ナフトキノン系化合物の微粒化粒子を含有する医薬組成物
所定のナフトキノン系化合物の微粒化粒子を組み入れることにより、やや溶けにくいナフトキノン系化合物の溶解度および吸収率を増加させることによって、優れたインビボ吸収特性を有する医薬組成物が提供される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子を含んでなる医薬組成物に関する。より具体的には、本発明は、所定のナフトキノン系化合物の微粒化粒子を組み入れることにより、やや溶けにくいナフトキノン系化合物の溶解度および吸収率を増加させることによって、優れたインビボ吸収特性を有する医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ナフトキノン系化合物の１つであるβ−ラパコンおよびその誘導体は、抗癌剤、抗生物質および抗真菌剤として使用することができることが公知であり（特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５および特許文献６）、そして抗癌薬として公知の類似の化合物が特許文献７、特許文献８、特許文献９、特許文献１０、特許文献１１に掲載されている。
【０００３】
本発明者らは、タンシノンを含む１，２−ナフトキノン系化合物を合成し、そしてタンシノンを含む１，２−ナフトキノン系化合物が肥満、糖尿病、再狭窄、インポテンス、前立腺疾患、高血圧症、心疾患、腎疾患および緑内障のような代謝疾患の予防および治療に有効であることを確かめた（例えば、特許文献１２、特許文献１３、特許文献１４、特許文献１５、特許文献１６、特許文献１７、特許文献１８、特許文献１９を参照のこと）。
【０００４】
しかし、前記のナフトキノン系化合物は、やや溶けにくい材料であり、これは、ＣＨ２Ｃｌ２、ＣＨＣｌ３、ＣＨ２ＣｌＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ３ＣＣｌ３、モノグリム、およびジグリムのような高溶解度の溶媒にのみ約２〜１０％の低い程度でやや溶けやすいが、他の通常の極性または非極性溶媒には溶けにくい。これらの理由のため、ナフトキノン系化合物には、それらの優れた薬理効果にもかかわらず、インビボ投与のための調製物の処方に関連する様々な難点がある。
【０００５】
従って、これらの薬物化合物を、それら自体だけで投与するかまたは経口経路を介する従来の簡単な処方物の形態で投与する場合、身体への薬物の吸収が実質的に認められず、即ち、薬物のバイオアベイラビリティが極めて低く、そのため、薬物固有の効力を及ぼすことができない。特に、これらの薬物化合物は、それらが所定の濃度を超える量で身体に吸収されるまで、治療効果を及ぼさない。これらの理由のため、これらのナフトキノン系化合物の固有な薬理学的特性を十分かつ満足に活用するために、これらの薬物のバイオアベイラビリティを最大にすることが可能な方法の開発および導入が早急に求められている。
【０００６】
これに関して、Ｂｏｏｔｈｍａｎらは、特許文献２０において、β−ラパコンを、β−シクロデキストリンのようなポリマー内に含有させて、それによって溶解度を増加させる技術を示唆した。
【０００７】
しかし、この技術は、薬物がポリマー内に含有されるため、薬物の量が、ポリマーの量に依存して制限されるという問題を有する。従って、経口用調製物、特に、高用量の経口用調製物の場合、経口用調製物の全量が過度に増加し、場合によってこの用量調製物の使用が制限される。
【０００８】
また、特許文献２１および特許文献２２では、ポリマーまたはアミノ酸のような分子と結合させて、それによって溶解度を増加させることにより、ナフトキノン系化合物をプロドラッグに変換する技術が示唆された；しかし、この技術は、化合物の構造を維持することができないという問題を有する。
【０００９】
また、やや溶けにくい化合物に通常利用することができる分散剤の使用も、ナフトキノン系化合物の溶解度を増加させるための方法として考えられたが、それには大量の分散剤が必要であり、それ故、高用量の調製の場合、上記の問題が生じる可能性がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】米国特許第５９６９１６３号明細書
【特許文献２】米国特許第５８２４７００号明細書
【特許文献３】米国特許第５７６３６２５号明細書
【特許文献４】米国特許第５６４１７７３号明細書
【特許文献５】米国特許第４８９８８７０号明細書
【特許文献６】米国特許第５９８５３３１号明細書
【特許文献７】国際公開第０６／１２８１２０号パンフレット
【特許文献８】国際公開第０４／０４５５５７号パンフレット
【特許文献９】国際公開第９６／０３３９８８号パンフレット
【特許文献１０】国際公開第９４／００４１４５号パンフレット
【特許文献１１】国際公開第９７／０３１９３６号パンフレット
【特許文献１２】ＫＲ２００４−０１１６３３９号明細書
【特許文献１３】ＫＲ２００６−１４５４１号明細書
【特許文献１４】ＰＣＴ／ＫＲ２００７／００６０１２号明細書
【特許文献１５】ＰＣＴ／ＫＲ２００７／００６０１３号明細書
【特許文献１６】ＰＣＴ／ＫＲ２００７／００６０１１号明細書
【特許文献１７】ＫＲ２００７−０１３６１０５号明細書
【特許文献１８】ＫＲ２００７−０１３９７４０号明細書
【特許文献１９】ＫＲ２００７−０１４１３０３号明細書
【特許文献２０】米国特許第６８９０５０号明細書
【特許文献２１】国際公開第０６／２０７１９号パンフレット
【特許文献２２】国際公開第０６／２０７２２号パンフレット
【特許文献２３】韓国特許出願第２００４−０１１６３３９号明細書
【特許文献２４】韓国特許出願第２００６−００１４５４１号明細書
【特許文献２５】韓国特許出願第２００７−０１３６１０５号明細書
【特許文献２６】韓国特許出願第２００７−０１３９７４０号明細書
【特許文献２７】韓国特許出願第２００７−０１４１３０３号明細書
【特許文献２８】韓国特許第１０−８１８５８６号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
上記の問題を解決するための多様な広範かつ集中的研究および実験の結果として、本発明者らは、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子を含んでなる医薬組成物を発見し、ここで、ナフトキノン系化合物は、式１および２：
【化１】
［式中、
Ｒ１〜Ｒ６は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アシル、置換または非置換Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、置換または非置換Ｃ４〜Ｃ１０アリール、置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−アリール、置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロ環および置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−１０−フェニルであるか、或いはそれらのうちの２個の置換基が一緒になって、二重結合を形成し得るか、或いは飽和または部分的若しくは完全に不飽和であり得る置換または非置換Ｃ３〜Ｃ６環状構造を形成し得、ここで、置換基は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニルおよびＣ１〜Ｃ１０アルキルアミノからなる群から選択される少なくとも１つのものであり得る；
Ｒ７〜Ｒ１０は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アシル、置換または非置換Ｃ４〜Ｃ１０アリール、および置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−１０−フェニルであるか、或いはそれらのうちの２個の置換基が一緒になって、二重結合を形成し得るか、或いは飽和または部分的若しくは完全に不飽和であり得る置換または非置換Ｃ３〜Ｃ６環状構造を形成し得、ここで、置換基は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルアミノ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ１０アリールおよびＣ４〜Ｃ１０ヘテロアリールからなる群から選択される少なくとも１つのものであり得る；
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ’であり、ここで、Ｒ’は、水素若しくはＣ１〜Ｃ６アルキルである；
Ｙは、Ｃ、Ｓ、Ｎ、またはＯであって、但し、ＹがＳ若しくはＯである場合、Ｒ５およびＲ６は存在せず、そしてＹがＮである場合、Ｒ５は水素若しくはＣ１〜Ｃ６低級アルキルであり、そしてＲ６は存在せず；そして
ｍは０若しくは１であって、但し、ｍが０である場合、ｍに隣接する炭素原子は直接結合を介して環状構造を形成し、そしてｎは０〜１０の整数である］
によって表される化合物、或いはその薬学的に許容できる塩、溶媒和物または異性体から選択される１つ以上のものである。
【００１２】
好ましくは、ＸはＯまたはＳであり、そしてＹはＣまたはＯである。
【００１３】
１つの好適な例では、Ｒ１〜Ｒ６は、それぞれ、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシおよび−（ＣＨ２）ｎ−フェニルからなる群から独立して選択され得るか、或いはＲ１およびＲ２またはＲ２およびＲ３は一緒になって、二重結合を形成するか、または置換または非置換Ｃ３〜Ｃ６環状構造を形成し得、ここで、置換基は水素若しくはＣ１〜Ｃ１０アルキルであり得る。
【００１４】
別の好適な例では、Ｒ７〜Ｒ１０は、それぞれ、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキルおよび置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシからなる群から独立して選択され得る。
【００１５】
本発明の式１または２の化合物のうち、ＸがＯであり、そしてＹがＣである式１−１または２−１で表される化合物、またはＸがＳである式１−２若しくは２−２で表される化合物が好適である。
【００１６】
ナフトキノン系化合物のうち、以下の式３〜７
【化２】
［式中、Ｒ１〜Ｒ１０、Ｙおよびｍは、式１におけるように定義される］
の化合物が好適である。
【００１７】
別の例では、式１または２の化合物は、式中、ｍが０である式１−３または２−３
【化３】
［式中、Ｒ１〜Ｒ１０およびＸは上記のように定義される］
の化合物であり得、そして隣接する炭素原子はそれらの間の直接結合を介して環状構造（フラン環）を形成し、以後、「フラノ−ｏ−ナフトキノン誘導体」と称される。
【００１８】
更に、式１または式２の化合物は、式中、ｍが１である式１−４または式２−４
【化４】
［式中、Ｒ１〜Ｒ１８、Ｘ、Ｙおよびｍは上記のように定義される］
の化合物であり得、以後、しばしば、「チオピラノ−１，２−ナフトキノン誘導体」と称される。
【００１９】
別の例では、Ｒ７およびＲ８がそれらの間で直接結合を介して環状構造を形成した式１の化合物は、式１−５または１−６の構造を有し得、そして式１の化合物は、化合物２−５または２−６であり得る。
【化５】
［式中、Ｒ１〜Ｒ１８、Ｘ、Ｙおよびｍは上記のように定義される］。好ましくは、Ｒ１〜Ｒ１８は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルおよびフェニルから選択される少なくとも１つのものであり得る。
【００２０】
本発明の医薬組成物において、ナフトキノン系化合物の範囲には、すべて、薬学的に許容できるその塩、溶媒和物または異性体が含まれる。
【００２１】
本明細書において使用する用語「医薬組成物」は、式１または２の化合物と、希釈剤またはキャリアのような他の化学成分との混合物を意味する。医薬組成物は、化合物の生物体への投与を容易にする。化合物を投与する様々な技術が当該技術分野において公知であり、そして経口、注入、エアゾル、非経口および局所投与が挙げられるが、これらに限定されない。また、医薬組成物は、目的の化合物と、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸などのような酸とを反応させることによって、得ることができる。
【００２２】
本開示物において使用する用語「薬学的に許容できる塩」は、化合物が投与される生物体に有意な刺激を生じず、そして化合物の生物活性および特性を排除しない化合物の処方を意味する。薬学的塩の例として、化合物と、薬学的に許容できるアニオン、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸およびヨウ化水素酸のような無機酸；酒石酸、ギ酸、クエン酸、酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、グルコン酸、安息香酸、乳酸、フマル酸、マレイン酸およびサリチル酸のような有機炭酸；またはメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸のようなスルホン酸を含有する非毒性酸付加塩を形成することが可能な酸との酸付加塩を挙げることができる。具体的には、薬学的に許容できるカルボン酸塩の例として、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウムおよびマグネシウムのようなアルカリ金属またはアルカリ土類金属との塩、リジン、アルギニン、およびグアニジンのようなアミノ酸との塩、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、ジエタノールアミン、コリンおよびトリエチルアミンのような有機塩との塩が挙げられる。本発明の式１の化合物は、当該技術分野において周知の従来の方法によって、その塩に変換することができる。
【００２３】
本明細書において使用する用語「溶媒和物」は、非共有分子間力によって結合した化学量論的若しくは非化学量論的量の溶媒を更に含む本発明の化合物またはその塩を意味する。好適な溶媒は、揮発性、非毒性、および／またはヒトへの投与に許容可能である。溶媒が水である場合、溶媒和物は水和物を指す。
【００２４】
本明細書において使用する用語「異性体」は、同じ化学式または分子式を有するが、光学的または立体的に異なる本発明の化合物またはその塩を意味する。
【００２５】
他で特定しない限り、用語「式１若しくは２の化合物」または「ナフトキノン系化合物」は、化合物自体、および薬学的に許容できるその塩、溶媒和物および異性体を包含することが意図される。
【００２６】
本明細書において使用する用語「アルキル」は、不飽和を伴わずに炭素および水素を含有するラジカルを指す。アルキルラジカルは、直鎖であってもよく、または分岐していてもよい。アルキルラジカルの例として、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ヘキシル、ｔ−ブチルおよびｓｅｃ−ブチルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２７】
低級アルキルは、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル（例えば、その直鎖または分岐アルキル主鎖において１〜１０個の炭素原子を有するアルキル）である。アルキルは、場合により置換することができる。置換する場合、アルキルを、任意の特定の結合点（任意の炭素原子）において、４個以下の置換基として置換することができる。
【００２８】
一方、アルキルが別のアルキル基によって置換される場合、それは、「分岐アルキル」と同じ意味として使用し得る。
【００２９】
用語「アルケニル」は、長さおよび置換可能性のような上記のアルキルに類似するが、１つ以上の炭素−炭素二重結合を含有する不飽和脂肪族を意味する。
【００３０】
例えば、用語「アルケニル」は、直鎖アルケニル（例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル）、分岐アルケニル、シクロアルケニル（脂環式化合物、例えば、シクロプロペニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニル）、アルキルまたはアルケニルによって置換されるシクロアルケニル、およびシクロアルキルまたはシクロアルケニルによって置換されるアルケニルを含む。用語「アルケニル」はまた、酸素、窒素、イオウまたはリンによって置換された１つ以上のカーボハイドロゲン主鎖の炭素原子を有する更なるアルケニル基を含む。具体例として、直鎖または分岐アルケニル基は、その主鎖において６個以下の炭素原子（例えば、直鎖ではＣ２〜Ｃ６、分岐鎖ではＣ３〜Ｃ６）を有する。同様に、シクロアルケニルは、環系に３〜８個の炭素原子、より好ましくは、５〜６個の炭素原子を有し得る。
【００３１】
用語「アルキニル」は、長さおよび置換可能性のような上記のアルキルに類似するが、１つ以上の炭素−炭素三重結合を含有する不飽和脂肪族を意味する。例えば、用語「アルキニル」は、直鎖アルキニル（例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、デシニル）、分岐アルキニル（アルキルまたはアルケニルによって置換されるアルキニルを含む）およびシクロアルキルまたはシクロアルケニルによって置換されるアルキニルを含む。用語「アルキニル」はまた、酸素、窒素、イオウまたはリンによって置換された１つ以上のカーボハイドロゲン主鎖の炭素原子を有する更なるアルキニル基を含む。具体例として、直鎖または分岐アルキニル基は、その主鎖において６個以下の炭素原子（例えば、直鎖ではＣ２〜Ｃ６、分岐鎖ではＣ３〜Ｃ６）を有する。
【００３２】
アルキル、アルキニルまたはアルケニルを置換する場合、それらは、ヒドロキシル、カルボキシレート、オキソ、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ハロアルキル（例えば、ＣＣｌ３またはＣＦ３）、アルキルオキシカルボニル（−Ｃ（Ｏ）Ｒ）、アルキルカルボニルオキシ（−ＯＣＯＲ）、カルバモイル（−ＮＨＣＯＯＲ−または−ＯＣＯＮＨＲ−）、尿素（−ＮＨＣＯＮＨＲ−）、チオール、シアノ、ニトロ、アミノ、アシルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルチオ、アリールチオ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アリールオキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、アリール、アミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルカルボニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、アリールカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシカルボニル、ヘテロシクリルオキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロシクリルのような置換基によって置換することができる。
【００３３】
好ましくは、置換基は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルアミノ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ１０アリールおよびＣ４〜Ｃ１０ヘテロアリールから選択される少なくとも１つのものである。
【００３４】
用語「シクロアルキル」は、任意の別の結合もまたは共鳴二重結合も伴わない３〜１５個の炭素原子、好ましくは、３〜８個の炭素原子を含むアルキル基を意味する。シクロアルキルは、１〜４個の環を含んでもよい。シクロアルキルの例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびアダマンチルが挙げられる。シクロアルキルの置換基の例には、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、チオールまたはＣ１〜Ｃ１０アルキルチオがある。
【００３５】
用語「ヘテロシクロアルキル」は、１つ以上の環炭素原子が、窒素（Ｎ）、イオウ（Ｓ）または酸素（Ｏ）のようなヘテロ原子で置換される炭素環基を意味し、そして飽和若しくは非飽和７〜１１員環の二環式ヘテロ環または化学的に安定な非芳香属性３〜８員環の単環式ヘテロ環を意味し、そして縮合、スピロ、架橋を介して更なる環を形成してもよい。各ヘテロ環は、少なくとも１つの炭素原子および１〜４個のヘテロ原子からなる。ヘテロシクリルラジカルは、環内のいずれかの部分（ａｎｙ ｅｎｄｏｃｙｃｌｉｃ ｒｉｎｇ）と結合して、安定な構造を生じる。好適なヘテロ環として、フラン、チオフェン、ピロール、ピロリン、ピロリジン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、イミダゾリン、イミダゾリジン、ピラゾール、ピラゾリン、ピラゾリジン、イソチアゾール、トリアゾール、チアジアゾール、ピラン、ピリジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、ピペラジンおよびトリアジンが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロ環は、３〜７員環の単環式ヘテロ環、例えば、限定されないが、ピペリジニル、ピラニル、ピペラジニル、モルホリニル、チアモルホリニルおよびテトラヒドロフラニル、より好ましくは、５〜７員環の単環式ヘテロ環を含む。
【００３６】
本明細書において使用する用語「アリール」は、共役パイ（π）電子系を有する少なくとも１つの環を有し、そして炭素環アリール（例えば、フェニル）およびヘテロ環アリール（例えば、ピリジン）基の両方を含む芳香族置換基を指す。本用語は、単環式または縮合多環（即ち、炭素原子の隣接する対を共有する環）基を含む。アリールは、炭素環化合物であってもよく、または場合により、その芳香環系において１〜４個のヘテロ原子（例えば、窒素（Ｎ）、イオウ（Ｓ）若しくは酸素（Ｏ））を有してもよい。
【００３７】
アリールまたはヘテロアリールの例として、フェニル、ナフチル、ピリジル、ピリミジル、ピロリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、キナゾリニル、チアゾリル、ベンゾチオフェニル、フラニル、イミダゾリルおよびチオフェニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３８】
シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、置換基、限定されないが、例えば、ヒドロキシル、ハロゲン、チオール、シアノ、ニトロ、アミノ、アシルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルチオ、アリールチオ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アリールオキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、アリール、カルボキシレート、アミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルカルボニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、アリールカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシカルボニル、ヘテロシクリルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルスルホニル、アリールスルホニル、およびヘテロシクリルによって、場合により置換されていてもよい。
【００３９】
本発明の式１または２の置換基Ｒ１〜Ｒ６は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニルおよびＣ１〜Ｃ１０アルキルアミノから選択される１つ以上のものである置換基によって、場合により置換されていてもよい。更に、置換基Ｒ７〜Ｒ１０もまた置換されていてもよく、そして置換基は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、およびＣ１〜Ｃ１０アルキルアミノ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ１０アリール並びにＣ４〜Ｃ１０ヘテロアリールから選択される１つ以上のものである。
【００４０】
用語「アルコキシ」は、−Ｏ−アルキル（ここで、アルキルは上記で定義されるとおりである）を意味する。アルコキシは、オキソ架橋を介して、主鎖のアリールまたはヘテロアリールに結合する。アルコキシは直鎖であってもよく、または分岐であってもよいが、直鎖の方が好適である。例えば、メトキシ、エチルオキシ、プロポキシ、ブチルオキシ、ｔ−ブチルオキシまたはｉ−プロポキシが含まれる。好適なアルコキシは１〜４個の炭素原子を含む；特に好適なアルコキシは１〜３個の炭素原子を含む。
【００４１】
用語「ハロゲン」または「ハロ」は、ＶＩＩａ属の元素、例えば、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、フッ素（Ｆ）、ヨウ素（Ｉ）を含む。
【００４２】
用語「アミン」または「アミノ」は、１つ以上の炭素またはヘテロ原子と共有結合した窒素原子を有する化合物を含む。
【００４３】
本発明の化合物のうち、以下の表１の化合物が特に好ましいが、これらに限定されるわけではない。
【００４４】
【表１−１】
【表１−２】
【表１−３】
【表１−４】
【表１−５】
【表１−６】
【表１−７】
【表１−８】
【表１−９】
【００４５】
ナフトキノン系化合物は疎水性物質であり、そして粗薬物から抽出、単離および精製してもよく、またはそうでなければ有機合成によって合成してもよい。ナフトキノン系化合物が結晶状態で存在する場合、それは、水に対する溶解性を実質的に示さない。
【００４６】
これに対し、本発明のナフトキノン系化合物を微粒化すると、薬物化合物の溶解度を有意に増加させることができ、結果的に、それらのインビボ吸収率が改善される。
【００４７】
ナフトキノン系化合物は、上記のように、水に対して低い溶解度を示す。本明細書において使用する用語「水に対して低い溶解度」は、化合物が、中性または酸性の水溶液において１０ｍｇ／ｍＬ以下、より好ましくは、１ｍｇ／ｍＬ以下の溶解度を有することを意味する。
【００４８】
本発明のナフトキノン系化合物では、有効成分は、高い程度の結晶度を伴う結晶構造を有してもよく、または低い程度の結晶度を伴う結晶構造を有してもよい。好ましくは、有効成分は低い結晶化度を伴う結晶構造からなり、これにより、式１または２の化合物の低い溶解度に関連する問題を解決し、そしてそれらの溶解度を増加させることができる。本明細書において使用する用語「低い程度の結晶度」は５０％以下の結晶度を指し、そして材料の固有な結晶度が完全に消失した非晶質構造を包含する。
【００４９】
好ましくは、本発明の組成物は、乾燥剤を更に含んでなり得る。乾燥剤を組み入れると、ナフトキノン系化合物の再結晶を経時的に阻害し、従って、粒子の微粒化による薬物化合物の溶解度の増加を維持することが可能である。後に例示するように、これらの事実は、ケイ酸カルシウムを組成物に添加することにより、体重の有意な消失がもたらされることを示す実施例９から明確に確認することができる。更に、乾燥剤は、医薬組成物のフロキュレーションおよび凝集を抑制する役割を果たす一方、ナフトキノン系化合物の治療効果に有害な影響を及ぼすことがない。
【００５０】
乾燥剤の好適な例として、コロイダルシリカ、軽質無水ケイ酸、重質無水ケイ酸、塩化ナトリウム、ケイ酸カルシウム、アルミノケイ酸カリウム、アルミノケイ酸カルシウムなどを挙げることができるが、これらに限定されない。これらの材料は、単独またはそれらの任意の組み合わせで使用し得る。
【００５１】
乾燥剤の添加は、組成物調製プロセスのいずれの工程において行ってもよい。例えば、乾燥剤は、ナフトキノン系化合物の微粒化プロセス中に添加してもよく、またはそうでなければ、組成物の調製プロセス中に添加してもよい。
【００５２】
本明細書において使用する用語「微粒化粒子」は、粒度が１０００μｍ以下である粒子を意味し、そしてナノ粒子およびマイクロ粒子を包含する。用語「ナノ−」は１〜１０００ｎｍの範囲として定義され、そして「マイクロ−」は１〜１０００μｍの範囲として定義される。粒子、好ましくは、球体または中空を伴う粒子の形態は、特に制限されない。
【００５３】
本発明の微粒化粒子の粒径を減少させると、比表面積が増加し、それによって溶解率および溶解度が増加する。しかし、粒径が過度に小さいと、そのようなサイズを有する細密な粒子を調製することが困難になり、そしてまた溶解度の悪化を生じ得る粒子の凝塊形成または凝集が生じ得る。
【００５４】
従って、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子の粒度は、９０％以上の粒子の平均粒子径（Ｘ９０）が３０μｍ以下、より好ましくは、１ｍｍ〜２０μｍ、そして特に好ましくは、１ｎｍ〜１０μｍである場合が望ましい。別の実施形態では、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子の粒度は、５０％以上の粒子の平均粒子径（Ｘ５０）が１０μｍ以下、より好ましくは、１ｍｍ〜５μｍ、そして特に好ましくは、１ｎｍ〜３μｍである場合が望ましい。
【００５５】
更に、微粒化粒子は、均等な溶解度を考慮すると、狭い分布の粒径を有する場合が好ましい。望ましい例では、９０％以上の微粒化粒子が、平均粒径から１０％範囲内、好ましくは、平均粒径から５％の範囲内、特に、平均粒径から２％の範囲内にある。
【００５６】
本明細書において使用する用語「直径」、「粒径」および「平均粒子径」は、個数基準平均粒径を意味する。
【００５７】
本明細書において使用するように、微粒化ナフトキノン系化合物は、化合物のみの微粒化形態、および化合物の混合物の微粒化形態、および界面活性剤のような添加物を含むことが意図される。
【００５８】
本発明は、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子による罹患した動物の治療を介して、薬物のバイオアベイラビリティの増加による薬物の活性および治療効果を提示する。
【００５９】
好ましくは、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子の調製のための粒子微粒化方法は、ミリング、沈殿、高圧均質化、および超臨界微粒化を含み得る。これらの方法は、極めて細かく分割した粒子を得るために、単独で使用してもよく、またはそれらの任意の組み合わせで使用してもよい。
【００６０】
ミリングは、強力な物理的な力を有効成分の粒子に適用することによって、有効成分を細かい粒子に粉砕する方法である。機械的ミリングは、ジェットミリング、ボールミリング、振動ミリング、ハンマーミリングなどのような多様なミリングプロセスを使用することによって、行ってもよい。４０℃以下の温度で空気圧を使用して行うことができるジェットミリングが、特に好適である。
【００６１】
好ましくは、界面活性剤を更に添加して、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子の調製中に生じ得る粒子の凝塊形成または凝集を防止してもよい。界面活性剤の添加の時間を、特に制限するものはない。例えば、界面活性剤は、微粒化プロセス前、中および／または後に混合してもよい。
【００６２】
これらの上記の一連のプロセスを介して、本発明者は、ナフトキノン系化合物のようなやや溶けにくい薬物を微小粒子に容易に粉砕することができたが、これは、従来のミリング方法だけでは、達成することが困難であった。更に、界面活性剤を組み入れることによって、より細かい粒度により効率的に微粒化することができ、粒子の相互作用による凝塊形成および凝集に関与せず、そして粒子の封入またはカプセル化を必要としない、小サイズ化された、安定かつ容易に分散可能なナフトキノン系化合物が生成される。更に、ナフトキノン系化合物のそのようにして調製された微粒化粒子は、僅かな量の界面活性剤を含有するため、そのような粒子は、安定な懸濁液またはエマルジョンを形成するために水に比較的容易に分散可能であり、吸収率の増加を認めることができ、そして経口用調製物に処方することができる。従って、有効成分として同じ量のナフトキノン系化合物を使用したとき、そのようにして処方された経口用調製物は、他の投与処方物と比較して、比較的上位のバイオアベイラビリティを発揮することができる。
【００６３】
本発明において、界面活性剤は、ナフトキノン系化合物表面に化学的に結合する材料を除く、ナフトキノン系化合物の表面に物理的に結合する材料であり、そして乳化剤およびポリマーを含む従来の薬学的処方に使用されるビヒクルを包含する概念である。好ましくは、界面活性剤は、当該技術分野において公知の有機性薬物ビヒクルであってもよく、または無機性薬物ビヒクルであってもよく、そして例えば、高分子量のポリマー、低分子量のオリゴマー、および天然に存在する界面活性剤を含んでもよい。
【００６４】
乳化剤に特に制限はなく、例えば、レシチン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジル−セリン、ホスファチジルイノシトール、それらの誘導体のような脂質；ステアリン酸グリセリル、パルミチン酸ソルビタンのような脂肪酸のエステル誘導体；モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（Ｔｗｅｅｎ２０）、モノパルミチン酸ポリオキシエチレンソルビタン（Ｔｗｅｅｎ４０）、モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（Ｔｗｅｅｎ６０）、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（Ｔｗｅｅｎ８０）、モノラウリン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ２０）、モノラウリン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ２０）、モノステアリン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ６０）、モノオレイン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ８０）などのようなソルビタンベースの乳化剤がある。
【００６５】
界面活性剤として、カゼイン、ゼラチン、リン脂質、トラガント、レシチン、アカシアガム、コレステロール、ステアリン酸、塩化ベンザルコニウム、ステアリンカルシウム、モノステアリン酸グリセリル、天然のリン脂質、蝋、腸溶性樹脂、パラフィン、アカシアのような天然に存在する界面活性剤；ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテル、ソルビタンエステル、モノステアリン酸グリセロール、ポリエチレングリコール、セチルアルコール、セトステアリルアルコール、ステアリルアルコール、ポロキサマー、ポロキサミン、メチルセルロース、ヒドロキシセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、非結晶セルロース、合成リン脂質のような非イオン性界面活性剤；ラウリン酸カリウム、ステアリン酸トリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、硫酸アルキルポリオキシエチレン、アルギン酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、負に荷電したホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシット、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、負に荷電したグリセリルエステル、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウムのようなアニオン性界面活性剤；および第四級アンモニウム化合物、塩化ベンザルコニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ラウリルジメチルベンジル−アンモニウム、コロイド粘土、ベントナイト、ビーガム、天然の合成リン脂質、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジン酸、リゾリン脂質、卵またはダイズリン脂質のようなカチオン性界面活性剤を挙げることができるが、これらに限定されない。界面活性剤の好適な例として、ラウリル硫酸ナトリウム、リン酸化脂質、ケイ酸カルシウム、キトサン、またはパルミチン酸スクロースを挙げることができる。
【００６６】
界面活性剤の含有量は、ナフトキノン系化合物および界面活性剤の全重量に基づいて、好ましくは、０．１〜５０％、より好ましくは、０．５〜３０％、そして特に好ましくは、０．５〜１５％の範囲であり得る。
【００６７】
微粒化粒子のサイズは、粉砕時間または界面活性剤含有量を制御することによって、調整してもよい。
【００６８】
上記の粉砕プロセスを使用して、粒子の縮小を行う場合、好ましくは、微粒化プロセスを冷蔵条件下で行って、粒度成長および粒子凝集を減少させてもよい。更に、粒度成長および粒子凝集は、低温での微粒化粒子の貯蔵によって、最小限にすることができる。
【００６９】
一方、水溶液は、直接乾燥、またはビヒクルに対するスプレーコーティング、または流動床スプレーコーターを使用するビヒクルに対するスプレーによって、乾燥してもよい。
【００７０】
必要であれば、医薬組成物は、水溶性ポリマーおよび／または溶解剤を更に含んでなり得る。
【００７１】
水溶性ポリマーは、式１または２の化合物の分子或いは粒子の周囲を親水性にして、結果的に水溶性を増強し、そして好ましくは、有効成分としての式１または２の化合物の非晶質状態を維持することによって、粒子の有効成分の凝集を防止することを援助する。
【００７２】
好ましくは、水溶性ポリマーはｐＨ依存的ポリマーであり、そして胃腸ｐＨの個体間および個体内のばらつき下であっても、有効成分の結晶殿消失および親水性の増強を生じ得る。
【００７３】
水溶性ポリマーの例として、セルロース誘導体、ポリビニルベースのポリマー、ポリグリコールベースのポリマー、ポリアルケンオキシド、ポリアルケングリコール、メタクリル酸−エチルアクリレートコポリマー、トウモロコシタンパク質抽出物、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、寒天、カラギーナン、ペクチン、グァーガム、ローカストビーンガム、キサンタンガム、ゲランガム、アラビアガム、シェラックなどを挙げることができる。
【００７４】
水溶性ポリマーの含有量が所与のレベルより過度に高くなると、溶解度の更なる増加は認められないが、溶出剤への暴露時に水溶性ポリマーが過度に膨潤するため、処方物の周りにフィルムが形成されることによって、処方物の硬さが全体的に増加すること、および溶出剤が処方物に浸透しないことのような様々な問題が不利に生じる。従って、好ましくは、溶解剤を添加して、ナフトキノン系化合物の物理特性を改変することによって、処方物の溶解度を最小限にする。
【００７５】
この点に関して、溶解剤は、やや溶けにくい化合物の可溶化および湿潤性を増強する役割を果たし、そして食事、および食事摂取後の薬物投与の時間差に由来するナフトキノン系化合物のバイオアベイラビリティのばらつきを有意に減少させることができる。溶解剤は、従来の広範に使用される界面活性剤または両親媒性物質から選択してもよく、そして溶解剤の具体例として、上記で定義した界面活性剤を参照にし得る。
【００７６】
崩壊促進剤は、薬物放出速度を改善するのに役立ち、そして標的部位における薬物の迅速な放出を可能にして、それによって、薬物のバイオアベイラビリティを増加させることが可能である。崩壊促進剤の好適な例として、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、カルボキシメチルセルロースカルシウム、デンプングリコール酸ナトリウムおよび低置換ヒドロキシプロピルセルロースからなる群から選択される少なくとも１つのものを挙げることができるが、これらに限定されない。クロスカルメロースナトリウムが好適である。
【００７７】
上記の様々な要因を考慮すると、有効成分の１００重量部に基づいて、１０〜１０００重量部の水溶性ポリマー、１〜３０重量部の崩壊促進剤、および０．１〜２０重量部の溶解剤を添加するのが好適である。
【００７８】
必要であれば、上記の成分に加えて、処方物に関連して当該技術分野において公知の他の材料も場合により添加してよい。
【００７９】
必要であれば、更に、医薬組成物は、薬学的に許容できるキャリア、希釈剤、ビヒクルまたはそれらの任意の組み合わせを更に含んでなり得る。乾燥剤の添加において例示されるように、これらの付随的成分もまた、様々な工程において添加し得る。
【００８０】
用語「キャリア」は、細胞または組織への化合物の組みいれを容易にする化学化合物を意味する。例えば、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）は、生物体の細胞または組織への多くの有機化合物の取り込みを容易にするため、一般的に利用されるキャリアである。
【００８１】
用語「希釈剤」は、目的の化合物を溶解し、そして化合物の生物学的に活性な形態を安定化する水に希釈される化学化合物を定義する。緩衝化溶液に溶解される塩は、当該技術分野において希釈剤として利用される。リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）はヒト体液のイオン強度条件を模倣するため、これは、１つの一般的に使用される緩衝溶液である。緩衝液塩は、低濃度で溶液のｐＨを制御することができるため、緩衝液希釈剤が、化合物の生物活性を改変することは稀である。
【００８２】
キャリアの種類は特に制限されないが、キャリアは、所望される処方物に依存して、当該技術分野において従来使用される好適なもの、例えば、デンプン、ラクトース、マンニトール、カルボキシメチルセルロース、トウモロコシデンプンおよび無機塩のような個体キャリア；蒸留水、生理食塩水、グルコース水溶液のような液体キャリア、エタノール、プロピレングリコール、およびポリエチレングリコールのようなアルコール；並びに様々な動物および植物油、白色ワセリン、パラフィンおよび蝋のような油性キャリアからなる群から選択される少なくとも１つのものであってもよい。
【００８３】
ビヒクルの例として、充填剤、例えば、ラクトース、スクロース、マンニトールおよびソルビトール、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、イネデンプン、ポテトデンプン、ゼラチン、トラガカントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはセルロース材料、例えば、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）を挙げることができる。
【００８４】
好ましくは、本発明の組成物は、１つ以上の化粧品若しくは食品に許容できるキャリアまたはビヒクルを含有する組成物に処方することができる。即ち、組成物は、化粧品または化粧品添加物、飲料若しくは飲料添加物、食品若しくは食品添加物、または機能性健康食品の形態で処方物に調製することができる。
【００８５】
本明細書において使用する用語「機能性健康食品」は、本発明の組成物を一般の食品に添加して、それによってその機能を改善する食品を指す。この目的のために、本発明の組成物は、一般の食品に添加してもよく、またはカプセル、粉末、懸濁液などの形態で調製してもよい。本発明の組成物を含有するそのような機能性健康食品の摂取は、健康に有益な効果をもたらし、そして食品が原材料として使用されるため、従来の薬物とは異なり、薬物の長期投与時に生じ得る有害な副作用が認められないという利点がある。
【００８６】
食品添加物として本発明の組成物を使用することを所望する場合、組成物を単独で添加してもよく、またはそうでなければ、他の食品若しくは食品成分と共同して使用してもよく、または任意の従来の方法に従って適切に使用してもよい。有効成分の混合量は、所望する用途および適用（予防、健康または治療的処置）に依存して適切に決定してもよい。上記の食品の種類に特に制限はない。
【００８７】
化粧品の原材料として本発明の組成物を使用することを所望する場合、組成物を、それ自体で添加することができるか、または他の化粧品成分と共同して使用することができるか、または他の従来の方法に従って、適切に使用してもよい。有効成分の混合量は、その使用の目的に依存して、適切に決定してもよい。
【００８８】
本発明に従う医薬組成物は、好ましくは、腸を標的にした処方物に調製される経口医薬組成物であってもよい。
【００８９】
一般的に、経口医薬組成物は、経口投与時に胃を通過し、主として小腸で吸収され、次いで、進退のすべての組織に拡散され、それによって標的組織に治療効果を及ぼす。
【００９０】
これに関して、本発明の経口医薬組成物は、有効成分の腸を標的にした処方物を介する有効成分として、式１または２の化合物の生体吸収およびバイオアベイラビリティを増強する。より具体的には、本発明の医薬組成物の有効成分が主として胃および小腸の上部において吸収される場合、身体に吸収された有効成分は、肝臓の代謝を直接受けて、次いで、有効成分の実質的な分解に至るため、所望するレベルの治療効果を発揮することが不可能である。これに対し、有効成分が主に小腸下部の周囲および下流で吸収される場合、吸収された有効成分は、リンパ管を介して標的組織に移動して、それによって高い治療効果を発揮することが予想される。
【００９１】
更に、本発明の医薬組成物が消化プロセスの最終目的である結腸を標的にするようにそれを構築する場合、薬物のインビボ保持時間を増加させることが可能であり、そしてまた、薬物の身体への投与時の身体での代謝により生じ得る薬物の分解を最小限にすることが可能である。結果として、疾患の治療に必要な有効成分の臨界有効量（ｃｒｉｔｉｃａｌ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｄｏｓｅ）を有意に低下させるために薬物の薬物動態特性を改善し、そして微量の有効成分の投与であっても所望される治療効果を得ることが可能である。更に、経口医薬組成物では、胃内のｐＨの変化および食事の取り込みパターンから生じ得るバイオアベイラビリティの個体間および個体内のばらつきを減少させることによって、薬物の吸収のばらつきを最小限にすることもまた可能である。
【００９２】
従って、本発明の腸を標的にした処方物は、有効成分が、主に小腸および大腸、より好ましくは、空腸、並びに小腸下部に対応する回腸および結腸、特に好ましくは、回腸または結腸において吸収されるように構成される。
【００９３】
腸を標的にした処方物は、多様な方法を介して消化管の多数の生理学的パラメータを利用することによって、設計し得る。本発明の１つの好適な実施形態では、腸を標的にした処方物は、（１）ｐＨ感受性ポリマーに基づく処方方法、（２）腸特異的細菌酵素によって分解可能な生分解性ポリマーに基づく処方方法、（３）腸特異的細菌酵素によって分解可能な生分解マトリックスに基づく処方方法、または（４）所与の遅延時間後の薬物の放出を可能にする処方方法、およびそれらの任意の組み合わせによって調製し得る。
【００９４】
具体的には、（１）ｐＨ感受性ポリマーを使用する腸を標的にした処方物は、消化管のｐＨ変化に基づく薬物送達システムである。胃のｐＨは１〜３の範囲であるが、小腸および大腸のｐＨは７以上の値を有し、胃のｐＨと比較して高い。この事実に基づいて、医薬組成物が消化管のｐＨ変動の影響を受けることなく、腸の下部に到達することを確実にするために、ｐＨ感受性ポリマーを使用してもよい。ｐＨ感受性ポリマーの例として、メタクリル酸−エチルアクリレートコポリマー（Ｅｕｄｒａｇｉｔ：Ｒｅｇｉｓｔｅｒｅｄ Ｔｒａｄｅｍａｒｋ ｏｆ Ｒｏｈｍ Ｐｈａｒｍａ ＧｍｂＨ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）およびそれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１つのものを挙げることができるが、これらに限定されない。
【００９５】
好ましくは、ｐＨ感受性ポリマーは、コーティングプロセスによって添加してもよい。例えば、ポリマーの添加は、溶媒中でポリマーを混合して、水溶性コーティング懸濁液を形成させ、得られるコーティング懸濁液をスプレーして、フィルムコーティングを形成させ、そしてフィルムコーティングを乾燥することによって、行ってもよい。
【００９６】
腸特異的細菌酵素によって分解可能な生分解性ポリマーを使用する腸を標的にした処方物（２）は、腸内細菌によって産生させることができる特異的酵素の分解能の利用に基づく。特異的酵素の例として、アゾ還元酵素、細菌のヒドロラーゼ、グリコシダーゼ、エステラーゼ、ポリサッカリダーゼなどを挙げることができる。
【００９７】
標的としてアゾ還元酵素を使用する腸を標的にした処方物を設計することを所望する場合、生分解性ポリマーは、アゾ芳香族連結を含有するポリマー、例えば、スチレンおよびヒドロキシエチルメタクリレート（ＨＥＭＡ）のコポリマーであってもよい。ポリマーを有効成分を含有する処方物に添加する場合、腸内細菌、例えば、バクテロイデス・フラジリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓ）およびユーバクテリウム・リモサム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｉｍｏｓｕｍ）によって特異的に分泌されるアゾ還元酵素の作用を介するポリマーのアゾ基の還元によって、有効成分を腸に放出してもよい。
【００９８】
標的としてグリコシダーゼ、エステラーゼ、またはポリサッカリダーゼを使用して、腸を標的にした処方物を設計する場合、生分解性ポリマーは、天然に存在する多糖またはその置換誘導体であってもよい。例えば、生分解性ポリマーは、デキストランエステル、ペクチン、アミラーゼ、エチルセルロースおよびその薬学的に許容できる塩からなる群から選択される少なくとも１つのものであってもよい。ポリマーを有効成分に添加する場合、腸内細菌、例えば、ビフィズス菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ）およびバクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｐｐ．）によって特異的に分泌される各酵素の作用を介するポリマーの加水分解によって、有効成分を腸に放出させてもよい。これらのポリマーは、天然の材料であり、そしてインビボでの毒性の危険性が低い利点を有する。
【００９９】
腸特異的細菌酵素によって分解可能な生分解性マトリックスを使用する腸を標的にした処方物（３）は、生分解性ポリマーが相互に架橋し、そして有効成分または有効成分含有処方に添加される形態であってもよい。生分解性ポリマーの例として、コンドロイチン硫酸、グァーガム、キトサン、ペクチンなどのような天然に存在するポリマーを挙げることができる。薬物放出の程度は、マトリックスを構成するポリマーの架橋の程度に依存して変動し得る。
【０１００】
天然に存在するポリマーに加えて、生分解性マトリックスは、Ｎ−置換アクリルアミドに基づく合成ハイドロゲルであってもよい。例えば、マトリックスとして、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルアクリルアミドとアクリル酸との架橋、または２−ヒドロキシエチルメタクリレートと４−メタクリロイルオキシアゾベンゼンとのコポリマー化によって合成されるハイドロゲルを使用してもよい。架橋は、例えば、上記のような、アゾ連結であってもよく、そして処方物は、腸の薬物送達に最適な条件を提供するために架橋が維持され、そして薬物が腸に送達される場合、腸粘膜と相互作用するために連結が分解される形態であってもよい。
【０１０１】
更に、遅延時間後の薬物の時間経過放出による腸を標的にした処方物（４）は、ｐＨ変化に関わらず、予め決定された時間後に有効成分を放出させる機構を利用する薬物送達システムである。有効な薬物の腸溶性放出を達成するために、処方物は、胃のｐＨ環境に耐性であるべきであり、そして有効成分を腸へ放出する前の、身体から腸への薬物の送達に要する期間に対応する５〜６時間は、静穏期（ｓｉｌｅｎｔ ｐｈａｓｅ）の状態であるべきである。時間特異的遅延放出処方物は、ポリエチレンオキシドとポリウレタンとのコポリマー化から調製されるハイドロゲルの添加によって、調製してもよい。
【０１０２】
具体的には、遅延放出処方物は、薬物を不溶性ポリマーに適用した後に上記の組成物を有するハイドロゲルを添加すると、処方物が胃内および小腸の消化管上部に滞留している間、処方物が水を吸収して膨潤し、次に、消化管下部である小腸の下部に移動してから薬物を放出するような構成を有してもよく、そして薬物の遅延時間は、ハイドロゲルの長さに依存して決定される。
【０１０３】
ポリマーの別の例として、遅延放出処方に、エチルセルロース（ＥＣ）を使用してもよい。ＥＣは不溶性のポリマーであり、そして水の浸透による膨潤媒体の膨潤または蠕動運動による腸の内圧の変化に応答して、薬物放出時間を遅延するための因子としての役割を果たし得る。遅延時間は、ＥＣの厚さによって制御され得る。更なる例として、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）はまた、ポリマーの厚さの制御による所与の期間後、薬物放出を可能にする遅延剤として使用してもよく、そして５〜１０時間の遅延時間を有してもよい。
【０１０４】
活性成分としてのナフトキノン系化合物の微粒化粒子は、治療有効量まで含有することができ、ここで、用語「治療有効量」は、化合物が投与される場合、治療が必要な疾患の症状の１つ以上をある程度緩和若しくは減少させるか、または予防が必要な疾患の化学的マーカーまたは症状の開始を遅延するのに有効な有効成分の量を意味する。
【０１０５】
それ故、治療有効量は、（ｉ）疾患の進行の速度を反転する；（ｉｉ）疾患の更なる進行をある程度阻害する；および／または（ｉｉｉ）疾患に伴う１つ以上の症状をある程度緩和する（または好ましくは、排除する）効果を示す有効成分の量を指す。治療が必要な疾患の既知のインビボおよびインビトロモデル系に関する化合物で実験することによって、治療有効量を実験的に決定してもよい。
【０１０６】
本発明の医薬組成物を単位剤形に処方する場合、好ましくは、有効成分の式Ｉの化合物は、約０．１〜５，０００ｍｇの単位用量で含有される。投与する化合物の量は、治療する患者の体重、および年齢、疾患の特徴的性質および重症度に依存して、担当医が決定する。しかし、成人の患者では、患者に投与しようとする有効成分の用量は、投与の回数および強度に依存するが、典型的に、１日あたり約１〜１０００ｍｇ／ｋｇの範囲内にある。成人患者への筋肉内または静脈内投与のために、単回用量として１日あたり計約１〜５００ｍｇが十分であり、好ましくは、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子が、１日あたり少なくとも１０ｍｇを超えて投与されるように設計され得る。
【０１０７】
本発明の医薬組成物は、代謝疾患、再狭窄、インポテンス、前立腺疾患、高血圧症、心疾患、腎疾患および緑内障、変性疾患、並びにミトコンドリア機能障害関連疾患の予防または治療に有効であり、ここで、代謝疾患として、肥満、肥満合併症、肝疾患、動脈硬化、脳卒中、心筋梗塞、循環器系疾患、虚血性疾患、糖尿病、糖尿病関連合併症または炎症性疾患を挙げることができるが、これらに限定されない。
【０１０８】
本発明のナフトキノン系化合物およびその治療効果については、特許出願に付与された次の番号：特許文献２３、特許文献２４、特許文献２５、特許文献２６、特許文献２７、特許文献１４、特許文献１５および特許文献１６（これらの開示内容は、それらの全体が本明細書において参考として援用される）に開示されている。
【０１０９】
上記および他の目的、特徴並びに他の利点は、添付の図面とあわせて、後に記載の詳細な説明からより明確に理解されよう。図面について：
【図面の簡単な説明】
【０１１０】
【図１】超臨界流体を使用した時の微粒化クリプトタンシノンの粒度分布を示す。
【図２】超臨界流体を使用する前の微粒化クリプトタンシノンの粒度分布を示す。
【図３】実施例１５に従う時間経過に対する化合物１の微粒化粒子の溶解率の変化を示すグラフである。
【図４】実施例１５に従う時間経過に対する化合物５８抽出物の微粒化粒子の溶解率の変化を示すグラフである。
【図５】実施例１５に従う時間経過に対する化合物５の微粒化粒子の溶解率の変化を示すグラフである。
【図６】実施例１５に従う時間経過に対する化合物４４および５１の微粒化粒子の溶解率の変化を示すグラフである。
【図７】実施例１６に従う時間経過に対する化合物１の微粒化粒子および顆粒化粒子の溶解率の変化を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０１１１】
これより、以下の実施例を参考に、本発明をより詳細に説明する。これらの実施例は、本発明を例示するためのみに提供され、本発明の範囲および趣旨を限定するものと解釈すべきではない。
【実施例】
【０１１２】
実施例１：超臨界微粒化を使用する化合物５８（クリプトタンシノン）の微粒化粒子の調製
超臨界微粒化プロセスを開発するために、１〜１００μｍの粒度分布および３０μｍの平均粒度を有する５ｇのクリプトタンシノン、並びに０．５ｇのラウリル硫酸ナトリウムを、４５ｍＬの塩化メチレンに溶解した。その後、得られたクリプトタンシノンの塩化メチレン溶液を、１／１６インチの直径を有するノズルオリフィスを介して、１〜２ｍＬ／分の流速で、３０℃の温度、８０バール、および２，０００ｒｐｍに設定した反応容器に注入し、そして液化二酸化炭素を充填した一方、ＩＳＣＯポンプを使用して、１／１６インチの直径を有するノズルオリフィスを介し、１０〜２０ｍＬ／分の流速で二酸化炭素を注入した。
【０１１３】
反応容器において、不溶性溶媒として液体二酸化炭素溶液から小サイズ化粒子の沈殿物を回収するために、反応容器の１５倍の容積の二酸化炭素を流し込んで残りの有機溶媒を取り出し、そして反応容器の圧力を低下させて、クリプトタンシノンの微粒化粒子を回収した。超臨界液体を使用した場合のクリプトタンシノンの微粒化粒子のサイズおよび超臨界微粒化の適用前の微粒化粒子のサイズを、それぞれ図１および２に示す。図１および２に示すように、９５％を超える粒子は、０．１〜２μｍの体積直径を有する粒子からなる。
【０１１４】
実施例２：Ｊｅｔ ｍｉｌｌを使用する化合物５８（クリプトタンシノン）の微粒化粒子の調製
Ｊｅｔ ｍｉｌｌ（ＳＪ−１００，Ｎｉｓｓｈｉｎ，Ｊａｐａｎ）を使用して、クリプトタンシノンの微粒化を行った。０．６５Ｍｐａの供給圧、および５０〜１００ｇ／時間の供給速度で操作を行った。０．２ｇのラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）および１０ｇのクリプトタンシノンを混合および粉砕した。微粒化粒子を回収し、そしてゼータ電位測定による粒径について、粒度を決定した。平均粒度は１５００ｎｍであった。
【０１１５】
実施例３：高圧ホモジナイザーを使用する化合物５８（クリプトタンシノン）の微粒化粒子の調製
０．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウムと混合した１５ｇのクリプトタンシノンを、６００ｍＬの水溶液に分散させ、次いで、Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ Ｔ２５ Ｂａｓｉｃホモジナイザー（ＩＫＡ−Ｗｅｒｋｅ ＧｍｂＨ，Ｇｅｒｍａｎｙ）中、２４，０００ｒｐｍで１０分間処理して、粒度分布を狭くした。まず、マイクロフルイダイザープロセッサ（Ｍ−１１０ＥＨ，Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を介し、１５℃および７，０００ｐｓｉでの低圧均質化の１または２回通過、それに続く、１５，０００ｐｓｉにおける高圧均質化の３回通過によって、粒子のサイズを均質にした。すべての操作において、熱交換装置を使用して、装置の温度を１５℃に維持した。クリプトタンシノンサンプルを回収し、次いで、粒度をアッセイした。サンプルのいくつかを、効力の評価に使用した。上記のマイクロフルイダイザーを通過した９５％を超える粒子は、０．１〜２μｍの体積直径を有する粒子からなった。
【０１１６】
実施例４：高圧ホモジナイザーを使用する化合物６０（１５，１６−ジヒドロタンシノン）の微粒化粒子の調製
０．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウムと混合した１５ｇの１５，１６−ジヒドロタンシノンを、６００ｍＬの水溶液に分散させ、次いで、Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ Ｔ２５ Ｂａｓｉｃホモジナイザー（ＩＫＡ−Ｗｅｒｋｅ ＧｍｂＨ，Ｇｅｒｍａｎｙ）中、２４，０００ｒｐｍで１０分間処理して、粒度分布を狭くした。まず、マイクロフルイダイザープロセッサ（Ｍ−１１０ＥＨ，Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を介し、１５℃および７，０００ｐｓｉでの低圧均質化の１または２回通過、それに続く、１５，０００ｐｓｉにおける高圧均質化の３回通過によって、粒子のサイズを均質にした。すべての操作において、熱交換装置を使用して、装置の温度を１５℃に維持した。１５，１６−ジヒドロタンシノンサンプルを回収し、次いで、粒度をアッセイした。サンプルのいくつかを、効力の評価に使用した。上記のマイクロフルイダイザーを通過した９５％を超える粒子は、０．１〜２μｍの体積直径を有する粒子からなった。
【０１１７】
実施例５：高圧ホモジナイザーを使用する化合物５９（タンシノンＩＩＡ）の微粒化粒子の調製
０．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウムと混合した１５ｇのタンシノンＩＩＡを、６００ｍＬの水溶液に分散させ、次いで、Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ Ｔ２５ Ｂａｓｉｃホモジナイザー（ＩＫＡ−Ｗｅｒｋｅ ＧｍｂＨ，Ｇｅｒｍａｎｙ）中、２４，０００ｒｐｍで１０分間処理して、粒度分布を狭くした。まず、マイクロフルイダイザープロセッサ（Ｍ−１１０ＥＨ，Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を介し、１５℃および７，０００ｐｓｉでの低圧均質化の５回通過、それに続く、２４，０００ｐｓｉにおける高圧均質化の５０回通過によって、粒子のサイズを均質にした。すべての操作において、熱交換装置を使用して、装置の温度を１５℃に維持した。タンシノンＩＩＡサンプルを回収し、次いで、粒度をアッセイした。サンプルのいくつかを、効力の評価に使用した。上記のマイクロフルイダイザーを通過した９５％を超える粒子は、０．１〜２μｍの体積直径を有する粒子からなった。
【０１１８】
実施例６：動物に対する化合物５８（クリプトタンシノン）の微粒化粒子の効果
実施例１〜３の手順に従って、１ｇのクリプトタンシノンの単純に粉砕した粉末、および１ｇのクリプトタンシノン化合物の各微粒化粒子を、１０ｍＬの蒸留水と混合し、そして得られた混合物を、超音波処理装置中で３０分間処理して、クリプトタンシノン化合物の懸濁液を調製した。クリプトタンシノン含有量が４００ｍｇ／ｋｇのこれらの懸濁液を、ｏｂ／ｏｂマウスに１日１回投与し、そして動物の体重（ＢＷ）の変化を調べた。
【０１１９】
この目的のために、２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢のｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化させた動物を、無作為に５つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：ラウリル硫酸ナトリウム（１０ｍｇ／ｋｇ）の投与を伴うコントロール群、クリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）の単純に粉砕した粉末の投与を伴う群、超臨界微粒化に供されたクリプトタンシノンの投与を伴う群（実施例１）、ジェットミル粉砕したクリプトタンシノンの投与を伴う群（実施例２）、およびマイクロフルイダイザーでミリング粉砕したクリプトタンシノンの投与を伴う群（実施例３）。各群の動物に、４００ｍｇ／ｋｇの薬物サンプルを経口的に（ＰＯ）投与した。動物に、固形飼料ペレットおよび水を自由に摂取させた。動物の体重の変化の結果を、以下の表１に示す。表１から分かるように、クリプトタンシノンの微粒化粒子の各投与は、単純に粉砕したクリプトタンシノン粉末を投与した群と比較して、微粒化方法および装置にかかわらず、同じ用量の化合物において有意な体重の減少を示したことが確認された。
【０１２０】
【表２】
【０１２１】
実施例７：様々な用量のクリプトタンシノンの微粒化粒子による薬物の治療有効量の決定
２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇおよび１００ｍｇ／ｋｇにおけるＪｅｔ ｍｉｌｌ−微粒化クリプトタンシノンと０．２％（ｗ／ｗ）ラウリル硫酸ナトリウムとの混合物からなる処方物のそれぞれを、４週間の高脂肪の食餌によって肥満を生じさせたＤＩＯ（食餌誘導性肥満）ＳＤラットに、連日２８日間、投与した。コントロールとして、０．２％の濃度の界面活性剤ＳＬＳを蒸留水に懸濁し、次いで、懸濁液を動物に投与した。結果として、以下の表３から分かるように、コントロール群と比較して、体重の有意な減少が確認され、そして体重の減少は濃度依存的であった。
【０１２２】
【表３】
【０１２３】
実施例８：クリプトタンシノンの微粒化粒子の効力の増強に対するリン脂質の効果
リン脂質であるホスファチジルコリン（ＰＣ）が、クリプトタンシノンの微粒化粒子の粒度を維持し、粒子の凝塊形成または凝集を防止し、そしてクリプトタンシノンの治療効力を増強するかどうかを確かめるために、以下のような動物実験を行った。
【０１２４】
この目的のために、５週齢のＣ５７ＢＬ／６雄性マウスを、Ｏｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物高脂肪の食餌を８週間、供給することによって、ＤＩＯ（食餌誘導性肥満）マウスモデルを確立した。体重４０ｇの１３週齢の雄性マウスを実験に使用した。実験動物用の食餌として、動物に高脂肪の飼料（４５ｋｃａｌ％脂肪）（Ｄ１２４５１，Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ）を与えた。ＤＩＯマウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化させた動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：何ら薬物サンプルの投与を伴わないコントロール群、ビヒクル（ＰＣ）のみの投与を伴う群、クリプトタンシノン（１５０ｍｇ／ｋｇ）の投与を伴う群、およびクリプトタンシノン（１５０ｍｇ／ｋｇ）＋ＰＣの投与を伴う群。各群の動物に、薬物サンプルを経口的に（ＰＯ）４０日間、投与した。動物に、自由に、固形飼料ペレットおよび水を摂取させた。
【０１２５】
【表４】
【０１２６】
表４から分かるように、クリプトタンシノンとホスファチジルコリン（ＰＣ）との組み合わせを投与した群では、コントロール群、ビヒクル投与群およびクリプトタンシノン投与群と比較して、有意な体重の減少が認められたことが確認された。
【０１２７】
実施例９：クリプトタンシノンの微粒化粒子の効力の増強に対するケイ酸カルシウムの効果
ケイ酸カルシウムが、クリプトタンシノンの微粒化粒子の粒度を維持し、粒子の凝塊形成または凝集を防止し、そしてクリプトタンシノンの治療効力を増強するかどうかを確かめるために、以下のような動物実験を行った。
【０１２８】
２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢ｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化された動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：何ら薬物サンプルの投与を伴わないコントロール群、ビヒクル（ケイ酸カルシウム）のみの投与を伴う群、クリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）の投与を伴う群、およびクリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）＋ケイ酸カルシウムの投与を伴う群。各群の動物に、飼料と混合した薬物サンプルを２０日間、投与した。研究期間全体をとおして、すべての動物に、水および標準的な実験動物用の食餌を自由に摂取させた。
【０１２９】
動物の体重の変化の結果を、以下の表５に示す。表５から分かるように、クリプトタンシノンとケイ酸カルシウムとの組み合わせを投与した群では、コントロール群、ビヒクル投与群およびクリプトタンシノン投与群と比較して、有意な体重の減少が認められたことが確認された。
【０１３０】
【表５】
【０１３１】
実施例１０：クリプトタンシノンの微粒化粒子の効力の増強に対するキトサンの効果
キトサンが、クリプトタンシノンの微粒化粒子の粒度を維持し、粒子の凝塊形成または凝集を防止し、そしてクリプトタンシノンの治療効力を増強するかどうかを確かめるために、以下のような動物実験を行った。
【０１３２】
２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢ｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化された動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：何ら薬物サンプルの投与を伴わないコントロール群、ビヒクル（キトサン）のみの投与を伴う群、クリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）の投与を伴う群、およびクリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）＋キトサンの投与を伴う群。各群の動物に、飼料と混合した薬物サンプルを２０日間、投与した。研究期間全体をとおして、すべての動物に、水および標準的な実験動物用の食餌を自由に摂取させた。
【０１３３】
動物の体重の変化の結果を、以下の表６に示す。表６から分かるように、クリプトタンシノンとキトサンとの組み合わせを投与した群では、コントロール群、ビヒクル投与群およびクリプトタンシノン投与群と比較して、有意な体重の減少が認められたことが確認された。
【０１３４】
【表６】
【０１３５】
実施例１１：クリプトタンシノンの微粒化粒子の効力の増強に対するパルミチン酸スクロースの効果
乳化剤であるパルミチン酸スクロースが、クリプトタンシノンの微粒化粒子の粒度を維持し、粒子の凝塊形成または凝集を防止し、そしてクリプトタンシノンの治療効力を増強するかどうかを確かめるために、以下のような動物実験を行った。
【０１３６】
２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢ｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化された動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：何ら薬物サンプルの投与を伴わないコントロール群、ビヒクル（パルミチン酸スクロース）のみの投与を伴う群、クリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）の投与を伴う群、およびクリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）＋パルミチン酸スクロースの投与を伴う群。各群の動物に、飼料と混合した薬物サンプルを２０日間、投与した。研究期間全体をとおして、すべての動物に、水および標準的な実験動物用の食餌を自由に摂取させた。
【０１３７】
動物の体重の変化の結果を、以下の表７に示す。表７から分かるように、クリプトタンシノンとパルミチン酸スクロースとの組み合わせを投与した群では、コントロール群、ビヒクル投与群およびクリプトタンシノン投与群と比較して、有意な体重の減少が認められたことが確認された。
【０１３８】
【表７】
【０１３９】
実施例１２：動物に対する１５，１６−ジヒドロタンシノンの微粒化粒子の効果
１５，１６−ジヒドロタンシノンの微粒化粒子の治療効力を確認するために、以下のような動物実験を行った。
【０１４０】
この目的のために、２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢のｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化された動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：何ら薬物サンプルの投与を伴わないコントロール群、ビヒクル（ラウリル硫酸ナトリウム）のみの投与を伴う群、１５，１６−ジヒドロタンシノン（マイクロ粒子化前、４００ｍｇ／ｋｇ）＋ラウリル硫酸ナトリウムの投与を伴う群、および１５，１６−ジヒドロタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）＋ラウリル硫酸ナトリウムの微粒化粒子の投与を伴う群。各群の動物に、飼料と混合した薬物サンプルを２０日間、投与した。研究期間全体をとおして、すべての動物に、水および標準的な実験動物用の食餌を自由に摂取させた。
【０１４１】
動物の体重の変化の結果を、以下の表８に示す。表８から分かるように、１５，１６−ジヒドロタンシノンの微粒化粒子とラウリル硫酸ナトリウムとの組み合わせを投与した群では、コントロール群、ビヒクル投与群および１５，１６−ジヒドロタンシノンの非微粒化粒子投与群と比較して、有意な体重の減少が認められたことが確認された。
【０１４２】
【表８】
【０１４３】
実施例１３：動物に対するタンシノンＩＩＡの微粒化粒子の効果
タンシノンＩＩＡの微粒化粒子の治療効力を確認するために、以下のような動物実験を行った。
【０１４４】
この目的のために、２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢のｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化された動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：何ら薬物サンプルの投与を伴わないコントロール群、ビヒクル（ラウリル硫酸ナトリウム）のみの投与を伴う群、タンシノンＩＩＡ（マイクロ粒子化前、４００ｍｇ／ｋｇ）＋ラウリル硫酸ナトリウムの投与を伴う群、およびタンシノンＩＩＡ（４００ｍｇ／ｋｇ）＋ラウリル硫酸ナトリウムの微粒化粒子の投与を伴う群。各群の動物に、飼料と混合した薬物サンプルを２０日間、投与した。研究期間全体をとおして、すべての動物に、水および標準的な実験動物用の食餌を自由に摂取させた。
【０１４５】
動物の体重の変化の結果を、以下の表９に示す。表９から分かるように、タンシノンＩＩＡの微粒化粒子とラウリル硫酸ナトリウムとの組み合わせを投与した群では、コントロール群、ビヒクル投与群およびタンシノンＩＩＡの非微粒化粒子投与群と比較して、有意な体重の減少が認められたことが確認された。
【０１４６】
【表９】
【０１４７】
実施例１４：動物に対する化合物１（β−ラパコン）の微粒化粒子の腸を標的にした処方物の効果
β−ラパコンの微粒化粒子を、腸を標的にした薬物送達システムの処方物に調製した場合のβ−ラパコン｛７，８−ジヒドロ−２，２−ジメチル−２Ｈ−ナフト（２，３−ｂ）ジヒドロピラン−７，８−ジオン｝の治療効力を確認するために、以下のような動物実験を行った。
【０１４８】
０．２ｇのラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）および１０ｇのβ−ラパコンを混合および粉砕した。得られた混合物に、β−ラパコンに対しておよそ等量の水溶性ポリマー（ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、並びにクロスカルメロースナトリウムおよび軽質無水ケイ酸のようなビヒクルを添加し、続いて、スプレー乾燥を行った。次いで、スプレー乾燥生成物を、ｐＨ感受性ポリマーとして約２０重量％のＥｕｄｒａｇｉｔ Ｓ−１００および可塑剤として約２重量％のＰＥＧ＃６，０００を含有するエタノール溶液に添加し、次いで、混合物をスプレー乾燥して、腸を標的にした処方物を調製した。
【０１４９】
各処方物の効力を確認するために、β−ラパコン含有量が２００ｍｇ／ｋｇの処方物を、ｏｂ／ｏｂマウスに１日１回投与し、そして動物の体重（ＢＷ）の変化を調べた。
【０１５０】
この目的のために、２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢のｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化された動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：ラウリル硫酸ナトリウム（１０ｍｇ／ｋｇ）の投与を伴うコントロール群、β−ラパコン（２００ｍｇ／ｋｇ）の単純に粉砕した粉末の投与を伴う群、ジェットミル粉砕したβ−ラパコンの投与を伴う群、およびミリングプロセスに供されたβ−ラパコンの腸を標的にした処方物の投与を伴う群。動物の各群に、２００ｍｇ／ｋｇの薬物サンプルを経口的に（ＰＯ）投与した。動物に、固形飼料ペレットおよび水を自由に摂取させた。動物の体重の変化の結果を、以下の表１０に示す。
【０１５１】
【表１０】
【０１５２】
表１０から分かるように、腸を標的にした処方物の投与を伴う群は、体重の最大の減少（％）を示し、それ故、これは、優れたバイオアベイラビリティが得られることを表す。
【０１５３】
実施例１５：溶解試験
溶解試験は、一般に以下の条件下で行った。
【０１５４】
溶解試験は、Ｋｏｒｅａｎ Ｐｈｒａｍａｃｏｐｅｉａのパドル法に従って行った。パドル速度は７５ｒｐｍであり、流出液の温度は３７℃であり、そして試験溶液は、ｐＨ６．８、１．５％Ｔｗｅｅｎ８０の混合溶液であった。まず、試験溶液を、３５μｍのＭｅｍｂｒａｎｅフィルターを通してろ過し、そして遠心分離を行った。上清の液体を採取し、そして薬物の含有量をＨＰＬＣによって分析し、そして放出した薬物の量を、異なる時点で測定した。溶解試験に使用した薬物は、表１に掲載の化合物１、５、４４および５１、および６０ｗｔ％を超える化合物５８（「化合物５８抽出物」）を含有する特許文献２８に記載の抽出物である。何ら界面活性剤を伴わずに、Ｊｅｔ ｍｉｌｌまたはボールミルを使用して、マイクロ粒子化を行った。化合物の粒度を、ＨＥＬＯＳ測定によって決定した。
【０１５５】
粒度測定のために細胞に約３ｍｌのサンプルを入れ、そして１サンプルあたり６０秒の間、粒度を測定することによって、粒度の測定を行った。微粒化の前および後の粒度を以下に示す。
【０１５６】
【表１１】
【０１５７】
各化合物の微粒化の前および後の溶解率を、以下の表１２に示す。表１２において認められるように、すべての溶解率並びに溶解度は微粒化後に増加することが確かめられた。
【０１５８】
【表１２】
【０１５９】
更に、溶解率の変化をそれぞれ異なる時点で測定し、そして結果を図３〜６に示す。
【０１６０】
図３〜６を参考にして、化合物１、５、５８、４４および５１の微粒化粒子の溶解率は、微粒化前の溶解率と比較して有意に増加し、特に、化合物４４および５１並びに化合物５８抽出物の微粒化粒子の溶解率は、１５０％を超えるまで増加した。
【０１６１】
実施例１６：化合物１（β−ラパコン）の微粒化粒子の溶解率および顆粒化調製物の溶解率
５．４ｗｔ％の軽質無水ケイ酸、３０．４ｗｔ％のクロスカルメロースナトリウム、および５．４ｗｔ％のラウリル硫酸ナトリウムをβ−ラパコンの微粒化粒子に添加し、次いで、均一に混合した。このように調製した混合物を６．２５％ＨＰＭＣエタノール溶液でコーティングし、次いで、１０％ＨＰＭＣ／エタノール溶液で顆粒化した。
【０１６２】
上記で得られたβ−ラパコンの顆粒化調製物、および微粒化粒子の溶解率を図７に示す。実施例１５と同じ様式で、溶解率を決定するための試験を行った。
【０１６３】
図７を参考にして、適切なアジュバントを使用して、微粒化粒子を顆粒化する場合、１２時間まで溶解率は有意に変化しないが、溶解開始時間は短くなることを確認した。
【産業上の利用可能性】
【０１６４】
上記の説明から明らかなように、本発明は、代謝疾患の治療および予防に対して治療効果を有するやや溶けにくい物質である式１または２のナフトキノン系化合物の微粒化粒子を組み入れることで、水溶液または非極性溶媒における安定性および容易な分散性から生じる薬物の溶解度および生体吸収率の増強を介して、ナフトキノン系化合物のバイオアベイラビリティを増加させることにより、有効な薬物の利用可能性および効力を改善することができる。更に、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子を含んでなる組成物は、経口用調製物に処方することができるため、本発明は、ナフトキノン系化合物の経口用製剤をはじめて提供する。
【０１６５】
例示を目的として、本発明の好適な実施形態について開示してきたが、当業者であれば、添付の特許請求の範囲において開示した本発明の範囲および趣旨から逸脱することなく、様々な変更、付加および置換が可能であることを理解するであろう。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子を含んでなる医薬組成物に関する。より具体的には、本発明は、所定のナフトキノン系化合物の微粒化粒子を組み入れることにより、やや溶けにくいナフトキノン系化合物の溶解度および吸収率を増加させることによって、優れたインビボ吸収特性を有する医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ナフトキノン系化合物の１つであるβ−ラパコンおよびその誘導体は、抗癌剤、抗生物質および抗真菌剤として使用することができることが公知であり（特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５および特許文献６）、そして抗癌薬として公知の類似の化合物が特許文献７、特許文献８、特許文献９、特許文献１０、特許文献１１に掲載されている。
【０００３】
本発明者らは、タンシノンを含む１，２−ナフトキノン系化合物を合成し、そしてタンシノンを含む１，２−ナフトキノン系化合物が肥満、糖尿病、再狭窄、インポテンス、前立腺疾患、高血圧症、心疾患、腎疾患および緑内障のような代謝疾患の予防および治療に有効であることを確かめた（例えば、特許文献１２、特許文献１３、特許文献１４、特許文献１５、特許文献１６、特許文献１７、特許文献１８、特許文献１９を参照のこと）。
【０００４】
しかし、前記のナフトキノン系化合物は、やや溶けにくい材料であり、これは、ＣＨ２Ｃｌ２、ＣＨＣｌ３、ＣＨ２ＣｌＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ３ＣＣｌ３、モノグリム、およびジグリムのような高溶解度の溶媒にのみ約２〜１０％の低い程度でやや溶けやすいが、他の通常の極性または非極性溶媒には溶けにくい。これらの理由のため、ナフトキノン系化合物には、それらの優れた薬理効果にもかかわらず、インビボ投与のための調製物の処方に関連する様々な難点がある。
【０００５】
従って、これらの薬物化合物を、それら自体だけで投与するかまたは経口経路を介する従来の簡単な処方物の形態で投与する場合、身体への薬物の吸収が実質的に認められず、即ち、薬物のバイオアベイラビリティが極めて低く、そのため、薬物固有の効力を及ぼすことができない。特に、これらの薬物化合物は、それらが所定の濃度を超える量で身体に吸収されるまで、治療効果を及ぼさない。これらの理由のため、これらのナフトキノン系化合物の固有な薬理学的特性を十分かつ満足に活用するために、これらの薬物のバイオアベイラビリティを最大にすることが可能な方法の開発および導入が早急に求められている。
【０００６】
これに関して、Ｂｏｏｔｈｍａｎらは、特許文献２０において、β−ラパコンを、β−シクロデキストリンのようなポリマー内に含有させて、それによって溶解度を増加させる技術を示唆した。
【０００７】
しかし、この技術は、薬物がポリマー内に含有されるため、薬物の量が、ポリマーの量に依存して制限されるという問題を有する。従って、経口用調製物、特に、高用量の経口用調製物の場合、経口用調製物の全量が過度に増加し、場合によってこの用量調製物の使用が制限される。
【０００８】
また、特許文献２１および特許文献２２では、ポリマーまたはアミノ酸のような分子と結合させて、それによって溶解度を増加させることにより、ナフトキノン系化合物をプロドラッグに変換する技術が示唆された；しかし、この技術は、化合物の構造を維持することができないという問題を有する。
【０００９】
また、やや溶けにくい化合物に通常利用することができる分散剤の使用も、ナフトキノン系化合物の溶解度を増加させるための方法として考えられたが、それには大量の分散剤が必要であり、それ故、高用量の調製の場合、上記の問題が生じる可能性がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】米国特許第５９６９１６３号明細書
【特許文献２】米国特許第５８２４７００号明細書
【特許文献３】米国特許第５７６３６２５号明細書
【特許文献４】米国特許第５６４１７７３号明細書
【特許文献５】米国特許第４８９８８７０号明細書
【特許文献６】米国特許第５９８５３３１号明細書
【特許文献７】国際公開第０６／１２８１２０号パンフレット
【特許文献８】国際公開第０４／０４５５５７号パンフレット
【特許文献９】国際公開第９６／０３３９８８号パンフレット
【特許文献１０】国際公開第９４／００４１４５号パンフレット
【特許文献１１】国際公開第９７／０３１９３６号パンフレット
【特許文献１２】ＫＲ２００４−０１１６３３９号明細書
【特許文献１３】ＫＲ２００６−１４５４１号明細書
【特許文献１４】ＰＣＴ／ＫＲ２００７／００６０１２号明細書
【特許文献１５】ＰＣＴ／ＫＲ２００７／００６０１３号明細書
【特許文献１６】ＰＣＴ／ＫＲ２００７／００６０１１号明細書
【特許文献１７】ＫＲ２００７−０１３６１０５号明細書
【特許文献１８】ＫＲ２００７−０１３９７４０号明細書
【特許文献１９】ＫＲ２００７−０１４１３０３号明細書
【特許文献２０】米国特許第６８９０５０号明細書
【特許文献２１】国際公開第０６／２０７１９号パンフレット
【特許文献２２】国際公開第０６／２０７２２号パンフレット
【特許文献２３】韓国特許出願第２００４−０１１６３３９号明細書
【特許文献２４】韓国特許出願第２００６−００１４５４１号明細書
【特許文献２５】韓国特許出願第２００７−０１３６１０５号明細書
【特許文献２６】韓国特許出願第２００７−０１３９７４０号明細書
【特許文献２７】韓国特許出願第２００７−０１４１３０３号明細書
【特許文献２８】韓国特許第１０−８１８５８６号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
上記の問題を解決するための多様な広範かつ集中的研究および実験の結果として、本発明者らは、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子を含んでなる医薬組成物を発見し、ここで、ナフトキノン系化合物は、式１および２：
【化１】
［式中、
Ｒ１〜Ｒ６は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アシル、置換または非置換Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、置換または非置換Ｃ４〜Ｃ１０アリール、置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−アリール、置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロ環および置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−１０−フェニルであるか、或いはそれらのうちの２個の置換基が一緒になって、二重結合を形成し得るか、或いは飽和または部分的若しくは完全に不飽和であり得る置換または非置換Ｃ３〜Ｃ６環状構造を形成し得、ここで、置換基は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニルおよびＣ１〜Ｃ１０アルキルアミノからなる群から選択される少なくとも１つのものであり得る；
Ｒ７〜Ｒ１０は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アシル、置換または非置換Ｃ４〜Ｃ１０アリール、および置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−１０−フェニルであるか、或いはそれらのうちの２個の置換基が一緒になって、二重結合を形成し得るか、或いは飽和または部分的若しくは完全に不飽和であり得る置換または非置換Ｃ３〜Ｃ６環状構造を形成し得、ここで、置換基は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルアミノ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ１０アリールおよびＣ４〜Ｃ１０ヘテロアリールからなる群から選択される少なくとも１つのものであり得る；
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ’であり、ここで、Ｒ’は、水素若しくはＣ１〜Ｃ６アルキルである；
Ｙは、Ｃ、Ｓ、Ｎ、またはＯであって、但し、ＹがＳ若しくはＯである場合、Ｒ５およびＲ６は存在せず、そしてＹがＮである場合、Ｒ５は水素若しくはＣ１〜Ｃ６低級アルキルであり、そしてＲ６は存在せず；そして
ｍは０若しくは１であって、但し、ｍが０である場合、ｍに隣接する炭素原子は直接結合を介して環状構造を形成し、そしてｎは０〜１０の整数である］
によって表される化合物、或いはその薬学的に許容できる塩、溶媒和物または異性体から選択される１つ以上のものである。
【００１２】
好ましくは、ＸはＯまたはＳであり、そしてＹはＣまたはＯである。
【００１３】
１つの好適な例では、Ｒ１〜Ｒ６は、それぞれ、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシおよび−（ＣＨ２）ｎ−フェニルからなる群から独立して選択され得るか、或いはＲ１およびＲ２またはＲ２およびＲ３は一緒になって、二重結合を形成するか、または置換または非置換Ｃ３〜Ｃ６環状構造を形成し得、ここで、置換基は水素若しくはＣ１〜Ｃ１０アルキルであり得る。
【００１４】
別の好適な例では、Ｒ７〜Ｒ１０は、それぞれ、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキルおよび置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシからなる群から独立して選択され得る。
【００１５】
本発明の式１または２の化合物のうち、ＸがＯであり、そしてＹがＣである式１−１または２−１で表される化合物、またはＸがＳである式１−２若しくは２−２で表される化合物が好適である。
【００１６】
ナフトキノン系化合物のうち、以下の式３〜７
【化２】
［式中、Ｒ１〜Ｒ１０、Ｙおよびｍは、式１におけるように定義される］
の化合物が好適である。
【００１７】
別の例では、式１または２の化合物は、式中、ｍが０である式１−３または２−３
【化３】
［式中、Ｒ１〜Ｒ１０およびＸは上記のように定義される］
の化合物であり得、そして隣接する炭素原子はそれらの間の直接結合を介して環状構造（フラン環）を形成し、以後、「フラノ−ｏ−ナフトキノン誘導体」と称される。
【００１８】
更に、式１または式２の化合物は、式中、ｍが１である式１−４または式２−４
【化４】
［式中、Ｒ１〜Ｒ１８、Ｘ、Ｙおよびｍは上記のように定義される］
の化合物であり得、以後、しばしば、「チオピラノ−１，２−ナフトキノン誘導体」と称される。
【００１９】
別の例では、Ｒ７およびＲ８がそれらの間で直接結合を介して環状構造を形成した式１の化合物は、式１−５または１−６の構造を有し得、そして式１の化合物は、化合物２−５または２−６であり得る。
【化５】
［式中、Ｒ１〜Ｒ１８、Ｘ、Ｙおよびｍは上記のように定義される］。好ましくは、Ｒ１〜Ｒ１８は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルおよびフェニルから選択される少なくとも１つのものであり得る。
【００２０】
本発明の医薬組成物において、ナフトキノン系化合物の範囲には、すべて、薬学的に許容できるその塩、溶媒和物または異性体が含まれる。
【００２１】
本明細書において使用する用語「医薬組成物」は、式１または２の化合物と、希釈剤またはキャリアのような他の化学成分との混合物を意味する。医薬組成物は、化合物の生物体への投与を容易にする。化合物を投与する様々な技術が当該技術分野において公知であり、そして経口、注入、エアゾル、非経口および局所投与が挙げられるが、これらに限定されない。また、医薬組成物は、目的の化合物と、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸などのような酸とを反応させることによって、得ることができる。
【００２２】
本開示物において使用する用語「薬学的に許容できる塩」は、化合物が投与される生物体に有意な刺激を生じず、そして化合物の生物活性および特性を排除しない化合物の処方を意味する。薬学的塩の例として、化合物と、薬学的に許容できるアニオン、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸およびヨウ化水素酸のような無機酸；酒石酸、ギ酸、クエン酸、酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、グルコン酸、安息香酸、乳酸、フマル酸、マレイン酸およびサリチル酸のような有機炭酸；またはメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸のようなスルホン酸を含有する非毒性酸付加塩を形成することが可能な酸との酸付加塩を挙げることができる。具体的には、薬学的に許容できるカルボン酸塩の例として、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウムおよびマグネシウムのようなアルカリ金属またはアルカリ土類金属との塩、リジン、アルギニン、およびグアニジンのようなアミノ酸との塩、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、ジエタノールアミン、コリンおよびトリエチルアミンのような有機塩との塩が挙げられる。本発明の式１の化合物は、当該技術分野において周知の従来の方法によって、その塩に変換することができる。
【００２３】
本明細書において使用する用語「溶媒和物」は、非共有分子間力によって結合した化学量論的若しくは非化学量論的量の溶媒を更に含む本発明の化合物またはその塩を意味する。好適な溶媒は、揮発性、非毒性、および／またはヒトへの投与に許容可能である。溶媒が水である場合、溶媒和物は水和物を指す。
【００２４】
本明細書において使用する用語「異性体」は、同じ化学式または分子式を有するが、光学的または立体的に異なる本発明の化合物またはその塩を意味する。
【００２５】
他で特定しない限り、用語「式１若しくは２の化合物」または「ナフトキノン系化合物」は、化合物自体、および薬学的に許容できるその塩、溶媒和物および異性体を包含することが意図される。
【００２６】
本明細書において使用する用語「アルキル」は、不飽和を伴わずに炭素および水素を含有するラジカルを指す。アルキルラジカルは、直鎖であってもよく、または分岐していてもよい。アルキルラジカルの例として、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ヘキシル、ｔ−ブチルおよびｓｅｃ−ブチルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２７】
低級アルキルは、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル（例えば、その直鎖または分岐アルキル主鎖において１〜１０個の炭素原子を有するアルキル）である。アルキルは、場合により置換することができる。置換する場合、アルキルを、任意の特定の結合点（任意の炭素原子）において、４個以下の置換基として置換することができる。
【００２８】
一方、アルキルが別のアルキル基によって置換される場合、それは、「分岐アルキル」と同じ意味として使用し得る。
【００２９】
用語「アルケニル」は、長さおよび置換可能性のような上記のアルキルに類似するが、１つ以上の炭素−炭素二重結合を含有する不飽和脂肪族を意味する。
【００３０】
例えば、用語「アルケニル」は、直鎖アルケニル（例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル）、分岐アルケニル、シクロアルケニル（脂環式化合物、例えば、シクロプロペニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニル）、アルキルまたはアルケニルによって置換されるシクロアルケニル、およびシクロアルキルまたはシクロアルケニルによって置換されるアルケニルを含む。用語「アルケニル」はまた、酸素、窒素、イオウまたはリンによって置換された１つ以上のカーボハイドロゲン主鎖の炭素原子を有する更なるアルケニル基を含む。具体例として、直鎖または分岐アルケニル基は、その主鎖において６個以下の炭素原子（例えば、直鎖ではＣ２〜Ｃ６、分岐鎖ではＣ３〜Ｃ６）を有する。同様に、シクロアルケニルは、環系に３〜８個の炭素原子、より好ましくは、５〜６個の炭素原子を有し得る。
【００３１】
用語「アルキニル」は、長さおよび置換可能性のような上記のアルキルに類似するが、１つ以上の炭素−炭素三重結合を含有する不飽和脂肪族を意味する。例えば、用語「アルキニル」は、直鎖アルキニル（例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、デシニル）、分岐アルキニル（アルキルまたはアルケニルによって置換されるアルキニルを含む）およびシクロアルキルまたはシクロアルケニルによって置換されるアルキニルを含む。用語「アルキニル」はまた、酸素、窒素、イオウまたはリンによって置換された１つ以上のカーボハイドロゲン主鎖の炭素原子を有する更なるアルキニル基を含む。具体例として、直鎖または分岐アルキニル基は、その主鎖において６個以下の炭素原子（例えば、直鎖ではＣ２〜Ｃ６、分岐鎖ではＣ３〜Ｃ６）を有する。
【００３２】
アルキル、アルキニルまたはアルケニルを置換する場合、それらは、ヒドロキシル、カルボキシレート、オキソ、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ハロアルキル（例えば、ＣＣｌ３またはＣＦ３）、アルキルオキシカルボニル（−Ｃ（Ｏ）Ｒ）、アルキルカルボニルオキシ（−ＯＣＯＲ）、カルバモイル（−ＮＨＣＯＯＲ−または−ＯＣＯＮＨＲ−）、尿素（−ＮＨＣＯＮＨＲ−）、チオール、シアノ、ニトロ、アミノ、アシルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルチオ、アリールチオ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アリールオキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、アリール、アミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルカルボニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、アリールカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシカルボニル、ヘテロシクリルオキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロシクリルのような置換基によって置換することができる。
【００３３】
好ましくは、置換基は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルアミノ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ１０アリールおよびＣ４〜Ｃ１０ヘテロアリールから選択される少なくとも１つのものである。
【００３４】
用語「シクロアルキル」は、任意の別の結合もまたは共鳴二重結合も伴わない３〜１５個の炭素原子、好ましくは、３〜８個の炭素原子を含むアルキル基を意味する。シクロアルキルは、１〜４個の環を含んでもよい。シクロアルキルの例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびアダマンチルが挙げられる。シクロアルキルの置換基の例には、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、チオールまたはＣ１〜Ｃ１０アルキルチオがある。
【００３５】
用語「ヘテロシクロアルキル」は、１つ以上の環炭素原子が、窒素（Ｎ）、イオウ（Ｓ）または酸素（Ｏ）のようなヘテロ原子で置換される炭素環基を意味し、そして飽和若しくは非飽和７〜１１員環の二環式ヘテロ環または化学的に安定な非芳香属性３〜８員環の単環式ヘテロ環を意味し、そして縮合、スピロ、架橋を介して更なる環を形成してもよい。各ヘテロ環は、少なくとも１つの炭素原子および１〜４個のヘテロ原子からなる。ヘテロシクリルラジカルは、環内のいずれかの部分（ａｎｙ ｅｎｄｏｃｙｃｌｉｃ ｒｉｎｇ）と結合して、安定な構造を生じる。好適なヘテロ環として、フラン、チオフェン、ピロール、ピロリン、ピロリジン、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、イミダゾリン、イミダゾリジン、ピラゾール、ピラゾリン、ピラゾリジン、イソチアゾール、トリアゾール、チアジアゾール、ピラン、ピリジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、ピペラジンおよびトリアジンが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロ環は、３〜７員環の単環式ヘテロ環、例えば、限定されないが、ピペリジニル、ピラニル、ピペラジニル、モルホリニル、チアモルホリニルおよびテトラヒドロフラニル、より好ましくは、５〜７員環の単環式ヘテロ環を含む。
【００３６】
本明細書において使用する用語「アリール」は、共役パイ（π）電子系を有する少なくとも１つの環を有し、そして炭素環アリール（例えば、フェニル）およびヘテロ環アリール（例えば、ピリジン）基の両方を含む芳香族置換基を指す。本用語は、単環式または縮合多環（即ち、炭素原子の隣接する対を共有する環）基を含む。アリールは、炭素環化合物であってもよく、または場合により、その芳香環系において１〜４個のヘテロ原子（例えば、窒素（Ｎ）、イオウ（Ｓ）若しくは酸素（Ｏ））を有してもよい。
【００３７】
アリールまたはヘテロアリールの例として、フェニル、ナフチル、ピリジル、ピリミジル、ピロリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、キナゾリニル、チアゾリル、ベンゾチオフェニル、フラニル、イミダゾリルおよびチオフェニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３８】
シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、置換基、限定されないが、例えば、ヒドロキシル、ハロゲン、チオール、シアノ、ニトロ、アミノ、アシルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルチオ、アリールチオ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アリールオキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、アリール、カルボキシレート、アミノカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルカルボニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、アリールカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシカルボニル、ヘテロシクリルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルスルホニル、アリールスルホニル、およびヘテロシクリルによって、場合により置換されていてもよい。
【００３９】
本発明の式１または２の置換基Ｒ１〜Ｒ６は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニルおよびＣ１〜Ｃ１０アルキルアミノから選択される１つ以上のものである置換基によって、場合により置換されていてもよい。更に、置換基Ｒ７〜Ｒ１０もまた置換されていてもよく、そして置換基は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、およびＣ１〜Ｃ１０アルキルアミノ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ１０アリール並びにＣ４〜Ｃ１０ヘテロアリールから選択される１つ以上のものである。
【００４０】
用語「アルコキシ」は、−Ｏ−アルキル（ここで、アルキルは上記で定義されるとおりである）を意味する。アルコキシは、オキソ架橋を介して、主鎖のアリールまたはヘテロアリールに結合する。アルコキシは直鎖であってもよく、または分岐であってもよいが、直鎖の方が好適である。例えば、メトキシ、エチルオキシ、プロポキシ、ブチルオキシ、ｔ−ブチルオキシまたはｉ−プロポキシが含まれる。好適なアルコキシは１〜４個の炭素原子を含む；特に好適なアルコキシは１〜３個の炭素原子を含む。
【００４１】
用語「ハロゲン」または「ハロ」は、ＶＩＩａ属の元素、例えば、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、フッ素（Ｆ）、ヨウ素（Ｉ）を含む。
【００４２】
用語「アミン」または「アミノ」は、１つ以上の炭素またはヘテロ原子と共有結合した窒素原子を有する化合物を含む。
【００４３】
本発明の化合物のうち、以下の表１の化合物が特に好ましいが、これらに限定されるわけではない。
【００４４】
【表１−１】
【表１−２】
【表１−３】
【表１−４】
【表１−５】
【表１−６】
【表１−７】
【表１−８】
【表１−９】
【００４５】
ナフトキノン系化合物は疎水性物質であり、そして粗薬物から抽出、単離および精製してもよく、またはそうでなければ有機合成によって合成してもよい。ナフトキノン系化合物が結晶状態で存在する場合、それは、水に対する溶解性を実質的に示さない。
【００４６】
これに対し、本発明のナフトキノン系化合物を微粒化すると、薬物化合物の溶解度を有意に増加させることができ、結果的に、それらのインビボ吸収率が改善される。
【００４７】
ナフトキノン系化合物は、上記のように、水に対して低い溶解度を示す。本明細書において使用する用語「水に対して低い溶解度」は、化合物が、中性または酸性の水溶液において１０ｍｇ／ｍＬ以下、より好ましくは、１ｍｇ／ｍＬ以下の溶解度を有することを意味する。
【００４８】
本発明のナフトキノン系化合物では、有効成分は、高い程度の結晶度を伴う結晶構造を有してもよく、または低い程度の結晶度を伴う結晶構造を有してもよい。好ましくは、有効成分は低い結晶化度を伴う結晶構造からなり、これにより、式１または２の化合物の低い溶解度に関連する問題を解決し、そしてそれらの溶解度を増加させることができる。本明細書において使用する用語「低い程度の結晶度」は５０％以下の結晶度を指し、そして材料の固有な結晶度が完全に消失した非晶質構造を包含する。
【００４９】
好ましくは、本発明の組成物は、乾燥剤を更に含んでなり得る。乾燥剤を組み入れると、ナフトキノン系化合物の再結晶を経時的に阻害し、従って、粒子の微粒化による薬物化合物の溶解度の増加を維持することが可能である。後に例示するように、これらの事実は、ケイ酸カルシウムを組成物に添加することにより、体重の有意な消失がもたらされることを示す実施例９から明確に確認することができる。更に、乾燥剤は、医薬組成物のフロキュレーションおよび凝集を抑制する役割を果たす一方、ナフトキノン系化合物の治療効果に有害な影響を及ぼすことがない。
【００５０】
乾燥剤の好適な例として、コロイダルシリカ、軽質無水ケイ酸、重質無水ケイ酸、塩化ナトリウム、ケイ酸カルシウム、アルミノケイ酸カリウム、アルミノケイ酸カルシウムなどを挙げることができるが、これらに限定されない。これらの材料は、単独またはそれらの任意の組み合わせで使用し得る。
【００５１】
乾燥剤の添加は、組成物調製プロセスのいずれの工程において行ってもよい。例えば、乾燥剤は、ナフトキノン系化合物の微粒化プロセス中に添加してもよく、またはそうでなければ、組成物の調製プロセス中に添加してもよい。
【００５２】
本明細書において使用する用語「微粒化粒子」は、粒度が１０００μｍ以下である粒子を意味し、そしてナノ粒子およびマイクロ粒子を包含する。用語「ナノ−」は１〜１０００ｎｍの範囲として定義され、そして「マイクロ−」は１〜１０００μｍの範囲として定義される。粒子、好ましくは、球体または中空を伴う粒子の形態は、特に制限されない。
【００５３】
本発明の微粒化粒子の粒径を減少させると、比表面積が増加し、それによって溶解率および溶解度が増加する。しかし、粒径が過度に小さいと、そのようなサイズを有する細密な粒子を調製することが困難になり、そしてまた溶解度の悪化を生じ得る粒子の凝塊形成または凝集が生じ得る。
【００５４】
従って、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子の粒度は、９０％以上の粒子の平均粒子径（Ｘ９０）が３０μｍ以下、より好ましくは、１ｍｍ〜２０μｍ、そして特に好ましくは、１ｎｍ〜１０μｍである場合が望ましい。別の実施形態では、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子の粒度は、５０％以上の粒子の平均粒子径（Ｘ５０）が１０μｍ以下、より好ましくは、１ｍｍ〜５μｍ、そして特に好ましくは、１ｎｍ〜３μｍである場合が望ましい。
【００５５】
更に、微粒化粒子は、均等な溶解度を考慮すると、狭い分布の粒径を有する場合が好ましい。望ましい例では、９０％以上の微粒化粒子が、平均粒径から１０％範囲内、好ましくは、平均粒径から５％の範囲内、特に、平均粒径から２％の範囲内にある。
【００５６】
本明細書において使用する用語「直径」、「粒径」および「平均粒子径」は、個数基準平均粒径を意味する。
【００５７】
本明細書において使用するように、微粒化ナフトキノン系化合物は、化合物のみの微粒化形態、および化合物の混合物の微粒化形態、および界面活性剤のような添加物を含むことが意図される。
【００５８】
本発明は、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子による罹患した動物の治療を介して、薬物のバイオアベイラビリティの増加による薬物の活性および治療効果を提示する。
【００５９】
好ましくは、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子の調製のための粒子微粒化方法は、ミリング、沈殿、高圧均質化、および超臨界微粒化を含み得る。これらの方法は、極めて細かく分割した粒子を得るために、単独で使用してもよく、またはそれらの任意の組み合わせで使用してもよい。
【００６０】
ミリングは、強力な物理的な力を有効成分の粒子に適用することによって、有効成分を細かい粒子に粉砕する方法である。機械的ミリングは、ジェットミリング、ボールミリング、振動ミリング、ハンマーミリングなどのような多様なミリングプロセスを使用することによって、行ってもよい。４０℃以下の温度で空気圧を使用して行うことができるジェットミリングが、特に好適である。
【００６１】
好ましくは、界面活性剤を更に添加して、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子の調製中に生じ得る粒子の凝塊形成または凝集を防止してもよい。界面活性剤の添加の時間を、特に制限するものはない。例えば、界面活性剤は、微粒化プロセス前、中および／または後に混合してもよい。
【００６２】
これらの上記の一連のプロセスを介して、本発明者は、ナフトキノン系化合物のようなやや溶けにくい薬物を微小粒子に容易に粉砕することができたが、これは、従来のミリング方法だけでは、達成することが困難であった。更に、界面活性剤を組み入れることによって、より細かい粒度により効率的に微粒化することができ、粒子の相互作用による凝塊形成および凝集に関与せず、そして粒子の封入またはカプセル化を必要としない、小サイズ化された、安定かつ容易に分散可能なナフトキノン系化合物が生成される。更に、ナフトキノン系化合物のそのようにして調製された微粒化粒子は、僅かな量の界面活性剤を含有するため、そのような粒子は、安定な懸濁液またはエマルジョンを形成するために水に比較的容易に分散可能であり、吸収率の増加を認めることができ、そして経口用調製物に処方することができる。従って、有効成分として同じ量のナフトキノン系化合物を使用したとき、そのようにして処方された経口用調製物は、他の投与処方物と比較して、比較的上位のバイオアベイラビリティを発揮することができる。
【００６３】
本発明において、界面活性剤は、ナフトキノン系化合物表面に化学的に結合する材料を除く、ナフトキノン系化合物の表面に物理的に結合する材料であり、そして乳化剤およびポリマーを含む従来の薬学的処方に使用されるビヒクルを包含する概念である。好ましくは、界面活性剤は、当該技術分野において公知の有機性薬物ビヒクルであってもよく、または無機性薬物ビヒクルであってもよく、そして例えば、高分子量のポリマー、低分子量のオリゴマー、および天然に存在する界面活性剤を含んでもよい。
【００６４】
乳化剤に特に制限はなく、例えば、レシチン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジル−セリン、ホスファチジルイノシトール、それらの誘導体のような脂質；ステアリン酸グリセリル、パルミチン酸ソルビタンのような脂肪酸のエステル誘導体；モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（Ｔｗｅｅｎ２０）、モノパルミチン酸ポリオキシエチレンソルビタン（Ｔｗｅｅｎ４０）、モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（Ｔｗｅｅｎ６０）、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（Ｔｗｅｅｎ８０）、モノラウリン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ２０）、モノラウリン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ２０）、モノステアリン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ６０）、モノオレイン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ８０）などのようなソルビタンベースの乳化剤がある。
【００６５】
界面活性剤として、カゼイン、ゼラチン、リン脂質、トラガント、レシチン、アカシアガム、コレステロール、ステアリン酸、塩化ベンザルコニウム、ステアリンカルシウム、モノステアリン酸グリセリル、天然のリン脂質、蝋、腸溶性樹脂、パラフィン、アカシアのような天然に存在する界面活性剤；ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテル、ソルビタンエステル、モノステアリン酸グリセロール、ポリエチレングリコール、セチルアルコール、セトステアリルアルコール、ステアリルアルコール、ポロキサマー、ポロキサミン、メチルセルロース、ヒドロキシセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、非結晶セルロース、合成リン脂質のような非イオン性界面活性剤；ラウリン酸カリウム、ステアリン酸トリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、硫酸アルキルポリオキシエチレン、アルギン酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、負に荷電したホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシット、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、負に荷電したグリセリルエステル、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウムのようなアニオン性界面活性剤；および第四級アンモニウム化合物、塩化ベンザルコニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ラウリルジメチルベンジル−アンモニウム、コロイド粘土、ベントナイト、ビーガム、天然の合成リン脂質、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジン酸、リゾリン脂質、卵またはダイズリン脂質のようなカチオン性界面活性剤を挙げることができるが、これらに限定されない。界面活性剤の好適な例として、ラウリル硫酸ナトリウム、リン酸化脂質、ケイ酸カルシウム、キトサン、またはパルミチン酸スクロースを挙げることができる。
【００６６】
界面活性剤の含有量は、ナフトキノン系化合物および界面活性剤の全重量に基づいて、好ましくは、０．１〜５０％、より好ましくは、０．５〜３０％、そして特に好ましくは、０．５〜１５％の範囲であり得る。
【００６７】
微粒化粒子のサイズは、粉砕時間または界面活性剤含有量を制御することによって、調整してもよい。
【００６８】
上記の粉砕プロセスを使用して、粒子の縮小を行う場合、好ましくは、微粒化プロセスを冷蔵条件下で行って、粒度成長および粒子凝集を減少させてもよい。更に、粒度成長および粒子凝集は、低温での微粒化粒子の貯蔵によって、最小限にすることができる。
【００６９】
一方、水溶液は、直接乾燥、またはビヒクルに対するスプレーコーティング、または流動床スプレーコーターを使用するビヒクルに対するスプレーによって、乾燥してもよい。
【００７０】
必要であれば、医薬組成物は、水溶性ポリマーおよび／または溶解剤を更に含んでなり得る。
【００７１】
水溶性ポリマーは、式１または２の化合物の分子或いは粒子の周囲を親水性にして、結果的に水溶性を増強し、そして好ましくは、有効成分としての式１または２の化合物の非晶質状態を維持することによって、粒子の有効成分の凝集を防止することを援助する。
【００７２】
好ましくは、水溶性ポリマーはｐＨ依存的ポリマーであり、そして胃腸ｐＨの個体間および個体内のばらつき下であっても、有効成分の結晶殿消失および親水性の増強を生じ得る。
【００７３】
水溶性ポリマーの例として、セルロース誘導体、ポリビニルベースのポリマー、ポリグリコールベースのポリマー、ポリアルケンオキシド、ポリアルケングリコール、メタクリル酸−エチルアクリレートコポリマー、トウモロコシタンパク質抽出物、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、寒天、カラギーナン、ペクチン、グァーガム、ローカストビーンガム、キサンタンガム、ゲランガム、アラビアガム、シェラックなどを挙げることができる。
【００７４】
水溶性ポリマーの含有量が所与のレベルより過度に高くなると、溶解度の更なる増加は認められないが、溶出剤への暴露時に水溶性ポリマーが過度に膨潤するため、処方物の周りにフィルムが形成されることによって、処方物の硬さが全体的に増加すること、および溶出剤が処方物に浸透しないことのような様々な問題が不利に生じる。従って、好ましくは、溶解剤を添加して、ナフトキノン系化合物の物理特性を改変することによって、処方物の溶解度を最小限にする。
【００７５】
この点に関して、溶解剤は、やや溶けにくい化合物の可溶化および湿潤性を増強する役割を果たし、そして食事、および食事摂取後の薬物投与の時間差に由来するナフトキノン系化合物のバイオアベイラビリティのばらつきを有意に減少させることができる。溶解剤は、従来の広範に使用される界面活性剤または両親媒性物質から選択してもよく、そして溶解剤の具体例として、上記で定義した界面活性剤を参照にし得る。
【００７６】
崩壊促進剤は、薬物放出速度を改善するのに役立ち、そして標的部位における薬物の迅速な放出を可能にして、それによって、薬物のバイオアベイラビリティを増加させることが可能である。崩壊促進剤の好適な例として、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、カルボキシメチルセルロースカルシウム、デンプングリコール酸ナトリウムおよび低置換ヒドロキシプロピルセルロースからなる群から選択される少なくとも１つのものを挙げることができるが、これらに限定されない。クロスカルメロースナトリウムが好適である。
【００７７】
上記の様々な要因を考慮すると、有効成分の１００重量部に基づいて、１０〜１０００重量部の水溶性ポリマー、１〜３０重量部の崩壊促進剤、および０．１〜２０重量部の溶解剤を添加するのが好適である。
【００７８】
必要であれば、上記の成分に加えて、処方物に関連して当該技術分野において公知の他の材料も場合により添加してよい。
【００７９】
必要であれば、更に、医薬組成物は、薬学的に許容できるキャリア、希釈剤、ビヒクルまたはそれらの任意の組み合わせを更に含んでなり得る。乾燥剤の添加において例示されるように、これらの付随的成分もまた、様々な工程において添加し得る。
【００８０】
用語「キャリア」は、細胞または組織への化合物の組みいれを容易にする化学化合物を意味する。例えば、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）は、生物体の細胞または組織への多くの有機化合物の取り込みを容易にするため、一般的に利用されるキャリアである。
【００８１】
用語「希釈剤」は、目的の化合物を溶解し、そして化合物の生物学的に活性な形態を安定化する水に希釈される化学化合物を定義する。緩衝化溶液に溶解される塩は、当該技術分野において希釈剤として利用される。リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）はヒト体液のイオン強度条件を模倣するため、これは、１つの一般的に使用される緩衝溶液である。緩衝液塩は、低濃度で溶液のｐＨを制御することができるため、緩衝液希釈剤が、化合物の生物活性を改変することは稀である。
【００８２】
キャリアの種類は特に制限されないが、キャリアは、所望される処方物に依存して、当該技術分野において従来使用される好適なもの、例えば、デンプン、ラクトース、マンニトール、カルボキシメチルセルロース、トウモロコシデンプンおよび無機塩のような個体キャリア；蒸留水、生理食塩水、グルコース水溶液のような液体キャリア、エタノール、プロピレングリコール、およびポリエチレングリコールのようなアルコール；並びに様々な動物および植物油、白色ワセリン、パラフィンおよび蝋のような油性キャリアからなる群から選択される少なくとも１つのものであってもよい。
【００８３】
ビヒクルの例として、充填剤、例えば、ラクトース、スクロース、マンニトールおよびソルビトール、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、イネデンプン、ポテトデンプン、ゼラチン、トラガカントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはセルロース材料、例えば、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）を挙げることができる。
【００８４】
好ましくは、本発明の組成物は、１つ以上の化粧品若しくは食品に許容できるキャリアまたはビヒクルを含有する組成物に処方することができる。即ち、組成物は、化粧品または化粧品添加物、飲料若しくは飲料添加物、食品若しくは食品添加物、または機能性健康食品の形態で処方物に調製することができる。
【００８５】
本明細書において使用する用語「機能性健康食品」は、本発明の組成物を一般の食品に添加して、それによってその機能を改善する食品を指す。この目的のために、本発明の組成物は、一般の食品に添加してもよく、またはカプセル、粉末、懸濁液などの形態で調製してもよい。本発明の組成物を含有するそのような機能性健康食品の摂取は、健康に有益な効果をもたらし、そして食品が原材料として使用されるため、従来の薬物とは異なり、薬物の長期投与時に生じ得る有害な副作用が認められないという利点がある。
【００８６】
食品添加物として本発明の組成物を使用することを所望する場合、組成物を単独で添加してもよく、またはそうでなければ、他の食品若しくは食品成分と共同して使用してもよく、または任意の従来の方法に従って適切に使用してもよい。有効成分の混合量は、所望する用途および適用（予防、健康または治療的処置）に依存して適切に決定してもよい。上記の食品の種類に特に制限はない。
【００８７】
化粧品の原材料として本発明の組成物を使用することを所望する場合、組成物を、それ自体で添加することができるか、または他の化粧品成分と共同して使用することができるか、または他の従来の方法に従って、適切に使用してもよい。有効成分の混合量は、その使用の目的に依存して、適切に決定してもよい。
【００８８】
本発明に従う医薬組成物は、好ましくは、腸を標的にした処方物に調製される経口医薬組成物であってもよい。
【００８９】
一般的に、経口医薬組成物は、経口投与時に胃を通過し、主として小腸で吸収され、次いで、進退のすべての組織に拡散され、それによって標的組織に治療効果を及ぼす。
【００９０】
これに関して、本発明の経口医薬組成物は、有効成分の腸を標的にした処方物を介する有効成分として、式１または２の化合物の生体吸収およびバイオアベイラビリティを増強する。より具体的には、本発明の医薬組成物の有効成分が主として胃および小腸の上部において吸収される場合、身体に吸収された有効成分は、肝臓の代謝を直接受けて、次いで、有効成分の実質的な分解に至るため、所望するレベルの治療効果を発揮することが不可能である。これに対し、有効成分が主に小腸下部の周囲および下流で吸収される場合、吸収された有効成分は、リンパ管を介して標的組織に移動して、それによって高い治療効果を発揮することが予想される。
【００９１】
更に、本発明の医薬組成物が消化プロセスの最終目的である結腸を標的にするようにそれを構築する場合、薬物のインビボ保持時間を増加させることが可能であり、そしてまた、薬物の身体への投与時の身体での代謝により生じ得る薬物の分解を最小限にすることが可能である。結果として、疾患の治療に必要な有効成分の臨界有効量（ｃｒｉｔｉｃａｌ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｄｏｓｅ）を有意に低下させるために薬物の薬物動態特性を改善し、そして微量の有効成分の投与であっても所望される治療効果を得ることが可能である。更に、経口医薬組成物では、胃内のｐＨの変化および食事の取り込みパターンから生じ得るバイオアベイラビリティの個体間および個体内のばらつきを減少させることによって、薬物の吸収のばらつきを最小限にすることもまた可能である。
【００９２】
従って、本発明の腸を標的にした処方物は、有効成分が、主に小腸および大腸、より好ましくは、空腸、並びに小腸下部に対応する回腸および結腸、特に好ましくは、回腸または結腸において吸収されるように構成される。
【００９３】
腸を標的にした処方物は、多様な方法を介して消化管の多数の生理学的パラメータを利用することによって、設計し得る。本発明の１つの好適な実施形態では、腸を標的にした処方物は、（１）ｐＨ感受性ポリマーに基づく処方方法、（２）腸特異的細菌酵素によって分解可能な生分解性ポリマーに基づく処方方法、（３）腸特異的細菌酵素によって分解可能な生分解マトリックスに基づく処方方法、または（４）所与の遅延時間後の薬物の放出を可能にする処方方法、およびそれらの任意の組み合わせによって調製し得る。
【００９４】
具体的には、（１）ｐＨ感受性ポリマーを使用する腸を標的にした処方物は、消化管のｐＨ変化に基づく薬物送達システムである。胃のｐＨは１〜３の範囲であるが、小腸および大腸のｐＨは７以上の値を有し、胃のｐＨと比較して高い。この事実に基づいて、医薬組成物が消化管のｐＨ変動の影響を受けることなく、腸の下部に到達することを確実にするために、ｐＨ感受性ポリマーを使用してもよい。ｐＨ感受性ポリマーの例として、メタクリル酸−エチルアクリレートコポリマー（Ｅｕｄｒａｇｉｔ：Ｒｅｇｉｓｔｅｒｅｄ Ｔｒａｄｅｍａｒｋ ｏｆ Ｒｏｈｍ Ｐｈａｒｍａ ＧｍｂＨ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）およびそれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１つのものを挙げることができるが、これらに限定されない。
【００９５】
好ましくは、ｐＨ感受性ポリマーは、コーティングプロセスによって添加してもよい。例えば、ポリマーの添加は、溶媒中でポリマーを混合して、水溶性コーティング懸濁液を形成させ、得られるコーティング懸濁液をスプレーして、フィルムコーティングを形成させ、そしてフィルムコーティングを乾燥することによって、行ってもよい。
【００９６】
腸特異的細菌酵素によって分解可能な生分解性ポリマーを使用する腸を標的にした処方物（２）は、腸内細菌によって産生させることができる特異的酵素の分解能の利用に基づく。特異的酵素の例として、アゾ還元酵素、細菌のヒドロラーゼ、グリコシダーゼ、エステラーゼ、ポリサッカリダーゼなどを挙げることができる。
【００９７】
標的としてアゾ還元酵素を使用する腸を標的にした処方物を設計することを所望する場合、生分解性ポリマーは、アゾ芳香族連結を含有するポリマー、例えば、スチレンおよびヒドロキシエチルメタクリレート（ＨＥＭＡ）のコポリマーであってもよい。ポリマーを有効成分を含有する処方物に添加する場合、腸内細菌、例えば、バクテロイデス・フラジリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓ）およびユーバクテリウム・リモサム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｉｍｏｓｕｍ）によって特異的に分泌されるアゾ還元酵素の作用を介するポリマーのアゾ基の還元によって、有効成分を腸に放出してもよい。
【００９８】
標的としてグリコシダーゼ、エステラーゼ、またはポリサッカリダーゼを使用して、腸を標的にした処方物を設計する場合、生分解性ポリマーは、天然に存在する多糖またはその置換誘導体であってもよい。例えば、生分解性ポリマーは、デキストランエステル、ペクチン、アミラーゼ、エチルセルロースおよびその薬学的に許容できる塩からなる群から選択される少なくとも１つのものであってもよい。ポリマーを有効成分に添加する場合、腸内細菌、例えば、ビフィズス菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ）およびバクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｓｐｐ．）によって特異的に分泌される各酵素の作用を介するポリマーの加水分解によって、有効成分を腸に放出させてもよい。これらのポリマーは、天然の材料であり、そしてインビボでの毒性の危険性が低い利点を有する。
【００９９】
腸特異的細菌酵素によって分解可能な生分解性マトリックスを使用する腸を標的にした処方物（３）は、生分解性ポリマーが相互に架橋し、そして有効成分または有効成分含有処方に添加される形態であってもよい。生分解性ポリマーの例として、コンドロイチン硫酸、グァーガム、キトサン、ペクチンなどのような天然に存在するポリマーを挙げることができる。薬物放出の程度は、マトリックスを構成するポリマーの架橋の程度に依存して変動し得る。
【０１００】
天然に存在するポリマーに加えて、生分解性マトリックスは、Ｎ−置換アクリルアミドに基づく合成ハイドロゲルであってもよい。例えば、マトリックスとして、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルアクリルアミドとアクリル酸との架橋、または２−ヒドロキシエチルメタクリレートと４−メタクリロイルオキシアゾベンゼンとのコポリマー化によって合成されるハイドロゲルを使用してもよい。架橋は、例えば、上記のような、アゾ連結であってもよく、そして処方物は、腸の薬物送達に最適な条件を提供するために架橋が維持され、そして薬物が腸に送達される場合、腸粘膜と相互作用するために連結が分解される形態であってもよい。
【０１０１】
更に、遅延時間後の薬物の時間経過放出による腸を標的にした処方物（４）は、ｐＨ変化に関わらず、予め決定された時間後に有効成分を放出させる機構を利用する薬物送達システムである。有効な薬物の腸溶性放出を達成するために、処方物は、胃のｐＨ環境に耐性であるべきであり、そして有効成分を腸へ放出する前の、身体から腸への薬物の送達に要する期間に対応する５〜６時間は、静穏期（ｓｉｌｅｎｔ ｐｈａｓｅ）の状態であるべきである。時間特異的遅延放出処方物は、ポリエチレンオキシドとポリウレタンとのコポリマー化から調製されるハイドロゲルの添加によって、調製してもよい。
【０１０２】
具体的には、遅延放出処方物は、薬物を不溶性ポリマーに適用した後に上記の組成物を有するハイドロゲルを添加すると、処方物が胃内および小腸の消化管上部に滞留している間、処方物が水を吸収して膨潤し、次に、消化管下部である小腸の下部に移動してから薬物を放出するような構成を有してもよく、そして薬物の遅延時間は、ハイドロゲルの長さに依存して決定される。
【０１０３】
ポリマーの別の例として、遅延放出処方に、エチルセルロース（ＥＣ）を使用してもよい。ＥＣは不溶性のポリマーであり、そして水の浸透による膨潤媒体の膨潤または蠕動運動による腸の内圧の変化に応答して、薬物放出時間を遅延するための因子としての役割を果たし得る。遅延時間は、ＥＣの厚さによって制御され得る。更なる例として、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）はまた、ポリマーの厚さの制御による所与の期間後、薬物放出を可能にする遅延剤として使用してもよく、そして５〜１０時間の遅延時間を有してもよい。
【０１０４】
活性成分としてのナフトキノン系化合物の微粒化粒子は、治療有効量まで含有することができ、ここで、用語「治療有効量」は、化合物が投与される場合、治療が必要な疾患の症状の１つ以上をある程度緩和若しくは減少させるか、または予防が必要な疾患の化学的マーカーまたは症状の開始を遅延するのに有効な有効成分の量を意味する。
【０１０５】
それ故、治療有効量は、（ｉ）疾患の進行の速度を反転する；（ｉｉ）疾患の更なる進行をある程度阻害する；および／または（ｉｉｉ）疾患に伴う１つ以上の症状をある程度緩和する（または好ましくは、排除する）効果を示す有効成分の量を指す。治療が必要な疾患の既知のインビボおよびインビトロモデル系に関する化合物で実験することによって、治療有効量を実験的に決定してもよい。
【０１０６】
本発明の医薬組成物を単位剤形に処方する場合、好ましくは、有効成分の式Ｉの化合物は、約０．１〜５，０００ｍｇの単位用量で含有される。投与する化合物の量は、治療する患者の体重、および年齢、疾患の特徴的性質および重症度に依存して、担当医が決定する。しかし、成人の患者では、患者に投与しようとする有効成分の用量は、投与の回数および強度に依存するが、典型的に、１日あたり約１〜１０００ｍｇ／ｋｇの範囲内にある。成人患者への筋肉内または静脈内投与のために、単回用量として１日あたり計約１〜５００ｍｇが十分であり、好ましくは、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子が、１日あたり少なくとも１０ｍｇを超えて投与されるように設計され得る。
【０１０７】
本発明の医薬組成物は、代謝疾患、再狭窄、インポテンス、前立腺疾患、高血圧症、心疾患、腎疾患および緑内障、変性疾患、並びにミトコンドリア機能障害関連疾患の予防または治療に有効であり、ここで、代謝疾患として、肥満、肥満合併症、肝疾患、動脈硬化、脳卒中、心筋梗塞、循環器系疾患、虚血性疾患、糖尿病、糖尿病関連合併症または炎症性疾患を挙げることができるが、これらに限定されない。
【０１０８】
本発明のナフトキノン系化合物およびその治療効果については、特許出願に付与された次の番号：特許文献２３、特許文献２４、特許文献２５、特許文献２６、特許文献２７、特許文献１４、特許文献１５および特許文献１６（これらの開示内容は、それらの全体が本明細書において参考として援用される）に開示されている。
【０１０９】
上記および他の目的、特徴並びに他の利点は、添付の図面とあわせて、後に記載の詳細な説明からより明確に理解されよう。図面について：
【図面の簡単な説明】
【０１１０】
【図１】超臨界流体を使用した時の微粒化クリプトタンシノンの粒度分布を示す。
【図２】超臨界流体を使用する前の微粒化クリプトタンシノンの粒度分布を示す。
【図３】実施例１５に従う時間経過に対する化合物１の微粒化粒子の溶解率の変化を示すグラフである。
【図４】実施例１５に従う時間経過に対する化合物５８抽出物の微粒化粒子の溶解率の変化を示すグラフである。
【図５】実施例１５に従う時間経過に対する化合物５の微粒化粒子の溶解率の変化を示すグラフである。
【図６】実施例１５に従う時間経過に対する化合物４４および５１の微粒化粒子の溶解率の変化を示すグラフである。
【図７】実施例１６に従う時間経過に対する化合物１の微粒化粒子および顆粒化粒子の溶解率の変化を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０１１１】
これより、以下の実施例を参考に、本発明をより詳細に説明する。これらの実施例は、本発明を例示するためのみに提供され、本発明の範囲および趣旨を限定するものと解釈すべきではない。
【実施例】
【０１１２】
実施例１：超臨界微粒化を使用する化合物５８（クリプトタンシノン）の微粒化粒子の調製
超臨界微粒化プロセスを開発するために、１〜１００μｍの粒度分布および３０μｍの平均粒度を有する５ｇのクリプトタンシノン、並びに０．５ｇのラウリル硫酸ナトリウムを、４５ｍＬの塩化メチレンに溶解した。その後、得られたクリプトタンシノンの塩化メチレン溶液を、１／１６インチの直径を有するノズルオリフィスを介して、１〜２ｍＬ／分の流速で、３０℃の温度、８０バール、および２，０００ｒｐｍに設定した反応容器に注入し、そして液化二酸化炭素を充填した一方、ＩＳＣＯポンプを使用して、１／１６インチの直径を有するノズルオリフィスを介し、１０〜２０ｍＬ／分の流速で二酸化炭素を注入した。
【０１１３】
反応容器において、不溶性溶媒として液体二酸化炭素溶液から小サイズ化粒子の沈殿物を回収するために、反応容器の１５倍の容積の二酸化炭素を流し込んで残りの有機溶媒を取り出し、そして反応容器の圧力を低下させて、クリプトタンシノンの微粒化粒子を回収した。超臨界液体を使用した場合のクリプトタンシノンの微粒化粒子のサイズおよび超臨界微粒化の適用前の微粒化粒子のサイズを、それぞれ図１および２に示す。図１および２に示すように、９５％を超える粒子は、０．１〜２μｍの体積直径を有する粒子からなる。
【０１１４】
実施例２：Ｊｅｔ ｍｉｌｌを使用する化合物５８（クリプトタンシノン）の微粒化粒子の調製
Ｊｅｔ ｍｉｌｌ（ＳＪ−１００，Ｎｉｓｓｈｉｎ，Ｊａｐａｎ）を使用して、クリプトタンシノンの微粒化を行った。０．６５Ｍｐａの供給圧、および５０〜１００ｇ／時間の供給速度で操作を行った。０．２ｇのラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）および１０ｇのクリプトタンシノンを混合および粉砕した。微粒化粒子を回収し、そしてゼータ電位測定による粒径について、粒度を決定した。平均粒度は１５００ｎｍであった。
【０１１５】
実施例３：高圧ホモジナイザーを使用する化合物５８（クリプトタンシノン）の微粒化粒子の調製
０．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウムと混合した１５ｇのクリプトタンシノンを、６００ｍＬの水溶液に分散させ、次いで、Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ Ｔ２５ Ｂａｓｉｃホモジナイザー（ＩＫＡ−Ｗｅｒｋｅ ＧｍｂＨ，Ｇｅｒｍａｎｙ）中、２４，０００ｒｐｍで１０分間処理して、粒度分布を狭くした。まず、マイクロフルイダイザープロセッサ（Ｍ−１１０ＥＨ，Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を介し、１５℃および７，０００ｐｓｉでの低圧均質化の１または２回通過、それに続く、１５，０００ｐｓｉにおける高圧均質化の３回通過によって、粒子のサイズを均質にした。すべての操作において、熱交換装置を使用して、装置の温度を１５℃に維持した。クリプトタンシノンサンプルを回収し、次いで、粒度をアッセイした。サンプルのいくつかを、効力の評価に使用した。上記のマイクロフルイダイザーを通過した９５％を超える粒子は、０．１〜２μｍの体積直径を有する粒子からなった。
【０１１６】
実施例４：高圧ホモジナイザーを使用する化合物６０（１５，１６−ジヒドロタンシノン）の微粒化粒子の調製
０．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウムと混合した１５ｇの１５，１６−ジヒドロタンシノンを、６００ｍＬの水溶液に分散させ、次いで、Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ Ｔ２５ Ｂａｓｉｃホモジナイザー（ＩＫＡ−Ｗｅｒｋｅ ＧｍｂＨ，Ｇｅｒｍａｎｙ）中、２４，０００ｒｐｍで１０分間処理して、粒度分布を狭くした。まず、マイクロフルイダイザープロセッサ（Ｍ−１１０ＥＨ，Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を介し、１５℃および７，０００ｐｓｉでの低圧均質化の１または２回通過、それに続く、１５，０００ｐｓｉにおける高圧均質化の３回通過によって、粒子のサイズを均質にした。すべての操作において、熱交換装置を使用して、装置の温度を１５℃に維持した。１５，１６−ジヒドロタンシノンサンプルを回収し、次いで、粒度をアッセイした。サンプルのいくつかを、効力の評価に使用した。上記のマイクロフルイダイザーを通過した９５％を超える粒子は、０．１〜２μｍの体積直径を有する粒子からなった。
【０１１７】
実施例５：高圧ホモジナイザーを使用する化合物５９（タンシノンＩＩＡ）の微粒化粒子の調製
０．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウムと混合した１５ｇのタンシノンＩＩＡを、６００ｍＬの水溶液に分散させ、次いで、Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ Ｔ２５ Ｂａｓｉｃホモジナイザー（ＩＫＡ−Ｗｅｒｋｅ ＧｍｂＨ，Ｇｅｒｍａｎｙ）中、２４，０００ｒｐｍで１０分間処理して、粒度分布を狭くした。まず、マイクロフルイダイザープロセッサ（Ｍ−１１０ＥＨ，Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を介し、１５℃および７，０００ｐｓｉでの低圧均質化の５回通過、それに続く、２４，０００ｐｓｉにおける高圧均質化の５０回通過によって、粒子のサイズを均質にした。すべての操作において、熱交換装置を使用して、装置の温度を１５℃に維持した。タンシノンＩＩＡサンプルを回収し、次いで、粒度をアッセイした。サンプルのいくつかを、効力の評価に使用した。上記のマイクロフルイダイザーを通過した９５％を超える粒子は、０．１〜２μｍの体積直径を有する粒子からなった。
【０１１８】
実施例６：動物に対する化合物５８（クリプトタンシノン）の微粒化粒子の効果
実施例１〜３の手順に従って、１ｇのクリプトタンシノンの単純に粉砕した粉末、および１ｇのクリプトタンシノン化合物の各微粒化粒子を、１０ｍＬの蒸留水と混合し、そして得られた混合物を、超音波処理装置中で３０分間処理して、クリプトタンシノン化合物の懸濁液を調製した。クリプトタンシノン含有量が４００ｍｇ／ｋｇのこれらの懸濁液を、ｏｂ／ｏｂマウスに１日１回投与し、そして動物の体重（ＢＷ）の変化を調べた。
【０１１９】
この目的のために、２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢のｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化させた動物を、無作為に５つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：ラウリル硫酸ナトリウム（１０ｍｇ／ｋｇ）の投与を伴うコントロール群、クリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）の単純に粉砕した粉末の投与を伴う群、超臨界微粒化に供されたクリプトタンシノンの投与を伴う群（実施例１）、ジェットミル粉砕したクリプトタンシノンの投与を伴う群（実施例２）、およびマイクロフルイダイザーでミリング粉砕したクリプトタンシノンの投与を伴う群（実施例３）。各群の動物に、４００ｍｇ／ｋｇの薬物サンプルを経口的に（ＰＯ）投与した。動物に、固形飼料ペレットおよび水を自由に摂取させた。動物の体重の変化の結果を、以下の表１に示す。表１から分かるように、クリプトタンシノンの微粒化粒子の各投与は、単純に粉砕したクリプトタンシノン粉末を投与した群と比較して、微粒化方法および装置にかかわらず、同じ用量の化合物において有意な体重の減少を示したことが確認された。
【０１２０】
【表２】
【０１２１】
実施例７：様々な用量のクリプトタンシノンの微粒化粒子による薬物の治療有効量の決定
２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇおよび１００ｍｇ／ｋｇにおけるＪｅｔ ｍｉｌｌ−微粒化クリプトタンシノンと０．２％（ｗ／ｗ）ラウリル硫酸ナトリウムとの混合物からなる処方物のそれぞれを、４週間の高脂肪の食餌によって肥満を生じさせたＤＩＯ（食餌誘導性肥満）ＳＤラットに、連日２８日間、投与した。コントロールとして、０．２％の濃度の界面活性剤ＳＬＳを蒸留水に懸濁し、次いで、懸濁液を動物に投与した。結果として、以下の表３から分かるように、コントロール群と比較して、体重の有意な減少が確認され、そして体重の減少は濃度依存的であった。
【０１２２】
【表３】
【０１２３】
実施例８：クリプトタンシノンの微粒化粒子の効力の増強に対するリン脂質の効果
リン脂質であるホスファチジルコリン（ＰＣ）が、クリプトタンシノンの微粒化粒子の粒度を維持し、粒子の凝塊形成または凝集を防止し、そしてクリプトタンシノンの治療効力を増強するかどうかを確かめるために、以下のような動物実験を行った。
【０１２４】
この目的のために、５週齢のＣ５７ＢＬ／６雄性マウスを、Ｏｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物高脂肪の食餌を８週間、供給することによって、ＤＩＯ（食餌誘導性肥満）マウスモデルを確立した。体重４０ｇの１３週齢の雄性マウスを実験に使用した。実験動物用の食餌として、動物に高脂肪の飼料（４５ｋｃａｌ％脂肪）（Ｄ１２４５１，Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ）を与えた。ＤＩＯマウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化させた動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：何ら薬物サンプルの投与を伴わないコントロール群、ビヒクル（ＰＣ）のみの投与を伴う群、クリプトタンシノン（１５０ｍｇ／ｋｇ）の投与を伴う群、およびクリプトタンシノン（１５０ｍｇ／ｋｇ）＋ＰＣの投与を伴う群。各群の動物に、薬物サンプルを経口的に（ＰＯ）４０日間、投与した。動物に、自由に、固形飼料ペレットおよび水を摂取させた。
【０１２５】
【表４】
【０１２６】
表４から分かるように、クリプトタンシノンとホスファチジルコリン（ＰＣ）との組み合わせを投与した群では、コントロール群、ビヒクル投与群およびクリプトタンシノン投与群と比較して、有意な体重の減少が認められたことが確認された。
【０１２７】
実施例９：クリプトタンシノンの微粒化粒子の効力の増強に対するケイ酸カルシウムの効果
ケイ酸カルシウムが、クリプトタンシノンの微粒化粒子の粒度を維持し、粒子の凝塊形成または凝集を防止し、そしてクリプトタンシノンの治療効力を増強するかどうかを確かめるために、以下のような動物実験を行った。
【０１２８】
２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢ｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化された動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：何ら薬物サンプルの投与を伴わないコントロール群、ビヒクル（ケイ酸カルシウム）のみの投与を伴う群、クリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）の投与を伴う群、およびクリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）＋ケイ酸カルシウムの投与を伴う群。各群の動物に、飼料と混合した薬物サンプルを２０日間、投与した。研究期間全体をとおして、すべての動物に、水および標準的な実験動物用の食餌を自由に摂取させた。
【０１２９】
動物の体重の変化の結果を、以下の表５に示す。表５から分かるように、クリプトタンシノンとケイ酸カルシウムとの組み合わせを投与した群では、コントロール群、ビヒクル投与群およびクリプトタンシノン投与群と比較して、有意な体重の減少が認められたことが確認された。
【０１３０】
【表５】
【０１３１】
実施例１０：クリプトタンシノンの微粒化粒子の効力の増強に対するキトサンの効果
キトサンが、クリプトタンシノンの微粒化粒子の粒度を維持し、粒子の凝塊形成または凝集を防止し、そしてクリプトタンシノンの治療効力を増強するかどうかを確かめるために、以下のような動物実験を行った。
【０１３２】
２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢ｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化された動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：何ら薬物サンプルの投与を伴わないコントロール群、ビヒクル（キトサン）のみの投与を伴う群、クリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）の投与を伴う群、およびクリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）＋キトサンの投与を伴う群。各群の動物に、飼料と混合した薬物サンプルを２０日間、投与した。研究期間全体をとおして、すべての動物に、水および標準的な実験動物用の食餌を自由に摂取させた。
【０１３３】
動物の体重の変化の結果を、以下の表６に示す。表６から分かるように、クリプトタンシノンとキトサンとの組み合わせを投与した群では、コントロール群、ビヒクル投与群およびクリプトタンシノン投与群と比較して、有意な体重の減少が認められたことが確認された。
【０１３４】
【表６】
【０１３５】
実施例１１：クリプトタンシノンの微粒化粒子の効力の増強に対するパルミチン酸スクロースの効果
乳化剤であるパルミチン酸スクロースが、クリプトタンシノンの微粒化粒子の粒度を維持し、粒子の凝塊形成または凝集を防止し、そしてクリプトタンシノンの治療効力を増強するかどうかを確かめるために、以下のような動物実験を行った。
【０１３６】
２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢ｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化された動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：何ら薬物サンプルの投与を伴わないコントロール群、ビヒクル（パルミチン酸スクロース）のみの投与を伴う群、クリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）の投与を伴う群、およびクリプトタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）＋パルミチン酸スクロースの投与を伴う群。各群の動物に、飼料と混合した薬物サンプルを２０日間、投与した。研究期間全体をとおして、すべての動物に、水および標準的な実験動物用の食餌を自由に摂取させた。
【０１３７】
動物の体重の変化の結果を、以下の表７に示す。表７から分かるように、クリプトタンシノンとパルミチン酸スクロースとの組み合わせを投与した群では、コントロール群、ビヒクル投与群およびクリプトタンシノン投与群と比較して、有意な体重の減少が認められたことが確認された。
【０１３８】
【表７】
【０１３９】
実施例１２：動物に対する１５，１６−ジヒドロタンシノンの微粒化粒子の効果
１５，１６−ジヒドロタンシノンの微粒化粒子の治療効力を確認するために、以下のような動物実験を行った。
【０１４０】
この目的のために、２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢のｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化された動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：何ら薬物サンプルの投与を伴わないコントロール群、ビヒクル（ラウリル硫酸ナトリウム）のみの投与を伴う群、１５，１６−ジヒドロタンシノン（マイクロ粒子化前、４００ｍｇ／ｋｇ）＋ラウリル硫酸ナトリウムの投与を伴う群、および１５，１６−ジヒドロタンシノン（４００ｍｇ／ｋｇ）＋ラウリル硫酸ナトリウムの微粒化粒子の投与を伴う群。各群の動物に、飼料と混合した薬物サンプルを２０日間、投与した。研究期間全体をとおして、すべての動物に、水および標準的な実験動物用の食餌を自由に摂取させた。
【０１４１】
動物の体重の変化の結果を、以下の表８に示す。表８から分かるように、１５，１６−ジヒドロタンシノンの微粒化粒子とラウリル硫酸ナトリウムとの組み合わせを投与した群では、コントロール群、ビヒクル投与群および１５，１６−ジヒドロタンシノンの非微粒化粒子投与群と比較して、有意な体重の減少が認められたことが確認された。
【０１４２】
【表８】
【０１４３】
実施例１３：動物に対するタンシノンＩＩＡの微粒化粒子の効果
タンシノンＩＩＡの微粒化粒子の治療効力を確認するために、以下のような動物実験を行った。
【０１４４】
この目的のために、２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢のｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化された動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：何ら薬物サンプルの投与を伴わないコントロール群、ビヒクル（ラウリル硫酸ナトリウム）のみの投与を伴う群、タンシノンＩＩＡ（マイクロ粒子化前、４００ｍｇ／ｋｇ）＋ラウリル硫酸ナトリウムの投与を伴う群、およびタンシノンＩＩＡ（４００ｍｇ／ｋｇ）＋ラウリル硫酸ナトリウムの微粒化粒子の投与を伴う群。各群の動物に、飼料と混合した薬物サンプルを２０日間、投与した。研究期間全体をとおして、すべての動物に、水および標準的な実験動物用の食餌を自由に摂取させた。
【０１４５】
動物の体重の変化の結果を、以下の表９に示す。表９から分かるように、タンシノンＩＩＡの微粒化粒子とラウリル硫酸ナトリウムとの組み合わせを投与した群では、コントロール群、ビヒクル投与群およびタンシノンＩＩＡの非微粒化粒子投与群と比較して、有意な体重の減少が認められたことが確認された。
【０１４６】
【表９】
【０１４７】
実施例１４：動物に対する化合物１（β−ラパコン）の微粒化粒子の腸を標的にした処方物の効果
β−ラパコンの微粒化粒子を、腸を標的にした薬物送達システムの処方物に調製した場合のβ−ラパコン｛７，８−ジヒドロ−２，２−ジメチル−２Ｈ−ナフト（２，３−ｂ）ジヒドロピラン−７，８−ジオン｝の治療効力を確認するために、以下のような動物実験を行った。
【０１４８】
０．２ｇのラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）および１０ｇのβ−ラパコンを混合および粉砕した。得られた混合物に、β−ラパコンに対しておよそ等量の水溶性ポリマー（ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、並びにクロスカルメロースナトリウムおよび軽質無水ケイ酸のようなビヒクルを添加し、続いて、スプレー乾燥を行った。次いで、スプレー乾燥生成物を、ｐＨ感受性ポリマーとして約２０重量％のＥｕｄｒａｇｉｔ Ｓ−１００および可塑剤として約２重量％のＰＥＧ＃６，０００を含有するエタノール溶液に添加し、次いで、混合物をスプレー乾燥して、腸を標的にした処方物を調製した。
【０１４９】
各処方物の効力を確認するために、β−ラパコン含有量が２００ｍｇ／ｋｇの処方物を、ｏｂ／ｏｂマウスに１日１回投与し、そして動物の体重（ＢＷ）の変化を調べた。
【０１５０】
この目的のために、２型糖尿病の肥満マウスモデルとして１０週齢のｏｂ／ｏｂ雄性マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ）をＯｒｉｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａより購入し、そして実験の前に、１０日間、飼育室の新たな環境に順応させた。動物に、実験動物用の食餌として、固形飼料（Ｐ５０５３，Ｌａｂｄｉｅｔ）を与えた。ｏｂ／ｏｂ雄性マウスを収容し、そして２２±２℃の温度、５５±５％の湿度、および１２時間の明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクル（午前８：００〜午後８：００の明期）で維持した飼育室において、１０日間、新たな環境に順応させた。乱塊法に従って、上記のように順応化された動物を、無作為に４つの群に分け、次の各群は、７匹の動物で構成された：ラウリル硫酸ナトリウム（１０ｍｇ／ｋｇ）の投与を伴うコントロール群、β−ラパコン（２００ｍｇ／ｋｇ）の単純に粉砕した粉末の投与を伴う群、ジェットミル粉砕したβ−ラパコンの投与を伴う群、およびミリングプロセスに供されたβ−ラパコンの腸を標的にした処方物の投与を伴う群。動物の各群に、２００ｍｇ／ｋｇの薬物サンプルを経口的に（ＰＯ）投与した。動物に、固形飼料ペレットおよび水を自由に摂取させた。動物の体重の変化の結果を、以下の表１０に示す。
【０１５１】
【表１０】
【０１５２】
表１０から分かるように、腸を標的にした処方物の投与を伴う群は、体重の最大の減少（％）を示し、それ故、これは、優れたバイオアベイラビリティが得られることを表す。
【０１５３】
実施例１５：溶解試験
溶解試験は、一般に以下の条件下で行った。
【０１５４】
溶解試験は、Ｋｏｒｅａｎ Ｐｈｒａｍａｃｏｐｅｉａのパドル法に従って行った。パドル速度は７５ｒｐｍであり、流出液の温度は３７℃であり、そして試験溶液は、ｐＨ６．８、１．５％Ｔｗｅｅｎ８０の混合溶液であった。まず、試験溶液を、３５μｍのＭｅｍｂｒａｎｅフィルターを通してろ過し、そして遠心分離を行った。上清の液体を採取し、そして薬物の含有量をＨＰＬＣによって分析し、そして放出した薬物の量を、異なる時点で測定した。溶解試験に使用した薬物は、表１に掲載の化合物１、５、４４および５１、および６０ｗｔ％を超える化合物５８（「化合物５８抽出物」）を含有する特許文献２８に記載の抽出物である。何ら界面活性剤を伴わずに、Ｊｅｔ ｍｉｌｌまたはボールミルを使用して、マイクロ粒子化を行った。化合物の粒度を、ＨＥＬＯＳ測定によって決定した。
【０１５５】
粒度測定のために細胞に約３ｍｌのサンプルを入れ、そして１サンプルあたり６０秒の間、粒度を測定することによって、粒度の測定を行った。微粒化の前および後の粒度を以下に示す。
【０１５６】
【表１１】
【０１５７】
各化合物の微粒化の前および後の溶解率を、以下の表１２に示す。表１２において認められるように、すべての溶解率並びに溶解度は微粒化後に増加することが確かめられた。
【０１５８】
【表１２】
【０１５９】
更に、溶解率の変化をそれぞれ異なる時点で測定し、そして結果を図３〜６に示す。
【０１６０】
図３〜６を参考にして、化合物１、５、５８、４４および５１の微粒化粒子の溶解率は、微粒化前の溶解率と比較して有意に増加し、特に、化合物４４および５１並びに化合物５８抽出物の微粒化粒子の溶解率は、１５０％を超えるまで増加した。
【０１６１】
実施例１６：化合物１（β−ラパコン）の微粒化粒子の溶解率および顆粒化調製物の溶解率
５．４ｗｔ％の軽質無水ケイ酸、３０．４ｗｔ％のクロスカルメロースナトリウム、および５．４ｗｔ％のラウリル硫酸ナトリウムをβ−ラパコンの微粒化粒子に添加し、次いで、均一に混合した。このように調製した混合物を６．２５％ＨＰＭＣエタノール溶液でコーティングし、次いで、１０％ＨＰＭＣ／エタノール溶液で顆粒化した。
【０１６２】
上記で得られたβ−ラパコンの顆粒化調製物、および微粒化粒子の溶解率を図７に示す。実施例１５と同じ様式で、溶解率を決定するための試験を行った。
【０１６３】
図７を参考にして、適切なアジュバントを使用して、微粒化粒子を顆粒化する場合、１２時間まで溶解率は有意に変化しないが、溶解開始時間は短くなることを確認した。
【産業上の利用可能性】
【０１６４】
上記の説明から明らかなように、本発明は、代謝疾患の治療および予防に対して治療効果を有するやや溶けにくい物質である式１または２のナフトキノン系化合物の微粒化粒子を組み入れることで、水溶液または非極性溶媒における安定性および容易な分散性から生じる薬物の溶解度および生体吸収率の増強を介して、ナフトキノン系化合物のバイオアベイラビリティを増加させることにより、有効な薬物の利用可能性および効力を改善することができる。更に、ナフトキノン系化合物の微粒化粒子を含んでなる組成物は、経口用調製物に処方することができるため、本発明は、ナフトキノン系化合物の経口用製剤をはじめて提供する。
【０１６５】
例示を目的として、本発明の好適な実施形態について開示してきたが、当業者であれば、添付の特許請求の範囲において開示した本発明の範囲および趣旨から逸脱することなく、様々な変更、付加および置換が可能であることを理解するであろう。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナフトキノン系化合物の微粒化粒子を含んでなる医薬組成物であって、
前記ナフトキノン系化合物は、式１および２：
【化１】
［式中、
Ｒ１〜Ｒ６は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アシル、置換または非置換Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、置換または非置換Ｃ４〜Ｃ１０アリール、置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−アリール、置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロ環および置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−１０−フェニルであるか、或いはそれらのうちの２個の置換基が一緒になって、二重結合、或いは飽和または部分的若しくは完全に不飽和であり得る置換または非置換Ｃ３〜Ｃ６環状構造を形成してよく、ここで、置換基は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニルおよびＣ１〜Ｃ１０アルキルアミノからなる群から選択される少なくとも１つのものであってよく；
Ｒ７〜Ｒ１０は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アシル、置換または非置換Ｃ４〜Ｃ１０アリール、および置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−１０−フェニルであるか、或いはそれらのうちの２個の置換基が一緒になって、二重結合、或いは飽和または部分的若しくは完全に不飽和であり得る置換または非置換Ｃ３〜Ｃ６環状構造を形成してよく、ここで、置換基は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルアミノ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ１０アリールおよびＣ４〜Ｃ１０ヘテロアリールからなる群から選択される少なくとも１つのものであってよく；
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ’であり、ここで、Ｒ’は、水素若しくはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｙは、Ｃ、Ｓ、ＮまたはＯであって、但し、ＹがＳ若しくはＯである場合、Ｒ５およびＲ６は存在せず、ＹがＮである場合、Ｒ５は水素若しくはＣ１〜Ｃ６低級アルキルであり、かつＲ６は存在せず；
ｍは０若しくは１であって、但し、ｍが０である場合、ｍに隣接する炭素原子は直接結合を介して環状構造を形成し、そしてｎは０〜１０の整数である］
によって表される化合物、或いは薬学的に許容できるそれらの塩、溶媒和物または異性体から選択される１つ以上のものであることを特徴とする医薬組成物。
【請求項２】
前記ＸはＯまたはＳであり、ＹはＣまたはＯであることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記式１の化合物は、式１−１または式１−２：
【化２】
［式中、Ｒ１〜Ｒ１０、Ｙおよびｍは、請求項１に記載のとおりである］
の化合物であることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記式１の化合物は、式１−３〜式１−６：
【化３】
［式中、Ｒ１〜Ｒ１８、Ｘ、Ｙおよびｍは、請求項１に記載のとおりである］
の化合物のうちの１つであることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記Ｒ１〜Ｒ６は、それぞれ、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシおよび−（ＣＨ２）ｎ−フェニルからなる群から独立して選択されるか、或いはＲ１およびＲ２またはＲ２およびＲ３が一緒になって、二重結合、または置換または非置換Ｃ３〜Ｃ６環状構造を形成し、ここで、置換基は水素若しくはＣ１〜Ｃ１０アルキルであることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記Ｒ７〜Ｒ１０は、それぞれ独立して水素、ヒドロキシル、ハロゲン、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、および置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシからなる群から選択されることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記ナフトキノン系化合物は、以下の化合物：
【化４−１】
【化４−２】
【化４−３】
或いは薬学的に許容できるそれらの塩、溶媒和物または異性体から選択されることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記ナフトキノン系化合物の微粒化粒子のサイズは、粒度の９０％（Ｘ９０）が１ｎｍ〜３０μｍの範囲内にあるサイズであることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記ナフトキノン系化合物の微粒化粒子のサイズは、粒度の５０％（Ｘ５０）が１ｎｍ〜１０μｍの範囲内にあるサイズであることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
界面活性剤を更に含んでなることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記界面活性剤を、前記ナフトキノン系化合物の微粒化粒子および界面活性剤の全重量に基づいて０．１〜５０重量％の範囲で含むことを特徴とする請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
水溶性ポリマーおよび／または溶解剤を更に含んでなることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
薬学的に許容できるビヒクルおよび／またはキャリアを更に含んでなることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記医薬組成物は、腸を標的にした処方物に調製される経口医薬組成物であることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記腸を標的にした処方物は、ｐＨ感受性ポリマーの添加によって調製されることを特徴とする請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記腸を標的にした処方物は、腸特異的細菌酵素によって分解可能な生分解性ポリマーの添加によって調製されることを特徴とする請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記腸を標的にした処方物は、腸特異的細菌酵素によって分解可能な生分解性マトリックスの添加によって調製されることを特徴とする請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記腸を標的にした処方物は、予め決定された遅延時間後の薬物の放出を可能にする形態で構築されることを特徴とする請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記ナフトキノン系化合物の微粒化粒子は、ミリング、沈殿、高圧均質化または超臨界微粒化を含む微粒化プロセスによって調製されることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記ナフトキノン系化合物の微粒化粒子は、１日あたり少なくとも１０ｍｇを超えて投与されることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記ナフトキノン系化合物の微粒化粒子は、顆粒化されることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記医薬組成物は、代謝疾患、再狭窄、インポテンス、前立腺疾患、高血圧症、心疾患、腎疾患および緑内障、変性疾患並びにミトコンドリア機能障害関連疾患からなる群から選択される１つ以上のものの予防および治療に使用されることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
メタボリックシンドロームは、肥満、肥満合併症、肝疾患、動脈硬化、脳卒中、心筋梗塞、循環器系疾患、虚血性疾患、糖尿病、糖尿病関連合併症および炎症性疾患からなる群から選択される１つ以上のものであることを特徴とする請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項１】
ナフトキノン系化合物の微粒化粒子を含んでなる医薬組成物であって、
前記ナフトキノン系化合物は、式１および２：
【化１】
［式中、
Ｒ１〜Ｒ６は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アシル、置換または非置換Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、置換または非置換Ｃ４〜Ｃ１０アリール、置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−アリール、置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロ環および置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−１０−フェニルであるか、或いはそれらのうちの２個の置換基が一緒になって、二重結合、或いは飽和または部分的若しくは完全に不飽和であり得る置換または非置換Ｃ３〜Ｃ６環状構造を形成してよく、ここで、置換基は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニルおよびＣ１〜Ｃ１０アルキルアミノからなる群から選択される少なくとも１つのものであってよく；
Ｒ７〜Ｒ１０は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アシル、置換または非置換Ｃ４〜Ｃ１０アリール、および置換または非置換−（ＣＨ２）ｎ−１０−フェニルであるか、或いはそれらのうちの２個の置換基が一緒になって、二重結合、或いは飽和または部分的若しくは完全に不飽和であり得る置換または非置換Ｃ３〜Ｃ６環状構造を形成してよく、ここで、置換基は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルアミノ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４〜Ｃ１０アリールおよびＣ４〜Ｃ１０ヘテロアリールからなる群から選択される少なくとも１つのものであってよく；
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ’であり、ここで、Ｒ’は、水素若しくはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｙは、Ｃ、Ｓ、ＮまたはＯであって、但し、ＹがＳ若しくはＯである場合、Ｒ５およびＲ６は存在せず、ＹがＮである場合、Ｒ５は水素若しくはＣ１〜Ｃ６低級アルキルであり、かつＲ６は存在せず；
ｍは０若しくは１であって、但し、ｍが０である場合、ｍに隣接する炭素原子は直接結合を介して環状構造を形成し、そしてｎは０〜１０の整数である］
によって表される化合物、或いは薬学的に許容できるそれらの塩、溶媒和物または異性体から選択される１つ以上のものであることを特徴とする医薬組成物。
【請求項２】
前記ＸはＯまたはＳであり、ＹはＣまたはＯであることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記式１の化合物は、式１−１または式１−２：
【化２】
［式中、Ｒ１〜Ｒ１０、Ｙおよびｍは、請求項１に記載のとおりである］
の化合物であることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記式１の化合物は、式１−３〜式１−６：
【化３】
［式中、Ｒ１〜Ｒ１８、Ｘ、Ｙおよびｍは、請求項１に記載のとおりである］
の化合物のうちの１つであることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記Ｒ１〜Ｒ６は、それぞれ、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルケニル、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシおよび−（ＣＨ２）ｎ−フェニルからなる群から独立して選択されるか、或いはＲ１およびＲ２またはＲ２およびＲ３が一緒になって、二重結合、または置換または非置換Ｃ３〜Ｃ６環状構造を形成し、ここで、置換基は水素若しくはＣ１〜Ｃ１０アルキルであることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記Ｒ７〜Ｒ１０は、それぞれ独立して水素、ヒドロキシル、ハロゲン、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、および置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシからなる群から選択されることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記ナフトキノン系化合物は、以下の化合物：
【化４−１】
【化４−２】
【化４−３】
或いは薬学的に許容できるそれらの塩、溶媒和物または異性体から選択されることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記ナフトキノン系化合物の微粒化粒子のサイズは、粒度の９０％（Ｘ９０）が１ｎｍ〜３０μｍの範囲内にあるサイズであることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記ナフトキノン系化合物の微粒化粒子のサイズは、粒度の５０％（Ｘ５０）が１ｎｍ〜１０μｍの範囲内にあるサイズであることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
界面活性剤を更に含んでなることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記界面活性剤を、前記ナフトキノン系化合物の微粒化粒子および界面活性剤の全重量に基づいて０．１〜５０重量％の範囲で含むことを特徴とする請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
水溶性ポリマーおよび／または溶解剤を更に含んでなることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
薬学的に許容できるビヒクルおよび／またはキャリアを更に含んでなることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記医薬組成物は、腸を標的にした処方物に調製される経口医薬組成物であることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記腸を標的にした処方物は、ｐＨ感受性ポリマーの添加によって調製されることを特徴とする請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記腸を標的にした処方物は、腸特異的細菌酵素によって分解可能な生分解性ポリマーの添加によって調製されることを特徴とする請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記腸を標的にした処方物は、腸特異的細菌酵素によって分解可能な生分解性マトリックスの添加によって調製されることを特徴とする請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記腸を標的にした処方物は、予め決定された遅延時間後の薬物の放出を可能にする形態で構築されることを特徴とする請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記ナフトキノン系化合物の微粒化粒子は、ミリング、沈殿、高圧均質化または超臨界微粒化を含む微粒化プロセスによって調製されることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記ナフトキノン系化合物の微粒化粒子は、１日あたり少なくとも１０ｍｇを超えて投与されることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記ナフトキノン系化合物の微粒化粒子は、顆粒化されることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記医薬組成物は、代謝疾患、再狭窄、インポテンス、前立腺疾患、高血圧症、心疾患、腎疾患および緑内障、変性疾患並びにミトコンドリア機能障害関連疾患からなる群から選択される１つ以上のものの予防および治療に使用されることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
メタボリックシンドロームは、肥満、肥満合併症、肝疾患、動脈硬化、脳卒中、心筋梗塞、循環器系疾患、虚血性疾患、糖尿病、糖尿病関連合併症および炎症性疾患からなる群から選択される１つ以上のものであることを特徴とする請求項２２に記載の医薬組成物。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【公表番号】特表２０１１−５００５５７（Ｐ２０１１−５００５５７Ａ）
【公表日】平成２３年１月６日（２０１１．１．６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５２８７９７（Ｐ２０１０−５２８７９７）
【出願日】平成２０年１０月７日（２００８．１０．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＫＲ２００８／００５８８５
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０４８２５１
【国際公開日】平成２１年４月１６日（２００９．４．１６）
【出願人】（５０９０１０４３６）マゼンス インコーポレイテッド (11)
【出願人】（５０６２２２７９７）ケーティ アンド ジー カンパニー リミテッド (9)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年１月６日（２０１１．１．６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年１０月７日（２００８．１０．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＫＲ２００８／００５８８５
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０４８２５１
【国際公開日】平成２１年４月１６日（２００９．４．１６）
【出願人】（５０９０１０４３６）マゼンス インコーポレイテッド (11)
【出願人】（５０６２２２７９７）ケーティ アンド ジー カンパニー リミテッド (9)
【Ｆターム（参考）】
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