【課題】
本発明は薬剤の標的蛋白質を、該薬剤と蛋白質の結合ではなく薬剤に応答した蛋白質の立体構造の変化を指標として、しかも前記薬剤の構造修飾を必要とすることなく、同定する方法の提供を課題とする。
【解決手段】
薬剤の作用による標的蛋白質の立体構造の変化を薬剤の側からではなく、薬剤に応答した標的蛋白質の側から捕捉及び検出する手法を開発することにより、従来の手法で不可避であった薬剤の化学構造の修飾を必要とせずに、該薬剤の標的蛋白質を同定することを可能にした。即ち、ユビキチンリガーゼ蛋白質が、標的蛋白質を探索したい薬剤による蛋白質の立体構造の変化を認識することを見出し、細胞内蛋白質とユビキチンリガーゼ蛋白質との結合の変化を指標に標的蛋白質を探索したい薬剤の標的蛋白質を検出し同定する方法を構築した。 （もっと読む）

本発明は、標的分子特異的プローブに結合した少なくとも1つのコンポーネントを含む、標的分子を検出するためのレポーターユニットであって、少なくとも1つのコンポーネントが、第一酵素の活性によってプローブから遊離し、それにより、少なくとも1つのコンポーネントを、重合反応で基質を用いる第二酵素のための基質として利用できるようにして、検出可能な構造を得るレポーターユニットに関する。 （もっと読む）

本発明は、２６ＳプロテアソームのＳ５ａサブユットのパーキンが媒介するユビキチン化が測定されるか、あるいはトロポニン１のユビキチン化が測定されるパーキン活性のインビトロおよび細胞に基づくアッセイ方法を提供する。このアッセイ方法はパーキンタンパク質リガーゼ活性を調節する作用物質をスクリーニングするために使用できる。 （もっと読む）

【課題】多細胞生物に対する、化合物、薬剤または毒素の毒性を評価する方法を提供する。
【解決手段】既知の毒素にさらされた組織もしくは細胞における、さらされない組織もしくは細胞と比較してのタンパク質の活性、遺伝子発現の全体的な変化の解明、ならびに毒素にさらすことにより示差的に発現された個々の遺伝子の同定に基づき、マイクロアレイおよびその他の固相プローブと共に使用するように設計された、毒素誘発性の示差的な発現によって特徴づけられる遺伝子のデータベースを含むことからなる。 （もっと読む）

【課題】本発明の目的は、リン酸修飾を触媒する酵素の活性をアッセイするための方法を提供することである。
【解決手段】本発明は、キナーゼ、ホスファターゼ、シクラーゼ、およびホスホジエステラーゼのようなリン酸修飾を触媒する酵素の活性を測定することができるアッセイに関する。アッセイはまた、キナーゼ、ホスファターゼ、シクラーゼ、およびホスホジエステラーゼの活性を調整する物質を同定およびスクリーニングするためにも用いることができる。 （もっと読む）

本発明は、生物発光検出によりピロリン酸塩を検出する方法に関する。さらに、ピロリン酸塩が形成されるまたは消費される化学反応、特に酵素触媒反応を測定する方法を記載する。かかる反応は、例えばグアニリルシクラーゼ、アデニリルシクラーゼ、DNAポリメラーゼまたはRNAポリメラーゼにより触媒される。この新規な方法は高感度性および干渉に対する低感受性により区別され、容易に自動化および小型化でき、さらに連続的な測定を行うのに適している。本方法は、医薬品有効成分の研究を含む、医学的診断および生物医学的研究の領域において特に有利に用いることができる。 （もっと読む）

【課題】新規なポリヌクレオチドの配列決定方法を提供すること。
【解決手段】以下の工程を含む、ポリヌクレオチドの配列を決定する方法を提供する：
(i)定められた位置に固定化されたポリヌクレオチド進行型酵素と、標的ポリヌクレオチドとを、 酵素活性の誘導に十分な条件下で接触させる工程;
(ii)酵素とポリヌクレオチドとの相互作用の結果である効果を検出する工程、ここで、該効果は、非線形光シグナルまたは非線形シグナルに結合した線形シグナルの測定により検出する。 （もっと読む）

【課題】ヘリカーゼの二本鎖核酸を一本鎖核酸へ解離させる活性を、放射性同位体元素や電気化学的測定手法、FRETなどを用いずに、簡便かつ安価に測定可能にする方法を提供する。
【解決手段】へリカーゼ活性を測定するための基質として、核酸構成塩基の近接、離間により、蛍光強度が変化する蛍光色素で標識した核酸と、該核酸と相補の塩基配列を有する他方の核酸とにより、蛍光標識二本鎖核酸を調製し、この蛍光標識２本鎖核酸を基質として、ヘリカーゼによる酵素反応を行い、一本鎖核酸への解離に伴い、変化する蛍光強度を測定する。 （もっと読む）

【課題】検出配列の相違を検出する方法を提供する。
【解決手段】本発明は、組み合せたリガーゼ検出反応（ＬＤＲ）およびポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を用いて検出配列の相違を検出する方法を提供するすることに関する。本発明の１つの実施態様は、ポリメラーゼ連鎖反応に組み合せたリガーゼ検出反応の使用である。本発明の他の実施態様は、１次ポリメラーゼ連鎖反応と組み合わせた２次ポリメラーゼ連鎖反応と組み合せたリガーゼ検出反応である。本発明の第３の実施態様は、１次ポリメラーゼ連鎖反応と組み合わせた２次ポリメラーゼ連鎖反応である。リガーゼ検出反応およびポリメラーゼ連鎖反応のこのような組み合せは、核酸配列相違の多重検出を可能とする。 （もっと読む）

【課題】感作性物質の新規な評価方法の提供。
【解決手段】S9分画及びミクロソーム分画からなる群から選択される代謝酵素材料を被験物質及び補酵素と混合し、反応させることにより、当該被験物質又はその代謝物を代謝酵素材料のタンパク質成分に結合させ、当該代謝酵素材料のタンパク質成分に存在するSH基の量を測定することを特徴とする、感作性物質のインビトロ評価方法又はスクリーニング方法。 （もっと読む）