ヒトの生殖系列細胞および生殖腺組織の単離、特徴付け、低温保存および保存のための方法とシステムとが提供される。また、不妊の生殖器官を再配置させるために低温保存された細胞の移植のための方法も開示される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
生殖能力を失うおそれのある哺乳動物から生殖腺組織を収集することと、
前記生殖腺組織を中央保存設備に運ぶことと、
前記生殖腺組織を処理することと、
前記生殖腺組織を低温保存することと、
前記低温保存された生殖腺組織の生殖能力の可能性を決定することと、
を含む、生殖系列幹細胞を保存する方法。
【請求項２】
前記生殖腺組織は、
精巣組織である、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記精巣組織を処理することは、
約０．５‐２．０ｍｍ^２の精巣組織の断片を調製することを含む、
ことを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項４】
精巣組織を処理することは、
コラゲナーゼ、デオキシリボヌクレアーゼ、ヒアルロニダーゼおよびトリプシンからなる群から選択される少なくとも１つの酵素で前記精巣組織を分解することと、
前記少なくとも１つの酵素を不活性化することによって、分離した精巣細胞の懸濁液を得ることと、
を含むことを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項５】
分離した精巣細胞から雄の生殖系列幹細胞を単離するステップをさらに含み、
前記雄の生殖系列幹細胞は、
黄体形成ホルモン受容体を発現しないことで特徴付けられる、
ことを特徴とする請求項４に記載の方法。
【請求項６】
分離した精巣細胞から雄の生殖系列幹細胞を単離するステップをさらに含み、
前記雄の生殖系列幹細胞は、
ＳＳＥＡ‐４を発現することで特徴付けられる、
ことを特徴とする請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記雄の生殖系列幹細胞は、
ＧＦＲ‐α１およびＶＡＳＡをさらに発現する、
ことを特徴とする請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記生殖能力の可能性を決定することは、
成熟した精子に生体外で分化するための精巣組織の能力である、
ことを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項９】
生殖能力の可能性を決定することは、
減数分裂および減数分裂後のマーカーの発現と、大きさと、形態との少なくとも１つによって精巣細胞の特性を決定することである、
ことを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項１０】
前記生殖腺組織は、
卵巣組織である、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記卵巣組織を処理することは、
約０．５‐３．０ｍｍ^２の卵巣組織の断片を調製することを含む、
ことを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記処理することは、
コラゲナーゼ、デオキシリボヌクレアーゼ、ヒアルロニダーゼおよびトリプシンからなる群から選択される少なくとも１つの酵素で前記卵巣組織を分解することと、
前記少なくとも１つの酵素を不活性化することによって、分離した卵巣細胞の懸濁液を得ることと、
をさらに含むことを特徴とする請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
生殖能力の可能性を決定することは、
成熟した卵子に生体外で分化するための前記卵巣組織の能力によって行われる、
ことを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
生殖能力の可能性を決定することは、
減数分裂および減数分裂後のマーカーの発現と、大きさと、形態との少なくとも１つによって卵巣細胞の特性を決定することである、
ことを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
前記低温保存した生殖腺組織を、前記生殖腺組織が単離された同じ個体に残された生殖腺組織に移植するステップをさらに含む、
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
生殖腺組織を収集する手段と、
生殖腺組織を運ぶ手段と、
生殖系列幹細胞を単離するために生殖腺組織を処理する手段と、
生殖腺組織または前記生殖系列幹細胞を低温保存する手段と、
低温保存された生殖腺組織または前記低温保存された生殖系列幹細胞の生殖能力の可能性を決定する手段と、
を備える生殖系列幹細胞の保存システム。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図１Ｃ】

【図１Ｄ】

【図１Ｅ】

【図１Ｆ】

【図１Ｇ】

【図１Ｈ】

【図２】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図３Ｅ】

【図４】

【図４Ｐ】

【図４Ｑ】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図６】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図７Ｄ】

【図７Ｅ】

【図７Ｆ】

【図７Ｇ】

【図７Ｈ】

【図７Ｉ】

【図７Ｊ】

【図７Ｋ】

【図７Ｌ】

【図７Ｍ】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図８Ｃ】

【図８Ｄ】

【図８Ｅ】

【図８Ｆ】

【図８Ｇ】

【図８Ｈ】

【図８Ｉ】

【図８Ｊ】

【図８Ｋ】

【図８Ｌ】

【図９】

【図１０】

【図１０Ｐ】

【図１０Ｑ】

【図１１Ａ】

【図１１Ｂ】

【図１１Ｃ】

【図１２Ａ】

【図１２Ｂ】

【図１２Ｃ】

【図１３】

【図１４Ａ】

【図１４Ｂ】

【図１４Ｃ】

【図１４Ｄ】

【図１４Ｅ】

【図１４Ｆ】

【図１４Ｇ】

【図１４Ｈ】

【図１４Ｉ】

【図１４Ｊ】

【図１４Ｋ】

【図１５Ａ】

【図１５Ｂ】

【図１５Ｃ】

【図１５Ｄ】

【図１６Ａ】

【図１６Ｂ】

【図１６Ｃ】

【図１６Ｄ】

【図１７Ａ】

【図１７Ｂ】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１Ａ】

【図２１Ｂ】

【図２１Ｃ】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６Ａ】

【図２６Ｂ】

【図２７】

【図２８】

【図２９Ａ】

【図２９Ｂ】

【図２９Ｃ】

【図２９Ｄ】

【図３０Ａ】

【図３０Ｂ】

【図３１Ａ】

【図３１Ｂ】

【図３２Ａ】

【図３２Ｂ】

【図３３Ａ】

【図３３Ｂ】

【図３４Ａ】

【図３４Ｂ】

【図３５Ａ】

【図３５Ｂ】

【図３６Ａ】

【図３６Ｂ】

【図３７Ａ】

【図３７Ｂ】

【図３８Ａ】

【図３８Ｂ】

【図３９】

【図４０Ａ】

【図４０Ｂ】

【図４１】

【図４２】

【図４３Ａ】

【図４３Ｂ】

【図４３Ｃ】

【図４３Ｄ】

【図４３Ｅ】

【図４３Ｆ】

【図４３Ｇ】

【図４３Ｈ】

【図４３Ｉ】

【図４４】

【図４５Ａ】

【図４５Ｂ】

【図４６】

【図４７】

【図４８】

【図４９】

【図５０Ａ】

【図５０Ｂ】

【図５１Ａ】

【図５１Ｂ】

【図５２】

【図５３Ａ】

【図５３Ｂ】

【公表番号】特表２０１３−５１４９６９（Ｐ２０１３−５１４９６９Ａ）
【公表日】平成２５年５月２日（２０１３．５．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５３８０４４（Ｐ２０１２−５３８０４４）
【出願日】平成２２年１１月５日（２０１０．１１．５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０５５７０６
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０５７１２３
【国際公開日】平成２３年５月１２日（２０１１．５．１２）
【出願人】（５１２１１６５４９）プライムジェン　バイオテック　エルエルシー　ディービーエイ　リプロサイト (2)
【出願人】（５１２１１６５５０）
【Ｆターム（参考）】