ブレンド精油
【課題】フリーラジカル抑制作用を有するブレンド精油を提供する。
【解決手段】ブレンド精油は、ＤＬ−シトロネロールと、オイゲノールと、シトラールと、オイゲノールメチルエーテルと、チモールとを含有する。含有されるこれらの化学成分は、植物精油中のＤＰＰＨ（１,１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル）ラジカル消去能、ＡＢＴＳ（２,２−アジノ−ジ−エチルベンツチアゾリン−６−スルホン酸）+ラジカル消去能、キレート結合能および還元力が極めてよい化学成分であるため、ブレンド精油は優れたフリーラジカル抑制力および抗酸化力を果たすことができる。
【解決手段】ブレンド精油は、ＤＬ−シトロネロールと、オイゲノールと、シトラールと、オイゲノールメチルエーテルと、チモールとを含有する。含有されるこれらの化学成分は、植物精油中のＤＰＰＨ（１,１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル）ラジカル消去能、ＡＢＴＳ（２,２−アジノ−ジ−エチルベンツチアゾリン−６−スルホン酸）+ラジカル消去能、キレート結合能および還元力が極めてよい化学成分であるため、ブレンド精油は優れたフリーラジカル抑制力および抗酸化力を果たすことができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ブレンド精油に関し、詳しくはフリーラジカル抑制作用を有するブレンド精油に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
米国の化学専門家Dr. Harmanは、１９９３年に定期刊行物Drugs Agingにより、フリーラジカル過剰は生物を老化させる重要な原因となることを証明した。しかしながら、生物自体の酸化および代謝反応過程または外部の環境中のイオン放射、および空気汚染と化学物質による環境汚染物は生物体内にフリーラジカル(free radical)および誘導体を絶えず生じさせる。人間の場合、人体の表面を覆う皮膚は外部の環境からもっとも影響されやすい。例えば、環境中の紫外線は皮膚の真皮中の繊維芽細胞およびミトコンドリアに刺激を与え、過酸化アニオン(superoxide anion, Ｏ2-)を放出させる。過酸化アニオンが多過ぎると破壊性のより強いフリーラジカルに転換するという現象が発生する。体内には酸化および抗酸化のバランス状態を維持する抗酸化防御システムがあるため、活性酸素種(reactive oxygen species, ＲＯＳ)およびフリーラジカルの生成を減退させることが可能である。一方、長期的に過度の日射に当たると、体内に大量生成したフリーラジカルは皮膚の抗酸化防御力を低下させ、光老化(photoaging)、表皮の皺、皮膚の免疫力失調および皮膚がんなどの急性または慢性の皮膚障害を起こす。
【０００３】
それに対し、フリーラジカル消去および抗酸化機能を果たすことが可能な製品が登場し、これらの製品は皮膚の表面に塗ることによって皮膚の抗酸化力を高める。しかしながら、多くの抗酸化力の比較的よい製品内に含有される抗酸化成分の分子は比較的大きいか水溶性であるため、皮膚に吸収されにくい。従って、実際に達成できる抗酸化力は限られる。
【０００４】
一方、消費者のナチュラルなスタイルを求める傾向に対して、精油（エッセンシャルオイル）を混合したブレンド精油が開発されている。ブレンド精油は、成分の特定の精油が抗酸化成分を含有し、その分子は比較的小さいため、皮膚に吸収されやすく、大いに受け入れられる。精油中に含有される抗酸化成分は薫香、塗擦、マッサージまたは入浴などの方法によって皮膚の細胞および呼吸系統に吸収され、そののち細孔の伝導によって皮膚組織に浸み込み、全身細胞まで届いて抗酸化効果を達成する。しかしながら、市販の酸化を抑制可能なブレンド精油は、フリーラジカル消去および酸化抑制を確実に達成することを証明できる客観的な実験データがない。
精油（エッセンシャルオイル）は、例えば特許文献１等に開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００３−１９０２６７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の主な目的は、フリーラジカル抑制作用を有するブレンド精油を提供することである。このブレンド精油は、フリーラジカル抑制力および抗酸化力が市販のブレンド精油より強いことが実験データで証明された。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上述の目的を達成するために、本発明によるブレンド精油は、ＤＬ−シトロネロール(ＤＬ−Citronellol)と、オイゲノール(eugenol)と、シトラール(cis/trans-Citral)と、オイゲノールメチルエーテル(Eugenol methyl ether)と、チモール(Thymol)とを含有する。
【０００８】
本発明によるブレンド精油は、好ましくは、０．５〜８ｗｔ％のＤＬ−シトロネロールと、４．５〜２４．６ｗｔ％のオイゲノールと、３．７５〜２０ｗｔ％のシトラールと、０．１５〜１２．５ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテルと、４．５〜２５．２ｗｔ％のチモールとを含有する。
【０００９】
そのうちＤＬ−シトロネロールは、ゼラニウム精油から獲得できる。
オイゲノールはニッケイ精油から獲得できる。
シトラールはレモングラス精油から獲得できる。
オイゲノールメチルエーテルは月桂樹精油（西インド）から獲得できる。
チモールはオレガノ精油から獲得できる。
【００１０】
本発明によるブレンド精油に含有される化学成分は、植物精油中のＤＰＰＨ（１,１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル）ラジカル消去能、ＡＢＴＳ（２,２−アジノ−ジ−エチルベンツチアゾリン−６−スルホン酸）+ラジカル消去能、キレート結合能および還元力が極めてよい化学成分であるため、本発明によるブレンド精油は優れたフリーラジカル抑制力および抗酸化力を果たすことができる。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明によるブレンド精油について説明する。本発明によるフリーラジカル抑制作用を有するブレンド精油は、ＤＬ−シトロネロールと、オイゲノールと、シトラールと、オイゲノールメチルエーテルと、チモールとを含有する。
【００１２】
本発明の一実施形態によるブレンド精油は、０．５〜８ｗｔ％のＤＬ−シトロネロールと、４．５〜２４．６ｗｔ％のオイゲノールと、３．７５〜２０ｗｔ％のシトラールと、０．１５〜１２．５ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテルと、４．５〜２５．２ｗｔ％のチモールとを含有する。
【００１３】
フェノール類は、フリーラジカル消去能が極めてよい。過量のフェノール類は刺激臭がするため、上述した成分の含量は多数回の実験によって求められた最良の割合であり、かつフリーラジカル消去能を果たすことができるだけでなく、ブレンド精油の香りを保持することができる。
【００１４】
まず説明すべきなのは、精油を抽出する植物の産地、栽培方法、採集時期、精油の抽出方法および抽出部位などの要素によって精油中の化学成分の含量が異なることである。従って、以下の記載に挙げられる精油の化学成分の含量は所定の範囲内で変更することが認められる。
【００１５】
ＤＬ−シトロネロールは、ゼラニウム精油から獲得され、ゼラニウム精油の５〜４０ｗｔ％を占める。オイゲノールは、ニッケイ精油から獲得され、ニッケイ精油の３０〜８２ｗｔ％を占める。シトラールは、レモングラス精油から獲得され、レモングラス精油の２５〜８０ｗｔ％を占める。オイゲノールメチルエーテルは、月桂樹精油（西インド）から獲得され、月桂樹精油（西インド）の０．１〜５ｗｔ％を占める。チモールは、オレガノ精油から獲得され、オレガノ精油の３０〜８４ｗｔ％を占める。
【００１６】
以下、本発明の実施例のブレンド精油は、４０ｗｔ％のＤＬ−シトロネロール成分を含有したゼラニウム精油と、８２ｗｔ％のオイゲノール成分を含有したニッケイ精油と、８０ｗｔ％のシトラール成分を含有したレモングラス精油と、５ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテル成分を含有した月桂樹精油（西インド）と、８４ｗｔ％のチモール成分を含有したオレガノ精油とを異なる割合で均質に混合して調製したものである。
混合方法について、特に制限がない。周知の均質に混合できる方法を使用してもよい。
【００１７】
本発明は、以下の実施例になんら限定されるものではなく、発明の趣旨を逸脱しない範囲において種々の形態で実施可能である。
【００１８】
（実施例１）
１０ｇのゼラニウム精油と、３０ｇのニッケイ精油と、１５ｇのレモングラス精油と、１５ｇの月桂樹精油（西インド）と、３０ｇのオレガノ精油とを混合し、１００ｇのブレンド精油を調製する。完成したブレンド精油は、４ｗｔ％のＤＬ−シトロネロールと、２４．６ｗｔ％のオイゲノール、１２ｗｔ％のシトラールと、０．７５ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテルと、２５．２ｗｔ％のチモールとを含有する。
【００１９】
（実施例２）
１０ｇのゼラニウム精油と、２５ｇのニッケイ精油と、２０ｇのレモングラス精油と、２０ｇの月桂樹精油（西インド）と、２５ｇのオレガノ精油とを混合し、１００ｇのブレンド精油を調製する。完成したブレンド精油は、４ｗｔ％のＤＬ−シトロネロールと、２０．５ｗｔ％のオイゲノール、１６ｗｔ％のシトラールと、１ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテルと、２１ｗｔ％のチモールとを含有する。
【００２０】
（実施例３）
２０ｇのゼラニウム精油と、１５ｇのニッケイ精油と、２５ｇのレモングラス精油と、２５ｇの月桂樹精油（西インド）と、１５ｇのオレガノ精油とを混合し、１００ｇのブレンド精油を調製する。完成したブレンド精油は、８ｗｔ％のＤＬ−シトロネロールと、１２．３ｗｔ％のオイゲノール、２０ｗｔ％のシトラールと、１．２５ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテルと、１２．６ｗｔ％のチモールとを含有する。
【００２１】
（比較例１）
業者Ｂが販売したブレンド精油は、有機ベルガモット、オレンジ、グレープフルーツ、ローズウッド、パルマローザ、ローズマリー、ミント、ジンジャー、レモン、ヒマラヤスギおよびパチョリなどの成分を含有する。
【００２２】
（比較例２）
業者Ｄが販売したブレンド精油は、柑橘、ベルガモット、オレンジ、ネロリ、紫檀、ヒマラヤスギおよび白檀などの成分を含有する。
【００２３】
（比較例３）
業者Ｍが販売したブレンド精油は、ジュニパー、エヴァーラスティング、ローズウッド、ローズマリーおよびミントなどの成分を含有する。
【００２４】
（比較例４）
業者Ｌが販売したブレンド精油（１）は、ダマスクローズ、没薬、パチョリ、ベチバー、ジンジャーおよびローズウッドなどの成分を含有する。
【００２５】
（比較例５）
業者Ｌが販売したブレンド精油（２）は、プチグレン、ゼラニウム、クラリセージ、サイプレス、ローズウッドおよびグレープフルーツなどの成分を含有する。
【００２６】
（比較例６）
業者Ｌが販売したブレンド精油（６）は、ローズゼラニウム、ローズマリー、バジル、樟脳、高地ラベンダーおよびゼラニウムなどの成分を含有する。
【００２７】
（比較例７）
業者Ｌが販売したブレンド精油（７）は、高地ラベンダー、ローズウッド、乳香、没薬およびバジルなどの成分を含有する。
【００２８】
（比較例８）
業者Ｌが販売したブレンド精油（８）は、高地ラベンダー、グレープフルーツ、ベチバー、ショウノウおよびベルガモットなどの成分を含有する。
【００２９】
以下、上述した実施例および比較例のフリーラジカル抑制力および抗酸化力を下記の方法で測定する。測定結果は表１に示したとおりである。
【００３０】
＜１．ＤＰＰＨラジカル消去能測定＞
まず実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油をそれぞれ濃度が１０ｍｇ/ｍＬの溶液に調製する。
【００３１】
続いて、ＤＰＰＨ（１,１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル、1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl）をエタノールに溶解させ、濃度が１．５２×１０-4ＭのＤＰＰＨエタノール溶液を調製する。
続いて、前述した５００μＬの実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油のそれぞれの溶液と、２５００μＬのＤＰＰＨエタノール溶液とを均質に振動撹拌し、そののち室温下で光線に当たらないように３０分間放置すれば、実験ブロックが完成する。
一方、対照ブロックは、前述した実験ブロック中の実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油の溶液を５００μＬのブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）に取り替えるものである。
【００３２】
続いて、５１７ｎｍの波長下での実験ブロックおよび対照ブロックの吸光数値を赤外光／可視分光光度計で測定する。
ＤＰＰＨラジカル消去能の強弱は、数式１によって判定される。数値が高ければ高いほど、ＤＰＰＨラジカル消去能が強くなる。
（数式１）
ＤＰＰＨラジカル消去率（％）＝｛１−（実験ブロックの吸光数値／対照ブロックの吸光数値）｝×１００
【００３３】
＜２．ＡＢＴＳ+ラジカル消去能測定＞
まず実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油をそれぞれ濃度が１ｍｇ/ｍＬの溶液に調製する。
【００３４】
続いて、２５０μＬの脱イオン水と、２５０μＬの濃度が５００μＭの過酸化水素（Ｈ2Ｏ2）溶液と、２５０μＬの濃度が１０００μＭのＡＢＴＳ（２,２−アジノ−ジ−エチルベンツチアゾリン−６−スルホン酸、2,2’-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid)溶液と、２５０μＬの濃度が８．８Ｕ/ｍＬのペルオキシダーゼ(Peroxidase)とを、ミキサーで均質に混合し、１０分後安定した青緑色のＡＢＴＳ+フリーラジカルが生じると、２５０μＬの前述した実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油の溶液を別々に加える。そののち溶液をミキサーで均質に混合し、１０分間放置すれば実験ブロックが完成する。
【００３５】
一方、対照ブロックは、ブチルヒドロキシアニソール(butylated hydroxyl anisole, ＢＨＡ)を標準品とし、前述した実験ブロック中の実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油の溶液を２５０μＬの脱イオン水に取り替えるものである。
【００３６】
続いて、４１０ｎｍの波長下での実験ブロックおよび対照ブロックの吸光数値を酵素免疫吸着測定器で測定する。
【００３７】
ＡＢＴＳ+ラジカル消去能の強弱は、数式２によって判定される。数値が高ければ高いほど、ＡＢＴＳ+ラジカル消去能が強くなる。
（数式２）
ＡＢＴＳ+ラジカル消去率（％）＝｛１−（実験ブロックの吸光数値／対照ブロックの吸光数値）｝×１００
【００３８】
＜３．キレート結合能測定＞
まず実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油をそれぞれ濃度が１ｍｇ/ｍＬの液体に調製する。
【００３９】
続いて、７５０μＬの濃度が２ｍＭの塩化第二鉄(Iron(II) chloride)溶液と、２５０μＬのメタノールと、５００μＬの前述した実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油のそれぞれの溶液とを３０秒振動撹拌する。続いて１５００μＬの濃度が５ｍＭのフェロジン(Ferrozine)液体を加え、室温下で光線に当たらないように３０分間放置する。続いて、液体が完全反応に達した後、３０００ｒｐｍの回転数で遠心分離を５分間行い、そののち上層の透明液体を取れば実験ブロックが完成する。
【００４０】
一方、対照ブロックは、遠心分離を行わず、前述した実験ブロック中の実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油の溶液を５００μＬのエチレンジアミン四酢酸(ethylenediaminetetraacetic acid, ＥＤＴＡ)に取り替えるものである。
【００４１】
続いて、５６２ｎｍの波長下での実験ブロックおよび対照ブロックの吸光数値を赤外光／可視分光光度計で測定する。
【００４２】
キレート結合能の強弱は、数式３によって判定される。数値が高ければ高いほど、キレート結合能が強くなる。
（数式３）
キレート結合率（％）＝｛１−（実験ブロックの吸光数値／対照ブロックの吸光数値）｝×１００
【００４３】
＜４．還元力測定＞
まず実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油をそれぞれ濃度が１０ｍｇ/ｍＬの液体に調製する。
【００４４】
濃度が０．２Ｍのリン酸二水素ナトリウム(sodium dihydrogenphosphate)溶液と、濃度が０．２Ｍのリン酸水素二ナトリウム(disodium hydrogenphosphate)溶液とを濃度が２ｍＭ、ｐＨが６．６のリン酸塩緩衝溶液(phosphate buffer solution)に調製する。
【００４５】
続いて、５００μＬの前述した実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油のそれぞれの溶液と、２５０μＬのリン酸塩緩衝溶液と、２５０μＬの濃度が１％の赤血塩とを均質に混合する。続いて５０℃温度下で水浴を２０分間行い、そののち急速冷却を５分間行う。続いて、２５０μＬの濃度が１０％のトリクロル酢酸を加え、溶液を均質に混合する。続いて、上層の透明溶液を１００μＬ採り、そののち５００μＬの脱イオン水と、７５０μＬの濃度が０．１％の塩化第二鉄溶液とを加え、溶液を均質に混合する。続いて、室温下で光線に当たらないように３０分間放置すれば実験ブロックが完成する。
【００４６】
一方、対照ブロックは、ブチルヒドロキシアニソール(ＢＨＡ)を標準品とし、前述した実験ブロックの溶液を５００μＬの濃度が９９．８％のアルコールに取り替えるものである。
【００４７】
続いて、２００μＬの実験ブロックおよび対照ブロックを酵素免疫吸着測定器の９６個の孔に別々に注入する。続いて、７００ｎｍの波長下での実験ブロックおよび対照ブロックの吸光数値を酵素免疫吸着測定器で測定する。
【００４８】
還元力の強弱は、数式４によって判定される。数値が高ければ高いほど、還元力が強くなる。
（数式４）
還元力（％）＝（実験ブロックの吸光数値／対照ブロックの吸光数値）×１００
【００４９】
【表１】
【００５０】
表１の結果により、本発明の実施例１〜３のブレンド精油は、ＤＰＰＨラジカル消去能、ＡＢＴＳ+ラジカル消去能、キレート結合能および還元力が比較例１〜８のブレンド精油よりも優れていることが判明した。
【００５１】
一方、本発明の実施例３のブレンド精油について、薫香方式によって人体実験を行った。その結果、本発明によるブレンド精油は人体の血液中のフリーラジカル消去効果を有することが判明した。実験過程は次の通りである。１５人の成人に対し、薫香を受ける前の血液と、薫香を１０分間受けた血液とを採り、分析する。続いて、０．２ｍＬの血液と、０．１ｍＬの０．９％の生理食塩水とを均質に混合し、体温に近い３７℃まで加熱し、そののち１ｍＬの試薬を加える。試薬は２．５ｍｇのルシゲニン（lucigenin）を５０ｍＬの０．９％の生理食塩水に溶解させて生成したものである。続いて、フリーラジカル測定器(Chemiluminescence Spectrometer)によってフリーラジカルの数を測定する。測定結果は表２に示したとおりである。
【００５２】
【表２】
【００５３】
表２により、薫香方式によって人体実験を行った実施例３のブレンド精油は、血液中のフリーラジカルを確実に消去でき、フリーラジカル消去率の平均が７０％に近いことが判明した。
【００５４】
上述したとおり、本発明の実施例１〜３によるブレンド精油は、全体のＤＰＰＨラジカル消去能、ＡＢＴＳ+ラジカル消去能、キレート結合能および還元力が非常に優れるだけでなく、人体実験の結果によりフリーラジカル消去効果が明らかである。従って、本発明によるブレンド精油は優れたフリーラジカル抑制力および抗酸化力を確実に果たすことができる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ブレンド精油に関し、詳しくはフリーラジカル抑制作用を有するブレンド精油に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
米国の化学専門家Dr. Harmanは、１９９３年に定期刊行物Drugs Agingにより、フリーラジカル過剰は生物を老化させる重要な原因となることを証明した。しかしながら、生物自体の酸化および代謝反応過程または外部の環境中のイオン放射、および空気汚染と化学物質による環境汚染物は生物体内にフリーラジカル(free radical)および誘導体を絶えず生じさせる。人間の場合、人体の表面を覆う皮膚は外部の環境からもっとも影響されやすい。例えば、環境中の紫外線は皮膚の真皮中の繊維芽細胞およびミトコンドリアに刺激を与え、過酸化アニオン(superoxide anion, Ｏ2-)を放出させる。過酸化アニオンが多過ぎると破壊性のより強いフリーラジカルに転換するという現象が発生する。体内には酸化および抗酸化のバランス状態を維持する抗酸化防御システムがあるため、活性酸素種(reactive oxygen species, ＲＯＳ)およびフリーラジカルの生成を減退させることが可能である。一方、長期的に過度の日射に当たると、体内に大量生成したフリーラジカルは皮膚の抗酸化防御力を低下させ、光老化(photoaging)、表皮の皺、皮膚の免疫力失調および皮膚がんなどの急性または慢性の皮膚障害を起こす。
【０００３】
それに対し、フリーラジカル消去および抗酸化機能を果たすことが可能な製品が登場し、これらの製品は皮膚の表面に塗ることによって皮膚の抗酸化力を高める。しかしながら、多くの抗酸化力の比較的よい製品内に含有される抗酸化成分の分子は比較的大きいか水溶性であるため、皮膚に吸収されにくい。従って、実際に達成できる抗酸化力は限られる。
【０００４】
一方、消費者のナチュラルなスタイルを求める傾向に対して、精油（エッセンシャルオイル）を混合したブレンド精油が開発されている。ブレンド精油は、成分の特定の精油が抗酸化成分を含有し、その分子は比較的小さいため、皮膚に吸収されやすく、大いに受け入れられる。精油中に含有される抗酸化成分は薫香、塗擦、マッサージまたは入浴などの方法によって皮膚の細胞および呼吸系統に吸収され、そののち細孔の伝導によって皮膚組織に浸み込み、全身細胞まで届いて抗酸化効果を達成する。しかしながら、市販の酸化を抑制可能なブレンド精油は、フリーラジカル消去および酸化抑制を確実に達成することを証明できる客観的な実験データがない。
精油（エッセンシャルオイル）は、例えば特許文献１等に開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００３−１９０２６７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の主な目的は、フリーラジカル抑制作用を有するブレンド精油を提供することである。このブレンド精油は、フリーラジカル抑制力および抗酸化力が市販のブレンド精油より強いことが実験データで証明された。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上述の目的を達成するために、本発明によるブレンド精油は、ＤＬ−シトロネロール(ＤＬ−Citronellol)と、オイゲノール(eugenol)と、シトラール(cis/trans-Citral)と、オイゲノールメチルエーテル(Eugenol methyl ether)と、チモール(Thymol)とを含有する。
【０００８】
本発明によるブレンド精油は、好ましくは、０．５〜８ｗｔ％のＤＬ−シトロネロールと、４．５〜２４．６ｗｔ％のオイゲノールと、３．７５〜２０ｗｔ％のシトラールと、０．１５〜１２．５ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテルと、４．５〜２５．２ｗｔ％のチモールとを含有する。
【０００９】
そのうちＤＬ−シトロネロールは、ゼラニウム精油から獲得できる。
オイゲノールはニッケイ精油から獲得できる。
シトラールはレモングラス精油から獲得できる。
オイゲノールメチルエーテルは月桂樹精油（西インド）から獲得できる。
チモールはオレガノ精油から獲得できる。
【００１０】
本発明によるブレンド精油に含有される化学成分は、植物精油中のＤＰＰＨ（１,１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル）ラジカル消去能、ＡＢＴＳ（２,２−アジノ−ジ−エチルベンツチアゾリン−６−スルホン酸）+ラジカル消去能、キレート結合能および還元力が極めてよい化学成分であるため、本発明によるブレンド精油は優れたフリーラジカル抑制力および抗酸化力を果たすことができる。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明によるブレンド精油について説明する。本発明によるフリーラジカル抑制作用を有するブレンド精油は、ＤＬ−シトロネロールと、オイゲノールと、シトラールと、オイゲノールメチルエーテルと、チモールとを含有する。
【００１２】
本発明の一実施形態によるブレンド精油は、０．５〜８ｗｔ％のＤＬ−シトロネロールと、４．５〜２４．６ｗｔ％のオイゲノールと、３．７５〜２０ｗｔ％のシトラールと、０．１５〜１２．５ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテルと、４．５〜２５．２ｗｔ％のチモールとを含有する。
【００１３】
フェノール類は、フリーラジカル消去能が極めてよい。過量のフェノール類は刺激臭がするため、上述した成分の含量は多数回の実験によって求められた最良の割合であり、かつフリーラジカル消去能を果たすことができるだけでなく、ブレンド精油の香りを保持することができる。
【００１４】
まず説明すべきなのは、精油を抽出する植物の産地、栽培方法、採集時期、精油の抽出方法および抽出部位などの要素によって精油中の化学成分の含量が異なることである。従って、以下の記載に挙げられる精油の化学成分の含量は所定の範囲内で変更することが認められる。
【００１５】
ＤＬ−シトロネロールは、ゼラニウム精油から獲得され、ゼラニウム精油の５〜４０ｗｔ％を占める。オイゲノールは、ニッケイ精油から獲得され、ニッケイ精油の３０〜８２ｗｔ％を占める。シトラールは、レモングラス精油から獲得され、レモングラス精油の２５〜８０ｗｔ％を占める。オイゲノールメチルエーテルは、月桂樹精油（西インド）から獲得され、月桂樹精油（西インド）の０．１〜５ｗｔ％を占める。チモールは、オレガノ精油から獲得され、オレガノ精油の３０〜８４ｗｔ％を占める。
【００１６】
以下、本発明の実施例のブレンド精油は、４０ｗｔ％のＤＬ−シトロネロール成分を含有したゼラニウム精油と、８２ｗｔ％のオイゲノール成分を含有したニッケイ精油と、８０ｗｔ％のシトラール成分を含有したレモングラス精油と、５ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテル成分を含有した月桂樹精油（西インド）と、８４ｗｔ％のチモール成分を含有したオレガノ精油とを異なる割合で均質に混合して調製したものである。
混合方法について、特に制限がない。周知の均質に混合できる方法を使用してもよい。
【００１７】
本発明は、以下の実施例になんら限定されるものではなく、発明の趣旨を逸脱しない範囲において種々の形態で実施可能である。
【００１８】
（実施例１）
１０ｇのゼラニウム精油と、３０ｇのニッケイ精油と、１５ｇのレモングラス精油と、１５ｇの月桂樹精油（西インド）と、３０ｇのオレガノ精油とを混合し、１００ｇのブレンド精油を調製する。完成したブレンド精油は、４ｗｔ％のＤＬ−シトロネロールと、２４．６ｗｔ％のオイゲノール、１２ｗｔ％のシトラールと、０．７５ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテルと、２５．２ｗｔ％のチモールとを含有する。
【００１９】
（実施例２）
１０ｇのゼラニウム精油と、２５ｇのニッケイ精油と、２０ｇのレモングラス精油と、２０ｇの月桂樹精油（西インド）と、２５ｇのオレガノ精油とを混合し、１００ｇのブレンド精油を調製する。完成したブレンド精油は、４ｗｔ％のＤＬ−シトロネロールと、２０．５ｗｔ％のオイゲノール、１６ｗｔ％のシトラールと、１ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテルと、２１ｗｔ％のチモールとを含有する。
【００２０】
（実施例３）
２０ｇのゼラニウム精油と、１５ｇのニッケイ精油と、２５ｇのレモングラス精油と、２５ｇの月桂樹精油（西インド）と、１５ｇのオレガノ精油とを混合し、１００ｇのブレンド精油を調製する。完成したブレンド精油は、８ｗｔ％のＤＬ−シトロネロールと、１２．３ｗｔ％のオイゲノール、２０ｗｔ％のシトラールと、１．２５ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテルと、１２．６ｗｔ％のチモールとを含有する。
【００２１】
（比較例１）
業者Ｂが販売したブレンド精油は、有機ベルガモット、オレンジ、グレープフルーツ、ローズウッド、パルマローザ、ローズマリー、ミント、ジンジャー、レモン、ヒマラヤスギおよびパチョリなどの成分を含有する。
【００２２】
（比較例２）
業者Ｄが販売したブレンド精油は、柑橘、ベルガモット、オレンジ、ネロリ、紫檀、ヒマラヤスギおよび白檀などの成分を含有する。
【００２３】
（比較例３）
業者Ｍが販売したブレンド精油は、ジュニパー、エヴァーラスティング、ローズウッド、ローズマリーおよびミントなどの成分を含有する。
【００２４】
（比較例４）
業者Ｌが販売したブレンド精油（１）は、ダマスクローズ、没薬、パチョリ、ベチバー、ジンジャーおよびローズウッドなどの成分を含有する。
【００２５】
（比較例５）
業者Ｌが販売したブレンド精油（２）は、プチグレン、ゼラニウム、クラリセージ、サイプレス、ローズウッドおよびグレープフルーツなどの成分を含有する。
【００２６】
（比較例６）
業者Ｌが販売したブレンド精油（６）は、ローズゼラニウム、ローズマリー、バジル、樟脳、高地ラベンダーおよびゼラニウムなどの成分を含有する。
【００２７】
（比較例７）
業者Ｌが販売したブレンド精油（７）は、高地ラベンダー、ローズウッド、乳香、没薬およびバジルなどの成分を含有する。
【００２８】
（比較例８）
業者Ｌが販売したブレンド精油（８）は、高地ラベンダー、グレープフルーツ、ベチバー、ショウノウおよびベルガモットなどの成分を含有する。
【００２９】
以下、上述した実施例および比較例のフリーラジカル抑制力および抗酸化力を下記の方法で測定する。測定結果は表１に示したとおりである。
【００３０】
＜１．ＤＰＰＨラジカル消去能測定＞
まず実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油をそれぞれ濃度が１０ｍｇ/ｍＬの溶液に調製する。
【００３１】
続いて、ＤＰＰＨ（１,１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル、1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl）をエタノールに溶解させ、濃度が１．５２×１０-4ＭのＤＰＰＨエタノール溶液を調製する。
続いて、前述した５００μＬの実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油のそれぞれの溶液と、２５００μＬのＤＰＰＨエタノール溶液とを均質に振動撹拌し、そののち室温下で光線に当たらないように３０分間放置すれば、実験ブロックが完成する。
一方、対照ブロックは、前述した実験ブロック中の実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油の溶液を５００μＬのブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）に取り替えるものである。
【００３２】
続いて、５１７ｎｍの波長下での実験ブロックおよび対照ブロックの吸光数値を赤外光／可視分光光度計で測定する。
ＤＰＰＨラジカル消去能の強弱は、数式１によって判定される。数値が高ければ高いほど、ＤＰＰＨラジカル消去能が強くなる。
（数式１）
ＤＰＰＨラジカル消去率（％）＝｛１−（実験ブロックの吸光数値／対照ブロックの吸光数値）｝×１００
【００３３】
＜２．ＡＢＴＳ+ラジカル消去能測定＞
まず実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油をそれぞれ濃度が１ｍｇ/ｍＬの溶液に調製する。
【００３４】
続いて、２５０μＬの脱イオン水と、２５０μＬの濃度が５００μＭの過酸化水素（Ｈ2Ｏ2）溶液と、２５０μＬの濃度が１０００μＭのＡＢＴＳ（２,２−アジノ−ジ−エチルベンツチアゾリン−６−スルホン酸、2,2’-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid)溶液と、２５０μＬの濃度が８．８Ｕ/ｍＬのペルオキシダーゼ(Peroxidase)とを、ミキサーで均質に混合し、１０分後安定した青緑色のＡＢＴＳ+フリーラジカルが生じると、２５０μＬの前述した実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油の溶液を別々に加える。そののち溶液をミキサーで均質に混合し、１０分間放置すれば実験ブロックが完成する。
【００３５】
一方、対照ブロックは、ブチルヒドロキシアニソール(butylated hydroxyl anisole, ＢＨＡ)を標準品とし、前述した実験ブロック中の実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油の溶液を２５０μＬの脱イオン水に取り替えるものである。
【００３６】
続いて、４１０ｎｍの波長下での実験ブロックおよび対照ブロックの吸光数値を酵素免疫吸着測定器で測定する。
【００３７】
ＡＢＴＳ+ラジカル消去能の強弱は、数式２によって判定される。数値が高ければ高いほど、ＡＢＴＳ+ラジカル消去能が強くなる。
（数式２）
ＡＢＴＳ+ラジカル消去率（％）＝｛１−（実験ブロックの吸光数値／対照ブロックの吸光数値）｝×１００
【００３８】
＜３．キレート結合能測定＞
まず実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油をそれぞれ濃度が１ｍｇ/ｍＬの液体に調製する。
【００３９】
続いて、７５０μＬの濃度が２ｍＭの塩化第二鉄(Iron(II) chloride)溶液と、２５０μＬのメタノールと、５００μＬの前述した実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油のそれぞれの溶液とを３０秒振動撹拌する。続いて１５００μＬの濃度が５ｍＭのフェロジン(Ferrozine)液体を加え、室温下で光線に当たらないように３０分間放置する。続いて、液体が完全反応に達した後、３０００ｒｐｍの回転数で遠心分離を５分間行い、そののち上層の透明液体を取れば実験ブロックが完成する。
【００４０】
一方、対照ブロックは、遠心分離を行わず、前述した実験ブロック中の実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油の溶液を５００μＬのエチレンジアミン四酢酸(ethylenediaminetetraacetic acid, ＥＤＴＡ)に取り替えるものである。
【００４１】
続いて、５６２ｎｍの波長下での実験ブロックおよび対照ブロックの吸光数値を赤外光／可視分光光度計で測定する。
【００４２】
キレート結合能の強弱は、数式３によって判定される。数値が高ければ高いほど、キレート結合能が強くなる。
（数式３）
キレート結合率（％）＝｛１−（実験ブロックの吸光数値／対照ブロックの吸光数値）｝×１００
【００４３】
＜４．還元力測定＞
まず実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油をそれぞれ濃度が１０ｍｇ/ｍＬの液体に調製する。
【００４４】
濃度が０．２Ｍのリン酸二水素ナトリウム(sodium dihydrogenphosphate)溶液と、濃度が０．２Ｍのリン酸水素二ナトリウム(disodium hydrogenphosphate)溶液とを濃度が２ｍＭ、ｐＨが６．６のリン酸塩緩衝溶液(phosphate buffer solution)に調製する。
【００４５】
続いて、５００μＬの前述した実施例１〜３および比較例１〜８のブレンド精油のそれぞれの溶液と、２５０μＬのリン酸塩緩衝溶液と、２５０μＬの濃度が１％の赤血塩とを均質に混合する。続いて５０℃温度下で水浴を２０分間行い、そののち急速冷却を５分間行う。続いて、２５０μＬの濃度が１０％のトリクロル酢酸を加え、溶液を均質に混合する。続いて、上層の透明溶液を１００μＬ採り、そののち５００μＬの脱イオン水と、７５０μＬの濃度が０．１％の塩化第二鉄溶液とを加え、溶液を均質に混合する。続いて、室温下で光線に当たらないように３０分間放置すれば実験ブロックが完成する。
【００４６】
一方、対照ブロックは、ブチルヒドロキシアニソール(ＢＨＡ)を標準品とし、前述した実験ブロックの溶液を５００μＬの濃度が９９．８％のアルコールに取り替えるものである。
【００４７】
続いて、２００μＬの実験ブロックおよび対照ブロックを酵素免疫吸着測定器の９６個の孔に別々に注入する。続いて、７００ｎｍの波長下での実験ブロックおよび対照ブロックの吸光数値を酵素免疫吸着測定器で測定する。
【００４８】
還元力の強弱は、数式４によって判定される。数値が高ければ高いほど、還元力が強くなる。
（数式４）
還元力（％）＝（実験ブロックの吸光数値／対照ブロックの吸光数値）×１００
【００４９】
【表１】
【００５０】
表１の結果により、本発明の実施例１〜３のブレンド精油は、ＤＰＰＨラジカル消去能、ＡＢＴＳ+ラジカル消去能、キレート結合能および還元力が比較例１〜８のブレンド精油よりも優れていることが判明した。
【００５１】
一方、本発明の実施例３のブレンド精油について、薫香方式によって人体実験を行った。その結果、本発明によるブレンド精油は人体の血液中のフリーラジカル消去効果を有することが判明した。実験過程は次の通りである。１５人の成人に対し、薫香を受ける前の血液と、薫香を１０分間受けた血液とを採り、分析する。続いて、０．２ｍＬの血液と、０．１ｍＬの０．９％の生理食塩水とを均質に混合し、体温に近い３７℃まで加熱し、そののち１ｍＬの試薬を加える。試薬は２．５ｍｇのルシゲニン（lucigenin）を５０ｍＬの０．９％の生理食塩水に溶解させて生成したものである。続いて、フリーラジカル測定器(Chemiluminescence Spectrometer)によってフリーラジカルの数を測定する。測定結果は表２に示したとおりである。
【００５２】
【表２】
【００５３】
表２により、薫香方式によって人体実験を行った実施例３のブレンド精油は、血液中のフリーラジカルを確実に消去でき、フリーラジカル消去率の平均が７０％に近いことが判明した。
【００５４】
上述したとおり、本発明の実施例１〜３によるブレンド精油は、全体のＤＰＰＨラジカル消去能、ＡＢＴＳ+ラジカル消去能、キレート結合能および還元力が非常に優れるだけでなく、人体実験の結果によりフリーラジカル消去効果が明らかである。従って、本発明によるブレンド精油は優れたフリーラジカル抑制力および抗酸化力を確実に果たすことができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＤＬ−シトロネロールと、オイゲノールと、シトラールと、オイゲノールメチルエーテルと、チモールとを含有し、フリーラジカル抑制作用を有することを特徴とするブレンド精油。
【請求項２】
０．５〜８ｗｔ％のＤＬ−シトロネロールと、４．５〜２４．６ｗｔ％のオイゲノールと、３．７５〜２０ｗｔ％のシトラールと、０．１５〜１２．５ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテルと、４．５〜２５．２ｗｔ％のチモールとを含有することを特徴とする請求項１に記載のブレンド精油。
【請求項３】
ＤＬ−シトロネロールは、ゼラニウム精油から獲得されることを特徴とする請求項１または２に記載のブレンド精油。
【請求項４】
オイゲノールは、ニッケイ精油から獲得されることを特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載のブレンド精油。
【請求項５】
シトラールは、レモングラス精油から獲得されることを特徴とする請求項１〜４のいずれか一項に記載のブレンド精油。
【請求項６】
オイゲノールメチルエーテルは、月桂樹精油から獲得されることを特徴とする請求項１〜５のいずれか一項に記載のブレンド精油。
【請求項７】
チモールは、オレガノ精油から獲得されることを特徴とする請求項１〜６のいずれか一項に記載のブレンド精油。
【請求項１】
ＤＬ−シトロネロールと、オイゲノールと、シトラールと、オイゲノールメチルエーテルと、チモールとを含有し、フリーラジカル抑制作用を有することを特徴とするブレンド精油。
【請求項２】
０．５〜８ｗｔ％のＤＬ−シトロネロールと、４．５〜２４．６ｗｔ％のオイゲノールと、３．７５〜２０ｗｔ％のシトラールと、０．１５〜１２．５ｗｔ％のオイゲノールメチルエーテルと、４．５〜２５．２ｗｔ％のチモールとを含有することを特徴とする請求項１に記載のブレンド精油。
【請求項３】
ＤＬ−シトロネロールは、ゼラニウム精油から獲得されることを特徴とする請求項１または２に記載のブレンド精油。
【請求項４】
オイゲノールは、ニッケイ精油から獲得されることを特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載のブレンド精油。
【請求項５】
シトラールは、レモングラス精油から獲得されることを特徴とする請求項１〜４のいずれか一項に記載のブレンド精油。
【請求項６】
オイゲノールメチルエーテルは、月桂樹精油から獲得されることを特徴とする請求項１〜５のいずれか一項に記載のブレンド精油。
【請求項７】
チモールは、オレガノ精油から獲得されることを特徴とする請求項１〜６のいずれか一項に記載のブレンド精油。
【公開番号】特開２０１２−１７４１２（Ｐ２０１２−１７４１２Ａ）
【公開日】平成２４年１月２６日（２０１２．１．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−１５５７４０（Ｐ２０１０−１５５７４０）
【出願日】平成２２年７月８日（２０１０．７．８）
【出願人】（５１０１８９３９６）弘光科技大學 (1)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年１月２６日（２０１２．１．２６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年７月８日（２０１０．７．８）
【出願人】（５１０１８９３９６）弘光科技大學 (1)
【Ｆターム（参考）】
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