α−リポ酸Ｌ−オルニチン塩およびその製造法
【課題】高純度のα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩結晶およびその製造法を提供する。
【解決手段】液温０〜１０℃のα−リポ酸エタノール溶液へ、液温０〜１０℃のＬ−オルニチン含水エタノール溶液を徐々に滴下し、さらに同温度において混合液を攪拌し、析出した結晶を母液から分離し、０〜１０℃の冷エタノール溶液で洗浄し，４０℃以下の温度で減圧乾燥する。得られた結晶は融点１６９〜１７１℃を示し、Ｘ線回折により明らかな結晶像を示す。
【解決手段】液温０〜１０℃のα−リポ酸エタノール溶液へ、液温０〜１０℃のＬ−オルニチン含水エタノール溶液を徐々に滴下し、さらに同温度において混合液を攪拌し、析出した結晶を母液から分離し、０〜１０℃の冷エタノール溶液で洗浄し，４０℃以下の温度で減圧乾燥する。得られた結晶は融点１６９〜１７１℃を示し、Ｘ線回折により明らかな結晶像を示す。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品および食品サプリメントとして有用なα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩の結晶、およびその製造法に関する。
【背景技術】
【０００２】
チオクト酸とも呼ばれるα−リポ酸(化学名１，２−ジチオラン−３−ペンタン酸)は、Ｒ（＋）型として動物および植物細胞中に存在する天然物質である。このものは体内において糖代謝経路に含まれるケト酸の酸化的脱カルボキシル化反応に必須な補酵素であり、また抗酸化作用を有することから、活性酵素の抑制による老化防止が期待されている。近年化学合成されたα−リポ酸が医薬品として、および食品サプリメントとして使用されている。
【０００３】
α−リポ酸は水に難溶なため、食品サプリメントには固体のα−リポ酸が使用されている。水溶性のα−リポ酸塩も知られている。これらのうち生理的に意義がある有機塩基との塩として、ＦＲ４６８０Ｍにはα−リポ酸のオルニチン塩が記載されている。それによるとα−リポ酸オルニチン塩は融点１４７℃の白色結晶性粉末であると記載されている。しかしながらその製造法の記載はなく、原料オルニチンが天然型のＬ体であるとの記載もない。この特許が出願された１９６５年当時の技術水準を鑑みれば、オルニチンはタンパク質をアルカリで加水分解し、Ｌ−アルギニンの二次的分解およびラセミ化によって生成したＤＬ−体であった可能性が大である。
【０００４】
今日では発酵法などにより天然型Ｌ−オルニチンの製造が可能になっており、高純度のα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩の結晶およびその製造法の提供が望まれる。
【発明の開示】
【０００５】
本発明者らは、α−リポ酸のＬ−オルニチン塩を結晶として単離することに成功した。この結晶はＦＲ４６８０Ｍに報告されている値と異なり、１６９〜１７１℃の融点を持っている。さらにＸ線回折チャートにより明らかな結晶像を持っている。オルニチンは必須アミノ酸ではないが、尿素回路の一員として尿素産生に関係し、代謝上重要な役割を持つことが知られている。しかしながらそのＤ−異性体にはそのような作用はないので、α−リポ酸のカウンターカチオンとしてＬ−オルニチンを選ぶことはオルニチンの生理活性を富化することになり、有益である。
【０００６】
本発明によるα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩結晶の製造法は、液温０〜１０℃のα−リポ酸エタノール溶液へ液温０〜１０℃のＬ−オルニチン含水エタノール溶液を徐々に滴下し、さらに同温度において混合液を攪拌し、析出した結晶を母液から分離し、４０℃以下の温度で減圧乾燥することよりなる。ここで母液から分離した結晶は、乾燥前に０〜１０℃の冷エタノールで洗浄することが望ましい。
【０００７】
このように液体（エタノールおよび含水エタノール）の温度を０〜１０℃に保つことは、結晶が析出する母液中の塩の飽和溶解度を下げ、大部分の塩を結晶の形で析出させて収率を高める効果があり、さらにα−リポ酸が重合して不純物として製品に混入することを避ける効果がある。さらにこの方法で使用する溶媒はエタノールと水のみであるから、安全性が高く、食品サプリメントとして投与するのに適している。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
好ましい実施態様に従った本発明のα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩結晶の製造法は、
（ａ）α−リポ酸を所要量のエタノールに溶解する工程；
（ｂ）α−リポ酸に対して理論量のＬ−オルニチンを含水エタノールに溶解する工程；
（ｃ）工程（ａ）で得たα−リポ酸溶液へ工程（ｂ）で得たＬ−オルニチン溶液を徐々に滴下し、攪拌して結晶を析出させる工程；
（ｄ）工程（ｃ）で析出させた結晶を常法により母液から分離し、エタノールで洗浄する工程；
（ｅ）分離した結晶を４０℃以下の温度で減圧乾燥する工程；よりなり、
（ｆ）工程（ａ）ないし（ｄ）はすべて液温０〜１０℃において実施され；
（ｇ）工程（ａ）および（ｂ）において使用するアルコールおよび水の量は工程（ｃ）において結晶が析出する母液のエタノール濃度が９０ｖ／ｖ％以上となる量とすること、すなわち工程（ｂ）においてＬ−オルニチンを必要最小限の量の水に溶解し、これにエタノールを添加したものをα−リポ酸のエタノール溶液へ滴下することである。
【０００９】
例えばα−リポ酸を４０〜４８ｍＬ／ｇのエタノールに溶解し、一方当量のＬ−オルニチンを１．８〜２．２ｍＬ／ｇの水に溶解し、これに２〜１０ｍＬ／ｇのエタノールを添加してα−リポ酸エタノール溶液へ滴下する。これによりエタノール全体の液量が少なくてすみ、かつ塩の結晶収率も例えば８０％に向上する。
【００１０】
原料α−リポ酸は通常ラセミ体であるが、これを光学分割して得られるＲ（＋）型異性体を使用することもできる。他方の原料Ｌ−オルニチンは通常塩酸塩の形で提供されるので、これから常法によりＬ−オルニチンを遊離させて用いる。例えば、塩酸塩水溶液を水酸化ナトリウムで中和し、中和液を強酸性イオン交換樹脂のカラムに通液して遊離オルニチンを吸着させる。カラムを水で良く洗浄し、洗液がｐＨ７になったらアンモニア水で吸着された遊離オルニチンを溶出し、溶出液からアンモニアを蒸発により除去してから凍結乾燥してＬ−オルニチンを得ることができる。
【００１１】
以下に限定を意図しない実施例を挙げ、本発明を例証する。
【実施例】
【００１２】
Ａ．遊離Ｌ−オルニチンの製造
Ｌ−オルニチン塩酸塩１０ｇを水４０ｍＬに溶解し、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液６２ｍＬ（２．１当量）で中和した。中和液を強酸性イオン交換樹脂１００ｍＬを充填したカラムに通液した。カラムに水を流し、洗液がｐＨ７になったら１Ｎアンモニア水を流し、カラムに吸着されたＬ−オルニチンを溶出した。得られた溶出液から蒸発によりアンモニアを除去し、凍結乾燥して粉末状のＬ−オルニチンを得た。収量６．１６ｇ（理論の７９％）
【００１３】
Ｂ．α−リポ酸Ｌ−オルニチン塩の製造
エタノール１３２ｍＬを０から０℃に冷却し、α−リポ酸３ｇを加え、同温度で１時間攪拌し、溶解した。
【００１４】
別にＬ−オルニチン１．９２ｇ（１．０当量）を水９．６ｍＬに加えて溶解し、これにエタノール１８ｍＬを添加してＬ−オルニチン溶液を得た。
【００１５】
０〜１０℃に冷却した上のα−リポ酸溶液へ、同温度のＬ−オルニチン溶液を徐々に滴下し、同温度で一時間攪拌し、析出した結晶を濾過し、エタノール６ｍＬで洗浄し、４０℃で減圧乾燥し、α−リポ酸Ｌ−オルニチン塩の結晶３．９１ｇ（理論の８０％）を得た。このものは融点１６９〜１７１℃を示し、Ｘ線回折パターンにおいて明らかな結晶像を示した。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】α−リポ酸Ｌ−オルニチン塩のＸ線回折チャートである。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品および食品サプリメントとして有用なα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩の結晶、およびその製造法に関する。
【背景技術】
【０００２】
チオクト酸とも呼ばれるα−リポ酸(化学名１，２−ジチオラン−３−ペンタン酸)は、Ｒ（＋）型として動物および植物細胞中に存在する天然物質である。このものは体内において糖代謝経路に含まれるケト酸の酸化的脱カルボキシル化反応に必須な補酵素であり、また抗酸化作用を有することから、活性酵素の抑制による老化防止が期待されている。近年化学合成されたα−リポ酸が医薬品として、および食品サプリメントとして使用されている。
【０００３】
α−リポ酸は水に難溶なため、食品サプリメントには固体のα−リポ酸が使用されている。水溶性のα−リポ酸塩も知られている。これらのうち生理的に意義がある有機塩基との塩として、ＦＲ４６８０Ｍにはα−リポ酸のオルニチン塩が記載されている。それによるとα−リポ酸オルニチン塩は融点１４７℃の白色結晶性粉末であると記載されている。しかしながらその製造法の記載はなく、原料オルニチンが天然型のＬ体であるとの記載もない。この特許が出願された１９６５年当時の技術水準を鑑みれば、オルニチンはタンパク質をアルカリで加水分解し、Ｌ−アルギニンの二次的分解およびラセミ化によって生成したＤＬ−体であった可能性が大である。
【０００４】
今日では発酵法などにより天然型Ｌ−オルニチンの製造が可能になっており、高純度のα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩の結晶およびその製造法の提供が望まれる。
【発明の開示】
【０００５】
本発明者らは、α−リポ酸のＬ−オルニチン塩を結晶として単離することに成功した。この結晶はＦＲ４６８０Ｍに報告されている値と異なり、１６９〜１７１℃の融点を持っている。さらにＸ線回折チャートにより明らかな結晶像を持っている。オルニチンは必須アミノ酸ではないが、尿素回路の一員として尿素産生に関係し、代謝上重要な役割を持つことが知られている。しかしながらそのＤ−異性体にはそのような作用はないので、α−リポ酸のカウンターカチオンとしてＬ−オルニチンを選ぶことはオルニチンの生理活性を富化することになり、有益である。
【０００６】
本発明によるα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩結晶の製造法は、液温０〜１０℃のα−リポ酸エタノール溶液へ液温０〜１０℃のＬ−オルニチン含水エタノール溶液を徐々に滴下し、さらに同温度において混合液を攪拌し、析出した結晶を母液から分離し、４０℃以下の温度で減圧乾燥することよりなる。ここで母液から分離した結晶は、乾燥前に０〜１０℃の冷エタノールで洗浄することが望ましい。
【０００７】
このように液体（エタノールおよび含水エタノール）の温度を０〜１０℃に保つことは、結晶が析出する母液中の塩の飽和溶解度を下げ、大部分の塩を結晶の形で析出させて収率を高める効果があり、さらにα−リポ酸が重合して不純物として製品に混入することを避ける効果がある。さらにこの方法で使用する溶媒はエタノールと水のみであるから、安全性が高く、食品サプリメントとして投与するのに適している。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
好ましい実施態様に従った本発明のα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩結晶の製造法は、
（ａ）α−リポ酸を所要量のエタノールに溶解する工程；
（ｂ）α−リポ酸に対して理論量のＬ−オルニチンを含水エタノールに溶解する工程；
（ｃ）工程（ａ）で得たα−リポ酸溶液へ工程（ｂ）で得たＬ−オルニチン溶液を徐々に滴下し、攪拌して結晶を析出させる工程；
（ｄ）工程（ｃ）で析出させた結晶を常法により母液から分離し、エタノールで洗浄する工程；
（ｅ）分離した結晶を４０℃以下の温度で減圧乾燥する工程；よりなり、
（ｆ）工程（ａ）ないし（ｄ）はすべて液温０〜１０℃において実施され；
（ｇ）工程（ａ）および（ｂ）において使用するアルコールおよび水の量は工程（ｃ）において結晶が析出する母液のエタノール濃度が９０ｖ／ｖ％以上となる量とすること、すなわち工程（ｂ）においてＬ−オルニチンを必要最小限の量の水に溶解し、これにエタノールを添加したものをα−リポ酸のエタノール溶液へ滴下することである。
【０００９】
例えばα−リポ酸を４０〜４８ｍＬ／ｇのエタノールに溶解し、一方当量のＬ−オルニチンを１．８〜２．２ｍＬ／ｇの水に溶解し、これに２〜１０ｍＬ／ｇのエタノールを添加してα−リポ酸エタノール溶液へ滴下する。これによりエタノール全体の液量が少なくてすみ、かつ塩の結晶収率も例えば８０％に向上する。
【００１０】
原料α−リポ酸は通常ラセミ体であるが、これを光学分割して得られるＲ（＋）型異性体を使用することもできる。他方の原料Ｌ−オルニチンは通常塩酸塩の形で提供されるので、これから常法によりＬ−オルニチンを遊離させて用いる。例えば、塩酸塩水溶液を水酸化ナトリウムで中和し、中和液を強酸性イオン交換樹脂のカラムに通液して遊離オルニチンを吸着させる。カラムを水で良く洗浄し、洗液がｐＨ７になったらアンモニア水で吸着された遊離オルニチンを溶出し、溶出液からアンモニアを蒸発により除去してから凍結乾燥してＬ−オルニチンを得ることができる。
【００１１】
以下に限定を意図しない実施例を挙げ、本発明を例証する。
【実施例】
【００１２】
Ａ．遊離Ｌ−オルニチンの製造
Ｌ−オルニチン塩酸塩１０ｇを水４０ｍＬに溶解し、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液６２ｍＬ（２．１当量）で中和した。中和液を強酸性イオン交換樹脂１００ｍＬを充填したカラムに通液した。カラムに水を流し、洗液がｐＨ７になったら１Ｎアンモニア水を流し、カラムに吸着されたＬ−オルニチンを溶出した。得られた溶出液から蒸発によりアンモニアを除去し、凍結乾燥して粉末状のＬ−オルニチンを得た。収量６．１６ｇ（理論の７９％）
【００１３】
Ｂ．α−リポ酸Ｌ−オルニチン塩の製造
エタノール１３２ｍＬを０から０℃に冷却し、α−リポ酸３ｇを加え、同温度で１時間攪拌し、溶解した。
【００１４】
別にＬ−オルニチン１．９２ｇ（１．０当量）を水９．６ｍＬに加えて溶解し、これにエタノール１８ｍＬを添加してＬ−オルニチン溶液を得た。
【００１５】
０〜１０℃に冷却した上のα−リポ酸溶液へ、同温度のＬ−オルニチン溶液を徐々に滴下し、同温度で一時間攪拌し、析出した結晶を濾過し、エタノール６ｍＬで洗浄し、４０℃で減圧乾燥し、α−リポ酸Ｌ−オルニチン塩の結晶３．９１ｇ（理論の８０％）を得た。このものは融点１６９〜１７１℃を示し、Ｘ線回折パターンにおいて明らかな結晶像を示した。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】α−リポ酸Ｌ−オルニチン塩のＸ線回折チャートである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液温０〜１０℃のα−リポ酸エタノール溶液へ、液温０〜１０℃のＬ−オルニチン含水エタノール溶液を徐々に滴下し、さらに同温度において混合液を攪拌し、析出した結晶を母液から分離し、４０℃以下の温度で減圧乾燥することを特徴とするα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩の製造法。
【請求項２】
母液から分離した結晶を減圧乾燥する前に、０〜１０℃の冷エタノールで洗浄する工程を含む請求項１の方法。
【請求項３】
（ａ）α−リポ酸を所要量のエタノールに溶解する工程；
（ｂ）α−リポ酸に対し理論量のＬ−オルニチンを含水エタノールに溶解する工程；
（ｃ）工程（ａ）で得たα−リポ酸溶液へ工程（ｂ）で得たＬ−オルニチン溶液を徐々に滴下し、攪拌して結晶を析出させる工程；
（ｄ）工程（ｃ）で析出させた結晶を常法により母液から分離し、エタノールで洗浄する工程；
（ｅ）分離した結晶を４０℃以下の温度で減圧乾燥する工程；よりなり、
（ｆ）工程（ａ）ないし（ｄ）は液温０〜１０℃において実施され；
（ｇ）工程（ａ）および（ｂ）において使用するアルコールおよび水の量は工程（ｅ）において結晶が析出する母液のエタノール濃度が９０ｖ／ｖ％以上となる量である；
ことを特徴とするα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩結晶の製造法。
【請求項４】
融点１６９〜１７１℃を示すα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩結晶。
【請求項１】
液温０〜１０℃のα−リポ酸エタノール溶液へ、液温０〜１０℃のＬ−オルニチン含水エタノール溶液を徐々に滴下し、さらに同温度において混合液を攪拌し、析出した結晶を母液から分離し、４０℃以下の温度で減圧乾燥することを特徴とするα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩の製造法。
【請求項２】
母液から分離した結晶を減圧乾燥する前に、０〜１０℃の冷エタノールで洗浄する工程を含む請求項１の方法。
【請求項３】
（ａ）α−リポ酸を所要量のエタノールに溶解する工程；
（ｂ）α−リポ酸に対し理論量のＬ−オルニチンを含水エタノールに溶解する工程；
（ｃ）工程（ａ）で得たα−リポ酸溶液へ工程（ｂ）で得たＬ−オルニチン溶液を徐々に滴下し、攪拌して結晶を析出させる工程；
（ｄ）工程（ｃ）で析出させた結晶を常法により母液から分離し、エタノールで洗浄する工程；
（ｅ）分離した結晶を４０℃以下の温度で減圧乾燥する工程；よりなり、
（ｆ）工程（ａ）ないし（ｄ）は液温０〜１０℃において実施され；
（ｇ）工程（ａ）および（ｂ）において使用するアルコールおよび水の量は工程（ｅ）において結晶が析出する母液のエタノール濃度が９０ｖ／ｖ％以上となる量である；
ことを特徴とするα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩結晶の製造法。
【請求項４】
融点１６９〜１７１℃を示すα−リポ酸Ｌ−オルニチン塩結晶。
【図１】
【公開番号】特開２００８−１５６２８２（Ｐ２００８−１５６２８２Ａ）
【公開日】平成２０年７月１０日（２００８．７．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−３４７０３２（Ｐ２００６−３４７０３２）
【出願日】平成１８年１２月２５日（２００６．１２．２５）
【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）平成１８年度、経済産業省、水溶性のα−リポ酸アミノ酸塩の実用的製造法の開発委託研究、産業再生法第３０条の適用を受ける特許出願
【出願人】（０００２３６５７３）浜理薬品工業株式会社 (18)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年７月１０日（２００８．７．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１２月２５日（２００６．１２．２５）
【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）平成１８年度、経済産業省、水溶性のα−リポ酸アミノ酸塩の実用的製造法の開発委託研究、産業再生法第３０条の適用を受ける特許出願
【出願人】（０００２３６５７３）浜理薬品工業株式会社 (18)
【Ｆターム（参考）】
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