改変トランスフェリン融合タンパク質
血清半減期または血清安定性が増大した、トランスフェリンと可溶性毒素受容体を含む治療タンパク質または治療ペプチドとの改変融合タンパク質が開示される。好ましい融合タンパク質には、トランスフェリン成分が、全くグリコシル化されないかグリコシル化が低下している、鉄に対して全く結合しないか結合が低下している、トランスフェリン受容体に対して全く結合しないか結合が低下している、の少なくともいずれかであるように改変された融合タンパク質が含まれる。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療タンパク質または治療ペプチドに融合された改変トランスフェリン（Ｔｆ）タンパク質を含む融合タンパク質であって、Ｔｆタンパク質が、低下したグリコシル化、低下した金属の結合、または低下した受容体の結合を示す、融合タンパク質。
【請求項２】
治療タンパク質または前記治療ペプチドが、β−インターフェロン（ＩＦＮ）、グルカゴン様ペプチド（ＧＬＰ−１）、エリスロポエチンミメティックペプチド（ＥＭＰ１）、Ｔ−２０、インスリンおよび可溶性毒素受容体からなる群から選択される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項３】
可溶性毒素受容体がシナプトタグミンＩである、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項４】
治療タンパク質もしくは治療ペプチドまたは可溶性毒素受容体が、ＴｆのＣ末端に融合される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項５】
治療タンパク質もしくは治療ペプチドまたは可溶性毒素受容体が、ＴｆのＮ末端に融合される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項６】
治療タンパク質もしくは治療ペプチドまたは可溶性毒素受容体が、Ｔｆの少なくとも１つのループの中に挿入される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項７】
Ｔｆタンパク質がトランスフェリン受容体（ＴｆＲ）に対する低下した親和性を有する、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項８】
Ｔｆタンパク質がラクトフェリンである、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項９】
Ｔｆタンパク質がＴｆＲと結合しない、請求項７に記載の融合タンパク質。
【請求項１０】
Ｔｆタンパク質が鉄に対する低下した親和性を有する、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１１】
Ｔｆタンパク質が鉄と結合しない、請求項１０に記載の融合タンパク質。
【請求項１２】
Ｔｆタンパク質がグリコシル化を妨げる変異を少なくとも１つ含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１３】
Ｔｆタンパク質がラクトフェリンである、請求項１２に記載の融合タンパク質。
【請求項１４】
ツニカマイシンの存在下で発現される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１５】
Ｔｆタンパク質が、Ｔｆタンパク質のＮドメインの一部、架橋ペプチド、およびＴｆタンパク質のＣドメインの一部を含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１６】
架橋ペプチドにより治療タンパク質または治療ペプチドがＴｆに連結される、請求項１５に記載の融合タンパク質。
【請求項１７】
治療タンパク質または治療ペプチドが、Ｔｆタンパク質のＮドメインとＣドメインとの間に挿入される、請求項１５に記載の融合タンパク質。
【請求項１８】
Ｔｆタンパク質が、少なくとも１つのアミノ酸の置換、欠失または付加をヒンジ領域に含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１９】
ヒンジ領域が、配列番号３の９４残基目付近〜９６残基目付近、配列番号３の２４５残基目付近〜２４７残基目付近、配列番号３の３１６残基目付近〜３１８残基目付近、配列番号３の４２５残基目付近〜４２７残基目付近、配列番号３の５８１残基目付近〜５８２残基目付近、および配列番号３の６５２残基目付近〜６５８残基目付近からなる群から選択される、請求項１８に記載の融合タンパク質。
【請求項２０】
Ｔｆタンパク質が、Ａｓｐ６３、Ｇｌｙ６５、Ｔｙｒ９５、Ｔｙｒ１８８、Ｌｙｓ２０６、Ｈｉｓ２０７、Ｈｉｓ２４９、Ａｓｐ３９２、Ｔｙｒ４２６、Ｔｙｒ５１４、Ｔｙｒ５１７、Ｈｉｓ５８５、Ｔｈｒ１２０、Ａｒｇ１２４、Ａｌａ１２６、Ｇｌｙ１２７、Ｔｈｒ４５２、Ａｒｇ４５６、Ａｌａ４５８およびＧｌｙ４５９からなる群から選択される配列番号３内の位置における、少なくとも１つのアミノ酸の置換、欠失または付加を有する、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項２１】
治療タンパク質または治療ペプチドにより、Ｔｆの少なくとも１つのループが置き換えられる、請求項６に記載の融合タンパク質。
【請求項２２】
グリコシル化部位が、配列番号３のアミノ酸Ｎ４１３および配列番号３のアミノ酸Ｎ６１１に対応するアミノ酸残基からなる群から選択される、請求項１２に記載の融合タンパク質。
【請求項２３】
Ｔｆが、Ａｓｐ６３、Ｇｌｙ６５、Ｔｙｒ９５、Ｔｙｒ１８８、Ｌｙｓ２０６、Ｈｉｓ２０７、Ｈｉｓ２４９、Ａｓｐ３９２、Ｔｙｒ４２６、Ｔｙｒ５１４、Ｔｙｒ５１７、Ｈｉｓ５８５、Ｔｈｒ１２０、Ａｒｇ１２４、Ａｌａ１２６、Ｇｌｙ１２７、Ｔｈｒ４５２、Ａｒｇ４５６、Ａｌａ４５８およびＧｌｙ４５９からなる群から選択される配列番号３内のアミノ酸に対応するアミノ酸残基において、少なくとも１つのアミノ酸の置換、欠失または付加を含む、請求項７または９に記載の融合タンパク質。
【請求項２４】
ＴｆのＣ末端のプロリン残基が欠失している、請求項４に記載の融合タンパク質。
【請求項２５】
ＴｆのＣ末端のシステインループが欠失している、請求項４に記載の融合タンパク質。
【請求項２６】
治療タンパク質または治療ペプチドの血清半減期が、非融合状態の治療タンパク質もしくは治療ペプチドまたは可溶性毒素受容体の血清半減期よりも増大している、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項２７】
Ｔｆタンパク質がＴｆＲと結合しない、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項２８】
Ｔｆタンパク質が低下したグリコシル化を示すか、またはグリコシル化を全く示さない、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項２９】
グリコシル化を妨げる変異を少なくとも１つ含む、請求項２８に記載の融合タンパク質。
【請求項３０】
請求項１に記載される融合タンパク質をコードする核酸分子。
【請求項３１】
請求項３０に記載される核酸分子を含むベクター。
【請求項３２】
請求項３１に記載されるベクターを含む宿主細胞。
【請求項３３】
請求項３０に記載される核酸分子を含む宿主細胞。
【請求項３４】
コードされる融合タンパク質を発現させる条件のもとで、請求項３２に記載の宿主細胞を培養することを含む、Ｔｆ融合タンパク質を発現させる方法。
【請求項３５】
コードされる融合タンパク質を発現させる条件のもとで、請求項３３に記載の宿主細胞を培養することを含む、Ｔｆ融合タンパク質を発現させる方法。
【請求項３６】
原核生物または真核生物である、請求項３２に記載の宿主細胞。
【請求項３７】
原核生物または真核生物である、請求項３３に記載の宿主細胞。
【請求項３８】
酵母細胞である、請求項３６に記載の宿主細胞。
【請求項３９】
酵母細胞である、請求項３７に記載の宿主細胞。
【請求項４０】
請求項３０に記載される核酸分子を含む遺伝子組換え動物。
【請求項４１】
請求項４０に記載される遺伝子組換え動物から融合タンパク質を単離することを含む、Ｔｆ融合タンパク質を製造する方法。
【請求項４２】
Ｔｆ融合タンパク質がラクトフェリンを含む、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
融合タンパク質が遺伝子組換え動物から得られる生物学的液体から単離される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
液体が血清または乳汁である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
請求項１に記載の融合タンパク質を投与するステップを含む、患者の疾患または疾患症状を治療する方法。
【請求項４６】
Ｔｆタンパク質がＮ末端ドメインをタンパク質の各末端に有する、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項４７】
治療タンパク質もしくは治療ペプチドまたは可溶性毒素受容体が、Ｔｆタンパク質の各Ｎ末端ドメインに融合される、請求項４６に記載の融合タンパク質。
【請求項４８】
可溶性毒素受容体が毒素に特異的に結合する、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項４９】
治療タンパク質または治療ペプチドが、β−ＩＦＮ、ＧＬＰ−１、エリスロポエチンミメティックペプチド（ＥＭＰ１）、Ｔ−２０、インスリンまたは可溶性毒素受容体のアナログであり、前記アナログは疾患、状態または障害を治療、予防または改善に効果的である、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項５０】
請求項１、２または３に記載される融合タンパク質と、担体とを含む医薬組成物。
【請求項５１】
治療上有効な量の請求項１に記載の融合タンパク質を被験者に投与するステップを含む、被験者を治療する方法。
【請求項５２】
被験者が多発性硬化症、脳腫瘍、皮膚ガン、Ｂ型肝炎またはＣ型肝炎に罹患しており、融合タンパク質がβ−ＩＦＮまたはそのアナログを含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記被験者が多発性硬化症に罹患している、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
健常者と比較して被験者はグルコースレベルの上昇がみられ、融合タンパク質がＧＬＰ−１またはそのアナログを含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
グルコースレベルの上昇が糖尿病に関連する、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
糖尿病がＩＩ型糖尿病である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
健常者と比較して、被験者は低赤血球産生か不完全な赤血球産生がみられ、融合タンパク質がＥＭＰ１またはそのアナログを含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５８】
低赤血球産生または不完全な赤血球産生が、貧血、β−サラセミア、妊娠障害、月経障害、関節リウマチ、ＡＩＤＳおよびガンに関連する、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
被験者がレトロウイルスの感染により引き起こされる疾患に罹患しており、治療ペプチドがウイルス進入の阻害剤である、請求項５１に記載の方法。
【請求項６０】
レトロウイルスがヒトレトロウイルスである、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
ヒトレトロウイルスが、ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、ヒトＴリンパ球ウイルスＩ（ＨＴＬＶ−Ｉ）、ＨＴＬＶ−ＩＩおよびＨＴＬＶ−ＩＩＩからなる群から選択される、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
レトロウイルスが非ヒトレトロウイルスである、請求項５９に記載の方法。
【請求項６３】
非ヒトレトロウイルスが、ウシ白血病ウイルス、ネコ肉腫ウイルス、ネコ白血病ウイルス、サル肉腫ウイルス、サル白血病ウイルスおよびヒツジ進行性肺炎ウイルスからなる群から選択される、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
阻害剤がＴ−２０、Ｔ−１２４９またはそれらのアナログである、請求項５９に記載の方法。
【請求項６５】
疾患がＡＩＤＳである、請求項５９に記載の方法。
【請求項６６】
治療上有効な量の、可溶性毒素受容体に融合された改変Ｔｆタンパク質を含む融合タンパク質を被験者に投与することを含む、毒素に関連する疾患または状態を予防または治療する方法であって、改変Ｔｆタンパク質が、低下したグリコシル化、低下した金属の結合、または低下した受容体の結合を示す、方法。
【請求項６７】
可溶性毒素受容体が、炭疽菌毒素受容体、ボツリヌス毒素受容体およびジフテリア毒素受容体からなる群から選択される、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
可溶性ボツリヌス毒素受容体がシナプトタグミンのアミノ酸１〜５３（配列番号４）である、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
治療タンパク質または治療ペプチドがトランスフェリンの１つ以上のループに挿入される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項７０】
治療タンパク質が５つのトランスフェリンのループのそれぞれに挿入される、請求項６９に記載の融合タンパク質。
【請求項７１】
ＧＬＰ−１が１つの付加アミノ酸をＮ末端に更に含む、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項７２】
前記アミノ酸がＧｌｙである、請求項７１に記載の融合タンパク質。
【請求項７３】
ＧＬＰ−１アナログがＮ末端において改変トランスフェリンタンパク質に融合される、請求項７１に記載の融合タンパク質。
【請求項７４】
被験者のグルコースレベルを調節する方法であって、治療上有効な量の、ＧＬＰ−１またはそのアナログと融合された改変Ｔｆタンパク質を含む融合タンパク質を被験者に投与することを含み、改変Ｔｆタンパク質が、低下したグリコシル化、低下した金属の結合、または低下した受容体の結合を示す、方法。
【請求項７５】
治療タンパク質または治療ペプチドが、Ａｓｐ３３、Ａｓｎ５５、Ａｓｎ７５、Ａｓｐ９０、Ｇｌｙ２５７、Ｌｙｓ２８０、Ｈｉｓ２８９、Ｓｅｒ２９８、Ｓｅｒ１０５、Ｇｌｕ１４１、Ａｓｐ１６６、Ｇｌｎ１８４、ａｓｐ１９７、Ｌｙｓ２１７、Ｔｈｒ２３１およびＣｙｓ２４１からなる群から選択される配列番号３内の１以上の部位において、ｍＴｆのＮドメインの中に挿入される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項７６】
治療タンパク質または治療ペプチドが、Ａｓｐ３３、Ａｓｎ５５、Ａｓｎ７５、Ａｓｐ９０、Ｇｌｙ２５７、Ｌｙｓ２８０、Ｈｉｓ２８９、Ｓｅｒ２９８、Ｓｅｒ１０５、Ｇｌｕ１４１、Ａｓｐ１６６、Ｇｌｎ１８４、ａｓｐ１９７、Ｌｙｓ２１７、Ｔｈｒ２３１またはＣｙｓ２４１に対応する配列番号３内の１以上の部位において、ｍＴｆのＣドメインの中に挿入される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項７７】
治療タンパク質または治療ペプチドが、Ａｓｐ３３、Ａｓｎ５５、Ａｓｎ７５、Ａｓｐ９０、Ｇｌｙ２５７、Ｌｙｓ２８０、Ｈｉｓ２８９、Ｓｅｒ２９８、Ｓｅｒ１０５、Ｇｌｕ１４１、Ａｓｐ１６６、Ｇｌｎ１８４、ａｓｐ１９７、Ｌｙｓ２１７、Ｔｈｒ２３１またはＣｙｓ２４１に対応する配列番号３内の１以上の部位において、ｍＴｆの中に更に挿入される、請求項７５に記載の融合タンパク質。
【請求項７８】
治療ペプチドがＥＭＰ１であり、ＥＭＰ１が、配列番号３のＨｉｓ２８９および配列番号３のＡｓｐ１６６からなる群から選択される１以上の部位においてｍＴｆのＮドメインの中に挿入される、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項７９】
治療ペプチドがＥＭＰ１であり、ＥＭＰ１が、配列番号３のＨｉｓ２８９または配列番号３のＡｓｐ１６６に対応する１つ以上の部位においてｍＴｆのＣドメインの中に挿入される、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項８０】
治療ペプチドがＥＭＰ１であり、ＥＭＰ１が、配列番号３のＨｉｓ２８９または配列番号３のＡｓｐ１６６に対応する１つ以上の部位においてｍＴｆのＣドメインの中に更に挿入される、請求項７８に記載の融合タンパク質。
【請求項８１】
ｍＴｆがＣ末端Ｐｒｏの欠失によって更に改変される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項８２】
ｍＴｆがＣ末端Ｐｒｏに隣接するＡｒｇ−Ａｒｇの欠失によって更に改変される、請求項８１に記載の融合タンパク質。
【請求項８３】
ｍＴｆが配列番号３のＣｙｓ４０２とＣｙｓ６７４との間のジスルフィド結合を除くことによって更に改変される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項８４】
ジスルフィド結合が配列番号３のＣｙｓ４０２およびＣｙｓ６７４をＧｌｙ残基に変異させることによって除かれる、請求項８３に記載の融合タンパク質。
【請求項８５】
ｍＴｆが配列番号３のＣｙｓ４０２およびＣｙｓ６７４をＧｌｙ残基に変異させることによって更に改変される、請求項８２に記載の融合タンパク質。
【請求項８６】
治療タンパク質または治療ペプチドが、Ｎ１（２８６〜２９２）、Ｎ２（１６２〜１７０）、Ｃ１（４８９〜４９５）およびＣ２（６２３〜６２８）からなる群から選択される配列番号３内の１以上のループに挿入される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項８７】
改変Ｔｆタンパク質がＮ末端ドメインを１つ含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項８８】
健常者と比較して被験者はグルコースレベルの上昇がみられ、融合タンパク質がインスリンまたはそのアナログを含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項８９】
グルコースレベルの上昇が糖尿病に関連する、請求項８８に記載の方法。
【請求項１】
治療タンパク質または治療ペプチドに融合された改変トランスフェリン（Ｔｆ）タンパク質を含む融合タンパク質であって、Ｔｆタンパク質が、低下したグリコシル化、低下した金属の結合、または低下した受容体の結合を示す、融合タンパク質。
【請求項２】
治療タンパク質または前記治療ペプチドが、β−インターフェロン（ＩＦＮ）、グルカゴン様ペプチド（ＧＬＰ−１）、エリスロポエチンミメティックペプチド（ＥＭＰ１）、Ｔ−２０、インスリンおよび可溶性毒素受容体からなる群から選択される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項３】
可溶性毒素受容体がシナプトタグミンＩである、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項４】
治療タンパク質もしくは治療ペプチドまたは可溶性毒素受容体が、ＴｆのＣ末端に融合される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項５】
治療タンパク質もしくは治療ペプチドまたは可溶性毒素受容体が、ＴｆのＮ末端に融合される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項６】
治療タンパク質もしくは治療ペプチドまたは可溶性毒素受容体が、Ｔｆの少なくとも１つのループの中に挿入される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項７】
Ｔｆタンパク質がトランスフェリン受容体（ＴｆＲ）に対する低下した親和性を有する、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項８】
Ｔｆタンパク質がラクトフェリンである、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項９】
Ｔｆタンパク質がＴｆＲと結合しない、請求項７に記載の融合タンパク質。
【請求項１０】
Ｔｆタンパク質が鉄に対する低下した親和性を有する、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１１】
Ｔｆタンパク質が鉄と結合しない、請求項１０に記載の融合タンパク質。
【請求項１２】
Ｔｆタンパク質がグリコシル化を妨げる変異を少なくとも１つ含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１３】
Ｔｆタンパク質がラクトフェリンである、請求項１２に記載の融合タンパク質。
【請求項１４】
ツニカマイシンの存在下で発現される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１５】
Ｔｆタンパク質が、Ｔｆタンパク質のＮドメインの一部、架橋ペプチド、およびＴｆタンパク質のＣドメインの一部を含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１６】
架橋ペプチドにより治療タンパク質または治療ペプチドがＴｆに連結される、請求項１５に記載の融合タンパク質。
【請求項１７】
治療タンパク質または治療ペプチドが、Ｔｆタンパク質のＮドメインとＣドメインとの間に挿入される、請求項１５に記載の融合タンパク質。
【請求項１８】
Ｔｆタンパク質が、少なくとも１つのアミノ酸の置換、欠失または付加をヒンジ領域に含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１９】
ヒンジ領域が、配列番号３の９４残基目付近〜９６残基目付近、配列番号３の２４５残基目付近〜２４７残基目付近、配列番号３の３１６残基目付近〜３１８残基目付近、配列番号３の４２５残基目付近〜４２７残基目付近、配列番号３の５８１残基目付近〜５８２残基目付近、および配列番号３の６５２残基目付近〜６５８残基目付近からなる群から選択される、請求項１８に記載の融合タンパク質。
【請求項２０】
Ｔｆタンパク質が、Ａｓｐ６３、Ｇｌｙ６５、Ｔｙｒ９５、Ｔｙｒ１８８、Ｌｙｓ２０６、Ｈｉｓ２０７、Ｈｉｓ２４９、Ａｓｐ３９２、Ｔｙｒ４２６、Ｔｙｒ５１４、Ｔｙｒ５１７、Ｈｉｓ５８５、Ｔｈｒ１２０、Ａｒｇ１２４、Ａｌａ１２６、Ｇｌｙ１２７、Ｔｈｒ４５２、Ａｒｇ４５６、Ａｌａ４５８およびＧｌｙ４５９からなる群から選択される配列番号３内の位置における、少なくとも１つのアミノ酸の置換、欠失または付加を有する、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項２１】
治療タンパク質または治療ペプチドにより、Ｔｆの少なくとも１つのループが置き換えられる、請求項６に記載の融合タンパク質。
【請求項２２】
グリコシル化部位が、配列番号３のアミノ酸Ｎ４１３および配列番号３のアミノ酸Ｎ６１１に対応するアミノ酸残基からなる群から選択される、請求項１２に記載の融合タンパク質。
【請求項２３】
Ｔｆが、Ａｓｐ６３、Ｇｌｙ６５、Ｔｙｒ９５、Ｔｙｒ１８８、Ｌｙｓ２０６、Ｈｉｓ２０７、Ｈｉｓ２４９、Ａｓｐ３９２、Ｔｙｒ４２６、Ｔｙｒ５１４、Ｔｙｒ５１７、Ｈｉｓ５８５、Ｔｈｒ１２０、Ａｒｇ１２４、Ａｌａ１２６、Ｇｌｙ１２７、Ｔｈｒ４５２、Ａｒｇ４５６、Ａｌａ４５８およびＧｌｙ４５９からなる群から選択される配列番号３内のアミノ酸に対応するアミノ酸残基において、少なくとも１つのアミノ酸の置換、欠失または付加を含む、請求項７または９に記載の融合タンパク質。
【請求項２４】
ＴｆのＣ末端のプロリン残基が欠失している、請求項４に記載の融合タンパク質。
【請求項２５】
ＴｆのＣ末端のシステインループが欠失している、請求項４に記載の融合タンパク質。
【請求項２６】
治療タンパク質または治療ペプチドの血清半減期が、非融合状態の治療タンパク質もしくは治療ペプチドまたは可溶性毒素受容体の血清半減期よりも増大している、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項２７】
Ｔｆタンパク質がＴｆＲと結合しない、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項２８】
Ｔｆタンパク質が低下したグリコシル化を示すか、またはグリコシル化を全く示さない、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項２９】
グリコシル化を妨げる変異を少なくとも１つ含む、請求項２８に記載の融合タンパク質。
【請求項３０】
請求項１に記載される融合タンパク質をコードする核酸分子。
【請求項３１】
請求項３０に記載される核酸分子を含むベクター。
【請求項３２】
請求項３１に記載されるベクターを含む宿主細胞。
【請求項３３】
請求項３０に記載される核酸分子を含む宿主細胞。
【請求項３４】
コードされる融合タンパク質を発現させる条件のもとで、請求項３２に記載の宿主細胞を培養することを含む、Ｔｆ融合タンパク質を発現させる方法。
【請求項３５】
コードされる融合タンパク質を発現させる条件のもとで、請求項３３に記載の宿主細胞を培養することを含む、Ｔｆ融合タンパク質を発現させる方法。
【請求項３６】
原核生物または真核生物である、請求項３２に記載の宿主細胞。
【請求項３７】
原核生物または真核生物である、請求項３３に記載の宿主細胞。
【請求項３８】
酵母細胞である、請求項３６に記載の宿主細胞。
【請求項３９】
酵母細胞である、請求項３７に記載の宿主細胞。
【請求項４０】
請求項３０に記載される核酸分子を含む遺伝子組換え動物。
【請求項４１】
請求項４０に記載される遺伝子組換え動物から融合タンパク質を単離することを含む、Ｔｆ融合タンパク質を製造する方法。
【請求項４２】
Ｔｆ融合タンパク質がラクトフェリンを含む、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
融合タンパク質が遺伝子組換え動物から得られる生物学的液体から単離される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
液体が血清または乳汁である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
請求項１に記載の融合タンパク質を投与するステップを含む、患者の疾患または疾患症状を治療する方法。
【請求項４６】
Ｔｆタンパク質がＮ末端ドメインをタンパク質の各末端に有する、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項４７】
治療タンパク質もしくは治療ペプチドまたは可溶性毒素受容体が、Ｔｆタンパク質の各Ｎ末端ドメインに融合される、請求項４６に記載の融合タンパク質。
【請求項４８】
可溶性毒素受容体が毒素に特異的に結合する、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項４９】
治療タンパク質または治療ペプチドが、β−ＩＦＮ、ＧＬＰ−１、エリスロポエチンミメティックペプチド（ＥＭＰ１）、Ｔ−２０、インスリンまたは可溶性毒素受容体のアナログであり、前記アナログは疾患、状態または障害を治療、予防または改善に効果的である、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項５０】
請求項１、２または３に記載される融合タンパク質と、担体とを含む医薬組成物。
【請求項５１】
治療上有効な量の請求項１に記載の融合タンパク質を被験者に投与するステップを含む、被験者を治療する方法。
【請求項５２】
被験者が多発性硬化症、脳腫瘍、皮膚ガン、Ｂ型肝炎またはＣ型肝炎に罹患しており、融合タンパク質がβ−ＩＦＮまたはそのアナログを含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記被験者が多発性硬化症に罹患している、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
健常者と比較して被験者はグルコースレベルの上昇がみられ、融合タンパク質がＧＬＰ−１またはそのアナログを含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
グルコースレベルの上昇が糖尿病に関連する、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
糖尿病がＩＩ型糖尿病である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
健常者と比較して、被験者は低赤血球産生か不完全な赤血球産生がみられ、融合タンパク質がＥＭＰ１またはそのアナログを含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５８】
低赤血球産生または不完全な赤血球産生が、貧血、β−サラセミア、妊娠障害、月経障害、関節リウマチ、ＡＩＤＳおよびガンに関連する、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
被験者がレトロウイルスの感染により引き起こされる疾患に罹患しており、治療ペプチドがウイルス進入の阻害剤である、請求項５１に記載の方法。
【請求項６０】
レトロウイルスがヒトレトロウイルスである、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
ヒトレトロウイルスが、ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、ヒトＴリンパ球ウイルスＩ（ＨＴＬＶ−Ｉ）、ＨＴＬＶ−ＩＩおよびＨＴＬＶ−ＩＩＩからなる群から選択される、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
レトロウイルスが非ヒトレトロウイルスである、請求項５９に記載の方法。
【請求項６３】
非ヒトレトロウイルスが、ウシ白血病ウイルス、ネコ肉腫ウイルス、ネコ白血病ウイルス、サル肉腫ウイルス、サル白血病ウイルスおよびヒツジ進行性肺炎ウイルスからなる群から選択される、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
阻害剤がＴ−２０、Ｔ−１２４９またはそれらのアナログである、請求項５９に記載の方法。
【請求項６５】
疾患がＡＩＤＳである、請求項５９に記載の方法。
【請求項６６】
治療上有効な量の、可溶性毒素受容体に融合された改変Ｔｆタンパク質を含む融合タンパク質を被験者に投与することを含む、毒素に関連する疾患または状態を予防または治療する方法であって、改変Ｔｆタンパク質が、低下したグリコシル化、低下した金属の結合、または低下した受容体の結合を示す、方法。
【請求項６７】
可溶性毒素受容体が、炭疽菌毒素受容体、ボツリヌス毒素受容体およびジフテリア毒素受容体からなる群から選択される、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
可溶性ボツリヌス毒素受容体がシナプトタグミンのアミノ酸１〜５３（配列番号４）である、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
治療タンパク質または治療ペプチドがトランスフェリンの１つ以上のループに挿入される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項７０】
治療タンパク質が５つのトランスフェリンのループのそれぞれに挿入される、請求項６９に記載の融合タンパク質。
【請求項７１】
ＧＬＰ−１が１つの付加アミノ酸をＮ末端に更に含む、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項７２】
前記アミノ酸がＧｌｙである、請求項７１に記載の融合タンパク質。
【請求項７３】
ＧＬＰ−１アナログがＮ末端において改変トランスフェリンタンパク質に融合される、請求項７１に記載の融合タンパク質。
【請求項７４】
被験者のグルコースレベルを調節する方法であって、治療上有効な量の、ＧＬＰ−１またはそのアナログと融合された改変Ｔｆタンパク質を含む融合タンパク質を被験者に投与することを含み、改変Ｔｆタンパク質が、低下したグリコシル化、低下した金属の結合、または低下した受容体の結合を示す、方法。
【請求項７５】
治療タンパク質または治療ペプチドが、Ａｓｐ３３、Ａｓｎ５５、Ａｓｎ７５、Ａｓｐ９０、Ｇｌｙ２５７、Ｌｙｓ２８０、Ｈｉｓ２８９、Ｓｅｒ２９８、Ｓｅｒ１０５、Ｇｌｕ１４１、Ａｓｐ１６６、Ｇｌｎ１８４、ａｓｐ１９７、Ｌｙｓ２１７、Ｔｈｒ２３１およびＣｙｓ２４１からなる群から選択される配列番号３内の１以上の部位において、ｍＴｆのＮドメインの中に挿入される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項７６】
治療タンパク質または治療ペプチドが、Ａｓｐ３３、Ａｓｎ５５、Ａｓｎ７５、Ａｓｐ９０、Ｇｌｙ２５７、Ｌｙｓ２８０、Ｈｉｓ２８９、Ｓｅｒ２９８、Ｓｅｒ１０５、Ｇｌｕ１４１、Ａｓｐ１６６、Ｇｌｎ１８４、ａｓｐ１９７、Ｌｙｓ２１７、Ｔｈｒ２３１またはＣｙｓ２４１に対応する配列番号３内の１以上の部位において、ｍＴｆのＣドメインの中に挿入される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項７７】
治療タンパク質または治療ペプチドが、Ａｓｐ３３、Ａｓｎ５５、Ａｓｎ７５、Ａｓｐ９０、Ｇｌｙ２５７、Ｌｙｓ２８０、Ｈｉｓ２８９、Ｓｅｒ２９８、Ｓｅｒ１０５、Ｇｌｕ１４１、Ａｓｐ１６６、Ｇｌｎ１８４、ａｓｐ１９７、Ｌｙｓ２１７、Ｔｈｒ２３１またはＣｙｓ２４１に対応する配列番号３内の１以上の部位において、ｍＴｆの中に更に挿入される、請求項７５に記載の融合タンパク質。
【請求項７８】
治療ペプチドがＥＭＰ１であり、ＥＭＰ１が、配列番号３のＨｉｓ２８９および配列番号３のＡｓｐ１６６からなる群から選択される１以上の部位においてｍＴｆのＮドメインの中に挿入される、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項７９】
治療ペプチドがＥＭＰ１であり、ＥＭＰ１が、配列番号３のＨｉｓ２８９または配列番号３のＡｓｐ１６６に対応する１つ以上の部位においてｍＴｆのＣドメインの中に挿入される、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項８０】
治療ペプチドがＥＭＰ１であり、ＥＭＰ１が、配列番号３のＨｉｓ２８９または配列番号３のＡｓｐ１６６に対応する１つ以上の部位においてｍＴｆのＣドメインの中に更に挿入される、請求項７８に記載の融合タンパク質。
【請求項８１】
ｍＴｆがＣ末端Ｐｒｏの欠失によって更に改変される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項８２】
ｍＴｆがＣ末端Ｐｒｏに隣接するＡｒｇ−Ａｒｇの欠失によって更に改変される、請求項８１に記載の融合タンパク質。
【請求項８３】
ｍＴｆが配列番号３のＣｙｓ４０２とＣｙｓ６７４との間のジスルフィド結合を除くことによって更に改変される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項８４】
ジスルフィド結合が配列番号３のＣｙｓ４０２およびＣｙｓ６７４をＧｌｙ残基に変異させることによって除かれる、請求項８３に記載の融合タンパク質。
【請求項８５】
ｍＴｆが配列番号３のＣｙｓ４０２およびＣｙｓ６７４をＧｌｙ残基に変異させることによって更に改変される、請求項８２に記載の融合タンパク質。
【請求項８６】
治療タンパク質または治療ペプチドが、Ｎ１（２８６〜２９２）、Ｎ２（１６２〜１７０）、Ｃ１（４８９〜４９５）およびＣ２（６２３〜６２８）からなる群から選択される配列番号３内の１以上のループに挿入される、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項８７】
改変Ｔｆタンパク質がＮ末端ドメインを１つ含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項８８】
健常者と比較して被験者はグルコースレベルの上昇がみられ、融合タンパク質がインスリンまたはそのアナログを含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項８９】
グルコースレベルの上昇が糖尿病に関連する、請求項８８に記載の方法。
【図１】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図３】
【図４】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図３】
【図４】
【公表番号】特表２００６−５０３５８８（Ｐ２００６−５０３５８８Ａ）
【公表日】平成１８年２月２日（２００６．２．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−５６９７５２（Ｐ２００４−５６９７５２）
【出願日】平成１５年８月２８日（２００３．８．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００３／０２６８１８
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０２０４０５
【国際公開日】平成１６年３月１１日（２００４．３．１１）
【出願人】（５０４０６２４３０）バイオレクシス ファーマシューティカル コーポレイション (4)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年２月２日（２００６．２．２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１５年８月２８日（２００３．８．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００３／０２６８１８
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０２０４０５
【国際公開日】平成１６年３月１１日（２００４．３．１１）
【出願人】（５０４０６２４３０）バイオレクシス ファーマシューティカル コーポレイション (4)
【Ｆターム（参考）】
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