１８Ｆ標識葉酸
本発明は、フッ素−１８がトリアゾールリンカーまたはテトラゾールリンカーを介して葉酸またはその誘導体に共有結合で連結される新規１８Ｆ−葉酸放射性医薬品、それらの製造方法、ならびにがん、炎症性疾患および自己免疫疾患の診断およびその治療のモニタリングにおけるそれらの使用に関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フッ素−１８がトリアゾールリンカーまたはテトラゾールリンカーを介して葉酸またはその誘導体に共有結合で連結される新規１８Ｆ葉酸放射性医薬品、それらの製造方法、そしてがん、炎症性疾患および自己免疫疾患の診断およびモニタリングならびにその治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
診断剤または治療剤などのエフェクター部分を送達するための細胞特異的ターゲティングは広く研究されている分野であり、非侵襲的診断および／または非侵襲的治療への医学的応用の開発につながっている。特に、γ線または光子または粒子線として電磁放射線を放射する放射性物質を利用する核医学的手順および処置では、特定組織を可視化し、疾患を検討評価しかつ／または治療的処置の効果をモニタリングするべく高いシグナル強度を達成するために、または他の例えば健常組織における放射線傷害のリスクを伴わずに特定患部に十分な線量の電離放射線を送達するべく高い放射線量を達成するために、標的とする細胞または組織におけるこれら放射性物質の選択的局在化が要求される。したがって、細胞特異的構造、特に腫瘍（すなわちがん）または炎症性疾患および自己免疫疾患の場合に存在する構造、例えばそれぞれの生物学的媒体によって特異的にターゲティングされうる受容体、抗原、ハプテンなどを決定し検討評価することは、極めて重要な関心事である。
【０００３】
葉酸受容体（ＦＲ）はこれらの構造の一つであると同定されている。ＦＲは高アフィニティー（ＫＤ＜１０−９Ｍ）膜結合型タンパク質である。正常な組織および器官では、ＦＲ発現はほんのわずかな器官（例えば腎臓、肺、脈絡叢、および胎盤）に強く制限され、それらの器官では、発現が主に上皮細胞の管腔面で起こるので、循環中の葉酸が供されることはない。ＦＲ−アルファは、広範囲にわたるさまざまな特定細胞タイプ、例えば上皮腫瘍（例えば卵巣、子宮頚部、子宮内膜、乳房、結腸直腸、腎臓、肺、鼻咽頭）などで、しばしば過剰発現され、一方、ＦＲ−ベータは白血病細胞でしばしば過剰発現される（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の約７０％はＦＲ−ベータ陽性である）。したがって、これらはどちらも、選択的腫瘍ターゲティングのための貴重な腫瘍マーカーとして使用することができる（非特許文献１：ElnakatおよびRatnam, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1067-84）。また、慢性関節リウマチと診断された患者における活性化滑膜マクロファージが機能的に活性なＦＲ−ベータを持つ（しかし休止滑膜マクロファージは持たない）ことも、最近になって発見されている（非特許文献２：Nakashima-Matsushitaら, Arthritis & Rheumatism, 1999, 42(8): 1609-16）。したがって、関節炎関節では活性化マクロファージを葉酸コンジュゲートでターゲティングすることができ、これは、慢性関節リウマチの診断および処置への可能性を切り開く特性である（非特許文献３：Paulosら, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1205-17）。
【０００４】
したがって、ベンゾイルアミノ部分を介してグルタミン酸にコンジュゲートされたプテリジン骨格に基づく葉酸とその誘導体は、葉酸受容体を保有する細胞集団に治療剤および／または診断剤を送達するためのターゲティング剤として、正常細胞との比較でそのような細胞における治療剤および／または診断剤の選択的濃縮を達成するために、過去１５年間にわたって徹底的に研究されてきた。
【０００５】
例えば葉酸放射性医薬品（非特許文献４：LeamonおよびLow, Drug Discov. Today 2001; 6:44-51；特許文献１：米国特許第4,276,280号明細書）、フッ素化葉酸化学療法剤（特許文献２：米国特許第 4,628,090号明細書）、化学療法剤との葉酸コンジュゲート（非特許文献５：LeamonおよびReddy, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1127-41；非特許文献６：Leamonら, Bioconjugate Chem. 2005; 16:803-11）、タンパク質およびタンパク質毒素との葉酸コンジュゲート（非特許文献７：Wardら, J. Drug Target. 2000; 8:119-23；非特許文献８：Leamonら, J. Biol. Chem. 1993; 268:24847-54；非特許文献９：LeamonおよびLow, J. Drug Target. 1994; 2:101-12）、アンチセンスオリゴヌクレオチドとの葉酸コンジュゲート（非特許文献１０：Liら, Pharm. Res. 1998; 15:1540-45；非特許文献１１：ZhaoおよびLee, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1193-204）、リポソームとの葉酸コンジュゲート（非特許文献１２：LeeおよびLow, Biochim. Biophys. Acta-Biomembr. 1995; 1233:134-44；非特許文献１３：Gabizonら, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1177-92）、ハプテン分子との葉酸コンジュゲート（非特許文献１４：Paulosら, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1205-17）、ＭＲＩ造影剤との葉酸コンジュゲート（非特許文献１５：Kondaら, Magn. Reson. Mat. Phys. Biol. Med. 2001; 12:104-13）など、さまざまな葉酸誘導体および葉酸コンジュゲートが知られており、（前）臨床的に評価されている。通例、これらの誘導体およびコンジュゲートは全て、既知のカルボン酸カップリング方法に適している葉酸のグルタミン酸部分で修飾されている。
【０００６】
葉酸放射性医薬品は、特に、改良されたがん、炎症性疾患および自己免疫疾患の診断、ならびにその治療の有効性の評価には、極めて有用である。これには、処置応答の検討評価および／または予測が含まれ、したがって照射線量測定の改良が含まれうる。当技術分野ではラジオイメージングに適した典型的可視化技法が知られており、例えば陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、プラナーイメージングまたは単光子放射型コンピュータ断層（ＳＰＥＣＴ）イメージング、ガンマカメラ、シンチレーションなどがある。
【０００７】
ＰＥＴとＳＰＥＣＴはどちらも、選択したターゲット部位をイメージングし、マッピングし、その活性を測定するために、放射性トレーサーを使用する。しかし、ＰＥＴが近接したサイクロトロンを必要とする陽電子放出核種を使用するのに対して、ＳＰＥＣＴはジェネレータシステムで入手することができる単光子放出核種を使用し、これにより、その使用がより便利になりうる。しかしながら、ＳＰＥＣＴはＰＥＴより感度が低く、数少ないアプローチを除くと、定量方法を欠いている。ＰＥＴの場合は、陽電子消滅が２本の５１１ｋｅＶガンマ線をもたらし、それが充実した定量方法の基礎になっている。したがってＰＥＴは、脳および他の器官におけるリガンドまたは代謝基質の取り込みおよびアフィニティーを検討評価するための最も洗練された機能イメージング技術の一つであり、それゆえに代謝活性に基づくイメージングの手段になる。これは、例えば陽電子放出同位体を対象に投与することによって達成され、それが放射性崩壊を起こす際に、陽電子／電子消滅によってもたらされるガンマ線がＰＥＴスキャナーによって検出される。
【０００８】
ＰＥＴに有用な適切な同位体を選択する際に考慮する必要がある因子には、患者への投与に先だって、場合によっては薬学的に許容できる担体に、診断用組成物を調製することを可能にするのに十分な、その陽電子放出同位体の半減期、およびＰＥＴスキャンによる体外測定を可能とするに足りる活性を与えるのに十分な残留半減期が含まれる。さらにまた、適切な同位体は、不必要な放射線への患者曝露を制限するために、十分に短い半減期を持つべきでもある。通例、ＰＥＴ用の適切な放射性医薬品はガリウムまたは銅などの金属同位体に基づきうる。しかし、これら二つはその金属の捕捉にキレーターを必要し、それが立体的および化学的性質に影響を及ぼしうる。もう一つの選択肢として、放射性医薬品は、最小限の構造変化をもたらす、共有結合で連結された同位体に基づくこともできる。共有結合による取付けに使用される、ＰＥＴスキャニングに適した放射性核種は、典型的には、１１Ｃ（約２０分）、１３Ｎ（約１０分）、１５Ｏ（約２分）、１８Ｆ（約１１０分）など、短い半減期を持つ同位体である。
【０００９】
現在までに、キレートベースの葉酸放射性医薬品がいくつか合成され、葉酸受容体陽性腫瘍をイメージングするための診断剤として、成功裏に評価されている。最も広く研究された誘導体は、ＳＰＥＣＴ用に１１１Ｉｎおよび９９ｍＴｃで標識されるか（非特許文献１６：Siegelら, J. Nucl. Med. 2003, 44:700；非特許文献１７：Muellerら, J. Organomet. Chem. 2004, 689:4712）、PET用に68Gaで標識された（非特許文献１８：Mathiasら, Nucl. Med. Biol. 2003, 30(7):725）。しかし、上記はいずれも適切なキレート剤を必要とし、それは通例、葉酸にそのグルタミン酸部分を介して連結される。
【００１０】
したがって、共有結合で連結された同位体を持つ葉酸放射性医薬品は、大いに興味が持たれるだろう。特に１８Ｆ標識葉酸放射性医薬品は、上記の考慮事項を全て満たすであろうそのイメージング特性ゆえに、ＰＥＴイメージングに最も適しているだろう。他の適切な放射性核種（１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ）と比較して、１８Ｆは、その半減期が約１１０分と長く、しかも最も低い陽電子エネルギーを持つ陽電子を放出して崩壊し、それが高分解能ＰＥＴにおける最も鮮明なイメージを可能にするので、極めて有用である。さらにまた、１８Ｆの長い半減期が、より複雑な合成と、放射化学施設を持たないＰＥＴセンターへのサテライト供給も可能にする。
【００１１】
しかし、葉酸の構造は１８Ｆによる直接的な放射標識には適していない。したがって今までのところ、文献に報告された１８Ｆ標識葉酸誘導体は極めてわずかしかない（非特許文献１９：Bettioら, J. Nucl. Med., 2006, 47(7), 1153；特許文献３：国際特許公開第2006/071754号パンフレット）。その上、現在報告されている放射合成は時間がかかり、５％未満という低い放射化学収率しか与えない（非特許文献２０：Bettioら, J. Nucl. Med., 2006, 47(7), 1153）。したがって、現在知られている１８Ｆ標識葉酸またはその誘導体では、がん、炎症性疾患および自己免疫疾患の診断および処置を改良するための腫瘍の代謝イメージングに適した特異的放射性医薬品のニーズを満たすことができない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】米国特許第4,276,280号明細書
【特許文献２】米国特許第4,628,090号明細書
【特許文献３】国際特許公開第2006/071754号パンフレット
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】ElnakatおよびRatnam, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1067-84
【非特許文献２】Nakashima-Matsushitaら, Arthritis & Rheumatism, 1999, 42(8): 1609-16
【非特許文献３】非特許文献３：Paulosら, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1205-17
【非特許文献４】LeamonおよびLow, Drug Discov. Today 2001; 6:44-51
【非特許文献５】LeamonおよびReddy, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1127-41
【非特許文献６】Leamonら, Bioconjugate Chem. 2005; 16:803-11
【非特許文献７】Wardら, J. Drug Target. 2000; 8:119-23
【非特許文献８】Leamonら, J. Biol. Chem. 1993; 268:24847-54
【非特許文献９】LeamonおよびLow, J. Drug Target. 1994; 2:101-12
【非特許文献１０】Liら, Pharm. Res. 1998; 15:1540-45
【非特許文献１１】ZhaoおよびLee, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1193-204
【非特許文献１２】LeeおよびLow, Biochim. Biophys. Acta-Biomembr. 1995; 1233:134-44
【非特許文献１３】Gabizonら, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1177-92
【非特許文献１４】Paulosら, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1205-17
【非特許文献１５】Kondaら, Magn. Reson. Mat. Phys. Biol. Med. 2001; 12:104-13
【非特許文献１６】Siegelら, J. Nucl. Med. 2003, 44:700
【非特許文献１７】Muellerら, J. Organomet. Chem. 2004, 689:4712
【非特許文献１８】Mathiasら, Nucl. Med. Biol. 2003, 30(7):725
【非特許文献１９】Bettioら, J. Nucl. Med., 2006, 47(7), 1153；WO 2006/071754
【非特許文献２０】Bettioら, J. Nucl. Med., 2006, 47(7), 1153
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本出願人は、フッ素−１８がトリアゾールリンカーまたはテトラゾールリンカーを介して葉酸またはその誘導体に、例えば葉酸のグルタミン酸官能基などに連結される、新規１８Ｆ標識葉酸放射性医薬品を製造するための高効率な汎用的方法を、ここに見出した。予備的インビトロ研究では、ＦＲ陽性腫瘍の強力な診断剤としてのそれらの適性が示唆された。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、第１の態様において、フッ素−１８がトリアゾールリンカーまたはテトラゾールリンカーを介して葉酸またはその誘導体に、例えば葉酸またはその誘導体のグルタミン酸官能基に連結される、新規１８Ｆ−葉酸放射性医薬品（以下、本発明の化合物ともいう）に関する。
【００１６】
ある具体的実施形態において、新規葉酸放射性医薬品は式Ｉの化合物である：
【化１】
［式中、
Ｐは葉酸またはその誘導体であり、
Ｓ１、Ｓ２は、互いに独立して、単結合またはスペーサーであり、かつ
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］。
【００１７】
好ましくは、Ｓ１およびＳ２は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈもしくは−ＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、または−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＮＯ２、−ＣＯＲ’もしくは−ＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す。
【００１８】
より具体的には、本発明は、式ＩＩを持つ化合物に関する：
【化２】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および(Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ)カルボニル（式中、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５はＨ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６、Ｒ７は、互いに独立して、直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）、または式ＩＩＩの基：
【化３】
［式中、Ｓ１およびＳ２は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、かつ
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］
であり（ただし、Ｒ６およびＲ７の一方は式ＩＩＩの基であるものとする）、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を持つ］。
【００１９】
さらにもう一つの具体的実施形態において、本発明は式ＩＶの化合物を包含する：
【化４】
［式中、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であるか、または式Ｖの基：
【化５】
［式中、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表し（ただし、二つのヘテロ原子が互いに隣接することはないものとする）、
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］
であり、かつ
Ｘ１〜Ｘ５、Ｒ１〜Ｒ６、ｍ、ｐおよびｑは、上に定義した通りである。
ただし、Ｒ６が式ＩＩＩの基であるか、またはＲ８およびＲ９の一方が式Ｖの基であるものとする］。
【００２０】
さらにもう一つの態様において、本発明はそれらの製造方法に関する。より具体的には、本発明の化合物は、アジドとアルキンまたはアルキン代替物、例えばニトリルとの１，３−双極子付加環化反応を使って、高い収率で得ることができる。
【００２１】
もう一つの態様において、本発明は本発明化合物の医薬組成物に関する。
【００２２】
さらにもう一つの態様において、本発明は、インビトロまたはインビボでの、がん、炎症性疾患および自己免疫疾患の診断ならびにその治療のモニタリングにおける使用に関する。
【００２３】
ある実施形態において、本発明は、葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団を画像診断するための本発明化合物の使用に関する。
【００２４】
より具体的には、本発明は、葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団を画像診断するための方法を包含し、これには例えば、組織試料中の、葉酸受容体を発現させる細胞、例えば腫瘍細胞または活性化マクロファージを、インビトロ検出するための方法が含まれる。そのような方法はインビボでも行うことができる。
【００２５】
したがって、さらにもう一つの実施形態において、本発明は、がん、炎症性疾患および自己免疫疾患の画像診断および／またはその治療のモニタリングを必要とする対象への便利で効果的な投与のための、本発明化合物の使用に関する。本発明の方法の対象は、好ましくは哺乳動物、例えば動物またはヒト、好ましくはヒトである。
【００２６】
そのような本発明の方法は、がん、炎症性疾患および自己免疫疾患を診断または治療するための他の任意の方法、例えば既に開発されている他の診断および／または治療剤を使用する方法、ならびにＸ線コンピュータ断層撮影法（ＣＴ）、磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）、機能的磁気共鳴イメージング（ｆＭＲＩ）、単光子放射型コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）、光学イメージング、および超音波を利用する方法などと組み合わせて、実施することができる。
【００２７】
本発明の他の特徴および利点は、以下に記載する本発明の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかになるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は、１８Ｆ−クリック（Click）葉酸（γ−（４−（４−（４−［１８Ｆ］フルオロブチル）−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ブチル）葉酸アミドの合成をを示す。
【図２】図２は、γ−（４−アジド−ブチオニル）−葉酸アミドの合成を示す。
【図３】図３は、１８Ｆ−クリック葉酸を使ったエクスビボ生体内分布研究によって示される葉酸受容体陽性組織における特異的取り込みを示す。
【図４】図４は、［１８Ｆ］ＦＤＧを使ったＰＥＴイメージと比較した、１８Ｆ−クリック葉酸を使ったＰＥＴイメージを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本発明は、第１の態様において、フッ素−１８がトリアゾールリンカーまたはテトラゾールリンカーを介して葉酸またはその誘導体に、例えば葉酸のグルタミン酸官能基に連結される、新規１８Ｆ−葉酸放射性医薬品（以下、本発明の化合物ともいう）に関する。
【００３０】
本明細書で使用する用語「葉酸」は、以下に定義する基Ｓ１をパラ位に保持するアミノベンゾイル部分に連結された縮合ピリミジン複素環に基づく化合物を含む。本明細書にいう「縮合ピリミジン複素環」には、さらなる５員または６員複素環と縮合したピリミジン、例えばプテリジンまたはピロロピリミジン二環が包含される。本明細書にいう葉酸の好ましい代表例は、葉酸骨格、すなわちプテロイル-グルタミン酸またはＮ−［４（プテリジン−６−イルメチルアミノ）ベンゾイル］−グルタミン酸）、およびその誘導体に基づき、これには、適宜置換された葉酸、フォリン酸、プテロポリグルタミン酸、および葉酸受容体結合性プテリジン類、例えばテトラヒドロプテリン類、ジヒドロ葉酸類、テトラヒドロ葉酸類、ならびにそれらのデアザおよびジデアザ類似体が含まれる。葉酸は本発明の化合物に使用される好ましい基本構造である。用語「デアザ」および「ジデアザ」類似体とは、天然葉酸構造中の１個または２個の窒素原子の代わりに炭素原子を持つ、当技術分野で認識されている類似体を指す。例えばデアザ類似体には、１−デアザ、３−デアザ、５−デアザ、８−デアザ、および１０−デアザ類似体が含まれる。ジデアザ類似体には、例えば１，５−ジデアザ、５，１０−ジデアザ、８，１０−ジデアザ、および５，８−ジデアザ類似体が含まれる。好ましいデアザ類似体化合物には、Ｎ−［４−［２−［（６Ｒ）−２−アミノ−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−４−オキソピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−６−イル］エチル］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸（ロメトレキソール）およびＮ−［４−［１−［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］プロピル］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸（エダトレキセート）が含まれる。
【００３１】
より具体的には、新規葉酸放射性医薬品は式Ｉの化合物である：
【化６】
［式中、
Ｐは葉酸またはその誘導体であり、
Ｓ１、Ｓ２は、互いに独立して、単結合またはスペーサーであり、かつ
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］。
【００３２】
好ましくは、Ｓ１およびＳ２は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す。
【００３３】
もう一つの具体的実施形態では、新規葉酸放射性医薬品が式ＩＩの化合物である：
【化７】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル（式中、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５はＨ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６、Ｒ７は、互いに独立して、直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）、または式ＩＩＩの基：
【化８】
［式中、Ｓ１およびＳ２は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、かつ
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］
であり（ただし、Ｒ６およびＲ７の一方は式ＩＩＩの基であるものとする）、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を持つ］。
【００３４】
好ましい実施形態では、Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、Ｒ７が式ＩＩＩの基である。
【００３５】
もう一つの好ましい実施形態では、Ｒ７がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、Ｒ６が式ＩＩＩの基である。
【００３６】
略号「Ｎ」および「Ｃ」は、考えうる全ての飽和度を表すと理解される。すなわち、Ｎは−ＮＨ−および−Ｎ＝結合を包含し、Ｃは−ＣＨ２−および−ＣＨ＝結合を包含する。
【００３７】
さらに、（Ｈ）ｑは表示した環上（すなわちＸ３、Ｃ６、Ｃ７およびＸ４上）の全てのＨ置換基を表すと理解される。例えば、ｑ＝５は完全飽和無置換類似体（Ｘ３＝Ｘ４＝Ｎ、ｐ＝０）を表し、ｑ＝７は完全飽和無置換５，８−ジデアザ類似体（Ｘ３＝Ｘ４＝Ｃ、ｐ＝０）を表し、ｑ＝１はＸ３＝Ｘ４＝Ｎ、ｐ＝０の完全不飽和類似体を表す。
【００３８】
Ｓ１は、好ましくは、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１８アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、より好ましくは、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１８アルキル（これは無置換であるか、少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、または無置換５員もしくは６員芳香環で置き換えられてもよい。
【００３９】
好ましい実施形態では、Ｓ１が単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい。
【００４０】
もう一つの好ましい実施形態において、Ｓ１はアミノ酸、すなわちアミノ基（例えばＮＨ２またはＮＨ３＋）とカルボン酸基（例えばＣＯＯＨまたはＣＯＯ-）の両方を持つ化合物を表しうる。ある具体的実施形態において、アミノ酸は、α−アミノ酸、β−アミノ酸、Ｄ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸であることができる。アミノ酸は天然アミノ酸（例えばアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、またはヒスチジンなど）であってもよいし、またはその誘導体であってもよい。誘導体の例には、適宜置換されたアミノ酸、例えばＣＮ、Ｈａｌ、および／またはＮＯ２から選択される一つ以上の置換基を持つものなどがある。アミノ酸には、他の任意の非天然アミノ酸、例えばノルロイシン、ノルバリン、Ｌ−またはＤ−ナフトアラニン（naphthalanine）、オルニチン、ホモアルギニン、その他、ペプチド技術分野で周知であるものなどを含めることもできる（例えばM. Bodanzsky「Principles of Peptide Synthesis」改訂第1版および改訂第2版、Springer-Verlag、ニューヨーク州ニューヨーク、1984および1993、ならびにStewartおよびYoung「Solid Phase Peptide Synthesis」第2版、Pierce Chemical Co.、イリノイ州ロックフォード、1984を参照されたい；どちらの文献も参照により本明細書に組み込まれる）。アミノ酸およびアミノ酸類似体／誘導体は商業的に購入するか（Sigma Chemical Co.；Advanced Chemtech）、当技術分野で知られる方法を使って合成することができる。もう一つの具体的実施形態では、アミノ酸は、複数の同じアミノ酸または異なるアミノ酸（上に定義したもの）が共有結合で連結されている（すなわち従来のペプチド結合または他の結合を介して連結されている）ポリアミノ酸（ポリペプチドともいう）の一部であることもできる。好ましいアミノ酸には、例えばグルタミン酸、アスパラギン酸、グルタミン、アスパルチン（aspartine）、リジン、アルギニン、システイン、およびその誘導体、などが含まれ、好ましいポリアミノ酸には、ホモポリマー、その各ホモポリマー（すなわち、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸など）が含まれる。最も好ましいのは、適宜置換されたアスパラギン酸およびグルタミン酸である。
【００４１】
Ｓ２は、好ましくは、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）であり、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、より好ましくは、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）である。
【００４２】
最も好ましくは、Ｓ２は単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルである。
【００４３】
上に示した通り、本明細書にいう葉酸の好ましい代表例は、Ｓ１がグルタミン酸残基である葉酸骨格およびその誘導体に基づく。したがって、もう一つの具体的実施形態では、新規葉酸放射性医薬品が式ＩＶの化合物である：
【化９】
［式中、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、-Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であるか、または式Ｖの基：
【化１０】
［式中、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］
であり、かつ
Ｘ１〜Ｘ５、Ｒ１〜Ｒ６、ｍ、ｐおよびｑは、式ＩＩの化合物および後述の好ましい実施形態に従って定義する通りである。
ただし、Ｒ６が式ＩＩＩの基であるか、またはＲ８およびＲ９の一方が式Ｖの基であるものとする］。
【００４４】
Ｓ２およびＳ３は、好ましくは、互いに独立して、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す）であり、より好ましくは、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）である。
【００４５】
最も好ましくは、Ｓ２およびＳ３が、互いに独立して、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルである。
【００４６】
Ａｒ１は、式Ｖ−ａおよびＶ−ｂのトリアゾールまたはテトラゾール：
【化１１】
［式中、点線はスペーサー基への連結部位を表し、かつ
Ｚ１〜Ｚ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであって、全てのＮの和が３または４であるようになっている］
であり、好ましくは式Ｖ−ｃ、Ｖ−ｄ、およびＶ−ｅから選択される：
【化１２】
［式中、点線はスペーサー基への連結部位を表し、Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）であり、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す］。
【００４７】
ある具体的実施形態では、Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、Ｒ８およびＲ９の一方が式Ｖの基である。
【００４８】
もう一つの具体的実施形態では、Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、もしくは基Ｒ５、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、かつＲ９が式Ｖの基である。
【００４９】
さらにもう一つの具体的実施形態では、Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、Ｒ９がＨであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であり、かつＲ８が式Ｖの基である。
【００５０】
さらにもう一つの具体的実施形態では、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、かつＲ６は式Ｖの基である。
【００５１】
したがって、もう一つの具体的実施形態では、新規葉酸放射性医薬品が、式ＶＩ、ＶＩａまたはＶＩｂの化合物である：
【化１３】
【化１４】
【化１５】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ６はＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールであり、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を持つ］。
【００５２】
Ｓ２およびＳ３は、好ましくは、互いに独立して、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す）であり、より好ましくは、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）である。
【００５３】
最も好ましくは、Ｓ２およびＳ３は、互いに独立して、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルである。
【００５４】
さらにもう一つの具体的実施形態では、新規葉酸放射性医薬品が式ＶＩＩａ〜ＶＩＩｆまたはＶＩＩＩａ〜ＶＩＩＩｆの化合物である：
【化１６】
【化１７】
【化１８】
【化１９】
【化２０】
【化２１】
【化２２】
【化２３】
【化２４】
【化２５】
【化２６】
【化２７】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ６はＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、
Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）であり、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表し、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を持つ］。
【００５５】
上に定義したさらなる好ましい実施形態は、式ＶＩ〜ＶＩＩＩの化合物にも適用される。
【００５６】
好ましくは、Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、アルキル、−ＯＲ５、−ＮＨＲ’であることができ、より好ましくは、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’であることができる（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）。
【００５７】
好ましくは、Ｒ３はＨ、ホルミル、Ｃ１−Ｃ１２アルキルまたはＣ１−Ｃ１２アルカノイルである。
【００５８】
好ましくは、Ｒ４はＨ、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、またはＣ１−Ｃ１２アルカノイルである。
【００５９】
好ましくは、Ｒ５はＨ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル、より好ましくは、ＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルである。
【００６０】
好ましくは、Ｒ６はＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、より好ましくはＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、またはＣ１−Ｃ８アルキルである。
【００６１】
本発明化合物の具体的実施形態には、例えば、
（ａ）Ｘ１〜Ｘ５がＮであり、Ｒ１がＮＹ１Ｙ２であり、Ｒ２がＯであり、Ｒ４がＹ３であり、ｍが１であり、ｐが０または１であり、かつｑが１または３である化合物、または
（ｂ）Ｘ１〜Ｘ５がＮであり、Ｒ１がＮＹ１Ｙ２であり、Ｒ２がＮＨ２であり、Ｒ４がＹ３であり、ｍが１であり、ｐが０であり、ｑが１である化合物、
が含まれる。
【００６２】
したがって、さらにもう一つの具体的実施形態において、本発明は、例えば式ＩＸ、ＩＸａ、ＸまたはＸａの化合物に関する：
【化２８】
【化２９】
【化３０】
【化３１】
［式中、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）から選択され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｙ３は、Ｈ、ホルミル、ニトロソ、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）から選択され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）であり、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表し、かつ
Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す］。
【００６３】
好ましくは、Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）である。
【００６４】
用語「アルキル」が単独でまたは組み合わされて使用される場合、この用語は、好ましくは、１〜１２個の炭素原子を含有する直鎖または分岐アルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、t-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシルなどを指す。より好ましいアルキル基は１〜８個、さらに好ましくは１〜４個の炭素原子を含有する。
【００６５】
本明細書で使用する用語「アルケニル」は、単独で、または他の基と組み合わされて、２〜１２個の炭素原子を含有する直鎖または分岐アルキル基、例えばメチレン、エチレン、プロピレン、イソプロピレン、ブチレン、t-ブチレン、ｓｅｃ−ブチレン、イソブチレン、アミレン、イソアミレン、ペンチレン、イソペンチレン、ヘキシレンなどを指す。好ましいアルケニル基は２〜６個の炭素原子を含有する。
【００６６】
本明細書で使用する用語「アルキニル」は、一つ以上の炭素-炭素三重結合を持つ炭素原子の線状鎖または分岐鎖を指す。好ましいアルキニル基は、２〜１２個、より好ましくは２〜６個の炭素原子を含有する。
【００６７】
本明細書で使用する用語「アルコキシ」は、酸素で置換された、上に定義したアルキル、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどを指す。
【００６８】
本明細書で使用する用語「アルカノイル」は、ホルミルを指すか、または末端がカルボニルで置換された、上に定義したアルキル、例えばアセチル、プロパノイル、ブタノイル、ペンタノイルなどを指す。
【００６９】
本明細書で使用する用語「アルキルアミノ」は、窒素で置換された、上に定義したアルキルを指し、モノアルキルアミノ、例えばメチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノなどと、ジアルキルアミノ、例えばジメチルアミノ、ジエチルアミノ、メチルプロピルアミノなどの両方を包含する。
【００７０】
本明細書で使用する用語「ハロ」は、任意の第１７族元素を指し、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、およびアスタチン（アスタチノ）を包含する。
【００７１】
さらにもう一つの態様において、本発明は、本発明の化合物を合成する方法を提供する。本出願人は、熱条件下または触媒の存在下で行われるアジドとアルキンまたはアルキン代替物との付加環化反応を含むプロセスによって、本発明の化合物が効果的に得られることを見出した。これらの反応は、ヒュスゲン（Huisgen）１，３−双極子付加環化反応（熱条件）およびクリック（Click）反応（触媒条件）として知られており、当技術分野において記載されている（KolbおよびSharpless, Drug Discovery Today 2003, 8, 1128；Kolbら, Angew. Chem. Int. Ed. 2001, 40, 2004；Rostovtsev, V. V.ら, Angew. Chem. Int. Ed. 2002, 41, 2596；US 2005/02222427；WO 06/116629）。より具体的には、Ａｒ１がトリアゾールである式Ｉの化合物は、アジドＲａ−Ｎ３とアルキンＲｂ−Ｃ≡Ｃ−Ｒｃとの付加環化反応によって得られ、Ａｒ１がテトラゾールである式Ｉの化合物は、アジドＲａ−Ｎ３とシアン化物Ｒｂ−Ｃ≡Ｎとの付加環化反応によって得られる。ここでは、可能性のある全ての組合せ、すなわちＲａが葉酸誘導体であり、かつＲｂが１８Ｆ標識基である組合せ、ならびにＲｂが葉酸誘導体であり、かつＲａが１８Ｆ標識基である組合せが考えられる。したがって、この反応のモジュール性および汎用性は、多種多様なリンカーを使って葉酸に放射性同位体をカップリングすることを可能にする。
【００７２】
ある具体的実施形態では、熱条件下で、すなわち１０〜２００℃の範囲、好ましくは１０〜１００℃の範囲の温度で、付加環化反応が行われる。
【００７３】
もう一つの実施形態では、遷移金属錯体などの触媒、例えばＲｕおよびＣｕ（Ｉ）の存在下で、付加環化反応が行われる。好ましい触媒は、Ｃｕ（Ｉ）塩、例えばＣｕ（Ｉ）塩化物、臭化物、ヨウ化物である。あるいは、Ｃｕ（ＩＩ）塩の系中（in situ）還元によって、Ｃｕ（Ｉ）を得ることもできる。この反応は、さまざまなプロトン性または非プロトン性溶媒中、例えばメタノール、エタノール、２−プロパノール、第３級ブタノール、ｎ−ブタノールおよび／もしくは水またはその緩衝溶液中、広範囲にわたる温度（例えば１０〜１００℃の温度、好ましくは室温）で、さまざまなｐＨ（例えば４〜１２）において、酸化的または還元的条件下で、他の官能基の存在下に、保護基を必要とすることなく行うことができる。
【００７４】
適当な条件を選択することは当業者には自明だろう（参照により本明細書に組み込まれるUS 2005/0222427およびそこで引用されている文献も参照されたい）。
【００７５】
付加環化反応用の１８Ｆ標識出発物質、すなわち１８Ｆ標識アルキン、アルキン代替物またはアジドは、適切な脱離基を持つ各アルキン、アルキン代替物またはアジドとの置換反応で得られる。アルキン上の脱離基は当技術分野で知られる任意の一般的脱離基であることができ、例えばハロゲン、ニトロ、ジアゾニウム塩、スルホン酸エステル（メシラート、トシラートを含む）、ペンタフルオロベンゾアートなどが挙げられる。通例、置換反応は、アセトニトリル、アセトン、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、N-メチルピロリジノン（ＮＭＰ）、ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）ならびにその混合物から選択される極性非プロトン性溶媒中で行われる。
【００７６】
したがって、ある模範的反応では、選択したアルキンまたはアルキン代替物であって適切な脱離基を備えたものを、例えば炭酸テトラブチルアンモニウムや、炭酸カリウムまたはシュウ酸カリウムと組み合わされたアミノポリエーテル類（例えばＫｒｙｐｔｏｆｉｘ（ｃ） ２．２．２）などといった相間移動触媒で活性化された［１８Ｆ］フルオリドを使って、標準的条件（例えばアセトニトリル、１００℃、１０〜１５分）での置換反応で標識した。その結果生じた［１８Ｆ］標識アルキンを、適切な溶媒と共に、選択した触媒（例えばＣｕ（Ｉ）Ｉ）へと共蒸留した。この混合物に、選択したアジド−葉酸または誘導体を標準的条件（例えばＤＭＦ、Ｈ２ＯおよびＤＩＰＥＡ中のアスコルビン酸Ｎａ、８０℃）で加えることにより、最終標識生成物を２５〜３５％のＲＣＹで得た。
【００７７】
あるいは、選択したアジドであって適切な脱離基を備えたものを、例えば炭酸テトラブチルアンモニウムや、炭酸カリウムまたはシュウ酸カリウムと組み合わされたアミノポリエーテル類（例えばＫｒｙｐｔｏｆｉｘ（ｃ） ２．２．２）などといった相間移動触媒で活性化された［１８Ｆ］フルオリドを使って標識することにより、［１８Ｆ］標識アジドを得て、次にそれを、標準的条件での１，３−双極子付加環化反応で、選択したアルキン置換葉酸または誘導体にカップリングした。
【００７８】
さらにもう一つの態様において、本発明は、画像診断を必要とする対象への便利で効果的な投与のための、本発明の葉酸放射性医薬品の使用を提供する。
【００７９】
したがって本発明は、葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団を画像診断するための方法であって、少なくとも一つの本発明の葉酸放射性医薬品を画像診断量で投与するステップ、および前記細胞または細胞集団の診断画像を取得するステップを含む方法を提供する。
【００８０】
そのようなイメージングは、インビトロまたはインビボで葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団に対して行うことができる。
【００８１】
したがって本発明は、組織試料中の葉酸受容体を発現させる細胞をインビトロ検出するための方法であって、前記組織試料を、少なくとも一つの本発明の葉酸放射性医薬品と、結合を起こさせてそのような結合をＰＥＴイメージングによって検出することができるように、有効な量ならびに十分な時間および条件で、接触させることを含む方法を提供する。
【００８２】
さらにもう一つの態様において、本発明は、がん、炎症性疾患および自己免疫疾患の画像診断および／またはその治療のモニタリングを必要とする対象への便利で効果的な投与のための、本発明の葉酸放射性医薬品の使用を提供する。
【００８３】
もう一つの態様において、本発明は、同時に診断および治療するための方法であって、その必要がある対象に、少なくとも一つの本発明の葉酸放射性医薬品を、診断有効量で、治療活性剤と組み合わせて投与するステップ、および処置の経過を追跡するために前記組織の診断画像を取得するステップを含む方法を提供する。
【００８４】
本発明の方法の対象は、好ましくは哺乳動物、例えば動物またはヒト、好ましくはヒトである。
【００８５】
投薬量は所望する効果の性質、例えば診断または治療の形態、処置の種類および頻度、診断装置、調製物の適用の形態、ならびに受容者の年齢、体重、栄養および状態、もしあれば同時処置の種類に左右される。
【００８６】
しかし、最も好ましい投薬量は、当業者には理解される通り、また当業者であれば甚だしい実験を行わずに決定することができるように、個々の対象に合わせて調整することができる。これには通例、標準用量の調節（例えば患者の体重が軽ければ用量の削減）を伴う。
【００８７】
処置は、最適量を下回る少量で開始し、最適な効果が達成されるように、それを増加させることができる。
【００８８】
ＰＥＴスキャナーでのイメージング操作は、放射性トレーサーの投与後、数分以内から２〜４時間後までに行われる。スケジュールは、イメージングターゲット、および放射性トレーサーの動態、ならびに所望する情報に左右される。
【００８９】
本発明の葉酸放射性医薬品の好ましい投与経路は、静脈内注射によるものである。
【００９０】
注射に適した形態として、本発明の上記葉酸放射性医薬品の滅菌水性溶液または分散系が挙げられる。通例、放射性医薬品は、生理緩衝溶液中に製剤化されるだろう。
【００９１】
葉酸放射性医薬品は、例えば限定するわけではないが、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどの抗細菌剤または抗真菌剤の添加など、当技術分野で認識されている任意の技法で滅菌することができる。
【００９２】
好ましくは、それらを投与前に滅菌濾過することにより、余分な滅菌剤の必要が排除される。
【００９３】
注射用溶液剤の場合、好ましい単位投薬量は約０．０１ｍＬ〜約１０ｍＬである。静脈内投与後は、所望であれば、投与された用量のうちの十分な量を選択した標的領域に蓄積させるために、放射標識試薬が対象に投与された後、数分以内から２〜４時間後までに、インビボの器官または腫瘍のイメージングを行うことができる。
【００９４】
本発明の葉酸放射性医薬品は、対象から採取した組織生検中の葉酸受容体を発現させる細胞のインビトロ検出にも使用することができる。したがって、さらにもう一つの実施形態において、本発明は、組織試料中の葉酸受容体を発現させる細胞（例えば腫瘍細胞）をインビトロ検出するための方法であって、前記組織試料を、本発明の葉酸放射性医薬品と、結合を起こさせてそのような結合をイメージング技法によって検出することができるように、有効な量ならびに十分な時間および条件で接触させることを含む方法を提供する。
【００９５】
試料は、当業者に知られている手法によって、例えば組織生検材料もしくは体液を収集することによって、または気管もしくは肺試料などを吸引することによって収集することができる。
【００９６】
試験される組織試料には、例えば腫瘍細胞、上皮細胞、腎臓、胃腸系または肝胆道系など、葉酸受容体を発現させる細胞を含有すると疑われる任意の組織が含まれる。試料は、顕微鏡による検査および観察を容易にするために、例えばミクロトームなどで薄切することができる。試料は、試料組織の組織学的品質を改良するために、本発明の葉酸放射性医薬品の一つとのインキュベーションの前または後に、適当な固定剤で固定することもできる。
【００９７】
本発明の葉酸放射性医薬品が細胞上の葉酸受容体に結合するのに十分な時間および条件には、標準的な組織培養条件が含まれる。すなわち、試料をインビトロで培養し、生理的媒質中で本発明の複合体または組成物の一つと共にインキュベートすることができる。そのような条件は当業者にはよく知られている。あるいは、試料を固定した後、等張緩衝液または生理的緩衝液中で本発明の葉酸放射性医薬品と共にインキュベートすることもできる。
【００９８】
どの応用でも、本発明の化合物を使用する場か、またはその近くで、本発明の化合物を製造することが便利である。
【００９９】
ここに開示し、特許請求する化合物および／または方法は全て、本開示を考慮すれば甚だしい実験を行わずに、製造および実行することができる。本発明の範囲から逸脱することなく本発明に変形を加えうることは、当業者には明白だろう。本明細書に記載する実施例は、例示を意図するものであって網羅的ではないので、決して、例示される実施例を本発明の限定であるとみなしてはならない。
【０１００】
実施例
材料と方法
赤外スペクトルは、Ｊａｓｃｏ ＦＴ／ＩＲ−６２００ ＡＴＲ−ＩＲで記録した。核磁気共鳴スペクトルは、対応する溶媒シグナルを内部標準として、Ｂｒｕｋｅｒ ４００ＭＨｚまたは５００ＭＨｚ分光計で記録した。化学シフトはテトラメチルシラン（０．００ｐｐｍ）を基準として百万分率（ｐｐｍ）で報告する。結合定数Ｊの値はヘルツ（Ｈｚ）で記載し、実験項では１Ｈ−ＮＭＲスペクトルの説明に以下の略号を使用する。一重線（ｓ）、二重線（ｄ）、三重線（ｔ）、多重線（ｍ）、二重線の二重線（ｄｄ）。複雑な多重線の化学シフトはその出現範囲として記載する。低分解能質量分析（ＬＲ−ＭＳ）はＭｉｃｒｏｍａｓｓ Ｑｕａｔｔｒｏ ｍｉｃｒｏ（商標）ＡＰＩ ＬＣ−ＥＳＩで記録した。
【０１０１】
水感受性反応は火炎乾燥したガラス器具中、アルゴン下で行った。反応は薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ、ＥＭ Ｓｃｉｅｎｃｅ ０．２５ｍｍ厚、プリコートシリカゲル６０Ｆ−２５４ガラス支持プレート上で実行）またはＨＰＬＣでモニターした。ＨＰＬＣは、Ｌ−７４００波長可変吸収検出器を装備したＭｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ Ｌ−７０００システムで行った。分析用ＨＰＬＣは、ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）カラム（Ｃ１８、５μｍ、４．６×１５０ｍｍ、Ｗａｔｅｒｓ）で、以下の溶媒系を使って行った（１ｍＬ／分）：０．１％ＴＦＡ水溶液（溶媒Ａ）、アセトニトリル（溶媒Ｂ）、１ｍＬ／分；０−１分、９５％Ａ；１−１５分、９５→５％Ａ；１５−２０分、５％Ａ；２０→２２分、５→９５％Ａ；２２→２５分、９５％Ａ。セミ分取用ＨＰＬＣはＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）セミプレップカラム（Ｃ１８、５μｍ、１０×１５０ｍｍ、Ｗａｔｅｒｓ）、３ｍＬ／分、均一濃度のＮＨ４ＨＣＯ３（１０ｍＭ、８８％）／ＣＨ３ＣＮ（１２％）で行った。化学薬品は全て、別段の明示がない限り、供給されたものをそのまま使用した。
【０１０２】
ｎ．ｃ．ａ．［１８Ｆ］フルオリドの製造
ｎ．ｃ．ａ．［１８Ｆ］フルオリドはＣｙｃｌｏｎｅ１８／９サイクロトロン（ＩＢＡ、ベルギー）での１８Ｏ（ｐ，ｎ）１８Ｆ核反応によって製造した。９７％同位体濃縮された［１８Ｏ］水を、２．１ｍｌの液体ターゲットをつかって、１６ＭｅＶ陽子線で照射した。［１８Ｆ］フルオリド／［１８Ｏ］水溶液を、ターゲットから、マニピュレータを装備した合成ホットセルに、ヘリウム流を使って移した。
【０１０３】
５ｍｌの０．５Ｍ炭酸カリウム溶液と５ｍｌの水でプレコンディショニングしておいたアニオン交換カートリッジ（Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ａｃｃｅｌｌ Ｐｌｕｓ ＱＭＡ、Ｗａｔｅｒｓ ＡＧ）上に［１８Ｆ］フルオリド（約２０〜３０ＧＢｑ）を捕捉すると共に、［１８Ｏ］水を再利用するために回収した。アセトニトリル／水（４：１）１．５ｍｌ中の炭酸カリウム（２ｍｇ）とＫｒｙｐｔｏｆｉｘ（ｃ）２．２．２（１０ｍｇ）の溶液を使って、［１８Ｆ］フルオリドを、１０ｍｌ密封反応容器中に直接溶出させた。８５〜９０℃で減圧と窒素気流とによって溶媒を除去した。次に、１ｍｌの乾燥アセトニトリルを３回加え、蒸発乾固した。
【実施例１】
【０１０４】
１９Ｆ−クリック葉酸標準の合成
【化３２】
（ａ）６−［１９Ｆ］フルオロ−１-ヘキシンの合成
乾燥ＴＨＦ（１２ｍＬ）中の５−ヘキシン−１−イル＝ｐ−トシラート（３３０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）（van Hestら, J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 1282に記載された手法に従って５−ヘキシン−１−オールをトシル化することによって製造）、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）２．２．２（６２０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）およびＫＦ（９７ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を還流下で２０時間撹拌した。周囲圧で揮発性成分を分留することにより、６−［１９Ｆ］フルオロ−１−ヘキシンをＴＨＦ中の４２％溶液（２００ｍｇ、６２％）として得た：Ｂｐ：６５−７０℃／１気圧；１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） δ ４．５１ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝６．０Ｈｚ）， ４．４０ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝６．０Ｈｚ）， ２．２３ （ｄｔ， ２Ｈ， Ｊ＝７．６および２．８Ｈｚ）， １．９５ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝２．８Ｈｚ）， １．８０−１．７３ （ｍ， ２Ｈ）， １．６５−１．６１ （ｍ， ２Ｈ） ｐｐｍ。
【０１０５】
（ｂ）γ−（４−アジド−ブチオニル）−葉酸アミドの合成
符号については図2を参照されたい。
Ｎ−ＢＯＣ−アミノ−ブタン−アジド（２）を、モノ−ＢＯＣ−ジアミノブタン（１）から、Linkらが記載した手法（J. Am. Chem. Soc. 2004, 126, 10598）に従って製造した。ＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ（２０％）中、室温で、終夜、中間体２を脱保護することにより、減圧乾燥後に、４−アジド−ブタン−アミンのＴＦＡ塩（３）を無色の油状物（０．４４ｇ、９４％）として得た：１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） δ ４．５４ （ｂｓ， １Ｈ）， ３．２７ （ｔ， ２Ｈ， Ｊ＝６．５Ｈｚ）， ３．２５−３．１０ （ｍ， ２Ｈ）， １．６３−１．５０ （ｍ， ４Ｈ）， １．１４ （ｓ， ９Ｈ） ｐｐｍ；ＬＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝２１５．２１（Ｃ９Ｈ１８Ｎ４Ｏ２の計算値：２１４．２６）。
【０１０６】
火炎乾燥したフラスコ中、アルゴン下で、ＢｏｃＧｌｕＯＭｅ（４、２６１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ、モレキュラーシーブ４Å上）に溶解し、Ｅｔ３Ｎ（２１０μＬ、１．５当量）を加えた。ＨＢＴＵ（３８０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を０℃で加え、その混合物を半時間撹拌した。その活性化された酸の溶液を、導管を通して、Ｅｔ３Ｎ（２１０μＬ、１．５当量）を含有するアミンＴＦＡ塩３（２２８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、０℃で移した。２時間後に、その混合物を室温まで温め、終夜撹拌した。揮発性成分を減圧下で除去し、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（６０：１→３０：１）を使って、残渣を精製することにより、生成物5を無色の油状物（３３０ｍｇ、９２％）として得た。中間体５をＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ（２０％）中、室温で終夜、脱保護することにより、減圧乾燥後に、Ｇｌｕ（４−アジド−ブチルアミド）ＯＭｅのＴＦＡ塩（６）を淡黄色油状物（７４０ｍｇ、定量的）として得た：１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） δ １０．１５−８．６０ （ｂｓ， ３Ｈ）， ６．７４ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝５．６Ｈｚ）， ４．１４ （ｄｄ， １Ｈ， Ｊ＝７．７および３．７Ｈｚ）， ３．８０ （ｓ， ３Ｈ）， ３．３１−３．２６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２５−３．１８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５９−２．４５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３８−２．２７ （ｍ， １Ｈ）， ２．２４−２．１３ （ｍ， １Ｈ）， １．６３−１．５０ （ｍ， ４Ｈ） ｐｐｍ；ＬＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝２５８．２３（Ｃ１０Ｈ１９Ｎ５Ｏ３の計算値：２５７．２９）。
【０１０７】
火炎乾燥したフラスコ中、アルゴン下で、Ｎ２−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチレン−１０−ホルミル−プテロイン酸７（１９８ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ、モレキュラーシーブ４Å上）に懸濁し、Ｅｔ３Ｎ（１０４μＬ、０．７５ｍｍｏｌ）を加えた。ＨＢＴＵ（３８０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を０℃で加え、その混合物を１時間撹拌した。その結果生じた橙色溶液に、０℃で、Ｅｔ３Ｎ（２１０μＬ、１．５ｍｍｏｌ）を含有するアミンＴＦＡ塩６（１８６ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（９ｍＬ）溶液を加えた。その結果生じた透明黄色溶液を０℃で１時間撹拌した後、室温まで温まらせた。減圧下で揮発性成分を除去し、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（１７：１→１０：１）を使って、残渣を精製することにより、生成物８を黄色固形物（２９０ｍｇ、９２％）として得た。アジド葉酸８（６３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を１Ｍ ＮａＯＨ（３ｍＬ）に溶解し、室温で終夜撹拌した。その結果生じた濁った溶液をＣｅｌｉｔｅ（商標）を通した濾過によって清澄化した。その黄色溶液のｐＨをＨＣｌ（最初は３７％ＨＣｌ、次に１Ｍ ＨＣｌ）の添加によってｐＨ約２に調節したところ、生成物の析出が起こった。その懸濁液を遠心分離（３５００ｒｐｍで１０分）し、淡黄色上清をデカントし、固形生成物を減圧下で乾燥して、γ−（４−アジド−ブチオニル）−葉酸アミドのペンタ塩酸塩９を黄色粉末（７５ｍｇ、定量的）として得た：ｍｐ＞２００℃；１Ｈ−ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ １２．２１−１１．９５ （ｂｓ， １Ｈ）， ８．６４ （ｓ， １Ｈ）， ８．１８ （ｄ， １Ｈ， Ｊ＝７．２Ｈｚ）， ７．８５ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝５．７Ｈｚ）， ７．６５ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ＝９．０Ｈｚ）， ７．００−６．８２ （ｂｓ， ２Ｈ）， ６．９３ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝６．２Ｈｚ）， ６．６４ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ＝９．０Ｈｚ）， ４．４９ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ＝５．９Ｈｚ）， ４．３２−４．２２ （ｍ， １Ｈ）， ３．２９ （ｔ， ２Ｈ， Ｊ＝６．８Ｈｚ）， ３．０３ （ｑ， ２Ｈ， Ｊ＝６．５Ｈｚ）， ３．０９−２．９６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１２−１．８３ （ｍ， ２Ｈ）， １．５５−１．４５ （ｍ， ２Ｈ）， １．４５−１．３５ （ｍ， ２Ｈ）（１個のＮＨは観測されなかった）ｐｐｍ； １３Ｃ−ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ １７３．８， １７１．５， １６６．３， １６０．８， １５６．６， １５３．８， １５０．８， １４８．７， １４８．５， １２８．９， １２７．９， １２１．３， １１１．２， ５２．２， ５０．３， ４５．９， ３７．９， ３２．０， ２６．６， ２６．３， ２５．７ ｐｐｍ；ＨＲ−ＭＳ：［Ｍ］＋＝５３７．２１２７（Ｃ２３Ｈ２７Ｎ１１Ｏ５の計算値：５３７．２１９７）；元素分析（括弧内はＣ２３Ｈ２７Ｎ１１Ｏ５（ＨＣｌ）５として算出した％値）Ｃ ３９．１６ （３８．３８）， Ｈ ４．０９ （４．４８）， Ｎ ２１．４３ （２１．４０）， Ｏ （１１．１１）、Ｃｌ （２４．６３）。
【０１０８】
（ｃ）１９Ｆ−クリック葉酸標準の合成
γ−（４−アジドブチル）−葉酸アミド（ペンタ塩酸塩、１４ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）をｔＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１、２ｍＬ）に懸濁し、６−［１９Ｆ］フルオロ−１−ヘキシン（４８ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、Ｃｕ（ＯＡｃ）２（０．８ｍｇ、２０モル％）およびアスコルビン酸ナトリウム（１．５ｍｇ、４０モル％）を加えた。その混合物を７５℃で３０分間撹拌したところ、ＨＰＬＣがアジド出発物質の完全な変換を示した。その混合物を室温まで冷却し、その結果生じた懸濁液を１Ｍ ＮａＯＨ数滴の添加によって溶解させた。ＨＣｌ（１Ｍ）を最終ｐＨが２になるように添加したところ、生成物の析出が起こった。その混合物を遠心分離（３５００ｒｐｍで１０分間）し、淡黄色上清をデカントした。固形物を乾燥することにより、褐色粉末（２０ｍｇ）を得た。その粗生成物を０．１Ｍ ＮａＯＨ（０．４ｍＬ）に溶解し、セミ分取用ＨＰＬＣで精製した。集めた生成物含有画分を減圧下で濃縮し、残渣をＮａＯＨ（１Ｍ、１ｍＬ）に溶解した。ＨＣｌ（１Ｍ）を最終ｐＨが２になるように添加したところ、生成物の析出が起こった。遠心分離（３５００ｒｐｍで１０分間）、淡黄色上清のデカンテーション、および固形物の乾燥により、最終生成物のペンタ塩酸塩を黄色粉末（９ｍｇ、５３％）として得た：１Ｈ−ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ １２．０２−１１．８５ （ｂｓ， １Ｈ）， ８．６６ （ｓ， １Ｈ）， ８．１９ （ｄ， １Ｈ， Ｊ＝７．８Ｈｚ）， ７．８６−７．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．６５ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ＝８．７Ｈｚ）， ７．３５−６．９５ （ブロードｍ， ２Ｈ）， ６．６５ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ＝８．７Ｈｚ）， ４．５３−４．４７ （ｍ， ３Ｈ）， ４．４０ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝５．８Ｈｚ）， ４．３２−４．２３ （ｍ， ３Ｈ）， ３．５４−３．３２ （ｂｓ， １Ｈ）， ３．０８−２．９７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６２ （ｔ， ２Ｈ， Ｊ＝６．６Ｈｚ）， ２．２２−２．１３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０９−２．００ （ｍ， １Ｈ）， １．９８−１．８８ （ｍ， １Ｈ）， １．７９−１．６０ （ｍ， ６Ｈ）， １．３６−１．２６ （ｍ， ２Ｈ） ｐｐｍ；１３Ｃ−ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ １７３．８， １７１．５， １６６．３， １６０．７， １５５．０， １５３．５， １５０．７， １４９．１， １４８．５， １４６．５， １２９．０， １２８．０， １２１．７， １２１．４， １１１．２， ８４．２， ８３．０， ５２．２， ４８．８， ４５．９， ３７．７， ３２．０， ２９．３， ２７．２， ２６．５， ２６．１， ２４．８， ２４．５ ｐｐｍ；ＬＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝６３８．２４（Ｃ２９Ｈ３６ＦＮ１１Ｏ５の計算値：６３７．６７）；元素分析（括弧内はＣ２９Ｈ３６Ｎ１１Ｏ５（ＨＣｌ）５として算出した％値）Ｃ ４２．７２ （４２．４８）， Ｈ ５．１８ （５．０４）， Ｎ １８．１７ （１８，７９）， Ｏ （９．７６）， Ｆ （２．３２）、Ｃｌ （２１．６２）。
【実施例２】
【０１０９】
１８Ｆ−クリック葉酸の合成
【化３３】
得られた乾燥［１８Ｆ］フルオリド−クリプテート錯体に、アセトニトリル１．２ｍｌ中の５−ヘキシン−１−イル＝ｐ−トシラート（２５μｌ）を加えた。反応容器を、ＰＴＦＥ管を介して、ヨウ化銅（Ｉ）（２．５ｍｇ）を含有する第２の反応容器に接続し、それをドライアイス／イソプロパノール冷却浴に入れた。反応容器１中の反応混合物を９５〜１００℃に加熱し、それと同時に１８Ｆ標識生成物６−［１８Ｆ］フルオロ−１−ヘキシンをアセトニトリルと共に第２反応容器へと共蒸留した（ｂｐ（６−［１８Ｆ］フルオロ−１−ヘキシン）＝１０６℃）。６−［１８Ｆ］フルオロ−１−ヘキシンは７０〜８５％の放射化学収率および９０〜９８％の放射化学純度で得られた。１２分後に、アセトニトリル約０．８〜１．０ｍｌ中の６−［１８Ｆ］フルオロ−１−ヘキシンを含有する第２反応容器を取り外し、室温まで温まらせた。この混合物に、水０．３ｍｌ、ＤＩＥＡ ２５μｌ、水０．１５ｍｌ中のアスコルビン酸ナトリウム２５ｍｇおよびＤＭＦ ０．２ｍｌ中のγ−（４−アジド−ブチオニル）−葉酸アミド（実施例１（ｂ）参照）を逐次、加えた。その混合物を８０℃に加熱し、２０分以内に６０℃まで冷ました。粗混合物の１８Ｆ−クリック−葉酸含有量は５５〜６５％だった。
【０１１０】
セミ分取用ＨＰＬＣ精製のために、その混合物をＨＰＬＣ溶媒２ｍｌで希釈した。分離は、ＲＰ１８カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（ｃ） Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８， ２５０×１０ｍｍ）で、以下の勾配を使って行った。溶媒Ａ＝１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム溶液、Ｂ＝メタノール、０〜３０分；Ａ：９０％→４０％、３０〜４０分：Ａ：４０％、４０〜４５分：Ａ：４０％→９０％。
【０１１１】
単離された１８Ｆ−クリック葉酸のＨＰＬＣ溶媒を減圧下および窒素気流下に１００℃で除去した。生成物を生理的リン酸緩衝溶液中に製剤化した。
【実施例３】
【０１１２】
１８Ｆ−クリック葉酸を使ったインビトロ、インビボおよびエクスビボ研究
１８Ｆ−クリック葉酸をインビトロ血漿安定性研究および肝ミクロソームを使った代謝産物研究に使用した。
【０１１３】
１８Ｆ−クリック葉酸を、振とう水槽中、３７℃で、ヒト血漿およびマウス血漿の両方と共にインキュベートした。異なる時点で一部を採取し、ＨＰＬＣで分析した。トレーサーは高い安定性を示した。０〜１２０分の期間中、脱フッ素または他の放射性分解産物は検出されなかった。
【０１１４】
ヒトおよびマウス肝ミクロソームを使った代謝産物研究を、０〜３０分の時間枠にわたって３７℃で行った。０、５、１５および３０分時点で一部を採取した。この研究は、１８Ｆ−クリック葉酸の放射性代謝産物または分解を、３０分にわたって示さなかった。
【０１１５】
１８Ｆ−クリック葉酸を、ＫＢ異種移植片腫瘍を保有する８匹のヌードマウスを用いるエクスビボ生体内分布研究に応用した。約２ＭＢｑの放射性トレーサーを各動物に注射した。遮断群（４匹）では、２００μｇの天然葉酸を放射性トレーサーの１０分前に注射した。注射の４５分後に動物を屠殺した。葉酸受容体陽性ＫＢ腫瘍は、９４％という特異的遮断率で、放射性トレーサーの高い特異的取り込みを示す。さらにまた、葉酸受容体を発現させることが知られている腎臓にも、７８％の特異的遮断で特異的取り込みが見出された。高い非特異的取込みが胆嚢、腸および糞便に見出されたことにより、放射性トレーサーの強い肝胆汁排泄が示される。
【０１１６】
図３は葉酸受容体陽性組織における１８Ｆ−クリック葉酸の高い特異的取込みを示す。
【０１１７】
１８Ｆ−クリック葉酸を使ったインビボＰＥＴイメージングをＫＢ異種移植片腫瘍を保有するヌードマウスで行った。約１１ＭＢｑの放射性トレーサーを各動物に注射した。遮断群では２００μｇの天然葉酸を放射性トレーサーの１０分前に注射した。ＰＥＴスキャンを注射後１５分から４５分まで取得した。
【０１１８】
１８Ｆ−クリック葉酸を使って、ＫＢ腫瘍をＰＥＴでイメージングすることができた。腫瘍対バックグラウンド比が低いため、ＫＢ腫瘍はほどほどにしか可視化されなかった。腹部領域（胆嚢、腸）における高い放射能蓄積が、放射性トレーサーの強い肝胆汁排泄を示す。
【０１１９】
［１８Ｆ］ＦＤＧを使ったＰＥＴイメージングを１８Ｆ−クリック葉酸研究の４日後に同じ動物で行った。約９ＭＢｑの［１８Ｆ］ＦＤＧを各動物に注射した。ＰＥＴスキャンを注射後３０分から６０分まで取得した。［１８Ｆ］ＦＤＧスキャンは葉酸受容体陽性ＫＢ腫瘍をイメージングすることができなかった。［１８Ｆ］ＦＤＧはＰＥＴ腫瘍イメージングでは最もよく使用される放射性トレーサーであるが、［１８Ｆ］ＦＤＧはＫＢ異種移植片腫瘍のイメージングには適さないことが知られている（Bettioら, J. Nucl. Med. 1998；47：1153-60）。
【０１２０】
図４に、１８Ｆ−クリック葉酸を使ったＰＥＴ画像（左側）を、［１８Ｆ］ＦＤＧを使ったＰＥＴ画像（右側）と対比して示す。矢印はＫＢ異種移植片腫瘍の位置を示す。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フッ素−１８がトリアゾールリンカーまたはテトラゾールリンカーを介して葉酸またはその誘導体に共有結合で連結される新規１８Ｆ葉酸放射性医薬品、それらの製造方法、そしてがん、炎症性疾患および自己免疫疾患の診断およびモニタリングならびにその治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
診断剤または治療剤などのエフェクター部分を送達するための細胞特異的ターゲティングは広く研究されている分野であり、非侵襲的診断および／または非侵襲的治療への医学的応用の開発につながっている。特に、γ線または光子または粒子線として電磁放射線を放射する放射性物質を利用する核医学的手順および処置では、特定組織を可視化し、疾患を検討評価しかつ／または治療的処置の効果をモニタリングするべく高いシグナル強度を達成するために、または他の例えば健常組織における放射線傷害のリスクを伴わずに特定患部に十分な線量の電離放射線を送達するべく高い放射線量を達成するために、標的とする細胞または組織におけるこれら放射性物質の選択的局在化が要求される。したがって、細胞特異的構造、特に腫瘍（すなわちがん）または炎症性疾患および自己免疫疾患の場合に存在する構造、例えばそれぞれの生物学的媒体によって特異的にターゲティングされうる受容体、抗原、ハプテンなどを決定し検討評価することは、極めて重要な関心事である。
【０００３】
葉酸受容体（ＦＲ）はこれらの構造の一つであると同定されている。ＦＲは高アフィニティー（ＫＤ＜１０−９Ｍ）膜結合型タンパク質である。正常な組織および器官では、ＦＲ発現はほんのわずかな器官（例えば腎臓、肺、脈絡叢、および胎盤）に強く制限され、それらの器官では、発現が主に上皮細胞の管腔面で起こるので、循環中の葉酸が供されることはない。ＦＲ−アルファは、広範囲にわたるさまざまな特定細胞タイプ、例えば上皮腫瘍（例えば卵巣、子宮頚部、子宮内膜、乳房、結腸直腸、腎臓、肺、鼻咽頭）などで、しばしば過剰発現され、一方、ＦＲ−ベータは白血病細胞でしばしば過剰発現される（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の約７０％はＦＲ−ベータ陽性である）。したがって、これらはどちらも、選択的腫瘍ターゲティングのための貴重な腫瘍マーカーとして使用することができる（非特許文献１：ElnakatおよびRatnam, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1067-84）。また、慢性関節リウマチと診断された患者における活性化滑膜マクロファージが機能的に活性なＦＲ−ベータを持つ（しかし休止滑膜マクロファージは持たない）ことも、最近になって発見されている（非特許文献２：Nakashima-Matsushitaら, Arthritis & Rheumatism, 1999, 42(8): 1609-16）。したがって、関節炎関節では活性化マクロファージを葉酸コンジュゲートでターゲティングすることができ、これは、慢性関節リウマチの診断および処置への可能性を切り開く特性である（非特許文献３：Paulosら, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1205-17）。
【０００４】
したがって、ベンゾイルアミノ部分を介してグルタミン酸にコンジュゲートされたプテリジン骨格に基づく葉酸とその誘導体は、葉酸受容体を保有する細胞集団に治療剤および／または診断剤を送達するためのターゲティング剤として、正常細胞との比較でそのような細胞における治療剤および／または診断剤の選択的濃縮を達成するために、過去１５年間にわたって徹底的に研究されてきた。
【０００５】
例えば葉酸放射性医薬品（非特許文献４：LeamonおよびLow, Drug Discov. Today 2001; 6:44-51；特許文献１：米国特許第4,276,280号明細書）、フッ素化葉酸化学療法剤（特許文献２：米国特許第 4,628,090号明細書）、化学療法剤との葉酸コンジュゲート（非特許文献５：LeamonおよびReddy, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1127-41；非特許文献６：Leamonら, Bioconjugate Chem. 2005; 16:803-11）、タンパク質およびタンパク質毒素との葉酸コンジュゲート（非特許文献７：Wardら, J. Drug Target. 2000; 8:119-23；非特許文献８：Leamonら, J. Biol. Chem. 1993; 268:24847-54；非特許文献９：LeamonおよびLow, J. Drug Target. 1994; 2:101-12）、アンチセンスオリゴヌクレオチドとの葉酸コンジュゲート（非特許文献１０：Liら, Pharm. Res. 1998; 15:1540-45；非特許文献１１：ZhaoおよびLee, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1193-204）、リポソームとの葉酸コンジュゲート（非特許文献１２：LeeおよびLow, Biochim. Biophys. Acta-Biomembr. 1995; 1233:134-44；非特許文献１３：Gabizonら, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1177-92）、ハプテン分子との葉酸コンジュゲート（非特許文献１４：Paulosら, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1205-17）、ＭＲＩ造影剤との葉酸コンジュゲート（非特許文献１５：Kondaら, Magn. Reson. Mat. Phys. Biol. Med. 2001; 12:104-13）など、さまざまな葉酸誘導体および葉酸コンジュゲートが知られており、（前）臨床的に評価されている。通例、これらの誘導体およびコンジュゲートは全て、既知のカルボン酸カップリング方法に適している葉酸のグルタミン酸部分で修飾されている。
【０００６】
葉酸放射性医薬品は、特に、改良されたがん、炎症性疾患および自己免疫疾患の診断、ならびにその治療の有効性の評価には、極めて有用である。これには、処置応答の検討評価および／または予測が含まれ、したがって照射線量測定の改良が含まれうる。当技術分野ではラジオイメージングに適した典型的可視化技法が知られており、例えば陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、プラナーイメージングまたは単光子放射型コンピュータ断層（ＳＰＥＣＴ）イメージング、ガンマカメラ、シンチレーションなどがある。
【０００７】
ＰＥＴとＳＰＥＣＴはどちらも、選択したターゲット部位をイメージングし、マッピングし、その活性を測定するために、放射性トレーサーを使用する。しかし、ＰＥＴが近接したサイクロトロンを必要とする陽電子放出核種を使用するのに対して、ＳＰＥＣＴはジェネレータシステムで入手することができる単光子放出核種を使用し、これにより、その使用がより便利になりうる。しかしながら、ＳＰＥＣＴはＰＥＴより感度が低く、数少ないアプローチを除くと、定量方法を欠いている。ＰＥＴの場合は、陽電子消滅が２本の５１１ｋｅＶガンマ線をもたらし、それが充実した定量方法の基礎になっている。したがってＰＥＴは、脳および他の器官におけるリガンドまたは代謝基質の取り込みおよびアフィニティーを検討評価するための最も洗練された機能イメージング技術の一つであり、それゆえに代謝活性に基づくイメージングの手段になる。これは、例えば陽電子放出同位体を対象に投与することによって達成され、それが放射性崩壊を起こす際に、陽電子／電子消滅によってもたらされるガンマ線がＰＥＴスキャナーによって検出される。
【０００８】
ＰＥＴに有用な適切な同位体を選択する際に考慮する必要がある因子には、患者への投与に先だって、場合によっては薬学的に許容できる担体に、診断用組成物を調製することを可能にするのに十分な、その陽電子放出同位体の半減期、およびＰＥＴスキャンによる体外測定を可能とするに足りる活性を与えるのに十分な残留半減期が含まれる。さらにまた、適切な同位体は、不必要な放射線への患者曝露を制限するために、十分に短い半減期を持つべきでもある。通例、ＰＥＴ用の適切な放射性医薬品はガリウムまたは銅などの金属同位体に基づきうる。しかし、これら二つはその金属の捕捉にキレーターを必要し、それが立体的および化学的性質に影響を及ぼしうる。もう一つの選択肢として、放射性医薬品は、最小限の構造変化をもたらす、共有結合で連結された同位体に基づくこともできる。共有結合による取付けに使用される、ＰＥＴスキャニングに適した放射性核種は、典型的には、１１Ｃ（約２０分）、１３Ｎ（約１０分）、１５Ｏ（約２分）、１８Ｆ（約１１０分）など、短い半減期を持つ同位体である。
【０００９】
現在までに、キレートベースの葉酸放射性医薬品がいくつか合成され、葉酸受容体陽性腫瘍をイメージングするための診断剤として、成功裏に評価されている。最も広く研究された誘導体は、ＳＰＥＣＴ用に１１１Ｉｎおよび９９ｍＴｃで標識されるか（非特許文献１６：Siegelら, J. Nucl. Med. 2003, 44:700；非特許文献１７：Muellerら, J. Organomet. Chem. 2004, 689:4712）、PET用に68Gaで標識された（非特許文献１８：Mathiasら, Nucl. Med. Biol. 2003, 30(7):725）。しかし、上記はいずれも適切なキレート剤を必要とし、それは通例、葉酸にそのグルタミン酸部分を介して連結される。
【００１０】
したがって、共有結合で連結された同位体を持つ葉酸放射性医薬品は、大いに興味が持たれるだろう。特に１８Ｆ標識葉酸放射性医薬品は、上記の考慮事項を全て満たすであろうそのイメージング特性ゆえに、ＰＥＴイメージングに最も適しているだろう。他の適切な放射性核種（１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ）と比較して、１８Ｆは、その半減期が約１１０分と長く、しかも最も低い陽電子エネルギーを持つ陽電子を放出して崩壊し、それが高分解能ＰＥＴにおける最も鮮明なイメージを可能にするので、極めて有用である。さらにまた、１８Ｆの長い半減期が、より複雑な合成と、放射化学施設を持たないＰＥＴセンターへのサテライト供給も可能にする。
【００１１】
しかし、葉酸の構造は１８Ｆによる直接的な放射標識には適していない。したがって今までのところ、文献に報告された１８Ｆ標識葉酸誘導体は極めてわずかしかない（非特許文献１９：Bettioら, J. Nucl. Med., 2006, 47(7), 1153；特許文献３：国際特許公開第2006/071754号パンフレット）。その上、現在報告されている放射合成は時間がかかり、５％未満という低い放射化学収率しか与えない（非特許文献２０：Bettioら, J. Nucl. Med., 2006, 47(7), 1153）。したがって、現在知られている１８Ｆ標識葉酸またはその誘導体では、がん、炎症性疾患および自己免疫疾患の診断および処置を改良するための腫瘍の代謝イメージングに適した特異的放射性医薬品のニーズを満たすことができない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】米国特許第4,276,280号明細書
【特許文献２】米国特許第4,628,090号明細書
【特許文献３】国際特許公開第2006/071754号パンフレット
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】ElnakatおよびRatnam, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1067-84
【非特許文献２】Nakashima-Matsushitaら, Arthritis & Rheumatism, 1999, 42(8): 1609-16
【非特許文献３】非特許文献３：Paulosら, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1205-17
【非特許文献４】LeamonおよびLow, Drug Discov. Today 2001; 6:44-51
【非特許文献５】LeamonおよびReddy, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1127-41
【非特許文献６】Leamonら, Bioconjugate Chem. 2005; 16:803-11
【非特許文献７】Wardら, J. Drug Target. 2000; 8:119-23
【非特許文献８】Leamonら, J. Biol. Chem. 1993; 268:24847-54
【非特許文献９】LeamonおよびLow, J. Drug Target. 1994; 2:101-12
【非特許文献１０】Liら, Pharm. Res. 1998; 15:1540-45
【非特許文献１１】ZhaoおよびLee, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1193-204
【非特許文献１２】LeeおよびLow, Biochim. Biophys. Acta-Biomembr. 1995; 1233:134-44
【非特許文献１３】Gabizonら, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1177-92
【非特許文献１４】Paulosら, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1205-17
【非特許文献１５】Kondaら, Magn. Reson. Mat. Phys. Biol. Med. 2001; 12:104-13
【非特許文献１６】Siegelら, J. Nucl. Med. 2003, 44:700
【非特許文献１７】Muellerら, J. Organomet. Chem. 2004, 689:4712
【非特許文献１８】Mathiasら, Nucl. Med. Biol. 2003, 30(7):725
【非特許文献１９】Bettioら, J. Nucl. Med., 2006, 47(7), 1153；WO 2006/071754
【非特許文献２０】Bettioら, J. Nucl. Med., 2006, 47(7), 1153
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本出願人は、フッ素−１８がトリアゾールリンカーまたはテトラゾールリンカーを介して葉酸またはその誘導体に、例えば葉酸のグルタミン酸官能基などに連結される、新規１８Ｆ標識葉酸放射性医薬品を製造するための高効率な汎用的方法を、ここに見出した。予備的インビトロ研究では、ＦＲ陽性腫瘍の強力な診断剤としてのそれらの適性が示唆された。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、第１の態様において、フッ素−１８がトリアゾールリンカーまたはテトラゾールリンカーを介して葉酸またはその誘導体に、例えば葉酸またはその誘導体のグルタミン酸官能基に連結される、新規１８Ｆ−葉酸放射性医薬品（以下、本発明の化合物ともいう）に関する。
【００１６】
ある具体的実施形態において、新規葉酸放射性医薬品は式Ｉの化合物である：
【化１】
［式中、
Ｐは葉酸またはその誘導体であり、
Ｓ１、Ｓ２は、互いに独立して、単結合またはスペーサーであり、かつ
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］。
【００１７】
好ましくは、Ｓ１およびＳ２は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈもしくは−ＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、または−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＮＯ２、−ＣＯＲ’もしくは−ＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す。
【００１８】
より具体的には、本発明は、式ＩＩを持つ化合物に関する：
【化２】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および(Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ)カルボニル（式中、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５はＨ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６、Ｒ７は、互いに独立して、直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）、または式ＩＩＩの基：
【化３】
［式中、Ｓ１およびＳ２は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、かつ
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］
であり（ただし、Ｒ６およびＲ７の一方は式ＩＩＩの基であるものとする）、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を持つ］。
【００１９】
さらにもう一つの具体的実施形態において、本発明は式ＩＶの化合物を包含する：
【化４】
［式中、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であるか、または式Ｖの基：
【化５】
［式中、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表し（ただし、二つのヘテロ原子が互いに隣接することはないものとする）、
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］
であり、かつ
Ｘ１〜Ｘ５、Ｒ１〜Ｒ６、ｍ、ｐおよびｑは、上に定義した通りである。
ただし、Ｒ６が式ＩＩＩの基であるか、またはＲ８およびＲ９の一方が式Ｖの基であるものとする］。
【００２０】
さらにもう一つの態様において、本発明はそれらの製造方法に関する。より具体的には、本発明の化合物は、アジドとアルキンまたはアルキン代替物、例えばニトリルとの１，３−双極子付加環化反応を使って、高い収率で得ることができる。
【００２１】
もう一つの態様において、本発明は本発明化合物の医薬組成物に関する。
【００２２】
さらにもう一つの態様において、本発明は、インビトロまたはインビボでの、がん、炎症性疾患および自己免疫疾患の診断ならびにその治療のモニタリングにおける使用に関する。
【００２３】
ある実施形態において、本発明は、葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団を画像診断するための本発明化合物の使用に関する。
【００２４】
より具体的には、本発明は、葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団を画像診断するための方法を包含し、これには例えば、組織試料中の、葉酸受容体を発現させる細胞、例えば腫瘍細胞または活性化マクロファージを、インビトロ検出するための方法が含まれる。そのような方法はインビボでも行うことができる。
【００２５】
したがって、さらにもう一つの実施形態において、本発明は、がん、炎症性疾患および自己免疫疾患の画像診断および／またはその治療のモニタリングを必要とする対象への便利で効果的な投与のための、本発明化合物の使用に関する。本発明の方法の対象は、好ましくは哺乳動物、例えば動物またはヒト、好ましくはヒトである。
【００２６】
そのような本発明の方法は、がん、炎症性疾患および自己免疫疾患を診断または治療するための他の任意の方法、例えば既に開発されている他の診断および／または治療剤を使用する方法、ならびにＸ線コンピュータ断層撮影法（ＣＴ）、磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）、機能的磁気共鳴イメージング（ｆＭＲＩ）、単光子放射型コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）、光学イメージング、および超音波を利用する方法などと組み合わせて、実施することができる。
【００２７】
本発明の他の特徴および利点は、以下に記載する本発明の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかになるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は、１８Ｆ−クリック（Click）葉酸（γ−（４−（４−（４−［１８Ｆ］フルオロブチル）−１，２，３−トリアゾール−１−イル）ブチル）葉酸アミドの合成をを示す。
【図２】図２は、γ−（４−アジド−ブチオニル）−葉酸アミドの合成を示す。
【図３】図３は、１８Ｆ−クリック葉酸を使ったエクスビボ生体内分布研究によって示される葉酸受容体陽性組織における特異的取り込みを示す。
【図４】図４は、［１８Ｆ］ＦＤＧを使ったＰＥＴイメージと比較した、１８Ｆ−クリック葉酸を使ったＰＥＴイメージを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本発明は、第１の態様において、フッ素−１８がトリアゾールリンカーまたはテトラゾールリンカーを介して葉酸またはその誘導体に、例えば葉酸のグルタミン酸官能基に連結される、新規１８Ｆ−葉酸放射性医薬品（以下、本発明の化合物ともいう）に関する。
【００３０】
本明細書で使用する用語「葉酸」は、以下に定義する基Ｓ１をパラ位に保持するアミノベンゾイル部分に連結された縮合ピリミジン複素環に基づく化合物を含む。本明細書にいう「縮合ピリミジン複素環」には、さらなる５員または６員複素環と縮合したピリミジン、例えばプテリジンまたはピロロピリミジン二環が包含される。本明細書にいう葉酸の好ましい代表例は、葉酸骨格、すなわちプテロイル-グルタミン酸またはＮ−［４（プテリジン−６−イルメチルアミノ）ベンゾイル］−グルタミン酸）、およびその誘導体に基づき、これには、適宜置換された葉酸、フォリン酸、プテロポリグルタミン酸、および葉酸受容体結合性プテリジン類、例えばテトラヒドロプテリン類、ジヒドロ葉酸類、テトラヒドロ葉酸類、ならびにそれらのデアザおよびジデアザ類似体が含まれる。葉酸は本発明の化合物に使用される好ましい基本構造である。用語「デアザ」および「ジデアザ」類似体とは、天然葉酸構造中の１個または２個の窒素原子の代わりに炭素原子を持つ、当技術分野で認識されている類似体を指す。例えばデアザ類似体には、１−デアザ、３−デアザ、５−デアザ、８−デアザ、および１０−デアザ類似体が含まれる。ジデアザ類似体には、例えば１，５−ジデアザ、５，１０−ジデアザ、８，１０−ジデアザ、および５，８−ジデアザ類似体が含まれる。好ましいデアザ類似体化合物には、Ｎ−［４−［２−［（６Ｒ）−２−アミノ−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−４−オキソピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−６−イル］エチル］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸（ロメトレキソール）およびＮ−［４−［１−［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］プロピル］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸（エダトレキセート）が含まれる。
【００３１】
より具体的には、新規葉酸放射性医薬品は式Ｉの化合物である：
【化６】
［式中、
Ｐは葉酸またはその誘導体であり、
Ｓ１、Ｓ２は、互いに独立して、単結合またはスペーサーであり、かつ
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］。
【００３２】
好ましくは、Ｓ１およびＳ２は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す。
【００３３】
もう一つの具体的実施形態では、新規葉酸放射性医薬品が式ＩＩの化合物である：
【化７】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル（式中、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５はＨ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６、Ｒ７は、互いに独立して、直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）、または式ＩＩＩの基：
【化８】
［式中、Ｓ１およびＳ２は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、かつ
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］
であり（ただし、Ｒ６およびＲ７の一方は式ＩＩＩの基であるものとする）、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を持つ］。
【００３４】
好ましい実施形態では、Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、Ｒ７が式ＩＩＩの基である。
【００３５】
もう一つの好ましい実施形態では、Ｒ７がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、Ｒ６が式ＩＩＩの基である。
【００３６】
略号「Ｎ」および「Ｃ」は、考えうる全ての飽和度を表すと理解される。すなわち、Ｎは−ＮＨ−および−Ｎ＝結合を包含し、Ｃは−ＣＨ２−および−ＣＨ＝結合を包含する。
【００３７】
さらに、（Ｈ）ｑは表示した環上（すなわちＸ３、Ｃ６、Ｃ７およびＸ４上）の全てのＨ置換基を表すと理解される。例えば、ｑ＝５は完全飽和無置換類似体（Ｘ３＝Ｘ４＝Ｎ、ｐ＝０）を表し、ｑ＝７は完全飽和無置換５，８−ジデアザ類似体（Ｘ３＝Ｘ４＝Ｃ、ｐ＝０）を表し、ｑ＝１はＸ３＝Ｘ４＝Ｎ、ｐ＝０の完全不飽和類似体を表す。
【００３８】
Ｓ１は、好ましくは、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１８アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、より好ましくは、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１８アルキル（これは無置換であるか、少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、または無置換５員もしくは６員芳香環で置き換えられてもよい。
【００３９】
好ましい実施形態では、Ｓ１が単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい。
【００４０】
もう一つの好ましい実施形態において、Ｓ１はアミノ酸、すなわちアミノ基（例えばＮＨ２またはＮＨ３＋）とカルボン酸基（例えばＣＯＯＨまたはＣＯＯ-）の両方を持つ化合物を表しうる。ある具体的実施形態において、アミノ酸は、α−アミノ酸、β−アミノ酸、Ｄ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸であることができる。アミノ酸は天然アミノ酸（例えばアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、またはヒスチジンなど）であってもよいし、またはその誘導体であってもよい。誘導体の例には、適宜置換されたアミノ酸、例えばＣＮ、Ｈａｌ、および／またはＮＯ２から選択される一つ以上の置換基を持つものなどがある。アミノ酸には、他の任意の非天然アミノ酸、例えばノルロイシン、ノルバリン、Ｌ−またはＤ−ナフトアラニン（naphthalanine）、オルニチン、ホモアルギニン、その他、ペプチド技術分野で周知であるものなどを含めることもできる（例えばM. Bodanzsky「Principles of Peptide Synthesis」改訂第1版および改訂第2版、Springer-Verlag、ニューヨーク州ニューヨーク、1984および1993、ならびにStewartおよびYoung「Solid Phase Peptide Synthesis」第2版、Pierce Chemical Co.、イリノイ州ロックフォード、1984を参照されたい；どちらの文献も参照により本明細書に組み込まれる）。アミノ酸およびアミノ酸類似体／誘導体は商業的に購入するか（Sigma Chemical Co.；Advanced Chemtech）、当技術分野で知られる方法を使って合成することができる。もう一つの具体的実施形態では、アミノ酸は、複数の同じアミノ酸または異なるアミノ酸（上に定義したもの）が共有結合で連結されている（すなわち従来のペプチド結合または他の結合を介して連結されている）ポリアミノ酸（ポリペプチドともいう）の一部であることもできる。好ましいアミノ酸には、例えばグルタミン酸、アスパラギン酸、グルタミン、アスパルチン（aspartine）、リジン、アルギニン、システイン、およびその誘導体、などが含まれ、好ましいポリアミノ酸には、ホモポリマー、その各ホモポリマー（すなわち、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸など）が含まれる。最も好ましいのは、適宜置換されたアスパラギン酸およびグルタミン酸である。
【００４１】
Ｓ２は、好ましくは、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）であり、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、より好ましくは、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）である。
【００４２】
最も好ましくは、Ｓ２は単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルである。
【００４３】
上に示した通り、本明細書にいう葉酸の好ましい代表例は、Ｓ１がグルタミン酸残基である葉酸骨格およびその誘導体に基づく。したがって、もう一つの具体的実施形態では、新規葉酸放射性医薬品が式ＩＶの化合物である：
【化９】
［式中、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、-Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であるか、または式Ｖの基：
【化１０】
［式中、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］
であり、かつ
Ｘ１〜Ｘ５、Ｒ１〜Ｒ６、ｍ、ｐおよびｑは、式ＩＩの化合物および後述の好ましい実施形態に従って定義する通りである。
ただし、Ｒ６が式ＩＩＩの基であるか、またはＲ８およびＲ９の一方が式Ｖの基であるものとする］。
【００４４】
Ｓ２およびＳ３は、好ましくは、互いに独立して、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す）であり、より好ましくは、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）である。
【００４５】
最も好ましくは、Ｓ２およびＳ３が、互いに独立して、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルである。
【００４６】
Ａｒ１は、式Ｖ−ａおよびＶ−ｂのトリアゾールまたはテトラゾール：
【化１１】
［式中、点線はスペーサー基への連結部位を表し、かつ
Ｚ１〜Ｚ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであって、全てのＮの和が３または４であるようになっている］
であり、好ましくは式Ｖ−ｃ、Ｖ−ｄ、およびＶ−ｅから選択される：
【化１２】
［式中、点線はスペーサー基への連結部位を表し、Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）であり、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す］。
【００４７】
ある具体的実施形態では、Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、Ｒ８およびＲ９の一方が式Ｖの基である。
【００４８】
もう一つの具体的実施形態では、Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、もしくは基Ｒ５、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、かつＲ９が式Ｖの基である。
【００４９】
さらにもう一つの具体的実施形態では、Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、Ｒ９がＨであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であり、かつＲ８が式Ｖの基である。
【００５０】
さらにもう一つの具体的実施形態では、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、かつＲ６は式Ｖの基である。
【００５１】
したがって、もう一つの具体的実施形態では、新規葉酸放射性医薬品が、式ＶＩ、ＶＩａまたはＶＩｂの化合物である：
【化１３】
【化１４】
【化１５】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ６はＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールであり、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を持つ］。
【００５２】
Ｓ２およびＳ３は、好ましくは、互いに独立して、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す）であり、より好ましくは、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）である。
【００５３】
最も好ましくは、Ｓ２およびＳ３は、互いに独立して、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルである。
【００５４】
さらにもう一つの具体的実施形態では、新規葉酸放射性医薬品が式ＶＩＩａ〜ＶＩＩｆまたはＶＩＩＩａ〜ＶＩＩＩｆの化合物である：
【化１６】
【化１７】
【化１８】
【化１９】
【化２０】
【化２１】
【化２２】
【化２３】
【化２４】
【化２５】
【化２６】
【化２７】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ６はＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、
Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）であり、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表し、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を持つ］。
【００５５】
上に定義したさらなる好ましい実施形態は、式ＶＩ〜ＶＩＩＩの化合物にも適用される。
【００５６】
好ましくは、Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、アルキル、−ＯＲ５、−ＮＨＲ’であることができ、より好ましくは、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’であることができる（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）。
【００５７】
好ましくは、Ｒ３はＨ、ホルミル、Ｃ１−Ｃ１２アルキルまたはＣ１−Ｃ１２アルカノイルである。
【００５８】
好ましくは、Ｒ４はＨ、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、またはＣ１−Ｃ１２アルカノイルである。
【００５９】
好ましくは、Ｒ５はＨ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル、より好ましくは、ＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルである。
【００６０】
好ましくは、Ｒ６はＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、より好ましくはＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、またはＣ１−Ｃ８アルキルである。
【００６１】
本発明化合物の具体的実施形態には、例えば、
（ａ）Ｘ１〜Ｘ５がＮであり、Ｒ１がＮＹ１Ｙ２であり、Ｒ２がＯであり、Ｒ４がＹ３であり、ｍが１であり、ｐが０または１であり、かつｑが１または３である化合物、または
（ｂ）Ｘ１〜Ｘ５がＮであり、Ｒ１がＮＹ１Ｙ２であり、Ｒ２がＮＨ２であり、Ｒ４がＹ３であり、ｍが１であり、ｐが０であり、ｑが１である化合物、
が含まれる。
【００６２】
したがって、さらにもう一つの具体的実施形態において、本発明は、例えば式ＩＸ、ＩＸａ、ＸまたはＸａの化合物に関する：
【化２８】
【化２９】
【化３０】
【化３１】
［式中、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）から選択され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｙ３は、Ｈ、ホルミル、ニトロソ、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）から選択され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）であり、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表し、かつ
Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す］。
【００６３】
好ましくは、Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）である。
【００６４】
用語「アルキル」が単独でまたは組み合わされて使用される場合、この用語は、好ましくは、１〜１２個の炭素原子を含有する直鎖または分岐アルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、t-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシルなどを指す。より好ましいアルキル基は１〜８個、さらに好ましくは１〜４個の炭素原子を含有する。
【００６５】
本明細書で使用する用語「アルケニル」は、単独で、または他の基と組み合わされて、２〜１２個の炭素原子を含有する直鎖または分岐アルキル基、例えばメチレン、エチレン、プロピレン、イソプロピレン、ブチレン、t-ブチレン、ｓｅｃ−ブチレン、イソブチレン、アミレン、イソアミレン、ペンチレン、イソペンチレン、ヘキシレンなどを指す。好ましいアルケニル基は２〜６個の炭素原子を含有する。
【００６６】
本明細書で使用する用語「アルキニル」は、一つ以上の炭素-炭素三重結合を持つ炭素原子の線状鎖または分岐鎖を指す。好ましいアルキニル基は、２〜１２個、より好ましくは２〜６個の炭素原子を含有する。
【００６７】
本明細書で使用する用語「アルコキシ」は、酸素で置換された、上に定義したアルキル、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどを指す。
【００６８】
本明細書で使用する用語「アルカノイル」は、ホルミルを指すか、または末端がカルボニルで置換された、上に定義したアルキル、例えばアセチル、プロパノイル、ブタノイル、ペンタノイルなどを指す。
【００６９】
本明細書で使用する用語「アルキルアミノ」は、窒素で置換された、上に定義したアルキルを指し、モノアルキルアミノ、例えばメチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノなどと、ジアルキルアミノ、例えばジメチルアミノ、ジエチルアミノ、メチルプロピルアミノなどの両方を包含する。
【００７０】
本明細書で使用する用語「ハロ」は、任意の第１７族元素を指し、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、およびアスタチン（アスタチノ）を包含する。
【００７１】
さらにもう一つの態様において、本発明は、本発明の化合物を合成する方法を提供する。本出願人は、熱条件下または触媒の存在下で行われるアジドとアルキンまたはアルキン代替物との付加環化反応を含むプロセスによって、本発明の化合物が効果的に得られることを見出した。これらの反応は、ヒュスゲン（Huisgen）１，３−双極子付加環化反応（熱条件）およびクリック（Click）反応（触媒条件）として知られており、当技術分野において記載されている（KolbおよびSharpless, Drug Discovery Today 2003, 8, 1128；Kolbら, Angew. Chem. Int. Ed. 2001, 40, 2004；Rostovtsev, V. V.ら, Angew. Chem. Int. Ed. 2002, 41, 2596；US 2005/02222427；WO 06/116629）。より具体的には、Ａｒ１がトリアゾールである式Ｉの化合物は、アジドＲａ−Ｎ３とアルキンＲｂ−Ｃ≡Ｃ−Ｒｃとの付加環化反応によって得られ、Ａｒ１がテトラゾールである式Ｉの化合物は、アジドＲａ−Ｎ３とシアン化物Ｒｂ−Ｃ≡Ｎとの付加環化反応によって得られる。ここでは、可能性のある全ての組合せ、すなわちＲａが葉酸誘導体であり、かつＲｂが１８Ｆ標識基である組合せ、ならびにＲｂが葉酸誘導体であり、かつＲａが１８Ｆ標識基である組合せが考えられる。したがって、この反応のモジュール性および汎用性は、多種多様なリンカーを使って葉酸に放射性同位体をカップリングすることを可能にする。
【００７２】
ある具体的実施形態では、熱条件下で、すなわち１０〜２００℃の範囲、好ましくは１０〜１００℃の範囲の温度で、付加環化反応が行われる。
【００７３】
もう一つの実施形態では、遷移金属錯体などの触媒、例えばＲｕおよびＣｕ（Ｉ）の存在下で、付加環化反応が行われる。好ましい触媒は、Ｃｕ（Ｉ）塩、例えばＣｕ（Ｉ）塩化物、臭化物、ヨウ化物である。あるいは、Ｃｕ（ＩＩ）塩の系中（in situ）還元によって、Ｃｕ（Ｉ）を得ることもできる。この反応は、さまざまなプロトン性または非プロトン性溶媒中、例えばメタノール、エタノール、２−プロパノール、第３級ブタノール、ｎ−ブタノールおよび／もしくは水またはその緩衝溶液中、広範囲にわたる温度（例えば１０〜１００℃の温度、好ましくは室温）で、さまざまなｐＨ（例えば４〜１２）において、酸化的または還元的条件下で、他の官能基の存在下に、保護基を必要とすることなく行うことができる。
【００７４】
適当な条件を選択することは当業者には自明だろう（参照により本明細書に組み込まれるUS 2005/0222427およびそこで引用されている文献も参照されたい）。
【００７５】
付加環化反応用の１８Ｆ標識出発物質、すなわち１８Ｆ標識アルキン、アルキン代替物またはアジドは、適切な脱離基を持つ各アルキン、アルキン代替物またはアジドとの置換反応で得られる。アルキン上の脱離基は当技術分野で知られる任意の一般的脱離基であることができ、例えばハロゲン、ニトロ、ジアゾニウム塩、スルホン酸エステル（メシラート、トシラートを含む）、ペンタフルオロベンゾアートなどが挙げられる。通例、置換反応は、アセトニトリル、アセトン、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、N-メチルピロリジノン（ＮＭＰ）、ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）ならびにその混合物から選択される極性非プロトン性溶媒中で行われる。
【００７６】
したがって、ある模範的反応では、選択したアルキンまたはアルキン代替物であって適切な脱離基を備えたものを、例えば炭酸テトラブチルアンモニウムや、炭酸カリウムまたはシュウ酸カリウムと組み合わされたアミノポリエーテル類（例えばＫｒｙｐｔｏｆｉｘ（ｃ） ２．２．２）などといった相間移動触媒で活性化された［１８Ｆ］フルオリドを使って、標準的条件（例えばアセトニトリル、１００℃、１０〜１５分）での置換反応で標識した。その結果生じた［１８Ｆ］標識アルキンを、適切な溶媒と共に、選択した触媒（例えばＣｕ（Ｉ）Ｉ）へと共蒸留した。この混合物に、選択したアジド−葉酸または誘導体を標準的条件（例えばＤＭＦ、Ｈ２ＯおよびＤＩＰＥＡ中のアスコルビン酸Ｎａ、８０℃）で加えることにより、最終標識生成物を２５〜３５％のＲＣＹで得た。
【００７７】
あるいは、選択したアジドであって適切な脱離基を備えたものを、例えば炭酸テトラブチルアンモニウムや、炭酸カリウムまたはシュウ酸カリウムと組み合わされたアミノポリエーテル類（例えばＫｒｙｐｔｏｆｉｘ（ｃ） ２．２．２）などといった相間移動触媒で活性化された［１８Ｆ］フルオリドを使って標識することにより、［１８Ｆ］標識アジドを得て、次にそれを、標準的条件での１，３−双極子付加環化反応で、選択したアルキン置換葉酸または誘導体にカップリングした。
【００７８】
さらにもう一つの態様において、本発明は、画像診断を必要とする対象への便利で効果的な投与のための、本発明の葉酸放射性医薬品の使用を提供する。
【００７９】
したがって本発明は、葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団を画像診断するための方法であって、少なくとも一つの本発明の葉酸放射性医薬品を画像診断量で投与するステップ、および前記細胞または細胞集団の診断画像を取得するステップを含む方法を提供する。
【００８０】
そのようなイメージングは、インビトロまたはインビボで葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団に対して行うことができる。
【００８１】
したがって本発明は、組織試料中の葉酸受容体を発現させる細胞をインビトロ検出するための方法であって、前記組織試料を、少なくとも一つの本発明の葉酸放射性医薬品と、結合を起こさせてそのような結合をＰＥＴイメージングによって検出することができるように、有効な量ならびに十分な時間および条件で、接触させることを含む方法を提供する。
【００８２】
さらにもう一つの態様において、本発明は、がん、炎症性疾患および自己免疫疾患の画像診断および／またはその治療のモニタリングを必要とする対象への便利で効果的な投与のための、本発明の葉酸放射性医薬品の使用を提供する。
【００８３】
もう一つの態様において、本発明は、同時に診断および治療するための方法であって、その必要がある対象に、少なくとも一つの本発明の葉酸放射性医薬品を、診断有効量で、治療活性剤と組み合わせて投与するステップ、および処置の経過を追跡するために前記組織の診断画像を取得するステップを含む方法を提供する。
【００８４】
本発明の方法の対象は、好ましくは哺乳動物、例えば動物またはヒト、好ましくはヒトである。
【００８５】
投薬量は所望する効果の性質、例えば診断または治療の形態、処置の種類および頻度、診断装置、調製物の適用の形態、ならびに受容者の年齢、体重、栄養および状態、もしあれば同時処置の種類に左右される。
【００８６】
しかし、最も好ましい投薬量は、当業者には理解される通り、また当業者であれば甚だしい実験を行わずに決定することができるように、個々の対象に合わせて調整することができる。これには通例、標準用量の調節（例えば患者の体重が軽ければ用量の削減）を伴う。
【００８７】
処置は、最適量を下回る少量で開始し、最適な効果が達成されるように、それを増加させることができる。
【００８８】
ＰＥＴスキャナーでのイメージング操作は、放射性トレーサーの投与後、数分以内から２〜４時間後までに行われる。スケジュールは、イメージングターゲット、および放射性トレーサーの動態、ならびに所望する情報に左右される。
【００８９】
本発明の葉酸放射性医薬品の好ましい投与経路は、静脈内注射によるものである。
【００９０】
注射に適した形態として、本発明の上記葉酸放射性医薬品の滅菌水性溶液または分散系が挙げられる。通例、放射性医薬品は、生理緩衝溶液中に製剤化されるだろう。
【００９１】
葉酸放射性医薬品は、例えば限定するわけではないが、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどの抗細菌剤または抗真菌剤の添加など、当技術分野で認識されている任意の技法で滅菌することができる。
【００９２】
好ましくは、それらを投与前に滅菌濾過することにより、余分な滅菌剤の必要が排除される。
【００９３】
注射用溶液剤の場合、好ましい単位投薬量は約０．０１ｍＬ〜約１０ｍＬである。静脈内投与後は、所望であれば、投与された用量のうちの十分な量を選択した標的領域に蓄積させるために、放射標識試薬が対象に投与された後、数分以内から２〜４時間後までに、インビボの器官または腫瘍のイメージングを行うことができる。
【００９４】
本発明の葉酸放射性医薬品は、対象から採取した組織生検中の葉酸受容体を発現させる細胞のインビトロ検出にも使用することができる。したがって、さらにもう一つの実施形態において、本発明は、組織試料中の葉酸受容体を発現させる細胞（例えば腫瘍細胞）をインビトロ検出するための方法であって、前記組織試料を、本発明の葉酸放射性医薬品と、結合を起こさせてそのような結合をイメージング技法によって検出することができるように、有効な量ならびに十分な時間および条件で接触させることを含む方法を提供する。
【００９５】
試料は、当業者に知られている手法によって、例えば組織生検材料もしくは体液を収集することによって、または気管もしくは肺試料などを吸引することによって収集することができる。
【００９６】
試験される組織試料には、例えば腫瘍細胞、上皮細胞、腎臓、胃腸系または肝胆道系など、葉酸受容体を発現させる細胞を含有すると疑われる任意の組織が含まれる。試料は、顕微鏡による検査および観察を容易にするために、例えばミクロトームなどで薄切することができる。試料は、試料組織の組織学的品質を改良するために、本発明の葉酸放射性医薬品の一つとのインキュベーションの前または後に、適当な固定剤で固定することもできる。
【００９７】
本発明の葉酸放射性医薬品が細胞上の葉酸受容体に結合するのに十分な時間および条件には、標準的な組織培養条件が含まれる。すなわち、試料をインビトロで培養し、生理的媒質中で本発明の複合体または組成物の一つと共にインキュベートすることができる。そのような条件は当業者にはよく知られている。あるいは、試料を固定した後、等張緩衝液または生理的緩衝液中で本発明の葉酸放射性医薬品と共にインキュベートすることもできる。
【００９８】
どの応用でも、本発明の化合物を使用する場か、またはその近くで、本発明の化合物を製造することが便利である。
【００９９】
ここに開示し、特許請求する化合物および／または方法は全て、本開示を考慮すれば甚だしい実験を行わずに、製造および実行することができる。本発明の範囲から逸脱することなく本発明に変形を加えうることは、当業者には明白だろう。本明細書に記載する実施例は、例示を意図するものであって網羅的ではないので、決して、例示される実施例を本発明の限定であるとみなしてはならない。
【０１００】
実施例
材料と方法
赤外スペクトルは、Ｊａｓｃｏ ＦＴ／ＩＲ−６２００ ＡＴＲ−ＩＲで記録した。核磁気共鳴スペクトルは、対応する溶媒シグナルを内部標準として、Ｂｒｕｋｅｒ ４００ＭＨｚまたは５００ＭＨｚ分光計で記録した。化学シフトはテトラメチルシラン（０．００ｐｐｍ）を基準として百万分率（ｐｐｍ）で報告する。結合定数Ｊの値はヘルツ（Ｈｚ）で記載し、実験項では１Ｈ−ＮＭＲスペクトルの説明に以下の略号を使用する。一重線（ｓ）、二重線（ｄ）、三重線（ｔ）、多重線（ｍ）、二重線の二重線（ｄｄ）。複雑な多重線の化学シフトはその出現範囲として記載する。低分解能質量分析（ＬＲ−ＭＳ）はＭｉｃｒｏｍａｓｓ Ｑｕａｔｔｒｏ ｍｉｃｒｏ（商標）ＡＰＩ ＬＣ−ＥＳＩで記録した。
【０１０１】
水感受性反応は火炎乾燥したガラス器具中、アルゴン下で行った。反応は薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ、ＥＭ Ｓｃｉｅｎｃｅ ０．２５ｍｍ厚、プリコートシリカゲル６０Ｆ−２５４ガラス支持プレート上で実行）またはＨＰＬＣでモニターした。ＨＰＬＣは、Ｌ−７４００波長可変吸収検出器を装備したＭｅｒｃｋ−Ｈｉｔａｃｈｉ Ｌ−７０００システムで行った。分析用ＨＰＬＣは、ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）カラム（Ｃ１８、５μｍ、４．６×１５０ｍｍ、Ｗａｔｅｒｓ）で、以下の溶媒系を使って行った（１ｍＬ／分）：０．１％ＴＦＡ水溶液（溶媒Ａ）、アセトニトリル（溶媒Ｂ）、１ｍＬ／分；０−１分、９５％Ａ；１−１５分、９５→５％Ａ；１５−２０分、５％Ａ；２０→２２分、５→９５％Ａ；２２→２５分、９５％Ａ。セミ分取用ＨＰＬＣはＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）セミプレップカラム（Ｃ１８、５μｍ、１０×１５０ｍｍ、Ｗａｔｅｒｓ）、３ｍＬ／分、均一濃度のＮＨ４ＨＣＯ３（１０ｍＭ、８８％）／ＣＨ３ＣＮ（１２％）で行った。化学薬品は全て、別段の明示がない限り、供給されたものをそのまま使用した。
【０１０２】
ｎ．ｃ．ａ．［１８Ｆ］フルオリドの製造
ｎ．ｃ．ａ．［１８Ｆ］フルオリドはＣｙｃｌｏｎｅ１８／９サイクロトロン（ＩＢＡ、ベルギー）での１８Ｏ（ｐ，ｎ）１８Ｆ核反応によって製造した。９７％同位体濃縮された［１８Ｏ］水を、２．１ｍｌの液体ターゲットをつかって、１６ＭｅＶ陽子線で照射した。［１８Ｆ］フルオリド／［１８Ｏ］水溶液を、ターゲットから、マニピュレータを装備した合成ホットセルに、ヘリウム流を使って移した。
【０１０３】
５ｍｌの０．５Ｍ炭酸カリウム溶液と５ｍｌの水でプレコンディショニングしておいたアニオン交換カートリッジ（Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ａｃｃｅｌｌ Ｐｌｕｓ ＱＭＡ、Ｗａｔｅｒｓ ＡＧ）上に［１８Ｆ］フルオリド（約２０〜３０ＧＢｑ）を捕捉すると共に、［１８Ｏ］水を再利用するために回収した。アセトニトリル／水（４：１）１．５ｍｌ中の炭酸カリウム（２ｍｇ）とＫｒｙｐｔｏｆｉｘ（ｃ）２．２．２（１０ｍｇ）の溶液を使って、［１８Ｆ］フルオリドを、１０ｍｌ密封反応容器中に直接溶出させた。８５〜９０℃で減圧と窒素気流とによって溶媒を除去した。次に、１ｍｌの乾燥アセトニトリルを３回加え、蒸発乾固した。
【実施例１】
【０１０４】
１９Ｆ−クリック葉酸標準の合成
【化３２】
（ａ）６−［１９Ｆ］フルオロ−１-ヘキシンの合成
乾燥ＴＨＦ（１２ｍＬ）中の５−ヘキシン−１−イル＝ｐ−トシラート（３３０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）（van Hestら, J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 1282に記載された手法に従って５−ヘキシン−１−オールをトシル化することによって製造）、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）２．２．２（６２０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）およびＫＦ（９７ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を還流下で２０時間撹拌した。周囲圧で揮発性成分を分留することにより、６−［１９Ｆ］フルオロ−１−ヘキシンをＴＨＦ中の４２％溶液（２００ｍｇ、６２％）として得た：Ｂｐ：６５−７０℃／１気圧；１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） δ ４．５１ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝６．０Ｈｚ）， ４．４０ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝６．０Ｈｚ）， ２．２３ （ｄｔ， ２Ｈ， Ｊ＝７．６および２．８Ｈｚ）， １．９５ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝２．８Ｈｚ）， １．８０−１．７３ （ｍ， ２Ｈ）， １．６５−１．６１ （ｍ， ２Ｈ） ｐｐｍ。
【０１０５】
（ｂ）γ−（４−アジド−ブチオニル）−葉酸アミドの合成
符号については図2を参照されたい。
Ｎ−ＢＯＣ−アミノ−ブタン−アジド（２）を、モノ−ＢＯＣ−ジアミノブタン（１）から、Linkらが記載した手法（J. Am. Chem. Soc. 2004, 126, 10598）に従って製造した。ＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ（２０％）中、室温で、終夜、中間体２を脱保護することにより、減圧乾燥後に、４−アジド−ブタン−アミンのＴＦＡ塩（３）を無色の油状物（０．４４ｇ、９４％）として得た：１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） δ ４．５４ （ｂｓ， １Ｈ）， ３．２７ （ｔ， ２Ｈ， Ｊ＝６．５Ｈｚ）， ３．２５−３．１０ （ｍ， ２Ｈ）， １．６３−１．５０ （ｍ， ４Ｈ）， １．１４ （ｓ， ９Ｈ） ｐｐｍ；ＬＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝２１５．２１（Ｃ９Ｈ１８Ｎ４Ｏ２の計算値：２１４．２６）。
【０１０６】
火炎乾燥したフラスコ中、アルゴン下で、ＢｏｃＧｌｕＯＭｅ（４、２６１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ、モレキュラーシーブ４Å上）に溶解し、Ｅｔ３Ｎ（２１０μＬ、１．５当量）を加えた。ＨＢＴＵ（３８０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を０℃で加え、その混合物を半時間撹拌した。その活性化された酸の溶液を、導管を通して、Ｅｔ３Ｎ（２１０μＬ、１．５当量）を含有するアミンＴＦＡ塩３（２２８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、０℃で移した。２時間後に、その混合物を室温まで温め、終夜撹拌した。揮発性成分を減圧下で除去し、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（６０：１→３０：１）を使って、残渣を精製することにより、生成物5を無色の油状物（３３０ｍｇ、９２％）として得た。中間体５をＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ（２０％）中、室温で終夜、脱保護することにより、減圧乾燥後に、Ｇｌｕ（４−アジド−ブチルアミド）ＯＭｅのＴＦＡ塩（６）を淡黄色油状物（７４０ｍｇ、定量的）として得た：１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） δ １０．１５−８．６０ （ｂｓ， ３Ｈ）， ６．７４ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝５．６Ｈｚ）， ４．１４ （ｄｄ， １Ｈ， Ｊ＝７．７および３．７Ｈｚ）， ３．８０ （ｓ， ３Ｈ）， ３．３１−３．２６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２５−３．１８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５９−２．４５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３８−２．２７ （ｍ， １Ｈ）， ２．２４−２．１３ （ｍ， １Ｈ）， １．６３−１．５０ （ｍ， ４Ｈ） ｐｐｍ；ＬＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝２５８．２３（Ｃ１０Ｈ１９Ｎ５Ｏ３の計算値：２５７．２９）。
【０１０７】
火炎乾燥したフラスコ中、アルゴン下で、Ｎ２−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチレン−１０−ホルミル−プテロイン酸７（１９８ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ、モレキュラーシーブ４Å上）に懸濁し、Ｅｔ３Ｎ（１０４μＬ、０．７５ｍｍｏｌ）を加えた。ＨＢＴＵ（３８０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を０℃で加え、その混合物を１時間撹拌した。その結果生じた橙色溶液に、０℃で、Ｅｔ３Ｎ（２１０μＬ、１．５ｍｍｏｌ）を含有するアミンＴＦＡ塩６（１８６ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（９ｍＬ）溶液を加えた。その結果生じた透明黄色溶液を０℃で１時間撹拌した後、室温まで温まらせた。減圧下で揮発性成分を除去し、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（１７：１→１０：１）を使って、残渣を精製することにより、生成物８を黄色固形物（２９０ｍｇ、９２％）として得た。アジド葉酸８（６３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を１Ｍ ＮａＯＨ（３ｍＬ）に溶解し、室温で終夜撹拌した。その結果生じた濁った溶液をＣｅｌｉｔｅ（商標）を通した濾過によって清澄化した。その黄色溶液のｐＨをＨＣｌ（最初は３７％ＨＣｌ、次に１Ｍ ＨＣｌ）の添加によってｐＨ約２に調節したところ、生成物の析出が起こった。その懸濁液を遠心分離（３５００ｒｐｍで１０分）し、淡黄色上清をデカントし、固形生成物を減圧下で乾燥して、γ−（４−アジド−ブチオニル）−葉酸アミドのペンタ塩酸塩９を黄色粉末（７５ｍｇ、定量的）として得た：ｍｐ＞２００℃；１Ｈ−ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ １２．２１−１１．９５ （ｂｓ， １Ｈ）， ８．６４ （ｓ， １Ｈ）， ８．１８ （ｄ， １Ｈ， Ｊ＝７．２Ｈｚ）， ７．８５ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝５．７Ｈｚ）， ７．６５ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ＝９．０Ｈｚ）， ７．００−６．８２ （ｂｓ， ２Ｈ）， ６．９３ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝６．２Ｈｚ）， ６．６４ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ＝９．０Ｈｚ）， ４．４９ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ＝５．９Ｈｚ）， ４．３２−４．２２ （ｍ， １Ｈ）， ３．２９ （ｔ， ２Ｈ， Ｊ＝６．８Ｈｚ）， ３．０３ （ｑ， ２Ｈ， Ｊ＝６．５Ｈｚ）， ３．０９−２．９６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１２−１．８３ （ｍ， ２Ｈ）， １．５５−１．４５ （ｍ， ２Ｈ）， １．４５−１．３５ （ｍ， ２Ｈ）（１個のＮＨは観測されなかった）ｐｐｍ； １３Ｃ−ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ １７３．８， １７１．５， １６６．３， １６０．８， １５６．６， １５３．８， １５０．８， １４８．７， １４８．５， １２８．９， １２７．９， １２１．３， １１１．２， ５２．２， ５０．３， ４５．９， ３７．９， ３２．０， ２６．６， ２６．３， ２５．７ ｐｐｍ；ＨＲ−ＭＳ：［Ｍ］＋＝５３７．２１２７（Ｃ２３Ｈ２７Ｎ１１Ｏ５の計算値：５３７．２１９７）；元素分析（括弧内はＣ２３Ｈ２７Ｎ１１Ｏ５（ＨＣｌ）５として算出した％値）Ｃ ３９．１６ （３８．３８）， Ｈ ４．０９ （４．４８）， Ｎ ２１．４３ （２１．４０）， Ｏ （１１．１１）、Ｃｌ （２４．６３）。
【０１０８】
（ｃ）１９Ｆ−クリック葉酸標準の合成
γ−（４−アジドブチル）−葉酸アミド（ペンタ塩酸塩、１４ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）をｔＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１、２ｍＬ）に懸濁し、６−［１９Ｆ］フルオロ−１−ヘキシン（４８ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、Ｃｕ（ＯＡｃ）２（０．８ｍｇ、２０モル％）およびアスコルビン酸ナトリウム（１．５ｍｇ、４０モル％）を加えた。その混合物を７５℃で３０分間撹拌したところ、ＨＰＬＣがアジド出発物質の完全な変換を示した。その混合物を室温まで冷却し、その結果生じた懸濁液を１Ｍ ＮａＯＨ数滴の添加によって溶解させた。ＨＣｌ（１Ｍ）を最終ｐＨが２になるように添加したところ、生成物の析出が起こった。その混合物を遠心分離（３５００ｒｐｍで１０分間）し、淡黄色上清をデカントした。固形物を乾燥することにより、褐色粉末（２０ｍｇ）を得た。その粗生成物を０．１Ｍ ＮａＯＨ（０．４ｍＬ）に溶解し、セミ分取用ＨＰＬＣで精製した。集めた生成物含有画分を減圧下で濃縮し、残渣をＮａＯＨ（１Ｍ、１ｍＬ）に溶解した。ＨＣｌ（１Ｍ）を最終ｐＨが２になるように添加したところ、生成物の析出が起こった。遠心分離（３５００ｒｐｍで１０分間）、淡黄色上清のデカンテーション、および固形物の乾燥により、最終生成物のペンタ塩酸塩を黄色粉末（９ｍｇ、５３％）として得た：１Ｈ−ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ １２．０２−１１．８５ （ｂｓ， １Ｈ）， ８．６６ （ｓ， １Ｈ）， ８．１９ （ｄ， １Ｈ， Ｊ＝７．８Ｈｚ）， ７．８６−７．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．６５ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ＝８．７Ｈｚ）， ７．３５−６．９５ （ブロードｍ， ２Ｈ）， ６．６５ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ＝８．７Ｈｚ）， ４．５３−４．４７ （ｍ， ３Ｈ）， ４．４０ （ｔ， １Ｈ， Ｊ＝５．８Ｈｚ）， ４．３２−４．２３ （ｍ， ３Ｈ）， ３．５４−３．３２ （ｂｓ， １Ｈ）， ３．０８−２．９７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６２ （ｔ， ２Ｈ， Ｊ＝６．６Ｈｚ）， ２．２２−２．１３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０９−２．００ （ｍ， １Ｈ）， １．９８−１．８８ （ｍ， １Ｈ）， １．７９−１．６０ （ｍ， ６Ｈ）， １．３６−１．２６ （ｍ， ２Ｈ） ｐｐｍ；１３Ｃ−ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６） δ １７３．８， １７１．５， １６６．３， １６０．７， １５５．０， １５３．５， １５０．７， １４９．１， １４８．５， １４６．５， １２９．０， １２８．０， １２１．７， １２１．４， １１１．２， ８４．２， ８３．０， ５２．２， ４８．８， ４５．９， ３７．７， ３２．０， ２９．３， ２７．２， ２６．５， ２６．１， ２４．８， ２４．５ ｐｐｍ；ＬＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝６３８．２４（Ｃ２９Ｈ３６ＦＮ１１Ｏ５の計算値：６３７．６７）；元素分析（括弧内はＣ２９Ｈ３６Ｎ１１Ｏ５（ＨＣｌ）５として算出した％値）Ｃ ４２．７２ （４２．４８）， Ｈ ５．１８ （５．０４）， Ｎ １８．１７ （１８，７９）， Ｏ （９．７６）， Ｆ （２．３２）、Ｃｌ （２１．６２）。
【実施例２】
【０１０９】
１８Ｆ−クリック葉酸の合成
【化３３】
得られた乾燥［１８Ｆ］フルオリド−クリプテート錯体に、アセトニトリル１．２ｍｌ中の５−ヘキシン−１−イル＝ｐ−トシラート（２５μｌ）を加えた。反応容器を、ＰＴＦＥ管を介して、ヨウ化銅（Ｉ）（２．５ｍｇ）を含有する第２の反応容器に接続し、それをドライアイス／イソプロパノール冷却浴に入れた。反応容器１中の反応混合物を９５〜１００℃に加熱し、それと同時に１８Ｆ標識生成物６−［１８Ｆ］フルオロ−１−ヘキシンをアセトニトリルと共に第２反応容器へと共蒸留した（ｂｐ（６−［１８Ｆ］フルオロ−１−ヘキシン）＝１０６℃）。６−［１８Ｆ］フルオロ−１−ヘキシンは７０〜８５％の放射化学収率および９０〜９８％の放射化学純度で得られた。１２分後に、アセトニトリル約０．８〜１．０ｍｌ中の６−［１８Ｆ］フルオロ−１−ヘキシンを含有する第２反応容器を取り外し、室温まで温まらせた。この混合物に、水０．３ｍｌ、ＤＩＥＡ ２５μｌ、水０．１５ｍｌ中のアスコルビン酸ナトリウム２５ｍｇおよびＤＭＦ ０．２ｍｌ中のγ−（４−アジド−ブチオニル）−葉酸アミド（実施例１（ｂ）参照）を逐次、加えた。その混合物を８０℃に加熱し、２０分以内に６０℃まで冷ました。粗混合物の１８Ｆ−クリック−葉酸含有量は５５〜６５％だった。
【０１１０】
セミ分取用ＨＰＬＣ精製のために、その混合物をＨＰＬＣ溶媒２ｍｌで希釈した。分離は、ＲＰ１８カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（ｃ） Ｇｅｍｉｎｉ ５μ Ｃ１８， ２５０×１０ｍｍ）で、以下の勾配を使って行った。溶媒Ａ＝１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム溶液、Ｂ＝メタノール、０〜３０分；Ａ：９０％→４０％、３０〜４０分：Ａ：４０％、４０〜４５分：Ａ：４０％→９０％。
【０１１１】
単離された１８Ｆ−クリック葉酸のＨＰＬＣ溶媒を減圧下および窒素気流下に１００℃で除去した。生成物を生理的リン酸緩衝溶液中に製剤化した。
【実施例３】
【０１１２】
１８Ｆ−クリック葉酸を使ったインビトロ、インビボおよびエクスビボ研究
１８Ｆ−クリック葉酸をインビトロ血漿安定性研究および肝ミクロソームを使った代謝産物研究に使用した。
【０１１３】
１８Ｆ−クリック葉酸を、振とう水槽中、３７℃で、ヒト血漿およびマウス血漿の両方と共にインキュベートした。異なる時点で一部を採取し、ＨＰＬＣで分析した。トレーサーは高い安定性を示した。０〜１２０分の期間中、脱フッ素または他の放射性分解産物は検出されなかった。
【０１１４】
ヒトおよびマウス肝ミクロソームを使った代謝産物研究を、０〜３０分の時間枠にわたって３７℃で行った。０、５、１５および３０分時点で一部を採取した。この研究は、１８Ｆ−クリック葉酸の放射性代謝産物または分解を、３０分にわたって示さなかった。
【０１１５】
１８Ｆ−クリック葉酸を、ＫＢ異種移植片腫瘍を保有する８匹のヌードマウスを用いるエクスビボ生体内分布研究に応用した。約２ＭＢｑの放射性トレーサーを各動物に注射した。遮断群（４匹）では、２００μｇの天然葉酸を放射性トレーサーの１０分前に注射した。注射の４５分後に動物を屠殺した。葉酸受容体陽性ＫＢ腫瘍は、９４％という特異的遮断率で、放射性トレーサーの高い特異的取り込みを示す。さらにまた、葉酸受容体を発現させることが知られている腎臓にも、７８％の特異的遮断で特異的取り込みが見出された。高い非特異的取込みが胆嚢、腸および糞便に見出されたことにより、放射性トレーサーの強い肝胆汁排泄が示される。
【０１１６】
図３は葉酸受容体陽性組織における１８Ｆ−クリック葉酸の高い特異的取込みを示す。
【０１１７】
１８Ｆ−クリック葉酸を使ったインビボＰＥＴイメージングをＫＢ異種移植片腫瘍を保有するヌードマウスで行った。約１１ＭＢｑの放射性トレーサーを各動物に注射した。遮断群では２００μｇの天然葉酸を放射性トレーサーの１０分前に注射した。ＰＥＴスキャンを注射後１５分から４５分まで取得した。
【０１１８】
１８Ｆ−クリック葉酸を使って、ＫＢ腫瘍をＰＥＴでイメージングすることができた。腫瘍対バックグラウンド比が低いため、ＫＢ腫瘍はほどほどにしか可視化されなかった。腹部領域（胆嚢、腸）における高い放射能蓄積が、放射性トレーサーの強い肝胆汁排泄を示す。
【０１１９】
［１８Ｆ］ＦＤＧを使ったＰＥＴイメージングを１８Ｆ−クリック葉酸研究の４日後に同じ動物で行った。約９ＭＢｑの［１８Ｆ］ＦＤＧを各動物に注射した。ＰＥＴスキャンを注射後３０分から６０分まで取得した。［１８Ｆ］ＦＤＧスキャンは葉酸受容体陽性ＫＢ腫瘍をイメージングすることができなかった。［１８Ｆ］ＦＤＧはＰＥＴ腫瘍イメージングでは最もよく使用される放射性トレーサーであるが、［１８Ｆ］ＦＤＧはＫＢ異種移植片腫瘍のイメージングには適さないことが知られている（Bettioら, J. Nucl. Med. 1998；47：1153-60）。
【０１２０】
図４に、１８Ｆ−クリック葉酸を使ったＰＥＴ画像（左側）を、［１８Ｆ］ＦＤＧを使ったＰＥＴ画像（右側）と対比して示す。矢印はＫＢ異種移植片腫瘍の位置を示す。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化１】
［式中、
Ｐは葉酸またはその誘導体であり、
Ｓ１、Ｓ２は、互いに独立して、単結合またはスペーサーであり、かつ
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］。
【請求項２】
Ｓ１およびＳ２が、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、もしくは−ＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式ＩＩで表わされる、請求項１に記載の化合物：
【化２】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル（式中、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５はＨ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６、Ｒ７は、互いに独立して、直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）、または式ＩＩＩで表わされる基：
【化３】
［式中、Ｓ１およびＳ２は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、かつ
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］
であり（ただし、Ｒ６およびＲ７の一方は式ＩＩＩの基であるものとする）、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を有する］。
【請求項４】
Ｒ６が直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、かつＲ７が式ＩＩＩで表わされる基である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ７が直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、かつＲ６が式ＩＩＩで表わされる基である、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
Ｓ１が単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１８アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｓ２が単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）であり、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、より好ましくは、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）である、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
式ＩＶで表わされる化合物：
【化４】
［式中、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であるか、または式Ｖで表わされる基：
【化５】
［式中、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］
であり、かつ
Ｘ１〜Ｘ５、Ｒ１〜Ｒ６、ｍ、ｐおよびｑは、請求項３で定義した通りである。
ただし、Ｒ６が式ＩＩＩの基であるか、またはＲ８およびＲ９の少なくとも一方が式Ｖの基であるものとする］。
【請求項９】
Ｓ２およびＳ３が、互いに独立して、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す）であり、より好ましくは、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ａｒ１が式Ｖ−ｃ、Ｖ−ｄおよびＶ−ｅ：
【化６】
［式中、点線はスペーサー基への連結部位を表し、Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す）である］
から選択される、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、かつＲ８およびＲ９の少なくとも一方が式Ｖで表わされる基である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、Ｒ８がＨであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、ＨａｌもしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であり、かつＲ９が式Ｖで表わされる基である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、Ｒ９がＨであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、ＨａｌもしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であり、かつＲ８が式Ｖで表わされる基である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、ＨａｌもしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であり、かつＲ６が式Ｖで表わされる基である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１５】
式ＶＩ、ＶＩａまたはＶＩｂ：
【化７】
【化８】
【化９】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ６はＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールであり、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を有する］
で表わされる、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｓ２およびＳ３が、互いに独立して、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）である、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ａｒ１が式Ｖ−ｃ、Ｖ−ｄおよびＶ−ｅ：
【化１０】
［式中、点線はスペーサー基への連結部位を表し、Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す）である］
から選択される、請求項１５または１６に記載の化合物。
【請求項１８】
式ＶＩＩａ〜ＶＩＩｆまたはＶＩＩＩａ〜ＶＩＩＩｆで表わされる、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物：
【化１１】
【化１２】
【化１３】
【化１４】
【化１５】
【化１６】
【化１７】
【化１８】
【化１９】
【化２０】
【化２１】
【化２２】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ６はＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、
Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）であり、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表し、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を持つ］。
【請求項１９】
Ｒ１およびＲ２が、互いに独立して、Ｈ、アルキル、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）である、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ３がＨ、ホルミル、Ｃ１−Ｃ１２アルキルまたはＣ１−Ｃ１２アルカノイルである、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ４がＨ、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、またはＣ１−Ｃ１２アルカノイルである、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ５がＨ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルである、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ６がＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニルである、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４】
式ＩＸ、ＩＸａ、ＸまたはＸａ：
【化２３】
【化２４】
【化２５】
【化２６】
［式中、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）から選択され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｙ３は、Ｈ、ホルミル、ニトロソ、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）から選択され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す）であり、かつ
Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す］
で表わされる、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｓ２およびＳ３が、互いに独立して、直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ８アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）である、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
（ａ）アジド誘導化葉酸を１８Ｆ標識アルキンまたはアルキン代替物と１，３−付加環化反応で反応させるステップ、および（ｂ）化合物を単離するステップを含む、請求項１に記載の化合物を製造するための方法。
【請求項２７】
１８Ｆ標識アルキンまたはアルキン代替物が、１８Ｆ標識アルキンまたはアルキン代替物を得るために脱離基を備えたアルキンまたはアルキン代替物を［１８Ｆ］フルオリドと反応させることによる置換反応で製造される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
（ａ）アルキンまたはアルキン代替物で誘導体化された葉酸を１８Ｆ標識アジドと１，３−付加環化反応で反応させるステップ、および（ｂ）化合物を単離するステップを含む、請求項１に記載の化合物を製造するための方法。
【請求項２９】
１８Ｆ標識アジドが、１８Ｆ標識アジドを得るために脱離基を備えたアジドを［１８Ｆ］フルオリドと反応させることによる置換反応で製造される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
付加環化反応が熱条件下または触媒の存在下で行われる、請求項２６〜２９に記載の方法。
【請求項３１】
（ａ）適切な脱離基を備えた（Ｃ２−Ｃ１２）アルカ−１−インまたはその代替物を［１８Ｆ］フルオリドと反応させるステップ、および（ｂ）得られた生成物をアジド葉酸または誘導体とＣｕ（Ｉ）触媒１，３−双極子付加環化反応でカップリングするステップを含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項３２】
（ａ）適切な脱離基を備えた（Ｃ１−Ｃ１２）アジドを［１８Ｆ］フルオリドと反応させるステップ、および（ｂ）得られた生成物を、アルキニルまたはその代替物で誘導体化された葉酸と、Ｃｕ（Ｉ）触媒１，３−双極子付加環化反応でカップリングするステップを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
インビトロまたはインビボで葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団を画像診断するための請求項１〜２５に記載の化合物の使用。
【請求項３４】
画像診断を必要とする対象への便利で効果的な投与のための請求項１〜２５に記載の化合物の使用。
【請求項３５】
葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団を画像診断するための方法であって、少なくとも一つの請求項１〜２５に記載の化合物を画像診断量で投与するステップ、および前記細胞または細胞集団の診断画像を得るステップを含む方法。
【請求項３６】
画像診断がインビトロまたはインビボで葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団に対して行われる、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
組織試料中の葉酸受容体を発現させる細胞をインビトロ検出するための方法であって、前記組織試料を、請求項１〜２５に記載の化合物と、結合を起こさせてそのような結合をＰＥＴイメージングによって検出することができるように、有効な量ならびに十分な時間および条件で接触させることを含む方法。
【請求項３８】
対象を画像診断またはモニタリングする方法であって、（ｉ）少なくとも一つの請求項１〜２５に記載の化合物を画像診断量で投与するステップ、および（ｉｉ）前記少なくとも一つの化合物からのシグナルを検出することにより、ＰＥＴを使って画像診断を行うステップを含む方法。
【請求項３９】
対象におけるがん、炎症性疾患および自己免疫疾患の治療をモニタリングする方法であって、（ｉ）その必要がある対象に少なくとも一つの請求項１〜２５に記載の化合物を画像診断量で治療活性剤と組み合わせて投与するステップ、および（ｉｉ）がん、炎症性疾患および自己免疫疾患の治療の経過を追跡するために前記少なくとも一つの化合物からのシグナルを検出することによりＰＥＴを使って画像診断を行うステップを含む方法。
【請求項４０】
がん、炎症性疾患および自己免疫疾患の他の任意の診断方法または治療方法と組み合わせて使用される請求項３８または３９の方法。
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化１】
［式中、
Ｐは葉酸またはその誘導体であり、
Ｓ１、Ｓ２は、互いに独立して、単結合またはスペーサーであり、かつ
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］。
【請求項２】
Ｓ１およびＳ２が、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、もしくは−ＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式ＩＩで表わされる、請求項１に記載の化合物：
【化２】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル（式中、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５はＨ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６、Ｒ７は、互いに独立して、直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）、または式ＩＩＩで表わされる基：
【化３】
［式中、Ｓ１およびＳ２は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、かつ
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］
であり（ただし、Ｒ６およびＲ７の一方は式ＩＩＩの基であるものとする）、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を有する］。
【請求項４】
Ｒ６が直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、かつＲ７が式ＩＩＩで表わされる基である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ７が直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、かつＲ６が式ＩＩＩで表わされる基である、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
Ｓ１が単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１８アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｓ２が単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）であり、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、より好ましくは、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）である、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
式ＩＶで表わされる化合物：
【化４】
［式中、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であるか、または式Ｖで表わされる基：
【化５】
［式中、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールである］
であり、かつ
Ｘ１〜Ｘ５、Ｒ１〜Ｒ６、ｍ、ｐおよびｑは、請求項３で定義した通りである。
ただし、Ｒ６が式ＩＩＩの基であるか、またはＲ８およびＲ９の少なくとも一方が式Ｖの基であるものとする］。
【請求項９】
Ｓ２およびＳ３が、互いに独立して、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す）であり、より好ましくは、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ａｒ１が式Ｖ−ｃ、Ｖ−ｄおよびＶ−ｅ：
【化６】
［式中、点線はスペーサー基への連結部位を表し、Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す）である］
から選択される、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、かつＲ８およびＲ９の少なくとも一方が式Ｖで表わされる基である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、Ｒ８がＨであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、ＨａｌもしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であり、かつＲ９が式Ｖで表わされる基である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ６がＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、または基Ｒ５であり、Ｒ９がＨであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、ＨａｌもしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であり、かつＲ８が式Ｖで表わされる基である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、ＨａｌもしくはＮＯ２で置換され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよい）であり、かつＲ６が式Ｖで表わされる基である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１５】
式ＶＩ、ＶＩａまたはＶＩｂ：
【化７】
【化８】
【化９】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ６はＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、
Ａｒ１はトリアゾールまたはテトラゾールであり、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を有する］
で表わされる、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｓ２およびＳ３が、互いに独立して、単結合であるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）である、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ａｒ１が式Ｖ−ｃ、Ｖ−ｄおよびＶ−ｅ：
【化１０】
［式中、点線はスペーサー基への連結部位を表し、Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す）である］
から選択される、請求項１５または１６に記載の化合物。
【請求項１８】
式ＶＩＩａ〜ＶＩＩｆまたはＶＩＩＩａ〜ＶＩＩＩｆで表わされる、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物：
【化１１】
【化１２】
【化１３】
【化１４】
【化１５】
【化１６】
【化１７】
【化１８】
【化１９】
【化２０】
【化２１】
【化２２】
［式中、
Ｘ１〜Ｘ５は、互いに独立して、ＣまたはＮであり、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、および（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニル（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである）であり、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ６はＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表し、
Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）であり、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表し、
ｍは０または１であり、
ｐは０、１または２であり、かつ
ｑは１〜７の値を持つ］。
【請求項１９】
Ｒ１およびＲ２が、互いに独立して、Ｈ、アルキル、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）である、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ３がＨ、ホルミル、Ｃ１−Ｃ１２アルキルまたはＣ１−Ｃ１２アルカノイルである、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ４がＨ、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、またはＣ１−Ｃ１２アルカノイルである、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ５がＨ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルである、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ６がＨ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、または（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニルである、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４】
式ＩＸ、ＩＸａ、ＸまたはＸａ：
【化２３】
【化２４】
【化２５】
【化２６】
［式中、
Ｘ６、Ｘ７は、互いに独立して、Ｃ、ＮまたはＯであり、
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）から選択され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｙ３は、Ｈ、ホルミル、ニトロソ、直鎖または分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）から選択され、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈであるか、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、埋込まれた非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置き換えられてもよく、
Ｒ”はＨ、Ｈａｌ、ＮＨ−ＣＯＲ’、ＮＨ−ＳＯ２Ｒ’、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’（Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）、または直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＳＨ、ＣＯ２Ｈ、もしくはＮＯ２で置換される）であるか、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す）であり、かつ
Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合であるか、またはスペーサーユニット、例えば直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）であり、非隣接ＣＨ２基の一つ以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換される）で置き換えられてもよく、Ｒ’はＨもしくはＣ１−Ｃ６アルキル、またはその組合せを表す］
で表わされる、上記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｓ２およびＳ３が、互いに独立して、直鎖もしくは分岐Ｃ１−Ｃ８アルキル（これは無置換であるか、または少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、もしくはＮＯ２で置換される）、または５員もしくは６員芳香環（これは無置換であるか、またはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’、もしくはＣＯＯＲ’で置換され、Ｒ’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す）である、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
（ａ）アジド誘導化葉酸を１８Ｆ標識アルキンまたはアルキン代替物と１，３−付加環化反応で反応させるステップ、および（ｂ）化合物を単離するステップを含む、請求項１に記載の化合物を製造するための方法。
【請求項２７】
１８Ｆ標識アルキンまたはアルキン代替物が、１８Ｆ標識アルキンまたはアルキン代替物を得るために脱離基を備えたアルキンまたはアルキン代替物を［１８Ｆ］フルオリドと反応させることによる置換反応で製造される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
（ａ）アルキンまたはアルキン代替物で誘導体化された葉酸を１８Ｆ標識アジドと１，３−付加環化反応で反応させるステップ、および（ｂ）化合物を単離するステップを含む、請求項１に記載の化合物を製造するための方法。
【請求項２９】
１８Ｆ標識アジドが、１８Ｆ標識アジドを得るために脱離基を備えたアジドを［１８Ｆ］フルオリドと反応させることによる置換反応で製造される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
付加環化反応が熱条件下または触媒の存在下で行われる、請求項２６〜２９に記載の方法。
【請求項３１】
（ａ）適切な脱離基を備えた（Ｃ２−Ｃ１２）アルカ−１−インまたはその代替物を［１８Ｆ］フルオリドと反応させるステップ、および（ｂ）得られた生成物をアジド葉酸または誘導体とＣｕ（Ｉ）触媒１，３−双極子付加環化反応でカップリングするステップを含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項３２】
（ａ）適切な脱離基を備えた（Ｃ１−Ｃ１２）アジドを［１８Ｆ］フルオリドと反応させるステップ、および（ｂ）得られた生成物を、アルキニルまたはその代替物で誘導体化された葉酸と、Ｃｕ（Ｉ）触媒１，３−双極子付加環化反応でカップリングするステップを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
インビトロまたはインビボで葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団を画像診断するための請求項１〜２５に記載の化合物の使用。
【請求項３４】
画像診断を必要とする対象への便利で効果的な投与のための請求項１〜２５に記載の化合物の使用。
【請求項３５】
葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団を画像診断するための方法であって、少なくとも一つの請求項１〜２５に記載の化合物を画像診断量で投与するステップ、および前記細胞または細胞集団の診断画像を得るステップを含む方法。
【請求項３６】
画像診断がインビトロまたはインビボで葉酸受容体を発現させる細胞または細胞集団に対して行われる、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
組織試料中の葉酸受容体を発現させる細胞をインビトロ検出するための方法であって、前記組織試料を、請求項１〜２５に記載の化合物と、結合を起こさせてそのような結合をＰＥＴイメージングによって検出することができるように、有効な量ならびに十分な時間および条件で接触させることを含む方法。
【請求項３８】
対象を画像診断またはモニタリングする方法であって、（ｉ）少なくとも一つの請求項１〜２５に記載の化合物を画像診断量で投与するステップ、および（ｉｉ）前記少なくとも一つの化合物からのシグナルを検出することにより、ＰＥＴを使って画像診断を行うステップを含む方法。
【請求項３９】
対象におけるがん、炎症性疾患および自己免疫疾患の治療をモニタリングする方法であって、（ｉ）その必要がある対象に少なくとも一つの請求項１〜２５に記載の化合物を画像診断量で治療活性剤と組み合わせて投与するステップ、および（ｉｉ）がん、炎症性疾患および自己免疫疾患の治療の経過を追跡するために前記少なくとも一つの化合物からのシグナルを検出することによりＰＥＴを使って画像診断を行うステップを含む方法。
【請求項４０】
がん、炎症性疾患および自己免疫疾患の他の任意の診断方法または治療方法と組み合わせて使用される請求項３８または３９の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図２】
【図３】
【図４】
【公表番号】特表２０１０−５２３６２５（Ｐ２０１０−５２３６２５Ａ）
【公表日】平成２２年７月１５日（２０１０．７．１５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５０２５１９（Ｐ２０１０−５０２５１９）
【出願日】平成２０年４月１１日（２００８．４．１１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０５４４０６
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１２５６１５
【国際公開日】平成２０年１０月２３日（２００８．１０．２３）
【出願人】（５９２０１０４５０）メルック・エプロバ・アクチエンゲゼルシヤフト (10)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年７月１５日（２０１０．７．１５）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年４月１１日（２００８．４．１１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０５４４０６
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１２５６１５
【国際公開日】平成２０年１０月２３日（２００８．１０．２３）
【出願人】（５９２０１０４５０）メルック・エプロバ・アクチエンゲゼルシヤフト (10)
【Ｆターム（参考）】
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