ピリジンの非古典的カンナビノイド化合物及び関連する使用方法
式Iの化合物を開示する。式Iにおいて、R1、R2、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ及びＺは、明細書中にて定義される通りであってもよい。化合物は、カンナビノイド受容体によって仲介される疾患の治療に用いられてもよい。
【化１】
【化１】
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
本願は、２００８年５月１９日に出願された出願番号61/128,088の優先権の利益を主張するものであり、その出願の全てを併合するものである。
【０００２】
古典的カンナビノイドであるデルタ‐９‐テトラヒドロカンナビノール（Δ９-THC）は、カンナビス サティバ（Cannabis sativa）から抽出される主要な有効成分である。カンナビノイドの効果は、特異的高親和性受容体との相互作用による。現在、２つのカンナビノイド受容体が特定されている。すなわち、CB-１、つまり哺乳類の脳及び末梢組織における他の多くの部分で見出される中枢受容体、及びCB-2、つまり主に免疫システムに関連する細胞において見出される末梢受容体である。さらに、近年、GPR35及びGPR55というオーファン受容体が、カンナビノイド型リガンドと結合することが報告され、三つ目の受容体の亜型として紹介された。CB-１受容体は、古典的カンナビノイドと関連する精神活性を仲介すると考えられている。これらの受容体の特性評価は、アゴニストWIN 55212-2等の特異的合成リガンドの開発によって可能となった（D'Ambra et al, J. Med Chem. 35:124 (1992)) 及び CP 55,940 (Melvin et al, Med Chem. 27:67 (1984))。
【０００３】
薬理学的に、カンナビノイドは、中枢神経系、心臓血管、免疫システム及び／又は内分泌系等の様々な標的に影響を与えるために使用可能である。特に、CB-1又はCB-2受容体及び潜在的にGPR35及びGPR55受容体に親和性を持つ化合物は、抗がん剤、抗肥満薬、鎮痛剤、筋弛緩剤及び抗緑内障薬として有用である。これらの化合物は、同様に、胸腺の疾患、嘔吐、様々な神経障害、記憶障害、運動障害、片頭痛治療、多発性硬化症、ぜんそく、てんかん、虚血、苦痛、起立性低血圧、骨粗しょう症、肝線維症、炎症及び過敏性大腸症、並びに心不全の治療に使用可能である。
【０００４】
しかしながら、Δ9-THC等のカンナビノイドは、同様に細胞膜に作用して、眠気、物アミンオキシダーゼ機能の障害、及び非受容体介在性の脳機能の障害等の望ましくない副作用を引き起こす。カンナビノイドには、依存性及び向精神性を有するものもあり、これらはその治療価値を制限する傾向がある。
【０００５】
構造が同定された多くの非古典的ビアリル及びトリアリルカンナビノイドが、Makriyannis らのUS特許番号7,057,076に記載されている。Makriyannisは、２個以上の化合物に対する様々な結合親和性を同定しているが、ＣＢ−１及びＣＢ−２受容体の両方における個々の化合物の結合データを示すサポートデータを何も示していない。よって、それらの化合物が、他の受容体に対するよりも、ある受容体に対して選択性が高いかどうかを評価することは難しい。
【０００６】
本技術分野においては、古典的又は非古典的カンナビノイドのアナログが、現在継続して求められている。アナログは、CB-1 受容体 及び／又はCB-2受容体により仲介される疾患及び障害の処置という治療上の目的に使用可能である。
【発明の概要】
【０００７】
前述の課題に鑑みて、本発明は、様々な複素環カンナビノイドアナログ化合物、組成物、及び／又は関連する方法を提供することを目的とし、それによって、上記に外接した技術を含む従来技術の様々な欠如及び欠陥を克服する。当業者は、本発明の１つ又は複数の側面がある目的を達成でき、その一方で他の１つ又は複数の側面が他の目的を達成できることを理解するであろう。それぞれの目的は、その全ての点において、本発明の全ての側面に等しく当てはまるものではない。下記の目的は、本発明のいずれの側面に対しても適用されると考えられる。
【０００８】
カンナビノイド及びヒト細胞及び組織に存在する関連受容体に対する親和性を示す１又は複数種類のカンナビノイド化合物を特定することも、本発明の目的となり得る。
【０００９】
Ｂ環ピリジン系を備える１又は複数の新たなピリジン非古典的カンナビノイド受容体リガンドを提供することも本発明の目的となり得る。このような化合物は、ビアリル又はトリアリル環系を備えることができる。
【００１０】
治療での使用用のカンナビノイド受容体選択性を示すこれらの化合物の同定も、本発明の他の目的となり得る。
【００１１】
本発明の他の目的、特徴、利益及び利点は、本概要及び下記の実施形態の説明によって明白であり、種々のカンナビノイド化合物及び関連する治療法方の知識を有する当業者にとって、容易に理解できるであろう。このような目的、特徴、利益及び利点は、以下に示される付随の例、データ、図及び全ての妥当な推論単独で又は本明細書に取り込まれる文献の考慮を伴って、結合されることは、明白であろう。
【００１２】
１つに、本発明は、下記式（Ｉ）で表される化合物から選択あれるカンナビノイドアナログ化合物を対象としてもよい。
【００１３】
【化１】
式Ｉにおいて、Ｗ及びVの一方はＮであってもよく、他方はＣであってもよく；Xは、H、置換された及び置換されていないアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリル、アリルアルキル、ヘテロアリル、ヘテロアリルアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択されてもよく、各アルキル部分は任意に３回以下で置換されていてもよく、それぞれの環部分は、１、２、３、４、又は５個の置換基によって任意に置換されていてもよく；ＹはＳ，Ｏ，ＣＨ２，CH(CH3)，CH(OH), C(CH3)(OH), C(CH3)2, C(-U(CH2)nU-), C(O), NH, S(O),及びS(O)2から選択されてもよく；ｎは１以上の整数であり、好ましくは１〜６であり；UはCH2, S及びOから選択されてもよく；ＺはＨ、置換された及び置換されていないアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリル、アリルアルキル、ヘテロアリル、ヘテロアリルアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキルから選択されてもよく、それぞれのアルキル部分は任意に３回以下で置換されていてもよく、それぞれの環部分は、１、２、３、４、又は５個の置換基によって任意に置換されていてもよく；R1及びR2は、独立して、H、並びに置換された及び置換されていないアルキルから選択される。
【００１４】
また、本発明は、本書に示すように、化合物の塩を対象とすることができる。
【００１５】
また、本発明は、本書に示すように、化合物のプロドラッグを対象とすることができる。
【００１６】
本発明はまた、以下に説明される化合物、その塩及び／又はプロドラッグ、並びに医薬的に許容されるキャリア成分を含有する医薬組成物を対象とすることができる。
【００１７】
本発明は、カンナビノイド受容体の活性を修飾する方法を対象としてもよい。このような方法は、カンナビノイド又は関連レセプター、その塩及び／又は化合物における活性を有する、本発明の若しくは本書に説明する他の化合物、塩及び又はプロドラッグを提供すること；並びに、細胞及び／又は細胞のカンナビノイド受容体とこのような化合物とを接触させること、を備えてもよい。下記に示すように、このような接触は、カンナビノイドの活性を少なくとも部分的に修飾する少なくとも部分的な効果を奏することができる。
【００１８】
本発明はまた、カンナビノイド受容体介在疾患の治療方法を対象としてもよい。このような方法は、カンナビノイド受容体における活性を有する、本書に示す化合物又は本書に示す他の化合物、その塩及び／又はプロドラッグを提供すること；並びに、患者に、カンナビノイド受容体介在疾患を治療する少なくとも部分的な効果を有してもよい、化合物、塩及び／又はプロドラッグを所定量投与すること；を備えてもよい。本発明のこの側面は、CB-1 及び／若しくは CB-2（又は関連する）受容体の過活性又はCB-1 及び／若しくは CB-2（又は関連する）受容体の非活性又は低活性が介在する病状を治療又は抑制するための、CB-1若しくは関連受容体のアゴニスト、CB-1若しくは関連受容体のアンタゴニスト、CB-2若しくは関連受容体のアゴニスト、並びに／又はCB-2若しくは関連受容体のアンタゴニストの使用に関連してもよい。
【００１９】
本発明はまた、下記式の化合物から選択される化合物を対象としてもよい。
【００２０】
【化２】
式Iにおいて、Ｗ及びＶの一方がＮであってもよく、他方がＣであってもよく；Ｘは、アルキルであってもよく、フェニル、ベンジル、シクロヘキシル、チオフェニル及びピリジニルから選択されてもよく、それぞれの環部分は、ハロ、アルキル、及びアルコキシ部分から独立して選択される１〜５個の置換基によって任意に置換されていてもよく；Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ又はアルキルから選択されてもよく；Ｙは、カルボニル、ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレン部分から選択されてもよく；Ｚは、アルキルであってもよく、シクロアルキル、フェニル及びチオフェニルから選択されてもよく、これらはそれぞれ、任意に、１〜５個の置換基で置換されていてもよく、置換基は本発明を知った当業者により理解され、本書のどこかに記載されたものを包含するが、それに限定されない。ある実施形態において、Ｘは、クロロ、メチル及びメトキシ置換基から独立して選択される１〜５個の基で任意に置換されたフェニルであってもよい。このような実施形態において、Ｚは、アルキル又はフェニル部分であってもよく、任意に、Ｘは、ベンジル又はジクロロフェニル部分であってもよい。このような化合物は、いずれも、このような化合物の塩及び／又はプロドラッグから選択されてもよい。単独の又は複数のこれらの化合物は、ある量で、成長細胞の死を引き起こす効果を少なくとも部分的に奏する。
【００２１】
本発明は、限定されることなく、同様に、がんの治療方法を対象とすることができる。このような方法は、がん細胞の成長細胞等のカンナビノイド受容体を有するがん細胞を準備することと；このような成長を式Ｉに示す化合物から選択されるカンナビノイド化合物と接触させることとを備えていてもよい。
【００２２】
【化３】
式Ｉにおいて、Ｒ２、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ及びＺは、上述した通りであってもよい。実施形態において、Ｘは、アルキルであってもよく、フェニル、シクロヘキシル、チオフェニル及びピリジニルから選択されてもよく、これらはそれぞれ、任意に、ハロ、アルキル及びアルコキシ部分から選択される１〜５個の置換基で置換されていてもよく；Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ又はアルキルから選択されてもよく；Ｙは、カルボニル、ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレンから選択されてもよく；Ｚは、アルキルであってもよく、シクロヘキシル、フェニル及びチオフェニルであってもよく、これらはそれぞれ、任意に、１〜５個の置換基で置換されていてもよく、置換基は本発明を知った当業者により理解され、本書のどこかに記載されたものを包含するが、それに限定されず；単独の又は複数の化合物について、これらの化合物の塩及びプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、ある量で、成長細胞の死を引き起こす効果を少なくとも部分的に奏する。ある実施形態で、X及びZは、クロロ、ヒドロキシ及びメトキシから独立して選択される１〜５個の基で、任意に置換されたフェニルであってもよい。このような実施形態において、R1及びR2は、独立して、H及びメチル部分から選択されてもよい。このような実施形態において、R1及びR2の少なくとも一方は、メチル以外の基であってもよい。本書で説明されるように、かつ限定されることなく、Yはいずれも、カルボニル又はジメチルメチレンであってもよい。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】CB-1受容体における化合物５ｅの機能活性を示す。
【図２】CB-２受容体における化合物５ｅの機能活性を示す。
【図３】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間及び１８時間後のG-CSFの分泌結果を示す。
【図４】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間後及び１８時間後のIL-１βの分泌結果を示す。
【図５】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による１８時間後のIL-6の分泌結果を示す。
【図６】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間後のIL-6の分泌結果を示す。
【図７】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による１８時間後のIL-8の分泌結果を示す。
【図８】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間後のIL-8の分泌結果を示す。
【図９】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間後及び１８時間後のMCP-Iの分泌結果を示す。
【図１０】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間後のMIFの分泌結果を示す。
【図１１】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による１８時間後のMIFの分泌結果を示す。
【図１２】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による１８時間後のRANTESの分泌結果を示す。
【図１３】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間後のRANTESの分泌結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本発明に包含される新規の化合物は、上述の一般式Iで表される化合物、塩及びプロドラッグ並びに／又はその医薬組成物である。
【００２５】
本発明において、「アルキル」とは、１〜２０個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖アルキル基を意味する。任意に、本発明におけるアルキル基は、１又は複数の二重結合及び／又は１又は複数の三重結合を含有していてもよい。
【００２６】
「シクロアルキル」は、３〜１２個の炭素原子を有する炭素環基を意味する。シクロアルキルは、単環でもよく、多数の環が融合した系であってもよい。任意に、本発明のシクロアルキル基は、１又は複数の二重結合及び／又は１又は複数の三重結合を含有していてもよい。
【００２７】
「複素環」とは、縮合環系を包含し、窒素、酸素又は硫黄及びその組み合わせから選択される少なくとも１個かつ４個までのヘテロ原子を含有する、４、５、６又は７員環の１又は複数の複素環系を意味する。
【００２８】
「アリル」は、少なくとも１つの環が芳香環である、単環、多環、又は縮合環を有する芳香族炭素環系を意味する。
【００２９】
「ヘテロアリル」は、縮合環系を包含し、窒素、酸素、又は硫黄及びそれらの組み合わせから選択される少なくとも１個かつ４個までのヘテロ原子を含有する、３〜１２個の原子を有する１又は複数の芳香族環系である。
【００３０】
「アリルアルキル」は、アリル基によって置換されたアルキル基であり、結合部分がアルキル鎖の炭素である。
【００３１】
本書において、「置換された」は、当業者にとって理解されるような置換を意図する。少なくとも１個の、及び５個程度の置換基が、１個の基に存在してもよい。置換基の例として、ハロ、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、アリル、ヘテロアリル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、アルキルチオール、ハロアルキル（例えばトリフルオロメチル）、カルボキシ、アルキルカルボキシ、カルバモイル等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３２】
１つの観点からは、代表として、非限定的なピリジンピリミジンアナログが、下記スキーム１に示す逆合成式に基づいて、中間化合物の反応から調製されてもよい。
【００３３】
【化４】
スキーム１において、R3及びR4は、メチル、エチル及びトリクロロフェニルから選択される。IIに関連する化合物は、スキーム２に描かれ、参照することで本書に組み込まれるYip, et al. See, Org. Lett 9:3469に記載されるように、ナトリウムエトキシド等の塩を用いたマロン酸エステルの直接アルキル化又は銅触媒カップリングを含む標準的な手法によって、適切なジアルキル又はジアリルマロン酸から予め調製される。
【００３４】
【化５】
中間体IIIは、次いで中間体エナミンの加水分解を行う、芳香族及び脂肪族ニトリル類から、臭化メチルマグネシウム／THF又はメチルリチウムを含む公知の化学反応により、予め調製される(参照することで本書にその全体が組み込まれるSee, e.g., Moss, Tet. Lett. 36:8761を参照のこと)(スキーム３)。中間体IVは、標準的な方法を用いて、対応するニトリル及びメチルリチウムから予め調製される。
【００３５】
【化６】
Ｙにgem−ジアルキル、複素環式、又は炭素環式置換基を含有する誘導体は、その化合物は市販されていないが、メチレンニトリルの直接アルキル化（Makriyannisの米国特許番号7,057,76及び公開番号2004/087590を参照のこと。これらの文献の全体は、参照されることで、本書に組み込まれる）又は適切に置換されたアリル、ヘテロアリルハロゲン及びイソプロピルニトリルから調製される（参照されることで全体が本書に組み込まれる、2003年8月21日出願の米国公開番号2005/0065033を参照のこと)。スキーム４及び５は、この化学反応の典型であるが、この化学反応の範囲に限定されるものではない。
【００３６】
【化７】
【００３７】
【化８】
Ｙにケト、ヒドロキシ、アルキルヒドロキシ置換基を含有する誘導体は、Ｙ＝ＣＨ２を有する化合物の直接酸化によって、又はＣ２アルデヒドピリジンから調製され、既に報告されている化学反応を用いて、2,2−ビス−エチルスルファニル−アセトアミジン及び適切に置換されたマロン酸エステルから調製される（スキーム６）（参照されることで本書にその全体が組み込まれる米国特許番号 7,169,942を参照のこと）。
【００３８】
【化９】
対応するピリジンは、スキーム７に示されるように、ジメチル-、ジエチル-、又はビス（トリクロロフェニル）-マロン酸と、必須の２-ケトアナログに由来する適切な置換されたシッフ塩基との反応によって調製され（参照されることで、その全体が本書に組み込まれるIto and Miyajima, J. Heterocyclic Chem. 1992, 29:1037, 及び Kappe et al, J. Heterocyclic Chem 1988, 25:463）、スキーム７において、R2は、ベンジル又はｔ-ブチルであり、Ｒ３、Ｒ４はメチル、エチル、フェニル、及び/又はビス（トリクロロフェニル）である。他に、必須のイミンは、適切なニトリル及びメチルリチウムから、標準的な方法を用いて調製される。
【００３９】
【化１０】
いくつかの代表的な、しかし非限定的な化合物の合成が本書で述べられるが、他の種々の化合物が同様の手法及び／又はその単純な変更を用いることで調製され得ることを、当業者は理解するであろう。すなわち、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｙ及びＺ部分の特性は、それぞれの試薬、出発物質、中間体及びそれらの化学的性質によってのみ限定される。様々な他の部分及び/又は置換基は、上述の同時係属出願に記載されたものを含むがこれらに限定されない。
【００４０】
上述した同時に継続する出願に記載されたように、本発明は、より広くは、種々の他のこのような化合物、その塩及び／又はプロドラッグを、それらに対応する医薬組成物と共に、検討する。このような化合物、塩、プロドラッグ、及び／又は医薬組成物は、本書に記載するように使われてもよい。例えば、本発明は、CB-1受容体及びCB-2受容体の一方又は両方の活性を修飾するために使われてもよい。このような方法は、細胞及び／又はそのカンナビノイド受容体と、本発明の化合物とを接触させることによって実行されてもよく、このような接触は、ｅｘ ｖｉｖｏかｉｎ ｖｉｖｏかに関わらず、このようなカンナビノイド受容体の活性を少なくとも部分的に修飾する少なくとも部分的な効果を有する。
【００４１】
より一般的には、本発明の化合物及び／又は組成物の種々の薬理学的及び／又は治療上の利点は、同時継続する前述の出願で述べられた情報を考慮して理解可能である。本発明のアナログは、本書に記載するように、幅広い症状の治療に薬理学的に効果のある量で投与され得る。限定されることなく、種々の症状及び／又は病状は、発明の名称が「トリ−アリル／ヘテロ芳香族カンナビノイド及びその使用（Tri-Aryl/Hetero aromatic Cannabinoids and Use Thereof）」で、２００８年３月３日に出願された、同時継続する出願番号12/074,342の段落００６７に記載され、その全体は、本書に組み込まれる。
【００４２】
従って、本発明は、本書に記載される化合物を提供すること（このような化合物は、カンナビノイド受容体での活性を示す）；並びに、そのような化合物にカンナビノイド受容体を有する細胞を接触させること、及び／又は患者にそのような化合物を投与すること（このような化合物は、カンナビノイド受容体／仲介疾患を治療するために少なくとも部分的に効果的な量で用いられる）を備える方法を対象としてもよい。このようなカンナビノイド受容体は、本書に記載される受容体であってもよく、本発明を知った当業者によって理解され、実現されてもよい。
【００４３】
医薬組成物若しくは治療の一部に若しくは一部として示されるように、受容体が効果的な量の１つ若しくは複数の本発明の化合物と接触することによって、又は、効果的な量の１つ又は複数の化合物とそのような受容体を有する細胞を接触させることにより、化合物が細胞内で受容体と接触し、カンナビノイド及び関連受容体の活性は、影響を受け、仲介され、及び／又は修飾され得る。接触は、ｉｎ ｖｉｔｒｏであっても、ｉｎ ｖｉｖｏであってもよい。すなわち、当業者によって理解されるように、「接触」とは、カンナビノイド及び／又は関連受容体と、１又は複数の化合物と、このような化合物が、受容体の活性に結合、影響、又は修飾するように、引き合わされることを意味する。受容体の活性を修飾する及び／又はそれに影響を与える１又は複数の化合物の効果的な量は、実験的に決定され、このような決定を行うことは、当該技術分野の技術の範囲である。
【００４４】
限定されることなく、本発明のアナログ化合物は、同時継続している前述の‘３４２出願の実施例２に記載されている受容体結合アッセイにおいてｅｘ ｖｉｖｏで使用され得る。本発明のアナログ化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏ活性は、その同時継続出願の実施例３に記載されているものと同じ方法によって実証され得る。また、ｉｎ ｖｉｖｏ活性は、その実施例４及び６に記載されたプロトコルを用いても実証され得る。より具体的には、ヒト肺, 前立腺, 結腸直腸及び膵癌の細胞株に対する、本発明の種々の代表的な化合物の抗がん活性は、上述の同時継続の’３４２出願の実施例９に記載された方法を用いることで確認可能である。このような方法を拡大して、本発明は、同様に中枢神経系のがん成長を治療すること、及び／又はそのような成長における細胞死を誘導することに用いられてもよい。本発明によると、本書に記載される多様なカンナビノイド化合物は、上述されたものを含むがそれらに限定されず、ヒトの緑内障及び／又は脳腫瘍の治療方法と関連して用いられてもよい。このような実施形態を描く上で、同時継続出願で記載されたように、ヒト脳腫瘍に接触させ及び／又は治療することに本発明の１又は複数の化合物が提供され使用され得、このような接触及び／又は治療は、細胞死及び／又は関連する効果によって証明される。
【実施例】
【００４５】
下記の非限定的な実施例及びデータは、本書に示す手法を通じて利用可能である通り、ピリジンの非古典的カンナビノイド受容体リガンド及び／又は化合物の合成を含む、本発明の化合物、組成物及び／又は方法に関連する種々の側面及び特徴を説明する。従来技術と比べて、本発明の化合物及び方法は、驚くべき、予想外かつ従来技術に反する結果及びデータを提供する。本発明の利用可能性がいくつかの化合物、部位及び／又はそれらの置換物の調製及び使用を通じて説明されるが、当業者は、同程度の結果が、本発明の範囲に応じて、他の種々の化合物、部位及び／又は置換物によって得られることを理解する。全ての化合物は、ChemBioDraw Ultra Version 11.0.01を用いて命名された。
【００４６】
実施例1a
【００４７】
【化１１】
ジエチル2-フェニルマロン酸
二口丸底フラスコに、固体であれば、ＣｕＩ（0.114 g, 0.6 mmol）、2-ピコリン酸（0.148 g, 1.2 mmol）、ＣｓＣＯ３（5.89 g, 18 mmol）及びヨウ化アリル（6 mmol）を順次入れた。容器を真空にして、窒素で３回満たした。無水１，４-ジオキサン（10 ml）を加え、次いで蒸留マロン酸エステル(1.9 ml, 12 mmol)及びヨウ化フェニル(12 mmol)を容積的に添加した。容器を密封して７０℃に加熱した。進行をＴＬＣでモニターした後、反応液を室温まで冷却し、酢酸エチルで分離し、塩化アンモニウムで洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、１０％EtOAc/ヘキサン混合物を用いたカラムクロマトグラフィーで精製した。収率92％、Rf= 0.41（酢酸エチル／ヘキサン＝１：９）。1H NMR (CDCl3,500MHz:δ7.41-7.31,m,5H),4.62(s,1H),4.25-4.15(m, 4H),1.26(t,6H)。MS259(M+23)。
【００４８】
実施例1b
同様に、下記マロン酸エステルを合成した。
【００４９】
【化１２】
ジエチル2-m-トリルマロン酸エステル
収率：９２％, Rf= 0.55(酢酸エチル/ヘキサン=l:9)。1H NMR (CDCl3, 500 MHz:δδ7.12-7.3 (m, 4H),4.62(s,1H), 4.20-4.28(m,4H), 2.27(s,3H), 1.22-1.25 (m, 6H)。 MS 273 (M+23)。
【００５０】
実施例1c
【００５１】
【化１３】
ジエチル2-（ピリジン-2-イル）マロン酸
収率：８８％, Rf=0.29 (酢酸エチル/ヘキサン=3:7)。1H NMR(CDCl3, 500MHz: δ8.5(d, 1H), 7.7(d,1H), 7.62-7.58(m,1H), 7.18-7.12(m,1H), 4.80(s,1H), 4.21-4.15(m,4H), 1.21(t,6H). MS 260(M+23)。
【００５２】
実施例1d
【００５３】
【化１４】
ジエチル2−（チオフェン-2-イル）マロン酸
収率：63%, Rf=0.29(酢酸エチル/ヘキサン=l:9)。１H NMR (CDCl3,300 MHz:δ7.28 (d,1H), 7.1-7.0 (m,2H), 4.8 (s,1H), 4.26-4.2 (m,4H), 1.2(t,6H). MS 265(M+23)。
【００５４】
実施例1e
【００５５】
【化１５】
ジエチル2‐シクロヘキシルマロン酸
収率：９４％, Rf=0.59(酢酸エチル/ヘキサン=1:9)。1H NMR (CDCl3, 500MHz : δ4.22-4.14(m,4H), 3.12(d,1H), 2.14-2.05(m,1H), 1.75-1.63(m,5H), 1.34-1.24 (m,8H), 1.20-1.20 (m,3H). MS 265 (M+23)。
【００５６】
実施例1f
【００５７】
【化１６】
ジエチル2-ヘキシルマロン酸
収率：91%, Rf= 0.44(酢酸エチル/ヘキサン=l:9)。1H NMR (CDCl3, 300 MHz : δ4.11-4.40(m,4H), 331(t,1H), 1.80(m,2H), 1.38(m,2H), 1.1-1.4(m,12H), 0.8(t,3H). MS 267(M+23)。
【００５８】
実施例1g
【００５９】
【化１７】
ジエチル2-（３-メトキシフェニル）マロン酸
生成物を、MS 289（M+23）で同定した。
【００６０】
実施例1h
【００６１】
【化１８】
ジエチル2-（3,5-ジクロロフェニル）マロン酸
生成物をMS 328 (M+23)で同定した。
【００６２】
実施例1i
【００６３】
【化１９】
ジエチル2-（2,4-ジクロロフェニル）マロン酸
生成物をMS 328(M+23)で同定した。
【００６４】
実施例1j
【００６５】
【化２０】
ジエチル2-（４‐（トリフルオロメチル）フェニル）マロン酸
生成物をMS327(M+23)で同定した。
【００６６】
実施例1k
【００６７】
【化２１】
ジエチル2-（ピラジン-2-イル）マロン酸
生成物をMS 261(M+23)で同定した。
【００６８】
実施例1l
【００６９】
【化２２】
ジエチル2-（ピリミジン-2-イル）マロン酸
生成物を、MS261(M+23)で同定した。
【００７０】
実施例1m
【００７１】
【化２３】
ジエチル2-（ナフタレン-1-イル）マロン酸
生成物をMS309(M+23)で同定した。
【００７２】
実施例1n
【００７３】
【化２４】
ジエチル2-（1H-ピロール-3-イル）マロン酸
生成物をMS 249(M+23)で同定した。
【００７４】
実施例1o
【００７５】
【化２５】
ジエチル2-シクロペンチルマロン酸
生成物をMS251(M+23)で同定した。
【００７６】
実施例2a
【００７７】
【化２６】
2-メチル-2-（チオフェン-2-イル）プロパンニトリル
2-（チオフェン-2-イル）アセトニトリル（１ｇ、８．１３ｍｍｏｌ）の４ｍｌの無水ＴＨＦの溶液に、ＫＨＭＤＳ（２４．４ｍｍｏｌ、４８．９ｍｌ、０．５Ｍトルエン溶液）を０℃で添加した。混合物を３分間撹拌し、１６．２６ｍｍｏｌヨードメタン（１．１３ｍｌを無水ＴＨＦ２６ｍｌに添加したもの）を１０分かけて添加した。混合物を５分間撹拌し、ＴＬＣによってモニターした。完了次第、含水塩化アンモニウムによって反応を停止した。有機相を、酢酸エチルによって分離し、硫酸ナトリウムによって乾燥させた。生成物を、真空蒸留によって精製した（１トールにおける沸点は４２℃）。 収率：８９％。 １Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．４ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ）、７．２ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ）、７．０ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ）、１．９ｐｐｍ（ｓ，６Ｈ）。
実施例2b
同様に、下記化合物を合成した。
【００７８】
【化２７】
2,2-ジメチルオクタンニトリル
真空蒸留によって精製（１．１トールでの沸点が５０〜５５℃）。収率：８４％ Ｉ．Ｒ．（ｎｅａｔ）ニトリル２２３０ｃｍ−１，１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）１．５ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ）。１．４〜１．３ｐｐｍ（ｍ，１２Ｈ）、０．９ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ）。
実施例３ａ
【００７９】
【化２８】
2-メチル-2-フェニルプロパンニトリル
フルオロベンゼン（５．８５ｍＬ，６２．４ｍｍｏｌ）の１００ｍＬの無水トルエン溶液にイソブチロニトリル（２２．５ｍＬ，２５０ｍｍｏｌ）を添加し、次いで２００ｍＬの０．５Ｍ ＫＨＭＤＳのトルエン溶液（１００ｍｍｏｌ）を添加した。反応液を８０℃で２４時間撹拌した。反応液を室温で冷却し、ジエチルエーテルで希釈し、水及び食塩水で洗浄した。有機分画を硫酸ナトリウムで乾燥させて、減圧下で濃縮した。生成物を酢酸エチル/ヘキサン勾配を用いたフラッシュクロマトグラフィーで精製し、茶色い油状の目的の化合物を４．５７ｇ（５０％）の収量で得た。ＭＳ：（ＥＳＩ，Ｐｏｓ）ｍ／ｚ １６８．０（Ｍ+２３） １ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，CDCｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．４８（ｄ，２Ｈ），７．３９（ｔ，２Ｈ），７．３１（ｔ，１Ｈ），１．７３（ｓ，６Ｈ）。
【００８０】
実施例３ｂ
同様に、下記化合物を合成した。
【００８１】
【化２９】
2-メチル-2-ピリジン-2-イル-プロパンニトリル
2-メチル-2-フェニル-プロパンニトリルと同様の方法で、2-ブロモピリジンを出発物質として、茶色い油状の生成物を得た。ＭＳ：（ＥＳＩ，Ｐｏｓ）ｍ／ｚ １６８．９（Ｍ+２３）。
実施例３ｃ
【００８２】
【化３０】
2-シクロヘキシル-2-メチルプロピオニトリル
無色の油、収率：89% MS:(ESI,Pos.) 174.0 (M+1) 1HNMR(500MHz,CDCl3):∂(ppm) 1.81-1.89(m,4H), 1.7(m,1H), 1.19-1.34(m,7H), 1.07-1.28(m,5H)。
【００８３】
実施例４ａ
【００８４】
【化３１】
3-メチル-3-フェニルブタン-2-オン
０℃に冷却した2-メチル-2-フェニル−プロピオンニトリル（３ａ，５００ｍｇ，３．１ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液に、臭化メチルマグネシウム（４０８ｍｇ，３．４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物は、室温まで温められ、一晩還流された。混合物を１Ｎ ＨＣｌで処理し、水相をジエチルエーテルで抽出した。生成物をＭＳ：（ＥＳＩ，Ｐｏｓ）ｍ／ｚ １８７．２（Ｍ＋２３）で確認した。
【００８５】
実施例４ｂ
本書に示す通り、Y−及び／又はZ-置換ピリジン中間体の途中の対応するシッフ塩基化合物を提供するために、上述した合成方法に相当する種々の合成方法を用いて、様々な他のケトンを各ニトリルから調製することができる。
実施例５ａ
【００８６】
【化３２】
6-（2-（チオフェン-2-イル）プロパン-2-イル）-3-トリルピリジン‐2,4‐ジオール （５ａ）
２ａ（0.83g,5.5mmol）の無水ジエチルエーテル（5 mL）の溶液に、アルゴン下で、1.6M メチルリチウムのジエチルエーテル溶液（21 mL, 33.00mmol）を添加し、混合物を３時間、室温で撹拌した。水で反応を停止した後、混合物をジエチルエーテルで抽出した。抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を減圧下で蒸発させて、無色の油を得た（0.86, 95%）。中間生成物（３-メチル-3-（チオフェン-2-イル）ブタン-2-イミン）；0.73g, 4.36 mmol）及びジエチル2-m-トリルマロン酸（0.70g,4.36 mmol）の溶液を１ｍＬのジグリムに溶解させた溶液を、３時間１３５℃で還流した。反応混合物を冷却し、ヘキサンに注ぐことで、黄色の沈殿物を得た。黄色の沈殿物を集め、酢酸エチル／ヘキサン混合物から結晶化した。オフホワイトの粉末、収率：52% MS:(ESI,Neg) 323.90 (M-1) 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) : ∂(ppm) 10.69(s,1H), 10.19(s,1H), 7.46(d,1H), 7.11-7.19(m,3H), 6.99-7.05(m,3H), 5.78(s,1H), 2.28(s,3H), 1.72(s,6H)。
【００８７】
実施例５ｂ
同様に、下記化合物を合成した。
【００８８】
【化３３】
6-（2-シクロヘキシルプロパン-2-イル）-3-（3,5-ジクロロフェニル）ピリジン‐2,4‐ジオール （５ｂ）
白色粉末、収率40% MS:(ESI,Neg) 377.9(M-1) 1HNMR(300 MHz,DMSO-d6):∂(ppm) 10.88(s,1H), 10.71(s,1H), 7.51(m,3H), 5.90(s,1H), 2.29(s,3H), 1.4-1.9(m,7H), 1.11-1.14(m,10H)。
【００８９】
実施例5ｃ
【００９０】
【化３４】
3-（3,5-ジクロロフェニル）‐6-（2-フェニルプロパン-2-イル）ピリジン‐2,4‐ジオール （５ｃ）
白色粉末、収率：63% MS: (ESI, Neg) 372.7 (M-I) 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) : ∂(ppm) 10.79(s,1H), 10.74(s,1H), 7.26-7.49(m,8H), 5.96(s,1H), 1.63(s,6H)。
【００９１】
実施例５ｄ
【００９２】
【化３５】
3-（3,5-ジクロロフェニル）‐6-（2-（チオフェン-2-イル）プロパン-2-イル）ピリジン‐2,4ジオール （５ｄ）
オフホワイトの粉末、収率47% MS: (ESI,Neg) 377.9 (M-1) 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) : ∂(ppm) 10.95(s, 1H), 10.77(s, 1H), 7.46-7.48(m, 3H), 7.41(t, 1H), 7.01-7.05(m, 2H), 5.78(s, 1H), 1.72(s, 6H)。
【００９３】
実施例５ｅ
【００９４】
【化３６】
3-（3,5-ジクロロフェニル）-6-（2-（チオフェン-2-イル）プロパン-2-イル）ピリジン-2,4-ジオール （５ｄ）
オフホワイトの粉末、収率47% MS: (ESI, Neg) 379.9 (M-1) 1HNMR (500 MHz, DMSO- d6) : ∂(ppm) 10.96(s, 1H), 10.72(s, 1H), 7.51(d, 2H), 7.40(t, 1H), 5.94(s, 1H), 1.60-1.63(m, 2H), 1.04-1.24(m,14H), 0.84(t, 3H)。
【００９５】
実施例５ｆ
【００９６】
【化３７】
6-（2-シクロヘキシルプロパン-2-イル）-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール （５ｆ）
白色粉末、収率：48% MS: (ESI, Neg) 324.0 (M-1) 1HNMR (300MHz,DMSO-d6) : ∂(ppm) 10.81(s, 1H), 10.25(s, 1H), 7.17-7.19(m, 4H), 5.91(s, 1H), 2.29(s, 3H), 1.4-1.9(m, 7H), 1.11- 1.14(m, 10H)。
【００９７】
実施例５ｇ
【００９８】
【化３８】
6-（2-フェニルプロパン-2-イル）-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール （５ｇ）
白色粉末、収率：61% MS:(ESI, Neg) 317.9 (M-1) 1HNMR (300 MHz, DMSO-d6) : ∂(ppm) 10.51(s, 1H), 10.23(s, 1H), 6.99(m, 9H), 5.93(s, 1H), 2.28(s, 3H), 1.62(s, 6H)。
【００９９】
実施例５ｈ
【０１００】
【化３９】
2-（2-メチルオクタン-2-イル）-５-m-トリルピリミジン-４，6-ジオール （５ｈ）
白色粉末、収率：41% MS: (ESI, Neg) 326.1 (M-1) 1HNMR (500 MHz, CDCl3) : ∂(ppm) 7.34 (t, 1H) 7.19-7.26(m, 3H), 5.94(s, 1H), 2.39(s, 3H), 1.56(m, 2H), 1.16- 1.30(m, 14H) , 0.88(t, 3H)。
【０１０１】
実施例５ｉ
【０１０２】
【化４０】
3-ヘキシル-6-（2-メチルオクタン-2-イル）ピリジン-2,4-ジオール （５ｉ）
白色粉末、収率：38% MS: (ESI, Neg) 320.0 (M-I) <1>HNMR (300 MHz, CDCl3) : d(ppm) 5.89(s, 1H), 2.71(m, 2H), 1.61-1.58(m, 2H), 1.25-1.42(m, 22H) , 0.98(m, 6H)
実施例５ｊ
【０１０３】
【化４１】
6-（2-メチルオクタン-2-イル）-3-フェニルピリジン-2,4-ジオール （５ｊ）
白色粉末、収率38% MS: (ESI, Neg) 312.1 (M-1) 1HNMR (500 MHz, CDCl3) : ∂(ppm) 7.42-7.49(m, 4H), 7.35-7.38(m, 1H), 5.93(s, 1H), 1.53-1.56(m, 2H), 1.14- 1.27(m, 14H) , 0.87(t, 3H)。
【０１０４】
実施例５ｋ
【０１０５】
【化４２】
3-シクロヘキシル-6-（2-メチルオクタン-2-イル）ピリジン-2,4-ジオール （５ｋ）
白色粉末、収率：39% MS: (ESI, Neg) 318.0 (M-1) 1HNMR (300 MHz, MeOD) : ∂(ppm) 5.90(s, 1H), 2.81(m, 1H), 2.10(m, 2H), 1.61-1.58(m, 6H), 1.18-1.43(m, 18H), 0.88(t, 3H)。
【０１０６】
実施例５ｌ
【０１０７】
【化４３】
6’-（2-メチルオクタン-2-イル）-2,3’-ビピリジン-2',4’-ジオール （５ｌ）
淡黄色粉末、収率：23% MS: (ESI, Neg) 313.1 (M-1) 1HNMR (300 MHz, CDCl3) : ∂(ppm) 9.28-9.31(d, 1H), 8.9 (s, 1H), 8.31(d, 1H),7.89-7.91(t, 1H),7.22-7.27(t, 1H), 5.95(s, 1H), 1.58-1.62(m, 2H), 1.22-1.31(m, 14H) , 0.86(t, 3H)
実施例５ｍ
【０１０８】
【化４４】
3-(3-メトキシフェニル)-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール (5m)
白色粉末, 収率: 45% MS: (ESI, Neg) 342.0 (M-1) 1HNMR (300 MHz, DMSO-d6) : ∂(ppm) 10.78(s, 1H), 10.19(s, 1H), 7.21(m, 1H), 6.95-6.96(m, 2H), 6.73-6.81(m, 1H), 5.85(s, 1H), 3.7(s, 3H), 1.59-1.67(m, 2H), 1.04-1.22(m, 14H) , 0.84(t, 3H)。
【０１０９】
実施例 5n
【０１１０】
【化４５】
3-ベンジル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール (5n) - 白色 粉末, 収率: 41% MS: (ESI, Neg) 326.0 (M-I) 1HNMR (300 MHz, CDCl3) : d(ppm) 7.24-7.32(m, 5H), 6.10(s,lH), 3.91(s, 2H), 1.51-1.58(m, 2H), 1.11-1.28(m, 14H) , 0.86(t,3H).
実施例７
Ｂ‐環構造を有するいくつかの化合物について述べるが、他のこのような化合物は、様々なＸ，Ｙ及び／又はＺ部分を提供するために調製可能であり、このような化合物は、市販され又は合成されることで入手可能な、対応するシッフ塩基及び／又はマロン酸エステル中間体によってのみ限定される。同様に、Ｒ１及びＲ２は、マロン酸エステル出発物質の選択、又は結果物であるカンナビノイド化合物における二次化学反応によって、様々である。
【０１１１】
実施例８
受容体結合アッセイ
ヒトＣＢ-１受容体でトランスフェクトされたＨＥＫ２９３細胞由来の細胞膜と、ヒトＣＢ−２受容体でトランスフェクトされたＣＨＯ-Ｋ１細胞由来の細胞膜を調整した。１２０Ｃｉ／ｍｍｏｌの特異的活性を有する［３Ｈ］ＣＰ５５，９４０をＰｅｒｋｉｎ-Ｅｌｍｅｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ社から入手した。全ての他の化合物及び試薬は、シグマアルドリッチ社から入手した。アッセイは、１．２μの孔径を持つグラスファイバーフィルター（親水性、ＧＦＣフィルター）を装着したミリポア社の９６穴プレートで行った。アッセイの前に、フィルターを０．０５％ポリエチレンイミン溶液に浸し、脱イオン水で５回洗浄した。ろ過は、９６穴吸引多岐管（ミリポア社）にて行い、実験の最後にフィルターをピペットチップでシンチレーションバイアル中に直接打ち抜き、バイアルを５ｍｌのシンチレーションカクテル エコライト（＋）（フィッシャーサイエンティフィック社）で満たした。測定は、ベックマン社のシンチレーションカウンターＬＳ６５００モデルで行った。薬物溶液は、ＤＭＳＯ中で調製し、放射性リガンドをエタノール中に溶解させた。
【０１１２】
インキュベーションバッファー：５０ｍＭ ＴＲＩＳ-ＨＣｌ，５ｍＭ ＭｇＣｌ２，２．５ｍＭ ＥＤＴＡ，０．５ｍｇ／ｍｌ 脂肪酸フリーの牛血清アルブミン，ｐＨ７．４。
【０１１３】
CB-1 受容体への結合プロトコル：８μｇの細胞膜（インキュベーションバッファーでの１：８希釈液２０μｌ）を、５μｌの薬物溶液（１０−４Ｍ〜１０−１２Ｍ）及び５μｌの５．４ｎＭ［３Ｈ］ＣＰ５５，９４０と共に、合計体積を２００μｌとして、３０℃で９０分インキュベートした。非特異的結合を１０μＭのＷＩＮ５５，２１２-２（Ｋｉ＝４．４ｎＭ）を用いて決定した。細胞膜をろ過紙、フィルターを０．２ｍｌの氷冷インキュベーションバッファーで７回洗浄し、減圧下で空気乾燥した。
【０１１４】
ＣＢ−２受容体への結合プロトコル：１５．３μｇの細胞膜（インキュベーションバッファー胃での１：２０希釈液２０μｌ）を、５μｌの薬物溶液（１０−４Ｍ〜１０−１２Ｍ）及び５μｌの１０ｎＭ［３Ｈ］ＣＰ５５，９４０と共に、合計体積を２００μｌとして、３０℃で９０分インキュベートした。非特異的結合を１０μＭのＷＩＮ５５，２１２-２（Ｋｉ＝４．４ｎＭ）を用いて決定した。細胞膜をろ過紙、フィルターを０．２ｍｌの氷冷インキュベーションバッファーで７回洗浄し、減圧下で空気乾燥した。
【０１１５】
データの蓄積及び統計分析：１０−４Ｍから１０−１２Ｍまでの様々な濃度の薬物を添加した試料を各実験について３点ずつ用意し、個々のモル濃度におけるＩＣ５０値をＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍを用いて決定した。各薬物の対応するＫｉ値をチェン-プルソフ式を用いて決定し、最終データは２点以上の実験のＫｉ±Ｓ．Ｅ．Ｍ．で表される。
【０１１６】
機能アッセイ：環状ヌクレオチド感受性カチオンチャネル及びヒトＣＢ‐１又はＣＢ‐２受容体でステイブルトランスフェクトされたＨＥＫ-293細胞株（ＢＤバイオサイエンス社、サンノゼ、ＣＡ ＵＳＡ）を、ポリ‐D‐リジンでコートされた９６穴プレートに、細胞７００００個／穴の密度で蒔いた。アッセイの前に、プレートを５％CO2中３７℃で一晩インキュベートした。プレートをインキュベータから取り出し、完全成長培地（ＤＭＥＭ，１０％ＦＢＳ，２５０μｇ／ｍｌ Ｇ４１８及び１μｇ ピューロマイシン）を０．２５％ＢＳＡ含有１００μＬのＤＭＥＭに置換した。次に、１００μＬのメンブランポテンシャルダイローディングバッファー（membrane potential dye loading buffer）（モレキュラーデバイス社、サニーベイル、ＣＡ ＵＳＡ）を使用書にのっとって調製した。プレートをインキュベータに３０分間戻し、薬物添加の前に、基準線蛍光をバイオテックシナジー ２マルチモードマイクロプレートリーダー（バイオテックインストゥルメンツ社、ウィノースキ、ＶＴ ＵＳＡ）で、５４０ｎｍ励起光及び５９０ｎｍ発光フィルターを用いて、読み取った。２．５％ＤＭＳＯ、１．２５μＭの５’-（Ｎ-エチルカルボキシアミド）アデノシン及び１２５μＭのＲｏ２０-１７２４を含有する５０μＬのＤＰＢＳに薬物を添加した。プレートを室温で２５分インキュベートし、５４０ｎｍ励起光及び５９０ｎｍ発光にて再度蛍光を測定した。
【０１１７】
図１は、ＣＢ−１受容体における化合物５ｅの機能活性を示す。図２は、CB-2受容体における化合物５ｅの機能活性を示す。
【０１１８】
細胞毒性アッセイ：９６穴ポリスチレンプレートに、完全血清培地にて細胞を細胞７５０００個／ｍＬ，１００μＬ／穴の密度で蒔いた。細胞が接着するように、プレートを３７℃かつ５％ＣＯ２下で２４時間インキュベートした。１００倍濃度の薬物溶液をＤＭＳＯにて調製し、１％ＦＢＳ培地に１：１００で混合し、望ましい濃度を得た。薬物−培地混合物を細胞に投与する直前にボルテックスにかけた。完全血清培地を除いて、薬物‐培地混合物で置換し、１８時間インキュベートした。１０μLのCounting Kit 8（ＣＣＫ８，Ｄｏｊｉｎｄｏ♯ＣＫ０４−１１）を各ウェルに添加し、生細胞測定を行った。ＣＣＫ８ダイを添加したインキュベーションを２〜４時間行った後、４５０ｎｍの吸光度をバイオテックシナジー２ プレートリーダーによって測定した。
【０１１９】
グリア芽腫脳腫瘍細胞株であるＬＮ‐２２９に対する選択された化合物の細胞毒性を表１に示す。グリア芽腫脳腫瘍細胞株DBTRG05MGに対する選択された化合物の細胞毒性を表２に示す。
【０１２０】
【表１】
【０１２１】
【表２】
炎症についての調査
単球の分化：ＴＨＰ-１ヒト単核白血球（ATCC＃TIB-202）の懸濁液に、ホルボール１２‐ミリスチン酸塩13-酢酸塩（PMA Aldrich #P1585）及びイオノマイシン（Aldrich #10634）をそれぞれ１０及び５００ｎｇ／ｍｌ添加し、マクロファージ様細胞への分化を誘導した。細胞を３０，０００個／穴で蒔き、３７℃かつ５％ＣＯ２／９５％大気で３〜１０日インキュベートして、形質転換を完了させた。アッセイまで、必要に応じて培地を交換した。
【０１２２】
サイトカインアッセイ：A549 (ATCC #CCL-185)、HUV-EC-C (ATCC #CRL- 1730)、又は分化したTHP-１細胞を、９６穴ポリスチレンプレートに、３００，０００個／ｍｌ（１００μＬ／穴）の密度で蒔き、細胞が接着するように、３７℃で５％ＣＯ２／９５％大気で２４時間インキュベートした。１００倍濃度の薬物溶液をＤＭＳＯにて調製し、１％ＦＢＳ培地に１：１００で混合し、望ましい濃度を得た。
【０１２３】
プレートをインキュベートから取り出し、完全成長培地を、１％ＦＢＳ及び１μｇ／ｍｌのリポ多糖体又はペプチドグリカン（分化したＴＨＰ−１用）、又はＡ５４９及びＨＵＶＥＣの場合のＴＮＦ‐α（１０ｎｇ／ｍｌ）又はＩＬ‐１β（１ｎｇ／ｍｌ）、コントロールウェルの場合の刺激剤なし、を含有する５０μＬの培地に交換した。薬物処理の前に１時間、細胞をインキュベータに戻した。１％ＦＢＳ及び適切な刺激剤を上述の濃度で含有する培地で、所望の終濃度の２倍濃度で薬物‐培地溶液を調製した。薬物を含有しないコントロール培地を同様に調製した。５０μＬの薬物含有培地又はコントロール培地を、適切なウェルに添加し、プレートをインキュベータに１８時間戻した。培地の上清をウェルから除き、アッセイまで−８０℃で冷凍した。
【０１２４】
図３〜図１３は、ＴＮＦ‐αの存在又は非存在下で、ＥＣ１及びＥＣ１０での化合物６ｂに暴露されたＡ５４９による様々なモジュレータの分泌特性を示す。グラフの凡例は、pyrT 1-4 =8.52μＭの化合物6bで4時間；pyrT 2-4=13.6μMの化合物6bで４時間；pyrT 1-18=8.52μMの化合物6bで１８時間；pyrT2-18=13.6 μMの化合物6bで18 時間；TNF =１０ｎｇ／ｍｌのTNF-αである。
【０１２５】
これで、本発明及びそれを製造する及び使用する方法及び工程について、完全、明確に、簡潔に、かつ正確な用語にて、すべての当業者が製造できて使えるように、説明した。本発明の望ましい実施形態が説明され、請求の範囲に記載された発明の精神又は範囲から逸脱しない範囲での変更が可能であることが理解される。本発明とみなされる対象物を特定し、明確にクレームするために、下記の請求の範囲は本明細書を含む。
【背景技術】
【０００１】
本願は、２００８年５月１９日に出願された出願番号61/128,088の優先権の利益を主張するものであり、その出願の全てを併合するものである。
【０００２】
古典的カンナビノイドであるデルタ‐９‐テトラヒドロカンナビノール（Δ９-THC）は、カンナビス サティバ（Cannabis sativa）から抽出される主要な有効成分である。カンナビノイドの効果は、特異的高親和性受容体との相互作用による。現在、２つのカンナビノイド受容体が特定されている。すなわち、CB-１、つまり哺乳類の脳及び末梢組織における他の多くの部分で見出される中枢受容体、及びCB-2、つまり主に免疫システムに関連する細胞において見出される末梢受容体である。さらに、近年、GPR35及びGPR55というオーファン受容体が、カンナビノイド型リガンドと結合することが報告され、三つ目の受容体の亜型として紹介された。CB-１受容体は、古典的カンナビノイドと関連する精神活性を仲介すると考えられている。これらの受容体の特性評価は、アゴニストWIN 55212-2等の特異的合成リガンドの開発によって可能となった（D'Ambra et al, J. Med Chem. 35:124 (1992)) 及び CP 55,940 (Melvin et al, Med Chem. 27:67 (1984))。
【０００３】
薬理学的に、カンナビノイドは、中枢神経系、心臓血管、免疫システム及び／又は内分泌系等の様々な標的に影響を与えるために使用可能である。特に、CB-1又はCB-2受容体及び潜在的にGPR35及びGPR55受容体に親和性を持つ化合物は、抗がん剤、抗肥満薬、鎮痛剤、筋弛緩剤及び抗緑内障薬として有用である。これらの化合物は、同様に、胸腺の疾患、嘔吐、様々な神経障害、記憶障害、運動障害、片頭痛治療、多発性硬化症、ぜんそく、てんかん、虚血、苦痛、起立性低血圧、骨粗しょう症、肝線維症、炎症及び過敏性大腸症、並びに心不全の治療に使用可能である。
【０００４】
しかしながら、Δ9-THC等のカンナビノイドは、同様に細胞膜に作用して、眠気、物アミンオキシダーゼ機能の障害、及び非受容体介在性の脳機能の障害等の望ましくない副作用を引き起こす。カンナビノイドには、依存性及び向精神性を有するものもあり、これらはその治療価値を制限する傾向がある。
【０００５】
構造が同定された多くの非古典的ビアリル及びトリアリルカンナビノイドが、Makriyannis らのUS特許番号7,057,076に記載されている。Makriyannisは、２個以上の化合物に対する様々な結合親和性を同定しているが、ＣＢ−１及びＣＢ−２受容体の両方における個々の化合物の結合データを示すサポートデータを何も示していない。よって、それらの化合物が、他の受容体に対するよりも、ある受容体に対して選択性が高いかどうかを評価することは難しい。
【０００６】
本技術分野においては、古典的又は非古典的カンナビノイドのアナログが、現在継続して求められている。アナログは、CB-1 受容体 及び／又はCB-2受容体により仲介される疾患及び障害の処置という治療上の目的に使用可能である。
【発明の概要】
【０００７】
前述の課題に鑑みて、本発明は、様々な複素環カンナビノイドアナログ化合物、組成物、及び／又は関連する方法を提供することを目的とし、それによって、上記に外接した技術を含む従来技術の様々な欠如及び欠陥を克服する。当業者は、本発明の１つ又は複数の側面がある目的を達成でき、その一方で他の１つ又は複数の側面が他の目的を達成できることを理解するであろう。それぞれの目的は、その全ての点において、本発明の全ての側面に等しく当てはまるものではない。下記の目的は、本発明のいずれの側面に対しても適用されると考えられる。
【０００８】
カンナビノイド及びヒト細胞及び組織に存在する関連受容体に対する親和性を示す１又は複数種類のカンナビノイド化合物を特定することも、本発明の目的となり得る。
【０００９】
Ｂ環ピリジン系を備える１又は複数の新たなピリジン非古典的カンナビノイド受容体リガンドを提供することも本発明の目的となり得る。このような化合物は、ビアリル又はトリアリル環系を備えることができる。
【００１０】
治療での使用用のカンナビノイド受容体選択性を示すこれらの化合物の同定も、本発明の他の目的となり得る。
【００１１】
本発明の他の目的、特徴、利益及び利点は、本概要及び下記の実施形態の説明によって明白であり、種々のカンナビノイド化合物及び関連する治療法方の知識を有する当業者にとって、容易に理解できるであろう。このような目的、特徴、利益及び利点は、以下に示される付随の例、データ、図及び全ての妥当な推論単独で又は本明細書に取り込まれる文献の考慮を伴って、結合されることは、明白であろう。
【００１２】
１つに、本発明は、下記式（Ｉ）で表される化合物から選択あれるカンナビノイドアナログ化合物を対象としてもよい。
【００１３】
【化１】
式Ｉにおいて、Ｗ及びVの一方はＮであってもよく、他方はＣであってもよく；Xは、H、置換された及び置換されていないアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリル、アリルアルキル、ヘテロアリル、ヘテロアリルアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択されてもよく、各アルキル部分は任意に３回以下で置換されていてもよく、それぞれの環部分は、１、２、３、４、又は５個の置換基によって任意に置換されていてもよく；ＹはＳ，Ｏ，ＣＨ２，CH(CH3)，CH(OH), C(CH3)(OH), C(CH3)2, C(-U(CH2)nU-), C(O), NH, S(O),及びS(O)2から選択されてもよく；ｎは１以上の整数であり、好ましくは１〜６であり；UはCH2, S及びOから選択されてもよく；ＺはＨ、置換された及び置換されていないアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリル、アリルアルキル、ヘテロアリル、ヘテロアリルアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキルから選択されてもよく、それぞれのアルキル部分は任意に３回以下で置換されていてもよく、それぞれの環部分は、１、２、３、４、又は５個の置換基によって任意に置換されていてもよく；R1及びR2は、独立して、H、並びに置換された及び置換されていないアルキルから選択される。
【００１４】
また、本発明は、本書に示すように、化合物の塩を対象とすることができる。
【００１５】
また、本発明は、本書に示すように、化合物のプロドラッグを対象とすることができる。
【００１６】
本発明はまた、以下に説明される化合物、その塩及び／又はプロドラッグ、並びに医薬的に許容されるキャリア成分を含有する医薬組成物を対象とすることができる。
【００１７】
本発明は、カンナビノイド受容体の活性を修飾する方法を対象としてもよい。このような方法は、カンナビノイド又は関連レセプター、その塩及び／又は化合物における活性を有する、本発明の若しくは本書に説明する他の化合物、塩及び又はプロドラッグを提供すること；並びに、細胞及び／又は細胞のカンナビノイド受容体とこのような化合物とを接触させること、を備えてもよい。下記に示すように、このような接触は、カンナビノイドの活性を少なくとも部分的に修飾する少なくとも部分的な効果を奏することができる。
【００１８】
本発明はまた、カンナビノイド受容体介在疾患の治療方法を対象としてもよい。このような方法は、カンナビノイド受容体における活性を有する、本書に示す化合物又は本書に示す他の化合物、その塩及び／又はプロドラッグを提供すること；並びに、患者に、カンナビノイド受容体介在疾患を治療する少なくとも部分的な効果を有してもよい、化合物、塩及び／又はプロドラッグを所定量投与すること；を備えてもよい。本発明のこの側面は、CB-1 及び／若しくは CB-2（又は関連する）受容体の過活性又はCB-1 及び／若しくは CB-2（又は関連する）受容体の非活性又は低活性が介在する病状を治療又は抑制するための、CB-1若しくは関連受容体のアゴニスト、CB-1若しくは関連受容体のアンタゴニスト、CB-2若しくは関連受容体のアゴニスト、並びに／又はCB-2若しくは関連受容体のアンタゴニストの使用に関連してもよい。
【００１９】
本発明はまた、下記式の化合物から選択される化合物を対象としてもよい。
【００２０】
【化２】
式Iにおいて、Ｗ及びＶの一方がＮであってもよく、他方がＣであってもよく；Ｘは、アルキルであってもよく、フェニル、ベンジル、シクロヘキシル、チオフェニル及びピリジニルから選択されてもよく、それぞれの環部分は、ハロ、アルキル、及びアルコキシ部分から独立して選択される１〜５個の置換基によって任意に置換されていてもよく；Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ又はアルキルから選択されてもよく；Ｙは、カルボニル、ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレン部分から選択されてもよく；Ｚは、アルキルであってもよく、シクロアルキル、フェニル及びチオフェニルから選択されてもよく、これらはそれぞれ、任意に、１〜５個の置換基で置換されていてもよく、置換基は本発明を知った当業者により理解され、本書のどこかに記載されたものを包含するが、それに限定されない。ある実施形態において、Ｘは、クロロ、メチル及びメトキシ置換基から独立して選択される１〜５個の基で任意に置換されたフェニルであってもよい。このような実施形態において、Ｚは、アルキル又はフェニル部分であってもよく、任意に、Ｘは、ベンジル又はジクロロフェニル部分であってもよい。このような化合物は、いずれも、このような化合物の塩及び／又はプロドラッグから選択されてもよい。単独の又は複数のこれらの化合物は、ある量で、成長細胞の死を引き起こす効果を少なくとも部分的に奏する。
【００２１】
本発明は、限定されることなく、同様に、がんの治療方法を対象とすることができる。このような方法は、がん細胞の成長細胞等のカンナビノイド受容体を有するがん細胞を準備することと；このような成長を式Ｉに示す化合物から選択されるカンナビノイド化合物と接触させることとを備えていてもよい。
【００２２】
【化３】
式Ｉにおいて、Ｒ２、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ及びＺは、上述した通りであってもよい。実施形態において、Ｘは、アルキルであってもよく、フェニル、シクロヘキシル、チオフェニル及びピリジニルから選択されてもよく、これらはそれぞれ、任意に、ハロ、アルキル及びアルコキシ部分から選択される１〜５個の置換基で置換されていてもよく；Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ又はアルキルから選択されてもよく；Ｙは、カルボニル、ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレンから選択されてもよく；Ｚは、アルキルであってもよく、シクロヘキシル、フェニル及びチオフェニルであってもよく、これらはそれぞれ、任意に、１〜５個の置換基で置換されていてもよく、置換基は本発明を知った当業者により理解され、本書のどこかに記載されたものを包含するが、それに限定されず；単独の又は複数の化合物について、これらの化合物の塩及びプロドラッグ及びそれらの組み合わせは、ある量で、成長細胞の死を引き起こす効果を少なくとも部分的に奏する。ある実施形態で、X及びZは、クロロ、ヒドロキシ及びメトキシから独立して選択される１〜５個の基で、任意に置換されたフェニルであってもよい。このような実施形態において、R1及びR2は、独立して、H及びメチル部分から選択されてもよい。このような実施形態において、R1及びR2の少なくとも一方は、メチル以外の基であってもよい。本書で説明されるように、かつ限定されることなく、Yはいずれも、カルボニル又はジメチルメチレンであってもよい。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】CB-1受容体における化合物５ｅの機能活性を示す。
【図２】CB-２受容体における化合物５ｅの機能活性を示す。
【図３】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間及び１８時間後のG-CSFの分泌結果を示す。
【図４】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間後及び１８時間後のIL-１βの分泌結果を示す。
【図５】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による１８時間後のIL-6の分泌結果を示す。
【図６】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間後のIL-6の分泌結果を示す。
【図７】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による１８時間後のIL-8の分泌結果を示す。
【図８】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間後のIL-8の分泌結果を示す。
【図９】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間後及び１８時間後のMCP-Iの分泌結果を示す。
【図１０】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間後のMIFの分泌結果を示す。
【図１１】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による１８時間後のMIFの分泌結果を示す。
【図１２】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による１８時間後のRANTESの分泌結果を示す。
【図１３】TNF-αの存在下及び非存在下におけるEC1及びEC10での化合物５ｂに暴露されたA549細胞による４時間後のRANTESの分泌結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本発明に包含される新規の化合物は、上述の一般式Iで表される化合物、塩及びプロドラッグ並びに／又はその医薬組成物である。
【００２５】
本発明において、「アルキル」とは、１〜２０個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖アルキル基を意味する。任意に、本発明におけるアルキル基は、１又は複数の二重結合及び／又は１又は複数の三重結合を含有していてもよい。
【００２６】
「シクロアルキル」は、３〜１２個の炭素原子を有する炭素環基を意味する。シクロアルキルは、単環でもよく、多数の環が融合した系であってもよい。任意に、本発明のシクロアルキル基は、１又は複数の二重結合及び／又は１又は複数の三重結合を含有していてもよい。
【００２７】
「複素環」とは、縮合環系を包含し、窒素、酸素又は硫黄及びその組み合わせから選択される少なくとも１個かつ４個までのヘテロ原子を含有する、４、５、６又は７員環の１又は複数の複素環系を意味する。
【００２８】
「アリル」は、少なくとも１つの環が芳香環である、単環、多環、又は縮合環を有する芳香族炭素環系を意味する。
【００２９】
「ヘテロアリル」は、縮合環系を包含し、窒素、酸素、又は硫黄及びそれらの組み合わせから選択される少なくとも１個かつ４個までのヘテロ原子を含有する、３〜１２個の原子を有する１又は複数の芳香族環系である。
【００３０】
「アリルアルキル」は、アリル基によって置換されたアルキル基であり、結合部分がアルキル鎖の炭素である。
【００３１】
本書において、「置換された」は、当業者にとって理解されるような置換を意図する。少なくとも１個の、及び５個程度の置換基が、１個の基に存在してもよい。置換基の例として、ハロ、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、アリル、ヘテロアリル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、アルキルチオール、ハロアルキル（例えばトリフルオロメチル）、カルボキシ、アルキルカルボキシ、カルバモイル等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３２】
１つの観点からは、代表として、非限定的なピリジンピリミジンアナログが、下記スキーム１に示す逆合成式に基づいて、中間化合物の反応から調製されてもよい。
【００３３】
【化４】
スキーム１において、R3及びR4は、メチル、エチル及びトリクロロフェニルから選択される。IIに関連する化合物は、スキーム２に描かれ、参照することで本書に組み込まれるYip, et al. See, Org. Lett 9:3469に記載されるように、ナトリウムエトキシド等の塩を用いたマロン酸エステルの直接アルキル化又は銅触媒カップリングを含む標準的な手法によって、適切なジアルキル又はジアリルマロン酸から予め調製される。
【００３４】
【化５】
中間体IIIは、次いで中間体エナミンの加水分解を行う、芳香族及び脂肪族ニトリル類から、臭化メチルマグネシウム／THF又はメチルリチウムを含む公知の化学反応により、予め調製される(参照することで本書にその全体が組み込まれるSee, e.g., Moss, Tet. Lett. 36:8761を参照のこと)(スキーム３)。中間体IVは、標準的な方法を用いて、対応するニトリル及びメチルリチウムから予め調製される。
【００３５】
【化６】
Ｙにgem−ジアルキル、複素環式、又は炭素環式置換基を含有する誘導体は、その化合物は市販されていないが、メチレンニトリルの直接アルキル化（Makriyannisの米国特許番号7,057,76及び公開番号2004/087590を参照のこと。これらの文献の全体は、参照されることで、本書に組み込まれる）又は適切に置換されたアリル、ヘテロアリルハロゲン及びイソプロピルニトリルから調製される（参照されることで全体が本書に組み込まれる、2003年8月21日出願の米国公開番号2005/0065033を参照のこと)。スキーム４及び５は、この化学反応の典型であるが、この化学反応の範囲に限定されるものではない。
【００３６】
【化７】
【００３７】
【化８】
Ｙにケト、ヒドロキシ、アルキルヒドロキシ置換基を含有する誘導体は、Ｙ＝ＣＨ２を有する化合物の直接酸化によって、又はＣ２アルデヒドピリジンから調製され、既に報告されている化学反応を用いて、2,2−ビス−エチルスルファニル−アセトアミジン及び適切に置換されたマロン酸エステルから調製される（スキーム６）（参照されることで本書にその全体が組み込まれる米国特許番号 7,169,942を参照のこと）。
【００３８】
【化９】
対応するピリジンは、スキーム７に示されるように、ジメチル-、ジエチル-、又はビス（トリクロロフェニル）-マロン酸と、必須の２-ケトアナログに由来する適切な置換されたシッフ塩基との反応によって調製され（参照されることで、その全体が本書に組み込まれるIto and Miyajima, J. Heterocyclic Chem. 1992, 29:1037, 及び Kappe et al, J. Heterocyclic Chem 1988, 25:463）、スキーム７において、R2は、ベンジル又はｔ-ブチルであり、Ｒ３、Ｒ４はメチル、エチル、フェニル、及び/又はビス（トリクロロフェニル）である。他に、必須のイミンは、適切なニトリル及びメチルリチウムから、標準的な方法を用いて調製される。
【００３９】
【化１０】
いくつかの代表的な、しかし非限定的な化合物の合成が本書で述べられるが、他の種々の化合物が同様の手法及び／又はその単純な変更を用いることで調製され得ることを、当業者は理解するであろう。すなわち、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｙ及びＺ部分の特性は、それぞれの試薬、出発物質、中間体及びそれらの化学的性質によってのみ限定される。様々な他の部分及び/又は置換基は、上述の同時係属出願に記載されたものを含むがこれらに限定されない。
【００４０】
上述した同時に継続する出願に記載されたように、本発明は、より広くは、種々の他のこのような化合物、その塩及び／又はプロドラッグを、それらに対応する医薬組成物と共に、検討する。このような化合物、塩、プロドラッグ、及び／又は医薬組成物は、本書に記載するように使われてもよい。例えば、本発明は、CB-1受容体及びCB-2受容体の一方又は両方の活性を修飾するために使われてもよい。このような方法は、細胞及び／又はそのカンナビノイド受容体と、本発明の化合物とを接触させることによって実行されてもよく、このような接触は、ｅｘ ｖｉｖｏかｉｎ ｖｉｖｏかに関わらず、このようなカンナビノイド受容体の活性を少なくとも部分的に修飾する少なくとも部分的な効果を有する。
【００４１】
より一般的には、本発明の化合物及び／又は組成物の種々の薬理学的及び／又は治療上の利点は、同時継続する前述の出願で述べられた情報を考慮して理解可能である。本発明のアナログは、本書に記載するように、幅広い症状の治療に薬理学的に効果のある量で投与され得る。限定されることなく、種々の症状及び／又は病状は、発明の名称が「トリ−アリル／ヘテロ芳香族カンナビノイド及びその使用（Tri-Aryl/Hetero aromatic Cannabinoids and Use Thereof）」で、２００８年３月３日に出願された、同時継続する出願番号12/074,342の段落００６７に記載され、その全体は、本書に組み込まれる。
【００４２】
従って、本発明は、本書に記載される化合物を提供すること（このような化合物は、カンナビノイド受容体での活性を示す）；並びに、そのような化合物にカンナビノイド受容体を有する細胞を接触させること、及び／又は患者にそのような化合物を投与すること（このような化合物は、カンナビノイド受容体／仲介疾患を治療するために少なくとも部分的に効果的な量で用いられる）を備える方法を対象としてもよい。このようなカンナビノイド受容体は、本書に記載される受容体であってもよく、本発明を知った当業者によって理解され、実現されてもよい。
【００４３】
医薬組成物若しくは治療の一部に若しくは一部として示されるように、受容体が効果的な量の１つ若しくは複数の本発明の化合物と接触することによって、又は、効果的な量の１つ又は複数の化合物とそのような受容体を有する細胞を接触させることにより、化合物が細胞内で受容体と接触し、カンナビノイド及び関連受容体の活性は、影響を受け、仲介され、及び／又は修飾され得る。接触は、ｉｎ ｖｉｔｒｏであっても、ｉｎ ｖｉｖｏであってもよい。すなわち、当業者によって理解されるように、「接触」とは、カンナビノイド及び／又は関連受容体と、１又は複数の化合物と、このような化合物が、受容体の活性に結合、影響、又は修飾するように、引き合わされることを意味する。受容体の活性を修飾する及び／又はそれに影響を与える１又は複数の化合物の効果的な量は、実験的に決定され、このような決定を行うことは、当該技術分野の技術の範囲である。
【００４４】
限定されることなく、本発明のアナログ化合物は、同時継続している前述の‘３４２出願の実施例２に記載されている受容体結合アッセイにおいてｅｘ ｖｉｖｏで使用され得る。本発明のアナログ化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏ活性は、その同時継続出願の実施例３に記載されているものと同じ方法によって実証され得る。また、ｉｎ ｖｉｖｏ活性は、その実施例４及び６に記載されたプロトコルを用いても実証され得る。より具体的には、ヒト肺, 前立腺, 結腸直腸及び膵癌の細胞株に対する、本発明の種々の代表的な化合物の抗がん活性は、上述の同時継続の’３４２出願の実施例９に記載された方法を用いることで確認可能である。このような方法を拡大して、本発明は、同様に中枢神経系のがん成長を治療すること、及び／又はそのような成長における細胞死を誘導することに用いられてもよい。本発明によると、本書に記載される多様なカンナビノイド化合物は、上述されたものを含むがそれらに限定されず、ヒトの緑内障及び／又は脳腫瘍の治療方法と関連して用いられてもよい。このような実施形態を描く上で、同時継続出願で記載されたように、ヒト脳腫瘍に接触させ及び／又は治療することに本発明の１又は複数の化合物が提供され使用され得、このような接触及び／又は治療は、細胞死及び／又は関連する効果によって証明される。
【実施例】
【００４５】
下記の非限定的な実施例及びデータは、本書に示す手法を通じて利用可能である通り、ピリジンの非古典的カンナビノイド受容体リガンド及び／又は化合物の合成を含む、本発明の化合物、組成物及び／又は方法に関連する種々の側面及び特徴を説明する。従来技術と比べて、本発明の化合物及び方法は、驚くべき、予想外かつ従来技術に反する結果及びデータを提供する。本発明の利用可能性がいくつかの化合物、部位及び／又はそれらの置換物の調製及び使用を通じて説明されるが、当業者は、同程度の結果が、本発明の範囲に応じて、他の種々の化合物、部位及び／又は置換物によって得られることを理解する。全ての化合物は、ChemBioDraw Ultra Version 11.0.01を用いて命名された。
【００４６】
実施例1a
【００４７】
【化１１】
ジエチル2-フェニルマロン酸
二口丸底フラスコに、固体であれば、ＣｕＩ（0.114 g, 0.6 mmol）、2-ピコリン酸（0.148 g, 1.2 mmol）、ＣｓＣＯ３（5.89 g, 18 mmol）及びヨウ化アリル（6 mmol）を順次入れた。容器を真空にして、窒素で３回満たした。無水１，４-ジオキサン（10 ml）を加え、次いで蒸留マロン酸エステル(1.9 ml, 12 mmol)及びヨウ化フェニル(12 mmol)を容積的に添加した。容器を密封して７０℃に加熱した。進行をＴＬＣでモニターした後、反応液を室温まで冷却し、酢酸エチルで分離し、塩化アンモニウムで洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、１０％EtOAc/ヘキサン混合物を用いたカラムクロマトグラフィーで精製した。収率92％、Rf= 0.41（酢酸エチル／ヘキサン＝１：９）。1H NMR (CDCl3,500MHz:δ7.41-7.31,m,5H),4.62(s,1H),4.25-4.15(m, 4H),1.26(t,6H)。MS259(M+23)。
【００４８】
実施例1b
同様に、下記マロン酸エステルを合成した。
【００４９】
【化１２】
ジエチル2-m-トリルマロン酸エステル
収率：９２％, Rf= 0.55(酢酸エチル/ヘキサン=l:9)。1H NMR (CDCl3, 500 MHz:δδ7.12-7.3 (m, 4H),4.62(s,1H), 4.20-4.28(m,4H), 2.27(s,3H), 1.22-1.25 (m, 6H)。 MS 273 (M+23)。
【００５０】
実施例1c
【００５１】
【化１３】
ジエチル2-（ピリジン-2-イル）マロン酸
収率：８８％, Rf=0.29 (酢酸エチル/ヘキサン=3:7)。1H NMR(CDCl3, 500MHz: δ8.5(d, 1H), 7.7(d,1H), 7.62-7.58(m,1H), 7.18-7.12(m,1H), 4.80(s,1H), 4.21-4.15(m,4H), 1.21(t,6H). MS 260(M+23)。
【００５２】
実施例1d
【００５３】
【化１４】
ジエチル2−（チオフェン-2-イル）マロン酸
収率：63%, Rf=0.29(酢酸エチル/ヘキサン=l:9)。１H NMR (CDCl3,300 MHz:δ7.28 (d,1H), 7.1-7.0 (m,2H), 4.8 (s,1H), 4.26-4.2 (m,4H), 1.2(t,6H). MS 265(M+23)。
【００５４】
実施例1e
【００５５】
【化１５】
ジエチル2‐シクロヘキシルマロン酸
収率：９４％, Rf=0.59(酢酸エチル/ヘキサン=1:9)。1H NMR (CDCl3, 500MHz : δ4.22-4.14(m,4H), 3.12(d,1H), 2.14-2.05(m,1H), 1.75-1.63(m,5H), 1.34-1.24 (m,8H), 1.20-1.20 (m,3H). MS 265 (M+23)。
【００５６】
実施例1f
【００５７】
【化１６】
ジエチル2-ヘキシルマロン酸
収率：91%, Rf= 0.44(酢酸エチル/ヘキサン=l:9)。1H NMR (CDCl3, 300 MHz : δ4.11-4.40(m,4H), 331(t,1H), 1.80(m,2H), 1.38(m,2H), 1.1-1.4(m,12H), 0.8(t,3H). MS 267(M+23)。
【００５８】
実施例1g
【００５９】
【化１７】
ジエチル2-（３-メトキシフェニル）マロン酸
生成物を、MS 289（M+23）で同定した。
【００６０】
実施例1h
【００６１】
【化１８】
ジエチル2-（3,5-ジクロロフェニル）マロン酸
生成物をMS 328 (M+23)で同定した。
【００６２】
実施例1i
【００６３】
【化１９】
ジエチル2-（2,4-ジクロロフェニル）マロン酸
生成物をMS 328(M+23)で同定した。
【００６４】
実施例1j
【００６５】
【化２０】
ジエチル2-（４‐（トリフルオロメチル）フェニル）マロン酸
生成物をMS327(M+23)で同定した。
【００６６】
実施例1k
【００６７】
【化２１】
ジエチル2-（ピラジン-2-イル）マロン酸
生成物をMS 261(M+23)で同定した。
【００６８】
実施例1l
【００６９】
【化２２】
ジエチル2-（ピリミジン-2-イル）マロン酸
生成物を、MS261(M+23)で同定した。
【００７０】
実施例1m
【００７１】
【化２３】
ジエチル2-（ナフタレン-1-イル）マロン酸
生成物をMS309(M+23)で同定した。
【００７２】
実施例1n
【００７３】
【化２４】
ジエチル2-（1H-ピロール-3-イル）マロン酸
生成物をMS 249(M+23)で同定した。
【００７４】
実施例1o
【００７５】
【化２５】
ジエチル2-シクロペンチルマロン酸
生成物をMS251(M+23)で同定した。
【００７６】
実施例2a
【００７７】
【化２６】
2-メチル-2-（チオフェン-2-イル）プロパンニトリル
2-（チオフェン-2-イル）アセトニトリル（１ｇ、８．１３ｍｍｏｌ）の４ｍｌの無水ＴＨＦの溶液に、ＫＨＭＤＳ（２４．４ｍｍｏｌ、４８．９ｍｌ、０．５Ｍトルエン溶液）を０℃で添加した。混合物を３分間撹拌し、１６．２６ｍｍｏｌヨードメタン（１．１３ｍｌを無水ＴＨＦ２６ｍｌに添加したもの）を１０分かけて添加した。混合物を５分間撹拌し、ＴＬＣによってモニターした。完了次第、含水塩化アンモニウムによって反応を停止した。有機相を、酢酸エチルによって分離し、硫酸ナトリウムによって乾燥させた。生成物を、真空蒸留によって精製した（１トールにおける沸点は４２℃）。 収率：８９％。 １Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．４ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ）、７．２ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ）、７．０ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ）、１．９ｐｐｍ（ｓ，６Ｈ）。
実施例2b
同様に、下記化合物を合成した。
【００７８】
【化２７】
2,2-ジメチルオクタンニトリル
真空蒸留によって精製（１．１トールでの沸点が５０〜５５℃）。収率：８４％ Ｉ．Ｒ．（ｎｅａｔ）ニトリル２２３０ｃｍ−１，１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）１．５ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ）。１．４〜１．３ｐｐｍ（ｍ，１２Ｈ）、０．９ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ）。
実施例３ａ
【００７９】
【化２８】
2-メチル-2-フェニルプロパンニトリル
フルオロベンゼン（５．８５ｍＬ，６２．４ｍｍｏｌ）の１００ｍＬの無水トルエン溶液にイソブチロニトリル（２２．５ｍＬ，２５０ｍｍｏｌ）を添加し、次いで２００ｍＬの０．５Ｍ ＫＨＭＤＳのトルエン溶液（１００ｍｍｏｌ）を添加した。反応液を８０℃で２４時間撹拌した。反応液を室温で冷却し、ジエチルエーテルで希釈し、水及び食塩水で洗浄した。有機分画を硫酸ナトリウムで乾燥させて、減圧下で濃縮した。生成物を酢酸エチル/ヘキサン勾配を用いたフラッシュクロマトグラフィーで精製し、茶色い油状の目的の化合物を４．５７ｇ（５０％）の収量で得た。ＭＳ：（ＥＳＩ，Ｐｏｓ）ｍ／ｚ １６８．０（Ｍ+２３） １ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，CDCｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．４８（ｄ，２Ｈ），７．３９（ｔ，２Ｈ），７．３１（ｔ，１Ｈ），１．７３（ｓ，６Ｈ）。
【００８０】
実施例３ｂ
同様に、下記化合物を合成した。
【００８１】
【化２９】
2-メチル-2-ピリジン-2-イル-プロパンニトリル
2-メチル-2-フェニル-プロパンニトリルと同様の方法で、2-ブロモピリジンを出発物質として、茶色い油状の生成物を得た。ＭＳ：（ＥＳＩ，Ｐｏｓ）ｍ／ｚ １６８．９（Ｍ+２３）。
実施例３ｃ
【００８２】
【化３０】
2-シクロヘキシル-2-メチルプロピオニトリル
無色の油、収率：89% MS:(ESI,Pos.) 174.0 (M+1) 1HNMR(500MHz,CDCl3):∂(ppm) 1.81-1.89(m,4H), 1.7(m,1H), 1.19-1.34(m,7H), 1.07-1.28(m,5H)。
【００８３】
実施例４ａ
【００８４】
【化３１】
3-メチル-3-フェニルブタン-2-オン
０℃に冷却した2-メチル-2-フェニル−プロピオンニトリル（３ａ，５００ｍｇ，３．１ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液に、臭化メチルマグネシウム（４０８ｍｇ，３．４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物は、室温まで温められ、一晩還流された。混合物を１Ｎ ＨＣｌで処理し、水相をジエチルエーテルで抽出した。生成物をＭＳ：（ＥＳＩ，Ｐｏｓ）ｍ／ｚ １８７．２（Ｍ＋２３）で確認した。
【００８５】
実施例４ｂ
本書に示す通り、Y−及び／又はZ-置換ピリジン中間体の途中の対応するシッフ塩基化合物を提供するために、上述した合成方法に相当する種々の合成方法を用いて、様々な他のケトンを各ニトリルから調製することができる。
実施例５ａ
【００８６】
【化３２】
6-（2-（チオフェン-2-イル）プロパン-2-イル）-3-トリルピリジン‐2,4‐ジオール （５ａ）
２ａ（0.83g,5.5mmol）の無水ジエチルエーテル（5 mL）の溶液に、アルゴン下で、1.6M メチルリチウムのジエチルエーテル溶液（21 mL, 33.00mmol）を添加し、混合物を３時間、室温で撹拌した。水で反応を停止した後、混合物をジエチルエーテルで抽出した。抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を減圧下で蒸発させて、無色の油を得た（0.86, 95%）。中間生成物（３-メチル-3-（チオフェン-2-イル）ブタン-2-イミン）；0.73g, 4.36 mmol）及びジエチル2-m-トリルマロン酸（0.70g,4.36 mmol）の溶液を１ｍＬのジグリムに溶解させた溶液を、３時間１３５℃で還流した。反応混合物を冷却し、ヘキサンに注ぐことで、黄色の沈殿物を得た。黄色の沈殿物を集め、酢酸エチル／ヘキサン混合物から結晶化した。オフホワイトの粉末、収率：52% MS:(ESI,Neg) 323.90 (M-1) 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) : ∂(ppm) 10.69(s,1H), 10.19(s,1H), 7.46(d,1H), 7.11-7.19(m,3H), 6.99-7.05(m,3H), 5.78(s,1H), 2.28(s,3H), 1.72(s,6H)。
【００８７】
実施例５ｂ
同様に、下記化合物を合成した。
【００８８】
【化３３】
6-（2-シクロヘキシルプロパン-2-イル）-3-（3,5-ジクロロフェニル）ピリジン‐2,4‐ジオール （５ｂ）
白色粉末、収率40% MS:(ESI,Neg) 377.9(M-1) 1HNMR(300 MHz,DMSO-d6):∂(ppm) 10.88(s,1H), 10.71(s,1H), 7.51(m,3H), 5.90(s,1H), 2.29(s,3H), 1.4-1.9(m,7H), 1.11-1.14(m,10H)。
【００８９】
実施例5ｃ
【００９０】
【化３４】
3-（3,5-ジクロロフェニル）‐6-（2-フェニルプロパン-2-イル）ピリジン‐2,4‐ジオール （５ｃ）
白色粉末、収率：63% MS: (ESI, Neg) 372.7 (M-I) 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) : ∂(ppm) 10.79(s,1H), 10.74(s,1H), 7.26-7.49(m,8H), 5.96(s,1H), 1.63(s,6H)。
【００９１】
実施例５ｄ
【００９２】
【化３５】
3-（3,5-ジクロロフェニル）‐6-（2-（チオフェン-2-イル）プロパン-2-イル）ピリジン‐2,4ジオール （５ｄ）
オフホワイトの粉末、収率47% MS: (ESI,Neg) 377.9 (M-1) 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) : ∂(ppm) 10.95(s, 1H), 10.77(s, 1H), 7.46-7.48(m, 3H), 7.41(t, 1H), 7.01-7.05(m, 2H), 5.78(s, 1H), 1.72(s, 6H)。
【００９３】
実施例５ｅ
【００９４】
【化３６】
3-（3,5-ジクロロフェニル）-6-（2-（チオフェン-2-イル）プロパン-2-イル）ピリジン-2,4-ジオール （５ｄ）
オフホワイトの粉末、収率47% MS: (ESI, Neg) 379.9 (M-1) 1HNMR (500 MHz, DMSO- d6) : ∂(ppm) 10.96(s, 1H), 10.72(s, 1H), 7.51(d, 2H), 7.40(t, 1H), 5.94(s, 1H), 1.60-1.63(m, 2H), 1.04-1.24(m,14H), 0.84(t, 3H)。
【００９５】
実施例５ｆ
【００９６】
【化３７】
6-（2-シクロヘキシルプロパン-2-イル）-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール （５ｆ）
白色粉末、収率：48% MS: (ESI, Neg) 324.0 (M-1) 1HNMR (300MHz,DMSO-d6) : ∂(ppm) 10.81(s, 1H), 10.25(s, 1H), 7.17-7.19(m, 4H), 5.91(s, 1H), 2.29(s, 3H), 1.4-1.9(m, 7H), 1.11- 1.14(m, 10H)。
【００９７】
実施例５ｇ
【００９８】
【化３８】
6-（2-フェニルプロパン-2-イル）-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール （５ｇ）
白色粉末、収率：61% MS:(ESI, Neg) 317.9 (M-1) 1HNMR (300 MHz, DMSO-d6) : ∂(ppm) 10.51(s, 1H), 10.23(s, 1H), 6.99(m, 9H), 5.93(s, 1H), 2.28(s, 3H), 1.62(s, 6H)。
【００９９】
実施例５ｈ
【０１００】
【化３９】
2-（2-メチルオクタン-2-イル）-５-m-トリルピリミジン-４，6-ジオール （５ｈ）
白色粉末、収率：41% MS: (ESI, Neg) 326.1 (M-1) 1HNMR (500 MHz, CDCl3) : ∂(ppm) 7.34 (t, 1H) 7.19-7.26(m, 3H), 5.94(s, 1H), 2.39(s, 3H), 1.56(m, 2H), 1.16- 1.30(m, 14H) , 0.88(t, 3H)。
【０１０１】
実施例５ｉ
【０１０２】
【化４０】
3-ヘキシル-6-（2-メチルオクタン-2-イル）ピリジン-2,4-ジオール （５ｉ）
白色粉末、収率：38% MS: (ESI, Neg) 320.0 (M-I) <1>HNMR (300 MHz, CDCl3) : d(ppm) 5.89(s, 1H), 2.71(m, 2H), 1.61-1.58(m, 2H), 1.25-1.42(m, 22H) , 0.98(m, 6H)
実施例５ｊ
【０１０３】
【化４１】
6-（2-メチルオクタン-2-イル）-3-フェニルピリジン-2,4-ジオール （５ｊ）
白色粉末、収率38% MS: (ESI, Neg) 312.1 (M-1) 1HNMR (500 MHz, CDCl3) : ∂(ppm) 7.42-7.49(m, 4H), 7.35-7.38(m, 1H), 5.93(s, 1H), 1.53-1.56(m, 2H), 1.14- 1.27(m, 14H) , 0.87(t, 3H)。
【０１０４】
実施例５ｋ
【０１０５】
【化４２】
3-シクロヘキシル-6-（2-メチルオクタン-2-イル）ピリジン-2,4-ジオール （５ｋ）
白色粉末、収率：39% MS: (ESI, Neg) 318.0 (M-1) 1HNMR (300 MHz, MeOD) : ∂(ppm) 5.90(s, 1H), 2.81(m, 1H), 2.10(m, 2H), 1.61-1.58(m, 6H), 1.18-1.43(m, 18H), 0.88(t, 3H)。
【０１０６】
実施例５ｌ
【０１０７】
【化４３】
6’-（2-メチルオクタン-2-イル）-2,3’-ビピリジン-2',4’-ジオール （５ｌ）
淡黄色粉末、収率：23% MS: (ESI, Neg) 313.1 (M-1) 1HNMR (300 MHz, CDCl3) : ∂(ppm) 9.28-9.31(d, 1H), 8.9 (s, 1H), 8.31(d, 1H),7.89-7.91(t, 1H),7.22-7.27(t, 1H), 5.95(s, 1H), 1.58-1.62(m, 2H), 1.22-1.31(m, 14H) , 0.86(t, 3H)
実施例５ｍ
【０１０８】
【化４４】
3-(3-メトキシフェニル)-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール (5m)
白色粉末, 収率: 45% MS: (ESI, Neg) 342.0 (M-1) 1HNMR (300 MHz, DMSO-d6) : ∂(ppm) 10.78(s, 1H), 10.19(s, 1H), 7.21(m, 1H), 6.95-6.96(m, 2H), 6.73-6.81(m, 1H), 5.85(s, 1H), 3.7(s, 3H), 1.59-1.67(m, 2H), 1.04-1.22(m, 14H) , 0.84(t, 3H)。
【０１０９】
実施例 5n
【０１１０】
【化４５】
3-ベンジル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール (5n) - 白色 粉末, 収率: 41% MS: (ESI, Neg) 326.0 (M-I) 1HNMR (300 MHz, CDCl3) : d(ppm) 7.24-7.32(m, 5H), 6.10(s,lH), 3.91(s, 2H), 1.51-1.58(m, 2H), 1.11-1.28(m, 14H) , 0.86(t,3H).
実施例７
Ｂ‐環構造を有するいくつかの化合物について述べるが、他のこのような化合物は、様々なＸ，Ｙ及び／又はＺ部分を提供するために調製可能であり、このような化合物は、市販され又は合成されることで入手可能な、対応するシッフ塩基及び／又はマロン酸エステル中間体によってのみ限定される。同様に、Ｒ１及びＲ２は、マロン酸エステル出発物質の選択、又は結果物であるカンナビノイド化合物における二次化学反応によって、様々である。
【０１１１】
実施例８
受容体結合アッセイ
ヒトＣＢ-１受容体でトランスフェクトされたＨＥＫ２９３細胞由来の細胞膜と、ヒトＣＢ−２受容体でトランスフェクトされたＣＨＯ-Ｋ１細胞由来の細胞膜を調整した。１２０Ｃｉ／ｍｍｏｌの特異的活性を有する［３Ｈ］ＣＰ５５，９４０をＰｅｒｋｉｎ-Ｅｌｍｅｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ社から入手した。全ての他の化合物及び試薬は、シグマアルドリッチ社から入手した。アッセイは、１．２μの孔径を持つグラスファイバーフィルター（親水性、ＧＦＣフィルター）を装着したミリポア社の９６穴プレートで行った。アッセイの前に、フィルターを０．０５％ポリエチレンイミン溶液に浸し、脱イオン水で５回洗浄した。ろ過は、９６穴吸引多岐管（ミリポア社）にて行い、実験の最後にフィルターをピペットチップでシンチレーションバイアル中に直接打ち抜き、バイアルを５ｍｌのシンチレーションカクテル エコライト（＋）（フィッシャーサイエンティフィック社）で満たした。測定は、ベックマン社のシンチレーションカウンターＬＳ６５００モデルで行った。薬物溶液は、ＤＭＳＯ中で調製し、放射性リガンドをエタノール中に溶解させた。
【０１１２】
インキュベーションバッファー：５０ｍＭ ＴＲＩＳ-ＨＣｌ，５ｍＭ ＭｇＣｌ２，２．５ｍＭ ＥＤＴＡ，０．５ｍｇ／ｍｌ 脂肪酸フリーの牛血清アルブミン，ｐＨ７．４。
【０１１３】
CB-1 受容体への結合プロトコル：８μｇの細胞膜（インキュベーションバッファーでの１：８希釈液２０μｌ）を、５μｌの薬物溶液（１０−４Ｍ〜１０−１２Ｍ）及び５μｌの５．４ｎＭ［３Ｈ］ＣＰ５５，９４０と共に、合計体積を２００μｌとして、３０℃で９０分インキュベートした。非特異的結合を１０μＭのＷＩＮ５５，２１２-２（Ｋｉ＝４．４ｎＭ）を用いて決定した。細胞膜をろ過紙、フィルターを０．２ｍｌの氷冷インキュベーションバッファーで７回洗浄し、減圧下で空気乾燥した。
【０１１４】
ＣＢ−２受容体への結合プロトコル：１５．３μｇの細胞膜（インキュベーションバッファー胃での１：２０希釈液２０μｌ）を、５μｌの薬物溶液（１０−４Ｍ〜１０−１２Ｍ）及び５μｌの１０ｎＭ［３Ｈ］ＣＰ５５，９４０と共に、合計体積を２００μｌとして、３０℃で９０分インキュベートした。非特異的結合を１０μＭのＷＩＮ５５，２１２-２（Ｋｉ＝４．４ｎＭ）を用いて決定した。細胞膜をろ過紙、フィルターを０．２ｍｌの氷冷インキュベーションバッファーで７回洗浄し、減圧下で空気乾燥した。
【０１１５】
データの蓄積及び統計分析：１０−４Ｍから１０−１２Ｍまでの様々な濃度の薬物を添加した試料を各実験について３点ずつ用意し、個々のモル濃度におけるＩＣ５０値をＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍを用いて決定した。各薬物の対応するＫｉ値をチェン-プルソフ式を用いて決定し、最終データは２点以上の実験のＫｉ±Ｓ．Ｅ．Ｍ．で表される。
【０１１６】
機能アッセイ：環状ヌクレオチド感受性カチオンチャネル及びヒトＣＢ‐１又はＣＢ‐２受容体でステイブルトランスフェクトされたＨＥＫ-293細胞株（ＢＤバイオサイエンス社、サンノゼ、ＣＡ ＵＳＡ）を、ポリ‐D‐リジンでコートされた９６穴プレートに、細胞７００００個／穴の密度で蒔いた。アッセイの前に、プレートを５％CO2中３７℃で一晩インキュベートした。プレートをインキュベータから取り出し、完全成長培地（ＤＭＥＭ，１０％ＦＢＳ，２５０μｇ／ｍｌ Ｇ４１８及び１μｇ ピューロマイシン）を０．２５％ＢＳＡ含有１００μＬのＤＭＥＭに置換した。次に、１００μＬのメンブランポテンシャルダイローディングバッファー（membrane potential dye loading buffer）（モレキュラーデバイス社、サニーベイル、ＣＡ ＵＳＡ）を使用書にのっとって調製した。プレートをインキュベータに３０分間戻し、薬物添加の前に、基準線蛍光をバイオテックシナジー ２マルチモードマイクロプレートリーダー（バイオテックインストゥルメンツ社、ウィノースキ、ＶＴ ＵＳＡ）で、５４０ｎｍ励起光及び５９０ｎｍ発光フィルターを用いて、読み取った。２．５％ＤＭＳＯ、１．２５μＭの５’-（Ｎ-エチルカルボキシアミド）アデノシン及び１２５μＭのＲｏ２０-１７２４を含有する５０μＬのＤＰＢＳに薬物を添加した。プレートを室温で２５分インキュベートし、５４０ｎｍ励起光及び５９０ｎｍ発光にて再度蛍光を測定した。
【０１１７】
図１は、ＣＢ−１受容体における化合物５ｅの機能活性を示す。図２は、CB-2受容体における化合物５ｅの機能活性を示す。
【０１１８】
細胞毒性アッセイ：９６穴ポリスチレンプレートに、完全血清培地にて細胞を細胞７５０００個／ｍＬ，１００μＬ／穴の密度で蒔いた。細胞が接着するように、プレートを３７℃かつ５％ＣＯ２下で２４時間インキュベートした。１００倍濃度の薬物溶液をＤＭＳＯにて調製し、１％ＦＢＳ培地に１：１００で混合し、望ましい濃度を得た。薬物−培地混合物を細胞に投与する直前にボルテックスにかけた。完全血清培地を除いて、薬物‐培地混合物で置換し、１８時間インキュベートした。１０μLのCounting Kit 8（ＣＣＫ８，Ｄｏｊｉｎｄｏ♯ＣＫ０４−１１）を各ウェルに添加し、生細胞測定を行った。ＣＣＫ８ダイを添加したインキュベーションを２〜４時間行った後、４５０ｎｍの吸光度をバイオテックシナジー２ プレートリーダーによって測定した。
【０１１９】
グリア芽腫脳腫瘍細胞株であるＬＮ‐２２９に対する選択された化合物の細胞毒性を表１に示す。グリア芽腫脳腫瘍細胞株DBTRG05MGに対する選択された化合物の細胞毒性を表２に示す。
【０１２０】
【表１】
【０１２１】
【表２】
炎症についての調査
単球の分化：ＴＨＰ-１ヒト単核白血球（ATCC＃TIB-202）の懸濁液に、ホルボール１２‐ミリスチン酸塩13-酢酸塩（PMA Aldrich #P1585）及びイオノマイシン（Aldrich #10634）をそれぞれ１０及び５００ｎｇ／ｍｌ添加し、マクロファージ様細胞への分化を誘導した。細胞を３０，０００個／穴で蒔き、３７℃かつ５％ＣＯ２／９５％大気で３〜１０日インキュベートして、形質転換を完了させた。アッセイまで、必要に応じて培地を交換した。
【０１２２】
サイトカインアッセイ：A549 (ATCC #CCL-185)、HUV-EC-C (ATCC #CRL- 1730)、又は分化したTHP-１細胞を、９６穴ポリスチレンプレートに、３００，０００個／ｍｌ（１００μＬ／穴）の密度で蒔き、細胞が接着するように、３７℃で５％ＣＯ２／９５％大気で２４時間インキュベートした。１００倍濃度の薬物溶液をＤＭＳＯにて調製し、１％ＦＢＳ培地に１：１００で混合し、望ましい濃度を得た。
【０１２３】
プレートをインキュベートから取り出し、完全成長培地を、１％ＦＢＳ及び１μｇ／ｍｌのリポ多糖体又はペプチドグリカン（分化したＴＨＰ−１用）、又はＡ５４９及びＨＵＶＥＣの場合のＴＮＦ‐α（１０ｎｇ／ｍｌ）又はＩＬ‐１β（１ｎｇ／ｍｌ）、コントロールウェルの場合の刺激剤なし、を含有する５０μＬの培地に交換した。薬物処理の前に１時間、細胞をインキュベータに戻した。１％ＦＢＳ及び適切な刺激剤を上述の濃度で含有する培地で、所望の終濃度の２倍濃度で薬物‐培地溶液を調製した。薬物を含有しないコントロール培地を同様に調製した。５０μＬの薬物含有培地又はコントロール培地を、適切なウェルに添加し、プレートをインキュベータに１８時間戻した。培地の上清をウェルから除き、アッセイまで−８０℃で冷凍した。
【０１２４】
図３〜図１３は、ＴＮＦ‐αの存在又は非存在下で、ＥＣ１及びＥＣ１０での化合物６ｂに暴露されたＡ５４９による様々なモジュレータの分泌特性を示す。グラフの凡例は、pyrT 1-4 =8.52μＭの化合物6bで4時間；pyrT 2-4=13.6μMの化合物6bで４時間；pyrT 1-18=8.52μMの化合物6bで１８時間；pyrT2-18=13.6 μMの化合物6bで18 時間；TNF =１０ｎｇ／ｍｌのTNF-αである。
【０１２５】
これで、本発明及びそれを製造する及び使用する方法及び工程について、完全、明確に、簡潔に、かつ正確な用語にて、すべての当業者が製造できて使えるように、説明した。本発明の望ましい実施形態が説明され、請求の範囲に記載された発明の精神又は範囲から逸脱しない範囲での変更が可能であることが理解される。本発明とみなされる対象物を特定し、明確にクレームするために、下記の請求の範囲は本明細書を含む。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式で表され、
【化１】
上記式において、
Ｗ及びＶのうちの１方はNであり、他方はCであり；
Ｘは、Ｈ、置換された及び置換されていないアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリル、アリルアルキル、ヘテロアリル、ヘテロアリルアルキル、ヘテロシクロアルキル,及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択され、それぞれのアルキル部分は、３回以下で任意に置換され、それぞれの環部分は、任意に、１、２、３、４、又は５個の置換基で置換され；
Ｙは、Ｓ，Ｏ，ＣＨ２,ＣＨ(ＣＨ３),ＣＨ(ＯＨ)，Ｃ(ＣＨ３)(ＯＨ)，Ｃ(ＣＨ３)２，Ｃ（-Ｕ（ＣＨ２）ｎＵ-），Ｃ（Ｏ），ＮＨ，Ｓ（Ｏ）,及びＳ（Ｏ）２から選択され；
ｎは１以上の整数であり;
Ｕは、ＣＨ２，Ｓ，及びＯから選択され；
Ｚは、Ｈ,置換された及び置換されていないアルキル, シクロアルキル,シクロアルキルアルキル, アリル, アリルアルキル, ヘテロアリル, ヘテロアリルアルキル, ヘテロシクロアルキル, 及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択され、それぞれのアルキル部分は、３回以下で任意に置換され、それぞれの環部分は、１、２、３、４又は５個の置換基で任意に置換され；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ並びに置換された及び置換されていないアルキルから選択される、
化合物。
【請求項２】
Ｘは、アルキル、シクロアルキル, フェニル, ベンジル, チオフェニル及びピリジニルから選択され、それぞれの環部分は、ハロ, アルキル及びアルコキシから独立して選択される１〜５個の基で任意に置換され；
Ｒ１及びＲ２は、独立してＨ及びアルキルから選択され；
Ｙは、カルボニル, ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレンから選択され；
Ｚは、アルキル, シクロアルキル, 置換されたシクロアルキル, フェニル, 置換されたフェニル, チオフェニル及び置換されたチオフェニルから選択される、
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘは、アルキル、ベンジル又はフェニルであり、環部分は、クロロ、メチル及びメトキシから独立して選択される１、２、又は３個の基で任意に置換される、
請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘは、ヘキシル, ベンジル, 3-メトキシフェニル, 3-メチルフェニル又は3,5-ジクロロフェニルである、
請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｙはジメチルメチレンである、
請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｚは、アルキル、フェニル又はシクロアルキルである、
請求項２に記載の化合物。
【請求項７】
下記式で表される請求項１に記載の化合物。
【化２】
【請求項８】
Ｘは、アルキル、フェニル、ベンジル、チオフェニル、及びピリジニルから選択され、それぞれの環部分は、ハロ、アルキル及びアルコキシから独立して選択される１〜５個の基で任意に置換され；
Ｙは、カルボニル、ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレンから選択され；
Ｚは、アルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、フェニル、置換されたフェニル、チオフェニル及び置換されたチオフェニルから選択される、
請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｘは、アルキル、ベンジル又はフェニルであり、環部分は、クロロ、メチル及びメトキシから独立して選択される１、２、又は３個の基で任意に置換される、
請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｘは、ヘキシル, ベンジル, 3-メトキシフェニル, 3-メチルフェニル又は3,5-ジクロロフェニルである
請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｙは、ジメチルメチレンである、
請求項８に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｚは、アルキル、フェニル又はシクロアルキルである、
請求項８に記載の化合物。
【請求項１３】
a） 6-(2-(チオフェン-2-イル)プロパン-2-イル)-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール;
b) 6-(2-シクロヘキシルプロパン-2-イル)-3-(3,5-ジクロロフェニル)ピリジン-2,4-ジオール;
c) 3-(3,5-ジクロロフェニル)-6-(2-フェニルプロパン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
d) 3-(3,5-ジクロロフェニル)-6-(2-(チオフェン-2-イル)プロパン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール
e) 3-(3,5-ジクロロフェニル)-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
f) 6-(2-シクロヘキシルプロパン-2-イル)-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール;
g) 6-(2-フェニルプロパン-2-イル)-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール;
h) 2-(2-メチルオクタン-2-イル)-5-m-トリルピリミジン-4,6-ジオール;
i) 3-ヘキシル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
j) 6-(2-メチルオクタン-2-イル)-3-フェニルピリジン-2,4-ジオール;
k) 3-シクロヘキシル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
l) 6'-(2-メチルオクタン-2-イル)-2,3'-ビピリジン-2',4'-ジオール;
m) 3-(3-メトキシフェニル)-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;及び
n) 3-ベンジル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール
から選択される、
請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
カンナビノイド受容体によって仲介される疾患の治療方法であって、
前記受容体と前記カンナビノイド受容体／仲介疾患を治療できる量の化合物とを接触させることを備え、
前記化合物は、下記式で表され、
【化３】
上記式において、
W及びVのうちの１つはNであり、他方はCであり；
Ｘは、Ｈ, 置換された及び置換されていないアルキル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル, アリル, アリルアルキル, ヘテロアリル, ヘテロアリルアルキル, ヘテロシクロアルキル, ヘテロシクロアルキルアルキルから選択され, それぞれのアルキル部分は、３回以下で任意に置換され、それぞれの環部分は、１、２、３、４又は５個の置換基で任意に 置換され;
Ｙは、S、O、CH2、CH(CH3)、CH(OH)、C(CH3)(OH)、C(CH3)2、C(-Ｕ(CH２)ｎＵ-)、C(O)、NH、S(O)、及びS(O)2から選択され；
ｎは、１以上の整数であってもよく；
Ｕは、CH2、S及びOから選択され；
Ｚは、Ｈ、置換された及び置換されていないアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリル、アリルアルキル、ヘテロアリル、ヘテロアリルアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択され、それぞれのアルキル部分は、任意に３回以下で置換され、それぞれの環部分は、任意に１、２、３、４、又は５個の置換基で置換され；
Ｒ１及びＲ２は、Ｈ並びに置換された及び置換されていないアルキルから独立して選択される、
方法。
【請求項１５】
カンナビノイド受容体は、CB-1及びＣＢ−２から選択される、
請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記疾患は、ヒト肺がん、前立腺がん、結腸直腸がん、膵がん、CNSがん、脳腫瘍、及びヒト緑内障から選択される、
請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
Ｘは、アルキル、フェニル, ベンジル, チオフェニル及びピリジニルから選択され,それぞれの環部分は、ハロ, アルキル及びアルコキシから独立して選択される１〜５個の基で任意に置換され;
Ｙは、カルボニル, ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレンから選択され;
Ｚは、アルキル, シクロアルキル, 置換されたシクロアルキル, フェニル, 置換され フェニル, チオフェニル及び置換されたチオフェニルから選択される、
請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
Ｘは、アルキル, ベンジル又はフェニルであり、環部分は、クロロ, メチル及びメトキシから独立して選択される１、２又は３個の基で任意に置換される、
請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
Ｘは、ヘキシル, ベンジル, 3- メトキシフェニル, 3-メチルフェニル 又は3,5-ジクロロフェニルである、
請求項17に記載の方法。
【請求項２０】
Ｙはジメチルメチレンである、
請求項１７に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｚは、アルキル, フェニル又はシクロアルキルである、
請求項１７に記載の化合物。
【請求項２２】
前記化合物は、
a) 6-(2-(チオフェン-2-イル)プロパン-2-イル)-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール;
b) 6-(2-シクロヘキシルプロパン-2-イル)-3-(3,5-ジクロロフェニル)ピリジン-2,4-ジオール;
c) 3-(3,5-ジクロロフェニル)-6-(2-フェニルプロパン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
d) 3-(3,5-ジクロロフェニル)-6-(2-(チオフェン-2-イル)プロパン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール；
e) 3-(3,5-ジクロロフェニル)-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
f) 6-(2-シクロヘキシルプロパン-2-イル)-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール;
g) 6-(2-フェニルプロパン-2-イル)-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール;
h) 2-(2-メチルオクタン-2-イル)-5-m-トリルピリミジン-4,6-ジオール;
i) 3-ヘキシル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
j) 6-(2-メチルオクタン-2-イル)-3-フェニルピリジン-2,4-ジオール;
k) 3-シクロヘキシル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
l) 6'-(2-メチルオクタン-2-イル)-2,3'-biピリジン-2',4'-ジオール;
m) 3-(3-メトキシフェニル)-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;及び
n) 3-ベンジル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール
から選択される、
請求項１４に記載の方法。
【請求項１】
下記式で表され、
【化１】
上記式において、
Ｗ及びＶのうちの１方はNであり、他方はCであり；
Ｘは、Ｈ、置換された及び置換されていないアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリル、アリルアルキル、ヘテロアリル、ヘテロアリルアルキル、ヘテロシクロアルキル,及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択され、それぞれのアルキル部分は、３回以下で任意に置換され、それぞれの環部分は、任意に、１、２、３、４、又は５個の置換基で置換され；
Ｙは、Ｓ，Ｏ，ＣＨ２,ＣＨ(ＣＨ３),ＣＨ(ＯＨ)，Ｃ(ＣＨ３)(ＯＨ)，Ｃ(ＣＨ３)２，Ｃ（-Ｕ（ＣＨ２）ｎＵ-），Ｃ（Ｏ），ＮＨ，Ｓ（Ｏ）,及びＳ（Ｏ）２から選択され；
ｎは１以上の整数であり;
Ｕは、ＣＨ２，Ｓ，及びＯから選択され；
Ｚは、Ｈ,置換された及び置換されていないアルキル, シクロアルキル,シクロアルキルアルキル, アリル, アリルアルキル, ヘテロアリル, ヘテロアリルアルキル, ヘテロシクロアルキル, 及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択され、それぞれのアルキル部分は、３回以下で任意に置換され、それぞれの環部分は、１、２、３、４又は５個の置換基で任意に置換され；
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ並びに置換された及び置換されていないアルキルから選択される、
化合物。
【請求項２】
Ｘは、アルキル、シクロアルキル, フェニル, ベンジル, チオフェニル及びピリジニルから選択され、それぞれの環部分は、ハロ, アルキル及びアルコキシから独立して選択される１〜５個の基で任意に置換され；
Ｒ１及びＲ２は、独立してＨ及びアルキルから選択され；
Ｙは、カルボニル, ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレンから選択され；
Ｚは、アルキル, シクロアルキル, 置換されたシクロアルキル, フェニル, 置換されたフェニル, チオフェニル及び置換されたチオフェニルから選択される、
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘは、アルキル、ベンジル又はフェニルであり、環部分は、クロロ、メチル及びメトキシから独立して選択される１、２、又は３個の基で任意に置換される、
請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘは、ヘキシル, ベンジル, 3-メトキシフェニル, 3-メチルフェニル又は3,5-ジクロロフェニルである、
請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｙはジメチルメチレンである、
請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｚは、アルキル、フェニル又はシクロアルキルである、
請求項２に記載の化合物。
【請求項７】
下記式で表される請求項１に記載の化合物。
【化２】
【請求項８】
Ｘは、アルキル、フェニル、ベンジル、チオフェニル、及びピリジニルから選択され、それぞれの環部分は、ハロ、アルキル及びアルコキシから独立して選択される１〜５個の基で任意に置換され；
Ｙは、カルボニル、ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレンから選択され；
Ｚは、アルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、フェニル、置換されたフェニル、チオフェニル及び置換されたチオフェニルから選択される、
請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｘは、アルキル、ベンジル又はフェニルであり、環部分は、クロロ、メチル及びメトキシから独立して選択される１、２、又は３個の基で任意に置換される、
請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｘは、ヘキシル, ベンジル, 3-メトキシフェニル, 3-メチルフェニル又は3,5-ジクロロフェニルである
請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｙは、ジメチルメチレンである、
請求項８に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｚは、アルキル、フェニル又はシクロアルキルである、
請求項８に記載の化合物。
【請求項１３】
a） 6-(2-(チオフェン-2-イル)プロパン-2-イル)-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール;
b) 6-(2-シクロヘキシルプロパン-2-イル)-3-(3,5-ジクロロフェニル)ピリジン-2,4-ジオール;
c) 3-(3,5-ジクロロフェニル)-6-(2-フェニルプロパン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
d) 3-(3,5-ジクロロフェニル)-6-(2-(チオフェン-2-イル)プロパン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール
e) 3-(3,5-ジクロロフェニル)-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
f) 6-(2-シクロヘキシルプロパン-2-イル)-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール;
g) 6-(2-フェニルプロパン-2-イル)-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール;
h) 2-(2-メチルオクタン-2-イル)-5-m-トリルピリミジン-4,6-ジオール;
i) 3-ヘキシル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
j) 6-(2-メチルオクタン-2-イル)-3-フェニルピリジン-2,4-ジオール;
k) 3-シクロヘキシル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
l) 6'-(2-メチルオクタン-2-イル)-2,3'-ビピリジン-2',4'-ジオール;
m) 3-(3-メトキシフェニル)-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;及び
n) 3-ベンジル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール
から選択される、
請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
カンナビノイド受容体によって仲介される疾患の治療方法であって、
前記受容体と前記カンナビノイド受容体／仲介疾患を治療できる量の化合物とを接触させることを備え、
前記化合物は、下記式で表され、
【化３】
上記式において、
W及びVのうちの１つはNであり、他方はCであり；
Ｘは、Ｈ, 置換された及び置換されていないアルキル, シクロアルキル, シクロアルキルアルキル, アリル, アリルアルキル, ヘテロアリル, ヘテロアリルアルキル, ヘテロシクロアルキル, ヘテロシクロアルキルアルキルから選択され, それぞれのアルキル部分は、３回以下で任意に置換され、それぞれの環部分は、１、２、３、４又は５個の置換基で任意に 置換され;
Ｙは、S、O、CH2、CH(CH3)、CH(OH)、C(CH3)(OH)、C(CH3)2、C(-Ｕ(CH２)ｎＵ-)、C(O)、NH、S(O)、及びS(O)2から選択され；
ｎは、１以上の整数であってもよく；
Ｕは、CH2、S及びOから選択され；
Ｚは、Ｈ、置換された及び置換されていないアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリル、アリルアルキル、ヘテロアリル、ヘテロアリルアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択され、それぞれのアルキル部分は、任意に３回以下で置換され、それぞれの環部分は、任意に１、２、３、４、又は５個の置換基で置換され；
Ｒ１及びＲ２は、Ｈ並びに置換された及び置換されていないアルキルから独立して選択される、
方法。
【請求項１５】
カンナビノイド受容体は、CB-1及びＣＢ−２から選択される、
請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記疾患は、ヒト肺がん、前立腺がん、結腸直腸がん、膵がん、CNSがん、脳腫瘍、及びヒト緑内障から選択される、
請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
Ｘは、アルキル、フェニル, ベンジル, チオフェニル及びピリジニルから選択され,それぞれの環部分は、ハロ, アルキル及びアルコキシから独立して選択される１〜５個の基で任意に置換され;
Ｙは、カルボニル, ジメチルメチレン及びヒドロキシメチレンから選択され;
Ｚは、アルキル, シクロアルキル, 置換されたシクロアルキル, フェニル, 置換され フェニル, チオフェニル及び置換されたチオフェニルから選択される、
請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
Ｘは、アルキル, ベンジル又はフェニルであり、環部分は、クロロ, メチル及びメトキシから独立して選択される１、２又は３個の基で任意に置換される、
請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
Ｘは、ヘキシル, ベンジル, 3- メトキシフェニル, 3-メチルフェニル 又は3,5-ジクロロフェニルである、
請求項17に記載の方法。
【請求項２０】
Ｙはジメチルメチレンである、
請求項１７に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｚは、アルキル, フェニル又はシクロアルキルである、
請求項１７に記載の化合物。
【請求項２２】
前記化合物は、
a) 6-(2-(チオフェン-2-イル)プロパン-2-イル)-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール;
b) 6-(2-シクロヘキシルプロパン-2-イル)-3-(3,5-ジクロロフェニル)ピリジン-2,4-ジオール;
c) 3-(3,5-ジクロロフェニル)-6-(2-フェニルプロパン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
d) 3-(3,5-ジクロロフェニル)-6-(2-(チオフェン-2-イル)プロパン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール；
e) 3-(3,5-ジクロロフェニル)-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
f) 6-(2-シクロヘキシルプロパン-2-イル)-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール;
g) 6-(2-フェニルプロパン-2-イル)-3-m-トリルピリジン-2,4-ジオール;
h) 2-(2-メチルオクタン-2-イル)-5-m-トリルピリミジン-4,6-ジオール;
i) 3-ヘキシル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
j) 6-(2-メチルオクタン-2-イル)-3-フェニルピリジン-2,4-ジオール;
k) 3-シクロヘキシル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;
l) 6'-(2-メチルオクタン-2-イル)-2,3'-biピリジン-2',4'-ジオール;
m) 3-(3-メトキシフェニル)-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール;及び
n) 3-ベンジル-6-(2-メチルオクタン-2-イル)ピリジン-2,4-ジオール
から選択される、
請求項１４に記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【公表番号】特表２０１１−５２０９７３（Ｐ２０１１−５２０９７３Ａ）
【公表日】平成２３年７月２１日（２０１１．７．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５１０６５８（Ｐ２０１１−５１０６５８）
【出願日】平成２１年５月１９日（２００９．５．１９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０４４５５８
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１４３１８０
【国際公開日】平成２１年１１月２６日（２００９．１１．２６）
【出願人】（５１０３０６９８２）ユニヴァーシティ オブ テネシー リサーチ ファウンデーション，ザ (4)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年７月２１日（２０１１．７．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年５月１９日（２００９．５．１９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０４４５５８
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１４３１８０
【国際公開日】平成２１年１１月２６日（２００９．１１．２６）
【出願人】（５１０３０６９８２）ユニヴァーシティ オブ テネシー リサーチ ファウンデーション，ザ (4)
【Ｆターム（参考）】
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