【課題】Ｔ細胞を活性化を共刺激する新規なＣＴＬＡ４／ＣＤ２８リガンドをコードする核酸の提供。
【解決手段】一態様において該核酸はＢリンパ球抗原Ｂ７−２をコードする配列を有する。好ましくは該核酸は、特定な配列からなるヌクレオチド配列の少なくとも１部分を含むＤＮＡ分子である。当該核酸配列を様々な発現ベクターにインテグレイトし、様々な宿主、特に哺乳動物および昆虫細胞培養等の真核生物細胞で、対応するタンパク質またはペプチドを合成する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣＤ２８またはＣＴＬＡ４を結合する能力を有するペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む単離した核酸であって、該核酸は、図８（配列番号２）に示すアミノ酸配列を含むペプチドをコードする核酸分子の相補物に、６.０×ＮａＣｌ／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）で約４５℃でハイブリダイズした後、約５０℃の温度で２×ＳＳＣで洗浄するものである単離した核酸。
【請求項２】
ペプチドが図８（配列番号２）に示したヒトＢ７−２タンパク質のアミノ酸残基２４−１３３を含む請求項１に記載の単離した核酸。
【請求項３】
ＣＤ２８またはＣＴＬＡ４を結合する能力を有するペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む単離した核酸であって、該核酸は、図１４（配列番号２３）に示すアミノ酸配列を含むペプチドをコードする核酸分子の相補物に、６.０×ＮａＣｌ／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）で約４５℃でハイブリダイズした後、約５０℃の温度で２×ＳＳＣで洗浄するものである単離した核酸。
【請求項４】
ＣＤ２８またはＣＴＬＡ４を結合する能力を有する第１のペプチドをコードする第１のヌクレオチド配列（第１のペプチドは図８（配列番号２）に示すヒトＢ７−２ペプチドのアミノ酸残基２４−２４５と少なくとも９０％アミノ酸配列同一性を有する）、並びに第２のペプチドをコードする第２のヌクレオチドを含むＢ７−２融合タンパク質をコードする単離した核酸であって、該核酸はＤＮＡであり、第１のペプチドが図８（配列番号２）に示すヒトＢ７−２タンパク質のアミノ酸残基２４−１３３を含んでなる単離した核酸。
【請求項５】
ポリペプチドが図８(配列番号２)に示すヒトＢ７−２のアミノ酸残基２４−１３３を含んでなる請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項６】
腫瘍を有する患者を処置するのに用いる、Ｂ７−２発現に適した形の、配列番号２のポリペプチドに少なくとも９０％の同一性を有し、ＣＤ２８またはＣＴＬＡ４を結合する能力を有するポリペプチドをペプチドコードする核酸でトランスフェクトされた腫瘍細胞および医薬的に受容し得る担体を含む組成物であって、適当なビヒクル中の核酸を腫瘍中に注入することにより核酸をインビボで患者に運ぶ組成物。
【請求項７】
図８（配列番号２）に示すＢ７−２ポリペプチドを認識する抗体および配列番号２９に示すＢ７−１ポリペプチドを認識する抗体を含む組成物。
【請求項８】
更に医薬的に許容し得る担体を含む請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
Ｂ７−２を認識する抗体およびＢ７−１を認識する抗体がモノクローナル抗体である請求項７に記載の組成物。
【請求項１０】
Ｂ７−２を認識する抗体およびＢ７−１を認識する抗体がヒト化抗体である請求項７に記載の組成物。
【請求項１１】
Ｂ７−２を認識する抗体およびＢ７−１を認識する抗体の少なくとも１つがＩｇＧ２ａの抗体である請求項９に記載の抗体。
【請求項１２】
図８（配列番号２）に示すポリペプチド；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−１３３を含むポリペプチド；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−１３３よりなるポリペプチド；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−２４５を含むポリペプチド；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−２４５よりなるポリペプチド；
配列番号２に示すＢ７−２ポリペプチドと反応性の抗体；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−２４５を含むポリペプチドをコードする核酸分子；
図８（配列番号２）に示すポリペプチドをコードする核酸配列を含む核酸分子；
および配列番号１で示されるヌクレオチド配列のコード領域を含む核酸分子；
よりなる群から選択される分子、並びに医薬的に許容し得る担体を含む免疫応答をモジュレートするのに使用するための医薬的投与に適した組成物。
【請求項１３】
Ｂリンパ球抗原、Ｂ７−１の活性を有するペプチドを更に含んでなる請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
免疫応答をモジュレートするための医薬組成物であって、該組成物は
図８（配列番号２）に示すポリペプチド；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−１３３を含むポリペプチド；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−１３３よりなるポリペプチド；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−２４５を含むポリペプチド；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−２４５よりなるポリペプチド；
配列番号２に示すＢ７−２ポリペプチドと反応性の抗体；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−２４５含むポリペプチドをコードする核酸分子；
図８（配列番号２）に示すポリペプチドをコードする核酸配列を含む核酸分子；
配列番号１に示すヌクレオチド配列のコード領域を含む核酸分子；
よりなる群から選択される分子を含んでなり、該分子は免疫細胞と接触させ、それによりＢ７−２−リガンド相互作用により免疫細胞の共刺激を防止することを含んでなる組成物。
【請求項１５】
図８（配列番号２）に示すポリペプチド；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−１３３を含むポリペプチド；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−１３３よりなるポリペプチド；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−２４５を含むポリペプチド；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−２４５よりなるポリペプチド；
配列番号２に示すＢ７−２ポリペプチドに反応性の抗体；
図８（配列番号２）に示すアミノ酸残基２４−２４５を含むポリペプチドをコードする核酸分子；
図８（配列番号２）に示すポリペプチドをコードするヌクレオチドを含む核酸分子；
配列番号１に示すヌクレオチド配列のコード領域を含む核酸分子
よりなる群から選択される分子の、免疫応答をモジュレートするための医薬組成物の製造のための使用。
【請求項１６】
組成物がＴ細胞増殖をモジュレートする請求項１２に記載の組成物。
【請求項１７】
組成物が免疫応答を下方調節する請求項１２に記載の組成物。
【請求項１８】
組成物が免疫応答を上方調節する請求項１２に記載の組成物。
【請求項１９】
組成物が自己免疫病、アレルギー、および移植拒絶の少なくとも１つをモジュレートする請求項１２に記載の組成物。
【請求項２０】
組成物が病原体による感染をモジュレートする請求項１２に記載の組成物。
【請求項２１】
病原体がウイルスである請求項１２に記載の組成物。
【請求項２２】
ウイルスがＨＩＶである請求項１２に記載の組成物。
【請求項２３】
分子がＴ細胞増殖をモジュレートする請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
分子が免疫応答を下方調節する請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
分子が免疫応答を上方調節する請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
分子が自己免疫病、アレルギー、および移植拒絶の少なくとも１つをモジュレートする請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
分子が病原体による感染をモジュレートする請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
病原体がウイルスである請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
ウイルスがＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２である請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
分子がＴ細胞増殖をモジュレートする請求項１５に記載の使用。
【請求項３１】
分子が免疫応答を下方調節する請求項１５に記載の使用。
【請求項３２】
分子が免疫応答を上方調節する請求項１５に記載の使用。
【請求項３３】
分子が自己免疫病、アレルギー、および移植拒絶の少なくとも１つをモジュレートする請求項１５に記載の使用。
【請求項３４】
分子が病原体による感染をモジュレートする請求項１５に記載の使用。
【請求項３５】
病原体がウイルスである請求項１５に記載の使用。
【請求項３６】
ウイルスがＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２である請求項１５に記載の使用。
【請求項３７】
Ｂ細胞活性化抗原Ｂ７−２の単離された可変領域形であって、図８（配列番号２）に示すヒトＢ７−２タンパク質のアミノ酸残基２４−１３３を含むが、Ｂ７−２免疫グロブリン様定常領域ドメインを含まない可変領域形。
【請求項３８】
ヒトである請求項３７に記載のＢ７−２可変領域形。
【請求項３９】
異種ポリペプチドに作動可能に結合したＢ７−２可変領域ポリペプチドを含む融合タンパク質である請求項３７に記載のＢ７−２可変領域形。
【請求項４０】
融合タンパク質が可溶性のモノマーポリペプチドである請求項３９に記載のＢ７−２可変領域形。
【請求項４１】
Ｂ７−２可変領域ポリペプチドがヒトのＢ７−２可変領域ポリペプチドである請求項３９に記載のＢ７−２可変領域形。
【請求項４２】
ヒトのＢ７−２可変領域ポリペプチドが配列番号２の約２４−１３３のアミノ酸配列を含む請求項４１に記載のＢ７−２可変領域形。
【請求項４３】
異種ポリペプチドが免疫グロブリン定常領域である請求項３９に記載のＢ７−２可変領域形。
【請求項４４】
免疫グロブリン定常領域がヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３を含むＣγ１ドメインを含む請求項４３に記載のＢ７−２可変領域形。
【請求項４５】
免疫グロブリン定常領域が定常領域媒介生物学的エフェクター機能を減少させるよう修飾された請求項３９に記載のＢ７−２可変領域形。
【請求項４６】
生物学的エフェクター機能が補体活性化およびＦｃ受容体相互作用よりなる群から選択される請求項４５に記載のＢ７−２可変領域形。
【請求項４７】
免疫グロブリン定常領域がヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３を含むＣγ４ドメインである請求項４６に記載のＢ７−２可変領域形。
【請求項４８】
ＣＨ２ドメインの少なくとも１つのアミノ酸残基が置換、付加または削除により修飾されている請求項４７に記載のＢ７−２可変領域形。
【請求項４９】
異種ポリペプチドに作動可能に結合した図８（配列番号２）に示すヒトＢ７−２タンパク質のアミノ酸残基２４−１３３を含む単離されたＢ７−２融合タンパク質であって、Ｂ７−２融合タンパク質はＢ７−２免疫グロブリン様定常領域ドメインを含まないＢ７−２融合タンパク質。
【請求項５０】
ヒトＢ７−２免疫グロブリン様可変領域ドメインが配列番号２の約２４−１３３位置のアミノ酸配列を含む請求項４９に記載のＢ７−２融合タンパク質。
【請求項５１】
異種ポリペプチドが免疫グロブリン様定常領域ポリペプチドを含む請求項４９に記載のＢ７−２融合タンパク質。
【請求項５２】
Ｂ７−２融合タンパク質の可変領域形をコードする単離された核酸分子であって、Ｂ７−２融合タンパク質は異種ポリペプチドに作動可能に結合した図８（配列番号２）に示すヒトＢ７−２タンパク質のアミノ酸残基２４−１３３を含み、Ｂ７−２融合タンパク質はＢ７−２免疫グロブリン様定常領域ドメインを含まない単離された核酸分子。
【請求項５３】
Ｂ７−２可変領域ポリペプチドがヒトＢ７−２可変領域ポリペプチドである請求項５２に記載の単離された核酸分子。
【請求項５４】
ヒトＢ７−２可変領域ポリペプチドが配列番号２の約２４−１３３位置のアミノ酸配列を含む請求項５３に記載の単離された核酸分子。
【請求項５５】
異種ポリペプチドが免疫グロブリン定常領域ポリペプチドである請求項５２に記載の核酸。
【請求項５６】
免疫グロブリン定常領域がヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３を含むＣγ４ドメインを含む請求項５５に記載の核酸。
【請求項５７】
免疫グロブリン定常領域が定常領域媒介生物学的エフェクター機能を減少させるよう修飾された請求項５５に記載の核酸。
【請求項５８】
生物学的エフェクター機能が補体活性化およびＦｃ受容体相互作用よりなる群から選択される請求項５７に記載の核酸。
【請求項５９】
免疫グロブリン定常領域がヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３を含むＣγ４ドメインを含む請求項５８に記載の核酸。
【請求項６０】
ＣＨ２ドメインの少なくとも１つのアミノ酸残基が置換、付加または削除により修飾されている請求項５９に記載の核酸。
【請求項６１】
請求項５２〜６０のいずれかに記載の核酸分子を含む組換え発現ベクター。
【請求項６２】
請求項６１に記載の組換え発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項６３】
．免疫反応を調節するのに使用するための医薬投与に適した組成物であって、Ｂ細胞活性化抗原の単離された可変領域、請求項３７〜４８のいずれかに記載のＢ７−２、および医薬的に許容し得る担体を含む組成物。
【請求項６４】
免疫反応を調節するのに使用するための医薬投与に適した組成物であって、請求項５２〜６１のいずれかに記載のＢ７−２融合タンパク質の可変領域形をコードする単離された核酸、および医薬的に許容し得る担体を含む組成物。
【請求項６５】
組成物がＴ細胞増殖を調節する請求項６３または６４に記載の組成物。
【請求項６６】
組成物が免疫反応を上方調節する請求項６３または６４に記載の組成物。
【請求項６７】
組成物が病原体による感染を調節する請求項６３または６４に記載の組成物。
【請求項６８】
病原体がウイルスである請求項６７に記載の組成物。
【請求項６９】
ウイルスがＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２である請求項６８に記載の組成物。
【請求項７０】
活性化されたＴ細胞による反応を刺激するための組成物であって、Ｂ細胞活性化抗原Ｂ７−２の可変領域形を含み、Ｂ７−２の可変領域形は図８（配列番号２）に示すヒトＢ７−２タンパク質のアミノ酸残基２４−１３３を含むが、Ｂ７−２免疫グロブリン様定常領域ドメインを含まず、該Ｂ７−２の可変領域形活性化されたＴ細胞をと接触させ、その結果活性化されたＴ細胞による反応を刺激する組成物。
【請求項７１】
Ｔヘルパータイプ２（ＴＨ２）反応が優先して刺激される請求項７０に記載の組成物。
【請求項７２】
患者におけるＴ細胞増殖および／またはサイトカイン分泌の調節のための薬剤の製造のためのＢ細胞活性化抗原Ｂ７−２の可変領域形の使用であって、Ｂ７−２の可変領域は図８（配列番号２）に示すヒトＢ７−２タンパク質のアミノ酸残基２４−１３３を含むが、Ｂ７−２免疫グロブリン様定常領域ドメインを含まない使用。
【請求項７３】
請求項１，４，若しくは５に記載の組換え発現により製造される、ＣＤ２８またはＣＴＬＡ４に結合する能力を有するポリペプチドと特異的に反応する抗体またはその断片であって抗体はヒト化抗体である抗体またはその断片。
【請求項７４】
ヒト定常領域および非ヒト可変領域を含む請求項７３に記載の抗体またはその断片。
【請求項７５】
ヒト定常領域およびヒト可変領域キメラを含む請求項７３に記載の抗体またはその断片。
【請求項７６】
抗体が完全にヒトのモノクローナル抗体である、請求項１，４，若しくは５に記載の組換え発現により製造される、ＣＤ２８またはＣＴＬＡ４に結合する能力を有するポリペプチドと特異的に反応する抗体またはその断片。
【請求項７７】
請求項７３〜７６のいずれかに記載の抗体またはその断片を含む免疫反応を調節するのに使用するための医薬投与に適した組成物。
【請求項７８】
組成物がＴ細胞増殖を調節する請求項７７に記載の組成物。
【請求項７９】
組成物がＴ細胞媒介免疫反応を下方調節する請求項７７に記載の組成物。
【請求項８０】
組成物が、自己免疫病、アレルギーおよび移植拒絶の少なくとも１つを調節する請求項７７に記載の組成物。
【請求項８１】
Ｂリンパ球抗原、Ｂ７−２の免疫細胞表面のその天然のリガンドとの相互作用を防止する方法であって、その方法は免疫細胞を請求項７３〜７６のいずれかに記載の抗体またはその断片と接触させ、それによってＢ７−２相互作用による免疫細胞の共刺激を防止することを含む方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８−１】

【図８−２】

【図８−３】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２−１】

【図１２−２】

【図１３−１】

【図１３−２】

【図１４−１】

【図１４−２】

【図１４−３】

【図１４−４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【公開番号】特開２００９−６０９０５（Ｐ２００９−６０９０５Ａ）
【公開日】平成２１年３月２６日（２００９．３．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−２３７９６９（Ｐ２００８−２３７９６９）
【出願日】平成２０年９月１７日（２００８．９．１７）
【分割の表示】特願平７−５０５３９７の分割
【原出願日】平成６年７月２６日（１９９４．７．２６）
【出願人】（５９１１８３９９１）ダナ−ファーバー　キャンサー　インスティテュート，インコーポレイテッド (17)
【氏名又は名称原語表記】ＤＡＮＡ−ＦＡＲＢＥＲ　ＣＡＮＣＥＲ　ＩＮＳＴＩＴＵＴＥ，　ＩＮＣＯＲＰＯＲＡＴＥＤ
【出願人】（５０１４１８２１４）ジェネティクス　インスティテュート，エルエルシー (35)
【Ｆターム（参考）】