フタロシアニン誘導体、その調製方法、これを有する医薬組成物、及びその使用
細菌の感染、とくにグラム陰性細菌によって生じる感染の光線力学処置に有用で、光感受特性と水に高い溶解性とを有するフタロシアニン誘導体について述べる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、治療用の光感受性を有する化合物の分野に係り、特に、下記の式（Ｉ）の新規のフタロシアニン誘導体に関するものであって、光感受性と水に対する高い溶解性とを有し、細菌の感染、特に、グラム陰性細菌で生じる感染の光線力学処置に有用なものに関する。
【背景技術】
【０００２】
色素性のフルオロフォア（ｃｈｒｏｍｏｆｌｕｏｒｏｐｈｏｒｅ）のフタロシアニンの大員環を含有する分子は、可視光と相互作用することにより、ラジカルや一重項酸素などの活性酸素種を産生することが知られている。
【０００３】
これらの特性ゆえ、フタロシアニン化合物は、長い間、治療上の処置及び診断の目的の双方で、光線力学療法（ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ；以下、ＰＤＴと称する。）に使用されてきた。
【０００４】
この化合物の例としては、非特許文献１に述べられている。ＰＤＴに有用な光感受性の薬剤は、本願出願人の名義の特許文献１に述べられている亜鉛フタロシアニン複合体及びそのコンジュゲートである。これら化合物は、腫瘍及び微生物感染の療法のＰＤＴによる処置において効果的な光感受性を有する薬剤であることが証明されている。
【０００５】
しかしながら、特許文献１に述べられているフタロシアニン誘導体のグラム陰性細菌に対する一般的に示されている光動力活性は、グラム陽性細菌に対するものよりも、一般的に低い。このことは、光感受性を有する薬剤に対して、グラム陰性細菌（大腸菌、緑膿菌など）がグラム陽性細菌（ブドウ球菌、Ａ群溶血性レンサ球菌など）よりもより耐性を有するという既知の知見と一致する。本題に関する複数の研究によると、この耐性の増大は、グラム陰性細菌と構造的に異なるグラム陰性細菌の細胞壁に関連する。
【０００６】
従って、グラム陰性細菌において、高い光毒性と、より大きい透過性及び局在性とを組み合わせた光感受性を有する化合物を同定することが要求されており、これは、この種の細菌によって生じる感染について、光線力学療法（ＰＤＴ）においてその効果がより増大することとなる。
【特許文献１】米国特許第５，９６５，５９８号明細書
【非特許文献１】Ｂｅｎ−Ｈｕｒ Ｅ．ら著、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｂｉｏｌ．、１９８５年、４７巻、ｐ．１４５−１４７
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本願出願人は、下記の式（Ｉ）に示す四置換された新規のフタロシアニン誘導体が、光毒性の有効性を有するとともに細菌不活化とそれに続く分解とに有用な時間の間、変化することなく光線感作物質として残存することを確実とするような光退色動態を保持し、従って、全身性の吸収と、遅延した光毒性の誘導による特性を阻止することを見出した。
【０００８】
さらに、水に対して高い溶解性を特に示し、生命体内で良好な生物学的利用能と速い代謝性とが確実となる。従って、このフタロシアニン誘導体は、グラム陰性細菌によって生じる細菌感染の光動力処置に有用である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
従って、本発明の主題は、下記式（Ｉ）のフタロシアニン誘導体であって、各置換基は、フタロシアニン環の１，８（１１），１５（１８），２２（２５）の位置、又は２，９（１０），１６（１７），２３（２４）の位置に存在するものである。
【００１０】
【化７】
【００１１】
本発明のさらなる主題は、上記の式（Ｉ）のフタロシアニン誘導体を活性本体として有するとともに、可能な金属キレート剤と組み合わせて有する医薬組成物、グラム陰性細菌によって生じる細菌感染及び混合感染の光線力学療法による処置用の医薬組成物の調製へのこれらの誘導体の使用、式（Ｉ）の誘導体の調製方法、及びこの調製方法を形成する、式（Ｖ）、（ＶＩ）及び（ＶＩＩ）の新規の中間体である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明の特徴および利点について、下記の通り、詳細に述べる。
【００１３】
本発明による式（Ｉ）の誘導体は、特許文献１に記載の一般式に包含されるものであるが、具体的に同定されたものではない。また、本発明の誘導体は、上記の特許文献に言及するのと同様の産物に比較して予期せぬ高い程度で、グラム陰性細菌による細菌感染に対する光線力学治療ＰＤＴに驚くべき有効性を示した。グラム陰性細菌に対するこの特別の抗菌活性は、この種の微生物によって生じる細菌感染、及び一部がグラム陰性細菌であり他の一部が他の細菌種であるものによる混合感染の処置に有効である。
【００１４】
水に対する溶解性についても、驚くべきことに高いことが証明され、特許文献１に述べる同様の産物と比較して、生命体内での高い生物学的利用能と速い代謝性とをもたらす。
【００１５】
本発明の式（Ｉ）の産物は、標的細胞に局在する能力を有し、そこで、所定の波長の光を照射した後に、細胞自体に障害を与える活性種を産生する。短い持続時間故、これらの活性種は、標的細胞に達し、近隣の細胞に伝播することなくこの細胞に障害を与える一方、生物学的標的に達しなかったものは、急速に崩壊する。従って、上記の産物を使用するおかげで、ＰＤＴ治療法は、選択的であり、全身性又は局在性で、皮膚に対する光毒性の現象を生じさせない。
【００１６】
本発明のフタロシアニン誘導体は、現在使用されている光感受性を有する薬剤よりも大きいモル減衰係数を有し、このことは、有効な治療上の反応を保証するものである。本発明の産物は、さらに、６５０ｎｍよりも長い波長の組織透過性照射により、活性化され、従って、これらの照射の透過性故、皮膚又は粘膜表面とともに、深在性感染であるかどうかにかかわらず、局在的な感染に対するＰＤＴ治療の適用に適する：照射した際、この産物は、低い酸化状態であっても、活性酸素種の産生を誘導し、このことは、低酸素の環境で生存する周知の嫌気性細菌に対する特定の処置を可能にし得る必要のある産物に重要な要件である。
【００１７】
光を照射しない場合、本発明の産物は、宿主組織及び／又は細胞に対して限定した毒性を有するが、活性酸素種の連続的な産生方法において照射されれば、再活性化する。
【００１８】
ＰＤＴ処置を行うのに適した光源は、本技術分野において公知であって、６５０〜７５０ｎｍの波長のフィルタリングされたコヒーレント（ｃｏｈｅｒｅｎｔ）な光源、又は本発明による化合物の波長に特別なレーザーの白色光を有する。使用する光照射の全量は、処置及び処置対象の組織に応じて、様々であり、一般的に、５０〜１０００Ｊ／ｃｍ２、好ましくは１００〜３５０Ｊ／ｃｍ２である。
【００１９】
特に、本発明の産物は、非常に似通った構造のその他の産物とは対照的に、グラム陰性細菌に対して特に良好な効果を示した。しかしながら、このその他の産物では、本発明の産物と比較して、グラム陰性細菌に対して低い光動力活性を示す。
【００２０】
本発明のフタロシアニン誘導体は、下記の工程によって市販の化合物から出発して調製されてもよい。本発明の方法は、下記のステップを有する：
【００２１】
ｉ）下記の式（ＩＶ）の化合物を得るように、式（ＩＩ）のフタロシアニンへの式（ＩＩＩ）のアミノアルコールの求核置換を行うステップ；
【００２２】
【化８】
【００２３】
ｉｉ）式（Ｖ）の化合物を得るように、ステップｉ）に由来する式（ＩＶ）の化合物へのアミノ基の窒素の反応性メチル化反応を行うステップと；
【００２４】
【化９】
【００２５】
ｉｉｉ）下記式（ＶＩ）の亜鉛（ＩＩ）のフタロシアニンを得るように、ステップｉｉ）に由来する式（Ｖ）の化合物の塩基触媒の４量体化を行うと同時に、適当な亜鉛（ＩＩ）を用いた金属挿入を行うステップと；
【００２６】
【化１０】
【００２７】
ｉｖ）ヨウ素の４級アンモニウム基で置換された式（ＶＩＩ）の対応するフタロシアニンを得るように、ヨウ化メチルの処理により、ステップｉｉｉ）に由来する式（ＶＩ）のフタロシアニンのアミノ基を４級塩化するステップと；
【００２８】
【化１１】
【００２９】
ｖ）塩化物型の式（Ｉ）の対応するフタロシアニンを得るように、ステップｉｖ）に由来するヨウ素型の式（ＶＩＩ）のフタロシアニンを、適当なイオン交換樹脂で処理するステップと；
【００３０】
【化１２】
を有する。
【００３１】
本願出願人の知見が及ぶ限り、例えば特許文献１に記載の方法のような、現在まで各種文献に述べられた置換された亜鉛フタロシアニンを調製する方法は、本発明による式（Ｉ）の化合物などの塩化物を調製するには、適さない。
【００３２】
ステップｉｉ）の反応性メチル化反応は、適当な溶媒に溶解された式（ＩＶ）の第１級アミンを、還元剤の存在下、カルボニル化剤で処理することにより、実行されてもよい；好適な条件としては、アセトニトリルに溶解した上記の式（ＩＶ）のアミンを３０％のホルムアルデヒド水溶液及びシアノボロハイドライドナトリウムで処理するものである。
【００３３】
本発明による方法のステップｉｉｉ）は、塩基として、１，５−ジアザビシクロ［５．４．０］ノン−５−エン（以下、ＤＢＮと略する。）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（以下、ＤＢＵと略する。）及び２−ジメチルアミノ−エタノール（以下、ＤＭＡＥと略する。）を用いて、有機溶媒中、好ましくはジメチルホルムアミド（以下、ＤＭＦと略する。）などの水和性のもので行われてもよい。あるいは、ステップｉｉｉ）は、好ましくは、溶媒の不存在下、上記のものから選択した塩基を用いて、行われる。
【００３４】
反応時間は、合成の規模に応じて、様々であり、温度は、１００〜２５０℃、好ましくは１３０〜１８０℃で様々である。ステップｉｉｉ）を溶媒の不存在下で実行する場合、上記の塩基としてＤＢＵを用い、１４０℃の温度で、最適な結果が得られる。
【００３５】
式（ＶＩ）の粗産物は、ステップｉｉｉ）の反応混合物を、水で処理し、懸濁液を濾過又は遠心分離し、その後、回収した固形物を水及びメタノールを用いて数回洗浄して、好ましく沈殿される。
【００３６】
ステップｉｉｉ）に由来する中間体（ＶＩ）は、カラムクロマトグラフィー、及びその後、続くステップを行う前に溶媒から再沈殿することにより、好ましく精製される。クロマトグラフィー用の固定相は、例えば、シリカゲルであり、移動相は、ジクロロメタン及びメタノールの混合物である；再沈殿について、例えば、ジクロロメタンは、溶媒として用いられてもよく、沈殿剤として、ｎ−ヘキサンを用いてもよい。
【００３７】
本発明の好適実施例によると、本発明による方法のステップｉｖ）において、メチル化の対象のアミノ基当たり、１〜２０当量、好ましくは５〜１１当量でヨウ化メチルを用いる。さらに、上記のメチル化反応は、溶媒中、好ましくはＤＭＦ、ジメチルスルフォキシド（以下、ＤＭＳＯと略する。）及びＮ−メチルピロリドン（以下、ＮＭＰと略する。）からなる群から選択されたものの中で典型的に行われる。
【００３８】
本発明による方法の好適なものとしては、上記のステップｉｖ）のメチル化反応は、アミノ基当たり５〜１１当量のヨウ化メチルと、溶媒としてＮＭＰとを用いて、行われる。
【００３９】
ステップｉｉｉ）における用語「適当な亜鉛（ＩＩ）塩」とは、例えば、塩化亜鉛（ＩＩ）又は酢酸亜鉛（ＩＩ）、好ましくは酢酸亜鉛（ＩＩ）を意味する。
【００４０】
本発明の特に好適な実施例によると、式（ＶＩＩ）の産物は、ＮＭＰの容量に対して２容量の量でメタノールを用いてＮＭＰを希釈した後、ＮＭＰの容量に対して、ＮＭＰの溶液から、８容量の量でメチルエーテル又はイソプロピルエーテルを用いて、沈殿される。
【００４１】
本発明による方法のステップｖ）におけるヨウ素から塩化物への変換は、ヨウ化物の溶液とイオン交換樹脂とを用いて、産物を、蒸留、凍結乾燥又は沈殿により上記の溶媒から産物を回収することにより、クロマトグラフィーの方法により好ましく行われる。本発明による方法を実行するのに適したイオン交換樹脂は、４級のアンモニウムの官能基を有する強塩基樹脂であり、例えば、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＩＲＡ−４００（ＣＩ）樹脂などの、４〜１０％の架橋度のポリスチレンを基礎とした樹脂が挙げられる。
【００４２】
本発明による方法の好適実施例によると、ステップｖ）は、式（ＶＩＩ）のヨウ化物のメタノールの溶液と、適当な樹脂とを用い、溶出物をエチルエーテルで処理して、式（Ｉ）の所望の塩化物を沈殿することによるクロマトグラフィー法により、行われる。
【００４３】
本発明による方法の好適実施例によると、イオン交換樹脂を用いる場合、ステップｖ）は、メタノール／ＤＭＳＯの８／２の混合物の式（ＶＩＩ）のヨウ化物の溶液と、適当な樹脂とを用い、エチルエーテルで処理することによる溶出物からの式（Ｉ）の取得した塩化物を再結晶し、且つメタノールに溶解しエチルエーテルを添加することによる残りのＤＭＳＯから精製することにより、実行される。
【００４４】
本発明による方法の好適な態様は、ステップｖ）におけるイオン交換クロマトグラフィーについて、水よりもメタノールを基礎とした溶離剤を用いることである。この点、上記の方法について、存在する関連する化合物からさらに最終的な塩化物を精製して、９８％よりも高いＨＰＬＣの精製を達成する。
【００４５】
本発明による産物は、医薬的に許容な賦形剤と、非経口の投与及び局所投与用などの医薬組成物用の希釈剤と組み合わせて、活性本体として使用されてもよい。
【００４６】
上記の組成物は、例えば、水溶液、ローション、クリーム、軟膏又はゲルなどとして製剤化されてもよい。これらの医薬組成物において、活性本体の用量は、体重ｋｇ当たり０．１〜２０ｍｇ、好ましくは０．２〜５ｍｇの式（Ｉ）の産物で様々であってもよい。
【００４７】
特に好適なものとしては、本発明の医薬組成物は、式（Ｉ）の産物とともに、金属キレート剤、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋などに特異的な金属キレート剤から好ましく選択されるものを有し、例えば、クエン酸、１，２−ジアミノシクロヘキサン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＣＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）又はエチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＤＴＡ）が挙げられる。特に好適なものは、ＥＤＴＡを有する組成物である。
【実施例】
【００４８】
例示の目的で、下記の通り、限定的でない本発明の例について、述べる。
【００４９】
（例１）
フタロシアニン環の１，８（１１），１５（１８），２２（２５）の位置に置換基を有する式（Ｉ）のフタロシアニン誘導体の調製
ａ）３−（４−アミノフェノキシ）フタロニトリルの合成
１６０ｇの３−ニトロフタロニトリル（０．９２モル）と、１５０．４ｇの４−アミノフェノール（１．３７モル）とを２．５Ｌのジメチルスルフォキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、その後、３８４ｇのＫ２ＣＯ３（２．７７モル）を添加する。
【００５０】
このようにして得た反応混合物を、室温で、激しく攪拌しながら２２時間保持し、その後、１１．２Ｌの脱イオン水で処理し、攪拌下、３０分間保持する。
【００５１】
このようにして得た懸濁液を濾過し、脱イオン水（２×２Ｌ）で固形物を洗浄する。
【００５２】
乾燥後、２１３．６ｇの固形産物を得、これは、３−（４−アミノフェノキシ）フタロニトリル（収率９８．７％）である。融点及び１Ｈ−ＮＭＲの分析により、この産物を特徴付けした。
【００５３】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δｐｐｍ＝７．７８−７．７１（ｍ，２Ｈ），７．１０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），６．８９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），６．６２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），５．２８（ｂｓ，２Ｈ）
【００５４】
融点：１８８−１９１℃
【００５５】
ｂ）３−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）フタロニトリルの合成
上記のａ）の通り得た、１００ｇの３−（４−アミノフェノキシ）フタロシアニン（０．４１モル）を、２．６ＬのＣＨ３ＣＮに溶解する。
【００５６】
この混合物を、攪拌し、４００ｍＬの３０％ホルムアルデヒド水溶液を添加する。この混合物を０℃で保持し、１３２ｇのＮａＢＨ３ＣＮ（２．１モル）を添加するとともに、８０ｍＬの氷酢酸をｐＨ６．８になるまで添加する。
【００５７】
このようにして得た混合物を、５０℃に加熱し、熱条件で保持し、２２時間攪拌する。その後、この混合物を、室温とし、１２Ｌの脱イオン水で処理し、攪拌下で３０分間保持し、その後、得た懸濁液を濾過し、固形物を、脱イオン水（２×２Ｌ）で洗浄する。
【００５８】
乾燥後、１０７．８ｇの固形産物を得、これは、３−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）フタロニトリル（収率９６．３％）である。融点及び１Ｈ−ＮＭＲの分析により、この産物を特徴付けした。
【００５９】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δｐｐｍ＝７．７６−７．７４（ｍ，２Ｈ），７．１２−７．０６（ｍ，３Ｈ），６．７９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ），２．９０（ｓ，６Ｈ）
【００６０】
融点：１６０−１６２℃
【００６１】
ｃ）亜鉛（ＩＩ）［１，８（１１），１５（１８），２２（２５）−テトラキス−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）］フタロシアニネートの合成
窒素雰囲気下、上記のｂ）の通り得た、８０ｇの３−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）フタロニトリル（０．３モル）を４６０ｍＬのＤＢＵ（３モル）に溶解する。
【００６２】
２８ｇのＺｎ（ＡｃＯ）２（０．１５ モル）を、上記のように得た溶液に添加し、この反応混合物を１４０℃とし、この温度で保持し、遮光し、窒素雰囲気下、２２時間、激しく攪拌する。その後、この混合物を、再び室温とし、その後、１４Ｌの脱イオン水で処理し、この混合物を濾過し、固形物をＨ２Ｏ（２×２Ｌ）及びメタノール（１×１Ｌ）で洗浄する。このようにして得た産物を、シリカゲルクロマトグラフィー（移動相：ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ＝９８／２〜９５／５）を行い、その後、０．５ＬのＣＨ２Ｃｌ２のクロマトグラフィーに由来する産物を溶解することにより、溶媒から再沈殿し、これを４Ｌのｎ−ヘキサンに添加することにより再沈殿することにより、精製した。
【００６３】
濾過した後、ｎ−ヘキサン（２×１Ｌ）で洗浄し、乾燥して、亜鉛（ＩＩ）［１，８（１１），１５（１８），２２（２５）−テトラキス−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）］フタロシアニネート（収率７２．３％）の６０．１ｇの産物を得た。融点及び１Ｈ−ＮＭＲの分析により、この産物を特徴付けした。
【００６４】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δｐｐｍ＝９．２０−８．７５（ｍ，４Ｈ），８．１９−７．９６（ｍ＝４Ｈ），７．５９−６．７０（ｍ，２０Ｈ），２．９３−２．９０（ｍ，２４Ｈ）
【００６５】
ｄ）亜鉛（ＩＩ）［１，８（１１），１５（１８），２２（２５）−テトラキス−（４−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムフェノキシ）］フタロシアニネートテトラヨーダイドの合成
上記のｃ）の通りに得た、６０ｇの亜鉛（ＩＩ）［１，８（１１），１５（１８），２２（２５）−テトラキス−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）］フタロシアニネート（０．０５４モル）を、１．５ＬのＮ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）に溶解した。
【００６６】
その後、１５０ｍＬのＭｅＩ（２．４モル）を添加し、この溶液を室温で保持し、遮光し、攪拌しながら、窒素雰囲気下で、７２時間保持する。このようにして得た反応混合物を、３ＬのＭｅＯＨで希釈し、その後、１２Ｌのイソプロピルエーテルで処理する。処理した後、得た懸濁液を、１／２時間、攪拌し、１時間保持し、その後、濾過し、固形物をイソプロピルエーテル（２×２Ｌ）及びエチルエーテル（２×２Ｌ）で洗浄する。９４．７ｇの湿潤した産物を得、これを、その後、２つのサブバッチに分割して使用した。この産物について、１Ｈ−ＮＭＲで特徴付けた。
【００６７】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δｐｐｍ＝９．４９−７．３１（ｍ，２８Ｈ），３．６７−３．５５（ｍ，３６Ｈ）
【００６８】
ｅ）亜鉛（ＩＩ）［１，８（１１），１５（１８），２２（２５）−テトラキス−（４−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムフェノキシ）］フタロシアニネートテトラクロライドの合成
上記のｄ）で得て２つのサブバッチに分割した、それぞれ４７．２ｇの亜鉛（ＩＩ）［１，８（１１），１５（１８），２２（２５）−テトラキス−（４−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムフェノキシ）］フタロシアニネートテトラヨーダイドを、下記の通り、処理した。
【００６９】
４７．２ｇの上記の産物を、２Ｌの４／１のＭｅＯＨ／ＤＭＳＯに溶解する。この溶液を、固定相として、０．５ＭのＨＣｌの水溶液で前もって洗浄し、４／１のＭｅＯＨ／ＤＭＳＯで処理した４７０ｇのＡｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＩＲＡ４００（ＣＩ）樹脂のカラムクロマトグラフィーにかける。１２Ｌのエチルエーテルを、溶出物に緩徐に添加し、攪拌しながら保持する。得た懸濁液を、１時間載置し、その後濾過し、エチルエーテル（４×０．５Ｌ）で洗浄する。
【００７０】
２つの手法により、３ＬのＭｅＯＨに溶解し、その後１２Ｌのエチルエーテルを得た溶液に緩徐に添加する一方、攪拌下保持して、再沈殿して、３１．１ｇ及び３２．１ｇの湿潤した産物を得た。上記の懸濁液を、１時間載置し、その後、濾過し、エチルエーテル（４×０．５Ｌ）で洗浄する。
【００７１】
乾燥後、５７．８ｇの表題の化合物を得て、下記の通り、特徴付けた。
【００７２】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δｐｐｍ＝９．４６−７．２９（ｍ，２８Ｈ），３．７０−３．５７（ｍ＝３６Ｈ）
【００７３】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δｐｐｍ＝１６０．３６，１６０．２３，１５８．７８，１５８．６４，１５８．５１，１５８．２６，１５３．９０，１５３．２９，１５３．１２，１５２．７，１５２．４３，１５２．１９，１５１．６０，１５０．０３，１４９．６５，１４３．３３，１４３．０８，１４２．９０，１４１．９０，１４１．６７，１３２．１２，１３１．６６，１３１．２６，１２９．２５，１２９．０５，１２８．４８，１２８．１９，１２３．７６，１２３．１６，１２１．３７，１２０．８５，１２０．４８，１１８．８８，１１７．５９，１１７．３１，５７．２４，５７．０９
【００７４】
ＵＶ−ｖｉｓ（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ：５０／５０）：λｍａｘ（％）：６９０（１００），６２２（１８），３４０（２３）
【００７５】
ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２９４．１［（Ｍ−４Ｃｌ）４＋］
【技術分野】
【０００１】
本発明は、治療用の光感受性を有する化合物の分野に係り、特に、下記の式（Ｉ）の新規のフタロシアニン誘導体に関するものであって、光感受性と水に対する高い溶解性とを有し、細菌の感染、特に、グラム陰性細菌で生じる感染の光線力学処置に有用なものに関する。
【背景技術】
【０００２】
色素性のフルオロフォア（ｃｈｒｏｍｏｆｌｕｏｒｏｐｈｏｒｅ）のフタロシアニンの大員環を含有する分子は、可視光と相互作用することにより、ラジカルや一重項酸素などの活性酸素種を産生することが知られている。
【０００３】
これらの特性ゆえ、フタロシアニン化合物は、長い間、治療上の処置及び診断の目的の双方で、光線力学療法（ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ；以下、ＰＤＴと称する。）に使用されてきた。
【０００４】
この化合物の例としては、非特許文献１に述べられている。ＰＤＴに有用な光感受性の薬剤は、本願出願人の名義の特許文献１に述べられている亜鉛フタロシアニン複合体及びそのコンジュゲートである。これら化合物は、腫瘍及び微生物感染の療法のＰＤＴによる処置において効果的な光感受性を有する薬剤であることが証明されている。
【０００５】
しかしながら、特許文献１に述べられているフタロシアニン誘導体のグラム陰性細菌に対する一般的に示されている光動力活性は、グラム陽性細菌に対するものよりも、一般的に低い。このことは、光感受性を有する薬剤に対して、グラム陰性細菌（大腸菌、緑膿菌など）がグラム陽性細菌（ブドウ球菌、Ａ群溶血性レンサ球菌など）よりもより耐性を有するという既知の知見と一致する。本題に関する複数の研究によると、この耐性の増大は、グラム陰性細菌と構造的に異なるグラム陰性細菌の細胞壁に関連する。
【０００６】
従って、グラム陰性細菌において、高い光毒性と、より大きい透過性及び局在性とを組み合わせた光感受性を有する化合物を同定することが要求されており、これは、この種の細菌によって生じる感染について、光線力学療法（ＰＤＴ）においてその効果がより増大することとなる。
【特許文献１】米国特許第５，９６５，５９８号明細書
【非特許文献１】Ｂｅｎ−Ｈｕｒ Ｅ．ら著、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｂｉｏｌ．、１９８５年、４７巻、ｐ．１４５−１４７
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本願出願人は、下記の式（Ｉ）に示す四置換された新規のフタロシアニン誘導体が、光毒性の有効性を有するとともに細菌不活化とそれに続く分解とに有用な時間の間、変化することなく光線感作物質として残存することを確実とするような光退色動態を保持し、従って、全身性の吸収と、遅延した光毒性の誘導による特性を阻止することを見出した。
【０００８】
さらに、水に対して高い溶解性を特に示し、生命体内で良好な生物学的利用能と速い代謝性とが確実となる。従って、このフタロシアニン誘導体は、グラム陰性細菌によって生じる細菌感染の光動力処置に有用である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
従って、本発明の主題は、下記式（Ｉ）のフタロシアニン誘導体であって、各置換基は、フタロシアニン環の１，８（１１），１５（１８），２２（２５）の位置、又は２，９（１０），１６（１７），２３（２４）の位置に存在するものである。
【００１０】
【化７】
【００１１】
本発明のさらなる主題は、上記の式（Ｉ）のフタロシアニン誘導体を活性本体として有するとともに、可能な金属キレート剤と組み合わせて有する医薬組成物、グラム陰性細菌によって生じる細菌感染及び混合感染の光線力学療法による処置用の医薬組成物の調製へのこれらの誘導体の使用、式（Ｉ）の誘導体の調製方法、及びこの調製方法を形成する、式（Ｖ）、（ＶＩ）及び（ＶＩＩ）の新規の中間体である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明の特徴および利点について、下記の通り、詳細に述べる。
【００１３】
本発明による式（Ｉ）の誘導体は、特許文献１に記載の一般式に包含されるものであるが、具体的に同定されたものではない。また、本発明の誘導体は、上記の特許文献に言及するのと同様の産物に比較して予期せぬ高い程度で、グラム陰性細菌による細菌感染に対する光線力学治療ＰＤＴに驚くべき有効性を示した。グラム陰性細菌に対するこの特別の抗菌活性は、この種の微生物によって生じる細菌感染、及び一部がグラム陰性細菌であり他の一部が他の細菌種であるものによる混合感染の処置に有効である。
【００１４】
水に対する溶解性についても、驚くべきことに高いことが証明され、特許文献１に述べる同様の産物と比較して、生命体内での高い生物学的利用能と速い代謝性とをもたらす。
【００１５】
本発明の式（Ｉ）の産物は、標的細胞に局在する能力を有し、そこで、所定の波長の光を照射した後に、細胞自体に障害を与える活性種を産生する。短い持続時間故、これらの活性種は、標的細胞に達し、近隣の細胞に伝播することなくこの細胞に障害を与える一方、生物学的標的に達しなかったものは、急速に崩壊する。従って、上記の産物を使用するおかげで、ＰＤＴ治療法は、選択的であり、全身性又は局在性で、皮膚に対する光毒性の現象を生じさせない。
【００１６】
本発明のフタロシアニン誘導体は、現在使用されている光感受性を有する薬剤よりも大きいモル減衰係数を有し、このことは、有効な治療上の反応を保証するものである。本発明の産物は、さらに、６５０ｎｍよりも長い波長の組織透過性照射により、活性化され、従って、これらの照射の透過性故、皮膚又は粘膜表面とともに、深在性感染であるかどうかにかかわらず、局在的な感染に対するＰＤＴ治療の適用に適する：照射した際、この産物は、低い酸化状態であっても、活性酸素種の産生を誘導し、このことは、低酸素の環境で生存する周知の嫌気性細菌に対する特定の処置を可能にし得る必要のある産物に重要な要件である。
【００１７】
光を照射しない場合、本発明の産物は、宿主組織及び／又は細胞に対して限定した毒性を有するが、活性酸素種の連続的な産生方法において照射されれば、再活性化する。
【００１８】
ＰＤＴ処置を行うのに適した光源は、本技術分野において公知であって、６５０〜７５０ｎｍの波長のフィルタリングされたコヒーレント（ｃｏｈｅｒｅｎｔ）な光源、又は本発明による化合物の波長に特別なレーザーの白色光を有する。使用する光照射の全量は、処置及び処置対象の組織に応じて、様々であり、一般的に、５０〜１０００Ｊ／ｃｍ２、好ましくは１００〜３５０Ｊ／ｃｍ２である。
【００１９】
特に、本発明の産物は、非常に似通った構造のその他の産物とは対照的に、グラム陰性細菌に対して特に良好な効果を示した。しかしながら、このその他の産物では、本発明の産物と比較して、グラム陰性細菌に対して低い光動力活性を示す。
【００２０】
本発明のフタロシアニン誘導体は、下記の工程によって市販の化合物から出発して調製されてもよい。本発明の方法は、下記のステップを有する：
【００２１】
ｉ）下記の式（ＩＶ）の化合物を得るように、式（ＩＩ）のフタロシアニンへの式（ＩＩＩ）のアミノアルコールの求核置換を行うステップ；
【００２２】
【化８】
【００２３】
ｉｉ）式（Ｖ）の化合物を得るように、ステップｉ）に由来する式（ＩＶ）の化合物へのアミノ基の窒素の反応性メチル化反応を行うステップと；
【００２４】
【化９】
【００２５】
ｉｉｉ）下記式（ＶＩ）の亜鉛（ＩＩ）のフタロシアニンを得るように、ステップｉｉ）に由来する式（Ｖ）の化合物の塩基触媒の４量体化を行うと同時に、適当な亜鉛（ＩＩ）を用いた金属挿入を行うステップと；
【００２６】
【化１０】
【００２７】
ｉｖ）ヨウ素の４級アンモニウム基で置換された式（ＶＩＩ）の対応するフタロシアニンを得るように、ヨウ化メチルの処理により、ステップｉｉｉ）に由来する式（ＶＩ）のフタロシアニンのアミノ基を４級塩化するステップと；
【００２８】
【化１１】
【００２９】
ｖ）塩化物型の式（Ｉ）の対応するフタロシアニンを得るように、ステップｉｖ）に由来するヨウ素型の式（ＶＩＩ）のフタロシアニンを、適当なイオン交換樹脂で処理するステップと；
【００３０】
【化１２】
を有する。
【００３１】
本願出願人の知見が及ぶ限り、例えば特許文献１に記載の方法のような、現在まで各種文献に述べられた置換された亜鉛フタロシアニンを調製する方法は、本発明による式（Ｉ）の化合物などの塩化物を調製するには、適さない。
【００３２】
ステップｉｉ）の反応性メチル化反応は、適当な溶媒に溶解された式（ＩＶ）の第１級アミンを、還元剤の存在下、カルボニル化剤で処理することにより、実行されてもよい；好適な条件としては、アセトニトリルに溶解した上記の式（ＩＶ）のアミンを３０％のホルムアルデヒド水溶液及びシアノボロハイドライドナトリウムで処理するものである。
【００３３】
本発明による方法のステップｉｉｉ）は、塩基として、１，５−ジアザビシクロ［５．４．０］ノン−５−エン（以下、ＤＢＮと略する。）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（以下、ＤＢＵと略する。）及び２−ジメチルアミノ−エタノール（以下、ＤＭＡＥと略する。）を用いて、有機溶媒中、好ましくはジメチルホルムアミド（以下、ＤＭＦと略する。）などの水和性のもので行われてもよい。あるいは、ステップｉｉｉ）は、好ましくは、溶媒の不存在下、上記のものから選択した塩基を用いて、行われる。
【００３４】
反応時間は、合成の規模に応じて、様々であり、温度は、１００〜２５０℃、好ましくは１３０〜１８０℃で様々である。ステップｉｉｉ）を溶媒の不存在下で実行する場合、上記の塩基としてＤＢＵを用い、１４０℃の温度で、最適な結果が得られる。
【００３５】
式（ＶＩ）の粗産物は、ステップｉｉｉ）の反応混合物を、水で処理し、懸濁液を濾過又は遠心分離し、その後、回収した固形物を水及びメタノールを用いて数回洗浄して、好ましく沈殿される。
【００３６】
ステップｉｉｉ）に由来する中間体（ＶＩ）は、カラムクロマトグラフィー、及びその後、続くステップを行う前に溶媒から再沈殿することにより、好ましく精製される。クロマトグラフィー用の固定相は、例えば、シリカゲルであり、移動相は、ジクロロメタン及びメタノールの混合物である；再沈殿について、例えば、ジクロロメタンは、溶媒として用いられてもよく、沈殿剤として、ｎ−ヘキサンを用いてもよい。
【００３７】
本発明の好適実施例によると、本発明による方法のステップｉｖ）において、メチル化の対象のアミノ基当たり、１〜２０当量、好ましくは５〜１１当量でヨウ化メチルを用いる。さらに、上記のメチル化反応は、溶媒中、好ましくはＤＭＦ、ジメチルスルフォキシド（以下、ＤＭＳＯと略する。）及びＮ−メチルピロリドン（以下、ＮＭＰと略する。）からなる群から選択されたものの中で典型的に行われる。
【００３８】
本発明による方法の好適なものとしては、上記のステップｉｖ）のメチル化反応は、アミノ基当たり５〜１１当量のヨウ化メチルと、溶媒としてＮＭＰとを用いて、行われる。
【００３９】
ステップｉｉｉ）における用語「適当な亜鉛（ＩＩ）塩」とは、例えば、塩化亜鉛（ＩＩ）又は酢酸亜鉛（ＩＩ）、好ましくは酢酸亜鉛（ＩＩ）を意味する。
【００４０】
本発明の特に好適な実施例によると、式（ＶＩＩ）の産物は、ＮＭＰの容量に対して２容量の量でメタノールを用いてＮＭＰを希釈した後、ＮＭＰの容量に対して、ＮＭＰの溶液から、８容量の量でメチルエーテル又はイソプロピルエーテルを用いて、沈殿される。
【００４１】
本発明による方法のステップｖ）におけるヨウ素から塩化物への変換は、ヨウ化物の溶液とイオン交換樹脂とを用いて、産物を、蒸留、凍結乾燥又は沈殿により上記の溶媒から産物を回収することにより、クロマトグラフィーの方法により好ましく行われる。本発明による方法を実行するのに適したイオン交換樹脂は、４級のアンモニウムの官能基を有する強塩基樹脂であり、例えば、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＩＲＡ−４００（ＣＩ）樹脂などの、４〜１０％の架橋度のポリスチレンを基礎とした樹脂が挙げられる。
【００４２】
本発明による方法の好適実施例によると、ステップｖ）は、式（ＶＩＩ）のヨウ化物のメタノールの溶液と、適当な樹脂とを用い、溶出物をエチルエーテルで処理して、式（Ｉ）の所望の塩化物を沈殿することによるクロマトグラフィー法により、行われる。
【００４３】
本発明による方法の好適実施例によると、イオン交換樹脂を用いる場合、ステップｖ）は、メタノール／ＤＭＳＯの８／２の混合物の式（ＶＩＩ）のヨウ化物の溶液と、適当な樹脂とを用い、エチルエーテルで処理することによる溶出物からの式（Ｉ）の取得した塩化物を再結晶し、且つメタノールに溶解しエチルエーテルを添加することによる残りのＤＭＳＯから精製することにより、実行される。
【００４４】
本発明による方法の好適な態様は、ステップｖ）におけるイオン交換クロマトグラフィーについて、水よりもメタノールを基礎とした溶離剤を用いることである。この点、上記の方法について、存在する関連する化合物からさらに最終的な塩化物を精製して、９８％よりも高いＨＰＬＣの精製を達成する。
【００４５】
本発明による産物は、医薬的に許容な賦形剤と、非経口の投与及び局所投与用などの医薬組成物用の希釈剤と組み合わせて、活性本体として使用されてもよい。
【００４６】
上記の組成物は、例えば、水溶液、ローション、クリーム、軟膏又はゲルなどとして製剤化されてもよい。これらの医薬組成物において、活性本体の用量は、体重ｋｇ当たり０．１〜２０ｍｇ、好ましくは０．２〜５ｍｇの式（Ｉ）の産物で様々であってもよい。
【００４７】
特に好適なものとしては、本発明の医薬組成物は、式（Ｉ）の産物とともに、金属キレート剤、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋などに特異的な金属キレート剤から好ましく選択されるものを有し、例えば、クエン酸、１，２−ジアミノシクロヘキサン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＣＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）又はエチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＤＴＡ）が挙げられる。特に好適なものは、ＥＤＴＡを有する組成物である。
【実施例】
【００４８】
例示の目的で、下記の通り、限定的でない本発明の例について、述べる。
【００４９】
（例１）
フタロシアニン環の１，８（１１），１５（１８），２２（２５）の位置に置換基を有する式（Ｉ）のフタロシアニン誘導体の調製
ａ）３−（４−アミノフェノキシ）フタロニトリルの合成
１６０ｇの３−ニトロフタロニトリル（０．９２モル）と、１５０．４ｇの４−アミノフェノール（１．３７モル）とを２．５Ｌのジメチルスルフォキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、その後、３８４ｇのＫ２ＣＯ３（２．７７モル）を添加する。
【００５０】
このようにして得た反応混合物を、室温で、激しく攪拌しながら２２時間保持し、その後、１１．２Ｌの脱イオン水で処理し、攪拌下、３０分間保持する。
【００５１】
このようにして得た懸濁液を濾過し、脱イオン水（２×２Ｌ）で固形物を洗浄する。
【００５２】
乾燥後、２１３．６ｇの固形産物を得、これは、３−（４−アミノフェノキシ）フタロニトリル（収率９８．７％）である。融点及び１Ｈ−ＮＭＲの分析により、この産物を特徴付けした。
【００５３】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δｐｐｍ＝７．７８−７．７１（ｍ，２Ｈ），７．１０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），６．８９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），６．６２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），５．２８（ｂｓ，２Ｈ）
【００５４】
融点：１８８−１９１℃
【００５５】
ｂ）３−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）フタロニトリルの合成
上記のａ）の通り得た、１００ｇの３−（４−アミノフェノキシ）フタロシアニン（０．４１モル）を、２．６ＬのＣＨ３ＣＮに溶解する。
【００５６】
この混合物を、攪拌し、４００ｍＬの３０％ホルムアルデヒド水溶液を添加する。この混合物を０℃で保持し、１３２ｇのＮａＢＨ３ＣＮ（２．１モル）を添加するとともに、８０ｍＬの氷酢酸をｐＨ６．８になるまで添加する。
【００５７】
このようにして得た混合物を、５０℃に加熱し、熱条件で保持し、２２時間攪拌する。その後、この混合物を、室温とし、１２Ｌの脱イオン水で処理し、攪拌下で３０分間保持し、その後、得た懸濁液を濾過し、固形物を、脱イオン水（２×２Ｌ）で洗浄する。
【００５８】
乾燥後、１０７．８ｇの固形産物を得、これは、３−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）フタロニトリル（収率９６．３％）である。融点及び１Ｈ−ＮＭＲの分析により、この産物を特徴付けした。
【００５９】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δｐｐｍ＝７．７６−７．７４（ｍ，２Ｈ），７．１２−７．０６（ｍ，３Ｈ），６．７９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ），２．９０（ｓ，６Ｈ）
【００６０】
融点：１６０−１６２℃
【００６１】
ｃ）亜鉛（ＩＩ）［１，８（１１），１５（１８），２２（２５）−テトラキス−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）］フタロシアニネートの合成
窒素雰囲気下、上記のｂ）の通り得た、８０ｇの３−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）フタロニトリル（０．３モル）を４６０ｍＬのＤＢＵ（３モル）に溶解する。
【００６２】
２８ｇのＺｎ（ＡｃＯ）２（０．１５ モル）を、上記のように得た溶液に添加し、この反応混合物を１４０℃とし、この温度で保持し、遮光し、窒素雰囲気下、２２時間、激しく攪拌する。その後、この混合物を、再び室温とし、その後、１４Ｌの脱イオン水で処理し、この混合物を濾過し、固形物をＨ２Ｏ（２×２Ｌ）及びメタノール（１×１Ｌ）で洗浄する。このようにして得た産物を、シリカゲルクロマトグラフィー（移動相：ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ＝９８／２〜９５／５）を行い、その後、０．５ＬのＣＨ２Ｃｌ２のクロマトグラフィーに由来する産物を溶解することにより、溶媒から再沈殿し、これを４Ｌのｎ−ヘキサンに添加することにより再沈殿することにより、精製した。
【００６３】
濾過した後、ｎ−ヘキサン（２×１Ｌ）で洗浄し、乾燥して、亜鉛（ＩＩ）［１，８（１１），１５（１８），２２（２５）−テトラキス−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）］フタロシアニネート（収率７２．３％）の６０．１ｇの産物を得た。融点及び１Ｈ−ＮＭＲの分析により、この産物を特徴付けした。
【００６４】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δｐｐｍ＝９．２０−８．７５（ｍ，４Ｈ），８．１９−７．９６（ｍ＝４Ｈ），７．５９−６．７０（ｍ，２０Ｈ），２．９３−２．９０（ｍ，２４Ｈ）
【００６５】
ｄ）亜鉛（ＩＩ）［１，８（１１），１５（１８），２２（２５）−テトラキス−（４−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムフェノキシ）］フタロシアニネートテトラヨーダイドの合成
上記のｃ）の通りに得た、６０ｇの亜鉛（ＩＩ）［１，８（１１），１５（１８），２２（２５）−テトラキス−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェノキシ）］フタロシアニネート（０．０５４モル）を、１．５ＬのＮ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）に溶解した。
【００６６】
その後、１５０ｍＬのＭｅＩ（２．４モル）を添加し、この溶液を室温で保持し、遮光し、攪拌しながら、窒素雰囲気下で、７２時間保持する。このようにして得た反応混合物を、３ＬのＭｅＯＨで希釈し、その後、１２Ｌのイソプロピルエーテルで処理する。処理した後、得た懸濁液を、１／２時間、攪拌し、１時間保持し、その後、濾過し、固形物をイソプロピルエーテル（２×２Ｌ）及びエチルエーテル（２×２Ｌ）で洗浄する。９４．７ｇの湿潤した産物を得、これを、その後、２つのサブバッチに分割して使用した。この産物について、１Ｈ−ＮＭＲで特徴付けた。
【００６７】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δｐｐｍ＝９．４９−７．３１（ｍ，２８Ｈ），３．６７−３．５５（ｍ，３６Ｈ）
【００６８】
ｅ）亜鉛（ＩＩ）［１，８（１１），１５（１８），２２（２５）−テトラキス−（４−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムフェノキシ）］フタロシアニネートテトラクロライドの合成
上記のｄ）で得て２つのサブバッチに分割した、それぞれ４７．２ｇの亜鉛（ＩＩ）［１，８（１１），１５（１８），２２（２５）−テトラキス−（４−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムフェノキシ）］フタロシアニネートテトラヨーダイドを、下記の通り、処理した。
【００６９】
４７．２ｇの上記の産物を、２Ｌの４／１のＭｅＯＨ／ＤＭＳＯに溶解する。この溶液を、固定相として、０．５ＭのＨＣｌの水溶液で前もって洗浄し、４／１のＭｅＯＨ／ＤＭＳＯで処理した４７０ｇのＡｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＩＲＡ４００（ＣＩ）樹脂のカラムクロマトグラフィーにかける。１２Ｌのエチルエーテルを、溶出物に緩徐に添加し、攪拌しながら保持する。得た懸濁液を、１時間載置し、その後濾過し、エチルエーテル（４×０．５Ｌ）で洗浄する。
【００７０】
２つの手法により、３ＬのＭｅＯＨに溶解し、その後１２Ｌのエチルエーテルを得た溶液に緩徐に添加する一方、攪拌下保持して、再沈殿して、３１．１ｇ及び３２．１ｇの湿潤した産物を得た。上記の懸濁液を、１時間載置し、その後、濾過し、エチルエーテル（４×０．５Ｌ）で洗浄する。
【００７１】
乾燥後、５７．８ｇの表題の化合物を得て、下記の通り、特徴付けた。
【００７２】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δｐｐｍ＝９．４６−７．２９（ｍ，２８Ｈ），３．７０−３．５７（ｍ＝３６Ｈ）
【００７３】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δｐｐｍ＝１６０．３６，１６０．２３，１５８．７８，１５８．６４，１５８．５１，１５８．２６，１５３．９０，１５３．２９，１５３．１２，１５２．７，１５２．４３，１５２．１９，１５１．６０，１５０．０３，１４９．６５，１４３．３３，１４３．０８，１４２．９０，１４１．９０，１４１．６７，１３２．１２，１３１．６６，１３１．２６，１２９．２５，１２９．０５，１２８．４８，１２８．１９，１２３．７６，１２３．１６，１２１．３７，１２０．８５，１２０．４８，１１８．８８，１１７．５９，１１７．３１，５７．２４，５７．０９
【００７４】
ＵＶ−ｖｉｓ（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ：５０／５０）：λｍａｘ（％）：６９０（１００），６２２（１８），３４０（２３）
【００７５】
ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ２９４．１［（Ｍ−４Ｃｌ）４＋］
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）のフタロシアニン誘導体
【化１】
であって、
フタロシアニン環の１，８（１１），１５（１８），２２（２５）の位置、又は２，９（１０），１６（１７），２３（２４）の位置に置換基が存在することを特徴とするフタロシアニン誘導体。
【請求項２】
請求項１に記載のフタロシアニン誘導体の調製方法であって、
ｉ）下記式（ＩＶ）の化合物を得るように、下記式（ＩＩ）のフタロニトリルに、下記式（ＩＩＩ）のアミノアルコールを求核置換するステップと；
【化２】
ｉｉ）下記式（Ｖ）の化合物を得るように、ステップｉ）に由来する式（ＩＶ）の化合物に対してアミノ基の窒素の反応性メチル化の反応を行うステップと；
【化３】
ｉｉｉ）下記式（ＶＩ）の亜鉛（ＩＩ）フタロシアニンを得るように、ステップｉｉ）に由来する式（Ｖ）の化合物の塩基触媒の４量体化すると同時に適当な亜鉛（ＩＩ）塩を用いた金属挿入を行うステップと；
【化４】
ｉｖ）ヨウ素型の４級アンモニウム基で置換した下記式（ＶＩＩ）の対応するフタロシアニンを得るように、ヨウ化メチルで処理することにより、ステップｉｉｉ）に由来する式（ＶＩ）のフタロシアニンのアミノ基を４級塩化するステップと；
【化５】
ｖ）塩化物型の式（Ｉ）の対応するフタロシアニンを得るように、ステップｉｖ）に由来するヨウ素型の式（ＶＩＩ）のフタロシアニンを、適当なイオン交換樹脂で処理するステップと；
【化６】
を有することを特徴とする方法。
【請求項３】
反応性メチル化の反応を行う前記ステップｉｉ）は、アセトニトリルに溶解した式（ＩＩ）の化合物を、シアノボロハイドライドナトリウムの存在下、３０％のホルムアルデヒド水溶液で処理することにより、実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記ステップｉｉｉ）は、１００〜２５０℃の温度で実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記温度は、１３０〜１８０℃の範囲であることを特徴とする請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記ステップｉｉｉ）は、１，５−ジアザビシクロ［５．４．０］ノン−５−エン（ＤＢＮ）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）及び２−ジメチルアミノ−エタノール（ＤＭＡＥ）から選択される塩基を塩基として用いて、有機溶媒中で実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記ステップｉｉｉ）は、１，５−ジアザビシクロ［５．４．０］ノン−５−エン（ＤＢＮ）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）及び２−ジメチルアミノ−エタノール（ＤＭＡＥ）から選択される塩基を塩基として用いて、溶媒の不存在下で実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項８】
前記ステップｉｉｉ）は、塩基としてＤＢＵを用いて、溶媒の不存在下で、１４０℃の温度で実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項９】
ステップｉｉｉ）で得た式（ＶＩ）の粗産物は、反応混合物を水で処理し、懸濁液を濾過又は遠心分離し、回収した固形物を、水及びメタノールで数回洗浄することにより、沈殿されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１０】
ステップｉｖ）を行う前に、カラムクロマトグラフィー法を行うことによりステップｉｉｉ）に由来する式（ＶＩ）の中間物を精製し、溶媒から再沈殿を行うステップをさらに有することを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１１】
前記カラムクロマトグラフィーは、固定相として、シリカゲルを用い、移動相としてジクロロメタン及びメタノールの混合物を用いて、行われ；
前記の再沈殿は、溶媒として、ジクロロメタンを、沈殿剤としてｎ−ヘキサンを用いて、実行されることを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
ステップｉｖ）の前記メチル化剤は、ヨウ化メチルであることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１３】
前記ヨウ化メチルは、式（ＶＩ）の産物においてメチル化の対象のアミノ基当たり１〜２０当量の量で使用されることを特徴とする請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ヨウ化メチルは、式（ＶＩ）の産物においてメチル化の対象のアミノ基当たり５〜１１当量の量で使用されることを特徴とする請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
ステップｉｖ）の前記メチル化反応は、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド及びＮ−メチルピロリドンから選択された溶媒中で実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１６】
前記溶媒は、Ｎ−メチルピロリドンであることを特徴とする請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
ステップｉｖ）の前記メチル化反応は、式（ＶＩ）の産物において対象のアミノ基当たりメチル化剤として５〜１１当量の量を用い、溶媒としてＮ−メチルピロリドンを用いて実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１８】
ステップｉｖ）の反応産物は、Ｎ−メチルピロリドンの用量に対して２用量の量のメタノールでＮ−メチルピロリドンの溶液を希釈した後、Ｎ−メチルピロリドンに対して８当量の量のエチルエーテル又はイソプロピルエーテルを用いて、Ｎ−メチルピロリドンの溶液から、沈殿されることを特徴とする請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
ステップｉｉｉ）の前記の亜鉛（ＩＩ）塩は、塩化亜鉛（ＩＩ）及び酢酸亜鉛（ＩＩ）から選択されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項２０】
ステップｉｉｉ）の前記亜鉛（ＩＩ）塩は、酢酸亜鉛（ＩＩ）であることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項２１】
ステップｖ）の前記イオン交換樹脂は、４級のアンモニウム官能基の強塩基樹脂から選択されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項２２】
前記樹脂は、４〜１０％の架橋度のポリスチレンを基礎とした樹脂であることを特徴とする請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
ステップｖ）における前記のフタロシアニン（ＶＩＩ）の処理は、前記フタロシアニン（ＶＩＩ）の溶液と前記イオン交換樹脂とを用いたクロマトグラフィーにより、且つ式（Ｉ）のフタロシアニンを、蒸留、凍結乾燥又は沈殿により回収することにより、達成されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項２４】
前記クロマトグラフィーは、塩化物型の式（Ｉ）のフタロシアニンを沈殿させるように、式（ＶＩＩ）のフタロシアニンのメタノール溶液を、イオン交換樹脂に通し、その後、その溶出液を、エチルエーテルで処理することにより、又は式（ＶＩＩ）のメタノール／ジメチルスルホキシドの溶液を、樹脂に通し、その後、この溶出液を、エチルエーテルで処理して、式（Ｉ）のフタロシアニンを沈殿させ、その後、メタノールに溶解し、エチルエーテルを添加して再沈殿させることにより、精製されることを特徴とする請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
活性本体として請求項１に記載のフタロシアニン誘導体を有するとともに、医薬的に許容な賦形剤及び／又は希釈剤と組み合わせたことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２６】
金属キレート剤をさらに有することを特徴とする請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記金属キレート剤は、Ｃａ２＋及びＭｇ２＋のイオンに特異性を有する金属キレート剤から選択されることを特徴とする請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記金属キレート剤は、クエン酸、１，２−ジアミノシクロヘキサン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＣＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）及びエチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＤＴＡ）からなる群から選択されることを特徴とする請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記金属キレート剤は、ＥＤＴＡであることを特徴とする請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
グラム陰性細菌の単独、又はこれとその他の細菌種の存在下により生じる細菌感染の光線力学治療による処置のための、医薬組成物の調製への、請求項１に記載の式（Ｉ）のフタロシアニン誘導体の使用。
【請求項３１】
請求項２乃至２４のいずれか一項に記載の方法の中間体としての、式（Ｖ）、（ＶＩ）及び（ＶＩＩ）の化合物。
【請求項１】
下記式（Ｉ）のフタロシアニン誘導体
【化１】
であって、
フタロシアニン環の１，８（１１），１５（１８），２２（２５）の位置、又は２，９（１０），１６（１７），２３（２４）の位置に置換基が存在することを特徴とするフタロシアニン誘導体。
【請求項２】
請求項１に記載のフタロシアニン誘導体の調製方法であって、
ｉ）下記式（ＩＶ）の化合物を得るように、下記式（ＩＩ）のフタロニトリルに、下記式（ＩＩＩ）のアミノアルコールを求核置換するステップと；
【化２】
ｉｉ）下記式（Ｖ）の化合物を得るように、ステップｉ）に由来する式（ＩＶ）の化合物に対してアミノ基の窒素の反応性メチル化の反応を行うステップと；
【化３】
ｉｉｉ）下記式（ＶＩ）の亜鉛（ＩＩ）フタロシアニンを得るように、ステップｉｉ）に由来する式（Ｖ）の化合物の塩基触媒の４量体化すると同時に適当な亜鉛（ＩＩ）塩を用いた金属挿入を行うステップと；
【化４】
ｉｖ）ヨウ素型の４級アンモニウム基で置換した下記式（ＶＩＩ）の対応するフタロシアニンを得るように、ヨウ化メチルで処理することにより、ステップｉｉｉ）に由来する式（ＶＩ）のフタロシアニンのアミノ基を４級塩化するステップと；
【化５】
ｖ）塩化物型の式（Ｉ）の対応するフタロシアニンを得るように、ステップｉｖ）に由来するヨウ素型の式（ＶＩＩ）のフタロシアニンを、適当なイオン交換樹脂で処理するステップと；
【化６】
を有することを特徴とする方法。
【請求項３】
反応性メチル化の反応を行う前記ステップｉｉ）は、アセトニトリルに溶解した式（ＩＩ）の化合物を、シアノボロハイドライドナトリウムの存在下、３０％のホルムアルデヒド水溶液で処理することにより、実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記ステップｉｉｉ）は、１００〜２５０℃の温度で実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記温度は、１３０〜１８０℃の範囲であることを特徴とする請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記ステップｉｉｉ）は、１，５−ジアザビシクロ［５．４．０］ノン−５−エン（ＤＢＮ）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）及び２−ジメチルアミノ−エタノール（ＤＭＡＥ）から選択される塩基を塩基として用いて、有機溶媒中で実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記ステップｉｉｉ）は、１，５−ジアザビシクロ［５．４．０］ノン−５−エン（ＤＢＮ）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）及び２−ジメチルアミノ−エタノール（ＤＭＡＥ）から選択される塩基を塩基として用いて、溶媒の不存在下で実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項８】
前記ステップｉｉｉ）は、塩基としてＤＢＵを用いて、溶媒の不存在下で、１４０℃の温度で実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項９】
ステップｉｉｉ）で得た式（ＶＩ）の粗産物は、反応混合物を水で処理し、懸濁液を濾過又は遠心分離し、回収した固形物を、水及びメタノールで数回洗浄することにより、沈殿されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１０】
ステップｉｖ）を行う前に、カラムクロマトグラフィー法を行うことによりステップｉｉｉ）に由来する式（ＶＩ）の中間物を精製し、溶媒から再沈殿を行うステップをさらに有することを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１１】
前記カラムクロマトグラフィーは、固定相として、シリカゲルを用い、移動相としてジクロロメタン及びメタノールの混合物を用いて、行われ；
前記の再沈殿は、溶媒として、ジクロロメタンを、沈殿剤としてｎ−ヘキサンを用いて、実行されることを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
ステップｉｖ）の前記メチル化剤は、ヨウ化メチルであることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１３】
前記ヨウ化メチルは、式（ＶＩ）の産物においてメチル化の対象のアミノ基当たり１〜２０当量の量で使用されることを特徴とする請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ヨウ化メチルは、式（ＶＩ）の産物においてメチル化の対象のアミノ基当たり５〜１１当量の量で使用されることを特徴とする請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
ステップｉｖ）の前記メチル化反応は、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド及びＮ−メチルピロリドンから選択された溶媒中で実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１６】
前記溶媒は、Ｎ−メチルピロリドンであることを特徴とする請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
ステップｉｖ）の前記メチル化反応は、式（ＶＩ）の産物において対象のアミノ基当たりメチル化剤として５〜１１当量の量を用い、溶媒としてＮ−メチルピロリドンを用いて実行されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１８】
ステップｉｖ）の反応産物は、Ｎ−メチルピロリドンの用量に対して２用量の量のメタノールでＮ−メチルピロリドンの溶液を希釈した後、Ｎ−メチルピロリドンに対して８当量の量のエチルエーテル又はイソプロピルエーテルを用いて、Ｎ−メチルピロリドンの溶液から、沈殿されることを特徴とする請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
ステップｉｉｉ）の前記の亜鉛（ＩＩ）塩は、塩化亜鉛（ＩＩ）及び酢酸亜鉛（ＩＩ）から選択されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項２０】
ステップｉｉｉ）の前記亜鉛（ＩＩ）塩は、酢酸亜鉛（ＩＩ）であることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項２１】
ステップｖ）の前記イオン交換樹脂は、４級のアンモニウム官能基の強塩基樹脂から選択されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項２２】
前記樹脂は、４〜１０％の架橋度のポリスチレンを基礎とした樹脂であることを特徴とする請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
ステップｖ）における前記のフタロシアニン（ＶＩＩ）の処理は、前記フタロシアニン（ＶＩＩ）の溶液と前記イオン交換樹脂とを用いたクロマトグラフィーにより、且つ式（Ｉ）のフタロシアニンを、蒸留、凍結乾燥又は沈殿により回収することにより、達成されることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項２４】
前記クロマトグラフィーは、塩化物型の式（Ｉ）のフタロシアニンを沈殿させるように、式（ＶＩＩ）のフタロシアニンのメタノール溶液を、イオン交換樹脂に通し、その後、その溶出液を、エチルエーテルで処理することにより、又は式（ＶＩＩ）のメタノール／ジメチルスルホキシドの溶液を、樹脂に通し、その後、この溶出液を、エチルエーテルで処理して、式（Ｉ）のフタロシアニンを沈殿させ、その後、メタノールに溶解し、エチルエーテルを添加して再沈殿させることにより、精製されることを特徴とする請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
活性本体として請求項１に記載のフタロシアニン誘導体を有するとともに、医薬的に許容な賦形剤及び／又は希釈剤と組み合わせたことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２６】
金属キレート剤をさらに有することを特徴とする請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記金属キレート剤は、Ｃａ２＋及びＭｇ２＋のイオンに特異性を有する金属キレート剤から選択されることを特徴とする請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記金属キレート剤は、クエン酸、１，２−ジアミノシクロヘキサン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＣＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）及びエチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＤＴＡ）からなる群から選択されることを特徴とする請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記金属キレート剤は、ＥＤＴＡであることを特徴とする請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
グラム陰性細菌の単独、又はこれとその他の細菌種の存在下により生じる細菌感染の光線力学治療による処置のための、医薬組成物の調製への、請求項１に記載の式（Ｉ）のフタロシアニン誘導体の使用。
【請求項３１】
請求項２乃至２４のいずれか一項に記載の方法の中間体としての、式（Ｖ）、（ＶＩ）及び（ＶＩＩ）の化合物。
【公表番号】特表２００８−５４０３８４（Ｐ２００８−５４０３８４Ａ）
【公表日】平成２０年１１月２０日（２００８．１１．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５０９４５３（Ｐ２００８−５０９４５３）
【出願日】平成１８年５月４日（２００６．５．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００６／０６２０６２
【国際公開番号】ＷＯ２００６／１１７３９９
【国際公開日】平成１８年１１月９日（２００６．１１．９）
【出願人】（５０４３９４１０２）エル．モルテニ アンド シー．デイ フラテッリ アリッチ ソシエタ’ディ エセルチヅィオ ソシエタ ペル アチオニ (7)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年１１月２０日（２００８．１１．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年５月４日（２００６．５．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００６／０６２０６２
【国際公開番号】ＷＯ２００６／１１７３９９
【国際公開日】平成１８年１１月９日（２００６．１１．９）
【出願人】（５０４３９４１０２）エル．モルテニ アンド シー．デイ フラテッリ アリッチ ソシエタ’ディ エセルチヅィオ ソシエタ ペル アチオニ (7)
【Ｆターム（参考）】
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