びＭＯＲ１４など；（７）テンダミスタット、トレスタチン、及びＡｌ−３６８８などのアルファ−アミラーゼインヒビター；
（８）リノグリリド、ナテグリニド、ミチグリニド（グルファスト）、ＩＤ１１０１、Ａ−４１６６などのインスリン分泌促進剤；（９）クロモキシル及びエトモキシル並びに同様のものなどの脂肪酸酸化防止剤；（１０）ミダグリゾール；イサグリドール；デリグリドール；イダゾキサン；エーロキサン；及びフルパロキサンなどのＡ２拮抗薬；（１１）インスリン又はインスリン模倣薬、例えば、ビオタ、ＬＰ−１００，ノバラピド、インスリンデテミル、インスリンリスプロ、インスリングラルギン、インスリン亜鉛懸濁液（レンテ及びウルトラレンテ）；Ｌｙｓ−Ｐｒｏインスリン、ＧＬＰ−１（１７−３６）、ＧＬＰ−１（７３−７）（インスリントロピン）；ＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２）エキセナチド／エキセンジン−４、エキセナチドＬＡＲ、リナグルチド（Ｌｉｎａｇｌｕｔｉｄｅ）、ＡＶＥ００１０、ＣＪＣ１１３１、ＢＩＭ５１０７７、ＣＳ８７２、ＴＨＯ３１８、ＢＡＹ−６９４３２６、ＧＰ０１０、ＡＬＢＵＧＯＮ（アルブミンに縮合したＧＬＰ−Ｉ）、ＨＧＸ−００７（Ｅｐａｃアゴニスト）、Ｓ−２３５２１、及びＷＯ０４／０２２００４号、同第０４／３７８５９号において開示された化合物など；（１２）ＪＴ−５０１及びファルグリタザール（ＧＷ−２５７０／ＧＩ−２６２５７９）などの非チアゾリジンジオンなど；（１３）ＰＰＡＲα／γデュアルアゴニスト、例えば、ＡＶＥ ０８４７、ＣＬＸ−０９４０、ＧＷ−１５３６、ＧＷ１９２９、ＧＷ−２４３３、ＫＲＰ−２９７、Ｌ−７９６４４９、ＬＢＭ ６４２、ＬＲ−９０、ＬＹ５１０９１９、ＭＫ−０７６７、ＯＮＯ ５１２９、ＳＢ ２１９９９４、ＴＡＫ−５５９、ＴＡＫ−６５４、６７７９５４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）、Ｅ−３０３０（Ｅｉｓａｉ）、ＬＹ５１０９２９（Ｌｉｌｌｙ）、ＡＫｌ０９（Ａｓａｈｉ）、ＤＲＦ２６５５ （Ｄｒ．Ｒｅｄｄｙ）、ＤＲＦ８３５１（Ｄｒ．Ｒｅｄｄｙ）、ＭＣ３００２（Ｍａｘｏｃｏｒｅ）、ＴＹ５１５０１（ＴｏａＥｉｙｏ）、ナベグリタザル、ムラグリタザル、ペリグリタザル、テサグリタザル（ＧＡＬＩＤＡ）、レグリタザル（ＪＴＴ−５０１）、チグリタザル（ｃｈｉｇｌｉｔａｚａｒ）、及びＷＯ９９／１６７５８号、同第９９／１９３１３号、同第９９／２０６１４号、同第９９／３８８５０号、同第００／２３４１５号、同第００／２３４１７号、同第００／２３４４５号、同第００／５０４１４号、同第０１／００５７９号、同第０１／７９１５０号、同第０２／０６２７９９号、同第０３／０３３４８１号、同第０３／０３３４５０号、同第０３／０３３４５３で開示されたもの；及び（１４）他のインスリン抵抗性改善薬；（１５）ＶＰＡＣ２受容体アゴニスト；（１６）ＧＬＫモジュレーター、例えば、ＰＳＮｌ０５、ＲＯ ２８１６７５、ＲＯ ２７４３７５、及びＷＯ０３／０１５７７４号、同第０３／０００２６２号、同第０３／０５５４８２号、同第０４／０４６１３９号、同第０４／０４５６１４号、同第０４／０６３１７９号、同第０４／０６３１９４号、同第０４／０５０６４５で開示されたものなど；（１７）レチノイドモジュレーター、例えば、ＷＯ０３／０００２４９号に開示されているものなど；（１８）ＧＳＫ ３ベータ／ＧＳＫインヒビター、例えば、４−［２−（２−ブロモフェニル）−４−（４−フルオロフェニル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル］ピリジン、ＣＴ２１０２２、ＣＴ２００２６、ＣＴ−９８０２３、ＳＢ−２１６７６３、ＳＢ４１０１１１、ＳＢ−６７５２３６、ＣＰ−７０９４９、ＸＤ４２４１、及びＷＯ０３／０３７８６９号、同第０３／０３８７７号、同第０３／０３７８９１号、同第０３／０２４４４７号、同第０５／０００１９２号、同第０５／０１９２１８で開示された化合物など；（１９）グリコゲンホスホリラーゼ（ＨＧＬＰａ）インヒビター、例えば、ＡＶＥ５６８８、ＰＳＮ３５７、ＧＰｉ−８７９、ＷＯ０３／０３７８６４号、同第０３／０９１２１３号、同第０４／０９２１５８号、同第０５／０１３９７５号、同第０５／０１３９８１号、ＵＳ２００４／０２２０２２９号、及びＪＰ２００４−１９６７０２で開示されたものなど；（２０）ＡＴＰ消費プロモータ、例えば、ＷＯ０３／００７９９０号に開示されているものなど；（２１）ＰＰＡＲγアゴニスト及びメトホルミンの固定組み合わせ、例えば、ＡＶＡＮＤＡＭＥＴ；（２２） ＰＰＡＲ汎アゴニスト、例えば、ＧＳＫ６７７９５４；（２３）ＳＮＯＲＦとも称されるＧＰＲ４０（Ｇ−タンパク質共役受容体）、例えば、ＢＧ ７００、及びＷＯ０４／０４１２６６号、同第０４／０２２５５１号、同第０３／０９９７９３号で開示されたもの；（２４）ＧＰＲｌ１９（ＲＵＰ３；ＳＮＯＲＦ２５、とも称される）、例えば、ＲＵＰ３、ＨＧＰＲＢＭＹ２６、ＰＦＩ００７、ＳＮＯＲＦ２５；（２５）アデノシン受容体２Ｂアンタゴニスト、例えば、ＡＴＬ−６１８、ＡＴ１−８０２、Ｅ３０８０など；（２６）カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼインヒビター、例えば、ＳＴ１３２７、ＳＴ１３２６など；（２７）フルクトース１，６−ビスホスファターゼインヒビター、例えば、ＣＳ−９１７、ＭＢ７８０３など；（２８）グルカゴンアンタゴニスト、例えば、ＡＴ７７０７７、ＢＡＹ ６９４３２６、ＧＷ ４１２３Ｘ、ＮＮ２５Ｏ１、及びＷＯ０３／０６４４０４号、同第０５／００７８１号、ＵＳ２００４／０２０９９２８号、同第２００４／０２９９４３号で開示されたものなど；（３０）グルコース−６−ホスファターゼインヒビター；（３１）ホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）インヒビター；（３２）ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ（ＰＤＫ）アクティベータ；（３３）ＲＸＲアゴニスト、例えば、ＭＣ １０３６、ＣＳ０００ｌ８、ＪＮＪ １０１６６８０６、及びＷＯ０４／０８９９１６号、ＵＳ６７５９５４６号で開示されたものなど；（３４）ＳＧＬＴインヒビター、例えば、ＡＶＥ ２２６８、ＫＧＴ １２５１、Ｔ１０９５／ＲＷＪ３９４７１８；（３５）ＢＬＸ−１００２。
【００７６】
（ｂ）脂質低下薬、例えば、（１）胆汁酸抑制剤、例えば、コレスチラミン、コレセベレム、コレスチポール、架橋デキストランのジアルキルアミノアルキル誘導体；Ｃｏｌｅｓｔｉｄ（登録商標）；ＬｏＣｈｏｌｅｓｔ（登録商標）；及びＱｕｅｓｔｒａｎ（登録商標）など；（２）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素インヒビター、例えば、アトルバスタチン、イタバスタチン、ピタバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、パラバスタチン、リバスタチン、ロスバスタチン、シムバスタチン、ロスバスタチン（ＺＤ−４５２２）など、とくにシンバスタチン；（３）ＨＭＧ−ＣｏＡシンターゼインヒビター；（４）コレステロール吸収インヒビター、例えば、ＦＭＶＰ４ （Ｆｏｒｂｅｓ Ｍｅｄｉ−Ｔｅｃｈ）， ＫＴ６−９７１ （Ｋｏｔｏｂｕｋｉ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）， ＦＭ−ＶＡｌ２ （Ｆｏｒｂｅｓ Ｍｅｄｉ−Ｔｅｃｈ）， ＦＭ−ＶＰ−２４ （Ｆｏｒｂｅｓ Ｍｅｄｉ−Ｔｅｃｈ）、スタノールエステル、β−シトステロール、チクェシドなどのステロール配糖体、及びエゼチミブなどのアゼチジノン；及びＷＯ０４／００５２４７号など（５）アシルコエンザイムＡ−コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）インヒビター、例えば、アバシミブ、エフルチミブ、パクチミブ（ＫＹ５０５）、ＳＭＰ７９７（Ｓｕｍｉｔｏｍｏ）、ＳＭ３２５０４（Ｓｕｍｉｔｏｍｏ）、及びＷＯ０３／０９１２１６号で開示されたものなど；（６）ＣＥＴＰインヒビター、例えば、ＪＴＴ ７０５ （Ｊａｐａｎ Ｔｏｂａｃｃｏ）、トルセトラピブ、ＣＰ ５３２，６３２、ＢＡＹ６３−２１４９（Ｂａｙｅｒ）、ＳＣ ５９１、ＳＣ ７９５など；（７）スクアレンシンセターゼインヒビター；（８）酸化防止剤、例えばプロブコールなど；（９）ＰＰＡＲαアゴニスト、例えば、ベクロフィブレート（ｂｅｃｌｏｆｉｂｒａｔｅ）、ベンザフィブレート（ｂｅｎｚａｆｉｂｒａｔｅ）、シプロフィブレート、クロフィブレート、エトフィブレート、フェノフィブレート、ゲムカベン、及びゲンフィブロジル、ＧＷ ７６４７、ＢＭ １７０７４４（Ｋｏｗａ）、ＬＹ５１８６７４（Ｌｉｌｌｙ）、ＧＷ５９０７３５（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）、ＫＲＰ−１０１（Ｋｙｏｒｉｎ）、ＤＲＦ１０９４５（Ｄｒ．Ｒｅｄｄｙ）、ＮＳ−２２０／Ｒ１５９３（Ｎｉｐｐｏｎ Ｓｈｉｎｙａｋｕ／Ｒｏｃｈｅ）、ＳＴ１９２９（Ｓｉｇｍａ Ｔａｕ）、ＭＣ３００１／ＭＣ３００４（ＭａｘｏＣｏｒｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ゲムカベンカルシウム、他のフィブリン酸誘導体、例えば、Ａｔｒｏｍｉｄ（登録商標）、Ｌｏｐｉｄ（登録商標）、及びＴｒｉｃｏｒ（登録商標）、及びＵＳ６，５４８，５３８号で公開されたものなど；（１０）ＦＸＲ受容体モジュレータ、例えば、ＧＷ ４０６４ （ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）， ＳＲ １０３９１２， ＱＲＸ４０１， ＬＮ−６６９１ （Ｌｉｏｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ），及びＷＯ０２／０６４１２５号、同第０４／０４５５１１号など；（１１）ＬＸＲ受容体モジュレータ、例えば、ＧＷ ３９６５ （ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）， Ｔ９０１３１３７、及びＸＴＣＯ１７９６２８（Ｘ−ｃｅｐｔｏｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ／Ｓａｎｙｏ）、並びにＷＯ０３／０３１４０８号、同第０３／０６３７９６号、同第０４／０７２０４１号など；（１２）リポタンパク質合成インヒビター、例えば、ナイアシン；（１３）レニン−アンジオテンシン系インヒビター；（１４）ＰＰＡＲδ部分アゴニスト、例えば、ＷＯ０３／０２４３９５号に開示されているもの；（１５）胆汁酸再吸収インヒビター、例えば、ＢＡＲＩ １４５３、ＳＣ４３５、ＰＨＡ３８４６４０、Ｓ８９２１、ＡＺＤ７７０６、及び同様のもの；胆汁酸シークエステラント、例えば、コレセベラム（ｃｏｌｅｓｅｖｅｌａｍ）（ＷＥＬＣＨＯＬ／ ＣＨＯＬＥＳＴＡＧＥＬ）；（１６）ＰＰＡＲγアゴニスト、例えば、ＧＷ ５０１５１６（Ｌｉｇａｎｄ、ＧＳＫ）、ＧＷ ５９０７３５、ＧＷ−０７４２（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）、Ｔ６５９（Ａｍｇｅｎ／Ｔｕｌａｒｉｋ）、ＬＹ９３４（Ｌｉｌｌｙ）、ＮＮＣ６１００５０（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ）、及び、ＷＯ９７／２８１４９号、同第０１／７９１９７号、同第０２／１４２９１号、同第０２／４６１５４号、同第０２／４６１７６号、同第０２／０７６９５７号、同第０３／０１６２９１号、同第０３／０３３４９３号、同第０３／０３５６０３号、同第０３／０７２１００号、同第０３／０９７６０７号、同第０４／００５２５３号、同第０４／００７４３９号、あるいはＪＰ１０−２３７０４９で公開されたものなど；（１７）トリグリセリド合成インヒビター；（１８）ミクロソームトリグルセリド輸送（ＭＴＴＰ）インヒビター、例えば、インプリタピド、ＬＡＢ６８７、ＪＴＴｌ３０（Ｊａｐａｎ Ｔｏｂａｃｃｏ）、ＣＰ３４６０８６、及びＷＯ０３／０７２５３２号で開示されたものなど；（１９）転写モジュレータ；（２０）スクアレンエポキシダーゼインヒビター；（２１）低密度リポ蛋白（ＬＤＬ）受容体誘導物質；（２２）血小板凝集抑制剤；（２３）５−ＬＯ又はＦＬＡＰインヒビター；並びに（２４）ＨＭ７４Ａ受容体アゴニストを含むナイアシン受容体アゴニスト；（２５）ＰＰＡＲモジュレータ、例えば、ＷＯ０１／２５１８１号、同第０１／７９１５０号、同第０２／７９１６２号、同第０２／０８１４２８号、同第０３／０１６２６５号、同第０３／０３３４５３号で開示されたもの；（２６）ＷＯ０３／０３９５３５号に開示されているようなナイアシン結合クロム；（２７）ＷＯ０３／０４０１１４号に開示されている置換酸誘導体；（２８）注入ＨＤＬ、例えば、ＬＵＶ／ＥＴＣ−５８８（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＡＰＯ−Ａｌミラノ／ＥＴＣ２１６（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＥＴＣ−６４２（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩＳＩＳ３０１０１２、Ｄ４Ｆ（Ｂｒｕｉｎ Ｐｈａｒｍａ）、合成三量体ＡｐｏＡｌ、泡沫細胞を標的とするＢｉｏｒａｌ Ａｐｏ Ａｌなど；（２９）ＩＢＡＴインヒビター、例えば、ＢＡＲＩ１４３／ＨＭＲ１４５Ａ／ＨＭＲ１４５３（Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ、ＰＨＡ３８４６４０Ｅ（Ｐｆｉｚｅｒ）、Ｓ８９２１（Ｓｈｉｏｎｏｇｉ）、ＡＺＤ７８０６（ＡｓｔｒＺｅｎｅｃａ）、ＡＫ１０５（Ａｓａｈ Ｋａｓｅｉ）など；（３０）Ｌｐ−ＰＬＡ２インヒビター、例えば、ＳＢ４８０８４８（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）、６５９０３２（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）、６７７１１６（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）など；（３１）脂質組成物に影響を及ぼす他の薬剤、例えば、ＥＴＣ１００１／ＥＳＰ３１０１５（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＥＳＰ−５５０１６（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＡＧＩ１０６７（ＡｔｈｅｒｏＧｅｎｉｃｓ）、ＡＣ３０５６（Ａｍｙｌｉｎ）、ＡＺＤ４６１９（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）など。
【００７７】
（ｃ）次のような抗高血圧薬、例えば、（１）利尿薬、例えば、コルタリドン、コルチアジド、ジクロロフェンアミド、ヒドロフルメチアジド、インダパミド及びヒドロクロロチアジドを含むチアジド；ループ利尿薬、例えば、ブメタニド、エタクリン酸、フロセミド及びトルセミド；カリウム保持性利尿薬、例えば、アミロライド及びトリアムテレン；並びにアルドステロン拮抗薬、例えば、スピロノラクトン、エピレノンなど；（２）β−アドレナリン遮断薬、例えば、アセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ベバントロール、ビソプロロール、ボピンドロール、カルテオロール、カルベジロール、セリプロロール、エスモロロール、インデノロール、メタプロロール、ナドロール、ネビボロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロパノロール、ソタロール、タータトロール、チリソロール及びチモロールなど；（３）カルシウムチャネル遮断薬、例えば、アムロジピン、アラニジピン、アゼルニジピン、バルニジピン、ベニジピン、ベプリジル、シナルジピン、クレビジピン、ジルチアゼム、エホニジピン、フェロジピン、ガロパミル、イスラジピン、ラシジピン、レミルジピン、レルカニジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニルバジピン、ニモデピン、ニソルジピン、ニトレンジピン、マニジピン、プラニジピン、及びベラパミルなど；（４）アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）インヒビター、例えば、ベナゼプリル；カプトプリル；シラザプリル；デラプリル；エナラプリル；ホシノプリル；イミダプリル；ロシノプリル；モエキシプリル；キナプリル；キナプリラット；ラミプリル；ペルインドプリル；ペルインドロプリル；クアニプリル；スピラプリル；テノカプリル；トランドラプリル及びゾフェノプリルなど；（５）ニュートラルエンドペプチダーゼインヒビター、例えば、オマパトリラット、カドキサトリル及びエカドトリル、ホシドトリル、サムパトリラット、ＡＶＥ７６８８、ＥＲ４０３０など；（６）エンドセリン拮抗薬、例えば、テゾセンタン、Ａ３０８１６５、及びＹＭ６２８９９など；（７）血管拡張剤、例えば、ヒドララジン、クロニジン、ミノキシジル、及びニコチニルアルコールなど；（８）アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト、例えば、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、プラトサルタン、タソサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、及びＥＸＰ−３１３７、ＦＩ６８２８Ｋ、及びＲＮＨ６２７０など；（９）α／βアドレナリン遮断薬、例えば、ニプラジロール，アロチノロール及びアモスラロールなど；（１０）アルファ１遮断薬、例えば、テラゾシン、ウラピジル、プラゾシン、ブナゾシン、トリマゾシン、ドキサゾシン、ナフトピジル、インドラミン、ＷＨＩＰ １６４、及びＸＥＮ０１０など；（１１）アルファ２アゴニスト、例えば、ロフェキシジン、チアメニジン、モキソニジン、リリメニジン、及びグアノベンズなど；（１２）アルドステロンインヒビターなど；（１３）アンジオポイエチン−２結合剤、例えば、ＷＯ０３／０３０８３３号に開示されているもの。
【００７８】
（ｄ）抗肥満薬、例えば、（１）５ＨＴ（セロトニン）トランスポーター阻害剤、例えば、パロキセチン、フルオキセチン、フェンフルタミン、フルボキサミン、セルトラリン、もしくはイミプラミン、及びＷＯ０３／００６６３号に開示されているもの、並びにセロトニン／ノルアドレナリン再吸収阻害剤、例えば、シブトラミン（ＭＥＲＩＤＩＡ／ＲＥＤＵＣＴＩＬ）など、及びドーパミン取り込み阻害剤／ノルエピネフリン取り込み阻害剤、例えば、塩酸ラダファキシン、３５３１６２（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）など；（２）ＮＥ（ノルエピネフリン）トランスポーター阻害剤、例えば、ＧＷ ３２０６５９，デスピラミン、タルスプラム、及びノミフェンシン；（３）ＣＢｌ（カンナビノイド−１受容体）アンタゴニスト／インバースアゴニスト、例えば、リモナバント（ＡＣＣＯＭＰＬＩＡ Ｓａｎｏｆｉ Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ）、ＳＲ−１４７７７８（Ｓａｎｏｆｉ Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ）、ＡＶＥ１６２５（Ｓａｎｏｆｉ− Ａｖｅｎｔｉｓ）、ＢＡＹ ６５−２５２０（Ｂａｙｅｒ）、ＳＬＶ ３１９（Ｓｏｌｖａｙ）、ＳＬＶ３２６（Ｓｏｌｖａｙ）、ＣＰ９４５５９８（Ｐｆｉｚｅｒ）、Ｅ−６７７６（Ｅｓｔｅｖｅ）、Ｏ１６９１（Ｏｒｇａｎｉｘ）、ＯＲＧ１４４８１（Ｏｒｇａｎｏｎ）、ＶＥＲ２４３４３（Ｖｅｒｎａｌｉｓ）、ＮＥＳＳ０３２７（Ｕｎｉｖ ｏｆ Ｓａｓｓａｒｉ／Ｕｎｉｖ ｏｆ Ｃａｇｌｉａｒｉ）、及び米国特許第４，９７３，５８７号、同第５，０１３，８３７号、 同第５，０８１，１２２号、同第５，１１２，８２０号、同第５，２９２，７３６号、同第５，５３２，２３７号、同第５，６２４，９４１号、同第６，０２８，０８４号、及び同第６，５０９３６７号；ならびにＷＯ９６／３３１５９号、同第９７／２９０７９号、同第９８／３１２２７号、同第９８／３３７６５号、同第９８／３７０６１号、同第９８／４１５１９号、同第９８／４３６３５号、同第９８／４３６３６号、同第９９／０２４９９号、同第００／１０９６７号、同第００／１０９６８号、同第０１／０９１２０号、同第０１／５８８６９号、同第０１／６４６３２号、同第０１／６４６３３号、同第０１／６４６３４号、同第０１／７０７００号、同第０１／９６３３０号、同第０２／０７６９４９号、同第０３／００６００７号、同第０３／００７８８７号、同第０３／０２０２１７号、同第０３／０２６６４７号、同第０３／０２６６４８号、同第０３／０２７０６９号、同第０３／０２７０７６号、同第０３／０２７１１４号、同第０３／０３７３３２号、同第０３／０４０１０７号、同第０４／０９６７６３号、同第０４／１１１０３９号、同第０４／１１１０３３号、同第０４／１１１０３４号、同第０４／１１１０３８号、同第０４／０１３１２０号、同第０５／０００３０１号、同第０５／０１６２８６号、同第０５／０６６１２６号、もしくはＥＰ６５８５４６号で開示されたものなど；（４）グレリンアゴニスト／アンタゴニスト、例えば、ＢＶＴ８１−９７ （ＢｉｏＶｉｔｒｕｍ）， ＲＣ １２９１ （Ｒｅｊｕｖｅｎｏｎ）， ＳＲＤ−０４６７７ （Ｓｕｍｉｔｏｍｏ）、非アシル化グレリン（ＴｈｅｒａＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、及びＷＯ０１／８７３３５号、ＷＯ０２／０８２５０号、ＷＯ０５／０１２３３１号で開示されたものなど；（５）Ｈ３（ヒスタミンＨ３）アンタゴニスト／インバースアゴニスト、例えば、チオペラミド、３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロピル−Ｎ−（４−ペンテニル）カルバメート）、クロベンプロピット、ヨードフェンプロピット、イモプロキシファン、ＧＴ２３９４（Ｇｌｉａｔｅｃｈ）、及びＡ３３１４４０、並びにＷＯ０２／１５９０５号に開示されているもの；並びにＯ−［３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパノール］カルバメート（Ｋｉｅｃ−Ｋｏｎｏｎｏｗｉｃｚ、Ｋ．ｅｔ ａｌ．、Ｐｈａｒｍａｚｉｅ、５５：３４９−５５（２０００））、ピペリジン含有ヒスタミンＨ３−受容体アンタゴニスト（Ｌａｚｅｗｓｋａ、Ｄ．ｅｔ ａｌ．、Ｐｈａｒｍａｚｉｅ、５６：９２７−３２（２００１）、ベンゾフェノン誘導体及び関連化合物（Ｓａｓｓｅ、Ａ．ｅｔ ａｌ．、Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ．（Ｗｅｉｎｈｅｉｍ）３３４：４５−５２（２００１））、置換Ｎ−フェニルカルバメート（Ｒｅｉｄｅｍｅｉｓｔｅｒ、Ｓ．ｅｔ ａｌ．、Ｐｈａｒｍａｚｉｅ、５５：８３−６（２０００））、及びプロキシファン誘導体（Ｓａｓｓｅ、Ａ．ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４３：３３３５−４３（２０００））、並びにＷＯ０３／０２４９２８号、同第０３／０２４９２９号に開示されているものなどのヒスタミンＨ３受容体モジュレーター；（６）メラニン凝集ホルモン１受容体（ＭＣＨｌＲ）アンタゴニスト、例えば、Ｔ−２２６２９６（Ｔａｋｅｄａ）、Ｔ７１ （Ｔａｋｅｄａ／Ａｍｇｅｎ）、ＡＭＧＮ− ６０８４５０、ＡＭＧＮ−５０３７９６ （Ａｍｇｅｎ）、８５６４６４ （Ｇｌａｘｏ Ｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）、Ａ２２４９４０（Ａｂｂｏｔｔ）、Ａ７９８（Ａｂｂｏｔｔ）、ＡＴＣ０１７５／ＡＲ２２４３４９（Ａｒｅｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＧＷ８０３４３０（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｉｎｅ）、ＮＢＩ−ＩＡ（Ｎｅｕｒｏｃｒｉｎｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＮＧＸ−Ｉ（Ｎｅｕｒｏｇｅｎ）、ＳＮＰ−７９４１（Ｓｙｎａｐｔｉｃ）、ＳＮＡＰ９８４７（Ｓｙｎａｐｔｉｃ）、Ｔ−２２６２９３（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｌｏｕｇｈ）、ＴＰＩ−１３６１−１７（埼玉医科大学／カリフォルニア大学アーバイン）、及びＷＯ０１／２１１６９号、同第０１／８２９２５号、同第０１／８７８３４号、同第０２／０５１８０９号、同第０２／０６２４５号、同第０２／０７６９２９号、同第０２／０７６９４７号、同第０２／０４４３３号、０２／５１８０９号
、同第０２／０８３１３４号、同第０２／０９４７９９号、同第０３／００４０２７号、同第０３／１３５７４号、同第０３／１５７６９号、同第０３／０２８６４１号、同第０３／０３５６２４号、同第０３／０３３４７６号、同第０３／０３３４８０号、同第０４／００４６１１号、同第０４／００４７２６号、同第０４／０１１４３８号、同第０４／０２８４５９号、同第０４／０３４７０２号、同第０４／０３９７６４号、同第０４／０５２８４８号、同第０４／０８７６８０号に開示されたもの、もしくは日本特許出願ＪＰ１３−２２６２６９号、ＪＰ１４−３７０５９号、ＪＰ２００４−３１５５１１号など；（７）ＭＣＨ２Ｒ（メラニン凝集ホルモン２Ｒ）アゴニスト／アンタゴニスト；（８）ＮＰＹ１（神経ペプチドＹ Ｙ１）アンタゴニス、例えば、ＢＭＳ２０５７４９、ＢＩＢＰ３２２６，Ｊ−１１５８１４、ＢＩＢＯ ３３０４、ＬＹ−３５７８９７、ＣＰ−６７１９０６、及びＧＩ−２６４８７９Ａ；並びにＵＳ６，００１，８３６号；及びＷＯ９６／１４３０７号、同第０１／２３３８７号、同第９９／５１６００号、同第０１／８５６９０号、同第０１／８５０９８号、同第０１／８５１７３号、及び同第０１／８９５２８号に開示されているもの；（９）ＮＰＹ５（神経ペプチドＹ Ｙ５）アンタゴニスト、例えば、１５２，８０４、Ｓ２３６７（Ｓｈｉｏｎｏｇｉ）、Ｅ−６９９９（Ｅｓｔｅｖｅ）、ＧＷ−５６９１８０Ａ、ＧＷ−５９４８８４Ａ （ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）、ＧＷ−５８７０８１Ｘ、ＧＷ−５４８１１８Ｘ；ＦＲ２３５，２０８；ＦＲ２２６９２８，ＦＲ２４０６６２，ＦＲ２５２３８４；１２２９Ｕ９１、ＧＩ−２６４８７９Ａ、ＣＧＰ７１６８３Ａ、Ｃ−７５（Ｆａｓｇｅｎ）、ＬＹ−３７７８９７，ＬＹ３６６３７７、ＰＤ−１６０１７０、ＳＲ−１２０５６２Ａ、ＳＲ−１２０８１９Ａ、Ｓ２３６７（Ｓｈｉｏｎｏｇｉ）、ＪＣＦ−１０４，及びＨ４０９／２２；並びにＵＳ６，１４０，３５４号、同第６，１９１，１６０号、同第６，２５８，８３７号、同第６，３１３，２９８号、同第６，３２６，３７５号、同第６，３２９，３９５号、同第６，３３５，３４５号、同第６，３３７，３３２号、同第６，３２９，３９５号及び同第６，３４０，６８３号；ＥＰ第０１０１０６９１号、同第０１０４４９７０号、及びＦＲ第２５２３８４号；及びＷＯ９７／１９６８２号、同第９７／２０８２０号、同第９７／２０８２１号、同第９７／２０８２２号、同第９７／２０８２３号、同第９８／２７０６３号、同第００／１０７４０９号、同第００／１８５７１４号、同第００／１８５７３０号、同第００／６４８８０号、同第００／６８１９７号、同第００／６９８４９号、同第０１／０９１２０号、同第０１／１４３７６号、同第０１／８５７１４号、同第０１／８５７３０号、同第０１／０７４０９号、同第０１／０２３７９号、同第０１／０２３７９号、同第０１／２３３８８号、同第０１／２３３８９号、同第０１／４４２０１号、同第０１／６２７３７号、同第０１／６２７３８号、同第０１／０９１２０号、同第０２／２０４８８号、同第０２／２２５９２号、同第０２／４８１５２号、同第０２／４９６４８号、同第０２／０５１８０６号、同第０２／０９４７８９号、同第０３／００９８４５号、同第０３／０１４０８３号、同第０３／０２２８４９号、同第０３／０２８７２６号、同第０５／０１４５９２号、同第０５／０１４９３号；及びＮｏｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４３：４２８８−４３１２（２０００）に開示されている化合物；（１０）レプチン、例えば、組換えヒトレプチン（ＰＥＧ−ＯＢ、Ｈｏｆｆｍａｎ Ｌａ Ｒｏｃｈｅ）及び組換えメチオニルヒトレプチン（Ａｍｇｅｎ）；（１１）レプチン誘導体、例えば、特許番号第５，５５２，５２４号、同第５，５５２，５２３号、同第５，５５２，５２２号、同第５，５２１，２８３号；及びＷＯ９６／２３５１３号；同第９６／２３５１４号；同第９６／２３５１５号；同第９６／２３５１６号；同第９６／２３５１７号；同第９６／２３５１８号；同第９６／２３５１９号；及び同第９６／２３５２０に開示されているもの；（１２）オピオイドアンタゴニスト、例えば、ナルメフェン（Ｒｅｖｅｘ（登録商標））、３−メトキシナルトレキソン、ナロキソン、及びナルトレキソン；並びにＷＯ００／２１５０９号に開示されているもの；（１３）オレキシンアンタゴニスト、例えば、ＳＢ−３３４８６７−Ａ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）、及びＷＯ０１／９６３０２号、同第０１／６８６０９号、同第０２／４４１７２号、同第０２／５１２３２号、同第０２／５１８３８号、同第０２／０８９８００号、同第０２／０９０３５５号、同第０３／０２３５６１号、同第０３／０３２９９１号、同第０３／０３７８４７号、同第０４／００４７３３号、同第０４／０２６８６６号、同第０４／０４１７９１号、同第０４／０８５４０３号で開示されたものなど；（１４）ＢＲＳ３（ボンベシン受容体サブタイプ３）アゴニスト；（１５）ＣＣＫ−Ａ（コレシストキニン−Ａ）アゴニスト、例えば、ＡＲ−Ｒ １５８４９、ＧＩ １８１７７１、ＪＭＶ−１８０、Ａ−７１３７８、Ａ−７１６２３、ＰＤ１７０２９２、ＰＤ１４９１６４、ＳＲ１４６１３１、ＳＲ１２５１８０、ブタビンダイド、並びにＵＳ５，７３９，１０６号に開示されているもの；（１６）ＣＮＴＦ（毛様体神経栄養因子）、例えば、ＧＩ−１８１７７１（Ｇｌａｘｏ−Ｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）；ＳＲ１４６１３１（Ｓａｎｏｆｉ Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ）；ブタビンダイド；及びＰＤ １７０，２９２、ＰＤ １４９１６４（Ｐｆｉｚｅｒ）；（１７）ＣＮＴＦ誘導体、例えば、アキソキン（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）；及びＷＯ９４／０９１３４号、同第９８／２２１２８号、及び同第９９／４３８１３号に開示されているもの；（１８）ＧＨＳ（成長ホルモン分泌促進物質受容体）アゴニスト、例えば、ＮＮ７０３，ヘキサレリン、ＭＫ−０６７７、ＳＭ−１３０６８６、ＣＰ−４２４，３９１、Ｌ−６９２，４２９、及びＬ−１６３，２５５、並びにＵＳ６３５８９５１号、米国特許出願番号２００２／０４９１９６及び同２００２／０２２６３７；及びＷＯ０１／５６５９２号、もしくは同第０２／３２８８８号に開示されているもの；（１９）５ＨＴ２ｃ（セロトニン受容体２ｃ）アゴニスト、例えば、ＡＰＤ３５４６／ＡＲ１０Ａ（Ａｒｅｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＡＴＨ８８６５１（Ａｔｈｅｒｓｙｓ）、ＡＴＨ８８７４０（Ａｔｈｅｒｓｙｓ）、ＢＶＴ９３３（Ｂｉｏｖｉｔｒｕｍ／ＧＳＫ）、ＤＰＣＡ３７２１５（ＢＭＳ）、ＩＫ２６４；ＬＹ４４８１００（Ｌｉｌｌｙ）、ＰＮＵ ２２３９４；ＷＡＹ ４７０（Ｗｙｅｔｈ）、ＷＡＹ６２９（Ｗｙｅｔｈ）、ＷＡＹ１６１５０３（Ｂｉｏｖｉｔｒｕｍ）、Ｒ−１０６５、ＶＲｌ０６５（Ｖｅｒｎａｌｉｓ／Ｒｏｃｈｅ）、ＹＭ ３４８；並びにＵＳ３，９１４，２５０号；及びＷＯ０１／６６５４８号、同第０２／３６５９６号、同第０２／４８１２４号、同第０２／１０１６９号、同第０２／４４１５２号；同第０２／５１８４４号、同第０２／４０４５６号、同第０２／４０４５７号、同第０３／０５７６９８号、同第０５／０００８４９号に開示されているもの；（２０）Ｍｃ３ｒ（メラノコルチン３受容体）アゴニスト；（２１）Ｍｃ４ｒ（メラノコルチン４受容体）アゴニスト、例えば、ＣＨＩＲ８６０３６（Ｃｈｉｒｏｎ）、ＣＨＩＲ９１５（Ｃｈｉｒｏｎ）；ＭＥ−１０１４２（Ｍｅｌａｃｕｒｅ）、ＭＥ−１０１４５（Ｍｅｌａｃｕｒｅ）、ＨＳ−１３１（Ｍｅｌａｃｕｒｅ）、ＮＢＩ７２４３２（Ｎｅｕｒｏｃｒｉｎｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＮＮＣ ７０−６１９（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ）、ＴＴＰ２４３５（Ｔｒａｎｓｔｅｃｈ）、及びＷＯ９９／６４００２号、同第００／７４６７９号、同第０１／９９１７５２号、同第０１／０１２５１９２号、同第０１／５２８８０号、同第０１／７４８４４号、同第０１／７０７０８号、同第０１／７０３３７号、同第０１／９１７５２号、同第０１／０１０８４２号、同第０２／０５９０９５号、同第０２／０５９１０７号、同第０２／０５９１０８号、同第０２／０５９１１７号、同第０２／０６２７６６号、同第０２／０６９０９５号、同第０２／１２１６６号、同第０２／１１７１５号、 同第０２／１２１７８号、同第０２／１５９０９号、同第０２／３８５４４号、同第０２／０６８３８７号、同第０２／０６８３８８号、同第０２／０６７８６９号、同第０２／０８１４３０号、同第０３／０６６０４号、同第０３／００７９４９号、同第０３／００９８４７号、同第０３／００９８５０号、同第０３／０１３５０９号、同第０３／０３１４１０号、同第０３／０９４９１８号、同第０４／０２８４５３号、同第０４／０４８３４５号、同第０４／０５０６１０号、同第０４／０７５８２３号、同第０４／０８３２０８号、同第０４／０８９９５１号、同第０５／０００３３９号、及びＥＰ１４６００６９号、及びＵＳ２００５０４９２６９号、及びＪＰ２００５−５０４２８３９に開示されているもの、並びに同様のもの；（２２）モノアミン再取り込み阻害剤、例えば、シブトラトミン（Ｍｅｒｉｄｉａ（登録商標）／Ｒｅｄｕｃｔｉｌ（登録商標））及びその塩、並びにＵＳ４，７４６，６８０号、同第４，８０６，５７０号、及び同第５，４３６，２７２号、米国特許公報第２００２／０００６９６４号、及びＷＯ０１／２７０６８号、及び同第０１／６２３４１号で開示された化合物；（２３）セロトニン再取り込み阻害剤、例えば、デキセフェンフルラミン、フルオキセチン、並びにＵＳ６，３６５，６３３号、及びＷＯ０１／２７０６０号、及び同第０１／１６２３４１号にあるもの；（２４）ＧＬＰ−１（グルカゴン様ペプチド１）アゴニスト；（２５）トピラマート（Ｔｏｐｉｍａｘ（登録商標））；（２６）フィトファーム化合物５７（ＣＰ ６４４，６７３）；（２７）ＡＣＣ２（アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ−２）阻害剤；（２８）β３（ベータアドレナリン作動性受容体３）アゴニスト、例えば、ラフェベルグロン／ＡＤ９６７７／ＴＡＫ６７７（Ｄａｉｎｉｐｐｏｎ／Ｔａｋｅｄａ）、ＣＬ−３１６，２４３、ＳＢ ４１８７９０、ＢＲＬ−３７３４４、Ｌ−７９６５６８、ＢＭＳ−１９６０８５、ＢＲＬ−３５１３５Ａ、ＣＧＰ１２１７７Ａ、ＢＴＡ−２４３、ＧＲＣ１０８７（Ｇｌｅｎｍａｒｋ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＧＷ ４２７３５３（ソラベグロン塩酸塩）、トレカドリン、Ｚｅｎｅｃａ Ｄ７１１４，Ｎ−５９８４（Ｎｉｓｓｈｉｎ Ｋｙｏｒｉｎ）、ＬＹ−３７７６０４（Ｌｉｌｌｙ）、ＫＴ０７９２４（Ｋｉｓｓｅｉ）、ＳＲ ５９１１９Ａ、及び、米国特許第５，７０５，５１５号、同第５，４５１，６７７号；及びＷＯ９４／１８１６１号、同第９５／２９１５９号、同第９７／４６５５６号、同第９８／０４５２６号、同第９８／３２７５３号、同第０１／７４７８２号、同第０２／３２８９７号、同第０３／０１４１１３号、同第０３／０１６２７６号、同第０３／０１６３０７号、同第０３／０２４９４８号、同第０３／０２４９５３号、同第０３／０３７８８１号、同第０４／１０８６７４号に開示された化合物；（２９）ＤＧＡＴ１（ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ１）阻害剤；（３０）ＤＧＡＴ２（ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２）阻害剤；（３１）セルレニン及びＣ７５などのＦＡＳ（脂肪酸シンターゼ）阻害剤；（３２）ＰＤＥ（ホスホジエステラーゼ）阻害剤、例えば、テオフィリン、ペントキシフィリン、ザプリナスト、シルデナフィル、アムリノン、ミルリノン、シロスタミド、ロリプラム及びシロミラスト、並びに、ＷＯ０３／０３７４３２号、同第０３／０３７８９９号に開示された化合物；（３３）甲状腺ホルモンβアゴニスト、例えば、ＫＢ−２６１１（ＫａｒｏＢｉｏＢＭＳ）、及び、ＷＯ０２／１５８４５号；及び日本特許出願２０００−２５６１９０号に開示された化合物；（３４）ＵＣＰ−１（非結合タンパク質１）、ＵＣＰ−２、又はＵＣＰ−３活性化物質、例えば、
フィタン酸、４−［（Ｅ）−２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−５，５，８，８−テトラメチル−２−ナフタレニル）−１−プロペニル］安息香酸（ＴＴＮＰＢ）、及びレチノイン酸；及びＷＯ９９／００１２３号に開示された化合物；（３５）アシルエストロゲン、例えば、ｄｅｌ Ｍａｒ−Ｇｒａｓａ、Ｍ．ｅｔ ａｌ．、Ｏｂｅｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、９：２０２−９（２００１）で開示されたオレオイルエストロン；（３６）グルココルチコイド受容体アンタゴニスト、例えば、ＣＰ４７２５５５（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＫＢ ３３０５、及びＷＯ０４／０００８６９号、同第０４／０７５８６４号に開示された化合物など；（３７）１１βＨＳＤ−１（１１−ベータヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ−タイプ１）阻害剤、例えば、ＢＶＴ ３４９８（ＡＭＧ ３３１）、ＢＶＴ ２７３３，３−（１−アダマンチル）−４−エチル−５−（エチルチオ）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、３−（１−アダマンチル）−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−４−メチル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、３−アダマンタニル−４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，３ａ−デカヒドロ−１，２，４−トリアゾロ［４，３−ａ］［１１］アヌレン、及び、ＷＯ０１／９００９１号、同第０１／９００９０号、同第０１／９００９２号、同第０２／０７２０８４号、同第０４／０１１４１０号、同第０４／０３３４２７号、同第０４／０４１２６４号、同第０４／０２７０４７号、同第０４／０５６７４４号、同第０４／０６５３５１号、同第０４／０８９４１５号、同第０４／０３７２５１に開示された化合物など；（３８）ＳＣＤ−１（ステアロイル−ＣｏＡデサチュラーゼ−１）阻害剤；（３９）ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）阻害剤、例えば、イソロイシンチアゾリジド、バリンピロリジド、シタグリプチン、サクサグリプチン、ＮＶＰ−ＤＰＰ７２８、ＬＡＦ２３７（ビルダグリプチン）、Ｐ９３／０１、ＴＳＬ ２２５、ＴＭＣ−２Ａ／２Ｂ／２Ｃ、ＦＥ ９９９０１１、Ｐ９３１０／Ｋ３６４、ＶＥＰ ０１７７、ＳＤＺ ２７４−４４４、ＧＳＫ ８２３０９３、Ｅ ３０２４、ＳＹＲ ３２２、ＴＳ０２１、ＳＳＲ １６２３６９、ＧＲＣ ８２００、Ｋ５７９、ＮＮ７２０１、ＣＲ １４０２３、ＰＨＸ １００４、ＰＨＸ １１４９、ＰＴ−６３０、ＳＫ−０４０３；及び、ＷＯ０２／０８３１２８号、同第０２／０６２７６４号、同第０２／１４２７１号、同第０３／０００１８０号、同第０３／０００１８１号、同第０３／０００２５０号、同第０３／００２５３０号、同第０３／００２５３１号、同第０３／００２５５３号、同第０３／００２５９３号、同第０３／００４４９８号、同第０３／００４４９６号、同第０３／００５７６６号、同第０３／０１７９３６号、同第０３／０２４９４２号、同第０３／０２４９６５号、同第０３／０３３５２４号、同第０３／０５５８８１号、同第０３／０５７１４４号、同第０３／０３７３２７号、同第０４／０４１７９５号、同第０４／０７１４５４号、同第０４／０２１４８７０号、同第０４／０４１２７３号、同第０４／０４１８２０号、同第０４／０５０６５８号、同第０４／０４６１０６号、同第０４／０６７５０９号、同第０４／０４８５３２号、同第０４／０９９１８５号、同第０４／１０８７３０号、同第０５／００９９５６号、同第０４／０９８０６号、同第０５／０２３７６２号、同第２００５／０４３２９２号、及びＥＰ第１,２５８,４７６号に開示された化合物；（４０）リパーゼインヒビター、例えば、テトラヒドロリプスタチン（オーリスタット／ＸＥＮＩＣＡＬ）、ＡＴＬ９６２（Ａｌｉｚｙｍｅ／Ｔａｋｅｄａ）、ＧＴ３８９２５５（Ｇｅｎｚｙｍｅ／Ｐｅｐｔｉｍｍｕｎｅ）Ｔｒｉｔｏｎ ＷＲ１３３９、ＲＨＣ８０２６７、リプスタチン、ティーサポニン、及びジエチルウンベリフェリルホスフェート、ＦＬ−３８６、ＷＡＹ−１２１８９８、Ｂａｙ−Ｎ−３１７６、バリラクトン、エステラシン、エベラクトンＡ、エベラクトンＢ、及びＲＨＣ ８０２６７、並びにＷＯ０１／７７０９４号、同第０４／１１１００４号、及びＵＳ４，５９８，０８９号、同第４，４５２，８１３号、同第５，５１２，５６５号、同第５，３９１，５７１号、同第５，６０２，１５１号、同第４，４０５，６４４号、同第４，１８９，４３８号、及び同第４，２４２，４５３号に開示された化合物など；（４１）脂肪酸トランスポーター阻害剤；（４２）ジカルボキシレートトランスポーター阻害剤；（４３）グルコーストランスポーター阻害剤；並びに（４４）ホスフェートトランスポーター阻害剤；（４５）食欲減退二環式化合物、例えば、１４２６（Ａｖｅｎｔｉｓ）及び１９５４（Ａｖｅｎｔｉｓ）、並びにＷＯ００／１８７４９号、同第０１／３２６３８号、同第０１／６２７４６号、同第０１／６２７４７号、及び同第０３／０１５７６９号に開示された化合物；（４６）ペプチドＹＹ及びＰＹＹアゴニスト、例えば、ＰＹＹ３３６（Ｎａｓｔｅｃｈ／Ｍｅｒｃｋ）、ＡＣ１６２３５２（ＩＣ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ／Ｃｕｒｉｓ／Ａｍｙｌｉｎ）、ＴＭ３０３３５／ＴＭ３０３３８（７ＴＭ Ｐｈａｒｍａ）、ＰＹＹ３３６（Ｅｍｉｓｐｈｅｒｅ Ｔｅｈｃｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ペグ化ペプチドＹＹ３−３６、ＷＯ０３／０２６５９１号、同第０４／０８９２７９号に開示された化合物など；（４７）脂質代謝モジュレーター、例えば、マスリン酸、エリトロジオール、ウルソール酸ウバオール、ベチュリン酸、ベチュリン、及び同様のものなど、並びにＷＯ０３／０１１２６７号に開示された化合物；（４８）転写因子モジュレーター、例えば、ＷＯ０３／０２６５７６号に開示された化合物；（４９）Ｍｃ５ｒ（メラノコルチン５受容体）モジュレーター、例えば、ＷＯ９７／１９９５２号、同第００／１５８２６号、同第００／１５７９０号、米国特許２００３００９２０４１号に開示された化合物など；（５０）脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）；（５１）Ｍｃ１ｒ（メラノコルチン１受容体モジュレーター、例えば、ＬＫ−１８４（Ｐｒｏｃｔｏｒ＆Ｇａｍｂｌｅ）など；（５２）５ＨＴ６アンタゴニスト、例えば、ＢＶＴ７４３１６（ＢｉｏＶｉｔｒｕｍ）、ＢＶＴ５１８２ｃ（ＢｉｏＶｉｔｒｕｍ）、Ｅ−６７９５（Ｅｓｔｅｖｅ）、Ｅ−６８１４（Ｅｓｔｅｖｅ）、ＳＢ３９９８８５（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）、ＳＢ２７１０４６（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）、ＲＯ−０４６７９０（Ｒｏｃｈｅ）など；（５３）脂肪酸トランスポータータンパク質４（ＦＡＴＰ４）；（５４）アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤、例えば、ＣＰ６４０１８６、ＣＰ６１０４３１、ＣＰ６４０１８８（Ｐｆｉｚｅｒ）；（５５）Ｃ−末端成長ホルモンフラグメント、例えば、ＡＯＤ９６０４（Ｍｏｎａｓｈ Ｕｎｉｖ／Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）など；（５６）オキシントモジューリン；（５７）ニューロペプチドＦＦ受容体アンタゴニスト、例えばＷＯ０４／０８３２１８号に開示された化合物など；（５８）アミリンアゴニスト、例えば、Ｓｙｍｌｉｎ／プラムリンチド／ＡＣ１３７（Ａｍｙｌｉｎ）；（５９）フーディア及びトリコカウロン抽出物；（６０）ＢＶＴ７４７１３及びその他の腸脂質食欲抑制剤；（６１）ドーパミンアゴニスト、例えば、ブプロピオン（ウェルブトリン／ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）；（６２）ゾニサミドなど（ゾネグラン／Ｄａｉｎｉｐｐｏｎ／Ｅｌａｎ）など。
【００７９】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストと組み合わせて使用することができる特定の化合物としては、特定のＣＢＩアンタゴニスト／インバースアゴニストが挙げられ、そのようなものとしては、ＷＯ０３／０７７８４７号で開示されたもの：例えば、Ｎ−［３−（４−クロロフェニル）−２（Ｓ）−フェニル−１（Ｓ）−メチルプロピル］−２−（４−トリフルオロメチル−２−ピリミジルオキシ）−２−メチルプロパンアミド、Ｎ−［３−（４−クロロフェニル）−２−（３−シアノフェニル）−１−メチルプロピル］−２−（５−トリフルオロメチル−２−ピリジルオキシ）−２−メチルプロパンアミド、Ｎ−［３−（４−クロロフェニル）−２−（５−クロロ−３−ピリジル）−１−メチルプロピル］−２−（５−トリフルオロメチル−２−ピリジルオキシ）−２−メチルプロパンアミドなど、及びその薬学的に許容される塩；及びＷＯ０５／０００８０９号のもの：例えば、３−｛１−［ビス（４−クロロフェニル）メチル］アゼチジン−３−イリデン）−３−（３，５−ジフルオロフェニル）−２，２−ジメチルプロパンニトリル、１−｛１−［１−（４−クロロフェニル）ペンチル］アゼチジン−３−イル｝−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−メチルプロパン−２−オール、３−（（Ｓ）−（４−クロロフェニル）｛３−［（１Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝メチル）ベンゾニトリル、３−（（Ｓ）−（４−クロロフェニル）｛３−［（１Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝メチル）ベンゾニトリル、３−（（４−クロロフェニル）｛３−［１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２，２−ジメチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝メチル）ベンゾニトリル、３−（（１Ｓ）−１−｛１−［（Ｓ）−（３−シアノフェニル）（４−シアノフェニル）メチル］アゼチジン−３−イル｝−２−フルオロ−２−メチルプロピル）−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（４−クロロフェニル）（３−｛（１Ｓ）−２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、及び５−（（４−クロロフェニル）｛３−［（１Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−ｙＩ｝メチル）チオフェン−３−カルボニトリルなど、及びその薬学的に許容される塩；並びに：３−［（Ｓ）−（４−クロロフェニル）（３−｛（１Ｓ）−２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］−２−メチルプロピル）アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（４−クロロフェニル）（３−｛（１Ｓ）−２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（３−｛（１Ｓ）−１−［３−（５−アミノ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−５−フルオロフェニル］−２−フルオロ−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）（４−クロロフェニル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（４−シアノフェニル）（３−｛（１Ｓ）−２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（３−｛（１Ｓ）−１−［３−（５−アミノ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−５−フルオロフェニル］−２−フルオロ−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）（４−シアノフェニル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（４−シアノフェニル）（３−｛（１Ｓ）−２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（Ｓ）−（４−クロロフェニル）（３−｛（１Ｓ）−２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−シアノフェニル）［３−（１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニル］−メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、５−（３−｛１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−２−フルオロ−２−メチルプロピル｝−５−フルオロフェニル）−１Ｈ−テトラゾール、５−（３−｛１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−２−フルオロ−２−メチルプロピル｝−５−フルオロフェニル）−１−メチル−１Ｈ−テトラゾール、５−（３−｛１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−２−フルオロ−２−メチルプロピル｝−５−フルオロフェニル）−２−メチル−２Ｈ−テトラゾール、３−［（４−クロロフェニル）（３−｛２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（４−クロロフェニル）（３−｛２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（４−シアノフェニル）（３−｛２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、３−［（４−シアノフェニル）（３−｛２−フルオロ−１−［３−フルオロ−５−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル］−２−メチルプロピル｝アゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル、５−｛３−［（Ｓ）−｛３−［（１Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝（４−クロロフェニル）メチル］フェニル）−１，３，４−オキサジアゾール−２（３Ｈ）−オン、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−クロロフェニル）［３−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−シアノフェニル）［３−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−シアノフェニル）［３−（１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−クロロフェニル）［３−（１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、３−（（１Ｓ）−１−｛１−［（Ｓ）−［３−（５−アミノ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］（４−クロロフェニル）メチル］アゼチジン−３−イル｝−２−フルオロ−２−メチルプロピル）−５−フルオロベンゾニトリル、３−（（１Ｓ）−１−｛１−［（Ｓ）−［３−（５−アミノ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］（４−シアノフェニル）メチル］アゼチジン−３−イル｝−２−フルオロ−２−メチルプロピル）−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−シアノフェニル）［３−（１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニル］メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、３−［（１Ｓ）−１−（１−｛（Ｓ）−（４−クロロフェニル）［３−（１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）フェニル］メチル｝アゼチジン−３−イル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］−５−フルオロベンゾニトリル、５−［３−（（Ｓ）−（４−クロロフェニル）｛３−［（１Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝メチル）フェニル］−１，３，４−オキサジアゾール−２（３Ｈ）−オン、５−［３−（（Ｓ）−（４−クロロフェニル）｛３−［（１Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝メチル）フェニル］−１，３，４−オキサジアゾール−２（３Ｈ）−オン、４−｛（Ｓ）−｛３−［（１Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−フルオロ−２−メチルプロピル］アゼチジン−１−イル｝［３−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル］メチル｝−ベンゾニトリル、ＡＣＯＭＰＬＩＡ（リモナバント、Ｎ−（１−ピペリジニル）−５−（４−クロロフェニル）−１−（２，４−ジクロロフェニル）−４−メチルピラゾール−３−カルボキサミド、ＳＲ１４１７１６Ａ）、３−（４−クロロフェニル−Ｎ’−（４−クロロフェニル）スルホニル−Ｎ−メチル−４−フェニル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミド（ＳＬＶ−３１９）、タラナバント（ｔａｒａｎａｂａｎｔ）、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−３−（４−クロロフェニル）−２−（３−シアノフェニル）−１−メチルプロピル］−２−メチル−２−［［５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジニル］オキシ］プロパンアミドなど、及びその薬学的に許容される塩、が挙げられる。
【００８０】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストと組み合わせて使用することができる特定のＮＰＹ５アンタゴニストとしては、３−オキソ−Ｎ−（５−フェニル−２−ピラジニル）−スピロ［イソベンゾフラン−１（３Ｈ），４’−ピペリジン］−１’−カルボキサミド、３−オキソ−Ｎ−（７−トリフルオロメチルピリド［３，２−ｂ］ピリジン−２−イル）スピロ−［イソベンゾフラン−１（３Ｈ），４’−ピペリジン］−１’−カルボキサミド、Ｎ−［５−（３−フルオロフェニル）−２−ピリミジニル］−３−オキソスピロ−［イソベンゾフラン−１（３Ｈ），４’−ピペリジン］−１’−カルボキサミド、トランス−３’−オキソ−Ｎ−（５−フェニル−２−ピリミジニル）スピロ［シクロヘキサン−１、１’（３’Ｈ）−イソベンゾフラン］−４−カルボキサミド、トランス−３’−オキソ−Ｎ−［１−（３−キノリル）−４−イミダゾリル］スピロ［シクロヘキサン−１，１’（３’Ｈ）−イソベンゾフラン］−４−カルボキサミド、トランス−３−オキソ−Ｎ−（５−フェニル−２−ピラジニル）スピロ［４−アザイソ−ベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−Ｎ−［５−（３−フルオロフェニル）−２−ピリミジニル］−３−オキソスピロ［５−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ）、１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−Ｎ−［５−（２−フルオロフェニル）−２−ピリミジニル］−３−オキソスピロ［５−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−Ｎ−［１−（３，５−ジフルオロフェニル）−４−イミダゾリル］−３−オキソスピロ［７−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−３−オキソ−Ｎ−（１−フェニル−４−ピラゾリル）スピロ［４−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−Ｎ−［１−（２−フルオロフェニル）−３−ピラゾリル］−３−オキソスピロ［６−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−３−オキソ−Ｎ−（１−フェニル−３−ピラゾリル）スピロ［６−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、トランス−３−オキソ−Ｎ−（２−フェニル−１，２，３−トリアゾール−４−イル）スピロ［６−アザイソベンゾフラン−１（３Ｈ），１’−シクロヘキサン］−４’−カルボキサミド、及びその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【００８１】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストと組み合わせて使用することができる特定のＡＣＣ−１／２インヒビターとしては、１’−［（４，８−ジメトキシキノリン−２−イル）カルボニル］−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）スピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−４−オン；（５−｛１’−［（４，８−ジメトキシキノリン−２−イル）カルボニル］−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル｝−２Ｈ−テトラゾール−２−イル）メチルピバレート；５−｛１’−［（８−シクロプロピル−４−メトキシキノリン−２−イル）カルボニル］−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル｝ニコチン酸；１’−（８−メトキシ−４−モルホリン−４−イル−２−ナフトイル）−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）スピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−４−オン；及び１’−［（４−エトキシ−８−エチルキノリン−２−イル）カルボニル］−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）スピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−４−オン；及びその薬学的に許容される塩が挙げられる。ＭＫ−３８８７、Ｌ００１７３８７９１。
【００８２】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストと組み合わせて使用することができる特定のＭＣＨ１Ｒアンタゴニスト化合物としては、１−｛４−［（１−エチルアゼチジン−３−イル）オキシ］フェニル｝−４−［（４−フルオロベンジル）オキシ］ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−［（４−フルオロベンジル）オキシ］−１−｛４−［（１−イソプロピルアゼチジン−３−イル）オキシ］フェニル｝ピリジン−２（１Ｈ）−オン、１−［４−（アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル］−４−［（５−クロロピリジン−２−イル）メトキシ］ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−［（５−クロロピリジン−２−イル）メトキシ］−１−｛４−［（１−エチルアゼチジン−３−イル）オキシ］フェニル｝ピリジン−２（１Ｈ）−オン、４−［（５−クロロピリジン−２−イル）メトキシ］−１−｛４−［（ｌ−プロピルアゼチジン−３−イル）オキシ］フェニル｝ピリジン−２（１Ｈ）−オン、及び４−［（５−クロロピリジン−２−イル）メトキシ］−１−（４−｛［（２Ｓ）−１−エチルアゼチジン−２−イル］メトキシ｝フェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン、又はその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【００８３】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストと組み合わせて使用することができる特定のＤＰ−ＩＶインヒビターは、７−［（３Ｒ）−３−アミノ−４−（２，４，５−トリフルオロフェニル）ブタノイル］−３−（トリフルオロメチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，２，４−トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン、又はその薬学的に許容される塩である。
【００８４】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストと組み合わせて使用できる特定のＨ３（ヒスタミンＨ３）アンタゴニスト／インバースアゴニストとしては、ＷＯ０５／０７７９０５号に記載されているもの：例えば、３−｛４−［（１−シクロブチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−２−エチルピリド［２，３−ｄ］−ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、３−｛４−［（１−シクロブチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−２−メチルピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、２−エチル−３−（４−｛３−［（３Ｓ）−３−メチルピペリジン−１−イル］プロポキシ｝フェニル）ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、２−メチル−３−（４−｛３−［（３Ｓ）−３−メチルピペリジン−１−イル］プロポキシ｝フェニル）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、３−｛４−［（１−シクロブチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−２，５−ジメチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−２−メチル−５−トリフルオロメチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−５−メトキシ−２−メチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチルピペリジン−４−イル）オキシ］フェニル｝−５−フルオロ−２−メチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチルピペリジン−４−イル）オキシ］フェニル｝−７−フルオロ−２−メチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチルピペリジン−４−イル）オキシ］フェニル｝−６−メトキシ−２−メチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチルピペリジン−４−イル）オキシ］フェニル｝−６−フルオロ−２−メチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロブチルピペリジン−４−イル）オキシ］フェニル｝−８−フルオロ−２−メチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、３−｛４−［（１−シクロペンチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−２−メチルピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、３−｛４−［（１−シクロブチルピペリジン−４−イル）オキシ］フェニル｝−６−フルオロ−２−メチルピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、３−｛４−［（Ｉ−シクロブチル−４−ピペリジニル）オキシ］フェニル｝−２−エチルピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、６−メトキシ−２−メチル−３−｛４−［３−（１−ピペリジニル）プロポキシ］フェニル｝ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、６−メトキシ−２−メチル−３−｛４−［３−（１−ピロリジニル）プロポキシ］フェニル｝ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン）、２，５−ジメチル−３−｛４−［３−（１−ピロリジニル）プロポキシ］フェニル｝−４（３Ｈ）−キナゾリノン、２−メチル−３−｛４−［３−（１−ピロリジニル）プロポキシ］フェニル｝−５−トリフルオロメチル−４（３Ｈ）−キナゾリノン、５−フルオロ−２−メチル−３−｛４−［３−（１−ピペリジニル）プロポキシ］フェニル｝−４（３Ｈ）−キナゾリノン、６−メトキシ−２−メチル−３−｛４−［３−（１−ピペリジニル）プロポキシ］フェニル｝−４（３Ｈ）−キナゾリノン、５−メトキシ−２−メチル−３−（４−｛３−［（３Ｓ）−３−メチルピペリジン−１−イル］プロポキシ｝フェニル）−４（３Ｈ）−キナゾリノン、７−メトキシ−２−メチル−３−（４−｛３−［（３Ｓ）−３−メチルピペリジン−１−イル］プロポキシ｝フェニル）−４（３Ｈ）−キナゾリノン、２−メチル−３−（４−｛３−［（３Ｓ）−３−メチルピペリジン−１−イル］プロポキシ｝フェニル）ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、５−フルオロ−２−メチル−３−（４−｛３−［（２Ｒ）−２−メチルピロリジン−１−イル］プロポキシ｝フェニル）−４（３Ｈ）−キナゾリノン、２−メチル−３−（４−｛３−［（２Ｒ）−２−メチルピロリジン−１−イル］プロポキシ｝フェニル）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン、６−メトキシ−２−メチル−３−（４−｛３−［（２Ｒ）−２−メチルピロリジン−１−イル］プロポキシ｝フェニル）−４（３Ｈ）−キナゾリノン、６−メトキシ−２−メチル−３−（４−｛３−［（２Ｓ）−２−メチルピロリジン−１−イル］プロポキシ｝フェニル）−４（３Ｈ）−キナゾリノンなど、及びその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【００８５】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストと組み合わせて使用することができる特定のＣＣＫ１Ｒアゴニストとしては、３−（４−｛［１−（３−エトキシフェニル）−２−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］カルボニル｝−１−ピペラジニル）−１−ナフトエ酸；３−（４−｛［１−（３−エトキシフェニル）−２−（２−フルオロ−４−メチルフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］カルボニル｝−１−ピペラジニル）−１−ナフトエ酸；３−（４−｛［１−（３−エトキシフェニル）−２−（４−フルオロフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］カルボニル｝−１−ピペラジニル）−１−ナフトエ酸；３−（４−｛［１−（３−エトキシフェニル）−２−（２，４−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］カルボニル｝−１−ピペラジニル）−１−ナフトエ酸；及び３−（４−｛［１−（２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−６−イル）−２−（４−フルオロフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］カルボニル｝−１−ピペラジニル）−１−ナフトエ酸；及びその薬学的に許容される塩が挙げられる。ＭＫ−８４０６。
【００８６】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストと組み合わせて使用することができる特定のＭＣ４Ｒアゴニストとしては、１）（５Ｓ）−１’−｛［（３Ｒ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（２，３，４−トリフルオロフェニル）ピペリジン−４−イル］カルボニル｝−３−クロロ−２−メチル−５−［１−メチル−１−（１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）エチル］−５Ｈ−スピロ［フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］；２）（５Ｒ）−１’−｛［（３Ｒ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（２，３，４−トリフルオロフェニル）−ピペリジン−４−イル］カルボニル｝−３−クロロ−２−メチル−５−［１−メチル−１−（１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）エチル］−５Ｈ−スピロ［フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］；３）２−（１’−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピロリジン−３−イル］カルボニル｝−３−クロロ−２−メチル−５Ｈ−スピロ［フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］−５−イル）−２−メチルプロパンニトリル；４）１’−｛［（３Ｓ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２，４−ジフルオロフェニル）ピロリジン−３−イル］カルボニル｝−３−クロロ−２−メチル−５−［１−メチル−１−（１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）エチル］−５Ｈ−スピロ［フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］；５）Ｎ−［（３Ｒ，４Ｒ）−３−（｛３−クロロ−２−メチル−５−［１−メチル−１−（１−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−イル）エチル］−１’Ｈ，５Ｈ−スピロ［フロ−［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル｝カルボニル）−４−（２，４−ジフルオロフェニル）−シクロペンチル］−Ｎ−メチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−アミン；６）２−［３−クロロ−１’−（｛（１Ｒ，２Ｒ）−２−（２，４−ジフルオロフェニル）−４−［メチル（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アミノ］−シクロペンチル｝−カルボニル）−２−メチル−５Ｈ−スピロ［フロ［３，４−ｂ］ピリジン−７，４’−ピペリジン］−５−イル］−２−メチル−プロパン−ニトリル；及びその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【００８７】
更に、インクレチンホルモングルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）の他のペプチド類似体及び模倣体も、ニューロメジンＵ受容体アゴニストと組み合わせて使用することができる。
【００８８】
１種以上のニューロメジンＵ受容体アゴニストを含有する医薬組成物を個体に投与する方法としては、これに限定されるものではないが、皮内、筋内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻内、硬膜外及び、経口による投与が挙げられる。この組成物は、任意の簡易な経路、例えば、注入又はボーラス注入法、上皮又は粘膜皮膚内層（例えば、口腔粘膜、直腸及び腸の粘膜など）、眼、などを介した吸収により投与することができ、他の生理活性物質と共に投与することもできる。投与は、全身又は局所に対して行うことができる。更に、脳室内注射及び髄膜注射を含む任意の適した経路によって中枢神経系に組成物を投与することが有利な場合がある。脳室内注射は、タンク（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）（例えば、ｏｍｍａｙａ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）に接続された脳室内カテーテルによって容易に行うことができる。また、経肺投与も、吸入器又は噴霧器の使用とエアロゾール化剤を含有する処方により採用することができる。また、１種以上ニューロメジンＵ受容体アゴニストを、治療を必要とする領域に局所的に投与することも望ましい場合がある。これは、例えば、これに限定されるものではないが、手術中の局所注入や、注射、カテーテル、座薬、又はインプラントによる局所適用などによって達成することができる。
【００８９】
様々な送達系が公知であり、ニューロメジンＵ受容体アゴニストを投与するために使用することができるものとしては、リポソーム中への封入、ミクロ粒子、マイクロカプセル；ミニセル；ポリマー；カプセル剤；錠剤；などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。１つの実施態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストをベシクル（ｖｅｓｉｃｌｅ）中、特にリポソーム中において送達してもよい。リポソームでは、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、他の薬学的に許容される担体に加えて、ミセル、不溶性単層、液晶、ラメラ層として水溶液中に凝集形態で存在する脂質などの両親媒性薬剤と併用される。リポソーム製剤のために適した脂質としては、これに限定されるものではないが、モノグリセリド、ジグリセリド、スルファチド、リゾレシチン、リン脂質、サポニン、胆汁酸などが挙げられる。リポゾーム製剤の調製は、例えば、ＵＳ４，８３７，０２８号及び同第４，７３７，３２３号で開示されているように当該技術分野の範囲内である。更に別の実施態様において、ニューロメジンＵ受容体アゴニストは、これに限定されるものではないが、送達ポンプ（例えば、Ｓａｕｄｅｋ，ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：５７４（１９８９）を参照）及び半透過性ポリマー性材料（例えば、Ｈｏｗａｒｄ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．７１：１０５（１９８９）を参照）などの放出抑制システムにおいて送達することができる。更に、放出抑制システムは、治療標的（例えば、脳）の近傍に配置することができ、その結果、必要な量は、全身性適用量の一部だけで済む。例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ，Ｉｎ：Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ １９８４（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃｃａ Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ）を参照のこと。
【００９０】
特定の障害又は症状の治療において有効な、ニューロメジンＵ受容体アゴニストを含有する組成物の量は、この障害又は症状の性質に依存し、そして当業者による標準的な臨床技術によって決定することができる。更に、最適な投与量範囲を同定する手助けとして、必要に応じて、インビトロアッセイを使用してもよい。また、製剤において採用される正確な用量は、投与の経路並びに疾患又は障害の重症度に依存し、そして医師の判断及び各患者の状況に従って決定されるべきである。最終的に、主治医が、各個々の患者を治療する組成物の量を決定する。最初、主治医は、少ない投与量で組成物を投与し、患者の反応を観察する。患者に最適な治療効果が得られるまで、組成物の投与量を増加させてもよく、その投与量からそれ以上増やさないようにする。一般に、１日の投与量範囲は、単回投与又は分割投与で、約０．００１ｍｇ〜約１００ｍｇ／哺乳動物体重ｋｇ、好ましくは０．０１ｍｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、最も好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲内にある。他方、場合によってはその範囲外の用量を用いることが必要な場合もある。しかし、ニューロメジンＵ受容体アゴニストを含有する組成物の静脈内投与に好適な投投与量範囲は、一般的に、キログラム（Ｋｇ）体重当たり約５〜５００マイクログラム（μｇ）の活性化合物である。鼻腔内投与に好適な投与量範囲は、一般に、約０．０１ｐｇ／ｋｇ体重〜１ｍｇ／ｋｇ体重である。有効投与量は、インビトロ又は動物モデル試験系から得た用量反応曲線より外挿してもよい。坐薬は、一般的に０．５重量％〜１０重量％の範囲で活性成分を含有し、経口製剤は、好ましくは１０％〜９５％の活性成分を含有する。最後に、主治医は、本発明のニューロメジンＵ受容体アゴニストを含有する組成物を使用する治療の適切な持続期間を決める。また、投与量は、個々の患者の年齢、体重及び反応に応じても変わる。
【００９１】
更に、医薬組成物の１種以上の成分、及びニューロメジンＵ受容体アゴニストで満たされた１種以上の容器を包含する医薬品パック又はキットを提供する。そのような容器に関連して、医薬品又は生物学的製品の製造、使用又は販売を規制する政府当局により規定された様式の通知書がこのような容器に添付されてもよく、この通知書はヒトへの投与のための製造、使用又は販売に対する当局による認可を反映している。
【００９２】
以下の例は、本発明の更なる理解を促進することを意図するものである。
【００９３】
実施例１
ヒト又は齧歯動物のＮＭＵＲ１又はＮＭＵＲ２発現細胞株の産出
【００９４】
ＮＭＵＲ１又はＮＭＵＲ２をコードしているヒト、マウス、又はラットのｃＤＮＡを（Ｈｏｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ ４０６：７０−７４（２０００）に記載されているように）、ｐｃＤＮＡ５（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）においてサブクローニングし、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ／ＣＡ）から購入したＦＬＰ−Ｉｎ ＣＨＯ細胞及びＨＥＫ−２９３ ＦＬＰ−Ｉｎ細胞にリポフェクトアミン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用してトランスフェクトした。Ｆｌｐ−Ｉｎ系は、酵母からのＦｌｐ組み換え酵素を用いて、特有の遺伝子位置での目的遺伝子の組み込みと発現を可能にする。トランスフェクされた細胞は、２００μｇ／ｍＬのハイグロマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含有する培養地で培養したものから選択した。集団は初期継代で凍結し、そしてこれらの株は更なる研究に使用された。ｍＲＮＡを発現した安定したクローンは、ＦＬＩＰＲ及びＲＴ−ＰＣＲによって機能的に同定した。公共のゲノムデータベースに基づき、齧歯動物のＮＭＵＲ１受容体は、翻訳のための開始コドンとして従来のメチオニン（ＡＴＧ）を有しているが、代替の開始コドン（ラットのためのＴＴＧ及びマウスのためのＣＴＧ）を有していないようである。このようにして、２つの異なった齧歯動物のＮＭＵＲ１細胞株を産出した。すなわち、１つはゲノムデータベースから予測されるコドンを有する細胞系と、もう１つは開始コドンとして設計されたメチオニン（ＡＴＧ）を有する細胞系である。更に、ヒト受容体を発現する安定細胞株は、ＣＭＶプロモーター下でエクオリン遺伝子を安定して発現するＨＥＫ−２９３／ａｅｑ１７細胞で産出した。ヒトＮＭＵＲ２ ｃＤＮＡは、ｐＣＤＮＡ３．１にクローニングし、そして、ヒトＮＭＵＲ１は、ｐＩＲＥＳ−ｐｕｒｏ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）にサブクローニングし、トランスフェクション後に、Ｇ４１８及びハイグロマイシン（ＮＭＵＲ２）又はピューロマイシン（ＮＭＵＲ１）のどちらかを含む培養液中で細胞を選別した。
【００９５】
実施例２
インビトロ機能アッセイ
【００９６】
ＮＭＵ受容体は、主にＧα_q/11タンパク質を通じてシグナルを発し、これにより、カルシウム流動アッセイを機能活性に利用することができる。
【００９７】
ＦＬＩＰＲアッセイ
【００９８】
ヒト及び／又は齧歯動物のＮＭＵＲ１又はヒトＮＭＵＲ２受容体を発現する安定な細胞株を、ポリリジン被覆３８４ウェルブラックウォールプレート上にて、１２，０００細胞／ウェルの密度で終夜プレート培養した。翌日、プレートから培養液を取り除き、それに続いて細胞を、ＦＬＩＰＲ緩衝液（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．１％のＢＳＡ、２．５ｍＭのプロベネシド（Ｓｉｇｍａ）、及び１．６ｍＭのＴＲ４０を含む１Ｘ Ｈａｎｋの緩衝食塩水）中で稀釈したカルシウム感受性色そのＦｌｕｏ−３（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）を用いて充填した。全ての試薬は、特に明記しない限り、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎから入手した。ペプチドストックは、実験当日に、２ｍＭのストック濃度でＤＭＳＯにて再懸濁し、ＦＬＩＰＲ緩衝液で稀釈して４μＭの作業用ストック溶液とした。
【００９９】
室温で９０分間のインキュベーションの後、細胞プレートを、ＦＬＩＰＲ （Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）に充填して、化合物／ペプチド添加前後の細胞の蛍光をモニターした（励起＝４８８ｎＭ；発光＝５４０ｎＭ）。ＮＭＵＲ発現細胞株について、ＦＬＩＰＲを使用し、１μＭペプチドを最も多い投与量として、８〜１２点の用量反応を試験した。ペプチド添加後の反応は、各ウェルに対し、最大蛍光単位から刺激直前の蛍光を引いたものとして求めた。ＥＣ₅₀は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ， ＣＡ）ソフトウェアを使用して計算した。
【０１００】
ヒト（表３）、マウス（表４）及びラット（表５）のＮＭＵＲ１及びＮＭＵＲ２に対するＦＬＩＰＲアッセイにおけるニューロメジンＵ受容体アゴニスト（ＮＭＵ１−ＮＭＵ２５）のインビトロ活性について調べる。ＥＣ_50Sは、ｎＭ値で示す。パーセント活性は、１μＭでの、同濃度でのｈＮＭＵ−２５反応と比較した最大反応を意味する。ＮＴ＝試験せず。表は、大部分のニューロメジンＵ受容体アゴニストが二重特異性であり、ＮＭＵＲ１及びＮＭＵＲ２受容体の両方を結合することを示している。
【０１０１】
【表３−１】




【０１０２】
【表３−２】

【０１０３】
【表４−１】

【０１０４】
【表４−２】






【０１０５】
【表５】

【０１０６】
エクオリン
【０１０７】
ＦＬＩＰＲに加えて、エクオリンアッセイを使用してＮＭＵ受容体機能を評価することもできる。エクオリンクラゲの遺伝子を発現する安定細胞株を使用して、細胞内カルシウム動員をモニターすることにより、ＧＰＣＲの活性化を報告することができる。その目的は、エクオリン生物発光を特に刺激する化合物を特定することにある。カルシウム依存発光は、腔腸動物発光酵そのセレンテラジンで細胞を処理することにより発生する。つまり、ｈＮＭＵＲ１又はｈＮＭＵＲ２を発現するＨＥＫ−２９３／ａｅｑ １７細胞の融合性単層を、セレンテラジン（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）で「チャージ」する。コンフルエントＴ７５フラスコを、３００μＭのグルタチオン及び０．１％のＦＢＳを含有する培養液で洗浄する。８ｍＬの培養液、０．１％ＦＢＳ、３００μＭのグルタチオン、及び２０μＭのセレンテラジン中で、細胞を３７℃にて１時間インキュベートする。続いて、Ｔ７５フラスコを６ｍＬのＥＣＢ緩衝液（１４０ｍＭのＮａＣｌ、２０ｍＭのＫＣｌ、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、５ｍＭのグルコース、１ｍＭのＭｇＣｌ、１ｍＭのＣａＣｌ₂、０．１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ、ｐＨ７．３〜７．４）で洗浄する。ＥＣＢ緩衝液中で細胞をフラスコから除去し、ペレット化し、そして２×１０⁵細胞／ｍＬの濃度で再懸濁する。細胞にアゴニストを加え、ルミノメーターを使用して活性を測定する。
【０１０８】
ＩＰ１アッセイ
【０１０９】
カルシウムの直接測定に加え、Ｇｑ−結合活性と密接に相関のある、ホスファチジル・イノシトールカスケードの主生成物の１つであるミオイノシトール１リン酸（ＩＰ１）を測定することにより、ＮＭＵ受容体活性を決定することができる。ＩＰ１レベルを測定するためにＨＴＲＦ（均一時間分解蛍光）を使用する、Ｃｉｓｂｉｏ（ベッドフォード（ＭＡ））からのアッセイキット（ＩＰＯｎｅ）が利用可能である。アッセイはメーカーの使用法に従って行う。つまり、細胞を３０，０００細胞／ウェルの濃度で終夜、３８４−ウェルホワイトウォールプレートにプレート培養する。次の日、細胞から培養液を除去し、刺激緩衝液（ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒ）（１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１ｍＭのＣａＣｌ₂、０．５ｍＭのＭｇＣｌ₂、４．２ｍＭのＫＣＬ、１４６ｍＭのＮａＣｌ、５．５ｍＭのグルコース、５０ｍＭのＬｌＣｌ、ｐＨ７．４）で稀釈された１０μＬのアゴニストを加える。細胞をアゴニストと共に、３７℃で１時間インキュベートする。検出分子を加え、ＩＰ１−ｄ２接合体及びアンチＩＰ１クリプテート（ａｎｔｉ−ＩＰ１ｃｒｙｐｔａｔｅ）（製造メーカーのプトロコール通りに調製）、並びに細胞を室温で１時間インキュベートする。蛍光をＥｎｖｉｓｉｏｎ装置で測定し、結果は、装置から読み取った値の蛍光比から計算する。
【０１１０】
ＮＭＵ受容体活性の別の測定法
【０１１１】
追加データは、ＮＭＵ受容体のシグナル伝達が、Ｇαｉ結合活性を介して起こり得ることを示している。ｈＮＭＵＲ１又はｈＮＭＵＲ２のいずれかの活性は、ホルスコリン（１０ｕＭ）刺激ｃＡＭＰ蓄積の阻害をもたらすことを示している。Ｇｉ結合ジグナルを測定するために、ホルスコリン誘導ｃＡＭＰの阻害を測定することができる。つまり、実験前に細胞を２４時間プレート培養する。ニューロメジンＵ受容体アゴニストを細胞に加え、１０分間インキュベートし、続いて１０μＭのホルスコリンを加える。１０分間インキュベートした後、細胞からｃＡＭＰを抽出し、ラジオレセプタアッセイによって測定する。ｃＡＭＰのベースレベル及びｃＡＭＰのホルスコリン刺激レベルを、アゴニスト処理の有無によって測定する。
【０１１２】
種間でのＮＭＵＲ１に対して特異的なＮＭＵＲ１サブタイプ選択的ニューロメジンＵ受容体アゴニストに対する機能データ及び結合データのまとめを表６及び表７に示す。活性は、天然ｈＮＭＵの反応と比較してパーセントで計算する。
【０１１３】
【表６】





【０１１４】
【表７】

【０１１５】
実施例３
結合アッセイ
【０１１６】
膜調製：
【０１１７】
ＮＭＵ受容体を発現する融合性細胞単層（上記のＨＥＫ細胞）を、リン酸緩衝溶液で収穫し、遠心分離法で採取し、膜緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓＣｌ（ｐＨ７．４）、５ｍＭの塩化マグネシウム、１Ｘプロアテーゼインヒビターカクテル、１０μＭのホスホラミドン）で再懸濁した。細胞ペレットをホモジナイズした後、その溶液を１８，０００ｒｐｍにて４℃で２０分間遠心分離した。ペレットを膜緩衝液で再懸濁し、最終濃度０．５〜５μｇ／μＬの膜を得て、−８０℃で保存した。
【０１１８】
^１２５Ｉ−ｈＮＭＵ−２５結合アッセイ：
【０１１９】
実験は、２〜５μｇの膜及び０．１ｎＭの^１２５Ｉ−ｈＮＭＵ−２５（約１２，０００ｃｐｍ／ウェル）を使用して、９６ウェルフォーマットで２００μＬ容量にて、アッセイ緩衝液（２５ｍＭのＴｒｉｓＣｌ（ｐＨ７．４）、１０ｍＭのＭｇＣｌ₂、２ｍＭのＥＤＴＡ、１Ｘプロアテーゼインヒビターカクテル、１００μｇ／ｍＬのバシトラシン（Ｂａｃｉｔｒｉｃｉｎ）、１０μＭのホスホラミドン）中で実施した。非特異的結合に対しては、１μＭのｈＮＭＵ−２５を加えた。約５μＬのペプチドを加えてアンタゴニスト活性を測定し、反応物全体を振盪しながら室温で８０分間インキュベートした。反応は、０．３％のポリエチレンイミン含浸ミリポア９６−ウェルフィルタープレートを通して急速に濾過することによって終結させ、氷冷緩衝液（５ｍＭのＴｒｉｓＣｌ（ｐＨ７．４）、１０ｍＭのＭｇＣｌ₂、２．５ｍＭのＥＤＴＡ、０．０４％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００）で洗浄した。プレートは、室温で終夜風乾し、回復した放射活性を標準のシンチレーション計測により測定した。ＩＣ₅₀は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して求めた。
【０１２０】
実験データ解析：
【０１２１】
濃度−反応曲線及び放射リガンド結合データは、Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄソフトウエア）を使用してフィッティングした。結果は、下記の表８及び表９にまとめた。
【０１２２】
【表８】

【０１２３】
【表９−１】

【０１２４】
【表９−２】

【０１２５】
実施例４
ニューロメジンＵ受容体アゴニストの合成
【０１２６】
当該技術分野で周知の技術を使用してニューロメジンＵ受容体アゴニストを生成することができる。例えば、短縮型（ｔｒｕｎｃａｔｅｄ）ＮＭＵ類似体のポリペプチド領域を化学的に又は生化学的に合成することができ、所望により、修飾することによりブロックされたＮ−末端及び／又はブロックされたＣ−末端を生成することができる。ポリペプチドの化学的合成のための技法は、当該技術分野において周知である（例えば、Ｖｉｎｃｅｎｔ，Ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， Ｎ．Ｙ．，Ｄｅｋｋｅｒ，１９９０を参照のこと）。細胞中への核酸の導入及び核酸の発現に関する生化学合成のための手法の例としては、Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ，１９８７−１９９８、及びＳａｍｂｒｏｏｋ，ｅｔ ａｌ．， ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ Ｅｄ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，１９８９において提供されている。
【０１２７】
１．１ アミノ酸置換及び修飾
【０１２８】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストＮＭＵ１は、４０ｋＤａの分岐したＰＥＧが天然ヒトニューロメジンＵペプチドのＮ−末端に結合したペグ化ペプチドである。ペプチドのＮ−末端基は、分岐した（ＰＥＧ）₂４０Ｋ Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド類似体（例えば、ｍＰＥＧ２−ＮＨＳ−４０ｋ；Ｎｅｋｔａｒ，Ｓａｎ Ｃａｒｌｏｓ，ＣＡ；カタログ番号２Ｚ３Ｙ０Ｔ０１）でアシル化した。これは、改善された薬理学的特性を有するニューロメジンＵ受容体アゴニストを産出するように設計した。ＮＭＵの野生型配列であるペプチド前駆体を、４０ｋＤａの分岐したＰＥＧのＮ−ヒドロキシスクシンイミド誘導体と反応させた。この試薬によるペグ化は、特にペプチドのＮ−末端アミノ基において生じるが、それは、Ｎ−末端アミノ基がペプチドにおいて唯一利用可能なアミノ基であるためである。
【０１２９】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストＮＭＵ２は、天然のＮＭＵペプチドがＮ−末端でアセチル化されたものである。これは、アセチル化、より一般的には、活性におけるＮ−末端でのアシル化の影響を研究するために設計された。残基１９〜２５の最小活性配列に基づいて、Ｎ−末端に追加のアセチル化システイン残基を付加することにより、これらの残基１７〜２５でペプチド配列を修飾した。システインのチオール化基は、（ａ）結合のためのコントロールペプチドであるＮＭＵ６を得るためのＮ−エチルマレイミド；（ｂ）改善されたインビボ薬理学的特性を有するように設計されたペグ化類似体であるＮＭＵ７を得るための（ＰＥＧ）₂ ４０ｋＤａ；又は（ｃ）改善されたインビボ薬理学的特性を有するように設計された脂質化された類似体であるＮＭＵ１１を得るためのコレステロール基、によって更に誘導化した。
【０１３０】
他のペプチド配列は、天然のＮＭＵ配列から始めて、Ｎ末端でアセチル化システイン残基を加えながら、設計された。例えば、システインのチオール化基は、（ａ）結合のためのコントロールペプチドであるＮＭＵ８を得るためのＮ−エチルマレイミド；（ｂ）ＮＭＵ９を得るためのＮｅｋｔａｒ（ｍＰＥＧ２−ＭＡＬ−４０ｋ、カタログ番号２Ｄ３Ｙ０Ｔ０１）からの（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａ、又はＮＭＵ１２をを得るためのＮＯＦ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｊａｐａｎ（ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＧＬ２−４００ＭＡ）からの（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａ；（ｃ）ＮＭＵ１０を得るためのコレステロール基；（ｄ）ＮＭＵ２１を得るための（ＰＥＧ）２０ｋＤａ；（ｅ）ＮＭＵ２６を得るための（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａ；又は（ｆ）ＮＭＵ２７を得るための（ＰＥＧ）４０ｋＤａ、で誘導化した。これらのすべてのニューロメジンＵ受容体アゴニストは、改善されたインビボ薬理学的特性を有するように設計された。
【０１３１】
他のペプチドの例において、２０位の天然ＮＭＵ−２５アミノ酸残基は、Ｄ−アラニンに、並びに２１位のアミノ酸残基はトリプトファンに変わっている。これらの突然変異は、ＮＭＵＲ１受容体に対する選択性を追加し、Ｎ−末端に追加のアセチル化システイン残基を有する。システインのチオール化基は、（ａ）コントロールペプチドであるＮＭＵｌ３を得るためのＮ−エチルマレイミド；（ｂ）改善されたインビボ薬理学的特性を有するように設計されたペグ化類似体であるＮＭＵ１４を得るための（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａ、によって誘導化した。
【０１３２】
ペプチドＮＭＵ１５及びペプチドＮＭＵ１６は、アミノ酸残基１９〜２５を含む最小活性配列に基づくペグ化ペプチドを得るように設計された。配列は、スペーサー及びアセチル化システイン残基としてのＴｔｄｓ基（１−アミノ４，７，１０−トリオキサ−１３−トリデカンアミンコハク酸）のＮ−末端への導入によって修飾した。スペーサーは、ＰＥＧ部分を付加することによって最小配列の活性への影響を最小にするために導入した。システインのチオール化基は、（ａ）結合のためのコントロールペプチドを得るためのＮ−エチルマレイミド；（ｂ）改善したインビボ薬理学的特性を持つように設計したペグ化類似体であるＮＭＵ１６を得るための（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａ、によって誘導体化した。
【０１３３】
ペプチドＮＭＵ１７及びペプチドＮＭＵ１８は、Ｎ−末端の短縮型（ｔｒｕｎｃａｔｅｄ）配列１２〜２５に基づいてペグ化ペプチドが得られるように設計した。ペプチドは、Ｎ−末端に追加のアセチル化システイン残基を有する。システインのチオール化基は、（ａ）結合のためのコントロールペプチドであるＮＭＵ１７を得るためのＮ−エチルマレイミド；（ｂ）改善されたインビボ薬理学的特性を有するように設計されたペグ化類似体であるＮＭＵ１８を得るための（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａ、によって誘導体化した。
【０１３４】
ペプチドＮＭＵ１９及びペプチドＮＭＵ２０は、Ｎ−末端の短縮型（ｔｒｕｎｃａｔｅｄ）配列７〜２５に基づいてペグ化ペプチドを得るように設計した。ペプチドは、Ｎ−末端に追加のアセチル化システイン残基を有する。システインのチオール化基は、（ａ）結合のためのコントロールペプチドであるＮＭＵ１９を得るためのＮ−エチルマレイミド；又は、（ｂ）改善されたインビボ薬理学的特性を有するように設計されたペグ化類似体であるＮＭＵ２０を得るための（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａ、によって誘導体化した。
【０１３５】
ペプチドＮＭＵ２２及びペプチドＮＭＵ２３は、天然のＮＭＵ配列から開始し、Ｎ−末端で２つのシステイン残基を加えるように設計した。ペプチドのＮ−末端をアセチル化した。システインのチオール化基は、（ａ）結合のためのコントロールペプチドであるＮＭＵ２２を得るためのＮ−エチルマレイミド；又は、（ｂ）改善されたインビボ薬理学的特性を有するように設計されたペグ化類似体であるＮＭＵ２３を得るための（ＰＥＧ）２０ｋＤａ、によって誘導化した。
【０１３６】
ペプチドＮＭＵ２４及びペプチドＮＭＵ２５は、Ｎ−末端でパルミトイル化されたシステイン残基が付加された天然のＮＭＵ配列に基づいている。それらは、（１）Ｎ−末端パルミトイル化、又はより一般的には、脂肪酸鎖によるアシル化；及び、（２）ペグ化及び脂質化の両方の組み合わせ効果の活性への影響を研究するために設計されている。システインのチオール化基は、（ａ）改善されたインビボ薬理学的特徴を有するように設計され、結合のためのコントロールペプチドとして機能するように設計された脂質化類似体であるＮＭＵ２４を得るためのＮ−エチルマレイミド；（ｂ）ＮＭＵ２５を得るための（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａ（この脂質化及びペグ化した類似体は、改善されたインビボ薬理学的特性を有するように設計された）、によって誘導体化した。
【０１３７】
ペプチドＮＭＵ２８及びペプチドＮＭＵ２９は、天然のＮＭＵ残基１７−２５に及ぶ。アセチル化システイン残基に、スペーサーとして機能するように、Ｔｔｄｓ基及びＮ−末端を付加した。スペーサーは、ＰＥＧ部分の追加によって配列の活性への影響を最小にするために導入した。システインのチオール化基は、（ａ）結合のためのコントロールペプチドであるＮＭＵ２８を得るためのＮ−エチルマレイミド；又は、（ｂ）改善されたインビボ薬理学的特性を有するように設計されたペグ化類似体であるＮＭＵ２９を得るための（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａ、によって誘導体化した。
【０１３８】
１．２． ペグ化及び／又はコレステロイル化
【０１３９】
本発明のニューロメジンＵ受容体アゴニストのペグ化部位は、ＮＭＵの構造及びＮＭＵ受容体との相互作用を考慮して選択した。したがって、ペグ化は、好ましくは部位選択的である。ペプチドＮＭＵのＮ−末端アミノ基は、配列における唯一利用可能なアミノ基であるため、ペプチドＮＭＵのＮ−末端アミノ基でのペグ化は可能である。例えば、ペプチドのＮ−末端基を、分岐した（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａ Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド類似体（例えば、ｍＰＥＧ２−ＮＨＳ−４０ｋ；Ｎｅｋｔａｒ、ＣＡ；カタログ番号２Ｚ３Ｙ０Ｔ０１）でアシル化した。
【０１４０】
１．３． ニューロメジンＵ受容体アゴニストの合成
【０１４１】
ニューロメジンＵ受容体アゴニスト（表１参照）は、Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ化学を使用し、ペプチドシンセサイザーＡＢＩ４３３Ａ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）により、固相で合成した。各ペプチドに対して、０．７５ｇの樹脂Ｆｍｏｃ−Ｌｉｎｋｅｒ ＡＭ−Ｃｈａｍｐｉｏｎ、１％架橋（Ｂｉｏｓｅａｒｃｈ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ， Ｉｎｃ．， Ｎｏｖａｔｏ， ＣＡ）および修飾したＲｉｎｋリンカーのｐ−［（Ｒ，Ｓ）−α−［９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシホルムアミド］−２，４−ジメトキシベンジル］−フェノキシ酢酸（Ｒｉｎｋ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．２８：３７８７−３７８９（１９８７）；Ｂｅｒｎａｔｏｗｉｃｚ，ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．３０：４６４５−４６６７（１９８９））で誘導体化したＰＥＧ−ＰＳベース樹脂を使用した。アシル化反応は、樹脂遊離アミノ基上で４倍過剰の活性化アミノ酸により、６０分間実施した。アミノ酸は、等モル量のＨＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１−３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）及び２倍モル過剰のＤＩＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）でＤＭＦ中において活性化した。
【０１４２】
あるいはまた、ペプチドは、Ｆｍｏｃ／ｔ−Ｂｕ化学を使用してＰｉｏｎｅｅｒ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）において、固相によって合成した。この場合、全てのアシル化反応は、シンセイサイザー上でペプチドアセンブリの終わりに、４倍過剰の活性化アミノ酸を用いて、樹脂遊離アミノ基上で６０分間実施した。側鎖保護基は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｓｅｒ、及びＴｙｒに対してはｔｅｒｔ−ブチル；Ａｓｎ、Ｃｙｓ、及びＧｌｎに対してはトリチル；Ａｒｇに対しては２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニルであった。Ｎ−末端アセチル化反応は、ＤＭＦ中における１０倍過剰の無水酢酸との反応により、ペプチドアセンブリの終わりにおいて実施した。Ｎ−末端パルミトイル化反応（ＮＭＵ２４及びＮＭＵ２５に対し）は、樹脂遊離アミノ基上での４倍過剰の活性化パルミチン酸との反応により、ペプチドアセンブリの終わりに実施した。パルミチン酸は、ＤＭＦ中における等モル量のＤＩＰＣ（１，３−ジイソプロピルカルボジイミド）及びＨＯＢｔ（ヒドロキシベンゾトリアゾール）により活性化した。
【０１４３】
合成の終わりに、乾燥ペプチド樹脂を、個別に、室温で２．５時間、２０ｍＬの開裂混合物、８８％のＴＦＡ、５％のフェノール、２％のトリイソプロピルシラン、及び５％の水で処理した（Ｓｏｌｅ及びＢａｒａｎｙ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５７：５３９９−５４０３（１９９２））。各樹脂をフィルターにかけ、ペプチドを沈殿させるためにその溶液を冷メチル−ｔ−ブチルエーテルに加えた。遠心分離の後、ペプチドペレットを新鮮な冷メチル−ｔ−ブチルエーテルで洗浄して、有機スカベンジャーを除去した。この工程を二度繰り返した。最終的にペレットは乾燥させ、Ｈ₂Ｏ、２０％アセトニトリル中に再懸濁させ、凍結乾燥した。
【０１４４】
粗ペプチドは、セミ分取Ｗａｔｅｒｓ ＲＣＭ Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ（登録商標） Ｃ₄又はＣ₁₈カートリッジ（４０ｘ２００ｍｍ、１５μｍ）を使用し、溶出液として（Ａ）０．１％ＴＦＡの水溶液及び（Ｂ）０．１％ＴＦＡのアセトニトリル溶液を使用し、流量８０ｍＬ／分で、逆相ＨＰＬＣによって精製した。分析ＨＰＬＣは、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｊｕｐｉｔｅｒ Ｃ₄カラム（１５０ｘ４．６ｍｍ、５μｍ）又はＲｅｐｒｏＳｉｌ−Ｐｕｒ３００ Ｃ₄カラム（１５０ｘ４．６ｍｍ、５μｍ）（Ｄｒ．Ｍａｉｓｃｈ ＧｍｂＨ）又はＢｅｃｋｍａｎ、Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ Ｃ₁₈カラム（２５０ｘ４．６ｍｍ、５μｍ）で、流速１ｍＬ／分にて行った。精製したペプチドは、Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＬＣＺプラットホームでのエレクトロスプレイ質量分析によって同定した。
【０１４５】
ペプチドＮＭＵ６の合成は、チオール含有ＮＭＵペプチド前駆体をＨＥＰＥＳ ０．１Ｍ ｐＨ７．３、ＥＤＴＡ ４ｍＭに溶かすことによって実施した。そして、１．５モル過剰のＮ−エチルマレイミドを加えた。１時間インキュベートした後、ペプチドをＨＰＬＣで精製した。
【０１４６】
ペプチドＮＭＵ８の合成は、チオール含有ＮＭＵペプチド前駆体をＨＥＰＥＳ ０．１Ｍ ｐＨ７．３，ＥＤＴＡ ４ｍＭに溶かすことによって実施した。そして、１．５モル過剰のＮ−エチルマレイミドを加えた。１時間インキュベートした後、ペプチドをＨＰＬＣで精製した。
【０１４７】
ペプチドＮＭＵ１３の合成は、チオール含有ＮＭＵペプチド前駆体をＨＥＰＥＳ ０．１Ｍ ｐＨ７．３，ウレア８Ｍ、ＥＤＴＡ ４ｍＭに溶かすことによって実施した。そして、１．５モル過剰のＮ−エチルマレイミドを加えた。１時間インキュベートした後、ペプチドをＨＰＬＣで精製した。
【０１４８】
ペプチドＮＭＵ１５の合成は、チオール含有ＮＭＵペプチド前駆体をＨＥＰＥＳ ０．１Ｍ ｐＨ７．３，ＥＤＴＡ ４ｍＭに溶かすことによって実施した。そして、１．５モル過剰のＮ−エチルマレイミドを加えた。１時間インキュベートした後、ペプチドをＨＰＬＣで精製した。
【０１４９】
ペプチドＮＭＵ１７の合成は、チオール含有ＮＭＵペプチド前駆体をＨＥＰＥＳ ０．１Ｍ ｐＨ７．３，ＥＤＴＡ ４ｍＭに溶かすことによって実施した。そして、１．５モル過剰のＮ−エチルマレイミドを加えた。１時間インキュベートした後、ペプチドをＨＰＬＣで精製した。
【０１５０】
ペプチドＮＭＵ１９の合成は、チオール含有ＮＭＵペプチド前駆体をリン酸ナトリウム ０．１Ｍ ｐＨ６．５，ウレア４Ｍ、ＥＤＴＡ ４ｍＭに溶かすことによって実施した。そして、１．５モル過剰のＮ−エチルマレイミドを加えた。１時間インキュベートした後、ペプチドをＨＰＬＣで精製した。
【０１５１】
ペプチドＮＭＵ２２の合成は、チオール含有ＮＭＵペプチド前駆体をリン酸ナトリウム０．２Ｍ ｐＨ６．５，ウレア８Ｍ、ＥＤＴＡ ４ｍＭに溶かすことによって実施した。そして、３モル過剰のＮ−エチルマレイミドを加えた。１時間インキュベートした後、ペプチドをＨＰＬＣで精製した。
【０１５２】
ペプチドＮＭＵ２４の合成は、チオール含有ＮＭＵペプチド前駆体をリン酸ナトリウム０．２Ｍ ｐＨ６．５，ウレア８Ｍ、ＥＤＴＡ ４ｍＭに溶かすことによって実施した。そして、３モル過剰のＮ−エチルマレイミドを加えた。１時間インキュベートした後、ペプチドをＨＰＬＣで精製した。
【０１５３】
ペプチドＮＭＵ２８の合成は、チオール含有ＮＭＵペプチド前駆体をＨＥＰＥＳ ０．１Ｍ ｐＨ７．３，ＥＤＴＡ ４ｍＭに溶かすことによって実施した。そして、１．５モル過剰のＮ−エチルマレイミドを加えた。１時間インキュベートした後、ペプチドをＨＰＬＣで精製した。
【０１５４】
１．４．ニューロメジンＵ（ＮＵＭ）類似体のペグ化
【０１５５】
ペグ化反応は、アミド結合（ＮＭＵ１）形成又はチオエーテル結合形成が可能な条件下で実施した。次いで、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）及びサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を使用してペグ化ＮＭＵペプチドを単離した。陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）は、ＴＳＫ ＳＰ−５ＰＷ（Ｔｏｓｏｈ）カラム（１６ ｘ １００ｍｍ）で、ＮａＣｌ（０〜１Ｍ）の直線勾配、３．５カラム容量、０．２％ギ酸、流速量１ｍＬ／分、勾配溶出２ｍＬ／分で実施した。サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）は、ＴＳＫ−ＨＷ５０（Ｔｏｓｏｈ）カラム（２１ ｘ ７００ ｍｍ）にて、酢酸０．１％（ｗ／ｖ）、３０％アセトニトリル、流速１ｍＬ／分で実施した。ペグ化ＮＭＵ類似体は、ＲＰ−ＨＰＬＣ、ＨＰＬＣ−ＳＥＣ、及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆ質量スペクトル分析を使用して同定した。
【０１５６】
ＮＭＵ１ペプチドは、アミド結合を介して共有結合したＰＥＧを有する誘導体を製造するために、天然のＮＭＵペプチド前駆体から合成した。
【０１５７】
ＮＭＵ１の合成
８．７ｍｇのペプチド前駆体（２．８μモル）を、１．５ｍＬの０．２Ｍ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．３に溶解した。次いで、３．５ｍＬの水に溶解させた３６０ｍｇのｍＰＥＧ２−ＮＨＳ−４０ｋ（ＮＥＫＴＡＲ、２Ｚ３Ｙ０ｔ０１）（８．６μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：３）をこの溶液に加えた。１８時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。ＮＭＵ７、ＮＭＵ９、ＮＭＵ１２、ＮＭＵ１４、ＮＭＵ１６、ＮＭＵ１８、ＮＭＵ２０．ＮＭＵ２１、ＮＭＵ２３、ＮＭＵ２５、ＮＭＵ２６、ＮＭＵ２７、及びＮＭＵ２９ペプチドは、チオエーテル結合を介して共有結合したＰＥＧを有する誘導体を製造するために、チオール含有ＮＭＵペプチド前駆体から合成した。
【０１５８】
ＮＭＵ７の合成
１０ｍｇのペプチド前駆体（７．６μモル）を、１ｍＬの０．２Ｍ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．３，４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、３ｍＬの水に溶解させた３４０ｍｇのｍＰＥＧ２−ＭＡＬ−４０ｋ（ＮＥＫＴＡＲ、２Ｄ３Ｙ０Ｔ０１）（８．４μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：１．１）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１５９】
ＮＭＵ９の合成
１５ｍｇのペプチド前駆体（４．６μモル）を、１ｍＬの０．２Ｍ リン酸ナトリウム，ｐＨ６．５，ウレア ８Ｍ，４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、２ｍＬの水に溶解させた２０４ｍｇのｍＰＥＧ２−ＭＡＬ−４０ｋ（ＮＥＫＴＡＲ、２Ｄ３Ｙ０Ｔ０１）（５．１μモル）（ペプチド：ＰＥＧ＝１：１．１）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１６０】
ＮＭＵ１２の合成
８ｍｇのペプチド前駆体（２．５μモル）を、１ｍＬの０．１Ｍ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．３，ウレア ８Ｍ，４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、２ｍＬの水に溶解させた１１５ｍｇのＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＧＬ２−４００ＭＡ（ＮＯＦ Ｃｏｒｐ．）（２．７μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：１．１）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１６１】
ＮＭＵ１４の合成
１０ｍｇのペプチド前駆体（３．１μモル）を、１ｍＬの０．１Ｍ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．３，ウレア８Ｍ，４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、２ｍＬの水に溶解させた１４５ｍｇのＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＧＬ２−４００ＭＡ（ＮＯＦ Ｃｏｒｐ．）（３．４μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：１．１）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１６２】
ＮＭＵ１６の合成
８．３ｍｇのペプチド前駆体（６．０μモル）を、１ｍＬの０．１Ｍ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．３，４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、２ｍＬの水に溶解させた２８０ｍｇのＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＧＬ２−４００ＭＡ（ＮＯＦ Ｃｏｒｐ．）（６．６μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：１．１）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１６３】
ＮＭＵ１８の合成
１０ｍｇのペプチド前駆体（５．４μモル）を、１ｍＬの０．１Ｍ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．３，４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、２ｍＬの水に溶解させた２５０ｍｇのＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＧＬ２−４００ＭＡ（ＮＯＦ Ｃｏｒｐ．）（５．９μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：１．１）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１６４】
ＮＭＵ２０の合成
１０ｍｇのペプチド前駆体（４．１μモル）を、１ｍＬの０．１Ｍ リン酸ナトリウム，ｐＨ７．３，ウレア４Ｍ，４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、２ｍＬの水に溶解させた１７４ｍｇのＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＧＬ２−４００ＭＡ（ＮＯＦ Ｃｏｒｐ．）（４．１μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：１）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１６５】
ＮＭＵ２１の合成
１０ｍｇのペプチド前駆体（３．１μモル）を、１ｍＬの９０ｍＭ リン酸ナトリウム，ｐＨ６．６，ウレア４Ｍ、４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、１ｍＬの水に溶解させた６５ｍｇのＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＭＥ−２００ＭＡ（ＮＯＦ Ｃｏｒｐ．）（３．１μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：１）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１６６】
ＮＭＵ２３の合成
１０ｍｇのペプチド前駆体（３．０μモル）を、１ｍＬの９０ｍＭ リン酸ナトリウム，ｐＨ７．１，ウレア８Ｍ，４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、２ｍＬの水に溶解させた１５７ｍｇのＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＭＥ−２００ＭＡ（ＮＯＦ Ｃｏｒｐ．）（７．５μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：２．５）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１６７】
ＮＭＵ２５の合成
１０ｍｇのペプチド前駆体（２．９μモル）を、１ｍＬの９０ｍＭリン酸ナトリウム，ｐＨ７．１，ウレア８Ｍ、４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、２ｍＬの水に溶解させた１２５ｍｇのＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＧＬ２−４００ＭＡ（ＮＯＦ Ｃｏｒｐ．）（２．９μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：１）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１６８】
ＮＭＵ２６の合成
１０ｍｇのペプチド前駆体（３．１μモル）を、１ｍＬの９０ｍＭリン酸ナトリウム，ｐＨ７．１，ウレア８Ｍ，４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、２ｍＬの水に溶解させた７０ｍｇのＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＧＬ２−２００ＭＡ（ＮＯＦ Ｃｏｒｐ．）（３．１μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：１）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１６９】
ＮＭＵ２７の合成
１０ｍｇのペプチド前駆体（３．１μモル）を、１ｍＬの９０ｍＭリン酸ナトリウム，ｐＨ７．１，ウレア８Ｍ，４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、２ｍＬの水に溶解させた１３６ｍｇのｍＰＥＧ−マレイミド−４０ｋＤａ（ＤＯＷｐｈａｒｍａ、００８−０１６）（３．４μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：１．１）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１７０】
ＮＭＵ２９の合成
８ｍｇのペプチド前駆体（５．１μモル）を、１ｍＬの０．１Ｍ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．３，４ｍＭ ＥＤＴＡに溶解した。次いで、２ｍＬの水に溶解させた２１７ｍｇのＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＧＬ２−４００ＭＡ（ＮＯＦ Ｃｏｒｐ．）（５．１μモル）（ペプチド：ＰＥＧのモル比＝１：１）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、ペグ化ペプチド溶液をギ酸１％まで酸性化し、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＩＸＣ）により精製した。ＩＸＣ精製ペグ化ペプチドは、更にＳＥＣによって精製し、ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−Ｔｏｆにより同定した。
【０１７１】
１．５．ニューロメジンＵ（ＮＭＵ）類似体のコレステロイル化
【０１７２】
コレステロールによる誘導体化は、チオエーテル結合の形成が可能な条件下で実施した。次いで、コレステロイル化されたニューロメジンＵ受容体アゴニストを、ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレイ質量分析によって同定した。
【０１７３】
ＮＭＵ１０の合成
１８ｍｇのペプチド前駆体（５．６μモル）を、１ｍＬのＤＭＦに溶解した。次いで、７０μＬのＴＨＦに溶解させた３ｍｇのコレステリルブロモアセテート（１４μモル）（ペプチド：コレステリルブロモアセテートのモル比＝１：１．１）、及び５μＬのＤＩＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）（ペプチドに対して２．５倍モル過剰）をこの溶液に加えた。１時間のインキュベーション後、コレステロイル化されたペプチドをＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレイ質量分析によって同定した。
【０１７４】
ＮＭＵ１１の合成
１７ｍｇのペプチド前駆体（１２．９μモル）を、１ｍＬのＤＭＦに溶解した。次いで、０．１７ｍＬのＴＨＦに溶解させた７．２ｍｇのコレステリルブロモアセテート（１４μモル）（ペプチド：コレステリルブロモアセテートのモル比＝１：１．１）、及び１１．７μＬのＤＩＥＡ（ペプチドに対して５倍モル過剰）をこの溶液に加えた．１時間のインキュベーション後、コレステロイル化されたペプチドをＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレイ質量分析によって同定した。
【０１７５】
実施例５
ＮＭＵ及びその類似体を用いた給餌試験
【０１７６】
標準の相同組換法を使用して、ＮＭＵＲ１ノックアウト（Ｎｍｕｒ１−／−）マウスを得た。続いて、Ｎｍｕｒ１マウスをＴａｃｏｎｉｃ Ｆａｒｍｓに移して、７５％ Ｃ５７ＢＬ／６ ｘ ２５％ １２９Ｓ６／ＳｖＥｖ混合遺伝的背景に維持するか、Ｃ５７ＢＬ／６に６世代戻して交配させた。ＮＭＵＲ２ノックアウト（Ｎｍｕｒ２−／−）マウスは、Ｄｅｌｔａｇｅｎ Ｉｎｃ．， Ｓａｎ Ｍａｔｅｏ， ＣＡから認可を受け、続いてＴａｃｏｎｉｃ Ｆａｒｍｓに移して、７５％ Ｃ５７ＢＬ／６ ｘ ２５％ １２９／ＯｌａＨｓｄ混合遺伝的背景に維持するか、Ｃ５７ＢＬ／６に７世代戻し交配させた。ＮＭＵＲ１及びＮＭＵＲ２の二重ノックアウト（Ｎｍｕｒ１＆２−／−）マウスは、Ｎ６ Ｎｍｕｒ１−／−マウスをＮ７ Ｎｍｕｒ２−／−マウスと交配することによって得た。マウスは、個々に、従来のＳＰＦ施設のＴｅｃｎｉｐｌａｓｔケージに収容した。マウスは、最初、通常の食事で飼育し、続いて、早期は高脂肪食（Ｄ１２４９２：脂肪から６０％ｋｃａｌ；Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ）に切り替え、適宜自由に水を飲めるようにして、１２時間（明）／１２時間（暗）のサイクルで飼育した。
【０１７７】
適宜餌を与えられた食餌誘発性肥満の雄のマウスは、明期から暗期へうつる約３０分前に、体重を測定し、腹腔内か皮下注射のどちらかで投与し、予め重量を測定した高脂肪食Ｄ１２４９２のアリコートを与え、次いで、最初の暗期の開始後、２時間及び１８時間（１日目）、４２時間（２日目）、６６時間（３日目）、及び９０時間（４日目）に体重を測定した。１８、４２、６６、及び９０時間の時点でマウスの体重を測定した。データは、給餌研究の結果を示している（全ての値は平均±ＳＥＭとして報告され、データは両側独立スチューデントｔ検定を使用して分析した；ｐ値≦０．０５は、有意であるとしてアスタリスクで示した）。
【０１７８】
図２Ａ及び２Ｂに示されているように、ＮＭＵＲ１−選択的ペプチド（ニューロメジンＵ受容体アゴニストＨ及びＮＭＵ１３）の急性末梢投与は、野生型マウスにおいて食物摂取を著しく減少させたが、Ｎｍｕｒ１ノックアウトマウスではそうではなく、ＮＭＵＲ１がこれらの類似体の食欲抑制作用に必要であることを示している。更に、これらのデータは、ＮＭＵＲ１−選択的アゴニズムが、汎ＮＭＵＲ１／２アゴニストＮＭＵの食欲抑制作用を再現するのに十分であることを示している。
【０１７９】
図３Ａ及び３Ｂは、ペグ化ＮＭＵの急性皮下投与が、投与後３日間にわたって食物摂取を減少させることを示している。ペグ化類似体のインビトロ及びインビボの代謝プロフィールは一致しており、ＮＭＵは、ｈＮＭＵ−２５と比較した場合、終夜において食物摂取を減少させるより素晴らしい効果を示し、食物摂取における減少は、投与後３日間観察された。また、体重の著しい減少も観察された。
【０１８０】
図４Ａ及び４Ｂは、ＮＭＵＲ１も、有効な食欲抑制ペプチドであることを示している。ＮＭＵ１と同様に、ペプチドの１回の皮下投与後に、食物摂取及び体重において著しい減少が、３日間観察される。
【０１８１】
更に、図５Ａ及び５Ｂは、ＮＭＵ１２の食欲抑制効果は、ＮＭＵＲ１受容体及びＮＭＵＲ２受容体によって媒介されることを示している。ＮＭＵ１２の急性投与は、野生型動物においては効果が高いが、ＮＭＵＲ１／ＮＭＵＲ２二重ノックアウト動物では効果が観察されなかった。ＮＭＵＲ２受容体での効果は、主に脳内で生じるため、この結果は、ＮＭＵ１２が血液−脳関門を通過できることを示している。食物摂取と体重を減少させるＮＭＵＲ２の効果は、中枢曝露（ｃｅｎｔｒａｌ ｅｘｐｏｓｕｒｅ）を必要とするのに対し、ＮＭＵＲ１の場合は、末梢曝露（ｐｅｒｉｈｅｒａｌ ｅｘｐｏｓｕｒｅ）を必要とする。
【０１８２】
図６Ａ及び６Ｂは、ペグ化ＮＭＵ１２の長期の食欲抑制効果が、ＮＭＵＲ１受容体とＮＭＵＲ２受容体の両方によって媒介されることを示している。食物摂取及び体重における減少は、ＮＭＵＲ１ノックアウト動物において、投与後２日間観察される。しかし、ＮＭＵＲ２ノックアウト動物では、終夜の効果のみが観察される。これは、ＮＭＵＲ１によってのみ媒介されるｈＮＭＵ−２５の食欲抑制作用と対照的であり、ｈＮＭＵ−２５及びＮＭＵＲ２が、異なる作用メカニズムを有していることを示している。
【０１８３】
図７Ａ〜７Ｃは、ＮＭＵ１２の長期投与により、食物摂取及び体重を減少させることが可能であることを示している。ＮＭＵＲ１２は、連日（ＱＤ）、隔日（Ｑ２Ｄ）、３日毎（Ｑ３Ｄ）に投与した。パネルＡは、治療開始後９日間における体重の累積変化を示している。試験の４日目に最後の投与を行い、９日目まで測定を行った。累積食物摂取（Ｂ）及び体重（Ｃ）は、ＮＭＵ１２に対する全ての投薬パラダイムにおいて著しく減少した。食物摂取は、溶媒投与群と比較して、これらの投与量で１２〜２７％減少した。同様に、体重の累積変化は、溶媒対照群と比較して、３．３％から最大７．３％までの範囲で減少したことを示している。
【０１８４】
ｈＮＭＵ−２５およびＮＭＵ類似体のインビボ実験からの食物摂取及び体重の変化における減少比率の要約を表１０に示す。計算は溶媒の応答をベースとしている。
【０１８５】
【表１０】

【０１８６】
実施例６
血漿安定性実験
【０１８７】
様々な種からの血漿におけるＮＭＵ１２及びＮＭＵ１の安定性を評価するため、インビボでのスパイクイン（ｓｐｉｋｅ−ｉｎ）実験を実施した。ＮＭＵ１２、ＮＭＵ１、又はｈＮＭＵ−２５を、最終濃度が１μＭとなるように血漿（Ｂｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎから購入）に加え、様々な温度（室温、４℃、及び３７℃）でインキュベートした。様々なタイミングでこれらの血漿試料のアリコートを採取し、−８０℃で凍結し、続いて、様々なインキュベーション時間後に残存している活性ペプチドの比率を決定するために、細胞株発現ヒトＮＭＵＲ１によってＦＬＩＰＲアッセイにかけた。試料中に残存しているペプチドの活性比率は、ペプチド試料に任意の温度負荷をかける前の開始時間（Ｔ＝０）での試料に対するＦＬＩＰＲ応答に基づいて計算した。
Ｔ＝０では、期待される回復は１００％である。
【０１８８】
図８は、スパイクイン実験によるヒト血漿中でのｈＮＭＵ−２５並びにペグ化ニューロメジンＵ受容体アゴニストＮＭＵ１及びＮＭＵ１２のインビトロ安定性を示しており、ＮＭＵのペグ化により、ヒト血漿中での安定性が向上することを示している。ヒト血漿におけるｈＮＭＵ−２５の半減期は１６時間未満であったが、ペグ化アゴニストＮＭＵ１（ペグ化ｈＮＭＵ−２５）及びＮＭＵ１２は、３７℃でインキュベートされたヒト血漿中において、３日間を超える半減期を示した。
【０１８９】
実施例７
バイオアッセイを使用するペプチドの薬物動態分析
【０１９０】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストＮＭＵ１２の投与された動物における曝露レベルは、バイオアッセイを使用して測定し、ｈＮＭＵ−２５曝露レベルと比較した。動物に、１０ｍｇ／ｋｇのＮＭＵ１２又はｈＮＭＵ−２５を皮下投与し、投与後の様々なタイミングで血漿を採取した。バイオアッセイは、ＦＬＩＰＲベースのアッセイであり、基本的に上記で説明したように以下のような変更を加え実施した。アッセイ前の試料調製は、血漿試料の分解を最小にするために氷の上で実施した。アッセイは、最終濃度４％血漿にて行った。投与された血漿で３点滴定を行い、ＦＬＩＰＲを使用して、細胞株を発現するヒトＮＭＵＲ１を試験した。試料を添加後の応答は、各ウェルに対し、最大蛍光ユニットから刺激直前の蛍光を引いたものとして求めた。投与された血漿試料の３点滴定に加え、標準として機能するように、ペプチド（ｈＮＭＵ−２５又はＮＭＵ１２）の１６点滴定を４％血漿（自然血漿）で行った。血漿中のペプチドの濃度は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して適切な標準から推定に基づいて計算した。
【０１９１】
図９は、マウスにおけるｈＮＭＵ−２５及びペグ化ＮＭＵ１２の薬物動態学的特徴を示しており、ＮＭＵのペグ化により、インビボでの代謝安定性が向上することを示している。
破線は、アッセイに対する検出限界（ＬＯＤ）を示す。これらの実験は、ＮＭＵのペグ化がインビトロ及びインビボの両方での代謝安定性を高めることを示している。
【０１９２】
本発明について、具体的実施態様を参照して本明細書中にて説明しているが、本発明がこれらに限定されるものではないことは理解されるべきである。
当該技術分野の通常の技術及び本明細書の教示にアクセスする手段を有する者であれば、本発明の範囲内の更なる修正及び実施態様について認識するであろう。
従って、本末明は、添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるものである。
【図面の簡単な説明】
【０１９３】
【図１Ａ】アゴニストＨの末梢投与が食物摂取を減少させ、これらの食欲抑制作用がＮＭＵＲ１によって媒介されることを示す図である。食物由来の肥満であるＮｍｕｒ１＋／＋とＮｍｕｒ１−／−マウスに、溶媒（水）、３．２５ｍモル／ｋｇの化合物Ｈ又は３．２５ｍモル／ｋｇのｈＮＭＵ−２５のいずれかを、暗期の開始前の３０分に腹腔内に投与し、食物摂取量を、それぞれ２時間後及び８時間後（終夜）に測定した。＊溶媒に対してＰ＜０．０５、１投与群当たりｎ＝１１〜１２
【図１Ｂ】図１Ａにおけるマウスの体重の終夜による変化を示す図である。
【図２Ａ】ＮＭＵＲ１選択的アゴニストＨの急性末梢投与は、野生型マウスの食物摂取を著しく減少させるが、ＮＭＵＲ１ノックアウトマウスでは減少させなかったことを示す図であり、このことは、ＮＭＵＲ１がアゴニストＨの食欲抑制作用に必要であることを示している。更に、このデータは、ＮＭＵＲ１選択的アゴニズムが、汎ＮＭＵＲ１／２アゴニストＮＭＵの食欲抑制作用を再現するのに十分であることを示す。
【図２Ｂ】ＮＭＵＲ１−選択的アゴニストであるＮＭＵ１３の急性末梢投与も、野生型マウスの食物摂取を著しく減少させるが、Ｎｍｕｒ１ノックアウトでは減少させなかったことを示す図であり、このことは、このアゴニストの食欲抑制作用には、ＮＭＵＲ１が必要であることを示している。更に、このデータは、ＮＭＵＲ１−選択的アゴニズムが、汎ＮＭＵＲ１／２アゴニストＮＭＵの食欲抑制作用再現するのに十分であることを示す。
【図３Ａ】ペグ化ＮＭＵの急性皮下投与が、投与後３日間の食物摂取を減少することを示す図である。ペグ化類似物の生体内外の代謝プロフィールに対応して、ＮＭＵ１は、ｈＮＭＵ−２５と比較した場合、終夜の食物接収減少において優れた効果を示し、そして食物摂取における減少は、投与後３日間観察された。また、体重の著しい減少も観測された（図３Ｂ）。
【図３Ｂ】図３Ａのマウスの体重における変化を示す図である。
【図４Ａ】ＮＭＵ１２も有効な食欲抑制ペプチドであることを示す図である。ＮＭＵ１同様に、食物摂取と体重における著しい減少（図４Ｂ）が、アゴニストの単回皮下投与後の３日間観察された。
【図４Ｂ】図４Ａのマウスの体重の変化を示す図である。
【図５Ａ】ＮＭＵ１２の食欲抑制作用がＮＭＵＲｌとＮＭＵＲ２受容体によって媒介されることを示す図である。ＮＭＵ１２の急性投与は、野生型動物において非常に有効であるが、ＮＭＵＲ１／ＮＭＵＲ２二重ノックアウト動物では、効果は観察されなかった。
【図５Ｂ】図５Ａのネズミの体重における毎日の変化を示す図である。
【図６Ａ】ペグ化ＮＭＵ１２の食欲抑制作用が、ＮＭＵＲ１及びＮＭＵＲ２受容体の両方によって媒介されることを示す図である。食物摂取と体重における減少（図６Ｂ）は、ＮＭＵＲ１ノックアウト動物において投与後２日間観察された。しかしながら、ＮＭＵＲ２ノックアウト動物では、終夜の効果だけが観察された。これは、ＮＭＵＲ１によってのみ媒介されるｈＮＭＵ−２５の食欲抑制作用と対照的であり、ｈＮＭＵ−２５及びＮＭＵＲ２が、異なる作用メカニズムを有していることを示している。
【図６Ｂ】図６Ａのネズミの体重における４日間の変化を示す図である。
【図７Ａ】ＮＭＵ１２の長期投与により、食物摂取及び体重が減少し得ることを示す図である。ＮＭＵＲ２は、毎日（ＱＤ）、一日おき（Ｑ２Ｄ）、３日毎（Ｑ３Ｄ）に投与された。図は、治療開始後９日間における体重の累積変化を示している。試験の４日目に最後の投与を行い、９日目まで測定を行った。
【図７Ｂ】図７Ａのマウスの累積食物摂取が、ＮＭＵ１２のすべての投薬パラダイムにおいて著しく減少したことを示す図である。食物摂取量は、溶媒投与群に対して、これらの投与量にて１２〜２７％減少した。
【図７Ｃ】図７Ａのマウスの体重における累積変化が、溶媒対照群に対して、３．３％から最大ａ７．３％までの減少に及んだことを示す図である。
【図８】スパイクイン（ｓｐｉｋｅ−ｉｎ）実験による、血漿中でのｈＮＭＵ−２５並びにペグ化アゴニストＮＭＵ１及びＮＭＵ１２のインビトロ安定性の比較を示す図である。ペグ化により、ヒト血漿におけるより優れた安定性が提供された。ヒト血漿におけるｈＮＭＵ−２５の半減期は１６時間未満であったが、ペグ化アゴニストは、３７℃でインキュベートされたヒト血漿中において、３日間を超える半減期を示した。
【図９】マウスにおけるｈＮＭＵ−２５及びペグ化アゴニストＮＭＵ１２の薬物動態学的特徴の比較を示す図である。ペグ化は、インビボにおいて、よりすぐれた代謝安定性を提供した。ｈＮＭＵ−２５又はＮＭＵ１２の１０ｍｇ／ｋｇを、動物に皮下投与した。血漿は、投与後に様々な時点で採取し、バイオアッセイにおいて測定した。破線は、アッセイに対する検出限界（ＬＯＤ）を示す。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
Ｚ¹−ペプチド−Ｚ²
［式中、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号２７）（ここで、アミノ酸１〜１７は、任意のアミノ酸又は欠失であってもよく；アミノ酸Ｘ¹⁸は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹が、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰は、欠失、Ｌ、
Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹は、Ｆ、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；Ｘ²²は、Ｒ、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³は、Ｐ、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴は、Ｒ、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ²⁵は、Ｎ、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、又はＡであり；Ｚ¹は、存在してもよい保護基であり、存在する場合には、該保護基はＮ−末端アミノ基に結合しており；Ｚ²は、ＮＨ₂、又は存在してもよい保護基であり、存在する場合には、該保護基はＣ−末端カルボキシ基に結合している］を有するニューロメジンＵ受容体アゴニスト及びその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
前記Ｎ−末端アミノ酸が、ＰＥＧ、コレステロール、Ｎ−エチルマレイミジル、及びパルミトイルからなる群から選択された１つ以上の分子と共有結合している、請求項１に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項３】
前記ペプチドが更に、前記ペプチドの前記Ｎ−末端においてシステイン残基を有し、保護基が存在してもよく、存在する場合には、該保護基は該システイン残基のＮ−末端アミノ基に結合している、請求項１に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項４】
前記Ｎ−末端の前記システイン残基のチオール基が、ＰＥＧ、コレステロール、Ｎ−エチルマレイミジル、及びパルミトイルからなる群から選択された１つ以上の分子に共有結合している、請求項３に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項５】
前記Ｎ−末端におけるシステイン残基のチオール基がＰＥＧ分子に共有結合している、請求項１に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項６】
遠位末端及び近位末端を有するリンカー基が、該遠位末端において前記ペプチドの前記Ｎ−末端に共有結合し、該近位末端においてシステイン残基のカルボキシル末端に共有結合し、保護基が存在してもよく、存在する場合には、該保護基は該システイン残基のＮ−末端アミノ基に結合している、請求項１に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項７】
前記システイン残基のチオール基は、ＰＥＧ、コレステロール、Ｎ−エチルマレイミジル、及びパルミトイルからなる群から選択された１つ以上の分子に結合している、請求項６に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項８】
前記ペプチドが、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｆ−Ｌ−Ｆ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｎ（配列番号１）（ここで、アミノ酸１〜１７が、任意のアミノ酸又は欠失であってもよい）を有する、請求項１に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項９】
前記ペプチドが、配列番号２，配列番号３，配列番号４，配列番号５，及び配列番号６からなる群から選択されたアミノ酸配列を有する、請求項８に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項１０】
前記ペプチドが、配列番号２で示されたアミノ酸配列を有する、請求項１に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項１１】
前記アゴニストが、式：Ａｃ−Ｃ₂−ペプチド−ＣＯＮＨ₂［式中、Ａｃはアシル基、Ｃ₂はＣｙｓ（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａであり、かつ該ペプチドが配列番号２で表される前記アミノ酸配列を有する］を有する、請求項１に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項１２】
前記ペプチドが、アミノ酸配列Ｆ−Ｒ−Ｖ−Ｄ−Ｅ−Ｅ−Ｆ−Ｑ−Ｓ−Ｐ−Ｆ−Ａ−Ｓ−Ｑ−Ｓ−Ｒ−Ｇ−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号７）（ここで、アミノ酸Ｘ¹⁸は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰は、欠失、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹は、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ²²は、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³は、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴は、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ^２５は、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、あるいはＡである）を含む、請求項１に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項１３】
前記ペプチドが、配列番号１４、配列番号１５、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、及び配列番号２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１２に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項１４】
前記ペプチドが、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸（配列番号８）（ここで、アミノ酸Ｘ¹は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ²は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ³は、欠失、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ⁴は、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；アミノ酸Ｘ⁵は、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ⁶は、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ⁷は、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ⁸は、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、あるいはＡである）を有する、請求項１に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項１５】
前記ペプチドが、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、及び配列番号２１からなる群から選択されたアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト。
【請求項１６】
血液−脳関門を通過することが可能なニューロメジンＵ受容体アゴニストを産生するための方法であって、該アゴニストを１つ以上のＰＥＧ分子（ここで該１つ以上のＰＥＧ分子により前記ペプチドが血液−脳関門を通過することができる）に共有結合させる工程を包む方法。
【請求項１７】
式：
Ｚ¹−ペプチド−Ｚ²
［式中、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号２７）（ここで、アミノ酸１〜１７は、任意のアミノ酸又は欠失であってもよく；アミノ酸Ｘ¹⁸は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰は、欠失、Ｌ、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹は、Ｆ、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；Ｘ²²は、Ｒ、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³は、Ｐ、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴は、Ｒ、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ²⁵は、Ｎ、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、又はＡであり；Ｚ¹は、存在してもよい保護基であり、存在する場合には、該保護基はＮ−末端アミノ基に結合しており；Ｚ²は、ＮＨ₂₂、又は存在してもよい保護基であり、存在する場合には、該保護基はＣ−末端カルボキシ基に結合している］を有するニューロメジンＵ受容体アゴニストおよびその薬学的に許容される塩である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ニューロメジンＵ受容体アゴニストのサブタイプに対して特異的であるＮＭＵ−２５ペプチドの全て又は一部を含むニューロメジンＵ受容体アゴニストを製造するための方法であって、ペプチドのＣ−末端で７つのアミノ酸の１つ以上を、ヒトＮＭＵ−２５ペプチドに対して天然ではないアミノ酸又はアミノ酸類似体に修飾する工程を包む方法。
【請求項１９】
個体において代謝性障害を治療するための方法であって、個体の障害を治療するために、式：
Ｚ¹−ペプチド−Ｚ²
［式中、ペプチドは、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｘ¹⁹−Ｘ²⁰−Ｘ²¹−Ｘ²²−Ｘ²³−Ｘ²⁴−Ｘ²⁵（配列番号２７）（ここで、アミノ酸１〜１７は、任意のアミノ酸又は欠失であってもよく；アミノ酸Ｘ¹⁸は、欠失、Ｙ、Ｗ、Ｆ、デスアミノ酸、又はアシル基であり；アミノ酸Ｘ¹⁹は、Ａ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、又は脂肪族アミノ酸であり；アミノ酸Ｘ²⁰は、欠失、Ｌ、Ｇ、サルコシン（Ｓａｒ）、Ｄ−Ｌｅｕ、ＮＭｅ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ａｌａ、又はＡであり；アミノ酸Ｘ²¹は、Ｆ、ＮＭｅ−Ｐｈｅ、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、Ａ、又はＷであり；Ｘ²²は、Ｒ、Ｋ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²³は、Ｐ、Ｓａｒ、Ａ、又はＬであり；アミノ酸Ｘ²⁴は、Ｒ、Ｈａｒｇ、又はＫであり；アミノ酸Ｘ²⁵は、Ｎ、任意のＤ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸、Ｎｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、又はＡであり；Ｚ¹は、存在してもよい保護基であり、存在する場合には、該保護基はＮ−末端アミノ基に結合しており；Ｚ²は、ＮＨ₂、又は存在してもよい保護基であり、存在する場合には、該保護基はＣ−末端カルボキシ基に結合している］を有するニューロメジンＵ受容体アゴニスト及びその薬学的に許容される塩の治療有効量を該個体に投与する工程を包む方法。
【請求項２０】
メタボリックシンドローム又はＸ症候群、ＩＩ型糖尿病、糖尿病の合併症、高血圧症、脂質異常症、心臓血管疾患、胆石、変形性関節症、及びある特定の形態の癌からなる群から選択された前記代謝性障害を治療するために特に有用である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記代謝性障害が肥満である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
前記ペプチドが、アミノ酸配列Ｘ¹−Ｘ²−Ｘ³−Ｘ⁴−Ｘ⁵−Ｘ⁶−Ｘ⁷−Ｘ⁸−Ｘ⁹−Ｘ¹⁰−Ｘ¹¹−Ｘ¹²−Ｘ¹³−Ｘ¹⁴−Ｘ¹⁵−Ｘ¹⁶−Ｘ¹⁷−Ｘ¹⁸−Ｆ−Ｌ−Ｆ−Ｒ−Ｐ−Ｒ−Ｎ（配列番号１）（ここで、アミノ酸１〜１７は、任意のアミノ酸又は欠失であってもよい）を有する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記ペプチドが、配列番号２，配列番号３，配列番号４，配列番号５，及び配列番号６からなる群から選択されたアミノ酸配列を有する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記ペプチドが、配列番号２で示されたアミノ酸配列を有する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記Ｎ−末端アミノ酸が、ＰＥＧ、コレステロール、Ｎ−エチルマレイミジル、及びパルミトイルからなる群から選択された１つ以上の分子と共有結合している、請求項１９に記載の方法。
【請求項２６】
前記ペプチドが、更に、前記ペプチドの前記Ｎ−末端においてシステイン残基を有し、保護基が存在してもよく、存在する場合には、該保護基は該システイン残基のＮ−末端アミノ基に結合している、請求項１９に記載の方法。
【請求項２７】
前記Ｎ−末端における前記システイン残基の前記チオール基が、ＰＥＧ、コレステロール、Ｎ−エチルマレイミジル、及びパルミトイルからなる群から選択された１つ以上の分子に共有結合している、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記Ｎ−末端における前記システイン残基の前記チオール基が、ＰＥＧ分子に共有結合している、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
遠位末端及び近位末端を有するリンカー基が、その遠位末端でペプチドのＮ−末端に共有結合しており、該リンカー基の近位末端は、システイン残基のカルボキシル末端に共有結合し、保護基が存在してもよく、存在する場合には、該保護基は前記システイン残基の前記Ｎ−末端アミノ基に結合している、請求項１９に記載の方法。
【請求項３０】
前記システイン残基の前記チオール基が、ＰＥＧ、コレステロール、Ｎ−エチルマレイミジル、及びパルミトイルからなる群から選択された１つ以上の分子に結合している、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記アゴニストが、式Ａｃ−Ｃ₂−ペプチド−ＣＯＮＨ₂（ここで、Ａｃはアセチル基であり、Ｃ₂はＣｙｓ（ＰＥＧ）₂４０ｋＤａであり、該ペプチドは配列番号２で表されるアミノ酸配列を有する）を有する、請求項１９に記載の方法。
【請求項３２】
代謝性障害の治療のための医薬の製造における、請求項１〜１５のいずれか１項に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニストの使用。
【請求項３３】
肥満の治療のための医薬の製造における、請求項１〜１５のいずれか１項に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニストの使用。
【請求項３４】
ＩＩ型糖尿病の治療のための医薬の製造における、請求項１〜１５のいずれか１項に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニストの使用。
【請求項３５】
請求項１〜１５のいずれか１項に記載のニューロメジンＵ受容体アゴニスト及び薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図８】

【図９】

【公表番号】特表２００９−５３０３７９（Ｐ２００９−５３０３７９Ａ）
【公表日】平成２１年８月２７日（２００９．８．２７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５０１４６７（Ｐ２００９−５０１４６７）
【出願日】平成１９年３月１６日（２００７．３．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／００６６３５
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１０９１３５
【国際公開日】平成１９年９月２７日（２００７．９．２７）
【出願人】（３９００２３５２６）メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド (924)
【氏名又は名称原語表記】ＭＥＲＣＫ　＆　ＣＯＭＰＡＮＹ　ＩＮＣＯＰＯＲＡＴＥＤ
【出願人】（５０１２０９４２７）イステイチユート・デイ・リチエルケ・デイ・ビオロジア・モレコラーレ・ピ・アンジエレツテイ・エツセ・ピー・アー (90)
【Ｆターム（参考）】