器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する組成物
【課題】 器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する新規な組成物の提供。
【解決手段】 アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物およびドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する組成物。
【解決手段】 アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物およびドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
高次脳機能とは、注意、記憶、知覚、言語、計算などの脳機能を指し、脳梗塞、一過性脳虚血発作などの虚血性脳卒中、脳出血、くも膜下出血などの出血性脳卒中や脳震盪や脳挫傷などの外傷性疾患により、器質的な脳障害が生じた時に、高次脳機能障害が認められる。高次脳機能障害には、半側身体失認、地誌的障害、 失認症、失語症、記憶障害、失行症、注意障害、遂行機能障害や行動や情緒の障害などが挙げられる。
【０００３】
こうした高次脳機能障害に対しては、種々の治療薬が研究・開発が進められているが、そのほとんどは器質的脳障害の原因に対する対症療法であり、低下した高次脳機能を改善又は向上させる化合物については、残念ながら有効な化合物が見出されていないのが現状である。つまり、高次脳機能障害を判定し、改善効果を評価する方法は、ミニメンタルステイツ検査（MMSE）、改訂長谷川式簡易知能評価スケール（HDS-R）やウェクスラー知能検査（WAIS-R）などを挙げることができる。しかし、MMSEやHDS-Rでは、高次脳機能の改善又は向上を評価するには精度にと再現性に欠け、WAIS-Rでは時間と労力がかかり過ぎるといった欠点があった。そこで、客観的に高次脳機能の改善又は向上を目的に薬剤を開発・研究するためには、高次脳機能を客観的に評価する有効手段が必要であった。
【０００４】
最近、高次脳機能をより高精度に再現性を持って評価する方法としてRBANS神経心理テストに注目が集まっている。RBANS神経心理テストは、米国のRandolphが開発した Repeatable Battery for the Assessment of Neuropsychological Statusの略称で、３０分程度の短時間で、繰り返し、評価し得る神経心理テスト課題である。このRBANS神経心理テストは、老人性認知症や統合失調症に代表される精神神経疾患などの早期診断や経過観察、および治療効果の判定に威力を発揮し、脳血管障害や頭部外傷後の後遺症、すなわち高次脳機能障害の判定にも有用であると考えられている［山嶋哲盛ら 脳神経 Vol.54 463-471 (2002)］。したがって、RBANS神経心理テストによりヒトの高次脳機能を短時間で再現性良く判定することができるようになった。
【０００５】
脳は脂質の塊のような組織であって、例えば、白質においては1/3が、灰白質においては1/4がリン脂質に占められている。脳の各種細胞膜を構成しているリン脂質中の高度不飽和脂肪酸は、アラキドン酸とドコサヘキサエン酸が主である。しかし、これらアラキドン酸とドコサヘキサエン酸は動物体内ではde novo合成できず、直接あるいは間接的（アラキドン酸の前駆体となるリノール酸、ドコサヘキサエン酸の前駆体となるα-リノレン酸）に食事から摂取する必要がある。そこで、アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸の学習記憶能力の向上、老人性痴呆症の予防回復に注目が集っている。
【０００６】
ドコサヘキサエン酸については、魚油という豊富な供給源が存在することから、脳機能改善に関する種々の研究がなされ、学習能力増強剤、記憶力増強剤、痴呆予防剤、痴呆治療剤、抗痴呆薬または脳機能改善効果を有する機能性食品等（特開平7-82146、特開平5-117147、特開平2-49723）の特許が出願されている。そして、アラキドン酸及び/又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物については、最近、特開2003-048831「脳機能低下に起因する症状あるいは疾患の予防又は改善作用を有する組成物」において、加齢動物をモリス型水迷路試験に供して、加齢に伴う学習能の低下をアラキドン酸及び/又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物を投与することにより改善することを明らかにされている。
【０００７】
また、群馬大学医学部の宮永らは、正常者26名を対象に、2400mgのDHAを含有するカプセルを経口的に服用させ、服用前と服用2時間後に認知応答と相関のある事象関連電位（P300）を測定して、P300の潜時が有意に短縮し、振幅も有意に高くなることを見出している［宮永和夫、食の科学、P84-96（1999）］。しかし、擬似サンプルとの比較結果ではなく、血中DHA濃度とP300の結果に相関が認められていない、さらに、正常老人97名を対象に、900mgのDHAを含有するカプセルを6ヶ月間、毎日服用させた長期投与試験では、P300に何ら変化がなく、DHAの有効性を示すには全く不十分な内容であった。
【０００８】
さらに宮永らは、１日あたり700〜1400mgのDHAを含有するカプセルを６ヶ月間経口的に服用させ、脳血管性痴呆13例中10例に、またアルツハイマー型痴呆5例全例にやや改善以上の効果が認められたと報告している［宮永和夫、臨床栄養、881-901（1995）］。しかし、記憶・学習能力ではなく、意志の伝達、意欲・発動性の向上、せん妄、徘徊、うつ状態、歩行障害の改善が示されたに過ぎない。
【０００９】
このように、アラキドン酸やドコサヘキサエン酸に記憶・学習能力改善効果が期待されるとされながら、健常高齢者の事象関連電位の改善や脳血管性痴呆患者、アルツハイマー患者の情動や行動障害を改善したことが示されたにとどまっており、器質的脳障害による高次脳機能の低下に対して、改善又は向上作用を有するかどうかは全く明らかではなかった。
したがって、器質的脳障害による高次脳機能の低下を改善又は向上させ、医薬、さらには食品への適応に優れた副作用の少ない化合物の開発が強く望まれている。
【００１０】
【特許文献１】特開2003-048831
【非特許文献１】宮永和夫、食の科学、P84-96（1999）
【非特許文献２】宮永和夫、臨床栄養、881-901（1995）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
従って本発明は、アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物並びにドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を有効成分とする、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品及びその製造方法を提供しようとするものである。より詳細には、アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸、アラキドン酸又はドコサヘキサエン酸のアルコールエステル並びに構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であるトリグリセリド、リン脂質及び糖脂質の群から選ばれた少なくとも1種を有効成分とする器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品及びその製造方法を提供しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者等は、アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物並びにドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物の、高次脳機能の低下に対する改善作用を明らかにする目的で鋭意研究した結果、驚くべきことに、RBANS神経心理テストを指標に評価することで、アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物並びにドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物の器質的脳障害による高次脳機能障害患者に対する効果をヒトで明らかにした。
【００１３】
従って本発明は、アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物並びにドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を有効成分とする、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品及びその製造方法を提供する。より詳細には、アラキドン酸並びにドコサヘキサエン酸、アラキドン酸又はドコサヘキサエン酸のアルコールエステル、さらに構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であるトリグリセリド、リン脂質及び糖脂質の群から選ばれた少なくとも1種を有効成分とする器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品及びその製造方法を提供しようとするものである。
【００１４】
本発明により、アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物並びにドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を有効成分とする、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品及びその製造方法を提供することができ、現代社会の人類において特に有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本発明は、アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物並びにドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を有効成分とする、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品及びその製造方法に関するものである。
【００１６】
器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下とは、脳梗塞、一過性脳虚血発作などの虚血性脳卒中、脳出血、くも膜下出血などの出血性脳卒中、脳震盪や脳挫傷などの外傷性疾患等が原因である器質的な脳障害により生じる、半側身体失認、地誌的障害、失認症、失語症、記憶障害、失行症、注意障害、遂行機能障害や行動や情緒の障害などを挙げることができるが、これらの障害に限定しているわけではなく、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に伴う症状はすべて含まれる。
【００１７】
本発明の有効成分はアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であって、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とするすべての化合物も利用することができる。アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物には、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸の塩類、例えばカルシウム塩、ナトリウム塩などを挙げることができる、また、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸のアルコールエステル、例えばアラキドン酸メチルエステル、ドコサヘキサエン酸エチルエステルなどを挙げることができる。また、構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であるトリグリセリド、ジグリセリド、モノグリセリド、リン脂質、さらには糖脂質などを利用することができる。
【００１８】
食品への適応を考えた場合には、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸はトリグリセリドやリン脂質の形態、特にトリグリセリドの形態にすることが望ましい。
【００１９】
従って本発明においては、本発明の有効成分である構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であるトリグリセリドを含有するトリグリセリド（アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を含有するトリグリセリド）を使用することができる。アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を含有するトリグリセリドとしては、トリグリセリドを構成する全脂肪酸のうちアラキドン酸またはドコサヘキサエン酸の割合が5重量(W/W)%以上、好ましくは10重量%以上、より好ましくは20重量%以上、もっと好ましくは30重量%以上である油脂（トリグリセリド）が食品に適用する場合には望ましい形態となる。したがって、本発明において、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を含有する油脂（トリグリセリド）を生産する能力を有する微生物を培養して得られたものであればすべて使用することができる。
【００２０】
例えば、アラキドン酸を含有する油脂（トリグリセリド）の生産能を有する微生物としては、モルティエレラ（Mortierella）属、コニディオボラス（Conidiobolus）属、フィチウム（Pythium）属、フィトフトラ（Phytophthora）属、ペニシリューム（Penicillium）属、クラドスポリューム（Cladosporium）属、ムコール（Mucor）属、フザリューム（Fusarium）属、アスペルギルス（Aspergillus）属、ロードトルラ（Rhodotorula）属、エントモフトラ（Entomophthora）属、エキノスポランジウム（Echinosporangium）属、サプロレグニア（Saprolegnia）属に属する微生物を挙げることができる。
【００２１】
モルティエレラ（Mortierella）属モルティエレラ（Mortierella）亜属に属する微生物では、例えばモルティエレラ・エロンガタ（Mortierella elongata）、モルティエレラ・エキシグア（Mortierella exigua）、モルティエレラ・フィグロフィラ（Mortierella hygrophila）、モルティエレラ・アルピナ（Mortierella alpina）等を挙げることができる。具体的にはモルティエレラ・エロンガタ（Mortierella elongata）IFO8570、モルティエレラ・エキシグア（Mortierella exigua）IFO8571、モルティエレラ・フィグロフィラ（Mortierella hygrophila）IFO5941、モルティエレラ・アルピナ（Mortierella alpina）IFO8568、ATCC16266、ATCC32221、ATCC42430、CBS219.35、CBS224.37、CBS250.53、CBS343.66、CBS527.72、CBS529.72、CBS608.70、CBS754.68等の菌株を挙げることができる。
【００２２】
これらの菌株はいずれも、大阪市の財団法人醗酵研究所（IFO）、及び米国のアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（American Type Culture Collection, ATCC）及び、Centrralbureau voor Schimmelcultures（CBS）からなんら制限なく入手することができる。また本発明の研究グループが土壌から分離した菌株モルティエレラ・エロンガタSAM0219（微工研菌寄第8703号）（微工研条寄第1239号）を使用することもできる。
【００２３】
高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品の製造法であって、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を単独で、あるいはアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を実質的に含有しない、あるいは含有していても僅かな飲食品原料とともに配合することができる。ここで、僅かな量とは、飲食品原料にアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸が含まれていたとしても、それを配合した食品組成物を人が摂取しても、後述する本発明の1日当たりのアラキドン酸摂取量に達していない量を意味する。
【００２４】
特に構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であるトリグリセリドの場合には、油脂（トリグリセリド）の用途に関しては無限の可能性があり、食品、飲料、医薬品、医薬部外品の原料並びに添加物として使用することがでる。そして、その使用目的、使用量に関して何ら制限を受けるものではない。
【００２５】
例えば、食品組成物としては、一般食品の他、機能性食品、栄養補助食品、特定保健用食品、未熟児用調製乳、乳児用調製乳、乳児用食品、妊産婦食品又は老人用食品等を挙げることができる。油脂を含む食品例として、肉、魚、またはナッツ等の本来油脂を含む天然食品、スープ等の調理時に油脂を加える食品、ドーナッツ等の熱媒体として油脂を用いる食品、バター等の油脂食品、クッキー等の加工時に油脂を加える加工食品、あるいはハードビスケット等の加工仕上げ時に油脂を噴霧または塗布する食品等が挙げられる。さらに、油脂を含まない、農産食品、醗酵食品、畜産食品、水産食品、または飲料に添加することができる。さらに、機能性食品、医薬品、医薬部外品の形態であっても構わず、例えば、経腸栄養剤、粉末、顆粒、トローチ、内服液、懸濁液、乳濁液、シロップ等の加工形態であってもよい。本発明の食品には、アラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する旨の表示を付することができる。
【００２６】
また本発明の組成物は、本発明の有効成分以外に、一般に飲食品、医薬品または医薬部外品に用いられる各種担体や添加物を含んでいてよい。特に本発明の有効成分の酸化防止を防ぐ目的で抗酸化を含むことが望ましい。抗酸化剤として、例えば、トコフェロール類、フラボン誘導体、フィロズルシン類、コウジ酸、没食子酸誘導体、カテキン類、フキ酸、ゴシポール、ピラジン誘導体、セサモール、グァヤオール、グァヤク酸、p-クマリン酸、ノールジヒドログァヤテッチク酸、ステロール類、テルペン類、核酸塩基類、カロチノイド類、リグナン類などのような天然抗酸化剤およびアスコルビン酸パルミチン酸エステル、アスコルビン酸ステアリン酸エステル、ブチルヒドロキシアニソール(BHA)、ブチルヒドロキシトルエン(BHT)、モノ-t-ブチルヒドロキノン(TBHQ)、4-ヒドロキシメイル-2,6-ジ-t-ブチルフェノール(HMBP)に代表されるような合成抗酸化剤を挙げることができる。
【００２７】
トコフェロール類では、α-トコフェロール、β-トコフェロール、γ-トコフェロール、δ-トコフェロール、ε-トコフェロール、ξ-トコフェロール、η-トコフェロールおよびトコフェロールエステル（酢酸トコフェロール等）等を挙げることができる。さらに、カロチノイド類では、例えば、β-カロチン、カンタキサンチン、アスタキサンチン等を挙げることができる。
【００２８】
本発明の組成物は、本発明の有効成分以外に、担体として、各種キャリアー担体、イクステンダー剤、希釈剤、増量剤、分散剤、賦形剤、結合剤溶媒（例、水、エタノール、植物油）、溶解補助剤、緩衝剤、溶解促進剤、ゲル化剤、懸濁化剤、小麦粉、米粉、でん粉、コーンスターチ、ポリサッカライド、ミルクタンパク質、コラーゲン、米油、レシチンなどが挙げられる、添加剤としては、例えば、ビタミン類、甘味料、有機酸、着色剤、香料、湿化防止剤、ファイバー、電解質、ミネラル、栄養素、抗酸化剤、保存剤、芳香剤、湿潤剤、天然の食物抽出物、野菜抽出物などを挙げることができるが、これらに限定しているわけではない。
【００２９】
アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物の主薬効成分はアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸にある。アラキドン酸の一日あたり食事からの摂取量は関東地区で0.14g、関西地区で0.19〜0.20g、ドコサヘキサエン酸の一日あたり食事からの摂取量は関東地区で0.37〜0.38g、関西地区で0.69〜0.82gとの報告があり（脂質栄養学4, 73-82, 1995）、相当量、さらにはそれ以上、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を摂取する必要がある。したがって、本発明のアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸並びにアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物の成人（例えば、体重60kgとして）一日当たりの摂取量は、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸量換算として、0.001g〜20g、好ましくは0.01g〜10g、より好ましくは0.05〜5g、最も好ましくは0.1g〜2gとする。
【００３０】
本発明の有効成分を実際に飲食品に適用する場合には、食品に配合するアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸の絶対量も重要となる。ただし、飲食品に配合する絶対量も、配合する飲食品の摂取量によって変化することから、構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であるトリグリセリドを含有するトリグリセリドを食品に配合する場合には、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸として0.001重量%以上、好ましくは0.01重量%以上、より好ましくは0.1重量%以上となるように配合する。
【００３１】
本発明の組成物を医薬品として使用する場合、製剤技術分野において慣用の方法、例えば、日本薬局方に記載の方法あるいはそれに準じる方法に従って製造することができる。
本発明の組成物を医薬品として使用する場合、組成物中の有効成分の配分量は、本発明の目的が達成される限り特に限定されず、適宜適当な配合割合で使用が可能である。
本発明の組成物を医薬品として使用する場合、投与単位形態で投与するのが望ましく、特に、経口投与が好ましい。
【００３２】
本発明の組成物の投与量は、年令、体重、症状、投与回数などにより異なるが、例えば、成人（約60kgとして）一日当たり本発明のアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸量換算として、通常約0.001g〜20g、好ましくは約0.01g〜10g、より好ましくは約0.05〜5g、最も好ましくは約0.1g〜2gを一日1回〜3回に分割して投与するのがよい。
【００３３】
脳のリン脂質膜の主要な脂肪酸はアラキドン酸並びにドコサヘキサエン酸であり、バランスを考えた場合、本発明の組成物は、アラキドン酸にドコサヘキサエン酸との組み合わせが望ましい。一般にアラキドン酸（n-6系 不飽和脂肪酸）とドコサヘキサエン酸（n-3系 不飽和脂肪酸）は、それぞれリノール酸とα-リノレン酸から同一の酵素により生合成される。したがって、アラキドン酸を単独で投与した場合には、ドコサヘキサエン酸の生合成を抑制する。また、逆にドコサヘキサエン酸を単独で投与した場合には、アラキドン酸の生合成を抑制する。このような弊害を防ぐためにも、アラキドン酸とドコサヘキサエン酸を組み合わせて摂取することが望ましい。また、脳のリン脂質膜にはエイコサペンタエン酸の割合が非常に低いことから、ほとんどエイコサペンタエン酸を含まないアラキドン酸とドコサヘキサエン酸との組み合わせがより望ましい。そして、アラキドン酸とドコサヘキサエン酸の組み合わせにおいて、アラキドン酸／ドコサヘキサエン酸比（重量）が0.1〜15の範囲、好ましくは0.25〜10の範囲にあることが望ましい。また、アラキドン酸の５分の１（重量比）を超えない量のエイコサペンタエン酸の配合した飲食物が望ましい。
【実施例】
【００３４】
次に、実施例により、本発明をさらに具体的に説明する。しかし、本発明は、下記の実施例に限定されない。
実施例１. アラキドン酸を構成脂肪酸とするトリグリセリドの製造方法
アラキドン酸生産菌としてモルティエレラ・アルピナ（Mortierella alpina）を用いた。グルコース1.8%、脱脂大豆粉3.1%、大豆油1.2%、KH2PO4 0.3%、Na2SO4 0.1%、CaCl2・2H2O 0.05%及びMgCl2・6H2O 0.05%を含む培地6kLを、10kL培養槽に調製し、初発pHを6.0に調整した。前培養液30Lを接種し、温度26℃、通気量 360m3/h、槽内圧200kPaの条件で8日間の通気撹拌培養を行った。なお、攪拌数は溶存酸素濃度を10-15ppmを維持するように調整した。さらに、グルコース濃度を４日目までは流加法によって培地中のグルコース濃度が1-2.5%の範囲内となるように、それ以降は0.5-1%を維持した（上記の%は、重量(W/V)%を意味する）。
【００３５】
培養終了後、ろ過、乾燥によりアラキドン酸を構成脂肪酸とするトリグリセリドを含有する菌体を回収し、得られた菌体からヘキサン抽出により油脂を抽出し、食用油脂の精製工程（脱ガム、脱酸、脱臭、脱色）を経て、アラキドン酸含有トリグリセリド（構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸であるトリグリセリドを含有するトリグリセリド）220kgを得た。得られた油脂（トリグリセリド）をメチルエステル化し、得られた脂肪酸メチルエステルをガスクロマトグラフィーで分析したところ、全脂肪酸に占めるアラキドン酸の割合は27.84%であった。さらに、上記アラキドン酸含有油脂（トリグリセリド）をエチルエステル化し、アラキドン酸エチルエステルを27%含む脂肪酸エチルエステル混合物から、常法の高速液体クロマトグラフィーによって、99%アラキドン酸エチルエステルを分離・精製した。
【００３６】
実施例２. 試験カプセルの製造
ゼラチン100重量部及び食添グリセリン35重量部に水を加え50〜60℃で溶解し、粘度2000cpのゼラチン被膜を調製した。次に実施例１で得たアラキドン酸含有油脂（トリグリセリド）60重量%と魚油（ツナ油：全脂肪酸に占めるドコサヘキサエン酸の割合は、40.5%）40重量％で混合し、ビタミンE油0.05重量%を混合して内容物１を調製した。これら内容物1を用いて、常法によりカプセル成形及び乾燥を行い、一粒240mgの内容物を含有するソフトカプセルを製造した。人試験用の擬似カプセルとして、内容物をオリーブ油（オリーブ油に対してビタミンE油0.05重量%を混合）としたソフトカプセルを同時に製造した。
【００３７】
実施例３. 器質的脳障害患者の高次脳機能に及ぼすアラキドン酸およびドコサヘキサエン酸含有食用油脂カプセル摂取試験
RBANS神経心理テスト（Repeatable Battery for the Assessment of Neuropsychological Status）は、その開発者であるRandolphの方法［J Clin Exp Neuropsychol Vol.20 310-319 (1998)］を日本語訳した日本版アーバンス神経心理テスト［脳神経 Vol.54 463-471 (2002)］を用いた。すなわち、即時記憶、視空間・構成、言語、注意および遅延記憶の５つの認知領域について、12の下位検査により評価した。なお、本発明のヒト試験は、ヘルシンキ宣言の精神に則り十分な配慮の下に実施した。
【００３８】
試験参加同意の説明を行い、同意を得られた器質的脳障害患者６名（脳挫傷患者３名、脳梗塞患者３名：いずれも高次脳機能障害の程度が安定している患者）にアーバンス神経心理テストを実施した翌日から、アラキドン酸およびドコサヘキサエン酸をそれぞれ１日240mg摂取できるように、実施例２で調製したアラキドン酸およびドコサヘキサエン酸含有食用油脂カプセル(アラキドン酸およびドコサヘキサエン酸としてそれぞれ40mg/粒)6粒を３ヶ月間服用させた。カプセルの摂取後にもアーバンス神経心理テストを実施し、実施前のテスト結果と、即時記憶、視空間・構成、言語、注意および遅延記憶の５つの認知領域における粗点を比較した。健常高齢者に対して実施したアーバンス神経心理テストにおいても、繰り返し実施による差は認められず、学習効果はないものと考えられる。
【００３９】
カプセル摂取前後の即時記憶並びに遅延記憶の粗点の変化を図１に示す。アラキドン酸およびドコサヘキサエン酸含有食用油脂カプセルを摂取することで、即時記憶の粗点が平均で11.9点有意に上昇し、遅延記憶の粗点が平均で18.1点有意に上昇することが明らかとなった。
このように、アラキドン酸およびドコサヘキサエン酸含有食用油脂を服用することで器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下を改善することを初めて明らかにした。
【００４０】
実施例４. 脂肪輸液剤への使用
実施例１で得たアラキドン酸含有油脂（トリグリセリド）200g、魚油を精製したドコサヘキサエン酸含有油脂（トリグリセリド）200g、精製卵黄レシチン48g、オレイン酸20g、グリセリン100g及び0.1N 苛性ソーダ40mlを加え、ホモジナイザーで分散させたのち、注射用蒸留水を加えて４リットルとする。これを高圧噴霧式乳化機にて乳化し、脂質乳液を調製した。該脂質乳液を200mlずつプラスチック製バッグに分注したのち、121℃、20分間、高圧蒸気滅菌処理して脂肪輸液剤とする。
【００４１】
実施例５. ジュースへの使用
β-シクロデキストリン2gを20%エタノール水溶液20mlに添加し、ここにスターラーで撹拌しながら、実施例１で得たアラキドン酸含有油脂（トリグリセリド）と魚油を精製したドコサヘキサエン酸含有油脂（トリグリセリド）の混合液（ビタミンEを0.05%配合）100mgを加え、50℃で２時間インキュベートした。室温冷却（約1時間）後、さらに撹拌を続けながら4℃で10時間インキュベートした。生成した沈殿を、遠心分離により回収し、n-ヘキサンで洗浄後、凍結乾燥を行い、アラキドン酸およびドコサヘキサエン酸含有トリグリセリドを含有するシクロデキストリン包接化合物1.8gを得た。この粉末1gをジュース10Lに均一に混ぜ合わせ、アラキドン酸およびドコサヘキサエン酸含有トリグリセリドを含有するジュースを調製した。
【００４２】
実施例６. アラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成るカプセルの調製例
ゼラチン100重量部及び食添グリセリン35重量部に水を加え50〜60℃で溶解し、粘度2000cpのゼラチン被膜を調製した。次に実施例1で得たアラキドン酸含有油脂（トリグリセリド）にビタミンE油0.05重量%を混合し、内容物2を調製した。実施例1で得た99%アラキドン酸エチルエステルに、ビタミンE油0.05重量%を混合し内容物3を調製した。これら内容物2から3を用いて、常法によりカプセル成形及び乾燥を行い、一粒当たり180mgの内容物を含有するソフトカプセルを製造した。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】図１はアーバンス神経心理テストによるアラキドン酸含有油脂の器質的脳障害患者の高次脳機能障害（即時記憶および遅延記憶）に及ぼす影響を示す図である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
高次脳機能とは、注意、記憶、知覚、言語、計算などの脳機能を指し、脳梗塞、一過性脳虚血発作などの虚血性脳卒中、脳出血、くも膜下出血などの出血性脳卒中や脳震盪や脳挫傷などの外傷性疾患により、器質的な脳障害が生じた時に、高次脳機能障害が認められる。高次脳機能障害には、半側身体失認、地誌的障害、 失認症、失語症、記憶障害、失行症、注意障害、遂行機能障害や行動や情緒の障害などが挙げられる。
【０００３】
こうした高次脳機能障害に対しては、種々の治療薬が研究・開発が進められているが、そのほとんどは器質的脳障害の原因に対する対症療法であり、低下した高次脳機能を改善又は向上させる化合物については、残念ながら有効な化合物が見出されていないのが現状である。つまり、高次脳機能障害を判定し、改善効果を評価する方法は、ミニメンタルステイツ検査（MMSE）、改訂長谷川式簡易知能評価スケール（HDS-R）やウェクスラー知能検査（WAIS-R）などを挙げることができる。しかし、MMSEやHDS-Rでは、高次脳機能の改善又は向上を評価するには精度にと再現性に欠け、WAIS-Rでは時間と労力がかかり過ぎるといった欠点があった。そこで、客観的に高次脳機能の改善又は向上を目的に薬剤を開発・研究するためには、高次脳機能を客観的に評価する有効手段が必要であった。
【０００４】
最近、高次脳機能をより高精度に再現性を持って評価する方法としてRBANS神経心理テストに注目が集まっている。RBANS神経心理テストは、米国のRandolphが開発した Repeatable Battery for the Assessment of Neuropsychological Statusの略称で、３０分程度の短時間で、繰り返し、評価し得る神経心理テスト課題である。このRBANS神経心理テストは、老人性認知症や統合失調症に代表される精神神経疾患などの早期診断や経過観察、および治療効果の判定に威力を発揮し、脳血管障害や頭部外傷後の後遺症、すなわち高次脳機能障害の判定にも有用であると考えられている［山嶋哲盛ら 脳神経 Vol.54 463-471 (2002)］。したがって、RBANS神経心理テストによりヒトの高次脳機能を短時間で再現性良く判定することができるようになった。
【０００５】
脳は脂質の塊のような組織であって、例えば、白質においては1/3が、灰白質においては1/4がリン脂質に占められている。脳の各種細胞膜を構成しているリン脂質中の高度不飽和脂肪酸は、アラキドン酸とドコサヘキサエン酸が主である。しかし、これらアラキドン酸とドコサヘキサエン酸は動物体内ではde novo合成できず、直接あるいは間接的（アラキドン酸の前駆体となるリノール酸、ドコサヘキサエン酸の前駆体となるα-リノレン酸）に食事から摂取する必要がある。そこで、アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸の学習記憶能力の向上、老人性痴呆症の予防回復に注目が集っている。
【０００６】
ドコサヘキサエン酸については、魚油という豊富な供給源が存在することから、脳機能改善に関する種々の研究がなされ、学習能力増強剤、記憶力増強剤、痴呆予防剤、痴呆治療剤、抗痴呆薬または脳機能改善効果を有する機能性食品等（特開平7-82146、特開平5-117147、特開平2-49723）の特許が出願されている。そして、アラキドン酸及び/又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物については、最近、特開2003-048831「脳機能低下に起因する症状あるいは疾患の予防又は改善作用を有する組成物」において、加齢動物をモリス型水迷路試験に供して、加齢に伴う学習能の低下をアラキドン酸及び/又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物を投与することにより改善することを明らかにされている。
【０００７】
また、群馬大学医学部の宮永らは、正常者26名を対象に、2400mgのDHAを含有するカプセルを経口的に服用させ、服用前と服用2時間後に認知応答と相関のある事象関連電位（P300）を測定して、P300の潜時が有意に短縮し、振幅も有意に高くなることを見出している［宮永和夫、食の科学、P84-96（1999）］。しかし、擬似サンプルとの比較結果ではなく、血中DHA濃度とP300の結果に相関が認められていない、さらに、正常老人97名を対象に、900mgのDHAを含有するカプセルを6ヶ月間、毎日服用させた長期投与試験では、P300に何ら変化がなく、DHAの有効性を示すには全く不十分な内容であった。
【０００８】
さらに宮永らは、１日あたり700〜1400mgのDHAを含有するカプセルを６ヶ月間経口的に服用させ、脳血管性痴呆13例中10例に、またアルツハイマー型痴呆5例全例にやや改善以上の効果が認められたと報告している［宮永和夫、臨床栄養、881-901（1995）］。しかし、記憶・学習能力ではなく、意志の伝達、意欲・発動性の向上、せん妄、徘徊、うつ状態、歩行障害の改善が示されたに過ぎない。
【０００９】
このように、アラキドン酸やドコサヘキサエン酸に記憶・学習能力改善効果が期待されるとされながら、健常高齢者の事象関連電位の改善や脳血管性痴呆患者、アルツハイマー患者の情動や行動障害を改善したことが示されたにとどまっており、器質的脳障害による高次脳機能の低下に対して、改善又は向上作用を有するかどうかは全く明らかではなかった。
したがって、器質的脳障害による高次脳機能の低下を改善又は向上させ、医薬、さらには食品への適応に優れた副作用の少ない化合物の開発が強く望まれている。
【００１０】
【特許文献１】特開2003-048831
【非特許文献１】宮永和夫、食の科学、P84-96（1999）
【非特許文献２】宮永和夫、臨床栄養、881-901（1995）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
従って本発明は、アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物並びにドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を有効成分とする、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品及びその製造方法を提供しようとするものである。より詳細には、アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸、アラキドン酸又はドコサヘキサエン酸のアルコールエステル並びに構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であるトリグリセリド、リン脂質及び糖脂質の群から選ばれた少なくとも1種を有効成分とする器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品及びその製造方法を提供しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者等は、アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物並びにドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物の、高次脳機能の低下に対する改善作用を明らかにする目的で鋭意研究した結果、驚くべきことに、RBANS神経心理テストを指標に評価することで、アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物並びにドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物の器質的脳障害による高次脳機能障害患者に対する効果をヒトで明らかにした。
【００１３】
従って本発明は、アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物並びにドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を有効成分とする、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品及びその製造方法を提供する。より詳細には、アラキドン酸並びにドコサヘキサエン酸、アラキドン酸又はドコサヘキサエン酸のアルコールエステル、さらに構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であるトリグリセリド、リン脂質及び糖脂質の群から選ばれた少なくとも1種を有効成分とする器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品及びその製造方法を提供しようとするものである。
【００１４】
本発明により、アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物並びにドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を有効成分とする、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品及びその製造方法を提供することができ、現代社会の人類において特に有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本発明は、アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物並びにドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を有効成分とする、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品及びその製造方法に関するものである。
【００１６】
器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下とは、脳梗塞、一過性脳虚血発作などの虚血性脳卒中、脳出血、くも膜下出血などの出血性脳卒中、脳震盪や脳挫傷などの外傷性疾患等が原因である器質的な脳障害により生じる、半側身体失認、地誌的障害、失認症、失語症、記憶障害、失行症、注意障害、遂行機能障害や行動や情緒の障害などを挙げることができるが、これらの障害に限定しているわけではなく、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に伴う症状はすべて含まれる。
【００１７】
本発明の有効成分はアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であって、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とするすべての化合物も利用することができる。アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物には、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸の塩類、例えばカルシウム塩、ナトリウム塩などを挙げることができる、また、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸のアルコールエステル、例えばアラキドン酸メチルエステル、ドコサヘキサエン酸エチルエステルなどを挙げることができる。また、構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であるトリグリセリド、ジグリセリド、モノグリセリド、リン脂質、さらには糖脂質などを利用することができる。
【００１８】
食品への適応を考えた場合には、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸はトリグリセリドやリン脂質の形態、特にトリグリセリドの形態にすることが望ましい。
【００１９】
従って本発明においては、本発明の有効成分である構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であるトリグリセリドを含有するトリグリセリド（アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を含有するトリグリセリド）を使用することができる。アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を含有するトリグリセリドとしては、トリグリセリドを構成する全脂肪酸のうちアラキドン酸またはドコサヘキサエン酸の割合が5重量(W/W)%以上、好ましくは10重量%以上、より好ましくは20重量%以上、もっと好ましくは30重量%以上である油脂（トリグリセリド）が食品に適用する場合には望ましい形態となる。したがって、本発明において、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を含有する油脂（トリグリセリド）を生産する能力を有する微生物を培養して得られたものであればすべて使用することができる。
【００２０】
例えば、アラキドン酸を含有する油脂（トリグリセリド）の生産能を有する微生物としては、モルティエレラ（Mortierella）属、コニディオボラス（Conidiobolus）属、フィチウム（Pythium）属、フィトフトラ（Phytophthora）属、ペニシリューム（Penicillium）属、クラドスポリューム（Cladosporium）属、ムコール（Mucor）属、フザリューム（Fusarium）属、アスペルギルス（Aspergillus）属、ロードトルラ（Rhodotorula）属、エントモフトラ（Entomophthora）属、エキノスポランジウム（Echinosporangium）属、サプロレグニア（Saprolegnia）属に属する微生物を挙げることができる。
【００２１】
モルティエレラ（Mortierella）属モルティエレラ（Mortierella）亜属に属する微生物では、例えばモルティエレラ・エロンガタ（Mortierella elongata）、モルティエレラ・エキシグア（Mortierella exigua）、モルティエレラ・フィグロフィラ（Mortierella hygrophila）、モルティエレラ・アルピナ（Mortierella alpina）等を挙げることができる。具体的にはモルティエレラ・エロンガタ（Mortierella elongata）IFO8570、モルティエレラ・エキシグア（Mortierella exigua）IFO8571、モルティエレラ・フィグロフィラ（Mortierella hygrophila）IFO5941、モルティエレラ・アルピナ（Mortierella alpina）IFO8568、ATCC16266、ATCC32221、ATCC42430、CBS219.35、CBS224.37、CBS250.53、CBS343.66、CBS527.72、CBS529.72、CBS608.70、CBS754.68等の菌株を挙げることができる。
【００２２】
これらの菌株はいずれも、大阪市の財団法人醗酵研究所（IFO）、及び米国のアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（American Type Culture Collection, ATCC）及び、Centrralbureau voor Schimmelcultures（CBS）からなんら制限なく入手することができる。また本発明の研究グループが土壌から分離した菌株モルティエレラ・エロンガタSAM0219（微工研菌寄第8703号）（微工研条寄第1239号）を使用することもできる。
【００２３】
高次脳機能の低下に対する改善作用を有する飲食品の製造法であって、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を単独で、あるいはアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を実質的に含有しない、あるいは含有していても僅かな飲食品原料とともに配合することができる。ここで、僅かな量とは、飲食品原料にアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸が含まれていたとしても、それを配合した食品組成物を人が摂取しても、後述する本発明の1日当たりのアラキドン酸摂取量に達していない量を意味する。
【００２４】
特に構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であるトリグリセリドの場合には、油脂（トリグリセリド）の用途に関しては無限の可能性があり、食品、飲料、医薬品、医薬部外品の原料並びに添加物として使用することがでる。そして、その使用目的、使用量に関して何ら制限を受けるものではない。
【００２５】
例えば、食品組成物としては、一般食品の他、機能性食品、栄養補助食品、特定保健用食品、未熟児用調製乳、乳児用調製乳、乳児用食品、妊産婦食品又は老人用食品等を挙げることができる。油脂を含む食品例として、肉、魚、またはナッツ等の本来油脂を含む天然食品、スープ等の調理時に油脂を加える食品、ドーナッツ等の熱媒体として油脂を用いる食品、バター等の油脂食品、クッキー等の加工時に油脂を加える加工食品、あるいはハードビスケット等の加工仕上げ時に油脂を噴霧または塗布する食品等が挙げられる。さらに、油脂を含まない、農産食品、醗酵食品、畜産食品、水産食品、または飲料に添加することができる。さらに、機能性食品、医薬品、医薬部外品の形態であっても構わず、例えば、経腸栄養剤、粉末、顆粒、トローチ、内服液、懸濁液、乳濁液、シロップ等の加工形態であってもよい。本発明の食品には、アラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する旨の表示を付することができる。
【００２６】
また本発明の組成物は、本発明の有効成分以外に、一般に飲食品、医薬品または医薬部外品に用いられる各種担体や添加物を含んでいてよい。特に本発明の有効成分の酸化防止を防ぐ目的で抗酸化を含むことが望ましい。抗酸化剤として、例えば、トコフェロール類、フラボン誘導体、フィロズルシン類、コウジ酸、没食子酸誘導体、カテキン類、フキ酸、ゴシポール、ピラジン誘導体、セサモール、グァヤオール、グァヤク酸、p-クマリン酸、ノールジヒドログァヤテッチク酸、ステロール類、テルペン類、核酸塩基類、カロチノイド類、リグナン類などのような天然抗酸化剤およびアスコルビン酸パルミチン酸エステル、アスコルビン酸ステアリン酸エステル、ブチルヒドロキシアニソール(BHA)、ブチルヒドロキシトルエン(BHT)、モノ-t-ブチルヒドロキノン(TBHQ)、4-ヒドロキシメイル-2,6-ジ-t-ブチルフェノール(HMBP)に代表されるような合成抗酸化剤を挙げることができる。
【００２７】
トコフェロール類では、α-トコフェロール、β-トコフェロール、γ-トコフェロール、δ-トコフェロール、ε-トコフェロール、ξ-トコフェロール、η-トコフェロールおよびトコフェロールエステル（酢酸トコフェロール等）等を挙げることができる。さらに、カロチノイド類では、例えば、β-カロチン、カンタキサンチン、アスタキサンチン等を挙げることができる。
【００２８】
本発明の組成物は、本発明の有効成分以外に、担体として、各種キャリアー担体、イクステンダー剤、希釈剤、増量剤、分散剤、賦形剤、結合剤溶媒（例、水、エタノール、植物油）、溶解補助剤、緩衝剤、溶解促進剤、ゲル化剤、懸濁化剤、小麦粉、米粉、でん粉、コーンスターチ、ポリサッカライド、ミルクタンパク質、コラーゲン、米油、レシチンなどが挙げられる、添加剤としては、例えば、ビタミン類、甘味料、有機酸、着色剤、香料、湿化防止剤、ファイバー、電解質、ミネラル、栄養素、抗酸化剤、保存剤、芳香剤、湿潤剤、天然の食物抽出物、野菜抽出物などを挙げることができるが、これらに限定しているわけではない。
【００２９】
アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物の主薬効成分はアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸にある。アラキドン酸の一日あたり食事からの摂取量は関東地区で0.14g、関西地区で0.19〜0.20g、ドコサヘキサエン酸の一日あたり食事からの摂取量は関東地区で0.37〜0.38g、関西地区で0.69〜0.82gとの報告があり（脂質栄養学4, 73-82, 1995）、相当量、さらにはそれ以上、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を摂取する必要がある。したがって、本発明のアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸並びにアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物の成人（例えば、体重60kgとして）一日当たりの摂取量は、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸量換算として、0.001g〜20g、好ましくは0.01g〜10g、より好ましくは0.05〜5g、最も好ましくは0.1g〜2gとする。
【００３０】
本発明の有効成分を実際に飲食品に適用する場合には、食品に配合するアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸の絶対量も重要となる。ただし、飲食品に配合する絶対量も、配合する飲食品の摂取量によって変化することから、構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸であるトリグリセリドを含有するトリグリセリドを食品に配合する場合には、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸として0.001重量%以上、好ましくは0.01重量%以上、より好ましくは0.1重量%以上となるように配合する。
【００３１】
本発明の組成物を医薬品として使用する場合、製剤技術分野において慣用の方法、例えば、日本薬局方に記載の方法あるいはそれに準じる方法に従って製造することができる。
本発明の組成物を医薬品として使用する場合、組成物中の有効成分の配分量は、本発明の目的が達成される限り特に限定されず、適宜適当な配合割合で使用が可能である。
本発明の組成物を医薬品として使用する場合、投与単位形態で投与するのが望ましく、特に、経口投与が好ましい。
【００３２】
本発明の組成物の投与量は、年令、体重、症状、投与回数などにより異なるが、例えば、成人（約60kgとして）一日当たり本発明のアラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を、アラキドン酸及び／又はドコサヘキサエン酸量換算として、通常約0.001g〜20g、好ましくは約0.01g〜10g、より好ましくは約0.05〜5g、最も好ましくは約0.1g〜2gを一日1回〜3回に分割して投与するのがよい。
【００３３】
脳のリン脂質膜の主要な脂肪酸はアラキドン酸並びにドコサヘキサエン酸であり、バランスを考えた場合、本発明の組成物は、アラキドン酸にドコサヘキサエン酸との組み合わせが望ましい。一般にアラキドン酸（n-6系 不飽和脂肪酸）とドコサヘキサエン酸（n-3系 不飽和脂肪酸）は、それぞれリノール酸とα-リノレン酸から同一の酵素により生合成される。したがって、アラキドン酸を単独で投与した場合には、ドコサヘキサエン酸の生合成を抑制する。また、逆にドコサヘキサエン酸を単独で投与した場合には、アラキドン酸の生合成を抑制する。このような弊害を防ぐためにも、アラキドン酸とドコサヘキサエン酸を組み合わせて摂取することが望ましい。また、脳のリン脂質膜にはエイコサペンタエン酸の割合が非常に低いことから、ほとんどエイコサペンタエン酸を含まないアラキドン酸とドコサヘキサエン酸との組み合わせがより望ましい。そして、アラキドン酸とドコサヘキサエン酸の組み合わせにおいて、アラキドン酸／ドコサヘキサエン酸比（重量）が0.1〜15の範囲、好ましくは0.25〜10の範囲にあることが望ましい。また、アラキドン酸の５分の１（重量比）を超えない量のエイコサペンタエン酸の配合した飲食物が望ましい。
【実施例】
【００３４】
次に、実施例により、本発明をさらに具体的に説明する。しかし、本発明は、下記の実施例に限定されない。
実施例１. アラキドン酸を構成脂肪酸とするトリグリセリドの製造方法
アラキドン酸生産菌としてモルティエレラ・アルピナ（Mortierella alpina）を用いた。グルコース1.8%、脱脂大豆粉3.1%、大豆油1.2%、KH2PO4 0.3%、Na2SO4 0.1%、CaCl2・2H2O 0.05%及びMgCl2・6H2O 0.05%を含む培地6kLを、10kL培養槽に調製し、初発pHを6.0に調整した。前培養液30Lを接種し、温度26℃、通気量 360m3/h、槽内圧200kPaの条件で8日間の通気撹拌培養を行った。なお、攪拌数は溶存酸素濃度を10-15ppmを維持するように調整した。さらに、グルコース濃度を４日目までは流加法によって培地中のグルコース濃度が1-2.5%の範囲内となるように、それ以降は0.5-1%を維持した（上記の%は、重量(W/V)%を意味する）。
【００３５】
培養終了後、ろ過、乾燥によりアラキドン酸を構成脂肪酸とするトリグリセリドを含有する菌体を回収し、得られた菌体からヘキサン抽出により油脂を抽出し、食用油脂の精製工程（脱ガム、脱酸、脱臭、脱色）を経て、アラキドン酸含有トリグリセリド（構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸であるトリグリセリドを含有するトリグリセリド）220kgを得た。得られた油脂（トリグリセリド）をメチルエステル化し、得られた脂肪酸メチルエステルをガスクロマトグラフィーで分析したところ、全脂肪酸に占めるアラキドン酸の割合は27.84%であった。さらに、上記アラキドン酸含有油脂（トリグリセリド）をエチルエステル化し、アラキドン酸エチルエステルを27%含む脂肪酸エチルエステル混合物から、常法の高速液体クロマトグラフィーによって、99%アラキドン酸エチルエステルを分離・精製した。
【００３６】
実施例２. 試験カプセルの製造
ゼラチン100重量部及び食添グリセリン35重量部に水を加え50〜60℃で溶解し、粘度2000cpのゼラチン被膜を調製した。次に実施例１で得たアラキドン酸含有油脂（トリグリセリド）60重量%と魚油（ツナ油：全脂肪酸に占めるドコサヘキサエン酸の割合は、40.5%）40重量％で混合し、ビタミンE油0.05重量%を混合して内容物１を調製した。これら内容物1を用いて、常法によりカプセル成形及び乾燥を行い、一粒240mgの内容物を含有するソフトカプセルを製造した。人試験用の擬似カプセルとして、内容物をオリーブ油（オリーブ油に対してビタミンE油0.05重量%を混合）としたソフトカプセルを同時に製造した。
【００３７】
実施例３. 器質的脳障害患者の高次脳機能に及ぼすアラキドン酸およびドコサヘキサエン酸含有食用油脂カプセル摂取試験
RBANS神経心理テスト（Repeatable Battery for the Assessment of Neuropsychological Status）は、その開発者であるRandolphの方法［J Clin Exp Neuropsychol Vol.20 310-319 (1998)］を日本語訳した日本版アーバンス神経心理テスト［脳神経 Vol.54 463-471 (2002)］を用いた。すなわち、即時記憶、視空間・構成、言語、注意および遅延記憶の５つの認知領域について、12の下位検査により評価した。なお、本発明のヒト試験は、ヘルシンキ宣言の精神に則り十分な配慮の下に実施した。
【００３８】
試験参加同意の説明を行い、同意を得られた器質的脳障害患者６名（脳挫傷患者３名、脳梗塞患者３名：いずれも高次脳機能障害の程度が安定している患者）にアーバンス神経心理テストを実施した翌日から、アラキドン酸およびドコサヘキサエン酸をそれぞれ１日240mg摂取できるように、実施例２で調製したアラキドン酸およびドコサヘキサエン酸含有食用油脂カプセル(アラキドン酸およびドコサヘキサエン酸としてそれぞれ40mg/粒)6粒を３ヶ月間服用させた。カプセルの摂取後にもアーバンス神経心理テストを実施し、実施前のテスト結果と、即時記憶、視空間・構成、言語、注意および遅延記憶の５つの認知領域における粗点を比較した。健常高齢者に対して実施したアーバンス神経心理テストにおいても、繰り返し実施による差は認められず、学習効果はないものと考えられる。
【００３９】
カプセル摂取前後の即時記憶並びに遅延記憶の粗点の変化を図１に示す。アラキドン酸およびドコサヘキサエン酸含有食用油脂カプセルを摂取することで、即時記憶の粗点が平均で11.9点有意に上昇し、遅延記憶の粗点が平均で18.1点有意に上昇することが明らかとなった。
このように、アラキドン酸およびドコサヘキサエン酸含有食用油脂を服用することで器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下を改善することを初めて明らかにした。
【００４０】
実施例４. 脂肪輸液剤への使用
実施例１で得たアラキドン酸含有油脂（トリグリセリド）200g、魚油を精製したドコサヘキサエン酸含有油脂（トリグリセリド）200g、精製卵黄レシチン48g、オレイン酸20g、グリセリン100g及び0.1N 苛性ソーダ40mlを加え、ホモジナイザーで分散させたのち、注射用蒸留水を加えて４リットルとする。これを高圧噴霧式乳化機にて乳化し、脂質乳液を調製した。該脂質乳液を200mlずつプラスチック製バッグに分注したのち、121℃、20分間、高圧蒸気滅菌処理して脂肪輸液剤とする。
【００４１】
実施例５. ジュースへの使用
β-シクロデキストリン2gを20%エタノール水溶液20mlに添加し、ここにスターラーで撹拌しながら、実施例１で得たアラキドン酸含有油脂（トリグリセリド）と魚油を精製したドコサヘキサエン酸含有油脂（トリグリセリド）の混合液（ビタミンEを0.05%配合）100mgを加え、50℃で２時間インキュベートした。室温冷却（約1時間）後、さらに撹拌を続けながら4℃で10時間インキュベートした。生成した沈殿を、遠心分離により回収し、n-ヘキサンで洗浄後、凍結乾燥を行い、アラキドン酸およびドコサヘキサエン酸含有トリグリセリドを含有するシクロデキストリン包接化合物1.8gを得た。この粉末1gをジュース10Lに均一に混ぜ合わせ、アラキドン酸およびドコサヘキサエン酸含有トリグリセリドを含有するジュースを調製した。
【００４２】
実施例６. アラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成るカプセルの調製例
ゼラチン100重量部及び食添グリセリン35重量部に水を加え50〜60℃で溶解し、粘度2000cpのゼラチン被膜を調製した。次に実施例1で得たアラキドン酸含有油脂（トリグリセリド）にビタミンE油0.05重量%を混合し、内容物2を調製した。実施例1で得た99%アラキドン酸エチルエステルに、ビタミンE油0.05重量%を混合し内容物3を調製した。これら内容物2から3を用いて、常法によりカプセル成形及び乾燥を行い、一粒当たり180mgの内容物を含有するソフトカプセルを製造した。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】図１はアーバンス神経心理テストによるアラキドン酸含有油脂の器質的脳障害患者の高次脳機能障害（即時記憶および遅延記憶）に及ぼす影響を示す図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物およびドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する組成物。
【請求項２】
アラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物及びドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物が、アラキドン酸又はドコサヘキサエン酸のアルコールエステル又は構成脂肪酸の一部もしくは全部がアラキドン酸又はドコサヘキサエン酸である、トリグリセリド、リン脂質もしくは糖脂質である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸であるトリグリセリドを含有するトリグリセリド及び構成脂肪酸の一部又は全部がドコサヘキサエン酸であるトリグリセリドを含有するトリグリセリドの、アラキドン酸又はドコサヘキサエン酸の割合が、トリグリセリドを構成する全脂肪酸に対して5重量%以上であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸であるリン脂質を含有するリン脂質及び構成脂肪酸の一部又は全部がドコサヘキサエン酸であるリン脂質を含有するリン脂質の、アラキドン酸又はドコサヘキサエン酸の割合が、リン脂質を構成する全脂肪酸に対して5重量%以上であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項５】
アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んでなる、器質的脳障害に起因する高次機能の低下に対する改善作用を有する組成物。
【請求項６】
アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物が、構成脂肪酸の一部もしくは全部がアラキドン酸及びドコサヘキサエン酸である、トリグリセリド、リン脂質もしくは糖脂質である請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
上記アラキドン酸とドコサヘキサエン酸の組み合わせにおいて、アラキドン酸/ドコサヘキサエン酸比（重量）が0.1〜15の範囲にあることを特徴とする請求項１〜６に記載の組成物。
【請求項８】
アラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する組成物。
【請求項９】
アラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物が、アラキドン酸のアルコールエステル又は構成脂肪酸の一部もしくは全部がアラキドン酸である、トリグリセリド、リン脂質もしくは糖脂質である請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸であるトリグリセリドを含有するトリグリセリドの、アラキドン酸の割合が、トリグリセリドを構成する全脂肪酸に対して5重量%以上であることを特徴とする、請求項８又は９に記載の組成物。
【請求項１１】
構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸であるリン脂質を含有するリン脂質の、アラキドン酸の割合が、リン脂質を構成する全脂肪酸に対して5重量%以上であることを特徴とする、請求項８又は９に記載の組成物。
【請求項１２】
器質的脳障害が、脳梗塞、一過性脳虚血発作などの虚血性脳卒中が原因である請求項１〜11記載の組成物。
【請求項１３】
器質的脳障害が、脳出血、くも膜下出血などの出血性脳卒中が原因である請求項１〜11記載の組成物。
【請求項１４】
器質的脳障害が、脳震盪や脳挫傷などの外傷性疾患が原因である請求項１〜11記載の組成物。
【請求項１５】
組成物が、食品組成物又は医薬組成物である請求項１〜14のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
食品組成物が、機能性食品、栄養補助食品、特定保健用食品又は老人用食品であることを特徴とする請求項15に記載の組成物。
【請求項１７】
医薬組成物が、経腸栄養剤、粉末、顆粒、トローチ、内服液、懸濁液、乳濁液、シロップ又はカプセル製剤であることを特徴とする請求項15に記載の組成物。
【請求項１８】
アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物およびドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する旨の表示を付した飲食物。
【請求項１９】
アラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する旨の表示を付した飲食物。
【請求項２０】
アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する旨の表示を付した飲食物。
【請求項１】
アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物およびドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する組成物。
【請求項２】
アラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物及びドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物が、アラキドン酸又はドコサヘキサエン酸のアルコールエステル又は構成脂肪酸の一部もしくは全部がアラキドン酸又はドコサヘキサエン酸である、トリグリセリド、リン脂質もしくは糖脂質である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸であるトリグリセリドを含有するトリグリセリド及び構成脂肪酸の一部又は全部がドコサヘキサエン酸であるトリグリセリドを含有するトリグリセリドの、アラキドン酸又はドコサヘキサエン酸の割合が、トリグリセリドを構成する全脂肪酸に対して5重量%以上であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸であるリン脂質を含有するリン脂質及び構成脂肪酸の一部又は全部がドコサヘキサエン酸であるリン脂質を含有するリン脂質の、アラキドン酸又はドコサヘキサエン酸の割合が、リン脂質を構成する全脂肪酸に対して5重量%以上であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項５】
アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んでなる、器質的脳障害に起因する高次機能の低下に対する改善作用を有する組成物。
【請求項６】
アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物が、構成脂肪酸の一部もしくは全部がアラキドン酸及びドコサヘキサエン酸である、トリグリセリド、リン脂質もしくは糖脂質である請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
上記アラキドン酸とドコサヘキサエン酸の組み合わせにおいて、アラキドン酸/ドコサヘキサエン酸比（重量）が0.1〜15の範囲にあることを特徴とする請求項１〜６に記載の組成物。
【請求項８】
アラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する組成物。
【請求項９】
アラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物が、アラキドン酸のアルコールエステル又は構成脂肪酸の一部もしくは全部がアラキドン酸である、トリグリセリド、リン脂質もしくは糖脂質である請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸であるトリグリセリドを含有するトリグリセリドの、アラキドン酸の割合が、トリグリセリドを構成する全脂肪酸に対して5重量%以上であることを特徴とする、請求項８又は９に記載の組成物。
【請求項１１】
構成脂肪酸の一部又は全部がアラキドン酸であるリン脂質を含有するリン脂質の、アラキドン酸の割合が、リン脂質を構成する全脂肪酸に対して5重量%以上であることを特徴とする、請求項８又は９に記載の組成物。
【請求項１２】
器質的脳障害が、脳梗塞、一過性脳虚血発作などの虚血性脳卒中が原因である請求項１〜11記載の組成物。
【請求項１３】
器質的脳障害が、脳出血、くも膜下出血などの出血性脳卒中が原因である請求項１〜11記載の組成物。
【請求項１４】
器質的脳障害が、脳震盪や脳挫傷などの外傷性疾患が原因である請求項１〜11記載の組成物。
【請求項１５】
組成物が、食品組成物又は医薬組成物である請求項１〜14のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
食品組成物が、機能性食品、栄養補助食品、特定保健用食品又は老人用食品であることを特徴とする請求項15に記載の組成物。
【請求項１７】
医薬組成物が、経腸栄養剤、粉末、顆粒、トローチ、内服液、懸濁液、乳濁液、シロップ又はカプセル製剤であることを特徴とする請求項15に記載の組成物。
【請求項１８】
アラキドン酸及び／又はアラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物およびドコサヘキサエン酸及び／又はドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する旨の表示を付した飲食物。
【請求項１９】
アラキドン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する旨の表示を付した飲食物。
【請求項２０】
アラキドン酸及びドコサヘキサエン酸を構成脂肪酸とする化合物を含んで成る、器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する旨の表示を付した飲食物。
【図１】
【公開番号】特開２００７−８８６３（Ｐ２００７−８８６３Ａ）
【公開日】平成１９年１月１８日（２００７．１．１８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−１９１６２４（Ｐ２００５−１９１６２４）
【出願日】平成１７年６月３０日（２００５．６．３０）
【出願人】（０００００１９０４）サントリー株式会社 (319)
【出願人】（５０４１６０７８１）国立大学法人金沢大学 (282)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年１月１８日（２００７．１．１８）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年６月３０日（２００５．６．３０）
【出願人】（０００００１９０４）サントリー株式会社 (319)
【出願人】（５０４１６０７８１）国立大学法人金沢大学 (282)
【Ｆターム（参考）】
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