ＭＭＰ阻害活性を有する画像診断剤
本発明は画像診断の分野に関する。具体的には、本発明は、特定のマトリックスメタロプロテイナーゼが関与していることが知られている疾患の画像診断に関する。本発明の一実施形態は、画像診断に好適な、マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害活性を有する化合物である。本発明ではまた、本発明の画像診断剤を哺乳動物への投与に適した形態で含む医薬組成物も開示されている。本発明ではさらに、本発明の画像診断剤の合成における中間体、及び本発明の医薬組成物の調製用キットも開示されている。本発明の医薬組成物は、特定のマトリックスメタロプロテイナーゼが関与していることが知られている疾患の診断に用いることができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インビボでの画像診断、特にＳＰＥＣＴイメージングの分野に関する。具体的には、本発明はマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む新規イメージング剤であって、循環器疾患、炎症性疾患及び悪性疾患のインビボでの画像診断に有用な新規イメージング剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰｓ）とは、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の分解又は再構築を仲介する、少なくとも２０種の亜鉛依存性エンドペプチダーゼのファミリーのことである［Ｍａｓｓｏｖａ ｅｔ ａｌ ＦＡＳＥＢ Ｊ（１９９８）１２ １０７５−９５］。また、ＭＭＰファミリーのメンバーは、血管壁の全成分を分解することができるため、ＥＣＭの成分の分解を伴う生理現象と病理現象の両方に大きな役割を果たす。ＭＭＰｓは細胞の挙動を制御する細胞−マトリックス相互作用に干渉することができるため、その活性は細胞の分化、遊走、増殖及びアポトーシスといった様々なプロセスに影響を与える［Ｎａｇａｓｅ ａｎｄ Ｗｏｅｓｓｎｅｒ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９９）２７４ ２１４９１−４］。生理状況下でのＭＭＰ活性を細かく調整する負の調整制御は、必ずしも適切に働くわけではない。ＭＭＰ活性の不適切な発現は、いくつかの疾患状態における病理機序の一部を構成すると考えられている。そのため、ＭＭＰｓは、多くの炎症性、悪性及び変性疾患の治療用阻害剤の標的となっている［Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ ｅｔ ａｌ Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．（１９９９）９９ ２７３５−７６］。
【０００３】
したがって、ＭＭＰｓの合成阻害剤は多くの炎症性、悪性及び変性疾患の治療に有用であると考えられている。さらに、ＭＭＰｓの阻害剤がこれらの疾患の診断に有用であることも示唆されている。国際公開第０１／６０４１６号には、アテローム性動脈硬化症、心不全及び再狭窄などの細胞外マトリックス分解に関連する循環器病の診断に有用であるとして提示された化合物が開示されている。同パンフレットに開示の化合物は、診断用金属に結合することが可能なキレート剤に任意のリンカーを介して連結しているＭＭＰ阻害剤を含む。好ましいＭＭＰ阻害剤、キレート剤及びリンカーは同パンフレットに記載されている。Ｚｈｅｎｇらの報告［Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２９ ７６１−７７０（２００２）］には、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）トレーサー１１Ｃ及び１８Ｆで標識したＭＭＰ阻害剤の合成が記録されている。同報告に記載の化合物は、乳癌の非侵襲イメージングに有用であると仮定されている。
【特許文献１】国際公開第０１／６０４１６号パンフレット
【特許文献２】国際公開第９１／０１１４４号パンフレット
【特許文献３】米国特許第４８８５３６３号明細書
【非特許文献１】Ｍａｓｓｏｖａ ｅｔ ａｌ ＦＡＳＥＢ Ｊ（１９９８）１２ １０７５−９５
【非特許文献２】Ｎａｇａｓｅ ａｎｄ Ｗｏｅｓｓｎｅｒ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９９）２７４ ２１４９１−４
【非特許文献３】Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ ｅｔ ａｌ Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．（１９９９）９９ ２７３５−７６
【非特許文献４】Ｚｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２９ ７６１−７７０（２００２）
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
画像診断に特に有用であることが判明した、ＭＭＰ阻害活性を有する新規画像診断剤が開示されている。本発明の別の一態様は、人体の画像診断に有用な医薬組成物である。また、本発明の医薬組成物の調製用キットも開示されている。さらに本発明は、本発明の医薬組成物の、画像診断のための使用を含む。
【０００５】
本発明のイメージング剤は、特定のマトリックスメタロプロテイナーゼが関与することが知られている一連の疾患状態（炎症性、悪性及び変性疾患）の、インビボでの画像診断に有用である。
【０００６】
これらの疾患状態には以下が含まれる。
【０００７】
（ａ）各種ＭＭＰｓが過剰発現するアテローム性動脈硬化症。ＭＭＰ−１、３、７、９、１１、１２、１３及びＭＴ１−ＭＭＰのレベルの上昇が、ヒトのアテローム硬化型プラーク内で検出された［Ｓ．Ｊ．Ｇｅｏｒｇｅ、Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ、９（５）、９９３−１００７（２０００）及び同論文内の参照文献］。ヒトアテロームでのＭＭＰ−２の発現［Ｚ．Ｌｉ ｅｔ ａｌ、Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．、１４８、１２１−１２８（１９９６）］及びＭＭＰ−８の発現［Ｍ．Ｐ．Ｈｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、１０４、１８９９−１９０４（２００１）］もまた報告されている。
【０００８】
（ｂ）ＣＨＦ（Ｐｅｔｅｒｓｏｎ，Ｊ．Ｔ．ｅｔ ａｌ．Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ、Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ．Ｒｅｓ．（２００２）、５５（１）、２９−４４では、心不全においてＭＭＰ−１、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−８、ＭＭＰ−９、ＭＭＰ−１３及びＭＭＰ−１４が上方制御されることが報告されている）。
【０００９】
（ｃ）癌［Ｖｉｈｉｎｅｎ ｅｔ ａｌ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ９９、ｐ１５７−１６６（２００２）では、ＭＭＰの癌への関与が概説されており、特にＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−７及びＭＭＰ−９が強調されている］。
【００１０】
（ｄ）関節炎［Ｊａｃｓｏｎ ｅｔ ａｌ、Ｉｎｆｌａｍｍ．Ｒｅｓ．５０（４）、ｐ１８３−１８６（２００１）「Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｉｎ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ−ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｇｅｌａｔｉｎａｓｅ Ａ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ」では、ＭＭＰ−２が特に論じられている］。
【００１１】
（ｅ）筋萎縮性側索硬化症［Ｌｉｍ ｅｔ ａｌ、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、６７、２５１−２５９（１９９６）；ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９が関与］。
【００１２】
（ｆ）ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９及びＭＭＰ−１３が関係すると報告されている脳転移［Ｓｐｉｎａｌｅ、Ｃｉｒｃｕｌ．Ｒｅｓ．、９０、５２０−５３０（２００２）］。
【００１３】
（ｇ）ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９が関与すると報告されている脳血管疾患［Ｌｕｋｅｓ ｅｔ ａｌ、Ｍｏｌ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．、１９、２６７−２８４（１９９９）］。
【００１４】
（ｈ）ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９が患部組織内で同定されたアルツハイマー病［Ｂａｃｋｓｔｒｏｍ ｅｔ ａｌ、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、５８、９８３−９９２（１９９２）］。
【００１５】
（ｉ）ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３及びＭＭＰ−９が関与する神経炎症性疾患［Ｍｕｎ−Ｂｒｙｃｅ ｅｔ ａｌ、Ｂｒａｉｎ．Ｒｅｓ．、９３３、４２−４９（２００２）］。
【００１６】
（ｊ）ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−８及びＭＭＰ−９が上方制御されると報告されているＣＯＰＤ（即ち、慢性閉塞性肺疾患）［Ｓｅｇｕｒａ−Ｖａｌｄｅｚ ｅｔ ａｌ、Ｃｈｅｓｔ、１１７、６８４−６９４（２０００）］。
【００１７】
（ｋ）眼病［Ｋｕｒｐａｋｕｓ−Ｗｈｅａｔｅｒ ｅｔ ａｌ、Ｐｒｏｇ．Ｈｉｓｔｏ．Ｃｙｔｏｃｈｅｍ．、３６（３）、１７９−２５９（２００１）］。
【００１８】
（ｌ）皮膚疾患［Ｈｅｒｏｕｙ，Ｙ．、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．、７（１）、３−１２（２００１）］。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
本発明の第１の態様は、γ−放射性核種で標識した式Ｉのマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む画像診断剤である。
【００２０】
【化１】
【００２１】
式中、Ｒ１は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ６−１４アリール、Ｃ７−２０アリールアルキルから選択されるか、或いはＲ５及びそれが結合した炭素と共にＣ６−８シクロアルキル環又はＣ４−６複素環を形成するか、或いはＲ４と共に５〜７個の原子及びＮ又はＯから選択される１又は２個のヘテロ原子を含有するＣ４−６複素環を形成し、
Ｒ２及びＲ３は各々独立に水素、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アミノ、Ｃ６−１４アリール、Ｃ７−２０アリールアルキル又はＣ７−２０カルバモイルアリールであり、
Ｒ４はＣ６−１４アリール、Ｃ４−６ヘテロアリール、Ｃ７−２０アリールアルキル、Ｃ７−２０カルバモイルアリール又はアリールカルバモイルアリールであり、
Ｒ５は水素又はＣ１−６アルキルから選択される。
【００２２】
ただし、Ｒ１がイソプロピル、Ｒ３が水素、Ｒ４が３−ピリジルの場合、Ｒ２はメトキシではない。
【００２３】
単独で又は他の基（例えばヒドロキシアルキル、アミノアルキル、カルボキシアルキル又はアルコキシアルキル）の一部として用いられる「アルキル」は、本明細書では、任意の直鎖状、分岐状又は環状の飽和又は不飽和ＣｘＨ２ｘ＋１基（式中、特に指定がなければ、ｘは１〜６の整数である。）として定義される。
【００２４】
単独で又は他の基の一部として用いられる「アリール」は、本明細書では、単環式又は多環式芳香族炭化水素から誘導される任意のＣ６−１４分子断片又は基として定義される。本発明の好適なアリール基は、任意の位置で置換されていてもよいフェニル又はナフチル基である。
【００２５】
「アリールアルキル」は、本発明では、上記定義のアルキル基及びアリール基からなる任意のＣ７−２０基として定義される。
【００２６】
「複素環」は、本発明では、１又は２個のヘテロ原子を含むＣ４−６環式基として定義される。好適なヘテロ原子としてはＮ及びＯが挙げられる。
【００２７】
「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素から選択される基を意味する。
【００２８】
「アミン」は、本発明では、アミノ又は置換アミノ基を含有する任意の有機基として定義される。
【００２９】
本明細書で用いる「γ−放射性核種で標識した」という表現は、式Ｉの原子又は置換基の１個が、γ−放射性核種を、人工的に富化されたレベルの下部構造に固有の原子として、或いは該γ−放射性核種を結合させるのに適した官能基を介して化学的に結合した追加の必須要素として含むことを意味する。
【００３０】
本発明の好ましい画像診断剤は、γ−放射性核種で標識した式Ｉの化合物を含み、式中、
Ｒ１はＣ１−６アルキル、Ｃ６−１４アリール又はＣ７−２０アリールアルキルから選択されるか、或いはＲ５及びそれが結合した炭素と共にＣ４−６複素環を形成し、
Ｒ２は水素、ヒドロキシ、メチル、イソプロピル、メトキシ又はハロゲンであり、
Ｒ３は水素であり、
Ｒ４はピリジル又は（Ａｒ１）ｙ−（Ｒ″′）ｚ（ＮＨ）−フェニルであって、式中、Ａｒ１はフェニレンであり、Ｒ″′はＣＨ２又はＣ＝Ｏであり、ｙは０又は１であり、ｚは０又は１であり、
Ｒ５は水素である。
【００３１】
ただし、Ｒ１がイソプロピル、Ｒ４が３−ピリジルの場合、Ｒ２はメトキシではない。
【００３２】
本発明の最も好ましい画像診断剤は、γ−放射性核種で標識した式Ｉの化合物を含み、式中、
Ｒ１はメチル、イソブチル、イソプロピル、ベンジル又はヒドロキシベンジルであり、
Ｒ２はヒドロキシ、ハロゲン又はメトキシであり、
Ｒ３は水素であり、
Ｒ４はピリジル又は（Ａｒ１）ｙ−（Ｒ″′）ｚ（ＮＨ）−フェニルであって、式中、Ａｒ１は１，４−フェニレンであり、Ｒ″′はＣＨ２又はＣ＝Ｏであり、ｙは０又は１であり、ｚは０又は１であり、
Ｒ５は水素である。
【００３３】
ただし、Ｒ１がイソプロピル、Ｒ４が３−ピリジルの場合、Ｒ２はメトキシではない。
【００３４】
Ｒ５が水素の場合、本発明のマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤は、Ｒ１基を有する炭素原子にキラル中心を含む。このキラル中心における鏡像異性体は本発明の範囲内であり、好ましいかかる鏡像異性体は、式Ｉａの鏡像異性体である。
【００３５】
【化２】
【００３６】
本発明の特に好ましい画像診断剤は、式Ｉの化合物を含み、式中、該γ−放射性核種は、置換基Ｒ１〜Ｒ４の１個以上個と置換されているか、それに化学的に結合している。本発明の最も好ましい画像診断剤は、式Ｉの化合物を含み、式中、Ｒ２はスルホンアミドに対してパラ位にあり、Ｒ３はスルホンアミドに対してメタ位にある。
【００３７】
γ−放射体で標識されていない式Ｉの化合物は、ＭａｃＰｈｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９７；２５２５−３２記載の方法に従って容易に合成することができる。
【００３８】
本発明の好適なγ−放射性核種は、γ−放射性金属イオン又はγ−放射性ハロゲンである。これらについて、好ましい実施形態及び最も好ましい実施形態を含め、以下、さらに詳細に説明する。
【００３９】
本発明のγ−放射性核種が金属イオンの場合、９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、１１３ｍＩｎ、６７Ｃｕ又は６７Ｇａから好適に選択される。好ましいγ−放射性金属イオンは、９９ｍＴｃ、６７Ｃｕ、６７Ｇａ及び１１１Ｉｎであり、９９ｍＴｃが最も好ましい。金属イオンは、好適には、本発明の画像診断剤中に金属錯体として、画像診断剤が式ＩＩの金属錯体結合体となるように存在する。
【００４０】
［｛マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤｝−（Ａ）ｎ］ｍ−［金属錯体］
（ＩＩ）
式中、−（Ａ）ｎ−はリンカー基であり、
ｎは０〜５０の整数であり、
ｍは１、２又は３である。
【００４１】
「金属錯体」という用語は、金属イオンと１個以上の配位子との配位錯体を意味する。金属錯体が「トランスキレート化耐性を有すること」、即ち、金属の配位部位をめぐって競合する可能性のある他の配位子との配位子交換が容易には行われないことが非常に好ましい。競合する可能性のある配位子としては、式Ｉの化合物に加えて、インビトロの製剤中の賦形剤（例えば、製剤中で用いられる放射線防護剤又は抗菌防腐剤）、或いはインビボの内因性化合物（例えば、グルタチオン、トランスフェリン又は血漿タンパク質）が挙げられる。「リンカー基」（Ａ）ｎは、式ＩＩａに関する下記定義の通りである。
【００４２】
本発明の第２の態様は、放射標識されることで式ＩＩの金属錯体結合体を形成する配位子結合体である。本発明の好ましい配位子結合体は、式ＩＩａの配位子結合体である。
【００４３】
［｛マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤｝−（Ａ）ｎ］ｍ−［配位子］
（ＩＩａ）
式中、−（Ａ）ｎ−はリンカー基であって、式中、各Ａは独立にＣＲ′２、ＣＲ′＝ＣＲ′、Ｃ≡Ｃ、ＣＨ２ＣＨ２Ｏ、ＣＲ′２ＣＯ２、ＣＯ２ＣＲ′２、ＮＲ′ＣＯ、ＣＯＮＲ′、ＮＲ′（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ′、ＮＲ′（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ′、ＳＯ２ＮＲ′、ＮＲ′ＳＯ２、ＣＲ′２ＯＣＲ′２、ＣＲ′２ＳＣＲ′２，ＣＲ′２ＮＲＣＲ′２、Ｃ４−８シクロヘテロアルキレン基、Ｃ４−８シクロアルキレン基、Ｃ５−１２アリーレン基、Ｃ３−１２ヘテロアリーレン基又はアミノ酸であり、
Ｒ′はＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ１−４アルコキシアルキル又はＣ１−４ヒドロキシアルキルから各々独立に選択され、
ｎは０〜５０の整数であり、
ｍは１、２又は３である。
【００４４】
式ＩＩ及びＩＩａ中、ｍは好ましくは１又は２であり、最も好ましくは１である。
【００４５】
トランスキレート化耐性を有する金属錯体結合体を形成する、本発明で好適に用いられる配位子としては、（金属ドナー原子を連結する炭素原子又は非配位ヘテロ原子の非配位骨格を有することで）５員環又は６員環のキレート環を形成するように、２〜６個、好ましくは２〜４個の金属ドナー原子が配置されているキレート剤、或いは、イソニトリル、ホスフィン又はジアゼニドなどの、金属イオンと強力に結合するドナー原子を含む単座配位子が挙げられる。キレート剤の一部として金属によく結合するドナー原子の種類は、アミン、チオール、アミド、オキシム及びホスフィンが挙げられる。ホスフィンは強い金属錯体を形成するため、単座又は二座のホスフィンでも好適な金属錯体を形成する。イソニトリル及びジアゼニドは、その線状の幾何配置のため、それ自体容易にはキレート剤には組み込まれにくいため、通常は単座配位子として用いられる。好適なイソニトリルとしては、例えば、ｔｅｒｔ−ブチルイソニトリルなどの単純アルキル、及びＭＩＢＩ（即ち、１−イソシアノ−２−メトキシ−２−メチルプロパン）などのエーテル置換イソニトリルが挙げられる。好適なホスフィンとしては、テトロフォスミン、及びトリス（３−メトキシプロピル）ホスフィンなどの単座ホスフィンが挙げられる。好適なジアゼニドとしては、ＨＹＮＩＣ系の配位子、即ちヒドラジン置換ピリジン又はニコチンアミドが挙げられる。
【００４６】
トランスキレート化耐性を有する金属錯体を形成する、テクネチウム用の好適なキレート剤としては、下記の化合物が挙げられるが、それだけには限定されない。
【００４７】
（ｉ）式ＩＩＩのジアミンジオキシム。
【００４８】
【化３】
【００４９】
式中、Ｅ１〜Ｅ６は各々独立にＲ″基であり、
各Ｒ″はＨ又はＣ１−１０アルキル、Ｃ３−１０アルキルアリール、Ｃ２−１０アルコキシアリール、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０フルオロアルキル、Ｃ２−１０カルボキシアルキル若しくはＣ１−１０アミノアルキルであるか、或いは２個以上のＲ″基がそれらが結合した原子と共に炭素環、複素環、飽和又は不飽和環を形成するものであり、１個以上のＲ″基は式Ｉの化合物に結合し、
Ｑは式−（Ｊ）ｆ−の架橋基であり、
式中、ｆは３、４又は５であり、各Ｊは独立に−Ｏ−、−ＮＲ″−又は−Ｃ（Ｒ″）２−である。ただし、−（Ｊ）ｆ−は−Ｏ−又は−ＮＲ″−である最大１個のＪ基を含有する。
【００５０】
好ましいＱ基は以下の通りである。
【００５１】
Ｑ＝−（ＣＨ２）（ＣＨＲ″）（ＣＨ２）−、即ちプロピレンアミンオキシム、又はＰｎＡＯ誘導体、
Ｑ＝−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ″）（ＣＨ２）２−、即ちペンチレンアミンオキシム、又はＰｅｎｔＡＯ誘導体、
Ｑ＝−（ＣＨ２）２ＮＲ″（ＣＨ２）２−。
【００５２】
Ｅ１〜Ｅ６は、Ｃ１−３アルキル、Ｃ４−１０アルキルアリール、Ｃ２−３アルコキシアルキル、Ｃ１−３ヒドロキシアルキル、Ｃ１−２フルオロアルキル、Ｃ１−３カルボキシアルキル又はＣ１−３アミノアルキルから好ましく選択される。最も好ましくは、各Ｅ１〜Ｅ６基はＣＨ３である。
【００５３】
式Ｉの化合物は、Ｅ１又はＥ６のＲ″基、或いはＱ部分のＲ″基に結合することが好ましい。最も好ましくは、式Ｉの化合物はＱ部分のＲ″基に結合する。式Ｉの化合物がＱ部分のＲ″基に結合する場合、Ｒ″基は橋頭位にあることが好ましい。その場合、Ｑは−（ＣＨ２）（ＣＨＲ″）（ＣＨ２）−、−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ″）（ＣＨ２）２−又は−（ＣＨ２）２ＮＲ″（ＣＨ２）２−であることが好ましく、−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ″）（ＣＨ２）２−であることが最も好ましい。
【００５４】
特に好ましい二官能性ジアミンジオキシムキレート剤は、以下の構造を有し、
【００５５】
【化４】
【００５６】
それにより式Ｉの化合物は、橋頭の−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２基を介して結合する。本明細書の残りの部分では、この二官能性ジアミンジオキシムキレート剤をキレート剤１又はＣＡ１と呼ぶ。
【００５７】
（ｉｉ）ＭＡＧ３（メルカプロアセチルトリグリシン）などのチオールトリアミドドナーセットを有するＮ３Ｓ配位子及び関連配位子、又はＰＩＣＡなどのジアミドピリジンチオールドナーセットを有するＮ３Ｓ配位子。
【００５８】
（ｉｉｉ）ＢＡＴ若しくはＥＣＤ（即ち、エチルシステイネートダイマー）などのジアミンジチオールドナーセット、又はＭＡＭＡなどのアミドアミンジチオールドナーセットを有するＮ２Ｓ２配位子。
【００５９】
（ｉｖ）シクラム、モノオキソシクラム又はジオキソシクラムなどのテトラミン、アミドトリアミン又はジアミドジアミンドナーセットを有する開環又は大環状配位子であるＮ４配位子。
【００６０】
（ｖ）ジアミンジフェノールドナーセットを有するＮ２Ｏ２配位子。
【００６１】
上記配位子は、９９ｍＴｃと錯体を形成するのに特に好適であり、Ｊｕｒｉｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ［Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．（１９９９）９９ ２２０５−２２１８］により詳しく記載されている。他の好適な配位子はＳａｎｄｏｚの国際公開第９１／０１１４４号に記載されており、同パンフレットにはインジウム及びガドリニウムに特に好適な配位子、とりわけ大環状アミノカルボン酸塩及びアミノホスホン酸配位子が含まれている。ガドリニウムの非イオン性（即ち、中性）金属錯体を形成する錯体が知られており、米国特許第４８８５３６３号に記載されている。放射性金属イオンがテクネチウムの場合、配位子は四座配位子であるキレート剤であることが好ましい。テクテニウム用の好ましいキレート剤は、ジアミンジオキシム、或いは上記のＮ２Ｓ２又はＮ３Ｓドナーセットを有するキレート剤である。テクテニウム用の特に好ましいキレート剤はジアミンジオキシムである。
【００６２】
式ＩＩのリンカー基−（Ａ）ｎ−の役割は、式Ｉの化合物の活性部位から、比較的嵩高な金属錯体を引き離すことにあり、それによって該化合物のＭＭＰ酵素への結合が妨げられることがなくなると予想されている。これは、それにより嵩高な基が自ら活性部位から離れる自由を有する、屈曲性のある鎖（例えば、単純アルキル鎖）、及び／又は、金属錯体が活性部位から離れるよう方向付ける、シクロアルキル若しくはアリールスペーサーなどの強固なスペーサーの組合せにより達成可能である。
【００６３】
リンカー基の性質は、得られる金属錯体コンジュゲートの体内分布を改変するのに用いることもできる。したがって、例えばリンカー中へのエーテル基の導入により、血漿タンパク質の結合が最小限に抑えられる。いくつかの連結した−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−基を含むリンカー（ＰＥＧリンカー）又は１〜１０個のアミノ酸のペプチド鎖を含むリンカーは、特定の化合物の臨床特性、とりわけ体内分布の好ましい改変を可能にするさらなる特性を有する。かかる「生体改変」リンカー基は、筋肉又は肝臓などの背景組織、及び／又は血液からのイメージング剤の除去を促進でき、したがって、背景による干渉がより少なくなるため、より良い診断画像が得られる。生体改変リンカー基は、特定の排泄経路を選択するために、例えば肝臓ではなく腎臓を選択するためにも用いることができる。
【００６４】
アルキレン基又はアリーレン基などの非ペプチドリンカー基は、それと結合した式Ｉの化合物との間で著しい水素結合相互反応が生じないため、リンカーが式Ｉの化合物を包み込むことがないという利点を有する。好ましいアルキレンスペーサー基は−（ＣＨ２）ｑ−（式中、ｑは２〜５）である。好ましいアリーレンスペーサーは式ＩＶのアリーレンスペーサーである。
【００６５】
【化５】
【００６６】
式中、ａ及びｂは独立に０、１又は２である。
【００６７】
リンカー基がＰＥＧ又はペプチド鎖を含まない場合、好ましいリンカー基−（Ａ）ｎ−は、２〜１０個の原子、最も好ましくは２〜５個の原子、特に好ましくは２又は３個の原子からなる−（Ａ）ｎ−部分を構成する連結した原子の主鎖を有する。２個の原子からなる最小のリンカー基主鎖でも、キレート剤が式Ｉの化合物から十分に隔てられ、それにより任意の相互反応が最小限に抑えられるという利点が得られる。リンカー基がＰＥＧリンカーの場合、−（Ａ）ｎ−中のＡ基の数ｎは最大５０、好ましくは１５〜３０である。リンカーがペプチド鎖を含む場合、１〜１０個のアミノ酸残基からなるペプチド鎖であることが好ましく、アミノ酸残基はグリシン、リジン、アスパラギン酸又はセリンから選択されることが好ましい。
【００６８】
結合が血液中で容易に代謝されないように、式Ｉの化合物が金属錯体に結合していることが非常に好ましい。そうでなければ、該化合物が所望のインビボの標的部位に到達する前に、金属錯体が開裂してしまうためである。そのため、式Ｉの化合物は、容易に代謝されない結合を介して、本発明の金属錯体と共有結合していることが好ましい。
【００６９】
γ−放射性金属イオンで標識した本発明の最も好ましい化合物は、ＣＡ１に配位した９９ｍＴｃで標識した本発明の化合物であり、ＣＡ１は、好適な化学官能基を介して、任意のリンカーと、式ＩのＲ１〜Ｒ４の置換基の１個において結合している。９９ｍＴｃで標識した本発明の好ましい化合物としては、例えば下記に例示の通りである（Ｔｃは構造中の９９ｍＴｃを意味する）。
【００７０】
【化６】
【００７１】
［０］γ−放射性核種が放射性ハロゲンの場合、ヨウ素の同位体であることが好ましく、画像診断剤は、前駆体とヨウ素のγ−放射性同位体とを反応させることで有用に調製される。かかる前駆体は以下で詳しく説明し、本発明の第４の態様とする。本発明の好ましいヨウ素のγ−放射性同位体は１２３Ｉ又は１３１Ｉである。
【００７２】
ヨウ素のγ−放射性同位体は、直接共有結合を介して、ベンゼン環などの芳香環又はビニル基に結合していることが好ましい。飽和脂肪族環系に結合しているヨウ素原子は、インビボで代謝される傾向にあり、そのためヨウ素のγ−放射性同位体が失われる傾向にあるためである。最も好ましくは、ヨウ素のγ−放射性同位体は、直接共有結合を介して式Ｉの−ＮＳＯ２−フェニル環に結合している。
【００７３】
ヨウ素のγ−放射性同位体で標識した、本発明の特に好ましい画像診断剤は、式Ｉの化合物であって、式中、
（ｉ）Ｒ１はイソプロピルであり、Ｒ２は４−ＯＨであり、Ｒ３は３−１２３Ｉであり、Ｒ４はピリジル（Ｒ４が３−ピリジルの場合、化合物４）であるか、
（ｉｉ）Ｒ１はイソプロピルであり、Ｒ２は４−１２３Ｉであり、Ｒ３はＨであり、Ｒ４はピリジル（Ｒ４が３−ピリジルの場合、化合物７）であるか、
（ｉｉｉ）Ｒ１はイソプロピルであり、Ｒ２は４−（４−［１２３Ｉ］ヨードベンズアミド）であり、Ｒ３はＨであり、Ｒ４はピリジル（Ｒ４が３−ピリジルの場合、化合物２０）であるか、
（ｉｖ）Ｒ１は４−ヒドロキシ−３−［１２３Ｉ］ヨードベンジルであり、Ｒ２は４−ヨードであり、Ｒ３はＨであり、Ｒ４はピリジル（Ｒ４が３−ピリジルの場合、化合物２１）であるか、或いは
（ｖ）Ｒ１はイソプロピルであり、Ｒ２は４−ヨードであり、Ｒ３は３−Ｈであり、Ｒ４は（Ａｒ１）ｙ−（Ｒ″′）ｚ（ＮＨ）−（Ａｒ２）であって、Ａｒ１は１，４−フェニレンであり、Ａｒ２は４−［１２３Ｉ］ヨードフェニルであり、Ｒ″′はＣＨ２又はＣ＝Ｏであり、ｙは０又は１であり、ｚは０又は１であり、
Ｒ４がピリジルの場合、３−ピリジルであることが好ましい化合物である。
【００７４】
放射性ヨウ素化ＭＭＰ阻害剤の非放射性類似体は、ＭＭＰ−２に対して優れた阻害作用を示し、ＩＣ５０値は化合物９（表１）では２．５ｎＭであり、化合物８（表１）では３２０ｎＭである。これらの非放射性類似体はまた、ＭＭＰ−９に対しても優れた阻害作用を示し、ＩＣ５０値は化合物９では４．６ｎＭであり、化合物８では１５３ｎＭである。そのため、本発明の化合物は、インビボでのＭＭＰ活性のイメージングに成功することが予想できる、インビトロでの特性を有する。そのため、これらの新規放射性トレーサーをＳＰＥＣＴと組み合わせて用いることで、インビボで非侵襲的にＭＭＰ活性をイメージングするための革新的な手段が提供される。動物モデルにおけるイメージング調査により、本発明の薬剤がインビボでのＭＭＰ活性の画像診断に好適であることがさらに証明される。
【００７５】
第３の態様では、本発明は、前記の画像診断剤を、生体適合性担体と共に、哺乳動物への投与に適した形態で含む医薬組成物を提供する。「生体適合性担体」とは、画像診断剤がそれに懸濁又は溶解することで、該組成物が生理的に許容できるようになる、即ち、毒性又は不当な不快感なしに哺乳動物の身体に投与可能になる、流体、特に液体のことである。生体適合性担体は、好適には、発熱物質を含まない注射用の滅菌水などの注射可能な液体担体、（注射用の最終製品が等張性を有するように、又は低浸透圧性を有さないように、平衡化されていると有利である）食塩水などの水溶液、１種以上の張度調節物質（例えば、生体適合性対イオンを有する血漿カチオン）、糖（例えば、グルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えば、ソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えば、グリセリン）、或いは他の非イオン性ポリオール材料（例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液である。
【００７６】
本発明の第４の態様は、本発明の放射性ヨウ素化画像診断剤の調製に有用な前駆体であって、該画像診断剤を得るためのヨウ素のγ−放射性同位体との反応に好適な基を含む前駆体である。放射性ヨウ素化画像診断剤の調製に好適な前駆体は、ヨウ化又は臭化アリールなどの（放射性ヨウ素との交換を許容する）非放射性ハロゲン原子、活性化アリール環（例えば、フェノール基）、有機金属前駆体化合物（例えば、トリアルキルスズ又はトリアルキルシリル）、或いはトリアゼンなどの有機前駆体を含む、式Ｉの化合物である。ヨウ素のγ−放射性同位体を導入する方法は、Ｂｏｌｔｏｎ［Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２００２ ４５ ４８５−５２８］に記載されている。ヨウ素のγ−放射性同位体が結合できる好適なアリール基としては、例えば下記のアリール基が挙げられる。
【００７７】
【化７】
【００７８】
好適なアリール基が存在する本発明の好ましい前駆体化合物としては、例えば下記に例示の通りである。
【００７９】
【化８】
【００８０】
上記で論じた好適なアリール基は両方とも、芳香環上にヨウ素で容易に置換可能な置換基を含有する。ヨウ素のγ−放射性同位体を含有する代替の置換基は、例えば、下記のような放射性ハロゲン交換を介した直接ヨウ素化により合成することができる。
【００８１】
【化９】
【００８２】
第５の態様では、本発明は、本発明の医薬組成物の調製用キットを提供する。本発明の医薬組成物がγ−放射性金属で標識した画像診断剤を含む場合、該キットは（ｉ）γ−放射性金属の配位に適した配位子と結合した式Ｉの化合物を含む配位子結合体、及び（ｉｉ）生体適合性還元剤を含む。本発明の医薬組成物がヨウ素のγ−放射性同位体で標識した画像診断剤を含む場合、該キットはヨウ素のγ−放射性同位体との反応に適した基を含む式Ｉの化合物である前駆体を含み、それにより該前駆体と、通常はヨウ化物の形態であるヨウ素のγ−放射性同位体との反応で、該画像診断剤が得られる。
【００８３】
かかるキットは、例えば直接注射を介してヒトの血流に投与するのに適した無菌の放射性医薬品が得られるよう設計されている。９９ｍＴｃについて、キットは凍結乾燥されていることが好ましく、９９ｍＴｃ放射性同位体発生装置からの無菌９９ｍＴｃ−パーテクネテート（ＴｃＯ４−）で再構築され、さらに操作を行わずにヒト投与に適した溶液が得られるよう設計されている。好適なキットは、遊離塩基又は酸性塩の形態の配位子又はキレート剤結合体を、亜二チオン酸ナトリウム、重亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、ホルムアミジンスルフィン酸、第１スズイオン、Ｆｅ（ＩＩ）又はＣｕ（Ｉ）などの生体適合性還元剤と共に収容する容器（例えば、隔壁が封着されているバイアル）を含む。生体適合性還元剤は、塩化第１スズ又は酒石酸第１スズなどの第１スズ塩であることが好ましい。或いは、キットは、放射性金属の付加時にトランスメタレーション（即ち、金属交換）されて所望の生成物を与える金属錯体を含んでもよい。
【００８４】
キットは、トランスキレート剤、放射線防護剤、抗菌防腐剤、ｐＨ調節剤又は充填剤などの追加の成分をさらに含んでもよい。「トランスキレート剤」とは、急速に反応してテクネチウムと弱い錯体を形成し、次いで配位子により置換される化合物のことである。これにより、錯体化テクネチウムと競合するパーテクネテートが急速に還元されるため、還元・加水分解したテクネチウム（ＲＨＴ）が形成される危険性が最小限に抑えられる。好適なかかるトランスキレート剤は、弱有機酸、即ちｐＫａが３〜７の範囲の有機酸と生体適合性カチオンとの塩である。適切なかかる弱有機酸は、酢酸、クエン酸、酒石酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、安息香酸、フェノール又はホスホン酸である。したがって、好適な塩は酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩、フェノール塩又はホスホン酸塩である。好ましいかかる塩は酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩又はホスホン酸塩であり、最も好ましくはホスホン酸塩であり、特に好ましくはジホスホン酸塩である。好ましいかかるトランスキレート剤は、ＭＤＰ、即ちメチレンジホスホン酸と生体適合性カチオンとの塩である。
【００８５】
「生体適合性カチオン」という用語は、イオン化され、負の電荷を有する基と塩を形成する正の電荷を有する対イオンを意味し、この正の電荷を有する基もまた無毒であり、したがって哺乳動物の身体、特に人体への投与に適している。好適な生体適合性カチオンとしては、例えばアルカリ金属のナトリウム又はカリウム、アルカリ土類金属のカルシウム及びマグネシウム、並びにアンモニウムイオンが挙げられる。好ましい生体適合性カチオンはナトリウム及びカリウム、最も好ましくはナトリウムである。
【００８６】
「放射能防護剤」とは、水の放射線分解で生じる含酸素フリーラジカルなどの高反応性フリーラジカルを捕捉することにより、酸化還元プロセスなどの分解反応を阻害する化合物を意味する。本発明の放射能防護剤は、アスコルビン酸、ｐ−アミノ安息香酸（即ち、４−アミノ安息香酸）、ゲンチシン酸（即ち、２，５−ジヒドロキシ安息香酸）、及びその前記の生体適合性カチオンとの塩から好適に選択される。
【００８７】
「抗菌防腐剤」という用語は、細菌、酵母又はカビなどの有害の可能性がある微生物の増殖を阻害する薬剤を意味する。抗菌防腐剤は、用量に応じていくつかの殺菌特性をも発揮し得る。本発明の抗菌防腐剤の主な役割は、再構築後の医薬組成物、即ち、放射性診断用製品自体において、任意のかかる微生物の増殖を抑制することにある。しかしながら、抗菌防腐剤を、再構築前の本発明のキットの１種以上の成分中で、有害の可能性がある微生物の増殖を抑制するために用いてもよい。好適な抗菌防腐剤としては、パラベン、即ち、メチル、エチル、プロピル又はブチルパラベン或いはその混合物、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、セトリミド及びチオマーサルが挙げられる。好ましい抗菌防腐剤はパラベンである。
【００８８】
「ｐＨ調節剤」という用語は、再構成されたキットのｐＨがヒト又は哺乳動物への投与に許容される範囲（約ｐＨ４．０〜１０．５）内にあることを確実にするのに有用な化合物又は化合物の混合物を意味する。好適なかかるｐＨ調節剤としては、トリシン、リン酸塩又はＴＲＩＳ［即ち、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン］などの製薬的に許容される緩衝液、及び炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム又はその混合物などの製薬的に許容される塩基が挙げられる。配位子結合体を酸性塩の形態で用いる場合、ｐＨ調節剤を別のバイアル又は容器内に入れて、多段階法の一部としてキットの使用者がｐＨを調節できるようにしてもよい。
【００８９】
「充填剤」という用語は、製造及び凍結乾燥中の原料の取り扱いを容易にできる、製薬的に許容される増量剤を意味する。好適な賦形剤としては、塩化ナトリウムなどの無機塩、及びスクロース、マルトース、マンニトール又はトレハロースなどの水溶性の糖又は糖アルコールが挙げられる。
【００９０】
本発明の第６の態様は、本発明の医薬組成物の、循環器疾患の画像診断のための使用である。本発明の医薬組成物は、アテローム性動脈硬化症及びＣＨＦの画像診断に特に有用である。本発明の画像診断剤の使用により、活性プラーク負荷が同定されて、冠動脈疾患の発症が分かっているか又は疑わしい患者、即ち、疼痛又は疼痛の病歴を有する患者、或いは危険性が高いことが確認されたが無症候である患者の危険性が層別化される。また、本発明の画像診断剤により、症候性の患者の脆弱なプラークが同定されて、狭窄に関係なく急性心筋梗塞又は脳卒中の高い危険性が確認され、患者が胸痛を呈する場合でも危険性が直ちに層別化される。さらに、脆弱なプラークの血管形成術は危険性が高く、術後に動脈塞栓症を引き起こすおそれがある。したがって、このサブタイプのプラークのイメージングにより、術後合併症を減少させることができる。
【００９１】
本発明の第７の態様は、本発明の医薬組成物の、炎症性疾患の画像診断、特にＣＯＰＤの画像診断のための使用である。
【実施例】
【００９２】
実施例１には、非放射性の従来技術化合物ＣＧＳ２７０２３の調製に使われた合成経路が記載されている。
【００９３】
実施例２には、いずれも本発明の画像診断剤である化合物６及び７の非放射性の変種である化合物９の調製に使われた合成経路が記載されている。
【００９４】
実施例３には、実施例１４及び１５記載の化合物６及び７の調製に用いられる前駆体である化合物１４の調製に使われた合成経路が記載されている。
【００９５】
実施例４には、実施例１２及び１３記載の化合物４及び５の調製に用いられる前駆体である化合物１３の調製に使われた合成経路が記載されている。
【００９６】
実施例５には、いずれも本発明の画像診断剤である化合物４及び５の非放射性の変種である化合物８の合成に使われた合成経路が記載されている。
【００９７】
実施例６には、いずれも本発明の画像診断剤である化合物１、２、３、１６及び１７中に９９ｍＴｃを配位させるのに用いられるキレート剤であるＣＡ１の調製に使われた合成が記載されている。
【００９８】
実施例７には、９９ｍＴｃで標識されて化合物１を生成することができる配位子結合体である化合物１０の合成に使われた合成経路が記載されている。
【００９９】
実施例８には、９９ｍＴｃで標識されて化合物２を生成することができる配位子結合体である化合物１１の調製に使われた合成経路が記載されている。
【０１００】
実施例９には、９９ｍＴｃで標識されて化合物１６を生成することができる配位子結合体である化合物１８の調製に使われた合成経路が記載されている。
【０１０１】
実施例１０には、９９ｍＴｃで標識されて化合物１７を生成することができる配位子結合体である化合物１９の調製に使われた合成経路が記載されている。
【０１０２】
実施例１１には、化合物１０、１１、１２、１８及び１９を９９ｍＴｃで標識する方法が記載されている。
【０１０３】
実施例１２には、化合物１３を１２３Ｉで標識することによる化合物４の調製が記載されている。実施例１３では、実施例１２と同じ調製方法を使って化合物５を得たが、実施例１３では化合物１３を１２５Ｉで標識した。
【０１０４】
実施例１４には、前駆体である化合物１４を用いた化合物６の放射性合成が記載されている。実施例１５では、実施例１４と同じ放射性合成を使って化合物７を調製した。化合物６及び７はいずれも本発明の画像診断剤である。
【０１０５】
実施例１６には、化合物６及び７の放射性合成に適した前駆体である化合物１５の合成が記載されている。
【０１０６】
実施例１７には、トリブチルスズ前駆体である化合物１５からの化合物７の放射性合成が記載されている。
【０１０７】
実施例１８には、本発明の化合物の、ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９を阻害する能力を評価するために使われたアッセイが記載されている。表２の結果からは、本発明の画像診断剤の非放射性の変種（化合物８及び９）が従来技術化合物と同程度のＭＭＰ阻害活性を有することが明らかになる。これにより、これらの化合物（化合物２〜５）の非放射性の変種を、ＭＭＰが関与する疾患状態における画像診断剤に使用できることが証明される。
【０１０８】
実施例１９には、本発明の化合物のインビボ特性の評価に使われたＡｐｏＥ（−／−）マウスモデルが記載されている。
【０１０９】
実施例２０には、組織学及び免疫組織化学用組織サンプルの調製に使われた方法が記載されている。実施例２１には、オートラジオグラフィー用サンプルの調製に使われた方法が記載されている。図８に示すこれらの実験の結果から、化合物５の取り込みがＭＭＰ−９の存在と関連があることが証明される。
【０１１０】
実施例２２には、マウスにおいてインビボイメージング調査を行った方法が記載されている。実験では、結紮を行った領域で１２０分にわたって化合物４の取り込みが増大したことが証明され、化合物４が病変部に特異的に取り込まれたことを示唆している。また、非放射性の従来技術化合物ＣＧＳ２７０２３を予め投与したＡｐｏＥ−／−マウスでは、化合物４が同様には取り込まれなかったことも証明され、化合物４がＣＧＳ２７０２３と同様の結合特性を有することを示唆している。関心領域の分析により調査した化合物４の生体分布では、腎排泄及び肝排泄を介して血液から迅速に排除されたこと、同時期に胸腔及び脳で目立ったシグナルがみられなかったことが明らかになった（図１２）。かかる除去特性は画像診断剤に好適である。
【０１１１】
本明細書で例示した化合物の多くは式Ｉの化合物であり、便宜のため次頁の表１で定義する。
【０１１２】
【表１】
【０１１３】
実施例１ ＣＧＳ２７０２３（従来技術）の調製
ＭａｃＰｈｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ［Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９７、４０；２５２５−２５３２］記載の合成の変法によりＣＧＳ２７０２３を合成した。
【０１１４】
本合成は、市販のバリンｔ−ブチルエステルとフェニルスルホニルクロリドとを反応させることで開始した。一方、ＭａｃＰｈｅｒｓｏｎらの合成は、保護されていないバリンとフェニルスルホニルクロリドとを反応させ、次にｔ−ブチルエステルとして酸官能基を保護することで開始する。本合成の残りはＭａｃＰｈｅｒｓｏｎらの報告と同じであった。使用した合成経路を図１に示す。ＣＧＳ２７０２３の場合、Ｘはメトキシである。
【０１１５】
収率９４％
融点１５６〜１５８°
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１０．７６（広幅，ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、８．５２（ｍ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．１８（ｄ，３Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．６９（ｄｄ，３Ｊ１＝８．１Ｈｚ，３Ｊ２＝５．６Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．４７（ｄ，３Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、６．８２（ｄ，３Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、４．７２（ｄ，２Ｊ＝１６．７Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．５２（ｄ，２Ｊ＝１６．７Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、３．６３（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ３）、３．６４（ｄ，３Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｎ−ＣＨ）、１．８５〜１．７１（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．５９（ｄ，３Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．４２（ｄ，３Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）。
【０１１６】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１６６．２２、１６３．０１、１４４．９１、１４２．０１、１４１．１４、１３８．７８、１３１．４８、１２９．５９、１２６．５２、１１４．７２、６３．３５、５６．１２、４５．０４、２８．０９、１９．５０、１９．２９。
【０１１７】
実施例２ 化合物９の調製
図１のＸをＩとして、実施例１でＣＧＳ２７０２３について記載したものと同じ方法で、化合物９を調製した。
【０１１８】
収率：粗生成物５６％。これをアセトニトリルから再結晶して３６％の無色固体が得られる。
【０１１９】
融点１６９℃。
【０１２０】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１０．８７（広幅，ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、８．８０（ｍ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．４５（ｄ，３Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．９６（ｄｄ，３Ｊ１＝８．１Ｈｚ，３Ｊ２＝６．０Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．９０（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．５２（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、４．９５（ｄ，２Ｊ＝１６．９Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．７４（ｄ，２Ｊ＝１６．９Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、３．８３（ｄ，３Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｎ−ＣＨ）、２．０５〜１．９３（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．７８（ｄ，３Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．５９（ｄ，３Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）。
【０１２１】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１６６．９５、１４５．６７、１４３．５８、１４２．６９、１４０．２７、１３９．４７、１３９．１８、１２９．９６、１２７．４５、１０２．９９、６４．５１、４６．１６、２９．１１、２０．５１、２０．２４。
【０１２２】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：４９０（Ｍ−ＨＣｌ＋Ｈ＋）。
【０１２３】
元素分析：Ｃ１７Ｈ２１ｌＣｌＮ３Ｏ４Ｓ：Ｃ ３８．８３、Ｈ ４．０３、Ｎ ７．９９。実測値：Ｃ ３８．６７、Ｈ ３．８５、Ｎ ７．９４。
【０１２４】
実施例３ 化合物１４の調製
図１のＸをＢｒとして、実施例１でＣＧＳ２７０２３について記載したものと同じ方法で、化合物１４を調製した。
【０１２５】
収率：無色固体５１％。
【０１２６】
融点：１６９〜１７０℃。
【０１２７】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１１．０３（広幅，ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、８．８０（ｍ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．４２（ｄ，３Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．９３（ｄｄ，３Ｊ１＝８．０Ｈｚ，３Ｊ２＝５．９Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．９０（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．５２（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、４．９８（ｄ，２Ｊ＝１６．６Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．７７（ｄ，２Ｊ＝１６．６Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、３．８８（ｄ，３Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｎ−ＣＨ）、２．０８〜１．９５（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．８１（ｄ，３Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．６３（ｄ，３Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）。
【０１２８】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１６５．９１、１４５．１３、１４２．０２、１４１．１７、１３８．９１、１３８．４７、１３２．６７、１２９．３９、１２７．５１、１２６．６６、６３．５４、４５．１８、２８．１２、１９．５１、１９．２３。
【０１２９】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：４６６（Ｍ−ＨＣｌ＋Ｎａ＋）、４６４（Ｍ−ＨＣｌ＋Ｎａ＋）、４４４（Ｍ−ＨＣｌ＋Ｈ＋）、４４２（Ｍ−ＨＣｌ＋Ｈ＋）。
【０１３０】
元素分析：Ｃ１７Ｈ２１ＢｒＣｌＮ３Ｏ４Ｓの計算値：Ｃ ４２．６４、Ｈ ４．４２、Ｎ ８．７８。実測値Ｃ ４２．６０、Ｈ ４．２０、Ｎ ８．５２。
【０１３１】
実施例４ 化合物１３の調製
ＸがＢｎＯである図１の式Ｖ（Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）−２（Ｒ）−［［（４−ベンジルオキシフェニル）スルホニル］（３−ピコリル）アミノ］−３−メチルブタンアミド）から、実施例１でＣＧＳ２７０２３について記載したものと同じ経路を介して、化合物１３の合成を行った。
【０１３２】
図１の式Ｖ（式中、ＸはＢｎＯ）に対応する化合物１．２０ｇ（２．２８ｍｍｏｌ）を無水メタノール３０ｍｌに溶解し、Ｐｄ／Ｃ（１０％）１１０ｍｇで処理し、Ｈ２雰囲気下で６６時間攪拌した。触媒を濾別し、エタノール８０ｍｌで洗浄した。溶媒を蒸発させ、固体残渣を減圧乾燥した。クロロホルムから再結晶させて、無色の微結晶生成物である図１の式Ｖ（式中、ＸはＯＨ）（Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）−２（Ｒ）−［［（４−ヒドロキシフェニル）スルホニル］（３−ピコリル）アミノ］−３−メチル−ブタンアミド）を７９７ｍｇ（１．８３ｍｍｏｌ、８０％）得た。
【０１３３】
融点１６０〜１６２℃。
【０１３４】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１０．７４（ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、８．６４（ｓ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．５４（ｍ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．８３（ｄ，３Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．６３（ｄ，３Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．３７（ｄｄ，３Ｊ１＝７．８Ｈｚ，３Ｊ２＝４．８Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、６．９１（ｄ，３Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、４．８０（ｓ，２Ｈ，ＣＨ２）、４．０９（ｄ，３Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｎ−ＣＨ）、２．０９〜１．９７（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、１．２２（ｓ，９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）３）、０．９３（ｄ，３Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．８６（ｄ，３Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）。
【０１３５】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１６８．１４、１６１．５６、１５０．３０、１４８．４９、１３６．６４、１３３．８５、１３０．８７、１２９．４３、１２３．１８、１１５．７８、８１．０４、６３．０７、４５．５２、２８．５６、２６．６０、１９．５９、１９．２０。
【０１３６】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：４７４（Ｍ＋Ｋ＋）、４５８（Ｍ＋Ｎａ＋）、４３６（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０１３７】
図１の式Ｖ（式中、ＸはＯＨ）６００ｍｇ（１．３８ｍｍｏｌ）を、エタノール８０μｌ（１．３８ｍｍｏｌ）を含有するジクロロエタン３０ｍｌ中に溶解した。溶液を−１０℃に冷却し、塩酸を３時間吹き込んだ。反応容器を密封し、混合物を室温まで加熱した。２日間攪拌後、溶媒の体積を蒸発により３分の１まで減少させ、残渣をエーテルで処理した。得られた懸濁液を激しく４時間攪拌した。沈殿物を吸引濾過により回収し、減圧乾燥して化合物１３を５６２ｍｇ（１．３５ｍｍｏｌ、９８％）、無色の粉末固体として得た。
【０１３８】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１１．１３（ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、１０．８３（ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、８．９６（ｓ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．５９（ｄ，３Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．１１（ｄｄ，３Ｊ１＝７．７Ｈｚ，３Ｊ２＝５．９Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．７７（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．０６（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、５．１１（ｄ，２Ｊ＝１６．８Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．９０（ｄ，２Ｊ＝１６．８Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．０１（ｄ，３Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｎ−ＣＨ）、２．２５〜２．１２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．９９（ｄ，３Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．８１（ｄ，３Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）。
【０１３９】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１６６．３２、１６２．０４、１４４．８５、１４２．０９、１４１．１７、１３８．９９、１２９．７２、１２９．５９、１２６．４５、１１５．９３、６３．３０、４４．９８、２８．０８、１９．４９、１９．３３。
【０１４０】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：４０２（Ｍ−ＨＣｌ＋Ｎａ）＋。
【０１４１】
実施例５ 化合物８の調製
ＸがＯＨである図１の式Ｖ（Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）−２（Ｒ）−［［（４−ヒドロキシフェニル）スルホニル］（３−ピコリル）アミノ］−３−メチル−ブタンアミド）から、実施例１でＣＧＳ２７０２３について記載したものと同じ経路を介して、化合物８の合成を行った。
【０１４２】
図１の式Ｖ（式中、ＸはＯＨ）１．００ｇ（２．３０ｍｍｏｌ）を、メタノール４０ｍｌに溶解し、炭酸ナトリウム１．２２ｇ（１１．５ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を氷浴中で冷却し、一塩化ヨウ素をメタノールに溶解させた１Ｍ溶液２．３ｍｌを１時間にわたって滴下した。滴下中、溶液の深紅色がほぼ即時に消失した。混合物を室温にして、終夜攪拌した。懸濁液を濾過した後、濾液を１０％チオ硫酸ナトリウム溶液４ｍｌで処理し、１Ｎ Ｈ２ＳＯ４でｐＨ７に調節した。エーテルで抽出後、混合抽出物を食塩水で洗浄、乾燥した（Ｎａ２ＳＯ４）。エーテル溶液を減圧濃縮してＮ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）−２（Ｒ）−［［（４−ヒドロキシ−３−ヨードフェニル）スルホニル］（３−ピコリル）−アミノ］−３−メチルブタンアミド９００ｍｇを得た。これは薄桃色固体であり、さらに精製することなく次のステップに使用した。
【０１４３】
粗製のＮ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）−２（Ｒ）−［［（４−ヒドロキシ−３−ヨードフェニル）スルホニル］（３−ピコリル）−アミノ］−３−メチルブタンアミド９００ｍｇを、エタノール９３μｌを含有するジクロロメタン１５０ｍｌに溶解させた。溶液を−１０℃に冷却し、塩酸を１．５時間吹き込んだ。反応容器を密封し、混合物を室温まで加熱した。室温で１９時間攪拌後、溶媒を蒸発により約２０ｍｌに減少させ、残渣をエーテル約５０ｍｌで処理した。得られた懸濁液を激しく１〜２時間攪拌した。沈殿物を吸引濾過で回収し、減圧乾燥して無色から薄黄色の粉末固体８３０ｍｇを得た。メタノール／アセトニトリル（１：１）で２回再結晶させて、純化合物８を１５０ｍｇ得た。
【０１４４】
収率：１２％（２段階にわたる）。
【０１４５】
融点：２０１〜２０３℃。
【０１４６】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１１．７０（広幅，ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、１１．０３（広幅，ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、８．８６（ｓ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．８４（ｓ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．４５（ｄ，３Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．９８（ｄｄ，３Ｊ１＝８．３Ｈｚ，３Ｊ２＝５．７Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．９６（ｄ，３Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．６９（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．１０（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、４．９８（ｄ，２Ｊ＝１６．５Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．８２（ｄ，２Ｊ＝１６．５Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、３．８９（ｄ，３Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｎ−ＣＨ）、２．１５〜２．０２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．８７（ｄ，３Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．６９（ｄ，３Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）。
【０１４７】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１６６．２５、１６１．３２、１４４．９５、１４２．２２、１４１．３６、１３８．７２、１３８．１２、１３１．３３、１２９．１５、１２６．４４、１１５．１６、８４．８７、６３．３３、４５．０３、２８．０５、１９．５０、１９．３１。
【０１４８】
元素分析：Ｃ１７Ｈ２１ＩＮ３Ｏ５ＳＣｌの計算値：Ｃ ３７．６９、Ｈ ３．９０、Ｎ ７．７６；実測値：Ｃ ３７．８４、Ｈ ４．４２、Ｎ ７．３９。
【０１４９】
実施例６ キレート剤１の調製
６（ａ） ３（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステル
カルボメトキシメチレントリフェニルホスホラン（１６７ｇ、０．５ｍｏｌ）のトルエン（６００ｍｌ）溶液を３−オキソグルタル酸ジメチル（８７ｇ、０．５ｍｏｌ）で処理し、反応液を１２０℃の油浴上、窒素雰囲気下で１００℃に３６時間加熱した。次に、反応液を減圧濃縮し、油状残渣を４０／６０石油エーテル／ジエチルエーテル１：１、６００ｍｌで粉砕した。トリフェニルホスフィンオキシドを沈殿除去し、上澄液をデカント／濾別した。減圧蒸発させた残渣を高真空下、沸点でＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留して（０．２ｔｏｒｒでオーブン温度１８０〜２００℃）、３（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステルを８９．０８ｇ、２６７ｍＭ、５３％で得た。
【０１５０】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）：δ３．３１（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２）、３．７（９Ｈ，ｓ，３×ＯＣＨ３）、３．８７（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２）、５．７９（１Ｈ，ｓ，＝ＣＨ）、ｐｐｍ。
【０１５１】
ＮＭＲ １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ３６．５６、ＣＨ３、４８．７、２×ＣＨ３、５２．０９及び５２．５（２×ＣＨ２）；１２２．３及び１４６．１６ Ｃ＝ＣＨ；１６５．９、１７０．０及び１７０．５ ３×ＣＯＯｐｐｍ。
【０１５２】
６（ｂ） ３（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステルの水素付加
３（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステル（８９ｇ、２６７ｍｍｏｌ）のメタノール（２００ｍｌ）溶液を、木炭上のパラジウム１０％：水５０％（９ｇ）と共に、水素ガス雰囲気下（５０ｐｓｉ）３０時間振とうした。溶液をｋｉｅｓｅｌｇｕｈｒで濾過し、減圧濃縮して３−（メトキシカルボニルメチル）グルタル酸ジメチルエステルを油状物として得た（収量８４．９ｇ、収率９４％）。
【０１５３】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ２．４８（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，３×ＣＨ２）、２．７８（１Ｈ，六重線，Ｊ＝８Ｈｚ ＣＨ）、３．７（９Ｈ，ｓ，３×ＣＨ３）。
【０１５４】
ＮＭＲ １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ２８．６、ＣＨ；３７．５０、３×ＣＨ３；５１．６、３×ＣＨ２；１７２．２８、３×ＣＯＯ
６（ｃ） トリメチルエステルのトリアセテートへの還元及びエステル化
窒素雰囲気下、２Ｌ三つ口丸底フラスコ中で、水素化リチウムアルミニウム（２０ｇ、５８８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（４００ｍｌ）溶液をトリ（メチルオキシカルボニルメチル）メタン（４０ｇ、２１２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２００ｍｌ）溶液で１時間にわたって慎重に処理した。激しい発熱反応が生じ、溶媒は激しく還流した。反応液を９０℃の油浴上で加熱し、３日間還流させた。酢酸（１００ｍｌ）を慎重に滴下することで反応液をクエンチして、水素の発生を中止させた。攪拌した反応混合物を無水酢酸溶液（５００ｍｌ）で、緩やかに還流させる速度で慎重に処理した。このフラスコに蒸留用の装備をつけ、攪拌後、９０℃（油浴温度）で加熱してテトラヒドロフランを留去した。無水酢酸（３００ｍｌ）をさらに加え、還流時の構成に戻し、反応液を１４０℃の油浴中で５時間攪拌、加熱した。反応液を冷却、濾過した。酸化アルミニウム沈殿物を酢酸エチルで洗浄し、混合濾液をロータリーエバポレーター上で、水浴温度５０℃で減圧（５ｍｍＨｇ）濃縮して油状物を得た。油状物を酢酸エチル（５００ｍｌ）中に取り込み、飽和炭酸カリウム水溶液で洗浄した。酢酸エチル溶液を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮して油状物を得た。油状物を高真空下でＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留してトリス（２−アセトキシエチル）メタン（収量４５．３１３ｇ、収率９５．９％、０．１６５ｍｏｌ）を油状物として得た。０．１ｍｍＨｇで沸点２２０。
【０１５５】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ１．６６（７Ｈ，ｍ，３×ＣＨ２，ＣＨ）、２．０８（１Ｈ，ｓ，３×ＣＨ３）；４．１（６Ｈ，ｔ ３×ＣＨ２Ｏ）。
【０１５６】
ＮＭＲ １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ２０．９、ＣＨ３；２９．３４、ＣＨ；３２．１７、ＣＨ２；６２．１５、ＣＨ２Ｏ；１７１、ＣＯ。
【０１５７】
６（ｄ） トリアセテートからの酢酸エステル基の除去
トリス（２−アセトキシエチル）メタン（４５．３ｇ、１６５ｍＭ）のメタノール（２００ｍｌ）及び８８０アンモニア（１００ｍｌ）溶液を８０℃の油浴上で２日間加熱した。反応液をさらなる８８０アンモニア（５０ｍｌ）で処理し、油浴中８０℃で２４時間加熱した。８８０アンモニア（５０ｍｌ）をさらに加え、反応液を８０℃で２４時間加熱した。次に、反応液を減圧濃縮して全溶媒を除去し、油状物を得た。これを８８０アンモニア（１５０ｍｌ）中に取り込み、８０℃で２４時間加熱した。次に、反応液を減圧濃縮して全溶媒を除去し、油状物を得た。沸点１７０〜１８０、０．２ｍｍでのＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留でアセトアミドを得た。このアセトアミドを収容しているバルブをきれいに洗浄し、蒸留を継続した。沸点２２０℃、０．２ｍｍで蒸留してトリス（２−ヒドロキシエチル）メタン（２２．５３ｇ、１５２ｍｍｏｌ、９２．１％）を得た。
【０１５８】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ１．４５（６Ｈ，ｑ，３×ＣＨ２）、２．２（１Ｈ，五重線，ＣＨ）；３．７（６Ｈ，ｔ ３×ＣＨ２ＯＨ）；５．５（３Ｈ，ｂｒｓ，３×ＯＨ）。
【０１５９】
ＮＭＲ １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ２２．１３、ＣＨ；３３．９５、３×ＣＨ２；５７．８、３×ＣＨ２ＯＨ。
【０１６０】
６（ｅ） トリオールのトリス（メタンスルホネート）への変換
攪拌・氷冷したトリス（２−ヒドロキシエチル）メタン（１０ｇ、０．０６７６ｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍｌ）溶液を、塩化メタンスルホニル（４０ｇ、０．３４９ｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍｌ）溶液に、窒素下、温度が１５℃を超えて上昇しない速度でゆっくりと滴下した。次に、ピリジン（２１．４ｇ、０．２７ｍｏｌ、４当量）のジクロロメタン（５０ｍｌ）溶液を、温度が１５℃を超えて上昇し発熱反応を起こさないような速度で滴下した。反応液を室温で２４時間攪拌した後、５Ｎ塩酸溶液（８０ｍｌ）で処理、層分離した。水層をさらなるジクロロメタン（５０ｍｌ）で抽出し、有機抽出物を混合、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、減圧濃縮して、過剰量の塩化メタンスルホニルで汚染したトリス（２−（メチルスルホニルオキシ）エチル）メタンを得た。理論上の収量は２５．８ｇであった。
【０１６１】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ４．３（６Ｈ，ｔ，２×ＣＨ２）、３．０（９Ｈ，ｓ，３×ＣＨ３）、２（１Ｈ，六重線，ＣＨ）、１．８５（６Ｈ，ｑ，３×ＣＨ２）。
【０１６２】
６（ｆ） １，１，１−トリス（２−アジドエチル）メタンの調製
トリス（２−（メチルスルホニルオキシ）−エチル）メタン［ステップ１（ｅ）から、過剰量の塩化メチルスルホニルで汚染］（２５．８ｇ、６７ｍｍｏｌ、理論値）の乾燥ＤＭＦ（２５０ｍｌ）攪拌溶液を窒素下、アジ化ナトリウム（３０．７ｇ、０．４７ｍｏｌ）で少しづつ１５分かけて処理した。発熱が観察され、反応液を氷浴上で冷却した。３０分後、反応混合物を５０℃の油浴上で２４時間加熱した。反応液は褐色になった。反応液を冷却し、希炭酸カリウム溶液（２００ｍｌ）で処理し、４０／６０石油エーテル／ジエチルエーテル１０：１（３×１５０ｍｌ）で３回抽出した。有機抽出物を水（２×１５０ｍｌ）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過した。エタノール（２００ｍｌ）を石油／エーテル溶液に加えてトリアジドを溶液に保ち、体積を減圧下で２００ｍｌ以上に減少させた。エタノール（２００ｍｌ）を加え、減圧再濃縮して最後の微量の石油を除去し、２００ｍｌ以上のエタノール溶液が残った。
【０１６３】
注意：アジ化物は爆発の可能性があり、常に希溶液に保たなければならないので、溶媒をすべて除去することのないように。
【０１６４】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ３．３５（６Ｈ，ｔ，３×ＣＨ２）、１．８（１Ｈ，六重線，ＣＨ）、１．６（６Ｈ，ｑ，３×ＣＨ２）。
【０１６５】
６（ｇ） １，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンの調製
トリス（２−アジドエチル）メタン（１５．０６ｇ、０．０６７６ｍｏｌ）（前の反応の収率を１００％とする）のエタノール（２００ｍｌ）溶液を、木炭上の１０％パラジウム（２ｇ、水５０％）で処理し、１２時間水素添加した。反応容器から２時間毎に排気して、反応液から発生した窒素を除去し、水素を再充填した。サンプルをＮＭＲ分析用に採取して、トリアジドのトリアミンへの変換完了を確認した。
【０１６６】
注意：非還元アジ化物は蒸留時に爆発の可能性あり。
【０１６７】
反応液をセライトパッドで濾過して触媒を除去し、減圧濃縮してトリス（２−アミノエチル）メタンを油状物として得た。これを０．４ｍｍ／Ｈｇで沸点１８０〜２００℃のＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留でさらに精製して無色油状物を得た（８．１ｇ、５５．９ｍｍｏｌ、トリオールからの合計収率８２．７％）。
【０１６８】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、２．７２（６Ｈ，ｔ，３×ＣＨ２Ｎ）、１．４１（Ｈ，七重線，ＣＨ）、１．３９（６Ｈ，ｑ，３×ＣＨ２）。
【０１６９】
ＮＭＲ １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ３９．８（ＣＨ２ＮＨ２）、３８．２（ＣＨ２．）、３１．０（ＣＨ）。
【０１７０】
１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンは、下記の代替方法でも調製することができる。
【０１７１】
６（ｇ）（ｉ）：トリメチルエステルのｐ−メトキシ−ベンジルアミンを用いたアミド化
トリス（メチルオキシカルボニルメチル）メタン［２ｇ、８．４ｍｍｏｌ；上記ステップ６（ｂ）と同様に調製］をｐ−メトキシ−ベンジルアミン（２５ｇ、１７８．６ｍｍｏｌ）に溶解した。装置を蒸留用に調整し、窒素流下で１２０℃に２４時間加熱した。反応の進行を回収したメタノールの量によりモニターした。反応混合物を外界温度に冷却し、酢酸エチル３０ｍｌを加えた後、蒸留したトリアミド生成物を３０分間攪拌した。トリアミドを濾過により単離し、フィルターケーキを十分量の酢酸エチルで数回洗浄して、過剰量のｐ−メトキシ−ベンジルアミンを除去した。乾燥後、白色粉末４．６ｇ、１００％を得た。この極めて不溶性の生成物を次のステップに、さらに精製又は特徴付けをせずに直接使用した。
【０１７２】
６（ｇ）（ｉｉ）：１，１，１−トリス［２−（ｐ−メトキシベンジルアミノ）エチル］メタンの調製
氷水浴中で冷却した１０００ｍｌ三つ口丸底フラスコ中の１Ｍボラン溶液（３．５ｇ、２４４．３ｍｍｏｌ）ボランに、ステップ２（ａ）のトリアミド（１０ｇ、１７．８９ｍｍｏｌ）を慎重に加える。添加完了後、氷水浴を除去し、反応混合物を６０℃に加熱する。反応混合物を６０℃で２０時間攪拌する。反応混合物のサンプル（１ｍｌ）を取り出し、５Ｎ ＨＣｌ ０．５ｍｌと混合、３０分間静置した。サンプルに５０ＮａＯＨ ０．５ｍｌを加えた後、水２ｍｌを加え、溶液を攪拌して白色沈殿物をすべて溶解させた。溶液をエーテル（５ｍｌ）で抽出し、蒸発させた。残渣をアセトニトリルに溶解して濃度を１ｍｇ／ｍｌにし、質量分析法で分析した。モノ及びジアミド（Ｍ＋Ｈ／ｚ＝５２０及び５３４）が質量スペクトルに見られる場合、反応は完了していない。反応を完了させるには、１ＭボランＴＨＦ溶液１００ｍｌをさらに加え、反応混合物を６０℃でさらに６時間攪拌し、上記のサンプリング法に従って新しいサンプルを取り出す。必要であれば１ＭボランＴＨＦ溶液の添加をさらに続けてトリアミンへの変換を完了させる。
【０１７３】
反応混合物を外界温度に冷却し、５Ｎ ＨＣｌをゆっくり加える［注意：気泡が活発に形成！］。ＨＣｌを加えて、ガス発生がもはや観察されないようにした。混合物を３０分間攪拌した後、蒸発させた。ケーキをＮａＯＨ水溶液（２０〜４０％；１：２ｗ／ｖ）に懸濁させ、３０分間攪拌した。次に、混合物を水で希釈した（３倍体積）。次に混合物をジエチルエーテル（２×１５０ｍｌ）で抽出した［注意：ハロゲン化溶媒を使用しないこと］。次に、混合有機相を水（１×２００ｍｌ）、食塩水（１５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。蒸発後の油状物としての収量７．６ｇ、収率８４％。
【０１７４】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ：１．４５、（６Ｈ，ｍ，３×ＣＨ２；１．５４、（１Ｈ，七重線，ＣＨ）；２．６０（６Ｈ，ｔ，３×ＣＨ２Ｎ）；３．６８（６Ｈ，ｓ，ＡｒＣＨ２）；３．７８（９Ｈ，ｓ，３×ＣＨ３Ｏ）；６．９４（６Ｈ，ｄ，６×Ａｒ）。７．２０（６Ｈ，ｄ，６×Ａｒ）。
【０１７５】
ＮＭＲ １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ：３２．１７、ＣＨ；３４．４４、ＣＨ２；４７．００、ＣＨ２；５３．５６、ＡｒＣＨ２；５５．２５、ＣＨ３Ｏ；１１３．７８、Ａｒ；１２９．２９、Ａｒ；１３２．６１；Ａｒ；１５８．６０、Ａｒ；
６（ｇ）（ｉｉｉ） １，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンの調製
１，１，１−トリス［２−（ｐ−メトキシベンジルアミノ）エチル］メタン（２０．０グラム、０．０３６ｍｏｌ）をメタノール（１００ｍｌ）に溶解し、Ｐｄ（ＯＨ）２（５．０グラム）を加えた。混合物を水素添加し（３バール、１００℃、オートクレーブ中）、５時間攪拌した。１０時間後及び１５時間後、Ｐｄ（ＯＨ）２をさらに２回（２×５グラム）各々加えた。
【０１７６】
反応混合物を濾過し、濾液をメタノールで洗浄した。混合有機相を蒸発させ、残渣を減圧（１×１０−２、１１０℃）蒸留して、前記方法で得たものと同一の１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンを２．６０グラム（５０％）得た。
【０１７７】
６（ｈ） ３−クロロ−２−ニトロソブタンの調製。
【０１７８】
２−メチルブト−２−エン（１４７ｍｌ、１．４ｍｏｌ）と亜硝酸イソアミル（１５６ｍｌ、１．１６ｍｏｌ）との混合物をカーディス及びメタノールの浴中で−３０℃に冷却し、オーバーヘッド空気攪拌機で激しく攪拌し、濃塩酸（１４０ｍｌ、１．６８ｍｏｌ）を温度が−２０℃未満に維持されるような速度で滴下して処理した。著しい発熱が生じ、過熱を避けるために注意が必要なことから、これには約１時間を要する。エタノール（１００ｍｌ）を加えて上記添加の完了時に形成したスラリーの粘度を低下させ、反応液を−２０〜−１０℃でさらに２時間攪拌して反応を完了させた。沈殿物を減圧濾過で回収し、冷（−２０℃）エタノール４×３０ｍｌ及び氷冷水１００ｍｌで洗浄し、減圧乾燥して３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタンを白色固体として得た。エタノール濾液と洗液を混合し、水（２００ｍｌ）で希釈し、冷却し、−１０℃で１時間静置して、３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタンのさらなる生成物が結晶化された。沈殿物を濾過により回収し、最小量の水で洗浄し、減圧乾燥してＮＭＲによる純度９８％超の３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタンの全収量（１１５ｇ ０．８５ｍｏｌ、７３％）を得た。
【０１７９】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、異性体の混合物（異性体１，９０％）１．５ｄ、（２Ｈ，ＣＨ３）、１．６５ｄ、（４Ｈ，２×ＣＨ３）、５．８５、ｑ及び５．９５、ｑ、合計１Ｈ。（異性体２，１０％）、１．７６ｓ、（６Ｈ，２×ＣＨ３）、２．０７（３Ｈ，ＣＨ３）。
【０１８０】
６（ｉ） ビス［Ｎ−（１，１−ジメチル−２−Ｎ−ヒドロキシイミンプロピル）２−アミノエチル］−（２−アミノエチル）メタン（キレート剤１）の合成
トリス（２−アミノエチル）メタン（４．０４７ｇ、２７．９ｍｍｏｌ）の乾燥エタノール（３０ｍｌ）溶液に、無水炭酸カリウム（７．７ｇ、５５．８ｍｍｏｌ、２当量）を室温で、窒素雰囲気下で激しく攪拌しながら加えた。３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタン（７．５６ｇ、５５．８ｍｏｌ、２当量）の溶液を乾燥エタノール（１００ｍｌ）に溶解し、この溶液７５ｍｌを上記反応混合物にゆっくりと滴下した。反応後、ジクロロメタン、メタノール、濃アンモニア（比重０．８８）の１００／３０／５混合物中で運転するシリカ上でのＴＬＣにかけ、ＴＬＣプレートをニンヒドリン噴霧及び加熱により展開した。モノ、ジ及びトリアルキル化生成物がみられ、Ｒｆ値はこの順序で増大した。分析ＨＰＬＣを、ＲＰＲ逆相カラムを使って、３％アンモニア水中のアセトニトリルのグラジエントを７．５〜７５％にして運転した。反応液を減圧濃縮してエタノールを除去し、水（１１０ｍｌ）に再懸濁した。水性スラリーをエーテル（１００ｍｌ）で抽出してトリアルキル化合物の一部及び親油性不純物を除去し、水層中にはモノ及び所望のジアルキル化生成物が残った。水溶液を酢酸アンモニウム（２当量、４．３ｇ、５５．８ｍｍｏｌ）で緩衝して良好なクロマトグラフィーを確保した。水溶液を終夜４℃で保管した後、自動分取ＨＰＬＣで精製した。
【０１８１】
収量・収率（２．２ｇ、６．４ｍＭ、２３％）。
【０１８２】
質量スペクトル；陽イオン１０Ｖコーン電圧。実測値：３４４；計算値Ｍ＋Ｈ＝３４４。
【０１８３】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ１．２４（６Ｈ，ｓ，２×ＣＨ３）、１．３（６Ｈ，ｓ，２×ＣＨ３）、１．２５〜１．７５（７Ｈ，ｍ，３×ＣＨ２，ＣＨ）、（３Ｈ，ｓ，２×ＣＨ２）、２．５８（４Ｈ，ｍ，ＣＨ２Ｎ）、２．８８（２Ｈ，ｔ ＣＨ２Ｎ２）、５．０（６Ｈ，ｓ，ＮＨ２ ，２×ＮＨ，２×ＯＨ）。
【０１８４】
ＮＭＲ １Ｈ（（ＣＤ３）２ＳＯ）δ１．１４×ＣＨ；１．２９、３×ＣＨ２；２．１（４Ｈ，ｔ，２×ＣＨ２）；
ＮＭＲ １３Ｃ（（ＣＤ３）２ＳＯ）、δ９．０（４×ＣＨ３）、２５．８（２×ＣＨ３）、３１．０ ２×ＣＨ２、３４．６ ＣＨ２、５６．８ ２×ＣＨ２Ｎ；１６０．３、Ｃ＝Ｎ。
【０１８５】
ＨＰＬＣ条件：流量８ｍｌ／分、２５ｍｍＰＲＰカラム使用
Ａ＝３％アンモニア溶液（比重＝０．８８）／水。
【０１８６】
Ｂ＝アセトニトリル
時間 Ｂ（％）
０ ７．５
１５ ７５．０
２０ ７５．０
２２ ７．５
３０ ７．５
１運転当たり水溶液３ｍｌを負荷、１２．５〜１３．５分の時間窓内に回収。
【０１８７】
実施例７ 化合物１０の調製
合成経路は図２に示す。
【０１８８】
７（ａ） ４−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチル−プロピルスルファモイル）−安息香酸メチルエステル（化合物１＊）
２−アミノ−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｈ−Ｄ−Ｖａｌ−ＯｔＢｕ．ＨＣｌ）（５００ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２０ｍｌ）攪拌懸濁液に、ピリジン（７６７μｌ、９．５２ｍｍｏｌ）を外界温度で加えた。透明で無色の溶液が速やかに得られた。次に、４−クロロスルホニル−安息香酸メチルエステル（６７０ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（６ｍｌ）溶液を滴下し、薄黄色になった混合物を外界温度で４時間攪拌した。反応はＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：１）でモニターした。溶媒を蒸発させ、酢酸エチル（５０ｍｌ）及び飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１０ｍｌ）を加えた。混合物を分液漏斗に移しかえ、激しく振とうした。次に層分離し、酢酸エチル層を食塩水（１０ｍｌ）で１回抽出、乾燥（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて粗生成物を得た。（酢酸エチル／ヘキサン、１：１）を用いたフラッシュクロマトグラフィーで標記純生成物を白色固体として得た。収量８８０ｍｇ（収率９９．５５％）。
【０１８９】
７（ｂ） ４−［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチル−プロピル）−ピリジン−３−イルメチル−スルファモイル］−安息香酸メチルエステル（化合物２＊）
４−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチル−プロピルスルファモイル）−安息香酸メチルエステル（化合物１＊−８８４ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（３０ｍｌ）攪拌溶液に、炭酸セシウム（１０．８６ｇ、３３．３４ｍｍｏｌ）を外界温度で加えた。次に、塩化３−ピコリル塩酸塩（５４６ｍｇ、３．３３ｍｍｏｌ）を懸濁液に加え、反応混合物を室温で２４時間混合した。その時点でＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン １：１）モニタリングを行い、反応の完了が明らかになった。混合物を蒸発乾固し、残渣を酢酸エチル（５０ｍｌ）中で攪拌した。酢酸エチル相を水（１×５０ｍｌ）で抽出、乾燥（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて粗生成物を褐色油状物として得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィーで精製して標記純生成物を無色油状物として得た。収量８００ｍｇ（収率７９．２１％）。
【０１９０】
７（ｃ） ４−［（１−カルボキシ−２−メチル−プロピル）−ピリジン−３−イルメチル−スルファモイル］−安息香酸メチルエステル（化合物３＊）
エステル（化合物２＊−３２１ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（１５ｍｌ）に溶解し、−１０℃に冷却した。塩酸ガスを溶液に１０分間吹き込んだ。反応混合物を封着、室温に加熱、１６時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残渣を塩化メチレン（２×１０ｍｌ）と共蒸発させて標記生成物を白色気泡として得た（２７８ｍｇ、収率８３．７３％）。
【０１９１】
７（ｄ） ４−［（１−ヒドロキシカルバモイル−２−メチル−プロピル）−ピリジン−３−イルメチル−スルファモイル］−安息香酸メチルエステル（化合物５＊）
酸（化合物３＊−１１２ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３９ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（２９７μｌ、１．４ｍｍｏｌ）及びＯ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル｝ヒドロキシルアミン（１２４ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（８ｍｌ）に溶解した。Ｎ−［（ジメチルアミノ）プロピル］−Ｎ′−エチルカルボジイミド塩酸塩（７３ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２４時間攪拌した。反応混合物を水（１０ｍｌ）で希釈、塩化メチレン（２×１０ｍｌ）で抽出した。塩化メチレン混合相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過した。塩酸のジオキサン溶液を数滴、濾液に加えて標記の遊離ヒドロキサム酸（１０８ｍｇ）を直接得た。
【０１９２】
７（ｅ） ４−［（１−ヒドロキシカルバモイル−２−メチル−プロピル）−ピリジン−３−イルメチル−スルファモイル］−安息香酸（化合物６＊）
２Ｎ水酸化ナトリウム（２００μｌ）をエステル（化合物５＊−３２ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）のメタノール（１ｍｌ）溶液に加え、反応混合物を外界温度で攪拌した。３０分後、混合物を蒸発乾固し、残渣を水（２ｍｌ）に溶解した。溶液を２Ｎ ＨＣｌで酸性にした。分取ＨＰＬＣで標記純生成物を白色粉末として得た（収量２８ｍｇ、収率９５．０１％）。
【０１９３】
７（ｆ） ４−［（１−ヒドロキシカルバモイル−２−メチル−プロピル）−ピリジン−３−イルメチル−スルファモイル］−Ｎ−｛５−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−３−［２−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−エチル］−ペンチル｝−ベンズアミド（化合物１０）
酸（化合物６＊）−１２．５ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ｝、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３．６８ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（１７．４μｌ、０．１２４ｍｍｏｌ）及びＮ−［（ジメチルアミノ）プロピル］−Ｎ′−エチルカルボジイミド塩酸塩（８．０６ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（２ｍｌ）に溶解した。キレート剤１（１３ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２４時間攪拌した。溶媒を蒸発させた後、粗生成物をＨＰＬＣで直接精製した（グラジエント００＿３０＿６０）。標記生成物は薄褐色のゴムであった（収量２ｍｇ、収率９％）。
【０１９４】
実施例８ 化合物１１の調製
化合物１１の合成は図３に示す。
【０１９５】
８（ａ） ２−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニルアミノ）−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
２−アミノ−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｈ−Ｄ−Ｖａｌ−ＯｔＢｕ．ＨＣｌ）（５００ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２０ｍｌ）攪拌懸濁液に、ピリジン（７６７μｌ、９．５２ｍｍｏｌ）を周囲温度で加えた。透明で無色の溶液が速やかに得られた。次に、塩化４−メトキシル−ベンゼンスルホニル（５４１ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍｌ）溶液を滴下し、薄黄色になった混合物を外界温度で攪拌した。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：１）で、反応が３時間後に完了したことが明らかになった。アセトニトリルを蒸発させた後、残渣をジクロロメタン（３０ｍｌ）に取り込み、１０％炭酸水素ナトリウム溶液（３０ｍｌ）及び水（３０ｍｌ）で各々１回づつ抽出した。次に層分離し、ジクロロメタン層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて粗生成物を得た。（酢酸エチル／ヘキサン、１：１）を用いたフラッシュクロマトグラフィーで標記純生成物を白色固体として得た。収量８０１ｍｇ（収率９３．９０％）。
【０１９６】
８（ｂ） ４−｛［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチル−プロピル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−メチル｝安息香酸メチルエステル（化合物７）
２−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニルアミノ）−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１４０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（５ｍｌ）攪拌溶液に、炭酸セシウム（１．３３ｇ、４．１０ｍｍｏｌ）を外界温度で加えた。次に、４−（ブロモメチル）安息香酸メチル（１１５ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を懸濁液に加え、反応混合物を７０℃で１時間混合した。その時点でＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン １：１）モニタリングにより、反応の完了が明らかになった。外界温度に冷却後、混合物を濾過して過剰量の炭酸セシウムを除去し、蒸発乾固した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン １：１）で精製して標記純生成物を薄黄色油状物として得た。収量１５３ｍｇ（収率７６％）。
【０１９７】
８（ｃ） ４−｛［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチル−プロピル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−メチル｝−安息香酸（化合物８＊）
ジエステル（化合物７＊）（１５１ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２ｍｌ）に溶解し、４Ｎ ＬｉＯＨ（２５０μｌ）を外界温度で加えた。混合物を６０℃に５時間加熱した時点で、ＨＰＬＣモニタリングにより加水分解の完了が明らかになった。混合物を外界温度に冷却し、溶媒を蒸発させた。残渣を水に溶解し、透明溶液をジエチルエーテルで１回抽出した。次に、水相を５℃（氷／水）に冷却し、１Ｎ ＨＣｌで中和した後、酢酸エチル（３×５ｍｌ）で抽出した。混合酢酸エチル相を水（５ｍｌ）及び食塩水（５ｍｌ）で抽出、（Ｎａ２ＳＯ４）で乾燥、濾過し、蒸発させて標記生成物を白色気泡として得た。収量１３３ｍｇ（収率９０％）。
【０１９８】
８（ｄ） ２−［（４−｛５−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−３−［２−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチルプロピルアミノ）−エチル］−ペンチルカルバモイル｝−ベンジル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物９＊）
酸（化合物８＊）（６１ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（４ｍｌ）溶液にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４６μｌ、０．２６ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド、ＨＡＴＵ（４９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）及びＣ−Ｐｎ２１６（５１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を外界温度で攪拌し、１時間後、ＨＰＬＣにより新しい生成物への変換の完了が明らかになった。混合物を蒸発乾固した後、フラッシュクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール、８：２）で標記純生成物を白色結晶として単離した。収量６６ｍｇ
８（ｅ） ２−［（４−｛５−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−３−［２−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−エチル］−ペンチルカルバモイル｝−ベンジル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸（化合物１０＊）
ジクロロメタン（４ｍｌ）をｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物９＊）（６４ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）に加え、得られた乳白色溶液に外界温度で塩酸ガスを１０分間吹き込んだ。混合物を蒸発乾固し、残渣をジクロロメタン（５×５ｍｌ）と共蒸発させて標記生成物をオフホワイト固体として得た。収量５８ｍｇ（収率９７％）。Ｍ＋１＝７４７。
【０１９９】
８（ｆ） ４−｛［（１−ヒドロキシカルバモイル−２−メチル−プロピル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］メチル｝−Ｎ−｛５−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−３−［２−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−エチル］−ペンチル｝−ベンズアミド（化合物１１）
ヒドロキサム酸を、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルで保護された中間体（化合物１１＊）を介して結合させた。これに従い、酸（化合物１０＊）（５７ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（３４μｌ、０．３０ｍｍｏｌ）、［７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート］ＰｙＡＯＰ、４０ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）及びＯ−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）ヒドロキシルアミン（１２ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）の混合物のジメチルホルムアミド（４ｍｌ）溶液を外界温度で攪拌し、反応をＨＰＬＣでモニターした。反応を３時間後に停止し、溶媒を蒸発させた。残渣をジクロロメタンに再溶解し、外界温度で塩酸ガスを混合物に１０分間吹き込んだ。混合物を蒸発乾固し、残渣をジクロロメタン（５×５ｍｌ）と共蒸発させた。ＨＰＬＣで標記生成物を白色粉末として得、Ｍ＋Ｈは７６２であった。収量１５ｍｇ。
【０２００】
実施例９ 化合物１８の調製
９（ａ） ２−［［４−（２−｛２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エチルカルバモイル）−ベンジル］−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物１２＊）
酸（化合物８＊；１４０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（６ｍｌ）溶液にＮ，Ｎ′−ジイソプロピルエチルアミン（１０４．５１μｌ、０．６０ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド、ＨＡＴＵ（１１４ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）及び２−｛２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エチルアミン（６５．５０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を外界温度で攪拌し、２時間後、ＨＰＬＣモニタリングで新しい生成物への変換の完了が明らかになった。混合物を蒸発乾固した後、フラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル）で標記純生成物を無色油状物として単離した。収量１４２ｍｇ（収率７０％）。
【０２０１】
９（ｂ） ２−［［４−（２−｛２−［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エチルカルバモイル）−ベンジル］−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物１３＊）
０℃（氷／Ｈ２Ｏ）に冷却したアジ化物（化合物１２＊；２００ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍｌ）攪拌溶液にトリフェニルホスフィン（８４ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加えた。この温度で５分攪拌後、冷却浴を除去し、外界温度で１９時間攪拌を続けた。次に水（２００μｌ）を加え、１５時間後に分析（ＨＰＬＣ）したところ、加水分解の完了が示された。溶媒を蒸発させ、油状残渣をフラッシュクロマトグラフィーで、まずＣＨＣｌ３／メタノール（８：２）、次いでＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏを用い精製して標記化合物を無色油状物として得た。収量１３４ｍｇ（収率７１％）。Ｍ＋６５２
９（ｃ） ２−［｛４−［２−（２−｛２−［２−（４−カルボキシ−ブチリルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−ベンジル｝−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルＣＡ１（化合物１４＊）
アミン（化合物１３＊；７３ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３９μｌ，０．２２ｍｍｏｌ）及び活性エステルである４−｛５−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−３−［２−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−エチル］−ペンチルカルバモイル｝−チオ酪酸２，３，５，６−テトラフルオロ−フェニルエステル（ｂ；８５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（５ｍｌ）溶液を外界温度で２時間攪拌した。その時点でのＨＰＬＣモニタリングにより、反応の完了が明らかになった。混合物を蒸発乾固させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ、８：２）で精製して標記生成物をゴムとして得た。収量５４ｍｇ（収率４５％）。
【０２０２】
９（ｄ） ２−［｛４−［２−（２−｛２−［２−（４−カルボキシ−ブチリルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−ベンジル｝−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｃＰｎ２１６（化合物１５＊）
ジクロロメタン（５ｍｌ）をｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物１４＊；５０ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）に加え、得られた乳白色溶液に外界温度で塩酸ガスを１０分間吹き込んだ。混合物を蒸発乾固し、残渣をジクロロメタン（５×５ｍｌ）と共蒸発させて標記生成物を白色固体として得た。収量４７ｍｇ（収率９９％）。Ｍ＋１＝１０３５。
【０２０３】
９（ｅ） ４−［２−（２−｛２−［２−（４−｛［（１−ヒドロキシカルバモイル−２−メチル−プロピル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−メチル｝−ベンゾイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−酪酸ｃＰｎ２１６（化合物１８）
ヒドロキサム酸官能基を、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルで保護された中間体を介して結合させた。これに従い、酸（化合物１５＊；４７ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（２０μｌ、０．１８ｍｍｏｌ）、［７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート］ＰｙＡＯＰ（ａ；２３．５ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）及びＯ−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）ヒドロキシルアミン（１０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）の混合物のジメチルホルムアミド（３ｍｌ）溶液を外界温度で攪拌し、反応をＨＰＬＣでモニターした。反応を１時間後に停止し、溶媒を蒸発させた。残渣をジクロロメタンに再溶解し、外界温度で塩酸ガスを混合物に１０分間吹き込んだ。混合物を蒸発乾固し、残渣をジクロロメタン（５×５ｍｌ）と共蒸発させた。ＨＰＬＣで標記生成物を白色粉末として得た。Ｍ＋Ｈは１０５０、収量７ｍｇ（収率１５％）であった。
【０２０４】
実施例１０ 化合物１９の調製
１０（ａ） ２−［｛４−［２−（２−｛２−［２−（２−カルボキシメトキシ−アセチルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−ベンジル｝−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物１７＊）
アミン（化合物１３＊；６０ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ′−ジイソプロピルエチルアミン（９６μｌ、０．５５ｍｍｏｌ）及びジグリコール酸無水物（６６ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）の混合物のジメチルホルムアミド（６ｍｌ）溶液を外界温度で３時間攪拌した。その時点でＨＰＣモニタリングを行い、反応の完了が明らかになった。溶媒を減圧除去し、残渣を０．１％ＴＦＡを含有するアセトニトリルに溶解した。５分間攪拌後、混合物を蒸発乾固し、ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、６５：２５：４を用いたフラッシュクロマトグラフィーで粗生成物を精製した。標記生成物を白色気泡として得た。収量７０．５０ｍｇ（収率９９．８０％）。
【０２０５】
１０（ｂ） ２−［｛４−［２−（２−｛２−［２−（２−カルボキシメトキシ−アセチルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−ベンジル｝−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル−ＣＡ１結合体（化合物１８＊）
酸（化合物１７＊；７０．５０ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（５ｍｌ）溶液にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３２μｌ、０．１８４ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド、ＨＡＴＵ（３８ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）及びキレート剤１（ＣＡ１；３４ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を外界温度で攪拌し、６時間後、ＨＰＬＣにより新しい生成物への実質的な変換の完了が明らかになった。混合物を蒸発乾固した後、アセトニトリル：水：０．１％トリフルオロ酢酸（１０：８０：６０）を用いた分取ＨＰＬＣクロマトグラフィーで標記純生成物を白色結晶として単離した。収量２１ｍｇ（収率２１％）。
【０２０６】
１０（ｃ） ２−［｛４−［２−（２−｛２−［２−（２−カルボキシメトキシ−アセチルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−ベンジル｝−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸−ＣＡ１結合体（化合物１９＊）
ジクロロメタン（３ｍｌ）をｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物１８＊；２０ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）に加え、得られた乳白色溶液に外界温度で塩酸ガスを６０分間吹き込んだ。混合物を蒸発乾固し、残渣をジクロロメタン（５×５ｍｌ）と共蒸発させて標記生成物をオフホワイト固体として得た。収量１８ｍｇ（収率９５％）。Ｍ＋１＝１０３７。
【０２０７】
１０（ｄ） ｛［２−（２−｛２−［２−（４−｛［（１−ヒドロキシカルバモイル−２−メチル−プロピル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−メチル｝−ベンゾイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−メトキシ｝−酢酸−ＣＡ１結合体（化合物１９）
ヒドロキサム酸を、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルで保護された中間体を介して結合させた。これに従い、酸（化合物１９＊；１８ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（８μｌ、０．７０ｍｍｏｌ）、［７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート］ＰｙＡＯＰ（９．４ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）及びＯ−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）ヒドロキシルアミン（４ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）の混合物のジメチルホルムアミド（２ｍｌ）溶液を外界温度で攪拌し、反応をＨＰＬＣでモニターした。反応を２時間後に停止し、溶媒を蒸発させた。残渣（化合物２０＊）をジクロロメタンに再溶解し、外界温度で塩酸ガスを混合物に１０分間吹き込んだ。混合物を蒸発乾固し、残渣をジクロロメタン（５×３ｍｌ）と共蒸発させた。ＨＰＬＣで標記生成物を白色粉末として得、Ｍ＋Ｈは１０５２であった。収量４ｍｇ（収率２２．３５％）。
【０２０８】
実施例１１ 化合物１、２、３、１６及び１７を各々生成するための、化合物１０、１１、１２、１８及び１９の９９ｍＴｃ標識
ＳｎＣｌ２ １０ｍｇ及びＭＤＰ ９０ｍｇを窒素で浄化した生理食塩水１００ｍｌに溶解してＳｎＣｌ２／ＭＤＰ溶液を調製する。化合物１０、１１又は１２の１つをメタノールに溶解した１ｍｇ／ｍｌ溶液５０μｌに、（１）メタノール０．７ｍｌ、（２）０．１Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液０．５ｍｌ、（３）５００ＭＢｑ／ｍｌ ＴｃＯ４ ０．５ｍｌ及び（４）ＳｎＣｌ２／ＭＤＰ溶液１００μｌを加える。この反応混合物を３７℃で３０分加熱して化合物１、２又は３の１つを各々形成する。
【０２０９】
実施例１２ 化合物４の調製
化合物４の調製用の合成経路を図６に示す。４μ［１２３Ｉ］ＮａＩの０．０５Ｎ ＮａＯＨ溶液４μｌ（１２．０４ＭＢｑ）、化合物１３溶液３９μｌ（濃度＝１．２３ｇ／ＭｅＯＨ １リットル）及びＮＣＳ溶液７１μｌ（ＮＣＳ＝Ｎ−クロロスクシンイミド）（濃度＝０．５７９ｇ／注射用水１リットル）を円錐型バイアルに加えた。
【０２１０】
混合物を１分間ボルテックスした後、暗所で６０分間、室温で振とうした。次に、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液２５μｌ（濃度＝２．００ｇ／注射用水１リットル）を加え、混合物を再度ボルテックスした。
【０２１１】
溶液を、γ−及びＵＶ検出器並びに対応する２０×４ｍｍ２のプレカラムを有するＮｕｃｌｅｏｓｉｌ（登録商標）逆相Ｃ−１８ ５μ ２５０×４ｍｍ２ カラムを備えたグラジエントＨＰＬＣクロマトグラフに注入した。
【０２１２】
ＨＰＬＣ条件：
溶離液Ａ： ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ ９５０／５０／１
溶離液Ｂ： ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ ５０／９５０／１
時間プログラム： 溶離液Ｂを４５分以内に９２％から５０％に、次いで１０分以内に５０％から９２％に
流量： １．５ｍｌ／分
λ： ２５４ｎｍ
保持時間（生成物−画分）：１８．５０〜１９．８０分
この画分を蒸発乾固し、ＰＢＳ緩衝液２００ｍｌに再溶解し、同条件（上記参照）でグラジエントＨＰＬＣに再注入した。
【０２１３】
保持時間（化合物４）： １７．４０〜１８．７０分
この生成物の品質管理（ＨＰＬＣ、同条件）では、γ及びＵＶチャネル中に不純物は現れなかった。放射線化学収量は４４％であった。
【０２１４】
実施例１３ 化合物５の調製
化合物５は化合物４の１２５Ｉ変種である。［１２３Ｉ］ＮａＩの代わりに［１２５Ｉ］ＮａＩを使用した以外は、実施例１２記載の方法で調製した。
【０２１５】
実施例１４ 化合物６の調製
２，５−ジヒドロキシ安息香酸０．６ｍｇ、アスコルビン酸０．８ｍｇ、注射用水２０μｌ及びＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ溶液５μｌ（濃度＝３．２６ｇ／注射用水１リットル）を、化合物１４を５０μｌ収容した円錐形バイアル（濃度＝２．００ｇ／ＥｔＯＨ １リットル）に加えた。氷冷した混合物をＨｅ流で１０分間脱気した。次に、［１２５Ｉ］ＮａＩの０．０５Ｎ ＮａＯＨ溶液４μｌ（８．６８ＭＢｑ）を加え、ボルテックスした。混合物を１１３℃まで５１分間加熱し、５分毎に振とうした。室温に冷却後、混合物をＥｔＯＨ ４０μｌで希釈した。次に、溶液をＨＰＬＣクロマトグラフに注入し、実施例１０記載のようにＨＰＬＣを行った。保持時間（生成物画分）：１７．１８〜１９．５４分。
【０２１６】
この画分を蒸発乾固し、ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ：５０／９５０／１ ２００μｌに再溶解し、グラジエントＨＰＬＣに再注入した。保持時間（化合物６）：２１．０５〜２１．３６分。
【０２１７】
生成物のＨＰＬＣによる品質管理では、γ及びＵＶチャネル中に不純物は検出されなかった。２回目の品質管理用注入物に化合物９（即ち、非放射性の化合物６）の一定分量を加えることで、保持時間パラメータを認識した。
【０２１８】
平均放射線化学収率：２３％（ｎ＝５）。
【０２１９】
実施例１５ 化合物７の調製
［１２５Ｉ］ＮａＩの代わりに［１２３Ｉ］ＮａＩを使用する以外は、実施例６と同じ経路を介して化合物７を調製する。
【０２２０】
実施例１６ 化合物１５の調製
化合物１５の調製に使用できる合成経路を図７に示す。
【０２２１】
合成経路Ａでは、フラスコに窒素を入れた後、ジクロロ（ビストリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（０．１当量）及び酢酸カリウム（３当量）を順次加える。Ｎ−メチルピロリドン（５ｍｌ）を加えた後、化合物９（１当量）及び水素化トリブチルスズ（２当量）を順次加える。反応混合物を室温で２４時間攪拌する。次に反応混合物を酢酸エチルで希釈、水で洗浄、硫酸マグネシウムで乾燥する。溶媒を蒸発し、標記生成物をＨＰＬＣ精製で単離する。
【０２２２】
合成経路Ｂでは、フラスコに窒素を入れた後、化合物１４及び無水トルエンを加える。これにヘキサブチルスズ及びテトラキシトリフェニルホスフィンパラジウムを順次加える。反応混合物を２４時間加熱還流して標記生成物を得る。
【０２２３】
実施例１７ 化合物７の調製
０．１ｍＭ Ｎａ１２７Ｉの０．０１Ｍ ＮａＯＨ溶液１０μｌを０．２Ｍ ＮＨ４ＯＡｃ（ｐＨ４）２００μｌに加えた。次にＮａ１２７Ｉ／ＮＨ４ＯＡｃ溶液をＮａ１２３Ｉの０．０５Ｍ ＮａＯＨ溶液１１．０μｌ（１１１ＭＢｑ）に加えた。混合溶液をシラン処理プラスチックバイアルに移しかえた。過酢酸を酢酸に溶解した３６〜４０重量％溶液５μｌをＨ２Ｏ ５ｍｌに加えて、過酢酸の溶液を調製した。次に、調製した過酢酸溶液５μｌを、Ｎａ１２３／１２７Ｉを収容したバイアルに加えた。最後に、シラン処理プラスチックバイアル中のトリブチルスズ前駆体（化合物１５）の３ｍＭ溶液１７μｌを反応混合物に加え、溶液を３分間静置した。
【０２２４】
化合物７は、γ−及びＵＶ検出器並びに逆相Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃ１８（２）Ｌｕｎａ ５μ、１５０×４．６ｍｍカラムを備えたグラジエントＨＰＬＣクロマトグラフィーを用いて分析又は精製することができる。
【０２２５】
ＨＰＬＣ条件
溶離液Ａ：０．１％ＴＦＡ水溶液
溶離液Ｂ：０．１％ＴＦＡ ＣＨ３ＣＮ溶液
溶離液Ｂは２０分かけて２０％から８０％に。
【０２２６】
２０分 ８０％ Ｂ
２０．２分 １００％ Ｂ
２３．２分 １００％ Ｂ
２３．７分 ２０％ Ｂ
流量： １ｍｌ／分
λ： ２５４ｎｍ
保持時間：７分
実施例１８ ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９阻害活性アッセイ
合成広スペクトル蛍光原基質である（７−メトキシクマリン−４−イル）アセチルｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−（３−（２，４−ジニトロフェニル）−Ｌ−２，３−ジアミノ−プロピオニル）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を使って、既述のＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９活性［Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２ ２２０８６−２２０９１（１９９７）］をアッセイした。ＣＧＳ２７０２３並びに化合物８、９、１３及び１４によるＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９の阻害アッセイは、ＭＭＰ−２（１ｎｍ）又はＭＭＰ−９（２ｎｍ）、及び様々な濃度（１０ｐｍ〜１ｍＭ）でアッセイすべき該化合物を、０．２Ｍ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＣａＣｌ２、２０μＭ ＺｎＳＯ４及び０．０５％食塩水を含有するｐＨ７．５の５０ｍＭトリス−ＨＣｌ中、３５〜３７℃で３０分間予めインキュベートすることで行った。次に、基質（５μＭ）の一定分量（１０μｌ）を、予めインキュベートした９０μＭのＭＭＰ／化合物混合物に加え、活性を以下の経時的生成物放出により３７℃で測定した。蛍光変化のモニタリングは、Ｆｕｓｉｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｐａｃｋａｒｄ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を用い、励起及び放射波長をＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９について各々３３０、３９０ｎｍに設定して行った。阻害率は、生成物放出が経時的に直線状である最初１０分の反応プロファイルから測定した。非線形回帰分析は、Ｌｉｎｕｘ用ソフトウェアＸＭＧＲＡＣＥ ５．１８を用いて行った。
【０２２７】
アッセイした化合物について得られたＩＣ５０値を下記の表２に示す。
【０２２８】
【表２】
【０２２９】
実施例１９ ＡｐｏＥ（−／−）マウスモデル
ＡｐｏＥ−／−マウス（４週齢、２０〜２８ｇ）にキシラジン／ケタミン（Ｂａｙｅｒ、ドイツ）の腹腔内注射で麻酔をかけた。左総頸動脈を、分岐近傍で５−０シルク（Ｅｔｈｉｃｏｎ）を用いて結紮した。偽手術した対照群では、左総頸動脈の下に縛らずに縫合糸を通した。これらの動物を１週間かけて回復させた後、高コレステロールの食餌（ココファット１５％、コレステロール１．０％、コール酸ナトリウム０．５％）を与えた。手術の５週間後、マウスを組織病理学、オートラジオグラフィー及びイメージング調査に使用した。
【０２３０】
実施例２０ 組織学及び免疫組織化学
実施例１６記載のＡｐｏＥ−／−マウスをＬａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ緩衝液で３分間灌流した。結紮部位並びに左及び右頸動脈を除去し、さらなる切除をせずに液体窒素中でスナップ冷凍した。５つの切片（組織病理学用に１０μｍ）毎のグループを等間隔で回収した。
【０２３１】
結紮部位並びに左及び右頸動脈の外科標本の連続クリオスタット切片（１０μｍ）を切除し、顕微鏡スライド上で風乾し、３．７５％ＰＦＡ（ＭＭＰ−９）中に１０分間、４℃のアセトン中に１０分間（ＭＡＣ３、５５０２９２、ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ、カリフォルニア州、米国）固定した。切片をヘマトキシリン及びエオシンで染色した。免疫組織化学用に、切片を、抗ペルオキシダーゼ試薬（Ｓ２００１、ＤＡＫＯ、デンマーク）で１０分、１％ＢＳＡで２５分、バックグラウンド低減成分を有する抗体希釈液（Ｓ３０２２、ＤＡＫＯ、カリフォルニア州、米国）中に室温で１時間おいた一次抗体（２μｇ／ｍｌウサギ抗マウスＭＭＰ−９、ＡＢ１９０４７、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ、ドイツ）又は対照抗体（ウサギＩｇＧ、Ｅ０４３２、ＤＡＫＯ、デンマーク）で３０分インキュベートし、サプライヤーの推奨に従って処理した。ヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）のビオチン結合体（ＡＢ１３２Ｂ、１：５００、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ、ドイツ）２５分。ストレプトアビジン−ＨＲＰ（ＬＳＡＢキット、Ｋ０６７５、カリフォルニア州、米国）２５分、ＡＥＣ（Ｋ０６９６、ＤＡＫＯ、カリフォルニア州、米国）２０分、ヘマトキシリン１分、Ｈ２Ｏ １〜２分。
【０２３２】
免疫組織化学の結果及びオートラジオグラフィーの結果を図８に示す。取り込みはＭＭＰ−９の存在と関連していることが明らかである。
【０２３３】
実施例２１ インビボでのオートラジオグラフィー
４匹の結紮されたＡｐｏＥ−／−マウスの眼窩後に、０．５μＣｉ（２０ＭＢｑ）の化合物５の０．９％ＮａＣｌ ０．２ｍｌ溶液及びＣＧＳ２７０２３（０．９％ＮａＣｌ ２００μｌに溶解した６ｍＭ溶液、非特異的に結合）又は食塩水を注射し、その２時間後に放射性リガンドを注射した。マウスは注射２時間後に屠殺した。結紮部位並びに左及び右総頸動脈を素早く除去し、凍結切片を切除した後、厚さ６０μｍの切片をミクロオートラジオグラフィー用に処理した。
【０２３４】
オートラジオグラフィーの結果を、実施例１７で論じた免疫組織化学の結果と併せて図８に示す。
【０２３５】
実施例２２ インビボでのイメージング
化合物４を眼窩後の静脈叢に注射し、超高解像度コリメータを備えたＳｉｅｍｅｎｓ ＭＵＬＴＩＳＰＥＣＴ ３ガンマカメラ上で平面イメージングを行った。動画像を１分フレームのオリジナルフレーミングで得て、このフレーミングを分析用に１０分フレームに要約した。プラーク領域を環状のＲＯＩｓ（関心領域）により分析し、ＴＡＣｓ（時間放射能曲線）を作成した。
【０２３６】
実験Ａ：９ＭＢｑの化合物４の０．９％ＮａＣｌ ２００μｌ溶液を各マウス（マウス１〜６）に注射し、動画像を注射後１２０分までに撮影した。ＴＡＣｓを作成し、結紮領域で１２０分にわたり標識化合物の取り込みが増大したことがわかった（図９参照）。
【０２３７】
実験Ｂ：２日後、ＣＧＳ２７０２３を０．９％ＮａＣｌ ２００μｌに溶解した６ｍＭ溶液を前の実験のマウス４及び５に注射し、その２時間後に７．５ＭＢｑの化合物４の０．９％ＮａＣｌ ２００μｌ溶液を注射した。マウス１〜３にも、非放射性予備投与なしに７．５ＭＢｑの化合物４の０．９％ＮａＣｌ ２００μｌ溶液を注射した。動画像を１２０分にわたって得（図１０）、ＴＡＣｓを作成した。マウス４及び５における取り込みを、実験Ａの予備投与なしの場合と実験Ｂの予備投与後とで比較したところ、予備投与した動物での取り込み量がより少ないことがわかった（図１１参照）。
【０２３８】
実験Ａでは、肝臓、腎臓、膀胱、脳及び胸郭上に追加のＲＯＩｓを設定した。各ＲＯＩについて、減衰補正したＴＡＣｓを計算し、注射後１０分の放射能、即ち、正規化された秒当たりカウント数に正規化した（図１２参照）。
【図面の簡単な説明】
【０２３９】
【図１】γ−放射性核種がヨウ素の放射性同位体である、本発明の画像診断剤の放射性合成用の前駆体化合物の調製に使った合成経路を示す図である。これらの放射性ヨウ素標識した画像診断剤の非放射性の変種もまた、この合成経路を経由して調製された。図１の「Ｘ」は同図のＶ及びＶＩと同定義である。
【図２】配位子結合体である化合物１０、１１、１８及び１９の調製に各々使われた合成経路を示す図である。
【図３】配位子結合体である化合物１０、１１、１８及び１９の調製に各々使われた合成経路を示す図である。
【図４】配位子結合体である化合物１０、１１、１８及び１９の調製に各々使われた合成経路を示す図である。
【図５】配位子結合体である化合物１０、１１、１８及び１９の調製に各々使われた合成経路を示す図である。
【図６】化合物１３の放射性ヨウ素標識を介した化合物４の放射性合成を示す図である。
【図７】前駆体である化合物１５の調製に使われる２つの代替合成経路を示す図である。
【図８】ＡｐｏＥ（−／−）マウスから採取した左頸動脈のサンプルを用いて行った免疫組織化学の結果を示す図である。ＨＥ＝ヘマトキシリン及びエオシン。また、化合物５のインビボ注射後のＡｐｏＥ（−／−）マウスから採取した左頸動脈の試料を用いて行ったオートラジオグラフィー（「Ａｕｔｏｒａｄ」と称する）の結果を示す図でもある。
【図９】化合物４注射後のＡｐｏＥ（−／−）マウス内で形成された画像を示す。
【図１０】非放射性化合物を予め投与しなかったＡｐｏＥ（−／−）マウスと非放射性化合物ＣＧＳ２７０２３を予め投与した後のＡｐｏＥ（−／−）マウスとの、化合物４の取り込みの比較を示す図である。
【図１１】実験Ａの予備投与なしの場合と実験Ｂの予備投与後とでのマウス４及び５における取り込みに基づいて作成された時間放射能曲線を示す図である。予備投与した動物での取り込み量がより少ないことがわかった。
【図１２】実験ＡのＡｐｏＥ−／−マウス１〜６の肝臓、腎臓、膀胱、脳及び胸郭の関心領域分析から得られた平均（±ＳＥＭ）データを示す図である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インビボでの画像診断、特にＳＰＥＣＴイメージングの分野に関する。具体的には、本発明はマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む新規イメージング剤であって、循環器疾患、炎症性疾患及び悪性疾患のインビボでの画像診断に有用な新規イメージング剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰｓ）とは、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の分解又は再構築を仲介する、少なくとも２０種の亜鉛依存性エンドペプチダーゼのファミリーのことである［Ｍａｓｓｏｖａ ｅｔ ａｌ ＦＡＳＥＢ Ｊ（１９９８）１２ １０７５−９５］。また、ＭＭＰファミリーのメンバーは、血管壁の全成分を分解することができるため、ＥＣＭの成分の分解を伴う生理現象と病理現象の両方に大きな役割を果たす。ＭＭＰｓは細胞の挙動を制御する細胞−マトリックス相互作用に干渉することができるため、その活性は細胞の分化、遊走、増殖及びアポトーシスといった様々なプロセスに影響を与える［Ｎａｇａｓｅ ａｎｄ Ｗｏｅｓｓｎｅｒ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９９）２７４ ２１４９１−４］。生理状況下でのＭＭＰ活性を細かく調整する負の調整制御は、必ずしも適切に働くわけではない。ＭＭＰ活性の不適切な発現は、いくつかの疾患状態における病理機序の一部を構成すると考えられている。そのため、ＭＭＰｓは、多くの炎症性、悪性及び変性疾患の治療用阻害剤の標的となっている［Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ ｅｔ ａｌ Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．（１９９９）９９ ２７３５−７６］。
【０００３】
したがって、ＭＭＰｓの合成阻害剤は多くの炎症性、悪性及び変性疾患の治療に有用であると考えられている。さらに、ＭＭＰｓの阻害剤がこれらの疾患の診断に有用であることも示唆されている。国際公開第０１／６０４１６号には、アテローム性動脈硬化症、心不全及び再狭窄などの細胞外マトリックス分解に関連する循環器病の診断に有用であるとして提示された化合物が開示されている。同パンフレットに開示の化合物は、診断用金属に結合することが可能なキレート剤に任意のリンカーを介して連結しているＭＭＰ阻害剤を含む。好ましいＭＭＰ阻害剤、キレート剤及びリンカーは同パンフレットに記載されている。Ｚｈｅｎｇらの報告［Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２９ ７６１−７７０（２００２）］には、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）トレーサー１１Ｃ及び１８Ｆで標識したＭＭＰ阻害剤の合成が記録されている。同報告に記載の化合物は、乳癌の非侵襲イメージングに有用であると仮定されている。
【特許文献１】国際公開第０１／６０４１６号パンフレット
【特許文献２】国際公開第９１／０１１４４号パンフレット
【特許文献３】米国特許第４８８５３６３号明細書
【非特許文献１】Ｍａｓｓｏｖａ ｅｔ ａｌ ＦＡＳＥＢ Ｊ（１９９８）１２ １０７５−９５
【非特許文献２】Ｎａｇａｓｅ ａｎｄ Ｗｏｅｓｓｎｅｒ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９９）２７４ ２１４９１−４
【非特許文献３】Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ ｅｔ ａｌ Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．（１９９９）９９ ２７３５−７６
【非特許文献４】Ｚｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２９ ７６１−７７０（２００２）
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
画像診断に特に有用であることが判明した、ＭＭＰ阻害活性を有する新規画像診断剤が開示されている。本発明の別の一態様は、人体の画像診断に有用な医薬組成物である。また、本発明の医薬組成物の調製用キットも開示されている。さらに本発明は、本発明の医薬組成物の、画像診断のための使用を含む。
【０００５】
本発明のイメージング剤は、特定のマトリックスメタロプロテイナーゼが関与することが知られている一連の疾患状態（炎症性、悪性及び変性疾患）の、インビボでの画像診断に有用である。
【０００６】
これらの疾患状態には以下が含まれる。
【０００７】
（ａ）各種ＭＭＰｓが過剰発現するアテローム性動脈硬化症。ＭＭＰ−１、３、７、９、１１、１２、１３及びＭＴ１−ＭＭＰのレベルの上昇が、ヒトのアテローム硬化型プラーク内で検出された［Ｓ．Ｊ．Ｇｅｏｒｇｅ、Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ、９（５）、９９３−１００７（２０００）及び同論文内の参照文献］。ヒトアテロームでのＭＭＰ−２の発現［Ｚ．Ｌｉ ｅｔ ａｌ、Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．、１４８、１２１−１２８（１９９６）］及びＭＭＰ−８の発現［Ｍ．Ｐ．Ｈｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、１０４、１８９９−１９０４（２００１）］もまた報告されている。
【０００８】
（ｂ）ＣＨＦ（Ｐｅｔｅｒｓｏｎ，Ｊ．Ｔ．ｅｔ ａｌ．Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ、Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ．Ｒｅｓ．（２００２）、５５（１）、２９−４４では、心不全においてＭＭＰ−１、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−８、ＭＭＰ−９、ＭＭＰ−１３及びＭＭＰ−１４が上方制御されることが報告されている）。
【０００９】
（ｃ）癌［Ｖｉｈｉｎｅｎ ｅｔ ａｌ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ９９、ｐ１５７−１６６（２００２）では、ＭＭＰの癌への関与が概説されており、特にＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−７及びＭＭＰ−９が強調されている］。
【００１０】
（ｄ）関節炎［Ｊａｃｓｏｎ ｅｔ ａｌ、Ｉｎｆｌａｍｍ．Ｒｅｓ．５０（４）、ｐ１８３−１８６（２００１）「Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｉｎ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ−ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｇｅｌａｔｉｎａｓｅ Ａ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ」では、ＭＭＰ−２が特に論じられている］。
【００１１】
（ｅ）筋萎縮性側索硬化症［Ｌｉｍ ｅｔ ａｌ、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、６７、２５１−２５９（１９９６）；ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９が関与］。
【００１２】
（ｆ）ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９及びＭＭＰ−１３が関係すると報告されている脳転移［Ｓｐｉｎａｌｅ、Ｃｉｒｃｕｌ．Ｒｅｓ．、９０、５２０−５３０（２００２）］。
【００１３】
（ｇ）ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９が関与すると報告されている脳血管疾患［Ｌｕｋｅｓ ｅｔ ａｌ、Ｍｏｌ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．、１９、２６７−２８４（１９９９）］。
【００１４】
（ｈ）ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９が患部組織内で同定されたアルツハイマー病［Ｂａｃｋｓｔｒｏｍ ｅｔ ａｌ、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、５８、９８３−９９２（１９９２）］。
【００１５】
（ｉ）ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３及びＭＭＰ−９が関与する神経炎症性疾患［Ｍｕｎ−Ｂｒｙｃｅ ｅｔ ａｌ、Ｂｒａｉｎ．Ｒｅｓ．、９３３、４２−４９（２００２）］。
【００１６】
（ｊ）ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−８及びＭＭＰ−９が上方制御されると報告されているＣＯＰＤ（即ち、慢性閉塞性肺疾患）［Ｓｅｇｕｒａ−Ｖａｌｄｅｚ ｅｔ ａｌ、Ｃｈｅｓｔ、１１７、６８４−６９４（２０００）］。
【００１７】
（ｋ）眼病［Ｋｕｒｐａｋｕｓ−Ｗｈｅａｔｅｒ ｅｔ ａｌ、Ｐｒｏｇ．Ｈｉｓｔｏ．Ｃｙｔｏｃｈｅｍ．、３６（３）、１７９−２５９（２００１）］。
【００１８】
（ｌ）皮膚疾患［Ｈｅｒｏｕｙ，Ｙ．、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．、７（１）、３−１２（２００１）］。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
本発明の第１の態様は、γ−放射性核種で標識した式Ｉのマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む画像診断剤である。
【００２０】
【化１】
【００２１】
式中、Ｒ１は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ６−１４アリール、Ｃ７−２０アリールアルキルから選択されるか、或いはＲ５及びそれが結合した炭素と共にＣ６−８シクロアルキル環又はＣ４−６複素環を形成するか、或いはＲ４と共に５〜７個の原子及びＮ又はＯから選択される１又は２個のヘテロ原子を含有するＣ４−６複素環を形成し、
Ｒ２及びＲ３は各々独立に水素、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アミノ、Ｃ６−１４アリール、Ｃ７−２０アリールアルキル又はＣ７−２０カルバモイルアリールであり、
Ｒ４はＣ６−１４アリール、Ｃ４−６ヘテロアリール、Ｃ７−２０アリールアルキル、Ｃ７−２０カルバモイルアリール又はアリールカルバモイルアリールであり、
Ｒ５は水素又はＣ１−６アルキルから選択される。
【００２２】
ただし、Ｒ１がイソプロピル、Ｒ３が水素、Ｒ４が３−ピリジルの場合、Ｒ２はメトキシではない。
【００２３】
単独で又は他の基（例えばヒドロキシアルキル、アミノアルキル、カルボキシアルキル又はアルコキシアルキル）の一部として用いられる「アルキル」は、本明細書では、任意の直鎖状、分岐状又は環状の飽和又は不飽和ＣｘＨ２ｘ＋１基（式中、特に指定がなければ、ｘは１〜６の整数である。）として定義される。
【００２４】
単独で又は他の基の一部として用いられる「アリール」は、本明細書では、単環式又は多環式芳香族炭化水素から誘導される任意のＣ６−１４分子断片又は基として定義される。本発明の好適なアリール基は、任意の位置で置換されていてもよいフェニル又はナフチル基である。
【００２５】
「アリールアルキル」は、本発明では、上記定義のアルキル基及びアリール基からなる任意のＣ７−２０基として定義される。
【００２６】
「複素環」は、本発明では、１又は２個のヘテロ原子を含むＣ４−６環式基として定義される。好適なヘテロ原子としてはＮ及びＯが挙げられる。
【００２７】
「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素から選択される基を意味する。
【００２８】
「アミン」は、本発明では、アミノ又は置換アミノ基を含有する任意の有機基として定義される。
【００２９】
本明細書で用いる「γ−放射性核種で標識した」という表現は、式Ｉの原子又は置換基の１個が、γ−放射性核種を、人工的に富化されたレベルの下部構造に固有の原子として、或いは該γ−放射性核種を結合させるのに適した官能基を介して化学的に結合した追加の必須要素として含むことを意味する。
【００３０】
本発明の好ましい画像診断剤は、γ−放射性核種で標識した式Ｉの化合物を含み、式中、
Ｒ１はＣ１−６アルキル、Ｃ６−１４アリール又はＣ７−２０アリールアルキルから選択されるか、或いはＲ５及びそれが結合した炭素と共にＣ４−６複素環を形成し、
Ｒ２は水素、ヒドロキシ、メチル、イソプロピル、メトキシ又はハロゲンであり、
Ｒ３は水素であり、
Ｒ４はピリジル又は（Ａｒ１）ｙ−（Ｒ″′）ｚ（ＮＨ）−フェニルであって、式中、Ａｒ１はフェニレンであり、Ｒ″′はＣＨ２又はＣ＝Ｏであり、ｙは０又は１であり、ｚは０又は１であり、
Ｒ５は水素である。
【００３１】
ただし、Ｒ１がイソプロピル、Ｒ４が３−ピリジルの場合、Ｒ２はメトキシではない。
【００３２】
本発明の最も好ましい画像診断剤は、γ−放射性核種で標識した式Ｉの化合物を含み、式中、
Ｒ１はメチル、イソブチル、イソプロピル、ベンジル又はヒドロキシベンジルであり、
Ｒ２はヒドロキシ、ハロゲン又はメトキシであり、
Ｒ３は水素であり、
Ｒ４はピリジル又は（Ａｒ１）ｙ−（Ｒ″′）ｚ（ＮＨ）−フェニルであって、式中、Ａｒ１は１，４−フェニレンであり、Ｒ″′はＣＨ２又はＣ＝Ｏであり、ｙは０又は１であり、ｚは０又は１であり、
Ｒ５は水素である。
【００３３】
ただし、Ｒ１がイソプロピル、Ｒ４が３−ピリジルの場合、Ｒ２はメトキシではない。
【００３４】
Ｒ５が水素の場合、本発明のマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤は、Ｒ１基を有する炭素原子にキラル中心を含む。このキラル中心における鏡像異性体は本発明の範囲内であり、好ましいかかる鏡像異性体は、式Ｉａの鏡像異性体である。
【００３５】
【化２】
【００３６】
本発明の特に好ましい画像診断剤は、式Ｉの化合物を含み、式中、該γ−放射性核種は、置換基Ｒ１〜Ｒ４の１個以上個と置換されているか、それに化学的に結合している。本発明の最も好ましい画像診断剤は、式Ｉの化合物を含み、式中、Ｒ２はスルホンアミドに対してパラ位にあり、Ｒ３はスルホンアミドに対してメタ位にある。
【００３７】
γ−放射体で標識されていない式Ｉの化合物は、ＭａｃＰｈｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９７；２５２５−３２記載の方法に従って容易に合成することができる。
【００３８】
本発明の好適なγ−放射性核種は、γ−放射性金属イオン又はγ−放射性ハロゲンである。これらについて、好ましい実施形態及び最も好ましい実施形態を含め、以下、さらに詳細に説明する。
【００３９】
本発明のγ−放射性核種が金属イオンの場合、９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、１１３ｍＩｎ、６７Ｃｕ又は６７Ｇａから好適に選択される。好ましいγ−放射性金属イオンは、９９ｍＴｃ、６７Ｃｕ、６７Ｇａ及び１１１Ｉｎであり、９９ｍＴｃが最も好ましい。金属イオンは、好適には、本発明の画像診断剤中に金属錯体として、画像診断剤が式ＩＩの金属錯体結合体となるように存在する。
【００４０】
［｛マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤｝−（Ａ）ｎ］ｍ−［金属錯体］
（ＩＩ）
式中、−（Ａ）ｎ−はリンカー基であり、
ｎは０〜５０の整数であり、
ｍは１、２又は３である。
【００４１】
「金属錯体」という用語は、金属イオンと１個以上の配位子との配位錯体を意味する。金属錯体が「トランスキレート化耐性を有すること」、即ち、金属の配位部位をめぐって競合する可能性のある他の配位子との配位子交換が容易には行われないことが非常に好ましい。競合する可能性のある配位子としては、式Ｉの化合物に加えて、インビトロの製剤中の賦形剤（例えば、製剤中で用いられる放射線防護剤又は抗菌防腐剤）、或いはインビボの内因性化合物（例えば、グルタチオン、トランスフェリン又は血漿タンパク質）が挙げられる。「リンカー基」（Ａ）ｎは、式ＩＩａに関する下記定義の通りである。
【００４２】
本発明の第２の態様は、放射標識されることで式ＩＩの金属錯体結合体を形成する配位子結合体である。本発明の好ましい配位子結合体は、式ＩＩａの配位子結合体である。
【００４３】
［｛マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤｝−（Ａ）ｎ］ｍ−［配位子］
（ＩＩａ）
式中、−（Ａ）ｎ−はリンカー基であって、式中、各Ａは独立にＣＲ′２、ＣＲ′＝ＣＲ′、Ｃ≡Ｃ、ＣＨ２ＣＨ２Ｏ、ＣＲ′２ＣＯ２、ＣＯ２ＣＲ′２、ＮＲ′ＣＯ、ＣＯＮＲ′、ＮＲ′（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ′、ＮＲ′（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ′、ＳＯ２ＮＲ′、ＮＲ′ＳＯ２、ＣＲ′２ＯＣＲ′２、ＣＲ′２ＳＣＲ′２，ＣＲ′２ＮＲＣＲ′２、Ｃ４−８シクロヘテロアルキレン基、Ｃ４−８シクロアルキレン基、Ｃ５−１２アリーレン基、Ｃ３−１２ヘテロアリーレン基又はアミノ酸であり、
Ｒ′はＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ１−４アルコキシアルキル又はＣ１−４ヒドロキシアルキルから各々独立に選択され、
ｎは０〜５０の整数であり、
ｍは１、２又は３である。
【００４４】
式ＩＩ及びＩＩａ中、ｍは好ましくは１又は２であり、最も好ましくは１である。
【００４５】
トランスキレート化耐性を有する金属錯体結合体を形成する、本発明で好適に用いられる配位子としては、（金属ドナー原子を連結する炭素原子又は非配位ヘテロ原子の非配位骨格を有することで）５員環又は６員環のキレート環を形成するように、２〜６個、好ましくは２〜４個の金属ドナー原子が配置されているキレート剤、或いは、イソニトリル、ホスフィン又はジアゼニドなどの、金属イオンと強力に結合するドナー原子を含む単座配位子が挙げられる。キレート剤の一部として金属によく結合するドナー原子の種類は、アミン、チオール、アミド、オキシム及びホスフィンが挙げられる。ホスフィンは強い金属錯体を形成するため、単座又は二座のホスフィンでも好適な金属錯体を形成する。イソニトリル及びジアゼニドは、その線状の幾何配置のため、それ自体容易にはキレート剤には組み込まれにくいため、通常は単座配位子として用いられる。好適なイソニトリルとしては、例えば、ｔｅｒｔ−ブチルイソニトリルなどの単純アルキル、及びＭＩＢＩ（即ち、１−イソシアノ−２−メトキシ−２−メチルプロパン）などのエーテル置換イソニトリルが挙げられる。好適なホスフィンとしては、テトロフォスミン、及びトリス（３−メトキシプロピル）ホスフィンなどの単座ホスフィンが挙げられる。好適なジアゼニドとしては、ＨＹＮＩＣ系の配位子、即ちヒドラジン置換ピリジン又はニコチンアミドが挙げられる。
【００４６】
トランスキレート化耐性を有する金属錯体を形成する、テクネチウム用の好適なキレート剤としては、下記の化合物が挙げられるが、それだけには限定されない。
【００４７】
（ｉ）式ＩＩＩのジアミンジオキシム。
【００４８】
【化３】
【００４９】
式中、Ｅ１〜Ｅ６は各々独立にＲ″基であり、
各Ｒ″はＨ又はＣ１−１０アルキル、Ｃ３−１０アルキルアリール、Ｃ２−１０アルコキシアリール、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０フルオロアルキル、Ｃ２−１０カルボキシアルキル若しくはＣ１−１０アミノアルキルであるか、或いは２個以上のＲ″基がそれらが結合した原子と共に炭素環、複素環、飽和又は不飽和環を形成するものであり、１個以上のＲ″基は式Ｉの化合物に結合し、
Ｑは式−（Ｊ）ｆ−の架橋基であり、
式中、ｆは３、４又は５であり、各Ｊは独立に−Ｏ−、−ＮＲ″−又は−Ｃ（Ｒ″）２−である。ただし、−（Ｊ）ｆ−は−Ｏ−又は−ＮＲ″−である最大１個のＪ基を含有する。
【００５０】
好ましいＱ基は以下の通りである。
【００５１】
Ｑ＝−（ＣＨ２）（ＣＨＲ″）（ＣＨ２）−、即ちプロピレンアミンオキシム、又はＰｎＡＯ誘導体、
Ｑ＝−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ″）（ＣＨ２）２−、即ちペンチレンアミンオキシム、又はＰｅｎｔＡＯ誘導体、
Ｑ＝−（ＣＨ２）２ＮＲ″（ＣＨ２）２−。
【００５２】
Ｅ１〜Ｅ６は、Ｃ１−３アルキル、Ｃ４−１０アルキルアリール、Ｃ２−３アルコキシアルキル、Ｃ１−３ヒドロキシアルキル、Ｃ１−２フルオロアルキル、Ｃ１−３カルボキシアルキル又はＣ１−３アミノアルキルから好ましく選択される。最も好ましくは、各Ｅ１〜Ｅ６基はＣＨ３である。
【００５３】
式Ｉの化合物は、Ｅ１又はＥ６のＲ″基、或いはＱ部分のＲ″基に結合することが好ましい。最も好ましくは、式Ｉの化合物はＱ部分のＲ″基に結合する。式Ｉの化合物がＱ部分のＲ″基に結合する場合、Ｒ″基は橋頭位にあることが好ましい。その場合、Ｑは−（ＣＨ２）（ＣＨＲ″）（ＣＨ２）−、−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ″）（ＣＨ２）２−又は−（ＣＨ２）２ＮＲ″（ＣＨ２）２−であることが好ましく、−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ″）（ＣＨ２）２−であることが最も好ましい。
【００５４】
特に好ましい二官能性ジアミンジオキシムキレート剤は、以下の構造を有し、
【００５５】
【化４】
【００５６】
それにより式Ｉの化合物は、橋頭の−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２基を介して結合する。本明細書の残りの部分では、この二官能性ジアミンジオキシムキレート剤をキレート剤１又はＣＡ１と呼ぶ。
【００５７】
（ｉｉ）ＭＡＧ３（メルカプロアセチルトリグリシン）などのチオールトリアミドドナーセットを有するＮ３Ｓ配位子及び関連配位子、又はＰＩＣＡなどのジアミドピリジンチオールドナーセットを有するＮ３Ｓ配位子。
【００５８】
（ｉｉｉ）ＢＡＴ若しくはＥＣＤ（即ち、エチルシステイネートダイマー）などのジアミンジチオールドナーセット、又はＭＡＭＡなどのアミドアミンジチオールドナーセットを有するＮ２Ｓ２配位子。
【００５９】
（ｉｖ）シクラム、モノオキソシクラム又はジオキソシクラムなどのテトラミン、アミドトリアミン又はジアミドジアミンドナーセットを有する開環又は大環状配位子であるＮ４配位子。
【００６０】
（ｖ）ジアミンジフェノールドナーセットを有するＮ２Ｏ２配位子。
【００６１】
上記配位子は、９９ｍＴｃと錯体を形成するのに特に好適であり、Ｊｕｒｉｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ［Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．（１９９９）９９ ２２０５−２２１８］により詳しく記載されている。他の好適な配位子はＳａｎｄｏｚの国際公開第９１／０１１４４号に記載されており、同パンフレットにはインジウム及びガドリニウムに特に好適な配位子、とりわけ大環状アミノカルボン酸塩及びアミノホスホン酸配位子が含まれている。ガドリニウムの非イオン性（即ち、中性）金属錯体を形成する錯体が知られており、米国特許第４８８５３６３号に記載されている。放射性金属イオンがテクネチウムの場合、配位子は四座配位子であるキレート剤であることが好ましい。テクテニウム用の好ましいキレート剤は、ジアミンジオキシム、或いは上記のＮ２Ｓ２又はＮ３Ｓドナーセットを有するキレート剤である。テクテニウム用の特に好ましいキレート剤はジアミンジオキシムである。
【００６２】
式ＩＩのリンカー基−（Ａ）ｎ−の役割は、式Ｉの化合物の活性部位から、比較的嵩高な金属錯体を引き離すことにあり、それによって該化合物のＭＭＰ酵素への結合が妨げられることがなくなると予想されている。これは、それにより嵩高な基が自ら活性部位から離れる自由を有する、屈曲性のある鎖（例えば、単純アルキル鎖）、及び／又は、金属錯体が活性部位から離れるよう方向付ける、シクロアルキル若しくはアリールスペーサーなどの強固なスペーサーの組合せにより達成可能である。
【００６３】
リンカー基の性質は、得られる金属錯体コンジュゲートの体内分布を改変するのに用いることもできる。したがって、例えばリンカー中へのエーテル基の導入により、血漿タンパク質の結合が最小限に抑えられる。いくつかの連結した−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−基を含むリンカー（ＰＥＧリンカー）又は１〜１０個のアミノ酸のペプチド鎖を含むリンカーは、特定の化合物の臨床特性、とりわけ体内分布の好ましい改変を可能にするさらなる特性を有する。かかる「生体改変」リンカー基は、筋肉又は肝臓などの背景組織、及び／又は血液からのイメージング剤の除去を促進でき、したがって、背景による干渉がより少なくなるため、より良い診断画像が得られる。生体改変リンカー基は、特定の排泄経路を選択するために、例えば肝臓ではなく腎臓を選択するためにも用いることができる。
【００６４】
アルキレン基又はアリーレン基などの非ペプチドリンカー基は、それと結合した式Ｉの化合物との間で著しい水素結合相互反応が生じないため、リンカーが式Ｉの化合物を包み込むことがないという利点を有する。好ましいアルキレンスペーサー基は−（ＣＨ２）ｑ−（式中、ｑは２〜５）である。好ましいアリーレンスペーサーは式ＩＶのアリーレンスペーサーである。
【００６５】
【化５】
【００６６】
式中、ａ及びｂは独立に０、１又は２である。
【００６７】
リンカー基がＰＥＧ又はペプチド鎖を含まない場合、好ましいリンカー基−（Ａ）ｎ−は、２〜１０個の原子、最も好ましくは２〜５個の原子、特に好ましくは２又は３個の原子からなる−（Ａ）ｎ−部分を構成する連結した原子の主鎖を有する。２個の原子からなる最小のリンカー基主鎖でも、キレート剤が式Ｉの化合物から十分に隔てられ、それにより任意の相互反応が最小限に抑えられるという利点が得られる。リンカー基がＰＥＧリンカーの場合、−（Ａ）ｎ−中のＡ基の数ｎは最大５０、好ましくは１５〜３０である。リンカーがペプチド鎖を含む場合、１〜１０個のアミノ酸残基からなるペプチド鎖であることが好ましく、アミノ酸残基はグリシン、リジン、アスパラギン酸又はセリンから選択されることが好ましい。
【００６８】
結合が血液中で容易に代謝されないように、式Ｉの化合物が金属錯体に結合していることが非常に好ましい。そうでなければ、該化合物が所望のインビボの標的部位に到達する前に、金属錯体が開裂してしまうためである。そのため、式Ｉの化合物は、容易に代謝されない結合を介して、本発明の金属錯体と共有結合していることが好ましい。
【００６９】
γ−放射性金属イオンで標識した本発明の最も好ましい化合物は、ＣＡ１に配位した９９ｍＴｃで標識した本発明の化合物であり、ＣＡ１は、好適な化学官能基を介して、任意のリンカーと、式ＩのＲ１〜Ｒ４の置換基の１個において結合している。９９ｍＴｃで標識した本発明の好ましい化合物としては、例えば下記に例示の通りである（Ｔｃは構造中の９９ｍＴｃを意味する）。
【００７０】
【化６】
【００７１】
［０］γ−放射性核種が放射性ハロゲンの場合、ヨウ素の同位体であることが好ましく、画像診断剤は、前駆体とヨウ素のγ−放射性同位体とを反応させることで有用に調製される。かかる前駆体は以下で詳しく説明し、本発明の第４の態様とする。本発明の好ましいヨウ素のγ−放射性同位体は１２３Ｉ又は１３１Ｉである。
【００７２】
ヨウ素のγ−放射性同位体は、直接共有結合を介して、ベンゼン環などの芳香環又はビニル基に結合していることが好ましい。飽和脂肪族環系に結合しているヨウ素原子は、インビボで代謝される傾向にあり、そのためヨウ素のγ−放射性同位体が失われる傾向にあるためである。最も好ましくは、ヨウ素のγ−放射性同位体は、直接共有結合を介して式Ｉの−ＮＳＯ２−フェニル環に結合している。
【００７３】
ヨウ素のγ−放射性同位体で標識した、本発明の特に好ましい画像診断剤は、式Ｉの化合物であって、式中、
（ｉ）Ｒ１はイソプロピルであり、Ｒ２は４−ＯＨであり、Ｒ３は３−１２３Ｉであり、Ｒ４はピリジル（Ｒ４が３−ピリジルの場合、化合物４）であるか、
（ｉｉ）Ｒ１はイソプロピルであり、Ｒ２は４−１２３Ｉであり、Ｒ３はＨであり、Ｒ４はピリジル（Ｒ４が３−ピリジルの場合、化合物７）であるか、
（ｉｉｉ）Ｒ１はイソプロピルであり、Ｒ２は４−（４−［１２３Ｉ］ヨードベンズアミド）であり、Ｒ３はＨであり、Ｒ４はピリジル（Ｒ４が３−ピリジルの場合、化合物２０）であるか、
（ｉｖ）Ｒ１は４−ヒドロキシ−３−［１２３Ｉ］ヨードベンジルであり、Ｒ２は４−ヨードであり、Ｒ３はＨであり、Ｒ４はピリジル（Ｒ４が３−ピリジルの場合、化合物２１）であるか、或いは
（ｖ）Ｒ１はイソプロピルであり、Ｒ２は４−ヨードであり、Ｒ３は３−Ｈであり、Ｒ４は（Ａｒ１）ｙ−（Ｒ″′）ｚ（ＮＨ）−（Ａｒ２）であって、Ａｒ１は１，４−フェニレンであり、Ａｒ２は４−［１２３Ｉ］ヨードフェニルであり、Ｒ″′はＣＨ２又はＣ＝Ｏであり、ｙは０又は１であり、ｚは０又は１であり、
Ｒ４がピリジルの場合、３−ピリジルであることが好ましい化合物である。
【００７４】
放射性ヨウ素化ＭＭＰ阻害剤の非放射性類似体は、ＭＭＰ−２に対して優れた阻害作用を示し、ＩＣ５０値は化合物９（表１）では２．５ｎＭであり、化合物８（表１）では３２０ｎＭである。これらの非放射性類似体はまた、ＭＭＰ−９に対しても優れた阻害作用を示し、ＩＣ５０値は化合物９では４．６ｎＭであり、化合物８では１５３ｎＭである。そのため、本発明の化合物は、インビボでのＭＭＰ活性のイメージングに成功することが予想できる、インビトロでの特性を有する。そのため、これらの新規放射性トレーサーをＳＰＥＣＴと組み合わせて用いることで、インビボで非侵襲的にＭＭＰ活性をイメージングするための革新的な手段が提供される。動物モデルにおけるイメージング調査により、本発明の薬剤がインビボでのＭＭＰ活性の画像診断に好適であることがさらに証明される。
【００７５】
第３の態様では、本発明は、前記の画像診断剤を、生体適合性担体と共に、哺乳動物への投与に適した形態で含む医薬組成物を提供する。「生体適合性担体」とは、画像診断剤がそれに懸濁又は溶解することで、該組成物が生理的に許容できるようになる、即ち、毒性又は不当な不快感なしに哺乳動物の身体に投与可能になる、流体、特に液体のことである。生体適合性担体は、好適には、発熱物質を含まない注射用の滅菌水などの注射可能な液体担体、（注射用の最終製品が等張性を有するように、又は低浸透圧性を有さないように、平衡化されていると有利である）食塩水などの水溶液、１種以上の張度調節物質（例えば、生体適合性対イオンを有する血漿カチオン）、糖（例えば、グルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えば、ソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えば、グリセリン）、或いは他の非イオン性ポリオール材料（例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液である。
【００７６】
本発明の第４の態様は、本発明の放射性ヨウ素化画像診断剤の調製に有用な前駆体であって、該画像診断剤を得るためのヨウ素のγ−放射性同位体との反応に好適な基を含む前駆体である。放射性ヨウ素化画像診断剤の調製に好適な前駆体は、ヨウ化又は臭化アリールなどの（放射性ヨウ素との交換を許容する）非放射性ハロゲン原子、活性化アリール環（例えば、フェノール基）、有機金属前駆体化合物（例えば、トリアルキルスズ又はトリアルキルシリル）、或いはトリアゼンなどの有機前駆体を含む、式Ｉの化合物である。ヨウ素のγ−放射性同位体を導入する方法は、Ｂｏｌｔｏｎ［Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２００２ ４５ ４８５−５２８］に記載されている。ヨウ素のγ−放射性同位体が結合できる好適なアリール基としては、例えば下記のアリール基が挙げられる。
【００７７】
【化７】
【００７８】
好適なアリール基が存在する本発明の好ましい前駆体化合物としては、例えば下記に例示の通りである。
【００７９】
【化８】
【００８０】
上記で論じた好適なアリール基は両方とも、芳香環上にヨウ素で容易に置換可能な置換基を含有する。ヨウ素のγ−放射性同位体を含有する代替の置換基は、例えば、下記のような放射性ハロゲン交換を介した直接ヨウ素化により合成することができる。
【００８１】
【化９】
【００８２】
第５の態様では、本発明は、本発明の医薬組成物の調製用キットを提供する。本発明の医薬組成物がγ−放射性金属で標識した画像診断剤を含む場合、該キットは（ｉ）γ−放射性金属の配位に適した配位子と結合した式Ｉの化合物を含む配位子結合体、及び（ｉｉ）生体適合性還元剤を含む。本発明の医薬組成物がヨウ素のγ−放射性同位体で標識した画像診断剤を含む場合、該キットはヨウ素のγ−放射性同位体との反応に適した基を含む式Ｉの化合物である前駆体を含み、それにより該前駆体と、通常はヨウ化物の形態であるヨウ素のγ−放射性同位体との反応で、該画像診断剤が得られる。
【００８３】
かかるキットは、例えば直接注射を介してヒトの血流に投与するのに適した無菌の放射性医薬品が得られるよう設計されている。９９ｍＴｃについて、キットは凍結乾燥されていることが好ましく、９９ｍＴｃ放射性同位体発生装置からの無菌９９ｍＴｃ−パーテクネテート（ＴｃＯ４−）で再構築され、さらに操作を行わずにヒト投与に適した溶液が得られるよう設計されている。好適なキットは、遊離塩基又は酸性塩の形態の配位子又はキレート剤結合体を、亜二チオン酸ナトリウム、重亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、ホルムアミジンスルフィン酸、第１スズイオン、Ｆｅ（ＩＩ）又はＣｕ（Ｉ）などの生体適合性還元剤と共に収容する容器（例えば、隔壁が封着されているバイアル）を含む。生体適合性還元剤は、塩化第１スズ又は酒石酸第１スズなどの第１スズ塩であることが好ましい。或いは、キットは、放射性金属の付加時にトランスメタレーション（即ち、金属交換）されて所望の生成物を与える金属錯体を含んでもよい。
【００８４】
キットは、トランスキレート剤、放射線防護剤、抗菌防腐剤、ｐＨ調節剤又は充填剤などの追加の成分をさらに含んでもよい。「トランスキレート剤」とは、急速に反応してテクネチウムと弱い錯体を形成し、次いで配位子により置換される化合物のことである。これにより、錯体化テクネチウムと競合するパーテクネテートが急速に還元されるため、還元・加水分解したテクネチウム（ＲＨＴ）が形成される危険性が最小限に抑えられる。好適なかかるトランスキレート剤は、弱有機酸、即ちｐＫａが３〜７の範囲の有機酸と生体適合性カチオンとの塩である。適切なかかる弱有機酸は、酢酸、クエン酸、酒石酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、安息香酸、フェノール又はホスホン酸である。したがって、好適な塩は酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩、フェノール塩又はホスホン酸塩である。好ましいかかる塩は酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩又はホスホン酸塩であり、最も好ましくはホスホン酸塩であり、特に好ましくはジホスホン酸塩である。好ましいかかるトランスキレート剤は、ＭＤＰ、即ちメチレンジホスホン酸と生体適合性カチオンとの塩である。
【００８５】
「生体適合性カチオン」という用語は、イオン化され、負の電荷を有する基と塩を形成する正の電荷を有する対イオンを意味し、この正の電荷を有する基もまた無毒であり、したがって哺乳動物の身体、特に人体への投与に適している。好適な生体適合性カチオンとしては、例えばアルカリ金属のナトリウム又はカリウム、アルカリ土類金属のカルシウム及びマグネシウム、並びにアンモニウムイオンが挙げられる。好ましい生体適合性カチオンはナトリウム及びカリウム、最も好ましくはナトリウムである。
【００８６】
「放射能防護剤」とは、水の放射線分解で生じる含酸素フリーラジカルなどの高反応性フリーラジカルを捕捉することにより、酸化還元プロセスなどの分解反応を阻害する化合物を意味する。本発明の放射能防護剤は、アスコルビン酸、ｐ−アミノ安息香酸（即ち、４−アミノ安息香酸）、ゲンチシン酸（即ち、２，５−ジヒドロキシ安息香酸）、及びその前記の生体適合性カチオンとの塩から好適に選択される。
【００８７】
「抗菌防腐剤」という用語は、細菌、酵母又はカビなどの有害の可能性がある微生物の増殖を阻害する薬剤を意味する。抗菌防腐剤は、用量に応じていくつかの殺菌特性をも発揮し得る。本発明の抗菌防腐剤の主な役割は、再構築後の医薬組成物、即ち、放射性診断用製品自体において、任意のかかる微生物の増殖を抑制することにある。しかしながら、抗菌防腐剤を、再構築前の本発明のキットの１種以上の成分中で、有害の可能性がある微生物の増殖を抑制するために用いてもよい。好適な抗菌防腐剤としては、パラベン、即ち、メチル、エチル、プロピル又はブチルパラベン或いはその混合物、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、セトリミド及びチオマーサルが挙げられる。好ましい抗菌防腐剤はパラベンである。
【００８８】
「ｐＨ調節剤」という用語は、再構成されたキットのｐＨがヒト又は哺乳動物への投与に許容される範囲（約ｐＨ４．０〜１０．５）内にあることを確実にするのに有用な化合物又は化合物の混合物を意味する。好適なかかるｐＨ調節剤としては、トリシン、リン酸塩又はＴＲＩＳ［即ち、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン］などの製薬的に許容される緩衝液、及び炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム又はその混合物などの製薬的に許容される塩基が挙げられる。配位子結合体を酸性塩の形態で用いる場合、ｐＨ調節剤を別のバイアル又は容器内に入れて、多段階法の一部としてキットの使用者がｐＨを調節できるようにしてもよい。
【００８９】
「充填剤」という用語は、製造及び凍結乾燥中の原料の取り扱いを容易にできる、製薬的に許容される増量剤を意味する。好適な賦形剤としては、塩化ナトリウムなどの無機塩、及びスクロース、マルトース、マンニトール又はトレハロースなどの水溶性の糖又は糖アルコールが挙げられる。
【００９０】
本発明の第６の態様は、本発明の医薬組成物の、循環器疾患の画像診断のための使用である。本発明の医薬組成物は、アテローム性動脈硬化症及びＣＨＦの画像診断に特に有用である。本発明の画像診断剤の使用により、活性プラーク負荷が同定されて、冠動脈疾患の発症が分かっているか又は疑わしい患者、即ち、疼痛又は疼痛の病歴を有する患者、或いは危険性が高いことが確認されたが無症候である患者の危険性が層別化される。また、本発明の画像診断剤により、症候性の患者の脆弱なプラークが同定されて、狭窄に関係なく急性心筋梗塞又は脳卒中の高い危険性が確認され、患者が胸痛を呈する場合でも危険性が直ちに層別化される。さらに、脆弱なプラークの血管形成術は危険性が高く、術後に動脈塞栓症を引き起こすおそれがある。したがって、このサブタイプのプラークのイメージングにより、術後合併症を減少させることができる。
【００９１】
本発明の第７の態様は、本発明の医薬組成物の、炎症性疾患の画像診断、特にＣＯＰＤの画像診断のための使用である。
【実施例】
【００９２】
実施例１には、非放射性の従来技術化合物ＣＧＳ２７０２３の調製に使われた合成経路が記載されている。
【００９３】
実施例２には、いずれも本発明の画像診断剤である化合物６及び７の非放射性の変種である化合物９の調製に使われた合成経路が記載されている。
【００９４】
実施例３には、実施例１４及び１５記載の化合物６及び７の調製に用いられる前駆体である化合物１４の調製に使われた合成経路が記載されている。
【００９５】
実施例４には、実施例１２及び１３記載の化合物４及び５の調製に用いられる前駆体である化合物１３の調製に使われた合成経路が記載されている。
【００９６】
実施例５には、いずれも本発明の画像診断剤である化合物４及び５の非放射性の変種である化合物８の合成に使われた合成経路が記載されている。
【００９７】
実施例６には、いずれも本発明の画像診断剤である化合物１、２、３、１６及び１７中に９９ｍＴｃを配位させるのに用いられるキレート剤であるＣＡ１の調製に使われた合成が記載されている。
【００９８】
実施例７には、９９ｍＴｃで標識されて化合物１を生成することができる配位子結合体である化合物１０の合成に使われた合成経路が記載されている。
【００９９】
実施例８には、９９ｍＴｃで標識されて化合物２を生成することができる配位子結合体である化合物１１の調製に使われた合成経路が記載されている。
【０１００】
実施例９には、９９ｍＴｃで標識されて化合物１６を生成することができる配位子結合体である化合物１８の調製に使われた合成経路が記載されている。
【０１０１】
実施例１０には、９９ｍＴｃで標識されて化合物１７を生成することができる配位子結合体である化合物１９の調製に使われた合成経路が記載されている。
【０１０２】
実施例１１には、化合物１０、１１、１２、１８及び１９を９９ｍＴｃで標識する方法が記載されている。
【０１０３】
実施例１２には、化合物１３を１２３Ｉで標識することによる化合物４の調製が記載されている。実施例１３では、実施例１２と同じ調製方法を使って化合物５を得たが、実施例１３では化合物１３を１２５Ｉで標識した。
【０１０４】
実施例１４には、前駆体である化合物１４を用いた化合物６の放射性合成が記載されている。実施例１５では、実施例１４と同じ放射性合成を使って化合物７を調製した。化合物６及び７はいずれも本発明の画像診断剤である。
【０１０５】
実施例１６には、化合物６及び７の放射性合成に適した前駆体である化合物１５の合成が記載されている。
【０１０６】
実施例１７には、トリブチルスズ前駆体である化合物１５からの化合物７の放射性合成が記載されている。
【０１０７】
実施例１８には、本発明の化合物の、ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９を阻害する能力を評価するために使われたアッセイが記載されている。表２の結果からは、本発明の画像診断剤の非放射性の変種（化合物８及び９）が従来技術化合物と同程度のＭＭＰ阻害活性を有することが明らかになる。これにより、これらの化合物（化合物２〜５）の非放射性の変種を、ＭＭＰが関与する疾患状態における画像診断剤に使用できることが証明される。
【０１０８】
実施例１９には、本発明の化合物のインビボ特性の評価に使われたＡｐｏＥ（−／−）マウスモデルが記載されている。
【０１０９】
実施例２０には、組織学及び免疫組織化学用組織サンプルの調製に使われた方法が記載されている。実施例２１には、オートラジオグラフィー用サンプルの調製に使われた方法が記載されている。図８に示すこれらの実験の結果から、化合物５の取り込みがＭＭＰ−９の存在と関連があることが証明される。
【０１１０】
実施例２２には、マウスにおいてインビボイメージング調査を行った方法が記載されている。実験では、結紮を行った領域で１２０分にわたって化合物４の取り込みが増大したことが証明され、化合物４が病変部に特異的に取り込まれたことを示唆している。また、非放射性の従来技術化合物ＣＧＳ２７０２３を予め投与したＡｐｏＥ−／−マウスでは、化合物４が同様には取り込まれなかったことも証明され、化合物４がＣＧＳ２７０２３と同様の結合特性を有することを示唆している。関心領域の分析により調査した化合物４の生体分布では、腎排泄及び肝排泄を介して血液から迅速に排除されたこと、同時期に胸腔及び脳で目立ったシグナルがみられなかったことが明らかになった（図１２）。かかる除去特性は画像診断剤に好適である。
【０１１１】
本明細書で例示した化合物の多くは式Ｉの化合物であり、便宜のため次頁の表１で定義する。
【０１１２】
【表１】
【０１１３】
実施例１ ＣＧＳ２７０２３（従来技術）の調製
ＭａｃＰｈｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ［Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９７、４０；２５２５−２５３２］記載の合成の変法によりＣＧＳ２７０２３を合成した。
【０１１４】
本合成は、市販のバリンｔ−ブチルエステルとフェニルスルホニルクロリドとを反応させることで開始した。一方、ＭａｃＰｈｅｒｓｏｎらの合成は、保護されていないバリンとフェニルスルホニルクロリドとを反応させ、次にｔ−ブチルエステルとして酸官能基を保護することで開始する。本合成の残りはＭａｃＰｈｅｒｓｏｎらの報告と同じであった。使用した合成経路を図１に示す。ＣＧＳ２７０２３の場合、Ｘはメトキシである。
【０１１５】
収率９４％
融点１５６〜１５８°
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１０．７６（広幅，ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、８．５２（ｍ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．１８（ｄ，３Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．６９（ｄｄ，３Ｊ１＝８．１Ｈｚ，３Ｊ２＝５．６Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．４７（ｄ，３Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、６．８２（ｄ，３Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、４．７２（ｄ，２Ｊ＝１６．７Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．５２（ｄ，２Ｊ＝１６．７Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、３．６３（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ３）、３．６４（ｄ，３Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｎ−ＣＨ）、１．８５〜１．７１（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．５９（ｄ，３Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．４２（ｄ，３Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）。
【０１１６】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１６６．２２、１６３．０１、１４４．９１、１４２．０１、１４１．１４、１３８．７８、１３１．４８、１２９．５９、１２６．５２、１１４．７２、６３．３５、５６．１２、４５．０４、２８．０９、１９．５０、１９．２９。
【０１１７】
実施例２ 化合物９の調製
図１のＸをＩとして、実施例１でＣＧＳ２７０２３について記載したものと同じ方法で、化合物９を調製した。
【０１１８】
収率：粗生成物５６％。これをアセトニトリルから再結晶して３６％の無色固体が得られる。
【０１１９】
融点１６９℃。
【０１２０】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１０．８７（広幅，ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、８．８０（ｍ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．４５（ｄ，３Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．９６（ｄｄ，３Ｊ１＝８．１Ｈｚ，３Ｊ２＝６．０Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．９０（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．５２（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、４．９５（ｄ，２Ｊ＝１６．９Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．７４（ｄ，２Ｊ＝１６．９Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、３．８３（ｄ，３Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｎ−ＣＨ）、２．０５〜１．９３（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．７８（ｄ，３Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．５９（ｄ，３Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）。
【０１２１】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１６６．９５、１４５．６７、１４３．５８、１４２．６９、１４０．２７、１３９．４７、１３９．１８、１２９．９６、１２７．４５、１０２．９９、６４．５１、４６．１６、２９．１１、２０．５１、２０．２４。
【０１２２】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：４９０（Ｍ−ＨＣｌ＋Ｈ＋）。
【０１２３】
元素分析：Ｃ１７Ｈ２１ｌＣｌＮ３Ｏ４Ｓ：Ｃ ３８．８３、Ｈ ４．０３、Ｎ ７．９９。実測値：Ｃ ３８．６７、Ｈ ３．８５、Ｎ ７．９４。
【０１２４】
実施例３ 化合物１４の調製
図１のＸをＢｒとして、実施例１でＣＧＳ２７０２３について記載したものと同じ方法で、化合物１４を調製した。
【０１２５】
収率：無色固体５１％。
【０１２６】
融点：１６９〜１７０℃。
【０１２７】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１１．０３（広幅，ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、８．８０（ｍ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．４２（ｄ，３Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．９３（ｄｄ，３Ｊ１＝８．０Ｈｚ，３Ｊ２＝５．９Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．９０（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．５２（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、４．９８（ｄ，２Ｊ＝１６．６Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．７７（ｄ，２Ｊ＝１６．６Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、３．８８（ｄ，３Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｎ−ＣＨ）、２．０８〜１．９５（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．８１（ｄ，３Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．６３（ｄ，３Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）。
【０１２８】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１６５．９１、１４５．１３、１４２．０２、１４１．１７、１３８．９１、１３８．４７、１３２．６７、１２９．３９、１２７．５１、１２６．６６、６３．５４、４５．１８、２８．１２、１９．５１、１９．２３。
【０１２９】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：４６６（Ｍ−ＨＣｌ＋Ｎａ＋）、４６４（Ｍ−ＨＣｌ＋Ｎａ＋）、４４４（Ｍ−ＨＣｌ＋Ｈ＋）、４４２（Ｍ−ＨＣｌ＋Ｈ＋）。
【０１３０】
元素分析：Ｃ１７Ｈ２１ＢｒＣｌＮ３Ｏ４Ｓの計算値：Ｃ ４２．６４、Ｈ ４．４２、Ｎ ８．７８。実測値Ｃ ４２．６０、Ｈ ４．２０、Ｎ ８．５２。
【０１３１】
実施例４ 化合物１３の調製
ＸがＢｎＯである図１の式Ｖ（Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）−２（Ｒ）−［［（４−ベンジルオキシフェニル）スルホニル］（３−ピコリル）アミノ］−３−メチルブタンアミド）から、実施例１でＣＧＳ２７０２３について記載したものと同じ経路を介して、化合物１３の合成を行った。
【０１３２】
図１の式Ｖ（式中、ＸはＢｎＯ）に対応する化合物１．２０ｇ（２．２８ｍｍｏｌ）を無水メタノール３０ｍｌに溶解し、Ｐｄ／Ｃ（１０％）１１０ｍｇで処理し、Ｈ２雰囲気下で６６時間攪拌した。触媒を濾別し、エタノール８０ｍｌで洗浄した。溶媒を蒸発させ、固体残渣を減圧乾燥した。クロロホルムから再結晶させて、無色の微結晶生成物である図１の式Ｖ（式中、ＸはＯＨ）（Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）−２（Ｒ）−［［（４−ヒドロキシフェニル）スルホニル］（３−ピコリル）アミノ］−３−メチル−ブタンアミド）を７９７ｍｇ（１．８３ｍｍｏｌ、８０％）得た。
【０１３３】
融点１６０〜１６２℃。
【０１３４】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１０．７４（ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、８．６４（ｓ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．５４（ｍ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．８３（ｄ，３Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．６３（ｄ，３Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．３７（ｄｄ，３Ｊ１＝７．８Ｈｚ，３Ｊ２＝４．８Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、６．９１（ｄ，３Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、４．８０（ｓ，２Ｈ，ＣＨ２）、４．０９（ｄ，３Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｎ−ＣＨ）、２．０９〜１．９７（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、１．２２（ｓ，９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）３）、０．９３（ｄ，３Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．８６（ｄ，３Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）。
【０１３５】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１６８．１４、１６１．５６、１５０．３０、１４８．４９、１３６．６４、１３３．８５、１３０．８７、１２９．４３、１２３．１８、１１５．７８、８１．０４、６３．０７、４５．５２、２８．５６、２６．６０、１９．５９、１９．２０。
【０１３６】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：４７４（Ｍ＋Ｋ＋）、４５８（Ｍ＋Ｎａ＋）、４３６（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０１３７】
図１の式Ｖ（式中、ＸはＯＨ）６００ｍｇ（１．３８ｍｍｏｌ）を、エタノール８０μｌ（１．３８ｍｍｏｌ）を含有するジクロロエタン３０ｍｌ中に溶解した。溶液を−１０℃に冷却し、塩酸を３時間吹き込んだ。反応容器を密封し、混合物を室温まで加熱した。２日間攪拌後、溶媒の体積を蒸発により３分の１まで減少させ、残渣をエーテルで処理した。得られた懸濁液を激しく４時間攪拌した。沈殿物を吸引濾過により回収し、減圧乾燥して化合物１３を５６２ｍｇ（１．３５ｍｍｏｌ、９８％）、無色の粉末固体として得た。
【０１３８】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１１．１３（ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、１０．８３（ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、８．９６（ｓ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．５９（ｄ，３Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．１１（ｄｄ，３Ｊ１＝７．７Ｈｚ，３Ｊ２＝５．９Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．７７（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．０６（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、５．１１（ｄ，２Ｊ＝１６．８Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．９０（ｄ，２Ｊ＝１６．８Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．０１（ｄ，３Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｎ−ＣＨ）、２．２５〜２．１２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．９９（ｄ，３Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．８１（ｄ，３Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）。
【０１３９】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１６６．３２、１６２．０４、１４４．８５、１４２．０９、１４１．１７、１３８．９９、１２９．７２、１２９．５９、１２６．４５、１１５．９３、６３．３０、４４．９８、２８．０８、１９．４９、１９．３３。
【０１４０】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：４０２（Ｍ−ＨＣｌ＋Ｎａ）＋。
【０１４１】
実施例５ 化合物８の調製
ＸがＯＨである図１の式Ｖ（Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）−２（Ｒ）−［［（４−ヒドロキシフェニル）スルホニル］（３−ピコリル）アミノ］−３−メチル−ブタンアミド）から、実施例１でＣＧＳ２７０２３について記載したものと同じ経路を介して、化合物８の合成を行った。
【０１４２】
図１の式Ｖ（式中、ＸはＯＨ）１．００ｇ（２．３０ｍｍｏｌ）を、メタノール４０ｍｌに溶解し、炭酸ナトリウム１．２２ｇ（１１．５ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を氷浴中で冷却し、一塩化ヨウ素をメタノールに溶解させた１Ｍ溶液２．３ｍｌを１時間にわたって滴下した。滴下中、溶液の深紅色がほぼ即時に消失した。混合物を室温にして、終夜攪拌した。懸濁液を濾過した後、濾液を１０％チオ硫酸ナトリウム溶液４ｍｌで処理し、１Ｎ Ｈ２ＳＯ４でｐＨ７に調節した。エーテルで抽出後、混合抽出物を食塩水で洗浄、乾燥した（Ｎａ２ＳＯ４）。エーテル溶液を減圧濃縮してＮ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）−２（Ｒ）−［［（４−ヒドロキシ−３−ヨードフェニル）スルホニル］（３−ピコリル）−アミノ］−３−メチルブタンアミド９００ｍｇを得た。これは薄桃色固体であり、さらに精製することなく次のステップに使用した。
【０１４３】
粗製のＮ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）−２（Ｒ）−［［（４−ヒドロキシ−３−ヨードフェニル）スルホニル］（３−ピコリル）−アミノ］−３−メチルブタンアミド９００ｍｇを、エタノール９３μｌを含有するジクロロメタン１５０ｍｌに溶解させた。溶液を−１０℃に冷却し、塩酸を１．５時間吹き込んだ。反応容器を密封し、混合物を室温まで加熱した。室温で１９時間攪拌後、溶媒を蒸発により約２０ｍｌに減少させ、残渣をエーテル約５０ｍｌで処理した。得られた懸濁液を激しく１〜２時間攪拌した。沈殿物を吸引濾過で回収し、減圧乾燥して無色から薄黄色の粉末固体８３０ｍｇを得た。メタノール／アセトニトリル（１：１）で２回再結晶させて、純化合物８を１５０ｍｇ得た。
【０１４４】
収率：１２％（２段階にわたる）。
【０１４５】
融点：２０１〜２０３℃。
【０１４６】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１１．７０（広幅，ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、１１．０３（広幅，ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、８．８６（ｓ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．８４（ｓ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、８．４５（ｄ，３Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．９８（ｄｄ，３Ｊ１＝８．３Ｈｚ，３Ｊ２＝５．７Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．９６（ｄ，３Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．６９（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、７．１０（ｄ，３Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ，ＨＡｒｙｌ）、４．９８（ｄ，２Ｊ＝１６．５Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、４．８２（ｄ，２Ｊ＝１６．５Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨ２）、３．８９（ｄ，３Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｎ−ＣＨ）、２．１５〜２．０２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．８７（ｄ，３Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）、０．６９（ｄ，３Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）２）。
【０１４７】
１３Ｃ−ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ［ｐｐｍ］：１６６．２５、１６１．３２、１４４．９５、１４２．２２、１４１．３６、１３８．７２、１３８．１２、１３１．３３、１２９．１５、１２６．４４、１１５．１６、８４．８７、６３．３３、４５．０３、２８．０５、１９．５０、１９．３１。
【０１４８】
元素分析：Ｃ１７Ｈ２１ＩＮ３Ｏ５ＳＣｌの計算値：Ｃ ３７．６９、Ｈ ３．９０、Ｎ ７．７６；実測値：Ｃ ３７．８４、Ｈ ４．４２、Ｎ ７．３９。
【０１４９】
実施例６ キレート剤１の調製
６（ａ） ３（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステル
カルボメトキシメチレントリフェニルホスホラン（１６７ｇ、０．５ｍｏｌ）のトルエン（６００ｍｌ）溶液を３−オキソグルタル酸ジメチル（８７ｇ、０．５ｍｏｌ）で処理し、反応液を１２０℃の油浴上、窒素雰囲気下で１００℃に３６時間加熱した。次に、反応液を減圧濃縮し、油状残渣を４０／６０石油エーテル／ジエチルエーテル１：１、６００ｍｌで粉砕した。トリフェニルホスフィンオキシドを沈殿除去し、上澄液をデカント／濾別した。減圧蒸発させた残渣を高真空下、沸点でＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留して（０．２ｔｏｒｒでオーブン温度１８０〜２００℃）、３（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステルを８９．０８ｇ、２６７ｍＭ、５３％で得た。
【０１５０】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）：δ３．３１（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２）、３．７（９Ｈ，ｓ，３×ＯＣＨ３）、３．８７（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２）、５．７９（１Ｈ，ｓ，＝ＣＨ）、ｐｐｍ。
【０１５１】
ＮＭＲ １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ３６．５６、ＣＨ３、４８．７、２×ＣＨ３、５２．０９及び５２．５（２×ＣＨ２）；１２２．３及び１４６．１６ Ｃ＝ＣＨ；１６５．９、１７０．０及び１７０．５ ３×ＣＯＯｐｐｍ。
【０１５２】
６（ｂ） ３（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステルの水素付加
３（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステル（８９ｇ、２６７ｍｍｏｌ）のメタノール（２００ｍｌ）溶液を、木炭上のパラジウム１０％：水５０％（９ｇ）と共に、水素ガス雰囲気下（５０ｐｓｉ）３０時間振とうした。溶液をｋｉｅｓｅｌｇｕｈｒで濾過し、減圧濃縮して３−（メトキシカルボニルメチル）グルタル酸ジメチルエステルを油状物として得た（収量８４．９ｇ、収率９４％）。
【０１５３】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ２．４８（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，３×ＣＨ２）、２．７８（１Ｈ，六重線，Ｊ＝８Ｈｚ ＣＨ）、３．７（９Ｈ，ｓ，３×ＣＨ３）。
【０１５４】
ＮＭＲ １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ２８．６、ＣＨ；３７．５０、３×ＣＨ３；５１．６、３×ＣＨ２；１７２．２８、３×ＣＯＯ
６（ｃ） トリメチルエステルのトリアセテートへの還元及びエステル化
窒素雰囲気下、２Ｌ三つ口丸底フラスコ中で、水素化リチウムアルミニウム（２０ｇ、５８８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（４００ｍｌ）溶液をトリ（メチルオキシカルボニルメチル）メタン（４０ｇ、２１２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２００ｍｌ）溶液で１時間にわたって慎重に処理した。激しい発熱反応が生じ、溶媒は激しく還流した。反応液を９０℃の油浴上で加熱し、３日間還流させた。酢酸（１００ｍｌ）を慎重に滴下することで反応液をクエンチして、水素の発生を中止させた。攪拌した反応混合物を無水酢酸溶液（５００ｍｌ）で、緩やかに還流させる速度で慎重に処理した。このフラスコに蒸留用の装備をつけ、攪拌後、９０℃（油浴温度）で加熱してテトラヒドロフランを留去した。無水酢酸（３００ｍｌ）をさらに加え、還流時の構成に戻し、反応液を１４０℃の油浴中で５時間攪拌、加熱した。反応液を冷却、濾過した。酸化アルミニウム沈殿物を酢酸エチルで洗浄し、混合濾液をロータリーエバポレーター上で、水浴温度５０℃で減圧（５ｍｍＨｇ）濃縮して油状物を得た。油状物を酢酸エチル（５００ｍｌ）中に取り込み、飽和炭酸カリウム水溶液で洗浄した。酢酸エチル溶液を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮して油状物を得た。油状物を高真空下でＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留してトリス（２−アセトキシエチル）メタン（収量４５．３１３ｇ、収率９５．９％、０．１６５ｍｏｌ）を油状物として得た。０．１ｍｍＨｇで沸点２２０。
【０１５５】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ１．６６（７Ｈ，ｍ，３×ＣＨ２，ＣＨ）、２．０８（１Ｈ，ｓ，３×ＣＨ３）；４．１（６Ｈ，ｔ ３×ＣＨ２Ｏ）。
【０１５６】
ＮＭＲ １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ２０．９、ＣＨ３；２９．３４、ＣＨ；３２．１７、ＣＨ２；６２．１５、ＣＨ２Ｏ；１７１、ＣＯ。
【０１５７】
６（ｄ） トリアセテートからの酢酸エステル基の除去
トリス（２−アセトキシエチル）メタン（４５．３ｇ、１６５ｍＭ）のメタノール（２００ｍｌ）及び８８０アンモニア（１００ｍｌ）溶液を８０℃の油浴上で２日間加熱した。反応液をさらなる８８０アンモニア（５０ｍｌ）で処理し、油浴中８０℃で２４時間加熱した。８８０アンモニア（５０ｍｌ）をさらに加え、反応液を８０℃で２４時間加熱した。次に、反応液を減圧濃縮して全溶媒を除去し、油状物を得た。これを８８０アンモニア（１５０ｍｌ）中に取り込み、８０℃で２４時間加熱した。次に、反応液を減圧濃縮して全溶媒を除去し、油状物を得た。沸点１７０〜１８０、０．２ｍｍでのＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留でアセトアミドを得た。このアセトアミドを収容しているバルブをきれいに洗浄し、蒸留を継続した。沸点２２０℃、０．２ｍｍで蒸留してトリス（２−ヒドロキシエチル）メタン（２２．５３ｇ、１５２ｍｍｏｌ、９２．１％）を得た。
【０１５８】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ１．４５（６Ｈ，ｑ，３×ＣＨ２）、２．２（１Ｈ，五重線，ＣＨ）；３．７（６Ｈ，ｔ ３×ＣＨ２ＯＨ）；５．５（３Ｈ，ｂｒｓ，３×ＯＨ）。
【０１５９】
ＮＭＲ １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ２２．１３、ＣＨ；３３．９５、３×ＣＨ２；５７．８、３×ＣＨ２ＯＨ。
【０１６０】
６（ｅ） トリオールのトリス（メタンスルホネート）への変換
攪拌・氷冷したトリス（２−ヒドロキシエチル）メタン（１０ｇ、０．０６７６ｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍｌ）溶液を、塩化メタンスルホニル（４０ｇ、０．３４９ｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍｌ）溶液に、窒素下、温度が１５℃を超えて上昇しない速度でゆっくりと滴下した。次に、ピリジン（２１．４ｇ、０．２７ｍｏｌ、４当量）のジクロロメタン（５０ｍｌ）溶液を、温度が１５℃を超えて上昇し発熱反応を起こさないような速度で滴下した。反応液を室温で２４時間攪拌した後、５Ｎ塩酸溶液（８０ｍｌ）で処理、層分離した。水層をさらなるジクロロメタン（５０ｍｌ）で抽出し、有機抽出物を混合、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、減圧濃縮して、過剰量の塩化メタンスルホニルで汚染したトリス（２−（メチルスルホニルオキシ）エチル）メタンを得た。理論上の収量は２５．８ｇであった。
【０１６１】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ４．３（６Ｈ，ｔ，２×ＣＨ２）、３．０（９Ｈ，ｓ，３×ＣＨ３）、２（１Ｈ，六重線，ＣＨ）、１．８５（６Ｈ，ｑ，３×ＣＨ２）。
【０１６２】
６（ｆ） １，１，１−トリス（２−アジドエチル）メタンの調製
トリス（２−（メチルスルホニルオキシ）−エチル）メタン［ステップ１（ｅ）から、過剰量の塩化メチルスルホニルで汚染］（２５．８ｇ、６７ｍｍｏｌ、理論値）の乾燥ＤＭＦ（２５０ｍｌ）攪拌溶液を窒素下、アジ化ナトリウム（３０．７ｇ、０．４７ｍｏｌ）で少しづつ１５分かけて処理した。発熱が観察され、反応液を氷浴上で冷却した。３０分後、反応混合物を５０℃の油浴上で２４時間加熱した。反応液は褐色になった。反応液を冷却し、希炭酸カリウム溶液（２００ｍｌ）で処理し、４０／６０石油エーテル／ジエチルエーテル１０：１（３×１５０ｍｌ）で３回抽出した。有機抽出物を水（２×１５０ｍｌ）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過した。エタノール（２００ｍｌ）を石油／エーテル溶液に加えてトリアジドを溶液に保ち、体積を減圧下で２００ｍｌ以上に減少させた。エタノール（２００ｍｌ）を加え、減圧再濃縮して最後の微量の石油を除去し、２００ｍｌ以上のエタノール溶液が残った。
【０１６３】
注意：アジ化物は爆発の可能性があり、常に希溶液に保たなければならないので、溶媒をすべて除去することのないように。
【０１６４】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ３．３５（６Ｈ，ｔ，３×ＣＨ２）、１．８（１Ｈ，六重線，ＣＨ）、１．６（６Ｈ，ｑ，３×ＣＨ２）。
【０１６５】
６（ｇ） １，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンの調製
トリス（２−アジドエチル）メタン（１５．０６ｇ、０．０６７６ｍｏｌ）（前の反応の収率を１００％とする）のエタノール（２００ｍｌ）溶液を、木炭上の１０％パラジウム（２ｇ、水５０％）で処理し、１２時間水素添加した。反応容器から２時間毎に排気して、反応液から発生した窒素を除去し、水素を再充填した。サンプルをＮＭＲ分析用に採取して、トリアジドのトリアミンへの変換完了を確認した。
【０１６６】
注意：非還元アジ化物は蒸留時に爆発の可能性あり。
【０１６７】
反応液をセライトパッドで濾過して触媒を除去し、減圧濃縮してトリス（２−アミノエチル）メタンを油状物として得た。これを０．４ｍｍ／Ｈｇで沸点１８０〜２００℃のＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留でさらに精製して無色油状物を得た（８．１ｇ、５５．９ｍｍｏｌ、トリオールからの合計収率８２．７％）。
【０１６８】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、２．７２（６Ｈ，ｔ，３×ＣＨ２Ｎ）、１．４１（Ｈ，七重線，ＣＨ）、１．３９（６Ｈ，ｑ，３×ＣＨ２）。
【０１６９】
ＮＭＲ １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ３９．８（ＣＨ２ＮＨ２）、３８．２（ＣＨ２．）、３１．０（ＣＨ）。
【０１７０】
１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンは、下記の代替方法でも調製することができる。
【０１７１】
６（ｇ）（ｉ）：トリメチルエステルのｐ−メトキシ−ベンジルアミンを用いたアミド化
トリス（メチルオキシカルボニルメチル）メタン［２ｇ、８．４ｍｍｏｌ；上記ステップ６（ｂ）と同様に調製］をｐ−メトキシ−ベンジルアミン（２５ｇ、１７８．６ｍｍｏｌ）に溶解した。装置を蒸留用に調整し、窒素流下で１２０℃に２４時間加熱した。反応の進行を回収したメタノールの量によりモニターした。反応混合物を外界温度に冷却し、酢酸エチル３０ｍｌを加えた後、蒸留したトリアミド生成物を３０分間攪拌した。トリアミドを濾過により単離し、フィルターケーキを十分量の酢酸エチルで数回洗浄して、過剰量のｐ−メトキシ−ベンジルアミンを除去した。乾燥後、白色粉末４．６ｇ、１００％を得た。この極めて不溶性の生成物を次のステップに、さらに精製又は特徴付けをせずに直接使用した。
【０１７２】
６（ｇ）（ｉｉ）：１，１，１−トリス［２−（ｐ−メトキシベンジルアミノ）エチル］メタンの調製
氷水浴中で冷却した１０００ｍｌ三つ口丸底フラスコ中の１Ｍボラン溶液（３．５ｇ、２４４．３ｍｍｏｌ）ボランに、ステップ２（ａ）のトリアミド（１０ｇ、１７．８９ｍｍｏｌ）を慎重に加える。添加完了後、氷水浴を除去し、反応混合物を６０℃に加熱する。反応混合物を６０℃で２０時間攪拌する。反応混合物のサンプル（１ｍｌ）を取り出し、５Ｎ ＨＣｌ ０．５ｍｌと混合、３０分間静置した。サンプルに５０ＮａＯＨ ０．５ｍｌを加えた後、水２ｍｌを加え、溶液を攪拌して白色沈殿物をすべて溶解させた。溶液をエーテル（５ｍｌ）で抽出し、蒸発させた。残渣をアセトニトリルに溶解して濃度を１ｍｇ／ｍｌにし、質量分析法で分析した。モノ及びジアミド（Ｍ＋Ｈ／ｚ＝５２０及び５３４）が質量スペクトルに見られる場合、反応は完了していない。反応を完了させるには、１ＭボランＴＨＦ溶液１００ｍｌをさらに加え、反応混合物を６０℃でさらに６時間攪拌し、上記のサンプリング法に従って新しいサンプルを取り出す。必要であれば１ＭボランＴＨＦ溶液の添加をさらに続けてトリアミンへの変換を完了させる。
【０１７３】
反応混合物を外界温度に冷却し、５Ｎ ＨＣｌをゆっくり加える［注意：気泡が活発に形成！］。ＨＣｌを加えて、ガス発生がもはや観察されないようにした。混合物を３０分間攪拌した後、蒸発させた。ケーキをＮａＯＨ水溶液（２０〜４０％；１：２ｗ／ｖ）に懸濁させ、３０分間攪拌した。次に、混合物を水で希釈した（３倍体積）。次に混合物をジエチルエーテル（２×１５０ｍｌ）で抽出した［注意：ハロゲン化溶媒を使用しないこと］。次に、混合有機相を水（１×２００ｍｌ）、食塩水（１５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。蒸発後の油状物としての収量７．６ｇ、収率８４％。
【０１７４】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ：１．４５、（６Ｈ，ｍ，３×ＣＨ２；１．５４、（１Ｈ，七重線，ＣＨ）；２．６０（６Ｈ，ｔ，３×ＣＨ２Ｎ）；３．６８（６Ｈ，ｓ，ＡｒＣＨ２）；３．７８（９Ｈ，ｓ，３×ＣＨ３Ｏ）；６．９４（６Ｈ，ｄ，６×Ａｒ）。７．２０（６Ｈ，ｄ，６×Ａｒ）。
【０１７５】
ＮＭＲ １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ：３２．１７、ＣＨ；３４．４４、ＣＨ２；４７．００、ＣＨ２；５３．５６、ＡｒＣＨ２；５５．２５、ＣＨ３Ｏ；１１３．７８、Ａｒ；１２９．２９、Ａｒ；１３２．６１；Ａｒ；１５８．６０、Ａｒ；
６（ｇ）（ｉｉｉ） １，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンの調製
１，１，１−トリス［２−（ｐ−メトキシベンジルアミノ）エチル］メタン（２０．０グラム、０．０３６ｍｏｌ）をメタノール（１００ｍｌ）に溶解し、Ｐｄ（ＯＨ）２（５．０グラム）を加えた。混合物を水素添加し（３バール、１００℃、オートクレーブ中）、５時間攪拌した。１０時間後及び１５時間後、Ｐｄ（ＯＨ）２をさらに２回（２×５グラム）各々加えた。
【０１７６】
反応混合物を濾過し、濾液をメタノールで洗浄した。混合有機相を蒸発させ、残渣を減圧（１×１０−２、１１０℃）蒸留して、前記方法で得たものと同一の１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンを２．６０グラム（５０％）得た。
【０１７７】
６（ｈ） ３−クロロ−２−ニトロソブタンの調製。
【０１７８】
２−メチルブト−２−エン（１４７ｍｌ、１．４ｍｏｌ）と亜硝酸イソアミル（１５６ｍｌ、１．１６ｍｏｌ）との混合物をカーディス及びメタノールの浴中で−３０℃に冷却し、オーバーヘッド空気攪拌機で激しく攪拌し、濃塩酸（１４０ｍｌ、１．６８ｍｏｌ）を温度が−２０℃未満に維持されるような速度で滴下して処理した。著しい発熱が生じ、過熱を避けるために注意が必要なことから、これには約１時間を要する。エタノール（１００ｍｌ）を加えて上記添加の完了時に形成したスラリーの粘度を低下させ、反応液を−２０〜−１０℃でさらに２時間攪拌して反応を完了させた。沈殿物を減圧濾過で回収し、冷（−２０℃）エタノール４×３０ｍｌ及び氷冷水１００ｍｌで洗浄し、減圧乾燥して３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタンを白色固体として得た。エタノール濾液と洗液を混合し、水（２００ｍｌ）で希釈し、冷却し、−１０℃で１時間静置して、３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタンのさらなる生成物が結晶化された。沈殿物を濾過により回収し、最小量の水で洗浄し、減圧乾燥してＮＭＲによる純度９８％超の３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタンの全収量（１１５ｇ ０．８５ｍｏｌ、７３％）を得た。
【０１７９】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、異性体の混合物（異性体１，９０％）１．５ｄ、（２Ｈ，ＣＨ３）、１．６５ｄ、（４Ｈ，２×ＣＨ３）、５．８５、ｑ及び５．９５、ｑ、合計１Ｈ。（異性体２，１０％）、１．７６ｓ、（６Ｈ，２×ＣＨ３）、２．０７（３Ｈ，ＣＨ３）。
【０１８０】
６（ｉ） ビス［Ｎ−（１，１−ジメチル−２−Ｎ−ヒドロキシイミンプロピル）２−アミノエチル］−（２−アミノエチル）メタン（キレート剤１）の合成
トリス（２−アミノエチル）メタン（４．０４７ｇ、２７．９ｍｍｏｌ）の乾燥エタノール（３０ｍｌ）溶液に、無水炭酸カリウム（７．７ｇ、５５．８ｍｍｏｌ、２当量）を室温で、窒素雰囲気下で激しく攪拌しながら加えた。３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタン（７．５６ｇ、５５．８ｍｏｌ、２当量）の溶液を乾燥エタノール（１００ｍｌ）に溶解し、この溶液７５ｍｌを上記反応混合物にゆっくりと滴下した。反応後、ジクロロメタン、メタノール、濃アンモニア（比重０．８８）の１００／３０／５混合物中で運転するシリカ上でのＴＬＣにかけ、ＴＬＣプレートをニンヒドリン噴霧及び加熱により展開した。モノ、ジ及びトリアルキル化生成物がみられ、Ｒｆ値はこの順序で増大した。分析ＨＰＬＣを、ＲＰＲ逆相カラムを使って、３％アンモニア水中のアセトニトリルのグラジエントを７．５〜７５％にして運転した。反応液を減圧濃縮してエタノールを除去し、水（１１０ｍｌ）に再懸濁した。水性スラリーをエーテル（１００ｍｌ）で抽出してトリアルキル化合物の一部及び親油性不純物を除去し、水層中にはモノ及び所望のジアルキル化生成物が残った。水溶液を酢酸アンモニウム（２当量、４．３ｇ、５５．８ｍｍｏｌ）で緩衝して良好なクロマトグラフィーを確保した。水溶液を終夜４℃で保管した後、自動分取ＨＰＬＣで精製した。
【０１８１】
収量・収率（２．２ｇ、６．４ｍＭ、２３％）。
【０１８２】
質量スペクトル；陽イオン１０Ｖコーン電圧。実測値：３４４；計算値Ｍ＋Ｈ＝３４４。
【０１８３】
ＮＭＲ １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ１．２４（６Ｈ，ｓ，２×ＣＨ３）、１．３（６Ｈ，ｓ，２×ＣＨ３）、１．２５〜１．７５（７Ｈ，ｍ，３×ＣＨ２，ＣＨ）、（３Ｈ，ｓ，２×ＣＨ２）、２．５８（４Ｈ，ｍ，ＣＨ２Ｎ）、２．８８（２Ｈ，ｔ ＣＨ２Ｎ２）、５．０（６Ｈ，ｓ，ＮＨ２ ，２×ＮＨ，２×ＯＨ）。
【０１８４】
ＮＭＲ １Ｈ（（ＣＤ３）２ＳＯ）δ１．１４×ＣＨ；１．２９、３×ＣＨ２；２．１（４Ｈ，ｔ，２×ＣＨ２）；
ＮＭＲ １３Ｃ（（ＣＤ３）２ＳＯ）、δ９．０（４×ＣＨ３）、２５．８（２×ＣＨ３）、３１．０ ２×ＣＨ２、３４．６ ＣＨ２、５６．８ ２×ＣＨ２Ｎ；１６０．３、Ｃ＝Ｎ。
【０１８５】
ＨＰＬＣ条件：流量８ｍｌ／分、２５ｍｍＰＲＰカラム使用
Ａ＝３％アンモニア溶液（比重＝０．８８）／水。
【０１８６】
Ｂ＝アセトニトリル
時間 Ｂ（％）
０ ７．５
１５ ７５．０
２０ ７５．０
２２ ７．５
３０ ７．５
１運転当たり水溶液３ｍｌを負荷、１２．５〜１３．５分の時間窓内に回収。
【０１８７】
実施例７ 化合物１０の調製
合成経路は図２に示す。
【０１８８】
７（ａ） ４−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチル−プロピルスルファモイル）−安息香酸メチルエステル（化合物１＊）
２−アミノ−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｈ−Ｄ−Ｖａｌ−ＯｔＢｕ．ＨＣｌ）（５００ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２０ｍｌ）攪拌懸濁液に、ピリジン（７６７μｌ、９．５２ｍｍｏｌ）を外界温度で加えた。透明で無色の溶液が速やかに得られた。次に、４−クロロスルホニル−安息香酸メチルエステル（６７０ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（６ｍｌ）溶液を滴下し、薄黄色になった混合物を外界温度で４時間攪拌した。反応はＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：１）でモニターした。溶媒を蒸発させ、酢酸エチル（５０ｍｌ）及び飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１０ｍｌ）を加えた。混合物を分液漏斗に移しかえ、激しく振とうした。次に層分離し、酢酸エチル層を食塩水（１０ｍｌ）で１回抽出、乾燥（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて粗生成物を得た。（酢酸エチル／ヘキサン、１：１）を用いたフラッシュクロマトグラフィーで標記純生成物を白色固体として得た。収量８８０ｍｇ（収率９９．５５％）。
【０１８９】
７（ｂ） ４−［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチル−プロピル）−ピリジン−３−イルメチル−スルファモイル］−安息香酸メチルエステル（化合物２＊）
４−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチル−プロピルスルファモイル）−安息香酸メチルエステル（化合物１＊−８８４ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（３０ｍｌ）攪拌溶液に、炭酸セシウム（１０．８６ｇ、３３．３４ｍｍｏｌ）を外界温度で加えた。次に、塩化３−ピコリル塩酸塩（５４６ｍｇ、３．３３ｍｍｏｌ）を懸濁液に加え、反応混合物を室温で２４時間混合した。その時点でＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン １：１）モニタリングを行い、反応の完了が明らかになった。混合物を蒸発乾固し、残渣を酢酸エチル（５０ｍｌ）中で攪拌した。酢酸エチル相を水（１×５０ｍｌ）で抽出、乾燥（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて粗生成物を褐色油状物として得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィーで精製して標記純生成物を無色油状物として得た。収量８００ｍｇ（収率７９．２１％）。
【０１９０】
７（ｃ） ４−［（１−カルボキシ−２−メチル−プロピル）−ピリジン−３−イルメチル−スルファモイル］−安息香酸メチルエステル（化合物３＊）
エステル（化合物２＊−３２１ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（１５ｍｌ）に溶解し、−１０℃に冷却した。塩酸ガスを溶液に１０分間吹き込んだ。反応混合物を封着、室温に加熱、１６時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残渣を塩化メチレン（２×１０ｍｌ）と共蒸発させて標記生成物を白色気泡として得た（２７８ｍｇ、収率８３．７３％）。
【０１９１】
７（ｄ） ４−［（１−ヒドロキシカルバモイル−２−メチル−プロピル）−ピリジン−３−イルメチル−スルファモイル］−安息香酸メチルエステル（化合物５＊）
酸（化合物３＊−１１２ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３９ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（２９７μｌ、１．４ｍｍｏｌ）及びＯ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル｝ヒドロキシルアミン（１２４ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（８ｍｌ）に溶解した。Ｎ−［（ジメチルアミノ）プロピル］−Ｎ′−エチルカルボジイミド塩酸塩（７３ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２４時間攪拌した。反応混合物を水（１０ｍｌ）で希釈、塩化メチレン（２×１０ｍｌ）で抽出した。塩化メチレン混合相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過した。塩酸のジオキサン溶液を数滴、濾液に加えて標記の遊離ヒドロキサム酸（１０８ｍｇ）を直接得た。
【０１９２】
７（ｅ） ４−［（１−ヒドロキシカルバモイル−２−メチル−プロピル）−ピリジン−３−イルメチル−スルファモイル］−安息香酸（化合物６＊）
２Ｎ水酸化ナトリウム（２００μｌ）をエステル（化合物５＊−３２ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）のメタノール（１ｍｌ）溶液に加え、反応混合物を外界温度で攪拌した。３０分後、混合物を蒸発乾固し、残渣を水（２ｍｌ）に溶解した。溶液を２Ｎ ＨＣｌで酸性にした。分取ＨＰＬＣで標記純生成物を白色粉末として得た（収量２８ｍｇ、収率９５．０１％）。
【０１９３】
７（ｆ） ４−［（１−ヒドロキシカルバモイル−２−メチル−プロピル）−ピリジン−３−イルメチル−スルファモイル］−Ｎ−｛５−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−３−［２−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−エチル］−ペンチル｝−ベンズアミド（化合物１０）
酸（化合物６＊）−１２．５ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ｝、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３．６８ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（１７．４μｌ、０．１２４ｍｍｏｌ）及びＮ−［（ジメチルアミノ）プロピル］−Ｎ′−エチルカルボジイミド塩酸塩（８．０６ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（２ｍｌ）に溶解した。キレート剤１（１３ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２４時間攪拌した。溶媒を蒸発させた後、粗生成物をＨＰＬＣで直接精製した（グラジエント００＿３０＿６０）。標記生成物は薄褐色のゴムであった（収量２ｍｇ、収率９％）。
【０１９４】
実施例８ 化合物１１の調製
化合物１１の合成は図３に示す。
【０１９５】
８（ａ） ２−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニルアミノ）−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
２−アミノ−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｈ−Ｄ−Ｖａｌ−ＯｔＢｕ．ＨＣｌ）（５００ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２０ｍｌ）攪拌懸濁液に、ピリジン（７６７μｌ、９．５２ｍｍｏｌ）を周囲温度で加えた。透明で無色の溶液が速やかに得られた。次に、塩化４−メトキシル−ベンゼンスルホニル（５４１ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍｌ）溶液を滴下し、薄黄色になった混合物を外界温度で攪拌した。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：１）で、反応が３時間後に完了したことが明らかになった。アセトニトリルを蒸発させた後、残渣をジクロロメタン（３０ｍｌ）に取り込み、１０％炭酸水素ナトリウム溶液（３０ｍｌ）及び水（３０ｍｌ）で各々１回づつ抽出した。次に層分離し、ジクロロメタン層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて粗生成物を得た。（酢酸エチル／ヘキサン、１：１）を用いたフラッシュクロマトグラフィーで標記純生成物を白色固体として得た。収量８０１ｍｇ（収率９３．９０％）。
【０１９６】
８（ｂ） ４−｛［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチル−プロピル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−メチル｝安息香酸メチルエステル（化合物７）
２−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニルアミノ）−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１４０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（５ｍｌ）攪拌溶液に、炭酸セシウム（１．３３ｇ、４．１０ｍｍｏｌ）を外界温度で加えた。次に、４−（ブロモメチル）安息香酸メチル（１１５ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を懸濁液に加え、反応混合物を７０℃で１時間混合した。その時点でＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン １：１）モニタリングにより、反応の完了が明らかになった。外界温度に冷却後、混合物を濾過して過剰量の炭酸セシウムを除去し、蒸発乾固した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン １：１）で精製して標記純生成物を薄黄色油状物として得た。収量１５３ｍｇ（収率７６％）。
【０１９７】
８（ｃ） ４−｛［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチル−プロピル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−メチル｝−安息香酸（化合物８＊）
ジエステル（化合物７＊）（１５１ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２ｍｌ）に溶解し、４Ｎ ＬｉＯＨ（２５０μｌ）を外界温度で加えた。混合物を６０℃に５時間加熱した時点で、ＨＰＬＣモニタリングにより加水分解の完了が明らかになった。混合物を外界温度に冷却し、溶媒を蒸発させた。残渣を水に溶解し、透明溶液をジエチルエーテルで１回抽出した。次に、水相を５℃（氷／水）に冷却し、１Ｎ ＨＣｌで中和した後、酢酸エチル（３×５ｍｌ）で抽出した。混合酢酸エチル相を水（５ｍｌ）及び食塩水（５ｍｌ）で抽出、（Ｎａ２ＳＯ４）で乾燥、濾過し、蒸発させて標記生成物を白色気泡として得た。収量１３３ｍｇ（収率９０％）。
【０１９８】
８（ｄ） ２−［（４−｛５−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−３−［２−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチルプロピルアミノ）−エチル］−ペンチルカルバモイル｝−ベンジル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物９＊）
酸（化合物８＊）（６１ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（４ｍｌ）溶液にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４６μｌ、０．２６ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド、ＨＡＴＵ（４９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）及びＣ−Ｐｎ２１６（５１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を外界温度で攪拌し、１時間後、ＨＰＬＣにより新しい生成物への変換の完了が明らかになった。混合物を蒸発乾固した後、フラッシュクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール、８：２）で標記純生成物を白色結晶として単離した。収量６６ｍｇ
８（ｅ） ２−［（４−｛５−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−３−［２−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−エチル］−ペンチルカルバモイル｝−ベンジル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸（化合物１０＊）
ジクロロメタン（４ｍｌ）をｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物９＊）（６４ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）に加え、得られた乳白色溶液に外界温度で塩酸ガスを１０分間吹き込んだ。混合物を蒸発乾固し、残渣をジクロロメタン（５×５ｍｌ）と共蒸発させて標記生成物をオフホワイト固体として得た。収量５８ｍｇ（収率９７％）。Ｍ＋１＝７４７。
【０１９９】
８（ｆ） ４−｛［（１−ヒドロキシカルバモイル−２−メチル−プロピル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］メチル｝−Ｎ−｛５−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−３−［２−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−エチル］−ペンチル｝−ベンズアミド（化合物１１）
ヒドロキサム酸を、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルで保護された中間体（化合物１１＊）を介して結合させた。これに従い、酸（化合物１０＊）（５７ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（３４μｌ、０．３０ｍｍｏｌ）、［７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート］ＰｙＡＯＰ、４０ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）及びＯ−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）ヒドロキシルアミン（１２ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）の混合物のジメチルホルムアミド（４ｍｌ）溶液を外界温度で攪拌し、反応をＨＰＬＣでモニターした。反応を３時間後に停止し、溶媒を蒸発させた。残渣をジクロロメタンに再溶解し、外界温度で塩酸ガスを混合物に１０分間吹き込んだ。混合物を蒸発乾固し、残渣をジクロロメタン（５×５ｍｌ）と共蒸発させた。ＨＰＬＣで標記生成物を白色粉末として得、Ｍ＋Ｈは７６２であった。収量１５ｍｇ。
【０２００】
実施例９ 化合物１８の調製
９（ａ） ２−［［４−（２−｛２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エチルカルバモイル）−ベンジル］−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物１２＊）
酸（化合物８＊；１４０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（６ｍｌ）溶液にＮ，Ｎ′−ジイソプロピルエチルアミン（１０４．５１μｌ、０．６０ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド、ＨＡＴＵ（１１４ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）及び２−｛２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エチルアミン（６５．５０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を外界温度で攪拌し、２時間後、ＨＰＬＣモニタリングで新しい生成物への変換の完了が明らかになった。混合物を蒸発乾固した後、フラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル）で標記純生成物を無色油状物として単離した。収量１４２ｍｇ（収率７０％）。
【０２０１】
９（ｂ） ２−［［４−（２−｛２−［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エチルカルバモイル）−ベンジル］−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物１３＊）
０℃（氷／Ｈ２Ｏ）に冷却したアジ化物（化合物１２＊；２００ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍｌ）攪拌溶液にトリフェニルホスフィン（８４ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加えた。この温度で５分攪拌後、冷却浴を除去し、外界温度で１９時間攪拌を続けた。次に水（２００μｌ）を加え、１５時間後に分析（ＨＰＬＣ）したところ、加水分解の完了が示された。溶媒を蒸発させ、油状残渣をフラッシュクロマトグラフィーで、まずＣＨＣｌ３／メタノール（８：２）、次いでＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏを用い精製して標記化合物を無色油状物として得た。収量１３４ｍｇ（収率７１％）。Ｍ＋６５２
９（ｃ） ２−［｛４−［２−（２−｛２−［２−（４−カルボキシ−ブチリルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−ベンジル｝−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルＣＡ１（化合物１４＊）
アミン（化合物１３＊；７３ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３９μｌ，０．２２ｍｍｏｌ）及び活性エステルである４−｛５−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−３−［２−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−エチル］−ペンチルカルバモイル｝−チオ酪酸２，３，５，６−テトラフルオロ−フェニルエステル（ｂ；８５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（５ｍｌ）溶液を外界温度で２時間攪拌した。その時点でのＨＰＬＣモニタリングにより、反応の完了が明らかになった。混合物を蒸発乾固させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ、８：２）で精製して標記生成物をゴムとして得た。収量５４ｍｇ（収率４５％）。
【０２０２】
９（ｄ） ２−［｛４−［２−（２−｛２−［２−（４−カルボキシ−ブチリルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−ベンジル｝−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｃＰｎ２１６（化合物１５＊）
ジクロロメタン（５ｍｌ）をｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物１４＊；５０ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）に加え、得られた乳白色溶液に外界温度で塩酸ガスを１０分間吹き込んだ。混合物を蒸発乾固し、残渣をジクロロメタン（５×５ｍｌ）と共蒸発させて標記生成物を白色固体として得た。収量４７ｍｇ（収率９９％）。Ｍ＋１＝１０３５。
【０２０３】
９（ｅ） ４−［２−（２−｛２−［２−（４−｛［（１−ヒドロキシカルバモイル−２−メチル−プロピル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−メチル｝−ベンゾイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−酪酸ｃＰｎ２１６（化合物１８）
ヒドロキサム酸官能基を、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルで保護された中間体を介して結合させた。これに従い、酸（化合物１５＊；４７ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（２０μｌ、０．１８ｍｍｏｌ）、［７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート］ＰｙＡＯＰ（ａ；２３．５ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）及びＯ−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）ヒドロキシルアミン（１０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）の混合物のジメチルホルムアミド（３ｍｌ）溶液を外界温度で攪拌し、反応をＨＰＬＣでモニターした。反応を１時間後に停止し、溶媒を蒸発させた。残渣をジクロロメタンに再溶解し、外界温度で塩酸ガスを混合物に１０分間吹き込んだ。混合物を蒸発乾固し、残渣をジクロロメタン（５×５ｍｌ）と共蒸発させた。ＨＰＬＣで標記生成物を白色粉末として得た。Ｍ＋Ｈは１０５０、収量７ｍｇ（収率１５％）であった。
【０２０４】
実施例１０ 化合物１９の調製
１０（ａ） ２−［｛４−［２−（２−｛２−［２−（２−カルボキシメトキシ−アセチルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−ベンジル｝−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物１７＊）
アミン（化合物１３＊；６０ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ′−ジイソプロピルエチルアミン（９６μｌ、０．５５ｍｍｏｌ）及びジグリコール酸無水物（６６ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）の混合物のジメチルホルムアミド（６ｍｌ）溶液を外界温度で３時間攪拌した。その時点でＨＰＣモニタリングを行い、反応の完了が明らかになった。溶媒を減圧除去し、残渣を０．１％ＴＦＡを含有するアセトニトリルに溶解した。５分間攪拌後、混合物を蒸発乾固し、ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、６５：２５：４を用いたフラッシュクロマトグラフィーで粗生成物を精製した。標記生成物を白色気泡として得た。収量７０．５０ｍｇ（収率９９．８０％）。
【０２０５】
１０（ｂ） ２−［｛４−［２−（２−｛２−［２−（２−カルボキシメトキシ−アセチルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−ベンジル｝−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル−ＣＡ１結合体（化合物１８＊）
酸（化合物１７＊；７０．５０ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（５ｍｌ）溶液にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３２μｌ、０．１８４ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド、ＨＡＴＵ（３８ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）及びキレート剤１（ＣＡ１；３４ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を外界温度で攪拌し、６時間後、ＨＰＬＣにより新しい生成物への実質的な変換の完了が明らかになった。混合物を蒸発乾固した後、アセトニトリル：水：０．１％トリフルオロ酢酸（１０：８０：６０）を用いた分取ＨＰＬＣクロマトグラフィーで標記純生成物を白色結晶として単離した。収量２１ｍｇ（収率２１％）。
【０２０６】
１０（ｃ） ２−［｛４−［２−（２−｛２−［２−（２−カルボキシメトキシ−アセチルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−ベンジル｝−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−３−メチル−酪酸−ＣＡ１結合体（化合物１９＊）
ジクロロメタン（３ｍｌ）をｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物１８＊；２０ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）に加え、得られた乳白色溶液に外界温度で塩酸ガスを６０分間吹き込んだ。混合物を蒸発乾固し、残渣をジクロロメタン（５×５ｍｌ）と共蒸発させて標記生成物をオフホワイト固体として得た。収量１８ｍｇ（収率９５％）。Ｍ＋１＝１０３７。
【０２０７】
１０（ｄ） ｛［２−（２−｛２−［２−（４−｛［（１−ヒドロキシカルバモイル−２−メチル−プロピル）−（４−メトキシ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−メチル｝−ベンゾイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルカルバモイル］−メトキシ｝−酢酸−ＣＡ１結合体（化合物１９）
ヒドロキサム酸を、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルで保護された中間体を介して結合させた。これに従い、酸（化合物１９＊；１８ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（８μｌ、０．７０ｍｍｏｌ）、［７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート］ＰｙＡＯＰ（９．４ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）及びＯ−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）ヒドロキシルアミン（４ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）の混合物のジメチルホルムアミド（２ｍｌ）溶液を外界温度で攪拌し、反応をＨＰＬＣでモニターした。反応を２時間後に停止し、溶媒を蒸発させた。残渣（化合物２０＊）をジクロロメタンに再溶解し、外界温度で塩酸ガスを混合物に１０分間吹き込んだ。混合物を蒸発乾固し、残渣をジクロロメタン（５×３ｍｌ）と共蒸発させた。ＨＰＬＣで標記生成物を白色粉末として得、Ｍ＋Ｈは１０５２であった。収量４ｍｇ（収率２２．３５％）。
【０２０８】
実施例１１ 化合物１、２、３、１６及び１７を各々生成するための、化合物１０、１１、１２、１８及び１９の９９ｍＴｃ標識
ＳｎＣｌ２ １０ｍｇ及びＭＤＰ ９０ｍｇを窒素で浄化した生理食塩水１００ｍｌに溶解してＳｎＣｌ２／ＭＤＰ溶液を調製する。化合物１０、１１又は１２の１つをメタノールに溶解した１ｍｇ／ｍｌ溶液５０μｌに、（１）メタノール０．７ｍｌ、（２）０．１Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液０．５ｍｌ、（３）５００ＭＢｑ／ｍｌ ＴｃＯ４ ０．５ｍｌ及び（４）ＳｎＣｌ２／ＭＤＰ溶液１００μｌを加える。この反応混合物を３７℃で３０分加熱して化合物１、２又は３の１つを各々形成する。
【０２０９】
実施例１２ 化合物４の調製
化合物４の調製用の合成経路を図６に示す。４μ［１２３Ｉ］ＮａＩの０．０５Ｎ ＮａＯＨ溶液４μｌ（１２．０４ＭＢｑ）、化合物１３溶液３９μｌ（濃度＝１．２３ｇ／ＭｅＯＨ １リットル）及びＮＣＳ溶液７１μｌ（ＮＣＳ＝Ｎ−クロロスクシンイミド）（濃度＝０．５７９ｇ／注射用水１リットル）を円錐型バイアルに加えた。
【０２１０】
混合物を１分間ボルテックスした後、暗所で６０分間、室温で振とうした。次に、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液２５μｌ（濃度＝２．００ｇ／注射用水１リットル）を加え、混合物を再度ボルテックスした。
【０２１１】
溶液を、γ−及びＵＶ検出器並びに対応する２０×４ｍｍ２のプレカラムを有するＮｕｃｌｅｏｓｉｌ（登録商標）逆相Ｃ−１８ ５μ ２５０×４ｍｍ２ カラムを備えたグラジエントＨＰＬＣクロマトグラフに注入した。
【０２１２】
ＨＰＬＣ条件：
溶離液Ａ： ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ ９５０／５０／１
溶離液Ｂ： ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ ５０／９５０／１
時間プログラム： 溶離液Ｂを４５分以内に９２％から５０％に、次いで１０分以内に５０％から９２％に
流量： １．５ｍｌ／分
λ： ２５４ｎｍ
保持時間（生成物−画分）：１８．５０〜１９．８０分
この画分を蒸発乾固し、ＰＢＳ緩衝液２００ｍｌに再溶解し、同条件（上記参照）でグラジエントＨＰＬＣに再注入した。
【０２１３】
保持時間（化合物４）： １７．４０〜１８．７０分
この生成物の品質管理（ＨＰＬＣ、同条件）では、γ及びＵＶチャネル中に不純物は現れなかった。放射線化学収量は４４％であった。
【０２１４】
実施例１３ 化合物５の調製
化合物５は化合物４の１２５Ｉ変種である。［１２３Ｉ］ＮａＩの代わりに［１２５Ｉ］ＮａＩを使用した以外は、実施例１２記載の方法で調製した。
【０２１５】
実施例１４ 化合物６の調製
２，５−ジヒドロキシ安息香酸０．６ｍｇ、アスコルビン酸０．８ｍｇ、注射用水２０μｌ及びＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ溶液５μｌ（濃度＝３．２６ｇ／注射用水１リットル）を、化合物１４を５０μｌ収容した円錐形バイアル（濃度＝２．００ｇ／ＥｔＯＨ １リットル）に加えた。氷冷した混合物をＨｅ流で１０分間脱気した。次に、［１２５Ｉ］ＮａＩの０．０５Ｎ ＮａＯＨ溶液４μｌ（８．６８ＭＢｑ）を加え、ボルテックスした。混合物を１１３℃まで５１分間加熱し、５分毎に振とうした。室温に冷却後、混合物をＥｔＯＨ ４０μｌで希釈した。次に、溶液をＨＰＬＣクロマトグラフに注入し、実施例１０記載のようにＨＰＬＣを行った。保持時間（生成物画分）：１７．１８〜１９．５４分。
【０２１６】
この画分を蒸発乾固し、ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ：５０／９５０／１ ２００μｌに再溶解し、グラジエントＨＰＬＣに再注入した。保持時間（化合物６）：２１．０５〜２１．３６分。
【０２１７】
生成物のＨＰＬＣによる品質管理では、γ及びＵＶチャネル中に不純物は検出されなかった。２回目の品質管理用注入物に化合物９（即ち、非放射性の化合物６）の一定分量を加えることで、保持時間パラメータを認識した。
【０２１８】
平均放射線化学収率：２３％（ｎ＝５）。
【０２１９】
実施例１５ 化合物７の調製
［１２５Ｉ］ＮａＩの代わりに［１２３Ｉ］ＮａＩを使用する以外は、実施例６と同じ経路を介して化合物７を調製する。
【０２２０】
実施例１６ 化合物１５の調製
化合物１５の調製に使用できる合成経路を図７に示す。
【０２２１】
合成経路Ａでは、フラスコに窒素を入れた後、ジクロロ（ビストリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（０．１当量）及び酢酸カリウム（３当量）を順次加える。Ｎ−メチルピロリドン（５ｍｌ）を加えた後、化合物９（１当量）及び水素化トリブチルスズ（２当量）を順次加える。反応混合物を室温で２４時間攪拌する。次に反応混合物を酢酸エチルで希釈、水で洗浄、硫酸マグネシウムで乾燥する。溶媒を蒸発し、標記生成物をＨＰＬＣ精製で単離する。
【０２２２】
合成経路Ｂでは、フラスコに窒素を入れた後、化合物１４及び無水トルエンを加える。これにヘキサブチルスズ及びテトラキシトリフェニルホスフィンパラジウムを順次加える。反応混合物を２４時間加熱還流して標記生成物を得る。
【０２２３】
実施例１７ 化合物７の調製
０．１ｍＭ Ｎａ１２７Ｉの０．０１Ｍ ＮａＯＨ溶液１０μｌを０．２Ｍ ＮＨ４ＯＡｃ（ｐＨ４）２００μｌに加えた。次にＮａ１２７Ｉ／ＮＨ４ＯＡｃ溶液をＮａ１２３Ｉの０．０５Ｍ ＮａＯＨ溶液１１．０μｌ（１１１ＭＢｑ）に加えた。混合溶液をシラン処理プラスチックバイアルに移しかえた。過酢酸を酢酸に溶解した３６〜４０重量％溶液５μｌをＨ２Ｏ ５ｍｌに加えて、過酢酸の溶液を調製した。次に、調製した過酢酸溶液５μｌを、Ｎａ１２３／１２７Ｉを収容したバイアルに加えた。最後に、シラン処理プラスチックバイアル中のトリブチルスズ前駆体（化合物１５）の３ｍＭ溶液１７μｌを反応混合物に加え、溶液を３分間静置した。
【０２２４】
化合物７は、γ−及びＵＶ検出器並びに逆相Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃ１８（２）Ｌｕｎａ ５μ、１５０×４．６ｍｍカラムを備えたグラジエントＨＰＬＣクロマトグラフィーを用いて分析又は精製することができる。
【０２２５】
ＨＰＬＣ条件
溶離液Ａ：０．１％ＴＦＡ水溶液
溶離液Ｂ：０．１％ＴＦＡ ＣＨ３ＣＮ溶液
溶離液Ｂは２０分かけて２０％から８０％に。
【０２２６】
２０分 ８０％ Ｂ
２０．２分 １００％ Ｂ
２３．２分 １００％ Ｂ
２３．７分 ２０％ Ｂ
流量： １ｍｌ／分
λ： ２５４ｎｍ
保持時間：７分
実施例１８ ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９阻害活性アッセイ
合成広スペクトル蛍光原基質である（７−メトキシクマリン−４−イル）アセチルｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−（３−（２，４−ジニトロフェニル）−Ｌ−２，３−ジアミノ−プロピオニル）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＮＨ２（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を使って、既述のＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９活性［Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２ ２２０８６−２２０９１（１９９７）］をアッセイした。ＣＧＳ２７０２３並びに化合物８、９、１３及び１４によるＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９の阻害アッセイは、ＭＭＰ−２（１ｎｍ）又はＭＭＰ−９（２ｎｍ）、及び様々な濃度（１０ｐｍ〜１ｍＭ）でアッセイすべき該化合物を、０．２Ｍ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＣａＣｌ２、２０μＭ ＺｎＳＯ４及び０．０５％食塩水を含有するｐＨ７．５の５０ｍＭトリス−ＨＣｌ中、３５〜３７℃で３０分間予めインキュベートすることで行った。次に、基質（５μＭ）の一定分量（１０μｌ）を、予めインキュベートした９０μＭのＭＭＰ／化合物混合物に加え、活性を以下の経時的生成物放出により３７℃で測定した。蛍光変化のモニタリングは、Ｆｕｓｉｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｐａｃｋａｒｄ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を用い、励起及び放射波長をＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９について各々３３０、３９０ｎｍに設定して行った。阻害率は、生成物放出が経時的に直線状である最初１０分の反応プロファイルから測定した。非線形回帰分析は、Ｌｉｎｕｘ用ソフトウェアＸＭＧＲＡＣＥ ５．１８を用いて行った。
【０２２７】
アッセイした化合物について得られたＩＣ５０値を下記の表２に示す。
【０２２８】
【表２】
【０２２９】
実施例１９ ＡｐｏＥ（−／−）マウスモデル
ＡｐｏＥ−／−マウス（４週齢、２０〜２８ｇ）にキシラジン／ケタミン（Ｂａｙｅｒ、ドイツ）の腹腔内注射で麻酔をかけた。左総頸動脈を、分岐近傍で５−０シルク（Ｅｔｈｉｃｏｎ）を用いて結紮した。偽手術した対照群では、左総頸動脈の下に縛らずに縫合糸を通した。これらの動物を１週間かけて回復させた後、高コレステロールの食餌（ココファット１５％、コレステロール１．０％、コール酸ナトリウム０．５％）を与えた。手術の５週間後、マウスを組織病理学、オートラジオグラフィー及びイメージング調査に使用した。
【０２３０】
実施例２０ 組織学及び免疫組織化学
実施例１６記載のＡｐｏＥ−／−マウスをＬａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ緩衝液で３分間灌流した。結紮部位並びに左及び右頸動脈を除去し、さらなる切除をせずに液体窒素中でスナップ冷凍した。５つの切片（組織病理学用に１０μｍ）毎のグループを等間隔で回収した。
【０２３１】
結紮部位並びに左及び右頸動脈の外科標本の連続クリオスタット切片（１０μｍ）を切除し、顕微鏡スライド上で風乾し、３．７５％ＰＦＡ（ＭＭＰ−９）中に１０分間、４℃のアセトン中に１０分間（ＭＡＣ３、５５０２９２、ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ、カリフォルニア州、米国）固定した。切片をヘマトキシリン及びエオシンで染色した。免疫組織化学用に、切片を、抗ペルオキシダーゼ試薬（Ｓ２００１、ＤＡＫＯ、デンマーク）で１０分、１％ＢＳＡで２５分、バックグラウンド低減成分を有する抗体希釈液（Ｓ３０２２、ＤＡＫＯ、カリフォルニア州、米国）中に室温で１時間おいた一次抗体（２μｇ／ｍｌウサギ抗マウスＭＭＰ−９、ＡＢ１９０４７、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ、ドイツ）又は対照抗体（ウサギＩｇＧ、Ｅ０４３２、ＤＡＫＯ、デンマーク）で３０分インキュベートし、サプライヤーの推奨に従って処理した。ヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）のビオチン結合体（ＡＢ１３２Ｂ、１：５００、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ、ドイツ）２５分。ストレプトアビジン−ＨＲＰ（ＬＳＡＢキット、Ｋ０６７５、カリフォルニア州、米国）２５分、ＡＥＣ（Ｋ０６９６、ＤＡＫＯ、カリフォルニア州、米国）２０分、ヘマトキシリン１分、Ｈ２Ｏ １〜２分。
【０２３２】
免疫組織化学の結果及びオートラジオグラフィーの結果を図８に示す。取り込みはＭＭＰ−９の存在と関連していることが明らかである。
【０２３３】
実施例２１ インビボでのオートラジオグラフィー
４匹の結紮されたＡｐｏＥ−／−マウスの眼窩後に、０．５μＣｉ（２０ＭＢｑ）の化合物５の０．９％ＮａＣｌ ０．２ｍｌ溶液及びＣＧＳ２７０２３（０．９％ＮａＣｌ ２００μｌに溶解した６ｍＭ溶液、非特異的に結合）又は食塩水を注射し、その２時間後に放射性リガンドを注射した。マウスは注射２時間後に屠殺した。結紮部位並びに左及び右総頸動脈を素早く除去し、凍結切片を切除した後、厚さ６０μｍの切片をミクロオートラジオグラフィー用に処理した。
【０２３４】
オートラジオグラフィーの結果を、実施例１７で論じた免疫組織化学の結果と併せて図８に示す。
【０２３５】
実施例２２ インビボでのイメージング
化合物４を眼窩後の静脈叢に注射し、超高解像度コリメータを備えたＳｉｅｍｅｎｓ ＭＵＬＴＩＳＰＥＣＴ ３ガンマカメラ上で平面イメージングを行った。動画像を１分フレームのオリジナルフレーミングで得て、このフレーミングを分析用に１０分フレームに要約した。プラーク領域を環状のＲＯＩｓ（関心領域）により分析し、ＴＡＣｓ（時間放射能曲線）を作成した。
【０２３６】
実験Ａ：９ＭＢｑの化合物４の０．９％ＮａＣｌ ２００μｌ溶液を各マウス（マウス１〜６）に注射し、動画像を注射後１２０分までに撮影した。ＴＡＣｓを作成し、結紮領域で１２０分にわたり標識化合物の取り込みが増大したことがわかった（図９参照）。
【０２３７】
実験Ｂ：２日後、ＣＧＳ２７０２３を０．９％ＮａＣｌ ２００μｌに溶解した６ｍＭ溶液を前の実験のマウス４及び５に注射し、その２時間後に７．５ＭＢｑの化合物４の０．９％ＮａＣｌ ２００μｌ溶液を注射した。マウス１〜３にも、非放射性予備投与なしに７．５ＭＢｑの化合物４の０．９％ＮａＣｌ ２００μｌ溶液を注射した。動画像を１２０分にわたって得（図１０）、ＴＡＣｓを作成した。マウス４及び５における取り込みを、実験Ａの予備投与なしの場合と実験Ｂの予備投与後とで比較したところ、予備投与した動物での取り込み量がより少ないことがわかった（図１１参照）。
【０２３８】
実験Ａでは、肝臓、腎臓、膀胱、脳及び胸郭上に追加のＲＯＩｓを設定した。各ＲＯＩについて、減衰補正したＴＡＣｓを計算し、注射後１０分の放射能、即ち、正規化された秒当たりカウント数に正規化した（図１２参照）。
【図面の簡単な説明】
【０２３９】
【図１】γ−放射性核種がヨウ素の放射性同位体である、本発明の画像診断剤の放射性合成用の前駆体化合物の調製に使った合成経路を示す図である。これらの放射性ヨウ素標識した画像診断剤の非放射性の変種もまた、この合成経路を経由して調製された。図１の「Ｘ」は同図のＶ及びＶＩと同定義である。
【図２】配位子結合体である化合物１０、１１、１８及び１９の調製に各々使われた合成経路を示す図である。
【図３】配位子結合体である化合物１０、１１、１８及び１９の調製に各々使われた合成経路を示す図である。
【図４】配位子結合体である化合物１０、１１、１８及び１９の調製に各々使われた合成経路を示す図である。
【図５】配位子結合体である化合物１０、１１、１８及び１９の調製に各々使われた合成経路を示す図である。
【図６】化合物１３の放射性ヨウ素標識を介した化合物４の放射性合成を示す図である。
【図７】前駆体である化合物１５の調製に使われる２つの代替合成経路を示す図である。
【図８】ＡｐｏＥ（−／−）マウスから採取した左頸動脈のサンプルを用いて行った免疫組織化学の結果を示す図である。ＨＥ＝ヘマトキシリン及びエオシン。また、化合物５のインビボ注射後のＡｐｏＥ（−／−）マウスから採取した左頸動脈の試料を用いて行ったオートラジオグラフィー（「Ａｕｔｏｒａｄ」と称する）の結果を示す図でもある。
【図９】化合物４注射後のＡｐｏＥ（−／−）マウス内で形成された画像を示す。
【図１０】非放射性化合物を予め投与しなかったＡｐｏＥ（−／−）マウスと非放射性化合物ＣＧＳ２７０２３を予め投与した後のＡｐｏＥ（−／−）マウスとの、化合物４の取り込みの比較を示す図である。
【図１１】実験Ａの予備投与なしの場合と実験Ｂの予備投与後とでのマウス４及び５における取り込みに基づいて作成された時間放射能曲線を示す図である。予備投与した動物での取り込み量がより少ないことがわかった。
【図１２】実験ＡのＡｐｏＥ−／−マウス１〜６の肝臓、腎臓、膀胱、脳及び胸郭の関心領域分析から得られた平均（±ＳＥＭ）データを示す図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
γ−放射性核種で標識した式Ｉのマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む画像診断剤。
【化１】
式中、Ｒ１は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ６−１４アリール、Ｃ７−２０アリールアルキルから選択されるか、或いはＲ５及びそれが結合した炭素と共にＣ６−８シクロアルキル環又はＣ４−６複素環を形成するか、或いはＲ４と共に５〜７個の原子及びＮ又はＯから選択される１又は２個のヘテロ原子を含有するＣ４−６複素環を形成し、
Ｒ２及びＲ３は各々独立に水素、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アミノ、Ｃ６−１４アリール、Ｃ７−２０アリールアルキル又はＣ７−２０カルバモイルアリールであり、
Ｒ４はＣ６−１４アリール、Ｃ４−６ヘテロアリール、Ｃ７−２０アリールアルキル、Ｃ７−２０カルバモイルアリール又はアリールカルバモイルアリールであり、
Ｒ５は水素又はＣ１−６アルキルから選択される。
【請求項２】
Ｒ１がＣ１−６アルキル、Ｃ６−１４アリール又はＣ７−２０アリールアルキルから選択されるか、或いはＲ５及びそれが結合した炭素と共にＣ４−６複素環を形成し、
Ｒ２が水素、ヒドロキシ、メチル、イソプロピル、メトキシ又はハロゲンであり、
Ｒ３が水素であり、
Ｒ４がピリジル又は（Ａｒ１）ｙ−（Ｒ″′）ｚ（ＮＨ）−フェニルであって、式中、Ａｒ１がフェニレンであり、Ｒ″′がＣＨ２又はＣ＝Ｏであり、ｙが０又は１であり、ｚが０又は１であり、
Ｒ５が水素である、
請求項１記載の画像診断剤。
【請求項３】
Ｒ１がメチル、イソブチル、イソプロピル、ベンジル又はヒドロキシベンジルであり、
Ｒ２がヒドロキシ、ハロゲン又はメトキシであり、
Ｒ３が水素であり、
Ｒ４がピリジル又は（Ａｒ１）ｙ−（Ｒ″′）ｚ（ＮＨ）−フェニルであって、式中、Ａｒ１が１，４−フェニレンであり、Ｒ″′がＣＨ２又はＣ＝Ｏであり、ｙが０又は１であり、ｚが０又は１であり、
Ｒ５が水素である、
請求項１又は請求項２記載の画像診断剤。
【請求項４】
Ｒ５が水素であり、マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤が式Ｉａのマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤である、請求項１乃至請求項３記載の画像診断剤。
【化２】
【請求項５】
Ｒ１〜Ｒ４の１個が前記γ−放射性核種を含む、請求項１乃至請求項４記載の画像診断剤。
【請求項６】
Ｒ２がスルホンアミドに対してパラ位にあり、Ｒ３がスルホンアミドに対してメタ位にある、請求項１乃至請求項５記載の画像診断剤。
【請求項７】
前記γ−放射性核種が９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、１１３ｍＩｎ、６７Ｃｕ又は６７Ｇａから選択されるγ−放射性金属である、請求項１乃至請求項６のいずれか記載の画像診断剤。
【請求項８】
前記γ−放射性金属が、前記γ−放射性金属と１個以上の配位子との金属錯体の一部として存在する、請求項７記載の画像診断剤。
【請求項９】
前記金属錯体が式ＩのＲ１、Ｒ２又はＲ４の位置で結合している、請求項８記載の画像診断剤。
【請求項１０】
式ＩＩの画像診断剤である、請求項８及び請求項９記載の画像診断剤。
［｛マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤｝］−（Ａ）ｎ］ｍ−［金属錯体］
（ＩＩ）
式中、−（Ａ）ｎ−はリンカー基であって、式中、各Ａは独立にＣＲ′２、ＣＲ′＝ＣＲ′、Ｃ≡Ｃ、ＣＨ２ＣＨ２Ｏ、ＣＲ′２ＣＯ２、ＣＯ２ＣＲ′２、ＮＲ′ＣＯ、ＣＯＮＲ′、ＮＲ′（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ′、ＮＲ′（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ′、ＳＯ２ＮＲ′、ＮＲ′ＳＯ２、ＣＲ′２ＯＣＲ′２、ＣＲ′２ＳＣＲ′２，ＣＲ′２ＮＲＣＲ′２、Ｃ４−８シクロヘテロアルキレン基、Ｃ４−８シクロアルキレン基、Ｃ５−１２アリーレン基又はＣ３−１２ヘテロアリーレン基であり、
Ｒ′はＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ１−４アルコキシアルキル又はＣ１−４ヒドロキシアルキルから各々独立に選択され、
ｎは０〜５０の整数であり、
ｍは１、２又は３である。
【請求項１１】
前記１個以上の配位子が、ジアミンジオキシム、Ｎ３Ｓ、Ｎ２Ｓ２、Ｎ４及びＮ２Ｏ２から選択されるドナーセットを有するキレート剤を含む、請求項８乃至請求項１０記載の画像診断剤。
【請求項１２】
前記γ−放射性核種がヨウ素のγ−放射性同位体である、請求項１乃至請求項６記載の画像診断剤。
【請求項１３】
前記ヨウ素のγ−放射性同位体が１２３Ｉである、請求項１２記載の画像診断剤。
【請求項１４】
ヨウ素のγ−放射性同位体が直接共有結合を介して式Ｉ又は式Ｉａの芳香環の３位又は４位に結合している、請求項１２及び請求項１３記載の画像診断剤。
【請求項１５】
９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、１１３ｍＩｎ、６７Ｃｕ又は６７Ｇａから選択されるγ−放射性金属の配位に適した配位子に結合している式Ｉ又は式Ｉａのマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む配位子結合体。
【請求項１６】
式ＩＩａの配位子結合体である、請求項１５記載の配位子結合体。
［｛マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤｝−（Ａｎ）］ｍ−［配位子］
（ＩＩａ）
式中、（Ａｎ）、ｎ及びｍは請求項９における式ＩＩと同定義である。
【請求項１７】
前記配位子がキレート剤であって、キレート剤中、金属配位により５員環又は６員環のキレート環が形成されるように、２〜６個の金属ドナー原子が配置されている、請求項１６記載の配位子結合体。
【請求項１８】
前記キレート剤がジアミンジオキシム、Ｎ３Ｓ配位子、Ｎ２Ｓ２配位子、Ｎ４配位子及びＮ２Ｏ２配位子から選択される、請求項１７記載の配位子結合体。
【請求項１９】
請求項１乃至請求項１４のいずれか記載の画像診断剤を、生体適合性担体と共に、哺乳動物への投与に適した形態で含む医薬組成物。
【請求項２０】
請求項７乃至請求項１１記載の画像診断剤を含む、請求項１９記載の医薬組成物。
【請求項２１】
請求項１２乃至請求項１４記載の画像診断剤を含む、請求項１９記載の医薬組成物。
【請求項２２】
請求項１２乃至請求項１４記載の画像診断剤の調製に有用な前駆体であって、前記画像診断剤を得るためのヨウ素のγ−放射性同位体との反応に好適な基を含む前駆体。
【請求項２３】
ヨウ素のγ−放射性同位体との反応に好適な前記基がヨウ化アリール、臭化アリール、フェノール基、トリアルキルスズ誘導体、トリアルキルシリル誘導体、トリアゼン基又はアリールジアゾニウム塩から選択される、請求項２２記載の前駆体。
【請求項２４】
請求項１９乃至請求項２１記載の医薬組成物の調製用キット。
【請求項２５】
医薬組成物が請求項２０で定義の通りであって、請求項１５乃至請求項１８記載の配位子結合体を含む、請求項２４記載のキット。
【請求項２６】
γ−放射性金属が９９ｍＴｃである、請求項２５記載のキット。
【請求項２７】
生体適合性還元剤をさらに含む、請求項２５及び請求項２６記載のキット。
【請求項２８】
生体適合性還元剤がＳｎ２＋である、請求項２７記載のキット。
【請求項２９】
医薬組成物が請求項２１で定義の通りであって、請求項２２及び請求項２３記載の前駆体を含む、請求項２４記載のキット。
【請求項３０】
請求項１９乃至請求項２１記載の医薬組成物の、循環器疾患の画像診断のための使用。
【請求項３１】
循環器疾患がアテローム性動脈硬化症である、請求項３０記載の使用。
【請求項３２】
循環器疾患が鬱血性心不全である、請求項３０記載の使用。
【請求項３３】
請求項１９乃至請求項２１記載の医薬組成物の、炎症性疾患の画像診断のための使用。
【請求項３４】
炎症性疾患が慢性閉塞性肺疾患である、請求項３３記載の使用。
【請求項１】
γ−放射性核種で標識した式Ｉのマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む画像診断剤。
【化１】
式中、Ｒ１は水素、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ６−１４アリール、Ｃ７−２０アリールアルキルから選択されるか、或いはＲ５及びそれが結合した炭素と共にＣ６−８シクロアルキル環又はＣ４−６複素環を形成するか、或いはＲ４と共に５〜７個の原子及びＮ又はＯから選択される１又は２個のヘテロ原子を含有するＣ４−６複素環を形成し、
Ｒ２及びＲ３は各々独立に水素、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アミノ、Ｃ６−１４アリール、Ｃ７−２０アリールアルキル又はＣ７−２０カルバモイルアリールであり、
Ｒ４はＣ６−１４アリール、Ｃ４−６ヘテロアリール、Ｃ７−２０アリールアルキル、Ｃ７−２０カルバモイルアリール又はアリールカルバモイルアリールであり、
Ｒ５は水素又はＣ１−６アルキルから選択される。
【請求項２】
Ｒ１がＣ１−６アルキル、Ｃ６−１４アリール又はＣ７−２０アリールアルキルから選択されるか、或いはＲ５及びそれが結合した炭素と共にＣ４−６複素環を形成し、
Ｒ２が水素、ヒドロキシ、メチル、イソプロピル、メトキシ又はハロゲンであり、
Ｒ３が水素であり、
Ｒ４がピリジル又は（Ａｒ１）ｙ−（Ｒ″′）ｚ（ＮＨ）−フェニルであって、式中、Ａｒ１がフェニレンであり、Ｒ″′がＣＨ２又はＣ＝Ｏであり、ｙが０又は１であり、ｚが０又は１であり、
Ｒ５が水素である、
請求項１記載の画像診断剤。
【請求項３】
Ｒ１がメチル、イソブチル、イソプロピル、ベンジル又はヒドロキシベンジルであり、
Ｒ２がヒドロキシ、ハロゲン又はメトキシであり、
Ｒ３が水素であり、
Ｒ４がピリジル又は（Ａｒ１）ｙ−（Ｒ″′）ｚ（ＮＨ）−フェニルであって、式中、Ａｒ１が１，４−フェニレンであり、Ｒ″′がＣＨ２又はＣ＝Ｏであり、ｙが０又は１であり、ｚが０又は１であり、
Ｒ５が水素である、
請求項１又は請求項２記載の画像診断剤。
【請求項４】
Ｒ５が水素であり、マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤が式Ｉａのマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤である、請求項１乃至請求項３記載の画像診断剤。
【化２】
【請求項５】
Ｒ１〜Ｒ４の１個が前記γ−放射性核種を含む、請求項１乃至請求項４記載の画像診断剤。
【請求項６】
Ｒ２がスルホンアミドに対してパラ位にあり、Ｒ３がスルホンアミドに対してメタ位にある、請求項１乃至請求項５記載の画像診断剤。
【請求項７】
前記γ−放射性核種が９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、１１３ｍＩｎ、６７Ｃｕ又は６７Ｇａから選択されるγ−放射性金属である、請求項１乃至請求項６のいずれか記載の画像診断剤。
【請求項８】
前記γ−放射性金属が、前記γ−放射性金属と１個以上の配位子との金属錯体の一部として存在する、請求項７記載の画像診断剤。
【請求項９】
前記金属錯体が式ＩのＲ１、Ｒ２又はＲ４の位置で結合している、請求項８記載の画像診断剤。
【請求項１０】
式ＩＩの画像診断剤である、請求項８及び請求項９記載の画像診断剤。
［｛マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤｝］−（Ａ）ｎ］ｍ−［金属錯体］
（ＩＩ）
式中、−（Ａ）ｎ−はリンカー基であって、式中、各Ａは独立にＣＲ′２、ＣＲ′＝ＣＲ′、Ｃ≡Ｃ、ＣＨ２ＣＨ２Ｏ、ＣＲ′２ＣＯ２、ＣＯ２ＣＲ′２、ＮＲ′ＣＯ、ＣＯＮＲ′、ＮＲ′（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ′、ＮＲ′（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ′、ＳＯ２ＮＲ′、ＮＲ′ＳＯ２、ＣＲ′２ＯＣＲ′２、ＣＲ′２ＳＣＲ′２，ＣＲ′２ＮＲＣＲ′２、Ｃ４−８シクロヘテロアルキレン基、Ｃ４−８シクロアルキレン基、Ｃ５−１２アリーレン基又はＣ３−１２ヘテロアリーレン基であり、
Ｒ′はＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ１−４アルコキシアルキル又はＣ１−４ヒドロキシアルキルから各々独立に選択され、
ｎは０〜５０の整数であり、
ｍは１、２又は３である。
【請求項１１】
前記１個以上の配位子が、ジアミンジオキシム、Ｎ３Ｓ、Ｎ２Ｓ２、Ｎ４及びＮ２Ｏ２から選択されるドナーセットを有するキレート剤を含む、請求項８乃至請求項１０記載の画像診断剤。
【請求項１２】
前記γ−放射性核種がヨウ素のγ−放射性同位体である、請求項１乃至請求項６記載の画像診断剤。
【請求項１３】
前記ヨウ素のγ−放射性同位体が１２３Ｉである、請求項１２記載の画像診断剤。
【請求項１４】
ヨウ素のγ−放射性同位体が直接共有結合を介して式Ｉ又は式Ｉａの芳香環の３位又は４位に結合している、請求項１２及び請求項１３記載の画像診断剤。
【請求項１５】
９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、１１３ｍＩｎ、６７Ｃｕ又は６７Ｇａから選択されるγ−放射性金属の配位に適した配位子に結合している式Ｉ又は式Ｉａのマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む配位子結合体。
【請求項１６】
式ＩＩａの配位子結合体である、請求項１５記載の配位子結合体。
［｛マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤｝−（Ａｎ）］ｍ−［配位子］
（ＩＩａ）
式中、（Ａｎ）、ｎ及びｍは請求項９における式ＩＩと同定義である。
【請求項１７】
前記配位子がキレート剤であって、キレート剤中、金属配位により５員環又は６員環のキレート環が形成されるように、２〜６個の金属ドナー原子が配置されている、請求項１６記載の配位子結合体。
【請求項１８】
前記キレート剤がジアミンジオキシム、Ｎ３Ｓ配位子、Ｎ２Ｓ２配位子、Ｎ４配位子及びＮ２Ｏ２配位子から選択される、請求項１７記載の配位子結合体。
【請求項１９】
請求項１乃至請求項１４のいずれか記載の画像診断剤を、生体適合性担体と共に、哺乳動物への投与に適した形態で含む医薬組成物。
【請求項２０】
請求項７乃至請求項１１記載の画像診断剤を含む、請求項１９記載の医薬組成物。
【請求項２１】
請求項１２乃至請求項１４記載の画像診断剤を含む、請求項１９記載の医薬組成物。
【請求項２２】
請求項１２乃至請求項１４記載の画像診断剤の調製に有用な前駆体であって、前記画像診断剤を得るためのヨウ素のγ−放射性同位体との反応に好適な基を含む前駆体。
【請求項２３】
ヨウ素のγ−放射性同位体との反応に好適な前記基がヨウ化アリール、臭化アリール、フェノール基、トリアルキルスズ誘導体、トリアルキルシリル誘導体、トリアゼン基又はアリールジアゾニウム塩から選択される、請求項２２記載の前駆体。
【請求項２４】
請求項１９乃至請求項２１記載の医薬組成物の調製用キット。
【請求項２５】
医薬組成物が請求項２０で定義の通りであって、請求項１５乃至請求項１８記載の配位子結合体を含む、請求項２４記載のキット。
【請求項２６】
γ−放射性金属が９９ｍＴｃである、請求項２５記載のキット。
【請求項２７】
生体適合性還元剤をさらに含む、請求項２５及び請求項２６記載のキット。
【請求項２８】
生体適合性還元剤がＳｎ２＋である、請求項２７記載のキット。
【請求項２９】
医薬組成物が請求項２１で定義の通りであって、請求項２２及び請求項２３記載の前駆体を含む、請求項２４記載のキット。
【請求項３０】
請求項１９乃至請求項２１記載の医薬組成物の、循環器疾患の画像診断のための使用。
【請求項３１】
循環器疾患がアテローム性動脈硬化症である、請求項３０記載の使用。
【請求項３２】
循環器疾患が鬱血性心不全である、請求項３０記載の使用。
【請求項３３】
請求項１９乃至請求項２１記載の医薬組成物の、炎症性疾患の画像診断のための使用。
【請求項３４】
炎症性疾患が慢性閉塞性肺疾患である、請求項３３記載の使用。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【公表番号】特表２００６−５１９２１６（Ｐ２００６−５１９２１６Ａ）
【公表日】平成１８年８月２４日（２００６．８．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５０２２６１（Ｐ２００６−５０２２６１）
【出願日】平成１６年２月１０日（２００４．２．１０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００４／０００５２４
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０６９３６５
【国際公開日】平成１６年８月１９日（２００４．８．１９）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
Ｌｉｎｕｘ
【出願人】（３０５０４０７１０）ジーイー・ヘルスケア・リミテッド (99)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年８月２４日（２００６．８．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年２月１０日（２００４．２．１０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００４／０００５２４
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０６９３６５
【国際公開日】平成１６年８月１９日（２００４．８．１９）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
Ｌｉｎｕｘ
【出願人】（３０５０４０７１０）ジーイー・ヘルスケア・リミテッド (99)
【Ｆターム（参考）】
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