Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）のエンベロープタンパク質Ｅ１及びＥ２の立体構造エピトープについて、ＨＣＶ感染者由来のモノクローナル抗体群を用いて同定し特徴を調べた。ＨＣＶタンパク質Ｅ１又はＥ２のこれらの保存立体構造及び直鎖状エピトープは、ＨＣＶに対するヒトの免疫応答において重要であり、ウイルスの中和に特に重要であると考えられる。これら立体構造エピトープの同定に基づいて、完全立体構造エピトープを有するペプチド及びミモトープを含むワクチンを調製し、ＨＣＶ感染予防及び／又は治療のために患者に投与することができる。それぞれ特定のＥ１又はＥ２エピトープに対する、４種の異なるモノクローナル抗体グループを同定することで、ＨＣＶに対する感染者の応答に基づいて感染者を分類することができ、適当な治療投与計画を決めることができる。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｃ型肝炎ウイルス１ｂのＥ１タンパク質のアミノ酸２０６〜３１３内の立体構造エピトープに対する抗体。
【請求項２】
多重ＨＣＶ遺伝子型に由来するＨＣＶ Ｅ１タンパク質のアミノ酸１９４〜２０４内の直鎖状エピトープに対する抗体。
【請求項３】
Ｈ−１１４により認識されるエピトープに対する抗体。
【請求項４】
Ｈ−１１１により認識されるエピトープに対する抗体。
【請求項５】
請求項１又は２に記載の抗体を発現する細胞系。
【請求項６】
Ｂ細胞系である、請求項５に記載の細胞系。
【請求項７】
ヒト細胞系である、請求項５に記載の細胞系。
【請求項８】
哺乳類細胞系である、請求項５に記載の細胞系。
【請求項９】
真核細胞系である、請求項６に記載の細胞系。
【請求項１０】
ハイブリドーマである、請求項５に記載の細胞系。
【請求項１１】
エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）で形質転換されている、請求項５に記載の細胞系。
【請求項１２】
ウイルスで感染されている、請求項５に記載の細胞系。
【請求項１３】
ファージで感染されている、請求項５に記載の細胞系。
【請求項１４】
請求項１又は２に記載の抗体を提示するウイルス。
【請求項１５】
モノクローナル抗体である、請求項１、２、３又は４のいずれかに記載の抗体。
【請求項１６】
人体に適応させた抗体である、請求項１、２、３又は４のいずれかに記載の抗体。
【請求項１７】
哺乳類の抗体である、請求項１、２、３又は４のいずれかに記載の抗体。
【請求項１８】
ＨＣＶ Ｅ１タンパク質又はペプチドを請求項１、２、３又は４のいずれかに記載の抗体に、抗体がＨＣＶ Ｅ１タンパク質又はペプチドに結合するのに十分な時間、接触させ；
Ｅ１の推定受容体を発現する細胞とＨＣＶ Ｅ１タンパク質又はペプチドと抗体とを、タンパク質又はペプチドによる推定受容体への結合を可能にするのに充分な時間、接触させ；
タンパク質又はペプチドによる細胞への結合を検出する（抗体の非存在下における結合と比較して細胞表面への結合が低下していた場合、受容体をＨＣＶ Ｅ１受容体と同定する）
段階を包含する、ＨＣＶ Ｅ１タンパク質又はペプチドに対する受容体を同定する方法。
【請求項１９】
請求項１、２、３又は４のいずれかに記載の抗体を固体支持体に付着し；抗体をＨＣＶ Ｅ１タンパク質又はペプチドに、ＨＣＶ Ｅ１タンパク質又はペプチドが抗体に結合してタンパク質又はペプチド−抗体複合体を形成するのに十分な時間、接触させ；
ライブラリータンパク質又はペプチドが複合体に結合するのに十分な時間、複合体をライブラリータンパク質又はペプチドと接触させ；
未結合のライブラリータンパク質又はペプチドを複合体から除去し；
複合体に結合するライブラリータンパク質又はペプチドを同定する（ここで結合したライブラリータンパク質又はペプチドは推定ＨＣＶ Ｅ１受容体である）
段階を包含する、ＨＣＶ Ｅ１タンパク質又はペプチドに対する受容体を同定する方法。
【請求項２０】
請求項１、２、３又は４のいずれかに記載の抗体と、薬剤として許容される賦形剤とを含む薬剤組成物。
【請求項２１】
抗体が、ＨＣＶのＥ１及びＥ２タンパク質に対するものであることを特徴とする、２種以上のモノクローナル抗体の組み合わせを含む薬剤組成物。
【請求項２２】
抗体が、単一ＨＣＶ遺伝子型のＥ１及びＥ２タンパク質に対するものであることを特徴とする、請求項２１に記載の薬剤組成物。
【請求項２３】
抗体が、多重ＨＣＶ遺伝子型のＥ１及びＥ２タンパク質に対するものであることを特徴とする、請求項２１に記載の薬剤組成物。
【請求項２４】
抗体が直鎖状エピトープに対するものである、請求項２１に記載の薬剤組成物。
【請求項２５】
抗体が立体構造エピトープに対するものである、請求項２１に記載の薬剤組成物。
【請求項２６】
抗体が直鎖状及び立体構造エピトープに対するものである、請求項２１に記載の薬剤組成物。
【請求項２７】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−５を含む、請求項２１に記載の薬剤組成物。
【請求項２８】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−７を含む、請求項２１に記載の薬剤組成物。
【請求項２９】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−４Ｇを含む、請求項２１に記載の薬剤組成物。
【請求項３０】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−８Ｃを含む、請求項２１に記載の薬剤組成物。
【請求項３１】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−１７を含む、請求項２１に記載の薬剤組成物。
【請求項３２】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−２を含む、請求項２１に記載の薬剤組成物。
【請求項３３】
ＨＣＶに感染した又はＨＣＶに感染しやすい患者を提供し；そして
患者に請求項１、２、３又は４のいずれかに記載の抗体を投与する
段階を包含する、ＨＣＶに感染した患者を治療する方法。
【請求項３４】
ＨＣＶに感染した又はＨＣＶに感染しやすい患者を提供し；そして
患者に請求項１、２、３又は４のいずれかに記載の抗体を投与する
段階を包含する、ＨＣＶに接触した患者を治療する方法。
【請求項３５】
１種以上の異なる抗体を投与することを包含する、請求項３３又は３４に記載の方法。
【請求項３６】
２種以上のモノクローナル抗体を患者に投与することを包含し、抗体がＨＣＶのＥ１及びＥ２タンパク質に対するものであることを特徴とする、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
抗体が、単一ＨＣＶ遺伝子型のＥ１及びＥ２タンパク質に対するものであることを特徴とする、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
抗体が、多重ＨＣＶ遺伝子型のＥ１及びＥ２タンパク質に対するものであることを特徴とする、請求項３５に記載の方法。
【請求項３９】
抗体が直鎖状エピトープに対するものである、請求項３５に記載の方法。
【請求項４０】
抗体が立体構造エピトープに対するものである、請求項３５に記載の方法。
【請求項４１】
抗体が直鎖状及び立体構造エピトープに対するものである、請求項３５に記載の方法。
【請求項４２】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−５を含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項４３】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−７を含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項４４】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−４Ｇを含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項４５】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−８Ｃを含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項４６】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−１７を含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項４７】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−２を含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項４８】
ＨＣＶ１ｂＥ１タンパク質のアミノ酸２０６〜３１３を含む、ＨＣＶのＥ１タンパク質の立体構造エピトープを含むペプチド。
【請求項４９】
アミノ酸が、ＨＣＶ１ｂのＥ１タンパク質のアミノ酸２０６〜３１３に類似していることを特徴とする、ＨＣＶ Ｅ１のアミノ酸配列を含むペプチド。
【請求項５０】
ＨＣＶ１ｂＥ１タンパク質のアミノ酸２０６〜３１３に類似したアミノ酸を含む非ＨＣＶタンパク質又はペプチド。
【請求項５１】
ＨＣＶ１ｂＥ１タンパク質のアミノ酸２０６〜３１３が天然の立体構造である、請求項５０に記載の非ＨＣＶタンパク質又はペプチド
【請求項５２】
請求項４９に記載のペプチドに少なくとも６０％の同一性を有するペプチド。
【請求項５３】
請求項４９に記載のペプチドに少なくとも７０％の同一性を有するペプチド。
【請求項５４】
請求項４９に記載のペプチドに少なくとも８０％の同一性を有するペプチド。
【請求項５５】
請求項４９に記載のペプチドに少なくとも９０％の同一性を有するペプチド。
【請求項５６】
アミノ酸２０６〜３１３を含むＨＣＶ Ｅ１の１ｂ遺伝子型の立体構造エピトープに対して十分な三次元構造的類似性を有する作用物にして、該作用物の存在下で抗体へのエピトープの結合と競合させ、該作用物の非存在下での結合と比較するための作用物。
【請求項５７】
ペプチドである、請求項５６に記載の作用物。
【請求項５８】
小分子である、請求項５６に記載の作用物。
【請求項５９】
化合物である、請求項５６に記載の作用物。
【請求項６０】
有機分子である、請求項５６に記載の作用物。
【請求項６１】
無機分子である、請求項５６に記載の作用物。
【請求項６２】
ミモトープである、請求項５６に記載の作用物。
【請求項６３】
ＨＣＶ１ｂのＥ１タンパク質のアミノ酸２０６〜３１３内の立体構造エピトープを含む、ＨＣＶ Ｅ１のペプチド断片を含むワクチン。
【請求項６４】
請求項１又は３に記載の抗体によって認識されるエピトープを含むＨＣＶ Ｅ１ペプチド断片を含むワクチン。
【請求項６５】
Ｈ−１１４及びＨ−１１１からなる群より選ばれてなるヒトモノクローナル抗体により認識されるエピトープを含むＨＣＶ Ｅ１のペプチド断片を含むワクチン。
【請求項６６】
請求項４８に記載のペプチドを含むワクチン。
【請求項６７】
請求項５６に記載の作用物を含むワクチン。
【請求項６８】
ヒトモノクローナル抗体により認識されるエピトープを含むＨＣＶ Ｅ１のペプチド断片少なくとも１個とヒトモノクローナル抗体により認識されるエピトープを含むＨＣＶ Ｅ２のペプチド断片少なくとも１個との組み合わせを含むワクチン。
【請求項６９】
ペプチド断片が単一ＨＣＶ遺伝子型のものである、請求項６８に記載のワクチン。
【請求項７０】
ＨＣＶ Ｅ１及びＥ２のペプチド断片が多重ＨＣＶ遺伝子型のものである、請求項６８に記載のワクチン。
【請求項７１】
エピトープが、ＨＣＶ Ｅ１及びＥ２のペプチド断片上の直鎖状エピトープである、請求項６８に記載のワクチン。
【請求項７２】
エピトープが、ＨＣＶ Ｅ１及びＥ２のペプチド断片上の立体構造エピトープである、請求項６８に記載のワクチン。
【請求項７３】
エピトープが、ＨＣＶ Ｅ１及びＥ２のペプチド断片上の直鎖状エピトープと立体構造エピトープとの組み合わせである、請求項６８に記載のワクチン。
【請求項７４】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−５を含む、請求項６８に記載のワクチン。
【請求項７５】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−７を含む、請求項６８に記載のワクチン。
【請求項７６】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−４Ｇを含む、請求項６８に記載のワクチン。
【請求項７７】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−８Ｃを含む、請求項６８に記載のワクチン。
【請求項７８】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−１７を含む、請求項６８に記載のワクチン。
【請求項７９】
Ｈ−１１１及びＣＢＨ−２を含む、請求項６８に記載のワクチン。
【請求項８０】
ＨＣＶ感染患者から血清を得て；
請求項１又は２に記載の抗ＨＣＶモノクローナル抗体によるそのエピトープへの結合について、患者血清による阻害を測定し；そして
治療投与の候補者として患者を同定する
段階を含む、ＨＣＶ感染患者を分類する方法。
【請求項８１】
患者に抗体を投与する段階を更に包含する請求項４４に記載の方法。
【請求項８２】
個人を用意し；
請求項１又は２に記載の抗体を、抗体がその抗原に結合するのに好適な条件下で、該個人から得た体液に接触させ；そして
抗体によるペプチドへの結合を検出する
段階を含む、ＨＣＶ感染を検出する方法。
【請求項８３】
個人を用意し；
請求項１に記載の抗体少なくとも２種を、抗体／抗原結合するのに好適な条件下で、該個人から得た体液に接触させ；
抗体によるペプチドへの結合を検出し；そして
抗体結合の特性を分析してＨＣＶの遺伝子型を決定する
段階を含む、ＨＣＶの遺伝子型を同定する方法。
【請求項８４】
体液が血液である、請求項８２又は８３に記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１Ａ】

【図２１Ｂ】

【図２２Ａ】

【図２２Ｂ】

【図２３】

【図２４】

【図２５Ａ】

【図２５Ｂ】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】


【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【図４３Ａ】

【図４３Ｂ】

【図４４】

【図４５】

【図４６】

【公表番号】特表２００６−５０４６４５（Ｐ２００６−５０４６４５Ａ）
【公表日】平成１８年２月９日（２００６．２．９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−５１９７０１（Ｐ２００４−５１９７０１）
【出願日】平成１５年６月２７日（２００３．６．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００３／０２０５８０
【国際公開番号】ＷＯ２００４／００５３１６
【国際公開日】平成１６年１月１５日（２００４．１．１５）
【出願人】（５０３１９９９７３）ボード　オブ　トラスティーズ　オブ　リーランド　スタンフォード　ジュニア　ユニバーシティ (1)
【Ｆターム（参考）】