出願人は、ヘパリン結合ドメインがアラニンスキャンニング、部位特異的変異誘発によって不活性化されたＶＥＧＦ１６４タンパク質変異体を用いて、血管内皮増殖因子ＶＥＧＦ１６４（１６５）タンパク質分子の炎症誘発性ドメインを明確にした。本発明は、修飾ヘパリン結合ドメインを有する新規ＶＥＧＦ変種を提供する。ＶＥＧＦ変種は、受容体結合機能を維持しながら、天然ＶＥＧＦに匹敵するヘパリン結合機能を改変した。本発明は、血管新生及び炎症に関係する障害を治療する組成物及び方法を提供する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
天然ＶＥＧＦポリペプチド配列の１つ以上の変化を有する、炎症誘発活性の低いＶＥＧＦポリペプチド配列変種を含む、ポリペプチド。
【請求項２】
天然ＶＥＧＦポリペプチド配列の変化が、ＶＥＧＲ−２（ＦＬＫ−１／ＫＤＲ）に対する親和性を実質的に維持しながら、ヘパリン結合親和性を低下させる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
天然ＶＥＧＦポリペプチド配列の変化が、ＶＥＧＲ−２（ＦＬＫ−１／ＫＤＲ）に対する親和性を実質的に維持しながら、ニューロピリン−１受容体結合親和性を低下させる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４】
天然ＶＥＧＦポリペプチド配列の変化が、ＶＥＧＲ−２（ＦＬＫ−１／ＫＤＲ）に対する親和性を実質的に維持しながら、ヘパリン結合親和性を低下させる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項５】
天然ＶＥＧＦポリペプチド配列の変化が、ＶＥＧＲ−２（ＦＬＫ−１／ＫＤＲ）に対する親和性を実質的に維持しながら、Ｆｌｔ−１結合親和性を低下させる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項６】
天然ＶＥＧＦポリペプチド配列の変化が、血管新生促進機能を実質的に維持しながら、白血球動員を減少させる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項７】
天然ＶＥＧＦポリペプチド配列の変化が、血管新生促進機能を実質的に維持しながら、血管透過性を低下させる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項８】
天然ＶＥＧＦポリペプチド配列の変化が、神経保護促進機能を実質的に維持しながら、白血球動員を減少させる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項９】
天然ＶＥＧＦポリペプチド配列の変化が、神経保護促進機能を実質的に維持しながら、血管透過性を低下させる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
天然ＶＥＧＦポリペプチド配列が、ヒト、マウス、ラット、サル、ウシ、ブタ、ヒツジ、イヌ、ネコ及びウサギからなる群から選択されるほ乳動物のＶＥＧＦアイソフォームである、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
天然ＶＥＧＦポリペプチド配列が、ＶＥＧＦ１６４、ＶＥＧＦ１６５、ＶＥＧＦ１８９及びＶＥＧＦ２０６からなる群から選択される、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
天然ＶＥＧＦポリペプチド配列が、ＰＣＳＥＲＲＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＫＮＴＤＳＲＣＫＡ ＲＱＬＥＬＮＥＲＴＣ ＲＣＤＫＰＲＲ（配列番号１）である、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
ＶＥＧＦポリペプチド配列変種が、配列：ＰＣＳＥ Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３ Ｘ_４ＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＸ_５ＣＳ ＣＸ_６ＮＴＤＳ Ｘ_７Ｃ Ｘ_８Ａ Ｘ_９ＱＬＥＬＮＥ Ｘ_１０ＴＣ Ｘ_１１ＣＤＸ_１２Ｐ Ｘ_１３Ｘ_１４（配列番号２）（式中、Ｘ_１−Ｘ_１４の少なくとも１個は、天然ＶＥＧＦポリペプチド配列：ＰＣＳＥＲＲＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＫＮＴＤＳＲＣＫＡ ＲＱＬＥＬＮＥＲＴＣ ＲＣＤＫＰＲＲ（配列番号１）の非塩基性アミノ酸置換、非塩基性アミノ酸挿入、アミノ酸欠失又はこれらの組合せである。）を有する、請求項１２に記載のポリペプチド。
【請求項１４】
Ｘ_１−Ｘ_１４の少なくとも１個が非塩基性アミノ酸置換である、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１５】
Ｘ_１、Ｘ_２及びＸ_５−Ｘ_１１の少なくとも１個が非塩基性アミノ酸置換である、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１６】
非塩基性アミノ酸が、Ａ、Ｎ、Ｄ、Ｃ、Ｑ、Ｅ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｓ、Ｔ及びＶからなる群から選択される、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１７】
非塩基性アミノ酸がアラニンである、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１８】
ＶＥＧＦポリペプチド配列変種が、配列：ＰＣＳＥＸ_１Ｘ_２ＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＫＮＴＤＳＲＣＫＡ ＲＱＬＥＬＮＥＲＴＣ Ｘ_３ＣＤＫＰＲＲ（配列番号２８）（式中、Ｘ_１、Ｘ_２及びＸ_３の少なくとも１個は非塩基性アミノ酸である。）を有する、請求項１２に記載のポリペプチド。
【請求項１９】
非塩基性アミノ酸が、Ａ、Ｎ、Ｄ、Ｃ、Ｑ、Ｅ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｓ、Ｔ及びＶからなる群から選択される、請求項１８に記載のポリペプチド。
【請求項２０】
非塩基性アミノ酸がアラニンである、請求項１８に記載のポリペプチド。
【請求項２１】
ＶＥＧＦ変種が、ＰＣＳＥＲＡＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＫＮＴＤＳＲＣＫＡ ＲＱＬＥＬＮＥＲＴＣ ＡＣＤＫＰＲＲ（配列番号３）、ＰＣＳＥＡＡＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＫＮＴＤＳＲＣＫＡ ＲＱＬＥＬＮＥＲＴＣ ＡＣＤＫＰＲＲ（配列番号４）、ＰＣＳＥＲＲＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＡＮＴＤＳＡＣＫＡ ＡＱＬＥＬＮＥＲＴＣ ＲＣＤＫＰＲＲ（配列番号５）、ＰＣＳＥＲＲＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＫＮＴＤＳＡＣＫＡ ＡＱＬＥＬＮＥＲＴＣ ＲＣＤＫＰＲＲ（配列番号６）、ＰＣＳＥＲＲＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＡＮＴＤＳＲＣＫＡ ＲＱＬＥＬＮＥＲＴＣ ＲＣＤＫＰＲＲ（配列番号７）、ＰＣＳＥＲＲＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＡＮＴＤＳＡＣＫＡ ＡＱＬＥＬＮＥＲＴＣ ＡＣＤＫＰＲＲ（配列番号８）、ＰＣＳＥＲＲＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＡＮＴＤＳＲＣＫＡ ＲＱＬＥＬＮＥＲＴＣ ＲＣＤＫＰＲＲ（配列番号９）、ＰＣＳＥＲＲＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＫＮＴＤＳＲＣＫＡ ＲＱＬＥＬＮＥＡＴＣ ＡＣＤＫＰＲＲ（配列番号１０）、ＰＣＳＥＡＡＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＫＮＴＤＳＲＣＫＡ ＲＱＬＥＬＮＥＲＴＣ ＲＣＤＫＰＲＲ（配列番号１１）及びＰＣＳＥＡＡＫＨＬＦ ＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳ ＣＫＮＴＤＳＲＣＫＡ ＲＱＬＥＬＮＥＡＴＣ ＡＣＤＫＰＲＲ（配列番号１２）からなる群から選択される配列を有する、請求項１８に記載のポリペプチド。
【請求項２２】
ＶＥＧＦ変種が、ＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＡＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＡＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号１３）、ＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣ ＳＥＡＡＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＡＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号１４）、ＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＡ ＮＴＤＳＡＣＫＡＡＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号１５）、ＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＡＣＫＡＡＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号１６）、ＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＡ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号１７）、ＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＡ ＮＴＤＳＡＣＫＡＡＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＡＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号１８）、ＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＡ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号１９）、ＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＡＴＣＡＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号２０）、ＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣ ＳＥＡＡＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号２１）及びＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣ ＳＥＡＡＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＡＴＣＡＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号２２）からなる群から選択される配列を有する、請求項１８に記載のポリペプチド。
【請求項２３】
ＶＥＧＦ変種が、以下の配列からなる群から選択される配列を有する、請求項１８に記載のポリペプチド：
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＡＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＡＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号２３）、
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＡＡＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＡＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号２４）、
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＡＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号２５）、
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＡＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号２６）、及び
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＡＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号２７）。
【請求項２４】
Ｘ_１−Ｘ_１４の少なくとも１個がアミノ酸欠失である、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項２５】
Ｘ_１、Ｘ_２及びＸ_５−Ｘ_１１の少なくとも１個がアミノ酸欠失である、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項２６】
ＶＥＧＦ変種が、以下の配列からなる群から選択される配列を有する、請求項２５に記載のポリペプチド：
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号２９）、
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号３０）、
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号３１）、及び
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号３２）。
【請求項２７】
Ｘ_１−Ｘ_１４の少なくとも１個が非塩基性アミノ酸挿入である、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項２８】
Ｘ_１、Ｘ_２及びＸ_５−Ｘ_１１の少なくとも１個が非塩基性アミノ酸挿入である、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項２９】
ＶＥＧＦ変種が、以下の配列からなる群から選択される配列を有する、請求項２８に記載のポリペプチド：
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＡＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＡＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号３３）、
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＡＲＡＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＡＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号３４）、
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＡＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号３５）、
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＡＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号３６）、及び
ＡＰＭＡ ＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶ ＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳ ＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤ ＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥ ＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬ ＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥ ＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳ ＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫ ＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭ ＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣ ＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥ ＮＰＣＧＰＣ ＳＥＡＲＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号３７）。
【請求項３０】
ポリペプチドが、ほ乳動物の天然ＶＥＧＦ ｃＤＮＡをコードする核酸と厳密な条件下でハイブリッド形成する核酸によってコードされる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３１】
ほ乳動物の天然ＶＥＧＦ ｃＤＮＡが、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００３３７６のヒトＶＥＧＦ ｃＤＮＡである、請求項３０に記載のポリペプチド。
【請求項３２】
請求項１に記載のポリペプチドを投与することを含む、炎症性副作用の少ないＶＥＧＦポリペプチド配列変種を用いて疾患又は障害を治療する方法。
【請求項３３】
ＶＥＧＦポリペプチド配列変種が、虚血性心疾患において側副血管の形成を増加させる、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
疾患又は障害が創傷治癒である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
疾患又は障害が循環器疾患である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３６】
疾患又は症状が虚血である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３７】
ＶＥＧＦポリペプチド配列変種が神経保護を強化する、請求項３２に記載の方法。
【請求項３８】
疾患又は障害が、神経の疾患又は障害である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３９】
疾患又は障害が、眼球神経の疾患又は障害である、請求項３２に記載の方法。
【請求項４０】
疾患又は障害が緑内障である、請求項３２に記載の方法。
【請求項４１】
（ａ）試験化合物の存在下でヘパリン／ＶＥＧＦ相互作用レベルを検出すること、及び
（ｂ）試験化合物の存在下におけるヘパリン／ＶＥＧＦ相互作用レベルを試験化合物の非存在下におけるヘパリン／ＶＥＧＦ相互作用レベルと比較すること
を含み、
試験化合物の存在下におけるヘパリン／ＶＥＧＦ相互作用レベルが試験化合物の非存在下におけるヘパリン／ＶＥＧＦ相互作用レベルよりも低い場合に、試験化合物がヘパリン／ＶＥＧＦ相互作用阻害剤である、
ヘパリン／ＶＥＧＦ相互作用阻害剤を特定する方法。
【請求項４２】
（ｃ）ＶＥＧＦ受容体とのＶＥＧＦ相互作用レベルを試験化合物の存在下で検出することによって、ＶＥＧＦ血管形成促進効果を妨げない特定のＶＥＧＦ炎症誘発作用阻害剤を特定すること、及び
（ｄ）試験化合物の存在下におけるＶＥＧＦ受容体とのＶＥＧＦ相互作用レベルを、試験化合物の非存在下におけるＶＥＧＦ受容体とのＶＥＧＦ相互作用レベルと比較すること
をさらに含み、
試験化合物の存在下におけるＶＥＧＦ受容体とのＶＥＧＦ相互作用レベルが、試験化合物の非存在下におけるＶＥＧＦ受容体とのＶＥＧＦ相互作用レベルと実質的に同じ、又はそれよりも高い場合に、試験化合物が特定のＶＥＧＦ炎症誘発作用阻害剤であり、試験化合物がヘパリン／ＶＥＧＦ相互作用阻害剤である、
請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
ＶＥＧＦ受容体がＶＥＧＦＲ−２（ＦＬＫ−１／ＫＤＲ）である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
ＶＥＧＦ受容体がＶＥＧＦＲ−１である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
試験化合物がアプタマーである、請求項４２に記載の方法。
【請求項４６】
試験化合物がペプチド又はペプチド模倣物である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４７】
試験化合物が小分子である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４８】
ＶＥＧＦポリペプチドとＶＥＧＦ血管形成促進効果を妨げない特定のＶＥＧＦ炎症誘発作用阻害剤とを、ほ乳動物対象に同時投与して、ＶＥＧＦ炎症誘発作用を抑制しながら血管新生を刺激するすることをさらに含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項４９】
（ａ）天然ＶＥＧＦポリペプチド配列の変種を含むポリペプチドを用意すること、及び
（ｂ）変種を含むポリペプチドのヘパリン結合レベルを、天然ＶＥＧＦポリペプチド配列を含むポリペプチドのヘパリン結合レベルと比較すること
を含み、
変種を含むポリペプチドのヘパリン結合レベルが、天然ＶＥＧＦポリペプチド配列を含むポリペプチドのヘパリン結合レベルよりも低い場合に、ＶＥＧＦポリペプチド配列変種が、ヘパリンに対する親和性の低いＶＥＧＦポリペプチド配列変種である、
ヘパリンに対する親和性の低いＶＥＧＦポリペプチド配列変種を単離する方法。
【請求項５０】
（ａ）ＶＥＧＦヘパリン結合ドメイン機能を担う部位の原子座標を用意し、それによってＶＥＧＦヘパリン結合性を担う部位の３次元構造を定義する段階と、
（ｂ）ＶＥＧＦヘパリン結合ドメインの３次元構造を使用して、調節物質候補をコンピュータモデリングによって設計又は選択する段階と、
（ｃ）調節物質候補を用意する段階と、
（ｄ）前記調節物質候補のＶＥＧＦヘパリン結合ドメイン活性調節能力を求めるために、調節物質候補をＶＥＧＦヘパリン結合ドメインと物理的に接触させる段階と
を含み、
ＶＥＧＦヘパリン結合ドメイン活性の調節物質が特定される、
ＶＥＧＦヘパリン結合ドメイン活性の調節物質候補を特定する方法。
【請求項５１】
請求項１に記載のポリペプチドを含むＶＥＧＦ変種をコードする配列を含む単離核酸分子。
【請求項５２】
ａ）ＶＥＧＦ変種をコードするポリヌクレオチドと、
ｂ）前記ＶＥＧＦ変種をコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結された、宿主細胞中で機能する転写制御配列及び翻訳制御配列と、
ｃ）選択マーカーと
を含む、請求項１に記載のポリペプチドを含むＶＥＧＦ変種を宿主細胞中で産生するための発現ベクター。
【請求項５３】
宿主細胞中でＶＥＧＦ変種が発現されるように、請求項１に記載のポリペプチドを含むＶＥＧＦ変種をコードするポリヌクレオチドで安定に形質転換された宿主細胞、及び該ポリヌクレオチドを安定に形質移入された宿主細胞。
【請求項５４】
可溶性ヘパリン結合ドメインを投与する段階を含む、ＶＥＧＦ１６４によって誘導される白血球停滞を阻止する方法。
【請求項５５】
可溶性ヘパリン結合ドメインが、ＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣ ＳＥＲＲＫＨＬＦＶＱ ＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫ ＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱ ＬＥＬＮＥＲＴＣＲＣ ＤＫＰＲＲ（配列番号３８）の配列を有するポリペプチドを含む、請求項５４に記載の方法。

【図１】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図３Ｅ】

【図３Ｆ】

【図３Ｇ】

【図３Ｈ】

【図３Ｉ】

【図３Ｊ】

【図３Ｋ】

【図３Ｌ】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６Ａ】

【図１６Ｂ】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２Ａ】

【図２２Ｂ】

【図２２Ｃ】

【図２２Ｄ】

【図２２Ｅ】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【公表番号】特表２００８−５３８９２７（Ｐ２００８−５３８９２７Ａ）
【公表日】平成２０年１１月１３日（２００８．１１．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５０９１７８（Ｐ２００８−５０９１７８）
【出願日】平成１８年４月２８日（２００６．４．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０１６２９５
【国際公開番号】ＷＯ２００６／１１９０３５
【国際公開日】平成１８年１１月９日（２００６．１１．９）
【出願人】（５０６０６４９１３）（オーエスアイ）アイテツク・インコーポレーテツド (10)
【Ｆターム（参考）】