プロテアーゼ変異体を含む組成物及び方法
本発明は、プロテアーゼ変異体、プロテアーゼ変異体を含む組成物、並びに、このようなプロテアーゼ変異体及び組成物を使用する方法を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
親プロテアーゼの単離されたプロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｌ／Ｑからなる群から選択される３つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含み、ここで、前記変異体はタンパク質分解活性を有し、前記変異体の各アミノ酸位置は、配列番号２のアミノ酸配列と前記変異体のアミノ酸配列とのアラインメントによって決定される、配列番号２のアミノ酸配列におけるアミノ酸位置に対応させることにより番号付けされる、変異体。
【請求項２】
前記変異体のアミノ酸配列が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｌ／Ｑからなる群から選択される４つのアミノ酸置換を含む、請求項１に記載の変異体。
【請求項３】
前記変異体のアミノ酸配列が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｌ／Ｑからなる群から選択される５つのアミノ酸置換を含む、請求項１に記載の変異体。
【請求項４】
前記変異体のアミノ酸配列が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｌ／Ｑからなる群から選択される６つのアミノ酸置換を含む、請求項１に記載の変異体。
【請求項５】
前記変異体のアミノ酸配列がアミノ酸置換Ｘ０９７Ａを更に含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項６】
前記変異体のアミノ酸配列がアミノ酸置換Ｘ０２４Ｇ／Ｒ＋Ｘ０５３Ｇ＋Ｘ０７８Ｎ＋Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ／Ｓ＋Ｘ２１７Ｌ／Ｑ又はＸ０９７Ａ＋Ｘ１２８Ａ／Ｓ＋Ｘ２１７Ｌ／Ｑを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項７】
前記変異体のアミノ酸配列がアミノ酸置換Ｓ０２４Ｇ／Ｒ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ／Ｓ＋Ｙ２１７Ｌ／Ｑ又はＧ０９７Ａ＋Ｇ１２８Ａ／Ｓ＋Ｙ２１７Ｌ／Ｑを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項８】
前記変異体のアミノ酸配列がアミノ酸置換Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ又はＳ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ、を含み、選択的に、Ｎ１０９Ｇ、Ｎ０７６Ｄ、Ｓ０３３Ｔ、Ｎ２４３Ｖ、Ｓ２４８Ａ、Ａ０８８Ｔ、及びＳ０６３Ｇからなる群から選択される置換を更に含む、請求項７に記載の変異体。
【請求項９】
前記変異体のアミノ酸配列が、以下のもの：
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｇ１３１Ｈ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ、
Ｓ００９Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ１４１Ｒ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｓ１６２Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｓ１６２Ｇ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｎ０６１Ｇ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ａ、
Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２１８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ｎ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｇ１３１Ｈ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｔ１５８Ｓ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｎ０６１Ｓ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｐ０４０Ａ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ｎ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｓ００９Ｔ＋Ｓ０１８Ｔ＋Ｙ０２１Ｎ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ１４１Ｒ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｎ２１８Ｓ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ｎ１０９Ｇ、
Ｓ０６３Ｇ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ｎ０７６Ｄ、
Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ２１８Ｓ、及び
Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ２１８Ｓからなる群から選択される１組のアミノ酸置換を更に含む、請求項７に記載の変異体。
【請求項１０】
前記変異体のアミノ酸配列がアミノ酸置換Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑを含み、以下のもの：
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｇ１３１Ｈ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ、
Ｓ００９Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｋ１４１Ｒ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｓ１６２Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｓ１６２Ｇ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｎ０６１Ｇ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ａ、
Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｎ２１８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ｎ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｇ１３１Ｈ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｔ１５８Ｓ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｎ０６１Ｓ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｐ０４０Ａ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ｎ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｓ００９Ｔ＋Ｓ０１８Ｔ＋Ｙ０２１Ｎ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｋ１４１Ｒ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｎ２１８Ｓ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ｎ１０９Ｇ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ａ１２８Ｓ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ｎ０７６Ｄ、
Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｎ２１８Ｓ、及び
Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ２１８Ｓからなる群から選択される１組のアミノ酸置換を更に含む、請求項７に記載の変異体。
【請求項１１】
前記変異体のアミノ酸配列が、配列番号２又は配列番号６のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項１２】
前記変異体のアミノ酸配列が、配列番号２又は配列番号６のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％の配列同一性を有する、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項１３】
前記変異体が、前記親プロテアーゼと比較して向上したタンパク質分解活性及び／又はクリーニング活性を有するか、あるいは、配列番号２の配列を有するＢＰＮ’プロテアーゼのタンパク質分解活性と比較して向上したタンパク質分解活性及び／又はクリーニング活性を有する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項１４】
前記変異体が、配列番号４の配列を有するプロテアーゼのタンパク質分解活性と比較して向上したタンパク質分解活性を有する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項１５】
前記変異体が、配列番号６の配列を有するプロテアーゼのタンパク質分解活性と比較して向上したタンパク質分解活性を有する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項１６】
前記親プロテアーゼがスブチリシンプロテアーゼである、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項１７】
前記親プロテアーゼが、配列番号２のアミノ酸配列を有するバチルス・アミロリケファシエンス（B. amyloliquefaciens）スブチリシンプロテアーゼＢＰＮ’に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項１６に記載の変異体。
【請求項１８】
前記親プロテアーゼが、配列番号２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％の配列同一性を有する、請求項１６に記載の変異体。
【請求項１９】
前記変異体が配列番号６のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の変異体。
【請求項２０】
親プロテアーゼの単離されたプロテアーゼ変異体であって、前記プロテアーゼ変異体はタンパク質分解活性を有し、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される配列番号２のアミノ酸位置に対応する１つ以上のアミノ酸位置にて変異を含むアミノ酸配列を含み、ここで、前記変異の少なくとも１つは独立して、
（ｉ）前記位置を占めるアミノ酸残基の上流又は下流における１つ以上のアミノ酸残基の挿入、
（ｉｉ）前記位置を占めるアミノ酸残基の欠失、又は
（ｉｉｉ）異なるアミノ酸残基による、前記位置を占めるアミノ酸残基の置換、
であり、ここで、各アミノ酸位置は、配列番号２のアミノ酸配列と変異体のアミノ酸配列とのアラインメントによって決定される配列番号２に記載のバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）スブチリシンプロテアーゼＢＰＮ’のアミノ酸配列におけるアミノ酸位置に対応させることにより番号付けされる、変異体。
【請求項２１】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される２つのアミノ酸位置における変異を含むアミノ酸配列を含む、請求項２０に記載の変異体。
【請求項２２】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される３つのアミノ酸位置における変異を含むアミノ酸配列を含む、請求項２１に記載の変異体。
【請求項２３】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される４つのアミノ酸位置における変異を含むアミノ酸配列を含む、請求項２２に記載の変異体。
【請求項２４】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される５つのアミノ酸位置における変異を含むアミノ酸配列を含む、請求項２３に記載の変異体。
【請求項２５】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される６つのアミノ酸位置における変異を含むアミノ酸配列を含む、請求項２４に記載の変異体。
【請求項２６】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される配列番号２の位置に対応するアミノ酸位置のそれぞれにおける変異を含むアミノ酸配列を含む、請求項２５に記載の変異体。
【請求項２７】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される位置における異なるアミノ酸残基によるアミノ酸残基の置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項２０〜２６のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項２８】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される２つの位置のそれぞれにおける異なるアミノ酸残基によるアミノ酸残基の置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項２７に記載の変異体。
【請求項２９】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される４つの位置のそれぞれにおける異なるアミノ酸残基によるアミノ酸残基の置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項２８に記載の変異体。
【請求項３０】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される５つの位置のそれぞれにおける異なるアミノ酸残基によるアミノ酸残基の置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項２９に記載の変異体。
【請求項３１】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される６つの位置のそれぞれにおける異なるアミノ酸残基によるアミノ酸残基の置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項３０に記載の変異体。
【請求項３２】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、１０１、１２８及び２１７のそれぞれにおける異なるアミノ酸残基によるアミノ酸残基の置換を含むアミノ酸配列を含み、ここで、各位置が配列番号２における位置と対応させることにより番号付けされる、請求項３１に記載の変異体。
【請求項３３】
前記変異体が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ０９７Ａ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｑ／Ｌからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項２０〜３２のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項３４】
前記変異体が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ０９７Ａ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｑ／Ｌからなる群から選択される少なくとも２つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の変異体。
【請求項３５】
前記変異体が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ０９７Ａ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｑ／Ｌからなる群から選択される少なくとも３つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項３４に記載の変異体。
【請求項３６】
前記変異体が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ０９７Ａ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｑ／Ｌからなる群から選択される少なくとも４つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項３５に記載の変異体。
【請求項３７】
前記変異体が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ０９７Ａ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｑ／Ｌからなる群から選択される少なくとも５つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項３６に記載の変異体。
【請求項３８】
前記変異体が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ０９７Ａ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｑ／Ｌからなる群から選択される少なくとも６つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項３７に記載の変異体。
【請求項３９】
前記変異体が、（ａ）Ｘ１２８Ａ／Ｓ及び／又はＸ２１７Ｌ／Ｑ、（ｂ）Ｇ１２８Ａ／Ｓ及び／又はＹ２１７Ｌ／Ｑ、並びに、（ｃ）Ｇ０９７Ａ、Ｇ１２８Ａ／Ｓ及び／又はＹ２１７Ｌ／Ｑからなる群から選択される置換の組を含むアミノ酸配列を含む、請求項２０〜３８のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４０】
前記変異体が、アミノ酸置換Ｘ０２４Ｇ／Ｒ＋Ｘ０５３Ｇ＋Ｘ０７８Ｎ＋Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ／Ｓ＋Ｘ２１７Ｑ／Ｌを含むアミノ酸配列を含む、請求項２０〜３９のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４１】
前記変異体が、配列番号２のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項２０〜４０のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４２】
前記変異体が、配列番号２に対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項４１に記載の変異体。
【請求項４３】
前記変異体のアミノ酸配列がＳ０２４Ｇ、Ｓ０５３Ｇ、Ｓ０７８Ｎ、Ｓ１０１Ｎ、Ｇ１２８Ａ／Ｓ及びＹ２１７Ｑの群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換を含む、請求項２０〜４２のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４４】
前記変異体のアミノ酸配列がアミノ酸置換Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑを含む、請求項２０〜４３のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４５】
前記変異体が、前記親プロテアーゼと比較して向上したタンパク質分解活性及び／又はクリーニング活性を有するか、あるいは、配列番号２に記載のプロテアーゼのタンパク質分解活性と比較して向上したタンパク質分解活性及び／又はクリーニング活性を有する、請求項２０〜４４のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４６】
前記変異体が、配列番号４に記載のプロテアーゼのタンパク質分解活性と比較して向上したタンパク質分解活性を有する、請求項２０〜４４のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４７】
前記変異体が、配列番号６に記載のプロテアーゼのタンパク質分解活性と比較して向上したタンパク質分解活性を有する、請求項２０〜４４のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４８】
前記親プロテアーゼがスブチリシンプロテアーゼである、請求項２０〜４７のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４９】
前記親プロテアーゼが、配列番号２のアミノ酸配列を有するバチルス・アミロリケファシエンス（B. amyloliquefaciens）スブチリシンプロテアーゼＢＰＮ’に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項４８に記載の変異体。
【請求項５０】
前記親プロテアーゼが、配列番号２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％の配列同一性を有する、請求項４９に記載の変異体。
【請求項５１】
親プロテアーゼの単離されたプロテアーゼ変異体であって、（ａ）前記プロテアーゼ変異体は、（ｉ）配列番号２の配列に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列であって、（ｉｉ）位置２４及び５３におけるグリシンの置換、位置７８及び１０１におけるアスパラギンの置換、位置１２８におけるアラニン又はセリンの置換、及び位置２１７におけるグルタミンの置換を含む、アミノ酸配列を含み、（ｂ）前記親プロテアーゼは、配列番号２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有し、（ｃ）前記変異体の各アミノ酸位置は、配列番号２の配列のアミノ酸位置に対応させることにより番号付けされ、並びに（ｄ）前記変異体は、親プロテアーゼと比較してタンパク質分解活性及び／又はクリーニング活性が増大している、変異体。
【請求項５２】
前記変異体が成熟型である、請求項１〜５１のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項５３】
タンパク質分解活性を有する単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドは、
ａ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｇ１３１Ｈ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｌ２５７Ｇ、
ｂ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ、
ｃ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ００９Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ１４１Ｒ＋Ｎ２４３Ｖ、
ｄ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ１６２Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｅ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ、
ｆ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｌ２５７Ｇ、
ｇ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ１６２Ｇ＋Ｌ２５７Ｇ、
ｈ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ０６１Ｇ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
ｉ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ａ、
ｊ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２１８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ｎ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｋ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｌ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｇ１３１Ｈ＋Ｎ２４３Ｖ、
ｍ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ、
ｎ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
ｏ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｌ２５７Ｇ、
ｐ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ０６１Ｓ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
ｑ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｐ０４０Ａ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ｎ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｒ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ００９Ｔ＋Ｓ０１８Ｔ＋Ｙ０２１Ｎ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ１４１Ｒ、
ｓ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｔ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｎ２１８Ｓ＋Ｌ２５７Ｇ、
ｕ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｖ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｗ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０６３Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｘ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０６３Ｇ＋Ｎ１０９Ｇ、
ｙ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０６３Ｇ、
ｚ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０６３Ｇ＋Ｎ０７６Ｄ、
ａａ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ２１８Ｓ、
ｂｂ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ２１８Ｓ及び
ｃｃ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ、からなる群から選択されるポリペプチド配列に対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ここで、前記変異体の各アミノ酸位置は、配列番号２の配列のアミノ酸位置に対応させることにより番号付けされる、変異体。
【請求項５４】
請求項１〜５２のいずれか一項に記載の変異体又は請求項５３に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列あるいはその相補的ポリヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
【請求項５５】
配列番号３若しくは配列番号５に記載のポリヌクレオチド配列又はその相補的ポリヌクレオチド配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するポリヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
【請求項５６】
請求項５４又は５５に記載の少なくとも１つの核酸を含む発現ベクター。
【請求項５７】
前記少なくとも１つの核酸がプロモーターに作用可能に連結されている、請求項５６に記載の発現ベクター。
【請求項５８】
（ａ）請求項６４又は６５に記載の核酸、あるいは、（ｂ）請求項５６又は５７に記載の発現ベクター、を含む、組み換え宿主細胞。
【請求項５９】
前記宿主細胞が細菌細胞である、請求項５８に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項６０】
前記宿主細胞がバチルス細胞である、請求項５９に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項６１】
前記宿主細胞が枯草菌（Bacillus subtilis）細胞である、請求項７０に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項６２】
（ａ）請求項５４又は５５に記載の核酸、あるいは、（ｂ）請求項５６又は５７に記載の発現ベクター、を含む、細胞培養物。
【請求項６３】
プロテアーゼ変異体の製造方法であって、前記方法が、前記変異体の生産を促進する条件下で請求項５８〜６１のいずれか一項に記載の組み換え宿主細胞を培養することを含む、方法。
【請求項６４】
前記細胞培養物から前記変異体を回収することを更に含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
プロテアーゼ変異体の製造方法であって、前記方法が、
（ａ）請求項５６又は５７に記載の組み換え発現ベクターを細胞集団に導入することと、
（ｂ）前記発現ベクターによりコードされるプロテアーゼ変異体の生産を促進する条件下で培地内で前記細胞を培養することと、を含む、方法。
【請求項６６】
（ｃ）前記細胞から又は前記培地から前記変異体を単離又は回収することを更に含む、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
組成物が布地ケア製品及びホームケア製品ではない、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の変異体又は請求項５３に記載のポリペプチドを含む組成物。
【請求項６８】
少なくとも１つの添加剤成分又は担体を含む、請求項６７に記載の組成物。
【請求項６９】
前記組成物が追加の酵素を含む、請求項６７又は６８に記載の組成物。
【請求項７０】
前記追加の酵素が、ヘミセルラーゼ、セルラーゼ、アミラーゼ、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、ペクタートリアーゼ、マンナナーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、β−グルカナーゼ、アラビノシターゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ及びラッカーゼからなる群から選択される、請求項６９に記載の組成物。
【請求項７１】
前記組成物が、コンタクトレンズをクリーニングするための洗剤組成物である、請求項６７〜７０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７２】
前記組成物が、パーソナルケア用途において有用であるクリーニング組成物である、請求項６７〜７０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７３】
少なくとも１つのビルダー及び／又は少なくとも１つの界面活性剤を更に含む、請求項６７〜７２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７４】
クリーニングの必要のある物品又は表面をクリーニングするための方法であって、前記方法が、前記物品又は表面を、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の変異体、請求項５３に記載のポリペプチド又は請求項６７〜７３のいずれか一項に記載の組成物と接触させることを含む、方法。
【請求項７５】
前記物品又は表面を水ですすぐことを更に含む、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
表面又は物品をクリーニングするための方法であって、前記物品又は表面を所望の程度までクリーニング又は洗浄するのに、充分な時間にわたって並びに／又は充分な若しくは有効な条件下で、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の変異体、請求項５３に記載のポリペプチド又は請求項６７〜７３のいずれか一項に記載の組成物と、洗浄すべき前記物品又は表面の少なくとも一部分を接触させることを含む、方法。
【請求項７７】
表面若しくは布地の処理及び／又はクリーニング方法であって、選択的に前記表面若しくは布地を洗浄する及び／又はすすぐ工程、前記表面若しくは布地を請求項１〜５２のいずれか一項に記載の変異体、請求項５２に記載のポリペプチド又は請求項６７〜７３のいずれか一項に記載の組成物と接触させる工程、次いで、選択的に前記表面若しくは布地を洗浄する及び／又はすすぐ工程を含む、方法。
【請求項７８】
請求項１〜５２のいずれか一項に記載の変異体であって、前記親プロテアーゼがスブチリシンプロテアーゼであり、前記変異体が、前記親スブチリシンプロテアーゼと比較したときに洗剤において向上した洗浄性能又は向上したクリーニング性能を有するスブチリシンプロテアーゼ変異体、又は、
請求項５３に記載のポリペプチドであって、配列番号２、配列番号４又は配列番号６のプロテアーゼと比較したときに洗剤において向上した洗浄性能又は向上したクリーニング性能を有するポリペプチド。
【請求項１】
親プロテアーゼの単離されたプロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｌ／Ｑからなる群から選択される３つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含み、ここで、前記変異体はタンパク質分解活性を有し、前記変異体の各アミノ酸位置は、配列番号２のアミノ酸配列と前記変異体のアミノ酸配列とのアラインメントによって決定される、配列番号２のアミノ酸配列におけるアミノ酸位置に対応させることにより番号付けされる、変異体。
【請求項２】
前記変異体のアミノ酸配列が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｌ／Ｑからなる群から選択される４つのアミノ酸置換を含む、請求項１に記載の変異体。
【請求項３】
前記変異体のアミノ酸配列が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｌ／Ｑからなる群から選択される５つのアミノ酸置換を含む、請求項１に記載の変異体。
【請求項４】
前記変異体のアミノ酸配列が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｌ／Ｑからなる群から選択される６つのアミノ酸置換を含む、請求項１に記載の変異体。
【請求項５】
前記変異体のアミノ酸配列がアミノ酸置換Ｘ０９７Ａを更に含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項６】
前記変異体のアミノ酸配列がアミノ酸置換Ｘ０２４Ｇ／Ｒ＋Ｘ０５３Ｇ＋Ｘ０７８Ｎ＋Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ／Ｓ＋Ｘ２１７Ｌ／Ｑ又はＸ０９７Ａ＋Ｘ１２８Ａ／Ｓ＋Ｘ２１７Ｌ／Ｑを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項７】
前記変異体のアミノ酸配列がアミノ酸置換Ｓ０２４Ｇ／Ｒ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ／Ｓ＋Ｙ２１７Ｌ／Ｑ又はＧ０９７Ａ＋Ｇ１２８Ａ／Ｓ＋Ｙ２１７Ｌ／Ｑを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項８】
前記変異体のアミノ酸配列がアミノ酸置換Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ又はＳ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ、を含み、選択的に、Ｎ１０９Ｇ、Ｎ０７６Ｄ、Ｓ０３３Ｔ、Ｎ２４３Ｖ、Ｓ２４８Ａ、Ａ０８８Ｔ、及びＳ０６３Ｇからなる群から選択される置換を更に含む、請求項７に記載の変異体。
【請求項９】
前記変異体のアミノ酸配列が、以下のもの：
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｇ１３１Ｈ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ、
Ｓ００９Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ１４１Ｒ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｓ１６２Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｓ１６２Ｇ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｎ０６１Ｇ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ａ、
Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２１８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ｎ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｇ１３１Ｈ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｔ１５８Ｓ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｎ０６１Ｓ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｐ０４０Ａ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ｎ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｓ００９Ｔ＋Ｓ０１８Ｔ＋Ｙ０２１Ｎ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ１４１Ｒ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｎ２１８Ｓ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ｎ１０９Ｇ、
Ｓ０６３Ｇ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ｎ０７６Ｄ、
Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ２１８Ｓ、及び
Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ２１８Ｓからなる群から選択される１組のアミノ酸置換を更に含む、請求項７に記載の変異体。
【請求項１０】
前記変異体のアミノ酸配列がアミノ酸置換Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑを含み、以下のもの：
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｇ１３１Ｈ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ、
Ｓ００９Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｋ１４１Ｒ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｓ１６２Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｓ１６２Ｇ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｎ０６１Ｇ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ａ、
Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｎ２１８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ｎ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｇ１３１Ｈ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｔ１５８Ｓ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｎ０６１Ｓ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
Ｐ０４０Ａ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ｎ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｓ００９Ｔ＋Ｓ０１８Ｔ＋Ｙ０２１Ｎ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｋ１４１Ｒ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｎ２１８Ｓ＋Ｌ２５７Ｇ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ｎ１０９Ｇ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ａ１２８Ｓ、
Ｓ０６３Ｇ＋Ｎ０７６Ｄ、
Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ａ１２８Ｓ＋Ｎ２１８Ｓ、及び
Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ２１８Ｓからなる群から選択される１組のアミノ酸置換を更に含む、請求項７に記載の変異体。
【請求項１１】
前記変異体のアミノ酸配列が、配列番号２又は配列番号６のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項１２】
前記変異体のアミノ酸配列が、配列番号２又は配列番号６のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％の配列同一性を有する、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項１３】
前記変異体が、前記親プロテアーゼと比較して向上したタンパク質分解活性及び／又はクリーニング活性を有するか、あるいは、配列番号２の配列を有するＢＰＮ’プロテアーゼのタンパク質分解活性と比較して向上したタンパク質分解活性及び／又はクリーニング活性を有する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項１４】
前記変異体が、配列番号４の配列を有するプロテアーゼのタンパク質分解活性と比較して向上したタンパク質分解活性を有する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項１５】
前記変異体が、配列番号６の配列を有するプロテアーゼのタンパク質分解活性と比較して向上したタンパク質分解活性を有する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項１６】
前記親プロテアーゼがスブチリシンプロテアーゼである、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項１７】
前記親プロテアーゼが、配列番号２のアミノ酸配列を有するバチルス・アミロリケファシエンス（B. amyloliquefaciens）スブチリシンプロテアーゼＢＰＮ’に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項１６に記載の変異体。
【請求項１８】
前記親プロテアーゼが、配列番号２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％の配列同一性を有する、請求項１６に記載の変異体。
【請求項１９】
前記変異体が配列番号６のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の変異体。
【請求項２０】
親プロテアーゼの単離されたプロテアーゼ変異体であって、前記プロテアーゼ変異体はタンパク質分解活性を有し、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される配列番号２のアミノ酸位置に対応する１つ以上のアミノ酸位置にて変異を含むアミノ酸配列を含み、ここで、前記変異の少なくとも１つは独立して、
（ｉ）前記位置を占めるアミノ酸残基の上流又は下流における１つ以上のアミノ酸残基の挿入、
（ｉｉ）前記位置を占めるアミノ酸残基の欠失、又は
（ｉｉｉ）異なるアミノ酸残基による、前記位置を占めるアミノ酸残基の置換、
であり、ここで、各アミノ酸位置は、配列番号２のアミノ酸配列と変異体のアミノ酸配列とのアラインメントによって決定される配列番号２に記載のバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）スブチリシンプロテアーゼＢＰＮ’のアミノ酸配列におけるアミノ酸位置に対応させることにより番号付けされる、変異体。
【請求項２１】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される２つのアミノ酸位置における変異を含むアミノ酸配列を含む、請求項２０に記載の変異体。
【請求項２２】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される３つのアミノ酸位置における変異を含むアミノ酸配列を含む、請求項２１に記載の変異体。
【請求項２３】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される４つのアミノ酸位置における変異を含むアミノ酸配列を含む、請求項２２に記載の変異体。
【請求項２４】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される５つのアミノ酸位置における変異を含むアミノ酸配列を含む、請求項２３に記載の変異体。
【請求項２５】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される６つのアミノ酸位置における変異を含むアミノ酸配列を含む、請求項２４に記載の変異体。
【請求項２６】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される配列番号２の位置に対応するアミノ酸位置のそれぞれにおける変異を含むアミノ酸配列を含む、請求項２５に記載の変異体。
【請求項２７】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される位置における異なるアミノ酸残基によるアミノ酸残基の置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項２０〜２６のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項２８】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される２つの位置のそれぞれにおける異なるアミノ酸残基によるアミノ酸残基の置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項２７に記載の変異体。
【請求項２９】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される４つの位置のそれぞれにおける異なるアミノ酸残基によるアミノ酸残基の置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項２８に記載の変異体。
【請求項３０】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される５つの位置のそれぞれにおける異なるアミノ酸残基によるアミノ酸残基の置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項２９に記載の変異体。
【請求項３１】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、９７、１０１、１２８及び２１７からなる群から選択される６つの位置のそれぞれにおける異なるアミノ酸残基によるアミノ酸残基の置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項３０に記載の変異体。
【請求項３２】
前記変異体が、位置２４、５３、７８、１０１、１２８及び２１７のそれぞれにおける異なるアミノ酸残基によるアミノ酸残基の置換を含むアミノ酸配列を含み、ここで、各位置が配列番号２における位置と対応させることにより番号付けされる、請求項３１に記載の変異体。
【請求項３３】
前記変異体が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ０９７Ａ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｑ／Ｌからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項２０〜３２のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項３４】
前記変異体が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ０９７Ａ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｑ／Ｌからなる群から選択される少なくとも２つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の変異体。
【請求項３５】
前記変異体が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ０９７Ａ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｑ／Ｌからなる群から選択される少なくとも３つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項３４に記載の変異体。
【請求項３６】
前記変異体が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ０９７Ａ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｑ／Ｌからなる群から選択される少なくとも４つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項３５に記載の変異体。
【請求項３７】
前記変異体が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ０９７Ａ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｑ／Ｌからなる群から選択される少なくとも５つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項３６に記載の変異体。
【請求項３８】
前記変異体が、Ｘ０２４Ｇ／Ｒ、Ｘ０５３Ｇ、Ｘ０７８Ｎ、Ｘ０９７Ａ、Ｘ１０１Ｎ、Ｘ１２８Ａ／Ｓ及びＸ２１７Ｑ／Ｌからなる群から選択される少なくとも６つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項３７に記載の変異体。
【請求項３９】
前記変異体が、（ａ）Ｘ１２８Ａ／Ｓ及び／又はＸ２１７Ｌ／Ｑ、（ｂ）Ｇ１２８Ａ／Ｓ及び／又はＹ２１７Ｌ／Ｑ、並びに、（ｃ）Ｇ０９７Ａ、Ｇ１２８Ａ／Ｓ及び／又はＹ２１７Ｌ／Ｑからなる群から選択される置換の組を含むアミノ酸配列を含む、請求項２０〜３８のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４０】
前記変異体が、アミノ酸置換Ｘ０２４Ｇ／Ｒ＋Ｘ０５３Ｇ＋Ｘ０７８Ｎ＋Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ／Ｓ＋Ｘ２１７Ｑ／Ｌを含むアミノ酸配列を含む、請求項２０〜３９のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４１】
前記変異体が、配列番号２のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項２０〜４０のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４２】
前記変異体が、配列番号２に対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項４１に記載の変異体。
【請求項４３】
前記変異体のアミノ酸配列がＳ０２４Ｇ、Ｓ０５３Ｇ、Ｓ０７８Ｎ、Ｓ１０１Ｎ、Ｇ１２８Ａ／Ｓ及びＹ２１７Ｑの群から選択される少なくとも１つのアミノ酸置換を含む、請求項２０〜４２のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４４】
前記変異体のアミノ酸配列がアミノ酸置換Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑを含む、請求項２０〜４３のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４５】
前記変異体が、前記親プロテアーゼと比較して向上したタンパク質分解活性及び／又はクリーニング活性を有するか、あるいは、配列番号２に記載のプロテアーゼのタンパク質分解活性と比較して向上したタンパク質分解活性及び／又はクリーニング活性を有する、請求項２０〜４４のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４６】
前記変異体が、配列番号４に記載のプロテアーゼのタンパク質分解活性と比較して向上したタンパク質分解活性を有する、請求項２０〜４４のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４７】
前記変異体が、配列番号６に記載のプロテアーゼのタンパク質分解活性と比較して向上したタンパク質分解活性を有する、請求項２０〜４４のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４８】
前記親プロテアーゼがスブチリシンプロテアーゼである、請求項２０〜４７のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項４９】
前記親プロテアーゼが、配列番号２のアミノ酸配列を有するバチルス・アミロリケファシエンス（B. amyloliquefaciens）スブチリシンプロテアーゼＢＰＮ’に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項４８に記載の変異体。
【請求項５０】
前記親プロテアーゼが、配列番号２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％の配列同一性を有する、請求項４９に記載の変異体。
【請求項５１】
親プロテアーゼの単離されたプロテアーゼ変異体であって、（ａ）前記プロテアーゼ変異体は、（ｉ）配列番号２の配列に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列であって、（ｉｉ）位置２４及び５３におけるグリシンの置換、位置７８及び１０１におけるアスパラギンの置換、位置１２８におけるアラニン又はセリンの置換、及び位置２１７におけるグルタミンの置換を含む、アミノ酸配列を含み、（ｂ）前記親プロテアーゼは、配列番号２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有し、（ｃ）前記変異体の各アミノ酸位置は、配列番号２の配列のアミノ酸位置に対応させることにより番号付けされ、並びに（ｄ）前記変異体は、親プロテアーゼと比較してタンパク質分解活性及び／又はクリーニング活性が増大している、変異体。
【請求項５２】
前記変異体が成熟型である、請求項１〜５１のいずれか一項に記載の変異体。
【請求項５３】
タンパク質分解活性を有する単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドは、
ａ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｇ１３１Ｈ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｌ２５７Ｇ、
ｂ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ、
ｃ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ００９Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ１４１Ｒ＋Ｎ２４３Ｖ、
ｄ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ１６２Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｅ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ、
ｆ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｌ２５７Ｇ、
ｇ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ１６２Ｇ＋Ｌ２５７Ｇ、
ｈ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ０６１Ｇ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
ｉ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ａ、
ｊ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２１８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ｎ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｋ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｌ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｇ１３１Ｈ＋Ｎ２４３Ｖ、
ｍ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ、
ｎ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
ｏ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｌ２５７Ｇ、
ｐ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ０６１Ｓ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ、
ｑ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｐ０４０Ａ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｓ２４８Ｎ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｒ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ００９Ｔ＋Ｓ０１８Ｔ＋Ｙ０２１Ｎ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ１４１Ｒ、
ｓ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｔ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ａ０８８Ｔ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ａ１１６Ｔ＋Ｔ１５８Ｓ＋Ｎ２１８Ｓ＋Ｌ２５７Ｇ、
ｕ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｖ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ１０９Ｇ＋Ｎ２４３Ｖ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｗ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０６３Ｇ＋Ｋ２５６Ｒ、
ｘ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０６３Ｇ＋Ｎ１０９Ｇ、
ｙ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０６３Ｇ、
ｚ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０６３Ｇ＋Ｎ０７６Ｄ、
ａａ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ｓ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｓ０３３Ｔ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ２１８Ｓ、
ｂｂ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ＋Ｎ０７６Ｄ＋Ｎ２１８Ｓ及び
ｃｃ）ＢＰＮ’−Ｓ０２４Ｇ＋Ｓ０５３Ｇ＋Ｓ０７８Ｎ＋Ｓ１０１Ｎ＋Ｇ１２８Ａ＋Ｙ２１７Ｑ、からなる群から選択されるポリペプチド配列に対して少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ここで、前記変異体の各アミノ酸位置は、配列番号２の配列のアミノ酸位置に対応させることにより番号付けされる、変異体。
【請求項５４】
請求項１〜５２のいずれか一項に記載の変異体又は請求項５３に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列あるいはその相補的ポリヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
【請求項５５】
配列番号３若しくは配列番号５に記載のポリヌクレオチド配列又はその相補的ポリヌクレオチド配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するポリヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
【請求項５６】
請求項５４又は５５に記載の少なくとも１つの核酸を含む発現ベクター。
【請求項５７】
前記少なくとも１つの核酸がプロモーターに作用可能に連結されている、請求項５６に記載の発現ベクター。
【請求項５８】
（ａ）請求項６４又は６５に記載の核酸、あるいは、（ｂ）請求項５６又は５７に記載の発現ベクター、を含む、組み換え宿主細胞。
【請求項５９】
前記宿主細胞が細菌細胞である、請求項５８に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項６０】
前記宿主細胞がバチルス細胞である、請求項５９に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項６１】
前記宿主細胞が枯草菌（Bacillus subtilis）細胞である、請求項７０に記載の組み換え宿主細胞。
【請求項６２】
（ａ）請求項５４又は５５に記載の核酸、あるいは、（ｂ）請求項５６又は５７に記載の発現ベクター、を含む、細胞培養物。
【請求項６３】
プロテアーゼ変異体の製造方法であって、前記方法が、前記変異体の生産を促進する条件下で請求項５８〜６１のいずれか一項に記載の組み換え宿主細胞を培養することを含む、方法。
【請求項６４】
前記細胞培養物から前記変異体を回収することを更に含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
プロテアーゼ変異体の製造方法であって、前記方法が、
（ａ）請求項５６又は５７に記載の組み換え発現ベクターを細胞集団に導入することと、
（ｂ）前記発現ベクターによりコードされるプロテアーゼ変異体の生産を促進する条件下で培地内で前記細胞を培養することと、を含む、方法。
【請求項６６】
（ｃ）前記細胞から又は前記培地から前記変異体を単離又は回収することを更に含む、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
組成物が布地ケア製品及びホームケア製品ではない、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の変異体又は請求項５３に記載のポリペプチドを含む組成物。
【請求項６８】
少なくとも１つの添加剤成分又は担体を含む、請求項６７に記載の組成物。
【請求項６９】
前記組成物が追加の酵素を含む、請求項６７又は６８に記載の組成物。
【請求項７０】
前記追加の酵素が、ヘミセルラーゼ、セルラーゼ、アミラーゼ、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、ペクタートリアーゼ、マンナナーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、β−グルカナーゼ、アラビノシターゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ及びラッカーゼからなる群から選択される、請求項６９に記載の組成物。
【請求項７１】
前記組成物が、コンタクトレンズをクリーニングするための洗剤組成物である、請求項６７〜７０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７２】
前記組成物が、パーソナルケア用途において有用であるクリーニング組成物である、請求項６７〜７０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７３】
少なくとも１つのビルダー及び／又は少なくとも１つの界面活性剤を更に含む、請求項６７〜７２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７４】
クリーニングの必要のある物品又は表面をクリーニングするための方法であって、前記方法が、前記物品又は表面を、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の変異体、請求項５３に記載のポリペプチド又は請求項６７〜７３のいずれか一項に記載の組成物と接触させることを含む、方法。
【請求項７５】
前記物品又は表面を水ですすぐことを更に含む、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
表面又は物品をクリーニングするための方法であって、前記物品又は表面を所望の程度までクリーニング又は洗浄するのに、充分な時間にわたって並びに／又は充分な若しくは有効な条件下で、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の変異体、請求項５３に記載のポリペプチド又は請求項６７〜７３のいずれか一項に記載の組成物と、洗浄すべき前記物品又は表面の少なくとも一部分を接触させることを含む、方法。
【請求項７７】
表面若しくは布地の処理及び／又はクリーニング方法であって、選択的に前記表面若しくは布地を洗浄する及び／又はすすぐ工程、前記表面若しくは布地を請求項１〜５２のいずれか一項に記載の変異体、請求項５２に記載のポリペプチド又は請求項６７〜７３のいずれか一項に記載の組成物と接触させる工程、次いで、選択的に前記表面若しくは布地を洗浄する及び／又はすすぐ工程を含む、方法。
【請求項７８】
請求項１〜５２のいずれか一項に記載の変異体であって、前記親プロテアーゼがスブチリシンプロテアーゼであり、前記変異体が、前記親スブチリシンプロテアーゼと比較したときに洗剤において向上した洗浄性能又は向上したクリーニング性能を有するスブチリシンプロテアーゼ変異体、又は、
請求項５３に記載のポリペプチドであって、配列番号２、配列番号４又は配列番号６のプロテアーゼと比較したときに洗剤において向上した洗浄性能又は向上したクリーニング性能を有するポリペプチド。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【公表番号】特表２０１３−５１３３８５（Ｐ２０１３−５１３３８５Ａ）
【公表日】平成２５年４月２２日（２０１３．４．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５４３２７５（Ｐ２０１２−５４３２７５）
【出願日】平成２２年１２月９日（２０１０．１２．９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０５９６２８
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０７２０９９
【国際公開日】平成２３年６月１６日（２０１１．６．１６）
【出願人】（５０９２４０４７９）ダニスコ・ユーエス・インク (81)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２５年４月２２日（２０１３．４．２２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１２月９日（２０１０．１２．９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０５９６２８
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０７２０９９
【国際公開日】平成２３年６月１６日（２０１１．６．１６）
【出願人】（５０９２４０４７９）ダニスコ・ユーエス・インク (81)
【Ｆターム（参考）】
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