イソオキサゾールおよびその使用
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を提供する。これらの化合物は、神経学的障害、神経変性障害、虚血性障害および炎症性障害の処置に有用である。従って、本発明はまた、本発明の化合物を含む薬学的に受容可能な組成物、ならびにこれらの化合物および組成物を、神経学的障害、神経変性障害、虚血性障害および炎症性障害の処置において利用する方法を提供する。この組成物は、発作についての処置、アルツハイマー病についての処置、パーキンソン病についての処置、多発性硬化症（ＭＳ）を処置するための薬剤、喘息についての処置、精神分裂病を処置するための薬剤、抗炎症剤、免疫調節剤もしくは免疫抑制剤、神経栄養因子、心臓血管疾患を処置するための薬剤、または免疫不全障害を処置するための薬剤から選択されるさらなる治療薬剤をさらに含んでもよい。
【化１】
【化１】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の技術分野）
本発明は、ヒトの種々の疾患および状態（例えば、いくつか名前を挙げると、虚血性障害、発作における再灌流／虚血、神経変性障害、神経学的障害、炎症性疾患、心臓病、器官低酸素、およびトロンビン誘発性血小板凝集）に有用なイソオキサゾールに関する。本発明はまた、本発明の化合物を含む薬学的に受容可能な組成物、および種々の障害の処置においてこの組成物を用いる方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
脳への血流の減少または脳の破壊から生じる発作は、米国および他の先進国における第３位の死因である。さらに、発作を生き延びた患者は、代表的に、顔面または四肢の麻痺、言語障害、膀胱機能の喪失、嚥下不能または痴呆を含め、長期の障害を有する。
【０００３】
発作は、通常、虚血性（生体組織における酸素の不足から生じる）または出血性（脳における出血を生じる動脈壁における断裂から生じる）のいずれかとして特徴付けられる。大部分の一般的型の発作である虚血性発作は、全ての発作のうちの８０％余を引き起こす。酸素枯渇が虚血性発作において生じた後に、最終的に細胞死となる事象のサイクルが誘発されると考えられる。例えば、タンパク質（例えば、興奮性アミノ酸）が放出され、これが過剰産生された場合、神経細胞を殺傷すると仮定されている。これらのタンパク質は、ニューロンを覆う膜におけるチャネルを開いて、多量のカルシウムを流入させ、そしてこのカルシウムは続いて、ニューロン内で反応して、細胞に損傷を与える有害物質を放出すると考えられる。さらなる仮定は、通常マイナーな分子修復を行う酵素であるＰＡＲＰが、過剰のＡＴＰを取り込むことによる実質的障害に応答し、元々の細胞死領域の周囲のさらなる細胞死をもたらすことを示唆した。さらに、さらなる障害もまた、下流の応答（例えば、炎症性反応）からもたらされることが仮定されている（ｄｅｌ Ｚｏｐｐｏら，Ｂｒａｉｎ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０００，１０，９５−１１２を参照のこと）。
【０００４】
医学研究者は、何十年もの間、虚血性脳発作の有効な早期処置を不首尾ながらも求めてきた。明らかに、虚血性脳組織が動脈血を受けるのが迅速であればあるほど、細胞死および得られる永続的な損傷が低減または予防され得る機会が増す。虚血性発作の初期処置について現在用いられている薬物としては、静脈内血栓崩壊剤（例えば、ｔ−ＰＡ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標））またはストレプトキナーゼ）；および抗凝固剤（例えば、アンクロド、アスプリン（Ａｓｐｒｉｎ）、アグレノックス（Ａｇｇｒｅｎｏｘ）、チエノピリジン（Ｔｈｉｅｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ）およびワルファリン）が挙げられる。しかし、不幸なことに、これらの薬剤の多くは、虚血賞発作の処置において有効でないか、または重篤な副作用に関連している。例えば、チオのピリジン（例えば、チクロジピン（Ｔｉｃｌｏｐｉｄｉｎｅ）（Ｔｉｃｌｉｄ（登録商標））は、可逆的な狼瘡様症状、可逆的な好中球減少および血小板減少に関連している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
発作について現在利用可能な処置選択肢が存在しないことを考慮すると、虚血性障害を低減もしくは予防し得るか、および／または下流の細胞応答から生じる損傷（例えば、炎症性応答）を低減もしくは予防し得る、安全かつ有効な治療薬剤を開発することが所望される。より一般的には、他の虚血性障害および炎症性障害の処置のために有用な治療薬剤を開発することもまた所望される。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（発明の要旨）
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を提供することにより、この必要性に取り組む：
【０００７】
【化１３】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ｎおよびｒは、以下に定義した通りである。
【０００８】
本発明の化合物、およびその薬学的に受容可能な組成物は、種々の障害（いくつか名前を挙げると、神経変性障害、神経学的障害、炎症性障害、虚血性障害、発作における再灌流／虚血、心臓病、アレルギー障害、器官低酸素、およびトロンビン誘発性血小板凝集が挙げられる）を処置するか、予防するかまたはその重篤度を低下させるために有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
（発明の詳細な説明）
（１．本発明の化合物の説明）
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩に関する：
【００１０】
【化１４】
ここで：
ここで：
Ｒ１は、水素またはハロゲンであり；
Ｒ２は、置換されているかまたは置換されていないシクロアルキルであり；
Ｒ３の各出現箇所は、独立して、ハロゲン、アルキル、
【００１１】
【化１５】
であり、ここで、ｍは、０、１または２であり、Ｒ４は、水素またはアルキルであり；
ｒは、０、１または２であり；そして
ｎは、０、１または２である。
【００１２】
本明細書中で用いられる場合、そうでないと示されない限り、以下の定義は、適用されるべきである。
【００１３】
語句「必要に応じて置換された」は、語句「置換されたかまたは置換されていない」と交換可能に用いられる。そうでないと示されない限り、必要に応じて置換された基は、各置換可能な部分の基において置換基を有し得、そして各置換は、他の置換とは独立している。
【００１４】
単独で、またはより大きな部分のうちの一部として用いられる場合、用語「アルキル」、「アルコキシ」、「ヒドロキシアルキル」、「アルコキシアルキル」、および「アルコキシカルボニル」は、１〜１７個の炭素原子（好ましくは１〜４個の炭素原子）を含む、そしてアルケニルの場合は、少なくとも２個の炭素原子および１つの二重結合、そしてアルキニルの場合は少なくとも２個の炭素原子および１つの三重結合を含む、環式および非環式の、置換および非置換の、そして直鎖および分枝鎖の両方を包含する。特定の実施形態では、シクロアルキル基は、好ましくは、５個、６個または７個の炭素原子を含み、そして単環式または二環式であり得る。さらに、シクロアルキル基は、１以上の置換基を含み得る。（Ｒ２によって定義される通りの）シクロアルキル環の飽和炭素上の１個以上の水素原子の置換のための適切な置換基（Ｒ５）としては、以下のうちの１個以上の独立した出現箇所が挙げられる：
【００１５】
【化１６】
ここで、ｑは、０、１または２であり、そしてＲ６の各出現箇所は、独立して、水素またはアルキルである。
【００１６】
置換基または可変基の組み合わせは、このような組み合わせが安定かまたは化学的に実行可能な化合物をもたらす場合にのみ許容され得る。安定な化合物または化学的に実行可能な化合物は、水分または他の化学的に反応性の条件の不存在下で、４０℃以下の温度にて少なくとも１週間保持した場合に実質的に変更されないものである。
【００１７】
そうでないと言及しない限り、本明細書中に示す構造はまた、この構造の全ての立体化学形態（すなわち、各不斉中心について、Ｒ配置およびＳ配置）を包含することを意味する。それゆえ、本発明の単一の立体化学的異性体ならびに鏡像異性体およびジアステレオ異性体の混合物は、本発明の範囲内である。そうでないと言及しない限り、本明細書中に示す構造はまた、１以上の同位体が富化された原子の存在についてのみ異なる化合物を包含することを意味する。例えば、重水素またはトリチウムによる水素の置換または１３Ｃまたは１４Ｃ富化炭素による炭素の置換以外は本発明の構造を有する化合物は、本発明の範囲内にある。このような化合物は、例えば、生物学的アッセイにおける分析ツールまたはプローブとして有用である。
【００１８】
（ＩＩ．特定の例示的化合物の説明）
特定の例示的な実施形態では、上記に直接的に記載される式Ｉの化合物については、Ｒ１は、水素またはフッ素であり；Ｒ２は、置換されているかまたは置換されていないシクロアルキルであり；ｒは、０または１であり；Ｒ３は、アルキル、または−（ＣＨ２）ｍＯＲ４であり；ｍは、０、１または２であり；Ｒ４は、水素またはアルキルであり；そしてｎは、０、１または２である。
【００１９】
他の特定の例示的な実施形態では、Ｒ２は、置換されているかまたは置換されていないシクロヘキシルまたはノルボルニルであり、従って、構造ＩＩおよび構造ＩＩＩを有する化合物が提供される：
【００２０】
【化１７】
ここで、Ｒ１、Ｒ３、ｒおよびｎは、上記および本明細書中のサブセットで定義された通りであり；Ｒ５の各出現箇所は、独立して、以下である：
【００２１】
【化１８】
ここで、ｑは、０、１または２であり、そしてＲ６の各出現箇所は、独立して、水素またはアルキルであり；そしてｐは、０、１または２である。
【００２２】
上記の化合物の特定のサブクラスは、以下においてより詳細に記載される。上記に一般的に記載される化合物（式Ｉ）およびそれらのクラス（例えば、式ＩＩおよび式ＩＩＩ）の各々について、以下のサブセットの任意の組み合わせが、本発明の例示的なサブクラスを記載するために利用され得ることが認識される。特に、特定の好ましいサブクラスとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：
ｉ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでＲ１がＦである化合物；
ｉｉ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでＲ１がＨである化合物；
ｉｉｉ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでＲ２が、置換されているかまたは置換されていないシクロヘキシルである化合物；
ｉｖ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでＲ２が、置換されているかまたは置換されていないノルボルニルである化合物；
ｖ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでＲ３が、アルキル、ＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、またはアルコキシである化合物；
ｖｉ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでｎが０である化合物；
ｖｉｉ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでｎが１である化合物；
ｖｉｉｉ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでｎが２である化合物；
ｉｘ）式ＩＩの化合物であって、ここでｐが０である、化合物；
ｘ）式ＩＩＩの化合物であって、ここでｐが０である、化合物；
ｘｉ）式ＩＩＩの化合物であって、ここでｐが１である、化合物；
ｘｉｉ）式ＩＩＩの化合物であって、ここでｐが２である、化合物；
ｘｉｉｉ）式ＩＩまたはＩＩＩの化合物であって、ここでｐが０または１であり、そしてＲが、独立して、ＯＨまたはアルキルである、化合物；ならびに
ｘｉｖ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでｒが、０または１である化合物。
【００２３】
特定の好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＩを有し、そしてＲ１はＦまたはＨであり；ｐは０であり；ｎは０または１であり；ｒは０または１であり；そしてＲ３は、ＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、アルキルまたはアルコキシである。
【００２４】
特定の他の好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＩＩを有し、そしてＲ１は、ＦまたはＨであり；ｐは、０、１または２であり；Ｒ５の各出現箇所は、独立して、アルキル、ＯＨ、ＣＨ２ＯＨまたはアルコキシであり；ｎは、０または１であり；ｒは、０または１であり；そしてＲ３は、ＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、アルキルまたはアルコキシである。
【００２５】
式Ｉの化合物の代表的例を、表１に以下に示す。
【００２６】
【化１９】
【００２７】
【化２０】
【００２８】
【化２１】
【００２９】
【化２２】
（ＩＩＩ．一般的合成方法論）
本発明の化合物は、以下の一般的スキーム例示されるような類似の化合物について当業者に公知の方法によって、および以下の調製実施例によって、一般的に調製され得る。
【００３０】
以下のスキーム１は、式Ｉの化合物の一般的調製方法を示す。一般に、以下に記載されるように、以下の化合物（例えば、６Ａ、７Ａ、１０Ａおよび１１Ａ）は、当業者に公知の方法を用いて式Ｉ、式ＩＩおよび式ＩＩＩの種々の化合物を形成する際に有用な中間体である。さらに、これらの化合物の合成方法は、ＰＣＴ公報ＷＯ ０１／１２６２１に一般的に記載される。ＰＣＴ公報ＷＯ ０１／１２６２１の内容全体は、本明細書中に参考として援用される。スキーム２は、式Ｉおよび式ＩＩの特定の例示的な化合物（ノルボルニル誘導体およびシクロヘキシル誘導体に関する）の一般的合成方法を示し、ここで、フルオロ置換クロロキシム（ｃｈｌｏｒｏｘｉｍｅ）中間体、ならびに置換されていないかまたはヒドロキシ置換のピペリジニル中間体が利用される。
【００３１】
（スキーム１）
【００３２】
【化２３】
（スキーム２）
【００３３】
【化２４】
（ＩＶ．本発明の化合物の用途）
本発明の化合物は、予想外に、かつ驚くべきことに、虚血性損傷に対するニューロン細胞の保護における増大した能力およびインビトロでのＣＮＳ炎症アッセイにおいてインヒビターとしての増大した能力を示す。本発明において利用される化合物の活性は、インビトロで、インビボで、または細胞株において、当該分野で公知の方法に従ってアッセイされ得る。例示的なインビトロアッセイとしては、インビトロ虚血（ＯＲＧ）アッセイ、およびインビトロＣＮＳ炎症アッセイが挙げられる。インビボでのアッセイとしては、本明細書で以下においてより詳細に記載される通りの、ラットＭＣＡＯ（中大脳動脈閉塞）効力研究が挙げられる。
【００３４】
別の実施形態によれば、本発明は、本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な塩、および薬学的に受容可能なキャリア、アジュバントまたはビヒクルを含む組成物を提供する。本発明の組成物中の化合物の量は、患者における虚血障害、炎症障害、神経変性障害または神経学的障害を処置、予防または軽減するために有効であるような量である。好ましくは、本発明の組成物は、このような組成物を必要とする患者への投与のために処方される。より好ましくは、本発明の組成物は、患者への経口投与のために処方される。
【００３５】
用語「患者」は、本明細書中で用いられる場合、動物を、好ましくは哺乳動物を、そして最も好ましくはヒトを意味する。
【００３６】
用語「薬学的に受容可能なキャリア、アジュバント、またはビヒクル」とは、処方される化合物の薬理学的活性を破壊しない、無毒性のキャリア、アジュバントまたはビヒクルをいう。本発明の組成物において用いられ得る薬学的に受容可能なキャリア、アジュバントまたはビヒクルとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）、緩衝物質（例えば、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分的グリセリド混合物）、水、塩または電解質（例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩）、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂。
【００３７】
本発明の化合物の薬学的に受容可能な塩としては、薬学的に受容可能な無機酸および無機塩基ならびに有機酸および有機塩基由来の塩が挙げられる。適切な酸性塩の例としては以下が挙げられる：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩（ｃａｍｐｈｏｒａｔｅ）、ショウノウスルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸、ジグルコン酸、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、蟻酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモエート（ｐａｌｍｏａｔｅ）、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩（ｐｉｖａｌａｔｅ）、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシレートおよびウンデカン酸塩。他の酸（例えば、シュウ酸）は、それ自体は薬学的に受容可能ではないが、本発明の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な酸付加塩を得る際に中間体として有用な塩の調製において使用され得る。
【００３８】
適切な塩基から誘導される塩としては、アルカリ金属（例えば、ナトリウムおよびカリウム）塩、アルカリ土類金属（例えば、マグネシウム）塩、アルミニウム塩およびＮ＋（Ｃ１〜４アルキル）４塩が挙げられる。本発明はまた、本明細書中で開示される化合物の任意の塩基性窒素含有基の四級化も想定する。水溶性もしくは油溶性または分散性の生成物は、このような四級化によって得られ得る。
【００３９】
本発明の組成物は、経口的に、非経口的に、吸入スプレーによって、局所的に、直腸的に、経鼻的に、頬に、膣に、または移植レザバを介して投与され得る。用語「非経口的」は、本明細書中で使用される場合、皮下、静脈内、筋内、関節内、滑膜内、胸骨内、髄腔内、肝臓内、病巣内および頭蓋内の注射または注入技術を含む。好ましくは、これらの組成物は、経口的に、腹腔内に、または静脈内に投与される。本発明の組成物の無菌の注射可能形態は、水性懸濁液または油性懸濁液であり得る。これらの懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤、および懸濁剤を使用して、当該分野で公知の技術に従って処方され得る。無菌の注射可能な調製物はまた、無毒性の非経口的に受容可能な希釈剤または溶媒中の、無菌の注射可能な溶液または懸濁液であり得る（例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液）。使用され得る受容可能なビヒクルおよび溶媒の中では、水、リンガー液および等張塩化ナトリウム溶液である。さらに、無菌の不揮発性油が、溶媒または懸濁媒体として従来より使用される。
【００４０】
この目的のために、任意の無刺激の揮発性油が使用され得、このような油としては、合成のモノグリセリドまたはジグリセリドが挙げられる。脂肪酸（例えば、オレイン酸）およびそのグリセリド誘導体は、天然の薬学的に受容可能な油（例えば、オリーブ油またはヒマシ油、特にそれらのポリオキシエチル化バージョン）と同様、注射可能物の調製において有用である。これらの油溶液または懸濁液はまた、長鎖アルコールの希釈剤もしくは分散剤（例えば、カルボキシメチルセルロース）または類似の分散剤（これらは、乳濁液および懸濁液を含む薬学的に受容可能な投薬形態の処方物中に一般に使用される）を含み得る。他の一般に使用される界面活性剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ、Ｓｐａｎ）および他の乳化剤またはバイオアベイラビリティー増強剤（これらは、一般に、薬学的に受容可能な固体、液体、または他の投薬形態の製造において使用される）はまた、処方の目的のために使用され得る。
【００４１】
本発明の薬学的に受容可能な組成物は、任意の経口的に受容可能な投薬形態（カプセル剤、錠剤、水性懸濁剤または液剤が挙げられるが、これらに限定されない）で、経口的に投与され得る。経口的使用のための錠剤の場合、一般に使用されるキャリアとしては、ラクトースおよびコーンスターチが挙げられる。滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）もまた、代表的に添加される。カプセル形態での経口投与のために、有用な希釈剤としては、ラクトースおよび乾燥コーンスターチが挙げられる。経口的使用のために水性懸濁液が必要な場合、活性成分は、乳化剤および懸濁剤と組み合わされる。所望の場合、特定の甘味料、香料または着色料もまた、添加され得る。
【００４２】
あるいは、本発明の薬学的に受容可能な組成物は、直腸投与のために坐剤の形態で投与され得る。これらは、薬剤を、適切な非刺激性の賦形剤（これは、室温で固体であるが、直腸温度では液体であり、従って、直腸で溶融して薬物を放出する）と混合することによって調製され得る。このような材料としては、ココアバター、蜜蝋およびポリエチレングリコールが挙げられる。
【００４３】
本発明の薬学的に受容可能な組成物はまた、（特に、処置の標的が局所的適用によって容易に接近可能である領域または器官を含む場合（眼、皮膚または下部腸管の疾患を含む）に）局所的に投与され得る。適切な局所的処方物は、これらの領域または器官のそれぞれについて容易に調製される。
【００４４】
下部腸管に対する局所的適用は、直腸坐剤処方物（上記を参照のこと）または適切な浣腸剤処方物でもたらされ得る。局所的な経皮パッチもまた使用され得る。
【００４５】
局所的適用について、この薬学的に受容可能な組成物は、１つ以上のキャリア中に懸濁または溶解された活性成分を含有する適切な軟膏中に処方され得る。本発明の化合物の局所的投与のためのキャリアとしては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：鉱油、ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化蝋および水。あるいは、この薬学的組成物は、１つ以上の薬学的に受容可能なキャリアに懸濁または溶解された活性成分を含有する適切なローション剤またはクリーム剤中に処方され得る。適切なキャリアとしては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水。
【００４６】
眼科用途のために、この薬学的に受容可能な組成物は、塩化ベンザルコニウムのような保存剤を含むかまたは含まないかのいずれかの、等張のｐＨ調整した滅菌生理食塩水中の微細化懸濁液として、または好ましくは、等張のｐＨ調整した滅菌生理食塩水中の溶液として、処方され得る。あるいは、眼科用途のために、この薬学的に受容可能な組成物は、ワセリンのような軟膏中に処方され得る。
【００４７】
本発明の薬学的に受容可能な組成物はまた、鼻エアロゾルまたは吸入によって投与され得る。このような組成物は、製薬処方の分野で周知の技術に従って調製され、そしてベンジルアルコールもしくは他の適切な保存剤、バイオアベイラビリティーを増強するための吸収促進剤、フッ化炭素、および／または他の従来の可溶化剤もしくは分散剤を使用して、生理食塩水中の溶液として調製され得る。
【００４８】
最も好ましくは、本発明の薬学的に受容可能な組成物は、経口投与のために処方される。
【００４９】
キャリア物質と一緒にされて、単一投薬形態を生成し得る本発明の化合物の量は、処置される宿主および投与の特定の様式に依存して変動する。好ましくは、この組成物は、０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の間のインヒビターの投薬量が、これらの組成物を受ける患者に投与され得るように処方されるべきである。。
【００５０】
任意の特定の患者に対する特定の投薬量および処置レジメンは、種々の因子に依存することもまた理解されるべきであり、この種々の因子としては、使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与時間、排泄の速度、薬物の組合わせ、ならびに処置医の判断および処置されている特定の疾患の重症度が挙げられる。組成物中での本発明の化合物の量はまた、その組成物における特定の化合物に依存する。
【００５１】
処置または予防される特定の状態（または疾患）に依存して、さらなる治療薬剤（これは通常、その状態（または関連する副作用もしくは障害）を処置または予防するために投与される）もまた、本発明の組成物中に存在し得る。本明細書中で用いられる場合、特定の疾患（または状態）を処置または予防するために通常投与されるさらなる治療薬剤は、「処置される疾患または状態について適切である」として公知である。
【００５２】
例えば、発作についての既知の処置としては、以下が挙げられる：Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、組換え体または遺伝子操作された組織プラスミノーゲンアクチベーター（ｒｔ−ＰＡ）、ヘパリン、グルタミン酸アンタゴニスト、カルシウムアンタゴニスト、オピエートアンタゴニスト、ＧＡＢＡアゴニストおよび抗酸化剤。
【００５３】
本発明の化合物がまた組み合わされ得る薬剤の他の例としてはまた、以下が挙げられるがこれらに限定されない：アルツハイマー病についての処置（Ａｒｉｃｅｐｔｏ（登録商標）およびＥｘｃｅｌｏｎ（登録商標））；パーキンソン病についての処置（例えば、Ｌ−ＤＯＰＡ／カルビドパ、エンタカポン（ｅｎｔａｃａｐｏｎｅ）、ロピンロール（ｒｏｐｉｎｒｏｌｅ）、プラミペキソール（ｐｒａｍｉｐｅｘｏｌｅ）、ブロモクリプチン、ペルゴリド、トリヘキセフェンジル（ｔｒｉｈｅｘｅｐｈｅｎｄｙｌ）、およびアマンタジン）；多発性硬化症（ＭＳ）を処置するための薬剤（例えば、βインターフェロン（例えば、Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）およびＲｅｂｉｆ（登録商標））、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）およびミトキサントロン）；喘息についての処置（例えば、アルブテロールおよびＳｉｎｇｕｌａｉｒ（登録商標））；精神分裂病の処置のための薬剤（例えば、ジプレキサ（ｚｙｐｒｅｘａ）、リスパーダル（ｒｉｓｐｅｒｄａｌ）、セロルール（ｓｅｒｏｑｕｅｌ）、およびハロペリドール）；抗炎症性剤（例えば、コルチコステロイド、ＴＮＦブロッカー、ＩＬ−１ ＲＡ、アザチオプリン、シクロホスファミド、およびスルファサラジン）；免疫調節剤および免疫抑制剤（例えば、シクロスポリン、タクロリムス、ラパマイシン、ミコレノレートモフェチル（ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌａｔｅ ｍｏｆｅｔｉｌ）、インターフェロン、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン、およびスルファサラジン）；神経栄養因子（例えば、アセチルコリンエステラーゼインヒビター、ＭＡＯインヒビター、インターフェロン、抗痙攣剤、イオンチャネルブロッカー、リルゾール（ｒｉｌｕｚｏｌｅ）、および抗パーキンソン症候群剤）；心臓血管疾患を処置するための薬剤（例えば、β−ブロッカー、ＡＣＥインヒビター、利尿剤、硝酸塩、カルシウムチャネルブロッカー、およびスタチン）；肝臓疾患を処置するための薬剤（例えば、コルチコステロイド、コレスチラミン、インターフェロン、および抗ウイルス剤）；血管障害を処置するための薬剤（例えば、コルチコステロイド、抗白血病剤、および増殖因子）；ならびに免疫不全障害を処置するための薬剤（例えば、γグロブリン）。
【００５４】
本発明の組成物中に存在するさらなる治療薬剤の量は、唯一の活性薬剤としてこの治療薬剤を含む組成物中に通常投与される量を超えない。好ましくは、現在開示される組成物中のさらなる治療薬剤の量は、治療的に活性な唯一の薬剤としてこの薬剤を含む組成物中に通常存在する量の約５０％〜１００％の範囲をとる。
【００５５】
別の実施形態によれば、本発明は、神経学的障害、神経変性障害、虚血性障害または炎症性障害を処置するか、予防するかまたはこれらの重篤度を低減する方法に関し、この方法は、本発明の化合物またはこの化合物を含む組成物を被験体（好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒト）に投与する工程を包含する。特定の好ましい実施形態では、本発明は、虚血性障害を処置するか、予防するかまたはこの重篤度を低減する方法に関し、最も好ましくは、発作を処置するか、予防するかまたは発作の重篤度を低減するための方法に関する。
【００５６】
用語「生物学的サンプル」は、本明細書中で使用される場合、細胞培養物またはその抽出物；哺乳動物またはその抽出物から得た生検物質；ならびに血液、唾液、子宮、糞便、精液、涙液、もしくは他の体液、またはそれらの抽出物を包含するが、これらに限定されない。
【００５７】
用語「虚血性障害」は、本明細書中で使用される場合、器官の血管に影響を与える、任意の疾患または状態を包含する。特定の好ましい実施形態では、虚血性障害は、脳の血管に影響を与える、任意の疾患または状態（例えば、いくつか名前を挙げると、発作および一過性の虚血性発作）を包含する。
【００５８】
本発明の化合物によって処置または予防され得る神経変性疾患としては、アルツハイマー病、脳の虚血、または外傷性傷害によって引き起こされた神経変性疾患が挙げられるが
本発明の化合物によって処置または予防され得る例示的な計画的障害および疾患としては、発作および一過性虚血性発作が挙げられるがこれらに限定されない。
【００５９】
本発明の化合物によって処置または予防され得る炎症性疾患としては、急性膵炎、慢性膵炎、喘息、アレルギー、および成人呼吸窮迫症候群が挙げられるがこれらに限定されない。
【００６０】
本発明の化合物によって処置または予防され得る自己免疫疾患としては、糸球体腎炎、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、強皮症、慢性甲状腺炎、グレーヴズ病、自己免疫胃炎、糖尿病、自己免疫溶血性貧血、自己免疫好中球減少、血小板減少、アトピー性皮膚炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、多発性硬化症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬、または移植片対宿主病が挙げられるがこれらに限定されない。
【００６１】
代替の実施形態では、さらなる治療薬剤を含まない組成物を利用する本発明の方法は、上記患者にさらなる治療剤を別々に投与するさらなる工程を包含する。これらのさらなる治療剤を別々に投与する場合、これらは、患者に、本発明の組成物よりも前に、本発明の組成物に続いて、または本発明の組成物の後に投与され得る。
【００６２】
本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な組成物はまた、移植可能な医療用デバイス（例えば、プロテーゼ、人工弁、血管移植片、ステント、およびカテーテル）をコーティングするための組成物中に組み込まれ得る。血管ステントは、例えば、再狭窄（損傷後の血管壁の再狭窄）を克服するために用いられている。しかし、ステントまたは他の移植可能なデバイスを用いる患者は、凝塊形成または血小板活性化の危険性がある。これらの望ましくない効果は、本明細書中に記載される通りの化合物を含む薬学的に受容可能な組成物でこのデバイスを予めコーティングすることによって、防止または緩和され得る。コーティングされた移植可能なデバイスの適切なコーティングおよび一般的な調製は、米国特許第６，０９９，５６２号、同第５，８８６，０２６号；および同第５，３０４，１２１号に開示される。このコーティングは、代表的には、生体適合性ポリマー材料（例えば、ヒドロゲルポリマー、ポリメチルジシロキサン、ポリカプロラクトン、ポリエチレングリコール、ポリ乳酸、エチレン酢酸ビニル、およびこれらの混合物）である。コーティングは、必要に応じて、フルオロシリコーン、ポリサッカリド、ポリエチレングリコール、リン脂質またはこれらの組み合わせの適切なトップコートによってさらに被覆されて、組成物に制御放出特性を与え得る。本発明の化合物でコーティングされた移植可能なデバイスは、本発明の別の実施形態である。
【００６３】
本明細書中に記載される本発明がより完全に理解され得るために、以下の実施例を説明する。これらの実施例は、説明の目的のみのためであり、そして本発明を限定するとは決して解釈されるべきでないことは理解されるべきである。
【実施例】
【００６４】
本明細書中で用いられる場合、用語「Ｒｔ（分）」は、指定したＨＰＬＣ法を用いたときの化合物に関連したＨＰＬＣ保持時間（分）をいう。そうでないと示されない限り、報告された保持時間を得るために利用されるＨＰＬＣ法は、以下の通りである：
方法Ａ：カラム：ライトニング、２．１×５０ｍｍ；勾配：４分間かけて、１００％水（０．１％ ＴＦＡ）→１００％ ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）；流量：０．８ｍＬ／分。
【００６５】
方法Ｂ：カラム：ライトニング、２．１×５０ｍｍ；勾配：４分間かけて、９０％水（０．１％ ＴＦＡ）→９０％ ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）；流量：０．８ｍＬ／分。
【００６６】
方法Ｃ：カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、３０×１５０ｍｍ；勾配：８分間かけて、１０％→９０％ ＣＨ３ＣＮ／水（０．０１％ＴＦＡ）；流量：１ｍＬ／分；検出：２１０、２２０、２５４、２８０または３００ｎｍ。
【００６７】
方法Ｄ：カラム：Ｄｉａｃｅｌｌ Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＯＪ−Ｈ ２５０×４．６ｍｍ；Ｉｓｏｃｒａｔｉｃ：５％ ＭｅＯＨ／ＣＯ２；圧力：２００バール；温度：４０℃；流量：２ｍＬ／分；検出：２２０ｎｍ。
【００６８】
（実施例１：フルオロ置換クロロオキシム６の調製）
【００６９】
【化２５】
Ａ）２の調製：オーバーヘッド撹拌子および還流凝縮器を備えた５Ｌの３首丸底フラスコにおいて、チオールピリミジン１の塩酸塩４９７．６ｇ（３．０６ｍｏｌ）を、１ＬのＭｅＯＨに懸濁した。６Ｎ ＮａＯＨ溶液（１．２Ｌ、過剰量）を添加し、そして混合物を１５分間攪拌した。この溶液を還流加熱し、そしてヨウ化メチル（１９２ｍＬ、３．０８ｍｏｌ）を少しずつ添加した。この混合物を２時間還流し、冷却し、そしてＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして減圧下でエバポレートして、３４７．３ｇ（８１％）のスルフィドを明黄色オイルとして得た。
【００７０】
【化２６】
Ｂ）３の調製：オーバーヘッド撹拌子を備えた５Ｌの３首丸底フラスコにおいて、４−メチル−２−チオメチルピリミジン（３４４．５ｇ、２．４６ｍｏｌ）を２ＬのＴＨＦ中に溶解した。シュウ酸ジエチル（３３４ｍＬ、２．４６ｍｏｌ）を添加した。ｔ−ブトキシドカリウム（２８６．２２ｇ、２．５５ｍｏｌ）を５０ｇずつ添加した。各部分は、軽度の発熱を生じた。この混合物は迅速に褐色になり、そして最終的に黄色の沈澱物が形成されて濃厚な混合物を形成した。この反応物を１０％ ＮＨ４Ｃｌ水溶液中に注ぎ、そしてＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そしてシリカゲルのプラグを通して濾過した。このプラグを１０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出した。濾液をエバポレートして、褐色固体を得た。この固体を最少量のＣＨ２Ｃｌ２中に溶解した。ヘキサンを添加し、そして溶液を冷却して固体を沈澱させ、この固体を濾過した。濾液をエバポレートし、そして沈澱プロセスを繰り返して、合計４０１．５ｇ（６０％）のケトエステル３を得た。
【００７１】
【化２７】
Ｃ）５の調製：オーバーヘッド撹拌子を備えた３Ｌの３首丸底フラスコにおいて、５６６．６ｇ（４．０７ｍｏｌ）の４−フルオロベンズアルデヒドを、２ＬのＭｅＯＨ中に溶解した。この溶液に、５６５．０ｇ（６．８９ｍｏｌ）の酢酸ナトリウムを添加した。この固体は、完全には溶解しなかった。塩酸ヒドロキシルアミン（３０４．４２ｇ、４．３８ｍｏｌ）を５０ｇずつ添加した。塩酸ヒドロキシルアミンの各々の添加は、軽度の発熱を生じた。白色固体が反応の間に沈澱し、一方、この混合物はそれほど濃厚にはならなかった。この混合物を１時間攪拌した。水を添加し、これは最初に沈澱物を溶解した。より多くの水の添加により、白色結晶固体が沈澱し、この沈澱を濾過し、水で洗浄し、そして減圧下で乾燥して、５５８．３ｇ（９９％）のオキシム５を得た。
【００７２】
【化２８】
Ｄ）フルオロ置換クロロオキシム６の調製：オーバーヘッド撹拌子を備えた３Ｌの３首丸底フラスコにおいて、５５８．３ｇ（４．０１ｍｏｌ）のオキシム５を、２ＬのＤＭＦ中に溶解した。Ｎ−クロロクスシンイミド（５８１．６ｇ、４．３６ｍｏｌ）を３０ｇずつ添加した。誘導器官が観察され、その後、反応が生じた。反応開始時およびＮＣＳの各添加の際に軽度の発熱が観察された。この反応物を一晩攪拌し、そして水中に注いで白色固体を沈澱させた。この固体を濾過し、水で洗浄し、そして減圧下でエバポレートして、３０９．２ｇ（４４％）のクロロオキシム６を白色固体として得た。
【００７３】
（実施例２：臭化物（１０）の調製）
【００７４】
【化２９】
Ａ）７の調製：１Ｌ丸底フラスコにおいて、２４．６ｇ（９０．６ｍＭｏｌ）のケトエステル３を、３００ｍＬのエタノール中に溶解した。この溶液に、１８．６ｇ（１０７ｍＭｏｌ）のクロロオキシム６を添加した。トリエチルアミン（５３ｍＬ、３８０ｍＭｏｌ）をこの溶液に滴下して黄色にし、そして軽度の発熱を生じた。このケトエステルがＴＬＣによってもはや現れなくなるまで（約１時間）、この溶液を攪拌した。この混合物を水中に注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。この抽出物を乾燥し、そしてシリカゲルのプラグにて濾過した。このプラグを２５％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出させた。この濾液を減圧下でエバポレートして、粗製生成物を黄色固体として得た。この固体を最少量のＣＨ２Ｃｌ２中に溶解した。ヘキサンを添加し、そしてこの溶液を冷却して、２９．５ｇ（９０％）のイソオキサゾール７を黄色固体として沈澱させた。
【００７５】
【化３０】
Ｂ）８の調製：５Ｌの３首丸底フラスコにおいて、エステル７（２７８．７ｇ、７７３ｍＭｏｌ）を２ＬのＴＨＦ中に溶解した。メタノール（１Ｌ）を添加した。水素化ホウ素ナトリウム（６３．７０ｇ、１．６７ｍｏｌ）を１０ｇずつ添加した。水素化ホウ素物の各添加によって、いくらかの発泡が生じ、多量の気体が発生した。この溶液を２時間攪拌した。ＴＬＣは、生成物８の混合物およびより低いＲｆスポットを示した。この溶液を１Ｎ ＨＣｌ中に注意深く注ぎ、そしてＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして減圧下でエバポレートした。オイルを最少量のＣＨ２Ｃｌ２中に再度溶解し、ヘキサンを添加し、そしてこの溶液を冷却して、５８ｇのアルコール８を白色固体として沈澱させた。濾液を減圧下で濃縮し、シリカゲルのプラグで濾過した。５％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２でのプラグの溶出により、アルコール８が副生成物から選択的に溶出された。さらに４８ｇのアルコールをこのプラグから回収して、合計１０６ｇ（４２％）の生成物を得た。
【００７６】
【化３１】
Ｃ）９の調製：室温のメタノール（１．５Ｌ）中の８（３１．７４ｇ、１００ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液に、滴下漏斗を介して４５分間かけて水（７５０ｍＬ）中のオキソン（１３５ｇ、２２０ｍＭｏｌ）の溶液を添加した。得られた反応混合物を一晩攪拌した。水を添加し、そして混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして濃縮して、９（３１．９６ｇ、９１．４８ｍＭｏｌ、９１％）を白色固体として提供した。
【００７７】
【化３２】
Ｄ）１０の調製：室温のＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）中の９（３１．９６ｇ、９１．４８ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液に、ＣＢｒ４（４２．４ｇ、１２８ｍＭｏｌ）、続いてＰＰｈ３（２８．８ｇ、１１０ｍＭｏｌ）を添加した。わずかな発熱が観察された。２０分後、さらなるＰＰｈ３（２．００ｇ）を添加した。２時間後、反応物を濃縮した。得られた物質をＥｔＯＨ（５００ｍＬ）中にピックアップし、そして攪拌した。所望の生成物（１０）が溶液から沈澱し、そしてこれを収集し、そしてさらなるＥｔＯＨでリンスして、３２．３ｇ（７８．７ｍＭｏｌ、８６％）の白色固体を得た。
【００７８】
【化３３】
実施例３：ピペリジニル中間体１１の調製：室温のＣＨ３ＣＮ（２０ｍＬ）中の１０（１．６６ｇ、４．０３ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液に、ピペリジン（０．４０６ｍＬ、４．１１ｍＭｏｌ）を添加し、続いてＥｔ３Ｎ（０．５７３ｍＬ、４．１１ｍＭｏｌ）を添加した。６０分後、反応物を濃縮し、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）とＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）との間で分配した。水層をさらなるＣＨ２Ｃｌ２（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、ＳｉＯ２を通して濾過し、そして濃縮して、１．５０ｇ（３．６０ｍＭｏｌ、８９％）の無色オイルを得た。
【００７９】
【化３４】
実施例４：ヒドロキシ置換ピペリジニル中間体１２の調製：室温のＣＨ３ＣＮ（２２０ｍＬ）中の１０（２２．７ｇ、５５．２ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液に、４−ヒドロキシピペリジン（５．５８ｇ、５５．２ｍＭｏｌ）、続いてＥｔ３Ｎ（８．０８ｍＬ、５８．０ｍＭｏｌ）を添加した。９０分後、この反応物を濃縮し、飽和ＮａＨＣＯ３とＣＨ２Ｃｌ２との間で分配した。水層をさらに２回、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ＳｉＯ２を通して濾過し、そして濃縮して、２３．７ｇ（５４．７ｍＭｏｌ、９９．２％の収率）の無色泡状体を得た。
【００８０】
【化３５】
実施例５：Ｉ−１の調製：ＤＭＳＯ（１００ｍＬ）中の１２（２４．８ｇ、５７．３ｍＭｏｌ）およびシクロヘキシルアミン（１３．１ｍＬ、１１５ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液を、７５℃にて４．５時間加熱した。反応物を室温まで冷却した。さらになる当量のシクロヘキシルアミン（６．５ｍＬ、５７ｍＭｏｌ）を添加し、そしてこの溶液を１６時間攪拌し、この間に白色沈澱物が形成された。この固体を濾過によって収集し、そしていくつかの部分のＥｔＯＡｃでリンスした。母液をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水、飽和ＮａＨＣＯ３、およびブラインで洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして濃縮した。得られた固体を少ない部分の熱ＥｔＯＡｃ中に懸濁し、そして濾過した。合わせた固体をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）中で１６時間攪拌し、そして再度濾過した。この濾液をさらなるＥｔＯＡｃでリンスした。得られた固体を減圧下で乾燥して、２４．６ｇ（５４．５ｍＭｏｌ、９５％）の白色の非晶質粉末を得た。
【００８１】
【化３６】
ビスＨＣｌ塩：ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（１：２）中のＩ−１（２．８８ｇ、６．３８ｍＭｏｌ）の溶液を、ＨＣｌ（６．４ｍＬ、ジオキサン中４Ｍ）で処理した。２分後、Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ）を添加し、そして沈澱物がゆっくりと形成された。さらなる２０分間の攪拌後、Ｅｔ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加し、そしてこの溶液を濾過した。固体濾液をいくつかの部分のＥｔ２Ｏでリンスした。収集した固体を減圧下で乾燥して、３．２２ｇ（６．１４ｍＭｏｌ、９６％の収率）の白色粉末を得た。
【００８２】
ＨＰＬＣ（方法Ａ）ｔｒ＝３．０７分；ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ４５２．３（Ｍ＋Ｈ）。
【００８３】
【化３７】
実施例７：Ｉ−３の調製：ＤＭＳＯ（３００ｍＬ）中の１１（２２．６５ｇ、５４．３８ｍＭｏｌ）およびシクロヘキシルアミン（１２．４ｍＬ、１０９ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液を８５℃まで４時間加熱した。反応物を冷却し、水中に注ぎ、そしていくつかの部分のＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして濃縮した。固体残渣をＥｔＯＨから再結晶して、１８．７５ｇ（４３．０５ｍＭｏｌ、７９％）のＩ−３を得た。
【００８４】
【化３８】
ビス−ＨＣｌ塩：ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（１：１）中のＩ−３（１．３２ｇ、３．０４ｍＭｏｌ）の溶液を過剰の過剰のＨＣｌ−Ｅｔ２Ｏ溶液で処理した。数分後、この溶液を濃縮し、そして揮発成分を減圧下で除去して、対応するビス−ＨＣｌ塩（１．５０ｇ、２．９５ｍＭｏｌ、９７％の収率）を白色固体として得た。
【００８５】
ＨＰＬＣ（方法Ａ）ｔｒ＝３．２５分；ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ ４３６．２（Ｍ＋Ｈ）。
【００８６】
【化３９】
【００８７】
【化４０】
（実施例１７：Ｎ−ＣＢｚ−（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンおよびＮ−ＣＢｚ−（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンの調製）
【００８８】
【化４１】
スキーム３に示すように、実施例１９、２０および２１において使用するために、Ｎ−ＣＢｚ−（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンおよびＮ−ＣＢｚ−（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミン（および実施例１８に記載される通りのＨＣｌ塩）を以下の党利に調製する：０℃の水（２２０ｍＬ）中のラセミ２−オキソ−アミノノルボルナン（２２．０ｇ、１９８ｍＭｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（２２．０ｇ、２０７ｍＭｏｌ）の溶液に、クロロギ酸ベンジル（３５．５ｇ、１９８ｍＭｏｌ）を滴下漏斗を介してゆっくりと滴下した。２０分後、さらなる水（１００ｍＬ）をこの反応物に添加し、そして添加をさらに２０分間続けた。添加が完了したら、Ｅｔ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加し、そして反応物を０℃にて１時間維持した。次いで、この反応物を室温まで温め、そしてＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）中に注いだ。層を分配し、そして水層をさらなるＥｔ２Ｏ（３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を１Ｍ ＨＣｌ、１Ｍ ＮａＯＨおよびブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、シリカゲルを通して濾過し、そして濃縮して、白色固体（４７．０ｇ、１９２ｍＭｏｌ、９７％）を得た。
【００８９】
この物質（４３．８ｇ）を、分取ＨＰＬＣ（カラム：ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ（登録商標）ＯＤ−Ｈ（登録商標）、２．１×２５ｃｍ、溶離液：ＣＯ２／ＩＰＡ：９０／１０、３０℃）を用いて分離した。Ｎ−ＣＢｚ−（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミン（１８．９４ｇ、８６．４％の回収率、＞９９％ｅｅ）ＨＰＬＣ：ｔｒ＝３．５１分。Ｎ−ＣＢｚ−（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミン（１９．４２ｇ、８４．１％の回収率、９９％ｅｅ）ＨＰＬＣ：ｔｒ＝３．９０分。
【００９０】
実施例１８：（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−ビシクロ−［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンＨＣｌ円の調製：０℃のトルエン中のＮ−ＣＢｚ−（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミン（１９．４２ｇ、７９．１６ｍＭｏｌ）およびＰｄ（炭素上５％、１．９ｇ）の脱気した溶液を、Ｈ２雰囲気下に配置した。氷浴を除去し、そして反応物を１９時間攪拌した。次いで、ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）を添加し、そして混合物を１５分間攪拌した。この反応物をＣｅｌｉｔｅを通して濾過し、そしてケークをＭｅＯＨ（１００ｍＬ）でリンスした。得られた濾液をＨＣｌ（２．０Ｍ、４５ｍＬ）で処理し、そして１０分間攪拌した。液体の濃縮によって、白色固体（１１．０ｇ，７４．６ｍＭｏｌ，９４．２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、５００ＭＨｚ）δ３．１３（ｄｄ，１Ｈ）、２．３９（ｍ，１Ｈ）、２．３４（ｄ，１Ｈ）、１．８１（ｄｄｄ，１Ｈ）、１．６８−１．５２（複雑なｍ，３Ｈ）、１．４２（ｄｄ，１Ｈ）、１．３４（ｄ，１Ｈ）、１．２３（ｍ，２Ｈ）。
【００９１】
実施例１９：Ｉ−１３の調製：ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中の１２（１６．０ｇ、３７．１ｍＭｏｌ）および（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミン（最終生成物の鏡像純度および絶対的立体配置は、以下の文献の方法に従った合成によって得た（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンまたは（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンを用いて調製された物質を用いたＨＰＬＣ比較に基づいて帰属された。Ｅｄａ，Ｍ；Ｔａｋｅｍｏｔｏ，Ｔ．；Ｏｎｏ，Ｓ．−Ｉ．；Ｏｋａｄａ，Ｔ．，Ｋｏｓａｋａ，Ｋ．；Ｇｏｈｄａ，Ｍ．；Ｍａｔｚｎｏ，Ｓ．；Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｎ．；Ｆｕｋａｙａ，Ｃ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｒｓ．１９９４，３７，１９８３−１９９０およびその中の参考文献を参照のこと）（６．７５ｇ、４４．５ｍＭｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（４．７２ｇ、４４．５ｍＭｏｌ）の攪拌溶液を、７０℃まで０時間加熱した。この反応物を室温まで冷却した。反応物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水中に注ぎ、さらに２つの部分のＣＨ２Ｃｌ２で分配抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ溶離液）によって、１６．０ｇの粘性オイルを得た。１Ｈ ＮＭＲの遊離塩基、Ｉ−１８と同じ。
【００９２】
実施例２０：ビスＨＣｌ塩の調製：ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（１：４）中のＩ−１３（１６．０ｇ）の溶液をＨＣｌ（２．５〜３当量、Ｅｔ２Ｏ中２．０Ｍ）で処理した。数分後、沈澱物が形成され始めた。３０分後、さらなるＥｔ２Ｏを添加し、そしてこの溶液を濾過した。固体濾液を、さらにいくつかの部分のＥｔ２Ｏでリンスした。収集した固体を減圧下で乾燥して、１５．６９ｇ（２９．２５ｍＭｏｌ、７９％の収率）の白色粉末を得た。この物質を、これを温かいＭｅＯＨ中に１５分間懸濁し、そしてＭＴＢＥの添加によって塩析することによってさらに精製した。
【００９３】
ＨＰＬＣ（方法Ａ）ｔｒ＝２．７９分；ＨＰＬＣ（方法Ｃ）ｔｒ＝４．６０分；ＨＰＬＣ（キラル方法Ｄ）ｔｒ＝１４．７４分、（＞９９％ｅｅ）；ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ ４６４．２（Ｍ＋Ｈ）。
【００９４】
実施例２１：Ｉ−１４の調製：これを、（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンを用いて出発して、実施例Ｉ−１３について記載の通りに調製した。遊離塩基の１Ｈ ＮＭＲは、Ｉ−１８と同じである。
【００９５】
【化４２】
【００９６】
【化４３】
実施例２５：Ｉ−１８の調製：ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中の１２（２．００ｇ、４．６２ｍＭｏｌ）および２−オキソ−ノルボルニルアミン（１．１０ｍＬ、９．２４ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液を７５℃まで４時間加熱した。反応物を室温まで冷却した。反応物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水中に注ぎ、２つのさらなる部分のＣＨ２Ｃｌ２で分配抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ溶離液）によって、２．０３ｇ（４．３８ｍＭｏｌ、９５％）の無色泡状物を得た。
【００９７】
【化４４】
ビスＨＣｌ塩：ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（１：２）中のＩ−１８（２．０３ｇ、４．３８ｍＭｏｌ）の溶液を、ＨＣｌ（１７．５ｍＬ、Ｅｔ２Ｏ中１Ｍ）で処理した。数分後、沈澱物が形成され始めた。３０分後、さらなるＥｔ２Ｏを添加し、そしてこの溶液を濾過した。固体濾液をさらなるいくつかの部分のＥｔ２Ｏでリンスした。収集した固体を減圧下で乾燥して、１．９３ｇ（３．６０ｍＭｏｌ、８２％の収率）の白色固体を得た。
【００９８】
ＨＰＬＣ（方法Ａ）ｔｒ＝２．７９分；ＨＰＬＣ（方法Ｃ）ｔｒ＝４．５９分；（キラル方法Ｄ）ｔｒ＝１４．８７および１６．８７分；ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ ４６４．３（Ｍ＋Ｈ）。
【００９９】
【化４５】
（実施例２８：ラットＭＣＡＯ有効性の研究）
（一般手順）
ラットをイソフルレンで麻酔して、無菌手術のために準備した。ＭＣＡを管腔内技術を用いて閉塞して、虚血を誘導した（Ｓｃｈｍｉｄ−Ｅｌｓａｅｓｓｅｒなど、Ｓｔｒｏｋｅ，１９９８；２９：２１６２−２１７０）。閉塞を虚血２時間後に除去し、Ｖｅｒｔｅｘにより提供されるＭｅｄ−ｅ−ｃｅｌｌポンプを用いて、ラットに化合物もしくはビヒクルを投薬した。化合物を、Ｉ．Ｐ．注入によってかまたはＩ．Ｖ．注入によって投薬し、２、３、または４投薬量投与において、１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲で投与した。ｉ．ｖ．ボーラスおよび持続注入を、外頸静脈を通じて投与した（ＭＣＡＯ前にカニューレ挿入した）。この実験の全持続時間は、２４、４８、もしくは７２時間である。実験の終わりに、ラット脳を取り出し、氷上において、１×ＰＢＳ中で１０分間冷却した。２ｍｍ厚の冠状切片（７切片／脳）を、１×ＰＢＳ中の２％ＴＴＣによって染色し、そして１０％中性緩衝ホルマリンによって、一晩、後固定（ｐｏｓｔ ｆｉｘ）した。
【０１００】
虚血２時間後、閉塞器を取り外す前に、神経学的欠損基準に基づいて、この動物を研究に含めるかまたは研究から除外するかの決定を行った。０〜３の段階を、以下の神経学的反応：１）回転、２）触覚ひげ反応（ｔａｃｔｉｌｅ ｗｈｉｓｋｅｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ）、および３）尾の懸垂下での前肢の回旋、の各々に対して使用し、そして各動物において反応スコア（０〜９）を計算した。研究に含めるための最小スコアは、５以上である。加えて、早期に死亡した動物は全て研究から除外した。追加の動物を研究に含めて、各群が必要とする最終的な「Ｎ」を確実に得た。
【０１０１】
（測定された生理学的変数）
体温を手術中にモニタリングし、正常値近くに維持した（３６．８〜３７．５℃）。体温を、ＭＣＡＯの時間、虚血にいたる２時間、処置開始時（虚血２時間後、４時間後、または６時間後）、虚血２４時間後、４８時間後、および７２時間後（実験終了時）において記録した。
【０１０２】
体重を、虚血０時間後、２４時間後、４８時間後、および７２時間後に記録した。
【０１０３】
行動学的評価を虚血前、および虚血２時間後、４時間後、６時間後、２４時間後、４８時間後、および７２時間後に行った。
【０１０４】
本発明の化合物を、虚血惹起の２、４、または６時間後、３、または４投薬量投与で、１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲の投薬量で、投与した。一般に、これらの状態下で投与された化合物は、１０％〜７０％保護作用の範囲で％保護作用を示した。
【０１０５】
特定の好ましい実施形態において、化合物は、２−１００ｍｇ／ｋｇの範囲の投与投薬量で虚血惹起２時間後に投与され（ＴＭＣＡＯ（一過性ＭＣＡＯ）またはＰＭＣＡＯ（持続性ＭＣＡＯ）モデル）、約３５〜約７０の範囲内で％保護作用を示す。
【０１０６】
さらに他の好ましい実施形態において、化合物は、ＴＭＣＡＯモデルを用いて、虚血惹起４時間後または６時間後に、２−１５ｍｇ／ｋｇの範囲の投与投薬量で（３または４投薬量投与で）投与され、そして約３０〜約５５の範囲内で％保護作用を示す。
【０１０７】
特定の他の好ましい実施形態において、化合物は、ＴＭＣＡＯモデルを用いて、虚血惹起４時間後に、２−１００ｍｇ／ｋｇの範囲の投与投薬量で（３または４投薬量投与で）投与され、そして約４０〜約５５の範囲内で％保護作用を示す。
【０１０８】
さらに他の好ましい実施形態において、本発明の化合物は、持続注入様式で投薬される。なお別の好ましい実施形態において、化合物は、持続注入様式で０．１２５〜５ｍｇ／ｋｇ／時の範囲で投薬される。
【０１０９】
（実施例２９：インビトロ虚血（ＯＧＤ）アッセイ）
（神経保護作用パーセントの決定）
本明細書中で使用される場合、用語「保護作用パーセント」は、虚血性傷害（ＯＧＤ）に対して保護されたニューロン細胞のパーセンテージを示し、以下として計算される：
％保護作用＝（テスト−ＯＧＤ）／（正常−ＯＧＤ）×１００。
【０１１０】
このプロトコールは、培養海馬ニューロン細胞において、無酸素−再酸素付加によって実験的虚血を誘導するために使用される手順を記載する。テスト化合物の神経保護効果は、虚血誘導性のニューロン細胞障害およびニューロン細胞死に対して評価される。
【０１１１】
以下の工程を、アッセイの日の前に行った：
ＬｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ［ＬｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌは、ＮｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ，カスタムオーダー）＋０．５ｍＭグルコース、０．５ｍＭ Ｌ−グルタミンおよび０．２５×ペニシリン／ストレプトマイシンを含有する］を、低酸素チャンバーで一晩前平衡化した。
【０１１２】
ＬｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌを、通常のインキュベーター（５％ＣＯ２）で一晩前平衡化した。
【０１１３】
通常のインキュベーター（５％ＣＯ２）中で、Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ２７ＡＯ［Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ２７ＡＯは、２×Ｂ２７−ＡＯサプリメント（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ Ｃａｔ＃１０８８９−０３８）、０．５ｍＭ Ｌ−グルタミン、および０．２５×ペニシリン／ストレプトマイシンを含有するＮｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ Ｃａｔ＃２１１０３−０４９）を含む］を、一晩前平衡化した。
【０１１４】
以下の工程を、アッセイの日に行った：
ＬｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地を低酸素チャンバーから取り出し、この培地を１００％Ｎ２で軽く３０分間泡立て、完全に脱酸素化した。
【０１１５】
Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ２７ｍ培養培地［Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ２７ｍは、２×Ｂ２７サプリメント（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ Ｃａｔ＃１７５０４−０４４）および０．５ｍＭ Ｌ−グルタミンを含有するＮｅｕｒｏｂａｓａｌ培地を含む］を、滅菌ガラスパスツールピペットが取付けられた真空ポンプを用いて、各１２ウェルプレート中の細胞から吸引した。
【０１１６】
プレートを、２ｍｌのグルコースフリーＢＳＳ０（ｐＨ７．４）で一度洗浄し、以下から調製した：１４３．６ｍＭ ＮａＣｌ、５．４ｍＭ ＫＣｌ、１．８ｍＭ ＣａＣｌ２、０．８ｍＭ ＭｇＳＯ４、１ｍＭ ＮａＨ２Ｐ０４、２６．２ｍＭ ＮａＨＣ０３、１０ｍｇ／ｌフェノールレッド、および０．２５×Ｐ／Ｓ。
【０１１７】
ニューロン（最初の培養から１０〜１１日）に、脱酸素化したＬｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ（１２ウェルプレートの各ウェルに対して１ｍｌ／ウェル）を補充した。これらのニューロン細胞を、Ｐａｒｋ ＬＣ，Ｃａｌｉｎｇａｓａｎ ＮＹ，Ｕｃｈｉｄａ Ｋ，Ｚｈａｎｇ Ｈ，Ｇｉｂｓｏｎ ＧＥ．（２０００）「Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ｅｌｉｃｉｔｓ ｂｒａｉｎ ｃｅｌｌ ｔｙｐｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ａｎｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｉｎ ｃｕｌｔｕｒｅ」Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ ７４（１）：１１４−１２４に従って調製した。
【０１１８】
テスト化合物を各ウェルに直接添加した（３種類の濃度の化合物＋ポジティブコントロール、それぞれ三通り）。化合物を、１００％ＤＭＳＯに溶解し（ここで、ＤＭＳＯの濃度は、０．５％を超えない）、次いで、プレートを低酸素チャンバー中に、プレートの蓋が半分開いた状態で５時間置いた。
【０１１９】
酸素正常状態コントロールとして、前平衡化した酸素正常状態のＬｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地を各ウェルに添加し、プレートを通常の培養インキュベーター中に４時間、再度置いた。
【０１２０】
低酸素状態の４時間後、存在している培地を慎重に吸引し、２ｍｌの新しい酸素化した（前平衡化した）Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ２７ＡＯを、各ウェルに添加した。使用前に、培養インキュベーター（５％Ｃ０２／９５％０２）中に一晩置くことによって、再酸素化した培地を獲得した。
【０１２１】
同じ濃度の同じテスト化合物を対応するウェルに戻して加え、このプレートを細胞培養インキュベーター（５％Ｃ０２／９５％０２）中に置き、２０〜２４時間再酸素化した。２０〜２４時間の再酸素化の後、以下に記載する細胞追跡緑色蛍光法（ｃｅｌｌ ｔｒａｃｋｅｒ ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｍｅｔｈｏｄ）を用いて、生存ニューロン数を計数した。
【０１２２】
存在する培養培地を１２ウェルプレートの各ウェルから吸引し、ニューロンを３０〜３７℃に予め温めたＨＢＳＳ（ｐＨ７．４，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ，Ｃａｔ＃１４１７０−１１２）で、一度洗浄した。
【０１２３】
プレートの各ウェルに、ＨＢＳＳ中に溶解させた２．５μＭ Ｃｅｌｌ Ｔｒａｃｋｅｒ Ｇｒｅｅｎ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ Ｃａｔ＃２９２５）および５μＭ Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３３４２蛍光色素を、１ｍｌ添加した。次いで、このプレートを室温で暗所に１５分間置き、次いでニューロンを、２ｍｌのＨＢＳＳで一度洗浄した。各ウェルに１ｍｌのＨＢＳＳを添加し、生存蛍光細胞数および死亡蛍光細胞数を、Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ（登録商標）自動画像化システムを用いて計数した。
【０１２４】
好ましい実施形態において、以下の化合物が、≧５０％のパーセント保護作用値を有することが見出された：Ｉ−１、Ｉ−３、Ｉ−１３、およびＩ１−１８。
【０１２５】
（実施例３０：インビトロＣＮＳ炎症アッセイ：）
このプロトコールは、培養ＣＮＳ混合グリア細胞において、リポ多糖類（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈｒｉｄｅ）（ＬＰＳ）による実験的炎症を誘導するために用いられる手順を記載する。テスト化合物の抗炎症効果を、混合グリア細胞におけるＬＰＳ−誘導性腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）産生に対して評価した。
【０１２６】
以下の工程を、アッセイの日に行った：
混合グリア細胞（最初の培養から７日）に、ＤＭＥＭ（高グルコース：Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ）、Ｆ−１２（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ）、１００％ウシ胎仔血清、および１００×Ｎ−２サプリメント（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ）の５０：５０：１０：１での組み合わせからなる、混合グリア細胞培養培地を補充した。これらの混合グリア細胞を、Ｐａｒｋ ＬＣ，Ｃａｌｉｎｇａｓａｎ ＮＹ，Ｕｃｈｉｄａ Ｋ，Ｚｈａｎｇ Ｈ，Ｇｉｂｓｏｎ ＧＥ．（２０００）「Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ｅｌｉｃｉｔｓ ｂｒａｉｎ ｃｅｌｌ ｔｙｐｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ａｎｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｉｎ ｃｕｌｔｕｒｅ」Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ ７４（１）：１１４−１２４に従って調製した（ある程度の改変を含む）。手短に言えば、ラット胎仔前脳（１〜２日齢）を単離し、粉砕して、５％ＣＯ２インキュベーター中、３７℃で、９６ウェルプレート上で混合グリア培地中に置いた（２０，０００細胞／ウェル）。最初の培養から４日目に、細胞に新しい培地を補充した。
【０１２７】
テスト化合物を、各ウェルに直接添加した（５種類の濃度の化合物＋ポジティブコントロール、それぞれ四通り）。混合物を１００％ＤＭＳＯに溶解した（ここで、ＤＭＳＯの濃度は、０．５％を超えない）。投薬３０分後、５０ｎｇ／ｍｌのリポ多糖類（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈｒｉｄｅ）（ＬＰＳ）を、各ウェルに直接添加し、次いで、このプレートを５％ＣＯ２インキュベーター中に、３７℃で６時間置いた。ＬＰＳ処理の６時間後、存在する培地を慎重に回収し、培地中のＴＮＦ−αの量を検出した。
【０１２８】
混合グリア細胞から産生された、細胞培養培地中におけるＴＮＦ−αの存在の定量的決定を、ＢｉｏｓｏｕｒｃｅラットＴＮＦ−α ＥＬＩＳＡキット（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）によリ提供されるプロトコールおよび試薬に基づいて、固相サンドイッチ酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）法を用いて行った。
【０１２９】
好ましい実施形態において、以下の化合物が、１μＭ以下のＩＣ５０を有することが見出された：Ｉ−１３、Ｉ−１４、およびＩ−１８。
【技術分野】
【０００１】
（発明の技術分野）
本発明は、ヒトの種々の疾患および状態（例えば、いくつか名前を挙げると、虚血性障害、発作における再灌流／虚血、神経変性障害、神経学的障害、炎症性疾患、心臓病、器官低酸素、およびトロンビン誘発性血小板凝集）に有用なイソオキサゾールに関する。本発明はまた、本発明の化合物を含む薬学的に受容可能な組成物、および種々の障害の処置においてこの組成物を用いる方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
脳への血流の減少または脳の破壊から生じる発作は、米国および他の先進国における第３位の死因である。さらに、発作を生き延びた患者は、代表的に、顔面または四肢の麻痺、言語障害、膀胱機能の喪失、嚥下不能または痴呆を含め、長期の障害を有する。
【０００３】
発作は、通常、虚血性（生体組織における酸素の不足から生じる）または出血性（脳における出血を生じる動脈壁における断裂から生じる）のいずれかとして特徴付けられる。大部分の一般的型の発作である虚血性発作は、全ての発作のうちの８０％余を引き起こす。酸素枯渇が虚血性発作において生じた後に、最終的に細胞死となる事象のサイクルが誘発されると考えられる。例えば、タンパク質（例えば、興奮性アミノ酸）が放出され、これが過剰産生された場合、神経細胞を殺傷すると仮定されている。これらのタンパク質は、ニューロンを覆う膜におけるチャネルを開いて、多量のカルシウムを流入させ、そしてこのカルシウムは続いて、ニューロン内で反応して、細胞に損傷を与える有害物質を放出すると考えられる。さらなる仮定は、通常マイナーな分子修復を行う酵素であるＰＡＲＰが、過剰のＡＴＰを取り込むことによる実質的障害に応答し、元々の細胞死領域の周囲のさらなる細胞死をもたらすことを示唆した。さらに、さらなる障害もまた、下流の応答（例えば、炎症性反応）からもたらされることが仮定されている（ｄｅｌ Ｚｏｐｐｏら，Ｂｒａｉｎ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０００，１０，９５−１１２を参照のこと）。
【０００４】
医学研究者は、何十年もの間、虚血性脳発作の有効な早期処置を不首尾ながらも求めてきた。明らかに、虚血性脳組織が動脈血を受けるのが迅速であればあるほど、細胞死および得られる永続的な損傷が低減または予防され得る機会が増す。虚血性発作の初期処置について現在用いられている薬物としては、静脈内血栓崩壊剤（例えば、ｔ−ＰＡ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標））またはストレプトキナーゼ）；および抗凝固剤（例えば、アンクロド、アスプリン（Ａｓｐｒｉｎ）、アグレノックス（Ａｇｇｒｅｎｏｘ）、チエノピリジン（Ｔｈｉｅｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ）およびワルファリン）が挙げられる。しかし、不幸なことに、これらの薬剤の多くは、虚血賞発作の処置において有効でないか、または重篤な副作用に関連している。例えば、チオのピリジン（例えば、チクロジピン（Ｔｉｃｌｏｐｉｄｉｎｅ）（Ｔｉｃｌｉｄ（登録商標））は、可逆的な狼瘡様症状、可逆的な好中球減少および血小板減少に関連している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
発作について現在利用可能な処置選択肢が存在しないことを考慮すると、虚血性障害を低減もしくは予防し得るか、および／または下流の細胞応答から生じる損傷（例えば、炎症性応答）を低減もしくは予防し得る、安全かつ有効な治療薬剤を開発することが所望される。より一般的には、他の虚血性障害および炎症性障害の処置のために有用な治療薬剤を開発することもまた所望される。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（発明の要旨）
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を提供することにより、この必要性に取り組む：
【０００７】
【化１３】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ｎおよびｒは、以下に定義した通りである。
【０００８】
本発明の化合物、およびその薬学的に受容可能な組成物は、種々の障害（いくつか名前を挙げると、神経変性障害、神経学的障害、炎症性障害、虚血性障害、発作における再灌流／虚血、心臓病、アレルギー障害、器官低酸素、およびトロンビン誘発性血小板凝集が挙げられる）を処置するか、予防するかまたはその重篤度を低下させるために有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
（発明の詳細な説明）
（１．本発明の化合物の説明）
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩に関する：
【００１０】
【化１４】
ここで：
ここで：
Ｒ１は、水素またはハロゲンであり；
Ｒ２は、置換されているかまたは置換されていないシクロアルキルであり；
Ｒ３の各出現箇所は、独立して、ハロゲン、アルキル、
【００１１】
【化１５】
であり、ここで、ｍは、０、１または２であり、Ｒ４は、水素またはアルキルであり；
ｒは、０、１または２であり；そして
ｎは、０、１または２である。
【００１２】
本明細書中で用いられる場合、そうでないと示されない限り、以下の定義は、適用されるべきである。
【００１３】
語句「必要に応じて置換された」は、語句「置換されたかまたは置換されていない」と交換可能に用いられる。そうでないと示されない限り、必要に応じて置換された基は、各置換可能な部分の基において置換基を有し得、そして各置換は、他の置換とは独立している。
【００１４】
単独で、またはより大きな部分のうちの一部として用いられる場合、用語「アルキル」、「アルコキシ」、「ヒドロキシアルキル」、「アルコキシアルキル」、および「アルコキシカルボニル」は、１〜１７個の炭素原子（好ましくは１〜４個の炭素原子）を含む、そしてアルケニルの場合は、少なくとも２個の炭素原子および１つの二重結合、そしてアルキニルの場合は少なくとも２個の炭素原子および１つの三重結合を含む、環式および非環式の、置換および非置換の、そして直鎖および分枝鎖の両方を包含する。特定の実施形態では、シクロアルキル基は、好ましくは、５個、６個または７個の炭素原子を含み、そして単環式または二環式であり得る。さらに、シクロアルキル基は、１以上の置換基を含み得る。（Ｒ２によって定義される通りの）シクロアルキル環の飽和炭素上の１個以上の水素原子の置換のための適切な置換基（Ｒ５）としては、以下のうちの１個以上の独立した出現箇所が挙げられる：
【００１５】
【化１６】
ここで、ｑは、０、１または２であり、そしてＲ６の各出現箇所は、独立して、水素またはアルキルである。
【００１６】
置換基または可変基の組み合わせは、このような組み合わせが安定かまたは化学的に実行可能な化合物をもたらす場合にのみ許容され得る。安定な化合物または化学的に実行可能な化合物は、水分または他の化学的に反応性の条件の不存在下で、４０℃以下の温度にて少なくとも１週間保持した場合に実質的に変更されないものである。
【００１７】
そうでないと言及しない限り、本明細書中に示す構造はまた、この構造の全ての立体化学形態（すなわち、各不斉中心について、Ｒ配置およびＳ配置）を包含することを意味する。それゆえ、本発明の単一の立体化学的異性体ならびに鏡像異性体およびジアステレオ異性体の混合物は、本発明の範囲内である。そうでないと言及しない限り、本明細書中に示す構造はまた、１以上の同位体が富化された原子の存在についてのみ異なる化合物を包含することを意味する。例えば、重水素またはトリチウムによる水素の置換または１３Ｃまたは１４Ｃ富化炭素による炭素の置換以外は本発明の構造を有する化合物は、本発明の範囲内にある。このような化合物は、例えば、生物学的アッセイにおける分析ツールまたはプローブとして有用である。
【００１８】
（ＩＩ．特定の例示的化合物の説明）
特定の例示的な実施形態では、上記に直接的に記載される式Ｉの化合物については、Ｒ１は、水素またはフッ素であり；Ｒ２は、置換されているかまたは置換されていないシクロアルキルであり；ｒは、０または１であり；Ｒ３は、アルキル、または−（ＣＨ２）ｍＯＲ４であり；ｍは、０、１または２であり；Ｒ４は、水素またはアルキルであり；そしてｎは、０、１または２である。
【００１９】
他の特定の例示的な実施形態では、Ｒ２は、置換されているかまたは置換されていないシクロヘキシルまたはノルボルニルであり、従って、構造ＩＩおよび構造ＩＩＩを有する化合物が提供される：
【００２０】
【化１７】
ここで、Ｒ１、Ｒ３、ｒおよびｎは、上記および本明細書中のサブセットで定義された通りであり；Ｒ５の各出現箇所は、独立して、以下である：
【００２１】
【化１８】
ここで、ｑは、０、１または２であり、そしてＲ６の各出現箇所は、独立して、水素またはアルキルであり；そしてｐは、０、１または２である。
【００２２】
上記の化合物の特定のサブクラスは、以下においてより詳細に記載される。上記に一般的に記載される化合物（式Ｉ）およびそれらのクラス（例えば、式ＩＩおよび式ＩＩＩ）の各々について、以下のサブセットの任意の組み合わせが、本発明の例示的なサブクラスを記載するために利用され得ることが認識される。特に、特定の好ましいサブクラスとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：
ｉ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでＲ１がＦである化合物；
ｉｉ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでＲ１がＨである化合物；
ｉｉｉ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでＲ２が、置換されているかまたは置換されていないシクロヘキシルである化合物；
ｉｖ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでＲ２が、置換されているかまたは置換されていないノルボルニルである化合物；
ｖ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでＲ３が、アルキル、ＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、またはアルコキシである化合物；
ｖｉ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでｎが０である化合物；
ｖｉｉ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでｎが１である化合物；
ｖｉｉｉ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでｎが２である化合物；
ｉｘ）式ＩＩの化合物であって、ここでｐが０である、化合物；
ｘ）式ＩＩＩの化合物であって、ここでｐが０である、化合物；
ｘｉ）式ＩＩＩの化合物であって、ここでｐが１である、化合物；
ｘｉｉ）式ＩＩＩの化合物であって、ここでｐが２である、化合物；
ｘｉｉｉ）式ＩＩまたはＩＩＩの化合物であって、ここでｐが０または１であり、そしてＲが、独立して、ＯＨまたはアルキルである、化合物；ならびに
ｘｉｖ）上記に一般的に記載され、本明細書中のクラスおよびサブクラスに属する化合物であって、ここでｒが、０または１である化合物。
【００２３】
特定の好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＩを有し、そしてＲ１はＦまたはＨであり；ｐは０であり；ｎは０または１であり；ｒは０または１であり；そしてＲ３は、ＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、アルキルまたはアルコキシである。
【００２４】
特定の他の好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＩＩを有し、そしてＲ１は、ＦまたはＨであり；ｐは、０、１または２であり；Ｒ５の各出現箇所は、独立して、アルキル、ＯＨ、ＣＨ２ＯＨまたはアルコキシであり；ｎは、０または１であり；ｒは、０または１であり；そしてＲ３は、ＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、アルキルまたはアルコキシである。
【００２５】
式Ｉの化合物の代表的例を、表１に以下に示す。
【００２６】
【化１９】
【００２７】
【化２０】
【００２８】
【化２１】
【００２９】
【化２２】
（ＩＩＩ．一般的合成方法論）
本発明の化合物は、以下の一般的スキーム例示されるような類似の化合物について当業者に公知の方法によって、および以下の調製実施例によって、一般的に調製され得る。
【００３０】
以下のスキーム１は、式Ｉの化合物の一般的調製方法を示す。一般に、以下に記載されるように、以下の化合物（例えば、６Ａ、７Ａ、１０Ａおよび１１Ａ）は、当業者に公知の方法を用いて式Ｉ、式ＩＩおよび式ＩＩＩの種々の化合物を形成する際に有用な中間体である。さらに、これらの化合物の合成方法は、ＰＣＴ公報ＷＯ ０１／１２６２１に一般的に記載される。ＰＣＴ公報ＷＯ ０１／１２６２１の内容全体は、本明細書中に参考として援用される。スキーム２は、式Ｉおよび式ＩＩの特定の例示的な化合物（ノルボルニル誘導体およびシクロヘキシル誘導体に関する）の一般的合成方法を示し、ここで、フルオロ置換クロロキシム（ｃｈｌｏｒｏｘｉｍｅ）中間体、ならびに置換されていないかまたはヒドロキシ置換のピペリジニル中間体が利用される。
【００３１】
（スキーム１）
【００３２】
【化２３】
（スキーム２）
【００３３】
【化２４】
（ＩＶ．本発明の化合物の用途）
本発明の化合物は、予想外に、かつ驚くべきことに、虚血性損傷に対するニューロン細胞の保護における増大した能力およびインビトロでのＣＮＳ炎症アッセイにおいてインヒビターとしての増大した能力を示す。本発明において利用される化合物の活性は、インビトロで、インビボで、または細胞株において、当該分野で公知の方法に従ってアッセイされ得る。例示的なインビトロアッセイとしては、インビトロ虚血（ＯＲＧ）アッセイ、およびインビトロＣＮＳ炎症アッセイが挙げられる。インビボでのアッセイとしては、本明細書で以下においてより詳細に記載される通りの、ラットＭＣＡＯ（中大脳動脈閉塞）効力研究が挙げられる。
【００３４】
別の実施形態によれば、本発明は、本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な塩、および薬学的に受容可能なキャリア、アジュバントまたはビヒクルを含む組成物を提供する。本発明の組成物中の化合物の量は、患者における虚血障害、炎症障害、神経変性障害または神経学的障害を処置、予防または軽減するために有効であるような量である。好ましくは、本発明の組成物は、このような組成物を必要とする患者への投与のために処方される。より好ましくは、本発明の組成物は、患者への経口投与のために処方される。
【００３５】
用語「患者」は、本明細書中で用いられる場合、動物を、好ましくは哺乳動物を、そして最も好ましくはヒトを意味する。
【００３６】
用語「薬学的に受容可能なキャリア、アジュバント、またはビヒクル」とは、処方される化合物の薬理学的活性を破壊しない、無毒性のキャリア、アジュバントまたはビヒクルをいう。本発明の組成物において用いられ得る薬学的に受容可能なキャリア、アジュバントまたはビヒクルとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）、緩衝物質（例えば、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分的グリセリド混合物）、水、塩または電解質（例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩）、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂。
【００３７】
本発明の化合物の薬学的に受容可能な塩としては、薬学的に受容可能な無機酸および無機塩基ならびに有機酸および有機塩基由来の塩が挙げられる。適切な酸性塩の例としては以下が挙げられる：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩（ｃａｍｐｈｏｒａｔｅ）、ショウノウスルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸、ジグルコン酸、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、蟻酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモエート（ｐａｌｍｏａｔｅ）、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩（ｐｉｖａｌａｔｅ）、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシレートおよびウンデカン酸塩。他の酸（例えば、シュウ酸）は、それ自体は薬学的に受容可能ではないが、本発明の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な酸付加塩を得る際に中間体として有用な塩の調製において使用され得る。
【００３８】
適切な塩基から誘導される塩としては、アルカリ金属（例えば、ナトリウムおよびカリウム）塩、アルカリ土類金属（例えば、マグネシウム）塩、アルミニウム塩およびＮ＋（Ｃ１〜４アルキル）４塩が挙げられる。本発明はまた、本明細書中で開示される化合物の任意の塩基性窒素含有基の四級化も想定する。水溶性もしくは油溶性または分散性の生成物は、このような四級化によって得られ得る。
【００３９】
本発明の組成物は、経口的に、非経口的に、吸入スプレーによって、局所的に、直腸的に、経鼻的に、頬に、膣に、または移植レザバを介して投与され得る。用語「非経口的」は、本明細書中で使用される場合、皮下、静脈内、筋内、関節内、滑膜内、胸骨内、髄腔内、肝臓内、病巣内および頭蓋内の注射または注入技術を含む。好ましくは、これらの組成物は、経口的に、腹腔内に、または静脈内に投与される。本発明の組成物の無菌の注射可能形態は、水性懸濁液または油性懸濁液であり得る。これらの懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤、および懸濁剤を使用して、当該分野で公知の技術に従って処方され得る。無菌の注射可能な調製物はまた、無毒性の非経口的に受容可能な希釈剤または溶媒中の、無菌の注射可能な溶液または懸濁液であり得る（例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液）。使用され得る受容可能なビヒクルおよび溶媒の中では、水、リンガー液および等張塩化ナトリウム溶液である。さらに、無菌の不揮発性油が、溶媒または懸濁媒体として従来より使用される。
【００４０】
この目的のために、任意の無刺激の揮発性油が使用され得、このような油としては、合成のモノグリセリドまたはジグリセリドが挙げられる。脂肪酸（例えば、オレイン酸）およびそのグリセリド誘導体は、天然の薬学的に受容可能な油（例えば、オリーブ油またはヒマシ油、特にそれらのポリオキシエチル化バージョン）と同様、注射可能物の調製において有用である。これらの油溶液または懸濁液はまた、長鎖アルコールの希釈剤もしくは分散剤（例えば、カルボキシメチルセルロース）または類似の分散剤（これらは、乳濁液および懸濁液を含む薬学的に受容可能な投薬形態の処方物中に一般に使用される）を含み得る。他の一般に使用される界面活性剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ、Ｓｐａｎ）および他の乳化剤またはバイオアベイラビリティー増強剤（これらは、一般に、薬学的に受容可能な固体、液体、または他の投薬形態の製造において使用される）はまた、処方の目的のために使用され得る。
【００４１】
本発明の薬学的に受容可能な組成物は、任意の経口的に受容可能な投薬形態（カプセル剤、錠剤、水性懸濁剤または液剤が挙げられるが、これらに限定されない）で、経口的に投与され得る。経口的使用のための錠剤の場合、一般に使用されるキャリアとしては、ラクトースおよびコーンスターチが挙げられる。滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）もまた、代表的に添加される。カプセル形態での経口投与のために、有用な希釈剤としては、ラクトースおよび乾燥コーンスターチが挙げられる。経口的使用のために水性懸濁液が必要な場合、活性成分は、乳化剤および懸濁剤と組み合わされる。所望の場合、特定の甘味料、香料または着色料もまた、添加され得る。
【００４２】
あるいは、本発明の薬学的に受容可能な組成物は、直腸投与のために坐剤の形態で投与され得る。これらは、薬剤を、適切な非刺激性の賦形剤（これは、室温で固体であるが、直腸温度では液体であり、従って、直腸で溶融して薬物を放出する）と混合することによって調製され得る。このような材料としては、ココアバター、蜜蝋およびポリエチレングリコールが挙げられる。
【００４３】
本発明の薬学的に受容可能な組成物はまた、（特に、処置の標的が局所的適用によって容易に接近可能である領域または器官を含む場合（眼、皮膚または下部腸管の疾患を含む）に）局所的に投与され得る。適切な局所的処方物は、これらの領域または器官のそれぞれについて容易に調製される。
【００４４】
下部腸管に対する局所的適用は、直腸坐剤処方物（上記を参照のこと）または適切な浣腸剤処方物でもたらされ得る。局所的な経皮パッチもまた使用され得る。
【００４５】
局所的適用について、この薬学的に受容可能な組成物は、１つ以上のキャリア中に懸濁または溶解された活性成分を含有する適切な軟膏中に処方され得る。本発明の化合物の局所的投与のためのキャリアとしては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：鉱油、ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化蝋および水。あるいは、この薬学的組成物は、１つ以上の薬学的に受容可能なキャリアに懸濁または溶解された活性成分を含有する適切なローション剤またはクリーム剤中に処方され得る。適切なキャリアとしては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水。
【００４６】
眼科用途のために、この薬学的に受容可能な組成物は、塩化ベンザルコニウムのような保存剤を含むかまたは含まないかのいずれかの、等張のｐＨ調整した滅菌生理食塩水中の微細化懸濁液として、または好ましくは、等張のｐＨ調整した滅菌生理食塩水中の溶液として、処方され得る。あるいは、眼科用途のために、この薬学的に受容可能な組成物は、ワセリンのような軟膏中に処方され得る。
【００４７】
本発明の薬学的に受容可能な組成物はまた、鼻エアロゾルまたは吸入によって投与され得る。このような組成物は、製薬処方の分野で周知の技術に従って調製され、そしてベンジルアルコールもしくは他の適切な保存剤、バイオアベイラビリティーを増強するための吸収促進剤、フッ化炭素、および／または他の従来の可溶化剤もしくは分散剤を使用して、生理食塩水中の溶液として調製され得る。
【００４８】
最も好ましくは、本発明の薬学的に受容可能な組成物は、経口投与のために処方される。
【００４９】
キャリア物質と一緒にされて、単一投薬形態を生成し得る本発明の化合物の量は、処置される宿主および投与の特定の様式に依存して変動する。好ましくは、この組成物は、０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の間のインヒビターの投薬量が、これらの組成物を受ける患者に投与され得るように処方されるべきである。。
【００５０】
任意の特定の患者に対する特定の投薬量および処置レジメンは、種々の因子に依存することもまた理解されるべきであり、この種々の因子としては、使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与時間、排泄の速度、薬物の組合わせ、ならびに処置医の判断および処置されている特定の疾患の重症度が挙げられる。組成物中での本発明の化合物の量はまた、その組成物における特定の化合物に依存する。
【００５１】
処置または予防される特定の状態（または疾患）に依存して、さらなる治療薬剤（これは通常、その状態（または関連する副作用もしくは障害）を処置または予防するために投与される）もまた、本発明の組成物中に存在し得る。本明細書中で用いられる場合、特定の疾患（または状態）を処置または予防するために通常投与されるさらなる治療薬剤は、「処置される疾患または状態について適切である」として公知である。
【００５２】
例えば、発作についての既知の処置としては、以下が挙げられる：Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）、組換え体または遺伝子操作された組織プラスミノーゲンアクチベーター（ｒｔ−ＰＡ）、ヘパリン、グルタミン酸アンタゴニスト、カルシウムアンタゴニスト、オピエートアンタゴニスト、ＧＡＢＡアゴニストおよび抗酸化剤。
【００５３】
本発明の化合物がまた組み合わされ得る薬剤の他の例としてはまた、以下が挙げられるがこれらに限定されない：アルツハイマー病についての処置（Ａｒｉｃｅｐｔｏ（登録商標）およびＥｘｃｅｌｏｎ（登録商標））；パーキンソン病についての処置（例えば、Ｌ−ＤＯＰＡ／カルビドパ、エンタカポン（ｅｎｔａｃａｐｏｎｅ）、ロピンロール（ｒｏｐｉｎｒｏｌｅ）、プラミペキソール（ｐｒａｍｉｐｅｘｏｌｅ）、ブロモクリプチン、ペルゴリド、トリヘキセフェンジル（ｔｒｉｈｅｘｅｐｈｅｎｄｙｌ）、およびアマンタジン）；多発性硬化症（ＭＳ）を処置するための薬剤（例えば、βインターフェロン（例えば、Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）およびＲｅｂｉｆ（登録商標））、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）およびミトキサントロン）；喘息についての処置（例えば、アルブテロールおよびＳｉｎｇｕｌａｉｒ（登録商標））；精神分裂病の処置のための薬剤（例えば、ジプレキサ（ｚｙｐｒｅｘａ）、リスパーダル（ｒｉｓｐｅｒｄａｌ）、セロルール（ｓｅｒｏｑｕｅｌ）、およびハロペリドール）；抗炎症性剤（例えば、コルチコステロイド、ＴＮＦブロッカー、ＩＬ−１ ＲＡ、アザチオプリン、シクロホスファミド、およびスルファサラジン）；免疫調節剤および免疫抑制剤（例えば、シクロスポリン、タクロリムス、ラパマイシン、ミコレノレートモフェチル（ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌａｔｅ ｍｏｆｅｔｉｌ）、インターフェロン、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン、およびスルファサラジン）；神経栄養因子（例えば、アセチルコリンエステラーゼインヒビター、ＭＡＯインヒビター、インターフェロン、抗痙攣剤、イオンチャネルブロッカー、リルゾール（ｒｉｌｕｚｏｌｅ）、および抗パーキンソン症候群剤）；心臓血管疾患を処置するための薬剤（例えば、β−ブロッカー、ＡＣＥインヒビター、利尿剤、硝酸塩、カルシウムチャネルブロッカー、およびスタチン）；肝臓疾患を処置するための薬剤（例えば、コルチコステロイド、コレスチラミン、インターフェロン、および抗ウイルス剤）；血管障害を処置するための薬剤（例えば、コルチコステロイド、抗白血病剤、および増殖因子）；ならびに免疫不全障害を処置するための薬剤（例えば、γグロブリン）。
【００５４】
本発明の組成物中に存在するさらなる治療薬剤の量は、唯一の活性薬剤としてこの治療薬剤を含む組成物中に通常投与される量を超えない。好ましくは、現在開示される組成物中のさらなる治療薬剤の量は、治療的に活性な唯一の薬剤としてこの薬剤を含む組成物中に通常存在する量の約５０％〜１００％の範囲をとる。
【００５５】
別の実施形態によれば、本発明は、神経学的障害、神経変性障害、虚血性障害または炎症性障害を処置するか、予防するかまたはこれらの重篤度を低減する方法に関し、この方法は、本発明の化合物またはこの化合物を含む組成物を被験体（好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒト）に投与する工程を包含する。特定の好ましい実施形態では、本発明は、虚血性障害を処置するか、予防するかまたはこの重篤度を低減する方法に関し、最も好ましくは、発作を処置するか、予防するかまたは発作の重篤度を低減するための方法に関する。
【００５６】
用語「生物学的サンプル」は、本明細書中で使用される場合、細胞培養物またはその抽出物；哺乳動物またはその抽出物から得た生検物質；ならびに血液、唾液、子宮、糞便、精液、涙液、もしくは他の体液、またはそれらの抽出物を包含するが、これらに限定されない。
【００５７】
用語「虚血性障害」は、本明細書中で使用される場合、器官の血管に影響を与える、任意の疾患または状態を包含する。特定の好ましい実施形態では、虚血性障害は、脳の血管に影響を与える、任意の疾患または状態（例えば、いくつか名前を挙げると、発作および一過性の虚血性発作）を包含する。
【００５８】
本発明の化合物によって処置または予防され得る神経変性疾患としては、アルツハイマー病、脳の虚血、または外傷性傷害によって引き起こされた神経変性疾患が挙げられるが
本発明の化合物によって処置または予防され得る例示的な計画的障害および疾患としては、発作および一過性虚血性発作が挙げられるがこれらに限定されない。
【００５９】
本発明の化合物によって処置または予防され得る炎症性疾患としては、急性膵炎、慢性膵炎、喘息、アレルギー、および成人呼吸窮迫症候群が挙げられるがこれらに限定されない。
【００６０】
本発明の化合物によって処置または予防され得る自己免疫疾患としては、糸球体腎炎、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、強皮症、慢性甲状腺炎、グレーヴズ病、自己免疫胃炎、糖尿病、自己免疫溶血性貧血、自己免疫好中球減少、血小板減少、アトピー性皮膚炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、多発性硬化症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬、または移植片対宿主病が挙げられるがこれらに限定されない。
【００６１】
代替の実施形態では、さらなる治療薬剤を含まない組成物を利用する本発明の方法は、上記患者にさらなる治療剤を別々に投与するさらなる工程を包含する。これらのさらなる治療剤を別々に投与する場合、これらは、患者に、本発明の組成物よりも前に、本発明の組成物に続いて、または本発明の組成物の後に投与され得る。
【００６２】
本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な組成物はまた、移植可能な医療用デバイス（例えば、プロテーゼ、人工弁、血管移植片、ステント、およびカテーテル）をコーティングするための組成物中に組み込まれ得る。血管ステントは、例えば、再狭窄（損傷後の血管壁の再狭窄）を克服するために用いられている。しかし、ステントまたは他の移植可能なデバイスを用いる患者は、凝塊形成または血小板活性化の危険性がある。これらの望ましくない効果は、本明細書中に記載される通りの化合物を含む薬学的に受容可能な組成物でこのデバイスを予めコーティングすることによって、防止または緩和され得る。コーティングされた移植可能なデバイスの適切なコーティングおよび一般的な調製は、米国特許第６，０９９，５６２号、同第５，８８６，０２６号；および同第５，３０４，１２１号に開示される。このコーティングは、代表的には、生体適合性ポリマー材料（例えば、ヒドロゲルポリマー、ポリメチルジシロキサン、ポリカプロラクトン、ポリエチレングリコール、ポリ乳酸、エチレン酢酸ビニル、およびこれらの混合物）である。コーティングは、必要に応じて、フルオロシリコーン、ポリサッカリド、ポリエチレングリコール、リン脂質またはこれらの組み合わせの適切なトップコートによってさらに被覆されて、組成物に制御放出特性を与え得る。本発明の化合物でコーティングされた移植可能なデバイスは、本発明の別の実施形態である。
【００６３】
本明細書中に記載される本発明がより完全に理解され得るために、以下の実施例を説明する。これらの実施例は、説明の目的のみのためであり、そして本発明を限定するとは決して解釈されるべきでないことは理解されるべきである。
【実施例】
【００６４】
本明細書中で用いられる場合、用語「Ｒｔ（分）」は、指定したＨＰＬＣ法を用いたときの化合物に関連したＨＰＬＣ保持時間（分）をいう。そうでないと示されない限り、報告された保持時間を得るために利用されるＨＰＬＣ法は、以下の通りである：
方法Ａ：カラム：ライトニング、２．１×５０ｍｍ；勾配：４分間かけて、１００％水（０．１％ ＴＦＡ）→１００％ ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）；流量：０．８ｍＬ／分。
【００６５】
方法Ｂ：カラム：ライトニング、２．１×５０ｍｍ；勾配：４分間かけて、９０％水（０．１％ ＴＦＡ）→９０％ ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）；流量：０．８ｍＬ／分。
【００６６】
方法Ｃ：カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ、３０×１５０ｍｍ；勾配：８分間かけて、１０％→９０％ ＣＨ３ＣＮ／水（０．０１％ＴＦＡ）；流量：１ｍＬ／分；検出：２１０、２２０、２５４、２８０または３００ｎｍ。
【００６７】
方法Ｄ：カラム：Ｄｉａｃｅｌｌ Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＯＪ−Ｈ ２５０×４．６ｍｍ；Ｉｓｏｃｒａｔｉｃ：５％ ＭｅＯＨ／ＣＯ２；圧力：２００バール；温度：４０℃；流量：２ｍＬ／分；検出：２２０ｎｍ。
【００６８】
（実施例１：フルオロ置換クロロオキシム６の調製）
【００６９】
【化２５】
Ａ）２の調製：オーバーヘッド撹拌子および還流凝縮器を備えた５Ｌの３首丸底フラスコにおいて、チオールピリミジン１の塩酸塩４９７．６ｇ（３．０６ｍｏｌ）を、１ＬのＭｅＯＨに懸濁した。６Ｎ ＮａＯＨ溶液（１．２Ｌ、過剰量）を添加し、そして混合物を１５分間攪拌した。この溶液を還流加熱し、そしてヨウ化メチル（１９２ｍＬ、３．０８ｍｏｌ）を少しずつ添加した。この混合物を２時間還流し、冷却し、そしてＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして減圧下でエバポレートして、３４７．３ｇ（８１％）のスルフィドを明黄色オイルとして得た。
【００７０】
【化２６】
Ｂ）３の調製：オーバーヘッド撹拌子を備えた５Ｌの３首丸底フラスコにおいて、４−メチル−２−チオメチルピリミジン（３４４．５ｇ、２．４６ｍｏｌ）を２ＬのＴＨＦ中に溶解した。シュウ酸ジエチル（３３４ｍＬ、２．４６ｍｏｌ）を添加した。ｔ−ブトキシドカリウム（２８６．２２ｇ、２．５５ｍｏｌ）を５０ｇずつ添加した。各部分は、軽度の発熱を生じた。この混合物は迅速に褐色になり、そして最終的に黄色の沈澱物が形成されて濃厚な混合物を形成した。この反応物を１０％ ＮＨ４Ｃｌ水溶液中に注ぎ、そしてＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そしてシリカゲルのプラグを通して濾過した。このプラグを１０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出した。濾液をエバポレートして、褐色固体を得た。この固体を最少量のＣＨ２Ｃｌ２中に溶解した。ヘキサンを添加し、そして溶液を冷却して固体を沈澱させ、この固体を濾過した。濾液をエバポレートし、そして沈澱プロセスを繰り返して、合計４０１．５ｇ（６０％）のケトエステル３を得た。
【００７１】
【化２７】
Ｃ）５の調製：オーバーヘッド撹拌子を備えた３Ｌの３首丸底フラスコにおいて、５６６．６ｇ（４．０７ｍｏｌ）の４−フルオロベンズアルデヒドを、２ＬのＭｅＯＨ中に溶解した。この溶液に、５６５．０ｇ（６．８９ｍｏｌ）の酢酸ナトリウムを添加した。この固体は、完全には溶解しなかった。塩酸ヒドロキシルアミン（３０４．４２ｇ、４．３８ｍｏｌ）を５０ｇずつ添加した。塩酸ヒドロキシルアミンの各々の添加は、軽度の発熱を生じた。白色固体が反応の間に沈澱し、一方、この混合物はそれほど濃厚にはならなかった。この混合物を１時間攪拌した。水を添加し、これは最初に沈澱物を溶解した。より多くの水の添加により、白色結晶固体が沈澱し、この沈澱を濾過し、水で洗浄し、そして減圧下で乾燥して、５５８．３ｇ（９９％）のオキシム５を得た。
【００７２】
【化２８】
Ｄ）フルオロ置換クロロオキシム６の調製：オーバーヘッド撹拌子を備えた３Ｌの３首丸底フラスコにおいて、５５８．３ｇ（４．０１ｍｏｌ）のオキシム５を、２ＬのＤＭＦ中に溶解した。Ｎ−クロロクスシンイミド（５８１．６ｇ、４．３６ｍｏｌ）を３０ｇずつ添加した。誘導器官が観察され、その後、反応が生じた。反応開始時およびＮＣＳの各添加の際に軽度の発熱が観察された。この反応物を一晩攪拌し、そして水中に注いで白色固体を沈澱させた。この固体を濾過し、水で洗浄し、そして減圧下でエバポレートして、３０９．２ｇ（４４％）のクロロオキシム６を白色固体として得た。
【００７３】
（実施例２：臭化物（１０）の調製）
【００７４】
【化２９】
Ａ）７の調製：１Ｌ丸底フラスコにおいて、２４．６ｇ（９０．６ｍＭｏｌ）のケトエステル３を、３００ｍＬのエタノール中に溶解した。この溶液に、１８．６ｇ（１０７ｍＭｏｌ）のクロロオキシム６を添加した。トリエチルアミン（５３ｍＬ、３８０ｍＭｏｌ）をこの溶液に滴下して黄色にし、そして軽度の発熱を生じた。このケトエステルがＴＬＣによってもはや現れなくなるまで（約１時間）、この溶液を攪拌した。この混合物を水中に注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。この抽出物を乾燥し、そしてシリカゲルのプラグにて濾過した。このプラグを２５％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出させた。この濾液を減圧下でエバポレートして、粗製生成物を黄色固体として得た。この固体を最少量のＣＨ２Ｃｌ２中に溶解した。ヘキサンを添加し、そしてこの溶液を冷却して、２９．５ｇ（９０％）のイソオキサゾール７を黄色固体として沈澱させた。
【００７５】
【化３０】
Ｂ）８の調製：５Ｌの３首丸底フラスコにおいて、エステル７（２７８．７ｇ、７７３ｍＭｏｌ）を２ＬのＴＨＦ中に溶解した。メタノール（１Ｌ）を添加した。水素化ホウ素ナトリウム（６３．７０ｇ、１．６７ｍｏｌ）を１０ｇずつ添加した。水素化ホウ素物の各添加によって、いくらかの発泡が生じ、多量の気体が発生した。この溶液を２時間攪拌した。ＴＬＣは、生成物８の混合物およびより低いＲｆスポットを示した。この溶液を１Ｎ ＨＣｌ中に注意深く注ぎ、そしてＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして減圧下でエバポレートした。オイルを最少量のＣＨ２Ｃｌ２中に再度溶解し、ヘキサンを添加し、そしてこの溶液を冷却して、５８ｇのアルコール８を白色固体として沈澱させた。濾液を減圧下で濃縮し、シリカゲルのプラグで濾過した。５％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２でのプラグの溶出により、アルコール８が副生成物から選択的に溶出された。さらに４８ｇのアルコールをこのプラグから回収して、合計１０６ｇ（４２％）の生成物を得た。
【００７６】
【化３１】
Ｃ）９の調製：室温のメタノール（１．５Ｌ）中の８（３１．７４ｇ、１００ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液に、滴下漏斗を介して４５分間かけて水（７５０ｍＬ）中のオキソン（１３５ｇ、２２０ｍＭｏｌ）の溶液を添加した。得られた反応混合物を一晩攪拌した。水を添加し、そして混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして濃縮して、９（３１．９６ｇ、９１．４８ｍＭｏｌ、９１％）を白色固体として提供した。
【００７７】
【化３２】
Ｄ）１０の調製：室温のＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）中の９（３１．９６ｇ、９１．４８ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液に、ＣＢｒ４（４２．４ｇ、１２８ｍＭｏｌ）、続いてＰＰｈ３（２８．８ｇ、１１０ｍＭｏｌ）を添加した。わずかな発熱が観察された。２０分後、さらなるＰＰｈ３（２．００ｇ）を添加した。２時間後、反応物を濃縮した。得られた物質をＥｔＯＨ（５００ｍＬ）中にピックアップし、そして攪拌した。所望の生成物（１０）が溶液から沈澱し、そしてこれを収集し、そしてさらなるＥｔＯＨでリンスして、３２．３ｇ（７８．７ｍＭｏｌ、８６％）の白色固体を得た。
【００７８】
【化３３】
実施例３：ピペリジニル中間体１１の調製：室温のＣＨ３ＣＮ（２０ｍＬ）中の１０（１．６６ｇ、４．０３ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液に、ピペリジン（０．４０６ｍＬ、４．１１ｍＭｏｌ）を添加し、続いてＥｔ３Ｎ（０．５７３ｍＬ、４．１１ｍＭｏｌ）を添加した。６０分後、反応物を濃縮し、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）とＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）との間で分配した。水層をさらなるＣＨ２Ｃｌ２（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、ＳｉＯ２を通して濾過し、そして濃縮して、１．５０ｇ（３．６０ｍＭｏｌ、８９％）の無色オイルを得た。
【００７９】
【化３４】
実施例４：ヒドロキシ置換ピペリジニル中間体１２の調製：室温のＣＨ３ＣＮ（２２０ｍＬ）中の１０（２２．７ｇ、５５．２ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液に、４−ヒドロキシピペリジン（５．５８ｇ、５５．２ｍＭｏｌ）、続いてＥｔ３Ｎ（８．０８ｍＬ、５８．０ｍＭｏｌ）を添加した。９０分後、この反応物を濃縮し、飽和ＮａＨＣＯ３とＣＨ２Ｃｌ２との間で分配した。水層をさらに２回、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ＳｉＯ２を通して濾過し、そして濃縮して、２３．７ｇ（５４．７ｍＭｏｌ、９９．２％の収率）の無色泡状体を得た。
【００８０】
【化３５】
実施例５：Ｉ−１の調製：ＤＭＳＯ（１００ｍＬ）中の１２（２４．８ｇ、５７．３ｍＭｏｌ）およびシクロヘキシルアミン（１３．１ｍＬ、１１５ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液を、７５℃にて４．５時間加熱した。反応物を室温まで冷却した。さらになる当量のシクロヘキシルアミン（６．５ｍＬ、５７ｍＭｏｌ）を添加し、そしてこの溶液を１６時間攪拌し、この間に白色沈澱物が形成された。この固体を濾過によって収集し、そしていくつかの部分のＥｔＯＡｃでリンスした。母液をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水、飽和ＮａＨＣＯ３、およびブラインで洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして濃縮した。得られた固体を少ない部分の熱ＥｔＯＡｃ中に懸濁し、そして濾過した。合わせた固体をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）中で１６時間攪拌し、そして再度濾過した。この濾液をさらなるＥｔＯＡｃでリンスした。得られた固体を減圧下で乾燥して、２４．６ｇ（５４．５ｍＭｏｌ、９５％）の白色の非晶質粉末を得た。
【００８１】
【化３６】
ビスＨＣｌ塩：ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（１：２）中のＩ−１（２．８８ｇ、６．３８ｍＭｏｌ）の溶液を、ＨＣｌ（６．４ｍＬ、ジオキサン中４Ｍ）で処理した。２分後、Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ）を添加し、そして沈澱物がゆっくりと形成された。さらなる２０分間の攪拌後、Ｅｔ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加し、そしてこの溶液を濾過した。固体濾液をいくつかの部分のＥｔ２Ｏでリンスした。収集した固体を減圧下で乾燥して、３．２２ｇ（６．１４ｍＭｏｌ、９６％の収率）の白色粉末を得た。
【００８２】
ＨＰＬＣ（方法Ａ）ｔｒ＝３．０７分；ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ４５２．３（Ｍ＋Ｈ）。
【００８３】
【化３７】
実施例７：Ｉ−３の調製：ＤＭＳＯ（３００ｍＬ）中の１１（２２．６５ｇ、５４．３８ｍＭｏｌ）およびシクロヘキシルアミン（１２．４ｍＬ、１０９ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液を８５℃まで４時間加熱した。反応物を冷却し、水中に注ぎ、そしていくつかの部分のＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして濃縮した。固体残渣をＥｔＯＨから再結晶して、１８．７５ｇ（４３．０５ｍＭｏｌ、７９％）のＩ−３を得た。
【００８４】
【化３８】
ビス−ＨＣｌ塩：ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（１：１）中のＩ−３（１．３２ｇ、３．０４ｍＭｏｌ）の溶液を過剰の過剰のＨＣｌ−Ｅｔ２Ｏ溶液で処理した。数分後、この溶液を濃縮し、そして揮発成分を減圧下で除去して、対応するビス−ＨＣｌ塩（１．５０ｇ、２．９５ｍＭｏｌ、９７％の収率）を白色固体として得た。
【００８５】
ＨＰＬＣ（方法Ａ）ｔｒ＝３．２５分；ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ ４３６．２（Ｍ＋Ｈ）。
【００８６】
【化３９】
【００８７】
【化４０】
（実施例１７：Ｎ−ＣＢｚ−（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンおよびＮ−ＣＢｚ−（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンの調製）
【００８８】
【化４１】
スキーム３に示すように、実施例１９、２０および２１において使用するために、Ｎ−ＣＢｚ−（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンおよびＮ−ＣＢｚ−（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミン（および実施例１８に記載される通りのＨＣｌ塩）を以下の党利に調製する：０℃の水（２２０ｍＬ）中のラセミ２−オキソ−アミノノルボルナン（２２．０ｇ、１９８ｍＭｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（２２．０ｇ、２０７ｍＭｏｌ）の溶液に、クロロギ酸ベンジル（３５．５ｇ、１９８ｍＭｏｌ）を滴下漏斗を介してゆっくりと滴下した。２０分後、さらなる水（１００ｍＬ）をこの反応物に添加し、そして添加をさらに２０分間続けた。添加が完了したら、Ｅｔ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加し、そして反応物を０℃にて１時間維持した。次いで、この反応物を室温まで温め、そしてＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）中に注いだ。層を分配し、そして水層をさらなるＥｔ２Ｏ（３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を１Ｍ ＨＣｌ、１Ｍ ＮａＯＨおよびブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、シリカゲルを通して濾過し、そして濃縮して、白色固体（４７．０ｇ、１９２ｍＭｏｌ、９７％）を得た。
【００８９】
この物質（４３．８ｇ）を、分取ＨＰＬＣ（カラム：ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ（登録商標）ＯＤ−Ｈ（登録商標）、２．１×２５ｃｍ、溶離液：ＣＯ２／ＩＰＡ：９０／１０、３０℃）を用いて分離した。Ｎ−ＣＢｚ−（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミン（１８．９４ｇ、８６．４％の回収率、＞９９％ｅｅ）ＨＰＬＣ：ｔｒ＝３．５１分。Ｎ−ＣＢｚ−（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミン（１９．４２ｇ、８４．１％の回収率、９９％ｅｅ）ＨＰＬＣ：ｔｒ＝３．９０分。
【００９０】
実施例１８：（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−ビシクロ−［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンＨＣｌ円の調製：０℃のトルエン中のＮ−ＣＢｚ−（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミン（１９．４２ｇ、７９．１６ｍＭｏｌ）およびＰｄ（炭素上５％、１．９ｇ）の脱気した溶液を、Ｈ２雰囲気下に配置した。氷浴を除去し、そして反応物を１９時間攪拌した。次いで、ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）を添加し、そして混合物を１５分間攪拌した。この反応物をＣｅｌｉｔｅを通して濾過し、そしてケークをＭｅＯＨ（１００ｍＬ）でリンスした。得られた濾液をＨＣｌ（２．０Ｍ、４５ｍＬ）で処理し、そして１０分間攪拌した。液体の濃縮によって、白色固体（１１．０ｇ，７４．６ｍＭｏｌ，９４．２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、５００ＭＨｚ）δ３．１３（ｄｄ，１Ｈ）、２．３９（ｍ，１Ｈ）、２．３４（ｄ，１Ｈ）、１．８１（ｄｄｄ，１Ｈ）、１．６８−１．５２（複雑なｍ，３Ｈ）、１．４２（ｄｄ，１Ｈ）、１．３４（ｄ，１Ｈ）、１．２３（ｍ，２Ｈ）。
【００９１】
実施例１９：Ｉ−１３の調製：ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中の１２（１６．０ｇ、３７．１ｍＭｏｌ）および（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミン（最終生成物の鏡像純度および絶対的立体配置は、以下の文献の方法に従った合成によって得た（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンまたは（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンを用いて調製された物質を用いたＨＰＬＣ比較に基づいて帰属された。Ｅｄａ，Ｍ；Ｔａｋｅｍｏｔｏ，Ｔ．；Ｏｎｏ，Ｓ．−Ｉ．；Ｏｋａｄａ，Ｔ．，Ｋｏｓａｋａ，Ｋ．；Ｇｏｈｄａ，Ｍ．；Ｍａｔｚｎｏ，Ｓ．；Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｎ．；Ｆｕｋａｙａ，Ｃ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｒｓ．１９９４，３７，１９８３−１９９０およびその中の参考文献を参照のこと）（６．７５ｇ、４４．５ｍＭｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（４．７２ｇ、４４．５ｍＭｏｌ）の攪拌溶液を、７０℃まで０時間加熱した。この反応物を室温まで冷却した。反応物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水中に注ぎ、さらに２つの部分のＣＨ２Ｃｌ２で分配抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ溶離液）によって、１６．０ｇの粘性オイルを得た。１Ｈ ＮＭＲの遊離塩基、Ｉ−１８と同じ。
【００９２】
実施例２０：ビスＨＣｌ塩の調製：ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（１：４）中のＩ−１３（１６．０ｇ）の溶液をＨＣｌ（２．５〜３当量、Ｅｔ２Ｏ中２．０Ｍ）で処理した。数分後、沈澱物が形成され始めた。３０分後、さらなるＥｔ２Ｏを添加し、そしてこの溶液を濾過した。固体濾液を、さらにいくつかの部分のＥｔ２Ｏでリンスした。収集した固体を減圧下で乾燥して、１５．６９ｇ（２９．２５ｍＭｏｌ、７９％の収率）の白色粉末を得た。この物質を、これを温かいＭｅＯＨ中に１５分間懸濁し、そしてＭＴＢＥの添加によって塩析することによってさらに精製した。
【００９３】
ＨＰＬＣ（方法Ａ）ｔｒ＝２．７９分；ＨＰＬＣ（方法Ｃ）ｔｒ＝４．６０分；ＨＰＬＣ（キラル方法Ｄ）ｔｒ＝１４．７４分、（＞９９％ｅｅ）；ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ ４６４．２（Ｍ＋Ｈ）。
【００９４】
実施例２１：Ｉ−１４の調製：これを、（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ）−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルアミンを用いて出発して、実施例Ｉ−１３について記載の通りに調製した。遊離塩基の１Ｈ ＮＭＲは、Ｉ−１８と同じである。
【００９５】
【化４２】
【００９６】
【化４３】
実施例２５：Ｉ−１８の調製：ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中の１２（２．００ｇ、４．６２ｍＭｏｌ）および２−オキソ−ノルボルニルアミン（１．１０ｍＬ、９．２４ｍＭｏｌ）の攪拌した溶液を７５℃まで４時間加熱した。反応物を室温まで冷却した。反応物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水中に注ぎ、２つのさらなる部分のＣＨ２Ｃｌ２で分配抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、そして濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ溶離液）によって、２．０３ｇ（４．３８ｍＭｏｌ、９５％）の無色泡状物を得た。
【００９７】
【化４４】
ビスＨＣｌ塩：ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（１：２）中のＩ−１８（２．０３ｇ、４．３８ｍＭｏｌ）の溶液を、ＨＣｌ（１７．５ｍＬ、Ｅｔ２Ｏ中１Ｍ）で処理した。数分後、沈澱物が形成され始めた。３０分後、さらなるＥｔ２Ｏを添加し、そしてこの溶液を濾過した。固体濾液をさらなるいくつかの部分のＥｔ２Ｏでリンスした。収集した固体を減圧下で乾燥して、１．９３ｇ（３．６０ｍＭｏｌ、８２％の収率）の白色固体を得た。
【００９８】
ＨＰＬＣ（方法Ａ）ｔｒ＝２．７９分；ＨＰＬＣ（方法Ｃ）ｔｒ＝４．５９分；（キラル方法Ｄ）ｔｒ＝１４．８７および１６．８７分；ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ ４６４．３（Ｍ＋Ｈ）。
【００９９】
【化４５】
（実施例２８：ラットＭＣＡＯ有効性の研究）
（一般手順）
ラットをイソフルレンで麻酔して、無菌手術のために準備した。ＭＣＡを管腔内技術を用いて閉塞して、虚血を誘導した（Ｓｃｈｍｉｄ−Ｅｌｓａｅｓｓｅｒなど、Ｓｔｒｏｋｅ，１９９８；２９：２１６２−２１７０）。閉塞を虚血２時間後に除去し、Ｖｅｒｔｅｘにより提供されるＭｅｄ−ｅ−ｃｅｌｌポンプを用いて、ラットに化合物もしくはビヒクルを投薬した。化合物を、Ｉ．Ｐ．注入によってかまたはＩ．Ｖ．注入によって投薬し、２、３、または４投薬量投与において、１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲で投与した。ｉ．ｖ．ボーラスおよび持続注入を、外頸静脈を通じて投与した（ＭＣＡＯ前にカニューレ挿入した）。この実験の全持続時間は、２４、４８、もしくは７２時間である。実験の終わりに、ラット脳を取り出し、氷上において、１×ＰＢＳ中で１０分間冷却した。２ｍｍ厚の冠状切片（７切片／脳）を、１×ＰＢＳ中の２％ＴＴＣによって染色し、そして１０％中性緩衝ホルマリンによって、一晩、後固定（ｐｏｓｔ ｆｉｘ）した。
【０１００】
虚血２時間後、閉塞器を取り外す前に、神経学的欠損基準に基づいて、この動物を研究に含めるかまたは研究から除外するかの決定を行った。０〜３の段階を、以下の神経学的反応：１）回転、２）触覚ひげ反応（ｔａｃｔｉｌｅ ｗｈｉｓｋｅｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ）、および３）尾の懸垂下での前肢の回旋、の各々に対して使用し、そして各動物において反応スコア（０〜９）を計算した。研究に含めるための最小スコアは、５以上である。加えて、早期に死亡した動物は全て研究から除外した。追加の動物を研究に含めて、各群が必要とする最終的な「Ｎ」を確実に得た。
【０１０１】
（測定された生理学的変数）
体温を手術中にモニタリングし、正常値近くに維持した（３６．８〜３７．５℃）。体温を、ＭＣＡＯの時間、虚血にいたる２時間、処置開始時（虚血２時間後、４時間後、または６時間後）、虚血２４時間後、４８時間後、および７２時間後（実験終了時）において記録した。
【０１０２】
体重を、虚血０時間後、２４時間後、４８時間後、および７２時間後に記録した。
【０１０３】
行動学的評価を虚血前、および虚血２時間後、４時間後、６時間後、２４時間後、４８時間後、および７２時間後に行った。
【０１０４】
本発明の化合物を、虚血惹起の２、４、または６時間後、３、または４投薬量投与で、１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲の投薬量で、投与した。一般に、これらの状態下で投与された化合物は、１０％〜７０％保護作用の範囲で％保護作用を示した。
【０１０５】
特定の好ましい実施形態において、化合物は、２−１００ｍｇ／ｋｇの範囲の投与投薬量で虚血惹起２時間後に投与され（ＴＭＣＡＯ（一過性ＭＣＡＯ）またはＰＭＣＡＯ（持続性ＭＣＡＯ）モデル）、約３５〜約７０の範囲内で％保護作用を示す。
【０１０６】
さらに他の好ましい実施形態において、化合物は、ＴＭＣＡＯモデルを用いて、虚血惹起４時間後または６時間後に、２−１５ｍｇ／ｋｇの範囲の投与投薬量で（３または４投薬量投与で）投与され、そして約３０〜約５５の範囲内で％保護作用を示す。
【０１０７】
特定の他の好ましい実施形態において、化合物は、ＴＭＣＡＯモデルを用いて、虚血惹起４時間後に、２−１００ｍｇ／ｋｇの範囲の投与投薬量で（３または４投薬量投与で）投与され、そして約４０〜約５５の範囲内で％保護作用を示す。
【０１０８】
さらに他の好ましい実施形態において、本発明の化合物は、持続注入様式で投薬される。なお別の好ましい実施形態において、化合物は、持続注入様式で０．１２５〜５ｍｇ／ｋｇ／時の範囲で投薬される。
【０１０９】
（実施例２９：インビトロ虚血（ＯＧＤ）アッセイ）
（神経保護作用パーセントの決定）
本明細書中で使用される場合、用語「保護作用パーセント」は、虚血性傷害（ＯＧＤ）に対して保護されたニューロン細胞のパーセンテージを示し、以下として計算される：
％保護作用＝（テスト−ＯＧＤ）／（正常−ＯＧＤ）×１００。
【０１１０】
このプロトコールは、培養海馬ニューロン細胞において、無酸素−再酸素付加によって実験的虚血を誘導するために使用される手順を記載する。テスト化合物の神経保護効果は、虚血誘導性のニューロン細胞障害およびニューロン細胞死に対して評価される。
【０１１１】
以下の工程を、アッセイの日の前に行った：
ＬｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ［ＬｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌは、ＮｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ，カスタムオーダー）＋０．５ｍＭグルコース、０．５ｍＭ Ｌ−グルタミンおよび０．２５×ペニシリン／ストレプトマイシンを含有する］を、低酸素チャンバーで一晩前平衡化した。
【０１１２】
ＬｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌを、通常のインキュベーター（５％ＣＯ２）で一晩前平衡化した。
【０１１３】
通常のインキュベーター（５％ＣＯ２）中で、Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ２７ＡＯ［Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ２７ＡＯは、２×Ｂ２７−ＡＯサプリメント（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ Ｃａｔ＃１０８８９−０３８）、０．５ｍＭ Ｌ−グルタミン、および０．２５×ペニシリン／ストレプトマイシンを含有するＮｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ Ｃａｔ＃２１１０３−０４９）を含む］を、一晩前平衡化した。
【０１１４】
以下の工程を、アッセイの日に行った：
ＬｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地を低酸素チャンバーから取り出し、この培地を１００％Ｎ２で軽く３０分間泡立て、完全に脱酸素化した。
【０１１５】
Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ２７ｍ培養培地［Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ２７ｍは、２×Ｂ２７サプリメント（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ Ｃａｔ＃１７５０４−０４４）および０．５ｍＭ Ｌ−グルタミンを含有するＮｅｕｒｏｂａｓａｌ培地を含む］を、滅菌ガラスパスツールピペットが取付けられた真空ポンプを用いて、各１２ウェルプレート中の細胞から吸引した。
【０１１６】
プレートを、２ｍｌのグルコースフリーＢＳＳ０（ｐＨ７．４）で一度洗浄し、以下から調製した：１４３．６ｍＭ ＮａＣｌ、５．４ｍＭ ＫＣｌ、１．８ｍＭ ＣａＣｌ２、０．８ｍＭ ＭｇＳＯ４、１ｍＭ ＮａＨ２Ｐ０４、２６．２ｍＭ ＮａＨＣ０３、１０ｍｇ／ｌフェノールレッド、および０．２５×Ｐ／Ｓ。
【０１１７】
ニューロン（最初の培養から１０〜１１日）に、脱酸素化したＬｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ（１２ウェルプレートの各ウェルに対して１ｍｌ／ウェル）を補充した。これらのニューロン細胞を、Ｐａｒｋ ＬＣ，Ｃａｌｉｎｇａｓａｎ ＮＹ，Ｕｃｈｉｄａ Ｋ，Ｚｈａｎｇ Ｈ，Ｇｉｂｓｏｎ ＧＥ．（２０００）「Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ｅｌｉｃｉｔｓ ｂｒａｉｎ ｃｅｌｌ ｔｙｐｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ａｎｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｉｎ ｃｕｌｔｕｒｅ」Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ ７４（１）：１１４−１２４に従って調製した。
【０１１８】
テスト化合物を各ウェルに直接添加した（３種類の濃度の化合物＋ポジティブコントロール、それぞれ三通り）。化合物を、１００％ＤＭＳＯに溶解し（ここで、ＤＭＳＯの濃度は、０．５％を超えない）、次いで、プレートを低酸素チャンバー中に、プレートの蓋が半分開いた状態で５時間置いた。
【０１１９】
酸素正常状態コントロールとして、前平衡化した酸素正常状態のＬｏＧ−Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地を各ウェルに添加し、プレートを通常の培養インキュベーター中に４時間、再度置いた。
【０１２０】
低酸素状態の４時間後、存在している培地を慎重に吸引し、２ｍｌの新しい酸素化した（前平衡化した）Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ２７ＡＯを、各ウェルに添加した。使用前に、培養インキュベーター（５％Ｃ０２／９５％０２）中に一晩置くことによって、再酸素化した培地を獲得した。
【０１２１】
同じ濃度の同じテスト化合物を対応するウェルに戻して加え、このプレートを細胞培養インキュベーター（５％Ｃ０２／９５％０２）中に置き、２０〜２４時間再酸素化した。２０〜２４時間の再酸素化の後、以下に記載する細胞追跡緑色蛍光法（ｃｅｌｌ ｔｒａｃｋｅｒ ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｍｅｔｈｏｄ）を用いて、生存ニューロン数を計数した。
【０１２２】
存在する培養培地を１２ウェルプレートの各ウェルから吸引し、ニューロンを３０〜３７℃に予め温めたＨＢＳＳ（ｐＨ７．４，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ，Ｃａｔ＃１４１７０−１１２）で、一度洗浄した。
【０１２３】
プレートの各ウェルに、ＨＢＳＳ中に溶解させた２．５μＭ Ｃｅｌｌ Ｔｒａｃｋｅｒ Ｇｒｅｅｎ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ Ｃａｔ＃２９２５）および５μＭ Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３３４２蛍光色素を、１ｍｌ添加した。次いで、このプレートを室温で暗所に１５分間置き、次いでニューロンを、２ｍｌのＨＢＳＳで一度洗浄した。各ウェルに１ｍｌのＨＢＳＳを添加し、生存蛍光細胞数および死亡蛍光細胞数を、Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ（登録商標）自動画像化システムを用いて計数した。
【０１２４】
好ましい実施形態において、以下の化合物が、≧５０％のパーセント保護作用値を有することが見出された：Ｉ−１、Ｉ−３、Ｉ−１３、およびＩ１−１８。
【０１２５】
（実施例３０：インビトロＣＮＳ炎症アッセイ：）
このプロトコールは、培養ＣＮＳ混合グリア細胞において、リポ多糖類（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈｒｉｄｅ）（ＬＰＳ）による実験的炎症を誘導するために用いられる手順を記載する。テスト化合物の抗炎症効果を、混合グリア細胞におけるＬＰＳ−誘導性腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）産生に対して評価した。
【０１２６】
以下の工程を、アッセイの日に行った：
混合グリア細胞（最初の培養から７日）に、ＤＭＥＭ（高グルコース：Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ）、Ｆ−１２（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ）、１００％ウシ胎仔血清、および１００×Ｎ−２サプリメント（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ）の５０：５０：１０：１での組み合わせからなる、混合グリア細胞培養培地を補充した。これらの混合グリア細胞を、Ｐａｒｋ ＬＣ，Ｃａｌｉｎｇａｓａｎ ＮＹ，Ｕｃｈｉｄａ Ｋ，Ｚｈａｎｇ Ｈ，Ｇｉｂｓｏｎ ＧＥ．（２０００）「Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ｅｌｉｃｉｔｓ ｂｒａｉｎ ｃｅｌｌ ｔｙｐｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ａｎｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｉｎ ｃｕｌｔｕｒｅ」Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ ７４（１）：１１４−１２４に従って調製した（ある程度の改変を含む）。手短に言えば、ラット胎仔前脳（１〜２日齢）を単離し、粉砕して、５％ＣＯ２インキュベーター中、３７℃で、９６ウェルプレート上で混合グリア培地中に置いた（２０，０００細胞／ウェル）。最初の培養から４日目に、細胞に新しい培地を補充した。
【０１２７】
テスト化合物を、各ウェルに直接添加した（５種類の濃度の化合物＋ポジティブコントロール、それぞれ四通り）。混合物を１００％ＤＭＳＯに溶解した（ここで、ＤＭＳＯの濃度は、０．５％を超えない）。投薬３０分後、５０ｎｇ／ｍｌのリポ多糖類（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈｒｉｄｅ）（ＬＰＳ）を、各ウェルに直接添加し、次いで、このプレートを５％ＣＯ２インキュベーター中に、３７℃で６時間置いた。ＬＰＳ処理の６時間後、存在する培地を慎重に回収し、培地中のＴＮＦ−αの量を検出した。
【０１２８】
混合グリア細胞から産生された、細胞培養培地中におけるＴＮＦ−αの存在の定量的決定を、ＢｉｏｓｏｕｒｃｅラットＴＮＦ−α ＥＬＩＳＡキット（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）によリ提供されるプロトコールおよび試薬に基づいて、固相サンドイッチ酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）法を用いて行った。
【０１２９】
好ましい実施形態において、以下の化合物が、１μＭ以下のＩＣ５０を有することが見出された：Ｉ−１３、Ｉ−１４、およびＩ−１８。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化１】
またはその薬学的に受容可能な塩であって、
ここで：
Ｒ１は、水素またはハロゲンであり；
Ｒ２は、置換されているかまたは置換されていないシクロアルキルであり；
Ｒ３の各出現箇所は、独立して、ハロゲン、アルキル、
【化２】
であり、ここで、ｍは、０、１または２であり、Ｒ４は、水素またはアルキルであり；
ｒは、０、１または２であり；そして
ｎは、０、１または２である、化合物またはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項２】
Ｒ１が、水素またはフッ素であり；Ｒ２が、置換されているかまたは置換されていないシクロアルキルであり；ｒが、０または１であり；Ｒ３が、アルキルまたは−（ＣＨ２）ｍＯＲ４であり、ここでｍは、０、１または２であり、Ｒ４は、水素またはアルキルであり；そしてｎが、０、１または２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２が、置換されているかまたは置換されていないノルボルニルであり、化合物が、式ＩＩ：
【化３】
を有し、
ここで、Ｒ１が、水素またはハロゲンであり；
Ｒ３の各出現箇所が、独立して、ハロゲン、アルキル、
【化４】
であり、ここで、ｍが、０、１または２であり、Ｒ４が、水素またはアルキルであり；
ｎが、０、１または２であり；
ｒが、０、１または２であり；
Ｒ５の各出現箇所が、独立して、ハロゲン、アルキル、
【化５】
であり、ここで、ｑが、０、１または２であり、Ｒ６の各出現箇所が、独立して、水素またはアルキルであり；そして
ｐが、０、１または２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２が、置換されているかまたは置換されていないシクロヘキシルであり、化合物が、式ＩＩＩ：
【化６】
を有し、
ここで、Ｒ１が、水素またはハロゲンであり；
Ｒ３の各出現箇所が、独立して、ハロゲン、アルキル、
【化７】
であり、ここで、ｍが、０、１または２であり、Ｒ４が、水素またはアルキルであり；
ｎが、０、１または２であり；
ｒが、０、１または２であり；
Ｒ５の各出現箇所が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、
【化８】
であり、ここで、ｑが、０、１または２であり、Ｒ６の各出現箇所が、独立して、水素またはアルキルであり；そして
ｐが、０、１または２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１がＦである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１がＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
ｒが０であるかまたはｒが１であり、そしてＲ３が、アルキル、ＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、またはアルコキシである、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
ｎが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
ｎが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
ｎが２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
ｐが０である、請求項３に記載の化合物。
【請求項１２】
ｐが０である、請求項４に記載の化合物。
【請求項１３】
ｐが１である、請求項４に記載の化合物。
【請求項１４】
ｐが２である、請求項４に記載の化合物。
【請求項１５】
ｐが０または１であり、そしてＲ５がＯＨまたはアルキルである、請求項３または４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ１がＦまたはＨであり；ｐが０であり；ｎが０または１であり；ｒが０または１であり；そしてＲ３がＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、アルキルまたはアルコキシである、請求項３に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ１がＦまたはＨであり；ｐが０、１または２であり；Ｒ５の各出現箇所が、独立して、アルキル、ＯＨ、ＣＨ２ＯＨまたはアルコキシであり；ｎが０または１であり；ｒが０または１であり；そしてＲ３がＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、アルキルまたはアルコキシである、請求項４に記載の化合物。
【請求項１８】
前記化合物が、以下の構造：
【化９】
【化１０】
【化１１】
【化１２】
のうちの１つを有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
治療有効量の請求項１に記載の化合物および薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤を含む、薬学的組成物。
【請求項２０】
発作についての処置、アルツハイマー病についての処置、パーキンソン病についての処置、多発性硬化症（ＭＳ）を処置するための薬剤、喘息についての処置、精神分裂病を処置するための薬剤、抗炎症剤、免疫調節剤もしくは免疫抑制剤、神経栄養因子、心臓血管疾患を処置するための薬剤、または免疫不全障害を処置するための薬剤から選択されるさらなる治療薬剤をさらに含む、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
神経変性障害、神経学的障害、虚血性障害または炎症性障害を処置するための方法であって、治療有効量の請求項１に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項２２】
前記虚血性障害が、発作である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
以下の工程：
発作についての処置、アルツハイマー病についての処置、パーキンソン病についての処置、多発性硬化症（ＭＳ）を処置するための薬剤、喘息についての処置、精神分裂病を処置するための薬剤、抗炎症剤、免疫調節剤もしくは免疫抑制剤、神経栄養因子、心臓血管疾患を処置するための薬剤、または免疫不全障害を処置するための薬剤から選択されるさらなる治療薬剤を患者に投与する工程をさらに包含し、ここで：
該さらなる治療薬剤が、処置されるべき疾患について適切であり；そして該さらなる治療薬剤が、単一投薬形態として前記組成物と一緒に投与されるか、または複数投薬形態の一部として該組成物とは別に投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
神経変性障害、神経学的障害、虚血性障害または炎症性障害の処置のための医薬の製造における、請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項２５】
前記虚血性障害が、発作である、請求項２４に記載の使用。
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化１】
またはその薬学的に受容可能な塩であって、
ここで：
Ｒ１は、水素またはハロゲンであり；
Ｒ２は、置換されているかまたは置換されていないシクロアルキルであり；
Ｒ３の各出現箇所は、独立して、ハロゲン、アルキル、
【化２】
であり、ここで、ｍは、０、１または２であり、Ｒ４は、水素またはアルキルであり；
ｒは、０、１または２であり；そして
ｎは、０、１または２である、化合物またはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項２】
Ｒ１が、水素またはフッ素であり；Ｒ２が、置換されているかまたは置換されていないシクロアルキルであり；ｒが、０または１であり；Ｒ３が、アルキルまたは−（ＣＨ２）ｍＯＲ４であり、ここでｍは、０、１または２であり、Ｒ４は、水素またはアルキルであり；そしてｎが、０、１または２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２が、置換されているかまたは置換されていないノルボルニルであり、化合物が、式ＩＩ：
【化３】
を有し、
ここで、Ｒ１が、水素またはハロゲンであり；
Ｒ３の各出現箇所が、独立して、ハロゲン、アルキル、
【化４】
であり、ここで、ｍが、０、１または２であり、Ｒ４が、水素またはアルキルであり；
ｎが、０、１または２であり；
ｒが、０、１または２であり；
Ｒ５の各出現箇所が、独立して、ハロゲン、アルキル、
【化５】
であり、ここで、ｑが、０、１または２であり、Ｒ６の各出現箇所が、独立して、水素またはアルキルであり；そして
ｐが、０、１または２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２が、置換されているかまたは置換されていないシクロヘキシルであり、化合物が、式ＩＩＩ：
【化６】
を有し、
ここで、Ｒ１が、水素またはハロゲンであり；
Ｒ３の各出現箇所が、独立して、ハロゲン、アルキル、
【化７】
であり、ここで、ｍが、０、１または２であり、Ｒ４が、水素またはアルキルであり；
ｎが、０、１または２であり；
ｒが、０、１または２であり；
Ｒ５の各出現箇所が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、
【化８】
であり、ここで、ｑが、０、１または２であり、Ｒ６の各出現箇所が、独立して、水素またはアルキルであり；そして
ｐが、０、１または２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１がＦである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１がＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
ｒが０であるかまたはｒが１であり、そしてＲ３が、アルキル、ＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、またはアルコキシである、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
ｎが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
ｎが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
ｎが２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
ｐが０である、請求項３に記載の化合物。
【請求項１２】
ｐが０である、請求項４に記載の化合物。
【請求項１３】
ｐが１である、請求項４に記載の化合物。
【請求項１４】
ｐが２である、請求項４に記載の化合物。
【請求項１５】
ｐが０または１であり、そしてＲ５がＯＨまたはアルキルである、請求項３または４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ１がＦまたはＨであり；ｐが０であり；ｎが０または１であり；ｒが０または１であり；そしてＲ３がＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、アルキルまたはアルコキシである、請求項３に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ１がＦまたはＨであり；ｐが０、１または２であり；Ｒ５の各出現箇所が、独立して、アルキル、ＯＨ、ＣＨ２ＯＨまたはアルコキシであり；ｎが０または１であり；ｒが０または１であり；そしてＲ３がＯＨ、ＣＨ２ＯＨ、アルキルまたはアルコキシである、請求項４に記載の化合物。
【請求項１８】
前記化合物が、以下の構造：
【化９】
【化１０】
【化１１】
【化１２】
のうちの１つを有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
治療有効量の請求項１に記載の化合物および薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤を含む、薬学的組成物。
【請求項２０】
発作についての処置、アルツハイマー病についての処置、パーキンソン病についての処置、多発性硬化症（ＭＳ）を処置するための薬剤、喘息についての処置、精神分裂病を処置するための薬剤、抗炎症剤、免疫調節剤もしくは免疫抑制剤、神経栄養因子、心臓血管疾患を処置するための薬剤、または免疫不全障害を処置するための薬剤から選択されるさらなる治療薬剤をさらに含む、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
神経変性障害、神経学的障害、虚血性障害または炎症性障害を処置するための方法であって、治療有効量の請求項１に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項２２】
前記虚血性障害が、発作である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
以下の工程：
発作についての処置、アルツハイマー病についての処置、パーキンソン病についての処置、多発性硬化症（ＭＳ）を処置するための薬剤、喘息についての処置、精神分裂病を処置するための薬剤、抗炎症剤、免疫調節剤もしくは免疫抑制剤、神経栄養因子、心臓血管疾患を処置するための薬剤、または免疫不全障害を処置するための薬剤から選択されるさらなる治療薬剤を患者に投与する工程をさらに包含し、ここで：
該さらなる治療薬剤が、処置されるべき疾患について適切であり；そして該さらなる治療薬剤が、単一投薬形態として前記組成物と一緒に投与されるか、または複数投薬形態の一部として該組成物とは別に投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
神経変性障害、神経学的障害、虚血性障害または炎症性障害の処置のための医薬の製造における、請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項２５】
前記虚血性障害が、発作である、請求項２４に記載の使用。
【公表番号】特表２００６−５０２１６８（Ｐ２００６−５０２１６８Ａ）
【公表日】平成１８年１月１９日（２００６．１．１９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−５３４６６９（Ｐ２００４−５３４６６９）
【出願日】平成１５年９月８日（２００３．９．８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００３／０２７９０３
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０２２５５５
【国際公開日】平成１６年３月１８日（２００４．３．１８）
【出願人】（５９８０３２１０６）バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド (414)
【氏名又は名称原語表記】ＶＥＲＴＥＸ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＩＮＣＯＲＰＯＲＡＴＥＤ
【住所又は居所原語表記】１３０ Ｗａｖｅｒｌｙ Ｓｔｒｅｅｔ， Ｃａｍｒｉｄｇｅ， Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ ０２１３９−４２４２， Ｕ．Ｓ．Ａ．
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年１月１９日（２００６．１．１９）
【国際特許分類】
【出願日】平成１５年９月８日（２００３．９．８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００３／０２７９０３
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０２２５５５
【国際公開日】平成１６年３月１８日（２００４．３．１８）
【出願人】（５９８０３２１０６）バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド (414)
【氏名又は名称原語表記】ＶＥＲＴＥＸ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＩＮＣＯＲＰＯＲＡＴＥＤ
【住所又は居所原語表記】１３０ Ｗａｖｅｒｌｙ Ｓｔｒｅｅｔ， Ｃａｍｒｉｄｇｅ， Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ ０２１３９−４２４２， Ｕ．Ｓ．Ａ．
【Ｆターム（参考）】
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