ＨＣＶ治療のための３’，５’−ジ−Ｏ−アシル化ヌクレオシド
式Ｉ［式中、Ｒ１は本明細書に定義のとおりである］を有する化合物は、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ５ｂポリメラーゼインヒビターである。肝炎の複製を阻害するための組成物および方法、該化合物を製造するプロセスならびにそのプロセスで使用される合成中間体もまた開示する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼのインヒビターのプロドラッグである３’，５’−ジ−Ｏ−アシル化ヌクレオシドを提供するものである。経口投与される時、これらの化合物は消化管から容易に吸収され、インビボで効率的に親ヌクレオシドに戻る。これらのプロドラッグは、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製を阻害し、ＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼのインヒビターとして、ＨＣＶ複製のインヒビターとして、そして哺乳動物のＣ型肝炎感染の治療に有用である。
【０００２】
特に本発明は、このヌクレオシドが経口投与された時に改善された薬物吸収を提供し、過去に開示されたプロドラッグよりも優れた、アシル化ピリミジンヌクレオシドの使用に関わるものである。
【０００３】
Ｃ型肝炎ウイルスは重大な健康問題であり、全世界で慢性肝疾患の主たる原因となっている（Boyer, N. et al. J. Hepatol. 2000 32:98-112）。ＨＣＶに感染した患者は、肝硬変とこれに続く肝細胞癌を発症するリスクがあり、よってＨＣＶは肝臓移植の主要な適応である。
【０００４】
世界保健機関によれば、２億人以上の感染者が全世界に存在し、毎年少なくとも３００〜４００万人が感染している。いったん感染すると、約２０%の人間はウイルスが除去されるが、残りの人間はその後の人生でＨＣＶを担持し得る。慢性感染した人間の１０〜２０%は、最終的には肝臓を破壊する肝硬変または癌を発症する。このウイルス疾患は、汚染された血液および血液製品、汚染された針によって、または性的に非経口的な伝染をし、感染した母親またはキャリアの母親から子へと垂直に伝染する。組換えインターフェロンα単独またはヌクレオシド類似体リバビリンとの組み合わせを用いた免疫療法に限定されているＨＣＶ感染の現行治療は、急速に耐性が現れるため、臨床上の有益性が限られている。慢性ＨＣＶ感染に対して効果的に闘う、改善された治療薬に対する緊急の必要性がある。
【０００５】
現在、ＨＣＶ感染の治療に使用できる認可された治療法は限られた数しかない。ＨＣＶを治療するための新規および既存の治療的アプローチならびにＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害が以下で論じられている：R. G. Gish, Sem. Liver. Dis., 1999 19:5; Di Besceglie, A. M. and Bacon, B. R., Scientific American, October: 1999 80-85; G. Lake-Bakaar, "Current and Future Therapy for Chronic Hepatitis C Virus Liver Disease", Curr. Drug Targ. Infect Dis. 2003 3(3):247-253; P. Hoffmann et al, "Recent patents on experimental therapy for hepatitis C virus infection (1999-2002)", Exp. Opin. Ther. Patents 2003 13(11): 1707-1723; F. F. Poordad et al. "Developments in Hepatitis C therapy during 2000-2002", Exp. Opin. Emerging Drugs 2003 8(l):9-25; M. P. Walker et al, "Promising Candidates for the treatment of chronic hepatitis C", Exp. Opin. Investig. Drugs 2003 12(8):1269-1280; S.-L. Tan et al, "Hepatitis C Therapeutics: Current Status and Emerging Strategies", Nature Rev. Drug Discov. 2002 1:867-881; R. De Francesco et al. "Approaching a new era for hepatitis C virus therapy: inhibitors of the NS3-4A serine protease and the NS5B RNA-dependent RNA polymerase", Antiviral Res. 2003 58: 1-16; Q. M. Wang et al. "Hepatitis C virus encoded proteins: targets for antiviral therapy", Drugs of the Future 2000 25(9):933-8-944; J. A. Wu and Z. Hong, "Targeting NS5B-Dependent RNA Polymerase for Anti-HCV Chemotherapy", Cur. Drug Targ.-Inf Dis. 2003 3:207-219。これらの総論は、現在開発プロセスの様々な段階にある化合物に言及している。同一または異なる標的に対する２または３種の抗ウイルス薬による併用療法が、耐性ウイルス株の発生を回避または遅延させるための標準的な抗ウイルス療法となっており、上記の総論に開示される化合物は本発明化合物との併用療法に使用でき、これらの総論を引用によりその全内容を本明細書の一部とする。
【０００６】
リバビリン（１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−カルボン酸アミド；VIRAZOLE（登録商標））は、合成の、非インターフェロン誘導性広域スペクトル抗ウイルスヌクレオシド類似体である。リバビリンは、Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅを包含する幾つかのＤＮＡおよびＲＮＡウイルスに対してインビトロ活性を有する(G. L. Davis, Gastroenterology 2000 118:S104-S114)。単剤療法では、リバビリンは患者の４０%において血清アミノトランスフェラーゼレベルを正常まで低下させるが、ＨＣＶ−ＲＮＡの血清レベルは低下させない。さらに、リバビリンは著しい毒性を示し、貧血を誘発することがわかっている。リバビリンはＨＣＶに対する単剤療法には認可されていないが、この化合物はインターフェロンα−２ａおよびインターフェロンα−２ｂとの併用療法において認可されている。ビラミジンは肝細胞でリバビリンに変換されるプロドラッグである。
【０００７】
ほぼ１０年の間、慢性肝炎の治療にインターフェロン（ＩＦＮ）が利用されてきた。ＩＦＮは、ウイルス感染に応答した免疫細胞により産生される糖蛋白である。二つの異なったタイプのインターフェロンが認められている：１型には幾つかのインターフェロンαおよび一つのインターフェロンβが含まれ、２型にはインターフェロンγが含まれる。１型インターフェロンは主に感染した細胞によって産生され、近傍の細胞をデノボ感染から防御する。ＩＦＮは、ＨＣＶを包む多くのウイルスのウイルス複製を阻害し、Ｃ型肝炎感染の唯一の治療として使用する場合、ＩＦＮは血清ＨＣＶ−ＲＮＡを検出不能レベルにまで抑制する。加えて、ＩＦＮは血清アミノトランスフェラーゼレベルを正常化する。都合の悪い事に、ＩＦＮの効果は一時的である。治療の終了によって再発率７０%という結果となり、僅か１０〜１５%が、正常な血清アラニントランスフェラーゼレベルを持つ持続的ウイルス学的反応を示すに過ぎない（L. -B. Davis, 上記）。
【０００８】
初期ＩＦＮ療法の一つの制限は、血液からのこの蛋白の急速なクリアランスであった。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を用いたＩＦＮの化学的誘導体化は、実質的に改善された薬物動態学的性質を有する蛋白を生成した。PEGASYS（登録商標）は、インターフェロンα−２ａおよび４０ｋＤ分岐モノメトキシＰＥＧのコンジュゲートであり、そしてPEG-INTRON（登録商標）は、インターフェロンα−２ｂおよび１２ｋＤモノメトキシＰＥＧのコンジュゲートである（B. A. Luxon et al., Clin. Therap. 2002 24(9):13631383; A. Kozlowski and J. M. Harris, J. Control. Release, 2001 72:217-224）。
【０００９】
インターフェロンα−２ａおよびインターフェロンα−２ｂが、現在ＨＣＶ治療のための単剤療法として認可されている。ROFERON-A（登録商標）（Roche）は、インターフェロンα−２ａの組換え型である。REGASYS（登録商標）（Roche）は、インターフェロンα−２ａのＰＥＧ化（即ちポリエチレングリコール修飾された）型である。INTRON-A（登録商標）（Schering Corporation）は、インターフェロンα−２ｂの組換え型であり、そしてPEG-INTRON（登録商標）（Schering Corporation）は、インターフェロンα−２ｂのＰＥＧ化型である。
【００１０】
インターフェロンαの他の型、ならびにインターフェロンβ、γ、τおよびωが、ＨＣＶ治療のために現在臨床開発中である。例えば、InterMune社によりINFERGEN（登録商標）（インターフェロン アルファコン−１）、Viragen社によりOMNIFERON（登録商標）（天然インターフェロン）、Human Genome Sciences社によりAlBUFERON（登録商標）、Ares-Serono社によりREBIF（登録商標）（インターフェロンβ−１ａ）、BioMedicine社によりオメガインターフェロン、Amarillo Biosciences社により経口インターフェロンアルファ、ならびにInterMune社によりインターフェロンγ、インターフェロンτ、およびインターフェロンγ−１ｂが開発中である。
【００１１】
リバビリンおよびインターフェロンαによるＨＣＶの併用療法が、現時点で最適な治療法である。リバビリンとＰＥＧ−ＩＮＦ（上記）の組み合わせは、患者の５４〜５６%に持続的ウイルス反応（ＳＶＲ）をもたらす。このＳＶＲは２型および３型ＨＣＶについては８０%に近い（Walker, 上記）。残念なことに、この組み合わせは副作用をも導き、それが臨床上の問題をもたらす。皮下ＩＦＮ−αには抑欝、インフルエンザ様症状および皮膚反応が伴い、リバビリンによる持続的治療には溶血性貧血が伴う。
【００１２】
Ｃ型肝炎ウイルス感染治療のために現在前臨床または臨床開発中であるその他の高分子化合物には、Schering-Plough社のインターロイキン−１０、Intermeuron社のIP-SO1、Vertex社のメリメボディブ（VS-497）、RPI社のHEPTAZYME（登録商標）、Idun Pharma社のIDN-6556、XTL社のXTL-002、Chiron社のHCV/MFS9、NABI社のCIVACIR（登録商標）（Ｃ型肝炎免疫グロブリン）、SciClone社のZADAXIN（登録商標）（チモシンα−１）、SciClone社のチモシン＋ＰＥＧ化インターフェロン、CEPLENE（登録商標）；Innogenetics社のＥ２に対する治療ワクチン、Intercell社の治療ワクチン、Epimmune/Genencor社の治療ワクチン、Merix社の治療ワクチン、Tripep社の治療ワクチン、Chron-VacCがある。
【００１３】
リボザイムはＨＣＶ ＲＮＡを標的としている。リボザイムは、ＲＮＡの配列特異的開裂を触媒する、エンドヌクレアーゼ活性を有する天然の短分子である。これに代わるアプローチは、ＲＮＡに結合してＲＮアーゼＨ仲介性開裂を刺激する、アンチセンスオリゴヌクレオチドの使用である。
【００１４】
抗ＨＣＶ療法としての薬物開発のための潜在的分子標的が現在幾つか同定されており、それらには、ＮＳ２−ＮＳ３オートプロテアーゼ、Ｎ３プロテアーゼ、Ｎ３ヘリカーゼおよびＮＳ５Ｂポリメラーゼが包含されるがこれらに限定される訳ではない。一本鎖センスＲＮＡゲノムの複製にはＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼが絶対不可欠であり、この必須酵素は薬化学者の間に著しい興味を喚起してきた。
【００１５】
ＮＳ５Ｂポリメラーゼのヌクレオシドインヒビターは、鎖伸張ができない非天然基質として、または、ポリメラーゼとの結合について天然ヌクレオチドと競合する競合的インヒビターとして作用できる。鎖ターミネーターとして機能するためには、ヌクレオシド類似体が細胞に取り込まれ、インビボで三リン酸に変換され、ポリメラーゼヌクレオチド結合部位について競合せねばならない。この三リン酸への変換は、通常、細胞キナーゼによって仲介され、それが潜在的ヌクレオシドポリメラーゼインヒビターにさらなる構造上の要件を付与する。残念なことに、この事が、ＨＣＶ複製のインヒビターとしてのヌクレオシドの直接評価を、ｉｎ ｓｉｔｕリン酸化が可能な細胞型アッセイに限定する。
【００１６】
【化３】
【００１７】
２β−メチルヌクレオシド１はE. Walton 等（J. Med. Chem. 1969 12(2):306-309）によって最初に記載された。置換ヌクレオシドのエステルは、合成反応列において保護炭水化物中間体として使用されてきた（E. Walton, GB 12909654。１９７０年１０月２１日公開）。塩基がシチジンである場合、アシル化誘導体は一般に、アミノ置換基がアシル化されている、２のジ−およびトリ−エステルである（E. Walton, 上記、J. L. Clark et al. J. Med Chem. 2005 48(17):5504-5508; R. E. Harry-O’kuru et al. J. Org. Chem. 1997 62(6):1754-1759; J. -P. Sommadossi et al. WO 2004002422）。エステル中間体は典型的には、結晶化合物をより生成し易い安息香酸エステルまたはフェニル酢酸エステルである。４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン誘導体の抗ウイルス活性が報告されている（E. Walton, J. Med Chem., 上記）。
【００１８】
２００１年１１月２９日に公開されたＷＯ ０１ ９０１２１において、J. -P. SommadossiおよびP. Lacollaは、式１および２で示される１’−アルキル−および２’−アルキルヌクレオシドの抗ＨＣＶポリメラーゼ活性を開示および例示している。２００１年１２月６日に公開されたＷＯ ０１／９２２８２において、J. -P. SommadossiおよびP. Lacollaは、式１および２で示される１’−アルキル−および２’−アルキルヌクレオシドによるフラビウイルス属およびペスチウイルス属の治療を開示および例示している。２００３年４月３日に公開されたＷＯ０３／０２６６７５において、G. Gosselinは、フラビウイルス属およびペスチウイルス属を治療するための４’−アルキルヌクレオシド３を開示している。２００４年６月３日に公開されたＷＯ２００４／０４６３３１において、J. -P. Sommadossi等は、２’−分岐ヌクレオシドおよびフラビウイルス科の突然変異を開示している。２００３年４月３日に公開されたＷＯ０３／０２６５８９において、G. Gosselin等は、４’−修飾されたヌクレオシドを用いたＣ型肝炎ウイルスの治療法を開示している。２００５年２月３日に公開されたＷＯ２００５００９４１８において、R. Storer等は、ＨＣＶを包含するフラビウイルス科により引き起こされる疾患の治療のためのプリンヌクレオシド類似体を開示している。
【００１９】
別の特許出願は、Ｃ型肝炎ウイルス感染を治療するための或る種のヌクレオシド類似体の使用を開示している。２００１年５月１０日公開のＷＯ ０１／３２１５３において、R. Storerは、ウイルス疾患治療のためのヌクレオシド誘導体を開示している。２００１年８月２３日公開のＷＯ ０１／６０３１５では、H. Ismaili等が、ヌクレオシド化合物を用いたフラビウイルス感染の治療または予防方法を開示している。２００２年３月７日公開のＷＯ ０２／１８４０４では、R. Devos等が、ＨＣＶウイルス治療のための４’−置換ヌクレオチドを開示している。２００１年１０月２５日公開のＷＯ ０１／７９２４６では、K. A. Watanabeが、ウイルス疾患治療のための２’−または３’−ヒドロキシメチルヌクレオシド化合物を開示している。２００２年４月２５日公開のＷＯ ０２／３２９２０および２００２年６月２０日公開のＷＯ ０２／４８１６５では、L. Stuyver等が、ウイルス疾患治療のためのヌクレオシド化合物を開示している。
【００２０】
【化４】
【００２１】
２００３年１２月２４日公開のＷＯ ０３／１０５７７０において、B. Bhat等は、ＨＣＶ感染の治療に有用な一連の炭素環式ヌクレオシド誘導体を開示している。２００３年１月２２日公開のＷＯ ２００４／００７５１２では、B. Bhat等がＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼを阻害するヌクレオシド化合物を開示している。この公報に開示されているヌクレオシドは、主として２’−メチル−２’−ヒドロキシ置換ヌクレオシドである。２００２年７月２５日公開のＷＯ ２００２／０５７４２５では、S. S. Carroll等が、ＲＮＡ依存性ウイルスポリメラーゼを阻害するヌクレオシド誘導体およびＨＣＶ感染を治療する方法を開示している。２００２年７月２５日公開のＷＯ ０２／０５７２８７では、S. S. Carroll等が、塩基が場合により置換されていてもよい、７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンラジカル５である関連する２α−メチルおよび２β−メチルリボース誘導体を開示している。同出願は、３β−メチルヌクレオシドの一例を開示している。S. S. Carroll等（J. Biol. Chem. 2003 278(14):11979-11984）は、４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メトキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン（５ａ）によるＨＣＶポリメラーゼの阻害を開示している。２００４年１月２９日公開のＷＯ ２００４／００９０２０では、D. B. Olsen等が、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼのインヒビターとしての一連のチオヌクレオシド誘導体を開示している。
【００２２】
「２’−フルオロヌクレオシド」なる標題のＰＣＴ公開Ｎｏ．ＷＯ９９／４３６９１（エモリー大学）は、ＨＣＶを治療するための或る２’−フルオロヌクレオシドの使用を開示している。「２’−フルオロヌクレオシド」なる標題の米国特許Ｎｏ．６３４８５８７（エモリー大学）は、Ｂ型肝炎、ＨＣＶ、ＨＩＶおよび異常な細胞増殖の治療に有用な２’−フルオロヌクレオシドのファミリーを開示している。２’−フルオロ置換基の両方の立体配置が開示されている。
【００２３】
Eldrup等（Oral Session V, Hepatitis C Virus, Flaviviridae; 16th International Conference on Antiviral Research(Apr. 27, 2003, Savannah, Ga.)）は、ＨＣＶ阻害のための２’−修飾ヌクレオシドの構造活性相関を記載している。
【００２４】
Bhat等（Oral Session V, Hepatitis C Virus, Flaviviridae; 16th International Conference on Antiviral Research(Apr. 27, 2003, Savannah, Ga.); p A75）は、ＨＣＶ ＲＮＡ複製の潜在的インヒビターとしてのヌクレオシド類似体の合成および薬物動態学的性質を記載している。この著者は、２’−修飾ヌクレオシドが細胞に基づくレプリコンアッセイにおいて強力な阻害活性を示すと報告している。
【００２５】
Olsen等（Oral Session V, Hepatitis C Virus, Flaviviridae; 16th International Conference on Antiviral Research(Apr. 27, 2003, Savannah, Ga.)p A76）はさらに、ＨＣＶ ＲＮＡ複製に及ぼす２’−修飾ヌクレオシドの効果を記載している。
【００２６】
ＨＩＶ逆転写酵素の非ヌクレオシドアロステリックインヒビターは、単独で、そしてヌクレオシドインヒビターとの、およびプロテアーゼインヒビターとの併用で、有効な治療薬であることが証明されている。ベンズイミダゾール（H. Hashimoto et al. WO01/47833、H. Hashimoto et al. WO03/000254、P. L. Beaulieu et al. WO03/020240 A2; P. L. Beaulieu et al. US6448281 B1; P. L. Beaulieu et al. WO03/007945 A1）；インドール（P. L. Beaulieu et al. WO03/0010141 A2）；ベンゾチアジアジン（D. Dhanak et al. WO01/85172 A1; D. Dhanak et al. WO03/037262 A2; K. J. Duffy et al. WO03/099801 A1, D. Chai et al. WO2004052312, D. Chai et al. WO2004052313, D. Chai et al. WO02/098424, J. K. Pratt et al. WO2004/041818 A1; J. K. Pratt et al. WO2004/087577 A1）、チオフェン（C. K. Chan et al. WO02/100851）；ベンゾチオフェン（D. C. Young and T. R. Bailey WO00/18231）；β−ケトピルバート（S. Attamura et al. US6492423 B1, A. Attamura et al. WO00/06529）；ピリミジン（C. Gardelli et al. WO02/06246 A1）；ピリミジンジオン（T. R. Bailey and D. C. Young WO00/13708）；トリアジン（K. -H. Chung et al. WO02/079187 A1）；ローダニン誘導体（T. R. Bailey and D. C. Young WO00/10573, J. C. Jean et al. WO01/77091 A2）；２，４−ジオキソピラン（R. A. Love et al. EP256628 A2）；フェニルアラニン誘導体（M. Wang et al. J. Biol. Chem. 2003 278:2489-2495）を包含する幾つかのクラスの非ヌクレオシドＨＣＶ ＮＳ５Ｂインヒビターが記載されており、現在様々な開発段階にある。
【００２７】
ＮＳ３プロテアーゼが、新たな抗ＨＣＶ療法発見のための大きな標的として浮上している。１９９８年５月２８日公開のＷＯ９８／２２４９６においてM. R. Attwood等は、プロテアーゼのメカニズムベースの活性部位を開示した（M. R. Attwood et al., Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1999 10:259-273; M. R. Attwood et al., Preparation and use of amino acid derivatives as anti-viral agents, ドイツ国特許公開ＤＥ １９９１４４７４）。１９９８年４月３０日公開のＷＯ９８／１７６７９では、R. D. Tung等が、ＮＳ３プロテアーゼに関するメカニズムベースのペプチドインヒビターを開示した。
【００２８】
１９９９年２月１８日公開のＷＯ９９／０７７３４および１９９９年８月９日公開のＷＯ００／０９５４３においてM Llinas-Brunet等は、ＨＣＶプロテアーゼのペプチドインヒビターを開示している。２０００年１０月１２日公開のＷＯ００／５９９２９では、Y. S. Tsantrizos等が、ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼの強力なインヒビターである大環状トリペプチドを開示している。Boehringer-Ingelheimの一連の関連特許は、関連するプロテアーゼインヒビターを開示しており、トリペプチド誘導体ＢＩＬＮ ２０６１の同定を導いている（M. Llinas-Brunet et al. Biorg. Med. Chem. Lett. 2000 10(20):2267-70; J. Med Chem. 2004 47(26):6584-94; J. Med. Chem. 2004 47(7):1605-1608; Angew. Chem. Int. Ed. Eng. 2003 42(12):1356-60）。
【００２９】
Bristol-Myers Squibbにより同定された別のトリペプチドインヒビターが、特に、２００３年１２月４日公開のＷＯ０３／０９９２７４、２００４年４月２２日公開のＷＯ２００４／０３２８２７、２００３年７月３日公開のＷＯ０３／０５３３４９、２００５年５月２６日公開のＷＯ２００５／０４６７１２および２００５年６月９日公開のＷＯ２００５／０５１４１０に開示されている。２００４年８月２６日公開のＷＯ２００４／０７２２３４および２００４年１１月４日公開のＷＯ２００４／０９３７９８では、Enanta Pharmaceuticalsによってさらなるトリペプチドプロテアーゼインヒビターが開示された。２００５年４月２８日公開のＷＯ２００５／０３７２１４では、L. M. Blatt等が、ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼを阻害するさらに別のトリペプチド誘導体を開示している。２００５年４月７日公開のＷＯ２００５／０３０７９６では、S. Venkatraman等がＨＣＶ ＮＳ３セリンプロテアーゼの大環状インヒビターを開示している。２００５年６月３０日公開のＷＯ２００５／０５８８２１では、F. Velazquez等がＨＣＶ ＮＳ３／ＮＳ４ａセリンプロテアーゼのインヒビターを開示している。２００２年６月２０日公開のＷＯ０２／４８１７２では、Z. ZhuがＮＳ３プロテアーゼのインヒビターとしてのジアリールペプチドを開示している。共に２００２年１月３１日に公開されたＷＯ０２／０８１８７およびＷＯ０２／０８２５６においてA. Saksena等はＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼのペプチドインヒビターを開示している。２００２年１月３１日公開のＷＯ０２／０８２５１では、M. Lim-Wilby等がＮＳ３プロテアーゼのペプチドインヒビターを開示している。１９９９年１２月２１日公開のＵＳ６００４９３３では、L. W. Spruce等が、ＨＣＶエンドペプチダーゼを包含するシステインプロテアーゼを阻害するヘテロ環式ペプチド誘導体を開示している。
【００３０】
ＲＤ３−４０８２およびＲＤ３−４０７８（前者はアミドの位置が１４炭素鎖で置換されており、後者はパラ−フェノキシフェニル基をプロセシングする）を包含する、２，４，６−トリヒドロキシ−３−ニトロベンズアミド誘導体のような非基質型ＮＳ３プロテアーゼインヒビター（Sudo K. et al., BBRC 1997 238:643-647; Sudo K. et al. Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1998 9:186）もまた研究されつつある。
【００３１】
フェナントレンキノンＳＣＨ６８６３１はＨＣＶプロテアーゼインヒビターである（Chu M. et al. Tetrahedron Lett. 1996 37:7229-7232）。同じ著者による別の例では、真菌Penicillium griseofulvumから単離されたＳＣＨ３５１６３３がプロテアーゼインヒビターであると同定された（Chu M. et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999 9:1949-1952）。高分子エグリンｃに基づく選択的インヒビターの設計により、ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼ酵素に対するナノモルレベルの有効性が達成されている。ヒルから単離されたエグリンｃは、S. griseusプロテアーゼＡおよびＢ、α−キモトリプシン、キマーゼおよびサブチリシンといった幾つかのセリンプロテアーゼの強力なインヒビターである（Qasim M. A. et al., Biochemistry 1997 36:1598-1607）。
【００３２】
逆相ＨＰＬＣアッセイにおいてＮＳ３／４Ａ融合蛋白およびＮＳ５Ａ／５Ｂ基質と関連する阻害を示すチアゾリジン誘導体（Sudo K. et al. Antiviral Research 1996 32:9-18）、特に、長鎖アルキルで置換された融合シンナモイル部分を有する化合物ＲＤ−１−６２５０、ＲＤ４ ６２０５およびＲＤ４ ６１９３。チアゾリジンおよびベンズアニリドは、N. Kakiuchi等（FEBS Let. 1998 421:217-220）およびN. Takeshita等（Anal. Biochem. 1997 247:242-246）によって同定された。
【００３３】
ＨＣＶのＮＳ３セリンプロテアーゼインヒビターとしてのイミダゾリジノンが、ＷＯ０２／０８１９８（Schering Corporation。２００２年１月３１日公開）およびＷＯ０２／４８１５７（Bristol Myers Squibb。２００２年６月２０日公開）に開示されている。２００２年６月２０日公開のＷＯ０２／４８１１６では、P. Glunz等がＮＳ３プロテアーゼのピリミジノンインヒビターを開示している。
【００３４】
抗ＨＣＶのためのその他の酵素標的には、ＨＣＶ ＩＲＥＳ部位（内部リボソーム進入部位）およびＨＣＶヘリカーゼがある。ＩＲＥＳインヒビターはImmusol、Rigel Pharmaceuticals（R803）により、およびAnadys（ANA245およびANA246）により報告されている。VertexはＨＣＶヘリカーゼインヒビターを開示している。
【００３５】
耐性突然変異株を抑制できる併用療法は抗ウイルス化学療法に対する充分に確立されたアプローチとなっている。本明細書に開示したヌクレオシドインヒビターは、他のヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼインヒビター、非ヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼインヒビター、およびＨＣＶプロテアーゼインヒビターと併用することができる。その他の種類のＨＣＶ薬、例えばウイルス進入インヒビター、ヘリカーゼインヒビター、ＩＲＥＳインヒビター、リボザイムおよびアンチセンスオリゴヌクレオチドが浮上し、そして開発されていることから、これらもまた併用療法のための優れた候補薬となるであろう。インターフェロン誘導体は既にリバビリンとうまく併用されており、インターフェロンおよび化学修飾インターフェロンは、本明細書に開示されるヌクレオシドとの併用に有用であろう。
【００３６】
本発明の目的は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染した宿主の治療のための新たな化合物、方法および組成物を提供することである。
【００３７】
ヌクレオシド誘導体は、しばしば強力な抗ウイルス（例えば、ＨＩＶ、ＨＣＶ、単純ヘルペス、ＣＭＶ）および抗癌化学療法薬である。あいにくそれらの実用性は二つの要因によってしばしば限定される。第一に、乏しい薬物動態学的性質が、腸管からのヌクレオシドの吸収およびヌクレオシド誘導体の細胞内濃度をしばしば制限し、そして第二に、不十分な物理的性質は、活性成分の送達を強化するために用いられ得る製剤の選択枝を限定する。
【００３８】
Albertは、固有の生物活性を欠いているが活性薬物への代謝的変換が可能である化合物を表現するのにプロドラッグという用語を導入した（A. Albert, Selective Toxicity, Chapman and Hall, London, 1951）。プロドラッグは近年論評されており（P. Ettmayer et al., J. Med Chem. 2004 47(10):2393-2404; K. Beaumont et al., Curr. Drug Metab. 2003 4:461-485; H. Bundgaard, Design of Prodrugs: Bioreversible derivatives for various functional groups and chemical entities in Design of Produrgs, H. Bundgaard(ed) Elsevier Science Publishers, Amersterdam 1985; G. M. Pauletti et al. Adv. Drug Deliv. Rev. 1997 27:235-256; R. J. Jones and N. Bischofberger, Antiviral Res. 1995 27;1-15およびC. R. Wagner et al., Med. Res. Rev. 2000 20:417-45）、これらの文献は引用によりその全内容を本明細書の一部とする。この変換は特異的酵素、しばしば加水分解酵素によって触媒されるが、活性化合物は非特異的化学プロセスによって再生されることもある。
【００３９】
薬学的に許容されるプロドラッグとは、宿主において代謝、例えば加水分解または酸化されて、毒物学的不利益を有するフラグメントを形成せずに本発明化合物を形成する化合物を指す。典型的なプロドラッグの例は、活性化合物の官能基部分に結合した生物学的に不安定な保護基を有する化合物を包含する。糖部分にあるヒドロキシ基（群）の、アルキル化、アシル化またはその他の親油性修飾が、プロヌクレオシドの設計に利用されてきた。これらのプロヌクレオシドはインビボで加水分解または脱アルキル化されて活性化合物を生成できる。
【００４０】
経口バイオアベイラビリティーを制限する要因はしばしば、胃腸管からの吸収ならびに腸壁および肝臓による初回通過排泄である。ＧＩ管を経由した経細胞吸収の最適化は、ゼロより大きなＤ（７．４）を要する。しかしながら、分配係数の最適化が成功を保証する訳ではない。プロドラッグは、腸細胞にある活性な排出トランスポーターを回避する必要があるかも知れない。腸細胞での細胞内代謝は、排出ポンプにより腸管内腔へと代謝産物を戻す受動輸送または能動輸送を引き起こし得る。プロドラッグは、標的細胞またはレセプターに到達する前の、血中での望ましくない生物学的変換を回避するよう設計されねばならない。
【００４１】
ペプチドトランスポーター（ＰＥＰＴ蛋白）は、腸および腎臓の上皮細胞の刷子縁膜に局在する、プロトン共役能動輸送系（proton-coupled active transport system）であって、蛋白およびアミノ酸吸収において重要な役割を果たす。これらの輸送系がアミノ酸と結合した薬物の取り込みを仲介するという発見は、薬物デリバリーのための強力な手段を提供した（T. Terada and K. Inui, Curr. Drug Metab. 2004 5(1):85-94; E. De Clercq and H. J. Field, Brit. J. Pharmacol. 2006 147(1):1-11）。抗ヘルペスヌクレオシドであるアシクロビルおよびガンシクロビルは、Ｌ−アミノ酸エステルに結合する時、ＰＥＰＴ蛋白により効率的に細胞中に輸送されることが見いだされた（H. Han et al., Pharm. Res. 1998 15(8):1154-1159; C. U. Nielsen and B. Brodin, Curr. Drug Targets 2003 4(5):373-388）。アシクロビルのＬ−バリニルエステルおよびバラシクロビルはＰＥＰＴ取り込みの基質であることが見いだされた（G. M. Friedrichsen et al. Eur. J. Pharm. Sci. 2002 16(1-2):1-13; A. Guo et al. J. Pharm. Exp. Ther. 1999 289(32):29509-29514; M. E. Ganapathy et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998 246(2):470-475）。
【００４２】
２００４年１月８日公開のＷＯ２００４／００３０００においてJ. -P. Sommadossi等は、１’−、２’−、３’−および４’−置換β−Ｄおよびβ−Ｌヌクレオシドの２’−および３’プロドラッグを開示している。２００４年１月８日公開のＷＯ２００４／００２４２２では、フラビウイルス感染治療のための２’−Ｃ−メチル−３’−Ｏ−バリンエステルリボフラノシルシチジンを開示している。Idenixは、１のバリンエステル４（Ｂ＝シトシン）であると考えられる関連化合物ＮＭ２８３の治験を報告している。２００４年１月８日公開のＷＯ２００４／００２９９９では、J. -P. Sommadossi等が、ＨＣＶ感染を包含するフラビウイルス感染の治療のための、１’、２’、３’または４’分岐ヌクレオシドの、一連の２’または３’プロドラッグを開示している。２００４年６月２４日公開のＷＯ２００４／０５２８９９では、R. Storer等が、２β−メチル−シトシンの３’−Ｏ−バリニル誘導体の製造プロセスを開示している。２００４年７月１５日公開のＷＯ２００４／０５８７９２では、R. Storer等が３’−Ｏ−バリニル誘導体製造のための一段階プロセスを開示している。
【００４３】
２００５年１月２５日登録のＵＳ６８４６８１０においてJ. A. Martin等は、ＨＣＶ感染患者の治療に有用なプロドラッグとして４’−アジド−シトシンのアシル誘導体を開示している。Ｕ．Ｓ． Ｓｅｒ．Ｎｏ．１１／６３５８９８では、K. Sarma等が、ＨＣＶ感染患者の治療に有用な、２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−メチル−シチジンのジアシル誘導体を開示している。２００６年２月２３日公開のＵＳ公開Ｎｏ．２００６／００４０８９０では、J. A. Martin等が、ＨＣＶ感染患者の治療に有用な４’−アジド−シタラビンおよびそのプロドラッグを開示している。
【００４４】
本発明は、４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン（Ｉ、（２Ｒ）−２β−メチル−シチジンとも言う）：
【化５】
［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ３−５シクロアルキルおよびＣ２−５ハロアルキルより成る群から独立して選ばれる］
なる新規なジ−アシル誘導体ならびにそれらの水和物、溶媒和物および酸付加塩を目的とするものである。
【００４５】
本発明化合物は、ＨＣＶにより仲介される疾患の治療に有用であり、さらに本発明は、単剤または併用療法において本発明化合物を用いてＨＣＶ感染患者を治療する方法ならびに該化合物を含有する医薬組成物を含む。本発明はさらに、このジアシル誘導体を製造する方法に関するものである。
【００４６】
４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン Ｉ−４のＨＣＶポリメラーゼ阻害活性が開示されている（J. -P. Sommadossi等、上記）。臨床診療においては、ＨＣＶポリメラーゼを速やかに阻害する、高いＩ−４の血中レベルを提供し、それによって、ウイルスが突然変異して耐性株を選択する機会が最小限となる条件の下でウイルスレベルを低下させる事が望ましい。親ヌクレオシドでは充分な高レベルを達成するのは困難である。プロドラッグは、化合物の薬物動態学的および物理的性質を改善し、それによってバイオアベイラビリティーを最適化し得る。バリンエステルＩ−５がＩ−４のプロドラッグとして研究されてきた。
【００４７】
プロドラッグ候補物質の想定は一見単純に見えるが、適切な物理化学的および薬物動態学的性質、インビボ変換、ならびに安全性プロファイルを有する化合物の同定は、かなりの実験を要する複雑な複合的取り組みである。経口デリバリー用プロドラッグの同定に対する障害は、投与後の活性部分の迅速且つ効果的な放出を可能にしつつ、充分な水溶性、親油性および化学的安定性を維持することを包含する。プロドラッグの非エステラーゼ代謝およびトランスポーター仲介性クリアランスを最小化せねばならない（K.Beaumont
et al. Curr. Drug Metab. 2003 4(6):461-485)。チトクロムＰ４５０酵素の阻害または誘導もまた望ましくない薬物−薬物相互作用を産むことがある。
【００４８】
ここに、Ｉ−４のジエステルが優れたプロドラッグであり、実質的により高いＩ−４の血中レベルを提供することが見いだされた。
【００４９】
本発明の或る態様では、Ｒ１が本明細書上記に定義のとおりである、式Ｉの化合物が提供される。
【００５０】
本発明の別の態様では、Ｒ１がエチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチルまたはイソ−ブチルである、式Ｉの化合物が提供される。
【００５１】
本発明のさらに別の態様では、Ｒ１がエチルまたはイソ−プロピルである、式Ｉの化合物が提供される。
【００５２】
本発明のさらに別の態様では、Ｒ１がイソ−プロピルであり、該化合物が塩酸、メシル酸塩、ヘミ硫酸または硫酸塩である式Ｉの化合物が提供される。
【００５３】
本発明のもう一つの態様は、ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための抗ウイルス薬としての、上記定義による式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用である。
【００５４】
本発明の別の態様は、ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための、少なくとも一つの免疫系調節物質および／またはＨＣＶの複製を阻害する少なくとも一つの抗ウイルス薬と組み合わせた抗ウイルス薬としての、上記定義による式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用である。
【００５５】
本発明の別の態様は、ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための医薬を製造するための、上記定義による式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用である。
【００５６】
本発明の別の態様は、ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための医薬を製造するための、少なくとも一つの免疫系調節物質および／またはＨＣＶの複製を阻害する少なくとも一つの抗ウイルス薬と組み合わせた、上記定義による式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用である。
【００５７】
本発明のさらに別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の治療有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。
【００５８】
本発明のさらに別の態様では、１日あたり０．１〜１０g用量の式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。さらに別の態様では、この用量は一日あたり０．５および７gの間であり、さらなる態様では、この用量は１日あたり１．０および６．０gの間である。
【００５９】
本発明の別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の治療有効量、ならびに、少なくとも一つの免疫系調節物質および／またはＨＣＶの複製を阻害する少なくとも一つの抗ウイルス薬の治療有効量を、それを必要とする患者に同時投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。
【００６０】
本発明の別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の治療有効量、および、少なくとも一つの免疫系調節物質（この免疫系調節物質は、インターフェロン、インターロイキン、腫瘍壊死因子またはコロニー刺激因子である）の治療有効量を、それを必要とする患者に同時投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。
【００６１】
本発明の別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の治療有効量、および、少なくとも一つの免疫系調節物質（この免疫系調節物質は、インターフェロンまたは化学的に誘導体化されたインターフェロンである）の治療有効量を、それを必要とする患者に同時投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。
【００６２】
本発明の別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の治療有効量、および、少なくとも一つの他の抗ウイルス化合物の治療有効量を、それを必要とする患者に同時投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。
【００６３】
本発明の別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の治療有効量、および、少なくとも一つの他の抗ウイルス化合物（この化合物は、ＨＣＶプロテアーゼインヒビター、別のヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼインヒビター、非ヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼインヒビター、ＨＣＶヘリカーゼインヒビター、ＨＣＶプライマーゼインヒビターまたはＨＣＶ融合インヒビターである）の治療有効量を、それを必要とする患者に同時投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。
【００６４】
本発明の別の態様では、少なくとも一つの薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合した、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩を含む、医薬組成物が提供される。
【００６５】
本発明の別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の製造方法であって、下に列挙され実施例に例示される工程（ｉ）〜（ｖ）を含む方法が提供される。この方法は、均質であっても二相性であってもよい塩基性水性有機媒質中で、ＤＭＡＰ、および溶液を少なくとも約７．５のｐＨに維持するに充分な塩基の存在下に、本明細書に定義されるようなアシル化剤でＩを処理することを含む。本方法は、ヘテロ環式塩基による付随反応を伴わないアシル化が可能である。
【００６６】
本発明のさらなる態様は、塩基性反応条件下でＯ−アシルヌクレオシドIIを得るためのヌクレオシドＩの選択的Ｏ−アシル化：
【化６】
［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ３−５シクロアルキル、Ｃ２−５ハロアルキルおよび場合により置換されていてもよいフェニルより成る群から選ばれる］
の方法であって、
（ｉ）IIおよびＤＭＡＰを不均質な水性溶媒混合物に溶解し、水性塩基を添加してｐＨを約７．５〜約１２に調節し；
（ii）場合により充分な飽和ＮａＣｌ水を加えて二相性反応混合物を生成し；
（iii）アシル化剤を加え、ｐＨを約７．５〜約１２に維持するに充分なさらなる塩基を加え；
（iv）反応を監視して、変換が満足できるレベルに到達した時に前記アシル化剤および前記塩基の添加を中止し；
（ｖ）場合により、このＯ−アシルヌクレオシドを薬学的に許容される酸と接触させて、Ｏ−アシルヌクレオシドの酸付加塩を形成させる、
工程を含む方法である。
【００６７】
本明細書で使用する「ａ」または「ａｎ」という句は、１以上のその実体を指し；例えば、「ａ ｃｏｍｐｏｕｎｄ」とは、１以上の化合物または少なくとも一つの化合物を指す。このように、「ａ」（または「ａｎ」）、「１以上」、および「少なくとも一つ」は本明細書では互換的に使用できる。
【００６８】
「本明細書上記に定義されるように」という句は、本明細書に記載された最初の定義を指す。
【００６９】
本明細書で使用される「独立して」という語は、同じ化合物の内部に同じまたは異なる定義を有する変数が存在するかしないかに関わりなく、或る変数が任意の一例に適用されることを示す。したがって、Ｒ１が２回現れ、且つ「Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ３−５シクロアルキルおよびＣ２−５ハロアルキルより成る群から独立して選ばれる」と定義されている化合物では、両方のＲ１が同一であってもよいし、Ｒ１が異なる意義を有していてもよい。
【００７０】
本明細書で使用される「場合による」または「場合により」という語は、その後に記載される事象または状況が起こるかも知れないが起こる必要がある訳ではなく、この表現が、その事象または状況が起こる例と起こらない例を包含することを意味する。
【００７１】
本明細書で使用される「独立して」という語は、同じ化合物の内部に同じまたは異なる定義を有する変数が存在するかしないかに関わりなく、或る変数が任意の一例に適用されることを示す。したがって、Ｒ１が２回現れ、且つ「Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ３−５シクロアルキルおよびＣ２−５ハロアルキルより成る群から独立して選ばれる」と定義されている化合物では、両方のＲ１が同一であってもよいし、互いに異なっていてもよい。
【００７２】
本明細書で使用される「アルケニル」という語は、１または２個のオレフィン二重結合（好ましくは１個のオレフィン二重結合）を持ち２〜１０個の炭素原子を有する非置換炭化水素鎖基を指す。本明細書で使用される「Ｃ２−５アルケニル」とは、２〜５個の炭素より成るアルケニルを指す。例にはビニル、１−プロペニル、２−プロペニル（アリル）または２−ブテニル（クロチル）がある。
【００７３】
本明細書で使用される「アルキル」という語は、１〜１０個の炭素原子を含む非分岐または分岐鎖の飽和一価炭化水素残基を指す。本明細書で使用する「Ｃ２−５アルキル」とは、２〜５個の炭素より成るアルキルを指す。アルキル基の例には、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチルまたはペンチル、イソペンチル、ネオペンチルがあるが、これらに限定されない。
【００７４】
本明細書で使用される「シクロアルキル」という語は、３〜８個の炭素原子を含む飽和炭素環式環、即ちシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルまたはシクロオクチルを指す。本明細書で使用する「Ｃ３−５シクロアルキル」とは、炭素環式環内の３〜５個の炭素で構成されるシクロアルキルを指す。
【００７５】
本明細書で使用される「ハロアルキル」という語は、１、２、３またはそれ以上の水素原子がハロゲンで置換されている、上記定義による非分岐または分岐鎖アルキル基を指す。本明細書で使用される「Ｃ２−５ハロアルキル」とは、２〜５個の炭素および１〜１１個のハロゲン置換基より成るハロアルキルを指す。例には、１−フルオロメチル、１−クロロメチル、１−ブロモメチル、１−ヨードメチル、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、トリブロモメチル、トリヨードメチル、１−フルオロエチル、１−クロロエチル、１−ブロモエチル、１−ヨードエチル、２−フルオロエチル、２−クロロエチル、２−ブロモエチル、２−ヨードエチル、２，２−ジクロロエチル、３−ブロモプロピルまたは２，２，２−トリフルオロエチルがある。
【００７６】
本明細書で使用される「ジ−アシル」誘導体という語は、３’−および５’−ヒドロキシがエステル−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ１［式中、Ｒ１は請求項１に定義のとおりである］である、本明細書に記載の誘導体化されたヌクレオシド化合物を指す。
【００７７】
本明細書で使用される「アシル化剤」という語は、無水物または酸ハロゲン化物のいずれかを指す。本明細書で使用される「無水物」という語は、一般構造Ｒ１Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｒ１［式中、Ｒ１は請求項１に定義の通りである］で示される化合物を指す。本明細書で使用される「酸ハロゲン化物」という語は、一般構造Ｒ１Ｃ（Ｏ）Ｘ［式中、Ｘはハロゲンである］で示される化合物を指す。「アシルイミダゾール」という語は、一般構造Ｒ１Ｃ（Ｏ）Ｘ［式中、ＸはＮ−イミダゾリルである］で示される化合物を指す。
【００７８】
本明細書で使用される、化合物の「活性化誘導体」という語は、元の化合物を所望の化学反応において活性にする、該化合物の一時的な反応性形態を指し、ここで、元の化合物は中等度に反応性であるか、または非反応性である。活性化は、元の化合物よりも高い自由エネルギー内容量を有する、誘導体または当該分子内部の化学基を形成することによって達成され、このことにより、活性化型が他の試薬とより反応し易くなる。本発明の状況において、カルボキシ基の活性化が特に重要であり、対応する活性化剤またはカルボキシ基を活性化する基を、下により詳細に述べる。本発明にとって特に興味深いのは、カルボン酸無水物およびカルボン酸塩化物である。
【００７９】
本明細書で使用される「不均質な水性溶媒混合物」という句は、二相性または不均質な混合物を生成する、水および有機共溶媒の混合物を指す。この不均質な水性溶媒混合物は、限られた水溶性を持つ共溶媒から生成されてもよく、または水性成分のイオン強度を、水相中での共溶媒の溶解度を限定するよう調節することができる。
【００８０】
「アルカリ金属水酸化物」という語は、式ＭＯＨ［式中、Ｍは、リチウム、ナトリウム、カリウムまたはセシウムである］で示される化合物を指し、「アルカリ金属重炭酸塩」は、式ＭＨＣＯ３［式中、Ｍは、ナトリウムまたはカリウムである］を指し、そして「アルカリ金属炭酸塩」は、式Ｍ２ＣＯ３［式中、Ｍはナトリウムまたはカリウムである］を指す。当業者は、ｐＨを所望の範囲に維持するために他の塩基を使用でき、そして他の塩基もまた本発明の範囲内にあることが理解できるであろう。
【００８１】
本明細書で使用される略語には、アセチル（Ａｃ）、雰囲気（Ａｔｍ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、メチル（Ｍｅ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、ブチル（Ｂｕ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、融点（ｍｐ）、ＭｅＳＯ２−（メシルまたはＭｓ）、質量分析（ｍｓ）、メチルｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、プロピル（Ｐｒ）、ポンド／平方インチ（ｐｓｉ）、ビリジン（ｐｙｒ）、室温（ｒｔまたはＲＴ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、トリエチルアミン（Ｅｔ３ＮまたはＴＥＡ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）、エチル（Ｅｔ）、４−Ｍｅ−Ｃ６Ｈ４ＳＯ２−またはトシル（Ｔｓ）、イソ−プロピル（ｉ−Ｐｒ）、エタノール（ＥｔＯＨ）がある。接頭辞ノルマル（ｎ）、イソ（ｉ−）、第二（ｓｅｃ−）、第三（ｔｅｒｔ−）およびネオを包含する常套的命名法は、アルキル部分と共に使用される場合、それらの慣用的意義を有する（J. Rigaudy and D. P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford）。
【００８２】
本発明に包含され本発明の範囲内にある代表的化合物の例を表Ｉに記載する。これらの例およびそれに続く製造例は、当業者が本発明をより明確に理解し実施できるよう、提供するものである。それらは本発明の範囲を限定するものと考えてはならず、単に本発明を例示および代表するものと考えるべきである。
【００８３】
一般に、本明細書で使用される命名法は、ＩＵＰＡＣ体系的命名法の創成のためのAUTONOM（登録商標）v.4.0、Beilstein Instituteコンピューターシステムに基づいている。表示される構造とその構造に与えられた名称の間に相違がある場合、表示された構造により重要性を認めるべきである。さらに、構造または構造の一部の立体化学が例えば太線または点線によって示されていない場合、その構造または構造の一部は、全ての立体異性体を包含すると解釈すべきである。これらの環系の付番方式を表１に示す。
【００８４】
【表１】
【００８５】
ヒト対象における潜在的挙動をさらに評価するため、Ｃａｃｏ−２細胞を経由した輸送を推定プロドラッグについて評価した。Ｃａｃｏ−２細胞は、分子の潜在的吸収／透過性を評価するために一般的に使用される（G. Gaviraghi et al. in Pharmacokinetic optimization in drug research. Biological, Pharmacokinetic and Computational Strategies. B. Testa et al. eds. Wiley Interscience VCH, Zurich 2001 pp3-14）。Ｉ−４のＣ２−４アルキルジエステルについてＣａｃｏ−２透過性が許容可能であることが判明した。
【００８６】
本発明化合物は、水性有機溶媒中、Ｉ−４のアシル化により一工程で製造するのが好都合である。溶媒は、均質な水溶液または二相溶液のいずれであってもよい。水性有機溶媒のｐＨは、アシル化によって生成される酸を中和するための塩基を添加することにより、７．５以上に維持される。この塩基は、アルカリもしくはアルカリ金属水酸化物または第三アミンのいずれかとすることができる。この反応を、当分野においてアシル化の触媒であることが知られているＤＭＡＰの存在下で実施する。この方法の有利な点は、ヘテロ環式塩基をアシル化せずに所望生成物を取得できることである。保護基は必要なく、よって保護／脱保護工程の必要性を排除できる。この方法を、付記する実施例に記載する。
【００８７】
本発明化合物は多岐にわたる経口投与剤型および担体中に調合できる。経口投与は、錠剤、被覆錠剤、硬および軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳剤、シロップ剤、または懸濁剤の形態とすることができる。本発明化合物は、他の投与経路の中でも特に、坐剤投与する時に有効である。最も好都合な投与方法は一般に、都合の良い毎日の投薬レジメンを用いる経口投与であり、このレジメンは、疾患の重篤度および抗ウイルス薬に対する患者の反応に従って調節できる。
【００８８】
本発明化合物または化合物群および薬学的に使用可能なそれらの塩を、１以上の常套的賦形剤、担体、または希釈剤と共に、医薬組成物および単位剤型の形態とすることができる。この医薬組成物および単位投薬形態は、さらなる活性化合物を含むまたは含まない、常套的割合の常套的成分で構成され、そして、単位投薬形態は、使用される目的日用量範囲に相応する活性成分の、適切な有効量を含有できる。この医薬組成物は、固体、例えば錠剤もしくは充填済みカプセル剤、半固体、散剤、持続放出調合物、または液体、例えば懸濁剤、乳剤、もしくは経口使用のための充填済みカプセル剤；または直腸もしくは腟内投与のための坐剤の形態で使用できる。典型的な調製物は、約５%〜約９５%の活性化合物または化合物群（ｗ／ｗ）を含有するであろう。「調製物」または「投薬形態」という語は、活性化合物の固体および液体調合物の両者の包含を意図しており、当業者は、所望の用量および薬物動態学的パラメータに応じて活性成分が異なる調合物として存在できることが理解できるであろう。
【００８９】
本明細書で使用する「賦形剤」という語は、医薬組成物の製造に使用され、一般に安全で、非毒性で、且つ生物学的にもその他の点でも不適切でない化合物を指し、獣医学的使用およびヒトへの薬学的使用のために許容される賦形剤を包含する。本発明化合物は単独で投与できるが、一般的には、目的とする投与経路および標準的薬務に関して選択された１以上の適切な薬学的賦形剤、希釈剤または担体と混合して投与される。
【００９０】
さらに、活性成分の「薬学的に許容される塩」の形態は、まず非塩形態においては存在しない望ましい薬物動態学的性質を活性成分に付与し、そして、身体におけるその治療活性の点で活性成分の薬力学に良い影響を与えることさえある。本明細書で使用される化合物の「薬学的に許容される塩」という句は、薬学的に許容され、親化合物の望ましい薬理活性を有する塩を意味する。そのような塩には、（１）塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などのような無機酸によって形成される；もしくは、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタン−ジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、サリチル酸、ムコン酸等のような有機酸によって形成される酸付加塩がある。薬学的に許容される塩に対する全ての言及は、本明細書で定義される、同じ酸付加塩の、溶媒付加形態（溶媒和物）または結晶形態（多形）を包含する事を理解すべきである。
【００９１】
固体形態の調製物には、散剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、坐剤、および分散性顆粒剤がある。固体担体は、希釈剤、香料、可溶化剤、潤滑剤、懸濁化剤、結合剤、保存剤、錠剤崩壊剤、またはカプセル化材料としても働き得る１以上の物質であってよい。散剤においては、担体は一般に、微粉化された活性成分との混合物である、微粉化された固体である。錠剤においては、活性成分を、一般に、必要とされる結合能を有する担体と適切な割合で混合し、所望の形状およびサイズに圧縮する。好適な担体は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、乳糖、ペクチン、デキストリン、澱粉、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ロウ、カカオ脂などを包含するが、これらに限定される訳ではない。固体形態調製物は、活性成分に加えて、着色料、香料、安定剤、緩衝剤、人工および天然甘味料、分散剤、増粘剤、可溶化剤などを含有できる。
【００９２】
液体製剤もまた経口投与に好適であり、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤および水性懸濁剤をはじめとする液体製剤を包含する。これらは、使用直前に液体形態調製物に変換されるよう意図されている固体形態調製物を包含する。乳剤は、溶液、例えばプロピレングリコール水溶液中に調製することができ、または、レシチン、ソルビタンモノオレアート、またはアラビアゴムのような乳化剤を含有することができる。水性懸濁液は、微粉化した活性成分を、粘性材料、例えば天然または合成ゴム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、およびその他の周知の懸濁化剤を用いて水に分散させる事によって製造できる。
【００９３】
本発明化合物は、坐剤として投与するために調合することができる。まず、低融点ロウ、例えば脂肪酸グリセリド混合物またはカカオ脂を融解させ、活性成分を例えば撹拌によって均一に分散させる。次に、溶融した均質な混合物を、都合の良いサイズの鋳型に注ぎ、冷却し、固化させる。
【００９４】
本発明化合物は、腟内投与用に調合することができる。活性成分に加えて、当分野で適当であることが知られているような担体を含む、ペッサリー、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、発泡剤またはスプレー剤。
【００９５】
好適な製剤は、薬用担体、希釈剤および賦形剤と共に、E. W. Martin編、Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvaniaに記載されている。熟練した製剤科学者は、本明細書の教示内の製剤を改変して、本発明に係る組成物を不安定にしたりそれらの治療活性を損なったりすることなく、特定の投与経路のための数多くの製剤を提供することができる。
【００９６】
本化合物を、例えば水またはその他の媒質に対してより可溶性にする改変は、軽微な改変（例えば塩の形成）によって容易に達成でき、それらは充分に当分野の通常の技術範囲内にある。患者に最大有益効果が得られるように本化合物の薬物動態を管理するため、特定化合物の投与経路および投薬レジメンを改変することも、充分に当分野の通常の技術範囲内にある。
【００９７】
本明細書で使用する「治療有効量」という語は、個体において疾患の症状を低減させるのに必要な量を意味する。用量は、それぞれ特定の症例における個体の必要性に適合させる。その用量は、治療しようとする疾患の重篤度、患者の年齢および全身健康状態、患者がそれによって治療されている他の医薬、投与経路および投与形態、ならびに関わっている医師の好みおよび経験といった数多くの因子に応じて広範囲に変わり得る。経口投与のためには、一日あたり約０．１および約１０gの間の日用量が、単剤療法および／または併用療法において好適である。好ましい日用量は、一日あたり約０．５および約７．５g、より好ましくは１．５および約６．０gの間である。一般的に、治療はウイルスを速やかに減少させまたは排除するため大量の初期「負荷用量」で開始し、その後感染の再発を防止するに充分なレベルまで用量を減少させる。本明細書に記載の疾患の治療における通常の技術を有する者は、過度の実験を行うことなく、個人の知識、経験および本出願の内容に依拠して、与えられた疾患および患者のための本発明化合物の治療有効量を確定することができる。
【００９８】
治療上の有効性は、血清蛋白（例えば、アルブミン、凝固因子、アルカリホスファターゼ、アミノトランスフェラーゼ（例えば、アラニントランスアミナーゼ、アスパラギン酸トランスアミナーゼ）、５’−ヌクレオシダーゼ、γ−グルタミニルトランスペプチダーゼ、等）のような蛋白レベル、ビリルビン合成、コレステロール合成、および胆汁酸合成を包含する（但しこれらに限定されない）肝機能；炭水化物代謝、アミノ酸およびアンモニア代謝を包含する（但しこれらに限定されない）肝代謝機能の試験から確認できる。或いは、治療上の有効性はＨＣＶ−ＲＮＡを測定することによって監視できる。これらの試験の結果によって用量を最適化できる。
【００９９】
本発明の態様において、活性化合物または塩を、リバビリンのような他の抗ウイルス薬、他のヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼインヒビター、ＨＣＶ非ヌクレオシドポリメラーゼインヒビター、ＨＣＶプロテアーゼインヒビター、ＨＣＶヘリカーゼインヒビターまたはＨＣＶ融合インヒビターと組み合わせて投与できる。活性化合物またはその誘導体もしくは塩を他の抗ウイルス薬と組み合わせて投与する時、その活性は、親化合物よりも増大し得る。治療が併用療法である場合、このような投与は、ヌクレオシド誘導体の投与に関して同時または連続的とすることができる。よって本明細書で使用される「同時投与」とは、同時または異なる時点での該物質の投与を包含する。２以上の物質の同時投与は、２以上の活性成分を含有する単一製剤によって、または、単一の活性物質を有する２以上の投薬形態の実質的同時投与によって達成できる。
【０１００】
本明細書における、治療に対する言及は、現在の状態の予防および治療に拡大されることを理解されたい。さらに、本明細書で使用されるＨＣＶ感染の「治療」という語もまた、ＨＣＶ感染に付随するまたはそれにより仲介される疾患もしくは状態、またはその臨床症状の治療もしくは予防を包含する。
【０１０１】
実施例１
プロピオン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−ヒドロキシ−４−メチル−３−プロピオニルオキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル；塩酸塩９（Ｉ−１）。
ＴＨＦ（１５mL）およびＨ２Ｏ（７mL）中のＩ−４（１．０g、３．８９mmol）の溶液にＴＥＡ（４．７２g、３３．８７mol）を加え、反応混合物を５℃に冷却した。反応混合物の温度を０℃以下に維持しながら塩化プロピオニル（１．４４g、１５．４５mmol）を徐々に加えた。反応をｈｐｌｃで監視し、初期添加が完了した後、モノプロピオナートエステルがまだ存在していたので、さらなる塩化プロピオニル（０．７２g、７．７７mmol）を加え、反応をＲＴで一夜撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、濃ＨＣｌでｐＨを約６．５に調節した。混合物をＥｔＯＡｃ（３０mL）およびＨ２Ｏ（１５mL）に分配し、相を分離した。水相をＥｔＯＡｃ（２ｘ２５mL）で抽出し、合した有機抽出液を希ブライン（２ｘ２０mL）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、油状物として遊離塩基を得た。この油状物をＩＰＡ（５mL）に溶解し、ＩＰＡ中のＨＣｌ（約４Ｎ ＨＣｌ １mL）で処理し、減圧濃縮した。残留物をＩＰＡ／ＭＴＢＥ／酢酸イソプロピル（１：３：１５）から再結晶し、得られた結晶を濾過し、酢酸イソプロピルで洗浄し、８０℃で減圧乾燥すると、０．９５g（６０．１%）のＩ−１が得られた。
【０１０２】
実施例２
イソ酪酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−ヒドロキシ−３−イソブチリルオキシ−４−メチル−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル；塩酸塩（Ｉ−２）。
Ｉ−４（０．５０g、１．９４mmol）、ＤＭＡＰ（０．０２６g、０．２１mmol）、ＴＨＦ（８mL）およびＨ２Ｏ（４mL）の溶液に、ＴＥＡ（２．３６g、１６．９３mmol）を加え、反応混合物を約−５℃に冷却した。反応温度が０℃以下に維持される速度でイソブチリルクロリド（０．９３mL、８．７５mmol）を滴下した。反応をＨＰＬＣ−ＭＳで監視した。モノアシル化副生成物を除去するため（ｈｐｌｃにより測定）、さらなる０．４１gおよび０．２１gアリコートのイソブチリルクロリド（計１．５５g、１４．５８mmol）を加えた。反応をＲＴで一夜撹拌し、０℃に冷却し、濃ＨＣｌでｐＨを６．５に調節した。混合物をＥｔＯＡｃ（３０mL）およびＨ２Ｏ（１５mL）に分配し、相を分離した。水相をＥｔＯＡｃ（２ｘ１５mL）で抽出し、合わせた有機抽出液を、希ブライン（２０mL）、希ＮａＨＣＯ３（２０mL）、希ブライン（１５mL）で順次洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、油状物として遊離塩基を得た。この油状物をＩＰＡ（５mL）に溶解し、ＩＰＡ中のＨＣｌ（約４Ｎ ＨＣｌ １mL）で処理し、減圧濃縮した。残留物をＩＰＡ／ＭＴＢＥ（１：１０）から再結晶し、得られた結晶を濾過し、ＭＴＢＥで洗浄し、８０℃で減圧乾燥すると、０．６１g（７２．６%）のＩ−２が得られた。
【０１０３】
実施例３
ペンタン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−ヒドロキシ−４−メチル−３−ペンタノイルオキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル；塩酸塩（Ｉ−３）。
Ｉ−４（０．４９０g、１．９０mmol）、ＤＭＡＰ（０．０２６g、０．２１mmol）、ＴＨＦ（７mL）およびＨ２Ｏ（３mL）の溶液に、ＴＥＡ（２．３１g、１６．５９mmol）を加え、反応混合物を約０℃に冷却した。反応温度が５℃以下に維持される速度で無水吉草酸（１．６g、２．５７mmol）を滴下した。反応をＨＰＬＣ−ＭＳで監視した。モノアシル化副生成物を除去するため、０．３２gアリコートの無水吉草酸を２回加えた（計２．２４g、１１．９９mmol）。反応混合物を０℃に冷却し、濃ＨＣｌでｐＨを６．８に調節した。混合物をＥｔＯＡｃ（３０mL）およびＨ２Ｏ（１５mL）に分配し、相を分離した。水相をＥｔＯＡｃ（２ｘ１５mL）で抽出し、合わせた有機抽出液を、希ＮａＨＣＯ３（２ｘ２０mL）および水（１ｘ２０mL）で順次洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、油状物として遊離塩基を得た。この油状物をＩＰＡ（５mL）に溶解し、ＩＰＡ中のＨＣｌ（約４Ｎ ＨＣｌ ０．８mL）で処理し、減圧濃縮した。残留物をＩＰＡ／ＭＴＢＥ／ヘプタン（１：０．５：１０；１５mL）から再結晶し、得られた結晶を濾過し、ヘプタンで洗浄し、Ｎ２雰囲気下に８０℃で減圧乾燥すると、０．８８g（５５．７%）のＩ−３が得られた。
【０１０４】
実施例４
ラットにおける薬物動態学的パラメータの決定
体重２００〜２５０gの無傷の雄性ＩＧＳウィスターハンラットＣｒｌ：ＷＩ（ＧＬｘ／ＢＲＬ／Ｈａｎ）ＩＧＳ ＢＲ（ハノーバー−ウィスター）ラットを使用した。実験化合物の各用量レベルについて３匹のラットより成る群を使用した。実験の間は動物に餌と水を自由に摂取させた。被験物質を、１０mg/kgのＩ−５に相当する用量で、Ｃａｐｔｅｘ ３５５ＥＰ、Ｃａｐｍｕｌ ＭＣＭ、ＥｔＯＨ、およびプロピレングリコール（３０：２０：２０：３０）を含有する水性懸濁液として調合し、強制栄養により経口投与した。０．２５、０．５、１、３、５、および８時間の時点で頸静脈カニューレから、そして２４時間の時点で心臓穿刺により、処置ラットから血液試料（０．３mL）を採取した。この試料にシュウ酸カリウム／ＮａＦを加え、サンプリング操作の間、氷上に保存した。試料をできるだけ速やかに−４℃の冷蔵遠心機で遠心し、血漿試料を、分析するまで−８０℃の冷凍庫に保存した。血漿のアリコート（０．０５mL）をアセトニトリル０．１mLと混合した。内部標準（水中０．０５mL）および０．０２mLのブランク溶媒を加えた。非処置ラット由来の血漿０．０５mLアリコートをアセトニトリル０．１mL、メタノール：水（１：１）中の標準溶液０．０２mLアリコート、および水中の内部標準０．０５mLアリコートと混合することにより、一組の較正標準を作製した。各々の血漿試料および較正標準を良く撹拌し、次いで３０００ｒｐｍで５分間遠心して蛋白を沈殿させた。遠心で得た上清（各々１００μL）を、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析用に２００μLの水性移動相を入れた９６ウェルプレートに移した。
【０１０５】
試料の分析 − プロドラッグを、タンデム質量分析計（ＨＰＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）を備えた高速液体クロマトグラフィーを用いて分析した。分離にはＴｈｅｒｍｏ Ａｑｕａｓｉｌ Ｃ１８ ４．６ｘ５０mmカラム（５μM）を使用した。イオン化プロセスにはエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）を使用した。移動相Ａは、０．１%ギ酸を加えた水中５mM酢酸アンモニウムを含有し、移動相Ｂは、０．１%ギ酸を加えたＭｅＯＨを含有していた。溶離を１mL/分の流速で勾配を使用して実施した。
【０１０６】
実施例５
Ｃａｃｏ２プロトコル
材料
クレブス・ヘンゼライト緩衝液、塩化カルシウム二水和物、および重炭酸ナトリウムの粉末はSigma（St. Louis, MO）から購入した。Ｃａｃｏ−２細胞（継代 〜１００）はRoche Baselから得た。ダルベッコ改良イーグル培地（ＤＭＥＭ）／ｈｉｇｈ ｍｅｄｉｕｍ、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタン−スルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、および牛血清は、JRH Bioscience（Lenexa, KS）から取得した。ＭＥＭ非必須アミノ酸、Ｌ−グルタミン、ペニシリン、およびストレプトマイシンはGIBCO Labs, Life Tech. LLC（Grand Island, NY）から得た。Ｓｎａｐｗｅｌｌ細胞培養インサート（直径６．５mm、１．１２cm2、孔径０．４μm）はCostar（Cambridge, MA）から取得した。
【０１０７】
細胞培養
７５cm2のフラスコで細胞を増殖させ、５%ＣＯ２および９５%空気の雰囲気下で３７℃に維持した。培地は、５%牛血清、２５mMＨＥＰＥＳ、１%ＭＥＭ非必須アミノ酸、１%Ｌ−グルタミン、１００U/mLペニシリン、および１００μg/mLストレプトマイシンを添加したＤＭＥＭ／ｈｉｇｈ ｍｅｄｉｕｍで構成した。培養を分割比１−３で毎週継代した。透過性の実験のため、継代数１１０〜１２０のＣａｃｏ−２細胞をＳｎａｐｗｅｌｌインサートに入れたＴｒａｎｓｗｅｌｌポリカーボネートフィルター上に４０００００細胞／cm2の密度で撒き、使用前に７日間培養した。
【０１０８】
クレブス・ヘンゼライト緩衝液
１０mMグルコースおよび２．５mM ＣａＣｌ２を含有しｐＨ６．５および７．４に調節したクレブス・ヘンゼライト重炭酸塩緩衝液を、パケットの指示どおりに調製した。塩粉末を、ミリポア水で必要容量の約９０％に定量的に溶解した。１Ｎ ＨＣｌまたは１Ｎ ＮａＯＨでｐＨ調節する前に、塩化カルシウム二水和物および重炭酸ナトリウムを加えた。さらなるミリポア水を加えてこの溶液を最終容量とした。この溶液を０．２２ミクロン孔の膜を用いて濾過滅菌し、使用するまで冷蔵庫（〜２０℃）で保存した。
【０１０９】
細胞の調製
Cell Culture Core Facilityから分化した細胞を得、５%ＣＯ２および９５%空気の雰囲気下に３７℃で平衡化させた。ｃａｃｏ−２単層を含むＳｎａｐｗｅｌｌインサートを３７℃の平衡化したクレブス・ヘンゼライトｐＨ７．４緩衝液ですすいだ。
【０１１０】
方法
拡散チャンバーとして細胞インサートを利用した。頂端および側底チャンバー中のクレブス・ヘンゼライト緩衝液のｐＨはそれぞれ６．５および７．５であり、頂端側の基質の初期濃度は１００μMであった。頂端チャンバー中の被験化合物を伴う細胞を、５%ＣＯ２および９５%空気の雰囲気下に３７℃でおよそ３０分間プレインキュベートした。ｐＨ６．５クレブス・ヘンゼライト緩衝液中１００μMの化合物を伴う細胞インサートを、側底チャンバー中のプレ平衡化緩衝液を入れた新たなプレート中に移した時に実験を開始した。ドナー側からの試料を時刻０分に、そしてドナーおよびレシーバー側からの両試料を時刻３０分に採取して分析した。
【０１１１】
実験後対照
ルシファーイエローを使用して拡散系の挙動を評価した。被験化合物の最終サンプリングの後、ルシファーイエローを初期濃度１００μMとなるように頂端チャンバーに加えた。６０分間インキュベートした後、底部チャンバーから２５０μLを取り、アッセイした。
【０１１２】
透過係数（Ｐａｐｐ）の算出
Ｐａｐｐを以下の式を用いて算出した：
【０１１３】
【数１】
【０１１４】
式中、Ｖは、レシーバー溶液の容量（cm3）であり、Ａは、Ｓｎａｐｗｅｌｌインサートの表面積（cm2）であり、Ｃ０は初期濃度（nM）であり、そしてｄＣ／ｄｔは、レシーバーチャンバー内の経時的濃度変化、即ち、レシーバーチャンバー内の濃度対時間の傾き（nM/分）である。各サンプリング時点における濃度は、実験に応じて、取り除いたアリコートまたは新しいプレートへのドナーインサートの移動を考慮して補正した。
【０１１５】
実施例６
本化合物のための代表的医薬組成物
【０１１６】
【表２】
【０１１７】
成分を混合し、造粒し、活性化合物約５００mgを入れた硬ゼラチンカプセルに分注する。
【０１１８】
【表３】
【０１１９】
成分を合わせ、水などの溶媒を用いて造粒する。次にこの調合物を乾燥し、適切な打錠機を用いて活性化合物約５００mgを含有する錠剤を製造する。
【０１２０】
【表４】
【０１２１】
成分を混合して経口投与のための懸濁剤を製造する。
【０１２２】
【表５】
【０１２３】
成分を一緒に融解し、蒸気浴上で混合し、総重量２．５gが入る鋳型に注ぐ。
【０１２４】
それらの特別な形態で、もしくは開示された機能を実行する手段の観点で表した、上の説明または後の請求項に開示される特徴、または開示された結果を達成する方法もしくは過程は、必要に応じて、別々に、またはそのような特徴を任意に組み合わせて、様々な形態で本発明を実現するために利用できる。
【０１２５】
前記の発明を、明確化および理解の目的のため、説明および実施例によって幾分詳細に記載してきた。付記する請求項の範囲内で変更および修飾を施し得ることは、当業者には明らかであろう。故に、上の説明は例示的なものであって限定的なものでないことを理解すべきである。したがって本発明の範囲は、上の説明を参照して決定すべきものではなく、以下に付記する請求項および係る請求項が権利を与える等価物の全範囲を参照して決定せねばならない。
【０１２６】
本明細書に引用する全ての特許、特許出願および公報は、各々個々の特許、特許出願または公報が個別にその旨記載してあるかの如く、引用によりその全内容を本明細書の一部とする。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼのインヒビターのプロドラッグである３’，５’−ジ−Ｏ−アシル化ヌクレオシドを提供するものである。経口投与される時、これらの化合物は消化管から容易に吸収され、インビボで効率的に親ヌクレオシドに戻る。これらのプロドラッグは、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス複製を阻害し、ＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼのインヒビターとして、ＨＣＶ複製のインヒビターとして、そして哺乳動物のＣ型肝炎感染の治療に有用である。
【０００２】
特に本発明は、このヌクレオシドが経口投与された時に改善された薬物吸収を提供し、過去に開示されたプロドラッグよりも優れた、アシル化ピリミジンヌクレオシドの使用に関わるものである。
【０００３】
Ｃ型肝炎ウイルスは重大な健康問題であり、全世界で慢性肝疾患の主たる原因となっている（Boyer, N. et al. J. Hepatol. 2000 32:98-112）。ＨＣＶに感染した患者は、肝硬変とこれに続く肝細胞癌を発症するリスクがあり、よってＨＣＶは肝臓移植の主要な適応である。
【０００４】
世界保健機関によれば、２億人以上の感染者が全世界に存在し、毎年少なくとも３００〜４００万人が感染している。いったん感染すると、約２０%の人間はウイルスが除去されるが、残りの人間はその後の人生でＨＣＶを担持し得る。慢性感染した人間の１０〜２０%は、最終的には肝臓を破壊する肝硬変または癌を発症する。このウイルス疾患は、汚染された血液および血液製品、汚染された針によって、または性的に非経口的な伝染をし、感染した母親またはキャリアの母親から子へと垂直に伝染する。組換えインターフェロンα単独またはヌクレオシド類似体リバビリンとの組み合わせを用いた免疫療法に限定されているＨＣＶ感染の現行治療は、急速に耐性が現れるため、臨床上の有益性が限られている。慢性ＨＣＶ感染に対して効果的に闘う、改善された治療薬に対する緊急の必要性がある。
【０００５】
現在、ＨＣＶ感染の治療に使用できる認可された治療法は限られた数しかない。ＨＣＶを治療するための新規および既存の治療的アプローチならびにＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害が以下で論じられている：R. G. Gish, Sem. Liver. Dis., 1999 19:5; Di Besceglie, A. M. and Bacon, B. R., Scientific American, October: 1999 80-85; G. Lake-Bakaar, "Current and Future Therapy for Chronic Hepatitis C Virus Liver Disease", Curr. Drug Targ. Infect Dis. 2003 3(3):247-253; P. Hoffmann et al, "Recent patents on experimental therapy for hepatitis C virus infection (1999-2002)", Exp. Opin. Ther. Patents 2003 13(11): 1707-1723; F. F. Poordad et al. "Developments in Hepatitis C therapy during 2000-2002", Exp. Opin. Emerging Drugs 2003 8(l):9-25; M. P. Walker et al, "Promising Candidates for the treatment of chronic hepatitis C", Exp. Opin. Investig. Drugs 2003 12(8):1269-1280; S.-L. Tan et al, "Hepatitis C Therapeutics: Current Status and Emerging Strategies", Nature Rev. Drug Discov. 2002 1:867-881; R. De Francesco et al. "Approaching a new era for hepatitis C virus therapy: inhibitors of the NS3-4A serine protease and the NS5B RNA-dependent RNA polymerase", Antiviral Res. 2003 58: 1-16; Q. M. Wang et al. "Hepatitis C virus encoded proteins: targets for antiviral therapy", Drugs of the Future 2000 25(9):933-8-944; J. A. Wu and Z. Hong, "Targeting NS5B-Dependent RNA Polymerase for Anti-HCV Chemotherapy", Cur. Drug Targ.-Inf Dis. 2003 3:207-219。これらの総論は、現在開発プロセスの様々な段階にある化合物に言及している。同一または異なる標的に対する２または３種の抗ウイルス薬による併用療法が、耐性ウイルス株の発生を回避または遅延させるための標準的な抗ウイルス療法となっており、上記の総論に開示される化合物は本発明化合物との併用療法に使用でき、これらの総論を引用によりその全内容を本明細書の一部とする。
【０００６】
リバビリン（１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−カルボン酸アミド；VIRAZOLE（登録商標））は、合成の、非インターフェロン誘導性広域スペクトル抗ウイルスヌクレオシド類似体である。リバビリンは、Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅを包含する幾つかのＤＮＡおよびＲＮＡウイルスに対してインビトロ活性を有する(G. L. Davis, Gastroenterology 2000 118:S104-S114)。単剤療法では、リバビリンは患者の４０%において血清アミノトランスフェラーゼレベルを正常まで低下させるが、ＨＣＶ−ＲＮＡの血清レベルは低下させない。さらに、リバビリンは著しい毒性を示し、貧血を誘発することがわかっている。リバビリンはＨＣＶに対する単剤療法には認可されていないが、この化合物はインターフェロンα−２ａおよびインターフェロンα−２ｂとの併用療法において認可されている。ビラミジンは肝細胞でリバビリンに変換されるプロドラッグである。
【０００７】
ほぼ１０年の間、慢性肝炎の治療にインターフェロン（ＩＦＮ）が利用されてきた。ＩＦＮは、ウイルス感染に応答した免疫細胞により産生される糖蛋白である。二つの異なったタイプのインターフェロンが認められている：１型には幾つかのインターフェロンαおよび一つのインターフェロンβが含まれ、２型にはインターフェロンγが含まれる。１型インターフェロンは主に感染した細胞によって産生され、近傍の細胞をデノボ感染から防御する。ＩＦＮは、ＨＣＶを包む多くのウイルスのウイルス複製を阻害し、Ｃ型肝炎感染の唯一の治療として使用する場合、ＩＦＮは血清ＨＣＶ−ＲＮＡを検出不能レベルにまで抑制する。加えて、ＩＦＮは血清アミノトランスフェラーゼレベルを正常化する。都合の悪い事に、ＩＦＮの効果は一時的である。治療の終了によって再発率７０%という結果となり、僅か１０〜１５%が、正常な血清アラニントランスフェラーゼレベルを持つ持続的ウイルス学的反応を示すに過ぎない（L. -B. Davis, 上記）。
【０００８】
初期ＩＦＮ療法の一つの制限は、血液からのこの蛋白の急速なクリアランスであった。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を用いたＩＦＮの化学的誘導体化は、実質的に改善された薬物動態学的性質を有する蛋白を生成した。PEGASYS（登録商標）は、インターフェロンα−２ａおよび４０ｋＤ分岐モノメトキシＰＥＧのコンジュゲートであり、そしてPEG-INTRON（登録商標）は、インターフェロンα−２ｂおよび１２ｋＤモノメトキシＰＥＧのコンジュゲートである（B. A. Luxon et al., Clin. Therap. 2002 24(9):13631383; A. Kozlowski and J. M. Harris, J. Control. Release, 2001 72:217-224）。
【０００９】
インターフェロンα−２ａおよびインターフェロンα−２ｂが、現在ＨＣＶ治療のための単剤療法として認可されている。ROFERON-A（登録商標）（Roche）は、インターフェロンα−２ａの組換え型である。REGASYS（登録商標）（Roche）は、インターフェロンα−２ａのＰＥＧ化（即ちポリエチレングリコール修飾された）型である。INTRON-A（登録商標）（Schering Corporation）は、インターフェロンα−２ｂの組換え型であり、そしてPEG-INTRON（登録商標）（Schering Corporation）は、インターフェロンα−２ｂのＰＥＧ化型である。
【００１０】
インターフェロンαの他の型、ならびにインターフェロンβ、γ、τおよびωが、ＨＣＶ治療のために現在臨床開発中である。例えば、InterMune社によりINFERGEN（登録商標）（インターフェロン アルファコン−１）、Viragen社によりOMNIFERON（登録商標）（天然インターフェロン）、Human Genome Sciences社によりAlBUFERON（登録商標）、Ares-Serono社によりREBIF（登録商標）（インターフェロンβ−１ａ）、BioMedicine社によりオメガインターフェロン、Amarillo Biosciences社により経口インターフェロンアルファ、ならびにInterMune社によりインターフェロンγ、インターフェロンτ、およびインターフェロンγ−１ｂが開発中である。
【００１１】
リバビリンおよびインターフェロンαによるＨＣＶの併用療法が、現時点で最適な治療法である。リバビリンとＰＥＧ−ＩＮＦ（上記）の組み合わせは、患者の５４〜５６%に持続的ウイルス反応（ＳＶＲ）をもたらす。このＳＶＲは２型および３型ＨＣＶについては８０%に近い（Walker, 上記）。残念なことに、この組み合わせは副作用をも導き、それが臨床上の問題をもたらす。皮下ＩＦＮ−αには抑欝、インフルエンザ様症状および皮膚反応が伴い、リバビリンによる持続的治療には溶血性貧血が伴う。
【００１２】
Ｃ型肝炎ウイルス感染治療のために現在前臨床または臨床開発中であるその他の高分子化合物には、Schering-Plough社のインターロイキン−１０、Intermeuron社のIP-SO1、Vertex社のメリメボディブ（VS-497）、RPI社のHEPTAZYME（登録商標）、Idun Pharma社のIDN-6556、XTL社のXTL-002、Chiron社のHCV/MFS9、NABI社のCIVACIR（登録商標）（Ｃ型肝炎免疫グロブリン）、SciClone社のZADAXIN（登録商標）（チモシンα−１）、SciClone社のチモシン＋ＰＥＧ化インターフェロン、CEPLENE（登録商標）；Innogenetics社のＥ２に対する治療ワクチン、Intercell社の治療ワクチン、Epimmune/Genencor社の治療ワクチン、Merix社の治療ワクチン、Tripep社の治療ワクチン、Chron-VacCがある。
【００１３】
リボザイムはＨＣＶ ＲＮＡを標的としている。リボザイムは、ＲＮＡの配列特異的開裂を触媒する、エンドヌクレアーゼ活性を有する天然の短分子である。これに代わるアプローチは、ＲＮＡに結合してＲＮアーゼＨ仲介性開裂を刺激する、アンチセンスオリゴヌクレオチドの使用である。
【００１４】
抗ＨＣＶ療法としての薬物開発のための潜在的分子標的が現在幾つか同定されており、それらには、ＮＳ２−ＮＳ３オートプロテアーゼ、Ｎ３プロテアーゼ、Ｎ３ヘリカーゼおよびＮＳ５Ｂポリメラーゼが包含されるがこれらに限定される訳ではない。一本鎖センスＲＮＡゲノムの複製にはＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼが絶対不可欠であり、この必須酵素は薬化学者の間に著しい興味を喚起してきた。
【００１５】
ＮＳ５Ｂポリメラーゼのヌクレオシドインヒビターは、鎖伸張ができない非天然基質として、または、ポリメラーゼとの結合について天然ヌクレオチドと競合する競合的インヒビターとして作用できる。鎖ターミネーターとして機能するためには、ヌクレオシド類似体が細胞に取り込まれ、インビボで三リン酸に変換され、ポリメラーゼヌクレオチド結合部位について競合せねばならない。この三リン酸への変換は、通常、細胞キナーゼによって仲介され、それが潜在的ヌクレオシドポリメラーゼインヒビターにさらなる構造上の要件を付与する。残念なことに、この事が、ＨＣＶ複製のインヒビターとしてのヌクレオシドの直接評価を、ｉｎ ｓｉｔｕリン酸化が可能な細胞型アッセイに限定する。
【００１６】
【化３】
【００１７】
２β−メチルヌクレオシド１はE. Walton 等（J. Med. Chem. 1969 12(2):306-309）によって最初に記載された。置換ヌクレオシドのエステルは、合成反応列において保護炭水化物中間体として使用されてきた（E. Walton, GB 12909654。１９７０年１０月２１日公開）。塩基がシチジンである場合、アシル化誘導体は一般に、アミノ置換基がアシル化されている、２のジ−およびトリ−エステルである（E. Walton, 上記、J. L. Clark et al. J. Med Chem. 2005 48(17):5504-5508; R. E. Harry-O’kuru et al. J. Org. Chem. 1997 62(6):1754-1759; J. -P. Sommadossi et al. WO 2004002422）。エステル中間体は典型的には、結晶化合物をより生成し易い安息香酸エステルまたはフェニル酢酸エステルである。４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン誘導体の抗ウイルス活性が報告されている（E. Walton, J. Med Chem., 上記）。
【００１８】
２００１年１１月２９日に公開されたＷＯ ０１ ９０１２１において、J. -P. SommadossiおよびP. Lacollaは、式１および２で示される１’−アルキル−および２’−アルキルヌクレオシドの抗ＨＣＶポリメラーゼ活性を開示および例示している。２００１年１２月６日に公開されたＷＯ ０１／９２２８２において、J. -P. SommadossiおよびP. Lacollaは、式１および２で示される１’−アルキル−および２’−アルキルヌクレオシドによるフラビウイルス属およびペスチウイルス属の治療を開示および例示している。２００３年４月３日に公開されたＷＯ０３／０２６６７５において、G. Gosselinは、フラビウイルス属およびペスチウイルス属を治療するための４’−アルキルヌクレオシド３を開示している。２００４年６月３日に公開されたＷＯ２００４／０４６３３１において、J. -P. Sommadossi等は、２’−分岐ヌクレオシドおよびフラビウイルス科の突然変異を開示している。２００３年４月３日に公開されたＷＯ０３／０２６５８９において、G. Gosselin等は、４’−修飾されたヌクレオシドを用いたＣ型肝炎ウイルスの治療法を開示している。２００５年２月３日に公開されたＷＯ２００５００９４１８において、R. Storer等は、ＨＣＶを包含するフラビウイルス科により引き起こされる疾患の治療のためのプリンヌクレオシド類似体を開示している。
【００１９】
別の特許出願は、Ｃ型肝炎ウイルス感染を治療するための或る種のヌクレオシド類似体の使用を開示している。２００１年５月１０日公開のＷＯ ０１／３２１５３において、R. Storerは、ウイルス疾患治療のためのヌクレオシド誘導体を開示している。２００１年８月２３日公開のＷＯ ０１／６０３１５では、H. Ismaili等が、ヌクレオシド化合物を用いたフラビウイルス感染の治療または予防方法を開示している。２００２年３月７日公開のＷＯ ０２／１８４０４では、R. Devos等が、ＨＣＶウイルス治療のための４’−置換ヌクレオチドを開示している。２００１年１０月２５日公開のＷＯ ０１／７９２４６では、K. A. Watanabeが、ウイルス疾患治療のための２’−または３’−ヒドロキシメチルヌクレオシド化合物を開示している。２００２年４月２５日公開のＷＯ ０２／３２９２０および２００２年６月２０日公開のＷＯ ０２／４８１６５では、L. Stuyver等が、ウイルス疾患治療のためのヌクレオシド化合物を開示している。
【００２０】
【化４】
【００２１】
２００３年１２月２４日公開のＷＯ ０３／１０５７７０において、B. Bhat等は、ＨＣＶ感染の治療に有用な一連の炭素環式ヌクレオシド誘導体を開示している。２００３年１月２２日公開のＷＯ ２００４／００７５１２では、B. Bhat等がＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼを阻害するヌクレオシド化合物を開示している。この公報に開示されているヌクレオシドは、主として２’−メチル−２’−ヒドロキシ置換ヌクレオシドである。２００２年７月２５日公開のＷＯ ２００２／０５７４２５では、S. S. Carroll等が、ＲＮＡ依存性ウイルスポリメラーゼを阻害するヌクレオシド誘導体およびＨＣＶ感染を治療する方法を開示している。２００２年７月２５日公開のＷＯ ０２／０５７２８７では、S. S. Carroll等が、塩基が場合により置換されていてもよい、７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンラジカル５である関連する２α−メチルおよび２β−メチルリボース誘導体を開示している。同出願は、３β−メチルヌクレオシドの一例を開示している。S. S. Carroll等（J. Biol. Chem. 2003 278(14):11979-11984）は、４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メトキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン（５ａ）によるＨＣＶポリメラーゼの阻害を開示している。２００４年１月２９日公開のＷＯ ２００４／００９０２０では、D. B. Olsen等が、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼのインヒビターとしての一連のチオヌクレオシド誘導体を開示している。
【００２２】
「２’−フルオロヌクレオシド」なる標題のＰＣＴ公開Ｎｏ．ＷＯ９９／４３６９１（エモリー大学）は、ＨＣＶを治療するための或る２’−フルオロヌクレオシドの使用を開示している。「２’−フルオロヌクレオシド」なる標題の米国特許Ｎｏ．６３４８５８７（エモリー大学）は、Ｂ型肝炎、ＨＣＶ、ＨＩＶおよび異常な細胞増殖の治療に有用な２’−フルオロヌクレオシドのファミリーを開示している。２’−フルオロ置換基の両方の立体配置が開示されている。
【００２３】
Eldrup等（Oral Session V, Hepatitis C Virus, Flaviviridae; 16th International Conference on Antiviral Research(Apr. 27, 2003, Savannah, Ga.)）は、ＨＣＶ阻害のための２’−修飾ヌクレオシドの構造活性相関を記載している。
【００２４】
Bhat等（Oral Session V, Hepatitis C Virus, Flaviviridae; 16th International Conference on Antiviral Research(Apr. 27, 2003, Savannah, Ga.); p A75）は、ＨＣＶ ＲＮＡ複製の潜在的インヒビターとしてのヌクレオシド類似体の合成および薬物動態学的性質を記載している。この著者は、２’−修飾ヌクレオシドが細胞に基づくレプリコンアッセイにおいて強力な阻害活性を示すと報告している。
【００２５】
Olsen等（Oral Session V, Hepatitis C Virus, Flaviviridae; 16th International Conference on Antiviral Research(Apr. 27, 2003, Savannah, Ga.)p A76）はさらに、ＨＣＶ ＲＮＡ複製に及ぼす２’−修飾ヌクレオシドの効果を記載している。
【００２６】
ＨＩＶ逆転写酵素の非ヌクレオシドアロステリックインヒビターは、単独で、そしてヌクレオシドインヒビターとの、およびプロテアーゼインヒビターとの併用で、有効な治療薬であることが証明されている。ベンズイミダゾール（H. Hashimoto et al. WO01/47833、H. Hashimoto et al. WO03/000254、P. L. Beaulieu et al. WO03/020240 A2; P. L. Beaulieu et al. US6448281 B1; P. L. Beaulieu et al. WO03/007945 A1）；インドール（P. L. Beaulieu et al. WO03/0010141 A2）；ベンゾチアジアジン（D. Dhanak et al. WO01/85172 A1; D. Dhanak et al. WO03/037262 A2; K. J. Duffy et al. WO03/099801 A1, D. Chai et al. WO2004052312, D. Chai et al. WO2004052313, D. Chai et al. WO02/098424, J. K. Pratt et al. WO2004/041818 A1; J. K. Pratt et al. WO2004/087577 A1）、チオフェン（C. K. Chan et al. WO02/100851）；ベンゾチオフェン（D. C. Young and T. R. Bailey WO00/18231）；β−ケトピルバート（S. Attamura et al. US6492423 B1, A. Attamura et al. WO00/06529）；ピリミジン（C. Gardelli et al. WO02/06246 A1）；ピリミジンジオン（T. R. Bailey and D. C. Young WO00/13708）；トリアジン（K. -H. Chung et al. WO02/079187 A1）；ローダニン誘導体（T. R. Bailey and D. C. Young WO00/10573, J. C. Jean et al. WO01/77091 A2）；２，４−ジオキソピラン（R. A. Love et al. EP256628 A2）；フェニルアラニン誘導体（M. Wang et al. J. Biol. Chem. 2003 278:2489-2495）を包含する幾つかのクラスの非ヌクレオシドＨＣＶ ＮＳ５Ｂインヒビターが記載されており、現在様々な開発段階にある。
【００２７】
ＮＳ３プロテアーゼが、新たな抗ＨＣＶ療法発見のための大きな標的として浮上している。１９９８年５月２８日公開のＷＯ９８／２２４９６においてM. R. Attwood等は、プロテアーゼのメカニズムベースの活性部位を開示した（M. R. Attwood et al., Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1999 10:259-273; M. R. Attwood et al., Preparation and use of amino acid derivatives as anti-viral agents, ドイツ国特許公開ＤＥ １９９１４４７４）。１９９８年４月３０日公開のＷＯ９８／１７６７９では、R. D. Tung等が、ＮＳ３プロテアーゼに関するメカニズムベースのペプチドインヒビターを開示した。
【００２８】
１９９９年２月１８日公開のＷＯ９９／０７７３４および１９９９年８月９日公開のＷＯ００／０９５４３においてM Llinas-Brunet等は、ＨＣＶプロテアーゼのペプチドインヒビターを開示している。２０００年１０月１２日公開のＷＯ００／５９９２９では、Y. S. Tsantrizos等が、ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼの強力なインヒビターである大環状トリペプチドを開示している。Boehringer-Ingelheimの一連の関連特許は、関連するプロテアーゼインヒビターを開示しており、トリペプチド誘導体ＢＩＬＮ ２０６１の同定を導いている（M. Llinas-Brunet et al. Biorg. Med. Chem. Lett. 2000 10(20):2267-70; J. Med Chem. 2004 47(26):6584-94; J. Med. Chem. 2004 47(7):1605-1608; Angew. Chem. Int. Ed. Eng. 2003 42(12):1356-60）。
【００２９】
Bristol-Myers Squibbにより同定された別のトリペプチドインヒビターが、特に、２００３年１２月４日公開のＷＯ０３／０９９２７４、２００４年４月２２日公開のＷＯ２００４／０３２８２７、２００３年７月３日公開のＷＯ０３／０５３３４９、２００５年５月２６日公開のＷＯ２００５／０４６７１２および２００５年６月９日公開のＷＯ２００５／０５１４１０に開示されている。２００４年８月２６日公開のＷＯ２００４／０７２２３４および２００４年１１月４日公開のＷＯ２００４／０９３７９８では、Enanta Pharmaceuticalsによってさらなるトリペプチドプロテアーゼインヒビターが開示された。２００５年４月２８日公開のＷＯ２００５／０３７２１４では、L. M. Blatt等が、ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼを阻害するさらに別のトリペプチド誘導体を開示している。２００５年４月７日公開のＷＯ２００５／０３０７９６では、S. Venkatraman等がＨＣＶ ＮＳ３セリンプロテアーゼの大環状インヒビターを開示している。２００５年６月３０日公開のＷＯ２００５／０５８８２１では、F. Velazquez等がＨＣＶ ＮＳ３／ＮＳ４ａセリンプロテアーゼのインヒビターを開示している。２００２年６月２０日公開のＷＯ０２／４８１７２では、Z. ZhuがＮＳ３プロテアーゼのインヒビターとしてのジアリールペプチドを開示している。共に２００２年１月３１日に公開されたＷＯ０２／０８１８７およびＷＯ０２／０８２５６においてA. Saksena等はＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼのペプチドインヒビターを開示している。２００２年１月３１日公開のＷＯ０２／０８２５１では、M. Lim-Wilby等がＮＳ３プロテアーゼのペプチドインヒビターを開示している。１９９９年１２月２１日公開のＵＳ６００４９３３では、L. W. Spruce等が、ＨＣＶエンドペプチダーゼを包含するシステインプロテアーゼを阻害するヘテロ環式ペプチド誘導体を開示している。
【００３０】
ＲＤ３−４０８２およびＲＤ３−４０７８（前者はアミドの位置が１４炭素鎖で置換されており、後者はパラ−フェノキシフェニル基をプロセシングする）を包含する、２，４，６−トリヒドロキシ−３−ニトロベンズアミド誘導体のような非基質型ＮＳ３プロテアーゼインヒビター（Sudo K. et al., BBRC 1997 238:643-647; Sudo K. et al. Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1998 9:186）もまた研究されつつある。
【００３１】
フェナントレンキノンＳＣＨ６８６３１はＨＣＶプロテアーゼインヒビターである（Chu M. et al. Tetrahedron Lett. 1996 37:7229-7232）。同じ著者による別の例では、真菌Penicillium griseofulvumから単離されたＳＣＨ３５１６３３がプロテアーゼインヒビターであると同定された（Chu M. et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999 9:1949-1952）。高分子エグリンｃに基づく選択的インヒビターの設計により、ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼ酵素に対するナノモルレベルの有効性が達成されている。ヒルから単離されたエグリンｃは、S. griseusプロテアーゼＡおよびＢ、α−キモトリプシン、キマーゼおよびサブチリシンといった幾つかのセリンプロテアーゼの強力なインヒビターである（Qasim M. A. et al., Biochemistry 1997 36:1598-1607）。
【００３２】
逆相ＨＰＬＣアッセイにおいてＮＳ３／４Ａ融合蛋白およびＮＳ５Ａ／５Ｂ基質と関連する阻害を示すチアゾリジン誘導体（Sudo K. et al. Antiviral Research 1996 32:9-18）、特に、長鎖アルキルで置換された融合シンナモイル部分を有する化合物ＲＤ−１−６２５０、ＲＤ４ ６２０５およびＲＤ４ ６１９３。チアゾリジンおよびベンズアニリドは、N. Kakiuchi等（FEBS Let. 1998 421:217-220）およびN. Takeshita等（Anal. Biochem. 1997 247:242-246）によって同定された。
【００３３】
ＨＣＶのＮＳ３セリンプロテアーゼインヒビターとしてのイミダゾリジノンが、ＷＯ０２／０８１９８（Schering Corporation。２００２年１月３１日公開）およびＷＯ０２／４８１５７（Bristol Myers Squibb。２００２年６月２０日公開）に開示されている。２００２年６月２０日公開のＷＯ０２／４８１１６では、P. Glunz等がＮＳ３プロテアーゼのピリミジノンインヒビターを開示している。
【００３４】
抗ＨＣＶのためのその他の酵素標的には、ＨＣＶ ＩＲＥＳ部位（内部リボソーム進入部位）およびＨＣＶヘリカーゼがある。ＩＲＥＳインヒビターはImmusol、Rigel Pharmaceuticals（R803）により、およびAnadys（ANA245およびANA246）により報告されている。VertexはＨＣＶヘリカーゼインヒビターを開示している。
【００３５】
耐性突然変異株を抑制できる併用療法は抗ウイルス化学療法に対する充分に確立されたアプローチとなっている。本明細書に開示したヌクレオシドインヒビターは、他のヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼインヒビター、非ヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼインヒビター、およびＨＣＶプロテアーゼインヒビターと併用することができる。その他の種類のＨＣＶ薬、例えばウイルス進入インヒビター、ヘリカーゼインヒビター、ＩＲＥＳインヒビター、リボザイムおよびアンチセンスオリゴヌクレオチドが浮上し、そして開発されていることから、これらもまた併用療法のための優れた候補薬となるであろう。インターフェロン誘導体は既にリバビリンとうまく併用されており、インターフェロンおよび化学修飾インターフェロンは、本明細書に開示されるヌクレオシドとの併用に有用であろう。
【００３６】
本発明の目的は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染した宿主の治療のための新たな化合物、方法および組成物を提供することである。
【００３７】
ヌクレオシド誘導体は、しばしば強力な抗ウイルス（例えば、ＨＩＶ、ＨＣＶ、単純ヘルペス、ＣＭＶ）および抗癌化学療法薬である。あいにくそれらの実用性は二つの要因によってしばしば限定される。第一に、乏しい薬物動態学的性質が、腸管からのヌクレオシドの吸収およびヌクレオシド誘導体の細胞内濃度をしばしば制限し、そして第二に、不十分な物理的性質は、活性成分の送達を強化するために用いられ得る製剤の選択枝を限定する。
【００３８】
Albertは、固有の生物活性を欠いているが活性薬物への代謝的変換が可能である化合物を表現するのにプロドラッグという用語を導入した（A. Albert, Selective Toxicity, Chapman and Hall, London, 1951）。プロドラッグは近年論評されており（P. Ettmayer et al., J. Med Chem. 2004 47(10):2393-2404; K. Beaumont et al., Curr. Drug Metab. 2003 4:461-485; H. Bundgaard, Design of Prodrugs: Bioreversible derivatives for various functional groups and chemical entities in Design of Produrgs, H. Bundgaard(ed) Elsevier Science Publishers, Amersterdam 1985; G. M. Pauletti et al. Adv. Drug Deliv. Rev. 1997 27:235-256; R. J. Jones and N. Bischofberger, Antiviral Res. 1995 27;1-15およびC. R. Wagner et al., Med. Res. Rev. 2000 20:417-45）、これらの文献は引用によりその全内容を本明細書の一部とする。この変換は特異的酵素、しばしば加水分解酵素によって触媒されるが、活性化合物は非特異的化学プロセスによって再生されることもある。
【００３９】
薬学的に許容されるプロドラッグとは、宿主において代謝、例えば加水分解または酸化されて、毒物学的不利益を有するフラグメントを形成せずに本発明化合物を形成する化合物を指す。典型的なプロドラッグの例は、活性化合物の官能基部分に結合した生物学的に不安定な保護基を有する化合物を包含する。糖部分にあるヒドロキシ基（群）の、アルキル化、アシル化またはその他の親油性修飾が、プロヌクレオシドの設計に利用されてきた。これらのプロヌクレオシドはインビボで加水分解または脱アルキル化されて活性化合物を生成できる。
【００４０】
経口バイオアベイラビリティーを制限する要因はしばしば、胃腸管からの吸収ならびに腸壁および肝臓による初回通過排泄である。ＧＩ管を経由した経細胞吸収の最適化は、ゼロより大きなＤ（７．４）を要する。しかしながら、分配係数の最適化が成功を保証する訳ではない。プロドラッグは、腸細胞にある活性な排出トランスポーターを回避する必要があるかも知れない。腸細胞での細胞内代謝は、排出ポンプにより腸管内腔へと代謝産物を戻す受動輸送または能動輸送を引き起こし得る。プロドラッグは、標的細胞またはレセプターに到達する前の、血中での望ましくない生物学的変換を回避するよう設計されねばならない。
【００４１】
ペプチドトランスポーター（ＰＥＰＴ蛋白）は、腸および腎臓の上皮細胞の刷子縁膜に局在する、プロトン共役能動輸送系（proton-coupled active transport system）であって、蛋白およびアミノ酸吸収において重要な役割を果たす。これらの輸送系がアミノ酸と結合した薬物の取り込みを仲介するという発見は、薬物デリバリーのための強力な手段を提供した（T. Terada and K. Inui, Curr. Drug Metab. 2004 5(1):85-94; E. De Clercq and H. J. Field, Brit. J. Pharmacol. 2006 147(1):1-11）。抗ヘルペスヌクレオシドであるアシクロビルおよびガンシクロビルは、Ｌ−アミノ酸エステルに結合する時、ＰＥＰＴ蛋白により効率的に細胞中に輸送されることが見いだされた（H. Han et al., Pharm. Res. 1998 15(8):1154-1159; C. U. Nielsen and B. Brodin, Curr. Drug Targets 2003 4(5):373-388）。アシクロビルのＬ−バリニルエステルおよびバラシクロビルはＰＥＰＴ取り込みの基質であることが見いだされた（G. M. Friedrichsen et al. Eur. J. Pharm. Sci. 2002 16(1-2):1-13; A. Guo et al. J. Pharm. Exp. Ther. 1999 289(32):29509-29514; M. E. Ganapathy et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998 246(2):470-475）。
【００４２】
２００４年１月８日公開のＷＯ２００４／００３０００においてJ. -P. Sommadossi等は、１’−、２’−、３’−および４’−置換β−Ｄおよびβ−Ｌヌクレオシドの２’−および３’プロドラッグを開示している。２００４年１月８日公開のＷＯ２００４／００２４２２では、フラビウイルス感染治療のための２’−Ｃ−メチル−３’−Ｏ−バリンエステルリボフラノシルシチジンを開示している。Idenixは、１のバリンエステル４（Ｂ＝シトシン）であると考えられる関連化合物ＮＭ２８３の治験を報告している。２００４年１月８日公開のＷＯ２００４／００２９９９では、J. -P. Sommadossi等が、ＨＣＶ感染を包含するフラビウイルス感染の治療のための、１’、２’、３’または４’分岐ヌクレオシドの、一連の２’または３’プロドラッグを開示している。２００４年６月２４日公開のＷＯ２００４／０５２８９９では、R. Storer等が、２β−メチル−シトシンの３’−Ｏ−バリニル誘導体の製造プロセスを開示している。２００４年７月１５日公開のＷＯ２００４／０５８７９２では、R. Storer等が３’−Ｏ−バリニル誘導体製造のための一段階プロセスを開示している。
【００４３】
２００５年１月２５日登録のＵＳ６８４６８１０においてJ. A. Martin等は、ＨＣＶ感染患者の治療に有用なプロドラッグとして４’−アジド−シトシンのアシル誘導体を開示している。Ｕ．Ｓ． Ｓｅｒ．Ｎｏ．１１／６３５８９８では、K. Sarma等が、ＨＣＶ感染患者の治療に有用な、２’−デオキシ−２’−α−フルオロ−２’−β−メチル−シチジンのジアシル誘導体を開示している。２００６年２月２３日公開のＵＳ公開Ｎｏ．２００６／００４０８９０では、J. A. Martin等が、ＨＣＶ感染患者の治療に有用な４’−アジド−シタラビンおよびそのプロドラッグを開示している。
【００４４】
本発明は、４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン（Ｉ、（２Ｒ）−２β−メチル−シチジンとも言う）：
【化５】
［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ３−５シクロアルキルおよびＣ２−５ハロアルキルより成る群から独立して選ばれる］
なる新規なジ−アシル誘導体ならびにそれらの水和物、溶媒和物および酸付加塩を目的とするものである。
【００４５】
本発明化合物は、ＨＣＶにより仲介される疾患の治療に有用であり、さらに本発明は、単剤または併用療法において本発明化合物を用いてＨＣＶ感染患者を治療する方法ならびに該化合物を含有する医薬組成物を含む。本発明はさらに、このジアシル誘導体を製造する方法に関するものである。
【００４６】
４−アミノ−１−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン Ｉ−４のＨＣＶポリメラーゼ阻害活性が開示されている（J. -P. Sommadossi等、上記）。臨床診療においては、ＨＣＶポリメラーゼを速やかに阻害する、高いＩ−４の血中レベルを提供し、それによって、ウイルスが突然変異して耐性株を選択する機会が最小限となる条件の下でウイルスレベルを低下させる事が望ましい。親ヌクレオシドでは充分な高レベルを達成するのは困難である。プロドラッグは、化合物の薬物動態学的および物理的性質を改善し、それによってバイオアベイラビリティーを最適化し得る。バリンエステルＩ−５がＩ−４のプロドラッグとして研究されてきた。
【００４７】
プロドラッグ候補物質の想定は一見単純に見えるが、適切な物理化学的および薬物動態学的性質、インビボ変換、ならびに安全性プロファイルを有する化合物の同定は、かなりの実験を要する複雑な複合的取り組みである。経口デリバリー用プロドラッグの同定に対する障害は、投与後の活性部分の迅速且つ効果的な放出を可能にしつつ、充分な水溶性、親油性および化学的安定性を維持することを包含する。プロドラッグの非エステラーゼ代謝およびトランスポーター仲介性クリアランスを最小化せねばならない（K.Beaumont
et al. Curr. Drug Metab. 2003 4(6):461-485)。チトクロムＰ４５０酵素の阻害または誘導もまた望ましくない薬物−薬物相互作用を産むことがある。
【００４８】
ここに、Ｉ−４のジエステルが優れたプロドラッグであり、実質的により高いＩ−４の血中レベルを提供することが見いだされた。
【００４９】
本発明の或る態様では、Ｒ１が本明細書上記に定義のとおりである、式Ｉの化合物が提供される。
【００５０】
本発明の別の態様では、Ｒ１がエチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチルまたはイソ−ブチルである、式Ｉの化合物が提供される。
【００５１】
本発明のさらに別の態様では、Ｒ１がエチルまたはイソ−プロピルである、式Ｉの化合物が提供される。
【００５２】
本発明のさらに別の態様では、Ｒ１がイソ−プロピルであり、該化合物が塩酸、メシル酸塩、ヘミ硫酸または硫酸塩である式Ｉの化合物が提供される。
【００５３】
本発明のもう一つの態様は、ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための抗ウイルス薬としての、上記定義による式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用である。
【００５４】
本発明の別の態様は、ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための、少なくとも一つの免疫系調節物質および／またはＨＣＶの複製を阻害する少なくとも一つの抗ウイルス薬と組み合わせた抗ウイルス薬としての、上記定義による式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用である。
【００５５】
本発明の別の態様は、ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための医薬を製造するための、上記定義による式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用である。
【００５６】
本発明の別の態様は、ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための医薬を製造するための、少なくとも一つの免疫系調節物質および／またはＨＣＶの複製を阻害する少なくとも一つの抗ウイルス薬と組み合わせた、上記定義による式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用である。
【００５７】
本発明のさらに別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の治療有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。
【００５８】
本発明のさらに別の態様では、１日あたり０．１〜１０g用量の式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。さらに別の態様では、この用量は一日あたり０．５および７gの間であり、さらなる態様では、この用量は１日あたり１．０および６．０gの間である。
【００５９】
本発明の別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の治療有効量、ならびに、少なくとも一つの免疫系調節物質および／またはＨＣＶの複製を阻害する少なくとも一つの抗ウイルス薬の治療有効量を、それを必要とする患者に同時投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。
【００６０】
本発明の別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の治療有効量、および、少なくとも一つの免疫系調節物質（この免疫系調節物質は、インターフェロン、インターロイキン、腫瘍壊死因子またはコロニー刺激因子である）の治療有効量を、それを必要とする患者に同時投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。
【００６１】
本発明の別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の治療有効量、および、少なくとも一つの免疫系調節物質（この免疫系調節物質は、インターフェロンまたは化学的に誘導体化されたインターフェロンである）の治療有効量を、それを必要とする患者に同時投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。
【００６２】
本発明の別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の治療有効量、および、少なくとも一つの他の抗ウイルス化合物の治療有効量を、それを必要とする患者に同時投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。
【００６３】
本発明の別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の治療有効量、および、少なくとも一つの他の抗ウイルス化合物（この化合物は、ＨＣＶプロテアーゼインヒビター、別のヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼインヒビター、非ヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼインヒビター、ＨＣＶヘリカーゼインヒビター、ＨＣＶプライマーゼインヒビターまたはＨＣＶ融合インヒビターである）の治療有効量を、それを必要とする患者に同時投与することを含む、ＨＣＶにより仲介される疾患を治療するための方法が提供される。
【００６４】
本発明の別の態様では、少なくとも一つの薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合した、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩を含む、医薬組成物が提供される。
【００６５】
本発明の別の態様では、式Ｉ［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ２−５ハロアルキルおよびＣ３−５シクロアルキルより成る群から選ばれる］で示される化合物またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の製造方法であって、下に列挙され実施例に例示される工程（ｉ）〜（ｖ）を含む方法が提供される。この方法は、均質であっても二相性であってもよい塩基性水性有機媒質中で、ＤＭＡＰ、および溶液を少なくとも約７．５のｐＨに維持するに充分な塩基の存在下に、本明細書に定義されるようなアシル化剤でＩを処理することを含む。本方法は、ヘテロ環式塩基による付随反応を伴わないアシル化が可能である。
【００６６】
本発明のさらなる態様は、塩基性反応条件下でＯ−アシルヌクレオシドIIを得るためのヌクレオシドＩの選択的Ｏ−アシル化：
【化６】
［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ３−５シクロアルキル、Ｃ２−５ハロアルキルおよび場合により置換されていてもよいフェニルより成る群から選ばれる］
の方法であって、
（ｉ）IIおよびＤＭＡＰを不均質な水性溶媒混合物に溶解し、水性塩基を添加してｐＨを約７．５〜約１２に調節し；
（ii）場合により充分な飽和ＮａＣｌ水を加えて二相性反応混合物を生成し；
（iii）アシル化剤を加え、ｐＨを約７．５〜約１２に維持するに充分なさらなる塩基を加え；
（iv）反応を監視して、変換が満足できるレベルに到達した時に前記アシル化剤および前記塩基の添加を中止し；
（ｖ）場合により、このＯ−アシルヌクレオシドを薬学的に許容される酸と接触させて、Ｏ−アシルヌクレオシドの酸付加塩を形成させる、
工程を含む方法である。
【００６７】
本明細書で使用する「ａ」または「ａｎ」という句は、１以上のその実体を指し；例えば、「ａ ｃｏｍｐｏｕｎｄ」とは、１以上の化合物または少なくとも一つの化合物を指す。このように、「ａ」（または「ａｎ」）、「１以上」、および「少なくとも一つ」は本明細書では互換的に使用できる。
【００６８】
「本明細書上記に定義されるように」という句は、本明細書に記載された最初の定義を指す。
【００６９】
本明細書で使用される「独立して」という語は、同じ化合物の内部に同じまたは異なる定義を有する変数が存在するかしないかに関わりなく、或る変数が任意の一例に適用されることを示す。したがって、Ｒ１が２回現れ、且つ「Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ３−５シクロアルキルおよびＣ２−５ハロアルキルより成る群から独立して選ばれる」と定義されている化合物では、両方のＲ１が同一であってもよいし、Ｒ１が異なる意義を有していてもよい。
【００７０】
本明細書で使用される「場合による」または「場合により」という語は、その後に記載される事象または状況が起こるかも知れないが起こる必要がある訳ではなく、この表現が、その事象または状況が起こる例と起こらない例を包含することを意味する。
【００７１】
本明細書で使用される「独立して」という語は、同じ化合物の内部に同じまたは異なる定義を有する変数が存在するかしないかに関わりなく、或る変数が任意の一例に適用されることを示す。したがって、Ｒ１が２回現れ、且つ「Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ３−５シクロアルキルおよびＣ２−５ハロアルキルより成る群から独立して選ばれる」と定義されている化合物では、両方のＲ１が同一であってもよいし、互いに異なっていてもよい。
【００７２】
本明細書で使用される「アルケニル」という語は、１または２個のオレフィン二重結合（好ましくは１個のオレフィン二重結合）を持ち２〜１０個の炭素原子を有する非置換炭化水素鎖基を指す。本明細書で使用される「Ｃ２−５アルケニル」とは、２〜５個の炭素より成るアルケニルを指す。例にはビニル、１−プロペニル、２−プロペニル（アリル）または２−ブテニル（クロチル）がある。
【００７３】
本明細書で使用される「アルキル」という語は、１〜１０個の炭素原子を含む非分岐または分岐鎖の飽和一価炭化水素残基を指す。本明細書で使用する「Ｃ２−５アルキル」とは、２〜５個の炭素より成るアルキルを指す。アルキル基の例には、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチルまたはペンチル、イソペンチル、ネオペンチルがあるが、これらに限定されない。
【００７４】
本明細書で使用される「シクロアルキル」という語は、３〜８個の炭素原子を含む飽和炭素環式環、即ちシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルまたはシクロオクチルを指す。本明細書で使用する「Ｃ３−５シクロアルキル」とは、炭素環式環内の３〜５個の炭素で構成されるシクロアルキルを指す。
【００７５】
本明細書で使用される「ハロアルキル」という語は、１、２、３またはそれ以上の水素原子がハロゲンで置換されている、上記定義による非分岐または分岐鎖アルキル基を指す。本明細書で使用される「Ｃ２−５ハロアルキル」とは、２〜５個の炭素および１〜１１個のハロゲン置換基より成るハロアルキルを指す。例には、１−フルオロメチル、１−クロロメチル、１−ブロモメチル、１−ヨードメチル、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、トリブロモメチル、トリヨードメチル、１−フルオロエチル、１−クロロエチル、１−ブロモエチル、１−ヨードエチル、２−フルオロエチル、２−クロロエチル、２−ブロモエチル、２−ヨードエチル、２，２−ジクロロエチル、３−ブロモプロピルまたは２，２，２−トリフルオロエチルがある。
【００７６】
本明細書で使用される「ジ−アシル」誘導体という語は、３’−および５’−ヒドロキシがエステル−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ１［式中、Ｒ１は請求項１に定義のとおりである］である、本明細書に記載の誘導体化されたヌクレオシド化合物を指す。
【００７７】
本明細書で使用される「アシル化剤」という語は、無水物または酸ハロゲン化物のいずれかを指す。本明細書で使用される「無水物」という語は、一般構造Ｒ１Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｒ１［式中、Ｒ１は請求項１に定義の通りである］で示される化合物を指す。本明細書で使用される「酸ハロゲン化物」という語は、一般構造Ｒ１Ｃ（Ｏ）Ｘ［式中、Ｘはハロゲンである］で示される化合物を指す。「アシルイミダゾール」という語は、一般構造Ｒ１Ｃ（Ｏ）Ｘ［式中、ＸはＮ−イミダゾリルである］で示される化合物を指す。
【００７８】
本明細書で使用される、化合物の「活性化誘導体」という語は、元の化合物を所望の化学反応において活性にする、該化合物の一時的な反応性形態を指し、ここで、元の化合物は中等度に反応性であるか、または非反応性である。活性化は、元の化合物よりも高い自由エネルギー内容量を有する、誘導体または当該分子内部の化学基を形成することによって達成され、このことにより、活性化型が他の試薬とより反応し易くなる。本発明の状況において、カルボキシ基の活性化が特に重要であり、対応する活性化剤またはカルボキシ基を活性化する基を、下により詳細に述べる。本発明にとって特に興味深いのは、カルボン酸無水物およびカルボン酸塩化物である。
【００７９】
本明細書で使用される「不均質な水性溶媒混合物」という句は、二相性または不均質な混合物を生成する、水および有機共溶媒の混合物を指す。この不均質な水性溶媒混合物は、限られた水溶性を持つ共溶媒から生成されてもよく、または水性成分のイオン強度を、水相中での共溶媒の溶解度を限定するよう調節することができる。
【００８０】
「アルカリ金属水酸化物」という語は、式ＭＯＨ［式中、Ｍは、リチウム、ナトリウム、カリウムまたはセシウムである］で示される化合物を指し、「アルカリ金属重炭酸塩」は、式ＭＨＣＯ３［式中、Ｍは、ナトリウムまたはカリウムである］を指し、そして「アルカリ金属炭酸塩」は、式Ｍ２ＣＯ３［式中、Ｍはナトリウムまたはカリウムである］を指す。当業者は、ｐＨを所望の範囲に維持するために他の塩基を使用でき、そして他の塩基もまた本発明の範囲内にあることが理解できるであろう。
【００８１】
本明細書で使用される略語には、アセチル（Ａｃ）、雰囲気（Ａｔｍ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、メチル（Ｍｅ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、ブチル（Ｂｕ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、融点（ｍｐ）、ＭｅＳＯ２−（メシルまたはＭｓ）、質量分析（ｍｓ）、メチルｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、プロピル（Ｐｒ）、ポンド／平方インチ（ｐｓｉ）、ビリジン（ｐｙｒ）、室温（ｒｔまたはＲＴ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、トリエチルアミン（Ｅｔ３ＮまたはＴＥＡ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）、エチル（Ｅｔ）、４−Ｍｅ−Ｃ６Ｈ４ＳＯ２−またはトシル（Ｔｓ）、イソ−プロピル（ｉ−Ｐｒ）、エタノール（ＥｔＯＨ）がある。接頭辞ノルマル（ｎ）、イソ（ｉ−）、第二（ｓｅｃ−）、第三（ｔｅｒｔ−）およびネオを包含する常套的命名法は、アルキル部分と共に使用される場合、それらの慣用的意義を有する（J. Rigaudy and D. P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford）。
【００８２】
本発明に包含され本発明の範囲内にある代表的化合物の例を表Ｉに記載する。これらの例およびそれに続く製造例は、当業者が本発明をより明確に理解し実施できるよう、提供するものである。それらは本発明の範囲を限定するものと考えてはならず、単に本発明を例示および代表するものと考えるべきである。
【００８３】
一般に、本明細書で使用される命名法は、ＩＵＰＡＣ体系的命名法の創成のためのAUTONOM（登録商標）v.4.0、Beilstein Instituteコンピューターシステムに基づいている。表示される構造とその構造に与えられた名称の間に相違がある場合、表示された構造により重要性を認めるべきである。さらに、構造または構造の一部の立体化学が例えば太線または点線によって示されていない場合、その構造または構造の一部は、全ての立体異性体を包含すると解釈すべきである。これらの環系の付番方式を表１に示す。
【００８４】
【表１】
【００８５】
ヒト対象における潜在的挙動をさらに評価するため、Ｃａｃｏ−２細胞を経由した輸送を推定プロドラッグについて評価した。Ｃａｃｏ−２細胞は、分子の潜在的吸収／透過性を評価するために一般的に使用される（G. Gaviraghi et al. in Pharmacokinetic optimization in drug research. Biological, Pharmacokinetic and Computational Strategies. B. Testa et al. eds. Wiley Interscience VCH, Zurich 2001 pp3-14）。Ｉ−４のＣ２−４アルキルジエステルについてＣａｃｏ−２透過性が許容可能であることが判明した。
【００８６】
本発明化合物は、水性有機溶媒中、Ｉ−４のアシル化により一工程で製造するのが好都合である。溶媒は、均質な水溶液または二相溶液のいずれであってもよい。水性有機溶媒のｐＨは、アシル化によって生成される酸を中和するための塩基を添加することにより、７．５以上に維持される。この塩基は、アルカリもしくはアルカリ金属水酸化物または第三アミンのいずれかとすることができる。この反応を、当分野においてアシル化の触媒であることが知られているＤＭＡＰの存在下で実施する。この方法の有利な点は、ヘテロ環式塩基をアシル化せずに所望生成物を取得できることである。保護基は必要なく、よって保護／脱保護工程の必要性を排除できる。この方法を、付記する実施例に記載する。
【００８７】
本発明化合物は多岐にわたる経口投与剤型および担体中に調合できる。経口投与は、錠剤、被覆錠剤、硬および軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳剤、シロップ剤、または懸濁剤の形態とすることができる。本発明化合物は、他の投与経路の中でも特に、坐剤投与する時に有効である。最も好都合な投与方法は一般に、都合の良い毎日の投薬レジメンを用いる経口投与であり、このレジメンは、疾患の重篤度および抗ウイルス薬に対する患者の反応に従って調節できる。
【００８８】
本発明化合物または化合物群および薬学的に使用可能なそれらの塩を、１以上の常套的賦形剤、担体、または希釈剤と共に、医薬組成物および単位剤型の形態とすることができる。この医薬組成物および単位投薬形態は、さらなる活性化合物を含むまたは含まない、常套的割合の常套的成分で構成され、そして、単位投薬形態は、使用される目的日用量範囲に相応する活性成分の、適切な有効量を含有できる。この医薬組成物は、固体、例えば錠剤もしくは充填済みカプセル剤、半固体、散剤、持続放出調合物、または液体、例えば懸濁剤、乳剤、もしくは経口使用のための充填済みカプセル剤；または直腸もしくは腟内投与のための坐剤の形態で使用できる。典型的な調製物は、約５%〜約９５%の活性化合物または化合物群（ｗ／ｗ）を含有するであろう。「調製物」または「投薬形態」という語は、活性化合物の固体および液体調合物の両者の包含を意図しており、当業者は、所望の用量および薬物動態学的パラメータに応じて活性成分が異なる調合物として存在できることが理解できるであろう。
【００８９】
本明細書で使用する「賦形剤」という語は、医薬組成物の製造に使用され、一般に安全で、非毒性で、且つ生物学的にもその他の点でも不適切でない化合物を指し、獣医学的使用およびヒトへの薬学的使用のために許容される賦形剤を包含する。本発明化合物は単独で投与できるが、一般的には、目的とする投与経路および標準的薬務に関して選択された１以上の適切な薬学的賦形剤、希釈剤または担体と混合して投与される。
【００９０】
さらに、活性成分の「薬学的に許容される塩」の形態は、まず非塩形態においては存在しない望ましい薬物動態学的性質を活性成分に付与し、そして、身体におけるその治療活性の点で活性成分の薬力学に良い影響を与えることさえある。本明細書で使用される化合物の「薬学的に許容される塩」という句は、薬学的に許容され、親化合物の望ましい薬理活性を有する塩を意味する。そのような塩には、（１）塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などのような無機酸によって形成される；もしくは、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタン−ジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、サリチル酸、ムコン酸等のような有機酸によって形成される酸付加塩がある。薬学的に許容される塩に対する全ての言及は、本明細書で定義される、同じ酸付加塩の、溶媒付加形態（溶媒和物）または結晶形態（多形）を包含する事を理解すべきである。
【００９１】
固体形態の調製物には、散剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、坐剤、および分散性顆粒剤がある。固体担体は、希釈剤、香料、可溶化剤、潤滑剤、懸濁化剤、結合剤、保存剤、錠剤崩壊剤、またはカプセル化材料としても働き得る１以上の物質であってよい。散剤においては、担体は一般に、微粉化された活性成分との混合物である、微粉化された固体である。錠剤においては、活性成分を、一般に、必要とされる結合能を有する担体と適切な割合で混合し、所望の形状およびサイズに圧縮する。好適な担体は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、乳糖、ペクチン、デキストリン、澱粉、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ロウ、カカオ脂などを包含するが、これらに限定される訳ではない。固体形態調製物は、活性成分に加えて、着色料、香料、安定剤、緩衝剤、人工および天然甘味料、分散剤、増粘剤、可溶化剤などを含有できる。
【００９２】
液体製剤もまた経口投与に好適であり、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤および水性懸濁剤をはじめとする液体製剤を包含する。これらは、使用直前に液体形態調製物に変換されるよう意図されている固体形態調製物を包含する。乳剤は、溶液、例えばプロピレングリコール水溶液中に調製することができ、または、レシチン、ソルビタンモノオレアート、またはアラビアゴムのような乳化剤を含有することができる。水性懸濁液は、微粉化した活性成分を、粘性材料、例えば天然または合成ゴム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、およびその他の周知の懸濁化剤を用いて水に分散させる事によって製造できる。
【００９３】
本発明化合物は、坐剤として投与するために調合することができる。まず、低融点ロウ、例えば脂肪酸グリセリド混合物またはカカオ脂を融解させ、活性成分を例えば撹拌によって均一に分散させる。次に、溶融した均質な混合物を、都合の良いサイズの鋳型に注ぎ、冷却し、固化させる。
【００９４】
本発明化合物は、腟内投与用に調合することができる。活性成分に加えて、当分野で適当であることが知られているような担体を含む、ペッサリー、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、発泡剤またはスプレー剤。
【００９５】
好適な製剤は、薬用担体、希釈剤および賦形剤と共に、E. W. Martin編、Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvaniaに記載されている。熟練した製剤科学者は、本明細書の教示内の製剤を改変して、本発明に係る組成物を不安定にしたりそれらの治療活性を損なったりすることなく、特定の投与経路のための数多くの製剤を提供することができる。
【００９６】
本化合物を、例えば水またはその他の媒質に対してより可溶性にする改変は、軽微な改変（例えば塩の形成）によって容易に達成でき、それらは充分に当分野の通常の技術範囲内にある。患者に最大有益効果が得られるように本化合物の薬物動態を管理するため、特定化合物の投与経路および投薬レジメンを改変することも、充分に当分野の通常の技術範囲内にある。
【００９７】
本明細書で使用する「治療有効量」という語は、個体において疾患の症状を低減させるのに必要な量を意味する。用量は、それぞれ特定の症例における個体の必要性に適合させる。その用量は、治療しようとする疾患の重篤度、患者の年齢および全身健康状態、患者がそれによって治療されている他の医薬、投与経路および投与形態、ならびに関わっている医師の好みおよび経験といった数多くの因子に応じて広範囲に変わり得る。経口投与のためには、一日あたり約０．１および約１０gの間の日用量が、単剤療法および／または併用療法において好適である。好ましい日用量は、一日あたり約０．５および約７．５g、より好ましくは１．５および約６．０gの間である。一般的に、治療はウイルスを速やかに減少させまたは排除するため大量の初期「負荷用量」で開始し、その後感染の再発を防止するに充分なレベルまで用量を減少させる。本明細書に記載の疾患の治療における通常の技術を有する者は、過度の実験を行うことなく、個人の知識、経験および本出願の内容に依拠して、与えられた疾患および患者のための本発明化合物の治療有効量を確定することができる。
【００９８】
治療上の有効性は、血清蛋白（例えば、アルブミン、凝固因子、アルカリホスファターゼ、アミノトランスフェラーゼ（例えば、アラニントランスアミナーゼ、アスパラギン酸トランスアミナーゼ）、５’−ヌクレオシダーゼ、γ−グルタミニルトランスペプチダーゼ、等）のような蛋白レベル、ビリルビン合成、コレステロール合成、および胆汁酸合成を包含する（但しこれらに限定されない）肝機能；炭水化物代謝、アミノ酸およびアンモニア代謝を包含する（但しこれらに限定されない）肝代謝機能の試験から確認できる。或いは、治療上の有効性はＨＣＶ−ＲＮＡを測定することによって監視できる。これらの試験の結果によって用量を最適化できる。
【００９９】
本発明の態様において、活性化合物または塩を、リバビリンのような他の抗ウイルス薬、他のヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼインヒビター、ＨＣＶ非ヌクレオシドポリメラーゼインヒビター、ＨＣＶプロテアーゼインヒビター、ＨＣＶヘリカーゼインヒビターまたはＨＣＶ融合インヒビターと組み合わせて投与できる。活性化合物またはその誘導体もしくは塩を他の抗ウイルス薬と組み合わせて投与する時、その活性は、親化合物よりも増大し得る。治療が併用療法である場合、このような投与は、ヌクレオシド誘導体の投与に関して同時または連続的とすることができる。よって本明細書で使用される「同時投与」とは、同時または異なる時点での該物質の投与を包含する。２以上の物質の同時投与は、２以上の活性成分を含有する単一製剤によって、または、単一の活性物質を有する２以上の投薬形態の実質的同時投与によって達成できる。
【０１００】
本明細書における、治療に対する言及は、現在の状態の予防および治療に拡大されることを理解されたい。さらに、本明細書で使用されるＨＣＶ感染の「治療」という語もまた、ＨＣＶ感染に付随するまたはそれにより仲介される疾患もしくは状態、またはその臨床症状の治療もしくは予防を包含する。
【０１０１】
実施例１
プロピオン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−ヒドロキシ−４−メチル−３−プロピオニルオキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル；塩酸塩９（Ｉ−１）。
ＴＨＦ（１５mL）およびＨ２Ｏ（７mL）中のＩ−４（１．０g、３．８９mmol）の溶液にＴＥＡ（４．７２g、３３．８７mol）を加え、反応混合物を５℃に冷却した。反応混合物の温度を０℃以下に維持しながら塩化プロピオニル（１．４４g、１５．４５mmol）を徐々に加えた。反応をｈｐｌｃで監視し、初期添加が完了した後、モノプロピオナートエステルがまだ存在していたので、さらなる塩化プロピオニル（０．７２g、７．７７mmol）を加え、反応をＲＴで一夜撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、濃ＨＣｌでｐＨを約６．５に調節した。混合物をＥｔＯＡｃ（３０mL）およびＨ２Ｏ（１５mL）に分配し、相を分離した。水相をＥｔＯＡｃ（２ｘ２５mL）で抽出し、合した有機抽出液を希ブライン（２ｘ２０mL）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、油状物として遊離塩基を得た。この油状物をＩＰＡ（５mL）に溶解し、ＩＰＡ中のＨＣｌ（約４Ｎ ＨＣｌ １mL）で処理し、減圧濃縮した。残留物をＩＰＡ／ＭＴＢＥ／酢酸イソプロピル（１：３：１５）から再結晶し、得られた結晶を濾過し、酢酸イソプロピルで洗浄し、８０℃で減圧乾燥すると、０．９５g（６０．１%）のＩ−１が得られた。
【０１０２】
実施例２
イソ酪酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−ヒドロキシ−３−イソブチリルオキシ−４−メチル−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル；塩酸塩（Ｉ−２）。
Ｉ−４（０．５０g、１．９４mmol）、ＤＭＡＰ（０．０２６g、０．２１mmol）、ＴＨＦ（８mL）およびＨ２Ｏ（４mL）の溶液に、ＴＥＡ（２．３６g、１６．９３mmol）を加え、反応混合物を約−５℃に冷却した。反応温度が０℃以下に維持される速度でイソブチリルクロリド（０．９３mL、８．７５mmol）を滴下した。反応をＨＰＬＣ−ＭＳで監視した。モノアシル化副生成物を除去するため（ｈｐｌｃにより測定）、さらなる０．４１gおよび０．２１gアリコートのイソブチリルクロリド（計１．５５g、１４．５８mmol）を加えた。反応をＲＴで一夜撹拌し、０℃に冷却し、濃ＨＣｌでｐＨを６．５に調節した。混合物をＥｔＯＡｃ（３０mL）およびＨ２Ｏ（１５mL）に分配し、相を分離した。水相をＥｔＯＡｃ（２ｘ１５mL）で抽出し、合わせた有機抽出液を、希ブライン（２０mL）、希ＮａＨＣＯ３（２０mL）、希ブライン（１５mL）で順次洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、油状物として遊離塩基を得た。この油状物をＩＰＡ（５mL）に溶解し、ＩＰＡ中のＨＣｌ（約４Ｎ ＨＣｌ １mL）で処理し、減圧濃縮した。残留物をＩＰＡ／ＭＴＢＥ（１：１０）から再結晶し、得られた結晶を濾過し、ＭＴＢＥで洗浄し、８０℃で減圧乾燥すると、０．６１g（７２．６%）のＩ−２が得られた。
【０１０３】
実施例３
ペンタン酸（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−ヒドロキシ−４−メチル−３−ペンタノイルオキシ−テトラヒドロ−フラン−２−イルメチルエステル；塩酸塩（Ｉ−３）。
Ｉ−４（０．４９０g、１．９０mmol）、ＤＭＡＰ（０．０２６g、０．２１mmol）、ＴＨＦ（７mL）およびＨ２Ｏ（３mL）の溶液に、ＴＥＡ（２．３１g、１６．５９mmol）を加え、反応混合物を約０℃に冷却した。反応温度が５℃以下に維持される速度で無水吉草酸（１．６g、２．５７mmol）を滴下した。反応をＨＰＬＣ−ＭＳで監視した。モノアシル化副生成物を除去するため、０．３２gアリコートの無水吉草酸を２回加えた（計２．２４g、１１．９９mmol）。反応混合物を０℃に冷却し、濃ＨＣｌでｐＨを６．８に調節した。混合物をＥｔＯＡｃ（３０mL）およびＨ２Ｏ（１５mL）に分配し、相を分離した。水相をＥｔＯＡｃ（２ｘ１５mL）で抽出し、合わせた有機抽出液を、希ＮａＨＣＯ３（２ｘ２０mL）および水（１ｘ２０mL）で順次洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧濃縮して、油状物として遊離塩基を得た。この油状物をＩＰＡ（５mL）に溶解し、ＩＰＡ中のＨＣｌ（約４Ｎ ＨＣｌ ０．８mL）で処理し、減圧濃縮した。残留物をＩＰＡ／ＭＴＢＥ／ヘプタン（１：０．５：１０；１５mL）から再結晶し、得られた結晶を濾過し、ヘプタンで洗浄し、Ｎ２雰囲気下に８０℃で減圧乾燥すると、０．８８g（５５．７%）のＩ−３が得られた。
【０１０４】
実施例４
ラットにおける薬物動態学的パラメータの決定
体重２００〜２５０gの無傷の雄性ＩＧＳウィスターハンラットＣｒｌ：ＷＩ（ＧＬｘ／ＢＲＬ／Ｈａｎ）ＩＧＳ ＢＲ（ハノーバー−ウィスター）ラットを使用した。実験化合物の各用量レベルについて３匹のラットより成る群を使用した。実験の間は動物に餌と水を自由に摂取させた。被験物質を、１０mg/kgのＩ−５に相当する用量で、Ｃａｐｔｅｘ ３５５ＥＰ、Ｃａｐｍｕｌ ＭＣＭ、ＥｔＯＨ、およびプロピレングリコール（３０：２０：２０：３０）を含有する水性懸濁液として調合し、強制栄養により経口投与した。０．２５、０．５、１、３、５、および８時間の時点で頸静脈カニューレから、そして２４時間の時点で心臓穿刺により、処置ラットから血液試料（０．３mL）を採取した。この試料にシュウ酸カリウム／ＮａＦを加え、サンプリング操作の間、氷上に保存した。試料をできるだけ速やかに−４℃の冷蔵遠心機で遠心し、血漿試料を、分析するまで−８０℃の冷凍庫に保存した。血漿のアリコート（０．０５mL）をアセトニトリル０．１mLと混合した。内部標準（水中０．０５mL）および０．０２mLのブランク溶媒を加えた。非処置ラット由来の血漿０．０５mLアリコートをアセトニトリル０．１mL、メタノール：水（１：１）中の標準溶液０．０２mLアリコート、および水中の内部標準０．０５mLアリコートと混合することにより、一組の較正標準を作製した。各々の血漿試料および較正標準を良く撹拌し、次いで３０００ｒｐｍで５分間遠心して蛋白を沈殿させた。遠心で得た上清（各々１００μL）を、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析用に２００μLの水性移動相を入れた９６ウェルプレートに移した。
【０１０５】
試料の分析 − プロドラッグを、タンデム質量分析計（ＨＰＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）を備えた高速液体クロマトグラフィーを用いて分析した。分離にはＴｈｅｒｍｏ Ａｑｕａｓｉｌ Ｃ１８ ４．６ｘ５０mmカラム（５μM）を使用した。イオン化プロセスにはエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）を使用した。移動相Ａは、０．１%ギ酸を加えた水中５mM酢酸アンモニウムを含有し、移動相Ｂは、０．１%ギ酸を加えたＭｅＯＨを含有していた。溶離を１mL/分の流速で勾配を使用して実施した。
【０１０６】
実施例５
Ｃａｃｏ２プロトコル
材料
クレブス・ヘンゼライト緩衝液、塩化カルシウム二水和物、および重炭酸ナトリウムの粉末はSigma（St. Louis, MO）から購入した。Ｃａｃｏ−２細胞（継代 〜１００）はRoche Baselから得た。ダルベッコ改良イーグル培地（ＤＭＥＭ）／ｈｉｇｈ ｍｅｄｉｕｍ、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタン−スルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、および牛血清は、JRH Bioscience（Lenexa, KS）から取得した。ＭＥＭ非必須アミノ酸、Ｌ−グルタミン、ペニシリン、およびストレプトマイシンはGIBCO Labs, Life Tech. LLC（Grand Island, NY）から得た。Ｓｎａｐｗｅｌｌ細胞培養インサート（直径６．５mm、１．１２cm2、孔径０．４μm）はCostar（Cambridge, MA）から取得した。
【０１０７】
細胞培養
７５cm2のフラスコで細胞を増殖させ、５%ＣＯ２および９５%空気の雰囲気下で３７℃に維持した。培地は、５%牛血清、２５mMＨＥＰＥＳ、１%ＭＥＭ非必須アミノ酸、１%Ｌ−グルタミン、１００U/mLペニシリン、および１００μg/mLストレプトマイシンを添加したＤＭＥＭ／ｈｉｇｈ ｍｅｄｉｕｍで構成した。培養を分割比１−３で毎週継代した。透過性の実験のため、継代数１１０〜１２０のＣａｃｏ−２細胞をＳｎａｐｗｅｌｌインサートに入れたＴｒａｎｓｗｅｌｌポリカーボネートフィルター上に４０００００細胞／cm2の密度で撒き、使用前に７日間培養した。
【０１０８】
クレブス・ヘンゼライト緩衝液
１０mMグルコースおよび２．５mM ＣａＣｌ２を含有しｐＨ６．５および７．４に調節したクレブス・ヘンゼライト重炭酸塩緩衝液を、パケットの指示どおりに調製した。塩粉末を、ミリポア水で必要容量の約９０％に定量的に溶解した。１Ｎ ＨＣｌまたは１Ｎ ＮａＯＨでｐＨ調節する前に、塩化カルシウム二水和物および重炭酸ナトリウムを加えた。さらなるミリポア水を加えてこの溶液を最終容量とした。この溶液を０．２２ミクロン孔の膜を用いて濾過滅菌し、使用するまで冷蔵庫（〜２０℃）で保存した。
【０１０９】
細胞の調製
Cell Culture Core Facilityから分化した細胞を得、５%ＣＯ２および９５%空気の雰囲気下に３７℃で平衡化させた。ｃａｃｏ−２単層を含むＳｎａｐｗｅｌｌインサートを３７℃の平衡化したクレブス・ヘンゼライトｐＨ７．４緩衝液ですすいだ。
【０１１０】
方法
拡散チャンバーとして細胞インサートを利用した。頂端および側底チャンバー中のクレブス・ヘンゼライト緩衝液のｐＨはそれぞれ６．５および７．５であり、頂端側の基質の初期濃度は１００μMであった。頂端チャンバー中の被験化合物を伴う細胞を、５%ＣＯ２および９５%空気の雰囲気下に３７℃でおよそ３０分間プレインキュベートした。ｐＨ６．５クレブス・ヘンゼライト緩衝液中１００μMの化合物を伴う細胞インサートを、側底チャンバー中のプレ平衡化緩衝液を入れた新たなプレート中に移した時に実験を開始した。ドナー側からの試料を時刻０分に、そしてドナーおよびレシーバー側からの両試料を時刻３０分に採取して分析した。
【０１１１】
実験後対照
ルシファーイエローを使用して拡散系の挙動を評価した。被験化合物の最終サンプリングの後、ルシファーイエローを初期濃度１００μMとなるように頂端チャンバーに加えた。６０分間インキュベートした後、底部チャンバーから２５０μLを取り、アッセイした。
【０１１２】
透過係数（Ｐａｐｐ）の算出
Ｐａｐｐを以下の式を用いて算出した：
【０１１３】
【数１】
【０１１４】
式中、Ｖは、レシーバー溶液の容量（cm3）であり、Ａは、Ｓｎａｐｗｅｌｌインサートの表面積（cm2）であり、Ｃ０は初期濃度（nM）であり、そしてｄＣ／ｄｔは、レシーバーチャンバー内の経時的濃度変化、即ち、レシーバーチャンバー内の濃度対時間の傾き（nM/分）である。各サンプリング時点における濃度は、実験に応じて、取り除いたアリコートまたは新しいプレートへのドナーインサートの移動を考慮して補正した。
【０１１５】
実施例６
本化合物のための代表的医薬組成物
【０１１６】
【表２】
【０１１７】
成分を混合し、造粒し、活性化合物約５００mgを入れた硬ゼラチンカプセルに分注する。
【０１１８】
【表３】
【０１１９】
成分を合わせ、水などの溶媒を用いて造粒する。次にこの調合物を乾燥し、適切な打錠機を用いて活性化合物約５００mgを含有する錠剤を製造する。
【０１２０】
【表４】
【０１２１】
成分を混合して経口投与のための懸濁剤を製造する。
【０１２２】
【表５】
【０１２３】
成分を一緒に融解し、蒸気浴上で混合し、総重量２．５gが入る鋳型に注ぐ。
【０１２４】
それらの特別な形態で、もしくは開示された機能を実行する手段の観点で表した、上の説明または後の請求項に開示される特徴、または開示された結果を達成する方法もしくは過程は、必要に応じて、別々に、またはそのような特徴を任意に組み合わせて、様々な形態で本発明を実現するために利用できる。
【０１２５】
前記の発明を、明確化および理解の目的のため、説明および実施例によって幾分詳細に記載してきた。付記する請求項の範囲内で変更および修飾を施し得ることは、当業者には明らかであろう。故に、上の説明は例示的なものであって限定的なものでないことを理解すべきである。したがって本発明の範囲は、上の説明を参照して決定すべきものではなく、以下に付記する請求項および係る請求項が権利を与える等価物の全範囲を参照して決定せねばならない。
【０１２６】
本明細書に引用する全ての特許、特許出願および公報は、各々個々の特許、特許出願または公報が個別にその旨記載してあるかの如く、引用によりその全内容を本明細書の一部とする。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ３−５シクロアルキルおよびＣ２−５ハロアルキルより成る群から独立して選ばれる］
で示される化合物ならびにそれらの水和物、溶媒和物および酸付加塩。
【請求項２】
Ｒ１が、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチルまたはイソ−ブチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、エチルまたはイソ−プロピルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がイソ−プロピルであり、化合物が、塩酸塩、メシル酸塩、ヘミ硫酸塩または硫酸塩である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための抗ウイルス薬としての、請求項１〜４のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物、またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用。
【請求項６】
ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための、少なくとも一つの免疫系調節物質および／またはＨＣＶの複製を阻害する少なくとも一つの抗ウイルス薬と組み合わせた抗ウイルス薬としての、請求項１〜４のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用。
【請求項７】
ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための医薬を製造するための、請求項１〜４のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用。
【請求項８】
ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための医薬を製造するための、少なくとも一つの免疫系調節物質および／またはＨＣＶの複製を阻害する少なくとも一つの抗ウイルス薬と組み合わせた、請求項１〜４のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用。
【請求項９】
請求項１に記載の化合物の治療有効量を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）により仲介される疾患を治療する方法。
【請求項１０】
一日あたり０．１および１０gの間の用量の化合物を患者に投与する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
一日あたり０．５および７．５gの間の用量を患者に投与する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
一日あたり１．０および６．０gの間の用量を患者に投与する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
少なくとも一つの免疫系調節物質および／またはＨＣＶの複製を阻害する少なくとも一つの抗ウイルス薬を投与することをさらに含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
少なくとも一つの薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合した、治療有効量の請求項１に記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項１５】
塩基性反応条件下でＯ−アシルヌクレオシドIIを得るためのヌクレオシドＩの選択的Ｏ−アシル化：
【化２】
［式中、Ｒ１は、Ｃ２−４非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−４非分岐または分岐アルケニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ２−５ハロアルキルおよび場合により置換されていてもよいフェニルより成る群から選ばれる］
の方法であって、
（ｉ）IIおよびＤＭＡＰを不均一な水性溶媒混合物に溶解し、水性塩基を添加してｐＨを約７．５〜約１２に調節し；
（ii）場合により充分な飽和ＮａＣｌ水を加えて二相性反応混合物を生成し；
（iii）アシル化剤を加え、ｐＨを約７．５〜約１２に維持するに充分なさらなる塩基を加え；
（iv）反応を監視して、変換が満足できるレベルに到達した時に前記アシル化剤および前記塩基の添加を中止し；
（ｖ）場合により、このＯ−アシルヌクレオシドを薬学的に許容される酸と接触させて、Ｏ−アシルヌクレオシドの酸付加塩を形成させる、
工程を含む方法。
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
［式中、Ｒ１は、Ｃ２−５非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−５非分岐または分岐アルケニル、Ｃ３−５シクロアルキルおよびＣ２−５ハロアルキルより成る群から独立して選ばれる］
で示される化合物ならびにそれらの水和物、溶媒和物および酸付加塩。
【請求項２】
Ｒ１が、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチルまたはイソ−ブチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、エチルまたはイソ−プロピルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がイソ−プロピルであり、化合物が、塩酸塩、メシル酸塩、ヘミ硫酸塩または硫酸塩である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための抗ウイルス薬としての、請求項１〜４のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物、またはその水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用。
【請求項６】
ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための、少なくとも一つの免疫系調節物質および／またはＨＣＶの複製を阻害する少なくとも一つの抗ウイルス薬と組み合わせた抗ウイルス薬としての、請求項１〜４のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用。
【請求項７】
ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための医薬を製造するための、請求項１〜４のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用。
【請求項８】
ＨＣＶにより仲介される疾患の治療のための医薬を製造するための、少なくとも一つの免疫系調節物質および／またはＨＣＶの複製を阻害する少なくとも一つの抗ウイルス薬と組み合わせた、請求項１〜４のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物またはそれらの水和物、溶媒和物もしくは酸付加塩の使用。
【請求項９】
請求項１に記載の化合物の治療有効量を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）により仲介される疾患を治療する方法。
【請求項１０】
一日あたり０．１および１０gの間の用量の化合物を患者に投与する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
一日あたり０．５および７．５gの間の用量を患者に投与する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
一日あたり１．０および６．０gの間の用量を患者に投与する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
少なくとも一つの免疫系調節物質および／またはＨＣＶの複製を阻害する少なくとも一つの抗ウイルス薬を投与することをさらに含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
少なくとも一つの薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合した、治療有効量の請求項１に記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項１５】
塩基性反応条件下でＯ−アシルヌクレオシドIIを得るためのヌクレオシドＩの選択的Ｏ−アシル化：
【化２】
［式中、Ｒ１は、Ｃ２−４非分岐または分岐アルキル、Ｃ２−４非分岐または分岐アルケニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ２−５ハロアルキルおよび場合により置換されていてもよいフェニルより成る群から選ばれる］
の方法であって、
（ｉ）IIおよびＤＭＡＰを不均一な水性溶媒混合物に溶解し、水性塩基を添加してｐＨを約７．５〜約１２に調節し；
（ii）場合により充分な飽和ＮａＣｌ水を加えて二相性反応混合物を生成し；
（iii）アシル化剤を加え、ｐＨを約７．５〜約１２に維持するに充分なさらなる塩基を加え；
（iv）反応を監視して、変換が満足できるレベルに到達した時に前記アシル化剤および前記塩基の添加を中止し；
（ｖ）場合により、このＯ−アシルヌクレオシドを薬学的に許容される酸と接触させて、Ｏ−アシルヌクレオシドの酸付加塩を形成させる、
工程を含む方法。
【公表番号】特表２００９−５３２４１１（Ｐ２００９−５３２４１１Ａ）
【公表日】平成２１年９月１０日（２００９．９．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５０３５２９（Ｐ２００９−５０３５２９）
【出願日】平成１９年３月２６日（２００７．３．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００７／０５２８６６
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１１３１５９
【国際公開日】平成１９年１０月１１日（２００７．１０．１１）
【出願人】（５９１００３０１３）エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー (1,754)
【氏名又は名称原語表記】Ｆ． ＨＯＦＦＭＡＮＮ−ＬＡ ＲＯＣＨＥ ＡＫＴＩＥＮＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年９月１０日（２００９．９．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年３月２６日（２００７．３．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００７／０５２８６６
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１１３１５９
【国際公開日】平成１９年１０月１１日（２００７．１０．１１）
【出願人】（５９１００３０１３）エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー (1,754)
【氏名又は名称原語表記】Ｆ． ＨＯＦＦＭＡＮＮ−ＬＡ ＲＯＣＨＥ ＡＫＴＩＥＮＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]