１５−置換ビタミンＤ３誘導体
【課題】新規ビタミンＤ３誘導体を提供する。
【解決手段】下記式（１）で表される化合物またはその医薬上許容される溶媒和物。
ここで、Ｒは水素原子または炭素数１〜４のアルキル基を表す。
【解決手段】下記式（１）で表される化合物またはその医薬上許容される溶媒和物。
ここで、Ｒは水素原子または炭素数１〜４のアルキル基を表す。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品として有用なビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物、それらを用いた治療剤、それらを含有する医薬組成物、およびそれらの製造中間体に関する。さらに詳しくは、１５−置換ビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物、それらを含有する医薬組成物、およびそれらを有効成分とする骨粗鬆症、悪性腫瘍、乾癬症、副甲状腺機能亢進症、炎症性呼吸器疾患、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、脱毛症、アクネ、または皮膚炎の治療剤、ならびにそれらの製造中間体に関する。
【背景技術】
【０００２】
活性型ビタミンＤ３誘導体は、小腸でのカルシウム吸収促進作用を有し、骨では骨吸収、骨形成を調節する等の作用を有し、骨粗鬆症の治療剤として使用されている。また、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）の分泌抑制作用を有し、ＰＴＨの亢進した二次性副甲状腺機能亢進症の治療に用いられている。さらに、これらの作用に加えて免疫調節作用、細胞増殖抑制作用や細胞分化誘導作用が見いだされ、例えば、癌、乾癬、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、アクネ、湿疹、皮膚炎等の疾患治療剤への適応が検討されている。これら治療剤としての薬理効果を高めるため、これまでに体内の活性型ビタミンＤ３誘導体である１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３を構造モチーフとして数多くの活性型ビタミンＤ３誘導体が合成されてきた。
【０００３】
しかしながらその多くはビタミンＤ３側鎖やＡ環に対する修飾体であり、Ｄ環に対する修飾体は合成困難であるため１６−エン誘導体を除いてほとんど報告されておらず、本発明の１５位に置換基を有する誘導体は全く報告されていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、従来の活性型ビタミンＤ３誘導体よりも医薬治療剤として有用な新規ビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を提供することである。
【０００５】
また、本発明の目的は、それらビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する骨粗鬆症、悪性腫瘍、乾癬症、副甲状腺機能亢進症、炎症性呼吸器疾患、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、脱毛症、アクネ、または皮膚炎の治療剤を提供することである。
【０００６】
さらに、本発明の目的は、それらビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を含んでなる医薬組成物を提供することである。
【０００７】
さらに本発明の目的は、それらビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を製造するのに適した中間体を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の１５位に置換基を有する誘導体（１）の合成は、例えば下記スキーム１のようにＣＤ環側鎖化合物（２）と文献既知のＡ環化合物（３）のカップリング、引き続く水酸基の脱保護により行うことができる。ここで、Ｒ’は水酸基の保護基または炭素数１〜４のアルキル基を表し、ＰＧは水酸基の保護基を表す。
【０００９】
（スキーム１）
【化１】
【００１０】
しかし、ここで用いられる化合物（２）の合成法は知られておらず、新たに合成法を開発する必要があった。そこで、本発明の発明者らは、以下に示す方法を検討した。
【００１１】
まず、１，５−水素原子移動機構に基づく方法を検討した。これは以下に示すように化合物Ａから化合物Ｃへの変換を行うことにより、８位水酸基を１８位へ移植する方法である（モーマンら（Ｍｏｍａｎ ｅｔ ａｌ．）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、６９巻、４６１−４６２５頁、２００４年）。
【００１２】
【化２】
【００１３】
この方法を応用し、文献既知の化合物Ｄ（メイナルドら（Ｍａｙｎａｒｄ ｅｔ ａｌ．）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、５７巻、３２１４−４３１７頁、１９９２年）から誘導される化合物Ｅに対して同様の反応を行うことにより、１８位の水酸基を１５位に移植し、化合物（２）が合成できるのではないかと考えた。
【００１４】
【化３】
【００１５】
しかしながら、反応系は複雑な混合物を与え、目的とする１５位置換体は得ることができず、代わりに化合物ＨないしＩと思われる化合物が得られた。また、Ｅの段階でその後の化学変換に耐えうる十分量を確保することも困難と思われた。
【００１６】
【化４】
【００１７】
そこで、別の方法を考案した。すなわち、文献既知の化合物（４）（フェルナンデスら（Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ ｅｔ ａｌ．）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、５７巻、３１７３−３１７８頁、１９９２年）に２重結合を導入し化合物（６）を得る。これをエポキシド（１０）に変換し、これに対して側鎖のグリニヤ試薬（１１）をカップリングさせることにより１５位に水酸基が導入された化合物（１２）を得る。これを変換して目的物（２）を得る方法である。
【００１８】
【化５】
【００１９】
まず化合物（４）から（６）の変換を行った。一般的な方法であるフェニルセレン置換脱離を検討したが、目的物は得られず、環拡大した（Ｊ）が得られたのみであった。本反応でセレノキシドへの酸化剤に過酸化水素の代わりにメタクロロ過安息香酸を用いるとわずかに目的の（６）が得られたが、本合成経路にのせるほど量産化ができず、断念せざるを得なかった。
【００２０】
【化６】
【００２１】
そこで、種々条件を検討した結果、エノールアセテート（５）を経由するルートで（６）が得られることがわかった。
【００２２】
【化７】
【００２３】
さらに、化合物（６）から目的物（２）への変換は、後述のスキーム２に沿って得られることがわかった。
【００２４】
以上のように、従来にはない合成法を新たに開発することにより、はじめて本発明化合物の合成が可能になり、本発明の完成に至ったのである。
【００２５】
すなわち、本発明は下記式（１）で表されるビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物である。
【００２６】
【化８】
ここで、Ｒは水素原子または炭素数１〜４のアルキル基を表す。
【００２７】
また、本発明は、上記式（１）で表されるビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物と、製薬学的に許容される担体とからなる医薬組成物である。
【００２８】
また、本発明は、上記式（１）で表されるビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する、骨粗鬆症、悪性腫瘍、乾癬症、副甲状腺機能亢進症、炎症性呼吸器疾患、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、脱毛症、アクネ、および皮膚炎からなる群から選ばれる一つ以上の疾患の治療剤である。
【００２９】
さらに、本発明は、式（２）で表されるビタミンＤ３誘導体の製造中間体である。
【化９】
ここで、Ｒ’は水酸基の保護基または炭素数１〜４のアルキル基を表し、ＰＧは水酸基の保護基を表す。
【発明の効果】
【００３０】
本発明によれば、骨粗鬆症、悪性腫瘍、乾癬症、副甲状腺機能亢進症、炎症性呼吸器疾患、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、脱毛症、アクネ、皮膚炎などに代表される様々な疾患の治療に有効な新規ビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物が提供される。
【００３１】
一方、本発明の上記式（２）で表される製造中間体は、本発明のビタミンＤ３誘導体等を製造するのに有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３２】
本発明における用語の定義は以下の通りである。 アルキル基とは、直鎖、分岐鎖、あるいは環状の脂肪族炭化水素基をいう。Ｃ１−Ｃ４のアルキル基とは、炭素数１から４のアルキル基を意味し、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基を具体的な基として挙げることができる。
【００３３】
上記式（１）中、Ｒは水素原子または炭素数１〜４のアルキル基を表すが、中でも水素原子、メチル基が好ましい。
なお、上記式（１）中、ビタミンＤ構造の１５位の立体配置は、Ｒ配置、Ｓ配置のいずれでもよい。
【００３４】
本発明のビタミンＤ３誘導体は必要に応じてその医薬上許容される溶媒和物に変換することができる。そのような溶媒としては、水、メタノ−ル、エタノ−ル、プロパノール、２−プロパノール、ブタノ−ル、ｔ−ブタノ−ル、アセトニトリル、アセトン、メチルエチルケトン、クロロホルム、酢酸エチル、ジエチルエ−テル、ｔ−ブチルメチルエ−テル、ベンゼン、トルエン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ等を挙げることができる。特に、水、メタノ−ル、エタノ−ル、プロパノール、２−プロパノール、アセトニトリル、アセトン、メチルエチルケトン、酢酸エチルを好ましいものとして挙げることができる。
【００３５】
本発明のビタミンＤ３誘導体の具体例としては、以下のものが挙げられる。
化合物（１ａ）： １５（Ｓ）−ヒドロキシ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３
化合物（１ｄ）： １５（Ｒ）−ヒドロキシ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３
化合物（１ｃ）： １５（Ｓ）−メトキシ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３
化合物（１ｄ）： １５（Ｒ）−メトキシ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３
化合物（１ｅ）： １５（Ｓ）−エトキシ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３
化合物（１ｆ）： １５（Ｒ）−エトキシ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３
【００３６】
また上記式（２）中、Ｒ’は水酸基の保護基または炭素数１〜４のアルキル基を表し、ＰＧは水酸基の保護基を表す。これら水酸基の保護基としては、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、メトキシメチル基、テトラヒドロ−４Ｈ−ピラン−２−イル基、アセチル基、ピバロイル基などが挙げられる。このうち、トリメチルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、メトキシメチル基が好ましい例として挙げられる。炭素数１〜４のアルキル基としては、メチル基が好ましい。また、上記式（２）におけるＯＲの置換した炭素の立体配置は、Ｒ配置、Ｓ配置のいずれでもよい。
【００３７】
上記式（１）で表されるビタミンＤ３誘導体の合成はいかなる方法で行ってもよいが、例えば、前述の下記スキーム１に従い、ＣＤ環側鎖化合物（２）と文献既知のＡ環化合物（３）（例えば、Ｂａｇｉｏｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、５１巻、３０９８−３１０８頁、１９８６年）のカップリング、引き続く水酸基の脱保護により行うことができる。
【００３８】
（スキーム１）
【化１０】
【００３９】
ここで、化合物（２）は、例えば下記スキーム２に従って合成することができる。
【化１１】
【００４０】
すなわち、文献既知の化合物（４）（フェルナンデスら（Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ ｅｔ ａｌ．）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、５７巻、３１７３−３１７８頁、１９９２年）からエノールアセテート（５）を経由して２重結合を導入した化合物（６）を得る。これを還元後、エポキシ化、酸化、エチリデン基導入反応を順次行って化合物（１０）を得る。これに対して側鎖構造を持つグリニヤ試薬（１１）をカップリングさせることにより１５位に水酸基が導入された化合物（１２）を得る。１５位水酸基を保護（１５−ＯＨ体合成用）あるいはエーテル化（１５−アルコキシ体合成用）して化合物（１３）とし、これに水素添加、ＴＢＳ脱保護、酸化することにより目的物（２）を得ることができる。本スキームによれば１５位の立体配置は（Ｓ）体のものが得られるが、化合物（１２）を光延反応に付す、水酸基を酸化・還元する、などの処理により１５位の立体配置が反転した化合物（１２）を得、以降上記と同様に反応させることにより、１５位の立体配置が（Ｒ）体のものも得ることができる。
【００４１】
以上のようにして得られるプレビタミンＤ３誘導体は、必要に応じて前述のような医薬上許容される溶媒和物に変換することができる。かかる溶媒和物は、フリーの化合物（１）を該溶媒、あるいは該溶媒を含有する混合溶媒より再結晶することにより得ることができる。
【００４２】
本発明のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する骨粗鬆症等の治療剤は、通常製剤化に用いられる担体や賦形剤、その他の添加剤を用いて調製される。製剤用の担体や賦形剤としては、固体または液体いずれでもよく、例えば乳糖、ステアリン酸マグネシウム、スターチ、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、オリーブ油、ゴマ油、カカオバター、エチレングリコール等やその他常用のものが挙げられる。投与は錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等による経口投与、あるいは静注、筋注等の注射剤、坐剤、経皮等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。
【００４３】
本発明の治療剤における有効成分の治療有効量は、投与経路、患者の年齢、性別、疾患の程度によって異なるが、通常０．００１〜１００００μｇ／日程度であり、投与回数は通常１〜３回／日ないし１〜３回／週であり、このような条件を満足するように製剤を調製するのが好ましい。
【実施例】
【００４４】
以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれによって限定されるものではない。
【００４５】
［実施例１］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｓ，３Ｒ，１５Ｓ，２０Ｒ）−１５−ヒドロキシ−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１,３,２５−トリオール（化合物（１ａ））の製造
【００４６】
【化１２】
【００４７】
（Ａ） 化合物（４）（５６５ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）（フェルナンデスら（Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ ｅｔ ａｌ．）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、５７巻、３１７３−３１７８頁、１９９２年）の酢酸イソプロペニル（２０ｍＬ）溶液に（＋）−１０−カンファースルホン酸（１３９ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）を室温で加え、１１７℃で２０時間加熱還流した。その溶液を室温まで冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、同温で１時間攪拌した。水層をエーテル抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）で精製したところ、化合物（５）（４８０ｍｇ，１．４８ｍｍｏｌ，７４％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.00 (s, 6H), 0.87 (s, 9H), 1.12 (s, 3H), 1.34 (dt, J = 3.6, 12.8 Hz, 1H), 1.46 (m, 1H), 1.52 (m, 1H), 1.59-1.69 (m, 2H), 1.75-1.88 (m, 2H), 1.99 (ddd, J = 3.3, 6.0, 14.2 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.30 (ddd, J = 1.7, 11.5, 14.2 Hz, 1H), 4.06 (m, 1H), 5.41 (dd, J = 1.7, 3.2 Hz, 1H).
ESI-HRMS calcd for C18H33O3Si ([M+H]+) 325.2199, found 325.2199.
【００４８】
（Ｂ） （Ａ）で得られた化合物（５）（１９２ｍｇ，０．５９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（７．４ｍＬ）溶液に炭酸アリルメチル（０．２７ｍＬ，２．３６ｍｍｏｌ）とトリブチルスズメトキシド（０．０８ｍＬ，０．３０ ｍｍｏｌ）を室温で加え、さらに酢酸パラジウム（４０ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）を７０℃で加え、１０６℃で２時間加熱還流した。その溶液を室温まで冷却した後、エーテルを用いてショートシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーでパラジウムを除去し、減圧下で溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）で精製したところ、化合物（６）（８７ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ，６２％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.044 (s, 3H), 0.058 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 1.33 (s, 3H), 1.48-1.50 (m, 3H), 1.75 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 2.55 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 4.42 (m, 1H), 6.00 (dd, J = 3.3, 6.0 Hz), 7.42 (m, 1H).
EI-LRMS m/z 280 (M+), 265, 223.
EI-HRMS calcd for C16H28O2Si 280.1868, found 280.1900.
【００４９】
（Ｃ） （Ｂ）で得られた化合物（６）（４４４ｍｇ，１．５８ｍｍｏｌ）のトルエン（５．３ｍＬ）溶液にＤＩＢＡＬ−Ｈトルエン溶液（０．９９Ｍ，３．２ｍＬ，３．１２ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、同温で４０分間攪拌した。その溶液をエーテルで希釈した後、飽和酒石酸水溶液を同温で加え、室温まで昇温して１時間攪拌した。水層をエーテルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）で精製したところ、化合物（７）（４４７ｍｇ，１．５８ ｍｍｏｌ，ｑｕａｎｔ．）が白色固体として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.019 (s, 3H), 0.022 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 1.05 (s, 3H), 1.38-1.53 (m, 4H), 1.66 (m, 1H), 1.77-1.90 (m, 2H), 2.03 (m, 1H), 4.18 (s, 1H), 4.27 (dd, J = 2.4, 5.2 Hz, 1H), 5.64 (ddd, J = 1.0, 3.4, 4.4 Hz, 1H), 5.86 (m, 1H).
EI-LRMS m/z 282 (M+), 267, 225.
EI-HRMS calcd for C16H30O2Si 282.2015, found 282.2016.
【００５０】
（Ｄ） （Ｃ）で得られた化合物（７）（２７０ｍｇ，０．９６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４．８ｍＬ）溶液にｍ−クロロ過安息香酸（４９５ｍｇ，２．８７ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で５時間攪拌した。その溶液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液を０℃で加えた後、水層をエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝６／１）で精製したところ、化合物（８）（２５６ｍｇ，０．８６ｍｍｏｌ，９０％）が無色油状物質として得られた。なお、得られた化合物（８）のエポキシ基の結合する炭素の立体配置は、（８）の水酸基をアセチル化し、これをＸ線結晶構造解析することにより上記記載の立体配置であることを確認した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.052 (s, 3H), 0.065 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 1.13-1.42 (m, 4H), 1.22 (s, 3H), 1.62-1.77 (m, 3H), 2.02 (s, 1H), 3.41-3.49 (m, 3H), 4.42 (m, 1H).
EI-LRMS m/z 298 (M+), 283, 241, 211.
EI-HRMS calcd for C16H30O2Si 298.1966, found 298.1971.
【００５１】
（Ｅ） （Ｄ）で得られた化合物（８）（３４１ｍｇ，１．１４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５．７ｍＬ）溶液にテトラプロピルアンモニウム パールテネート（ＴＰＡＰ）（２００ｍｇ，０．５７ｍｍｏｌ）と４−メチルモルフォリン Ｎ−オキシド（ＮＭＯ）（２００ｍｇ，１．７１ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で３０分間攪拌した。その溶液をエーテルで希釈し、ショートシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーに通した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）で精製したところ、化合物（９）（３３２ｍｇ，１．１２ｍｍｏｌ，９８％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.017 (s, 3H), 0.039 (s, 3H), 0.83 (s, 9H), 1.29 (s, 3H), 1.33-1.46 (m, 3H), 1.62-1.75 (m, 4H), 3.57 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.47 (s, 1H).
EI-LRMS m/z 296 (M+), 265, 239, 223.
EI-HRMS calcd for C16H28O3Si 296.1800, found 296.1773.
【００５２】
（Ｆ） エチルトリフェニルホスホニウムブロミド（６１３ｍｇ，１．６５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．５ｍＬ）懸濁液にｎ−ＢｕＬｉ ヘキサン溶液（１．５８Ｍ，０．９ｍＬ，１．４５ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、０℃まで昇温して、同温で１時間攪拌した。その溶液に（Ｅ）で得られた化合物（９）（９７ ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．８ mL）溶液を０℃で加えた後、同温で２４時間攪拌した。その溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を０℃で加え、水層をエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）で精製したところ、化合物（１０）（７８ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ，７６％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.049 (s, 3H), 0.073 (s, 3H), 0.88 (s, 9H), 1.19 (s, 9H), 1.22-1.46 (br, 3H), 1.60-1.76 (br, 4H), 1.78 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 3.55 (dd, J = 1.8, 3.3 Hz, 1H), 4.05 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 5.29 (dd, J = 6.9, 13.4 Hz, 1H).
EI-LRMS m/z 308 (M+), 293, 262, 251, 235.
EI-HRMS calcd for C18H32O2Si 308.2170, found 308.2166.
【００５３】
（Ｇ） ＣｕＣＮ（１０９ｍｇ，１．２０ｍｍｏｌ）のエーテル（０．６ｍＬ）懸濁液に４−（メトキシメトキシ）−４−メチルペンチル基からなるグリニヤ試薬（１１）（ＰＧ＝ＭＯＭ）（０．１４Ｍ，４．０ｍＬ，１．２ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、同温で１時間攪拌した。その溶液に（Ｆ）で得られた化合物（１０）（７５ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）のエーテル（０．６ｍＬ）溶液を−７８℃で加えた後、−２０℃まで昇温し、同温で２時間攪拌した。その溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を同温で加え、水層をエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）で精製したところ、化合物（１２）（ＰＧ＝ＭＯＭ）（７５ ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ，６９％）の無色油状物質が得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.043 (s, 3H), 0.059 (s, 3H), 0.87 (s, 9H), 1.05 (t, J = 7.2, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.19 (s, 6H), 1.34-1.54 (br, 12H), 1.61-1.73 (br, 2H), 1.79-1.89 (br, 2H), 1.92-2.07 (br, 2H), 3.34 (s, 3H), 4.29 (m, 1H), 4.59-4.62 (br, 1H), 4.67 (s, 2H), 5.27 (s, 2H).
EI-LRMS m/z 453 (M+-H), 335.
EI-HRMS calcd for C26H49O4Si 453.3403, found 453.3409.
【００５４】
（Ｈ） （Ｇ）で得られた化合物（１２）（ＰＧ＝ＭＯＭ）（１２ｍｇ，０．０２６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（０．２６ｍＬ）溶液にクロロメチルメチルエーテル（０．３ｍＬ，０．０３９ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．４ｍＬ，０．０７８ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で２．５時間攪拌した。その溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を０℃で加えた後、水層をエーテル抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）で精製したところ、化合物（１３）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（１１．４ｍｇ，０．０２４ｍｍｏｌ，９４％）の無色油状物質が得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.035 (s, 3H), 0.038 (s, 3H), 0.87 (s, 9H), 0.99 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.05 (s, 3H), 1.18 (s, 6H), 1.22-1.59 (m, 10H), 1.64-1.75 (m, 2H), 1.79-1.88 (m, 1H), 2.01-2.07 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.38 (s, 3H), 4.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.47 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.71 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.36 (s, 1H).
ESI-HRMS calcd for C28H54O5SiNa ([M+Na]+) 521.3638, found 521.3638.
【００５５】
（Ｉ） （Ｈ）で得られた化合物（１３）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（１０８ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）のメタノール（２．２ｍＬ）溶液に触媒量のＰｄ／Ｃを室温で加え、Ｈ２雰囲気下、室温で１８時間攪拌した。その溶液をエーテルで希釈した後、ろ紙でろ過し、Ｐｄ／Ｃを除去した。減圧下で溶媒を留去し、得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４０／１）で精製したところ、化合物（１４）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（６９ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ，６４％）の無色油状物質が得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.0070 (s, 3H), 0.027 (s, 3H), 0.86 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.87 (s, 9H), 0.91 (s, 3H), 1.19 (s, 6H), 1.15-1.47 (m, 7H), 1.68-179 (m, 4H), 1.88-1.91 (m, 1H), 3.34 (s, 3H), 3.36 (s, 3H), 3.85-3.95 (m, 1H), 4.17-4.18 (m, 1H), 4.62 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 5.9Hz, 1H), 4.68 (s, 2H).
ESI-HRMS calcd for C28H56O5SiNa ([M+Na]+) 523.3790, found 523.3795.
【００５６】
（Ｊ） （Ｉ）で得られた化合物（１４）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（７３ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２．９ｍＬ）溶液にＴＢＡＦ テトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ，２．９ｍＬ，２．９２ｍｍｏｌ）を室温で加え、８０℃で１６．５時間加熱還流した。その溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を０℃で加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製したところ、化合物（１５）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（５３ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ，９４％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.89 (d, J = 5.9 Hz, 3H), 0.96 (s, 3H), 1.21 (s, 6H), 1.25 (s, 3H), 1.11-1.53 (m, 9H), 1.60 (s, 1H), 1.75-1.84 (m, 4H), 1.94-1.97 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 4.09 (dt, J = 9.3, 18.1 Hz, 1H), 4.22 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.62 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.70 (s, 2H), 4.71 (d, J = 6.8 Hz, 1H).
ESI-HRMS calcd for C22H42O5Na ([M+Na]+) 409.2923, found 409.2930.
【００５７】
（Ｋ） （Ｊ）で得られた化合物（１５）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（５３ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２．７ｍＬ）溶液にＴＰＡＰ（２４ｍｇ，０．０６９ｍｍｏｌ）、ＮＭＯ（２４ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ）とＭＳ４Ａ（６９ｍｇ）を０℃で加え、室温で１時間攪拌した。その溶液をエーテルで希釈し、ショートシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーに通した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）で精製したところ、化合物（２）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（５１ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ，９８％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.65 (s, 3H), 0.85-0.90 (m, 2H), 0.94 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.04-1.09 (m, 3H), 1.21 (s, 6H), 1.25 (s, 3H), 1.31-1.50 (m, 2H), 1.62-1.76 (m, 2H), 1.80-1.92 (m, 2H), 2.00-2.09 (m, 2H), 2.24-2.34 (m, 2H), 2.61 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 3.36 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 4.33 (dt, J = 4.2, 8.9 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.70 (s, 2H).
ESI-HRMS calcd for C22H40O5Na ([M+Na]+) 407.2773, found 407.2769.
【００５８】
（Ｌ） 化合物（３）（８４ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）（Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ，Ｅ．Ｇ． ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、１９８６年、５１巻、３０９８頁）のＴＨＦ（０．９ｍＬ）溶液にｎ−ＢｕＬｉ ヘキサン溶液（１．５７Ｍ，０．１０ｍＬ，０．１６ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、同温で１０分間攪拌した。その溶液に（Ｋ）で得られた化合物（２）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（３７ｍｇ，０．０９６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．０ｍＬ）溶液を−７８℃で加え、１時間同温で攪拌した。その後、室温まで２時間かけて昇温した。その溶液に水を０℃で加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１−４／１−２／１）で精製したところ、化合物（１６）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（９．２ｍｇ，０．０１２ｍｍｏｌ，１３％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.036 (s, 12H), 0.055 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 0.86 (s, 9H), 0.89 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.98-1.05 (m, 1H), 1.19 (s, 6H), 1.32-1.71 (m, 11H), 1.73-1.90 (m, 4H), 1.94 (br d, J = 12.7 Hz, 1H), 2.15-2.23 (m, 2H), 2.44 (dd, J = 3.7, 13.2 Hz, 1H), 2.84 (brd, J = 15.6 Hz, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.34 (s, 3H), 3.98 (dt, J = 4.4, 9.5 Hz, 1H), 4.14-4.19 (m, 1H), 4.36 (dd, J = 3.9, 6.6 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.68 (s, 2H), 4.88 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 5.18 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 11.0 Hz, 1H).
ESI-HRMS calcd for C43H80O6Si2Na ([M+Na]+) 749.5572, found 749.5576.
【００５９】
（Ｍ） （Ｌ）で得られた化合物（１６）（２２ｍｇ，０．０２９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２．９ｍＬ）溶液に（＋）−１０−カンファースルホン酸（１３６ｍｇ，０．５９ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で２３時間攪拌した。その溶液を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を０℃で加えた。その溶液を減圧下濃縮し、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物を薄層プレパラティブクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製したところ、化合物（１ａ）（７．３ｍｇ，０．０１７ｍｍｏｌ，５８％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.59 (s, 3H), 0.92 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.05-1.11 (m, 1H), 1.22-1.69 (m, 15H), 1.76-2.09 (m, 9H), 2.28-2.36 (m, 2H), 2.61 (dd, J = 2.9, 12.9 Hz, 1H), 2.88 (dd, J = 2.9, 12.1 Hz, 1H), 3.58-3.74 (m, 2H), 4.03-4.30 (m, 2H), 4.43-4.46 (m, 1H), 5.01 (s, 1H), 5.35 (s, 1H), 6.18 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 11.1 Hz, 1H).
ESI-HRMS calcd for C27H44O4Na ([M+Na]+) 455.3137, found 455.3140.
【００６０】
［実施例２］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｓ，３Ｒ，１５Ｒ，２０Ｒ）−１５−メトキシ−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１,３,２５−トリオール（化合物（１ｃ））の製造
【００６１】
【化１３】
【００６２】
（Ａ） 実施例１の（Ｇ）で得られた化合物（１２）（ＰＧ＝ＭＯＭ）（１２０ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５．２ ｍＬ）溶液に水素化ナトリウム（５０ｍｇ，２．０８ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で1時間攪拌した。その溶液にヨウ化メチル（０．１６ｍＬ，２．６０ｍｍｏｌ）を室温で加え、８０℃で２．５時間加熱還流した。室温まで冷却した後、飽和塩化アンモニウム水溶液を０℃で加えた。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）で精製したところ、化合物（１７）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（９０ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ，７４％）の無色油状物質が得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.029 (s, 3H), 0.041 (s, 3H), 0.87 (s, 9H), 0.98 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.05 (s, 3H), 1.18 (s, 6H), 1.20-1.52 (m, 9H), 1.60-1.72 (m, 3H), 1.77-1.90 (m, 1H), 1.99-2.08 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 4.18 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.67 (s, 2H), 5.45 (s, 1H).
ESI-HRMS calcd for C27H57O4SiNa ([M+Na]+) 491.3533, found 491.3524.
【００６３】
（Ｂ） （Ａ）で得られた化合物（１７）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（９０ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ）のメタノール（３．８ｍＬ）溶液に触媒量のＰｄ／Ｃを室温で加え、同温でＨ２雰囲気下、１７時間攪拌した。その溶液をエーテルで希釈した後、ショートシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ジエチルエーテル）によりＰｄ／Ｃを除去した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４０／１）で精製したところ、（１８）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（８３ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ，９２％）の無色油状物質が得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.013 (s, 6H), 0.86 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.88 (s, 9H), 0.91 (s, 3H), 0.95-1.03 (m, 1H), 1.14-1.47 (m, 11H), 1.19 (s, 6H), 1.58-1.78 (m, 4H), 1.88 (br d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.28 (s, 3H), 3.35 (s, 3H), 3.62 (dt, J = 3.9, 9.4 Hz, 1H), 4.14 (m, 1H), 4.68 (s, 2H).
ESI-HRMS calcd for C27H54O4SiNa ([M+Na]+) 493.3689, found 493.3690.
【００６４】
（Ｃ） （Ｂ）で得られた化合物（１８）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（１２２ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３．３ｍＬ）溶液にＴＢＡＦ テトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ，５．２ｍＬ，５．１９ｍｍｏｌ）を室温で加え、８０℃で１４時間加熱還流した。その溶液にＴＢＡＦ テトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ，２．６ｍＬ，２．６０ｍｍｏｌ）を室温で加え、８０℃で５時間加熱還流した。さらにその溶液にＴＢＡＦ テトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ，５．２ｍＬ，５．１９ｍｍｏｌ）を室温で加え、８０℃で１７．５時間加熱還流した。さらにＴＢＡＦ テトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ，５．２ｍＬ，５．１９ｍｍｏｌ）を室温で加え、８０℃で５時間加熱還流した。その溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を０℃で加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製したところ、化合物（１９）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（９１ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ，９８％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.89 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 0.96 (s, 3H), 1.03 (br t, J = 9.8 Hz, 1H), 1.21 (s, 6H), 1.24-1.72 (m, 13H), 1.74-1.82 (m, 3H), 1.95 (br d, J = 12.7 Hz, 1H), 3.35 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 3.74 (ddd, J = 3.9, 8.5, 12.8 Hz, 1H), 4.24 (m, 1H), 4.71 (s, 2H).
ESI-HRMS calcd for C21H40O4Na ([M+Na]+) 379.2824, found 379.2830.
【００６５】
（Ｄ） （Ｃ）で得られた化合物（１９）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（９０ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２．５ｍＬ）溶液にＴＰＡＰ（４４ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、ＮＭＯ（４４ｍｇ，０．３８ｍｍｏｌ）とＭＳ４Ａ（１２５ｍｇ）を０℃で加え、室温で１．５時間攪拌した。その溶液をエーテルで希釈し、ショートシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーに通した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）で精製したところ、化合物（２）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（７５ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ，８５％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.64 (s, 3H), 0.95 (d, J = 6.6 Hz, 3 H), 1.02-1.10 (m, 1H), 1.21 (s, 6H), 1.23-1.50 (m, 8H), 1.62-1.94 (m, 5H), 1.99-2.08 (m, 2H), 2.23-2.34 (m, 2H), 2.55 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 3.29 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 4.01 (dt, J = 3.6, 8.6 Hz, 1 H), 4.70 (s, 3H).
ESI-HRMS calcd for C21H38O4Na ([M+Na]+) 377.2668, found 377.2674.
【００６６】
（Ｅ） 化合物（３）（１８５ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２．０ｍＬ）溶液にｎ−ＢｕＬｉ ヘキサン溶液（１．６０Ｍ，０．２２ｍＬ，０．３５ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、同温で１０分間攪拌した。その溶液に（Ｄ）で得られた化合物（２）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（７５ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２．２ｍＬ）溶液を−７８℃で加え、同温で２時間攪拌した。その後、室温まで２．５時間かけて昇温した。その溶液に水を０℃で加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１→６／１→４／１→２／１）で精製したところ、化合物（２０）（１３ｍｇ，０．０１８ｍｍｏｌ，９％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.040 (s, 3H), 0.044 (s, 3H), 0.051 (s, 6H), 0.54 (s, 3H), 0.86 (s, 9H), 0.86 (s, 9H), 0.90 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.03 (m, 1H), 1.19 (s, 6H), 1.31-1.87 (m, 15H), 1.92 (br d, J = 12.5 Hz, 1H), 2.07 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 2.21 (dd, J = 7.7, 13.2 Hz, 1H), 2.44 (dd, 4.0, 13.2 Hz, 1H), 2.82 (dd, J = 2.9, 13.2 Hz, 1H), 3.27 (s, 3H), 3.35 (s, 3H), 3.69 (ddd, J = 4.0, 9.3, 13.7 Hz, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.36 (dd, J = 3.5, 6.7 Hz, 1H), 4.69 (s, 2H), 4.90 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.19 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 11.4 Hz, 1H).
ESI-HRMS calcd for C42H79O5Si2([M+H]+) 719.5466, found 719.5458.
【００６７】
（Ｆ） （Ｅ）で得られた化合物（２０）（４．７ｍｇ，０．００６５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１．３ｍＬ）溶液に（＋）−１０−カンファースルホン酸（１５ｍｇ，０．０６５ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で４時間攪拌した。その溶液を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を０℃で加えた。その溶液を減圧下で濃縮し、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物を薄層プレパラティブクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製したところ、化合物（１ｃ）（２．８ｍｇ，０．００６３ｍｍｏｌ，９７％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.58 (s, 3H), 0.93 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.08 (m, 1H), 1.22 (s, 6H), 1.34-1.75 (m, 18H), 1.85 (m, 1H), 1.97 (m, 4H), 2.11 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 2.31 (dd, J = 7.4, 13.0 Hz, 1H), 2.63 (dd, J = 13.0, 3.9 Hz, 1H), 2.84 (dd, J = 13.0, 3.2 Hz, 1H), 3.31 (s, 3H), 3.73 (ddd, J = 3.9, 9.2, 13.6 Hz, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.43 (m, 1H), 5.05 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.35 (s, 1H), 6.16 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 11.4 Hz, 1H).
ESI-HRMS calcd for C28H46O4Na ([M+Na]+) 469.3294, found 469.3286.
【００６８】
［実施例３］
ニワトリ小腸粘膜細胞質内１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３リセプタ−（ＶＤＲ）
に対する結合親和性
文献記載の方法（石塚ら、ステロイズ（Ｓｔｅｒｏｉｄｓ）、１９８２年、３７巻、ｐ．３３−４３）に従った。すなわち、１２×７５ｍｍのポリプロピレンチュ−ブに、ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社から購入した［２６、２７−メチル−３Ｈ］１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３（１７６Ｃｉ／ｍｍｏｌ）２０ｐｇと被験化合物を５０μｌのエタノ−ルに溶解した。これに、リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）１ｍｌにニワトリ小腸粘膜細胞より上記文献記載の方法で調製したＶＤＲ０．１ｍｇとゲラチン２ｍｇを溶解した溶液を加え、２５℃で１時間反応させた。反応後、４０％ポリエチレングリコ−ル６０００溶液１ｍｌを各チュ−ブに加え、激しく撹拌後、４℃、２２６０×ｇで６０分間遠心分離した。沈殿部分のチュ−ブをカッタ−ナイフで切り取り、液体シンチレ−ション用バイアルに入れ、１０ｍｌのジオキサンシンチレ−タ−を加え、放射能をベックマンＬＳ６５００型液体シンチレ−ションカウンタ−で測定した。
この結果、本発明の化合物は、少なくとも１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の数１０分の１の親和性は有することがわかった。
【００６９】
［実施例４］
ヒト骨芽細胞（ＨＯＳ細胞）におけるＶＤＲ転写活性
レポーターベクターはｐＧＬ３ベクター（ｐｒｏｍｅｇａ社）を用い、ルシフェラーゼ遺伝子の上流に、文献既知の方法（Ｏｚｏｎｏら、ザ・ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ）、２６５巻、２１８８１―２１８８８頁、１９９０年）で得られるヒトオステオカルシン遺伝子プロモーター部分の配列を、ＨＯＳ細胞（ＡＴＣＣより入手）から取得したｃＤＮＡよりクローニングし、組み込んで構築した。発現ベクターはｐＣＤＮＡ３ベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）にヒトＶＤＲおよびヒトＲＸＲをコードするＤＮＡ配列を挿入して構築した。ＨＯＳ細胞は１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地で３７℃、５％ＣＯ２の条件で培養し、２日あるいは３日ごとに継代した。この継代培養していた細胞を遠心回収し、無血清、フェノールレッド不含のＤＭＥＭ培地に４×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌの密度で分散させ、９６ウェルプレートに０．１ｍＬ／ウェルで播種した。この系に、（１）に記載した各種ベクターをＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）試薬を用いてウェルあたり０．０５ｍＬ添加した。３７℃で３時間インキュベートした後、各ウェルに各種濃度の被験化合物エタノール溶液あるいはコントロールとしてエタノールを２μＬずつ添加した。３７℃で２４時間インキュベートした後、培地を取り除き、ＰＢＳ（−）で一度洗浄した後、ＤｕａｌＧｌｏ−Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、ルミノメータ（ベルトールド社）によりルシフェラーゼ活性を測定した。
この結果、本発明の化合物は、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３に比べ、２分の１から同等の転写活性を有することが判明した。
【産業上の利用可能性】
【００７０】
本発明のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物は、医薬品として用いられる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品として有用なビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物、それらを用いた治療剤、それらを含有する医薬組成物、およびそれらの製造中間体に関する。さらに詳しくは、１５−置換ビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物、それらを含有する医薬組成物、およびそれらを有効成分とする骨粗鬆症、悪性腫瘍、乾癬症、副甲状腺機能亢進症、炎症性呼吸器疾患、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、脱毛症、アクネ、または皮膚炎の治療剤、ならびにそれらの製造中間体に関する。
【背景技術】
【０００２】
活性型ビタミンＤ３誘導体は、小腸でのカルシウム吸収促進作用を有し、骨では骨吸収、骨形成を調節する等の作用を有し、骨粗鬆症の治療剤として使用されている。また、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）の分泌抑制作用を有し、ＰＴＨの亢進した二次性副甲状腺機能亢進症の治療に用いられている。さらに、これらの作用に加えて免疫調節作用、細胞増殖抑制作用や細胞分化誘導作用が見いだされ、例えば、癌、乾癬、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、アクネ、湿疹、皮膚炎等の疾患治療剤への適応が検討されている。これら治療剤としての薬理効果を高めるため、これまでに体内の活性型ビタミンＤ３誘導体である１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３を構造モチーフとして数多くの活性型ビタミンＤ３誘導体が合成されてきた。
【０００３】
しかしながらその多くはビタミンＤ３側鎖やＡ環に対する修飾体であり、Ｄ環に対する修飾体は合成困難であるため１６−エン誘導体を除いてほとんど報告されておらず、本発明の１５位に置換基を有する誘導体は全く報告されていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、従来の活性型ビタミンＤ３誘導体よりも医薬治療剤として有用な新規ビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を提供することである。
【０００５】
また、本発明の目的は、それらビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する骨粗鬆症、悪性腫瘍、乾癬症、副甲状腺機能亢進症、炎症性呼吸器疾患、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、脱毛症、アクネ、または皮膚炎の治療剤を提供することである。
【０００６】
さらに、本発明の目的は、それらビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を含んでなる医薬組成物を提供することである。
【０００７】
さらに本発明の目的は、それらビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を製造するのに適した中間体を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の１５位に置換基を有する誘導体（１）の合成は、例えば下記スキーム１のようにＣＤ環側鎖化合物（２）と文献既知のＡ環化合物（３）のカップリング、引き続く水酸基の脱保護により行うことができる。ここで、Ｒ’は水酸基の保護基または炭素数１〜４のアルキル基を表し、ＰＧは水酸基の保護基を表す。
【０００９】
（スキーム１）
【化１】
【００１０】
しかし、ここで用いられる化合物（２）の合成法は知られておらず、新たに合成法を開発する必要があった。そこで、本発明の発明者らは、以下に示す方法を検討した。
【００１１】
まず、１，５−水素原子移動機構に基づく方法を検討した。これは以下に示すように化合物Ａから化合物Ｃへの変換を行うことにより、８位水酸基を１８位へ移植する方法である（モーマンら（Ｍｏｍａｎ ｅｔ ａｌ．）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、６９巻、４６１−４６２５頁、２００４年）。
【００１２】
【化２】
【００１３】
この方法を応用し、文献既知の化合物Ｄ（メイナルドら（Ｍａｙｎａｒｄ ｅｔ ａｌ．）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、５７巻、３２１４−４３１７頁、１９９２年）から誘導される化合物Ｅに対して同様の反応を行うことにより、１８位の水酸基を１５位に移植し、化合物（２）が合成できるのではないかと考えた。
【００１４】
【化３】
【００１５】
しかしながら、反応系は複雑な混合物を与え、目的とする１５位置換体は得ることができず、代わりに化合物ＨないしＩと思われる化合物が得られた。また、Ｅの段階でその後の化学変換に耐えうる十分量を確保することも困難と思われた。
【００１６】
【化４】
【００１７】
そこで、別の方法を考案した。すなわち、文献既知の化合物（４）（フェルナンデスら（Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ ｅｔ ａｌ．）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、５７巻、３１７３−３１７８頁、１９９２年）に２重結合を導入し化合物（６）を得る。これをエポキシド（１０）に変換し、これに対して側鎖のグリニヤ試薬（１１）をカップリングさせることにより１５位に水酸基が導入された化合物（１２）を得る。これを変換して目的物（２）を得る方法である。
【００１８】
【化５】
【００１９】
まず化合物（４）から（６）の変換を行った。一般的な方法であるフェニルセレン置換脱離を検討したが、目的物は得られず、環拡大した（Ｊ）が得られたのみであった。本反応でセレノキシドへの酸化剤に過酸化水素の代わりにメタクロロ過安息香酸を用いるとわずかに目的の（６）が得られたが、本合成経路にのせるほど量産化ができず、断念せざるを得なかった。
【００２０】
【化６】
【００２１】
そこで、種々条件を検討した結果、エノールアセテート（５）を経由するルートで（６）が得られることがわかった。
【００２２】
【化７】
【００２３】
さらに、化合物（６）から目的物（２）への変換は、後述のスキーム２に沿って得られることがわかった。
【００２４】
以上のように、従来にはない合成法を新たに開発することにより、はじめて本発明化合物の合成が可能になり、本発明の完成に至ったのである。
【００２５】
すなわち、本発明は下記式（１）で表されるビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物である。
【００２６】
【化８】
ここで、Ｒは水素原子または炭素数１〜４のアルキル基を表す。
【００２７】
また、本発明は、上記式（１）で表されるビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物と、製薬学的に許容される担体とからなる医薬組成物である。
【００２８】
また、本発明は、上記式（１）で表されるビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する、骨粗鬆症、悪性腫瘍、乾癬症、副甲状腺機能亢進症、炎症性呼吸器疾患、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、脱毛症、アクネ、および皮膚炎からなる群から選ばれる一つ以上の疾患の治療剤である。
【００２９】
さらに、本発明は、式（２）で表されるビタミンＤ３誘導体の製造中間体である。
【化９】
ここで、Ｒ’は水酸基の保護基または炭素数１〜４のアルキル基を表し、ＰＧは水酸基の保護基を表す。
【発明の効果】
【００３０】
本発明によれば、骨粗鬆症、悪性腫瘍、乾癬症、副甲状腺機能亢進症、炎症性呼吸器疾患、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、脱毛症、アクネ、皮膚炎などに代表される様々な疾患の治療に有効な新規ビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物が提供される。
【００３１】
一方、本発明の上記式（２）で表される製造中間体は、本発明のビタミンＤ３誘導体等を製造するのに有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３２】
本発明における用語の定義は以下の通りである。 アルキル基とは、直鎖、分岐鎖、あるいは環状の脂肪族炭化水素基をいう。Ｃ１−Ｃ４のアルキル基とは、炭素数１から４のアルキル基を意味し、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基を具体的な基として挙げることができる。
【００３３】
上記式（１）中、Ｒは水素原子または炭素数１〜４のアルキル基を表すが、中でも水素原子、メチル基が好ましい。
なお、上記式（１）中、ビタミンＤ構造の１５位の立体配置は、Ｒ配置、Ｓ配置のいずれでもよい。
【００３４】
本発明のビタミンＤ３誘導体は必要に応じてその医薬上許容される溶媒和物に変換することができる。そのような溶媒としては、水、メタノ−ル、エタノ−ル、プロパノール、２−プロパノール、ブタノ−ル、ｔ−ブタノ−ル、アセトニトリル、アセトン、メチルエチルケトン、クロロホルム、酢酸エチル、ジエチルエ−テル、ｔ−ブチルメチルエ−テル、ベンゼン、トルエン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ等を挙げることができる。特に、水、メタノ−ル、エタノ−ル、プロパノール、２−プロパノール、アセトニトリル、アセトン、メチルエチルケトン、酢酸エチルを好ましいものとして挙げることができる。
【００３５】
本発明のビタミンＤ３誘導体の具体例としては、以下のものが挙げられる。
化合物（１ａ）： １５（Ｓ）−ヒドロキシ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３
化合物（１ｄ）： １５（Ｒ）−ヒドロキシ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３
化合物（１ｃ）： １５（Ｓ）−メトキシ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３
化合物（１ｄ）： １５（Ｒ）−メトキシ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３
化合物（１ｅ）： １５（Ｓ）−エトキシ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３
化合物（１ｆ）： １５（Ｒ）−エトキシ−１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３
【００３６】
また上記式（２）中、Ｒ’は水酸基の保護基または炭素数１〜４のアルキル基を表し、ＰＧは水酸基の保護基を表す。これら水酸基の保護基としては、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、メトキシメチル基、テトラヒドロ−４Ｈ−ピラン−２−イル基、アセチル基、ピバロイル基などが挙げられる。このうち、トリメチルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、メトキシメチル基が好ましい例として挙げられる。炭素数１〜４のアルキル基としては、メチル基が好ましい。また、上記式（２）におけるＯＲの置換した炭素の立体配置は、Ｒ配置、Ｓ配置のいずれでもよい。
【００３７】
上記式（１）で表されるビタミンＤ３誘導体の合成はいかなる方法で行ってもよいが、例えば、前述の下記スキーム１に従い、ＣＤ環側鎖化合物（２）と文献既知のＡ環化合物（３）（例えば、Ｂａｇｉｏｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、５１巻、３０９８−３１０８頁、１９８６年）のカップリング、引き続く水酸基の脱保護により行うことができる。
【００３８】
（スキーム１）
【化１０】
【００３９】
ここで、化合物（２）は、例えば下記スキーム２に従って合成することができる。
【化１１】
【００４０】
すなわち、文献既知の化合物（４）（フェルナンデスら（Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ ｅｔ ａｌ．）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、５７巻、３１７３−３１７８頁、１９９２年）からエノールアセテート（５）を経由して２重結合を導入した化合物（６）を得る。これを還元後、エポキシ化、酸化、エチリデン基導入反応を順次行って化合物（１０）を得る。これに対して側鎖構造を持つグリニヤ試薬（１１）をカップリングさせることにより１５位に水酸基が導入された化合物（１２）を得る。１５位水酸基を保護（１５−ＯＨ体合成用）あるいはエーテル化（１５−アルコキシ体合成用）して化合物（１３）とし、これに水素添加、ＴＢＳ脱保護、酸化することにより目的物（２）を得ることができる。本スキームによれば１５位の立体配置は（Ｓ）体のものが得られるが、化合物（１２）を光延反応に付す、水酸基を酸化・還元する、などの処理により１５位の立体配置が反転した化合物（１２）を得、以降上記と同様に反応させることにより、１５位の立体配置が（Ｒ）体のものも得ることができる。
【００４１】
以上のようにして得られるプレビタミンＤ３誘導体は、必要に応じて前述のような医薬上許容される溶媒和物に変換することができる。かかる溶媒和物は、フリーの化合物（１）を該溶媒、あるいは該溶媒を含有する混合溶媒より再結晶することにより得ることができる。
【００４２】
本発明のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する骨粗鬆症等の治療剤は、通常製剤化に用いられる担体や賦形剤、その他の添加剤を用いて調製される。製剤用の担体や賦形剤としては、固体または液体いずれでもよく、例えば乳糖、ステアリン酸マグネシウム、スターチ、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、オリーブ油、ゴマ油、カカオバター、エチレングリコール等やその他常用のものが挙げられる。投与は錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等による経口投与、あるいは静注、筋注等の注射剤、坐剤、経皮等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。
【００４３】
本発明の治療剤における有効成分の治療有効量は、投与経路、患者の年齢、性別、疾患の程度によって異なるが、通常０．００１〜１００００μｇ／日程度であり、投与回数は通常１〜３回／日ないし１〜３回／週であり、このような条件を満足するように製剤を調製するのが好ましい。
【実施例】
【００４４】
以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれによって限定されるものではない。
【００４５】
［実施例１］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｓ，３Ｒ，１５Ｓ，２０Ｒ）−１５−ヒドロキシ−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１,３,２５−トリオール（化合物（１ａ））の製造
【００４６】
【化１２】
【００４７】
（Ａ） 化合物（４）（５６５ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）（フェルナンデスら（Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ ｅｔ ａｌ．）、ザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．）、５７巻、３１７３−３１７８頁、１９９２年）の酢酸イソプロペニル（２０ｍＬ）溶液に（＋）−１０−カンファースルホン酸（１３９ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）を室温で加え、１１７℃で２０時間加熱還流した。その溶液を室温まで冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、同温で１時間攪拌した。水層をエーテル抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）で精製したところ、化合物（５）（４８０ｍｇ，１．４８ｍｍｏｌ，７４％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.00 (s, 6H), 0.87 (s, 9H), 1.12 (s, 3H), 1.34 (dt, J = 3.6, 12.8 Hz, 1H), 1.46 (m, 1H), 1.52 (m, 1H), 1.59-1.69 (m, 2H), 1.75-1.88 (m, 2H), 1.99 (ddd, J = 3.3, 6.0, 14.2 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.30 (ddd, J = 1.7, 11.5, 14.2 Hz, 1H), 4.06 (m, 1H), 5.41 (dd, J = 1.7, 3.2 Hz, 1H).
ESI-HRMS calcd for C18H33O3Si ([M+H]+) 325.2199, found 325.2199.
【００４８】
（Ｂ） （Ａ）で得られた化合物（５）（１９２ｍｇ，０．５９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（７．４ｍＬ）溶液に炭酸アリルメチル（０．２７ｍＬ，２．３６ｍｍｏｌ）とトリブチルスズメトキシド（０．０８ｍＬ，０．３０ ｍｍｏｌ）を室温で加え、さらに酢酸パラジウム（４０ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）を７０℃で加え、１０６℃で２時間加熱還流した。その溶液を室温まで冷却した後、エーテルを用いてショートシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーでパラジウムを除去し、減圧下で溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）で精製したところ、化合物（６）（８７ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ，６２％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.044 (s, 3H), 0.058 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 1.33 (s, 3H), 1.48-1.50 (m, 3H), 1.75 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 2.55 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 4.42 (m, 1H), 6.00 (dd, J = 3.3, 6.0 Hz), 7.42 (m, 1H).
EI-LRMS m/z 280 (M+), 265, 223.
EI-HRMS calcd for C16H28O2Si 280.1868, found 280.1900.
【００４９】
（Ｃ） （Ｂ）で得られた化合物（６）（４４４ｍｇ，１．５８ｍｍｏｌ）のトルエン（５．３ｍＬ）溶液にＤＩＢＡＬ−Ｈトルエン溶液（０．９９Ｍ，３．２ｍＬ，３．１２ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、同温で４０分間攪拌した。その溶液をエーテルで希釈した後、飽和酒石酸水溶液を同温で加え、室温まで昇温して１時間攪拌した。水層をエーテルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）で精製したところ、化合物（７）（４４７ｍｇ，１．５８ ｍｍｏｌ，ｑｕａｎｔ．）が白色固体として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.019 (s, 3H), 0.022 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 1.05 (s, 3H), 1.38-1.53 (m, 4H), 1.66 (m, 1H), 1.77-1.90 (m, 2H), 2.03 (m, 1H), 4.18 (s, 1H), 4.27 (dd, J = 2.4, 5.2 Hz, 1H), 5.64 (ddd, J = 1.0, 3.4, 4.4 Hz, 1H), 5.86 (m, 1H).
EI-LRMS m/z 282 (M+), 267, 225.
EI-HRMS calcd for C16H30O2Si 282.2015, found 282.2016.
【００５０】
（Ｄ） （Ｃ）で得られた化合物（７）（２７０ｍｇ，０．９６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４．８ｍＬ）溶液にｍ−クロロ過安息香酸（４９５ｍｇ，２．８７ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で５時間攪拌した。その溶液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液を０℃で加えた後、水層をエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝６／１）で精製したところ、化合物（８）（２５６ｍｇ，０．８６ｍｍｏｌ，９０％）が無色油状物質として得られた。なお、得られた化合物（８）のエポキシ基の結合する炭素の立体配置は、（８）の水酸基をアセチル化し、これをＸ線結晶構造解析することにより上記記載の立体配置であることを確認した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.052 (s, 3H), 0.065 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 1.13-1.42 (m, 4H), 1.22 (s, 3H), 1.62-1.77 (m, 3H), 2.02 (s, 1H), 3.41-3.49 (m, 3H), 4.42 (m, 1H).
EI-LRMS m/z 298 (M+), 283, 241, 211.
EI-HRMS calcd for C16H30O2Si 298.1966, found 298.1971.
【００５１】
（Ｅ） （Ｄ）で得られた化合物（８）（３４１ｍｇ，１．１４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５．７ｍＬ）溶液にテトラプロピルアンモニウム パールテネート（ＴＰＡＰ）（２００ｍｇ，０．５７ｍｍｏｌ）と４−メチルモルフォリン Ｎ−オキシド（ＮＭＯ）（２００ｍｇ，１．７１ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で３０分間攪拌した。その溶液をエーテルで希釈し、ショートシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーに通した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）で精製したところ、化合物（９）（３３２ｍｇ，１．１２ｍｍｏｌ，９８％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.017 (s, 3H), 0.039 (s, 3H), 0.83 (s, 9H), 1.29 (s, 3H), 1.33-1.46 (m, 3H), 1.62-1.75 (m, 4H), 3.57 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.47 (s, 1H).
EI-LRMS m/z 296 (M+), 265, 239, 223.
EI-HRMS calcd for C16H28O3Si 296.1800, found 296.1773.
【００５２】
（Ｆ） エチルトリフェニルホスホニウムブロミド（６１３ｍｇ，１．６５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．５ｍＬ）懸濁液にｎ−ＢｕＬｉ ヘキサン溶液（１．５８Ｍ，０．９ｍＬ，１．４５ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、０℃まで昇温して、同温で１時間攪拌した。その溶液に（Ｅ）で得られた化合物（９）（９７ ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．８ mL）溶液を０℃で加えた後、同温で２４時間攪拌した。その溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を０℃で加え、水層をエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）で精製したところ、化合物（１０）（７８ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ，７６％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.049 (s, 3H), 0.073 (s, 3H), 0.88 (s, 9H), 1.19 (s, 9H), 1.22-1.46 (br, 3H), 1.60-1.76 (br, 4H), 1.78 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 3.55 (dd, J = 1.8, 3.3 Hz, 1H), 4.05 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 5.29 (dd, J = 6.9, 13.4 Hz, 1H).
EI-LRMS m/z 308 (M+), 293, 262, 251, 235.
EI-HRMS calcd for C18H32O2Si 308.2170, found 308.2166.
【００５３】
（Ｇ） ＣｕＣＮ（１０９ｍｇ，１．２０ｍｍｏｌ）のエーテル（０．６ｍＬ）懸濁液に４−（メトキシメトキシ）−４−メチルペンチル基からなるグリニヤ試薬（１１）（ＰＧ＝ＭＯＭ）（０．１４Ｍ，４．０ｍＬ，１．２ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、同温で１時間攪拌した。その溶液に（Ｆ）で得られた化合物（１０）（７５ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）のエーテル（０．６ｍＬ）溶液を−７８℃で加えた後、−２０℃まで昇温し、同温で２時間攪拌した。その溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を同温で加え、水層をエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）で精製したところ、化合物（１２）（ＰＧ＝ＭＯＭ）（７５ ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ，６９％）の無色油状物質が得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.043 (s, 3H), 0.059 (s, 3H), 0.87 (s, 9H), 1.05 (t, J = 7.2, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.19 (s, 6H), 1.34-1.54 (br, 12H), 1.61-1.73 (br, 2H), 1.79-1.89 (br, 2H), 1.92-2.07 (br, 2H), 3.34 (s, 3H), 4.29 (m, 1H), 4.59-4.62 (br, 1H), 4.67 (s, 2H), 5.27 (s, 2H).
EI-LRMS m/z 453 (M+-H), 335.
EI-HRMS calcd for C26H49O4Si 453.3403, found 453.3409.
【００５４】
（Ｈ） （Ｇ）で得られた化合物（１２）（ＰＧ＝ＭＯＭ）（１２ｍｇ，０．０２６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（０．２６ｍＬ）溶液にクロロメチルメチルエーテル（０．３ｍＬ，０．０３９ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．４ｍＬ，０．０７８ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で２．５時間攪拌した。その溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を０℃で加えた後、水層をエーテル抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）で精製したところ、化合物（１３）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（１１．４ｍｇ，０．０２４ｍｍｏｌ，９４％）の無色油状物質が得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.035 (s, 3H), 0.038 (s, 3H), 0.87 (s, 9H), 0.99 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.05 (s, 3H), 1.18 (s, 6H), 1.22-1.59 (m, 10H), 1.64-1.75 (m, 2H), 1.79-1.88 (m, 1H), 2.01-2.07 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.38 (s, 3H), 4.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.47 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.71 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.36 (s, 1H).
ESI-HRMS calcd for C28H54O5SiNa ([M+Na]+) 521.3638, found 521.3638.
【００５５】
（Ｉ） （Ｈ）で得られた化合物（１３）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（１０８ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）のメタノール（２．２ｍＬ）溶液に触媒量のＰｄ／Ｃを室温で加え、Ｈ２雰囲気下、室温で１８時間攪拌した。その溶液をエーテルで希釈した後、ろ紙でろ過し、Ｐｄ／Ｃを除去した。減圧下で溶媒を留去し、得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４０／１）で精製したところ、化合物（１４）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（６９ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ，６４％）の無色油状物質が得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.0070 (s, 3H), 0.027 (s, 3H), 0.86 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.87 (s, 9H), 0.91 (s, 3H), 1.19 (s, 6H), 1.15-1.47 (m, 7H), 1.68-179 (m, 4H), 1.88-1.91 (m, 1H), 3.34 (s, 3H), 3.36 (s, 3H), 3.85-3.95 (m, 1H), 4.17-4.18 (m, 1H), 4.62 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 5.9Hz, 1H), 4.68 (s, 2H).
ESI-HRMS calcd for C28H56O5SiNa ([M+Na]+) 523.3790, found 523.3795.
【００５６】
（Ｊ） （Ｉ）で得られた化合物（１４）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（７３ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２．９ｍＬ）溶液にＴＢＡＦ テトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ，２．９ｍＬ，２．９２ｍｍｏｌ）を室温で加え、８０℃で１６．５時間加熱還流した。その溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を０℃で加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製したところ、化合物（１５）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（５３ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ，９４％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.89 (d, J = 5.9 Hz, 3H), 0.96 (s, 3H), 1.21 (s, 6H), 1.25 (s, 3H), 1.11-1.53 (m, 9H), 1.60 (s, 1H), 1.75-1.84 (m, 4H), 1.94-1.97 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 4.09 (dt, J = 9.3, 18.1 Hz, 1H), 4.22 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.62 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.70 (s, 2H), 4.71 (d, J = 6.8 Hz, 1H).
ESI-HRMS calcd for C22H42O5Na ([M+Na]+) 409.2923, found 409.2930.
【００５７】
（Ｋ） （Ｊ）で得られた化合物（１５）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（５３ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２．７ｍＬ）溶液にＴＰＡＰ（２４ｍｇ，０．０６９ｍｍｏｌ）、ＮＭＯ（２４ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ）とＭＳ４Ａ（６９ｍｇ）を０℃で加え、室温で１時間攪拌した。その溶液をエーテルで希釈し、ショートシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーに通した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）で精製したところ、化合物（２）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（５１ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ，９８％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.65 (s, 3H), 0.85-0.90 (m, 2H), 0.94 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.04-1.09 (m, 3H), 1.21 (s, 6H), 1.25 (s, 3H), 1.31-1.50 (m, 2H), 1.62-1.76 (m, 2H), 1.80-1.92 (m, 2H), 2.00-2.09 (m, 2H), 2.24-2.34 (m, 2H), 2.61 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 3.36 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 4.33 (dt, J = 4.2, 8.9 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.70 (s, 2H).
ESI-HRMS calcd for C22H40O5Na ([M+Na]+) 407.2773, found 407.2769.
【００５８】
（Ｌ） 化合物（３）（８４ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）（Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ，Ｅ．Ｇ． ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、１９８６年、５１巻、３０９８頁）のＴＨＦ（０．９ｍＬ）溶液にｎ−ＢｕＬｉ ヘキサン溶液（１．５７Ｍ，０．１０ｍＬ，０．１６ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、同温で１０分間攪拌した。その溶液に（Ｋ）で得られた化合物（２）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（３７ｍｇ，０．０９６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．０ｍＬ）溶液を−７８℃で加え、１時間同温で攪拌した。その後、室温まで２時間かけて昇温した。その溶液に水を０℃で加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１−４／１−２／１）で精製したところ、化合物（１６）（ＰＧ＝Ｒ’＝ＭＯＭ）（９．２ｍｇ，０．０１２ｍｍｏｌ，１３％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.036 (s, 12H), 0.055 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 0.86 (s, 9H), 0.89 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.98-1.05 (m, 1H), 1.19 (s, 6H), 1.32-1.71 (m, 11H), 1.73-1.90 (m, 4H), 1.94 (br d, J = 12.7 Hz, 1H), 2.15-2.23 (m, 2H), 2.44 (dd, J = 3.7, 13.2 Hz, 1H), 2.84 (brd, J = 15.6 Hz, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.34 (s, 3H), 3.98 (dt, J = 4.4, 9.5 Hz, 1H), 4.14-4.19 (m, 1H), 4.36 (dd, J = 3.9, 6.6 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.68 (s, 2H), 4.88 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 5.18 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 11.0 Hz, 1H).
ESI-HRMS calcd for C43H80O6Si2Na ([M+Na]+) 749.5572, found 749.5576.
【００５９】
（Ｍ） （Ｌ）で得られた化合物（１６）（２２ｍｇ，０．０２９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２．９ｍＬ）溶液に（＋）−１０−カンファースルホン酸（１３６ｍｇ，０．５９ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で２３時間攪拌した。その溶液を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を０℃で加えた。その溶液を減圧下濃縮し、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物を薄層プレパラティブクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製したところ、化合物（１ａ）（７．３ｍｇ，０．０１７ｍｍｏｌ，５８％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.59 (s, 3H), 0.92 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.05-1.11 (m, 1H), 1.22-1.69 (m, 15H), 1.76-2.09 (m, 9H), 2.28-2.36 (m, 2H), 2.61 (dd, J = 2.9, 12.9 Hz, 1H), 2.88 (dd, J = 2.9, 12.1 Hz, 1H), 3.58-3.74 (m, 2H), 4.03-4.30 (m, 2H), 4.43-4.46 (m, 1H), 5.01 (s, 1H), 5.35 (s, 1H), 6.18 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 11.1 Hz, 1H).
ESI-HRMS calcd for C27H44O4Na ([M+Na]+) 455.3137, found 455.3140.
【００６０】
［実施例２］
（５Ｚ，７Ｅ）−（１Ｓ，３Ｒ，１５Ｒ，２０Ｒ）−１５−メトキシ−９，１０−セコ−５，７，１０（１９）−コレスタトリエン−１,３,２５−トリオール（化合物（１ｃ））の製造
【００６１】
【化１３】
【００６２】
（Ａ） 実施例１の（Ｇ）で得られた化合物（１２）（ＰＧ＝ＭＯＭ）（１２０ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５．２ ｍＬ）溶液に水素化ナトリウム（５０ｍｇ，２．０８ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で1時間攪拌した。その溶液にヨウ化メチル（０．１６ｍＬ，２．６０ｍｍｏｌ）を室温で加え、８０℃で２．５時間加熱還流した。室温まで冷却した後、飽和塩化アンモニウム水溶液を０℃で加えた。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２０／１）で精製したところ、化合物（１７）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（９０ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ，７４％）の無色油状物質が得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.029 (s, 3H), 0.041 (s, 3H), 0.87 (s, 9H), 0.98 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.05 (s, 3H), 1.18 (s, 6H), 1.20-1.52 (m, 9H), 1.60-1.72 (m, 3H), 1.77-1.90 (m, 1H), 1.99-2.08 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 4.18 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.67 (s, 2H), 5.45 (s, 1H).
ESI-HRMS calcd for C27H57O4SiNa ([M+Na]+) 491.3533, found 491.3524.
【００６３】
（Ｂ） （Ａ）で得られた化合物（１７）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（９０ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ）のメタノール（３．８ｍＬ）溶液に触媒量のＰｄ／Ｃを室温で加え、同温でＨ２雰囲気下、１７時間攪拌した。その溶液をエーテルで希釈した後、ショートシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ジエチルエーテル）によりＰｄ／Ｃを除去した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４０／１）で精製したところ、（１８）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（８３ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ，９２％）の無色油状物質が得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.013 (s, 6H), 0.86 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.88 (s, 9H), 0.91 (s, 3H), 0.95-1.03 (m, 1H), 1.14-1.47 (m, 11H), 1.19 (s, 6H), 1.58-1.78 (m, 4H), 1.88 (br d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.28 (s, 3H), 3.35 (s, 3H), 3.62 (dt, J = 3.9, 9.4 Hz, 1H), 4.14 (m, 1H), 4.68 (s, 2H).
ESI-HRMS calcd for C27H54O4SiNa ([M+Na]+) 493.3689, found 493.3690.
【００６４】
（Ｃ） （Ｂ）で得られた化合物（１８）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（１２２ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３．３ｍＬ）溶液にＴＢＡＦ テトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ，５．２ｍＬ，５．１９ｍｍｏｌ）を室温で加え、８０℃で１４時間加熱還流した。その溶液にＴＢＡＦ テトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ，２．６ｍＬ，２．６０ｍｍｏｌ）を室温で加え、８０℃で５時間加熱還流した。さらにその溶液にＴＢＡＦ テトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ，５．２ｍＬ，５．１９ｍｍｏｌ）を室温で加え、８０℃で１７．５時間加熱還流した。さらにＴＢＡＦ テトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ，５．２ｍＬ，５．１９ｍｍｏｌ）を室温で加え、８０℃で５時間加熱還流した。その溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を０℃で加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製したところ、化合物（１９）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（９１ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ，９８％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.89 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 0.96 (s, 3H), 1.03 (br t, J = 9.8 Hz, 1H), 1.21 (s, 6H), 1.24-1.72 (m, 13H), 1.74-1.82 (m, 3H), 1.95 (br d, J = 12.7 Hz, 1H), 3.35 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 3.74 (ddd, J = 3.9, 8.5, 12.8 Hz, 1H), 4.24 (m, 1H), 4.71 (s, 2H).
ESI-HRMS calcd for C21H40O4Na ([M+Na]+) 379.2824, found 379.2830.
【００６５】
（Ｄ） （Ｃ）で得られた化合物（１９）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（９０ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２．５ｍＬ）溶液にＴＰＡＰ（４４ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、ＮＭＯ（４４ｍｇ，０．３８ｍｍｏｌ）とＭＳ４Ａ（１２５ｍｇ）を０℃で加え、室温で１．５時間攪拌した。その溶液をエーテルで希釈し、ショートシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーに通した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）で精製したところ、化合物（２）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（７５ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ，８５％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.64 (s, 3H), 0.95 (d, J = 6.6 Hz, 3 H), 1.02-1.10 (m, 1H), 1.21 (s, 6H), 1.23-1.50 (m, 8H), 1.62-1.94 (m, 5H), 1.99-2.08 (m, 2H), 2.23-2.34 (m, 2H), 2.55 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 3.29 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 4.01 (dt, J = 3.6, 8.6 Hz, 1 H), 4.70 (s, 3H).
ESI-HRMS calcd for C21H38O4Na ([M+Na]+) 377.2668, found 377.2674.
【００６６】
（Ｅ） 化合物（３）（１８５ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２．０ｍＬ）溶液にｎ−ＢｕＬｉ ヘキサン溶液（１．６０Ｍ，０．２２ｍＬ，０．３５ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、同温で１０分間攪拌した。その溶液に（Ｄ）で得られた化合物（２）（ＰＧ＝ＭＯＭ、Ｒ’＝ＣＨ３）（７５ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２．２ｍＬ）溶液を−７８℃で加え、同温で２時間攪拌した。その後、室温まで２．５時間かけて昇温した。その溶液に水を０℃で加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１→６／１→４／１→２／１）で精製したところ、化合物（２０）（１３ｍｇ，０．０１８ｍｍｏｌ，９％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.040 (s, 3H), 0.044 (s, 3H), 0.051 (s, 6H), 0.54 (s, 3H), 0.86 (s, 9H), 0.86 (s, 9H), 0.90 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.03 (m, 1H), 1.19 (s, 6H), 1.31-1.87 (m, 15H), 1.92 (br d, J = 12.5 Hz, 1H), 2.07 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 2.21 (dd, J = 7.7, 13.2 Hz, 1H), 2.44 (dd, 4.0, 13.2 Hz, 1H), 2.82 (dd, J = 2.9, 13.2 Hz, 1H), 3.27 (s, 3H), 3.35 (s, 3H), 3.69 (ddd, J = 4.0, 9.3, 13.7 Hz, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.36 (dd, J = 3.5, 6.7 Hz, 1H), 4.69 (s, 2H), 4.90 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.19 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 11.4 Hz, 1H).
ESI-HRMS calcd for C42H79O5Si2([M+H]+) 719.5466, found 719.5458.
【００６７】
（Ｆ） （Ｅ）で得られた化合物（２０）（４．７ｍｇ，０．００６５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１．３ｍＬ）溶液に（＋）−１０−カンファースルホン酸（１５ｍｇ，０．０６５ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で４時間攪拌した。その溶液を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を０℃で加えた。その溶液を減圧下で濃縮し、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去して得られた残留物を薄層プレパラティブクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製したところ、化合物（１ｃ）（２．８ｍｇ，０．００６３ｍｍｏｌ，９７％）が無色油状物質として得られた。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.58 (s, 3H), 0.93 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.08 (m, 1H), 1.22 (s, 6H), 1.34-1.75 (m, 18H), 1.85 (m, 1H), 1.97 (m, 4H), 2.11 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 2.31 (dd, J = 7.4, 13.0 Hz, 1H), 2.63 (dd, J = 13.0, 3.9 Hz, 1H), 2.84 (dd, J = 13.0, 3.2 Hz, 1H), 3.31 (s, 3H), 3.73 (ddd, J = 3.9, 9.2, 13.6 Hz, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.43 (m, 1H), 5.05 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.35 (s, 1H), 6.16 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 11.4 Hz, 1H).
ESI-HRMS calcd for C28H46O4Na ([M+Na]+) 469.3294, found 469.3286.
【００６８】
［実施例３］
ニワトリ小腸粘膜細胞質内１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３リセプタ−（ＶＤＲ）
に対する結合親和性
文献記載の方法（石塚ら、ステロイズ（Ｓｔｅｒｏｉｄｓ）、１９８２年、３７巻、ｐ．３３−４３）に従った。すなわち、１２×７５ｍｍのポリプロピレンチュ−ブに、ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社から購入した［２６、２７−メチル−３Ｈ］１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３（１７６Ｃｉ／ｍｍｏｌ）２０ｐｇと被験化合物を５０μｌのエタノ−ルに溶解した。これに、リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）１ｍｌにニワトリ小腸粘膜細胞より上記文献記載の方法で調製したＶＤＲ０．１ｍｇとゲラチン２ｍｇを溶解した溶液を加え、２５℃で１時間反応させた。反応後、４０％ポリエチレングリコ−ル６０００溶液１ｍｌを各チュ−ブに加え、激しく撹拌後、４℃、２２６０×ｇで６０分間遠心分離した。沈殿部分のチュ−ブをカッタ−ナイフで切り取り、液体シンチレ−ション用バイアルに入れ、１０ｍｌのジオキサンシンチレ−タ−を加え、放射能をベックマンＬＳ６５００型液体シンチレ−ションカウンタ−で測定した。
この結果、本発明の化合物は、少なくとも１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の数１０分の１の親和性は有することがわかった。
【００６９】
［実施例４］
ヒト骨芽細胞（ＨＯＳ細胞）におけるＶＤＲ転写活性
レポーターベクターはｐＧＬ３ベクター（ｐｒｏｍｅｇａ社）を用い、ルシフェラーゼ遺伝子の上流に、文献既知の方法（Ｏｚｏｎｏら、ザ・ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ）、２６５巻、２１８８１―２１８８８頁、１９９０年）で得られるヒトオステオカルシン遺伝子プロモーター部分の配列を、ＨＯＳ細胞（ＡＴＣＣより入手）から取得したｃＤＮＡよりクローニングし、組み込んで構築した。発現ベクターはｐＣＤＮＡ３ベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）にヒトＶＤＲおよびヒトＲＸＲをコードするＤＮＡ配列を挿入して構築した。ＨＯＳ細胞は１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地で３７℃、５％ＣＯ２の条件で培養し、２日あるいは３日ごとに継代した。この継代培養していた細胞を遠心回収し、無血清、フェノールレッド不含のＤＭＥＭ培地に４×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌの密度で分散させ、９６ウェルプレートに０．１ｍＬ／ウェルで播種した。この系に、（１）に記載した各種ベクターをＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）試薬を用いてウェルあたり０．０５ｍＬ添加した。３７℃で３時間インキュベートした後、各ウェルに各種濃度の被験化合物エタノール溶液あるいはコントロールとしてエタノールを２μＬずつ添加した。３７℃で２４時間インキュベートした後、培地を取り除き、ＰＢＳ（−）で一度洗浄した後、ＤｕａｌＧｌｏ−Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、ルミノメータ（ベルトールド社）によりルシフェラーゼ活性を測定した。
この結果、本発明の化合物は、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３に比べ、２分の１から同等の転写活性を有することが判明した。
【産業上の利用可能性】
【００７０】
本発明のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物は、医薬品として用いられる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）で表されるビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。
【化１】
ここで、Ｒは水素原子または炭素数１〜４のアルキル基を表す。
【請求項２】
Ｒが水素原子またはメチル基を表す請求項１に記載のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。
【請求項３】
Ｒが水素原子を表す請求項１に記載のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。
【請求項４】
Ｒがメチル基を表す請求項１に記載のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。
【請求項５】
請求項１から請求項４のいずれかに記載のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物と、製薬学的に許容される担体とからなる医薬組成物。
【請求項６】
請求項１から請求項４のいずれかに記載のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する、骨粗鬆症、悪性腫瘍、乾癬症、副甲状腺機能亢進症、炎症性呼吸器疾患、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、脱毛症、アクネ、および皮膚炎からなる群から選ばれる一つ以上の疾患の治療剤。
【請求項７】
下記式（２）で表される化合物。
【化２】
ここで、Ｒ’は水酸基の保護基または炭素数１〜４のアルキル基を表し、ＰＧは水酸基の保護基を表す。
【請求項８】
Ｒ’とＰＧがいずれもメトキシメチル基を表す請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ’がメチル基を表し、ＰＧがメトキシメチル基を表す請求項７に記載の化合物。
【請求項１】
下記式（１）で表されるビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。
【化１】
ここで、Ｒは水素原子または炭素数１〜４のアルキル基を表す。
【請求項２】
Ｒが水素原子またはメチル基を表す請求項１に記載のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。
【請求項３】
Ｒが水素原子を表す請求項１に記載のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。
【請求項４】
Ｒがメチル基を表す請求項１に記載のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。
【請求項５】
請求項１から請求項４のいずれかに記載のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物と、製薬学的に許容される担体とからなる医薬組成物。
【請求項６】
請求項１から請求項４のいずれかに記載のビタミンＤ３誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する、骨粗鬆症、悪性腫瘍、乾癬症、副甲状腺機能亢進症、炎症性呼吸器疾患、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、脱毛症、アクネ、および皮膚炎からなる群から選ばれる一つ以上の疾患の治療剤。
【請求項７】
下記式（２）で表される化合物。
【化２】
ここで、Ｒ’は水酸基の保護基または炭素数１〜４のアルキル基を表し、ＰＧは水酸基の保護基を表す。
【請求項８】
Ｒ’とＰＧがいずれもメトキシメチル基を表す請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ’がメチル基を表し、ＰＧがメトキシメチル基を表す請求項７に記載の化合物。
【公開番号】特開２００９−１９１０３２（Ｐ２００９−１９１０３２Ａ）
【公開日】平成２１年８月２７日（２００９．８．２７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−３４６３１（Ｐ２００８−３４６３１）
【出願日】平成２０年２月１５日（２００８．２．１５）
【出願人】（５０３３６９４９５）帝人ファーマ株式会社 (159)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２１年８月２７日（２００９．８．２７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年２月１５日（２００８．２．１５）
【出願人】（５０３３６９４９５）帝人ファーマ株式会社 (159)
【Ｆターム（参考）】
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