ウイルスベクターを使用する制御された遺伝子発現に関する組成物および方法
本発明の核酸構築物は、第１の核酸配列、第２の核酸配列、および第３の核酸配列を含むベクターを含み、該第１の核酸配列は第１の転写制御エレメントに作動可能に連結された目的の配列を含み、該第２の核酸配列は第２の転写制御エレメントに作動可能に連結され、かつ該第１の核酸配列の発現を制御するポリペプチドをコードし、該第３の核酸配列は該第１の転写制御エレメントに作動可能に連結された調節因子標的配列を含み、そして該第１および第２の転写制御エレメントは反対の方向に向いている。この構築物を用いて、本発明は、宿主の効率的なトランスフェクションを提供し、ならびに目的の移入された配列を有する宿主への修飾因子（例えば、テトラサイクリンなどの抗生物質）の単純な投与によって、目的の移入された配列の発現のタイミングおよびレベルの精巧な制御を提供することができる。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１の核酸配列、第２の核酸配列、および第３の核酸配列を含むベクターを含む単一の核酸構築物であって、該第１の核酸配列は第１の転写制御エレメントに作動可能に連結された目的の配列を含み、該第２の核酸配列は第２の転写制御エレメントに作動可能に連結され、かつ該第１の核酸配列の発現を制御するポリペプチドをコードし、該第３の核酸配列は該第１の転写制御エレメントに作動可能に連結された調節因子標的配列を含み、そして該第１および第２の転写制御エレメントは反対の方向に向いている、核酸構築物。
【請求項２】
前記ベクターがウイルスベクターである、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項３】
前記ウイルスベクターが自己不活化している、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項４】
前記第１または第２の転写制御エレメントが他の転写制御エレメントの活性に影響を与える、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項５】
前記第１または第２の転写制御エレメントが並列している、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項６】
リンカー配列が前記第１の転写制御エレメントと第２の転写制御エレメントとの間に位置している、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項７】
前記リンカー配列が染色体インシュレーターである、請求項６に記載の核酸構築物。
【請求項８】
請求項１に記載の核酸構築物を含む細胞株。
【請求項９】
前記調節因子標的配列が少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１０】
前記調節因子標的配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１１】
前記調節因子標的配列が２つのｔｅｔオペレーター配列に隣接したＴＡＴＡボックスを含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１２】
前記調節因子標的配列が配列番号６の配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１３】
前記第１の核酸配列の発現がＣｒｅの存在に依存する、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１４】
前記調節因子標的配列がＴＡＴＡ配列に隣接した選択マーカーを含み、該ＴＡＴＡ配列が少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列に作動可能に連結され、該選択マーカーはｌｏｘ Ｐ部位に隣接し、そして該調節因子配列が前記第１の転写制御エレメントと前記第１の核酸配列の間に位置する、請求項１３に記載の核酸構築物。
【請求項１５】
前記目的の配列が目的のタンパク質をコードする、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１６】
前記コードされるタンパク質がＤＮＡポリメラーゼＩＩＩの転写因子である、請求項１５に記載の核酸構築物。
【請求項１７】
前記目的の配列が、マイクロＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｍＲＮＡの配列である、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１８】
前記第２の核酸配列がテトラサイクリンリプレッサーをコードする核酸配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１９】
前記第２の核酸配列が、核局在化シグナルをコードする核酸配列をさらに含む、請求項１８に記載の核酸構築物。
【請求項２０】
前記コードされている核局在化シグナルがＳＶ４０核局在化シグナルである、請求項１９に記載の核酸構築物。
【請求項２１】
前記第２の核酸配列が配列番号１の配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項２２】
前記第２の核酸配列がＶＰ１６をさらに含む、請求項１８に記載の核酸構築物。
【請求項２３】
前記第２の核酸配列が配列番号２の配列を含む、請求項２２に記載の核酸構築物。
【請求項２４】
前記第２の核酸配列がテトラサイクリンアクチベーターをコードする核酸配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項２５】
前記第２の核酸配列が核局在化シグナルをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２４に記載の核酸構築物。
【請求項２６】
前記コードされる核局在化シグナルがＳＶ４０核局在化シグナルである、請求項２５に記載の核酸構築物。
【請求項２７】
前記第２の核酸配列が配列番号２の配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項２８】
前記第２の核酸配列がＶＰ１６をさらに含む、請求項２４に記載の核酸構築物。
【請求項２９】
前記第２の核酸配列が配列番号３の配列を含む、請求項２８に記載の核酸構築物。
【請求項３０】
第３の転写制御エレメントに作動可能に連結された第４の核酸配列をさらに含み、該第４の核酸配列は第２の目的の配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項３１】
前記第３の転写制御エレメントがプロモーターである、請求項３０に記載の核酸構築物。
【請求項３２】
前記第２の目的の配列が目的のタンパク質をコードする、請求項３１に記載の核酸構築物。
【請求項３３】
前記第２の目的の配列が、マイクロＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｍＲＮＡである、請求項３１に記載の核酸構築物。
【請求項３４】
前記第３の転写制御エレメントが、マウスＨｉ、ヒトＨ１、またはＵ６プロモーターからなる群より選択される、請求項３３に記載の核酸構築物。
【請求項３５】
選択マーカーをコードする配列を含む第４の核酸配列をさらに含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項３６】
前記選択マーカーがＧＦＰまたはＲＦＰからなる群より選択される、請求項３５に記載の核酸構築物。
【請求項３７】
内部リボソーム侵入部位をさらに含む、請求項３５に記載の核酸構築物。
【請求項３８】
前記第１の核酸配列の発現が調節可能である、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項３９】
前記転写制御エレメントがプロモーターまたはエンハンサーからなる群より選択される、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項４０】
前記プロモーターが、ｍＨ１プロモーター、ｈＨ１プロモーター、ＣＡＧプロモーター、ＣＭＶプロモーター、ＣＭＶベースのプロモーター、ニワトリβ−アクチンプロモーター、ユビキチンＣプロモーター、またはＥＦ−１αプロモーターからなる群より選択される、請求項３９に記載の核酸構築物。
【請求項４１】
前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項４０に記載の核酸構築物。
【請求項４２】
前記調節因子標的配列に作動可能に連結された、ＧＡＬ−４をコードする核酸配列をさらに含む、請求項１６に記載の核酸構築物。
【請求項４３】
少なくとも２つのｔｅｔＯ配列を含む、請求項４２に記載の核酸構築物。
【請求項４４】
前記調節因子標的配列が少なくとも１つのｔｅｔ調節因子標的配列を含む、請求項４２に記載の核酸構築物。
【請求項４５】
前記調節因子標的配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項４２に記載の核酸構築物。
【請求項４６】
前記調節因子標的配列が、２つのｔｅｔオペレーター配列に隣接するＴＡＴＡボックスを含む、請求項４２に記載の核酸構築物。
【請求項４７】
前記調節因子標的配列が配列番号６の配列を含む、請求項４２に記載の核酸構築物。
【請求項４８】
第２の調節因子配列および第２の目的の配列に作動可能に連結されたＧＡＬ−４をコードする核酸配列をさらに含み、該第２の目的の配列は第３の転写制御エレメントに作動可能に連結され、該第２の目的の配列は、マイクロＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、およびｓｉＲＮＡからなる群より選択され、そして該第２の調節因子配列は、該ＧＡＬ−４をコードする核酸配列と、該第２の目的の配列との間に配置されている、請求項４２に記載の核酸構築物。
【請求項４９】
前記第２の調節因子標的配列が少なくとも１つの調節因子標的配列を含む、請求項４８に記載の核酸構築物。
【請求項５０】
前記第２の調節因子標的配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項４８に記載の核酸構築物。
【請求項５１】
前記第２の調節因子標的配列が、２つのｔｅｔオペレーター配列に隣接するＴＡＴＡボックスを含む、請求項４８に記載の核酸構築物。
【請求項５２】
前記第２の調節因子標的配列が配列番号６の配列を含む、請求項４８に記載の核酸構築物。
【請求項５３】
前記第３の転写制御エレメントがプロモーターまたはエンハンサーからなる群より選択される、請求項４８に記載の核酸構築物。
【請求項５４】
前記プロモーターが、ｍＨ１プロモーター、ｈＨ１プロモーター、ユビキチンＣプロモーター、またはＥＦ−１αプロモーターからなる群より選択される、請求項５３に記載の核酸構築物。
【請求項５５】
第１の核酸配列、第２の核酸配列、および第３の核酸配列を含むベクターを含む単一の核酸構築物であって、該第１の核酸配列、該第２の核酸配列、および該第３の核酸配列は、単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されており、該第１の核酸配列は目的の配列を含み、該第２の核酸配列は該第１の核酸配列の発現を制御可能であるポリペプチドをコードし、該第３の核酸配列は第１の転写制御エレメントに作動可能に連結された調節因子標的配列を含み、そして該第１の転写制御エレメントは該第１の核酸配列および第２の核酸配列の発現を駆動可能である、核酸構築物。
【請求項５６】
前記ベクターがウイルスベクターである、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項５７】
前記ウイルスベクターが自己不活化している、請求項５６に記載の核酸構築物。
【請求項５８】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む細胞株。
【請求項５９】
前記調節因子標的配列が少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６０】
前記調節因子標的配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６１】
前記調節因子標的配列が２つのｔｅｔオペレーター配列に隣接したＴＡＴＡボックスを含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６２】
前記調節因子標的配列が配列番号６の配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６３】
前記第１の核酸配列の発現がＣｒｅの存在に依存する、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６４】
調節因子配列がＴＡＴＡ配列に隣接した選択マーカーを含み、該ＴＡＴＡ配列が少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列に連結され、該選択マーカーはｌｏｘ Ｐ部位にもまた隣接し、そして該調節因子配列が前記第１の転写制御エレメントと前記第１の核酸配列との間に位置する、請求項６３に記載の核酸構築物。
【請求項６５】
前記目的の配列が目的のタンパク質をコードする、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６６】
前記目的のタンパク質がＤＮＡポリメラーゼＩＩＩの転写因子である、請求項６５に記載の核酸構築物。
【請求項６７】
前記目的の配列が、マイクロＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｍＲＮＡである、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６８】
前記調節因子標的配列に作動可能に連結された、ＧＡＬ−４をコードする核酸配列をさらに含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６９】
配列番号６の配列を含む、請求項６８に記載の核酸構築物。
【請求項７０】
前記調節因子標的配列が少なくとも１つのｔｅｔ調節因子標的配列を含む、請求項６８に記載の核酸構築物。
【請求項７１】
前記調節因子標的配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項６８に記載の核酸構築物。
【請求項７２】
前記調節因子標的配列が、２つのｔｅｔオペレーター配列に隣接するＴＡＴＡボックスを含む、請求項６８に記載の核酸構築物。
【請求項７３】
前記調節因子標的配列が配列番号６の配列を含む、請求項６８に記載の核酸構築物。
【請求項７４】
前記第２の調節因子標的配列および第２の目的の配列に作動可能に連結されたＧＡＬ−４をコードする核酸配列をさらに含み、該第２の目的の配列は第３の転写制御エレメントに作動可能に連結され、該第２の目的の配列は、マイクロＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、およびｓｉＲＮＡからなる群より選択され、そして該第２の調節因子標的配列は、該ＧＡＬ−４をコードする核酸配列と、該第２の目的の配列との間に配置されている、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項７５】
前記第２の調節因子標的配列が少なくとも１つのｔｅｔ調節因子標的配列を含む、請求項７４に記載の核酸構築物。
【請求項７６】
前記第２の調節因子標的配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項７４に記載の核酸構築物。
【請求項７７】
前記第２の調節因子標的配列が、２つのｔｅｔオペレーター配列に隣接するＴＡＴＡボックスを含む、請求項７４に記載の核酸構築物。
【請求項７８】
前記第２の調節因子標的配列が配列番号６の配列を含む、請求項７４に記載の核酸構築物。
【請求項７９】
前記第３の転写制御エレメントがプロモーターまたはエンハンサーからなる群より選択される、請求項７４に記載の核酸構築物。
【請求項８０】
前記プロモーターが、ｍＨ１プロモーターまたは、ｈＨ１プロモーターからなる群より選択される、請求項７９に記載の核酸構築物。
【請求項８１】
前記第２の核酸配列がテトラサイクリンリプレッサーをコードする核酸配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項８２】
前記第２の核酸配列が、核局在化シグナルをコードする核酸配列をさらに含む、請求項８１に記載の核酸構築物。
【請求項８３】
前記コードされる核局在化シグナルがＳＶ４０核局在化シグナルである、請求項８２に記載の核酸構築物。
【請求項８４】
前記第２の核酸配列が配列番号１の配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項８５】
前記第２の核酸配列がＶＰ１６をさらに含む、請求項８１に記載の核酸構築物。
【請求項８６】
前記第２の核酸配列が配列番号２の配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項８７】
前記第２の核酸配列がテトラサイクリンアクチベーターをコードする核酸配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項８８】
前記第２の核酸配列が、核局在化シグナルをコードする核酸配列をさらに含む、請求項８７に記載の核酸構築物。
【請求項８９】
前記コードされる核局在化シグナル配列がＳＶ４０核局在化シグナルである、請求項８８に記載の核酸構築物。
【請求項９０】
前記第２の核酸配列が配列番号２の配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項９１】
前記第２の核酸配列がＶＰ１６をさらに含む、請求項８７に記載の核酸構築物。
【請求項９２】
前記第２の核酸配列が配列番号３の配列を含む、請求項９１に記載の核酸構築物。
【請求項９３】
第３の転写制御エレメントに作動可能に連結された第４の核酸配列をさらに含み、該第４の核酸配列が第２の目的の配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項９４】
前記第３の転写制御エレメントがプロモーターである、請求項９３に記載の核酸構築物。
【請求項９５】
前記第２の目的の配列が目的のタンパク質をコードする、請求項９３に記載の核酸構築物。
【請求項９６】
前記第３の転写制御エレメントがプロモーターである、請求項９３に記載の核酸構築物。
【請求項９７】
前記第２の目的の配列が、マイクロＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｍＲＮＡである、請求項９３に記載の核酸構築物。
【請求項９８】
前記第３の転写制御エレメントが、マウスＨｉプロモーター、ヒトＨ１プロモーター、Ｕ６もしくはユビキチンＣプロモーター、またはＥＦ−１αプロモーターからなる群より選択される、請求項９７に記載の核酸構築物。
【請求項９９】
第４の核酸配列をさらに含み、該第４の核酸配列は選択マーカーをコードする配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１００】
前記選択マーカーがＧＦＰまたはＲＦＰからなる群より選択される、請求項９９の核酸構築物。
【請求項１０１】
内部リボソーム侵入部位をさらに含む、請求項９９に記載の核酸構築物。
【請求項１０２】
前記第１の核酸配列の発現が調節可能である、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０３】
前記転写制御エレメントが、プロモーターまたはエンハンサーからなる群より選択される、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０４】
前記転写制御エレメントが、ＣＭＶプロモーターの３’部分を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０５】
前記転写制御エレメントが、ＣＭＶプロモーターの５’部分を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０６】
前記転写制御エレメントが、β−アクチンプロモーターの一部を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０７】
前記転写制御エレメントがＣＡＧプロモーターを含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０８】
前記転写制御エレメントが、ＣＡＧプロモーターに作動可能に連結された３’ＣＭＶプロモーター配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０９】
前記転写制御エレメントが、配列番号１２の配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１１０】
前記転写制御エレメントが、マウスＨｉプロモーター、ヒトＨ１プロモーター、Ｕ６ユビキチンＣプロモーター、またはＥＦ−１αプロモーターからなる群より選択される、請求項６７に記載の核酸構築物。
【請求項１１１】
ＣＡＧプロモーターの５’末端に融合されたＣＭＶプロモーターの３’末端を含む、二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１２】
配列番号１２に示される配列を含む、請求項１１１に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１３】
前記二方向性プロモーターが調節可能である、請求項１１１に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１４】
前記二方向性プロモーターが構成的である、請求項１１１に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１５】
ＥＦ−１αプロモーターの５’末端に融合されたＣＭＶプロモーターの３’末端を含む二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１６】
配列番号１３に示される配列を含む、請求項１１５に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１７】
前記二方向性プロモーターが調節可能である、請求項１１５に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１８】
前記二方向性プロモーターが構成的である、請求項１１５に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１９】
目的の配列の調節を可能にするのに適切な条件下で、請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程を包含する、目的の配列の発現を選択的に調節する方法。
【請求項１２０】
組換えタンパク質の発現を可能にするのに適切な条件下で、請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程を含む組換えタンパク質を作製する方法であって、目的の配列は、該組換えタンパク質をコードする核酸配列である、方法。
【請求項１２１】
前記標的細胞が糖タンパク質上で均一なグリコシル化パターンを生成する、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２２】
前記標的細胞が、対照細胞と比較してＧｎＴＩ活性が減少している、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２３】
前記目的の配列の調節を可能にするのに適切な条件下で、請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程によって前記標的細胞が産生される、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２４】
請求項１に記載の核酸構築物がインビトロで前記標的細胞に導入される、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２５】
免疫応答を誘発するために十分な量で、請求項１２０に記載の方法によって作製された組換えタンパク質を被験体に導入する工程を包含する、被験体における免疫応答を誘発する方法。
【請求項１２６】
請求項１に記載の核酸構築物がインビボで前記標的細胞に導入される、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２７】
目的の配列の調節を可能にするのに適切な条件下で、請求項５５に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程を包含する、目的の配列の発現を選択的に調節する方法。
【請求項１２８】
組換えタンパク質の発現を可能にするのに適切な条件下で、請求項５５に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程を包含する、組換えタンパク質を作製する方法であって、目的の配列は、該組換えタンパク質をコードする核酸配列である、方法。
【請求項１２９】
前記標的細胞が糖タンパク質上で均一なグリコシル化パターンを生成する、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３０】
前記標的細胞が、対照細胞と比較してＧｎＴＩ活性が減少している、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３１】
請求項３３１に記載の方法を使用して前記標的細胞が産生される、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３２】
前記核酸構築物がインビトロで前記標的細胞に導入される、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３３】
免疫応答を誘発するために十分な量で、請求項１２８に記載の方法によって作製された組換えタンパク質を被験体に導入する工程を包含する、被験体における免疫応答を誘発する方法。
【請求項１３４】
前記核酸構築物がインビボで前記標的細胞に導入される、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３５】
トランスジェニック動物を作製する方法であって、
ａ）請求項１に記載の核酸構築物を接合体に導入する工程；
ｂ）該接合体を分娩まで成長させる工程；
ｃ）そのゲノムが該核酸構築物を含む動物を入手する工程；
ｄ）Ｆ１子孫を得るために、該動物を非トランスジェニック動物と交配させる工程；および
ｅ）そのゲノムが該核酸構築物を含む動物を選択する工程
を包含する、方法。
【請求項１３６】
請求項１に記載の核酸構築物を含む導入遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック動物。
【請求項１３７】
トランスジェニック動物を作製する方法であって、
ａ）請求項５５に記載の核酸構築物を接合体に導入する工程；
ｂ）該接合体を分娩まで成長させる工程；
ｃ）そのゲノムが該核酸構築物を含む動物を入手する工程；
ｄ）Ｆ１子孫を得るために、該動物を非トランスジェニック動物と交配させる工程；および
ｅ）そのゲノムが該核酸構築物を含む動物を選択する工程
を包含する、方法。
【請求項１３８】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む導入遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック動物。
【請求項１３９】
Ｋｉｓｓ−１を発現しているトランスジェニック動物。
【請求項１４０】
Ｋｉｓｓ−１の発現が調節可能である、請求項１３９に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１４１】
請求項１３５に記載の方法を使用して産生される、Ｋｉｓｓ−１を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４２】
請求項１３７に記載の方法を使用して産生される、Ｋｉｓｓ−１を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４３】
請求項１に記載の核酸構築物を含む、Ｋｉｓｓ−１を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４４】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む、Ｋｉｓｓ−１を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４５】
ＦＯＸ Ｐ３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４６】
ＦＯＸ Ｐ３の発現が調節可能である、請求項１４５に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１４７】
請求項１３５に記載の方法を使用して産生される、ＦＯＸ Ｐ３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４８】
請求項１３７に記載の方法を使用して産生される、ＦＯＸ Ｐ３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４９】
請求項１に記載の核酸構築物を含む、ＦＯＸ Ｐ３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５０】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む、ＦＯＸ Ｐ３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５１】
ＮＦκβを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５２】
ＮＦκβの発現が調節可能である、請求項１５１に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１５３】
請求項１３５に記載の方法を使用して産生される、ＮＦκβを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５４】
請求項１３７に記載の方法を使用して産生される、ＮＦκβを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５５】
請求項１に記載の核酸構築物を含む、ＮＦκβを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５６】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む、ＮＦκβを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５７】
マイクロＲＮＡ２２３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５８】
マイクロＲＮＡ２２３の発現が調節可能である、請求項１５７に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１５９】
請求項１３５に記載の方法を使用して産生される、マイクロＲＮＡ２２３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６０】
請求項１３７に記載の方法を使用して産生される、マイクロＲＮＡ２２３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６１】
請求項１に記載の核酸構築物を含む、マイクロＲＮＡ２２３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６２】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む、マイクロＲＮＡ２２３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６３】
Ｃｒｅを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６４】
Ｃｒｅの発現が調節可能である、請求項１６３に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１６５】
請求項４４７に記載の方法を使用して産生される、請求項１６３に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１６６】
請求項４４８に記載の方法を使用して産生される、請求項１６３に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１６７】
請求項１に記載の核酸構築物を含む、Ｃｒｅを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６８】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む、Ｃｒｅを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６９】
請求項１に記載の核酸構築物を含むワクチン。
【請求項１７０】
請求項５５に記載の核酸構築物を含むワクチン。
【請求項１７１】
請求項１６９に記載の組成物を被験体に投与する工程を包含する、被験体における免疫応答を産生する方法。
【請求項１７２】
請求項１７０に記載の組成物を被験体に投与する工程を包含する、被験体における免疫応答を産生する方法。
【請求項１７３】
被験体における免疫応答を産生する方法であって、該免疫応答がＨＩＶに対する免疫応答であり、該方法は請求項１６９に記載の組成物を該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１７４】
被験体における免疫応答を産生する方法であって、該免疫応答がＨＩＶに対する免疫応答であり、該方法は請求項１７０に記載の組成物を該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１７５】
組換えタンパク質を作製する方法であって、
ａ．少なくとも１つのＶＰ１６配列に作動可能に連結された調節配列に作動可能に連結されているプロモーターを含む第１の核酸構築物を標的細胞に導入する工程；
ｂ．該第１の核酸配列の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；
ｃ．工程（ｂ）の細胞に、目的の配列に作動可能に連結された調節因子標的配列を含む第２の核酸構築物を導入する工程であって、
該目的の配列は組換えタンパク質をコードする核酸配列である、工程；および
ｄ．組換えタンパク質の発現を可能にする条件下で、工程（ｃ）の細胞を維持する工程
を包含する、方法。
【請求項１７６】
前記第１の核酸構築物が配列番号４４の配列を含む、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７７】
前記第２の核酸構築物が、調節因子標的配列に作動可能に連結された転写制御エレメントに作動可能に連結されている目的の配列を含む、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７８】
前記目的の配列が、選択マーカーに作動可能に連結されたＩＲＥＳ配列に作動可能に連結されている、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７９】
前記目的の配列が、選択マーカーに作動可能に連結されたＩＲＥＳ様配列に作動可能に連結されている、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１８０】
組換えタンパク質を作製する方法であって、
ａ．少なくとも１つのＶＰ１６配列に作動可能に連結された調節因子配列に作動可能に連結されているプロモーターを含む第１の核酸構築物を標的細胞に導入する工程；
ｂ．目的の配列に作動可能に連結されている調節因子標的配列を含む第２の核酸構築物を、工程（ａ）の同じ標的細胞に導入する工程であって、該目的の配列は組換えタンパク質をコード可能な核酸配列である、工程；ならびに
ｃ．該標的細胞のゲノムへの該第１の核酸配列および第２の核酸配列の組み込みを可能にする条件下に該標的細胞を維持する工程；ならびに
ｄ．該組換えタンパク質の発現を可能にする条件下に工程（ｃ）の細胞を維持する工程
を包含する、方法。
【請求項１８１】
前記第１の核酸構築物が配列番号４４の配列を含む、請求項１８０に記載の方法。
【請求項１８２】
前記第２の核酸構築物が、調節因子標的配列に作動可能に連結された転写制御エレメントに作動可能に連結されている目的の配列を含む、請求項１８０に記載の方法。
【請求項１８３】
前記目的の配列が、選択マーカーに作動可能に連結されたＩＲＥＳ配列に作動可能に連結されている、請求項１８０に記載の方法。
【請求項１８４】
前記目的の配列が、選択マーカーに作動可能に連結されたＩＲＥＳ様配列に作動可能に連結されている、請求項１８０に記載の方法。
【請求項１８５】
被験体における免疫応答を誘発する方法であって、
ａ．請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；および
ｃ．免疫応答を誘発するために十分な量で、該被験体に工程（ｂ）の標的細胞を導入する工程
を包含する、方法。
【請求項１８６】
請求項１に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１８５に記載の方法。
【請求項１８７】
被験体における免疫応答を誘発する方法であって、
ａ．請求項５５に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；および
ｃ．免疫応答を誘発するために十分な量で、該被験体に工程（ｂ）の標的細胞を導入する工程
を包含する、方法。
【請求項１８８】
請求項５５に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１８７に記載の方法。
【請求項１８９】
被験体における免疫応答を誘発する方法であって、
ａ．請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程であって、
請求項１に記載の核酸構築物の転写制御エレメントが調節可能である、工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；および
ｃ．工程（ｂ）の標的細胞を該被験体に導入する工程；および
ｄ．目的の配列の発現を誘導するために十分な量で、請求項１に記載の核酸構築物の転写制御エレメントを調節可能である物質の有効量を該被験体に投与する工程であって、
該目的の配列は、免疫応答を誘導するために十分な量で発現される、工程
を包含する、方法。
【請求項１９０】
請求項１に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１８９に記載の方法。
【請求項１９１】
被験体における免疫応答を誘発する方法であって、
ａ．請求項５５に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；および
ｃ．工程（ｂ）の標的細胞を該被験体に導入する工程；および
ｄ．目的の配列の発現を誘導するために十分な量で、請求項５５に記載の核酸構築物の転写制御エレメントを調節可能である物質の有効量を該被験体に投与する工程であって、
該目的の配列は、免疫応答を誘導するために十分な量で発現される、工程
を包含する、方法。
【請求項１９２】
請求項５５に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９３】
目的のタンパク質に対する抗体を生成する方法であって、
ａ．請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程であって、
請求項１に記載の核酸構築物の転写制御エレメントは調節可能であり、
目的の配列は、目的のタンパク質をコード可能である、工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；
ｃ．工程（ｂ）の細胞を該被験体に導入する工程；
ｄ．該目的の配列の発現を誘導するために十分な量で、請求項１に記載の核酸構築物の転写制御エレメントを調節可能である物質の有効量を該被験体に投与する工程であって、
該目的の配列は、免疫応答を誘導するために十分な量で発現され、そして
該免疫応答が、該目的のタンパク質に対する抗体を生成する、工程
を包含する、方法。
【請求項１９４】
前記方法によって産生される前記抗体を単離する工程をさらに包含する、請求項１９３に記載の方法。
【請求項１９５】
請求項１に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１９３に記載の方法。
【請求項１９６】
目的のタンパク質に対する抗体を生成する方法であって、
ａ．請求項５５に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程であって、
請求項５５に記載の核酸構築物の転写制御エレメントは調節可能であり、
目的の配列は、目的のタンパク質をコード可能である、工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；
ｃ．工程（ｂ）の標的細胞を該被験体に導入する工程；
ｄ．該目的の配列の発現を誘導するために十分な量で、請求項５５に記載の核酸構築物の転写制御エレメントを調節可能である物質の有効量を該被験体に投与する工程であって、
該目的の配列は、免疫応答を誘導するために十分な量で発現され、そして
該免疫応答が、該目的のタンパク質に対する抗体を生成する、工程
を包含する、方法。
【請求項１９７】
前記方法によって産生される前記抗体を単離する工程をさらに包含する、請求項１９６に記載の方法。
【請求項１９８】
請求項５５に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１９６に記載の方法。
【請求項１９９】
目的のタンパク質に対する抗体を生成する方法であって、
ａ．請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程であって、
目的の配列は、目的のタンパク質をコードすることが可能である、工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；および
ｃ．工程（ｂ）の細胞を該被験体に導入する工程であって、
該細胞は、免疫応答を誘導するために十分な量で該目的の配列を発現し、
該免疫応答は、該目的のタンパク質に対する抗体を生成する、工程；
を包含する、方法。
【請求項２００】
前記方法によって産生される前記抗体を単離する工程をさらに包含する、請求項１９９に記載の方法。
【請求項２０１】
請求項１に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１９９に記載の方法。
【請求項２０２】
目的のタンパク質に対する抗体を生成する方法であって、
ａ．請求項５５に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程であって、
請求項５５に記載の核酸構築物の転写制御エレメントは調節可能であり、
目的の配列は、目的のタンパク質をコードすることが可能である、工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；
ｃ．工程（ｂ）の細胞を該被験体に導入する工程であって、
該細胞は、免疫応答を誘導するために十分な量で該目的の配列を発現し、
該免疫応答は、該目的のタンパク質に対する抗体を生成する、工程；
を包含する、方法。
【請求項２０３】
前記方法によって産生される前記抗体を単離する工程をさらに包含する、請求項２０２に記載の方法。
【請求項２０４】
請求項５５に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項２０２に記載の方法。
【請求項２０５】
ｅｆ１αプロモーターの５’末端に融合されたＣＭＶプロモーターの５’末端を含む、二方向性転写制御エレメント。
【請求項２０６】
前記ＣＭＶプロモーターの３’末端に作動可能に連結された調節因子標的配列をさらに含む、請求項２０５に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項２０７】
配列番号５１に記載の配列を含む、請求項２０５に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項２０８】
第１の核酸配列および第２の核酸配列を含むパッケージング構築物であって、該第１の核酸配列はＧａｇポリタンパク質をコードし、該第２の核酸配列はＧａｇ−Ｐｒｏ−Ｐｏｌポリタンパク質をコードし、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、フレームシフトまたは翻訳リードスルーを減少する１個以上の変異を各々含み、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、同じヌクレオチド配列の異なるコード領域から発現され、そして該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物。
【請求項２０９】
ｒｅｖ応答エレメントを含む第３の核酸配列をさらに含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１０】
請求項２０８に記載のパッケージング構築物を含む細胞株。
【請求項２１１】
前記第１の核酸配列と前記第２の核酸配列との間のエレメントをさらに含み、該エレメントは、該第１の核酸配列と該第２の核酸配列の示差的発現を提供する、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１２】
前記第１の核酸配列と前記第２の核酸配列との間の前記エレメントが、内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項２１１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１３】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項２１２に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１４】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項２１２に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１５】
前記内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項２１２に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１６】
少なくとも１つの転写制御エレメントが調節可能である、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１７】
少なくとも１つの転写制御エレメントがテトラサイクリンまたはドキシサイクリンによって調節可能である、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１８】
少なくとも１つの転写制御エレメントが少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１９】
標的である少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２０】
標的である少なくとも１つの転写制御エレメントが配列番号６の配列を含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２１】
少なくとも１つの転写制御エレメントがプロモーターである、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２２】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項２２１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２３】
少なくとも１つの転写制御エレメントが構成的である、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２４】
少なくとも１つの前記構成的転写制御エレメントがプロモーターである、請求項２２３に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２５】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項２２４に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２６】
前記第１の核酸配列が、フレームシフトのために必要とされるｇａｇ配列中の少なくとも１つの点変異を含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２７】
前記第１の核酸配列が配列番号１９のヌクレオチド配列を含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２８】
前記第２の核酸配列が、フレームシフトのために必要とされるｇａｇ−ｐｏｌ配列における単一ヌクレオチド挿入および少なくとも１つの点変異を含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２９】
前記第１の核酸配列が配列番号１１のヌクレオチド配列を含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３０】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列の１つ以上は最適化されたコドンである、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３１】
Ｔａｔをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３２】
Ｒｅｖをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３３】
約９９：１〜約８０：２０の比率でＧａｇおよびＧａｇ−Ｐｏｌを発現することが可能である、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３４】
複製可能でない組換え体を生成することが可能である、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３５】
前記第１の核酸配列が第１の転写制御エレメントに作動可能に連結されており、前記第２の核酸配列が第２の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３６】
前記第１の転写制御エレメントが前記第２の転写制御エレメントよりも強力である、請求項２３５に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３７】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列が反対の方向で発現される、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３８】
少なくとも１つの前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３９】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列が単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２４０】
前記単一の転写制御エレメントが調節可能である、請求項２３９に記載のパッケージング構築物。
【請求項２４１】
前記単一の転写制御エレメントが二方向性プロモーターである、請求項２３９に記載のパッケージング構築物。
【請求項２４２】
前記二方向性プロモーターが調節可能である、請求項２４１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２４３】
請求項２０８に記載のパッケージング構築物、およびエンベロープ糖タンパク質を発現する核酸構築物を含む、パッケージング系。
【請求項２４４】
請求項２０９に記載のパッケージング構築物、およびエンベロープ糖タンパク質を発現する核酸構築物を含む、パッケージング系。
【請求項２４５】
請求項２４３に記載のパッケージング系を使用してウイルス様粒子を作製する方法。
【請求項２４６】
請求項２４４に記載のパッケージング系を使用してウイルス様粒子を作製する方法。
【請求項２４７】
第１の核酸配列および第２の核酸配列を含むパッケージング構築物であって、該第１の核酸配列はＧａｇポリタンパク質をコードし、該第２の核酸配列はＧａｇ−Ｐｒｏポリタンパク質をコードし、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、フレームシフトまたは翻訳リードスルーを減少する１個以上の変異を含み、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、同じヌクレオチド配列の異なるコード領域から発現され、そして該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物。
【請求項２４８】
ｒｅｖ応答エレメントを含む第３の核酸配列をさらに含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２４９】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列の間のエレメントをさらに含み、該エレメントは、該２つの核酸配列の示差的発現を提供する、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５０】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列の間の前記エレメントが内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項２４９に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５１】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項２５０に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５２】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項２５０に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５３】
前記内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項２５０に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５４】
少なくとも１つの転写制御エレメントが調節可能である、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５５】
少なくとも１つの転写制御エレメントがテトラサイクリンまたはドキシサイクリンによって調節可能である、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５６】
少なくとも１つの転写制御エレメントが少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５７】
少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項２５６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５８】
少なくとも１つの転写制御エレメントが配列番号６の配列を含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５９】
少なくとも１つの転写制御エレメントがプロモーターである、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６０】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項２５９に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６１】
１つ以上の前記転写制御エレメントが構成的である、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６２】
前記第１の核酸配列が、フレームシフトのために必要とされるｇａｇ配列中の少なくとも１つの点変異を含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６３】
前記第１の核酸配列が配列番号１９のヌクレオチド配列を含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６４】
前記第２の核酸配列が、フレームシフトのために必要とされるｇａｇ−ｐｏｌ配列における単一ヌクレオチド挿入および少なくとも１つの点変異を含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６５】
前記第２の核酸配列が配列番号２０のヌクレオチド配列を含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６６】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列の１つ以上は最適化されたコドンである、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６７】
Ｔａｔをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６８】
Ｒｅｖをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６９】
約９９：１〜約８０：２０の比率でＧａｇおよびＧａｇ−Ｐｏｌを発現することが可能である、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７０】
複製可能でない組換え体を生成することが可能である、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７１】
前記第１の核酸配列が第１の転写制御エレメントに作動可能に連結されており、前記第２の核酸配列が第２の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７２】
前記第１の転写制御エレメントが前記第２の転写制御エレメントよりも強力である、請求項２７１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７３】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列が反対の方向で発現される、請求項２７１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７４】
前記第１の転写制御エレメントおよび前記第２の転写制御エレメントが同じである、請求項２７１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７５】
前記第１の転写制御エレメントおよび前記第２の転写制御エレメントが異なる、請求項２７１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７６】
少なくとも１つの前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項２７１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７７】
前記標的である第１の核酸配列および第２の核酸配列が単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７８】
前記単一の転写制御エレメントが調節可能である、請求項２７７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７９】
前記単一の転写制御エレメントが二方向性プロモーターである、請求項２７７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２８０】
前記二方向性プロモーターが調節可能である、請求項２７９に記載のパッケージング構築物。
【請求項２８１】
請求項２４７に記載のパッケージング構築物、およびエンベロープ糖タンパク質を発現する核酸構築物を含む、パッケージング系。
【請求項２８２】
請求項２４８に記載のパッケージング構築物、およびエンベロープ糖タンパク質を発現する核酸構築物を含む、パッケージング系。
【請求項２８３】
請求項２８１に記載のパッケージング系を使用してウイルス様粒子を作製する方法。
【請求項２８４】
請求項２８２に記載のパッケージング系を使用してウイルス様粒子を作製する方法。
【請求項２８５】
請求項２４７に記載の標的パッケージング構築物を含む細胞株。
【請求項２８６】
第１の核酸配列、第２の核酸配列、および第３の核酸配列を含むパッケージング構築物であって、該第１の核酸配列はＧａｇポリタンパク質をコードし、該第２の核酸配列はＧａｇ−Ｐｒｏポリタンパク質をコードし、該第３の核酸配列はＶｐｒ−逆転写酵素−インテグラーゼタンパク質をコードし、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列はフレームシフトまたは翻訳リードスルーを減少する１個以上の変異を含み、該第１の核酸配列、該第２の核酸配列、および該第３の核酸配列は、同じヌクレオチド配列の異なるコード領域から発現され、そして該第１の核酸配列、該第２の核酸配列、および該第３の核酸配列は、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物。
【請求項２８７】
前記第１の核酸配列と前記第２の核酸配列との間のエレメントをさらに含み、該エレメントは、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列の示差的発現を提供する、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２８８】
示差的発現を提供する、前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列の間の前記エレメントが内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項２８７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２８９】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項２８８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９０】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項２８８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９１】
前記内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項２８８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９２】
少なくとも１つの転写制御エレメントが調節可能である、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９３】
少なくとも１つの転写制御エレメントがテトラサイクリンまたはドキシサイクリンによって調節可能である、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９４】
少なくとも１つの転写制御エレメントが少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９５】
少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項２９４に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９６】
少なくとも１つの転写制御エレメントが配列番号６の配列を含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９７】
少なくとも１つの転写制御エレメントがプロモーターである、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９８】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項２９７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９９】
１つ以上の前記転写制御エレメントが構成的である、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３００】
少なくとも１つの前記構成的転写制御エレメントがプロモーターである、請求項２９９に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０１】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項３００に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０２】
前記第１の核酸配列が、フレームシフトのために必要とされるｇａｇ配列中の少なくとも１つの点変異を含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０３】
前記第１の核酸配列が配列番号１９のヌクレオチド配列を含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０４】
前記第２の核酸配列が、フレームシフトのために必要とされるｇａｇ−ｐｏｌ配列における単一ヌクレオチド挿入および少なくとも１つの点変異を含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０５】
前記第２の核酸配列が配列番号２０のヌクレオチド配列を含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０６】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列の１つ以上は最適化されたコドンである、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０７】
Ｔａｔをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０８】
Ｒｅｖをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０９】
約９９：１〜約８０：２０の比率でＧａｇおよびＧａｇ−Ｐｏｌを発現することが可能である、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１０】
複製可能でない組換え体を生成することが可能である、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１１】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列が第１の転写制御エレメントに作動可能に連結されており、前記第３の核酸配列が第２の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１２】
前記第１の転写制御エレメントが前記第２の転写制御エレメントよりも強力である、請求項３１１に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１３】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列または前記第３の核酸配列が反対の方向で発現される、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１４】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列が第１の転写制御エレメントに作動可能に連結されており、前記第３の核酸配列が第２の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３１３に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１５】
少なくとも１つの前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項３１４に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１６】
前記第１の核酸配列、前記第２の核酸配列、および前記第３の核酸配列が単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３１３に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１７】
前記単一の転写制御エレメントが調節可能である、請求項３１６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１８】
前記単一の転写制御エレメントが二方向性プロモーターである、請求項３１６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１９】
前記二方向性プロモーターが調節可能である、請求項３１８に記載のパッケージング構築物。
【請求項３２０】
前記第１の核酸配列または前記第２の核酸配列と前記第３の核酸配列との間のエレメントをさらに含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物であって、該第３の核酸配列は、該第１の核酸配列と該第２の核酸配列の間に配置されず、該エレメントは、該第１の核酸配列または該第２の核酸配列と、該第３の核酸配列との間の示差的発現を提供する、構築物。
【請求項３２１】
前記エレメントが内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項３２０に記載のパッケージング構築物。
【請求項３２２】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項３２１に記載のパッケージング構築物。
【請求項３２３】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項３２１に記載のパッケージング構築物。
【請求項３２４】
前記内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項３２１に記載のパッケージング構築物。
【請求項３２５】
請求項２８６に記載のパッケージング構築物、およびエンベロープ糖タンパク質を発現する核酸構築物を含む、パッケージング系。
【請求項３２６】
請求項３２５に記載のパッケージング系を使用してウイルス様粒子を作製する方法。
【請求項３２７】
発現系であって、
ａ．請求項２０８、２４７、または２８６に記載のパッケージング構築物；
ｂ．エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸配列を含むエンベロープ核酸構築物であって、該エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸配列が、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物；および
ｃ．１つ以上の目的の遺伝子を含む遺伝子移入構築物
を含む、発現系。
【請求項３２８】
テトラサイクリントランス活性化因子をコードする核酸に作動可能に連結された、核局在化シグナルをコードする核酸配列を含む核局在化シグナルをコードする構築物をさらに含む、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３２９】
前記核局在化シグナルをコードする構築物が転写制御エレメントをさらに含む、請求項３２８に記載の発現系。
【請求項３３０】
前記転写制御エレメントがプロモーターまたはエンハンサーである、請求項３２９に記載の発現系。
【請求項３３１】
前記核局在化シグナルをコードする核酸配列が少なくとも１つのリンカー配列と隣接している、請求項３２８に記載の発現系。
【請求項３３２】
前記リンカー配列が配列番号１５をコードする、請求項３３１に記載の発現系。
【請求項３３３】
前記核局在化シグナルをコードする構築物が、５’から３’へサイトメガロウイルスプロモーター、第１のリンカーをコードする配列、第２の核局在化シグナル、第２のリンカー配列、およびテトラサイクリントランス活性化因子をコードする配列を含み、該コードされるリンカーが配列番号１５である、請求項３２８に記載の発現系。
【請求項３３４】
前記エンベロープ糖タンパク質が細胞への侵入を促進する、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３３５】
前記エンベロープ糖タンパク質がウイルスエンベロープ糖タンパク質である、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３３６】
前記ウイルスエンベロープ糖タンパク質が水疱性口内炎ウイルスのＧタンパク質（ＶＳＶ−Ｇ）である、請求項３３５に記載の発現系。
【請求項３３７】
前記遺伝子移入構築物がマーカーをコードする配列をさらに含み、前記目的の遺伝子および該マーカーをコードする配列が少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３３８】
前記遺伝子移入構築物が２つの目的の配列を含む、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３３９】
前記遺伝子移入構築物が前記目的の遺伝子の３’に位置するウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメントをさらに含む、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３４０】
前記遺伝子移入構築物が１つ以上の長い末端反復配列を含む、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３４１】
前記遺伝子移入構築物が３’の長い末端反復配列に変異を含む、請求項３４０に記載の発現系。
【請求項３４２】
プロモーター配列が５’または３’の長い末端反復配列の代わりに置換されている、請求項３４０に記載の発現系。
【請求項３４３】
前記遺伝子移入構築物の少なくとも１つの転写制御エレメントがプロモーターである、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３４４】
前記遺伝子移入構築物の前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３４５】
前記遺伝子移入構築物の前記転写制御エレメントが調節因子構築物をさらに含み、該調節因子構築物が少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結された調節可能エレメントを含む、請求項３４４に記載の発現系。
【請求項３４６】
前記遺伝子移入構築物が、前記目的の遺伝子と前記マーカーをコードする配列との間のエレメントをさらに含み、該エレメントが、該目的の遺伝子および該マーカーをコードする配列の示差的発現を提供する、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３４７】
前記目的の遺伝子と前記マーカーをコードする配列との間の前記エレメントが、内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項３４６に記載の発現系。
【請求項３４８】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項３４７に記載の発現系。
【請求項３４９】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項３４７に記載の発現系。
【請求項３５０】
前記内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項３４７に記載の発現系。
【請求項３５１】
前記遺伝子移入構築物が少なくとも１つの転写制御エレメントを含む、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３５２】
前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３５３】
前記転写制御エレメントがテトラサイクリンまたはドキシサイクリンによって調節可能である、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３５４】
少なくとも１つの転写制御エレメントが少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３５５】
少なくとも１つの転写制御エレメントが配列番号６の配列を含む、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３５６】
前記転写制御エレメントがプロモーターである、請求項３５１に記載の発現系。
【請求項３５７】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項３５６に記載の発現系。
【請求項３５８】
前記遺伝子移入構築物の少なくとも１つの転写制御エレメントが構成的である、請求項３５１に記載の発現系。
【請求項３５９】
前記構成的転写制御エレメントがプロモーターである、請求項３５８に記載の発現系。
【請求項３６０】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項３５９に記載の発現系。
【請求項３６１】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が異なる転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３６２】
前記マーカーをコードする配列に作動可能に連結された前記転写制御エレメントが、前記目的の遺伝子に作動可能に連結された前記転写制御エレメントよりも強力である、請求項３６１に記載の発現系。
【請求項３６３】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が反対の方向で発現される、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３６４】
少なくとも１つの前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項３６３に記載の発現系。
【請求項３６５】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３６３に記載の発現系。
【請求項３６６】
前記単一の転写制御エレメントが調節可能である、請求項３６５に記載の発現系。
【請求項３６７】
前記単一の転写制御エレメントが二方向性プロモーターである、請求項３６６に記載の発現系。
【請求項３６８】
請求項３２７に記載の発現系を含む細胞株。
【請求項３６９】
発現系であって、
ａ．Ｇａｇポリタンパク質をコードする核酸配列を含む第１の核酸構築物を含む第１のパッケージング構築物であって、該Ｇａｇをコードする核酸配列は、フレームシフトまたは翻訳リードスルーを減少する１個以上の変異を含み、かつ少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物；
ｂ．Ｇａｇ−Ｐｏｌポリタンパク質をコードする核酸配列を含む第２の核酸構築物を含む第２のパッケージング構築物であって、該Ｇａｇ−Ｐｏｌをコードする核酸配列は、フレームシフトまたは翻訳リードスルーを減少する１個以上の変異を含み、かつ少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物；
ｃ．エンベロープ糖タンパク質をコードする第３の核酸配列を含む第３の核酸構築物であって、該第３の核酸配列が少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物；および
ｄ．少なくとも１つの目的の遺伝子を含む遺伝子移入構築物
を含む、発現系。
【請求項３７０】
請求項３６９に記載の発現系を含む細胞株。
【請求項３７１】
テトラサイクリントランス活性化因子コーディングに作動可能に連結された核局在化シグナルをコードする第４の核酸配列を含む第４の核酸構築物をさらに含む、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３７２】
前記第４の核酸構築物が転写制御エレメントをさらに含む、請求項３７１に記載の発現系。
【請求項３７３】
前記核局在化シグナルをコードする配列が少なくとも１つのリンカー配列と隣接している、請求項３７１に記載の発現系。
【請求項３７４】
前記リンカー配列が配列番号１５をコードする、請求項３７３に記載の発現系。
【請求項３７５】
前記第４の核酸配列が、５’から３’へ、サイトメガロウイルスプロモーター、配列番号１５をコードする核酸配列、核局在化シグナルをコードする核酸配列、配列番号１５をコードする核酸配列、およびテトラサイクリントランス活性化因子をコードする核酸配列を含む、請求項３７１に記載の発現系。
【請求項３７６】
前記ウイルスエンベロープ糖タンパク質が水疱性口内炎ウイルスのＧタンパク質（ＶＳＶ−Ｇ）である、請求項３７１に記載の発現系。
【請求項３７７】
前記遺伝子移入構築物がマーカーをコードする配列をさらに含み、前記目的の遺伝子および該マーカーをコードする配列が少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３７８】
前記遺伝子移入構築物が第２の目的の遺伝子をさらに含む、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３７９】
前記遺伝子移入構築物が、前記目的の遺伝子と前記マーカーをコードする配列との間のエレメントをさらに含み、該エレメントは、該目的の遺伝子および該マーカーをコードする配列の示差的発現を提供する、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３８０】
前記目的の遺伝子と前記マーカーをコードする配列との間のエレメントが、内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項３７９に記載の発現系。
【請求項３８１】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項３８０に記載の発現系。
【請求項３８２】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項３８０に記載の発現系。
【請求項３８３】
前記内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項３８０に記載の発現系。
【請求項３８４】
前記遺伝子移入構築物が少なくとも１つの転写制御エレメントを含む、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３８５】
前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３８６】
前記転写制御エレメントがテトラサイクリンまたはドキシサイクリンによって調節可能である、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３８７】
少なくとも１つの転写制御エレメントが少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３８８】
少なくとも１つの転写制御エレメントが配列番号６の配列を含む、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３８９】
前記転写制御エレメントがプロモーターである、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３９０】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項３８９に記載の発現系。
【請求項３９１】
少なくとも１つの転写制御エレメントが構成的である、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３９２】
前記構成的転写制御エレメントがプロモーターである、請求項３９１に記載の発現系。
【請求項３９３】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項３９２に記載の発現系。
【請求項３９４】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が異なる転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３７７に記載の発現系。
【請求項３９５】
前記マーカーをコードする配列に作動可能に連結された前記転写制御エレメントが、前記目的の遺伝子に作動可能に連結された前記転写制御エレメントよりも強力である、請求項３９４に記載の発現系。
【請求項３９６】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が反対の方向で発現される、請求項３７７に記載の発現系。
【請求項３９７】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が２つの異なる転写制御エレメントに作動可能に連結される、請求項３９６に記載の発現系。
【請求項３９８】
少なくとも１つの前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項３９７に記載の発現系。
【請求項３９９】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３９６に記載の発現系。
【請求項４００】
前記単一の転写制御エレメントが調節可能である、請求項３９９に記載の発現系。
【請求項４０１】
前記単一の転写制御エレメントが二方向性プロモーターである、請求項３９９に記載の発現系。
【請求項４０２】
ウイルス様粒子を作製する方法であって、
ａ．請求項２０８、２４７、または２８６に記載のパッケージング核酸構築物を細胞に導入する工程；および
ｂ．エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸配列を含むエンベロープ構築物を該細胞に導入し、該エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸配列は、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、工程；および
ｃ．ウイルス様粒子の形成を可能にする条件下に該細胞を維持する工程
を包含する、方法。
【請求項４０３】
遺伝子移入方法であって
ａ．請求項２０８、２４７、または２８６に記載のパッケージング核酸構築物を細胞に導入する工程；および
ｂ．エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸配列を含むエンベロープ構築物を該細胞に導入し、該エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸配列は、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、工程；
ｃ．１つ以上の目的の遺伝子を含む遺伝子移入構築物を該細胞に導入する工程；および
ｄ．ウイルス様粒子の形成を可能にする条件下に該細胞を維持する工程
を包含する、方法。
【請求項４０４】
前記遺伝子移入構築物がマーカーをコードする核酸配列をさらに含み、前記目的の遺伝子および該マーカーをコードする核酸配列が少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項４０３に記載の方法。
【請求項４０５】
前記遺伝子移入構築物が、前記目的の遺伝子の３’に位置するウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメントをさらに含む、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４０６】
前記遺伝子移入構築物の前記転写制御エレメントがプロモーターである、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４０７】
前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４０８】
前記遺伝子移入構築物が、前記目的の遺伝子と前記マーカーをコードする配列との間のエレメントをさらに含み、該エレメントが、該目的の遺伝子および該マーカーをコードする配列の示差的発現を提供する、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４０９】
前記目的の遺伝子と前記マーカーをコードする配列との間の前記エレメントが、内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項４０８に記載の方法。
【請求項４１０】
前記内部リボソーム侵入部位または前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項４０９に記載の方法。
【請求項４１１】
前記内部リボソーム侵入部位も前記内部リボソーム侵入部位様エレメントも天然に存在しない、請求項４０９に記載の方法。
【請求項４１２】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項４０９に記載の方法。
【請求項４１３】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項４０９に記載の方法。
【請求項４１４】
前記内部リボソーム侵入部位または前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項４０９に記載の遺伝子移入構築物。
【請求項４１５】
前記遺伝子移入構築物が少なくとも１つの転写制御エレメントを含む、請求項４０３に記載の方法。
【請求項４１６】
前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項４１５に記載の方法。
【請求項４１７】
少なくとも１つの転写制御エレメントがテトラサイクリンまたはドキシサイクリンによって調節可能である、請求項４１５に記載の方法。
【請求項４１８】
少なくとも１つの転写制御エレメントが少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項４１５に記載の方法。
【請求項４１９】
少なくとも１つの転写制御エレメントが配列番号６の配列を含む、請求項４１５に記載の方法。
【請求項４２０】
前記転写制御エレメントがプロモーターである、請求項４１５に記載の方法。
【請求項４２１】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項４２０に記載の方法。
【請求項４２２】
少なくとも１つの転写制御エレメントが構成的である、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４２３】
前記構成的転写制御エレメントがプロモーターである、請求項４２２に記載の方法。
【請求項４２４】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項４２３に記載の方法。
【請求項４２５】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が異なる転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４２６】
前記目的の遺伝子に作動可能に連結された前記転写制御エレメントが、前記マーカーをコードする配列に作動可能に連結された前記転写制御エレメントよりも強力である、請求項４２５に記載の方法。
【請求項４２７】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が反対の方向で発現される、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４２８】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が２つの異なる転写制御エレメントに作動可能に連結される、請求項４２７に記載の方法。
【請求項４２９】
少なくとも１つの前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項４２８に記載の方法。
【請求項４３０】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項４２７に記載の方法。
【請求項４３１】
前記単一の転写制御エレメントが調節可能である、請求項４３０に記載の方法。
【請求項４３２】
前記単一の転写制御エレメントが二方向性プロモーターである、請求項４２７に記載の方法。
【請求項４３３】
前記二方向性プロモーターが調節可能である、請求項４３０に記載の方法。
【請求項４３４】
テトラサイクリントランス活性化因子をコードする核酸配列に作動可能に連結された核局在化シグナルをコードする核酸配列を含む核局在化シグナルをコードする構築物を前記細胞に導入する工程をさらに包含する、請求項４２７に記載の方法。
【請求項４３５】
前記核局在化シグナルをコードする構築物が転写制御エレメントをさらに含む、請求項４３４に記載の方法。
【請求項４３６】
前記転写制御エレメントがプロモーターまたはエンハンサーである、請求項４３５に記載の方法。
【請求項４３７】
前記核局在化シグナルをコードする配列が少なくとも１つのリンカー配列と隣接している、請求項４３４に記載の方法。
【請求項４３８】
前記リンカー配列が配列番号１５をコードする、請求項４３７に記載の方法。
【請求項４３９】
前記核局在化シグナルをコードする構築物が、５’から３’へ、サイトメガロウイルスプロモーター、配列番号１５をコードする核酸配列、核局在化シグナルをコードする核酸配列、配列番号１５をコードする核酸配列、およびテトラサイクリントランス活性化因子をコードする核酸配列を含む、請求項４３４に記載の方法。
【請求項４４０】
目的の外因性遺伝子を含む細胞であって、該目的の遺伝子が、請求項４０３に記載の方法によって該細胞に移入される、細胞。
【請求項４４１】
細胞による組換えタンパク質の発現を可能にするのに適切な条件下で、請求項４０２に記載の方法によって作製されたウイルス粒子と標的細胞を接触させる工程を包含する、組換えタンパク質を作製する方法。
【請求項４４２】
免疫応答を誘発するために十分な量で、請求項４４１に記載の方法によって作製された組換えタンパク質を被験体に導入する工程を包含する、被験体における免疫応答を誘導する方法。
【請求項４４３】
前記標的細胞が糖タンパク質上で均一なグリコシル化パターンを生成する、請求項４４２に記載の方法。
【請求項４４４】
前記標的細胞は、対照細胞と比較してＧｎＴＩ活性が減少している、請求項４４３に記載の方法。
【請求項４４５】
請求項４４３の方法によって作製されたタンパク質を被験体に投与する工程を包含する、選択されたタンパク質で被験体を治療する方法。
【請求項４４６】
ウイルス粒子形成を調節する因子をスクリーニングする方法であって
ａ．第１の核酸配列および第２の核酸配列を含むパッケージング核酸構築物を細胞に導入する工程であって、該第１の核酸配列はＧａｇポリタンパク質をコードし、該第２の核酸配列はＧａｇ−Ｐｒｏ−Ｐｏｌポリタンパク質をコードし、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、フレームシフトまたは翻訳リードスルーを減少する１個以上の変異を含み、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、同じヌクレオチド配列の異なるコード領域から発現され、そして該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、スクリーニングされる該因子に作動可能に連結されている、工程；
ｂ．エンベロープ糖タンパク質をコードする第３の核酸配列を含むエンベロープ構築物を該細胞に導入する工程であって、該第３の核酸配列は、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、工程；
ｃ．ウイルス粒子の形成を可能にするのに適切な条件下で該細胞を培養する工程；
ｄ．該ウイルス粒子を検出する工程；
ｅ．対照培養物と比較した場合に、スクリーニングされる該培養物中でのウイルス粒子の数の増加または減少は、該因子がウイルス粒子形成を調節することを示す、工程
を包含する、方法。
【請求項４４７】
トランスジェニック動物を作製する方法であって、
ａ．請求項４０２に記載の方法によって作製したウイルス粒子を接合体に導入する工程；
ｂ．該接合体を分娩まで成長させる工程；
ｃ．そのゲノムが、目的の遺伝子を発現可能である核酸構築物を含む動物を入手する工程；
ｄ．Ｆ１子孫を得るために、該動物を非トランスジェニック動物と交配させる工程；および
ｅ．そのゲノムが、該目的の遺伝子を発現可能である該核酸構築物を含む動物を選択する工程であって、該動物が、選択された目的の遺伝子を発現する、工程
を包含する、方法。
【請求項４４８】
請求項４４７に記載の方法によって作製されたトランスジェニック動物。
【請求項４４９】
パッケージング系であって
ａ．Ｇａｇポリタンパク質をコードする第１の変異した核酸を含む第１の核酸構築物であって、該第１の変異した核酸は転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物；および
ｂ．Ｇａｇ−Ｐｏｌポリタンパク質をコードする第２の変異した核酸を含む第２の核酸構築物であって、該第２の変異した核酸は転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物；
を含み、
ｃ．該第１の核酸構築物および該第２の核酸構築物の変異は、ウイルス粒子形成を可能にするＧａｇおよびＧａｇ−Ｐｏｌポリタンパク質の発現の比率を生じる、パッケージング系。
【請求項４５０】
前記ＧａｇおよびＧａｇ−Ｐｏｌポリタンパク質の発現の比率が約９９：１〜約８０：２０である、請求項４４９に記載のパッケージング系。
【請求項４５１】
前記第１の変異した核酸が最小ＣＭＶプロモーターに作動可能に連結され、前記第２の変異した核酸が熱ショックタンパク質プロモーターに作動可能に連結されている、請求項４４９に記載のパッケージング系。
【請求項４５２】
目的の抗原を結合する抗体を同定する方法であって、該方法は
ａ．目的の抗原を結合する抗体を含むことが疑われるサンプル、および該目的の抗原を発現する標的細胞を接触させる工程であって、
該標的細胞は、請求項１、５５、２０８、２４７、および２８６に記載の核酸構築物の１つ以上を含む、工程；ならびに
ｂ．該サンプル中の抗体が、該標的細胞によって発現された該目的の抗原に結合するか否かを決定し、それによって、該目的の抗原に結合する該抗体が、該目的の抗原を結合する抗体として同定される、工程
を包含する、方法。
【請求項１】
第１の核酸配列、第２の核酸配列、および第３の核酸配列を含むベクターを含む単一の核酸構築物であって、該第１の核酸配列は第１の転写制御エレメントに作動可能に連結された目的の配列を含み、該第２の核酸配列は第２の転写制御エレメントに作動可能に連結され、かつ該第１の核酸配列の発現を制御するポリペプチドをコードし、該第３の核酸配列は該第１の転写制御エレメントに作動可能に連結された調節因子標的配列を含み、そして該第１および第２の転写制御エレメントは反対の方向に向いている、核酸構築物。
【請求項２】
前記ベクターがウイルスベクターである、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項３】
前記ウイルスベクターが自己不活化している、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項４】
前記第１または第２の転写制御エレメントが他の転写制御エレメントの活性に影響を与える、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項５】
前記第１または第２の転写制御エレメントが並列している、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項６】
リンカー配列が前記第１の転写制御エレメントと第２の転写制御エレメントとの間に位置している、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項７】
前記リンカー配列が染色体インシュレーターである、請求項６に記載の核酸構築物。
【請求項８】
請求項１に記載の核酸構築物を含む細胞株。
【請求項９】
前記調節因子標的配列が少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１０】
前記調節因子標的配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１１】
前記調節因子標的配列が２つのｔｅｔオペレーター配列に隣接したＴＡＴＡボックスを含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１２】
前記調節因子標的配列が配列番号６の配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１３】
前記第１の核酸配列の発現がＣｒｅの存在に依存する、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１４】
前記調節因子標的配列がＴＡＴＡ配列に隣接した選択マーカーを含み、該ＴＡＴＡ配列が少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列に作動可能に連結され、該選択マーカーはｌｏｘ Ｐ部位に隣接し、そして該調節因子配列が前記第１の転写制御エレメントと前記第１の核酸配列の間に位置する、請求項１３に記載の核酸構築物。
【請求項１５】
前記目的の配列が目的のタンパク質をコードする、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１６】
前記コードされるタンパク質がＤＮＡポリメラーゼＩＩＩの転写因子である、請求項１５に記載の核酸構築物。
【請求項１７】
前記目的の配列が、マイクロＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｍＲＮＡの配列である、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１８】
前記第２の核酸配列がテトラサイクリンリプレッサーをコードする核酸配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項１９】
前記第２の核酸配列が、核局在化シグナルをコードする核酸配列をさらに含む、請求項１８に記載の核酸構築物。
【請求項２０】
前記コードされている核局在化シグナルがＳＶ４０核局在化シグナルである、請求項１９に記載の核酸構築物。
【請求項２１】
前記第２の核酸配列が配列番号１の配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項２２】
前記第２の核酸配列がＶＰ１６をさらに含む、請求項１８に記載の核酸構築物。
【請求項２３】
前記第２の核酸配列が配列番号２の配列を含む、請求項２２に記載の核酸構築物。
【請求項２４】
前記第２の核酸配列がテトラサイクリンアクチベーターをコードする核酸配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項２５】
前記第２の核酸配列が核局在化シグナルをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２４に記載の核酸構築物。
【請求項２６】
前記コードされる核局在化シグナルがＳＶ４０核局在化シグナルである、請求項２５に記載の核酸構築物。
【請求項２７】
前記第２の核酸配列が配列番号２の配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項２８】
前記第２の核酸配列がＶＰ１６をさらに含む、請求項２４に記載の核酸構築物。
【請求項２９】
前記第２の核酸配列が配列番号３の配列を含む、請求項２８に記載の核酸構築物。
【請求項３０】
第３の転写制御エレメントに作動可能に連結された第４の核酸配列をさらに含み、該第４の核酸配列は第２の目的の配列を含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項３１】
前記第３の転写制御エレメントがプロモーターである、請求項３０に記載の核酸構築物。
【請求項３２】
前記第２の目的の配列が目的のタンパク質をコードする、請求項３１に記載の核酸構築物。
【請求項３３】
前記第２の目的の配列が、マイクロＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｍＲＮＡである、請求項３１に記載の核酸構築物。
【請求項３４】
前記第３の転写制御エレメントが、マウスＨｉ、ヒトＨ１、またはＵ６プロモーターからなる群より選択される、請求項３３に記載の核酸構築物。
【請求項３５】
選択マーカーをコードする配列を含む第４の核酸配列をさらに含む、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項３６】
前記選択マーカーがＧＦＰまたはＲＦＰからなる群より選択される、請求項３５に記載の核酸構築物。
【請求項３７】
内部リボソーム侵入部位をさらに含む、請求項３５に記載の核酸構築物。
【請求項３８】
前記第１の核酸配列の発現が調節可能である、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項３９】
前記転写制御エレメントがプロモーターまたはエンハンサーからなる群より選択される、請求項１に記載の核酸構築物。
【請求項４０】
前記プロモーターが、ｍＨ１プロモーター、ｈＨ１プロモーター、ＣＡＧプロモーター、ＣＭＶプロモーター、ＣＭＶベースのプロモーター、ニワトリβ−アクチンプロモーター、ユビキチンＣプロモーター、またはＥＦ−１αプロモーターからなる群より選択される、請求項３９に記載の核酸構築物。
【請求項４１】
前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項４０に記載の核酸構築物。
【請求項４２】
前記調節因子標的配列に作動可能に連結された、ＧＡＬ−４をコードする核酸配列をさらに含む、請求項１６に記載の核酸構築物。
【請求項４３】
少なくとも２つのｔｅｔＯ配列を含む、請求項４２に記載の核酸構築物。
【請求項４４】
前記調節因子標的配列が少なくとも１つのｔｅｔ調節因子標的配列を含む、請求項４２に記載の核酸構築物。
【請求項４５】
前記調節因子標的配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項４２に記載の核酸構築物。
【請求項４６】
前記調節因子標的配列が、２つのｔｅｔオペレーター配列に隣接するＴＡＴＡボックスを含む、請求項４２に記載の核酸構築物。
【請求項４７】
前記調節因子標的配列が配列番号６の配列を含む、請求項４２に記載の核酸構築物。
【請求項４８】
第２の調節因子配列および第２の目的の配列に作動可能に連結されたＧＡＬ−４をコードする核酸配列をさらに含み、該第２の目的の配列は第３の転写制御エレメントに作動可能に連結され、該第２の目的の配列は、マイクロＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、およびｓｉＲＮＡからなる群より選択され、そして該第２の調節因子配列は、該ＧＡＬ−４をコードする核酸配列と、該第２の目的の配列との間に配置されている、請求項４２に記載の核酸構築物。
【請求項４９】
前記第２の調節因子標的配列が少なくとも１つの調節因子標的配列を含む、請求項４８に記載の核酸構築物。
【請求項５０】
前記第２の調節因子標的配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項４８に記載の核酸構築物。
【請求項５１】
前記第２の調節因子標的配列が、２つのｔｅｔオペレーター配列に隣接するＴＡＴＡボックスを含む、請求項４８に記載の核酸構築物。
【請求項５２】
前記第２の調節因子標的配列が配列番号６の配列を含む、請求項４８に記載の核酸構築物。
【請求項５３】
前記第３の転写制御エレメントがプロモーターまたはエンハンサーからなる群より選択される、請求項４８に記載の核酸構築物。
【請求項５４】
前記プロモーターが、ｍＨ１プロモーター、ｈＨ１プロモーター、ユビキチンＣプロモーター、またはＥＦ−１αプロモーターからなる群より選択される、請求項５３に記載の核酸構築物。
【請求項５５】
第１の核酸配列、第２の核酸配列、および第３の核酸配列を含むベクターを含む単一の核酸構築物であって、該第１の核酸配列、該第２の核酸配列、および該第３の核酸配列は、単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されており、該第１の核酸配列は目的の配列を含み、該第２の核酸配列は該第１の核酸配列の発現を制御可能であるポリペプチドをコードし、該第３の核酸配列は第１の転写制御エレメントに作動可能に連結された調節因子標的配列を含み、そして該第１の転写制御エレメントは該第１の核酸配列および第２の核酸配列の発現を駆動可能である、核酸構築物。
【請求項５６】
前記ベクターがウイルスベクターである、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項５７】
前記ウイルスベクターが自己不活化している、請求項５６に記載の核酸構築物。
【請求項５８】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む細胞株。
【請求項５９】
前記調節因子標的配列が少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６０】
前記調節因子標的配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６１】
前記調節因子標的配列が２つのｔｅｔオペレーター配列に隣接したＴＡＴＡボックスを含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６２】
前記調節因子標的配列が配列番号６の配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６３】
前記第１の核酸配列の発現がＣｒｅの存在に依存する、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６４】
調節因子配列がＴＡＴＡ配列に隣接した選択マーカーを含み、該ＴＡＴＡ配列が少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列に連結され、該選択マーカーはｌｏｘ Ｐ部位にもまた隣接し、そして該調節因子配列が前記第１の転写制御エレメントと前記第１の核酸配列との間に位置する、請求項６３に記載の核酸構築物。
【請求項６５】
前記目的の配列が目的のタンパク質をコードする、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６６】
前記目的のタンパク質がＤＮＡポリメラーゼＩＩＩの転写因子である、請求項６５に記載の核酸構築物。
【請求項６７】
前記目的の配列が、マイクロＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｍＲＮＡである、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６８】
前記調節因子標的配列に作動可能に連結された、ＧＡＬ−４をコードする核酸配列をさらに含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項６９】
配列番号６の配列を含む、請求項６８に記載の核酸構築物。
【請求項７０】
前記調節因子標的配列が少なくとも１つのｔｅｔ調節因子標的配列を含む、請求項６８に記載の核酸構築物。
【請求項７１】
前記調節因子標的配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項６８に記載の核酸構築物。
【請求項７２】
前記調節因子標的配列が、２つのｔｅｔオペレーター配列に隣接するＴＡＴＡボックスを含む、請求項６８に記載の核酸構築物。
【請求項７３】
前記調節因子標的配列が配列番号６の配列を含む、請求項６８に記載の核酸構築物。
【請求項７４】
前記第２の調節因子標的配列および第２の目的の配列に作動可能に連結されたＧＡＬ−４をコードする核酸配列をさらに含み、該第２の目的の配列は第３の転写制御エレメントに作動可能に連結され、該第２の目的の配列は、マイクロＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、およびｓｉＲＮＡからなる群より選択され、そして該第２の調節因子標的配列は、該ＧＡＬ−４をコードする核酸配列と、該第２の目的の配列との間に配置されている、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項７５】
前記第２の調節因子標的配列が少なくとも１つのｔｅｔ調節因子標的配列を含む、請求項７４に記載の核酸構築物。
【請求項７６】
前記第２の調節因子標的配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項７４に記載の核酸構築物。
【請求項７７】
前記第２の調節因子標的配列が、２つのｔｅｔオペレーター配列に隣接するＴＡＴＡボックスを含む、請求項７４に記載の核酸構築物。
【請求項７８】
前記第２の調節因子標的配列が配列番号６の配列を含む、請求項７４に記載の核酸構築物。
【請求項７９】
前記第３の転写制御エレメントがプロモーターまたはエンハンサーからなる群より選択される、請求項７４に記載の核酸構築物。
【請求項８０】
前記プロモーターが、ｍＨ１プロモーターまたは、ｈＨ１プロモーターからなる群より選択される、請求項７９に記載の核酸構築物。
【請求項８１】
前記第２の核酸配列がテトラサイクリンリプレッサーをコードする核酸配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項８２】
前記第２の核酸配列が、核局在化シグナルをコードする核酸配列をさらに含む、請求項８１に記載の核酸構築物。
【請求項８３】
前記コードされる核局在化シグナルがＳＶ４０核局在化シグナルである、請求項８２に記載の核酸構築物。
【請求項８４】
前記第２の核酸配列が配列番号１の配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項８５】
前記第２の核酸配列がＶＰ１６をさらに含む、請求項８１に記載の核酸構築物。
【請求項８６】
前記第２の核酸配列が配列番号２の配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項８７】
前記第２の核酸配列がテトラサイクリンアクチベーターをコードする核酸配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項８８】
前記第２の核酸配列が、核局在化シグナルをコードする核酸配列をさらに含む、請求項８７に記載の核酸構築物。
【請求項８９】
前記コードされる核局在化シグナル配列がＳＶ４０核局在化シグナルである、請求項８８に記載の核酸構築物。
【請求項９０】
前記第２の核酸配列が配列番号２の配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項９１】
前記第２の核酸配列がＶＰ１６をさらに含む、請求項８７に記載の核酸構築物。
【請求項９２】
前記第２の核酸配列が配列番号３の配列を含む、請求項９１に記載の核酸構築物。
【請求項９３】
第３の転写制御エレメントに作動可能に連結された第４の核酸配列をさらに含み、該第４の核酸配列が第２の目的の配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項９４】
前記第３の転写制御エレメントがプロモーターである、請求項９３に記載の核酸構築物。
【請求項９５】
前記第２の目的の配列が目的のタンパク質をコードする、請求項９３に記載の核酸構築物。
【請求項９６】
前記第３の転写制御エレメントがプロモーターである、請求項９３に記載の核酸構築物。
【請求項９７】
前記第２の目的の配列が、マイクロＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｍＲＮＡである、請求項９３に記載の核酸構築物。
【請求項９８】
前記第３の転写制御エレメントが、マウスＨｉプロモーター、ヒトＨ１プロモーター、Ｕ６もしくはユビキチンＣプロモーター、またはＥＦ−１αプロモーターからなる群より選択される、請求項９７に記載の核酸構築物。
【請求項９９】
第４の核酸配列をさらに含み、該第４の核酸配列は選択マーカーをコードする配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１００】
前記選択マーカーがＧＦＰまたはＲＦＰからなる群より選択される、請求項９９の核酸構築物。
【請求項１０１】
内部リボソーム侵入部位をさらに含む、請求項９９に記載の核酸構築物。
【請求項１０２】
前記第１の核酸配列の発現が調節可能である、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０３】
前記転写制御エレメントが、プロモーターまたはエンハンサーからなる群より選択される、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０４】
前記転写制御エレメントが、ＣＭＶプロモーターの３’部分を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０５】
前記転写制御エレメントが、ＣＭＶプロモーターの５’部分を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０６】
前記転写制御エレメントが、β−アクチンプロモーターの一部を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０７】
前記転写制御エレメントがＣＡＧプロモーターを含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０８】
前記転写制御エレメントが、ＣＡＧプロモーターに作動可能に連結された３’ＣＭＶプロモーター配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１０９】
前記転写制御エレメントが、配列番号１２の配列を含む、請求項５５に記載の核酸構築物。
【請求項１１０】
前記転写制御エレメントが、マウスＨｉプロモーター、ヒトＨ１プロモーター、Ｕ６ユビキチンＣプロモーター、またはＥＦ−１αプロモーターからなる群より選択される、請求項６７に記載の核酸構築物。
【請求項１１１】
ＣＡＧプロモーターの５’末端に融合されたＣＭＶプロモーターの３’末端を含む、二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１２】
配列番号１２に示される配列を含む、請求項１１１に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１３】
前記二方向性プロモーターが調節可能である、請求項１１１に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１４】
前記二方向性プロモーターが構成的である、請求項１１１に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１５】
ＥＦ−１αプロモーターの５’末端に融合されたＣＭＶプロモーターの３’末端を含む二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１６】
配列番号１３に示される配列を含む、請求項１１５に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１７】
前記二方向性プロモーターが調節可能である、請求項１１５に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１８】
前記二方向性プロモーターが構成的である、請求項１１５に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項１１９】
目的の配列の調節を可能にするのに適切な条件下で、請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程を包含する、目的の配列の発現を選択的に調節する方法。
【請求項１２０】
組換えタンパク質の発現を可能にするのに適切な条件下で、請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程を含む組換えタンパク質を作製する方法であって、目的の配列は、該組換えタンパク質をコードする核酸配列である、方法。
【請求項１２１】
前記標的細胞が糖タンパク質上で均一なグリコシル化パターンを生成する、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２２】
前記標的細胞が、対照細胞と比較してＧｎＴＩ活性が減少している、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２３】
前記目的の配列の調節を可能にするのに適切な条件下で、請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程によって前記標的細胞が産生される、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２４】
請求項１に記載の核酸構築物がインビトロで前記標的細胞に導入される、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２５】
免疫応答を誘発するために十分な量で、請求項１２０に記載の方法によって作製された組換えタンパク質を被験体に導入する工程を包含する、被験体における免疫応答を誘発する方法。
【請求項１２６】
請求項１に記載の核酸構築物がインビボで前記標的細胞に導入される、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２７】
目的の配列の調節を可能にするのに適切な条件下で、請求項５５に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程を包含する、目的の配列の発現を選択的に調節する方法。
【請求項１２８】
組換えタンパク質の発現を可能にするのに適切な条件下で、請求項５５に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程を包含する、組換えタンパク質を作製する方法であって、目的の配列は、該組換えタンパク質をコードする核酸配列である、方法。
【請求項１２９】
前記標的細胞が糖タンパク質上で均一なグリコシル化パターンを生成する、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３０】
前記標的細胞が、対照細胞と比較してＧｎＴＩ活性が減少している、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３１】
請求項３３１に記載の方法を使用して前記標的細胞が産生される、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３２】
前記核酸構築物がインビトロで前記標的細胞に導入される、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３３】
免疫応答を誘発するために十分な量で、請求項１２８に記載の方法によって作製された組換えタンパク質を被験体に導入する工程を包含する、被験体における免疫応答を誘発する方法。
【請求項１３４】
前記核酸構築物がインビボで前記標的細胞に導入される、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３５】
トランスジェニック動物を作製する方法であって、
ａ）請求項１に記載の核酸構築物を接合体に導入する工程；
ｂ）該接合体を分娩まで成長させる工程；
ｃ）そのゲノムが該核酸構築物を含む動物を入手する工程；
ｄ）Ｆ１子孫を得るために、該動物を非トランスジェニック動物と交配させる工程；および
ｅ）そのゲノムが該核酸構築物を含む動物を選択する工程
を包含する、方法。
【請求項１３６】
請求項１に記載の核酸構築物を含む導入遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック動物。
【請求項１３７】
トランスジェニック動物を作製する方法であって、
ａ）請求項５５に記載の核酸構築物を接合体に導入する工程；
ｂ）該接合体を分娩まで成長させる工程；
ｃ）そのゲノムが該核酸構築物を含む動物を入手する工程；
ｄ）Ｆ１子孫を得るために、該動物を非トランスジェニック動物と交配させる工程；および
ｅ）そのゲノムが該核酸構築物を含む動物を選択する工程
を包含する、方法。
【請求項１３８】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む導入遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック動物。
【請求項１３９】
Ｋｉｓｓ−１を発現しているトランスジェニック動物。
【請求項１４０】
Ｋｉｓｓ−１の発現が調節可能である、請求項１３９に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１４１】
請求項１３５に記載の方法を使用して産生される、Ｋｉｓｓ−１を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４２】
請求項１３７に記載の方法を使用して産生される、Ｋｉｓｓ−１を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４３】
請求項１に記載の核酸構築物を含む、Ｋｉｓｓ−１を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４４】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む、Ｋｉｓｓ−１を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４５】
ＦＯＸ Ｐ３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４６】
ＦＯＸ Ｐ３の発現が調節可能である、請求項１４５に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１４７】
請求項１３５に記載の方法を使用して産生される、ＦＯＸ Ｐ３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４８】
請求項１３７に記載の方法を使用して産生される、ＦＯＸ Ｐ３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１４９】
請求項１に記載の核酸構築物を含む、ＦＯＸ Ｐ３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５０】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む、ＦＯＸ Ｐ３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５１】
ＮＦκβを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５２】
ＮＦκβの発現が調節可能である、請求項１５１に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１５３】
請求項１３５に記載の方法を使用して産生される、ＮＦκβを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５４】
請求項１３７に記載の方法を使用して産生される、ＮＦκβを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５５】
請求項１に記載の核酸構築物を含む、ＮＦκβを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５６】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む、ＮＦκβを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５７】
マイクロＲＮＡ２２３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１５８】
マイクロＲＮＡ２２３の発現が調節可能である、請求項１５７に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１５９】
請求項１３５に記載の方法を使用して産生される、マイクロＲＮＡ２２３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６０】
請求項１３７に記載の方法を使用して産生される、マイクロＲＮＡ２２３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６１】
請求項１に記載の核酸構築物を含む、マイクロＲＮＡ２２３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６２】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む、マイクロＲＮＡ２２３を発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６３】
Ｃｒｅを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６４】
Ｃｒｅの発現が調節可能である、請求項１６３に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１６５】
請求項４４７に記載の方法を使用して産生される、請求項１６３に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１６６】
請求項４４８に記載の方法を使用して産生される、請求項１６３に記載のトランスジェニック動物。
【請求項１６７】
請求項１に記載の核酸構築物を含む、Ｃｒｅを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６８】
請求項５５に記載の核酸構築物を含む、Ｃｒｅを発現するトランスジェニック動物。
【請求項１６９】
請求項１に記載の核酸構築物を含むワクチン。
【請求項１７０】
請求項５５に記載の核酸構築物を含むワクチン。
【請求項１７１】
請求項１６９に記載の組成物を被験体に投与する工程を包含する、被験体における免疫応答を産生する方法。
【請求項１７２】
請求項１７０に記載の組成物を被験体に投与する工程を包含する、被験体における免疫応答を産生する方法。
【請求項１７３】
被験体における免疫応答を産生する方法であって、該免疫応答がＨＩＶに対する免疫応答であり、該方法は請求項１６９に記載の組成物を該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１７４】
被験体における免疫応答を産生する方法であって、該免疫応答がＨＩＶに対する免疫応答であり、該方法は請求項１７０に記載の組成物を該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１７５】
組換えタンパク質を作製する方法であって、
ａ．少なくとも１つのＶＰ１６配列に作動可能に連結された調節配列に作動可能に連結されているプロモーターを含む第１の核酸構築物を標的細胞に導入する工程；
ｂ．該第１の核酸配列の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；
ｃ．工程（ｂ）の細胞に、目的の配列に作動可能に連結された調節因子標的配列を含む第２の核酸構築物を導入する工程であって、
該目的の配列は組換えタンパク質をコードする核酸配列である、工程；および
ｄ．組換えタンパク質の発現を可能にする条件下で、工程（ｃ）の細胞を維持する工程
を包含する、方法。
【請求項１７６】
前記第１の核酸構築物が配列番号４４の配列を含む、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７７】
前記第２の核酸構築物が、調節因子標的配列に作動可能に連結された転写制御エレメントに作動可能に連結されている目的の配列を含む、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７８】
前記目的の配列が、選択マーカーに作動可能に連結されたＩＲＥＳ配列に作動可能に連結されている、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７９】
前記目的の配列が、選択マーカーに作動可能に連結されたＩＲＥＳ様配列に作動可能に連結されている、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１８０】
組換えタンパク質を作製する方法であって、
ａ．少なくとも１つのＶＰ１６配列に作動可能に連結された調節因子配列に作動可能に連結されているプロモーターを含む第１の核酸構築物を標的細胞に導入する工程；
ｂ．目的の配列に作動可能に連結されている調節因子標的配列を含む第２の核酸構築物を、工程（ａ）の同じ標的細胞に導入する工程であって、該目的の配列は組換えタンパク質をコード可能な核酸配列である、工程；ならびに
ｃ．該標的細胞のゲノムへの該第１の核酸配列および第２の核酸配列の組み込みを可能にする条件下に該標的細胞を維持する工程；ならびに
ｄ．該組換えタンパク質の発現を可能にする条件下に工程（ｃ）の細胞を維持する工程
を包含する、方法。
【請求項１８１】
前記第１の核酸構築物が配列番号４４の配列を含む、請求項１８０に記載の方法。
【請求項１８２】
前記第２の核酸構築物が、調節因子標的配列に作動可能に連結された転写制御エレメントに作動可能に連結されている目的の配列を含む、請求項１８０に記載の方法。
【請求項１８３】
前記目的の配列が、選択マーカーに作動可能に連結されたＩＲＥＳ配列に作動可能に連結されている、請求項１８０に記載の方法。
【請求項１８４】
前記目的の配列が、選択マーカーに作動可能に連結されたＩＲＥＳ様配列に作動可能に連結されている、請求項１８０に記載の方法。
【請求項１８５】
被験体における免疫応答を誘発する方法であって、
ａ．請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；および
ｃ．免疫応答を誘発するために十分な量で、該被験体に工程（ｂ）の標的細胞を導入する工程
を包含する、方法。
【請求項１８６】
請求項１に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１８５に記載の方法。
【請求項１８７】
被験体における免疫応答を誘発する方法であって、
ａ．請求項５５に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；および
ｃ．免疫応答を誘発するために十分な量で、該被験体に工程（ｂ）の標的細胞を導入する工程
を包含する、方法。
【請求項１８８】
請求項５５に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１８７に記載の方法。
【請求項１８９】
被験体における免疫応答を誘発する方法であって、
ａ．請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程であって、
請求項１に記載の核酸構築物の転写制御エレメントが調節可能である、工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；および
ｃ．工程（ｂ）の標的細胞を該被験体に導入する工程；および
ｄ．目的の配列の発現を誘導するために十分な量で、請求項１に記載の核酸構築物の転写制御エレメントを調節可能である物質の有効量を該被験体に投与する工程であって、
該目的の配列は、免疫応答を誘導するために十分な量で発現される、工程
を包含する、方法。
【請求項１９０】
請求項１に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１８９に記載の方法。
【請求項１９１】
被験体における免疫応答を誘発する方法であって、
ａ．請求項５５に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；および
ｃ．工程（ｂ）の標的細胞を該被験体に導入する工程；および
ｄ．目的の配列の発現を誘導するために十分な量で、請求項５５に記載の核酸構築物の転写制御エレメントを調節可能である物質の有効量を該被験体に投与する工程であって、
該目的の配列は、免疫応答を誘導するために十分な量で発現される、工程
を包含する、方法。
【請求項１９２】
請求項５５に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９３】
目的のタンパク質に対する抗体を生成する方法であって、
ａ．請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程であって、
請求項１に記載の核酸構築物の転写制御エレメントは調節可能であり、
目的の配列は、目的のタンパク質をコード可能である、工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；
ｃ．工程（ｂ）の細胞を該被験体に導入する工程；
ｄ．該目的の配列の発現を誘導するために十分な量で、請求項１に記載の核酸構築物の転写制御エレメントを調節可能である物質の有効量を該被験体に投与する工程であって、
該目的の配列は、免疫応答を誘導するために十分な量で発現され、そして
該免疫応答が、該目的のタンパク質に対する抗体を生成する、工程
を包含する、方法。
【請求項１９４】
前記方法によって産生される前記抗体を単離する工程をさらに包含する、請求項１９３に記載の方法。
【請求項１９５】
請求項１に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１９３に記載の方法。
【請求項１９６】
目的のタンパク質に対する抗体を生成する方法であって、
ａ．請求項５５に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程であって、
請求項５５に記載の核酸構築物の転写制御エレメントは調節可能であり、
目的の配列は、目的のタンパク質をコード可能である、工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；
ｃ．工程（ｂ）の標的細胞を該被験体に導入する工程；
ｄ．該目的の配列の発現を誘導するために十分な量で、請求項５５に記載の核酸構築物の転写制御エレメントを調節可能である物質の有効量を該被験体に投与する工程であって、
該目的の配列は、免疫応答を誘導するために十分な量で発現され、そして
該免疫応答が、該目的のタンパク質に対する抗体を生成する、工程
を包含する、方法。
【請求項１９７】
前記方法によって産生される前記抗体を単離する工程をさらに包含する、請求項１９６に記載の方法。
【請求項１９８】
請求項５５に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１９６に記載の方法。
【請求項１９９】
目的のタンパク質に対する抗体を生成する方法であって、
ａ．請求項１に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程であって、
目的の配列は、目的のタンパク質をコードすることが可能である、工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；および
ｃ．工程（ｂ）の細胞を該被験体に導入する工程であって、
該細胞は、免疫応答を誘導するために十分な量で該目的の配列を発現し、
該免疫応答は、該目的のタンパク質に対する抗体を生成する、工程；
を包含する、方法。
【請求項２００】
前記方法によって産生される前記抗体を単離する工程をさらに包含する、請求項１９９に記載の方法。
【請求項２０１】
請求項１に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項１９９に記載の方法。
【請求項２０２】
目的のタンパク質に対する抗体を生成する方法であって、
ａ．請求項５５に記載の核酸構築物を標的細胞に導入する工程であって、
請求項５５に記載の核酸構築物の転写制御エレメントは調節可能であり、
目的の配列は、目的のタンパク質をコードすることが可能である、工程；
ｂ．工程（ａ）における核酸構築物の組み込みを可能にする条件下に該細胞を維持して、該標的細胞のゲノムに組み込む工程；
ｃ．工程（ｂ）の細胞を該被験体に導入する工程であって、
該細胞は、免疫応答を誘導するために十分な量で該目的の配列を発現し、
該免疫応答は、該目的のタンパク質に対する抗体を生成する、工程；
を包含する、方法。
【請求項２０３】
前記方法によって産生される前記抗体を単離する工程をさらに包含する、請求項２０２に記載の方法。
【請求項２０４】
請求項５５に記載の核酸構築物の目的の配列が膜タンパク質をコードすることが可能である、請求項２０２に記載の方法。
【請求項２０５】
ｅｆ１αプロモーターの５’末端に融合されたＣＭＶプロモーターの５’末端を含む、二方向性転写制御エレメント。
【請求項２０６】
前記ＣＭＶプロモーターの３’末端に作動可能に連結された調節因子標的配列をさらに含む、請求項２０５に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項２０７】
配列番号５１に記載の配列を含む、請求項２０５に記載の二方向性転写制御エレメント。
【請求項２０８】
第１の核酸配列および第２の核酸配列を含むパッケージング構築物であって、該第１の核酸配列はＧａｇポリタンパク質をコードし、該第２の核酸配列はＧａｇ−Ｐｒｏ−Ｐｏｌポリタンパク質をコードし、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、フレームシフトまたは翻訳リードスルーを減少する１個以上の変異を各々含み、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、同じヌクレオチド配列の異なるコード領域から発現され、そして該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物。
【請求項２０９】
ｒｅｖ応答エレメントを含む第３の核酸配列をさらに含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１０】
請求項２０８に記載のパッケージング構築物を含む細胞株。
【請求項２１１】
前記第１の核酸配列と前記第２の核酸配列との間のエレメントをさらに含み、該エレメントは、該第１の核酸配列と該第２の核酸配列の示差的発現を提供する、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１２】
前記第１の核酸配列と前記第２の核酸配列との間の前記エレメントが、内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項２１１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１３】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項２１２に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１４】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項２１２に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１５】
前記内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項２１２に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１６】
少なくとも１つの転写制御エレメントが調節可能である、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１７】
少なくとも１つの転写制御エレメントがテトラサイクリンまたはドキシサイクリンによって調節可能である、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１８】
少なくとも１つの転写制御エレメントが少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２１９】
標的である少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２０】
標的である少なくとも１つの転写制御エレメントが配列番号６の配列を含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２１】
少なくとも１つの転写制御エレメントがプロモーターである、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２２】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項２２１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２３】
少なくとも１つの転写制御エレメントが構成的である、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２４】
少なくとも１つの前記構成的転写制御エレメントがプロモーターである、請求項２２３に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２５】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項２２４に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２６】
前記第１の核酸配列が、フレームシフトのために必要とされるｇａｇ配列中の少なくとも１つの点変異を含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２７】
前記第１の核酸配列が配列番号１９のヌクレオチド配列を含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２８】
前記第２の核酸配列が、フレームシフトのために必要とされるｇａｇ−ｐｏｌ配列における単一ヌクレオチド挿入および少なくとも１つの点変異を含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２２９】
前記第１の核酸配列が配列番号１１のヌクレオチド配列を含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３０】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列の１つ以上は最適化されたコドンである、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３１】
Ｔａｔをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３２】
Ｒｅｖをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３３】
約９９：１〜約８０：２０の比率でＧａｇおよびＧａｇ−Ｐｏｌを発現することが可能である、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３４】
複製可能でない組換え体を生成することが可能である、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３５】
前記第１の核酸配列が第１の転写制御エレメントに作動可能に連結されており、前記第２の核酸配列が第２の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３６】
前記第１の転写制御エレメントが前記第２の転写制御エレメントよりも強力である、請求項２３５に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３７】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列が反対の方向で発現される、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３８】
少なくとも１つの前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２３９】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列が単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項２０８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２４０】
前記単一の転写制御エレメントが調節可能である、請求項２３９に記載のパッケージング構築物。
【請求項２４１】
前記単一の転写制御エレメントが二方向性プロモーターである、請求項２３９に記載のパッケージング構築物。
【請求項２４２】
前記二方向性プロモーターが調節可能である、請求項２４１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２４３】
請求項２０８に記載のパッケージング構築物、およびエンベロープ糖タンパク質を発現する核酸構築物を含む、パッケージング系。
【請求項２４４】
請求項２０９に記載のパッケージング構築物、およびエンベロープ糖タンパク質を発現する核酸構築物を含む、パッケージング系。
【請求項２４５】
請求項２４３に記載のパッケージング系を使用してウイルス様粒子を作製する方法。
【請求項２４６】
請求項２４４に記載のパッケージング系を使用してウイルス様粒子を作製する方法。
【請求項２４７】
第１の核酸配列および第２の核酸配列を含むパッケージング構築物であって、該第１の核酸配列はＧａｇポリタンパク質をコードし、該第２の核酸配列はＧａｇ−Ｐｒｏポリタンパク質をコードし、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、フレームシフトまたは翻訳リードスルーを減少する１個以上の変異を含み、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、同じヌクレオチド配列の異なるコード領域から発現され、そして該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物。
【請求項２４８】
ｒｅｖ応答エレメントを含む第３の核酸配列をさらに含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２４９】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列の間のエレメントをさらに含み、該エレメントは、該２つの核酸配列の示差的発現を提供する、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５０】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列の間の前記エレメントが内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項２４９に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５１】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項２５０に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５２】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項２５０に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５３】
前記内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項２５０に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５４】
少なくとも１つの転写制御エレメントが調節可能である、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５５】
少なくとも１つの転写制御エレメントがテトラサイクリンまたはドキシサイクリンによって調節可能である、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５６】
少なくとも１つの転写制御エレメントが少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５７】
少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項２５６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５８】
少なくとも１つの転写制御エレメントが配列番号６の配列を含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２５９】
少なくとも１つの転写制御エレメントがプロモーターである、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６０】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項２５９に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６１】
１つ以上の前記転写制御エレメントが構成的である、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６２】
前記第１の核酸配列が、フレームシフトのために必要とされるｇａｇ配列中の少なくとも１つの点変異を含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６３】
前記第１の核酸配列が配列番号１９のヌクレオチド配列を含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６４】
前記第２の核酸配列が、フレームシフトのために必要とされるｇａｇ−ｐｏｌ配列における単一ヌクレオチド挿入および少なくとも１つの点変異を含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６５】
前記第２の核酸配列が配列番号２０のヌクレオチド配列を含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６６】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列の１つ以上は最適化されたコドンである、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６７】
Ｔａｔをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６８】
Ｒｅｖをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２６９】
約９９：１〜約８０：２０の比率でＧａｇおよびＧａｇ−Ｐｏｌを発現することが可能である、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７０】
複製可能でない組換え体を生成することが可能である、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７１】
前記第１の核酸配列が第１の転写制御エレメントに作動可能に連結されており、前記第２の核酸配列が第２の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７２】
前記第１の転写制御エレメントが前記第２の転写制御エレメントよりも強力である、請求項２７１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７３】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列が反対の方向で発現される、請求項２７１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７４】
前記第１の転写制御エレメントおよび前記第２の転写制御エレメントが同じである、請求項２７１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７５】
前記第１の転写制御エレメントおよび前記第２の転写制御エレメントが異なる、請求項２７１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７６】
少なくとも１つの前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項２７１に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７７】
前記標的である第１の核酸配列および第２の核酸配列が単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項２４７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７８】
前記単一の転写制御エレメントが調節可能である、請求項２７７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２７９】
前記単一の転写制御エレメントが二方向性プロモーターである、請求項２７７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２８０】
前記二方向性プロモーターが調節可能である、請求項２７９に記載のパッケージング構築物。
【請求項２８１】
請求項２４７に記載のパッケージング構築物、およびエンベロープ糖タンパク質を発現する核酸構築物を含む、パッケージング系。
【請求項２８２】
請求項２４８に記載のパッケージング構築物、およびエンベロープ糖タンパク質を発現する核酸構築物を含む、パッケージング系。
【請求項２８３】
請求項２８１に記載のパッケージング系を使用してウイルス様粒子を作製する方法。
【請求項２８４】
請求項２８２に記載のパッケージング系を使用してウイルス様粒子を作製する方法。
【請求項２８５】
請求項２４７に記載の標的パッケージング構築物を含む細胞株。
【請求項２８６】
第１の核酸配列、第２の核酸配列、および第３の核酸配列を含むパッケージング構築物であって、該第１の核酸配列はＧａｇポリタンパク質をコードし、該第２の核酸配列はＧａｇ−Ｐｒｏポリタンパク質をコードし、該第３の核酸配列はＶｐｒ−逆転写酵素−インテグラーゼタンパク質をコードし、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列はフレームシフトまたは翻訳リードスルーを減少する１個以上の変異を含み、該第１の核酸配列、該第２の核酸配列、および該第３の核酸配列は、同じヌクレオチド配列の異なるコード領域から発現され、そして該第１の核酸配列、該第２の核酸配列、および該第３の核酸配列は、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物。
【請求項２８７】
前記第１の核酸配列と前記第２の核酸配列との間のエレメントをさらに含み、該エレメントは、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列の示差的発現を提供する、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２８８】
示差的発現を提供する、前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列の間の前記エレメントが内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項２８７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２８９】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項２８８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９０】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項２８８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９１】
前記内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項２８８に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９２】
少なくとも１つの転写制御エレメントが調節可能である、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９３】
少なくとも１つの転写制御エレメントがテトラサイクリンまたはドキシサイクリンによって調節可能である、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９４】
少なくとも１つの転写制御エレメントが少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９５】
少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列がＴＡＴＡボックスに作動可能に連結されている、請求項２９４に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９６】
少なくとも１つの転写制御エレメントが配列番号６の配列を含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９７】
少なくとも１つの転写制御エレメントがプロモーターである、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９８】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項２９７に記載のパッケージング構築物。
【請求項２９９】
１つ以上の前記転写制御エレメントが構成的である、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３００】
少なくとも１つの前記構成的転写制御エレメントがプロモーターである、請求項２９９に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０１】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項３００に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０２】
前記第１の核酸配列が、フレームシフトのために必要とされるｇａｇ配列中の少なくとも１つの点変異を含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０３】
前記第１の核酸配列が配列番号１９のヌクレオチド配列を含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０４】
前記第２の核酸配列が、フレームシフトのために必要とされるｇａｇ−ｐｏｌ配列における単一ヌクレオチド挿入および少なくとも１つの点変異を含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０５】
前記第２の核酸配列が配列番号２０のヌクレオチド配列を含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０６】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列の１つ以上は最適化されたコドンである、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０７】
Ｔａｔをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０８】
Ｒｅｖをコードする核酸配列をさらに含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３０９】
約９９：１〜約８０：２０の比率でＧａｇおよびＧａｇ−Ｐｏｌを発現することが可能である、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１０】
複製可能でない組換え体を生成することが可能である、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１１】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列が第１の転写制御エレメントに作動可能に連結されており、前記第３の核酸配列が第２の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１２】
前記第１の転写制御エレメントが前記第２の転写制御エレメントよりも強力である、請求項３１１に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１３】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列または前記第３の核酸配列が反対の方向で発現される、請求項２８６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１４】
前記第１の核酸配列および前記第２の核酸配列が第１の転写制御エレメントに作動可能に連結されており、前記第３の核酸配列が第２の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３１３に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１５】
少なくとも１つの前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項３１４に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１６】
前記第１の核酸配列、前記第２の核酸配列、および前記第３の核酸配列が単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３１３に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１７】
前記単一の転写制御エレメントが調節可能である、請求項３１６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１８】
前記単一の転写制御エレメントが二方向性プロモーターである、請求項３１６に記載のパッケージング構築物。
【請求項３１９】
前記二方向性プロモーターが調節可能である、請求項３１８に記載のパッケージング構築物。
【請求項３２０】
前記第１の核酸配列または前記第２の核酸配列と前記第３の核酸配列との間のエレメントをさらに含む、請求項２８６に記載のパッケージング構築物であって、該第３の核酸配列は、該第１の核酸配列と該第２の核酸配列の間に配置されず、該エレメントは、該第１の核酸配列または該第２の核酸配列と、該第３の核酸配列との間の示差的発現を提供する、構築物。
【請求項３２１】
前記エレメントが内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項３２０に記載のパッケージング構築物。
【請求項３２２】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項３２１に記載のパッケージング構築物。
【請求項３２３】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項３２１に記載のパッケージング構築物。
【請求項３２４】
前記内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項３２１に記載のパッケージング構築物。
【請求項３２５】
請求項２８６に記載のパッケージング構築物、およびエンベロープ糖タンパク質を発現する核酸構築物を含む、パッケージング系。
【請求項３２６】
請求項３２５に記載のパッケージング系を使用してウイルス様粒子を作製する方法。
【請求項３２７】
発現系であって、
ａ．請求項２０８、２４７、または２８６に記載のパッケージング構築物；
ｂ．エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸配列を含むエンベロープ核酸構築物であって、該エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸配列が、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物；および
ｃ．１つ以上の目的の遺伝子を含む遺伝子移入構築物
を含む、発現系。
【請求項３２８】
テトラサイクリントランス活性化因子をコードする核酸に作動可能に連結された、核局在化シグナルをコードする核酸配列を含む核局在化シグナルをコードする構築物をさらに含む、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３２９】
前記核局在化シグナルをコードする構築物が転写制御エレメントをさらに含む、請求項３２８に記載の発現系。
【請求項３３０】
前記転写制御エレメントがプロモーターまたはエンハンサーである、請求項３２９に記載の発現系。
【請求項３３１】
前記核局在化シグナルをコードする核酸配列が少なくとも１つのリンカー配列と隣接している、請求項３２８に記載の発現系。
【請求項３３２】
前記リンカー配列が配列番号１５をコードする、請求項３３１に記載の発現系。
【請求項３３３】
前記核局在化シグナルをコードする構築物が、５’から３’へサイトメガロウイルスプロモーター、第１のリンカーをコードする配列、第２の核局在化シグナル、第２のリンカー配列、およびテトラサイクリントランス活性化因子をコードする配列を含み、該コードされるリンカーが配列番号１５である、請求項３２８に記載の発現系。
【請求項３３４】
前記エンベロープ糖タンパク質が細胞への侵入を促進する、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３３５】
前記エンベロープ糖タンパク質がウイルスエンベロープ糖タンパク質である、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３３６】
前記ウイルスエンベロープ糖タンパク質が水疱性口内炎ウイルスのＧタンパク質（ＶＳＶ−Ｇ）である、請求項３３５に記載の発現系。
【請求項３３７】
前記遺伝子移入構築物がマーカーをコードする配列をさらに含み、前記目的の遺伝子および該マーカーをコードする配列が少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３３８】
前記遺伝子移入構築物が２つの目的の配列を含む、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３３９】
前記遺伝子移入構築物が前記目的の遺伝子の３’に位置するウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメントをさらに含む、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３４０】
前記遺伝子移入構築物が１つ以上の長い末端反復配列を含む、請求項３２７に記載の発現系。
【請求項３４１】
前記遺伝子移入構築物が３’の長い末端反復配列に変異を含む、請求項３４０に記載の発現系。
【請求項３４２】
プロモーター配列が５’または３’の長い末端反復配列の代わりに置換されている、請求項３４０に記載の発現系。
【請求項３４３】
前記遺伝子移入構築物の少なくとも１つの転写制御エレメントがプロモーターである、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３４４】
前記遺伝子移入構築物の前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３４５】
前記遺伝子移入構築物の前記転写制御エレメントが調節因子構築物をさらに含み、該調節因子構築物が少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結された調節可能エレメントを含む、請求項３４４に記載の発現系。
【請求項３４６】
前記遺伝子移入構築物が、前記目的の遺伝子と前記マーカーをコードする配列との間のエレメントをさらに含み、該エレメントが、該目的の遺伝子および該マーカーをコードする配列の示差的発現を提供する、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３４７】
前記目的の遺伝子と前記マーカーをコードする配列との間の前記エレメントが、内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項３４６に記載の発現系。
【請求項３４８】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項３４７に記載の発現系。
【請求項３４９】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項３４７に記載の発現系。
【請求項３５０】
前記内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項３４７に記載の発現系。
【請求項３５１】
前記遺伝子移入構築物が少なくとも１つの転写制御エレメントを含む、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３５２】
前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３５３】
前記転写制御エレメントがテトラサイクリンまたはドキシサイクリンによって調節可能である、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３５４】
少なくとも１つの転写制御エレメントが少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３５５】
少なくとも１つの転写制御エレメントが配列番号６の配列を含む、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３５６】
前記転写制御エレメントがプロモーターである、請求項３５１に記載の発現系。
【請求項３５７】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項３５６に記載の発現系。
【請求項３５８】
前記遺伝子移入構築物の少なくとも１つの転写制御エレメントが構成的である、請求項３５１に記載の発現系。
【請求項３５９】
前記構成的転写制御エレメントがプロモーターである、請求項３５８に記載の発現系。
【請求項３６０】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項３５９に記載の発現系。
【請求項３６１】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が異なる転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３６２】
前記マーカーをコードする配列に作動可能に連結された前記転写制御エレメントが、前記目的の遺伝子に作動可能に連結された前記転写制御エレメントよりも強力である、請求項３６１に記載の発現系。
【請求項３６３】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が反対の方向で発現される、請求項３３７に記載の発現系。
【請求項３６４】
少なくとも１つの前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項３６３に記載の発現系。
【請求項３６５】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３６３に記載の発現系。
【請求項３６６】
前記単一の転写制御エレメントが調節可能である、請求項３６５に記載の発現系。
【請求項３６７】
前記単一の転写制御エレメントが二方向性プロモーターである、請求項３６６に記載の発現系。
【請求項３６８】
請求項３２７に記載の発現系を含む細胞株。
【請求項３６９】
発現系であって、
ａ．Ｇａｇポリタンパク質をコードする核酸配列を含む第１の核酸構築物を含む第１のパッケージング構築物であって、該Ｇａｇをコードする核酸配列は、フレームシフトまたは翻訳リードスルーを減少する１個以上の変異を含み、かつ少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物；
ｂ．Ｇａｇ−Ｐｏｌポリタンパク質をコードする核酸配列を含む第２の核酸構築物を含む第２のパッケージング構築物であって、該Ｇａｇ−Ｐｏｌをコードする核酸配列は、フレームシフトまたは翻訳リードスルーを減少する１個以上の変異を含み、かつ少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物；
ｃ．エンベロープ糖タンパク質をコードする第３の核酸配列を含む第３の核酸構築物であって、該第３の核酸配列が少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物；および
ｄ．少なくとも１つの目的の遺伝子を含む遺伝子移入構築物
を含む、発現系。
【請求項３７０】
請求項３６９に記載の発現系を含む細胞株。
【請求項３７１】
テトラサイクリントランス活性化因子コーディングに作動可能に連結された核局在化シグナルをコードする第４の核酸配列を含む第４の核酸構築物をさらに含む、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３７２】
前記第４の核酸構築物が転写制御エレメントをさらに含む、請求項３７１に記載の発現系。
【請求項３７３】
前記核局在化シグナルをコードする配列が少なくとも１つのリンカー配列と隣接している、請求項３７１に記載の発現系。
【請求項３７４】
前記リンカー配列が配列番号１５をコードする、請求項３７３に記載の発現系。
【請求項３７５】
前記第４の核酸配列が、５’から３’へ、サイトメガロウイルスプロモーター、配列番号１５をコードする核酸配列、核局在化シグナルをコードする核酸配列、配列番号１５をコードする核酸配列、およびテトラサイクリントランス活性化因子をコードする核酸配列を含む、請求項３７１に記載の発現系。
【請求項３７６】
前記ウイルスエンベロープ糖タンパク質が水疱性口内炎ウイルスのＧタンパク質（ＶＳＶ−Ｇ）である、請求項３７１に記載の発現系。
【請求項３７７】
前記遺伝子移入構築物がマーカーをコードする配列をさらに含み、前記目的の遺伝子および該マーカーをコードする配列が少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３７８】
前記遺伝子移入構築物が第２の目的の遺伝子をさらに含む、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３７９】
前記遺伝子移入構築物が、前記目的の遺伝子と前記マーカーをコードする配列との間のエレメントをさらに含み、該エレメントは、該目的の遺伝子および該マーカーをコードする配列の示差的発現を提供する、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３８０】
前記目的の遺伝子と前記マーカーをコードする配列との間のエレメントが、内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項３７９に記載の発現系。
【請求項３８１】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項３８０に記載の発現系。
【請求項３８２】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項３８０に記載の発現系。
【請求項３８３】
前記内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項３８０に記載の発現系。
【請求項３８４】
前記遺伝子移入構築物が少なくとも１つの転写制御エレメントを含む、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３８５】
前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３８６】
前記転写制御エレメントがテトラサイクリンまたはドキシサイクリンによって調節可能である、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３８７】
少なくとも１つの転写制御エレメントが少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３８８】
少なくとも１つの転写制御エレメントが配列番号６の配列を含む、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３８９】
前記転写制御エレメントがプロモーターである、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３９０】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項３８９に記載の発現系。
【請求項３９１】
少なくとも１つの転写制御エレメントが構成的である、請求項３６９に記載の発現系。
【請求項３９２】
前記構成的転写制御エレメントがプロモーターである、請求項３９１に記載の発現系。
【請求項３９３】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項３９２に記載の発現系。
【請求項３９４】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が異なる転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３７７に記載の発現系。
【請求項３９５】
前記マーカーをコードする配列に作動可能に連結された前記転写制御エレメントが、前記目的の遺伝子に作動可能に連結された前記転写制御エレメントよりも強力である、請求項３９４に記載の発現系。
【請求項３９６】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が反対の方向で発現される、請求項３７７に記載の発現系。
【請求項３９７】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が２つの異なる転写制御エレメントに作動可能に連結される、請求項３９６に記載の発現系。
【請求項３９８】
少なくとも１つの前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項３９７に記載の発現系。
【請求項３９９】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３９６に記載の発現系。
【請求項４００】
前記単一の転写制御エレメントが調節可能である、請求項３９９に記載の発現系。
【請求項４０１】
前記単一の転写制御エレメントが二方向性プロモーターである、請求項３９９に記載の発現系。
【請求項４０２】
ウイルス様粒子を作製する方法であって、
ａ．請求項２０８、２４７、または２８６に記載のパッケージング核酸構築物を細胞に導入する工程；および
ｂ．エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸配列を含むエンベロープ構築物を該細胞に導入し、該エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸配列は、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、工程；および
ｃ．ウイルス様粒子の形成を可能にする条件下に該細胞を維持する工程
を包含する、方法。
【請求項４０３】
遺伝子移入方法であって
ａ．請求項２０８、２４７、または２８６に記載のパッケージング核酸構築物を細胞に導入する工程；および
ｂ．エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸配列を含むエンベロープ構築物を該細胞に導入し、該エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸配列は、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、工程；
ｃ．１つ以上の目的の遺伝子を含む遺伝子移入構築物を該細胞に導入する工程；および
ｄ．ウイルス様粒子の形成を可能にする条件下に該細胞を維持する工程
を包含する、方法。
【請求項４０４】
前記遺伝子移入構築物がマーカーをコードする核酸配列をさらに含み、前記目的の遺伝子および該マーカーをコードする核酸配列が少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項４０３に記載の方法。
【請求項４０５】
前記遺伝子移入構築物が、前記目的の遺伝子の３’に位置するウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメントをさらに含む、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４０６】
前記遺伝子移入構築物の前記転写制御エレメントがプロモーターである、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４０７】
前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４０８】
前記遺伝子移入構築物が、前記目的の遺伝子と前記マーカーをコードする配列との間のエレメントをさらに含み、該エレメントが、該目的の遺伝子および該マーカーをコードする配列の示差的発現を提供する、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４０９】
前記目的の遺伝子と前記マーカーをコードする配列との間の前記エレメントが、内部リボソーム侵入部位または内部リボソーム侵入部位様エレメントである、請求項４０８に記載の方法。
【請求項４１０】
前記内部リボソーム侵入部位または前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項４０９に記載の方法。
【請求項４１１】
前記内部リボソーム侵入部位も前記内部リボソーム侵入部位様エレメントも天然に存在しない、請求項４０９に記載の方法。
【請求項４１２】
前記内部リボソーム侵入部位がＥＭＣ−ウイルスＩＲＥＳまたはＨＣＶ−ウイルスＩＲＥＳである、請求項４０９に記載の方法。
【請求項４１３】
前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが天然に存在する、請求項４０９に記載の方法。
【請求項４１４】
前記内部リボソーム侵入部位または前記内部リボソーム侵入部位様エレメントが変異している、請求項４０９に記載の遺伝子移入構築物。
【請求項４１５】
前記遺伝子移入構築物が少なくとも１つの転写制御エレメントを含む、請求項４０３に記載の方法。
【請求項４１６】
前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項４１５に記載の方法。
【請求項４１７】
少なくとも１つの転写制御エレメントがテトラサイクリンまたはドキシサイクリンによって調節可能である、請求項４１５に記載の方法。
【請求項４１８】
少なくとも１つの転写制御エレメントが少なくとも１つのｔｅｔオペレーター配列を含む、請求項４１５に記載の方法。
【請求項４１９】
少なくとも１つの転写制御エレメントが配列番号６の配列を含む、請求項４１５に記載の方法。
【請求項４２０】
前記転写制御エレメントがプロモーターである、請求項４１５に記載の方法。
【請求項４２１】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項４２０に記載の方法。
【請求項４２２】
少なくとも１つの転写制御エレメントが構成的である、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４２３】
前記構成的転写制御エレメントがプロモーターである、請求項４２２に記載の方法。
【請求項４２４】
前記プロモーターがＣＭＶベース、ＣＡＧ、ＳＶ４０ベース、熱ショックタンパク質ベース、ｍＨ１ベース、ｈＨ１ベース、ニワトリβアクチンベース、Ｕ６ベース、ユビキチンＣベース、またはＥＦ−１αベースのプロモーターである、請求項４２３に記載の方法。
【請求項４２５】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が異なる転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４２６】
前記目的の遺伝子に作動可能に連結された前記転写制御エレメントが、前記マーカーをコードする配列に作動可能に連結された前記転写制御エレメントよりも強力である、請求項４２５に記載の方法。
【請求項４２７】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が反対の方向で発現される、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４２８】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が２つの異なる転写制御エレメントに作動可能に連結される、請求項４２７に記載の方法。
【請求項４２９】
少なくとも１つの前記転写制御エレメントが調節可能である、請求項４２８に記載の方法。
【請求項４３０】
前記マーカーをコードする配列および前記目的の遺伝子が単一の転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項４２７に記載の方法。
【請求項４３１】
前記単一の転写制御エレメントが調節可能である、請求項４３０に記載の方法。
【請求項４３２】
前記単一の転写制御エレメントが二方向性プロモーターである、請求項４２７に記載の方法。
【請求項４３３】
前記二方向性プロモーターが調節可能である、請求項４３０に記載の方法。
【請求項４３４】
テトラサイクリントランス活性化因子をコードする核酸配列に作動可能に連結された核局在化シグナルをコードする核酸配列を含む核局在化シグナルをコードする構築物を前記細胞に導入する工程をさらに包含する、請求項４２７に記載の方法。
【請求項４３５】
前記核局在化シグナルをコードする構築物が転写制御エレメントをさらに含む、請求項４３４に記載の方法。
【請求項４３６】
前記転写制御エレメントがプロモーターまたはエンハンサーである、請求項４３５に記載の方法。
【請求項４３７】
前記核局在化シグナルをコードする配列が少なくとも１つのリンカー配列と隣接している、請求項４３４に記載の方法。
【請求項４３８】
前記リンカー配列が配列番号１５をコードする、請求項４３７に記載の方法。
【請求項４３９】
前記核局在化シグナルをコードする構築物が、５’から３’へ、サイトメガロウイルスプロモーター、配列番号１５をコードする核酸配列、核局在化シグナルをコードする核酸配列、配列番号１５をコードする核酸配列、およびテトラサイクリントランス活性化因子をコードする核酸配列を含む、請求項４３４に記載の方法。
【請求項４４０】
目的の外因性遺伝子を含む細胞であって、該目的の遺伝子が、請求項４０３に記載の方法によって該細胞に移入される、細胞。
【請求項４４１】
細胞による組換えタンパク質の発現を可能にするのに適切な条件下で、請求項４０２に記載の方法によって作製されたウイルス粒子と標的細胞を接触させる工程を包含する、組換えタンパク質を作製する方法。
【請求項４４２】
免疫応答を誘発するために十分な量で、請求項４４１に記載の方法によって作製された組換えタンパク質を被験体に導入する工程を包含する、被験体における免疫応答を誘導する方法。
【請求項４４３】
前記標的細胞が糖タンパク質上で均一なグリコシル化パターンを生成する、請求項４４２に記載の方法。
【請求項４４４】
前記標的細胞は、対照細胞と比較してＧｎＴＩ活性が減少している、請求項４４３に記載の方法。
【請求項４４５】
請求項４４３の方法によって作製されたタンパク質を被験体に投与する工程を包含する、選択されたタンパク質で被験体を治療する方法。
【請求項４４６】
ウイルス粒子形成を調節する因子をスクリーニングする方法であって
ａ．第１の核酸配列および第２の核酸配列を含むパッケージング核酸構築物を細胞に導入する工程であって、該第１の核酸配列はＧａｇポリタンパク質をコードし、該第２の核酸配列はＧａｇ−Ｐｒｏ−Ｐｏｌポリタンパク質をコードし、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、フレームシフトまたは翻訳リードスルーを減少する１個以上の変異を含み、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、同じヌクレオチド配列の異なるコード領域から発現され、そして該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、スクリーニングされる該因子に作動可能に連結されている、工程；
ｂ．エンベロープ糖タンパク質をコードする第３の核酸配列を含むエンベロープ構築物を該細胞に導入する工程であって、該第３の核酸配列は、少なくとも１つの転写制御エレメントに作動可能に連結されている、工程；
ｃ．ウイルス粒子の形成を可能にするのに適切な条件下で該細胞を培養する工程；
ｄ．該ウイルス粒子を検出する工程；
ｅ．対照培養物と比較した場合に、スクリーニングされる該培養物中でのウイルス粒子の数の増加または減少は、該因子がウイルス粒子形成を調節することを示す、工程
を包含する、方法。
【請求項４４７】
トランスジェニック動物を作製する方法であって、
ａ．請求項４０２に記載の方法によって作製したウイルス粒子を接合体に導入する工程；
ｂ．該接合体を分娩まで成長させる工程；
ｃ．そのゲノムが、目的の遺伝子を発現可能である核酸構築物を含む動物を入手する工程；
ｄ．Ｆ１子孫を得るために、該動物を非トランスジェニック動物と交配させる工程；および
ｅ．そのゲノムが、該目的の遺伝子を発現可能である該核酸構築物を含む動物を選択する工程であって、該動物が、選択された目的の遺伝子を発現する、工程
を包含する、方法。
【請求項４４８】
請求項４４７に記載の方法によって作製されたトランスジェニック動物。
【請求項４４９】
パッケージング系であって
ａ．Ｇａｇポリタンパク質をコードする第１の変異した核酸を含む第１の核酸構築物であって、該第１の変異した核酸は転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物；および
ｂ．Ｇａｇ−Ｐｏｌポリタンパク質をコードする第２の変異した核酸を含む第２の核酸構築物であって、該第２の変異した核酸は転写制御エレメントに作動可能に連結されている、構築物；
を含み、
ｃ．該第１の核酸構築物および該第２の核酸構築物の変異は、ウイルス粒子形成を可能にするＧａｇおよびＧａｇ−Ｐｏｌポリタンパク質の発現の比率を生じる、パッケージング系。
【請求項４５０】
前記ＧａｇおよびＧａｇ−Ｐｏｌポリタンパク質の発現の比率が約９９：１〜約８０：２０である、請求項４４９に記載のパッケージング系。
【請求項４５１】
前記第１の変異した核酸が最小ＣＭＶプロモーターに作動可能に連結され、前記第２の変異した核酸が熱ショックタンパク質プロモーターに作動可能に連結されている、請求項４４９に記載のパッケージング系。
【請求項４５２】
目的の抗原を結合する抗体を同定する方法であって、該方法は
ａ．目的の抗原を結合する抗体を含むことが疑われるサンプル、および該目的の抗原を発現する標的細胞を接触させる工程であって、
該標的細胞は、請求項１、５５、２０８、２４７、および２８６に記載の核酸構築物の１つ以上を含む、工程；ならびに
ｂ．該サンプル中の抗体が、該標的細胞によって発現された該目的の抗原に結合するか否かを決定し、それによって、該目的の抗原に結合する該抗体が、該目的の抗原を結合する抗体として同定される、工程
を包含する、方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５−１】
【図１５−２】
【図１６】
【図１７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５−１】
【図１５−２】
【図１６】
【図１７】
【公表番号】特表２００９−５１９７１５（Ｐ２００９−５１９７１５Ａ）
【公表日】平成２１年５月２１日（２００９．５．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５４５８８４（Ｐ２００８−５４５８８４）
【出願日】平成１８年１２月１８日（２００６．１２．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０４８２４３
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１０２８７２
【国際公開日】平成１９年９月１３日（２００７．９．１３）
【出願人】（５０６３８５３３５）ザ ユーエービー リサーチ ファウンデーション (10)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年５月２１日（２００９．５．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１２月１８日（２００６．１２．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０４８２４３
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１０２８７２
【国際公開日】平成１９年９月１３日（２００７．９．１３）
【出願人】（５０６３８５３３５）ザ ユーエービー リサーチ ファウンデーション (10)
【Ｆターム（参考）】
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