検査用デバイス（４０）は、血液検体を導入する注入孔（４４ａ）と、流路（２１１Ａ）を介して注入孔（４４ａ）と連通され、血液検体を受け取る血球分離チャンバー（４１）と、溶血液を収容する溶血チャンバー（４２）とを含む。検査用デバイス（４０）は、回転中心回りに回転および停止されることにより、血球分離チャンバー（４１）に収容されている血液検体を血球および血漿液に分離し、血球分離チャンバー（４１）は、流路（２１１Ｂ）を介して流路統合領域（４３）と連通されており、血液検体から分離された血漿液を流路（２１１Ｂ）を介して移送させ、流路統合領域において溶血液を血漿液と所定の希釈比で混合希釈させる。

【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液検体を検査する検査用デバイスに係り、特に臨床検査分野に適用可能な検査用デバイスおよび血液混合希釈方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、分析・解析・検査技術の進歩により、様々な物質を測定することが可能となってきている。特に、臨床検査分野においては、生化学反応、酵素反応、免疫反応等の特異反応に基づく測定原理の開発により、病態に反映する体液中の物質を測定できるようになった。
【０００３】
その中で、ＰＯＣＴと呼ばれる臨床検査分野が注目されている。ＰＯＣＴは、対診時に頻繁に実行される病理学的検査システムであり、患者に対して迅速に診断を行うことを可能にする。ＰＯＣＴは、簡易迅速測定を第一とし、検体を採取してから検査結果が出るまでの時間の短縮を目的とした取組が行われている。したがって、ＰＯＣＴに要求されるのは、簡易な測定原理であり、小型で携帯性があり、操作性が良い測定装置である。
【０００４】
近年の技術開発の進歩により、例えば、血糖センサに代表されるように簡単に測定できる小型の測定機器が開発されてきている。ＰＯＣＴの波及効果は、迅速な測定結果の取得による迅速正確な診断を可能とすることに加え、検査にかかるコストの低減、血液等の検体の少量化に伴う被検者の負担の軽減および感染性廃棄物の少量化等が考えられる。現在、臨床検査はＰＯＣＴへの移行が急速に起こっており、そのニーズに応えるべくＰＯＣＴ対応測定機器の開発が行われている。
【０００５】
ＰＯＣＴ分野において、注目を受けている測定項目として、Ｈｂ（ヘモグロビン）Ａ１ｃがある。ＨｂＡ１ｃは、糖尿病患者の１〜３ヶ月間の長期血糖コントロールの目安として有用な検査項目である。
【０００６】
このＨｂＡ１ｃの検査結果は、血液検体中の全Ｈｂ濃度に対する比として算出される。したがって、ＨｂＡ１ｃの量だけでなく、Ｈｂ類の総量が測定される必要がある。血液検体中の他の測定対象物と異なり、ＨｂＡ１ｃを含むＨｂ類は、赤血球の中に存在している。このために、血液検体中のＨｂＡ１ｃの含有量を測定するためには溶血操作が必要である。「溶血」とは、赤血球膜が破れ、Ｈｂ類が赤血球の外に排出される現象をいう。赤血球の大きさは、それぞれの赤血球膜に加わる外液の浸透圧によって影響される。赤血球は、生理的食塩水（０．９％ＮａＣｌ）より濃い塩溶液中では、水が外に出て収縮し、一方、生理的食塩水（０．９％ＮａＣｌ）より薄い塩溶液中では、水が中に入って膨張する。このような収縮および膨張過程において、赤血球膜が破れると、Ｈｂ類が赤血球の外に排出される。個人差はあるが、血液中の全Ｈｂ濃度は、通常約１５０ｇ／Ｌである。これは非常に高い濃度であり、Ｈｂ類を測定するには不都合である。
【０００７】
したがって、ＨｂＡ１ｃの含有量を測定する場合、血液検体を予め溶血した後に、さらに、予め定められた範囲の濃度域まで、緩衝液を用いて希釈する必要がある。すなわち、溶血試薬等の試薬が必要となり、分析に加えて、その試薬の使用のための操作ステップが必要となり、ＨｂＡ１ｃの含有量の測定が複雑かつ困難となっていた。
【０００８】
このような問題点を解決するため、バイエル製のＤＣＡ２０００システムという検査用デバイスが開発された（例えば、特許文献１参照）。すなわち、この従来の検査用デバイスでは、実質的に水平な回転軸回りに回転操作される反応カセットを採用しており、この反応カセットは、反応路と、反応路と連通し液体試料を反応路に導入する注入孔とを具備している。すなわち、この従来の検査用デバイスは、簡易に希釈液を導入できる手段を備えている。また、その反応路は、分析試薬を組み込んだ試薬域と、液体試料を分析試薬に接触させ、かつ液体試料が分析試薬とともに攪拌されることで、所定の反応を促すことが十分に行われるように、反応路に沿って液体試料の重力による流れを乱す手段とを有している。このように構成された反応カセットが、回転軸回りに回転および振動させられることにより、液体試料を反応路を通じて流動させて分析試薬に接触させ、かつ液体試料が分析試薬とともに攪拌されることで、所定の反応を促し、液体試料中の検出可能な反応を測定する。
【特許文献１】特開平３−４６５６６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
バイエル製のＤＣＡ２０００システムのような従来の検査用デバイスは、さらに小型化され、かつ、携帯性が向上されなければ、ＰＯＣＴへの適用が実現できない。しかしながら、このように構成された従来の検査用デバイスは、例えば緩衝液のような試薬を必要とし、かつ、試薬を収容するための容量を必要とするため、既に述べた小型化および携帯性の向上を実現できないという問題が生じる。例えば、検体１μｌを５００倍に希釈するときは、５００μｌの緩衝液が必要である。従来の検査用デバイスは、さらに小型化されると、５００μｌの緩衝液を収容するための容量をもたせることができない。したがって、従来の検査用デバイスがさらに小型化された場合には、検体は検査用デバイスの外で緩衝液と混合および希釈され、希釈された検体の一部のみが検査用デバイスに導入されることとなる。検体が検査用デバイス内で高倍率に希釈されることが必要な場合には、従来の検査用デバイスは小型化されることができないため、携帯性および操作性に乏しくなる。さらに、希釈された検体の残りが廃液となるという問題があった。
【００１０】
さらに、従来の検査用デバイスは、たとえ希釈液を収容するための容量を有しているとしても、血液検体が希釈液で希釈されるため、一度検査された血液検体の血漿液の一部を構成する構成要素を他の種類の検査に用いることができないというもう一つの問題が生じる。
【００１１】
本発明は、既に述べた従来の検査用デバイスに固有の問題を解決するためになされるものである。すなわち、本発明の目的は、従来の検査用デバイスと比較して、小型で携帯性および操作性に優れ、例えば緩衝液などの外部から導入される液体の量を非常に少なくすることができる検査用デバイスを提供することである。また、本発明のもう一つの目的は、廃液をほとんど排出しない検査用デバイスを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の第１の発明によると、検査用デバイスは、検体を導入する検体注入孔と、それぞれ空気孔と連通された複数のチャンバーと、それぞれ前記複数のチャンバーと連通されて伸びている複数の流路とを含んでおり、流路は、一部分で互いに統合されて流路統合領域を形成する少なくとも２つの流路を含み、少なくとも２つの流路は、希釈液を移送させる１つ以上の希釈液流路と、検体注入孔と連通され、検体を流路統合領域に移送させる検体流路とを含んでいるため、検体は流路統合領域に保持され、所定の希釈比で、希釈液と混合希釈される。
【００１３】
上述のように構成された本発明に係る検査用デバイスでは、検査用デバイス内で検体が希釈液と所定の希釈比で混合希釈されるように、１つ以上の希釈液流路のそれぞれは希釈液を移送させることができ、検体流路は検体を移送することができるため、本発明に係る検査用デバイスは、従来の検査用デバイスと比較して、小型で、携帯性および操作性に優れ、例えば緩衝液などの外部から導入される液体の量を非常に少なくすることができる。
【００１４】
上述の検査用デバイスでは、検体流路の一部を形成する流入流路を介して検体注入孔と連通され、血液検体を受け取る血球分離チャンバーと、溶血液を収容し、希釈液流路と連通される溶血チャンバーとを含んでいてもよい。
【００１５】
検査用デバイスは、回転中心回りに回転および停止されることにより、血球分離チャンバーに収容されている血液検体を血球および血漿液に分離し、血球分離チャンバーは、検体流路の一部を形成する流出流路を介して流路統合領域と連通されており、血液検体から分離された血漿液を流出流路を介して移送させ、流路統合領域において溶血液を血漿液と混合希釈させてもよい。
【００１６】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、検査用デバイスの回転中に、血球分離チャンバー内で血液検体を血球および血漿液に分離することができ、溶血チャンバーから移送された溶血液を血漿液で希釈することができるため、従来の検査用デバイスが前処理のために必要としていた、例えば緩衝液などの外部の液体が不要となる。
【００１７】
上述の検査用デバイスでは、流路統合領域は空気孔が形成されたものであり、血漿液と溶血液が流路統合領域に流入して互いに混合されてもよい。
【００１８】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、血漿液と溶血液が移送されて互いに混合されることを容易にする。
【００１９】
上述の検査用デバイスでは、血球分離チャンバーから流路統合領域まで伸びる検体流路の流出流路は、血球分離チャンバーより回転中心に向かう内周側に配置される上昇部と、血球分離チャンバーより回転中心から離隔する外周側に配置される下降部とを含んでいてもよい。
【００２０】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、検査用デバイスの回転中に、溶血チャンバーに含まれた液体の液面の検査用デバイスの回転中心からの距離と、流路に含まれる液体の液面の検査用デバイスの回転中心からの距離とが等しくなるように、血球分離チャンバーに含まれている液体を流路を介して移送させるため、検査用デバイスの回転中に、血球分離チャンバー、および、血球分離チャンバーの表面より回転中心から離隔する外周側に配置される流路に、液体を保持することができる。
【００２１】
上述の検査用デバイスでは、血球分離チャンバーは、血液検体を溶血する溶血剤を担持するものであってもよい。
【００２２】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、血液検体を血球と血漿液に分離できると同時に、血液検体を溶血させて溶血液を得ることができる。これにより、本発明に係る検査用デバイスは、血液検体を注入されるだけで、検査用デバイス内で溶血液を血漿液と混合希釈することができる。
【００２３】
上述の検査用デバイスでは、血球分離チャンバーは、溶血された血液中に含まれたＨｂ類を変性させる変性剤を担持するものであってもよい。
【００２４】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、溶血液が血球分離チャンバーに流入した後に、例えば、溶血液に含まれたＨｂ類と血糖との結合が促進されるため、Ｈｂ類、特に、ＨｂＡ１ｃ、を免疫反応測定原理に基づいて測定することができる。
【００２５】
上述の検査用デバイスでは、血球分離チャンバーは、溶血液中に含まれたＨｂ類を分解させる蛋白質分解酵素を担持するものであってもよい。
【００２６】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、溶血液中に含まれたＨｂ類のそれぞれを、立体障害なしに容易に抗体と反応できる複数のペプチドに分解することができる。
【００２７】
上述の検査用デバイスでは、複数のチャンバーは、検体注入孔と連通されたチャンバーより回転中心に向かう内周側にそれぞれ配置される１つ以上の流路を介して、別の１つのチャンバーと連通される２つ以上のチャンバーを含んでいてもよく、２つ以上のチャンバーのうちの１つのチャンバーが検体注入孔と連通されて、血液検体を、検体注入孔からその１つのチャンバーに移送させた後に、１つ以上の流路を介して２つ以上のチャンバーのうちの残りのチャンバーに移送させてもよい。
【００２８】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、１つの注入孔を介して１つの検査用デバイスに注入された検体を、チャンバーが検体で満杯になるたびに、次々に他のチャンバーにそれぞれの所定量分配させることを可能にする。
【００２９】
本発明の第２の発明によると、上述の検査用デバイスでは、検体注入孔はデバイス本体に血液検体を導入するものであってもよく、複数の流路は、検体注入孔と連通された溶血工程流路を含み、血液検体を、検体注入孔から導入させて、溶血させてもよい。
【００３０】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、検査用デバイスに注入された血液検体から所望の溶血液を取得することができる。
【００３１】
上述の検査用デバイスでは、溶血工程流路は、血液検体を検体注入孔から導入させて一時的に保持することが可能であり、血液検体を溶血させて溶血液を製造する溶血工程流路部と、毛細管現象によって液体が溶血工程流路部へ移送されることを妨げる移送停止手段とを含んでいてもよい。
【００３２】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、移送停止手段は、所定の位置で、例えば血液などの液体が毛細管現象によって溶血工程流路に移送されることを妨げることができ、血液検体は溶血されて溶血工程流路で溶血液となり、溶血工程が完了した後に、このように製造された溶血液は、キャピラリーバルブを越えて、溶血工程流路から移送される。
【００３３】
上述の検査用デバイスでは、溶血工程流路部は、他の１つ以上の流路と統合されて流路統合領域を形成し、溶血液を溶血工程流路部から流路統合領域に移送させてもよい。
【００３４】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、溶血液を他の流路から移送された液体（例えば、血漿液）と容易に混合させる。
【００３５】
上述の検査用デバイスでは、複数のチャンバーは、検体注入孔と溶血工程流路との間に位置し、かつ、それらと連通される血液処理チャンバーを含んでいてもよく、溶血工程流路はさらに、血液処理チャンバーと溶血工程流路部との間に配置され、溶血工程流路を閉塞して、溶血工程流路部と血液処理チャンバーとの間で液体の流れを阻止する閉塞手段を含んでいてもよい。
【００３６】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、溶血液が溶血工程流路から血液処理チャンバーに移送されることを妨げ、液体が血液処理チャンバーから溶血工程流路部に移送されることを妨げられるため、血液処理チャンバー内で実行される血液処理工程と、溶血工程流路内で実行される溶血工程とを厳密に分離することができる。
【００３７】
上述の検査用デバイスでは、溶血工程流路はさらに、溶血工程流路部と流路統合領域との間に配置され、毛細管現象によって液体が溶血工程流路部から流路統合領域に移送されることを妨げる静止手段を含んでいてもよい。
【００３８】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、静止手段が、所定の位置で溶血液の流路統合領域への流入を妨げることができるため、溶血液が流動を停止されている間に、溶血液をさらに処理することができる。
【００３９】
上述の検査用デバイスでは、血液検体は、検査用デバイスの回転中に溶血されてもよく、溶血工程流路はさらに、溶血工程流路部から流路統合領域まで伸びる流出流路部を含んでいてもよく、流出流路部はさらに、血液処理チャンバーより回転中心に向かう内周側に配置される上昇部と、血液処理チャンバーより回転中心から離隔する外周側に配置される下降部とを含んでいてもよい。
【００４０】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、検査用デバイスの回転中に、血液処理チャンバーおよび下降部の所定の領域に溶血液を保持することができる。
【００４１】
上述の検査用デバイスでは、閉塞手段は、血液処理チャンバーと溶血工程流路部との間で化学的変化を引き起こし、溶血工程流路を閉塞して溶血工程流路部と血液処理チャンバーとの間の液体の流れを阻止するものであってもよい。
【００４２】
このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、例えば、血液凝固によって溶血工程流路を容易に閉塞することができる。
【００４３】
本発明の第３の発明によると、上述の検査用デバイスでは、１つ以上の希釈液流路は、希釈液を流路統合領域を介して所定の方向に移送させるものであってもよく、検体流路は、検体を流路統合領域に一時的に保持することが可能であり、所定の希釈比で検体を希釈液と混合希釈させるものであってもよい。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、流路統合領域に保持された検体を、流路統合領域を介して所定の方向に移送された希釈液によって混合希釈する。
【００４４】
上述の検査用デバイスでは、検体流路と１つ以上の希釈液流路のそれぞれとは、流路統合領域において、互いに交差し、かつ、それぞれの検体流路および１つ以上の希釈液流路の近い箇所の厚みよりも大きな厚みを有する空間を介して互いに連通されてもよい。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、検体流路と１つ以上の希釈液流路のそれぞれとが、互いに干渉することを妨げることができる。
【００４５】
上述の検査用デバイスでは、検体流路および１つ以上の希釈液流路のそれぞれは、空気孔と連通される端部を有していてもよい。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、検体と希釈液とを容易に移送させる。
【００４６】
上述の検査用デバイスでは、複数の流路は、流路統合領域において、検体流路と連通される端部を有する延長流路を含んでいてもよく、その連通は、検体流路および延長流路の近い箇所の厚みよりも大きな厚みを有する空間を介して行われる。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、検査用デバイスの回転停止中に、検体流路と延長流路とが互いに干渉することを妨げることができ、また、検体を流路統合領域において希釈液と混合希釈させることができ、検査用デバイスの回転中に、延長流路を介して移送させることができる。
【００４７】
上述の検査用デバイスでは、複数の流路は、流路統合領域より回転中心から離隔する外周側に配置される頂点部を有する流路を含み、頂点部に検体を収容するものであってもよい。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、検査用デバイスの回転中に、液体を頂点部に保持することができる。
【００４８】
本発明の第４の発明によると、血液混合希釈方法は、血液検体を検査用デバイスに導入する血液導入工程と、血液導入工程で検査用デバイスに導入された血液検体を、溶血される第１の血液と、血漿液と血球に分離される第２の血液とに分ける分配工程と、検査用デバイスを回転させて、第１の血液を溶血させ、第２の血液を血球と血漿液とに分離させる血球および血漿液取得工程と、検査用デバイスの回転を停止させて、溶血液と血漿液をそれぞれの流路を介して移送させる液体移送工程と、前記検査用デバイスを回転させて、溶血液を血漿液と混合希釈させる混合希釈工程とを含む。
【００４９】
本発明の血液混合希釈方法によると、上述のように、検査用デバイスに導入された血液検体は、溶血される第１の血液と、血漿液と血球に分離される第２の血液とに分けられ、検査用デバイスの回転中に、第１の血液は溶血され、第２の血液は血球と血漿液とに分離され、検査用デバイスの回転停止中に、溶血液および血漿液はそれぞれの流路を介して移送され、検査用デバイスが再び回転すると、溶血液は血漿液と混合希釈される。したがって、本発明に係る血液混合希釈方法は、上述のように、検査用デバイスの回転および停止を制御するだけで、血液検体を第１の血液と第２の血液とに分離し、第１の血液を溶血し、第２の血液を血球と血漿液とに分離し、溶血液を血漿液で混合希釈することができる。
【００５０】
本発明の第５の発明によると、上述の検査用デバイスでは、複数のチャンバーは、検体注入孔と連通され、血液検体を取得し、検査用デバイスの回転中に、血液検体を溶血させ、血漿液と血球とに分離させる血球分離チャンバーと、血液検体の一部を構成する構成要素を希釈する希釈液を内部に導入する希釈液導入チャンバーと、血漿液と希釈液を取得し、検査用デバイスの回転中に、血漿液を希釈液で混合希釈させる混合チャンバーとを含み、血球分離チャンバーは、血液検体の一部を構成する構成要素を溶血する溶血剤を担持してもよい。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、血液検体および希釈液を検査用デバイスに導入し、検査用デバイスの回転および停止を制御するだけで、例えば、血球分離工程、溶血工程および希釈工程などの前処理を実施することができるため、本発明に係る検査用デバイスは、従来の検査用デバイスと比較して、小型で、携帯性および操作性に優れ、例えば緩衝液などの外部から導入される液体の量を非常に少なくすることができる。
【００５１】
上述の検査用デバイスでは、検査用デバイスの総容量は、血液検体を構成する全ての構成要素を希釈するための必要量以上の希釈液導入可能なものであってもよい。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、希釈液が検査用デバイス本体から溢れ出ることを妨げることができる。
【００５２】
上述の検査用デバイスでは、血球分離チャンバーに担持される溶血剤の量が血球分離チャンバーに収容される血液検体の全てを溶血する量よりも少なくてもよい。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、血球分離チャンバーに収容された血液検体を部分的に溶血することができるため、製造される溶血液の量を減らすことができ、それによって、内部に導入される希釈液の量を低減することができる。
【００５３】
上述の検査用デバイスでは、血球分離チャンバーに担持される溶血剤の量は、血漿液の一部を構成する構成要素を部分的に溶血させる程度に実質的に十分少なくてもよく、部分的に溶血された血漿液の一部を構成する構成要素は、混合チャンバーにおいて、希釈比２５０以上で希釈液と混合希釈される。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、血球分離チャンバーに収容された血液検体を部分的に溶血することができ、製造される溶血液の量を減らすことができるため、このように溶血された血漿液の一部を構成する構成要素が、混合チャンバーにおいて、２５０以上の高い希釈比で、希釈液と混合希釈されることにより、このようにして取得された液体を比色法によって、直ちに測定することが可能である。例えば、Ｈｂ濃度は、ＳＬＳ−Ｈｂ法を用いた比色分析によって測定される。特に、ＨｂＡ１ｃの場合には、ボロン酸親和性原理、酵素反応原理などに基づいた測定が実施されてもよい。
【００５４】
上述の検査用デバイスでは、血球分離チャンバーに担持される溶血剤の量は、血漿液の一部を構成する構成要素を部分的に溶血させる程度に実質的に十分少なくてもよく、部分的に溶血された血漿液の一部を構成する構成要素は、混合チャンバーにおいて、希釈比５００以上で希釈液と混合希釈される。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、このようにして取得された液体に対して、直ちに免疫競合系測定を実施できる。特に、ＨｂＡ１ｃの場合には、部分的に溶血された血漿液の一部を構成する構成要素は、抗体の働きに応じて、約５００から５０００の間の希釈比で希釈される必要がある。
【００５５】
上述の検査用デバイスでは、血球分離チャンバーに担持される溶血剤の量は、血漿液の一部を構成する構成要素を部分的に溶血させる程度に実質的に十分少なくてもよく、部分的に溶血された血漿液の一部を構成する構成要素は、混合チャンバーにおいて、希釈比５０００以上で希釈液と混合希釈される。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、このようにして取得された液体に対して、直ちに免疫測定を実施できる。
【００５６】
上述の検査用デバイスでは、複数のチャンバーはさらに、血球分離チャンバーから移送され、混合チャンバーで希釈液によって希釈される所定量の血漿液を取得する血漿液サンプリングチャンバーを含んでいてもよい。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、検査用デバイスの回転および停止を制御するだけで、Ｈｂ類の測定の前処理を実施することができる。
【００５７】
上述の検査用デバイスはさらに、所定の領域において、血漿液の一部を構成する蛋白質を変性させる変性剤を含んでいてもよく、変性剤を血漿液サンプリングチャンバーに取得された所定量の血漿液と反応させてもよい。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、血漿液中のＨｂ類を免疫学的に測定させることが可能である。特に、ＨｂＡ１ｃを免疫反応測定原理によって測定する場合には、血漿液中に含まれる蛋白質は、各蛋白質のβ−アミノ酸の領域が露出されるように、変性される必要がある。変性剤は、凍結乾燥されて、例えば溶血された血漿液が導入される領域に担持されてもよい。ここで、変性剤としては、例えば、カオトロピックイオンを含んだ塩類、界面活性剤、酸化剤などを用いてもよい。
【００５８】
上述の検査用デバイスはさらに、所定の領域において、血漿液の一部を構成する蛋白質を分解する蛋白質分解酵素を含み、蛋白質分解酵素を血漿液サンプリングチャンバーに取得された所定量の血漿液と反応させてもよい。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、血漿液に含まれたＨｂ類が免疫学的に測定されることを可能にする。特に、ＨｂＡ１ｃを免疫反応測定原理によって測定する場合には、血漿液中に含まれる蛋白質は、ＨｂＡ１ｃのβ−アミノ酸の断片が製造されるように、分解される必要がある。
【００５９】
上述の検査用デバイスでは、複数のチャンバーおよび複数の流路のうちの少なくとも１つが、空気孔と連通されていてもよい。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、液体を容易に移送させることができる。空気孔が流路またはチャンバーに設けられている場合は、流路またはチャンバー中を空気が通り抜けることができるため、液体は流路またはチャンバーを容易に流れる。すなわち、液体を流路またはチャンバーを介して滞りなく移送させるように、空気が流れる必要がある。したがって、空気孔は、液体が流路またはチャンバーを流れるために必要不可欠である。さらに、検査用デバイスが回転中心回りに回転される間、液体が空気孔から漏れる可能性がある。したがって、空気孔は、流路またはチャンバーの、例えば、回転中心に近い位置に設けられることが好ましい。
【００６０】
上述の検査用デバイスでは、複数の流路のうちの少なくとも１つが、複数の流路のうちの少なくとも１つが連通されたチャンバーより回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を有していて、毛細管現象によって液体を移送させてもよい。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、検査用デバイスの回転中に、遠心力によってチャンバー内に液体を保持することができ、検査用デバイスの回転が停止し、液体が遠心力から解放された後には、毛細管現象によって液体を少なくとも１つの流路を介して移送することができる。
【００６１】
上述の検査用デバイスでは、複数のチャンバーは、それぞれが溶血剤を担持する１つ以上の溶血チャンバーを含んでいてもよく、１つ以上の溶血チャンバーのそれぞれに担持される溶血剤の量は、１つ以上の溶血チャンバーに収容される血液検体の全てを溶血する量よりも少ない。このように構成された本発明に係る検査用デバイスは、上述のように、さらに、血球分離チャンバーに加えて、１つ以上の溶血チャンバーに収容された血液検体を複数回に渡って部分的に溶血することができるため、さらに製造される溶血液の量を減らすことができ、それによって、内部に導入される希釈液の量を低減することができる。
【００６２】
本発明の第６の発明によると、検査用デバイスを用いて、血液検体の一部を構成する構成要素を混合希釈する血液混合希釈方法は、血液検体を検査用デバイスに導入する血液導入工程と、血液検体の一部を構成する構成要素を希釈する希釈液を導入する希釈液導入工程と、検査用デバイスの回転によって、血液検体を溶血し、血球と血漿液とに分離する溶血分離工程と、検査用デバイスの回転を停止し、血漿液および希釈液を移送させる液体移送工程と、検査用デバイスを回転させて、血漿液を希釈液と混合希釈させる混合希釈工程とを含む。本発明に係る血液混合希釈方法は、検査用デバイスの回転および停止を制御するだけで、Ｈｂ類の測定の前処理を実施することができるため、本発明に係る検査用デバイスは、従来の検査用デバイスと比較して、小型で、携帯性および操作性に優れ、例えば緩衝液などの外部から導入される液体の量を非常に少なくすることができる。
【図面の簡単な説明】
【００６３】
本発明に係る検査用デバイスおよび血液混合希釈方法の特徴および利点は、添付の図面と共に以下の詳細な説明から明らかになる。
【図１】（ａ）本発明に係る検査用デバイスの第１実施例の一部を構成する第１の流路パーツを示すブロック図、（ｂ）本発明に係る検査用デバイスの第１実施例の一部を構成する第２の流路パーツを示すブロック図
【図２】（ａ）図１（ａ）に示された第１の流路パーツの作製手順を説明する断面図、（ｂ）図１（ａ）のII-II矢視断面図
【図３】（ａ）図１（ｂ）に示された第２の流路パーツの作製手順を説明する断面図、（ｂ）図１（ｂ）のIII-III矢視断面図
【図４】本発明に係る検査用デバイスの第２実施例を示す概略図
【図５】本発明に係る検査用デバイスの第２実施例の上面図
【図６】本発明に係る検査用デバイスを回転する回転装置を示す概略図
【図７】本発明に係る検査用デバイスの第３実施例を示す概略図
【図８】本発明に係る検査用デバイスの第４実施例を示す概略図
【図９】本発明に係る検査用デバイスの第５実施例を示す概略図
【図１０】本発明に係る検査用デバイスの第６実施例を示す概略図
【図１１】ＳＬＳ−Ｈｂ法によって作成された検量線を示すグラフ
【図１２】ラテックス免疫凝集法によって作成された検量線を示すグラフ
【図１３】本発明に係る検査用デバイスの第７実施例を示す正面図
【図１４】本発明に係る検査用デバイスの第８実施例を示す正面図
【符号の説明】
【００６４】
１１ 基本的な流路パーツ（第１の流路パーツ）
１２ キャピラリーバルブを含む流路部（第２の流路パーツ）
２１、２５ 両面粘着性シート
２６、３１ トップカバー
２７ ベース基盤
２９、３０ 切り取り部
４０、５０、６０、７０ 検査用デバイス
４１、５１、６１ 血球分離チャンバー
４２、５２、６２ 溶血チャンバー
４３、５３、６３ 混合チャンバー
４４ａ、４４ｂ、５４、６４ａ、６４ｂ 注入孔（検体注入孔）
１２０ａ、１３０ａ、２２０ａ、２３０ａ 注入孔（検体注入孔）
２２ 接着剤層
２３ 芯
５５、１１１、１２１ 流路
１１２ チャンバー
１１３ 空気孔
１２０ｂ、１３０ｂ、１４０ａ、２２０ｂ、２３０ｂ、２４０ａ、２６０ａ、２７０ａ 空気孔
１１５ 上面
５６、７１、７２、１２２ キャピラリーバルブ
５７ 血液凝固因子
６５、６７、６８、１１４ 頂点部
２１１Ａ、２１１Ｂ、２１１Ｃ、２１１Ｄ 流路
７００ 回転装置
７１１ クランパー
７１３ ターンテーブル
７１４ スピンドルモーター
７１５ 制御デバイス
１１０、２１０、４１０ 検査用デバイス
１２０、２２０ 血球分離チャンバー
１３０ 希釈液注入チャンバー
１４０、２７０ 混合チャンバー
２３０ 希釈液注入チャンバー
２４０ 同期用チャンバー
２５０ 血漿液サンプリングチャンバー
２６０ オーバーフローチャンバー
１５０、１６０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０ 流路
１５０ａ、１６０ａ、２８０ａ、２９０ａ、３００ａ、３２０ａ キャピラリーバルブ
１５０ｂ、１６０ｂ、２８０ｂ、２９０ｂ、３００ｂ、３２０ｂ 屈曲部
４５１ フェリシアン化カリウム
１５３、１６３、２８３、２９３、３０３、３２３ 点線
１５１、１６１、２８１、２９１、３０１、３１１、３２１ 境界位置（流入）
１５４、１６４、２８４、２９４、３０４、３２４ 境界位置（流出）
【発明を実施するための最良の形態】
【００６５】
以下、本発明の実施の形態について、図面を用いて説明する。
【００６６】
なお、以下に説明する各検査用デバイスは、デバイス本体に例えば毛細管等の機能流路が形成され、検体の検査中に回転軸の回りに回転可能であり、回転軸は、検査用デバイスを貫いていても、検査用デバイスの外側に伸びていてもよい。すなわち、本発明の検査用デバイスは、自身を貫く回転軸を有し、自ら回転する形態の検査用デバイスと、自身の外側に伸びる回転軸を有し、所定半径の円周軌道上を回転可能な回転可能な形態の検査用デバイスとを含む。さらに、本明細書に記載される回転数および時間と、検査用デバイス内に流入される液体類を制御するために用いられる回転制御パラメータは、例として示されるものであり、本発明を限定するものではない。
（実施の形態１）
本発明に係る検査用デバイスの第１の実施の形態について説明する。
【００６７】
本発明の第１の実施の形態に係る検査用デバイスは、カセット状のデバイス本体に、検体を導入する検体注入孔と、それぞれ空気孔と連通された複数のチャンバーと、それぞれ前記複数のチャンバーから出ている複数、例えば２つの流路と、これら流路を１つに統合させた流路統合領域とを形成した検査用デバイスである。少なくとも２つの流路は、検体が流路統合領域に保持され、所定の希釈比で、希釈液と混合希釈されるように、それぞれが希釈液を流動させる少なくとも１つの希釈液流路と、検体注入孔と連通し、検体を流路統合領域に流動させる検体流路とを含む。それぞれのチャンバーと流路統合領域の大きさは、目標希釈比に基づいて決定される。
【００６８】
本実施の形態では、検査用デバイスは、例えば、検体流路の一部を形成する流入流路を介して、検体注入孔に連通し、血液検体を受け取る血球分離チャンバーと、溶血液を収容し、流路に連通する溶血チャンバーからなる２つのチャンバーを含むものである。
【００６９】
検査用デバイスは、回転中心回りに回転および停止するようになっており、血球分離チャンバーに収容されている血液検体を血球および血漿液に分離する。血球分離チャンバーは、溶血液が流路統合領域において血漿液と混合希釈されるように、検体流路の一部を形成する流出流路を介して流路統合領域と連通されており、血液検体から分離された血漿液を流出流路を通じて流動させる。ここで、溶血チャンバーに収容された溶血液は、血液検体を溶血することにより予め調整される。チャンバーの大きさの比、すなわち血球分離チャンバーおよび溶血チャンバーの大きさの比は、目標とする混合希釈比によって設定される。
【００７０】
本実施形態の形態においては、それぞれの流路は、毛細管現象によって液体が移送されるように十分小さい厚みを有している。空気孔は、液体が流路またはチャンバーを流れるために必要不可欠である。空気孔が流路またはチャンバーに設けられると、流路またはチャンバー中を空気が通り抜けられるため、液体は流路またはチャンバーを容易に流れる。チャンバーまたは流路は、確実に液体が滞りなく流れるように、空気孔と連通されるように形成される必要がある。さらに、検査用デバイスが回転中心回りに回転されているときに、液体が空気孔から漏れる可能性がある。したがって、空気孔は、例えば、流路もしくはチャンバーに対して回転中心に近い側に設けられることが好ましい。検査用デバイスは、例えば、他のチャンバーから溢れた血液検体または溶血液などの液体を収容するオーバーフローチャンバーを含んでいてもよい。液体が流れ込むチャンバー（流入チャンバー）は、液体が漏れないように、相対的に大きく形成されていてもよい。
【００７１】
本実施形態においては、液体は、複数の例えば２つの流路が交差し、互いに統合される流路統合領域で混合希釈される。流路統合領域は、１つのチャンバーあるいは別の一本の流路によって形成されてもよい。
【００７２】
空気孔は、液体が流路統合領域を流れるために必要不可欠である。複数の流路を流れるそれぞれの液体によって、空気が流路統合領域で遮断されると、直ちに液体の流れは静止してしまい、検査用デバイスは適切に機能できなくなる。本実施の形態では、流路統合領域は、血漿液および溶血液が容易に流れ込むように、空気孔と連通されるように形成されている。
【００７３】
本実施の形態では、チャンバーと流路統合領域との間に伸びて連通される流路は、検査用デバイスの回転中心に向かって、チャンバーの（回転中心に近い）上面より回転中心に向かう内周側に配置される上昇部と、検査用デバイスの回転中心に向かって、チャンバーの（液体が流れ出る）出口部より回転中心から離隔する外周側に配置される下降部とを含む。ここで、「上」あるいは「上向き」という言葉は、検査用デバイスが回転されているときに、遠心力が及ぼされる方向と逆向きの方向を意味しており、「下」あるいは「下向き」という言葉は、検査用デバイスが回転されているときに、遠心力が及ぼされる方向を意味している。上昇部は、例えば、検査用デバイスの回転中心に向かって、チャンバーの上面より回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を有する逆Ｕ字形の形状をなすことが好ましい。このように形成された流路は、検査用デバイスが回転されている際には、遠心力によって、チャンバーおよび下降部に液体を保持させることが可能であり、検査用デバイスが回転を停止され、かつ、液体が遠心力から解放されたときには、毛細管現象によって上昇部を介して液体をさらに流動させることが可能である。これに対して、仮に、液体を連続的に移送させるのであれば、頂点部は、チャンバーの上面と等しい位置か、あるいは外周側に位置していてもよい。
【００７４】
チャンバーから出る流路上には、その流路より大きな厚みの領域（以下、キャピラリーバルブという）が適宜の位置に設けられている。
【００７５】
次に、本実施形態の検査用デバイスの動作について説明する。
【００７６】
血液検体は血球分離チャンバーに注入され、溶血液は溶血チャンバーに注入される。溶血液は、血液検体を溶血することにより予め調整される。血球分離チャンバーに注入された血液検体は、毛細管現象によって、第１の流路を介して第１の流路中に形成されたキャピラリーバルブまで移送される。同様に、溶血チャンバーに注入された溶血液は、毛細管現象によって、第２の流路を介して第２の流路中に形成されたキャピラリーバルブまで移送される。
【００７７】
そして、検査用デバイスは所定の回転速度で回転される。検査用デバイスが回転されている間、血液検体は血球と血漿液とに分離され、このように血球分離チャンバーで分離された液体が遠心力によってキャピラリーバルブを越えて、第１の流路を介してさらに移送されることにより、血球分離チャンバーに含まれた液体の液面は、検査用デバイスの回転中心からの距離が第１の流路中に含まれた液体の液面（第１の流路の上昇部よりも前）とほぼ等しくなる。このようにキャピラリーバルブを越えて第１の流路を介して移送される液体は、血液検体から分離された血漿液である。同様に、検査用デバイスが回転されている間、溶血チャンバーに含まれた溶血液が、遠心力によってキャピラリーバルブを越えて、第２の流路を介してさらに移送されることにより、溶血チャンバーに含まれた液体の液面は、検査用デバイスの回転中心からの距離が（第２の流路の上昇部よりも先に）第２の流路中に含まれた液体の液面とほぼ等しくなる。このようにキャピラリーバルブを越えて第２の流路を介して移送される溶血液は、例えば血球の残骸などの不純物を分離される。
【００７８】
検査用デバイスの回転が停止すると、血漿液は、毛細管現象によって、第１の流路を介してさらに移送され、流路統合領域の手前の位置で停止される。第１の流路は、流路統合領域の手前にキャピラリーバルブを備えていてもよい。同様に、検査用デバイスの回転が停止すると、溶血液は、毛細管現象によって、第２の流路を介してさらに移送され、流路統合領域の手前の位置で停止される。第２の流路は、流路統合領域の手前にキャピラリーバルブを備えていてもよい。
【００７９】
検査用デバイスは、再び所定の回転速度で回転され、溶血液は、所定の希釈比で血漿液と混合希釈される。上述のとおり、混合希釈比は、チャンバーの容積の比率、すなわち血球分離チャンバーおよび溶血チャンバーの容積の比率によって設定される。
【００８０】
本実施の形態では、検査用デバイスの回転速度は、血液検体が十分に血球と血漿液とに分離されており、かつ、液体が流路を介して十分に移送される限り、任意の値であってよい。
【００８１】
血球分離チャンバーは、血液検体を溶血する溶血剤を担持するものであってもよい。このように構成された検査用デバイスは、回転中に血液検体を血球と血漿液に分離できると同時に、血液検体を溶血させる溶血工程を実行することができる。
【００８２】
さらに、血球分離チャンバーは、溶血された血漿液中に溶解されたヘモグロビン類を変性させる変性剤を担持するものであってもよい。血球分離チャンバーは、溶血された血漿液中に溶解されたヘモグロビン類を分解させる蛋白質分解酵素を担持するものであってもよい。このように構成された検査用デバイスは、血漿液に含まれるヘモグロビン類、特に、ＨｂＡ１ｃ、を抗原抗体反応原理に基づいて測定することができる。
【００８３】
本発明でいう溶血剤、変性剤としては、例えば、塩類、界面活性剤がそれぞれ考えられる。溶血剤および変性剤は、それぞれの赤血球膜に加わる浸透圧の変化によって、赤血球膜を破壊するように働くものである。また、蛋白質分解酵素とは、ペプシン、トリプシン、リシルエンドペプチダーゼ、エンドプロテインナーゼ、アルギニルエンドペプチダーゼ等が考えられる。
【００８４】
本発明に係る検査用デバイスにおいては、２つ以上のチャンバーが、検体注入孔と連通されたチャンバーの回転中心に向かう内周側にそれぞれ位置する１つ以上の流路を介して、別の１つのチャンバーと連通されていてもよく、２つ以上のチャンバーのうちの１つが検体注入孔と連通されることにより、血液検体が検体注入孔から移送されて、１つ以上の流路を介して２つ以上のチャンバーのうちの残りのチャンバーに導入されてもよい。このように構成された検査用デバイスは、チャンバーが検体で満たされると、１つの注入孔を介して検査用デバイスに導入された検体を所定の量だけ次々に他のチャンバーに移送することができる。すなわち、このように構成された検査用デバイスは、検体を注入孔に１回導入することによって、検体を血球分離チャンバーおよび溶血チャンバーを含む複数のチャンバーに移送することができる。仮に、溶血チャンバーが既に述べた溶血剤を担持する場合には、血液検体が注入孔に導入されると、直ちに血液検体を溶血させる溶血工程が実行される。検査用デバイスが回転されると、溶血液が取得される。
（実施の形態２）
本発明に係る検査用デバイスの第２の実施の形態について説明する。
【００８５】
本発明の第２の実施の形態に係る検査用デバイスにおいては、検体注入孔が血液検体を導入し、流路が、検体注入孔と連通され、血液検体が検体注入孔から導入されて溶血される溶血工程流路を含む。
【００８６】
このような構成にすることで、本実施形態の検査用デバイスは、血液検体を検体注入孔に１回導入することによって、所望の溶血液を血液検体から取得することができる。すなわち、検体注入孔から導入された血液検体の一部が溶血工程流路を介して移送されて血液処理チャンバーに流入することにより、血液検体は、溶血される第１の血液部と、血漿液と血球に分離される第２の血液部に分かれる。
【００８７】
血液検体を溶血させる溶血工程は、所定の時間を要する。溶血工程流路は、血液検体を検体注入孔から導入して一時的に保持することにより、溶血液を製造することが可能な溶血工程流路部を含むことが好ましい。本実施の形態では、溶血工程流路は、毛細管現象による液体の溶血工程流路部への流入を妨げるキャピラリーバルブからなる移送停止手段を含む。このようにして溶血工程流路で製造された溶血液と、血液処理チャンバー中で血液検体から分離された血漿液とは、それぞれの流路を介して流路統合領域に流入されて、互いに混合希釈される。
【００８８】
本実施の形態の検査用デバイスは、以下に示す３つの必要不可欠な構成要素を含んでいる。すなわち、本実施の形態の検査用デバイスは、１）血液処理チャンバーと溶血工程流路部との間に配置され、溶血工程流路を閉塞させて、溶血工程流路部と検体血液が導入される血液処理チャンバーとの間で、液体の流れを阻止する閉塞手段と、２）毛細管現象による液体の移送を静止させるキャピラリーバルブからなる静止手段と、３）溶血工程流路部から流路統合領域まで伸びて、回転中心に向かって、血液処理チャンバーの上面より回転中心に向かう内周側に配置される上昇部と、回転中心から見て、血液処理チャンバーの下面より回転中心から離隔する外周側に配置される下降部とを備える。
【００８９】
検査用デバイスの回転中には、液体に遠心力が及ぼされるため、溶血工程流路部と血液処理チャンバーとの間の液体の流れを阻止するように溶血工程流路が閉塞されない限り、溶血液が所定の希釈比で希釈されないので、第１の構成要素１）は重要である。
【００９０】
第２の構成要素２）は、血液検体が、血液処理チャンバーに導入される際に、毛細管現象によって溶血工程流路へ移送されることを妨げるように機能する。
【００９１】
第３の構成要素３）は、キャピラリーバルブからなる静止手段を超えて遠心力によって移送された液体が、血液処理チャンバーおよび下降流路の所定の領域に保持されて、血液処理チャンバーに含まれた液体の液面の検査用デバイスの回転中心からの距離が、下降流路中に含まれた液体の液面の検査用デバイスの回転中心からの距離とほぼ等しくなるようにするために重要である。さらに、上昇部が、検査用デバイスの回転中心に向かって、血液処理チャンバーの上面より回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を有する逆Ｕ字形の形状をなすことがより好ましい。検査用デバイスの回転によって、溶血液から不純物が分離されるのと同時に、血液検体が血球と血漿液とに分離される。
【００９２】
本実施の形態の検査用デバイスは、上述の点を除いて第１の実施形態の検査用デバイスと実質的に同様である。溶血液は所定の希釈比で血漿液と混合希釈される。
【００９３】
本実施の形態では、閉塞手段が、血液処理チャンバーと溶血工程流路部との間で溶血工程流路を閉塞して、溶血工程流路部と血液処理チャンバーとの間の液体の流れを阻止するような化学的変化を引き起こすものであってもよい。例えば、血液凝固因子は、効果的な閉塞手段となり得る。
（実施の形態３）
本発明に係る検査用デバイスの第３の実施の形態について説明する。
【００９４】
本発明の第３の実施の形態に係る検査用デバイスは、上記２つの実施の形態の場合よりも高倍率の希釈を実現する場合に好適なものであり、希釈液を流路統合領域を介して所定の方向に移送させる１つ以上の希釈液流路と、検体を流路統合領域に一時的に保持することが可能な検体流路とを備えることにより、所定の希釈比で検体を希釈液と混合希釈させるものである。
【００９５】
本実施の形態では、検体流路と１つ以上の希釈液流路のそれぞれとは、交差し、流路統合領域において、例えば、それぞれの検体流路および１つ以上の希釈液流路の近い箇所の厚みよりも大きな厚みを有するキャピラリーバルブによって形成される空間を介して互いに連通される。本実施の形態では、キャピラリーバルブの位置が重要である。本実施の形態の検査用デバイスはさらに、流路統合領域において、例えば、それぞれの検体流路および延長流路の近い箇所の厚みよりも大きな厚みを有するキャピラリーバルブによって形成される空間を介して検体流路と連通される端部を有する延長流路を含む。検体流路は、１つ以上の希釈液流路と延長流路の端部との間にそれぞれのキャピラリーバルブを介して離れるように配置される。
【００９６】
このように構成された本実施の形態の検査用デバイスは、検査用デバイスの１回目の回転が停止し、かつ、血球分離工程および溶血工程が終了した後に、検体流路を介して移送された検体液体と１つ以上の希釈液移送流路のそれぞれを介して移送された希釈液とが毛細管現象によってさらに移送されることを妨げることができるため、検体液体と希釈液とを互いに混合することができる。液体が検体流路および１つ以上の希釈液流路のそれぞれを介して移送されるためには、空気の流れが必要である。したがって、本実施の形態においては、検体流路および１つ以上の希釈液流路のそれぞれは、空気孔と連通される端部を有する。
【００９７】
検査用デバイスが再び回転されると、流路統合領域に一時的に保持された検体は、希釈液と所定の比率で混合希釈される。流路統合領域に保持されている検体と比較して、希釈液が流路統合領域を介して過剰に移送されるため、本実施形態の検査用デバイスは、高希釈比で検体を希釈液と混合希釈することができる。本実施の形態においては、検体流路が、それぞれが血液処理チャンバーより回転中心から離隔する外周側に配置される１対の頂点部を含み、流路統合領域が１対の頂点部の間に配置されるため、検体が希釈液と混合希釈されている間は、流路統合領域に保持されている検体は移送されない。本実施の形態では、希釈比は、流路統合領域の周りの領域に保持された検体の量と、流路統合領域を介して移送される希釈液の量との比に基づいて決定される。すなわち、希釈比は、流路統合領域の周りの領域の容量と、流路統合領域を介して移送される希釈液の流量に基づいて調整可能である。
（実施の形態４）
本発明による血液混合希釈方法の第４の実施の形態について説明する。
【００９８】
本実施の形態の血液混合希釈方法は、血液検体を検査用デバイスに導入する血液導入工程と、血液導入工程で検査用デバイスに導入した血液検体を、溶血される第１の血液と、血漿液と血球に分離される第２の血液とに分ける分配工程と、検査用デバイスの回転によって、第１の血液を溶血させ、第２の血液を血球と血漿液とに分離させる血球および血漿液取得工程と、検査用デバイスの回転静止後に、溶血液と血漿液をそれぞれの流路を介して移送させる液体移送工程と、検査用デバイスの回転によって、溶血液を血漿液と混合希釈させる混合希釈工程とを含む。
【００９９】
既に述べたように、本実施の形態の血液混合希釈方法は、検査用デバイスの回転および停止を制御するだけで、血液検体を第１の血液と第２の血液とに分離し、第１の血液を溶血し、第２の血液を血球と血漿液とに分離し、溶血液を血漿液で混合希釈することができる。
（実施の形態５）
本発明に係る検査用デバイスの第５の実施の形態について説明する。
【０１００】
本発明の第５の実施の形態に係る検査用デバイスは、検体注入孔と連通され、血液検体を取得し、検査用デバイスの回転中に、血液検体を溶血し、血漿液と血球とに分離する血球分離チャンバーと、血液検体の一部を構成する構成要素を希釈するための希釈液を内部に導入する希釈液導入チャンバーと、血漿液と希釈液を取得し、検査用デバイスの回転中に、血漿液を希釈液で混合希釈させる混合チャンバーと、血液検体の一部を構成する構成要素を溶血する溶血剤を担持する血球分離チャンバーとを含む。
【０１０１】
本実施の形態の検査用デバイスは、血液検体および希釈液を検査用デバイスに導入し、検査用デバイスの回転および停止を制御するだけで、例えば、血球分離工程、溶血工程および希釈工程などの前処理を実施することができるため、本実施の形態の検査用デバイスは、従来の検査用デバイスと比較して、小型で、携帯性および操作性に優れ、例えば緩衝液などの外部から導入される液体の量を非常に少なくすることができる。
【０１０２】
本実施の形態の検査用デバイスの総容量は、血液検体を構成する全ての構成要素を希釈するための必要量以上の希釈液を内部に導入することが可能であることが好ましく、それによって、希釈液が検査用デバイス本体から溢れ出ることがない。さらに、血球分離チャンバーに担持される溶血剤の量が血球分離チャンバーに収容される血液検体の全てを溶血する量よりも少ないことが好ましい。以下、全血液検体を溶血するのに必要な量よりも少ない量の溶血剤を用いて血液検体を溶血することを、「部分溶血」または「血液検体を部分的に溶血する」という。このように構成された本実施形態の検査用デバイスは、血球分離チャンバーに収容された血液検体を部分的に溶血することができるため、製造される溶血液の量を減らすことができ、それによって、内部に導入される希釈液の量を低減することができる。
【０１０３】
本発明によると、検査用デバイスは、血液検体を複数回に渡って部分的に溶血するものであってもよい。以下、血液検体を複数回に渡って部分的に溶血することを「多段部分溶血」という。多段部分溶血は、検査用デバイスがごく少量の溶血剤で必要量の溶血液を得ることを可能にする。本実施の形態の検査用デバイスは、さらに、それぞれが前記溶血剤を担持する１つ以上の追加のチャンバーを含んでいてもよく、前記１つ以上の追加のチャンバーのそれぞれに担持される溶血剤の量は、前記１つ以上の追加のチャンバーに収容される血液検体の全てを溶血する量よりも少ない。このように構成された本発明の検査用デバイスは、複数回に渡って血液検体を部分的に溶血でき、さらに製造される溶血液の量を減らすことができるため、内部に注入される希釈液の量と同時に溶血剤の量を減らすことができる。
（実施の形態６）
本発明による血液混合希釈方法の第６の実施の形態について説明する。
【０１０４】
本実施の形態の血液混合希釈方法は、血液検体を検査用デバイスに導入する血液導入工程と、血液検体の一部を構成する構成要素を希釈する希釈液を導入する希釈液導入工程と、検査用デバイスの回転によって、血液検体を溶血し、血球と血漿液とに分離する溶血分離工程と、検査用デバイスの回転を停止し、溶血された血漿液および希釈液を移送させる液体移送工程と、検査用デバイスを回転して、溶血液を希釈液と混合希釈させる混合希釈工程とを含む。
【０１０５】
既に述べたように、本実施の形態の血液混合希釈方法は、検査用デバイスの回転および停止を制御するだけで、例えばＨｂ類の測定の前処理を実施することができるため、検査用デバイスは、従来の検査用デバイスと比較して、小型で、携帯性および操作性に優れ、例えば緩衝液などの外部から導入される液体の量を非常に少なくすることができる。
【実施例】
【０１０６】
以下に、本発明の検査用デバイスおよび血液混合稀釈方法の実施例を、血球分離チャンバーと溶血チャンバーを有するデバイスを例にして、詳細に説明する。なお、ここでの実施例に係る具体的な限定は、本発明の要旨を限定するものでないことはいうまでもない。
（実施例１）
図１乃至図３は、本発明の第１実施例の検査用デバイスを示す図である。
【０１０７】
本実施例の検査用デバイスは、図１および図２に示すように、第１および第２の流路パーツを含む。図１（ａ）は、本発明に係る検査用デバイスの第１実施例の一部を構成する第１の流路パーツ１１を含む基本的な流路パーツを示すブロック図である。図１（ｂ）は、本発明に係る検査用デバイスの一部を構成する第２の流路パーツ１２からなる、キャピラリーバルブを含む屈曲部を示すブロック図である。第１の流路パーツ１１は、流路１１１と、流路１１１と連通されたチャンバー１１２とを含む。第２の流路パーツ１２は、キャピラリーバルブ１２２が内部に形成された第２の流路１２１を含む。キャピラリーバルブ１２２の厚み（断面積）は、第２の流路１２１のキャピラリーバルブ１２２に近い箇所の厚みよりも大きい。
【０１０８】
まず、この図１により第１および第２の流路パーツの構成を説明し、次いで、その作製方法について図２および図３を用いて説明する。
【０１０９】
図１（ａ）に示す第１の流路パーツ１１は、例えば、希釈、混合、反応、検出等の分析工程を達成するための場となるチャンバー１１２と、チャンバー１１２と連通された流路１１１および空気孔１１３とを含む。さらに、チャンバー１１２には、延長部分１１２ａが形成されている。延長部分１１２ａは、別の流路をチャンバー１１２と連結し、かつ、連通する場合に使用される。流路１１１は、チャンバー１１２から伸びているが、チャンバー１１２の反対側の延長部分１１２ａから離隔されている。空気孔１１３は、流路１１１およびチャンバー１１２から離隔されるよう配置されている。
【０１１０】
検査用デバイスは、回転中心回りに回転可能である。チャンバー１１２は、回転中心に近い上面１１５を有する。流路１１１は、検査用デバイスの回転中心に向かって、チャンバー１１２の上面１１５より回転中心に向かう内周側に配置される頂点部１１４を有する逆Ｕ字形の屈曲部を含む。このように構成された第１の流路パーツ１１は、回転中に生じる遠心力によって、チャンバー１１２および頂点部１１４より回転中心から離隔する外周側に位置する流路１１１に液体を保持することができる。連続的に液体を流動させ続ける場合は、逆に、頂点部１１４は、チャンバー１１２の上面１１５より外周側に配置されていてもよい。
【０１１１】
本実施例では、一旦、チャンバー１１２内に液体が保持される必要があるので、頂点部１１４は、検査用デバイスの回転中心に向かって、チャンバー１１２の上面１１５より回転中心に向かう内周側に配置される。
【０１１２】
図１（ｂ）に示す第２の流路パーツ１２は、全体として逆Ｕ字形の形状をなし、内部にキャピラリーバルブ１２２が形成された第２の流路１２１を含む。第２の流路１２１は、短手方向に傾けられた両端を有する。キャピラリーバルブ１２２は、第２の流路１２１に形成されており、厚み（断面積）が第２の流路１２１のキャピラリーバルブ１２２に近い箇所の厚みよりも大きい空間を形成する。第２の流路１２１は、キャピラリーバルブ１２２よりも手前に位置する流入流路部と、第２の流路１２１を液体が流動する方向に沿って、キャピラリーバルブ１２２よりも後に位置する流出流路部とに分けられる。第２の流路パーツ１２のキャピラリーバルブ１２２は、流入流路部と流出流路部との間の毛細管現象による液体の流動を静止させる静止手段として機能する。キャピラリーバルブ１２２が、厚み（断面積）が第２の流路１２１のキャピラリーバルブ１２２に近い箇所の厚みよりも大きい空間を形成していることにより、第２の流路１２１を流れる液体は、検査用デバイスの回転停止後に、第２の流路１２１の所定の区間において定常状態となるため、第２の流路１２１を流動することが妨げられる。本実施例では、流路には、液体を静止させたい箇所、タイミング、区間を考慮して適宜キャピラリーバルブが設けられている。
【０１１３】
図２および図３は、図１に示した第１および第２の流路パーツの作製手順を説明する断面図である。図２および図３に示すように、第１および第２の流路パーツのそれぞれは３つの層を含む。図２（ａ）は、図１（ａ）に示した第１の流路パーツ１１の作製手順を説明する断面図であり、図２（ｂ）は、図１（ａ）のII-II矢視断面図である。図３（ａ）は、図１（ｂ）に示した第２の流路パーツ１２の作製手順を説明する断面図であり、図３（ｂ）は、図１（ｂ）のIII-III矢視断面図である。
【０１１４】
まず、図２を用いて第１の流路パーツ１１の作製方法について詳細に説明する。
【０１１５】
第１の流路パーツ１１の作製は、準備工程、切り取り工程、コーティング工程、接着工程の順に行われる。
【０１１６】
図２（ａ）に示した第１の流路パーツ１１は、ベース基盤２７と、トップカバー２６と、ベース基盤２７とトップカバー２６との間に配置された両面粘着性シート２５とを含む。準備工程では、部分的な加工品として、ベース基盤２７、トップカバー２６、加工前の両面粘着性シート２１が準備される。加工前の両面粘着性シート２１は、フレックスコン社製であり、厚さが５０μｍの芯２３、厚さが両面それぞれ２５μｍの接着剤層２２、剥離紙２４とを含む。
【０１１７】
切り取り工程では、グラフテック社製のカッティングプロッターによって、加工前の両面粘着性シート２１から、チャンバー１１２と流路１１１を形成する空間に相当する切り取り部２９が切り取られて、両面粘着性シート２５が作製される。この切り取り工程では、加工前の両面粘着性シート２１は、下側の剥離紙２４以外の層に切り込みを入れられた後に、切り取り部２９が加工前の両面粘着性シート２１から取り除かれる。
【０１１８】
コーティング工程では、ベース基盤２７は、ポリスチレン（polystyrene；以下、ＰＳと略す）をコーティングされる。ベース基盤２７は、ポリスチレン（シグマアルドリッチ社製）の２−アセトキシ−１−メトキシプロパンの１重量（ｗ／ｖ）％溶液をスピンコートされた後に、一晩、真空状態で十分に乾燥されることが好ましい。さらに、ベース基盤２７は、界面活性剤をスピンコートされた後に、一晩、真空状態で十分に乾燥される。このように界面活性剤でコーティングされたベース基盤２７は、親水性が増加しており、流動特性が向上している。本実施例では、ベース基盤２７は、円盤状であり、ポリカーボネート製である。
【０１１９】
トップカバー２６には、予め空気孔１１３が開けられており、チャンバー１１２に対応する凹部１１２Ｃが成型される。
【０１２０】
接着工程では、このようにスピンコートされたベース基盤２７（ＰＳコートベース基盤）とトップカバー２６とが、両面粘着性シート２５を介して互いに貼り合わせられることにより、第１の流路パーツ１１が作製される。
【０１２１】
上述のように、本発明においては、コーティング工程で、ベース基盤２７は、まずＰＳをスピンコートされ、次に界面活性剤をスピンコートされるが、ベース基盤２７は、まず界面活性剤をスピンコートされ、次にＰＳをスピンコートされてもよく、あるいは、ベース基盤２７は、ＰＳの代わりに界面活性剤をスピンコートされてもよい。
【０１２２】
次に、図３を用いて第２の流路パーツ１２の作製方法について詳細に説明する。
【０１２３】
第１の流路パーツ１１と同様に、第２の流路パーツ１２の作製は、準備工程、切り取り工程、コーティング工程、接着工程の工程によって行われる。
【０１２４】
図３（ｂ）に示した第２の流路パーツ１２は、ベース基盤２７と、トップカバー３１と、ベース基盤２７とトップカバー３１との間に配置された両面粘着性シート２５とを含む。切り取り工程において、加工前の両面粘着性シート２１から第２の流路１２１とキャピラリーバルブ１２２を形成する空間に相当する切り取り部３０がカッティングプロッターによって切り取られて、両面粘着性シート２５が作製される点と、トップカバー３１にキャピラリーバルブ１２２に対応する凹部１２２Ｃが成型される点を除いて、準備工程、コーティング工程、切り取り工程、接着工程は、第１の流路パーツ１１の作製方法とほぼ同様である。接着工程では、ベース基盤２７とトップカバー３１とが、両面粘着性シート２５を介して互いに貼り合わせられることにより、第２の流路パーツ１２が作製される。
【０１２５】
そして、以上説明した基本的な流路パーツである第１の流路パーツ１１および第２の流路パーツ１２を必要数だけ適宜組み合わせる（接続する）ことにより、本発明の目的とする機能を有する検査用デバイスが作製される。
（実施例２）
図４乃至図６は、本発明の第２実施例の検査用デバイスを示す図である。図４は、本発明の検査用デバイスの第２実施例を示す概略図である。図５は、本発明の検査用デバイスの本実施例の上面図である。図６は、検査用デバイスを回転する回転装置を示す概略図である。
【０１２６】
以下、まず図４を用いて本実施例の検査用デバイスの構成を示した後に、本実施例の検査用デバイスによって実行される溶血液を血漿液と混合希釈する動作を説明する。
【０１２７】
図４に示す本実施例の検査用デバイス４０は、血球分離チャンバー４１と、溶血チャンバー４２と、混合チャンバー４３とを含む。検査用デバイス４０は、図４に図示していない回転中心回りに回転可能である。上述のように、検査用デバイス４０は、図１に示した第１の流路パーツ１１と第２の流路パーツ１２とを適切な数だけ適宜接続することにより作製される。図５に示す本実施例の検査用デバイス４０は、中央孔４０ａを有する円盤形状をなしている。図４から明らかなように、記載を簡易化して、検査用デバイス４０の動作の全容に関する理解を助けるために、検査用デバイス４０が、血球分離チャンバー４１、溶血チャンバー４２および混合チャンバー４３から構成されているものとして説明する。実際には、検査用デバイス４０は、図４に示したもの以外にも必要に応じて、さらにチャンバー、流路などを含んでいてもよいことは言うまでもない。
【０１２８】
ここで、血球分離チャンバー４１は、７０μｌ（マイクロリットル）相当の血液を導入することができる容積を有している。溶血チャンバー４２は、５μｌ相当の溶血液を導入することができる大きさを有する。血球分離チャンバー４１には、空気孔１１３ａと、注入孔４４ａと、流路２１１Ａに連通されている出口部（図示せず）とが形成されている。流路２１１Ａには、血球分離チャンバー４１の近くにキャピラリーバルブ１２２ａが形成されている。溶血チャンバー４２には、空気孔１１３ｂと、注入孔４４ｂと、流路２１１Ｂに連通されている出口部（図示せず）とが形成されている。流路２１１Ｂには、溶血チャンバー４２の近くにキャピラリーバルブ１２２ｂが形成されている。混合チャンバー４３には、空気孔１１３ｃと、それぞれが流路２１１Ａおよび流路２１１Ｂに連通されている注入孔（図示せず）とが形成されている。流路２１１Ａには、混合チャンバー４３の近くにキャピラリーバルブ１２２ｄが形成されている。流路２１１Ｂには、混合チャンバー４３の近くにキャピラリーバルブ１２２ｃが形成されている。すなわち、流路２１１Ａは２つのキャピラリーバルブ１２２ａ、１２２ｄを備え、流路２１１Ｂは２つのキャピラリーバルブ１２２ｂ、１２２ｃを備えている。
【０１２９】
血球分離チャンバー４１は、検査用デバイス４０の回転中心に面する上面と、上面と相対する下面とを有する。血球分離チャンバー４１の上面の位置は一点鎖線Ｌ１で表されている。血球分離チャンバー４１の下面の位置は一点鎖線Ｌ２で表されている。図４から明らかなように、記載を簡易化して、検査用デバイス４０の動作の全容に関する理解を助けるために、一点鎖線Ｌ１および一点鎖線Ｌ２を直線として描いている。実際には、血球分離チャンバー４１の上面および下面は、検査用デバイス４０の回転中心に対して同心円状に配置されている。したがって、一点鎖線Ｌ１、Ｌ２は、それぞれ検査用デバイス４０の回転中心に対して同心円状に配置された円弧である。血球分離チャンバー４１から、混合チャンバー４３からなる流路統合領域まで伸びた流路２１１Ａは、血球分離チャンバー４１の上面より検査用デバイス４０の回転中心に向かう内周側（一点鎖線Ｌ１より検査用デバイス４０の回転中心に向かう内周側）に配置される上昇部と、血球分離チャンバー４１の下面より検査用デバイス４０の回転中心から離隔する外周側（一点鎖線Ｌ２より検査用デバイス４０の回転中心から離隔する外周側）に配置される下降部とを含む。同様に、溶血チャンバー４２から混合チャンバー４３まで伸びた流路２１１Ｂは、血球分離チャンバー４１の上面より検査用デバイス４０の回転中心に向かう内周側（一点鎖線Ｌ１より検査用デバイス４０の回転中心に向かう内周側）に配置される上昇部と、血球分離チャンバー４１の下面より検査用デバイス４０の回転中心から離隔する外周側（一点鎖線Ｌ２より検査用デバイス４０の回転中心から離隔する外周側）に配置される下降部とを含む。
【０１３０】
検査用デバイス４０は、例えば図６に示した回転装置７００に載置され、回転される。回転装置７００は、検査用デバイス４０の中央孔４０ａに受けられて検査用デバイス４０を固定するクランパー７１１と、検査用デバイス４０を支持するターンテーブル７１３と、検査用デバイスを回転させるようにターンテーブル７１３を駆動するスピンドルモーター７１４と、スピンドルモーター７１４を制御する制御デバイス７１５とを含む。このように構成された回転装置７００は、所定の時間に検査用デバイス４０を回転および停止するように動作する。
【０１３１】
次に、本実施例の検査用デバイスの動作について説明する。
【０１３２】
本実施例では、使用された検体は、全血検体（全血検査に用いられる検体）であり、溶血液についてはエッペンドルフチューブ（エッペンドルフ社製の検査用試験管）中に入れられた血液１ｍｌに対して塩化カリウム１ｇを添加して、十分に混和することにより調整されたものを使用した。
【０１３３】
７０μｌ（マイクロリットル）の全血検体は、注入孔４４ａを介して血球分離チャンバー４１に導入された。血球分離チャンバー４１には空気孔１１３ａが形成されているため、全血検体は、血球分離チャンバー４１に容易に導入される。全血検体は、毛細管現象によって流路２１１Ａを介して浸透し、キャピラリーバルブ１２２ａで定常状態に達した。同様に、５μｌの溶血液は、注入孔４４ｂを介して溶血チャンバー４２に導入された。溶血チャンバー４２に導入された溶血液は、血球分離チャンバー４１中の全血検体から分離された血球を用いて調整された。溶血チャンバー４２には空気孔１１３ｂが形成されているため、溶血液は、溶血チャンバー４２に容易に導入される。溶血液は、毛細管現象によって流路２１１Ｂを介して浸透し、キャピラリーバルブ１２２ｂで定常状態に達した。
【０１３４】
検査用デバイス４０は、回転装置７００によって４０００ｒｐｍ（rotation per minute）で４分間回転されることにより、血球分離チャンバー４１に含まれた全血検体を血球と血漿液とに分離した。検査用デバイス４０の回転中に、血球分離チャンバー４１に含まれた液体（全血検体から分離された血漿液）は、流路２１１Ａを介してキャピラリーバルブ１２２ａを越えて流動し、血球分離チャンバー４１に含まれた液体の液面の検査用デバイス４０の回転中心からの距離とほぼ等しくなるところに到達した。同様に、検査用デバイス４０の回転中に、溶血チャンバー４２に含まれた液体（溶血液）は、流路２１１Ｂを介してキャピラリーバルブ１２２ｂを越えて流動し、溶血チャンバー４２に含まれた液体の液面の検査用デバイス４０の回転中心からの距離とほぼ等しくなるところに到達した。
【０１３５】
検査用デバイス４０の回転停止後、血漿液はさらに毛細管現象によって流路２１１Ａを介して混合チャンバー４３の手前のキャピラリーバルブ１２２ｄまで移送されて停止した。混合チャンバー４３には空気孔１１３ｃが形成されているため、血漿液は、毛細管現象によって流路２１１Ａを介して容易に移送される。同様に、検査用デバイス４０の回転停止後、溶血液はさらに毛細管現象によって流路２１１Ｂを介して混合チャンバー４３の手前のキャピラリーバルブ１２２ｃまで移送されて停止した。混合チャンバー４３には空気孔１１３ｃが形成されているため、溶血液は、毛細管現象によって流路２１１Ｂを介して容易に移送される。
【０１３６】
検査用デバイス４０は、再び回転装置７００によって１５００ｒｐｍで１分間回転されることによって、回転停止の際に、血漿液はさらに流路２１１Ａを介してキャピラリーバルブ１２２ｄから混合チャンバー４３まで移送され、溶血液はさらに流路２１１Ｂを介してキャピラリーバルブ１２２ｃから混合チャンバー４３まで移送された。血漿液と溶血液はこのようにして混合チャンバー４３で互いに混合され、希釈された液（混合希釈液）が得られた。
【０１３７】
以上、説明したように本実施例の検査用デバイスは、所定の条件下で回転および停止されることにより、全血検体から分離された血漿液と溶血液とを混合希釈することができた。
（実施例３）
図７は、本発明の第３実施例の検査用デバイスを示す概略図である。以下、まず図7を用いて本実施例の検査用デバイスの構成を示した後に、本実施例の検査用デバイスによって実行される溶血液を血漿液と混合希釈する動作を説明する。本実施例の構成要素のうち、上述の実施例と同様のものには同様の符号を付して説明を省略する。
【０１３８】
図７に示す本実施例の検査用デバイス５０は、血球分離チャンバー５１と、溶血チャンバー５２と、混合チャンバー５３とを含む。検査用デバイス５０は、図示しない回転中心回りに回転可能である。上述のように、検査用デバイス５０は、図１に示した第１の流路パーツ１１と第２の流路パーツ１２とを適切な数だけ適宜接続することにより作製される。本実施例の検査用デバイスは、所定の条件下で回転および停止されることにより、全血検体が内部に１回導入されるだけで、溶血液と血漿液とを混合希釈することが可能である。
【０１３９】
ここで、血球分離チャンバー５１は、７０μｌ相当の血液を内部に導入することが可能な大きさを有している。溶血チャンバー５２は、５μｌ相当の溶血液を内部に導入することが可能な大きさを有している。血球分離チャンバー５１には、空気孔１１３ａと、注入孔５４と、流路２１１Ａに連通されている第１の出口部（図示せず）とが形成されている。流路２１１Ａには、血球分離チャンバー５１の近くにキャピラリーバルブ１２２ａが形成されている。溶血チャンバー５２には、空気孔１１３ｂと、流路２１１Ｂに連通されている出口部（図示せず）とが形成されている。流路２１１Ｂには、溶血チャンバー５２の近くにキャピラリーバルブ１２２ｂが形成されている。混合チャンバー５３には、空気孔１１３ｃと、それぞれが流路２１１Ａおよび流路２１１Ｂに連通されている注入孔（図示せず）とが形成されている。流路２１１Ａには、混合チャンバー５３の近くにキャピラリーバルブ１２２ｄが形成されている。流路２１１Ｂには、混合チャンバー５３の近くにキャピラリーバルブ１２２ｃが形成されている。すなわち、流路２１１Ａは２つのキャピラリーバルブ１２２ａ、１２２ｄを備え、流路２１１Ｂは２つのキャピラリーバルブ１２２ｂ、１２２ｃを備えている。このように、流路２１１Ａおよび流路２１１Ｂの構成は、上述の実施例に示されたものと同様である。
【０１４０】
本実施例の検査用デバイス５０においては、図７に示したように、血球分離チャンバー５１および溶血チャンバー５２は血球分離チャンバー５１および溶血チャンバー５２間に伸びる流路５５を介して互いに連通されている。血球分離チャンバー５１は、流路５５の一端と連通される図示しない第２の出口部を有する。血球分離チャンバー５１の第２の出口部は、検査用デバイス５０の回転中心からの距離が、血球分離チャンバー５１の第１の出口部の回転中心からの距離よりも遠くなるように配置される。血球分離チャンバー５１の第２の出口部は、検査用デバイス５０の回転中心から最も遠い端部の近くに配置されることが好ましい。溶血チャンバー５２は、流路５５の他端と連通される図示しない注入孔を有する。溶血チャンバー５２の注入孔は、検査用デバイス５０の回転中心から最も遠い端部の近くに配置されることが好ましい。
【０１４１】
流路５５には、キャピラリーバルブ５６（移送停止手段）が形成されている。流路５５は、所定の血液凝固因子５７（詳細は図示せず）を担持させる流路領域を含む。流路領域は、キャピラリーバルブ５６と溶血チャンバー５２の注入孔との間に配置される。溶血チャンバー５２は、内部に塩化カリウム（図示せず）を溶血剤として担持している。本実施例では、溶血チャンバー５２は、溶血工程流路を構成する。
【０１４２】
溶血チャンバー５２における溶血剤の担持は、例えば、溶血剤を含んだ溶液を溶血チャンバー５２の内面に塗布し、溶血チャンバー５２の内面を凍結乾燥によって乾燥させることにより可能となる。同様に、流路領域における血液凝固因子５７の担持は、例えば、血液凝固因子５７を含んだ溶液を流路領域の内面に塗布し、流路領域の内面を凍結乾燥によって乾燥させることにより可能となる。
【０１４３】
血球分離チャンバー５１は、検査用デバイス５０の回転中心に面する上面と、上面と相対する下面とを有する。血球分離チャンバー５１の上面の位置は一点鎖線Ｌ１で表されている。血球分離チャンバー５１の下面の位置は一点鎖線Ｌ２で表されている。図７から明らかなように、記載を簡易化して、検査用デバイス５０の動作の全容に関する理解を助けるために、一点鎖線Ｌ１および一点鎖線Ｌ２を直線として描いている。実際には、血球分離チャンバー５１の上面および下面は、検査用デバイス５０の回転中心に対して同心円状に配置されている。したがって、一点鎖線Ｌ１、Ｌ２は、それぞれ検査用デバイス５０の回転中心に対して同心円状に配置された円弧である。
【０１４４】
血球分離チャンバー５１から、混合チャンバー５３からなる流路統合領域まで伸びた流路２１１Ａは、血球分離チャンバー５１の上面より検査用デバイス５０の回転中心に向かう内周側（一点鎖線Ｌ１より検査用デバイス５０の回転中心に向かう内周側）に配置される上昇部と、血球分離チャンバー５１の下面より検査用デバイス５０の回転中心から離隔する外周側（一点鎖線Ｌ２より検査用デバイス５０の回転中心から離隔する外周側）に配置される下降部とを含む。同様に、溶血チャンバー５２から混合チャンバー５３まで伸びた流路２１１Ｂは、血球分離チャンバー５１の上面より検査用デバイス５０の回転中心に向かう内周側（一点鎖線Ｌ１より検査用デバイス５０の回転中心に向かう内周側）に配置される上昇部と、血球分離チャンバー５１の下面より検査用デバイス５０の回転中心から離隔する外周側（一点鎖線Ｌ２より検査用デバイス５０の回転中心から離隔する外周側）に配置される下降部とを含む。
【０１４５】
本実施例の検査用デバイス５０は、例えば図６に示した回転装置７００に載置され、回転される。
【０１４６】
以下、本発明の検査用デバイス５０の本実施例における動作と、本実施例の検査用デバイス５０によって実行される溶血液を混合希釈する方法の一実施例を説明する。
【０１４７】
本実施例では、使用された検体は、全血検体（全血検査に用いられる検体）である。
【０１４８】
まず、７０μｌの全血検体は、注入孔５４を介して血球分離チャンバー５１に導入されることにより、血液検体が検査用デバイス５０に導入された（血液導入工程）。血球分離チャンバー５１には空気孔１１３ａが形成されているため、全血検体は、血球分離チャンバー５１に容易に導入される。全血検体は、毛細管現象によって流路５５および流路２１１Ａを介して浸透し、キャピラリーバルブ５６およびキャピラリーバルブ１２２ａで定常状態に達した。
【０１４９】
検査用デバイス５０は、回転装置７００によって４０００ｒｐｍで４分間回転された。検査用デバイス５０の回転中に、全血検体は血球と血漿液に分離されずに、流路５５を介して遠心力によってキャピラリーバルブ５６を越えて移送され、溶血チャンバー５２に到達し、血球分離チャンバー５１に含まれた液体の液面の検査用デバイス５０の回転中心からの距離と、溶血チャンバー５２に含まれた液体の液面の検査用デバイス５０の回転中心からの距離とがほぼ等しくなった。このようにして、検査用デバイス５０に導入された血液は、溶血工程で使用される血液と、血球分離工程で使用される血液とに分けられる（分配工程）。
【０１５０】
流路５５に流入した血液は、流路５５の流路領域中に担持された血液凝固因子５７（閉塞手段）と反応した。血液凝固因子５７と反応した血液は、所定時間が経過した後に凝固し、流路５５を詰まらせた。血球分離チャンバー５１と溶血チャンバー５２とはこのように互いに分断された。
【０１５１】
血球分離チャンバー５１に含まれた液体は、流路２１１Ａを介してキャピラリーバルブ１２２ａを越えて移送され、血球分離チャンバー５１に含まれた液体の液面の検査用デバイス５０の回転中心からの距離と、流路２１１Ａを介して移送された液体の液面の検査用デバイス５０の回転中心からの距離とがほぼ等しくなった。同様に、溶血チャンバー５２に含まれた液体は、流路２１１Ｂを介してキャピラリーバルブ１２２ｂを越えて移送され、溶血チャンバー５２に含まれた液体の液面の検査用デバイス５０の回転中心からの距離と、流路２１１Ｂを介して移送された液体の液面の検査用デバイス５０の回転中心からの距離とがほぼ等しくなった。
【０１５２】
検査用デバイス５０は、回転装置７００によって１０分間連続的に回転されることにより、血球分離チャンバー５１に含まれた血液を血球と血漿液とに十分に分離させ（血球分離工程（血球および血漿液取得工程）、かつ、同様に、溶血チャンバー５２に含まれた血液を、溶血チャンバー５２に担持された溶血剤によって十分に溶血させた（溶血工程）。
【０１５３】
検査用デバイス５０の回転停止後、血漿液はさらに毛細管現象によって流路２１１Ａを介して混合チャンバー５３の手前のキャピラリーバルブ１２２ｄまで移送されて停止した。混合チャンバー５３には空気孔１１３ｃが形成されているため、血漿液は、毛細管現象によって流路２１１Ａを介して容易に移送される。同様に、検査用デバイス５０の回転停止後、溶血液はさらに毛細管現象によって流路２１１Ｂを介して混合チャンバー５３の手前のキャピラリーバルブ１２２ｃまで移送されて停止した（液体移送工程）。混合チャンバー５３には空気孔１１３ｃが形成されているため、溶血液は、毛細管現象によって流路２１１Ｂを介して容易に移送される。
【０１５４】
検査用デバイス５０は、再び回転装置７００によって１５００ｒｐｍで１分間回転されることによって、回転停止の際に、血漿液はさらに流路２１１Ａを介してキャピラリーバルブ１２２ｄから混合チャンバー５３まで移送され、溶血液はさらに流路２１１Ｂを介してキャピラリーバルブ１２２ｃから混合チャンバー５３まで移送された。血漿液と溶血液はこのようにして混合チャンバー５３で互いに混合され、希釈された液（混合希釈液）が得られた（混合希釈工程）。
【０１５５】
本実施例で記載してきたように、溶血工程流路は溶血チャンバー５２からなるが、溶血液が混合チャンバー５３に移送されるのであれば、溶血工程流路は他の流路またはチャンバーからなっていてもよい。例えば、溶血工程流路は流路２１１Ｂからなっていてもよい。この場合は、流路２１１Ｂは内部に溶血剤を担持していてもよい。
【０１５６】
以上、説明したように、本実施例の検査用デバイスおよび血液混合稀釈方法では、本実施例の検査用デバイスが、血球分離チャンバー５１と、キャピラリーバルブ５６が形成された流路５５を介して血球分離チャンバー５１と互いに連通される溶血チャンバー５２とを含み、流路５５が内部に血液凝固因子５７を担持し、溶血チャンバー５２が内部に溶血剤を担持しているため、所定の条件下で回転および停止されることにより、全血検体が内部に１回導入されるだけで、溶血液と血漿液とを混合希釈することが可能である。
（実施例４）
図８は、本発明の第４実施例の検査用デバイスを示す概略図である。以下、まず図８を用いて本実施例の検査用デバイスの構成を示した後に、本実施例の検査用デバイスによって実行される溶血液を血漿液と混合希釈する動作を説明する。本実施例の構成要素のうち、上述の実施例と同様のものには同様の符号を付して説明を省略する。
【０１５７】
図８に示す本実施例の検査用デバイス６０は、血球分離チャンバー６１と、溶血チャンバー６２と、混合チャンバー６３とを含む。検査用デバイス６０は、図示しない回転中心回りに回転可能である。上述のように、検査用デバイス６０は、図１に示した第１の流路パーツ１１と第２の流路パーツ１２とを適切な数だけ適宜接続することにより作製される。本実施例の検査用デバイスは、所定の条件下で回転および停止されることにより、溶血液と血液から分離された血漿液とを高希釈比で混合希釈することが可能である。
【０１５８】
ここで、血球分離チャンバー６１は、７０μｌ相当の血液を内部に導入することが可能な大きさを有している。溶血チャンバー６２は、５μｌ相当の溶血液を内部に導入することが可能な大きさを有している。血球分離チャンバー６１には、空気孔１１３ａと、注入孔６４ａと、流路２１１Ａに連通されている出口部（図示せず）とが形成されている。流路２１１Ａには、血球分離チャンバー６１の近くにキャピラリーバルブ１２２ａが形成されている。溶血チャンバー６２には、空気孔１１３ｂと、注入孔６４ｂと、流路２１１Ｂに連通されている出口部（図示せず）とが形成されている。流路２１１Ｂには、溶血チャンバー６２の近くにキャピラリーバルブ１２２ｂが形成されている。混合チャンバー６３には、空気孔１１３ｃと、流路２１１Ｃからなる延長流路に連通されている注入孔（図示せず）とが形成されている。
【０１５９】
血球分離チャンバー６１は、検査用デバイス６０の回転中心に面する上面と、上面と相対する下面とを有する。血球分離チャンバー６１の上面の位置は一点鎖線Ｌ１で表されている。血球分離チャンバー６１の下面の位置は一点鎖線Ｌ２で表されている。図８から明らかなように、記載を簡易化して、検査用デバイス６０の動作の全容に関する理解を助けるために、一点鎖線Ｌ１および一点鎖線Ｌ２を直線として描いている。実際には、血球分離チャンバー６１の上面および下面は、検査用デバイス６０の回転中心に対して同心円状に配置されている。したがって、一点鎖線Ｌ１、Ｌ２は、それぞれ検査用デバイス６０の回転中心に対して同心円状に配置された円弧である。
【０１６０】
本実施例の検査用デバイス６０においては、図８から明らかなように、流路２１１Ａは、血球分離チャンバー６１と連通される一端と、空気孔６６が形成された他端とを有する。血球分離チャンバー６１と空気孔６６との間に伸びる流路２１１Ａは、血球分離チャンバー６１の下面より検査用デバイス６０の回転中心から離隔する外周側（一点鎖線Ｌ２より検査用デバイス６０の回転中心から離隔する外周側）に配置される頂点部６５を含む。頂点部６５は、Ｕ字形の形状をなしている。同様に、図８から明らかなように、流路２１１Ｂは、溶血チャンバー６２と連通される一端と、空気孔６９が形成された他端とを有する。溶血チャンバー６２と空気孔６９との間に伸びる流路２１１Ｂは、逆Ｕ字形の１対の頂点部６８ａ、６８ｂと、Ｕ字型で頂点部６８ａ、６８ｂの間に位置する頂点部６７を有する。頂点部６７は、血球分離チャンバー６１と、溶血チャンバー６２と、流路２１１Ａの頂点部６５の下面より検査用デバイス６０の回転中心から離隔する外周側に配置される。頂点部６８ａ、６８ｂは、さらに頂点部６７より検査用デバイス６０の回転中心から離隔する外周側に配置される。
【０１６１】
流路２１１Ａの一部を形成する頂点部６５と頂点部６７とは、キャピラリーバルブ７１を介して互いに連通されている。頂点部６７と混合チャンバー６３とは、キャピラリーバルブ７１と別のキャピラリーバルブ７２を介して互いに連通されている。したがって、頂点部６７は、キャピラリーバルブ７１、７２間に位置する。流路２１１Ｃは、キャピラリーバルブ７２から混合チャンバー６３まで伸びており、キャピラリーバルブ７２を混合チャンバー６３に連通させる。
【０１６２】
すなわち、本実施例の検査用デバイスは、流路２１１Ｂからなる１つの流路と、流路２１１Ａおよび流路２１１Ｃからなる１つまたは２つの他の流路とを含み、流路２１１Ａ、２１１Ｂ、２１１Ｃは、交差し、それぞれの交差領域と連通され、流路２１１Ｂの交差領域に収容された液体を、流路２１１Ａと流路２１１Ｃの交差領域を介して混合チャンバー６３に向かう所定の方向に流動する液体と混合希釈させる。流路２１１Ｂは、流路２１１Ａおよび２１１Ｂのそれぞれの厚みが増加するキャピラリーバルブ７１の位置で流路２１１Ａと交差し連通される。
【０１６３】
本実施例の検査用デバイス６０は、例えば図６に示した回転装置７００に載置され、回転される。
【０１６４】
以下、図８を用いて、本発明の検査用デバイス６０の本実施例における動作と、本実施例の検査用デバイス６０によって実行される溶血液を混合希釈する方法の一実施例を説明する。
【０１６５】
本実施例では、使用された検体は、全血検体（全血検査に用いられる検体）であり、溶血液についてはエッペンドルフチューブ（エッペンドルフ社製の検査用試験管）中に入れられた血液１ｍｌに対して塩化カリウム１ｇを添加して、十分に混和することにより調整されたものを使用した。
【０１６６】
７０μｌの全血検体は、注入孔６４ａを介して血球分離チャンバー６１に導入され、先に調整された５μｌの溶血液は、注入孔６４ｂを介して溶血チャンバー６２に導入されて、血液検体および溶血液が検査用デバイス６０に導入された（血液導入工程、血液検体を溶血される第１の血液と、血漿液と血球に分離される第２の血液とに分ける分配工程）。血球分離チャンバー６１には空気孔１１３ａが形成されているため、全血検体は、血球分離チャンバー６１に容易に導入される。全血検体は、毛細管現象によって流路２１１Ａを介して浸透し、キャピラリーバルブ１２２ａで定常状態に達した。同様に、溶血チャンバー６２には空気孔１１３ｂが形成されているため、溶血液は、溶血チャンバー６２に容易に導入される。溶血液は、毛細管現象によって流路２１１Ｂを介して浸透し、キャピラリーバルブ１２２ｂで定常状態に達した。
【０１６７】
検査用デバイス６０は、回転装置７００によって４０００ｒｐｍで４分間回転された。検査用デバイス６０の回転中に、血球分離チャンバー６１に含まれた血液は血球と血漿液とに十分に分離された（血球分離工程（血球および血漿液取得工程））。さらに、検査用デバイス６０の回転中に、血球分離チャンバー６１に含まれた液体（血漿液）は、流路２１１Ａを介してキャピラリーバルブ１２２ａを越えて移送され、血球分離チャンバー６１に含まれた液体の液面の検査用デバイス６０の回転中心からの距離と、流路２１１Ａを介して移送された液体の液面の検査用デバイス６０の回転中心からの距離とがほぼ等しくなり、溶血チャンバー６２に含まれた液体（溶血液）は、流路２１１Ｂを介してキャピラリーバルブ１２２ｂを越えて移送され、溶血チャンバー６２に含まれた液体の液面の検査用デバイス６０の回転中心からの距離と、流路２１１Ｂを介して移送された液体の液面の検査用デバイス６０の回転中心からの距離とがほぼ等しくなった。
【０１６８】
検査用デバイス６０の回転停止後、血漿液は、さらに毛細管現象によって流路２１１Ａを介して毛細管現象によって空気孔６６まで移送され、液体（溶血液）は、さらに毛細管現象によって流路２１１Ｂを介して毛細管現象によって空気孔６９まで移送される。これに対して、流路２１１Ａおよび流路２１１Ｂは、キャピラリーバルブ７１、７２があるために、互いに干渉しなかった（検査用デバイス６０の回転停止後の血液検体および血漿液の移送工程（液体移送工程））。
【０１６９】
検査用デバイス６０は、回転装置７００によってさらに１分間連続的に回転されることにより、空気孔６６まで伸びる流路２１１Ａに含まれた血漿液は、キャピラリーバルブ７１、７２を越えて流路２１１Ｃを介して混合チャンバー６３に移送された。これにより、実質的に空気孔６９まで伸びる流路２１１Ｂの一部を形成する頂点部６７に含まれた溶血液は、流路２１１Ａおよび流路２１１Ｂと交差する流路２１１Ｃを介して移送された血漿液と混合希釈され、混合チャンバー６３に移送された。これにより、本実施例の検査用デバイス６０は、検体液体を内部に含む流路２１１Ｂからなる検体流路と、それぞれが希釈液を所定の方向に流動させる流路２１１Ａおよび流路２１１Ｃからなる１つ以上の希釈液移送流路とを含み、検体流路である流路２１１Ｂと１つ以上の希釈液移送流路である流路２１１Ａ、２１１Ｃが交差領域で交差し、検体流路である流路２１１Ｂの交差領域に収容された検体液体を、１つ以上の希釈液移送流路である流路２１１Ａ、２１１Ｃの交差領域を介して所定の方向に流動する希釈液と混合希釈させるため、本実施例の検査用デバイス６０は、溶血液を血漿液と高希釈比で混合希釈することを可能にする。
【０１７０】
さらに、本実施例では、希釈比が、検査用デバイス６０の回転中心より外周側（一点鎖線Ｌ２より検査用デバイス６０の回転中心から離隔する外周側）に配置された流路２１１Ａである流路統合領域の周りの領域に保持された検体の量と、キャピラリーバルブ７１、７２を越えて流路２１１Ｃを介して移送される希釈液の量との比に基づいて決定される。すなわち、希釈比は、例えば、検査用デバイス６０の回転中心から離隔する外周側に配置された流路２１１Ａの容量と、流路２１１Ａの厚みと、頂点部６７と頂点部６８ａ、６８ｂのそれぞれとの間の距離などに基づいて調整可能である。
【０１７１】
本実施例で記載してきたように、流路２１１Ａ、流路２１１Ｂおよび流路２１１Ｃは、それぞれの流路の近い箇所の厚みよりも大きな厚みを有するキャピラリーバルブ７１、７２によって形成される空間を介して互いが離れるように配置されているが、流路２１１Ａ、流路２１１Ｂおよび流路２１１Ｃが、キャピラリーバルブ７１、７２に加えて、毛細管現象による液体の移送を停止させるのに十分な距離で互いが離れるように配置されていてもよいことは述べるまでもない。このように構成された検査用デバイス６０は、回転停止中に、さらに効率的に希釈液がキャピラリーバルブ７１、７２を越えて混合チャンバーに移送されることを停止することができるため、希釈の精度が悪化することを阻止できる。
【０１７２】
以上、説明したように、本実施例の検査用デバイスおよび血液混合稀釈方法は、本実施例の検査用デバイスが、所定の条件下で回転および停止されることにより、溶血液と血液検体から分離された血漿液とを高希釈比で血漿液とを混合希釈することが可能である。
（実施例５）
図９は、本発明の第５実施例の検査用デバイスを示す概略図である。以下、まず図９を用いて本実施例の検査用デバイスの構成を示した後に、本実施例の検査用デバイスに検体を導入する動作を説明する。本実施例の構成要素のうち、上述の実施例と同様のものには同様の符号を付して説明を省略する。
【０１７３】
図９に示す本実施例の検査用デバイス７０は、血球分離チャンバー４１と、溶血チャンバー４２と、混合チャンバー４３とを含む。検査用デバイス７０は、図９に図示しない回転中心回りに回転可能である。上述の実施例の検査用デバイスと同様に、検査用デバイス７０は、図１に示した第１の流路パーツ１１と第２の流路パーツ１２とを適切な数だけ適宜接続することにより作製される。
【０１７４】
ここで、血球分離チャンバー４１には、空気孔１１３ａと、注入孔４４と、流路２１１Ａに連通されている第１の出口部（図示せず）と、流路２１１Ｄに連通されている第２の出口部（図示せず）とが形成されている。流路２１１Ａには、血球分離チャンバー４１の近くにキャピラリーバルブ１２２ａが形成されている。溶血チャンバー４２には、空気孔１１３ｂと、流路２１１Ｄに連通されている注入孔（図示せず）と、流路２１１Ｂに連通されている出口部（図示せず）とが形成されている。流路２１１Ｂには、溶血チャンバー４２の近くにキャピラリーバルブ１２２ｂが形成されている。混合チャンバー４３には、空気孔１１３ｃと、流路２１１Ａおよび流路２１１Ｂにそれぞれ連通されている注入孔（図示せず）とが形成されている。流路２１１Ａには、混合チャンバー４３の近くにキャピラリーバルブ１２２ｃが形成されている。流路２１１Ｂには、混合チャンバー４３の近くにキャピラリーバルブ１２２ｄが形成されている。すなわち、流路２１１Ａは２つのキャピラリーバルブ１２２ａ、１２２ｃを備え、流路２１１Ｂは２つのキャピラリーバルブ１２２ｂ、１２２ｄを備えている。
【０１７５】
第３実施例の検査用デバイス５０と同様に、溶血チャンバー４２は溶血剤を担持する。さらに、溶血チャンバー４２は溶血液中に含まれるヘモグロビン類を分解させる蛋白質分解酵素を担持する。蛋白質分解酵素は、例えば、蛋白質分解酵素を含んだ溶液を溶血チャンバー４２の内面に塗布し、溶血チャンバー４２の内面を乾燥させることによって担持されてもよい。
【０１７６】
血球分離チャンバー４１は、検査用デバイス７０の回転中心に面する上面と、上面と相対する下面とを有する。血球分離チャンバー４１の上面の位置は一点鎖線Ｌ１で表されている。血球分離チャンバー４１の下面の位置は一点鎖線Ｌ２で表されている。図９から明らかなように、記載を簡易化して、検査用デバイス７０の動作の全容に関する理解を助けるために、一点鎖線Ｌ１および一点鎖線Ｌ２を直線として描いている。実際には、血球分離チャンバー４１の上面および下面は、検査用デバイス７０の回転中心に対して同心円状に配置されている。したがって、一点鎖線Ｌ１、Ｌ２は、それぞれ検査用デバイス５０の回転中心に対して同心円状に配置された円弧である。血球分離チャンバー４１から、混合チャンバー４３からなる流路統合領域まで伸びた流路２１１Ａは、血球分離チャンバー４１の上面より検査用デバイス７０の回転中心に向かう内周側（一点鎖線Ｌ１より検査用デバイス７０の回転中心に向かう内周側）に配置される上昇部と、血球分離チャンバー４１の下面より検査用デバイス７０の回転中心から離隔する外周側（一点鎖線Ｌ２より検査用デバイス７０の回転中心から離隔する外周側）に配置される下降部とを含む。同様に、溶血チャンバー４２から混合チャンバー４３まで伸びた流路２１１Ｂは、血球分離チャンバー４１の上面より検査用デバイス７０の回転中心に向かう内周側（一点鎖線Ｌ１より検査用デバイス７０の回転中心に向かう内周側）に配置される上昇部と、血球分離チャンバー４１の下面より検査用デバイス７０の回転中心から離隔する外周側（一点鎖線Ｌ２より検査用デバイス７０の回転中心から離隔する外周側）に配置される下降部とを含む。
【０１７７】
血球分離チャンバー４１は溶血チャンバー４２と、血球分離チャンバー４１から溶血チャンバー４２まで伸びた流路２１１Ｄを介して連通されており、図９から明らかなように、流路２１１Ｄは、血球分離チャンバー４１の上面および溶血チャンバー４２の上面より検査用デバイス７０の回転中心に向かう内周側に配置される。このように構成された本実施例の検査用デバイス７０では、血球分離チャンバー４１に注入孔４４を介して注入された検体は、血球分離チャンバー４１が検体によってほぼ満杯になったときに、流路２１１Ｄを介して溶血チャンバー４２に移送されるため、血球分離チャンバー４１に１つの注入孔４４を介して注入された検体が、２つ以上のチャンバー、すなわち、血球分離チャンバー４１および溶血チャンバー４２に流入することが可能となる。
【０１７８】
以上、説明したように、このように構成された本実施例の検査用デバイス７０では、血球分離チャンバー４１が検体によってほぼ満杯になったときに、１つの注入孔４４を介して血球分離チャンバー４１に注入された検体が、流路２１１Ｄを介して溶血チャンバー４２および他のチャンバーにまで移送されることにより、注入孔４４を介して注入された検体が、複数のチャンバー、すなわち、血球分離チャンバー４１および溶血チャンバー４２のそれぞれに所定量分配されることが可能となるため、さらに検査用デバイスの適用範囲を拡大することが可能となる。さらに、このように構成された本実施例の検査用デバイス７０では、検査用デバイス７０に１つの注入孔４４を介して注入された検体が、複数のチャンバー、すなわち、血球分離チャンバー４１および溶血チャンバー４２に移送されるため、操作性に優れている。さらに、溶血チャンバー４２は、変性剤を凍結乾燥状態で担持するものであってもよい。変性剤を担持した溶血チャンバー４２は、注入された血液検体に含まれるヘモグロビン類を変性させることができる。
【０１７９】
以上、説明したように、このように構成された本実施例の検査用デバイス７０は、回転および停止されることにより、注入された血液検体から分離されて得られた血漿液と溶血液とを混合希釈することができる。このように構成された検査用デバイスでは、従来の検査用デバイスで必要不可欠であった、所定の希釈比で溶血液を希釈する準備工程を削除できるため、さらに、例えば、準備工程で必要となる緩衝液などの試薬が不要となる。本発明の検査用デバイスでは、追加の緩衝液を注入する必要がなく、例えば、検体から分離された血漿液が追加の緩衝液によって希釈されることがないので、本発明の検査用デバイスは、デバイス内に１回だけ注入された検体が、複数の検査に同時に用いられるという利点を有することとなる。本発明の検査用デバイスは、臨床検査分野、特にＰＯＣＴの分野に適用できる検査用デバイスおよび血液混合稀釈方法として有用である。
（実施例６）
本発明の第６実施例の検査用デバイスについて、図１０を用いて説明する。図１０は、本実施例の検査用デバイスの正面図である。
【０１８０】
以下、まず図１０を用いて本実施例の検査用デバイスの構成を示す。
【０１８１】
図１０に示す本実施例の検査用デバイス１１０は、血液検体を溶血させ、かつ、血球と血漿液とに分離させる血球分離チャンバー１２０と、血液検体の一部を構成する要素を希釈する希釈液を収容する希釈液注入チャンバー１３０と、血液検体を希釈液と混合希釈させる混合チャンバー１４０と、血球分離チャンバー１２０と連通される第１の端部および混合チャンバー１４０と連通される第２の端部を有し、血球分離チャンバー１２０と混合チャンバー１４０とを互いに連通させる流路１５０と、希釈液注入チャンバー１３０と連通される第１の端部および混合チャンバー１４０と連通される第２の端部を有し、希釈液注入チャンバー１３０と混合チャンバー１４０とを互いに連通させる流路１６０とを含む。
【０１８２】
検査用デバイス１１０は、図１０に図示しない回転中心回りに回転可能である。上述のように、検査用デバイス１１０は、図１に示した第１の流路パーツ１１と第２の流路パーツ１２とを適切な数だけ適宜接続することにより作製される。
【０１８３】
血球分離チャンバー１２０には、血液検体を注入する注入孔１２０ａと、空気孔１２０ｂと、流路１５０に連通されている出口部（図示せず）とが形成されている。血球分離チャンバー１２０は、例えば、溶血剤として塩化カリウムを担持している。本実施例では、塩化カリウムが溶血剤として用いられるが、本発明では、それぞれの赤血球膜に加わる浸透圧の変化によって、赤血球膜を破壊するように働くものであれば、溶血剤として界面活性剤、塩類などを用いてもよい。
【０１８４】
溶血後の血漿液に含まれるＨｂ類の濃度を少なくするためには、血漿液中に破壊されていない赤血球がある程度残留している状態を作り出すことが好ましい。以下、全血液検体を溶血するのに必要な量よりも少ない量の溶血剤を用いて血液検体を溶血することを、「部分溶血」または「血液検体を部分的に溶血する」という。以下、血液検体が部分的に溶血された後に得られた血漿液を、「部分溶血血漿液」という。
【０１８５】
本実施例では、血球分離チャンバー１２０に収容される塩化カリウム１２１の量は８００μｇであり、これは血液８０μｌに対して１％ｗ／ｖの量に等しい。１％ｗ／ｖの塩化カリウム１２１は、血液検体を１．６％（検体中のＨｂ類が１５ｇ／ｄｌの場合、０．２４ｇ／ｄｌに相当するＨｂ類が溶出する）部分的に溶血することができる。血球分離チャンバー１２０は、１０μｌの血液を収容可能な容積を有している。
【０１８６】
希釈液注入チャンバー１３０には、希釈液を注入する注入孔１３０ａと、空気孔１３０ｂと、流路１６０に連通されている出口部（図示せず）とが形成されている。希釈液注入チャンバー１３０は、８０μｌの希釈液を注入されることが可能な容積を有している。
【０１８７】
混合チャンバー１４０には、空気孔１４０ａと、流路１５０および流路１６０のそれぞれと連通される注入孔（図示せず）と、検査用デバイス１１０から混合された液が回収される取出口１４０ｂとが形成されている。混合チャンバー１４０の一部を構成する取出口１４０ｂは、粘着性テープ１４１によって塞がれている。混合チャンバー１４０は、８３μｌ以上の量の液体を注入されることが可能な容積を有している。
【０１８８】
流路１５０には、血球分離チャンバー１２０の近くにキャピラリーバルブ１５０ａが形成されている。キャピラリーバルブ１５０ａは、厚み（断面積）が流路１５０のキャピラリーバルブ１５０ａに近い箇所の厚みよりも大きい領域を形成する。流路１５０は、血球分離チャンバー１２０より検査用デバイス１１０の回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を備える逆Ｕ字形の屈曲部１５０ｂを含む。逆Ｕ字形の屈曲部１５０ｂは、キャピラリーバルブ１５０ａと混合チャンバー１４０との間に配置される。キャピラリーバルブ１５０ａを除く流路１５０の厚み（断面積）は、毛細管現象が起こる程度に十分に小さい。
【０１８９】
検査用デバイス１１０の回転中には、血球分離チャンバー１２０に収容された血液検体は、遠心力およびサイホン効果によってキャピラリーバルブ１５０ａを越えて流路１５０を介して移送される。検査用デバイス１１０の回転中に、血球分離チャンバー１２０に含まれている液体が流路１５０を介して血球分離チャンバー１２０の外部に移送されて、血球分離チャンバー１２０に７μｌの液体が残留するように、血球分離チャンバー１２０は、流路１５０の第１の端部と、検査用デバイス１１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置１５１で連通されている。
【０１９０】
流路１６０には、希釈液注入チャンバー１３０の近くにキャピラリーバルブ１６０ａが形成されている。キャピラリーバルブ１６０ａは、厚み（断面積）が流路１６０のキャピラリーバルブ１６０ａに近い箇所の厚みよりも大きい領域を形成する。流路１６０は、希釈液注入チャンバー１３０より検査用デバイス１１０の回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を備える逆Ｕ字形の屈曲部１６０ｂを含む。逆Ｕ字形の屈曲部１６０ｂは、キャピラリーバルブ１６０ａと混合チャンバー１４０との間に配置される。キャピラリーバルブ１６０ａを除く流路１６０の厚み（断面積）は、毛細管現象が起こる程度に十分に小さい。
【０１９１】
検査用デバイス１１０の回転中には、希釈液注入チャンバー１３０に収容された希釈液は、遠心力およびサイホン効果によってキャピラリーバルブ１６０ａを越えて流路１６０を介して移送される。検査用デバイス１１０の回転中に、希釈液注入チャンバー１３０に含まれている全ての液体が流路１６０を介して希釈液注入チャンバー１３０の外部に移送されるように、希釈液注入チャンバー１３０は、流路１６０の第１の端部と、検査用デバイス１１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置１６１で連通されている。
【０１９２】
次に、本実施例の検査用デバイス１１０によって実行される溶血液、すなわちＨｂ類、と希釈液との混合希釈を説明する。
【０１９３】
本実施例では、使用された検体は、全血検体（全血検査に用いられる検体）であり、希釈液としては、１％ドデシル硫酸ナトリウム（以下、単にＳＤＳと記す）水溶液が用いられた。
【０１９４】
１０μｌの全血検体は、まず注入孔１２０ａを介して血球分離チャンバー１２０に導入された。血球分離チャンバー１２０には空気孔１２０ｂが形成されているため、全血検体は、血球分離チャンバー１２０に容易に導入される。全血検体は、毛細管現象によって流路１５０を介して浸透し、キャピラリーバルブ１５０ａの手前の位置１５２で定常状態に達して停止した。同様に、８０μｌの１％ＳＤＳ水溶液は、注入孔１３０ａを介して希釈液注入チャンバー１３０に導入された。希釈液注入チャンバー１３０には空気孔１３０ｂが形成されているため、１％ＳＤＳ水溶液は、希釈液注入チャンバー１３０に容易に導入される。１％ＳＤＳ水溶液は、毛細管現象によって流路１６０を介して浸透し、キャピラリーバルブ１６０ａの手前の位置１６２で定常状態に達して停止した。１％ＳＤＳ水溶液は、ヘモグロビンテストワコー（和光純薬工業株式会社製）の試薬であり、Ｈｂを変性および酸化させてＨｂの吸収特性を安定させるものである。
【０１９５】
検査用デバイス１１０は、図６に示される回転装置７００のターンテーブル７１３に載置された。制御デバイス７１５はスピンドルモーター７１４を、検査用デバイス１１０がターンテーブル７１３とともに回転するように制御した。検査用デバイス１１０は、このように回転装置７００によって、４０００ｒｐｍで４分間回転された。
【０１９６】
検査用デバイス１１０の１回目の回転中に、検査用デバイス１１０に含まれた全血検体は、遠心力によって血球分離チャンバー１２０と流路１５０に保持され、血球分離チャンバー１２０に含まれた全血検体の液面と流路１５０に含まれた全血検体の液面とが、図１０に示した点線１５３の位置に揃った。すなわち、全血検体は、キャピラリーバルブ１５０ａを越えて流路１５０を介して混合チャンバー１４０に向かって移送され、逆Ｕ字形の屈曲部１５０ｂの手前の点線１５３に到達して停止した。図１０から明らかなように、記載を簡易化して、検査用デバイス１１０の動作の全容に関する理解を助けるために、点線１５３を直線として描いている。実際には、血球分離チャンバー１２０に含まれた全血検体の液面と流路１５０に含まれた全血検体の液面は、検査用デバイス１１０の回転中心に対して同心円状に配置されている。したがって、点線１５３は、検査用デバイス１１０の回転中心に対して同心円状に配置された円弧である。さらに、検査用デバイス１１０の１回目の回転中に、血球分離チャンバー１２０に含まれた全血検体は、血球分離チャンバー１２０に収容された塩化カリウム１２１で部分的に溶血され、血球と血漿液とに分離された。
【０１９７】
さらに、検査用デバイス１１０の１回目の回転中に、検査用デバイス１１０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液は、遠心力によって希釈液注入チャンバー１３０と流路１６０に保持され、希釈液注入チャンバー１３０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液の液面と流路１６０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液の液面とが、図１０に示した点線１６３の位置に揃った。すなわち、１％ＳＤＳ水溶液は、キャピラリーバルブ１６０ａを越えて流路１６０を介して混合チャンバー１４０に向かって移送され、逆Ｕ字形の屈曲部１６０ｂの手前の点線１６３に到達して停止した。図１０から明らかなように、記載を簡易化して、検査用デバイス１１０の動作の全容に関する理解を助けるために、点線１６３を直線として描いている。実際には、希釈液注入チャンバー１３０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液の液面と流路１６０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液の液面は、検査用デバイス１１０の回転中心に対して同心円状に配置されている。したがって、点線１６３は、検査用デバイス１１０の回転中心に対して同心円状に配置された円弧である。
【０１９８】
制御デバイス７１５は、スピンドルモーター７１４を、検査用デバイス２１０がターンテーブル７１３とともに停止するように制御した。検査用デバイス１１０は、このように停止された。
【０１９９】
検査用デバイス１１０の回転停止後、部分溶血液の血漿液（以下、単に部分溶血血漿液と記す）は、さらに毛細管現象によって流路１５０を介して逆Ｕ字形の屈曲部１５０ｂを越えて移送され、流路１５０と混合チャンバー１４０の間の境界位置１５４に到達した。混合チャンバー１４０には空気孔１４０ａが形成されているため、部分溶血血漿液は、毛細管現象によって流路１５０を介して容易に移送される。同様に、検査用デバイス１１０の回転停止後、１％ＳＤＳ水溶液は、さらに毛細管現象によって流路１６０を介して逆Ｕ字形の屈曲部１６０ｂを越えて移送され、流路１６０と混合チャンバー１４０の間の境界位置１６４に到達した。混合チャンバー１４０には空気孔１４０ａが形成されているため、１％ＳＤＳ水溶液は、毛細管現象によって流路１６０を介して容易に移送される。
【０２００】
検査用デバイス１１０は、回転装置７００によって再び１分間１５００ｒｐｍで回転された。
【０２０１】
検査用デバイス１１０の２回目の回転中には、血球分離チャンバー１２０に収容された部分溶血血漿液は、遠心力およびサイホン効果によって流路１５０を介して血球分離チャンバー１２０から混合チャンバー１４０まで移送される。既に述べたように、検査用デバイス１１０の回転中に、血球分離チャンバー１２０に含まれている液体が流路１５０を介して血球分離チャンバー１２０の外部に移送されて、血球分離チャンバー１２０に７μｌの液体が残留するように、血球分離チャンバー１２０は、流路１５０の第１の端部と、検査用デバイス１１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置１５１で連通されている。血球分離チャンバー１２０に注入された全血検体の量は１０μｌであったため、約３μｌの部分溶血血漿液が流路１５０を介して混合チャンバー１４０に移送された。
【０２０２】
さらに、検査用デバイス１１０の２回目の回転中には、検査用デバイス１１０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液は、遠心力およびサイホン効果によって流路１６０を介して希釈液注入チャンバー１３０から混合チャンバー１４０まで移送された。既に述べたように、検査用デバイス１１０の回転中に、希釈液注入チャンバー１３０に含まれている全ての液体が流路１６０を介して希釈液注入チャンバー１３０の外部に移送されるように、希釈液注入チャンバー１３０は、流路１６０の第１の端部と、検査用デバイス１１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置１６１で連通されている。希釈液注入チャンバー１３０に注入された１％ＳＤＳ水溶液の量は８０μｌであったため、約８０μｌの１％ＳＤＳ水溶液が流路１６０を介して混合チャンバー１４０に移送された。
【０２０３】
制御デバイス７１５は、スピンドルモーター７１４を、検査用デバイス２１０がターンテーブル７１３とともに停止するように制御した。検査用デバイス１１０は、このように停止された。部分溶血血漿液と１％ＳＤＳ水溶液がこのように混合チャンバー１４０で互いに混合されることにより、希釈液が得られた。
【０２０４】
粘着性テープ１４１は、混合チャンバー１４０の一部を形成する取出口１４０ｂから取り除かれ、例えば、ガラス管やピペットによって、混合チャンバー１４０から取出口１４０ｂを介して必要量の希釈された液が回収された。
【０２０５】
混合チャンバー１４０では、希釈比２８で、約３μｌの部分溶血血漿液が、約８０μｌの１％ＳＤＳ水溶液で混合希釈された。本実施例では、１．６％の部分溶血血漿液が血球分離チャンバー１２０に注入された。すなわち、溶血液は希釈比６２．５で既に希釈されていた。したがって、本実施例の検査用デバイス１１０は、約１７５０の希釈比で溶血液を希釈することが可能である。
【０２０６】
Ｈｂ濃度は、図１１および図１２に示される検量線を用いることによって算出可能である。図１１は、ＳＬＳ（ラウリル硫酸ナトリウム）−Ｈｂ法（和光純薬工業株式会社製Ｈｂ測定用キットであるヘモグロビンテストワコー）の検量線を示すグラフである。図１１に示した検量線は、以下の方法で作成された。まず、それぞれ希釈比が異なる複数の標準Ｈｂ試薬（それぞれ１μｌ）が、それぞれ１％ＳＬＳ水溶液（それぞれ４μｌ）に加えられ、十分に混合されて、標準Ｈｂ試薬の希釈系列が作成された。次に、波長５４０ｎｍでの吸光度が標準Ｈｂ試薬の希釈系列に対して測定された。得られた測定値を用いて、Ｈｂ濃度に対する（波長５４０ｎｍでの）吸光度の検量線が作成された。同様に、図１２に示した検量線は、以下の方法で作成された。まず、それぞれ希釈比が異なる複数の標準Ｈｂ試薬（それぞれ２７μｌ）が、それぞれ緩衝液（５９０μｌ）とラテックス標識抗Ｈｂ抗体液（５０μｌ）の混合液に加えられ、十分に混合されて、標準Ｈｂ試薬の希釈系列が作成された。次に、波長６６０ｎｍでの吸光度が標準Ｈｂ試薬の希釈系列に対して測定された。本実施例では、図１２に示した検量線は、エクステル・ヘモオートのＬｘ凝集試薬によるラテックス免疫凝集測定キット（協和メデックス株式会社製）を用いて作成された。図１１および図１２に示した検量線を用いて、各検体についてＨｂ濃度が算出された。例えば、Ｈｂ濃度の高い検体に対しては、図１１に示した検量線を使用して、ＳＬＳ−Ｈｂ法を用いることが好ましい。これに対して、Ｈｂ濃度の低い検体に対しては、図１２に示した検量線を使用して、ラテックス免疫凝集法を用いることが好ましい。図１２に示した検量線は、超高感度測定を実行するために作成されたものであるため、図１２を用いて測定される検体は、予め適切に希釈されている必要がある。
【０２０７】
以上、説明したように、本実施例の検査用デバイス１１０は、血液検体および希釈液を収容しているため、所定の条件下で回転および停止されることにより、例えば、血球分離工程、溶血工程および希釈工程などの前処理を検査用デバイス１１０内で簡易に実施できる。したがって、本実施例の検査用デバイス１１０は、操作性に優れており、廃液を出さない。さらに、本実施例の検査用デバイス１１０は、廃液を出さないため、ユーザや環境にも優しい。
【０２０８】
さらに、例えば、１μｌの血液検体を従来の希釈方法で希釈比１７５０で希釈するに当たっては、１．７５ｍｌの希釈液が必要となるため、従来の小型の検査用デバイスは、ごく少量の血液検体であっても１回の操作では希釈できない。これに対して、本実施例の検査用デバイス１１０は、１μｌの血液検体を非常に少量の８０μｌの希釈液を用いて希釈比１７５０で希釈できるため、血液検体を１回の操作で希釈できる。したがって、本実施例の検査用デバイス１１０は、操作性に優れており、廃液を出さず、小型化が可能である。
【０２０９】
さらに、本実施例の検査用デバイス１１０は、内部に収容された血液検体を希釈するのに必要な量よりも多い８０μｌ以上の希釈液を内部に導入することが可能な容積を有しているため、希釈液が検査用デバイス本体から溢れ出ることがない。
【０２１０】
さらに、本実施例の検査用デバイス１１０は、血球分離チャンバー１２０に収容された１０μｌの全血液検体を溶血するのに十分な量ではない８００μｇの塩化カリウム１２１を収容している。すなわち、本実施例の検査用デバイス１１０は、血球分離チャンバー１２０に収容された血液検体を部分的にだけ溶血する少量の塩化カリウム１２１を収容して、製造される溶血液の量を減らすことにより、内部に注入される希釈液の量を低減することができる。
【０２１１】
さらに、本実施例の検査用デバイス１１０は、混合チャンバー１４０に含まれた混合希釈された血漿液中のＨｂ濃度が希釈比２５０以上で希釈されるように、血球分離チャンバー１２０に収容された血液検体を部分的に溶血する少量の８００μｇの塩化カリウム１２１を収容している。したがって、本実施例の検査用デバイス１１０によって、混合チャンバー１４０から取得された混合希釈液を比色法によって、直ちに測定することが可能となる。さらに、本実施例の検査用デバイス１１０は、混合チャンバー１４０に含まれた混合希釈された血漿液中のＨｂ濃度が希釈比５００以上で希釈されるように、血球分離チャンバー１２０に収容された血液検体を部分的に溶血する少量の８００μｇの塩化カリウム１２１を収容している。したがって、本実施例の検査用デバイス１１０によって、混合チャンバー１４０から取得された混合希釈液に対して、直ちに免疫競合系測定を実施できる。
【０２１２】
さらに、本実施例の検査用デバイス１１０は、流路およびチャンバーに形成された複数の空気孔を有している。したがって、本実施例の検査用デバイス１１０は、流路およびチャンバーを介する液体の流れを良くすることができるので、チャンバー間を液体が容易に流動することができる。
【０２１３】
本実施例の検査用デバイス１１０は、血球分離チャンバー１２０より検査用デバイス１１０の回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を備える逆Ｕ字形の屈曲部１５０ｂを有する流路１５０を含み、毛細管現象によって流路１５０を介して部分溶血血漿液を移送させる。したがって、本実施例の検査用デバイス１１０は、回転中に、血球分離チャンバー１２０に部分溶血血漿液を保持することができる。これに対して、本実施例の検査用デバイス１１０が回転を停止され、部分溶血血漿液が遠心力から解放されたときに、本実施例の検査用デバイス１１０は、血球分離チャンバー１２０から流路１５０を介して部分溶血血漿液を移送させることができる。
【０２１４】
さらに、本実施例の検査用デバイス１１０は、希釈液注入チャンバー１３０より検査用デバイス１１０の回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を備える逆Ｕ字形の屈曲部１６０ｂを有する流路１６０を含み、毛細管現象によって流路１６０を介して希釈液を移送させる。したがって、本実施例の検査用デバイス１１０は、回転中に、希釈液注入チャンバー１３０に希釈液を保持することができる。これに対して、本実施例の検査用デバイス１１０が回転を停止され、希釈液が遠心力から解放されたときに、本実施例の検査用デバイス１１０は、希釈液注入チャンバー１３０から流路１６０を介して希釈液を移送させることができる。
【０２１５】
上述のように、本実施例の検査用デバイス１１０においては、検査用デバイス本体に注入される溶血剤の量を調整することによって、溶血液が高希釈比で希釈される。しかしながら、さらに高い希釈比、例えば５０００、で溶血液を希釈するためには、本実施例の検査用デバイス１１０は、０．６％の部分溶血液を必要とするため、希釈の精度が悪化する。したがって、希釈比が非常に高い場合には、本実施例の検査用デバイス１１０に代えて、実施例７の検査用デバイスを採用することが好ましい。
（実施例７）
本発明の第７実施例の検査用デバイスについて図１３を用いて説明する。図１３は、本実施例の検査用デバイスの正面図である。本実施例の検査用デバイスは、血液検体を構成する赤血球に含まれるＨｂ類を希釈比約５０００で希釈するように設計されている。
【０２１６】
以下、まず図１３を用いて本実施例の検査用デバイスの構成を示す。
【０２１７】
図１３に示す本実施例の検査用デバイス２１０は、血液検体を部分的に溶血させ、かつ、血球と血漿液とに分離させる血球分離チャンバー２２０と、希釈液が注入され、血液検体を構成する赤血球に含まれるＨｂ類を希釈する希釈液注入チャンバー２３０と、Ｈｂ類を希釈する希釈工程の実行中に、希釈液の流れと部分溶血血漿液の流れとの同期をとる同期用チャンバー２４０と、血球分離チャンバー２２０から移送された所定量、例えば、１μｌの部分溶血血漿液を取得する血漿液サンプリングチャンバー２５０と、血漿液サンプリングチャンバー２５０から溢れ出た液体を収容するオーバーフローチャンバー２６０と、部分溶血血漿液を希釈液と混合希釈させる混合チャンバー２７０とを含む。本実施例の検査用デバイス２１０は、さらに、血球分離チャンバー２２０と連通される第１の端部および血漿液サンプリングチャンバー２５０と連通される第２の端部を有し、血球分離チャンバー２２０と血漿液サンプリングチャンバー２５０とを互いに連通させる流路２８０と、希釈液注入チャンバー２３０と連通される第１の端部および同期用チャンバー２４０と連通される第２の端部を有し、希釈液注入チャンバー２３０と同期用チャンバー２４０とを互いに連通させる流路２９０と、同期用チャンバー２４０と連通される第１の端部および血漿液サンプリングチャンバー２５０と連通される第２の端部を有し、同期用チャンバー２４０と血漿液サンプリングチャンバー２５０とを互いに連通させる流路３００と、血漿液サンプリングチャンバー２５０と連通される第１の端部およびオーバーフローチャンバー２６０と連通される第２の端部を有し、血漿液サンプリングチャンバー２５０とオーバーフローチャンバー２６０とを互いに連通させる流路３１０と、血漿液サンプリングチャンバー２５０と連通される第１の端部および混合チャンバー２７０と連通される第２の端部を有し、血漿液サンプリングチャンバー２５０と混合チャンバー２７０とを互いに連通させる流路３２０とを含む。
【０２１８】
検査用デバイス２１０は、図１３に図示しない回転中心回りに回転可能である。上述のように、検査用デバイス２１０は、図１に示した第１の流路パーツ１１と第２の流路パーツ１２とを適切な数だけ適宜接続することにより作製される。
【０２１９】
血球分離チャンバー２２０には、血液検体を注入する注入孔２２０ａと、空気孔２２０ｂと、流路２８０に連通されている出口部（図示せず）とが形成されている。血球分離チャンバー２２０は、例えば、溶血剤として塩化カリウム２２１を担持している。本実施例では、塩化カリウム２２１が溶血剤として用いられるが、それぞれの赤血球膜に加わる浸透圧の変化によって、赤血球膜を破壊するように働くものであれば、溶血剤として界面活性剤、塩類などを用いてもよい。
【０２２０】
本実施例では、血球分離チャンバー２２０に収容される塩化カリウム２２１の量は８００μｇであり、これは血液８０μｌに対して１％ｗ／ｖの量に等しい。１％ｗ／ｖの塩化カリウム２２１は、血液検体を１．６％（検体中のＨｂ類が１５ｇ／ｄｌの場合、０．２４ｇ／ｄｌに相当するＨｂ類が溶出する）部分的に溶血することができる。血球分離チャンバー２２０は、１０μｌの血液を収容可能な容積を有している。
【０２２１】
希釈液注入チャンバー２３０には、希釈液を注入する注入孔２３０ａと、空気孔２３０ｂと、流路２９０に連通されている出口部（図示せず）とが形成されている。希釈液注入チャンバー２３０は、８０μｌの希釈液を注入されることが可能な容積を有している。
【０２２２】
同期用チャンバー２４０には、流路２９０と連通される注入孔（図示せず）と、流路３００に連通される出口部（図示せず）と、空気孔２４０ａとが形成されている。同期用チャンバー２４０は、８０μｌの希釈液を注入されることが可能な容積を有している。
【０２２３】
血漿液サンプリングチャンバー２５０には、流路３００と連通される第1の注入孔（図示せず）と、流路２８０と連通される第２の注入孔（図示せず）と、流路３２０に連通される出口部（図示せず）と、空気孔２５０ａとが形成されている。血漿液サンプリングチャンバー２５０は、１μｌ以上の液体を注入されることが可能な容積を有している。
【０２２４】
オーバーフローチャンバー２６０には、流路３１０と連通される注入孔（図示せず）と、空気孔２６０ａとを有する。オーバーフローチャンバー２６０は、２μｌ以上の部分溶血血漿液を注入されることが可能な容積を有している。
【０２２５】
混合チャンバー２７０には、空気孔２７０ａと、流路３２０と連通される注入孔（図示せず）と、混合された液体が検査用デバイス２１０外から取り出される取出口２７０ｂとが形成されている。混合チャンバー２７０の一部を構成する取出口２７０ｂは、粘着性テープ２７１によって塞がれている。混合チャンバー２７０は、８１μｌ以上の液体を注入されることが可能な容積を有している。
【０２２６】
流路２８０には、血球分離チャンバー２２０の近くにキャピラリーバルブ２８０ａが形成されている。キャピラリーバルブ２８０ａは、流路２８０のキャピラリーバルブ２８０ａに近い箇所の厚み（断面積）よりも厚みの大きい領域を流路２８０中に形成している。流路２８０は、血球分離チャンバー２２０より検査用デバイス２１０の回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を備える逆Ｕ字形の屈曲部２８０ｂを含む。逆Ｕ字形の屈曲部２８０ｂは、キャピラリーバルブ２８０ａと混合チャンバー２７０との間に配置される。キャピラリーバルブ２８０ａを除く流路２８０の厚み（断面積）は、毛細管現象が起こる程度に十分に小さい。
【０２２７】
検査用デバイス２１０の回転中には、血球分離チャンバー２２０に収容された液体に及ぼされる遠心力は、液体を流路２８０を介して血球分離チャンバー２２０外に流出させる。検査用デバイス２１０の回転中に、血球分離チャンバー２２０に含まれている液体が、遠心力およびサイホン効果によって流路２８０を介して血球分離チャンバー２２０外に移送されて、血球分離チャンバー２２０に７μｌの液体が残留するように、血球分離チャンバー２２０は、流路２８０の第１の端部と、検査用デバイス２１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置２８１で連通されている。
【０２２８】
流路２９０には、希釈液注入チャンバー２３０の近くにキャピラリーバルブ２９０ａが形成されている。キャピラリーバルブ２９０ａは、流路２９０のキャピラリーバルブ２９０ａに近い箇所の厚み（断面積）よりも厚みの大きい領域を流路２９０中に形成している。流路２９０は、希釈液注入チャンバー２３０より検査用デバイス２１０の回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を備える逆Ｕ字形の屈曲部２９０ｂを含む。逆Ｕ字形の屈曲部２９０ｂは、キャピラリーバルブ２９０ａと同期用チャンバー２４０との間に配置される。キャピラリーバルブ２９０ａを除く流路２９０の厚み（断面積）は、毛細管現象が起こる程度に十分に小さい。
【０２２９】
検査用デバイス２１０の回転中には、希釈液注入チャンバー２３０に収容された液体に及ぼされる遠心力は、液体を流路２９０を介して希釈液注入チャンバー２３０外に流出させる。検査用デバイス２１０の回転中に、希釈液注入チャンバー２３０に含まれている全ての液体が、遠心力およびサイホン効果によって流路２９０を介して希釈液注入チャンバー２３０外に移送されるように、希釈液注入チャンバー２３０は、流路２９０の第１の端部と、検査用デバイス２１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置２９１で連通されている。
【０２３０】
流路３００は、同期用チャンバー２４０より検査用デバイス２１０の回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を備える逆Ｕ字形の屈曲部３００ｂを含む。流路３００の厚み（断面積）は、毛細管現象が起こる程度に十分に小さい。
【０２３１】
検査用デバイス２１０の回転中には、同期用チャンバー２４０に収容された液体に及ぼされる遠心力は、液体を流路３００を介して同期用チャンバー２４０外に流出させる。検査用デバイス２１０の回転中に、同期用チャンバー２４０に含まれている全ての液体が、遠心力およびサイホン効果によって流路２９０を介して同期用チャンバー２４０外に移送されるように、同期用チャンバー２４０は、流路３００の第１の端部と、検査用デバイス２１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置３０１で連通されている。
【０２３２】
流路３１０は、血漿液サンプリングチャンバー２５０からオーバーフローチャンバー２６０まで伸びている。流路３１０の厚み（断面積）は、毛細管現象が起こる程度に十分に小さい。
【０２３３】
検査用デバイス２１０の回転中には、血漿液サンプリングチャンバー２５０に収容された液体に及ぼされる遠心力は、液体を流路３１０を介して血漿液サンプリングチャンバー２５０外に流出させる。検査用デバイス２１０の回転中に、血漿液サンプリングチャンバー２５０に含まれている液体が、遠心力およびサイホン効果によって流路３１０を介して血漿液サンプリングチャンバー２５０外に移送されて、血漿液サンプリングチャンバー２５０に１μｌの液体が残留するように、血漿液サンプリングチャンバー２５０は、流路３１０の第１の端部と、検査用デバイス２１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置３１１で連通されている。
【０２３４】
流路３２０は、血漿液サンプリングチャンバー２５０から混合チャンバー２７０まで伸びている。
【０２３５】
流路３２０は、血漿液サンプリングチャンバー２５０より検査用デバイス２１０の回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を備える逆Ｕ字形の屈曲部３２０ｂを含む。流路３２０の厚み（断面積）は、毛細管現象が起こる程度に十分に小さい。さらに、流路３２０の厚みと形状は、検査用デバイス２１０の回転中に、血漿液サンプリングチャンバー２５０から混合チャンバー２７０に移送される液体の量が、同期用チャンバー２４０から血漿液サンプリングチャンバー２５０に移送される液体の量と実質的に等しくなるように設計されている。
【０２３６】
検査用デバイス２１０の回転中に、血漿液サンプリングチャンバー２５０に含まれている全ての液体が、遠心力およびサイホン効果によって流路３２０を介して血漿液サンプリングチャンバー２５０外に移送されて、血漿液サンプリングチャンバー２５０に１μｌの液体が残留するように、血漿液サンプリングチャンバー２５０は、流路３２０の第１の端部と、検査用デバイス２１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置３２１で連通されている。
【０２３７】
以下に、本実施例の検査用デバイス２１０によって実行される溶血液、すなわちＨｂ類、を希釈液と混合希釈する方法を説明する。
【０２３８】
本実施例では、使用された検体は、全血検体（全血検査に用いられる検体）であり、希釈液としては、１％ＳＤＳ水溶液が用いられた。
【０２３９】
１０μｌの全血検体は、まず注入孔２２０ａを介して血球分離チャンバー２２０に導入された。血球分離チャンバー２２０には空気孔２２０ｂが形成されているため、全血検体は、血球分離チャンバー２２０に容易に導入される。全血検体は、毛細管現象によって流路２８０を介して浸透し、キャピラリーバルブ２８０ａの手前の位置２８２で定常状態に達して停止した。同様に、８０μｌの１％ＳＤＳ水溶液は、注入孔２３０ａを介して希釈液注入チャンバー１３０に導入された。希釈液注入チャンバー２３０には空気孔２３０ｂが形成されているため、１％ＳＤＳ水溶液は、希釈液注入チャンバー２３０に容易に導入される。１％ＳＤＳ水溶液は、毛細管現象によって流路２９０を介して浸透し、キャピラリーバルブ２９０ａの手前の位置２９２で定常状態に達して停止した。
【０２４０】
検査用デバイス２１０は、図６に示した回転装置７００のターンテーブル７１３に載置された。制御デバイス７１５はスピンドルモーター７１４を、検査用デバイス１１０がターンテーブル７１３とともに回転するように制御した。検査用デバイス２１０は、このように回転装置７００によって、４０００ｒｐｍで４分間回転された。
【０２４１】
検査用デバイス２１０の１回目の回転中に、検査用デバイス２１０に含まれた全血検体は、遠心力によって血球分離チャンバー２２０と流路２８０に保持され、血球分離チャンバー２２０に含まれた全血検体の液面と流路２８０に含まれた全血検体の液面とが、図１３に示した点線２８３の位置に揃った。すなわち、全血検体は、キャピラリーバルブ２８０ａを越えて流路２８０を介して血漿液サンプリングチャンバー２５０に向かって移送され、逆Ｕ字形の屈曲部２８０ｂの手前の点線２８３に到達して停止した。図１３から明らかなように、記載を簡易化して、検査用デバイス２１０の動作の全容に関する理解を助けるために、点線２８３を直線として描いている。実際には、血球分離チャンバー２２０に含まれた全血検体の液面と流路２８０に含まれた全血検体の液面は、検査用デバイス２１０の回転中心に対して同心円状に配置されている。したがって、点線２８３は、検査用デバイス２１０の回転中心に対して同心円状に配置された円弧である。さらに、検査用デバイス２１０の１回目の回転中に、血球分離チャンバー２２０に含まれた全血検体は、血球分離チャンバー２２０に収容された塩化カリウム２２１で部分的に溶血され、血球と血漿液とに分離された。
【０２４２】
さらに、検査用デバイス２１０の１回目の回転中に、検査用デバイス２１０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液は、遠心力によって希釈液注入チャンバー２３０と流路２９０に保持され、希釈液注入チャンバー２３０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液の液面と流路２９０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液の液面とが、図１３に示した点線２９３の位置に揃った。すなわち、１％ＳＤＳ水溶液は、キャピラリーバルブ２９０ａを越えて流路２９０を介して同期用チャンバー２４０に向かって移送され、逆Ｕ字形の屈曲部２９０ｂの手前の点線２９３に到達して停止した。図１３から明らかなように、記載を簡易化して、検査用デバイス２１０の動作の全容に関する理解を助けるために、点線２９３を直線として描いている。実際には、希釈液注入チャンバー２３０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液の液面と流路２９０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液の液面は、検査用デバイス２１０の回転中心に対して同心円状に配置されている。したがって、点線２９３は、検査用デバイス２１０の回転中心に対して同心円状に配置された円弧である。
【０２４３】
制御デバイス７１５は、スピンドルモーター７１４を、検査用デバイス２１０がターンテーブル７１３とともに停止するように制御した。検査用デバイス２１０は、このように停止された。
【０２４４】
検査用デバイス２１０の回転停止後、部分的に溶血された血漿液（以下、単に部分溶血血漿液と記す）は、さらに毛細管現象によって流路２８０を介して逆Ｕ字形の屈曲部２８０ｂを越えて移送され、流路２８０と血漿液サンプリングチャンバー２５０の間の境界位置２８４に到達した。血漿液サンプリングチャンバー２５０には空気孔２５０ａが形成されているため、部分溶血血漿液は、毛細管現象によって流路２８０を介して容易に移送される。同様に、検査用デバイス２１０の回転停止後、１％ＳＤＳ水溶液は、さらに毛細管現象によって流路２９０を介して逆Ｕ字形の屈曲部２９０ｂを越えて移送され、流路２９０と同期用チャンバー２４０の間の境界位置２９４に到達した。同期用チャンバー２４０には空気孔２４０ａが形成されているため、１％ＳＤＳ水溶液は、毛細管現象によって流路２９０を介して容易に移送される。
【０２４５】
検査用デバイス２１０は、回転装置７００によって再び１分間１５００ｒｐｍで回転された。
【０２４６】
検査用デバイス２１０の２回目の回転中には、検査用デバイス２１０に収容された部分溶血血漿液は、遠心力およびサイホン効果によって流路２８０を介して血球分離チャンバー２２０から血漿液サンプリングチャンバー２５０まで移送される。
【０２４７】
既に述べたように、検査用デバイス２１０の回転中に、血球分離チャンバー２２０に含まれている液体が流路２８０を介して血球分離チャンバー２２０外に移送されて、血球分離チャンバー２２０に７μｌの液体が残留するように、血球分離チャンバー２２０は、流路２８０の第１の端部と、検査用デバイス２１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置２８１で連通されている。血球分離チャンバー２２０に注入された全血検体の量は１０μｌであったため、約３μｌの部分溶血血漿液が血漿液サンプリングチャンバー２５０に移送された。
【０２４８】
既に述べたように、検査用デバイス２１０の回転中に、血漿液サンプリングチャンバー２５０に含まれている液体が、遠心力およびサイホン効果によって、流路３１０を介して血漿液サンプリングチャンバー２５０外に移送されて、血漿液サンプリングチャンバー２５０に１μｌの液体が残留するように、血漿液サンプリングチャンバー２５０は、流路３１０の第１の端部と、検査用デバイス２１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置３１１で連通されている。血漿液サンプリングチャンバー２５０に注入された部分溶血血漿液の量は３μｌであったため、約２μｌの部分溶血血漿液が流路３１０を介して血漿液サンプリングチャンバー２５０外に移送され、約１μｌの部分溶血血漿液が血漿液サンプリングチャンバー２５０に残留した。
【０２４９】
血漿液サンプリングチャンバー２５０に残留した部分溶血血漿液は、遠心力によって血漿液サンプリングチャンバー２５０および流路３２０に保持され、血漿液サンプリングチャンバー２５０に含まれた部分溶血血漿液の液面と流路３２０に含まれた部分溶血血漿液の液面とが、図１３に示した点線３２３の位置に揃った。すなわち、部分溶血血漿液は、流路３２０を介して移送され、逆Ｕ字形の屈曲部３２０ｂの手前の点線３２３に到達して停止した。
【０２５０】
さらに、検査用デバイス２１０の２回目の回転中には、検査用デバイス２１０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液は、遠心力およびサイホン効果によって流路２９０を介して希釈液注入チャンバー２３０から同期用チャンバー２４０まで移送される。既に述べたように、検査用デバイス２１０の回転中に、希釈液注入チャンバー２３０に含まれている全ての希釈液が流路２９０を介して希釈液注入チャンバー２３０外に移送されるように、希釈液注入チャンバー２３０は、流路２９０の第１の端部と、検査用デバイス２１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置２９１で連通されている。希釈液注入チャンバー２３０に注入された１％ＳＤＳ水溶液の量は８０μｌであったため、約８０μｌの１％ＳＤＳ水溶液が流路２９０を介して同期用チャンバー２４０に移送された。
【０２５１】
流路２９０を介して希釈液注入チャンバー２３０から同期用チャンバー２４０に移送された１％ＳＤＳ水溶液は、遠心力によって同期用チャンバー２４０および流路３００に保持され、同期用チャンバー２４０に含まれた１％ＳＤＳ水溶液の液面と流路３００に含まれた１％ＳＤＳ水溶液の液面とが、図１３に示した点線３０３の位置に揃った。すなわち、１％ＳＤＳ水溶液は、血漿液サンプリングチャンバー２５０に向かって流路３００を介して移送され、逆Ｕ字形の屈曲部３００ｂの手前の点線３０３に到達して停止した。
【０２５２】
制御デバイス７１５はスピンドルモーター７１４を、検査用デバイス２１０がターンテーブル７１３とともに停止するように制御した。このようにして、検査用デバイス２１０の第２回目の回転が停止した。流路３２０に含まれた部分溶血血漿液は、毛細管現象によって逆Ｕ字形の屈曲部１６０ｂを介して移送され、流路３２０と混合チャンバー２７０の間の境界位置３２４に到達した。同様に、流路３００に含まれた１％ＳＤＳ水溶液は、毛細管現象によって逆Ｕ字形の屈曲部３００ｂを介して移送され、流路３００と血漿液サンプリングチャンバー２５０の間の境界位置３０４に到達した。
【０２５３】
制御デバイス７１５は再びスピンドルモーター７１４を、検査用デバイス１１０がターンテーブル７１３とともに回転するように制御した。検査用デバイス２１０は、このように回転装置７００によって、１５００ｒｐｍで１分間回転された。
【０２５４】
検査用デバイス２１０の３回目の回転中には、血漿液サンプリングチャンバー２５０に収容された液体は、遠心力およびサイホン効果によって、流路３２０を介して血漿液サンプリングチャンバー２５０から混合チャンバー２７０まで移送される。同時に、検査用デバイス２１０に収容された液体は、遠心力およびサイホン効果によって、流路３００を介して同期用チャンバー２４０から血漿液サンプリングチャンバー２５０まで移送される。
【０２５５】
既に述べたように、流路３２０の厚みと形状は、検査用デバイス２１０の回転中に、血漿液サンプリングチャンバー２５０から混合チャンバー２７０に移送される液体の総量が、同期用チャンバー２４０から血漿液サンプリングチャンバー２５０に移送される液体の総量と実質的に等しくなるように設計されている。本実施例では、血漿液サンプリングチャンバー２５０に含まれた部分溶血血漿液が、同期用チャンバー２４０から移送された液体によって流出されるように、血漿液サンプリングチャンバー２５０は、同期用チャンバー２４０よりも容量を小さく作製されている。
【０２５６】
さらに、検査用デバイス２１０の回転中に、同期用チャンバー２４０に含まれている全ての液体が、遠心力およびサイホン効果によって、流路３００を介して同期用チャンバー２４０外に移送されるように、同期用チャンバー２４０は、流路３００の第１の端部と、検査用デバイス２１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置３０１で連通されており、検査用デバイス２１０の回転中に、血漿液サンプリングチャンバー２５０に含まれている全ての液体が、遠心力およびサイホン効果によって、流路３２０を介して血漿液サンプリングチャンバー２５０外に移送されるように、血漿液サンプリングチャンバー２５０は、流路３２０の第１の端部と、検査用デバイス２１０の回転中心から所定距離だけ離隔された境界位置３２１で連通されている。検査用デバイス２１０が２回目に停止した後に、血漿液サンプリングチャンバー２５０および流路３２０に含まれた約１μｌの部分溶血血漿液、および、検査用デバイス２１０が２回目に停止した後に、同期用チャンバー２４０および流路３００に含まれた約８０μｌの１％ＳＤＳ水溶液は、全て流路３２０を介して、混合チャンバー２７０に移送された。
【０２５７】
制御デバイス７１５はスピンドルモーター７１４を、検査用デバイス２１０がターンテーブル７１３とともに停止するように制御した。このようにして、検査用デバイス２１０の第３回目の回転が停止した。部分溶血血漿液と１％ＳＤＳ水溶液がこのように混合チャンバー２７０で互いに混合されることにより、希釈液が得られた。
【０２５８】
粘着性テープ２７１は、混合チャンバー２７０の一部を形成する取出口２７０ｂから取り除かれ、例えば、ガラス管やピペットによって、混合チャンバー２７０から取出口２７０ｂを介して必要量の希釈された液体が回収された。
【０２５９】
混合チャンバー２７０では、希釈比８１で、約１μｌの部分溶血血漿液が、約８０μｌの１％ＳＤＳ水溶液で混合希釈された。本実施例では、１．６％の部分溶血血漿液が血球分離チャンバー２２０に注入された。すなわち、溶血液は希釈比６２．５で既に希釈されていた。したがって、本実施例の検査用デバイス２１０は、約５０００の希釈比で血液検体中に含まれたＨｂ類を希釈することが可能である。
【０２６０】
以上、説明したように、本実施例の検査用デバイス２１０は、血液検体および希釈液を収容しているため、所定の条件下で回転および停止されることにより、例えば、血球分離工程、溶血工程および希釈工程などの前処理を検査用デバイス２１０内で簡易に実施できる。したがって、本実施例の検査用デバイス２１０は、操作性に優れており、廃液を出さない。さらに、本実施例の検査用デバイス２１０は、廃液を出さないため、ユーザや環境にも優しい。
【０２６１】
さらに、例えば、１μｌの血液検体を従来の希釈方法で希釈比５０００で希釈するに当たっては、５ｍｌの希釈液が必要となるため、従来の小型の検査用デバイスは、ごく少量の血液検体であっても１回の操作では希釈できない。これに対して、本実施例の検査用デバイス２１０は、血液検体を非常に少量の８０μｌの希釈液を用いて希釈比５０００で希釈できるため、血液検体を１回の操作で希釈できる。したがって、本実施例の検査用デバイス２１０は、操作性に優れており、廃液を出さず、小型化が可能である。
【０２６２】
さらに、本実施例の検査用デバイス２１０は、内部に収容された血液検体を希釈するのに必要な量よりも多い８０μｌ以上の希釈液を内部に導入することが可能な容積を有しているため、希釈液が検査用デバイス本体から溢れ出ることがない。
【０２６３】
さらに、本実施例の検査用デバイス２１０は、血球分離チャンバー２２０に収容された１０μｌの全血液検体を溶血するのに十分な量ではない８００μｇの塩化カリウム２２１を収容している。すなわち、本実施例の検査用デバイス２１０は、血球分離チャンバー２２０に収容された血液検体を部分的に溶血する少量の塩化カリウム２２１を収容することにより、内部に注入される希釈液の量を低減することができる。
【０２６４】
さらに、本実施例の検査用デバイス２１０は、混合チャンバー２７０に含まれた混合希釈された血漿液中のＨｂ濃度が希釈比５０００以上で希釈されるように、血球分離チャンバー２２０に収容された血液検体を部分的に溶血する少量の８００μｇの塩化カリウム１２１を収容している。したがって、本実施例の検査用デバイス２１０によって、混合チャンバー２７０から取得された混合希釈液が、例えば、比色測定、免疫競合系測定、免疫測定による測定を直ちに実施することができる。特に、ＨｂＡ１ｃに対しては、ボロン酸親和性原理、酵素反応原理などに基づいた測定が実施される。
【０２６５】
さらに、本実施例の検査用デバイス２１０は、血球分離チャンバー２２０から移送された所定量、すなわち、１μｌの部分溶血血漿液を取得する血漿液サンプリングチャンバー２５０を含むので、検査用デバイス２１０に対する回転および停止の制御によって、Ｈｂ類の測定の前処理を実施することができる。
【０２６６】
さらに、本実施例の検査用デバイス２１０は、流路およびチャンバーに形成された複数の空気孔を有している。したがって、本実施例の検査用デバイス２１０は、流路およびチャンバーを介する液体の流れを良くすることができるので、チャンバー間を液体が容易に流動することができる。
【０２６７】
本実施例の検査用デバイス２１０は、血球分離チャンバー２２０より検査用デバイス２１０の回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を備える逆Ｕ字形の屈曲部２８０ｂを有する流路２８０を含み、毛細管現象によって流路２８０を介して部分溶血血漿液を移送させる。したがって、本実施例の検査用デバイス２１０は、回転中に、血球分離チャンバー２２０に部分溶血血漿液を保持することができる。これに対して、本実施例の検査用デバイス２１０が回転を停止され、部分溶血血漿液が遠心力から解放されたときに、本実施例の検査用デバイス２１０は、血球分離チャンバー２２０から流路２８０を介して部分溶血血漿液を移送させることができる。
【０２６８】
本実施例の検査用デバイス２１０は、さらに、希釈液注入チャンバー２３０より検査用デバイス２１０の回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を備える逆Ｕ字形の屈曲部２９０ｂを有する流路２９０を含み、毛細管現象によって流路２９０を介して部分溶血血漿液を移送させる。したがって、本実施例の検査用デバイス２１０は、回転中に、希釈液注入チャンバー２３０に希釈液を保持することができる。これに対して、本実施例の検査用デバイス２１０が回転を停止され、部分溶血血漿液が遠心力から解放されたときに、本実施例の検査用デバイス２１０は、希釈液注入チャンバー２３０から流路２９０を介して希釈液を移送させることができる。
【０２６９】
本実施例の検査用デバイス２１０は、さらに、同期用チャンバー２４０より検査用デバイス２１０の回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を備える逆Ｕ字形の屈曲部３００ｂを有する流路３００を含み、毛細管現象によって流路３００を介して希釈液を移送させる。したがって、本実施例の検査用デバイス２１０は、回転中に、同期用チャンバー２４０に希釈液を保持することができる。これに対して、本実施例の検査用デバイス２１０が回転を停止され、希釈液が遠心力から解放されたときに、本実施例の検査用デバイス２１０は、同期用チャンバー２４０から流路３００を介して希釈液を移送させることができる。
【０２７０】
本実施例の検査用デバイス２１０は、さらに、血漿液サンプリングチャンバー２５０より検査用デバイス２１０の回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を備える逆Ｕ字形の屈曲部３２０ｂを有する流路３２０を含み、毛細管現象によって流路３２０を介して希釈液を移送させる。したがって、本実施例の検査用デバイス２１０は、回転中に、血漿液サンプリングチャンバー２５０に希釈液を保持することができる。これに対して、本実施例の検査用デバイス２１０が回転を停止され、希釈液が遠心力から解放されたときに、本実施例の検査用デバイス２１０は、血漿液サンプリングチャンバー２５０から流路３２０を介して希釈液を移送させることができる。
（実施例８）
本発明の第８実施例の検査用デバイスについて図１４を用いて説明する。図１４は、本発明に係る検査用デバイスの本実施例の正面図である。図１４に示した本実施例の検査用デバイスの構成要素は、以下に記載する構成要素を除いて、図１３に示した第７実施例の検査用デバイス２１０と実質的に同様である。したがって、以下では、本実施例の構成要素のうち、第７実施例の検査用デバイスと異なるものについてのみ説明する。なお、本実施例の構成要素のうち、第７実施例の検査用デバイスと同様のものについては説明を省略するが、図１３に示した第７実施例の検査用デバイスと同様の符号を付す。
【０２７１】
以下、まず図１４を用いて本実施例の検査用デバイスの構成を示す。
【０２７２】
本実施例の検査用デバイス４１０は、血液検体を構成する赤血球に含まれるＨｂ類を希釈比約５０００で希釈するためのものである。
【０２７３】
本実施例の検査用デバイス４１０は、血漿液サンプリングチャンバー２５０が、フェリシアン化カリウム４５１を予め担持していることを除いて、第７実施例の検査用デバイス２１０と実質的に同様である。フェリシアン化カリウム４５１は、部分溶血血漿液中の蛋白質を変性させる変性剤として働く。
【０２７４】
以下に、本実施例の検査用デバイス４１０によって実行される溶血液、すなわちＨｂ類、を希釈液と混合希釈する方法は、以下に記載する工程を除いて、第７実施例の検査用デバイス２１０と実質的に同様である。
【０２７５】
８０μｌの１％ＳＤＳ水溶液の代わりに、８０μｌの０．１％ＳＤＳ水溶液は、注入孔２３０ａを介して希釈液注入チャンバー２３０に導入される。０．１％ＳＤＳ水溶液は、濃度が低いため、免疫反応に影響を与えない。０．１％ＳＤＳ水溶液は、Ｈｂを変性および酸化させてＨｂの吸収特性を安定させる試薬として働く。
【０２７６】
血漿液サンプリングチャンバー２５０中で部分溶血血漿液が完全に変性されるように、検査用デバイス４１０は、２回目の回転中に３分以上回転されて、部分溶血血漿液を血漿液サンプリングチャンバー２５０中のフェリシアン化カリウム４５１と混合させる。
【０２７７】
混合チャンバー２７０では、希釈比８１で、約１μｌの部分溶血血漿液が約８０μｌの０．１％ＳＤＳ水溶液で混合希釈された。本実施例では、１．６％の部分溶血血漿液が血球分離チャンバー２２０に注入された。すなわち、溶血液は希釈比６２．５で既に希釈されていた。したがって、本実施例の検査用デバイス４１０は、約５０００の希釈比で血液検体中に含まれたＨｂ類を希釈することが可能である。さらに、部分溶血血漿液は、血漿液サンプリングチャンバー２５０中のフェリシアン化カリウム４５１によって変性される。これにより、本実施例の検査用デバイス４１０は、ユーザが完全に変性された部分溶血血漿液を回収することを可能にする。すなわち、本実施例の検査用デバイス４１０は、ＨｂＡ１ｃを免疫反応測定原理によって測定する場合に使用されることが好ましい。
【０２７８】
以上、説明したように、本実施例の検査用デバイス４１０は、血液検体および希釈液を収容しているため、所定の条件下で回転および停止されることにより、例えば、血球分離工程、溶血工程および希釈工程などの前処理を検査用デバイス４１０内で簡易に実施できる。したがって、本実施例の検査用デバイス４１０は、操作性に優れており、廃液を出さない。さらに、本実施例の検査用デバイス４１０は、廃液を出さないため、ユーザや環境にも優しい。
【０２７９】
さらに、本実施例の検査用デバイス４１０は、部分溶血血漿液中に含まれる蛋白質を変性させるフェリシアン化カリウム４５１を担持する血漿液サンプリングチャンバー２５０を含むため、血液検体中のＨｂ類を免疫学的に測定させることが可能である。さらに、血漿液サンプリングチャンバー２５０が、フェリシアン化カリウム４５１の代わりに、部分溶血血漿液中に含まれる蛋白質を分解させる酵素を予め担持している場合でも同様の効果が得られる。
【０２８０】
前の実施例に記載したように、本発明に係る検査用デバイスは、血液検体を構成する要素を溶血する溶血剤を担持する血球分離チャンバーを含み、血球分離チャンバーに担持される溶血剤の量が血球分離チャンバーに収容される血液検体の全てを溶血する量よりも少ないため、血液検体は部分的に溶血され、製造される溶血液の量が減り、それによって内部に注入される希釈液の量が減る。検査用デバイスは、血液検体を複数回に渡って部分的に溶血するものであってもよい。血液検体を複数回に渡って部分的に溶血することを「多段部分溶血」という。多段部分溶血は、検査用デバイスがごく少量の溶血剤で必要量の溶血液を得ることを可能にする。本実施例の検査用デバイスは、さらに、それぞれが前記溶血剤を担持する１つ以上の追加のチャンバーを含み、前記１つ以上の追加のチャンバーのそれぞれに担持される溶血剤の量は、前記１つ以上の追加のチャンバーに収容される血液検体の全てを溶血する量よりも少ない。このように構成された検査用デバイスは、複数回に渡って血液検体を部分的に溶血でき、さらに製造される溶血液の量を減らすことができるため、内部に注入される希釈液の量と同時に溶血剤の量を減らすことができる。
【産業上の利用可能性】
【０２８１】
以上のように、本発明に係る検査用デバイスは、従来の検査用デバイスと比較して操作性に優れ、小型であり、廃液も出さない。本発明に係る検査用デバイスおよび血液混合希釈方法は、臨床検査分野におけるＰＯＣＴに適用可能である。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
デバイス本体に、検体を導入する検体注入孔と、
それぞれ空気孔と連通された複数のチャンバーと、
それぞれ前記複数のチャンバーと連通されて伸びている複数の流路とを含み、前記複数の流路は、互いに統合されて流路統合領域を形成する少なくとも２つの流路を含んだ検査用デバイスであって、
前記少なくとも２つの流路は、希釈液を移送させる１つ以上の希釈液流路と、前記検体注入孔と連通され、前記検体を前記流路統合領域に移送させる検体流路とを含み、前記検体が前記流路統合領域に保持され、所定の希釈比で、前記希釈液と混合希釈されることを特徴とする検査用デバイス。
【請求項２】
前記複数のチャンバーは、
前記検体流路の一部を形成する流入流路を介して前記検体注入孔と連通され、血液検体を受け取る血球分離チャンバーと、溶血液を収容する溶血チャンバーとを含み、
前記検査用デバイスは、回転中心回りに回転および停止されることにより、前記血球分離チャンバーに収容されている前記血液検体を血球および血漿液に分離し、
前記血球分離チャンバーは、前記検体流路の一部を形成する流出流路を介して前記流路統合領域と連通されており、前記血液検体から分離された前記血漿液を前記流出流路を介して移送させ、前記流路統合領域において前記溶血液を前記血漿液と混合希釈させることを特徴とする請求項１に記載の検査用デバイス。
【請求項３】
前記流路統合領域は空気孔が形成されたものであり、前記血漿液と前記溶血液が前記流路統合領域に流入して互いに混合されることを特徴とする請求項２に記載の検査用デバイス。
【請求項４】
前記血球分離チャンバーから前記流路統合領域まで伸びる前記検体流路の前記流出流路は、前記血球分離チャンバーより前記回転中心に向かう内周側に配置される上昇部と、前記血球分離チャンバーより前記回転中心から離隔する外周側に配置される下降部とを含むことを特徴とする請求項２に記載の検査用デバイス。
【請求項５】
前記血球分離チャンバーは、前記血液検体を溶血する溶血剤を担持することを特徴とする請求項２に記載の検査用デバイス。
【請求項６】
前記血球分離チャンバーは、溶血された血液中に含まれたヘモグロビン類を変性させる変性剤を担持することを特徴とする請求項２に記載の検査用デバイス。
【請求項７】
前記血球分離チャンバーは、溶血された血液中に含まれたヘモグロビン類を分解させる蛋白質分解酵素を担持することを特徴とする請求項２に記載の検査用デバイス。
【請求項８】
前記複数のチャンバーは、前記検体注入孔と連通された前記チャンバーより回転中心に向かう内周側にそれぞれ配置される１つ以上の前記流路を介して、別の１つのチャンバーと連通される２つ以上のチャンバーを含み、
前記２つ以上のチャンバーのうちの１つのチャンバーは、前記検体注入孔と連通されて、前記血液検体を、前記検体注入孔から前記１つのチャンバーに移送させた後に、前記１つ以上の前記流路を介して前記２つ以上のチャンバーのうちの残りのチャンバーに移送させることを特徴とする請求項２に記載の検査用デバイス。
【請求項９】
前記検体注入孔は、デバイス本体に血液検体を導入するものであり、
前記複数の流路は、前記検体注入孔と連通された溶血工程流路を含み、前記血液検体を、前記検体注入孔から導入させて、溶血させることを特徴とする請求項１に記載の検査用デバイス。
【請求項１０】
前記溶血工程流路は、前記血液検体を前記検体注入孔から導入させて一時的に保持することが可能であり、前記血液検体を溶血させて溶血液を製造する溶血工程流路部と、
毛細管現象によって液体が前記溶血工程流路部へ移送されることを妨げる移送停止手段とを含むことを特徴とする請求項９に記載の検査用デバイス。
【請求項１１】
前記溶血工程流路部は、他の１つ以上の流路と統合されて流路統合領域を形成し、前記溶血液を前記溶血工程流路部から前記流路統合領域に移送させることを特徴とする請求項１０に記載の検査用デバイス。
【請求項１２】
前記複数のチャンバーは、前記検体注入孔と前記溶血工程流路との間に位置し、かつ、それらと連通される血液処理チャンバーを含み、
前記溶血工程流路はさらに、前記血液処理チャンバーと前記溶血工程流路部との間に配置され、前記溶血工程流路を閉塞して、前記溶血工程流路部と前記血液処理チャンバーとの間で液体の流れを阻止する閉塞手段を含むことを特徴とする請求項１１に記載の検査用デバイス。
【請求項１３】
前記溶血工程流路はさらに、前記溶血工程流路部と前記流路統合領域との間に配置され、毛細管現象によって液体が前記溶血工程流路部から前記流路統合領域に移送されることを妨げる静止手段を含むことを特徴とする請求項１２に記載の検査用デバイス。
【請求項１４】
前記血液検体は、前記検査用デバイスの回転中に溶血され、
前記溶血工程流路はさらに、前記溶血工程流路部から前記流路統合領域まで伸びる流出流路部を含み、
前記流出流路部はさらに、前記血液処理チャンバーより前記回転中心に向かう内周側に配置される上昇部と、前記血液処理チャンバーより前記回転中心から離隔する外周側に配置される下降部とを含むことを特徴とする請求項１３に記載の検査用デバイス。
【請求項１５】
前記閉塞手段は、前記血液処理チャンバーと前記溶血工程流路部との間で化学的変化を引き起こし、前記溶血工程流路を閉塞して、前記溶血工程流路部と前記血液処理チャンバーとの間の液体の流れを阻止することを特徴とする請求項１２に記載の検査用デバイス。
【請求項１６】
前記１つ以上の希釈液流路は、前記希釈液を前記流路統合領域を介して所定の方向に移送させ、
前記検体流路は、前記検体を前記流路統合領域に一時的に保持することが可能であり、所定の希釈比で前記検体を前記希釈液と混合希釈させることを特徴とする請求項１に記載の検査用デバイス。
【請求項１７】
前記検体流路と前記１つ以上の希釈液流路のそれぞれとは、前記流路統合領域において、互いに交差し、かつ、それぞれの前記検体流路および前記１つ以上の希釈液流路の近い箇所の厚みよりも大きな厚みを有する空間を介して互いに連通されることを特徴とする請求項１６に記載の検査用デバイス。
【請求項１８】
前記検体流路および前記１つ以上の希釈液流路のそれぞれは、空気孔と連通される端部を有することを特徴とする請求項１７に記載の検査用デバイス。
【請求項１９】
前記複数の流路は、前記流路統合領域において、前記検体流路と連通される端部を有する延長流路を含み、その連通は、前記検体流路および前記延長流路の近い箇所の厚みよりも大きな厚みを有する空間を介して行われることを特徴とする請求項１７に記載の検査用デバイス。
【請求項２０】
前記複数の流路は、前記流路統合領域より前記回転中心から離隔する外周側に配置される頂点部を有する流路を含み、前記頂点部に前記検体を収容することを特徴とする請求項１６に記載の検査用デバイス。
【請求項２１】
血液混合希釈方法は、血液検体を検査用デバイスに導入する血液導入工程と、
前記血液導入工程で前記検査用デバイスに導入された前記血液検体を、溶血される第１の血液と、血漿液と血球に分離される第２の血液とに分ける分配工程と、
前記検査用デバイスを回転させて、前記第１の血液を溶血させ、前記第２の血液を血球と血漿液とに分離させる血球および血漿液取得工程と、
前記検査用デバイスの回転を停止させて、溶血液と前記血漿液をそれぞれの流路を介して移送させる液体移送工程と、
前記検査用デバイスを回転させて、前記溶血液を前記血漿液と混合希釈させる混合希釈工程とを含む検査用デバイス。
【請求項２２】
前記複数のチャンバーは、前記検体注入孔と連通され、血液検体を取得し、前記検査用デバイスの回転中に、前記血液検体を溶血させ、血漿液と血球とに分離させる血球分離チャンバーと、前記血液検体の一部を構成する構成要素を希釈する希釈液を内部に導入する希釈液導入チャンバーと、前記血漿液と前記希釈液を取得し、検査用デバイスの回転中に、前記血漿液を前記希釈液で混合希釈させる混合チャンバーとを含み、
前記血球分離チャンバーは、前記血液検体の一部を構成する構成要素を溶血する溶血剤を担持することを特徴とする請求項１に記載の検査用デバイス。
【請求項２３】
前記検査用デバイスの総容量は、前記血液検体を構成する全ての前記構成要素を希釈するための必要量以上の前記希釈液を導入可能なものであることを特徴とする請求項２２に記載の検査用デバイス。
【請求項２４】
前記血球分離チャンバーに担持される前記溶血剤の量は、前記血球分離チャンバーに収容される前記血液検体の全てを溶血する量よりも少ないことを特徴とする請求項２２に記載の検査用デバイス。
【請求項２５】
前記血球分離チャンバーに担持される前記溶血剤の量は、前記血漿液の一部を構成する前記構成要素を部分的に溶血させる程度に実質的に十分少なく、部分的に溶血された前記血漿液の一部を構成する前記構成要素は、前記混合チャンバーにおいて、希釈比２５０以上で前記希釈液と混合希釈されることを特徴とする請求項２４に記載の検査用デバイス。
【請求項２６】
前記血球分離チャンバーに担持される前記溶血剤の量は、前記血漿液の一部を構成する前記構成要素を部分的に溶血させる程度に実質的に十分少なく、部分的に溶血された前記血漿液の一部を構成する前記構成要素は、前記混合チャンバーにおいて、希釈比５００以上で前記希釈液と混合希釈されることを特徴とする請求項２４に記載の検査用デバイス。
【請求項２７】
前記血球分離チャンバーに担持される前記溶血剤の量は、前記血漿液の一部を構成する前記構成要素を部分的に溶血させる程度に実質的に十分少なく、部分的に溶血された前記血漿液の一部を構成する前記構成要素は、前記混合チャンバーにおいて、希釈比５０００以上で前記希釈液と混合希釈されることを特徴とする請求項２４に記載の検査用デバイス。
【請求項２８】
前記複数のチャンバーはさらに、前記血球分離チャンバーから移送され、前記混合チャンバーで前記希釈液によって希釈される所定量の血漿液を取得する血漿液サンプリングチャンバを含むことを特徴とする請求項２２に記載の検査用デバイス。
【請求項２９】
所定の領域において、前記血漿液の一部を構成する蛋白質を変性させる変性剤を含み、前記変性剤を前記血漿液サンプリングチャンバーに取得された前記所定量の前記血漿液と反応させることを特徴とする請求項２８に記載の検査用デバイス。
【請求項３０】
所定の領域において、前記血漿液の一部を構成する蛋白質を分解する蛋白質分解酵素を含み、前記蛋白質分解酵素を前記血漿液サンプリングチャンバーに取得された前記所定量の前記血漿液と反応させることを特徴とする請求項２８に記載の検査用デバイス。
【請求項３１】
前記複数のチャンバーおよび前記複数の流路のうちの少なくとも１つが、空気孔と連通されることを特徴とする請求項２２に記載の検査用デバイス。
【請求項３２】
前記複数の流路のうちの少なくとも１つは、前記複数の流路のうちの少なくとも１つが連通されたチャンバーより回転中心に向かう内周側に配置される頂点部を有していて、毛細管現象によって液体を移送させることを特徴とする請求項２２に記載の検査用デバイス。
【請求項３３】
前記複数のチャンバーは、それぞれが前記溶血剤を担持する１つ以上の溶血チャンバーを含み、前記１つ以上の溶血チャンバーのそれぞれに担持される前記溶血剤の量は、前記１つ以上の溶血チャンバーに収容される前記血液検体の全てを溶血する量よりも少ないことを特徴とする請求項２２に記載の検査用デバイス。
【請求項３４】
検査用デバイスを用いて、血液検体の一部を構成する構成要素を混合希釈する血液混合希釈方法であって、
血液検体を前記検査用デバイスに導入する血液導入工程と、
前記血液検体の一部を構成する前記構成要素を希釈する希釈液を導入する希釈液導入工程と、
前記検査用デバイスを回転させて、前記血液検体を溶血させ、血球と血漿液とに分離する溶血分離工程と、
前記検査用デバイスの回転を停止させて、前記血漿液および前記希釈液を移送させる液体移送工程と、
前記検査用デバイスを回転させて、前記血漿液を前記希釈液と混合希釈させる混合希釈工程とを含む血液混合希釈方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【公表番号】特表２００８−５２５７９１（Ｐ２００８−５２５７９１Ａ）
【公表日】平成２０年７月１７日（２００８．７．１７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５４７８３７（Ｐ２００７−５４７８３７）
【出願日】平成１７年１２月２０日（２００５．１２．２０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００５／０２３８４２
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０７０７７２
【国際公開日】平成１８年７月６日（２００６．７．６）
【出願人】（０００００５８２１）松下電器産業株式会社 (73,050)
【Ｆターム（参考）】