新規なアセチレン誘導体
【課題】 ＨＳＰ９０阻害活性を有する新規なアセチレン誘導体の提供。
【解決手段】 下記一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、または、一般式（１Ｃ）
［式中、Ａは、酸素原子、硫黄原子、または、ＮＲ１を示し、Ｘは置換基を有しても良いメチレン基を示し、ｎは０−３を示し、Ｙ及びＹｃは各々独立して水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基等を示し、Ｚは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、置換基を有していてもよい炭素環等を示す。］で表されるアセチレン誘導体、そのプロドラッグ、またはそれらの薬理学的に許容される塩、および、それらを有効成分とする、ＨＳＰ９０阻害剤。
【解決手段】 下記一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、または、一般式（１Ｃ）
［式中、Ａは、酸素原子、硫黄原子、または、ＮＲ１を示し、Ｘは置換基を有しても良いメチレン基を示し、ｎは０−３を示し、Ｙ及びＹｃは各々独立して水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基等を示し、Ｚは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、置換基を有していてもよい炭素環等を示す。］で表されるアセチレン誘導体、そのプロドラッグ、またはそれらの薬理学的に許容される塩、および、それらを有効成分とする、ＨＳＰ９０阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なアセチレン誘導体及びアセチレン誘導体を有効成分とするＨＳＰ９０阻害剤に関する。これは、ＨＳＰ９０のＡＴＰ結合部位に結合することで、その機能を阻害し、ＨＳＰ９０と標的蛋白質の結合を阻害し、最終的に細胞増殖を抑制する。
【背景技術】
【０００２】
分子シャペロンとは、蛋白質の機能的高次構造形成を促進するため標的蛋白質と一時的に複合体を形成する蛋白質の総称である。蛋白質の折り畳みや会合を助け、凝集を抑止する活性を持つ蛋白質を幅広く指して分子シャペロンと呼んでおり、その分子量によって幾つかのファミリーに分類される（ＨＳＰ９０、 ＨＳＰ７０、 ＨＳＰ６０、 ＨＳＰ４０、 ｓｍａｌｌ ＨＳＰｓなど）。特にＨＳＰ９０は細胞内のシグナル伝達系に関わる多数の分子と相互作用することが知られており、ＨＳＰ９０が細胞周期制御および癌化・増殖・生存シグナルに深く関与していることが明らかになりつつある。
【０００３】
ＨＳＰ９０は細胞内に豊富に存在する（全可溶性蛋白質の１〜２％を占めている）分子シャペロンであり、細胞質に一様に分布しており、おもに２量体として存在する。蛋白質の折り畳みにおけるＨＳＰ９０単独の活性は弱く、折り畳み活性を持つ他の分子シャペロン（以下ｃｏ−シャペロンという。ＨＳＰ７０、 ｐ２３など）と共同で機能している。ＨＳＰ９０は複合体を形成した標的蛋白質の機能発現に必要な場合が多く、ＨＳＰ９０が不安定な折り畳み状態にある蛋白質を特異的に認識して結合するという生化学的特性に基づいている。ＨＳＰ９０はＡＴＰに依存して変性または折り畳み状態にない蛋白質の(再)折り畳みを行う。特に、癌関連のシグナル伝達に関わる多様なｋｅｙ蛋白質(ｓｔｅｒｏｉｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ、 Ｒａｆ ｓｅｒｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ、 ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅｓ)の構造構築に必要とされる。最近の知見によると、ヒト腫瘍では多くのｋｅｙシグナル分子の調節が失われており、これらは機能を維持するためにＨＳＰ９０を必要としている。(非特許文献１)
【０００４】
Ｇｅｌｄａｎａｍｙｃｉｎ(ＧＭ)は当初チロシンキナーゼ阻害剤として微生物から見出されたアンサマイシン系天然物であるが、チロシンキナーゼに対する直接の阻害活性は弱く、その後この薬剤がＨＳＰ９０に特異的に作用することが見出された。ＧＭとは構造の異なるマクロライド系天然物であるＲａｄｉｃｉｃｏｌ(ＲＤ)もやはりＨＳＰ９０に作用しその機能を阻害する。ＧＭやＲＤはｉｎ ｖｉｔｒｏで癌関連のシグナル伝達にかかわる多様なｋｅｙ蛋白質(ｓｔｅｒｏｉｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒや Ｒａｆ、Ｈｅｒ２など)の分解を引き起こすこと、各種癌細胞の増殖抑制を引き起こすことが知られている。ＨＳＰ９０はＮ末端にシャペロン機能の調節に重要な役割を果たすＡＴＰ／ＡＤＰ結合部位を含んでいる。この部位はＨＳＰ９０ ｆａｍｉｌｙ に特異的でよく保存されており、他の分子シャペロンには存在しない。ＧＭやＲＤなどはこのＡＴＰ／ＡＤＰ結合部位に直接結合することが結晶構造解析において明らかにされている。(非特許文献２、３)また、上記アンタゴニストがＡＴＰ／ＡＤＰ結合領域へ結合することにより、ｐ２３などのｃｏ−シャペロンとの会合が阻害されることが知られている。その結果、標的蛋白質とＨＳＰ９０を含むシャペロン複合体の構成が変化し、最終的に標的蛋白質は複合体から離脱して、主にユビキチン・プロテアソ−ム系で分解される。したがって、ＨＳＰ９０アンタゴニストによる癌細胞の増殖抑制作用は、ＨＳＰ９０の標的蛋白質量の減少とそれに伴う下流へのシグナル伝達の遮断によるものと考えられる。
【０００５】
ＨＳＰ９０アンタゴニストはＨＳＰ９０に折り畳まれ、機能を発現する標的蛋白質に対して選択的に作用し、それ以外の蛋白質の機能および発現量には全く影響を及ぼさない。癌化する過程では複数の遺伝子異常が蓄積されており、腫瘍細胞では変異蛋白質は正常蛋白質よりもシャペロン活性を必要としているという報告、ＨＳＰ９０の発現量が種々の癌で増加しているという報告、ＧＭ誘導体である１７−ＡＡＧの動物モデルにおける薬物動態の解析からは、正常組織と比較して癌部により１７−ＡＡＧの蓄積性が高いという報告がなされている。これらのことから、ＨＳＰ９０アンタゴニストは正常細胞ではなく癌細胞に特異的に作用することが期待できる。また、異常な蛋白質発現や低酸素、栄養飢餓といった一種ストレス状態下にある癌細胞がＨＳＰ９０に依存している度合いが高いため、癌細胞の感受性がより高いと考えられる。
【０００６】
ＨＳＰ９０アンタゴニストのうち、１７−ＡＡＧは第Ｉ／ＩＩ層臨床試験進行中であり、ＲＤ誘導体研究も行われているが（非特許文献４）、医薬品として使用するには、何れも分子量、安定性、水溶性等の物性面で問題がある。医薬品として有用な水溶性低分子ＨＳＰ９０阻害剤が求められている。低分子のＨＳＰ９０阻害剤として、アデノシン誘導体であるＰＵ３およびその誘導体（特許文献１、非特許文献５、非特許文献６、非特許文献７）が報告されている。また、５員環が結合した１，３−ジヒドロキシベンゼン誘導体がＨＳＰ９０阻害剤として報告されている（特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５、特許文献６、特許文献７）が、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおける癌細胞増殖抑制活性も弱い。一方、本発明のアセチレン誘導体がＨＳＰ９０阻害活性を有することは文献上知られていない。
【０００７】
【特許文献１】国際公開第０２／０３６０７５号公報
【特許文献２】国際公開第０３／０５５８６０号公報
【特許文献３】国際公開第０４／０５００８７号公報
【特許文献４】国際公開第０４／０５６７８２号公報
【特許文献５】国際公開第０４／０９６２１２号公報
【特許文献６】国際公開第０４／０７２０５１号公報
【特許文献７】国際公開第０５／０００３００号公報
【０００８】
【非特許文献１】Ｈｓｐ９０ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｓ ｎｏｖｅｌ ｃａｎｃｅｒ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｏｌ Ｍｅｄ．２００２； ８（４ Ｓｕｐｐｌ．）： ｐ．Ｓ５５−６１．
【非特許文献２】Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎ ＨＳＰ９０−ｐｐ６０ｖ−ｓｒｃ ｈｅｔｅｒｏｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｂｙ ｂｅｎｚｏｑｕｉｎｏｎｅ ａｎｓａｍｙｃｉｎｓ： ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｓｔｒｅｓｓ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ．Ｓ．Ａ．１９９４； ９１（１８）： ｐ．８３２４−８３２８．
【非特許文献３】Ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ａｎ Ｈｓｐ９０−ｇｅｌｄａｎａｍｙｃｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘ： ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ ａ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｈａｐｅｒｏｎｅ ｂｙ ａｎ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｇｅｎｔ．Ｃｅｌｌ １９９７ Ａｐｒ １８； ８９（２）： ｐ．２３９−２５０．
【非特許文献４】Ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ − ｐｒｅｓｅｎｔ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ． Ｃｕｒｒ．Ｃａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇ Ｔａｒｇｅｔｓ．２００３ Ｏｃｔ；．３（５）： ｐ．３８５−３９０．
【非特許文献５】Ａ ｓｍａｌｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｔｏ ｂｉｎｄ ｔｏ ｔｈｅ ａｄｅｎｉｎｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｃｋｅｔ ｏｆ Ｈｓｐ９０ ｃａｕｓｅｓ Ｈｅｒ２ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ａｒｒｅｓｔ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｇ．Ｃｈｉｏｓｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．２００１ Ｍａｒ；８（３）：ｐ．２８９−２９９．
【非特許文献６】Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ Ｗｉｄｅ−Ｒａｎｇｅ Ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｖｉａ ＰＵ２４ＦＣｌ，ａ Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ Ｔｕｍｏｒ Ｈｓｐ９０．Ｍ．Ｖｉｌｅｎｃｈｉｋ ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，１１，ｐ．７８７−７９７（２００４）．
【非特許文献７】Ａｄｅｎｉｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｈａｐｅｒｏｎｅ ＨＳＰ９０−ＳＡＲ ｅｘｐｌａｉｎｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｘ−ｒａｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ．Ｄ．Ｄｙｍｏｃｋ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１４（０２），ｐ．３２５−３２８（２００４）．
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
細胞増殖に関与しているＨＳＰ９０の阻害剤は上述のように癌細胞選択的に効果を表すことが期待されており、開発が進められているものもあるが、医薬として求められる安定性や効果を十分に発揮するものは得られておらず、医薬として使用可能なＨＳＰ９０阻害剤が望まれている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記課題を解決するために、本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、下記一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、または、一般式（１Ｃ）
【化１】
で表されるアセチレン誘導体、そのプロドラッグ、または、その薬理学的に許容されうる塩が、ＨＳＰ９０を阻害することを見出し、本発明を完成した。
【００１１】
すなわち、本発明は、
（１）下記一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、または、一般式（１Ｃ）
【００１２】
【化２】
【００１３】
［式中、Ａは、酸素原子、硫黄原子、または、ＮＲ１を示し、Ｘは置換基を有しても良いメチレン基を示し、ｎは０−３を示し、Ｙは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、メルカプト基、水酸基、ハロゲン原子、アルキルチオ基、アリールチオ基、アルキルスルフィニル基、アリールスルフィニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を示し、Ｙｃは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、またはカルバモイル基を示す。Ｚは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、ハロゲン原子、スルファモイル基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、カルバモイル基、またはシリル基を示し、Ｒは、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を示す。ただし、ＡがＮＲ１の時、Ｒは、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を示す。Ｒ１は水素原子、もしくは、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６の、アルケニル基、もしくはアルキニル基を示す。］
で表されるアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（２）下記一般式（１Ａ−Ｏ）
【００１４】
【化３】
【００１５】
［式中、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎは、一般式（１Ａ）のＸ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎと同じ意味を表す。］
で表される（１）に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（３）下記一般式（１Ｂ−Ｏ）
【００１６】
【化４】
【００１７】
［式中、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎは、一般式（１Ｂ）のＸ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎと同じ意味を表す。］
で表される（１）に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（４）下記一般式（１Ｃ）
【００１８】
【化５】
【００１９】
［式中、Ｘ、Ｚ、Ｒ、Ｙｃおよびｎは、一般式（１Ｃ）のＸ、Ｚ、Ｒ、Ｙｃおよびｎと同じ意味を表す。］
で表される（１）に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（５）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｘで表される置換基を有しても良いメチレン基の置換基が、水素原子、または、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６の、アルケニル基若しくはアルキニル基である、（１）ないし（４）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（６）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｘが無置換メチレン基である、（１）ないし（５）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（７）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ｎが１である、（１）ないし（６）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（８）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ｎが０である、（１）ないし（６）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（９）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｚが、水素原子、置換基を有していてもよい、炭素数１〜６のアルキル基、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、またはシリル基である、（１）ないし（８）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１０）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｚが水素原子若しくは炭素数１〜４のアルキル基である、（１）ないし（９）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１１）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ＹまたはＹｃが、水素原子もしくは炭素数１〜６の非環状アルキル基である、（１）ないし（１０）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１２）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ＹまたはＹｃがカルバモイル基である、（１）ないし（１０）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１３）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｒが置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基である、（１）ないし（１２）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１４）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｒが下記一般式（２）
【００２０】
【化６】
【００２１】
［式中、ｎ’は０〜３を表す。Ｒ３は、環状でも非環状でも良く置換基を有しても良い、アルコキシル基、アミノ基、アシルアミノ基、または、スルフォニルアミノ基示す。］
で表される、（１）ないし（１３）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１５）一般式（２）において、ｎ’が０または１であり、Ｒ３が環状アミノ基である、（１４）に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１６）一般式（２）において、ｎ’ が０であり、Ｒ３がアルコキシル基である、（１４）に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１７）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）で表される化合物が、下記一般式（１Ａ−Ｏ１）、一般式（１Ｂ−Ｏ１）、又は、一般式（１Ｃ−１）
【００２２】
【化７】
【００２３】
［上記式中、Ｙａ、Ｙｂ、Ｙｃ１は、各々独立して、水素原子、メチル基またはＮ−エチルカルバモイル基を示し、Ｚａ、Ｚｂ、Ｚｃは、各々独立して、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、フェニル基又はトリメチルシリル基を示し、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃは、各々独立して、メトキシ基、モルフォリン−４−イルメチル基、または、モルフォリノ基を示す。］で表される（１）ないし（１５）のいずれか一項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１８）４−（ブチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−２９）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３０）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−トリメチルシラニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３３）、
４−（４，４−ジメチルペンチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３４）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３５）、
（１９）４−（ブチン−２−イル）−６−［５−メチル−４−（４−モルフォリン−４−イルメチル−フェニル）−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール、
４−（ブチン−２−イル）−６−［５−メチル−４−（４−モルフォリン−４−イル−フェニル）−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール、
（２０）５−［５−（ブチン−２−イル）−２，４−ジヒドロキシ−フェニル］−４−（４−モルフォリン−４−イルメチル−フェニル）−イソキサゾール−３−カルボン酸 エチルアミド、
（２１）（１）ないし（２０）記載のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体のプロドラッグ、またはそのプロドラッグの薬理学的に許容される塩、
（２２）（１）ないし（２１）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体、そのプロドラッグまたはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、ＨＳＰ９０阻害剤、
（２３）（１）ないし（２１）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体、そのプロドラッグまたはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、抗癌剤、
に関する。
【発明の効果】
【００２４】
本発明により、優れたＨＳＰ９０阻害活性を有する本発明記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する薬剤組成物、特に癌治療剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
以下に本発明の詳細を述べる。
【００２６】
本発明において、ハロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子を示す。
【００２７】
本発明において、アルキル基とは、特に記載しない場合は炭素数１〜２０、好ましくは炭素数１〜８の鎖状、分岐状、または、炭素数３〜２０、好ましくは炭素数３〜８の環状アルキル基を示す。鎖状アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、ｎ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基等が挙げられる。分岐状アルキル基としては、例えば、イソプロピル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、２，２−ジメチルプロピル基等が挙げられる。環状アルキル基としては、例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、アダマンチル基等が挙げられる。
【００２８】
本発明において、アルケニル基とは、いずれか１カ所以上に炭素―炭素二重結合を有する、炭素数２〜２０、好ましくは炭素数２〜８の鎖状、分岐状、または炭素数３〜２０、好ましくは炭素数３〜８の環状アルケニル基を示す。鎖状アルケニル基としては、例えば、エテニル基、１−プロペニル基、または、１−ブテニル基等の１−アルケニル基、２−ブテニル基、または、２−ペンテニル基等の２−アルケニル基等が挙げられる。分岐状アルケニル基としては、例えば、イソプロペニル基、３−メチル−１−ブテニル基、または、ゲラニル基等が挙げられる。
【００２９】
本発明において、アルキニル基とは、いずれか１カ所以上に炭素―炭素三重結合を有する、炭素数２〜２０、好ましくは炭素数２〜８のアルキニル基を示す。例えば、エチニル基、１−プロピニル基、３，３−ジメチル−１−ブチニル基等の１−アルキニル基、２−プロピニル基、２−ブチニル基、３−フェニル−２−プロピニル基、４，４−ジメチル−２−ペンチニル基、３−トリメチルシリル−２−プロピニル基等の２−アルキニル基等が挙げられる。
【００３０】
本発明において、炭素環アリール基としては、例えば、フェニル基、ナフチル基等が挙げられる。複素環アリール基としては、例えば、ピリジル基、ピリミジニル基、キノリル基、キナゾリル基、ナフチリジニル基、フリル基、ピロリル基、インドリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基、イソキサゾリル基、トリアゾリル基等が挙げられる。
【００３１】
本発明において、置換基を有しても良い、と記載した場合の置換基としては、例えば、メルカプト基、水酸基、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、炭素環若しくは複素環アリール基、アルキルチオ基、アリールチオ基、アルキルスルフィニル基、アリールスルフィニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、アシルオキシ基、アルコキシカルボニルオキシ基、カルバモイルオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、アルコキシカルボニルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基等が挙げられる。芳香環上の置換位置は、オルト位でも、メタ位でも、パラ位でも良い。
【００３２】
本発明において、アルキルチオ基としては炭素数１〜８のアルキルチオ基を示し、例えば、メチルチオ基、イソプロピルチオ基、ベンジルチオ基等が挙げられる。アリールチオ基としては、例えば、フェニルチオ基、ナフチルチオ基、ピリジルチオ基等が挙げられる。アルキルスルフィニル基としては炭素数１〜８のアルキルスルフィニル基を示し、例えば、メチルスルフィニル基、イソプロピルスルフィニル基、ベンジルスルフィニル基等が挙げられる。アリールスルフィニル基としては、例えば、フェニルスルフィニル基、ナフチルスルフィニル基、ピリジルスルフィニル基等が挙げられる。アルキルスルフォニル基としては炭素数１〜８のアルキルスルフォニル基を示し、例えば、メチルスルフォニル基、イソプロピルスルフォニル基、ベンジルスルフォニル基等が挙げられる。アリールスルフォニル基としては、例えば、フェニルスルフォニル基、ナフチルスルフォニル基、ピリジルスルフォニル基等が挙げられる。スルファモイル基としては、例えば、ジメチルスルファモイル基、フェニルスルファモイル基等が挙げられる。
【００３３】
本発明において、アルコキシル基としては炭素数１〜８のアルコキシル基を示し、例えば、メトキシ基、イソプロポキシ基、ベンジルオキシ基等が挙げられる。アリールオキシ基としては、例えば、フェノキシ基、ナフチルオキシ基、ピリジルオキシ基等が挙げられる。アシルオキシ基としては炭素数１〜８のアシルオキシ基を示し、例えば、アセトキシル基、ベンゾイルオキシ基等が挙げられる。アルコキシカルボニルオキシ基としては炭素数１〜８のアルコキシカルボニルオキシ基を示し、例えば、メトキシカルボニルオキシ基、トリフルオロメトキシカルボニル基等が挙げられる。カルバモイルオキシ基としては、例えば、ジメチルカルバモイルオキシ基、フェニルカルバモイルオキシ基等が挙げられる。
【００３４】
本発明において、アミノ基としては、例えば、無置換アミノ基、ジメチルアミノ基、モルホリノ基、ピペリジニル基、フェニルアミノ基等が挙げられる。アシルアミノ基としては、例えば、アセチルアミノ基、ベンゾイルアミノ基等が挙げられる。アルコキシカルボニルアミノ基としては炭素数１〜８のアルコキシカルボニルアミノ基を示し、例えば、メトキシカルボニルアミノ基、エトキシカルボニルアミノ基、ベンジルオキシカルボニルアミノ基等が挙げられる。ウレイド基としては、例えば、トリメチルウレイド基、１−メチル−３−フェニル−ウレイド基等が挙げられる。スルフォニルアミノ基としては、例えば、メタンスルフォニルアミノ基、ベンゼンスルフォニルアミノ基等が挙げられる。スルファモイルアミノ基としては、例えば、ジメチルスルファモイルアミノ基等が挙げられる。
【００３５】
本発明において、アシル基としては、例えば、アセチル基、ピバロイル基、ベンゾイル基、ピリジンカルボニル基等が挙げられる。アルコキシカルボニル基としては、例えば、メトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基等が挙げられる。カルバモイル基としては、例えば、ジメチルカルバモイル基、フェニルカルバモイル基等が挙げられる。
【００３６】
本発明において、シリル基としては、例えば、トリメチルシリル基、トリイソプロピルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチル−ジフェニル−シリル基等が挙げられる。
【００３７】
本発明において、Ａで表される置換基としては、酸素原子、硫黄原子、または置換基を有しても良い窒素原子が挙げられる。Ａで表される置換基としては、なかでも、酸素原子が好ましい。
【００３８】
本発明においてＡで表される置換基がＮＲ１である場合、Ｒ１で表される置換基としては、水素原子、または、置換基を有していてもよい、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６の、アルケニル基もしくはアルキニル基が挙げられる。Ｒ１で表される置換基としては、なかでも、水素原子が好ましい。
【００３９】
本発明においてＲとしては、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、置換基を有していてもよいアルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、及びシリル基が挙げられ、この中では置換基を有しても良い炭素環および複素環アリール基が好ましい。Ｒで表される置換基を有しても良い炭素環アリ−ル基としては、例えば、フェニル基、メトキシフェニル基、ブロモフェニル基、アミノフェニル基、メチルフェニル基、ジメトキシフェニル基、一般式（２）
【化８】
【００４０】
［式中、ｎ’は０〜３を表す。Ｒ３は、環状でも非環状でも良く置換基を有しても良い、アルコキシル基、アミノ基、アシルアミノ基、または、スルフォニルアミノ基示す。］で表される置換基等が好ましく、なかでも、一般式（２）で表される置換基が特に好ましい。
【００４１】
一般式（２）で表される置換基中、ｎ’としては、０または１が特に好ましい。Ｒ３としては、アルコキシル基、アミノ基、アシルアミノ基、及びスルフォニルアミノ基を挙げることができ、アルコキシル基としては例えば、メトキシ基、エトキシ基等が、アミノ基としては環状アミノ基、非環状アミノ基、又は芳香族アミノ基が挙げられ、環状アミノ基としては例えばモルフォリノ基、ピペリジニル基、ピペラジニル基、ピロリジニル基等が、非環状アミノ基としては例えばジメチルアミノ基、イソプロピルアミノ基、シクロヘキシルアミノ基、２−ヒドロキシエチルアミノ基、２−メトキシエチルアミノ基等が、芳香族アミノ基としては例えばフェニルアミノ基等がそれぞれ挙げられる。また、アシルアミノ基としては例えばアセチルアミノ基、ベンゾイルアミノ基等が、スルフォニルアミノ基としてはメタンスルフォニルアミノ基、ベンゼンスルフォニルアミノ基等がそれぞれ挙げられる。Ｒ３としては中でも、メトキシ基、エトキシ基等のアルコキシル基、モルフォリノ基、ピペリジニル基、ピペラジニル基、ピロリジニル基等の環状アミノ基が特に好ましい。
【００４２】
一般式（２）で表される置換基としては、４−メトキシフェニル基、４−（モルフォリン−４−イル）−フェニル基、および、４−（モルフォリン−４−イルメチル）−フェニル基が特に好ましい。
【００４３】
一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、及び、一般式（１Ｃ）で表される化合物において、Ｚで表される置換基としては、水素原子、置換基を有していてもよい、若しくは炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６のアルケニル基若しくはアルキニル基、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、ハロゲン原子、スルファモイル基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、カルバモイル基、及びシリル基を挙げることができ、水素原子、置換基を有しても良い炭素数１〜６のアルキル基、置換基を有していてもよい炭素環アリール基、カルバモイル基およびシリル基が好ましく、なかでも、水素原子、メチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、フェニル基、トリメチルシリル基が特に好ましい。
【００４４】
一般式（１Ａ）、及び、一般式（１Ｂ）で表される化合物において、Ｙで表される置換基としては、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、メルカプト基、水酸基、ハロゲン原子、アルキルチオ基、アリールチオ基、アルキルスルフィニル基、アリールスルフィニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を挙げることができる。一般式（１Ａ）及び一般式（１Ｂ）で表される化合物において、Ｙで表される置換基としては、水素原子、置換基を有しても良い炭素数１〜６のアルキル基、および、カルバモイル基が好ましい。
【００４５】
一般式（１Ｃ）で表される化合物において、Ｙｃで表される置換基としては、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、またはカルバモイル基を挙げることができる。一般式（１Ｃ）で表される化合物において、Ｙｃで表される置換基としては、水素原子、置換基を有しても良い炭素数１〜６のアルキル基、および、カルバモイル基が好ましい。
【００４６】
本発明においてＸで表される置換基としては、置換基を有しても良いメチレン基をあげることができるが、この置換基としては、例えば、水素原子、または、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６の、アルケニル基若しくはアルキニル基が挙げられる。なかでも水素原子が好ましい。
【００４７】
一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、及び、一般式（１Ｃ）で表される化合物において、ｎは０ないし３のいずれかの整数を表し、０および１が好ましい。
【００４８】
本発明の化合物としては、なかでも、下記一般式（１Ａ−Ｏ１）、一般式（１Ｂ−Ｏ１）、及び、一般式（１Ｃ−１）
【００４９】
【化９】
【００５０】
［上記式中、Ｙａ、Ｙｂ、Ｙｃ１は、各々独立して、水素原子、メチル基またはＮ−エチルカルバモイル基を示し、Ｚａ、Ｚｂ、Ｚｃは、各々独立して、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、フェニル基又はトリメチルシリル基を示し、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃは、各々独立して、メトキシ基、モルフォリン−４−イルメチル基、または、モルフォリノ基を示す。］で表される化合物が好ましい。
【００５１】
一般式（１Ａ−Ｏ１）、一般式（１Ｂ−Ｏ１）、及び、一般式（１Ｃ−１）で表される化合物中、Ｚａ、Ｚｂ、Ｚｃで表される置換基としては、水素原子、メチル基が特に好ましい。一般式（１Ａ−Ｏ１）、一般式（１Ｂ−Ｏ１）、及び、一般式（１Ｃ−１）で表される化合物中、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃで表される置換基としては、メトキシ基、モルフォリン−４−イルメチル基が特に好ましい。
【００５２】
一般式（１）もしくは一般式（１Ａ−Ｏ１）、一般式（１Ｂ−Ｏ１）、及び、一般式（１Ｃ−１）で示される化合物の具体例は以下の通りである。
【００５３】
４−（ブチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−２９）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３０）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−トリメチルシラニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３３）、
４−（４，４−ジメチルペンチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３４）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３５）、
４−（ブチン−２−イル）−６−［５−メチル−４−（４−モルフォリン−４−イルメチル−フェニル）−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール、
４−（ブチン−２−イル）−６−［５−メチル−４−（４−モルフォリン−４−イル−フェニル）−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール、
５−［５−（ブチン−２−イル）−２，４−ジヒドロキシ−フェニル］−４−（４−モルフォリン−４−イルメチル−フェニル）−イソキサゾール−３−カルボン酸 エチルアミド。
【００５４】
本発明のプロドラッグとしては、例えば一般式（１Ａ−Ｌ）、一般式（１Ｂ−Ｌ）、及び、一般式（１Ｃ−Ｌ）
【００５５】
【化１０】
【００５６】
［上記式中、Ｌ１、Ｌ２は、生体内でＯ−Ｌ１結合若しくはＯ−Ｌ２結合が解離して水酸基を遊離し易い置換基を示す。Ｌ１、Ｌ２の何れか一方は水素原子でも良い。Ｘ、Ｙ、Ｙｃ、Ｚ、Ｒ及びｎは前記した通り。］で表される化合物が挙げられる。Ｌ１、Ｌ２で表される置換基としては、アシル基、カルバモイル基、アルコキシカルボニル基、フォスフォリル基、及びアルコキシメチル基等が挙げられる。アシル基としては例えば、アセチル基、トリフロロアセチル基等が、カルバモイル基としては例えばジメチルカルバモイル基等が、アルコキシカルボニル基としては例えばメトキシカルボニル基等が、フォスフォリル基としては（ＭｅＯ）２Ｐ（＝Ｏ）−等が、アルコキシメチル基としてはメトキシメチル基等が挙げられる。
【００５７】
本発明におけるアセチレン誘導体は、酸、または塩基と塩を形成する場合もあり、本発明は一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、または、一般式（１Ｃ）で表される化合物の塩を有効成分とするＨＳＰ９０阻害剤および癌治療薬も含有する。酸との塩としては、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩等の無機酸塩や、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸との塩を挙げることができる。塩基との塩としては、例えばナトリウム塩等を挙げることができる。これらの塩は、定法によって製造することができる。
【００５８】
本発明の化合物は、例えば、スキーム（１）のようにして製造することができる。
【００５９】
【化１１】
【００６０】
スキーム（１）中、Ｒａ、Ｙａ、およびＺａは、一般式（１Ａ−Ｏ１）のＲａ、Ｙａ、およびＺａと同じ意味を表す。Ｐｒｏ２は、水酸基の保護基を表す。以下に各工程を説明する。
【００６１】
工程Ａ：一般式（ＩＭ−１）で表されるホルミル置換レゾルシノール誘導体のホルミル基にアルキニル金属を付加させることにより、一般式（ＩＭ−２）で表されるアルコール誘導体を合成する工程である。アルキニル金属としては、例えば、３，３−ジメチル−１−ブチニルリチウム、リチウムフェニルアセチリド、リチウム（トリメチルシリル）アセチリド等のアルキニルリチウム、１−プロピニルマグネシウムブロマイド、エチニルマグネシウムブロマイド等のアルキニルマグネシウムハライド等を用いることができる。本工程は、好ましくは、アルキニル金属として、例えばリチウム（トリメチルシリル）アセチリド、１−プロピニルマグネシウムブロマイド等を用い、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等のエーテル系溶媒中、−２０度から５０度、好ましくは−１０度から２０度で１５分〜２４時間反応させることにより実施できる。
【００６２】
工程Ｂ：一般式（ＩＭ−２）で表されるベンジルアルコール誘導体のベンジル位の水酸基を還元的に除去する工程である。本工程は、例えば還元剤としてトリエチルシラン等のハイドロシランを用い酸触媒の存在下還元反応を行うか、または、パラジウム触媒存在下塩化第一錫を用いる還元反応等により実施できる。本工程は、好ましくは、アセトニトリル溶媒中、還元剤としてトリエチルシランを用い、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体存在下、−１０度から２０度で３０分〜３時間反応させることにより実施できる。
【００６３】
工程Ｃ：一般式（ＩＭ−３）で表される水酸基が保護されたレゾルシノール誘導体の、水酸基の保護基を脱保護し、一般式（１Ａ−Ｏ１）で表されるアセチレン誘導体を製造する工程である。水酸基の保護基がメトキシメチル基の場合、酸性条件下実施することができる。酸触媒としては、塩酸、硫酸等の無機酸、トルエンスルホン酸、メタンスルフォン酸、トリフロロスルフォン酸等のスルフォン酸、酢酸、トリフロロ酢酸等のカルボン酸、ピリジニウムパラトルエンスルフォネート等の強酸―弱塩基塩等、その他、メトキシメチル基を脱保護できることが知られている触媒で保護基以外の部分に影響を与えない触媒であれば、何でも使用できる。保護基がメトキシメチル基の場合、例えば、酸触媒として３．０―８．０規定塩酸を用い、メタノール中、１０度から４０度で、５時間から３日間の反応時間で実施するのが好ましい。
【００６４】
スキーム（１）の原料化合物である、一般式（ＩＭ−１）で表されるホルミルレゾルシノール誘導体は、例えば、スキーム（２）のようにして製造することができる。スキーム（２）中、ＲａおよびＹａは、一般式（１Ａ−Ｏ１）のＲａおよびＹａと同じ意味を表す。Ｐｒｏ１およびＰｒｏ２は、水酸基の保護基を表す。Ｈａｌはハロゲン原子を示す。以下に各工程を説明する。
【００６５】
【化１２】
【００６６】
工程Ｄ：一般式（ＩＭ−４）で表されるレゾルシノール誘導体の水酸基を保護する工程である。本工程で使用できる保護基Ｐｒｏ１としては、例えば、メトキシメチル基、ベンジルオキシメチル基等のアルコキシメチル基、置換または無置換ベンジル基、シリル基等が挙げられる。Ｐｒｏ１がベンジル基の場合、例えば、ジメチルホルムアミド等の極性非プロトン溶媒、アセトニトリル等のニトリル系溶媒、または、エーテル系溶媒等の溶媒中、炭酸カリウム等の塩基共存下、２０度から１００度で３０分〜２４時間反応させることにより実施できる。
【００６７】
工程Ｅ：一般式（ＩＭ−５）で表されるレゾルシノール誘導体のホルミル基をオキシムに変換する工程である。本工程は、例えば、エタノール、メタノール等のアルコール系溶媒、水、またはこれらの混合溶媒中、トリエチルアミン、ピリジン、炭酸カリウム等の塩基存在下、ヒドロキシルアミン塩酸塩と、０度から１００度で２時間〜４８時間反応させることにより実施できる。
【００６８】
工程Ｆ：一般式（ＩＭ−６）で表されるオキシム誘導体を、一般式（ＩＭ−７）で表されるニトリルオキシドに変換する工程である。本工程は、例えば、クロロフォルム、ジクロロメタン等のハロゲン系溶媒中、ピリジン等の塩基共存下、Ｎ−クロロスクシンイミドと０度から５０度で３０分〜１０時間反応させることにより実施できる。
【００６９】
工程Ｇ：一般式（ＩＭ−８）で表されるベンジルケトン誘導体を塩基処理することにより一般式（ＩＭ−８’）で表されるエノールエーテルとし（工程Ｇ−１）、次いで一般式（ＩＭ−７）で表されるニトリルオキシドと反応させる（工程Ｇ−２）ことにより、一般式（ＩＭ−９）で表されるジヒドロイソキサゾール誘導体を合成する工程である。エノールエーテルの生成に用いられる塩基としては、例えば、リチウムジイソプロピルアミド、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、ソジウムビス（トリメチルシリル）アミド、ポタシウムビス（トリメチルシリル）アミド、ポタシウムｔｅｒｔ−ブトキシド等が挙げられる。なかでも、リチウムジイソプロピルアミドが好ましい。反応溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等のエーテル系溶媒、ベンゼン、トルエン等の炭化水素系溶媒、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等の非プロトン性高極性溶媒等が使用できる。本工程は、例えば、一般式（ＩＭ−８）で表されるベンジルケトン誘導体を、テトラヒドロフラン中、リチウムジイソプロピルアミドを用いて−１０度から１５度で、３０分〜３時間反応させてエノールエーテルとし、次いで、一般式（ＩＭ−７）で表されるニトリルオキシドを加えて、０度から４０度で、５時間〜４８時間反応させて実施することができる。
【００７０】
工程Ｈ：一般式（ＩＭ−９）で表されるジヒドロイソキサゾール誘導体の脱水反応により、一般式（ＩＭ−１０）で表される芳香族イソキサゾール誘導体へ変換する反応である。本工程は、例えば、硫酸、トルエンスルフォン酸、メタンスルフォン酸等の酸触媒を用い、実施できる。本工程は、好ましくは、トルエンスルフォン酸水和物を１当量用い、メタノール、エタノール等の極性溶媒中、３０度〜溶媒沸点で、１５分〜５時間処理することにより実施できる。
【００７１】
工程Ｉ：一般式（ＩＭ−１０）で表される水酸基が保護されたレゾルシノール誘導体の、水酸基の保護基を除去する工程である。例えば保護基がベンジル基の場合、水素雰囲気中、パラジウム−炭素等の触媒の存在下、メタノール、エタノール等のアルコール性溶媒中撹拌すること等により、実施できる。
【００７２】
工程Ｊ：一般式（ＩＭ−１１）で表されるレゾルシノール誘導体をハロゲン化する工程である。ハロゲン原子としては、塩素原子、臭素原子、またはヨウ素原子が挙げられ、中でも、臭素原子が好ましい。ハロゲン原子が臭素原子の場合、臭素化剤としては、Ｎ−ブロモスクシンイミド、ベンジルトリメチルアンモニウムトリブロマイド、臭素等が挙げられ、中でも、ベンジルトリメチルアンモニウムトリブロマイドが好ましい。本工程は、ハロゲン化剤としてベンジルトリメチルアンモニウムトリブロマイドを用い、ハロゲン系溶媒中、０度から５０度で実施するのが好ましい。
【００７３】
工程Ｋ：一般式（ＩＭ−１２）で表されるレゾルシノール誘導体の水酸基を保護する工程である。本工程で使用できる保護基Ｐｒｏ２としては、例えば、アルコキシメチル基、置換または無置換ベンジル基、シリル基等が挙げられる。なかでも、メトキシメチル基、ベンジルオキシメチル基等のアルコキシメチル基が好ましく、メトキシメチル基が特に好ましい。Ｐｒｏ２がメトキシメチル基の場合、例えば、メトキシメチル化剤としてメトキシメチルクロライドを用い、ハロゲン系溶媒、ジメチルホルムアミド等の極性非プロトン溶媒、アセトニトリル等のニトリル系溶媒、または、エーテル系溶媒等の溶媒中、トリエチルアミン、ピリジン、ジイソプロピルエチルアミン、または、炭酸カリウム等の塩基共存下、−１０度から３０度で３０分〜２４時間反応させることにより実施できる。
【００７４】
工程Ｌ：一般式（ＩＭ−１３）で表されるハロゲン置換レゾルシノール誘導体のハロゲン原子をリチウム等の金属原子と交換し、次いでホルミル基に変換する工程である。例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等のエーテル系溶媒中、ｎ−ブチルリチウムを用い、−１００度から０度、好ましくは−８０度から−３０度ででハロゲンーリチウム交換反応を行い、次いでジメチルホルムアミドを加え、−５０度から５０度で反応させることにより実施できる。
【００７５】
一般式（１Ｂ−Ｏ１）で表される化合物は、例えば、スキーム（３）のようにして製造することができる。
【００７６】
【化１３】
【００７７】
スキーム（３）中、Ｒｂ、Ｙｂ、およびＺｂは、一般式（１Ｂ−Ｏ１）のＲｂ、Ｙｂ、およびＺｂと同じ意味を表す。Ｐｒｏ４は、水酸基の保護基を表す。
【００７８】
工程Ａｂ、工程Ｂｂ、工程Ｃｂは、スキーム（１）の工程Ａ、工程Ｂ、工程Ｃに準じて実施できる。工程Ｌｂは、スキーム（２）の工程Ｌに準じて実施できる。原料化合物１Ｂ−Ｏ１−ＩＭ１は、ＷＯ ２００４／０７２０５１に記載の方法に準じて合成できる。
【００７９】
一般式（１Ｃ−１）で表される化合物、例えばＹｃ１が水素原子である１Ｃ−１Ｈは、例えば、スキーム（４）のようにして製造することができる。
【００８０】
【化１４】
【００８１】
スキーム（４）中、ＲｃおよびＺｃは、一般式（１Ｃ）のＲｃおよびＺｃと同じ意味を表す。スキーム（４）中、Ｐｒｏ３は、水酸基の保護基を表す。
【００８２】
工程Ａｃ、工程Ｂｃ、工程Ｃｃは、スキーム（１）の工程Ａ、工程Ｂ、工程Ｃに準じて実施できる。工程Ｌｃは、スキーム（２）の工程Ｌに準じて実施できる。
【００８３】
本発明のアセチレン誘導体、そのプロドラッグ、またはその製薬上許容し得る塩を制癌剤として使用する場合は、単独または担体、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、流動化剤、コーティング剤、懸濁化剤、乳化剤、安定化剤、保存剤、矯味剤、着香剤、希釈剤、溶解補助剤等の製薬上許容し得る添加剤と混合して粉剤、顆粒剤、錠剤、カブレット剤、カプセル剤、注射剤、座剤、軟膏剤等の製剤形態で、経口または非経口的（全身投与、局所投与等）に安全に投与される。製剤中の本発明のアセチレン誘導体、そのプロドラッグ、または製薬上許容し得る塩の含量は、製剤により種々異なるが、通常０．１〜１００重量％であることが好ましい。投与量は投与経路、患者の年齢並びに予防または治療すべき実際の症状等により異なるが、例えば成人に経口投与する場合、有効成分として１日０．０１ｍｇ〜２０００ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜１０００ｍｇとすることができ、１日１回又は数回に分けて投与できる。
【００８４】
本発明のアセチレン誘導体、そのプロドラッグ、およびその薬理学的に許容される塩は、ＨＳＰ９０阻害作用を有し、癌治療剤として有用である。
【実施例】
【００８５】
次に本発明を実施例により更に具体的に説明するが、本発明はこれらの例によって何ら制限されるものではない。また、本発明の化合物の有効性を示す本発明の代表的な化合物の薬理試験結果を、表１に示す。
実施例化合物のＬＣ／ＭＳ測定条件は次のとおりである。
１）
機種：島津 ＬＣＭＳ−ＱＰ８０００アルファ
カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−ＩＩＩ、２．１ｍｍ ｉ．ｄ．ｘ１００ｍｍ、
移動相Ａ：アセトニトリル／ギ酸 （９９．９／０．１）
移動相Ｂ：水／ギ酸 （９９．９／０．１）
グラジェント：時間（分） ０．０ ５．５ ５．５１ １０．０
Ａ濃度 ａ １００ ａ ａ
流速：０．３ｍＬ／分
測定条件１）ａ＝２０； 測定条件２）ａ＝６０
２）
機種：島津 ＬＣＭＳ−２０１０Ａ
カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−ＩＩＩ、２．１ｍｍ ｉ．ｄ．ｘ１００ｍｍ、
移動相Ａ：アセトニトリル／ギ酸 （９９．９／０．１）
移動相Ｂ：水／ギ酸 （９９．９／０．１）
グラジェント：時間（分） ０．０ ５．５ ６．５ ６．５１ １０．０
Ａ濃度 ａ ９０ ９０ ａ ａ
流速：０．３ｍＬ／分
測定条件３）ａ＝２０； 測定条件４）ａ＝６０
【００８６】
（１Ａ−Ｏ１−２９）および（１Ａ−Ｏ１−３０）の製造
（１Ａ−Ｏ１−２９）および（１Ａ−Ｏ１−３０）を以下のスキーム（５）に従って合成した。
【００８７】
【化１５】
【００８８】
実施例１
４−（ブチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−２９）の製造
【００８９】
第一工程
１−｛２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−フェニル｝−２−ブチン−１−オール（ＩＭ−２−２９）
アルゴン雰囲気中、氷冷撹拌下、１−プロピニルマグネシウムブロマイド（０．５Ｍテトラヒドロフラン溶液０．６ｍＬ）に、２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンズアルデヒド（ＩＭ−１ａ、４９．６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１ｍＬ）溶液を加え、１時間１５分攪拌した。氷冷攪拌下、反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液および飽和食塩水を加え、ジエチルエーテルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、１−｛２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−フェニル｝−２−ブチン−１−オール（ＩＭ−２−２９）を含む黄色油状物質（５７．１ｍｇ）を得た。
【００９０】
第二工程
３−｛５−（ブチン−２−イル）−２，４−ビス−メトキシメトキシ−フェニル｝−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−３−２９）
アルゴン雰囲気中、室温攪拌下、前工程で得られた１−｛２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−フェニル｝−２−ブチン−１−オール（ＩＭ−２−２９）を含む粗生成物（３４．４ｍｇ）のアセトニトリル（１ｍＬ）溶液中にトリエチルシラン（０．０１３３ｍＬ、０．０８３４ｍｍｏｌ）を加えた。氷冷下とした後、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（０．０１０６ｍＬ、０．０８３４ｍｍｏｌ）を加え、１時間攪拌した。反応溶液に炭酸カリウムを加え５分ほど攪拌後、水を加え攪拌した。酢酸エチルで抽出し、抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、３−｛５−（ブチン−２−イル）−２，４−ビス−メトキシメトキシ−フェニル｝−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−３−２９）を含む褐色油状物質（３２．８ｍｇ）を得た。
【００９１】
第三工程
４−（ブチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−２９）
室温攪拌下、前工程で得られた３−｛５−（ブチン−２−イル）−２，４−ビス−メトキシメトキシ−フェニル｝−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−３−２９）を含む粗生成物（３２．８ｍｇ）のメタノール（２．５ｍＬ）溶液中に、５Ｎ塩酸（０．５ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）を加え、３日間攪拌した。反応溶液を氷冷下とした後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えしばらく攪拌した。酢酸エチルで抽出し、抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、黒褐色油状物質を得た。分取用薄相クロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、４−（ブチン−２−イル）６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−２９、白色固体、１３．２ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ、ＰＯＳ）：３５０［Ｍ＋Ｈ］＋。；保持時間：６．７７分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：０．９７（ｔ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，３Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），３．１８（ｑ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，２Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），５．７９（ｓ，１Ｈ），６．５３（ｓ，１Ｈ），６．９１（ｓ，１Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），９．７６（Ｓ，１Ｈ）．
【００９２】
実施例２
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３０）の製造
実施例１と同様にして、標題化合物を合成した。
収率４４．７％（３工程）
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：３３６［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：６．５０分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：１．８７（ｔ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），３．２７（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），５．３１（ｓ，１Ｈ），６．４７（ｓ，１Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．１０（ｓ，１Ｈ），７．１９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），９．８６（ｓ，１Ｈ）．
【００９３】
（１Ａ−Ｏ１−３３）、（１Ａ−Ｏ１−３４）、および、（１Ａ−Ｏ１−３５）の製造
１Ａ−Ｏ１−３３）、（１Ａ−Ｏ１−３４）、および、（１Ａ−Ｏ１−３５）を以下のスキーム（６）に従って合成した。
【００９４】
【化１６】
【００９５】
実施例３
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３５）の製造
【００９６】
第一工程
１−｛２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−フェニル｝−３−フェニル−２−プロピン−１−オール（ＩＭ−２−３５）
アルゴン雰囲気中、−７８度で撹拌下、エチニルベンゼン（０．０２６ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（０．５ｍＬ）溶液中に、ノルマルブチルリチウム（１．５９Ｍノルマルヘキサン溶液０．１５ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。２０分攪拌後、反応溶液に２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンズアルデヒド（ＩＭ−１ａ、３９．５ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１ｍＬ）溶液を加えた。氷冷下とした後、１時間攪拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液および飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、１−｛２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−フェニル｝−３−フェニル−２−プロピン−１−オール（ＩＭ−２−３５）を含む淡黄色油状物質（５７．１ｍｇ）を得た。
【００９７】
第二工程
３−［２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−フェニル］−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−３−３５）
アルゴン雰囲気中、室温攪拌下、前工程で得られた１−｛２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−フェニル｝−３−フェニル−２−プロピン−１−オール（ＩＭ−２−３５）を含む粗生成物（５４．４ｍｇ）のアセトニトリル（１ｍＬ）溶液中にトリエチルシラン（０．０１８５ｍＬ、０．１１６ｍｍｏｌ）を加えた。氷冷下とした後、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（０．０１４７ｍＬ、０．１１６ｍｍｏｌ）を加え、１時間半攪拌した。反応溶液に炭酸カリウムを加え５分ほど攪拌後、水を加え攪拌した。酢酸エチルで抽出し、抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、３−［２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−フェニル］−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−３−３５）を含む褐色油状物質（５１．２ｍｇ）を得た。
【００９８】
第三工程
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３５）
室温攪拌下、前工程で得られた３−［２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−フェニル］−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−３−３５）を含む粗生成物（５１．２ｍｇ）のメタノール（２．０ｍＬ）溶液中に、８Ｎ塩酸（０．３ｍＬ、２．４ｍｍｏｌ）を加え、３日間攪拌した。反応溶液を氷冷下とした後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えしばらく攪拌した。酢酸エチルで抽出し、抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、赤褐色油状物質を得た。分取用薄相クロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３５、赤色固体、２３．４ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ、３工程５９．４％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：４１２［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：７．４４分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．３５（ｓ，３Ｈ），３．４７（ｓ，２Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ），５．６３（ｓ，１Ｈ），６．５４（ｓ，１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２７−７．３３（ｍ，５Ｈ），９．７２（ｓ，１Ｈ）．
【００９９】
実施例４
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−トリメチルシラニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３３）の製造
実施例３と同様にして、標題化合物を合成した。
収率５８．６％（３工程）
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ、ＰＯＳ）：４０８［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：７．６１分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：０．１４（ｓ，９Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），３．２２（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），６．１４（ｓ，１Ｈ），６．５７（ｓ，１Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），９．６９（ｓ，１Ｈ）．
【０１００】
実施例５
４−（４，４−ジメチルペンチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３４）の製造
実施例３と同様にして、標題化合物を合成した。
収率４６．３％（３工程）
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：３９２［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：７．４７分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：１．１７（ｓ，９Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），３．１５（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），６．４１（ｓ，１Ｈ），６，５７（ｓ，１Ｈ），６，７４（ｓ，１Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），９．６８（ｓ，１Ｈ）．
【０１０１】
実施例６
２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンズアルデヒド（ＩＭ−１ａ）の製造
２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンズアルデヒド（ＩＭ−１ａ）を以下のスキーム（７）に従って合成した。
【０１０２】
【化１７】
【０１０３】
第一工程 ２，４−ビス−ベンジルオキシ−ベンズアルデヒド（ＩＭ−５ａ）の製造
５００ｍＬのナス型フラスコに、２，４−ジヒドロキシ−ベンズアルデヒド（ＩＭ−４、２４ｇ、１８１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１００．１ｇ、７２４ｍｏｌ）、アセトニトリル（２５０ｍＬ）を入れ、反応液を０度まで冷却し、そこにベンジルブロマイド（４７．４ｍＬ）をゆっくり加えた。滴下終了後、１．５時間加熱還流した。反応終了後、炭酸カリウムをろ別し、酢酸エチル（３５０ｍＬ）を加え、有機層を飽和食塩水で２回洗浄した。水層を再度、酢酸エチルで抽出し、先ほどの有機層と合わせて、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣にヘキサン（５００ｍＬ）を加えることで固化させ、懸濁精製した。得られた固体をろ取、減圧乾燥することで標題化合物（５４．２１ｇ、９４．１％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ２）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：３１９［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：５．５３分；１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：１０．４（１Ｈ，ｓ），７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．３６−７．４５（１０Ｈ，ｍ）、６．５８−６．６８（２Ｈ，ｍ），５．１４（２Ｈ，ｓ），５．１１（２Ｈ，ｓ）。
【０１０４】
第二工程 ２，４−ビス−ベンジルオキシ−ベンズアルデヒドオキシム（ＩＭ−６ａ）の製造
５００ｍＬのナス型フラスコに、２，４−ビス−ベンジルオキシ−ベンズアルデヒド（ＩＭ−５ａ、５４．２１ｇ、１７０ｍｍｏｌ）、ヒドロキシルアミン塩酸塩（２３．７ｇ、３４０ｍｍｏｌ）、エタノール（３００ｍＬ）を加え、反応液を０度に冷却し、トリエチルアミン（４７．７ｍＬ）をゆっくり加えた。滴下終了後、液温を７５度にし、３．５時間撹拌した。
反応終了後、酢酸エチルを用い抽出操作を行い、有機層を減圧濃縮し、得られた固体をヘキサンで懸濁精製した。得られた固体をろ取、減圧乾燥することで標題化合物（５６．５ｇ、９９．５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件４）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：３３４［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：４．２３分；１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：８．５０（１Ｈ，ｓ），７．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ），７．２８−７．４７（１０Ｈ，ｍ），７．３４−７．４３（２Ｈ，ｍ），５．０６（４Ｈ，ｓ）。
【０１０５】
第三工程
２，４−ビス−ベンジルオキシ−ベンゾニトリル Ｎ−オキシド（ＩＭ−７ａ）
アルゴン雰囲気中、氷冷撹拌下、２，４−ビス−ベンジルオキシ−ベンズアルデヒドオキシム（ＩＭ−６ａ、２５ｇ、７５．０ｍｍｏｌ）のクロロホルム（２５０ｍＬ）溶液中に、ピリジン（３．６２ｍＬ、４５．０ｍｍｏｌ）を加えしばらく攪拌した。Ｎ−クロロスクシンイミド（１０．０ｇ、７４．９ｍｍｏｌ）を少量ずつ加え、その後、室温で４時間撹拌した。反応液に水を加え反応をとめた後、塩化メチレンで抽出し、抽出液を水で４回洗浄後、飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、褐色シロップを得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し得られた淡黄色シロップにヘキサンを加え結晶化し、濾別後、ヘキサンで洗浄した。得られた固体を減圧乾燥し、２，４−ビス−ベンジルオキシベンゾニトリル Ｎ−オキシド（ＩＭ−７ａ、淡黄色固体、２０．７ｇ、８３％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：５．０４（ｓ，２Ｈ），５．１１（ｓ，２Ｈ），６．５５−６．５８（ｍ，２Ｈ），７．３４−７．４１（ｍ，１１Ｈ）．
【０１０６】
第四工程
３−（２，４−ビス−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソキサゾール−５−オール（ＩＭ−９ａ）
アルゴン雰囲気中、氷冷撹拌下、リチウムジイソプロピルアミド（１．８Ｍヘプタン／テトラヒドロフラン／エチルベンゼン溶液、４４．３ｍＬ、７９．７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２４０ｍＬ）溶液中に、４−メトキシフェニルアセトン（１１．１ｍＬ、７２．３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２４０ｍＬ）溶液をゆっくり加え、１時間攪拌した。２，４−ビス−ベンジルオキシベンゾニトリル Ｎ−オキシド（ＩＭ−７ａ、２４．０ｇ、７２．４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）溶液を加えた後、室温にて終夜攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液で反応を停止後、減圧下溶媒を留去し濃縮した。酢酸エチルで抽出し、抽出液を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、得られた粗生成物をジエチルエーテルで懸濁精製した。得られた固体をジエチルエーテルで洗浄し、３−（２，４−ビス−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソキサゾール−５−オール（ＩＭ−９ａ、白色固体、１７．９ｇ、３６．１ｍｍｏｌ、４９．９％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ４）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：４９６［Ｍ＋Ｈ］＋，５１８［Ｍ＋Ｎａ］＋；保持時間：４．７６分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：１．１８，１．６５（ｓ，ｔｏｔａｌ ３Ｈ），２．４０，２．８２（ｓ，ｔｏｔａｌ １Ｈ），３．７４，３．７５（ｓ，ｔｏｔａｌ ３Ｈ），４．６６−４．７７（ｍ，１Ｈ），４．９０−５．０６（ｍ，２Ｈ），６．４０，６．４６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，ｔｏｔａｌ １Ｈ），６．５４，６．６１（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．８Ｈｚ，ｔｏｔａｌ １Ｈ），６．７４，６．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ｔｏｔａｌ ２Ｈ），６．７９，６．８１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ｔｏｔａｌ ２Ｈ），７．１６−７．２０（ｍ，１Ｈ），７．２８−７．３８（ｍ，９Ｈ），７．６９，７．７８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ｔｏｔａｌ １Ｈ）．
【０１０７】
第五工程
３−（２，４−ビス−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−１０ａ）
３−（２，４−ビス−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソキサゾール−５−オール（ＩＭ−９ａ、１７．５ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）のメタノール（４００ｍＬ）溶液にパラトルエンスルホン酸一水和物（６．７２ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）を加え、６０度で５０分攪拌した。室温下、反応溶液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、白色固体を得た。得られた白色固体を懸濁精製（ヘキサン、ジエチルエーテル）し、３−（２，４−ビス−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−１０ａ、白色固体、１６．１ｇ、３３．７ｍｍｏｌ、９５．５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ４）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：４７８［Ｍ＋Ｈ］＋，５００［Ｍ＋Ｎａ］＋。；保持時間：６．６７分。
１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．４７（ｓ，３Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），４．６８（ｓ，２Ｈ），５．０１（ｓ，２Ｈ），６．４５（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），６．６３（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），６．９０−６．９７（ｍ，２Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２１−７．２４（ｍ，３Ｈ），７．３２−７．４１（ｍ，６Ｈ）．
【０１０８】
第六工程
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（ＩＭ−１１ａ）
室温下、反応容器に３−（２，４−ビス−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−１０ａ、８．０２ｇ、１６．８ｍｍｏｌ）とメタノール（４００ｍＬ）を加えた。窒素置換後、パラジウムカーボン（１０％パラジウム、０．８ｇ）を加えた。水素置換後、室温で６時間攪拌した。再び窒素置換した後、パラジウムカーボンを濾去した。減圧下溶媒を留去し、暗緑色油状物質を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン、酢酸エチル）で精製し、４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（ＩＭ−１１ａ、淡黄色固体、４．５２ｇ、１５．２ｍｍｏｌ、９０．５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ４）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：２９８［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：２．４２分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．３５（ｓ，３Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），４．８９（ｓ，１Ｈ），６．１４（ｄｄ，Ｊ＝２．５，８．６Ｈｚ，１Ｈ），６．５１（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），９．８８（ｓ，１Ｈ）．
【０１０９】
第七工程
４−ブロモ−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（ＩＭ−１２ａ）
アルゴン雰囲気中、氷冷撹拌下、４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（ＩＭ−１１ａ、３．８１ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１５０ｍＬ）溶液にベンジルトリメチルアンモニウムトリブロマイド（５．０ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間１５分攪拌した。反応溶液に水を加えてしばらく攪拌後、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、赤色タール状物質を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム、ジエチルエーテル）で精製し、４−ブロモ−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（ＩＭ−１２ａ、淡紅色固体、４．７３ｇ、１２．６ｍｍｏｌ、９８．１％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：３７６，３７８［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：６．４８分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．３７（ｓ，３Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），５．５２（ｓ，１Ｈ），６．７１（ｓ，１Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．０９（ｓ，１Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），９．８７（ｓ，１Ｈ）．
【０１１０】
第八工程
３−（５−ブロモ−２，４−ビス−メトキシメトキシ−フェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−１３ａ）
アルゴン雰囲気中、氷冷撹拌下、４−ブロモ−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（ＩＭ−１２ａ、４．６６ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（２５ｍＬ）溶液中にジイソプロピルエチルアミン（１０．６ｍＬ、６０．９ｍｍｏｌ）を加え５分攪拌後、メトキシメチルクロライド（４．７ｍＬ、６１．９ｍｍｏｌ）を加え氷冷下１時間２０分攪拌した。氷冷撹拌下、反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液および飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、淡黄色油状物質を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム）で精製し、３−（５−ブロモ−２，４−ビス−メトキシメトキシ−フェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−１３ａ、白色固体、５．５８ｇ、１２．０ｍｍｏｌ、９６．８％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 １）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：４６４，４６６［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：７．７３分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．４９（ｓ，３Ｈ），３．０８（ｓ，３Ｈ），３．５２（ｓ，３Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），４．５７（ｓ，２Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．６４（ｓ，１Ｈ）．
【０１１１】
第九工程
２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンズアルデヒド（ＩＭ−１ａ）
アルゴン雰囲気中、−７８度で撹拌下、３−（５−ブロモ−２，４−ビス−メトキシメトキシ−フェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−１３ａ、１．００ｇ、２．１５ｍｍｏｌ）のジエチルエーテル（２０ｍＬ）溶液中に、ノルマルブチルリチウム（１．５９Ｍノルマルヘキサン溶液１．７５ｍＬ、２．７８ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。２時間攪拌後、ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ、６．５０ｍｍｏｌ）を加え３０分攪拌した。さらに室温下、２時間攪拌した。氷冷攪拌下、反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液および飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、粗生成物を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン、酢酸エチル）で精製し、２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンズアルデヒド（ＩＭ−１ａ、黄色固体、０．７５ｇ、１．８１ｍｍｏｌ、８４．４％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：４１４［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：６．５７分。
１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．５０（ｓ，３Ｈ），３．０８（ｓ，３Ｈ），３．５４（ｓ，３Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），４．７５（ｓ，２Ｈ），５．３０（ｓ，２Ｈ），６．８３（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），６．９５（ｓ，１Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），７．９９（ｓ，１Ｈ），１０．３７（ｓ，１Ｈ）．
【０１１２】
参考例１
４−クロロ−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１８Ｅ９７０）の合成
アルゴン雰囲気中、氷冷撹拌下、４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（スキーム７：ＩＭ−１１ａ、１．５０ｇ、５．０５ｍｍｏｌ）の四塩化炭素（２００ｍＬ）溶液にＮ−クロロスクシンイミド（６７４ｍｇ、５．０５ｍｍｏｌ）を加え、その後４日間加熱還流した。室温に戻した後、ろ過を行った。ろ液をクロロホルムで抽出し、抽出液を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後、減圧下溶媒を留去し、淡黄色油状物質を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム、ジエチルエーテル）で精製し、４−クロロ−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１８Ｅ９７０、白色固体、８０６．４ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ、４８．１％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ、ＰＯＳ）：３３２［Ｍ＋Ｈ］＋。；保持時間：６．３８分。
１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．３７（ｓ，３Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），５．５８（ｓ，１Ｈ），６．７１（ｓ，１Ｈ），６．９７（ｓ，１Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），７．１８（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），９．８７（ｓ，１Ｈ）．
【０１１３】
参考例２
４−エチル−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１８Ｅ４９０）の合成
４−エチル−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１８Ｅ４９０）を以下のスキーム（８）に従って合成した。
【０１１４】
【化１８】
【０１１５】
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 １）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ、ＰＯＳ）：３２６［Ｍ＋Ｈ］＋。；保持時間：７．１６分。
【０１１６】
合成例１
蛍光標識した１７−（６−アミノヘキシルアミノ）ハービマイシンＡの製造
蛍光標識した１７−（６−アミノヘキシルアミノ）ハービマイシンＡ（１７（Ａ））を以下のスキーム（９）に従って合成した。
【０１１７】
【化１９】
【０１１８】
ハービマイシンＡ（４７２ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）をクロロホルム（４２ｍＬ）に溶かし、これにヘキサメチレンジアミン（６９１ｍｇ、１１．９ｍｍｏｌ）を加え室温にて１８時間、撹拌した。反応液に水（５０ｍＬ）とクロロホルム（５０ｍＬ）を加え分液し、クロロホルム層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１５０ｍＬ、クロロホルム：メタノール：酢酸＝３０：６：１）を行い粗化合物（８０ｍｇ）を得た。さらに、ＮＨ−シリカゲルカラムクロマトグラフィー（４０ｍＬ、クロロホルム、富士シリシア化学株式会社）を行い１７−（６−アミノヘキシルアミノ）ハービマイシンＡ（１７（Ａ））（４８ｍｇ、収率８．５％）を得た。
【０１１９】
ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：６８９［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：９．５２（１Ｈ，ｂｒ），７．７０（１Ｈ，ｂｒ），７．００（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１９），７．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ），６５１（１Ｈ，ｔ、Ｊ＝１０．９Ｈｚ，Ｈ−４），５．８４（１Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝１０．９ａｎｄ７．３Ｈｚ，Ｈ−５），５．４−５．６（２Ｈ，ｂｒ，Ｈ−７ａｎｄＨ９），４．７５（２Ｈ，ｂｒ，ＣＯＮＨ２），４．７１（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１５），４．４８（１Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｈ−６），３．６８（２Ｈ，ｍ），３．５２（３Ｈ，ＯＭｅ），３．３５（３Ｈ，ＯＭｅ），３．３３（３Ｈ，ＯＭｅ），３．３２（３Ｈ，ＯＭｅ），２．００（３Ｈ，ｓ），１．９５−１．２２（１１Ｈ，ｍ），１．６８（３Ｈ，ｓ，Ｍｅ），１．０７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），０．９６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ）
【０１２０】
実施例７
本発明の化合物がＨＳＰ９０に結合することを確認するため、ＢＩＡＣＯＲＥ（表面プラズモン共鳴（Ｓｕｒｆａｃｅ Ｐｌａｓｍｏｎ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ＝ＳＰＲ）を応用して、生体分子の結合をセンサーチップ上で再現し、リアルタイムに測定する生体分子結合活性測定装置）を用いたＨＳＰ９０ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｓｓａｙ系を構築した（Ａｄａｍｃｚｙｋ，Ｍ．，Ｍｏｏｒｅ，Ｊ．Ａ．，Ｙｕ，Ｚ．（２０００）Ｍｅｔｈｏｄｓ， ２０， ３１９−３２８参照）。
【０１２１】
ＨＳＰ９０ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｓｓａｙ系はカルボキシメチルデキストランが導入してあるセンサーチップ（ＣＭ５，ＢＩＡＣＯＲＥ）上のカルボキシル基を介して、１７−（６-アミノへキシルアミノ）ハービマイシンＡを固定化し、ＢＩＡＣＯＲＥ−Ｘにより、センサーチップ表面に固定されたハービマイシンＡとｒＨＳＰ９０の結合により生じる質量変化をＳＰＲシグナルとして検出する系であり、方法はＢＩＡＣＯＲＥのプロトコールに従った。
【０１２２】
ハービマイシンＡを固定化したセンサーチップ表面に５０μｇ／ｍＬのｒＨＳＰ９０（Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｃｏｒｐ．，Ｖｉｃｔｏｒｉａ， ＢＣ Ｃａｎａｄａ）を、１０秒間添加し、ＳＰＲシグナル(相互作用を数値化した値を検出した。その結果、ＳＰＲシグナル上昇が認められ、ｒＨＳＰ９０とセンサーチップ上の固定化ハービマイシンＡとの結合が確認できた。
【０１２３】
ｒＨＳＰ９０蛋白質（５×１０−７Ｍ (５０μｇ／ｍＬ)）を、本発明のアセチレン誘導体と混合後、ハービマイシンＡを固定化したセンサーチップ表面に１０秒間添加し、ＢＩＡＣＯＲＥ−ＸによりＳＰＲシグナルを測定した。
【０１２４】
次いで下記の式（１）を用いて、本発明のアセチレン誘導体のｒＨＳＰ９０と固定化ハービマイシンＡとの結合に対する阻害活性（結合阻害率（％））を求めた。
【０１２５】
式（１）：結合阻害率（％）＝（（ｂ−ｓ）／ｓ）×１００
（上記式において、ｂ：本発明化合物非添加サンプルのＳＰＲシグナル；ｓ：本発明化合物添加サンプルのＳＰＲシグナル。）
【０１２６】
本発明のアセチレン誘導体の濃度と阻害活性から、ＨＳＰ９０蛋白質と固定化ハービマイシンＡとの結合を５０％阻害する濃度を求め、ＩＣ５０値とした。
【０１２７】
本発明のアセチレン誘導体は濃度依存的にＳＰＲシグナルを低下させ、本発明の化合物がＨＳＰ９０と固定化ハービマイシンＡとの結合を阻害することが示された。表１に結合阻害のＩＣ５０値を示す。
【０１２８】
比較例１
比較例として以下に示す１８Ｅ５４０、１８Ｅ４９０、１８Ｅ９７０、１８Ｆ２１０についても本発明のアセチレン誘導体と同様にｒＨＳＰ９０と固定化ハービマイシンＡとの結合に対する阻害活性（結合阻害率（％））を求めた。表２に結合阻害のＩＣ５０値を示す。なお、１８Ｅ９７０，１８Ｅ４９０の合成は、各々、参考例１、参考例２に示した。１８Ｅ５４０（ＩＭ−１１ａ）、１８Ｆ２１０（ＩＭ−１２ａ）の合成は、実施例６に示した。
【０１２９】
【化２０】
【０１３０】
実施例８
本実施例は、本発明の化合物が細胞増殖に与える影響を確認するため、ヒト乳癌細胞（ＭＣＦ７）に本発明化合物および比較例の化合物の各濃度サンプルを７２時間処理した。薬剤処理後の細胞の割合はメチレンブルー法による染色を行い、６６０ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダー（ＢｉｏＲａｄ）にて測定した。
【０１３１】
９６ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅに細胞を２千個／ｗｅｌｌ散布し、２４時間後に薬剤処理した。さらに７２時間後、培地を除去し、５０μＬのメタノールを添加して室温で２分間放置し、細胞を固定した。メタノールを除去後、１００μＬの染色液を添加し、３０分間染色した。２００μＬの蒸留水で３回洗浄を行い３％ＨＣｌ溶液を添加し、メチレンブルーの６６０ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダー（ＢｉｏＲａｄ）にて測定した。
【０１３２】
次いで下記の式（２）を用いて細胞増殖阻害率（％）を求めた。
式（２）：細胞増殖阻害率（％）＝（（Ｂ−Ａ）／Ｂ）×１００
（上記式において、Ｂ：本発明化合物非添加サンプルの６６０ｎｍの吸光度；Ａ：本発明化合物添加サンプルの６６０ｎｍの吸光度。）
【０１３３】
本発明のアセチレン誘導体の濃度と細胞増殖阻害率から、コントロールと比較して細胞増殖を５０％阻害する濃度を上記の式を用いて求め、ＩＣ５０値とした。
【０１３４】
本発明のアセチレン誘導体の細胞増殖阻害作用のＩＣ５０値を表１に示す。
【０１３５】
比較例２
上記１８Ｅ５４０、１８Ｅ４９０、１８Ｅ９７０、１８Ｆ２１０についても本発明のアセチレン誘導体と同様に細胞増殖阻害率（％）を求めた。表２に細胞増殖阻害のＩＣ５０値を示す。
【０１３６】
【表１】
【０１３７】
【表２】
【０１３８】
以上の結果より、本発明のアセチレン誘導体はＭＣＦ７細胞に対する増殖抑制効果を有し、その増殖抑制効果は比較例の化合物に比べて優れていることが明らかとなった。
【０１３９】
以上の結果より、本発明のアセチレン誘導体はＨＳＰ９０阻害活性を有して癌細胞の増殖抑制効果を有し、癌の治療薬として有用であることがわかった。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なアセチレン誘導体及びアセチレン誘導体を有効成分とするＨＳＰ９０阻害剤に関する。これは、ＨＳＰ９０のＡＴＰ結合部位に結合することで、その機能を阻害し、ＨＳＰ９０と標的蛋白質の結合を阻害し、最終的に細胞増殖を抑制する。
【背景技術】
【０００２】
分子シャペロンとは、蛋白質の機能的高次構造形成を促進するため標的蛋白質と一時的に複合体を形成する蛋白質の総称である。蛋白質の折り畳みや会合を助け、凝集を抑止する活性を持つ蛋白質を幅広く指して分子シャペロンと呼んでおり、その分子量によって幾つかのファミリーに分類される（ＨＳＰ９０、 ＨＳＰ７０、 ＨＳＰ６０、 ＨＳＰ４０、 ｓｍａｌｌ ＨＳＰｓなど）。特にＨＳＰ９０は細胞内のシグナル伝達系に関わる多数の分子と相互作用することが知られており、ＨＳＰ９０が細胞周期制御および癌化・増殖・生存シグナルに深く関与していることが明らかになりつつある。
【０００３】
ＨＳＰ９０は細胞内に豊富に存在する（全可溶性蛋白質の１〜２％を占めている）分子シャペロンであり、細胞質に一様に分布しており、おもに２量体として存在する。蛋白質の折り畳みにおけるＨＳＰ９０単独の活性は弱く、折り畳み活性を持つ他の分子シャペロン（以下ｃｏ−シャペロンという。ＨＳＰ７０、 ｐ２３など）と共同で機能している。ＨＳＰ９０は複合体を形成した標的蛋白質の機能発現に必要な場合が多く、ＨＳＰ９０が不安定な折り畳み状態にある蛋白質を特異的に認識して結合するという生化学的特性に基づいている。ＨＳＰ９０はＡＴＰに依存して変性または折り畳み状態にない蛋白質の(再)折り畳みを行う。特に、癌関連のシグナル伝達に関わる多様なｋｅｙ蛋白質(ｓｔｅｒｏｉｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ、 Ｒａｆ ｓｅｒｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ、 ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅｓ)の構造構築に必要とされる。最近の知見によると、ヒト腫瘍では多くのｋｅｙシグナル分子の調節が失われており、これらは機能を維持するためにＨＳＰ９０を必要としている。(非特許文献１)
【０００４】
Ｇｅｌｄａｎａｍｙｃｉｎ(ＧＭ)は当初チロシンキナーゼ阻害剤として微生物から見出されたアンサマイシン系天然物であるが、チロシンキナーゼに対する直接の阻害活性は弱く、その後この薬剤がＨＳＰ９０に特異的に作用することが見出された。ＧＭとは構造の異なるマクロライド系天然物であるＲａｄｉｃｉｃｏｌ(ＲＤ)もやはりＨＳＰ９０に作用しその機能を阻害する。ＧＭやＲＤはｉｎ ｖｉｔｒｏで癌関連のシグナル伝達にかかわる多様なｋｅｙ蛋白質(ｓｔｅｒｏｉｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒや Ｒａｆ、Ｈｅｒ２など)の分解を引き起こすこと、各種癌細胞の増殖抑制を引き起こすことが知られている。ＨＳＰ９０はＮ末端にシャペロン機能の調節に重要な役割を果たすＡＴＰ／ＡＤＰ結合部位を含んでいる。この部位はＨＳＰ９０ ｆａｍｉｌｙ に特異的でよく保存されており、他の分子シャペロンには存在しない。ＧＭやＲＤなどはこのＡＴＰ／ＡＤＰ結合部位に直接結合することが結晶構造解析において明らかにされている。(非特許文献２、３)また、上記アンタゴニストがＡＴＰ／ＡＤＰ結合領域へ結合することにより、ｐ２３などのｃｏ−シャペロンとの会合が阻害されることが知られている。その結果、標的蛋白質とＨＳＰ９０を含むシャペロン複合体の構成が変化し、最終的に標的蛋白質は複合体から離脱して、主にユビキチン・プロテアソ−ム系で分解される。したがって、ＨＳＰ９０アンタゴニストによる癌細胞の増殖抑制作用は、ＨＳＰ９０の標的蛋白質量の減少とそれに伴う下流へのシグナル伝達の遮断によるものと考えられる。
【０００５】
ＨＳＰ９０アンタゴニストはＨＳＰ９０に折り畳まれ、機能を発現する標的蛋白質に対して選択的に作用し、それ以外の蛋白質の機能および発現量には全く影響を及ぼさない。癌化する過程では複数の遺伝子異常が蓄積されており、腫瘍細胞では変異蛋白質は正常蛋白質よりもシャペロン活性を必要としているという報告、ＨＳＰ９０の発現量が種々の癌で増加しているという報告、ＧＭ誘導体である１７−ＡＡＧの動物モデルにおける薬物動態の解析からは、正常組織と比較して癌部により１７−ＡＡＧの蓄積性が高いという報告がなされている。これらのことから、ＨＳＰ９０アンタゴニストは正常細胞ではなく癌細胞に特異的に作用することが期待できる。また、異常な蛋白質発現や低酸素、栄養飢餓といった一種ストレス状態下にある癌細胞がＨＳＰ９０に依存している度合いが高いため、癌細胞の感受性がより高いと考えられる。
【０００６】
ＨＳＰ９０アンタゴニストのうち、１７−ＡＡＧは第Ｉ／ＩＩ層臨床試験進行中であり、ＲＤ誘導体研究も行われているが（非特許文献４）、医薬品として使用するには、何れも分子量、安定性、水溶性等の物性面で問題がある。医薬品として有用な水溶性低分子ＨＳＰ９０阻害剤が求められている。低分子のＨＳＰ９０阻害剤として、アデノシン誘導体であるＰＵ３およびその誘導体（特許文献１、非特許文献５、非特許文献６、非特許文献７）が報告されている。また、５員環が結合した１，３−ジヒドロキシベンゼン誘導体がＨＳＰ９０阻害剤として報告されている（特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５、特許文献６、特許文献７）が、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおける癌細胞増殖抑制活性も弱い。一方、本発明のアセチレン誘導体がＨＳＰ９０阻害活性を有することは文献上知られていない。
【０００７】
【特許文献１】国際公開第０２／０３６０７５号公報
【特許文献２】国際公開第０３／０５５８６０号公報
【特許文献３】国際公開第０４／０５００８７号公報
【特許文献４】国際公開第０４／０５６７８２号公報
【特許文献５】国際公開第０４／０９６２１２号公報
【特許文献６】国際公開第０４／０７２０５１号公報
【特許文献７】国際公開第０５／０００３００号公報
【０００８】
【非特許文献１】Ｈｓｐ９０ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｓ ｎｏｖｅｌ ｃａｎｃｅｒ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｏｌ Ｍｅｄ．２００２； ８（４ Ｓｕｐｐｌ．）： ｐ．Ｓ５５−６１．
【非特許文献２】Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎ ＨＳＰ９０−ｐｐ６０ｖ−ｓｒｃ ｈｅｔｅｒｏｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｂｙ ｂｅｎｚｏｑｕｉｎｏｎｅ ａｎｓａｍｙｃｉｎｓ： ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｓｔｒｅｓｓ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ．Ｓ．Ａ．１９９４； ９１（１８）： ｐ．８３２４−８３２８．
【非特許文献３】Ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ａｎ Ｈｓｐ９０−ｇｅｌｄａｎａｍｙｃｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘ： ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ ａ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｈａｐｅｒｏｎｅ ｂｙ ａｎ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｇｅｎｔ．Ｃｅｌｌ １９９７ Ａｐｒ １８； ８９（２）： ｐ．２３９−２５０．
【非特許文献４】Ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ − ｐｒｅｓｅｎｔ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ． Ｃｕｒｒ．Ｃａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇ Ｔａｒｇｅｔｓ．２００３ Ｏｃｔ；．３（５）： ｐ．３８５−３９０．
【非特許文献５】Ａ ｓｍａｌｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｔｏ ｂｉｎｄ ｔｏ ｔｈｅ ａｄｅｎｉｎｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｏｃｋｅｔ ｏｆ Ｈｓｐ９０ ｃａｕｓｅｓ Ｈｅｒ２ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ａｒｒｅｓｔ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｇ．Ｃｈｉｏｓｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．２００１ Ｍａｒ；８（３）：ｐ．２８９−２９９．
【非特許文献６】Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ Ｗｉｄｅ−Ｒａｎｇｅ Ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｖｉａ ＰＵ２４ＦＣｌ，ａ Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ Ｔｕｍｏｒ Ｈｓｐ９０．Ｍ．Ｖｉｌｅｎｃｈｉｋ ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，１１，ｐ．７８７−７９７（２００４）．
【非特許文献７】Ａｄｅｎｉｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｈａｐｅｒｏｎｅ ＨＳＰ９０−ＳＡＲ ｅｘｐｌａｉｎｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｘ−ｒａｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ．Ｄ．Ｄｙｍｏｃｋ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１４（０２），ｐ．３２５−３２８（２００４）．
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
細胞増殖に関与しているＨＳＰ９０の阻害剤は上述のように癌細胞選択的に効果を表すことが期待されており、開発が進められているものもあるが、医薬として求められる安定性や効果を十分に発揮するものは得られておらず、医薬として使用可能なＨＳＰ９０阻害剤が望まれている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記課題を解決するために、本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、下記一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、または、一般式（１Ｃ）
【化１】
で表されるアセチレン誘導体、そのプロドラッグ、または、その薬理学的に許容されうる塩が、ＨＳＰ９０を阻害することを見出し、本発明を完成した。
【００１１】
すなわち、本発明は、
（１）下記一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、または、一般式（１Ｃ）
【００１２】
【化２】
【００１３】
［式中、Ａは、酸素原子、硫黄原子、または、ＮＲ１を示し、Ｘは置換基を有しても良いメチレン基を示し、ｎは０−３を示し、Ｙは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、メルカプト基、水酸基、ハロゲン原子、アルキルチオ基、アリールチオ基、アルキルスルフィニル基、アリールスルフィニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を示し、Ｙｃは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、またはカルバモイル基を示す。Ｚは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、ハロゲン原子、スルファモイル基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、カルバモイル基、またはシリル基を示し、Ｒは、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を示す。ただし、ＡがＮＲ１の時、Ｒは、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を示す。Ｒ１は水素原子、もしくは、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６の、アルケニル基、もしくはアルキニル基を示す。］
で表されるアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（２）下記一般式（１Ａ−Ｏ）
【００１４】
【化３】
【００１５】
［式中、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎは、一般式（１Ａ）のＸ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎと同じ意味を表す。］
で表される（１）に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（３）下記一般式（１Ｂ−Ｏ）
【００１６】
【化４】
【００１７】
［式中、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎは、一般式（１Ｂ）のＸ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎと同じ意味を表す。］
で表される（１）に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（４）下記一般式（１Ｃ）
【００１８】
【化５】
【００１９】
［式中、Ｘ、Ｚ、Ｒ、Ｙｃおよびｎは、一般式（１Ｃ）のＸ、Ｚ、Ｒ、Ｙｃおよびｎと同じ意味を表す。］
で表される（１）に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（５）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｘで表される置換基を有しても良いメチレン基の置換基が、水素原子、または、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６の、アルケニル基若しくはアルキニル基である、（１）ないし（４）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（６）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｘが無置換メチレン基である、（１）ないし（５）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（７）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ｎが１である、（１）ないし（６）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（８）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ｎが０である、（１）ないし（６）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（９）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｚが、水素原子、置換基を有していてもよい、炭素数１〜６のアルキル基、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、またはシリル基である、（１）ないし（８）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１０）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｚが水素原子若しくは炭素数１〜４のアルキル基である、（１）ないし（９）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１１）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ＹまたはＹｃが、水素原子もしくは炭素数１〜６の非環状アルキル基である、（１）ないし（１０）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１２）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ＹまたはＹｃがカルバモイル基である、（１）ないし（１０）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１３）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｒが置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基である、（１）ないし（１２）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１４）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｒが下記一般式（２）
【００２０】
【化６】
【００２１】
［式中、ｎ’は０〜３を表す。Ｒ３は、環状でも非環状でも良く置換基を有しても良い、アルコキシル基、アミノ基、アシルアミノ基、または、スルフォニルアミノ基示す。］
で表される、（１）ないし（１３）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１５）一般式（２）において、ｎ’が０または１であり、Ｒ３が環状アミノ基である、（１４）に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１６）一般式（２）において、ｎ’ が０であり、Ｒ３がアルコキシル基である、（１４）に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１７）一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）で表される化合物が、下記一般式（１Ａ−Ｏ１）、一般式（１Ｂ−Ｏ１）、又は、一般式（１Ｃ−１）
【００２２】
【化７】
【００２３】
［上記式中、Ｙａ、Ｙｂ、Ｙｃ１は、各々独立して、水素原子、メチル基またはＮ−エチルカルバモイル基を示し、Ｚａ、Ｚｂ、Ｚｃは、各々独立して、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、フェニル基又はトリメチルシリル基を示し、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃは、各々独立して、メトキシ基、モルフォリン−４−イルメチル基、または、モルフォリノ基を示す。］で表される（１）ないし（１５）のいずれか一項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩、
（１８）４−（ブチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−２９）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３０）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−トリメチルシラニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３３）、
４−（４，４−ジメチルペンチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３４）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３５）、
（１９）４−（ブチン−２−イル）−６−［５−メチル−４−（４−モルフォリン−４−イルメチル−フェニル）−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール、
４−（ブチン−２−イル）−６−［５−メチル−４−（４−モルフォリン−４−イル−フェニル）−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール、
（２０）５−［５−（ブチン−２−イル）−２，４−ジヒドロキシ−フェニル］−４−（４−モルフォリン−４−イルメチル−フェニル）−イソキサゾール−３−カルボン酸 エチルアミド、
（２１）（１）ないし（２０）記載のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体のプロドラッグ、またはそのプロドラッグの薬理学的に許容される塩、
（２２）（１）ないし（２１）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体、そのプロドラッグまたはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、ＨＳＰ９０阻害剤、
（２３）（１）ないし（２１）のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体、そのプロドラッグまたはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、抗癌剤、
に関する。
【発明の効果】
【００２４】
本発明により、優れたＨＳＰ９０阻害活性を有する本発明記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する薬剤組成物、特に癌治療剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
以下に本発明の詳細を述べる。
【００２６】
本発明において、ハロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子を示す。
【００２７】
本発明において、アルキル基とは、特に記載しない場合は炭素数１〜２０、好ましくは炭素数１〜８の鎖状、分岐状、または、炭素数３〜２０、好ましくは炭素数３〜８の環状アルキル基を示す。鎖状アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、ｎ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基等が挙げられる。分岐状アルキル基としては、例えば、イソプロピル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、２，２−ジメチルプロピル基等が挙げられる。環状アルキル基としては、例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、アダマンチル基等が挙げられる。
【００２８】
本発明において、アルケニル基とは、いずれか１カ所以上に炭素―炭素二重結合を有する、炭素数２〜２０、好ましくは炭素数２〜８の鎖状、分岐状、または炭素数３〜２０、好ましくは炭素数３〜８の環状アルケニル基を示す。鎖状アルケニル基としては、例えば、エテニル基、１−プロペニル基、または、１−ブテニル基等の１−アルケニル基、２−ブテニル基、または、２−ペンテニル基等の２−アルケニル基等が挙げられる。分岐状アルケニル基としては、例えば、イソプロペニル基、３−メチル−１−ブテニル基、または、ゲラニル基等が挙げられる。
【００２９】
本発明において、アルキニル基とは、いずれか１カ所以上に炭素―炭素三重結合を有する、炭素数２〜２０、好ましくは炭素数２〜８のアルキニル基を示す。例えば、エチニル基、１−プロピニル基、３，３−ジメチル−１−ブチニル基等の１−アルキニル基、２−プロピニル基、２−ブチニル基、３−フェニル−２−プロピニル基、４，４−ジメチル−２−ペンチニル基、３−トリメチルシリル−２−プロピニル基等の２−アルキニル基等が挙げられる。
【００３０】
本発明において、炭素環アリール基としては、例えば、フェニル基、ナフチル基等が挙げられる。複素環アリール基としては、例えば、ピリジル基、ピリミジニル基、キノリル基、キナゾリル基、ナフチリジニル基、フリル基、ピロリル基、インドリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基、イソキサゾリル基、トリアゾリル基等が挙げられる。
【００３１】
本発明において、置換基を有しても良い、と記載した場合の置換基としては、例えば、メルカプト基、水酸基、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、炭素環若しくは複素環アリール基、アルキルチオ基、アリールチオ基、アルキルスルフィニル基、アリールスルフィニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、アシルオキシ基、アルコキシカルボニルオキシ基、カルバモイルオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、アルコキシカルボニルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基等が挙げられる。芳香環上の置換位置は、オルト位でも、メタ位でも、パラ位でも良い。
【００３２】
本発明において、アルキルチオ基としては炭素数１〜８のアルキルチオ基を示し、例えば、メチルチオ基、イソプロピルチオ基、ベンジルチオ基等が挙げられる。アリールチオ基としては、例えば、フェニルチオ基、ナフチルチオ基、ピリジルチオ基等が挙げられる。アルキルスルフィニル基としては炭素数１〜８のアルキルスルフィニル基を示し、例えば、メチルスルフィニル基、イソプロピルスルフィニル基、ベンジルスルフィニル基等が挙げられる。アリールスルフィニル基としては、例えば、フェニルスルフィニル基、ナフチルスルフィニル基、ピリジルスルフィニル基等が挙げられる。アルキルスルフォニル基としては炭素数１〜８のアルキルスルフォニル基を示し、例えば、メチルスルフォニル基、イソプロピルスルフォニル基、ベンジルスルフォニル基等が挙げられる。アリールスルフォニル基としては、例えば、フェニルスルフォニル基、ナフチルスルフォニル基、ピリジルスルフォニル基等が挙げられる。スルファモイル基としては、例えば、ジメチルスルファモイル基、フェニルスルファモイル基等が挙げられる。
【００３３】
本発明において、アルコキシル基としては炭素数１〜８のアルコキシル基を示し、例えば、メトキシ基、イソプロポキシ基、ベンジルオキシ基等が挙げられる。アリールオキシ基としては、例えば、フェノキシ基、ナフチルオキシ基、ピリジルオキシ基等が挙げられる。アシルオキシ基としては炭素数１〜８のアシルオキシ基を示し、例えば、アセトキシル基、ベンゾイルオキシ基等が挙げられる。アルコキシカルボニルオキシ基としては炭素数１〜８のアルコキシカルボニルオキシ基を示し、例えば、メトキシカルボニルオキシ基、トリフルオロメトキシカルボニル基等が挙げられる。カルバモイルオキシ基としては、例えば、ジメチルカルバモイルオキシ基、フェニルカルバモイルオキシ基等が挙げられる。
【００３４】
本発明において、アミノ基としては、例えば、無置換アミノ基、ジメチルアミノ基、モルホリノ基、ピペリジニル基、フェニルアミノ基等が挙げられる。アシルアミノ基としては、例えば、アセチルアミノ基、ベンゾイルアミノ基等が挙げられる。アルコキシカルボニルアミノ基としては炭素数１〜８のアルコキシカルボニルアミノ基を示し、例えば、メトキシカルボニルアミノ基、エトキシカルボニルアミノ基、ベンジルオキシカルボニルアミノ基等が挙げられる。ウレイド基としては、例えば、トリメチルウレイド基、１−メチル−３−フェニル−ウレイド基等が挙げられる。スルフォニルアミノ基としては、例えば、メタンスルフォニルアミノ基、ベンゼンスルフォニルアミノ基等が挙げられる。スルファモイルアミノ基としては、例えば、ジメチルスルファモイルアミノ基等が挙げられる。
【００３５】
本発明において、アシル基としては、例えば、アセチル基、ピバロイル基、ベンゾイル基、ピリジンカルボニル基等が挙げられる。アルコキシカルボニル基としては、例えば、メトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基等が挙げられる。カルバモイル基としては、例えば、ジメチルカルバモイル基、フェニルカルバモイル基等が挙げられる。
【００３６】
本発明において、シリル基としては、例えば、トリメチルシリル基、トリイソプロピルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチル−ジフェニル−シリル基等が挙げられる。
【００３７】
本発明において、Ａで表される置換基としては、酸素原子、硫黄原子、または置換基を有しても良い窒素原子が挙げられる。Ａで表される置換基としては、なかでも、酸素原子が好ましい。
【００３８】
本発明においてＡで表される置換基がＮＲ１である場合、Ｒ１で表される置換基としては、水素原子、または、置換基を有していてもよい、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６の、アルケニル基もしくはアルキニル基が挙げられる。Ｒ１で表される置換基としては、なかでも、水素原子が好ましい。
【００３９】
本発明においてＲとしては、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、置換基を有していてもよいアルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、及びシリル基が挙げられ、この中では置換基を有しても良い炭素環および複素環アリール基が好ましい。Ｒで表される置換基を有しても良い炭素環アリ−ル基としては、例えば、フェニル基、メトキシフェニル基、ブロモフェニル基、アミノフェニル基、メチルフェニル基、ジメトキシフェニル基、一般式（２）
【化８】
【００４０】
［式中、ｎ’は０〜３を表す。Ｒ３は、環状でも非環状でも良く置換基を有しても良い、アルコキシル基、アミノ基、アシルアミノ基、または、スルフォニルアミノ基示す。］で表される置換基等が好ましく、なかでも、一般式（２）で表される置換基が特に好ましい。
【００４１】
一般式（２）で表される置換基中、ｎ’としては、０または１が特に好ましい。Ｒ３としては、アルコキシル基、アミノ基、アシルアミノ基、及びスルフォニルアミノ基を挙げることができ、アルコキシル基としては例えば、メトキシ基、エトキシ基等が、アミノ基としては環状アミノ基、非環状アミノ基、又は芳香族アミノ基が挙げられ、環状アミノ基としては例えばモルフォリノ基、ピペリジニル基、ピペラジニル基、ピロリジニル基等が、非環状アミノ基としては例えばジメチルアミノ基、イソプロピルアミノ基、シクロヘキシルアミノ基、２−ヒドロキシエチルアミノ基、２−メトキシエチルアミノ基等が、芳香族アミノ基としては例えばフェニルアミノ基等がそれぞれ挙げられる。また、アシルアミノ基としては例えばアセチルアミノ基、ベンゾイルアミノ基等が、スルフォニルアミノ基としてはメタンスルフォニルアミノ基、ベンゼンスルフォニルアミノ基等がそれぞれ挙げられる。Ｒ３としては中でも、メトキシ基、エトキシ基等のアルコキシル基、モルフォリノ基、ピペリジニル基、ピペラジニル基、ピロリジニル基等の環状アミノ基が特に好ましい。
【００４２】
一般式（２）で表される置換基としては、４−メトキシフェニル基、４−（モルフォリン−４−イル）−フェニル基、および、４−（モルフォリン−４−イルメチル）−フェニル基が特に好ましい。
【００４３】
一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、及び、一般式（１Ｃ）で表される化合物において、Ｚで表される置換基としては、水素原子、置換基を有していてもよい、若しくは炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６のアルケニル基若しくはアルキニル基、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、ハロゲン原子、スルファモイル基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、カルバモイル基、及びシリル基を挙げることができ、水素原子、置換基を有しても良い炭素数１〜６のアルキル基、置換基を有していてもよい炭素環アリール基、カルバモイル基およびシリル基が好ましく、なかでも、水素原子、メチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、フェニル基、トリメチルシリル基が特に好ましい。
【００４４】
一般式（１Ａ）、及び、一般式（１Ｂ）で表される化合物において、Ｙで表される置換基としては、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、メルカプト基、水酸基、ハロゲン原子、アルキルチオ基、アリールチオ基、アルキルスルフィニル基、アリールスルフィニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を挙げることができる。一般式（１Ａ）及び一般式（１Ｂ）で表される化合物において、Ｙで表される置換基としては、水素原子、置換基を有しても良い炭素数１〜６のアルキル基、および、カルバモイル基が好ましい。
【００４５】
一般式（１Ｃ）で表される化合物において、Ｙｃで表される置換基としては、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、またはカルバモイル基を挙げることができる。一般式（１Ｃ）で表される化合物において、Ｙｃで表される置換基としては、水素原子、置換基を有しても良い炭素数１〜６のアルキル基、および、カルバモイル基が好ましい。
【００４６】
本発明においてＸで表される置換基としては、置換基を有しても良いメチレン基をあげることができるが、この置換基としては、例えば、水素原子、または、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６の、アルケニル基若しくはアルキニル基が挙げられる。なかでも水素原子が好ましい。
【００４７】
一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、及び、一般式（１Ｃ）で表される化合物において、ｎは０ないし３のいずれかの整数を表し、０および１が好ましい。
【００４８】
本発明の化合物としては、なかでも、下記一般式（１Ａ−Ｏ１）、一般式（１Ｂ−Ｏ１）、及び、一般式（１Ｃ−１）
【００４９】
【化９】
【００５０】
［上記式中、Ｙａ、Ｙｂ、Ｙｃ１は、各々独立して、水素原子、メチル基またはＮ−エチルカルバモイル基を示し、Ｚａ、Ｚｂ、Ｚｃは、各々独立して、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、フェニル基又はトリメチルシリル基を示し、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃは、各々独立して、メトキシ基、モルフォリン−４−イルメチル基、または、モルフォリノ基を示す。］で表される化合物が好ましい。
【００５１】
一般式（１Ａ−Ｏ１）、一般式（１Ｂ−Ｏ１）、及び、一般式（１Ｃ−１）で表される化合物中、Ｚａ、Ｚｂ、Ｚｃで表される置換基としては、水素原子、メチル基が特に好ましい。一般式（１Ａ−Ｏ１）、一般式（１Ｂ−Ｏ１）、及び、一般式（１Ｃ−１）で表される化合物中、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃで表される置換基としては、メトキシ基、モルフォリン−４−イルメチル基が特に好ましい。
【００５２】
一般式（１）もしくは一般式（１Ａ−Ｏ１）、一般式（１Ｂ−Ｏ１）、及び、一般式（１Ｃ−１）で示される化合物の具体例は以下の通りである。
【００５３】
４−（ブチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−２９）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３０）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−トリメチルシラニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３３）、
４−（４，４−ジメチルペンチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３４）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３５）、
４−（ブチン−２−イル）−６−［５−メチル−４−（４−モルフォリン−４−イルメチル−フェニル）−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール、
４−（ブチン−２−イル）−６−［５−メチル−４−（４−モルフォリン−４−イル−フェニル）−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール、
５−［５−（ブチン−２−イル）−２，４−ジヒドロキシ−フェニル］−４−（４−モルフォリン−４−イルメチル−フェニル）−イソキサゾール−３−カルボン酸 エチルアミド。
【００５４】
本発明のプロドラッグとしては、例えば一般式（１Ａ−Ｌ）、一般式（１Ｂ−Ｌ）、及び、一般式（１Ｃ−Ｌ）
【００５５】
【化１０】
【００５６】
［上記式中、Ｌ１、Ｌ２は、生体内でＯ−Ｌ１結合若しくはＯ−Ｌ２結合が解離して水酸基を遊離し易い置換基を示す。Ｌ１、Ｌ２の何れか一方は水素原子でも良い。Ｘ、Ｙ、Ｙｃ、Ｚ、Ｒ及びｎは前記した通り。］で表される化合物が挙げられる。Ｌ１、Ｌ２で表される置換基としては、アシル基、カルバモイル基、アルコキシカルボニル基、フォスフォリル基、及びアルコキシメチル基等が挙げられる。アシル基としては例えば、アセチル基、トリフロロアセチル基等が、カルバモイル基としては例えばジメチルカルバモイル基等が、アルコキシカルボニル基としては例えばメトキシカルボニル基等が、フォスフォリル基としては（ＭｅＯ）２Ｐ（＝Ｏ）−等が、アルコキシメチル基としてはメトキシメチル基等が挙げられる。
【００５７】
本発明におけるアセチレン誘導体は、酸、または塩基と塩を形成する場合もあり、本発明は一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、または、一般式（１Ｃ）で表される化合物の塩を有効成分とするＨＳＰ９０阻害剤および癌治療薬も含有する。酸との塩としては、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩等の無機酸塩や、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸との塩を挙げることができる。塩基との塩としては、例えばナトリウム塩等を挙げることができる。これらの塩は、定法によって製造することができる。
【００５８】
本発明の化合物は、例えば、スキーム（１）のようにして製造することができる。
【００５９】
【化１１】
【００６０】
スキーム（１）中、Ｒａ、Ｙａ、およびＺａは、一般式（１Ａ−Ｏ１）のＲａ、Ｙａ、およびＺａと同じ意味を表す。Ｐｒｏ２は、水酸基の保護基を表す。以下に各工程を説明する。
【００６１】
工程Ａ：一般式（ＩＭ−１）で表されるホルミル置換レゾルシノール誘導体のホルミル基にアルキニル金属を付加させることにより、一般式（ＩＭ−２）で表されるアルコール誘導体を合成する工程である。アルキニル金属としては、例えば、３，３−ジメチル−１−ブチニルリチウム、リチウムフェニルアセチリド、リチウム（トリメチルシリル）アセチリド等のアルキニルリチウム、１−プロピニルマグネシウムブロマイド、エチニルマグネシウムブロマイド等のアルキニルマグネシウムハライド等を用いることができる。本工程は、好ましくは、アルキニル金属として、例えばリチウム（トリメチルシリル）アセチリド、１−プロピニルマグネシウムブロマイド等を用い、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等のエーテル系溶媒中、−２０度から５０度、好ましくは−１０度から２０度で１５分〜２４時間反応させることにより実施できる。
【００６２】
工程Ｂ：一般式（ＩＭ−２）で表されるベンジルアルコール誘導体のベンジル位の水酸基を還元的に除去する工程である。本工程は、例えば還元剤としてトリエチルシラン等のハイドロシランを用い酸触媒の存在下還元反応を行うか、または、パラジウム触媒存在下塩化第一錫を用いる還元反応等により実施できる。本工程は、好ましくは、アセトニトリル溶媒中、還元剤としてトリエチルシランを用い、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体存在下、−１０度から２０度で３０分〜３時間反応させることにより実施できる。
【００６３】
工程Ｃ：一般式（ＩＭ−３）で表される水酸基が保護されたレゾルシノール誘導体の、水酸基の保護基を脱保護し、一般式（１Ａ−Ｏ１）で表されるアセチレン誘導体を製造する工程である。水酸基の保護基がメトキシメチル基の場合、酸性条件下実施することができる。酸触媒としては、塩酸、硫酸等の無機酸、トルエンスルホン酸、メタンスルフォン酸、トリフロロスルフォン酸等のスルフォン酸、酢酸、トリフロロ酢酸等のカルボン酸、ピリジニウムパラトルエンスルフォネート等の強酸―弱塩基塩等、その他、メトキシメチル基を脱保護できることが知られている触媒で保護基以外の部分に影響を与えない触媒であれば、何でも使用できる。保護基がメトキシメチル基の場合、例えば、酸触媒として３．０―８．０規定塩酸を用い、メタノール中、１０度から４０度で、５時間から３日間の反応時間で実施するのが好ましい。
【００６４】
スキーム（１）の原料化合物である、一般式（ＩＭ−１）で表されるホルミルレゾルシノール誘導体は、例えば、スキーム（２）のようにして製造することができる。スキーム（２）中、ＲａおよびＹａは、一般式（１Ａ−Ｏ１）のＲａおよびＹａと同じ意味を表す。Ｐｒｏ１およびＰｒｏ２は、水酸基の保護基を表す。Ｈａｌはハロゲン原子を示す。以下に各工程を説明する。
【００６５】
【化１２】
【００６６】
工程Ｄ：一般式（ＩＭ−４）で表されるレゾルシノール誘導体の水酸基を保護する工程である。本工程で使用できる保護基Ｐｒｏ１としては、例えば、メトキシメチル基、ベンジルオキシメチル基等のアルコキシメチル基、置換または無置換ベンジル基、シリル基等が挙げられる。Ｐｒｏ１がベンジル基の場合、例えば、ジメチルホルムアミド等の極性非プロトン溶媒、アセトニトリル等のニトリル系溶媒、または、エーテル系溶媒等の溶媒中、炭酸カリウム等の塩基共存下、２０度から１００度で３０分〜２４時間反応させることにより実施できる。
【００６７】
工程Ｅ：一般式（ＩＭ−５）で表されるレゾルシノール誘導体のホルミル基をオキシムに変換する工程である。本工程は、例えば、エタノール、メタノール等のアルコール系溶媒、水、またはこれらの混合溶媒中、トリエチルアミン、ピリジン、炭酸カリウム等の塩基存在下、ヒドロキシルアミン塩酸塩と、０度から１００度で２時間〜４８時間反応させることにより実施できる。
【００６８】
工程Ｆ：一般式（ＩＭ−６）で表されるオキシム誘導体を、一般式（ＩＭ−７）で表されるニトリルオキシドに変換する工程である。本工程は、例えば、クロロフォルム、ジクロロメタン等のハロゲン系溶媒中、ピリジン等の塩基共存下、Ｎ−クロロスクシンイミドと０度から５０度で３０分〜１０時間反応させることにより実施できる。
【００６９】
工程Ｇ：一般式（ＩＭ−８）で表されるベンジルケトン誘導体を塩基処理することにより一般式（ＩＭ−８’）で表されるエノールエーテルとし（工程Ｇ−１）、次いで一般式（ＩＭ−７）で表されるニトリルオキシドと反応させる（工程Ｇ−２）ことにより、一般式（ＩＭ−９）で表されるジヒドロイソキサゾール誘導体を合成する工程である。エノールエーテルの生成に用いられる塩基としては、例えば、リチウムジイソプロピルアミド、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、ソジウムビス（トリメチルシリル）アミド、ポタシウムビス（トリメチルシリル）アミド、ポタシウムｔｅｒｔ−ブトキシド等が挙げられる。なかでも、リチウムジイソプロピルアミドが好ましい。反応溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等のエーテル系溶媒、ベンゼン、トルエン等の炭化水素系溶媒、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等の非プロトン性高極性溶媒等が使用できる。本工程は、例えば、一般式（ＩＭ−８）で表されるベンジルケトン誘導体を、テトラヒドロフラン中、リチウムジイソプロピルアミドを用いて−１０度から１５度で、３０分〜３時間反応させてエノールエーテルとし、次いで、一般式（ＩＭ−７）で表されるニトリルオキシドを加えて、０度から４０度で、５時間〜４８時間反応させて実施することができる。
【００７０】
工程Ｈ：一般式（ＩＭ−９）で表されるジヒドロイソキサゾール誘導体の脱水反応により、一般式（ＩＭ−１０）で表される芳香族イソキサゾール誘導体へ変換する反応である。本工程は、例えば、硫酸、トルエンスルフォン酸、メタンスルフォン酸等の酸触媒を用い、実施できる。本工程は、好ましくは、トルエンスルフォン酸水和物を１当量用い、メタノール、エタノール等の極性溶媒中、３０度〜溶媒沸点で、１５分〜５時間処理することにより実施できる。
【００７１】
工程Ｉ：一般式（ＩＭ−１０）で表される水酸基が保護されたレゾルシノール誘導体の、水酸基の保護基を除去する工程である。例えば保護基がベンジル基の場合、水素雰囲気中、パラジウム−炭素等の触媒の存在下、メタノール、エタノール等のアルコール性溶媒中撹拌すること等により、実施できる。
【００７２】
工程Ｊ：一般式（ＩＭ−１１）で表されるレゾルシノール誘導体をハロゲン化する工程である。ハロゲン原子としては、塩素原子、臭素原子、またはヨウ素原子が挙げられ、中でも、臭素原子が好ましい。ハロゲン原子が臭素原子の場合、臭素化剤としては、Ｎ−ブロモスクシンイミド、ベンジルトリメチルアンモニウムトリブロマイド、臭素等が挙げられ、中でも、ベンジルトリメチルアンモニウムトリブロマイドが好ましい。本工程は、ハロゲン化剤としてベンジルトリメチルアンモニウムトリブロマイドを用い、ハロゲン系溶媒中、０度から５０度で実施するのが好ましい。
【００７３】
工程Ｋ：一般式（ＩＭ−１２）で表されるレゾルシノール誘導体の水酸基を保護する工程である。本工程で使用できる保護基Ｐｒｏ２としては、例えば、アルコキシメチル基、置換または無置換ベンジル基、シリル基等が挙げられる。なかでも、メトキシメチル基、ベンジルオキシメチル基等のアルコキシメチル基が好ましく、メトキシメチル基が特に好ましい。Ｐｒｏ２がメトキシメチル基の場合、例えば、メトキシメチル化剤としてメトキシメチルクロライドを用い、ハロゲン系溶媒、ジメチルホルムアミド等の極性非プロトン溶媒、アセトニトリル等のニトリル系溶媒、または、エーテル系溶媒等の溶媒中、トリエチルアミン、ピリジン、ジイソプロピルエチルアミン、または、炭酸カリウム等の塩基共存下、−１０度から３０度で３０分〜２４時間反応させることにより実施できる。
【００７４】
工程Ｌ：一般式（ＩＭ−１３）で表されるハロゲン置換レゾルシノール誘導体のハロゲン原子をリチウム等の金属原子と交換し、次いでホルミル基に変換する工程である。例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等のエーテル系溶媒中、ｎ−ブチルリチウムを用い、−１００度から０度、好ましくは−８０度から−３０度ででハロゲンーリチウム交換反応を行い、次いでジメチルホルムアミドを加え、−５０度から５０度で反応させることにより実施できる。
【００７５】
一般式（１Ｂ−Ｏ１）で表される化合物は、例えば、スキーム（３）のようにして製造することができる。
【００７６】
【化１３】
【００７７】
スキーム（３）中、Ｒｂ、Ｙｂ、およびＺｂは、一般式（１Ｂ−Ｏ１）のＲｂ、Ｙｂ、およびＺｂと同じ意味を表す。Ｐｒｏ４は、水酸基の保護基を表す。
【００７８】
工程Ａｂ、工程Ｂｂ、工程Ｃｂは、スキーム（１）の工程Ａ、工程Ｂ、工程Ｃに準じて実施できる。工程Ｌｂは、スキーム（２）の工程Ｌに準じて実施できる。原料化合物１Ｂ−Ｏ１−ＩＭ１は、ＷＯ ２００４／０７２０５１に記載の方法に準じて合成できる。
【００７９】
一般式（１Ｃ−１）で表される化合物、例えばＹｃ１が水素原子である１Ｃ−１Ｈは、例えば、スキーム（４）のようにして製造することができる。
【００８０】
【化１４】
【００８１】
スキーム（４）中、ＲｃおよびＺｃは、一般式（１Ｃ）のＲｃおよびＺｃと同じ意味を表す。スキーム（４）中、Ｐｒｏ３は、水酸基の保護基を表す。
【００８２】
工程Ａｃ、工程Ｂｃ、工程Ｃｃは、スキーム（１）の工程Ａ、工程Ｂ、工程Ｃに準じて実施できる。工程Ｌｃは、スキーム（２）の工程Ｌに準じて実施できる。
【００８３】
本発明のアセチレン誘導体、そのプロドラッグ、またはその製薬上許容し得る塩を制癌剤として使用する場合は、単独または担体、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、流動化剤、コーティング剤、懸濁化剤、乳化剤、安定化剤、保存剤、矯味剤、着香剤、希釈剤、溶解補助剤等の製薬上許容し得る添加剤と混合して粉剤、顆粒剤、錠剤、カブレット剤、カプセル剤、注射剤、座剤、軟膏剤等の製剤形態で、経口または非経口的（全身投与、局所投与等）に安全に投与される。製剤中の本発明のアセチレン誘導体、そのプロドラッグ、または製薬上許容し得る塩の含量は、製剤により種々異なるが、通常０．１〜１００重量％であることが好ましい。投与量は投与経路、患者の年齢並びに予防または治療すべき実際の症状等により異なるが、例えば成人に経口投与する場合、有効成分として１日０．０１ｍｇ〜２０００ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜１０００ｍｇとすることができ、１日１回又は数回に分けて投与できる。
【００８４】
本発明のアセチレン誘導体、そのプロドラッグ、およびその薬理学的に許容される塩は、ＨＳＰ９０阻害作用を有し、癌治療剤として有用である。
【実施例】
【００８５】
次に本発明を実施例により更に具体的に説明するが、本発明はこれらの例によって何ら制限されるものではない。また、本発明の化合物の有効性を示す本発明の代表的な化合物の薬理試験結果を、表１に示す。
実施例化合物のＬＣ／ＭＳ測定条件は次のとおりである。
１）
機種：島津 ＬＣＭＳ−ＱＰ８０００アルファ
カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−ＩＩＩ、２．１ｍｍ ｉ．ｄ．ｘ１００ｍｍ、
移動相Ａ：アセトニトリル／ギ酸 （９９．９／０．１）
移動相Ｂ：水／ギ酸 （９９．９／０．１）
グラジェント：時間（分） ０．０ ５．５ ５．５１ １０．０
Ａ濃度 ａ １００ ａ ａ
流速：０．３ｍＬ／分
測定条件１）ａ＝２０； 測定条件２）ａ＝６０
２）
機種：島津 ＬＣＭＳ−２０１０Ａ
カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−ＩＩＩ、２．１ｍｍ ｉ．ｄ．ｘ１００ｍｍ、
移動相Ａ：アセトニトリル／ギ酸 （９９．９／０．１）
移動相Ｂ：水／ギ酸 （９９．９／０．１）
グラジェント：時間（分） ０．０ ５．５ ６．５ ６．５１ １０．０
Ａ濃度 ａ ９０ ９０ ａ ａ
流速：０．３ｍＬ／分
測定条件３）ａ＝２０； 測定条件４）ａ＝６０
【００８６】
（１Ａ−Ｏ１−２９）および（１Ａ−Ｏ１−３０）の製造
（１Ａ−Ｏ１−２９）および（１Ａ−Ｏ１−３０）を以下のスキーム（５）に従って合成した。
【００８７】
【化１５】
【００８８】
実施例１
４−（ブチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−２９）の製造
【００８９】
第一工程
１−｛２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−フェニル｝−２−ブチン−１−オール（ＩＭ−２−２９）
アルゴン雰囲気中、氷冷撹拌下、１−プロピニルマグネシウムブロマイド（０．５Ｍテトラヒドロフラン溶液０．６ｍＬ）に、２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンズアルデヒド（ＩＭ−１ａ、４９．６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１ｍＬ）溶液を加え、１時間１５分攪拌した。氷冷攪拌下、反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液および飽和食塩水を加え、ジエチルエーテルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、１−｛２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−フェニル｝−２−ブチン−１−オール（ＩＭ−２−２９）を含む黄色油状物質（５７．１ｍｇ）を得た。
【００９０】
第二工程
３−｛５−（ブチン−２−イル）−２，４−ビス−メトキシメトキシ−フェニル｝−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−３−２９）
アルゴン雰囲気中、室温攪拌下、前工程で得られた１−｛２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−フェニル｝−２−ブチン−１−オール（ＩＭ−２−２９）を含む粗生成物（３４．４ｍｇ）のアセトニトリル（１ｍＬ）溶液中にトリエチルシラン（０．０１３３ｍＬ、０．０８３４ｍｍｏｌ）を加えた。氷冷下とした後、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（０．０１０６ｍＬ、０．０８３４ｍｍｏｌ）を加え、１時間攪拌した。反応溶液に炭酸カリウムを加え５分ほど攪拌後、水を加え攪拌した。酢酸エチルで抽出し、抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、３−｛５−（ブチン−２−イル）−２，４−ビス−メトキシメトキシ−フェニル｝−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−３−２９）を含む褐色油状物質（３２．８ｍｇ）を得た。
【００９１】
第三工程
４−（ブチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−２９）
室温攪拌下、前工程で得られた３−｛５−（ブチン−２−イル）−２，４−ビス−メトキシメトキシ−フェニル｝−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−３−２９）を含む粗生成物（３２．８ｍｇ）のメタノール（２．５ｍＬ）溶液中に、５Ｎ塩酸（０．５ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）を加え、３日間攪拌した。反応溶液を氷冷下とした後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えしばらく攪拌した。酢酸エチルで抽出し、抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、黒褐色油状物質を得た。分取用薄相クロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、４−（ブチン−２−イル）６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−２９、白色固体、１３．２ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ、ＰＯＳ）：３５０［Ｍ＋Ｈ］＋。；保持時間：６．７７分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：０．９７（ｔ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，３Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），３．１８（ｑ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，２Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），５．７９（ｓ，１Ｈ），６．５３（ｓ，１Ｈ），６．９１（ｓ，１Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），９．７６（Ｓ，１Ｈ）．
【００９２】
実施例２
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３０）の製造
実施例１と同様にして、標題化合物を合成した。
収率４４．７％（３工程）
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：３３６［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：６．５０分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：１．８７（ｔ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），３．２７（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），５．３１（ｓ，１Ｈ），６．４７（ｓ，１Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．１０（ｓ，１Ｈ），７．１９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），９．８６（ｓ，１Ｈ）．
【００９３】
（１Ａ−Ｏ１−３３）、（１Ａ−Ｏ１−３４）、および、（１Ａ−Ｏ１−３５）の製造
１Ａ−Ｏ１−３３）、（１Ａ−Ｏ１−３４）、および、（１Ａ−Ｏ１−３５）を以下のスキーム（６）に従って合成した。
【００９４】
【化１６】
【００９５】
実施例３
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３５）の製造
【００９６】
第一工程
１−｛２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−フェニル｝−３−フェニル−２−プロピン−１−オール（ＩＭ−２−３５）
アルゴン雰囲気中、−７８度で撹拌下、エチニルベンゼン（０．０２６ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（０．５ｍＬ）溶液中に、ノルマルブチルリチウム（１．５９Ｍノルマルヘキサン溶液０．１５ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。２０分攪拌後、反応溶液に２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンズアルデヒド（ＩＭ−１ａ、３９．５ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１ｍＬ）溶液を加えた。氷冷下とした後、１時間攪拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液および飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、１−｛２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−フェニル｝−３−フェニル−２−プロピン−１−オール（ＩＭ−２−３５）を含む淡黄色油状物質（５７．１ｍｇ）を得た。
【００９７】
第二工程
３−［２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−フェニル］−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−３−３５）
アルゴン雰囲気中、室温攪拌下、前工程で得られた１−｛２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−フェニル｝−３−フェニル−２−プロピン−１−オール（ＩＭ−２−３５）を含む粗生成物（５４．４ｍｇ）のアセトニトリル（１ｍＬ）溶液中にトリエチルシラン（０．０１８５ｍＬ、０．１１６ｍｍｏｌ）を加えた。氷冷下とした後、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（０．０１４７ｍＬ、０．１１６ｍｍｏｌ）を加え、１時間半攪拌した。反応溶液に炭酸カリウムを加え５分ほど攪拌後、水を加え攪拌した。酢酸エチルで抽出し、抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、３−［２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−フェニル］−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−３−３５）を含む褐色油状物質（５１．２ｍｇ）を得た。
【００９８】
第三工程
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３５）
室温攪拌下、前工程で得られた３−［２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−フェニル］−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−３−３５）を含む粗生成物（５１．２ｍｇ）のメタノール（２．０ｍＬ）溶液中に、８Ｎ塩酸（０．３ｍＬ、２．４ｍｍｏｌ）を加え、３日間攪拌した。反応溶液を氷冷下とした後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えしばらく攪拌した。酢酸エチルで抽出し、抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、赤褐色油状物質を得た。分取用薄相クロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３５、赤色固体、２３．４ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ、３工程５９．４％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：４１２［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：７．４４分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．３５（ｓ，３Ｈ），３．４７（ｓ，２Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ），５．６３（ｓ，１Ｈ），６．５４（ｓ，１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２７−７．３３（ｍ，５Ｈ），９．７２（ｓ，１Ｈ）．
【００９９】
実施例４
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−トリメチルシラニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３３）の製造
実施例３と同様にして、標題化合物を合成した。
収率５８．６％（３工程）
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ、ＰＯＳ）：４０８［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：７．６１分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：０．１４（ｓ，９Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），３．２２（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），６．１４（ｓ，１Ｈ），６．５７（ｓ，１Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），９．６９（ｓ，１Ｈ）．
【０１００】
実施例５
４−（４，４−ジメチルペンチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３４）の製造
実施例３と同様にして、標題化合物を合成した。
収率４６．３％（３工程）
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：３９２［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：７．４７分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：１．１７（ｓ，９Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），３．１５（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），６．４１（ｓ，１Ｈ），６，５７（ｓ，１Ｈ），６，７４（ｓ，１Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），９．６８（ｓ，１Ｈ）．
【０１０１】
実施例６
２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンズアルデヒド（ＩＭ−１ａ）の製造
２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンズアルデヒド（ＩＭ−１ａ）を以下のスキーム（７）に従って合成した。
【０１０２】
【化１７】
【０１０３】
第一工程 ２，４−ビス−ベンジルオキシ−ベンズアルデヒド（ＩＭ−５ａ）の製造
５００ｍＬのナス型フラスコに、２，４−ジヒドロキシ−ベンズアルデヒド（ＩＭ−４、２４ｇ、１８１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１００．１ｇ、７２４ｍｏｌ）、アセトニトリル（２５０ｍＬ）を入れ、反応液を０度まで冷却し、そこにベンジルブロマイド（４７．４ｍＬ）をゆっくり加えた。滴下終了後、１．５時間加熱還流した。反応終了後、炭酸カリウムをろ別し、酢酸エチル（３５０ｍＬ）を加え、有機層を飽和食塩水で２回洗浄した。水層を再度、酢酸エチルで抽出し、先ほどの有機層と合わせて、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣にヘキサン（５００ｍＬ）を加えることで固化させ、懸濁精製した。得られた固体をろ取、減圧乾燥することで標題化合物（５４．２１ｇ、９４．１％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ２）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：３１９［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：５．５３分；１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：１０．４（１Ｈ，ｓ），７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．３６−７．４５（１０Ｈ，ｍ）、６．５８−６．６８（２Ｈ，ｍ），５．１４（２Ｈ，ｓ），５．１１（２Ｈ，ｓ）。
【０１０４】
第二工程 ２，４−ビス−ベンジルオキシ−ベンズアルデヒドオキシム（ＩＭ−６ａ）の製造
５００ｍＬのナス型フラスコに、２，４−ビス−ベンジルオキシ−ベンズアルデヒド（ＩＭ−５ａ、５４．２１ｇ、１７０ｍｍｏｌ）、ヒドロキシルアミン塩酸塩（２３．７ｇ、３４０ｍｍｏｌ）、エタノール（３００ｍＬ）を加え、反応液を０度に冷却し、トリエチルアミン（４７．７ｍＬ）をゆっくり加えた。滴下終了後、液温を７５度にし、３．５時間撹拌した。
反応終了後、酢酸エチルを用い抽出操作を行い、有機層を減圧濃縮し、得られた固体をヘキサンで懸濁精製した。得られた固体をろ取、減圧乾燥することで標題化合物（５６．５ｇ、９９．５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件４）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：３３４［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：４．２３分；１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：８．５０（１Ｈ，ｓ），７．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ），７．２８−７．４７（１０Ｈ，ｍ），７．３４−７．４３（２Ｈ，ｍ），５．０６（４Ｈ，ｓ）。
【０１０５】
第三工程
２，４−ビス−ベンジルオキシ−ベンゾニトリル Ｎ−オキシド（ＩＭ−７ａ）
アルゴン雰囲気中、氷冷撹拌下、２，４−ビス−ベンジルオキシ−ベンズアルデヒドオキシム（ＩＭ−６ａ、２５ｇ、７５．０ｍｍｏｌ）のクロロホルム（２５０ｍＬ）溶液中に、ピリジン（３．６２ｍＬ、４５．０ｍｍｏｌ）を加えしばらく攪拌した。Ｎ−クロロスクシンイミド（１０．０ｇ、７４．９ｍｍｏｌ）を少量ずつ加え、その後、室温で４時間撹拌した。反応液に水を加え反応をとめた後、塩化メチレンで抽出し、抽出液を水で４回洗浄後、飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、褐色シロップを得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し得られた淡黄色シロップにヘキサンを加え結晶化し、濾別後、ヘキサンで洗浄した。得られた固体を減圧乾燥し、２，４−ビス−ベンジルオキシベンゾニトリル Ｎ−オキシド（ＩＭ−７ａ、淡黄色固体、２０．７ｇ、８３％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：５．０４（ｓ，２Ｈ），５．１１（ｓ，２Ｈ），６．５５−６．５８（ｍ，２Ｈ），７．３４−７．４１（ｍ，１１Ｈ）．
【０１０６】
第四工程
３−（２，４−ビス−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソキサゾール−５−オール（ＩＭ−９ａ）
アルゴン雰囲気中、氷冷撹拌下、リチウムジイソプロピルアミド（１．８Ｍヘプタン／テトラヒドロフラン／エチルベンゼン溶液、４４．３ｍＬ、７９．７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２４０ｍＬ）溶液中に、４−メトキシフェニルアセトン（１１．１ｍＬ、７２．３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２４０ｍＬ）溶液をゆっくり加え、１時間攪拌した。２，４−ビス−ベンジルオキシベンゾニトリル Ｎ−オキシド（ＩＭ−７ａ、２４．０ｇ、７２．４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）溶液を加えた後、室温にて終夜攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液で反応を停止後、減圧下溶媒を留去し濃縮した。酢酸エチルで抽出し、抽出液を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、得られた粗生成物をジエチルエーテルで懸濁精製した。得られた固体をジエチルエーテルで洗浄し、３−（２，４−ビス−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソキサゾール−５−オール（ＩＭ−９ａ、白色固体、１７．９ｇ、３６．１ｍｍｏｌ、４９．９％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ４）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：４９６［Ｍ＋Ｈ］＋，５１８［Ｍ＋Ｎａ］＋；保持時間：４．７６分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：１．１８，１．６５（ｓ，ｔｏｔａｌ ３Ｈ），２．４０，２．８２（ｓ，ｔｏｔａｌ １Ｈ），３．７４，３．７５（ｓ，ｔｏｔａｌ ３Ｈ），４．６６−４．７７（ｍ，１Ｈ），４．９０−５．０６（ｍ，２Ｈ），６．４０，６．４６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，ｔｏｔａｌ １Ｈ），６．５４，６．６１（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．８Ｈｚ，ｔｏｔａｌ １Ｈ），６．７４，６．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ｔｏｔａｌ ２Ｈ），６．７９，６．８１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ｔｏｔａｌ ２Ｈ），７．１６−７．２０（ｍ，１Ｈ），７．２８−７．３８（ｍ，９Ｈ），７．６９，７．７８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ｔｏｔａｌ １Ｈ）．
【０１０７】
第五工程
３−（２，４−ビス−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−１０ａ）
３−（２，４−ビス−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−イソキサゾール−５−オール（ＩＭ−９ａ、１７．５ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）のメタノール（４００ｍＬ）溶液にパラトルエンスルホン酸一水和物（６．７２ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）を加え、６０度で５０分攪拌した。室温下、反応溶液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、白色固体を得た。得られた白色固体を懸濁精製（ヘキサン、ジエチルエーテル）し、３−（２，４−ビス−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−１０ａ、白色固体、１６．１ｇ、３３．７ｍｍｏｌ、９５．５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ４）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：４７８［Ｍ＋Ｈ］＋，５００［Ｍ＋Ｎａ］＋。；保持時間：６．６７分。
１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．４７（ｓ，３Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），４．６８（ｓ，２Ｈ），５．０１（ｓ，２Ｈ），６．４５（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），６．６３（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），６．９０−６．９７（ｍ，２Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２１−７．２４（ｍ，３Ｈ），７．３２−７．４１（ｍ，６Ｈ）．
【０１０８】
第六工程
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（ＩＭ−１１ａ）
室温下、反応容器に３−（２，４−ビス−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−１０ａ、８．０２ｇ、１６．８ｍｍｏｌ）とメタノール（４００ｍＬ）を加えた。窒素置換後、パラジウムカーボン（１０％パラジウム、０．８ｇ）を加えた。水素置換後、室温で６時間攪拌した。再び窒素置換した後、パラジウムカーボンを濾去した。減圧下溶媒を留去し、暗緑色油状物質を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン、酢酸エチル）で精製し、４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（ＩＭ−１１ａ、淡黄色固体、４．５２ｇ、１５．２ｍｍｏｌ、９０．５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ４）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：２９８［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：２．４２分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．３５（ｓ，３Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），４．８９（ｓ，１Ｈ），６．１４（ｄｄ，Ｊ＝２．５，８．６Ｈｚ，１Ｈ），６．５１（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），９．８８（ｓ，１Ｈ）．
【０１０９】
第七工程
４−ブロモ−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（ＩＭ−１２ａ）
アルゴン雰囲気中、氷冷撹拌下、４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（ＩＭ−１１ａ、３．８１ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１５０ｍＬ）溶液にベンジルトリメチルアンモニウムトリブロマイド（５．０ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間１５分攪拌した。反応溶液に水を加えてしばらく攪拌後、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、赤色タール状物質を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム、ジエチルエーテル）で精製し、４−ブロモ−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（ＩＭ−１２ａ、淡紅色固体、４．７３ｇ、１２．６ｍｍｏｌ、９８．１％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：３７６，３７８［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：６．４８分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．３７（ｓ，３Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），５．５２（ｓ，１Ｈ），６．７１（ｓ，１Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．０９（ｓ，１Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），９．８７（ｓ，１Ｈ）．
【０１１０】
第八工程
３−（５−ブロモ−２，４−ビス−メトキシメトキシ−フェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−１３ａ）
アルゴン雰囲気中、氷冷撹拌下、４−ブロモ−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（ＩＭ−１２ａ、４．６６ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（２５ｍＬ）溶液中にジイソプロピルエチルアミン（１０．６ｍＬ、６０．９ｍｍｏｌ）を加え５分攪拌後、メトキシメチルクロライド（４．７ｍＬ、６１．９ｍｍｏｌ）を加え氷冷下１時間２０分攪拌した。氷冷撹拌下、反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液および飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、淡黄色油状物質を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム）で精製し、３−（５−ブロモ−２，４−ビス−メトキシメトキシ−フェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−１３ａ、白色固体、５．５８ｇ、１２．０ｍｍｏｌ、９６．８％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 １）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：４６４，４６６［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：７．７３分。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．４９（ｓ，３Ｈ），３．０８（ｓ，３Ｈ），３．５２（ｓ，３Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），４．５７（ｓ，２Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．６４（ｓ，１Ｈ）．
【０１１１】
第九工程
２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンズアルデヒド（ＩＭ−１ａ）
アルゴン雰囲気中、−７８度で撹拌下、３−（５−ブロモ−２，４−ビス−メトキシメトキシ−フェニル）−４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール（ＩＭ−１３ａ、１．００ｇ、２．１５ｍｍｏｌ）のジエチルエーテル（２０ｍＬ）溶液中に、ノルマルブチルリチウム（１．５９Ｍノルマルヘキサン溶液１．７５ｍＬ、２．７８ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。２時間攪拌後、ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ、６．５０ｍｍｏｌ）を加え３０分攪拌した。さらに室温下、２時間攪拌した。氷冷攪拌下、反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液および飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去、減圧下溶媒を留去し、粗生成物を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン、酢酸エチル）で精製し、２，４−ビス−メトキシメトキシ−５−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンズアルデヒド（ＩＭ−１ａ、黄色固体、０．７５ｇ、１．８１ｍｍｏｌ、８４．４％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：４１４［Ｍ＋Ｈ］＋；保持時間：６．５７分。
１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．５０（ｓ，３Ｈ），３．０８（ｓ，３Ｈ），３．５４（ｓ，３Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），４．７５（ｓ，２Ｈ），５．３０（ｓ，２Ｈ），６．８３（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），６．９５（ｓ，１Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），７．９９（ｓ，１Ｈ），１０．３７（ｓ，１Ｈ）．
【０１１２】
参考例１
４−クロロ−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１８Ｅ９７０）の合成
アルゴン雰囲気中、氷冷撹拌下、４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（スキーム７：ＩＭ−１１ａ、１．５０ｇ、５．０５ｍｍｏｌ）の四塩化炭素（２００ｍＬ）溶液にＮ−クロロスクシンイミド（６７４ｍｇ、５．０５ｍｍｏｌ）を加え、その後４日間加熱還流した。室温に戻した後、ろ過を行った。ろ液をクロロホルムで抽出し、抽出液を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾去後、減圧下溶媒を留去し、淡黄色油状物質を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム、ジエチルエーテル）で精製し、４−クロロ−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１８Ｅ９７０、白色固体、８０６．４ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ、４８．１％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 ３）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ、ＰＯＳ）：３３２［Ｍ＋Ｈ］＋。；保持時間：６．３８分。
１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３、ＴＭＳ）ｐｐｍ：２．３７（ｓ，３Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），５．５８（ｓ，１Ｈ），６．７１（ｓ，１Ｈ），６．９７（ｓ，１Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），７．１８（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），９．８７（ｓ，１Ｈ）．
【０１１３】
参考例２
４−エチル−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１８Ｅ４９０）の合成
４−エチル−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１８Ｅ４９０）を以下のスキーム（８）に従って合成した。
【０１１４】
【化１８】
【０１１５】
ＬＣ／ＭＳ（測定条件 １）：ｍ／ｚ（ＥＳＩ、ＰＯＳ）：３２６［Ｍ＋Ｈ］＋。；保持時間：７．１６分。
【０１１６】
合成例１
蛍光標識した１７−（６−アミノヘキシルアミノ）ハービマイシンＡの製造
蛍光標識した１７−（６−アミノヘキシルアミノ）ハービマイシンＡ（１７（Ａ））を以下のスキーム（９）に従って合成した。
【０１１７】
【化１９】
【０１１８】
ハービマイシンＡ（４７２ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）をクロロホルム（４２ｍＬ）に溶かし、これにヘキサメチレンジアミン（６９１ｍｇ、１１．９ｍｍｏｌ）を加え室温にて１８時間、撹拌した。反応液に水（５０ｍＬ）とクロロホルム（５０ｍＬ）を加え分液し、クロロホルム層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１５０ｍＬ、クロロホルム：メタノール：酢酸＝３０：６：１）を行い粗化合物（８０ｍｇ）を得た。さらに、ＮＨ−シリカゲルカラムクロマトグラフィー（４０ｍＬ、クロロホルム、富士シリシア化学株式会社）を行い１７−（６−アミノヘキシルアミノ）ハービマイシンＡ（１７（Ａ））（４８ｍｇ、収率８．５％）を得た。
【０１１９】
ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）：６８９［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：９．５２（１Ｈ，ｂｒ），７．７０（１Ｈ，ｂｒ），７．００（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１９），７．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ），６５１（１Ｈ，ｔ、Ｊ＝１０．９Ｈｚ，Ｈ−４），５．８４（１Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝１０．９ａｎｄ７．３Ｈｚ，Ｈ−５），５．４−５．６（２Ｈ，ｂｒ，Ｈ−７ａｎｄＨ９），４．７５（２Ｈ，ｂｒ，ＣＯＮＨ２），４．７１（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１５），４．４８（１Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｈ−６），３．６８（２Ｈ，ｍ），３．５２（３Ｈ，ＯＭｅ），３．３５（３Ｈ，ＯＭｅ），３．３３（３Ｈ，ＯＭｅ），３．３２（３Ｈ，ＯＭｅ），２．００（３Ｈ，ｓ），１．９５−１．２２（１１Ｈ，ｍ），１．６８（３Ｈ，ｓ，Ｍｅ），１．０７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），０．９６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ）
【０１２０】
実施例７
本発明の化合物がＨＳＰ９０に結合することを確認するため、ＢＩＡＣＯＲＥ（表面プラズモン共鳴（Ｓｕｒｆａｃｅ Ｐｌａｓｍｏｎ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ＝ＳＰＲ）を応用して、生体分子の結合をセンサーチップ上で再現し、リアルタイムに測定する生体分子結合活性測定装置）を用いたＨＳＰ９０ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｓｓａｙ系を構築した（Ａｄａｍｃｚｙｋ，Ｍ．，Ｍｏｏｒｅ，Ｊ．Ａ．，Ｙｕ，Ｚ．（２０００）Ｍｅｔｈｏｄｓ， ２０， ３１９−３２８参照）。
【０１２１】
ＨＳＰ９０ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｓｓａｙ系はカルボキシメチルデキストランが導入してあるセンサーチップ（ＣＭ５，ＢＩＡＣＯＲＥ）上のカルボキシル基を介して、１７−（６-アミノへキシルアミノ）ハービマイシンＡを固定化し、ＢＩＡＣＯＲＥ−Ｘにより、センサーチップ表面に固定されたハービマイシンＡとｒＨＳＰ９０の結合により生じる質量変化をＳＰＲシグナルとして検出する系であり、方法はＢＩＡＣＯＲＥのプロトコールに従った。
【０１２２】
ハービマイシンＡを固定化したセンサーチップ表面に５０μｇ／ｍＬのｒＨＳＰ９０（Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｃｏｒｐ．，Ｖｉｃｔｏｒｉａ， ＢＣ Ｃａｎａｄａ）を、１０秒間添加し、ＳＰＲシグナル(相互作用を数値化した値を検出した。その結果、ＳＰＲシグナル上昇が認められ、ｒＨＳＰ９０とセンサーチップ上の固定化ハービマイシンＡとの結合が確認できた。
【０１２３】
ｒＨＳＰ９０蛋白質（５×１０−７Ｍ (５０μｇ／ｍＬ)）を、本発明のアセチレン誘導体と混合後、ハービマイシンＡを固定化したセンサーチップ表面に１０秒間添加し、ＢＩＡＣＯＲＥ−ＸによりＳＰＲシグナルを測定した。
【０１２４】
次いで下記の式（１）を用いて、本発明のアセチレン誘導体のｒＨＳＰ９０と固定化ハービマイシンＡとの結合に対する阻害活性（結合阻害率（％））を求めた。
【０１２５】
式（１）：結合阻害率（％）＝（（ｂ−ｓ）／ｓ）×１００
（上記式において、ｂ：本発明化合物非添加サンプルのＳＰＲシグナル；ｓ：本発明化合物添加サンプルのＳＰＲシグナル。）
【０１２６】
本発明のアセチレン誘導体の濃度と阻害活性から、ＨＳＰ９０蛋白質と固定化ハービマイシンＡとの結合を５０％阻害する濃度を求め、ＩＣ５０値とした。
【０１２７】
本発明のアセチレン誘導体は濃度依存的にＳＰＲシグナルを低下させ、本発明の化合物がＨＳＰ９０と固定化ハービマイシンＡとの結合を阻害することが示された。表１に結合阻害のＩＣ５０値を示す。
【０１２８】
比較例１
比較例として以下に示す１８Ｅ５４０、１８Ｅ４９０、１８Ｅ９７０、１８Ｆ２１０についても本発明のアセチレン誘導体と同様にｒＨＳＰ９０と固定化ハービマイシンＡとの結合に対する阻害活性（結合阻害率（％））を求めた。表２に結合阻害のＩＣ５０値を示す。なお、１８Ｅ９７０，１８Ｅ４９０の合成は、各々、参考例１、参考例２に示した。１８Ｅ５４０（ＩＭ−１１ａ）、１８Ｆ２１０（ＩＭ−１２ａ）の合成は、実施例６に示した。
【０１２９】
【化２０】
【０１３０】
実施例８
本実施例は、本発明の化合物が細胞増殖に与える影響を確認するため、ヒト乳癌細胞（ＭＣＦ７）に本発明化合物および比較例の化合物の各濃度サンプルを７２時間処理した。薬剤処理後の細胞の割合はメチレンブルー法による染色を行い、６６０ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダー（ＢｉｏＲａｄ）にて測定した。
【０１３１】
９６ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅに細胞を２千個／ｗｅｌｌ散布し、２４時間後に薬剤処理した。さらに７２時間後、培地を除去し、５０μＬのメタノールを添加して室温で２分間放置し、細胞を固定した。メタノールを除去後、１００μＬの染色液を添加し、３０分間染色した。２００μＬの蒸留水で３回洗浄を行い３％ＨＣｌ溶液を添加し、メチレンブルーの６６０ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダー（ＢｉｏＲａｄ）にて測定した。
【０１３２】
次いで下記の式（２）を用いて細胞増殖阻害率（％）を求めた。
式（２）：細胞増殖阻害率（％）＝（（Ｂ−Ａ）／Ｂ）×１００
（上記式において、Ｂ：本発明化合物非添加サンプルの６６０ｎｍの吸光度；Ａ：本発明化合物添加サンプルの６６０ｎｍの吸光度。）
【０１３３】
本発明のアセチレン誘導体の濃度と細胞増殖阻害率から、コントロールと比較して細胞増殖を５０％阻害する濃度を上記の式を用いて求め、ＩＣ５０値とした。
【０１３４】
本発明のアセチレン誘導体の細胞増殖阻害作用のＩＣ５０値を表１に示す。
【０１３５】
比較例２
上記１８Ｅ５４０、１８Ｅ４９０、１８Ｅ９７０、１８Ｆ２１０についても本発明のアセチレン誘導体と同様に細胞増殖阻害率（％）を求めた。表２に細胞増殖阻害のＩＣ５０値を示す。
【０１３６】
【表１】
【０１３７】
【表２】
【０１３８】
以上の結果より、本発明のアセチレン誘導体はＭＣＦ７細胞に対する増殖抑制効果を有し、その増殖抑制効果は比較例の化合物に比べて優れていることが明らかとなった。
【０１３９】
以上の結果より、本発明のアセチレン誘導体はＨＳＰ９０阻害活性を有して癌細胞の増殖抑制効果を有し、癌の治療薬として有用であることがわかった。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、または、一般式（１Ｃ）
【化１】
［式中、Ａは、酸素原子、硫黄原子、または、ＮＲ１を示し、Ｘは置換基を有しても良いメチレン基を示し、ｎは０−３を示し、Ｙは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、メルカプト基、水酸基、ハロゲン原子、アルキルチオ基、アリールチオ基、アルキルスルフィニル基、アリールスルフィニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を示し、Ｙｃは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、またはカルバモイル基を示す。Ｚは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、ハロゲン原子、スルファモイル基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、カルバモイル基、またはシリル基を示し、Ｒは、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を示す。ただし、ＡがＮＲ１の時、Ｒは、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を示す。Ｒ１は水素原子、もしくは、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６の、アルケニル基、もしくはアルキニル基を示す。］
で表されるアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項２】
下記一般式（１Ａ−Ｏ）
【化２】
［式中、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎは、一般式（１Ａ）のＸ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎと同じ意味を表す。］
で表される請求項１に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項３】
下記一般式（１Ｂ−Ｏ）
【化３】
［式中、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎは、一般式（１Ｂ）のＸ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎと同じ意味を表す。］
で表される請求項１に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項４】
下記一般式（１Ｃ）
【化４】
［式中、Ｘ、Ｚ、Ｒ、Ｙｃおよびｎは、一般式（１Ｃ）のＸ、Ｚ、Ｒ、Ｙｃおよびｎと同じ意味を表す。］
で表される請求項１に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項５】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｘで表される置換基を有しても良いメチレン基の置換基が、水素原子、または、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６の、アルケニル基若しくはアルキニル基である、請求項１ないし請求項４のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項６】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｘが無置換メチレン基である、請求項１ないし請求項５のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項７】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ｎが１である、請求項１ないし請求項６のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項８】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ｎが０である、請求項１ないし請求項６のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項９】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｚが、水素原子、置換基を有していてもよい、炭素数１〜６のアルキル基、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、またはシリル基である、請求項１ないし請求項８のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１０】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｚが水素原子若しくは炭素数１〜４のアルキル基である、請求項１ないし請求項９のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１１】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ＹまたはＹｃが、水素原子もしくは炭素数１〜６の非環状アルキル基である、請求項１ないし請求項１０のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１２】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ＹまたはＹｃがカルバモイル基である、請求項１ないし請求項１０のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１３】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｒが置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基である、請求項１ないし請求項１２のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１４】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｒが下記一般式（２）
【化５】
［式中、ｎ’は０〜３を表す。Ｒ３は、環状でも非環状でも良く置換基を有しても良い、アルコキシル基、アミノ基、アシルアミノ基、または、スルフォニルアミノ基示す。］
で表される、請求項１ないし請求項１３のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１５】
一般式（２）において、ｎ’が０または１であり、Ｒ３が環状アミノ基である、請求項１４に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１６】
一般式（２）において、ｎ’ が０であり、Ｒ３がアルコキシル基である、請求項１４に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１７】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）で表される化合物が、下記一般式（１Ａ−Ｏ１）、一般式（１Ｂ−Ｏ１）、又は、一般式（１Ｃ−１）
【化８】
［上記式中、Ｙａ、Ｙｂ、Ｙｃ１は、各々独立して、水素原子、メチル基またはＮ−エチルカルバモイル基を示し、Ｚａ、Ｚｂ、Ｚｃは、各々独立して、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、フェニル基又はトリメチルシリル基を示し、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃは、各々独立して、メトキシ基、モルフォリン−４−イルメチル基、または、モルフォリノ基を示す。］で表される請求項１ないし請求項１５のいずれか一項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１８】
４−（ブチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−２９）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３０）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−トリメチルシラニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３３）、
４−（４，４−ジメチルペンチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３４）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３５）。
【請求項１９】
４−（ブチン−２−イル）−６−［５−メチル−４−（４−モルフォリン−４−イルメチル−フェニル）−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール、
４−（ブチン−２−イル）−６−［５−メチル−４−（４−モルフォリン−４−イル−フェニル）−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール。
【請求項２０】
５−［５−（ブチン−２−イル）−２，４−ジヒドロキシ−フェニル］−４−（４−モルフォリン−４−イルメチル−フェニル）−イソキサゾール−３−カルボン酸 エチルアミド。
【請求項２１】
請求項１ないし請求項２０記載のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体のプロドラッグ、またはそのプロドラッグの薬理学的に許容される塩。
【請求項２２】
請求項１ないし請求項２１のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体、そのプロドラッグまたはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、ＨＳＰ９０阻害剤。
【請求項２３】
請求項１ないし請求項２１のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体、そのプロドラッグまたはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、抗癌剤。
【請求項１】
下記一般式（１Ａ）、一般式（１Ｂ）、または、一般式（１Ｃ）
【化１】
［式中、Ａは、酸素原子、硫黄原子、または、ＮＲ１を示し、Ｘは置換基を有しても良いメチレン基を示し、ｎは０−３を示し、Ｙは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、メルカプト基、水酸基、ハロゲン原子、アルキルチオ基、アリールチオ基、アルキルスルフィニル基、アリールスルフィニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を示し、Ｙｃは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、またはカルバモイル基を示す。Ｚは、水素原子、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、ハロゲン原子、スルファモイル基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、カルバモイル基、またはシリル基を示し、Ｒは、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、置換もしくは無置換アミノ基、アシルアミノ基、ウレイド基、スルフォニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を示す。ただし、ＡがＮＲ１の時、Ｒは、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、置換基を有していてもよい、アルキル基、アルケニル基若しくはアルキニル基、アルキルスルフォニル基、アリールスルフォニル基、スルファモイル基、アルコキシル基、アリールオキシ基、ホルミル基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、またはシリル基を示す。Ｒ１は水素原子、もしくは、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６の、アルケニル基、もしくはアルキニル基を示す。］
で表されるアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項２】
下記一般式（１Ａ−Ｏ）
【化２】
［式中、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎは、一般式（１Ａ）のＸ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎと同じ意味を表す。］
で表される請求項１に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項３】
下記一般式（１Ｂ−Ｏ）
【化３】
［式中、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎは、一般式（１Ｂ）のＸ、Ｙ、Ｚ、Ｒ、およびｎと同じ意味を表す。］
で表される請求項１に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項４】
下記一般式（１Ｃ）
【化４】
［式中、Ｘ、Ｚ、Ｒ、Ｙｃおよびｎは、一般式（１Ｃ）のＸ、Ｚ、Ｒ、Ｙｃおよびｎと同じ意味を表す。］
で表される請求項１に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項５】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｘで表される置換基を有しても良いメチレン基の置換基が、水素原子、または、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数２〜６の、アルケニル基若しくはアルキニル基である、請求項１ないし請求項４のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項６】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｘが無置換メチレン基である、請求項１ないし請求項５のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項７】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ｎが１である、請求項１ないし請求項６のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項８】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ｎが０である、請求項１ないし請求項６のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項９】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｚが、水素原子、置換基を有していてもよい、炭素数１〜６のアルキル基、置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基、またはシリル基である、請求項１ないし請求項８のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１０】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｚが水素原子若しくは炭素数１〜４のアルキル基である、請求項１ないし請求項９のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１１】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ＹまたはＹｃが、水素原子もしくは炭素数１〜６の非環状アルキル基である、請求項１ないし請求項１０のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１２】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、ＹまたはＹｃがカルバモイル基である、請求項１ないし請求項１０のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１３】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｒが置換基を有していてもよい炭素環若しくは複素環アリール基である、請求項１ないし請求項１２のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１４】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）において、Ｒが下記一般式（２）
【化５】
［式中、ｎ’は０〜３を表す。Ｒ３は、環状でも非環状でも良く置換基を有しても良い、アルコキシル基、アミノ基、アシルアミノ基、または、スルフォニルアミノ基示す。］
で表される、請求項１ないし請求項１３のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１５】
一般式（２）において、ｎ’が０または１であり、Ｒ３が環状アミノ基である、請求項１４に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１６】
一般式（２）において、ｎ’ が０であり、Ｒ３がアルコキシル基である、請求項１４に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１７】
一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）、（１Ａ−Ｏ）、または（１Ｂ−Ｏ）で表される化合物が、下記一般式（１Ａ−Ｏ１）、一般式（１Ｂ−Ｏ１）、又は、一般式（１Ｃ−１）
【化８】
［上記式中、Ｙａ、Ｙｂ、Ｙｃ１は、各々独立して、水素原子、メチル基またはＮ−エチルカルバモイル基を示し、Ｚａ、Ｚｂ、Ｚｃは、各々独立して、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、フェニル基又はトリメチルシリル基を示し、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃは、各々独立して、メトキシ基、モルフォリン−４−イルメチル基、または、モルフォリノ基を示す。］で表される請求項１ないし請求項１５のいずれか一項に記載のアセチレン誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１８】
４−（ブチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−２９）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３０）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−トリメチルシラニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３３）、
４−（４，４−ジメチルペンチン−２−イル）−６−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３４）、
４−［４−（４−メトキシ−フェニル）−５−メチル−イソキサゾール−３−イル］−６−（３−フェニル−プロピン−２−イル）−ベンゼン−１，３−ジオール（１Ａ−Ｏ１−３５）。
【請求項１９】
４−（ブチン−２−イル）−６−［５−メチル−４−（４−モルフォリン−４−イルメチル−フェニル）−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール、
４−（ブチン−２−イル）−６−［５−メチル−４−（４−モルフォリン−４−イル−フェニル）−イソキサゾール−３−イル］−ベンゼン−１，３−ジオール。
【請求項２０】
５−［５−（ブチン−２−イル）−２，４−ジヒドロキシ−フェニル］−４−（４−モルフォリン−４−イルメチル−フェニル）−イソキサゾール−３−カルボン酸 エチルアミド。
【請求項２１】
請求項１ないし請求項２０記載のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体のプロドラッグ、またはそのプロドラッグの薬理学的に許容される塩。
【請求項２２】
請求項１ないし請求項２１のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体、そのプロドラッグまたはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、ＨＳＰ９０阻害剤。
【請求項２３】
請求項１ないし請求項２１のいずれか１項に記載のアセチレン誘導体、そのプロドラッグまたはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、抗癌剤。
【公開番号】特開２００８−１３７８９４（Ｐ２００８−１３７８９４Ａ）
【公開日】平成２０年６月１９日（２００８．６．１９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−８１８２０（Ｐ２００５−８１８２０）
【出願日】平成１７年３月２２日（２００５．３．２２）
【出願人】（０００００４０８６）日本化薬株式会社 (921)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年６月１９日（２００８．６．１９）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年３月２２日（２００５．３．２２）
【出願人】（０００００４０８６）日本化薬株式会社 (921)
【Ｆターム（参考）】
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