マクロファージ遊走阻止因子の酵素活性阻害剤
【課題】 安全性の高い新規なマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）の酵素活性阻害剤を提供すること。
【解決手段】 茶カテキン類を有効成分とするマクロファージ遊走阻止因子の酵素活性阻害剤を提供し、さらに該阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発炎症抑制剤並びにマクロファージ遊走阻止因子誘発ガン細胞増殖抑制剤を提供する。
【解決手段】 茶カテキン類を有効成分とするマクロファージ遊走阻止因子の酵素活性阻害剤を提供し、さらに該阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発炎症抑制剤並びにマクロファージ遊走阻止因子誘発ガン細胞増殖抑制剤を提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、茶カテキン類を有効成分とするマクロファージ遊走阻止因子（Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｆａｃｔｏｒ：以下においてＭＩＦと略記することがある）の酵素活性阻害剤、該ＭＩＦ酵素活性阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発炎症抑制剤、並びに該ＭＩＦ酵素活性阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発ガン細胞増殖抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液中の白血球に分類されるマクロファージは、炎症反応を惹き起こし異物の除去に寄与する働きをもつが、通常は血管中を血液と共に流動しており、能動的に炎症部位にとどまることはできない。そこで、マクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）が遊走中のマクロファージを炎症部位に的確にとどめ、我々の身体を異物から保護している。
【０００３】
一方で、ＭＩＦの過剰な生産は過度の炎症反応を惹き起こすため、ＭＩＦは炎症を伴う諸疾患に関与することが知られている。近年ではその関連疾患が拡大をみせ、免疫関連反応、腫瘍増殖、糸球体腎炎、マラリア貧血、敗血症性ショック、腫瘍関連血管新生、硝子体網膜症、乾癬、移植片対宿主病（組織拒絶）、アトピー性皮膚炎、関節リウマチ、炎症性腸疾患、中耳炎、クローン病、急性呼吸窮迫症候群、遅延型過敏症等、様々な生体反応に大きな影響を及ぼしていることが明らかになりつつある（非特許文献１〜９参照）。
このように、ＭＩＦは我々の身体に必須な因子である一方で、その制御が諸疾患の症状緩和に有益であるため、ＭＩＦ酵素活性阻害剤はＭＩＦを介する様々な疾患への予防・治療に役立てられている。
【０００４】
ＭＩＦを制御する試みはこれまでにも種々検討されている。例えば、ＭＩＦのもつｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性を抑制することにより、ＭＩＦを介する様々な諸疾患の予防・治療に役立てようと、ＭＩＦ酵素活性阻害物質を探索する努力が続けられており（非特許文献１０参照）、大豆中の成分であるイソフラボンがＭＩＦの酵素活性を抑制することが報告されている（非特許文献１１参照）。
【０００５】
ところで、茶の主要成分であるカテキン類は、抗酸化作用（特許文献１及び特許文献２参照）、抗菌・静菌作用（特許文献３及び特許文献４参照）、コレステロール上昇抑制作用（特許文献５参照）、血圧上昇抑制作用（特許文献６参照）、血糖上昇抑制作用（特許文献７参照）等、優れた生理活性作用を有することから、食品から医薬産業に至るまで幅広い分野で利用されている。しかしながら、茶カテキン類のＭＩＦ酵素活性阻害作用については、これまでに全く報告されていない。
【０００６】
【非特許文献１】Ｊｕｎ Ｎｉｓｈｉｈｉｒａ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、１９９８，ｖｏｌ．２、ｎｏ．１、ｐ．１７−２８
【非特許文献２】Ｋａｔｈｅｒｉｎｅ Ｌ Ｍｅｙｅｒ−Ｓｉｅｇｌｅｒ，ＢＭＣ Ｃａｎｃｅｒ，２００４，ｖｏｌ．４，ｎｏ．３４，ｐ．１−１２
【非特許文献３】Ｍｅｔｚ ａｎｄ Ｂｕｃａｌａ，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１９９７，ｖｏｌ．６６，ｐ．１９７−２２３
【非特許文献４】Ｓｗｏｐｅ ａｎｄ Ｌｏｌｉｓ，Ｒｅｖｉｅｗｓ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９９，ｖｏｌ．１３９，ｐ．１−３２
【非特許文献５】Ｗａｅｂｅｒ，Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｒｅｖｉｅｗｚ，１９９９，ｖｏｌ．１５，ｎｏ．１，ｐ．４７−５４
【非特許文献６】Ｂｕｃａｌａ，Ａｎｎａｌｓ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９９８，ｖｏｌ．８４０，ｐ．７４−８２
【非特許文献７】Ｂｅｒｎｈａｇｅｎ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ，１９９８，ｖｏｌ．７６，ｎｏ．３−４，ｐ．１５１−１６１
【非特許文献８】Ｄｏｎｎｅｌｌｙ ａｎｄ Ｂｕｃａｌａ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１９９７，ｖｏｌ．３，ｎｏ．１１，ｐ．５０２−５０７
【非特許文献９】Ｂｕｃａｌａ，ＦＡＳＥＢ Ｊｏｕｒｎａｌ，１９９６，ｖｏｌ．１０，ｎｏ．１４，ｐ．１６０７−１６１３
【非特許文献１０】Ｐｅｔｅｒ Ｄ．Ｓｅｎｔｅｒ，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ，２００２，ｖｏｌ．９９，ｎｏ．１，ｐ．１４４−１４９
【非特許文献１１】Ｍａｓａｙａ Ｏｒｉｔａ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００１，ｖｏｌ．４４，ｎｏ．４，ｐ．５４０−５４７
【特許文献１】特開昭５９−２１９３８４号公報
【特許文献２】特開平１−２６８６８３号公報
【特許文献３】特開平２−２７６５６２号公報
【特許文献４】特開平３−２４６２２７号公報
【特許文献５】特開昭６０−１５６６１４号公報
【特許文献６】特開昭６３−２１４１８３号公報
【特許文献７】特開平４−２５３９１８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって、本発明の目的は、安全性の高い新規なマクロファージ遊走阻止因子の酵素活性阻害剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意検討を重ねた結果、茶カテキン類が優れたマクロファージ遊走阻止因子の酵素活性阻害作用を有することを初めて見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、請求項１記載の本発明は、茶カテキン類を有効成分とするマクロファージ遊走阻止因子の酵素活性阻害剤である。
請求項２記載の本発明は、茶カテキン類が、エピガロカテキン、エピカテキンガレート、エピガロカテキンガレート及びガロカテキンガレートの中から選ばれた少なくとも１種である請求項１記載のマクロファージ遊走阻止因子のｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性阻害剤である。
請求項３記載の本発明は、請求項１又は２記載の阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発炎症抑制剤である。
請求項４記載の本発明は、請求項１又は２記載の阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発ガン細胞増殖抑制剤である。
【発明の効果】
【００１０】
本発明のマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）の酵素活性阻害剤は、ＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性阻害作用において優れており、既知の阻害剤と同様に、ＭＩＦを介する種々の疾患、例えば炎症疾患や癌に対する予防・治療効果（炎症抑制、ガン細胞増殖抑制）が期待できる。さらに、有効成分となる茶カテキン類は天然由来の成分であるため安全性においても問題が無く、医薬品としての使用はもとより飲食品、化粧品などに添加して用いるなど多様な利用が可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下に、本発明について詳しく説明する。
本発明のマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）酵素活性阻害剤の有効成分として機能する茶カテキン類とは、カテキン（Ｃ）、ガロカテキン（ＧＣ）、カテキンガレート（Ｃｇ）、ガロカテキンガレート（ＧＣｇ）、エピカテキン（ＥＣ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）、エピカテキンガレート（ＥＣｇ）、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）等のカテキンを意味し、これらのカテキンは（＋）‐体であっても良く、また、（−）‐体であってもよい。
【００１２】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤は、これらの茶カテキン類の中から選ばれた１種を単独で、もしくは２種以上を所望とする混合比で組み合わせて用いることができるが、上記カテキンのうち、ＥＧＣ、ＥＣｇ、ＥＧＣｇ及びＧＣｇの中から選ばれる少なくとも１種を含有するものであることが好ましく、ＥＣｇ、ＥＧＣｇ及びＧＣｇの中から選ばれる少なくとも１種を含有するものであることがより好ましく、ＥＣｇ及びＥＧＣｇから選ばれる少なくとも１種を含有するものであることが特に好ましい。
【００１３】
茶カテキン類の形態としては、液体及び固体（粉末を含む）の別を問わない。このような茶カテキン類は、主にツバキ科に属する茶樹（Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）から得られる葉、茎、木部、樹皮、根、実、種子のいずれか、あるいはこれらの２種類以上の混合物もしくはそれらの粉砕物から水、熱水、有機溶媒、含水有機溶媒あるいはこれらの混合物などにより抽出することにより得られる。特に、茶生葉あるいはその乾燥物から水、熱水、有機溶媒、含水有機溶媒、これらの混合物などを用いて抽出される抽出物自体、或いは必要に応じてさらに精製して得られる精製物として得ることが好ましい。
【００１４】
茶カテキン類の精製物に関しては、特公平１−４４２３２号公報、同２−１２４７４号公報、同２−２２７５５号公報、特開平４−２０５８９号公報、同５−２６０９０７号公報、同８−０９１７８号公報などに記載された方法により製造することができ、例えば茶葉を上記の溶媒で抽出して得られた抽出物を、有機溶媒分画や吸着樹脂などを用いて所望の程度に精製することができる。茶以外の植物から抽出する場合も、茶の場合と同様の方法により実施すればよい。また、本発明に用いる茶カテキン類は市販品を用いてもよく、このような市販品としては、例えば三井農林（株）製「ポリフェノン」、太陽化学（株）「サンフェノン」、（株）伊藤園「テアフラン」などを例示することができる。
【００１５】
上記したように、茶カテキン類にはＭＩＦの酵素活性阻害作用が認められるので、該茶カテキン類を有効成分として含有する本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤は、ＭＩＦを介する種々の疾患に対する予防・治療作用が期待される。
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤によるＭＩＦ酵素活性阻害効果は、直接、あるいは製剤化したものを摂取することにより発揮される。
その場合の摂取量は、摂取形態、年齢、体重などにより異なり、特に制限されるものではないが、経口的に摂取する場合、体重１ｋｇあたり０．１ｍｇ〜１００ｍｇ／回の摂取が好ましく、０．５ｍｇ〜５０ｍｇ／回の摂取がより好ましい。
【００１６】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤を単独で製剤化して摂取する場合における製剤形態は、有効成分として茶カテキン類を含んでなるものであればどのような形態であってもよく、例えば、粉末状などの固体状であってもよいし、液体やスラリー状であってもよい。
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤は、例えばイソフラボン等他のＭＩＦ酵素活性阻害剤と併用して用いても何ら問題は生じない。他のＭＩＦ酵素活性阻害剤と併用した場合には、より優れたＭＩＦ酵素活性阻害効果或いは個々の阻害剤の量を減じても同等の効果を期待することができる。
【００１７】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤は、飲食品に有効量を含ませることにより、ＭＩＦ酵素活性阻害効果を有する機能性飲食品として気軽に用いることができる。
飲食品に対する本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤の配合量は、有効量、すなわち、ＭＩＦ酵素活性阻害効果を発揮する配合量となるように、対象となる飲食品の形態や種類に応じて適宜設定することが好ましい。一般的には、最終製品中で０．０００１〜５重量％であればよいが、０．００１〜１重量％であることが好ましく、さらに０．０１〜０．５重量％がより好ましい。
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤を飲食品へ配合させる方法は、特に制限されるものではなく、飲食品の調製段階において、この分野で通常知られた慣用的な方法を用いて配合することができる。
【００１８】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤が配合されうる飲食品は、ＭＩＦ酵素活性阻害剤の有効成分となる茶カテキン類を配合することができるものであればどのような形態であってもよく、例えば、水溶液や混濁物や乳化物などの液状形態であっても、ゲル状やペースト状の半固形状形態であっても、粉末や顆粒、カプセル、タブレットなどの固形状形態であってもよい。
【００１９】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤が配合されうる飲食品の種類は特に限定されないが、好ましいものは飲料、さらに好ましいものは容器詰めされた飲料であり、具体的には、例えば、炭酸飲料、柑橘類（グレープフルーツ、オレンジ、レモンなど）の果汁、果汁飲料や果汁入り清涼飲料、柑橘類の果肉飲料や果粒入り果実飲料、トマト、ピーマン、セロリ、ウリ、ニンジン、ジャガイモ、アスパラガスなどの野菜を含む野菜系飲料、豆乳・豆乳飲料、コーヒー飲料、緑茶飲料・烏龍茶飲料・紅茶飲料などの茶系飲料、これらの粉末状もしくは顆粒状飲料や濃縮飲料、スポーツ飲料、ドリンク剤などの栄養飲料、アルコール飲料などが挙げられる。さらには、製造、販売時には粉末状などの形態（例えば、粉末清涼飲料等）であって、飲用時に適宜の濃度に水などで溶解して利用されるような飲料も含む。
【００２０】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤を単独で製剤化する際、あるいは飲食品等として配合する際は、必要に応じて、増量剤、酸化防止剤、着色剤、香料、矯味剤、界面活性剤、溶解補助剤、保存剤、糖類、甘味料、酸味料、ビタミン類などの公知の各種添加剤と適宜組み合わせて用いてもよい。
酸化防止剤としては、例えば、ビタミンＣ、ビタミンＥなどが挙げられる。
界面活性剤としては、例えば、ショ糖脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、レシチン、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン系非界面活性剤などが挙げられる。
【００２１】
糖類としては、グルコース、フラクトースなどの単糖類のほか、マルトース、シュクロースなどの二糖類、ポリデキストロース、ペクチン、キサンタンガム、アラビアガム、アルギン酸などの多糖類、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、シクロデキストリンなどのオリゴ糖、キシリトール、エリスリトール、ソルビトールなどの糖アルコールなどを例示することができる。
甘味料としては、天然甘味料（ソーマチン、ステビア抽出物、グリチルリチンなど）、合成甘味料（サッカリン、アスパルテームなど）などを利用できる。
酸味料としては、天然成分から抽出した果汁類のほか、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、リン酸などが挙げられる。
【００２２】
ビタミン類としては、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ナイアシン、パントテン酸、ビオチン、メソイノシトール、葉酸、コリン、ビタミンＵ、ビタミンＰなどの水溶性ビタミン類およびビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫなどの脂溶性ビタミン類が挙げられる。
その他の添加剤としては、グレープフルーツ、リンゴ、オレンジ、レモン、パイナップル、バナナ、ナシなどの各種果汁（濃縮果汁）；グルタミン酸、グリシン、アラニン、アスパラギン酸などのアミノ酸；イノシン酸、グアニル酸などの呈味成分；カルシウム、リン、カリウム、ナトリウム、マグネシウム、イオウ、塩素、鉄、亜鉛、マンガン、銅、ヨウ素などのミネラルないし微量元素などが挙げられる。
【００２３】
また、飲食品と同様に、適当な担体などにＭＩＦ酵素活性阻害剤を有効成分として含ませれば、医薬品や医薬部外品として応用することもできる。
医薬品としては、日本薬局方に収められている医薬品であれば特に限定されるものではなく、その製剤形態としては、例えば、エアゾール剤、液剤、エキス剤、エリキシル剤、カプセル剤、顆粒剤、丸剤、散剤、酒精剤、錠剤、シロップ剤、浸剤・煎剤、トローチ剤、芳香水剤、リモナーゼ剤などが挙げられる。
医薬部外品としては、厚生労働大臣が指定した医薬部外品で口に含むことができるものであれば特に限定されるものではなく、例えば、内服液剤、健康飲料、消毒剤、消毒保護剤、ビタミン含有保健剤などが挙げられる。
【００２４】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤は、ＭＩＦに起因する様々な免疫関連反応、腫瘍増殖、糸球体腎炎、炎症、マラリア貧血、敗血症性ショック、腫瘍関連血管新生、硝子体網膜症、乾癬、移植片対宿主病（組織拒絶）、アトピー性皮膚炎、関節リウマチ、炎症性腸疾患、中耳炎、クローン病、急性呼吸窮迫症候群、遅延型過敏症等の疾病または病理学的状態を治療するために使用できる。中でも本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤は、ＭＩＦに起因する炎症や腫瘍細胞の増殖を顕著に阻害することができる。したがって、本発明はＭＩＦに起因する炎症疾患や癌を予防・治療する方法をも提供するものである。
【実施例】
【００２５】
以下に実施例を挙げ、本発明をさらに詳しく説明する。ただし、本発明はこれに限定されるものではない。
【００２６】
実施例１
酵素活性の測定は、Zhangらの方法に従って行った（Zhang X, Bucala R: Inhibition of macrophage migration inhibitory factor (MIF) tautomerase activity by dopachrome analogs. Bioorg Med Chem Lett. 1999 Nov 15;9(22):3193-8.）。
【００２７】
基質溶液の調製
ｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅの阻害活性を調査するために、ＭＩＦの基質としてＬ-ドーパクロームメチルエステルを用いた。まず、１０ｍＭ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）で１０ｍＭ Ｌ-ドーパメチルエステル溶液（(株)シグマ製）を調製し、ｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅアッセイを行う３０分前にＬ-ドーパメチルエステル溶液１ｍｌを１０ｍＭ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）７ｍｌで希釈した。そして、２０ｍＭ 過ヨウ素酸ナトリウム水溶液（(株)シグマ製）１ｍＬを前記した希釈溶液へ添加して１０分間反応を行い、Ｌ-ドーパメチルエステルからＬ-ドーパクロームメチルエステルを生成させた。次に、反応溶液に１ｍｌの２０ｍＭ メチオニン水溶液を加え、過度の酸化反応を止め、オレンジ色を有する基質溶液を調製した。
【００２８】
ＭＩＦ（酵素）溶液の調製
リコンビナントヒトＭＩＦ或いはリコンビナントラットＭＩＦを２００マイクログラム／ｍｌ（０．２マイクログラム／マイクロリットル）となるように１０ｍＭ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）に溶解した。
【００２９】
カテキン溶液の調製
試験に使用したカテキン類はＳｉｇｍａ社製を使用した。各カテキンを１ｍＭとなるように１０ｍＭ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）に溶解した。
【００３０】
ｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅアッセイ
基質溶液０．１ｍＬに１０ｍＭ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）０．１ｍＬを加え、添加直後（０分）及び１分後の吸光度（波長４７５ｎｍ）を分光光度計で測定し、０分の吸光度と１分後の吸光度の差をブランク値とした。
ＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性は、基質溶液０．１ｍＬに１０ｍＭ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）０．１ｍＬを加えた後ＭＩＦ溶液１マイクロリットルを添加し、０分及び１分後の吸光度（波長４７５ｎｍ）を分光光度計で測定し、０分の吸光度と１分後の吸光度の差からブランク値を引いた値として表した。
カテキン類存在下でのＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性は、基質溶液０．１ｍＬにカテキン溶液０．１ｍＬを加えた後、ＭＩＦ溶液１マイクロリットルを添加し、０分及び１分後の吸光度（波長４７５ｎｍ）を分光光度計で測定し、０分の吸光度と１分後の吸光度の差からブランク値を引いた値として表した。
ＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性残存率は下式に基づいて算出し、８回の平均値及び標準偏差を求めた。ヒトＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性に関する結果を図１に示し、ラットＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性に関する結果を図２に示す。
【００３１】
（数１）
ＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅの活性残存率（％）
＝１００×（カテキン存在下でのＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性／カテキン無添加でのＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性）
【００３２】
図１又は図２から明らかなように、ＥＧＣ、ＥＣｇ、ＥＧＣｇ、ＧＣｇを加えることにより、カテキン無添加であるコントロールと比べて、ＭＩＦの酵素活性が有意に阻害された。中でも、ＥＣｇ、ＥＧＣｇ、ＧＣｇの３種類のカテキンのＭＩＦ酵素活性阻害作用が強く、ＥＣｇ及びＥＧＣｇがさらにＭＩＦの酵素活性を阻害する作用が強かった。
【産業上の利用可能性】
【００３３】
本発明により、茶カテキン類を有効成分とするマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）の酵素活性阻害剤が提供される。これは、医薬品等としての利用の他、飲食品に添加して用いることにより、ＭＩＦを介する種々の疾患、例えば炎症疾患や癌に対する予防・治療効果（炎症抑制、ガン細胞増殖抑制）が期待できる。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】カテキン類によるヒトＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性阻害を示す。
【図２】カテキン類によるラットＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性阻害を示す。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、茶カテキン類を有効成分とするマクロファージ遊走阻止因子（Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｆａｃｔｏｒ：以下においてＭＩＦと略記することがある）の酵素活性阻害剤、該ＭＩＦ酵素活性阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発炎症抑制剤、並びに該ＭＩＦ酵素活性阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発ガン細胞増殖抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液中の白血球に分類されるマクロファージは、炎症反応を惹き起こし異物の除去に寄与する働きをもつが、通常は血管中を血液と共に流動しており、能動的に炎症部位にとどまることはできない。そこで、マクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）が遊走中のマクロファージを炎症部位に的確にとどめ、我々の身体を異物から保護している。
【０００３】
一方で、ＭＩＦの過剰な生産は過度の炎症反応を惹き起こすため、ＭＩＦは炎症を伴う諸疾患に関与することが知られている。近年ではその関連疾患が拡大をみせ、免疫関連反応、腫瘍増殖、糸球体腎炎、マラリア貧血、敗血症性ショック、腫瘍関連血管新生、硝子体網膜症、乾癬、移植片対宿主病（組織拒絶）、アトピー性皮膚炎、関節リウマチ、炎症性腸疾患、中耳炎、クローン病、急性呼吸窮迫症候群、遅延型過敏症等、様々な生体反応に大きな影響を及ぼしていることが明らかになりつつある（非特許文献１〜９参照）。
このように、ＭＩＦは我々の身体に必須な因子である一方で、その制御が諸疾患の症状緩和に有益であるため、ＭＩＦ酵素活性阻害剤はＭＩＦを介する様々な疾患への予防・治療に役立てられている。
【０００４】
ＭＩＦを制御する試みはこれまでにも種々検討されている。例えば、ＭＩＦのもつｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性を抑制することにより、ＭＩＦを介する様々な諸疾患の予防・治療に役立てようと、ＭＩＦ酵素活性阻害物質を探索する努力が続けられており（非特許文献１０参照）、大豆中の成分であるイソフラボンがＭＩＦの酵素活性を抑制することが報告されている（非特許文献１１参照）。
【０００５】
ところで、茶の主要成分であるカテキン類は、抗酸化作用（特許文献１及び特許文献２参照）、抗菌・静菌作用（特許文献３及び特許文献４参照）、コレステロール上昇抑制作用（特許文献５参照）、血圧上昇抑制作用（特許文献６参照）、血糖上昇抑制作用（特許文献７参照）等、優れた生理活性作用を有することから、食品から医薬産業に至るまで幅広い分野で利用されている。しかしながら、茶カテキン類のＭＩＦ酵素活性阻害作用については、これまでに全く報告されていない。
【０００６】
【非特許文献１】Ｊｕｎ Ｎｉｓｈｉｈｉｒａ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、１９９８，ｖｏｌ．２、ｎｏ．１、ｐ．１７−２８
【非特許文献２】Ｋａｔｈｅｒｉｎｅ Ｌ Ｍｅｙｅｒ−Ｓｉｅｇｌｅｒ，ＢＭＣ Ｃａｎｃｅｒ，２００４，ｖｏｌ．４，ｎｏ．３４，ｐ．１−１２
【非特許文献３】Ｍｅｔｚ ａｎｄ Ｂｕｃａｌａ，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１９９７，ｖｏｌ．６６，ｐ．１９７−２２３
【非特許文献４】Ｓｗｏｐｅ ａｎｄ Ｌｏｌｉｓ，Ｒｅｖｉｅｗｓ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９９，ｖｏｌ．１３９，ｐ．１−３２
【非特許文献５】Ｗａｅｂｅｒ，Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｒｅｖｉｅｗｚ，１９９９，ｖｏｌ．１５，ｎｏ．１，ｐ．４７−５４
【非特許文献６】Ｂｕｃａｌａ，Ａｎｎａｌｓ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９９８，ｖｏｌ．８４０，ｐ．７４−８２
【非特許文献７】Ｂｅｒｎｈａｇｅｎ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ，１９９８，ｖｏｌ．７６，ｎｏ．３−４，ｐ．１５１−１６１
【非特許文献８】Ｄｏｎｎｅｌｌｙ ａｎｄ Ｂｕｃａｌａ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１９９７，ｖｏｌ．３，ｎｏ．１１，ｐ．５０２−５０７
【非特許文献９】Ｂｕｃａｌａ，ＦＡＳＥＢ Ｊｏｕｒｎａｌ，１９９６，ｖｏｌ．１０，ｎｏ．１４，ｐ．１６０７−１６１３
【非特許文献１０】Ｐｅｔｅｒ Ｄ．Ｓｅｎｔｅｒ，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ，２００２，ｖｏｌ．９９，ｎｏ．１，ｐ．１４４−１４９
【非特許文献１１】Ｍａｓａｙａ Ｏｒｉｔａ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００１，ｖｏｌ．４４，ｎｏ．４，ｐ．５４０−５４７
【特許文献１】特開昭５９−２１９３８４号公報
【特許文献２】特開平１−２６８６８３号公報
【特許文献３】特開平２−２７６５６２号公報
【特許文献４】特開平３−２４６２２７号公報
【特許文献５】特開昭６０−１５６６１４号公報
【特許文献６】特開昭６３−２１４１８３号公報
【特許文献７】特開平４−２５３９１８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって、本発明の目的は、安全性の高い新規なマクロファージ遊走阻止因子の酵素活性阻害剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意検討を重ねた結果、茶カテキン類が優れたマクロファージ遊走阻止因子の酵素活性阻害作用を有することを初めて見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、請求項１記載の本発明は、茶カテキン類を有効成分とするマクロファージ遊走阻止因子の酵素活性阻害剤である。
請求項２記載の本発明は、茶カテキン類が、エピガロカテキン、エピカテキンガレート、エピガロカテキンガレート及びガロカテキンガレートの中から選ばれた少なくとも１種である請求項１記載のマクロファージ遊走阻止因子のｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性阻害剤である。
請求項３記載の本発明は、請求項１又は２記載の阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発炎症抑制剤である。
請求項４記載の本発明は、請求項１又は２記載の阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発ガン細胞増殖抑制剤である。
【発明の効果】
【００１０】
本発明のマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）の酵素活性阻害剤は、ＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性阻害作用において優れており、既知の阻害剤と同様に、ＭＩＦを介する種々の疾患、例えば炎症疾患や癌に対する予防・治療効果（炎症抑制、ガン細胞増殖抑制）が期待できる。さらに、有効成分となる茶カテキン類は天然由来の成分であるため安全性においても問題が無く、医薬品としての使用はもとより飲食品、化粧品などに添加して用いるなど多様な利用が可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下に、本発明について詳しく説明する。
本発明のマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）酵素活性阻害剤の有効成分として機能する茶カテキン類とは、カテキン（Ｃ）、ガロカテキン（ＧＣ）、カテキンガレート（Ｃｇ）、ガロカテキンガレート（ＧＣｇ）、エピカテキン（ＥＣ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）、エピカテキンガレート（ＥＣｇ）、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）等のカテキンを意味し、これらのカテキンは（＋）‐体であっても良く、また、（−）‐体であってもよい。
【００１２】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤は、これらの茶カテキン類の中から選ばれた１種を単独で、もしくは２種以上を所望とする混合比で組み合わせて用いることができるが、上記カテキンのうち、ＥＧＣ、ＥＣｇ、ＥＧＣｇ及びＧＣｇの中から選ばれる少なくとも１種を含有するものであることが好ましく、ＥＣｇ、ＥＧＣｇ及びＧＣｇの中から選ばれる少なくとも１種を含有するものであることがより好ましく、ＥＣｇ及びＥＧＣｇから選ばれる少なくとも１種を含有するものであることが特に好ましい。
【００１３】
茶カテキン類の形態としては、液体及び固体（粉末を含む）の別を問わない。このような茶カテキン類は、主にツバキ科に属する茶樹（Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）から得られる葉、茎、木部、樹皮、根、実、種子のいずれか、あるいはこれらの２種類以上の混合物もしくはそれらの粉砕物から水、熱水、有機溶媒、含水有機溶媒あるいはこれらの混合物などにより抽出することにより得られる。特に、茶生葉あるいはその乾燥物から水、熱水、有機溶媒、含水有機溶媒、これらの混合物などを用いて抽出される抽出物自体、或いは必要に応じてさらに精製して得られる精製物として得ることが好ましい。
【００１４】
茶カテキン類の精製物に関しては、特公平１−４４２３２号公報、同２−１２４７４号公報、同２−２２７５５号公報、特開平４−２０５８９号公報、同５−２６０９０７号公報、同８−０９１７８号公報などに記載された方法により製造することができ、例えば茶葉を上記の溶媒で抽出して得られた抽出物を、有機溶媒分画や吸着樹脂などを用いて所望の程度に精製することができる。茶以外の植物から抽出する場合も、茶の場合と同様の方法により実施すればよい。また、本発明に用いる茶カテキン類は市販品を用いてもよく、このような市販品としては、例えば三井農林（株）製「ポリフェノン」、太陽化学（株）「サンフェノン」、（株）伊藤園「テアフラン」などを例示することができる。
【００１５】
上記したように、茶カテキン類にはＭＩＦの酵素活性阻害作用が認められるので、該茶カテキン類を有効成分として含有する本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤は、ＭＩＦを介する種々の疾患に対する予防・治療作用が期待される。
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤によるＭＩＦ酵素活性阻害効果は、直接、あるいは製剤化したものを摂取することにより発揮される。
その場合の摂取量は、摂取形態、年齢、体重などにより異なり、特に制限されるものではないが、経口的に摂取する場合、体重１ｋｇあたり０．１ｍｇ〜１００ｍｇ／回の摂取が好ましく、０．５ｍｇ〜５０ｍｇ／回の摂取がより好ましい。
【００１６】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤を単独で製剤化して摂取する場合における製剤形態は、有効成分として茶カテキン類を含んでなるものであればどのような形態であってもよく、例えば、粉末状などの固体状であってもよいし、液体やスラリー状であってもよい。
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤は、例えばイソフラボン等他のＭＩＦ酵素活性阻害剤と併用して用いても何ら問題は生じない。他のＭＩＦ酵素活性阻害剤と併用した場合には、より優れたＭＩＦ酵素活性阻害効果或いは個々の阻害剤の量を減じても同等の効果を期待することができる。
【００１７】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤は、飲食品に有効量を含ませることにより、ＭＩＦ酵素活性阻害効果を有する機能性飲食品として気軽に用いることができる。
飲食品に対する本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤の配合量は、有効量、すなわち、ＭＩＦ酵素活性阻害効果を発揮する配合量となるように、対象となる飲食品の形態や種類に応じて適宜設定することが好ましい。一般的には、最終製品中で０．０００１〜５重量％であればよいが、０．００１〜１重量％であることが好ましく、さらに０．０１〜０．５重量％がより好ましい。
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤を飲食品へ配合させる方法は、特に制限されるものではなく、飲食品の調製段階において、この分野で通常知られた慣用的な方法を用いて配合することができる。
【００１８】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤が配合されうる飲食品は、ＭＩＦ酵素活性阻害剤の有効成分となる茶カテキン類を配合することができるものであればどのような形態であってもよく、例えば、水溶液や混濁物や乳化物などの液状形態であっても、ゲル状やペースト状の半固形状形態であっても、粉末や顆粒、カプセル、タブレットなどの固形状形態であってもよい。
【００１９】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤が配合されうる飲食品の種類は特に限定されないが、好ましいものは飲料、さらに好ましいものは容器詰めされた飲料であり、具体的には、例えば、炭酸飲料、柑橘類（グレープフルーツ、オレンジ、レモンなど）の果汁、果汁飲料や果汁入り清涼飲料、柑橘類の果肉飲料や果粒入り果実飲料、トマト、ピーマン、セロリ、ウリ、ニンジン、ジャガイモ、アスパラガスなどの野菜を含む野菜系飲料、豆乳・豆乳飲料、コーヒー飲料、緑茶飲料・烏龍茶飲料・紅茶飲料などの茶系飲料、これらの粉末状もしくは顆粒状飲料や濃縮飲料、スポーツ飲料、ドリンク剤などの栄養飲料、アルコール飲料などが挙げられる。さらには、製造、販売時には粉末状などの形態（例えば、粉末清涼飲料等）であって、飲用時に適宜の濃度に水などで溶解して利用されるような飲料も含む。
【００２０】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤を単独で製剤化する際、あるいは飲食品等として配合する際は、必要に応じて、増量剤、酸化防止剤、着色剤、香料、矯味剤、界面活性剤、溶解補助剤、保存剤、糖類、甘味料、酸味料、ビタミン類などの公知の各種添加剤と適宜組み合わせて用いてもよい。
酸化防止剤としては、例えば、ビタミンＣ、ビタミンＥなどが挙げられる。
界面活性剤としては、例えば、ショ糖脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、レシチン、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン系非界面活性剤などが挙げられる。
【００２１】
糖類としては、グルコース、フラクトースなどの単糖類のほか、マルトース、シュクロースなどの二糖類、ポリデキストロース、ペクチン、キサンタンガム、アラビアガム、アルギン酸などの多糖類、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、シクロデキストリンなどのオリゴ糖、キシリトール、エリスリトール、ソルビトールなどの糖アルコールなどを例示することができる。
甘味料としては、天然甘味料（ソーマチン、ステビア抽出物、グリチルリチンなど）、合成甘味料（サッカリン、アスパルテームなど）などを利用できる。
酸味料としては、天然成分から抽出した果汁類のほか、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、リン酸などが挙げられる。
【００２２】
ビタミン類としては、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ナイアシン、パントテン酸、ビオチン、メソイノシトール、葉酸、コリン、ビタミンＵ、ビタミンＰなどの水溶性ビタミン類およびビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫなどの脂溶性ビタミン類が挙げられる。
その他の添加剤としては、グレープフルーツ、リンゴ、オレンジ、レモン、パイナップル、バナナ、ナシなどの各種果汁（濃縮果汁）；グルタミン酸、グリシン、アラニン、アスパラギン酸などのアミノ酸；イノシン酸、グアニル酸などの呈味成分；カルシウム、リン、カリウム、ナトリウム、マグネシウム、イオウ、塩素、鉄、亜鉛、マンガン、銅、ヨウ素などのミネラルないし微量元素などが挙げられる。
【００２３】
また、飲食品と同様に、適当な担体などにＭＩＦ酵素活性阻害剤を有効成分として含ませれば、医薬品や医薬部外品として応用することもできる。
医薬品としては、日本薬局方に収められている医薬品であれば特に限定されるものではなく、その製剤形態としては、例えば、エアゾール剤、液剤、エキス剤、エリキシル剤、カプセル剤、顆粒剤、丸剤、散剤、酒精剤、錠剤、シロップ剤、浸剤・煎剤、トローチ剤、芳香水剤、リモナーゼ剤などが挙げられる。
医薬部外品としては、厚生労働大臣が指定した医薬部外品で口に含むことができるものであれば特に限定されるものではなく、例えば、内服液剤、健康飲料、消毒剤、消毒保護剤、ビタミン含有保健剤などが挙げられる。
【００２４】
本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤は、ＭＩＦに起因する様々な免疫関連反応、腫瘍増殖、糸球体腎炎、炎症、マラリア貧血、敗血症性ショック、腫瘍関連血管新生、硝子体網膜症、乾癬、移植片対宿主病（組織拒絶）、アトピー性皮膚炎、関節リウマチ、炎症性腸疾患、中耳炎、クローン病、急性呼吸窮迫症候群、遅延型過敏症等の疾病または病理学的状態を治療するために使用できる。中でも本発明のＭＩＦ酵素活性阻害剤は、ＭＩＦに起因する炎症や腫瘍細胞の増殖を顕著に阻害することができる。したがって、本発明はＭＩＦに起因する炎症疾患や癌を予防・治療する方法をも提供するものである。
【実施例】
【００２５】
以下に実施例を挙げ、本発明をさらに詳しく説明する。ただし、本発明はこれに限定されるものではない。
【００２６】
実施例１
酵素活性の測定は、Zhangらの方法に従って行った（Zhang X, Bucala R: Inhibition of macrophage migration inhibitory factor (MIF) tautomerase activity by dopachrome analogs. Bioorg Med Chem Lett. 1999 Nov 15;9(22):3193-8.）。
【００２７】
基質溶液の調製
ｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅの阻害活性を調査するために、ＭＩＦの基質としてＬ-ドーパクロームメチルエステルを用いた。まず、１０ｍＭ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）で１０ｍＭ Ｌ-ドーパメチルエステル溶液（(株)シグマ製）を調製し、ｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅアッセイを行う３０分前にＬ-ドーパメチルエステル溶液１ｍｌを１０ｍＭ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）７ｍｌで希釈した。そして、２０ｍＭ 過ヨウ素酸ナトリウム水溶液（(株)シグマ製）１ｍＬを前記した希釈溶液へ添加して１０分間反応を行い、Ｌ-ドーパメチルエステルからＬ-ドーパクロームメチルエステルを生成させた。次に、反応溶液に１ｍｌの２０ｍＭ メチオニン水溶液を加え、過度の酸化反応を止め、オレンジ色を有する基質溶液を調製した。
【００２８】
ＭＩＦ（酵素）溶液の調製
リコンビナントヒトＭＩＦ或いはリコンビナントラットＭＩＦを２００マイクログラム／ｍｌ（０．２マイクログラム／マイクロリットル）となるように１０ｍＭ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）に溶解した。
【００２９】
カテキン溶液の調製
試験に使用したカテキン類はＳｉｇｍａ社製を使用した。各カテキンを１ｍＭとなるように１０ｍＭ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）に溶解した。
【００３０】
ｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅアッセイ
基質溶液０．１ｍＬに１０ｍＭ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）０．１ｍＬを加え、添加直後（０分）及び１分後の吸光度（波長４７５ｎｍ）を分光光度計で測定し、０分の吸光度と１分後の吸光度の差をブランク値とした。
ＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性は、基質溶液０．１ｍＬに１０ｍＭ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）０．１ｍＬを加えた後ＭＩＦ溶液１マイクロリットルを添加し、０分及び１分後の吸光度（波長４７５ｎｍ）を分光光度計で測定し、０分の吸光度と１分後の吸光度の差からブランク値を引いた値として表した。
カテキン類存在下でのＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性は、基質溶液０．１ｍＬにカテキン溶液０．１ｍＬを加えた後、ＭＩＦ溶液１マイクロリットルを添加し、０分及び１分後の吸光度（波長４７５ｎｍ）を分光光度計で測定し、０分の吸光度と１分後の吸光度の差からブランク値を引いた値として表した。
ＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性残存率は下式に基づいて算出し、８回の平均値及び標準偏差を求めた。ヒトＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性に関する結果を図１に示し、ラットＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性に関する結果を図２に示す。
【００３１】
（数１）
ＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅの活性残存率（％）
＝１００×（カテキン存在下でのＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性／カテキン無添加でのＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性）
【００３２】
図１又は図２から明らかなように、ＥＧＣ、ＥＣｇ、ＥＧＣｇ、ＧＣｇを加えることにより、カテキン無添加であるコントロールと比べて、ＭＩＦの酵素活性が有意に阻害された。中でも、ＥＣｇ、ＥＧＣｇ、ＧＣｇの３種類のカテキンのＭＩＦ酵素活性阻害作用が強く、ＥＣｇ及びＥＧＣｇがさらにＭＩＦの酵素活性を阻害する作用が強かった。
【産業上の利用可能性】
【００３３】
本発明により、茶カテキン類を有効成分とするマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）の酵素活性阻害剤が提供される。これは、医薬品等としての利用の他、飲食品に添加して用いることにより、ＭＩＦを介する種々の疾患、例えば炎症疾患や癌に対する予防・治療効果（炎症抑制、ガン細胞増殖抑制）が期待できる。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】カテキン類によるヒトＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性阻害を示す。
【図２】カテキン類によるラットＭＩＦのｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性阻害を示す。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
茶カテキン類を有効成分とするマクロファージ遊走阻止因子のｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性阻害剤。
【請求項２】
茶カテキン類が、エピガロカテキン、エピカテキンガレート、エピガロカテキンガレート及びガロカテキンガレートの中から選ばれた少なくとも１種である請求項１記載のマクロファージ遊走阻止因子のｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性阻害剤。
【請求項３】
請求項１又は２記載の阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発炎症抑制剤。
【請求項４】
請求項１又は２記載の阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発ガン細胞増殖抑制剤。
【請求項１】
茶カテキン類を有効成分とするマクロファージ遊走阻止因子のｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性阻害剤。
【請求項２】
茶カテキン類が、エピガロカテキン、エピカテキンガレート、エピガロカテキンガレート及びガロカテキンガレートの中から選ばれた少なくとも１種である請求項１記載のマクロファージ遊走阻止因子のｔａｕｔｏｍｅｒａｓｅ活性阻害剤。
【請求項３】
請求項１又は２記載の阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発炎症抑制剤。
【請求項４】
請求項１又は２記載の阻害剤を含有するマクロファージ遊走阻止因子誘発ガン細胞増殖抑制剤。
【図１】
【図２】
【図２】
【公開番号】特開２００７−２２９４６（Ｐ２００７−２２９４６Ａ）
【公開日】平成１９年２月１日（２００７．２．１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−２０５０８５（Ｐ２００５−２０５０８５）
【出願日】平成１７年７月１４日（２００５．７．１４）
【出願人】（３０３０４４７１２）三井農林株式会社 (72)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年２月１日（２００７．２．１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年７月１４日（２００５．７．１４）
【出願人】（３０３０４４７１２）三井農林株式会社 (72)
【Ｆターム（参考）】
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