エキセンジン含有徐放性製剤組成物、エキセンジン含有徐放性微粒球、及びその製造方法
本発明は、有効成分としてエキセンジンを含む生体利用率の高い徐放性製剤組成物、エキセンジン含有徐放性微粒球、及びその製造方法に関するものである。
より詳細には、本発明は、有効性分としてのエキセンジン、特定の粘度を有する生分解性高分子、及びコーティング物質を含み、有効成分の過度な初期放出がなく一定の期間にわたって有効濃度で持続的に放出することができると共に生体利用率の高い徐放性製剤組成物；有効性分としてのエキセンジンとこれを封入する生分解性高分子を含むコア、及び前記コアをコーティングするコーティング層を含む徐放性微粒球；ならびに、エキセンジン、生分解性高分子、及び溶媒を混合する段階と、前記混合物から溶媒を除去して、硬化された微粒球を調製する段階と、前記硬化された微粒球の表面にコーティング物質コーティング層を形成する段階とを含む徐放性微粒球の製造方法に関するものである。
より詳細には、本発明は、有効性分としてのエキセンジン、特定の粘度を有する生分解性高分子、及びコーティング物質を含み、有効成分の過度な初期放出がなく一定の期間にわたって有効濃度で持続的に放出することができると共に生体利用率の高い徐放性製剤組成物；有効性分としてのエキセンジンとこれを封入する生分解性高分子を含むコア、及び前記コアをコーティングするコーティング層を含む徐放性微粒球；ならびに、エキセンジン、生分解性高分子、及び溶媒を混合する段階と、前記混合物から溶媒を除去して、硬化された微粒球を調製する段階と、前記硬化された微粒球の表面にコーティング物質コーティング層を形成する段階とを含む徐放性微粒球の製造方法に関するものである。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２００７年３月２７日付けで出願された韓国特許出願第１０-２００７-００２９５８６号の優先権利益を主張し、この韓国特許出願の明細書は、参照することにより本明細書に組み込まれる。
【０００２】
(技術分野)
本発明は、有効成分としてエキセンジンを含む生体利用率の高い徐放性製剤組成物、エキセンジン含有徐放性微粒球、及びその製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００３】
エキセンジンは、人体内においてグルカゴン類似ペプチド-１（ＧＬＰ-１）ホルモンの役割を果たすＧＬＰ-１拮抗剤として作用し、ＧＬＰ-１（７-３６）ＮＨ２アミノ酸配列と５３％の類似性を示す（Goke, et al., J. Biol. Chem., 268: 19650-19655, 1993）。
【０００４】
ＧＬＰ-１は、代表的なインクレチンホルモンであって、腸内のＬ細胞から分泌されるペプチドとして消化器官に飲食物が入る場合に分泌され、膵臓のベータ細胞に作用してインスリンの分泌を促進して、血糖値を低下させる役割を果たす（Orskov, et al., Diabetes, 42:658-661, 1993）。また、ＧＬＰ-１は、膵臓のアルファ細胞に作用してグルカゴンの分泌を抑制し（D'Alessio, et al., J. Clin. Invest., 97:133-138, 1996）、胃腸内の飲食物の除去時間を遅延させて、飲食物の摂取を抑制する作用をするものとしても知られている（Schira, et al., J. Clin. Invest., 97:92-103, 1996）。ＧＬＰ-１は、単純に膵臓のベータ細胞でインスリンの分泌を促進するだけでなく、ベータ細胞の増殖及び生存率を増加させる役割も果たす（Buteau, et al., Diabetologia, 42:856-864, 1999）。しかし、分泌されたＧＬＰ-１は、ジペプチジルぺプチダーゼ-４（ＤＰＰ-４）酵素によってＮ-末端部位が切られて活性を失うようになるが、ＧＬＰ-１の半減期は約２分程度と非常に短いものとして知られている（Pridal, et al., Eur. J. Drug. Metab. Pharmacokinet., 21:51-59, 1996; Deacon, et al., Diabetes, 47:764-769, 1998）。
【０００５】
一方、エキセンジンは、生体内で血糖値に応じてインスリンの分泌を増加させ、食後のグルカゴンの分泌を抑制し、胃腸内の飲食物の除去速度を遅延させて、飲食物の摂取を抑制する作用をするものとして知られている（Edwards, et al., Am. J. Physiol. Endocrinol Metab., 281:155-161, 2001）。また、エキセンジンは、ＧＬＰ-１とは異なって、ＤＰＰ-４酵素によってＮ-末端部位が切られないため、ＧＬＰ-１より長時間にわたって生体内で作用するという長所がある（Thum, et al., Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes., 110:113-118, 2002）。エキセンジンは、ドクトカゲおよびタマトカゲの唾液分泌物から発見されたものであって、エキセンジン-３は、メキシコドクトカゲ（Heloderma Horridum）の毒に存在し、エキセンジン-４は、アメリカドクトカゲ（Heloderma suspectum）の毒に存在する（Eng, J., et al., J. Biol. Chem., 265:20259-62, 1990; Eng., J., et al., J. Biol. Chem., 267:7402-05, 1992）。
【０００６】
エキセンジン-４を糖尿病ｏｂ/ｏｂマウスに１日１回、腹腔内に注入することによって、長期持続性の血糖値低下効果があることが確認された（Greig et al., Diabetologia 42:45-50, 1999）。エキセンジン-４は、最近では、１日２回５μｇまたは１０μｇずつ皮下注射する注射剤の形態に開発されて、第２型の糖尿病治療剤として使用されている。エキセンジンは、ＤＰＰ-４酵素に対して安定しているが、人体に０.２μｇ/ｋｇ以上を皮下注射する場合に、嘔吐、悪心、頭痛などの副作用を誘発するものとして知られている（Drug Development Research, 53:260-267, 2001）。エキセンジンの投与において、初期放出及び初期高血中濃度による副作用によって投与量が制限されることは、エキセンジンの徐放性製剤を開発するのに最も大きな障害物となっている。
【０００７】
一般に、水溶性薬物の徐放性製剤の場合、投与後の初期段階に放出率が非常に高く、このような水溶性薬物の徐放性製剤の過度な初期放出を抑制するための多様な研究が進められてきた。特に、エキセンジンの場合、徐放性製剤を開発する際に、過度な初期放出による嘔吐、悪心、頭痛などの副作用を防止するために、初期放出を抑制しなければならない。
【０００８】
末端肥大症などの治療に使用されるオクトレオチドを含む徐放性微粒球製剤の初期放出を抑制するために、微粒球内にグルコースを薬物と共に含む１次エマルジョンを調製して、二重乳化蒸発法によって微粒球を製造して研究した例がある。この研究で、薬物と共にグルコースを封入すれば初期放出量を減少させることができることが明らかになった。しかし、微粒球の初期放出率が５％程度である製造条件では、グルコースを添加して製造しても封入量が増加せず、むしろ初期放出が増加する傾向を示した（J. Wang et al., Biometerials, 25:1919-1927, 2004）。
【０００９】
したがって、上記引用文献に開示された技術は、初期放出率を５％以下にして、初期放出による副作用を最小化しなければならないエキセンジンの徐放性製剤の製造には適用が難しい。
【００１０】
一方、下記の特許文献１（米国特許第７１６４００５号明細書）及び特許文献２（ＵＳ２００５/０２７１７０２）には、ラクチド及びグリコリドの比率が５０:５０であるポリラクチド‐コ‐グリコリド（PLGA）高分子を利用して、エキセンジン含有微粒球を相分離法によって製造する方法が記載されている。これらの特許文献１および２では、高分子としてＡｌｋｅｒｍｅｓ社のｐｏｌｙｍｅｒ３Ａ（ＩＶ=０.３８ｄＬ/ｇ）、ｐｏｌｙｍｅｒ４Ａ（ＩＶ=０.４２ｄＬ/ｇ）などを使用し、特に、ｐｏｌｙｍｅｒ４Ａを主に使用した。特許文献１および２は、エキセンジンと各々ｐｏｌｙｍｅｒ３Ａまたは４Ａとからなる微粒球の生体利用率を改善し、ペプチド薬物の安定性を改善するために、薬物と共にスクロース、マンニトールなどの糖と、硫酸アンモニウムなどの塩析（salting-out）成分とを混合して１次エマルジョンを製造して、微粒球を製造した。つまり、微粒球の製造時に、糖や硫酸アンモニウムなどの添加物を追加することによって、エキセンジンが高分子マトリックスから十分に放出されるようにして、生体利用率を改善させようとした。その結果、生体利用率はある程度改善されたが、これとともに高いＣｍａｘ値が示されたため、投与時に高い初期放出による副作用が現れるという短所が依然としてあった。つまり、生体利用率が高くなると、初期放出が過剰になる傾向があり、初期放出が低くなると、生体利用率が再度低くなる傾向がある。
【００１１】
このように、従来の徐放性微粒球の製造技術は、初期放出による副作用を最小化すると同時に生体利用率の改善が要求されるエキセンジン含有徐放性微粒球製剤に適用するには、過度な初期放出、低い生体利用率などの限界があるため適切でない。
【００１２】
したがって、このような上記問題点を解決し、低い初期放出及び改善された生体利用率特性を有するエキセンジン含有生分解性徐放性製剤の開発が切実に要求されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】米国特許第７１６４００５号明細書
【特許文献２】ＵＳ２００５/０２７１７０２
【特許文献３】韓国特許第１４０２０９号
【発明の概要】
【００１４】
このような要求に応じるために、本発明は、生分解性高分子を担体として、有効性分としてエキセンジンを含む徐放性製剤を提供することにおいて、従来の徐放性製剤の過度な初期放出を減少させ、生体利用率が高いエキセンジン含有徐放性製剤、及びその製造方法を提供することをその目的とする。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】エキセンジン含有ＲＧ５０２Ｈ製剤のコーティング物質コーティング層の有無によるラットでの血中薬物濃度の変化を示したグラフである。
【図２】エキセンジン含有ＲＧ５０３Ｈ製剤のコーティング物質コーティング層の有無によるラットでの血中薬物濃度の変化を示したグラフである。
【図３】エキセンジン含有ＲＧ５０２Ｈ:ＲＧ５０３Ｈ=１:１製剤混合物のコーティング物質コーティング層の有無、及びコーティング物質の種類によるラットでの血中薬物濃度の変化を示したグラフである。
【図４ａ】従来の二重乳化蒸発法によって調製された微粒球の電子顕微鏡写真である。
【図４ｂ】本発明による二重乳化蒸発法によって微粒球の表面をコーティング物質でコーティングした後の電子顕微鏡写真である。
【図４ｃ】１次水相にコーティング物質を添加して、二重乳化蒸発法によって調製した微粒球の電子顕微鏡写真である。
【図４ｄ】油相の高分子と共にコーティング物質を溶解させて、二重乳化蒸発法によって調製した微粒球の電子顕微鏡写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下の詳細な説明によって、本発明がより完全に認識され、これによる利点がより明確になるであろう。
【００１７】
本発明は、投与時の薬物の初期放出を最小化し、生体利用率を高くしたエキセンジン含有徐放性微粒球組成物に関するものである。
【００１８】
上記特許文献３（韓国特許第１４０２０９号）には、水溶性薬物の初期放出を抑制するために、水溶性薬物を所定の塩基性有機物と共に溶解させて１次エマルジョンを製造した後で、二重乳化蒸発法を利用した微粒球の製造方法について記述している。上記文献は、生分解性高分子の酸性残基と薬物保有物質の塩基性残基との間の反応によって堅固な膜を形成させて薬物の封入率を増加させ、不要な初期大量放出を抑制しようとしたものである。しかし、このような方法は、上記文献でも言及された通り、ＬＨＲＨ、ＴＲＨ、またはその誘導体などの中性または塩基性ポリペプチドの徐放性組成物の製造には有用であるが、薬物の特性によって異なり、特に、酸性薬物で、ＬＨＲＨ、ＴＲＨより分子量が相対的に大きなエキセンジンに適用する場合には、その効果が微々たるものとなる恐れがある。同時に、このような塩基性有機物の添加によって微粒球の表面の多孔性が増加するため、初期放出による副作用の発現可能性のあるエキセンジン含有徐放性製剤に適用するのは難しい。
【００１９】
したがって、本発明者らは、生分解性高分子を担体として、エキセンジンを含む微粒球の製造過程中または製造後に、微粒球の表面に所定のコーティング物質をコーティングすることによって、過度な初期放出による副作用がなく、生体利用率の高い微粒球が製造されるということを確認して、本発明を完成させた。
【００２０】
まず、本発明は、有効性分としてのエキセンジン、特定の粘度を有する生分解性高分子、及びコーティング物質を含み、有効成分の過度な初期放出がなく一定の期間にわたって有効濃度で持続的に放出することができると共に生体利用率の高い徐放性製剤組成物を提供する。
【００２１】
また、他の側面において、本発明は、有効性分としてのエキセンジン及び生分解性高分子を含むコア、及び前記コアをコーティングするコーティング層を含む徐放性微粒球を提供する。
【００２２】
これをより詳細に説明すれば、次の通りである。
【００２３】
本発明において、前記エキセンジンは、エキセンジン-３（配列番号1）及びエキセンジン-４（配列番号2）、これらの断片、誘導体、ならびにこれらの薬学的に許容可能な塩をすべて含む。
【００２４】
前記エキセンジン誘導体は、下記の化学式Ｉで定義される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩である。
【００２５】
［化学式Ｉ］
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28 - Z1,
前記式Ｉにおいて、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４-イミダゾプロピオニルであり；
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり；
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり；
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり；
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり；
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり；
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＣ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイルである）；
Ｘａａ２２は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ，Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、３級-ブチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ２７は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ２８は、ＡｌａまたはＡｓｎであり；
Ｚ１は、-ＯＨ、
-ＮＨ２、
Ｇｌｙ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、または
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２
［ここで、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８は、各々独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、またはＮ-アルキルアラニンであり、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、Ｚ２は、-ＯＨまたは-ＮＨ２である］であり、
但し、Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、及びＸａａ２８のうちの３個以下のみがＡｌａであり、Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
【００２６】
Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、及びＮ-アルキルアラニンに好ましいＮ-アルキル基には、好ましくは炭素原子数１乃至約６、より好ましくは炭素原子数１乃至４の低級アルキル基が含まれる。適切な化学式Ｉの化合物には、“新規のエキセンジンアゴニスト化合物”という発明の名称で、１９９８年１１月１３日付けで出願されたＰＣＴ出願番号第ＰＣＴ/ＵＳ９８/２４２７３号で、実施例１乃至８９で同定された化合物（各々“化合物１乃至８９”）及び実施例１０４及び１０５で同定された相応の化合物が含まれる（上記引用文献は、参照することにより本明細書に組み込まれる）。
【００２７】
好ましい化学式Ｉのエキセンジン誘導体には、Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、または４-イミダゾプロピオニルであるものが含まれる。より好ましくは、Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｌａ、または４-イミダゾプロピオニルである。最も好ましくは、Ｘａａ１は、Ｈｉｓまたは４-イミダゾプロピオニルである。
【００２８】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２がＧｌｙであるのが好ましい。
【００２９】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ３がＡｌａであるのが好ましい。
【００３０】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ４がＡｌａであるのが好ましい。
【００３１】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ９がＡｌａであるのが好ましい。
【００３２】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１４がＬｅｕ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであるのが好ましい。
【００３３】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２１がＬｙｓ-ＮＨε-Ｒ（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＣ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイルである）であるのが好ましい。
【００３４】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２５がＴｒｐまたはＰｈｅであるのが好ましい。
【００３５】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ６がＡｌａ、Ｐｈｅ、またはナフチルアラニンであり、Ｘａａ２２がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり、Ｘａａ２３がＩｌｅまたはＶａｌであるのが好ましい。また、化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８がＰｒｏ、ホモプロリン、チオプロリン、及びＮ-アルキルアラニンから独立的に選択されるのが好ましい。好ましくは、Ｚ１が-ＮＨ２であり、Ｚ２が-ＮＨ２である。
【００３６】
１つの側面において、前記化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１がＡｌａ、Ｈｉｓ、またはＴｙｒであり、より好ましくは、ＡｌａまたはＨｉｓであり；Ｘａａ２がＡｌａまたはＧｌｙであり；Ｘａａ６がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり；Ｘａａ１４がＡｌａ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；Ｘａａ２２がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり；Ｘａａ２３がＩｌｅまたはＶａｌであり；Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８がＰｒｏ、ホモプロリン、チオプロリン、またはＮ-アルキルアラニンから独立的に選択され；Ｘａａ３９がＳｅｒまたはＴｙｒであり、より好ましくは、Ｓｅｒである。より好ましくは、Ｚ１が-ＮＨ２である。
【００３７】
特に好ましい化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１がＨｉｓまたはＡｌａであり；Ｘａａ２がＧｌｙまたはＡｌａであり；Ｘａａ３がＡｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；Ｘａａ４がＡｌａまたはＧｌｙであり；Ｘａａ５がＡｌａまたはＴｈｒであり；Ｘａａ６がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり；Ｘａａ７がＴｈｒまたはＳｅｒであり；Ｘａａ８がＡｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；Ｘａａ９がＡｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；Ｘａａ１０がＡｌａ、Ｌｅｕ、またはペンチルグリシンであり；Ｘａａ１１がＡｌａまたはＳｅｒであり；Ｘａａ１２がＡｌａまたはＬｙｓであり；Ｘａａ１３がＡｌａまたはＧｌｎであり；Ｘａａ１４がＡｌａ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、またはペンチルグリシンであり；Ｘａａ１５がＡｌａまたはＧｌｕであり；Ｘａａ１６がＡｌａまたはＧｌｕであり；Ｘａａ１７がＡｌａまたはＧｌｕであり；Ｘａａ１９がＡｌａまたはＶａｌであり；Ｘａａ２０がＡｌａまたはＡｒｇであり；Ｘａａ２１がＡｌａまたはＬｅｕであり；Ｘａａ２２がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり；Ｘａａ２３がＩｌｅ、Ｖａｌ、または３級-ブチルグリシンであり；Ｘａａ２４がＡｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；Ｘａａ２５がＡｌａ、Ｔｒｐ、またはＰｈｅであり；Ｘａａ２６がＡｌａまたはＬｅｕであり；Ｘａａ２７がＡｌａまたはＬｙｓであり；Ｘａａ２８がＡｌａまたはＡｓｎであり；Ｚ１が-ＯＨ、-ＮＨ２、Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、またはＧｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２であり；Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８が独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、チオプロリン、またはＮ-メチルアラニンであり；Ｘａａ３９がＳｅｒまたはＴｙｒであり、より好ましくは、Ｓｅｒであり；Ｚ２が-ＯＨまたは-ＮＨ２であるが；但し、Ｘａａ３、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、及びＸａａ２８のうちの３個以下のみがＡｌａであり；Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
【００３８】
特に好ましい化学式Ｉの化合物には、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９８／２５７２８に記載された配列番号:５乃至９３のアミノ酸配列を有する化合物、または米国仮出願第６０/０６６，０２９号に記載された化合物が含まれる（これらの文献は、参照することにより本明細書に組み込まれる）。
【００３９】
特に好ましい側面によれば、化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１４がＡｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、またはペンチルグリシンであり、より好ましくは、Ｌｅｕまたはペンチルグリシンであり、Ｘａａ２５がＡｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、より好ましくは、Ｐｈｅまたはナフチルアラニンである。これら化合物は、試験管内及び生体内の両方において、ならびに当該化合物の合成中において、酸化的分解にそれほど敏感でない。
【００４０】
また他の側面において、前記エキセンジン誘導体は、次の化学式ＩＩで定義される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩である。
【００４１】
［化学式ＩＩ］
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 X1- Z1
前記式ＩＩにおいて、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４-イミダゾプロピオニルであり；
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり；
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり；
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり；
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ，ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり；
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり；
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｃ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイル、またはシクロアレイル-アルカノイルである）；
Ｘａａ２２は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、３級-ブチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり；
Ｘ１は、Ｌｙｓ Ａｓｎ、Ａｓｎ Ｌｙｓ、Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ Ａｓｎ、Ａｓｎ Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ、Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ Ａｌａ、Ａｌａ Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｃ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイル、またはシクロアルキルアルカノイルである）；
Ｚ１は、-ＯＨ、
-ＮＨ２、
Ｇｌｙ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、または
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２
［ここで、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８は、各々独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、またはＮ-アルキルアラニンであり、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、Ｚ２は、-ＯＨまたは-ＮＨ２である］であり、
但し、Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、及びＸａａ２６のうちの３個以下のみがＡｌａであり；Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、または４-イミダゾプロピオニルである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
【００４２】
好ましい化学式ＩＩのエキセンジン誘導体には、Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａａｌ、Ｎｏｒｖａｌ、または４-イミダゾプロピオニルであるものが含まれる。好ましくは、Ｘａａ１がＨｉｓ、４-イミダゾプロピオニル、またはＡｌａであり、より好ましくは、Ｈｉｓまたは４-イミダゾプロピオニルである。
【００４３】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２がＧｌｙであるのが好ましい。
【００４４】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ４がＡｌａであるのが好ましい。
【００４５】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ９がＡｌａであるのが好ましい。
【００４６】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１４がＬｅｕ、ペンチルグリシンまたはＭｅｔであるのが好ましい。
【００４７】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２５がＴｒｐまたはＰｈｅであるのが好ましい。
【００４８】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ６がＡｌａ、Ｐｈｅ、またはナフチルアラニンであり、Ｘａａ２２がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり、Ｘａａ２３がＩｌｅまたはＶａｌであるのが好ましい。
【００４９】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｚ１が-ＮＨ２の化合物を含むのが好ましい。
【００５０】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８がＰｒｏ、ホモプロリン、チオプロリン、及びＮ-アルキルアラニンからなる群より独立的に選択される化合物を含むのが好ましい。
【００５１】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ３９がＳｅｒまたはＴｙｒであるのが好ましく、Ｓｅｒの化合物を含むのがより好ましい。
【００５２】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｚ２が-ＮＨ２の化合物を含むのが好ましい。
【００５３】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｚ１が-ＮＨ２の化合物を含むのが好ましい。
【００５４】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２１がＬｙｓ-ＮＨε-Ｒ（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＣ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイルである）である化合物を含むのが好ましい。
【００５５】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘ１がＬｙｓＡｓｎ、Ｌｙｓ-ＮＨε-ＲＡｓｎ、またはＬｙｓ-ＮＨε-ＲＡｌａ（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＣ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイルである）である化合物を含むのが好ましい。
【００５６】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、ＷＯ９９/０２５７２８に記載された配列番号９５乃至１１０で同定されたものから選択されたアミノ酸配列を有する化合物を含む。また、前記化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、“新規のエキセンジンアゴニスト化合物”という発明の名称で、１９９８年１１月１３日付けで出願されたＰＣＴ出願番号第ＰＣＴ/ＵＳ９８/２４２１０号に記載された、配列番号５乃至９３に同定されたアミノ酸配列を有する化合物を含む。また他の側面において、前記化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、ＷＯ９９/００７４０４に記載された配列番号３７乃至４０のアミノ酸配列を有する化合物を含むことができる（これらの文献は、参照することにより本明細書に組み込まれる）。
【００５７】
前記化学式Ｉ及びＩＩで使用された略語は、次のような意味を有する。
【００５８】
“ＡＣＮ”または“ＣＨ３ＣＮ”は、アセトニトリルを示す。
【００５９】
“Ｂｏｃ”、“ｔＢｏｃ”、または“Ｔｂｏｃ”は、ｔ−ブトキシカルボニルを示す。
【００６０】
“ＤＣＣ”は、Ｎ,Ｎ′―ジシクロヘキシルカルボジイミドを示す。
【００６１】
“Ｆｍｏｃ”は、フルオレニルメトキシカルボニルを示す。
【００６２】
“ＨＢＴＵ”は、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾル−１−イル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロフォスフェイトを示す。
【００６３】
“ＨＯＢｔ”は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾル一水和物を示す。
【００６４】
“ｈｏｍｏＰ”または“ｈＰｒｏ”は、ホモプロリンを示す。
【００６５】
“ＭｅＡｌａ”または“Ｎｍｅ”は、Ｎ−メチルアラニンを示す。
【００６６】
“ｎａｐｈ”は、ナフチルアラニンを示す。
【００６７】
“ｐＧ”または“ｐＧｌｙ”は、ペンチルグリシンを示す。
【００６８】
“ｔＢｕＧ”は、３級−ブチルグリシンを示す。
【００６９】
“ＴｈｉｏＰ”または“ｔＰｒｏ”は、チオプロリンを示す。
【００７０】
“３Ｈｙｐ”は、３−ヒドロキシプロリンを示す。
【００７１】
“４Ｈｙｐ”は、４−ヒドロキシプロリンを示す。
【００７２】
“ＮＡＧ”は、Ｎ−アルキルグリシンを示す。
【００７３】
“ＮＡＰＧ”は、Ｎ−アルキルペンチルグリシンを示す。
【００７４】
“Ｎｏｒｖａｌ”は、ノルバリンを示す。
【００７５】
好ましい実施形態において、エキセンジン断片または誘導体は、エキセンジン-４（１-２８）（配列番号３）、エキセンジン-４（１-２８）アミド、エキセンジン-４（１-３０）（配列番号４）、エキセンジン-４（１-３０）アミド、エキセンジン-４（１-３１）（配列番号５）、エキセンジン-４（１-３１）アミド、１４Ｌｅｕ２５Ｐｈｅエキセンジン-４（配列番号６）、１４Ｌｅｕ２５Ｐｈｅエキセンジン-４アミド、及びこれらの薬学的に利用可能な塩からなる群より選択されたものである。
【００７６】
本発明の徐放性製剤組成物及び徐放性微粒球に含まれている有効性分としてのエキセンジンの含有量は、エキセンジン、生分解性高分子、及びコーティング物質からなる組成物または微粒球１００質量部に対して０.１乃至１０質量部であり、より好ましくは、０.８乃至６質量部である。本発明の組成物または微粒球内のエキセンジンの含有量が前記範囲より低い場合には、薬物本来の効果を有効に発揮することができず、前記の範囲より高い場合には、初期放出量が増加して、過度な初期放出による副作用が現れるため、エキセンジンの含有量は前記の範囲内で使用するのが好ましい。
【００７７】
前記生分解性高分子は、体内に投与すれば徐々に分解されて排出されるために人体に無害である高分子を総称するものであって、ポリラクチド（PLA）、ポリグリコリド（PGA）、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、及びポリアルキルカーボネートからなる群より選択された１種以上の高分子、ならびに前記高分子とポリエチレングリコール（PEG）との共重合体を含み、前記１種以上の高分子は、共重合体または単純混合物の形態であってよい。
【００７８】
例えば、前記生分解性高分子は、ドイツのＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ-Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ社のポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）のうち、ラクチドとグリコリドとの比率が１:１であるＲＧ５０２Ｈ（ＩＶ=０.１６乃至０.２４ｄＬ/ｇ）、ＲＧ５０３Ｈ（ＩＶ=０.３２乃至０.４４ｄＬ/ｇ）、及びＲＧ５０４Ｈ（ＩＶ=０.４５乃至０.６０ｄＬ/ｇ）、ラクチドとグリコリドとの比率が７５:２５であるＲＧ７５２Ｈ（ＩＶ=０.１４乃至０.２２ｄＬ/ｇ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）であるＲ２０２Ｈ（ＩＶ=０.１６乃至０.２４ｄＬ/ｇ）、及びＲ２０３Ｈ（ＩＶ=０.２５乃至０.３５ｄＬ/ｇ）、ならびに米国のＬａｋｅｓｈｏｒｅ Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ社（旧Ａｌｋｅｒｍｅｓ社）のラクチドとグリコリドとの比率が１:１である共重合体、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）のうち、５０５０ＤＬ ２Ａ（ＩＶ=０.１５乃至０.２５ｄＬ/ｇ）、５０５０ＤＬ ３Ａ（ＩＶ=０.２５乃至０.４３/ｇ）、及び５０５０ＤＬ ４Ａ（ＩＶ=０.３８乃至０.４８ｄＬ/ｇ）などからなる群より選択された１種以上のものである。
【００７９】
また他の側面において、前記生分解性高分子は、ポリラクチド（PLA）、ポリグリコリド（PGA）、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、及びポリアルキルカーボネートからなる群より選択された１種の高分子または２種以上の共重合体、ならびに前記高分子とポリエチレングリコール（PEG）との共重合体からなる群より選択された１種以上の高分子と、糖との複合体（以下、高分子-糖複合体という）である。
【００８０】
本発明における高分子糖複合体は、前記の高分子が糖のヒドロキシ基の位置に置換されている形態を意味する。前記糖は、１つ以上、好ましくは１乃至８個のサッカリド単位を含み、各サッカリド単位は、３乃至６個のヒドロキシ基を有するモノサッカリドまたはポリサッカリド、または直鎖構造を有して３乃至６個のヒドロキシ基を含む分子量２０,０００以下の糖アルコール類である。前記糖アルコール類は、マンニトール、ペンタエリトリトール、ソルビトール、リビトール、及びキシリトールなどを含むことができる。高分子は、前記糖に存在するヒドロキシ基のうちの３個以上に結合する。
【００８１】
本発明による高分子糖複合体は、糖に結合された高分子と類似した生体内特性を有し、高分子の種類によって多様な生体分解速度を示し、生体内分解時に生体に無害な高分子と糖とに分解されるので、本発明による生分解性高分子として適用可能である。好ましい実施形態としては、前記高分子糖複合体は、ＰＬＡ−グルコース複合体、ＰＧＡ−グルコース複合体、またはＰＬＧＡ−グルコース複合体である。このうち、ＰＬＧＡ−グルコース複合体は、次のような構造を有するものである。
【化１】
【００８２】
本発明による徐放性微粒球においては、外部に形成されたコーティング物質コーティング層がエキセンジンの初期放出を効果的に制御し、薬物の過度な初期放出による副作用を防止することができ、前記生分解性高分子は、粘度の制限なく使用することができる。
【００８３】
本発明による徐放性製剤組成物において、前記生分解性高分子は、有効成分であるエキセンジンを保護するマトリックスの役割を果たすものであるので、粘度が低すぎると薬物を効果的に保護することができずに薬物の初期放出量が多くなる恐れがあり、粘度が高すぎると、薬物の全体的な放出量が低くなって生体利用率が低くなる恐れがある。本発明においては、組成物と共に含まれているコーティング物質がさらに薬物徐放性作用を果たすので、前記生分解性高分子は、粘度が比較的低い範囲にあるものでも使用可能である。したがって、効果的な薬物の初期放出の調節及び生体利用率の改善のために、前記生分解性高分子は、クロロホルムに１％（Ｗ/Ｖ）の濃度に溶解させた後、２５℃±０.１℃でウベロデ（Ubbelohde）粘度計を利用して測定した固有粘度（IV）が０.１乃至０.６ｄＬ/ｇ、好ましくは０.１５乃至０.３１ｄＬ/ｇ、さらに好ましくは０.１６乃至０.２４ｄＬ/ｇである。
【００８４】
本発明の組成物または微粒球において、生分解性高分子は、薬物放出期間中に薬物を保護して、放出速度を調節するマトリックスの役割を果たすものであって、組成物または微粒球内の含有量は、エキセンジン、生分解性高分子、及びコーティング物質からなる組成物または微粒球１００質量部に対して８５乃至９９.８９質量部、より好ましくは９１乃至９９質量部である。
【００８５】
前記コーティング物質は、薬物の過度な初期放出を防止し、生体利用率を増加させる目的で用いられ、本発明による微粒球では、外部に形成されたコーティング層の形態で存在する。前記コーティング物質は、塩基性アミノ酸、ポリペプチド、及び有機窒素化合物からなる群より選択された１種以上のものである。前記塩基性アミノ酸は、アルギニン、リシン、ヒスチジン、及びこれらの誘導体を含み、前記ポリペプチドは、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上を含むアミノ酸２乃至１０個、好ましくは２乃至５個のポリペプチドであり、前記ポリペプチドは、アミノ酸全体の個数のうち、酸性アミノ酸の数に比べて塩基性アミノ酸の数が多いため、塩基性を示すものである。例えば、前記ポリペプチドは、Ｌ-Ａｌａ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ａｒｇ-Ｌ-Ｐｈｅ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｇｌｙ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｇｌｙ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌｅｕ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｙｒ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｖａｌ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｓｅｒなどである。また、前記有機窒素化合物は、クレアチン、クレアチニン、尿素などである。
【００８６】
本発明の組成物に含まれているコーティング物質の含有量または微粒球の表面にコーティング層として残留するコーティング物質の量は、エキセンジン、生分解性高分子、及びコーティング物質からなる組成物または微粒球１００質量部に対して０.０１乃至５質量部、好ましくは０.０１５乃至３質量部である。コーティング物質の含有量が前記範囲より少ない場合には、効果的な薬物徐放性が難しく、前記範囲より多くても初期放出抑制効果はそれ以上増加しないため、コーティング物質の含有量は前記の範囲にするのが好ましい。
【００８７】
本発明による徐放性微粒球は、コーティング物質でコーティングされた滑らかな表面を有し、平均粒子が１乃至５０μｍ、好ましくは５乃至３０μｍである（図４-ｂ参照）。このように、本発明の微粒球は、滑らかな表面及び適切な大きさを有することによって、効果的な薬物初期徐放性及び優れた生体利用率効果を得ることができる。
【００８８】
本発明による徐放性微粒球または徐放性製剤組成物から製造される微粒球は、従来の剤形とは異なり、微粒球の表面にコーティング物質がコーティングされた構造を有することによって、従来の方法を利用したエキセンジン含有微粒球製剤で達成できなかった過度な初期放出の抑制及び高い生体利用率を同時に達成することができるという利点を有する。特に、エキセンジンは、初期放出量が過剰である場合、嘔吐、悪心、頭痛などの副作用が発生するため、初期放出量を５％以下に制御することが大変重要である。本発明の徐放性微粒球または本発明の組成物から製造された微粒球は、エキセンジンの初期２４時間の放出量を５％以下に減少させる効果がある。エキセンジンを含む徐放性微粒球の投与による副作用を減少させるためには、初期放出量が本発明に記載されたｉｎ ｖｉｔｒｏ放出試験法で試験した場合に、初期１時間の放出量が５％以下、より好ましくは１％以下である。
【００８９】
従来の方法によるエキセンジン含有微粒球の過度な初期放出の副作用を減少させるための多様な試みが行われたが、このような試みのうち、過度な初期放出を抑制するのに成功した例のほとんどは、初期放出量だけでなく全体的な放出量も減少して、薬物の生体利用率が著しく低下する問題があった。しかし、本発明の微粒球は、表面にコーティング物質コーティング層を含むことによって、初期放出量を効果的に制御し、過度な初期放出による副作用を除去すると同時に、薬物の持続的で十分な放出を可能にして、生体利用率も優れているという利点を有する。
【００９０】
本発明の組成物または微粒球は、保護コロイド及び/または安定化剤などの賦形剤をさらに含むことができる。
【００９１】
本発明の組成物または微粒球は、ポリビニルアルコール、アルブミン、ポリビニルピロリドン、ゼラチンなどからなる群より選択された１種以上の保護コロイドをさらに含むことができる。前記保護コロイド物質は、エキセンジン含有微粒球の過度な初期放出の抑制には特別な効果がないが、微粒球間の凝集を防止し、分散性を改善する役割を果たす。このような役割を考慮すれば、前記保護コロイドは、エキセンジン、生分解性高分子、及びコーティング物質からなる組成物または微粒球の重量を基準にして０.０２％（Ｗ/Ｗ）乃至１.０％（Ｗ/Ｗ）の量でさらに含まれるのが好ましい。
【００９２】
また、本発明の組成物または微粒球は、凍結乾燥時に微粒球の安定性を向上させるために、マンニトール、トレハロース、スクロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどの賦形剤をエキセンジン、生分解性高分子、及びコーティング物質からなる微粒球の重量対比５％（Ｗ/Ｗ）乃至３０％（Ｗ/Ｗ）、より好ましくは１０％（Ｗ/Ｗ）乃至２０％（Ｗ/Ｗ）の量でさらに添加することができる。
【００９３】
その他にも、本発明の組成物または微粒球は、本発明が属する技術分野で医薬品の製剤化に通常使用されるすべての添加剤及び賦形剤をさらに含むことができ、これらの種類及び含有量は、関連技術分野の通常の知識を有する者であれば、誰でも容易に決定することができる。
【００９４】
また他の側面において、本発明は、前記のようなエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法を提供する。本発明によるエキセンジン含有徐放性微粒球は、多様な方法によって製造され、微粒球の製造過程中または製造後に、コーティング物質の水溶液に懸濁させて、微粒球の表面をコーティング物質でコーティングすることによって、本発明の徐放性微粒球を製造することができる。本発明による微粒球の製造方法は、二重乳化蒸発法（Ｗ/Ｏ/Ｗ法）、単一乳化蒸発法（Ｏ/Ｗ法）、相分離法、噴霧乾燥法などを用いることができる。
【００９５】
より詳しくは、本発明のエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法は、エキセンジンと生分解性高分子とを混合してＷ/Ｏ型エマルジョンまたは均質混合物を生成させる段階と、前記エマルジョンまたは均質混合物をコーティング物質水溶液に適用して乳化させて、コーティング層を形成する段階とを含むことができる。
【００９６】
より具体的には、二重乳化蒸発法を使用する場合、本発明の製造方法は、エキセンジン水溶液と生分解性高分子が溶解した有機溶媒とを混合して乳化して、一次エマルジョン（Ｗ/Ｏ）を形成する段階と、前記エマルジョンをコーティング物質水溶液に懸濁させてＷ/Ｏ/Ｗエマルジョンを形成させ、これを加温して有機溶媒を除去して硬化させる段階と、前記硬化された微粒球を回収して水洗して凍結乾燥する段階とを含むことができる。前記有機溶媒は、前記生分解性高分子を溶解させて、水溶液と混合されてエマルジョンを形成することができるすべての有機溶媒を用いることができ、例えば、クロロホルム、酢酸エチル、メチレンクロリド、及びメチルエチルケトンからなる群より選択された１種以上であり、好ましくは、メチレンクロリドである。この場合、コーティング物質は２次水相（Ｗ/Ｏ/Ｗエマルジョンの外部水相）に含まれ、有機溶媒が除去されて乾燥されれば、エキセンジンおよび生分解性高分子の外部にコーティング層を形成するようになる。
【００９７】
また、単一乳化蒸発法を使用する場合、本発明の製造方法は、生分解性高分子及びエキセンジンを有機溶媒に溶解させて、均一混合物を製造する段階と、前記均一混合物にコーティング物質水溶液を添加してエマルジョンを製造し、加温して有機溶媒を除去し硬化させる段階と、前記硬化された微粒球を回収して水洗して凍結乾燥する段階とを含むことができる。前記有機溶媒は、生分解性高分子及びエキセンジンを均一に混合させて、水溶液と混合してエマルジョンを形成することができるすべての有機溶媒を用いることができ、例えば、炭素数１乃至５のアルコール、氷酢酸、ギ酸、ジメチルスルホキシド、及びｎ-メチルピロリドンからなる群より選択された１種以上の溶媒とクロロホルム、エチルアセテート、メチルエチルケトン、及びメチレンクロリドからなる群より選択された１種以上の溶媒との混合溶媒、より好ましくは、メタノールとメチレンクロリドとの混合溶媒を用いる。この場合、前記生分解性高分子及びエキセンジンの均一混合物を乳化させて、有機溶媒を除去するための水溶液にコーティング物質を添加することによって、最終的に得られる微粒球の表面にコーティング層が形成される。
【００９８】
また他の側面において、本発明のエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法は、エキセンジンと生分解性高分子とを混合してエマルジョンまたは均質混合物を生成させる段階と、前記エマルジョンまたは均質混合物を粉末化して、１次微粒球を調製する段階と、前記１次微粒球をコーティング物質水溶液に懸濁させて、コーティング層を形成する段階とを含む。
【００９９】
前記粉末化方法には制限がなく、関連技術分野で通常適用される全ての粉末化方法を用いることが可能であり、例えば、相分離法または噴霧乾燥法を適用することができる。
【０１００】
より具体的には、前記粉末化に相分離法を使用する場合、本発明の製造方法は、エキセンジン水溶液及び高分子が溶解した有機溶媒を混合してエマルジョンを製造する段階、またはエキセンジン及び高分子を混合溶媒と混合して均一混合液を製造する段階と、ここにシリコーンオイルなどのオイルを加えて１次微粒球を調製する段階と、前記１次微粒球を生分解性高分子の非溶媒、例えば炭素数１乃至５のアルコールと炭素数１乃至１２のアルカンとの混合溶媒、好ましくは、エタノールとヘプタンとの混合溶媒を加えて前記微粒球から有機溶媒を除去して硬化させる段階と、微粒球をコーティング物質水溶液に懸濁させてコーティング層を形成する段階と、前記コーティング層が形成された微粒球を回収して、洗浄、凍結乾燥する段階とを含むことができる。
【０１０１】
前記有機溶媒は、クロロホルム、エチルアセテート、メチレンクロリド、及びメチルエチルケトンからなる群より選択された１種以上のものであり、好ましくは、メチレンクロリドである。また、前記混合溶媒は、炭素数１乃至５のアルコール、氷酢酸、ギ酸、ジメチルスルホキシド、及びｎ-メチルピロリドンからなる群より選択された１種以上の溶媒と、クロロホルム、エチルアセテート、メチレチルケトン、及びメチレンクロリドからなる群より選択された１種以上とが混合された混合溶媒であり、好ましくは、メタノールとメチレンクロリドとの混合溶媒である。
【０１０２】
また、噴霧乾燥法を使用する場合、本発明の製造方法は、エキセンジン水溶液及び高分子が溶解された有機溶媒を混合してエマルジョンを製造する段階、またはエキセンジン及び高分子を単一溶媒または混合溶媒と混合して均一な溶液を製造する段階と、前記溶液またはエマルジョンを噴霧乾燥させて１次微粒球を調製する段階と、前記１次微粒球をコーティング物質水溶液に懸濁させてコーティング層を形成する段階と、コーティング微粒球を水洗及び凍結乾燥する段階とを含むことができる。
【０１０３】
前記有機溶媒は、クロロホルム、エチルアセテート、メチレンクロリド、及びメチルエチルケトンからなる群より選択された１種以上のものであり、好ましくは、メチレンクロリドである。また、前記単一溶媒は、氷酢酸またはギ酸からなる群より選択された１種以上のものであり、前記混合溶媒は、炭素数１乃至５のアルコール、氷酢酸、ギ酸、ジメチルスルホキシド、及びｎ-メチルピロリドンからなる群より選択された１種以上の溶媒と、クロロホルム、エチルアセテート、メチレチルケトン、及びメチレンクロリドからなる群より選択された１種以上との混合溶媒であり、好ましくは、メタノールとメチレンクロリドとの混合溶媒である。
【０１０４】
本発明の製造方法は、通常の方法で保護コロイド物質を添加する段階をさらに含むことができ、好ましくは、前記保護コロイド物質は、微粒球にコーティング物質をコーティングする際に添加される。
【０１０５】
本発明による製造方法に使用された前記水相に溶解されたコーティング物質またはコーティング物質水溶液は、０.０１Ｍ乃至１Ｍの濃度で用い、より好ましくは、０.１Ｍ乃至０.５Ｍの濃度で使用することができる。コーティング物質の水溶液の濃度が前記範囲より低い場合には、微粒球の表面にコーティング物質が十分にコーティングされず、前記範囲より高い場合には、コーティング物質が過飽和溶液になって、飽和状態溶液での初期放出の抑制効果よりも改善されないため、本発明の微粒球製造に使用されるコーティング物質の濃度は前記範囲であるのが好ましい。
【０１０６】
本発明の製造方法において、エキセンジン、生分解性高分子、及びコーティング物質の種類及び含有量は上述の通りである。
【０１０７】
本発明によるエキセンジン含有組成物は、経口または非経口経路で投与することができ、好ましくは、静脈内投与、皮下投与、筋肉内投与、腹腔内投与などの非経口経路によって投与する。したがって、好ましい実施形態において、本発明の前記エキセンジン含有組成物は、分散液状態の注射剤として適用される。本発明による組成物の有効投与量は、患者の年齢、病気の種類及び程度、患者の状態などに応じて適切に調節可能であり、一般的には、有効成分量を基準に０.０１乃至１００μｇ/ｋｇ/日、好ましくは０.１乃至１０μｇ/ｋｇ/日とすることができ、前記分量を一度に投与したり、数回に分けて投与したりすることができる。
【０１０８】
以下、実施例によって本発明をより詳しく説明する。しかし、これら実施例は、いかなる場合にも本発明の範囲を制限するものと解釈されてはならない。
【実施例】
【０１０９】
＜実施例１＞噴霧乾燥法によるエキセンジン-４含有微粒球の調製
生分解性高分子であるＲＧ５０２Ｈ（Ｌｏｔ Ｎｏ.１００９８４８、ＩＶ=０.１９ｄＬ/ｇ）４.８５０ｇと、エキセンジン-４（Polypeptide Laboratories, USA）０.１５０ｇとを氷酢酸９７ｍＬに均一に溶解させた。製造された溶液を、ピストンポンプを利用して、超音波ノズル（Sono-tek、１２０ｋＨｚ）が装着された噴霧乾燥機（SODEVA, France）に１.５ｍＬ/ｍｉｎの流速で供給し、１８０℃の乾燥空気を供給して、微粒球を得た。これを各々保護コロイドとして１％（Ｗ/Ｖ）のポリビニルアルコール（polyvinyl alcohol, Gohsenol、ＥＧ-５０）を含む０.５Ｍのリシン水溶液（製剤１-１）、０.０１Ｍのリシン水溶液（製剤１-２）、０.１Ｍのヒスチジン水溶液（製剤１-３）、または０.５Ｍのアルギニン水溶液（製剤１-４）に各々懸濁させて、３時間攪拌した後で回収し、蒸溜水で洗浄して、凍結乾燥させた。比較のために、コーティング物質が含まれていない１％（Ｗ/Ｖ）のポリビニルアルコール水溶液にも同じ方法で懸濁、攪拌、洗浄、及び凍結乾燥させた（製剤１）。
【０１１０】
＜実施例２＞高分子の種類による発明の組成物の効果
生分解性高分子としてＲＧ５０３Ｈ（Ｌｏｔ Ｎｏ.１００６３７０、ＩＶ=０.３８ｄＬ/ｇ、製剤２、２-１、２-２）、ＲＧ５０２Ｈ及びＲＧ５０３Ｈの同量混合物（Ｌｏｔ Ｎｏ.１００９８４８:Ｌｏｔ Ｎｏ.１００６３７０=１:１、ＩＶ=０.２９ｄＬ/ｇ、製剤３、３-１）、ＲＧ５０４Ｈ（Ｌｏｔ Ｎｏ.１０１６６０５、ＩＶ=０.５１ｄＬ/ｇ、製剤４、４-１）、５０５０ＤＬ２Ａ（Ｌｏｔ Ｎｏ.ＬＰ-２０７、ＩＶ=０.１８ｄＬ/ｇ、製剤５、５-１）、及び５０５０ＤＬ４Ａ（Ｌｏｔ Ｎｏ.ＬＰ-２０６、ＩＶ=０.４６ｄＬ/ｇ、製剤６、６-１）を各々使用したことを除いては、前記実施例１と同じ方法でエキセンジン-４含有微粒球を製造した。
【０１１１】
＜実験例１-１＞微粒球のコーティング効果の試験
前記実施例１及び２で製造された微粒球内のエキセンジンの含有量は、次のような方法で定量した。エキセンジン-４標準品（Polypeptide Laboratories, USA）をＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）に溶解させた後、各々の濃度が２、５、１０μｇ/ｍＬになるようにＤＭＳＯで希釈して標準液とし、蛍光分光計（CaryEclipse, Varian, USA）を利用してＥｘ２８０ｎｍ、Ｅｍ３５０ｎｍでの蛍光を測定して、測定線を作成した。製造された微粒球を１５０μｇ/ｍＬになるようにＤＭＳＯに溶解させて、蛍光を測定した後、測定線に外挿して、微粒球内のエキセンジン含有量を測定した。
【０１１２】
本発明の組成物に使用されたコーティング物質、特にリシン、アルギニン、ヒスチジンなどが微粒球の表面に存在する量を測定するために、フルオレスカミン定量法を利用した。製造された微粒球をＤＭＳＯに１５０μｇ/ｍＬになるように溶解させた溶液を０.０１％（Ｗ/Ｖ）のフルオレスカミンアセトン溶液及び０.５Ｍのホウ酸ナトリウム（ｐＨ９.５）溶液と混合して、２０分間常温でインキュベーションした後、蛍光分光計（CaryEclipse, Varian, USA）を利用してＥｘ３９２ｎｍ、Ｅｍ４８０ｎｍでの蛍光を測定した。同じ方法で、使用されたコーティング物質をＤＭＳＯに溶解させて、ＤＭＳＯで各々の濃度が２、５、１０μｇ/ｍＬになるように希釈して標準液を調製し、蛍光を測定して測定線を作成した後、微粒球の表面のコーティング物質の量を定量した。
【０１１３】
本発明による微粒球の初期放出の抑制効果を確認するために、コーティング物質のコーティング微粒球及び従来の微粒球の試験管内の放出量を次の通り測定した。各々の微粒球１０ｍｇを放出試験液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７.５、１００ｍＭ ＮａＣｌ）１ｍＬに懸濁させて、３７℃で５ｒｐｍの速度で回転させながらインキュベーションした。１時間目および２４時間目に各々の試料を回収して遠心分離し、その上澄液に放出されたエキセンジンの量をＥｘ２８０ｎｍ、Ｅｍ３５０ｎｍで蛍光測定して定量した。
【０１１４】
本実施例で製造された微粒球の含有量及び試験管内の初期放出などを前述の方法によって試験した後、その結果を下記の表１に整理した。表１は、コーティング物質のコーティング及び高分子の種類による初期in vitro放出量の減少効果を示したものである。
【表１】
【０１１５】
表１から分かるように、噴霧乾燥後に、保護コロイドであるポリビニルアルコール溶液にだけ懸濁した製剤（製剤１、２、３、４、５及び６）に比べて、本発明によってコーティング物質をコーティングした製剤が、初期１時間及び２４時間の放出量が減少したことが分かる。このような効果は、高分子の粘度の範囲に関係なく同様に現れる効果であることが分かり、これは、エキセンジン含有徐放性微粒球の投与の際に、投与直後の初期血中濃度の急激な上昇による副作用を防止するのに大変重要である。
【０１１６】
＜実験例１−２＞コーティング物質及び高分子の粘度による投与初期血中濃度の減少
エキセンジンの副作用は、初期投与時の急激な血中薬物濃度の増加に伴うものであるので、投与直後の初期薬物放出による血中薬物濃度の上昇を抑制することが最も重要である。本発明の製剤の血中薬物濃度は、投薬後１時間で最高に達した後、減少する傾向を示した。実施例１及び２で製造された製剤の投与後の初期最高血中濃度（Conc. 1h）及び生体利用率などを観察するために、雄のＳ.Ｄ.ラット（３５０±２０ｇ）に投薬した。上述のようにして調製されたエキセンジン含有微粒球を懸濁液（０.５％（Ｗ/Ｗ）のカルボキシメチルセルロースナトリウム、５％（Ｗ/Ｗ）のマンニトール、０.１％（Ｗ/Ｗ）のトゥウィーン８０（Tween 80））に懸濁させた後、エーテルを用いた麻酔後に０.６ｍｇ（エキセンジン）/ｋｇの容量で皮下注射した。尾静脈を通して、投薬前０時間、投薬後１時間、及び１、２、４、７、１４、２１、２８日目に採血して、４℃で１２,０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した後、その血清を取って-２０℃で保管した。血清中のエキセンジンを酵素免疫検定キット（EK-070-94, Phoenix pharmaceuticals, Inc., USA）を使って定量し、時間血中濃度曲線より曲線下面積（AUC）を求めて、相対的生体利用率を比較した。
【０１１７】
投与された製剤の血中濃度グラフを図１乃至図３に示し、その結果を表２に整理した。表２は、コーティング及び高分子の粘度による投与初期血中薬物濃度の減少効果及びＡＵＣ比較結果を示したものである。
【表２】
【０１１８】
図１乃至図３及び表２に示されるように、コーティング物質をコーティングしなかった製剤は、コーティングした製剤に比べて、高い初期最高血中濃度を示すことが分かる。また、粘度が低い高分子であるＲＧ５０２Ｈで最も大きなＡＵＣ値、つまり、最も高い生体利用率を示しており、コーティング物質のコーティングによって、粘度の低い高分子製剤だけでなく、粘度の高い高分子製剤でも、生体利用率の改善効果が一部あることが確認できる。結論として、生体利用率は高分子の粘度によって大きく左右されるが、従来の技術を利用したエキセンジン含有製剤によって低粘度高分子を利用しても解決できなかった初期放出の抑制を本発明のコーティング物質のコーティングを通して解決することができることが分かる。
【０１１９】
＜実施例３＞薬物含有量が異なる微粒球の調製
生分解性高分子ＲＧ５０２Ｈにエキセンジン-４の含有量が各々１％（Ｗ/Ｗ）（製剤７及び７-１）及び７％（Ｗ/Ｗ）（製剤８及び８-１）になるように混合して、氷酢酸に溶解させた後、実施例１と同様な方法で噴霧乾燥させて、微粒球を調製した。調製された各々の微粒球を１％のポリビニルアルコール水溶液（製剤７及び８）または１％のポリビニルアルコール、０.５Ｍのリシン水溶液（製剤７-１及び８-１）に各々３時間懸濁した後で回収し、蒸溜水で洗浄して、凍結乾燥させた。
【０１２０】
＜実験例２＞薬物含有量の変化による初期放出の減少効果
前記実施例３で製造された微粒球の初期放出を前記実験例１-１の方法で測定し、下記の表３に整理した。表３は、薬物含有量によるコーティング物質のコーティング効果を整理したものである。
【表３】
【０１２１】
表３から分かるように、コーティング物質のコーティング層が形成されていない製剤１、７、及び８は、生分解性高分子に封入したエキセンジンの含有量が増加するのに伴って初期放出量も増加するが、本発明による表面にコーティング物質コーティング層が形成された製剤１-１、７-１、及び８-１は、エキセンジンの含有量に関係なく初期放出が著しく減少することが確認できる。
【０１２２】
＜実施例４＞二重乳化蒸発法によるエキセンジン-４含有微粒球の調製
９７０ｍｇのＲＧ５０２Ｈを３.２３ｍＬのジクロロメタン（Junsei Chem.）に溶解させた溶液に、３０ｍｇのエキセンジン-４を０.３ｍＬの蒸溜水に溶解させた溶液を加えて超音波処理した後、１次Ｗ/Ｏ乳化液を調製した。上述のようにして得られた１次エマルジョンを０.５％（Ｗ/Ｖ）のポリビニルアルコール水溶液２７０ｍＬに５０００ｒｐｍで攪拌しながら注入して、Ｗ/Ｏ/Ｗエマルジョンを調製した。これを、４０℃、４０００ｒｐｍで１時間懸濁しながらジクロロメタンを除去し、高分子を硬化させて、遠心分離して、微粒球を回収した。これを蒸溜水で２回洗浄した後、凍結乾燥させて、微粒球を調製した。同じ方法で製剤を調製する際に、１次エマルジョンを注入するための懸濁液を各々１％のＰＶＡ（製剤９）、０.５Ｍのｌｙｓ水溶液+１％のＰＶＡ（製剤９-１）、０.５ＭのＴｒｉｓ水溶液+１％のＰＶＡ（製剤９-２）、０.５Ｍの尿素水溶液+１％のＰＶＡ（製剤９-３）、０.０５Ｍのクレアチニン水溶液+１％のＰＶＡ（製剤９-４）、０.５Ｍのクレアチン水溶液+１％のＰＶＡ（製剤９-５）にして１時間懸濁した後で回収し、蒸溜水で洗浄して、凍結乾燥させた。
【０１２３】
このように得られた微粒球の電子顕微鏡写真を図４ａ及び図４ｂに示した。図４ａは、コーティング物質が含まれていない製剤９を示し、図４ｂは、コーティング物質コーティング層が形成された製剤９-１を示す。図４ｂで確認できるように、本発明による製剤は、滑らかな表面を有することが分かる。
【０１２４】
＜実験例３＞コーティング物質の種類による初期放出の減少効果
前記実施例４で得られた微粒球を前記実験例１-１によって試験し、初期２４時間の薬物放出量を観察して、その結果を下記の表４に整理した。表４は、コーティング物質による初期放出量の減少効果を整理したものである。
【表４】
【０１２５】
表４に示されたように、コーティング物質の種類によって初期放出の減少量に多少の差はあったが、本発明によるコーティング物質コーティング層を含む微粒球製剤９-１乃至９-５は、コーティング物質がコーティングされていない製剤９に比べて、初期放出を著しく減少させていることが確認できた。
【０１２６】
＜比較例＞エキセンジン-４及びコーティング物質封入微粒球の調製及び初期放出の観察
９７０ｍｇのＲＧ５０２Ｈを３.２３ｍＬのジクロロメタン（Junsei chem.）に溶解させた溶液に、３０ｍｇのエキセンジン-４、６.６８ｍｇのリシンを０.３ｍＬに溶解させた水溶液を加えて、１次Ｗ/Ｏエマルジョンを製造した後、１％のＰＶＡ水溶液に懸濁して、実施例４と同様な方法で微粒球（製剤１０）を製造した。また、９７０ｍｇのＲＧ５０２Ｈ、６．６８ｍｇのリシンを３.２３ｍＬのジクロロメタンに溶解させた溶液に、３０ｍｇのエキセンジン-４を０.３ｍＬに溶解させた水溶液を加えて、１次Ｗ/Ｏエマルジョンを製造した後、１％のＰＶＡ水溶液に懸濁して、実施例４と同様な方法で微粒球（製剤１１）を調製した。
【０１２７】
このように得られた製剤１０及び１１の電子顕微鏡写真を図４ｃ及び図４ｄに示した。図４ｃ及び図４ｄから分かるように、本比較例によって調製された微粒球は、表面に多くの細孔が形成されていることが確認できる。
【０１２８】
本比較例で製造された微粒球の初期１時間、２４時間の間の放出量を前記実験例１-１と同様な方法で測定して、その結果を下記の表５に整理した。表５は、微粒球の調製の際のコーティング物質の添加方法による初期放出の変化を整理したものである。
【表５】
【０１２９】
表５に示されたように、コーティング物質をコーティングせずにコーティング物質を薬物と共に封入させたり、高分子と混合したりして用いる場合、過度な量の初期放出が起こることが分かる。これは、エキセンジンの徐放性剤形には適用できない致命的欠陥である。
【０１３０】
これは、図４ｃ及び図４ｄに示されているように、１次エマルジョンの油相あるいは水相のどちらでも、コーティング物質を添加すれば、微粒球の表面の多孔性が増加するということが確認できる。結局、コーティング物質を微粒球の内部に添加すると、表面の多孔性を増加させて、薬物の過度な量の初期放出を起こすようになる。これに反して、本発明の構成によるコーティング物質コーティング微粒球は、表面の多孔性の増加がなく、表面が滑らかであると同時に、コーティング物質をコーティングしていない製剤９よりも少ない初期放出を示す。
【０１３１】
結局、前記韓国特許第１４０２０９号（特許文献３）などの従来の技術の方法では、エキセンジン含有製剤の製造時に、初期放出を所望するだけ減少させることはできず、特に、初期放出量によって副作用が発生するエキセンジン製剤には適用することができない。これに反して、本発明の組成物は、初期放出を極度に制限すべきエキセンジン徐放性微粒球の開発に非常に有用であることが分かる。また、本発明は、エキセンジン含有製剤の製造の際に、従来の初期放出を制御しようとした技術では達成できなかった高い生体利用率も共に達成することができるという利点がある。
【０１３２】
＜実施例５＞噴霧乾燥法によるエキセンジン-３含有微粒球の調製
生分解性高分子であるＲＧ５０２Ｈ（Ｌｏｔ Ｎｏ.１００９８４８、ＩＶ=０.１９ｄＬ/ｇ）４.８５０ｇと、エキセンジン-３（Peptron Inc., South Korea）０.１５０ｇとを氷酢酸９７ｍＬに均一に溶解させた。得られた溶液を、ピストンポンプを利用して、超音波ノズル（Sono-tek、１２０ｋＨｚ）が装着された噴霧乾燥機（SODEVA, France）に１.５ｍＬ/ｍｉｎの流速で供給し、１８０℃の乾燥空気を供給して、微粒球を得た。これを各々保護コロイドとして１％（Ｗ/Ｖ）のポリビニルアルコール（polyvinyl alcohol, Gohsenol、ＥＧ-５０）を含む０.５Ｍのリシン水溶液に懸濁し、３時間攪拌した後で回収し、蒸溜水で洗浄して、凍結乾燥させた。
【０１３３】
＜実施例６＞噴霧乾燥法によるエキセンジン-４（１-２８）アミド含有微粒球の調製
生分解性高分子であるＲＧ５０２Ｈ（Ｌｏｔ Ｎｏ.１００９８４８、ＩＶ=０.１９ｄＬ/ｇ）４.８５０ｇと、エキセンジン-４（１-２８）アミド（Peptron Inc., South Korea）０.１５０ｇとを氷酢酸９７ｍＬに均一に溶解させた。調製された溶液を、ピストンポンプを利用して、超音波ノズル（Sono-tek、１２０ｋＨｚ）が装着された噴霧乾燥機（SODEVA, France）に１.５ｍＬ/ｍｉｎの流速で供給し、１８０℃の乾燥空気を供給して、微粒球を得た。これを各々保護コロイドとして１％（Ｗ/Ｖ）のポリビニルアルコール（polyvinyl alcohol, Gohsenol、ＥＧ-５０）を含む０.５ＭのＬ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｓｅｒ水溶液に懸濁し、３時間攪拌して回収し、蒸溜水で洗浄して、Ｄ-マンニトール１０％（Ｗ/Ｗ）の水溶液１０ｍＬに懸濁して、凍結乾燥させた。
【０１３４】
＜実施例７＞相分離法を利用したエキセンジン-４含有微粒球の調製
０.１ｇのエキセンジン-４（Polypeptide Laboratories, USA）を１.８６ｍＬの蒸溜水に溶解させた後、ＲＧ５０２Ｈ（Ｌｏｔ Ｎｏ.１００９８４８、ＩＶ=０.１９ｄＬ/ｇ）１.８６ｇを２３.３２ｍＬのジクロロメタンに溶解させた溶液に徐々に注入して超音波処理して、１次エマルジョンを製造した。これに直ちに５８．８ｇのシリコーンオイルを徐々に注入して均質化して、初期微粒球を形成した。形成された初期微粒球に、３℃を維持しながら、４００ｇのヘプタン及び５０ｇのエタノールの混合液を５００ｒｐｍで攪拌しながら徐々に加えて、初期微粒球を硬化させた。約１時間攪拌した後、傾斜濾過により溶媒を除去した。その後、２００ｇのヘプタンをさらに加えて１時間追加攪拌することによって、初期微粒球からシリコーンオイルとジクロロメタンを除去した。形成された微粒球を濾過して回収し、４℃のヘプタンで洗浄した後、減圧乾燥させて、微粒球を調製した。これを再び０.５％（Ｗ/Ｖ）のポリビニルアルコール、０.５Ｍのリシン水溶液に１時間懸濁した後、濾過及び回収し、蒸溜水で洗浄して、凍結乾燥させて、製剤を調製した。
【０１３５】
上述の実施例に示したように、本発明は、エキセンジンを含む徐放性微粒球の表面をコーティング物質でコーティングすることによって、投与時の過度な初期薬物放出を減少させて、副作用を防止し、生体利用率を改善した新たな微粒球製剤を提供する。
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２００７年３月２７日付けで出願された韓国特許出願第１０-２００７-００２９５８６号の優先権利益を主張し、この韓国特許出願の明細書は、参照することにより本明細書に組み込まれる。
【０００２】
(技術分野)
本発明は、有効成分としてエキセンジンを含む生体利用率の高い徐放性製剤組成物、エキセンジン含有徐放性微粒球、及びその製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００３】
エキセンジンは、人体内においてグルカゴン類似ペプチド-１（ＧＬＰ-１）ホルモンの役割を果たすＧＬＰ-１拮抗剤として作用し、ＧＬＰ-１（７-３６）ＮＨ２アミノ酸配列と５３％の類似性を示す（Goke, et al., J. Biol. Chem., 268: 19650-19655, 1993）。
【０００４】
ＧＬＰ-１は、代表的なインクレチンホルモンであって、腸内のＬ細胞から分泌されるペプチドとして消化器官に飲食物が入る場合に分泌され、膵臓のベータ細胞に作用してインスリンの分泌を促進して、血糖値を低下させる役割を果たす（Orskov, et al., Diabetes, 42:658-661, 1993）。また、ＧＬＰ-１は、膵臓のアルファ細胞に作用してグルカゴンの分泌を抑制し（D'Alessio, et al., J. Clin. Invest., 97:133-138, 1996）、胃腸内の飲食物の除去時間を遅延させて、飲食物の摂取を抑制する作用をするものとしても知られている（Schira, et al., J. Clin. Invest., 97:92-103, 1996）。ＧＬＰ-１は、単純に膵臓のベータ細胞でインスリンの分泌を促進するだけでなく、ベータ細胞の増殖及び生存率を増加させる役割も果たす（Buteau, et al., Diabetologia, 42:856-864, 1999）。しかし、分泌されたＧＬＰ-１は、ジペプチジルぺプチダーゼ-４（ＤＰＰ-４）酵素によってＮ-末端部位が切られて活性を失うようになるが、ＧＬＰ-１の半減期は約２分程度と非常に短いものとして知られている（Pridal, et al., Eur. J. Drug. Metab. Pharmacokinet., 21:51-59, 1996; Deacon, et al., Diabetes, 47:764-769, 1998）。
【０００５】
一方、エキセンジンは、生体内で血糖値に応じてインスリンの分泌を増加させ、食後のグルカゴンの分泌を抑制し、胃腸内の飲食物の除去速度を遅延させて、飲食物の摂取を抑制する作用をするものとして知られている（Edwards, et al., Am. J. Physiol. Endocrinol Metab., 281:155-161, 2001）。また、エキセンジンは、ＧＬＰ-１とは異なって、ＤＰＰ-４酵素によってＮ-末端部位が切られないため、ＧＬＰ-１より長時間にわたって生体内で作用するという長所がある（Thum, et al., Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes., 110:113-118, 2002）。エキセンジンは、ドクトカゲおよびタマトカゲの唾液分泌物から発見されたものであって、エキセンジン-３は、メキシコドクトカゲ（Heloderma Horridum）の毒に存在し、エキセンジン-４は、アメリカドクトカゲ（Heloderma suspectum）の毒に存在する（Eng, J., et al., J. Biol. Chem., 265:20259-62, 1990; Eng., J., et al., J. Biol. Chem., 267:7402-05, 1992）。
【０００６】
エキセンジン-４を糖尿病ｏｂ/ｏｂマウスに１日１回、腹腔内に注入することによって、長期持続性の血糖値低下効果があることが確認された（Greig et al., Diabetologia 42:45-50, 1999）。エキセンジン-４は、最近では、１日２回５μｇまたは１０μｇずつ皮下注射する注射剤の形態に開発されて、第２型の糖尿病治療剤として使用されている。エキセンジンは、ＤＰＰ-４酵素に対して安定しているが、人体に０.２μｇ/ｋｇ以上を皮下注射する場合に、嘔吐、悪心、頭痛などの副作用を誘発するものとして知られている（Drug Development Research, 53:260-267, 2001）。エキセンジンの投与において、初期放出及び初期高血中濃度による副作用によって投与量が制限されることは、エキセンジンの徐放性製剤を開発するのに最も大きな障害物となっている。
【０００７】
一般に、水溶性薬物の徐放性製剤の場合、投与後の初期段階に放出率が非常に高く、このような水溶性薬物の徐放性製剤の過度な初期放出を抑制するための多様な研究が進められてきた。特に、エキセンジンの場合、徐放性製剤を開発する際に、過度な初期放出による嘔吐、悪心、頭痛などの副作用を防止するために、初期放出を抑制しなければならない。
【０００８】
末端肥大症などの治療に使用されるオクトレオチドを含む徐放性微粒球製剤の初期放出を抑制するために、微粒球内にグルコースを薬物と共に含む１次エマルジョンを調製して、二重乳化蒸発法によって微粒球を製造して研究した例がある。この研究で、薬物と共にグルコースを封入すれば初期放出量を減少させることができることが明らかになった。しかし、微粒球の初期放出率が５％程度である製造条件では、グルコースを添加して製造しても封入量が増加せず、むしろ初期放出が増加する傾向を示した（J. Wang et al., Biometerials, 25:1919-1927, 2004）。
【０００９】
したがって、上記引用文献に開示された技術は、初期放出率を５％以下にして、初期放出による副作用を最小化しなければならないエキセンジンの徐放性製剤の製造には適用が難しい。
【００１０】
一方、下記の特許文献１（米国特許第７１６４００５号明細書）及び特許文献２（ＵＳ２００５/０２７１７０２）には、ラクチド及びグリコリドの比率が５０:５０であるポリラクチド‐コ‐グリコリド（PLGA）高分子を利用して、エキセンジン含有微粒球を相分離法によって製造する方法が記載されている。これらの特許文献１および２では、高分子としてＡｌｋｅｒｍｅｓ社のｐｏｌｙｍｅｒ３Ａ（ＩＶ=０.３８ｄＬ/ｇ）、ｐｏｌｙｍｅｒ４Ａ（ＩＶ=０.４２ｄＬ/ｇ）などを使用し、特に、ｐｏｌｙｍｅｒ４Ａを主に使用した。特許文献１および２は、エキセンジンと各々ｐｏｌｙｍｅｒ３Ａまたは４Ａとからなる微粒球の生体利用率を改善し、ペプチド薬物の安定性を改善するために、薬物と共にスクロース、マンニトールなどの糖と、硫酸アンモニウムなどの塩析（salting-out）成分とを混合して１次エマルジョンを製造して、微粒球を製造した。つまり、微粒球の製造時に、糖や硫酸アンモニウムなどの添加物を追加することによって、エキセンジンが高分子マトリックスから十分に放出されるようにして、生体利用率を改善させようとした。その結果、生体利用率はある程度改善されたが、これとともに高いＣｍａｘ値が示されたため、投与時に高い初期放出による副作用が現れるという短所が依然としてあった。つまり、生体利用率が高くなると、初期放出が過剰になる傾向があり、初期放出が低くなると、生体利用率が再度低くなる傾向がある。
【００１１】
このように、従来の徐放性微粒球の製造技術は、初期放出による副作用を最小化すると同時に生体利用率の改善が要求されるエキセンジン含有徐放性微粒球製剤に適用するには、過度な初期放出、低い生体利用率などの限界があるため適切でない。
【００１２】
したがって、このような上記問題点を解決し、低い初期放出及び改善された生体利用率特性を有するエキセンジン含有生分解性徐放性製剤の開発が切実に要求されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】米国特許第７１６４００５号明細書
【特許文献２】ＵＳ２００５/０２７１７０２
【特許文献３】韓国特許第１４０２０９号
【発明の概要】
【００１４】
このような要求に応じるために、本発明は、生分解性高分子を担体として、有効性分としてエキセンジンを含む徐放性製剤を提供することにおいて、従来の徐放性製剤の過度な初期放出を減少させ、生体利用率が高いエキセンジン含有徐放性製剤、及びその製造方法を提供することをその目的とする。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】エキセンジン含有ＲＧ５０２Ｈ製剤のコーティング物質コーティング層の有無によるラットでの血中薬物濃度の変化を示したグラフである。
【図２】エキセンジン含有ＲＧ５０３Ｈ製剤のコーティング物質コーティング層の有無によるラットでの血中薬物濃度の変化を示したグラフである。
【図３】エキセンジン含有ＲＧ５０２Ｈ:ＲＧ５０３Ｈ=１:１製剤混合物のコーティング物質コーティング層の有無、及びコーティング物質の種類によるラットでの血中薬物濃度の変化を示したグラフである。
【図４ａ】従来の二重乳化蒸発法によって調製された微粒球の電子顕微鏡写真である。
【図４ｂ】本発明による二重乳化蒸発法によって微粒球の表面をコーティング物質でコーティングした後の電子顕微鏡写真である。
【図４ｃ】１次水相にコーティング物質を添加して、二重乳化蒸発法によって調製した微粒球の電子顕微鏡写真である。
【図４ｄ】油相の高分子と共にコーティング物質を溶解させて、二重乳化蒸発法によって調製した微粒球の電子顕微鏡写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下の詳細な説明によって、本発明がより完全に認識され、これによる利点がより明確になるであろう。
【００１７】
本発明は、投与時の薬物の初期放出を最小化し、生体利用率を高くしたエキセンジン含有徐放性微粒球組成物に関するものである。
【００１８】
上記特許文献３（韓国特許第１４０２０９号）には、水溶性薬物の初期放出を抑制するために、水溶性薬物を所定の塩基性有機物と共に溶解させて１次エマルジョンを製造した後で、二重乳化蒸発法を利用した微粒球の製造方法について記述している。上記文献は、生分解性高分子の酸性残基と薬物保有物質の塩基性残基との間の反応によって堅固な膜を形成させて薬物の封入率を増加させ、不要な初期大量放出を抑制しようとしたものである。しかし、このような方法は、上記文献でも言及された通り、ＬＨＲＨ、ＴＲＨ、またはその誘導体などの中性または塩基性ポリペプチドの徐放性組成物の製造には有用であるが、薬物の特性によって異なり、特に、酸性薬物で、ＬＨＲＨ、ＴＲＨより分子量が相対的に大きなエキセンジンに適用する場合には、その効果が微々たるものとなる恐れがある。同時に、このような塩基性有機物の添加によって微粒球の表面の多孔性が増加するため、初期放出による副作用の発現可能性のあるエキセンジン含有徐放性製剤に適用するのは難しい。
【００１９】
したがって、本発明者らは、生分解性高分子を担体として、エキセンジンを含む微粒球の製造過程中または製造後に、微粒球の表面に所定のコーティング物質をコーティングすることによって、過度な初期放出による副作用がなく、生体利用率の高い微粒球が製造されるということを確認して、本発明を完成させた。
【００２０】
まず、本発明は、有効性分としてのエキセンジン、特定の粘度を有する生分解性高分子、及びコーティング物質を含み、有効成分の過度な初期放出がなく一定の期間にわたって有効濃度で持続的に放出することができると共に生体利用率の高い徐放性製剤組成物を提供する。
【００２１】
また、他の側面において、本発明は、有効性分としてのエキセンジン及び生分解性高分子を含むコア、及び前記コアをコーティングするコーティング層を含む徐放性微粒球を提供する。
【００２２】
これをより詳細に説明すれば、次の通りである。
【００２３】
本発明において、前記エキセンジンは、エキセンジン-３（配列番号1）及びエキセンジン-４（配列番号2）、これらの断片、誘導体、ならびにこれらの薬学的に許容可能な塩をすべて含む。
【００２４】
前記エキセンジン誘導体は、下記の化学式Ｉで定義される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩である。
【００２５】
［化学式Ｉ］
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28 - Z1,
前記式Ｉにおいて、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４-イミダゾプロピオニルであり；
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり；
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり；
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり；
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり；
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり；
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＣ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイルである）；
Ｘａａ２２は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ，Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、３級-ブチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ２７は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ２８は、ＡｌａまたはＡｓｎであり；
Ｚ１は、-ＯＨ、
-ＮＨ２、
Ｇｌｙ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、または
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２
［ここで、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８は、各々独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、またはＮ-アルキルアラニンであり、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、Ｚ２は、-ＯＨまたは-ＮＨ２である］であり、
但し、Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、及びＸａａ２８のうちの３個以下のみがＡｌａであり、Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
【００２６】
Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、及びＮ-アルキルアラニンに好ましいＮ-アルキル基には、好ましくは炭素原子数１乃至約６、より好ましくは炭素原子数１乃至４の低級アルキル基が含まれる。適切な化学式Ｉの化合物には、“新規のエキセンジンアゴニスト化合物”という発明の名称で、１９９８年１１月１３日付けで出願されたＰＣＴ出願番号第ＰＣＴ/ＵＳ９８/２４２７３号で、実施例１乃至８９で同定された化合物（各々“化合物１乃至８９”）及び実施例１０４及び１０５で同定された相応の化合物が含まれる（上記引用文献は、参照することにより本明細書に組み込まれる）。
【００２７】
好ましい化学式Ｉのエキセンジン誘導体には、Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、または４-イミダゾプロピオニルであるものが含まれる。より好ましくは、Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｌａ、または４-イミダゾプロピオニルである。最も好ましくは、Ｘａａ１は、Ｈｉｓまたは４-イミダゾプロピオニルである。
【００２８】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２がＧｌｙであるのが好ましい。
【００２９】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ３がＡｌａであるのが好ましい。
【００３０】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ４がＡｌａであるのが好ましい。
【００３１】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ９がＡｌａであるのが好ましい。
【００３２】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１４がＬｅｕ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであるのが好ましい。
【００３３】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２１がＬｙｓ-ＮＨε-Ｒ（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＣ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイルである）であるのが好ましい。
【００３４】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２５がＴｒｐまたはＰｈｅであるのが好ましい。
【００３５】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ６がＡｌａ、Ｐｈｅ、またはナフチルアラニンであり、Ｘａａ２２がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり、Ｘａａ２３がＩｌｅまたはＶａｌであるのが好ましい。また、化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８がＰｒｏ、ホモプロリン、チオプロリン、及びＮ-アルキルアラニンから独立的に選択されるのが好ましい。好ましくは、Ｚ１が-ＮＨ２であり、Ｚ２が-ＮＨ２である。
【００３６】
１つの側面において、前記化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１がＡｌａ、Ｈｉｓ、またはＴｙｒであり、より好ましくは、ＡｌａまたはＨｉｓであり；Ｘａａ２がＡｌａまたはＧｌｙであり；Ｘａａ６がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり；Ｘａａ１４がＡｌａ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；Ｘａａ２２がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり；Ｘａａ２３がＩｌｅまたはＶａｌであり；Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８がＰｒｏ、ホモプロリン、チオプロリン、またはＮ-アルキルアラニンから独立的に選択され；Ｘａａ３９がＳｅｒまたはＴｙｒであり、より好ましくは、Ｓｅｒである。より好ましくは、Ｚ１が-ＮＨ２である。
【００３７】
特に好ましい化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１がＨｉｓまたはＡｌａであり；Ｘａａ２がＧｌｙまたはＡｌａであり；Ｘａａ３がＡｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；Ｘａａ４がＡｌａまたはＧｌｙであり；Ｘａａ５がＡｌａまたはＴｈｒであり；Ｘａａ６がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり；Ｘａａ７がＴｈｒまたはＳｅｒであり；Ｘａａ８がＡｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；Ｘａａ９がＡｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；Ｘａａ１０がＡｌａ、Ｌｅｕ、またはペンチルグリシンであり；Ｘａａ１１がＡｌａまたはＳｅｒであり；Ｘａａ１２がＡｌａまたはＬｙｓであり；Ｘａａ１３がＡｌａまたはＧｌｎであり；Ｘａａ１４がＡｌａ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、またはペンチルグリシンであり；Ｘａａ１５がＡｌａまたはＧｌｕであり；Ｘａａ１６がＡｌａまたはＧｌｕであり；Ｘａａ１７がＡｌａまたはＧｌｕであり；Ｘａａ１９がＡｌａまたはＶａｌであり；Ｘａａ２０がＡｌａまたはＡｒｇであり；Ｘａａ２１がＡｌａまたはＬｅｕであり；Ｘａａ２２がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり；Ｘａａ２３がＩｌｅ、Ｖａｌ、または３級-ブチルグリシンであり；Ｘａａ２４がＡｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；Ｘａａ２５がＡｌａ、Ｔｒｐ、またはＰｈｅであり；Ｘａａ２６がＡｌａまたはＬｅｕであり；Ｘａａ２７がＡｌａまたはＬｙｓであり；Ｘａａ２８がＡｌａまたはＡｓｎであり；Ｚ１が-ＯＨ、-ＮＨ２、Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、またはＧｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２であり；Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８が独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、チオプロリン、またはＮ-メチルアラニンであり；Ｘａａ３９がＳｅｒまたはＴｙｒであり、より好ましくは、Ｓｅｒであり；Ｚ２が-ＯＨまたは-ＮＨ２であるが；但し、Ｘａａ３、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、及びＸａａ２８のうちの３個以下のみがＡｌａであり；Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
【００３８】
特に好ましい化学式Ｉの化合物には、ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９８／２５７２８に記載された配列番号:５乃至９３のアミノ酸配列を有する化合物、または米国仮出願第６０/０６６，０２９号に記載された化合物が含まれる（これらの文献は、参照することにより本明細書に組み込まれる）。
【００３９】
特に好ましい側面によれば、化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１４がＡｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、またはペンチルグリシンであり、より好ましくは、Ｌｅｕまたはペンチルグリシンであり、Ｘａａ２５がＡｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、より好ましくは、Ｐｈｅまたはナフチルアラニンである。これら化合物は、試験管内及び生体内の両方において、ならびに当該化合物の合成中において、酸化的分解にそれほど敏感でない。
【００４０】
また他の側面において、前記エキセンジン誘導体は、次の化学式ＩＩで定義される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩である。
【００４１】
［化学式ＩＩ］
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 X1- Z1
前記式ＩＩにおいて、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４-イミダゾプロピオニルであり；
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり；
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり；
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり；
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ，ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり；
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり；
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｃ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイル、またはシクロアレイル-アルカノイルである）；
Ｘａａ２２は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、３級-ブチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり；
Ｘ１は、Ｌｙｓ Ａｓｎ、Ａｓｎ Ｌｙｓ、Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ Ａｓｎ、Ａｓｎ Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ、Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ Ａｌａ、Ａｌａ Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｃ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイル、またはシクロアルキルアルカノイルである）；
Ｚ１は、-ＯＨ、
-ＮＨ２、
Ｇｌｙ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、または
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２
［ここで、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８は、各々独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、またはＮ-アルキルアラニンであり、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、Ｚ２は、-ＯＨまたは-ＮＨ２である］であり、
但し、Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、及びＸａａ２６のうちの３個以下のみがＡｌａであり；Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、または４-イミダゾプロピオニルである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
【００４２】
好ましい化学式ＩＩのエキセンジン誘導体には、Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａａｌ、Ｎｏｒｖａｌ、または４-イミダゾプロピオニルであるものが含まれる。好ましくは、Ｘａａ１がＨｉｓ、４-イミダゾプロピオニル、またはＡｌａであり、より好ましくは、Ｈｉｓまたは４-イミダゾプロピオニルである。
【００４３】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２がＧｌｙであるのが好ましい。
【００４４】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ４がＡｌａであるのが好ましい。
【００４５】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ９がＡｌａであるのが好ましい。
【００４６】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１４がＬｅｕ、ペンチルグリシンまたはＭｅｔであるのが好ましい。
【００４７】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２５がＴｒｐまたはＰｈｅであるのが好ましい。
【００４８】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ６がＡｌａ、Ｐｈｅ、またはナフチルアラニンであり、Ｘａａ２２がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり、Ｘａａ２３がＩｌｅまたはＶａｌであるのが好ましい。
【００４９】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｚ１が-ＮＨ２の化合物を含むのが好ましい。
【００５０】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８がＰｒｏ、ホモプロリン、チオプロリン、及びＮ-アルキルアラニンからなる群より独立的に選択される化合物を含むのが好ましい。
【００５１】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ３９がＳｅｒまたはＴｙｒであるのが好ましく、Ｓｅｒの化合物を含むのがより好ましい。
【００５２】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｚ２が-ＮＨ２の化合物を含むのが好ましい。
【００５３】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｚ１が-ＮＨ２の化合物を含むのが好ましい。
【００５４】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２１がＬｙｓ-ＮＨε-Ｒ（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＣ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイルである）である化合物を含むのが好ましい。
【００５５】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘ１がＬｙｓＡｓｎ、Ｌｙｓ-ＮＨε-ＲＡｓｎ、またはＬｙｓ-ＮＨε-ＲＡｌａ（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＣ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイルである）である化合物を含むのが好ましい。
【００５６】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、ＷＯ９９/０２５７２８に記載された配列番号９５乃至１１０で同定されたものから選択されたアミノ酸配列を有する化合物を含む。また、前記化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、“新規のエキセンジンアゴニスト化合物”という発明の名称で、１９９８年１１月１３日付けで出願されたＰＣＴ出願番号第ＰＣＴ/ＵＳ９８/２４２１０号に記載された、配列番号５乃至９３に同定されたアミノ酸配列を有する化合物を含む。また他の側面において、前記化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、ＷＯ９９/００７４０４に記載された配列番号３７乃至４０のアミノ酸配列を有する化合物を含むことができる（これらの文献は、参照することにより本明細書に組み込まれる）。
【００５７】
前記化学式Ｉ及びＩＩで使用された略語は、次のような意味を有する。
【００５８】
“ＡＣＮ”または“ＣＨ３ＣＮ”は、アセトニトリルを示す。
【００５９】
“Ｂｏｃ”、“ｔＢｏｃ”、または“Ｔｂｏｃ”は、ｔ−ブトキシカルボニルを示す。
【００６０】
“ＤＣＣ”は、Ｎ,Ｎ′―ジシクロヘキシルカルボジイミドを示す。
【００６１】
“Ｆｍｏｃ”は、フルオレニルメトキシカルボニルを示す。
【００６２】
“ＨＢＴＵ”は、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾル−１−イル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロフォスフェイトを示す。
【００６３】
“ＨＯＢｔ”は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾル一水和物を示す。
【００６４】
“ｈｏｍｏＰ”または“ｈＰｒｏ”は、ホモプロリンを示す。
【００６５】
“ＭｅＡｌａ”または“Ｎｍｅ”は、Ｎ−メチルアラニンを示す。
【００６６】
“ｎａｐｈ”は、ナフチルアラニンを示す。
【００６７】
“ｐＧ”または“ｐＧｌｙ”は、ペンチルグリシンを示す。
【００６８】
“ｔＢｕＧ”は、３級−ブチルグリシンを示す。
【００６９】
“ＴｈｉｏＰ”または“ｔＰｒｏ”は、チオプロリンを示す。
【００７０】
“３Ｈｙｐ”は、３−ヒドロキシプロリンを示す。
【００７１】
“４Ｈｙｐ”は、４−ヒドロキシプロリンを示す。
【００７２】
“ＮＡＧ”は、Ｎ−アルキルグリシンを示す。
【００７３】
“ＮＡＰＧ”は、Ｎ−アルキルペンチルグリシンを示す。
【００７４】
“Ｎｏｒｖａｌ”は、ノルバリンを示す。
【００７５】
好ましい実施形態において、エキセンジン断片または誘導体は、エキセンジン-４（１-２８）（配列番号３）、エキセンジン-４（１-２８）アミド、エキセンジン-４（１-３０）（配列番号４）、エキセンジン-４（１-３０）アミド、エキセンジン-４（１-３１）（配列番号５）、エキセンジン-４（１-３１）アミド、１４Ｌｅｕ２５Ｐｈｅエキセンジン-４（配列番号６）、１４Ｌｅｕ２５Ｐｈｅエキセンジン-４アミド、及びこれらの薬学的に利用可能な塩からなる群より選択されたものである。
【００７６】
本発明の徐放性製剤組成物及び徐放性微粒球に含まれている有効性分としてのエキセンジンの含有量は、エキセンジン、生分解性高分子、及びコーティング物質からなる組成物または微粒球１００質量部に対して０.１乃至１０質量部であり、より好ましくは、０.８乃至６質量部である。本発明の組成物または微粒球内のエキセンジンの含有量が前記範囲より低い場合には、薬物本来の効果を有効に発揮することができず、前記の範囲より高い場合には、初期放出量が増加して、過度な初期放出による副作用が現れるため、エキセンジンの含有量は前記の範囲内で使用するのが好ましい。
【００７７】
前記生分解性高分子は、体内に投与すれば徐々に分解されて排出されるために人体に無害である高分子を総称するものであって、ポリラクチド（PLA）、ポリグリコリド（PGA）、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、及びポリアルキルカーボネートからなる群より選択された１種以上の高分子、ならびに前記高分子とポリエチレングリコール（PEG）との共重合体を含み、前記１種以上の高分子は、共重合体または単純混合物の形態であってよい。
【００７８】
例えば、前記生分解性高分子は、ドイツのＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ-Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ社のポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）のうち、ラクチドとグリコリドとの比率が１:１であるＲＧ５０２Ｈ（ＩＶ=０.１６乃至０.２４ｄＬ/ｇ）、ＲＧ５０３Ｈ（ＩＶ=０.３２乃至０.４４ｄＬ/ｇ）、及びＲＧ５０４Ｈ（ＩＶ=０.４５乃至０.６０ｄＬ/ｇ）、ラクチドとグリコリドとの比率が７５:２５であるＲＧ７５２Ｈ（ＩＶ=０.１４乃至０.２２ｄＬ/ｇ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）であるＲ２０２Ｈ（ＩＶ=０.１６乃至０.２４ｄＬ/ｇ）、及びＲ２０３Ｈ（ＩＶ=０.２５乃至０.３５ｄＬ/ｇ）、ならびに米国のＬａｋｅｓｈｏｒｅ Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ社（旧Ａｌｋｅｒｍｅｓ社）のラクチドとグリコリドとの比率が１:１である共重合体、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）のうち、５０５０ＤＬ ２Ａ（ＩＶ=０.１５乃至０.２５ｄＬ/ｇ）、５０５０ＤＬ ３Ａ（ＩＶ=０.２５乃至０.４３/ｇ）、及び５０５０ＤＬ ４Ａ（ＩＶ=０.３８乃至０.４８ｄＬ/ｇ）などからなる群より選択された１種以上のものである。
【００７９】
また他の側面において、前記生分解性高分子は、ポリラクチド（PLA）、ポリグリコリド（PGA）、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、及びポリアルキルカーボネートからなる群より選択された１種の高分子または２種以上の共重合体、ならびに前記高分子とポリエチレングリコール（PEG）との共重合体からなる群より選択された１種以上の高分子と、糖との複合体（以下、高分子-糖複合体という）である。
【００８０】
本発明における高分子糖複合体は、前記の高分子が糖のヒドロキシ基の位置に置換されている形態を意味する。前記糖は、１つ以上、好ましくは１乃至８個のサッカリド単位を含み、各サッカリド単位は、３乃至６個のヒドロキシ基を有するモノサッカリドまたはポリサッカリド、または直鎖構造を有して３乃至６個のヒドロキシ基を含む分子量２０,０００以下の糖アルコール類である。前記糖アルコール類は、マンニトール、ペンタエリトリトール、ソルビトール、リビトール、及びキシリトールなどを含むことができる。高分子は、前記糖に存在するヒドロキシ基のうちの３個以上に結合する。
【００８１】
本発明による高分子糖複合体は、糖に結合された高分子と類似した生体内特性を有し、高分子の種類によって多様な生体分解速度を示し、生体内分解時に生体に無害な高分子と糖とに分解されるので、本発明による生分解性高分子として適用可能である。好ましい実施形態としては、前記高分子糖複合体は、ＰＬＡ−グルコース複合体、ＰＧＡ−グルコース複合体、またはＰＬＧＡ−グルコース複合体である。このうち、ＰＬＧＡ−グルコース複合体は、次のような構造を有するものである。
【化１】
【００８２】
本発明による徐放性微粒球においては、外部に形成されたコーティング物質コーティング層がエキセンジンの初期放出を効果的に制御し、薬物の過度な初期放出による副作用を防止することができ、前記生分解性高分子は、粘度の制限なく使用することができる。
【００８３】
本発明による徐放性製剤組成物において、前記生分解性高分子は、有効成分であるエキセンジンを保護するマトリックスの役割を果たすものであるので、粘度が低すぎると薬物を効果的に保護することができずに薬物の初期放出量が多くなる恐れがあり、粘度が高すぎると、薬物の全体的な放出量が低くなって生体利用率が低くなる恐れがある。本発明においては、組成物と共に含まれているコーティング物質がさらに薬物徐放性作用を果たすので、前記生分解性高分子は、粘度が比較的低い範囲にあるものでも使用可能である。したがって、効果的な薬物の初期放出の調節及び生体利用率の改善のために、前記生分解性高分子は、クロロホルムに１％（Ｗ/Ｖ）の濃度に溶解させた後、２５℃±０.１℃でウベロデ（Ubbelohde）粘度計を利用して測定した固有粘度（IV）が０.１乃至０.６ｄＬ/ｇ、好ましくは０.１５乃至０.３１ｄＬ/ｇ、さらに好ましくは０.１６乃至０.２４ｄＬ/ｇである。
【００８４】
本発明の組成物または微粒球において、生分解性高分子は、薬物放出期間中に薬物を保護して、放出速度を調節するマトリックスの役割を果たすものであって、組成物または微粒球内の含有量は、エキセンジン、生分解性高分子、及びコーティング物質からなる組成物または微粒球１００質量部に対して８５乃至９９.８９質量部、より好ましくは９１乃至９９質量部である。
【００８５】
前記コーティング物質は、薬物の過度な初期放出を防止し、生体利用率を増加させる目的で用いられ、本発明による微粒球では、外部に形成されたコーティング層の形態で存在する。前記コーティング物質は、塩基性アミノ酸、ポリペプチド、及び有機窒素化合物からなる群より選択された１種以上のものである。前記塩基性アミノ酸は、アルギニン、リシン、ヒスチジン、及びこれらの誘導体を含み、前記ポリペプチドは、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上を含むアミノ酸２乃至１０個、好ましくは２乃至５個のポリペプチドであり、前記ポリペプチドは、アミノ酸全体の個数のうち、酸性アミノ酸の数に比べて塩基性アミノ酸の数が多いため、塩基性を示すものである。例えば、前記ポリペプチドは、Ｌ-Ａｌａ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ａｒｇ-Ｌ-Ｐｈｅ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｇｌｙ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｇｌｙ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌｅｕ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｙｒ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｖａｌ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｓｅｒなどである。また、前記有機窒素化合物は、クレアチン、クレアチニン、尿素などである。
【００８６】
本発明の組成物に含まれているコーティング物質の含有量または微粒球の表面にコーティング層として残留するコーティング物質の量は、エキセンジン、生分解性高分子、及びコーティング物質からなる組成物または微粒球１００質量部に対して０.０１乃至５質量部、好ましくは０.０１５乃至３質量部である。コーティング物質の含有量が前記範囲より少ない場合には、効果的な薬物徐放性が難しく、前記範囲より多くても初期放出抑制効果はそれ以上増加しないため、コーティング物質の含有量は前記の範囲にするのが好ましい。
【００８７】
本発明による徐放性微粒球は、コーティング物質でコーティングされた滑らかな表面を有し、平均粒子が１乃至５０μｍ、好ましくは５乃至３０μｍである（図４-ｂ参照）。このように、本発明の微粒球は、滑らかな表面及び適切な大きさを有することによって、効果的な薬物初期徐放性及び優れた生体利用率効果を得ることができる。
【００８８】
本発明による徐放性微粒球または徐放性製剤組成物から製造される微粒球は、従来の剤形とは異なり、微粒球の表面にコーティング物質がコーティングされた構造を有することによって、従来の方法を利用したエキセンジン含有微粒球製剤で達成できなかった過度な初期放出の抑制及び高い生体利用率を同時に達成することができるという利点を有する。特に、エキセンジンは、初期放出量が過剰である場合、嘔吐、悪心、頭痛などの副作用が発生するため、初期放出量を５％以下に制御することが大変重要である。本発明の徐放性微粒球または本発明の組成物から製造された微粒球は、エキセンジンの初期２４時間の放出量を５％以下に減少させる効果がある。エキセンジンを含む徐放性微粒球の投与による副作用を減少させるためには、初期放出量が本発明に記載されたｉｎ ｖｉｔｒｏ放出試験法で試験した場合に、初期１時間の放出量が５％以下、より好ましくは１％以下である。
【００８９】
従来の方法によるエキセンジン含有微粒球の過度な初期放出の副作用を減少させるための多様な試みが行われたが、このような試みのうち、過度な初期放出を抑制するのに成功した例のほとんどは、初期放出量だけでなく全体的な放出量も減少して、薬物の生体利用率が著しく低下する問題があった。しかし、本発明の微粒球は、表面にコーティング物質コーティング層を含むことによって、初期放出量を効果的に制御し、過度な初期放出による副作用を除去すると同時に、薬物の持続的で十分な放出を可能にして、生体利用率も優れているという利点を有する。
【００９０】
本発明の組成物または微粒球は、保護コロイド及び/または安定化剤などの賦形剤をさらに含むことができる。
【００９１】
本発明の組成物または微粒球は、ポリビニルアルコール、アルブミン、ポリビニルピロリドン、ゼラチンなどからなる群より選択された１種以上の保護コロイドをさらに含むことができる。前記保護コロイド物質は、エキセンジン含有微粒球の過度な初期放出の抑制には特別な効果がないが、微粒球間の凝集を防止し、分散性を改善する役割を果たす。このような役割を考慮すれば、前記保護コロイドは、エキセンジン、生分解性高分子、及びコーティング物質からなる組成物または微粒球の重量を基準にして０.０２％（Ｗ/Ｗ）乃至１.０％（Ｗ/Ｗ）の量でさらに含まれるのが好ましい。
【００９２】
また、本発明の組成物または微粒球は、凍結乾燥時に微粒球の安定性を向上させるために、マンニトール、トレハロース、スクロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどの賦形剤をエキセンジン、生分解性高分子、及びコーティング物質からなる微粒球の重量対比５％（Ｗ/Ｗ）乃至３０％（Ｗ/Ｗ）、より好ましくは１０％（Ｗ/Ｗ）乃至２０％（Ｗ/Ｗ）の量でさらに添加することができる。
【００９３】
その他にも、本発明の組成物または微粒球は、本発明が属する技術分野で医薬品の製剤化に通常使用されるすべての添加剤及び賦形剤をさらに含むことができ、これらの種類及び含有量は、関連技術分野の通常の知識を有する者であれば、誰でも容易に決定することができる。
【００９４】
また他の側面において、本発明は、前記のようなエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法を提供する。本発明によるエキセンジン含有徐放性微粒球は、多様な方法によって製造され、微粒球の製造過程中または製造後に、コーティング物質の水溶液に懸濁させて、微粒球の表面をコーティング物質でコーティングすることによって、本発明の徐放性微粒球を製造することができる。本発明による微粒球の製造方法は、二重乳化蒸発法（Ｗ/Ｏ/Ｗ法）、単一乳化蒸発法（Ｏ/Ｗ法）、相分離法、噴霧乾燥法などを用いることができる。
【００９５】
より詳しくは、本発明のエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法は、エキセンジンと生分解性高分子とを混合してＷ/Ｏ型エマルジョンまたは均質混合物を生成させる段階と、前記エマルジョンまたは均質混合物をコーティング物質水溶液に適用して乳化させて、コーティング層を形成する段階とを含むことができる。
【００９６】
より具体的には、二重乳化蒸発法を使用する場合、本発明の製造方法は、エキセンジン水溶液と生分解性高分子が溶解した有機溶媒とを混合して乳化して、一次エマルジョン（Ｗ/Ｏ）を形成する段階と、前記エマルジョンをコーティング物質水溶液に懸濁させてＷ/Ｏ/Ｗエマルジョンを形成させ、これを加温して有機溶媒を除去して硬化させる段階と、前記硬化された微粒球を回収して水洗して凍結乾燥する段階とを含むことができる。前記有機溶媒は、前記生分解性高分子を溶解させて、水溶液と混合されてエマルジョンを形成することができるすべての有機溶媒を用いることができ、例えば、クロロホルム、酢酸エチル、メチレンクロリド、及びメチルエチルケトンからなる群より選択された１種以上であり、好ましくは、メチレンクロリドである。この場合、コーティング物質は２次水相（Ｗ/Ｏ/Ｗエマルジョンの外部水相）に含まれ、有機溶媒が除去されて乾燥されれば、エキセンジンおよび生分解性高分子の外部にコーティング層を形成するようになる。
【００９７】
また、単一乳化蒸発法を使用する場合、本発明の製造方法は、生分解性高分子及びエキセンジンを有機溶媒に溶解させて、均一混合物を製造する段階と、前記均一混合物にコーティング物質水溶液を添加してエマルジョンを製造し、加温して有機溶媒を除去し硬化させる段階と、前記硬化された微粒球を回収して水洗して凍結乾燥する段階とを含むことができる。前記有機溶媒は、生分解性高分子及びエキセンジンを均一に混合させて、水溶液と混合してエマルジョンを形成することができるすべての有機溶媒を用いることができ、例えば、炭素数１乃至５のアルコール、氷酢酸、ギ酸、ジメチルスルホキシド、及びｎ-メチルピロリドンからなる群より選択された１種以上の溶媒とクロロホルム、エチルアセテート、メチルエチルケトン、及びメチレンクロリドからなる群より選択された１種以上の溶媒との混合溶媒、より好ましくは、メタノールとメチレンクロリドとの混合溶媒を用いる。この場合、前記生分解性高分子及びエキセンジンの均一混合物を乳化させて、有機溶媒を除去するための水溶液にコーティング物質を添加することによって、最終的に得られる微粒球の表面にコーティング層が形成される。
【００９８】
また他の側面において、本発明のエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法は、エキセンジンと生分解性高分子とを混合してエマルジョンまたは均質混合物を生成させる段階と、前記エマルジョンまたは均質混合物を粉末化して、１次微粒球を調製する段階と、前記１次微粒球をコーティング物質水溶液に懸濁させて、コーティング層を形成する段階とを含む。
【００９９】
前記粉末化方法には制限がなく、関連技術分野で通常適用される全ての粉末化方法を用いることが可能であり、例えば、相分離法または噴霧乾燥法を適用することができる。
【０１００】
より具体的には、前記粉末化に相分離法を使用する場合、本発明の製造方法は、エキセンジン水溶液及び高分子が溶解した有機溶媒を混合してエマルジョンを製造する段階、またはエキセンジン及び高分子を混合溶媒と混合して均一混合液を製造する段階と、ここにシリコーンオイルなどのオイルを加えて１次微粒球を調製する段階と、前記１次微粒球を生分解性高分子の非溶媒、例えば炭素数１乃至５のアルコールと炭素数１乃至１２のアルカンとの混合溶媒、好ましくは、エタノールとヘプタンとの混合溶媒を加えて前記微粒球から有機溶媒を除去して硬化させる段階と、微粒球をコーティング物質水溶液に懸濁させてコーティング層を形成する段階と、前記コーティング層が形成された微粒球を回収して、洗浄、凍結乾燥する段階とを含むことができる。
【０１０１】
前記有機溶媒は、クロロホルム、エチルアセテート、メチレンクロリド、及びメチルエチルケトンからなる群より選択された１種以上のものであり、好ましくは、メチレンクロリドである。また、前記混合溶媒は、炭素数１乃至５のアルコール、氷酢酸、ギ酸、ジメチルスルホキシド、及びｎ-メチルピロリドンからなる群より選択された１種以上の溶媒と、クロロホルム、エチルアセテート、メチレチルケトン、及びメチレンクロリドからなる群より選択された１種以上とが混合された混合溶媒であり、好ましくは、メタノールとメチレンクロリドとの混合溶媒である。
【０１０２】
また、噴霧乾燥法を使用する場合、本発明の製造方法は、エキセンジン水溶液及び高分子が溶解された有機溶媒を混合してエマルジョンを製造する段階、またはエキセンジン及び高分子を単一溶媒または混合溶媒と混合して均一な溶液を製造する段階と、前記溶液またはエマルジョンを噴霧乾燥させて１次微粒球を調製する段階と、前記１次微粒球をコーティング物質水溶液に懸濁させてコーティング層を形成する段階と、コーティング微粒球を水洗及び凍結乾燥する段階とを含むことができる。
【０１０３】
前記有機溶媒は、クロロホルム、エチルアセテート、メチレンクロリド、及びメチルエチルケトンからなる群より選択された１種以上のものであり、好ましくは、メチレンクロリドである。また、前記単一溶媒は、氷酢酸またはギ酸からなる群より選択された１種以上のものであり、前記混合溶媒は、炭素数１乃至５のアルコール、氷酢酸、ギ酸、ジメチルスルホキシド、及びｎ-メチルピロリドンからなる群より選択された１種以上の溶媒と、クロロホルム、エチルアセテート、メチレチルケトン、及びメチレンクロリドからなる群より選択された１種以上との混合溶媒であり、好ましくは、メタノールとメチレンクロリドとの混合溶媒である。
【０１０４】
本発明の製造方法は、通常の方法で保護コロイド物質を添加する段階をさらに含むことができ、好ましくは、前記保護コロイド物質は、微粒球にコーティング物質をコーティングする際に添加される。
【０１０５】
本発明による製造方法に使用された前記水相に溶解されたコーティング物質またはコーティング物質水溶液は、０.０１Ｍ乃至１Ｍの濃度で用い、より好ましくは、０.１Ｍ乃至０.５Ｍの濃度で使用することができる。コーティング物質の水溶液の濃度が前記範囲より低い場合には、微粒球の表面にコーティング物質が十分にコーティングされず、前記範囲より高い場合には、コーティング物質が過飽和溶液になって、飽和状態溶液での初期放出の抑制効果よりも改善されないため、本発明の微粒球製造に使用されるコーティング物質の濃度は前記範囲であるのが好ましい。
【０１０６】
本発明の製造方法において、エキセンジン、生分解性高分子、及びコーティング物質の種類及び含有量は上述の通りである。
【０１０７】
本発明によるエキセンジン含有組成物は、経口または非経口経路で投与することができ、好ましくは、静脈内投与、皮下投与、筋肉内投与、腹腔内投与などの非経口経路によって投与する。したがって、好ましい実施形態において、本発明の前記エキセンジン含有組成物は、分散液状態の注射剤として適用される。本発明による組成物の有効投与量は、患者の年齢、病気の種類及び程度、患者の状態などに応じて適切に調節可能であり、一般的には、有効成分量を基準に０.０１乃至１００μｇ/ｋｇ/日、好ましくは０.１乃至１０μｇ/ｋｇ/日とすることができ、前記分量を一度に投与したり、数回に分けて投与したりすることができる。
【０１０８】
以下、実施例によって本発明をより詳しく説明する。しかし、これら実施例は、いかなる場合にも本発明の範囲を制限するものと解釈されてはならない。
【実施例】
【０１０９】
＜実施例１＞噴霧乾燥法によるエキセンジン-４含有微粒球の調製
生分解性高分子であるＲＧ５０２Ｈ（Ｌｏｔ Ｎｏ.１００９８４８、ＩＶ=０.１９ｄＬ/ｇ）４.８５０ｇと、エキセンジン-４（Polypeptide Laboratories, USA）０.１５０ｇとを氷酢酸９７ｍＬに均一に溶解させた。製造された溶液を、ピストンポンプを利用して、超音波ノズル（Sono-tek、１２０ｋＨｚ）が装着された噴霧乾燥機（SODEVA, France）に１.５ｍＬ/ｍｉｎの流速で供給し、１８０℃の乾燥空気を供給して、微粒球を得た。これを各々保護コロイドとして１％（Ｗ/Ｖ）のポリビニルアルコール（polyvinyl alcohol, Gohsenol、ＥＧ-５０）を含む０.５Ｍのリシン水溶液（製剤１-１）、０.０１Ｍのリシン水溶液（製剤１-２）、０.１Ｍのヒスチジン水溶液（製剤１-３）、または０.５Ｍのアルギニン水溶液（製剤１-４）に各々懸濁させて、３時間攪拌した後で回収し、蒸溜水で洗浄して、凍結乾燥させた。比較のために、コーティング物質が含まれていない１％（Ｗ/Ｖ）のポリビニルアルコール水溶液にも同じ方法で懸濁、攪拌、洗浄、及び凍結乾燥させた（製剤１）。
【０１１０】
＜実施例２＞高分子の種類による発明の組成物の効果
生分解性高分子としてＲＧ５０３Ｈ（Ｌｏｔ Ｎｏ.１００６３７０、ＩＶ=０.３８ｄＬ/ｇ、製剤２、２-１、２-２）、ＲＧ５０２Ｈ及びＲＧ５０３Ｈの同量混合物（Ｌｏｔ Ｎｏ.１００９８４８:Ｌｏｔ Ｎｏ.１００６３７０=１:１、ＩＶ=０.２９ｄＬ/ｇ、製剤３、３-１）、ＲＧ５０４Ｈ（Ｌｏｔ Ｎｏ.１０１６６０５、ＩＶ=０.５１ｄＬ/ｇ、製剤４、４-１）、５０５０ＤＬ２Ａ（Ｌｏｔ Ｎｏ.ＬＰ-２０７、ＩＶ=０.１８ｄＬ/ｇ、製剤５、５-１）、及び５０５０ＤＬ４Ａ（Ｌｏｔ Ｎｏ.ＬＰ-２０６、ＩＶ=０.４６ｄＬ/ｇ、製剤６、６-１）を各々使用したことを除いては、前記実施例１と同じ方法でエキセンジン-４含有微粒球を製造した。
【０１１１】
＜実験例１-１＞微粒球のコーティング効果の試験
前記実施例１及び２で製造された微粒球内のエキセンジンの含有量は、次のような方法で定量した。エキセンジン-４標準品（Polypeptide Laboratories, USA）をＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）に溶解させた後、各々の濃度が２、５、１０μｇ/ｍＬになるようにＤＭＳＯで希釈して標準液とし、蛍光分光計（CaryEclipse, Varian, USA）を利用してＥｘ２８０ｎｍ、Ｅｍ３５０ｎｍでの蛍光を測定して、測定線を作成した。製造された微粒球を１５０μｇ/ｍＬになるようにＤＭＳＯに溶解させて、蛍光を測定した後、測定線に外挿して、微粒球内のエキセンジン含有量を測定した。
【０１１２】
本発明の組成物に使用されたコーティング物質、特にリシン、アルギニン、ヒスチジンなどが微粒球の表面に存在する量を測定するために、フルオレスカミン定量法を利用した。製造された微粒球をＤＭＳＯに１５０μｇ/ｍＬになるように溶解させた溶液を０.０１％（Ｗ/Ｖ）のフルオレスカミンアセトン溶液及び０.５Ｍのホウ酸ナトリウム（ｐＨ９.５）溶液と混合して、２０分間常温でインキュベーションした後、蛍光分光計（CaryEclipse, Varian, USA）を利用してＥｘ３９２ｎｍ、Ｅｍ４８０ｎｍでの蛍光を測定した。同じ方法で、使用されたコーティング物質をＤＭＳＯに溶解させて、ＤＭＳＯで各々の濃度が２、５、１０μｇ/ｍＬになるように希釈して標準液を調製し、蛍光を測定して測定線を作成した後、微粒球の表面のコーティング物質の量を定量した。
【０１１３】
本発明による微粒球の初期放出の抑制効果を確認するために、コーティング物質のコーティング微粒球及び従来の微粒球の試験管内の放出量を次の通り測定した。各々の微粒球１０ｍｇを放出試験液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７.５、１００ｍＭ ＮａＣｌ）１ｍＬに懸濁させて、３７℃で５ｒｐｍの速度で回転させながらインキュベーションした。１時間目および２４時間目に各々の試料を回収して遠心分離し、その上澄液に放出されたエキセンジンの量をＥｘ２８０ｎｍ、Ｅｍ３５０ｎｍで蛍光測定して定量した。
【０１１４】
本実施例で製造された微粒球の含有量及び試験管内の初期放出などを前述の方法によって試験した後、その結果を下記の表１に整理した。表１は、コーティング物質のコーティング及び高分子の種類による初期in vitro放出量の減少効果を示したものである。
【表１】
【０１１５】
表１から分かるように、噴霧乾燥後に、保護コロイドであるポリビニルアルコール溶液にだけ懸濁した製剤（製剤１、２、３、４、５及び６）に比べて、本発明によってコーティング物質をコーティングした製剤が、初期１時間及び２４時間の放出量が減少したことが分かる。このような効果は、高分子の粘度の範囲に関係なく同様に現れる効果であることが分かり、これは、エキセンジン含有徐放性微粒球の投与の際に、投与直後の初期血中濃度の急激な上昇による副作用を防止するのに大変重要である。
【０１１６】
＜実験例１−２＞コーティング物質及び高分子の粘度による投与初期血中濃度の減少
エキセンジンの副作用は、初期投与時の急激な血中薬物濃度の増加に伴うものであるので、投与直後の初期薬物放出による血中薬物濃度の上昇を抑制することが最も重要である。本発明の製剤の血中薬物濃度は、投薬後１時間で最高に達した後、減少する傾向を示した。実施例１及び２で製造された製剤の投与後の初期最高血中濃度（Conc. 1h）及び生体利用率などを観察するために、雄のＳ.Ｄ.ラット（３５０±２０ｇ）に投薬した。上述のようにして調製されたエキセンジン含有微粒球を懸濁液（０.５％（Ｗ/Ｗ）のカルボキシメチルセルロースナトリウム、５％（Ｗ/Ｗ）のマンニトール、０.１％（Ｗ/Ｗ）のトゥウィーン８０（Tween 80））に懸濁させた後、エーテルを用いた麻酔後に０.６ｍｇ（エキセンジン）/ｋｇの容量で皮下注射した。尾静脈を通して、投薬前０時間、投薬後１時間、及び１、２、４、７、１４、２１、２８日目に採血して、４℃で１２,０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した後、その血清を取って-２０℃で保管した。血清中のエキセンジンを酵素免疫検定キット（EK-070-94, Phoenix pharmaceuticals, Inc., USA）を使って定量し、時間血中濃度曲線より曲線下面積（AUC）を求めて、相対的生体利用率を比較した。
【０１１７】
投与された製剤の血中濃度グラフを図１乃至図３に示し、その結果を表２に整理した。表２は、コーティング及び高分子の粘度による投与初期血中薬物濃度の減少効果及びＡＵＣ比較結果を示したものである。
【表２】
【０１１８】
図１乃至図３及び表２に示されるように、コーティング物質をコーティングしなかった製剤は、コーティングした製剤に比べて、高い初期最高血中濃度を示すことが分かる。また、粘度が低い高分子であるＲＧ５０２Ｈで最も大きなＡＵＣ値、つまり、最も高い生体利用率を示しており、コーティング物質のコーティングによって、粘度の低い高分子製剤だけでなく、粘度の高い高分子製剤でも、生体利用率の改善効果が一部あることが確認できる。結論として、生体利用率は高分子の粘度によって大きく左右されるが、従来の技術を利用したエキセンジン含有製剤によって低粘度高分子を利用しても解決できなかった初期放出の抑制を本発明のコーティング物質のコーティングを通して解決することができることが分かる。
【０１１９】
＜実施例３＞薬物含有量が異なる微粒球の調製
生分解性高分子ＲＧ５０２Ｈにエキセンジン-４の含有量が各々１％（Ｗ/Ｗ）（製剤７及び７-１）及び７％（Ｗ/Ｗ）（製剤８及び８-１）になるように混合して、氷酢酸に溶解させた後、実施例１と同様な方法で噴霧乾燥させて、微粒球を調製した。調製された各々の微粒球を１％のポリビニルアルコール水溶液（製剤７及び８）または１％のポリビニルアルコール、０.５Ｍのリシン水溶液（製剤７-１及び８-１）に各々３時間懸濁した後で回収し、蒸溜水で洗浄して、凍結乾燥させた。
【０１２０】
＜実験例２＞薬物含有量の変化による初期放出の減少効果
前記実施例３で製造された微粒球の初期放出を前記実験例１-１の方法で測定し、下記の表３に整理した。表３は、薬物含有量によるコーティング物質のコーティング効果を整理したものである。
【表３】
【０１２１】
表３から分かるように、コーティング物質のコーティング層が形成されていない製剤１、７、及び８は、生分解性高分子に封入したエキセンジンの含有量が増加するのに伴って初期放出量も増加するが、本発明による表面にコーティング物質コーティング層が形成された製剤１-１、７-１、及び８-１は、エキセンジンの含有量に関係なく初期放出が著しく減少することが確認できる。
【０１２２】
＜実施例４＞二重乳化蒸発法によるエキセンジン-４含有微粒球の調製
９７０ｍｇのＲＧ５０２Ｈを３.２３ｍＬのジクロロメタン（Junsei Chem.）に溶解させた溶液に、３０ｍｇのエキセンジン-４を０.３ｍＬの蒸溜水に溶解させた溶液を加えて超音波処理した後、１次Ｗ/Ｏ乳化液を調製した。上述のようにして得られた１次エマルジョンを０.５％（Ｗ/Ｖ）のポリビニルアルコール水溶液２７０ｍＬに５０００ｒｐｍで攪拌しながら注入して、Ｗ/Ｏ/Ｗエマルジョンを調製した。これを、４０℃、４０００ｒｐｍで１時間懸濁しながらジクロロメタンを除去し、高分子を硬化させて、遠心分離して、微粒球を回収した。これを蒸溜水で２回洗浄した後、凍結乾燥させて、微粒球を調製した。同じ方法で製剤を調製する際に、１次エマルジョンを注入するための懸濁液を各々１％のＰＶＡ（製剤９）、０.５Ｍのｌｙｓ水溶液+１％のＰＶＡ（製剤９-１）、０.５ＭのＴｒｉｓ水溶液+１％のＰＶＡ（製剤９-２）、０.５Ｍの尿素水溶液+１％のＰＶＡ（製剤９-３）、０.０５Ｍのクレアチニン水溶液+１％のＰＶＡ（製剤９-４）、０.５Ｍのクレアチン水溶液+１％のＰＶＡ（製剤９-５）にして１時間懸濁した後で回収し、蒸溜水で洗浄して、凍結乾燥させた。
【０１２３】
このように得られた微粒球の電子顕微鏡写真を図４ａ及び図４ｂに示した。図４ａは、コーティング物質が含まれていない製剤９を示し、図４ｂは、コーティング物質コーティング層が形成された製剤９-１を示す。図４ｂで確認できるように、本発明による製剤は、滑らかな表面を有することが分かる。
【０１２４】
＜実験例３＞コーティング物質の種類による初期放出の減少効果
前記実施例４で得られた微粒球を前記実験例１-１によって試験し、初期２４時間の薬物放出量を観察して、その結果を下記の表４に整理した。表４は、コーティング物質による初期放出量の減少効果を整理したものである。
【表４】
【０１２５】
表４に示されたように、コーティング物質の種類によって初期放出の減少量に多少の差はあったが、本発明によるコーティング物質コーティング層を含む微粒球製剤９-１乃至９-５は、コーティング物質がコーティングされていない製剤９に比べて、初期放出を著しく減少させていることが確認できた。
【０１２６】
＜比較例＞エキセンジン-４及びコーティング物質封入微粒球の調製及び初期放出の観察
９７０ｍｇのＲＧ５０２Ｈを３.２３ｍＬのジクロロメタン（Junsei chem.）に溶解させた溶液に、３０ｍｇのエキセンジン-４、６.６８ｍｇのリシンを０.３ｍＬに溶解させた水溶液を加えて、１次Ｗ/Ｏエマルジョンを製造した後、１％のＰＶＡ水溶液に懸濁して、実施例４と同様な方法で微粒球（製剤１０）を製造した。また、９７０ｍｇのＲＧ５０２Ｈ、６．６８ｍｇのリシンを３.２３ｍＬのジクロロメタンに溶解させた溶液に、３０ｍｇのエキセンジン-４を０.３ｍＬに溶解させた水溶液を加えて、１次Ｗ/Ｏエマルジョンを製造した後、１％のＰＶＡ水溶液に懸濁して、実施例４と同様な方法で微粒球（製剤１１）を調製した。
【０１２７】
このように得られた製剤１０及び１１の電子顕微鏡写真を図４ｃ及び図４ｄに示した。図４ｃ及び図４ｄから分かるように、本比較例によって調製された微粒球は、表面に多くの細孔が形成されていることが確認できる。
【０１２８】
本比較例で製造された微粒球の初期１時間、２４時間の間の放出量を前記実験例１-１と同様な方法で測定して、その結果を下記の表５に整理した。表５は、微粒球の調製の際のコーティング物質の添加方法による初期放出の変化を整理したものである。
【表５】
【０１２９】
表５に示されたように、コーティング物質をコーティングせずにコーティング物質を薬物と共に封入させたり、高分子と混合したりして用いる場合、過度な量の初期放出が起こることが分かる。これは、エキセンジンの徐放性剤形には適用できない致命的欠陥である。
【０１３０】
これは、図４ｃ及び図４ｄに示されているように、１次エマルジョンの油相あるいは水相のどちらでも、コーティング物質を添加すれば、微粒球の表面の多孔性が増加するということが確認できる。結局、コーティング物質を微粒球の内部に添加すると、表面の多孔性を増加させて、薬物の過度な量の初期放出を起こすようになる。これに反して、本発明の構成によるコーティング物質コーティング微粒球は、表面の多孔性の増加がなく、表面が滑らかであると同時に、コーティング物質をコーティングしていない製剤９よりも少ない初期放出を示す。
【０１３１】
結局、前記韓国特許第１４０２０９号（特許文献３）などの従来の技術の方法では、エキセンジン含有製剤の製造時に、初期放出を所望するだけ減少させることはできず、特に、初期放出量によって副作用が発生するエキセンジン製剤には適用することができない。これに反して、本発明の組成物は、初期放出を極度に制限すべきエキセンジン徐放性微粒球の開発に非常に有用であることが分かる。また、本発明は、エキセンジン含有製剤の製造の際に、従来の初期放出を制御しようとした技術では達成できなかった高い生体利用率も共に達成することができるという利点がある。
【０１３２】
＜実施例５＞噴霧乾燥法によるエキセンジン-３含有微粒球の調製
生分解性高分子であるＲＧ５０２Ｈ（Ｌｏｔ Ｎｏ.１００９８４８、ＩＶ=０.１９ｄＬ/ｇ）４.８５０ｇと、エキセンジン-３（Peptron Inc., South Korea）０.１５０ｇとを氷酢酸９７ｍＬに均一に溶解させた。得られた溶液を、ピストンポンプを利用して、超音波ノズル（Sono-tek、１２０ｋＨｚ）が装着された噴霧乾燥機（SODEVA, France）に１.５ｍＬ/ｍｉｎの流速で供給し、１８０℃の乾燥空気を供給して、微粒球を得た。これを各々保護コロイドとして１％（Ｗ/Ｖ）のポリビニルアルコール（polyvinyl alcohol, Gohsenol、ＥＧ-５０）を含む０.５Ｍのリシン水溶液に懸濁し、３時間攪拌した後で回収し、蒸溜水で洗浄して、凍結乾燥させた。
【０１３３】
＜実施例６＞噴霧乾燥法によるエキセンジン-４（１-２８）アミド含有微粒球の調製
生分解性高分子であるＲＧ５０２Ｈ（Ｌｏｔ Ｎｏ.１００９８４８、ＩＶ=０.１９ｄＬ/ｇ）４.８５０ｇと、エキセンジン-４（１-２８）アミド（Peptron Inc., South Korea）０.１５０ｇとを氷酢酸９７ｍＬに均一に溶解させた。調製された溶液を、ピストンポンプを利用して、超音波ノズル（Sono-tek、１２０ｋＨｚ）が装着された噴霧乾燥機（SODEVA, France）に１.５ｍＬ/ｍｉｎの流速で供給し、１８０℃の乾燥空気を供給して、微粒球を得た。これを各々保護コロイドとして１％（Ｗ/Ｖ）のポリビニルアルコール（polyvinyl alcohol, Gohsenol、ＥＧ-５０）を含む０.５ＭのＬ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｓｅｒ水溶液に懸濁し、３時間攪拌して回収し、蒸溜水で洗浄して、Ｄ-マンニトール１０％（Ｗ/Ｗ）の水溶液１０ｍＬに懸濁して、凍結乾燥させた。
【０１３４】
＜実施例７＞相分離法を利用したエキセンジン-４含有微粒球の調製
０.１ｇのエキセンジン-４（Polypeptide Laboratories, USA）を１.８６ｍＬの蒸溜水に溶解させた後、ＲＧ５０２Ｈ（Ｌｏｔ Ｎｏ.１００９８４８、ＩＶ=０.１９ｄＬ/ｇ）１.８６ｇを２３.３２ｍＬのジクロロメタンに溶解させた溶液に徐々に注入して超音波処理して、１次エマルジョンを製造した。これに直ちに５８．８ｇのシリコーンオイルを徐々に注入して均質化して、初期微粒球を形成した。形成された初期微粒球に、３℃を維持しながら、４００ｇのヘプタン及び５０ｇのエタノールの混合液を５００ｒｐｍで攪拌しながら徐々に加えて、初期微粒球を硬化させた。約１時間攪拌した後、傾斜濾過により溶媒を除去した。その後、２００ｇのヘプタンをさらに加えて１時間追加攪拌することによって、初期微粒球からシリコーンオイルとジクロロメタンを除去した。形成された微粒球を濾過して回収し、４℃のヘプタンで洗浄した後、減圧乾燥させて、微粒球を調製した。これを再び０.５％（Ｗ/Ｖ）のポリビニルアルコール、０.５Ｍのリシン水溶液に１時間懸濁した後、濾過及び回収し、蒸溜水で洗浄して、凍結乾燥させて、製剤を調製した。
【０１３５】
上述の実施例に示したように、本発明は、エキセンジンを含む徐放性微粒球の表面をコーティング物質でコーティングすることによって、投与時の過度な初期薬物放出を減少させて、副作用を防止し、生体利用率を改善した新たな微粒球製剤を提供する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効性分としてのエキセンジン、固有粘度が０.１５乃至０.３１ｄＬ/ｇである生分解性高分子、及びコーティング物質を含み、
前記生分解性高分子が、ポリラクチド（PLA）、ポリグリコリド（PGA）、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、及びポリアルキルカーボネートからなる群より選択された高分子、前記高分子から選択された２種以上の高分子からなる共重合体または単純混合物、前記高分子とポリエチレングリコール（PEG）との共重合体、及び前記高分子または前記共重合体と糖とが結合した高分子糖複合体からなる群より選択されたものであり、
前記コーティング物質が、塩基性アミノ酸、ポリペプチド、及び有機窒素化合物からなる群より選択された１種以上のものであって、前記塩基性アミノ酸が、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上のものであり、前記ポリペプチドが、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上の塩基性アミノ酸を含み、アミノ酸全体の個数のうち、酸性アミノ酸の数に比べて塩基性アミノ酸の数が多いアミノ酸２乃至１０個のポリペプチドであり、前記有機窒素化合物が、クレアチン、クレアチニン、及び尿素からなる群より選択された１種以上のものである、徐放性製剤組成物。
【請求項２】
前記エキセンジンの含有量が、組成物１００質量部に対して０.１乃至１０質量部である、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。
【請求項３】
前記コーティング物質の含有量が、組成物１００質量部に対して０.０１乃至５質量部である、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。
【請求項４】
前記ポリペプチドが、Ｌ-Ａｌａ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ａｒｇ-Ｌ-Ｐｈｅ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｇｌｙ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｇｌｙ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌｅｕ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｙｒ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｖａｌ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、及びＬ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｓｅｒからなる群より選択された１種以上のものである、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。
【請求項５】
前記エキセンジンが、エキセンジン-３（配列番号１）、エキセンジン-４（配列番号２）、下記の化学式ＩまたはＩＩで定義される化合物、Ｃ末端がアミド基で置換されるかまたは置換されないエキセンジン誘導体、及びこれらの薬学的に許容可能な塩からなる群より選択された１種以上のものである、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。
［化学式Ｉ］
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28 - Z1,
前記式Ｉにおいて、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４-イミダゾプロピオニルであり；
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり；
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり；
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり；
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ，ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり；
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり；
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＣ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイルである）；
Ｘａａ２２は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ，Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、３級-ブチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ２７は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ２８は、ＡｌａまたはＡｓｎであり；
Ｚ１は、-ＯＨ、-ＮＨ２、Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、またはＧｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２であり（ここで、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８は、各々独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、またはＮ-アルキルアラニンであり、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、Ｚ２は、-ＯＨまたは-ＮＨ２である）、
但し、Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、及びＸａａ２８のうちの３個以下のみがＡｌａであり、Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
［化学式ＩＩ］
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 X1- Z1,
前記式ＩＩにおいて、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４-イミダゾプロピオニルであり；
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり；
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり；
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ，Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり；
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり；
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり；
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｃ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイル、またはシクロアレイル-アルカノイルである）；
Ｘａａ２２は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、３級-ブチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり；
Ｘ１は、Ｌｙｓ Ａｓｎ、Ａｓｎ Ｌｙｓ、Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ Ａｓｎ、Ａｓｎ Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ、Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ Ａｌａ、またはＡｌａ Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｃ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイル、またはシクロアルキルアルカノイルである）；
Ｚ１は、-ＯＨ、-ＮＨ２、Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、またはＧｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２であり（ここで、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８は、各々独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、またはＮ-アルキルアラニンであり、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、Ｚ２は、-ＯＨまたは-ＮＨ２である）、
但し、Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、及びＸａａ２６のうちの３個以下のみがＡｌａであり、Ｘａａ１が、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、または４-イミダゾプロピオニルである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
【請求項６】
前記エキセンジン誘導体が、配列番号３、配列番号４、配列番号５、または配列番号６のアミノ酸配列を有するポリペプチド、または前記ポリペプチドのＣの末端がアミド基で置換されたものである、請求項５に記載の徐放性製剤組成物。
【請求項７】
有効性分としてのエキセンジンと生分解性高分子とを含むコア、及び前記コアをコーティングするコーティング層を含み、
前記生分解性高分子が、ポリラクチド（PLA）、ポリグリコリド（PGA）、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、及びポリアルキルカーボネートからなる群より選択された高分子、前記高分子から選択された２種以上の高分子からなる共重合体または単純混合物、前記高分子とポリエチレングリコール（PEG）との共重合体、及び前記高分子または共重合体と糖とが結合した高分子糖複合体からなる群より選択されたものであり、
前記コーティング層が、塩基性アミノ酸、ポリペプチド、及び有機窒素化合物からなる群より選択された１種以上のコーティング物質から形成されたものであって、前記塩基性アミノ酸が、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上のものであり、前記ポリペプチドが、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上の塩基性アミノ酸を含み、アミノ酸全体の個数のうち、酸性アミノ酸の数に比べて塩基性アミノ酸の数が多いアミノ酸２乃至１０個のポリペプチドであり、前記有機窒素化合物が、クレアチン、クレアチニン、及び尿素からなる群より選択された１種以上のものである、コーティング層を含む徐放性微粒球。
【請求項８】
前記生分解性高分子は、固有粘度が０.１乃至０.６ｄＬ/ｇである、請求項７に記載の徐放性微粒球。
【請求項９】
前記生分解性高分子は、固有粘度が０.１５乃至０.３１ｄＬ/ｇである、請求項７に記載の徐放性微粒球。
【請求項１０】
前記エキセンジンの含有量が、微粒球１００質量部に対して０.１乃至１０質量部である、請求項７に記載の徐放性微粒球。
【請求項１１】
前記コーティング層の含有量が、微粒球１００質量部に対して０.０１乃至５質量部である、請求項７に記載の徐放性微粒球。
【請求項１２】
前記ポリペプチドが、Ｌ-Ａｌａ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ａｒｇ-Ｌ-Ｐｈｅ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｇｌｙ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｇｌｙ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌｅｕ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｙｒ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｖａｌ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、及びＬ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｓｅｒからなる群より選択された１種以上のものである、請求項７に記載の徐放性微粒球。
【請求項１３】
前記エキセンジンが、エキセンジン-３（配列番号１）、エキセンジン-４（配列番号２）、下記の化学式ＩまたはＩＩで定義される化合物、Ｃ末端がアミド基で置換されるかまたは置換されないエキセンジン誘導体、及びこれらの薬学的に許容可能な塩からなる群より選択された１種以上のものである、請求項７に記載の徐放性微粒球。
［化学式Ｉ］
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28 -Ｚ１,
前記式Ｉにおいて、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４-イミダゾプロピオニルであり；
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり；
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり；
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり；
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり；
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり；
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＣ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイルである）；
Ｘａａ２２は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、３級-ブチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ２７は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ２８は、ＡｌａまたはＡｓｎであり；
Ｚ１は、-ＯＨ、-ＮＨ２、Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、またはＧｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２であり（ここで、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８は、各々独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、またはＮ-アルキルアラニンであり、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、Ｚ２は、-ＯＨまたは-ＮＨ２である）、
但し、Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、及びＸａａ２８のうちの３個以下のみがＡｌａであり、Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
［化学式ＩＩ］
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 X1-Ｚ１,
前記式ＩＩにおいて、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４-イミダゾプロピオニルであり；
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり；
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり；
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり；
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり；
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり；
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｃ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイル、またはシクロアレイル-アルカノイルである）；
Ｘａａ２２は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、３級-ブチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり；
Ｘ１は、Ｌｙｓ Ａｓｎ、Ａｓｎ Ｌｙｓ、Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ Ａｓｎ、Ａｓｎ Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ、Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ Ａｌａ、Ａｌａ Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｃ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイル、またはシクロアルキルアルカノイルである）；
Ｚ１は、-ＯＨ、-ＮＨ２、Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、またはＧｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２であり（ここで、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８は、各々独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、またはＮ-アルキルアラニンであり、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、Ｚ２は、-ＯＨまたは-ＮＨ２である）、
但し、Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、及びＸａａ２６のうちの３個以下のみがＡｌａであり；Ｘａａ１が、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、または４-イミダゾプロピオニルである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
【請求項１４】
前記エキセンジン誘導体が、配列番号３、配列番号４、配列番号５または配列番号６のアミノ酸配列を有するポリペプチド、または前記ポリペプチドのＣの末端がアミド基で置換されたものである、請求項１３に記載の徐放性微粒球。
【請求項１５】
薬学的に許容可能な保護コロイド及び賦形剤からなる群より選択された１種以上をさらに含む、請求項７乃至１４のうちのいずれか1項に記載の徐放性微粒球。
【請求項１６】
エキセンジンと生分解性高分子とを混合してＷ/Ｏ型エマルジョンまたは均質混合物を生成する段階と、
前記エマルジョンまたは均質混合物をコーティング物質水溶液に添加することにより乳化させて、コーティング層を形成する段階
とを含み、
前記生分解性高分子が、ポリラクチド（PLA）、ポリグリコリド（PGA）、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、及びポリアルキルカーボネートからなる群より選択された高分子、前記高分子から選択された２種以上の高分子からなる共重合体または単純混合物、前記高分子とポリエチレングリコール（PEG）との共重合体、及び前記高分子または共重合体と糖とが結合した高分子糖複合体からなる群より選択されたものであり、
前記コーティング物質が、塩基性アミノ酸、ポリペプチド、及び有機窒素化合物からなる群より選択された１種以上のものであって、前記塩基性アミノ酸が、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上のものであり、前記ポリペプチドが、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上の塩基性アミノ酸を含み、アミノ酸全体の個数のうち、酸性アミノ酸の数に比べて塩基性アミノ酸の数が多いアミノ酸２乃至１０個のポリペプチドであり、前記有機窒素化合物が、クレアチン、クレアチニン、及び尿素からなる群より選択された１種以上のものである、
コーティング層を含むエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法。
【請求項１７】
コーティング物質水溶液は、濃度が０.０１Ｍ乃至１Ｍである、請求項１６に記載のエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法。
【請求項１８】
エキセンジンと生分解性高分子とを混合してエマルジョンまたは均一混合物を生成する段階と、
前記エマルジョンまたは均一混合物を粉末化して、１次微粒球を調製する段階と、
前記１次微粒球をコーティング物質水溶液に懸濁させて、コーティング層を形成する段階
とを含み、
前記生分解性高分子が、ポリラクチド（PLA）、ポリグリコリド（PGA）、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、及びポリアルキルカーボネートからなる群より選択された高分子、前記高分子から選択された２種以上の高分子からなる共重合体または単純混合物、前記高分子とポリエチレングリコール（PEG）との共重合体、及び前記高分子または共重合体と糖とが結合した高分子糖複合体からなる群より選択されたものであり、
前記コーティング物質が、塩基性アミノ酸、ポリペプチド、及び有機窒素化合物からなる群より選択された１種以上のものであって、前記塩基性アミノ酸が、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上のものであり、前記ポリペプチドが、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上の塩基性アミノ酸を含み、アミノ酸全体の個数のうち、酸性アミノ酸の数に比べて塩基性アミノ酸の数が多いアミノ酸２乃至１０個のポリペプチドであり、前記有機窒素化合物が、クレアチン、クレアチニン、及び尿素からなる群より選択された１種以上のものである、
コーティング層を含むエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法。
【請求項１９】
前記粉末化が、相分離法または噴霧乾燥法によって行われる、請求項１８に記載のエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法。
【請求項２０】
コーティング物質水溶液は、濃度が０.０１Ｍ乃至１Ｍである、請求項１８に記載のエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法。
【請求項１】
有効性分としてのエキセンジン、固有粘度が０.１５乃至０.３１ｄＬ/ｇである生分解性高分子、及びコーティング物質を含み、
前記生分解性高分子が、ポリラクチド（PLA）、ポリグリコリド（PGA）、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、及びポリアルキルカーボネートからなる群より選択された高分子、前記高分子から選択された２種以上の高分子からなる共重合体または単純混合物、前記高分子とポリエチレングリコール（PEG）との共重合体、及び前記高分子または前記共重合体と糖とが結合した高分子糖複合体からなる群より選択されたものであり、
前記コーティング物質が、塩基性アミノ酸、ポリペプチド、及び有機窒素化合物からなる群より選択された１種以上のものであって、前記塩基性アミノ酸が、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上のものであり、前記ポリペプチドが、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上の塩基性アミノ酸を含み、アミノ酸全体の個数のうち、酸性アミノ酸の数に比べて塩基性アミノ酸の数が多いアミノ酸２乃至１０個のポリペプチドであり、前記有機窒素化合物が、クレアチン、クレアチニン、及び尿素からなる群より選択された１種以上のものである、徐放性製剤組成物。
【請求項２】
前記エキセンジンの含有量が、組成物１００質量部に対して０.１乃至１０質量部である、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。
【請求項３】
前記コーティング物質の含有量が、組成物１００質量部に対して０.０１乃至５質量部である、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。
【請求項４】
前記ポリペプチドが、Ｌ-Ａｌａ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ａｒｇ-Ｌ-Ｐｈｅ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｇｌｙ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｇｌｙ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌｅｕ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｙｒ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｖａｌ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、及びＬ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｓｅｒからなる群より選択された１種以上のものである、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。
【請求項５】
前記エキセンジンが、エキセンジン-３（配列番号１）、エキセンジン-４（配列番号２）、下記の化学式ＩまたはＩＩで定義される化合物、Ｃ末端がアミド基で置換されるかまたは置換されないエキセンジン誘導体、及びこれらの薬学的に許容可能な塩からなる群より選択された１種以上のものである、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。
［化学式Ｉ］
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28 - Z1,
前記式Ｉにおいて、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４-イミダゾプロピオニルであり；
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり；
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり；
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり；
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ，ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり；
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり；
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＣ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイルである）；
Ｘａａ２２は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ，Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、３級-ブチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ２７は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ２８は、ＡｌａまたはＡｓｎであり；
Ｚ１は、-ＯＨ、-ＮＨ２、Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、またはＧｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２であり（ここで、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８は、各々独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、またはＮ-アルキルアラニンであり、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、Ｚ２は、-ＯＨまたは-ＮＨ２である）、
但し、Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、及びＸａａ２８のうちの３個以下のみがＡｌａであり、Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
［化学式ＩＩ］
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 X1- Z1,
前記式ＩＩにおいて、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４-イミダゾプロピオニルであり；
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり；
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり；
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ，Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり；
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり；
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり；
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｃ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイル、またはシクロアレイル-アルカノイルである）；
Ｘａａ２２は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、３級-ブチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり；
Ｘ１は、Ｌｙｓ Ａｓｎ、Ａｓｎ Ｌｙｓ、Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ Ａｓｎ、Ａｓｎ Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ、Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ Ａｌａ、またはＡｌａ Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｃ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイル、またはシクロアルキルアルカノイルである）；
Ｚ１は、-ＯＨ、-ＮＨ２、Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、またはＧｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２であり（ここで、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８は、各々独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、またはＮ-アルキルアラニンであり、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、Ｚ２は、-ＯＨまたは-ＮＨ２である）、
但し、Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、及びＸａａ２６のうちの３個以下のみがＡｌａであり、Ｘａａ１が、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、または４-イミダゾプロピオニルである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
【請求項６】
前記エキセンジン誘導体が、配列番号３、配列番号４、配列番号５、または配列番号６のアミノ酸配列を有するポリペプチド、または前記ポリペプチドのＣの末端がアミド基で置換されたものである、請求項５に記載の徐放性製剤組成物。
【請求項７】
有効性分としてのエキセンジンと生分解性高分子とを含むコア、及び前記コアをコーティングするコーティング層を含み、
前記生分解性高分子が、ポリラクチド（PLA）、ポリグリコリド（PGA）、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、及びポリアルキルカーボネートからなる群より選択された高分子、前記高分子から選択された２種以上の高分子からなる共重合体または単純混合物、前記高分子とポリエチレングリコール（PEG）との共重合体、及び前記高分子または共重合体と糖とが結合した高分子糖複合体からなる群より選択されたものであり、
前記コーティング層が、塩基性アミノ酸、ポリペプチド、及び有機窒素化合物からなる群より選択された１種以上のコーティング物質から形成されたものであって、前記塩基性アミノ酸が、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上のものであり、前記ポリペプチドが、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上の塩基性アミノ酸を含み、アミノ酸全体の個数のうち、酸性アミノ酸の数に比べて塩基性アミノ酸の数が多いアミノ酸２乃至１０個のポリペプチドであり、前記有機窒素化合物が、クレアチン、クレアチニン、及び尿素からなる群より選択された１種以上のものである、コーティング層を含む徐放性微粒球。
【請求項８】
前記生分解性高分子は、固有粘度が０.１乃至０.６ｄＬ/ｇである、請求項７に記載の徐放性微粒球。
【請求項９】
前記生分解性高分子は、固有粘度が０.１５乃至０.３１ｄＬ/ｇである、請求項７に記載の徐放性微粒球。
【請求項１０】
前記エキセンジンの含有量が、微粒球１００質量部に対して０.１乃至１０質量部である、請求項７に記載の徐放性微粒球。
【請求項１１】
前記コーティング層の含有量が、微粒球１００質量部に対して０.０１乃至５質量部である、請求項７に記載の徐放性微粒球。
【請求項１２】
前記ポリペプチドが、Ｌ-Ａｌａ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ａｒｇ-Ｌ-Ｐｈｅ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｇｌｙ、Ｇｌｙ-Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｇｌｙ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌｅｕ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｙｒ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｈｉｓ-Ｌ-Ｖａｌ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｌｙｓ、及びＬ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｔｈｒ-Ｌ-Ｌｙｓ-Ｌ-Ｓｅｒからなる群より選択された１種以上のものである、請求項７に記載の徐放性微粒球。
【請求項１３】
前記エキセンジンが、エキセンジン-３（配列番号１）、エキセンジン-４（配列番号２）、下記の化学式ＩまたはＩＩで定義される化合物、Ｃ末端がアミド基で置換されるかまたは置換されないエキセンジン誘導体、及びこれらの薬学的に許容可能な塩からなる群より選択された１種以上のものである、請求項７に記載の徐放性微粒球。
［化学式Ｉ］
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28 -Ｚ１,
前記式Ｉにおいて、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４-イミダゾプロピオニルであり；
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり；
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり；
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり；
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり；
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり；
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＣ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイルである）；
Ｘａａ２２は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、３級-ブチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり；
Ｘａａ２７は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ２８は、ＡｌａまたはＡｓｎであり；
Ｚ１は、-ＯＨ、-ＮＨ２、Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、またはＧｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２であり（ここで、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８は、各々独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、またはＮ-アルキルアラニンであり、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、Ｚ２は、-ＯＨまたは-ＮＨ２である）、
但し、Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、及びＸａａ２８のうちの３個以下のみがＡｌａであり、Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
［化学式ＩＩ］
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Ala Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 X1-Ｚ１,
前記式ＩＩにおいて、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４-イミダゾプロピオニルであり；
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり；
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり；
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり；
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり；
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり；
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり；
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり；
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり；
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｃ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイル、またはシクロアレイル-アルカノイルである）；
Ｘａａ２２は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、３級-ブチルグリシン、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり；
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり；
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり；
Ｘ１は、Ｌｙｓ Ａｓｎ、Ａｓｎ Ｌｙｓ、Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ Ａｓｎ、Ａｓｎ Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ、Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒ Ａｌａ、Ａｌａ Ｌｙｓ-ＮＨε-Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｃ１-Ｃ１０直鎖もしくは分枝鎖アルカノイル、またはシクロアルキルアルカノイルである）；
Ｚ１は、-ＯＨ、-ＮＨ２、Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７-Ｚ２、Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８-Ｚ２、またはＧｌｙ Ｇｌｙ Ｘａａ３１ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｘａａ３６ Ｘａａ３７ Ｘａａ３８ Ｘａａ３９-Ｚ２であり（ここで、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、及びＸａａ３８は、各々独立的にＰｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ-アルキルグリシン、Ｎ-アルキルペンチルグリシン、またはＮ-アルキルアラニンであり、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、Ｚ２は、-ＯＨまたは-ＮＨ２である）、
但し、Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、及びＸａａ２６のうちの３個以下のみがＡｌａであり；Ｘａａ１が、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、または４-イミダゾプロピオニルである場合には、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ９のうちの１つ以上がＡｌａである。
【請求項１４】
前記エキセンジン誘導体が、配列番号３、配列番号４、配列番号５または配列番号６のアミノ酸配列を有するポリペプチド、または前記ポリペプチドのＣの末端がアミド基で置換されたものである、請求項１３に記載の徐放性微粒球。
【請求項１５】
薬学的に許容可能な保護コロイド及び賦形剤からなる群より選択された１種以上をさらに含む、請求項７乃至１４のうちのいずれか1項に記載の徐放性微粒球。
【請求項１６】
エキセンジンと生分解性高分子とを混合してＷ/Ｏ型エマルジョンまたは均質混合物を生成する段階と、
前記エマルジョンまたは均質混合物をコーティング物質水溶液に添加することにより乳化させて、コーティング層を形成する段階
とを含み、
前記生分解性高分子が、ポリラクチド（PLA）、ポリグリコリド（PGA）、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、及びポリアルキルカーボネートからなる群より選択された高分子、前記高分子から選択された２種以上の高分子からなる共重合体または単純混合物、前記高分子とポリエチレングリコール（PEG）との共重合体、及び前記高分子または共重合体と糖とが結合した高分子糖複合体からなる群より選択されたものであり、
前記コーティング物質が、塩基性アミノ酸、ポリペプチド、及び有機窒素化合物からなる群より選択された１種以上のものであって、前記塩基性アミノ酸が、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上のものであり、前記ポリペプチドが、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上の塩基性アミノ酸を含み、アミノ酸全体の個数のうち、酸性アミノ酸の数に比べて塩基性アミノ酸の数が多いアミノ酸２乃至１０個のポリペプチドであり、前記有機窒素化合物が、クレアチン、クレアチニン、及び尿素からなる群より選択された１種以上のものである、
コーティング層を含むエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法。
【請求項１７】
コーティング物質水溶液は、濃度が０.０１Ｍ乃至１Ｍである、請求項１６に記載のエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法。
【請求項１８】
エキセンジンと生分解性高分子とを混合してエマルジョンまたは均一混合物を生成する段階と、
前記エマルジョンまたは均一混合物を粉末化して、１次微粒球を調製する段階と、
前記１次微粒球をコーティング物質水溶液に懸濁させて、コーティング層を形成する段階
とを含み、
前記生分解性高分子が、ポリラクチド（PLA）、ポリグリコリド（PGA）、ポリ（ラクチド‐コ‐グリコリド）（PLGA）、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、及びポリアルキルカーボネートからなる群より選択された高分子、前記高分子から選択された２種以上の高分子からなる共重合体または単純混合物、前記高分子とポリエチレングリコール（PEG）との共重合体、及び前記高分子または共重合体と糖とが結合した高分子糖複合体からなる群より選択されたものであり、
前記コーティング物質が、塩基性アミノ酸、ポリペプチド、及び有機窒素化合物からなる群より選択された１種以上のものであって、前記塩基性アミノ酸が、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上のものであり、前記ポリペプチドが、アルギニン、リシン、及びヒスチジンからなる群より選択された１種以上の塩基性アミノ酸を含み、アミノ酸全体の個数のうち、酸性アミノ酸の数に比べて塩基性アミノ酸の数が多いアミノ酸２乃至１０個のポリペプチドであり、前記有機窒素化合物が、クレアチン、クレアチニン、及び尿素からなる群より選択された１種以上のものである、
コーティング層を含むエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法。
【請求項１９】
前記粉末化が、相分離法または噴霧乾燥法によって行われる、請求項１８に記載のエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法。
【請求項２０】
コーティング物質水溶液は、濃度が０.０１Ｍ乃至１Ｍである、請求項１８に記載のエキセンジン含有徐放性微粒球の製造方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４ａ】
【図４ｂ】
【図４ｃ】
【図４ｄ】
【図２】
【図３】
【図４ａ】
【図４ｂ】
【図４ｃ】
【図４ｄ】
【公表番号】特表２０１０−５２２７４３（Ｐ２０１０−５２２７４３Ａ）
【公表日】平成２２年７月８日（２０１０．７．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５００８１６（Ｐ２０１０−５００８１６）
【出願日】平成２０年１月２２日（２００８．１．２２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＫＲ２００８／０００３９７
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１１７９２７
【国際公開日】平成２０年１０月２日（２００８．１０．２）
【出願人】（５０５４０４２２０）ペプトロン カンパニー リミテッド (6)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年７月８日（２０１０．７．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年１月２２日（２００８．１．２２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＫＲ２００８／０００３９７
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１１７９２７
【国際公開日】平成２０年１０月２日（２００８．１０．２）
【出願人】（５０５４０４２２０）ペプトロン カンパニー リミテッド (6)
【Ｆターム（参考）】
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