ヒドロキシビフェニルカルバルデヒドオキシム誘導体およびそのエストロゲン剤としての使用
本発明は、Ｒ１からＲ６およびＲ８までが本明細書において定義されるか、またはそれらの医薬上許容される塩であるところの、構造式（Ｉ）を有するエストロゲン受容体モジュレーターを提供する。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、４−ヒドロキシビフェニルカルバルデヒドオキシム誘導体、エストロゲン剤としてのその使用、およびその調製方法に関する。
【０００２】
（背景技術）
哺乳類の組織におけるエストロゲンの多面発現効果はよく報告されてきており、現在エストロゲンは多くの臓器系に影響を与えると評価されている［ＭｅｎｄｅｌｓｏｈｎおよびＫａｒａｓ、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３４０：１８１０−１８１１（１９９９年）；Ｅｐｐｅｒｓｏｎら、Ｐｓｙｃｈｏｓｏｍａｔｉｃ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ６１：６７６−６９７（１９９９年）；Ｃｒａｎｄａｌｌ、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｗｏｍｅｎｓ Ｈｅａｌｔｈ ＆ Ｇｅｎｄｅｒ Ｂａｓｅｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ８：１１５５−１１６６（１９９９年）；ＭｏｎｋおよびＢｒｏｄａｔｙ、Ｄｅｍｅｎｔｉａ ＆ Ｇｅｒｉａｔｒｉｃ Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ １１：１−１０（２０００年）；ＨｕｒｎおよびＭａｃｒａｅ、Ｊｏｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｒｅｂｒａｌ Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ ＆ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ２０：６３１−６５２（２０００年）；Ｃａｌｖｉｎ、Ｍａｔｕｒｉｔａｓ ３４：１９５−２１０（２０００年）；Ｆｉｎｋｉｎｇら、Ｚｅｉｔｓｃｈｒｉｆｔ ｆｕｒ Ｋａｒｄｉｏｌｏｇｉｅ ８９：４４２−４５３（２０００年）；Ｂｒｉｎｃａｔ、Ｍｅｔｕｒｉｔａｓ ３５：１０７−１１７（２０００年）；Ａｌ−Ａｚｚａｗｉ、Ｐｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ７７：２９２−３０４（２００１年）］。エストロゲンは、いくつかの方法で組織に影響を与え得る。最も特徴的な作用機構は、遺伝子転写を変化させる、エストロゲン受容体との相互作用である。エストロゲン受容体は、リガンド活性化転写因子であり、核内ホルモン受容体スーパーファミリーに属している。このファミリーの他のメンバーには、プロゲステロン、アンドロゲン、糖質コルチコイドおよび鉱質コルチコイド受容体を含む。リガンドと結合すると、これらの受容体は二量化し、ＤＮＡ上の特定の配列に直接結合することによって、または順次特定のＤＮＡ配列に直接結合する（ＡＰＩのような）他の転写因子と相互作用することによって、遺伝子転写を活性化し得る［ＭｏｇｇｓおよびＯｒｐｈａｎｉｄｅｓ、ＥＭＢＯ Ｒｅｐｏｒｔｓ２：７７５−７８１（２００１年）、Ｈａｌｌら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２７６：３６８６９−３６８７２（２００１年）；ＭｃＤｏｎｎｅｌｌ、Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ Ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｐ３５１−３６１（２０００年）］。「相互調節」タンパク質のクラスはまた、リガンド結合受容体と相互作用し、さらに転写活性を調節し得る［ＭｃＫｅｎｎａら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ ２０：３２１−３４４（１９９９年）］。エストロゲン受容体は、リガンド依存性およびそれに無関係の方法の両方で、ＮＦκＢ介在性の転写を阻害し得ることもまた示された［Ｑｕａｅｄａｃｋｅｒｓら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １４２：１１５６−１１６６（２００１年）；Ｂｈａｔら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ６７：２３３−２４０（１９９８年）；Ｐｅｌｚｅｒら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ＆ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ２８６：１１５３−７（２００１年）］。
【０００３】
エストロゲン受容体はまた、リン酸化によって活性化され得る。このリン酸化は、ＥＧＦのような成長因子によって媒介され、リガンドを用いずに遺伝子転写に変化を引き起こす［ＭｏｇｇｓおよびＯｒｐｈａｎｉｄｅｓ、ＥＭＢＯ Ｒｅｐｏｒｔｓ２：７７５−７８１（２００１年）；Ｈａｌｌら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２７６：３６８６９−３６８７２（２００１年）］。
【０００４】
エストロゲンが細胞に影響を与え得るそれほど特徴付けられていない手段は、いわゆる膜受容体を介するものである。そのような受容体が存在するかは論争のあるところであるが、エストロゲンが非常に迅速な細胞からの非ゲノム性反応を誘導することが周知である。これらの効果の導入に関与する分子の存在は明確には単離されていないが、それはエストロゲン受容体の核型に少なくとも関連していることを示唆する根拠がある［Ｌｅｖｉｎ、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ９１：１８６０−１８６７（２００１年）；Ｌｅｖｉｎ、Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ＆ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ １０：３７４−３７７（１９９９年）］。
【０００５】
二つのエストロゲン受容体が、現在までに発見されている。一番目のエストロゲン受容体は約１５年前にクローニングされ、現在ＥＲαと呼ばれている［Ｇｒｅｅｎら、Ｎａｔｕｒｅ ３２０：１３４−９（１９８６年）］。二番目は比較的最近発見され、ＥＲβと呼ばれている［Ｋｕｉｐｅｒら、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ ９３：５９２５−５９３０（１９９６年）］。ＥＲβに対する早期の作用は、様々なリガンドに対するアフィニティを決定することに集中しており、実際ＥＲαとのいくつかの相違がみられた。ＥＲβの組織分布は、齧歯類においてよくマッピングされており、ＥＲαとは一致していない。マウスおよびラットの子宮のような組織は大部分がＥＲαを発現しており、一方マウスおよびラットの肺は大部分がＥＲβを発現している［Ｃｏｕｓｅら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １３８：４６１３−４６２１（１９９７年）；Ｋｕｉｐｅｒら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １３８：８６３−８７０（１９９７年）］。同一の臓器内でさえ、ＥＲαおよびＥＲβの分布は区分され得る。例えば、マウスの卵巣においては、ＥＲβは顆粒膜細胞において高く発現しており、ＥＲαの発現は莢膜および間質細胞に限られている［ＳａｒおよびＷｅｌｓｃｈ、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １４０：９６３−９７１（１９９９年）；Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １４０：２５８１−２５９１（１９９９年）］。しかしながら、受容体が共に発現している実例があり、ＥＲαおよびＥＲβがヘテロ二量体を形成し得るという試験管内での研究による証拠もある［Ｃｏｗｌｅｙら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２７２：１９８５８−１９８６２（１９９７年）］。
【０００６】
最も強力な体内で作られるエストロゲンは、１７βエストラジオールである。多数の化合物が、１７βエストラジオールの活性に似るかまたはそれをブロックすることが述べられてきた。１７βエストラジオールとおおよそ同一の生物学的効果を有する化合物は、「エストロゲン受容体アゴニスト」と呼ばれている。１７βエストラジオールの効果をブロックする化合物は、１７βエストラジオールと組み合わせて与える場合、「エストロゲン受容体アンタゴニスト」と呼ばれる。実際には、エストロゲン受容体アゴニストおよびエストロゲン受容体アンタゴニストの活性の間には連続性があり、いくつかの化合物はある組織においてはエストロゲン受容体アゴニストとして作用し、他の組織においてはエストロゲン受容体アンタゴニストとして作用する。混合した活性を有するこれらの化合物は、選択性エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭＳ）と呼ばれ、医薬上有用な試薬である（例えば、ＥＶＩＳＴＡ）［ＭｃＤｏｎｎｅｌｌ、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ７：Ｓ１０−Ｓ１５（２０００年）；Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎら、Ｈｕｍａｎ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｕｐｄａｔｅ ６：２１２−２２４（２０００年）］。何故同一の化合物が細胞特異的な効果を有し得るのかについての正確な理由は解明されていないが、受容体の立体構造上および／または相互調節タンパク質の環境上の違いが示唆されている。
【０００７】
エストロゲン受容体が、リガンドを結合する際に異なった立体構造をとることが一定期間知られてきた。しかしながら、この変化の重要性および巧妙さは、ごく最近明らかになった。ＥＲαおよびＥＲβの三次元構造は、様々なリガンドと結晶化することによって解明され、受容体−相互調節タンパク質相互作用に必要となるタンパク質配列に立体的障害をもたらすエストロゲン受容体アンタゴニストの存在下で、へリックス１２の復位を明確に示す［Ｐｉｋｅら、Ｅｍｂｏ １８：４６０８−４６１８（１９９９年）；Ｓｈｉａｕら、Ｃｅｌｌ ９５：９２７−９３７（１９９８年）］。それに加えて、ファージディスプレイの技術は、異なるリガンドの存在下でエストロゲン受容体と相互作用するペプチドを同定するために用いられてきた［Ｐａｉｇｅら、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ ９６：３９９９−４００４（１９９９年）］。例えば、完全なエストロゲン受容体アゴニストの１７βエストラジオールおよびジエチルスチルベストロールに結合したＥＲαの間で区別する、ペプチドを同定した。ＥＲαおよびＥＲβに結合したクロミフェンの間で区別するために、他のペプチドを示した。これらのデータは、各々のリガンドが、明確な生物学的活性を有する可能性がある、特有で予測できない立体構造に、受容体を配置する可能性を秘めていることを示している。
【０００８】
上記したように、エストロゲンは、一連の生物学的工程に影響を与える。それに加えて、性差が認められている場合（例えば、疾患頻度、治療に対する反応等）、説明としては、男性および女性の間のエストロゲンレベルの相違を含めるも可能である。
【０００９】
（発明の開示）
本発明は、式：
【化１】
［式中：
Ｒ１およびＲ２は、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、置換されていてもよいフェニル、または置換されていてもよい低級アルキルであり；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＣＮ、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよい低級アルキル、または置換されていてもよい低級アルコキシであり；
Ｒ８は、各々独立に、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、または置換されていてもよい低級アルキルであり；
Ｒ９は置換されていてもよい低級アルキルである］
で示される化合物、または医薬上許容されるその塩またはプロドラッグに関する。一つの好ましい実施形態として、Ｒ８はＨである。
【００１０】
他の態様として、本発明は、式：
【化２】
の化合物に関する。
さらに他の態様として、本発明は、式：
【化３】
の化合物に関する。
【００１１】
さらなる態様として、本発明は、式：
【化４】
［式中：
Ｒ１は、ＯＨ、または置換されていてもよい低級アルコキシであり；
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＣＮ、フェニル、低級アルキル、低級アルコキシであり、そのフェニル、低級アルキルおよび低級アルコキシは所望により置換されていてよい］
で示される化合物、または医薬上許容されるその塩またはプロドラッグに関する。
【００１２】
他の態様として、本発明は、一つまたはそれより多くの本発明の化合物および医薬上許容されるキャリアを含む、医薬組成物に関する。
【００１３】
さらに他の態様として、本発明は、炎症性腸疾患のような疾患の治療または阻害における、本発明の化合物の使用法に関する。
【００１４】
（発明の詳細な記載）
本発明は、新規な４'−ヒドロキシビフェニルカルバルデヒドオキシム誘導体を提供する。好ましくはエストロゲン剤として作用する、これらの化合物は、（クローン病および大腸炎を含む）炎症性腸疾患のような疾患の治療または阻害に有用である。一の態様において、本発明は、式：
【化５】
［式中：
Ｒ１およびＲ２は、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、ＣＮであり、置換されていてもよいフェニル、または置換されていてもよい低級アルキルであり；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＣＮであり、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよい低級アルキル、または置換されていてもよい低級アルコキシであり；
Ｒ８は、各々独立に、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９であり、または置換されていてもよい低級アルキルであり；
およびＲ９は置換されていてもよい低級アルキルである］
で示される化合物、または医薬上許容されるその塩またはプロドラッグに関する。一つの好ましい実施形態として、Ｒ８はＨである。
【００１５】
本発明に従った化合物は、
【化６】
であってよい。
ある態様として、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は、各々独立に、Ｈ、Ｃｌ、Ｆ、メチルまたはメトキシであり、Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、Ｆまたはメチルである。他の態様として、本発明は、式：
【化７】
の化合物に関する。
ある態様として、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は、各々独立に、Ｈ、Ｃｌ、Ｆ、メチルまたはメトキシであり、Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、Ｆまたはメチルである。
【００１６】
さらに他の態様として、本発明は、式：
【化８】
［式中：
Ｒ１は、ＯＨ、または置換されていてもよい低級アルコキシであり；
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＣＮ、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよい低級アルキル、置換されていてもよい低級アルコキシである］
ところの化合物、または医薬上許容されるその塩またはプロドラッグに関する。ある実施形態として、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、各々独立に、Ｈ、メチル、Ｃｌ、Ｆまたはメトキシである。
【００１７】
医薬上許容される塩は、本発明の化合物が塩基部分を含む場合、有機酸および無機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、乳酸、クエン酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、マロン酸、マンデル酸、リンゴ酸、フタル酸、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸、硫酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、カンフルスルホン酸、および同じように知られた許容される酸から形成され得る。塩はまた、本発明の化合物が酸部分を含む場合、アルカリ金属塩（例えばナトリウム、リチウムまたはカリウム）、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、炭素数１−６のアルキルアンモニウム塩または各々のアルキル基に炭素数１−６のジアルキルアンモニウム塩、および各々のアルキル基に炭素数１−６のトリアルキルアンモニウム塩のような、有機塩基および無機塩基から形成され得る。
【００１８】
本明細書で用いられている「アルキル」という用語は、単独で用いられる場合もまたは他の基の一部として用いられる場合も、置換したまたは置換していない脂肪族炭水化物鎖を指し、他に明記していない限りは、１ないし１２の炭素原子、好ましくは１ないし６の炭素原子を含む直鎖および分枝鎖を含むが、それだけに限定されない。例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｉ−ブチルおよびｔ−ブチルは、「アルキル」という用語によって包括される。「アルキル」の定義の中に特に含まれるものは、所望により置換してよい脂肪族炭水化物鎖である。
【００１９】
本明細書の定義において用いられている炭素数は、炭素骨格および炭素分枝を指すが、アルコキシ置換基などのような置換基の炭素原子は含めない。
【００２０】
本明細書で用いられている「アルケニル」という用語は、単独で用いられる場合もまたは他の基の一部として用いられる場合も、置換したまたは置換していない脂肪族炭水化物鎖を指し、２ないし８の炭素原子を有し、少なくとも一つの二重結合を含む直鎖および分枝鎖を含むが、それだけに限定されない。好ましくは、アルケニル部分は、１または２つの二重結合を有する。そのようなアルケニル部分は、ＥまたはＺ立体構造で存在してよく、本発明の化合物は両方の立体構造を含む。「アルケニル」の定義の中に特に含まれるものは、所望により置換してよい脂肪族炭水化物鎖である。Ｏ、ＳまたはＮ−Ｒ１のような、アルケニルに結合したヘテロ原子は、二重結合に関与している炭素原子に結合すべきでない。
【００２１】
本明細書で用いられている「フェニル」という用語は、単独で用いられる場合もまたは他の基の一部として用いられる場合も、置換したまたは置換していないフェニル基を指す。
【００２２】
所望により置換したアルキル、アルケニルおよびフェニルは、一つまたはそれより多くの置換基によって置換してよい。適当な任意の置換基は、独立に、ニトロ、シアノ、−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アルキルアルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシアルコキシ、パーフルオロアルキル、パーフルオロアルコキシ、アリールアルキル、アルキルアリール、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、アルキルチオ、−Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、（Ｒ１１）（Ｒ１２）Ｎ−アルコキシアルキル、（Ｒ１１）（Ｒ１２）Ｎ−アルキルアリールオキシアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｓ−アリール（式中ｓ＝０−２）または−Ｓ（Ｏ）ｓ−ヘテロアリール（式中ｓ＝０−２）から選択してよい。本発明のある具体例として、アルキル、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルについての好ましい置換基には、ニトロ、シアノ、−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、ハロ、ヒドロキシ、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アルコキシアルキルおよびアルコキシカルボニルを含む。本発明のある具体例として、アリールおよびヘテロアリールについての好ましい置換基には、−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、アルキル、ハロ、パーフルオロアルキル、パーフルオロアルコキシ、アリールアルキルおよびアルキルアリールを含む。
【００２３】
アルキルまたはアルケニル部分を置換する場合、例えば、典型的には１、２、３または多置換されてよい。ハロゲン置換基の例としては、１−ブロモビニル、１−フルオロビニル、１，２−ジフルオロビニル、２，２−ジフルオロビニル、１，２，２−トリフルオロビニル、１，２−ジブロモエタン、１，２−ジフルオロエタン、１−フルオロ−２−ブロモエタン、ＣＦ２ＣＦ３、ＣＦ２ＣＦ２ＣＦ３などを含む。
ハロゲンという用語は、臭素、塩素、フッ素およびヨウ素を含む。
【００２４】
「低級アルキル」という用語は、１ないし６の炭素原子を有するアルキル基を指し、ある具体例として、１ないし３の炭素原子が好ましい。
本明細書で用いられている「低級アルコキシ」という用語は、Ｒが１ないし６の炭素原子のアルキル基であり、ある具体例として１ないし３の炭素原子が好ましいところの、Ｒ−Ｏ−基を指す。
【００２５】
本発明に従って用いる場合、本発明に包含される化合物または物質を供給するということに関する「供給」という用語は、直接そのような化合物または物質を投与するか、または体内で同等量の化合物または物質を形成するプロドラッグ、誘導体または類似物を投与することのいずれかを意味する。
【００２６】
本発明の化合物は、少なくとも部分的にエストロゲン不足または過剰が影響する、またはエストロゲン剤の使用によって治療または阻害できる可能性のある、健康状態、障害または病態の治療または阻害に有用なエストロゲン受容体モジュレーターとして用いられ得る。本発明の化合物は、生成される体内のエストロゲンのレベルが非常に減少している、閉経前、閉経期、閉経後の患者を治療する上で特に有用である。閉経は、一般に最後の自然の月経期間として定義され、血流中の循環エストロゲンの実質的な減少につながる卵巣機能の停止によって特徴づけられる。本明細書で用いられている、閉経はまた、外科的な、化学的な、または早発性の卵巣機能の低下または停止につながる疾患によって引き起こされる、エストロゲン生成の減少状態を含む。
【００２７】
従って、本発明の化合物は、骨の正味の損失につながる、個体の新しい骨組織の形成および古い組織の再吸収の不均衡から生じ得る、骨粗鬆症の治療または阻害において、骨の脱灰の阻害において有用である。そのような骨の涸渇は、ある範囲の個体、特に閉経後の女性、両側卵巣摘出術を受けた女性、長期コルチコステロイド療法を受けているまたは受けた人々、性腺発育不全の人々およびクッシング症候群に罹患している人々に生じる。歯および口の骨を含めた、骨についての特別な要求である、交換は、骨折、欠陥のある骨構造を有する個体、および骨関係の外科治療および／または人工装具の埋め込みを受けた人々における、これらの化合物を用いてもまた行い得る。上で述べた問題に加えて、これらの化合物は、骨関節症、低カルシウム血症、高カルシウム血症、ページェット病、骨軟化症、骨石灰脱失、多発性骨髄腫および骨組織に有害な影響を与える他の形の癌の治療または阻害に用いられ得る。
【００２８】
本発明の化合物はまた、前立腺肥大、子宮平滑筋腫、乳癌、子宮内膜症、子宮内膜癌、多嚢胞性卵巣症候群、子宮内膜ポリープ、良性胸部疾患、子宮腺筋症、卵巣癌、メラノーマ、前立腺癌、大腸癌、神経膠腫または星状細胞芽腫のような中枢神経系の癌を含む、良性または悪性の異常組織増殖の治療または阻害に有用である。
【００２９】
本発明の化合物は心臓保護性であり、コレステロール、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）およびＬＤＬレベルの低下において；高コレステロール血症；高脂血症；心臓血管疾患；アテローム性動脈硬化症；末梢血管疾患；再狭窄および血管攣縮の阻害または治療において；免疫関連血管傷害につながる細胞の事象に由来する血管壁傷害の阻害において有用である。この心臓血管保護の特性は、閉経後の患者をエストロゲンで治療する際に骨粗鬆症を防ぐために、また男性においてエストロゲン治療が望ましい場合に非常に重要である。
【００３０】
本発明の化合物はまた抗酸化剤であり、それゆえに、フリーラジカル誘発性病態の治療または阻害に有用である。抗酸化剤療法を認可すべきと示されている特定の健康状態は、癌、中枢神経系障害、アルツハイマー病、骨疾患、加齢、炎症性疾患、末梢血管疾患、関節リウマチ、自己免疫疾患、呼吸窮迫、肺気腫、再灌流後傷害の予防、ウィルス性肝炎、慢性活動性肝炎、結核、乾癬、全身性エリテマトーデス、成人呼吸窮迫症候群、中枢神経系外傷および脳卒中のある場合である。
【００３１】
本発明の化合物はまた、認知機能の向上をもたらす上で、老人性痴呆、アルツハイマー病、認知力低下、神経変性疾患の治療または阻害する上で、神経保護または認知機能の向上をもたらす上で有用である。
【００３２】
本発明の化合物はまた、炎症性腸疾患、潰瘍性直腸炎、クローン病および大腸炎；ホットフラッシュ、膣または外陰部の萎縮、萎縮性膣炎、膣の乾燥、掻痒、性交疼痛、排尿困難、頻尿、尿失禁、尿路感染症を含む血管運動神経症状、ホットフラッシュ、筋痛症、関節痛、不眠症、刺激過敏などを含む血管運動神経症状のような更年期障害；男性型禿頭症； 皮膚の萎縮；アクネ；ＩＩ型糖尿病；機能不全性子宮出血；および不妊を治療または阻害する上で有用である。
【００３３】
本発明の化合物は、白血病、子宮内膜剥離、慢性腎疾患または肝疾患、または凝固機能疾患または障害のような、無月経であることが都合のよい病態において有用である。
本発明の化合物は、特にプロゲスチンと結合した場合、避妊薬として用いられ得る。
【００３４】
特定の病態または障害の治療または阻害のために投与する場合、有効用量は、治療を受ける個人に関する様々な身体的因子とともに、利用する特定の化合物、投与法、健康状態、およびその治療する病気の重篤度に依存して変化する可能性がある。本発明の化合物の有効な投与は、約０．１ｍｇ／日から約１０００ｍｇ／日までの経口用量で行ってよい。投与は、一回の用量でまたは二回またはそれより多くに分割した用量で、好ましくは、約１０ｍｇ／日から約６００ｍｇ／日まで、より好ましくは、約５０ｍｇ／日から約６００ｍｇ／日までである。投与する一日の用量は、投与経路によって変化させることが望まれる。
【００３５】
そのような用量は、経口、インプラントを介するもの、非経口（静脈内、腹膜内および皮下注射を含む）、直腸内、鼻腔内、膣内および経皮投与を含めた、本明細書の活性のある化合物をレシピエントの血流に与える際に有用であるあらゆる方法で投与してよい。
【００３６】
本発明の活性のある化合物を含む経口処方は、錠剤、カプセル、バッカル形態、トローチ、ロゼンジ、および経口用液体、懸濁液または溶液を含めた、従来用いられてきたあらゆる経口用形態を含んでいてよい。カプセルは、医薬上許容されるデンプン（例えば、トウモロコシ、ポテトまたはタピオカのデンプン）、糖、人工甘味料、結晶性および微晶質のセルロースのような粉末にしたセルロース、小麦粉、ゼラチン、ゴムその他のような不活性の充填剤および／または希釈剤との、活性のある化合物の混合物を含んでいてよい。有用な錠剤の処方は、従来の圧縮、湿性顆粒化または乾性顆粒化法によって作られ、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、雲母、ラウリル硫酸ナトリウム、微晶質のセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ポリビニルピロリジン、ゼラチン、アルギン酸、アラビアゴム、キサンゴム、クエン酸ナトリウム、複雑なシリケート、炭酸カルシウム、グリシン、デキストリン、スクロース、ソルビトール、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、ラクトース、カオリン、マンニトール、塩化ナトリウム、雲母、乾燥デンプンおよび粉末にした糖を含むが、それだけに限定されない、医薬上許容される希釈剤、結合剤、潤滑剤、錠剤分解剤、表面修飾剤（界面活性剤を含む）、懸濁剤または安定剤を利用してよい。好ましい表面修飾剤には、非イオン性および陰イオン性表面修飾剤を含む。表面修飾剤の代表例には、ポリキサマー１８８、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、コロイド状二酸化ケイ素、リン酸塩、硫酸ドデシルナトリウム、珪酸アルミニウムマグネシウムおよびトリエタノールアミンを含むが、それだけに限定されない。本明細書の経口処方は、活性のある化合物の吸収性を変化させるために、標準的な遅延性または徐放性処方を利用してよい。経口処方はまた、必要となる適切な溶解剤または乳化剤を含む、水中またはフルーツジュース中に活性成分を投与することを含んでいてよい。
ある場合においては、化合物をエーロゾルの形態で気道に直接投与することが望ましい可能性がある。
【００３７】
本発明の化合物はまた、腸管外にまた腹膜内に投与してよい。遊離塩基または医薬上許容される塩のようなこれらの活性のある化合物の溶液または懸濁液は、ヒドロキシプロピルセルロースのような界面活性剤と適切に混合した水中で調製し得る。分散剤はまた、グリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびそれらの油中の混合物中で調製し得る。保存および使用の通常の条件下では、これらの調製は、微生物の増殖を防ぐための保存剤を含む。
【００３８】
注射使用に適した医薬形態には、無菌の水溶液または分散液、および無菌の注射溶液または分散液を即座に調製するための無菌の粉末を含む。あらゆる場合において、その形態は無菌でなければならず、容易に注射できる程度に流動性がなければならない。製造および保存の条件下で安定でなければならず、細菌および真菌のような微生物の混入作用に対して保護されなければならない。キャリアは、例えば水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコールおよび液状ポリエチレングリコール）、それらの適当な混合物および植物油を含む、溶媒または分散媒であってよい。
【００３９】
本明細書の目的のために、経皮投与は、体表面、および上皮および粘膜組織を含む体内通路の内側の裏打ちを介するあらゆる投与を含むと考えられている。そのような投与は、現在の化合物または医薬上許容されるそれらの塩を、ローション、クリーム、フォーム、パッチ、懸濁液、溶液および坐薬（直腸および膣用）の形で用いて実行してよい。
【００４０】
経皮投与は、活性のある化合物、および活性のある化合物に対して反応性が無く、皮膚に対して無毒で、皮膚を介して血流に全身吸収させるための薬剤の輸送を可能にするキャリアを含む、経皮パッチを用いることによってなされてよい。キャリアは、クリームおよび軟膏、ペースト、ゲルおよび閉鎖装置のようなあらゆる数々の形態をとっていてよい。クリームおよび軟膏は、水の中に油または油の中に水のタイプのいずれかの、粘性の液体または半固体の乳濁液であってよい。石油中または活性成分を含む親水性の石油中に散在している吸収性の粉末を含むペーストもまた、適している可能性がある。様々な閉鎖装置は、活性成分を含むキャリアまたは基質と共にあるいはなしで、活性成分を含む保存器を覆う半透膜のように、活性成分を血流に放出するために用いてよい。他の閉鎖装置は、文献において知られている。
【００４１】
坐薬処方は、坐薬の融点を変化させるためのワックス、およびグリセリンを付加してまたは付加しないで、カカオバターを含めた伝統的な材料から作ってよい。様々な分子量のポリエチレングリコールのような、水溶性の坐薬の主成分もまた用いてよい。
【００４２】
本発明の化合物の調製に用いられる試薬は、市販で入手するか、または文献に記述されている標準的な操作で調製するどちらかであってよい。
本発明のいくつかの代表例の調製は、次のスキーム１−１１に記述されている。
【００４３】
【化９】
【００４４】
【化１０】
【００４５】
【化１１】
【００４６】
【化１２】
【００４７】
【化１３】
【００４８】
【化１４】
【００４９】
【化１５】
【００５０】
【化１６】
【００５１】
【化１７】
【００５２】
【化１８】
【００５３】
【化１９】
【００５４】
実施例１
４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸
方法Ａ．−７８℃のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中の（４−ブロモ−フェノキシ）−tert−ブチル−ジメチルシラン（２０ｍＬ、２３．４８ｇ、０．０８２モル）の溶液に、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍの溶液の３９．２ｍＬ、０．０９８モル）を、窒素存在下で数分間攪拌しながらゆっくりと加えた。その溶液を−７８℃で１時間攪拌し、ついで室温に一夜加温した。その反応物を０℃まで冷却し、水（２０ｍＬ）および２ＮのＨＣｌ（２０ｍＬ）を、その反応混合物に加えた。その後全混合物を、２ＮＨＣｌ（３６０ｍＬ）を加えて１０分間攪拌した。混合物を、酢酸エチル（３×２５０ｍＬ）を用いて抽出した。合した有機層を、約５０ｍＬの体積に濃縮した。結晶化は冷ヘキサンで誘発され、固体の生成物を濾過によって収集し、真空下で乾燥させて表題の化合物１４．５ｇ（７０％）を白色の固体として得た：１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．１９（６Ｈ，ｓ），０．９４（９Ｈ，ｓ），６．８０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．６９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３６Ｈｚ），７．８７（２Ｈ，ｓ）。
【００５５】
実施例２
４'−ヒドロキシ−３−メチル［１，１'−ビフェニル］−４−カルボニトリル
方法Ｂ．４−ブロモ−２−メチルベンゾニトリル（１．８ｇ，９．１８ミリモル）、４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（３．０ｇ，１１．９ミリモル）、炭酸ナトリウム（２Ｍの水溶液の１３．８ｍＬ、２７．５ミリモル）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．５３ｇ，０．４６ミリモル）、およびエチレングリコールジメチルエステル（７０ｍＬ）の混合物を、加熱して一晩還流した。混合物を室温まで冷却し、水に注ぎ、その後酢酸エチル（３ｘ）を用いて抽出し、塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。シリカクロマトグラフィー（１５％−２５％ 酢酸エチル−ヘキサン）によって精製し、表題の化合物１．８１ｇ（９４％）を黄色を帯びた固体として得た：融点１７７−１７８℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．５２（３Ｈ，ｓ），６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５０Ｈｚ），７．６０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４９Ｈｚ），７．７１（１Ｈ，ｓ），７．７７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１２Ｈｚ），９．７９（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ２２２０ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２０８（Ｍ−Ｈ）−。
Ｃ１４Ｈ１１ＮＯについての分析：
予測値：Ｃ：８０．３６，Ｈ：５．３０，Ｎ：６．６９
実測値：Ｃ：７９．９１，Ｈ：５．２７，Ｎ：６．５７
【００５６】
実施例３
４'−ヒドロキシ−３−メチル［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒド
乾燥したトルエン中の、４'−ヒドロキシ−３−メチル［１，１'−ビフェニル］−４−カルボニトリル（５００ｍｇ，２．３９ミリモル）溶液を−７８℃まで冷却し、ジイソブチルアルミニウム水素化物（トルエン中の１．５Ｍ溶液４．０ｍＬ，５．９８ミリモル）を全て同時に加えた。反応混合物を３．５時間以上かけて室温まで温めた。メタノール（１．２ｍＬ）を加え、続いて０℃の水（１．２ｍＬ）を加え、混合物を室温で２０分間攪拌した。１ＮのＨＣｌ溶液をｐＨ＜７になるまで攪拌しながら加えた。混合物を酢酸エチル（３ｘ）を用いて抽出し、塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。シリカクロマトグラフィー（１５％−２５％ 酢酸エチル−ヘキサン）によって精製し、表題の化合物４５９ｍｇ（９１％）を白色の固体として得た：融点１６１−１６２℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．６７（３Ｈ，ｓ），６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４１Ｈｚ），７．５９−７．６５（４Ｈ，ｍ），７．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０３Ｈｚ），９．７８（１Ｈ，ｓ），１０．２２（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６８０ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２１１（Ｍ−Ｈ）−。
Ｃ１４Ｈ１２Ｏ２についての分析：
予測値：Ｃ：７９．２３，Ｈ：５．７０
実測値：Ｃ：７８．７９，Ｈ：５．９０
【００５７】
実施例４
４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、４−ブロモベンズアルデヒド（７３０ｍｇ，３．９７ミリモル）を４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（１．３ｇ，５．１６ミリモル）と反応させることによって調製し、６００ｍｇ（４８％）の白色の結晶を得た：１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．２４（６Ｈ，ｓ），１．０１（９Ｈ，ｓ），６．９４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５４Ｈｚ），７．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５６Ｈｚ），７．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１９Ｈｚ），７．５３（２Ｈ，ｄ，８．２０Ｈｚ），１０．０４（１Ｈ，ｓ）。
【００５８】
実施例５
４'− ヒドロキシ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒド
６ｍＬの乾燥したＤＭＦ中の、４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（３２０ｍｇ，１．０３ミリモル）、無水ＫＦ（１２０ｍｇ，２．０６ミリモル）および４８％水性ＨＢｒ（３５μｌ，０．３１ミリモル）の混合物を、窒素存在下、室温で１時間攪拌した。ＴＬＣは出発物質の存在を示し、それゆえにさらに４８％水性ＨＢｒ（３５μｌ，０．３１ミリモル）を反応物に加え、混合物を１．５時間攪拌し続けた。混合物を冷却しながら１Ｎの水性ＨＣｌ（３０ｍＬ）に注いだ。合した抽出物を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させ、生成物（１００％）は直接次の工程に用いた。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４３Ｈｚ），７．６３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４６Ｈｚ），７．８３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１６Ｈｚ），７．９４（２Ｈ，ｄ，８．０２Ｈｚ），９．７９（１Ｈ，ｓ），１０．０１（１Ｈ，ｓ）。
【００５９】
実施例６
トリクロロ−メタンスルホン酸３−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル
方法Ｄ．０℃のジクロロメタン８０ｍＬ中の、２−クロロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（１．３１ｇ，８．４ミリモル）およびピリジン（１．１ｍＬ，１３．４ミリモル）溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（１．８４ｍＬ，３．０８ｇ，１０．９ミリモル）を加えた。溶液をゆっくりと室温まで温め、２．５時間攪拌した。溶液を０℃まで冷却し、氷水と共に攪拌してあらゆる過剰の無水物を分解した。混合物を、飽和重炭酸ナトリウムを加えることによってわずかに塩基性にした。生じた層を分離し、水層をジクロロメタン（３×１００ｍＬ）を用いて抽出した。合した有機層を塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、真空下で溶媒を除去してオレンジオイルを生成し、それをシリカクロマトグラフィー（５％酢酸エチル−ヘキサン）によって精製して、表題の化合物１．８３ｇ（７６％）を透明で無色の油として得た：１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．３５Ｈｚ，Ｊ＝８．６４Ｈｚ），８．０４−８．０７（２Ｈ，ｍ），１０．３０（１Ｈ，ｓ）。
【００６０】
実施例７
トリクロロ−メタンスルホン酸２−フルオロ−４−ホルミル−フェニルエステル
表題の化合物を、方法Ｄに従って、３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（１．２ｇ，８．５６ミリモル）をトリフルオロメタンスルホン酸無水物（１．８７ｍＬ，３．１４ｇ，１１．１ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色の油を得、それを精製することなく、直接次の工程に用いた：１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．５３−７．５８（１Ｈ，ｍ），７．７７−７．８５（２Ｈ，ｍ），１０．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４５Ｈｚ）。
【００６１】
実施例８
４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−クロロ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロ−メタンスルホン酸３−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（１．７８ｇ，６．１８ミリモル）を４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（２．０３ｇ，８．０３ミリモル）と反応させることによって調製し、０．９２ｇ（４３％）の白色の固体として得た：融点３８−３９℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．２３（６Ｈ，ｓ），０．９７（９Ｈ，ｓ），６．９８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ），７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ），７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ），１０．３４（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２３１／２３３（Ｍ−Ｈ）−（脱保護化した生成物イオン）。
Ｃ１９Ｈ２３ＣｌＯ２Ｓｉについての分析：
予測値：Ｃ：６５．７８，Ｈ：６．６８
実測値：Ｃ：６５．５９，Ｈ：６．６０
【００６２】
実施例９および１０
方法Ｂに従って、トリフルオロメタンスルホン酸２−フルオロ−４−ホルミル−フェニルエステル（２．１ｇ，７．７２ミリモル）を、４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（２．１４ｇ，８．４９ミリモル）と反応させて、次の二つの化合物を生成した。
４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−フルオロ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
１．６２ｇ（６３％）のろう状の黄色を帯びた固体：１ＨＮＭＲ（アセトン−ｄ６）：δ０．２８（６Ｈ，ｓ），１．０２（９Ｈ，ｓ），７．０２−７．０６（２Ｈ，ｍ），７．５７−７．６０（２Ｈ，ｍ），７．７１−７．７８（２Ｈ，ｍ），７．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９１Ｈｚ，Ｊ＝１．５１Ｈｚ），１０．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７３Ｈｚ）；１３ＣＮＭＲ（アセトン−ｄ６）：δ−４．２９，１８．８０，２６．００，１１６．８２（ｄ，Ｊ＝２３．９０Ｈｚ），１２１．１５，１２６．６９（ｄ，Ｊ＝３．２５Ｈｚ），１２８．４２（ｄ，１．２１Ｈｚ），１３１．３０（ｄ，Ｊ＝３．４８Ｈｚ），１３２．２０（ｄ，Ｊ＝３．４４Ｈｚ），１３５．２７（ｄ，Ｊ＝１３．６１），１３８．０９（ｄ，Ｊ＝６．６４Ｈｚ），１５７．２３，１６０．６８（ｄ，Ｊ＝２４８．５６Ｈｚ），１９１．５１；ＩＲ１６９２ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３３１（Ｍ＋Ｈ）＋，３７２（Ｍ＋Ｈ＋ＡＣＮ）＋。
Ｃ１９Ｈ２３ＦＯ２Ｓｉについての分析：
予測値：Ｃ：６９．０６，Ｈ：７．０２
実測値：Ｃ：６９．７１，Ｈ：７．３４
２−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
０．３２ｇ（１９％）の黄色を帯びた固体：融点１４９−１５０℃；１ＨＮＭＲ（アセトン−ｄ６）：δ７．０８−７．１３（２Ｈ，ｍ），７．６２−７．６７（２Ｈ，ｍ），７．８０−７．９１（２Ｈ，ｍ），７．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９２Ｈｚ，Ｊ＝１．５８Ｈｚ），８．９３（１Ｈ，ｓ），１０．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７３Ｈｚ）；ＩＲ１６６９ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２１５（Ｍ−Ｈ）−１。
Ｃ１３Ｈ９ＦＯ２についての分析：
予測値：Ｃ：７２．２２，Ｈ：４．２０
実測値：Ｃ：７１．３８，Ｈ：４．１２
【００６３】
実施例１１
４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−クロロ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−クロロ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（４０５ｍｇ，１．１７ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１５４ｍｇ，２．２２ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた油を得、それを精製なしで次の工程に用いた：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３６２／３６４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００６４】
実施例１２
４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−フルオロ−［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−フルオロ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（４５０ｍｇ，１．３６ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１９０ｍｇ，２．７３ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体を得、それを精製なしで次の工程に用いた：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３４４（Ｍ−Ｈ）−，３４６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００６５】
実施例１３
３−フルオロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、４−ブロモ−２−フルオロ−カルバルデヒド（３ｇ，１４．８ミリモル）を４−メトキシフェニルボロン酸（２．７０ｇ，１７．８ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体３．２ｇ（９４％）を得た：融点８５−８６℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．８３（３Ｈ，ｓ），７．０６−７．０９（２Ｈ，ｍ），７．７０−７．７５（２Ｈ，ｍ），７．７９−７．８２（２Ｈ，ｍ），７．８８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ），１０．２２（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６８１ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２３１（Ｍ＋Ｈ）＋。
Ｃ１４Ｈ１１ＦＯ２についての分析：
予測値：Ｃ：７３．０３，Ｈ：４．８２
実測値：Ｃ：７２．９９，Ｈ：４．７３
【００６６】
実施例１４
３−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
方法Ｆ．０℃の塩化メチレン（３５ｍＬ）中の、３−フルオロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（０．９８６ｇ，４．２９ミリモル）の混合物に、三臭化ホウ素（塩化メチレン中１Ｎの溶液１０．７ｍＬ，１０．７ミリモル）をゆっくりと加えた。混合物をゆっくりと室温まで温め、一晩中攪拌した。水（４ｍＬ）を、氷水の水槽中で攪拌しながら、混合物に注入した。生じた混合物を水に注ぎ、酢酸エチル（３×）を用いて抽出した。合した有機層を塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させ、シリカカラムクロマトグラフィー（１５％−３０％酢酸エチル−ヘキサン）によって精製して、表題の化合物１５０ｍｇ（１６％）を白色の固体として得た。分析用試料は逆相分取用ＨＰＬＣによって供給された：融点１６４−１６６℃；１ＨＮＭＲ（アセトン−ｄ６）：δ７６．９８−７．０１（２Ｈ，ｍ），７．５６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．４９Ｈｚ，Ｊ＝１．６４Ｈｚ），７．６３−７．６６（１Ｈ，ｍ），７．６７−７．７０（２Ｈ，ｍ），７．８９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８５Ｈｚ），８．８８（１Ｈ，ｂｓ），１０．３１（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２１５（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ９ＦＯ２として：
予測値：Ｃ：７２．２２，Ｈ：４．２０
実測値：Ｃ：７１．８３，Ｈ：４．０４
【００６７】
実施例１５
トリフルオロ−メタンスルホン酸２−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル
表題の化合物を、方法Ｄに従って、３−クロロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（５ｇ，３１．９ミリモル）をトリフルオロメタンスルホン酸無水物（７．０ｍＬ，１１．７ｇ，４１．５ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色の油９．１５ｇ（１００％）を得、それを精製することなく、直接次の工程に用いた：１ＨＮＭＲ：δ７．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４８Ｈｚ），８．０７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５１Ｈｚ，Ｊ＝１．９３Ｈｚ），８．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９２Ｈｚ），１０．０４（１Ｈ，ｓ）。
【００６８】
実施例１６
２−クロロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロ−メタンスルホン酸２−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（５ｇ，１７．４ミリモル）を４−メトキシフェニルボロン酸（３．４４ｇ，２２．６ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体３．８３ｇ（８９％）を得た：融点８５−８７℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．８２（３Ｈ，ｓ），７．０７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８３Ｈｚ），７．４６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４５Ｈｚ），７．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８７Ｈｚ），７．９２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８７Ｈｚ，Ｊ＝１．５６Ｈｚ），８．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４９Ｈｚ）；１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ５５．１４，１１３．７２，１２７．８０，１２９．７２，１３０．４２，１３０．８２，１３２．１５，１３２．２１，１３６．１１，１４４．９０，１５９．３３，１９１．７３；ＩＲ１６９２ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ２４６／２４８Ｍ＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１１ＣｌＯ２として：
予測値：Ｃ：６８．１６，Ｈ：４．４９
実測値：Ｃ：６７．７６，Ｈ：４．３６
【００６９】
実施例１７
２'−クロロ−４'−（ジブロモメチル）−１，１'−ビフェニル−４−オール
表題の化合物を、方法Ｆに従って、２−クロロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（８００ｍｇ，３．２５ミリモル）を三臭化ホウ素（塩化メチレン中１Ｎの溶液８．１ｍＬ，８．１３ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体６００ｍｇ（５０％）を得た：融点１０７−１０８℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５２Ｈｚ），７．２９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５０Ｈｚ），７．４３（１Ｈ，ｓ），７．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１２Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０７Ｈｚ，Ｊ＝１．８３Ｈｚ），７．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７９Ｈｚ），９．７１（１Ｈ，ｂｓ）；１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ４０．６６，１１４．９４，１２５．６６，１２７．３４，１２８．１４，１３０．３９，１３０．８７，１３１．８０，１４０．９５，１４２．１４，１５７．３６；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３７３／３７５／３７７／３７９（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ９Ｂｒ２ＣｌＯとして：
予測値：Ｃ：４１．４８，Ｈ：２．４１
実測値：Ｃ：４１．６４，Ｈ：２．１４
【００７０】
実施例１８
トリフルオロ−メタンスルホン酸４−ホルミル−３−メトキシ−フェニルエステル
表題の化合物を、方法Ｄに従って、４−ヒドロキシ−２−メトキシベンズアルデヒド（３ｇ，１９．７ミリモル）をトリフルオロメタンスルホン酸無水物（４．３ｍＬ，７．２ｇ，２５．６ミリモル）と反応させることによって調製し、褐色のシロップを得、それを精製なしで次の工程に用いた：１ＨＮＭＲ：δ３．９７（３Ｈ，ｓ），７．２１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．６４Ｈｚ，Ｊ＝２．１７Ｈｚ），７．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２４Ｈｚ），７．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６４Ｈｚ），１０．３１（１Ｈ，ｓ）。
【００７１】
実施例１９
トリフルオロ−メタンスルホン酸４−ホルミル−２−メチル−フェニルエステル
表題の化合物を、方法Ｄに従って、４−ヒドロキシ−３−メチルベンズアルデヒド（２．５ｇ，１８．４ミリモル）をトリフルオロメタンスルホン酸無水物（４．０ｍＬ，６．７５ｇ，２３．９ミリモル）と反応させることによって調製し、褐色の油を得、それを精製なしで直接次の工程に用いた。
【００７２】
実施例２０
４'−ヒドロキシ−３−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロ−メタンスルホン酸４−ホルミル−３−メトキシ−フェニルエステル（１１．０ミリモル）を４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（３．５０ｇ，１３．８６ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体８８０ｍｇ（３５％、２工程にわたって）を得た：融点１５９−１６１℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＤＯ−ｄ６）：δ４．０１（３Ｈ，ｓ），６．８９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６２Ｈｚ），７．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１６Ｈｚ），７．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１５Ｈｚ），７．６６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６３Ｈｚ），７．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０９Ｈｚ），９．８０（１Ｈ，ｓ），１０．３４（１Ｈ，ｓ）；融点１５９−１６１℃；ＩＲ１６６０ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２２７（Ｍ−Ｈ）−，２２９（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１２Ｏ３として：
予測値：Ｃ：７３．６７，Ｈ：５．３０
実測値：Ｃ：７３．４４，Ｈ：４．９９
【００７３】
実施例２１
４'−ヒドロキシ−２−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロ−メタンスルホン酸４−ホルミル−２−メチル−フェニルエステル（９．３ミリモル）を４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（２．３５ｇ，９．３ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体１．１２ｍｇ（５７％、２工程にわたって）を得た：融点９４−９６℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：）：δ２．３３（３Ｈ，ｓ），６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５５Ｈｚ），７．２２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５１Ｈｚ），７．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ），７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８２Ｈｚ），７．８１（１Ｈ，ｓ），９．６５（１Ｈ，ｓ），１０．００（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６７０ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２１１（Ｍ−Ｈ）−，２１３（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：７９．２３，Ｈ：５．７０
実測値：Ｃ：７７．４９，Ｈ：５．６７
【００７４】
実施例２２
３−フルオロ−４−メトキシフェニルボロン酸
表題の化合物を、方法Ａに従って、４−ブロモ−２−フルオロアニソール（１０ｇ，０．０４９モル）をｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍの溶液２３．４ｍＬ，０．０５９モル）と、続いてトリイソプロピルホウ素（４５．２ｍＬ，３６．９ｇ，０．１９６モル）と反応させることによって調製し、白色の固体７．１ｇ（８５．２％）を得た：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ１６９（Ｍ−Ｈ）−。
【００７５】
実施例２３
３−クロロ−３'−フルオロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロ−メタンスルホン酸３−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（２．８ｇ，９．６２ミリモル）を３−フルオロ−４−メトキシフェニルボロン酸（１．８ｇ，１０．６ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体１．８７ｇ（７４％、２工程にわたって）を得た：融点１１６−１１８℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．９１（３Ｈ，ｓ），７．３０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．６６−７．６８（１Ｈ，ｍ），７．７９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．９１Ｈｚ，Ｊ＝２．４７Ｈｚ），７．８５−７．８７（１Ｈ，ｍ），７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２４Ｈｚ），７．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６５Ｈｚ），１０．３４（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６８８ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２６５／２６７（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１０ＣｌＦＯ２として：
予測値：Ｃ：６３．５３，Ｈ：３．８１
実測値：Ｃ：６３．２９，Ｈ：３．６３
【００７６】
実施例２４
３−クロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｆに従って、３−クロロ−３'−フルオロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（９９０ｍｇ，３．７５ミリモル）を三臭化ホウ素（塩化メチレン中１Ｎの溶液１１．２５ｍＬ，１１．２５ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体９４０ｍｇ（１００％）を得た。化合物は、精製なしで次の工程に用いた。分析用試料はＨＰＬＣ精製によって得られた：融点２０６−２０８℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．０６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．５１−７．５３（１Ｈ，ｍ），７．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４７Ｈｚ，Ｊ＝１２．６３Ｈｚ），７．８１−７．８３（１Ｈ，ｍ），７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ），７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６６Ｈｚ），１０．３２９（１Ｈ，ｓ），１０．３３０（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６６７ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２４９／２５１（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ８ＣｌＦＯ２として：
予測値：Ｃ：６２．２９，Ｈ：３．２２
実測値：Ｃ：６１．９７，Ｈ：３．２１
【００７７】
実施例２５
３−クロロ−３' ，５'−ジフルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロ−メタンスルホン酸３−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（１ｇ，３．５ミリモル）を３' ，５'−ジフルオロ−４−tert−ブチルジメチルシリオキシボロン酸（１．１ｇ，３．８ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体０．５６ｇ（６０％）を得た：融点２３３−２３５℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．６４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８５Ｈｚ），７．８５−７．９１（２Ｈ，ｍ），７．９８（１Ｈ，ｓ），１０．３３（１Ｈ，ｓ），１０．７０（１Ｈ，ｂｓ）；ＩＲ１６６５ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（２６７／２６９）（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ７ＣｌＦ２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：５８．１２，Ｈ：２．６３
実測値：Ｃ：５７．７９，Ｈ：２．７２
【００７８】
実施例２６および２７
トリフルオロ−メタンスルホン酸３−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（３．７８ｇ，１３．１２ミリモル）を、方法Ｂに従って、４−メトキシ−２−メチルフェニルボロン酸（２．６１ｇ，１５．７ミリモル）と反応させ、二つの化合物を生成した：
３−クロロ−４'−メトキシ−２'−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
２．１８ｇ（６４％）の白色の固体：１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．２６（３Ｈ，ｓ），３．７９（３Ｈ，ｓ），６．８８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４１Ｈｚ，Ｊ＝２．６６Ｈｚ），６．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．５０Ｈｚ），７．２３（１Ｈ，Ｊ＝８．４０Ｈｚ），７．５０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９３Ｈｚ，Ｊ＝１．３２Ｈｚ），７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５３Ｈｚ），７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５７Ｈｚ），１０．３６（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６８２ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２６１／２６３（Ｍ＋Ｈ）＋，３７２（Ｍ＋Ｈ＋ＡＣＮ）＋。
元素分析：Ｃ１５Ｈ１３ＣｌＯ２として：
予測値：Ｃ：６９．１０，Ｈ：５．０３
実測値：Ｃ：６９．１３，Ｈ：４．７３
４，４' '−ジメトキシ− ２，２' '−ジメチル−１，１'： ３'，１' '−テルフェニル−４'−カルバルデヒド
０．５６ｇ（１２％）無色；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．１０（３Ｈ，ｓ），２．２９（３Ｈ，ｓ），３．７８（３Ｈ，ｓ），３．８０（３Ｈ，ｓ），６．８５−６．８８（２Ｈ，ｍ），６．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３８Ｈｚ），６．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３８Ｈｚ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３２Ｈｚ），７．２４−７．２５（２Ｈ，ｍ），７．５２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．７４Ｈｚ，Ｊ＝１．７８Ｈｚ），７．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３３Ｈｚ），９．６８（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６７９ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３４７（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ２３Ｈ２２Ｏ３として：
予測値：Ｃ：７９．７４，Ｈ：６．４０
実測値：Ｃ：７９．２５，Ｈ：６．０５
【００７９】
実施例２８
３−クロロ−４'−ヒドロキシ−２'−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
密封したチューブの中の３−クロロ−４'−メトキシ−２'−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（１．０ｇ，３．８４ミリモル）および塩酸ピリジニウム（６ｇ）を、攪拌しながら１時間１９５℃で加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、２ＮのＨＣｌ溶液および酢酸エチルと共に攪拌した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（ｘ２）を用いて抽出した。合した有機層を塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させ、暗緑色の固体（１ｇ）を生成した。生成物は、さらなる何らかの精製なしで用いた。分析用試料は、ＨＰＬＣ精製によって得られ、白色の固体を得た：融点１２５−１２７℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．２１（３Ｈ，ｓ），６．６８−６．７２（２Ｈ，ｍ），７．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１５Ｈｚ），７．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８９Ｈｚ），７．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４８Ｈｚ），７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９８Ｈｚ），９．６２（１Ｈ，ｓ），１０．２＝３５（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２４５／２４７（Ｍ−Ｈ）−，２４７／２４９（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１１ＣｌＯ２として：
予測値：Ｃ：６８．１６，Ｈ：４．４９
実測値：Ｃ：６７．６３，Ｈ：４．４３
【００８０】
実施例２９
４'−ヒドロキシ−３−メチル［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム
１５ｍＬの無水メタノール中の、４'−ヒドロキシ−３−メチル［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒド（３１０ｍｇ，１．４６ミリモル），ヒドロキシルアミン塩酸塩（２０３ｍｇ，２．９２ミリモル）およびピリジン（２３６μｌ，２．９２ミリモル）の混合物を、２．５時間還流した。溶媒を減圧下で除去し、混合物を酢酸エチルおよび水中に溶解し、酢酸エチル（ｘ３）を用いて抽出し、塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過した。溶媒を蒸発させ、再結晶化（酢酸エチル、アセトンおよびヘキサン）によって精製し、表題の化合物１７７ｍｇ（５３％）を黄色を帯びた固体として得た：融点１９５−１９７℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．４３（３Ｈ，ｓ），６．８４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４８Ｈｚ），７．４２−７．４５（２Ｈ，ｍ），７．５２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５１Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．００Ｈｚ），８．３２（１Ｈ，ｓ），９．６０（１Ｈ，ｓ），１１．２５（１Ｈ，ｓ）；１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１９．６２，１１５．６０，１２３．４０，１２６．６０，１２７．５６，１２７．９９，１２９．０５，１３０．０３，１３６．３４，１４０．４３，１４６．８０，１５７．２４；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２２６（Ｍ−Ｈ）−，２２８（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１３ＮＯ２として：
予測値：Ｃ：７３．９９，Ｈ：５．７７，Ｎ：６．１６
実測値：Ｃ：７３．８１，Ｈ：５．７５，Ｎ：６．０４
【００８１】
実施例３０
４'−ヒドロキシ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、４'−ヒドロキシ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒド（１．０３ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１４０ｍｇ，２ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体１９３ｍｇ（７９％，２工程にわたって）を得た：融点２０７−２１０℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３７Ｈｚ），７．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３９Ｈｚ），７．６２（４Ｈ，ｓ），８．１５（１Ｈ，ｓ），９．６２（１Ｈ，ｓ），１１．２１（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２１２（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ１１ＮＯ２として：
予測値：Ｃ：７３．２３，Ｈ：５．２０，Ｎ：６．５７
実測値：Ｃ：７２．７８，Ｈ：５．４１，Ｎ：６．３８
【００８２】
実施例３１
３−クロロ−４'−ヒドロキシ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム
方法Ｅ．フッ化テトラブチルアンモニウム（テトラヒドロフラン中の１．０Ｍ溶液１．２９ｍＬ、１．２９３ミリモル）を、テトラヒドロフラン１０ｍＬ中の４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−クロロ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム（１．１７ミリモル）溶液に加えた。混合物を室温で１０分間攪拌し、その後酢酸エチルおよび水に注いだ。生じた層を分離し、水層を酢酸エチル（３ｘ）を用いて抽出した。合した有機層を塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を真空下で除去した。シリカクロマトグラフィー（２０％−３０％酢酸エチル−ヘキサン）によって精製し、表題の化合物０．１８６ｍｇ（６４％）を黄色を帯びた固体として得た：融点１８７−１８９℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５５Ｈｚ），７．５６−７．６３（３Ｈ，ｍ），７．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６０Ｈｚ），７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２６Ｈｚ），８．３６（１Ｈ，ｓ），９．７５（１Ｈ，ｓ），１１．６６（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２４６（Ｍ−Ｈ）−，２４８（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ１０ＣｌＮＯ２として：
予測値：Ｃ：６３．０４，Ｈ：４．０７，Ｎ：５．６６
実測値：Ｃ：６２．９６，Ｈ：４．１０，Ｎ：５．４２
【００８３】
実施例３２
２−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｅに従って、４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−フルオロ−［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム（１．０２ミリモル）をフッ化テトラブチルアンモニウム（テトラヒドロフラン中の１．０Ｍ溶液１．１２ｍＬ、１．１２ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体１９８ｍｇ（８４％）を得た：融点１７８−１８０℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８４−６．８９（２Ｈ，ｍ），７．３９−５．５４（５Ｈ，ｍ），８．１７（１Ｈ，ｓ），９．７１（１Ｈ，ｓ），１１．４３（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２３０（Ｍ−Ｈ）−，２３２（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ１０ＦＮＯ２として：
予測値：Ｃ：６７．５３，Ｈ：４．３６，Ｎ：６．０６
実測値：Ｃ：６７．１３，Ｈ：４．１１，Ｎ：６．００
【００８４】
実施例３３
３−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、３−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（１５４ｍｇ，０．７１３ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（９９ｍｇ，１．４３ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体１５６ｍｇ（９５％）を得た：融点１８１−１８３℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８４−６．８７（２Ｈ，ｍ），７．４８−７．５３（２Ｈ，ｍ），７．５７−７．６０（２Ｈ，ｍ），７．７６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１４Ｈｚ），８．２２（１Ｈ，ｓ），９．７４（１Ｈ，ｓ），１１．５６（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２３０（Ｍ−Ｈ）−，２３２（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ１０ＦＮＯ２として：
予測値：Ｃ：６７．５３，Ｈ：４．３６，Ｎ：６．０６
実測値：Ｃ：６８．１０，Ｈ：４．２８，Ｎ：６．０１
【００８５】
実施例３４
２−クロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、２'−クロロ−４'−（ジブロモメチル）−１，１'−ビフェニル−４−オール（２７０ｍｇ，０．７２２ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１８５ｍｇ，２．６６ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体１６０ｍｇ（９０％）を得た：融点１７８−１７９℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５４Ｈｚ），７．２８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５１Ｈｚ），７．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９８Ｈｚ），７．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６５Ｈｚ，Ｊ＝１．４２Ｈｚ），７．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．３４Ｈｚ），８．１８（１Ｈ，ｓ），９．６７（１Ｈ，ｓ），１１．４５（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２４６／２４８（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ１０ＣｌＮＯ２として：
予測値：Ｃ：６３．０４，Ｈ：４．０７，Ｎ：５．６６
実測値：Ｃ：６３．０７，Ｈ：３．９９，Ｎ：５．６７
【００８６】
実施例３５
４'−ヒドロキシ−３−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、４'−ヒドロキシ−３−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（２２５ｍｇ，０．９８６ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１３７ｍｇ，１．９７ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体２１０ｍｇ（８８％）を得た：融点２２８−２３０℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．９１（３Ｈ，ｓ），６．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ），７．２１（１Ｈ，ｓ），７．５６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ），７．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９８Ｈｚ），８．２８（１Ｈ，ｓ），９．６３（１Ｈ，ｓ），１１．１９（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２４２（Ｍ−Ｈ）−，２４４（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１３ＮＯ３として：
予測値：Ｃ：６９．１２，Ｈ：５．３９，Ｎ：５．７６
実測値：Ｃ：６８．８７，Ｈ：５．２９，Ｎ：５．６４
【００８７】
実施例３６
４'−ヒドロキシ−２−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、４'−ヒドロキシ−２−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（３５０ｍｇ，１．６５ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（２３０ｍｇ，３．３０ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体３６０ｍｇ（９６％）を得た：融点１６９−１７１℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．２５（３Ｈ，ｓ），６．８２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５２Ｈｚ），７．１６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４５Ｈｚ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８４Ｈｚ），７．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９３Ｈｚ），７．４７（１Ｈ，ｓ），８．１１（１Ｈ，ｓ），９．５２（１Ｈ，ｓ），１１．１９（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２２６（Ｍ−Ｈ）−，２２８（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１３ＮＯ２として：
予測値：Ｃ：７３．９９，Ｈ：５．７７，Ｎ：６．１６
実測値：Ｃ：７３．７２，Ｈ：５．６３，Ｎ：６．３７
【００８８】
実施例３７
３−クロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、３−クロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（１．５２ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（２３３ｍｇ，３．３４ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体２６０ｍｇ（６６％）を得た：融点１９８−２００℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．０３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．４１−７．４３（１Ｈ，ｍ），７．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．９１Ｈｚ，Ｊ＝２．２０Ｈｚ），７．６４−７．６６（１Ｈ，ｍ），７．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９２Ｈｚ），７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２４Ｈｚ），８．３６（１Ｈ，ｓ），１０．１６（１Ｈ，ｂｓ），１１．６８（１Ｈ，ｂｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２６４／２６６（Ｍ−Ｈ）−，２６６／２６８（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ９ＣｌＦＮＯ２として：
予測値：Ｃ：５８．７７，Ｈ：３．４１，Ｎ：５．２７
実測値：Ｃ：５８．６７，Ｈ：３．６５，Ｎ：４．９９
【００８９】
実施例３８
３−クロロ−３'， ５'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、３−クロロ−３'， ５'−ジフルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（２００ｍｇ，０．７４６ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１５６ｍｇ，２．２４ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体１００ｍｇ（４７％）を得た：融点２１６−２１９℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．５４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５１Ｈｚ），７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９７Ｈｚ），７．８４−７．８６（２Ｈ，ｍ），８．３７（１Ｈ，ｓ），１０．５２（１Ｈ，ｓ），１１．７４（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２８２／２８４（Ｍ−Ｈ）−，２８４／２８６（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ８ＣｌＦ２ＮＯ２として：
予測値：Ｃ：５５．０５，Ｈ：２．８４，Ｎ：４．９４
実測値：Ｃ：５４．９６，Ｈ：３．０２，Ｎ：４．７５
【００９０】
実施例３９
３−クロロ−４'−ヒドロキシ−２'−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、無水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）およびメタノール中で、３−クロロ−４'−ヒドロキシ−２'−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（５００ｍｇ，２．０３ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（４２５ｍｇ，６．１０ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体３５０ｍｇ（５７％，２工程にわたって）を得た：融点１６９−１７１℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．１９（３Ｈ，ｓ），６．６５−６．７０（２Ｈ，ｍ），７．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１４Ｈｚ），７．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０５Ｈｚ），７．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４０Ｈｚ），７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ），８．３８（１Ｈ，ｓ），９．５１（１Ｈ，ｓ），１１．６９（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２６０／２６２（Ｍ−Ｈ）−，２６２／２６４（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１２ＣｌＮＯ２として：
予測値：Ｃ：６４．２５，Ｈ：４．６２，Ｎ：５．３５
実測値：Ｃ：６３．８７，Ｈ：４．４３，Ｎ：５．３１
【００９１】
実施例４０
（２，６−ジクロロ−４−メトキシ−フェニル）−メタノール
３，５ジクロロアニソール（１６．３９ｇ，９２．５９ミリモル），ＨＣｌ（濃縮した溶液２５０ｍＬ）および硫酸（濃縮した溶液２．５ｍＬ）の混合物を、６０℃で一晩中攪拌した。混合物を室温まで冷却し、有機層を除去した。水層をジクロロメタン（２ｘ１００ｍＬ）を用いて抽出した。合した有機層を水で洗浄し、溶媒を蒸発させることによって除去した。残存している油に、ＮａＯＨ（１Ｎ溶液１８０ｍＬ）およびジオクサン（８５ｍＬ）を加えた。混合物を３時間還流しながら攪拌し、室温まで冷却した。有機層を除去し、水層をジクロロメタン（３ｘ１００ｍＬ）を用いて抽出した。合した有機層を水で洗浄し、塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過した。残渣をシリカ（９０％ヘキサン−１０％酢酸エチル）上で精製し、表題の化合物５．８２ｇ（３０％）を白色の固体として得た：融点７１−７２℃；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．８８（１Ｈ，ｓ），３．７３（３Ｈ，ｓ），４．８１（２Ｈ，ｓ），６．８１（２Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ２０６／２０８／２１０（Ｍ＋）。
元素分析：Ｃ８Ｈ８Ｃｌ２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：４６．４１，Ｈ：３．８９
実測値：Ｃ：４６．３８，Ｈ：３．６９
【００９２】
実施例４１
２，６−ジクロロ−４−メトキシ−ベンズアルデヒド
ベンゼン（１００ｍＬ）中の、（２，６−ジクロロ−４−メトキシ−フェニル）−メタノール（５．６９ｇ，２７．４９ミリモル）およびＭｎＯ２（１５ｇ）の懸濁液を、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ ｔｒａｐを利用して、還流しながら一晩中攪拌した。懸濁液を室温まで冷却し、Ｃｅｌｉｔｅによって濾過し、溶媒を蒸発させることによって除去し、粗製白色固体４．６９ｇ（８３％）を得た。分析用試料は、メタノールで再結晶化することによって得られ、白色の針状結晶を得た：融点１０４−１０６℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．９０（３Ｈ，ｓ），７．２１（２Ｈ，ｓ），１０．２９（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ２０４／２０６／２１８（Ｍ＋）。
元素分析：Ｃ８Ｈ６Ｃｌ２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：４６．８６，Ｈ：２．
実測値：Ｃ：４６．６７，Ｈ：２．８９
【００９３】
実施例４２
２，６−ジクロロ−４−ヒドロキシ−ベンズアルデヒド
０℃のジクロロメタン（１２０ｍＬ）の、２，６−ジクロロ−４−メトキシ−ベンズアルデヒド（３．４４ｇ，１６．８ミリモル）溶液に、三臭化ホウ素（ジクロロメタン１Ｎ４２ｍＬ、４２ミリモル）をゆっくりと加えた。溶液を一晩中攪拌しながら室温まで温め、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２５０ｍＬ）によって急冷した。生じた混合物を酢酸エチル（３ｘ２００ｍＬ）を用いて抽出した。合した有機層を水で洗浄し、塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過した。溶媒を蒸発させることによって除去し、残渣をシリカ（７０％ヘキサン−３０％酢酸エチル）上で精製し、桃色の固体２．１９ｇ（６８％）を得た。酢酸エチル−ヘキサンとともに粉砕することで、表題の化合物の分析用試料を白色固体として得た：融点２１４−２１７℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．９５（２Ｈ，ｓ），１０．２６（１Ｈ，ｓ），１１．４４（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ１８９．８／１９１．８／１９３．８（Ｍ＋）。
元素分析：Ｃ７Ｈ４Ｃｌ２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：４４．０２，Ｈ：２．１１
実測値：Ｃ：４４．０８，Ｈ：２．０７
【００９４】
実施例４３
３，５−ジクロロ−４−ホルミル−フェニルトリフルオロメタンスルホン酸塩
表題の化合物を、方法Ｅに従って、２，６−ジクロロ−４−ヒドロキシ−ベンズアルデヒド（２．３５ｇ，１２．３ミリモル）をトリフルオロメタンスルホン酸無水物（４．５１ｇ，１６．０ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色の油３．４５ｇ（８７％）を得た。この油のＴＬＣ分析は、放置することで出発物質のフェノールに分解することを示した。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．０３（２Ｈ，ｓ），１０．３１（１Ｈ，ｓ）。
【００９５】
実施例４４
３，５−ジクロロ−４'ヒドロキシ−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｃに従って、３，５−ジクロロ−４−ホルミル−フェニルトリフルオロメタンスルホン酸塩（０．７３ｇ，２．２６ミリモル）を、４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（０．８０ｇ，３．２ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色の固体０．３０ｇ（５０％）を得た：融点１７８−１８０℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８４Ｈｚ），７．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７１Ｈｚ），７．８４（２Ｈ，ｓ），９．９５（１Ｈ，ｓ），１０．３８（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ２６６．０／２６８．０／２７０．０（Ｍ＋）。
元素分析：Ｃ１３Ｈ８Ｃｌ２Ｏ２・０．５Ｈ２Ｏとして：
予測値：Ｃ：５６．５５，Ｈ：３．２９
実測値：Ｃ：５６．３６，Ｈ：２．９０
【００９６】
実施例４５
２，３−ジクロロ−４−メトキシベンズアルデヒド
無水ジクロロメタン（４５ｍｌ）中の、２，３−ジクロロアニソール（１０．００ｇ，５６．６ミリモル）溶液に、ＴｉＣｌ４（１０．５ｍｌ，９６．１ミリモル）をすぐに加えた。α，α'−ジクロロメチルメチルエステル（５．１ｍｌ，５６．６ミリモル）をその後ゆっくり加え、内部温度を１５℃から２０℃までの間に維持した。混合物を室温で５時間攪拌し、砕いた氷にゆっくりと注ぎ、ジクロロメタン（３ｘ）で抽出し、ｐＨ＝７まで飽和重炭酸ナトリウムで洗浄し、その後塩性溶液を用いて洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して白色の固体１１．３４ｇ（９８％）を得た。分析用試料を、逆相分取用ＨＰＬＣによって供給された：融点１１２−１１３℃；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ４．０１（３Ｈ，ｓ），６．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７７Ｈｚ），７．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８２Ｈｚ），１０．３６（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２０５／２０７／２０９（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ８Ｈ６Ｃｌ２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：４６．８６，Ｈ：２．９５
実測値：Ｃ：４６．９２，Ｈ：２．７０
【００９７】
実施例４６
２，３−ジクロロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド
表題の化合物を、方法Ｄに従って、２，３−ジクロロ−４−メトキシベンズアルデヒド（１０ｇ，４９ミリモル）を、三臭化ホウ素（ＣＨ２Ｃｌ２中１Ｎ溶液１４７ｍｌ，１４７ミリモル）と反応させることによって調製し、暗い灰色の固体１１．３ｇを得、それは主に１ＨＮＭＲによって示される設計された生成物である。それをヘキサン中３０％ＣＨＣｌ３と共に粉末にし、純粋な生成物として灰色の固体３．６ｇを得た。分析用試料を、逆相分取用ＨＰＬＣによって白色固体として供給された：融点１７６−１７８℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６８Ｈｚ），７．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６７Ｈｚ），１０．１６（１Ｈ，ｓ），１１．９５（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ１８９／１９１／１９３（Ｍ−Ｈ）−，１９３／１９１／１９５（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ７Ｈ４Ｃｌ２Ｏ２・０．５Ｈ２Ｏとして：
予測値：Ｃ：４４．０２，Ｈ：２．１１
実測値：Ｃ：４３．８７，Ｈ：１．６７
【００９８】
実施例４７
トリフルオロメタンスルホン酸２，３−ジクロロ−４−ホルミル−フェニルエステル
表題の化合物を、実施例４３に従って、２，３−ジクロロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（２．５０ｇ，１３．２ミリモル）をトリフルオロメタンスルホン酸無水物（２．８８ｍｌ，４．８０ｇ，１７．１ミリモル）と反応させることによって調製し、褐色の結晶３．６９ｇ（８２％）を得、精製なしで直接次の工程に用いた。分析用試料は、シリカクロマトグラフィー（５％酢酸エチル−ヘキサン）によって白色固体として供給された：融点４４−４５℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７４Ｈｚ），８．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８１Ｈｚ），１０．２８（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ３２２／３２４／３２６（Ｍ）＋。
Ｃ８Ｈ３Ｃｌ２Ｆ３Ｏ４Ｓについての分析：
予測値：Ｃ：２９．７４，Ｈ：０．９４
実測値：Ｃ：３０．１９，Ｈ：０．８６
【００９９】
実施例４８−５０
トリフルオロメタンスルホン酸２，３−ジクロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（１．３９，４．３３ミリモル）を、方法Ｂに従って、ボロン酸２１（１．２０ｇ，４．７６ミリモル）と反応させ、次の三つの化合物を生成した。
２，３−ジクロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（４８）
白色固体３１０ｍｇ（２７％）：融点１７２−１７４℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８６−６．９１（２Ｈ，ｍ），７．３２−７．３５（２Ｈ，ｍ），７．５３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９４Ｈｚ，Ｊ＝０．４５Ｈｚ），７．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０１Ｈｚ），９．８５（１Ｈ，ｓ），１０．３５（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２６５／２６７／２６９（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ８Ｃｌ２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：５８．４６，Ｈ：３．０２
実測値：Ｃ：５７．７５，Ｈ：２．８２
２−クロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（４９）
オフホワイトの固体９０ｍｇ（９％）：融点１１４−１１６℃；；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８５−６．９０（２Ｈ，ｍ），７．３２−７．３６（２Ｈ，ｍ），７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８７Ｈｚ），７．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９０Ｈｚ，Ｊ＝１．５５Ｈｚ），８．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５２Ｈｚ），９．７９（１Ｈ，ｓ），１０．０２（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２３１／２３３（Ｍ−Ｈ）−，２３３／２３５（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ９ＣｌＯ２として：
予測値：Ｃ：６７．１１，Ｈ：３．９０
実測値：Ｃ：６７．４４，Ｈ：３．８７
２'− ジクロロ−４，４' '−ジヒドロキシ−１，１'： ３'，１' '−ターフェニル−４ '−カルバルデヒド（５０）
オフホワイトの固体１３０ｍｇ（９％）：融点２２２−２２３℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８５−６．８８（２Ｈ，ｍ），６．８８−６．９１（２Ｈ，ｍ），７．１７−７．２０（２Ｈ，ｍ），７．３１−７．３５（２Ｈ，ｍ），７．５２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ，Ｊ＝０．８９Ｈｚ），７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０７Ｈｚ），９．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．７７Ｈｚ），９．７３（１Ｈ，ｓ），９．７４（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３２３／３２５（Ｍ−Ｈ）−，３２５／３２７（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１９Ｈ１３ＣｌＯ３として：
予測値：Ｃ：７０．２７，Ｈ：４．０３
実測値：Ｃ：６９．８０，Ｈ：３．８８
【０１００】
実施例５１
２，３−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロメタンスルホン酸２，３−ジクロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（１．９０ｇ，５．９０ミリモル）を２１（１．３０ｇ，７．６７ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体０．８４ｇ（４７％）を得た：融点１６０−１６４℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＤＯ−ｄ６）：δ３．９０（３Ｈ，ｍ），７．２８−７．３０（２Ｈ，ｍ），７．４１−７．４３（１Ｈ，ｍ），７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３０Ｈｚ），７．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ），１０．３５（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ２９８／３００／３０２（Ｍ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ９Ｃｌ２ＦＯ２として：
予測値：Ｃ：５６．２１，Ｈ：３．０３
実測値：Ｃ：５７．５５，Ｈ：２．９７
【０１０１】
実施例５２および５３
２，３−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（０．７２ｇ，２．４２ミリモル）を、方法Ｅに従って、三臭化ホウ素（ＣＨ２Ｃｌ２中１Ｎ溶液７．２５ｍｌ，７．２５ミリモル）と反応させ、次の二つの化合物を生成した。
２'，３'−ジクロロ−４'−（ジブロモメチル）−３−フルオロ−１，１'−ビフェニル−４−オール（５２）
灰色の粘調なシロップ１３０ｍｇ（１３％）：１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．０４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．５４Ｈｚ），７．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４１Ｈｚ，Ｊ＝１．９７Ｈｚ），７．３２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．１８Ｈｚ，Ｊ＝１．９４Ｈｚ），７．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２７Ｈｚ），７．５４（１Ｈ，ｓ），７．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２３Ｈｚ），１０．２３（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ４２５／４２７／４２９（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ７Ｂｒ２Ｃｌ２ＦＯとして：
予測値：Ｃ：３６．４０，Ｈ：１．６５
実測値：Ｃ：３７．６０，Ｈ：１．６９
２，３−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（５３）
白色固体１４０ｍｇ（２０％）：１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．６０Ｈｚ），７．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４０Ｈｚ，Ｊ＝１．７９Ｈｚ），７．３５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．１５Ｈｚ，Ｊ＝１．８７Ｈｚ），７．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９７Ｈｚ），７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０９Ｈｚ），１０．３１（１Ｈ，ｓ），１０．３５（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２８３／２８５／２８７（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ７Ｃｌ２ＦＯ２として：
予測値：Ｃ：５４．７７，Ｈ：２．４７
実測値：Ｃ：５４．９３，Ｈ：２．１８
【０１０２】
実施例５４
３，５−ジクロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｆに従って、３，５−ジクロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（１７０ｍｇ，０．６３７ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（８９ｍｇ，１．２７ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体１６０ｍｇ（８９％）を得た：融点１８３−１８６℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．６３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．７６（２Ｈ，ｓ），８．２５（１Ｈ，ｓ），９．８１（１Ｈ，ｓ），１１．７８（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２８０／２８２／２８４（Ｍ−Ｈ）−，２８２／２８４／２８６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１０３】
実施例５５
３，５−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｆに従って、３，５−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（２９０ｍｇ，ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１４０ｍｇ，１．２７ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体２６０ｍｇ（８５％）を得た：融点１８５−１９０℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．０３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．８６Ｈｚ），７．４６−７．４９（１Ｈ，ｍ），７．６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．７４Ｈｚ，Ｊ＝２．２６Ｈｚ），７．８２（２Ｈ，ｓ），８．２５（１Ｈ，ｓ），１０．２４（１Ｈ，ｓ），１１．８０（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２９８／３００／３０２（Ｍ−Ｈ）−，３００／３０２／３０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ８Ｃｌ２ＦＮＯ２・０．２Ｈ２Ｏとして：
予測値：Ｃ：５１．４１，Ｈ：２．７９，Ｎ：４．６１
実測値：Ｃ：５１．７０，Ｈ：２．７５，Ｎ：４．２１
【０１０４】
実施例５６
２，３−ジクロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｆに従って、４８（１４０ｍｇ，０．５２６ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１１０ｍｇ，１．５８ミリモル）と反応させることによって調製し、オフホワイトの固体１４８ｍｇ（１００％）を得た：融点２０８−２１０℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８４−６．８７（２Ｈ，ｍ），７．２６−７．２９（２Ｈ，ｍ），７．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９４Ｈｚ），７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２０Ｈｚ），８．４１（１Ｈ，ｓ），９．７２（１Ｈ，ｓ），１１．８３（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２８０／２８２／２８４（Ｍ−Ｈ）−，２８２／２８４／２８６（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ９Ｃｌ２ＮＯ２として：
予測値：Ｃ：５５．３５，Ｈ：３．２２，Ｎ：４．９６
実測値：Ｃ：５５．７８，Ｈ：３．５９，Ｎ：４．４４
【０１０５】
実施例５７
５７（８５ｍｇ，０．２０ミリモル）を、方法Ｃに従って、ヒドロキシルアミン塩酸塩（３７６ｍｇ，５．３９ミリモル）およびピリジン（０．４３ｍｌ，５．３４ミリモル）と８日間反応させ、次の二つの化合物を生成した。
２，３−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム（５７）
白色固体１７．６ｍｇ（３０％）：融点２２５−２２７℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．０４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．５４Ｈｚ），７．１０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３５ｚ，Ｊ＝１．８８Ｈｚ），７．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．２２ｚ，Ｊ＝２．０１Ｈｚ），７．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１４Ｈｚ），７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１５Ｈｚ），８．４１（１Ｈ，ｓ），１０．１８（１Ｈ，ｓ），１１．８７（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２９８／３００／３０２（Ｍ−Ｈ）−，３００／３０２／３０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ８Ｃｌ２ＦＮＯ２・０．０９ＴＦＡとして：
予測値：Ｃ：５１．００，Ｈ：２．６３，Ｎ：４．５１
実測値：Ｃ：５０．９７，Ｈ：２．３７，Ｎ：４．３３
メチル２，３−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルボン酸塩
白色固体１６．９ｍｇ（２７％）：融点１５２−１５４℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．９０（３Ｈ，ｓ），７．０５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．５４Ｈｚ），７．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４１ｚ，Ｊ＝１．５５Ｈｚ），７．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．１６ｚ，Ｊ＝１．６８Ｈｚ），７．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０２Ｈｚ），７．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６４Ｈｚ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３１３／３１５／３１７（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ９Ｃｌ２ＦＯ３として：
予測値：Ｃ：５３．３６，Ｈ：２．８８
実測値：Ｃ：５１．９４，Ｈ：２．５４
【０１０６】
実施例５８
表１．４'−ヒドロキシ−ビフェニル−カルバルデヒドオキシム誘導体
【化２０】
【表１】
標準的な薬理学的試験操作において得られた結果は、本発明の化合物が、ＥＲβ受容体に対して幾分強い選択的親和性を有する、エストロゲン化合物であることを実証している。本発明の化合物は、ＥＲαよりもＥＲβに対して高い選択的親和性を有するものから、両受容体に対してほぼ同等の親和性を有するものまである。従って、本発明の化合物は、少なくとも一部は、受容体親和性選択性プロフィールに基づいた範囲の活性に及ぶであろう。それに加えて、各々の新しい受容体リガンド複合体は特異的であり、従って様々な共調節性タンパク質との相互作用も特異的であるので、本発明の化合物は、それらがおかれる細胞の状況に基づいて異なる調節作用を示すであろう。例えば、ある細胞型において、ある化合物がエストロゲンアゴニストとして作用し、一方他の組織においてはアンタゴニストとして作用することも起こりえる。そのような活性を有する化合物は、時にＳＥＲＭｓ（選択的エストロゲン受容体モジュレーター）と呼ばれてきた。しかしながら、多くのエストロゲンとは異なり、ＳＥＲＭｓの多くは子宮の湿性重量の増加を引き起こさない。これらの化合物は子宮においては抗エストロゲン性であり、子宮組織におけるエストロゲンアゴニストの栄養作用に完全に拮抗し得る。しかしながら、これらの化合物は、骨、心臓血管および中枢神経系においてはエストロゲンアゴニストとして作用する。これらの化合物はこのような組織選択性を有しているので、（骨または心臓血管のような特定の組織における）エストロゲン欠乏または（子宮または乳腺における）エストロゲン過剰によって引き起こされたまたはそれと関連する、哺乳類の病態または症候群の治療または予防に有用である。
【０１０７】
さらにそのような細胞特異的調節の他に、本発明の化合物はまた、ある受容体タイプに対してはアゴニストとして作用し、他の受容体に対してはアンタゴニストとして作用し得る。例えば、化合物がＥＲβのアンタゴニストであり、他方ＥＲαのアゴニストであるということがあり得るということが実証されてきた（Ｍｅｙｅｒｓ，Ｍａｒｖｉｎ Ｊ．；Ｓｕｎ，Ｊｕｎ；Ｃａｒｌｓｏｎ，Ｋａｔｈｒｙｎ Ｅ．；Ｋａｔｚｅｎｅｌｌｅｎｂｏｇｅｎ，Ｂｅｎｉｔａ Ｓ．；Ｋａｔｚｅｎｅｌｌｅｎｂｏｇｅｎ，Ｊｏｈｎ Ａ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（１９９９年），４２（１３），２４５６−２４６８）。そのようなＥＲＳＡＡ（エストロゲン受容体選択性アゴニストアンタゴニスト）活性は、この一連の化合物において薬学上明確なエストロゲン活性を与える。
【０１０８】
標準的な薬理学的試験操作は、所定の試験化合物の活性プロフィールを決定するために容易に利用できる。次の実施例は、いくつかの代表的な試験操作を簡潔に要約している。ＳＥＲＭｓについての標準的な薬理学的試験操作はまた、米国特許第４４１８０６８号および５９９８４０２号において与えられる。
【０１０９】
実施例５９
ラットの子宮肥大／抗子宮肥大試験操作
本化合物のエストロゲン様および抗エストロゲン性は、（Ｌ．Ｊ．ＢｌａｃｋおよびＲ．Ｌ．Ｇｏｏｄｅ，Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２６，１４５３（１９８０年）に以前記述された）幼若なラットの子宮肥大アッセイ（４日間）において決定され得る。スプレーグ・ドーレイラット（雌、１８日齢）を、六つの群で検査した。動物を、注射ビヒクルとしての５０％ＤＭＳＯ／５０％食塩水と共に、１０μＧの化合物、１００μＧの化合物、抗エストロゲン性を検査するための（１μＧの１７βエストラジオールを加えた１００μＧの化合物）、１μＧの１７βエストラジオール毎日静脈注射によって処理する。４日目に、動物をＣＯ２での窒息によって殺し、子宮を除去して過剰な脂質を剥がし、全ての体液を除去し、湿性重量を決定する。小断片の角質を組織学に供し、相補的成分３遺伝子発現を評価するために残りを用いてトータルＲＮＡを単離する。
【０１１０】
実施例６０
６週で卵巣切除したラット検査操作−骨および心臓保護
メスのスプレーグ・ドーレイＣＤラット、卵巣摘出群または偽手術を、Ｔａｃｏｎｉｃ Ｆａｒｍ社から手術後１日で得る（体重の範囲２４０−２７５ｇ）。それらを、ケージあたり３または４匹のラットずつ、１２時間／１２時間（明／暗）のスケジュールで部屋に収容し、食料（Ｐｕｒｉｎａ ５Ｋ９６Ｃラット食物）および水を自由に与える。全ての研究についての処理は、動物の到着後１日目から始め、指示されるように１週間に付き７日間で６週間投薬する。何ら処理を受けていない年齢の一致した偽手術した一群のラットを各研究について無傷のエストロゲンを十分与えた対照群に供する。
【０１１１】
全ての処理は、生理食塩水中の１％ツゥイーン８０中で、処理体積を体重１００ｇあたり０．１ｍＬにする規定された濃度で調製する。１７β−エストラジオールをコーンオイル（２０μｇ／ｍＬ）中に溶解し、ラットあたり０．１ｍＬを皮下投与する。全ての用量は、グループの平均体重測定に従って、３週間間隔で調節する。
【０１１２】
処理開始後５週間および研究の終了前１週間に、各々のラットを骨塩密度（ＢＭＤ）について評価する。脛骨近位部の総密度および骨梁密度を、ＸＣＴ−９６０Ｍ（ｐＱＣＴ；Ｓｔｒａｔｅｃ Ｍｅｄｉｚｉｎｔｅｃｈｎｉｋ，Ｐｆｏｒｚｈｅｉｍ，ドイツ）を用いて麻酔したラットにおいて評価する。測定は次のように実行する：スキャンの１５分前に、各々のラットに４５ｍｇ／ｋｇのケタミン、８．５ｍｇ／ｋｇのキシラジンおよび１．５ｍｇ／ｋｇのアセプロマジンを腹膜内注射して麻酔する。
【０１１３】
右の後肢に直径２５ｍｍのポリカーボネートチューブを通し、足関節を９０°の角度で、膝関節を１８０°の角度でアクリルフレームに貼り付ける。ポリカーボネートチューブを、ｐＱＣＴの開口部に垂直に維持する摺動性プラットホームに固定する。プラットホームを、大腿骨の遠位末端および脛骨の近位末端がスキャン範囲にあるように調節する。二次元スカウトビューを、１０ｍｍの長さおよび０．２ｍｍの線分解能で実行する。スカウトビューがモニター上で表示された後、脛骨の近位末端の位置を確認する。ｐＱＣＴスキャンを、この地点から３．４ｍｍ遠位から開始する。ｐＱＣＴスキャンは１ｍｍの厚さであり、０．１４０ｍｍのボクセル（三次元ピクセル）サイズを有し、スライスを介して１４５の映像からなる。
【０１１４】
ｐＱＣＴスキャンが完了した後、画像をモニター上に表示する。脛骨を含むが腓骨は除いた関心のある領域の概略を述べる。軟部組織は、反復アルゴリズムを用いて自動的に除去する。残りの骨密度（総密度）を、ｍｇ／ｃｍ３単位で報告する。骨の外層５５％を、同心らせん状に剥離する。残りの骨密度（骨梁密度）を、ｍｇ／ｃｍ３単位で報告する。ＢＭＤ評価の１週間後、ラットを二酸化炭素での窒息によって安楽死させ、血液をコレステロール決定のために収集した。子宮を摘出して、重量を量る。総コレステロールを、コレステロール／ＨＰキットを用いたＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ Ｈｉｔａｃｈｉ９１１臨床用分析器を用いて決定する。統計量を、Ｄｕｎｎｅｔテストによる一元配置分散分析を用いて比較した。
【０１１５】
実施例６１
ＭＣＦ−７／ＥＲＥ抗増殖検査操作
検査化合物の保存溶液（通常０．１Ｍ）を、ＤＭＳＯ中で調製し、その後ＤＭＳＯで１０ないし１００倍に希釈し、１または１０ｍＭの作用溶液を作る。ＤＭＳＯ保存液を、４℃（０．１Ｍ）または−２０℃（＜０．１Ｍ）のいずれかで保存する。ＭＣＦ−７細胞を、成長培地［１０％（体積／体積）の熱で不活化した胎児牛血清、１％（体積／体積）のペニシリン−ストレプトマイシン、および２ｍＭのグルタマックス−１を含むＤ−ＭＥＭ／Ｆ−１２培地］を用いて１週間に二回継代する。細胞を、５％ＣＯ２／９５％加湿した空気の培養器内で３７℃で、通気孔のあるフラスコ内で維持する。処理の１日前に、細胞を、成長培地を用いて、ウェルあたり２５０００個で９６ウェルプレートで平板培養し、３７℃で一晩中インキュベートする。
【０１１６】
細胞を、実験培地［１０％（体積／体積）の熱不活化チャコール処理（Charcoal stripped）胎児牛血清、１％（体積／体積）のペニシリン−ストレプトマイシン、２ｍＭのグルタマックス−１、１ｍＭのピルビン酸ナトリウムを含み、フェノールレッド不含のＤ−ＭＥＭ／Ｆ−１２培地］中で、アデノウィルス５−ＥＲＥ−ｔｋ−ルシフェラーゼの１：１０希釈液をウェルあたり５０μｌ用いて、３７℃で２時間感染させる。ついで、該ウェルを、実験培地１５０μｌを用いて一度洗浄する。最後に、細胞を、ウェルあたり１５０μλのビヒクル（０．１％以下 体積／体積 ＤＭＳＯ）または実験培地中に１０００倍以上に希釈される化合物を用いて、８ウェル／処理で、繰り返し２４時間３７℃で処理する。
【０１１７】
検査する化合物の最初のスクリーニングを、単独で（アゴニスト法）または０．１ｎＭの１７βエストラジオールと組み合わせて（ＥＣ８０；アンタゴニスト法）検査する、１μＭの単回投与で行う。各々９６のウェルプレートはまた、ビヒクル対照群（０．１％ 体積／体積 ＤＭＳＯ）およびアゴニスト対照群（０．１または１ｎＭの１７βエストラジオールのいずれか）を含む。投薬反応実験を、１０−１４から１０−５Ｍまで対数的に増加する活性のある化合物について、アゴニスト法および／またはアンタゴニスト法のいずれかで実行する。これらの投薬反応曲線から、ＥＣ５０およびＩＣ５０値を、各々算出する。各々の処理群における最終的なウェルには、ＥＲアンタゴニスト対照群として５μｌの３×１０−５ＭＩＣＩ−１８２，７８０（１０−６Ｍの最終濃度）を含む。
【０１１８】
処理後、１Ｘ細胞培養溶解試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）をウェルあたり２５μｌを用いて、細胞を攪拌器上で１５分間溶解する。細胞溶解物（２０μｌ）を、９６ウェルの照度計プレートに移し、ルシフェラーゼ活性を、ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔＬＢ９６Ｐ照度計（ＥＧ＆Ｇ Ｂｅｒｔｈｏｌｄ）中で、ルシフェラーゼ基質（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）をウェルあたり１００μｌ用いて測定する。基質の注入に先立って、各々のウェルについて１秒バックグラウンド測定を行う。基質の注入後、ルシフェラーゼ活性を、１秒間の猶予の後、１０秒間測定する。データを照度計からマッキントッシュパーソナルコンピューターに転送し、ＪＭＰソフトウェア（ＳＡＳ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）を用いて分析する；このプログラムは、各々のウェルについてのルシフェラーゼ測定から、読み取られたバックグラウンドを減算し、その後各々の処理の平均および標準偏差を決定する。
【０１１９】
ルシフェラーゼデータを対数に変換し、Ｈｕｂｅｒ Ｍ−エスティメーターを中心から離れた変換した観測量を減量するために用いる。ＪＭＰソフトウェアを、一元ＡＮＯＶＡ（Ｄｕｎｎｅｔテスト）変換して定量したデータを分析するために用いる。化合物による治療を、アゴニスト法におけるビヒクル対照群結果、またはアンタゴニスト法における陽性アゴニスト対照群結果（０．１ｎＭの１７βエストラジオール）と比較する。最初の単回投薬実験について、化合物による治療結果が適切な対照群（ｐ＜０．０５）と十分異なっていれば、結果は１７βエストラジオール対照群に比較したパーセンテージとして報告される［すなわち、（（化合物−ビヒクル対照群）／（１７βエストラジオール対照群−ビヒクル対照群））×１００］。ＪＭＰソフトウェアはまた、非線形投薬反応曲線からＥＣ５０および／またはＩＣ５０値を決定するために用いられる。
【０１２０】
実施例６２
ＬＤＬの酸化の阻害−抗酸化活性
豚の大動脈を屠殺場から得て、洗浄し、冷却したＰＢＳ中に移し、大動脈の内皮細胞を採取する。細胞を採取するために、大動脈の肋間の脈管を結紮し、大動脈の一方の末端をクランプする。新鮮な、濾過滅菌した０．２％のコラゲナーゼ（Ｓｉｇｍａ タイプＩ）を脈管中に配置し、脈管の他方の末端をその後クランプして閉鎖系を形成する。大動脈を３７℃で１５−２０インキュベートし、その後コラゲナーゼ溶液を収集し、２０００ｘｇで５分間遠心する。各々のペレットを、チャコール処理ＦＢＳ（５％）、Ｎｕ血清（５％）、Ｌ−グルタミン（４ｍＭ）、ペニシリン−ストレプトマイシン（１０００Ｕ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ）およびゲンチマイシン（７５μｇ／ｍｌ）を補足し、フェノールレッドを含まないＤＭＥＭ／ＨａｍＦ１２培地を含む、７ｍＬの内皮細胞培養培地中に懸濁し、１００ｍｍペトリ皿に播種し、５％ＣＯ２中で３７℃でインキュベートする。２０分後、細胞をＰＢＳですすぎ、新鮮な培地を加え、この操作を２４時間で再び繰り返した。細胞はおよそ１週間後に集密状態となる。内皮細胞に慣例的に１週間に２回養分を与え、集密状態になった時にはトリプシン処理し、１：７の比率で蒔く。１２．５μｇ／ｍｌのＬＤＬの細胞媒介性酸化は、評価すべき化合物（５μＭ）の存在下で４時間３７℃で可能となる。結果は、遊離アルデヒドの分析のためのＴＢＡＲＳ（チオバルビツール酸反応物質）法によって測定される、酸化過程の阻害のパーセンテージとして表現される（Ｙａｇｉ Ｋ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｍｅｄ １５：２１２−２１６（１９７６年））。
【０１２１】
実施例６３
Ｄ１２視床下部細胞検査操作
Ｄ１２視床下部細胞を、ＲＣＦ１７親細胞系からサブクローニングし、凍結させて保存する。それらを、１０％胎児牛血清（ＦＢＳ）を加えた、ＤＭＥＭ：Ｆ１２（１：１）、グルタマックス−１（２ｍＭ）、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）−ストレプトマイシン（１００ｍｇ／ｍｌ）中で慣例的に成長させる。細胞を、２−１０％チャコール処理ＦＢＳを含み、フェノールレッドを含まない培地（ＤＭＥＭ：Ｆ１２、グルタマックス、ペニシリン−ストレプトマイシン）中で、サブコンフルエント密度（１−４×１０６細胞／１５０ｍｍディッシュ）で培養する。細胞を、２％ＣＳＳ血清を含む培地で２４時間後再び養分を与える。アゴニスト活性について検査するために、細胞を１０ｎｍの１７βエストラジオールまたは様々な用量の検査する化合物（１ｍＭまたは１ｐＭから１ｍＭの範囲）で処理する。アンタゴニスト活性について検査するために、様々な用量（１００ｐＭないし１ｍＭ）の検査する化合物なしでまたはその存在下で、細胞を０．１ｎｍの１７βエストラジオールで処理する。対照群のディッシュをまた、陰性対照群としてＤＭＳＯで処理する。ホルモン付加の４８時間後、細胞を溶解させ、結合検査操作を実行する。
【０１２２】
各々の結合検査操作について、１００−１５０ｍｇのタンパク質を、１０ｎＭの３Ｈ−Ｒ５０２０および１００倍過剰Ｒ５０２０を用いて１５０ｍｌの体積でインキュベートする。３倍体反応（Ｒ５０２０を含む三つ、Ｒ５０２０なしの三つ）を、９６ウェルプレート中で調製する。タンパク質抽出物を最初に加え、続いて３Ｈ−Ｒ５０２０または１００ｘ非標識Ｒ５０２０を加えた３Ｈ−Ｒ５０２０を加える。反応は、室温で１−２時間実行される。反応は、１００ｍｌの冷５％チャコール（Ｎｏｒｉｔ ＳＸ−４）、ｐＨ７．４のＴＥ中０．５％デキストラン６９Ｋ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）を付加することによって停止する。室温で５分後、結合したおよび結合していないリガンドを、遠心することにより分離する（５分、１０００ＲＣＦ、４℃）。上澄み溶液（〜１５０ｍｌ）を除去し、シンチレーションバイアルに移す。シンチレーション流体（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｒｅａｄｙ Ｐｒｏｔｅｉｎ＋）を付加した後、試料をシンチレーションカウンターで１分間カウントする。
【０１２３】
実施例６４
ＣＮＳ視索前野におけるプロゲステロン受容体
六十（６０）日齢のメスのスプレーグ・ドーレイラットを、卵巣切除する。動物を、１２時間明るく、１２時間暗い光周期を有し、水および齧歯類の食物を自由に利用できる動物保育設備中に収容する。
【０１２４】
卵巣切除した動物を、無作為に、ビヒクル（５０％ＤＭＳＯ、４０％ＰＢＳ、１０％エタノールビヒクル）、１７βエストラジオール（２００ｎｇ／ｋｇ）または検査すべき化合物を用いて注射される群に分ける。追加の動物を、１７βエストラジオールの注射に先立って、検査する化合物で注射し、本化合物のアンタゴニスト特性を評価する。皮下注射の６時間後、動物を致死量のＣＯ２で安楽死させ、その脳を収集して凍結させる。
【０１２５】
動物から収集した組織を、低温保持装置上で−１６℃で切断し、シランで被覆した顕微鏡スライド上で収集する。切片を固定したスライドをその後４２℃に維持したスライド加温器上で乾燥させ、−８０℃で乾燥したスライドボックス内で保存する。プロセシングに先立って、乾燥したスライドボックスをゆっくり室温まで温め（−２０℃で１２−１６時間；４℃で２時間；室温で１時間）、スライド上での結露形成を除去し、それによって組織およびＲＮＡの分解を最小限にする。乾燥したスライドを金属のラックに載せ、４％パラホルムアルデヒド（ｐＨ９．０）中で５分間後固定し、前に記述したようにプロセシングする。
【０１２６】
ラットのＰＲｃＤＮＡ９の８１５ｂｐ断片（リガンド結合ドメイン）を含むプラスミドを線状にし、ラットのＰＲｍＲＮＡの一部に相補的な、Ｓ３５−ＵＴＰ標識プローブを生成するために用いられる。プロセシングした切片を固定したスライドを、リボプローブ（４−６ｘ１０ ６ ＤＰＭ／スライド）および５０％ホルムアルデヒドを含む２０ｍｌのハイブリダイゼーションミックスを用いてハイブリダイゼーションし、５５℃の加湿したチャンバー内で一晩中インキュベートする。午前中に、スライドを、２ｘＳＳＣ（０．１５ＭのＮａＣｌ、０．０１５Ｍのクエン酸ナトリウム；ｐＨ７．０）／１０ｍＭＤＴＴ中に浸した金属のラックに置く。ラックを、全て大きな容器に移し、２ｘＳＳＣ／１０ｍＭＤＴＴ中で室温で緩やかに攪拌しながら１５分間洗浄する。その後スライドをＲＮＡアーゼ緩衝剤中で３７℃で３０分間洗浄し、ＲＮＡアーゼＡ（２ｍｇ／ｍｌ）で３７℃で３０分間処理し、１５分間室温の１ＸＳＳＣ中で洗浄する。その後、スライドを、非特異的標識を除去するために６５℃で０．１ＸＳＳＣ中で洗浄し（２Ｘ３０分）、室温の０．１ＸＳＳＣ中で１５分間すすぎ、徐々に変化する一連のアルコール：酢酸アンモニウム（７０％、９５％および１００％）を用いて脱水する。空気乾燥したスライドを、３日間Ｘ線フィルムに向かい合わせ、その後写真のように加工する。全ての動物に由来するスライドをハイブリダイゼーションし、洗浄し、感光させ、アッセイの間の条件の変化による相違を排除するために写真のように加工する。
【０１２７】
実施例６５
ラットのホットフラッシュ−ＣＮＳの影響
卵巣切除したメスの６０日齢スプレーグ・ドーレイラットを、手術後に得る。手術は、最初の処理に最低限８日間先立ってなされる。動物を、１２時間明／暗周期の下で個別に収容し、標準的なラットの食物および水を制限無く与える。
【０１２８】
二つの対照群が、各々の研究に含まれる。用量を、ごま油中１０％ＤＭＳＯ中で（皮下投与実験）、または食塩水中１．０％ツゥイーン８０中で（経口投与実験）のいずれかで、ｍｇ／ｋｇ平均グループ体重に基づいて調製する。動物に、０．０１から１０ｍｇ／ｋｇ平均グループ体重の範囲の用量の検査する化合物を投与する。ビヒクルおよびエチニルエストラジオール（ＥＥ）対照（０．１ｍｇ／ｋｇ皮下投与、または０．３ｍｇ／ｋｇ経口投与）対照群が、各々の検査に含まれる。化合物をそのアンタゴニスト活性について検査する場合、ＥＥは、皮下投与または経口投与研究についてそれぞれ、０．１または０．３ｍｇ／ｋｇを共投与する。検査する化合物を、尾の皮膚温度が測定される日まで投与する。
【０１２９】
４日間の馴化後、動物を、関心のある化合物で毎日一度処理する。１０の動物／処理グループが存在する。化合物の投与は、０．１ｍｌを頸の首筋に皮下注射することによって、または０．５ｍｌの体積を経口投与することのいずれかによる。処理の３日目に、モルヒネのペレット（７５ｍｇ硫酸モルヒネ）を、皮下に埋め込む。処理の５日目に、一つまたは二つの追加のモルヒネのペレットを埋め込む。８日目に、動物のおよそ半分に、ケタミン（８０ｍｇ／ｋｇ、筋肉内）を注射し、ＭａｃＬａｂ Ｄａｔａ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（ＡＰＩ社、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ）に結合した熱電対を、尾の根本からおよそ１インチの尾に貼り付ける。この機構は、尾の皮膚の温度の継続的な測定を可能にした。基準の温度を１５分間測定し、その後モルヒネの効果をブロックするためにナロキソン（１．０ｍｇ／ｋｇ）を皮下投与し（０．２ｍｌ）、尾の皮膚の温度をその１時間後に測定する。９日目に、残りの動物を同様に計画し、分析する。
【０１３０】
実施例６６
単離したラットの大動脈輪における血管運動神経機能
スプレーグ・ドーレイラット（２４０−２６０グラム）を４グループに分ける：
１．正常の卵巣切除していないもの（無傷）
２．卵巣切除し（ｏｖｅｘ）、ビヒクル処理したもの
３．卵巣切除し、１７βエストラジオールで処理したもの（１ｍｇ／ｋｇ／日）
４．検査する化合物によって処理した卵巣切除した動物（すなわち１ｍｇ／ｋｇ／日）
動物を、処理におよそ３週間先立って卵巣切除する。各々の動物は、胃管栄養によって、１％ツゥイーン８０と共に、蒸留して脱イオン化した水中に懸濁した硫酸１７βエストラジオールまたは検査する化合物のいずれか１ｍｇ／ｋｇ／日を与えられる。ビヒクル処理動物は、薬剤処理群において用いられた適当な体積のビヒクルを与えられる。
【０１３１】
動物をＣＯ２吸入および放血によって安楽死させる。胸部大動脈を速やかに除去し、３７℃の生理的溶液中に、次の組成物（ｍＭ）と共に入れる：ＮａＣｌ（５４．７）、ＫＣｌ（５．０）、ＮａＨＣＯ３（２５．０）、ＭｇＣｌ２ ２Ｈ２Ｏ（２．５）、Ｄ−グルコース（１１．８）およびＣａＣｌ２（０．２）、９５％／５％のＣＯ２−Ｏ２でガス処理し、最終的なｐＨが７．４。動脈血管外膜を外表面から除去し、脈管を２−３ｍｍの幅の輪に切断する。輪を、一方の末端を浴の底に結び、他方の末端を力変換器に結んで、１０ｍＬの組織浴に吊す。１グラムの静止張力がその輪にかかる。輪は１時間で平衡に達し、シグナルを得て分析する。
【０１３２】
平衡も達した後、輪を高濃度のフェニレフリン（１０−８ないし１０−４Ｍ）に曝し、張力を記録する。その後、浴を新しい緩衝剤で３回すすぐ。洗浄後、２００ｍＭのＬ−ＮＡＭＥを組織浴に加え、３０分間平衡状態とする。ついで、フェニルフリン濃度反応曲線を繰り返す。
【０１３３】
実施例６７
８本の放射状迷路−認識力の向上
到着時に重さが２５０ｇであった、オスのスプレーグ・ドーレイ、ＣＤラット（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ、Ｋｉｎｇｓｔｏｎ、ニューヨーク）が用いられる。ラットを、標準的な実験室の食物および水を自由に与えて、１週間ケージあたり６匹収容する。収容するのは、２２℃に維持されたコロニールームであり、午前６時に点灯する１２時間の明／暗周期を有していた。設備に慣らした後、動物を個別に収容し、自由に餌を与えた重量の８５％に維持する。一度安定した体重に達すると、ラットは８本の放射状迷路に順応する。
【０１３４】
迷路の構造は、ＰｅｅｌｅおよびＢａｒｏｎ（Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、およびＢｅｈａｖｉｏｒ、２９：１４３−１５０、１９８８年）の迷路に適合する。迷路を７５．５ｃｍの高さまで上昇させ、互いに等距離に、中央から８本の放射状に離れるように取り囲む円形の領域からなる。各々のアームは、５８ｃｍの長さ×１３ｃｍの高さである。各々のセッションの開始に先立って、迷路の中央部分に動物を閉じこめるために、透明のプレキシグラスシリンダーを取り付ける。迷路の各々のアームは、データ取得単位にインターフェースで接続した３セットの光電池を備えており、それはまたコンピューターにインターフェースで接続する。光電池は迷路内のラットの運動を追跡するために用いられる。各々のアームの末端にある食物カップの上に位置するペレット供給器は、アームの外層の光電池が所定のセッションにおいて最初に活性化された場合に、二つの４５ｍｇのチョコレートペレットを与える。迷路は、視覚的な手がかりを与えるために、各々の壁に黒および白の幾何学的ポスターを有する検査室に位置している。全ての訓練および検査操作の間、ホワイトノイズが聴取される（約７０ｄｂ）。
【０１３５】
訓練操作は、五つの段階からなり、各々が毎日５分または１０分続くセッションを有する。ラットを迷路の中央部に配置する時、およびセッションを始めるためにシリンダーを上げる時の間には、１０秒間の遅れが必要とされる。第１段階の間、食物を制限したラットの組は、迷路の８つのアームの至る所に４５ｍｇのチョコレート食物ペレットが撒き散らされた迷路に、１０分間おく。第２段階の間、各々のラットを、中央の光電池から各々のアームの食物カップにペレットを撒き散らした迷路に、１０分間個別におく。第３段階の間、各々のラットを、食物ペレットが各々のアームにおける食物カップ内およびその周囲のみに位置している迷路に、１０分間おく。第４段階において、各々のラットに、各々のアームから二つのペレットを収集するために１０分間与える。一つのアームに再び入ることは、過誤とみなす。ラットを、三日連続の訓練で全過誤が２未満またはちょうど２となるような基準成績に達するまで、この方法で毎日訓練する。馴化および訓練の総時間は、およそ３週間である。
【０１３６】
検査する化合物を、リン酸緩衝食塩水中で調製し、１ｍｌ／ｋｇの体積で投与する。臭化水素酸スコポラミン（０．３ｍｇ／ｋｇ、皮下投与）は、過誤率を増加させる（記憶の損失）障害薬の役割を果たす。検査する化合物は、全ての検査日に最初に迷路に曝露させる３０分前に、スコポラミンと同時に腹膜内に与える。
【０１３７】
検査する化合物を評価するために、最小限の動物の数で高い実験効率を達成するように、繰り返し測定で８ｘ８で平衡を保ったラテン方格を計画する。８つの実験セッションには、週二日各々のセッション内で無作為化した８つの処理（ビヒクル、スコポラミン、スコポラミンと組み合わせた３用量の検査する化合物）を行う。各々の処理の後に、あらゆる他の処理を同回数行う。それゆえに、全ての処理の残存効果を評価でき、直接の処理効果を除去し得る。ＡＮＯＶＡの後、多重比較を、調節した方法でＤｕｎｎｅｔ両側検定を用いて実行する。
【０１３８】
最初の曝露の間の５分間以内に４つの正しい選択をしなかった動物、または二度目の曝露の最後までに全部で８つの選択をしなかった動物は、そのセッションについて「時間切れ」とみなす。検査する化合物の一回より多くの用量の投与の後に「時間切れ」となった全ての動物は、分析から除外される。
【０１３９】
実施例６８
神経保護
一次皮質ニューロン培養における時間依存性の細胞死の阻害
一次皮質ニューロンを、Ｍｏｎｙｅｒら、１９８９年、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ４８３：３４７−３５４に記述されている方法の変法を用いて、０−１日齢のラットの脳から生成した。分散させた脳組織を、ＤＭＥＭ／１０％ＰＤＨＳ（妊娠ドナーウマ血清）において三日間増殖させ、その後混合しているグリア細胞を除去するためにシトシンアラビノシド（ＡＲＣ）によって二日間処理した。５日目に、ＡＲＣ培地を除去し、ＤＭＥＭ／１０％ＰＤＨＳで置換した。ニューロン細胞を使用前にさらに４−７日間培養した。
【０１４０】
対照群の一次ニューロン培養は、培養中１２日目および１８日目の間で、進行性の細胞死を示す。検査する化合物を９日目にＤＭＥＭおよび１０％ＰＤＨＳ中で維持した６つの培養に加え、残りの培養を対照群として維持した後、１２の培養を酵素乳酸脱水素酵素（ＬＤ）の濃度を１２日目および１６日目に評価した。ＬＤを、Ｗｒｏｂｌｅｗｓｋｉら １９５５年、Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．９０：２１０−２１３による方法の変法を用いてアッセイした。ＬＤは、臨床上および組織生存力を決定するための基礎研究上の両方で一般に用いられる、細胞質基質酵素である。培地のＬＤの増加は、直接細胞死に関連している。
【０１４１】
低血糖によって誘発される細胞傷害に対する神経保護
ＡＴＣＣから得られたＣ６グリオーマ細胞は、ＦＡＬＣＯＮ２５ｃｍ２組織培養フラスコ中で、１×１０６細胞／ｍｌの濃度のＦＢＳを有するＲＰＭＩ培地中で平板培養に付した。低血糖の開始の４時間前に、維持培地を廃棄し、単層を適切な培地で二度洗浄し、その後血清を含まないでまたは検査する化合物を加えて血清は含まないで、３７℃で４時間インキュベートした。クレブリンゲルリン酸緩衝剤を、適切なグルコース処理を加える前に、単層を二度洗浄するために用いた。ＲＰＭＩ培地は、１ｍｌあたり２ｍｇのグルコースを含み；フラスコを、各々１００％グルコース（２ｍｇ／ｍｌ）、８０％グルコース（１．６ｍｇ／ｍｌ）、６０％グルコース（１．２ｍｇ／ｍｌ）、または０％グルコース（緩衝剤）、または検査する化合物を補足した緩衝剤を入れた、６のグループに分けた。全てのフラスコを２０時間インキュベートし、その後トリパンブルーを利用して、総細胞数、生細胞数および死細胞数について評価した。
【０１４２】
興奮毒性アミノ酸に対する神経保護
ＳＫ−Ｎ−ＳＨ神経芽腫細胞を含む５つの培養ディッシュを、検査する化合物を用いて処理し、５つの培養ディッシュを、ＲＰＭＩ培地で処理した。４時間後、全ての細胞を、ＮＭＤＡ（５００ｍｕＭ）を用いて５分間処理した。その後総生細胞および死細胞を決定した。
【０１４３】
酸素−グルコース欠乏に対する神経保護
アポトーシスを測定するための濃縮核の分析：皮質ニューロンを、Ｅ１８ラット胎児から調製し、ポリ−Ｄ−リシン（１０ｎｇ／ｍｌ）および１０００００細胞／ウェルの濃度の血清で予め被覆した８ウェルのチャンバースライド中に入れる。細胞を、１０％ＦＣＳを含む高グルコースＤＭＥＭ中に入れ、１０％ＣＯ２／９０％空気で３７℃でインキュベーター中に保存する。その翌日、血清を、培養培地をＢ２７補剤を含む高グルコースＤＭＥＭで置換することによって除去し、細胞を実験の日までさらに培地を交換することなしにインキュベーター中に保存する。６日目に、スライドを二つの群：対照群およびＯＧＤ群に分ける。対照群中の細胞は、グルコースおよびカスタムＢ２７（抗酸化剤なし）を含むＤＭＥＭを与えられる。ＯＧＤ群中の細胞は、１５分間真空下で脱気された、カスタムＢ２７を含むグルコース不含ＤＭＥＭを与えられる。細胞を、１０分間気密なチャンバー中で９０％Ｎ２／１０％ＣＯ２で洗い流し、３７℃で６時間インキュベートする。６時間後、対照およびＯＧＤの細胞を共に、グルコース含有のＤＭＥＭ中にビヒクル（ＤＭＳＯ）または試験化合物のいずれかを含有する培地の、カスタムＢ２７との置き換えに付す。細胞を、通常の酸素環境の３７℃のインキュベーターに戻す。２４時間後、細胞を、４％ＰＦＡ中で１０分間４℃で固定し、Ｔｏｐｒｏ（蛍光核結合色素）を用いて染色する。アポトーシスは、Ｌａｓｅｒ Ｓｃａｎｎｉｎｇ Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒを用いて、濃縮核を測定することによって評価される。
【０１４４】
細胞死の指標としてのＬＤＨ遊離の測定：皮質ニューロンを、Ｅ１８ラット胎児から調製し、ポリ−Ｄ−リシン（１０ｎｇ／ｍｌ）および１５００００細胞／ウェルの濃度の血清で予め被覆した４８ウェルの培養プレート中に入れる。細胞を、１０％ＦＣＳを含む高グルコースＤＭＥＭ中に入れ、１０％ＣＯ２／９０％空気で３７℃でインキュベーター中に保存する。その翌日、血清を、培養培地をＢ２７補剤を含む高グルコースＤＭＥＭで置換することによって除去する。６日目に、細胞を二つの群：対照群およびＯＧＤ群に分ける。対照群中の細胞は、グルコースおよびカスタムＢ２７（抗酸化剤なし）を含むＤＭＥＭを与えられる。ＯＧＤ群中の細胞は、１５分間真空下で脱気された、カスタムＢ２７を含むグルコース不含ＤＭＥＭを与えられる。細胞を、１０分間気密なチャンバー中で９０％Ｎ２／１０％ＣＯ２で洗い流し、３７℃で６時間インキュベートする。６時間後、対照およびＯＧＤの細胞を共に、グルコース含有のＤＭＥＭ中にビヒクル（ＤＭＳＯ）または試験化合物のいずれかを含有する培地の、カスタムＢ２７との置き換えに付す。細胞を、通常の酸素環境の３７℃のインキュベーターに戻す。２４時間後、細胞死を、細胞のＬＤＨ（乳酸脱水素酵素）の培養培地への遊離を測定することによって評価される。ＬＤＨアッセイのために、５０μｌの培地のアリコートを、９６ウェルプレートに移す。０．１Ｍのリン酸カリウム緩衝剤（ｐＨ７．５）１４０μｌおよび０．２ｍｇ／ｍｌのＮＡＤＨ１００μｌを加えた後、プレートを暗所で室温で２０分間放置する。反応は、ピルビン酸ナトリウム１０μｌを加えることによって開始される。プレートは、Ｔｈｅｒｍｏｍａｘプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）で、即座に３４０ｎＭで読み取られる。ＮＡＤＨ濃度の指標である吸光度は、６秒ごとに５分間記録され、ＮＡＤＨ消失率を示す勾配が、ＬＤＨ活性を算出するために用いられる。
ＬＤＨ活性（Ｕ／ｍｌ）＝（ΔＡ／分）（ＴＣＦ）（２０）（０．０８３３）／（０．７８）
式中：０．０８３３＝比例定数
０．７８＝計器光路長
【０１４５】
実施例６９ ＨＬＡラットテスト操作−クローン病および炎症性腸疾患
オスのＨＬＡ−Ｂ２７ラットを、Ｔａｃｏｎｉｃから得て、食物（ＰＭＩ Ｌａｂ ｄｉｅｔ ５００１）および水を制限無く得られるようにする。研究の開始において、ラットは２２−２６週齢である。
【０１４６】
ラットは、以下で列挙した処方の一つを、毎日一度７日間皮下投与する。各々の群において５匹のラットがおり、最後の用量を安楽死させる２時間前に投与する。
ビヒクル（５０％ＤＭＳＯ／５０％ＤｕｌｂｅｃｃｏのＰＢＳ）
１７α−エチニル−１７βエストラジオール（１０μｇ／ｋｇ）
検査する化合物
【０１４７】
排泄物の質を毎日観察し、次の尺度に従って等級付けする：下痢＝３；軟便＝２；正常の便＝１。検査操作の最後に、血清を収集し、−７０℃で保存する。結腸の断片を組織学的な分析のために調製し、追加の切片をミエロペルオキシダーゼ活性について分析する。
【０１４８】
次の方法は、ミエロペルオキシダーゼ活性を測定するために用いられる。結腸組織を採取し、液体窒素中で急速冷凍する。全結腸の代表的な試料は、試料間で一致していることを保証するために用いられる。組織は、使用するまで−８０℃で保存する。次に、組織を計量し（およそ５００ｍｇ）、５ｍＭのＨ２ＫＰＯ４（ｐＨ６）洗浄緩衝剤重量／体積１：１５中で均質化する。組織を、Ｓｏｒｖａｌｌ ＲＣ ５Ｂ遠心分離機中で、４５分間２−８℃で２００００×ｇで遠心する。その後上澄みを廃棄する。組織を再び懸濁し、５０ｍＭのＨ２ＫＰＯ４２．５ｍｌ（１：５ 重量／体積）中で、１０ｍＭのＥＤＴＡおよび０．５％のＨｅｘ臭化アンモニウムと共に均質化し、細胞内ＭＰＯの安定化を助ける。組織を液体窒素中で冷凍し、３７℃の水浴中で溶解し、細胞膜の溶解を確実にするために１５秒間超音波処理する。この操作を３回反復する。その後試料を氷上に２０分間おき、１２０００×ｇで１５分間２−８℃で遠心する。上澄みを、これらの工程の後に分析する。
【０１４９】
試験混合物は、２．９ｍｌの５０ｍＭのＨ２ＫＰＯ４を０．０００５％Ｈ２Ｏ２を含む０．１６７ｏ−ジアニシジンと一緒に反応管に加えることによって調製される。過酸化水素が分解されると、ｏ−ジアニシジンが酸化され、濃度依存的に４６０ｎｍにて吸光する。混合物を２５℃まで加熱する。１００μＬの組織上澄みを反応管に加え、１分間２５℃でインキュベートし、その後１ｍｌを使い捨てのプラスチックのキュベットに移す。ＯＤを、２分の反応時間ごとに、反応混合物２．９ｍｌおよび０．５％臭化アンモニウム溶液１００μｌを含むブランクに対して、４６０ｎｍで測定する。
【０１５０】
酵素活性単位を、４６０ｎｍにおける吸光度を、精製したヒトＭＰＯ３１．１単位／ガラス瓶を用いて用意した標準曲線と比較することによって、定量化する。ＭＰＯを再び溶解し、５０ｍＭのＨ２ＫＰＯ４を、１０ｍＭのＥＤＴＡおよび０．５％のＨｅｘ臭化アンモニウムと共に用いて、四つの既知の濃度に連続的に希釈する。試料の吸光度を、この曲線に対して比較し、活性を決定する。
【０１５１】
組織学的分析は、次のように実行する。結腸組織を、１０％中性緩衝ホルマリン中に浸す。各々の結腸の試料を、評価のために四つの試料に分配する。ホルマリン固定した組織を、パラフィン包埋のために真空浸透処理装置中で加工処理する。試料を５μｍに細分し、その後、Ｂｏｕｇｈｔｏｎ−Ｓｍｉｔｈの後修正された尺度を用いて、盲検的に組織学的評価をするために、ヘマトキシリンおよびエオジン（Ｈ＆Ｅ）で染色する。スコアの記録が完了した後試料を明らかにし、データを表に記入し、多重平均比較を用いてＡＮＯＶＡ線型モデル化することによって分析する。
【０１５２】
本明細書において引用されている、全ての特許、出版物および他の文書は、出典明示により本明細書の一部とする。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、４−ヒドロキシビフェニルカルバルデヒドオキシム誘導体、エストロゲン剤としてのその使用、およびその調製方法に関する。
【０００２】
（背景技術）
哺乳類の組織におけるエストロゲンの多面発現効果はよく報告されてきており、現在エストロゲンは多くの臓器系に影響を与えると評価されている［ＭｅｎｄｅｌｓｏｈｎおよびＫａｒａｓ、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３４０：１８１０−１８１１（１９９９年）；Ｅｐｐｅｒｓｏｎら、Ｐｓｙｃｈｏｓｏｍａｔｉｃ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ６１：６７６−６９７（１９９９年）；Ｃｒａｎｄａｌｌ、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｗｏｍｅｎｓ Ｈｅａｌｔｈ ＆ Ｇｅｎｄｅｒ Ｂａｓｅｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ８：１１５５−１１６６（１９９９年）；ＭｏｎｋおよびＢｒｏｄａｔｙ、Ｄｅｍｅｎｔｉａ ＆ Ｇｅｒｉａｔｒｉｃ Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ １１：１−１０（２０００年）；ＨｕｒｎおよびＭａｃｒａｅ、Ｊｏｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｒｅｂｒａｌ Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ ＆ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ２０：６３１−６５２（２０００年）；Ｃａｌｖｉｎ、Ｍａｔｕｒｉｔａｓ ３４：１９５−２１０（２０００年）；Ｆｉｎｋｉｎｇら、Ｚｅｉｔｓｃｈｒｉｆｔ ｆｕｒ Ｋａｒｄｉｏｌｏｇｉｅ ８９：４４２−４５３（２０００年）；Ｂｒｉｎｃａｔ、Ｍｅｔｕｒｉｔａｓ ３５：１０７−１１７（２０００年）；Ａｌ−Ａｚｚａｗｉ、Ｐｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ７７：２９２−３０４（２００１年）］。エストロゲンは、いくつかの方法で組織に影響を与え得る。最も特徴的な作用機構は、遺伝子転写を変化させる、エストロゲン受容体との相互作用である。エストロゲン受容体は、リガンド活性化転写因子であり、核内ホルモン受容体スーパーファミリーに属している。このファミリーの他のメンバーには、プロゲステロン、アンドロゲン、糖質コルチコイドおよび鉱質コルチコイド受容体を含む。リガンドと結合すると、これらの受容体は二量化し、ＤＮＡ上の特定の配列に直接結合することによって、または順次特定のＤＮＡ配列に直接結合する（ＡＰＩのような）他の転写因子と相互作用することによって、遺伝子転写を活性化し得る［ＭｏｇｇｓおよびＯｒｐｈａｎｉｄｅｓ、ＥＭＢＯ Ｒｅｐｏｒｔｓ２：７７５−７８１（２００１年）、Ｈａｌｌら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２７６：３６８６９−３６８７２（２００１年）；ＭｃＤｏｎｎｅｌｌ、Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ Ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｐ３５１−３６１（２０００年）］。「相互調節」タンパク質のクラスはまた、リガンド結合受容体と相互作用し、さらに転写活性を調節し得る［ＭｃＫｅｎｎａら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ ２０：３２１−３４４（１９９９年）］。エストロゲン受容体は、リガンド依存性およびそれに無関係の方法の両方で、ＮＦκＢ介在性の転写を阻害し得ることもまた示された［Ｑｕａｅｄａｃｋｅｒｓら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １４２：１１５６−１１６６（２００１年）；Ｂｈａｔら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ６７：２３３−２４０（１９９８年）；Ｐｅｌｚｅｒら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ＆ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ２８６：１１５３−７（２００１年）］。
【０００３】
エストロゲン受容体はまた、リン酸化によって活性化され得る。このリン酸化は、ＥＧＦのような成長因子によって媒介され、リガンドを用いずに遺伝子転写に変化を引き起こす［ＭｏｇｇｓおよびＯｒｐｈａｎｉｄｅｓ、ＥＭＢＯ Ｒｅｐｏｒｔｓ２：７７５−７８１（２００１年）；Ｈａｌｌら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２７６：３６８６９−３６８７２（２００１年）］。
【０００４】
エストロゲンが細胞に影響を与え得るそれほど特徴付けられていない手段は、いわゆる膜受容体を介するものである。そのような受容体が存在するかは論争のあるところであるが、エストロゲンが非常に迅速な細胞からの非ゲノム性反応を誘導することが周知である。これらの効果の導入に関与する分子の存在は明確には単離されていないが、それはエストロゲン受容体の核型に少なくとも関連していることを示唆する根拠がある［Ｌｅｖｉｎ、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ９１：１８６０−１８６７（２００１年）；Ｌｅｖｉｎ、Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ＆ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ １０：３７４−３７７（１９９９年）］。
【０００５】
二つのエストロゲン受容体が、現在までに発見されている。一番目のエストロゲン受容体は約１５年前にクローニングされ、現在ＥＲαと呼ばれている［Ｇｒｅｅｎら、Ｎａｔｕｒｅ ３２０：１３４−９（１９８６年）］。二番目は比較的最近発見され、ＥＲβと呼ばれている［Ｋｕｉｐｅｒら、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ ９３：５９２５−５９３０（１９９６年）］。ＥＲβに対する早期の作用は、様々なリガンドに対するアフィニティを決定することに集中しており、実際ＥＲαとのいくつかの相違がみられた。ＥＲβの組織分布は、齧歯類においてよくマッピングされており、ＥＲαとは一致していない。マウスおよびラットの子宮のような組織は大部分がＥＲαを発現しており、一方マウスおよびラットの肺は大部分がＥＲβを発現している［Ｃｏｕｓｅら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １３８：４６１３−４６２１（１９９７年）；Ｋｕｉｐｅｒら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １３８：８６３−８７０（１９９７年）］。同一の臓器内でさえ、ＥＲαおよびＥＲβの分布は区分され得る。例えば、マウスの卵巣においては、ＥＲβは顆粒膜細胞において高く発現しており、ＥＲαの発現は莢膜および間質細胞に限られている［ＳａｒおよびＷｅｌｓｃｈ、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １４０：９６３−９７１（１９９９年）；Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １４０：２５８１−２５９１（１９９９年）］。しかしながら、受容体が共に発現している実例があり、ＥＲαおよびＥＲβがヘテロ二量体を形成し得るという試験管内での研究による証拠もある［Ｃｏｗｌｅｙら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２７２：１９８５８−１９８６２（１９９７年）］。
【０００６】
最も強力な体内で作られるエストロゲンは、１７βエストラジオールである。多数の化合物が、１７βエストラジオールの活性に似るかまたはそれをブロックすることが述べられてきた。１７βエストラジオールとおおよそ同一の生物学的効果を有する化合物は、「エストロゲン受容体アゴニスト」と呼ばれている。１７βエストラジオールの効果をブロックする化合物は、１７βエストラジオールと組み合わせて与える場合、「エストロゲン受容体アンタゴニスト」と呼ばれる。実際には、エストロゲン受容体アゴニストおよびエストロゲン受容体アンタゴニストの活性の間には連続性があり、いくつかの化合物はある組織においてはエストロゲン受容体アゴニストとして作用し、他の組織においてはエストロゲン受容体アンタゴニストとして作用する。混合した活性を有するこれらの化合物は、選択性エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭＳ）と呼ばれ、医薬上有用な試薬である（例えば、ＥＶＩＳＴＡ）［ＭｃＤｏｎｎｅｌｌ、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ７：Ｓ１０−Ｓ１５（２０００年）；Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎら、Ｈｕｍａｎ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｕｐｄａｔｅ ６：２１２−２２４（２０００年）］。何故同一の化合物が細胞特異的な効果を有し得るのかについての正確な理由は解明されていないが、受容体の立体構造上および／または相互調節タンパク質の環境上の違いが示唆されている。
【０００７】
エストロゲン受容体が、リガンドを結合する際に異なった立体構造をとることが一定期間知られてきた。しかしながら、この変化の重要性および巧妙さは、ごく最近明らかになった。ＥＲαおよびＥＲβの三次元構造は、様々なリガンドと結晶化することによって解明され、受容体−相互調節タンパク質相互作用に必要となるタンパク質配列に立体的障害をもたらすエストロゲン受容体アンタゴニストの存在下で、へリックス１２の復位を明確に示す［Ｐｉｋｅら、Ｅｍｂｏ １８：４６０８−４６１８（１９９９年）；Ｓｈｉａｕら、Ｃｅｌｌ ９５：９２７−９３７（１９９８年）］。それに加えて、ファージディスプレイの技術は、異なるリガンドの存在下でエストロゲン受容体と相互作用するペプチドを同定するために用いられてきた［Ｐａｉｇｅら、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ ９６：３９９９−４００４（１９９９年）］。例えば、完全なエストロゲン受容体アゴニストの１７βエストラジオールおよびジエチルスチルベストロールに結合したＥＲαの間で区別する、ペプチドを同定した。ＥＲαおよびＥＲβに結合したクロミフェンの間で区別するために、他のペプチドを示した。これらのデータは、各々のリガンドが、明確な生物学的活性を有する可能性がある、特有で予測できない立体構造に、受容体を配置する可能性を秘めていることを示している。
【０００８】
上記したように、エストロゲンは、一連の生物学的工程に影響を与える。それに加えて、性差が認められている場合（例えば、疾患頻度、治療に対する反応等）、説明としては、男性および女性の間のエストロゲンレベルの相違を含めるも可能である。
【０００９】
（発明の開示）
本発明は、式：
【化１】
［式中：
Ｒ１およびＲ２は、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、置換されていてもよいフェニル、または置換されていてもよい低級アルキルであり；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＣＮ、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよい低級アルキル、または置換されていてもよい低級アルコキシであり；
Ｒ８は、各々独立に、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、または置換されていてもよい低級アルキルであり；
Ｒ９は置換されていてもよい低級アルキルである］
で示される化合物、または医薬上許容されるその塩またはプロドラッグに関する。一つの好ましい実施形態として、Ｒ８はＨである。
【００１０】
他の態様として、本発明は、式：
【化２】
の化合物に関する。
さらに他の態様として、本発明は、式：
【化３】
の化合物に関する。
【００１１】
さらなる態様として、本発明は、式：
【化４】
［式中：
Ｒ１は、ＯＨ、または置換されていてもよい低級アルコキシであり；
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＣＮ、フェニル、低級アルキル、低級アルコキシであり、そのフェニル、低級アルキルおよび低級アルコキシは所望により置換されていてよい］
で示される化合物、または医薬上許容されるその塩またはプロドラッグに関する。
【００１２】
他の態様として、本発明は、一つまたはそれより多くの本発明の化合物および医薬上許容されるキャリアを含む、医薬組成物に関する。
【００１３】
さらに他の態様として、本発明は、炎症性腸疾患のような疾患の治療または阻害における、本発明の化合物の使用法に関する。
【００１４】
（発明の詳細な記載）
本発明は、新規な４'−ヒドロキシビフェニルカルバルデヒドオキシム誘導体を提供する。好ましくはエストロゲン剤として作用する、これらの化合物は、（クローン病および大腸炎を含む）炎症性腸疾患のような疾患の治療または阻害に有用である。一の態様において、本発明は、式：
【化５】
［式中：
Ｒ１およびＲ２は、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、ＣＮであり、置換されていてもよいフェニル、または置換されていてもよい低級アルキルであり；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＣＮであり、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよい低級アルキル、または置換されていてもよい低級アルコキシであり；
Ｒ８は、各々独立に、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９であり、または置換されていてもよい低級アルキルであり；
およびＲ９は置換されていてもよい低級アルキルである］
で示される化合物、または医薬上許容されるその塩またはプロドラッグに関する。一つの好ましい実施形態として、Ｒ８はＨである。
【００１５】
本発明に従った化合物は、
【化６】
であってよい。
ある態様として、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は、各々独立に、Ｈ、Ｃｌ、Ｆ、メチルまたはメトキシであり、Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、Ｆまたはメチルである。他の態様として、本発明は、式：
【化７】
の化合物に関する。
ある態様として、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は、各々独立に、Ｈ、Ｃｌ、Ｆ、メチルまたはメトキシであり、Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、Ｆまたはメチルである。
【００１６】
さらに他の態様として、本発明は、式：
【化８】
［式中：
Ｒ１は、ＯＨ、または置換されていてもよい低級アルコキシであり；
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＣＮ、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよい低級アルキル、置換されていてもよい低級アルコキシである］
ところの化合物、または医薬上許容されるその塩またはプロドラッグに関する。ある実施形態として、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、各々独立に、Ｈ、メチル、Ｃｌ、Ｆまたはメトキシである。
【００１７】
医薬上許容される塩は、本発明の化合物が塩基部分を含む場合、有機酸および無機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、乳酸、クエン酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、マロン酸、マンデル酸、リンゴ酸、フタル酸、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸、硫酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、カンフルスルホン酸、および同じように知られた許容される酸から形成され得る。塩はまた、本発明の化合物が酸部分を含む場合、アルカリ金属塩（例えばナトリウム、リチウムまたはカリウム）、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、炭素数１−６のアルキルアンモニウム塩または各々のアルキル基に炭素数１−６のジアルキルアンモニウム塩、および各々のアルキル基に炭素数１−６のトリアルキルアンモニウム塩のような、有機塩基および無機塩基から形成され得る。
【００１８】
本明細書で用いられている「アルキル」という用語は、単独で用いられる場合もまたは他の基の一部として用いられる場合も、置換したまたは置換していない脂肪族炭水化物鎖を指し、他に明記していない限りは、１ないし１２の炭素原子、好ましくは１ないし６の炭素原子を含む直鎖および分枝鎖を含むが、それだけに限定されない。例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｉ−ブチルおよびｔ−ブチルは、「アルキル」という用語によって包括される。「アルキル」の定義の中に特に含まれるものは、所望により置換してよい脂肪族炭水化物鎖である。
【００１９】
本明細書の定義において用いられている炭素数は、炭素骨格および炭素分枝を指すが、アルコキシ置換基などのような置換基の炭素原子は含めない。
【００２０】
本明細書で用いられている「アルケニル」という用語は、単独で用いられる場合もまたは他の基の一部として用いられる場合も、置換したまたは置換していない脂肪族炭水化物鎖を指し、２ないし８の炭素原子を有し、少なくとも一つの二重結合を含む直鎖および分枝鎖を含むが、それだけに限定されない。好ましくは、アルケニル部分は、１または２つの二重結合を有する。そのようなアルケニル部分は、ＥまたはＺ立体構造で存在してよく、本発明の化合物は両方の立体構造を含む。「アルケニル」の定義の中に特に含まれるものは、所望により置換してよい脂肪族炭水化物鎖である。Ｏ、ＳまたはＮ−Ｒ１のような、アルケニルに結合したヘテロ原子は、二重結合に関与している炭素原子に結合すべきでない。
【００２１】
本明細書で用いられている「フェニル」という用語は、単独で用いられる場合もまたは他の基の一部として用いられる場合も、置換したまたは置換していないフェニル基を指す。
【００２２】
所望により置換したアルキル、アルケニルおよびフェニルは、一つまたはそれより多くの置換基によって置換してよい。適当な任意の置換基は、独立に、ニトロ、シアノ、−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アルキルアルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシアルコキシ、パーフルオロアルキル、パーフルオロアルコキシ、アリールアルキル、アルキルアリール、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、アルキルチオ、−Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、（Ｒ１１）（Ｒ１２）Ｎ−アルコキシアルキル、（Ｒ１１）（Ｒ１２）Ｎ−アルキルアリールオキシアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｓ−アリール（式中ｓ＝０−２）または−Ｓ（Ｏ）ｓ−ヘテロアリール（式中ｓ＝０−２）から選択してよい。本発明のある具体例として、アルキル、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルについての好ましい置換基には、ニトロ、シアノ、−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、ハロ、ヒドロキシ、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アルコキシアルキルおよびアルコキシカルボニルを含む。本発明のある具体例として、アリールおよびヘテロアリールについての好ましい置換基には、−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、アルキル、ハロ、パーフルオロアルキル、パーフルオロアルコキシ、アリールアルキルおよびアルキルアリールを含む。
【００２３】
アルキルまたはアルケニル部分を置換する場合、例えば、典型的には１、２、３または多置換されてよい。ハロゲン置換基の例としては、１−ブロモビニル、１−フルオロビニル、１，２−ジフルオロビニル、２，２−ジフルオロビニル、１，２，２−トリフルオロビニル、１，２−ジブロモエタン、１，２−ジフルオロエタン、１−フルオロ−２−ブロモエタン、ＣＦ２ＣＦ３、ＣＦ２ＣＦ２ＣＦ３などを含む。
ハロゲンという用語は、臭素、塩素、フッ素およびヨウ素を含む。
【００２４】
「低級アルキル」という用語は、１ないし６の炭素原子を有するアルキル基を指し、ある具体例として、１ないし３の炭素原子が好ましい。
本明細書で用いられている「低級アルコキシ」という用語は、Ｒが１ないし６の炭素原子のアルキル基であり、ある具体例として１ないし３の炭素原子が好ましいところの、Ｒ−Ｏ−基を指す。
【００２５】
本発明に従って用いる場合、本発明に包含される化合物または物質を供給するということに関する「供給」という用語は、直接そのような化合物または物質を投与するか、または体内で同等量の化合物または物質を形成するプロドラッグ、誘導体または類似物を投与することのいずれかを意味する。
【００２６】
本発明の化合物は、少なくとも部分的にエストロゲン不足または過剰が影響する、またはエストロゲン剤の使用によって治療または阻害できる可能性のある、健康状態、障害または病態の治療または阻害に有用なエストロゲン受容体モジュレーターとして用いられ得る。本発明の化合物は、生成される体内のエストロゲンのレベルが非常に減少している、閉経前、閉経期、閉経後の患者を治療する上で特に有用である。閉経は、一般に最後の自然の月経期間として定義され、血流中の循環エストロゲンの実質的な減少につながる卵巣機能の停止によって特徴づけられる。本明細書で用いられている、閉経はまた、外科的な、化学的な、または早発性の卵巣機能の低下または停止につながる疾患によって引き起こされる、エストロゲン生成の減少状態を含む。
【００２７】
従って、本発明の化合物は、骨の正味の損失につながる、個体の新しい骨組織の形成および古い組織の再吸収の不均衡から生じ得る、骨粗鬆症の治療または阻害において、骨の脱灰の阻害において有用である。そのような骨の涸渇は、ある範囲の個体、特に閉経後の女性、両側卵巣摘出術を受けた女性、長期コルチコステロイド療法を受けているまたは受けた人々、性腺発育不全の人々およびクッシング症候群に罹患している人々に生じる。歯および口の骨を含めた、骨についての特別な要求である、交換は、骨折、欠陥のある骨構造を有する個体、および骨関係の外科治療および／または人工装具の埋め込みを受けた人々における、これらの化合物を用いてもまた行い得る。上で述べた問題に加えて、これらの化合物は、骨関節症、低カルシウム血症、高カルシウム血症、ページェット病、骨軟化症、骨石灰脱失、多発性骨髄腫および骨組織に有害な影響を与える他の形の癌の治療または阻害に用いられ得る。
【００２８】
本発明の化合物はまた、前立腺肥大、子宮平滑筋腫、乳癌、子宮内膜症、子宮内膜癌、多嚢胞性卵巣症候群、子宮内膜ポリープ、良性胸部疾患、子宮腺筋症、卵巣癌、メラノーマ、前立腺癌、大腸癌、神経膠腫または星状細胞芽腫のような中枢神経系の癌を含む、良性または悪性の異常組織増殖の治療または阻害に有用である。
【００２９】
本発明の化合物は心臓保護性であり、コレステロール、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）およびＬＤＬレベルの低下において；高コレステロール血症；高脂血症；心臓血管疾患；アテローム性動脈硬化症；末梢血管疾患；再狭窄および血管攣縮の阻害または治療において；免疫関連血管傷害につながる細胞の事象に由来する血管壁傷害の阻害において有用である。この心臓血管保護の特性は、閉経後の患者をエストロゲンで治療する際に骨粗鬆症を防ぐために、また男性においてエストロゲン治療が望ましい場合に非常に重要である。
【００３０】
本発明の化合物はまた抗酸化剤であり、それゆえに、フリーラジカル誘発性病態の治療または阻害に有用である。抗酸化剤療法を認可すべきと示されている特定の健康状態は、癌、中枢神経系障害、アルツハイマー病、骨疾患、加齢、炎症性疾患、末梢血管疾患、関節リウマチ、自己免疫疾患、呼吸窮迫、肺気腫、再灌流後傷害の予防、ウィルス性肝炎、慢性活動性肝炎、結核、乾癬、全身性エリテマトーデス、成人呼吸窮迫症候群、中枢神経系外傷および脳卒中のある場合である。
【００３１】
本発明の化合物はまた、認知機能の向上をもたらす上で、老人性痴呆、アルツハイマー病、認知力低下、神経変性疾患の治療または阻害する上で、神経保護または認知機能の向上をもたらす上で有用である。
【００３２】
本発明の化合物はまた、炎症性腸疾患、潰瘍性直腸炎、クローン病および大腸炎；ホットフラッシュ、膣または外陰部の萎縮、萎縮性膣炎、膣の乾燥、掻痒、性交疼痛、排尿困難、頻尿、尿失禁、尿路感染症を含む血管運動神経症状、ホットフラッシュ、筋痛症、関節痛、不眠症、刺激過敏などを含む血管運動神経症状のような更年期障害；男性型禿頭症； 皮膚の萎縮；アクネ；ＩＩ型糖尿病；機能不全性子宮出血；および不妊を治療または阻害する上で有用である。
【００３３】
本発明の化合物は、白血病、子宮内膜剥離、慢性腎疾患または肝疾患、または凝固機能疾患または障害のような、無月経であることが都合のよい病態において有用である。
本発明の化合物は、特にプロゲスチンと結合した場合、避妊薬として用いられ得る。
【００３４】
特定の病態または障害の治療または阻害のために投与する場合、有効用量は、治療を受ける個人に関する様々な身体的因子とともに、利用する特定の化合物、投与法、健康状態、およびその治療する病気の重篤度に依存して変化する可能性がある。本発明の化合物の有効な投与は、約０．１ｍｇ／日から約１０００ｍｇ／日までの経口用量で行ってよい。投与は、一回の用量でまたは二回またはそれより多くに分割した用量で、好ましくは、約１０ｍｇ／日から約６００ｍｇ／日まで、より好ましくは、約５０ｍｇ／日から約６００ｍｇ／日までである。投与する一日の用量は、投与経路によって変化させることが望まれる。
【００３５】
そのような用量は、経口、インプラントを介するもの、非経口（静脈内、腹膜内および皮下注射を含む）、直腸内、鼻腔内、膣内および経皮投与を含めた、本明細書の活性のある化合物をレシピエントの血流に与える際に有用であるあらゆる方法で投与してよい。
【００３６】
本発明の活性のある化合物を含む経口処方は、錠剤、カプセル、バッカル形態、トローチ、ロゼンジ、および経口用液体、懸濁液または溶液を含めた、従来用いられてきたあらゆる経口用形態を含んでいてよい。カプセルは、医薬上許容されるデンプン（例えば、トウモロコシ、ポテトまたはタピオカのデンプン）、糖、人工甘味料、結晶性および微晶質のセルロースのような粉末にしたセルロース、小麦粉、ゼラチン、ゴムその他のような不活性の充填剤および／または希釈剤との、活性のある化合物の混合物を含んでいてよい。有用な錠剤の処方は、従来の圧縮、湿性顆粒化または乾性顆粒化法によって作られ、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、雲母、ラウリル硫酸ナトリウム、微晶質のセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ポリビニルピロリジン、ゼラチン、アルギン酸、アラビアゴム、キサンゴム、クエン酸ナトリウム、複雑なシリケート、炭酸カルシウム、グリシン、デキストリン、スクロース、ソルビトール、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、ラクトース、カオリン、マンニトール、塩化ナトリウム、雲母、乾燥デンプンおよび粉末にした糖を含むが、それだけに限定されない、医薬上許容される希釈剤、結合剤、潤滑剤、錠剤分解剤、表面修飾剤（界面活性剤を含む）、懸濁剤または安定剤を利用してよい。好ましい表面修飾剤には、非イオン性および陰イオン性表面修飾剤を含む。表面修飾剤の代表例には、ポリキサマー１８８、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、コロイド状二酸化ケイ素、リン酸塩、硫酸ドデシルナトリウム、珪酸アルミニウムマグネシウムおよびトリエタノールアミンを含むが、それだけに限定されない。本明細書の経口処方は、活性のある化合物の吸収性を変化させるために、標準的な遅延性または徐放性処方を利用してよい。経口処方はまた、必要となる適切な溶解剤または乳化剤を含む、水中またはフルーツジュース中に活性成分を投与することを含んでいてよい。
ある場合においては、化合物をエーロゾルの形態で気道に直接投与することが望ましい可能性がある。
【００３７】
本発明の化合物はまた、腸管外にまた腹膜内に投与してよい。遊離塩基または医薬上許容される塩のようなこれらの活性のある化合物の溶液または懸濁液は、ヒドロキシプロピルセルロースのような界面活性剤と適切に混合した水中で調製し得る。分散剤はまた、グリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびそれらの油中の混合物中で調製し得る。保存および使用の通常の条件下では、これらの調製は、微生物の増殖を防ぐための保存剤を含む。
【００３８】
注射使用に適した医薬形態には、無菌の水溶液または分散液、および無菌の注射溶液または分散液を即座に調製するための無菌の粉末を含む。あらゆる場合において、その形態は無菌でなければならず、容易に注射できる程度に流動性がなければならない。製造および保存の条件下で安定でなければならず、細菌および真菌のような微生物の混入作用に対して保護されなければならない。キャリアは、例えば水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコールおよび液状ポリエチレングリコール）、それらの適当な混合物および植物油を含む、溶媒または分散媒であってよい。
【００３９】
本明細書の目的のために、経皮投与は、体表面、および上皮および粘膜組織を含む体内通路の内側の裏打ちを介するあらゆる投与を含むと考えられている。そのような投与は、現在の化合物または医薬上許容されるそれらの塩を、ローション、クリーム、フォーム、パッチ、懸濁液、溶液および坐薬（直腸および膣用）の形で用いて実行してよい。
【００４０】
経皮投与は、活性のある化合物、および活性のある化合物に対して反応性が無く、皮膚に対して無毒で、皮膚を介して血流に全身吸収させるための薬剤の輸送を可能にするキャリアを含む、経皮パッチを用いることによってなされてよい。キャリアは、クリームおよび軟膏、ペースト、ゲルおよび閉鎖装置のようなあらゆる数々の形態をとっていてよい。クリームおよび軟膏は、水の中に油または油の中に水のタイプのいずれかの、粘性の液体または半固体の乳濁液であってよい。石油中または活性成分を含む親水性の石油中に散在している吸収性の粉末を含むペーストもまた、適している可能性がある。様々な閉鎖装置は、活性成分を含むキャリアまたは基質と共にあるいはなしで、活性成分を含む保存器を覆う半透膜のように、活性成分を血流に放出するために用いてよい。他の閉鎖装置は、文献において知られている。
【００４１】
坐薬処方は、坐薬の融点を変化させるためのワックス、およびグリセリンを付加してまたは付加しないで、カカオバターを含めた伝統的な材料から作ってよい。様々な分子量のポリエチレングリコールのような、水溶性の坐薬の主成分もまた用いてよい。
【００４２】
本発明の化合物の調製に用いられる試薬は、市販で入手するか、または文献に記述されている標準的な操作で調製するどちらかであってよい。
本発明のいくつかの代表例の調製は、次のスキーム１−１１に記述されている。
【００４３】
【化９】
【００４４】
【化１０】
【００４５】
【化１１】
【００４６】
【化１２】
【００４７】
【化１３】
【００４８】
【化１４】
【００４９】
【化１５】
【００５０】
【化１６】
【００５１】
【化１７】
【００５２】
【化１８】
【００５３】
【化１９】
【００５４】
実施例１
４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸
方法Ａ．−７８℃のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中の（４−ブロモ−フェノキシ）−tert−ブチル−ジメチルシラン（２０ｍＬ、２３．４８ｇ、０．０８２モル）の溶液に、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍの溶液の３９．２ｍＬ、０．０９８モル）を、窒素存在下で数分間攪拌しながらゆっくりと加えた。その溶液を−７８℃で１時間攪拌し、ついで室温に一夜加温した。その反応物を０℃まで冷却し、水（２０ｍＬ）および２ＮのＨＣｌ（２０ｍＬ）を、その反応混合物に加えた。その後全混合物を、２ＮＨＣｌ（３６０ｍＬ）を加えて１０分間攪拌した。混合物を、酢酸エチル（３×２５０ｍＬ）を用いて抽出した。合した有機層を、約５０ｍＬの体積に濃縮した。結晶化は冷ヘキサンで誘発され、固体の生成物を濾過によって収集し、真空下で乾燥させて表題の化合物１４．５ｇ（７０％）を白色の固体として得た：１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．１９（６Ｈ，ｓ），０．９４（９Ｈ，ｓ），６．８０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．６９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３６Ｈｚ），７．８７（２Ｈ，ｓ）。
【００５５】
実施例２
４'−ヒドロキシ−３−メチル［１，１'−ビフェニル］−４−カルボニトリル
方法Ｂ．４−ブロモ−２−メチルベンゾニトリル（１．８ｇ，９．１８ミリモル）、４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（３．０ｇ，１１．９ミリモル）、炭酸ナトリウム（２Ｍの水溶液の１３．８ｍＬ、２７．５ミリモル）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．５３ｇ，０．４６ミリモル）、およびエチレングリコールジメチルエステル（７０ｍＬ）の混合物を、加熱して一晩還流した。混合物を室温まで冷却し、水に注ぎ、その後酢酸エチル（３ｘ）を用いて抽出し、塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。シリカクロマトグラフィー（１５％−２５％ 酢酸エチル−ヘキサン）によって精製し、表題の化合物１．８１ｇ（９４％）を黄色を帯びた固体として得た：融点１７７−１７８℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．５２（３Ｈ，ｓ），６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５０Ｈｚ），７．６０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４９Ｈｚ），７．７１（１Ｈ，ｓ），７．７７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１２Ｈｚ），９．７９（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ２２２０ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２０８（Ｍ−Ｈ）−。
Ｃ１４Ｈ１１ＮＯについての分析：
予測値：Ｃ：８０．３６，Ｈ：５．３０，Ｎ：６．６９
実測値：Ｃ：７９．９１，Ｈ：５．２７，Ｎ：６．５７
【００５６】
実施例３
４'−ヒドロキシ−３−メチル［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒド
乾燥したトルエン中の、４'−ヒドロキシ−３−メチル［１，１'−ビフェニル］−４−カルボニトリル（５００ｍｇ，２．３９ミリモル）溶液を−７８℃まで冷却し、ジイソブチルアルミニウム水素化物（トルエン中の１．５Ｍ溶液４．０ｍＬ，５．９８ミリモル）を全て同時に加えた。反応混合物を３．５時間以上かけて室温まで温めた。メタノール（１．２ｍＬ）を加え、続いて０℃の水（１．２ｍＬ）を加え、混合物を室温で２０分間攪拌した。１ＮのＨＣｌ溶液をｐＨ＜７になるまで攪拌しながら加えた。混合物を酢酸エチル（３ｘ）を用いて抽出し、塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。シリカクロマトグラフィー（１５％−２５％ 酢酸エチル−ヘキサン）によって精製し、表題の化合物４５９ｍｇ（９１％）を白色の固体として得た：融点１６１−１６２℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．６７（３Ｈ，ｓ），６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４１Ｈｚ），７．５９−７．６５（４Ｈ，ｍ），７．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０３Ｈｚ），９．７８（１Ｈ，ｓ），１０．２２（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６８０ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２１１（Ｍ−Ｈ）−。
Ｃ１４Ｈ１２Ｏ２についての分析：
予測値：Ｃ：７９．２３，Ｈ：５．７０
実測値：Ｃ：７８．７９，Ｈ：５．９０
【００５７】
実施例４
４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、４−ブロモベンズアルデヒド（７３０ｍｇ，３．９７ミリモル）を４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（１．３ｇ，５．１６ミリモル）と反応させることによって調製し、６００ｍｇ（４８％）の白色の結晶を得た：１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．２４（６Ｈ，ｓ），１．０１（９Ｈ，ｓ），６．９４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５４Ｈｚ），７．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５６Ｈｚ），７．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１９Ｈｚ），７．５３（２Ｈ，ｄ，８．２０Ｈｚ），１０．０４（１Ｈ，ｓ）。
【００５８】
実施例５
４'− ヒドロキシ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒド
６ｍＬの乾燥したＤＭＦ中の、４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（３２０ｍｇ，１．０３ミリモル）、無水ＫＦ（１２０ｍｇ，２．０６ミリモル）および４８％水性ＨＢｒ（３５μｌ，０．３１ミリモル）の混合物を、窒素存在下、室温で１時間攪拌した。ＴＬＣは出発物質の存在を示し、それゆえにさらに４８％水性ＨＢｒ（３５μｌ，０．３１ミリモル）を反応物に加え、混合物を１．５時間攪拌し続けた。混合物を冷却しながら１Ｎの水性ＨＣｌ（３０ｍＬ）に注いだ。合した抽出物を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させ、生成物（１００％）は直接次の工程に用いた。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４３Ｈｚ），７．６３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４６Ｈｚ），７．８３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１６Ｈｚ），７．９４（２Ｈ，ｄ，８．０２Ｈｚ），９．７９（１Ｈ，ｓ），１０．０１（１Ｈ，ｓ）。
【００５９】
実施例６
トリクロロ−メタンスルホン酸３−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル
方法Ｄ．０℃のジクロロメタン８０ｍＬ中の、２−クロロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（１．３１ｇ，８．４ミリモル）およびピリジン（１．１ｍＬ，１３．４ミリモル）溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（１．８４ｍＬ，３．０８ｇ，１０．９ミリモル）を加えた。溶液をゆっくりと室温まで温め、２．５時間攪拌した。溶液を０℃まで冷却し、氷水と共に攪拌してあらゆる過剰の無水物を分解した。混合物を、飽和重炭酸ナトリウムを加えることによってわずかに塩基性にした。生じた層を分離し、水層をジクロロメタン（３×１００ｍＬ）を用いて抽出した。合した有機層を塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、真空下で溶媒を除去してオレンジオイルを生成し、それをシリカクロマトグラフィー（５％酢酸エチル−ヘキサン）によって精製して、表題の化合物１．８３ｇ（７６％）を透明で無色の油として得た：１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．３５Ｈｚ，Ｊ＝８．６４Ｈｚ），８．０４−８．０７（２Ｈ，ｍ），１０．３０（１Ｈ，ｓ）。
【００６０】
実施例７
トリクロロ−メタンスルホン酸２−フルオロ−４−ホルミル−フェニルエステル
表題の化合物を、方法Ｄに従って、３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（１．２ｇ，８．５６ミリモル）をトリフルオロメタンスルホン酸無水物（１．８７ｍＬ，３．１４ｇ，１１．１ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色の油を得、それを精製することなく、直接次の工程に用いた：１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．５３−７．５８（１Ｈ，ｍ），７．７７−７．８５（２Ｈ，ｍ），１０．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４５Ｈｚ）。
【００６１】
実施例８
４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−クロロ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロ−メタンスルホン酸３−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（１．７８ｇ，６．１８ミリモル）を４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（２．０３ｇ，８．０３ミリモル）と反応させることによって調製し、０．９２ｇ（４３％）の白色の固体として得た：融点３８−３９℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．２３（６Ｈ，ｓ），０．９７（９Ｈ，ｓ），６．９８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ），７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ），７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ），１０．３４（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２３１／２３３（Ｍ−Ｈ）−（脱保護化した生成物イオン）。
Ｃ１９Ｈ２３ＣｌＯ２Ｓｉについての分析：
予測値：Ｃ：６５．７８，Ｈ：６．６８
実測値：Ｃ：６５．５９，Ｈ：６．６０
【００６２】
実施例９および１０
方法Ｂに従って、トリフルオロメタンスルホン酸２−フルオロ−４−ホルミル−フェニルエステル（２．１ｇ，７．７２ミリモル）を、４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（２．１４ｇ，８．４９ミリモル）と反応させて、次の二つの化合物を生成した。
４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−フルオロ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
１．６２ｇ（６３％）のろう状の黄色を帯びた固体：１ＨＮＭＲ（アセトン−ｄ６）：δ０．２８（６Ｈ，ｓ），１．０２（９Ｈ，ｓ），７．０２−７．０６（２Ｈ，ｍ），７．５７−７．６０（２Ｈ，ｍ），７．７１−７．７８（２Ｈ，ｍ），７．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９１Ｈｚ，Ｊ＝１．５１Ｈｚ），１０．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７３Ｈｚ）；１３ＣＮＭＲ（アセトン−ｄ６）：δ−４．２９，１８．８０，２６．００，１１６．８２（ｄ，Ｊ＝２３．９０Ｈｚ），１２１．１５，１２６．６９（ｄ，Ｊ＝３．２５Ｈｚ），１２８．４２（ｄ，１．２１Ｈｚ），１３１．３０（ｄ，Ｊ＝３．４８Ｈｚ），１３２．２０（ｄ，Ｊ＝３．４４Ｈｚ），１３５．２７（ｄ，Ｊ＝１３．６１），１３８．０９（ｄ，Ｊ＝６．６４Ｈｚ），１５７．２３，１６０．６８（ｄ，Ｊ＝２４８．５６Ｈｚ），１９１．５１；ＩＲ１６９２ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３３１（Ｍ＋Ｈ）＋，３７２（Ｍ＋Ｈ＋ＡＣＮ）＋。
Ｃ１９Ｈ２３ＦＯ２Ｓｉについての分析：
予測値：Ｃ：６９．０６，Ｈ：７．０２
実測値：Ｃ：６９．７１，Ｈ：７．３４
２−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
０．３２ｇ（１９％）の黄色を帯びた固体：融点１４９−１５０℃；１ＨＮＭＲ（アセトン−ｄ６）：δ７．０８−７．１３（２Ｈ，ｍ），７．６２−７．６７（２Ｈ，ｍ），７．８０−７．９１（２Ｈ，ｍ），７．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９２Ｈｚ，Ｊ＝１．５８Ｈｚ），８．９３（１Ｈ，ｓ），１０．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７３Ｈｚ）；ＩＲ１６６９ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２１５（Ｍ−Ｈ）−１。
Ｃ１３Ｈ９ＦＯ２についての分析：
予測値：Ｃ：７２．２２，Ｈ：４．２０
実測値：Ｃ：７１．３８，Ｈ：４．１２
【００６３】
実施例１１
４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−クロロ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−クロロ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（４０５ｍｇ，１．１７ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１５４ｍｇ，２．２２ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた油を得、それを精製なしで次の工程に用いた：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３６２／３６４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００６４】
実施例１２
４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−フルオロ−［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−フルオロ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（４５０ｍｇ，１．３６ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１９０ｍｇ，２．７３ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体を得、それを精製なしで次の工程に用いた：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３４４（Ｍ−Ｈ）−，３４６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００６５】
実施例１３
３−フルオロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、４−ブロモ−２−フルオロ−カルバルデヒド（３ｇ，１４．８ミリモル）を４−メトキシフェニルボロン酸（２．７０ｇ，１７．８ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体３．２ｇ（９４％）を得た：融点８５−８６℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．８３（３Ｈ，ｓ），７．０６−７．０９（２Ｈ，ｍ），７．７０−７．７５（２Ｈ，ｍ），７．７９−７．８２（２Ｈ，ｍ），７．８８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ），１０．２２（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６８１ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２３１（Ｍ＋Ｈ）＋。
Ｃ１４Ｈ１１ＦＯ２についての分析：
予測値：Ｃ：７３．０３，Ｈ：４．８２
実測値：Ｃ：７２．９９，Ｈ：４．７３
【００６６】
実施例１４
３−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
方法Ｆ．０℃の塩化メチレン（３５ｍＬ）中の、３−フルオロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（０．９８６ｇ，４．２９ミリモル）の混合物に、三臭化ホウ素（塩化メチレン中１Ｎの溶液１０．７ｍＬ，１０．７ミリモル）をゆっくりと加えた。混合物をゆっくりと室温まで温め、一晩中攪拌した。水（４ｍＬ）を、氷水の水槽中で攪拌しながら、混合物に注入した。生じた混合物を水に注ぎ、酢酸エチル（３×）を用いて抽出した。合した有機層を塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させ、シリカカラムクロマトグラフィー（１５％−３０％酢酸エチル−ヘキサン）によって精製して、表題の化合物１５０ｍｇ（１６％）を白色の固体として得た。分析用試料は逆相分取用ＨＰＬＣによって供給された：融点１６４−１６６℃；１ＨＮＭＲ（アセトン−ｄ６）：δ７６．９８−７．０１（２Ｈ，ｍ），７．５６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．４９Ｈｚ，Ｊ＝１．６４Ｈｚ），７．６３−７．６６（１Ｈ，ｍ），７．６７−７．７０（２Ｈ，ｍ），７．８９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８５Ｈｚ），８．８８（１Ｈ，ｂｓ），１０．３１（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２１５（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ９ＦＯ２として：
予測値：Ｃ：７２．２２，Ｈ：４．２０
実測値：Ｃ：７１．８３，Ｈ：４．０４
【００６７】
実施例１５
トリフルオロ−メタンスルホン酸２−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル
表題の化合物を、方法Ｄに従って、３−クロロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（５ｇ，３１．９ミリモル）をトリフルオロメタンスルホン酸無水物（７．０ｍＬ，１１．７ｇ，４１．５ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色の油９．１５ｇ（１００％）を得、それを精製することなく、直接次の工程に用いた：１ＨＮＭＲ：δ７．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４８Ｈｚ），８．０７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５１Ｈｚ，Ｊ＝１．９３Ｈｚ），８．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９２Ｈｚ），１０．０４（１Ｈ，ｓ）。
【００６８】
実施例１６
２−クロロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロ−メタンスルホン酸２−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（５ｇ，１７．４ミリモル）を４−メトキシフェニルボロン酸（３．４４ｇ，２２．６ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体３．８３ｇ（８９％）を得た：融点８５−８７℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．８２（３Ｈ，ｓ），７．０７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８３Ｈｚ），７．４６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４５Ｈｚ），７．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８７Ｈｚ），７．９２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８７Ｈｚ，Ｊ＝１．５６Ｈｚ），８．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４９Ｈｚ）；１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ５５．１４，１１３．７２，１２７．８０，１２９．７２，１３０．４２，１３０．８２，１３２．１５，１３２．２１，１３６．１１，１４４．９０，１５９．３３，１９１．７３；ＩＲ１６９２ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ２４６／２４８Ｍ＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１１ＣｌＯ２として：
予測値：Ｃ：６８．１６，Ｈ：４．４９
実測値：Ｃ：６７．７６，Ｈ：４．３６
【００６９】
実施例１７
２'−クロロ−４'−（ジブロモメチル）−１，１'−ビフェニル−４−オール
表題の化合物を、方法Ｆに従って、２−クロロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（８００ｍｇ，３．２５ミリモル）を三臭化ホウ素（塩化メチレン中１Ｎの溶液８．１ｍＬ，８．１３ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体６００ｍｇ（５０％）を得た：融点１０７−１０８℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５２Ｈｚ），７．２９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５０Ｈｚ），７．４３（１Ｈ，ｓ），７．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１２Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０７Ｈｚ，Ｊ＝１．８３Ｈｚ），７．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７９Ｈｚ），９．７１（１Ｈ，ｂｓ）；１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ４０．６６，１１４．９４，１２５．６６，１２７．３４，１２８．１４，１３０．３９，１３０．８７，１３１．８０，１４０．９５，１４２．１４，１５７．３６；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３７３／３７５／３７７／３７９（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ９Ｂｒ２ＣｌＯとして：
予測値：Ｃ：４１．４８，Ｈ：２．４１
実測値：Ｃ：４１．６４，Ｈ：２．１４
【００７０】
実施例１８
トリフルオロ−メタンスルホン酸４−ホルミル−３−メトキシ−フェニルエステル
表題の化合物を、方法Ｄに従って、４−ヒドロキシ−２−メトキシベンズアルデヒド（３ｇ，１９．７ミリモル）をトリフルオロメタンスルホン酸無水物（４．３ｍＬ，７．２ｇ，２５．６ミリモル）と反応させることによって調製し、褐色のシロップを得、それを精製なしで次の工程に用いた：１ＨＮＭＲ：δ３．９７（３Ｈ，ｓ），７．２１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．６４Ｈｚ，Ｊ＝２．１７Ｈｚ），７．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２４Ｈｚ），７．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６４Ｈｚ），１０．３１（１Ｈ，ｓ）。
【００７１】
実施例１９
トリフルオロ−メタンスルホン酸４−ホルミル−２−メチル−フェニルエステル
表題の化合物を、方法Ｄに従って、４−ヒドロキシ−３−メチルベンズアルデヒド（２．５ｇ，１８．４ミリモル）をトリフルオロメタンスルホン酸無水物（４．０ｍＬ，６．７５ｇ，２３．９ミリモル）と反応させることによって調製し、褐色の油を得、それを精製なしで直接次の工程に用いた。
【００７２】
実施例２０
４'−ヒドロキシ−３−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロ−メタンスルホン酸４−ホルミル−３−メトキシ−フェニルエステル（１１．０ミリモル）を４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（３．５０ｇ，１３．８６ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体８８０ｍｇ（３５％、２工程にわたって）を得た：融点１５９−１６１℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＤＯ−ｄ６）：δ４．０１（３Ｈ，ｓ），６．８９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６２Ｈｚ），７．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１６Ｈｚ），７．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１５Ｈｚ），７．６６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６３Ｈｚ），７．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０９Ｈｚ），９．８０（１Ｈ，ｓ），１０．３４（１Ｈ，ｓ）；融点１５９−１６１℃；ＩＲ１６６０ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２２７（Ｍ−Ｈ）−，２２９（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１２Ｏ３として：
予測値：Ｃ：７３．６７，Ｈ：５．３０
実測値：Ｃ：７３．４４，Ｈ：４．９９
【００７３】
実施例２１
４'−ヒドロキシ−２−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロ−メタンスルホン酸４−ホルミル−２−メチル−フェニルエステル（９．３ミリモル）を４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（２．３５ｇ，９．３ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体１．１２ｍｇ（５７％、２工程にわたって）を得た：融点９４−９６℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：）：δ２．３３（３Ｈ，ｓ），６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５５Ｈｚ），７．２２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５１Ｈｚ），７．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ），７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８２Ｈｚ），７．８１（１Ｈ，ｓ），９．６５（１Ｈ，ｓ），１０．００（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６７０ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２１１（Ｍ−Ｈ）−，２１３（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：７９．２３，Ｈ：５．７０
実測値：Ｃ：７７．４９，Ｈ：５．６７
【００７４】
実施例２２
３−フルオロ−４−メトキシフェニルボロン酸
表題の化合物を、方法Ａに従って、４−ブロモ−２−フルオロアニソール（１０ｇ，０．０４９モル）をｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍの溶液２３．４ｍＬ，０．０５９モル）と、続いてトリイソプロピルホウ素（４５．２ｍＬ，３６．９ｇ，０．１９６モル）と反応させることによって調製し、白色の固体７．１ｇ（８５．２％）を得た：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ１６９（Ｍ−Ｈ）−。
【００７５】
実施例２３
３−クロロ−３'−フルオロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロ−メタンスルホン酸３−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（２．８ｇ，９．６２ミリモル）を３−フルオロ−４−メトキシフェニルボロン酸（１．８ｇ，１０．６ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体１．８７ｇ（７４％、２工程にわたって）を得た：融点１１６−１１８℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．９１（３Ｈ，ｓ），７．３０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．６６−７．６８（１Ｈ，ｍ），７．７９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．９１Ｈｚ，Ｊ＝２．４７Ｈｚ），７．８５−７．８７（１Ｈ，ｍ），７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２４Ｈｚ），７．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６５Ｈｚ），１０．３４（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６８８ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２６５／２６７（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１０ＣｌＦＯ２として：
予測値：Ｃ：６３．５３，Ｈ：３．８１
実測値：Ｃ：６３．２９，Ｈ：３．６３
【００７６】
実施例２４
３−クロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｆに従って、３−クロロ−３'−フルオロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（９９０ｍｇ，３．７５ミリモル）を三臭化ホウ素（塩化メチレン中１Ｎの溶液１１．２５ｍＬ，１１．２５ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体９４０ｍｇ（１００％）を得た。化合物は、精製なしで次の工程に用いた。分析用試料はＨＰＬＣ精製によって得られた：融点２０６−２０８℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．０６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．５１−７．５３（１Ｈ，ｍ），７．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４７Ｈｚ，Ｊ＝１２．６３Ｈｚ），７．８１−７．８３（１Ｈ，ｍ），７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ），７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６６Ｈｚ），１０．３２９（１Ｈ，ｓ），１０．３３０（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６６７ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２４９／２５１（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ８ＣｌＦＯ２として：
予測値：Ｃ：６２．２９，Ｈ：３．２２
実測値：Ｃ：６１．９７，Ｈ：３．２１
【００７７】
実施例２５
３−クロロ−３' ，５'−ジフルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロ−メタンスルホン酸３−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（１ｇ，３．５ミリモル）を３' ，５'−ジフルオロ−４−tert−ブチルジメチルシリオキシボロン酸（１．１ｇ，３．８ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体０．５６ｇ（６０％）を得た：融点２３３−２３５℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．６４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８５Ｈｚ），７．８５−７．９１（２Ｈ，ｍ），７．９８（１Ｈ，ｓ），１０．３３（１Ｈ，ｓ），１０．７０（１Ｈ，ｂｓ）；ＩＲ１６６５ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（２６７／２６９）（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ７ＣｌＦ２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：５８．１２，Ｈ：２．６３
実測値：Ｃ：５７．７９，Ｈ：２．７２
【００７８】
実施例２６および２７
トリフルオロ−メタンスルホン酸３−クロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（３．７８ｇ，１３．１２ミリモル）を、方法Ｂに従って、４−メトキシ−２−メチルフェニルボロン酸（２．６１ｇ，１５．７ミリモル）と反応させ、二つの化合物を生成した：
３−クロロ−４'−メトキシ−２'−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
２．１８ｇ（６４％）の白色の固体：１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．２６（３Ｈ，ｓ），３．７９（３Ｈ，ｓ），６．８８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４１Ｈｚ，Ｊ＝２．６６Ｈｚ），６．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．５０Ｈｚ），７．２３（１Ｈ，Ｊ＝８．４０Ｈｚ），７．５０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９３Ｈｚ，Ｊ＝１．３２Ｈｚ），７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５３Ｈｚ），７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５７Ｈｚ），１０．３６（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６８２ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２６１／２６３（Ｍ＋Ｈ）＋，３７２（Ｍ＋Ｈ＋ＡＣＮ）＋。
元素分析：Ｃ１５Ｈ１３ＣｌＯ２として：
予測値：Ｃ：６９．１０，Ｈ：５．０３
実測値：Ｃ：６９．１３，Ｈ：４．７３
４，４' '−ジメトキシ− ２，２' '−ジメチル−１，１'： ３'，１' '−テルフェニル−４'−カルバルデヒド
０．５６ｇ（１２％）無色；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．１０（３Ｈ，ｓ），２．２９（３Ｈ，ｓ），３．７８（３Ｈ，ｓ），３．８０（３Ｈ，ｓ），６．８５−６．８８（２Ｈ，ｍ），６．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３８Ｈｚ），６．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３８Ｈｚ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３２Ｈｚ），７．２４−７．２５（２Ｈ，ｍ），７．５２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．７４Ｈｚ，Ｊ＝１．７８Ｈｚ），７．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３３Ｈｚ），９．６８（１Ｈ，ｓ）；ＩＲ１６７９ｃｍ−１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３４７（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ２３Ｈ２２Ｏ３として：
予測値：Ｃ：７９．７４，Ｈ：６．４０
実測値：Ｃ：７９．２５，Ｈ：６．０５
【００７９】
実施例２８
３−クロロ−４'−ヒドロキシ−２'−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
密封したチューブの中の３−クロロ−４'−メトキシ−２'−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（１．０ｇ，３．８４ミリモル）および塩酸ピリジニウム（６ｇ）を、攪拌しながら１時間１９５℃で加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、２ＮのＨＣｌ溶液および酢酸エチルと共に攪拌した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（ｘ２）を用いて抽出した。合した有機層を塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させ、暗緑色の固体（１ｇ）を生成した。生成物は、さらなる何らかの精製なしで用いた。分析用試料は、ＨＰＬＣ精製によって得られ、白色の固体を得た：融点１２５−１２７℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．２１（３Ｈ，ｓ），６．６８−６．７２（２Ｈ，ｍ），７．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１５Ｈｚ），７．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８９Ｈｚ），７．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４８Ｈｚ），７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９８Ｈｚ），９．６２（１Ｈ，ｓ），１０．２＝３５（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２４５／２４７（Ｍ−Ｈ）−，２４７／２４９（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１１ＣｌＯ２として：
予測値：Ｃ：６８．１６，Ｈ：４．４９
実測値：Ｃ：６７．６３，Ｈ：４．４３
【００８０】
実施例２９
４'−ヒドロキシ−３−メチル［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム
１５ｍＬの無水メタノール中の、４'−ヒドロキシ−３−メチル［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒド（３１０ｍｇ，１．４６ミリモル），ヒドロキシルアミン塩酸塩（２０３ｍｇ，２．９２ミリモル）およびピリジン（２３６μｌ，２．９２ミリモル）の混合物を、２．５時間還流した。溶媒を減圧下で除去し、混合物を酢酸エチルおよび水中に溶解し、酢酸エチル（ｘ３）を用いて抽出し、塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過した。溶媒を蒸発させ、再結晶化（酢酸エチル、アセトンおよびヘキサン）によって精製し、表題の化合物１７７ｍｇ（５３％）を黄色を帯びた固体として得た：融点１９５−１９７℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．４３（３Ｈ，ｓ），６．８４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４８Ｈｚ），７．４２−７．４５（２Ｈ，ｍ），７．５２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５１Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．００Ｈｚ），８．３２（１Ｈ，ｓ），９．６０（１Ｈ，ｓ），１１．２５（１Ｈ，ｓ）；１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１９．６２，１１５．６０，１２３．４０，１２６．６０，１２７．５６，１２７．９９，１２９．０５，１３０．０３，１３６．３４，１４０．４３，１４６．８０，１５７．２４；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２２６（Ｍ−Ｈ）−，２２８（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１３ＮＯ２として：
予測値：Ｃ：７３．９９，Ｈ：５．７７，Ｎ：６．１６
実測値：Ｃ：７３．８１，Ｈ：５．７５，Ｎ：６．０４
【００８１】
実施例３０
４'−ヒドロキシ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、４'−ヒドロキシ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒド（１．０３ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１４０ｍｇ，２ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体１９３ｍｇ（７９％，２工程にわたって）を得た：融点２０７−２１０℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３７Ｈｚ），７．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３９Ｈｚ），７．６２（４Ｈ，ｓ），８．１５（１Ｈ，ｓ），９．６２（１Ｈ，ｓ），１１．２１（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２１２（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ１１ＮＯ２として：
予測値：Ｃ：７３．２３，Ｈ：５．２０，Ｎ：６．５７
実測値：Ｃ：７２．７８，Ｈ：５．４１，Ｎ：６．３８
【００８２】
実施例３１
３−クロロ−４'−ヒドロキシ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム
方法Ｅ．フッ化テトラブチルアンモニウム（テトラヒドロフラン中の１．０Ｍ溶液１．２９ｍＬ、１．２９３ミリモル）を、テトラヒドロフラン１０ｍＬ中の４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−クロロ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム（１．１７ミリモル）溶液に加えた。混合物を室温で１０分間攪拌し、その後酢酸エチルおよび水に注いだ。生じた層を分離し、水層を酢酸エチル（３ｘ）を用いて抽出した。合した有機層を塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、溶媒を真空下で除去した。シリカクロマトグラフィー（２０％−３０％酢酸エチル−ヘキサン）によって精製し、表題の化合物０．１８６ｍｇ（６４％）を黄色を帯びた固体として得た：融点１８７−１８９℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５５Ｈｚ），７．５６−７．６３（３Ｈ，ｍ），７．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６０Ｈｚ），７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２６Ｈｚ），８．３６（１Ｈ，ｓ），９．７５（１Ｈ，ｓ），１１．６６（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２４６（Ｍ−Ｈ）−，２４８（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ１０ＣｌＮＯ２として：
予測値：Ｃ：６３．０４，Ｈ：４．０７，Ｎ：５．６６
実測値：Ｃ：６２．９６，Ｈ：４．１０，Ｎ：５．４２
【００８３】
実施例３２
２−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｅに従って、４'−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−フルオロ−［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム（１．０２ミリモル）をフッ化テトラブチルアンモニウム（テトラヒドロフラン中の１．０Ｍ溶液１．１２ｍＬ、１．１２ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体１９８ｍｇ（８４％）を得た：融点１７８−１８０℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８４−６．８９（２Ｈ，ｍ），７．３９−５．５４（５Ｈ，ｍ），８．１７（１Ｈ，ｓ），９．７１（１Ｈ，ｓ），１１．４３（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２３０（Ｍ−Ｈ）−，２３２（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ１０ＦＮＯ２として：
予測値：Ｃ：６７．５３，Ｈ：４．３６，Ｎ：６．０６
実測値：Ｃ：６７．１３，Ｈ：４．１１，Ｎ：６．００
【００８４】
実施例３３
３−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、３−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（１５４ｍｇ，０．７１３ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（９９ｍｇ，１．４３ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体１５６ｍｇ（９５％）を得た：融点１８１−１８３℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８４−６．８７（２Ｈ，ｍ），７．４８−７．５３（２Ｈ，ｍ），７．５７−７．６０（２Ｈ，ｍ），７．７６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１４Ｈｚ），８．２２（１Ｈ，ｓ），９．７４（１Ｈ，ｓ），１１．５６（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２３０（Ｍ−Ｈ）−，２３２（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ１０ＦＮＯ２として：
予測値：Ｃ：６７．５３，Ｈ：４．３６，Ｎ：６．０６
実測値：Ｃ：６８．１０，Ｈ：４．２８，Ｎ：６．０１
【００８５】
実施例３４
２−クロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、２'−クロロ−４'−（ジブロモメチル）−１，１'−ビフェニル−４−オール（２７０ｍｇ，０．７２２ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１８５ｍｇ，２．６６ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体１６０ｍｇ（９０％）を得た：融点１７８−１７９℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５４Ｈｚ），７．２８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５１Ｈｚ），７．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９８Ｈｚ），７．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６５Ｈｚ，Ｊ＝１．４２Ｈｚ），７．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．３４Ｈｚ），８．１８（１Ｈ，ｓ），９．６７（１Ｈ，ｓ），１１．４５（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２４６／２４８（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ１０ＣｌＮＯ２として：
予測値：Ｃ：６３．０４，Ｈ：４．０７，Ｎ：５．６６
実測値：Ｃ：６３．０７，Ｈ：３．９９，Ｎ：５．６７
【００８６】
実施例３５
４'−ヒドロキシ−３−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、４'−ヒドロキシ−３−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（２２５ｍｇ，０．９８６ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１３７ｍｇ，１．９７ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体２１０ｍｇ（８８％）を得た：融点２２８−２３０℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．９１（３Ｈ，ｓ），６．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ），７．２１（１Ｈ，ｓ），７．５６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ），７．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９８Ｈｚ），８．２８（１Ｈ，ｓ），９．６３（１Ｈ，ｓ），１１．１９（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２４２（Ｍ−Ｈ）−，２４４（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１３ＮＯ３として：
予測値：Ｃ：６９．１２，Ｈ：５．３９，Ｎ：５．７６
実測値：Ｃ：６８．８７，Ｈ：５．２９，Ｎ：５．６４
【００８７】
実施例３６
４'−ヒドロキシ−２−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、４'−ヒドロキシ−２−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（３５０ｍｇ，１．６５ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（２３０ｍｇ，３．３０ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体３６０ｍｇ（９６％）を得た：融点１６９−１７１℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．２５（３Ｈ，ｓ），６．８２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５２Ｈｚ），７．１６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４５Ｈｚ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８４Ｈｚ），７．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９３Ｈｚ），７．４７（１Ｈ，ｓ），８．１１（１Ｈ，ｓ），９．５２（１Ｈ，ｓ），１１．１９（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２２６（Ｍ−Ｈ）−，２２８（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１３ＮＯ２として：
予測値：Ｃ：７３．９９，Ｈ：５．７７，Ｎ：６．１６
実測値：Ｃ：７３．７２，Ｈ：５．６３，Ｎ：６．３７
【００８８】
実施例３７
３−クロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、３−クロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（１．５２ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（２３３ｍｇ，３．３４ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色を帯びた固体２６０ｍｇ（６６％）を得た：融点１９８−２００℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．０３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．４１−７．４３（１Ｈ，ｍ），７．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．９１Ｈｚ，Ｊ＝２．２０Ｈｚ），７．６４−７．６６（１Ｈ，ｍ），７．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９２Ｈｚ），７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２４Ｈｚ），８．３６（１Ｈ，ｓ），１０．１６（１Ｈ，ｂｓ），１１．６８（１Ｈ，ｂｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２６４／２６６（Ｍ−Ｈ）−，２６６／２６８（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ９ＣｌＦＮＯ２として：
予測値：Ｃ：５８．７７，Ｈ：３．４１，Ｎ：５．２７
実測値：Ｃ：５８．６７，Ｈ：３．６５，Ｎ：４．９９
【００８９】
実施例３８
３−クロロ−３'， ５'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、３−クロロ−３'， ５'−ジフルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（２００ｍｇ，０．７４６ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１５６ｍｇ，２．２４ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体１００ｍｇ（４７％）を得た：融点２１６−２１９℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．５４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５１Ｈｚ），７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９７Ｈｚ），７．８４−７．８６（２Ｈ，ｍ），８．３７（１Ｈ，ｓ），１０．５２（１Ｈ，ｓ），１１．７４（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２８２／２８４（Ｍ−Ｈ）−，２８４／２８６（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ８ＣｌＦ２ＮＯ２として：
予測値：Ｃ：５５．０５，Ｈ：２．８４，Ｎ：４．９４
実測値：Ｃ：５４．９６，Ｈ：３．０２，Ｎ：４．７５
【００９０】
実施例３９
３−クロロ−４'−ヒドロキシ−２'−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｃに従って、無水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）およびメタノール中で、３−クロロ−４'−ヒドロキシ−２'−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（５００ｍｇ，２．０３ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（４２５ｍｇ，６．１０ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体３５０ｍｇ（５７％，２工程にわたって）を得た：融点１６９−１７１℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．１９（３Ｈ，ｓ），６．６５−６．７０（２Ｈ，ｍ），７．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１４Ｈｚ），７．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０５Ｈｚ），７．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４０Ｈｚ），７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ），８．３８（１Ｈ，ｓ），９．５１（１Ｈ，ｓ），１１．６９（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２６０／２６２（Ｍ−Ｈ）−，２６２／２６４（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ１２ＣｌＮＯ２として：
予測値：Ｃ：６４．２５，Ｈ：４．６２，Ｎ：５．３５
実測値：Ｃ：６３．８７，Ｈ：４．４３，Ｎ：５．３１
【００９１】
実施例４０
（２，６−ジクロロ−４−メトキシ−フェニル）−メタノール
３，５ジクロロアニソール（１６．３９ｇ，９２．５９ミリモル），ＨＣｌ（濃縮した溶液２５０ｍＬ）および硫酸（濃縮した溶液２．５ｍＬ）の混合物を、６０℃で一晩中攪拌した。混合物を室温まで冷却し、有機層を除去した。水層をジクロロメタン（２ｘ１００ｍＬ）を用いて抽出した。合した有機層を水で洗浄し、溶媒を蒸発させることによって除去した。残存している油に、ＮａＯＨ（１Ｎ溶液１８０ｍＬ）およびジオクサン（８５ｍＬ）を加えた。混合物を３時間還流しながら攪拌し、室温まで冷却した。有機層を除去し、水層をジクロロメタン（３ｘ１００ｍＬ）を用いて抽出した。合した有機層を水で洗浄し、塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過した。残渣をシリカ（９０％ヘキサン−１０％酢酸エチル）上で精製し、表題の化合物５．８２ｇ（３０％）を白色の固体として得た：融点７１−７２℃；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．８８（１Ｈ，ｓ），３．７３（３Ｈ，ｓ），４．８１（２Ｈ，ｓ），６．８１（２Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ２０６／２０８／２１０（Ｍ＋）。
元素分析：Ｃ８Ｈ８Ｃｌ２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：４６．４１，Ｈ：３．８９
実測値：Ｃ：４６．３８，Ｈ：３．６９
【００９２】
実施例４１
２，６−ジクロロ−４−メトキシ−ベンズアルデヒド
ベンゼン（１００ｍＬ）中の、（２，６−ジクロロ−４−メトキシ−フェニル）−メタノール（５．６９ｇ，２７．４９ミリモル）およびＭｎＯ２（１５ｇ）の懸濁液を、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ ｔｒａｐを利用して、還流しながら一晩中攪拌した。懸濁液を室温まで冷却し、Ｃｅｌｉｔｅによって濾過し、溶媒を蒸発させることによって除去し、粗製白色固体４．６９ｇ（８３％）を得た。分析用試料は、メタノールで再結晶化することによって得られ、白色の針状結晶を得た：融点１０４−１０６℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．９０（３Ｈ，ｓ），７．２１（２Ｈ，ｓ），１０．２９（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ２０４／２０６／２１８（Ｍ＋）。
元素分析：Ｃ８Ｈ６Ｃｌ２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：４６．８６，Ｈ：２．
実測値：Ｃ：４６．６７，Ｈ：２．８９
【００９３】
実施例４２
２，６−ジクロロ−４−ヒドロキシ−ベンズアルデヒド
０℃のジクロロメタン（１２０ｍＬ）の、２，６−ジクロロ−４−メトキシ−ベンズアルデヒド（３．４４ｇ，１６．８ミリモル）溶液に、三臭化ホウ素（ジクロロメタン１Ｎ４２ｍＬ、４２ミリモル）をゆっくりと加えた。溶液を一晩中攪拌しながら室温まで温め、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２５０ｍＬ）によって急冷した。生じた混合物を酢酸エチル（３ｘ２００ｍＬ）を用いて抽出した。合した有機層を水で洗浄し、塩性溶液を用いて洗浄し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過した。溶媒を蒸発させることによって除去し、残渣をシリカ（７０％ヘキサン−３０％酢酸エチル）上で精製し、桃色の固体２．１９ｇ（６８％）を得た。酢酸エチル−ヘキサンとともに粉砕することで、表題の化合物の分析用試料を白色固体として得た：融点２１４−２１７℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．９５（２Ｈ，ｓ），１０．２６（１Ｈ，ｓ），１１．４４（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ１８９．８／１９１．８／１９３．８（Ｍ＋）。
元素分析：Ｃ７Ｈ４Ｃｌ２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：４４．０２，Ｈ：２．１１
実測値：Ｃ：４４．０８，Ｈ：２．０７
【００９４】
実施例４３
３，５−ジクロロ−４−ホルミル−フェニルトリフルオロメタンスルホン酸塩
表題の化合物を、方法Ｅに従って、２，６−ジクロロ−４−ヒドロキシ−ベンズアルデヒド（２．３５ｇ，１２．３ミリモル）をトリフルオロメタンスルホン酸無水物（４．５１ｇ，１６．０ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色の油３．４５ｇ（８７％）を得た。この油のＴＬＣ分析は、放置することで出発物質のフェノールに分解することを示した。１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．０３（２Ｈ，ｓ），１０．３１（１Ｈ，ｓ）。
【００９５】
実施例４４
３，５−ジクロロ−４'ヒドロキシ−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｃに従って、３，５−ジクロロ−４−ホルミル−フェニルトリフルオロメタンスルホン酸塩（０．７３ｇ，２．２６ミリモル）を、４−tert−ブチル−ジメチルシリオキシフェニルボロン酸（０．８０ｇ，３．２ミリモル）と反応させることによって調製し、黄色の固体０．３０ｇ（５０％）を得た：融点１７８−１８０℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８４Ｈｚ），７．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７１Ｈｚ），７．８４（２Ｈ，ｓ），９．９５（１Ｈ，ｓ），１０．３８（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ２６６．０／２６８．０／２７０．０（Ｍ＋）。
元素分析：Ｃ１３Ｈ８Ｃｌ２Ｏ２・０．５Ｈ２Ｏとして：
予測値：Ｃ：５６．５５，Ｈ：３．２９
実測値：Ｃ：５６．３６，Ｈ：２．９０
【００９６】
実施例４５
２，３−ジクロロ−４−メトキシベンズアルデヒド
無水ジクロロメタン（４５ｍｌ）中の、２，３−ジクロロアニソール（１０．００ｇ，５６．６ミリモル）溶液に、ＴｉＣｌ４（１０．５ｍｌ，９６．１ミリモル）をすぐに加えた。α，α'−ジクロロメチルメチルエステル（５．１ｍｌ，５６．６ミリモル）をその後ゆっくり加え、内部温度を１５℃から２０℃までの間に維持した。混合物を室温で５時間攪拌し、砕いた氷にゆっくりと注ぎ、ジクロロメタン（３ｘ）で抽出し、ｐＨ＝７まで飽和重炭酸ナトリウムで洗浄し、その後塩性溶液を用いて洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して白色の固体１１．３４ｇ（９８％）を得た。分析用試料を、逆相分取用ＨＰＬＣによって供給された：融点１１２−１１３℃；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ４．０１（３Ｈ，ｓ），６．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７７Ｈｚ），７．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８２Ｈｚ），１０．３６（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２０５／２０７／２０９（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ８Ｈ６Ｃｌ２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：４６．８６，Ｈ：２．９５
実測値：Ｃ：４６．９２，Ｈ：２．７０
【００９７】
実施例４６
２，３−ジクロロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド
表題の化合物を、方法Ｄに従って、２，３−ジクロロ−４−メトキシベンズアルデヒド（１０ｇ，４９ミリモル）を、三臭化ホウ素（ＣＨ２Ｃｌ２中１Ｎ溶液１４７ｍｌ，１４７ミリモル）と反応させることによって調製し、暗い灰色の固体１１．３ｇを得、それは主に１ＨＮＭＲによって示される設計された生成物である。それをヘキサン中３０％ＣＨＣｌ３と共に粉末にし、純粋な生成物として灰色の固体３．６ｇを得た。分析用試料を、逆相分取用ＨＰＬＣによって白色固体として供給された：融点１７６−１７８℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６８Ｈｚ），７．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６７Ｈｚ），１０．１６（１Ｈ，ｓ），１１．９５（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ１８９／１９１／１９３（Ｍ−Ｈ）−，１９３／１９１／１９５（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ７Ｈ４Ｃｌ２Ｏ２・０．５Ｈ２Ｏとして：
予測値：Ｃ：４４．０２，Ｈ：２．１１
実測値：Ｃ：４３．８７，Ｈ：１．６７
【００９８】
実施例４７
トリフルオロメタンスルホン酸２，３−ジクロロ−４−ホルミル−フェニルエステル
表題の化合物を、実施例４３に従って、２，３−ジクロロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（２．５０ｇ，１３．２ミリモル）をトリフルオロメタンスルホン酸無水物（２．８８ｍｌ，４．８０ｇ，１７．１ミリモル）と反応させることによって調製し、褐色の結晶３．６９ｇ（８２％）を得、精製なしで直接次の工程に用いた。分析用試料は、シリカクロマトグラフィー（５％酢酸エチル−ヘキサン）によって白色固体として供給された：融点４４−４５℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７４Ｈｚ），８．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８１Ｈｚ），１０．２８（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ３２２／３２４／３２６（Ｍ）＋。
Ｃ８Ｈ３Ｃｌ２Ｆ３Ｏ４Ｓについての分析：
予測値：Ｃ：２９．７４，Ｈ：０．９４
実測値：Ｃ：３０．１９，Ｈ：０．８６
【００９９】
実施例４８−５０
トリフルオロメタンスルホン酸２，３−ジクロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（１．３９，４．３３ミリモル）を、方法Ｂに従って、ボロン酸２１（１．２０ｇ，４．７６ミリモル）と反応させ、次の三つの化合物を生成した。
２，３−ジクロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（４８）
白色固体３１０ｍｇ（２７％）：融点１７２−１７４℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８６−６．９１（２Ｈ，ｍ），７．３２−７．３５（２Ｈ，ｍ），７．５３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９４Ｈｚ，Ｊ＝０．４５Ｈｚ），７．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０１Ｈｚ），９．８５（１Ｈ，ｓ），１０．３５（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２６５／２６７／２６９（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ８Ｃｌ２Ｏ２として：
予測値：Ｃ：５８．４６，Ｈ：３．０２
実測値：Ｃ：５７．７５，Ｈ：２．８２
２−クロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（４９）
オフホワイトの固体９０ｍｇ（９％）：融点１１４−１１６℃；；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８５−６．９０（２Ｈ，ｍ），７．３２−７．３６（２Ｈ，ｍ），７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８７Ｈｚ），７．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９０Ｈｚ，Ｊ＝１．５５Ｈｚ），８．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５２Ｈｚ），９．７９（１Ｈ，ｓ），１０．０２（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２３１／２３３（Ｍ−Ｈ）−，２３３／２３５（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ９ＣｌＯ２として：
予測値：Ｃ：６７．１１，Ｈ：３．９０
実測値：Ｃ：６７．４４，Ｈ：３．８７
２'− ジクロロ−４，４' '−ジヒドロキシ−１，１'： ３'，１' '−ターフェニル−４ '−カルバルデヒド（５０）
オフホワイトの固体１３０ｍｇ（９％）：融点２２２−２２３℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８５−６．８８（２Ｈ，ｍ），６．８８−６．９１（２Ｈ，ｍ），７．１７−７．２０（２Ｈ，ｍ），７．３１−７．３５（２Ｈ，ｍ），７．５２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ，Ｊ＝０．８９Ｈｚ），７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０７Ｈｚ），９．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．７７Ｈｚ），９．７３（１Ｈ，ｓ），９．７４（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３２３／３２５（Ｍ−Ｈ）−，３２５／３２７（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１９Ｈ１３ＣｌＯ３として：
予測値：Ｃ：７０．２７，Ｈ：４．０３
実測値：Ｃ：６９．８０，Ｈ：３．８８
【０１００】
実施例５１
２，３−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド
表題の化合物を、方法Ｂに従って、トリフルオロメタンスルホン酸２，３−ジクロロ−４−ホルミル−フェニルエステル（１．９０ｇ，５．９０ミリモル）を２１（１．３０ｇ，７．６７ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体０．８４ｇ（４７％）を得た：融点１６０−１６４℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＤＯ−ｄ６）：δ３．９０（３Ｈ，ｍ），７．２８−７．３０（２Ｈ，ｍ），７．４１−７．４３（１Ｈ，ｍ），７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３０Ｈｚ），７．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ），１０．３５（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ２９８／３００／３０２（Ｍ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ９Ｃｌ２ＦＯ２として：
予測値：Ｃ：５６．２１，Ｈ：３．０３
実測値：Ｃ：５７．５５，Ｈ：２．９７
【０１０１】
実施例５２および５３
２，３−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（０．７２ｇ，２．４２ミリモル）を、方法Ｅに従って、三臭化ホウ素（ＣＨ２Ｃｌ２中１Ｎ溶液７．２５ｍｌ，７．２５ミリモル）と反応させ、次の二つの化合物を生成した。
２'，３'−ジクロロ−４'−（ジブロモメチル）−３−フルオロ−１，１'−ビフェニル−４−オール（５２）
灰色の粘調なシロップ１３０ｍｇ（１３％）：１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．０４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．５４Ｈｚ），７．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４１Ｈｚ，Ｊ＝１．９７Ｈｚ），７．３２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．１８Ｈｚ，Ｊ＝１．９４Ｈｚ），７．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２７Ｈｚ），７．５４（１Ｈ，ｓ），７．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２３Ｈｚ），１０．２３（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ４２５／４２７／４２９（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ７Ｂｒ２Ｃｌ２ＦＯとして：
予測値：Ｃ：３６．４０，Ｈ：１．６５
実測値：Ｃ：３７．６０，Ｈ：１．６９
２，３−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（５３）
白色固体１４０ｍｇ（２０％）：１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．６０Ｈｚ），７．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４０Ｈｚ，Ｊ＝１．７９Ｈｚ），７．３５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．１５Ｈｚ，Ｊ＝１．８７Ｈｚ），７．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９７Ｈｚ），７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０９Ｈｚ），１０．３１（１Ｈ，ｓ），１０．３５（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２８３／２８５／２８７（Ｍ−Ｈ）−。
元素分析：Ｃ１３Ｈ７Ｃｌ２ＦＯ２として：
予測値：Ｃ：５４．７７，Ｈ：２．４７
実測値：Ｃ：５４．９３，Ｈ：２．１８
【０１０２】
実施例５４
３，５−ジクロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｆに従って、３，５−ジクロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（１７０ｍｇ，０．６３７ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（８９ｍｇ，１．２７ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体１６０ｍｇ（８９％）を得た：融点１８３−１８６℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．６３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７９Ｈｚ），７．７６（２Ｈ，ｓ），８．２５（１Ｈ，ｓ），９．８１（１Ｈ，ｓ），１１．７８（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２８０／２８２／２８４（Ｍ−Ｈ）−，２８２／２８４／２８６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１０３】
実施例５５
３，５−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｆに従って、３，５−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒド（２９０ｍｇ，ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１４０ｍｇ，１．２７ミリモル）と反応させることによって調製し、白色の固体２６０ｍｇ（８５％）を得た：融点１８５−１９０℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．０３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．８６Ｈｚ），７．４６−７．４９（１Ｈ，ｍ），７．６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．７４Ｈｚ，Ｊ＝２．２６Ｈｚ），７．８２（２Ｈ，ｓ），８．２５（１Ｈ，ｓ），１０．２４（１Ｈ，ｓ），１１．８０（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２９８／３００／３０２（Ｍ−Ｈ）−，３００／３０２／３０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ８Ｃｌ２ＦＮＯ２・０．２Ｈ２Ｏとして：
予測値：Ｃ：５１．４１，Ｈ：２．７９，Ｎ：４．６１
実測値：Ｃ：５１．７０，Ｈ：２．７５，Ｎ：４．２１
【０１０４】
実施例５６
２，３−ジクロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム
表題の化合物を、方法Ｆに従って、４８（１４０ｍｇ，０．５２６ミリモル）をヒドロキシルアミン塩酸塩（１１０ｍｇ，１．５８ミリモル）と反応させることによって調製し、オフホワイトの固体１４８ｍｇ（１００％）を得た：融点２０８−２１０℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ６．８４−６．８７（２Ｈ，ｍ），７．２６−７．２９（２Ｈ，ｍ），７．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９４Ｈｚ），７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２０Ｈｚ），８．４１（１Ｈ，ｓ），９．７２（１Ｈ，ｓ），１１．８３（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２８０／２８２／２８４（Ｍ−Ｈ）−，２８２／２８４／２８６（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ９Ｃｌ２ＮＯ２として：
予測値：Ｃ：５５．３５，Ｈ：３．２２，Ｎ：４．９６
実測値：Ｃ：５５．７８，Ｈ：３．５９，Ｎ：４．４４
【０１０５】
実施例５７
５７（８５ｍｇ，０．２０ミリモル）を、方法Ｃに従って、ヒドロキシルアミン塩酸塩（３７６ｍｇ，５．３９ミリモル）およびピリジン（０．４３ｍｌ，５．３４ミリモル）と８日間反応させ、次の二つの化合物を生成した。
２，３−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム（５７）
白色固体１７．６ｍｇ（３０％）：融点２２５−２２７℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．０４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．５４Ｈｚ），７．１０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３５ｚ，Ｊ＝１．８８Ｈｚ），７．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．２２ｚ，Ｊ＝２．０１Ｈｚ），７．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１４Ｈｚ），７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１５Ｈｚ），８．４１（１Ｈ，ｓ），１０．１８（１Ｈ，ｓ），１１．８７（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２９８／３００／３０２（Ｍ−Ｈ）−，３００／３０２／３０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１３Ｈ８Ｃｌ２ＦＮＯ２・０．０９ＴＦＡとして：
予測値：Ｃ：５１．００，Ｈ：２．６３，Ｎ：４．５１
実測値：Ｃ：５０．９７，Ｈ：２．３７，Ｎ：４．３３
メチル２，３−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルボン酸塩
白色固体１６．９ｍｇ（２７％）：融点１５２−１５４℃；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３．９０（３Ｈ，ｓ），７．０５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．５４Ｈｚ），７．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４１ｚ，Ｊ＝１．５５Ｈｚ），７．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．１６ｚ，Ｊ＝１．６８Ｈｚ），７．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０２Ｈｚ），７．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６４Ｈｚ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３１３／３１５／３１７（Ｍ＋Ｈ）＋。
元素分析：Ｃ１４Ｈ９Ｃｌ２ＦＯ３として：
予測値：Ｃ：５３．３６，Ｈ：２．８８
実測値：Ｃ：５１．９４，Ｈ：２．５４
【０１０６】
実施例５８
表１．４'−ヒドロキシ−ビフェニル−カルバルデヒドオキシム誘導体
【化２０】
【表１】
標準的な薬理学的試験操作において得られた結果は、本発明の化合物が、ＥＲβ受容体に対して幾分強い選択的親和性を有する、エストロゲン化合物であることを実証している。本発明の化合物は、ＥＲαよりもＥＲβに対して高い選択的親和性を有するものから、両受容体に対してほぼ同等の親和性を有するものまである。従って、本発明の化合物は、少なくとも一部は、受容体親和性選択性プロフィールに基づいた範囲の活性に及ぶであろう。それに加えて、各々の新しい受容体リガンド複合体は特異的であり、従って様々な共調節性タンパク質との相互作用も特異的であるので、本発明の化合物は、それらがおかれる細胞の状況に基づいて異なる調節作用を示すであろう。例えば、ある細胞型において、ある化合物がエストロゲンアゴニストとして作用し、一方他の組織においてはアンタゴニストとして作用することも起こりえる。そのような活性を有する化合物は、時にＳＥＲＭｓ（選択的エストロゲン受容体モジュレーター）と呼ばれてきた。しかしながら、多くのエストロゲンとは異なり、ＳＥＲＭｓの多くは子宮の湿性重量の増加を引き起こさない。これらの化合物は子宮においては抗エストロゲン性であり、子宮組織におけるエストロゲンアゴニストの栄養作用に完全に拮抗し得る。しかしながら、これらの化合物は、骨、心臓血管および中枢神経系においてはエストロゲンアゴニストとして作用する。これらの化合物はこのような組織選択性を有しているので、（骨または心臓血管のような特定の組織における）エストロゲン欠乏または（子宮または乳腺における）エストロゲン過剰によって引き起こされたまたはそれと関連する、哺乳類の病態または症候群の治療または予防に有用である。
【０１０７】
さらにそのような細胞特異的調節の他に、本発明の化合物はまた、ある受容体タイプに対してはアゴニストとして作用し、他の受容体に対してはアンタゴニストとして作用し得る。例えば、化合物がＥＲβのアンタゴニストであり、他方ＥＲαのアゴニストであるということがあり得るということが実証されてきた（Ｍｅｙｅｒｓ，Ｍａｒｖｉｎ Ｊ．；Ｓｕｎ，Ｊｕｎ；Ｃａｒｌｓｏｎ，Ｋａｔｈｒｙｎ Ｅ．；Ｋａｔｚｅｎｅｌｌｅｎｂｏｇｅｎ，Ｂｅｎｉｔａ Ｓ．；Ｋａｔｚｅｎｅｌｌｅｎｂｏｇｅｎ，Ｊｏｈｎ Ａ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（１９９９年），４２（１３），２４５６−２４６８）。そのようなＥＲＳＡＡ（エストロゲン受容体選択性アゴニストアンタゴニスト）活性は、この一連の化合物において薬学上明確なエストロゲン活性を与える。
【０１０８】
標準的な薬理学的試験操作は、所定の試験化合物の活性プロフィールを決定するために容易に利用できる。次の実施例は、いくつかの代表的な試験操作を簡潔に要約している。ＳＥＲＭｓについての標準的な薬理学的試験操作はまた、米国特許第４４１８０６８号および５９９８４０２号において与えられる。
【０１０９】
実施例５９
ラットの子宮肥大／抗子宮肥大試験操作
本化合物のエストロゲン様および抗エストロゲン性は、（Ｌ．Ｊ．ＢｌａｃｋおよびＲ．Ｌ．Ｇｏｏｄｅ，Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２６，１４５３（１９８０年）に以前記述された）幼若なラットの子宮肥大アッセイ（４日間）において決定され得る。スプレーグ・ドーレイラット（雌、１８日齢）を、六つの群で検査した。動物を、注射ビヒクルとしての５０％ＤＭＳＯ／５０％食塩水と共に、１０μＧの化合物、１００μＧの化合物、抗エストロゲン性を検査するための（１μＧの１７βエストラジオールを加えた１００μＧの化合物）、１μＧの１７βエストラジオール毎日静脈注射によって処理する。４日目に、動物をＣＯ２での窒息によって殺し、子宮を除去して過剰な脂質を剥がし、全ての体液を除去し、湿性重量を決定する。小断片の角質を組織学に供し、相補的成分３遺伝子発現を評価するために残りを用いてトータルＲＮＡを単離する。
【０１１０】
実施例６０
６週で卵巣切除したラット検査操作−骨および心臓保護
メスのスプレーグ・ドーレイＣＤラット、卵巣摘出群または偽手術を、Ｔａｃｏｎｉｃ Ｆａｒｍ社から手術後１日で得る（体重の範囲２４０−２７５ｇ）。それらを、ケージあたり３または４匹のラットずつ、１２時間／１２時間（明／暗）のスケジュールで部屋に収容し、食料（Ｐｕｒｉｎａ ５Ｋ９６Ｃラット食物）および水を自由に与える。全ての研究についての処理は、動物の到着後１日目から始め、指示されるように１週間に付き７日間で６週間投薬する。何ら処理を受けていない年齢の一致した偽手術した一群のラットを各研究について無傷のエストロゲンを十分与えた対照群に供する。
【０１１１】
全ての処理は、生理食塩水中の１％ツゥイーン８０中で、処理体積を体重１００ｇあたり０．１ｍＬにする規定された濃度で調製する。１７β−エストラジオールをコーンオイル（２０μｇ／ｍＬ）中に溶解し、ラットあたり０．１ｍＬを皮下投与する。全ての用量は、グループの平均体重測定に従って、３週間間隔で調節する。
【０１１２】
処理開始後５週間および研究の終了前１週間に、各々のラットを骨塩密度（ＢＭＤ）について評価する。脛骨近位部の総密度および骨梁密度を、ＸＣＴ−９６０Ｍ（ｐＱＣＴ；Ｓｔｒａｔｅｃ Ｍｅｄｉｚｉｎｔｅｃｈｎｉｋ，Ｐｆｏｒｚｈｅｉｍ，ドイツ）を用いて麻酔したラットにおいて評価する。測定は次のように実行する：スキャンの１５分前に、各々のラットに４５ｍｇ／ｋｇのケタミン、８．５ｍｇ／ｋｇのキシラジンおよび１．５ｍｇ／ｋｇのアセプロマジンを腹膜内注射して麻酔する。
【０１１３】
右の後肢に直径２５ｍｍのポリカーボネートチューブを通し、足関節を９０°の角度で、膝関節を１８０°の角度でアクリルフレームに貼り付ける。ポリカーボネートチューブを、ｐＱＣＴの開口部に垂直に維持する摺動性プラットホームに固定する。プラットホームを、大腿骨の遠位末端および脛骨の近位末端がスキャン範囲にあるように調節する。二次元スカウトビューを、１０ｍｍの長さおよび０．２ｍｍの線分解能で実行する。スカウトビューがモニター上で表示された後、脛骨の近位末端の位置を確認する。ｐＱＣＴスキャンを、この地点から３．４ｍｍ遠位から開始する。ｐＱＣＴスキャンは１ｍｍの厚さであり、０．１４０ｍｍのボクセル（三次元ピクセル）サイズを有し、スライスを介して１４５の映像からなる。
【０１１４】
ｐＱＣＴスキャンが完了した後、画像をモニター上に表示する。脛骨を含むが腓骨は除いた関心のある領域の概略を述べる。軟部組織は、反復アルゴリズムを用いて自動的に除去する。残りの骨密度（総密度）を、ｍｇ／ｃｍ３単位で報告する。骨の外層５５％を、同心らせん状に剥離する。残りの骨密度（骨梁密度）を、ｍｇ／ｃｍ３単位で報告する。ＢＭＤ評価の１週間後、ラットを二酸化炭素での窒息によって安楽死させ、血液をコレステロール決定のために収集した。子宮を摘出して、重量を量る。総コレステロールを、コレステロール／ＨＰキットを用いたＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ Ｈｉｔａｃｈｉ９１１臨床用分析器を用いて決定する。統計量を、Ｄｕｎｎｅｔテストによる一元配置分散分析を用いて比較した。
【０１１５】
実施例６１
ＭＣＦ−７／ＥＲＥ抗増殖検査操作
検査化合物の保存溶液（通常０．１Ｍ）を、ＤＭＳＯ中で調製し、その後ＤＭＳＯで１０ないし１００倍に希釈し、１または１０ｍＭの作用溶液を作る。ＤＭＳＯ保存液を、４℃（０．１Ｍ）または−２０℃（＜０．１Ｍ）のいずれかで保存する。ＭＣＦ−７細胞を、成長培地［１０％（体積／体積）の熱で不活化した胎児牛血清、１％（体積／体積）のペニシリン−ストレプトマイシン、および２ｍＭのグルタマックス−１を含むＤ−ＭＥＭ／Ｆ−１２培地］を用いて１週間に二回継代する。細胞を、５％ＣＯ２／９５％加湿した空気の培養器内で３７℃で、通気孔のあるフラスコ内で維持する。処理の１日前に、細胞を、成長培地を用いて、ウェルあたり２５０００個で９６ウェルプレートで平板培養し、３７℃で一晩中インキュベートする。
【０１１６】
細胞を、実験培地［１０％（体積／体積）の熱不活化チャコール処理（Charcoal stripped）胎児牛血清、１％（体積／体積）のペニシリン−ストレプトマイシン、２ｍＭのグルタマックス−１、１ｍＭのピルビン酸ナトリウムを含み、フェノールレッド不含のＤ−ＭＥＭ／Ｆ−１２培地］中で、アデノウィルス５−ＥＲＥ−ｔｋ−ルシフェラーゼの１：１０希釈液をウェルあたり５０μｌ用いて、３７℃で２時間感染させる。ついで、該ウェルを、実験培地１５０μｌを用いて一度洗浄する。最後に、細胞を、ウェルあたり１５０μλのビヒクル（０．１％以下 体積／体積 ＤＭＳＯ）または実験培地中に１０００倍以上に希釈される化合物を用いて、８ウェル／処理で、繰り返し２４時間３７℃で処理する。
【０１１７】
検査する化合物の最初のスクリーニングを、単独で（アゴニスト法）または０．１ｎＭの１７βエストラジオールと組み合わせて（ＥＣ８０；アンタゴニスト法）検査する、１μＭの単回投与で行う。各々９６のウェルプレートはまた、ビヒクル対照群（０．１％ 体積／体積 ＤＭＳＯ）およびアゴニスト対照群（０．１または１ｎＭの１７βエストラジオールのいずれか）を含む。投薬反応実験を、１０−１４から１０−５Ｍまで対数的に増加する活性のある化合物について、アゴニスト法および／またはアンタゴニスト法のいずれかで実行する。これらの投薬反応曲線から、ＥＣ５０およびＩＣ５０値を、各々算出する。各々の処理群における最終的なウェルには、ＥＲアンタゴニスト対照群として５μｌの３×１０−５ＭＩＣＩ−１８２，７８０（１０−６Ｍの最終濃度）を含む。
【０１１８】
処理後、１Ｘ細胞培養溶解試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）をウェルあたり２５μｌを用いて、細胞を攪拌器上で１５分間溶解する。細胞溶解物（２０μｌ）を、９６ウェルの照度計プレートに移し、ルシフェラーゼ活性を、ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔＬＢ９６Ｐ照度計（ＥＧ＆Ｇ Ｂｅｒｔｈｏｌｄ）中で、ルシフェラーゼ基質（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）をウェルあたり１００μｌ用いて測定する。基質の注入に先立って、各々のウェルについて１秒バックグラウンド測定を行う。基質の注入後、ルシフェラーゼ活性を、１秒間の猶予の後、１０秒間測定する。データを照度計からマッキントッシュパーソナルコンピューターに転送し、ＪＭＰソフトウェア（ＳＡＳ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）を用いて分析する；このプログラムは、各々のウェルについてのルシフェラーゼ測定から、読み取られたバックグラウンドを減算し、その後各々の処理の平均および標準偏差を決定する。
【０１１９】
ルシフェラーゼデータを対数に変換し、Ｈｕｂｅｒ Ｍ−エスティメーターを中心から離れた変換した観測量を減量するために用いる。ＪＭＰソフトウェアを、一元ＡＮＯＶＡ（Ｄｕｎｎｅｔテスト）変換して定量したデータを分析するために用いる。化合物による治療を、アゴニスト法におけるビヒクル対照群結果、またはアンタゴニスト法における陽性アゴニスト対照群結果（０．１ｎＭの１７βエストラジオール）と比較する。最初の単回投薬実験について、化合物による治療結果が適切な対照群（ｐ＜０．０５）と十分異なっていれば、結果は１７βエストラジオール対照群に比較したパーセンテージとして報告される［すなわち、（（化合物−ビヒクル対照群）／（１７βエストラジオール対照群−ビヒクル対照群））×１００］。ＪＭＰソフトウェアはまた、非線形投薬反応曲線からＥＣ５０および／またはＩＣ５０値を決定するために用いられる。
【０１２０】
実施例６２
ＬＤＬの酸化の阻害−抗酸化活性
豚の大動脈を屠殺場から得て、洗浄し、冷却したＰＢＳ中に移し、大動脈の内皮細胞を採取する。細胞を採取するために、大動脈の肋間の脈管を結紮し、大動脈の一方の末端をクランプする。新鮮な、濾過滅菌した０．２％のコラゲナーゼ（Ｓｉｇｍａ タイプＩ）を脈管中に配置し、脈管の他方の末端をその後クランプして閉鎖系を形成する。大動脈を３７℃で１５−２０インキュベートし、その後コラゲナーゼ溶液を収集し、２０００ｘｇで５分間遠心する。各々のペレットを、チャコール処理ＦＢＳ（５％）、Ｎｕ血清（５％）、Ｌ−グルタミン（４ｍＭ）、ペニシリン−ストレプトマイシン（１０００Ｕ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ）およびゲンチマイシン（７５μｇ／ｍｌ）を補足し、フェノールレッドを含まないＤＭＥＭ／ＨａｍＦ１２培地を含む、７ｍＬの内皮細胞培養培地中に懸濁し、１００ｍｍペトリ皿に播種し、５％ＣＯ２中で３７℃でインキュベートする。２０分後、細胞をＰＢＳですすぎ、新鮮な培地を加え、この操作を２４時間で再び繰り返した。細胞はおよそ１週間後に集密状態となる。内皮細胞に慣例的に１週間に２回養分を与え、集密状態になった時にはトリプシン処理し、１：７の比率で蒔く。１２．５μｇ／ｍｌのＬＤＬの細胞媒介性酸化は、評価すべき化合物（５μＭ）の存在下で４時間３７℃で可能となる。結果は、遊離アルデヒドの分析のためのＴＢＡＲＳ（チオバルビツール酸反応物質）法によって測定される、酸化過程の阻害のパーセンテージとして表現される（Ｙａｇｉ Ｋ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｍｅｄ １５：２１２−２１６（１９７６年））。
【０１２１】
実施例６３
Ｄ１２視床下部細胞検査操作
Ｄ１２視床下部細胞を、ＲＣＦ１７親細胞系からサブクローニングし、凍結させて保存する。それらを、１０％胎児牛血清（ＦＢＳ）を加えた、ＤＭＥＭ：Ｆ１２（１：１）、グルタマックス−１（２ｍＭ）、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）−ストレプトマイシン（１００ｍｇ／ｍｌ）中で慣例的に成長させる。細胞を、２−１０％チャコール処理ＦＢＳを含み、フェノールレッドを含まない培地（ＤＭＥＭ：Ｆ１２、グルタマックス、ペニシリン−ストレプトマイシン）中で、サブコンフルエント密度（１−４×１０６細胞／１５０ｍｍディッシュ）で培養する。細胞を、２％ＣＳＳ血清を含む培地で２４時間後再び養分を与える。アゴニスト活性について検査するために、細胞を１０ｎｍの１７βエストラジオールまたは様々な用量の検査する化合物（１ｍＭまたは１ｐＭから１ｍＭの範囲）で処理する。アンタゴニスト活性について検査するために、様々な用量（１００ｐＭないし１ｍＭ）の検査する化合物なしでまたはその存在下で、細胞を０．１ｎｍの１７βエストラジオールで処理する。対照群のディッシュをまた、陰性対照群としてＤＭＳＯで処理する。ホルモン付加の４８時間後、細胞を溶解させ、結合検査操作を実行する。
【０１２２】
各々の結合検査操作について、１００−１５０ｍｇのタンパク質を、１０ｎＭの３Ｈ−Ｒ５０２０および１００倍過剰Ｒ５０２０を用いて１５０ｍｌの体積でインキュベートする。３倍体反応（Ｒ５０２０を含む三つ、Ｒ５０２０なしの三つ）を、９６ウェルプレート中で調製する。タンパク質抽出物を最初に加え、続いて３Ｈ−Ｒ５０２０または１００ｘ非標識Ｒ５０２０を加えた３Ｈ−Ｒ５０２０を加える。反応は、室温で１−２時間実行される。反応は、１００ｍｌの冷５％チャコール（Ｎｏｒｉｔ ＳＸ−４）、ｐＨ７．４のＴＥ中０．５％デキストラン６９Ｋ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）を付加することによって停止する。室温で５分後、結合したおよび結合していないリガンドを、遠心することにより分離する（５分、１０００ＲＣＦ、４℃）。上澄み溶液（〜１５０ｍｌ）を除去し、シンチレーションバイアルに移す。シンチレーション流体（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｒｅａｄｙ Ｐｒｏｔｅｉｎ＋）を付加した後、試料をシンチレーションカウンターで１分間カウントする。
【０１２３】
実施例６４
ＣＮＳ視索前野におけるプロゲステロン受容体
六十（６０）日齢のメスのスプレーグ・ドーレイラットを、卵巣切除する。動物を、１２時間明るく、１２時間暗い光周期を有し、水および齧歯類の食物を自由に利用できる動物保育設備中に収容する。
【０１２４】
卵巣切除した動物を、無作為に、ビヒクル（５０％ＤＭＳＯ、４０％ＰＢＳ、１０％エタノールビヒクル）、１７βエストラジオール（２００ｎｇ／ｋｇ）または検査すべき化合物を用いて注射される群に分ける。追加の動物を、１７βエストラジオールの注射に先立って、検査する化合物で注射し、本化合物のアンタゴニスト特性を評価する。皮下注射の６時間後、動物を致死量のＣＯ２で安楽死させ、その脳を収集して凍結させる。
【０１２５】
動物から収集した組織を、低温保持装置上で−１６℃で切断し、シランで被覆した顕微鏡スライド上で収集する。切片を固定したスライドをその後４２℃に維持したスライド加温器上で乾燥させ、−８０℃で乾燥したスライドボックス内で保存する。プロセシングに先立って、乾燥したスライドボックスをゆっくり室温まで温め（−２０℃で１２−１６時間；４℃で２時間；室温で１時間）、スライド上での結露形成を除去し、それによって組織およびＲＮＡの分解を最小限にする。乾燥したスライドを金属のラックに載せ、４％パラホルムアルデヒド（ｐＨ９．０）中で５分間後固定し、前に記述したようにプロセシングする。
【０１２６】
ラットのＰＲｃＤＮＡ９の８１５ｂｐ断片（リガンド結合ドメイン）を含むプラスミドを線状にし、ラットのＰＲｍＲＮＡの一部に相補的な、Ｓ３５−ＵＴＰ標識プローブを生成するために用いられる。プロセシングした切片を固定したスライドを、リボプローブ（４−６ｘ１０ ６ ＤＰＭ／スライド）および５０％ホルムアルデヒドを含む２０ｍｌのハイブリダイゼーションミックスを用いてハイブリダイゼーションし、５５℃の加湿したチャンバー内で一晩中インキュベートする。午前中に、スライドを、２ｘＳＳＣ（０．１５ＭのＮａＣｌ、０．０１５Ｍのクエン酸ナトリウム；ｐＨ７．０）／１０ｍＭＤＴＴ中に浸した金属のラックに置く。ラックを、全て大きな容器に移し、２ｘＳＳＣ／１０ｍＭＤＴＴ中で室温で緩やかに攪拌しながら１５分間洗浄する。その後スライドをＲＮＡアーゼ緩衝剤中で３７℃で３０分間洗浄し、ＲＮＡアーゼＡ（２ｍｇ／ｍｌ）で３７℃で３０分間処理し、１５分間室温の１ＸＳＳＣ中で洗浄する。その後、スライドを、非特異的標識を除去するために６５℃で０．１ＸＳＳＣ中で洗浄し（２Ｘ３０分）、室温の０．１ＸＳＳＣ中で１５分間すすぎ、徐々に変化する一連のアルコール：酢酸アンモニウム（７０％、９５％および１００％）を用いて脱水する。空気乾燥したスライドを、３日間Ｘ線フィルムに向かい合わせ、その後写真のように加工する。全ての動物に由来するスライドをハイブリダイゼーションし、洗浄し、感光させ、アッセイの間の条件の変化による相違を排除するために写真のように加工する。
【０１２７】
実施例６５
ラットのホットフラッシュ−ＣＮＳの影響
卵巣切除したメスの６０日齢スプレーグ・ドーレイラットを、手術後に得る。手術は、最初の処理に最低限８日間先立ってなされる。動物を、１２時間明／暗周期の下で個別に収容し、標準的なラットの食物および水を制限無く与える。
【０１２８】
二つの対照群が、各々の研究に含まれる。用量を、ごま油中１０％ＤＭＳＯ中で（皮下投与実験）、または食塩水中１．０％ツゥイーン８０中で（経口投与実験）のいずれかで、ｍｇ／ｋｇ平均グループ体重に基づいて調製する。動物に、０．０１から１０ｍｇ／ｋｇ平均グループ体重の範囲の用量の検査する化合物を投与する。ビヒクルおよびエチニルエストラジオール（ＥＥ）対照（０．１ｍｇ／ｋｇ皮下投与、または０．３ｍｇ／ｋｇ経口投与）対照群が、各々の検査に含まれる。化合物をそのアンタゴニスト活性について検査する場合、ＥＥは、皮下投与または経口投与研究についてそれぞれ、０．１または０．３ｍｇ／ｋｇを共投与する。検査する化合物を、尾の皮膚温度が測定される日まで投与する。
【０１２９】
４日間の馴化後、動物を、関心のある化合物で毎日一度処理する。１０の動物／処理グループが存在する。化合物の投与は、０．１ｍｌを頸の首筋に皮下注射することによって、または０．５ｍｌの体積を経口投与することのいずれかによる。処理の３日目に、モルヒネのペレット（７５ｍｇ硫酸モルヒネ）を、皮下に埋め込む。処理の５日目に、一つまたは二つの追加のモルヒネのペレットを埋め込む。８日目に、動物のおよそ半分に、ケタミン（８０ｍｇ／ｋｇ、筋肉内）を注射し、ＭａｃＬａｂ Ｄａｔａ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（ＡＰＩ社、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ）に結合した熱電対を、尾の根本からおよそ１インチの尾に貼り付ける。この機構は、尾の皮膚の温度の継続的な測定を可能にした。基準の温度を１５分間測定し、その後モルヒネの効果をブロックするためにナロキソン（１．０ｍｇ／ｋｇ）を皮下投与し（０．２ｍｌ）、尾の皮膚の温度をその１時間後に測定する。９日目に、残りの動物を同様に計画し、分析する。
【０１３０】
実施例６６
単離したラットの大動脈輪における血管運動神経機能
スプレーグ・ドーレイラット（２４０−２６０グラム）を４グループに分ける：
１．正常の卵巣切除していないもの（無傷）
２．卵巣切除し（ｏｖｅｘ）、ビヒクル処理したもの
３．卵巣切除し、１７βエストラジオールで処理したもの（１ｍｇ／ｋｇ／日）
４．検査する化合物によって処理した卵巣切除した動物（すなわち１ｍｇ／ｋｇ／日）
動物を、処理におよそ３週間先立って卵巣切除する。各々の動物は、胃管栄養によって、１％ツゥイーン８０と共に、蒸留して脱イオン化した水中に懸濁した硫酸１７βエストラジオールまたは検査する化合物のいずれか１ｍｇ／ｋｇ／日を与えられる。ビヒクル処理動物は、薬剤処理群において用いられた適当な体積のビヒクルを与えられる。
【０１３１】
動物をＣＯ２吸入および放血によって安楽死させる。胸部大動脈を速やかに除去し、３７℃の生理的溶液中に、次の組成物（ｍＭ）と共に入れる：ＮａＣｌ（５４．７）、ＫＣｌ（５．０）、ＮａＨＣＯ３（２５．０）、ＭｇＣｌ２ ２Ｈ２Ｏ（２．５）、Ｄ−グルコース（１１．８）およびＣａＣｌ２（０．２）、９５％／５％のＣＯ２−Ｏ２でガス処理し、最終的なｐＨが７．４。動脈血管外膜を外表面から除去し、脈管を２−３ｍｍの幅の輪に切断する。輪を、一方の末端を浴の底に結び、他方の末端を力変換器に結んで、１０ｍＬの組織浴に吊す。１グラムの静止張力がその輪にかかる。輪は１時間で平衡に達し、シグナルを得て分析する。
【０１３２】
平衡も達した後、輪を高濃度のフェニレフリン（１０−８ないし１０−４Ｍ）に曝し、張力を記録する。その後、浴を新しい緩衝剤で３回すすぐ。洗浄後、２００ｍＭのＬ−ＮＡＭＥを組織浴に加え、３０分間平衡状態とする。ついで、フェニルフリン濃度反応曲線を繰り返す。
【０１３３】
実施例６７
８本の放射状迷路−認識力の向上
到着時に重さが２５０ｇであった、オスのスプレーグ・ドーレイ、ＣＤラット（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ、Ｋｉｎｇｓｔｏｎ、ニューヨーク）が用いられる。ラットを、標準的な実験室の食物および水を自由に与えて、１週間ケージあたり６匹収容する。収容するのは、２２℃に維持されたコロニールームであり、午前６時に点灯する１２時間の明／暗周期を有していた。設備に慣らした後、動物を個別に収容し、自由に餌を与えた重量の８５％に維持する。一度安定した体重に達すると、ラットは８本の放射状迷路に順応する。
【０１３４】
迷路の構造は、ＰｅｅｌｅおよびＢａｒｏｎ（Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、およびＢｅｈａｖｉｏｒ、２９：１４３−１５０、１９８８年）の迷路に適合する。迷路を７５．５ｃｍの高さまで上昇させ、互いに等距離に、中央から８本の放射状に離れるように取り囲む円形の領域からなる。各々のアームは、５８ｃｍの長さ×１３ｃｍの高さである。各々のセッションの開始に先立って、迷路の中央部分に動物を閉じこめるために、透明のプレキシグラスシリンダーを取り付ける。迷路の各々のアームは、データ取得単位にインターフェースで接続した３セットの光電池を備えており、それはまたコンピューターにインターフェースで接続する。光電池は迷路内のラットの運動を追跡するために用いられる。各々のアームの末端にある食物カップの上に位置するペレット供給器は、アームの外層の光電池が所定のセッションにおいて最初に活性化された場合に、二つの４５ｍｇのチョコレートペレットを与える。迷路は、視覚的な手がかりを与えるために、各々の壁に黒および白の幾何学的ポスターを有する検査室に位置している。全ての訓練および検査操作の間、ホワイトノイズが聴取される（約７０ｄｂ）。
【０１３５】
訓練操作は、五つの段階からなり、各々が毎日５分または１０分続くセッションを有する。ラットを迷路の中央部に配置する時、およびセッションを始めるためにシリンダーを上げる時の間には、１０秒間の遅れが必要とされる。第１段階の間、食物を制限したラットの組は、迷路の８つのアームの至る所に４５ｍｇのチョコレート食物ペレットが撒き散らされた迷路に、１０分間おく。第２段階の間、各々のラットを、中央の光電池から各々のアームの食物カップにペレットを撒き散らした迷路に、１０分間個別におく。第３段階の間、各々のラットを、食物ペレットが各々のアームにおける食物カップ内およびその周囲のみに位置している迷路に、１０分間おく。第４段階において、各々のラットに、各々のアームから二つのペレットを収集するために１０分間与える。一つのアームに再び入ることは、過誤とみなす。ラットを、三日連続の訓練で全過誤が２未満またはちょうど２となるような基準成績に達するまで、この方法で毎日訓練する。馴化および訓練の総時間は、およそ３週間である。
【０１３６】
検査する化合物を、リン酸緩衝食塩水中で調製し、１ｍｌ／ｋｇの体積で投与する。臭化水素酸スコポラミン（０．３ｍｇ／ｋｇ、皮下投与）は、過誤率を増加させる（記憶の損失）障害薬の役割を果たす。検査する化合物は、全ての検査日に最初に迷路に曝露させる３０分前に、スコポラミンと同時に腹膜内に与える。
【０１３７】
検査する化合物を評価するために、最小限の動物の数で高い実験効率を達成するように、繰り返し測定で８ｘ８で平衡を保ったラテン方格を計画する。８つの実験セッションには、週二日各々のセッション内で無作為化した８つの処理（ビヒクル、スコポラミン、スコポラミンと組み合わせた３用量の検査する化合物）を行う。各々の処理の後に、あらゆる他の処理を同回数行う。それゆえに、全ての処理の残存効果を評価でき、直接の処理効果を除去し得る。ＡＮＯＶＡの後、多重比較を、調節した方法でＤｕｎｎｅｔ両側検定を用いて実行する。
【０１３８】
最初の曝露の間の５分間以内に４つの正しい選択をしなかった動物、または二度目の曝露の最後までに全部で８つの選択をしなかった動物は、そのセッションについて「時間切れ」とみなす。検査する化合物の一回より多くの用量の投与の後に「時間切れ」となった全ての動物は、分析から除外される。
【０１３９】
実施例６８
神経保護
一次皮質ニューロン培養における時間依存性の細胞死の阻害
一次皮質ニューロンを、Ｍｏｎｙｅｒら、１９８９年、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ４８３：３４７−３５４に記述されている方法の変法を用いて、０−１日齢のラットの脳から生成した。分散させた脳組織を、ＤＭＥＭ／１０％ＰＤＨＳ（妊娠ドナーウマ血清）において三日間増殖させ、その後混合しているグリア細胞を除去するためにシトシンアラビノシド（ＡＲＣ）によって二日間処理した。５日目に、ＡＲＣ培地を除去し、ＤＭＥＭ／１０％ＰＤＨＳで置換した。ニューロン細胞を使用前にさらに４−７日間培養した。
【０１４０】
対照群の一次ニューロン培養は、培養中１２日目および１８日目の間で、進行性の細胞死を示す。検査する化合物を９日目にＤＭＥＭおよび１０％ＰＤＨＳ中で維持した６つの培養に加え、残りの培養を対照群として維持した後、１２の培養を酵素乳酸脱水素酵素（ＬＤ）の濃度を１２日目および１６日目に評価した。ＬＤを、Ｗｒｏｂｌｅｗｓｋｉら １９５５年、Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．９０：２１０−２１３による方法の変法を用いてアッセイした。ＬＤは、臨床上および組織生存力を決定するための基礎研究上の両方で一般に用いられる、細胞質基質酵素である。培地のＬＤの増加は、直接細胞死に関連している。
【０１４１】
低血糖によって誘発される細胞傷害に対する神経保護
ＡＴＣＣから得られたＣ６グリオーマ細胞は、ＦＡＬＣＯＮ２５ｃｍ２組織培養フラスコ中で、１×１０６細胞／ｍｌの濃度のＦＢＳを有するＲＰＭＩ培地中で平板培養に付した。低血糖の開始の４時間前に、維持培地を廃棄し、単層を適切な培地で二度洗浄し、その後血清を含まないでまたは検査する化合物を加えて血清は含まないで、３７℃で４時間インキュベートした。クレブリンゲルリン酸緩衝剤を、適切なグルコース処理を加える前に、単層を二度洗浄するために用いた。ＲＰＭＩ培地は、１ｍｌあたり２ｍｇのグルコースを含み；フラスコを、各々１００％グルコース（２ｍｇ／ｍｌ）、８０％グルコース（１．６ｍｇ／ｍｌ）、６０％グルコース（１．２ｍｇ／ｍｌ）、または０％グルコース（緩衝剤）、または検査する化合物を補足した緩衝剤を入れた、６のグループに分けた。全てのフラスコを２０時間インキュベートし、その後トリパンブルーを利用して、総細胞数、生細胞数および死細胞数について評価した。
【０１４２】
興奮毒性アミノ酸に対する神経保護
ＳＫ−Ｎ−ＳＨ神経芽腫細胞を含む５つの培養ディッシュを、検査する化合物を用いて処理し、５つの培養ディッシュを、ＲＰＭＩ培地で処理した。４時間後、全ての細胞を、ＮＭＤＡ（５００ｍｕＭ）を用いて５分間処理した。その後総生細胞および死細胞を決定した。
【０１４３】
酸素−グルコース欠乏に対する神経保護
アポトーシスを測定するための濃縮核の分析：皮質ニューロンを、Ｅ１８ラット胎児から調製し、ポリ−Ｄ−リシン（１０ｎｇ／ｍｌ）および１０００００細胞／ウェルの濃度の血清で予め被覆した８ウェルのチャンバースライド中に入れる。細胞を、１０％ＦＣＳを含む高グルコースＤＭＥＭ中に入れ、１０％ＣＯ２／９０％空気で３７℃でインキュベーター中に保存する。その翌日、血清を、培養培地をＢ２７補剤を含む高グルコースＤＭＥＭで置換することによって除去し、細胞を実験の日までさらに培地を交換することなしにインキュベーター中に保存する。６日目に、スライドを二つの群：対照群およびＯＧＤ群に分ける。対照群中の細胞は、グルコースおよびカスタムＢ２７（抗酸化剤なし）を含むＤＭＥＭを与えられる。ＯＧＤ群中の細胞は、１５分間真空下で脱気された、カスタムＢ２７を含むグルコース不含ＤＭＥＭを与えられる。細胞を、１０分間気密なチャンバー中で９０％Ｎ２／１０％ＣＯ２で洗い流し、３７℃で６時間インキュベートする。６時間後、対照およびＯＧＤの細胞を共に、グルコース含有のＤＭＥＭ中にビヒクル（ＤＭＳＯ）または試験化合物のいずれかを含有する培地の、カスタムＢ２７との置き換えに付す。細胞を、通常の酸素環境の３７℃のインキュベーターに戻す。２４時間後、細胞を、４％ＰＦＡ中で１０分間４℃で固定し、Ｔｏｐｒｏ（蛍光核結合色素）を用いて染色する。アポトーシスは、Ｌａｓｅｒ Ｓｃａｎｎｉｎｇ Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒを用いて、濃縮核を測定することによって評価される。
【０１４４】
細胞死の指標としてのＬＤＨ遊離の測定：皮質ニューロンを、Ｅ１８ラット胎児から調製し、ポリ−Ｄ−リシン（１０ｎｇ／ｍｌ）および１５００００細胞／ウェルの濃度の血清で予め被覆した４８ウェルの培養プレート中に入れる。細胞を、１０％ＦＣＳを含む高グルコースＤＭＥＭ中に入れ、１０％ＣＯ２／９０％空気で３７℃でインキュベーター中に保存する。その翌日、血清を、培養培地をＢ２７補剤を含む高グルコースＤＭＥＭで置換することによって除去する。６日目に、細胞を二つの群：対照群およびＯＧＤ群に分ける。対照群中の細胞は、グルコースおよびカスタムＢ２７（抗酸化剤なし）を含むＤＭＥＭを与えられる。ＯＧＤ群中の細胞は、１５分間真空下で脱気された、カスタムＢ２７を含むグルコース不含ＤＭＥＭを与えられる。細胞を、１０分間気密なチャンバー中で９０％Ｎ２／１０％ＣＯ２で洗い流し、３７℃で６時間インキュベートする。６時間後、対照およびＯＧＤの細胞を共に、グルコース含有のＤＭＥＭ中にビヒクル（ＤＭＳＯ）または試験化合物のいずれかを含有する培地の、カスタムＢ２７との置き換えに付す。細胞を、通常の酸素環境の３７℃のインキュベーターに戻す。２４時間後、細胞死を、細胞のＬＤＨ（乳酸脱水素酵素）の培養培地への遊離を測定することによって評価される。ＬＤＨアッセイのために、５０μｌの培地のアリコートを、９６ウェルプレートに移す。０．１Ｍのリン酸カリウム緩衝剤（ｐＨ７．５）１４０μｌおよび０．２ｍｇ／ｍｌのＮＡＤＨ１００μｌを加えた後、プレートを暗所で室温で２０分間放置する。反応は、ピルビン酸ナトリウム１０μｌを加えることによって開始される。プレートは、Ｔｈｅｒｍｏｍａｘプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）で、即座に３４０ｎＭで読み取られる。ＮＡＤＨ濃度の指標である吸光度は、６秒ごとに５分間記録され、ＮＡＤＨ消失率を示す勾配が、ＬＤＨ活性を算出するために用いられる。
ＬＤＨ活性（Ｕ／ｍｌ）＝（ΔＡ／分）（ＴＣＦ）（２０）（０．０８３３）／（０．７８）
式中：０．０８３３＝比例定数
０．７８＝計器光路長
【０１４５】
実施例６９ ＨＬＡラットテスト操作−クローン病および炎症性腸疾患
オスのＨＬＡ−Ｂ２７ラットを、Ｔａｃｏｎｉｃから得て、食物（ＰＭＩ Ｌａｂ ｄｉｅｔ ５００１）および水を制限無く得られるようにする。研究の開始において、ラットは２２−２６週齢である。
【０１４６】
ラットは、以下で列挙した処方の一つを、毎日一度７日間皮下投与する。各々の群において５匹のラットがおり、最後の用量を安楽死させる２時間前に投与する。
ビヒクル（５０％ＤＭＳＯ／５０％ＤｕｌｂｅｃｃｏのＰＢＳ）
１７α−エチニル−１７βエストラジオール（１０μｇ／ｋｇ）
検査する化合物
【０１４７】
排泄物の質を毎日観察し、次の尺度に従って等級付けする：下痢＝３；軟便＝２；正常の便＝１。検査操作の最後に、血清を収集し、−７０℃で保存する。結腸の断片を組織学的な分析のために調製し、追加の切片をミエロペルオキシダーゼ活性について分析する。
【０１４８】
次の方法は、ミエロペルオキシダーゼ活性を測定するために用いられる。結腸組織を採取し、液体窒素中で急速冷凍する。全結腸の代表的な試料は、試料間で一致していることを保証するために用いられる。組織は、使用するまで−８０℃で保存する。次に、組織を計量し（およそ５００ｍｇ）、５ｍＭのＨ２ＫＰＯ４（ｐＨ６）洗浄緩衝剤重量／体積１：１５中で均質化する。組織を、Ｓｏｒｖａｌｌ ＲＣ ５Ｂ遠心分離機中で、４５分間２−８℃で２００００×ｇで遠心する。その後上澄みを廃棄する。組織を再び懸濁し、５０ｍＭのＨ２ＫＰＯ４２．５ｍｌ（１：５ 重量／体積）中で、１０ｍＭのＥＤＴＡおよび０．５％のＨｅｘ臭化アンモニウムと共に均質化し、細胞内ＭＰＯの安定化を助ける。組織を液体窒素中で冷凍し、３７℃の水浴中で溶解し、細胞膜の溶解を確実にするために１５秒間超音波処理する。この操作を３回反復する。その後試料を氷上に２０分間おき、１２０００×ｇで１５分間２−８℃で遠心する。上澄みを、これらの工程の後に分析する。
【０１４９】
試験混合物は、２．９ｍｌの５０ｍＭのＨ２ＫＰＯ４を０．０００５％Ｈ２Ｏ２を含む０．１６７ｏ−ジアニシジンと一緒に反応管に加えることによって調製される。過酸化水素が分解されると、ｏ−ジアニシジンが酸化され、濃度依存的に４６０ｎｍにて吸光する。混合物を２５℃まで加熱する。１００μＬの組織上澄みを反応管に加え、１分間２５℃でインキュベートし、その後１ｍｌを使い捨てのプラスチックのキュベットに移す。ＯＤを、２分の反応時間ごとに、反応混合物２．９ｍｌおよび０．５％臭化アンモニウム溶液１００μｌを含むブランクに対して、４６０ｎｍで測定する。
【０１５０】
酵素活性単位を、４６０ｎｍにおける吸光度を、精製したヒトＭＰＯ３１．１単位／ガラス瓶を用いて用意した標準曲線と比較することによって、定量化する。ＭＰＯを再び溶解し、５０ｍＭのＨ２ＫＰＯ４を、１０ｍＭのＥＤＴＡおよび０．５％のＨｅｘ臭化アンモニウムと共に用いて、四つの既知の濃度に連続的に希釈する。試料の吸光度を、この曲線に対して比較し、活性を決定する。
【０１５１】
組織学的分析は、次のように実行する。結腸組織を、１０％中性緩衝ホルマリン中に浸す。各々の結腸の試料を、評価のために四つの試料に分配する。ホルマリン固定した組織を、パラフィン包埋のために真空浸透処理装置中で加工処理する。試料を５μｍに細分し、その後、Ｂｏｕｇｈｔｏｎ−Ｓｍｉｔｈの後修正された尺度を用いて、盲検的に組織学的評価をするために、ヘマトキシリンおよびエオジン（Ｈ＆Ｅ）で染色する。スコアの記録が完了した後試料を明らかにし、データを表に記入し、多重平均比較を用いてＡＮＯＶＡ線型モデル化することによって分析する。
【０１５２】
本明細書において引用されている、全ての特許、出版物および他の文書は、出典明示により本明細書の一部とする。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
［式中：
Ｒ１およびＲ２は、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、置換されていてもよいフェニル、または置換されていてもよい低級アルキルであり；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＣＮ、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよい低級アルキル、または置換されていてもよい低級アルコキシであり；
Ｒ８は、各々独立に、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、または置換されていてもよい低級アルキルであり；
Ｒ９は置換されていてもよい低級アルキルである］
で示される化合物あるいはその医薬上許容される塩またはプロドラッグ。
【請求項２】
Ｒ８がＨであるところの、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１およびＲ２が、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、置換されていないフェニル、または置換されていない低級アルキルであるところの、請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
化合物が、式：
【化２】
で示される化合物であるところの、請求項２または３記載の化合物。
【請求項５】
化合物が、式：
【化３】
で示される化合物であるところの、請求項２記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ３、Ｒ５およびＲ６が、各々独立に、Ｈ、Ｃｌ、Ｆ、メチルまたはメトキシであり、Ｒ２がＨ、Ｃｌ、Ｆまたはメチルであるところの、請求項２ないし５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
（ａ）４'−ヒドロキシ−３−メチル［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｂ）４'− ヒドロキシ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｃ）３−クロロ−４'− ヒドロキシ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｄ）２−フルオロ−４'− ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｅ）３−フルオロ−４'− ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｆ）２−クロロ−４'− ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｇ）３−クロロ−４'− ヒドロキシ−２'−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｈ）４'− ヒドロキシ−２−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｉ）３−クロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｊ）３−クロロ−３'，５'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｋ）３，５−ジクロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｌ）３，５−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｍ）２，３−ジクロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｎ）２，３−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
またはこれらのいずれかの医薬上許容される塩である、請求項２記載の化合物。
【請求項８】
式：
【化４】
［式中：
Ｒ１は、ＯＨ、または置換されていてもよい低級アルコキシであり；
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＣＮ、フェニル、低級アルキル、低級アルコキシであり、そのフェニル、低級アルキルおよび低級アルコキシは置換されていてよい］
で示される化合物、あるいはその医薬上許容される塩またはプロドラッグ。
【請求項９】
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７が、各々独立に、Ｈ、メチル、Ｃｌ、Ｆまたはメトキシであるところの、請求項８記載の化合物。
【請求項１０】
化合物が４'− ヒドロキシ−３−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシムであるところの、請求項８記載の化合物。
【請求項１１】
ａ）請求項１ないし１０のいずれかに記載の化合物、および
ｂ）医薬用キャリア
を含む、医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類における骨粗鬆症の阻害方法。
【請求項１３】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類における骨関節症、低カルシウム血症、高カルシウム血症、ページェット病、骨軟化症、骨石灰脱失、多発性骨髄腫および骨組織に有害な影響を与える他の形態の癌を阻害する方法。
【請求項１４】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類における良性または悪性の異常組織増殖を阻害する方法。
【請求項１５】
異常組織増殖が、前立腺肥大、子宮平滑筋腫、乳癌、子宮内膜症、子宮内膜癌、多嚢胞性卵巣症候群、子宮内膜ポリープ、良性胸部疾患、子宮腺筋症、卵巣癌、メラノーマ、前立腺癌、大腸癌、神経膠腫または中枢神経系の癌であるところの、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類において、コレステロール、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）またはＬＤＬレベルを低下させるか；または高コレステロール血症；高脂血症；心臓血管疾患；アテローム性動脈硬化症；末梢血管疾患；再狭窄または血管攣縮を阻害するか；または免疫介在血管傷害に至る細胞性事象に由来する血管壁傷害を阻害する方法。
【請求項１７】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類においてフリーラジカル誘発性病態を阻害する方法。
【請求項１８】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類において、認知機能の向上または神経保護をもたらすか、または老人性痴呆、アルツハイマー病、認知力低下、神経変性疾患を治療または阻害する方法。
【請求項１９】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類において、炎症性腸疾患、潰瘍性直腸炎、クローン病、大腸炎、ホットフラッシュ、膣または外陰部の萎縮、萎縮性膣炎、膣の乾燥、掻痒、性交疼痛、排尿困難、頻尿、尿失禁、尿路感染症、血管運動神経症状；男性型禿頭症； 皮膚の萎縮；アクネ；ＩＩ型糖尿病；機能不全性子宮出血；または不妊を阻害する方法。
【請求項２０】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類において、白血病、子宮内膜剥離、慢性腎疾患または肝疾患、または凝固機能疾患または障害を阻害する方法。
【請求項２１】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物の医薬品としての使用。
【請求項２２】
哺乳類における、骨粗鬆症を阻害し；骨関節症、低カルシウム血症、高カルシウム血症、ページェット病、骨軟化症、骨石灰脱失、多発性骨髄腫または骨組織に有害な影響を与える他の形態の癌を阻害し；良性または悪性の異常組織増殖を阻害し；コレステロール、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）またはＬＤＬレベルを低下させ；高コレステロール血症；高脂血症；心臓血管疾患；アテローム性動脈硬化症；末梢血管疾患；再狭窄または血管攣縮を阻害し；または免疫関連血管傷害につながる細胞の事象に由来する血管壁傷害を阻害し；フリーラジカル誘発性病態を阻害し；認知機能の向上または神経保護をもたらし；または老人性痴呆、アルツハイマー病、認知力低下、または神経変性疾患を治療または阻害し；炎症性腸疾患、潰瘍性直腸炎、クローン病、大腸炎、ホットフラッシュ、膣または外陰部の萎縮、萎縮性膣炎、膣の乾燥、掻痒、性交疼痛、排尿困難、頻尿、尿失禁、尿路感染症、血管運動神経症状；男性型禿頭症； 皮膚の萎縮；アクネ；ＩＩ型糖尿病；機能不全性子宮出血；または不妊を阻害し、または白血病、子宮内膜剥離、慢性腎疾患または肝疾患、または凝固機能疾患または障害を阻害するための医薬品の調製のための、請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１】
式：
【化１】
［式中：
Ｒ１およびＲ２は、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、置換されていてもよいフェニル、または置換されていてもよい低級アルキルであり；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＣＮ、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよい低級アルキル、または置換されていてもよい低級アルコキシであり；
Ｒ８は、各々独立に、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、または置換されていてもよい低級アルキルであり；
Ｒ９は置換されていてもよい低級アルキルである］
で示される化合物あるいはその医薬上許容される塩またはプロドラッグ。
【請求項２】
Ｒ８がＨであるところの、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１およびＲ２が、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、置換されていないフェニル、または置換されていない低級アルキルであるところの、請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
化合物が、式：
【化２】
で示される化合物であるところの、請求項２または３記載の化合物。
【請求項５】
化合物が、式：
【化３】
で示される化合物であるところの、請求項２記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ３、Ｒ５およびＲ６が、各々独立に、Ｈ、Ｃｌ、Ｆ、メチルまたはメトキシであり、Ｒ２がＨ、Ｃｌ、Ｆまたはメチルであるところの、請求項２ないし５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
（ａ）４'−ヒドロキシ−３−メチル［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｂ）４'− ヒドロキシ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｃ）３−クロロ−４'− ヒドロキシ［１，１'−ビフェニル］−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｄ）２−フルオロ−４'− ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｅ）３−フルオロ−４'− ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｆ）２−クロロ−４'− ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｇ）３−クロロ−４'− ヒドロキシ−２'−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｈ）４'− ヒドロキシ−２−メチル−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｉ）３−クロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｊ）３−クロロ−３'，５'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｋ）３，５−ジクロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｌ）３，５−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｍ）２，３−ジクロロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
（ｎ）２，３−ジクロロ−３'−フルオロ−４'−ヒドロキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシム；
またはこれらのいずれかの医薬上許容される塩である、請求項２記載の化合物。
【請求項８】
式：
【化４】
［式中：
Ｒ１は、ＯＨ、または置換されていてもよい低級アルコキシであり；
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＣＮ、フェニル、低級アルキル、低級アルコキシであり、そのフェニル、低級アルキルおよび低級アルコキシは置換されていてよい］
で示される化合物、あるいはその医薬上許容される塩またはプロドラッグ。
【請求項９】
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７が、各々独立に、Ｈ、メチル、Ｃｌ、Ｆまたはメトキシであるところの、請求項８記載の化合物。
【請求項１０】
化合物が４'− ヒドロキシ−３−メトキシ−１，１'−ビフェニル−４−カルバルデヒドオキシムであるところの、請求項８記載の化合物。
【請求項１１】
ａ）請求項１ないし１０のいずれかに記載の化合物、および
ｂ）医薬用キャリア
を含む、医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類における骨粗鬆症の阻害方法。
【請求項１３】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類における骨関節症、低カルシウム血症、高カルシウム血症、ページェット病、骨軟化症、骨石灰脱失、多発性骨髄腫および骨組織に有害な影響を与える他の形態の癌を阻害する方法。
【請求項１４】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類における良性または悪性の異常組織増殖を阻害する方法。
【請求項１５】
異常組織増殖が、前立腺肥大、子宮平滑筋腫、乳癌、子宮内膜症、子宮内膜癌、多嚢胞性卵巣症候群、子宮内膜ポリープ、良性胸部疾患、子宮腺筋症、卵巣癌、メラノーマ、前立腺癌、大腸癌、神経膠腫または中枢神経系の癌であるところの、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類において、コレステロール、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）またはＬＤＬレベルを低下させるか；または高コレステロール血症；高脂血症；心臓血管疾患；アテローム性動脈硬化症；末梢血管疾患；再狭窄または血管攣縮を阻害するか；または免疫介在血管傷害に至る細胞性事象に由来する血管壁傷害を阻害する方法。
【請求項１７】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類においてフリーラジカル誘発性病態を阻害する方法。
【請求項１８】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類において、認知機能の向上または神経保護をもたらすか、または老人性痴呆、アルツハイマー病、認知力低下、神経変性疾患を治療または阻害する方法。
【請求項１９】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類において、炎症性腸疾患、潰瘍性直腸炎、クローン病、大腸炎、ホットフラッシュ、膣または外陰部の萎縮、萎縮性膣炎、膣の乾燥、掻痒、性交疼痛、排尿困難、頻尿、尿失禁、尿路感染症、血管運動神経症状；男性型禿頭症； 皮膚の萎縮；アクネ；ＩＩ型糖尿病；機能不全性子宮出血；または不妊を阻害する方法。
【請求項２０】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の有効量を、哺乳類に与えることを含む、その必要のある哺乳類において、白血病、子宮内膜剥離、慢性腎疾患または肝疾患、または凝固機能疾患または障害を阻害する方法。
【請求項２１】
請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物の医薬品としての使用。
【請求項２２】
哺乳類における、骨粗鬆症を阻害し；骨関節症、低カルシウム血症、高カルシウム血症、ページェット病、骨軟化症、骨石灰脱失、多発性骨髄腫または骨組織に有害な影響を与える他の形態の癌を阻害し；良性または悪性の異常組織増殖を阻害し；コレステロール、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）またはＬＤＬレベルを低下させ；高コレステロール血症；高脂血症；心臓血管疾患；アテローム性動脈硬化症；末梢血管疾患；再狭窄または血管攣縮を阻害し；または免疫関連血管傷害につながる細胞の事象に由来する血管壁傷害を阻害し；フリーラジカル誘発性病態を阻害し；認知機能の向上または神経保護をもたらし；または老人性痴呆、アルツハイマー病、認知力低下、または神経変性疾患を治療または阻害し；炎症性腸疾患、潰瘍性直腸炎、クローン病、大腸炎、ホットフラッシュ、膣または外陰部の萎縮、萎縮性膣炎、膣の乾燥、掻痒、性交疼痛、排尿困難、頻尿、尿失禁、尿路感染症、血管運動神経症状；男性型禿頭症； 皮膚の萎縮；アクネ；ＩＩ型糖尿病；機能不全性子宮出血；または不妊を阻害し、または白血病、子宮内膜剥離、慢性腎疾患または肝疾患、または凝固機能疾患または障害を阻害するための医薬品の調製のための、請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【公表番号】特表２００６−５２５３４６（Ｐ２００６−５２５３４６Ａ）
【公表日】平成１８年１１月９日（２００６．１１．９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５１３４５３（Ｐ２００６−５１３４５３）
【出願日】平成１６年４月３０日（２００４．４．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１３３１６
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０９９１２２
【国際公開日】平成１６年１１月１８日（２００４．１１．１８）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
マッキントッシュ
【出願人】（５９１０１１５０２）ワイス (573)
【氏名又は名称原語表記】Ｗｙｅｔｈ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年１１月９日（２００６．１１．９）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年４月３０日（２００４．４．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１３３１６
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０９９１２２
【国際公開日】平成１６年１１月１８日（２００４．１１．１８）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
マッキントッシュ
【出願人】（５９１０１１５０２）ワイス (573)
【氏名又は名称原語表記】Ｗｙｅｔｈ
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]