分子分離装置及び製造方法
【課題】液体サンプルから分子のサイズによって特定の分子を分離する分離装置の提供。
【解決手段】分子は、分離装置１によって、前記分子と、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きい流体力学直径を有する付加分子の少なくとも１つと、を含む液体サンプルから、分離される。前記分離装置は、基板２と、前記基板に配置される少なくとも１つの循環チャンネル７と、分離される前記分子と関係付けられており、且つ、前記基板の自由表面２ａの上に形成される少なくとも１つのナノチューブ３と、を備える。分離は、カーボンナノチューブのような、所定のものとして、且つ、制御された方法から選択された有効直径を有する、ナノチューブの内部チャンネル４によって達成する。前記内部チャンネルの前記有効直径は、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きく、且つ、大きい流体力学直径の前記付加分子の流体力学直径よりも小さくなるように選択される。
【解決手段】分子は、分離装置１によって、前記分子と、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きい流体力学直径を有する付加分子の少なくとも１つと、を含む液体サンプルから、分離される。前記分離装置は、基板２と、前記基板に配置される少なくとも１つの循環チャンネル７と、分離される前記分子と関係付けられており、且つ、前記基板の自由表面２ａの上に形成される少なくとも１つのナノチューブ３と、を備える。分離は、カーボンナノチューブのような、所定のものとして、且つ、制御された方法から選択された有効直径を有する、ナノチューブの内部チャンネル４によって達成する。前記内部チャンネルの前記有効直径は、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きく、且つ、大きい流体力学直径の前記付加分子の流体力学直径よりも小さくなるように選択される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、少なくとも１つの分子を、分離される前記分子と、分離される前記分子の流体力学直径(hydrodynamic diameter)よりも大きい流体力学直径を有する付加分子（additional molecule）の少なくとも１つと、を含む液体サンプル（liquid sample）から、分離する分離装置に関する。
【０００２】
また、本発明は、分離装置の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
分離技術は、特に、農業、食品製造、治金（metallurgy）及び染料、香料もしくは医学（medicine）や薬学(pharmacy)のための有効成分の抽出の分野において、常に重要である。
【０００４】
今日では、分離技術は、特定物質の製造のみならず、分析目的や、混合物の情報もしくは混合物の特性を知得するためにも、用いられる。
【０００５】
特に、生物学、衛生（health）分野においては、複合混合物（complex mixtures）の分離能力は、非常に重要な課題となりつつある。
【０００６】
例えば、プロテオミクス（proteomics）分野では、重要なたんぱく質（also called protein of interest）を同定するために質量スペクトルメーターを用いることを基礎とする実験的アプローチの１つの専門分野では、１つもしくはそれ以上の分離工程の前工程（prior stage）において、例えば、アクリルアミド ゲル（acrylamide gel）上の、もしくは、１もしくは２次元のゲル上の電気泳動や、液体クロマトグラフィーの、助けを借りること（resort）が必要である。特定の場合において、実際、質量スペクトルメーターは、生の生体サンプル（raw biological sample）を処理することができない。
【０００７】
例えば、癌のような、特定の病気の診察においては、患者の血液中における所定のマーカー（marker）の検出、及び／又は、滴定（titration）が必要である。これらのマーカーは、一般に特定のたんぱく質内にあり、マーカーの検出は、実行される分析プロトコル（analysis protocol）を必要とする。よって、マーカーの検出の最初のステップは、しばしば、いくつかの分離ステップで構成される。
【０００８】
同様に、所定の治療（therapy）は、血液中に蓄積した所定の毒性化合物の除去、すなわち、分離に基づくものである。これは、特に、腎臓障害に冒される患者のための血液透析の場合である。
【０００９】
しかしながら、生物学的分析手段（biological analysis means）の強い要求の１つは、小さなサイズのサンプルを処理するための能力を含むものである。臨床分野（diagnostic field）において、このことは、実際にサンプルをできるだけ侵襲の程度が低い方法（least invasive possible manner）で取り扱うことを可能にする（例えば、血液サンプル、又は、生検（biopsy））。増加している癌の早期発見、もしくは、治療の場合においては、小さいサイズの腫瘍を分析することがますます求められている。ライフ・サイエンス分野においては、非常に少ない量であるような、もしくは、個々の細胞又は特に細胞小器官（organelles）に存在するような、たんぱく質の性質を研究する必要がある。
【００１０】
多くの分離技術は、生体サンプル(biological sample)に適したものである。これらの技術は、異なる物理化学の法則に基づくものであり、処理される分子は、それら物理化学の法則の１つ１つに対する異なる性質によって区別される。例えば、下記のような性質を利用することができる。
【００１１】
−分子サイズは、膜の孔（pores）を通過する分子の移動能力だけではなく、分子が動く際の分子上の溶媒によって生ずる摩擦力や溶媒中の分子の拡散定数（diffusion constant）（これを決定する運動はブラウン運動（Brownian movement）と呼ばれる）をも、決定する。
【００１２】
−分子の電荷。生体分子（biological molecules）は、一般的な弱酸（核酸、たんぱく質はアミノ酸で形成される）であり、溶液のｐＨに従って異なる程度にイオン化している。従って、対象になる分子の電荷は、通常ｐＨに従って様々な状態となる。
【００１３】
−化学ポテンシャル(chemical potential)、すなわち、他の物質に対する、対象になる分子の親和力のことである。これらの親和力は、様々な分子間力によって引き起こされる。ファンデルワールス（Van der Waals）力、静電気力、親水性相互作用／非親水性相互作用、立体相互作用（steric interaction）、エントロピー相互作用（entropic interaction）。特定の生物学的相互作用（Biological interactions）は、これらの全ての力が組み合わさったものとして考えることができる。
【００１４】
−分子の構造、構造ダイナミクス（conformation dynamics）。生体分子は、通常、おおよそ固定された構造を有するポリマー（polymers）、又は、オリゴマー（oligomers）である。所定の複合培地（complex media）（例えば、ゲル）においては、そのサイズによって、空間的に再構成（reconfigure）する所定の分子の能力は、これらの培地の中を大抵簡単に移動することを可能にする。
【００１５】
最も一般的な分離技術は、異なる形式の電気泳動（electrophoresis）（１次元又は２次元のゲルであるキャピラリー（capillary））及び異なる形式の液体クロマトグラフィー、ろ過、透析、遠心分離（centrifugation）である。
【００１６】
これらの技術のあるものは、非常に小さいサイズのサンプルの処理、又は、数１０ナノメートル（分子サイズ）よりも小さい物質の分離には、適してはいない。例えば、これは遠心分離の場合である。
【００１７】
従って、数年にもおよぶ多くの研究は、非常に小さいサイズ、もしくは、非常に少ない量のサンプルを処理するため、マイクロテクノロジー及びナノテクノロジー分野に由来する技術を用いる分離装置の製造、ということになる。非常に有益なこれらの装置は、特に、対象となる分子のサイズに対応した特徴的なディメンション(dimension)を有する構造を製造することと、十分によくコントロールされた方法によって製造されることとを、可能にする中で見出される。
【００１８】
例えば、Jan C.T. Eijkel らの“The promise of nanotechnology for separation devices - from a top-down approach to nature-inspired separation devices”(Electrophoresis 2006,027,677-685)には、従来の分離方法を最適化し、且つ、新しい方法を提供するために、ナノテクノロジーの可能な応用が明らかにされている。Jan C.T. Eijkel らは、例えば、ＨＰＬＣ用のマイクロ構造及びナノ構造（nano-structured）のカラム（columns）、マイクロ構造及びナノ構造のふるい構造（sieving structures）などを、記載している。
【００１９】
Jianping Fu らの“A patterned anisotropic nanofluidic sieving structure for continuous-flow separation of DNA and proteins”(Nature Nanotechnology, Vol 2,February 2007)においては、生体分子（biomolecule）の分離のスピード及び分解能を改善するための、簡便なマイクロエレクトロニクス技術による２次元のふるい構造の製造が紹介されている。マイクロメートル以下の精度を得るためにマスクワーク(maskwork)を制御することが可能な、リソグラフィー及び反応性イオンエッチング（ＲＩＥ）技術による、シリコン基板のエッチングにより、ふるい構造を得ることができる。平坦なふるい構造は、幅１μｍ、深さ５５ｎｍの横チャンネル（lateral channel）によって他のメインチャンネル（main channel）と接続される、幅１μｍ、深さ３００ｎｍの平行なメインチャンネルを備える。メインチャンネルは、幅１μｍ、深さ５５ｎｍの横チャンネルによって他のメインチャンネルと接続される。ＤＮＡ分子やたんぱく質のような分子の動きは、メインチャンネルの方向の縦方向電界（longitudinal electric field）と、横チャンネルの方向の横方向電界（lateral electric field）と、の重なりによって、生じており、横チャンネルは、メインチャンネルよりも深くはない。このような構造における分離効果は、異なる分子が、横チャンネルを介して１つのメインチャンネルから他のチャンネルへ移動する確率が異なることから、生ずる。
【００２０】
Christopher C. Striemer らの“Charge- and size-based separation of macromolecules using ultrathin silicon membranes” (Nature, Vol 445, 15 February 2007) において、マイクロエレクトロニクス分野の簡便な方法を用いて作成された、非常に薄いナノポーラス膜が示されている。この膜の孔の平均サイズは、製造する際の温度パラメータを変化させることによって調節することができる。
【００２１】
ナノポーラス膜、又は、ふるい構造の場合には、孔の中の、もしくは、チャンネルの中の生体分子の移動は、孔、もしくは、チャンネルのサイズによってのみならず、孔、もしくは、チャンネルの輪郭を描く壁に生じる静電気ポテンシャル(electrostatic potential)によっても、条件づけられる。しかしながら、両方の場合において、ポテンシャルは静的なものであり、通過する確率をダイナミックに制御することを可能にするものではない。Rohit Karnikらの、“Field-effect control of protein transport in a nanofluidic transistor circuit”(Applied Physics Letters 88,123114(2006))には、トランジスタ(transistor)のようなものの製造と、キャピラリー（キャリアーに対してトランジスタ・チャンネルとして振舞う）の表面に、様々なポテンシャルが生じることが記載されている。著者は、これによって、チャンネル内のたんぱく質の通路をダイナミックに制御することが可能であることを明らかにしている。この原理は、キャピラリーのサイズが、例えば１０ナノメートル程度にも満たない材料の表面に生じるデバイ長（Debye length）程度である場合には、応用できる。
【００２２】
生体分子を分離するための異なる研究によって従来から提案されている分離装置は、製造するにはコストがかかるため、工業的に製造することが難しいという大きな欠点を有する。実際には、これらの分離装置は、対象分子のサイズに対応するディメンションの孔、又は、チャンネルを製造するために、非常に高価なリソグラフィー工程を使用することを必要とする。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２３】
本発明の目的は、シンプルで、簡単に使用でき、特に、生体分子のような、数１００ナノメートル以下の流体力学直径を有する少なくとも１つの分子を、分離される前記分子と、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きい流体力学直径を有する付加分子の少なくとも１つと、を含む液体サンプルから、効果的に分離することを可能にする、分離装置を提供することである。
【００２４】
本発明によれば、この目的は、
−基板と、
−前記基板に配置される少なくとも１つの循環チャンネル（circulation channel）と、
−少なくとも１つのナノチューブであって、
前記ナノチューブは、分離される前記分子と関係付けられて（会合して、associate）おり、且つ、前記基板の自由表面（free surface）の上に形成されており、
前記ナノチューブは、内部チャンネル(internal channel)を備え、且つ、前記循環チャンネルに対して開いており、且つ、プリセット有効直径（preset effective diameter）を有しており、
前記プリセット有効直径は、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きく、且つ、前記付加分子の流体力学直径よりも小さいものである、
少なくとも１つのナノチューブと、
を備える装置によって、達成される。
【００２５】
本発明のさらなる目的は、簡単に使用でき且つ安価な製造方法であって、少なくとも１つの分子を、分離される前記分子と分離される前記分子の流体力学直径よりも大きな流体力学直径を有する付加分子の少なくとも１つとを含む液体サンプルから分離する、分離装置の、製造方法を提供することである。
【００２６】
本発明によれば、この目的は、以下の連続するステップである、
−少なくとも１つのナノチューブの制御形成（controlled formation）であって、
前記ナノチューブは、分離される分子と関係付けられており、前記制御形成は、基板の自由表面の上での形成であり、前記基板は、化学薬品（chemical agent）の作用によって分解可能な材料から形成されており、
前記ナノチューブは、所定の有効直径（effective diameter）を有する内部チャンネルを備え、
前記有効直径は、分離しようとする前記分子の流体力学直径よりも大きく、且つ、前記付加分子の流体力学直径よりも小さい、
少なくとも１つのナノチューブの制御形成と、
−前記基板の前記自由表面の上と、前記ナノチューブの前記自由表面の上と、への、化学薬品に対して不浸透性である薄層（Thin layer）の形成と、
−前記ナノチューブの前記内部チャンネルへの前記化学薬品の導入、及び、前記基板の所定領域の選択的分解、による、循環チャンネルの形成と、
を備える方法によって、達成される。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図２】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図３】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図４】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図５】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図６】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図７】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図８】図７の分離装置の斜視図である。
【図９】図７の、本発明の他の実施形態による分離装置を示す概略断面図である。
【図１０】本発明の第２の実施形態による分離装置を示す概略断面図である。
【図１１】本発明の第３の実施形態による分離装置を示す概略断面図である。
【図１２】本発明の第４の実施形態による分離装置を示す概略断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
他の利点及び特徴は、本発明の特有な実施形態についての下記の説明により、さらに明らかにされる。本発明の特有な実施形態は、単なる例示であって、本発明を限定するものではない。本発明の特有な実施形態は、添付の図面により示される。
【００２９】
少なくとも１つの分子は、特に生体分子は、前記分子と、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きい流体力学直径を有する付加分子の少なくとも１つと、を含む液体サンプルから、分離装置によって、分離もしくは抽出される。
【００３０】
前記分離装置は、
−基板と、
−前記基板に配置される少なくとも１つの循環チャンネルと、
−分離される前記分子と関係付けられて（会合して、associate）おり、且つ、前記基板の自由表面の上に形成される、少なくとも１つのナノチューブと、
を備える。
【００３１】
流体力学直径（Ｄｈで示される）は、λＤで示されるデバイ長が足された分子の実際のサイズ（又は、直径）に対応する。デバイ長は、分子が帯電する（charge）際の、分子の周囲の電気２重層（electric double layer）の厚さに対応する。デバイ長は、特に、分子が帯電し、且つ、塩水（salt water）の緩衝溶液に含まれている際の、分子の電荷と局所的に均衡した対イオン雲（counter-ion cloud）の厚さに対応する。それは、１つの分子もしくは複数分子を備える溶液の状態、特に、電解質のタイプ及び濃度と温度とに依存する。
【００３２】
液体サンプルから分離もしくは抽出されることとなる１つの分子、もしくは、複数の分子は、通常、約数１０ナノメートル、さらに詳細には、１ｎｍから１μｍの間の流体力学直径（Ｄｈで示す）を有する。例えば、液体サンプルから分離、もしくは、抽出される１つの分子又は複数の分子は、６．８ｎｍの流体力学直径ＤｈＢＳＡを有するウシ血清アルブミン（bovine serum albumin）分子（ＢＳＡと示される）、及び／又は、１４ｎｍの流体力学直径ＤｈＩｇＧを有する免疫グロブリン（immunoglobulin）分子（ＩｇＧと示される）であることができる。
【００３３】
分離は、さらに詳細には、基板の自由表面の上に形成される、カーボンナノチューブのような、ナノチューブの内部チャンネルによって形成されたチャンネルによって行われる。さらに、ナノチューブの内部チャンネルは、循環チャンネルに対して開いている。
【００３４】
ナノチューブの内部チャンネルは、所望のものとして、且つ、制御された方法によって、選択された有効直径ｄｅを有する。内部チャンネルの有効直径ｄｅは、以下の式によって定義される。
−ｄｅ＝ｄｒ−２λＤ
ｄｒは、例えば、ナノチューブの内部壁によって輪郭が形成される断面の直径である、内部チャンネルの実直径（actual diameter）に対応する。λＤは、ナノチューブと分子とが同じ符号（sign）の電荷によって静電気帯電する際の、デバイ長に対応する。
−ｄｅ＝ｄｒ
他の場合であり、特に、ナノチューブと分子とが、反対の符号の電荷によって静電気帯電する場合、もしくは、帯電しない場合である。
【００３５】
チャンネルの有効直径ｄｅは、実際には、チャンネルと関係付けられる分子のみが通過可能であるように、選択され、さらに詳細には、分離される分子の流体力学直径Ｄｈに対応するように選択される。従って、それは、分離される分子の流体力学直径よりも大きく、且つ、付加分子のそれよりも小さいものとなる。有利には、有効直径は１ｎｍから１００ｎｍの間となる。
【００３６】
例えば、１２ｎｍの有効直径を有するナノチューブの内部チャンネルは、ＩｇＧ分子（ＤｈＩｇＧが１４ｎｍ）も含む溶液からＢＳＡ分子（ＤｈＢＳＡが６．８ｎｍ）を抽出することができる。
【００３７】
さらに、内部チャンネルの有効直径ｄｅと、分子の流体力学直径Ｄｈと、２つの直径ｄｅとＤｈとの間の関係とは、分子の静電気電荷と内部チャンネルの静電気電荷とに依存する。
【００３８】
例えば、内部チャンネルの有効直径が、デバイ長を考慮して、前記分子の流体力学直径よりも大きい場合には、正電荷に帯電した内部チャンネルは、正電荷に帯電した分子をブロックすることができる。一方、内部チャンネルと前記分子とが反対の符号の電荷によって帯電している場合には、単に、分子の流体力学直径は、ナノチューブの内部チャンネルの実直径ｄｒよりも小さくならなければならない。
【００３９】
さらに詳細には、内部チャンネルの表面を、制御された方法によって静電気帯電されるような機能的なものにする。それにより、分子の通過確率を増加させ、もしくは、減少させることを可能にする。
【００４０】
さらに、分子の静電電荷は、溶液のｐＨに依存する。分子に対して求められている電荷に従って溶液のｐＨを調節することは可能であり、それによって、分子の通過能力を増加させ、もしくは、減少させることを可能にする。例えば、ＢＳＡ分子は、７と等しいｐＨのもとでは、１３ｅ−に帯電し、従って、１０ｎｍと等しい実直径を有する負電荷に帯電する内部チャンネルを通過することができない。
【００４１】
循環チャンネルの使用に応じて、循環チャンネルは、液体サンプルが循環もしくは抽出される分子を除去することができるように、注入穴（inlet hole）、及び／又は、排出穴（outlet hole）を備えることができる。
【００４２】
これにより、分離は、液体サンプルを循環チャンネルに注入することによって、効果的なものとされる。この場合、分離もしくは抽出される分子のみが、ナノチューブで形成され、且つ、ナノチューブの自由端（free end）において再生された内部チャンネルを、通過することができる。さらに、循環チャンネルは、ナノチューブの内部チャンネルの実直径よりも大きい、若しくは、同等の幅、及び／又は、高さ、（もしくは、循環チャンネルの断面の場合の直径）を有する。有利には、循環チャンネルは、数１００マイクロメートルよりも小さい、もしくは、同等の、さらに詳細には、５ｎｍから１００μｍの間の幅、及び／又は、高さを有する。しかしながら、循環チャンネルの幅の最大値は、厳密なものではない。例えば、循環チャンネルの幅は、流量が増加するように、特に、大量のサンプルのために、もしくは、分離が継続的に行われるように、数センチメートルのものとすることができる。他の実施形態においては、ナノチューブと関係付けられる分子がこのナノチューブの内部チャンネルに入ることができるように、液体サンプルを、基板の自由表面に、その高さが対応するナノチューブの高さよりも高くなるように、堆積することができる。そして、抽出された分子は、循環チャンネルによって、取り除かれる。
【００４３】
チャンネルを有する分離装置は、有利には以下のチャンネルを、つまり、ナノメートルサイズのチャンネルであり、且つ、カーボンナノチューブのようなナノチューブの内部チャンネルによって形成されたチャンネルを、有する分離装置は、簡単に使用が出来るという利点を有し、その上、信頼性があり且つ効果的なものである。実際には、分離装置の製造工程において、さらに詳細には、ナノチューブの製造において、この内部チャンネルのディメンションは、完全に修得（mastered）し、制御される。１つのナノチューブを備えるかわりに、装置は複数のナノチューブを備えることができ、これによって、シンプルに製造される装置であることを確保しつつ、複合物の分離の実施を可能にする。装置は、異なる分子を分離するために、同一の実直径の内部チャンネル、及び／又は、異なる実直径の内部チャンネル、を有するナノチューブを備える。
【００４４】
このような装置は、有利には、シンプルで、且つ、簡単に利用でき、少なくとも１つのカーボンナノチューブの制御形成と、形成されたカーボンナノチューブの内部チャンネルを使用して前記基板中における循環チャンネルの形成と、を行う、製造方法によって、得ることができる。
【００４５】
例示として、図１から図７に、分離装置１の実施形態にかかる製造方法の異なるステップは示される。明確にするために、分離装置は、図１から図７に示され、以下のような、ナノチューブ、さらに正確には、カーボンナノチューブを備えるものとして説明される。当然、シングルナノチューブの形成のために説明される異なるステップは、同一のもしくは異なる直径の複数のナノチューブの形成に簡単に流用することができる。
【００４６】
分離装置１は、図１に示されるように、基板２から作られる。基板２は、この実施形態においては、化学薬品の作用によって分解可能な材料によって形成される。例えば、基板は酸化シリコンで形成され、化学薬品はフッ酸（ＨＦ）となる。加えて、循環チャンネルの高さは、基板２の厚さＥに依存し、有利には、それは５ｎｍから１ｍｍの間である。
【００４７】
図１から図４で示される、カーボンナノチューブ３は、制御された方法によって、基板２の自由表面２ａの上に、製造される。
【００４８】
カーボンナノチューブ３の制御形成は、特に、カーボンナノチューブ３の直径Ｄを制御すること、さらに詳細には、ナノチューブ３の中に配置された内部チャンネル４の実直径ｄｒ（先に示したｄｒである）を制御することで、構成される。カーボンナノチューブ３は、例えば、あらかじめ基板２の上に形成された触媒粒子（catalyst particle）５からの触媒手段によって、制御されて、得ることができる。実際には、ナノチューブが成長するために用いられる触媒粒子５の直径Ｄは、内部チャンネル４の直径ｄｒとつりあうナノチューブ３の直径Ｄと、実質的に等しくなる。カーボンナノチューブ３の直径Ｄに対して求められるサイズに対応する所望のサイズに制御された触媒５の粒子もしくはドロップ（drop）の形成によって、カーボンナノチューブ３の内部チャンネル４の直径ｄｒの制御は、可能である。
【００４９】
所望のサイズを有する触媒粒子５を得るためには主に２つの方法がある。
【００５０】
Shintaro Satoらの“Novel approach to fabricating carbon nanotube via interconnects using size-controlled catalyst nanoparticles”（International Interconnect Technology Conference,2006,pages230-232）に記載されているように、1つの方法は、触媒ターゲットのレーザーアブレーションによって触媒粒子を形成することと、形成された粒子の中から所望のサイズに対応した粒子を選択することと、選択された粒子を堆積することと、から構成される。
【００５１】
図１から図４に示されるように、他の方法は、基板２の自由表面２ａの所定の領域に触媒６の薄膜（thin film）を堆積することと（図２）、高温アニールをすることと、から構成される。
【００５２】
触媒６の薄膜は、例えば、ニッケル、鉄、コバルト及びこれらの化学元素の合金から選択される触媒によって、もしくは、ニッケル、鉄、コバルト及びこれらの化学元素の合金から選択される触媒によってそれぞれ形成された複数の独自の層によって、形成される。これは周知の手段によって堆積される。例えば、物理気相成長法によって、触媒を含むターゲットを用いるプラズマスパッタリング法によって、触媒を含むターゲットを用いる蒸着法によって、もしくは、特に電子（衝撃）（electronic（bombardment））の加熱によって、堆積される。図３に示されるように、高温アニールは、薄膜をドロップ、又は、粒子５に変形することができる。薄膜のアニールは、最初に、薄膜を基板の上に堆積し、抵抗、ランプ、又は、電気伝導フィラメントのような適切な加熱手段によって行われる。アニール温度は、有利には、４００℃から１０００℃、さらに有利には４００℃から５５０℃である。
【００５３】
薄膜の堆積とアニールとによって得られた触媒粒子５の直径Ｄは、事前に堆積された薄膜６のディメンションを前もって決定することによって、制御される。このことは、K B J Teo らの”Plasma enhanced chemical vapour deposition carbon nanotubes/nanofibres-how uniform do they grow?”（Institute of Physics Publishing, Nanotechnology 14(2003)204-211）に示されている。実際、直径Ｄは、前もって堆積された薄膜６の高さだけでなく、その幅にも依存する。さらに、基板２の中に触媒が拡散しない場合には、ドロップ５の体積は、薄膜６の事前の体積に対応するものとなる。
【００５４】
例えば、水銀線（mercury line）I、又は、深紫外線（deep UV）照射を用いる安価なリソグラフィーによって、基板２の表面２ａの上に、例えば、８０ｎｍ以上の幅をもつ触媒の薄膜６の形成は、可能であり、さらに、触媒粒子５のアニールによって、成形（shaping）を行うことも可能である。従って、この粒子５は、事前に堆積された触媒の薄膜６のサイズに比例する直径Ｄを有する。例えば、幅１００ｎｍ、高さ３ｎｍの薄膜は、約３０ｎｍの直径Ｄを有する粒子を得ることが可能である。さらに、触媒の薄膜６のディメンションは、リソグラフィー、エッチング、もしくは、ストリッピングによっても調節することができる。触媒の薄膜の堆積の前に、薄膜６によって覆われることのないように設計された基板２の自由表面２ａの部分の上にアルミニウムの層を堆積することによっても、触媒の薄膜６のディメンションを所望のものにすることができる。１つのカーボンナノチューブ３を基板２の自由表面２ａの上に形成する場合、有利には、触媒の薄膜６を、１５０ｎｍ未満の直径を有する円筒形状とする。
【００５５】
図４に示されるように、触媒粒子５の形成の後には、内部チャンネル４に配置されたカーボンナノチューブ３の成長工程が続く。成長は、有利には、化学気相成長法（ＣＶＤ）によって、もしくは、特に、高周波（radio frequency）の、もしくは、マイクロ波(microwave)のプラズマの、プラズマ化学気相成長法（ＰＥＣＶＤ）によって、得ることができる。成長工程が完了することにより、ナノチューブの自由端と内部チャンネル４の開口部（opening）４ａとを開放するための除去の前に、基板２の自由表面２ａの上に事前に配置された触媒は、通常、カーボンナノチューブ（先端成長(tip growth)）の自由端に位置することになる。例えば、触媒は、ＨＮＯ３を用いた化学処理工程によって、溶解することができる。
【００５６】
最初に、カーボンナノチューブ３は、基板２の自由表面２ａの上に形成され、循環チャンネル７は、図５から図７に示されるように、基板２の所定の領域を選択的に分解することができる化学薬品（例えば、フッ酸である）によって、形成される。
【００５７】
化学薬品から、基板２の自由表面２ａとカーボンナノチューブ３とを保護するために、化学薬品に対して不浸透性である薄層８は、基板２の自由表面２ａの全体の上と、カーボンナノチューブ３の壁の上と、に事前に堆積される。さらに、薄層８は、カーボンナノチューブ３の内部チャンネル４の開口部４ａを、ブロックしてはならない。例えば、開口部４ａがふさがれてしまった場合、もしくは、ナノチューブ３を短くする場合には、内部チャンネル４の開口部４ａを開放するために、循環チャンネル７の形成前に、化学機械平坦化（chemical mechanical polishing）工程を行う。
【００５８】
化学薬品が基板２と集中的に接触するようにするために、さらに、ナノチューブの下に配置され、且つ、循環チャンネル７を形成するように設計された、基板２の所定の領域を選択的に分解するために、図６中の矢印Ｆ１に示されるように、化学薬品は、開口部４ａを介して、ナノチューブ３の内部チャンネル４に導入される（図７）。分解可能な材料の基板の領域を選択的に分解するために、カーボンナノチューブの内部チャンネルの中に化学薬品を導入することは、金属接続構造（metal interconnection structure）と一体化するように設計された、ターゲット層の中の空気隙間（air gap）を形成するための、２００７年５月１５日に出願された仏国特許出願０７０３４８７号に既に記載されている。
【００５９】
化学薬品に対して不浸透性である薄層８は、有利には、基板２の自由表面２ａの上と、ナノチューブ３の自由表面の上とに、保持される。
【００６０】
図１から図７で示される製造工程は、簡単に使用することができ、且つ、安価であるという利点を示し、これによって、工業化を行うことが可能である。例えば、ナノメートルサイズの幅で、循環チャンネルの上へ機械的（automatically）に開く、ナノメートルサイズの少なくとも１つのチャンネル（ナノチューブの内部チャンネル）は、リソグラフィーやエッチング等の様々なデリケートで、且つ、細心の注意を払う工程を必要とすることなしに、この方法によって、簡単に得ることができる。先行技術においては、約１０ナノメートルのパターンに対する正確なディメンションの制御を行うには、コストがかかるリソグラフィー法で調整していた。しかしながら、本発明によれば、１つの内部チャンネルもしくは複数の内部チャンネルのサイズは、工業的方法において既に用いられているような、チューニング（tuning）を必要としないリソグラフィー工程を用いて可能であるような、特定の触媒粒子のサイズによって、制御され、所望のものとして形成される。さらに、この方法は、相対的に低い温度、特に、ナノポーラス膜を得るための従来技術による方法と比較して、相対的に低い温度において行われる。
【００６１】
最終的には、このような方法は、複数のナノチューブを備える分離装置を、簡便で、再現可能で、且つ、制御可能な方法において形成することを可能にする。従って、基板２の表面２ａに複数のナノチューブを形成した際には、化学薬品は、ナノチューブの異なる内部チャンネルの中に導入され、基板２の領域を選択的に分解し、有利には、循環チャンネルを形成するために、２つの内部チャンネル同士を接続する空気隙間を形成する。循環チャンネルの注入孔と排出孔とは、応用として、基板の側壁近傍のナノチューブに導入された化学薬品によって、得ることができる。従って、化学薬品は、孔を形成するために、前記側壁の領域を選択的に分解する。孔は、従来の場合には、リソグラフィー、エッチング、もしくは、スパッタリングによって、機械的に形成されていた。
【００６２】
例えば、分離装置は、１つの同一の分子を分離するために複数のナノチューブを備えることができる。従って、これらのナノチューブは、所定の分子と関係付けられるナノチューブのシリーズ（series）を形成する。図８においては、例えば、分離装置１は、自由表面２ａのような、化学薬品に対して不浸透性である材料で覆われている基板２の自由表面２ａの上に形成された、３つの同一のカーボンナノチューブ３ａ、３ｂ、３ｃのシリーズを備える。ナノチューブ３ａ、３ｂ、３ｃは、それぞれ、内部チャンネル４ａ、４ｂ、４ｃを備え、内部チャンネル４ａ、４ｂ、４ｃは、循環チャンネル７に向かって開いており、同一の直径ｄｒを有する。ナノチューブ３ａ、３ｂ及び３ｃは、特に、それぞれの対称軸と薄層８の自由表面の平面とが交差する点が、循環チャンネル７の長さ方向の軸Ａと平行な軸に沿って配置されるようになる。このようなカーボンナノチューブの配置は、同じ循環チャンネル７に開いた同じシリーズのナノチューブとして、平行なアセンブリー（assembly）の特徴的な実例を形成する。
【００６３】
有利には、カーボンナノチューブの場合には、カーボンナノチューブは電気伝導体であるため、分子弁（molecular valves）を形成するために、カーボンナノチューブに電位（アドレス信号）を印加することができる。図９には、例えば、金、窒化チタン、パラジウム、白金、鉄、又は、アルミニウムのような、電気伝導材料によって部分的に覆われているカーボンナノチューブ３を有する分離装置が、示されている。それによって、カーボンナノチューブ３は、電気伝導材料９によって少なくとも部分的に覆われている。さらに、図９においては、カーボンナノチューブ３の自由表面は、化学薬品に対して不浸透性である薄層８によって事前に覆われ、前記薄層は、循環チャンネル７が形成される際に用いられる。したがって、電気伝導材料９は、この実施形態においては、化学薬品に対して不浸透である材料の薄層８の上に、配置される。電気伝導材料９は、化学薬品に対して不浸透性である材料の薄層８によって事前に覆われたカーボンナノチューブ３の全周囲、又は、部分的にのみ、堆積することができる。
【００６４】
電気伝導材料９によって、カーボンナノチューブ３の部分を少なくとも覆うことは、通過する分子もしくは通過しない分子に対して静電気的な作用をすることを可能にし、これによって、分子バルブを得ることができる。従って、バイオ・トランジスタ（biological transistor）手段における分子の通路を制御するために、このような電気伝導材料９は、電気的接続を少なくとも１つの内部チャンネル４の周りに形成することを可能にする。
【００６５】
さらに、分離装置１は、異なるディメンションの内部チャンネルを有し、且つ、複数回の分離を順次行うことができる複数のナノチューブをも備えることができる。例えば、大きい、もしくは、小さいサイズを有するたんぱく質の混合物を、順次抽出することができる。分離装置の製造方法は、１つもしくはそれ以上のリソグラフィー工程を必要とし、しかしながら、これらのリソグラフィー工程は、アニール処理の際にドロップ状のものとして形成された触媒から作成された薄膜からナノチューブを形成するものとしては、相対的に低い分解能の工程である。
【００６６】
分離装置は、特徴的なナノチューブのシリーズも備える。特徴的なシリーズの意味するところは、各シリーズは、同じ直径ｄｒの内部チャンネルを有する複数のナノチューブを備え、ナノチューブの第１シリーズの内部チャンネルの直径ｄｒは、ナノチューブの第２シリーズの内部チャンネルのそれとは異なるということである。有利には、２つのシリーズの間の直径の差は、少なくとも２ｎｍとなる。
【００６７】
例えば、図１０においては、分離装置１は、同じ循環チャンネル７に開いた異なる３つの直径ｄｒの内部チャンネル４、１２、１３を有するカーボンナノチューブの３つのシリーズ３、１０、１１を備える。カーボンナノチューブの各シリーズは、分離される、もしくは、抽出される所定の分子と関係付けられている。従って、特定のシリーズの内部チャンネルの有効直径は、対応する分子の流体力学直径よりも大きいものとなる。さらに、特定のシリーズの内部チャンネルは、そのシリーズと関係付けられる分子の流体力学直径よりも、大きい流体力学直径を有する分子の通過を許すことはない。従って、特定のシリーズの内部チャンネルの有効直径は、前記シリーズと関係付けられる分子の量体力学直径よりも大きい流体力学直径を有する最小分子の流体力学直径よりも、小さくなる。
【００６８】
さらに、図１０中に示されるように、ナノチューブのシリーズは、循環チャンネルの中の液体サンプルの循環の軸に沿って（矢印Ｆ２）、内部チャンネルの直径ｄｒに従って順番が増加するように配置される。図１０においては、液体サンプルが、異なる流体力学直径を有する３つの抽出される分子を備える場合には、最も小さい流体力学直径の分子は、ナノチューブのシリーズ３によって抽出されることとなり、中間の流体力学直径の分子は、ナノチューブのシリーズ１０によって抽出されることとなり、さらに、最も大きい流体力学直径の分子は、循環チャンネル７から下流（downstream）に配置されたナノチューブのシリーズ１１によって抽出されることとなる。
【００６９】
さらに、図１０おいては、ナノチューブの各シリーズは、化学薬品に対して不浸透性である材料の薄層８の自由表面と、前記浸透性膜８の上に事前に形成される側壁１５と、によって輪郭が形成される外部溝１４の中に配置される。このような溝１４は、付加循環チャンネル（additional circulation channel）を形成することができる。先に説明したように、触媒粒子の直径Ｄは、堆積された薄膜６の高さと幅とに依存する。堆積された薄膜の幅は、２つの側壁１５が隔てられる距離によって定義される。従って、隣り合う２つの側壁１５の間の距離と等しい外部溝１４の幅は、例えば、対応するナノチューブの内部直径を定義するために用いることができるというような、触媒粒子の直径を定義するために用いることができる。
【００７０】
図１１に示されるように、２つのシリーズのナノチューブ３ａ、３ｂ及び１０ａ、１０ｂは、内部チャンネル４ａ、４ｂ及び１２ａ、１２ｂを備え、各内部チャンネルは、１つの同一の循環チャンネル７に対して開く孔を備える。３つの側壁１５は、化学薬品に対して不浸透性である材料の薄層８の自由表面上に、平行に、配置される。さらに、３つの側壁は、循環チャンネル７の中の流れの方向と垂直の方向に配置された面内に、配置される。従って、隣り合う２つの側壁１５は、薄層８の自由表面と、溝１４内に配置されたナノチューブのシリーズ３ａ、３ｂもしくは１０ａ、１０ｂと、を用いて、溝１４の輪郭を描く。ナノチューブを形成するために用いられる触媒の薄膜６の特徴的なシリーズの輪郭を描くためにナノチューブが形成される前に、壁１５は形成されることができる。例えば、側壁１５は、ＰＭＭＡのような生体適合性（biocompatible）のある材料によって形成される。従って、このような装置においては、溝１４も循環チャンネルを形成する。薄膜６の堆積の前に、すなわち、ナノチューブの成長の前に側壁を形成する際には、側壁が隔てられる距離は、触媒粒子の直径Ｄと、ナノチューブの内部直径と、を定義することができる。有利には、ナノチューブの直径を、側壁１５の間の距離まで伸ばすことが可能である。この点から見ると、液体サンプルの分子のサイズに従って分離することは、側壁１５の間の距離の作用として現れる。
【００７１】
図１０と図１１とに示される分離装置においては、分離される分子を含む液体サンプルは、溝１４中、もしくは、循環チャンネル７中、に流れる。例えば、図１１中に示される分離装置においては、液体サンプルは、循環チャンネル７中を流れることができ、分離される異なる複数の分子は、その流体力学直径とそのサイズとに従って、異なる面で、仕分けられ、且つ、分離され、次いで、仕分けされた分子は、溝１４中のカーボンナノチューブ３、１０の内部チャンネル４、１２の排出孔で回収される。
【００７２】
図１２に示される他の実施形態として、抽出する分子の純度を増加させるために、シリーズのナノチューブを、連続する（serial）アセンブリーに形成することもできる。このような連続するアセンブリーにおいては、複数の循環チャンネルは、同じ直径ｄｒのナノチューブの内部チャンネルによって、シリーズに接合される。例えば、図１２においては、５つの循環チャンネルは、基板２の表面２ａの上に形成された、ナノチューブ３の４つの内部チャンネル４によってシリーズに結合される。５つの循環チャンネルは、基板２中に配置された第１と第２の循環チャンネル７ａと７ｂと、基板２の上側に配置された３つの付加チャンネル（additional channel）と、によって形成される。従って、化学薬品に対して不浸透性である材料の薄層８の自由表面と、上壁１６（top wall）と、を用いて、２つの側壁１５は、垂直の付加循環チャンネル１７ａと１７ｂと、中間付加循環チャンネル（intermediate additional circulation channel)１７ｃと、の輪郭を描く。それぞれ第１と第２の循環チャンネル７ａと７ｂに対して開いている２つのナノチューブ３は、それぞれ、垂直な循環チャンネル１７ａと１７ｂの中に、配置される。さらに、中間循環チャンネル１７ｃは、それぞれ第１と第２の循環チャンネル７ａと７ｂに対して開いている２つのナノチューブを備える。図１２中の矢印Ｆ３は、このような分離装置における、液体サンプルの流れ方向を示す。
【００７３】
分離プロセスを改善するために、複数の分離装置を、シングルもしくはマルチのものを、結合させることもできる。さらに、上記の他の実施形態を、結合させることもできる。従って、図９中に示される実施形態は、図１０中もしくは図１１中に示される実施形態と関連付けることができる。この場合、所定のナノチューブは、分極性電極（polarizable electrode）によって部分的に覆われる前に事前に磨くことができる。
【００７４】
本発明にかかる分離装置は、有利には、生物学又は分析化学のためのたんぱく質の分離のための透析膜として用いることができる。
【００７５】
ナノチューブは、基板を選択的に分解するために用いられる化学薬品と共に用いることができる材料である、ＴｉＯ２、ＢＮ、ＭｏＳ、ＷＳ、ＣｕＳ、ＮｉＣｌ２、ＣｄＣｌ、ＣｄＩ、ＡｓＳ、ＡｌＳｉＧｅＯ、金属酸化物から選択される材料から形成されるナノチューブであることもできる。
【００７６】
少なくとも部分的にナノチューブの上端部を遮る触媒の除去は、必須のものではない。実際には、ナノチューブの側壁は、常に、水漏れをしないものではなく、例えば、分子がカーボンナノチューブのグラフェンシート（graphene sheet）を通過することは可能である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、少なくとも１つの分子を、分離される前記分子と、分離される前記分子の流体力学直径(hydrodynamic diameter)よりも大きい流体力学直径を有する付加分子（additional molecule）の少なくとも１つと、を含む液体サンプル（liquid sample）から、分離する分離装置に関する。
【０００２】
また、本発明は、分離装置の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
分離技術は、特に、農業、食品製造、治金（metallurgy）及び染料、香料もしくは医学（medicine）や薬学(pharmacy)のための有効成分の抽出の分野において、常に重要である。
【０００４】
今日では、分離技術は、特定物質の製造のみならず、分析目的や、混合物の情報もしくは混合物の特性を知得するためにも、用いられる。
【０００５】
特に、生物学、衛生（health）分野においては、複合混合物（complex mixtures）の分離能力は、非常に重要な課題となりつつある。
【０００６】
例えば、プロテオミクス（proteomics）分野では、重要なたんぱく質（also called protein of interest）を同定するために質量スペクトルメーターを用いることを基礎とする実験的アプローチの１つの専門分野では、１つもしくはそれ以上の分離工程の前工程（prior stage）において、例えば、アクリルアミド ゲル（acrylamide gel）上の、もしくは、１もしくは２次元のゲル上の電気泳動や、液体クロマトグラフィーの、助けを借りること（resort）が必要である。特定の場合において、実際、質量スペクトルメーターは、生の生体サンプル（raw biological sample）を処理することができない。
【０００７】
例えば、癌のような、特定の病気の診察においては、患者の血液中における所定のマーカー（marker）の検出、及び／又は、滴定（titration）が必要である。これらのマーカーは、一般に特定のたんぱく質内にあり、マーカーの検出は、実行される分析プロトコル（analysis protocol）を必要とする。よって、マーカーの検出の最初のステップは、しばしば、いくつかの分離ステップで構成される。
【０００８】
同様に、所定の治療（therapy）は、血液中に蓄積した所定の毒性化合物の除去、すなわち、分離に基づくものである。これは、特に、腎臓障害に冒される患者のための血液透析の場合である。
【０００９】
しかしながら、生物学的分析手段（biological analysis means）の強い要求の１つは、小さなサイズのサンプルを処理するための能力を含むものである。臨床分野（diagnostic field）において、このことは、実際にサンプルをできるだけ侵襲の程度が低い方法（least invasive possible manner）で取り扱うことを可能にする（例えば、血液サンプル、又は、生検（biopsy））。増加している癌の早期発見、もしくは、治療の場合においては、小さいサイズの腫瘍を分析することがますます求められている。ライフ・サイエンス分野においては、非常に少ない量であるような、もしくは、個々の細胞又は特に細胞小器官（organelles）に存在するような、たんぱく質の性質を研究する必要がある。
【００１０】
多くの分離技術は、生体サンプル(biological sample)に適したものである。これらの技術は、異なる物理化学の法則に基づくものであり、処理される分子は、それら物理化学の法則の１つ１つに対する異なる性質によって区別される。例えば、下記のような性質を利用することができる。
【００１１】
−分子サイズは、膜の孔（pores）を通過する分子の移動能力だけではなく、分子が動く際の分子上の溶媒によって生ずる摩擦力や溶媒中の分子の拡散定数（diffusion constant）（これを決定する運動はブラウン運動（Brownian movement）と呼ばれる）をも、決定する。
【００１２】
−分子の電荷。生体分子（biological molecules）は、一般的な弱酸（核酸、たんぱく質はアミノ酸で形成される）であり、溶液のｐＨに従って異なる程度にイオン化している。従って、対象になる分子の電荷は、通常ｐＨに従って様々な状態となる。
【００１３】
−化学ポテンシャル(chemical potential)、すなわち、他の物質に対する、対象になる分子の親和力のことである。これらの親和力は、様々な分子間力によって引き起こされる。ファンデルワールス（Van der Waals）力、静電気力、親水性相互作用／非親水性相互作用、立体相互作用（steric interaction）、エントロピー相互作用（entropic interaction）。特定の生物学的相互作用（Biological interactions）は、これらの全ての力が組み合わさったものとして考えることができる。
【００１４】
−分子の構造、構造ダイナミクス（conformation dynamics）。生体分子は、通常、おおよそ固定された構造を有するポリマー（polymers）、又は、オリゴマー（oligomers）である。所定の複合培地（complex media）（例えば、ゲル）においては、そのサイズによって、空間的に再構成（reconfigure）する所定の分子の能力は、これらの培地の中を大抵簡単に移動することを可能にする。
【００１５】
最も一般的な分離技術は、異なる形式の電気泳動（electrophoresis）（１次元又は２次元のゲルであるキャピラリー（capillary））及び異なる形式の液体クロマトグラフィー、ろ過、透析、遠心分離（centrifugation）である。
【００１６】
これらの技術のあるものは、非常に小さいサイズのサンプルの処理、又は、数１０ナノメートル（分子サイズ）よりも小さい物質の分離には、適してはいない。例えば、これは遠心分離の場合である。
【００１７】
従って、数年にもおよぶ多くの研究は、非常に小さいサイズ、もしくは、非常に少ない量のサンプルを処理するため、マイクロテクノロジー及びナノテクノロジー分野に由来する技術を用いる分離装置の製造、ということになる。非常に有益なこれらの装置は、特に、対象となる分子のサイズに対応した特徴的なディメンション(dimension)を有する構造を製造することと、十分によくコントロールされた方法によって製造されることとを、可能にする中で見出される。
【００１８】
例えば、Jan C.T. Eijkel らの“The promise of nanotechnology for separation devices - from a top-down approach to nature-inspired separation devices”(Electrophoresis 2006,027,677-685)には、従来の分離方法を最適化し、且つ、新しい方法を提供するために、ナノテクノロジーの可能な応用が明らかにされている。Jan C.T. Eijkel らは、例えば、ＨＰＬＣ用のマイクロ構造及びナノ構造（nano-structured）のカラム（columns）、マイクロ構造及びナノ構造のふるい構造（sieving structures）などを、記載している。
【００１９】
Jianping Fu らの“A patterned anisotropic nanofluidic sieving structure for continuous-flow separation of DNA and proteins”(Nature Nanotechnology, Vol 2,February 2007)においては、生体分子（biomolecule）の分離のスピード及び分解能を改善するための、簡便なマイクロエレクトロニクス技術による２次元のふるい構造の製造が紹介されている。マイクロメートル以下の精度を得るためにマスクワーク(maskwork)を制御することが可能な、リソグラフィー及び反応性イオンエッチング（ＲＩＥ）技術による、シリコン基板のエッチングにより、ふるい構造を得ることができる。平坦なふるい構造は、幅１μｍ、深さ５５ｎｍの横チャンネル（lateral channel）によって他のメインチャンネル（main channel）と接続される、幅１μｍ、深さ３００ｎｍの平行なメインチャンネルを備える。メインチャンネルは、幅１μｍ、深さ５５ｎｍの横チャンネルによって他のメインチャンネルと接続される。ＤＮＡ分子やたんぱく質のような分子の動きは、メインチャンネルの方向の縦方向電界（longitudinal electric field）と、横チャンネルの方向の横方向電界（lateral electric field）と、の重なりによって、生じており、横チャンネルは、メインチャンネルよりも深くはない。このような構造における分離効果は、異なる分子が、横チャンネルを介して１つのメインチャンネルから他のチャンネルへ移動する確率が異なることから、生ずる。
【００２０】
Christopher C. Striemer らの“Charge- and size-based separation of macromolecules using ultrathin silicon membranes” (Nature, Vol 445, 15 February 2007) において、マイクロエレクトロニクス分野の簡便な方法を用いて作成された、非常に薄いナノポーラス膜が示されている。この膜の孔の平均サイズは、製造する際の温度パラメータを変化させることによって調節することができる。
【００２１】
ナノポーラス膜、又は、ふるい構造の場合には、孔の中の、もしくは、チャンネルの中の生体分子の移動は、孔、もしくは、チャンネルのサイズによってのみならず、孔、もしくは、チャンネルの輪郭を描く壁に生じる静電気ポテンシャル(electrostatic potential)によっても、条件づけられる。しかしながら、両方の場合において、ポテンシャルは静的なものであり、通過する確率をダイナミックに制御することを可能にするものではない。Rohit Karnikらの、“Field-effect control of protein transport in a nanofluidic transistor circuit”(Applied Physics Letters 88,123114(2006))には、トランジスタ(transistor)のようなものの製造と、キャピラリー（キャリアーに対してトランジスタ・チャンネルとして振舞う）の表面に、様々なポテンシャルが生じることが記載されている。著者は、これによって、チャンネル内のたんぱく質の通路をダイナミックに制御することが可能であることを明らかにしている。この原理は、キャピラリーのサイズが、例えば１０ナノメートル程度にも満たない材料の表面に生じるデバイ長（Debye length）程度である場合には、応用できる。
【００２２】
生体分子を分離するための異なる研究によって従来から提案されている分離装置は、製造するにはコストがかかるため、工業的に製造することが難しいという大きな欠点を有する。実際には、これらの分離装置は、対象分子のサイズに対応するディメンションの孔、又は、チャンネルを製造するために、非常に高価なリソグラフィー工程を使用することを必要とする。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２３】
本発明の目的は、シンプルで、簡単に使用でき、特に、生体分子のような、数１００ナノメートル以下の流体力学直径を有する少なくとも１つの分子を、分離される前記分子と、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きい流体力学直径を有する付加分子の少なくとも１つと、を含む液体サンプルから、効果的に分離することを可能にする、分離装置を提供することである。
【００２４】
本発明によれば、この目的は、
−基板と、
−前記基板に配置される少なくとも１つの循環チャンネル（circulation channel）と、
−少なくとも１つのナノチューブであって、
前記ナノチューブは、分離される前記分子と関係付けられて（会合して、associate）おり、且つ、前記基板の自由表面（free surface）の上に形成されており、
前記ナノチューブは、内部チャンネル(internal channel)を備え、且つ、前記循環チャンネルに対して開いており、且つ、プリセット有効直径（preset effective diameter）を有しており、
前記プリセット有効直径は、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きく、且つ、前記付加分子の流体力学直径よりも小さいものである、
少なくとも１つのナノチューブと、
を備える装置によって、達成される。
【００２５】
本発明のさらなる目的は、簡単に使用でき且つ安価な製造方法であって、少なくとも１つの分子を、分離される前記分子と分離される前記分子の流体力学直径よりも大きな流体力学直径を有する付加分子の少なくとも１つとを含む液体サンプルから分離する、分離装置の、製造方法を提供することである。
【００２６】
本発明によれば、この目的は、以下の連続するステップである、
−少なくとも１つのナノチューブの制御形成（controlled formation）であって、
前記ナノチューブは、分離される分子と関係付けられており、前記制御形成は、基板の自由表面の上での形成であり、前記基板は、化学薬品（chemical agent）の作用によって分解可能な材料から形成されており、
前記ナノチューブは、所定の有効直径（effective diameter）を有する内部チャンネルを備え、
前記有効直径は、分離しようとする前記分子の流体力学直径よりも大きく、且つ、前記付加分子の流体力学直径よりも小さい、
少なくとも１つのナノチューブの制御形成と、
−前記基板の前記自由表面の上と、前記ナノチューブの前記自由表面の上と、への、化学薬品に対して不浸透性である薄層（Thin layer）の形成と、
−前記ナノチューブの前記内部チャンネルへの前記化学薬品の導入、及び、前記基板の所定領域の選択的分解、による、循環チャンネルの形成と、
を備える方法によって、達成される。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図２】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図３】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図４】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図５】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図６】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図７】本発明の第１の実施形態による分離装置の製造工程のうちの１つの工程を示す概略断面図である。
【図８】図７の分離装置の斜視図である。
【図９】図７の、本発明の他の実施形態による分離装置を示す概略断面図である。
【図１０】本発明の第２の実施形態による分離装置を示す概略断面図である。
【図１１】本発明の第３の実施形態による分離装置を示す概略断面図である。
【図１２】本発明の第４の実施形態による分離装置を示す概略断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
他の利点及び特徴は、本発明の特有な実施形態についての下記の説明により、さらに明らかにされる。本発明の特有な実施形態は、単なる例示であって、本発明を限定するものではない。本発明の特有な実施形態は、添付の図面により示される。
【００２９】
少なくとも１つの分子は、特に生体分子は、前記分子と、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きい流体力学直径を有する付加分子の少なくとも１つと、を含む液体サンプルから、分離装置によって、分離もしくは抽出される。
【００３０】
前記分離装置は、
−基板と、
−前記基板に配置される少なくとも１つの循環チャンネルと、
−分離される前記分子と関係付けられて（会合して、associate）おり、且つ、前記基板の自由表面の上に形成される、少なくとも１つのナノチューブと、
を備える。
【００３１】
流体力学直径（Ｄｈで示される）は、λＤで示されるデバイ長が足された分子の実際のサイズ（又は、直径）に対応する。デバイ長は、分子が帯電する（charge）際の、分子の周囲の電気２重層（electric double layer）の厚さに対応する。デバイ長は、特に、分子が帯電し、且つ、塩水（salt water）の緩衝溶液に含まれている際の、分子の電荷と局所的に均衡した対イオン雲（counter-ion cloud）の厚さに対応する。それは、１つの分子もしくは複数分子を備える溶液の状態、特に、電解質のタイプ及び濃度と温度とに依存する。
【００３２】
液体サンプルから分離もしくは抽出されることとなる１つの分子、もしくは、複数の分子は、通常、約数１０ナノメートル、さらに詳細には、１ｎｍから１μｍの間の流体力学直径（Ｄｈで示す）を有する。例えば、液体サンプルから分離、もしくは、抽出される１つの分子又は複数の分子は、６．８ｎｍの流体力学直径ＤｈＢＳＡを有するウシ血清アルブミン（bovine serum albumin）分子（ＢＳＡと示される）、及び／又は、１４ｎｍの流体力学直径ＤｈＩｇＧを有する免疫グロブリン（immunoglobulin）分子（ＩｇＧと示される）であることができる。
【００３３】
分離は、さらに詳細には、基板の自由表面の上に形成される、カーボンナノチューブのような、ナノチューブの内部チャンネルによって形成されたチャンネルによって行われる。さらに、ナノチューブの内部チャンネルは、循環チャンネルに対して開いている。
【００３４】
ナノチューブの内部チャンネルは、所望のものとして、且つ、制御された方法によって、選択された有効直径ｄｅを有する。内部チャンネルの有効直径ｄｅは、以下の式によって定義される。
−ｄｅ＝ｄｒ−２λＤ
ｄｒは、例えば、ナノチューブの内部壁によって輪郭が形成される断面の直径である、内部チャンネルの実直径（actual diameter）に対応する。λＤは、ナノチューブと分子とが同じ符号（sign）の電荷によって静電気帯電する際の、デバイ長に対応する。
−ｄｅ＝ｄｒ
他の場合であり、特に、ナノチューブと分子とが、反対の符号の電荷によって静電気帯電する場合、もしくは、帯電しない場合である。
【００３５】
チャンネルの有効直径ｄｅは、実際には、チャンネルと関係付けられる分子のみが通過可能であるように、選択され、さらに詳細には、分離される分子の流体力学直径Ｄｈに対応するように選択される。従って、それは、分離される分子の流体力学直径よりも大きく、且つ、付加分子のそれよりも小さいものとなる。有利には、有効直径は１ｎｍから１００ｎｍの間となる。
【００３６】
例えば、１２ｎｍの有効直径を有するナノチューブの内部チャンネルは、ＩｇＧ分子（ＤｈＩｇＧが１４ｎｍ）も含む溶液からＢＳＡ分子（ＤｈＢＳＡが６．８ｎｍ）を抽出することができる。
【００３７】
さらに、内部チャンネルの有効直径ｄｅと、分子の流体力学直径Ｄｈと、２つの直径ｄｅとＤｈとの間の関係とは、分子の静電気電荷と内部チャンネルの静電気電荷とに依存する。
【００３８】
例えば、内部チャンネルの有効直径が、デバイ長を考慮して、前記分子の流体力学直径よりも大きい場合には、正電荷に帯電した内部チャンネルは、正電荷に帯電した分子をブロックすることができる。一方、内部チャンネルと前記分子とが反対の符号の電荷によって帯電している場合には、単に、分子の流体力学直径は、ナノチューブの内部チャンネルの実直径ｄｒよりも小さくならなければならない。
【００３９】
さらに詳細には、内部チャンネルの表面を、制御された方法によって静電気帯電されるような機能的なものにする。それにより、分子の通過確率を増加させ、もしくは、減少させることを可能にする。
【００４０】
さらに、分子の静電電荷は、溶液のｐＨに依存する。分子に対して求められている電荷に従って溶液のｐＨを調節することは可能であり、それによって、分子の通過能力を増加させ、もしくは、減少させることを可能にする。例えば、ＢＳＡ分子は、７と等しいｐＨのもとでは、１３ｅ−に帯電し、従って、１０ｎｍと等しい実直径を有する負電荷に帯電する内部チャンネルを通過することができない。
【００４１】
循環チャンネルの使用に応じて、循環チャンネルは、液体サンプルが循環もしくは抽出される分子を除去することができるように、注入穴（inlet hole）、及び／又は、排出穴（outlet hole）を備えることができる。
【００４２】
これにより、分離は、液体サンプルを循環チャンネルに注入することによって、効果的なものとされる。この場合、分離もしくは抽出される分子のみが、ナノチューブで形成され、且つ、ナノチューブの自由端（free end）において再生された内部チャンネルを、通過することができる。さらに、循環チャンネルは、ナノチューブの内部チャンネルの実直径よりも大きい、若しくは、同等の幅、及び／又は、高さ、（もしくは、循環チャンネルの断面の場合の直径）を有する。有利には、循環チャンネルは、数１００マイクロメートルよりも小さい、もしくは、同等の、さらに詳細には、５ｎｍから１００μｍの間の幅、及び／又は、高さを有する。しかしながら、循環チャンネルの幅の最大値は、厳密なものではない。例えば、循環チャンネルの幅は、流量が増加するように、特に、大量のサンプルのために、もしくは、分離が継続的に行われるように、数センチメートルのものとすることができる。他の実施形態においては、ナノチューブと関係付けられる分子がこのナノチューブの内部チャンネルに入ることができるように、液体サンプルを、基板の自由表面に、その高さが対応するナノチューブの高さよりも高くなるように、堆積することができる。そして、抽出された分子は、循環チャンネルによって、取り除かれる。
【００４３】
チャンネルを有する分離装置は、有利には以下のチャンネルを、つまり、ナノメートルサイズのチャンネルであり、且つ、カーボンナノチューブのようなナノチューブの内部チャンネルによって形成されたチャンネルを、有する分離装置は、簡単に使用が出来るという利点を有し、その上、信頼性があり且つ効果的なものである。実際には、分離装置の製造工程において、さらに詳細には、ナノチューブの製造において、この内部チャンネルのディメンションは、完全に修得（mastered）し、制御される。１つのナノチューブを備えるかわりに、装置は複数のナノチューブを備えることができ、これによって、シンプルに製造される装置であることを確保しつつ、複合物の分離の実施を可能にする。装置は、異なる分子を分離するために、同一の実直径の内部チャンネル、及び／又は、異なる実直径の内部チャンネル、を有するナノチューブを備える。
【００４４】
このような装置は、有利には、シンプルで、且つ、簡単に利用でき、少なくとも１つのカーボンナノチューブの制御形成と、形成されたカーボンナノチューブの内部チャンネルを使用して前記基板中における循環チャンネルの形成と、を行う、製造方法によって、得ることができる。
【００４５】
例示として、図１から図７に、分離装置１の実施形態にかかる製造方法の異なるステップは示される。明確にするために、分離装置は、図１から図７に示され、以下のような、ナノチューブ、さらに正確には、カーボンナノチューブを備えるものとして説明される。当然、シングルナノチューブの形成のために説明される異なるステップは、同一のもしくは異なる直径の複数のナノチューブの形成に簡単に流用することができる。
【００４６】
分離装置１は、図１に示されるように、基板２から作られる。基板２は、この実施形態においては、化学薬品の作用によって分解可能な材料によって形成される。例えば、基板は酸化シリコンで形成され、化学薬品はフッ酸（ＨＦ）となる。加えて、循環チャンネルの高さは、基板２の厚さＥに依存し、有利には、それは５ｎｍから１ｍｍの間である。
【００４７】
図１から図４で示される、カーボンナノチューブ３は、制御された方法によって、基板２の自由表面２ａの上に、製造される。
【００４８】
カーボンナノチューブ３の制御形成は、特に、カーボンナノチューブ３の直径Ｄを制御すること、さらに詳細には、ナノチューブ３の中に配置された内部チャンネル４の実直径ｄｒ（先に示したｄｒである）を制御することで、構成される。カーボンナノチューブ３は、例えば、あらかじめ基板２の上に形成された触媒粒子（catalyst particle）５からの触媒手段によって、制御されて、得ることができる。実際には、ナノチューブが成長するために用いられる触媒粒子５の直径Ｄは、内部チャンネル４の直径ｄｒとつりあうナノチューブ３の直径Ｄと、実質的に等しくなる。カーボンナノチューブ３の直径Ｄに対して求められるサイズに対応する所望のサイズに制御された触媒５の粒子もしくはドロップ（drop）の形成によって、カーボンナノチューブ３の内部チャンネル４の直径ｄｒの制御は、可能である。
【００４９】
所望のサイズを有する触媒粒子５を得るためには主に２つの方法がある。
【００５０】
Shintaro Satoらの“Novel approach to fabricating carbon nanotube via interconnects using size-controlled catalyst nanoparticles”（International Interconnect Technology Conference,2006,pages230-232）に記載されているように、1つの方法は、触媒ターゲットのレーザーアブレーションによって触媒粒子を形成することと、形成された粒子の中から所望のサイズに対応した粒子を選択することと、選択された粒子を堆積することと、から構成される。
【００５１】
図１から図４に示されるように、他の方法は、基板２の自由表面２ａの所定の領域に触媒６の薄膜（thin film）を堆積することと（図２）、高温アニールをすることと、から構成される。
【００５２】
触媒６の薄膜は、例えば、ニッケル、鉄、コバルト及びこれらの化学元素の合金から選択される触媒によって、もしくは、ニッケル、鉄、コバルト及びこれらの化学元素の合金から選択される触媒によってそれぞれ形成された複数の独自の層によって、形成される。これは周知の手段によって堆積される。例えば、物理気相成長法によって、触媒を含むターゲットを用いるプラズマスパッタリング法によって、触媒を含むターゲットを用いる蒸着法によって、もしくは、特に電子（衝撃）（electronic（bombardment））の加熱によって、堆積される。図３に示されるように、高温アニールは、薄膜をドロップ、又は、粒子５に変形することができる。薄膜のアニールは、最初に、薄膜を基板の上に堆積し、抵抗、ランプ、又は、電気伝導フィラメントのような適切な加熱手段によって行われる。アニール温度は、有利には、４００℃から１０００℃、さらに有利には４００℃から５５０℃である。
【００５３】
薄膜の堆積とアニールとによって得られた触媒粒子５の直径Ｄは、事前に堆積された薄膜６のディメンションを前もって決定することによって、制御される。このことは、K B J Teo らの”Plasma enhanced chemical vapour deposition carbon nanotubes/nanofibres-how uniform do they grow?”（Institute of Physics Publishing, Nanotechnology 14(2003)204-211）に示されている。実際、直径Ｄは、前もって堆積された薄膜６の高さだけでなく、その幅にも依存する。さらに、基板２の中に触媒が拡散しない場合には、ドロップ５の体積は、薄膜６の事前の体積に対応するものとなる。
【００５４】
例えば、水銀線（mercury line）I、又は、深紫外線（deep UV）照射を用いる安価なリソグラフィーによって、基板２の表面２ａの上に、例えば、８０ｎｍ以上の幅をもつ触媒の薄膜６の形成は、可能であり、さらに、触媒粒子５のアニールによって、成形（shaping）を行うことも可能である。従って、この粒子５は、事前に堆積された触媒の薄膜６のサイズに比例する直径Ｄを有する。例えば、幅１００ｎｍ、高さ３ｎｍの薄膜は、約３０ｎｍの直径Ｄを有する粒子を得ることが可能である。さらに、触媒の薄膜６のディメンションは、リソグラフィー、エッチング、もしくは、ストリッピングによっても調節することができる。触媒の薄膜の堆積の前に、薄膜６によって覆われることのないように設計された基板２の自由表面２ａの部分の上にアルミニウムの層を堆積することによっても、触媒の薄膜６のディメンションを所望のものにすることができる。１つのカーボンナノチューブ３を基板２の自由表面２ａの上に形成する場合、有利には、触媒の薄膜６を、１５０ｎｍ未満の直径を有する円筒形状とする。
【００５５】
図４に示されるように、触媒粒子５の形成の後には、内部チャンネル４に配置されたカーボンナノチューブ３の成長工程が続く。成長は、有利には、化学気相成長法（ＣＶＤ）によって、もしくは、特に、高周波（radio frequency）の、もしくは、マイクロ波(microwave)のプラズマの、プラズマ化学気相成長法（ＰＥＣＶＤ）によって、得ることができる。成長工程が完了することにより、ナノチューブの自由端と内部チャンネル４の開口部（opening）４ａとを開放するための除去の前に、基板２の自由表面２ａの上に事前に配置された触媒は、通常、カーボンナノチューブ（先端成長(tip growth)）の自由端に位置することになる。例えば、触媒は、ＨＮＯ３を用いた化学処理工程によって、溶解することができる。
【００５６】
最初に、カーボンナノチューブ３は、基板２の自由表面２ａの上に形成され、循環チャンネル７は、図５から図７に示されるように、基板２の所定の領域を選択的に分解することができる化学薬品（例えば、フッ酸である）によって、形成される。
【００５７】
化学薬品から、基板２の自由表面２ａとカーボンナノチューブ３とを保護するために、化学薬品に対して不浸透性である薄層８は、基板２の自由表面２ａの全体の上と、カーボンナノチューブ３の壁の上と、に事前に堆積される。さらに、薄層８は、カーボンナノチューブ３の内部チャンネル４の開口部４ａを、ブロックしてはならない。例えば、開口部４ａがふさがれてしまった場合、もしくは、ナノチューブ３を短くする場合には、内部チャンネル４の開口部４ａを開放するために、循環チャンネル７の形成前に、化学機械平坦化（chemical mechanical polishing）工程を行う。
【００５８】
化学薬品が基板２と集中的に接触するようにするために、さらに、ナノチューブの下に配置され、且つ、循環チャンネル７を形成するように設計された、基板２の所定の領域を選択的に分解するために、図６中の矢印Ｆ１に示されるように、化学薬品は、開口部４ａを介して、ナノチューブ３の内部チャンネル４に導入される（図７）。分解可能な材料の基板の領域を選択的に分解するために、カーボンナノチューブの内部チャンネルの中に化学薬品を導入することは、金属接続構造（metal interconnection structure）と一体化するように設計された、ターゲット層の中の空気隙間（air gap）を形成するための、２００７年５月１５日に出願された仏国特許出願０７０３４８７号に既に記載されている。
【００５９】
化学薬品に対して不浸透性である薄層８は、有利には、基板２の自由表面２ａの上と、ナノチューブ３の自由表面の上とに、保持される。
【００６０】
図１から図７で示される製造工程は、簡単に使用することができ、且つ、安価であるという利点を示し、これによって、工業化を行うことが可能である。例えば、ナノメートルサイズの幅で、循環チャンネルの上へ機械的（automatically）に開く、ナノメートルサイズの少なくとも１つのチャンネル（ナノチューブの内部チャンネル）は、リソグラフィーやエッチング等の様々なデリケートで、且つ、細心の注意を払う工程を必要とすることなしに、この方法によって、簡単に得ることができる。先行技術においては、約１０ナノメートルのパターンに対する正確なディメンションの制御を行うには、コストがかかるリソグラフィー法で調整していた。しかしながら、本発明によれば、１つの内部チャンネルもしくは複数の内部チャンネルのサイズは、工業的方法において既に用いられているような、チューニング（tuning）を必要としないリソグラフィー工程を用いて可能であるような、特定の触媒粒子のサイズによって、制御され、所望のものとして形成される。さらに、この方法は、相対的に低い温度、特に、ナノポーラス膜を得るための従来技術による方法と比較して、相対的に低い温度において行われる。
【００６１】
最終的には、このような方法は、複数のナノチューブを備える分離装置を、簡便で、再現可能で、且つ、制御可能な方法において形成することを可能にする。従って、基板２の表面２ａに複数のナノチューブを形成した際には、化学薬品は、ナノチューブの異なる内部チャンネルの中に導入され、基板２の領域を選択的に分解し、有利には、循環チャンネルを形成するために、２つの内部チャンネル同士を接続する空気隙間を形成する。循環チャンネルの注入孔と排出孔とは、応用として、基板の側壁近傍のナノチューブに導入された化学薬品によって、得ることができる。従って、化学薬品は、孔を形成するために、前記側壁の領域を選択的に分解する。孔は、従来の場合には、リソグラフィー、エッチング、もしくは、スパッタリングによって、機械的に形成されていた。
【００６２】
例えば、分離装置は、１つの同一の分子を分離するために複数のナノチューブを備えることができる。従って、これらのナノチューブは、所定の分子と関係付けられるナノチューブのシリーズ（series）を形成する。図８においては、例えば、分離装置１は、自由表面２ａのような、化学薬品に対して不浸透性である材料で覆われている基板２の自由表面２ａの上に形成された、３つの同一のカーボンナノチューブ３ａ、３ｂ、３ｃのシリーズを備える。ナノチューブ３ａ、３ｂ、３ｃは、それぞれ、内部チャンネル４ａ、４ｂ、４ｃを備え、内部チャンネル４ａ、４ｂ、４ｃは、循環チャンネル７に向かって開いており、同一の直径ｄｒを有する。ナノチューブ３ａ、３ｂ及び３ｃは、特に、それぞれの対称軸と薄層８の自由表面の平面とが交差する点が、循環チャンネル７の長さ方向の軸Ａと平行な軸に沿って配置されるようになる。このようなカーボンナノチューブの配置は、同じ循環チャンネル７に開いた同じシリーズのナノチューブとして、平行なアセンブリー（assembly）の特徴的な実例を形成する。
【００６３】
有利には、カーボンナノチューブの場合には、カーボンナノチューブは電気伝導体であるため、分子弁（molecular valves）を形成するために、カーボンナノチューブに電位（アドレス信号）を印加することができる。図９には、例えば、金、窒化チタン、パラジウム、白金、鉄、又は、アルミニウムのような、電気伝導材料によって部分的に覆われているカーボンナノチューブ３を有する分離装置が、示されている。それによって、カーボンナノチューブ３は、電気伝導材料９によって少なくとも部分的に覆われている。さらに、図９においては、カーボンナノチューブ３の自由表面は、化学薬品に対して不浸透性である薄層８によって事前に覆われ、前記薄層は、循環チャンネル７が形成される際に用いられる。したがって、電気伝導材料９は、この実施形態においては、化学薬品に対して不浸透である材料の薄層８の上に、配置される。電気伝導材料９は、化学薬品に対して不浸透性である材料の薄層８によって事前に覆われたカーボンナノチューブ３の全周囲、又は、部分的にのみ、堆積することができる。
【００６４】
電気伝導材料９によって、カーボンナノチューブ３の部分を少なくとも覆うことは、通過する分子もしくは通過しない分子に対して静電気的な作用をすることを可能にし、これによって、分子バルブを得ることができる。従って、バイオ・トランジスタ（biological transistor）手段における分子の通路を制御するために、このような電気伝導材料９は、電気的接続を少なくとも１つの内部チャンネル４の周りに形成することを可能にする。
【００６５】
さらに、分離装置１は、異なるディメンションの内部チャンネルを有し、且つ、複数回の分離を順次行うことができる複数のナノチューブをも備えることができる。例えば、大きい、もしくは、小さいサイズを有するたんぱく質の混合物を、順次抽出することができる。分離装置の製造方法は、１つもしくはそれ以上のリソグラフィー工程を必要とし、しかしながら、これらのリソグラフィー工程は、アニール処理の際にドロップ状のものとして形成された触媒から作成された薄膜からナノチューブを形成するものとしては、相対的に低い分解能の工程である。
【００６６】
分離装置は、特徴的なナノチューブのシリーズも備える。特徴的なシリーズの意味するところは、各シリーズは、同じ直径ｄｒの内部チャンネルを有する複数のナノチューブを備え、ナノチューブの第１シリーズの内部チャンネルの直径ｄｒは、ナノチューブの第２シリーズの内部チャンネルのそれとは異なるということである。有利には、２つのシリーズの間の直径の差は、少なくとも２ｎｍとなる。
【００６７】
例えば、図１０においては、分離装置１は、同じ循環チャンネル７に開いた異なる３つの直径ｄｒの内部チャンネル４、１２、１３を有するカーボンナノチューブの３つのシリーズ３、１０、１１を備える。カーボンナノチューブの各シリーズは、分離される、もしくは、抽出される所定の分子と関係付けられている。従って、特定のシリーズの内部チャンネルの有効直径は、対応する分子の流体力学直径よりも大きいものとなる。さらに、特定のシリーズの内部チャンネルは、そのシリーズと関係付けられる分子の流体力学直径よりも、大きい流体力学直径を有する分子の通過を許すことはない。従って、特定のシリーズの内部チャンネルの有効直径は、前記シリーズと関係付けられる分子の量体力学直径よりも大きい流体力学直径を有する最小分子の流体力学直径よりも、小さくなる。
【００６８】
さらに、図１０中に示されるように、ナノチューブのシリーズは、循環チャンネルの中の液体サンプルの循環の軸に沿って（矢印Ｆ２）、内部チャンネルの直径ｄｒに従って順番が増加するように配置される。図１０においては、液体サンプルが、異なる流体力学直径を有する３つの抽出される分子を備える場合には、最も小さい流体力学直径の分子は、ナノチューブのシリーズ３によって抽出されることとなり、中間の流体力学直径の分子は、ナノチューブのシリーズ１０によって抽出されることとなり、さらに、最も大きい流体力学直径の分子は、循環チャンネル７から下流（downstream）に配置されたナノチューブのシリーズ１１によって抽出されることとなる。
【００６９】
さらに、図１０おいては、ナノチューブの各シリーズは、化学薬品に対して不浸透性である材料の薄層８の自由表面と、前記浸透性膜８の上に事前に形成される側壁１５と、によって輪郭が形成される外部溝１４の中に配置される。このような溝１４は、付加循環チャンネル（additional circulation channel）を形成することができる。先に説明したように、触媒粒子の直径Ｄは、堆積された薄膜６の高さと幅とに依存する。堆積された薄膜の幅は、２つの側壁１５が隔てられる距離によって定義される。従って、隣り合う２つの側壁１５の間の距離と等しい外部溝１４の幅は、例えば、対応するナノチューブの内部直径を定義するために用いることができるというような、触媒粒子の直径を定義するために用いることができる。
【００７０】
図１１に示されるように、２つのシリーズのナノチューブ３ａ、３ｂ及び１０ａ、１０ｂは、内部チャンネル４ａ、４ｂ及び１２ａ、１２ｂを備え、各内部チャンネルは、１つの同一の循環チャンネル７に対して開く孔を備える。３つの側壁１５は、化学薬品に対して不浸透性である材料の薄層８の自由表面上に、平行に、配置される。さらに、３つの側壁は、循環チャンネル７の中の流れの方向と垂直の方向に配置された面内に、配置される。従って、隣り合う２つの側壁１５は、薄層８の自由表面と、溝１４内に配置されたナノチューブのシリーズ３ａ、３ｂもしくは１０ａ、１０ｂと、を用いて、溝１４の輪郭を描く。ナノチューブを形成するために用いられる触媒の薄膜６の特徴的なシリーズの輪郭を描くためにナノチューブが形成される前に、壁１５は形成されることができる。例えば、側壁１５は、ＰＭＭＡのような生体適合性（biocompatible）のある材料によって形成される。従って、このような装置においては、溝１４も循環チャンネルを形成する。薄膜６の堆積の前に、すなわち、ナノチューブの成長の前に側壁を形成する際には、側壁が隔てられる距離は、触媒粒子の直径Ｄと、ナノチューブの内部直径と、を定義することができる。有利には、ナノチューブの直径を、側壁１５の間の距離まで伸ばすことが可能である。この点から見ると、液体サンプルの分子のサイズに従って分離することは、側壁１５の間の距離の作用として現れる。
【００７１】
図１０と図１１とに示される分離装置においては、分離される分子を含む液体サンプルは、溝１４中、もしくは、循環チャンネル７中、に流れる。例えば、図１１中に示される分離装置においては、液体サンプルは、循環チャンネル７中を流れることができ、分離される異なる複数の分子は、その流体力学直径とそのサイズとに従って、異なる面で、仕分けられ、且つ、分離され、次いで、仕分けされた分子は、溝１４中のカーボンナノチューブ３、１０の内部チャンネル４、１２の排出孔で回収される。
【００７２】
図１２に示される他の実施形態として、抽出する分子の純度を増加させるために、シリーズのナノチューブを、連続する（serial）アセンブリーに形成することもできる。このような連続するアセンブリーにおいては、複数の循環チャンネルは、同じ直径ｄｒのナノチューブの内部チャンネルによって、シリーズに接合される。例えば、図１２においては、５つの循環チャンネルは、基板２の表面２ａの上に形成された、ナノチューブ３の４つの内部チャンネル４によってシリーズに結合される。５つの循環チャンネルは、基板２中に配置された第１と第２の循環チャンネル７ａと７ｂと、基板２の上側に配置された３つの付加チャンネル（additional channel）と、によって形成される。従って、化学薬品に対して不浸透性である材料の薄層８の自由表面と、上壁１６（top wall）と、を用いて、２つの側壁１５は、垂直の付加循環チャンネル１７ａと１７ｂと、中間付加循環チャンネル（intermediate additional circulation channel)１７ｃと、の輪郭を描く。それぞれ第１と第２の循環チャンネル７ａと７ｂに対して開いている２つのナノチューブ３は、それぞれ、垂直な循環チャンネル１７ａと１７ｂの中に、配置される。さらに、中間循環チャンネル１７ｃは、それぞれ第１と第２の循環チャンネル７ａと７ｂに対して開いている２つのナノチューブを備える。図１２中の矢印Ｆ３は、このような分離装置における、液体サンプルの流れ方向を示す。
【００７３】
分離プロセスを改善するために、複数の分離装置を、シングルもしくはマルチのものを、結合させることもできる。さらに、上記の他の実施形態を、結合させることもできる。従って、図９中に示される実施形態は、図１０中もしくは図１１中に示される実施形態と関連付けることができる。この場合、所定のナノチューブは、分極性電極（polarizable electrode）によって部分的に覆われる前に事前に磨くことができる。
【００７４】
本発明にかかる分離装置は、有利には、生物学又は分析化学のためのたんぱく質の分離のための透析膜として用いることができる。
【００７５】
ナノチューブは、基板を選択的に分解するために用いられる化学薬品と共に用いることができる材料である、ＴｉＯ２、ＢＮ、ＭｏＳ、ＷＳ、ＣｕＳ、ＮｉＣｌ２、ＣｄＣｌ、ＣｄＩ、ＡｓＳ、ＡｌＳｉＧｅＯ、金属酸化物から選択される材料から形成されるナノチューブであることもできる。
【００７６】
少なくとも部分的にナノチューブの上端部を遮る触媒の除去は、必須のものではない。実際には、ナノチューブの側壁は、常に、水漏れをしないものではなく、例えば、分子がカーボンナノチューブのグラフェンシート（graphene sheet）を通過することは可能である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの分子を、分離される前記分子と、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きい流体力学直径を有する付加分子の少なくとも１つと、を含む液体サンプルから、分離する分離装置（１）であって、
−基板（２）と、
−前記基板（２）に配置される少なくとも１つの循環チャンネル（７）と、
−少なくとも１つのナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）であって、
前記ナノチューブは、分離される前記分子と関係付けられており、且つ、前記基板（２）の自由表面（２ａ）の上に形成されており、
前記ナノチューブは、内部チャンネル（４、４ａ、４ｂ、４ｃ、１２、１２ａ、１２ｂ、１３）を備え、且つ、前記循環チャンネル（７）に対して開いており、且つ、所定の有効直径（ｄｅ）を有しており、
前記所定の有効直径（ｄｅ）は、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きく、且つ、前記付加分子の流体力学直径よりも小さいものである、
少なくとも１つのナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）と、
を備えることを特徴とする分離装置。
【請求項２】
前記ナノチューブ（３）は、炭素、ＴｉＯ２、ＢＮ、ＭｏＳ、ＷＳ、ＣｕＳ、ＮｉＣｌ２、ＣｄＣｌ、ＣｄＩ、ＡｓＳ、ＡｌＳｉＧｅＯ及び酸化金属から選択される材料から形成されたナノチューブである、ことを特徴とする請求項１に記載の装置。
【請求項３】
前記基板（２）の前記自由表面（２ａ）の上に形成され、且つ、分離される複数の特定の分子とそれぞれが関係付けられている、複数のナノチューブ（３、１０、１１）を備え、前記ナノチューブの前記内部チャンネル（４、１２、１３）が、前記循環チャンネル（７）の中の前記液体サンプルの流れの軸に沿って、前記内部チャンネルの有効直径（ｄｅ）に従って順番が増加するように配置されている、ことを特徴とする請求項１又は２に記載の装置。
【請求項４】
ナノチューブ（３ａ、３ｂ、３ｃ及び１０ａ、１０ｂ）のシリーズの少なくとも１つを備え、前記ナノチューブは、分離される前記分子と関係付けられる同一の有効直径である内部チャンネル（４ａ、４ｂ、４ｃ及び１２ａ、１２ｂ）を備える、ことを特徴とする請求項１又は２に記載の装置。
【請求項５】
ナノチューブ（３ａ、３ｂ、３ｃ及び１０ａ、１０ｂ）の前記シリーズは、外部溝（１４）の輪郭を描く側壁（１５）の間に配置されることを特徴とする請求項４に記載の装置。
【請求項６】
ナノチューブの前記シリーズの内部直径は、前記対応する外部溝（１４）の前記側壁（１５）を隔てる距離まで伸びることを特徴とする請求項５に記載の装置。
【請求項７】
前記内部チャンネル（４、１２、１３）のそれぞれは、１つの同じ前記循環チャンネル（７）に対して開く孔を備えることを特徴とする請求項３から６のいずれか１つに記載の装置。
【請求項８】
ナノチューブ（３ａ、３ｂ、３ｃ及び１０ａ、１０ｂ）の複数のシリーズを備え、前記シリーズのそれぞれは、分離される複数の特定の分子と関係付けられており、且つ、前記循環チャンネル（７）の中の前記液体サンプルの流れの軸に沿って、それらの有効直径（ｄｅ）に従って順番が増加するように配置されている、ことを特徴とする請求項４から７のいずれか１つに記載の装置。
【請求項９】
前記側壁（１５）によって付加循環チャンネル（１７）の輪郭を描く上部壁（１６）と、連続するアセンブリーとして、ナノチューブの内部チャンネルを介して接続する複数の循環チャンネル（７ａ、７ｂ）と複数の付加循環チャンネル（１７ａ、１７ｂ、１７ｃ）と、を備える、ことを特徴とする請求項３から６のいずれか１つに記載の装置。
【請求項１０】
少なくとも１つのナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）は、電気伝導材料（９）によって少なくとも部分的に覆われることを特徴とする請求項１から９のいずれか１つに記載の装置。
【請求項１１】
分離装置（１）の製造方法であって、前記分離装置は、少なくとも１つの分子を、分離される前記分子と、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きい流体力学直径を有する付加分子の少なくとも１つと、を含む液体サンプルから、分離するものであり、前記製造方法は、以下の連続するステップである、
−少なくとも１つのナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）の制御形成であって、
前記ナノチューブは分離される前記分子と関係付けられており、前記制御形成は基板（２）の自由表面（２ａ）の上での形成であり、前記基板（２）は、化学薬品の作用によって分解可能な材料から形成されており、
前記ナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）は、所定の有効直径(ｄｅ)を有する内部チャンネル（４、４ａ、４ｂ、４ｃ、１２、１２ａ、１２ｂ、１３）を備え、
前記有効直径（ｄｅ）は、分離しようとする前記分子の流体力学直径よりも大きく、且つ、前記付加分子の流体力学直径よりも小さい、
少なくとも１つのナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）の制御形成と、
−前記基板（２）の前記自由表面（２ａ）の上と、前記ナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）の前記自由表面の上と、への、化学薬品に対して不浸透性である材料の薄層（８）の形成と、
−前記ナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）の前記内部チャンネル（４、４ａ、４ｂ、４ｃ、１２、１２ａ、１２ｂ、１３）への前記化学薬品の導入、及び、前記基板（２）の所定領域の選択的分解、による、循環チャンネル（７）の形成と、
を備えることを特徴とする方法。
【請求項１２】
前記基板（２）は酸化シリコンから形成されており、前記化学薬品はフッ酸である、ことを特徴とする請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）の制御形成は、前記基板（２）の前記自由表面（２ａ）の上に、前記内部チャンネル（４、４ａ、４ｂ、４ｃ、１２、１２ａ、１２ｂ、１３）の前記有効直径(ｄｅ)に比例する所定の直径（Ｄ）を有する触媒のドロップ（５）の形成と、
化学気相成長法、又は、プラズマ化学気相成長法によって、前記ドロップ（５）からの前記ナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）の成長を行わせることと、
によって行われる、ことを特徴とする請求項１１又は１２に記載の方法。
【請求項１４】
化学機械平坦化工程は、前記化学薬品が前記内部チャンネル（４、４ａ、４ｂ、４ｃ、１２、１２ａ、１２ｂ、１３）に導入される前に実施されることを特徴とする請求項８から１０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１】
少なくとも１つの分子を、分離される前記分子と、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きい流体力学直径を有する付加分子の少なくとも１つと、を含む液体サンプルから、分離する分離装置（１）であって、
−基板（２）と、
−前記基板（２）に配置される少なくとも１つの循環チャンネル（７）と、
−少なくとも１つのナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）であって、
前記ナノチューブは、分離される前記分子と関係付けられており、且つ、前記基板（２）の自由表面（２ａ）の上に形成されており、
前記ナノチューブは、内部チャンネル（４、４ａ、４ｂ、４ｃ、１２、１２ａ、１２ｂ、１３）を備え、且つ、前記循環チャンネル（７）に対して開いており、且つ、所定の有効直径（ｄｅ）を有しており、
前記所定の有効直径（ｄｅ）は、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きく、且つ、前記付加分子の流体力学直径よりも小さいものである、
少なくとも１つのナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）と、
を備えることを特徴とする分離装置。
【請求項２】
前記ナノチューブ（３）は、炭素、ＴｉＯ２、ＢＮ、ＭｏＳ、ＷＳ、ＣｕＳ、ＮｉＣｌ２、ＣｄＣｌ、ＣｄＩ、ＡｓＳ、ＡｌＳｉＧｅＯ及び酸化金属から選択される材料から形成されたナノチューブである、ことを特徴とする請求項１に記載の装置。
【請求項３】
前記基板（２）の前記自由表面（２ａ）の上に形成され、且つ、分離される複数の特定の分子とそれぞれが関係付けられている、複数のナノチューブ（３、１０、１１）を備え、前記ナノチューブの前記内部チャンネル（４、１２、１３）が、前記循環チャンネル（７）の中の前記液体サンプルの流れの軸に沿って、前記内部チャンネルの有効直径（ｄｅ）に従って順番が増加するように配置されている、ことを特徴とする請求項１又は２に記載の装置。
【請求項４】
ナノチューブ（３ａ、３ｂ、３ｃ及び１０ａ、１０ｂ）のシリーズの少なくとも１つを備え、前記ナノチューブは、分離される前記分子と関係付けられる同一の有効直径である内部チャンネル（４ａ、４ｂ、４ｃ及び１２ａ、１２ｂ）を備える、ことを特徴とする請求項１又は２に記載の装置。
【請求項５】
ナノチューブ（３ａ、３ｂ、３ｃ及び１０ａ、１０ｂ）の前記シリーズは、外部溝（１４）の輪郭を描く側壁（１５）の間に配置されることを特徴とする請求項４に記載の装置。
【請求項６】
ナノチューブの前記シリーズの内部直径は、前記対応する外部溝（１４）の前記側壁（１５）を隔てる距離まで伸びることを特徴とする請求項５に記載の装置。
【請求項７】
前記内部チャンネル（４、１２、１３）のそれぞれは、１つの同じ前記循環チャンネル（７）に対して開く孔を備えることを特徴とする請求項３から６のいずれか１つに記載の装置。
【請求項８】
ナノチューブ（３ａ、３ｂ、３ｃ及び１０ａ、１０ｂ）の複数のシリーズを備え、前記シリーズのそれぞれは、分離される複数の特定の分子と関係付けられており、且つ、前記循環チャンネル（７）の中の前記液体サンプルの流れの軸に沿って、それらの有効直径（ｄｅ）に従って順番が増加するように配置されている、ことを特徴とする請求項４から７のいずれか１つに記載の装置。
【請求項９】
前記側壁（１５）によって付加循環チャンネル（１７）の輪郭を描く上部壁（１６）と、連続するアセンブリーとして、ナノチューブの内部チャンネルを介して接続する複数の循環チャンネル（７ａ、７ｂ）と複数の付加循環チャンネル（１７ａ、１７ｂ、１７ｃ）と、を備える、ことを特徴とする請求項３から６のいずれか１つに記載の装置。
【請求項１０】
少なくとも１つのナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）は、電気伝導材料（９）によって少なくとも部分的に覆われることを特徴とする請求項１から９のいずれか１つに記載の装置。
【請求項１１】
分離装置（１）の製造方法であって、前記分離装置は、少なくとも１つの分子を、分離される前記分子と、分離される前記分子の流体力学直径よりも大きい流体力学直径を有する付加分子の少なくとも１つと、を含む液体サンプルから、分離するものであり、前記製造方法は、以下の連続するステップである、
−少なくとも１つのナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）の制御形成であって、
前記ナノチューブは分離される前記分子と関係付けられており、前記制御形成は基板（２）の自由表面（２ａ）の上での形成であり、前記基板（２）は、化学薬品の作用によって分解可能な材料から形成されており、
前記ナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）は、所定の有効直径(ｄｅ)を有する内部チャンネル（４、４ａ、４ｂ、４ｃ、１２、１２ａ、１２ｂ、１３）を備え、
前記有効直径（ｄｅ）は、分離しようとする前記分子の流体力学直径よりも大きく、且つ、前記付加分子の流体力学直径よりも小さい、
少なくとも１つのナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）の制御形成と、
−前記基板（２）の前記自由表面（２ａ）の上と、前記ナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）の前記自由表面の上と、への、化学薬品に対して不浸透性である材料の薄層（８）の形成と、
−前記ナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）の前記内部チャンネル（４、４ａ、４ｂ、４ｃ、１２、１２ａ、１２ｂ、１３）への前記化学薬品の導入、及び、前記基板（２）の所定領域の選択的分解、による、循環チャンネル（７）の形成と、
を備えることを特徴とする方法。
【請求項１２】
前記基板（２）は酸化シリコンから形成されており、前記化学薬品はフッ酸である、ことを特徴とする請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）の制御形成は、前記基板（２）の前記自由表面（２ａ）の上に、前記内部チャンネル（４、４ａ、４ｂ、４ｃ、１２、１２ａ、１２ｂ、１３）の前記有効直径(ｄｅ)に比例する所定の直径（Ｄ）を有する触媒のドロップ（５）の形成と、
化学気相成長法、又は、プラズマ化学気相成長法によって、前記ドロップ（５）からの前記ナノチューブ（３、３ａ、３ｂ、３ｃ、１０、１０ａ、１０ｂ、１２）の成長を行わせることと、
によって行われる、ことを特徴とする請求項１１又は１２に記載の方法。
【請求項１４】
化学機械平坦化工程は、前記化学薬品が前記内部チャンネル（４、４ａ、４ｂ、４ｃ、１２、１２ａ、１２ｂ、１３）に導入される前に実施されることを特徴とする請求項８から１０のいずれか１つに記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【公開番号】特開２００９−２９１７７７（Ｐ２００９−２９１７７７Ａ）
【公開日】平成２１年１２月１７日（２００９．１２．１７）
【国際特許分類】
【外国語出願】
【出願番号】特願２００９−４８２５３（Ｐ２００９−４８２５３）
【出願日】平成２１年３月２日（２００９．３．２）
【出願人】（５０２１４２３２３）コミサリア、ア、レネルジ、アトミク (195)
【氏名又は名称原語表記】ＣＯＭＭＩＳＳＡＲＩＡＴ Ａ Ｌ’ＥＮＥＲＧＩＥ ＡＴＯＭＩＱＵＥ
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２１年１２月１７日（２００９．１２．１７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−４８２５３（Ｐ２００９−４８２５３）
【出願日】平成２１年３月２日（２００９．３．２）
【出願人】（５０２１４２３２３）コミサリア、ア、レネルジ、アトミク (195)
【氏名又は名称原語表記】ＣＯＭＭＩＳＳＡＲＩＡＴ Ａ Ｌ’ＥＮＥＲＧＩＥ ＡＴＯＭＩＱＵＥ
【Ｆターム（参考）】
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