制御装置、およびその制御装置を用いた顕微鏡システム
【課題】顕微鏡を利用して標本を観察する場合に、観察の対象となっている領域をより正確に特定できるようにする。
【解決手段】制御装置３２は、容器１４の種別ごとに、容器１４のウェルの位置を特定する観察区域情報と、仮想的な容器全体を表すテンプレート画像を記録している。観察者は、観察時に容器１４の種別を指定し、容器１４全体のマクロ画像を撮影させる。制御装置３２は、指定された種別のテンプレート画像とマクロ画像を重畳して表示させ、観察者は、テンプレート画像の仮想的な容器とマクロ画像上の容器１４が重なるように、テンプレート画像の表示位置を修正させる。制御装置３２は、修正時の仮想的な容器の移動量に基づいて観察区域情報を補正し、補正後の観察区域情報と撮影時のステージ２１の位置情報から、観察画像が撮影された容器１４上のウェルを特定する。本発明は、顕微鏡観察システムに適用することができる。
【解決手段】制御装置３２は、容器１４の種別ごとに、容器１４のウェルの位置を特定する観察区域情報と、仮想的な容器全体を表すテンプレート画像を記録している。観察者は、観察時に容器１４の種別を指定し、容器１４全体のマクロ画像を撮影させる。制御装置３２は、指定された種別のテンプレート画像とマクロ画像を重畳して表示させ、観察者は、テンプレート画像の仮想的な容器とマクロ画像上の容器１４が重なるように、テンプレート画像の表示位置を修正させる。制御装置３２は、修正時の仮想的な容器の移動量に基づいて観察区域情報を補正し、補正後の観察区域情報と撮影時のステージ２１の位置情報から、観察画像が撮影された容器１４上のウェルを特定する。本発明は、顕微鏡観察システムに適用することができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は制御装置および顕微鏡システムに関し、特に、顕微鏡を利用して標本を観察する場合において、観察の対象となっている領域をより正確に特定することができるようにした制御装置および顕微鏡システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、ウェルプレートの各ウェルに異なる試薬を添加する等して、複数の標本を異なる条件で観察する場合に、標本の形態的な変化を捉えて、個々の標本にどのような現象が起こっているのかを知りたいという要求がある。ウェル内にある複数の標本が観察対象とされる場合には、１つのウェル内のいくつかの領域が、それぞれ被写体とされて標本ごとに観察画像が撮影される。
【０００３】
また、顕微鏡で標本を観察する場合に用いられる技術として、ウェルプレートに光を照射し、ウェルプレートからの反射光の強度を測定することにより、ウェルプレート上のウェルの配列方向を特定する技術もある（例えば、特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００７−１０８１４６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ところで、顕微鏡の対物レンズとステージとの相対的な位置関係を変化させて、ウェルプレート上の複数の位置において観察画像を撮影する場合、顕微鏡において、対物レンズの観察視野がウェルプレート上のどこにあるのかを特定することはできなかった。
【０００６】
例えば、上述した技術では、ウェルプレート上のウェルの配列方向は特定できるが、各ウェルの位置までは特定することができなかった。なぜなら、ウェルプレートの大きさに対して、対物レンズの観察視野は狭いためである。例えば、１０倍の対物レンズの視野が直径２ｍｍ程度であるのに対し、ウェルプレートは数１０ｍｍ以上の寸法を持っているためである。そのため、観察者は、目視で観察対象となっているウェルを特定し、そのウェルに関する情報をいちいち手書きで記録したり、観察画像の記録時に、ウェルが特定できる情報を入力して観察画像とともに記録させたりしなければならなかった。
【０００７】
本発明は、このような状況に鑑みてなされたものであり、顕微鏡を利用して標本を観察する場合において、観察の対象となっている領域をより正確に特定することができるようにするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の制御装置は、観察対象の標本が入れられる複数の標本収容部を有する容器が、顕微鏡のステージ上に載置されたときの前記標本収容部の位置を示す観察区域情報を記録する記録手段と、前記ステージに載置された前記容器における前記標本収容部の位置と、前記観察区域情報により示される前記標本収容部の位置とのずれが修正されるように、前記観察区域情報を補正する補正手段と、前記補正手段により補正された前記観察区域情報と、前記顕微鏡の対物レンズおよび前記ステージの相対的な位置関係とに基づいて、前記ステージ上の前記容器において、前記対物レンズの観察視野となっている領域が含まれる前記標本収容部を特定する特定手段とを備えることを特徴とする。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、顕微鏡を利用して標本を観察する場合において、観察の対象となっている領域をより正確に特定することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本発明を適用した顕微鏡観察システムの一実施の形態の構成例を示す図である。
【図２】制御装置の構成例を示す図である。
【図３】観察処理を説明するフローチャートである。
【図４】観察ウィンドウの表示例を示す図である。
【図５】マクロ画像の例を示す図である。
【図６】テンプレートの修正について説明する図である。
【図７】テンプレートの修正について説明する図である。
【図８】マップウィンドウの表示例を示す図である。
【図９】観察ウィンドウの表示例を示す図である。
【図１０】マクロ画像の例を示す図である。
【図１１】テンプレートの修正について説明する図である。
【図１２】テンプレートの修正について説明する図である。
【図１３】登録処理を説明するフローチャートである。
【図１４】タイムラプス観察処理を説明するフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、図面を参照して、本発明を適用した実施の形態について説明する。
【００１２】
〈第１の実施の形態〉
［顕微鏡観察システムの構成］
図１は、本発明を適用した顕微鏡観察システムの一実施の形態の構成例を示す図である。この顕微鏡観察システムは、顕微鏡１１、パーソナルコンピュータ１２、およびコントローラ１３から構成される。
【００１３】
顕微鏡１１には、観察対象の標本が入れられた容器１４が載置されるステージ２１、照明光を射出する光源２２および光源２３、対物レンズ２４、複数の対物レンズ２４を保持するレボルバ２５、並びにカメラ２６が設けられている。
【００１４】
光源２２から放射された光束は、図示していない照明光学系により集光され、容器１４に照射される。また、光源２３から放射された光束は、対物レンズ２４からカメラ２６の撮像素子に至る結像光学系の光路中にあるハーフミラー等で、結像光学系に導入され、対物レンズ２４を介して容器１４に照射される。また、結像光学系は、対物レンズ２４と図示しない結像レンズからなり、容器１４中の標本の像を撮像素子に結像する。
【００１５】
ステージ２１は、コントローラ１３の制御に従って電動駆動され、移動する。これにより、ステージ２１と対物レンズ２４との相対的な位置関係が変化する。具体的には、ステージ２１は、対物レンズ２４の光軸と垂直な方向、つまり図中、横方向および奥行き方向（以下、ｘｙ方向とも称する）に移動する。
【００１６】
また、ステージ２１には、図示せぬリニアエンコーダが設けられており、パーソナルコンピュータ１２は、コントローラ１３を介してリニアエンコーダから供給された信号により、ステージ２１のｘ，ｙの各方向の位置を知ることができる。
【００１７】
レボルバ２５は、コントローラ１３の制御に従って電動駆動され、保持している複数の対物レンズ２４のうちの何れかを、結像光学系の光路上に配置する。また、レボルバ２５は、コントローラ１３により駆動され、内蔵されたフォーカシング機構により、対物レンズ２４の光軸と平行な方向、すなわち図中、縦方向（以下、ｚ方向と称する）に移動する。これにより、対物レンズ２４がｚ方向に移動することになる。
【００１８】
さらに、光源２２および光源２３は、コントローラ１３の制御に従って照明光を射出し、照明光を容器１４に照射する。例えば、容器１４内の標本が明視野観察される場合、光源２２から照明光が射出され、照明光は図示せぬ照明光学系を通って図中、上側から容器１４に照射される。そして、容器１４内の標本に照射された照明光は、標本を透過して観察光となり、対物レンズ２４を介してカメラ２６に入射する。
【００１９】
また、例えば標本が蛍光観察される場合、光源２３から照明光として励起光が射出され、照明光は図示せぬ光学系および対物レンズ２４を通って図中、下側から容器１４に照射される。容器１４内の標本に照明光が照射されると、標本からは観察光としての蛍光が発現する。標本からの観察光は対物レンズ２４を含む結像光学系を通ってカメラ２６に入射する。
【００２０】
カメラ２６は、ＣＣＤ（Charge Coupled Devices）等の撮像素子からなり、対物レンズ２４を介して得られた標本の像を撮像することで、標本を被写体とする観察画像を撮影する。撮影により得られた観察画像は、カメラ２６からコントローラ１３に供給される。
【００２１】
コントローラ１３は、パーソナルコンピュータ１２からの指示に応じて顕微鏡１１の各部の動作を制御したり、カメラ２６から供給された観察画像をパーソナルコンピュータ１２に供給したりする。
【００２２】
パーソナルコンピュータ１２は、マウスなどからなる入力部３１、入力部３１からの指示に応じて動作する制御装置３２、および液晶ディスプレイなどからなり、観察画像等の画像を表示する表示部３３から構成される。制御装置３２は、観察者（ユーザ）の入力部３１への操作に応じて、コントローラ１３の動作を制御したり、表示部３３に各種の画像を表示させたりする。
【００２３】
また、図１の制御装置３２は、より詳細には図２に示すように構成される。すなわち、制御装置３２は、記録部６１、観察制御部６２、判別部６３、および表示制御部６４から構成される。
【００２４】
記録部６１は、カメラ２６で撮影された観察画像や、容器１４の種別ごとに予め得られているテンプレート情報などの各種のデータを記録する。
【００２５】
ここで、テンプレート情報とは、ステージ２１に容器１４が載置されたときの、容器１４における標本が入れられる標本収容部の位置を示す情報である。より詳細には、テンプレート情報には、仮想的な容器全体の画像であるテンプレート画像の画像データと、標本収容部の位置を示す標本収容部ごとの観察区域情報とが含まれている。
【００２６】
例えば、標本の観察に用いる容器１４として、複数のウェルを有するウェルプレートや、複数の区域に仕切られた４分割ディッシュなどが用いられる。これらの仕切られたウェルや区域にはそれぞれ標本が入れられる。さらに、ウェルや区域毎に標本の観察条件を異なるものとするために、各ウェルや区域には、互いに異なる試薬が添加されたり、各ウェルや区域が互いに異なる濃度の溶液で満たされたりする。
【００２７】
なお、以下においては、説明を簡単にするため、容器１４としてウェルプレートが用いられるものとして説明を続ける。容器１４がウェルプレートである場合、テンプレート情報により示される標本収容部は、標本が入れられる各ウェルである。
【００２８】
また、容器１４がウェルプレートである場合、ウェルプレートの種別によって、ウェルプレートに設けられたウェルの数、ウェルの形状、ウェルの大きさ、ウェルプレート上における各ウェルの位置の少なくとも何れかが異なる。そのため、記録部６１は、ウェルプレート（容器１４）の種別ごとに、テンプレート情報を記録している。
【００２９】
本実施の形態では、このテンプレート情報に含まれるテンプレート画像は、ステージ２１が移動されていない状態で、ステージ２１上の予め定められた位置（以下、仮想基準位置と称する）に、仮想的な容器を載置し、カメラにより、その仮想的な容器全体を上方から撮影して得られる画像である。なお、カメラにより撮像された画像以外にも、ウェルプレートの製造元が持っている容器１４の寸法図から作成された画像をテンプレート画像としてもよい。
【００３０】
なお、ステージ２１が移動されていない状態とは、対物レンズ２４の光軸が、ステージ２１の中心の位置にある状態をいう。また、仮想基準位置は、例えば、ステージ２１が移動されていない状態において、仮想的な容器の中心が、対物レンズ２４の光軸の位置となり、かつ仮想的な容器の長手方向がｘ方向（例えば、図１の奥行き方向）と平行となるような位置である。
【００３１】
例えば、１２穴のウェルプレートのテンプレート情報に含まれるテンプレート画像は、ステージ２１の仮想基準位置に１２穴のウェルプレートが載置された状態で、その１２穴のウェルプレートを図１中、上側から下方向（ｚ方向）に見たときのウェルプレートの輪郭と、各ウェルの輪郭とを表す画像とされる。
【００３２】
また、テンプレート情報に含まれるウェルごとの観察区域情報は、テンプレート画像取得時に示すステージ２１の位置を原点とし、仮想的なウェルプレートを仮想基準位置に載置した場合に、対物レンズ２４の光軸と交わる位置を基準位置とし、その基準位置を原点としたときのウェルの位置を示す情報である。
【００３３】
なお、以下、テンプレート画像により表される仮想的なウェルプレートを、仮想ウェルプレート、またはテンプレートと呼ぶこととする。
【００３４】
また、本実施の形態での説明では、説明を簡単にするために、テンプレート画像の基準位置とステージ２１から出力される位置情報の原点は同一位置に設定した。具体的には、対物レンズ２４の光軸と垂直な平面（ｘｙ平面）上のｘｙ座標を考え、ステージ２１の中心が対物レンズ２４の光軸と交わる状態のステージ２１の位置を、ステージ２１の基準位置とする。また、ステージ２１が基準位置にあるときのステージ２１のｘｙ座標を（０，０）とした。そして、仮想ウェルプレートの各ウェルの形状が、半径ｒの円形状であるものとする。したがって、ウェルの観察区域（ｘ１，ｙ１）は、任意の１つのウェルの中心位置を（ｘφｎ，ｙφｎ）としたときに、（ｘ１−ｘφｎ）２＋（ｙ１−ｙφｎ）２≦ｒ２を満たす領域とされる。
【００３５】
したがって、ステージ２１上に載置されたウェルプレートと同じ種別のテンプレート情報を用いれば、対物レンズ２４の光軸、すなわち対物レンズ２４の観察視野の中心の位置が、ウェルプレートのどの領域にあるかを特定することが可能となる。
【００３６】
例えば、ウェルプレートをステージ２１上に載置し、ステージ２１を移動させたとする。そのような場合、そのウェルプレートと同じ種別のテンプレートの各ウェルの観察区域情報と、ｘｙ座標により表されるステージ２１の位置とから、対物レンズ２４の観察視野の中心が、ウェルプレート上のどのウェルの領域内にあるかを特定することができる。
【００３７】
但し、この場合、実在のウェルプレートが、仮想ウェルプレートと同じ位置、つまり仮想基準位置に配置されることが前提とされる。
【００３８】
このように、記録部６１には、テンプレート画像と、ウェルごとの観察区域情報とからなるテンプレート情報が記録されている。
【００３９】
また、図２の観察制御部６２は、入力部３１から供給される信号に応じて、コントローラ１３を制御し、顕微鏡１１で撮影する位置を制御したり、表示部３３で表示される内容を表示制御部６４に指示を与えたりする。観察制御部６２には、カメラ２６による観察画像の撮影を制御する撮影制御部７１と、表示部３３に表示されたテンプレート画像の表示位置の修正を制御する修正制御部７２とが設けられている。
【００４０】
判別部６３は、観察制御部６２から供給されたステージ２１のｘｙ座標等の位置を示す情報（以下、単に位置情報と称する）と、記録部６１に記録されている観察区域情報とに基づいて、対物レンズ２４の観察視野の中心の位置を特定する。すなわち、観察視野の中心の位置が、容器１４上のどのウェル内に位置するかが特定される。また、判別部６３は、補正部７３を有しており、補正部７３は、観察制御部６２の指示に応じて、記録部６１から取得したテンプレート情報に含まれる各観察区域情報を補正する。
【００４１】
表示制御部６４は、観察画像の画像データや、テンプレート情報に含まれるテンプレート画像の画像データを、記録部６１または観察制御部６２から取得して表示部３３に供給し、表示部３３に観察画像やテンプレート画像を表示させる。
【００４２】
［顕微鏡観察システムの動作］
ところで、観察者が所定の種別の容器１４をステージ２１上の予め定められた所定の位置に所定の姿勢で載置し、入力部３１を操作して容器１４に入れられた標本の蛍光観察を指示すると、顕微鏡観察システムは、観察者の指示に応じて標本を観察し、観察画像を撮影する処理である観察処理を開始する。
【００４３】
以下、図３のフローチャートを参照して、顕微鏡観察システムによる観察処理について説明する。
【００４４】
ステップＳ１１において、観察制御部６２は、テンプレートを選択する。
【００４５】
例えば、観察者は、ステージ２１上に標本の入った容器１４を載置すると、入力部３１を操作して、テンプレートの一覧の表示を指示する。すると、観察制御部６２は、入力部３１からの信号に応じて表示制御部６４にテンプレートの一覧の表示を指示し、表示制御部６４は、その指示に従って記録部６１に記録されているテンプレート情報を参照して、表示部３３にテンプレートの一覧を表示させる。
【００４６】
そして、観察者が入力部３１を操作して、表示された一覧から、ステージ２１に載置した容器１４と同じ種別のテンプレート（仮想ウェルプレート）を指定すると、観察制御部６２は、観察者の操作に応じて、指定されたテンプレートを選択する。
【００４７】
テンプレートが指定されると、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して、光源２３から照明光を射出させるとともに、カメラ２６に容器１４の一部の領域を被写体とする観察画像を撮影させる。また、コントローラ１３は、カメラ２６から供給された観察画像を、観察制御部６２を介して表示制御部６４に供給する。
【００４８】
ステップＳ１２において、表示制御部６４は、観察制御部６２からの指示に応じて、コントローラ１３から供給された観察画像や、標本の観察時の操作に関するGUI（Graphical User Interface）が表示される観察ウィンドウを表示部３３に表示させる。
【００４９】
これにより、表示部３３の表示画面には、例えば、図４に示す観察ウィンドウ１０１が表示される。
【００５０】
観察ウィンドウ１０１の中央には、カメラ２６により撮影された観察画像が表示される観察画面１１１が設けられている。また、観察画面１１１の図中、右側には、マップウィンドウ１１２、選択操作ウィンドウ１１３、観察条件調整ウィンドウ１１４、およびステージ操作ウィンドウ１１５が設けられている。
【００５１】
マップウィンドウ１１２には、観察者により選択されたテンプレートのテンプレート画像１２１、つまり仮想ウェルプレートの画像が表示される。表示制御部６４は、観察者から指定されたテンプレートのテンプレート画像１２１を記録部６１から取得して、表示部３３にテンプレート画像１２１を表示させる。
【００５２】
図４において、テンプレート画像１２１上の１つの円は、１つのウェルの位置を表しており、テンプレート画像１２１として、マップウィンドウ１１２に、図中、縦方向に３個、横方向に４個の合計１２個のウェルが設けられた仮想ウェルプレートが表示されている。
【００５３】
なお、以下において、テンプレート（テンプレート画像１２１）上のウェルを特定する場合、図４中、一番上の列の左からｊ番目（但し、１≦ｊ≦４）のウェルを、ウェルＡｊとも称し、そのウェルのウェル番地がＡｊであるとする。同様に、図４中、中央の列の左からｊ番目（但し、１≦ｊ≦４）のウェルを、ウェルＢｊとも称し、そのウェルのウェル番地がＢｊであるとする。さらに、図４中、一番下の列の左からｊ番目（但し、１≦ｊ≦４）のウェルを、ウェルＣｊとも称し、そのウェルのウェル番地がＣｊであるとする。
【００５４】
したがって、例えば、図４中、左上のウェルは、ウェルＡ１であり、中央の列の左から４番目のウェルは、ウェルＢ４である。また、実際の容器１４上のウェルについても、テンプレート上のウェルと同様に、ウェルＡｊ，ウェルＢｊ，ウェルＣｊ（但し、１≦ｊ≦４）などと称することとする。
【００５５】
さらに、表示制御部６４は、観察制御部６２から供給されたステージ２１の位置情報に基づいて、テンプレート画像１２１上に、現時点における観察視野の中心の位置を示す観察マーク１２２を表示させる。この位置は、対物レンズ２４の光軸との交点の位置と一致している。
【００５６】
図４の例では、観察マーク１２２は、仮想ウェルプレートにおけるウェルＢ３内に表示されている。したがって、観察画面１１１には、ステージ２１上の容器１４における、ウェルＢ３内にある標本の観察画像が表示されていることになる。
【００５７】
上述したように、テンプレートは、ステージ２１に実際に載置された容器１４と同じ種別のものが選択される。そのため、容器１４には、マップウィンドウ１１２に表示されている仮想ウェルプレート（テンプレート）と同じ配列でウェルが設けられている。したがって、仮想ウェルプレート上の観察マーク１２２に示される位置に対応する、容器１４上の位置が、実際に顕微鏡１１により観察されていることになる。
【００５８】
このように、マップウィンドウ１１２に、テンプレート画像１２１および観察マーク１２２を表示することにより、観察者は、ステージ２１にどのような容器１４が載置されており、その容器１４のどの位置を観察しているかを容易に把握することができる。
【００５９】
また、選択操作ウィンドウ１１３には、顕微鏡１１の光学系中に配置される蛍光フィルタや、標本の観察倍率を選択するためのアイコンが設けられており、観察者は、入力部３１を操作してこれらのアイコンを選択することで、蛍光フィルタや観察倍率を変更できる。
【００６０】
例えば、選択操作ウィンドウ１１３内のアイコンが操作されると、コントローラ１３は、観察制御部６２の指示に応じて、顕微鏡１１の蛍光フィルタを変更させたり、レボルバ２５を駆動させて、観察光の光路上に配置される対物レンズ２４を変更させたりする。
【００６１】
観察条件調整ウィンドウ１１４には、観察画像の撮影時の露光条件や、標本に照射される照明光の明るさなど、標本の観察条件を調整するためのアイコンが設けられている。観察者は、入力部３１を操作してこれらのアイコンを操作することで、露光条件や照明光の明るさを調整することができる。
【００６２】
例えば、観察条件調整ウィンドウ１１４内のアイコンに対する操作がなされると、コントローラ１３は、観察制御部６２の指示に応じて顕微鏡１１を制御し、カメラ２６における露光時間や、光源２３からの照明光の明るさ（光量）を変更させる。
【００６３】
ステージ操作ウィンドウ１１５には、ステージ２１をｘ，ｙの各方向に移動させるときに操作されるアイコン、および対物レンズ２４（レボルバ２５）をｚ方向に移動させるときに操作されるアイコンが設けられている。観察者は、入力部３１を操作してこれらのアイコンを操作することで、ステージ２１や対物レンズ２４を移動させることができる。
【００６４】
図３のフローチャートの説明に戻り、表示部３３に観察ウィンドウ１０１が表示されると、観察者は入力部３１を操作して、ステージ２１に載置された容器１４全体の撮影画像であるマクロ画像を取得するモードの選択を指示する。
【００６５】
ステップＳ１３において、撮影制御部７１は、観察者の操作に応じてマクロ画像を取得するモードを選択し、マクロ画像を撮影させる。
【００６６】
すなわち、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して、容器１４内の標本の観察を、蛍光観察から明視野観察に切り替えさせる。具体的には、観察制御部６２は、標本からの観察光の光路上に配置される対物レンズ２４を、低倍率のものに変更させるとともに、光源２３の動作を停止させ、光源２２から照明光を射出させる。
【００６７】
これにより、光源２２からの照明光が容器１４に照射されて、容器１４からの観察光が、低倍率の対物レンズ２４を通ってカメラ２６に入射することになる。また、この状態で、使用者は、対物レンズ２４の焦点位置が、容器１４の中央付近のウェル内の標本の位置となるように、対物レンズ２４をｚ方向に移動させる。つまり、標本に合焦するように対物レンズ２４が移動される。
【００６８】
具体的には、まず、観察制御部６２は、対物レンズ２４の光軸中心が、記録部６１に記録されているテンプレートのウェルＢ２に対応する、容器１４のウェル内に位置するようにステージ２１を移動させる。そして使用者は、容器１４の任意の対象にピントが合うように対物レンズ２４を移動させる。使用者は合焦動作を終了すると、不図示のアイコンをクリックするなどにより観察制御部６２に合焦動作が終了したことを通知する。また、観察制御部６２は、その容器１４にピントが合った状態における対物レンズ２４のｚ方向の位置Ｚ０を一時的に保持する。
【００６９】
次に、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して、ステージ２１をｘｙ方向に所定量ずつ移動させるとともに、撮影制御部７１は、ステージ２１の移動に同期させて、コントローラ１３にステージ２１の各位置での観察画像の撮影を指示する。
【００７０】
このようにして、ステージ２１の各位置での容器１４を撮影することにより、観察制御部６２は、複数の観察画像を得る。そして、観察制御部６２は、このようにして得られた観察画像を、それらの撮影位置と同じ配置で並べて合成することで１つの画像を生成し、得られた画像をマクロ画像とする。
【００７１】
これにより、例えば、図５に示すマクロ画像１５１が得られる。なお。マクロ画像１５１において、１つの長方形は、撮影により得られた１つの観察画像を示している。つまり、マクロ画像１５１は、図中、縦方向に１３枚、横方向に１２枚の合計１５６枚の観察画像からなる。
【００７２】
また、マクロ画像１５１の中央には、ステージ２１上に配置された容器１４の画像が表示されている。この容器１４には、縦方向に３つ、横方向に４つの合計１２個のウェルが設けられており、マクロ画像１５１上において、容器１４は図中、右上方向に傾いている。
【００７３】
なお、マクロ画像を撮影するときに、対物レンズ２４のｚ方向の位置を固定したまま各領域での観察画像を撮影するのは、各位置において、多少、容器１４に焦点が合っていなくても、容器１４全体の画像が得られればよいからである。また、対物レンズ２４の焦点の位置合わせが容器１４のほぼ中央のウェル内で行われるのは、容器１４が傾いていたとしても、他の位置で焦点の位置合わせをする場合と比べて、マクロ画像の各位置でのぼけをより少なくすることができるからである。
【００７４】
また、マクロ画像は、複数枚の観察画像から生成されると説明されたが、ウェルプレート自体がかなり小さい特殊な複数のウェルを持つ容器では、１枚の画像とされてもよい。そのような場合、複数の対物レンズ２４のなかから、観察視野内に容器１４全体が収まる視野を持つものが選択されて、観察光の光路上に配置される。
【００７５】
このようにしてマクロ画像が得られると、観察制御部６２は、生成したマクロ画像を表示制御部６４に供給し、マップウィンドウ１１２への表示を指示する。
【００７６】
ステップＳ１４において、表示制御部６４は、観察制御部６２からのマクロ画像を表示部３３に供給し、マップウィンドウ１１２にマクロ画像を表示させる。
【００７７】
これにより、マップウィンドウ１１２には、例えば、図６に示すように、マクロ画像１５１がテンプレート画像１２１に重畳（スーパーインポーズ）されて表示される。図６の例では、テンプレート画像１２１の仮想ウェルプレートと、マクロ画像１５１上のウェルプレートがずれて表示されている。マクロ画像を取得したウェルプレートはステージ２１に設けられた図示していない位置決め機構によって位置決めされて固定されているが、その位置決め機構には位置決め誤差や大きさにばらつきがあるため、ウェルプレートのマクロ画像１５１がテンプレート画像１２１と表示されてしまう。
【００７８】
そこで、表示制御部６４は、マクロ画像１５１上のウェルプレートと、テンプレート画像１２１上の仮想ウェルプレートとの位置関係が、実際の容器１４（ウェルプレート）と仮想ウェルプレートとの位置関係と一致するようにマクロ画像１５１を表示させる。すなわち、マップウィンドウ１１２において、ウェルプレートが仮想ウェルプレートに対してずれていれば、実際の容器１４も、仮想ウェルプレートに対して、マップウィンドウ１１２の表示と同じ方向に同じ分だけずれて配置されていることになる。
【００７９】
図３のフローチャートの説明に戻り、マップウィンドウ１１２にマクロ画像１５１が表示されると、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して、対物レンズ２４をマクロ画像の取得前のものに変更させる。また、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して、ステージ２１の位置を、マクロ画像の取得前と同じ位置に移動させる。
【００８０】
ステップＳ１５において、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して、標本の観察を明視野観察から蛍光観察に切り替えさせる。コントローラ１３は、観察制御部６２の指示に従って、光源２２の動作を停止させ、光源２３から照明光を射出させる。これにより、光源２３からの照明光が標本に照射されるようになり、標本の蛍光観察が可能となる。
【００８１】
ところで、上述したように、観察区域情報により示される容器１４の各ウェルの位置は、実際にステージ２１に載置される容器１４が、仮想基準位置に配置されることが前提とされている。しかしながら、実際には、図６に示したように、容器１４が正確にテンプレート情報が示す位置に載置されないことがある。
【００８２】
このように、容器１４の載置位置にずれが生じると、観察区域情報から正確にウェルの位置を特定することができなくなってしまう。そこで、顕微鏡観察システムでは、より正確に観察の対象となっている領域、つまり対物レンズ２４の観察視野の中心の位置を特定できるように、観察区域情報を補正できるようになされている。
【００８３】
この観察区域情報の補正は、観察者が、テンプレート画像１２１とマクロ画像１５１が重なるようにテンプレート画像１２１を移動させて、その表示位置を修正させたときに、テンプレート画像１２１の修正時の移動方向と移動量に応じて行われる。
【００８４】
観察者は、マップウィンドウ１１２に表示されたテンプレート画像１２１と、マクロ画像１５１とを見て、観察区域情報の補正が必要だと判断した場合には、入力部３１を操作して、テンプレートの表示位置を任意の位置に移動させる。
【００８５】
例えば、観察者は、図７に示すように、マップウィンドウ１１２上においてマクロ画像１５１のウェルプレートとテンプレートとが完全に重なるように、テンプレート（仮想ウェルプレート）を任意の方向に平行移動させたり、回転移動させたりする。
【００８６】
ステップＳ１６において、観察制御部６２の修正制御部７２は、観察者の操作に応じて表示制御部６４を制御し、テンプレートの表示位置を修正する。すなわち、修正制御部７２は、入力部３１から供給された信号に基づいて、表示制御部６４にテンプレートの移動方向および移動量を通知し、マップウィンドウ１１２上におけるテンプレートの移動を制御する。表示制御部６４は、修正制御部７２からの通知に基づいてマップウィンドウ１１２上のテンプレートを移動させる。
【００８７】
このとき、マップウィンドウ１１２において、マクロ画像１５１は固定されたままとされ、テンプレート画像１２１（テンプレート）の表示位置だけが移動する。また、図７に示したように、テンプレートとマクロ画像１５１が重なった状態となると、観察者は、入力部３１を操作して、テンプレートの修正の実行を指示する。
【００８８】
すると、修正制御部７２は、観察者の操作に応じて、テンプレートの移動前の位置と、最終的にテンプレートがマクロ画像１５１に重なった状態となったときのテンプレートの位置とに基づいて、テンプレートの移動方向および移動量を求める。そして、修正制御部７２は、求めた移動方向および移動量を判別部６３の補正部７３に供給し、補正部７３に各ウェルの観察区域情報の補正を指示する。
【００８９】
なお、より詳細には、テンプレートの移動方向とは、テンプレートを平行移動させた方向と、テンプレートを回転移動させた方向をいい、テンプレートの移動量とは、テンプレートの平行移動および回転移動のそれぞれの移動量をいう。
【００９０】
ステップＳ１７において、補正部７３は、修正制御部７２から供給されたテンプレートの移動方向および移動量に基づいて、各ウェルの観察区域情報を補正する。
【００９１】
例えば、補正部７３は、観察区域情報と、テンプレートの移動方向および移動量とから、テンプレートの各ウェルの中心の移動後の位置（ｘｙ座標）を求め、それらの位置を示す情報と、ウェルの半径ｒとからなる情報を、補正後の観察区域情報とする。つまり、ウェルの中心の移動後の位置（ステージ２１のｘｙ座標）と、観察区域情報に含まれる移動前のウェルの位置（ステージ２１のｘｙ座標）との差分が、そのウェルの観察区域情報の補正値となる。
【００９２】
このように、観察区域情報を補正することにより、ステージ２１に載置された実際の容器１４の各ウェルの位置と、観察区域情報により示されるウェルの位置とのずれが修正される。これにより、対物レンズ２４の観察視野の位置をより正確に特定することができる。
【００９３】
なお、観察者が、テンプレートの位置が、得られたマクロ画像１５１の位置に対してずれていないと判断し、テンプレートの表示位置の修正を指示しなかった場合には、テンプレートの表示位置の修正および観察区域情報の補正は行われない。
【００９４】
また、テンプレートの表示位置の修正では、テンプレートが平行移動または回転移動されると説明したが、テンプレートが拡大または縮小されるようにしてもよい。そのような場合、観察区域情報の補正は、テンプレートの移動方向、移動量、拡大縮小の倍率に基づいて求められる。例えば、テンプレート上の特徴点を予め複数定めておき、テンプレートの修正前後の特徴点の位置の変化に基づいて方程式を立て、その方程式を解くことにより、補正後の各ウェルの中心の座標が求められる。
【００９５】
テンプレート画像１２１の表示位置の修正と、観察区域情報の補正とが行われると、観察者は、ステージ操作ウィンドウ１１５内のアイコン等を操作して、容器１４上の任意のウェル内から、観察目的に合った標本を探し出し、標本を蛍光観察する。
【００９６】
ステップＳ１８において、観察制御部６２は、入力部３１からの信号に基づいて、観察者によりｘｙ方向へのステージ２１の移動が指示されたか否かを判定する。
【００９７】
ステップＳ１８において、ステージ２１のｘｙ方向への移動が指示されなかったと判定された場合、ステージ２１を移動させないので、処理はステップＳ２０に進む。
【００９８】
これに対して、ステップＳ１８において、ステージ２１のｘｙ方向への移動が指示されたと判定された場合、ステップＳ１９において、観察制御部６２は、観察者の指示に応じてコントローラ１３を制御し、ステージ２１をｘｙ方向に移動させる。
【００９９】
なお、観察制御部６２は、観察者により対物レンズ２４のｚ方向の移動が指示された場合には、コントローラ１３を制御して、対物レンズ２４を移動させる。このようにして、観察者は、対物レンズ２４やステージ２１を移動させながら、任意のウェル内から、目的とする標本を見つけ出す。
【０１００】
観察者は、撮影に適した標本を見つけ出すと、ステージ２１のｘｙ方向の位置および対物レンズ２４のｚ方向の位置の微調整を行い、観察画像の撮影位置やピントを定める。そして、観察者は、入力部３１を操作することで、観察ウィンドウ１０１の観察条件調整ウィンドウ１１４上のアイコンを操作して、露光条件や照明光の明るさを調整し、さらに入力部３１を操作して、観察画像の撮影を指示する。
【０１０１】
ステップＳ１９においてステージ２１が移動されたか、またはステップＳ１８において、ステージ２１の移動が指示されなかったと判定された場合、ステップＳ２０の処理が行われる。すなわち、ステップＳ２０において、撮影制御部７１は、入力部３１からの信号に基づいて、観察画像の撮影が指示されたか否かを判定する。ステップＳ２０において、撮影が指示されなかったと判定された場合、観察画像の撮影は行わないので、処理はステップＳ２６に進む。
【０１０２】
一方、ステップＳ２０において、撮影が指示されたと判定された場合、ステップＳ２１において、撮影制御部７１は、コントローラ１３に観察画像の撮影を指示し、観察画像を撮影させる。コントローラ１３は、撮影制御部７１の指示に応じてカメラ２６に観察画像を撮影させ、カメラ２６から供給された観察画像を観察制御部６２に供給する。なお、撮影制御部７１からは、静止画像を取得するようにコントローラ１３に指示してもよいし、コントローラ１３から供給されたライブ画像から観察画像の１フレーム分をキャプチャして、観察画像としてもよい。
【０１０３】
観察制御部６２は、供給された観察画像を表示制御部６４に供給し、観察画面１１１に表示させる。また、観察制御部６２は、コントローラ１３から供給されるステージ２１の位置情報に基づいて、表示制御部６４へマップウィンドウ１１２の対象位置に撮影マークを表示する指示を行う。
【０１０４】
表示制御部６４は、観察制御部６２の指示に応じて表示部３３を制御し、マップウィンドウ１１２内のテンプレート画像１２１上における、観察画像が撮影された位置に対応する位置に、撮影マークを表示させる。この撮影マークは、観察画像が撮影された位置を示す画像である。
【０１０５】
これにより、マップウィンドウ１１２には、例えば、図８に示す撮影マーク１８１−１乃至撮影マーク１８１−３が表示される。なお、図８において、撮影マーク１８１−１乃至撮影マーク１８１−３のそれぞれは、１つの観察画像が撮影された位置を示している。なお、以下、撮影マーク１８１−１乃至撮影マーク１８１−３のそれぞれを個々に区別する必要のない場合、単に撮影マーク１８１とも称する。
【０１０６】
図８の例では、容器１４上のウェル番地Ａ１のウェル内の３箇所において、少なくとも１枚ずつ観察画像が撮影されたことになる。撮影マーク１８１は、観察画像が撮影されるごとに、その観察画像が撮影された位置に表示されていく。このように、観察画像が撮影された位置に、撮影マーク１８１を表示させることにより、観察者は、容器１４上のどの位置で観察画像を撮影したかを簡単に知ることができる。
【０１０７】
図３のフローチャートの説明に戻り、撮影マークを表示させると、観察制御部６２は、さらに、観察画像が撮影されたときのステージ２１の位置情報（ｘｙ座標）を判別部６３に供給し、観察画像が撮影された領域の特定を指示する。
【０１０８】
すると、ステップＳ２２において、判別部６３は、一時的に保持している補正後の観察区域情報と、観察制御部６２からの位置情報とに基づいて、観察画像が撮影された容器１４上のウェルを特定する。すなわち、観察画像が撮影されたときの対物レンズ２４の観察視野の中心が、容器１４上のどの位置にあったかが特定される。
【０１０９】
例えば、判別部６３は、保持しているテンプレート情報に含まれる複数の観察区域情報のうちの１つを選択する。そして、判別部６３は、位置情報により示されるステージ２１のｘｙ座標が、選択した観察区域情報により示されるウェルの中心のｘｙ座標を中心とする、ウェルの半径ｒの円の領域内の座標である場合、観察画像の撮影位置が、そのウェル内であるとする。つまり、観察画像が撮影されたときの対物レンズ２４の観察視野の中心が、そのウェル内に位置していたと特定される。
【０１１０】
また、判別部６３は、保持している全ての観察区域情報について、観察画像の撮影位置が、観察区域情報に示されるウェル内ではないとされた場合、観察画像の撮影された位置は、容器１４におけるウェルの領域とは異なる領域であるとする。すなわち、例えば、ウェル同士の間に設けられたウェル壁の領域に、対物レンズ２４の光軸が位置する状態で観察画像が撮影されたとする。
【０１１１】
判別部６３は、観察画像の撮影位置、つまり観察の対象となった領域を特定すると、その特定結果を観察制御部６２に供給する。
【０１１２】
例えば、観察画像が撮影された位置が、容器１４上のウェルＡ４であると特定された場合、判別部６３は、観察画像の撮影位置がウェル番地Ａ４のウェルである旨の特定結果を観察制御部６２に供給する。また、例えば、観察画像が撮影された位置が、容器１４上のウェルの領域とは異なる領域であると特定された場合、判別部６３は、観察画像の撮影位置がウェルの領域以外の領域である旨の特定結果を観察制御部６２に供給する。
【０１１３】
ステップＳ２３において、観察制御部６２は、判別部６３からの特定結果に基づいて、観察画像の撮影位置が容器１４上のウェル内であるか否かを判定する。
【０１１４】
ステップＳ２３においてウェル内であると判定された場合、ステップＳ２４において、観察制御部６２は、撮影された観察画像とともに、観察画像が撮影された容器１４のウェルを特定するウェル番地等を記録部６１に供給し、観察画像とウェル番地を記録させる。
【０１１５】
すると、記録部６１は、観察制御部６２から供給された観察画像と、ウェル番地とを関連付けて記録する。例えば、観察画像の撮影が行われたウェルが、ウェルＡ１であり、その観察画像の撮影が、ウェルＡ１内での１箇所目の撮影であった場合、観察画像のファイル名が「Ａ１−１」などとされて観察画像が記録される。これにより、各観察画像がどの位置で撮影されたものであるかを観察者に対して提示することができる。また、観察者がいちいち各観察画像の撮影位置を記録したり、入力したりする必要もなくなり、より簡単に、かつ間違いなく観察画像の管理をすることができるようになる。
【０１１６】
なお、観察画像には、ウェル番地の他、露光時間などの観察条件や、ステージ２１の位置情報、対物レンズ２４のｚ方向の位置を示す座標なども関連付けられて記録されるようにしてもよい。
【０１１７】
ステップＳ２４において観察画像が記録されると、その後、処理はステップＳ２６に進む。
【０１１８】
一方、ステップＳ２３においてウェル内ではないと判定された場合、ステップＳ２５において、観察制御部６２は観察者に警告を発し、その後、処理はステップＳ２６に進む。
【０１１９】
例えば、観察制御部６２は、表示制御部６４に対して警告の表示を指示し、表示制御部６４は、その指示に応じて、観察ウィンドウ１０１上の観察画面１１１に、「観察画像の撮影位置がウェル内ではありません」等の文字メッセージを表示させる。また、観察制御部６２が、観察画面１１１に表示された文字メッセージと同じ内容の音声メッセージを、図示せぬスピーカに出力させるようにしてもよい。
【０１２０】
このように、観察画像の撮影位置が、容器１４上のウェル内の領域でない場合、撮影された観察画像は、ウェル内の標本が表示される画像ではないため、観察画像の記録は行われない。これにより、無駄な観察画像が記録されてしまうことを防止することができる。なお、警告が発せられた場合でも、観察画像が記録部６１に記録されるようにしてもよい。
【０１２１】
ステップＳ２５において警告が発せられたか、ステップＳ２４において観察画像が記録されたか、またはステップＳ２０において撮影が指示されなかったと判定された場合、ステップＳ２６において、観察制御部６２は処理を終了するか否かを判定する。例えば、観察者が入力部３１を操作して、標本の観察の終了を指示した場合、処理を終了すると判定される。
【０１２２】
ステップＳ２６において、処理を終了しないと判定された場合、処理はステップＳ１８に戻り、上述した処理が繰り返される。すなわち、容器１４上の任意のウェル内での観察が継続して行われる。
【０１２３】
また、ステップＳ２６において、処理を終了すると判定された場合、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して顕微鏡１１での観察を終了させ、観察処理は終了する。
【０１２４】
このようにして、顕微鏡観察システムは、マップウィンドウ１１２にテンプレートとマクロ画像を重畳して表示させるとともに、観察者の操作に応じてテンプレートの表示位置を修正する。また、顕微鏡観察システムは、テンプレートの修正結果に基づいて、テンプレートの各ウェルの観察区域情報を補正する。
【０１２５】
このように、テンプレートの修正結果に基づいて、各ウェルの観察区域情報を補正することにより、テンプレートの各ウェルの位置と、実際にステージ２１上に載置されている容器１４の各ウェルの位置とを一致させることができる。したがって、観察の対象となっている対物レンズ２４の観察視野の位置をより正確に特定することができる。また、観察画像に対して、その観察画像が撮影された正確なウェル番地を関連付けて記録できるようになる。
【０１２６】
なお、以上においては、テンプレート画像１２１の移動方向および移動量に基づいて、観察区域情報が補正されると説明したが、観察区域情報の補正は、実際の容器１４上のウェルの位置と、観察区域情報により示されるウェルの位置とのずれが修正されれば、どのように行われてもよい。
【０１２７】
例えば、ステージ２１上にテンプレート情報が示す容器１４の輪郭線の一部を示す位置を表す線等が予め引かれており、観察者がその線と容器１４の該当する輪郭とのずれ量を計測し、その計測結果を、入力部３１を操作して入力すると、その入力に基づいて、補正部７３が観察区域情報を補正するようにしてもよい。また、例えば、容器１４の配置位置のテンプレート情報が示す位置に対するずれ量を検出するセンサを、予めステージ２１に設けておき、そのセンサの出力に基づいて、補正部７３が観察区域情報を補正するようにしてもよい。
【０１２８】
さらに、例えば、補正部７３が、マクロ画像から容器１４の輪郭を抽出し、抽出した容器１４の輪郭の画像と、テンプレート画像とを用いたパターンマッチングにより、容器１４のずれ量を検出して観察区域情報を補正するようにしてもよい。
【０１２９】
さらに、以上においては、容器１４としてウェルプレートが用いられる例について説明したが、容器１４として複数の区域に仕切られた４分割ディッシュなどが用いられてもよい。
【０１３０】
例えば、テンプレートとして、４分割ディッシュが選択された場合、図９に示すように、マップウィンドウ１１２には、４分割ディッシュを表すテンプレート画像２１１が表示される。この場合、テンプレート情報に含まれる観察区域情報は、４分割ディッシュに設けられた、標本が入れられる各区域の位置を特定するための情報とされる。
【０１３１】
また、マクロ画像を取得するモードの選択が指示されると、ステージ２１上に載置された４分割ディッシュのマクロ画像の撮影が行われ、その結果、例えば、図１０に示す４分割ディッシュのマクロ画像２４１が得られる。そして、図１１に示すように、マップウィンドウ１１２には、マクロ画像２４１がテンプレート画像２１１に重畳（スーパーインポーズ）されて表示される。
【０１３２】
さらに、図１２に示すように、観察者の入力部３１への操作により、マップウィンドウ１１２上のテンプレート画像２１１（テンプレート）が、マクロ画像２４１上の容器１４と重なるように、テンプレート画像２１１が移動される。そして、テンプレート画像２１１の移動方向および移動量から、観察区域情報が補正される。
【０１３３】
〈第２の実施の形態〉
［顕微鏡観察システムの動作］
また、以上においては、観察者の操作により観察画像が撮影されると説明したが、観察者が観察画像を撮影する位置（以下、撮影ポイントと称する）を登録しておき、それらの登録された位置でタイムラプス観察が行われるようにしてもよい。
【０１３４】
そのような場合、観察者が容器１４をステージ２１上に載置し、入力部３１を操作してタイムラプス観察時の撮影ポイントの指定の開始を指示すると、顕微鏡観察システムは、その指示に応じて撮影ポイントの登録を行なう処理である登録処理を開始する。
【０１３５】
以下、図１３のフローチャートを参照して、顕微鏡観察システムによる登録処理について説明する。なお、図１３において、ステップＳ６１乃至ステップＳ６９の処理のそれぞれは、図３のステップＳ１１乃至ステップＳ１９の処理のそれぞれと同様であるので、その説明は省略する。
【０１３６】
観察者は、撮影に適した標本を見つけ出すと、ステージ２１のｘｙ方向の位置および対物レンズ２４のｚ方向の位置の微調整を行い、観察画像の画角やピントを定める。そして、観察者は、入力部３１を操作することで、ステージ２１のｘｙ方向の位置、および対物レンズ２４のｚ方向の位置を、観察画像を撮影する位置である撮影ポイントとして登録するように指示する。
【０１３７】
ステップＳ７０において、観察制御部６２は、撮影ポイントの登録が指示されたか否かを判定する。
【０１３８】
ステップＳ７０において、登録が指示されなかったと判定された場合、処理はステップＳ７５に進む。
【０１３９】
これに対して、ステップＳ７０において、登録が指示されたと判定された場合、観察制御部６２は、登録が指示された時点でのステージ２１の位置情報を判別部６３に供給して、容器１４上の位置の特定を指示し、処理はステップＳ７１に進む。
【０１４０】
ステップＳ７１において、判別部６３は、一時的に保持している補正後の観察区域情報と、観察制御部６２からの位置情報とに基づいて、登録が指示された撮影ポイントが含まれる容器１４上のウェルを特定する。
【０１４１】
すなわち、ステップＳ７１では、図３のステップＳ２２の処理と同様の処理が行われ、撮影ポイントの登録が指示されたときの対物レンズ２４の観察視野の中心が、容器１４上のどの位置にあったかが特定される。
【０１４２】
判別部６３は、撮影ポイントの位置、つまり観察の対象となった領域を特定すると、その特定結果を観察制御部６２に供給する。
【０１４３】
ステップＳ７２において、観察制御部６２は、判別部６３からの特定結果に基づいて、撮影ポイントの位置が容器１４上のウェル内であるか否かを判定する。
【０１４４】
ステップＳ７２においてウェル内であると判定された場合、ステップＳ７３において、観察制御部６２は、判別部６３からの特定結果に基づいて、指示された撮影ポイントを特定するための撮影位置登録情報を生成する。そして、観察制御部６２は、生成した撮影位置登録情報を記録部６１に供給して記録させる。
【０１４５】
例えば、登録が指示された時点でのステージ２１の位置情報、対物レンズ２４のｚ方向の位置、撮影ポイントを特定する識別番号、および照明光の明るさや露光時間等の現時点での標本の観察条件を示す情報からなる撮影位置登録情報が生成される。
【０１４６】
ここで、撮影ポイントの識別番号は、撮影ポイントが含まれるウェルのウェル番地と、そのウェル内における何個目の撮影ポイントであるかを示す情報からなる。具体的には、撮影ポイントがウェルＡ１内に位置する２個目の撮影ポイントであるとすると、その撮影ポイントの識別番号は、「Ａ１−２」とされる。
【０１４７】
なお、撮影位置登録情報は、登録された順番に並べられて記録される。したがって、制御装置３２は、撮影位置登録情報が並べられている順番から、タイムラプス観察時に、観察画像を撮影していく撮影ポイントの順番を知ることができる。
【０１４８】
さらに、観察制御部６２は、撮影位置登録情報が記録されて撮影ポイントが登録されると、マップウィンドウ１１２における、その撮影ポイントの位置に、登録された撮影ポイントであることを示す登録マークを表示させるように、表示制御部６４に指示する。すると、表示制御部６４は、観察制御部６２からの指示に応じて、表示部３３を制御し、マップウィンドウ１１２に、登録マークを表示させる。これにより、ウェル内の同じ標本の位置を、観察者が撮影ポイントとして重複して登録してしまうことを防止することができる。
【０１４９】
このようにして、記録部６１に撮影位置登録情報が記録されると、その後、処理はステップＳ７５に進む。
【０１５０】
また、ステップＳ７２においてウェル内ではないと判定された場合、ステップＳ７４において、観察制御部６２は観察者に警告を発し、その後、処理はステップＳ７５に進む。例えば、ステップＳ７４では、図３のステップＳ２５と同様の処理が行われて、観察画面１１１に、観察画像の撮影位置がウェル内ではない旨の文字メッセージが表示される。
【０１５１】
このように、登録しようとする撮影ポイントの位置が、容器１４上のウェル内の領域でない場合、撮影ポイントで撮影される観察画像は、ウェル内の標本が表示される画像ではないため、撮影ポイントの登録は行われない。これにより、タイムラプス観察時に、無駄な観察画像が記録されてしまうことを防止することができる。なお、警告が発せられた場合でも、撮影ポイントが登録されるようにしてもよい。
【０１５２】
ステップＳ７４において警告が発せられたか、ステップＳ７３において撮影ポイントが登録されたか、またはステップＳ７０において登録が指示されなかったと判定されると、ステップＳ７５の処理が行われる。
【０１５３】
すなわち、ステップＳ７５において、観察制御部６２は、観察動作条件の入力が指示されたか否かを判定する。
【０１５４】
例えば、観察者は、全ての撮影ポイントの登録を終えると、入力部３１を操作して、タイムラプス観察の撮影時間間隔、撮影回数（ラウンド数）など、タイムラプス観察を行うときの観察動作条件の入力を指示する。観察制御部６２は、入力部３１から、観察動作条件の入力を指示する旨の信号が供給されると、入力が指示されたと判定する。
【０１５５】
ステップＳ７５において、観察動作条件の入力が指示されなかったと判定された場合、処理はステップＳ６８に戻り、上述した処理が繰り返される。
【０１５６】
これに対して、ステップＳ７５において、観察動作条件の入力が指示されたと判定された場合、ステップＳ７６において、観察制御部６２は、観察者により入力された観察動作条件を示す観察動作条件情報を記録部６１に供給し、記録させる。
【０１５７】
例えば、観察者が、撮影時間間隔として３０分を指定し、撮影回数として４９回を指定したとすると、観察制御部６２は、観察動作条件として、撮影時間間隔「３０分」および撮影回数「４９回」を示す観察動作条件情報を記録部６１に供給して、記録させる。
【０１５８】
この場合、登録された全ての撮影ポイントで観察画像を撮影する処理が、３０分間隔で４９回繰り返されることになり、これらの一連の処理が終了するまでに２４時間（＝30×（49−1）＝1440分）かかることになる。
【０１５９】
このようにして、記録部６１に観察動作条件情報が記録されると、登録処理は終了する。
【０１６０】
以上のように、顕微鏡観察システムは、テンプレートの修正結果に基づいて、各ウェルの観察区域情報を補正することにより、テンプレートの各ウェルの位置と、実際にステージ２１上に載置されている容器１４の各ウェルの位置とを一致させることができる。したがって、登録が指示された撮影ポイントの位置をより正確に特定することができ、標本の写らない無駄な撮影ポイントが登録されてしまうことを防止することができる。また、登録された撮影ポイントと、その撮影ポイントのある容器１４上のウェルを特定する情報とを関連付けて記録できるようになる。
【０１６１】
記録部６１に、各撮影ポイントの撮影位置登録情報と、観察動作条件情報とが記録されると、観察者は顕微鏡観察システムに対して、それらの情報に基づくタイムラプス観察をさせることができるようになる。観察者が入力部３１を操作して、タイムラプス観察を指示すると、顕微鏡観察システムは、その指示に応じてタイムラプス観察処理を開始する。
【０１６２】
以下、図１４のフローチャートを参照して、顕微鏡観察システムによるタイムラプス観察処理について説明する。
【０１６３】
ステップＳ１１１において、観察制御部６２は、記録部６１に記録されている観察動作条件情報を参照して、各撮影ポイントにおける観察画像を撮影する時刻となったか否かを判定する。
【０１６４】
ステップＳ１１１において、撮影する時刻となっていないと判定された場合、処理はステップＳ１１１に戻り、撮影する時刻となったと判定されるまで判定の処理が繰り返される。
【０１６５】
これに対して、ステップＳ１１１において、撮影する時刻となったと判定された場合、ステップＳ１１２において、観察制御部６２は、記録部６１に順番に並べられて記録されている撮影位置登録情報を参照して、撮影ポイントを１つ選択する。
【０１６６】
ステップＳ１１３において、カメラ２６は、選択された撮影ポイントでの観察画像を撮影する。すなわち、観察制御部６２は、選択した撮影ポイントの撮影位置登録情報に基づいてコントローラ１３を制御し、対物レンズ２４の観察視野の中心が撮影ポイントに位置するようにステージ２１を移動させるとともに、撮影位置登録情報に示される位置に対物レンズ２４を移動させる。また、観察制御部６２は、撮影位置登録情報に基づいてコントローラ１３を制御し、カメラ２６における露光時間や、照明光の明るさも変更させる。さらに、撮影制御部７１は、コントローラ１３を制御して、選択された撮影ポイントにおける観察画像を撮影させる。
【０１６７】
コントローラ１３は、ステージ２１やレボルバ２５を移動させたり、露光時間や照明光の明るさを変更させたりするとともに、カメラ２６に観察画像を撮影させ、撮影により得られた観察画像を観察制御部６２に供給する。
【０１６８】
また、観察画像の撮影時において、観察制御部６２は、観察画像の撮影位置登録情報を表示制御部６４に供給し、観察画像に関する情報の表示を指示する。すると、表示制御部６４は、観察制御部６２の指示に応じて表示部３３を制御し、現在、どのウェルの何個目の撮影ポイントを撮影しているかを示す文字を観察画面１１１に表示させるとともに、マップウィンドウ１１２に、その撮影ポイントの撮影マークを表示させる。例えば、観察画面１１１に表示される文字は「ウェル番地Ｂ２のポイント２で観察画像を撮影しています」などとされる。
【０１６９】
ステップＳ１１４において、観察制御部６２は、コントローラ１３から供給された観察画像と、撮影ポイントおよびラウンドを特定する情報とを記録部６１に供給し、関連付けて記録させる。
【０１７０】
例えば、撮影ポイントが、ウェルＢ２内の２個目の撮影ポイントであり、今回の観察画像の撮影が、その撮影ポイントの３回目の撮影である（３ラウンド目である）場合、観察制御部６２は、観察画像のファイル名を「Ｂ２−２−０００３」として記録させる。つまり、撮影ポイントの識別番号にラウンド数が付加された文字列がファイル名とされる。
【０１７１】
ステップＳ１１５において、観察制御部６２は、全ての撮影ポイントで観察画像を撮影したか否かを判定する。ステップＳ１１５において、まだ全ての撮影ポイントで観察画像を撮影していないと判定された場合、処理はステップＳ１１２に戻り、上述した処理が繰り返される。すなわち、次の撮影ポイントの観察画像が撮影される。
【０１７２】
これに対して、ステップＳ１１５において、全ての撮影ポイントで観察画像を撮影したと判定された場合、１つのラウンドが終了したので、ステップＳ１１６において、観察制御部６２は、全てのラウンドが終了したか否かを判定する。
【０１７３】
ステップＳ１１６において、まだ全てのラウンドが終了していないと判定された場合、処理はステップＳ１１１に戻り、上述した処理が繰り返される。すなわち、次のラウンドでの観察画像の撮影が行われる。
【０１７４】
一方、ステップＳ１１６において、全てのラウンドが終了したと判定された場合、タイムラプス観察処理は終了する。
【０１７５】
このようにして、顕微鏡観察システムは、記録されている撮影位置登録情報および観察動作条件情報に基づいて、タイムラプス観察を行い、各撮影ポイントの観察画像を記録する。観察画像の記録時に、撮影ポイントとラウンド数とを特定できるようにファイル名を定めることで、より効率的、かつ確実に観察画像の管理を行うことができる。
【０１７６】
なお、本発明の実施の形態は、上述した実施の形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲において種々の変更が可能である。
【符号の説明】
【０１７７】
１１ 顕微鏡， １２ パーソナルコンピュータ， １３ コントローラ， １４ 容器， ２１ ステージ， ２４ 対物レンズ， ２６ カメラ， ３２ 制御装置， ６１ 記録部， ６２ 観察制御部， ６３ 判別部， ６４ 表示制御部， ７１ 撮影制御部， ７２ 修正制御部， ７３ 補正部
【技術分野】
【０００１】
本発明は制御装置および顕微鏡システムに関し、特に、顕微鏡を利用して標本を観察する場合において、観察の対象となっている領域をより正確に特定することができるようにした制御装置および顕微鏡システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、ウェルプレートの各ウェルに異なる試薬を添加する等して、複数の標本を異なる条件で観察する場合に、標本の形態的な変化を捉えて、個々の標本にどのような現象が起こっているのかを知りたいという要求がある。ウェル内にある複数の標本が観察対象とされる場合には、１つのウェル内のいくつかの領域が、それぞれ被写体とされて標本ごとに観察画像が撮影される。
【０００３】
また、顕微鏡で標本を観察する場合に用いられる技術として、ウェルプレートに光を照射し、ウェルプレートからの反射光の強度を測定することにより、ウェルプレート上のウェルの配列方向を特定する技術もある（例えば、特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００７−１０８１４６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ところで、顕微鏡の対物レンズとステージとの相対的な位置関係を変化させて、ウェルプレート上の複数の位置において観察画像を撮影する場合、顕微鏡において、対物レンズの観察視野がウェルプレート上のどこにあるのかを特定することはできなかった。
【０００６】
例えば、上述した技術では、ウェルプレート上のウェルの配列方向は特定できるが、各ウェルの位置までは特定することができなかった。なぜなら、ウェルプレートの大きさに対して、対物レンズの観察視野は狭いためである。例えば、１０倍の対物レンズの視野が直径２ｍｍ程度であるのに対し、ウェルプレートは数１０ｍｍ以上の寸法を持っているためである。そのため、観察者は、目視で観察対象となっているウェルを特定し、そのウェルに関する情報をいちいち手書きで記録したり、観察画像の記録時に、ウェルが特定できる情報を入力して観察画像とともに記録させたりしなければならなかった。
【０００７】
本発明は、このような状況に鑑みてなされたものであり、顕微鏡を利用して標本を観察する場合において、観察の対象となっている領域をより正確に特定することができるようにするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の制御装置は、観察対象の標本が入れられる複数の標本収容部を有する容器が、顕微鏡のステージ上に載置されたときの前記標本収容部の位置を示す観察区域情報を記録する記録手段と、前記ステージに載置された前記容器における前記標本収容部の位置と、前記観察区域情報により示される前記標本収容部の位置とのずれが修正されるように、前記観察区域情報を補正する補正手段と、前記補正手段により補正された前記観察区域情報と、前記顕微鏡の対物レンズおよび前記ステージの相対的な位置関係とに基づいて、前記ステージ上の前記容器において、前記対物レンズの観察視野となっている領域が含まれる前記標本収容部を特定する特定手段とを備えることを特徴とする。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、顕微鏡を利用して標本を観察する場合において、観察の対象となっている領域をより正確に特定することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本発明を適用した顕微鏡観察システムの一実施の形態の構成例を示す図である。
【図２】制御装置の構成例を示す図である。
【図３】観察処理を説明するフローチャートである。
【図４】観察ウィンドウの表示例を示す図である。
【図５】マクロ画像の例を示す図である。
【図６】テンプレートの修正について説明する図である。
【図７】テンプレートの修正について説明する図である。
【図８】マップウィンドウの表示例を示す図である。
【図９】観察ウィンドウの表示例を示す図である。
【図１０】マクロ画像の例を示す図である。
【図１１】テンプレートの修正について説明する図である。
【図１２】テンプレートの修正について説明する図である。
【図１３】登録処理を説明するフローチャートである。
【図１４】タイムラプス観察処理を説明するフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、図面を参照して、本発明を適用した実施の形態について説明する。
【００１２】
〈第１の実施の形態〉
［顕微鏡観察システムの構成］
図１は、本発明を適用した顕微鏡観察システムの一実施の形態の構成例を示す図である。この顕微鏡観察システムは、顕微鏡１１、パーソナルコンピュータ１２、およびコントローラ１３から構成される。
【００１３】
顕微鏡１１には、観察対象の標本が入れられた容器１４が載置されるステージ２１、照明光を射出する光源２２および光源２３、対物レンズ２４、複数の対物レンズ２４を保持するレボルバ２５、並びにカメラ２６が設けられている。
【００１４】
光源２２から放射された光束は、図示していない照明光学系により集光され、容器１４に照射される。また、光源２３から放射された光束は、対物レンズ２４からカメラ２６の撮像素子に至る結像光学系の光路中にあるハーフミラー等で、結像光学系に導入され、対物レンズ２４を介して容器１４に照射される。また、結像光学系は、対物レンズ２４と図示しない結像レンズからなり、容器１４中の標本の像を撮像素子に結像する。
【００１５】
ステージ２１は、コントローラ１３の制御に従って電動駆動され、移動する。これにより、ステージ２１と対物レンズ２４との相対的な位置関係が変化する。具体的には、ステージ２１は、対物レンズ２４の光軸と垂直な方向、つまり図中、横方向および奥行き方向（以下、ｘｙ方向とも称する）に移動する。
【００１６】
また、ステージ２１には、図示せぬリニアエンコーダが設けられており、パーソナルコンピュータ１２は、コントローラ１３を介してリニアエンコーダから供給された信号により、ステージ２１のｘ，ｙの各方向の位置を知ることができる。
【００１７】
レボルバ２５は、コントローラ１３の制御に従って電動駆動され、保持している複数の対物レンズ２４のうちの何れかを、結像光学系の光路上に配置する。また、レボルバ２５は、コントローラ１３により駆動され、内蔵されたフォーカシング機構により、対物レンズ２４の光軸と平行な方向、すなわち図中、縦方向（以下、ｚ方向と称する）に移動する。これにより、対物レンズ２４がｚ方向に移動することになる。
【００１８】
さらに、光源２２および光源２３は、コントローラ１３の制御に従って照明光を射出し、照明光を容器１４に照射する。例えば、容器１４内の標本が明視野観察される場合、光源２２から照明光が射出され、照明光は図示せぬ照明光学系を通って図中、上側から容器１４に照射される。そして、容器１４内の標本に照射された照明光は、標本を透過して観察光となり、対物レンズ２４を介してカメラ２６に入射する。
【００１９】
また、例えば標本が蛍光観察される場合、光源２３から照明光として励起光が射出され、照明光は図示せぬ光学系および対物レンズ２４を通って図中、下側から容器１４に照射される。容器１４内の標本に照明光が照射されると、標本からは観察光としての蛍光が発現する。標本からの観察光は対物レンズ２４を含む結像光学系を通ってカメラ２６に入射する。
【００２０】
カメラ２６は、ＣＣＤ（Charge Coupled Devices）等の撮像素子からなり、対物レンズ２４を介して得られた標本の像を撮像することで、標本を被写体とする観察画像を撮影する。撮影により得られた観察画像は、カメラ２６からコントローラ１３に供給される。
【００２１】
コントローラ１３は、パーソナルコンピュータ１２からの指示に応じて顕微鏡１１の各部の動作を制御したり、カメラ２６から供給された観察画像をパーソナルコンピュータ１２に供給したりする。
【００２２】
パーソナルコンピュータ１２は、マウスなどからなる入力部３１、入力部３１からの指示に応じて動作する制御装置３２、および液晶ディスプレイなどからなり、観察画像等の画像を表示する表示部３３から構成される。制御装置３２は、観察者（ユーザ）の入力部３１への操作に応じて、コントローラ１３の動作を制御したり、表示部３３に各種の画像を表示させたりする。
【００２３】
また、図１の制御装置３２は、より詳細には図２に示すように構成される。すなわち、制御装置３２は、記録部６１、観察制御部６２、判別部６３、および表示制御部６４から構成される。
【００２４】
記録部６１は、カメラ２６で撮影された観察画像や、容器１４の種別ごとに予め得られているテンプレート情報などの各種のデータを記録する。
【００２５】
ここで、テンプレート情報とは、ステージ２１に容器１４が載置されたときの、容器１４における標本が入れられる標本収容部の位置を示す情報である。より詳細には、テンプレート情報には、仮想的な容器全体の画像であるテンプレート画像の画像データと、標本収容部の位置を示す標本収容部ごとの観察区域情報とが含まれている。
【００２６】
例えば、標本の観察に用いる容器１４として、複数のウェルを有するウェルプレートや、複数の区域に仕切られた４分割ディッシュなどが用いられる。これらの仕切られたウェルや区域にはそれぞれ標本が入れられる。さらに、ウェルや区域毎に標本の観察条件を異なるものとするために、各ウェルや区域には、互いに異なる試薬が添加されたり、各ウェルや区域が互いに異なる濃度の溶液で満たされたりする。
【００２７】
なお、以下においては、説明を簡単にするため、容器１４としてウェルプレートが用いられるものとして説明を続ける。容器１４がウェルプレートである場合、テンプレート情報により示される標本収容部は、標本が入れられる各ウェルである。
【００２８】
また、容器１４がウェルプレートである場合、ウェルプレートの種別によって、ウェルプレートに設けられたウェルの数、ウェルの形状、ウェルの大きさ、ウェルプレート上における各ウェルの位置の少なくとも何れかが異なる。そのため、記録部６１は、ウェルプレート（容器１４）の種別ごとに、テンプレート情報を記録している。
【００２９】
本実施の形態では、このテンプレート情報に含まれるテンプレート画像は、ステージ２１が移動されていない状態で、ステージ２１上の予め定められた位置（以下、仮想基準位置と称する）に、仮想的な容器を載置し、カメラにより、その仮想的な容器全体を上方から撮影して得られる画像である。なお、カメラにより撮像された画像以外にも、ウェルプレートの製造元が持っている容器１４の寸法図から作成された画像をテンプレート画像としてもよい。
【００３０】
なお、ステージ２１が移動されていない状態とは、対物レンズ２４の光軸が、ステージ２１の中心の位置にある状態をいう。また、仮想基準位置は、例えば、ステージ２１が移動されていない状態において、仮想的な容器の中心が、対物レンズ２４の光軸の位置となり、かつ仮想的な容器の長手方向がｘ方向（例えば、図１の奥行き方向）と平行となるような位置である。
【００３１】
例えば、１２穴のウェルプレートのテンプレート情報に含まれるテンプレート画像は、ステージ２１の仮想基準位置に１２穴のウェルプレートが載置された状態で、その１２穴のウェルプレートを図１中、上側から下方向（ｚ方向）に見たときのウェルプレートの輪郭と、各ウェルの輪郭とを表す画像とされる。
【００３２】
また、テンプレート情報に含まれるウェルごとの観察区域情報は、テンプレート画像取得時に示すステージ２１の位置を原点とし、仮想的なウェルプレートを仮想基準位置に載置した場合に、対物レンズ２４の光軸と交わる位置を基準位置とし、その基準位置を原点としたときのウェルの位置を示す情報である。
【００３３】
なお、以下、テンプレート画像により表される仮想的なウェルプレートを、仮想ウェルプレート、またはテンプレートと呼ぶこととする。
【００３４】
また、本実施の形態での説明では、説明を簡単にするために、テンプレート画像の基準位置とステージ２１から出力される位置情報の原点は同一位置に設定した。具体的には、対物レンズ２４の光軸と垂直な平面（ｘｙ平面）上のｘｙ座標を考え、ステージ２１の中心が対物レンズ２４の光軸と交わる状態のステージ２１の位置を、ステージ２１の基準位置とする。また、ステージ２１が基準位置にあるときのステージ２１のｘｙ座標を（０，０）とした。そして、仮想ウェルプレートの各ウェルの形状が、半径ｒの円形状であるものとする。したがって、ウェルの観察区域（ｘ１，ｙ１）は、任意の１つのウェルの中心位置を（ｘφｎ，ｙφｎ）としたときに、（ｘ１−ｘφｎ）２＋（ｙ１−ｙφｎ）２≦ｒ２を満たす領域とされる。
【００３５】
したがって、ステージ２１上に載置されたウェルプレートと同じ種別のテンプレート情報を用いれば、対物レンズ２４の光軸、すなわち対物レンズ２４の観察視野の中心の位置が、ウェルプレートのどの領域にあるかを特定することが可能となる。
【００３６】
例えば、ウェルプレートをステージ２１上に載置し、ステージ２１を移動させたとする。そのような場合、そのウェルプレートと同じ種別のテンプレートの各ウェルの観察区域情報と、ｘｙ座標により表されるステージ２１の位置とから、対物レンズ２４の観察視野の中心が、ウェルプレート上のどのウェルの領域内にあるかを特定することができる。
【００３７】
但し、この場合、実在のウェルプレートが、仮想ウェルプレートと同じ位置、つまり仮想基準位置に配置されることが前提とされる。
【００３８】
このように、記録部６１には、テンプレート画像と、ウェルごとの観察区域情報とからなるテンプレート情報が記録されている。
【００３９】
また、図２の観察制御部６２は、入力部３１から供給される信号に応じて、コントローラ１３を制御し、顕微鏡１１で撮影する位置を制御したり、表示部３３で表示される内容を表示制御部６４に指示を与えたりする。観察制御部６２には、カメラ２６による観察画像の撮影を制御する撮影制御部７１と、表示部３３に表示されたテンプレート画像の表示位置の修正を制御する修正制御部７２とが設けられている。
【００４０】
判別部６３は、観察制御部６２から供給されたステージ２１のｘｙ座標等の位置を示す情報（以下、単に位置情報と称する）と、記録部６１に記録されている観察区域情報とに基づいて、対物レンズ２４の観察視野の中心の位置を特定する。すなわち、観察視野の中心の位置が、容器１４上のどのウェル内に位置するかが特定される。また、判別部６３は、補正部７３を有しており、補正部７３は、観察制御部６２の指示に応じて、記録部６１から取得したテンプレート情報に含まれる各観察区域情報を補正する。
【００４１】
表示制御部６４は、観察画像の画像データや、テンプレート情報に含まれるテンプレート画像の画像データを、記録部６１または観察制御部６２から取得して表示部３３に供給し、表示部３３に観察画像やテンプレート画像を表示させる。
【００４２】
［顕微鏡観察システムの動作］
ところで、観察者が所定の種別の容器１４をステージ２１上の予め定められた所定の位置に所定の姿勢で載置し、入力部３１を操作して容器１４に入れられた標本の蛍光観察を指示すると、顕微鏡観察システムは、観察者の指示に応じて標本を観察し、観察画像を撮影する処理である観察処理を開始する。
【００４３】
以下、図３のフローチャートを参照して、顕微鏡観察システムによる観察処理について説明する。
【００４４】
ステップＳ１１において、観察制御部６２は、テンプレートを選択する。
【００４５】
例えば、観察者は、ステージ２１上に標本の入った容器１４を載置すると、入力部３１を操作して、テンプレートの一覧の表示を指示する。すると、観察制御部６２は、入力部３１からの信号に応じて表示制御部６４にテンプレートの一覧の表示を指示し、表示制御部６４は、その指示に従って記録部６１に記録されているテンプレート情報を参照して、表示部３３にテンプレートの一覧を表示させる。
【００４６】
そして、観察者が入力部３１を操作して、表示された一覧から、ステージ２１に載置した容器１４と同じ種別のテンプレート（仮想ウェルプレート）を指定すると、観察制御部６２は、観察者の操作に応じて、指定されたテンプレートを選択する。
【００４７】
テンプレートが指定されると、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して、光源２３から照明光を射出させるとともに、カメラ２６に容器１４の一部の領域を被写体とする観察画像を撮影させる。また、コントローラ１３は、カメラ２６から供給された観察画像を、観察制御部６２を介して表示制御部６４に供給する。
【００４８】
ステップＳ１２において、表示制御部６４は、観察制御部６２からの指示に応じて、コントローラ１３から供給された観察画像や、標本の観察時の操作に関するGUI（Graphical User Interface）が表示される観察ウィンドウを表示部３３に表示させる。
【００４９】
これにより、表示部３３の表示画面には、例えば、図４に示す観察ウィンドウ１０１が表示される。
【００５０】
観察ウィンドウ１０１の中央には、カメラ２６により撮影された観察画像が表示される観察画面１１１が設けられている。また、観察画面１１１の図中、右側には、マップウィンドウ１１２、選択操作ウィンドウ１１３、観察条件調整ウィンドウ１１４、およびステージ操作ウィンドウ１１５が設けられている。
【００５１】
マップウィンドウ１１２には、観察者により選択されたテンプレートのテンプレート画像１２１、つまり仮想ウェルプレートの画像が表示される。表示制御部６４は、観察者から指定されたテンプレートのテンプレート画像１２１を記録部６１から取得して、表示部３３にテンプレート画像１２１を表示させる。
【００５２】
図４において、テンプレート画像１２１上の１つの円は、１つのウェルの位置を表しており、テンプレート画像１２１として、マップウィンドウ１１２に、図中、縦方向に３個、横方向に４個の合計１２個のウェルが設けられた仮想ウェルプレートが表示されている。
【００５３】
なお、以下において、テンプレート（テンプレート画像１２１）上のウェルを特定する場合、図４中、一番上の列の左からｊ番目（但し、１≦ｊ≦４）のウェルを、ウェルＡｊとも称し、そのウェルのウェル番地がＡｊであるとする。同様に、図４中、中央の列の左からｊ番目（但し、１≦ｊ≦４）のウェルを、ウェルＢｊとも称し、そのウェルのウェル番地がＢｊであるとする。さらに、図４中、一番下の列の左からｊ番目（但し、１≦ｊ≦４）のウェルを、ウェルＣｊとも称し、そのウェルのウェル番地がＣｊであるとする。
【００５４】
したがって、例えば、図４中、左上のウェルは、ウェルＡ１であり、中央の列の左から４番目のウェルは、ウェルＢ４である。また、実際の容器１４上のウェルについても、テンプレート上のウェルと同様に、ウェルＡｊ，ウェルＢｊ，ウェルＣｊ（但し、１≦ｊ≦４）などと称することとする。
【００５５】
さらに、表示制御部６４は、観察制御部６２から供給されたステージ２１の位置情報に基づいて、テンプレート画像１２１上に、現時点における観察視野の中心の位置を示す観察マーク１２２を表示させる。この位置は、対物レンズ２４の光軸との交点の位置と一致している。
【００５６】
図４の例では、観察マーク１２２は、仮想ウェルプレートにおけるウェルＢ３内に表示されている。したがって、観察画面１１１には、ステージ２１上の容器１４における、ウェルＢ３内にある標本の観察画像が表示されていることになる。
【００５７】
上述したように、テンプレートは、ステージ２１に実際に載置された容器１４と同じ種別のものが選択される。そのため、容器１４には、マップウィンドウ１１２に表示されている仮想ウェルプレート（テンプレート）と同じ配列でウェルが設けられている。したがって、仮想ウェルプレート上の観察マーク１２２に示される位置に対応する、容器１４上の位置が、実際に顕微鏡１１により観察されていることになる。
【００５８】
このように、マップウィンドウ１１２に、テンプレート画像１２１および観察マーク１２２を表示することにより、観察者は、ステージ２１にどのような容器１４が載置されており、その容器１４のどの位置を観察しているかを容易に把握することができる。
【００５９】
また、選択操作ウィンドウ１１３には、顕微鏡１１の光学系中に配置される蛍光フィルタや、標本の観察倍率を選択するためのアイコンが設けられており、観察者は、入力部３１を操作してこれらのアイコンを選択することで、蛍光フィルタや観察倍率を変更できる。
【００６０】
例えば、選択操作ウィンドウ１１３内のアイコンが操作されると、コントローラ１３は、観察制御部６２の指示に応じて、顕微鏡１１の蛍光フィルタを変更させたり、レボルバ２５を駆動させて、観察光の光路上に配置される対物レンズ２４を変更させたりする。
【００６１】
観察条件調整ウィンドウ１１４には、観察画像の撮影時の露光条件や、標本に照射される照明光の明るさなど、標本の観察条件を調整するためのアイコンが設けられている。観察者は、入力部３１を操作してこれらのアイコンを操作することで、露光条件や照明光の明るさを調整することができる。
【００６２】
例えば、観察条件調整ウィンドウ１１４内のアイコンに対する操作がなされると、コントローラ１３は、観察制御部６２の指示に応じて顕微鏡１１を制御し、カメラ２６における露光時間や、光源２３からの照明光の明るさ（光量）を変更させる。
【００６３】
ステージ操作ウィンドウ１１５には、ステージ２１をｘ，ｙの各方向に移動させるときに操作されるアイコン、および対物レンズ２４（レボルバ２５）をｚ方向に移動させるときに操作されるアイコンが設けられている。観察者は、入力部３１を操作してこれらのアイコンを操作することで、ステージ２１や対物レンズ２４を移動させることができる。
【００６４】
図３のフローチャートの説明に戻り、表示部３３に観察ウィンドウ１０１が表示されると、観察者は入力部３１を操作して、ステージ２１に載置された容器１４全体の撮影画像であるマクロ画像を取得するモードの選択を指示する。
【００６５】
ステップＳ１３において、撮影制御部７１は、観察者の操作に応じてマクロ画像を取得するモードを選択し、マクロ画像を撮影させる。
【００６６】
すなわち、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して、容器１４内の標本の観察を、蛍光観察から明視野観察に切り替えさせる。具体的には、観察制御部６２は、標本からの観察光の光路上に配置される対物レンズ２４を、低倍率のものに変更させるとともに、光源２３の動作を停止させ、光源２２から照明光を射出させる。
【００６７】
これにより、光源２２からの照明光が容器１４に照射されて、容器１４からの観察光が、低倍率の対物レンズ２４を通ってカメラ２６に入射することになる。また、この状態で、使用者は、対物レンズ２４の焦点位置が、容器１４の中央付近のウェル内の標本の位置となるように、対物レンズ２４をｚ方向に移動させる。つまり、標本に合焦するように対物レンズ２４が移動される。
【００６８】
具体的には、まず、観察制御部６２は、対物レンズ２４の光軸中心が、記録部６１に記録されているテンプレートのウェルＢ２に対応する、容器１４のウェル内に位置するようにステージ２１を移動させる。そして使用者は、容器１４の任意の対象にピントが合うように対物レンズ２４を移動させる。使用者は合焦動作を終了すると、不図示のアイコンをクリックするなどにより観察制御部６２に合焦動作が終了したことを通知する。また、観察制御部６２は、その容器１４にピントが合った状態における対物レンズ２４のｚ方向の位置Ｚ０を一時的に保持する。
【００６９】
次に、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して、ステージ２１をｘｙ方向に所定量ずつ移動させるとともに、撮影制御部７１は、ステージ２１の移動に同期させて、コントローラ１３にステージ２１の各位置での観察画像の撮影を指示する。
【００７０】
このようにして、ステージ２１の各位置での容器１４を撮影することにより、観察制御部６２は、複数の観察画像を得る。そして、観察制御部６２は、このようにして得られた観察画像を、それらの撮影位置と同じ配置で並べて合成することで１つの画像を生成し、得られた画像をマクロ画像とする。
【００７１】
これにより、例えば、図５に示すマクロ画像１５１が得られる。なお。マクロ画像１５１において、１つの長方形は、撮影により得られた１つの観察画像を示している。つまり、マクロ画像１５１は、図中、縦方向に１３枚、横方向に１２枚の合計１５６枚の観察画像からなる。
【００７２】
また、マクロ画像１５１の中央には、ステージ２１上に配置された容器１４の画像が表示されている。この容器１４には、縦方向に３つ、横方向に４つの合計１２個のウェルが設けられており、マクロ画像１５１上において、容器１４は図中、右上方向に傾いている。
【００７３】
なお、マクロ画像を撮影するときに、対物レンズ２４のｚ方向の位置を固定したまま各領域での観察画像を撮影するのは、各位置において、多少、容器１４に焦点が合っていなくても、容器１４全体の画像が得られればよいからである。また、対物レンズ２４の焦点の位置合わせが容器１４のほぼ中央のウェル内で行われるのは、容器１４が傾いていたとしても、他の位置で焦点の位置合わせをする場合と比べて、マクロ画像の各位置でのぼけをより少なくすることができるからである。
【００７４】
また、マクロ画像は、複数枚の観察画像から生成されると説明されたが、ウェルプレート自体がかなり小さい特殊な複数のウェルを持つ容器では、１枚の画像とされてもよい。そのような場合、複数の対物レンズ２４のなかから、観察視野内に容器１４全体が収まる視野を持つものが選択されて、観察光の光路上に配置される。
【００７５】
このようにしてマクロ画像が得られると、観察制御部６２は、生成したマクロ画像を表示制御部６４に供給し、マップウィンドウ１１２への表示を指示する。
【００７６】
ステップＳ１４において、表示制御部６４は、観察制御部６２からのマクロ画像を表示部３３に供給し、マップウィンドウ１１２にマクロ画像を表示させる。
【００７７】
これにより、マップウィンドウ１１２には、例えば、図６に示すように、マクロ画像１５１がテンプレート画像１２１に重畳（スーパーインポーズ）されて表示される。図６の例では、テンプレート画像１２１の仮想ウェルプレートと、マクロ画像１５１上のウェルプレートがずれて表示されている。マクロ画像を取得したウェルプレートはステージ２１に設けられた図示していない位置決め機構によって位置決めされて固定されているが、その位置決め機構には位置決め誤差や大きさにばらつきがあるため、ウェルプレートのマクロ画像１５１がテンプレート画像１２１と表示されてしまう。
【００７８】
そこで、表示制御部６４は、マクロ画像１５１上のウェルプレートと、テンプレート画像１２１上の仮想ウェルプレートとの位置関係が、実際の容器１４（ウェルプレート）と仮想ウェルプレートとの位置関係と一致するようにマクロ画像１５１を表示させる。すなわち、マップウィンドウ１１２において、ウェルプレートが仮想ウェルプレートに対してずれていれば、実際の容器１４も、仮想ウェルプレートに対して、マップウィンドウ１１２の表示と同じ方向に同じ分だけずれて配置されていることになる。
【００７９】
図３のフローチャートの説明に戻り、マップウィンドウ１１２にマクロ画像１５１が表示されると、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して、対物レンズ２４をマクロ画像の取得前のものに変更させる。また、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して、ステージ２１の位置を、マクロ画像の取得前と同じ位置に移動させる。
【００８０】
ステップＳ１５において、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して、標本の観察を明視野観察から蛍光観察に切り替えさせる。コントローラ１３は、観察制御部６２の指示に従って、光源２２の動作を停止させ、光源２３から照明光を射出させる。これにより、光源２３からの照明光が標本に照射されるようになり、標本の蛍光観察が可能となる。
【００８１】
ところで、上述したように、観察区域情報により示される容器１４の各ウェルの位置は、実際にステージ２１に載置される容器１４が、仮想基準位置に配置されることが前提とされている。しかしながら、実際には、図６に示したように、容器１４が正確にテンプレート情報が示す位置に載置されないことがある。
【００８２】
このように、容器１４の載置位置にずれが生じると、観察区域情報から正確にウェルの位置を特定することができなくなってしまう。そこで、顕微鏡観察システムでは、より正確に観察の対象となっている領域、つまり対物レンズ２４の観察視野の中心の位置を特定できるように、観察区域情報を補正できるようになされている。
【００８３】
この観察区域情報の補正は、観察者が、テンプレート画像１２１とマクロ画像１５１が重なるようにテンプレート画像１２１を移動させて、その表示位置を修正させたときに、テンプレート画像１２１の修正時の移動方向と移動量に応じて行われる。
【００８４】
観察者は、マップウィンドウ１１２に表示されたテンプレート画像１２１と、マクロ画像１５１とを見て、観察区域情報の補正が必要だと判断した場合には、入力部３１を操作して、テンプレートの表示位置を任意の位置に移動させる。
【００８５】
例えば、観察者は、図７に示すように、マップウィンドウ１１２上においてマクロ画像１５１のウェルプレートとテンプレートとが完全に重なるように、テンプレート（仮想ウェルプレート）を任意の方向に平行移動させたり、回転移動させたりする。
【００８６】
ステップＳ１６において、観察制御部６２の修正制御部７２は、観察者の操作に応じて表示制御部６４を制御し、テンプレートの表示位置を修正する。すなわち、修正制御部７２は、入力部３１から供給された信号に基づいて、表示制御部６４にテンプレートの移動方向および移動量を通知し、マップウィンドウ１１２上におけるテンプレートの移動を制御する。表示制御部６４は、修正制御部７２からの通知に基づいてマップウィンドウ１１２上のテンプレートを移動させる。
【００８７】
このとき、マップウィンドウ１１２において、マクロ画像１５１は固定されたままとされ、テンプレート画像１２１（テンプレート）の表示位置だけが移動する。また、図７に示したように、テンプレートとマクロ画像１５１が重なった状態となると、観察者は、入力部３１を操作して、テンプレートの修正の実行を指示する。
【００８８】
すると、修正制御部７２は、観察者の操作に応じて、テンプレートの移動前の位置と、最終的にテンプレートがマクロ画像１５１に重なった状態となったときのテンプレートの位置とに基づいて、テンプレートの移動方向および移動量を求める。そして、修正制御部７２は、求めた移動方向および移動量を判別部６３の補正部７３に供給し、補正部７３に各ウェルの観察区域情報の補正を指示する。
【００８９】
なお、より詳細には、テンプレートの移動方向とは、テンプレートを平行移動させた方向と、テンプレートを回転移動させた方向をいい、テンプレートの移動量とは、テンプレートの平行移動および回転移動のそれぞれの移動量をいう。
【００９０】
ステップＳ１７において、補正部７３は、修正制御部７２から供給されたテンプレートの移動方向および移動量に基づいて、各ウェルの観察区域情報を補正する。
【００９１】
例えば、補正部７３は、観察区域情報と、テンプレートの移動方向および移動量とから、テンプレートの各ウェルの中心の移動後の位置（ｘｙ座標）を求め、それらの位置を示す情報と、ウェルの半径ｒとからなる情報を、補正後の観察区域情報とする。つまり、ウェルの中心の移動後の位置（ステージ２１のｘｙ座標）と、観察区域情報に含まれる移動前のウェルの位置（ステージ２１のｘｙ座標）との差分が、そのウェルの観察区域情報の補正値となる。
【００９２】
このように、観察区域情報を補正することにより、ステージ２１に載置された実際の容器１４の各ウェルの位置と、観察区域情報により示されるウェルの位置とのずれが修正される。これにより、対物レンズ２４の観察視野の位置をより正確に特定することができる。
【００９３】
なお、観察者が、テンプレートの位置が、得られたマクロ画像１５１の位置に対してずれていないと判断し、テンプレートの表示位置の修正を指示しなかった場合には、テンプレートの表示位置の修正および観察区域情報の補正は行われない。
【００９４】
また、テンプレートの表示位置の修正では、テンプレートが平行移動または回転移動されると説明したが、テンプレートが拡大または縮小されるようにしてもよい。そのような場合、観察区域情報の補正は、テンプレートの移動方向、移動量、拡大縮小の倍率に基づいて求められる。例えば、テンプレート上の特徴点を予め複数定めておき、テンプレートの修正前後の特徴点の位置の変化に基づいて方程式を立て、その方程式を解くことにより、補正後の各ウェルの中心の座標が求められる。
【００９５】
テンプレート画像１２１の表示位置の修正と、観察区域情報の補正とが行われると、観察者は、ステージ操作ウィンドウ１１５内のアイコン等を操作して、容器１４上の任意のウェル内から、観察目的に合った標本を探し出し、標本を蛍光観察する。
【００９６】
ステップＳ１８において、観察制御部６２は、入力部３１からの信号に基づいて、観察者によりｘｙ方向へのステージ２１の移動が指示されたか否かを判定する。
【００９７】
ステップＳ１８において、ステージ２１のｘｙ方向への移動が指示されなかったと判定された場合、ステージ２１を移動させないので、処理はステップＳ２０に進む。
【００９８】
これに対して、ステップＳ１８において、ステージ２１のｘｙ方向への移動が指示されたと判定された場合、ステップＳ１９において、観察制御部６２は、観察者の指示に応じてコントローラ１３を制御し、ステージ２１をｘｙ方向に移動させる。
【００９９】
なお、観察制御部６２は、観察者により対物レンズ２４のｚ方向の移動が指示された場合には、コントローラ１３を制御して、対物レンズ２４を移動させる。このようにして、観察者は、対物レンズ２４やステージ２１を移動させながら、任意のウェル内から、目的とする標本を見つけ出す。
【０１００】
観察者は、撮影に適した標本を見つけ出すと、ステージ２１のｘｙ方向の位置および対物レンズ２４のｚ方向の位置の微調整を行い、観察画像の撮影位置やピントを定める。そして、観察者は、入力部３１を操作することで、観察ウィンドウ１０１の観察条件調整ウィンドウ１１４上のアイコンを操作して、露光条件や照明光の明るさを調整し、さらに入力部３１を操作して、観察画像の撮影を指示する。
【０１０１】
ステップＳ１９においてステージ２１が移動されたか、またはステップＳ１８において、ステージ２１の移動が指示されなかったと判定された場合、ステップＳ２０の処理が行われる。すなわち、ステップＳ２０において、撮影制御部７１は、入力部３１からの信号に基づいて、観察画像の撮影が指示されたか否かを判定する。ステップＳ２０において、撮影が指示されなかったと判定された場合、観察画像の撮影は行わないので、処理はステップＳ２６に進む。
【０１０２】
一方、ステップＳ２０において、撮影が指示されたと判定された場合、ステップＳ２１において、撮影制御部７１は、コントローラ１３に観察画像の撮影を指示し、観察画像を撮影させる。コントローラ１３は、撮影制御部７１の指示に応じてカメラ２６に観察画像を撮影させ、カメラ２６から供給された観察画像を観察制御部６２に供給する。なお、撮影制御部７１からは、静止画像を取得するようにコントローラ１３に指示してもよいし、コントローラ１３から供給されたライブ画像から観察画像の１フレーム分をキャプチャして、観察画像としてもよい。
【０１０３】
観察制御部６２は、供給された観察画像を表示制御部６４に供給し、観察画面１１１に表示させる。また、観察制御部６２は、コントローラ１３から供給されるステージ２１の位置情報に基づいて、表示制御部６４へマップウィンドウ１１２の対象位置に撮影マークを表示する指示を行う。
【０１０４】
表示制御部６４は、観察制御部６２の指示に応じて表示部３３を制御し、マップウィンドウ１１２内のテンプレート画像１２１上における、観察画像が撮影された位置に対応する位置に、撮影マークを表示させる。この撮影マークは、観察画像が撮影された位置を示す画像である。
【０１０５】
これにより、マップウィンドウ１１２には、例えば、図８に示す撮影マーク１８１−１乃至撮影マーク１８１−３が表示される。なお、図８において、撮影マーク１８１−１乃至撮影マーク１８１−３のそれぞれは、１つの観察画像が撮影された位置を示している。なお、以下、撮影マーク１８１−１乃至撮影マーク１８１−３のそれぞれを個々に区別する必要のない場合、単に撮影マーク１８１とも称する。
【０１０６】
図８の例では、容器１４上のウェル番地Ａ１のウェル内の３箇所において、少なくとも１枚ずつ観察画像が撮影されたことになる。撮影マーク１８１は、観察画像が撮影されるごとに、その観察画像が撮影された位置に表示されていく。このように、観察画像が撮影された位置に、撮影マーク１８１を表示させることにより、観察者は、容器１４上のどの位置で観察画像を撮影したかを簡単に知ることができる。
【０１０７】
図３のフローチャートの説明に戻り、撮影マークを表示させると、観察制御部６２は、さらに、観察画像が撮影されたときのステージ２１の位置情報（ｘｙ座標）を判別部６３に供給し、観察画像が撮影された領域の特定を指示する。
【０１０８】
すると、ステップＳ２２において、判別部６３は、一時的に保持している補正後の観察区域情報と、観察制御部６２からの位置情報とに基づいて、観察画像が撮影された容器１４上のウェルを特定する。すなわち、観察画像が撮影されたときの対物レンズ２４の観察視野の中心が、容器１４上のどの位置にあったかが特定される。
【０１０９】
例えば、判別部６３は、保持しているテンプレート情報に含まれる複数の観察区域情報のうちの１つを選択する。そして、判別部６３は、位置情報により示されるステージ２１のｘｙ座標が、選択した観察区域情報により示されるウェルの中心のｘｙ座標を中心とする、ウェルの半径ｒの円の領域内の座標である場合、観察画像の撮影位置が、そのウェル内であるとする。つまり、観察画像が撮影されたときの対物レンズ２４の観察視野の中心が、そのウェル内に位置していたと特定される。
【０１１０】
また、判別部６３は、保持している全ての観察区域情報について、観察画像の撮影位置が、観察区域情報に示されるウェル内ではないとされた場合、観察画像の撮影された位置は、容器１４におけるウェルの領域とは異なる領域であるとする。すなわち、例えば、ウェル同士の間に設けられたウェル壁の領域に、対物レンズ２４の光軸が位置する状態で観察画像が撮影されたとする。
【０１１１】
判別部６３は、観察画像の撮影位置、つまり観察の対象となった領域を特定すると、その特定結果を観察制御部６２に供給する。
【０１１２】
例えば、観察画像が撮影された位置が、容器１４上のウェルＡ４であると特定された場合、判別部６３は、観察画像の撮影位置がウェル番地Ａ４のウェルである旨の特定結果を観察制御部６２に供給する。また、例えば、観察画像が撮影された位置が、容器１４上のウェルの領域とは異なる領域であると特定された場合、判別部６３は、観察画像の撮影位置がウェルの領域以外の領域である旨の特定結果を観察制御部６２に供給する。
【０１１３】
ステップＳ２３において、観察制御部６２は、判別部６３からの特定結果に基づいて、観察画像の撮影位置が容器１４上のウェル内であるか否かを判定する。
【０１１４】
ステップＳ２３においてウェル内であると判定された場合、ステップＳ２４において、観察制御部６２は、撮影された観察画像とともに、観察画像が撮影された容器１４のウェルを特定するウェル番地等を記録部６１に供給し、観察画像とウェル番地を記録させる。
【０１１５】
すると、記録部６１は、観察制御部６２から供給された観察画像と、ウェル番地とを関連付けて記録する。例えば、観察画像の撮影が行われたウェルが、ウェルＡ１であり、その観察画像の撮影が、ウェルＡ１内での１箇所目の撮影であった場合、観察画像のファイル名が「Ａ１−１」などとされて観察画像が記録される。これにより、各観察画像がどの位置で撮影されたものであるかを観察者に対して提示することができる。また、観察者がいちいち各観察画像の撮影位置を記録したり、入力したりする必要もなくなり、より簡単に、かつ間違いなく観察画像の管理をすることができるようになる。
【０１１６】
なお、観察画像には、ウェル番地の他、露光時間などの観察条件や、ステージ２１の位置情報、対物レンズ２４のｚ方向の位置を示す座標なども関連付けられて記録されるようにしてもよい。
【０１１７】
ステップＳ２４において観察画像が記録されると、その後、処理はステップＳ２６に進む。
【０１１８】
一方、ステップＳ２３においてウェル内ではないと判定された場合、ステップＳ２５において、観察制御部６２は観察者に警告を発し、その後、処理はステップＳ２６に進む。
【０１１９】
例えば、観察制御部６２は、表示制御部６４に対して警告の表示を指示し、表示制御部６４は、その指示に応じて、観察ウィンドウ１０１上の観察画面１１１に、「観察画像の撮影位置がウェル内ではありません」等の文字メッセージを表示させる。また、観察制御部６２が、観察画面１１１に表示された文字メッセージと同じ内容の音声メッセージを、図示せぬスピーカに出力させるようにしてもよい。
【０１２０】
このように、観察画像の撮影位置が、容器１４上のウェル内の領域でない場合、撮影された観察画像は、ウェル内の標本が表示される画像ではないため、観察画像の記録は行われない。これにより、無駄な観察画像が記録されてしまうことを防止することができる。なお、警告が発せられた場合でも、観察画像が記録部６１に記録されるようにしてもよい。
【０１２１】
ステップＳ２５において警告が発せられたか、ステップＳ２４において観察画像が記録されたか、またはステップＳ２０において撮影が指示されなかったと判定された場合、ステップＳ２６において、観察制御部６２は処理を終了するか否かを判定する。例えば、観察者が入力部３１を操作して、標本の観察の終了を指示した場合、処理を終了すると判定される。
【０１２２】
ステップＳ２６において、処理を終了しないと判定された場合、処理はステップＳ１８に戻り、上述した処理が繰り返される。すなわち、容器１４上の任意のウェル内での観察が継続して行われる。
【０１２３】
また、ステップＳ２６において、処理を終了すると判定された場合、観察制御部６２は、コントローラ１３を制御して顕微鏡１１での観察を終了させ、観察処理は終了する。
【０１２４】
このようにして、顕微鏡観察システムは、マップウィンドウ１１２にテンプレートとマクロ画像を重畳して表示させるとともに、観察者の操作に応じてテンプレートの表示位置を修正する。また、顕微鏡観察システムは、テンプレートの修正結果に基づいて、テンプレートの各ウェルの観察区域情報を補正する。
【０１２５】
このように、テンプレートの修正結果に基づいて、各ウェルの観察区域情報を補正することにより、テンプレートの各ウェルの位置と、実際にステージ２１上に載置されている容器１４の各ウェルの位置とを一致させることができる。したがって、観察の対象となっている対物レンズ２４の観察視野の位置をより正確に特定することができる。また、観察画像に対して、その観察画像が撮影された正確なウェル番地を関連付けて記録できるようになる。
【０１２６】
なお、以上においては、テンプレート画像１２１の移動方向および移動量に基づいて、観察区域情報が補正されると説明したが、観察区域情報の補正は、実際の容器１４上のウェルの位置と、観察区域情報により示されるウェルの位置とのずれが修正されれば、どのように行われてもよい。
【０１２７】
例えば、ステージ２１上にテンプレート情報が示す容器１４の輪郭線の一部を示す位置を表す線等が予め引かれており、観察者がその線と容器１４の該当する輪郭とのずれ量を計測し、その計測結果を、入力部３１を操作して入力すると、その入力に基づいて、補正部７３が観察区域情報を補正するようにしてもよい。また、例えば、容器１４の配置位置のテンプレート情報が示す位置に対するずれ量を検出するセンサを、予めステージ２１に設けておき、そのセンサの出力に基づいて、補正部７３が観察区域情報を補正するようにしてもよい。
【０１２８】
さらに、例えば、補正部７３が、マクロ画像から容器１４の輪郭を抽出し、抽出した容器１４の輪郭の画像と、テンプレート画像とを用いたパターンマッチングにより、容器１４のずれ量を検出して観察区域情報を補正するようにしてもよい。
【０１２９】
さらに、以上においては、容器１４としてウェルプレートが用いられる例について説明したが、容器１４として複数の区域に仕切られた４分割ディッシュなどが用いられてもよい。
【０１３０】
例えば、テンプレートとして、４分割ディッシュが選択された場合、図９に示すように、マップウィンドウ１１２には、４分割ディッシュを表すテンプレート画像２１１が表示される。この場合、テンプレート情報に含まれる観察区域情報は、４分割ディッシュに設けられた、標本が入れられる各区域の位置を特定するための情報とされる。
【０１３１】
また、マクロ画像を取得するモードの選択が指示されると、ステージ２１上に載置された４分割ディッシュのマクロ画像の撮影が行われ、その結果、例えば、図１０に示す４分割ディッシュのマクロ画像２４１が得られる。そして、図１１に示すように、マップウィンドウ１１２には、マクロ画像２４１がテンプレート画像２１１に重畳（スーパーインポーズ）されて表示される。
【０１３２】
さらに、図１２に示すように、観察者の入力部３１への操作により、マップウィンドウ１１２上のテンプレート画像２１１（テンプレート）が、マクロ画像２４１上の容器１４と重なるように、テンプレート画像２１１が移動される。そして、テンプレート画像２１１の移動方向および移動量から、観察区域情報が補正される。
【０１３３】
〈第２の実施の形態〉
［顕微鏡観察システムの動作］
また、以上においては、観察者の操作により観察画像が撮影されると説明したが、観察者が観察画像を撮影する位置（以下、撮影ポイントと称する）を登録しておき、それらの登録された位置でタイムラプス観察が行われるようにしてもよい。
【０１３４】
そのような場合、観察者が容器１４をステージ２１上に載置し、入力部３１を操作してタイムラプス観察時の撮影ポイントの指定の開始を指示すると、顕微鏡観察システムは、その指示に応じて撮影ポイントの登録を行なう処理である登録処理を開始する。
【０１３５】
以下、図１３のフローチャートを参照して、顕微鏡観察システムによる登録処理について説明する。なお、図１３において、ステップＳ６１乃至ステップＳ６９の処理のそれぞれは、図３のステップＳ１１乃至ステップＳ１９の処理のそれぞれと同様であるので、その説明は省略する。
【０１３６】
観察者は、撮影に適した標本を見つけ出すと、ステージ２１のｘｙ方向の位置および対物レンズ２４のｚ方向の位置の微調整を行い、観察画像の画角やピントを定める。そして、観察者は、入力部３１を操作することで、ステージ２１のｘｙ方向の位置、および対物レンズ２４のｚ方向の位置を、観察画像を撮影する位置である撮影ポイントとして登録するように指示する。
【０１３７】
ステップＳ７０において、観察制御部６２は、撮影ポイントの登録が指示されたか否かを判定する。
【０１３８】
ステップＳ７０において、登録が指示されなかったと判定された場合、処理はステップＳ７５に進む。
【０１３９】
これに対して、ステップＳ７０において、登録が指示されたと判定された場合、観察制御部６２は、登録が指示された時点でのステージ２１の位置情報を判別部６３に供給して、容器１４上の位置の特定を指示し、処理はステップＳ７１に進む。
【０１４０】
ステップＳ７１において、判別部６３は、一時的に保持している補正後の観察区域情報と、観察制御部６２からの位置情報とに基づいて、登録が指示された撮影ポイントが含まれる容器１４上のウェルを特定する。
【０１４１】
すなわち、ステップＳ７１では、図３のステップＳ２２の処理と同様の処理が行われ、撮影ポイントの登録が指示されたときの対物レンズ２４の観察視野の中心が、容器１４上のどの位置にあったかが特定される。
【０１４２】
判別部６３は、撮影ポイントの位置、つまり観察の対象となった領域を特定すると、その特定結果を観察制御部６２に供給する。
【０１４３】
ステップＳ７２において、観察制御部６２は、判別部６３からの特定結果に基づいて、撮影ポイントの位置が容器１４上のウェル内であるか否かを判定する。
【０１４４】
ステップＳ７２においてウェル内であると判定された場合、ステップＳ７３において、観察制御部６２は、判別部６３からの特定結果に基づいて、指示された撮影ポイントを特定するための撮影位置登録情報を生成する。そして、観察制御部６２は、生成した撮影位置登録情報を記録部６１に供給して記録させる。
【０１４５】
例えば、登録が指示された時点でのステージ２１の位置情報、対物レンズ２４のｚ方向の位置、撮影ポイントを特定する識別番号、および照明光の明るさや露光時間等の現時点での標本の観察条件を示す情報からなる撮影位置登録情報が生成される。
【０１４６】
ここで、撮影ポイントの識別番号は、撮影ポイントが含まれるウェルのウェル番地と、そのウェル内における何個目の撮影ポイントであるかを示す情報からなる。具体的には、撮影ポイントがウェルＡ１内に位置する２個目の撮影ポイントであるとすると、その撮影ポイントの識別番号は、「Ａ１−２」とされる。
【０１４７】
なお、撮影位置登録情報は、登録された順番に並べられて記録される。したがって、制御装置３２は、撮影位置登録情報が並べられている順番から、タイムラプス観察時に、観察画像を撮影していく撮影ポイントの順番を知ることができる。
【０１４８】
さらに、観察制御部６２は、撮影位置登録情報が記録されて撮影ポイントが登録されると、マップウィンドウ１１２における、その撮影ポイントの位置に、登録された撮影ポイントであることを示す登録マークを表示させるように、表示制御部６４に指示する。すると、表示制御部６４は、観察制御部６２からの指示に応じて、表示部３３を制御し、マップウィンドウ１１２に、登録マークを表示させる。これにより、ウェル内の同じ標本の位置を、観察者が撮影ポイントとして重複して登録してしまうことを防止することができる。
【０１４９】
このようにして、記録部６１に撮影位置登録情報が記録されると、その後、処理はステップＳ７５に進む。
【０１５０】
また、ステップＳ７２においてウェル内ではないと判定された場合、ステップＳ７４において、観察制御部６２は観察者に警告を発し、その後、処理はステップＳ７５に進む。例えば、ステップＳ７４では、図３のステップＳ２５と同様の処理が行われて、観察画面１１１に、観察画像の撮影位置がウェル内ではない旨の文字メッセージが表示される。
【０１５１】
このように、登録しようとする撮影ポイントの位置が、容器１４上のウェル内の領域でない場合、撮影ポイントで撮影される観察画像は、ウェル内の標本が表示される画像ではないため、撮影ポイントの登録は行われない。これにより、タイムラプス観察時に、無駄な観察画像が記録されてしまうことを防止することができる。なお、警告が発せられた場合でも、撮影ポイントが登録されるようにしてもよい。
【０１５２】
ステップＳ７４において警告が発せられたか、ステップＳ７３において撮影ポイントが登録されたか、またはステップＳ７０において登録が指示されなかったと判定されると、ステップＳ７５の処理が行われる。
【０１５３】
すなわち、ステップＳ７５において、観察制御部６２は、観察動作条件の入力が指示されたか否かを判定する。
【０１５４】
例えば、観察者は、全ての撮影ポイントの登録を終えると、入力部３１を操作して、タイムラプス観察の撮影時間間隔、撮影回数（ラウンド数）など、タイムラプス観察を行うときの観察動作条件の入力を指示する。観察制御部６２は、入力部３１から、観察動作条件の入力を指示する旨の信号が供給されると、入力が指示されたと判定する。
【０１５５】
ステップＳ７５において、観察動作条件の入力が指示されなかったと判定された場合、処理はステップＳ６８に戻り、上述した処理が繰り返される。
【０１５６】
これに対して、ステップＳ７５において、観察動作条件の入力が指示されたと判定された場合、ステップＳ７６において、観察制御部６２は、観察者により入力された観察動作条件を示す観察動作条件情報を記録部６１に供給し、記録させる。
【０１５７】
例えば、観察者が、撮影時間間隔として３０分を指定し、撮影回数として４９回を指定したとすると、観察制御部６２は、観察動作条件として、撮影時間間隔「３０分」および撮影回数「４９回」を示す観察動作条件情報を記録部６１に供給して、記録させる。
【０１５８】
この場合、登録された全ての撮影ポイントで観察画像を撮影する処理が、３０分間隔で４９回繰り返されることになり、これらの一連の処理が終了するまでに２４時間（＝30×（49−1）＝1440分）かかることになる。
【０１５９】
このようにして、記録部６１に観察動作条件情報が記録されると、登録処理は終了する。
【０１６０】
以上のように、顕微鏡観察システムは、テンプレートの修正結果に基づいて、各ウェルの観察区域情報を補正することにより、テンプレートの各ウェルの位置と、実際にステージ２１上に載置されている容器１４の各ウェルの位置とを一致させることができる。したがって、登録が指示された撮影ポイントの位置をより正確に特定することができ、標本の写らない無駄な撮影ポイントが登録されてしまうことを防止することができる。また、登録された撮影ポイントと、その撮影ポイントのある容器１４上のウェルを特定する情報とを関連付けて記録できるようになる。
【０１６１】
記録部６１に、各撮影ポイントの撮影位置登録情報と、観察動作条件情報とが記録されると、観察者は顕微鏡観察システムに対して、それらの情報に基づくタイムラプス観察をさせることができるようになる。観察者が入力部３１を操作して、タイムラプス観察を指示すると、顕微鏡観察システムは、その指示に応じてタイムラプス観察処理を開始する。
【０１６２】
以下、図１４のフローチャートを参照して、顕微鏡観察システムによるタイムラプス観察処理について説明する。
【０１６３】
ステップＳ１１１において、観察制御部６２は、記録部６１に記録されている観察動作条件情報を参照して、各撮影ポイントにおける観察画像を撮影する時刻となったか否かを判定する。
【０１６４】
ステップＳ１１１において、撮影する時刻となっていないと判定された場合、処理はステップＳ１１１に戻り、撮影する時刻となったと判定されるまで判定の処理が繰り返される。
【０１６５】
これに対して、ステップＳ１１１において、撮影する時刻となったと判定された場合、ステップＳ１１２において、観察制御部６２は、記録部６１に順番に並べられて記録されている撮影位置登録情報を参照して、撮影ポイントを１つ選択する。
【０１６６】
ステップＳ１１３において、カメラ２６は、選択された撮影ポイントでの観察画像を撮影する。すなわち、観察制御部６２は、選択した撮影ポイントの撮影位置登録情報に基づいてコントローラ１３を制御し、対物レンズ２４の観察視野の中心が撮影ポイントに位置するようにステージ２１を移動させるとともに、撮影位置登録情報に示される位置に対物レンズ２４を移動させる。また、観察制御部６２は、撮影位置登録情報に基づいてコントローラ１３を制御し、カメラ２６における露光時間や、照明光の明るさも変更させる。さらに、撮影制御部７１は、コントローラ１３を制御して、選択された撮影ポイントにおける観察画像を撮影させる。
【０１６７】
コントローラ１３は、ステージ２１やレボルバ２５を移動させたり、露光時間や照明光の明るさを変更させたりするとともに、カメラ２６に観察画像を撮影させ、撮影により得られた観察画像を観察制御部６２に供給する。
【０１６８】
また、観察画像の撮影時において、観察制御部６２は、観察画像の撮影位置登録情報を表示制御部６４に供給し、観察画像に関する情報の表示を指示する。すると、表示制御部６４は、観察制御部６２の指示に応じて表示部３３を制御し、現在、どのウェルの何個目の撮影ポイントを撮影しているかを示す文字を観察画面１１１に表示させるとともに、マップウィンドウ１１２に、その撮影ポイントの撮影マークを表示させる。例えば、観察画面１１１に表示される文字は「ウェル番地Ｂ２のポイント２で観察画像を撮影しています」などとされる。
【０１６９】
ステップＳ１１４において、観察制御部６２は、コントローラ１３から供給された観察画像と、撮影ポイントおよびラウンドを特定する情報とを記録部６１に供給し、関連付けて記録させる。
【０１７０】
例えば、撮影ポイントが、ウェルＢ２内の２個目の撮影ポイントであり、今回の観察画像の撮影が、その撮影ポイントの３回目の撮影である（３ラウンド目である）場合、観察制御部６２は、観察画像のファイル名を「Ｂ２−２−０００３」として記録させる。つまり、撮影ポイントの識別番号にラウンド数が付加された文字列がファイル名とされる。
【０１７１】
ステップＳ１１５において、観察制御部６２は、全ての撮影ポイントで観察画像を撮影したか否かを判定する。ステップＳ１１５において、まだ全ての撮影ポイントで観察画像を撮影していないと判定された場合、処理はステップＳ１１２に戻り、上述した処理が繰り返される。すなわち、次の撮影ポイントの観察画像が撮影される。
【０１７２】
これに対して、ステップＳ１１５において、全ての撮影ポイントで観察画像を撮影したと判定された場合、１つのラウンドが終了したので、ステップＳ１１６において、観察制御部６２は、全てのラウンドが終了したか否かを判定する。
【０１７３】
ステップＳ１１６において、まだ全てのラウンドが終了していないと判定された場合、処理はステップＳ１１１に戻り、上述した処理が繰り返される。すなわち、次のラウンドでの観察画像の撮影が行われる。
【０１７４】
一方、ステップＳ１１６において、全てのラウンドが終了したと判定された場合、タイムラプス観察処理は終了する。
【０１７５】
このようにして、顕微鏡観察システムは、記録されている撮影位置登録情報および観察動作条件情報に基づいて、タイムラプス観察を行い、各撮影ポイントの観察画像を記録する。観察画像の記録時に、撮影ポイントとラウンド数とを特定できるようにファイル名を定めることで、より効率的、かつ確実に観察画像の管理を行うことができる。
【０１７６】
なお、本発明の実施の形態は、上述した実施の形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲において種々の変更が可能である。
【符号の説明】
【０１７７】
１１ 顕微鏡， １２ パーソナルコンピュータ， １３ コントローラ， １４ 容器， ２１ ステージ， ２４ 対物レンズ， ２６ カメラ， ３２ 制御装置， ６１ 記録部， ６２ 観察制御部， ６３ 判別部， ６４ 表示制御部， ７１ 撮影制御部， ７２ 修正制御部， ７３ 補正部
【特許請求の範囲】
【請求項１】
観察対象の標本が入れられる複数の標本収容部を有する容器が、顕微鏡のステージ上に載置されたときの前記標本収容部の位置を示す観察区域情報を記録する記録手段と、
前記ステージに載置された前記容器における前記標本収容部の位置と、前記観察区域情報により示される前記標本収容部の位置とのずれが修正されるように、前記観察区域情報を補正する補正手段と、
前記補正手段により補正された前記観察区域情報と、前記顕微鏡の対物レンズおよび前記ステージの相対的な位置関係とに基づいて、前記ステージ上の前記容器において、前記対物レンズの観察視野となっている領域が含まれる前記標本収容部を特定する特定手段と
を備えることを特徴とする制御装置。
【請求項２】
前記記録手段は、前記容器に設けられた前記標本収容部の数、形状、大きさ、または配置のうちの少なくとも１つが互いに異なる複数の前記容器の前記観察区域情報を記録し、
前記特定手段は、複数の前記容器のうち、ユーザにより指定された前記容器の前記観察区域情報を用いて、前記観察視野となっている領域が含まれる前記標本収容部を特定する
ことを特徴とする請求項２に記載の制御装置。
【請求項３】
前記対物レンズの前記観察視野内にある領域を被写体として、観察画像を撮影させる撮影制御手段と、
前記特定手段により特定された、前記観察画像の撮影時に前記観察視野となっていた領域が含まれる前記標本収容部を示す情報と、前記観察画像とを関連付けて記録させる記録制御手段とをさらに備える
ことを特徴とする請求項１または請求項２に記載の制御装置。
【請求項４】
前記記録手段は、前記ステージ上に配置された仮想的な前記容器全体を表すテンプレート画像の画像データをさらに記録し、
前記撮影制御手段は、前記ステージに載置された前記容器全体の画像をマクロ画像として撮影させ、
前記テンプレート画像と、前記マクロ画像とを重畳して表示させる表示制御手段と、
ユーザの操作に応じて、表示されている前記テンプレート画像の仮想的な前記容器を、前記マクロ画像の前記容器に対して移動させる移動制御手段とをさらに備え、
前記補正手段は、前記マクロ画像の前記容器に対する前記テンプレート画像の仮想的な前記容器の移動方向および移動量に基づいて、前記観察区域情報を補正する
ことを特徴とする請求項３に記載の制御装置。
【請求項５】
前記表示制御手段は、表示されている前記テンプレート画像の仮想的な前記容器上に、前記対物レンズの前記観察視野の位置を示す画像をさらに表示させる
ことを特徴とする請求項４に記載の制御装置。
【請求項６】
前記表示制御手段は、表示されている前記テンプレート画像の仮想的な前記容器上に、前記観察画像が撮影された位置を示す画像をさらに表示させる
ことを特徴とする請求項４または請求項５に記載の制御装置。
【請求項７】
前記観察画像が撮影された領域が、前記容器における前記標本収容部内の領域でないと前記特定手段により特定された場合、警告を発する警告手段をさらに備える
ことを特徴とする請求項３乃至請求項６の何れかに記載の制御装置。
【請求項８】
光源からの照明光を前記標本に照射する照明光学系と、前記標本からの観察光を集光して前記標本の像を結像する結像光学系とを有する前記顕微鏡と、
請求項１乃至請求項７の何れかに記載の制御装置と
を備えることを特徴とする顕微鏡システム。
【請求項１】
観察対象の標本が入れられる複数の標本収容部を有する容器が、顕微鏡のステージ上に載置されたときの前記標本収容部の位置を示す観察区域情報を記録する記録手段と、
前記ステージに載置された前記容器における前記標本収容部の位置と、前記観察区域情報により示される前記標本収容部の位置とのずれが修正されるように、前記観察区域情報を補正する補正手段と、
前記補正手段により補正された前記観察区域情報と、前記顕微鏡の対物レンズおよび前記ステージの相対的な位置関係とに基づいて、前記ステージ上の前記容器において、前記対物レンズの観察視野となっている領域が含まれる前記標本収容部を特定する特定手段と
を備えることを特徴とする制御装置。
【請求項２】
前記記録手段は、前記容器に設けられた前記標本収容部の数、形状、大きさ、または配置のうちの少なくとも１つが互いに異なる複数の前記容器の前記観察区域情報を記録し、
前記特定手段は、複数の前記容器のうち、ユーザにより指定された前記容器の前記観察区域情報を用いて、前記観察視野となっている領域が含まれる前記標本収容部を特定する
ことを特徴とする請求項２に記載の制御装置。
【請求項３】
前記対物レンズの前記観察視野内にある領域を被写体として、観察画像を撮影させる撮影制御手段と、
前記特定手段により特定された、前記観察画像の撮影時に前記観察視野となっていた領域が含まれる前記標本収容部を示す情報と、前記観察画像とを関連付けて記録させる記録制御手段とをさらに備える
ことを特徴とする請求項１または請求項２に記載の制御装置。
【請求項４】
前記記録手段は、前記ステージ上に配置された仮想的な前記容器全体を表すテンプレート画像の画像データをさらに記録し、
前記撮影制御手段は、前記ステージに載置された前記容器全体の画像をマクロ画像として撮影させ、
前記テンプレート画像と、前記マクロ画像とを重畳して表示させる表示制御手段と、
ユーザの操作に応じて、表示されている前記テンプレート画像の仮想的な前記容器を、前記マクロ画像の前記容器に対して移動させる移動制御手段とをさらに備え、
前記補正手段は、前記マクロ画像の前記容器に対する前記テンプレート画像の仮想的な前記容器の移動方向および移動量に基づいて、前記観察区域情報を補正する
ことを特徴とする請求項３に記載の制御装置。
【請求項５】
前記表示制御手段は、表示されている前記テンプレート画像の仮想的な前記容器上に、前記対物レンズの前記観察視野の位置を示す画像をさらに表示させる
ことを特徴とする請求項４に記載の制御装置。
【請求項６】
前記表示制御手段は、表示されている前記テンプレート画像の仮想的な前記容器上に、前記観察画像が撮影された位置を示す画像をさらに表示させる
ことを特徴とする請求項４または請求項５に記載の制御装置。
【請求項７】
前記観察画像が撮影された領域が、前記容器における前記標本収容部内の領域でないと前記特定手段により特定された場合、警告を発する警告手段をさらに備える
ことを特徴とする請求項３乃至請求項６の何れかに記載の制御装置。
【請求項８】
光源からの照明光を前記標本に照射する照明光学系と、前記標本からの観察光を集光して前記標本の像を結像する結像光学系とを有する前記顕微鏡と、
請求項１乃至請求項７の何れかに記載の制御装置と
を備えることを特徴とする顕微鏡システム。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【公開番号】特開２０１１−４７６９５（Ｐ２０１１−４７６９５Ａ）
【公開日】平成２３年３月１０日（２０１１．３．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１９４４３８（Ｐ２００９−１９４４３８）
【出願日】平成２１年８月２５日（２００９．８．２５）
【出願人】（０００００４１１２）株式会社ニコン (12,601)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年３月１０日（２０１１．３．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年８月２５日（２００９．８．２５）
【出願人】（０００００４１１２）株式会社ニコン (12,601)
【Ｆターム（参考）】
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