ヒト免疫不全ウイルスの増殖阻害剤
【課題】新たなHIV増殖阻害剤を提供する。
【解決手段】2-[2-(フェニルメチルスルフォニル)エチルスルファニル]-5,6,7,8-テトラヒドロキノリン-3-カルボニトリルまたはその塩を含む、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の増殖阻害剤。
【解決手段】2-[2-(フェニルメチルスルフォニル)エチルスルファニル]-5,6,7,8-テトラヒドロキノリン-3-カルボニトリルまたはその塩を含む、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の増殖阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)の増殖阻害剤、またはヒト免疫不全ウイルス感染症治療用医薬組成物などに関する。
【背景技術】
【０００２】
後天性免疫不全症候群(AIDS)は、レトロウイルスであるヒト免疫不全ウイルス(HIV)の感染によって引き起こされる疾患である。HIVの感染初期はふつう無症状であるが、感染後、徐々に身体の免疫機能が低下し、日和見感染、がん、全身衰弱、および中枢神経変性を伴う進行性の疾患などが引き起こされる。HIVの感染からAIDSの発症までの期間は、一般に数年から数十年と長いが、一旦AIDSが発症すると、その致死率は非常に高い。そこで、AIDSの発症を防ぐために、HIVの増殖を阻害する化合物の探索が行われている。
【０００３】
HIVにはHIV-1とHIV-2の２つの型がある。これらのHIVは次のような生活環を持つ。先ず、HIVが細胞に感染すると、HIVの遺伝子RNAがウイルス粒子中に含まれる逆転写酵素によりDNAに逆転写されHIVインテグラーゼにより感染細胞のDNAに組み込まれる。次に、組み込まれたHIV遺伝子の5'端にあるLTR中のプロモーターからHIVのRNAが転写され遺伝子RNAになると同時に、そのRNAを鋳型としてウイルスタンパク質が合成される。合成されたウイルスタンパク質のいくつかはHIVプロテアーゼにより切断されて成熟タンパク質となり次世代のウイルス粒子を形成する。
【０００４】
以上のHIVの生活環を考慮すると、逆転写酵素を阻害すること、HIVインテグラーゼを阻害すること、LTRからのRNA転写を阻害すること、あるいはHIVプロテアーゼを阻害することなどにより、HIVの増殖を阻害することができると考えられる。
【０００５】
これまでに、逆転写酵素を阻害する、あるいはプロテアーゼを阻害するHIV増殖阻害剤等が知られている（例えば、特許文献１および２参照）。
【０００６】
【特許文献１】特許第3806090号公報
【特許文献２】特表2001-516350号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)は、これら従来のHIV増殖阻害剤に対する耐性を容易に獲得できる。したがって、HIVが従来の阻害剤に対する耐性を獲得した後にも使用できる、あるいはHIVが従来の阻害剤に対する耐性を獲得するまでの期間を延ばすことができる、新しいHIV増殖阻害剤が求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは上記課題を解決するために、鋭意検討した結果、所定の化合物にHIV増殖阻害活性があることを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は次のものである。
【０００９】
(1)2-[2-(フェニルメチルスルフォニル)エチルスルファニル]-5,6,7,8-テトラヒドロキノリン-3-カルボニトリル、
5,7-ジメチル-2-[2-(3-メチルピペリジン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニルキノリン-3-カルボニトリル、
N-シクロヘキシル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
N-シクロヘキシル-2-(3-エチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
N-シクロペンチル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
1-ピペリジン-1-イル-2-(3,5,7-トリメチルキノリン-2-イル)スルファニルエタノン、
2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-(オキソラン-2-イルメチル)アセトアミド、
2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニル-6,7-ジヒドロ-5H-シクロペンタピリジン-3-カルボニトリル、
4,6-ジメチル-2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニルピリジン-3-カルボニトリル、
2-(3-シアノ-8-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド、
2-(3-シアノ-7-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(3,4-ジメトキシフェニル)エチル]アセトアミド、
2-(3-シアノ-6-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド、
N-シクロペンチル-2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-1-ピペリジン-1-イルエタノン、
2-[2-(アゼパン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニル-5,7-ジメチルキノリン-3-カルボニトリル、および
2-[(3-シアノ-4-ピリジン-4-イル-5,6,7,8-テトラヒドロ-キノリン-2-イル)スルファニル]アセトアミド
からなる群から選択される少なくとも１つの化合物またはその塩を含む、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の増殖阻害剤。
(2)上記(1)に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症治療用医薬組成物。
(3)ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症治療用医薬組成物を製造するための、上記(1)に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
【発明の効果】
【００１０】
本発明により、新たなHIV増殖阻害剤が提供される。本発明の好ましい態様に係る阻害剤は、従来の阻害剤に対する耐性を獲得したHIVの増殖を効果的に阻害できる。本発明の別の好ましい態様に係る阻害剤は、HIVが従来の阻害剤に対する耐性を獲得するまでの期間を延ばすことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下、本発明を詳細に説明する。
なお、本明細書において引用された全ての刊行物、例えば先行技術文献、及び公開公報、特許公報その他の特許文献は、参照として本明細書に組み込まれる。
【００１２】
１．化合物
本発明は、HIV増殖阻害活性のある以下の化合物またはその塩を提供する。
(1)2-[2-(フェニルメチルスルフォニル)エチルスルファニル]-5,6,7,8-テトラヒドロキノリン-3-カルボニトリル<2-[2-(phenylmethylsulfonyl)ethylsulfanyl]-5,6,7,8-tetrahydroquinoline-3-carbonitrile>：GFI99-043
【００１３】
【化１】
【００１４】
(2)5,7-ジメチル-2-[2-(3-メチルピペリジン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニルキノリン-3-カルボニトリル<5,7-dimethyl-2-[2-(3-methylpiperidin-1-yl)-2-oxoethyl]sulfanylquinoline-3-carbonitrile>：GMI08-003
【００１５】
【化２】
【００１６】
(3)N-シクロヘキシル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclohexyl-2-(3-methylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-024
【００１７】
【化３】
【００１８】
(4)N-シクロヘキシル-2-(3-エチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclohexyl-2-(3-ethylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-052
【００１９】
【化４】
【００２０】
(5)N-シクロペンチル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclopentyl-2-(3-methylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-073
【００２１】
【化５】
【００２２】
(6)1-ピペリジン-1-イル-2-(3,5,7-トリメチルキノリン-2-イル)スルファニルエタノン<1-piperidin-1-yl-2-(3,5,7-trimethylquinolin-2-yl)sulfanylethanone>：GMI08-087
【００２３】
【化６】
【００２４】
(7)2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-(オキソラン-2-イルメチル)アセトアミド<2-(4-metylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-(oxolan-2-ylmethyl)acetamide>：GMI08-096
【００２５】
【化７】
【００２６】
(8)2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニル-6,7-ジヒドロ-5H-シクロペンタピリジン-3-カルボニトリル<2-(2-oxo-2-piperidin-1-ylethyl)sulfanyl-6,7-dihydro-5H-cyclopenta[b]pyridine-3-carbonitrile>：GMI08-003-002
【００２７】
【化８】
【００２８】
(9)4,6-ジメチル-2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニルピリジン-3-カルボニトリル<4,6-dimethyl-2-(2-oxo-2-piperidine-1-ylethyl)sulfanylpyridine-3-carbonitrile>：GMI08-003-042
【００２９】
【化９】
【００３０】
(10)2-(3-シアノ-8-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド<2-(3-cyano-8-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]acetamide>：GMI08-003-066
【００３１】
【化１０】
【００３２】
(11)2-(3-シアノ-7-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(3,4-ジメトキシフェニル)エチル]アセトアミド<2-(3-cyano-7-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-[2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethyl]acetamide>：GMI08-003-123
【００３３】
【化１１】
【００３４】
(12)2-(3-シアノ-6-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド<2-(3-cyano-6-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]acetamide>：GMI08-003-170
【００３５】
【化１２】
【００３６】
(13)N-シクロペンチル-2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclopentyl-2-(4-methylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-003-180
【００３７】
【化１３】
【００３８】
(14)2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-1-ピペリジン-1-イルエタノン<2-(4-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-1-piperidin-1-ylethanone>：GMI08-003-239
【００３９】
【化１４】
【００４０】
(15)2-[2-(アゼパン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニル-5,7-ジメチルキノリン-3-カルボニトリル<2-[2-(azepan-1-yl)-2-oxoethyl]sulfanyl-5,7-dimethylquinoline-3-carbonitrile>：GMI08-102
【００４１】
【化１５】
【００４２】
(16)2-[(3-シアノ-4-ピリジン-4-イル-5,6,7,8-テトラヒドロ-キノリン-2-イル)スルファニル]アセトアミド<2-[(3-cyano-4-pyridin-4-yl-5,6,7,8-tetrahydroquinolin-2-yl)sulfanyl]acetamide>：GFI99-043-075
【００４３】
【化１６】
【００４４】
上記化合物の塩としては、塩酸塩、硫酸塩、もしくはリン酸塩などの無機酸付加塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、もしくは蓚酸塩などの有機酸塩、またはナトリウム塩、カリウム塩、もしくはカルシウム塩などの塩が挙げられる。
【００４５】
上記化合物またはその塩の合成方法は、特に限定されず、公知の方法を用いて合成することができる。上記化合物またはその塩のうち、例えば、GFI99-043-075は次のようにして合成することができる。N-(1-cyclohexenyl)-morpholineおよび4-pyridinyl-methylenecyanothio(seleno)acetamideを２０℃の無水エタノール中で４時間攪拌する。その後、１０％水酸化カリウム水溶液を反応溶液に加え、５分経った後で2-Chloro-acetamideを加えて、５時間攪拌する。その後、反応溶液を濾過後、水、エタノール、ヘキサンで洗浄後、適宜精製を行うことにより、目的物質であるGFI99-043-075を例えば７５％の収率で得ることができる。（Dyachenko, V. D.; Litvinov, V. P. T. G. Shevchenko, Single stage synthesis of 2-alkylthio(seleno)-4-heteroaryl-3-cyano-5,6,7,8-tetrahydroquinolines., Chemistry of Heterocyclic Compounds (New York)(Translation of Khimiya Geterotsiklicheskikh Soedinenii), 33(10), 1203-1208; 1998）。
【００４６】
また、上記化合物またはその塩は、市販のものを入手しても良い。
例えば、GFI99-043は、ASINEX社から商品名BAS03395143として市販されている。
GMI08-003は、ASINEX社から商品名ASN05588029として市販されている。
GMI08-024は、ASINEX社から商品名ASN03799878として市販されている。
GMI08-052は、ASINEX社から商品名ASN05546408として市販されている。
GMI08-073は、ASINEX社から商品名ASN03799909として市販されている。
GMI08-087は、ASINEX社から商品名ASN03221372として市販されている。
GMI08-096は、ASINEX社から商品名BAS03434505として市販されている。
GMI08-003-002は、ASINEX社から商品名BAS01862082として市販されている。
GMI08-003-042は、ASINEX社から商品名BAS01862079として市販されている。
GMI08-003-066は、ASINEX社から商品名ASN05546041として市販されている。
GMI08-003-123は、ASINEX社から商品名ASN05545884として市販されている。
GMI08-003-170は、ASINEX社から商品名ASN05545551として市販されている。
GMI08-003-180は、ASINEX社から商品名BAS03434499として市販されている。
GMI08-003-239は、ASINEX社から商品名BAS02617839として市販されている。
GMI08-102は、ASINEX社から商品名ASN05588113として市販されている。
GFI99-043-075は、ASINEX社から商品名BAS02589988として市販されている。
【００４７】
２．ヒト免疫不全ウイルス(HIV)の増殖阻害剤
本発明は、上記化合物またはその塩（本明細書中で、本発明の化合物と呼ぶ場合がある。）を含む、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)の増殖阻害剤（本明細書中で、本発明の阻害剤と呼ぶ場合がある）を提供する。すなわち、本発明の阻害剤に含まれる化合物またはその塩は、GFI99-043、GMI08-003、GMI08-024、GMI08-052、GMI08-073、GMI08-087、GMI08-096、GMI08-003-002、GMI08-003-042、GMI08-003-066、GMI08-003-123、GMI08-003-170、GMI08-003-180、GMI08-003-239、GMI08-102、およびGFI99-043-075からなる群から選ばれる少なくとも１つの化合物またはその塩である。本発明の１つの態様の阻害剤に含まれる化合物またはその塩は、GFI99-043、GMI08-003、GMI08-024、GMI08-052、GMI08-073、GMI08-087、GMI08-096、GMI08-003-002、GMI08-003-042、GMI08-003-066、GMI08-003-123、GMI08-003-170、GMI08-003-180、GMI08-003-239、GMI08-102、もしくはGFI99-043-075、またはその塩である。本発明の１つの態様の阻害剤においては、本発明の化合物における塩は、医薬的に許容される塩である。医薬的に許容される塩としては、塩酸塩、硫酸塩、もしくはリン酸塩などの無機酸付加塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、もしくは蓚酸塩などの有機酸塩、またはナトリウム塩、カリウム塩、もしくはカルシウム塩などの塩が挙げられる。本発明の阻害剤は、HIV-1の増殖、好ましくは、HIV-1とHIV-2の両方の増殖を阻害することができる。
【００４８】
本発明の１つの態様では、本発明の阻害剤と併用して本発明の阻害剤のHIVの増殖阻害効果を高めることができる化合物をスクリーニングするために本発明の阻害剤を使用する。具体的には、候補化合物の存在下または非存在下、HIV感染細胞に、本発明の阻害剤を接触させて、細胞生存率を測定する。「接触」とは、HIV感染細胞と本発明の阻害剤とを同一の反応系または培養系に存在させることを意味し、例えば、HIV感染細胞を本発明の阻害剤の存在下で培養することなどが含まれる。尚、このとき、様々な濃度の候補化合物の存在下で、細胞生存率を測定するのが好ましい。そして、候補化合物の存在下での細胞生存率が、非存在下での細胞生存率と比較して高い時に（例えば、20%以上、30%以上、40%以上、50%以上、60%以上、70%以上、80%以上、90%以上、100%以上、150%以上、または200%以上高い時に）、候補化合物を、本発明の阻害剤と併用して本発明の阻害剤のHIVの増殖阻害効果を高めることができる化合物として選択する。細胞生存率は、公知の方法、例えば、MTTアッセイなどを用いて測定することができる。
【００４９】
本発明の別の態様では、哺乳動物(例えば、ヒト、サルなど)のHIV感染症を治療するために、経口または非経口で本発明の阻害剤を哺乳動物に適用する。本発明のある態様では、哺乳動物はヒトを除く哺乳動物である。
【００５０】
また、本発明の阻害剤は、使用目的に応じ、本発明の化合物に加えて、担体や添加物を含むものであってもよい。このような担体及び添加物として、水、酢酸、有機溶剤、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルスターチナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、キサンタンガム、アラビアゴム、カゼイン、寒天、ポリエチレングリコール、ジグリセリン、グリセリン、プロピレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、界面活性剤等が挙げられる。
【００５１】
本発明の阻害剤における本発明の化合物の使用量は、使用目的によって異なる。当業者であれば、使用目的に応じて、本発明の化合物の使用量を適宜選択することができる。
【００５２】
例えば、本発明の阻害剤と併用して本発明の阻害剤のHIVの増殖阻害効果を高めることができる化合物をスクリーニングするために本発明の阻害剤を用いる場合には、本発明の化合物の使用量を変動させて細胞生存率を測定するのが好ましい。この場合、本発明の化合物の使用量は、例えば、2μg/mL〜200μg/mL、好ましくは、10μg/mL〜100μg/mLである。
【００５３】
哺乳動物のHIV感染症を治療するために本発明の阻害剤を用いる場合には、本発明の化合物の使用量は、20 kｇの動物の場合、１日あたり、例えば、1mg〜600mg、好ましくは、20mg〜300mgである。
【００５４】
また、本発明は、HIV増殖阻害用の前記化合物またはその塩（本発明の化合物）を提供する。本発明の化合物の用法および用量は、前記阻害剤で説明したのと同様である。
【００５５】
また、本発明は、前記化合物またはその塩（本発明の化合物）を用いるHIV増殖阻害方法を提供する。ここで、「本発明の化合物を用いる」ことには、例えば、本発明の化合物と併用して本発明の化合物のHIVの増殖阻害効果を高めることができる化合物をスクリーニングするために本発明の化合物を使用すること、および哺乳動物のHIV感染症を治療するために、経口または非経口で本発明の化合物を動物に適用するために本発明の化合物を使用すること、などが含まれるが、これらに限定されない。本発明のHIV増殖阻害方法における本発明の化合物の用法および用量は、前記阻害剤で説明したのと同様である。
【００５６】
さらに、本発明は、HIV増殖阻害剤製造のための前記化合物またはその塩（本発明の化合物）の使用を提供する。本発明の使用における本発明の化合物の用法および用量は、前記HIV増殖阻害剤で説明したのと同様である。
【００５７】
３．医薬組成物
本発明は、前記化合物またはその塩（本発明の化合物）を含有する医薬組成物を提供する。本発明の医薬組成物に含まれる化合物またはその塩は、GFI99-043、GMI08-003、GMI08-024、GMI08-052、GMI08-073、GMI08-087、GMI08-096、GMI08-003-002、GMI08-003-042、GMI08-003-066、GMI08-003-123、GMI08-003-170、GMI08-003-180、GMI08-003-239、GMI08-102、およびGFI99-043-075からなる群から選ばれる少なくとも１つの化合物またはその塩である。本発明の１つの態様の医薬組成物に含まれる化合物またはその塩は、GFI99-043、GMI08-003、GMI08-024、GMI08-052、GMI08-073、GMI08-087、GMI08-096、GMI08-003-002、GMI08-003-042、GMI08-003-066、GMI08-003-123、GMI08-003-170、GMI08-003-180、GMI08-003-239、GMI08-102、もしくはGFI99-043-075またはその塩である。本発明の化合物における塩は、医薬的に許容される塩である。医薬的に許容される塩としては、塩酸塩、硫酸塩、もしくはリン酸塩などの無機酸付加塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、もしくは蓚酸塩などの有機酸塩、またはナトリウム塩、カリウム塩、もしくはカルシウム塩などの塩が挙げられる。本発明の医薬組成物に含まれる本発明の化合物は、HIV増殖阻害作用があるため、本発明の医薬組成物を投与することにより、HIV感染症を治療することができる。
【００５８】
HIV感染症は、HIVの感染により引き起こされる疾患であり、例えば、身体の免疫機能が低下することにより引き起こされる疾患が挙げられる。身体の免疫機能が低下することにより引き起こされる疾患としては、日和見感染(結核、カンジダ症、またはニューモシスチス肺炎など)、がん（カポジ肉腫、非ホジキンリンパ腫または原発性脳リンパ腫）、全身衰弱、および中枢神経変性を伴う進行性の疾患（痴呆症、または亜急性脳炎など）などが挙げられる。HIV感染症を治療することには、これらの疾患の発症を遅らせることも含まれる。
【００５９】
また、本発明の医薬組成物は、他のHIV感染症治療用医薬組成物と併用して、その治療効果を高めるため、あるいは耐性ウイルスの出現を遅らせるために使用しても良い。他のHIV感染症治療用医薬組成物としては、公知の医薬組成物を挙げることができ、例えば、ジドブジン（商品名Retrovir、Glaxo SmithKline）、ネビラピン（商品名Viramune、Boehringer）、ザルシタビン（商品名Hivid、中外）、ラミブジン（商品名Epivir、Glaxo SmithKline）、リトナビル（商品名Norvir、Abbott）、インジナビル（商品名Crixivan、万有）、またはサニルブジン（商品名Zerit、Bristol）からなる群から選択される少なくとも１つの医薬組成物を挙げることができる。好ましくは、ジドブジン（商品名Retrovir、Glaxo SmithKline）、ラミブジン（商品名Epivir、Glaxo SmithKline）、またはインジナビル（商品名Crixivan、万有）である
【００６０】
本発明の医薬組成物は、経口投与及び非経口投与のいずれの剤形をも採用することができる。
【００６１】
前記剤形は常法にしたがって製剤化することができ、本発明の化合物の他、医薬的に許容される担体や添加物を含むものであってもよい。このような担体及び添加物として、水、医薬的に許容される有機溶剤、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルスターチナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、キサンタンガム、アラビアゴム、カゼイン、寒天、ポリエチレングリコール、ジグリセリン、グリセリン、プロピレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、医薬添加物として許容される界面活性剤等が挙げられる。
【００６２】
上記添加物は、本発明の医薬組成物の剤型に応じて上記の中から単独で又は適宜組み合わせて選ばれる。剤形としては、経口投与の場合は、錠剤、カプセル剤、細粒剤、粉末剤、顆粒剤、液剤、シロップ剤等として、または適当な剤型により投与が可能である。非経口投与の場合は、注射剤等が挙げられる。注射剤型の場合は、例えば点滴等の静脈内注射等により全身又は局部的に投与することができる。
【００６３】
例えば、注射用製剤として使用する場合、本発明の医薬組成物を溶剤(例えば生理食塩水、緩衝液、ブドウ糖溶液等)に溶解し、これに適当な添加剤（ヒト血清アルブミン等）を加えたものを使用することができる。あるいは、使用前に溶解する剤形とするために凍結乾燥したものであってもよい。凍結乾燥用賦形剤としては、例えば、マンニトール、ブドウ糖等の糖アルコールや糖類を使用することができる。
【００６４】
本発明の医薬組成物または本発明の化合物の投与量は、年齢、性別、症状、投与経路、投与回数、剤型によって異なる。投与方法は、患者の年齢、症状により適宜選択する。投与量は、例えば成人(６０ｋｇ)の場合、1日当たり50〜2500ｍｇ、好ましくは300〜1800ｍｇ、より好ましくは600〜1200ｍｇである。投与方法は、患者の年齢、症状により適宜選択する。投与は、例えば１日当たり、１回または２〜４回に分けてもよい。
また、本発明医薬組成物または本発明の化合物を、他のHIV感染症治療用医薬組成物と併用する場合、本発明の化合物の量は、特に限定されず、他のHIV感染症治療用医薬組成物との個々の組み合わせによって異なるが、例えば、他のHIV感染症治療用医薬組成物の約0.1〜100倍（重量比）である。さらに好ましくは約1〜10倍（重量比）である。
【００６５】
また、本発明は、前記化合物またはその塩（本発明の化合物）を患者に投与することを含む、HIV感染症の治療方法を提供する。さらに、本発明は、本発明のHIV感染症治療用医薬組成物を製造するための、前記化合物またはその塩（本発明の化合物）の使用を提供する。HIV感染症の治療方法における、本発明の化合物の投与方法などは、上記医薬組成物で説明したのと同様である。また、本発明の化合物の使用における、医薬組成物の製造方法なども、上記医薬組成物で説明したのと同様である。
【実施例】
【００６６】
以下、本発明を実施例により具体的に説明する。
[概略]
ヒトT細胞由来の細胞株MT-4はHIVに感染すると細胞変性を起こして死滅する。一方、HIV増殖阻害活性のある供試化合物の存在下では、HIV感染MT-4細胞は死滅せずに、生き残ることができる。よって、供試化合物の存在下でのHIV感染MT-4細胞の生存率が高ければ、その供試化合物にHIV増殖阻害活性があると判断できる。
以下では、具体的には、96穴マイクロプレートで段階希釈した供試化合物にHIV感染MT-4細胞と非感染MT-4細胞をそれぞれ加え、5日間培養した。供試化合物非添加HIV非感染MT-4細胞の生存率を100%（コントロール）として、供試化合物の各濃度における細胞生存率をMTT法によって算出した（Nakashima et al. Antiviral Chemist Chemother 6; 271-280,1995）。そして、供試化合物のHIV増殖阻害活性（あるいはHIV感染阻止作用）と細胞障害活性を評価した。
【００６７】
[実施例１]
2-[2-(フェニルメチルスルフォニル)エチルスルファニル]-5,6,7,8-テトラヒドロキノリン-3-カルボニトリル<2-[2-(phenylmethylsulfonyl)ethylsulfanyl]-5,6,7,8-tetrahydroquinoline-3-carbonitrile>：GFI99-043
【００６８】
【化１７】
【００６９】
Nakashima et al. Antiviral Chmeist Chemother 6;271-280,1995に準じて、GFI99-043(ASINEX社)のHIV増殖阻害活性および細胞障害活性等を評価した。
【００７０】
細胞は、ヒトT細胞由来の細胞株MT-4を使用した。ウイルスは、HIV-1 IIIB株を使用した。培地は10% FCS含有RPMI1640培地 (Invitrogen社) を用いた。96穴マイクロプレート (Falcon社製) の2〜11列を用いて供試化合物を２倍系列で段階希釈した（100μL/well、最終濃度500μM, 250μM, 125μM, 62.5μM, 31.25μM, 15.625μM, 7.8125μM, 3.90625μM, 1.953125μM, または0μM）。MT-4細胞を3×105 cell/mLに調製し、プレートの上半分（B〜D行）にはHIV-1 IIIB株をmoi=0.01で感染させたMT-4細胞を、下半分（E〜G行）には非感染（mock感染）細胞を、それぞれ100μL/wellずつ加えた。5%CO2存在下、37℃で5日間培養した後、MTT試薬（0.75%）を加え、さらに２時間培養した。ウエルの底に沈んだ色素を吸わないように培地120μL/wellを除き、100μL/wellの色素溶解液を加えた。吸光度（波長540nm、対照690nm）を測定し、各薬剤濃度におけるHIV感染および非感染細胞の生存率を算出した。すなわち、供試化合物の濃度が0μMのときの非感染細胞の吸光度の値を細胞生存率100%として、吸光度の比から各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を計算した。その結果を図１に示す。図１中、縦軸が細胞生存率(% viabilility)であり、横軸が供試化合物の濃度である。また、HIV inf. MT-4がウイスル感染細胞であり、Mock inf. MT-4が非感染細胞である。図１に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
【００７１】
供試化合物のHIV増殖阻害活性を50%有効濃度値EC50および90%有効濃度値EC90で表わした。また、供試化合物の細胞障害活性を50%細胞障害濃度CC50で表わした。また、供試化合物の有効性を、有効係数(SI=CC50/EC50)で表わした。
EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【００７２】
【表１】
【００７３】
[実施例２]
5,7-ジメチル-2-[2-(3-メチルピペリジン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニルキノリン-3-カルボニトリル<5,7-dimethyl-2-[2-(3-methylpiperidin-1-yl)-2-oxoethyl]sulfanylquinoline-3-carbonitrile]>：GMI08-003
【００７４】
【化１８】
【００７５】
供試化合物としてGMI08-003（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【００７６】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図２に示す。図２に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【００７７】
【表２】
【００７８】
[実施例３]
N-シクロヘキシル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclohexyl-2-(3-methylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-024
【００７９】
【化１９】
【００８０】
供試化合物としてGMI08-024（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【００８１】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図３に示す。図３に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【００８２】
【表３】
【００８３】
[実施例４]
N-シクロヘキシル-2-(3-エチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclohexyl-2-(3-ethylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-052
【００８４】
【化２０】
【００８５】
供試化合物としてGMI08-052（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【００８６】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図４に示す。図４に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【００８７】
【表４】
【００８８】
[実施例５]
N-シクロペンチル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclopentyl-2-(3-methylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-073
【００８９】
【化２１】
【００９０】
供試化合物としてGMI08-073（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【００９１】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図５に示す。図５に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【００９２】
【表５】
【００９３】
[実施例６]
1-ピペリジン-1-イル-2-(3,5,7-トリメチルキノリン-2-イル)スルファニルエタノン<1-piperidin-1-yl-2-(3,5,7-trimethylquinolin-2-yl)sulfanylethanone>：GMI08-087
【００９４】
【化２２】
【００９５】
供試化合物としてGMI08-087（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【００９６】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図６に示す。図６に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【００９７】
【表６】
【００９８】
[実施例７]
2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-(オキソラン-2-イルメチル)アセトアミド<2-(4-metylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-(oxolan-2-ylmethyl)acetamide>：GMI08-096
【００９９】
【化２３】
【０１００】
供試化合物としてGMI08-096（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１０１】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図７に示す。図７に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１０２】
【表７】
【０１０３】
[実施例８]
【０１０４】
2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニル-6,7-ジヒドロ-5H-シクロペンタピリジン-3-カルボニトリル<2-(2-oxo-2-piperidin-1-ylethyl)sulfanyl-6,7-dihydro-5H-cyclopenta[b]pyridine-3-carbonitrile>：GMI08-003-002
【０１０５】
【化２４】
【０１０６】
供試化合物としてGMI08-003-002（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１０７】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図８に示す。図８に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１０８】
【表８】
【０１０９】
[実施例９]
【０１１０】
4,6-ジメチル-2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニルピリジン-3-カルボニトリル<4,6-dimethyl-2-(2-oxo-2-piperidine-1-ylethyl)sulfanylpyridine-3-carbonitrile>：GMI08-003-042
【０１１１】
【化２５】
【０１１２】
供試化合物としてGMI08-003-042（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１１３】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図９に示す。図９に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１１４】
【表９】
【０１１５】
[実施例１０]
2-(3-シアノ-8-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド<2-(3-cyano-8-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]acetamide>：GMI08-003-066
【０１１６】
【化２６】
【０１１７】
供試化合物としてGMI08-003-066（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１１８】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１０に示す。図１０に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１１９】
【表１０】
【０１２０】
[実施例１１]
2-(3-シアノ-7-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(3,4-ジメトキシフェニル)エチル]アセトアミド<2-(3-cyano-7-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-[2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethyl]acetamide>：GMI08-003-123
【０１２１】
【化２７】
【０１２２】
供試化合物としてGMI08-003-123（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１２３】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１１に示す。図１１に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１２４】
【表１１】
【０１２５】
[実施例１２]
2-(3-シアノ-6-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド<2-(3-cyano-6-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]acetamide>：GMI08-003-170
【０１２６】
【化２８】
【０１２７】
供試化合物としてGMI08-003-170（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１２８】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１２に示す。図１２に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１２９】
【表１２】
【０１３０】
[実施例１３]
N-シクロペンチル-2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclopentyl-2-(4-methylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-003-180
【０１３１】
【化２９】
【０１３２】
供試化合物としてGMI08-003-180（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１３３】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１３に示す。図１３に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１３４】
【表１３】
【０１３５】
[実施例１４]
2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-1-ピペリジン-1-イルエタノン<2-(4-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-1-piperidin-1-ylethanone>：GMI08-003-239
【０１３６】
【化３０】
【０１３７】
供試化合物としてGMI08-003-239（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１４に示す。図１４に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１３８】
【表１４】
【０１３９】
[実施例１５]
2-[2-(アゼパン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニル-5,7-ジメチルキノリン-3-カルボニトリル<2-[2-(azepan-1-yl)-2-oxoethyl]sulfanyl-5,7-dimethylquinoline-3-carbonitrile>：GMI08-102
【０１４０】
【化３１】
【０１４１】
供試化合物としてGMI08-102（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１４２】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１５に示す。図１５に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１４３】
【表１５】
【０１４４】
[実施例１６]
2-[(3-シアノ-4-ピリジン-4-イル-5,6,7,8-テトラヒドロ-キノリン-2-イル)スルファニル]アセトアミド<2-[(3-cyano-4-pyridin-4-yl-5,6,7,8-tetrahydroquinolin-2-yl)sulfanyl]acetamide>：GFI99-043-075
【０１４５】
【化３２】
【０１４６】
供試化合物としてGFI99-043-075（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１４７】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１６に示す。図１６に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１４８】
【表１６】
【図面の簡単な説明】
【０１４９】
【図１】供試化合物(GFI99-043)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図２】供試化合物(GMI08-003)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図３】供試化合物(GMI08-024)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図４】供試化合物(GMI08-052)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図５】供試化合物(GMI08-073)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図６】供試化合物(GMI08-087)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図７】供試化合物(GMI08-096)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図８】供試化合物(GMI08-003-002)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図９】供試化合物(GMI08-003-042)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１０】供試化合物(GMI08-003-066)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１１】供試化合物(GMI08-003-123)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１２】供試化合物(GMI08-003-170)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１３】供試化合物(GMI08-003-180)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１４】供試化合物(GMI08-003-239)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１５】供試化合物(GMI08-102)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１６】供試化合物(GFI99-043-075)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)の増殖阻害剤、またはヒト免疫不全ウイルス感染症治療用医薬組成物などに関する。
【背景技術】
【０００２】
後天性免疫不全症候群(AIDS)は、レトロウイルスであるヒト免疫不全ウイルス(HIV)の感染によって引き起こされる疾患である。HIVの感染初期はふつう無症状であるが、感染後、徐々に身体の免疫機能が低下し、日和見感染、がん、全身衰弱、および中枢神経変性を伴う進行性の疾患などが引き起こされる。HIVの感染からAIDSの発症までの期間は、一般に数年から数十年と長いが、一旦AIDSが発症すると、その致死率は非常に高い。そこで、AIDSの発症を防ぐために、HIVの増殖を阻害する化合物の探索が行われている。
【０００３】
HIVにはHIV-1とHIV-2の２つの型がある。これらのHIVは次のような生活環を持つ。先ず、HIVが細胞に感染すると、HIVの遺伝子RNAがウイルス粒子中に含まれる逆転写酵素によりDNAに逆転写されHIVインテグラーゼにより感染細胞のDNAに組み込まれる。次に、組み込まれたHIV遺伝子の5'端にあるLTR中のプロモーターからHIVのRNAが転写され遺伝子RNAになると同時に、そのRNAを鋳型としてウイルスタンパク質が合成される。合成されたウイルスタンパク質のいくつかはHIVプロテアーゼにより切断されて成熟タンパク質となり次世代のウイルス粒子を形成する。
【０００４】
以上のHIVの生活環を考慮すると、逆転写酵素を阻害すること、HIVインテグラーゼを阻害すること、LTRからのRNA転写を阻害すること、あるいはHIVプロテアーゼを阻害することなどにより、HIVの増殖を阻害することができると考えられる。
【０００５】
これまでに、逆転写酵素を阻害する、あるいはプロテアーゼを阻害するHIV増殖阻害剤等が知られている（例えば、特許文献１および２参照）。
【０００６】
【特許文献１】特許第3806090号公報
【特許文献２】特表2001-516350号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)は、これら従来のHIV増殖阻害剤に対する耐性を容易に獲得できる。したがって、HIVが従来の阻害剤に対する耐性を獲得した後にも使用できる、あるいはHIVが従来の阻害剤に対する耐性を獲得するまでの期間を延ばすことができる、新しいHIV増殖阻害剤が求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは上記課題を解決するために、鋭意検討した結果、所定の化合物にHIV増殖阻害活性があることを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は次のものである。
【０００９】
(1)2-[2-(フェニルメチルスルフォニル)エチルスルファニル]-5,6,7,8-テトラヒドロキノリン-3-カルボニトリル、
5,7-ジメチル-2-[2-(3-メチルピペリジン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニルキノリン-3-カルボニトリル、
N-シクロヘキシル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
N-シクロヘキシル-2-(3-エチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
N-シクロペンチル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
1-ピペリジン-1-イル-2-(3,5,7-トリメチルキノリン-2-イル)スルファニルエタノン、
2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-(オキソラン-2-イルメチル)アセトアミド、
2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニル-6,7-ジヒドロ-5H-シクロペンタピリジン-3-カルボニトリル、
4,6-ジメチル-2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニルピリジン-3-カルボニトリル、
2-(3-シアノ-8-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド、
2-(3-シアノ-7-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(3,4-ジメトキシフェニル)エチル]アセトアミド、
2-(3-シアノ-6-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド、
N-シクロペンチル-2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-1-ピペリジン-1-イルエタノン、
2-[2-(アゼパン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニル-5,7-ジメチルキノリン-3-カルボニトリル、および
2-[(3-シアノ-4-ピリジン-4-イル-5,6,7,8-テトラヒドロ-キノリン-2-イル)スルファニル]アセトアミド
からなる群から選択される少なくとも１つの化合物またはその塩を含む、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の増殖阻害剤。
(2)上記(1)に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症治療用医薬組成物。
(3)ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症治療用医薬組成物を製造するための、上記(1)に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
【発明の効果】
【００１０】
本発明により、新たなHIV増殖阻害剤が提供される。本発明の好ましい態様に係る阻害剤は、従来の阻害剤に対する耐性を獲得したHIVの増殖を効果的に阻害できる。本発明の別の好ましい態様に係る阻害剤は、HIVが従来の阻害剤に対する耐性を獲得するまでの期間を延ばすことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下、本発明を詳細に説明する。
なお、本明細書において引用された全ての刊行物、例えば先行技術文献、及び公開公報、特許公報その他の特許文献は、参照として本明細書に組み込まれる。
【００１２】
１．化合物
本発明は、HIV増殖阻害活性のある以下の化合物またはその塩を提供する。
(1)2-[2-(フェニルメチルスルフォニル)エチルスルファニル]-5,6,7,8-テトラヒドロキノリン-3-カルボニトリル<2-[2-(phenylmethylsulfonyl)ethylsulfanyl]-5,6,7,8-tetrahydroquinoline-3-carbonitrile>：GFI99-043
【００１３】
【化１】
【００１４】
(2)5,7-ジメチル-2-[2-(3-メチルピペリジン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニルキノリン-3-カルボニトリル<5,7-dimethyl-2-[2-(3-methylpiperidin-1-yl)-2-oxoethyl]sulfanylquinoline-3-carbonitrile>：GMI08-003
【００１５】
【化２】
【００１６】
(3)N-シクロヘキシル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclohexyl-2-(3-methylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-024
【００１７】
【化３】
【００１８】
(4)N-シクロヘキシル-2-(3-エチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclohexyl-2-(3-ethylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-052
【００１９】
【化４】
【００２０】
(5)N-シクロペンチル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclopentyl-2-(3-methylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-073
【００２１】
【化５】
【００２２】
(6)1-ピペリジン-1-イル-2-(3,5,7-トリメチルキノリン-2-イル)スルファニルエタノン<1-piperidin-1-yl-2-(3,5,7-trimethylquinolin-2-yl)sulfanylethanone>：GMI08-087
【００２３】
【化６】
【００２４】
(7)2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-(オキソラン-2-イルメチル)アセトアミド<2-(4-metylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-(oxolan-2-ylmethyl)acetamide>：GMI08-096
【００２５】
【化７】
【００２６】
(8)2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニル-6,7-ジヒドロ-5H-シクロペンタピリジン-3-カルボニトリル<2-(2-oxo-2-piperidin-1-ylethyl)sulfanyl-6,7-dihydro-5H-cyclopenta[b]pyridine-3-carbonitrile>：GMI08-003-002
【００２７】
【化８】
【００２８】
(9)4,6-ジメチル-2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニルピリジン-3-カルボニトリル<4,6-dimethyl-2-(2-oxo-2-piperidine-1-ylethyl)sulfanylpyridine-3-carbonitrile>：GMI08-003-042
【００２９】
【化９】
【００３０】
(10)2-(3-シアノ-8-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド<2-(3-cyano-8-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]acetamide>：GMI08-003-066
【００３１】
【化１０】
【００３２】
(11)2-(3-シアノ-7-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(3,4-ジメトキシフェニル)エチル]アセトアミド<2-(3-cyano-7-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-[2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethyl]acetamide>：GMI08-003-123
【００３３】
【化１１】
【００３４】
(12)2-(3-シアノ-6-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド<2-(3-cyano-6-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]acetamide>：GMI08-003-170
【００３５】
【化１２】
【００３６】
(13)N-シクロペンチル-2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclopentyl-2-(4-methylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-003-180
【００３７】
【化１３】
【００３８】
(14)2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-1-ピペリジン-1-イルエタノン<2-(4-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-1-piperidin-1-ylethanone>：GMI08-003-239
【００３９】
【化１４】
【００４０】
(15)2-[2-(アゼパン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニル-5,7-ジメチルキノリン-3-カルボニトリル<2-[2-(azepan-1-yl)-2-oxoethyl]sulfanyl-5,7-dimethylquinoline-3-carbonitrile>：GMI08-102
【００４１】
【化１５】
【００４２】
(16)2-[(3-シアノ-4-ピリジン-4-イル-5,6,7,8-テトラヒドロ-キノリン-2-イル)スルファニル]アセトアミド<2-[(3-cyano-4-pyridin-4-yl-5,6,7,8-tetrahydroquinolin-2-yl)sulfanyl]acetamide>：GFI99-043-075
【００４３】
【化１６】
【００４４】
上記化合物の塩としては、塩酸塩、硫酸塩、もしくはリン酸塩などの無機酸付加塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、もしくは蓚酸塩などの有機酸塩、またはナトリウム塩、カリウム塩、もしくはカルシウム塩などの塩が挙げられる。
【００４５】
上記化合物またはその塩の合成方法は、特に限定されず、公知の方法を用いて合成することができる。上記化合物またはその塩のうち、例えば、GFI99-043-075は次のようにして合成することができる。N-(1-cyclohexenyl)-morpholineおよび4-pyridinyl-methylenecyanothio(seleno)acetamideを２０℃の無水エタノール中で４時間攪拌する。その後、１０％水酸化カリウム水溶液を反応溶液に加え、５分経った後で2-Chloro-acetamideを加えて、５時間攪拌する。その後、反応溶液を濾過後、水、エタノール、ヘキサンで洗浄後、適宜精製を行うことにより、目的物質であるGFI99-043-075を例えば７５％の収率で得ることができる。（Dyachenko, V. D.; Litvinov, V. P. T. G. Shevchenko, Single stage synthesis of 2-alkylthio(seleno)-4-heteroaryl-3-cyano-5,6,7,8-tetrahydroquinolines., Chemistry of Heterocyclic Compounds (New York)(Translation of Khimiya Geterotsiklicheskikh Soedinenii), 33(10), 1203-1208; 1998）。
【００４６】
また、上記化合物またはその塩は、市販のものを入手しても良い。
例えば、GFI99-043は、ASINEX社から商品名BAS03395143として市販されている。
GMI08-003は、ASINEX社から商品名ASN05588029として市販されている。
GMI08-024は、ASINEX社から商品名ASN03799878として市販されている。
GMI08-052は、ASINEX社から商品名ASN05546408として市販されている。
GMI08-073は、ASINEX社から商品名ASN03799909として市販されている。
GMI08-087は、ASINEX社から商品名ASN03221372として市販されている。
GMI08-096は、ASINEX社から商品名BAS03434505として市販されている。
GMI08-003-002は、ASINEX社から商品名BAS01862082として市販されている。
GMI08-003-042は、ASINEX社から商品名BAS01862079として市販されている。
GMI08-003-066は、ASINEX社から商品名ASN05546041として市販されている。
GMI08-003-123は、ASINEX社から商品名ASN05545884として市販されている。
GMI08-003-170は、ASINEX社から商品名ASN05545551として市販されている。
GMI08-003-180は、ASINEX社から商品名BAS03434499として市販されている。
GMI08-003-239は、ASINEX社から商品名BAS02617839として市販されている。
GMI08-102は、ASINEX社から商品名ASN05588113として市販されている。
GFI99-043-075は、ASINEX社から商品名BAS02589988として市販されている。
【００４７】
２．ヒト免疫不全ウイルス(HIV)の増殖阻害剤
本発明は、上記化合物またはその塩（本明細書中で、本発明の化合物と呼ぶ場合がある。）を含む、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)の増殖阻害剤（本明細書中で、本発明の阻害剤と呼ぶ場合がある）を提供する。すなわち、本発明の阻害剤に含まれる化合物またはその塩は、GFI99-043、GMI08-003、GMI08-024、GMI08-052、GMI08-073、GMI08-087、GMI08-096、GMI08-003-002、GMI08-003-042、GMI08-003-066、GMI08-003-123、GMI08-003-170、GMI08-003-180、GMI08-003-239、GMI08-102、およびGFI99-043-075からなる群から選ばれる少なくとも１つの化合物またはその塩である。本発明の１つの態様の阻害剤に含まれる化合物またはその塩は、GFI99-043、GMI08-003、GMI08-024、GMI08-052、GMI08-073、GMI08-087、GMI08-096、GMI08-003-002、GMI08-003-042、GMI08-003-066、GMI08-003-123、GMI08-003-170、GMI08-003-180、GMI08-003-239、GMI08-102、もしくはGFI99-043-075、またはその塩である。本発明の１つの態様の阻害剤においては、本発明の化合物における塩は、医薬的に許容される塩である。医薬的に許容される塩としては、塩酸塩、硫酸塩、もしくはリン酸塩などの無機酸付加塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、もしくは蓚酸塩などの有機酸塩、またはナトリウム塩、カリウム塩、もしくはカルシウム塩などの塩が挙げられる。本発明の阻害剤は、HIV-1の増殖、好ましくは、HIV-1とHIV-2の両方の増殖を阻害することができる。
【００４８】
本発明の１つの態様では、本発明の阻害剤と併用して本発明の阻害剤のHIVの増殖阻害効果を高めることができる化合物をスクリーニングするために本発明の阻害剤を使用する。具体的には、候補化合物の存在下または非存在下、HIV感染細胞に、本発明の阻害剤を接触させて、細胞生存率を測定する。「接触」とは、HIV感染細胞と本発明の阻害剤とを同一の反応系または培養系に存在させることを意味し、例えば、HIV感染細胞を本発明の阻害剤の存在下で培養することなどが含まれる。尚、このとき、様々な濃度の候補化合物の存在下で、細胞生存率を測定するのが好ましい。そして、候補化合物の存在下での細胞生存率が、非存在下での細胞生存率と比較して高い時に（例えば、20%以上、30%以上、40%以上、50%以上、60%以上、70%以上、80%以上、90%以上、100%以上、150%以上、または200%以上高い時に）、候補化合物を、本発明の阻害剤と併用して本発明の阻害剤のHIVの増殖阻害効果を高めることができる化合物として選択する。細胞生存率は、公知の方法、例えば、MTTアッセイなどを用いて測定することができる。
【００４９】
本発明の別の態様では、哺乳動物(例えば、ヒト、サルなど)のHIV感染症を治療するために、経口または非経口で本発明の阻害剤を哺乳動物に適用する。本発明のある態様では、哺乳動物はヒトを除く哺乳動物である。
【００５０】
また、本発明の阻害剤は、使用目的に応じ、本発明の化合物に加えて、担体や添加物を含むものであってもよい。このような担体及び添加物として、水、酢酸、有機溶剤、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルスターチナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、キサンタンガム、アラビアゴム、カゼイン、寒天、ポリエチレングリコール、ジグリセリン、グリセリン、プロピレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、界面活性剤等が挙げられる。
【００５１】
本発明の阻害剤における本発明の化合物の使用量は、使用目的によって異なる。当業者であれば、使用目的に応じて、本発明の化合物の使用量を適宜選択することができる。
【００５２】
例えば、本発明の阻害剤と併用して本発明の阻害剤のHIVの増殖阻害効果を高めることができる化合物をスクリーニングするために本発明の阻害剤を用いる場合には、本発明の化合物の使用量を変動させて細胞生存率を測定するのが好ましい。この場合、本発明の化合物の使用量は、例えば、2μg/mL〜200μg/mL、好ましくは、10μg/mL〜100μg/mLである。
【００５３】
哺乳動物のHIV感染症を治療するために本発明の阻害剤を用いる場合には、本発明の化合物の使用量は、20 kｇの動物の場合、１日あたり、例えば、1mg〜600mg、好ましくは、20mg〜300mgである。
【００５４】
また、本発明は、HIV増殖阻害用の前記化合物またはその塩（本発明の化合物）を提供する。本発明の化合物の用法および用量は、前記阻害剤で説明したのと同様である。
【００５５】
また、本発明は、前記化合物またはその塩（本発明の化合物）を用いるHIV増殖阻害方法を提供する。ここで、「本発明の化合物を用いる」ことには、例えば、本発明の化合物と併用して本発明の化合物のHIVの増殖阻害効果を高めることができる化合物をスクリーニングするために本発明の化合物を使用すること、および哺乳動物のHIV感染症を治療するために、経口または非経口で本発明の化合物を動物に適用するために本発明の化合物を使用すること、などが含まれるが、これらに限定されない。本発明のHIV増殖阻害方法における本発明の化合物の用法および用量は、前記阻害剤で説明したのと同様である。
【００５６】
さらに、本発明は、HIV増殖阻害剤製造のための前記化合物またはその塩（本発明の化合物）の使用を提供する。本発明の使用における本発明の化合物の用法および用量は、前記HIV増殖阻害剤で説明したのと同様である。
【００５７】
３．医薬組成物
本発明は、前記化合物またはその塩（本発明の化合物）を含有する医薬組成物を提供する。本発明の医薬組成物に含まれる化合物またはその塩は、GFI99-043、GMI08-003、GMI08-024、GMI08-052、GMI08-073、GMI08-087、GMI08-096、GMI08-003-002、GMI08-003-042、GMI08-003-066、GMI08-003-123、GMI08-003-170、GMI08-003-180、GMI08-003-239、GMI08-102、およびGFI99-043-075からなる群から選ばれる少なくとも１つの化合物またはその塩である。本発明の１つの態様の医薬組成物に含まれる化合物またはその塩は、GFI99-043、GMI08-003、GMI08-024、GMI08-052、GMI08-073、GMI08-087、GMI08-096、GMI08-003-002、GMI08-003-042、GMI08-003-066、GMI08-003-123、GMI08-003-170、GMI08-003-180、GMI08-003-239、GMI08-102、もしくはGFI99-043-075またはその塩である。本発明の化合物における塩は、医薬的に許容される塩である。医薬的に許容される塩としては、塩酸塩、硫酸塩、もしくはリン酸塩などの無機酸付加塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、もしくは蓚酸塩などの有機酸塩、またはナトリウム塩、カリウム塩、もしくはカルシウム塩などの塩が挙げられる。本発明の医薬組成物に含まれる本発明の化合物は、HIV増殖阻害作用があるため、本発明の医薬組成物を投与することにより、HIV感染症を治療することができる。
【００５８】
HIV感染症は、HIVの感染により引き起こされる疾患であり、例えば、身体の免疫機能が低下することにより引き起こされる疾患が挙げられる。身体の免疫機能が低下することにより引き起こされる疾患としては、日和見感染(結核、カンジダ症、またはニューモシスチス肺炎など)、がん（カポジ肉腫、非ホジキンリンパ腫または原発性脳リンパ腫）、全身衰弱、および中枢神経変性を伴う進行性の疾患（痴呆症、または亜急性脳炎など）などが挙げられる。HIV感染症を治療することには、これらの疾患の発症を遅らせることも含まれる。
【００５９】
また、本発明の医薬組成物は、他のHIV感染症治療用医薬組成物と併用して、その治療効果を高めるため、あるいは耐性ウイルスの出現を遅らせるために使用しても良い。他のHIV感染症治療用医薬組成物としては、公知の医薬組成物を挙げることができ、例えば、ジドブジン（商品名Retrovir、Glaxo SmithKline）、ネビラピン（商品名Viramune、Boehringer）、ザルシタビン（商品名Hivid、中外）、ラミブジン（商品名Epivir、Glaxo SmithKline）、リトナビル（商品名Norvir、Abbott）、インジナビル（商品名Crixivan、万有）、またはサニルブジン（商品名Zerit、Bristol）からなる群から選択される少なくとも１つの医薬組成物を挙げることができる。好ましくは、ジドブジン（商品名Retrovir、Glaxo SmithKline）、ラミブジン（商品名Epivir、Glaxo SmithKline）、またはインジナビル（商品名Crixivan、万有）である
【００６０】
本発明の医薬組成物は、経口投与及び非経口投与のいずれの剤形をも採用することができる。
【００６１】
前記剤形は常法にしたがって製剤化することができ、本発明の化合物の他、医薬的に許容される担体や添加物を含むものであってもよい。このような担体及び添加物として、水、医薬的に許容される有機溶剤、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルスターチナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、キサンタンガム、アラビアゴム、カゼイン、寒天、ポリエチレングリコール、ジグリセリン、グリセリン、プロピレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、医薬添加物として許容される界面活性剤等が挙げられる。
【００６２】
上記添加物は、本発明の医薬組成物の剤型に応じて上記の中から単独で又は適宜組み合わせて選ばれる。剤形としては、経口投与の場合は、錠剤、カプセル剤、細粒剤、粉末剤、顆粒剤、液剤、シロップ剤等として、または適当な剤型により投与が可能である。非経口投与の場合は、注射剤等が挙げられる。注射剤型の場合は、例えば点滴等の静脈内注射等により全身又は局部的に投与することができる。
【００６３】
例えば、注射用製剤として使用する場合、本発明の医薬組成物を溶剤(例えば生理食塩水、緩衝液、ブドウ糖溶液等)に溶解し、これに適当な添加剤（ヒト血清アルブミン等）を加えたものを使用することができる。あるいは、使用前に溶解する剤形とするために凍結乾燥したものであってもよい。凍結乾燥用賦形剤としては、例えば、マンニトール、ブドウ糖等の糖アルコールや糖類を使用することができる。
【００６４】
本発明の医薬組成物または本発明の化合物の投与量は、年齢、性別、症状、投与経路、投与回数、剤型によって異なる。投与方法は、患者の年齢、症状により適宜選択する。投与量は、例えば成人(６０ｋｇ)の場合、1日当たり50〜2500ｍｇ、好ましくは300〜1800ｍｇ、より好ましくは600〜1200ｍｇである。投与方法は、患者の年齢、症状により適宜選択する。投与は、例えば１日当たり、１回または２〜４回に分けてもよい。
また、本発明医薬組成物または本発明の化合物を、他のHIV感染症治療用医薬組成物と併用する場合、本発明の化合物の量は、特に限定されず、他のHIV感染症治療用医薬組成物との個々の組み合わせによって異なるが、例えば、他のHIV感染症治療用医薬組成物の約0.1〜100倍（重量比）である。さらに好ましくは約1〜10倍（重量比）である。
【００６５】
また、本発明は、前記化合物またはその塩（本発明の化合物）を患者に投与することを含む、HIV感染症の治療方法を提供する。さらに、本発明は、本発明のHIV感染症治療用医薬組成物を製造するための、前記化合物またはその塩（本発明の化合物）の使用を提供する。HIV感染症の治療方法における、本発明の化合物の投与方法などは、上記医薬組成物で説明したのと同様である。また、本発明の化合物の使用における、医薬組成物の製造方法なども、上記医薬組成物で説明したのと同様である。
【実施例】
【００６６】
以下、本発明を実施例により具体的に説明する。
[概略]
ヒトT細胞由来の細胞株MT-4はHIVに感染すると細胞変性を起こして死滅する。一方、HIV増殖阻害活性のある供試化合物の存在下では、HIV感染MT-4細胞は死滅せずに、生き残ることができる。よって、供試化合物の存在下でのHIV感染MT-4細胞の生存率が高ければ、その供試化合物にHIV増殖阻害活性があると判断できる。
以下では、具体的には、96穴マイクロプレートで段階希釈した供試化合物にHIV感染MT-4細胞と非感染MT-4細胞をそれぞれ加え、5日間培養した。供試化合物非添加HIV非感染MT-4細胞の生存率を100%（コントロール）として、供試化合物の各濃度における細胞生存率をMTT法によって算出した（Nakashima et al. Antiviral Chemist Chemother 6; 271-280,1995）。そして、供試化合物のHIV増殖阻害活性（あるいはHIV感染阻止作用）と細胞障害活性を評価した。
【００６７】
[実施例１]
2-[2-(フェニルメチルスルフォニル)エチルスルファニル]-5,6,7,8-テトラヒドロキノリン-3-カルボニトリル<2-[2-(phenylmethylsulfonyl)ethylsulfanyl]-5,6,7,8-tetrahydroquinoline-3-carbonitrile>：GFI99-043
【００６８】
【化１７】
【００６９】
Nakashima et al. Antiviral Chmeist Chemother 6;271-280,1995に準じて、GFI99-043(ASINEX社)のHIV増殖阻害活性および細胞障害活性等を評価した。
【００７０】
細胞は、ヒトT細胞由来の細胞株MT-4を使用した。ウイルスは、HIV-1 IIIB株を使用した。培地は10% FCS含有RPMI1640培地 (Invitrogen社) を用いた。96穴マイクロプレート (Falcon社製) の2〜11列を用いて供試化合物を２倍系列で段階希釈した（100μL/well、最終濃度500μM, 250μM, 125μM, 62.5μM, 31.25μM, 15.625μM, 7.8125μM, 3.90625μM, 1.953125μM, または0μM）。MT-4細胞を3×105 cell/mLに調製し、プレートの上半分（B〜D行）にはHIV-1 IIIB株をmoi=0.01で感染させたMT-4細胞を、下半分（E〜G行）には非感染（mock感染）細胞を、それぞれ100μL/wellずつ加えた。5%CO2存在下、37℃で5日間培養した後、MTT試薬（0.75%）を加え、さらに２時間培養した。ウエルの底に沈んだ色素を吸わないように培地120μL/wellを除き、100μL/wellの色素溶解液を加えた。吸光度（波長540nm、対照690nm）を測定し、各薬剤濃度におけるHIV感染および非感染細胞の生存率を算出した。すなわち、供試化合物の濃度が0μMのときの非感染細胞の吸光度の値を細胞生存率100%として、吸光度の比から各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を計算した。その結果を図１に示す。図１中、縦軸が細胞生存率(% viabilility)であり、横軸が供試化合物の濃度である。また、HIV inf. MT-4がウイスル感染細胞であり、Mock inf. MT-4が非感染細胞である。図１に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
【００７１】
供試化合物のHIV増殖阻害活性を50%有効濃度値EC50および90%有効濃度値EC90で表わした。また、供試化合物の細胞障害活性を50%細胞障害濃度CC50で表わした。また、供試化合物の有効性を、有効係数(SI=CC50/EC50)で表わした。
EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【００７２】
【表１】
【００７３】
[実施例２]
5,7-ジメチル-2-[2-(3-メチルピペリジン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニルキノリン-3-カルボニトリル<5,7-dimethyl-2-[2-(3-methylpiperidin-1-yl)-2-oxoethyl]sulfanylquinoline-3-carbonitrile]>：GMI08-003
【００７４】
【化１８】
【００７５】
供試化合物としてGMI08-003（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【００７６】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図２に示す。図２に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【００７７】
【表２】
【００７８】
[実施例３]
N-シクロヘキシル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclohexyl-2-(3-methylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-024
【００７９】
【化１９】
【００８０】
供試化合物としてGMI08-024（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【００８１】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図３に示す。図３に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【００８２】
【表３】
【００８３】
[実施例４]
N-シクロヘキシル-2-(3-エチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclohexyl-2-(3-ethylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-052
【００８４】
【化２０】
【００８５】
供試化合物としてGMI08-052（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【００８６】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図４に示す。図４に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【００８７】
【表４】
【００８８】
[実施例５]
N-シクロペンチル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclopentyl-2-(3-methylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-073
【００８９】
【化２１】
【００９０】
供試化合物としてGMI08-073（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【００９１】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図５に示す。図５に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【００９２】
【表５】
【００９３】
[実施例６]
1-ピペリジン-1-イル-2-(3,5,7-トリメチルキノリン-2-イル)スルファニルエタノン<1-piperidin-1-yl-2-(3,5,7-trimethylquinolin-2-yl)sulfanylethanone>：GMI08-087
【００９４】
【化２２】
【００９５】
供試化合物としてGMI08-087（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【００９６】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図６に示す。図６に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【００９７】
【表６】
【００９８】
[実施例７]
2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-(オキソラン-2-イルメチル)アセトアミド<2-(4-metylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-(oxolan-2-ylmethyl)acetamide>：GMI08-096
【００９９】
【化２３】
【０１００】
供試化合物としてGMI08-096（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１０１】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図７に示す。図７に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１０２】
【表７】
【０１０３】
[実施例８]
【０１０４】
2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニル-6,7-ジヒドロ-5H-シクロペンタピリジン-3-カルボニトリル<2-(2-oxo-2-piperidin-1-ylethyl)sulfanyl-6,7-dihydro-5H-cyclopenta[b]pyridine-3-carbonitrile>：GMI08-003-002
【０１０５】
【化２４】
【０１０６】
供試化合物としてGMI08-003-002（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１０７】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図８に示す。図８に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１０８】
【表８】
【０１０９】
[実施例９]
【０１１０】
4,6-ジメチル-2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニルピリジン-3-カルボニトリル<4,6-dimethyl-2-(2-oxo-2-piperidine-1-ylethyl)sulfanylpyridine-3-carbonitrile>：GMI08-003-042
【０１１１】
【化２５】
【０１１２】
供試化合物としてGMI08-003-042（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１１３】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図９に示す。図９に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１１４】
【表９】
【０１１５】
[実施例１０]
2-(3-シアノ-8-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド<2-(3-cyano-8-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]acetamide>：GMI08-003-066
【０１１６】
【化２６】
【０１１７】
供試化合物としてGMI08-003-066（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１１８】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１０に示す。図１０に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１１９】
【表１０】
【０１２０】
[実施例１１]
2-(3-シアノ-7-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(3,4-ジメトキシフェニル)エチル]アセトアミド<2-(3-cyano-7-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-[2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethyl]acetamide>：GMI08-003-123
【０１２１】
【化２７】
【０１２２】
供試化合物としてGMI08-003-123（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１２３】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１１に示す。図１１に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１２４】
【表１１】
【０１２５】
[実施例１２]
2-(3-シアノ-6-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド<2-(3-cyano-6-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]acetamide>：GMI08-003-170
【０１２６】
【化２８】
【０１２７】
供試化合物としてGMI08-003-170（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１２８】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１２に示す。図１２に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１２９】
【表１２】
【０１３０】
[実施例１３]
N-シクロペンチル-2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド<N-cyclopentyl-2-(4-methylquinolin-2-yl)sulfanylacetamide>：GMI08-003-180
【０１３１】
【化２９】
【０１３２】
供試化合物としてGMI08-003-180（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１３３】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１３に示す。図１３に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１３４】
【表１３】
【０１３５】
[実施例１４]
2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-1-ピペリジン-1-イルエタノン<2-(4-methylquinolin-2-yl)sulfanyl-1-piperidin-1-ylethanone>：GMI08-003-239
【０１３６】
【化３０】
【０１３７】
供試化合物としてGMI08-003-239（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１４に示す。図１４に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１３８】
【表１４】
【０１３９】
[実施例１５]
2-[2-(アゼパン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニル-5,7-ジメチルキノリン-3-カルボニトリル<2-[2-(azepan-1-yl)-2-oxoethyl]sulfanyl-5,7-dimethylquinoline-3-carbonitrile>：GMI08-102
【０１４０】
【化３１】
【０１４１】
供試化合物としてGMI08-102（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１４２】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１５に示す。図１５に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１４３】
【表１５】
【０１４４】
[実施例１６]
2-[(3-シアノ-4-ピリジン-4-イル-5,6,7,8-テトラヒドロ-キノリン-2-イル)スルファニル]アセトアミド<2-[(3-cyano-4-pyridin-4-yl-5,6,7,8-tetrahydroquinolin-2-yl)sulfanyl]acetamide>：GFI99-043-075
【０１４５】
【化３２】
【０１４６】
供試化合物としてGFI99-043-075（ASINEX社）を用いたことを除き、実施例１と同様の方法で評価を行った。
【０１４７】
各濃度でのウイルス感染細胞および非感染細胞の細胞生存率を図１６に示す。図１６に示すように、MT-4細胞は、供試化合物の非存在下では、ウイルスの感染によって全て死滅した。しかし、供試化合物を添加すると、細胞生存率が上昇することが確認できた。
また、EC50、EC90、CC50およびSIを下記表に示す。
【０１４８】
【表１６】
【図面の簡単な説明】
【０１４９】
【図１】供試化合物(GFI99-043)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図２】供試化合物(GMI08-003)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図３】供試化合物(GMI08-024)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図４】供試化合物(GMI08-052)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図５】供試化合物(GMI08-073)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図６】供試化合物(GMI08-087)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図７】供試化合物(GMI08-096)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図８】供試化合物(GMI08-003-002)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図９】供試化合物(GMI08-003-042)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１０】供試化合物(GMI08-003-066)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１１】供試化合物(GMI08-003-123)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１２】供試化合物(GMI08-003-170)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１３】供試化合物(GMI08-003-180)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１４】供試化合物(GMI08-003-239)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１５】供試化合物(GMI08-102)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【図１６】供試化合物(GFI99-043-075)のHIV増殖阻害活性を示すグラフである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
2-[2-(フェニルメチルスルフォニル)エチルスルファニル]-5,6,7,8-テトラヒドロキノリン-3-カルボニトリル、
5,7-ジメチル-2-[2-(3-メチルピペリジン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニルキノリン-3-カルボニトリル、
N-シクロヘキシル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
N-シクロヘキシル-2-(3-エチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
N-シクロペンチル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
1-ピペリジン-1-イル-2-(3,5,7-トリメチルキノリン-2-イル)スルファニルエタノン、
2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-(オキソラン-2-イルメチル)アセトアミド、
2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニル-6,7-ジヒドロ-5H-シクロペンタピリジン-3-カルボニトリル、
4,6-ジメチル-2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニルピリジン-3-カルボニトリル、
2-(3-シアノ-8-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド、
2-(3-シアノ-7-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(3,4-ジメトキシフェニル)エチル]アセトアミド、
2-(3-シアノ-6-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド、
N-シクロペンチル-2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-1-ピペリジン-1-イルエタノン、
2-[2-(アゼパン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニル-5,7-ジメチルキノリン-3-カルボニトリル、および
2-[(3-シアノ-4-ピリジン-4-イル-5,6,7,8-テトラヒドロ-キノリン-2-イル)スルファニル]アセトアミド
からなる群から選択される少なくとも１つの化合物またはその塩を含む、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の増殖阻害剤。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症治療用医薬組成物。
【請求項３】
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症治療用医薬組成物を製造するための、請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
【請求項１】
2-[2-(フェニルメチルスルフォニル)エチルスルファニル]-5,6,7,8-テトラヒドロキノリン-3-カルボニトリル、
5,7-ジメチル-2-[2-(3-メチルピペリジン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニルキノリン-3-カルボニトリル、
N-シクロヘキシル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
N-シクロヘキシル-2-(3-エチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
N-シクロペンチル-2-(3-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
1-ピペリジン-1-イル-2-(3,5,7-トリメチルキノリン-2-イル)スルファニルエタノン、
2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-(オキソラン-2-イルメチル)アセトアミド、
2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニル-6,7-ジヒドロ-5H-シクロペンタピリジン-3-カルボニトリル、
4,6-ジメチル-2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)スルファニルピリジン-3-カルボニトリル、
2-(3-シアノ-8-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド、
2-(3-シアノ-7-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(3,4-ジメトキシフェニル)エチル]アセトアミド、
2-(3-シアノ-6-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-N-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]アセトアミド、
N-シクロペンチル-2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニルアセトアミド、
2-(4-メチルキノリン-2-イル)スルファニル-1-ピペリジン-1-イルエタノン、
2-[2-(アゼパン-1-イル)-2-オキソエチル]スルファニル-5,7-ジメチルキノリン-3-カルボニトリル、および
2-[(3-シアノ-4-ピリジン-4-イル-5,6,7,8-テトラヒドロ-キノリン-2-イル)スルファニル]アセトアミド
からなる群から選択される少なくとも１つの化合物またはその塩を含む、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の増殖阻害剤。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症治療用医薬組成物。
【請求項３】
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症治療用医薬組成物を製造するための、請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【公開番号】特開２０１０−５９０９９（Ｐ２０１０−５９０９９Ａ）
【公開日】平成２２年３月１８日（２０１０．３．１８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−２２６６４２（Ｐ２００８−２２６６４２）
【出願日】平成２０年９月４日（２００８．９．４）
【出願人】（５９６１６５５８９）学校法人 聖マリアンナ医科大学 (53)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年３月１８日（２０１０．３．１８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年９月４日（２００８．９．４）
【出願人】（５９６１６５５８９）学校法人 聖マリアンナ医科大学 (53)
【Ｆターム（参考）】
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