外傷治療
本発明は、外傷後に身体に、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む組成物を投与することによって、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害を低減する方法を提供する。また、（ｉ）および（ｉｉ）を含む、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害を低減する組成物を提供する。組成物は、二価マグネシウムカチオンを含んでもよいし、かつ／または高張性であってもよい。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害、例えば、ショック、卒中、心臓状態に起因する細胞、組織または臓器の傷害または外傷の結果として生じ得るその他の傷害を低減する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
西欧諸国では、多数の死が突然に、予想外に、特に、外傷の結果として起こる。医学的に、「外傷」とは、蘇生治療を必要とする場合もある、重篤なまたは決定的な肉体的傷害、創傷またはショックを指す。外傷は、病院で（例えば、病院の救急治療室で）、緊急輸送環境で（例えば、救急車で）または外傷が生じた病院外環境、例えば、家庭内もしくは産業事故、輸送事故、戦場およびテロリストの攻撃で施される外傷薬と関連することが多い。
【０００３】
外傷は、子供および年齢３４歳までのすべての個体の間の第１位の死因であり、高齢の集団では主な死亡原因であり、生産性生存年数の喪失をもたらし、相当な社会的費用を伴う。これは、火傷、心臓発作、脳卒中およびその他の心血管イベントに起因する死亡を含む。死亡はまた、ショックまたは外傷の結果として起こり得るその他の合併症に起因する場合もある。
【０００４】
これらの意識不明の外傷患者の３％未満しか、許容される結果に進まない。多数の生存者は、３ヶ月後に施設でのケアを必要とし、かなりの集団が回復不能な障害が残ったままとなる。戦場で損傷を受けた兵士の約２０％が死亡し、死亡の９０％は、緊急輸送の間のショックのために病院に到達する前に起こる。より最近の統計値は、治療可能である可能性のある戦闘傷害での死亡の５０％は、急性失血によるものであり、このために戦場での第１位の死因となるということを示唆する。
【０００５】
ショックは、組織酸素化の減少および酸素負債の蓄積を引き起こす循環機能不全であり、未治療のままである場合、最終的に、多臓器システム不全をもたらし得る。小児および成人外傷患者の両方におけるショックの最も一般的な形は、出血性または血液量減少性ショック（十分でない血液容量）である。心原性ショック（心臓による十分でない血液の拍出量、以下参照）も、ショックの一般的な形である。失血の結果としてのショックは、外傷のよくある合併症である。外傷死の約半数が、心肺および脳機能の著しい不全からの傷害後、最初の１時間の間に起こる。ショックの徴候や症状として、低血圧（低血圧症）、過呼吸（過換気）、弱い速い脈拍、寒冷な灰白色の−青みを帯びた（チアノーゼ）皮膚、尿流量の減少（乏尿）および精神的変化（大きな不安および嫌な予感、錯乱および時には、闘争的なことという感覚）が挙げられる。血液が失われると、最大のすぐに必要なことは、失われた容量を、血液または血液容積増量剤で補充することである。血液容積が、容積増量剤によって維持される場合には、外傷患者は、極めて低い血液ヘモグロビンレベル、健常な人の１／３未満を安全に許容し得る。
【０００６】
外傷の際、重要な臓器および組織の電気特性は維持されることができない。静止細胞電圧の降下が、外傷の間に起こり、多臓器不全および死亡につながり得る、心臓における高度に有害な不整脈および全身炎症の活性化、凝固性およびフリーラジカル生成プロセスの誘発につながり得る。激しい出血の際、患者は、平均動脈灌流圧が、約４０ｍｍＨｇに低下し、脈拍が大動脈で、もはや触知できないと、意識不明となる。呼吸が停止すると、脈拍はもはや触知できず、心停止が考えられる。大量の失血から脈欠損となり、救急診療部開胸術を受ける外傷患者の死亡率は、約９７％である。
【０００７】
ショックの１つの形は、「心原性ショック」と呼ばれる。これは、例えば、心臓筋肉の損傷（大きな心筋梗塞（心臓発作）に起因し得るような、心臓筋肉の障害（破裂を含む）、電気的緊張−弛緩（または伝導）システムの乱れおよびタンポナーデによる心臓が効率的にポンピングすることの不全によって引き起こされ得る。心原性ショックはまた、不整脈（例えば、心室性頻脈および心室細動）、心筋症、心臓弁の問題、心室流出障害などによって引き起こされ得る。心原性ショックは、患者の生命を救うため即時の治療を必要とする医学的な緊急事態である。
【０００８】
心原性ショックの１つの原因は、いわゆる「心臓発作」である。この用語は、心筋の壊死につながる、心臓虚血（通常、冠動脈の閉塞によって引き起こされる）につながるいくつかの異なる状態を指すよう用いられる。この筋肉の壊死は、胸痛および心筋組織の電気的不安定性を引き起こす。この電気的不安定性は、「心室性頻拍」および「心室細動」として現れ得る。心室性頻拍は、心室性異所性焦点に起因するタキージスリズミア（ｔａｃｈｙｄｙｓｒｈｙｔｈｍｉａ）であり、通常、１分あたり１２０拍動を超える速度を特徴とし、心室細動に急速に悪化し得るので、発病または死亡を避けるために迅速に治療されなければならない。心室細動は、心室の無秩序な電気的撹乱があり、その結果、もはや規則的に拍動せず、血液を効率よく送り出すことがなく、単に振動している状態である。心室細動の間、心筋は、酸素の供給不足によって、または特定の心臓病によって影響を受け、心室は、混乱した方法で、心房と無関係に収縮し、心室のいくつかの領域が収縮する一方で、他は弛緩している。心室細動は、広範囲の虚血につながる。直ちに治療されない限り、心室細動は、死亡を引き起こし、心臓に問題のある人における突然死の７５％〜８５％を占める。ＵＳＡ単独で、年に約４５０，０００の突然死があり、英国では、年に約７０，０００〜９０，０００の突然死がある。したがって、心室性頻拍および心室細動は、医学的な緊急事態であるが、これは、それらが数秒を超えて持続する場合、血液循環が停止し、脈拍、血圧、呼吸がなくなり、死亡が生じる。通常、この時点で薬剤および処置は、心臓のリズムを安定化することに向けられ、測定可能な脈拍のない意識不明の被験体の場合には、心臓を再開することによって被験体を蘇生し、気道を広げ、自発呼吸を回復させる。アミオダロンを用いて命にかかわる心臓不整脈を治療できるが、この薬物は、心律動異常および心停止自体を引き起こすことをはじめとする、重篤な副作用を有し得る。アミオダロンのその他の副作用として、肺浸潤、神経障害、振戦、甲状腺障害、悪心、低血圧および肝臓損傷が挙げられる。したがって、これらの緊急事態において、心臓を安定化するためまたは心臓を再開させるためおよび自発的循環を回復させるために有効な薬剤は、極めて限定されるか、または存在しない。ノルアドレナリンまたはアドレナリン（バソプレシンを伴うか伴わない）は、心肺蘇生とともに使用できるが、エピネフリンは、心臓収縮を増悪させ、心室細動の間の心筋酸素消費を増大することによって、ならびに微小血管障害を誘発することによって心臓機能不全を促進する場合がある。心室性頻拍または心室細動後に心臓を安定化することにおいて治療が成功する場合には、酸素（呼吸を助けるため利用可能である場合には）、β−遮断薬（心臓を弛緩させるのに役立つ）、血管拡張薬（心臓により多くの血液を送達するのに役立つ）、血液剤（抗凝固剤、抗血小板剤、血栓溶解剤など）および鎮痛剤など、いくつかの薬剤を投与する。心臓並びにその他の組織および臓器を治療する２、３の薬物は別として、薬剤は、特異的に心臓組織を治療するためには向けられない。不全の心筋自体のための有効な薬剤治療はなく、よく起こる心室細動のためのものもない。治療される場合には、通常、電気ショック（電気的除細動）によって治療される。
【０００９】
心臓の損傷はまた、再灌流時に引き起こされ得る。再潅流損傷の一例は、心臓が「機能不全に」なる場合である。この状態では、血流は回復されるが、心臓は異常に機能しており、治療されない場合には、さらなる心臓発作（例えば、心室細動）をもたらし得る。心臓蘇生は、心臓の再潅流を必然的に含み、結果として起こる、特に、心筋への再灌流傷害と関連している危険を伴う。筋肉細胞が壊死する場所は、梗塞と考えられる。約１５〜２０分という短期間のうちに細胞への血流が回復されている場合は、細胞は再潅流に反応し、生存することができる（したがって、梗塞を形成しない）が、再灌流の間、正常に機能せず、その通常の機能を実施しないという意味で「機能不全」であり得る。
【００１０】
蘇生を乗り切り、最初のイベントがあまり外傷性でない可能性がある患者では、依然として、全身および局所炎症および免疫活性化とそれに続く多臓器機能不全および不全の相当な危険性がある。多臓器不全は、過剰の自己破壊性全身炎症および免疫学的機能の結果であると考えられており、これでは、低酸素血症、組織低酸素症／生育不能組織、微生物／毒素および抗原／抗体複合体が関与している可能性がある。特に、いくつかの液性系（例えば、補体、凝固）および細胞系（内皮活性化、好中球、血小板、マクロファージ）の活性化が、関与していると考えられている。好中球は、肺、心臓、腎臓、肝臓および消化管の傷害において重要な役割を果たしており、大外傷後に見られることが多い。結果として、多数の媒介物質（毒性酸素種、タンパク質分解酵素、接着分子、サイトカイン）の合成、発現および放出があり、これが、身体における全身性炎症および組織損傷を引き起こし得る。
【００１１】
重篤な中核体温もまた、これらの外傷後続発性合併症の多くを増悪させ得る。３４℃を下回ると、死亡率が大幅に高まる。これにもかかわらず、何人もの研究者が、計画的な低体温の有益な効果を示唆しているが、これは、これが、低酸素性臓器機能不全および炎症反応の開始を防ぐことによって外傷犠牲者の「ゴールデンアワー」を延長し得るからである。臓器不全はまた、大手術後の術後期における死因の第１位である。大手術後の過剰炎症反応と、それに続く、細胞性免疫の劇的な低下は、その後の敗血症に対する感受性の増大の原因であると思われる。
【００１２】
蘇生治療は、通常、突然の命にかかわる疾病または外傷性傷害、例えば、心停止、呼吸不全、出血性失血、神経損傷および軟部組織および身体骨格の外傷性損傷に由来するものの状態の管理を改善する任意の処置と考えられる。通常、蘇生治療は、全身体酸素欠乏の治療を扱う。そのようなものとして、現在の蘇生戦略は、組織供給および需要比率を最適化することおよび出血、肺の浮腫および脳傷害後の頭蓋内高血圧症を悪化させる、過度に攻撃的な量補充の合併症を避けることを目的としている。
【００１３】
蘇生治療は、限局された「大きな心臓発作」または限局された「大きな卒中」の治療とは極めて異なっている。あまり理解されていない作用による、複数の臓器−組織反応間の複雑な相互作用を含み、このために、この科学は、特定の臓器または組織を保存するための治療とは分かれている。蘇生は、多くの相互作用を伴う複雑な生物系を含むと知られている。これらは、個々の構成要素の研究からは予測できない。傷害を受けた臓器は、その他の臓器に対する続発性効果を有し、これが全身に影響を及ぼし、衰弱性傷害および死亡につながり得る。
【００１４】
現在の治療は、晶液またはコロイドのいずれかであり得る補液又は量補充を含む。晶液は、蘇生治療によく用いられるが、これはそれらが安全であり、凝固の負の副作用を伴うものの役立つと思われるからである。晶液は、凝固を増大させることがわかり、効果は、用いた晶液の種類とは無関係であると思われる。晶液導入性過凝固状態は、天然に存在する抗凝固薬と、活性化された凝血原との間の不均衡によると思われる。量補充に用いられる晶液は、３つの主要な種類があり得る：１）低張性（例えば、水中デキストロース）、２）等張性（通常の生理食塩水または乳酸塩もしくは酢酸塩を含むリンガー溶液）あるいは３）高張性（例えば、７．５％生理食塩水）。晶液は、血管膜を自由に透過できるので、約２５％のみが血液コンパートメント中に残り、残りは身体の間質性コンパートメントおよび／または細胞内コンパートメント中にあり、組織浮腫を引き起こす。したがって、晶液蘇生は、コロイドベースの量補充戦略と比較して、微小循環性血流の適当な回復を達成する可能性が低い。
【００１５】
コロイド補充治療は、この目的には、人工コロイドとして、デキストラン−７０、デキストラン−４０、ヒドロキシエチルデンプン、ペンタスターチ、ラクトビオン酸、スクロース、マンニトールおよび修正ゼラチン（ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｆｌｕｉｄ ｇｅｌａｔｉｎｅ）などのコロイドを用いる。量補充のために最も適当な溶液については、多くの議論がある。
【００１６】
現在、戦場での兵士における、または自然災害現場での一般人またはテロリストの攻撃から傷害を受けた一般人における、重篤な出血性ショックを治療するための最適な液体組成物または液体蘇生計画はない。実際、承認された蘇生液の大部分は、内因性の組織保護はなく、蘇生結果に負に影響を及ぼす、命にかかわる炎症および過凝固性不均衡を誘発し得る。特に、軍隊のための新規製剤および蘇生治療の設計におけるさらなる挑戦は、その安全性および長期の避難後の負傷兵の生存時間を増大するための臨床有効性を保証するにもかかわらず、戦闘条件自体によって課せられる兵站学的考慮、例えば、重量および輸送の実行可能性、配置の容易さ、低光量環境での投与および野外での薬物の安定性によって阻まれている。
【００１７】
戦争では、銃弾および爆発する軍需品からの貫通性のある破片が命にかかわる出血を引き起こすことが多い。急性出血が、戦場傷害の死因の第１位であり、治療可能である可能性がある戦闘による負傷者における死亡の５０％を占める。戦場での１つの主要な満たされていない医学的必要性は、出血の制御が可能である前の重篤な出血の間の心臓の不安定化および停止をどのように防ぐかである。ショックの前に心臓および循環不足を安定化することは、最も重要である。心停止の治療の成功には、電気的に安定な、機械的に生存可能な心臓が再確立されることが必要である。現在、出血性ショックの前に細動および停止から心臓を安定化および保護する臨床上有効な方法はない。実際、心臓を洞調律に変えるために用いられる多数の薬理学的介入は、残念ながら、さらなる傷害を与え、心臓の蘇生可能性を危険にさらし得る。
【００１８】
心臓が不安定化されておらず、停止している、重篤な外傷性出血性症例では、血液量、血圧および臓器灌流の喪失が、重篤な臓器虚血および最終的には、多臓器機能不全および不全（ＭＯＦ）および死亡につながり得る。ＭＯＦは、ショック（出血性／外傷性）および蘇生に続発する死因の第１位であり、肺、腎臓、腸管、膵臓、肝臓、脳および心臓に関与する。ＭＯＦが、エンドポイント自体ではないが、圧倒的な自己破壊性の、局所および全身性炎症反応および免疫学的機能にかかわるプロセスであることは重要である。数十年の研究にもかかわらず、蘇生液は、組織灌流を回復させるが、特異的抗炎症性免疫抑制を有さず、生存促進特性も有さない。ショック導入性炎症反応の活性化は、ショック自体の間、初期晶液またはコロイドベースの蘇生治療の間、および血液補充を含む最終蘇生努力の間に起こることが重要である。
【００１９】
外傷に由来する傷害からの保護が、人工冬眠の形によって誘発され得るかどうかはわかっていない。生まれながらの冬眠動物は、数日から数ヶ月間その代謝エネルギー需要を低下する能力を有する。冬眠は、睡眠同様、休止状態の一形態であり、動物の代謝供給および需要の比率を適度なバランスに保つのに役立つ。これらの長期の「虚血」状態の間に損傷が起こらず、心臓のリズムが心室細動へと悪化しないことは際立っている。しかし、実質的に命を救う、または傷害を最小限にする可能性にもかかわらず、ヒト、特に、外傷患者において、同様の反応を刺激する既知法はない。
【００２０】
特許文献１、特許文献２および特許文献３には、医療処置に先立つ臨床設定において投与することによって、細胞、組織または臓器の損傷を限定するのに有用な組成物が記載されている。これらの組成物はまた、通常、患者の診断後に、直接、細胞、組織または臓器に投与される。しかし、患者が病院に到着する、および／または病院にいる、例えば、実質的な医学的配慮が利用可能である、または状態が診断され得る前に、細胞、組織または臓器に多くの損傷または傷害が生じる場合がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２１】
【特許文献１】国際公開第００／５６１４５号パンフレット
【特許文献２】国際公開第０４／０５６１８０号パンフレット
【特許文献３】国際公開第０４／０５６１８１号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２２】
本発明は、先行技術の１以上の困難および欠陥を克服すること、または少なくとも多少とも解決することを対象とする。
【課題を解決するための手段】
【００２３】
一態様では、本発明は、外傷後に身体に、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む組成物を投与することによって、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害を低減する方法を対象とする。
【００２４】
この態様によれば、成分（ｉ）および（ｉｉ）を含むさらなる組成物を、組成物の投与後に身体に投与してもよい。
【００２５】
どちらの組成物も、マグネシウムカチオン（二価）を含んでもよいし、および／または高張性であってもよい。
【００２６】
もう１つの態様では、本発明は、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害を低減するための組成物を対象とする。この態様の一実施形態では、組成物は、二価マグネシウムカチオンを含んでもよいし、かつ／または高張性であってもよい。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１Ａ】（Ａ）出血性ショックの前、（Ｂ）ショックの間および（Ｃ）ラットの心臓への直接の０．５ｍｌのアデノシン／リグノカイン溶液のボーラス投与後のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１Ｂ】（Ａ）出血性ショックの前、（Ｂ）ショックの間および（Ｃ）ラットの心臓への直接の０．５ｍｌのアデノシン／リグノカイン溶液のボーラス投与後のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１Ｃ】（Ａ）出血性ショックの前、（Ｂ）ショックの間および（Ｃ）ラットの心臓への直接の０．５ｍｌのアデノシン／リグノカイン溶液のボーラス投与後のＥＣＧトレースを示す図である。
【図２Ａ】（Ａ）出血性ショックの間およびラットの心臓へ直接アデノシン／リグノカイン溶液を注射した後の、および（Ｂ）注射後１０秒の、図１からのラット心臓のＥＣＧトレースより詳細に示す図である。溶液の注射時間は、矢印（Ｉ）によって示されている。矢印（ＩＩ）は、さらなる治療が必要であり得ると提案される時点を表す。
【図２Ｂ】（Ａ）出血性ショックの間およびラットの心臓へ直接アデノシン／リグノカイン溶液を注射した後の、および（Ｂ）注射後１０秒の、図１からのラット心臓のＥＣＧトレースより詳細に示す図である。溶液の注射時間は、矢印（Ｉ）によって示されている。矢印（ＩＩ）は、さらなる治療が必要であり得ると提案される時点を表す。
【図３】出血性ショックの開始に先立つ正常ラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図４】「ショック期間」の開始に先立つ出血期間の最後でのラットのＥＣＧトレースを示す図である。
【図５】６０分のショック期間の最後でのラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図６】１２０分のショック期間の最後でのラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図７】３時間のショック期間の最後でのラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図８】ＡＬＭ（アデノシン；リグノカイン；マグネシウム）のボーラス投与の１０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図９】ＡＬＭのボーラス投与の３０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１０】ＡＬＭのボーラス投与の６０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である
【図１１】ＡＬＭのボーラス投与の９０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１２Ａ】（Ａ）出血性ショックの前の（４５％失血）；（Ｂ）出血性ショックおよびアデノシン／リグノカイン蘇生液の静脈内投与の６０分後（Ｃ）出血性ショックおよびアデノシン／リグノカイン蘇生液の静脈内投与の１８０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１２Ｂ】（Ａ）出血性ショックの前の（４５％失血）；（Ｂ）出血性ショックおよびアデノシン／リグノカイン蘇生液の静脈内投与の６０分後（Ｃ）出血性ショックおよびアデノシン／リグノカイン蘇生液の静脈内投与の１８０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１２Ｃ】（Ａ）出血性ショックの前の（４５％失血）；（Ｂ）出血性ショックおよびアデノシン／リグノカイン蘇生液の静脈内投与の６０分後（Ｃ）出血性ショックおよびアデノシン／リグノカイン蘇生液の静脈内投与の１８０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１３Ａ】出血性ショック後（Ａ）０．５ｍｌの７．５％生理食塩水の投与後（Ｂ）０．５ｍｌのアデノシン／リグノカイン蘇生液の投与後の図１２からのラット心臓のＥＣＧモニタリングをより詳細に示す図である。
【図１３Ｂ】出血性ショック後（Ａ）０．５ｍｌの７．５％生理食塩水の投与後（Ｂ）０．５ｍｌのアデノシン／リグノカイン蘇生液の投与後の図１２からのラット心臓のＥＣＧモニタリングをより詳細に示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明は、病院、緊急輸送および病院外環境における外傷犠牲者のための改善された蘇生治療を対象とする。特に、本発明は、火傷、ショック、卒中、心臓発作またはその他の身体的事象に起因して、細胞、組織または臓器に傷害を受けている人の命にかかわる合併症、例えば、手術または臨床的介入に起因する、外傷の結果としての合併症を最小限にするために適用される。戦場での負傷兵または自然災害現場での一般人またはテロリストの攻撃から傷害を受けた一般人は、このような治療が有用であり得る状況である。
【００２９】
本発明は、心臓および脳などの重要な臓器、その他の神経組織および細胞、腎組織、肺組織、筋肉組織、肝臓および身体のその他の組織の保護、保存または安定化のために適用される。
【００３０】
一形態では、本発明は、外傷後に身体に、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む組成物を投与することによって、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害を低減する方法を提供する。
【００３１】
本発明のもう１つの形態では、本発明は、頻脈および／または細動の治療を対象とする。一形態では、本発明は、心房または心室起源の心臓不整脈、とりわけ、心室細動を治療する。心室細動および不整脈を含む頻脈および／または細動の治療は、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む組成物を、心臓を停止するのに有効な量で投与することを含む。一実施形態では、投与される量は、心臓を一瞬のみ停止するのに有効である。これは、正常なリズムへの心臓カルディオコンバーティング（ｃａｒｄｉｏｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ）を促進するのに十分であることが多い。１つの代替実施形態では、投与される量は、数回の拍動の期間、心臓の拍動を実質的にダウンレギュレートし、その後、心臓がその通常のリズムを回復するのを可能にするのに有効である。したがって、本発明はまた、頻脈および／または細動を治療する方法に及ぶ。組成物は、ボーラスとして投与されることが好ましい。組成物の投与は、頻脈および／または細動を鎮め、心臓が正常な望ましい洞調律に心変換するのを可能にすると考えられている。
【００３２】
好ましい実施形態では、本発明は、続いて、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む第２の組成物を、心臓を停止するのに有効な量未満で投与するさらなるステップを含む。第２の組成物の目的は、心臓およびその他の組織、例えば、脳、肝臓、肺および腎臓を保護することまたはそうするよう補助することである。特に、この実施形態は、再潅流傷害またはスタンニングを低減することを対象とする。上記で概説されるように、再潅流傷害は、頻脈性／細動性心臓を正常な、望ましい洞調律に上手く変換する際のよくある有害な出来事である。好ましい実施形態では、第２の組成物は、別の非停止性ボーラス注射として投与されるか、または点滴によって、もしくは別の送達装置もしくは経路によって連続的に送達される。
【００３３】
いずれかの理論または作用様式に拘束されるものではないが、本発明者は、本発明の組成物を用いて、身体を、事実上、生まれながらの冬眠動物のような停止した活気の状態に向けておくことまたは診断の前にもしくは外傷犠牲者に適した医学的な配慮が提供され得るまで身体を安定化することができるということを見い出した。本発明の治療によって提供される全般的な保護は、膜興奮性の調節から多数の細胞内シグナル伝達経路、例えば、熱ショックおよび生存促進キナーゼ経路まで重層的な系を含むと考えられる。主要な焦点は、脳、心臓および肺への損傷を低減することであるが、これはこのことが、回復および臨床転帰の改善と関連があるためである。それにもかかわらず、身体中の損傷を、非特異的方法で低減する広く作用するアプローチが望ましい。本発明の組成物の提案される機序は、（ｉ）ストレスが与えられた場合に細胞の電圧を守るのに役立ち得る、細胞におけるイオン不均衡、特に、ナトリウムおよびカルシウムイオン負荷の低減；（ｉｉ）自身において保護的であり、傷害を低減し、ならびにラジカル生成などの続発性効果を低減する、傷害に対する局所および全身炎症反応の減弱；（ｉｉｉ）過凝固状態へ入ることからの保護、すなわち、抗凝固または抗血栓溶解活性を含む。さらに、心臓に関しては、本発明は同時に、ギャップ結合による伝達の調節を含み得る、代謝要求への電気伝導の心房性および心室性整合の改善を、脳に関しては脳機能の改善を提供すると考えられている。本組成物は身体の酸素の要求を、種々の程度に低減し、したがって、身体の細胞、組織または臓器の損傷を低減し得るとも考えられている。別の形態では、本発明は、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害を低減するための組成物を提供する。本組成物は、以下の同定されるその他の成分をさらに含み得る。いくつかの実施形態では、カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストが、カルシウムチャネル遮断薬などの別の成分と置き換えられる。本組成物は、傷害を低減するための単回用量のために、有効量の（ｉ）および（ｉｉ）を含むことが好ましい。
【００３４】
さらに驚くべきことに、心室細動を起こしている被験体への停止濃度または停止濃度付近の成分（ｉ）および（ｉｉ）を含む組成物の投与は、心臓が、電気ショック治療を必要とせず、正常な洞調律を回復するのを補助することが観察された。
【００３５】
また、本発明を用いて、血管造影図検査または運動試験の間、またはそれらに先立って、心室細動を含む不整脈を治療または阻害できる。同様に、負傷患者の緊急輸送の間に、また現場緊急治療のために（すなわち、空港、競技場、病院、戦場または災害現場などの傷害または心臓発作の現場で）適用される。また、血管形成術、心臓カテーテル処置またはペースメーカーもしくはリードもしくは装置の挿入などの冠動脈インターベンションの前、最中、および／または後に、あるいは小児もしくは成人心臓手術、股関節手術、膝の手術、血管の手術もしくは脳の手術、大動脈解離、頚動脈内膜剥離術または一般外科手術を含む手術のためにも使用できる。
【００３６】
上記および下記の本発明の実施形態では、組成物の成分（ｉ）は、アデノシン受容体アゴニストであり得る。これは明らかに、アデノシン自体を含みながら、「アデノシン受容体アゴニスト」は内因性アデノシンレベルを高める効果を有する化合物によって置換されてもよいし、または補充されてもよい。これは、化合物が、体内の局所環境において内因性アデノシンレベルを上げる場合には、特に望ましい。内因性アデノシンを上げる効果は、アデノシンの細胞輸送を阻害し、ひいては、循環から除去するか、そうでなければ、その代謝を遅延し、その半減期を効率的に延長する化合物（例えば、ジピリダモール）および／または内因性アデノシン産生を刺激する化合物、例えば、プリンヌクレオシド類似体アカデシン（商標）またはＡＩＣＡ−リボシド（５−アミノ−４−イミダゾールカルボキサミドリボヌクレオシド）によって達成され得る。アカデシンはまた、アデノシンデアミナーゼの競合阻害剤でもある（ウシ腸管粘膜において、Ｋｉ＝３６２マイクロモル）。アカデシン（商標）は、約５０マイクロＭ（μＭ）の血漿濃度を生じるよう投与されることが望ましいが、１マイクロＭ〜１ｍＭの範囲であり得、２０〜２００μＭがより好ましい。アカデシン（商標）は、１０、２５、５０および１００ｍｇ／体重１ｋｇの用量で、経口的に投与される用量および／または静脈内投与からヒトにおいて安全であることがわかっている。
【００３７】
本発明の一形態では、組成物、および場合により第２の組成物はまた、二価のマグネシウムカチオンを含む。一実施形態では、マグネシウムの濃度は、最大約２．５ｍＭであり、もう１つの実施形態では、マグネシウムはより高い濃度、例えば、最大約２０ｍＭで存在する。マグネシウムは、生理学上および製薬上許容される塩、例えば、塩化マグネシウムおよび硫酸マグネシウムなどとして存在する。
【００３８】
もう１つの形態では、本発明の組成物は高張性である。本組成物は、７．５％のＮａＣｌを含むことが好ましい。本発明者は、ほんの小容量のこの高張性組成物をそれを必要とする被験体に投与すればよいということを見い出した。これは、本発明の組成物が、緊急の際に、または緊急輸送のために適用される場合に特に有利である。この態様によれば、医療器具一式または救急車において、ほんの少量の本発明の組成物が入手できることが必要である。したがって、本組成物は、保存および／または輸送することがより容易である。この「低容量」組成物は、補液の独特の特徴および特定の抗炎症特性、免疫抑制生存促進特性を有する。本発明のこの態様の組成物は、薬理学的に、戦場での負傷兵または都市の「災害激甚地」中の一般人のために時間を「稼ぎ」、これによって安全な避難、トリアージおよび支持療法の開始が可能となる。細胞の内部水分量を変更することによって、細胞の形または緊張度を変更する溶液の能力は、張力（ｔｏｎｉｃｉｔｙ）と呼ばれる（ｔｏｎｏ＝張力）。高張液は、身体の細胞において見られるものよりも高濃度の電解質と、したがって、身体の細胞の内側よりも相対的に少ない水をこのコンパートメントに含む。このような高張性環境では、浸透圧が、水を細胞から高張性環境へ流出させる。したがって、高張液は、高浸透圧環境を作製し、この環境における高浸透圧が、組織中の周囲の細胞と関連して、液体を、細胞からこのような系へ流れさせる。この方法であまりにも多量の水が除去されると、細胞は機能するのが困難となり得る。
【００３９】
本明細書に記載される本発明は、大部分は治療方法およびこれらの成分（ｉ）および（ｉｉ）を含有すると記載されている組成物を含む治療のための医薬の製造方法に関する。便宜上、この組成物は、本明細書において「本発明の組成物」とよばれるが、本発明の組成物である、本発明を実施する成分のいくつかの組み合わせがある。さらに、特に、ＷＯ００／５６１４５において説明されるように、成分（ｉ）および（ｉｉ）は、心臓を停止するか、停止しない濃度で存在し得る。これらの２種の組成物は、本明細書に記載される本発明において異なる方法で用いられ、それぞれ、「停止」濃度の組成物および「非停止」濃度の組成物と呼ばれる。一形態では、停止性組成物は、各々０．１ｍＭを超える（好ましくは、２０ｍＭを下回る）、アデノシンおよびリグノカインを含む。停止性組成物は、状況次第では、「心筋保護液」と呼ばれる。非停止性組成物の一形態では、アデノシンおよびリグノカインは、両方とも０．１ｍＭを下回り、好ましくは、５０ｎＭ〜９５μＭ、より好ましくは、１μＭ〜９０μＭである。
【００４０】
さらなる一形態では、本発明は、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害を低減するための医薬の調製のための（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストおよび（ｉｉ）局所麻酔薬の使用を提供する。使用は、医薬を、本明細書中、別の場所に示される１以上の方法で投与することを含むことが好ましい。
【００４１】
もう１つの形態では、本発明は、外傷後、身体を、事実上、停止した活気の、冬眠様状態に、または冬眠様状態に向けておく方法を提供する。これは、上記の組成物を投与することによって達成される。
【００４２】
用語「外傷」は、本明細書において、広い意味で用いられ、身体への重篤なまたは決定的な傷害、創傷またはショックを指す。外傷は、例えば、輸送事故または産業事故、誕生、手術、心臓発作、卒中、火傷、手術またはその他の医学的介入による合併症などの結果としての身体への予期しない肉体的損傷（または傷害）によって引き起こされ得る。外傷は、病院中または病院外両方での、身体の傷害に起因し得る。外傷は、病院で（例えば、病院の救急治療室で）、緊急輸送の間にまたは外傷が生じた病院外環境、例えば、家庭内もしくは産業事故、輸送事故、戦場およびテロリストの攻撃で施される外傷薬と関連していることが多い。多くの場合、外傷療法は、蘇生療法を含み得る。
【００４３】
本明細書において、用語「組織」とは、その広い意味で、特定の機能を発揮している身体の任意の部分、例えば、臓器および細胞またはその一部、例えば、細胞株またはオルガネラ調製物を指す。その他の例として、心臓、血管および脈管構造などの循環器、肺などの呼吸器、腎臓または膀胱などの泌尿器、胃、肝臓、膵臓または脾臓などの消化器、精巣、卵巣または子宮などの生殖器、脳などの神経学的臓器、精子または卵子などの生殖細胞および皮膚細胞、心臓細胞、すなわち、筋細胞、神経細胞、脳細胞または腎臓細胞などの体細胞が挙げられる。組織は、ヒトまたは動物ドナーに由来するものであり得る。ドナー臓器はまた、異種移植に適したものであり得る。
【００４４】
本明細書において、用語「臓器」とは、その広い意味で、組織および細胞またはその一部、例えば、内皮、上皮、血液脳関門、細胞株またはオルガネラ調製物を含む、特定の機能を発揮する身体の任意の一部を指す。その他の例として、血管、心臓などの循環器、肺などの呼吸器、腎臓または膀胱などの泌尿器、胃、肝臓、膵臓または脾臓などの消化器、陰嚢、精巣、卵巣または子宮などの生殖器、脳などの神経学的臓器、精子または卵子などの生殖細胞および皮膚細胞、心臓細胞、すなわち、筋細胞、神経細胞、脳細胞または腎臓細胞などの体細胞が挙げられる。
【００４５】
本明細書において用いられる、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」（またはその文法上の変形）は、用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」と同等であり、その他の要素または特徴の存在を排除すると受け取られてはならないということも理解されよう。
【００４６】
カリウムチャネルオープナーは、カリウムチャネルに対して、ゲートの開閉機構によってそれらを開けるよう作用する薬剤である。これは、通常、細胞の内側から外側である電気化学的勾配に沿った、膜を越えるカリウムの流出をもたらす。したがって、カリウムチャネルは、伝達物質、ホルモンまたは細胞機能を調節する薬物の作用の標的である。当然のことではあるが、カリウムチャネルオープナーは、同様にカリウムチャネルの活性を刺激し、同様の結果を伴うカリウムチャネルアゴニストを含む。また、当然のことながら、種々のカリウムチャネルを開けるまたは調節する多様なクラスの化合物があり、例えば、いくつかのチャネルは電位依存性であり、いくつかの整流性カリウムチャネルは、ＡＴＰ枯渇、アデノシンおよびオピオイドに対して感受性であり、その他のものは、脂肪酸によって活性化され、その他のチャネルは、ナトリウムおよびカルシウムなどのイオンによって調節される（すなわち、細胞ナトリウムおよびカルシウムの変化に応答するチャネル）。より最近は、２つのポアカリウムチャネルが発見され、静止膜電位の調節に関与するバックグラウンドチャネルとして機能すると考えられている。
【００４７】
カリウムチャネルオープナーは、ニコランジル、ジアゾキシド、ミノキシジル、ピナシジル、アプリカリム（ａｐｒｉｋａｌｉｍ）、クロモクリム（ｃｒｏｍｏｋｕｌｉｍ）および誘導体Ｕ−８９２３２、Ｐ−１０７５（選択的細胞膜ＫＡＴＰチャネルオープナー）、エマカリム（ｅｍａｋａｌｉｍ）、ＹＭ−９３４、（＋）−７，８−ジヒドロ−６，６−ジメチル−７−ヒドロキシ−８−（２−オキソ−１−ピペリジニル）−６Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ベンザ−２，１，３−オキサジアゾール（ＮＩＰ−１２１）、ＲＯ３１６９３０、ＲＷＪ２９００９、ＳＤＺＰＣＯ４００、リマカリム（ｒｉｍａｋａｌｉｍ）、シマカリム（ｓｙｍａｋａｌｉｍ）、ＹＭ０９９、２−（７，８−ジヒドロ−６，６−ジメチル−６Ｈ−［１，４］オキサジノ［２，３−ｆ］［２，１，３］ベンゾキサジアゾール−８−イル）ピリジン Ｎ−オキシド、９−（３−シアノフェニル）−３，４，６，７，９，１０−ヘキサヒドロ−１，８−（２Ｈ，５Ｈ）−アクリジンジオン（ＺＭ２４４０８５）、［（９Ｒ）−９−（４−フルオロ−３−１２５ヨードフェニル）−２，３，５，９−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［３，４−ｂ］チエノ［２，３−ｅ］ピリジン−８（７Ｈ）−オン−１，１−ジオキシド］（［１２５Ｉ］Ａ−３１２１１０）、（−）−Ｎ−（２−エトキシフェニル）−Ｎ’−（１，２，３−トリメチルプロピル）−２−ニトロエテン−１，１−ジアミン（Ｂａｙ Ｘ９２２８）、Ｎ−（４−ベンゾイルフェニル）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチルプロピオンアミン（ＺＤ６１６９）、ＺＤ６１６９（ＫＡＴＰオープナー）およびＺＤ０９４７（ＫＡＴＰオープナー）、ＷＡＹ−１３３５３７および新規ジヒドロピリジンカリウムチャネルオープナー、Ａ−２７８６３７からなる群から選択され得る。さらに、カリウムチャネルオープナーは、ＢＫ活性化剤（ＢＫ−オープナーまたはＢＫ（Ｃａ）タイプカリウムチャネルオープナーまたは大コンダクタンスカルシウム依存性カリウムチャネルオープナーとも呼ばれる）、例えば、ベンズイミダゾロン誘導体ＮＳ００４（５−トリフルオロメチル−１−（５−クロロ−２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−ベンズイミダゾール−２−オン）、ＮＳ１６１９（１，３−ジヒドロ−１−［２−ヒドロキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−５−（トリフルオロメチル）−２Ｈ−ベンズイミダゾール−２−オン）、ＮＳ１６０８（Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）−Ｎ’−（２−ヒドロキシ−５−クロロフェニル）尿素）、ＢＭＳ−２０４３５２、レチガビン（ＧＡＢＡアゴニストでもある）から選択できる。また中間体（例えば、ベンゾキサゾール、クロルゾキサゾンおよびゾキサゾラミン）および小コンダクタンスカルシウム依存性カリウムチャネルオープナーもある。ＫＡＴＰチャネルを開けると考えられているその他の化合物として、レボシメンダンおよび硫化水素ガス（Ｈ２Ｓ）またはＨ２Ｓ供与体（例えば、硫酸化ナトリウム、ＮａＨＳ）が挙げられる。
【００４８】
さらに、カリウムチャネルオープナーは、間接的カルシウムアンタゴニストとして作用し得る、すなわち、それらは、第３相再分極を加速することによって心臓活動電位期間を短縮し、ひいては、プラトー相を短縮することによって細胞へのカルシウム流入を低減するよう作用する。カルシウム流入の減少は、Ｌ型カルシウムチャネルが関与すると考えられているが、その他のカルシウムチャネルも関与している可能性がある。
【００４９】
カリウムチャネルオープナーとしては、アデノシン（６−アミノ−９−β−Ｄ−リボフラノシル−９Ｈ−プリン）が特に好ましい。アデノシンは、カリウムチャネルを開け、細胞を過分極させ、代謝機能を抑制し、おそらくは内皮細胞を保護し、組織のプレコンディショニングを増強し、虚血または損傷から保護することができる。アデノシンはまた、間接的カルシウムアンタゴニスト、血管拡張薬、抗不整脈薬、抗アドレナリン薬、フリーラジカルスカベンジャー、停止薬、抗炎症薬（好中球活性化を減弱する）、代謝製剤および可能性ある一酸化窒素供与体でもある。より最近、アデノシンは、いくつかのステップを阻害し、これが血液凝固過程の遅延をもたらし得ることがわかった。さらに、脳中のアデノシンレベルの上昇は、睡眠を引き起こすことがわかっており、種々の形の休止状態に関与している可能性がある。アデノシン類似体、２−クロロ−アデノシンも使用できる。
【００５０】
適したアデノシン受容体アゴニストは、以下から選択できる：Ｎ６−シクロペンチルアデノシン（ＣＰＡ）、Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン（ＮＥＣＡ）、２−［ｐ−（２−カルボキシエチル）フェネチル−アミノ−５’−Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン（ＣＧＳ−２１６８０）、２−クロロアデノシン、Ｎ６−［２−（３，５−デメトキシフェニル）−２−（２−メトキシフェニル］エチルアデノシン、２−クロロ−Ｎ６−シクロペンチルアデノシン（ＣＣＰＡ）、Ｎ−（４−アミノベンジル）−９−［５−（メチルカルボニル）−β−Ｄ−ロボフラノシル］−アデニン（ＡＢ−ＭＥＣＡ）、（［ＩＳ−［１ａ，２ｂ，３ｂ，４ａ（Ｓ＊）］］−４−［７−［［２−（３−クロロ−２−チエニル）−１−メチル−プロピル］アミノ］−３Ｈ−イミダゾール［４，５−ｂ］ピリジル−３−イル］シクロペンタンカルボキサミド（ＡＭＰ５７９）、Ｎ６−（Ｒ）−フェニルイソプロピルアデノシン（Ｒ−ＰＬＡ）、アミノフェニルエチルアデノシン（ＡＰＮＥＡ）およびシクロヘキシルアデノシン（ＣＨＡ）。ＣＣＰＡは、特に好ましい。その他のものとして、全アデノシンＡ１受容体アゴニスト、例えば、Ｎ−［３−（Ｒ）−テトラヒドロフラニル］−６− アミノプリンリボシド（ＣＶＴ−５１０）または部分アゴニスト、例えばＣＶＴ−２７５９およびアロステリックエンハンサー、例えば、ＰＤ８１７２３が挙げられる。その他のアゴニストとして、Ｎ６−シクロペンチル−２−（３−フェニルアミノカルボニルトリアゼン−１−イル）アデノシン（ＴＣＰＡ）、ヒトアデノシンＡ１受容体に対して高親和性を有する極めて選択的なアゴニストが挙げられ、Ａ１アデノシン受容体のアロステリックエンハンサーとして、２−アミノ−３−ナフトイルチオフェン（ｎａｐｔｈｏｙｌｔｈｉｏｐｈｅｎｅ）が挙げられる。
【００５１】
一態様では、本発明の組成物は、Ａ１アデノシン受容体アゴニストと局所麻酔薬とを含む。ＣＣＰＡは、特に好ましいＡ１アデノシン受容体アゴニストである。
【００５２】
本発明のいくつかの実施形態は、直接カルシウムアンタゴニストを利用し、その主な作用は細胞へのカルシウム流入を減少させることである。これらは、以下により詳細に説明される、少なくとも５つの主要なクラスのカルシウムチャネル遮断薬から選択される。当然のことではあるが、これらのカルシウムアンタゴニストは、細胞へのカルシウム流入を阻害することによる、一部の効果をカリウムチャネルオープナー、特に、ＡＴＰ感受性カリウムチャネルオープナーと共有する。
【００５３】
カルシウムチャネル遮断薬はまた、カルシウムアンタゴニストまたはカルシウム遮断薬とも呼ばれる。それらは臨床上、心拍数および収縮性を低減させ、血管を弛緩するために用いられることが多い。それらを用いて高血圧、狭心症または虚血によって引き起こされる不快感 および一部の不整脈を治療でき、それらは多数の効果をβ−遮断薬と共有し、これらもまたカルシウムを減少させるために試用できる。β−遮断薬（またはβ−アドレナリン作動性遮断薬）として、アテノロール（テノーミン（商標））、塩酸プロプラノロール（例えば、インデラル（商標））、塩酸エスモロール（ブレビブロック（商標））、コハク酸メトプロロール（例えば、ロプレソール（商標）またはトプロールＸＬ（商標））、塩酸アセブトロール（セクトラール（商標））、カルテオロール（例えば、カルトロール（Ｃａｒｔｒｏｌ）（商標））、硫酸ペンブトロール（レバトール（Ｌｅｖａｔｏｌ）（商標））およびピンドロール（ビスケン（Ｖｉｓｋｅｎ）（商標））が挙げられる。
【００５４】
５つの主要なクラスのカルシウムチャネル遮断薬が、多様な化学構造とともに知られている：１．ベンゾチアゼピン：例えば、ジルチアゼム、２．ジヒドロピリジン：例えば、ニフェジピン、ニカルジピン、ニモジピンおよび多数のその他のもの、３．フェニルアルキルアミン：例えば、ベラパミル、４．ジアリールアミノプロピルアミンエーテル：例えば、ベプリジル、５．ベンズイミダゾール置換テトラリン：例えば、ミベフラジル。
【００５５】
従来のカルシウムチャネル遮断薬は、Ｌ型カルシウムチャネル（「スローチャネル」）と結合し、これらのチャネルは、心筋および平滑筋において豊富であり、このことは、これらの薬物が、何故、心血管系に対して選択的効果を有するかを説明するのに役立つ。種々のクラスのＬ型カルシウムチャネル遮断薬が、α１−サブユニット、主要チャネル形成サブユニット上の異なる部位と結合する（α２、β、γ、δサブユニットも存在する）。異なるサブクラスのＬ型チャネルが存在し、これが組織選択性の一因であり得る。より最近、異なる特異性を有する新規カルシウムチャネル遮断薬も開発された。例えば、ベプリジルは、Ｌ型カルシウムチャネル遮断活性に加え、Ｎａ＋およびＫ＋チャネル遮断活性を有する薬物である。もう１つの例として、ミベフラジルがあり、これは、Ｔ型カルシウムチャネル遮断活性ならびにＬ型カルシウムチャネル遮断活性を有する。
【００５６】
３種の一般的なカルシウムチャネル遮断薬として、ジルチアゼム（カルディゼム）、ベラパミル（カラン）およびニフェジピン（プロカジア）がある。ニフェジピンおよび関連ジヒドロピリジンは、正常用量では、房室伝導系または洞房結節に対して大きな直接的な効果はなく、したがって、伝導または自動性に対して直接的な効果はない。それに対して、その他のカルシウムチャネル遮断薬は、負の変時性／変伝導性効果（ペースメーカー活性／伝導速度）を有する。例えば、ベラパミル（およびより小さな程度ではあるが、ジルチアゼム）は、ＡＶ伝導系およびＳＡ結節におけるスローチャネルの回復速度を低下させ、したがって、ＳＡ結節ペースメーカー活性およびスロー伝導を抑制するよう直接的に作用する。これらの２種の薬物は、頻度依存性および電圧依存性であり、それによって、迅速に脱分極している細胞においてより有効となる。また、ベラパミルは房室ブロックまたは心室機能の大きな抑制の可能性のために、β−遮断薬との組み合わせでは禁忌である。さらに、ミベフラジルは、負の変時性および変伝導性効果を有する。カルシウムチャネル遮断薬（特に、ベラパミル）はまた、血管攣縮を含む機序が根底にある場合、不安定狭心症の治療において特に有効であり得る。
【００５７】
ΩコノトキシンＭＶＩＩＡ（ＳＮＸ−１１１）は、Ｎ型カルシウムチャネル遮断薬であり、鎮痛剤としてモルヒネよりも１００〜１０００倍強力であるが、常習性はないと報告されている。このコノトキシンは、難治性疼痛を治療するために調査されている。ＳＮＸ−４８２、肉食性クモ毒の毒液に由来するさらなる毒素は、Ｒ型カルシウムチャネルを遮断する。この化合物は、アフリカンタランチュラ（Ａｆｒｉｃａｎ ｔａｒａｎｔｕｌａ）、ヒステロクラテス・ギガス（Ｈｙｓｔｅｒｏｃｒａｔｅｓ ｇｉｇａｓ）の毒液から単離され、記載された最初のＲ型カルシウムチャネル遮断薬である。Ｒ型カルシウムチャネルは、身体の自然な情報伝達ネットワークにおいて役割を果たすと考えられており、これでは、脳機能の調節の一因である。動物界から得られたその他のカルシウムチャネル遮断薬として、南アフリカ産サソリ由来のクルトキシン（Ｋｕｒｔｏｘｉｎ）、アフリカ産タランチュラ（Ａｆｒｉｃａｎ Ｔａｒａｎｔｕｌａ）由来のＳＮＸ−４８２、オーストラリア産タイパンスネーク（Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｔａｉｐａｎ ｓｎａｋｅ）由来のタイカトキシン（Ｔａｉｃａｔｏｘｉｎ）、ジョウゴグモ（Ｆｕｎｎｅｌ Ｗｅｂ Ｓｐｉｄｅｒ）由来のアガトキシン 、ブルーマウンテンジョウゴグモ（Ｂｌｕｅ Ｍｏｕｎｔａｉｎｓ Ｆｕｎｎｅｌ Ｗｅｂ Ｓｐｉｄｅｒ）由来のアトラコトキシン（Ａｔｒａｃｏｔｏｘｉｎ）、ウミカタツムリ（Ｍａｒｉｎｅ Ｓｎａｉｌ）由来のコノトキシン、チャイニーズバードスパイダー（Ｃｈｉｎｅｓｅ ｂｉｒｄ ｓｐｉｄｅｒ）由来のＨＷＴＸ−Ｉ、サウスアメリカンローズタランチュラ（Ｓｏｕｔｈ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｒｏｓｅ Ｔａｒａｎｔｕｌａ）由来のグラモトキシン（Ｇｒａｍｍｏｔｏｘｉｎ）ＳＩＡが挙げられる。この羅列はまた、カルシウムアンタゴニスト効果を有するこれらの毒素の誘導体を含む。
【００５８】
直接ＡＴＰ感受性カリウムチャネルオープナー（例えば、ニコランジル、アプリカレム（ａｐｒｉｋａｌｅｍ））または間接的ＡＴＰ感受性カリウムチャネルオープナー（例えば、アデノシン、オピオイド）はまた、間接的カルシウムアンタゴニストであり、組織へのカルシウム流入を減少させる。カルシウムアンタゴニストとしても作用するＡＴＰ感受性カリウムチャネルオープナーについて考えられる１つの機構は、第３相再分極を加速することによって心臓活動電位期間を短縮し、ひいては、プラトー相を短縮することすることである。プラトー相の間、カルシウムの正味の流入は、カリウムチャネルによるカリウムの流出によって釣り合いが取られ得る。第３相再分極の増強は、Ｌ型カルシウムチャネルを遮断または阻害することによって細胞へのカルシウム流入を阻害し、組織細胞におけるカルシウム（およびナトリウム）過負荷を防ぐことができる。
【００５９】
カルシウムチャネル遮断薬は、ニフェジピン、ニカルジピン、ニモピジピン（ｎｉｍｏｐｉｄｉｐｉｎｅ）、ニソルジピン、レルカニジピン、テロジピン（ｔｅｌｏｄｉｐｉｎｅ）、アンジゼム（ａｎｇｉｚｅｍ）、アルチアゼム（ａｌｔｉａｚｅｍ）、ベプリジル、アムロピジン（ａｍｌｏｐｉｄｉｎｅ）、フェロジピン、イスラジピンおよびカベロ（ｃａｖｅｒｏ）およびその他のラセミ化号物バリエーションから選択できる。
【００６０】
好ましい一形態では、カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストは、１分未満の、好ましくは、２０秒未満の血液半減期を有する。
【００６１】
いくつかの実施形態では、本組成物は、さらなるカリウムチャネルオープナーまたはアゴニスト、例えば、ジアゾキシドまたはニコランジルを含み得る。
【００６２】
本発明者はまた、ジアゾキシドの、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬との含有物は、傷害を低減することを見い出した。したがって、もう１つの態様では、本発明の組成物は、さらにジアゾキシドを含む。
【００６３】
ジアゾキシドは、カリウムチャネルオープナーであり、本発明では、イオンおよび容量調節、酸化的リン酸化およびミトコンドリア膜完全性を保つと考えられている（濃度依存性と思われる）。より最近、ジアゾキシドは、再酸素負荷でのミトコンドリアの酸化ストレスを減少することによって心保護を提供することがわかった。目下のところ、カリウムチャネルオープナーの保護効果が、ミトコンドリアにおける反応性酸素種生成の調節と関連しているかどうかはわかっていない。ジアゾキシドの濃度は、約１〜２００μＭの間であることが好ましい。通常、これがジアゾキシドの有効量としてである。ジアゾキシドの濃度は、約１０μＭであることがより好ましい。
【００６４】
本発明者らはまた、ニコランジルの、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬との含有物は、傷害を低減することを見い出した。したがって、もう１つの態様では、本発明の組成物は、さらにニコランジルを含む。
【００６５】
ニコランジルは、カリウムチャネルオープナーであり、組織および内皮を含む微小血管完全性を、虚血および再潅流損傷から保護し得る一酸化窒素供与体である。したがって、 ＫＡＴＰチャネルを開くことおよび硝酸様効果の二重の作用によって利益を与え得る。ニコランジルはまた、血管を拡張させ、これによって、前負荷および後負荷の両方を低減することによって、心臓がより容易に働くことが可能となることによって高血圧を低下させ得る。また、抗炎症特性および抗増殖特性を有し、これが虚血／再灌流傷害をさらに減弱し得ると考えられている。
【００６６】
本発明の組成物はまた、局所麻酔を導入する、そうでなければ局所麻酔薬として知られている化合物を含む。局所麻酔薬は、メキシレチン、ジフェニルヒダントイン、プリロカイン、プロカイン、メピボカイン（ｍｅｐｉｖｏｃａｉｎｅ）、キニジン、ジソピラミドおよびクラス１Ｂ抗不整脈薬、例えば、リグノカインまたはその誘導体、例えば、ＱＸ−３１４から選択され得る。
【００６７】
局所麻酔薬は、リグノカインであることが好ましい。この明細書では、用語「リドカイン」および「リグノカイン」は、同義的に用いられ、リグノカインは、おそらくは、ナトリウムファストチャネルを遮断し、代謝機能を抑制し、遊離細胞質カルシウムを低下させ、細胞からの酸素放出から保護し、おそらくは内皮細胞を保護し、筋フィラメント損傷から保護することによって局所麻酔薬として作用することができるので好ましい。リグノカインは、低い治療濃度では、通常、心房性組織に対してほとんど効果がなく、したがって、心房細動、心房粗動および上室性頻脈の治療において無効である。リグノカインはまた、フリーラジカルスカベンジャー、抗不整脈薬であり、抗炎症特性および抗過凝固特性を有する。リグノカインのような局所麻酔薬は、非麻酔性治療濃度で電圧依存性ナトリウムファストチャネルを完全には遮断しないが、チャネル活性をダウンレギュレートし、ナトリウム流入を減少させるということも理解されなければならない。リグノカインは、抗不整脈薬として、通常、第２相の活動電位を通じて継続し、結果として、活動電位および不応期を短縮する、小さなナトリウム電流を標的とすると考えられている。
【００６８】
リグノカインは、主に、ナトリウムファストチャネルを遮断することによって作用するので、当然のことではあるが、本発明の方法および組成物において、その他のナトリウムチャネル遮断薬を代わりに用いてもよいし、または局所麻酔薬と組み合わせて用いてもよい。また、当然のことながら、ナトリウムチャネル遮断薬は、ナトリウムチャネルを実質的に遮断するよう、またはナトリウムチャネルを少なくともダウンレギュレートするよう作用する化合物を含む。適したナトリウムチャネル遮断薬の例として、テトロドトキシンなどの毒液および薬物プリマキン、ＱＸ、ＨＮＳ−３２（ＣＡＳ Ｒｅｇｉｓｔｒｙ １８６０８６−１０−２番）、ＮＳ−７、κ−オピオイド受容体アゴニストＵ５０ ４８８、クロベネチン（ｃｒｏｂｅｎｅｔｉｎｅ）、ピルシカイニド、フェニトイン、トカイニド、メキシレチン、ＮＷ−１０２９（ベンジルアミノプロパンアミド誘導体）、ＲＳ１００６４２、リルゾール、カルバマゼピン、フレカイニド、プロパフェノン、アミオダロン、ソタロール、ブレチリウム、イミプラミンおよびモリシジンまたはそれらの誘導体のいずれかが挙げられる。その他の適したナトリウムチャネル遮断薬として、ビンポセチン（エチルアポビンカミネート（ｅｔｈｙｌ ａｐｏｖｉｎｃａｍｉｎａｔｅ）およびβ−カルボリン誘導体、向知性β−カルボリン（アンボカーブ（ａｍｂｏｃａｒｂ）、ＡＭＢ）が挙げられる。
【００６９】
一態様では、本発明の組成物は、本質的に、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とからなる。
【００７０】
もう１つの態様では、本発明の組成物は、オピオイドをさらに含み得る。オピオイドのさらなる追加は、改善されていない場合には、傷害の低減に対して同様の効果を有し得る。
【００７１】
オピオイドは、オピオイドアゴニストとしても知られ、または呼ばれ、アヘン（Ｇｒアヘン、ケシジュース）またはモルヒネ様特性を阻害し、通常、臨床上、特に、手術に際して、手術後の両方で疼痛を管理するために、中程度から強い鎮痛薬として用いられる一群の薬物である。オピオイドのその他の薬理作用として、眠気、呼吸抑制、気分の変化および意識の喪失を伴わない意識混濁が挙げられる。
【００７２】
オピオイドはまた、冬眠、正常な代謝速度および正常な中核体温の低下を特徴とする休止状態の１つの形の過程における「誘因」の一部として関与すると考えられている。この冬眠状態では、組織は、そうでなければ、酸素または代謝燃料供給の減少によって引き起こされ得る損傷からより保存され、虚血再潅流傷害からも保護される。
【００７３】
３種のオピオイドペプチド：エンケファリン、エンドルフィンおよびダイノルフィンがある。オピオイドは、心臓、脳およびその他の組織において立体特異的、飽和性結合部位と相互作用してアゴニストとして作用する。３種の主要なオピオイド受容体、すなわち、μ、κおよびδ受容体が同定およびクローニングされている。３種の受容体すべてが、結果として、Ｇ−タンパク質共役受容体ファミリー（このクラスは、アデノシンおよびブラジキニン受容体を含む）に分類されている。オピオイド受容体は、さらにサブタイプに分けられており、例えば、δ受容体には２種のサブタイプ、δ−１およびδ−２がある。
【００７４】
オピオイドの心血管効果は、中枢的に（すなわち、視床下部および脳幹の心血管および呼吸器中枢で）および末梢的に（すなわち、心筋細胞および脈管構造に対する直接および間接的両方の効果）の両方で損傷していない身体内に向けられる。例えば、オピオイドは、血管拡張に関与していることがわかっている。心臓および心血管系に対するオピオイドの一部の作用は、直接オピオイド受容体媒介性作用またはオピオイド、例えば、アリールアセトアミド薬の抗不整脈作用で観察されている、間接的、用量依存性非オピオイド受容体媒介性作用、例えば、イオンチャンネル遮断を含み得る。心臓は、３種のオピオイドペプチド、すなわち、エンケファリン、エンドルフィンおよびダイノルフィンを合成または産生できるということも知られている。しかし、δおよびκオピオイド受容体のみが、心室性筋細胞で同定されている。
【００７５】
いずれかの作用様式に拘束されるものではないが、オピオイドは、虚血性損傷を制限することおよび高レベルの損傷物質または虚血の際に自然に放出される化合物に対抗するよう生じる、不整脈の発生頻度を低下することによって、心保護的効果を提供すると考えられている。これは、筋線維膜における、およびミトコンドリア膜におけるＡＴＰ感受性カリウムチャネルの活性化によって媒介され得、カリウムチャネルを開けることに関与している。さらに、オピオイドの心保護的効果は、筋線維膜における、およびミトコンドリア膜におけるＡＴＰ感受性カリウムチャネルの活性化によって媒介されるということも考えられている。したがって、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストもカリウムチャネルを開けることに間接的に関与しているので、オピオイドは、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストの代わりに、またはそれらと組み合わせて使用できるということも考えられる。
【００７６】
当然のことではあるが、オピオイドは、オピオイド受容体に対して直接的に、および間接的に作用する化合物（天然または合成）を含む。オピオイドはまた、間接的用量依存性、非オピオイド受容体媒介性作用、例えば、オピオイドの抗不整脈作用で観察されているイオンチャンネル遮断を含む。
【００７７】
したがって、オピオイドは、エンケファリン、エンドルフィンおよびダイノルフィンから選択され得る。オピオイドは、δ、κおよび／またはμ受容体を標的とするエンケファリンであることが好ましい。オピオイドは、δオピオイド受容体アゴニストであることがより好ましい。オピオイドは、δ−１−オピオイド受容体アゴニストおよびδ−２−オピオイド受容体アゴニストから選択されることがさらにより好ましい。［Ｄ−Ｐｅｎ ２，５］エンケファリン（ＤＰＤＰＥ）は、特に好ましいδ−１−オピオイド受容体アゴニストである。
【００７８】
もう１つの態様では、本発明の組成物は、本質的に、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬と、（ｉｉｉ）δ−１−オピオイドとからなる。ＤＰＤＰＥは、特に好ましいδ−１−オピオイド受容体アゴニストである。
【００７９】
本発明者は、組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物の、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬との含有物、例えば、スクロースと、アデノシンと、リグノカインとを含む組成物は、身体の傷害を低減するのを補助することを見い出した。
【００８０】
したがって、さらなる態様では、本発明の組成物は、細胞、組織または臓器中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させるための少なくとも１種の化合物をさらに含み得る。
【００８１】
組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物は、水分の移動、すなわち、細胞外および細胞内環境間の水の移動を制御する傾向がある。したがって、これらの化合物は、浸透性の制御または調節に関与している。１つの結果は、組織中の細胞による水の取り込みを最小化するか、減少させる化合物は、浮腫、例えば、虚血性傷害の際に起こり得る浮腫と関連している細胞膨潤を低減するということである。
【００８２】
組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物は、通常、不透過物または受容体アンタゴニストもしくはアゴニストである。本発明の不透過物は、スクロース、ペンタスターチ、ヒドロキシエチルデンプン、ラフィノース、マンニトール、グルコン酸、ラクトビオン酸およびコロイドからなる群のうち１種以上から選択され得る。コロイドとして、アルブミン、ヘタスターチ、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、デキストラン４０およびデキストラン６０が挙げられる。浸透圧目的で選択され得るその他の化合物として、動物界において見られる浸透圧調整物質の主要なクラスに由来するもの、例えば、多価アルコール（ポリオール）および糖類、その他のアミノ酸およびアミノ酸誘導体およびメチル化アンモニウムおよびスルホニウム化合物が挙げられる。
【００８３】
細胞膨潤はまた、臓器回復、保存および手術による移植の際、重要であり得る炎症反応に起因し得る。サブスタンスＰ、重要な炎症性ニューロペプチドは、細胞浮腫をもたらすことがわかっており、したがって、サブスタンスＰのアンタゴニストは細胞膨潤を低減し得る。実際、サブスタンスＰのアンタゴニスト、（特異的ニューロキニン−１）受容体（ＮＫ−１）は、炎症性肝臓損傷、すなわち、浮腫形成、好中球浸潤、肝細胞アポトーシスおよび壊死を低減することがわかっている。２種のこのようなＮＫ−１アンタゴニストとして、ＣＰ−９６，３４５すなわち［（２Ｓ，３Ｓ）−シス−２−（ジフェニルメチル）−Ｎ−（（２−メトキシフェニル）−メチル）−１−アザビシクロ（２．２．２．）−オクタン−３−アミン（ＣＰ−９６，３４５）］およびＬ−７３３，０６０すなわち［（２Ｓ，３Ｓ）３−（［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メトキシ）−２− フェニルピペリジン］が挙げられる。Ｒ１１６３０１すなわち［（２Ｒ−トランス）−４−［１−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾイル］−２−（フェニルメチル）−４−ピペリジニル］−Ｎ−（２，６−ジメチルフェニル）−１−アセトアミド（Ｓ）−ヒドロキシブタンジオエート］は、もう１つの特異的活性ニューロキニン−１（ＮＫ（Ｉ））受容体アンタゴニストであり、ヒトＮＫ（１）受容体（Ｋ（ｉ）：０．４５ｎＭ）に対してナノモル以下の親和性を有し、ＮＫ（２）およびＮＫ（３）受容体に関しては２００倍を上回る選択性を有する。同様に細胞膨潤を低減し得るニューロキン受容体２（ＮＫ−２）のアンタゴニストとして、ＳＲ４８９６８が挙げられ、ＮＫ−３として、ＳＲ１４２８０１およびＳＢ−２２２２００が挙げられる。シクロスポリンＡを用いる、ミトコンドリア透過性移行の遮断およびミトコンドリア内膜電位の膜電位の低減はまた、単離された脳切片において、虚血導入性細胞膨潤を減少させることがわかった。さらに、グルタミン酸受容体アンタゴニスト（ＡＰ５／ＣＮＱＸ）および反応性酸素種スカベンジャー（アスコルビン酸、トロロクス（Ｒ）、ジメチルチオ尿素、テンポール（Ｒ））もまた、細胞膨潤の減少を示した。したがって、組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物はまた、これらの化合物のうち任意の１種から選択され得る。
【００８４】
また、当然のことではあるが、以下のエネルギー基質もまた、不透過物として作用し得る。適したエネルギー基質は、グルコースおよびその他の糖類、ピルビン酸、乳酸、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、アルギニン、エクトイン、タウリン、Ｎ−アセチル−β−リシン、アラニン、プロリン、β−ヒドロキシ酪酸およびその他のアミノ酸およびアミノ酸誘導体、トレハロース、フロリドシド、グリセロールおよびその他の多価アルコール（ポリオール）、ソルビトール、ミオイノシトール、ピニトール、インスリン、α−ケトグルタル酸、リンゴ酸、コハク酸、トリグリセリドおよび誘導体、脂肪酸およびカルニチンおよび誘導体からなる群に由来する１種以上から選択され得る。一実施形態では、組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させるための少なくとも１種の化合物は、エネルギー基質である。エネルギー基質は、代謝を回復するのに役立つ。エネルギー基質は、グルコースおよびその他の糖類、ピルビン酸、乳酸、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、アルギニン、エクトイン、タウリン、Ｎ−アセチル−β−リシン、アラニン、プロリンおよびその他のアミノ酸およびアミノ酸誘導体、トレハロース、フロリドシド、グリセロールおよびその他の多価アルコール（ポリオール）、ソルビトール、ミオイノシトール、ピニトール、インスリン、α−ケトグルタル酸、リンゴ酸、コハク酸、トリグリセリドおよび誘導体、脂肪酸およびカルニチンおよび誘導体からなる群に由来する１種以上から選択され得る。エネルギー基質が、身体の細胞、組織または臓器におけるエネルギー変換およびＡＴＰの生成のための還元当量の供給源であることを考えると、当然のことではあるが、エネルギー還元当量の直接供給は、エネルギー生成の基質として使用できる。例えば、１種以上または種々の割合のいずれかの還元型および酸化型のニコチン酸アミドアデニンジヌクレオチド（例えば、ＮＡＤもしくはＮＡＤＰおよびＮＡＤＨもしくはＮＡＤＰＨ）またはフラビンアデニンジヌクレオチド（ＦＡＤＨもしくはＦＡＤ）の供給は、ストレス時のＡＴＰ生成を維持するための結合エネルギーを供給するために直接的に使用できる。外傷の治療または傷害を低減するための本発明の組成物に、β−ヒドロキシ酪酸が加えられることが好ましい。
【００８５】
全身、臓器、組織または細胞にエネルギー基質を提供することに加え、硫化水素（Ｈ２Ｓ）またはＨ２Ｓ供与体（例えば、ＮａＨＳ）の存在下で、これらの基質の代謝における改善が起こり得る。硫化水素（Ｈ２Ｓ）またはＨ２Ｓ供与体（例えば、ＮａＨＳ）の存在は、虚血、再灌流および外傷のような代謝不均衡の期間の間、全身、臓器、組織または細胞を停止、保護および保存する際にエネルギー需要を低下させることによって、これらのエネルギー基質を代謝するのに役立ち得る。１μＭ（１０−６Ｍ）濃度を越える硫化水素の濃度は、ミトコンドリア呼吸鎖の一部であり、エネルギー基質由来の高エネルギー還元当量の代謝を、エネルギー（ＡＴＰ）生成および酸素消費と共役する、呼吸複合体ＩＶでの呼吸を阻害する代謝毒であり得る。しかし、硫化水素は、１０−６Ｍを下回る低濃度（例えば、１０−１０〜１０−９Ｍ）で、全身、臓器、組織または細胞のエネルギー需要を減少させることができ、これが、停止、保護および保存をもたらし得ることが観察された。つまり、極めて低レベルの硫化物は、ミトコンドリアをダウンレギュレートし、Ｏ２消費を減少させ、「呼吸制御」を実質的に増大させ、それによって、ミトコンドリアは、ミトコンドリア内膜をまたぐ電気化学的勾配を崩壊させず、少ないＯ２しか消費しない。したがって、少量の硫化物は、直接的または間接的にのいずれかで、水素イオン漏出チャネルを閉じ、ミトコンドリア呼吸をＡＴＰ生成とより緊密に良好に共役することができ、この効果によって、エネルギー基質に由来する高エネルギー還元当量の代謝が改善され得るという知見がある。また、硫黄濃度が低い場合には、ヒトを含む哺乳類では、細胞サイトゾルとミトコンドリアの間に硫黄循環が存在する可能性がある。極僅かの硫黄循環の存在は、ミトコンドリアの進化的起源および硫化物産生性宿主細胞と硫化物酸化性共生細菌の間の共生関係からの真核生物細胞におけるそれらの出現に関する現在の考えと一致する。したがって、硫化水素（Ｈ２Ｓ）またはＨ２Ｓ供与体（例えば、ＮａＨＳ）は、その他のエネルギー基質の代謝の改善に加え、それ自体エネルギー基質であり得る。したがって、一形態では、本発明は、硫化水素または硫化水素供与体をさらに含む上記の組成物を提供する。
【００８６】
一実施形態では、組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させるための少なくとも１種の化合物は、スクロースである。スクロースは、不透過物として水の移動を減少させる。スクロース、ラクトビオン酸およびラフィノースなどの不透過剤は、大きすぎて細胞に入ることができず、したがって、組織内の細胞外間隙中に留まり、特に、組織の保存の間に起こる、そうでなければ、組織に損傷を与える細胞膨潤を防ぐ浸透力をもたらす。
【００８７】
もう１つの実施形態では、組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させるための少なくとも１種の化合物は、コロイドである。適したコロイドとして、それだけには限らないが、デキストラン−７０、４０、５０および６０、ヒドロキシエチルデンプンおよび修正ゼラチン（ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｆｌｕｉｄ ｇｅｌａｔｉｎｅ）が挙げられる。コロイドは、液体に固体が懸濁している連続液相を有する組成物である。コロイドは、臨床上、重篤な傷害後の身体における細胞内、細胞外および血液コンパートメント間の水およびイオン分布のバランスの回復の助けとなるよう使用できる。コロイドはまた、臓器保存用溶液においても使用できる。晶液の投与はまた、身体の水およびイオンバランスを回復することができるが、それらは液体に懸濁された固体を有さないので、通常、より多くの容量の投与が必要である。したがって、容積増量剤は、コロイドベースまたは晶液ベースであり得る。
【００８８】
組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物の濃度は、約５〜５００ｍＭの間であることが好ましい。通常、組織中の細胞による水の取り込みを減少させるための有効量である。組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物の濃度は、約２０〜１００ｍＭの間であることがより好ましい。組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物の濃度は、約７０ｍＭであることがさらにより好ましくい。
【００８９】
さらなる実施形態では、本発明の組成物は、組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させるための、２種以上の化合物を含み得る。例えば、不透過物（ラフィノース、スクロースおよびペンタスターチ）の組み合わせが、組成物に含まれてもよく、さらに、コロイドおよび燃料基質の組み合わせが組成物に含まれてもよい。
【００９０】
本発明の組成物は、低浸透圧性、等浸透圧性または高浸透圧性であってもよい。
【００９１】
本発明者はまた、組織中の細胞の原形質膜を越えるナトリウムおよび水素イオンの輸送を阻害する化合物の、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬との含有物が傷害の低減を補助することを見い出した。
【００９２】
したがって、もう１つの態様では、本発明の組成物は、組織中の細胞の原形質膜を越えるナトリウムおよび水素イオンの輸送を阻害する化合物をさらに含む。
【００９３】
組織中の細胞の膜を超えるナトリウムおよび水素の輸送を阻害する化合物はまた、Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送阻害剤とも呼ばれる。Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送阻害剤は、ナトリウムおよびカルシウムが細胞に入るのを低減する。
【００９４】
組織中の細胞の膜を越えるナトリウムおよび水素の輸送を阻害する化合物は、アミロライド、ＥＩＰＡ（５−（Ｎ−エンチル−Ｎ−イソプロピル）−アミロリド）、カリポリド（ＨＯＥ−６４２）、エニポリド（ｅｎｉｐｏｒｉｄｅ）、トリアムテレン（２，４，７−トリアミノ−６−フェニルテリド）、ＥＭＤ８４０２１、ＥＭＤ９４３０９、ＥＭＤ９６７８５、ＥＭＤ８５１３１、ＨＯＥ６９４からなる群のうち１種以上から選択され得ることが好ましい。Ｂ１１Ｂ−５１３およびＴ−１６２５５９は、Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送のアイソフォーム１のその他の阻害剤である。
【００９５】
Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送阻害剤は、アミロライド（Ｎ−アミジノ−３，５−ジアミノ−６−クロロピリジン−２−カルボキシミドヒドロクロリドジヒドレート）であることが好ましい。アミロライドは、Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送体（Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送体はＮＨＥ−１と略されることも多い）を阻害し、カルシウムが細胞に入るのを低減する。虚血の間、過剰の細胞プロトン（または水素イオン）は、Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送体によってナトリウムに交換されると考えられている。
【００９６】
組織中の細胞の膜を超えるナトリウムおよび水素の輸送を阻害する化合物の濃度は、約１．０ｎＭ〜１．０ｍＭの間であることが好ましい。組織中の細胞の膜を超えるナトリウムおよび水素の輸送を阻害する化合物の濃度は、約２０μＭであることがより好ましい。
【００９７】
本発明者はまた、抗酸化剤の、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬との含有物を見い出した。したがって、もう１つの態様では、本発明の組成物は、抗酸化剤をさらに含み得る。
【００９８】
抗酸化剤は、通常、組織において酸化の損傷作用に対抗することができる酵素またはその他の有機物質である。本発明の組成物の抗酸化剤成分は、アロプリノール、カモシン（ｃａｍｏｓｉｎｅ）、ヒスチジン、補酵素Ｑ１０、ｎ−アセチル−システイン、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）、グルタチオンレダクターゼ（ＧＲ）、グルタチオンペルオキシダーゼ（ＧＰ）モジュレーターおよびレギュレーター、カタラーゼおよびその他の 金属結合酵素、ＮＡＤＰＨおよびＡＮＤ（Ｐ）Ｈオキシダーゼ阻害剤、グルタチオン、Ｕ−７４００６Ｆ、ビタミンＥ、トロロクス（ビタミンＥの可溶性型）、その他のトコフェロール（γおよびα、β、δ）、トコトリエノール、アスコルビン酸、ビタミンＣ、β−カロテン（ビタミンＡの植物型）、セレン、γリノール酸（ＧＬＡ）、α−リポ酸、尿酸（尿酸塩）、クルクミン、ビリルビン、プロアントシアニジン、エピガロカテキンガレート、ルテイン、リコペン、ビオフラボノイド、ポリフェノール、トロロクス（Ｒ）、ジメチルチオ尿素、テンポール（Ｒ）、カロテノイド、補酵素Ｑ、メラトニン、フラボノイド、ポリフェノール、アミノインドール、プロブコールおよびニテカポン、２１−アミノステロイドまたはラザロイド、スルフィドリル含有化合物（チアゾリジン、エブセレン、ジチオールチオン）およびＮ−アセチルシステインからなる群のうち１種以上から選択され得る。その他の抗酸化剤として、心筋梗塞の患者で．動脈性高血圧症および心不全の治療のために用いられるＡＣＥ阻害剤（カプトプリル、エナラプリル、リシノプリル）が挙げられる。ＡＣＥ阻害剤は、反応性酸素種を除去することによって再酸素負荷された心筋に対してその有益な効果を発揮する。また、使用できるその他の抗酸化剤として、β−メルカプトプロピオニルグリシン、Ｏ−フェナントロリン、ジチオカルバメート、セレギリゼ（ｓｅｌｅｇｉｌｉｚｅ）およびデスフェリオキサミン（デスフェラール）が挙げられ、鉄キレート剤は、実験梗塞モデルにおいて使用でき、これでは、ある程度のレベルの抗酸化剤保護を発揮した。スピントラップ剤、例えば、５’−５−ジメチル−１−ピロリオン−Ｎ−オキシド（ＤＭＰＯ）および（ａ−４−ピリジル−１−オキシド）−Ｎ−ｔ−ブチルニトロン（ＰＯＢＮ）はまた、抗酸化剤としても作用する。その他の抗酸化剤として、ニトロンラジカルスカベンジャーα−フェニル−ｔ−Ｎ−ブチルニトロン（ＰＢＮ）および誘導体ＰＢＮ（二硫黄誘導体を含む）；Ｎ−２−メルカプトプロピオニルグリシン（ＭＰＧ） ＯＨフリーラジカルの特異的スカベンジャー；リポオキシゲナーゼ阻害剤 ノルジヒドログアレチン酸（ｎｏｒｄｉｈｙｄｒｏｇｕａｒｅｔｉｃ ａｃｉｄ）（ＮＤＧＡ）；αリポ酸；コンドロイチン硫酸；Ｌ−システイン；オキシプリノールおよび亜鉛が挙げられる。
【００９９】
抗酸化剤は、アロプリノール（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ａ］ピリミジン−４−オール）であることが好ましい。アロプリノールは、反応性酸素種生成酵素キサンチンオキシダーゼの競合阻害剤である。アロプリノールの抗酸化特性は、酸化ストレス、ミトコンドリア損傷、アポトーシスおよび細胞死を低減することによって、心筋および内皮機能を保存するのに役立ち得る。抗酸化剤の濃度は、約１ｎＭ〜１００μＭであることが好ましい。
【０１００】
本発明者はまた、特定の量のカルシウムおよびマグネシウムイオンの、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬との含有物は、傷害を低減することを見い出した。特定の量のカルシウムおよびマグネシウムイオンの効果は、細胞内環境内のイオンの量を制御することである。カルシウムイオンは、細胞内環境から枯渇される、輸送される、またはそうでなければ除去される傾向があり、マグネシウムイオンは増大される、またはそうでなければ生存する、機能する細胞において通常見られるレベルに回復される傾向がある。
【０１０１】
したがって、もう１つの態様では、本発明の組成物は、身体組織中の細胞中のマグネシウムの量を増大させる量のマグネシウムの供給源をさらに含む。マグネシウムは、０．５ｍＭ〜２０ｍＭの間の濃度で存在することが好ましく、約２．５ｍＭがより好ましい。当然のことではあるが、これらの濃度は、組織、臓器または細胞と接触する組成物中のマグネシウムの有効濃度を指す。
【０１０２】
さらに、その中の本発明の組成物が投与される、通常のバッファーまたは担体（以下でより詳細に論じられている）は、カルシウムの完全欠損は、細胞、組織または臓器にとって有害であることがわかっているので、通常、約１ｍＭの濃度のカルシウムを含む。一形態では、本発明はまた、身体組織中の細胞内カルシウムの量を減少させるために、低カルシウム（例えば、０．５ｍＭ未満など）を含む担体を用いることを含み、身体組織中の細胞内カルシウムの量は、そうでなければ、傷害／外傷／スタンニングの際に増加し得る。本発明に記載のとおり、高マグネシウムおよび低カルシウムは、臓器の虚血および再酸素負荷の際の保護と関連している。この作用は、カルシウム負荷の減少によると考えられている。存在するカルシウムは、０．１ｍＭ〜０．８ｍＭの間の濃度であることが好ましく、約０．３ｍＭがより好ましい。
【０１０３】
一実施形態では、本組成物は、高い二価のマグネシウムイオンを含む。硫酸マグネシウムおよび塩化マグネシウムが適した供給源である。
【０１０４】
治療を必要とするヒト被験体の場合には、限定するものではないが、以下の、対応する濃度のアデノシン（Ａｄｏ）、リグノカイン（Ｌｉｄｏ）および硫酸マグネシウムを含む代替組成物が提供される。
【０１０５】
【化１】
これらの組成物中のそれぞれの有効成分各々の濃度は、投与前の組成物中の濃度を指す。当然のことではあるが、濃度は、体液または本組成物とともに投与され得るその他の液体によって希釈され得る。通常、本組成物は、組織でのこれらの成分の濃度が、前記表中の濃度よりも約１００倍低いよう、投与される。例えば、このような組成物の容器（例えば、バイアル）は、投与のために、１対１００部の血液、血漿、晶液または血液代用品に希釈され得る。
【０１０６】
一実施形態では、本発明の組成物は、アデノシンおよびリグノカインを含む。通常、組成物中のアデノシンおよびリドカインの濃度は、約１ｍＭ〜１００ｍＭの間である。投与さると、これらの成分の最終濃度は、約０．１ｍＭ〜１０ｍＭの間であり得る。
【０１０７】
もう１つの実施形態では、本組成物は、細胞輸送酵素阻害剤、例えば、ジピリダモールを含み、組成物中の成分の代謝または分解を防ぐ。
【０１０８】
さらなる態様では、本発明は、局所麻酔薬と以下のうち１種以上を含む組成物を提供する：
カリウムチャネルオープナー；
アデノシンアゴニスト；
オピオイド；
水の取り込みを減少させる、少なくとも１種の化合物；
Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送阻害剤；
抗酸化剤；および
身体組織中の細胞中のマグネシウムの量を増大させる量のマグネシウムの供給源。
【０１０９】
この組成物は、上記のうち２、３または４種を有することが好ましい。これらの成分にとって好ましい化合物は、上記で列挙されている。
【０１１０】
もう１つの実施形態では、本発明は、カリウムチャネルオープナーおよび／またはアデノシンアゴニストと、以下のうち１種以上とを含む組成物を提供する：
局所麻酔薬；
オピオイド；
水の取り込みを減少させる、少なくとも１種の化合物；
Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送阻害剤；
抗酸化剤；および
身体組織中の細胞中のマグネシウムの量を増大させる量のマグネシウムの供給源。
【０１１１】
この組成物は、上記のうち２、３または４種を有することが好ましい。これらの成分にとって好ましい化合物は、上記で列挙されている。
【０１１２】
炎症および血栓症のプロセスは、共通の機序によってつながっている。したがって、炎症のプロセスを理解することは、急性および慢性虚血性症状の治療を含む、血栓性障害の良好な管理に役立つと考えられる。臨床および種々の状況では、虚血から損傷を受けた臓器または組織への迅速な反応および初期の介入は、抗炎症療法および抗凝固療法の両方を含み得る。炎症反応を減弱するプロテアーゼ阻害剤に加え、さらなる抗炎症療法は、アスピリン、標準ヘパリン、低分子量ヘパリン（ＬＭＷＨ）、非ステロイド系抗炎症薬、抗血小板剤および糖タンパク質（ＧＰ）ＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体阻害剤、スタチン、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン遮断薬およびサブスタンスＰのアンタゴニストの投与を含んでいた。プロテアーゼ阻害剤の例として、インジナビル、ネルフィナビル、リトナビル、ロピナビル、アンプレナビルまたは広域スペクトルプロテアーゼ阻害剤アプロチニンが挙げられ、低分子量ヘパリン（ＬＭＷＨ）として、エノキサパリンがあり、非ステロイド系抗炎症薬として、インドメタシン、イブプロフェン、ロフェコキシブ、ナプロキセンまたはフルオキセチンがあり、抗血小板剤として、クロピドグレルまたはアスピリンがあり、糖タンパク質（ＧＰ）ＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体阻害剤として、アブシキマブがあり、スタチンとして、プラバスタチンがあり、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤として、カプトプリルがあり、アンジオテンシン遮断薬として、バルサルチン（ｖａｌｓａｒｔｉｎ）がある。
【０１１３】
したがって、本発明のもう１つの実施形態では、これらの薬剤の選択は、炎症および凝固の改善された管理を送達するよう本発明の組成物に加えられる。あるいは、本発明の組成物は、これらの薬剤のうち任意の１種以上とともに投与してもよい。
【０１１４】
特に、プロテアーゼ阻害剤は、心肺バイパスを用いて心臓手術を受けている患者およびＡＩＤＳなどの炎症反応が高められているその他の患者において、または慢性腱傷害の治療において全身炎症反応を減弱する。一部の広域スペクトルプロテアーゼ阻害剤、例えば、アプロチニンはまた、冠動脈バイパスなどの外科手術における失血および輸血の必要性を減少させる
ヌクレオシド輸送阻害剤、例えば、ジピリダモールなどの、血液中のアデノシンの分解を実質的に防ぐ化合物を、本発明の組成物において添加剤として使用できる。血液中のアデノシンの半減期は、約１０秒であり、そのため、その分解を実質的に防ぐための薬剤の存在によって、本発明の組成物の効果が最大となる。
【０１１５】
本発明の組成物はまた、約０．０１μＭ〜約１０ｍＭの濃度で含まれることが有利であり、０．０５〜１００μＭが好ましいジピリダモールを場合により含んでもよい。ジピリダモールは、心保護に関して主要な利点を有する。ジピリダモールは、アデノシン輸送および分解を阻害し、ストレス時の身体の細胞、組織および臓器の保護の増大をもたらすことによって、アデノシンの作用を補完し得る。ジピリダモールはまた、別個に、例えば、約０．４μｇまたは０．８μＭ濃度の血漿レベルを生じる４００ｍｇの毎日の錠剤を投与してよい。
【０１１６】
本発明の組成物は、約１０℃で高度に有益であるが、最大約３７℃の広い温度範囲にわたっても、傷害を防ぐために使用できる。本発明の組成物は、以下から選択される温度範囲で使用してよい：０〜５℃、５℃〜２０℃、２０℃〜３２℃および３２℃〜３８℃。
【０１１７】
本組成物は、静脈内に投与してもよいし、または静脈内および腹膜内の両方で投与してもよく、特定の状況では、大量失血から脈がない患者では、大腿動脈または大動脈などの主幹動脈に直接接続して投与してもよい。一実施形態では、本発明の組成物は、静脈内および会陰内に同時に投与してもよく、会陰は、事実上、血流のための組成物のリザーバーとして作用し、同時に、接触する近くの臓器に対して作用する。これは、外傷犠牲者、例えば、ショックを起こしているものに特に適している。
【０１１８】
本明細書に記載されるように、本発明の特定の実施形態では、本発明の組成物は、心臓発作、脳卒中などといった外傷後に身体の組織を保護し、保存し、再潅流後の身体組織の機能または生存力の良好〜優れた回復をもたらす。
【０１１９】
特に、組織がショックを受けた後に、保存の間の組織の生存力および身体組織の回復に影響を及ぼし、その結果、影響を受けた組織がそれらの過程の間、生存可能であるか、生存していること、およびその機能に戻ることができることは、重大である。
【０１２０】
身体の傷害を低減することは、影響を受けた組織を生存可能状態で維持し、その結果、組織が、外傷後にその機能を回復することができることと関連していることが好ましい。組織を生存可能状態で維持することまたは安定化することは、組織細胞の膜電位を静止レベルに、または静止レベル付近に維持し、虚血および再灌流の際の傷害の原因である、細胞のナトリウムまたはカリウム負荷を減少させることを含む。保存は、組織を保存する、または傷害、破壊または崩壊を防ぐ作用またはプロセスとして知られている。この適用では、本発明の組成物は、外傷によって引き起こされ得る、身体の組織のあらゆる可能性ある傷害、破壊または崩壊を最小にするよう作用する。
【０１２１】
傷害は、可逆性および不可逆性細胞傷害として、広く特徴付けることができる。例えば、可逆性細胞傷害は、通常、不整脈および／またはスタンニングから生じる心臓機能不全につながり得る。スタンニングは、通常、虚血期間後の血流回復時の左側ポンプ機能の喪失として特徴付けられる。通常、不整脈から生じ、心臓細胞自体は最初は壊死していないにもかかわらず、重篤な場合には、心臓の壊死につながる場合もある。定義による不可逆性傷害は、実際の細胞死に起因し、傷害の程度によっては、致命的であり得る。細胞死の量は、梗塞の大きさとして測定できる。心筋保護下の停止からの回復の際、条件が適当であれば、心臓は、再潅流によって、実質的に組織の正常な機能に回復され得る。心臓の機能の回復を評価するための最も一般的な方法は、心臓が発生させ得る圧力：
心臓ポンプフロー；および
心臓の電気的活性
を測定することによるものである。次いで、このデータを、停止前状態から測定されたデータと比較する。
【０１２２】
本発明の組成物は、心臓移植および新生児／乳児心臓を含めた心臓手術（直視下またはロボット心臓手術）の間の心臓組織の傷害を低減するのに特に有用である。その他の適用として、心臓発作、血管形成術または血管造影を含み得る心血管インターベンションの前、その間、その後の心臓損傷を低減することが挙げられる。例えば、本組成物は、心臓発作を起こしたことがあるか、進行中である被験体に投与でき、血液血栓溶解薬、例えば、ストレプトキナーゼの投与時に使用できる。血栓が溶解されるので、組成物の存在は心臓を、再灌流傷害などのさらなる傷害から保護し得る。本組成物は、正常な流れ、栄養物および／または酸素が種々の期間の間、欠乏している心臓の部分において、心臓保護薬として特に有効であり得る。例えば、薬剤組成物はまた、既存のまたは心血管インターベンションによって誘導され得る心臓虚血を治療するために使用できる。その他の適用として、トレッドミルで運動しながらの被験体の健康の評価などの診断手順を補助すること、または被験体がトレッドミルで運動できない場合には、部分的にまたは完全に遮断された血管または損傷を受けた心臓細胞を有し得る心臓などの身体の領域を可視化することを補助することが挙げられる。さらに、本発明は、被験体の身体または身体内の、または身体から単離された臓器および組織の、Ｘ線（慣例の、コンピュータ化された断層撮影法）または磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）など種々の可視化手順の間に使用できる。本発明は、傷害または損傷の可能性ある領域の、より良好な可視化を提供することに加え、被験体の心拍数を一時的に低下させ、それによって運動を減少させる（すなわち、心臓弛緩を増大することによって）ために使用でき、身体の血管、組織または臓器中の、特に、心臓の、可能性ある傷害の診断評価の間のより速いスキャン時間が可能となる。心拍数を低下させることおよびより迅速なスキャンを可能にすることはまた、傷害または損傷の可能性ある領域を可視化するのに必要とされる放射線の用量を低下させ得る。
【０１２３】
したがって、本発明のもう１つの実施形態では、身体の血管、組織または臓器、例えば、心臓に影響を及ぼす、医学的介入の前、その間またはその後に、上記の組成物を投与することを含む、身体の血管、組織または臓器、例えば、心臓を保存する方法が提供される。本発明のこの実施形態に用いられる組成物は、その中に停止性濃度または非停止性濃度の有効成分を有し得る。一形態では、本方法は、非停止性濃度の組成物を投与することを含み、もう１つの形態では、停止性濃度の組成物（好ましくは、ボーラスとして）と、それに続いて、非停止性濃度の組成物を有する。
【０１２４】
もう１つの実施形態では、本発明は、失血に由来する低酸素性損傷および虚血性損傷を低減するのに役立つことによって身体の酸素輸送能および生存を改善するために、血液または血液製剤または人工血液または酸素結合分子または溶液とともに投与してもよく、または含んでもよい。酸素含有分子、化合物または溶液は、天然または人工生産物から選択され得る。例えば、人工血液ベースの製剤は、ペルフルオロカーボンベースであるか、またはその他のヘモグロビンベースの代替物である。ヒト血液の酸素輸送能を模倣するために、ヘモピュア（Ｈｅｍｏｐｕｒｅ）（商標）、ゲレンポール（Ｇｅｌｅｎｐｏｌ）（商標）、オキシジェント（Ｏｘｙｇｅｎｔ）（商標）およびポリヘム（ＰｏｌｙＨｅｍｅ）（商標）のようないくつかの成分を加えてもよい。ヘモポアは、化学的に安定化されたウシヘモグロビンに基づいている。ゲレンポール（Ｇｅｌｅｎｐｏｌ）は、合成水溶性ポリマーと修飾ヘムタンパク質を含む重合されたヘモグロビンである。オキシジェント（Ｏｘｙｇｅｎｔ）は、手術の間、一時的に赤血球細胞の代わりとなる静脈内酸素担体として使用するためのパーフルブロンエマルジョンである。ポリヘム（ＰｏｌｙＨｅｍｅ）は、命にかかわる失血の治療のためのヒトヘモグロビンベースの溶液である。
【０１２５】
それだけには限らないが、酸素ガス混合物、血液、血液製剤または人工血液または酸素結合溶液をはじめとする種々の方法からの身体の酸素化が、ミトコンドリア酸化を維持し、これが 筋細胞および臓器の内皮を保存するのに役立つと考えられる。特定の様式または理論に拘束されようとは思わないが、本発明者は、９５％Ｏ２／５％ＣＯ２を用いて穏やかにバブリングすることが、ミトコンドリア酸化を維持し、これが筋細胞および冠動脈脈管構造を保存するのに役立つことを見い出した。
【０１２６】
全身または身体の外側の臓器に関する本発明のこの態様の１つの好ましい実施形態では、使用前および／または使用の間、組成物に空気を含ませる。酸素の供給源は、酸素が主要成分である、酸素ガス混合物であり得る。酸素は、例えば、ＣＯ２と混合されていてもよい。酸素ガス混合物は、９５％Ｏ２および５％ＣＯ２であることが好ましい。
【０１２７】
本発明のもう１つの態様では、
適した容器中の、本発明の組成物を提供することと、
血液、血液製剤、人工血液および酸素の供給源からなる群から選択される１種以上の栄養分子を提供することと、
場合により、酸素を用いて組成物に空気を含ませること（例えば、単離された臓器の場合）または栄養分子を、組成物と組み合わせること、またはその両方と、
組織を、傷害を低減するのに適した条件下で、組み合わせた組成物と接触させておくことと
を含む、傷害を低減する方法が提供される。酸素供給源は酸素ガス混合物であることが好ましい。酸素が主要成分であることが好ましい。酸素は、例えば、ＣＯ２と混合されていてもよい。酸素ガス混合物は、９５％Ｏ２および５％ＣＯ２であることが、さらに好ましい。組織と接触する前および／または接触する間、組成物に空気を含ませることが好ましい。
【０１２８】
本発明のこの態様に従う組成物は、液体の形であり得る。薬剤組成物の液体製剤は、例えば、溶液、シロップまたは懸濁液の形をとることができ、水またはその他の適したビヒクルで構成するための乾燥製剤として保存できる。このような液体製剤は、製薬上許容される添加剤、例えば、懸濁剤、乳化剤、非液体ビヒクル、保存料およびエネルギー供給源を用いて従来の手段によって調製できる。もう１つの形態では、本発明は、錠剤の形の組成物を含み、もう１つの形態では、本発明は、経口、皮膚または経鼻経路によって投与できるエアゾールを含む。
【０１２９】
本発明のもう１つの態様では、心臓組織を、虚血イベント後の再灌流の間に、例えば、術後期間または長期の回復において起こることが多い、再潅流傷害、例えば、炎症および血液凝固および血液凝固効果から保護する方法が提供される。この方法は、場合により、停止形のボーラスに続いて、非停止形の本発明の組成物を含む溶液を投与することを含む。
【０１３０】
本発明はまた、同溶液の投与を含む、虚血および／または再潅流の間、心臓組織において梗塞の大きさを減少させる方法ならびに／または炎症および血液凝固反応を低減する方法を提供する。
【０１３１】
身体は、ヒトまたは動物、例えば、家畜動物（例えば、ヒツジ、ウシまたはウマ）、実験試験動物（例えば、マウス、ウサギまたはモルモット）またはコンパニオンアニマル（例えば、イヌまたはネコ）、特に、経済的に重要な動物であり得る。身体はヒトであることが好ましい。
【０１３２】
本発明はまた、有効量の上記の本発明の組成物を投与することを含む、疼痛、例えば、神経因性疼痛を管理する方法を提供する。
【０１３３】
本発明は、例えば、心筋梗塞または心臓発作という状況における心臓の治療における、または外科手術の際の、例えば、直視下心臓手術の際の身体の傷害の低減において特に有利である。
【０１３４】
本発明の方法は、組織を本発明の組成物と、組織がプレコンディショニング、停止、保護および／または保存されるのに十分な条件下で一定時間接触させることを含む。組成物は、直視下心臓手術（オンポンプおよびオフポンプ）、血管形成術（バルーンおよびステントまたはその他の血管装置を用いた）など、およびクロットバスター（抗凝固性薬物または薬剤）を用いるような心臓インターベンションの間の保護のための前処理として、静脈内、結腸内ボーラスまたは任意のその他の適した送達経路として注入または投与され得る。
【０１３５】
本組成物は、低酸素症または虚血から脳を保護するために、静脈内に投与してよいし、または静脈内および腹腔内の両方で投与してもよく、または大量失血から脈がない患者における特定の状況では、または大腿動脈または大動脈などの主幹動脈に直接接続して投与してもよく、または大動脈解離の際は頚動脈または別の動脈に投与してもよい。一実施形態では、本発明の組成物は、静脈内および会陰内に同時に投与してもよく、会陰は、事実上、血流のための組成物のリザーバーとして作用し、同時に、接触する近くの臓器に対して作用する。これは、外傷犠牲者、例えば、ショックを起こしているものに特に適している。さらに、組成物が２種以上の成分を含む場合には、これらを別個ではあるが同時に投与してもよい。標的部位への成分の実質的に同時の送達が望ましい。これは、投与のための成分を組成物として予め混合することによって達成され得るが、必須ではない。本発明は、本発明の組成物の成分（例えば、第１の成分が、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストおよび（ｉｉ）局所麻酔薬である）の局所濃度（例えば、心臓などの臓器）の同時増加を対象とする。組成物の１つの好ましい形は、アデノシンとリグノカインの組み合わせである。
【０１３６】
本発明は、カテーテルによって直接的に最終的に調整可能なポンプによって最小量の有効物が漸増される「ミニプレジア（ｍｉｎｉｐｌｅｇｉａ）」または「マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）」として知られる処置と関連していることが多い、灌流ポンプを用いて化合物を投与することによって実施できる。本発明では、プロトコールは、上記のミニプレジア（ｍｉｎｉｐｌｅｇｉａ）を利用し、これでは、患者自身の酸素化血液を用いて、心臓へ微量が直接漸増される。「設定」とは、心臓などの臓器へ直接到達されている物質の量の、シリンジポンプなどのポンプでの量をいう。
【０１３７】
組成物はまた、直視下心臓手術（オンポンプおよびオフポンプ）、血管形成術（バルーンおよびステントまたはその他の血管装置を用いた）など、およびクロットバスターを用いるような心臓インターベンションの間の保護のために、静脈内、結腸内ボーラスまたは任意のその他の適した送達経路としてボーラス注入または投与され、細胞を傷害から保護および保存し得る。
【０１３８】
本組成物はまた、直視下心臓手術（オンポンプおよびオフポンプ）、血管形成術（バルーンおよびステントまたはその他の血管装置を用いた）など、およびクロットバスターを用いるような心臓インターベンション後の保護のために、静脈内、結腸内ボーラスまたは任意のその他の適した送達経路としてボーラス注入または投与され、細胞を傷害から保護および保存し得る。
【０１３９】
したがって、組織に本発明の組成物を静脈内によって送達することによって組織を接触させることができる。これは、組織へ送達するためのビヒクルとして血液を用いることを含む。特に、本発明の組成物は、血液心筋保護のために使用できる。あるいは、本組成物は、組織または臓器への血流が制限される場合には特に有用な組織または臓器へ直接的に穿刺によって（例えば、シリンジによって）ボーラスとして直接投与してもよい。組織を停止、保護および保存するための組成物はまた、経皮または経鼻経路によって、エアゾール、粉末、溶液またはペーストとして投与してもよい。
【０１４０】
あるいは、本組成物は、傷害を低減するために、組織、臓器または細胞に、または身体内の露出部に直接投与してもよい。特に、本発明の組成物は、晶液性心筋保護のために使用できる。
【０１４１】
本発明の組成物は、以下の送達プロトコールのうち１種または組み合わせに従って送達してもよい：間欠的、連続およびワンショット。
【０１４２】
したがって、本発明のもう１つの態様では、組成物、主要なカリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬とを含む組成物の単回用量を投与すると、身体の組織を停止、保護および保存する組成物が提供される。本発明はまた、その組成物の有効量を単回用量として投与することを含む、組織を停止および保護する方法を提供する。
【０１４３】
本発明のもう１つの態様では、組成物、主要なカリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬の有効量を含む組成物の間欠的投与によって組織を停止および保護する組成物が提供される。適した投与スケジュールは、停止期間を通じて２０分毎に２分の導入量である。実時間は、組成物を投与する当業者による観察および選択された動物／ヒトモデルに基づいて調整すればよい。本発明はまた、組織を停止、保護および保存する組成物を間欠的に投与する方法を提供する。
【０１４４】
本組成物はまた、正常および傷害を受けている両方の組織または臓器、例えば、心臓組織での連続注入においてももちろん使用できる。連続注入はまた、組織が本発明の組成物中に保存される組織の静置保存を含み、例えば、ドナー組織をドナーからレシピエントへ輸送するために、組織を適した容器中に入れ、本発明の溶液に浸漬してもよい。
【０１４５】
各送達プロトコールの用量および時間間隔は、適宜設計できる。例えば、本発明の組成物は、組織の最初の停止のために、ワンショットとして組織に送達してよい。次いで、組織を停止された状態に維持するために、さらなる本発明の組成物を連続的に投与してよい。さらに、組織を再灌流するか、正常機能を回復するために、本発明のさらなる組成物を連続的に投与してもよい。
【０１４６】
これまでに記載されたように、本発明の組成物を、以下から選択される温度範囲で用いる、または組織と接触させてもよい：約０℃〜約５℃、約５℃〜約２０℃、約２０℃〜約３２℃および約３２℃〜約３８℃。約０℃〜約５℃の温度の組織を表すために「超低体温」が用いられることは理解される。「中等度低体温」は、約５℃〜約２０℃の温度の組織を表すために用いられる。「軽度の低体温」は、約２０℃〜約３２℃の温度の組織を表すために用いられる。正常な体温は約３７〜約３８℃であるが、「正常体温」は、約３２℃〜約３８℃の温度の組織を表すために用いられる。
【０１４７】
組成物の各成分について、組織と単独で接触させることが可能であるが、薬剤組成物の成分が、１種以上の製薬上許容される担体、希釈剤、アジュバントおよび／または賦形剤とともに提供されることが好ましい。各担体、希釈剤、アジュバントおよび／または賦形剤は、薬剤組成物の成分と適合するよう製薬上許容されなければならず、また被験体にとって有害であってはならない。薬剤組成物は、液体担体、希釈剤、アジュバントおよび／または賦形剤とともに調製されることが好ましい。
【０１４８】
本発明の組成物は、液体の形、たとえば、溶液、シロップまたは懸濁液の、組織への投与に適したものであり得る、あるいは、使用前に水またはその他の適したビヒクルで構成するための乾燥製剤として投与してもよい。このような液体製剤は、従来手段によって調製できる。
【０１４９】
本発明の組成物は、組織への局所投与に適したものであり得る。このような製剤は、従来手段によって、クリーム、軟膏、ゼリー、溶液または懸濁液の形に調製できる。
【０１５０】
本組成物はまた、デポー製剤として製剤できる。このような長時間作用型製剤は、移植（例えば、皮下にまたは筋肉内に）によって、または筋肉内注射によって投与してもよい。したがって、例えば、本発明の組成物は、適したポリマー材料または疎水性材料を用いて製剤できる（例えば、許容されるオイル中のエマルジョンまたはイオン交換樹脂のような、または難溶性誘導体のような、例えば、難溶性塩のような）。
【０１５１】
したがって、本発明のこの態様は、傷害を低減する方法を提供し、これは、組成物を、製薬上許容される担体、希釈剤、アジュバントおよび／または賦形剤とともに提供することを含む。好ましい製薬上許容される担体として、約６〜約９、好ましくは、約７、より好ましくは、約７．４のｐＨおよび／または低濃度のカリウムを有するバッファーがある。例えば、組成物は、最大約１０ｍＭ、より好ましくは、約２〜約８ｍＭ、最も好ましくは、約４〜約６ｍＭの総カリウム濃度を有する。適したバッファーとして、１０ｍＭグルコース、１１７ｍＭ ＮａＣｌ、５．９ｍＭ ＫＣｌ、２５ｍＭ ＮａＨＣＯ３、１．２ｍＭ ＮａＨ２ＰＯ４、１．１２ｍＭ ＣａＣｌ２（遊離Ｃａ２＋＝１．０７ｍＭ）および０．５１２ｍＭ ＭｇＣｌ２（遊離Ｍｇ２＋＝０．５ｍＭ）を含むクレブス−ヘンゼライト（Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ）、通常、１０ｍＭグルコース、１２６ｍＭ ＮａＣｌ、５．４ｍＭ ＫＣｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ２、１ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．３３ｍＭ ＮａＨ２ＰＯ４および１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（Ｎ−［２−ヒドロキシエチル］ピペラジン−Ｎ’−［２−エタンスルホン酸］を含むタイロード液、フレメス（Ｆｒｅｍｅｓ）溶液、通常、１２９ＮａＣｌ、５ ｍＭ ＫＣｌ、２ｍＭ ＣａＣｌ２および２９ｍＭ乳酸を含む、ハートマン（Ｈａｒｔｍａｎｎｓ）溶液およびリンガー乳酸が挙げられる。その他の、適したイオン環境において使用できる筋肉中に存在する天然に存在する緩衝化合物として、カルノシン、ヒスチジン、アンセリン、オフィジンおよびバレネン（ｂａｌｅｎｅｎｅ）またはそれらの誘導体がある。低カリウムを用いることの１つの利点は、本組成物を、被験体、特に、小児の被験体、例えば、新生児／乳児にとってあまり傷害性ではなくすることである。高カリウムは、回復の間の不規則な心拍動、心臓損傷および細胞浸潤と関連している可能性があるカルシウムの蓄積と結び付けられている。新生児／乳児は、心停止の間の高カリウム損傷に対して成体よりもより感受性がある。手術後、新生児／乳児の心臓は、何日も正常に戻らない場合があり、集中治療または生命維持を必要とする場合もある。
【０１５２】
低濃度のマグネシウム、たとえば、最大約２．５ｍＭなどを有する担体を使用することもまた有利であるが、当然のことではあるが、高濃度のマグネシウム、例えば、最大約２０ｍＭを、必要に応じて、本組成物の活性に実質的に影響を及ぼすことなく使用できる。
【０１５３】
本発明のもう１つの実施形態では、傷害を低減するための、本発明の組成物の使用が提供される。
【０１５４】
本組成物は、投与または組織との接触の前および／またはその間に空気を含ませることが好ましい。
【実施例】
【０１５５】
以下は、本発明を例示する目的で、本発明の適した組成物の限定されない例として提供される。
【０１５６】
動物および試薬：
Ｊａｍｅｓ Ｃｏｏｋ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ Ｃｏｌｏｎｙから得た雄のスプラーグドーリーラット（３００〜３５０ｇ）に、自由に摂食させ、１２時間明／暗周期で収容する。実験当日に、ラットに、ネンブタール（チオペントンナトリウム（Ｔｈｉｏｂａｒｂ）；１００ｍｇ／ｋｇ）の腹膜内注射で麻酔をかけ、プロトコールを通じて、必要に応じて麻酔薬を投与した。動物を、１９９６年改訂、米国国立衛生研究所（ＮＩＨ）出版第８５−２３号、動物実験に関する指針（Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ）に従って処置した。
【０１５７】
塩酸リグノカインは、ｌｏｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｕｐｐｌｉｅｒｓ（Ｌｙｐｐａｒｄ， Ｑｕｅｅｎｓｌａｎｄ）から２％溶液（腸骨）として供給されるものである。アデノシン（Ａ９２５１＞９９％純度）を含めたすべてのその他の化学薬品は、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｃａｓｔｌｅ Ｈｉｌｌ，ＮＳＷ）から供給されるものである。
【０１５８】
手術プロトコール：
麻酔をかけたヘパリンで治療されていない動物を、特別に設計されたプレキシガラスクレードル中に入れる。気管切開を実施し、Ｈａｒｖａｒｄ Ｓｍａｌｌ Ａｎｉｍａｌ Ｖｅｎｔｉｌａｔｏｒ（Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ，Ｍａｓｓ．，ＵＳＡ）を用い、加湿した大気で１分当たり７５〜８０ストロークで動物に人工呼吸して、血液ｐＯ２、ｐＣＯ２およびｐＨを正常な生理学的範囲に維持する（Ｃｉｂａ−Ｃｏｒｎｉｎｇ ８６５ 血液ガス分析器）。
【０１５９】
体温を、３７℃に維持する（Ｈｏｍｅｏｔｈｅｒｍｉｃ Ｂｌａｎｋｅｔ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｕｎｉｔ，Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ，Ｍａｓｓ．，ＵＳＡ）。直腸プローブを用いて、中核体温を測定する。薬物の中止および注入のために左大腿静脈をＰＥ−５０チューブを用いてカニューレ処理し、一方で、右大腿動脈は、血液採取および血圧モニタリングのためにカニューレ処理する（ＭａｃＬａｂと接続しているＵＦＩ １０５０ＢＰ）。すべてのカニューレは、ヘパリン化生理食塩水（１００Ｕ／ｍｌ 生理食塩水）を含む。心電図（ＥＣＧ）リードを、リードＩＩ ＥＣＧ配置に皮下に埋め込む。ラットを、１５〜２０分間安定化させ、次いで、血液を回収する。リズム障害および／または８０ｍｍＨｇを下回る平均動脈圧の持続的な低下を有していた動物はいずれも研究から廃棄された。
【０１６０】
出血性ショック：
以下の実施例は、出血性ショックを対象としている。出血性ショックは、３ｍｌ／ラット１００ｇの速度で１０分かけて、大腿静脈または動脈から採血し、３０〜３５ｍｍＨｇまで平均動脈血圧（ＭＡＰ）を下げることによって誘導する。３００ｇのラットについて、総血液量は、０．０６×３００＋０．７７＝１８．７７ｍｌであると推定される。１０分間かけて９ｍｌを取り出すこと（０．９ｍｌ／分）は、約５０％の血液量喪失をもたらす。
【０１６１】
６０％失血に関する実験には、２０分間かけて１１．２ｍｌを取り出す（０．５６ｍｌ／分）。次いで、取り出した血液を、０．０２ｍｌのヘパリン（１０００Ｕ／ｍｌ）を用いて予めすすいでおいたガラスシリンジ中に維持する。ＭＡＰは、必要に応じて採血または再注入によって、晶液性蘇生に先立つ３回のショック期間中（１時間または２時間または３時間、各ショック期間ｎ＝６）、３０〜３５ｍｍＨＧの間で維持する。
【０１６２】
出血性ショック期間の最後に、ラットに、以下の実験の各々において概説される蘇生溶液を与えて、８０〜９０ｍｍＨｇのＭＡＰを達成する（いくつかの実験では、ＭＡＰは、アデノシンおよびリグノカインの降圧効果から約４０〜６０ｍｍＨｇに低く維持され、身体のエネルギー供給とエネルギー需要指数を良好にバランスをとる）。
【０１６３】
生存は、血行動態（ＭＡＰ、心拍）および蘇生後のＥＣＧから評価し、これは最大６時間モニターされる。死亡は、ＭＡＰ、ＨＲの消失および洞調律の喪失から認識され、心臓の検査によって確認される。
【０１６４】
（実施例１）
アデノシン／リグノカイン蘇生溶液の静脈内投与
ラットを、４群（群あたり１０匹のラット、ｎ＝１０）にランダムに割り当て、準備し、上記のように出血性ショックに付した。６０分のショックの後、ラットを以下のとおり蘇生させた：
１．１多量の輸液：遅い静脈内輸液増加
群１：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインを含む０．９％ＮａＣｌの９ｍｌ／１００ｇ（脱血液容量の３倍）の１０分注入。
【０１６５】
群２：０．９％ＮａＣｌの９ｍｌ／１００ｇの１０分注入
１．２少量の輸液：急激な静脈内輸液増加（内）流動量増強
群３：７．５％ＮａＣｌ／６％アデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）およびリドカインリグノカインを含むデキストラン−７０の０．４ｍｌ／１００ｇ（３００ｇのラットに対し１．２ｍｌ）のボーラス
群４：７．５％ＮａＣｌ／６％デキストラン−７０の０．４ｍｌ／１００ｇ（３００ｇのラットに対し１．２ｍｌ）のボーラス
（実施例２）
静脈内輸液増加の腹膜内支援
ラットを、各群に１０ラット（ｎ＝１０）で、上記の実施例１においてと同数の群にランダムに割り当てた。ラットを準備し、上記のように出血性ショックに付した。６０分のショック後、ラットを上記実施例１に記載されたものに、５ｍｌの、０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインの腹膜内ボーラスを加えて蘇生させる。
【０１６６】
（実施例３）
アデノシン／リグノカインおよびさらなる成分を含む蘇生溶液の、遅い静脈内投与
ラットを、各群に１０匹（ｎ＝１０）で１８群にランダムに割り当てた。ラットを準備し、上記のように出血性ショックに付した。６０分のショックの後、ラットを、下記の溶液の９ｍｌ（脱血容量の３倍）の１０分注入を用いて蘇生させる。
【０１６７】
群１：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μｕＭリグノカインおよび５０μＭジアゾキシド
群２：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μｕＭリグノカインおよび１μＭジピリダモール（ＭＷ５０４．６）、
群３：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび１μＭ［Ｄ−Ｐｅｎ２，５］エンケファリン（ＤＰＤＰＥ）
群４：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび高硫酸マグネシウム（５ｍＭ）、
群５：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび低硫酸マグネシウム（０．５ｍＭ）
群６：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび基質／燃料（１０ｍＭグルコース，１ｍＭピルビン酸）
群７：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび抗酸化剤（１ｍＭアロプリノール）
群８：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび１０ｕＭアミロライド
群９：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび５０〜１００ｍＭラフィノース。
【０１６８】
群１０：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび５０〜１００ｍＭスクロース。
【０１６９】
群１１：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび５０〜１００ｍＭペンタスターチ。
【０１７０】
群１２：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−３０。
【０１７１】
群１３：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−４０。
【０１７２】
群１４：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−５０。
【０１７３】
群１５：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−６０。
【０１７４】
群１６：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのヒドロキシエチルデンプン。
【０１７５】
群１７：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨの修正ゼラチン。
【０１７６】
群１８：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび５０ｕＭジアゾキシド、１μＭジピリダモール（ＭＷ５０４．６）、１μＭ［Ｄ−Ｐｅｎ２，５］エンケファリン（ＤＰＤＰＥ）、高および低硫酸マグネシウム（５および０．５ｍＭ）、基質／燃料（１０ｍＭグルコース、１ｍＭ ピルビン酸）、抗酸化剤（１ｍＭアロプリノール）、ＮａＨ阻害剤（１０μＭアミロライド）、５０〜１００ｍＭスクロースおよび生理的ｐＨのデキストラン−４０。
【０１７７】
（実施例４）
アデノシン／リグノカインおよびさらなる成分を含む蘇生溶液の迅速な静脈内投与
ラットを、１６群（ｎ＝１０）にランダムに割り当て、準備し、上記のように出血性ショックに付す。６０分のショック後、ラットを、以下の溶液の０．４ｍｌ／１００ｇ（３００ｇのラットに対し１．２ｍｌ）のボーラスを用いて蘇生させる。
【０１７８】
群１：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび５０μＭニコランジルを含む７．５％Ｎａｌ／６％デキストラン−７０。
【０１７９】
群２：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび１μＭジピリダモール（ＭＷ５０４．６）を含む７．５％ＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８０】
群３：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび１μＭ［Ｄ−Ｐｅｎ２，５］エンケファリン（ＤＰＤＰＥ）を含む７．５％ＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８１】
群４：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび高硫酸マグネシウム（５ｍＭ）を含む７．５％ＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８２】
群５：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび低硫酸マグネシウム（０．５ｍＭ）を含む７．５％ＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８３】
群６：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび基質／燃料（１０ｍＭグルコース、１ｍＭピルビン酸）を含むＮａＣＩ／６％デキストラン−７０。
【０１８４】
群７：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび１ｍＭアロプリノールを含むＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８５】
群８：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび１０μＭアミロライドを含むＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８６】
群９：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび不透過物（５０〜１００ｍＭラフィノース、スクロース、ペンタスターチ）を含むＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８７】
群１０：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０ｕＭリグノカインおよび５０〜１００ｍＭスクロース。
【０１８８】
群１１：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび５０〜１００ｍＭペンタスターチ。
【０１８９】
群１２：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび生理的ｐＨのコロイド（デキストラン−３０、４０、５０および６０ヒドロキシエチルデンプンおよび修正ゼラチン）を含むＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１９０】
群１３：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−４０。
【０１９１】
群１４：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−５０。
【０１９２】
群１５：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−６０。
【０１９３】
群１６：１０ｕＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび５０ｕＭジアゾキシド、１ｕＭジピリダモール（ＭＷ５０４．６）、１ｕＭ［Ｄ−Ｐｅｎ２，５］エンケファリン（ＤＰＤＰＥ）、高および低硫酸マグネシウム（５および０．５ｍＭ）、基質／燃料（１０ｍＭグルコース、１ｍＭピルビン酸塩）、抗酸化剤（１ｍＭアロプリノール）、ＮａＨ阻害薬（１０ｕＭアミロライド）、不透過物（５０〜１００ｍＭ生理的ｐＨのスクロースおよびデキストラン−４０。
【０１９４】
（実施例５）
遅い静脈内輸液増大の腹膜内支援
ラットを準備し、出血性ショックに付し、５ｍｌの、０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインの腹膜内ボーラスとともに、実施例３に記載の通り蘇生させる。
【０１９５】
（実施例６）
迅速な静脈内輸液増大の腹膜内支援
ラットを準備し、出血性ショックに付し、５ｍｌの、０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインの腹膜内ボーラスとともに、実施例４に記載の通り蘇生させる。
【０１９６】
（実施例７）
異なる蘇生戦略における体温低下の効果
上記の実施例（実施例１から６）を３５、３３、２０、および４℃で繰り返し行った。存在するペルフルオロカーボンベースの、またはヘモグロビンベースの代用品または血液、血液製剤または人工血液を含む製剤は、空気で平衡化されるか、予備試験で有効であるとわかった場合には、酸素を通気させるか、有してよいヒトの血液の酸素輸送能を模倣するために、ヘモピュア（商標）、ゲレンポール（Ｇｅｌｅｎｐｏｌ）（商標）、オキシジェント（Ｏｘｙｇｅｎｔ）（商標）、ポリヘム（ＰｏｌｙＨｅｍｅ）（商標）などの成分を加えてもよい。
【０１９７】
（実施例８）
心臓手術（オンポンプ）中のＶＦ治療
本発明の異なる利用法を、患者のＡ〜Ｅに表示された５群で示す。
【０１９８】
群Ａ：標準的な地域の病院で低体温（心筋保護送達温度１０℃）高カリウム心筋保護およびカリウム「ホットショット」（停止用量）を投与されている患者
群Ｂ：：標準的な地域の病院で加温（心筋保護送達温度３３℃）高カリウム心筋保護およびカリウム「ホットショット」（停止用量）を投与されている患者
群Ｃ：低体温でアデノシンおよびリグノカイン（心筋保護送達温度１０℃）心筋保護（通常のカリウム５ｍＭ）および心臓を蘇生するためＨｉｂｅｒＳｔａｒｔ（非停止用量）を投与されている患者
群Ｄ：加温アデノシンおよびリグノカイン（心臓保護送達温度３３℃）心臓保護（通常カリウム５ｍＭ）および、心臓を蘇生するためのアデノシンおよびリグノカインの非停止用量を投与されてきる患者。停止の前に心臓を前処理する効果を調べるための群ＢおよびＤ中のＬまたはＡＬＭ。
【０１９９】
群Ｅ：マグネシウム（１．０〜２０ｍＭ）を含むか含まないアデノシンおよびリグノカインの溶液を用いて、心臓を前処理／プレコンディショニングし、次いで、群Ｄにおいて停止させ、蘇生させる。また、心臓を、停止または非停止用量の、マグネシウム（１．０〜２０ｍＭ）を含むか含まないアデノシンおよびリグノカイン溶液と組み合わせて灌流後ポストコンディショイングしてもよい。
【０２００】
群Ａ〜Ｅにおける、ヒト患者のための心筋保護組成物およびプロトコールは以下のとおりである。
【０２０１】
１）群Ａ＆Ｂの高カリウム心筋保護液の組成：
心筋保護の導入２０ｍＭ Ｋ＋溶液（最終）：ＢＡＸＴＥＲ（コードＡＨＫ５５２４）。各５００ｍｌが以下を含む：塩化ナトリウムＢＰ ４．５ｇ、塩化カリウムＢＰ ３ｇ、塩化マグネシウムＢＰ ２．６ｇ、リグノカインＨＣｌ ＢＰ ２５０ｍｇ。使用前に、炭酸水素ナトリウム（２５ｍｍｏｌ／５００ｍｌ）およびアスパラギン酸一ナトリウム（１４ｍｍｏｌ／５００ｍｌ）を加え、ｐＨ約３．７およびオスモル濃度約５４７ｍＯｓｍ。
【０２０２】
心筋保護の維持９ｍＭ Ｋ＋溶液（最終）：ＢＡＸＴＥＲ（コードＡＨＫ５５２５）。各５００ｍｌが以下を含む：塩化ナトリウムＢＰ ４．５ｇ、塩化カリウムＢＰ １ｇ、塩化マグネシウムＢＰ ２．６ｇ。使用前に、炭酸水素ナトリウム（２５ｍｍｏｌ／５００ｍｌ）およびアスパラギン酸一ナトリウム（１４ｍｍｏｌ／５００ｍｌ）を加え、ｐＨ約３．７およびオスモル濃度約５４７ｍＯｓｍ。
【０２０３】
蘇生の間、停止溶液は、Ｋ＋維持と同一であるが、導入、維持および最終ショットの間の心筋心臓温度は、３２〜３８℃である。心臓は、この時点で停止したままである。
【０２０４】
２）群Ｃ、ＤおよびＥの、アデノシンおよびリグノカイン（「ＡＬ」）心筋保護液の組成：
ＡＬの最適濃度は、用量応答曲線から見い出される。Ａは、約０．２〜２ｍＭであり、Ｌは、約０．２〜４ｍＭである。これらの濃度は、ヒトにおいて安全であることがわかっている。マグネシウムは、１．０〜２０ｍＭであり得る。停止導入は、高レベルのＡおよびＬにおいてであり、維持用量はより低いもの、例えば、停止を導入する濃度の半分であり得る。心臓に注入される最終Ｋ＋およそ最終３〜６ｍＭ（通常およそ５ｍＭ）。導入および維持容量の温度プロフィールは、群Ａ＆Ｂについて記載される温度プロトコールと同様である。
【０２０５】
蘇生の間、アデノシンおよびリグノカイン溶液は、心臓を停止しないが、蘇生の間、心臓を保護および保存する。クロスクランプの開放に先立って拍動する場合もある。ＡＬおよびＭの濃度は、Ａ：１０〜４０マイクロモル、Ｌ：３０〜５０マイクロモルおよび１０〜２０ｍＭの硫酸マグネシウムおよび温度３２〜３８℃である。
【０２０６】
３）群Ｅの心筋保護液組成：上記の群Ｄと同様であるが、再灌流またはコンディショニング後の間の硫酸マグネシウムを伴うか伴わない、アデノシンおよびリグノカイン濃度の前処理／プレコンディショニング用量＋硫酸マグネシウムを伴うか伴わない、アデノシンおよびリグノカイン濃度を含む。
【０２０７】
マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）（血液の１部および９部）を用いるＭＰＳ Ｑｕｅｓｔ心筋保護灌流ポンプシステムが利用可能である場合には、以下の、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカイン濃度を用いて、研究に用いられる停止および維持用量を試験できる。
【０２０８】
停止の導入：５０ｍｌカセット中、５４ｍｇ Ａ＋１３２ｍｇ Ｌ（心臓に達する血液において、０．５ｍＭおよび１．０ｍＭ最終濃度）。Ｍｅｎｔｚｅｒらによる研究により、２ｍＭ ａｄｏは、ヒトにおける心筋保護において安全であると示されている。
【０２０９】
維持：５０ｍｌカセット中、２６ｍｇ Ａ＋６６ｍｇ Ｌ（０．２ｍＭ ａｄｏおよび０．５ｍＭ ｌｉｄｏ）。
【０２１０】
蘇生：１０μＭ Ａ、３０μＭ Ｌおよび１６ｍＭ ＭｇＳＯ４カセットで用いられる、ＡＬおよびＭｇ＋＋（「ＡＬＭ」とも呼ばれる）。
【０２１１】
命にかかわる不整脈（心室性頻拍および／または細動）を突然起こした、研究に登録された患者の治療：患者が、病院において手術の前または後に、突然の心イベント、例えば、心臓発作および心臓の拍動リズムの突然の変化（例えば、心室性頻拍または心室細動へ変換する）を起こしている場合には、心臓を蘇生するために、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラス用量を静脈内に（または心臓内に）投与し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要である場合には）。患者が、手術室または集中治療室中にいる間に、命にかかわる重篤な不整脈（心室細動または心室性頻拍）を起こしている場合には、心臓を蘇生するために、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラス用量を静脈内に（または心臓内に）投与し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要である場合には）。
【０２１２】
（実施例９）
ヒトにおけるオフポンプ心臓手術の間および後の、心臓不整脈からの保護およびＶＦの治療
前臨床研究によって、ｉｎ ｖｉｖｏラットおよびイヌモデルにおいて、マグネシウムを伴うか伴わない静脈内注入アデノシンおよびリグノカインは、心筋虚血の間の心臓にとって高度に保護的であるということが示された。３方面からの攻撃が想定される：１）虚血時間の間、静止細胞の膜電位または電圧を維持し、２）代謝をダウンレギュレートし、３）炎症および過凝固反応を鈍らせる。静止分極状態近くに膜電位を防御することによって、イオンおよび代謝の不均衡が減少し；細胞の代謝をダウンレギュレートすることによって需要が減少し、炎症および血液凝固反応を減弱することによって、再潅流の間のさらなる損傷が低減される。３つすべてを標的にすることによって、命にかかわる不整脈および心筋および冠動脈脈管構造両方のその他の虚血関連損傷からの、より大きな保護が提供される（Ｃａｎｙｏｎ，ＳおよびＤｏｂｓｏｎ，ＧＰ２００４「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ａｇａｉｎｓｔ ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ ａｎｄ ｃａｒｄｉａｃ ｄｅａｔｈ ｕｓｉｎｇ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ａｎｄ ｌｉｇｎｏｃａｉｎｅ ｄｕｒｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎ ｖｉｖｏ ｒａｔ」、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ、２８７：Ｈ１２８６〜Ｈ１２９５頁）。
【０２１３】
低リグノカイン用量を用いるアデノシンおよびリグノカインの静脈内注入は高度に心保護的であった。低リグノカイン濃度を用いるアデノシンおよびリグノカインは、急性虚血のラットモデルにおいて、死亡という結果にならず、重篤な不整脈を事実上なくし、梗塞の大きさを減少させた。
【０２１４】
心拍動下手術を受けている患者に投与される本発明の組成物は、中心静脈ライン上の専用ポートを介する静脈内経路によるものとなる。本組成物は、３０５μｇ／ｋｇ／分のアデノシンおよび６０μｇ／ｋｇ／分のリグノカインを含み、各冠動脈吻合の各５分前およびその間、静脈内に投与される。単回のリグノカインボーラス（１ｍｇ／ｋｇ）が、ＡＬ溶液の最初の投与の直前に３分間注射される。
【０２１５】
例えば、７０ｋｇの患者には：１分あたり０．３０５×７０＝２１．３５ｍｇのアデノシンおよび１分あたり０．０６×７５＝４．２ｍｇのリグノカインが投与される。アデノシンおよびリグノカイン溶液に先立って、７０ｍｇのリグノカイン−ＨＣＬがボーラスとして投与される。
【０２１６】
注入の制限：１時間の間、絶え間なく注入される場合には、６０分間絶え間なく投与される場合に投与されるアデノシンおよびリグノカインの総量は、６０×２１．３５＝１２８１ｍｇのアデノシンおよび６０×４．２ｍｇ＝２５２ｍｇのリグノカイン（＋７０ｍｇのボーラス＝３２２ｍｇ）に等しい。アデノシンの半減期は、ヒト血液において４〜１０秒である。本発明者らは、３つの吻合を完了するために３０分の総アデノシンおよびリグノカイン注入時間、平均時間各１０分を想定する。もう１つの実施例は、７０ｋｇの被験体において０．３ｍｇ／ｋｇ／分の注入速度であり、本発明者は２１ｍｇ／分を注入する必要がある。注入混合物が、５４０ｍｌ中、３００ｍｇ（すなわち、０．５６ｍｇ／ｍｌ）である場合には、本発明者らは、この被験体のために、３７．５ｍｌ／分すなわち２．２５０ｌ／時間で実施する必要がある。
【０２１７】
前臨床研究：ラット研究では、１０ｍｌの生理食塩水への０．０５６７ｇのアデノシンおよび０．５６５ｍｌのリグノカイン−ＨＣｌ（２０ｍｇ／ｍｌ）を、３００ｇのラットに１ｍｌ／時間でＩＶ注入した。そのため、３５分の前処理および虚血期間の間、本発明者らは、本発明者らが作製した１０ｍｌの溶液のうち３５／６０×１ｍｌ＝０．５８ｍｌしか用いない。
【０２１８】
ｌｉｄｏ−ＨＣｌの１ｍｇ／ｋｇのボーラスと、それに続くアデノシンおよびリグノカイン溶液の注入で開始する。アデノシン注入速度は、０．３１１ｍｇ／ｋｇ／分（すなわち、１ｍｌ／時間の注入速度または１分あたり１／６０ｍｌまたは１／６０×５．６ｍｇ／ｍｌ（本発明者らが作製した１０ｍｌ中）×１０００／３００（３００ｇのラットにつき）＝０．３１１ ｍｇ／ｋｇ／分）に変換する。リグノカイン注入速度は、０．０６２７ｍｇ／ｋｇ／分（すなわち、１／６０×１．１３ｍｇ／ｍｌ（本発明者らが作製した１０ｍｌ）×１０００／３００＝０．０６２７ｍｇ／ｋｇ／分）に変換する。
【０２１９】
ヒト研究：
７０ｋｇのヒトの研究のために、０．０５６７×７０／０．３＝１３．２３ｇのアデノシンおよび０．５６５×７０／０．３＝１３２ｍｌのリグノカイン−ＨＣｌ（２０ｍｇ／ｍｌ）を含む５００ｍｌ（５０回）バッグを作製し、この溶液を、１時間あたり５０ｍｌのＩＶ速度で送達する。これは、単位質量あたり同量の薬物を送達する。５つの吻合および各々の前５分間の前処理には、各吻合に２０分（最大）かかるとすれば、５×（２０＋５）分＝１２５分（最大）である。
【０２２０】
したがって、５０ｍｌ／時間で、１２５分間の全吻合時間、患者あたり約５０／６０×１２５＝１０４ｍｌを注入する。ＩＶ注入プロトコールの例：３００ｍｌ（５００ｍｌではない）を作製するには、３／５×１３．２３ｇのＡｄｏおよび３／５×１３２ｍｌのリグノカインＨＣｌとなり、１時間あたり５０ｍｌでｉｖ注入する。７０ｋｇのヒトには、アデノシン注入速度：０．３１１ｍｇ／ｋｇ／分または２１．７７ｍｇ／ヒト患者／分およびリグノカイン−ＨＣｌ注入速度：０．０６２７ｍｇ／ｋｇ／分または４．３９ｍｇ／ヒト患者／分。
【０２２１】
最初の吻合の６分前に、リグノカインのボーラス（１ｍｇ／ｋｇ）、続いて、ＡＬ溶液を５分間注射する。各吻合後に停止注入を完了した。外科医が、次の吻合の準備ができた時点で、前５分のＩＶ注入を始める。同じことを各吻合について反復する。
【０２２２】
投与のタイミング：手術前５分、局所虚血の間、連続して、吻合の完了後に停止する。
【０２２３】
（実施例１０）
「オンポンプ」心臓手術の間のＶＦの治療およびマグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインの使用
現在、すべての手術用心筋保護液の９９％を越えるものが、高カリウム（１５〜２０ｍＭ）を含み、これが、膜電位を８３ｍＶから約−５０ｍＶに脱分極することによって心臓を不自然に停止する。これらの脱分極電位でナトリウムは、Ｎａ＋「ウィンドウ」電流によって細胞の内側に増大し得、次いで、これが、Ｎａ／Ｃａ２＋交換体の逆転によって細胞内Ｃａ２＋の上昇をもたらす。損傷をもたらす可能性のあるＣａ２＋の蓄積が、心筋保護期間（導入および維持相）の間および／または停止後の蘇生−再潅流相の間に起こり得る。高カリウムと関係しているＣａ２＋負荷は、再潅流期間の間の心筋スタンニング、心室性不整脈、虚血性傷害、微小血管傷害、組織浮腫、フリーラジカル生成および機能喪失と関係している。カリウムを脱分極することはまた、強力な冠動脈血管収縮薬であり、これはさらに心筋保護下の停止、維持および回復の間の傷害に対する心臓の任意の先行受攻性を構成し得る。
【０２２４】
（実施例１１）
命にかかわる心室性頻拍および／または細動の治療：
多数の突然死が、急性心室性頻脈性不整脈（心室性頻拍および／または細動）によって引き起こされ、多くは、心疾患に関連して急性冠動脈イベントによって、または既知心疾患のない人において誘発される。致命的不整脈の出現における最も一般的な病態生理学カスケードは、心室性頻拍が悪化して心室細動、後に、心静止または心停止および死亡となる。患者が、病院において手術の前または後に、突然の心イベント、例えば、心臓発作および心臓の拍動リズムの突然の変化（例えば、心室性頻拍または心室細動へ変換する）を起こしている場合には、心臓を蘇生するために、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラス用量を静脈内に（または心臓内に）投与し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要である場合には）。患者が、手術室または集中治療室中にいる間に、命にかかわる重篤な不整脈（心室細動または心室性頻拍）を起こしている場合には、心臓を蘇生するために、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラス用量を静脈内に（または心臓内に）投与し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要である場合には）。
【０２２５】
マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインを用いて、不規則性不整脈、例えば、急性心室性頻脈性不整脈につながる予期せぬ心イベントを患っているヒト被験体を治療し、心臓を正常な拍動または洞調律に薬理学的に変換する方法は、以下のとおりである。
【０２２６】
心臓を、高カリウム性心筋保護導入、維持および蘇生のマイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）法を用いて停止する。マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）は、心筋に、血液と心筋保護の標準的な４：１混合物を注入して心臓を停止する代替法である。マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）は、カリウム（停止）およびマグネシウム（追加）溶液の微量滴定と合わせた、持続的な酸素の豊富な血液の送達による、心臓の有酸素性停止を導入および維持することを目指している。有酸素性停止は、標準的な４：１心筋保護投与計画のものを上回る優れた心筋保護および血糖値のより厳格な制御を提供する。追加的混合物にアデノシンおよびリグノカインを添加すると、さらに高レベルの心筋保護が、患者に長時間持続する周術期利益をもたらすと期待されることがより重要である。アデノシンおよびリグノカインの組成物は、心臓手術を患者にとって安全なものに、外科医にとって、より予測可能なものにする。
【０２２７】
この実施例は、カリウム停止導入および維持心筋保護と、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインを用いる非停止性蘇生溶液とを比較する。維持溶液もまた、アデノシンおよびリグノカインを含み得るが、これらの群における主な停止様式は高カリウムである。もう１つの別の群では、アデノシンおよびリグノカインが、心筋保護を導入および維持するための主な停止、保護および保存様式であり、蘇生を、カリウム停止、維持および蘇生群と比較する。心臓が、蘇生後に適切な機能に戻らない場合には、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラスを、灌流ライン中（心臓内）に投与して心臓を蘇生し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要とされる場合）。
【０２２８】
マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）送達プロトコール：オンポンプ冠動脈バイパス手術、弁手術または組み合わせた手順；またはこれらの再手術に予定されている患者。患者に麻酔および心臓手術を、通常の実施のとおり施す。変力物質、血管収縮薬の使用は「プロトコール主導」であり、手術／麻酔チームによって取り決められた使用のための判定基準に基づく。以下は、例えば、Ｑｕｅｓｔ ＭＰＳ（登録商標）Ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ Ｓｙｓｔｅｍにおける心臓の停止、維持および蘇生のために設計されたカセット処方である。
【０２２９】
停止カセット：
１．８０ｍＥｑの非希釈カリウム＝４０ｍＬ
２．高設定：２５ｍＥｑ／Ｌ
３．低設定：１０ｍＥｑ／Ｌ
追加カセット
１．１２ｍｇアデノシン＝４ｍＬ
２．２５ｍｇリグノカイン＝１ｍＬ
３．５ｇｍ硫酸マグネシウム＝１０ｍＬ
４．３０ｍＬ晶液プライム（例えば、プラズマライト（Ｐｌａｓｍａｌｙｔｅ））
５．追加カセット中の総容量：４５ｍＬ
６．追加設定：１０ｍＬ／Ｌ
ヘパリン処置時には、アイスリザーバーを氷で頂部まで満たす。必要に応じてリザーバーを補充する。送達温度約８〜１２℃。加温導入のための温度設定は、３７℃である。
【０２３０】
１．心停止は、正常温度高カリウム性血液マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）で導入する。患者に、高カリウム性血液マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）を施す。１）前処理投与計画としての追加カセット中のアデノシンおよびリグノカインおよびマグネシウム、２）維持心筋保護の送達の間の低アデノシンおよびリグノカイン、マグネシウムおよびカリウムレベルならびに３）加温再潅流用量としての、カリウムを含まないアデノシンおよびリグノカインおよびマグネシウム。
【０２３１】
２．導入期のクロスクランプの適用時には、順行性の流量を、５００ｍＬ／分に迅速に増大し、次いで、３２０〜３５０ｍＬ／分に直ちに戻す。これによって大動脈弁の閉鎖を確実にする。高（２５ｍＥｑ）カリウムを含む合計７００〜１０００ｍＬの加温血液心筋保護を、順行法で送達する。静止状態に達した時点で、逆行性加温に切り替え、さらなる７００ｍＬを送達する。
【０２３２】
３．温浴を冷却（４℃；送達温度は、８〜１２℃の間である）に切り替える。追加設定（生理食塩水またはアデノカイン（ａｄｅｎｏｃａｉｎｅ））を２ｍＬ／Ｌに下げる。可能ならいつでも、症例を通じてマイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）投与を続ける。
【０２３３】
４．クロスクランプの最後の１０分に近づいた時点で、調製物を作製し、温浴を切り替えて３７〜３８℃に加温することによって加温再灌流用量を送達する。
【０２３４】
５．加温再灌流用量：逆行法で、アデノシン及びリグノカインを含むか含まない加温血液の送達を開始または継続する。加温逆行性マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）をグラフトが完了するまで投与し、順行性送達モードに切り替える。これによって、グラフトの脱気が容易になり、心臓の右側が灌流されるのが可能となる。順行性送達様式によって、マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）が、適切に送達され、心筋に分配されることが確実となる（すべてのグラフトが完了した時点で）。順行モードで３〜５分後、脱気が完了した時点で、追加カセット中の残存容量（通常、５００〜１０００ｃｃ）が投与されるまで加温順行を継続する。
【０２３５】
いくつかのエンドポイントおよび測定可能な結果を、比較のために評価する：
１．年齢、性別、併存症（すなわち、糖尿病、高コレステロール血症、高血圧症、喫煙、ＣＯＰＤ、腎不全）を含めた患者個体群統計学および病歴。
【０２３６】
２．診断、ＢＳＡおよび検査値（ＢＵＮ／クレアチニン、ＩＮＲ、ＰＴ／ＰＴＴ、ＩＮＲ、ＰＬＴカウント、ヘパリン後グルコースおよびＨＣＴ）、意図されるグラフトの数を含めた手術前データ
３．１）バイパスされる血管の数
２）バイパスの長さ（離脱開始時）
３）クロスクランプ時間
４）血糖値、インスリン投与
５）症例の間のＨＣＴ
６）送達されるマイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）の総容量、投与される添加剤およびカリウムの量
７）加温再灌流用量の期間、ホットショットの容量
８）ブレイクスルーイベント（心筋の蘇生）の数および再停止するのに必要とされるカリウムレベル
９）ＣＰＢ前および後駆出分画
１０）クロスクランプ除去前の洞調律への回復（はい／いいえ）；心室細動の発生率
１１）心房細動の発生率
１２）カルディオバージョンの必要性（ショックの数、各々のエネルギーレベル）
１３）任意の再停止プロトコールの必要性［追加のまたは延長されるホットショット（外科医の要請で）、ホットショットの時点でアデノカインへ変換する必要性］
１４）手術室から手術後最初の２４時間までの尿排出量
１５）手術室から退院までの血液製剤使用量（ＦＦＰ、血小板、ＲＢＣおよび晶液）
１６）血糖値およびインスリン投与（手術後最初の２４時間）
１７）手術後６、１２、２４時間での血漿トロポニンレベル
１８）急性心筋梗塞の臨床的証拠（Ｑ波、不整脈）
をはじめとする手術中データ。
【０２３７】
４．人工呼吸器の時間（抜管までの時間）
５．ＩＣＵ滞在の長さおよび病院滞在の長さ（退院までの時間）
６．手術後心房細動の治療、カウンターショック（数およびジュール）および以下のスケジュールに従って測定されるペースメーカーの使用：
１）Ｘクランプ除去から手術室退出まで
２）手術後ＴＩＣＵでの最初の２４時間
３）ＴＩＣＵ退出から退院まで
７．以下のスケジュールに従って駆動され、測定される変力物質および血管収縮薬プロトコールの使用：
１）手術室を出る際の各々の比率
２）手術後最初の２４時間後ＴＩＣＵでの各々の比率。
【０２３８】
場合によっては、手術後心臓の蘇生の間、心臓は反応せず、細動する。心臓を蘇生するために、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラス用量を、灌流ラインまたは心臓の筋肉（または心臓内）への適したエントリーポイント中に投与し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要とされる場合）。集中治療室において患者が命にかかわる重篤な不整脈を起こしている場合には、心臓を蘇生するために、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラス用量を静脈内に（または心臓内に）投与し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要である場合には）。
【０２３９】
（実施例１２）
手術の間の治療
本発明の組成物および方法はまた、損傷を低減するために代謝活性の低下している期間の間、例えば、細胞静止状態（医学的に誘導されたまたはそうでない）に使用できる。心臓手術は一例である。この実施例では、既知高カリウム性心臓保護が用いられ、手術の間の組織損傷を低減するために本発明の組成物が投与される。
【０２４０】
このプロトコールは、微量の本発明の組成物を、種々の割合で患者自身の酸素化された血液と混合し、種々の設定で心臓に灌流する上記のミニプレジア（ｍｉｎｉｐｌｅｇｉａ）を用いる。「設定」とは、血液中に混合され、臓器、この実施例では、心臓へ直接送達される物質の量の、ポンプ、例えば、シリンジポンプでの量をいう。
【０２４１】
２種のカセットは以下のとおり調製した。
【０２４２】
（１）停止カセット：
１．４０ｍｌの、８０ｍＥｑを有する非希釈カリウム−したがって、２ｍＥｑ／ｍｌ
２．高設定：リットルあたり２５ｍＥｑ
３．低設定：リットルあたり１０ｍＥｑ
上記の項目１中のカリウムは主に心停止剤である。高カリウムは、その既知不利点および有害な副作用にもかかわらず、最もよく知られており、用いられている心停止である。代替心停止剤は、カリウムチャネルオープナー／アゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニスト（例えば、アデノシン）を、局所麻酔薬（例えば、リグノカイン）とともに、ｍＭ量で含むＷＯ００／５６１４５（ＧＰ Ｄｏｂｓｏｎ）に開示されている。この明細書の開示内容は、参照により全文が本明細書に組み込まれる。本明細書では例示されていないが、上記の項目１の高カリウム心停止剤は、このような心停止剤によって置換され得る。
【０２４３】
（２）追加カセット：
１．１２ｍｇを有する４ｍｌのアデノシン、従って、３ｍｇ／ｍｌ
２．１０ｍｌの硫酸マグネシウム＝５ｇ（または５ｇに相当するＭｇＳＯ４のバイアル）
３．３０ｍｌ−晶液プライムはいずれも（例えば、Ｌ／Ｒ、プラズマライト（Ｐｌａｓｍａｌｙｔｅ）商標）、ノルモソール（Ｎｏｒｍｏｓｏｌ）（商標））ポンプで使用できる。
【０２４４】
４．追加カセット中の総容量：４４ｍｌ
５．追加設定：１リットルあたり１０ｍｌ
このカセットは、５０ｍｌカセットを支持する機械に適している。
【０２４５】
以下の記載されるように、このカセットにリグノカインを添加し、改善された結果を送達する。リグノカインは、アデノシンのものの０．１〜１０倍、好ましくは、０．５〜２倍の濃度で添加される。
【０２４６】
以下のデータは、クロスクランプ除去の直前の回復期まで、このカセットにリグノカインを添加していない実験から得たものである。しかし、本発明のもう１つの実施形態では、アデノシンとリグノカインの組み合わせが、手順の維持または静止期の間に投与されるよう、その最初の使用からこのカセットにリグノカインを添加する。これは、心臓回復の見込みをさらに改善し、かつ／または術後合併症を低減するということがわかる。
【０２４７】
この実施例において組成物を投与するために用いた手順は、以下のとおりであり、虚血性停止ではなく、有酸素性停止を引き起こすことを全体的な目的とする。
【０２４８】
１．ヘパリン処置時には、アイスリザーバーを氷で頂部まで満たす。リザーバーは、ｘ−クランプ時間が３時間を超えるまで補充される必要はない。送達温度は約１２℃とする。最後の３回目のｘ−クランプ期間に向けて、酸素の豊富な血液のある程度の代謝が起こるはずである。
【０２４９】
２．加温導入のための温度設定は、加温（３７℃）。
【０２５０】
３．停止のための高設定：２５ｍＥｑ／１リットルの高カリウム性停止カセットが迅速な停止を導入する。
【０２５１】
４．追加のための設定：クロスクランプの前に１０ｍｌ／リットル。
【０２５２】
クロスクランプの適用時：
１．順行性のフローを５００ｍｌに迅速に増大し、次いで、３２０〜３５０ｍＬ／分に直ちに戻して、大動脈弁の閉鎖を確実にする。
【０２５３】
２．７００ｍｌの加温順行性を投与する。静止状態に達すれば、３００ｍｌをさらに投与し、次いで、低Ｋ＋設定（すなわち、１０ｍｌ／リットル）に切り替える。
【０２５４】
３．７００ｍｌの加温逆行性を投与する。
【０２５５】
４．水温を冷却に切り替える。冷逆行性を可能な限り投与する。経験的に停止設定を低くするほど、より長いフローが継続する。
【０２５６】
５．低追加設定を２ｍｌ／リットルとする。心臓のほとんどの準備が生じる。
【０２５７】
６．ＣＡＢＧを行う場合には、末梢をまず実施し、最初のグラフトの後に、マルチカテーテルラインによってグラフトをポンプとつなぐ。次いで、フローを、１５０トールの圧力を達成するよう極めてゆっくりと増大し、外科医にとって有用な情報であるフローに注意する。このことは、以下のいくつかのことに達する：
・圧力対フロー比の究極の判断基準を用いてグラフトの開存性を調べるための制御された機械装置；
・外科医は、吻合部の止血を調べる手段を有する；
・標的部位に順行性に、必要に応じて同時に、逆行性に送達する能力。
【０２５８】
７．処置が、弁および冠動脈での作業を含む場合には、冠動脈をまず実施する。このように病気の心臓に栄養分が提供され、それは弁が作動している間必要である。
【０２５９】
８．通常のＳＯＰに従ってＫ＋をモニターし、カリウム濃度を所望のレベルを満たすよう調整する。
【０２６０】
ｘ−クランプの最後の１０分に近づいた時点で、加温ショットのための調製物を作製する。これらは以下を含む：
１．水設定：加温（３７℃）
２．停止設定：０−Ｋ＋およびその他の代謝物を洗い流すため
３．２５ｍｇのリグノカインを追加バッグ（記載されているこの実施形態では、事前には添加されていない）に注入して、予防的抗不整脈薬組成物の標的送達を達成する−通常、処置時間の長さに応じて、この時点で、追加バッグ中に約１８〜３５ｍｌ残っており、これによって約１ｍｇ／ｍｌのリグノカイン濃度が提供される。
【０２６１】
４．追加設定：１５〜１８−目標は、クロスクランプの除去の前に追加バッグを空にすること。
【０２６２】
加温ショットのために：通常、ｘ−クランプ除去の５〜１０分前に開始した
１．逆行性加温を開始する、カリウムゼロ、追加設定１５。逆行性圧が最高レベル（３５〜４０トール）で維持されることを確認する。
【０２６３】
２．電気的活動が始まる場合には、もう１分逆行性を継続する。
【０２６４】
３．２〜３分間、順行性に切り替える（外科医の構想を不明瞭にしない場合）。これによってグラフトを脱気することが容易になり、心臓の右側が灌流されるのが可能となり、通常、安定な心拍を達成される。
【０２６５】
４．ｘ−クランプの間、逆向性に切り替えて戻す。
【０２６６】
５．追加設定を使い果たした場合には、ｘ−クランプ除去によって純粋な加温血液を用いて継続する。
【０２６７】
マイクロプレジック（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉｃ）技術を用いれば、投与する容量が多いほど、有酸素性停止であるので、心臓はより好む。多くの場合、適切に投与されると、酸素供給／需要比率は逆転される。１リットルを越え、最大６リットルの投与は、術後細動の最大の減少を伴う。
【０２６８】
加温血液心筋保護を用いて得られた臨床結果は、低体温によるいくつかの細胞機能の障害に関する初期の知見が、これまでに考えられていたよりも関連している可能性があるということを示唆している。これらとして、以下の低下が挙げられる：
１．膜安定性
２．グルコースおよび脂肪酸利用能
３．細胞膜機能の低下につながる、アデノシン三リン酸のミトコンドリア生成
４．細胞量調節の障害につながる、アデノシン三リン酸系の活性
５．筋小胞体のカルシウムと結合する能力の低下
６．ミトコンドリア状態呼吸およびクエン酸合成酵素の活性
７．細胞内ｐＨの制御
８．カルシウム取り込みに関する筋小胞体の活性
加温導入を、冷却維持およびクロスクランプの終了に向けた加温ショットと合わせることは、優れた結果を提供する。特に、アデノシン（その他の機能の中でも、極めて強力な血管拡張薬）を加えた加温導入は、すべての側枝を広げ、停止するのに必要な導管ならびに筋細胞および内皮に到達する添加剤を提供する。冷却導入を用いると、収縮ならびに心筋保護を筋細胞および内皮にまで全体的に分配できないこと現れる。
【０２６９】
冷却維持は、代謝取り込みの減少を提供し、氷融解によるクロスクランプの自然の成り行きの間に生じる温度のゆっくりとした上昇を伴う。平均温度は約１２〜１４℃に推移する。最後での加温ショットは、心筋保護の最も重要な局面である。心臓に、可能な限り長く加温血液（３２〜３７℃）を経験させることによって、変力物質および電気的支持を必要とする弛緩した、命のない心臓とは対照的に、心臓の機能的回復のほとんどを取り戻すことにおいて相違が生じることとなり得る。また、冷たい、弛緩した、拍動していない心臓を、例えば、クロスクランプが除去されるときに経験されるような、大流量の加温血液の外傷に付すことによって、心臓を確実に再灌流傷害を起こす状態にするという証拠がある。
【０２７０】
過去３０年の間に、外科医および灌流技師はその外科的技術に磨きをかけ、それによって、各患者の個々の必要性および要求にアプローチする方法を「カスタマイズ」することが可能となった。本質的に「型にはまった」アプローチが残っている唯一の領域は、心筋保護であり、本質的に「フリーサイズ」である。いずれか特定の理論または作用様式に拘束されるものではないが、この好ましい実施形態の方法は、患者を過剰に血液希釈せず、ひいては、結果の改善をもたらすことに対してより慎重に扱うべきであると考えられる。
【０２７１】
一実施形態では、心筋保護を用いて心臓手術を受けている２６８８人の患者を、異なる外科医および異なる技術を用いて６つの異なる病院で評価し、このデリケートな環境において変動性を評価した。すべての患者を標準的な高カリウム性心筋保護液を用いて処理して停止を導入した。患者のうち、１２７９人は、通常の標準的な晶液心筋保護プロトコール（「標準」）に付される群とした。１４０９人は、同様の高カリウム性心筋保護および上記の、すなわち、本発明の組成物を有する加温ＡＬＭ追加カセットを用いる、マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）プロトコール（すなわち、心臓に直接投与される最小量の心筋保護を用いるもの）に付された。本発明は、この形の心筋保護に特異的ではなく、それに限定されることもなく、本発明の方法の適用を形成し、評価するために本明細書で議論され、本発明の効果を例示する。
【０２７２】
追加カセットは上記のように用いられ、その結果、回復期の間、アデノシン、リグノカインおよびマグネシウムを含んでいた（従って表示「ＡＬＭ」）。本発明の方法は、単に便宜な略語として「ＡＬＭ」と呼ばれる。ＡＬＭは、上記のプロトコールに従ってクロスクランプ除去で投与された。
【０２７３】
表１は、２６８８人の患者の特徴を示し、表２は、測定された種々の術後合併症の出現を示す。
【０２７４】
【表１Ａ】
【０２７５】
【表１Ｂ】
表２では、表１において同定された患者の臨床結果が表にされている。第３の列は、各結果の標準心臓保護患者の割合（すなわち、第１の列のパーセンテージとしての第２の列）のパーセンテージとしての患者のＡＬＭ割合を表す。左の列の結果のすべては、負の結果であり、従って、最小化が望ましい。
【０２７６】
【表２】
上記のプロトコール後に合併症が、特に、術後心房性細胞および術中変力物質の必要性において実質的に減少されていることがわかる。特に、これらの負の結果の減少は、術中変力物質の８６％減少、術中ぺーシングにおいては６４％の減少、術中輸血においては４４％の減少、術後在院日数の長さの２１％の減少および術後心房性細胞における９１％の減少である。
【０２７７】
（実施例１３）
ショック後アデノシン／リグノカイン溶液の投与
この実施例では、以下のアデノシン／リグノカイン（ＡＬ）溶液（複数の溶液）を用いた：ＡＬ溶液＝クレブス−ヘンゼライト（Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ）溶液中、２００μＭアデノシン、５００μＭリグノカイン
ラットを、上記のように出血性ショックに２時間および１０分付した。
【０２７８】
図１は、この実験の間のラット心臓のＥＣＧモニタリングを示す。図１Ａは、ラット心臓を、出血性ショックの前の正常として示す（心拍数（ＨＲ）＝３７５ｂｐｍおよびＭＡＰ１１４ ｍｍＨｇ）。ショック後、ＨＲは、３５ｂｐｍ ＢＰ＜１０ｍｍＨｇに低下した（図１Ｂ）。０．５ｍＬのＡＬ溶液のボーラスを、心臓に直接投与した。図１Ｃは、ＨＲが、溶液の投与の１．５秒後に２０７ｂｐｍに増大したことを示す。
【０２７９】
図２Ａは、この実験の間のラット心臓のカルディオバージョンをより詳細に示す。特に、溶液の投与の１．５秒後、ラット心拍は３５ｂｐｍから２０７に増大した。溶液の投与点は、（Ｉ）として表されている。図２Ｂは、このラットの心拍が、溶液の投与の１０秒後に再度ゆっくりになることを示す。
【０２８０】
いずれか特定の作用様式または理論に拘束されるものではないが、これらの結果は、動物が極めて少容量の血液しか有さないので、ＡＬ溶液のボーラスが心拍を最初の期間戻すことができるということを示す。図２Ｂ中、（ＩＩ）に示されるさらなるインターベンション、例えば、胸部圧迫および／またはＡＬ溶液のさらなるショットが、被験体を生存させるのに必要とされ、同様に血液量補充を用いることが好ましい。
【０２８１】
この実施例は、蘇生の間、身体全体の酸素供給−需要比率を良好にバランスをとり、脳、心臓、肺および腸などの重要な臓器への損傷を低減することに特に重点をおいて、外傷性出血性ショックおよび蘇生と関連する炎症および過凝固不均衡を積極的に減弱するために、薬理学的に低代謝の「冬眠様」状態を誘導することを目的としている。肺の炎症状態および浮腫性、いわゆる「湿性肺」、「ショック肺」、「ダナン肺」または「急性呼吸窮迫症候群」は、激しく外傷を受けた患者の最大５０％で起こり得る。
【０２８２】
（実施例１４）
出血性ショック後の、アデノシン／リグノカイン蘇生液を用いた静脈内治療
この実施例では、以下のアデノシン／リグノカイン溶液（複数の溶液）を用いた。
【０２８３】
ＡＬＭ（蘇生溶液）＝７．５％ＮａＣｌ溶液中、１０μＭアデノシン、３０μＭリグノカインおよび２．５ｍＭ ＭｇＳＯ４。
【０２８４】
図３は、正常期の間のラットのＥＣＧトレースを示す。この時間に測定されたＭＡＰおよびＨＲは以下の表３に示されている。
【０２８５】
ラットを、ＭＡＰが約３０〜３５ｍｍＨｇに低下するまで、上記のような約４５％の失血を含む出血性ショックに付した。取り出された最大血液は、ショック期間の過程にわたって８．６ｍｌであった。
【０２８６】
総血液容量は、０．０６×３０４＋０．７７＝１９．０１ｍｌであると推定された。したがって、失われた血液容量％＝８．６／１９．０１×１００＝約４５％。
【０２８７】
図４は、「ショック期」の開始の前の出血期間の最後のラット心臓のＥＣＧモニタリングを示す。この時間に測定されたＭＡＰおよびＨＲは、以下の表３に示されている。
【０２８８】
動物はショックで１８０分間維持し、次いで、ＡＬＭまたは７．５％生理食塩水のいずれかを、ｉｖボーラスによって投与した。ＨＲおよびＭＡＰは、各６０分のショック期、すなわち、０〜６０分、（ｉｉ）６０〜１２０分、（ｉｉｉ）１２０〜１８０分の間測定し、以下の表３に示されている。ＥＣＧモニタリングは継続した（図５、図６および図７）。
【０２８９】
３時間のショック期の最後に、１．０ｍｌのボーラスＡＬＭ（７．５％ＮａＣｌ、２．５ｍＭ ＭｇＳＯ４、１０μＭ アデノシン、３０μＭ リドカイン）を、大腿静脈にゆっくりと注入した。
【０２９０】
注入１０分後ＥＣＧトレースが、図８に示されている。この時間にとられたＨＲおよびＭＡＰ測定値は、以下の表３に示されている。
【０２９１】
注入３０分後のＥＣＧトレースが、図９に示されている。この時点でとられたＨＲおよびＭＡＰ測定値は、以下の表３に示されている。
【０２９２】
注入６０分後のＥＣＧトレースが、図１０に示されている。この時点でとられたＨＲおよびＭＡＰ測定値は、以下の表３に示されている。
【０２９３】
注入９０分後のＥＣＧトレースが、図１１に示されている。この時点でとられたＨＲおよびＭＡＰ測定値は、以下の表３に示されている。
【０２９４】
【表３Ａ】
【０２９５】
【表３Ｂ】
（実施例１５）
アデノシン／リグノカイン蘇生液および７．５％生理食塩水を用いる静脈内治療の競合実施例
この実施例では、以下のアデノシン／リグノカイン溶液（複数の溶液）を用いた：
ＡＬＭ（蘇生溶液）＝７．５％ＮａＣｌ溶液中、１０μＭアデノシン、３０μＭリグノカインおよび２．５ｍＭ ＭｇＳＯ４。
【０２９６】
ラットを、ＭＡＰが約３０〜３５ｍｍＨｇに低下するまで、先の実施例に記載されるような約４５％の失血を含む出血性ショックに付した。
【０２９７】
図１２は、この実験の間のラットのＥＣＧトレースを示す。図１２Ａは、出血性ショックの前の正常としてのラット心臓を示す（ＨＲ約３５０ｂｐｍ；ＭＡＰ１００ｍｍＨｇ）。図１２Ｂは、ショックの６０分後のＥＣＧモニタリングを示す。ＭＡＰおよびＨＲは、この時点で測定した（ＭＡＰ４４ｍｍＨｇ；ＨＲ増大した約２８０ｂｐｍ）（図１２Ｂ）。ＥＣＧモニタリングは、さらに１２０分間継続した。図１２Ｃは、ＭＡＰがショックの１８０分後に４０ｍｍＨｇで比較的安定した状態を保つことを示す（ＨＲ約２３９ｂｐｍ）。
【０２９８】
図１３Ａは、ショックの１８０分後、０．５ｍＬの７．５％生理食塩水の投与後のラットのＥＣＧトレースを示す。ＨＲは、約３９ｂｐｍに低下した（ＭＡＰ３０ｍｍＨｇ）。これは、７．５％の生理食塩水溶液の投与後、約１０分間維持された。次いで、心拍数が２７０ｂｐｍに増大した。
【０２９９】
図１３Ｂは、ショックの１８０分後、ＡＬＭの０．５ｍｌボーラスの投与後のラットのＥＣＧトレースを示すＨＲは、直ちに２６１ｂｐｍに増大した（ＭＡＰ３５ｍｍＨｇ）。
【０３００】
これ（および先の実施例）は、出血性ショックを起こした被験体へのＡＬＭの定期的なボーラス投与によって心臓機能が維持され得ることを示す。いずれか特定の理論または作用様式に拘束されるものではないが、この低容量溶液は、十分な医学的支援が遅れている状況で使用できる。例えば、溶液は、病院への患者の困難なまたは延長された避難または輸送の間の腹膜内支援を提供するために、事故現場で、または戦場において現場の医師によって定期的な間隔で投与できる。この実施例は、この溶液の静脈内（ｉｖ）ボーラスは、心臓を安定化し、虚血性脱分極および不整脈から保護するため、および蘇生の前に身体の主要な臓器を薬理学的にダウンレギュレートするために、重度の失血の直後に配備することができるということを実証する。これによって、衛生兵または戦闘ライフセーバーが、外傷／傷害の現場近くで負傷兵を支援できることを想定する戦場シナリオが可能となる。
【０３０１】
本明細書において開示され、定義される本発明は、この文書または図面から記載されるか、または明らかな個々の特徴のうち２種以上のすべての代替組み合わせに及ぶことは理解される。これらの種々の組み合わせのすべてが本発明の種々の代替態様を構成する。
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害、例えば、ショック、卒中、心臓状態に起因する細胞、組織または臓器の傷害または外傷の結果として生じ得るその他の傷害を低減する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
西欧諸国では、多数の死が突然に、予想外に、特に、外傷の結果として起こる。医学的に、「外傷」とは、蘇生治療を必要とする場合もある、重篤なまたは決定的な肉体的傷害、創傷またはショックを指す。外傷は、病院で（例えば、病院の救急治療室で）、緊急輸送環境で（例えば、救急車で）または外傷が生じた病院外環境、例えば、家庭内もしくは産業事故、輸送事故、戦場およびテロリストの攻撃で施される外傷薬と関連することが多い。
【０００３】
外傷は、子供および年齢３４歳までのすべての個体の間の第１位の死因であり、高齢の集団では主な死亡原因であり、生産性生存年数の喪失をもたらし、相当な社会的費用を伴う。これは、火傷、心臓発作、脳卒中およびその他の心血管イベントに起因する死亡を含む。死亡はまた、ショックまたは外傷の結果として起こり得るその他の合併症に起因する場合もある。
【０００４】
これらの意識不明の外傷患者の３％未満しか、許容される結果に進まない。多数の生存者は、３ヶ月後に施設でのケアを必要とし、かなりの集団が回復不能な障害が残ったままとなる。戦場で損傷を受けた兵士の約２０％が死亡し、死亡の９０％は、緊急輸送の間のショックのために病院に到達する前に起こる。より最近の統計値は、治療可能である可能性のある戦闘傷害での死亡の５０％は、急性失血によるものであり、このために戦場での第１位の死因となるということを示唆する。
【０００５】
ショックは、組織酸素化の減少および酸素負債の蓄積を引き起こす循環機能不全であり、未治療のままである場合、最終的に、多臓器システム不全をもたらし得る。小児および成人外傷患者の両方におけるショックの最も一般的な形は、出血性または血液量減少性ショック（十分でない血液容量）である。心原性ショック（心臓による十分でない血液の拍出量、以下参照）も、ショックの一般的な形である。失血の結果としてのショックは、外傷のよくある合併症である。外傷死の約半数が、心肺および脳機能の著しい不全からの傷害後、最初の１時間の間に起こる。ショックの徴候や症状として、低血圧（低血圧症）、過呼吸（過換気）、弱い速い脈拍、寒冷な灰白色の−青みを帯びた（チアノーゼ）皮膚、尿流量の減少（乏尿）および精神的変化（大きな不安および嫌な予感、錯乱および時には、闘争的なことという感覚）が挙げられる。血液が失われると、最大のすぐに必要なことは、失われた容量を、血液または血液容積増量剤で補充することである。血液容積が、容積増量剤によって維持される場合には、外傷患者は、極めて低い血液ヘモグロビンレベル、健常な人の１／３未満を安全に許容し得る。
【０００６】
外傷の際、重要な臓器および組織の電気特性は維持されることができない。静止細胞電圧の降下が、外傷の間に起こり、多臓器不全および死亡につながり得る、心臓における高度に有害な不整脈および全身炎症の活性化、凝固性およびフリーラジカル生成プロセスの誘発につながり得る。激しい出血の際、患者は、平均動脈灌流圧が、約４０ｍｍＨｇに低下し、脈拍が大動脈で、もはや触知できないと、意識不明となる。呼吸が停止すると、脈拍はもはや触知できず、心停止が考えられる。大量の失血から脈欠損となり、救急診療部開胸術を受ける外傷患者の死亡率は、約９７％である。
【０００７】
ショックの１つの形は、「心原性ショック」と呼ばれる。これは、例えば、心臓筋肉の損傷（大きな心筋梗塞（心臓発作）に起因し得るような、心臓筋肉の障害（破裂を含む）、電気的緊張−弛緩（または伝導）システムの乱れおよびタンポナーデによる心臓が効率的にポンピングすることの不全によって引き起こされ得る。心原性ショックはまた、不整脈（例えば、心室性頻脈および心室細動）、心筋症、心臓弁の問題、心室流出障害などによって引き起こされ得る。心原性ショックは、患者の生命を救うため即時の治療を必要とする医学的な緊急事態である。
【０００８】
心原性ショックの１つの原因は、いわゆる「心臓発作」である。この用語は、心筋の壊死につながる、心臓虚血（通常、冠動脈の閉塞によって引き起こされる）につながるいくつかの異なる状態を指すよう用いられる。この筋肉の壊死は、胸痛および心筋組織の電気的不安定性を引き起こす。この電気的不安定性は、「心室性頻拍」および「心室細動」として現れ得る。心室性頻拍は、心室性異所性焦点に起因するタキージスリズミア（ｔａｃｈｙｄｙｓｒｈｙｔｈｍｉａ）であり、通常、１分あたり１２０拍動を超える速度を特徴とし、心室細動に急速に悪化し得るので、発病または死亡を避けるために迅速に治療されなければならない。心室細動は、心室の無秩序な電気的撹乱があり、その結果、もはや規則的に拍動せず、血液を効率よく送り出すことがなく、単に振動している状態である。心室細動の間、心筋は、酸素の供給不足によって、または特定の心臓病によって影響を受け、心室は、混乱した方法で、心房と無関係に収縮し、心室のいくつかの領域が収縮する一方で、他は弛緩している。心室細動は、広範囲の虚血につながる。直ちに治療されない限り、心室細動は、死亡を引き起こし、心臓に問題のある人における突然死の７５％〜８５％を占める。ＵＳＡ単独で、年に約４５０，０００の突然死があり、英国では、年に約７０，０００〜９０，０００の突然死がある。したがって、心室性頻拍および心室細動は、医学的な緊急事態であるが、これは、それらが数秒を超えて持続する場合、血液循環が停止し、脈拍、血圧、呼吸がなくなり、死亡が生じる。通常、この時点で薬剤および処置は、心臓のリズムを安定化することに向けられ、測定可能な脈拍のない意識不明の被験体の場合には、心臓を再開することによって被験体を蘇生し、気道を広げ、自発呼吸を回復させる。アミオダロンを用いて命にかかわる心臓不整脈を治療できるが、この薬物は、心律動異常および心停止自体を引き起こすことをはじめとする、重篤な副作用を有し得る。アミオダロンのその他の副作用として、肺浸潤、神経障害、振戦、甲状腺障害、悪心、低血圧および肝臓損傷が挙げられる。したがって、これらの緊急事態において、心臓を安定化するためまたは心臓を再開させるためおよび自発的循環を回復させるために有効な薬剤は、極めて限定されるか、または存在しない。ノルアドレナリンまたはアドレナリン（バソプレシンを伴うか伴わない）は、心肺蘇生とともに使用できるが、エピネフリンは、心臓収縮を増悪させ、心室細動の間の心筋酸素消費を増大することによって、ならびに微小血管障害を誘発することによって心臓機能不全を促進する場合がある。心室性頻拍または心室細動後に心臓を安定化することにおいて治療が成功する場合には、酸素（呼吸を助けるため利用可能である場合には）、β−遮断薬（心臓を弛緩させるのに役立つ）、血管拡張薬（心臓により多くの血液を送達するのに役立つ）、血液剤（抗凝固剤、抗血小板剤、血栓溶解剤など）および鎮痛剤など、いくつかの薬剤を投与する。心臓並びにその他の組織および臓器を治療する２、３の薬物は別として、薬剤は、特異的に心臓組織を治療するためには向けられない。不全の心筋自体のための有効な薬剤治療はなく、よく起こる心室細動のためのものもない。治療される場合には、通常、電気ショック（電気的除細動）によって治療される。
【０００９】
心臓の損傷はまた、再灌流時に引き起こされ得る。再潅流損傷の一例は、心臓が「機能不全に」なる場合である。この状態では、血流は回復されるが、心臓は異常に機能しており、治療されない場合には、さらなる心臓発作（例えば、心室細動）をもたらし得る。心臓蘇生は、心臓の再潅流を必然的に含み、結果として起こる、特に、心筋への再灌流傷害と関連している危険を伴う。筋肉細胞が壊死する場所は、梗塞と考えられる。約１５〜２０分という短期間のうちに細胞への血流が回復されている場合は、細胞は再潅流に反応し、生存することができる（したがって、梗塞を形成しない）が、再灌流の間、正常に機能せず、その通常の機能を実施しないという意味で「機能不全」であり得る。
【００１０】
蘇生を乗り切り、最初のイベントがあまり外傷性でない可能性がある患者では、依然として、全身および局所炎症および免疫活性化とそれに続く多臓器機能不全および不全の相当な危険性がある。多臓器不全は、過剰の自己破壊性全身炎症および免疫学的機能の結果であると考えられており、これでは、低酸素血症、組織低酸素症／生育不能組織、微生物／毒素および抗原／抗体複合体が関与している可能性がある。特に、いくつかの液性系（例えば、補体、凝固）および細胞系（内皮活性化、好中球、血小板、マクロファージ）の活性化が、関与していると考えられている。好中球は、肺、心臓、腎臓、肝臓および消化管の傷害において重要な役割を果たしており、大外傷後に見られることが多い。結果として、多数の媒介物質（毒性酸素種、タンパク質分解酵素、接着分子、サイトカイン）の合成、発現および放出があり、これが、身体における全身性炎症および組織損傷を引き起こし得る。
【００１１】
重篤な中核体温もまた、これらの外傷後続発性合併症の多くを増悪させ得る。３４℃を下回ると、死亡率が大幅に高まる。これにもかかわらず、何人もの研究者が、計画的な低体温の有益な効果を示唆しているが、これは、これが、低酸素性臓器機能不全および炎症反応の開始を防ぐことによって外傷犠牲者の「ゴールデンアワー」を延長し得るからである。臓器不全はまた、大手術後の術後期における死因の第１位である。大手術後の過剰炎症反応と、それに続く、細胞性免疫の劇的な低下は、その後の敗血症に対する感受性の増大の原因であると思われる。
【００１２】
蘇生治療は、通常、突然の命にかかわる疾病または外傷性傷害、例えば、心停止、呼吸不全、出血性失血、神経損傷および軟部組織および身体骨格の外傷性損傷に由来するものの状態の管理を改善する任意の処置と考えられる。通常、蘇生治療は、全身体酸素欠乏の治療を扱う。そのようなものとして、現在の蘇生戦略は、組織供給および需要比率を最適化することおよび出血、肺の浮腫および脳傷害後の頭蓋内高血圧症を悪化させる、過度に攻撃的な量補充の合併症を避けることを目的としている。
【００１３】
蘇生治療は、限局された「大きな心臓発作」または限局された「大きな卒中」の治療とは極めて異なっている。あまり理解されていない作用による、複数の臓器−組織反応間の複雑な相互作用を含み、このために、この科学は、特定の臓器または組織を保存するための治療とは分かれている。蘇生は、多くの相互作用を伴う複雑な生物系を含むと知られている。これらは、個々の構成要素の研究からは予測できない。傷害を受けた臓器は、その他の臓器に対する続発性効果を有し、これが全身に影響を及ぼし、衰弱性傷害および死亡につながり得る。
【００１４】
現在の治療は、晶液またはコロイドのいずれかであり得る補液又は量補充を含む。晶液は、蘇生治療によく用いられるが、これはそれらが安全であり、凝固の負の副作用を伴うものの役立つと思われるからである。晶液は、凝固を増大させることがわかり、効果は、用いた晶液の種類とは無関係であると思われる。晶液導入性過凝固状態は、天然に存在する抗凝固薬と、活性化された凝血原との間の不均衡によると思われる。量補充に用いられる晶液は、３つの主要な種類があり得る：１）低張性（例えば、水中デキストロース）、２）等張性（通常の生理食塩水または乳酸塩もしくは酢酸塩を含むリンガー溶液）あるいは３）高張性（例えば、７．５％生理食塩水）。晶液は、血管膜を自由に透過できるので、約２５％のみが血液コンパートメント中に残り、残りは身体の間質性コンパートメントおよび／または細胞内コンパートメント中にあり、組織浮腫を引き起こす。したがって、晶液蘇生は、コロイドベースの量補充戦略と比較して、微小循環性血流の適当な回復を達成する可能性が低い。
【００１５】
コロイド補充治療は、この目的には、人工コロイドとして、デキストラン−７０、デキストラン−４０、ヒドロキシエチルデンプン、ペンタスターチ、ラクトビオン酸、スクロース、マンニトールおよび修正ゼラチン（ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｆｌｕｉｄ ｇｅｌａｔｉｎｅ）などのコロイドを用いる。量補充のために最も適当な溶液については、多くの議論がある。
【００１６】
現在、戦場での兵士における、または自然災害現場での一般人またはテロリストの攻撃から傷害を受けた一般人における、重篤な出血性ショックを治療するための最適な液体組成物または液体蘇生計画はない。実際、承認された蘇生液の大部分は、内因性の組織保護はなく、蘇生結果に負に影響を及ぼす、命にかかわる炎症および過凝固性不均衡を誘発し得る。特に、軍隊のための新規製剤および蘇生治療の設計におけるさらなる挑戦は、その安全性および長期の避難後の負傷兵の生存時間を増大するための臨床有効性を保証するにもかかわらず、戦闘条件自体によって課せられる兵站学的考慮、例えば、重量および輸送の実行可能性、配置の容易さ、低光量環境での投与および野外での薬物の安定性によって阻まれている。
【００１７】
戦争では、銃弾および爆発する軍需品からの貫通性のある破片が命にかかわる出血を引き起こすことが多い。急性出血が、戦場傷害の死因の第１位であり、治療可能である可能性がある戦闘による負傷者における死亡の５０％を占める。戦場での１つの主要な満たされていない医学的必要性は、出血の制御が可能である前の重篤な出血の間の心臓の不安定化および停止をどのように防ぐかである。ショックの前に心臓および循環不足を安定化することは、最も重要である。心停止の治療の成功には、電気的に安定な、機械的に生存可能な心臓が再確立されることが必要である。現在、出血性ショックの前に細動および停止から心臓を安定化および保護する臨床上有効な方法はない。実際、心臓を洞調律に変えるために用いられる多数の薬理学的介入は、残念ながら、さらなる傷害を与え、心臓の蘇生可能性を危険にさらし得る。
【００１８】
心臓が不安定化されておらず、停止している、重篤な外傷性出血性症例では、血液量、血圧および臓器灌流の喪失が、重篤な臓器虚血および最終的には、多臓器機能不全および不全（ＭＯＦ）および死亡につながり得る。ＭＯＦは、ショック（出血性／外傷性）および蘇生に続発する死因の第１位であり、肺、腎臓、腸管、膵臓、肝臓、脳および心臓に関与する。ＭＯＦが、エンドポイント自体ではないが、圧倒的な自己破壊性の、局所および全身性炎症反応および免疫学的機能にかかわるプロセスであることは重要である。数十年の研究にもかかわらず、蘇生液は、組織灌流を回復させるが、特異的抗炎症性免疫抑制を有さず、生存促進特性も有さない。ショック導入性炎症反応の活性化は、ショック自体の間、初期晶液またはコロイドベースの蘇生治療の間、および血液補充を含む最終蘇生努力の間に起こることが重要である。
【００１９】
外傷に由来する傷害からの保護が、人工冬眠の形によって誘発され得るかどうかはわかっていない。生まれながらの冬眠動物は、数日から数ヶ月間その代謝エネルギー需要を低下する能力を有する。冬眠は、睡眠同様、休止状態の一形態であり、動物の代謝供給および需要の比率を適度なバランスに保つのに役立つ。これらの長期の「虚血」状態の間に損傷が起こらず、心臓のリズムが心室細動へと悪化しないことは際立っている。しかし、実質的に命を救う、または傷害を最小限にする可能性にもかかわらず、ヒト、特に、外傷患者において、同様の反応を刺激する既知法はない。
【００２０】
特許文献１、特許文献２および特許文献３には、医療処置に先立つ臨床設定において投与することによって、細胞、組織または臓器の損傷を限定するのに有用な組成物が記載されている。これらの組成物はまた、通常、患者の診断後に、直接、細胞、組織または臓器に投与される。しかし、患者が病院に到着する、および／または病院にいる、例えば、実質的な医学的配慮が利用可能である、または状態が診断され得る前に、細胞、組織または臓器に多くの損傷または傷害が生じる場合がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２１】
【特許文献１】国際公開第００／５６１４５号パンフレット
【特許文献２】国際公開第０４／０５６１８０号パンフレット
【特許文献３】国際公開第０４／０５６１８１号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２２】
本発明は、先行技術の１以上の困難および欠陥を克服すること、または少なくとも多少とも解決することを対象とする。
【課題を解決するための手段】
【００２３】
一態様では、本発明は、外傷後に身体に、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む組成物を投与することによって、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害を低減する方法を対象とする。
【００２４】
この態様によれば、成分（ｉ）および（ｉｉ）を含むさらなる組成物を、組成物の投与後に身体に投与してもよい。
【００２５】
どちらの組成物も、マグネシウムカチオン（二価）を含んでもよいし、および／または高張性であってもよい。
【００２６】
もう１つの態様では、本発明は、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害を低減するための組成物を対象とする。この態様の一実施形態では、組成物は、二価マグネシウムカチオンを含んでもよいし、かつ／または高張性であってもよい。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１Ａ】（Ａ）出血性ショックの前、（Ｂ）ショックの間および（Ｃ）ラットの心臓への直接の０．５ｍｌのアデノシン／リグノカイン溶液のボーラス投与後のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１Ｂ】（Ａ）出血性ショックの前、（Ｂ）ショックの間および（Ｃ）ラットの心臓への直接の０．５ｍｌのアデノシン／リグノカイン溶液のボーラス投与後のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１Ｃ】（Ａ）出血性ショックの前、（Ｂ）ショックの間および（Ｃ）ラットの心臓への直接の０．５ｍｌのアデノシン／リグノカイン溶液のボーラス投与後のＥＣＧトレースを示す図である。
【図２Ａ】（Ａ）出血性ショックの間およびラットの心臓へ直接アデノシン／リグノカイン溶液を注射した後の、および（Ｂ）注射後１０秒の、図１からのラット心臓のＥＣＧトレースより詳細に示す図である。溶液の注射時間は、矢印（Ｉ）によって示されている。矢印（ＩＩ）は、さらなる治療が必要であり得ると提案される時点を表す。
【図２Ｂ】（Ａ）出血性ショックの間およびラットの心臓へ直接アデノシン／リグノカイン溶液を注射した後の、および（Ｂ）注射後１０秒の、図１からのラット心臓のＥＣＧトレースより詳細に示す図である。溶液の注射時間は、矢印（Ｉ）によって示されている。矢印（ＩＩ）は、さらなる治療が必要であり得ると提案される時点を表す。
【図３】出血性ショックの開始に先立つ正常ラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図４】「ショック期間」の開始に先立つ出血期間の最後でのラットのＥＣＧトレースを示す図である。
【図５】６０分のショック期間の最後でのラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図６】１２０分のショック期間の最後でのラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図７】３時間のショック期間の最後でのラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図８】ＡＬＭ（アデノシン；リグノカイン；マグネシウム）のボーラス投与の１０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図９】ＡＬＭのボーラス投与の３０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１０】ＡＬＭのボーラス投与の６０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である
【図１１】ＡＬＭのボーラス投与の９０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１２Ａ】（Ａ）出血性ショックの前の（４５％失血）；（Ｂ）出血性ショックおよびアデノシン／リグノカイン蘇生液の静脈内投与の６０分後（Ｃ）出血性ショックおよびアデノシン／リグノカイン蘇生液の静脈内投与の１８０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１２Ｂ】（Ａ）出血性ショックの前の（４５％失血）；（Ｂ）出血性ショックおよびアデノシン／リグノカイン蘇生液の静脈内投与の６０分後（Ｃ）出血性ショックおよびアデノシン／リグノカイン蘇生液の静脈内投与の１８０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１２Ｃ】（Ａ）出血性ショックの前の（４５％失血）；（Ｂ）出血性ショックおよびアデノシン／リグノカイン蘇生液の静脈内投与の６０分後（Ｃ）出血性ショックおよびアデノシン／リグノカイン蘇生液の静脈内投与の１８０分後のラット心臓のＥＣＧトレースを示す図である。
【図１３Ａ】出血性ショック後（Ａ）０．５ｍｌの７．５％生理食塩水の投与後（Ｂ）０．５ｍｌのアデノシン／リグノカイン蘇生液の投与後の図１２からのラット心臓のＥＣＧモニタリングをより詳細に示す図である。
【図１３Ｂ】出血性ショック後（Ａ）０．５ｍｌの７．５％生理食塩水の投与後（Ｂ）０．５ｍｌのアデノシン／リグノカイン蘇生液の投与後の図１２からのラット心臓のＥＣＧモニタリングをより詳細に示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明は、病院、緊急輸送および病院外環境における外傷犠牲者のための改善された蘇生治療を対象とする。特に、本発明は、火傷、ショック、卒中、心臓発作またはその他の身体的事象に起因して、細胞、組織または臓器に傷害を受けている人の命にかかわる合併症、例えば、手術または臨床的介入に起因する、外傷の結果としての合併症を最小限にするために適用される。戦場での負傷兵または自然災害現場での一般人またはテロリストの攻撃から傷害を受けた一般人は、このような治療が有用であり得る状況である。
【００２９】
本発明は、心臓および脳などの重要な臓器、その他の神経組織および細胞、腎組織、肺組織、筋肉組織、肝臓および身体のその他の組織の保護、保存または安定化のために適用される。
【００３０】
一形態では、本発明は、外傷後に身体に、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む組成物を投与することによって、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害を低減する方法を提供する。
【００３１】
本発明のもう１つの形態では、本発明は、頻脈および／または細動の治療を対象とする。一形態では、本発明は、心房または心室起源の心臓不整脈、とりわけ、心室細動を治療する。心室細動および不整脈を含む頻脈および／または細動の治療は、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む組成物を、心臓を停止するのに有効な量で投与することを含む。一実施形態では、投与される量は、心臓を一瞬のみ停止するのに有効である。これは、正常なリズムへの心臓カルディオコンバーティング（ｃａｒｄｉｏｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ）を促進するのに十分であることが多い。１つの代替実施形態では、投与される量は、数回の拍動の期間、心臓の拍動を実質的にダウンレギュレートし、その後、心臓がその通常のリズムを回復するのを可能にするのに有効である。したがって、本発明はまた、頻脈および／または細動を治療する方法に及ぶ。組成物は、ボーラスとして投与されることが好ましい。組成物の投与は、頻脈および／または細動を鎮め、心臓が正常な望ましい洞調律に心変換するのを可能にすると考えられている。
【００３２】
好ましい実施形態では、本発明は、続いて、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む第２の組成物を、心臓を停止するのに有効な量未満で投与するさらなるステップを含む。第２の組成物の目的は、心臓およびその他の組織、例えば、脳、肝臓、肺および腎臓を保護することまたはそうするよう補助することである。特に、この実施形態は、再潅流傷害またはスタンニングを低減することを対象とする。上記で概説されるように、再潅流傷害は、頻脈性／細動性心臓を正常な、望ましい洞調律に上手く変換する際のよくある有害な出来事である。好ましい実施形態では、第２の組成物は、別の非停止性ボーラス注射として投与されるか、または点滴によって、もしくは別の送達装置もしくは経路によって連続的に送達される。
【００３３】
いずれかの理論または作用様式に拘束されるものではないが、本発明者は、本発明の組成物を用いて、身体を、事実上、生まれながらの冬眠動物のような停止した活気の状態に向けておくことまたは診断の前にもしくは外傷犠牲者に適した医学的な配慮が提供され得るまで身体を安定化することができるということを見い出した。本発明の治療によって提供される全般的な保護は、膜興奮性の調節から多数の細胞内シグナル伝達経路、例えば、熱ショックおよび生存促進キナーゼ経路まで重層的な系を含むと考えられる。主要な焦点は、脳、心臓および肺への損傷を低減することであるが、これはこのことが、回復および臨床転帰の改善と関連があるためである。それにもかかわらず、身体中の損傷を、非特異的方法で低減する広く作用するアプローチが望ましい。本発明の組成物の提案される機序は、（ｉ）ストレスが与えられた場合に細胞の電圧を守るのに役立ち得る、細胞におけるイオン不均衡、特に、ナトリウムおよびカルシウムイオン負荷の低減；（ｉｉ）自身において保護的であり、傷害を低減し、ならびにラジカル生成などの続発性効果を低減する、傷害に対する局所および全身炎症反応の減弱；（ｉｉｉ）過凝固状態へ入ることからの保護、すなわち、抗凝固または抗血栓溶解活性を含む。さらに、心臓に関しては、本発明は同時に、ギャップ結合による伝達の調節を含み得る、代謝要求への電気伝導の心房性および心室性整合の改善を、脳に関しては脳機能の改善を提供すると考えられている。本組成物は身体の酸素の要求を、種々の程度に低減し、したがって、身体の細胞、組織または臓器の損傷を低減し得るとも考えられている。別の形態では、本発明は、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とを含む、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害を低減するための組成物を提供する。本組成物は、以下の同定されるその他の成分をさらに含み得る。いくつかの実施形態では、カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストが、カルシウムチャネル遮断薬などの別の成分と置き換えられる。本組成物は、傷害を低減するための単回用量のために、有効量の（ｉ）および（ｉｉ）を含むことが好ましい。
【００３４】
さらに驚くべきことに、心室細動を起こしている被験体への停止濃度または停止濃度付近の成分（ｉ）および（ｉｉ）を含む組成物の投与は、心臓が、電気ショック治療を必要とせず、正常な洞調律を回復するのを補助することが観察された。
【００３５】
また、本発明を用いて、血管造影図検査または運動試験の間、またはそれらに先立って、心室細動を含む不整脈を治療または阻害できる。同様に、負傷患者の緊急輸送の間に、また現場緊急治療のために（すなわち、空港、競技場、病院、戦場または災害現場などの傷害または心臓発作の現場で）適用される。また、血管形成術、心臓カテーテル処置またはペースメーカーもしくはリードもしくは装置の挿入などの冠動脈インターベンションの前、最中、および／または後に、あるいは小児もしくは成人心臓手術、股関節手術、膝の手術、血管の手術もしくは脳の手術、大動脈解離、頚動脈内膜剥離術または一般外科手術を含む手術のためにも使用できる。
【００３６】
上記および下記の本発明の実施形態では、組成物の成分（ｉ）は、アデノシン受容体アゴニストであり得る。これは明らかに、アデノシン自体を含みながら、「アデノシン受容体アゴニスト」は内因性アデノシンレベルを高める効果を有する化合物によって置換されてもよいし、または補充されてもよい。これは、化合物が、体内の局所環境において内因性アデノシンレベルを上げる場合には、特に望ましい。内因性アデノシンを上げる効果は、アデノシンの細胞輸送を阻害し、ひいては、循環から除去するか、そうでなければ、その代謝を遅延し、その半減期を効率的に延長する化合物（例えば、ジピリダモール）および／または内因性アデノシン産生を刺激する化合物、例えば、プリンヌクレオシド類似体アカデシン（商標）またはＡＩＣＡ−リボシド（５−アミノ−４−イミダゾールカルボキサミドリボヌクレオシド）によって達成され得る。アカデシンはまた、アデノシンデアミナーゼの競合阻害剤でもある（ウシ腸管粘膜において、Ｋｉ＝３６２マイクロモル）。アカデシン（商標）は、約５０マイクロＭ（μＭ）の血漿濃度を生じるよう投与されることが望ましいが、１マイクロＭ〜１ｍＭの範囲であり得、２０〜２００μＭがより好ましい。アカデシン（商標）は、１０、２５、５０および１００ｍｇ／体重１ｋｇの用量で、経口的に投与される用量および／または静脈内投与からヒトにおいて安全であることがわかっている。
【００３７】
本発明の一形態では、組成物、および場合により第２の組成物はまた、二価のマグネシウムカチオンを含む。一実施形態では、マグネシウムの濃度は、最大約２．５ｍＭであり、もう１つの実施形態では、マグネシウムはより高い濃度、例えば、最大約２０ｍＭで存在する。マグネシウムは、生理学上および製薬上許容される塩、例えば、塩化マグネシウムおよび硫酸マグネシウムなどとして存在する。
【００３８】
もう１つの形態では、本発明の組成物は高張性である。本組成物は、７．５％のＮａＣｌを含むことが好ましい。本発明者は、ほんの小容量のこの高張性組成物をそれを必要とする被験体に投与すればよいということを見い出した。これは、本発明の組成物が、緊急の際に、または緊急輸送のために適用される場合に特に有利である。この態様によれば、医療器具一式または救急車において、ほんの少量の本発明の組成物が入手できることが必要である。したがって、本組成物は、保存および／または輸送することがより容易である。この「低容量」組成物は、補液の独特の特徴および特定の抗炎症特性、免疫抑制生存促進特性を有する。本発明のこの態様の組成物は、薬理学的に、戦場での負傷兵または都市の「災害激甚地」中の一般人のために時間を「稼ぎ」、これによって安全な避難、トリアージおよび支持療法の開始が可能となる。細胞の内部水分量を変更することによって、細胞の形または緊張度を変更する溶液の能力は、張力（ｔｏｎｉｃｉｔｙ）と呼ばれる（ｔｏｎｏ＝張力）。高張液は、身体の細胞において見られるものよりも高濃度の電解質と、したがって、身体の細胞の内側よりも相対的に少ない水をこのコンパートメントに含む。このような高張性環境では、浸透圧が、水を細胞から高張性環境へ流出させる。したがって、高張液は、高浸透圧環境を作製し、この環境における高浸透圧が、組織中の周囲の細胞と関連して、液体を、細胞からこのような系へ流れさせる。この方法であまりにも多量の水が除去されると、細胞は機能するのが困難となり得る。
【００３９】
本明細書に記載される本発明は、大部分は治療方法およびこれらの成分（ｉ）および（ｉｉ）を含有すると記載されている組成物を含む治療のための医薬の製造方法に関する。便宜上、この組成物は、本明細書において「本発明の組成物」とよばれるが、本発明の組成物である、本発明を実施する成分のいくつかの組み合わせがある。さらに、特に、ＷＯ００／５６１４５において説明されるように、成分（ｉ）および（ｉｉ）は、心臓を停止するか、停止しない濃度で存在し得る。これらの２種の組成物は、本明細書に記載される本発明において異なる方法で用いられ、それぞれ、「停止」濃度の組成物および「非停止」濃度の組成物と呼ばれる。一形態では、停止性組成物は、各々０．１ｍＭを超える（好ましくは、２０ｍＭを下回る）、アデノシンおよびリグノカインを含む。停止性組成物は、状況次第では、「心筋保護液」と呼ばれる。非停止性組成物の一形態では、アデノシンおよびリグノカインは、両方とも０．１ｍＭを下回り、好ましくは、５０ｎＭ〜９５μＭ、より好ましくは、１μＭ〜９０μＭである。
【００４０】
さらなる一形態では、本発明は、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の傷害を低減するための医薬の調製のための（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストおよび（ｉｉ）局所麻酔薬の使用を提供する。使用は、医薬を、本明細書中、別の場所に示される１以上の方法で投与することを含むことが好ましい。
【００４１】
もう１つの形態では、本発明は、外傷後、身体を、事実上、停止した活気の、冬眠様状態に、または冬眠様状態に向けておく方法を提供する。これは、上記の組成物を投与することによって達成される。
【００４２】
用語「外傷」は、本明細書において、広い意味で用いられ、身体への重篤なまたは決定的な傷害、創傷またはショックを指す。外傷は、例えば、輸送事故または産業事故、誕生、手術、心臓発作、卒中、火傷、手術またはその他の医学的介入による合併症などの結果としての身体への予期しない肉体的損傷（または傷害）によって引き起こされ得る。外傷は、病院中または病院外両方での、身体の傷害に起因し得る。外傷は、病院で（例えば、病院の救急治療室で）、緊急輸送の間にまたは外傷が生じた病院外環境、例えば、家庭内もしくは産業事故、輸送事故、戦場およびテロリストの攻撃で施される外傷薬と関連していることが多い。多くの場合、外傷療法は、蘇生療法を含み得る。
【００４３】
本明細書において、用語「組織」とは、その広い意味で、特定の機能を発揮している身体の任意の部分、例えば、臓器および細胞またはその一部、例えば、細胞株またはオルガネラ調製物を指す。その他の例として、心臓、血管および脈管構造などの循環器、肺などの呼吸器、腎臓または膀胱などの泌尿器、胃、肝臓、膵臓または脾臓などの消化器、精巣、卵巣または子宮などの生殖器、脳などの神経学的臓器、精子または卵子などの生殖細胞および皮膚細胞、心臓細胞、すなわち、筋細胞、神経細胞、脳細胞または腎臓細胞などの体細胞が挙げられる。組織は、ヒトまたは動物ドナーに由来するものであり得る。ドナー臓器はまた、異種移植に適したものであり得る。
【００４４】
本明細書において、用語「臓器」とは、その広い意味で、組織および細胞またはその一部、例えば、内皮、上皮、血液脳関門、細胞株またはオルガネラ調製物を含む、特定の機能を発揮する身体の任意の一部を指す。その他の例として、血管、心臓などの循環器、肺などの呼吸器、腎臓または膀胱などの泌尿器、胃、肝臓、膵臓または脾臓などの消化器、陰嚢、精巣、卵巣または子宮などの生殖器、脳などの神経学的臓器、精子または卵子などの生殖細胞および皮膚細胞、心臓細胞、すなわち、筋細胞、神経細胞、脳細胞または腎臓細胞などの体細胞が挙げられる。
【００４５】
本明細書において用いられる、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」（またはその文法上の変形）は、用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」と同等であり、その他の要素または特徴の存在を排除すると受け取られてはならないということも理解されよう。
【００４６】
カリウムチャネルオープナーは、カリウムチャネルに対して、ゲートの開閉機構によってそれらを開けるよう作用する薬剤である。これは、通常、細胞の内側から外側である電気化学的勾配に沿った、膜を越えるカリウムの流出をもたらす。したがって、カリウムチャネルは、伝達物質、ホルモンまたは細胞機能を調節する薬物の作用の標的である。当然のことではあるが、カリウムチャネルオープナーは、同様にカリウムチャネルの活性を刺激し、同様の結果を伴うカリウムチャネルアゴニストを含む。また、当然のことながら、種々のカリウムチャネルを開けるまたは調節する多様なクラスの化合物があり、例えば、いくつかのチャネルは電位依存性であり、いくつかの整流性カリウムチャネルは、ＡＴＰ枯渇、アデノシンおよびオピオイドに対して感受性であり、その他のものは、脂肪酸によって活性化され、その他のチャネルは、ナトリウムおよびカルシウムなどのイオンによって調節される（すなわち、細胞ナトリウムおよびカルシウムの変化に応答するチャネル）。より最近は、２つのポアカリウムチャネルが発見され、静止膜電位の調節に関与するバックグラウンドチャネルとして機能すると考えられている。
【００４７】
カリウムチャネルオープナーは、ニコランジル、ジアゾキシド、ミノキシジル、ピナシジル、アプリカリム（ａｐｒｉｋａｌｉｍ）、クロモクリム（ｃｒｏｍｏｋｕｌｉｍ）および誘導体Ｕ−８９２３２、Ｐ−１０７５（選択的細胞膜ＫＡＴＰチャネルオープナー）、エマカリム（ｅｍａｋａｌｉｍ）、ＹＭ−９３４、（＋）−７，８−ジヒドロ−６，６−ジメチル−７−ヒドロキシ−８−（２−オキソ−１−ピペリジニル）−６Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ベンザ−２，１，３−オキサジアゾール（ＮＩＰ−１２１）、ＲＯ３１６９３０、ＲＷＪ２９００９、ＳＤＺＰＣＯ４００、リマカリム（ｒｉｍａｋａｌｉｍ）、シマカリム（ｓｙｍａｋａｌｉｍ）、ＹＭ０９９、２−（７，８−ジヒドロ−６，６−ジメチル−６Ｈ−［１，４］オキサジノ［２，３−ｆ］［２，１，３］ベンゾキサジアゾール−８−イル）ピリジン Ｎ−オキシド、９−（３−シアノフェニル）−３，４，６，７，９，１０−ヘキサヒドロ−１，８−（２Ｈ，５Ｈ）−アクリジンジオン（ＺＭ２４４０８５）、［（９Ｒ）−９−（４−フルオロ−３−１２５ヨードフェニル）−２，３，５，９−テトラヒドロ−４Ｈ−ピラノ［３，４−ｂ］チエノ［２，３−ｅ］ピリジン−８（７Ｈ）−オン−１，１−ジオキシド］（［１２５Ｉ］Ａ−３１２１１０）、（−）−Ｎ−（２−エトキシフェニル）−Ｎ’−（１，２，３−トリメチルプロピル）−２−ニトロエテン−１，１−ジアミン（Ｂａｙ Ｘ９２２８）、Ｎ−（４−ベンゾイルフェニル）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチルプロピオンアミン（ＺＤ６１６９）、ＺＤ６１６９（ＫＡＴＰオープナー）およびＺＤ０９４７（ＫＡＴＰオープナー）、ＷＡＹ−１３３５３７および新規ジヒドロピリジンカリウムチャネルオープナー、Ａ−２７８６３７からなる群から選択され得る。さらに、カリウムチャネルオープナーは、ＢＫ活性化剤（ＢＫ−オープナーまたはＢＫ（Ｃａ）タイプカリウムチャネルオープナーまたは大コンダクタンスカルシウム依存性カリウムチャネルオープナーとも呼ばれる）、例えば、ベンズイミダゾロン誘導体ＮＳ００４（５−トリフルオロメチル−１−（５−クロロ−２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−ベンズイミダゾール−２−オン）、ＮＳ１６１９（１，３−ジヒドロ−１−［２−ヒドロキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−５−（トリフルオロメチル）−２Ｈ−ベンズイミダゾール−２−オン）、ＮＳ１６０８（Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）−Ｎ’−（２−ヒドロキシ−５−クロロフェニル）尿素）、ＢＭＳ−２０４３５２、レチガビン（ＧＡＢＡアゴニストでもある）から選択できる。また中間体（例えば、ベンゾキサゾール、クロルゾキサゾンおよびゾキサゾラミン）および小コンダクタンスカルシウム依存性カリウムチャネルオープナーもある。ＫＡＴＰチャネルを開けると考えられているその他の化合物として、レボシメンダンおよび硫化水素ガス（Ｈ２Ｓ）またはＨ２Ｓ供与体（例えば、硫酸化ナトリウム、ＮａＨＳ）が挙げられる。
【００４８】
さらに、カリウムチャネルオープナーは、間接的カルシウムアンタゴニストとして作用し得る、すなわち、それらは、第３相再分極を加速することによって心臓活動電位期間を短縮し、ひいては、プラトー相を短縮することによって細胞へのカルシウム流入を低減するよう作用する。カルシウム流入の減少は、Ｌ型カルシウムチャネルが関与すると考えられているが、その他のカルシウムチャネルも関与している可能性がある。
【００４９】
カリウムチャネルオープナーとしては、アデノシン（６−アミノ−９−β−Ｄ−リボフラノシル−９Ｈ−プリン）が特に好ましい。アデノシンは、カリウムチャネルを開け、細胞を過分極させ、代謝機能を抑制し、おそらくは内皮細胞を保護し、組織のプレコンディショニングを増強し、虚血または損傷から保護することができる。アデノシンはまた、間接的カルシウムアンタゴニスト、血管拡張薬、抗不整脈薬、抗アドレナリン薬、フリーラジカルスカベンジャー、停止薬、抗炎症薬（好中球活性化を減弱する）、代謝製剤および可能性ある一酸化窒素供与体でもある。より最近、アデノシンは、いくつかのステップを阻害し、これが血液凝固過程の遅延をもたらし得ることがわかった。さらに、脳中のアデノシンレベルの上昇は、睡眠を引き起こすことがわかっており、種々の形の休止状態に関与している可能性がある。アデノシン類似体、２−クロロ−アデノシンも使用できる。
【００５０】
適したアデノシン受容体アゴニストは、以下から選択できる：Ｎ６−シクロペンチルアデノシン（ＣＰＡ）、Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン（ＮＥＣＡ）、２−［ｐ−（２−カルボキシエチル）フェネチル−アミノ−５’−Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン（ＣＧＳ−２１６８０）、２−クロロアデノシン、Ｎ６−［２−（３，５−デメトキシフェニル）−２−（２−メトキシフェニル］エチルアデノシン、２−クロロ−Ｎ６−シクロペンチルアデノシン（ＣＣＰＡ）、Ｎ−（４−アミノベンジル）−９−［５−（メチルカルボニル）−β−Ｄ−ロボフラノシル］−アデニン（ＡＢ−ＭＥＣＡ）、（［ＩＳ−［１ａ，２ｂ，３ｂ，４ａ（Ｓ＊）］］−４−［７−［［２−（３−クロロ−２−チエニル）−１−メチル−プロピル］アミノ］−３Ｈ−イミダゾール［４，５−ｂ］ピリジル−３−イル］シクロペンタンカルボキサミド（ＡＭＰ５７９）、Ｎ６−（Ｒ）−フェニルイソプロピルアデノシン（Ｒ−ＰＬＡ）、アミノフェニルエチルアデノシン（ＡＰＮＥＡ）およびシクロヘキシルアデノシン（ＣＨＡ）。ＣＣＰＡは、特に好ましい。その他のものとして、全アデノシンＡ１受容体アゴニスト、例えば、Ｎ−［３−（Ｒ）−テトラヒドロフラニル］−６− アミノプリンリボシド（ＣＶＴ−５１０）または部分アゴニスト、例えばＣＶＴ−２７５９およびアロステリックエンハンサー、例えば、ＰＤ８１７２３が挙げられる。その他のアゴニストとして、Ｎ６−シクロペンチル−２−（３−フェニルアミノカルボニルトリアゼン−１−イル）アデノシン（ＴＣＰＡ）、ヒトアデノシンＡ１受容体に対して高親和性を有する極めて選択的なアゴニストが挙げられ、Ａ１アデノシン受容体のアロステリックエンハンサーとして、２−アミノ−３−ナフトイルチオフェン（ｎａｐｔｈｏｙｌｔｈｉｏｐｈｅｎｅ）が挙げられる。
【００５１】
一態様では、本発明の組成物は、Ａ１アデノシン受容体アゴニストと局所麻酔薬とを含む。ＣＣＰＡは、特に好ましいＡ１アデノシン受容体アゴニストである。
【００５２】
本発明のいくつかの実施形態は、直接カルシウムアンタゴニストを利用し、その主な作用は細胞へのカルシウム流入を減少させることである。これらは、以下により詳細に説明される、少なくとも５つの主要なクラスのカルシウムチャネル遮断薬から選択される。当然のことではあるが、これらのカルシウムアンタゴニストは、細胞へのカルシウム流入を阻害することによる、一部の効果をカリウムチャネルオープナー、特に、ＡＴＰ感受性カリウムチャネルオープナーと共有する。
【００５３】
カルシウムチャネル遮断薬はまた、カルシウムアンタゴニストまたはカルシウム遮断薬とも呼ばれる。それらは臨床上、心拍数および収縮性を低減させ、血管を弛緩するために用いられることが多い。それらを用いて高血圧、狭心症または虚血によって引き起こされる不快感 および一部の不整脈を治療でき、それらは多数の効果をβ−遮断薬と共有し、これらもまたカルシウムを減少させるために試用できる。β−遮断薬（またはβ−アドレナリン作動性遮断薬）として、アテノロール（テノーミン（商標））、塩酸プロプラノロール（例えば、インデラル（商標））、塩酸エスモロール（ブレビブロック（商標））、コハク酸メトプロロール（例えば、ロプレソール（商標）またはトプロールＸＬ（商標））、塩酸アセブトロール（セクトラール（商標））、カルテオロール（例えば、カルトロール（Ｃａｒｔｒｏｌ）（商標））、硫酸ペンブトロール（レバトール（Ｌｅｖａｔｏｌ）（商標））およびピンドロール（ビスケン（Ｖｉｓｋｅｎ）（商標））が挙げられる。
【００５４】
５つの主要なクラスのカルシウムチャネル遮断薬が、多様な化学構造とともに知られている：１．ベンゾチアゼピン：例えば、ジルチアゼム、２．ジヒドロピリジン：例えば、ニフェジピン、ニカルジピン、ニモジピンおよび多数のその他のもの、３．フェニルアルキルアミン：例えば、ベラパミル、４．ジアリールアミノプロピルアミンエーテル：例えば、ベプリジル、５．ベンズイミダゾール置換テトラリン：例えば、ミベフラジル。
【００５５】
従来のカルシウムチャネル遮断薬は、Ｌ型カルシウムチャネル（「スローチャネル」）と結合し、これらのチャネルは、心筋および平滑筋において豊富であり、このことは、これらの薬物が、何故、心血管系に対して選択的効果を有するかを説明するのに役立つ。種々のクラスのＬ型カルシウムチャネル遮断薬が、α１−サブユニット、主要チャネル形成サブユニット上の異なる部位と結合する（α２、β、γ、δサブユニットも存在する）。異なるサブクラスのＬ型チャネルが存在し、これが組織選択性の一因であり得る。より最近、異なる特異性を有する新規カルシウムチャネル遮断薬も開発された。例えば、ベプリジルは、Ｌ型カルシウムチャネル遮断活性に加え、Ｎａ＋およびＫ＋チャネル遮断活性を有する薬物である。もう１つの例として、ミベフラジルがあり、これは、Ｔ型カルシウムチャネル遮断活性ならびにＬ型カルシウムチャネル遮断活性を有する。
【００５６】
３種の一般的なカルシウムチャネル遮断薬として、ジルチアゼム（カルディゼム）、ベラパミル（カラン）およびニフェジピン（プロカジア）がある。ニフェジピンおよび関連ジヒドロピリジンは、正常用量では、房室伝導系または洞房結節に対して大きな直接的な効果はなく、したがって、伝導または自動性に対して直接的な効果はない。それに対して、その他のカルシウムチャネル遮断薬は、負の変時性／変伝導性効果（ペースメーカー活性／伝導速度）を有する。例えば、ベラパミル（およびより小さな程度ではあるが、ジルチアゼム）は、ＡＶ伝導系およびＳＡ結節におけるスローチャネルの回復速度を低下させ、したがって、ＳＡ結節ペースメーカー活性およびスロー伝導を抑制するよう直接的に作用する。これらの２種の薬物は、頻度依存性および電圧依存性であり、それによって、迅速に脱分極している細胞においてより有効となる。また、ベラパミルは房室ブロックまたは心室機能の大きな抑制の可能性のために、β−遮断薬との組み合わせでは禁忌である。さらに、ミベフラジルは、負の変時性および変伝導性効果を有する。カルシウムチャネル遮断薬（特に、ベラパミル）はまた、血管攣縮を含む機序が根底にある場合、不安定狭心症の治療において特に有効であり得る。
【００５７】
ΩコノトキシンＭＶＩＩＡ（ＳＮＸ−１１１）は、Ｎ型カルシウムチャネル遮断薬であり、鎮痛剤としてモルヒネよりも１００〜１０００倍強力であるが、常習性はないと報告されている。このコノトキシンは、難治性疼痛を治療するために調査されている。ＳＮＸ−４８２、肉食性クモ毒の毒液に由来するさらなる毒素は、Ｒ型カルシウムチャネルを遮断する。この化合物は、アフリカンタランチュラ（Ａｆｒｉｃａｎ ｔａｒａｎｔｕｌａ）、ヒステロクラテス・ギガス（Ｈｙｓｔｅｒｏｃｒａｔｅｓ ｇｉｇａｓ）の毒液から単離され、記載された最初のＲ型カルシウムチャネル遮断薬である。Ｒ型カルシウムチャネルは、身体の自然な情報伝達ネットワークにおいて役割を果たすと考えられており、これでは、脳機能の調節の一因である。動物界から得られたその他のカルシウムチャネル遮断薬として、南アフリカ産サソリ由来のクルトキシン（Ｋｕｒｔｏｘｉｎ）、アフリカ産タランチュラ（Ａｆｒｉｃａｎ Ｔａｒａｎｔｕｌａ）由来のＳＮＸ−４８２、オーストラリア産タイパンスネーク（Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｔａｉｐａｎ ｓｎａｋｅ）由来のタイカトキシン（Ｔａｉｃａｔｏｘｉｎ）、ジョウゴグモ（Ｆｕｎｎｅｌ Ｗｅｂ Ｓｐｉｄｅｒ）由来のアガトキシン 、ブルーマウンテンジョウゴグモ（Ｂｌｕｅ Ｍｏｕｎｔａｉｎｓ Ｆｕｎｎｅｌ Ｗｅｂ Ｓｐｉｄｅｒ）由来のアトラコトキシン（Ａｔｒａｃｏｔｏｘｉｎ）、ウミカタツムリ（Ｍａｒｉｎｅ Ｓｎａｉｌ）由来のコノトキシン、チャイニーズバードスパイダー（Ｃｈｉｎｅｓｅ ｂｉｒｄ ｓｐｉｄｅｒ）由来のＨＷＴＸ−Ｉ、サウスアメリカンローズタランチュラ（Ｓｏｕｔｈ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｒｏｓｅ Ｔａｒａｎｔｕｌａ）由来のグラモトキシン（Ｇｒａｍｍｏｔｏｘｉｎ）ＳＩＡが挙げられる。この羅列はまた、カルシウムアンタゴニスト効果を有するこれらの毒素の誘導体を含む。
【００５８】
直接ＡＴＰ感受性カリウムチャネルオープナー（例えば、ニコランジル、アプリカレム（ａｐｒｉｋａｌｅｍ））または間接的ＡＴＰ感受性カリウムチャネルオープナー（例えば、アデノシン、オピオイド）はまた、間接的カルシウムアンタゴニストであり、組織へのカルシウム流入を減少させる。カルシウムアンタゴニストとしても作用するＡＴＰ感受性カリウムチャネルオープナーについて考えられる１つの機構は、第３相再分極を加速することによって心臓活動電位期間を短縮し、ひいては、プラトー相を短縮することすることである。プラトー相の間、カルシウムの正味の流入は、カリウムチャネルによるカリウムの流出によって釣り合いが取られ得る。第３相再分極の増強は、Ｌ型カルシウムチャネルを遮断または阻害することによって細胞へのカルシウム流入を阻害し、組織細胞におけるカルシウム（およびナトリウム）過負荷を防ぐことができる。
【００５９】
カルシウムチャネル遮断薬は、ニフェジピン、ニカルジピン、ニモピジピン（ｎｉｍｏｐｉｄｉｐｉｎｅ）、ニソルジピン、レルカニジピン、テロジピン（ｔｅｌｏｄｉｐｉｎｅ）、アンジゼム（ａｎｇｉｚｅｍ）、アルチアゼム（ａｌｔｉａｚｅｍ）、ベプリジル、アムロピジン（ａｍｌｏｐｉｄｉｎｅ）、フェロジピン、イスラジピンおよびカベロ（ｃａｖｅｒｏ）およびその他のラセミ化号物バリエーションから選択できる。
【００６０】
好ましい一形態では、カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストは、１分未満の、好ましくは、２０秒未満の血液半減期を有する。
【００６１】
いくつかの実施形態では、本組成物は、さらなるカリウムチャネルオープナーまたはアゴニスト、例えば、ジアゾキシドまたはニコランジルを含み得る。
【００６２】
本発明者はまた、ジアゾキシドの、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬との含有物は、傷害を低減することを見い出した。したがって、もう１つの態様では、本発明の組成物は、さらにジアゾキシドを含む。
【００６３】
ジアゾキシドは、カリウムチャネルオープナーであり、本発明では、イオンおよび容量調節、酸化的リン酸化およびミトコンドリア膜完全性を保つと考えられている（濃度依存性と思われる）。より最近、ジアゾキシドは、再酸素負荷でのミトコンドリアの酸化ストレスを減少することによって心保護を提供することがわかった。目下のところ、カリウムチャネルオープナーの保護効果が、ミトコンドリアにおける反応性酸素種生成の調節と関連しているかどうかはわかっていない。ジアゾキシドの濃度は、約１〜２００μＭの間であることが好ましい。通常、これがジアゾキシドの有効量としてである。ジアゾキシドの濃度は、約１０μＭであることがより好ましい。
【００６４】
本発明者らはまた、ニコランジルの、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬との含有物は、傷害を低減することを見い出した。したがって、もう１つの態様では、本発明の組成物は、さらにニコランジルを含む。
【００６５】
ニコランジルは、カリウムチャネルオープナーであり、組織および内皮を含む微小血管完全性を、虚血および再潅流損傷から保護し得る一酸化窒素供与体である。したがって、 ＫＡＴＰチャネルを開くことおよび硝酸様効果の二重の作用によって利益を与え得る。ニコランジルはまた、血管を拡張させ、これによって、前負荷および後負荷の両方を低減することによって、心臓がより容易に働くことが可能となることによって高血圧を低下させ得る。また、抗炎症特性および抗増殖特性を有し、これが虚血／再灌流傷害をさらに減弱し得ると考えられている。
【００６６】
本発明の組成物はまた、局所麻酔を導入する、そうでなければ局所麻酔薬として知られている化合物を含む。局所麻酔薬は、メキシレチン、ジフェニルヒダントイン、プリロカイン、プロカイン、メピボカイン（ｍｅｐｉｖｏｃａｉｎｅ）、キニジン、ジソピラミドおよびクラス１Ｂ抗不整脈薬、例えば、リグノカインまたはその誘導体、例えば、ＱＸ−３１４から選択され得る。
【００６７】
局所麻酔薬は、リグノカインであることが好ましい。この明細書では、用語「リドカイン」および「リグノカイン」は、同義的に用いられ、リグノカインは、おそらくは、ナトリウムファストチャネルを遮断し、代謝機能を抑制し、遊離細胞質カルシウムを低下させ、細胞からの酸素放出から保護し、おそらくは内皮細胞を保護し、筋フィラメント損傷から保護することによって局所麻酔薬として作用することができるので好ましい。リグノカインは、低い治療濃度では、通常、心房性組織に対してほとんど効果がなく、したがって、心房細動、心房粗動および上室性頻脈の治療において無効である。リグノカインはまた、フリーラジカルスカベンジャー、抗不整脈薬であり、抗炎症特性および抗過凝固特性を有する。リグノカインのような局所麻酔薬は、非麻酔性治療濃度で電圧依存性ナトリウムファストチャネルを完全には遮断しないが、チャネル活性をダウンレギュレートし、ナトリウム流入を減少させるということも理解されなければならない。リグノカインは、抗不整脈薬として、通常、第２相の活動電位を通じて継続し、結果として、活動電位および不応期を短縮する、小さなナトリウム電流を標的とすると考えられている。
【００６８】
リグノカインは、主に、ナトリウムファストチャネルを遮断することによって作用するので、当然のことではあるが、本発明の方法および組成物において、その他のナトリウムチャネル遮断薬を代わりに用いてもよいし、または局所麻酔薬と組み合わせて用いてもよい。また、当然のことながら、ナトリウムチャネル遮断薬は、ナトリウムチャネルを実質的に遮断するよう、またはナトリウムチャネルを少なくともダウンレギュレートするよう作用する化合物を含む。適したナトリウムチャネル遮断薬の例として、テトロドトキシンなどの毒液および薬物プリマキン、ＱＸ、ＨＮＳ−３２（ＣＡＳ Ｒｅｇｉｓｔｒｙ １８６０８６−１０−２番）、ＮＳ−７、κ−オピオイド受容体アゴニストＵ５０ ４８８、クロベネチン（ｃｒｏｂｅｎｅｔｉｎｅ）、ピルシカイニド、フェニトイン、トカイニド、メキシレチン、ＮＷ−１０２９（ベンジルアミノプロパンアミド誘導体）、ＲＳ１００６４２、リルゾール、カルバマゼピン、フレカイニド、プロパフェノン、アミオダロン、ソタロール、ブレチリウム、イミプラミンおよびモリシジンまたはそれらの誘導体のいずれかが挙げられる。その他の適したナトリウムチャネル遮断薬として、ビンポセチン（エチルアポビンカミネート（ｅｔｈｙｌ ａｐｏｖｉｎｃａｍｉｎａｔｅ）およびβ−カルボリン誘導体、向知性β−カルボリン（アンボカーブ（ａｍｂｏｃａｒｂ）、ＡＭＢ）が挙げられる。
【００６９】
一態様では、本発明の組成物は、本質的に、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬とからなる。
【００７０】
もう１つの態様では、本発明の組成物は、オピオイドをさらに含み得る。オピオイドのさらなる追加は、改善されていない場合には、傷害の低減に対して同様の効果を有し得る。
【００７１】
オピオイドは、オピオイドアゴニストとしても知られ、または呼ばれ、アヘン（Ｇｒアヘン、ケシジュース）またはモルヒネ様特性を阻害し、通常、臨床上、特に、手術に際して、手術後の両方で疼痛を管理するために、中程度から強い鎮痛薬として用いられる一群の薬物である。オピオイドのその他の薬理作用として、眠気、呼吸抑制、気分の変化および意識の喪失を伴わない意識混濁が挙げられる。
【００７２】
オピオイドはまた、冬眠、正常な代謝速度および正常な中核体温の低下を特徴とする休止状態の１つの形の過程における「誘因」の一部として関与すると考えられている。この冬眠状態では、組織は、そうでなければ、酸素または代謝燃料供給の減少によって引き起こされ得る損傷からより保存され、虚血再潅流傷害からも保護される。
【００７３】
３種のオピオイドペプチド：エンケファリン、エンドルフィンおよびダイノルフィンがある。オピオイドは、心臓、脳およびその他の組織において立体特異的、飽和性結合部位と相互作用してアゴニストとして作用する。３種の主要なオピオイド受容体、すなわち、μ、κおよびδ受容体が同定およびクローニングされている。３種の受容体すべてが、結果として、Ｇ−タンパク質共役受容体ファミリー（このクラスは、アデノシンおよびブラジキニン受容体を含む）に分類されている。オピオイド受容体は、さらにサブタイプに分けられており、例えば、δ受容体には２種のサブタイプ、δ−１およびδ−２がある。
【００７４】
オピオイドの心血管効果は、中枢的に（すなわち、視床下部および脳幹の心血管および呼吸器中枢で）および末梢的に（すなわち、心筋細胞および脈管構造に対する直接および間接的両方の効果）の両方で損傷していない身体内に向けられる。例えば、オピオイドは、血管拡張に関与していることがわかっている。心臓および心血管系に対するオピオイドの一部の作用は、直接オピオイド受容体媒介性作用またはオピオイド、例えば、アリールアセトアミド薬の抗不整脈作用で観察されている、間接的、用量依存性非オピオイド受容体媒介性作用、例えば、イオンチャンネル遮断を含み得る。心臓は、３種のオピオイドペプチド、すなわち、エンケファリン、エンドルフィンおよびダイノルフィンを合成または産生できるということも知られている。しかし、δおよびκオピオイド受容体のみが、心室性筋細胞で同定されている。
【００７５】
いずれかの作用様式に拘束されるものではないが、オピオイドは、虚血性損傷を制限することおよび高レベルの損傷物質または虚血の際に自然に放出される化合物に対抗するよう生じる、不整脈の発生頻度を低下することによって、心保護的効果を提供すると考えられている。これは、筋線維膜における、およびミトコンドリア膜におけるＡＴＰ感受性カリウムチャネルの活性化によって媒介され得、カリウムチャネルを開けることに関与している。さらに、オピオイドの心保護的効果は、筋線維膜における、およびミトコンドリア膜におけるＡＴＰ感受性カリウムチャネルの活性化によって媒介されるということも考えられている。したがって、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストもカリウムチャネルを開けることに間接的に関与しているので、オピオイドは、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストの代わりに、またはそれらと組み合わせて使用できるということも考えられる。
【００７６】
当然のことではあるが、オピオイドは、オピオイド受容体に対して直接的に、および間接的に作用する化合物（天然または合成）を含む。オピオイドはまた、間接的用量依存性、非オピオイド受容体媒介性作用、例えば、オピオイドの抗不整脈作用で観察されているイオンチャンネル遮断を含む。
【００７７】
したがって、オピオイドは、エンケファリン、エンドルフィンおよびダイノルフィンから選択され得る。オピオイドは、δ、κおよび／またはμ受容体を標的とするエンケファリンであることが好ましい。オピオイドは、δオピオイド受容体アゴニストであることがより好ましい。オピオイドは、δ−１−オピオイド受容体アゴニストおよびδ−２−オピオイド受容体アゴニストから選択されることがさらにより好ましい。［Ｄ−Ｐｅｎ ２，５］エンケファリン（ＤＰＤＰＥ）は、特に好ましいδ−１−オピオイド受容体アゴニストである。
【００７８】
もう１つの態様では、本発明の組成物は、本質的に、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、（ｉｉ）局所麻酔薬と、（ｉｉｉ）δ−１−オピオイドとからなる。ＤＰＤＰＥは、特に好ましいδ−１−オピオイド受容体アゴニストである。
【００７９】
本発明者は、組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物の、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬との含有物、例えば、スクロースと、アデノシンと、リグノカインとを含む組成物は、身体の傷害を低減するのを補助することを見い出した。
【００８０】
したがって、さらなる態様では、本発明の組成物は、細胞、組織または臓器中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させるための少なくとも１種の化合物をさらに含み得る。
【００８１】
組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物は、水分の移動、すなわち、細胞外および細胞内環境間の水の移動を制御する傾向がある。したがって、これらの化合物は、浸透性の制御または調節に関与している。１つの結果は、組織中の細胞による水の取り込みを最小化するか、減少させる化合物は、浮腫、例えば、虚血性傷害の際に起こり得る浮腫と関連している細胞膨潤を低減するということである。
【００８２】
組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物は、通常、不透過物または受容体アンタゴニストもしくはアゴニストである。本発明の不透過物は、スクロース、ペンタスターチ、ヒドロキシエチルデンプン、ラフィノース、マンニトール、グルコン酸、ラクトビオン酸およびコロイドからなる群のうち１種以上から選択され得る。コロイドとして、アルブミン、ヘタスターチ、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、デキストラン４０およびデキストラン６０が挙げられる。浸透圧目的で選択され得るその他の化合物として、動物界において見られる浸透圧調整物質の主要なクラスに由来するもの、例えば、多価アルコール（ポリオール）および糖類、その他のアミノ酸およびアミノ酸誘導体およびメチル化アンモニウムおよびスルホニウム化合物が挙げられる。
【００８３】
細胞膨潤はまた、臓器回復、保存および手術による移植の際、重要であり得る炎症反応に起因し得る。サブスタンスＰ、重要な炎症性ニューロペプチドは、細胞浮腫をもたらすことがわかっており、したがって、サブスタンスＰのアンタゴニストは細胞膨潤を低減し得る。実際、サブスタンスＰのアンタゴニスト、（特異的ニューロキニン−１）受容体（ＮＫ−１）は、炎症性肝臓損傷、すなわち、浮腫形成、好中球浸潤、肝細胞アポトーシスおよび壊死を低減することがわかっている。２種のこのようなＮＫ−１アンタゴニストとして、ＣＰ−９６，３４５すなわち［（２Ｓ，３Ｓ）−シス−２−（ジフェニルメチル）−Ｎ−（（２−メトキシフェニル）−メチル）−１−アザビシクロ（２．２．２．）−オクタン−３−アミン（ＣＰ−９６，３４５）］およびＬ−７３３，０６０すなわち［（２Ｓ，３Ｓ）３−（［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］メトキシ）−２− フェニルピペリジン］が挙げられる。Ｒ１１６３０１すなわち［（２Ｒ−トランス）−４−［１−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾイル］−２−（フェニルメチル）−４−ピペリジニル］−Ｎ−（２，６−ジメチルフェニル）−１−アセトアミド（Ｓ）−ヒドロキシブタンジオエート］は、もう１つの特異的活性ニューロキニン−１（ＮＫ（Ｉ））受容体アンタゴニストであり、ヒトＮＫ（１）受容体（Ｋ（ｉ）：０．４５ｎＭ）に対してナノモル以下の親和性を有し、ＮＫ（２）およびＮＫ（３）受容体に関しては２００倍を上回る選択性を有する。同様に細胞膨潤を低減し得るニューロキン受容体２（ＮＫ−２）のアンタゴニストとして、ＳＲ４８９６８が挙げられ、ＮＫ−３として、ＳＲ１４２８０１およびＳＢ−２２２２００が挙げられる。シクロスポリンＡを用いる、ミトコンドリア透過性移行の遮断およびミトコンドリア内膜電位の膜電位の低減はまた、単離された脳切片において、虚血導入性細胞膨潤を減少させることがわかった。さらに、グルタミン酸受容体アンタゴニスト（ＡＰ５／ＣＮＱＸ）および反応性酸素種スカベンジャー（アスコルビン酸、トロロクス（Ｒ）、ジメチルチオ尿素、テンポール（Ｒ））もまた、細胞膨潤の減少を示した。したがって、組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物はまた、これらの化合物のうち任意の１種から選択され得る。
【００８４】
また、当然のことではあるが、以下のエネルギー基質もまた、不透過物として作用し得る。適したエネルギー基質は、グルコースおよびその他の糖類、ピルビン酸、乳酸、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、アルギニン、エクトイン、タウリン、Ｎ−アセチル−β−リシン、アラニン、プロリン、β−ヒドロキシ酪酸およびその他のアミノ酸およびアミノ酸誘導体、トレハロース、フロリドシド、グリセロールおよびその他の多価アルコール（ポリオール）、ソルビトール、ミオイノシトール、ピニトール、インスリン、α−ケトグルタル酸、リンゴ酸、コハク酸、トリグリセリドおよび誘導体、脂肪酸およびカルニチンおよび誘導体からなる群に由来する１種以上から選択され得る。一実施形態では、組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させるための少なくとも１種の化合物は、エネルギー基質である。エネルギー基質は、代謝を回復するのに役立つ。エネルギー基質は、グルコースおよびその他の糖類、ピルビン酸、乳酸、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、アルギニン、エクトイン、タウリン、Ｎ−アセチル−β−リシン、アラニン、プロリンおよびその他のアミノ酸およびアミノ酸誘導体、トレハロース、フロリドシド、グリセロールおよびその他の多価アルコール（ポリオール）、ソルビトール、ミオイノシトール、ピニトール、インスリン、α−ケトグルタル酸、リンゴ酸、コハク酸、トリグリセリドおよび誘導体、脂肪酸およびカルニチンおよび誘導体からなる群に由来する１種以上から選択され得る。エネルギー基質が、身体の細胞、組織または臓器におけるエネルギー変換およびＡＴＰの生成のための還元当量の供給源であることを考えると、当然のことではあるが、エネルギー還元当量の直接供給は、エネルギー生成の基質として使用できる。例えば、１種以上または種々の割合のいずれかの還元型および酸化型のニコチン酸アミドアデニンジヌクレオチド（例えば、ＮＡＤもしくはＮＡＤＰおよびＮＡＤＨもしくはＮＡＤＰＨ）またはフラビンアデニンジヌクレオチド（ＦＡＤＨもしくはＦＡＤ）の供給は、ストレス時のＡＴＰ生成を維持するための結合エネルギーを供給するために直接的に使用できる。外傷の治療または傷害を低減するための本発明の組成物に、β−ヒドロキシ酪酸が加えられることが好ましい。
【００８５】
全身、臓器、組織または細胞にエネルギー基質を提供することに加え、硫化水素（Ｈ２Ｓ）またはＨ２Ｓ供与体（例えば、ＮａＨＳ）の存在下で、これらの基質の代謝における改善が起こり得る。硫化水素（Ｈ２Ｓ）またはＨ２Ｓ供与体（例えば、ＮａＨＳ）の存在は、虚血、再灌流および外傷のような代謝不均衡の期間の間、全身、臓器、組織または細胞を停止、保護および保存する際にエネルギー需要を低下させることによって、これらのエネルギー基質を代謝するのに役立ち得る。１μＭ（１０−６Ｍ）濃度を越える硫化水素の濃度は、ミトコンドリア呼吸鎖の一部であり、エネルギー基質由来の高エネルギー還元当量の代謝を、エネルギー（ＡＴＰ）生成および酸素消費と共役する、呼吸複合体ＩＶでの呼吸を阻害する代謝毒であり得る。しかし、硫化水素は、１０−６Ｍを下回る低濃度（例えば、１０−１０〜１０−９Ｍ）で、全身、臓器、組織または細胞のエネルギー需要を減少させることができ、これが、停止、保護および保存をもたらし得ることが観察された。つまり、極めて低レベルの硫化物は、ミトコンドリアをダウンレギュレートし、Ｏ２消費を減少させ、「呼吸制御」を実質的に増大させ、それによって、ミトコンドリアは、ミトコンドリア内膜をまたぐ電気化学的勾配を崩壊させず、少ないＯ２しか消費しない。したがって、少量の硫化物は、直接的または間接的にのいずれかで、水素イオン漏出チャネルを閉じ、ミトコンドリア呼吸をＡＴＰ生成とより緊密に良好に共役することができ、この効果によって、エネルギー基質に由来する高エネルギー還元当量の代謝が改善され得るという知見がある。また、硫黄濃度が低い場合には、ヒトを含む哺乳類では、細胞サイトゾルとミトコンドリアの間に硫黄循環が存在する可能性がある。極僅かの硫黄循環の存在は、ミトコンドリアの進化的起源および硫化物産生性宿主細胞と硫化物酸化性共生細菌の間の共生関係からの真核生物細胞におけるそれらの出現に関する現在の考えと一致する。したがって、硫化水素（Ｈ２Ｓ）またはＨ２Ｓ供与体（例えば、ＮａＨＳ）は、その他のエネルギー基質の代謝の改善に加え、それ自体エネルギー基質であり得る。したがって、一形態では、本発明は、硫化水素または硫化水素供与体をさらに含む上記の組成物を提供する。
【００８６】
一実施形態では、組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させるための少なくとも１種の化合物は、スクロースである。スクロースは、不透過物として水の移動を減少させる。スクロース、ラクトビオン酸およびラフィノースなどの不透過剤は、大きすぎて細胞に入ることができず、したがって、組織内の細胞外間隙中に留まり、特に、組織の保存の間に起こる、そうでなければ、組織に損傷を与える細胞膨潤を防ぐ浸透力をもたらす。
【００８７】
もう１つの実施形態では、組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させるための少なくとも１種の化合物は、コロイドである。適したコロイドとして、それだけには限らないが、デキストラン−７０、４０、５０および６０、ヒドロキシエチルデンプンおよび修正ゼラチン（ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｆｌｕｉｄ ｇｅｌａｔｉｎｅ）が挙げられる。コロイドは、液体に固体が懸濁している連続液相を有する組成物である。コロイドは、臨床上、重篤な傷害後の身体における細胞内、細胞外および血液コンパートメント間の水およびイオン分布のバランスの回復の助けとなるよう使用できる。コロイドはまた、臓器保存用溶液においても使用できる。晶液の投与はまた、身体の水およびイオンバランスを回復することができるが、それらは液体に懸濁された固体を有さないので、通常、より多くの容量の投与が必要である。したがって、容積増量剤は、コロイドベースまたは晶液ベースであり得る。
【００８８】
組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物の濃度は、約５〜５００ｍＭの間であることが好ましい。通常、組織中の細胞による水の取り込みを減少させるための有効量である。組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物の濃度は、約２０〜１００ｍＭの間であることがより好ましい。組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させる化合物の濃度は、約７０ｍＭであることがさらにより好ましくい。
【００８９】
さらなる実施形態では、本発明の組成物は、組織中の細胞による水の取り込みを最小限にするか、減少させるための、２種以上の化合物を含み得る。例えば、不透過物（ラフィノース、スクロースおよびペンタスターチ）の組み合わせが、組成物に含まれてもよく、さらに、コロイドおよび燃料基質の組み合わせが組成物に含まれてもよい。
【００９０】
本発明の組成物は、低浸透圧性、等浸透圧性または高浸透圧性であってもよい。
【００９１】
本発明者はまた、組織中の細胞の原形質膜を越えるナトリウムおよび水素イオンの輸送を阻害する化合物の、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬との含有物が傷害の低減を補助することを見い出した。
【００９２】
したがって、もう１つの態様では、本発明の組成物は、組織中の細胞の原形質膜を越えるナトリウムおよび水素イオンの輸送を阻害する化合物をさらに含む。
【００９３】
組織中の細胞の膜を超えるナトリウムおよび水素の輸送を阻害する化合物はまた、Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送阻害剤とも呼ばれる。Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送阻害剤は、ナトリウムおよびカルシウムが細胞に入るのを低減する。
【００９４】
組織中の細胞の膜を越えるナトリウムおよび水素の輸送を阻害する化合物は、アミロライド、ＥＩＰＡ（５−（Ｎ−エンチル−Ｎ−イソプロピル）−アミロリド）、カリポリド（ＨＯＥ−６４２）、エニポリド（ｅｎｉｐｏｒｉｄｅ）、トリアムテレン（２，４，７−トリアミノ−６−フェニルテリド）、ＥＭＤ８４０２１、ＥＭＤ９４３０９、ＥＭＤ９６７８５、ＥＭＤ８５１３１、ＨＯＥ６９４からなる群のうち１種以上から選択され得ることが好ましい。Ｂ１１Ｂ−５１３およびＴ−１６２５５９は、Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送のアイソフォーム１のその他の阻害剤である。
【００９５】
Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送阻害剤は、アミロライド（Ｎ−アミジノ−３，５−ジアミノ−６−クロロピリジン−２−カルボキシミドヒドロクロリドジヒドレート）であることが好ましい。アミロライドは、Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送体（Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送体はＮＨＥ−１と略されることも多い）を阻害し、カルシウムが細胞に入るのを低減する。虚血の間、過剰の細胞プロトン（または水素イオン）は、Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送体によってナトリウムに交換されると考えられている。
【００９６】
組織中の細胞の膜を超えるナトリウムおよび水素の輸送を阻害する化合物の濃度は、約１．０ｎＭ〜１．０ｍＭの間であることが好ましい。組織中の細胞の膜を超えるナトリウムおよび水素の輸送を阻害する化合物の濃度は、約２０μＭであることがより好ましい。
【００９７】
本発明者はまた、抗酸化剤の、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬との含有物を見い出した。したがって、もう１つの態様では、本発明の組成物は、抗酸化剤をさらに含み得る。
【００９８】
抗酸化剤は、通常、組織において酸化の損傷作用に対抗することができる酵素またはその他の有機物質である。本発明の組成物の抗酸化剤成分は、アロプリノール、カモシン（ｃａｍｏｓｉｎｅ）、ヒスチジン、補酵素Ｑ１０、ｎ−アセチル−システイン、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）、グルタチオンレダクターゼ（ＧＲ）、グルタチオンペルオキシダーゼ（ＧＰ）モジュレーターおよびレギュレーター、カタラーゼおよびその他の 金属結合酵素、ＮＡＤＰＨおよびＡＮＤ（Ｐ）Ｈオキシダーゼ阻害剤、グルタチオン、Ｕ−７４００６Ｆ、ビタミンＥ、トロロクス（ビタミンＥの可溶性型）、その他のトコフェロール（γおよびα、β、δ）、トコトリエノール、アスコルビン酸、ビタミンＣ、β−カロテン（ビタミンＡの植物型）、セレン、γリノール酸（ＧＬＡ）、α−リポ酸、尿酸（尿酸塩）、クルクミン、ビリルビン、プロアントシアニジン、エピガロカテキンガレート、ルテイン、リコペン、ビオフラボノイド、ポリフェノール、トロロクス（Ｒ）、ジメチルチオ尿素、テンポール（Ｒ）、カロテノイド、補酵素Ｑ、メラトニン、フラボノイド、ポリフェノール、アミノインドール、プロブコールおよびニテカポン、２１−アミノステロイドまたはラザロイド、スルフィドリル含有化合物（チアゾリジン、エブセレン、ジチオールチオン）およびＮ−アセチルシステインからなる群のうち１種以上から選択され得る。その他の抗酸化剤として、心筋梗塞の患者で．動脈性高血圧症および心不全の治療のために用いられるＡＣＥ阻害剤（カプトプリル、エナラプリル、リシノプリル）が挙げられる。ＡＣＥ阻害剤は、反応性酸素種を除去することによって再酸素負荷された心筋に対してその有益な効果を発揮する。また、使用できるその他の抗酸化剤として、β−メルカプトプロピオニルグリシン、Ｏ−フェナントロリン、ジチオカルバメート、セレギリゼ（ｓｅｌｅｇｉｌｉｚｅ）およびデスフェリオキサミン（デスフェラール）が挙げられ、鉄キレート剤は、実験梗塞モデルにおいて使用でき、これでは、ある程度のレベルの抗酸化剤保護を発揮した。スピントラップ剤、例えば、５’−５−ジメチル−１−ピロリオン−Ｎ−オキシド（ＤＭＰＯ）および（ａ−４−ピリジル−１−オキシド）−Ｎ−ｔ−ブチルニトロン（ＰＯＢＮ）はまた、抗酸化剤としても作用する。その他の抗酸化剤として、ニトロンラジカルスカベンジャーα−フェニル−ｔ−Ｎ−ブチルニトロン（ＰＢＮ）および誘導体ＰＢＮ（二硫黄誘導体を含む）；Ｎ−２−メルカプトプロピオニルグリシン（ＭＰＧ） ＯＨフリーラジカルの特異的スカベンジャー；リポオキシゲナーゼ阻害剤 ノルジヒドログアレチン酸（ｎｏｒｄｉｈｙｄｒｏｇｕａｒｅｔｉｃ ａｃｉｄ）（ＮＤＧＡ）；αリポ酸；コンドロイチン硫酸；Ｌ−システイン；オキシプリノールおよび亜鉛が挙げられる。
【００９９】
抗酸化剤は、アロプリノール（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ａ］ピリミジン−４−オール）であることが好ましい。アロプリノールは、反応性酸素種生成酵素キサンチンオキシダーゼの競合阻害剤である。アロプリノールの抗酸化特性は、酸化ストレス、ミトコンドリア損傷、アポトーシスおよび細胞死を低減することによって、心筋および内皮機能を保存するのに役立ち得る。抗酸化剤の濃度は、約１ｎＭ〜１００μＭであることが好ましい。
【０１００】
本発明者はまた、特定の量のカルシウムおよびマグネシウムイオンの、カリウムチャネルオープナーまたはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬との含有物は、傷害を低減することを見い出した。特定の量のカルシウムおよびマグネシウムイオンの効果は、細胞内環境内のイオンの量を制御することである。カルシウムイオンは、細胞内環境から枯渇される、輸送される、またはそうでなければ除去される傾向があり、マグネシウムイオンは増大される、またはそうでなければ生存する、機能する細胞において通常見られるレベルに回復される傾向がある。
【０１０１】
したがって、もう１つの態様では、本発明の組成物は、身体組織中の細胞中のマグネシウムの量を増大させる量のマグネシウムの供給源をさらに含む。マグネシウムは、０．５ｍＭ〜２０ｍＭの間の濃度で存在することが好ましく、約２．５ｍＭがより好ましい。当然のことではあるが、これらの濃度は、組織、臓器または細胞と接触する組成物中のマグネシウムの有効濃度を指す。
【０１０２】
さらに、その中の本発明の組成物が投与される、通常のバッファーまたは担体（以下でより詳細に論じられている）は、カルシウムの完全欠損は、細胞、組織または臓器にとって有害であることがわかっているので、通常、約１ｍＭの濃度のカルシウムを含む。一形態では、本発明はまた、身体組織中の細胞内カルシウムの量を減少させるために、低カルシウム（例えば、０．５ｍＭ未満など）を含む担体を用いることを含み、身体組織中の細胞内カルシウムの量は、そうでなければ、傷害／外傷／スタンニングの際に増加し得る。本発明に記載のとおり、高マグネシウムおよび低カルシウムは、臓器の虚血および再酸素負荷の際の保護と関連している。この作用は、カルシウム負荷の減少によると考えられている。存在するカルシウムは、０．１ｍＭ〜０．８ｍＭの間の濃度であることが好ましく、約０．３ｍＭがより好ましい。
【０１０３】
一実施形態では、本組成物は、高い二価のマグネシウムイオンを含む。硫酸マグネシウムおよび塩化マグネシウムが適した供給源である。
【０１０４】
治療を必要とするヒト被験体の場合には、限定するものではないが、以下の、対応する濃度のアデノシン（Ａｄｏ）、リグノカイン（Ｌｉｄｏ）および硫酸マグネシウムを含む代替組成物が提供される。
【０１０５】
【化１】
これらの組成物中のそれぞれの有効成分各々の濃度は、投与前の組成物中の濃度を指す。当然のことではあるが、濃度は、体液または本組成物とともに投与され得るその他の液体によって希釈され得る。通常、本組成物は、組織でのこれらの成分の濃度が、前記表中の濃度よりも約１００倍低いよう、投与される。例えば、このような組成物の容器（例えば、バイアル）は、投与のために、１対１００部の血液、血漿、晶液または血液代用品に希釈され得る。
【０１０６】
一実施形態では、本発明の組成物は、アデノシンおよびリグノカインを含む。通常、組成物中のアデノシンおよびリドカインの濃度は、約１ｍＭ〜１００ｍＭの間である。投与さると、これらの成分の最終濃度は、約０．１ｍＭ〜１０ｍＭの間であり得る。
【０１０７】
もう１つの実施形態では、本組成物は、細胞輸送酵素阻害剤、例えば、ジピリダモールを含み、組成物中の成分の代謝または分解を防ぐ。
【０１０８】
さらなる態様では、本発明は、局所麻酔薬と以下のうち１種以上を含む組成物を提供する：
カリウムチャネルオープナー；
アデノシンアゴニスト；
オピオイド；
水の取り込みを減少させる、少なくとも１種の化合物；
Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送阻害剤；
抗酸化剤；および
身体組織中の細胞中のマグネシウムの量を増大させる量のマグネシウムの供給源。
【０１０９】
この組成物は、上記のうち２、３または４種を有することが好ましい。これらの成分にとって好ましい化合物は、上記で列挙されている。
【０１１０】
もう１つの実施形態では、本発明は、カリウムチャネルオープナーおよび／またはアデノシンアゴニストと、以下のうち１種以上とを含む組成物を提供する：
局所麻酔薬；
オピオイド；
水の取り込みを減少させる、少なくとも１種の化合物；
Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送阻害剤；
抗酸化剤；および
身体組織中の細胞中のマグネシウムの量を増大させる量のマグネシウムの供給源。
【０１１１】
この組成物は、上記のうち２、３または４種を有することが好ましい。これらの成分にとって好ましい化合物は、上記で列挙されている。
【０１１２】
炎症および血栓症のプロセスは、共通の機序によってつながっている。したがって、炎症のプロセスを理解することは、急性および慢性虚血性症状の治療を含む、血栓性障害の良好な管理に役立つと考えられる。臨床および種々の状況では、虚血から損傷を受けた臓器または組織への迅速な反応および初期の介入は、抗炎症療法および抗凝固療法の両方を含み得る。炎症反応を減弱するプロテアーゼ阻害剤に加え、さらなる抗炎症療法は、アスピリン、標準ヘパリン、低分子量ヘパリン（ＬＭＷＨ）、非ステロイド系抗炎症薬、抗血小板剤および糖タンパク質（ＧＰ）ＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体阻害剤、スタチン、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン遮断薬およびサブスタンスＰのアンタゴニストの投与を含んでいた。プロテアーゼ阻害剤の例として、インジナビル、ネルフィナビル、リトナビル、ロピナビル、アンプレナビルまたは広域スペクトルプロテアーゼ阻害剤アプロチニンが挙げられ、低分子量ヘパリン（ＬＭＷＨ）として、エノキサパリンがあり、非ステロイド系抗炎症薬として、インドメタシン、イブプロフェン、ロフェコキシブ、ナプロキセンまたはフルオキセチンがあり、抗血小板剤として、クロピドグレルまたはアスピリンがあり、糖タンパク質（ＧＰ）ＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体阻害剤として、アブシキマブがあり、スタチンとして、プラバスタチンがあり、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤として、カプトプリルがあり、アンジオテンシン遮断薬として、バルサルチン（ｖａｌｓａｒｔｉｎ）がある。
【０１１３】
したがって、本発明のもう１つの実施形態では、これらの薬剤の選択は、炎症および凝固の改善された管理を送達するよう本発明の組成物に加えられる。あるいは、本発明の組成物は、これらの薬剤のうち任意の１種以上とともに投与してもよい。
【０１１４】
特に、プロテアーゼ阻害剤は、心肺バイパスを用いて心臓手術を受けている患者およびＡＩＤＳなどの炎症反応が高められているその他の患者において、または慢性腱傷害の治療において全身炎症反応を減弱する。一部の広域スペクトルプロテアーゼ阻害剤、例えば、アプロチニンはまた、冠動脈バイパスなどの外科手術における失血および輸血の必要性を減少させる
ヌクレオシド輸送阻害剤、例えば、ジピリダモールなどの、血液中のアデノシンの分解を実質的に防ぐ化合物を、本発明の組成物において添加剤として使用できる。血液中のアデノシンの半減期は、約１０秒であり、そのため、その分解を実質的に防ぐための薬剤の存在によって、本発明の組成物の効果が最大となる。
【０１１５】
本発明の組成物はまた、約０．０１μＭ〜約１０ｍＭの濃度で含まれることが有利であり、０．０５〜１００μＭが好ましいジピリダモールを場合により含んでもよい。ジピリダモールは、心保護に関して主要な利点を有する。ジピリダモールは、アデノシン輸送および分解を阻害し、ストレス時の身体の細胞、組織および臓器の保護の増大をもたらすことによって、アデノシンの作用を補完し得る。ジピリダモールはまた、別個に、例えば、約０．４μｇまたは０．８μＭ濃度の血漿レベルを生じる４００ｍｇの毎日の錠剤を投与してよい。
【０１１６】
本発明の組成物は、約１０℃で高度に有益であるが、最大約３７℃の広い温度範囲にわたっても、傷害を防ぐために使用できる。本発明の組成物は、以下から選択される温度範囲で使用してよい：０〜５℃、５℃〜２０℃、２０℃〜３２℃および３２℃〜３８℃。
【０１１７】
本組成物は、静脈内に投与してもよいし、または静脈内および腹膜内の両方で投与してもよく、特定の状況では、大量失血から脈がない患者では、大腿動脈または大動脈などの主幹動脈に直接接続して投与してもよい。一実施形態では、本発明の組成物は、静脈内および会陰内に同時に投与してもよく、会陰は、事実上、血流のための組成物のリザーバーとして作用し、同時に、接触する近くの臓器に対して作用する。これは、外傷犠牲者、例えば、ショックを起こしているものに特に適している。
【０１１８】
本明細書に記載されるように、本発明の特定の実施形態では、本発明の組成物は、心臓発作、脳卒中などといった外傷後に身体の組織を保護し、保存し、再潅流後の身体組織の機能または生存力の良好〜優れた回復をもたらす。
【０１１９】
特に、組織がショックを受けた後に、保存の間の組織の生存力および身体組織の回復に影響を及ぼし、その結果、影響を受けた組織がそれらの過程の間、生存可能であるか、生存していること、およびその機能に戻ることができることは、重大である。
【０１２０】
身体の傷害を低減することは、影響を受けた組織を生存可能状態で維持し、その結果、組織が、外傷後にその機能を回復することができることと関連していることが好ましい。組織を生存可能状態で維持することまたは安定化することは、組織細胞の膜電位を静止レベルに、または静止レベル付近に維持し、虚血および再灌流の際の傷害の原因である、細胞のナトリウムまたはカリウム負荷を減少させることを含む。保存は、組織を保存する、または傷害、破壊または崩壊を防ぐ作用またはプロセスとして知られている。この適用では、本発明の組成物は、外傷によって引き起こされ得る、身体の組織のあらゆる可能性ある傷害、破壊または崩壊を最小にするよう作用する。
【０１２１】
傷害は、可逆性および不可逆性細胞傷害として、広く特徴付けることができる。例えば、可逆性細胞傷害は、通常、不整脈および／またはスタンニングから生じる心臓機能不全につながり得る。スタンニングは、通常、虚血期間後の血流回復時の左側ポンプ機能の喪失として特徴付けられる。通常、不整脈から生じ、心臓細胞自体は最初は壊死していないにもかかわらず、重篤な場合には、心臓の壊死につながる場合もある。定義による不可逆性傷害は、実際の細胞死に起因し、傷害の程度によっては、致命的であり得る。細胞死の量は、梗塞の大きさとして測定できる。心筋保護下の停止からの回復の際、条件が適当であれば、心臓は、再潅流によって、実質的に組織の正常な機能に回復され得る。心臓の機能の回復を評価するための最も一般的な方法は、心臓が発生させ得る圧力：
心臓ポンプフロー；および
心臓の電気的活性
を測定することによるものである。次いで、このデータを、停止前状態から測定されたデータと比較する。
【０１２２】
本発明の組成物は、心臓移植および新生児／乳児心臓を含めた心臓手術（直視下またはロボット心臓手術）の間の心臓組織の傷害を低減するのに特に有用である。その他の適用として、心臓発作、血管形成術または血管造影を含み得る心血管インターベンションの前、その間、その後の心臓損傷を低減することが挙げられる。例えば、本組成物は、心臓発作を起こしたことがあるか、進行中である被験体に投与でき、血液血栓溶解薬、例えば、ストレプトキナーゼの投与時に使用できる。血栓が溶解されるので、組成物の存在は心臓を、再灌流傷害などのさらなる傷害から保護し得る。本組成物は、正常な流れ、栄養物および／または酸素が種々の期間の間、欠乏している心臓の部分において、心臓保護薬として特に有効であり得る。例えば、薬剤組成物はまた、既存のまたは心血管インターベンションによって誘導され得る心臓虚血を治療するために使用できる。その他の適用として、トレッドミルで運動しながらの被験体の健康の評価などの診断手順を補助すること、または被験体がトレッドミルで運動できない場合には、部分的にまたは完全に遮断された血管または損傷を受けた心臓細胞を有し得る心臓などの身体の領域を可視化することを補助することが挙げられる。さらに、本発明は、被験体の身体または身体内の、または身体から単離された臓器および組織の、Ｘ線（慣例の、コンピュータ化された断層撮影法）または磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）など種々の可視化手順の間に使用できる。本発明は、傷害または損傷の可能性ある領域の、より良好な可視化を提供することに加え、被験体の心拍数を一時的に低下させ、それによって運動を減少させる（すなわち、心臓弛緩を増大することによって）ために使用でき、身体の血管、組織または臓器中の、特に、心臓の、可能性ある傷害の診断評価の間のより速いスキャン時間が可能となる。心拍数を低下させることおよびより迅速なスキャンを可能にすることはまた、傷害または損傷の可能性ある領域を可視化するのに必要とされる放射線の用量を低下させ得る。
【０１２３】
したがって、本発明のもう１つの実施形態では、身体の血管、組織または臓器、例えば、心臓に影響を及ぼす、医学的介入の前、その間またはその後に、上記の組成物を投与することを含む、身体の血管、組織または臓器、例えば、心臓を保存する方法が提供される。本発明のこの実施形態に用いられる組成物は、その中に停止性濃度または非停止性濃度の有効成分を有し得る。一形態では、本方法は、非停止性濃度の組成物を投与することを含み、もう１つの形態では、停止性濃度の組成物（好ましくは、ボーラスとして）と、それに続いて、非停止性濃度の組成物を有する。
【０１２４】
もう１つの実施形態では、本発明は、失血に由来する低酸素性損傷および虚血性損傷を低減するのに役立つことによって身体の酸素輸送能および生存を改善するために、血液または血液製剤または人工血液または酸素結合分子または溶液とともに投与してもよく、または含んでもよい。酸素含有分子、化合物または溶液は、天然または人工生産物から選択され得る。例えば、人工血液ベースの製剤は、ペルフルオロカーボンベースであるか、またはその他のヘモグロビンベースの代替物である。ヒト血液の酸素輸送能を模倣するために、ヘモピュア（Ｈｅｍｏｐｕｒｅ）（商標）、ゲレンポール（Ｇｅｌｅｎｐｏｌ）（商標）、オキシジェント（Ｏｘｙｇｅｎｔ）（商標）およびポリヘム（ＰｏｌｙＨｅｍｅ）（商標）のようないくつかの成分を加えてもよい。ヘモポアは、化学的に安定化されたウシヘモグロビンに基づいている。ゲレンポール（Ｇｅｌｅｎｐｏｌ）は、合成水溶性ポリマーと修飾ヘムタンパク質を含む重合されたヘモグロビンである。オキシジェント（Ｏｘｙｇｅｎｔ）は、手術の間、一時的に赤血球細胞の代わりとなる静脈内酸素担体として使用するためのパーフルブロンエマルジョンである。ポリヘム（ＰｏｌｙＨｅｍｅ）は、命にかかわる失血の治療のためのヒトヘモグロビンベースの溶液である。
【０１２５】
それだけには限らないが、酸素ガス混合物、血液、血液製剤または人工血液または酸素結合溶液をはじめとする種々の方法からの身体の酸素化が、ミトコンドリア酸化を維持し、これが 筋細胞および臓器の内皮を保存するのに役立つと考えられる。特定の様式または理論に拘束されようとは思わないが、本発明者は、９５％Ｏ２／５％ＣＯ２を用いて穏やかにバブリングすることが、ミトコンドリア酸化を維持し、これが筋細胞および冠動脈脈管構造を保存するのに役立つことを見い出した。
【０１２６】
全身または身体の外側の臓器に関する本発明のこの態様の１つの好ましい実施形態では、使用前および／または使用の間、組成物に空気を含ませる。酸素の供給源は、酸素が主要成分である、酸素ガス混合物であり得る。酸素は、例えば、ＣＯ２と混合されていてもよい。酸素ガス混合物は、９５％Ｏ２および５％ＣＯ２であることが好ましい。
【０１２７】
本発明のもう１つの態様では、
適した容器中の、本発明の組成物を提供することと、
血液、血液製剤、人工血液および酸素の供給源からなる群から選択される１種以上の栄養分子を提供することと、
場合により、酸素を用いて組成物に空気を含ませること（例えば、単離された臓器の場合）または栄養分子を、組成物と組み合わせること、またはその両方と、
組織を、傷害を低減するのに適した条件下で、組み合わせた組成物と接触させておくことと
を含む、傷害を低減する方法が提供される。酸素供給源は酸素ガス混合物であることが好ましい。酸素が主要成分であることが好ましい。酸素は、例えば、ＣＯ２と混合されていてもよい。酸素ガス混合物は、９５％Ｏ２および５％ＣＯ２であることが、さらに好ましい。組織と接触する前および／または接触する間、組成物に空気を含ませることが好ましい。
【０１２８】
本発明のこの態様に従う組成物は、液体の形であり得る。薬剤組成物の液体製剤は、例えば、溶液、シロップまたは懸濁液の形をとることができ、水またはその他の適したビヒクルで構成するための乾燥製剤として保存できる。このような液体製剤は、製薬上許容される添加剤、例えば、懸濁剤、乳化剤、非液体ビヒクル、保存料およびエネルギー供給源を用いて従来の手段によって調製できる。もう１つの形態では、本発明は、錠剤の形の組成物を含み、もう１つの形態では、本発明は、経口、皮膚または経鼻経路によって投与できるエアゾールを含む。
【０１２９】
本発明のもう１つの態様では、心臓組織を、虚血イベント後の再灌流の間に、例えば、術後期間または長期の回復において起こることが多い、再潅流傷害、例えば、炎症および血液凝固および血液凝固効果から保護する方法が提供される。この方法は、場合により、停止形のボーラスに続いて、非停止形の本発明の組成物を含む溶液を投与することを含む。
【０１３０】
本発明はまた、同溶液の投与を含む、虚血および／または再潅流の間、心臓組織において梗塞の大きさを減少させる方法ならびに／または炎症および血液凝固反応を低減する方法を提供する。
【０１３１】
身体は、ヒトまたは動物、例えば、家畜動物（例えば、ヒツジ、ウシまたはウマ）、実験試験動物（例えば、マウス、ウサギまたはモルモット）またはコンパニオンアニマル（例えば、イヌまたはネコ）、特に、経済的に重要な動物であり得る。身体はヒトであることが好ましい。
【０１３２】
本発明はまた、有効量の上記の本発明の組成物を投与することを含む、疼痛、例えば、神経因性疼痛を管理する方法を提供する。
【０１３３】
本発明は、例えば、心筋梗塞または心臓発作という状況における心臓の治療における、または外科手術の際の、例えば、直視下心臓手術の際の身体の傷害の低減において特に有利である。
【０１３４】
本発明の方法は、組織を本発明の組成物と、組織がプレコンディショニング、停止、保護および／または保存されるのに十分な条件下で一定時間接触させることを含む。組成物は、直視下心臓手術（オンポンプおよびオフポンプ）、血管形成術（バルーンおよびステントまたはその他の血管装置を用いた）など、およびクロットバスター（抗凝固性薬物または薬剤）を用いるような心臓インターベンションの間の保護のための前処理として、静脈内、結腸内ボーラスまたは任意のその他の適した送達経路として注入または投与され得る。
【０１３５】
本組成物は、低酸素症または虚血から脳を保護するために、静脈内に投与してよいし、または静脈内および腹腔内の両方で投与してもよく、または大量失血から脈がない患者における特定の状況では、または大腿動脈または大動脈などの主幹動脈に直接接続して投与してもよく、または大動脈解離の際は頚動脈または別の動脈に投与してもよい。一実施形態では、本発明の組成物は、静脈内および会陰内に同時に投与してもよく、会陰は、事実上、血流のための組成物のリザーバーとして作用し、同時に、接触する近くの臓器に対して作用する。これは、外傷犠牲者、例えば、ショックを起こしているものに特に適している。さらに、組成物が２種以上の成分を含む場合には、これらを別個ではあるが同時に投与してもよい。標的部位への成分の実質的に同時の送達が望ましい。これは、投与のための成分を組成物として予め混合することによって達成され得るが、必須ではない。本発明は、本発明の組成物の成分（例えば、第１の成分が、（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストおよび（ｉｉ）局所麻酔薬である）の局所濃度（例えば、心臓などの臓器）の同時増加を対象とする。組成物の１つの好ましい形は、アデノシンとリグノカインの組み合わせである。
【０１３６】
本発明は、カテーテルによって直接的に最終的に調整可能なポンプによって最小量の有効物が漸増される「ミニプレジア（ｍｉｎｉｐｌｅｇｉａ）」または「マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）」として知られる処置と関連していることが多い、灌流ポンプを用いて化合物を投与することによって実施できる。本発明では、プロトコールは、上記のミニプレジア（ｍｉｎｉｐｌｅｇｉａ）を利用し、これでは、患者自身の酸素化血液を用いて、心臓へ微量が直接漸増される。「設定」とは、心臓などの臓器へ直接到達されている物質の量の、シリンジポンプなどのポンプでの量をいう。
【０１３７】
組成物はまた、直視下心臓手術（オンポンプおよびオフポンプ）、血管形成術（バルーンおよびステントまたはその他の血管装置を用いた）など、およびクロットバスターを用いるような心臓インターベンションの間の保護のために、静脈内、結腸内ボーラスまたは任意のその他の適した送達経路としてボーラス注入または投与され、細胞を傷害から保護および保存し得る。
【０１３８】
本組成物はまた、直視下心臓手術（オンポンプおよびオフポンプ）、血管形成術（バルーンおよびステントまたはその他の血管装置を用いた）など、およびクロットバスターを用いるような心臓インターベンション後の保護のために、静脈内、結腸内ボーラスまたは任意のその他の適した送達経路としてボーラス注入または投与され、細胞を傷害から保護および保存し得る。
【０１３９】
したがって、組織に本発明の組成物を静脈内によって送達することによって組織を接触させることができる。これは、組織へ送達するためのビヒクルとして血液を用いることを含む。特に、本発明の組成物は、血液心筋保護のために使用できる。あるいは、本組成物は、組織または臓器への血流が制限される場合には特に有用な組織または臓器へ直接的に穿刺によって（例えば、シリンジによって）ボーラスとして直接投与してもよい。組織を停止、保護および保存するための組成物はまた、経皮または経鼻経路によって、エアゾール、粉末、溶液またはペーストとして投与してもよい。
【０１４０】
あるいは、本組成物は、傷害を低減するために、組織、臓器または細胞に、または身体内の露出部に直接投与してもよい。特に、本発明の組成物は、晶液性心筋保護のために使用できる。
【０１４１】
本発明の組成物は、以下の送達プロトコールのうち１種または組み合わせに従って送達してもよい：間欠的、連続およびワンショット。
【０１４２】
したがって、本発明のもう１つの態様では、組成物、主要なカリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬とを含む組成物の単回用量を投与すると、身体の組織を停止、保護および保存する組成物が提供される。本発明はまた、その組成物の有効量を単回用量として投与することを含む、組織を停止および保護する方法を提供する。
【０１４３】
本発明のもう１つの態様では、組成物、主要なカリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、局所麻酔薬の有効量を含む組成物の間欠的投与によって組織を停止および保護する組成物が提供される。適した投与スケジュールは、停止期間を通じて２０分毎に２分の導入量である。実時間は、組成物を投与する当業者による観察および選択された動物／ヒトモデルに基づいて調整すればよい。本発明はまた、組織を停止、保護および保存する組成物を間欠的に投与する方法を提供する。
【０１４４】
本組成物はまた、正常および傷害を受けている両方の組織または臓器、例えば、心臓組織での連続注入においてももちろん使用できる。連続注入はまた、組織が本発明の組成物中に保存される組織の静置保存を含み、例えば、ドナー組織をドナーからレシピエントへ輸送するために、組織を適した容器中に入れ、本発明の溶液に浸漬してもよい。
【０１４５】
各送達プロトコールの用量および時間間隔は、適宜設計できる。例えば、本発明の組成物は、組織の最初の停止のために、ワンショットとして組織に送達してよい。次いで、組織を停止された状態に維持するために、さらなる本発明の組成物を連続的に投与してよい。さらに、組織を再灌流するか、正常機能を回復するために、本発明のさらなる組成物を連続的に投与してもよい。
【０１４６】
これまでに記載されたように、本発明の組成物を、以下から選択される温度範囲で用いる、または組織と接触させてもよい：約０℃〜約５℃、約５℃〜約２０℃、約２０℃〜約３２℃および約３２℃〜約３８℃。約０℃〜約５℃の温度の組織を表すために「超低体温」が用いられることは理解される。「中等度低体温」は、約５℃〜約２０℃の温度の組織を表すために用いられる。「軽度の低体温」は、約２０℃〜約３２℃の温度の組織を表すために用いられる。正常な体温は約３７〜約３８℃であるが、「正常体温」は、約３２℃〜約３８℃の温度の組織を表すために用いられる。
【０１４７】
組成物の各成分について、組織と単独で接触させることが可能であるが、薬剤組成物の成分が、１種以上の製薬上許容される担体、希釈剤、アジュバントおよび／または賦形剤とともに提供されることが好ましい。各担体、希釈剤、アジュバントおよび／または賦形剤は、薬剤組成物の成分と適合するよう製薬上許容されなければならず、また被験体にとって有害であってはならない。薬剤組成物は、液体担体、希釈剤、アジュバントおよび／または賦形剤とともに調製されることが好ましい。
【０１４８】
本発明の組成物は、液体の形、たとえば、溶液、シロップまたは懸濁液の、組織への投与に適したものであり得る、あるいは、使用前に水またはその他の適したビヒクルで構成するための乾燥製剤として投与してもよい。このような液体製剤は、従来手段によって調製できる。
【０１４９】
本発明の組成物は、組織への局所投与に適したものであり得る。このような製剤は、従来手段によって、クリーム、軟膏、ゼリー、溶液または懸濁液の形に調製できる。
【０１５０】
本組成物はまた、デポー製剤として製剤できる。このような長時間作用型製剤は、移植（例えば、皮下にまたは筋肉内に）によって、または筋肉内注射によって投与してもよい。したがって、例えば、本発明の組成物は、適したポリマー材料または疎水性材料を用いて製剤できる（例えば、許容されるオイル中のエマルジョンまたはイオン交換樹脂のような、または難溶性誘導体のような、例えば、難溶性塩のような）。
【０１５１】
したがって、本発明のこの態様は、傷害を低減する方法を提供し、これは、組成物を、製薬上許容される担体、希釈剤、アジュバントおよび／または賦形剤とともに提供することを含む。好ましい製薬上許容される担体として、約６〜約９、好ましくは、約７、より好ましくは、約７．４のｐＨおよび／または低濃度のカリウムを有するバッファーがある。例えば、組成物は、最大約１０ｍＭ、より好ましくは、約２〜約８ｍＭ、最も好ましくは、約４〜約６ｍＭの総カリウム濃度を有する。適したバッファーとして、１０ｍＭグルコース、１１７ｍＭ ＮａＣｌ、５．９ｍＭ ＫＣｌ、２５ｍＭ ＮａＨＣＯ３、１．２ｍＭ ＮａＨ２ＰＯ４、１．１２ｍＭ ＣａＣｌ２（遊離Ｃａ２＋＝１．０７ｍＭ）および０．５１２ｍＭ ＭｇＣｌ２（遊離Ｍｇ２＋＝０．５ｍＭ）を含むクレブス−ヘンゼライト（Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ）、通常、１０ｍＭグルコース、１２６ｍＭ ＮａＣｌ、５．４ｍＭ ＫＣｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ２、１ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．３３ｍＭ ＮａＨ２ＰＯ４および１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（Ｎ−［２−ヒドロキシエチル］ピペラジン−Ｎ’−［２−エタンスルホン酸］を含むタイロード液、フレメス（Ｆｒｅｍｅｓ）溶液、通常、１２９ＮａＣｌ、５ ｍＭ ＫＣｌ、２ｍＭ ＣａＣｌ２および２９ｍＭ乳酸を含む、ハートマン（Ｈａｒｔｍａｎｎｓ）溶液およびリンガー乳酸が挙げられる。その他の、適したイオン環境において使用できる筋肉中に存在する天然に存在する緩衝化合物として、カルノシン、ヒスチジン、アンセリン、オフィジンおよびバレネン（ｂａｌｅｎｅｎｅ）またはそれらの誘導体がある。低カリウムを用いることの１つの利点は、本組成物を、被験体、特に、小児の被験体、例えば、新生児／乳児にとってあまり傷害性ではなくすることである。高カリウムは、回復の間の不規則な心拍動、心臓損傷および細胞浸潤と関連している可能性があるカルシウムの蓄積と結び付けられている。新生児／乳児は、心停止の間の高カリウム損傷に対して成体よりもより感受性がある。手術後、新生児／乳児の心臓は、何日も正常に戻らない場合があり、集中治療または生命維持を必要とする場合もある。
【０１５２】
低濃度のマグネシウム、たとえば、最大約２．５ｍＭなどを有する担体を使用することもまた有利であるが、当然のことではあるが、高濃度のマグネシウム、例えば、最大約２０ｍＭを、必要に応じて、本組成物の活性に実質的に影響を及ぼすことなく使用できる。
【０１５３】
本発明のもう１つの実施形態では、傷害を低減するための、本発明の組成物の使用が提供される。
【０１５４】
本組成物は、投与または組織との接触の前および／またはその間に空気を含ませることが好ましい。
【実施例】
【０１５５】
以下は、本発明を例示する目的で、本発明の適した組成物の限定されない例として提供される。
【０１５６】
動物および試薬：
Ｊａｍｅｓ Ｃｏｏｋ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ Ｃｏｌｏｎｙから得た雄のスプラーグドーリーラット（３００〜３５０ｇ）に、自由に摂食させ、１２時間明／暗周期で収容する。実験当日に、ラットに、ネンブタール（チオペントンナトリウム（Ｔｈｉｏｂａｒｂ）；１００ｍｇ／ｋｇ）の腹膜内注射で麻酔をかけ、プロトコールを通じて、必要に応じて麻酔薬を投与した。動物を、１９９６年改訂、米国国立衛生研究所（ＮＩＨ）出版第８５−２３号、動物実験に関する指針（Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ）に従って処置した。
【０１５７】
塩酸リグノカインは、ｌｏｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｕｐｐｌｉｅｒｓ（Ｌｙｐｐａｒｄ， Ｑｕｅｅｎｓｌａｎｄ）から２％溶液（腸骨）として供給されるものである。アデノシン（Ａ９２５１＞９９％純度）を含めたすべてのその他の化学薬品は、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｃａｓｔｌｅ Ｈｉｌｌ，ＮＳＷ）から供給されるものである。
【０１５８】
手術プロトコール：
麻酔をかけたヘパリンで治療されていない動物を、特別に設計されたプレキシガラスクレードル中に入れる。気管切開を実施し、Ｈａｒｖａｒｄ Ｓｍａｌｌ Ａｎｉｍａｌ Ｖｅｎｔｉｌａｔｏｒ（Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ，Ｍａｓｓ．，ＵＳＡ）を用い、加湿した大気で１分当たり７５〜８０ストロークで動物に人工呼吸して、血液ｐＯ２、ｐＣＯ２およびｐＨを正常な生理学的範囲に維持する（Ｃｉｂａ−Ｃｏｒｎｉｎｇ ８６５ 血液ガス分析器）。
【０１５９】
体温を、３７℃に維持する（Ｈｏｍｅｏｔｈｅｒｍｉｃ Ｂｌａｎｋｅｔ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｕｎｉｔ，Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ，Ｍａｓｓ．，ＵＳＡ）。直腸プローブを用いて、中核体温を測定する。薬物の中止および注入のために左大腿静脈をＰＥ−５０チューブを用いてカニューレ処理し、一方で、右大腿動脈は、血液採取および血圧モニタリングのためにカニューレ処理する（ＭａｃＬａｂと接続しているＵＦＩ １０５０ＢＰ）。すべてのカニューレは、ヘパリン化生理食塩水（１００Ｕ／ｍｌ 生理食塩水）を含む。心電図（ＥＣＧ）リードを、リードＩＩ ＥＣＧ配置に皮下に埋め込む。ラットを、１５〜２０分間安定化させ、次いで、血液を回収する。リズム障害および／または８０ｍｍＨｇを下回る平均動脈圧の持続的な低下を有していた動物はいずれも研究から廃棄された。
【０１６０】
出血性ショック：
以下の実施例は、出血性ショックを対象としている。出血性ショックは、３ｍｌ／ラット１００ｇの速度で１０分かけて、大腿静脈または動脈から採血し、３０〜３５ｍｍＨｇまで平均動脈血圧（ＭＡＰ）を下げることによって誘導する。３００ｇのラットについて、総血液量は、０．０６×３００＋０．７７＝１８．７７ｍｌであると推定される。１０分間かけて９ｍｌを取り出すこと（０．９ｍｌ／分）は、約５０％の血液量喪失をもたらす。
【０１６１】
６０％失血に関する実験には、２０分間かけて１１．２ｍｌを取り出す（０．５６ｍｌ／分）。次いで、取り出した血液を、０．０２ｍｌのヘパリン（１０００Ｕ／ｍｌ）を用いて予めすすいでおいたガラスシリンジ中に維持する。ＭＡＰは、必要に応じて採血または再注入によって、晶液性蘇生に先立つ３回のショック期間中（１時間または２時間または３時間、各ショック期間ｎ＝６）、３０〜３５ｍｍＨＧの間で維持する。
【０１６２】
出血性ショック期間の最後に、ラットに、以下の実験の各々において概説される蘇生溶液を与えて、８０〜９０ｍｍＨｇのＭＡＰを達成する（いくつかの実験では、ＭＡＰは、アデノシンおよびリグノカインの降圧効果から約４０〜６０ｍｍＨｇに低く維持され、身体のエネルギー供給とエネルギー需要指数を良好にバランスをとる）。
【０１６３】
生存は、血行動態（ＭＡＰ、心拍）および蘇生後のＥＣＧから評価し、これは最大６時間モニターされる。死亡は、ＭＡＰ、ＨＲの消失および洞調律の喪失から認識され、心臓の検査によって確認される。
【０１６４】
（実施例１）
アデノシン／リグノカイン蘇生溶液の静脈内投与
ラットを、４群（群あたり１０匹のラット、ｎ＝１０）にランダムに割り当て、準備し、上記のように出血性ショックに付した。６０分のショックの後、ラットを以下のとおり蘇生させた：
１．１多量の輸液：遅い静脈内輸液増加
群１：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインを含む０．９％ＮａＣｌの９ｍｌ／１００ｇ（脱血液容量の３倍）の１０分注入。
【０１６５】
群２：０．９％ＮａＣｌの９ｍｌ／１００ｇの１０分注入
１．２少量の輸液：急激な静脈内輸液増加（内）流動量増強
群３：７．５％ＮａＣｌ／６％アデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）およびリドカインリグノカインを含むデキストラン−７０の０．４ｍｌ／１００ｇ（３００ｇのラットに対し１．２ｍｌ）のボーラス
群４：７．５％ＮａＣｌ／６％デキストラン−７０の０．４ｍｌ／１００ｇ（３００ｇのラットに対し１．２ｍｌ）のボーラス
（実施例２）
静脈内輸液増加の腹膜内支援
ラットを、各群に１０ラット（ｎ＝１０）で、上記の実施例１においてと同数の群にランダムに割り当てた。ラットを準備し、上記のように出血性ショックに付した。６０分のショック後、ラットを上記実施例１に記載されたものに、５ｍｌの、０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインの腹膜内ボーラスを加えて蘇生させる。
【０１６６】
（実施例３）
アデノシン／リグノカインおよびさらなる成分を含む蘇生溶液の、遅い静脈内投与
ラットを、各群に１０匹（ｎ＝１０）で１８群にランダムに割り当てた。ラットを準備し、上記のように出血性ショックに付した。６０分のショックの後、ラットを、下記の溶液の９ｍｌ（脱血容量の３倍）の１０分注入を用いて蘇生させる。
【０１６７】
群１：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μｕＭリグノカインおよび５０μＭジアゾキシド
群２：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μｕＭリグノカインおよび１μＭジピリダモール（ＭＷ５０４．６）、
群３：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび１μＭ［Ｄ−Ｐｅｎ２，５］エンケファリン（ＤＰＤＰＥ）
群４：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび高硫酸マグネシウム（５ｍＭ）、
群５：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび低硫酸マグネシウム（０．５ｍＭ）
群６：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび基質／燃料（１０ｍＭグルコース，１ｍＭピルビン酸）
群７：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび抗酸化剤（１ｍＭアロプリノール）
群８：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび１０ｕＭアミロライド
群９：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび５０〜１００ｍＭラフィノース。
【０１６８】
群１０：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび５０〜１００ｍＭスクロース。
【０１６９】
群１１：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび５０〜１００ｍＭペンタスターチ。
【０１７０】
群１２：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−３０。
【０１７１】
群１３：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−４０。
【０１７２】
群１４：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−５０。
【０１７３】
群１５：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−６０。
【０１７４】
群１６：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのヒドロキシエチルデンプン。
【０１７５】
群１７：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨの修正ゼラチン。
【０１７６】
群１８：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび５０ｕＭジアゾキシド、１μＭジピリダモール（ＭＷ５０４．６）、１μＭ［Ｄ−Ｐｅｎ２，５］エンケファリン（ＤＰＤＰＥ）、高および低硫酸マグネシウム（５および０．５ｍＭ）、基質／燃料（１０ｍＭグルコース、１ｍＭ ピルビン酸）、抗酸化剤（１ｍＭアロプリノール）、ＮａＨ阻害剤（１０μＭアミロライド）、５０〜１００ｍＭスクロースおよび生理的ｐＨのデキストラン−４０。
【０１７７】
（実施例４）
アデノシン／リグノカインおよびさらなる成分を含む蘇生溶液の迅速な静脈内投与
ラットを、１６群（ｎ＝１０）にランダムに割り当て、準備し、上記のように出血性ショックに付す。６０分のショック後、ラットを、以下の溶液の０．４ｍｌ／１００ｇ（３００ｇのラットに対し１．２ｍｌ）のボーラスを用いて蘇生させる。
【０１７８】
群１：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび５０μＭニコランジルを含む７．５％Ｎａｌ／６％デキストラン−７０。
【０１７９】
群２：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび１μＭジピリダモール（ＭＷ５０４．６）を含む７．５％ＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８０】
群３：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび１μＭ［Ｄ−Ｐｅｎ２，５］エンケファリン（ＤＰＤＰＥ）を含む７．５％ＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８１】
群４：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび高硫酸マグネシウム（５ｍＭ）を含む７．５％ＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８２】
群５：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび低硫酸マグネシウム（０．５ｍＭ）を含む７．５％ＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８３】
群６：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび基質／燃料（１０ｍＭグルコース、１ｍＭピルビン酸）を含むＮａＣＩ／６％デキストラン−７０。
【０１８４】
群７：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび１ｍＭアロプリノールを含むＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８５】
群８：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび１０μＭアミロライドを含むＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８６】
群９：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび不透過物（５０〜１００ｍＭラフィノース、スクロース、ペンタスターチ）を含むＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１８７】
群１０：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０ｕＭリグノカインおよび５０〜１００ｍＭスクロース。
【０１８８】
群１１：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび５０〜１００ｍＭペンタスターチ。
【０１８９】
群１２：０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインおよび生理的ｐＨのコロイド（デキストラン−３０、４０、５０および６０ヒドロキシエチルデンプンおよび修正ゼラチン）を含むＮａＣｌ／６％デキストラン−７０。
【０１９０】
群１３：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−４０。
【０１９１】
群１４：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−５０。
【０１９２】
群１５：１０μＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび生理的ｐＨのデキストラン−６０。
【０１９３】
群１６：１０ｕＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および３０μＭリグノカインおよび５０ｕＭジアゾキシド、１ｕＭジピリダモール（ＭＷ５０４．６）、１ｕＭ［Ｄ−Ｐｅｎ２，５］エンケファリン（ＤＰＤＰＥ）、高および低硫酸マグネシウム（５および０．５ｍＭ）、基質／燃料（１０ｍＭグルコース、１ｍＭピルビン酸塩）、抗酸化剤（１ｍＭアロプリノール）、ＮａＨ阻害薬（１０ｕＭアミロライド）、不透過物（５０〜１００ｍＭ生理的ｐＨのスクロースおよびデキストラン−４０。
【０１９４】
（実施例５）
遅い静脈内輸液増大の腹膜内支援
ラットを準備し、出血性ショックに付し、５ｍｌの、０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインの腹膜内ボーラスとともに、実施例３に記載の通り蘇生させる。
【０１９５】
（実施例６）
迅速な静脈内輸液増大の腹膜内支援
ラットを準備し、出血性ショックに付し、５ｍｌの、０．２ｍＭアデノシン（またはアデノシン類似体またはアゴニスト）および０．５ｍＭリグノカインの腹膜内ボーラスとともに、実施例４に記載の通り蘇生させる。
【０１９６】
（実施例７）
異なる蘇生戦略における体温低下の効果
上記の実施例（実施例１から６）を３５、３３、２０、および４℃で繰り返し行った。存在するペルフルオロカーボンベースの、またはヘモグロビンベースの代用品または血液、血液製剤または人工血液を含む製剤は、空気で平衡化されるか、予備試験で有効であるとわかった場合には、酸素を通気させるか、有してよいヒトの血液の酸素輸送能を模倣するために、ヘモピュア（商標）、ゲレンポール（Ｇｅｌｅｎｐｏｌ）（商標）、オキシジェント（Ｏｘｙｇｅｎｔ）（商標）、ポリヘム（ＰｏｌｙＨｅｍｅ）（商標）などの成分を加えてもよい。
【０１９７】
（実施例８）
心臓手術（オンポンプ）中のＶＦ治療
本発明の異なる利用法を、患者のＡ〜Ｅに表示された５群で示す。
【０１９８】
群Ａ：標準的な地域の病院で低体温（心筋保護送達温度１０℃）高カリウム心筋保護およびカリウム「ホットショット」（停止用量）を投与されている患者
群Ｂ：：標準的な地域の病院で加温（心筋保護送達温度３３℃）高カリウム心筋保護およびカリウム「ホットショット」（停止用量）を投与されている患者
群Ｃ：低体温でアデノシンおよびリグノカイン（心筋保護送達温度１０℃）心筋保護（通常のカリウム５ｍＭ）および心臓を蘇生するためＨｉｂｅｒＳｔａｒｔ（非停止用量）を投与されている患者
群Ｄ：加温アデノシンおよびリグノカイン（心臓保護送達温度３３℃）心臓保護（通常カリウム５ｍＭ）および、心臓を蘇生するためのアデノシンおよびリグノカインの非停止用量を投与されてきる患者。停止の前に心臓を前処理する効果を調べるための群ＢおよびＤ中のＬまたはＡＬＭ。
【０１９９】
群Ｅ：マグネシウム（１．０〜２０ｍＭ）を含むか含まないアデノシンおよびリグノカインの溶液を用いて、心臓を前処理／プレコンディショニングし、次いで、群Ｄにおいて停止させ、蘇生させる。また、心臓を、停止または非停止用量の、マグネシウム（１．０〜２０ｍＭ）を含むか含まないアデノシンおよびリグノカイン溶液と組み合わせて灌流後ポストコンディショイングしてもよい。
【０２００】
群Ａ〜Ｅにおける、ヒト患者のための心筋保護組成物およびプロトコールは以下のとおりである。
【０２０１】
１）群Ａ＆Ｂの高カリウム心筋保護液の組成：
心筋保護の導入２０ｍＭ Ｋ＋溶液（最終）：ＢＡＸＴＥＲ（コードＡＨＫ５５２４）。各５００ｍｌが以下を含む：塩化ナトリウムＢＰ ４．５ｇ、塩化カリウムＢＰ ３ｇ、塩化マグネシウムＢＰ ２．６ｇ、リグノカインＨＣｌ ＢＰ ２５０ｍｇ。使用前に、炭酸水素ナトリウム（２５ｍｍｏｌ／５００ｍｌ）およびアスパラギン酸一ナトリウム（１４ｍｍｏｌ／５００ｍｌ）を加え、ｐＨ約３．７およびオスモル濃度約５４７ｍＯｓｍ。
【０２０２】
心筋保護の維持９ｍＭ Ｋ＋溶液（最終）：ＢＡＸＴＥＲ（コードＡＨＫ５５２５）。各５００ｍｌが以下を含む：塩化ナトリウムＢＰ ４．５ｇ、塩化カリウムＢＰ １ｇ、塩化マグネシウムＢＰ ２．６ｇ。使用前に、炭酸水素ナトリウム（２５ｍｍｏｌ／５００ｍｌ）およびアスパラギン酸一ナトリウム（１４ｍｍｏｌ／５００ｍｌ）を加え、ｐＨ約３．７およびオスモル濃度約５４７ｍＯｓｍ。
【０２０３】
蘇生の間、停止溶液は、Ｋ＋維持と同一であるが、導入、維持および最終ショットの間の心筋心臓温度は、３２〜３８℃である。心臓は、この時点で停止したままである。
【０２０４】
２）群Ｃ、ＤおよびＥの、アデノシンおよびリグノカイン（「ＡＬ」）心筋保護液の組成：
ＡＬの最適濃度は、用量応答曲線から見い出される。Ａは、約０．２〜２ｍＭであり、Ｌは、約０．２〜４ｍＭである。これらの濃度は、ヒトにおいて安全であることがわかっている。マグネシウムは、１．０〜２０ｍＭであり得る。停止導入は、高レベルのＡおよびＬにおいてであり、維持用量はより低いもの、例えば、停止を導入する濃度の半分であり得る。心臓に注入される最終Ｋ＋およそ最終３〜６ｍＭ（通常およそ５ｍＭ）。導入および維持容量の温度プロフィールは、群Ａ＆Ｂについて記載される温度プロトコールと同様である。
【０２０５】
蘇生の間、アデノシンおよびリグノカイン溶液は、心臓を停止しないが、蘇生の間、心臓を保護および保存する。クロスクランプの開放に先立って拍動する場合もある。ＡＬおよびＭの濃度は、Ａ：１０〜４０マイクロモル、Ｌ：３０〜５０マイクロモルおよび１０〜２０ｍＭの硫酸マグネシウムおよび温度３２〜３８℃である。
【０２０６】
３）群Ｅの心筋保護液組成：上記の群Ｄと同様であるが、再灌流またはコンディショニング後の間の硫酸マグネシウムを伴うか伴わない、アデノシンおよびリグノカイン濃度の前処理／プレコンディショニング用量＋硫酸マグネシウムを伴うか伴わない、アデノシンおよびリグノカイン濃度を含む。
【０２０７】
マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）（血液の１部および９部）を用いるＭＰＳ Ｑｕｅｓｔ心筋保護灌流ポンプシステムが利用可能である場合には、以下の、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカイン濃度を用いて、研究に用いられる停止および維持用量を試験できる。
【０２０８】
停止の導入：５０ｍｌカセット中、５４ｍｇ Ａ＋１３２ｍｇ Ｌ（心臓に達する血液において、０．５ｍＭおよび１．０ｍＭ最終濃度）。Ｍｅｎｔｚｅｒらによる研究により、２ｍＭ ａｄｏは、ヒトにおける心筋保護において安全であると示されている。
【０２０９】
維持：５０ｍｌカセット中、２６ｍｇ Ａ＋６６ｍｇ Ｌ（０．２ｍＭ ａｄｏおよび０．５ｍＭ ｌｉｄｏ）。
【０２１０】
蘇生：１０μＭ Ａ、３０μＭ Ｌおよび１６ｍＭ ＭｇＳＯ４カセットで用いられる、ＡＬおよびＭｇ＋＋（「ＡＬＭ」とも呼ばれる）。
【０２１１】
命にかかわる不整脈（心室性頻拍および／または細動）を突然起こした、研究に登録された患者の治療：患者が、病院において手術の前または後に、突然の心イベント、例えば、心臓発作および心臓の拍動リズムの突然の変化（例えば、心室性頻拍または心室細動へ変換する）を起こしている場合には、心臓を蘇生するために、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラス用量を静脈内に（または心臓内に）投与し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要である場合には）。患者が、手術室または集中治療室中にいる間に、命にかかわる重篤な不整脈（心室細動または心室性頻拍）を起こしている場合には、心臓を蘇生するために、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラス用量を静脈内に（または心臓内に）投与し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要である場合には）。
【０２１２】
（実施例９）
ヒトにおけるオフポンプ心臓手術の間および後の、心臓不整脈からの保護およびＶＦの治療
前臨床研究によって、ｉｎ ｖｉｖｏラットおよびイヌモデルにおいて、マグネシウムを伴うか伴わない静脈内注入アデノシンおよびリグノカインは、心筋虚血の間の心臓にとって高度に保護的であるということが示された。３方面からの攻撃が想定される：１）虚血時間の間、静止細胞の膜電位または電圧を維持し、２）代謝をダウンレギュレートし、３）炎症および過凝固反応を鈍らせる。静止分極状態近くに膜電位を防御することによって、イオンおよび代謝の不均衡が減少し；細胞の代謝をダウンレギュレートすることによって需要が減少し、炎症および血液凝固反応を減弱することによって、再潅流の間のさらなる損傷が低減される。３つすべてを標的にすることによって、命にかかわる不整脈および心筋および冠動脈脈管構造両方のその他の虚血関連損傷からの、より大きな保護が提供される（Ｃａｎｙｏｎ，ＳおよびＤｏｂｓｏｎ，ＧＰ２００４「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ａｇａｉｎｓｔ ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ ａｎｄ ｃａｒｄｉａｃ ｄｅａｔｈ ｕｓｉｎｇ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ａｎｄ ｌｉｇｎｏｃａｉｎｅ ｄｕｒｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎ ｖｉｖｏ ｒａｔ」、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ、２８７：Ｈ１２８６〜Ｈ１２９５頁）。
【０２１３】
低リグノカイン用量を用いるアデノシンおよびリグノカインの静脈内注入は高度に心保護的であった。低リグノカイン濃度を用いるアデノシンおよびリグノカインは、急性虚血のラットモデルにおいて、死亡という結果にならず、重篤な不整脈を事実上なくし、梗塞の大きさを減少させた。
【０２１４】
心拍動下手術を受けている患者に投与される本発明の組成物は、中心静脈ライン上の専用ポートを介する静脈内経路によるものとなる。本組成物は、３０５μｇ／ｋｇ／分のアデノシンおよび６０μｇ／ｋｇ／分のリグノカインを含み、各冠動脈吻合の各５分前およびその間、静脈内に投与される。単回のリグノカインボーラス（１ｍｇ／ｋｇ）が、ＡＬ溶液の最初の投与の直前に３分間注射される。
【０２１５】
例えば、７０ｋｇの患者には：１分あたり０．３０５×７０＝２１．３５ｍｇのアデノシンおよび１分あたり０．０６×７５＝４．２ｍｇのリグノカインが投与される。アデノシンおよびリグノカイン溶液に先立って、７０ｍｇのリグノカイン−ＨＣＬがボーラスとして投与される。
【０２１６】
注入の制限：１時間の間、絶え間なく注入される場合には、６０分間絶え間なく投与される場合に投与されるアデノシンおよびリグノカインの総量は、６０×２１．３５＝１２８１ｍｇのアデノシンおよび６０×４．２ｍｇ＝２５２ｍｇのリグノカイン（＋７０ｍｇのボーラス＝３２２ｍｇ）に等しい。アデノシンの半減期は、ヒト血液において４〜１０秒である。本発明者らは、３つの吻合を完了するために３０分の総アデノシンおよびリグノカイン注入時間、平均時間各１０分を想定する。もう１つの実施例は、７０ｋｇの被験体において０．３ｍｇ／ｋｇ／分の注入速度であり、本発明者は２１ｍｇ／分を注入する必要がある。注入混合物が、５４０ｍｌ中、３００ｍｇ（すなわち、０．５６ｍｇ／ｍｌ）である場合には、本発明者らは、この被験体のために、３７．５ｍｌ／分すなわち２．２５０ｌ／時間で実施する必要がある。
【０２１７】
前臨床研究：ラット研究では、１０ｍｌの生理食塩水への０．０５６７ｇのアデノシンおよび０．５６５ｍｌのリグノカイン−ＨＣｌ（２０ｍｇ／ｍｌ）を、３００ｇのラットに１ｍｌ／時間でＩＶ注入した。そのため、３５分の前処理および虚血期間の間、本発明者らは、本発明者らが作製した１０ｍｌの溶液のうち３５／６０×１ｍｌ＝０．５８ｍｌしか用いない。
【０２１８】
ｌｉｄｏ−ＨＣｌの１ｍｇ／ｋｇのボーラスと、それに続くアデノシンおよびリグノカイン溶液の注入で開始する。アデノシン注入速度は、０．３１１ｍｇ／ｋｇ／分（すなわち、１ｍｌ／時間の注入速度または１分あたり１／６０ｍｌまたは１／６０×５．６ｍｇ／ｍｌ（本発明者らが作製した１０ｍｌ中）×１０００／３００（３００ｇのラットにつき）＝０．３１１ ｍｇ／ｋｇ／分）に変換する。リグノカイン注入速度は、０．０６２７ｍｇ／ｋｇ／分（すなわち、１／６０×１．１３ｍｇ／ｍｌ（本発明者らが作製した１０ｍｌ）×１０００／３００＝０．０６２７ｍｇ／ｋｇ／分）に変換する。
【０２１９】
ヒト研究：
７０ｋｇのヒトの研究のために、０．０５６７×７０／０．３＝１３．２３ｇのアデノシンおよび０．５６５×７０／０．３＝１３２ｍｌのリグノカイン−ＨＣｌ（２０ｍｇ／ｍｌ）を含む５００ｍｌ（５０回）バッグを作製し、この溶液を、１時間あたり５０ｍｌのＩＶ速度で送達する。これは、単位質量あたり同量の薬物を送達する。５つの吻合および各々の前５分間の前処理には、各吻合に２０分（最大）かかるとすれば、５×（２０＋５）分＝１２５分（最大）である。
【０２２０】
したがって、５０ｍｌ／時間で、１２５分間の全吻合時間、患者あたり約５０／６０×１２５＝１０４ｍｌを注入する。ＩＶ注入プロトコールの例：３００ｍｌ（５００ｍｌではない）を作製するには、３／５×１３．２３ｇのＡｄｏおよび３／５×１３２ｍｌのリグノカインＨＣｌとなり、１時間あたり５０ｍｌでｉｖ注入する。７０ｋｇのヒトには、アデノシン注入速度：０．３１１ｍｇ／ｋｇ／分または２１．７７ｍｇ／ヒト患者／分およびリグノカイン−ＨＣｌ注入速度：０．０６２７ｍｇ／ｋｇ／分または４．３９ｍｇ／ヒト患者／分。
【０２２１】
最初の吻合の６分前に、リグノカインのボーラス（１ｍｇ／ｋｇ）、続いて、ＡＬ溶液を５分間注射する。各吻合後に停止注入を完了した。外科医が、次の吻合の準備ができた時点で、前５分のＩＶ注入を始める。同じことを各吻合について反復する。
【０２２２】
投与のタイミング：手術前５分、局所虚血の間、連続して、吻合の完了後に停止する。
【０２２３】
（実施例１０）
「オンポンプ」心臓手術の間のＶＦの治療およびマグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインの使用
現在、すべての手術用心筋保護液の９９％を越えるものが、高カリウム（１５〜２０ｍＭ）を含み、これが、膜電位を８３ｍＶから約−５０ｍＶに脱分極することによって心臓を不自然に停止する。これらの脱分極電位でナトリウムは、Ｎａ＋「ウィンドウ」電流によって細胞の内側に増大し得、次いで、これが、Ｎａ／Ｃａ２＋交換体の逆転によって細胞内Ｃａ２＋の上昇をもたらす。損傷をもたらす可能性のあるＣａ２＋の蓄積が、心筋保護期間（導入および維持相）の間および／または停止後の蘇生−再潅流相の間に起こり得る。高カリウムと関係しているＣａ２＋負荷は、再潅流期間の間の心筋スタンニング、心室性不整脈、虚血性傷害、微小血管傷害、組織浮腫、フリーラジカル生成および機能喪失と関係している。カリウムを脱分極することはまた、強力な冠動脈血管収縮薬であり、これはさらに心筋保護下の停止、維持および回復の間の傷害に対する心臓の任意の先行受攻性を構成し得る。
【０２２４】
（実施例１１）
命にかかわる心室性頻拍および／または細動の治療：
多数の突然死が、急性心室性頻脈性不整脈（心室性頻拍および／または細動）によって引き起こされ、多くは、心疾患に関連して急性冠動脈イベントによって、または既知心疾患のない人において誘発される。致命的不整脈の出現における最も一般的な病態生理学カスケードは、心室性頻拍が悪化して心室細動、後に、心静止または心停止および死亡となる。患者が、病院において手術の前または後に、突然の心イベント、例えば、心臓発作および心臓の拍動リズムの突然の変化（例えば、心室性頻拍または心室細動へ変換する）を起こしている場合には、心臓を蘇生するために、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラス用量を静脈内に（または心臓内に）投与し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要である場合には）。患者が、手術室または集中治療室中にいる間に、命にかかわる重篤な不整脈（心室細動または心室性頻拍）を起こしている場合には、心臓を蘇生するために、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラス用量を静脈内に（または心臓内に）投与し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要である場合には）。
【０２２５】
マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインを用いて、不規則性不整脈、例えば、急性心室性頻脈性不整脈につながる予期せぬ心イベントを患っているヒト被験体を治療し、心臓を正常な拍動または洞調律に薬理学的に変換する方法は、以下のとおりである。
【０２２６】
心臓を、高カリウム性心筋保護導入、維持および蘇生のマイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）法を用いて停止する。マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）は、心筋に、血液と心筋保護の標準的な４：１混合物を注入して心臓を停止する代替法である。マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）は、カリウム（停止）およびマグネシウム（追加）溶液の微量滴定と合わせた、持続的な酸素の豊富な血液の送達による、心臓の有酸素性停止を導入および維持することを目指している。有酸素性停止は、標準的な４：１心筋保護投与計画のものを上回る優れた心筋保護および血糖値のより厳格な制御を提供する。追加的混合物にアデノシンおよびリグノカインを添加すると、さらに高レベルの心筋保護が、患者に長時間持続する周術期利益をもたらすと期待されることがより重要である。アデノシンおよびリグノカインの組成物は、心臓手術を患者にとって安全なものに、外科医にとって、より予測可能なものにする。
【０２２７】
この実施例は、カリウム停止導入および維持心筋保護と、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインを用いる非停止性蘇生溶液とを比較する。維持溶液もまた、アデノシンおよびリグノカインを含み得るが、これらの群における主な停止様式は高カリウムである。もう１つの別の群では、アデノシンおよびリグノカインが、心筋保護を導入および維持するための主な停止、保護および保存様式であり、蘇生を、カリウム停止、維持および蘇生群と比較する。心臓が、蘇生後に適切な機能に戻らない場合には、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラスを、灌流ライン中（心臓内）に投与して心臓を蘇生し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要とされる場合）。
【０２２８】
マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）送達プロトコール：オンポンプ冠動脈バイパス手術、弁手術または組み合わせた手順；またはこれらの再手術に予定されている患者。患者に麻酔および心臓手術を、通常の実施のとおり施す。変力物質、血管収縮薬の使用は「プロトコール主導」であり、手術／麻酔チームによって取り決められた使用のための判定基準に基づく。以下は、例えば、Ｑｕｅｓｔ ＭＰＳ（登録商標）Ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ Ｓｙｓｔｅｍにおける心臓の停止、維持および蘇生のために設計されたカセット処方である。
【０２２９】
停止カセット：
１．８０ｍＥｑの非希釈カリウム＝４０ｍＬ
２．高設定：２５ｍＥｑ／Ｌ
３．低設定：１０ｍＥｑ／Ｌ
追加カセット
１．１２ｍｇアデノシン＝４ｍＬ
２．２５ｍｇリグノカイン＝１ｍＬ
３．５ｇｍ硫酸マグネシウム＝１０ｍＬ
４．３０ｍＬ晶液プライム（例えば、プラズマライト（Ｐｌａｓｍａｌｙｔｅ））
５．追加カセット中の総容量：４５ｍＬ
６．追加設定：１０ｍＬ／Ｌ
ヘパリン処置時には、アイスリザーバーを氷で頂部まで満たす。必要に応じてリザーバーを補充する。送達温度約８〜１２℃。加温導入のための温度設定は、３７℃である。
【０２３０】
１．心停止は、正常温度高カリウム性血液マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）で導入する。患者に、高カリウム性血液マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）を施す。１）前処理投与計画としての追加カセット中のアデノシンおよびリグノカインおよびマグネシウム、２）維持心筋保護の送達の間の低アデノシンおよびリグノカイン、マグネシウムおよびカリウムレベルならびに３）加温再潅流用量としての、カリウムを含まないアデノシンおよびリグノカインおよびマグネシウム。
【０２３１】
２．導入期のクロスクランプの適用時には、順行性の流量を、５００ｍＬ／分に迅速に増大し、次いで、３２０〜３５０ｍＬ／分に直ちに戻す。これによって大動脈弁の閉鎖を確実にする。高（２５ｍＥｑ）カリウムを含む合計７００〜１０００ｍＬの加温血液心筋保護を、順行法で送達する。静止状態に達した時点で、逆行性加温に切り替え、さらなる７００ｍＬを送達する。
【０２３２】
３．温浴を冷却（４℃；送達温度は、８〜１２℃の間である）に切り替える。追加設定（生理食塩水またはアデノカイン（ａｄｅｎｏｃａｉｎｅ））を２ｍＬ／Ｌに下げる。可能ならいつでも、症例を通じてマイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）投与を続ける。
【０２３３】
４．クロスクランプの最後の１０分に近づいた時点で、調製物を作製し、温浴を切り替えて３７〜３８℃に加温することによって加温再灌流用量を送達する。
【０２３４】
５．加温再灌流用量：逆行法で、アデノシン及びリグノカインを含むか含まない加温血液の送達を開始または継続する。加温逆行性マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）をグラフトが完了するまで投与し、順行性送達モードに切り替える。これによって、グラフトの脱気が容易になり、心臓の右側が灌流されるのが可能となる。順行性送達様式によって、マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）が、適切に送達され、心筋に分配されることが確実となる（すべてのグラフトが完了した時点で）。順行モードで３〜５分後、脱気が完了した時点で、追加カセット中の残存容量（通常、５００〜１０００ｃｃ）が投与されるまで加温順行を継続する。
【０２３５】
いくつかのエンドポイントおよび測定可能な結果を、比較のために評価する：
１．年齢、性別、併存症（すなわち、糖尿病、高コレステロール血症、高血圧症、喫煙、ＣＯＰＤ、腎不全）を含めた患者個体群統計学および病歴。
【０２３６】
２．診断、ＢＳＡおよび検査値（ＢＵＮ／クレアチニン、ＩＮＲ、ＰＴ／ＰＴＴ、ＩＮＲ、ＰＬＴカウント、ヘパリン後グルコースおよびＨＣＴ）、意図されるグラフトの数を含めた手術前データ
３．１）バイパスされる血管の数
２）バイパスの長さ（離脱開始時）
３）クロスクランプ時間
４）血糖値、インスリン投与
５）症例の間のＨＣＴ
６）送達されるマイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）の総容量、投与される添加剤およびカリウムの量
７）加温再灌流用量の期間、ホットショットの容量
８）ブレイクスルーイベント（心筋の蘇生）の数および再停止するのに必要とされるカリウムレベル
９）ＣＰＢ前および後駆出分画
１０）クロスクランプ除去前の洞調律への回復（はい／いいえ）；心室細動の発生率
１１）心房細動の発生率
１２）カルディオバージョンの必要性（ショックの数、各々のエネルギーレベル）
１３）任意の再停止プロトコールの必要性［追加のまたは延長されるホットショット（外科医の要請で）、ホットショットの時点でアデノカインへ変換する必要性］
１４）手術室から手術後最初の２４時間までの尿排出量
１５）手術室から退院までの血液製剤使用量（ＦＦＰ、血小板、ＲＢＣおよび晶液）
１６）血糖値およびインスリン投与（手術後最初の２４時間）
１７）手術後６、１２、２４時間での血漿トロポニンレベル
１８）急性心筋梗塞の臨床的証拠（Ｑ波、不整脈）
をはじめとする手術中データ。
【０２３７】
４．人工呼吸器の時間（抜管までの時間）
５．ＩＣＵ滞在の長さおよび病院滞在の長さ（退院までの時間）
６．手術後心房細動の治療、カウンターショック（数およびジュール）および以下のスケジュールに従って測定されるペースメーカーの使用：
１）Ｘクランプ除去から手術室退出まで
２）手術後ＴＩＣＵでの最初の２４時間
３）ＴＩＣＵ退出から退院まで
７．以下のスケジュールに従って駆動され、測定される変力物質および血管収縮薬プロトコールの使用：
１）手術室を出る際の各々の比率
２）手術後最初の２４時間後ＴＩＣＵでの各々の比率。
【０２３８】
場合によっては、手術後心臓の蘇生の間、心臓は反応せず、細動する。心臓を蘇生するために、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラス用量を、灌流ラインまたは心臓の筋肉（または心臓内）への適したエントリーポイント中に投与し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要とされる場合）。集中治療室において患者が命にかかわる重篤な不整脈を起こしている場合には、心臓を蘇生するために、マグネシウムを伴うか伴わないアデノシンおよびリグノカインのボーラス用量を静脈内に（または心臓内に）投与し、その後、除細動器を用いる（除細動器が必要である場合には）。
【０２３９】
（実施例１２）
手術の間の治療
本発明の組成物および方法はまた、損傷を低減するために代謝活性の低下している期間の間、例えば、細胞静止状態（医学的に誘導されたまたはそうでない）に使用できる。心臓手術は一例である。この実施例では、既知高カリウム性心臓保護が用いられ、手術の間の組織損傷を低減するために本発明の組成物が投与される。
【０２４０】
このプロトコールは、微量の本発明の組成物を、種々の割合で患者自身の酸素化された血液と混合し、種々の設定で心臓に灌流する上記のミニプレジア（ｍｉｎｉｐｌｅｇｉａ）を用いる。「設定」とは、血液中に混合され、臓器、この実施例では、心臓へ直接送達される物質の量の、ポンプ、例えば、シリンジポンプでの量をいう。
【０２４１】
２種のカセットは以下のとおり調製した。
【０２４２】
（１）停止カセット：
１．４０ｍｌの、８０ｍＥｑを有する非希釈カリウム−したがって、２ｍＥｑ／ｍｌ
２．高設定：リットルあたり２５ｍＥｑ
３．低設定：リットルあたり１０ｍＥｑ
上記の項目１中のカリウムは主に心停止剤である。高カリウムは、その既知不利点および有害な副作用にもかかわらず、最もよく知られており、用いられている心停止である。代替心停止剤は、カリウムチャネルオープナー／アゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニスト（例えば、アデノシン）を、局所麻酔薬（例えば、リグノカイン）とともに、ｍＭ量で含むＷＯ００／５６１４５（ＧＰ Ｄｏｂｓｏｎ）に開示されている。この明細書の開示内容は、参照により全文が本明細書に組み込まれる。本明細書では例示されていないが、上記の項目１の高カリウム心停止剤は、このような心停止剤によって置換され得る。
【０２４３】
（２）追加カセット：
１．１２ｍｇを有する４ｍｌのアデノシン、従って、３ｍｇ／ｍｌ
２．１０ｍｌの硫酸マグネシウム＝５ｇ（または５ｇに相当するＭｇＳＯ４のバイアル）
３．３０ｍｌ−晶液プライムはいずれも（例えば、Ｌ／Ｒ、プラズマライト（Ｐｌａｓｍａｌｙｔｅ）商標）、ノルモソール（Ｎｏｒｍｏｓｏｌ）（商標））ポンプで使用できる。
【０２４４】
４．追加カセット中の総容量：４４ｍｌ
５．追加設定：１リットルあたり１０ｍｌ
このカセットは、５０ｍｌカセットを支持する機械に適している。
【０２４５】
以下の記載されるように、このカセットにリグノカインを添加し、改善された結果を送達する。リグノカインは、アデノシンのものの０．１〜１０倍、好ましくは、０．５〜２倍の濃度で添加される。
【０２４６】
以下のデータは、クロスクランプ除去の直前の回復期まで、このカセットにリグノカインを添加していない実験から得たものである。しかし、本発明のもう１つの実施形態では、アデノシンとリグノカインの組み合わせが、手順の維持または静止期の間に投与されるよう、その最初の使用からこのカセットにリグノカインを添加する。これは、心臓回復の見込みをさらに改善し、かつ／または術後合併症を低減するということがわかる。
【０２４７】
この実施例において組成物を投与するために用いた手順は、以下のとおりであり、虚血性停止ではなく、有酸素性停止を引き起こすことを全体的な目的とする。
【０２４８】
１．ヘパリン処置時には、アイスリザーバーを氷で頂部まで満たす。リザーバーは、ｘ−クランプ時間が３時間を超えるまで補充される必要はない。送達温度は約１２℃とする。最後の３回目のｘ−クランプ期間に向けて、酸素の豊富な血液のある程度の代謝が起こるはずである。
【０２４９】
２．加温導入のための温度設定は、加温（３７℃）。
【０２５０】
３．停止のための高設定：２５ｍＥｑ／１リットルの高カリウム性停止カセットが迅速な停止を導入する。
【０２５１】
４．追加のための設定：クロスクランプの前に１０ｍｌ／リットル。
【０２５２】
クロスクランプの適用時：
１．順行性のフローを５００ｍｌに迅速に増大し、次いで、３２０〜３５０ｍＬ／分に直ちに戻して、大動脈弁の閉鎖を確実にする。
【０２５３】
２．７００ｍｌの加温順行性を投与する。静止状態に達すれば、３００ｍｌをさらに投与し、次いで、低Ｋ＋設定（すなわち、１０ｍｌ／リットル）に切り替える。
【０２５４】
３．７００ｍｌの加温逆行性を投与する。
【０２５５】
４．水温を冷却に切り替える。冷逆行性を可能な限り投与する。経験的に停止設定を低くするほど、より長いフローが継続する。
【０２５６】
５．低追加設定を２ｍｌ／リットルとする。心臓のほとんどの準備が生じる。
【０２５７】
６．ＣＡＢＧを行う場合には、末梢をまず実施し、最初のグラフトの後に、マルチカテーテルラインによってグラフトをポンプとつなぐ。次いで、フローを、１５０トールの圧力を達成するよう極めてゆっくりと増大し、外科医にとって有用な情報であるフローに注意する。このことは、以下のいくつかのことに達する：
・圧力対フロー比の究極の判断基準を用いてグラフトの開存性を調べるための制御された機械装置；
・外科医は、吻合部の止血を調べる手段を有する；
・標的部位に順行性に、必要に応じて同時に、逆行性に送達する能力。
【０２５８】
７．処置が、弁および冠動脈での作業を含む場合には、冠動脈をまず実施する。このように病気の心臓に栄養分が提供され、それは弁が作動している間必要である。
【０２５９】
８．通常のＳＯＰに従ってＫ＋をモニターし、カリウム濃度を所望のレベルを満たすよう調整する。
【０２６０】
ｘ−クランプの最後の１０分に近づいた時点で、加温ショットのための調製物を作製する。これらは以下を含む：
１．水設定：加温（３７℃）
２．停止設定：０−Ｋ＋およびその他の代謝物を洗い流すため
３．２５ｍｇのリグノカインを追加バッグ（記載されているこの実施形態では、事前には添加されていない）に注入して、予防的抗不整脈薬組成物の標的送達を達成する−通常、処置時間の長さに応じて、この時点で、追加バッグ中に約１８〜３５ｍｌ残っており、これによって約１ｍｇ／ｍｌのリグノカイン濃度が提供される。
【０２６１】
４．追加設定：１５〜１８−目標は、クロスクランプの除去の前に追加バッグを空にすること。
【０２６２】
加温ショットのために：通常、ｘ−クランプ除去の５〜１０分前に開始した
１．逆行性加温を開始する、カリウムゼロ、追加設定１５。逆行性圧が最高レベル（３５〜４０トール）で維持されることを確認する。
【０２６３】
２．電気的活動が始まる場合には、もう１分逆行性を継続する。
【０２６４】
３．２〜３分間、順行性に切り替える（外科医の構想を不明瞭にしない場合）。これによってグラフトを脱気することが容易になり、心臓の右側が灌流されるのが可能となり、通常、安定な心拍を達成される。
【０２６５】
４．ｘ−クランプの間、逆向性に切り替えて戻す。
【０２６６】
５．追加設定を使い果たした場合には、ｘ−クランプ除去によって純粋な加温血液を用いて継続する。
【０２６７】
マイクロプレジック（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉｃ）技術を用いれば、投与する容量が多いほど、有酸素性停止であるので、心臓はより好む。多くの場合、適切に投与されると、酸素供給／需要比率は逆転される。１リットルを越え、最大６リットルの投与は、術後細動の最大の減少を伴う。
【０２６８】
加温血液心筋保護を用いて得られた臨床結果は、低体温によるいくつかの細胞機能の障害に関する初期の知見が、これまでに考えられていたよりも関連している可能性があるということを示唆している。これらとして、以下の低下が挙げられる：
１．膜安定性
２．グルコースおよび脂肪酸利用能
３．細胞膜機能の低下につながる、アデノシン三リン酸のミトコンドリア生成
４．細胞量調節の障害につながる、アデノシン三リン酸系の活性
５．筋小胞体のカルシウムと結合する能力の低下
６．ミトコンドリア状態呼吸およびクエン酸合成酵素の活性
７．細胞内ｐＨの制御
８．カルシウム取り込みに関する筋小胞体の活性
加温導入を、冷却維持およびクロスクランプの終了に向けた加温ショットと合わせることは、優れた結果を提供する。特に、アデノシン（その他の機能の中でも、極めて強力な血管拡張薬）を加えた加温導入は、すべての側枝を広げ、停止するのに必要な導管ならびに筋細胞および内皮に到達する添加剤を提供する。冷却導入を用いると、収縮ならびに心筋保護を筋細胞および内皮にまで全体的に分配できないこと現れる。
【０２６９】
冷却維持は、代謝取り込みの減少を提供し、氷融解によるクロスクランプの自然の成り行きの間に生じる温度のゆっくりとした上昇を伴う。平均温度は約１２〜１４℃に推移する。最後での加温ショットは、心筋保護の最も重要な局面である。心臓に、可能な限り長く加温血液（３２〜３７℃）を経験させることによって、変力物質および電気的支持を必要とする弛緩した、命のない心臓とは対照的に、心臓の機能的回復のほとんどを取り戻すことにおいて相違が生じることとなり得る。また、冷たい、弛緩した、拍動していない心臓を、例えば、クロスクランプが除去されるときに経験されるような、大流量の加温血液の外傷に付すことによって、心臓を確実に再灌流傷害を起こす状態にするという証拠がある。
【０２７０】
過去３０年の間に、外科医および灌流技師はその外科的技術に磨きをかけ、それによって、各患者の個々の必要性および要求にアプローチする方法を「カスタマイズ」することが可能となった。本質的に「型にはまった」アプローチが残っている唯一の領域は、心筋保護であり、本質的に「フリーサイズ」である。いずれか特定の理論または作用様式に拘束されるものではないが、この好ましい実施形態の方法は、患者を過剰に血液希釈せず、ひいては、結果の改善をもたらすことに対してより慎重に扱うべきであると考えられる。
【０２７１】
一実施形態では、心筋保護を用いて心臓手術を受けている２６８８人の患者を、異なる外科医および異なる技術を用いて６つの異なる病院で評価し、このデリケートな環境において変動性を評価した。すべての患者を標準的な高カリウム性心筋保護液を用いて処理して停止を導入した。患者のうち、１２７９人は、通常の標準的な晶液心筋保護プロトコール（「標準」）に付される群とした。１４０９人は、同様の高カリウム性心筋保護および上記の、すなわち、本発明の組成物を有する加温ＡＬＭ追加カセットを用いる、マイクロプレジア（ｍｉｃｒｏｐｌｅｇｉａ）プロトコール（すなわち、心臓に直接投与される最小量の心筋保護を用いるもの）に付された。本発明は、この形の心筋保護に特異的ではなく、それに限定されることもなく、本発明の方法の適用を形成し、評価するために本明細書で議論され、本発明の効果を例示する。
【０２７２】
追加カセットは上記のように用いられ、その結果、回復期の間、アデノシン、リグノカインおよびマグネシウムを含んでいた（従って表示「ＡＬＭ」）。本発明の方法は、単に便宜な略語として「ＡＬＭ」と呼ばれる。ＡＬＭは、上記のプロトコールに従ってクロスクランプ除去で投与された。
【０２７３】
表１は、２６８８人の患者の特徴を示し、表２は、測定された種々の術後合併症の出現を示す。
【０２７４】
【表１Ａ】
【０２７５】
【表１Ｂ】
表２では、表１において同定された患者の臨床結果が表にされている。第３の列は、各結果の標準心臓保護患者の割合（すなわち、第１の列のパーセンテージとしての第２の列）のパーセンテージとしての患者のＡＬＭ割合を表す。左の列の結果のすべては、負の結果であり、従って、最小化が望ましい。
【０２７６】
【表２】
上記のプロトコール後に合併症が、特に、術後心房性細胞および術中変力物質の必要性において実質的に減少されていることがわかる。特に、これらの負の結果の減少は、術中変力物質の８６％減少、術中ぺーシングにおいては６４％の減少、術中輸血においては４４％の減少、術後在院日数の長さの２１％の減少および術後心房性細胞における９１％の減少である。
【０２７７】
（実施例１３）
ショック後アデノシン／リグノカイン溶液の投与
この実施例では、以下のアデノシン／リグノカイン（ＡＬ）溶液（複数の溶液）を用いた：ＡＬ溶液＝クレブス−ヘンゼライト（Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ）溶液中、２００μＭアデノシン、５００μＭリグノカイン
ラットを、上記のように出血性ショックに２時間および１０分付した。
【０２７８】
図１は、この実験の間のラット心臓のＥＣＧモニタリングを示す。図１Ａは、ラット心臓を、出血性ショックの前の正常として示す（心拍数（ＨＲ）＝３７５ｂｐｍおよびＭＡＰ１１４ ｍｍＨｇ）。ショック後、ＨＲは、３５ｂｐｍ ＢＰ＜１０ｍｍＨｇに低下した（図１Ｂ）。０．５ｍＬのＡＬ溶液のボーラスを、心臓に直接投与した。図１Ｃは、ＨＲが、溶液の投与の１．５秒後に２０７ｂｐｍに増大したことを示す。
【０２７９】
図２Ａは、この実験の間のラット心臓のカルディオバージョンをより詳細に示す。特に、溶液の投与の１．５秒後、ラット心拍は３５ｂｐｍから２０７に増大した。溶液の投与点は、（Ｉ）として表されている。図２Ｂは、このラットの心拍が、溶液の投与の１０秒後に再度ゆっくりになることを示す。
【０２８０】
いずれか特定の作用様式または理論に拘束されるものではないが、これらの結果は、動物が極めて少容量の血液しか有さないので、ＡＬ溶液のボーラスが心拍を最初の期間戻すことができるということを示す。図２Ｂ中、（ＩＩ）に示されるさらなるインターベンション、例えば、胸部圧迫および／またはＡＬ溶液のさらなるショットが、被験体を生存させるのに必要とされ、同様に血液量補充を用いることが好ましい。
【０２８１】
この実施例は、蘇生の間、身体全体の酸素供給−需要比率を良好にバランスをとり、脳、心臓、肺および腸などの重要な臓器への損傷を低減することに特に重点をおいて、外傷性出血性ショックおよび蘇生と関連する炎症および過凝固不均衡を積極的に減弱するために、薬理学的に低代謝の「冬眠様」状態を誘導することを目的としている。肺の炎症状態および浮腫性、いわゆる「湿性肺」、「ショック肺」、「ダナン肺」または「急性呼吸窮迫症候群」は、激しく外傷を受けた患者の最大５０％で起こり得る。
【０２８２】
（実施例１４）
出血性ショック後の、アデノシン／リグノカイン蘇生液を用いた静脈内治療
この実施例では、以下のアデノシン／リグノカイン溶液（複数の溶液）を用いた。
【０２８３】
ＡＬＭ（蘇生溶液）＝７．５％ＮａＣｌ溶液中、１０μＭアデノシン、３０μＭリグノカインおよび２．５ｍＭ ＭｇＳＯ４。
【０２８４】
図３は、正常期の間のラットのＥＣＧトレースを示す。この時間に測定されたＭＡＰおよびＨＲは以下の表３に示されている。
【０２８５】
ラットを、ＭＡＰが約３０〜３５ｍｍＨｇに低下するまで、上記のような約４５％の失血を含む出血性ショックに付した。取り出された最大血液は、ショック期間の過程にわたって８．６ｍｌであった。
【０２８６】
総血液容量は、０．０６×３０４＋０．７７＝１９．０１ｍｌであると推定された。したがって、失われた血液容量％＝８．６／１９．０１×１００＝約４５％。
【０２８７】
図４は、「ショック期」の開始の前の出血期間の最後のラット心臓のＥＣＧモニタリングを示す。この時間に測定されたＭＡＰおよびＨＲは、以下の表３に示されている。
【０２８８】
動物はショックで１８０分間維持し、次いで、ＡＬＭまたは７．５％生理食塩水のいずれかを、ｉｖボーラスによって投与した。ＨＲおよびＭＡＰは、各６０分のショック期、すなわち、０〜６０分、（ｉｉ）６０〜１２０分、（ｉｉｉ）１２０〜１８０分の間測定し、以下の表３に示されている。ＥＣＧモニタリングは継続した（図５、図６および図７）。
【０２８９】
３時間のショック期の最後に、１．０ｍｌのボーラスＡＬＭ（７．５％ＮａＣｌ、２．５ｍＭ ＭｇＳＯ４、１０μＭ アデノシン、３０μＭ リドカイン）を、大腿静脈にゆっくりと注入した。
【０２９０】
注入１０分後ＥＣＧトレースが、図８に示されている。この時間にとられたＨＲおよびＭＡＰ測定値は、以下の表３に示されている。
【０２９１】
注入３０分後のＥＣＧトレースが、図９に示されている。この時点でとられたＨＲおよびＭＡＰ測定値は、以下の表３に示されている。
【０２９２】
注入６０分後のＥＣＧトレースが、図１０に示されている。この時点でとられたＨＲおよびＭＡＰ測定値は、以下の表３に示されている。
【０２９３】
注入９０分後のＥＣＧトレースが、図１１に示されている。この時点でとられたＨＲおよびＭＡＰ測定値は、以下の表３に示されている。
【０２９４】
【表３Ａ】
【０２９５】
【表３Ｂ】
（実施例１５）
アデノシン／リグノカイン蘇生液および７．５％生理食塩水を用いる静脈内治療の競合実施例
この実施例では、以下のアデノシン／リグノカイン溶液（複数の溶液）を用いた：
ＡＬＭ（蘇生溶液）＝７．５％ＮａＣｌ溶液中、１０μＭアデノシン、３０μＭリグノカインおよび２．５ｍＭ ＭｇＳＯ４。
【０２９６】
ラットを、ＭＡＰが約３０〜３５ｍｍＨｇに低下するまで、先の実施例に記載されるような約４５％の失血を含む出血性ショックに付した。
【０２９７】
図１２は、この実験の間のラットのＥＣＧトレースを示す。図１２Ａは、出血性ショックの前の正常としてのラット心臓を示す（ＨＲ約３５０ｂｐｍ；ＭＡＰ１００ｍｍＨｇ）。図１２Ｂは、ショックの６０分後のＥＣＧモニタリングを示す。ＭＡＰおよびＨＲは、この時点で測定した（ＭＡＰ４４ｍｍＨｇ；ＨＲ増大した約２８０ｂｐｍ）（図１２Ｂ）。ＥＣＧモニタリングは、さらに１２０分間継続した。図１２Ｃは、ＭＡＰがショックの１８０分後に４０ｍｍＨｇで比較的安定した状態を保つことを示す（ＨＲ約２３９ｂｐｍ）。
【０２９８】
図１３Ａは、ショックの１８０分後、０．５ｍＬの７．５％生理食塩水の投与後のラットのＥＣＧトレースを示す。ＨＲは、約３９ｂｐｍに低下した（ＭＡＰ３０ｍｍＨｇ）。これは、７．５％の生理食塩水溶液の投与後、約１０分間維持された。次いで、心拍数が２７０ｂｐｍに増大した。
【０２９９】
図１３Ｂは、ショックの１８０分後、ＡＬＭの０．５ｍｌボーラスの投与後のラットのＥＣＧトレースを示すＨＲは、直ちに２６１ｂｐｍに増大した（ＭＡＰ３５ｍｍＨｇ）。
【０３００】
これ（および先の実施例）は、出血性ショックを起こした被験体へのＡＬＭの定期的なボーラス投与によって心臓機能が維持され得ることを示す。いずれか特定の理論または作用様式に拘束されるものではないが、この低容量溶液は、十分な医学的支援が遅れている状況で使用できる。例えば、溶液は、病院への患者の困難なまたは延長された避難または輸送の間の腹膜内支援を提供するために、事故現場で、または戦場において現場の医師によって定期的な間隔で投与できる。この実施例は、この溶液の静脈内（ｉｖ）ボーラスは、心臓を安定化し、虚血性脱分極および不整脈から保護するため、および蘇生の前に身体の主要な臓器を薬理学的にダウンレギュレートするために、重度の失血の直後に配備することができるということを実証する。これによって、衛生兵または戦闘ライフセーバーが、外傷／傷害の現場近くで負傷兵を支援できることを想定する戦場シナリオが可能となる。
【０３０１】
本明細書において開示され、定義される本発明は、この文書または図面から記載されるか、または明らかな個々の特徴のうち２種以上のすべての代替組み合わせに及ぶことは理解される。これらの種々の組み合わせのすべてが本発明の種々の代替態様を構成する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
外傷後に身体に、以下：
（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、
（ｉｉ）局所麻酔薬と
を含む組成物を投与することによる、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の損傷を低減する方法。
【請求項２】
前記組成物の投与後に、（ｉ）および（ｉｉ）を含むさらなる組成物を投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記組成物が、二価のマグネシウムカチオンをさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
マグネシウムの濃度が最大約２．５ｍＭである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記組成物が高張性である、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、
（ｉｉ）局所麻酔薬と
を含む、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の損傷を低減するための組成物。
【請求項７】
二価のマグネシウムカチオンをさらに含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項８】
高張性である、請求項７または８のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、
（ｉｉ）局所麻酔薬と
を含む組成物を投与することによって外傷犠牲者を治療する方法。
【請求項１】
外傷後に身体に、以下：
（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、
（ｉｉ）局所麻酔薬と
を含む組成物を投与することによる、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の損傷を低減する方法。
【請求項２】
前記組成物の投与後に、（ｉ）および（ｉｉ）を含むさらなる組成物を投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記組成物が、二価のマグネシウムカチオンをさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
マグネシウムの濃度が最大約２．５ｍＭである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記組成物が高張性である、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、
（ｉｉ）局所麻酔薬と
を含む、外傷後の身体の細胞、組織または臓器の損傷を低減するための組成物。
【請求項７】
二価のマグネシウムカチオンをさらに含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項８】
高張性である、請求項７または８のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
（ｉ）カリウムチャネルオープナーまたはアゴニストおよび／またはアデノシン受容体アゴニストと、
（ｉｉ）局所麻酔薬と
を含む組成物を投与することによって外傷犠牲者を治療する方法。
【図１Ａ】
【図１Ｂ】
【図１Ｃ】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２Ａ】
【図１２Ｂ】
【図１２Ｃ】
【図１３Ａ】
【図１３Ｂ】
【図１Ｂ】
【図１Ｃ】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２Ａ】
【図１２Ｂ】
【図１２Ｃ】
【図１３Ａ】
【図１３Ｂ】
【公表番号】特表２００９−５４４６２８（Ｐ２００９−５４４６２８Ａ）
【公表日】平成２１年１２月１７日（２００９．１２．１７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５２１０６５（Ｐ２００９−５２１０６５）
【出願日】平成１９年７月２５日（２００７．７．２５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＡＵ２００７／００１０２９
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０１１６７０
【国際公開日】平成２０年１月３１日（２００８．１．３１）
【出願人】（５０８３５４８７６）ハイバーネイション セラピューティクス リミテッド (3)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年１２月１７日（２００９．１２．１７）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年７月２５日（２００７．７．２５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＡＵ２００７／００１０２９
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０１１６７０
【国際公開日】平成２０年１月３１日（２００８．１．３１）
【出願人】（５０８３５４８７６）ハイバーネイション セラピューティクス リミテッド (3)
【Ｆターム（参考）】
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