プリン化合物
下式の化合物：
および疼痛の処置のための薬学的組成物。
および疼痛の処置のための薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プリン化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在の経口用薬理学的薬剤に関連する副作用の結果として、疼痛の処置のための代替療法の開発に対する必要があり続けている。
【０００３】
カンナビノイド受容体ＣＢ１およびＣＢ２は、Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）のクラスに属する。ＣＢ１受容体は中枢および末梢の両方で発現される一方で、ＣＢ２受容体は主として末梢で、主に免疫細胞および組織で発現される。
【０００４】
ＣＢ２受容体の薬理学的なおよび治療上の潜在性が、最近概説され（非特許文献１）、これはＣＢ２を疼痛、特に炎症性疼痛および神経因性疼痛の処置のための治療標的として同定している。
【０００５】
特許文献１は、プリン化合物およびカンナビノイド受容体リガンドとしての、特にＣＢ１受容体拮抗薬としてのその使用に関する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２００４／０３７８２３号パンフレット
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２００８） １５３、３１９−３３４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ＣＢ２作動薬、特にＣＢ２選択的な作動薬は、限定的な中枢で媒介される副作用で、疼痛を処置するための標的を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、下式の化合物：
【化１】
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＦ３、シクロプロピル、ＯＣＨ３、ＯＣＦ３およびＣＮから選択され；
Ｒ２は、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、アゼチジン−１−カルボン酸メチルエステルおよびテトラヒドロチオフェン−１，１−ジオキシドから選択され；
Ｒ３はＨであるか、またはＲ４と一緒になって縮合したピロリジン−２−オンを形成し；
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２フルオロアルキル、シクロプロピルおよびＣＯＣＨ３から選択され；
Ｒ５は、Ｈ、ＣＨ３およびＣＦ３から選択され；
ｎは０または１であり；
Ｘ１およびＸ３は、独立に、Ｎ、ＣＨおよびＣＲ６から選択され；
Ｘ２は、ＣＨおよびＣＲ６から選択されるが；
ただしＸ１、Ｘ２およびＸ３のただ１つはＣＨ以外でもよく；
Ｒ６は、Ｆ、Ｃｌ、ＣＦ３、ＯＣＨ３およびＯＣＦ３から選択される）
またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１０】
本発明の化合物は、インビトロでＣＢ２受容体の作動薬であることが見出された。好ましい本発明の化合物は、既存のＣＢ２作動薬よりも大きい効力を示す。より好ましい本発明の化合物はＣＢ２選択的な作動薬である。最も好ましい本発明の化合物は、既存のＣＢ２作動薬よりも大きいＣＢ２選択性を示す。
【００１１】
本発明は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される希釈剤または担体を含む薬学的組成物を提供する。
【００１２】
本発明は、治療における使用のための式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。本発明はまた、疼痛、特に骨関節炎痛の処置における使用のための式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。本発明の別の態様では、疼痛、特に骨関節炎痛の処置のための医薬の製造のための式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用が提供される。
【００１３】
本発明は、疼痛の処置のための方法であって、有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とするヒトまたは動物に投与する工程を包含する方法を提供する。本発明はまた、骨関節炎痛の処置のための方法であって、有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とするヒトまたは動物に投与する工程を包含する方法を提供する。
【００１４】
本発明は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、治療における使用のための薬学的組成物を提供する。本発明は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、疼痛、特に骨関節炎痛における使用のための薬学的組成物を提供する。
【００１５】
本発明の化合物は疼痛、特に炎症性疼痛、より具体的には関節痛、最も特定すれば骨関節炎痛の処置において使用されることが好ましい。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明の化合物の好ましい種は、下式の化合物：
【化２】
またはその薬学的に許容される塩であり、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は本明細書で定義されるとおりである。
【００１７】
本発明の化合物の好ましい種は、下式の化合物：
【化３】
またはその薬学的に許容される塩であり、式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ４は本明細書で定義されるとおりである。
【００１８】
式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物の特定のクラスが好ましい。以下の列挙された選択物は、そのような好ましいクラスを記載する：
１）Ｒ１はＣｌ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＦ３、シクロプロピルまたはＯＣＦ３である；
２）Ｒ１はＣｌ、メチルまたはエチルである；
３）Ｒ１はＣｌである；
４）Ｒ２はテトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロピラニルである；
５）Ｒ２はテトラヒドロフラニルである；
６）Ｒ２はテトラヒドロピラニルである；
７）Ｒ３はＨである；
８）Ｒ４はＣ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２フルオロアルキルまたはシクロプロピルである；
９）Ｒ４はメチル、エチル、２−フルオロエチルまたはシクロプロピルである；
１０）Ｒ４はメチルまたはエチルである；
１１）Ｒ５はＣＨ３である；
１２）Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、独立に、ＣＨおよびＣＲ６から選択され、ここでＲ６は、Ｃｌ、ＣＦ３、ＯＣＨ３またはＯＣＦ３から選択される；
１３）Ｘ１、Ｘ２およびＸ３はＣＨである；
１４）ｎは０である；
１５）Ｒ３はＨであり、Ｒ５はＣＨ３である；
１６）Ｒ１はＣｌ、メチルまたはエチルであり；かつＲ４はメチル、エチル、２−フルオロエチルまたはシクロプロピルである；
１７）Ｒ１はＣｌ、メチルまたはエチルであり；Ｒ２はテトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロピラニルであり；かつＲ４はメチル、エチル、２−フルオロエチルまたはシクロプロピルである；
１８）Ｒ１はＣｌであり；Ｒ２はテトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロピラニルであり；かつＲ４はメチル、エチル、２−フルオロエチルまたはシクロプロピルである；
１９）Ｒ１はＣｌであり；Ｒ２はテトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロピラニルであり；かつＲ４はメチルまたはエチルである；
２０）Ｒ１はＣｌであり；Ｒ２はテトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロピラニルであり；かつＲ４はメチルまたはエチルであり；Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、独立に、ＣＨおよびＣＲ６から選択され、ここでＲ６は、Ｃｌ、ＣＦ３、ＯＣＨ３またはＯＣＦ３から選択される。
【００１９】
本発明の化合物の各々の薬学的に許容される塩は、本出願の範囲内で企図される。
【００２０】
好ましい本発明の化合物としては、８−（２−クロロ−ピリジン−３−イル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン；２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−８−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−９Ｈ−プリン；２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−８−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−９Ｈ−プリン；２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−８−ｏ−トリル−９Ｈ−プリン；８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｓ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン；８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン；８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン；および８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリン；またはその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【００２１】
本明細書全体を通して用いられる場合、基が「本明細書中で定義される（ｄｅｆｉｎｅｄ ｈｅｒｅｉｎ）」または「本明細書中で定義される（ｈｅｒｅｉｎ ｄｅｆｉｎｅｄ）」によって修飾される場合、その基は第１に思い浮かぶ定義および最も広義の定義、ならびにその基の特定の定義の各々およびすべてを包含するということが理解されるべきである。
【００２２】
上記でおよび本発明の説明全体を通して用いられる場合、以下の用語は、特段の記載がない限り、以下の意味を有する。
【００２３】
本明細書で使用する場合、用語Ｃ１〜Ｃ２アルキルはメチルまたはエチルを意味する。
【００２４】
本明細書で使用する場合、用語Ｃ１〜Ｃ２フルオロアルキルは、１以上の水素がフッ素で置換されている、本明細書中で定義されるＣ１〜Ｃ２アルキル基を意味し、トリフルオロメチル、２−フルオロエチル、２，２−ジフルオロエチルおよび２，２，２ トリフルオロエチルが挙げられる。好ましいＣ１〜Ｃ２フルオロアルキル基は２−フルオロエチルである。
【００２５】
本明細書で使用する場合、用語「薬学的に許容される塩」は、生命体に対して実質的に無毒である本発明の化合物の塩を意味する。このような塩およびそれらを調製するための一般的な方法論は当該技術分野で周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌら、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ、（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ、２００２）；およびＪ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ． ６６、２−１９（１９７７）を参照のこと。好ましい薬学的に許容される塩は塩酸塩およびリン酸塩である。
【００２６】
本発明の実施形態は本明細書に提示される例を包含し、そして提示される例は１つのキラル形態または立体配座形態、またはそれらの塩であり得るが、本発明のさらなる実施形態は、記載されたその例のすべての他の立体異性形態および／または立体配座形態、ならびにその薬学的に許容される塩を包含する。
【００２７】
本明細書で使用する場合、用語「ＣＢ２選択的な作動薬」または「ＣＢ２選択性」は、ＣＢ１よりもＣＢ２に対してより大きい効力を有する化合物を意味する。好ましい本発明の化合物は≧１００倍のＣＢ２選択性を示す。より好ましい本発明の化合物は≧５００倍のＣＢ２選択性を示す。最も好ましい本発明の化合物は≧１０００倍のＣＢ２選択性を示す。
【００２８】
本発明の化合物は、好ましくは、様々な経路によって投与される薬学的組成物として処方される。好ましくは、このような組成物は、経口投与のためのものである。このような薬学的組成物およびそれらを調製するためのプロセスは、当該技術分野で周知である。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ａ，Ｇｅｎｎａｒｏら編、第１９版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、１９９５）を参照のこと。
【００２９】
以下のスキーム、手順および実施例は、本発明の実施をよりよく説明するために提供される。これらのスキーム、手順および実施例の工程についての適切な反応条件は当該技術分野で周知であり、溶媒および補助試薬の置換を含む反応条件の適切な改変は当業者の能力の範囲内である。
【００３０】
さらに、当業者は、いくつかの例では、部分が導入される順序はそれほど重要ではないということを理解する。式Ｉの化合物を生成するために必要とされる工程の特定の順序は、化学の当業者によって十分理解されるように、合成しようとする特定の化合物、出発化合物、およびその置換部分の相対的不安定性に依存する。当業者は、すべての置換基がすべての反応条件と適合するというわけではないということを理解する。これらの化合物は、合成の好都合な時点で当該技術分野で周知の方法によって保護または修飾され得る。
【００３１】
適切な保護基としては、本明細書中で以降「Ｇｒｅｅｎｅ」と呼ばれるＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．、１９９１に記載される保護基が挙げられる。Ｇｒｅｅｎｅは、当業者によって使用されるべき適切な保護基の「保護」および「脱保護」についての適切な条件を示す。
【００３２】
本発明の中間体および最終生成物は、所望に応じて、再結晶またはシリカゲルもしくはアルミナなどの固体支持体上でのクロマトグラフィーなどの一般的な技術によってさらに精製され得る。
【００３３】
本発明の化合物名はＡｕｔｏＮｏｍ ２０００を使用して生成される。
【００３４】
本明細書で使用される略語は以下のとおり定義される。
【００３５】
「ブライン」は飽和塩化ナトリウム水溶液を意味し；「ＢＳＡ」はウシ血清アルブミンを意味し、「ＤＤＱ」は２，３ ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４ ベンゾキノンを意味し；「ＤＭＥＡ」はＮ−エチルジメチルアミンを意味し；「ＥＤＴＡ」はエチレンジアミン四酢酸を意味し；「ＥｔＯＨ」はエタノールを意味し；「ＧＣＭＳ」はガスクロマトグラフィー−質量分析を意味し；「ＧＤＰ」はグアノシン二リン酸を意味し；「ＨＥＰＥＳ」は４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸を意味し；「ＩＰＡ」は２−プロパノールを意味し；「ＩＰＡｍ」は２−プロピルアミンを意味し；「Ｌ．Ｒ．」は限定試薬を意味し；「ＭｅＯＨ」はメタノールを意味し；「ＰＴＳＡ」はパラトルエンスルホン酸を意味し；「ＳＣＸ」はシリカベースの強陽イオン交換樹脂カラム、使い捨てカートリッジまたはその等価物を意味し；「ＳＦＣ」は超臨界流体クロマトグラフィーを意味する。
【００３６】
【化４】
出発のピリミジン（ａ）は、イソプロパノールなどの適切な溶媒の中で、高温で、適切に置換されたアミンおよびジイソプロピルエチルアミンまたはトリエチルアミンなどの適切な塩基と反応され、化合物（ｂ）を与える。
【００３７】
【化５】
出発の臭化物（ｃ−ｉ）は、無水ジエチルエーテルなどの適切な溶媒の中で、低温のｎ−ブチルリチウムなどの強塩基およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドと反応され、化合物（ｃ）を与える。
【００３８】
Ｓｕｚｕｋｉカップリング条件を使用して、出発のアルデヒド（ｃ−ｉｉ）は、１，４−ジオキサンまたはトルエンなどの適切な溶媒の中で、高温で、Ｒ１のボロン酸誘導体、（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）パラジウム（ＩＩ）クロリドまたはＰｄ（ＯＡｃ）２などの適切な触媒およびフッ化セシウムなどの適切な塩基と反応され、化合物（ｃ）を与える。
【００３９】
【化６】
出発のピリミジン（ｂ）は、１，４−ジオキサンまたはトルエンなどの適切な溶媒の中で、高温で、アルデヒド（ｃ）（ここでＸ１〜Ｘ４は、独立に、ＣＨおよびＣＲ６から選択される）およびｐ−トルエンスルホン酸またはシリカ上の１５％塩化第二鉄などの適切な酸と反応される。反応混合物を濾過し、濃縮し、その後、ジクロロメタンなどの適切な溶媒の中で、低温でＤＤＱと反応させ、プリン（ｄ）が得られる。
【００４０】
出発のピリミジン（ｂ）は、トルエンなどの適切な溶媒の中で、高温でアルデヒド（ｃ）（ここでＸ１〜Ｘ４の１つはＮである）およびｐ−トルエンスルホン酸などの適切な酸と反応される。反応混合物を濾過し、濃縮し、その後、高温で塩化チオニルと反応させ、プリン（ｄ）が得られる。
【００４１】
一般的手順２−１：
１，４−ジオキサン中のピリミジン（ｂ）（１．０当量、Ｌ．Ｒ．）、アルデヒド（ｃ）（２．０当量）、およびシリカ上の１５％塩化第二鉄（２００ｗｔ．％、Ｌ．Ｒ．に基づく）の混合物を１００℃に１６時間加熱する。冷却し、シリカを珪藻土に通して濾過して分け、減圧下で濾液を濃縮し、残渣を得る。残渣を乾燥ジクロロメタンに溶解し、０℃でＤＤＱ（１．０当量）を加える。撹拌しながら室温まで暖める。反応が完結すると、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１５％水酸化ナトリウム水溶液、水、およびブラインで洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得る。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、プリン（ｄ）を得る。
【００４２】
一般的手順２−２：
トルエン中のピリミジン（ｂ）（１．０当量、Ｌ．Ｒ．）、アルデヒド（ｃ）（２当量）、ｐ−トルエンスルホン酸（１０ｗｔ．％、Ｌ．Ｒ．に基づく）、およびモレキュラーシーブ（２００ｗｔ．％、Ｌ．Ｒ．に基づく）の溶液を還流状態で１６時間加熱する。冷却し、モレキュラーシーブを珪藻土に通して濾過して分け、濾液を減圧下で濃縮し、残渣を得る。残渣を乾燥ジクロロメタンに溶解し、ＤＤＱ（１．０当量）を０℃で加える。室温まで暖め、撹拌する。反応が完結すると、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１Ｎ水酸化ナトリウム溶液、水、およびブラインで洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得る。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、プリン（ｄ）を得る。
【００４３】
一般的手順２−３：
反応容器に、ピリミジン（ｂ）（１．０当量、Ｌ．Ｒ．）、アルデヒド（ｃ）（１．１当量）、トルエン、およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．０５当量）を入れる。窒素下で、１００℃で１時間撹拌する。室温まで冷却し、珪藻土上で濾過し、減圧下で濃縮する。次に、粗製油状物（イミン）に、室温で、窒素下で塩化チオニル（無溶媒／溶媒）をゆっくり加える。還流状態で３０分間撹拌する。室温まで冷却し、減圧下で濃縮する。トルエンを加えて減圧下で２回除去する。ジクロロメタンに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を用いてゆっくりと塩基性にする。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、プリン（ｄ）を得る。
【００４４】
【化７】
出発のプリン（ｄ）は、エタノールなどの適切な溶媒の中で、高温で、適切に置換されたピペリジンおよびトリエチルアミンなどの適切な塩基と反応され、化合物（ｅ）を与える。
【００４５】
【化８】
出発のプリン（ｄ−ｉ）は、エタノールなどの適切な溶媒の中で、高温で、適切に置換されたピペリジンおよびトリエチルアミンなどの適切な塩基と反応され、化合物（ｅ−ｉ）を与える。
【００４６】
プリン（ｅ−ｉ）は、シアン化亜鉛およびＰｄ（ＰＰｈ３）４などの適切な触媒およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの適切な溶媒と高温で反応され、化合物（ｅ−ｉｉ）を与える。
【００４７】
【化９】
出発のピリミジン（ｂ）は、メトキシベンゼンまたはジメチルスルホキシドなどの適切な溶媒の中で、高温でアルデヒド（ｃ）、適切に置換されたピペリジンおよびニトロベンゼンまたは酢酸などの適切な酸化剤と反応され、化合物（ｅ）を与える。
【００４８】
【化１０】
【００４９】
ジメチルアセトアミドなどの適切な溶媒の中の出発のピリミジン（ｂ）は、低温で適切に置換された酸塩化物（ｆ）と反応され、化合物（ｇ）を与える。
【００５０】
高温および高圧のイソプロパノールなどの適切な溶媒の中の、適切に置換されたピペリジンおよびジイソプロピルエチルアミンなどの適切な塩基の存在下でのピリミジン（ｇ）は、化合物（ｅ）を与える。
【００５１】
調製例１：
６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−ピリミジン−４，５−ジアミン
【化１１】
２−プロパノール（８０ｍＬ）中の４，６−ジクロロ−２−メチル−ピリミジン−５−イルアミン（０．００８ｍｏｌ、１．５ｇ、１．０当量）、４−アミノテトラヒドロピラン（０．０１２ｍｏｌ、１．２７ｇ、１．５当量）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．００９２ｍｏｌ、１．１ｇ、１．１当量）の溶液を、密封チューブの中で、１５０℃で１６時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、２−プロパノールを減圧下で除去し、残渣を得た。この残渣をジクロロメタンに溶解し、水およびブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得た。残渣をジクロロメタン：メタノール ９６：４で溶出するシリカゲルカラムで精製し、標記の化合物を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２４３．４１（Ｍ＋１）。
【００５２】
表１中の調製例２〜１２は、スキームＡに従って、適切なアミンを使用して、基本的に調製例１に記載されるようにして、調製し得る。
【００５３】
【表１−１】
【表１−２】
【表１−３】
【００５４】
調製例１３：
２−シクロプロピル−ベンズアルデヒド
【化１２】
６０ｍＬの反応バイアルに、２−ブロモ−ベンズアルデヒド（１０．８１０ｍｍｏｌｅｓ、１．２６４ｍＬ）、シクロプロピルボロン酸（１４．０５３ｍｍｏｌｅｓ、１．２０７ｇ）、リン酸三カリウムＮ−水和物（３７．８３４ｍｍｏｌｅｓ、８．０３１ｇ）、トリシクロヘキシルホスフィン（１．０８１ｍｍｏｌｅｓ、３０３．１３９ｍｇ）、トルエン（２８３．６５４ｍｍｏｌｅｓ、３０．０００ｍＬ）、および水（８３．２６３ｍｍｏｌｅｓ、１．５００ｍＬ）を入れた。次いでこの混合物を入念に脱気した。次に、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（５４０．４８２μｍｏｌｅｓ、１２１．３４３ｍｇ）を加え、この混合物を窒素下に置き、そして１００℃に加熱した。２時間後、室温まで冷却し、酢酸エチル（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。ヘキサン：ジクロロメタン ２０〜５０％で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、標記の化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００．３１ＭＨｚ，ｃｄｃｌ３）：１０．５７（ｓ，１Ｈ），７．７８（ｄｄ，Ｊ＝１．３，７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｔｄ，Ｊ＝７．５，１．３Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．０９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），２．６３−２．５６（ｍ，１Ｈ），１．０７−１．０２（ｍ，２Ｈ），０．７７−０．７３（ｍ，２Ｈ）。
【００５５】
調製例１４：
２−シクロプロピル−ピリジン−３−カルバルデヒド
【化１３】
４０ｍＬの反応バイアルに、３ｍＬの１，４−ジオキサンおよび撹拌子を入れた。窒素を用いて５分間脱気した。次に、このバイアルに、２−ブロモニコチンアルデヒド（６４５．１３４μｍｏｌｅｓ、１２０．０００ｍｇ）、シクロプロピルボロン酸（１．２９０ｍｍｏｌｅｓ、１１０．８３１ｍｇ）、およびフッ化セシウム（１．９３５ｍｍｏｌｅｓ、２９３．９９５ｍｇ）を入れた。次いでこのバイアルを、窒素を用いて再び脱気した。次に、（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（３２．２５７μｍｏｌｅｓ、２６．３４２ｍｇ）を加え、反応混合物を窒素下で１００℃に加熱した。反応が完結すると、混合物を室温まで冷却し、酢酸エチルを用いて珪藻土のパッドの上から濾過して、標記の化合物を得た。ＧＣＭＳ（ｍ／ｚ）：１４６（Ｍ）。
【００５６】
表２中の調製例１５〜４７は、スキームＣに従って、適切な置換ピリミジンを使用して、および表２に概略を記載したとおりの適切な一般的手順２−１から２−３を使用して調製し得る。
【００５７】
【表２−１】
【表２−２】
【表２−３】
【表２−４】
【表２−５】
【表２−６】
【００５８】
調製例４８：
６−クロロ−８−（２−クロロ−ピリジン−３−イル）−２−メチル−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン
【化１４】
反応容器に、Ｒ−６−クロロ−２−メチル−Ｎ４−（テトラヒドロ−フラン−３−イル）−ピリミジン−４，５−ジアミン（２．１８６ｍｍｏｌｅｓ、５００．０００ｍｇ）、２−ブロモニコチンアルデヒド（３．２８０ｍｍｏｌｅｓ、６１０．０４６ｍｇ）、トルエン（９４．５５１ｍｍｏｌｅｓ、１０．０００ｍＬ）、およびＰＴＳＡ一水和物（１０９．３２３μｍｏｌｅｓ、２０．７９５ｍｇ）を入れた。窒素下で、１００℃で１時間加熱した。室温まで冷却し、濾過し、減圧下で濃縮した。次に、この粗製油状物（イミン）に、室温で、窒素下で塩化チオニル（６８．６３０ｍｍｏｌｅｓ、５．０００ｍＬ）をゆっくり加えた。８０℃に３０分間加熱した。減圧下で濃縮した。トルエン（約１０ｍＬ）を加え、減圧下で２回除去した。残渣をジクロロメタンに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を用いてゆっくりと塩基性にした。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。ヘキサン：アセトンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、標記の化合物を得た。（６４８ｍｇ）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３５０（Ｍ＋１）。
【００５９】
調製例４９：
１−（２−フルオロ−エチル）−ピペラジン塩酸塩
【化１５】
工程１：
反応容器に、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペラジン（８．５９０ｍｍｏｌｅｓ、１．６００ｇ）、炭酸カリウム（２５．７７１ｍｍｏｌｅｓ、３．５６２ｇ）、ヨウ化ナトリウム（触媒）（６６．７１４μｍｏｌｅｓ、１０．０００ｍｇ）、１，４−ジオキサン（２３４．２６２ｍｍｏｌｅｓ、２０．０００ｍＬ）、１−ブロモ−２−フルオロエタン（９．４４９ｍｍｏｌｅｓ、７０４．０２９μＬ）、および撹拌子を入れた。撹拌しながら還流状態で一晩加熱した。反応が完結すると、室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。酢酸エチルおよび水を用いて分配した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、純粋な４−（２−フルオロ−エチル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得た。ＧＣＭＳ（ｍ／ｚ）：２３２（Ｍ）。
【００６０】
工程２：
１，４−ジオキサン中の４Ｎ ＨＣｌ（８６．０９６ｍｍｏｌｅｓ、２１．５２４ｍＬ）を、乾燥ジクロロメタン（６０ｍＬ）中の４−（２−フルオロ−エチル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８．６１０ｍｍｏｌｅｓ、２．０００ｇ）の撹拌溶液に、窒素下で、室温で加えた。窒素下で一晩撹拌した。減圧下で濃縮し、標記の化合物（８．６７９ｍｍｏｌｅｓ、１．７８０ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１３３（Ｍ＋１）。
【実施例】
【００６１】
実施例１：
８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン塩酸塩
【化１６】
エタノール（５．０ｍＬ）中の６−クロロ−８−（２−クロロフェニル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン（０．０００５ｍｏｌ、０．２ｇ）、Ｎ−エチルピペラジン（０．０００６ｍｏｌ、０．０６９ｇ、１．１当量）、およびトリエチルアミン（０．０００６ｍｏｌ、０．０６１ｇ、１．１当量）の溶液を、還流状態で２０時間加熱した。あるいは、マイクロ波照射を用いて反応液を加熱した。反応が完結すると、減圧下で反応混合物を濃縮した。残渣を乾燥ジクロロメタンに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、およびブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得た。ヘキサン：アセトン ９０：１０で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、遊離塩基を得た。ＨＣｌ（エタノール中の２Ｍ溶液）（１．０当量）を、ジエチルエーテル（５ｍＬ）中のこの遊離塩基（０．２３ｇ、０．５００ｍｍｏｌ）に０℃で加え、室温で２時間撹拌した。濾過し、沈殿物をジエチルエーテルで洗浄した。沈殿物を真空下で乾燥し、標記の化合物（０．２ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４４１．２８（Ｍ＋１）。あるいは、遊離塩基をアセトン、１：１ アセトニトリル：水、または別の適切な有機溶媒に溶解し、次いで撹拌しながら水性またはエーテル性のＨＣｌの溶液を加えることによって、ＨＣｌ塩を調製した。次いで凍結乾燥し、塩酸塩を得た。
【００６２】
表３中の実施例２〜７２は、スキームＤに従って、適切に置換されたプリンおよび適切に置換されたピペラジンを使用して、基本的に実施例１に記載されるようにして、調製し得る。
【００６３】
【表３−１】
【表３−２】
【表３−３】
【表３−４】
【表３−５】
【表３−６】
【表３−７】
【表３−８】
【表３−９】
【表３−１０】
【表３−１１】
【表３−１２】
【表３−１３】
【表３−１４】
【表３−１５】
【表３−１６】
【表３−１７】
【表３−１８】
【表３−１９】
【表３−２０】
【００６４】
上付き文字ａ〜ｒはキラル分離条件を表す：異性体１は分析用キラルカラムから最初に溶出するものであり、異性体２はそのキラルカラムから２番目に溶出するものである。
ａ．ＲｅｇｉｓＰａｃｋ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＥｔＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
ｂ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−Ｈ、溶離液：１００％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＤＭＥＡ）
ｃ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ、溶離液 ４０：６０ ＩＰＡ：ヘプタン（０．２％ ＤＭＥＡ）
ｄ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：２０％ ＩＰＡ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
ｅ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：７％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
ｆ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−Ｈ、溶離液：１００％ ＥｔＯＨ
ｇ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ、溶離液：３０：７０ ＩＰＡ：ヘプタン（０．２％ ＤＭＥＡ）
ｈ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＥｔＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
Ｉ．Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
Ｊ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＥｔＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
ｋ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ、溶離液：１５：８５ ＩＰＡ：ヘプタン（０．２ ＤＭＥＡ）
ｌ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：２０％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
ｍ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＥｔＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ） ＣＯ２
ｎ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＥｔＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ） ＣＯ２
ｏ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
ｐ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ、溶離液：５：９５ ＥｔＯＨ：ヘプタン（０．２％ ＤＭＥＡ）
ｑ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−Ｈ、溶離液：１００％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＤＭＥＡ）
ｒ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−Ｈ、溶離液：１００％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＤＭＥＡ）
【００６５】
実施例７７：
８−（４−メトキシ−２−メチル−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン
【化１７】
６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−ピリミジン−４，５−ジアミン（０．１００ｇ、０．４０２ｍｍｏｌ）、４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド（０．０９１ｇ、０．６０３ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルピペラジン（０．０４４ｇ、０．４４３ｍｍｏｌ）およびニトロベンゼン（０．０５０ｇ、０．４０２ｍｍｏｌ）をメトキシベンゼン（１．２ｍＬ）に溶解し、１４０℃に２日間加熱した。次に、室温で３日間撹拌した。次に、減圧下で濃縮し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液とジクロロメタンとの間で分配し、ジクロロメタンで洗浄した。水相をｐＨ １２まで塩基性にし、ジクロロメタンで抽出した。有機物を５ｇのＳＣＸ−２カラムにロードし、メタノールで洗浄し、次いでメタノール中の２Ｎ アンモニアで生成物を溶出した。分取用高圧液体クロマトグラフィーによって精製し、水／アセトニトリルから凍結乾燥し、標記の化合物を遊離塩基として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２３（Ｍ＋１）。
【００６６】
実施例７８
２−［２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン−８−イル］−ベンゾニトリル塩酸塩
【化１８】
工程１：
エタノール（１０．０ｍＬ）中の８−（２−ブロモフェニル）−６−クロロ−２−メチル−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン（０．００２３ｍｏｌ、１．０ｇ）、１−メチルピペラジン（０．００２５ｍｏｌ、０．２５ｇ、１．１当量）およびトリエチルアミン（０．００２５ｍｏｌ、０．２５ｇ、１．１当量）の溶液を９０℃で１６時間加熱した。減圧下で反応混合物を濃縮した。残渣を乾燥ジクロロメタンに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、およびブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、残渣を得た。この残渣を、ジクロロメタン：メタノール ９７：３で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、８−（２−ブロモ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン（０．７１ｇ）を得た。そのまま次の工程のために使用した。
【００６７】
工程２：
マイクロ波反応容器に、８−（２−ブロモ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン（０．００１５ｍｏｌ、０．７ｇ）、シアン化亜鉛（０．００２２ｍｏｌ、０．２５６ｇ、１．５当量）、および乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０ｍＬ）を入れた。窒素を用いて３回脱気した。Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．０００１ｍｏｌ、０．１７ｇ、０．１当量）を加え、再び窒素を用いて３回脱気した。この反応容器を密閉し、マイクロ波の中で１５０℃で１時間照射した。反応混合物を室温まで冷却し、反応混合物を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得た。残渣を、ジクロロメタン：メタノール ９９：１で溶出するシリカゲルカラムで精製し、遊離塩基を得た。ＨＣｌ（ジエチルエーテル中の２Ｍ 溶液）（０．０２６ｇ、０．０００７ｍｏｌ、１．０当量）を、ジエチルエーテル（５ｍＬ）中の２−（２−メチル−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン−８−イル）ベンゾニトリル（０．３ｇ、０．０００７ｍｏｌ）の混合物に０℃で加え、室温で２時間撹拌した。沈殿物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、真空中で乾燥し、標記の化合物を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１８．２９（Ｍ＋１）。
【００６８】
表４中の実施例７９〜８０は、スキームＥに従って、適切に置換されたプリンを使用して、基本的に実施例７８と同じ手順により２工程にわたって調製し得る。
【００６９】
【表４】
【００７０】
実施例８１：
２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−８−ｏ−トリル−９Ｈ−プリン塩酸塩
【化１９】
【００７１】
ジメチルスルホキシド（５ｍＬ）中の６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−ピリミジン−４，５−ジアミン（１ｇ、４．１２ｍｍｏｌｅｓ）の溶液に、ｏ−トルアルデヒド（４．１２ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルピペラジン（４．１２ｍｍｏｌ）を加え、次いで酢酸（９．８９ｍｍｏｌｅｓ、５６６．６３５μＬ）を加えた。この反応液を、雰囲気に開放して８時間、９０℃に加熱した。物質をあらかじめ条件を整えた（ｐｒｅ−ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ）ＳＣＸカラム上に入れ、メタノール中の７Ｎ アンモニアで溶出し、溶媒をエバポレーションし、粗製物を逆相クロマトグラフィーで精製した。この物質に１当量の１，４−ジオキサン中のＨＣｌ ４Ｍを加えた。過剰の溶媒をエバポレーションし、標記の化合物を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４０７（Ｍ＋１）。
【００７２】
表５中の実施例８２〜８３は、スキームＦに従って、適切なピリミジン、アルデヒド、およびピペラジンを使用して、基本的に実施例８１に記載されるようにして調製し得る。
【００７３】
【表５】
【００７４】
実施例８４：
３−［８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−プリン−９−イル］−アゼチジン−１−カルボン酸メチルエステル
【化２０】
工程１：
エタノール（２５．０ｍＬ）中の３−（６−クロロ−８−（２−クロロフェニル）−２−メチル−９Ｈ−プリン−９−イル）アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０１２ｍｏｌ、５．５ｇ）、Ｎ−エチルピペラジン（０．０１３ｍｏｌ、１．５９ｇ、１．１当量）、およびトリエチルアミン（０．０１３ｍｏｌ、１．４１ｇ、１．１当量）の溶液を９０℃で１６時間加熱した。減圧下で反応混合物を濃縮した。残渣を乾燥ジクロロメタンに溶解した。飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、およびブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得た。残渣を、ジクロロメタン：メタノール ９８：２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、３−（８−（２−クロロフェニル）−６−（４−エチルピペラジン−１−イル）−２−メチル−９Ｈ−プリン−９−イル）アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．０ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５１２．３１（Ｍ＋１）。
【００７５】
工程２：
トリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）を、ジクロロメタン（１５ｍＬ）中の３−（８−（２−クロロフェニル）−６−（４−エチルピペラジン−１−イル）−２−メチル−９Ｈ−プリン−９−イル）アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．００５ｍｏｌ、３．０ｇ）の溶液に０℃で加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液でクエンチし、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、９−（アゼチジン−３−イル）−８−（２−クロロフェニル）−６−（４−エチルピペラジン−１−イル）−２−メチル−９Ｈ−プリン（２．４ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１２．２２（Ｍ＋１）。
【００７６】
工程３：
クロロギ酸メチル（０．００２４ｍｏｌ、０．２２ｇ、２．５当量）を、乾燥ジクロロメタン（２ｍＬ）中の９−（アゼチジン−３−イル）−８−（２−クロロフェニル）−６−（４−エチルピペラジン−１−イル）−２−メチル−９Ｈ−プリン（０．０００９ｍｏｌ、０．４ｇ）およびピリジン（２ｍＬ）の溶液に０℃で加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液でクエンチし、次いでジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得た。この残渣を、ジクロロメタン：メタノール ９８：２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、標記の化合物を遊離塩基として得た（０．１５５ｇ）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４７０．６３（Ｍ＋１）。
【００７７】
実施例８５：
８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリン塩酸塩
【化２１】
工程１：
マイクロ波反応バイアルに、４，６−ジクロロ−ピリミジン−５−イルアミン（１２．２０ｍｍｏｌｅｓ、２．００ｇ）、イソプロピルアルコール（５ｍＬ）、Ｃ−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−メチルアミン（１４．６３ｍｍｏｌｅｓ、１．６９ｇ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１５．８５ｍｍｏｌｅｓ、２．７６ｍＬ）を入れた。撹拌しながら、マイクロ波の中で、高吸収度モードで１４０℃で２時間照射した。溶媒をエバポレーションし、残渣をジクロロメタンを用いて粉砕し、６−クロロ−Ｎ＊４＊−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−ピリミジン−４，５−ジアミンを得た。
【００７８】
工程２：
一般的手順２−１に従って、６−クロロ−Ｎ＊４＊−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−ピリミジン−４，５−ジアミンを使用して、６−クロロ−８−（２−クロロ−フェニル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリンを調製した。
【００７９】
工程３：
実施例１と同じ手順を使用して、６−クロロ−８−（２−クロロ−フェニル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリンをＮ−メチルピペラジンで置換して、塩酸塩を調製し、標記の化合物を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２７（Ｍ＋１）。
【００８０】
実施例８６：
８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−２−トリフルオロメチル−９Ｈ−プリン塩酸塩
【化２２】
工程１：
マイクロ波反応容器に、４，６−ジクロロ−２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イルアミン（４．３１ｍｍｏｌｅｓ、１．００ｇ）、イソプロピルアルコール（３ｍＬ）、（Ｒ）−（テトラヒドロ−フラン−３−イル）アミン（５．１７ｍｍｏｌｅｓ、６３９．２４ｍｇ）、ジイソプロピルエチルアミン（１２．９３ｍｍｏｌｅｓ、２．２６ｍＬ）を入れた。撹拌しながら、高吸収度モードを使用して１４０℃で２時間照射した。減圧下で濃縮し、ジクロロメタンに溶解し、水（２×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、エバポレーションし、褐色の油状物を得た。ヘキサン：酢酸エチル ０〜１００％で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、６−クロロ−Ｎ＊４＊−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４，５−ジアミンを得た。
【００８１】
工程２：
無水１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）中の６−クロロ−Ｎ＊４＊−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４，５−ジアミン（２．６７ｍｍｏｌｅｓ、０．７５６ｇ）および２−クロロ−ベンズアルデヒド（２．９４ｍｍｏｌｅｓ、３３１．３９μＬ）をシリカ上の１５％ 塩化第二鉄（８．５６ｍｍｏｌｅｓ、１．３９ｇ）で処理し、１００℃で一晩加熱した。珪藻土に通して濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液をエパポレーションし、６−クロロ−８−（２−クロロ−フェニル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−２−トリフルオロメチル−９Ｈ−プリンを得た。
【００８２】
工程３：
実施例１と同じ手順を使用して、６−クロロ−８−（２−クロロ−フェニル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−２−トリフルオロメチル−９Ｈ−プリンをＮ−メチルピペラジンで置換して、塩酸塩を調製し、標記の化合物を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４６７（Ｍ＋１）。
【００８３】
実施例８７：
８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリン塩酸塩
【化２３】
工程１：
還流冷却器、窒素導入口および撹拌棒を取り付けた１Ｌの丸底フラスコ（ｒｂｆ）の中で、５−アミノ−４，６−ジクロロ−２−メチルピリミジン（２５ｇ、１４０ｍｍｏｌ）、４−アミノメチルテトラヒドロピラン塩酸塩（３６．２ｇ、２３９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（５７ｍＬ、４０７．３ｍｍｏｌ）をイソプロピルアルコール（２８０ｍＬ）に溶解し、加熱して還流させた。４２時間後、室温まで冷却した。溶媒を減圧下で除去し、得られた残渣をジクロロメタン（３００ｍＬ）に溶解した。有機層を水（２×１５０ｍＬ）およびブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、エバポレーションし、６−クロロ−２−メチル−Ｎ−４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−ピリミジン−４，５−ジアミン（３８ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２５７／２５９（Ｍ＋１）。
【００８４】
工程２：
温度計、冷却器およびフリット付きの（ｆｒｉｔｔｅｄ）空気導入口を取り付けた３つ口の１Ｌの丸底フラスコ（ｒｂｆ）の中で、室温で６−クロロ−２−メチル−Ｎ−４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−ピリミジン−４，５−ジアミン（３７．６ｇ、１４６．４ｍｍｏｌ）および銅（ＩＩ）トリフルオロメタンスルホネート（２６．５ｇ、７３．２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（５８５ｍＬ）に溶解した。次いでトリエチルアミン（４１ｍＬ、２９３ｍｍｏｌ）、Ｎ−エチルピペラジン（２０．６ｍＬ、１６１．１ｍｍｏｌ）および２−クロロベンズアルデヒド（２４．７ｍＬ、２１９．７ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を、撹拌および空気散布（ａｉｒ ｓｐａｒｇｉｎｇ）をしながら１００℃に加熱した。
【００８５】
５．５時間後、加熱を止め、室温まで冷却した。酢酸エチル（１Ｌ）で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１×２００ｍＬ）および水酸化アンモニウム（１×２００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、エバポレーションし、褐色の油状物を得て、シリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中の４％ メタノール）によって精製し、８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリン（１７．６ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４５５／４５７（Ｍ＋１）。
【００８６】
工程３：
８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリン（５．２３ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）をジエチルエーテル（４５ｍＬ）中で撹拌し、室温で塩化水素（１，４−ジオキサン中の４Ｎ、２．９ｍＬ、１１．５ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、得られた固体を濾過によって集め、ジエチルエーテルで洗浄した。真空乾燥し、標記の化合物を得た（５．４ｇ）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４５５／４５７（Ｍ＋１−ＨＣｌ）。
【００８７】
実施例８８：
８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン塩酸塩
【化２４】
工程１：
還流冷却器、撹拌棒および窒素導入口を取り付けた１Ｌの丸底フラスコ（ｒｂｆ）の中で、５−アミノ−４，６−ジクロロ−２−メチルピリミジン（２０ｇ、１１２．３ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−（テトラヒドロ−フラン−３−イル）アミン塩酸塩（２０．８ｇ、１６８．５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４５ｍＬ、３２５．８１ｍｍｏｌ）およびイソプロピルアルコール（２２５ｍＬ）を合わせ、磁気撹拌しながら加熱して還流させた。４日後、加熱を止め、室温まで冷却した。溶媒を減圧下で除去し、得られた残渣をジクロロメタン（３００ｍＬ）に溶解し、水（２×１５０ｍＬ）およびブライン（１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、エバポレーションし、６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−ピリミジン−４，５−ジアミン（２３．１ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２２９／２３１（Ｍ＋１）。
【００８８】
工程２：
６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−ピリミジン−４，５−ジアミン（２３．１ｇ、１０１ｍｍｏｌ）、２−クロロベンズアルデヒド（１７．０ｍＬ．１５１．５ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルピペリジン（１２．３ｍＬ、１１１．１２ｍｍｏｌ）およびニトロベンゼン（１０．３ｍＬ、１０１．０１ｍｍｏｌ）をメトキシベンゼン（３００ｍＬ）に溶解し、空気に開放して１３０℃（内部温度）に加熱した。３６時間後、混合物を室温まで冷却し、ＳＣＸ−２樹脂（８０ｇ）のパッドの上に注ぎ、メタノール（５００ｍＬ）、次いでメタノール中の３．５Ｎ アンモニア（５００ｍＬ）で溶出した。メタノール中のアンモニアの画分から溶媒を除去し、褐色の油状物を得て、ジクロロメタン：メタノール ３〜２０％で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリンを暗色の油状物（１０．１ｇ）として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１３／４１５（Ｍ＋１）。
【００８９】
工程３：
８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン（８．６２ｇ、２０．９ｍｍｏｌ）をジエチルエーテル（１０５ｍＬ）に溶解し、塩化水素（ジオキサン中の４Ｎ、５．２ｍＬ、２０．８８ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を１５時間撹拌し、生成した固体を濾過によって集めた。これによって、自由流動性の黄色固体を得た。従って、この物質の大部分を丸底フラスコに移し、真空下に置き、標記の化合物を得た（７．３３ｇ）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１３／４１５（Ｍ＋１−ＨＣｌ）、［α］Ｄ２０＝＋２７°（ジクロロメタン中でｃ＝０．２５６）。
【００９０】
実施例８９：
８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリンリン酸塩
【化２５】
工程１：
３００ｍＬのガラス製の圧力反応器の中で、５−アミノ−４，６−ジクロロ−２−メチルピリミジン（２０．０ｇ、９７％、１０９．０ｍｍｏｌ）、４−アミノテトラヒドロピラン塩酸塩（２１．０ｇ、１５２．６ｍｍｏｌ）、ジ−イソプロピルエチルアミン（５７．０ｍＬ、３２６．９ｍｍｏｌ）およびイソプロピルアルコール（１００ｍＬ）を合わせた。圧力容器をしっかりと密閉し、撹拌を開始し、熱制御のための設定点を１００℃に調整した。この混合物を１００℃で２４時間撹拌した。反応器内容物を６０℃まで冷却し、容器から圧力を抜き、４−アミノテトラヒドロピラン塩酸塩（２．２５ｇ、１６．３ｍｍｏｌ）を加えた。容器を再び密閉し、内容物を１００℃の内部温度まで加熱し、さらに２４時間撹拌した。反応混合物を周囲温度まで冷却し、反応器から圧力を抜き、内容物を回収フラスコに移した。この混合物を、減圧下でそのもとの体積のおよそ１／３まで濃縮した。水（２００ｍＬ）および酢酸エチル（２００ｍＬ）を加え、得られた混合物を分液漏斗に移した。層を分離し、水層を酢酸エチル（１００ｍＬ）で再抽出し、すべての有機物を合わせた。水（２×１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、次いで有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で濃縮し、６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−ピリミジン−４，５−ジアミンをオフホワイトの固体（２５．０ｇ）として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２４３／２４５（Ｍ＋１）。
【００９１】
工程２：
５００ｍＬの３つ口フラスコの中で、窒素雰囲気下で６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−ピリミジン−４，５−ジアミン（２４．４ｇ、１００．４ｍｍｏｌ）をジメチルアセトアミド（１７５ｍＬ）に溶解した。得られた溶液を０〜５℃に冷却した。滴下漏斗を介して、内部温度を１０℃未満に維持して、塩化２−クロロベンゾイル（１５．５ｍＬ、１２２．４ｍｍｏｌ）を２０分間にわたって加えた。滴下漏斗をジメチルアセトアミド（１．０ｍＬ）でリンスした。得られた混合物を一晩撹拌し、その間に、自然と周囲温度まで暖まった。氷冷した脱イオン水（２５０ｍＬ）を第２の５００ｍＬのフラスコに入れ、次いで反応混合物を２０分間にわたってこの冷水に移した。得られたスラリーを２時間撹拌した。固体を濾過し、冷水（１２０ｍＬ）で洗浄し、５０℃で一晩真空乾燥し、２−クロロ−Ｎ−（４−クロロ−２−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル）ベンズアミドをオフホワイトの固体（３３．１ｇ）として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３８１／３８２（Ｍ＋１）。
【００９２】
工程３：
２−クロロ−Ｎ−（４−クロロ−２−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル）ベンズアミド（４５．０ｇ、１１８．０ｍｍｏｌ）、１−メチルピペラジン（２３．０ｍＬ、２０７．０ｍｍｏｌ）、ジ−イソプロピルエチルアミン（２３．０ｍＬ、１３１．９ｍｍｏｌ）およびイソプロピルアルコール（２２５ｍＬ）を１ＬのＰａｒｒ反応器の中で合わせた。反応器を密閉し、撹拌を開始し、熱制御のための設定点を１６０℃に調整した。内部温度が１６０℃に到達した後、混合物を２４時間撹拌した。反応器内容物を６０℃まで冷却し、容器から圧力を抜き、内容物を、オーバーヘッド撹拌装置を具えた２Ｌのフラスコに移した。反応器フラスコをイソプロピルアルコール（２５．０ｍＬ）で十分にリンスし、リンス液を主溶液と合わせた。冷たい脱イオン水（７８０ｍＬ）をこの混合物に３０分間にわたって加え、得られた沈殿物を３０分間撹拌した。この混合物を濾過し、固体を脱イオン水（２×２７０ｍＬ）で洗浄し、漏斗上で吸引乾燥した（ｐｕｌｌ ｄｒｙ）。生成物を４５℃で一晩さらに乾燥して、８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロピラン−４−イル）−９Ｈ−プリンをオフホワイトの固体（４４．８ｇ）として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２７／４２９（Ｍ＋１）。
【００９３】
工程４：
８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン（３．０ｇ、７．１ｍｍｏｌ）および無水エタノール（２４ｍＬ）を、還流のための装備を具えた５０ｍＬの３つ口フラスコの中で合わせた。得られた懸濁液を７０℃に加熱し、無水エタノール（６．０ｍＬ）中の８５％ リン酸（０．４９ｍＬ、７．２ｍｍｏｌ）を２５分間にわたって加えた。この混合物を７０℃で４５分間撹拌し、ゆっくりと周囲温度まで冷却し、さらに２時間撹拌した。混合物を濾過し、生成物のケーキを無水エタノール（６ｍＬ）でリンスし、吸引乾燥した。生成物を５５℃で一晩さらに乾燥して、標記の化合物を白色の結晶性固体（３．６ｇ）として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２７／４２９（Ｍ＋１）。
【００９４】
ＣＢ１およびＣＢ２のインビトロ機能アッセイ
例示した化合物は、ＳＰＡベースのＧＴＰ−γ−３５Ｓ結合アッセイを使用して、作動薬モードで試験される。すべてのアッセイ成分は、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、（室温でｐＨ ７．４）から構成されるアッセイ緩衝液の中で調製される。半対数の化合物希釈をＢＳＡ（最終０．１２５％）を含有するアッセイ緩衝液の中で行った。ＧＴＰ−γ３５−Ｓ結合は、ＣＢ１アッセイについての全膜（ｗｈｏｌｅ ｍｅｍｂｒａｎｅ）捕捉技術およびＣＢ２アッセイについてのこれまでに記載された抗体捕捉技術（ＤｅＬａｐｐら Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ ２８９：９４６−９５５、１９９９）の改変を使用して、９６ウェルのフォーマットで測定される。すべてのインキュベーションを室温で行う。
【００９５】
ＣＢ１：
ｈＣＢ１−ＣＨＯ膜、ＧＤＰ（最終１ｕＭ）、およびサポニン（最終１０ｕｇ／ｍＬ）をアッセイ緩衝液に加え、ホモジナイズした。希釈した化合物、ＧＴＰ−γ−３５Ｓ（最終５００ｎＭ）および膜をアッセイプレートに加え、３０分間インキュベーションした。次いで１ｍｇ／ウェルのＷｈｅａｔｇｅｒｍ Ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ ＳＰＡビーズを加え、プレートを密閉し、ボルテックスにかけ、さらに１時間インキュベーションした。次いでプレートを７００×ｇで１０分間遠心分離し、シンチレーションカウンタを使用して１ウェルあたり１分間計数した。
【００９６】
ＣＢ２−Ｓｆ９：
ｈＣＢ２−Ｓｆ９膜およびＧＤＰ（最終１ｕＭ）をアッセイ緩衝液に加え、ホモジナイズした。希釈した化合物および膜をアッセイプレートに加え、１５分間予備インキュベーションした。この後、ＧＴＰ−γ−３５Ｓ（最終５００ｎＭ）を加え、さらに３５分間インキュベーションした。次に、Ｎｏｎｉｄｅｔ Ｐ４０洗浄剤（最終０．２％）、抗Ｇｉ抗体（１：３６２の最終希釈）、および１．２５ｍｇの抗ウサギ抗体シンチレーション近接アッセイビーズを含有する混合物を加えた。次いでこのプレートを密閉し、ボルテックスにかけ、さらに２時間インキュベーションし、この後、遠心分離しＣＢ１について計数した。
【００９７】
データを分析するために、最初にすべてのウェルからバックグラウンドを差し引いた。作動薬／逆作動薬用量反応データを完全活性化薬（メタンアンダミド（ｍｅｔｈａｎａｎｄａｍｉｄｅ））反応に対して正規化することにより、作動薬有効性パーセントを決定した。Ａｃｔｉｖｉｔｙ ＢａｓｅおよびＸＬＦｉｔ３を用いた４パラメーターのロジスティック換算フィット（ｌｏｇｉｓｔｉｃ ｒｅｄｕｃｅｄ ｆｉｔ）を使用して、データを分析した。
【００９８】
例示した化合物のすべてを基本的に上記のとおりに試験し、各々が≦１００ｎＭのＣＢ２についての相対的ＥＣ５０値を有することを見出した。実施例６１は、ＣＢ２について１８ｎＭの相対的ＥＣ５０値およびＣＢ１について１９５０ｎＭの相対的ＥＣ５０値を有する。
【００９９】
このように、本発明の化合物はＣＢ２インビトロ活性を示す。さらに、本発明の化合物はＣＢ１よりもＣＢ２に対して選択性を示し、そのため中枢で媒介される副作用について限定的な潜在性をもたらす。
【０１００】
ヒトおよびラットのＣＢ２受容体からの３Ｈ−ＣＰ５５９４０の置換
Ｆｅｌｄｅｒらの方法（Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｏｃｏｌ．４８：４４３−４５０、１９９５）を、わずかの改変を加えて利用した。具体的にいうと、ヒトまたはラットのＣＢ２受容体を安定にまたは一過性に発現する細胞由来の膜ホモジネートを遠心分離によって洗浄し、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ＨＣｌ（ｐＨ ７．４）、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、２．５ｍＭ ＥＤＴＡ、および０．１％ ＢＳＡ緩衝液の中に希釈した。３Ｈ−ＣＰ５５９４０の特異的結合を１μＭ ＣＰ５５９４０を用いて定義した。特異的な３Ｈ−ＣＰ５５９４０結合を置き換えるための化合物の能力を、３００μｌの量で室温で９０分間インキュベーションすることによって、１％ ジメチルスルホキシドの存在下で、Ｔｒｉｓ、ＭｇＣｌ２、ＥＤＴＡ、ＢＳＡ緩衝液の中で、ある濃度範囲にわたって試験した。水中の０．５％ ポリビニルピロリドン、０．１％ ポリソルベート ２０で前処理したＵｎｉｆｉｌｔｅｒ ９６ウェルマイクロプレートを冷Ｔｒｉｓ緩衝液で３回洗浄した。次いで反応混合物をフィルタープレートに移し、その直後に急速濾過および冷Ｔｒｉｓ緩衝液を用いる３回の２００μｌの洗浄によってインキュベーションを停止した。フィルタープレートを乾燥した後、ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ ２０を各ウェルに加え、プレートを密閉し、毎分崩壊の測定のために計数した。置換曲線をグラフ化し、得られるＫｉ値をＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍを利用して決定した。
【０１０１】
実施例７６は、３３．９ｎＭのヒト受容体Ｋｉ値および３１．３ｎＭのラット受容体Ｋｉ値を有する。
【０１０２】
このように、本発明の化合物は、ヒトおよびラットのＣＢ２受容体の両方に対してインビトロで結合することが示される。
【０１０３】
モノヨードアセテート（ＭＩＡ）モデル
すべての研究について、ＭＩＡモデルにおいて疼痛を測定するために、ＭＩＡ注入時およそ８週齢の雄性のＬｅｗｉｓラットを使用する。このラットを１ケージあたり２または３匹の群で収容し、一定温度および１２時間明／１２時間暗のサイクルで維持する。動物は、データ収集の間を除いていつでも餌および水にアクセスできる。
【０１０４】
標準的なＭＩＡモデルでは、各ラットの右膝に５０ｕｌの生理食塩水中の０．３ｍｇ ＭＩＡを、および左膝に５０ｕｌの生理食塩水を注射する。疼痛を、ＭＩＡ注射後様々な時間で（通常、ＭＩＡ注射後１０日より前ではない）、インキャパシタンス試験（ｉｎｃａｐａｃｉｔａｎｃｅ ｔｅｓｔｉｎｇ）を使用して測定する。これは、ＭＩＡを注射した膝と生理食塩水を注射した膝との間の後肢の体重支持の差を測定し、そして各測定は、各々１秒にわたって測定した３つの別個の測定の平均である。
【０１０５】
ＣＢ２作動薬を用いた研究のために、ラットを用量群（ｎ＝５または６）に無作為化し、次いで検討中の化合物で１回投薬する。投薬は各ラットに対して１５分間だけずらし、用量後の所定の時間（通常２時間）に、疼痛をインキャパシタンス試験を使用して測定する。研究は、通常は、４つの群、溶媒（０．２５％ ポリソルベート ８０を加えた水中の１％ カルボキシメチルセルロース）、および単一用量での単一化合物であるか３つの用量の同じ化合物のいずれかであり得る３つの化合物群で行う。結果を、生理食塩水を注射した膝とＭＩＡを注射した膝との間の体重支持の差として報告し、溶媒で処置した動物と化合物で処置した動物との間で統計比較を行い、このモデルにおける膝の疼痛に対する化合物の効果を評価する。
【０１０６】
実施例８８を基本的に上記のとおりに試験し、０．３および１ｍｇ／ｋｇの経口用量で、溶媒に対して有意に疼痛を軽減することが見出された。
【０１０７】
このように、本発明の化合物は疼痛、特に関節痛の処置において有用であることが示される。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プリン化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在の経口用薬理学的薬剤に関連する副作用の結果として、疼痛の処置のための代替療法の開発に対する必要があり続けている。
【０００３】
カンナビノイド受容体ＣＢ１およびＣＢ２は、Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）のクラスに属する。ＣＢ１受容体は中枢および末梢の両方で発現される一方で、ＣＢ２受容体は主として末梢で、主に免疫細胞および組織で発現される。
【０００４】
ＣＢ２受容体の薬理学的なおよび治療上の潜在性が、最近概説され（非特許文献１）、これはＣＢ２を疼痛、特に炎症性疼痛および神経因性疼痛の処置のための治療標的として同定している。
【０００５】
特許文献１は、プリン化合物およびカンナビノイド受容体リガンドとしての、特にＣＢ１受容体拮抗薬としてのその使用に関する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２００４／０３７８２３号パンフレット
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２００８） １５３、３１９−３３４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ＣＢ２作動薬、特にＣＢ２選択的な作動薬は、限定的な中枢で媒介される副作用で、疼痛を処置するための標的を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、下式の化合物：
【化１】
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＦ３、シクロプロピル、ＯＣＨ３、ＯＣＦ３およびＣＮから選択され；
Ｒ２は、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、アゼチジン−１−カルボン酸メチルエステルおよびテトラヒドロチオフェン−１，１−ジオキシドから選択され；
Ｒ３はＨであるか、またはＲ４と一緒になって縮合したピロリジン−２−オンを形成し；
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２フルオロアルキル、シクロプロピルおよびＣＯＣＨ３から選択され；
Ｒ５は、Ｈ、ＣＨ３およびＣＦ３から選択され；
ｎは０または１であり；
Ｘ１およびＸ３は、独立に、Ｎ、ＣＨおよびＣＲ６から選択され；
Ｘ２は、ＣＨおよびＣＲ６から選択されるが；
ただしＸ１、Ｘ２およびＸ３のただ１つはＣＨ以外でもよく；
Ｒ６は、Ｆ、Ｃｌ、ＣＦ３、ＯＣＨ３およびＯＣＦ３から選択される）
またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１０】
本発明の化合物は、インビトロでＣＢ２受容体の作動薬であることが見出された。好ましい本発明の化合物は、既存のＣＢ２作動薬よりも大きい効力を示す。より好ましい本発明の化合物はＣＢ２選択的な作動薬である。最も好ましい本発明の化合物は、既存のＣＢ２作動薬よりも大きいＣＢ２選択性を示す。
【００１１】
本発明は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される希釈剤または担体を含む薬学的組成物を提供する。
【００１２】
本発明は、治療における使用のための式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。本発明はまた、疼痛、特に骨関節炎痛の処置における使用のための式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。本発明の別の態様では、疼痛、特に骨関節炎痛の処置のための医薬の製造のための式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用が提供される。
【００１３】
本発明は、疼痛の処置のための方法であって、有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とするヒトまたは動物に投与する工程を包含する方法を提供する。本発明はまた、骨関節炎痛の処置のための方法であって、有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とするヒトまたは動物に投与する工程を包含する方法を提供する。
【００１４】
本発明は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、治療における使用のための薬学的組成物を提供する。本発明は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、疼痛、特に骨関節炎痛における使用のための薬学的組成物を提供する。
【００１５】
本発明の化合物は疼痛、特に炎症性疼痛、より具体的には関節痛、最も特定すれば骨関節炎痛の処置において使用されることが好ましい。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明の化合物の好ましい種は、下式の化合物：
【化２】
またはその薬学的に許容される塩であり、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は本明細書で定義されるとおりである。
【００１７】
本発明の化合物の好ましい種は、下式の化合物：
【化３】
またはその薬学的に許容される塩であり、式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ４は本明細書で定義されるとおりである。
【００１８】
式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物の特定のクラスが好ましい。以下の列挙された選択物は、そのような好ましいクラスを記載する：
１）Ｒ１はＣｌ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＦ３、シクロプロピルまたはＯＣＦ３である；
２）Ｒ１はＣｌ、メチルまたはエチルである；
３）Ｒ１はＣｌである；
４）Ｒ２はテトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロピラニルである；
５）Ｒ２はテトラヒドロフラニルである；
６）Ｒ２はテトラヒドロピラニルである；
７）Ｒ３はＨである；
８）Ｒ４はＣ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２フルオロアルキルまたはシクロプロピルである；
９）Ｒ４はメチル、エチル、２−フルオロエチルまたはシクロプロピルである；
１０）Ｒ４はメチルまたはエチルである；
１１）Ｒ５はＣＨ３である；
１２）Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、独立に、ＣＨおよびＣＲ６から選択され、ここでＲ６は、Ｃｌ、ＣＦ３、ＯＣＨ３またはＯＣＦ３から選択される；
１３）Ｘ１、Ｘ２およびＸ３はＣＨである；
１４）ｎは０である；
１５）Ｒ３はＨであり、Ｒ５はＣＨ３である；
１６）Ｒ１はＣｌ、メチルまたはエチルであり；かつＲ４はメチル、エチル、２−フルオロエチルまたはシクロプロピルである；
１７）Ｒ１はＣｌ、メチルまたはエチルであり；Ｒ２はテトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロピラニルであり；かつＲ４はメチル、エチル、２−フルオロエチルまたはシクロプロピルである；
１８）Ｒ１はＣｌであり；Ｒ２はテトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロピラニルであり；かつＲ４はメチル、エチル、２−フルオロエチルまたはシクロプロピルである；
１９）Ｒ１はＣｌであり；Ｒ２はテトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロピラニルであり；かつＲ４はメチルまたはエチルである；
２０）Ｒ１はＣｌであり；Ｒ２はテトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロピラニルであり；かつＲ４はメチルまたはエチルであり；Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、独立に、ＣＨおよびＣＲ６から選択され、ここでＲ６は、Ｃｌ、ＣＦ３、ＯＣＨ３またはＯＣＦ３から選択される。
【００１９】
本発明の化合物の各々の薬学的に許容される塩は、本出願の範囲内で企図される。
【００２０】
好ましい本発明の化合物としては、８−（２−クロロ−ピリジン−３−イル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン；２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−８−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−９Ｈ−プリン；２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−８−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−９Ｈ−プリン；２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−８−ｏ−トリル−９Ｈ−プリン；８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｓ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン；８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン；８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン；および８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリン；またはその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【００２１】
本明細書全体を通して用いられる場合、基が「本明細書中で定義される（ｄｅｆｉｎｅｄ ｈｅｒｅｉｎ）」または「本明細書中で定義される（ｈｅｒｅｉｎ ｄｅｆｉｎｅｄ）」によって修飾される場合、その基は第１に思い浮かぶ定義および最も広義の定義、ならびにその基の特定の定義の各々およびすべてを包含するということが理解されるべきである。
【００２２】
上記でおよび本発明の説明全体を通して用いられる場合、以下の用語は、特段の記載がない限り、以下の意味を有する。
【００２３】
本明細書で使用する場合、用語Ｃ１〜Ｃ２アルキルはメチルまたはエチルを意味する。
【００２４】
本明細書で使用する場合、用語Ｃ１〜Ｃ２フルオロアルキルは、１以上の水素がフッ素で置換されている、本明細書中で定義されるＣ１〜Ｃ２アルキル基を意味し、トリフルオロメチル、２−フルオロエチル、２，２−ジフルオロエチルおよび２，２，２ トリフルオロエチルが挙げられる。好ましいＣ１〜Ｃ２フルオロアルキル基は２−フルオロエチルである。
【００２５】
本明細書で使用する場合、用語「薬学的に許容される塩」は、生命体に対して実質的に無毒である本発明の化合物の塩を意味する。このような塩およびそれらを調製するための一般的な方法論は当該技術分野で周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌら、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ、（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ、２００２）；およびＪ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ． ６６、２−１９（１９７７）を参照のこと。好ましい薬学的に許容される塩は塩酸塩およびリン酸塩である。
【００２６】
本発明の実施形態は本明細書に提示される例を包含し、そして提示される例は１つのキラル形態または立体配座形態、またはそれらの塩であり得るが、本発明のさらなる実施形態は、記載されたその例のすべての他の立体異性形態および／または立体配座形態、ならびにその薬学的に許容される塩を包含する。
【００２７】
本明細書で使用する場合、用語「ＣＢ２選択的な作動薬」または「ＣＢ２選択性」は、ＣＢ１よりもＣＢ２に対してより大きい効力を有する化合物を意味する。好ましい本発明の化合物は≧１００倍のＣＢ２選択性を示す。より好ましい本発明の化合物は≧５００倍のＣＢ２選択性を示す。最も好ましい本発明の化合物は≧１０００倍のＣＢ２選択性を示す。
【００２８】
本発明の化合物は、好ましくは、様々な経路によって投与される薬学的組成物として処方される。好ましくは、このような組成物は、経口投与のためのものである。このような薬学的組成物およびそれらを調製するためのプロセスは、当該技術分野で周知である。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ａ，Ｇｅｎｎａｒｏら編、第１９版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、１９９５）を参照のこと。
【００２９】
以下のスキーム、手順および実施例は、本発明の実施をよりよく説明するために提供される。これらのスキーム、手順および実施例の工程についての適切な反応条件は当該技術分野で周知であり、溶媒および補助試薬の置換を含む反応条件の適切な改変は当業者の能力の範囲内である。
【００３０】
さらに、当業者は、いくつかの例では、部分が導入される順序はそれほど重要ではないということを理解する。式Ｉの化合物を生成するために必要とされる工程の特定の順序は、化学の当業者によって十分理解されるように、合成しようとする特定の化合物、出発化合物、およびその置換部分の相対的不安定性に依存する。当業者は、すべての置換基がすべての反応条件と適合するというわけではないということを理解する。これらの化合物は、合成の好都合な時点で当該技術分野で周知の方法によって保護または修飾され得る。
【００３１】
適切な保護基としては、本明細書中で以降「Ｇｒｅｅｎｅ」と呼ばれるＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．、１９９１に記載される保護基が挙げられる。Ｇｒｅｅｎｅは、当業者によって使用されるべき適切な保護基の「保護」および「脱保護」についての適切な条件を示す。
【００３２】
本発明の中間体および最終生成物は、所望に応じて、再結晶またはシリカゲルもしくはアルミナなどの固体支持体上でのクロマトグラフィーなどの一般的な技術によってさらに精製され得る。
【００３３】
本発明の化合物名はＡｕｔｏＮｏｍ ２０００を使用して生成される。
【００３４】
本明細書で使用される略語は以下のとおり定義される。
【００３５】
「ブライン」は飽和塩化ナトリウム水溶液を意味し；「ＢＳＡ」はウシ血清アルブミンを意味し、「ＤＤＱ」は２，３ ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４ ベンゾキノンを意味し；「ＤＭＥＡ」はＮ−エチルジメチルアミンを意味し；「ＥＤＴＡ」はエチレンジアミン四酢酸を意味し；「ＥｔＯＨ」はエタノールを意味し；「ＧＣＭＳ」はガスクロマトグラフィー−質量分析を意味し；「ＧＤＰ」はグアノシン二リン酸を意味し；「ＨＥＰＥＳ」は４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸を意味し；「ＩＰＡ」は２−プロパノールを意味し；「ＩＰＡｍ」は２−プロピルアミンを意味し；「Ｌ．Ｒ．」は限定試薬を意味し；「ＭｅＯＨ」はメタノールを意味し；「ＰＴＳＡ」はパラトルエンスルホン酸を意味し；「ＳＣＸ」はシリカベースの強陽イオン交換樹脂カラム、使い捨てカートリッジまたはその等価物を意味し；「ＳＦＣ」は超臨界流体クロマトグラフィーを意味する。
【００３６】
【化４】
出発のピリミジン（ａ）は、イソプロパノールなどの適切な溶媒の中で、高温で、適切に置換されたアミンおよびジイソプロピルエチルアミンまたはトリエチルアミンなどの適切な塩基と反応され、化合物（ｂ）を与える。
【００３７】
【化５】
出発の臭化物（ｃ−ｉ）は、無水ジエチルエーテルなどの適切な溶媒の中で、低温のｎ−ブチルリチウムなどの強塩基およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドと反応され、化合物（ｃ）を与える。
【００３８】
Ｓｕｚｕｋｉカップリング条件を使用して、出発のアルデヒド（ｃ−ｉｉ）は、１，４−ジオキサンまたはトルエンなどの適切な溶媒の中で、高温で、Ｒ１のボロン酸誘導体、（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）パラジウム（ＩＩ）クロリドまたはＰｄ（ＯＡｃ）２などの適切な触媒およびフッ化セシウムなどの適切な塩基と反応され、化合物（ｃ）を与える。
【００３９】
【化６】
出発のピリミジン（ｂ）は、１，４−ジオキサンまたはトルエンなどの適切な溶媒の中で、高温で、アルデヒド（ｃ）（ここでＸ１〜Ｘ４は、独立に、ＣＨおよびＣＲ６から選択される）およびｐ−トルエンスルホン酸またはシリカ上の１５％塩化第二鉄などの適切な酸と反応される。反応混合物を濾過し、濃縮し、その後、ジクロロメタンなどの適切な溶媒の中で、低温でＤＤＱと反応させ、プリン（ｄ）が得られる。
【００４０】
出発のピリミジン（ｂ）は、トルエンなどの適切な溶媒の中で、高温でアルデヒド（ｃ）（ここでＸ１〜Ｘ４の１つはＮである）およびｐ−トルエンスルホン酸などの適切な酸と反応される。反応混合物を濾過し、濃縮し、その後、高温で塩化チオニルと反応させ、プリン（ｄ）が得られる。
【００４１】
一般的手順２−１：
１，４−ジオキサン中のピリミジン（ｂ）（１．０当量、Ｌ．Ｒ．）、アルデヒド（ｃ）（２．０当量）、およびシリカ上の１５％塩化第二鉄（２００ｗｔ．％、Ｌ．Ｒ．に基づく）の混合物を１００℃に１６時間加熱する。冷却し、シリカを珪藻土に通して濾過して分け、減圧下で濾液を濃縮し、残渣を得る。残渣を乾燥ジクロロメタンに溶解し、０℃でＤＤＱ（１．０当量）を加える。撹拌しながら室温まで暖める。反応が完結すると、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１５％水酸化ナトリウム水溶液、水、およびブラインで洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得る。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、プリン（ｄ）を得る。
【００４２】
一般的手順２−２：
トルエン中のピリミジン（ｂ）（１．０当量、Ｌ．Ｒ．）、アルデヒド（ｃ）（２当量）、ｐ−トルエンスルホン酸（１０ｗｔ．％、Ｌ．Ｒ．に基づく）、およびモレキュラーシーブ（２００ｗｔ．％、Ｌ．Ｒ．に基づく）の溶液を還流状態で１６時間加熱する。冷却し、モレキュラーシーブを珪藻土に通して濾過して分け、濾液を減圧下で濃縮し、残渣を得る。残渣を乾燥ジクロロメタンに溶解し、ＤＤＱ（１．０当量）を０℃で加える。室温まで暖め、撹拌する。反応が完結すると、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１Ｎ水酸化ナトリウム溶液、水、およびブラインで洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得る。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、プリン（ｄ）を得る。
【００４３】
一般的手順２−３：
反応容器に、ピリミジン（ｂ）（１．０当量、Ｌ．Ｒ．）、アルデヒド（ｃ）（１．１当量）、トルエン、およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．０５当量）を入れる。窒素下で、１００℃で１時間撹拌する。室温まで冷却し、珪藻土上で濾過し、減圧下で濃縮する。次に、粗製油状物（イミン）に、室温で、窒素下で塩化チオニル（無溶媒／溶媒）をゆっくり加える。還流状態で３０分間撹拌する。室温まで冷却し、減圧下で濃縮する。トルエンを加えて減圧下で２回除去する。ジクロロメタンに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を用いてゆっくりと塩基性にする。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、プリン（ｄ）を得る。
【００４４】
【化７】
出発のプリン（ｄ）は、エタノールなどの適切な溶媒の中で、高温で、適切に置換されたピペリジンおよびトリエチルアミンなどの適切な塩基と反応され、化合物（ｅ）を与える。
【００４５】
【化８】
出発のプリン（ｄ−ｉ）は、エタノールなどの適切な溶媒の中で、高温で、適切に置換されたピペリジンおよびトリエチルアミンなどの適切な塩基と反応され、化合物（ｅ−ｉ）を与える。
【００４６】
プリン（ｅ−ｉ）は、シアン化亜鉛およびＰｄ（ＰＰｈ３）４などの適切な触媒およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの適切な溶媒と高温で反応され、化合物（ｅ−ｉｉ）を与える。
【００４７】
【化９】
出発のピリミジン（ｂ）は、メトキシベンゼンまたはジメチルスルホキシドなどの適切な溶媒の中で、高温でアルデヒド（ｃ）、適切に置換されたピペリジンおよびニトロベンゼンまたは酢酸などの適切な酸化剤と反応され、化合物（ｅ）を与える。
【００４８】
【化１０】
【００４９】
ジメチルアセトアミドなどの適切な溶媒の中の出発のピリミジン（ｂ）は、低温で適切に置換された酸塩化物（ｆ）と反応され、化合物（ｇ）を与える。
【００５０】
高温および高圧のイソプロパノールなどの適切な溶媒の中の、適切に置換されたピペリジンおよびジイソプロピルエチルアミンなどの適切な塩基の存在下でのピリミジン（ｇ）は、化合物（ｅ）を与える。
【００５１】
調製例１：
６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−ピリミジン−４，５−ジアミン
【化１１】
２−プロパノール（８０ｍＬ）中の４，６−ジクロロ−２−メチル−ピリミジン−５−イルアミン（０．００８ｍｏｌ、１．５ｇ、１．０当量）、４−アミノテトラヒドロピラン（０．０１２ｍｏｌ、１．２７ｇ、１．５当量）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．００９２ｍｏｌ、１．１ｇ、１．１当量）の溶液を、密封チューブの中で、１５０℃で１６時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、２−プロパノールを減圧下で除去し、残渣を得た。この残渣をジクロロメタンに溶解し、水およびブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得た。残渣をジクロロメタン：メタノール ９６：４で溶出するシリカゲルカラムで精製し、標記の化合物を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２４３．４１（Ｍ＋１）。
【００５２】
表１中の調製例２〜１２は、スキームＡに従って、適切なアミンを使用して、基本的に調製例１に記載されるようにして、調製し得る。
【００５３】
【表１−１】
【表１−２】
【表１−３】
【００５４】
調製例１３：
２−シクロプロピル−ベンズアルデヒド
【化１２】
６０ｍＬの反応バイアルに、２−ブロモ−ベンズアルデヒド（１０．８１０ｍｍｏｌｅｓ、１．２６４ｍＬ）、シクロプロピルボロン酸（１４．０５３ｍｍｏｌｅｓ、１．２０７ｇ）、リン酸三カリウムＮ−水和物（３７．８３４ｍｍｏｌｅｓ、８．０３１ｇ）、トリシクロヘキシルホスフィン（１．０８１ｍｍｏｌｅｓ、３０３．１３９ｍｇ）、トルエン（２８３．６５４ｍｍｏｌｅｓ、３０．０００ｍＬ）、および水（８３．２６３ｍｍｏｌｅｓ、１．５００ｍＬ）を入れた。次いでこの混合物を入念に脱気した。次に、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（５４０．４８２μｍｏｌｅｓ、１２１．３４３ｍｇ）を加え、この混合物を窒素下に置き、そして１００℃に加熱した。２時間後、室温まで冷却し、酢酸エチル（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。ヘキサン：ジクロロメタン ２０〜５０％で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、標記の化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００．３１ＭＨｚ，ｃｄｃｌ３）：１０．５７（ｓ，１Ｈ），７．７８（ｄｄ，Ｊ＝１．３，７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｔｄ，Ｊ＝７．５，１．３Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．０９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），２．６３−２．５６（ｍ，１Ｈ），１．０７−１．０２（ｍ，２Ｈ），０．７７−０．７３（ｍ，２Ｈ）。
【００５５】
調製例１４：
２−シクロプロピル−ピリジン−３−カルバルデヒド
【化１３】
４０ｍＬの反応バイアルに、３ｍＬの１，４−ジオキサンおよび撹拌子を入れた。窒素を用いて５分間脱気した。次に、このバイアルに、２−ブロモニコチンアルデヒド（６４５．１３４μｍｏｌｅｓ、１２０．０００ｍｇ）、シクロプロピルボロン酸（１．２９０ｍｍｏｌｅｓ、１１０．８３１ｍｇ）、およびフッ化セシウム（１．９３５ｍｍｏｌｅｓ、２９３．９９５ｍｇ）を入れた。次いでこのバイアルを、窒素を用いて再び脱気した。次に、（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（３２．２５７μｍｏｌｅｓ、２６．３４２ｍｇ）を加え、反応混合物を窒素下で１００℃に加熱した。反応が完結すると、混合物を室温まで冷却し、酢酸エチルを用いて珪藻土のパッドの上から濾過して、標記の化合物を得た。ＧＣＭＳ（ｍ／ｚ）：１４６（Ｍ）。
【００５６】
表２中の調製例１５〜４７は、スキームＣに従って、適切な置換ピリミジンを使用して、および表２に概略を記載したとおりの適切な一般的手順２−１から２−３を使用して調製し得る。
【００５７】
【表２−１】
【表２−２】
【表２−３】
【表２−４】
【表２−５】
【表２−６】
【００５８】
調製例４８：
６−クロロ−８−（２−クロロ−ピリジン−３−イル）−２−メチル−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン
【化１４】
反応容器に、Ｒ−６−クロロ−２−メチル−Ｎ４−（テトラヒドロ−フラン−３−イル）−ピリミジン−４，５−ジアミン（２．１８６ｍｍｏｌｅｓ、５００．０００ｍｇ）、２−ブロモニコチンアルデヒド（３．２８０ｍｍｏｌｅｓ、６１０．０４６ｍｇ）、トルエン（９４．５５１ｍｍｏｌｅｓ、１０．０００ｍＬ）、およびＰＴＳＡ一水和物（１０９．３２３μｍｏｌｅｓ、２０．７９５ｍｇ）を入れた。窒素下で、１００℃で１時間加熱した。室温まで冷却し、濾過し、減圧下で濃縮した。次に、この粗製油状物（イミン）に、室温で、窒素下で塩化チオニル（６８．６３０ｍｍｏｌｅｓ、５．０００ｍＬ）をゆっくり加えた。８０℃に３０分間加熱した。減圧下で濃縮した。トルエン（約１０ｍＬ）を加え、減圧下で２回除去した。残渣をジクロロメタンに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を用いてゆっくりと塩基性にした。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。ヘキサン：アセトンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、標記の化合物を得た。（６４８ｍｇ）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３５０（Ｍ＋１）。
【００５９】
調製例４９：
１−（２−フルオロ−エチル）−ピペラジン塩酸塩
【化１５】
工程１：
反応容器に、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペラジン（８．５９０ｍｍｏｌｅｓ、１．６００ｇ）、炭酸カリウム（２５．７７１ｍｍｏｌｅｓ、３．５６２ｇ）、ヨウ化ナトリウム（触媒）（６６．７１４μｍｏｌｅｓ、１０．０００ｍｇ）、１，４−ジオキサン（２３４．２６２ｍｍｏｌｅｓ、２０．０００ｍＬ）、１−ブロモ−２−フルオロエタン（９．４４９ｍｍｏｌｅｓ、７０４．０２９μＬ）、および撹拌子を入れた。撹拌しながら還流状態で一晩加熱した。反応が完結すると、室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。酢酸エチルおよび水を用いて分配した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、純粋な４−（２−フルオロ−エチル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得た。ＧＣＭＳ（ｍ／ｚ）：２３２（Ｍ）。
【００６０】
工程２：
１，４−ジオキサン中の４Ｎ ＨＣｌ（８６．０９６ｍｍｏｌｅｓ、２１．５２４ｍＬ）を、乾燥ジクロロメタン（６０ｍＬ）中の４−（２−フルオロ−エチル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８．６１０ｍｍｏｌｅｓ、２．０００ｇ）の撹拌溶液に、窒素下で、室温で加えた。窒素下で一晩撹拌した。減圧下で濃縮し、標記の化合物（８．６７９ｍｍｏｌｅｓ、１．７８０ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１３３（Ｍ＋１）。
【実施例】
【００６１】
実施例１：
８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン塩酸塩
【化１６】
エタノール（５．０ｍＬ）中の６−クロロ−８−（２−クロロフェニル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン（０．０００５ｍｏｌ、０．２ｇ）、Ｎ−エチルピペラジン（０．０００６ｍｏｌ、０．０６９ｇ、１．１当量）、およびトリエチルアミン（０．０００６ｍｏｌ、０．０６１ｇ、１．１当量）の溶液を、還流状態で２０時間加熱した。あるいは、マイクロ波照射を用いて反応液を加熱した。反応が完結すると、減圧下で反応混合物を濃縮した。残渣を乾燥ジクロロメタンに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、およびブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得た。ヘキサン：アセトン ９０：１０で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、遊離塩基を得た。ＨＣｌ（エタノール中の２Ｍ溶液）（１．０当量）を、ジエチルエーテル（５ｍＬ）中のこの遊離塩基（０．２３ｇ、０．５００ｍｍｏｌ）に０℃で加え、室温で２時間撹拌した。濾過し、沈殿物をジエチルエーテルで洗浄した。沈殿物を真空下で乾燥し、標記の化合物（０．２ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４４１．２８（Ｍ＋１）。あるいは、遊離塩基をアセトン、１：１ アセトニトリル：水、または別の適切な有機溶媒に溶解し、次いで撹拌しながら水性またはエーテル性のＨＣｌの溶液を加えることによって、ＨＣｌ塩を調製した。次いで凍結乾燥し、塩酸塩を得た。
【００６２】
表３中の実施例２〜７２は、スキームＤに従って、適切に置換されたプリンおよび適切に置換されたピペラジンを使用して、基本的に実施例１に記載されるようにして、調製し得る。
【００６３】
【表３−１】
【表３−２】
【表３−３】
【表３−４】
【表３−５】
【表３−６】
【表３−７】
【表３−８】
【表３−９】
【表３−１０】
【表３−１１】
【表３−１２】
【表３−１３】
【表３−１４】
【表３−１５】
【表３−１６】
【表３−１７】
【表３−１８】
【表３−１９】
【表３−２０】
【００６４】
上付き文字ａ〜ｒはキラル分離条件を表す：異性体１は分析用キラルカラムから最初に溶出するものであり、異性体２はそのキラルカラムから２番目に溶出するものである。
ａ．ＲｅｇｉｓＰａｃｋ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＥｔＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
ｂ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−Ｈ、溶離液：１００％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＤＭＥＡ）
ｃ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ、溶離液 ４０：６０ ＩＰＡ：ヘプタン（０．２％ ＤＭＥＡ）
ｄ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：２０％ ＩＰＡ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
ｅ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：７％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
ｆ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−Ｈ、溶離液：１００％ ＥｔＯＨ
ｇ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ、溶離液：３０：７０ ＩＰＡ：ヘプタン（０．２％ ＤＭＥＡ）
ｈ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＥｔＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
Ｉ．Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
Ｊ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＥｔＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
ｋ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ、溶離液：１５：８５ ＩＰＡ：ヘプタン（０．２ ＤＭＥＡ）
ｌ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：２０％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
ｍ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＥｔＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ） ＣＯ２
ｎ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＥｔＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ） ＣＯ２
ｏ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−Ｈ ＳＦＣ、溶離液：１０％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＩＰＡｍ）／ＣＯ２
ｐ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ、溶離液：５：９５ ＥｔＯＨ：ヘプタン（０．２％ ＤＭＥＡ）
ｑ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−Ｈ、溶離液：１００％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＤＭＥＡ）
ｒ．Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−Ｈ、溶離液：１００％ ＭｅＯＨ（０．２％ ＤＭＥＡ）
【００６５】
実施例７７：
８−（４−メトキシ−２−メチル−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン
【化１７】
６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−ピリミジン−４，５−ジアミン（０．１００ｇ、０．４０２ｍｍｏｌ）、４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド（０．０９１ｇ、０．６０３ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルピペラジン（０．０４４ｇ、０．４４３ｍｍｏｌ）およびニトロベンゼン（０．０５０ｇ、０．４０２ｍｍｏｌ）をメトキシベンゼン（１．２ｍＬ）に溶解し、１４０℃に２日間加熱した。次に、室温で３日間撹拌した。次に、減圧下で濃縮し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液とジクロロメタンとの間で分配し、ジクロロメタンで洗浄した。水相をｐＨ １２まで塩基性にし、ジクロロメタンで抽出した。有機物を５ｇのＳＣＸ−２カラムにロードし、メタノールで洗浄し、次いでメタノール中の２Ｎ アンモニアで生成物を溶出した。分取用高圧液体クロマトグラフィーによって精製し、水／アセトニトリルから凍結乾燥し、標記の化合物を遊離塩基として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２３（Ｍ＋１）。
【００６６】
実施例７８
２−［２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン−８−イル］−ベンゾニトリル塩酸塩
【化１８】
工程１：
エタノール（１０．０ｍＬ）中の８−（２−ブロモフェニル）−６−クロロ−２−メチル−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン（０．００２３ｍｏｌ、１．０ｇ）、１−メチルピペラジン（０．００２５ｍｏｌ、０．２５ｇ、１．１当量）およびトリエチルアミン（０．００２５ｍｏｌ、０．２５ｇ、１．１当量）の溶液を９０℃で１６時間加熱した。減圧下で反応混合物を濃縮した。残渣を乾燥ジクロロメタンに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、およびブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、残渣を得た。この残渣を、ジクロロメタン：メタノール ９７：３で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、８−（２−ブロモ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン（０．７１ｇ）を得た。そのまま次の工程のために使用した。
【００６７】
工程２：
マイクロ波反応容器に、８−（２−ブロモ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン（０．００１５ｍｏｌ、０．７ｇ）、シアン化亜鉛（０．００２２ｍｏｌ、０．２５６ｇ、１．５当量）、および乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０ｍＬ）を入れた。窒素を用いて３回脱気した。Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．０００１ｍｏｌ、０．１７ｇ、０．１当量）を加え、再び窒素を用いて３回脱気した。この反応容器を密閉し、マイクロ波の中で１５０℃で１時間照射した。反応混合物を室温まで冷却し、反応混合物を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得た。残渣を、ジクロロメタン：メタノール ９９：１で溶出するシリカゲルカラムで精製し、遊離塩基を得た。ＨＣｌ（ジエチルエーテル中の２Ｍ 溶液）（０．０２６ｇ、０．０００７ｍｏｌ、１．０当量）を、ジエチルエーテル（５ｍＬ）中の２−（２−メチル−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン−８−イル）ベンゾニトリル（０．３ｇ、０．０００７ｍｏｌ）の混合物に０℃で加え、室温で２時間撹拌した。沈殿物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、真空中で乾燥し、標記の化合物を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１８．２９（Ｍ＋１）。
【００６８】
表４中の実施例７９〜８０は、スキームＥに従って、適切に置換されたプリンを使用して、基本的に実施例７８と同じ手順により２工程にわたって調製し得る。
【００６９】
【表４】
【００７０】
実施例８１：
２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−８−ｏ−トリル−９Ｈ−プリン塩酸塩
【化１９】
【００７１】
ジメチルスルホキシド（５ｍＬ）中の６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−ピリミジン−４，５−ジアミン（１ｇ、４．１２ｍｍｏｌｅｓ）の溶液に、ｏ−トルアルデヒド（４．１２ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルピペラジン（４．１２ｍｍｏｌ）を加え、次いで酢酸（９．８９ｍｍｏｌｅｓ、５６６．６３５μＬ）を加えた。この反応液を、雰囲気に開放して８時間、９０℃に加熱した。物質をあらかじめ条件を整えた（ｐｒｅ−ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ）ＳＣＸカラム上に入れ、メタノール中の７Ｎ アンモニアで溶出し、溶媒をエバポレーションし、粗製物を逆相クロマトグラフィーで精製した。この物質に１当量の１，４−ジオキサン中のＨＣｌ ４Ｍを加えた。過剰の溶媒をエバポレーションし、標記の化合物を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４０７（Ｍ＋１）。
【００７２】
表５中の実施例８２〜８３は、スキームＦに従って、適切なピリミジン、アルデヒド、およびピペラジンを使用して、基本的に実施例８１に記載されるようにして調製し得る。
【００７３】
【表５】
【００７４】
実施例８４：
３−［８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−プリン−９−イル］−アゼチジン−１−カルボン酸メチルエステル
【化２０】
工程１：
エタノール（２５．０ｍＬ）中の３−（６−クロロ−８−（２−クロロフェニル）−２−メチル−９Ｈ−プリン−９−イル）アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０１２ｍｏｌ、５．５ｇ）、Ｎ−エチルピペラジン（０．０１３ｍｏｌ、１．５９ｇ、１．１当量）、およびトリエチルアミン（０．０１３ｍｏｌ、１．４１ｇ、１．１当量）の溶液を９０℃で１６時間加熱した。減圧下で反応混合物を濃縮した。残渣を乾燥ジクロロメタンに溶解した。飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、およびブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得た。残渣を、ジクロロメタン：メタノール ９８：２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、３−（８−（２−クロロフェニル）−６−（４−エチルピペラジン−１−イル）−２−メチル−９Ｈ−プリン−９−イル）アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．０ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５１２．３１（Ｍ＋１）。
【００７５】
工程２：
トリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）を、ジクロロメタン（１５ｍＬ）中の３−（８−（２−クロロフェニル）−６−（４−エチルピペラジン−１−イル）−２−メチル−９Ｈ−プリン−９−イル）アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．００５ｍｏｌ、３．０ｇ）の溶液に０℃で加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液でクエンチし、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、９−（アゼチジン−３−イル）−８−（２−クロロフェニル）−６−（４−エチルピペラジン−１−イル）−２−メチル−９Ｈ−プリン（２．４ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１２．２２（Ｍ＋１）。
【００７６】
工程３：
クロロギ酸メチル（０．００２４ｍｏｌ、０．２２ｇ、２．５当量）を、乾燥ジクロロメタン（２ｍＬ）中の９−（アゼチジン−３−イル）−８−（２−クロロフェニル）−６−（４−エチルピペラジン−１−イル）−２−メチル−９Ｈ−プリン（０．０００９ｍｏｌ、０．４ｇ）およびピリジン（２ｍＬ）の溶液に０℃で加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液でクエンチし、次いでジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得た。この残渣を、ジクロロメタン：メタノール ９８：２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、標記の化合物を遊離塩基として得た（０．１５５ｇ）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４７０．６３（Ｍ＋１）。
【００７７】
実施例８５：
８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリン塩酸塩
【化２１】
工程１：
マイクロ波反応バイアルに、４，６−ジクロロ−ピリミジン−５−イルアミン（１２．２０ｍｍｏｌｅｓ、２．００ｇ）、イソプロピルアルコール（５ｍＬ）、Ｃ−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−メチルアミン（１４．６３ｍｍｏｌｅｓ、１．６９ｇ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１５．８５ｍｍｏｌｅｓ、２．７６ｍＬ）を入れた。撹拌しながら、マイクロ波の中で、高吸収度モードで１４０℃で２時間照射した。溶媒をエバポレーションし、残渣をジクロロメタンを用いて粉砕し、６−クロロ−Ｎ＊４＊−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−ピリミジン−４，５−ジアミンを得た。
【００７８】
工程２：
一般的手順２−１に従って、６−クロロ−Ｎ＊４＊−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−ピリミジン−４，５−ジアミンを使用して、６−クロロ−８−（２−クロロ−フェニル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリンを調製した。
【００７９】
工程３：
実施例１と同じ手順を使用して、６−クロロ−８−（２−クロロ−フェニル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリンをＮ−メチルピペラジンで置換して、塩酸塩を調製し、標記の化合物を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２７（Ｍ＋１）。
【００８０】
実施例８６：
８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−２−トリフルオロメチル−９Ｈ−プリン塩酸塩
【化２２】
工程１：
マイクロ波反応容器に、４，６−ジクロロ−２−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イルアミン（４．３１ｍｍｏｌｅｓ、１．００ｇ）、イソプロピルアルコール（３ｍＬ）、（Ｒ）−（テトラヒドロ−フラン−３−イル）アミン（５．１７ｍｍｏｌｅｓ、６３９．２４ｍｇ）、ジイソプロピルエチルアミン（１２．９３ｍｍｏｌｅｓ、２．２６ｍＬ）を入れた。撹拌しながら、高吸収度モードを使用して１４０℃で２時間照射した。減圧下で濃縮し、ジクロロメタンに溶解し、水（２×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、エバポレーションし、褐色の油状物を得た。ヘキサン：酢酸エチル ０〜１００％で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、６−クロロ−Ｎ＊４＊−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４，５−ジアミンを得た。
【００８１】
工程２：
無水１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）中の６−クロロ−Ｎ＊４＊−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４，５−ジアミン（２．６７ｍｍｏｌｅｓ、０．７５６ｇ）および２−クロロ−ベンズアルデヒド（２．９４ｍｍｏｌｅｓ、３３１．３９μＬ）をシリカ上の１５％ 塩化第二鉄（８．５６ｍｍｏｌｅｓ、１．３９ｇ）で処理し、１００℃で一晩加熱した。珪藻土に通して濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液をエパポレーションし、６−クロロ−８−（２−クロロ−フェニル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−２−トリフルオロメチル−９Ｈ−プリンを得た。
【００８２】
工程３：
実施例１と同じ手順を使用して、６−クロロ−８−（２−クロロ−フェニル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−２−トリフルオロメチル−９Ｈ−プリンをＮ−メチルピペラジンで置換して、塩酸塩を調製し、標記の化合物を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４６７（Ｍ＋１）。
【００８３】
実施例８７：
８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリン塩酸塩
【化２３】
工程１：
還流冷却器、窒素導入口および撹拌棒を取り付けた１Ｌの丸底フラスコ（ｒｂｆ）の中で、５−アミノ−４，６−ジクロロ−２−メチルピリミジン（２５ｇ、１４０ｍｍｏｌ）、４−アミノメチルテトラヒドロピラン塩酸塩（３６．２ｇ、２３９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（５７ｍＬ、４０７．３ｍｍｏｌ）をイソプロピルアルコール（２８０ｍＬ）に溶解し、加熱して還流させた。４２時間後、室温まで冷却した。溶媒を減圧下で除去し、得られた残渣をジクロロメタン（３００ｍＬ）に溶解した。有機層を水（２×１５０ｍＬ）およびブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、エバポレーションし、６−クロロ−２−メチル−Ｎ−４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−ピリミジン−４，５−ジアミン（３８ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２５７／２５９（Ｍ＋１）。
【００８４】
工程２：
温度計、冷却器およびフリット付きの（ｆｒｉｔｔｅｄ）空気導入口を取り付けた３つ口の１Ｌの丸底フラスコ（ｒｂｆ）の中で、室温で６−クロロ−２−メチル−Ｎ−４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−ピリミジン−４，５−ジアミン（３７．６ｇ、１４６．４ｍｍｏｌ）および銅（ＩＩ）トリフルオロメタンスルホネート（２６．５ｇ、７３．２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（５８５ｍＬ）に溶解した。次いでトリエチルアミン（４１ｍＬ、２９３ｍｍｏｌ）、Ｎ−エチルピペラジン（２０．６ｍＬ、１６１．１ｍｍｏｌ）および２−クロロベンズアルデヒド（２４．７ｍＬ、２１９．７ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を、撹拌および空気散布（ａｉｒ ｓｐａｒｇｉｎｇ）をしながら１００℃に加熱した。
【００８５】
５．５時間後、加熱を止め、室温まで冷却した。酢酸エチル（１Ｌ）で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１×２００ｍＬ）および水酸化アンモニウム（１×２００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、エバポレーションし、褐色の油状物を得て、シリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中の４％ メタノール）によって精製し、８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリン（１７．６ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４５５／４５７（Ｍ＋１）。
【００８６】
工程３：
８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリン（５．２３ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）をジエチルエーテル（４５ｍＬ）中で撹拌し、室温で塩化水素（１，４−ジオキサン中の４Ｎ、２．９ｍＬ、１１．５ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、得られた固体を濾過によって集め、ジエチルエーテルで洗浄した。真空乾燥し、標記の化合物を得た（５．４ｇ）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４５５／４５７（Ｍ＋１−ＨＣｌ）。
【００８７】
実施例８８：
８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン塩酸塩
【化２４】
工程１：
還流冷却器、撹拌棒および窒素導入口を取り付けた１Ｌの丸底フラスコ（ｒｂｆ）の中で、５−アミノ−４，６−ジクロロ−２−メチルピリミジン（２０ｇ、１１２．３ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−（テトラヒドロ−フラン−３−イル）アミン塩酸塩（２０．８ｇ、１６８．５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４５ｍＬ、３２５．８１ｍｍｏｌ）およびイソプロピルアルコール（２２５ｍＬ）を合わせ、磁気撹拌しながら加熱して還流させた。４日後、加熱を止め、室温まで冷却した。溶媒を減圧下で除去し、得られた残渣をジクロロメタン（３００ｍＬ）に溶解し、水（２×１５０ｍＬ）およびブライン（１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、エバポレーションし、６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−ピリミジン−４，５−ジアミン（２３．１ｇ）を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２２９／２３１（Ｍ＋１）。
【００８８】
工程２：
６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−ピリミジン−４，５−ジアミン（２３．１ｇ、１０１ｍｍｏｌ）、２−クロロベンズアルデヒド（１７．０ｍＬ．１５１．５ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルピペリジン（１２．３ｍＬ、１１１．１２ｍｍｏｌ）およびニトロベンゼン（１０．３ｍＬ、１０１．０１ｍｍｏｌ）をメトキシベンゼン（３００ｍＬ）に溶解し、空気に開放して１３０℃（内部温度）に加熱した。３６時間後、混合物を室温まで冷却し、ＳＣＸ−２樹脂（８０ｇ）のパッドの上に注ぎ、メタノール（５００ｍＬ）、次いでメタノール中の３．５Ｎ アンモニア（５００ｍＬ）で溶出した。メタノール中のアンモニアの画分から溶媒を除去し、褐色の油状物を得て、ジクロロメタン：メタノール ３〜２０％で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリンを暗色の油状物（１０．１ｇ）として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１３／４１５（Ｍ＋１）。
【００８９】
工程３：
８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン（８．６２ｇ、２０．９ｍｍｏｌ）をジエチルエーテル（１０５ｍＬ）に溶解し、塩化水素（ジオキサン中の４Ｎ、５．２ｍＬ、２０．８８ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を１５時間撹拌し、生成した固体を濾過によって集めた。これによって、自由流動性の黄色固体を得た。従って、この物質の大部分を丸底フラスコに移し、真空下に置き、標記の化合物を得た（７．３３ｇ）。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１３／４１５（Ｍ＋１−ＨＣｌ）、［α］Ｄ２０＝＋２７°（ジクロロメタン中でｃ＝０．２５６）。
【００９０】
実施例８９：
８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリンリン酸塩
【化２５】
工程１：
３００ｍＬのガラス製の圧力反応器の中で、５−アミノ−４，６−ジクロロ−２−メチルピリミジン（２０．０ｇ、９７％、１０９．０ｍｍｏｌ）、４−アミノテトラヒドロピラン塩酸塩（２１．０ｇ、１５２．６ｍｍｏｌ）、ジ−イソプロピルエチルアミン（５７．０ｍＬ、３２６．９ｍｍｏｌ）およびイソプロピルアルコール（１００ｍＬ）を合わせた。圧力容器をしっかりと密閉し、撹拌を開始し、熱制御のための設定点を１００℃に調整した。この混合物を１００℃で２４時間撹拌した。反応器内容物を６０℃まで冷却し、容器から圧力を抜き、４−アミノテトラヒドロピラン塩酸塩（２．２５ｇ、１６．３ｍｍｏｌ）を加えた。容器を再び密閉し、内容物を１００℃の内部温度まで加熱し、さらに２４時間撹拌した。反応混合物を周囲温度まで冷却し、反応器から圧力を抜き、内容物を回収フラスコに移した。この混合物を、減圧下でそのもとの体積のおよそ１／３まで濃縮した。水（２００ｍＬ）および酢酸エチル（２００ｍＬ）を加え、得られた混合物を分液漏斗に移した。層を分離し、水層を酢酸エチル（１００ｍＬ）で再抽出し、すべての有機物を合わせた。水（２×１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、次いで有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で濃縮し、６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−ピリミジン−４，５−ジアミンをオフホワイトの固体（２５．０ｇ）として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２４３／２４５（Ｍ＋１）。
【００９１】
工程２：
５００ｍＬの３つ口フラスコの中で、窒素雰囲気下で６−クロロ−２−メチル−Ｎ＊４＊−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−ピリミジン−４，５−ジアミン（２４．４ｇ、１００．４ｍｍｏｌ）をジメチルアセトアミド（１７５ｍＬ）に溶解した。得られた溶液を０〜５℃に冷却した。滴下漏斗を介して、内部温度を１０℃未満に維持して、塩化２−クロロベンゾイル（１５．５ｍＬ、１２２．４ｍｍｏｌ）を２０分間にわたって加えた。滴下漏斗をジメチルアセトアミド（１．０ｍＬ）でリンスした。得られた混合物を一晩撹拌し、その間に、自然と周囲温度まで暖まった。氷冷した脱イオン水（２５０ｍＬ）を第２の５００ｍＬのフラスコに入れ、次いで反応混合物を２０分間にわたってこの冷水に移した。得られたスラリーを２時間撹拌した。固体を濾過し、冷水（１２０ｍＬ）で洗浄し、５０℃で一晩真空乾燥し、２−クロロ−Ｎ−（４−クロロ−２−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル）ベンズアミドをオフホワイトの固体（３３．１ｇ）として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３８１／３８２（Ｍ＋１）。
【００９２】
工程３：
２−クロロ−Ｎ−（４−クロロ−２−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル）ベンズアミド（４５．０ｇ、１１８．０ｍｍｏｌ）、１−メチルピペラジン（２３．０ｍＬ、２０７．０ｍｍｏｌ）、ジ−イソプロピルエチルアミン（２３．０ｍＬ、１３１．９ｍｍｏｌ）およびイソプロピルアルコール（２２５ｍＬ）を１ＬのＰａｒｒ反応器の中で合わせた。反応器を密閉し、撹拌を開始し、熱制御のための設定点を１６０℃に調整した。内部温度が１６０℃に到達した後、混合物を２４時間撹拌した。反応器内容物を６０℃まで冷却し、容器から圧力を抜き、内容物を、オーバーヘッド撹拌装置を具えた２Ｌのフラスコに移した。反応器フラスコをイソプロピルアルコール（２５．０ｍＬ）で十分にリンスし、リンス液を主溶液と合わせた。冷たい脱イオン水（７８０ｍＬ）をこの混合物に３０分間にわたって加え、得られた沈殿物を３０分間撹拌した。この混合物を濾過し、固体を脱イオン水（２×２７０ｍＬ）で洗浄し、漏斗上で吸引乾燥した（ｐｕｌｌ ｄｒｙ）。生成物を４５℃で一晩さらに乾燥して、８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロピラン−４−イル）−９Ｈ−プリンをオフホワイトの固体（４４．８ｇ）として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２７／４２９（Ｍ＋１）。
【００９３】
工程４：
８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン（３．０ｇ、７．１ｍｍｏｌ）および無水エタノール（２４ｍＬ）を、還流のための装備を具えた５０ｍＬの３つ口フラスコの中で合わせた。得られた懸濁液を７０℃に加熱し、無水エタノール（６．０ｍＬ）中の８５％ リン酸（０．４９ｍＬ、７．２ｍｍｏｌ）を２５分間にわたって加えた。この混合物を７０℃で４５分間撹拌し、ゆっくりと周囲温度まで冷却し、さらに２時間撹拌した。混合物を濾過し、生成物のケーキを無水エタノール（６ｍＬ）でリンスし、吸引乾燥した。生成物を５５℃で一晩さらに乾燥して、標記の化合物を白色の結晶性固体（３．６ｇ）として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２７／４２９（Ｍ＋１）。
【００９４】
ＣＢ１およびＣＢ２のインビトロ機能アッセイ
例示した化合物は、ＳＰＡベースのＧＴＰ−γ−３５Ｓ結合アッセイを使用して、作動薬モードで試験される。すべてのアッセイ成分は、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、（室温でｐＨ ７．４）から構成されるアッセイ緩衝液の中で調製される。半対数の化合物希釈をＢＳＡ（最終０．１２５％）を含有するアッセイ緩衝液の中で行った。ＧＴＰ−γ３５−Ｓ結合は、ＣＢ１アッセイについての全膜（ｗｈｏｌｅ ｍｅｍｂｒａｎｅ）捕捉技術およびＣＢ２アッセイについてのこれまでに記載された抗体捕捉技術（ＤｅＬａｐｐら Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ ２８９：９４６−９５５、１９９９）の改変を使用して、９６ウェルのフォーマットで測定される。すべてのインキュベーションを室温で行う。
【００９５】
ＣＢ１：
ｈＣＢ１−ＣＨＯ膜、ＧＤＰ（最終１ｕＭ）、およびサポニン（最終１０ｕｇ／ｍＬ）をアッセイ緩衝液に加え、ホモジナイズした。希釈した化合物、ＧＴＰ−γ−３５Ｓ（最終５００ｎＭ）および膜をアッセイプレートに加え、３０分間インキュベーションした。次いで１ｍｇ／ウェルのＷｈｅａｔｇｅｒｍ Ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ ＳＰＡビーズを加え、プレートを密閉し、ボルテックスにかけ、さらに１時間インキュベーションした。次いでプレートを７００×ｇで１０分間遠心分離し、シンチレーションカウンタを使用して１ウェルあたり１分間計数した。
【００９６】
ＣＢ２−Ｓｆ９：
ｈＣＢ２−Ｓｆ９膜およびＧＤＰ（最終１ｕＭ）をアッセイ緩衝液に加え、ホモジナイズした。希釈した化合物および膜をアッセイプレートに加え、１５分間予備インキュベーションした。この後、ＧＴＰ−γ−３５Ｓ（最終５００ｎＭ）を加え、さらに３５分間インキュベーションした。次に、Ｎｏｎｉｄｅｔ Ｐ４０洗浄剤（最終０．２％）、抗Ｇｉ抗体（１：３６２の最終希釈）、および１．２５ｍｇの抗ウサギ抗体シンチレーション近接アッセイビーズを含有する混合物を加えた。次いでこのプレートを密閉し、ボルテックスにかけ、さらに２時間インキュベーションし、この後、遠心分離しＣＢ１について計数した。
【００９７】
データを分析するために、最初にすべてのウェルからバックグラウンドを差し引いた。作動薬／逆作動薬用量反応データを完全活性化薬（メタンアンダミド（ｍｅｔｈａｎａｎｄａｍｉｄｅ））反応に対して正規化することにより、作動薬有効性パーセントを決定した。Ａｃｔｉｖｉｔｙ ＢａｓｅおよびＸＬＦｉｔ３を用いた４パラメーターのロジスティック換算フィット（ｌｏｇｉｓｔｉｃ ｒｅｄｕｃｅｄ ｆｉｔ）を使用して、データを分析した。
【００９８】
例示した化合物のすべてを基本的に上記のとおりに試験し、各々が≦１００ｎＭのＣＢ２についての相対的ＥＣ５０値を有することを見出した。実施例６１は、ＣＢ２について１８ｎＭの相対的ＥＣ５０値およびＣＢ１について１９５０ｎＭの相対的ＥＣ５０値を有する。
【００９９】
このように、本発明の化合物はＣＢ２インビトロ活性を示す。さらに、本発明の化合物はＣＢ１よりもＣＢ２に対して選択性を示し、そのため中枢で媒介される副作用について限定的な潜在性をもたらす。
【０１００】
ヒトおよびラットのＣＢ２受容体からの３Ｈ−ＣＰ５５９４０の置換
Ｆｅｌｄｅｒらの方法（Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｏｃｏｌ．４８：４４３−４５０、１９９５）を、わずかの改変を加えて利用した。具体的にいうと、ヒトまたはラットのＣＢ２受容体を安定にまたは一過性に発現する細胞由来の膜ホモジネートを遠心分離によって洗浄し、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ＨＣｌ（ｐＨ ７．４）、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、２．５ｍＭ ＥＤＴＡ、および０．１％ ＢＳＡ緩衝液の中に希釈した。３Ｈ−ＣＰ５５９４０の特異的結合を１μＭ ＣＰ５５９４０を用いて定義した。特異的な３Ｈ−ＣＰ５５９４０結合を置き換えるための化合物の能力を、３００μｌの量で室温で９０分間インキュベーションすることによって、１％ ジメチルスルホキシドの存在下で、Ｔｒｉｓ、ＭｇＣｌ２、ＥＤＴＡ、ＢＳＡ緩衝液の中で、ある濃度範囲にわたって試験した。水中の０．５％ ポリビニルピロリドン、０．１％ ポリソルベート ２０で前処理したＵｎｉｆｉｌｔｅｒ ９６ウェルマイクロプレートを冷Ｔｒｉｓ緩衝液で３回洗浄した。次いで反応混合物をフィルタープレートに移し、その直後に急速濾過および冷Ｔｒｉｓ緩衝液を用いる３回の２００μｌの洗浄によってインキュベーションを停止した。フィルタープレートを乾燥した後、ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ ２０を各ウェルに加え、プレートを密閉し、毎分崩壊の測定のために計数した。置換曲線をグラフ化し、得られるＫｉ値をＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍを利用して決定した。
【０１０１】
実施例７６は、３３．９ｎＭのヒト受容体Ｋｉ値および３１．３ｎＭのラット受容体Ｋｉ値を有する。
【０１０２】
このように、本発明の化合物は、ヒトおよびラットのＣＢ２受容体の両方に対してインビトロで結合することが示される。
【０１０３】
モノヨードアセテート（ＭＩＡ）モデル
すべての研究について、ＭＩＡモデルにおいて疼痛を測定するために、ＭＩＡ注入時およそ８週齢の雄性のＬｅｗｉｓラットを使用する。このラットを１ケージあたり２または３匹の群で収容し、一定温度および１２時間明／１２時間暗のサイクルで維持する。動物は、データ収集の間を除いていつでも餌および水にアクセスできる。
【０１０４】
標準的なＭＩＡモデルでは、各ラットの右膝に５０ｕｌの生理食塩水中の０．３ｍｇ ＭＩＡを、および左膝に５０ｕｌの生理食塩水を注射する。疼痛を、ＭＩＡ注射後様々な時間で（通常、ＭＩＡ注射後１０日より前ではない）、インキャパシタンス試験（ｉｎｃａｐａｃｉｔａｎｃｅ ｔｅｓｔｉｎｇ）を使用して測定する。これは、ＭＩＡを注射した膝と生理食塩水を注射した膝との間の後肢の体重支持の差を測定し、そして各測定は、各々１秒にわたって測定した３つの別個の測定の平均である。
【０１０５】
ＣＢ２作動薬を用いた研究のために、ラットを用量群（ｎ＝５または６）に無作為化し、次いで検討中の化合物で１回投薬する。投薬は各ラットに対して１５分間だけずらし、用量後の所定の時間（通常２時間）に、疼痛をインキャパシタンス試験を使用して測定する。研究は、通常は、４つの群、溶媒（０．２５％ ポリソルベート ８０を加えた水中の１％ カルボキシメチルセルロース）、および単一用量での単一化合物であるか３つの用量の同じ化合物のいずれかであり得る３つの化合物群で行う。結果を、生理食塩水を注射した膝とＭＩＡを注射した膝との間の体重支持の差として報告し、溶媒で処置した動物と化合物で処置した動物との間で統計比較を行い、このモデルにおける膝の疼痛に対する化合物の効果を評価する。
【０１０６】
実施例８８を基本的に上記のとおりに試験し、０．３および１ｍｇ／ｋｇの経口用量で、溶媒に対して有意に疼痛を軽減することが見出された。
【０１０７】
このように、本発明の化合物は疼痛、特に関節痛の処置において有用であることが示される。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下式の化合物：
【化１】
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＦ３、シクロプロピル、ＯＣＨ３、ＯＣＦ３およびＣＮから選択され；
Ｒ２は、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、アゼチジン−１−カルボン酸メチルエステルおよびテトラヒドロチオフェン−１，１−ジオキシドから選択され；
Ｒ３はＨであるか、またはＲ４と一緒になって縮合したピロリジン−２−オンを形成し；
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２フルオロアルキル、シクロプロピルおよびＣＯＣＨ３から選択され；
Ｒ５は、Ｈ、ＣＨ３およびＣＦ３から選択され；
ｎは０または１であり；
Ｘ１およびＸ３は、独立に、Ｎ、ＣＨおよびＣＲ６から選択され；
Ｘ２は、ＣＨおよびＣＲ６から選択されるが；
ただしＸ１、Ｘ２およびＸ３のただ１つはＣＨ以外でもよく；
Ｒ６は、Ｆ、Ｃｌ、ＣＦ３、ＯＣＨ３およびＯＣＦ３から選択される）
またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ１は、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＦ３、シクロプロピルおよびＯＣＦ３から選択される、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ１はＣｌである、請求項１または２に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ２は、テトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロピラニルから選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
ｎは０である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Ｒ３はＨである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２フルオロアルキルまたはシクロプロピルから選択される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項８】
Ｒ４はＣ１〜Ｃ２アルキルである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
Ｒ５はＣＨ３である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、独立に、ＣＨおよびＣＲ６から選択され、ここでＲ６は、Ｃｌ、ＣＦ３、ＯＣＨ３およびＯＣＦ３から選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は各々ＣＨである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１２】
８−（２−クロロ−ピリジン−３−イル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン；２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−８−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−９Ｈ−プリン；２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−８−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−９Ｈ−プリン；２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−８−ｏ−トリル−９Ｈ−プリン；８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｓ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン；８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン；８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン；および８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリンから選択される、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリンである請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される希釈剤または担体を含む、薬学的組成物。
【請求項１５】
治療における使用のための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１６】
疼痛の処置における使用のための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１７】
骨関節炎痛の処置における使用のための、請求項１６に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１８】
疼痛の処置のための方法であって、有効量の請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とするヒトまたは動物に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１９】
骨関節炎痛の処置のための、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、治療における使用のための薬学的組成物。
【請求項２１】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、疼痛の処置における使用のための薬学的組成物。
【請求項２２】
骨関節炎痛の処置における使用のための請求項２１に記載の薬学的組成物。
【請求項１】
下式の化合物：
【化１】
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＦ３、シクロプロピル、ＯＣＨ３、ＯＣＦ３およびＣＮから選択され；
Ｒ２は、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、アゼチジン−１−カルボン酸メチルエステルおよびテトラヒドロチオフェン−１，１−ジオキシドから選択され；
Ｒ３はＨであるか、またはＲ４と一緒になって縮合したピロリジン−２−オンを形成し；
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２フルオロアルキル、シクロプロピルおよびＣＯＣＨ３から選択され；
Ｒ５は、Ｈ、ＣＨ３およびＣＦ３から選択され；
ｎは０または１であり；
Ｘ１およびＸ３は、独立に、Ｎ、ＣＨおよびＣＲ６から選択され；
Ｘ２は、ＣＨおよびＣＲ６から選択されるが；
ただしＸ１、Ｘ２およびＸ３のただ１つはＣＨ以外でもよく；
Ｒ６は、Ｆ、Ｃｌ、ＣＦ３、ＯＣＨ３およびＯＣＦ３から選択される）
またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ１は、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＦ３、シクロプロピルおよびＯＣＦ３から選択される、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ１はＣｌである、請求項１または２に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ２は、テトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロピラニルから選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
ｎは０である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Ｒ３はＨである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２フルオロアルキルまたはシクロプロピルから選択される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項８】
Ｒ４はＣ１〜Ｃ２アルキルである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
Ｒ５はＣＨ３である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、独立に、ＣＨおよびＣＲ６から選択され、ここでＲ６は、Ｃｌ、ＣＦ３、ＯＣＨ３およびＯＣＦ３から選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は各々ＣＨである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１２】
８−（２−クロロ−ピリジン−３−イル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン；２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−８−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−９Ｈ−プリン；２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−８−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−９Ｈ−プリン；２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−８−ｏ−トリル−９Ｈ−プリン；８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｓ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン；８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（Ｒ）−テトラヒドロ−フラン−３−イル−９Ｈ−プリン；８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリン；および８−（２−クロロ−フェニル）−６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルメチル）−９Ｈ−プリンから選択される、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
８−（２−クロロ−フェニル）−２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−９−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−９Ｈ−プリンである請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される希釈剤または担体を含む、薬学的組成物。
【請求項１５】
治療における使用のための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１６】
疼痛の処置における使用のための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１７】
骨関節炎痛の処置における使用のための、請求項１６に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１８】
疼痛の処置のための方法であって、有効量の請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とするヒトまたは動物に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１９】
骨関節炎痛の処置のための、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、治療における使用のための薬学的組成物。
【請求項２１】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、疼痛の処置における使用のための薬学的組成物。
【請求項２２】
骨関節炎痛の処置における使用のための請求項２１に記載の薬学的組成物。
【公表番号】特表２０１２−５１２８７３（Ｐ２０１２−５１２８７３Ａ）
【公表日】平成２４年６月７日（２０１２．６．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５４２２４６（Ｐ２０１１−５４２２４６）
【出願日】平成２１年１２月９日（２００９．１２．９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０６７２４９
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０８０３０６
【国際公開日】平成２２年７月１５日（２０１０．７．１５）
【出願人】（５９４１９７８７２）イーライ リリー アンド カンパニー (301)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年６月７日（２０１２．６．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１２月９日（２００９．１２．９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０６７２４９
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０８０３０６
【国際公開日】平成２２年７月１５日（２０１０．７．１５）
【出願人】（５９４１９７８７２）イーライ リリー アンド カンパニー (301)
【Ｆターム（参考）】
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