モチリン受容体の大環状拮抗薬
本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、ｎ1、ｍ、ｐ、Ｚ1、Ｚ2およびＺ3は明細書に記載の通りである）の新規大環状化合物、および医薬的に許容されるその塩、水化物または溶媒化合物に関する。本発明は、モチリン受容体の拮抗薬であり、この受容体および／または運動性機能不全に関連した疾患の治療に有効な、式（Ｉ）の化合物にも関する。
【化１】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、ｎ1、ｍ、ｐ、Ｚ1、Ｚ2およびＺ3は明細書に記載の通りである）の新規大環状化合物、および医薬的に許容されるその塩、水化物または溶媒化合物に関する。本発明は、モチリン受容体の拮抗薬であり、この受容体および／または運動性機能不全に関連した疾患の治療に有効な、式（Ｉ）の化合物にも関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、立体配座的に規定された新規大環状化合物、それを含む医薬組成物、およびその製造に使用される中間体に関する。本発明は、特に、モチリン受容体の活性に選択的に拮抗することが示された大環状化合物に関する。本発明は、さらに、胃腸障害、特に、胃の運動性の機能不全または増加したモチリン分泌が観察される一連の胃腸障害、例えば、高モチリン症（ｈｙｐｅｒｍｏｔｉｌｉｎｅｍｉａ）、過敏性腸症候群および消化不良、の治療に有用な、大環状化合物にも関する。
【背景技術】
【０００２】
多くのペプチドホルモンが、吸収、分泌、血流および運動性を包含する胃腸（ＧＩ）管の種々の機能の調節に関与している（Ｍｕｌｖｉｈｉｌｌ，ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｂａｓｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，４th ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｇｒｅｅｎｓｐａｎ，Ｆ．Ｓ．；Ｂａｘｔｅｒ，Ｊ．Ｄ．，ｅｄｓ．，Ａｐｐｌｅｔｏｎ ＆ Ｌａｎｇｅ：Ｎｏｒｗａｌｋ，ＣＴ，１９９４，ｐｐ．５５１−５７０）。脳とＧＩ系との相互作用が、これらの機能の適正な調節に不可欠である故に、ＧＩ管において局所的に、またはＣＮＳにおいて遠位的に、これらのペプチドを産生することができる。
【０００３】
これらのペプチドホルモンの１つであるモチリン（直鎖２２−アミノ酸ペプチド）は、空腹時胃腸運動活性を制御することによって、ＧＩ生理学的系において重要な調節機能を果たしている。従って、該ペプチドは、ヒトを含む哺乳動物において空腹時に十二指腸粘膜から定期的に放出される。より正確には、モチリンは、胃腸管平滑筋の収縮によって胃の運動性に強力な作用を発揮して、胃内容物排出を刺激し、腸管通過時間を短縮し、小腸における移動性運動複合体（ｍｉｇｒａｔｉｎｇ ｍｏｔｏｒ ｃｏｍｐｌｅｘ）のＩＩＩ相を開始させる（Ｉｔｏｈ，Ｚ．，Ｅｄ．，Ｍｏｔｉｌｉｎ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ：Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，１９９０，ＡＳＩＮ：０１２３７５７３０４；Ｎｅｌｓｏｎ，Ｄ．Ｋ．Ｄｉｇ．Ｄｉｓ．Ｓｃｉ．１９９６，４１，２００６−２０１５；Ｐｅｅｔｅｒｓ，Ｔ．Ｌ．；Ｖａｎｔｒａｐｐｅｎ，Ｇ．；Ｊａｎｓｓｅｎｓ，Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９８０，７９，７１６−７１９）。
【０００４】
モチリンは、主にヒト幽門洞および近位十二指腸に存在する受容体を介して、これらの作用を発揮するが、その受容体はＧＩ管の他の領域にも見出される（Ｐｅｅｔｅｒｓ，Ｔ．Ｌ．；Ｂｏｒｍａｎｓ，Ｖ．；Ｖａｎｔｒａｐｐｅｎ，Ｇ．Ｒｅｇｕｌ．Ｐｅｐｔ．１９８８，２３，１７１−１８２）。従って、モチリンホルモンは、ＧＩ系の上部および下部の両方の運動性に関与している（Ｗｉｌｌｉａｍｓ ｅｔ ａｌ．Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９９２，２６２，Ｇ５０−Ｇ５５）。さらに、モチリンおよびその受容体はＣＮＳおよび末梢にも見出され、まだ明確に解明されていない神経系での生理学的役割を示唆している（Ｄｅｐｏｏｒｔｅｒｅ，Ｉ．；Ｐｅｅｔｅｒｓ，Ｔ．Ｌ．Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９９７，２７２，Ｇ９９４−９９９ ａｎｄ Ｏ’Ｄｏｎｏｈｕｅ，Ｔ．Ｌ ｅｔ ａｌ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ １９８１，２，４６７−４７７）。例えば、脳におけるモチリン受容体は、摂食および摂水行動、排尿反射、中枢および脳幹神経調節および脳下垂体ホルモン分泌を包含する多くのＣＮＳ機能において、調節的役割を果たすことが示唆されている（Ｉｔｏｈ，Ｚ．Ｍｏｔｉｌｉｎ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ １９９７，１８，５９３−６０８；Ａｓａｋａｗａ，Ａ．；Ｉｎｕｉ，Ａ．；Ｍｏｍｏｓｅ，Ｋ．；ｅｔ ａｌ．，Ｍ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ １９９８，１９，９８７−９９０ ａｎｄ Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄ，Ｄ．Ｊ．；Ｇａｒｔｈｗａｉｔｅ，Ｔ．Ｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｂｅｈａｖ．１９８７，３９，７５３−７５６）。生理学的研究は、モチリンが摂食行動に及ぼす作用を実際に有することの確かな証拠を提供している（Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄ，Ｄ．Ｊ．；Ｇａｒｔｈｗａｉｔｅ，Ｔ．Ｌ．Ｐｈｙｓ．Ｂｅｈａｖ．１９８７，３９，７３５−７３６）。
【０００５】
最近のヒトモチリン受容体の同定およびクローン化（ＷＯ ９９／６４４３６）は、特定の治療目的のためにその活性を調節し得る薬剤の研究を、簡略化し、促進している。
【０００６】
モチリンは、胃の運動性の調節に不可欠かつ直接的に関与するため、モチリン受容体における活性を減少させる（低運動性）かまたは増加させる（高運動性）薬剤は、これらの適応症の新規有効薬剤を探すさらなる研究において、特に興味のもたれる分野である。
【０００７】
低運動性障害の治療において臨床的用途を有するモチリン受容体のペプチド作用薬が報告されている（Ｕ．Ｓ．５，６９５，９５２、同５，７２１，３５３、同６，０１８，０３７、同６，３８０，１５８、同６，４２０，５２１、Ｕ．Ｓ．Ａｐｐｌ．２００１／００４１７９１、ＷＯ ９８／４２８４０、ＷＯ ０１／００８３０およびＷＯ ０２／０５９１４１）。モチライド（ｍｏｔｉｌｉｄｅｓ）と一般に称されるエリスロマイシン誘導体も、モチリン受容体の作用薬として報告されている（Ｕ．Ｓ．４，９２０，１０２、同５，００８，２４９、同５，１７５，１５０、同５，４１８，２２４、同５，４７０，９６１、同５，５２３，４０１、同５，５５４，６０５、同５，６５８，８８８、同５，８５４，４０７、同５，９１２，２３５、同６，１００，２３９、同６，１６５，９８５、同６，４０３，７７５）。
【０００８】
モチリン受容体の拮抗薬は、下記の疾患を包含する運動高進症および高モチリン症に関連した疾患の治療薬として潜在的に極めて有用である：過敏性腸症候群、消化不良、胃食道逆流性疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、膵臓炎、乳児肥厚性幽門狭窄症、真性糖尿病、肥満症、吸収不良症候群、カルチノイド症候群、下痢、萎縮性結腸炎または胃炎、胃腸ダンピング症候群、胃腸切除後症候群、胃うっ滞、および肥満を生じる摂食障害。
【０００９】
種々のペプチド化合物が、モチリン受容体の拮抗薬として記載されている（Ｄｅｐｏｏｒｔｅｒｅ，Ｉ．；Ｍａｃｉｅｌａｇ，Ｍ．Ｊ．；Ｇａｌｄｅｓ，Ａ．；Ｐｅｅｔｅｒｓ，Ｔ．Ｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９５，２８６，２４１−２４７；ＵＳ ５，４７０，８３０、同６，２５５，２８５、同６，５８６，６３０、同６，７２０，４３３、Ｕ．Ｓ．２００３／０１７６６４３、ＷＯ ０２／６４６２３）。これらのペプチド拮抗薬は、薬剤分子としてのペプチドの既知の限界、特に低い経口バイオアベイラビリティおよび分解代謝を有する。
【００１０】
ペプチド誘導体の環化は、代謝安定性および立体配座自由性の両方に対して、直鎖ペプチドの特性を向上させるために使用される方法である。環状分子は、代謝酵素に対し、より耐性を示す傾向がある。そのような環化テトラペプチドモチリン拮抗薬が報告されている（Ｈａｒａｍｕｒａ，Ｍ．ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，６７０−６７５、Ｕ．Ｓ．２００３／０１９１０５３、ＷＯ ０２／１６４０４）。
【００１１】
自然界の非ペプチドおよび非環状の、他のモチリン拮抗薬も報告されている（Ｕ．Ｓ．５，９７２，９３９、同６，３８４，０３１、同６，３９２，０４０、同６，４２３，７１４、同６，５１１，９８０、同６，６２４，１６５、同６，６６７，３０９、Ｕ．Ｓ．２００２／０１１１４８４、同２００１／０４１７０１、同２００２／０１０３２３８、同２００１／００５６１０６、同２００２／００１３３５２、同２００３／０２０３９０６および同２００２／０００２１９２）。
【００１２】
本発明の大環状モチリン拮抗薬は、ペプチドおよび非ペプチド構造物の両方の成分を組み合わせて含み、この組合せはこの用途に関してこれまで探求されたことがない。
【００１３】
実際に、本発明の拮抗薬の構造的特徴は異なっている。特に、環状ペプチドである既知のモチリン拮抗薬に関して、Ｄ−アミノ酸を含有するそのような誘導体は活性が欠如していることが分かった。これに対して、本発明のトリペプチド擬似化合物については、３つの構造成分の２つにＤ−立体化学が必要とされる。
【００１４】
本発明のモチリン拮抗薬は、立体配座の調節と、疎水性相互作用、水素結合または双極子−双極子相互作用による相互作用のための追加的部位の付与との、２重の役割を果たすテザー（ｔｅｔｈｅｒ）成分を含むという点でも、先行技術と異なる。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
第一の態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
［式中、
Ｚ1、Ｚ2およびＺ3は、Ｏ、ＮおよびＮＲ10からなる群より独立して選択され、ここで、Ｒ10は、水素、低級アルキルおよび置換低級アルキルからなる群より選択され、
Ｒ1は、アリールで置換された低級アルキル、置換アリールで置換された低級アルキル、ヘテロアリールで置換された低級アルキル、および置換ヘテロアリールで置換された低級アルキルからなる群より独立して選択され、
Ｒ2は、水素であり、
Ｒ3は、アルキルおよびシクロアルキルからなる群より独立して選択され、但し、Ｚ1がＮであるとき、Ｒ3はＺ1と共に４、５、６または７員の複素環を形成し得るものとし、
Ｒ4は、水素であり、
Ｒ5およびＲ6は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群より独立して選択され、但し、Ｒ5およびＲ6の少なくとも１つは水素であるものとし、
Ｘは、Ｏ、ＮＲ8およびＮ（Ｒ9）2+からなる群より選択され、ここで、Ｒ8は、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、スルホニル、スルホンアミドおよびアミジノからなる群より選択され、Ｒ9は、水素、低級アルキルおよび置換低級アルキルからなる群より選択され、
ｍ、ｎ1およびｐは、０、１または２から独立して選択され、
Ｔは、式ＩＩ：
−Ｕ−（ＣＨ2）d−Ｗ−Ｙ−Ｚ−（ＣＨ2）e− （ＩＩ）
（式中、ｄおよびｅは、０、１、２、３、４または５から独立して選択され、
Ｕは、式（Ｉ）のＸに結合し、−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
ＹおよびＺは、それぞれ、場合により存在し、
Ｗ、ＹおよびＺは、−Ｏ−、−ＮＲ28−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ2−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＳＯ2−ＮＨ−、−ＮＨ−ＳＯ2−、−ＣＲ29Ｒ30−、ＺまたはＥ配置を有する−ＣＨ＝ＣＨ−、および−Ｃ≡Ｃ−からなる群よりか、または下記の群：
【化２】
から独立して選択される環構造物から、独立して選択され、
該環構造物に含有される任意の炭素原子は、窒素原子で置換することができ、但し、該環構造物が単環式環構造物である場合は、４個以下の窒素原子を有し、該環構造物が２環式環構造物である場合は、６個以下の窒素原子を有すものとし、
Ｇ1およびＧ2は、それぞれ独立して、−Ｏ−、−ＮＲ41−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ2−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＳＯ2−ＮＨ−、−ＮＨ−ＳＯ2−、−ＣＲ42Ｒ43−、ＺまたはＥ配置を有する−ＣＨ＝ＣＨ−、および−Ｃ≡Ｃ−からなる群より選択される共有結合または二価の基を表し、但し、Ｇ1は、Ｇ2より近くでＵに結合するものとし、
Ｋ1、Ｋ2、Ｋ3、Ｋ4、Ｋ6、Ｋ15およびＫ16は、Ｏ、ＮＲ44およびＳからなる群より独立して選択され、
ｆは、１、２、３、４、５または６から選択され、
Ｒ31、Ｒ32、Ｒ38、Ｒ39、Ｒ48およびＲ49は、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドから独立して選択され、
Ｒ33、Ｒ34、Ｒ35、Ｒ36、Ｒ37、Ｒ47、Ｒ50およびＲ51は、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、オキソ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドから独立して選択される）の二価の基である］の化合物、および医薬的に許容されるその塩、水化物または溶媒化合物に関する。
【００１６】
第二の態様において、本発明は、モチリン受容体の拮抗薬である式（１）の化合物も提供する。
【００１７】
第三の態様において、本発明は、治療有効量の式（１）の化合物を投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物におけるモチリン受容体に関連した疾患または運動性機能不全の治療法を提供する。
【００１８】
本発明を例示的実施形態と共に記載するが、本発明の範囲をそのような実施形態に限定するものではないと理解されるものとする。それどころか、添付の特許請求の範囲によって規定されるあらゆる代替物、改変物および等価物を包含するものとする。
【００１９】
［発明の詳細な説明］
前記の式（Ｉ）において、Ｒ1は、−（ＣＨ2）qＲ11および−ＣＨＲ12Ｒ13からなる群より選択するのが好ましく、
ここで、
ｑは、０、１、２または３であり、
Ｒ11およびＲ12は、下記の群：
【化３】
の環構造物から独立して選択され、
ここで、該環構造物中の任意の炭素原子は、窒素原子で置換することができ、但し、該環構造物が単環式環構造物である場合は、４個以下の窒素原子を有し、該環構造物が２環式環構造物である場合は、６個以下の窒素原子を有すものとし、
Ａ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4およびＡ5は、それぞれ場合により存在し、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より独立して選択され、
Ｂ1、Ｂ2、Ｂ3およびＢ4は、ＮＲ14、ＳまたはＯから独立して選択され、ここで、Ｒ14は、水素、アルキル、置換アルキル、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択され、
Ｒ13は、Ｒ11およびＲ12と同様に定義されるか、または低級アルキル、置換低級アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリールおよびアミドを含む群より選択される。
Ａ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4およびＡ5は、ハロゲン、トリフルオロメチル、Ｃ1〜6アルキルまたはＣ1〜6アルコキシから選択するのが最も好ましい。
【００２０】
Ｒ11、Ｒ12およびＲ13は、
【化４】
［式中、ＲaおよびＲbは、Ｃｌ、Ｆ、ＣＦ3、ＯＣＨ3、ＯＨ、Ｃ（ＣＨ3）3およびＣＨ3からなる群より選択される］からなる群より選択するのが好ましい。
【００２１】
式（Ｉ）のＲ3を、下記：
−（ＣＨ2）sＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）（ＣＨ2）tＣＨ3、−ＣＨ（ＯＲ15）ＣＨ3、−ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3、−（ＣＨ2）uＣＨ（ＣＨ3）2、−Ｃ（ＣＨ3）3および−（ＣＨ2）y−Ｒ21
からなる群より選択することも好ましく、
ここで、
ｓおよびｕは、０、１、２、３、４または５から独立して選択され、
ｔは、１、２、３または４から独立して選択され、
ｙは、０、１、２、３または４から選択され、
Ｒ15は、水素、アルキル、置換アルキル、ホルミルおよびアシルからなる群より選択され、
Ｒ21は、下記の群：
【化５】
から選択される環構造物から選択され、
ここで、該環構造物中の任意の炭素原子は、窒素原子で置換することができ、但し、該環構造物が単環式環構造物である場合は、４個以下の窒素原子を有し、該環構造物が２環式環構造物である場合は、６個以下の窒素原子を有すものとし、
ｚは、１、２、３、４または５から選択され、
Ｅ1、Ｅ2およびＥ3は、それぞれ場合により存在し、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より独立して選択され、
Ｊは、場合により存在し、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、オキソ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択される。
【００２２】
式（Ｉ）のテザー部分（Ｔ）は、下記：
【化６】
［式中、
Ｌ1は、Ｏ、ＮＨまたはＮＭｅであり、
Ｌ2は、ＣＨまたはＮであり、
Ｌ3は、ＣＨまたはＮであり、
Ｌ4は、ＯまたはＣＨ2であり、
Ｌ5は、ＣＨまたはＮであり、
Ｌ6は、ＣＲ52Ｒ53またはＯであり、
Ｒ46は、ＨまたはＣＨ3であり、
Ｒ52、Ｒ53、Ｒ54、Ｒ55、Ｒ56およびＲ57は、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノおよびオキソから独立して選択されるか、または、Ｒ52とＲ53、またはＲ54とＲ55、またはＲ56とＲ57とが一緒になって、炭素、酸素、硫黄および／または窒素原子を含有する３〜７員環を独立して形成することができ、
（Ｘ）は、式（Ｉ）のＸへの共有結合部位であり、
（Ｚ3）は、式（Ｉ）のＺ3への共有結合部位である］からなる群より選択するのが好ましい。
【００２３】
本発明の特に好ましい実施形態において、ｍ、ｎおよびｐが０であり、Ｘ、Ｚ1、Ｚ2およびＺ3がＮＨであり、Ｒ2、Ｒ4およびＲ5が水素であり、式（ＩＩＩ）：
【化７】
で示される式（Ｉ）の化合物を提供する
【００２４】
本発明の他の態様によれば、Ｚ1が窒素原子である場合に、Ｒ3がＺ1と共に４、５、６または７員の複素環を形成し、式（ＩＶ）：
【化８】
［式中、
該複素環は、第二窒素原子、または酸素原子または硫黄原子を含有してよく、
ｎ2は、０、１、２または３から選択され、
Ｒ7は、場合により存在し、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、オキソ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択される］で示される式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００２５】
本発明の本文中、アミノ、グアニジン、ウレイドおよびアミジノという用語は、それらの置換誘導体も含むものと理解される。
【００２６】
好ましくは、本発明は、式（１）の化合物を治療有効量で投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物における自発運動過剰症または高モチリン症に関連した疾患の治療法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
本発明の好ましい実施形態を、本明細書に詳しく説明し、不随する構造式、スキームおよび表に示したが、本発明はこれらの実施形態に厳密に限定されるものではなく、本発明の範囲または精神を逸脱せずに、種々の変更および改変をそれらに加え得るものと理解すべきである。
【００２８】
特に好ましい本発明の化合物は、下記の化合物：
【化９】
【化１０】
【化１１】
を包含するがそれらに限定されない。
前記の好ましいテザー部分（Ｔ）に加えて、本発明の化合物に使用される他の特定のテザー部分を下記：
【化１２】
に示す。
【００２９】
好ましい実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物を治療有効量で投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物における、過敏性腸症候群、消化不良、クローン病、胃食道逆流性疾患、潰瘍性大腸炎、膵臓炎、乳児肥厚性幽門狭窄症、カルチノイド症候群、吸収不良症候群、下痢、真性糖尿病、肥満症、胃腸切除後症候群、萎縮性結腸炎または胃炎、胃うっ滞、胃腸ダンピング症候群、セリアック病、および肥満を生じる摂食障害の治療法に関する。
【００３０】
合成方法
Ａ．一般情報
試薬および溶媒は、試薬品質またはそれ以上であり、特に記載がなければ、種々の商業的供給会社から入手した状態のままで使用した。使用したＤＭＦ、ＤＣＭおよびＴＨＦは、（ｉ）脱保護、（ｉｉ）樹脂キャッピング反応、および（ｉｉｉ）洗浄用以外は、ＤｒｉＳｏｌｖ（登録商標）（ＥＭ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｅ．Ｍｅｒｃｋ）または合成等級品質である。アミノ酸（ＡＡ）カップリング反応に使用したＮＭＰは、分析等級である。ＤＭＦは、使用前に、真空下に最低３０分間置くことによって十分に脱気した。Ｔｙｒ（３ｔＢｕ）は、ＪＰ２０００ ４４５９５に記載されている方法によって合成した。Ｃｐａは、文献法（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ ２００３，１４，３５７５−３５８０）を使用して製造するか、または商業的に入手した。Ｂｏｃ−およびＦｍｏｃ−保護アミノ酸および側鎖保護誘導体（Ｎ−メチルおよび非天然アミノ酸の誘導体を包含する）は、商業的供給会社から入手するか、または当業者に既知の標準法によって合成した。Ｄｄｚ−アミノ酸は、標準法によって合成するか、またはＯｒｐｅｇｅｎ（Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）またはＡｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ（Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ，ＫＹ，ＵＳＡ）から商業的に入手した。Ｂｔｓ−アミノ酸は、実施例６に記載のように合成した。ヒドロキシ酸は、商業的供給会社から入手するか、または文献法によって対応するアミノ酸から合成した。分析ＴＬＣは、蛍光指示薬を含有するシリカゲル６０Ｆ２５４のプレコート板（厚さ０．２５ｍｍ）上で行った。「減圧濃縮／蒸発」という用語は、除去される溶媒に適切な、水流吸引器圧、またはメカニカルオイル真空ポンプによって供給されるそれより強い真空下において、回転蒸発器を使用する蒸発を意味する。「ドライパック」は、溶媒で前処理されていないシリカゲル上でのクロマトグラフィーを意味し、これは、一般に、所望生成物と任意不純物の間にＲfの大差が存在する場合に、より大きい規模で精製に適用される。固相化学工程に関して、「標準法での乾燥」は、先ず空気中で（１時間）、次に、真空下（一般に油ポンプ）で、完全に乾燥するまで（約３０分からＯ／Ｎ（一晩）まで）樹脂を乾燥させることを意味する。
【００３１】
Ｂ．本発明の構成単位の合成法
実施例６：Ｂｔｓ−アミノ酸の合成の標準手順
【化１３】
初期ｐＨ約９．５（ｐＨメーター）の、０．２５Ｎ水酸化ナトリウム（０．０８ｍｏｌ、０．８当量）中のアミノ酸またはアミノ酸誘導体（０．１ｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、室温で、固体Ｂｔｓ−Ｃｌ（０．１１ｍｏｌ、１．１当量）を一度に添加した。得られた懸濁液を、２〜３日間勢いよく撹拌した。この間、反応のｐＨを、９．５〜１０．０の範囲に維持するのに必要とされる５．０Ｎ水酸化ナトリウムで調節すべきである。一般に、ｐＨを、最初の５時間は、２０〜３０分ごとに調節すべきである。一旦ｐＨが低下しなくなったら、反応がほぼ終了したことを示す。これは、ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９５：５）によって確認できる。終了後、反応混合物をＥｔ2Ｏで洗浄した。水性相における非極性不純物の非存在がＴＬＣによって確認されるまで、洗浄を継続する（一般に３×１００ｍＬ）。次に、水溶液を０℃に冷却し、さらに混濁が生じなくなるまで、１Ｎ ＨＣｌでｐＨ２．０に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。または、種々のアミノ酸または誘導体から得た生成物の溶解性に依存して、ＤＣＭおよびＥｔＯＡｃの混合物を抽出溶剤として使用してもよい。抽出の間に形成されるエマルジョンの故に、ＤＣＭを溶剤として単独で使用できないことに注意すべきである。合わした有機相をブライン（２×１５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、減圧蒸発させた。ＤＣＭ（１×）およびヘキサン（２×）を残渣から蒸発させて、ＥｔＯＡｃの完全除去を確実にし、所望化合物を収率５５〜９８％で固形物として得た。
【００３２】
特定のアミノ酸に有効であることがわかった変更を下記に示す：
Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、β−ＡｌａおよびＧＡＢＡ：ジベトシレーション（ｄｉｂｅｔｓｙｌａｔｉｏｎ）を防止するために、Ｂｔｓ−Ｃｌ １当量につき、アミノ酸１．５当量を使用。
【００３３】
Ｍｅｔ：酸化を防止するためにＮ2下で反応を実施する。
ＧｌｎおよびＡｓｎ：Ｂｔｓ−ＧｌｎおよびＢｔｓ−Ａｓｎの溶解性のため、標準手順に必要とされる変更を加えてワークアップを行う。反応の終了後、反応混合物をジエチルエーテルで洗浄した。水性層における非極性不純物の非存在がＴＬＣによって確認されるまで、洗浄を継続する（一般に３×１００ｍＬ）。次に、水性相を０℃に冷却し、６Ｎ ＨＣｌでｐＨ２．０に酸性化した。Ｂｔｓ−ＧｌｎおよびＢｔｓ−Ａｓｎの水溶性のために、溶液の容量を最小限にするために、６Ｎ ＨＣｌを使用した（これと対照的に、それらはＤＣＭ、ＥｔＯＡｃまたはクロロホルムに溶解しにくい）。溶液を０℃で１０分間維持し、生成物を濾過によって、白色沈殿物として収集した。固形物を、冷水（１×）、冷たいブライン（２×）および水（１×、２５℃）で洗浄した。この洗液のｐＨを測定し、約４でない場合は、固形物を水で再び洗浄した。最後に、固形物を冷ＥｔＯＡｃ、次に冷Ｅｔ2Ｏ（２×）で洗浄し、最後に真空乾燥した（油ポンプ）（収率８３〜８５％）。
【００３４】
Ｃ．立体配座的に規定された本発明の大環状化合物の一般的合成法
スキーム１
【化１４】
【００３５】
式Ｉの化合物は、従来の溶液合成技術または固相化学法を使用して合成できる。いずれの場合も、合成は４つのステップを含む。第一に、生物学的標的受容体の認識要素、さらに主に立体配座の調節および規定用のテザー部分１つを含む１〜４個の部分を包含する構成単位の合成。標準化学変換を使用する第二ステップにおいて、これらの構成単位を、一般に逐次的に、集成する。次に、第三ステップで、集成からの先駆物質を環化して、大環状構造物を得る。最後に、保護基の除去および任意精製を含む後環化処理ステップを行って、所望の最終化合物を得る（スキーム１）。この方法は、ＷＯ ０１／２５２５７および米国特許出願第０９／６７９，３３１号に既に開示されている。
【００３６】
Ｄ．本発明の代表的テザーの合成手順
本発明の化合物に必要とされる重要なテザー成分は、ＷＯ ０１／２５２５７、米国暫定特許出願第６０／４９１，２４８号または本明細書に開示されているように合成される。
【００３７】
実施例１６：テザーＴ８の合成の標準手順
【化１５】
【００３８】
ステップＴ８−１：クロロトリメチルシラン（１１６ｍＬ、０．９１ｍｏｌ、１．５当量）を、ＭｅＯＨ（５００ｍＬ、ＨＰＬＣ等級）中の２−ヒドロキシケイ皮酸（１００ｇ、０．６１ｍｏｌ、１．０当量）の懸濁液に、０℃で３０分間にわたって添加した。得られた混合物を室温で撹拌した（Ｏ／Ｎ）。反応をＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ、９８／２）によって監視した。必要であれば、温水中での反応混合物の加熱によって、工程を加速することができる。反応の終了後、反応混合物を減圧蒸発させて、メチル２−ヒドロキシシンナメートを、量的収量（ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｙｉｅｌｄ）で白色固形物（１０８．５ｇ）として得た。この中間体の素性をＮＭＲによって確認する。この反応をより大きい（ｋｇ）規模で行って、同様の結果を得ることができる。
【００３９】
ステップＴ８−２：３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（ＤＨＰ、１４０ｍＬ、１．５４ｍｏｌ、２．５２当量）を、２Ｌの三つ口フラスコ中の２−ブロモエタノール（１０８ｍＬ、１．５１ｍｏｌ、２．５当量）に、機械撹拌しながら０℃で２時間にわたって滴下した。得られた混合物を室温でさらに１時間撹拌した。ステップＴ８−１からのメチル２−ヒドロキシシンナメート（１０８ｇ、０．６１ｍｏｌ、１．０当量）、炭酸カルシウム（９２．２ｇ、０．６７ｍｏｌ、１．１当量）、ヨウ化カリウム（２０ｇ、０．１２ｍｏｌ、０．２当量）およびＤＭＦ（３００ｍＬ、分光分析等級）を、前記のフラスコに添加した。反応混合物を７０℃（外部温度）で２４時間撹拌した。反応をＴＬＣ（ＤＣＭ／Ｅｔ2Ｏ：９５／５）によって監視した。反応物を室温に冷まし、Ｅｔ2Ｏ（４５０ｍＬ）を添加した。無機塩を濾過によって除去し、Ｅｔ2Ｏ（３×５０ｍＬ）で洗浄した。濾液をヘキサン（４００ｍＬ）で希釈し、水（３×５００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。粗エステル（所望生成物および過剰のＢｒ−Ｃ2Ｈ4−ＯＴＨＰ）を、さらに精製せずに次の還元に使用した。
【００４０】
ステップＴ８−３：ＤＩＢＡＬ（１．５２５Ｌ、１．５２５ｍｏｌ、２．５当量、ＤＣＭ中１．０Ｍ）を、無水ＤＣＭ（６１０ｍＬ）中のステップＴ８−２からの前記粗エステル（理論収量に基づいて０．６１ｍｏｌ）の溶液に、機械撹拌しながら−３５℃で１．５時間にわたってゆっくり添加した。得られた混合物を、−３５℃で１．５時間、次に０℃で１．５時間撹拌した。反応をＴＬＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ：５０／５０）によって監視した。反応が終了したら、Ｎａ2ＳＯ4・１０Ｈ2Ｏ（１００ｇ、０．５当量）をゆっくり添加した。水素の発生が観察され、それが沈静化した時に、水を添加した（１００ｍＬ）。混合物を室温に温め、１０分間撹拌し、次に、温水で４０℃に温め、２０分間にわたって還流させながら撹拌した。混合物を室温に冷却し、ＤＣＭ（６００ｍＬ）で希釈し、上部溶液を濾過器にデカントした。フラスコに残留する固形物を、機械撹拌しながらジクロロメタン（５×５００ｍＬ）で洗浄し、濾過した。各洗浄からの濾液をＴＬＣによって検査し、必要であれば、追加洗浄を行って、追加生成物を回収した。代替ワークアップ手順において、ＤＣＭ（６００ｍＬ）での希釈後に、混合物を濾過した。次に、Ｓｏｘｈｌｅｔ抽出器を使用して、生じた固形物をジクロロメタン中０．５％のＴＥＡで連続的に抽出した。この代替手順によって、より高い収量が一般に得られたが、これは、より長い時間を要する。濾液を減圧濃縮して、残渣をドライパック（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン／Ｅｔ3Ｎ：２０／８０／０．５）によって精製して、生成物アルコールを黄色がかった油状物として得た（収率：９０％）。素性および純度をＮＭＲによって確認した。
【００４１】
ステップＴ８−４：無水ＤＭＦ２００ｍＬ中の、ステップＴ８−３からのアリル型アルコール（２８ｇ、０．１００ｍｏｌ、１．０当量）と、コリジン（０．１１０ｍｏｌ、１．１当量）との混合物に、無水ＤＭＦ１００ｍＬに溶解させた無水ＬｉＣｌ（４．２６ｇ、０．１００ｍｏｌ、１．０当量）をＮ2下に添加した。次に、混合物を０℃に冷却し、ＭｓＣｌ（１２．６７ｇ、０．１１０ｍｏｌ、１．１当量、Ｐ2Ｏ5で新たに蒸留）を滴下した。反応を室温に温め、ＴＬＣ（３：７ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって監視した。反応が終了した際に、ＮａＮ3（３２．７ｇ、０．５００ｍｏｌ、５．０当量）を添加した。反応混合物をＯ／Ｎ 室温で撹拌して進行させ、次に、ＮＭＲを行った（ｓｔｉｒｒｅｄ ａｔ ｒｔ Ｏ／Ｎ ｗｉｔｈ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｂｙ ＮＭＲ）。反応が終了したら、混合物を氷冷水浴に注ぎ、ジエチルエーテル（３×）で抽出した。次に、合わした有機相を、クエン酸緩衝液（２×）、飽和炭酸水素ナトリウム（２×）、最後にブライン（１×）で順次に洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。アリル型アジドを合計収率９０％で得、それは次のステップに使用するのに十分な質であった。
【００４２】
ステップＴ８−５：ＰＰｈ3（２５．９ｇ、０．０９９ｍｏｌ、１．５当量）を、ＴＨＦ１００ｍＬ中のステップＴ８−４からのアリル型アジド（２０．０ｇ、０．０６６ｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、０℃で添加した。溶液を、０℃で３０分間および室温で２０時間撹拌した。次に、水（１２ｍＬ）を添加し、得られた溶液を６０℃で４時間加熱した。溶液を室温に冷却し、２Ｎ ＨＣｌ（１５ｍＬ）を添加し、混合物を５０℃で９０分間撹拌した。分離した有機相を０．０５Ｎ ＨＣｌ（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わした水性相をＥｔ2Ｏ（５×１５０ｍＬ）およびトルエン（４×１５０ｍＬ）で洗浄し（ＴＬＣ後に、さらなる抽出が必要な場合がある）、それらを合わし、０．０５Ｎ ＨＣｌ（１×１００ｍＬ）で逆抽出した。この逆抽出からの酸性水性相を、主要水性相と合わし、エーテル（５×１５０ｍＬ）で再び洗浄した。次に、水性相のｐＨを、水酸化ナトリウム（５Ｎ）の添加によって８〜９に調節した。次のステップで必要とされる反応条件により、９より高いｐＨにならないように注意すべきである。水性相を減圧濃縮する（アスピレーター、次に、油ポンプ）か、または凍結乾燥した。トルエン（２×）を残渣に添加し、次に、減圧蒸発して、微量の水を除去した。粗生成物（所望アミノアルコール、および無機塩）を、さらに精製せずに次の反応に使用した。
【００４３】
ステップＴ８−６：ＤＭＦ（１８０ｍＬ）中の、ステップＴ８−５からの粗アミノアルコール（理論収量に基づいて０．５ｍｏｌ）と、Ｄｄｚ−ＯＰｈ（１７４ｇ、０．５５ｍｏｌ、１．１当量）と、Ｅｔ3Ｎ（７０ｍＬ、０．５ｍｏｌ、１．０当量）との混合物を、５０℃で２４時間撹拌した。必要であれば追加のＤＭＦを添加して、全ての物質を溶解させる。反応をＴＬＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ：５０／５０、ニンヒドリン検出）によって監視した。反応の終了後、反応混合物を、Ｅｔ2Ｏ（１．５Ｌ）および水（３００ｍＬ）で希釈した。分離した水性相をＥｔ2Ｏ（２×１５０ｍＬ）で抽出した。合わした有機相を水（３×５００ｍＬ）およびブライン（１×５００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。生成物が水性相に残らないことを確実にするために、相をＴＬＣによって監視した。残っていることが示された場合は、Ｅｔ2Ｏを使用して水性相をさらに１回またはそれ以上抽出して、この物質を回収する。粗生成物をドライパック（推奨カラム条件：ＥｔＯＡｃ／ヘキサン／Ｅｔ3Ｎ、３５／６５／０．５〜６５／３５／０．５）によって精製して、テザーＤｄｚ−Ｔ８を淡黄色シロップ状物として得た（収率：〜４０％）。生成物の素性および純度をＮＭＲによって確認した。
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：１．６ｐｐｍ（ｓ，６Ｈ，２×ＣＨ3），３．６−３．８ｐｐｍ（広幅 ｓ，１０ Ｈ，２×ＯＣＨ3，２×ＯＣＨ2），３．９５ｐｐｍ（三重項，２Ｈ，ＣＨ2Ｎ），６−６．２ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，２×ＣＨ），６．２−６．５ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ，３×ＣＨ，芳香族），６．６−７．６ｐｐｍ（ｍ，５Ｈ，芳香族）。
【００４４】
実施例１７：テザーＴ９の標準合成手順
【化１６】
【００４５】
６５ｇ規模における、Ｔ９−０からのＤｄｚ−Ｔ９の収量は、６０．９ｇ（９１％）であった。
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ７．１９−７．０１（ｍ，２Ｈ），６．９２−９．８３（ｍ，２Ｈ），６．５３（ｂｓ，２Ｈ），６．３４（ｔ，１Ｈ），５．１７（ｂｔ，１Ｈ），４．０８（ｍ，２Ｈ），３．９８（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｓ，６Ｈ），３．０１（ｂｑ，２Ｈ），２．６６（ｔ，３Ｈ），１．２６（ｂｓ，８Ｈ）；
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ１６０．９，１５６．８，１５５．６，１４９．６，１３０．４，１２７．５，１２１．２，１１１．７，１０３．２，９８．４，８０．，６９．７，６１．６，５５．５，４０．３，３０．５，２９．３，２７．４。
【００４６】
テザーＴ９は、Ｔ８から、ステップＴ９−３のような還元によるか、または当業者に既知の他の適切な水素化触媒を使用して合成することもできる。
【００４７】
実施例１８：Ｄｄｚ−プロパルギルアミンの合成の標準手順
【化１７】
乾燥させた三つ口フラスコ中で、脱気したＤＭＦ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、３８８ｍＬ）中のプロパルギルアミン（５３．７ｇ、０．９７５ｍｏｌ、１．５当量）の溶液を、Ｄｄｚ−Ｎ3（１７０．９ｇ、０．６５ｍｏｌ、１．０当量）、テトラメチルグアニジン（ＴＭＧ、８１．４ｍＬ、０．６５ｍｏｌ、１．０当量）およびＤＩＰＥＡ（１１３．１ｍＬ、０．６５ｍｏｌ、１．０当量）で処理し、Ｏ／Ｎ ５０℃で撹拌した。反応をＴＬＣ（条件：２５／７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、Ｒf：０．２５；検出：ＵＶ、ニンヒドリン）によって監視した。終了後、ＤＭＦを乾燥するまで減圧蒸発させ、残渣をＥｔ2Ｏ（１Ｌ）に溶解させた。有機溶液を、クエン酸緩衝液（ｐＨ４．５、３×）、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（２×）およびブライン（２×）で順次に洗浄し、次に、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。薄オレンジ色固形物を得た。この固形物をヘキサン中の１％ＥｔＯＡｃですりつぶし、次に、濾過によって収集し、真空乾燥させて（油ポンプ）、所望生成物（１５３．４ｇ、８５．２％）を得た。
【００４８】
実施例１９：テザーＴ１０の合成の標準手順
方法Ａ
【化１８】
【００４９】
このテザーを得る２つの選択的経路を開発した。第一の合成法は、商業的に入手可能なレゾルシノールのモノベンゾエート（Ｔ１０−０）から出発して進めた。実施例９からの保護アミノアルコールを使用する標準条件下のミツノブ反応、次に、ベンゾエートの鹸化を行って、再結晶後に高収量でＴ１０−１を得た。示された最適化条件を使用する２−ブロモエタノールでのフェノールのアルキル化を行って、ドライパック精製後に所望生成物Ｄｄｚ−Ｔ１０を収率４２％で得た。
ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン １：１、検出：ＵＶ、ニンヒドリン；Ｒf＝０．１７）。
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ７．１８，ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ；６．５１，ｍ，５Ｈ；６．３４，ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ；５．１９，ｓ，１Ｈ；４．０５，ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．０Ｈｚ；３．９４，ｍ，４Ｈ；３．７５，ｓ，６Ｈ；３．４９，ｄ，２Ｈ Ｊ＝５．２Ｈｚ；１．７３，ｓ，６Ｈ。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ １６０．８５６；δ １６０．１５２；１６０．００５；１５５．４１０；１４９．３０５；１３０．２７９；１０７．４３８；１０７．３１０；１０３．１６３；１０１．８７７；９８．５１７；６９．４８８；６７．３８２；６１．５９５；５５．４２７；４０．４２０；２９．４２７。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR：７．２５分。
ＭＳ：４２０（Ｍ＋Ｈ）。
【００５０】
方法Ｂ
Ｔ１０を得る第二合成経路を、下記のスキーム：
【化１９】
に示す。
【００５１】
レゾルシノールから出発して、２つの連続ミツノブ反応を、図示した適切な２個の炭素シントン（それら自体は、既知の保護法によって、２−アミノエタノールおよびエチレングリコールからそれぞれ誘導される）を使用して行う。最後に、ここでも標準条件下に、シリルエーテルを脱保護してＢｏｃ−Ｔ１０を得た。
【００５２】
２つの方法の収量は同程度であるが、第一の方法は、必要とされる機械操作が少なく、より大きい規模の場合に好ましい。
【００５３】
実施例２０：テザーＴ１１の合成の標準手順
【化２０】
【００５４】
ＴＬＣ（１５：８５ ＴＨＦ／ＤＣＭ；検出：ＵＶ；Ｒf：０．３３）。
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ ８．００，ｄ，１Ｈ；７．３２，ｄ，１Ｈ；７．１５，ｍ，１Ｈ；６．４４，ｓ，２Ｈ；６．３３，ｓ，１Ｈ；３．９９，ｔ，２Ｈ；３．７１，ｍ，８Ｈ；２．８９，ｍ＝４，２Ｈ；２．７１，ｔ，２Ｈ；１．７１，ｍ＝５，２Ｈ；１．６１，ｓ，６Ｈ。
13Ｃ ＮＭＲ（溶媒 ＤＭＳＯ−ｄ6）δ １６０．８７９；１５３．２７５；１５１．４０５；１５０．４４７；１４０．７７３；１２２．６６６；１１８．９３４；１０３．３４７；９８．４５６；７９．７７８；７０．４４９；６０．２１２；５５．７１７；５５．５９９；２９．７４０；２８．５９２。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR：５．４分。
ＭＳ：４１９（Ｍ＋Ｈ）。
【００５５】
実施例２６：テザーＴ１２の合成の標準手順
【化２１】
【００５６】
火炎乾燥した３Ｌの三つ口フラスコ中で、脱気したＤＭＦ（１Ｌ、０．４Ｍ）中の（アミノメチル）フェニルチオベンジルアルコール（１２−０、９６ｇ、０．３９ｍｏｌ）の溶液を調製した。この溶液に、ＤｄｚＮ3（０．９５当量）、次にＴＭＧ（０．３９ｍｏｌ、４９ｍＬ）を添加した。反応物を１０分間撹拌し、次に、ＤＩＰＥＡ（６８ｍＬ、０．３９ｍｏｌ）を添加した。ＤｄｚＮ3が残留していないことがＴＬＣによって示されるまで（一般に４８時間）、混合物をＮ2下に５０℃で加熱した（ＴＬＣ溶離剤：ＥｔＯＡｃ：ヘキサン ５０：５０；検出：ニンヒドリン）。終了後に、クエン酸緩衝液３Ｌを反応混合物に添加し、分離した水性相をＥｔ2Ｏ（３×１５００ｍＬ）で抽出した。合わした有機相を、クエン酸緩衝液（２×２００ｍＬ）、水（２×２００ｍＬ）およびブライン（２×２００ｍＬ）で順次に洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。ダークオレンジの油状物を得、これをドライパックで精製した。この手順のために、油状物をＥｔＯＡｃ：ヘキサン：ＤＣＭ：ＴＥＡ（２０：８０：１：０．５、ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）に先ず溶解させた。ここで、完全な溶解を確実にするために、少し余分のＤＣＭが必要な場合もあった。溶液をカラムに装填し、次に、所望生成物に極めて類似した物質に特に注意を払って、全ての不純物が分離されたことがＴＬＣによって示されるまで、カラムをＥｔＯＡｃ：ヘキサン：ＤＣＭ：Ｅｔ3Ｎ（２０：８０：１：０．５）で溶離した。次に、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：Ｅｔ3Ｎ ３０：７０：０．５（ｖ／ｖ／ｖ）、最後にＥｔＯＡｃ：ヘキサン：Ｅｔ3Ｎ（５０：５０：０．５）で溶離を継続して、所望生成物を得た。生成物を含有する画分から溶媒を減圧除去した後に、残渣を最少量のＤＣＭに溶解させ、３倍の量のヘキサンを添加し、次に、溶媒を再び減圧蒸発させた。この処理を、灰色がかった白色の泡状物が得られるまで繰り返した。該泡状物を、真空乾燥（油ポンプ）しながら凝固させた。または、該物質は、ＤＣＭ（１×）およびヘキサン（２×）での逐次濃縮後に固形物を生じた。テザーＤｄｚ−Ｔ１２を灰色がかった白色の固形物として得た（収率８５〜９０％）。
【００５７】
実施例２９：ミツノブ反応を使用する、テザーの付加の標準手順
実施例２９−Ａ：ＰＰｈ3−ＤＩＡＤ単離アダクトを使用
ＴＨＦまたはＴＨＦ−トルエン（１：１）中の適切なテザー（１．５当量）の０．２Ｍ溶液に、ＰＰｈ3−ＤＩＡＤ（当量の試薬を混合することによって予備形成し、溶媒の蒸発によって単離した；実施例２９−Ｃ参照）アダクト（１．０当量）を添加した。得られた混合物を、手で１０秒間撹拌し（溶液を混濁状に維持した）、次に、樹脂に添加した。または、樹脂を溶液に添加した。反応懸濁液を、Ｏ／Ｎ撹拌した（約５分後に、混合物が清澄になった）。樹脂を濾過し、２×ＤＣＭ、１×トルエン、１×ＥｔＯＨ、１×トルエン、１×（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）、１×（ＴＨＦ／ＭｅＯＨ）、１×（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）、１×（ＴＨＦ／ＭｅＯＨ）、２×ＤＣＭで洗浄し、次に、標準法で乾燥した。
【００５８】
実施例２９−Ｂ：「ＰＰｈ3−ＤＩＡＤインサイチュー手順」を使用
ＴＨＦまたはＴＨＦ−トルエン（１：１）中の適切なテザー（４当量）の０．２Ｍ溶液に、トリフェニルホスフィン（４当量）を添加した。得られた混合物を、均質溶液が得られるまで手でシェイクし、次に、樹脂に添加した。または、樹脂（または樹脂含有ＭｉｎｉＫａｎｓ）を溶液に添加した。次に、この懸濁液に、ＤＩＡＤ（３．９当量）を添加し、反応を撹拌した（Ｏ／Ｎ）。注意：より大きい規模の場合、反応が発熱性である故に、反応を氷浴で冷却すべきである。それに加えて、適切な通気孔を与えて、蓄積された圧力を放出させるべきである。樹脂を濾過し、ＤＣＭ（２×）、トルエン（１×）、ＥｔＯＨ（１×）、トルエン（１×）、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１×）、１×ＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１×）、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１×）、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１×）、２×ＤＣＭで洗浄し、次に、標準法で乾燥した。
【００５９】
実施例２９−Ｃ：ＰＰｈ3−ＤＩＡＤアダクトの合成手順
【化２２】
【００６０】
ＴＨＦ（０．４Ｍ）中のトリフェニルホスフィン（１当量）の十分に撹拌した溶液に、ＤＩＡＤ（１当量）を、窒素下に０℃で滴下した。次に、混合物を、撹拌しながら０℃に３０分間維持した。得られた白色固形物を濾過によって収集し（中型フリット濾過器を使用）、洗液が無色になるまで、冷たい無水ＴＨＦで洗浄し、最後に、無水Ｅｔ2Ｏで１回洗浄した。次に、白色固体生成物を真空乾燥し（油ポンプ）、窒素下に保存した。（注意：ＰＰｈ3−ＤＩＡＤアダクトは、すぐに必要とされる量より多く製造して、窒素下に保存することができ、この試薬を無水条件下に保存することが極めて重要である。）
【００６１】
実施例３０：還元的アミノ化による、テザーの付加の標準手順
実施例２９のミツノブ法は、適用することができないか、またはテザーの組み込みに有効でない場合がある。従って、好ましいテザーの１つについて下記に示すように、テザーの組み込みに使用できる還元的アミノ化が、代替法として開発された。同様の化学を使用して、本発明の他のテザーを組み込むことができる。
【化２３】
【００６２】
ＤＭＳＯ−Ｅｔ3Ｎ−ＤＣＭ中のＳＯ3・ピリジンを使用して、Ｄｄｚ誘導体として保護されたアミンを有するテザー（３０−２）を、対応するアルデヒド３０−２に効率的に酸化した。このアルデヒド（０．１４ｍｍｏｌ、５６ｍｇ、１．５当量、樹脂支持体の添加量に基づく）を、ＴＭＯＦ−ＭｅＯＨの１：３混合物（ＤｒｉＳｏｌｖ、４ｍＬ）に室温で溶解させた。トリペプチドを含有する樹脂（３０−１、末端アミンの脱保護からのそのトリフルオロ酢酸塩として）をこれに添加し、混合物を短時間撹拌して、樹脂を湿らせ、次に、ボラン−ピリジン錯体（商業的に入手可能な８Ｍ溶液として、２３μＬ、２当量）を懸濁液に導入した。反応を撹拌し（Ｏ／Ｎ）、次に、樹脂を濾過し、ＤＣＭ（２×）、ＴＨＦ（１×）、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ［３：１］（１×）、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ［３：１］（１×）、ＤＣＭ（２×）で洗浄し、標準法で乾燥した。所望の樹脂結合生成物３０−３が、ジアルキル化物質で汚染されないよう注意すべきである。しかし、反応が終了まで進まなくても、または少量のジアルキル化副生成物が存在していても、生成物は大環状化反応に十分な純度である。
【００６３】
実施例３２：テザーＴ２８の合成の標準手順
【化２４】
２−ヒドロキシベンズアルデヒド２８−０のヘンリー反応によって、２８−１を収率７９％で得た。次に、先ず水素化硼素ナトリウムで、次に接触水素添加によって、還元して、アミンを得、次に、これをそのＢｏｃ誘導体２８−２として保護した。これらの最初の２つのステップの収率は、より大きい規模の場合、より低かった。２−ブロモエタノールのＴＢＤＭＳエーテル（それ自体は標準法で合成される）での２８−２のアルキル化によって、２８−３を収率７４％で得た。標準条件下でのシリルエーテルの脱保護によって、所望の保護テザーＢｏｃ−Ｔ２８を得た。保護／脱保護ステップを避けるフェノールアルキル化用の炭酸エチレンの代替的使用では、収率７３％を生じた。
【００６４】
実施例３６：テザーＴ３２の合成の標準手順
【化２５】
【００６５】
ＴＬＣ（１００％ ＥｔＯＡｃ；検出：ＵＶ，ＣＭＡ；Ｒf＝０．２４）。
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，ｐｐｍ）：７．７４（１Ｈ，ｄｄ），７．３５（１Ｈ，ｄ），６．７２（１Ｈ，ｄ），６．５３−６．４９（２Ｈ，ｍ），３．６１−３．２９（１Ｈ，ｍ），５．０６（１Ｈ，ｔ），４．２５−４．０１（２Ｈ，ｍ），３．９１−３．８９（２Ｈ，ｍ），３．７３（３Ｈ，ｓ），２．９９（２Ｈ，ｄｄ），２．６３（２Ｈ，ｔ），１．７１（８Ｈ，広幅），１．５３（９Ｈ，ｓ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，ｐｐｍ）：１６３．８，１６２．２，１６１．０，１５９．７，１５５．９，１４９．４，１３０．０，１２９．１，１２８．０，１２６．８，１１０．８，９８．１，８０．９，７９．３，６９．７，６１．３，５５．５，３９．１，２９．３，２８．５，２６．７。
【００６６】
実施例３７：テザーＴ３３ａおよびＴ３３ｂの合成の標準手順
【化２６】
【００６７】
このテザーの（Ｒ）−異性体（Ｔ３３ａ）の合成は、２−ヨードフェノール（３３−０）および（Ｓ）−メチルラクテート（３３−Ａ）から出発して行った。３３−０および３３−Ａのミツノブ反応を、立体配置の反転と共に極めて高い収率で進めて、３３−１を得た。対応するアルコール（３３−２）へのエステルの還元も、高い収率で行われ、次に、Ｄｄｚ−プロパルギルアミンとのソナガシラ（Ｓｏｎａｇａｓｈｉｒａ）反応を行った。得られたカップリング生成物３３−３におけるアルキンを、接触水素添加によって還元した。スカベンジャー樹脂でのワークアップを行って、所望生成物Ｄｄｚ−Ｔ３３ａを得た。
【００６８】
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ（ｐｐｍ）７．１８−７．１１（ｍ，２Ｈ），６．９０（ｍ，２Ｈ），６．５２（ｍ，２Ｈ），６．３３（ｍ，１Ｈ），５．０９（ｂｔ，１Ｈ），４．５２（ｍ，１Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．０８（ｂｑ，２Ｈ），２．６４（ｂｔ，２Ｈ），１．７５（ｍ，８Ｈ）；１．２７（ｂｄ，３Ｈ），13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ １６０．８，１５５．５，１４９．５，１３１．２，１３０．６，１２７．４，１２１．２，１１３．３，１０３．２，９８，４，８０．７，７４．８，６６．５，５５，４，４０．２，３０．６，２９．３，２９．２，２７．４，１６．１。
ＨＰＬＣ（標準勾配）：ｔR：７．９３分
【００６９】
（Ｓ）−鏡像異性体（Ｄｄｚ−Ｔ３３ｂ）の合成は、（Ｒ）−メチルラクテート（３３−Ｂ）で開始して、同じ方法によって行われ、同程度の収率であった。
【化２７】
【００７０】
実施例３８：テザーＴ３４の合成の標準手順
【化２８】
【００７１】
ＴＬＣ（１００％ ＥｔＯＡｃ；検出：ＣＭＡ，Ｒf＝０．５）。
Ｃ24Ｈ35Ｎ3Ｏ7のＭＷ計算値４７７．５５；ＭＳ実測値（Ｍ＋Ｈ）+ ４７８。
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ１．６２（ｍ，２Ｈ），１．７０（ｍ，８Ｈ），２．４３（ｍ，２Ｈ），２．６７（ｍ，２Ｈ），３．０７（ｍ，２Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），３．４３（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｍ，２Ｈ），３．７５（ｓ，６Ｈ），５．４０（ｓｂ，１Ｈ），６．３１（ｓ，１Ｈ），６．４９（ｓ，２Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ２３．２５（ＣＨ2），２５．９７（ＣＨ2），２８．５６（ＣＨ3），３９．３１（ＣＨ3），３０．０９（ＣＨ3），３１．２５（ＣＨ2），３２．１９（ＣＨ2），４０．１６（ＣＨ2），５５．４７（ＣＨ3），６１．３８（ＣＨ2），８０．６５（Ｃｑ），９９．３８（Ｃｑ），１０３．１７（Ｃｑ），１１１．０１（Ｃｑ），１４９，６０（Ｃｑ），１５１．３３（Ｃｑ），１５２．４６（Ｃｑ），１６０．８０（Ｃｑ）。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR：６．６８分。
【００７２】
実施例３９：テザーＴ３５の合成の標準手順
【化２９】
【００７３】
ＴＬＣ（２５／７５ ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ；検出：ＵＶ，ニンヒドリン；Ｒf＝０．０３）
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ ７．０６−７．００（ｂｔ，１Ｈ），６．６１−６．５２（ｍ，４Ｈ），６．３５（ｍ，１Ｈ），５．１２（ｂｔ，１Ｈ），４．０３（ｍ，２Ｈ），３．９５（ｍ，２Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．１１−３．０４（ｂｑ，２Ｈ），２．６０（ｂｔ，２Ｈ），１．７５（ｍ，８Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ １６３．９，１６０．９，１６０．６，１５７．６，１５７．５，１５５．６，１４９．５，１３０．８，１３０．６，１２５．９，１０７．２６，１０６．９，１０３．２，９８，４，８０．８，７７．５，６９．９，６１，３，６０．９，６０．６，５５，４，４０．３，３０．４，２９．３，２６．９。
ＨＰＬＣ（標準勾配）：ｔR＝８．３７分。
【００７４】
実施例４０：テザーＴ３６の合成の標準手順
【化３０】
【００７５】
ＴＬＣ：（２５／７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ，ニンヒドリン；Ｒf＝０．０３）
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ（ｐｐｍ）：６．８４−６．７５（ｍ，３Ｈ），６．５２（ｂｓ，２Ｈ），６．３４（ｍ，１Ｈ），５．１７（ｂｔ，１Ｈ），４．０１（ｍ，２Ｈ），３．９３（ｍ，２Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．１０（ｂｑ，２Ｈ），２．６３（ｂｔ，２Ｈ），１．７４（ｍ，８Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ １６０．９，１５８．９，１５５．８，１５５．６，１５２．９，１５２．９，１４９．５，１３２．４，１３２．３，１１７．１，１１６．８，１１２．７，１１２．６，１０３．２，９８．４，８０．８，７０．４，６１．６，５５．５，４０．２，３０．３，２９．３，２７．４。
ＨＰＬＣ（標準勾配）：ｔR＝８．２９分。
【００７６】
実施例４１：テザーＴ３７の合成の標準手順
【化３１】
【００７７】
ＴＬＣ（２５／７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ，ニンヒドリン；Ｒf＝０．０３）
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ ７．１２−７．０８（ｂｄ，２Ｈ），６．７６−６．７３（ｄ，１Ｈ），６．５２（ｍ，２Ｈ），６．３３（ｂｓ，１Ｈ），５．１５（ｂｔ，１Ｈ），４．０２（ｍ，２Ｈ），３．９５（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｓ，６Ｈ），３．０９（ｂｑ，２Ｈ），２．６１（ｂｔ，２Ｈ），１．７４（ｍ，８Ｈ）。13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ １６０．８，１５５．６，１５５．４，１４９．５，１３２．４，１３０．１，１２７．０，１２６．０，１１２．８，１０３．２，９８．４，８０．８，７０．０，６１．４，５５．５，４０．３，３０．２，２９．３，２４．５，２７．４。
ＨＰＬＣ（標準勾配）：ｔR＝９．６０分。
【００７８】
実施例４２：テザーＴ３８の合成の標準手順
【化３２】
【００７９】
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ ７．２０−７．１０（ｍ，２Ｈ），６．９５−６．８０（ｍ，２Ｈ），６．５５（ｂｓ，２Ｈ），６．３５（ｓ，１Ｈ），５．１８（ｂｔ，１Ｈ），４．１２（ｍ，１Ｈ），３．９５（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｓ，６Ｈ），３．１５（ｂｑ，２Ｈ），２．６５（ｔ，２Ｈ），１．９８（ｂｓ，２Ｈ），１．６５（ｂｓ，６Ｈ），１．２５（ｍ，３Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ１６０．８，１５６．６，１５５．８，１４９．６，１３０．４，１２７．５，１２１．３，１１１．７，１０３．２，９８．４，８０．７，７３．５，６６．６，５５．５，４０．２，３０．５，２９．３，２９．１，２７．３，１９．５。
【００８０】
キラルＴ３８は、文献に記載されている不斉合成法、分解またはキラルクロマトグラフィー法を使用して得ることができる。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝８．４６分。
【００８１】
キラル物質は、キラルエポキシドから出発して得ることができる。例えば、Ｔ３８の（Ｓ）−異性体を、（Ｓ）−プロピレンオキシドから総収率８９％で合成した。
【００８２】
実施例４３：テザーＴ３９の合成の標準手順
【化３３】
【００８３】
ＴＬＣ（５０％ＥｔＯＡｃ，５０％ヘキサン；検出：ＵＶおよびＣＭＡ；Ｒf＝０．２５）
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，ｐｐｍ）：７．１１−７．０８（２Ｈ，ｍ），６．８６（１Ｈ，ｔ），６．７６（１Ｈ，ｄ），５．０５（１Ｈ，広幅），４．２６−３．８５（４Ｈ，ｍ），３．２２−３．０７（２Ｈ，ｍ），２．７１（１Ｈ，広幅），１．６６−１．６０（２Ｈ，ｍ），１．３３（９Ｈ，ｓ），１．１７（３Ｈ，ｄ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，ｐｐｍ）：１５６．１，１３５．０，１２７．１，１２７．０，１２１．４，１１１．７，６９．９，６１．５，３９．８，３８．４，２８．７，２０．７。
【００８４】
キラルＴ３９は、文献に記載されている不斉合成法、分解またはキラルクロマトグラフィー法を使用して得ることができる。
【００８５】
実施例４４：テザーＴ４０の合成の標準手順
【化３４】
【００８６】
ＴＬＣ（５０％ＥｔＯＡｃ，５０％ヘキサン；検出：ＵＶおよびＣＭＡ；Ｒf＝０．２５）
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，ｐｐｍ）：７．１１−７．０８（２Ｈ，ｍ），６．８６（１Ｈ，ｔ），６．７６（１Ｈ，ｄ），５．０５（１Ｈ，広幅），４．２６−３．８５（４Ｈ，ｍ），３．２２−３．０７（２Ｈ，ｍ），２．７１（１Ｈ，広幅），１．６６−１．６０（２Ｈ，ｍ），１．３３（９Ｈ，ｓ），１．１７（３Ｈ，ｄ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，ｐｐｍ）：１５６．１，１３５．０，１２７．１，１２７．０，１２１．４，１１１．７，６９．９，６１．５，３９．８，３８．４，２８．７，２０．７。
【００８７】
キラルＴ４０は、文献に記載されている不斉合成法、分解またはキラルクロマトグラフィー法を使用して得ることができる。
【００８８】
実施例４５：テザーＴ４１の合成の標準手順
【化３５】
【００８９】
ＴＬＣ（１００％ ＥｔＯＡｃ；検出：ＣＭＡ；Ｒf＝０．５）
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ．１．２３（ｓ，３Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），１．６９（ｓ，３Ｈ），１．７４（ｓ，３Ｈ），１．９０（ｍ，２Ｈ），２．３５（ｍ，１Ｈ），３．３５（ｍ，２Ｈ），３．７６（ｓ，６Ｈ），３．９２（ｍ，２Ｈ），４．４０（ｍ，２Ｈ），５．１０（ｍ，１Ｈ），６．１５（ｓ，１Ｈ），６．２５（ｓ，２Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ２５．５２（ＣＨ3），２７．５３（ＣＨ3），２８．８８（ＣＨ3），２９．６１（ＣＨ3），３５．９２（ＣＨ2），４２．６２（ＣＨ2），５５．４３（ＣＨ3），６０．６０（ＣＨ2），８２．３８（ＣＨ），８３．３３（ＣＨ），８３．６８（ＣＨ），８４．９６（ＣＨ），９８．２６（ＣＨ），１０３．２３（ＣＨ），１１８．３（Ｃｑ），１４９．５０（Ｃｑ），１５６．２０（Ｃｑ），１６０．０２（Ｃｑ）。
ＨＰＬＣ（標準勾配）：ｔR＝６．６４分。
ＭＳ：Ｍ＋Ｈ 実測値：４３９。
【００９０】
実施例４６：テザーＴ４２の合成の標準手順
【化３６】
【００９１】
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ６．８２−６．９８（ｍ，２Ｈ）；６．８０−６．７５（ｍ，１Ｈ）；６．５３（ｓ，２Ｈ）；６．３５（ｔ，１Ｈ，２ Ｈｚ）；５．２３（ｂ，１Ｈ）；４．０８（ｍ，１Ｈ）；３．９０−３．６８（ｍ，８Ｈ）；３．２０−２．９７（ｍ，２Ｈ）；２．９５−５３（ｍ，４Ｈ）；２．０−１．６３（ｍ，１０Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１６０．８５；１５５．５６；１５２．５５；１４９．５６；１２８．１３；１２７．７７；１２０．２８；１０３．２２；９８．４３；８０．７２；７６．８０；６５．７６；５５．４６；４０．２３；３０．４５；２９．３４；２９．２２；２７．１０；２４．９７；２３．９４。
【００９２】
Ｅ．本発明の大環状化合物の合成法の例
スキーム２：本発明の大環状化合物についてのチオエステル法
【化３７】
【００９３】
示したアミノ酸の１つまたはそれ以上を、対応するヒドロキシ酸で置き換えることができ、当業者に既知の方法を使用して、次の構成単位に結合させることができる。
【００９４】
実施例４７：チオエステルリンカーを使用する大環状化の標準手順
環化先駆物質を含有する樹脂を、適切な容器中で、予備洗浄ＭＰ−カーボネート樹脂［Ａｒｇｏｎａｕｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡによって市販されているＭＰ−カーボネート樹脂を３×ＴＨＦ（４００ｇにつき１Ｌ）で処理し、真空炉において、Ｏ／Ｎ ３０℃で乾燥した］（合成樹脂の初期添加量に対して１．４〜１．６当量）と合わす。次に、ＴＨＦ中の０．２Ｍ ＤＩＰＥＡ溶液を、合わした樹脂に添加し（１ｍＬ／６０ｍｇ ＭＰ−カーボネート樹脂）、懸濁液をＯ／Ｎ室温で撹拌した。次に、樹脂を濾過し、２×ＴＨＦで濯いだ。合わした濾液を適切な容器に収集し、次に、揮発性含有物を減圧蒸発させて［標準法に加えて、遠心蒸発（ＴｈｅｒｍｏＳａｖａｎｔ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，ＳｐｅｅｄＶａｃまたは同等物）を使用して、溶媒を真空除去することもできる］、粗大員環を得る。
【００９５】
実施例４８：チオエステルリンカーを使用する、銀補助大環状化の標準手順
環化自体および後のワークアップ除いて、この手順は実施例４７の手順と同じである。環化先駆物質を含有する樹脂を、適切な容器中で、予備洗浄ＭＰ−カーボネート樹脂［Ａｒｇｏｎａｕｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓによって市販されているＭＰ−カーボネート樹脂をＴＨＦ（３×、４００ｇにつき１Ｌ）で処理し、真空炉においてＯ／Ｎ ３０℃で乾燥した］（合成樹脂の初期添加量に対して１．４〜１．６当量）と合わす。これに、ＴＨＦ（樹脂１００ｍｇにつき１ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸銀（樹脂の初期添加量に対して１当量）を添加した。最後に、０．２Ｍ溶液を得るのに十分な量のＤＩＰＥＡを添加した。反応混合物を室温で撹拌した（Ｏ／Ｎ）。次に、溶液を濾過し、樹脂を２×ＴＨＦで洗浄した。濾液を適切な容器に収集し、次に、減圧蒸発させて［揮発性含有物は、遠心蒸発（ＴｈｅｒｍｏＳａｖａｎｔ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，ＳｐｅｅｄＶａｃまたは同等物）を使用して、真空除去することもできる］、粗大員環を得る。この手順のために、トリフルオロ酢酸銀を、使用以外の間は、乾燥器に保存すべきである。それに加えて、酸化銀の形成を最小限にするために、新しいビン（またはＮ2もしくはＡｒ下に最近開封したビン）のＴＨＦを使用することが推奨される。
【００９６】
さらに、Ｇｒｕｂｂｓ ｅｔ ａｌ．によって開発された閉環メタセシス（ＲＣＭ）法を使用して、本発明のいくつかの大環状化合物を得ることができる（例えば、ＵＳ ５，８１１，５１５；Ｇｒｕｂｂｓ，Ｒ．Ｈ．ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００１，６６，５２９１−５３００；Ｆｕｅｒｓｔｎｅｒ，Ａ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０００，３９，３０１２−３０４３参照）。
【００９７】
本発明の化合物の特定の誘導体を得るために、一般スキームにおける反応に付加的な反応が必要であった。いくつかの誘導体について、大環の形成前に、誘導される官能基を反応させることが好都合であった。環構造は、その官能基への試薬の接近を制限することができる。例えば、環の第二級窒素原子が誘導体化部位である大環状化合物のＮ−メチルおよびＮ−アシル誘導体の合成においては、適切な環化プロトコルの適用前に反応を行うのが好ましい。
【００９８】
他の場合、例えば、側鎖官能基の誘導体化の場合、大環の形成後に反応を行うのが最も好ましかった。例えば、側鎖におけるアミノ部分のさらなる反応は、部分的に保護された大員環の反応によって一般に効率的に行われた。このように、アシル化、スルホニル化、アルキル化（還元的アミノ化による）、グアニジンおよび尿素形成を、標準法によって行った。
【００９９】
下記の表１は、代表的であるが限定するものではない、本発明のいくつかの代表的化合物の化学合成の概要を示す。
【０１００】
【表１Ａ】
【表１Ｂ】
【表１Ｃ】
【表１Ｄ】
【表１Ｅ】
【表１Ｆ】
【表１Ｇ】
【０１０１】
Ｄ．本発明の選択化合物についての分析データ
1Ｈおよび13Ｃ ＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ Ｍｅｒｃｕｒｙ ３００ＭＨｚ分光器で記録し、溶媒の残留プロトン信号に関して内部参照する。溶液中の分子の立体配座についての情報は、当業者に既知の適切な二次元ＮＭＲ法を使用して得ることができる。ＨＰＬＣ精製は、Ｗａｔｅｒｓ ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘシステムを使用して、Ｗａｔｅｒｓ ＸＴｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８カラムで行った。自動中圧クロマトグラフィー精製は、１６までの試料を同時に精製することができる使い捨てシリカまたはＣ１８カートリッジを使用するＩｓｃｏ ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ １６ｘシステムで行った。ＭＳスペクトルは、Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍ ＩＩまたはＺＱシステムで記録した。ＨＲＭＳスペクトルは、ＶＧ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＡＢ−ＺＦ分光器で記録した。ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅデータベースソフトウエア（ＩＤＢＳ、Ｇｕｉｌｄｆｏｒｄ，Ｓｕｒｒｅｙ，ＵＫ）を使用して、化学的および生物学的情報を蓄積し、分析した。
【０１０２】
分析用ＨＰＬＣ分析の一般的方法
ＨＰＬＣ分析は、Ｗａｔｅｒｓ Ａｌｌｉａｎｃｅ ｓｙｓｔｅｍ ２６９５を、１ｍＬ／分で操作して、Ｘｔｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８カラム４．６×５０ｍｍ（３．５μｍ）を使用して行う。Ｗａｔｅｒｓ ９９６ ＰＤＡによって、純度評価用のＵＶデータを得た。ＬＣＰａｃｋｉｎｇｓスプリッタ（５０：４０：１０）は、流れを３部分に分離することを可能にした。第一部分（５０％）は、素性確認用のＡＰＣＩプローブを取り付けたＭｉｃｒｏｍａｓｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍ ＩＩ ＭＳに行った。第二部分（４０％）は、純度評価用の蒸発光散乱検出器（ＥＬＳＤ，Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ＰＬ−ＥＬＳ−１０００）に行き、最後の部分（１０％）は、定量化および純度評価用の化学発光窒素検出器（ＣＬＮＤ、Ａｎｔｅｋ Ｍｏｄｅｌ ８０６０）に行った。最新版のＷａｔｅｒｓ Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍソフトウエアパッケージを使用して、データを取り込み、処理した。
【０１０３】
本発明の化合物に好適な例示的ＬＣ法は、溶媒ＡとしてＭｅＯＨ、溶媒ＢとしてＨ2Ｏ、および溶媒Ｄとして１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏを使用する。最初の移動相組成は、Ａ５％、Ｂ８５％およびＤ１０％である。標準勾配法の詳細を下記に示す：
【０１０４】
時間 Ａ％ Ｂ％ Ｄ％ 曲線
０．００ ５ ８５ １０ ６
１．００ ５ ８５ １０ ６
６．００ ５０ ４０ １０ ６
９．００ ５０ ４０ １０ ６
１４．００ ９０ ０ １０ ６
１７．００ ９０ ０ １０ ６
１７．５０ ５ ８５ １０ ６
２０．００ ５ ８５ １０ ６
【０１０５】
化合物２〜６、８〜１０、５６、６５および１４４は、下記の表（３）に規定する通りである。
【０１０６】
化合物２
収量：純粋大環状化合物１２ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ８．８３（ｍ，１Ｈ）；８．５３（ｍ，１Ｈ）；７．６３（ｍ，１Ｈ）；７．４−７．０８（ｍ，７Ｈ）；７．００−６．８４（ｍ，２Ｈ）；６．６０（ｄ，１５Ｈｚ，１Ｈ）；６．４１（ｄｔ，１５Ｈｚ，５．４ Ｈｚ，１Ｈ）；４．３５（ｍ，１Ｈ）；４．２５−４．０５（ｍ，３Ｈ）；３．９４（ｄｔ，１Ｈ，６Ｈｚ，１５Ｈｚ）；３．７９（ｄｄ，１Ｈ，３．６Ｈｚ，８．４ Ｈｚ）；３．６０（ｍ，１Ｈ）；３．５２−３．４０（ｂｄ，１Ｈ）；３．２２−３．０６（ｍ，４Ｈ）；１．８８（ｍ，２Ｈ）；１．５４−１．２８（ｍ，２Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ，４．８Ｈｚ）；１．２２（ｄ，３Ｈ，２．７ Ｈｚ）；０．９２−０．８０（ｍ，６Ｈ）。
Ｃ30Ｈ40Ｎ4Ｏ4に関するＨＲＭＳ 計算値：５２０．３０４９；実測値：５２０．３０５７±０．００１６。
ＨＰＬＣ［標準勾配法（「分析用ＨＰＬＣ分析の一般的方法」において記載した方法を意味する）］ ｔR＝９．５５分。
【０１０７】
化合物４
収量：純粋大環状化合物１２ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．３５（ｂ，１Ｈ）；８．９８（ｂ，１Ｈ）；５．５２（ｄ，１Ｈ，８．４Ｈｚ）；８．３８（ｂ，１Ｈ）；７．２５（ｂ，１Ｈ）；７．１３−７．０７（ｍ，４Ｈ）；６．８６（ｔ，２Ｈ，７．５Ｈｚ）；６．５７（ｄ，２Ｈ，８．７ Ｈｚ）；４．３３（ｂ，１Ｈ）；４．２１−４．０２（ｍ，３Ｈ）；３．７８（ｄｄ，１Ｈ，３．３Ｈｚ；８．１Ｈｚ）；３．６５−３．５４（ｍ，１Ｈ）；３．３１−３．２３（ｍ，１Ｈ）；３．１３−３．０２（ｍ，４Ｈ）；２．７８−２．２．２８−２．１８（ｍ，１Ｈ）；２．０−１．８０（ｍ，２Ｈ）；１．５０−１．３０（ｍ，３Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ，４．５Ｈｚ）；１．２２（ｄ，３Ｈ，４．５Ｈｚ）；１．０１（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）；０．９０（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）；（ｔ，３Ｈ，７．５Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ１７２．２２；１７１．３７；１５７．７７；１５７．４４；１５６．０４；１３１．７６；１３０．８０；１３０．７０；１２７．８８；１２１．８２；１１５．８３；１１１．７１；６２．１３；６０．６２；５４．２１；５２．８１；４７．１３；４２．４７；３３．３１；２９．６９；２９．３０；２８．６１；２０．３６；１９．４４；１８．７２；１７．６０；１３．９７。
Ｃ30Ｈ42Ｎ4Ｏ5についてのＨＲＭＳ 計算値：５３８．３１５５；実測値：５３８．３１４５±０．００１６。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝８．１２分。
【０１０８】
化合物５
収量：純粋大環状化合物１７ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．０２（ｂ，１Ｈ）；８．４７（ｄ，１Ｈ，８．４Ｈｚ）；７．７（ｂ，１Ｈ）；７．５８（ｄ，１Ｈ，５．４Ｈｚ）；７．２８（ｄｄ，１Ｈ，７．８Ｈｚ，０．８Ｈｚ）；７．２０（ｔ，１Ｈ，９．０Ｈｚ，０．８Ｈｚ）；７．１４（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；６．９８−６．９１（ｍ，３Ｈ）；６．６６（ｄ，８．７Ｈｚ）；６．６３（ｄ，１Ｈ，１５．０Ｈｚ）；６．４３（ｄｔ，１Ｈ，６．０Ｈｚ，１５．０Ｈｚ）；４．２８−３．８６（ｍ，６Ｈ）；３．６０−３．４０（ｍ，２Ｈ）；３．２２−３．１２（ｍ，１Ｈ０）；３．０５（ｄ，２Ｈ，５．４Ｈｚ）；１．９２−１．８０（ｍ，１Ｈ）；１．５６−１．４０（ｍ，１Ｈ）；１．３６−１．２０（ｍ，２Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）；０．８４（ｔ，３Ｈ，７．２Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ１７２．５４；１７１．８６；１５８．９７；１５８．５６；１２７．３９；１５５．８４；１３１．６２；１２９．７３；１２９．２０；１２９．０２；１２８．４３；１２６．３０；１２４．５１；１２２．０１；１１５．８５；１１２．８８；６１．２３；５２．９０；５１．２３；４７．０８；４２．６６；３６．１３；３３．３０；２１．１４；１９．５７；１７．０７；１４．１４；１１．４９。
Ｃ28Ｈ36Ｎ4Ｏ5についてのＨＲＭＳ 計算値：５０８．２６８５；実測値：５０８．２６８１±０．００１５。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝７．６７分。
【０１０９】
化合物６
収量：純粋大環状化合物１６ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．３７（ｂ，１Ｈ）；８．８７（ｂ，１Ｈ）；８．６１（ｄ，１Ｈ，８．７Ｈｚ）；７．６２（ｂ，１Ｈ）；７．２７（ｄ，１Ｈ，７．８Ｈｚ）；７．２１（ｔ，１Ｈ，８．４Ｈｚ）；７．１４（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；６．９８−６．８７（ｍ，３Ｈ）；６．６４（ｄ，２Ｈ，８．１Ｈｚ）；６．７０（ｄ，１Ｈ，１５．６Ｈｚ）；６．３９（ｄｔ，１Ｈ，６．３Ｈｚ，１５．６Ｈｚ）；４．４４−４．３６（ｍ，１Ｈ）；４．３４−４．０８（ｍ，２Ｈｚ）；４．４５−３．９２（ｄｔ，１Ｈ，６．９Ｈｚ，１５．６Ｈｚ）；３．７４（ｄｄ，１Ｈ，３．６Ｈｚ，８．４Ｈｚ）；３．５４−３．２６（ｍ，３Ｈ）；３．２２−３．０２（ｍ，３Ｈ）；２．６０−２．３６（ｍ，４Ｈ）；２．２４−２．１４（ｍ，１Ｈ）；２．０２（ｓ，３Ｈ）；１．９６−１．８９（ｍ，１Ｈ）；１．８０−１．６６（ｍ，１Ｈ）；１．０１（ｄ，３Ｈ，６．３Ｈｚ）；０．９０（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ１７１．５１；１７１．２６；１５８．９０；１５８．４９；１５７．３８；１５５．８６；１３１．６３；１２９．８２；１２９．２１；１２８．８６；１２８．６３；１２６．２１；１２１．９８；１１５．８３；１１２．８３；６２．１１；６１．０６；５１．９７；４７．１０；４２．７８；３０．９１；３０．６７；２９．３４；２０．３７；１９．３９；１５．０６。
Ｃ30Ｈ40Ｎ4Ｏ5ＳについてのＨＲＭＳ計算値：５６８．２７１９；実測値：５６８．２７１１±０．００１７。
ＨＰＬＣ Ｒt（一般法）７．９２分。
【０１１０】
化合物８
収量：純粋大環状化合物２７ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．０５（ｂ，１Ｈ）；８．４３（ｂ，１Ｈ）；８．３４（ｄ，１Ｈ，９．３Ｈｚ）；７．４０（ｂ，１Ｈ）；６．９７（ｄ，１Ｈ，７．５Ｈｚ）；６．９２−６．７４（ｍ，９Ｈ）；６．６７−６．５４（ｍ，２Ｈ）；６．３３−６．２５（ｍ，３Ｈ）；６．１０（ｄｔ，１Ｈ，５．７Ｈｚ，１６．２Ｈｚ）；４．２２（ｄｔ，１Ｈ，０．９Ｈｚ，１２Ｈｚ）；３．９４−６．６６（ｍ，４Ｈ）；３．３０（ｄｄ，１Ｈ，３．６Ｈｚ，７．８Ｈｚ）；３．２４（ｍ，１Ｈ）；３．１８（ｍ，１Ｈ）；２．８５−２．６８（ｍ，３Ｈ）；２．４４−２．２３（ｍ，２Ｈ）；１．３２（ｏ，１Ｈ，７．５Ｈｚ）；０．９７−０．８９（ｍ，１Ｈ）；０．４２（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）；０．０１（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ１７１．２０；１５７．３５；１５５．８８；１３９．１２；１３１．６１；１３０．８７；１２９．７４；１２９．２１；１２８．７７；１２８．８８；１２６．８５；１２６．１９；１２１．９７；１１５．８２；１１２．８４；６２．０４；６１．１０；５５．０７；５０．０１；４７．０９；４２．８５；３７．４２；２９．１１。
Ｃ34Ｈ42Ｎ4Ｏ5についてのＨＲＭＳ 計算値：５８６．３１５５；実測値：５８６．３１４５±０．００１７。
ＨＰＬＣ Ｒt（一般法）９．３４分。
【０１１１】
化合物９
収量：純粋大環状化合物１７ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．３９（ｂ，１Ｈ）；８．８３（ｂ，１Ｈ）；８．２９（ｄ，１Ｈ，９．３Ｈｚ）；７．６２（ｂ，１Ｈ）；７．２８（ｄ，１Ｈ，６．６Ｈｚ）；７．２０（ｔ，１Ｈ，６．９Ｈｚ）；７．１２（ｄ，２Ｈ，７．８Ｈｚ）；６．９８−６．９１（ｍ，２Ｈ）；６．６３（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；６．５８（ｄ，１Ｈ，１６．２Ｈｚ）；６．４０（ｄｔ，１Ｈ，５．７Ｈｚ，１６．２Ｈｚ）；４．２９−４．１３（ｍ，３Ｈ）；４．０３−３．９２（ｍ，２Ｈ）；３．５２（ｍ，１Ｈ）；３．１５−３．０５（ｍ，３Ｈ）；２．４５−２．３７（ｍ，１Ｈ）；１．９６−１．８８（ｍ，１Ｈ）；１．２５（ｄｄ，２Ｈ，４．５Ｈｚ；６Ｈｚ）；１．０１（ｄ，３Ｈ，６．３Ｈｚ）；０．９１（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）；０．８６（ｄ，３Ｈ，７．２Ｈｚ）；０．８１（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ１７１．８５；１７１．１７；１５７．３７；１５５．８７；１３１．５９；１２９．８８；１２９．１８；１２８．９７；１２８．７８；１２８．５１；１２６．１６；１２１．９７；１１５．８３；１１２．８５；６１．５５；６１．１８；５８．１５；５４．２２；４７．０８；４２．８９；３６．３２；２９．３５；２９．００；２０．３４；１９．５６；１８．７３；１７．４４。
Ｃ30Ｈ40Ｎ4Ｏ5についてのＨＲＭＳ 計算値：５３６．２９９８；実測値：５３６．２９９０±０．００１７。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝８．１５分。
【０１１２】
化合物１０
収量：純粋大環状化合物２４ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ ９．３３（ｂ，１Ｈ）；８．８２（ｂ，１Ｈ）；８．５６（ｄ，１Ｈ，８．３Ｈｚ）；７．６０（ｂ，１Ｈ）；７．２７（ｄ，２Ｈ，７．８Ｈｚ）；７．２０（ｔ，１Ｈ，７．８Ｈｚ）；７．１３（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；６．９５（ｔ，２Ｈ，７．８Ｈｚ）；６．６４（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；６．５７（ｄ，１Ｈ，１５．４Ｈｚ）；６．３８（ｄｔ，１Ｈ，１５．４Ｈｚ，５．８Ｈｚ）；４．２６−４．１０（ｍ，３Ｈ）；３．９６（ｄｔ，１Ｈ，５．４Ｈｚ，８．４Ｈｚ）；３．７７（ｄｄ，１Ｈ，３．７Ｈｚ，７．８Ｈｚ）；３．５１−３．２４（ｍ，３Ｈ）；３．１８−３．０２（ｍ，３Ｈ）；１．９０（ｈ，１Ｈ，６．４Ｈｚ）；１．７３−１．５４（ｍ，２Ｈ）；１．４５（ｄｔ，１Ｈ，６．７Ｈｚ，０．９Ｈｚ）；０．９９（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）；０．８９（ｄ，３Ｈ，６．３Ｈｚ）；０．８７（ｄ，３Ｈ，６．０Ｈｚ）；０．８０（ｄ，３Ｈ，６．３Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ １７２．２３；１７１．１７；１５７．３７；１５５．８８；１３１．６２；１２９．８２；１２９．１９；１２８．９５；１２８．５９；１２６．２４；１２１．９９；１１５．８４；１１２．８８；６４．２３；６１．９８；６１．１４；５１．４３；６１．１４；５１．４３；４７．０７；４２．８１；２９．３８；２４．８５；２４．１１；２１．００；２０．３２；１９．３０。
Ｃ31Ｈ42Ｎ4Ｏ5についてのＨＲＭＳ 計算値：５５０．３１５５；実測値：５５０．３１５０±０．００１６。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝８．９１分。
【０１１３】
化合物５６
収量：純粋大環状化合物１６ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ ９．３９（ｂ，１Ｈ）；８．９０（ｂ，１Ｈ）；８．６７（ｄ，１Ｈ，８．４Ｈｚ）；７．７４（ｂ，４Ｈ）；７．２９−７．０８（ｍ，４Ｈ）；６．９９−６．８７（ｍ，２Ｈ）；６．６４（ｄ，２Ｈ，８．１Ｈｚ）；６．６１（ｄ，１Ｈ，１６．５Ｈｚ）；６．４０（ｄｔ，１Ｈ，５．７Ｈｚ，１６．５Ｈｚ）；４．４０−４．０６（ｍ，４Ｈ）；４．０２−３．９５（ｍ，１Ｈ）；３．７９（ｄｄ，１Ｈ，３．６Ｈｚ，７．８Ｈｚ）；３．５５−３．３０（ｍ，２Ｈ）；３．１６−３．０５（ｍ，３Ｈ）；２．８２−２．６９（ｍ，２Ｈ）；２．０２−１．８５（ｍ，２Ｈ）；１．６４−１．４３（ｍ，３Ｈ）；１．２９−１．２３（ｍ，１Ｈ）；１．０１（ｄ，３Ｈ，６．３Ｈｚ）；０．９１（ｄ，３Ｈ，６．３Ｈｚ）；０．８６−０．８４（ｍ，２Ｈ）。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝５．７１分。
【０１１４】
化合物６５
収量：純粋大環状化合物１７ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ ９．６０（ｂ，１Ｈ）；９．３９（ｂ，１Ｈ）；８．８８（ｂ，１Ｈ）；８．７０（ｄ，１Ｈ，７．５Ｈｚ）；８．５７（ｄ，１Ｈ，４．２Ｈｚ）；７．２７（ｔ，６Ｈｚ）；６．９６（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；６．６６（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；５．７８−５．６８（ｍ，１Ｈ）；５．４２−５．３３（ｍ，１Ｈ）；３．９６−３．８９（ｍ，１Ｈ）；３．８０−３．５７（ｍ，５Ｈ）；３．４１−３．３４（ｍ，１Ｈ）；３．１０−２．９０（ｍ，１Ｈ）；２．７８−２．６６（ｍ，１Ｈ）；２．２１−２．１０（ｍ，１Ｈ）；２．０６−１．９３（ｍ，１Ｈ）；１．７０−１．６０（ｍ，１Ｈ）；１．５２−１．４１（ｍ，１Ｈ）；１．３９−１．２６（ｍ，１Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ，４．８Ｈｚ）；１．２３（ｄ，３Ｈ，４．５Ｈｚ）；０．８３（ｄｄ，３Ｈ，３Ｈｚ，４．５Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ １７２．６８；１７２．６３；１５９．１５；１５８．７３；１５７．３８；１５７．２５；１３０．８９；１２４．９９；１１６．０３；６２．５１；６２．１２；５４．２９；４９．２７；４２．４７；３２．７７；３０．４３；２８．８５；２０．４６；１９．５９；１８．７２；１７．３９；１３．９０；１３．０９。
Ｃ24Ｈ36Ｎ4Ｏ4についてのＨＲＭＳ 計算値：４４４．２７３６；実測値：４４４．２７２６±０．００１３。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝６．８０分。
【０１１５】
化合物１４４
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ ７．４（ｍ，１Ｈ）；７．２７（ｄｔ，１Ｈ，１．５ Ｈｚ，６．６ Ｈｚ）；７．２２−７．１４（ｍ，２Ｈ）；７．０８−６．９８（ｍ，２Ｈ）；６．７８ ９ｔ，２Ｈ，６．６ Ｈｚ）；４．４５−４．３９（ｍ，２Ｈ）；４．１５（ｄ，２Ｈ，８．１ Ｈｚ）；７．７４（ｄ，１Ｈ，９．３ Ｈｚ）；３．５４（ｄ，１Ｈ，１０．８ Ｈｚ）；３．３５−３．２２（ｍ，２Ｈ）；３．２０（ｑ，１Ｈ，１．５ Ｈｚ）；２．８２−２．７１（ｍ，１Ｈ）；２．６１−２．５５（ｍ，１Ｈ）；２．２１−２．１１（ｍ，１ｈ）；２．０２−１．９４（ｍ，１Ｈ）；１．７４−１．４０（ｍ，５Ｈ）；１．０４（ｄ，３Ｈ，６．６ Ｈｚ）；０．９３（ｄ，３Ｈ，６．６ Ｈｚ）；０．７４−０．６４ ９ｍ，１Ｈ）；０．４５−０．２８（ｍ，２Ｈ）；０．１５−０．０８（ｍ，１Ｈ）；０．０６――０．０２（ｍ，１Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ １７３．２９；１７２．１４；１６７．５１；１５５．４７；１３４．８６；１３４．８１；１３０．３８；１３０．３１；１２８．８１；１２８．２５；１２７．４４；１２１．６３；１１０．３９；１０７．７１；１０５．０２；６７．１０；６６．６６；６２．８１；６２．０６；６０．１０；５３．９９；４１．４４；３６．０７；３１．９１；３０．０１；２９．１８；２８．９４；２７．７９；２３．６８；２３．１５；１９．０８；１８．２５；８．１７；４．９８；３．１６。
Ｃ31Ｈ41Ｎ4Ｏ4ＣｌについてのＨＲＭＳ 計算値：５６８．２８１６；実測値：５６８．２８０２±０．００１７。
【０１１６】
Ｆ．選択した本発明化合物の質量スペクトルデータ
【０１１７】
【表２Ａ】
【表２Ｂ】
【表２Ｃ】
【表２Ｄ】
【表２Ｅ】
【表２Ｆ】
【０１１８】
生物学的方法および結果
方法Ｂ１に記載する競合放射性リガンド結合アッセイを使用して、ヒトモチリン受容体における相互作用能力について、本発明の化合物を評価した。方法Ｂ２、Ｂ３およびＢ４に記載する機能アッセイを使用して、相互作用の他の特性決定を行うことができる。必要であれば、これらの方法のいくつかを高スループットな方法で行って、多くの化合物を同時に評価することができる。ヒトモチリン受容体の合成遺伝子の安定発現に基づくアッセイのような、ＨＴＳに好適な他のアッセイも記載されている。
【０１１９】
方法Ｂ１を使用した本発明の代表的化合物の試験についての結果を、表３に示す。結合活性を、下記のレベルの範囲として示す：Ａ＝０．００１〜０．１０μＭ、Ｂ＝０．１０〜１．０μＭ、Ｃ＝１．０〜１０．０μＭ。その他に、この方法を使用した２つの付加的化合物のアッセイ結果を下記に示す。観測されるように、これは、Ｄ−プロリンを第二認識構成単位として組み込むことによって生じる本発明の式ＩＶの代表的二環式化合物の活性を示す。重要なことに、化合物１（Ｋi＝レベルＢ）の直鎖類似体である化合物１２１の場合に生じる結合活性の欠如は、所望の相互作用を得るのに環状構造が極めて重要であることを示す。
【化３８】
【０１２０】
２つの代表的な本発明の化合物（化合物８および１１）の競合結合曲線を下記に示す：
【化３９】
【０１２１】
結合の機能的有意性の決定のために、方法Ｂ２に記載するエクオリンアッセイにおいて化合物を試験するのが好ましいが、方法Ｂ３の手順も適用できる。表４に示すデータからわかるように、試験した代表的化合物は、モチリン受容体において拮抗物質として作用し、試験した濃度において作用活性を有さない。機能的活性を、下記のレベルの範囲として示す：Ａ＝０．００１〜０．１０μＭ、Ｂ＝０．１０〜１．０μＭ。方法Ｂ２のアッセイのより高い感度（方法Ｃのほぼ１００倍）は、それをこの評価に好ましいものにしている。このことは、正の作用物質標準モチリンに関して各方法で得られたＥＣ50値において明らかである。それに加えて、方法Ｂ２は実際のシグナル事象を測定する（これは、該方法を、所望される効能に、より関連性のあるものにする）が、方法Ｂ３のアッセイはＧＴＰ代謝回転を測定するにすぎない。
【０１２２】
【表３】
【０１２３】
その他に、モチリン受容体に対する作用活性または拮抗活性の測定用の、一般的かつ科学的に認められている生体外アッセイは、ウサギ十二指腸または他の胃腸平滑筋組織の収縮である。A2-A4作用物質は、モチリンペプチドと比較して、＞５０％収縮を誘発する化合物として定義され、拮抗物質は、モチリンへの応答の＞５０％阻害を生じる化合物として定義される。本発明の化合物は、このアッセイにおいて、有意な拮抗活性を示した。例えば、方法Ｂ４に記載するように種々の濃度で得た反応のシルドプロットから計算して、化合物１４４はｐＡ2＝６．９５を示し、化合物１６５はｐＡ2＝７．１７を有していた。
【０１２４】
胃の運動性は、臨床的設定において、胃内容物排出に要する時間、およびそれに続くＧＩ管の通過時間として一般に測定される。胃内容物排出スキャンは、当業者によく知られており、簡単に言えば、経口造影剤、例えばバリウム、または放射性標識食の使用を含む。固体および液体を別々に測定することができる。試験食または液体を同位体（99mＴｃ）で放射性標識し、摂取または投与後に、ＧＩ管の通過時間および胃内容物排出時間を、ガンマカメラで可視化することによって測定する。これらの研究を、治療薬の投与前および投与後に行って、化合物の有効性を定量化する。
【０１２５】
方法例Ｂ１：競合放射性リガンド結合アッセイ（モチリン受容体）
材料：
・ ヒトモチリン受容体で安定にトランスフェクションしたＣＨＯ細胞から膜を調製し、１．５μｇ／アッセイポイントの量で使用した。［ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ（商標） ＳｉｇｎａｌＳｃｒｅｅｎ Ｐｒｏｄｕｃｔ ＃６１１０５４４］
・ ［125Ｉ］−モチリン（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，＃ＮＥＸ−３７８）；最終濃度：０．０４〜０．０６ｎＭ
・ モチリン（Ｂａｃｈｅｍ（商標），＃Ｈ−４３８５）；最終濃度：１μＭ
・ マルチスクリーン採取皿−ＧＦ／Ｂ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（商標），＃ＭＡＨＦＢ１Ｈ６０）
・ ポリプロピレン製ディープウェルタイタープレート（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ（商標），＃２６７００６）
・ ＴｏｐＳｅａｌ−Ａ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，＃６００５１８５）
・ ボトムシール（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，＃ＭＡＴＡＨ０Ｐ００）
・ ＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−０（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，＃６０１３６１１）
・ 結合緩衝液：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ ７．４）、１０ｍＭ ＭｇＣｌ2、１ｍＭ ＥＤＴＡ、０．１％ＢＳＡ
【０１２６】
アッセイ容量：
・ 結合緩衝液で希釈した膜１５０μＬ
・ 結合緩衝液で希釈した化合物１０μＬ
・ 結合緩衝液で希釈した放射性リガンド（［125Ｉ］−モチリン）１０μＬ
化合物の最終試験濃度（Ｎ＝１１）：１０、５、２、１、０．５、０．２、０．１、０．０５、０．０２、０．０１、０．００５μＭ
【０１２７】
化合物取り扱い：
化合物を、１００％ＤＭＳＯで希釈した１０ｍＭの保存濃度においてドライアイス上で凍結し、試験日まで−２０℃で保存した。試験日に、化合物を室温で解凍し、次に、アッセイ緩衝液で所望の試験濃度に希釈した。これらの条件下で、アッセイにおける最大最終ＤＭＳＯ濃度は０．５％であった。
【０１２８】
アッセイプロトコル：
ディープウェルプレートにおいて、希釈細胞膜（１．５μｇ／Ｌ）を、１０μＬの、結合緩衝液（全結合、Ｎ＝５）、１μＭ モチリン（非特異的結合、Ｎ＝３）または適切な濃度の被験化合物と合わす。１０μＬの［125Ｉ］−モチリン（最終濃度０．０４〜０．０６ｎＭ）を各ウェルに添加することによって、反応を開始させる。プレートをＴｏｐＳｅａｌ−Ａで密閉し、ゆるやかに渦をまかせ、室温で２時間培養する。Ｔｏｍｔｅｃハーベスターを使用して、予備浸漬した（０．３％ポリエチレンイミン、２時間）マルチスクリーン採取皿で試料を濾過することによって、反応を停止し、冷たい５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）５００μＬで９回洗浄し、次に、皿を換気フードで３０分間空気乾燥する。２５μＬのＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−０を各ウェルに添加する前に、ボトムシールを皿に適用する。次に、皿をＴｏｐＳｅａｌ−Ａで密閉し、ＴｏｐＣｏｕｎｔ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ Ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ Ｃｏｕｎｔｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）で、各ウェルにつき３０秒間カウントし、結果をカウント／分（ｃｐｍ）で表す。
可変勾配（ｖａｒｉａｂｌｅ ｓｌｏｐｅ）非線形回帰分析を使用して、ＧｒａｐｈＰａｄ（商標） Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）によって、データを分析する。Ｋi値は、［125Ｉ］−モチリンについて０．１６ｎＭのＫｄ値（膜特性決定の間に前もって測定）を使用して計算した。
【数１】
［式中、全結合および非特異的結合は、１μＭ モチリンの非存在または存在においてそれぞれ得たｃｐｍを表す］。
【０１２９】
方法例Ｂ２：エクオリン機能アッセイ（モチリン受容体）
材料：
・ ヒトモチリン受容体を発現するＡｅｑｕｏＳｃｒｅｅｎ（商標）（ＥＵＲＯＳＣＲＥＥＮ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）細胞系（細胞系ＥＳ−３８０−Ａ；受容体受け入れ番号ＡＦ０３４６３２）を使用して、膜を調製した。この細胞系は、Ｇα16およびミトコンドリア的に標的にされるエクオリンを共発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞（参照番号ＥＳ−ＷＴ−Ａ５）に、ヒトモチリン受容体をトランスフェクションすることによって構成される。
・ モチリン（Ｂａｃｈｅｍ，＃Ｈ−４３８５）
・ アッセイ緩衝液：ＤＭＥＭ−Ｆ１２（Ｄｕｌｂｅｃｃｏｅ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅｓ Ｍｅｄｉｕｍ）、ならびに１５ｍＭ ＨＥＰＥＳおよび０．１％ＢＳＡ（ｐＨ７．０）
・ セレンテラジン（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ（商標），Ｌｅｉｄｅｎ，Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）
【０１３０】
化合物の最終試験濃度（Ｎ＝５）：１０、３．１６、１、０．３１６、０．１μＭ
【０１３１】
化合物取り扱い：
化合物を、予備構成９６ウェルプレート中に約１．２μｍｏｌの量で、乾燥薄膜として準備した。化合物を１０ｍＭの濃度で１００％ＤＭＳＯに溶解させ、使用まで−２０℃で保存した。娘プレート（ｄａｕｇｈｔｅｒ ｐｌａｔｅｓ）を３０％ＤＭＳＯおよび０．１％ＢＳＡ中に５００μＭの濃度で準備し、試験まで−２０℃で保存した。試験日に、化合物を室温で解凍し、次に、アッセイ緩衝液で所望の試験濃度に希釈した。これらの条件で、アッセイにおける最大最終ＤＭＳＯ濃度は、０．６％であった。
【０１３２】
細胞調製：
５ｍＭ ＥＤＴＡを補充したＣａ2+およびＭｇ2+不含燐酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含有する培養皿から、細胞を収集し、１０００ｘｇで２分間ペレット化し、５×１０6細胞／ｍＬの密度でアッセイ緩衝液（前記参照）に再懸濁し、５μＭセレンテラジンの存在下に一晩培養する。装填後、細胞をアッセイ緩衝液で５×１０5細胞／ｍＬの濃度に希釈した。
【０１３３】
アッセイプロトコル：
作用試験については、細胞懸濁液５０μＬを、適切な濃度の被験化合物またはモチリン（基準作用物質）５０μＬと、９６ウェルプレート中で混合した（二重試料）。受容体活性化によって生じた発光を、Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｄｒｕｇ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ ６０００「ＦＤＳＳ ６０００」（Ｈａｍａｍａｔｓｕ Ｐｈｏｔｏｎｉｃｓ Ｋ．Ｋ．，Ｊａｐａｎ）を使用して記録した。
【０１３４】
拮抗試験については、作用試験の終了から１５〜３０分後に、約ＥＣ８０濃度のモチリン（即ち、０．５ｎＭ；１００μＬ）を、被験化合物を含有する細胞懸濁液に注入し（二重試料）、受容体の活性化によって生じた発光を、前段落に記載したように測定した。
【０１３５】
結果を相対光単位（ＲＬＵ）で示す。濃度応答曲線を、式Ｅ＝Ｅmax／（１＋ＥＣ50／Ｃ）ｎ［式中、Ｅは所定作用物質濃度（Ｃ）における測定ＲＬＵ値であり、Ｅmaxは最大応答であり、ＥＣ50は５０％刺激を生じる濃度であり、ｎは勾配指数である］に基づく非線形回帰分析（Ｓ字状用量−応答）によって、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して分析した。作用試験に関しては、各濃度の被験化合物の結果を、ＥＣ80に等しい濃度（即ち、０．５ｎＭ）でモチリンによって誘発される信号に対するパーセント活性化として表した。拮抗試験に関しては、各濃度の被験化合物の結果を、ＥＣ80に等しい濃度（即ち、０．５ｎＭ）でモチリンによって誘発される信号に対するパーセント阻害として表した。
【０１３６】
方法例Ｂ３：ＦｌａｓｈＰｌａｔｅモチリン［35Ｓ］−ＧＴＰγＳ機能アッセイ
材料：
・ ヒトモチリン受容体で安定にトランスフェクションしたＣＨＯ細胞から膜を調製し、１．５μｇ／アッセイポイントの量で使用した（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ ＳｉｇｎａｌＳｃｒｅｅｎ Ｐｒｏｄｕｃｔ ＃６１１０５４４）
・ ＧＴＰγＳ（Ｓｉｇｍａ，＃Ｇ−８６３４）
・ ［35Ｓ］−ＧＴＰγＳ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，＃ＮＥＸ−０３０Ｈ）
・ モチリン（Ｂａｃｈｅｍ，＃Ｈ−４３８５）
・ ９６ウェルＦｌａｓｈＰｌａｔｅマイクロプレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，＃ＳＭＰ２００）
・ ポリプロピレン製ディープウェルタイタープレート（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ，＃２６７００６）
・ ＴｏｐＳｅａｌ−Ａ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，＃６００５１８５）
・ アッセイ緩衝液：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ７．４）、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ2、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１μＭ ＧＤＰ、０．１％ＢＳＡ
【０１３７】
アッセイ容量
・ アッセイ緩衝液で希釈した化合物２５μＬ
・ アッセイ緩衝液２５μＬ（作用アッセイ）、またはアッセイ緩衝液で希釈した０．６μＭモチリン（０．１μＭ最終濃度）（拮抗アッセイ）
・ アッセイ緩衝液で希釈した［35Ｓ］−ＧＴＰγＳ １００μＬ
【０１３８】
化合物の最終試験濃度（Ｎ＝１２）：５０、２０、１０、５、２、１、０．５、０．２、０．１、０．０５、０．０２、０．０１μＭ
【０１３９】
化合物取り扱い：
化合物を、１００％ＤＭＳＯで希釈した１０ｍＭの保存濃度においてドライアイス上で凍結し、試験日まで−２０℃で保存した。試験日に、化合物を室温で解凍し、次に、アッセイ緩衝液で所望の試験濃度に希釈した。これらの条件において、アッセイにおける最大最終ＤＭＳＯ濃度は０．５％であった。
【０１４０】
アッセイプロトコル：
ＣＨＯ膜を、９６ウェルＦｌａｓｈＰｌａｔｅマイクロプレートに固定化した。被験化合物ＧＴＰγＳ、モチリン、および［35Ｓ］−ＧＴＰγＳを、前記のアッセイ容量において各ウェルで合わした。
【０１４１】
作用活性を測定するアッセイについては、２５μＬの、緩衝液（基礎値、Ｎ＝４）、１μＭ（最終濃度）モチリン（Ｅmax値、Ｎ＝３）、２５μＭ（最終濃度）ＧＴＰγＳ（非特異値、Ｎ＝４）または適切な濃度の被験化合物（Ｎ＝３）に加えて、さらに２５μＬの緩衝液を、各ウェルに添加した。
【０１４２】
拮抗活性を測定するアッセイについては、２５μＬの、緩衝液（基礎値、Ｎ＝３）、１μＭ（最終濃度）モチリン（Ｅmax値、Ｎ＝３）、２５μＭ（最終濃度）ＧＴＰγＳ（非特異値、Ｎ＝４）または適切な濃度の被験化合物（Ｎ＝３）に加えて、さらに２５μＬの緩衝液（非刺激対照）またはモチリン（０．１μＭ最終濃度）を、各ウェルに添加する。
【０１４３】
１００ｍＬの［35Ｓ］−ＧＴＰγＳを各ウェルに添加することによって、反応を開始する。各プレートを密閉し（ＴｏｐＳｅａｌ−Ａ）、暗所で室温において１５０分間培養する。次に、ＴｏｐＣｏｕｎｔ ＮＸＴによって、各ウェルにつき３０秒間、プレートをカウントする。
【０１４４】
ＩＣ50／ＥＣ50値の算出のために、非線形回帰分析（Ｓ字状用量−応答）を使用して、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ３．０（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）によって、データを分析した。
【数２】
［式中、最大および最小は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍによって算出した用量−応答曲線の最大値および最小値に対応する］。
【０１４５】
方法例Ｂ４：ウサギ十二指腸収縮性アッセイ
クレブス緩衝液を充填し、等張力変換器（ｉｓｏｔｏｎｉｃ ｆｏｒｃｅ ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ）に接続した１０ｍＬの器官槽に、十二指腸切片を前荷重１ｇで垂直につり下げた。安定化時間後に、筋肉細片を１０-4Ｍアセチルコリンで刺激し、洗浄した。安定最大収縮が得られるまで、少なくとも２０分間の間隔をあけてこれを繰り返した（２〜３回）。
【０１４６】
安定基本線に達した後、被験化合物を浴に添加した。１５分間培養した後、対数的に増加する濃度のモチリンを浴に添加することによって（最終濃度１０-9〜１０-6Ｍ）、モチリンへの用量応答を記録した。空試験（被験化合物の非存在）も行った。用量応答曲線の最後に、超最大用量のアセチルコリン（１０-4Ｍ）を添加し、この応答を基準（１００％収縮）として使用した。
【０１４７】
種々の被験化合物濃度における実験の結果を集め、分析して、シルドプロットからｐＡ2値を得た。
【０１４８】
特定の試験法を、例示目的で、本明細書に記載したが、これらの試験法の種々の変法ならびに代替試験法も、本発明の範囲を逸脱せずに使用し得るものと理解される。
【０１４９】
表３：選択化合物の結合活性
【表４Ａ】
【表４Ｂ】
【表４Ｃ】
【表４Ｄ】
【表４Ｅ】
【表４Ｆ】
【表４Ｇ】
【表４Ｈ】
【表４Ｉ】
【表４Ｊ】
【表４Ｋ】
【表４Ｌ】
【表４Ｍ】
【表４Ｎ】
【表４Ｏ】
【表４Ｐ】
【表４Ｑ】
【表４Ｒ】
【表４Ｓ】
【表４Ｔ】
【表４Ｕ】
【表４Ｖ】
【０１５０】
註：
方法Ｂ１を使用して、放射性リガンド競合結合アッセイを行った。
数値を範囲で示した：Ａ＝０．００１〜０．１００μＭ、Ｂ＝０．１００〜１．０μＭ、Ｃ＝１．０〜１０．０μＭ。
ＸはＮＨであり、但し、
化合物２２３および２２５において、Ｘは、
【化４０】
であり、
化合物２２４において、ＸはＮＭｅであり、
化合物２２６において、Ｘは、
【化４１】
であり、
化合物２２７において、Ｘは、
【化４２】
であり、
Ｚ1、Ｚ2およびＺ3はＮＨであり、但し、化合物３０、１７３および１７４おいてＺ1はＯであり、化合物１１１においてＺ2はＯであり、
Ｒ2、Ｒ4およびＲ5は水素であり、但し、化合物８５において、それは、
【化４３】
であり、
ｍ、ｎ1およびｐは０である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、立体配座的に規定された新規大環状化合物、それを含む医薬組成物、およびその製造に使用される中間体に関する。本発明は、特に、モチリン受容体の活性に選択的に拮抗することが示された大環状化合物に関する。本発明は、さらに、胃腸障害、特に、胃の運動性の機能不全または増加したモチリン分泌が観察される一連の胃腸障害、例えば、高モチリン症（ｈｙｐｅｒｍｏｔｉｌｉｎｅｍｉａ）、過敏性腸症候群および消化不良、の治療に有用な、大環状化合物にも関する。
【背景技術】
【０００２】
多くのペプチドホルモンが、吸収、分泌、血流および運動性を包含する胃腸（ＧＩ）管の種々の機能の調節に関与している（Ｍｕｌｖｉｈｉｌｌ，ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｂａｓｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，４th ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｇｒｅｅｎｓｐａｎ，Ｆ．Ｓ．；Ｂａｘｔｅｒ，Ｊ．Ｄ．，ｅｄｓ．，Ａｐｐｌｅｔｏｎ ＆ Ｌａｎｇｅ：Ｎｏｒｗａｌｋ，ＣＴ，１９９４，ｐｐ．５５１−５７０）。脳とＧＩ系との相互作用が、これらの機能の適正な調節に不可欠である故に、ＧＩ管において局所的に、またはＣＮＳにおいて遠位的に、これらのペプチドを産生することができる。
【０００３】
これらのペプチドホルモンの１つであるモチリン（直鎖２２−アミノ酸ペプチド）は、空腹時胃腸運動活性を制御することによって、ＧＩ生理学的系において重要な調節機能を果たしている。従って、該ペプチドは、ヒトを含む哺乳動物において空腹時に十二指腸粘膜から定期的に放出される。より正確には、モチリンは、胃腸管平滑筋の収縮によって胃の運動性に強力な作用を発揮して、胃内容物排出を刺激し、腸管通過時間を短縮し、小腸における移動性運動複合体（ｍｉｇｒａｔｉｎｇ ｍｏｔｏｒ ｃｏｍｐｌｅｘ）のＩＩＩ相を開始させる（Ｉｔｏｈ，Ｚ．，Ｅｄ．，Ｍｏｔｉｌｉｎ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ：Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，１９９０，ＡＳＩＮ：０１２３７５７３０４；Ｎｅｌｓｏｎ，Ｄ．Ｋ．Ｄｉｇ．Ｄｉｓ．Ｓｃｉ．１９９６，４１，２００６−２０１５；Ｐｅｅｔｅｒｓ，Ｔ．Ｌ．；Ｖａｎｔｒａｐｐｅｎ，Ｇ．；Ｊａｎｓｓｅｎｓ，Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９８０，７９，７１６−７１９）。
【０００４】
モチリンは、主にヒト幽門洞および近位十二指腸に存在する受容体を介して、これらの作用を発揮するが、その受容体はＧＩ管の他の領域にも見出される（Ｐｅｅｔｅｒｓ，Ｔ．Ｌ．；Ｂｏｒｍａｎｓ，Ｖ．；Ｖａｎｔｒａｐｐｅｎ，Ｇ．Ｒｅｇｕｌ．Ｐｅｐｔ．１９８８，２３，１７１−１８２）。従って、モチリンホルモンは、ＧＩ系の上部および下部の両方の運動性に関与している（Ｗｉｌｌｉａｍｓ ｅｔ ａｌ．Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９９２，２６２，Ｇ５０−Ｇ５５）。さらに、モチリンおよびその受容体はＣＮＳおよび末梢にも見出され、まだ明確に解明されていない神経系での生理学的役割を示唆している（Ｄｅｐｏｏｒｔｅｒｅ，Ｉ．；Ｐｅｅｔｅｒｓ，Ｔ．Ｌ．Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９９７，２７２，Ｇ９９４−９９９ ａｎｄ Ｏ’Ｄｏｎｏｈｕｅ，Ｔ．Ｌ ｅｔ ａｌ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ １９８１，２，４６７−４７７）。例えば、脳におけるモチリン受容体は、摂食および摂水行動、排尿反射、中枢および脳幹神経調節および脳下垂体ホルモン分泌を包含する多くのＣＮＳ機能において、調節的役割を果たすことが示唆されている（Ｉｔｏｈ，Ｚ．Ｍｏｔｉｌｉｎ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ １９９７，１８，５９３−６０８；Ａｓａｋａｗａ，Ａ．；Ｉｎｕｉ，Ａ．；Ｍｏｍｏｓｅ，Ｋ．；ｅｔ ａｌ．，Ｍ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ １９９８，１９，９８７−９９０ ａｎｄ Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄ，Ｄ．Ｊ．；Ｇａｒｔｈｗａｉｔｅ，Ｔ．Ｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｂｅｈａｖ．１９８７，３９，７５３−７５６）。生理学的研究は、モチリンが摂食行動に及ぼす作用を実際に有することの確かな証拠を提供している（Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄ，Ｄ．Ｊ．；Ｇａｒｔｈｗａｉｔｅ，Ｔ．Ｌ．Ｐｈｙｓ．Ｂｅｈａｖ．１９８７，３９，７３５−７３６）。
【０００５】
最近のヒトモチリン受容体の同定およびクローン化（ＷＯ ９９／６４４３６）は、特定の治療目的のためにその活性を調節し得る薬剤の研究を、簡略化し、促進している。
【０００６】
モチリンは、胃の運動性の調節に不可欠かつ直接的に関与するため、モチリン受容体における活性を減少させる（低運動性）かまたは増加させる（高運動性）薬剤は、これらの適応症の新規有効薬剤を探すさらなる研究において、特に興味のもたれる分野である。
【０００７】
低運動性障害の治療において臨床的用途を有するモチリン受容体のペプチド作用薬が報告されている（Ｕ．Ｓ．５，６９５，９５２、同５，７２１，３５３、同６，０１８，０３７、同６，３８０，１５８、同６，４２０，５２１、Ｕ．Ｓ．Ａｐｐｌ．２００１／００４１７９１、ＷＯ ９８／４２８４０、ＷＯ ０１／００８３０およびＷＯ ０２／０５９１４１）。モチライド（ｍｏｔｉｌｉｄｅｓ）と一般に称されるエリスロマイシン誘導体も、モチリン受容体の作用薬として報告されている（Ｕ．Ｓ．４，９２０，１０２、同５，００８，２４９、同５，１７５，１５０、同５，４１８，２２４、同５，４７０，９６１、同５，５２３，４０１、同５，５５４，６０５、同５，６５８，８８８、同５，８５４，４０７、同５，９１２，２３５、同６，１００，２３９、同６，１６５，９８５、同６，４０３，７７５）。
【０００８】
モチリン受容体の拮抗薬は、下記の疾患を包含する運動高進症および高モチリン症に関連した疾患の治療薬として潜在的に極めて有用である：過敏性腸症候群、消化不良、胃食道逆流性疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、膵臓炎、乳児肥厚性幽門狭窄症、真性糖尿病、肥満症、吸収不良症候群、カルチノイド症候群、下痢、萎縮性結腸炎または胃炎、胃腸ダンピング症候群、胃腸切除後症候群、胃うっ滞、および肥満を生じる摂食障害。
【０００９】
種々のペプチド化合物が、モチリン受容体の拮抗薬として記載されている（Ｄｅｐｏｏｒｔｅｒｅ，Ｉ．；Ｍａｃｉｅｌａｇ，Ｍ．Ｊ．；Ｇａｌｄｅｓ，Ａ．；Ｐｅｅｔｅｒｓ，Ｔ．Ｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９５，２８６，２４１−２４７；ＵＳ ５，４７０，８３０、同６，２５５，２８５、同６，５８６，６３０、同６，７２０，４３３、Ｕ．Ｓ．２００３／０１７６６４３、ＷＯ ０２／６４６２３）。これらのペプチド拮抗薬は、薬剤分子としてのペプチドの既知の限界、特に低い経口バイオアベイラビリティおよび分解代謝を有する。
【００１０】
ペプチド誘導体の環化は、代謝安定性および立体配座自由性の両方に対して、直鎖ペプチドの特性を向上させるために使用される方法である。環状分子は、代謝酵素に対し、より耐性を示す傾向がある。そのような環化テトラペプチドモチリン拮抗薬が報告されている（Ｈａｒａｍｕｒａ，Ｍ．ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，６７０−６７５、Ｕ．Ｓ．２００３／０１９１０５３、ＷＯ ０２／１６４０４）。
【００１１】
自然界の非ペプチドおよび非環状の、他のモチリン拮抗薬も報告されている（Ｕ．Ｓ．５，９７２，９３９、同６，３８４，０３１、同６，３９２，０４０、同６，４２３，７１４、同６，５１１，９８０、同６，６２４，１６５、同６，６６７，３０９、Ｕ．Ｓ．２００２／０１１１４８４、同２００１／０４１７０１、同２００２／０１０３２３８、同２００１／００５６１０６、同２００２／００１３３５２、同２００３／０２０３９０６および同２００２／０００２１９２）。
【００１２】
本発明の大環状モチリン拮抗薬は、ペプチドおよび非ペプチド構造物の両方の成分を組み合わせて含み、この組合せはこの用途に関してこれまで探求されたことがない。
【００１３】
実際に、本発明の拮抗薬の構造的特徴は異なっている。特に、環状ペプチドである既知のモチリン拮抗薬に関して、Ｄ−アミノ酸を含有するそのような誘導体は活性が欠如していることが分かった。これに対して、本発明のトリペプチド擬似化合物については、３つの構造成分の２つにＤ−立体化学が必要とされる。
【００１４】
本発明のモチリン拮抗薬は、立体配座の調節と、疎水性相互作用、水素結合または双極子−双極子相互作用による相互作用のための追加的部位の付与との、２重の役割を果たすテザー（ｔｅｔｈｅｒ）成分を含むという点でも、先行技術と異なる。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
第一の態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
［式中、
Ｚ1、Ｚ2およびＺ3は、Ｏ、ＮおよびＮＲ10からなる群より独立して選択され、ここで、Ｒ10は、水素、低級アルキルおよび置換低級アルキルからなる群より選択され、
Ｒ1は、アリールで置換された低級アルキル、置換アリールで置換された低級アルキル、ヘテロアリールで置換された低級アルキル、および置換ヘテロアリールで置換された低級アルキルからなる群より独立して選択され、
Ｒ2は、水素であり、
Ｒ3は、アルキルおよびシクロアルキルからなる群より独立して選択され、但し、Ｚ1がＮであるとき、Ｒ3はＺ1と共に４、５、６または７員の複素環を形成し得るものとし、
Ｒ4は、水素であり、
Ｒ5およびＲ6は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群より独立して選択され、但し、Ｒ5およびＲ6の少なくとも１つは水素であるものとし、
Ｘは、Ｏ、ＮＲ8およびＮ（Ｒ9）2+からなる群より選択され、ここで、Ｒ8は、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、スルホニル、スルホンアミドおよびアミジノからなる群より選択され、Ｒ9は、水素、低級アルキルおよび置換低級アルキルからなる群より選択され、
ｍ、ｎ1およびｐは、０、１または２から独立して選択され、
Ｔは、式ＩＩ：
−Ｕ−（ＣＨ2）d−Ｗ−Ｙ−Ｚ−（ＣＨ2）e− （ＩＩ）
（式中、ｄおよびｅは、０、１、２、３、４または５から独立して選択され、
Ｕは、式（Ｉ）のＸに結合し、−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
ＹおよびＺは、それぞれ、場合により存在し、
Ｗ、ＹおよびＺは、−Ｏ−、−ＮＲ28−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ2−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＳＯ2−ＮＨ−、−ＮＨ−ＳＯ2−、−ＣＲ29Ｒ30−、ＺまたはＥ配置を有する−ＣＨ＝ＣＨ−、および−Ｃ≡Ｃ−からなる群よりか、または下記の群：
【化２】
から独立して選択される環構造物から、独立して選択され、
該環構造物に含有される任意の炭素原子は、窒素原子で置換することができ、但し、該環構造物が単環式環構造物である場合は、４個以下の窒素原子を有し、該環構造物が２環式環構造物である場合は、６個以下の窒素原子を有すものとし、
Ｇ1およびＧ2は、それぞれ独立して、−Ｏ−、−ＮＲ41−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ2−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＳＯ2−ＮＨ−、−ＮＨ−ＳＯ2−、−ＣＲ42Ｒ43−、ＺまたはＥ配置を有する−ＣＨ＝ＣＨ−、および−Ｃ≡Ｃ−からなる群より選択される共有結合または二価の基を表し、但し、Ｇ1は、Ｇ2より近くでＵに結合するものとし、
Ｋ1、Ｋ2、Ｋ3、Ｋ4、Ｋ6、Ｋ15およびＫ16は、Ｏ、ＮＲ44およびＳからなる群より独立して選択され、
ｆは、１、２、３、４、５または６から選択され、
Ｒ31、Ｒ32、Ｒ38、Ｒ39、Ｒ48およびＲ49は、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドから独立して選択され、
Ｒ33、Ｒ34、Ｒ35、Ｒ36、Ｒ37、Ｒ47、Ｒ50およびＲ51は、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、オキソ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドから独立して選択される）の二価の基である］の化合物、および医薬的に許容されるその塩、水化物または溶媒化合物に関する。
【００１６】
第二の態様において、本発明は、モチリン受容体の拮抗薬である式（１）の化合物も提供する。
【００１７】
第三の態様において、本発明は、治療有効量の式（１）の化合物を投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物におけるモチリン受容体に関連した疾患または運動性機能不全の治療法を提供する。
【００１８】
本発明を例示的実施形態と共に記載するが、本発明の範囲をそのような実施形態に限定するものではないと理解されるものとする。それどころか、添付の特許請求の範囲によって規定されるあらゆる代替物、改変物および等価物を包含するものとする。
【００１９】
［発明の詳細な説明］
前記の式（Ｉ）において、Ｒ1は、−（ＣＨ2）qＲ11および−ＣＨＲ12Ｒ13からなる群より選択するのが好ましく、
ここで、
ｑは、０、１、２または３であり、
Ｒ11およびＲ12は、下記の群：
【化３】
の環構造物から独立して選択され、
ここで、該環構造物中の任意の炭素原子は、窒素原子で置換することができ、但し、該環構造物が単環式環構造物である場合は、４個以下の窒素原子を有し、該環構造物が２環式環構造物である場合は、６個以下の窒素原子を有すものとし、
Ａ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4およびＡ5は、それぞれ場合により存在し、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より独立して選択され、
Ｂ1、Ｂ2、Ｂ3およびＢ4は、ＮＲ14、ＳまたはＯから独立して選択され、ここで、Ｒ14は、水素、アルキル、置換アルキル、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択され、
Ｒ13は、Ｒ11およびＲ12と同様に定義されるか、または低級アルキル、置換低級アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリールおよびアミドを含む群より選択される。
Ａ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4およびＡ5は、ハロゲン、トリフルオロメチル、Ｃ1〜6アルキルまたはＣ1〜6アルコキシから選択するのが最も好ましい。
【００２０】
Ｒ11、Ｒ12およびＲ13は、
【化４】
［式中、ＲaおよびＲbは、Ｃｌ、Ｆ、ＣＦ3、ＯＣＨ3、ＯＨ、Ｃ（ＣＨ3）3およびＣＨ3からなる群より選択される］からなる群より選択するのが好ましい。
【００２１】
式（Ｉ）のＲ3を、下記：
−（ＣＨ2）sＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）（ＣＨ2）tＣＨ3、−ＣＨ（ＯＲ15）ＣＨ3、−ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3、−（ＣＨ2）uＣＨ（ＣＨ3）2、−Ｃ（ＣＨ3）3および−（ＣＨ2）y−Ｒ21
からなる群より選択することも好ましく、
ここで、
ｓおよびｕは、０、１、２、３、４または５から独立して選択され、
ｔは、１、２、３または４から独立して選択され、
ｙは、０、１、２、３または４から選択され、
Ｒ15は、水素、アルキル、置換アルキル、ホルミルおよびアシルからなる群より選択され、
Ｒ21は、下記の群：
【化５】
から選択される環構造物から選択され、
ここで、該環構造物中の任意の炭素原子は、窒素原子で置換することができ、但し、該環構造物が単環式環構造物である場合は、４個以下の窒素原子を有し、該環構造物が２環式環構造物である場合は、６個以下の窒素原子を有すものとし、
ｚは、１、２、３、４または５から選択され、
Ｅ1、Ｅ2およびＥ3は、それぞれ場合により存在し、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より独立して選択され、
Ｊは、場合により存在し、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、オキソ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択される。
【００２２】
式（Ｉ）のテザー部分（Ｔ）は、下記：
【化６】
［式中、
Ｌ1は、Ｏ、ＮＨまたはＮＭｅであり、
Ｌ2は、ＣＨまたはＮであり、
Ｌ3は、ＣＨまたはＮであり、
Ｌ4は、ＯまたはＣＨ2であり、
Ｌ5は、ＣＨまたはＮであり、
Ｌ6は、ＣＲ52Ｒ53またはＯであり、
Ｒ46は、ＨまたはＣＨ3であり、
Ｒ52、Ｒ53、Ｒ54、Ｒ55、Ｒ56およびＲ57は、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノおよびオキソから独立して選択されるか、または、Ｒ52とＲ53、またはＲ54とＲ55、またはＲ56とＲ57とが一緒になって、炭素、酸素、硫黄および／または窒素原子を含有する３〜７員環を独立して形成することができ、
（Ｘ）は、式（Ｉ）のＸへの共有結合部位であり、
（Ｚ3）は、式（Ｉ）のＺ3への共有結合部位である］からなる群より選択するのが好ましい。
【００２３】
本発明の特に好ましい実施形態において、ｍ、ｎおよびｐが０であり、Ｘ、Ｚ1、Ｚ2およびＺ3がＮＨであり、Ｒ2、Ｒ4およびＲ5が水素であり、式（ＩＩＩ）：
【化７】
で示される式（Ｉ）の化合物を提供する
【００２４】
本発明の他の態様によれば、Ｚ1が窒素原子である場合に、Ｒ3がＺ1と共に４、５、６または７員の複素環を形成し、式（ＩＶ）：
【化８】
［式中、
該複素環は、第二窒素原子、または酸素原子または硫黄原子を含有してよく、
ｎ2は、０、１、２または３から選択され、
Ｒ7は、場合により存在し、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、オキソ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択される］で示される式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００２５】
本発明の本文中、アミノ、グアニジン、ウレイドおよびアミジノという用語は、それらの置換誘導体も含むものと理解される。
【００２６】
好ましくは、本発明は、式（１）の化合物を治療有効量で投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物における自発運動過剰症または高モチリン症に関連した疾患の治療法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
本発明の好ましい実施形態を、本明細書に詳しく説明し、不随する構造式、スキームおよび表に示したが、本発明はこれらの実施形態に厳密に限定されるものではなく、本発明の範囲または精神を逸脱せずに、種々の変更および改変をそれらに加え得るものと理解すべきである。
【００２８】
特に好ましい本発明の化合物は、下記の化合物：
【化９】
【化１０】
【化１１】
を包含するがそれらに限定されない。
前記の好ましいテザー部分（Ｔ）に加えて、本発明の化合物に使用される他の特定のテザー部分を下記：
【化１２】
に示す。
【００２９】
好ましい実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物を治療有効量で投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物における、過敏性腸症候群、消化不良、クローン病、胃食道逆流性疾患、潰瘍性大腸炎、膵臓炎、乳児肥厚性幽門狭窄症、カルチノイド症候群、吸収不良症候群、下痢、真性糖尿病、肥満症、胃腸切除後症候群、萎縮性結腸炎または胃炎、胃うっ滞、胃腸ダンピング症候群、セリアック病、および肥満を生じる摂食障害の治療法に関する。
【００３０】
合成方法
Ａ．一般情報
試薬および溶媒は、試薬品質またはそれ以上であり、特に記載がなければ、種々の商業的供給会社から入手した状態のままで使用した。使用したＤＭＦ、ＤＣＭおよびＴＨＦは、（ｉ）脱保護、（ｉｉ）樹脂キャッピング反応、および（ｉｉｉ）洗浄用以外は、ＤｒｉＳｏｌｖ（登録商標）（ＥＭ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｅ．Ｍｅｒｃｋ）または合成等級品質である。アミノ酸（ＡＡ）カップリング反応に使用したＮＭＰは、分析等級である。ＤＭＦは、使用前に、真空下に最低３０分間置くことによって十分に脱気した。Ｔｙｒ（３ｔＢｕ）は、ＪＰ２０００ ４４５９５に記載されている方法によって合成した。Ｃｐａは、文献法（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ ２００３，１４，３５７５−３５８０）を使用して製造するか、または商業的に入手した。Ｂｏｃ−およびＦｍｏｃ−保護アミノ酸および側鎖保護誘導体（Ｎ−メチルおよび非天然アミノ酸の誘導体を包含する）は、商業的供給会社から入手するか、または当業者に既知の標準法によって合成した。Ｄｄｚ−アミノ酸は、標準法によって合成するか、またはＯｒｐｅｇｅｎ（Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）またはＡｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ（Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ，ＫＹ，ＵＳＡ）から商業的に入手した。Ｂｔｓ−アミノ酸は、実施例６に記載のように合成した。ヒドロキシ酸は、商業的供給会社から入手するか、または文献法によって対応するアミノ酸から合成した。分析ＴＬＣは、蛍光指示薬を含有するシリカゲル６０Ｆ２５４のプレコート板（厚さ０．２５ｍｍ）上で行った。「減圧濃縮／蒸発」という用語は、除去される溶媒に適切な、水流吸引器圧、またはメカニカルオイル真空ポンプによって供給されるそれより強い真空下において、回転蒸発器を使用する蒸発を意味する。「ドライパック」は、溶媒で前処理されていないシリカゲル上でのクロマトグラフィーを意味し、これは、一般に、所望生成物と任意不純物の間にＲfの大差が存在する場合に、より大きい規模で精製に適用される。固相化学工程に関して、「標準法での乾燥」は、先ず空気中で（１時間）、次に、真空下（一般に油ポンプ）で、完全に乾燥するまで（約３０分からＯ／Ｎ（一晩）まで）樹脂を乾燥させることを意味する。
【００３１】
Ｂ．本発明の構成単位の合成法
実施例６：Ｂｔｓ−アミノ酸の合成の標準手順
【化１３】
初期ｐＨ約９．５（ｐＨメーター）の、０．２５Ｎ水酸化ナトリウム（０．０８ｍｏｌ、０．８当量）中のアミノ酸またはアミノ酸誘導体（０．１ｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、室温で、固体Ｂｔｓ−Ｃｌ（０．１１ｍｏｌ、１．１当量）を一度に添加した。得られた懸濁液を、２〜３日間勢いよく撹拌した。この間、反応のｐＨを、９．５〜１０．０の範囲に維持するのに必要とされる５．０Ｎ水酸化ナトリウムで調節すべきである。一般に、ｐＨを、最初の５時間は、２０〜３０分ごとに調節すべきである。一旦ｐＨが低下しなくなったら、反応がほぼ終了したことを示す。これは、ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、９５：５）によって確認できる。終了後、反応混合物をＥｔ2Ｏで洗浄した。水性相における非極性不純物の非存在がＴＬＣによって確認されるまで、洗浄を継続する（一般に３×１００ｍＬ）。次に、水溶液を０℃に冷却し、さらに混濁が生じなくなるまで、１Ｎ ＨＣｌでｐＨ２．０に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。または、種々のアミノ酸または誘導体から得た生成物の溶解性に依存して、ＤＣＭおよびＥｔＯＡｃの混合物を抽出溶剤として使用してもよい。抽出の間に形成されるエマルジョンの故に、ＤＣＭを溶剤として単独で使用できないことに注意すべきである。合わした有機相をブライン（２×１５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、減圧蒸発させた。ＤＣＭ（１×）およびヘキサン（２×）を残渣から蒸発させて、ＥｔＯＡｃの完全除去を確実にし、所望化合物を収率５５〜９８％で固形物として得た。
【００３２】
特定のアミノ酸に有効であることがわかった変更を下記に示す：
Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、β−ＡｌａおよびＧＡＢＡ：ジベトシレーション（ｄｉｂｅｔｓｙｌａｔｉｏｎ）を防止するために、Ｂｔｓ−Ｃｌ １当量につき、アミノ酸１．５当量を使用。
【００３３】
Ｍｅｔ：酸化を防止するためにＮ2下で反応を実施する。
ＧｌｎおよびＡｓｎ：Ｂｔｓ−ＧｌｎおよびＢｔｓ−Ａｓｎの溶解性のため、標準手順に必要とされる変更を加えてワークアップを行う。反応の終了後、反応混合物をジエチルエーテルで洗浄した。水性層における非極性不純物の非存在がＴＬＣによって確認されるまで、洗浄を継続する（一般に３×１００ｍＬ）。次に、水性相を０℃に冷却し、６Ｎ ＨＣｌでｐＨ２．０に酸性化した。Ｂｔｓ−ＧｌｎおよびＢｔｓ−Ａｓｎの水溶性のために、溶液の容量を最小限にするために、６Ｎ ＨＣｌを使用した（これと対照的に、それらはＤＣＭ、ＥｔＯＡｃまたはクロロホルムに溶解しにくい）。溶液を０℃で１０分間維持し、生成物を濾過によって、白色沈殿物として収集した。固形物を、冷水（１×）、冷たいブライン（２×）および水（１×、２５℃）で洗浄した。この洗液のｐＨを測定し、約４でない場合は、固形物を水で再び洗浄した。最後に、固形物を冷ＥｔＯＡｃ、次に冷Ｅｔ2Ｏ（２×）で洗浄し、最後に真空乾燥した（油ポンプ）（収率８３〜８５％）。
【００３４】
Ｃ．立体配座的に規定された本発明の大環状化合物の一般的合成法
スキーム１
【化１４】
【００３５】
式Ｉの化合物は、従来の溶液合成技術または固相化学法を使用して合成できる。いずれの場合も、合成は４つのステップを含む。第一に、生物学的標的受容体の認識要素、さらに主に立体配座の調節および規定用のテザー部分１つを含む１〜４個の部分を包含する構成単位の合成。標準化学変換を使用する第二ステップにおいて、これらの構成単位を、一般に逐次的に、集成する。次に、第三ステップで、集成からの先駆物質を環化して、大環状構造物を得る。最後に、保護基の除去および任意精製を含む後環化処理ステップを行って、所望の最終化合物を得る（スキーム１）。この方法は、ＷＯ ０１／２５２５７および米国特許出願第０９／６７９，３３１号に既に開示されている。
【００３６】
Ｄ．本発明の代表的テザーの合成手順
本発明の化合物に必要とされる重要なテザー成分は、ＷＯ ０１／２５２５７、米国暫定特許出願第６０／４９１，２４８号または本明細書に開示されているように合成される。
【００３７】
実施例１６：テザーＴ８の合成の標準手順
【化１５】
【００３８】
ステップＴ８−１：クロロトリメチルシラン（１１６ｍＬ、０．９１ｍｏｌ、１．５当量）を、ＭｅＯＨ（５００ｍＬ、ＨＰＬＣ等級）中の２−ヒドロキシケイ皮酸（１００ｇ、０．６１ｍｏｌ、１．０当量）の懸濁液に、０℃で３０分間にわたって添加した。得られた混合物を室温で撹拌した（Ｏ／Ｎ）。反応をＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ、９８／２）によって監視した。必要であれば、温水中での反応混合物の加熱によって、工程を加速することができる。反応の終了後、反応混合物を減圧蒸発させて、メチル２−ヒドロキシシンナメートを、量的収量（ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｙｉｅｌｄ）で白色固形物（１０８．５ｇ）として得た。この中間体の素性をＮＭＲによって確認する。この反応をより大きい（ｋｇ）規模で行って、同様の結果を得ることができる。
【００３９】
ステップＴ８−２：３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（ＤＨＰ、１４０ｍＬ、１．５４ｍｏｌ、２．５２当量）を、２Ｌの三つ口フラスコ中の２−ブロモエタノール（１０８ｍＬ、１．５１ｍｏｌ、２．５当量）に、機械撹拌しながら０℃で２時間にわたって滴下した。得られた混合物を室温でさらに１時間撹拌した。ステップＴ８−１からのメチル２−ヒドロキシシンナメート（１０８ｇ、０．６１ｍｏｌ、１．０当量）、炭酸カルシウム（９２．２ｇ、０．６７ｍｏｌ、１．１当量）、ヨウ化カリウム（２０ｇ、０．１２ｍｏｌ、０．２当量）およびＤＭＦ（３００ｍＬ、分光分析等級）を、前記のフラスコに添加した。反応混合物を７０℃（外部温度）で２４時間撹拌した。反応をＴＬＣ（ＤＣＭ／Ｅｔ2Ｏ：９５／５）によって監視した。反応物を室温に冷まし、Ｅｔ2Ｏ（４５０ｍＬ）を添加した。無機塩を濾過によって除去し、Ｅｔ2Ｏ（３×５０ｍＬ）で洗浄した。濾液をヘキサン（４００ｍＬ）で希釈し、水（３×５００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。粗エステル（所望生成物および過剰のＢｒ−Ｃ2Ｈ4−ＯＴＨＰ）を、さらに精製せずに次の還元に使用した。
【００４０】
ステップＴ８−３：ＤＩＢＡＬ（１．５２５Ｌ、１．５２５ｍｏｌ、２．５当量、ＤＣＭ中１．０Ｍ）を、無水ＤＣＭ（６１０ｍＬ）中のステップＴ８−２からの前記粗エステル（理論収量に基づいて０．６１ｍｏｌ）の溶液に、機械撹拌しながら−３５℃で１．５時間にわたってゆっくり添加した。得られた混合物を、−３５℃で１．５時間、次に０℃で１．５時間撹拌した。反応をＴＬＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ：５０／５０）によって監視した。反応が終了したら、Ｎａ2ＳＯ4・１０Ｈ2Ｏ（１００ｇ、０．５当量）をゆっくり添加した。水素の発生が観察され、それが沈静化した時に、水を添加した（１００ｍＬ）。混合物を室温に温め、１０分間撹拌し、次に、温水で４０℃に温め、２０分間にわたって還流させながら撹拌した。混合物を室温に冷却し、ＤＣＭ（６００ｍＬ）で希釈し、上部溶液を濾過器にデカントした。フラスコに残留する固形物を、機械撹拌しながらジクロロメタン（５×５００ｍＬ）で洗浄し、濾過した。各洗浄からの濾液をＴＬＣによって検査し、必要であれば、追加洗浄を行って、追加生成物を回収した。代替ワークアップ手順において、ＤＣＭ（６００ｍＬ）での希釈後に、混合物を濾過した。次に、Ｓｏｘｈｌｅｔ抽出器を使用して、生じた固形物をジクロロメタン中０．５％のＴＥＡで連続的に抽出した。この代替手順によって、より高い収量が一般に得られたが、これは、より長い時間を要する。濾液を減圧濃縮して、残渣をドライパック（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン／Ｅｔ3Ｎ：２０／８０／０．５）によって精製して、生成物アルコールを黄色がかった油状物として得た（収率：９０％）。素性および純度をＮＭＲによって確認した。
【００４１】
ステップＴ８−４：無水ＤＭＦ２００ｍＬ中の、ステップＴ８−３からのアリル型アルコール（２８ｇ、０．１００ｍｏｌ、１．０当量）と、コリジン（０．１１０ｍｏｌ、１．１当量）との混合物に、無水ＤＭＦ１００ｍＬに溶解させた無水ＬｉＣｌ（４．２６ｇ、０．１００ｍｏｌ、１．０当量）をＮ2下に添加した。次に、混合物を０℃に冷却し、ＭｓＣｌ（１２．６７ｇ、０．１１０ｍｏｌ、１．１当量、Ｐ2Ｏ5で新たに蒸留）を滴下した。反応を室温に温め、ＴＬＣ（３：７ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって監視した。反応が終了した際に、ＮａＮ3（３２．７ｇ、０．５００ｍｏｌ、５．０当量）を添加した。反応混合物をＯ／Ｎ 室温で撹拌して進行させ、次に、ＮＭＲを行った（ｓｔｉｒｒｅｄ ａｔ ｒｔ Ｏ／Ｎ ｗｉｔｈ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｂｙ ＮＭＲ）。反応が終了したら、混合物を氷冷水浴に注ぎ、ジエチルエーテル（３×）で抽出した。次に、合わした有機相を、クエン酸緩衝液（２×）、飽和炭酸水素ナトリウム（２×）、最後にブライン（１×）で順次に洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。アリル型アジドを合計収率９０％で得、それは次のステップに使用するのに十分な質であった。
【００４２】
ステップＴ８−５：ＰＰｈ3（２５．９ｇ、０．０９９ｍｏｌ、１．５当量）を、ＴＨＦ１００ｍＬ中のステップＴ８−４からのアリル型アジド（２０．０ｇ、０．０６６ｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、０℃で添加した。溶液を、０℃で３０分間および室温で２０時間撹拌した。次に、水（１２ｍＬ）を添加し、得られた溶液を６０℃で４時間加熱した。溶液を室温に冷却し、２Ｎ ＨＣｌ（１５ｍＬ）を添加し、混合物を５０℃で９０分間撹拌した。分離した有機相を０．０５Ｎ ＨＣｌ（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わした水性相をＥｔ2Ｏ（５×１５０ｍＬ）およびトルエン（４×１５０ｍＬ）で洗浄し（ＴＬＣ後に、さらなる抽出が必要な場合がある）、それらを合わし、０．０５Ｎ ＨＣｌ（１×１００ｍＬ）で逆抽出した。この逆抽出からの酸性水性相を、主要水性相と合わし、エーテル（５×１５０ｍＬ）で再び洗浄した。次に、水性相のｐＨを、水酸化ナトリウム（５Ｎ）の添加によって８〜９に調節した。次のステップで必要とされる反応条件により、９より高いｐＨにならないように注意すべきである。水性相を減圧濃縮する（アスピレーター、次に、油ポンプ）か、または凍結乾燥した。トルエン（２×）を残渣に添加し、次に、減圧蒸発して、微量の水を除去した。粗生成物（所望アミノアルコール、および無機塩）を、さらに精製せずに次の反応に使用した。
【００４３】
ステップＴ８−６：ＤＭＦ（１８０ｍＬ）中の、ステップＴ８−５からの粗アミノアルコール（理論収量に基づいて０．５ｍｏｌ）と、Ｄｄｚ−ＯＰｈ（１７４ｇ、０．５５ｍｏｌ、１．１当量）と、Ｅｔ3Ｎ（７０ｍＬ、０．５ｍｏｌ、１．０当量）との混合物を、５０℃で２４時間撹拌した。必要であれば追加のＤＭＦを添加して、全ての物質を溶解させる。反応をＴＬＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ：５０／５０、ニンヒドリン検出）によって監視した。反応の終了後、反応混合物を、Ｅｔ2Ｏ（１．５Ｌ）および水（３００ｍＬ）で希釈した。分離した水性相をＥｔ2Ｏ（２×１５０ｍＬ）で抽出した。合わした有機相を水（３×５００ｍＬ）およびブライン（１×５００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。生成物が水性相に残らないことを確実にするために、相をＴＬＣによって監視した。残っていることが示された場合は、Ｅｔ2Ｏを使用して水性相をさらに１回またはそれ以上抽出して、この物質を回収する。粗生成物をドライパック（推奨カラム条件：ＥｔＯＡｃ／ヘキサン／Ｅｔ3Ｎ、３５／６５／０．５〜６５／３５／０．５）によって精製して、テザーＤｄｚ−Ｔ８を淡黄色シロップ状物として得た（収率：〜４０％）。生成物の素性および純度をＮＭＲによって確認した。
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：１．６ｐｐｍ（ｓ，６Ｈ，２×ＣＨ3），３．６−３．８ｐｐｍ（広幅 ｓ，１０ Ｈ，２×ＯＣＨ3，２×ＯＣＨ2），３．９５ｐｐｍ（三重項，２Ｈ，ＣＨ2Ｎ），６−６．２ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，２×ＣＨ），６．２−６．５ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ，３×ＣＨ，芳香族），６．６−７．６ｐｐｍ（ｍ，５Ｈ，芳香族）。
【００４４】
実施例１７：テザーＴ９の標準合成手順
【化１６】
【００４５】
６５ｇ規模における、Ｔ９−０からのＤｄｚ−Ｔ９の収量は、６０．９ｇ（９１％）であった。
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ７．１９−７．０１（ｍ，２Ｈ），６．９２−９．８３（ｍ，２Ｈ），６．５３（ｂｓ，２Ｈ），６．３４（ｔ，１Ｈ），５．１７（ｂｔ，１Ｈ），４．０８（ｍ，２Ｈ），３．９８（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｓ，６Ｈ），３．０１（ｂｑ，２Ｈ），２．６６（ｔ，３Ｈ），１．２６（ｂｓ，８Ｈ）；
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ１６０．９，１５６．８，１５５．６，１４９．６，１３０．４，１２７．５，１２１．２，１１１．７，１０３．２，９８．４，８０．，６９．７，６１．６，５５．５，４０．３，３０．５，２９．３，２７．４。
【００４６】
テザーＴ９は、Ｔ８から、ステップＴ９−３のような還元によるか、または当業者に既知の他の適切な水素化触媒を使用して合成することもできる。
【００４７】
実施例１８：Ｄｄｚ−プロパルギルアミンの合成の標準手順
【化１７】
乾燥させた三つ口フラスコ中で、脱気したＤＭＦ（Ｄｒｉｓｏｌｖ、３８８ｍＬ）中のプロパルギルアミン（５３．７ｇ、０．９７５ｍｏｌ、１．５当量）の溶液を、Ｄｄｚ−Ｎ3（１７０．９ｇ、０．６５ｍｏｌ、１．０当量）、テトラメチルグアニジン（ＴＭＧ、８１．４ｍＬ、０．６５ｍｏｌ、１．０当量）およびＤＩＰＥＡ（１１３．１ｍＬ、０．６５ｍｏｌ、１．０当量）で処理し、Ｏ／Ｎ ５０℃で撹拌した。反応をＴＬＣ（条件：２５／７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、Ｒf：０．２５；検出：ＵＶ、ニンヒドリン）によって監視した。終了後、ＤＭＦを乾燥するまで減圧蒸発させ、残渣をＥｔ2Ｏ（１Ｌ）に溶解させた。有機溶液を、クエン酸緩衝液（ｐＨ４．５、３×）、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（２×）およびブライン（２×）で順次に洗浄し、次に、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。薄オレンジ色固形物を得た。この固形物をヘキサン中の１％ＥｔＯＡｃですりつぶし、次に、濾過によって収集し、真空乾燥させて（油ポンプ）、所望生成物（１５３．４ｇ、８５．２％）を得た。
【００４８】
実施例１９：テザーＴ１０の合成の標準手順
方法Ａ
【化１８】
【００４９】
このテザーを得る２つの選択的経路を開発した。第一の合成法は、商業的に入手可能なレゾルシノールのモノベンゾエート（Ｔ１０−０）から出発して進めた。実施例９からの保護アミノアルコールを使用する標準条件下のミツノブ反応、次に、ベンゾエートの鹸化を行って、再結晶後に高収量でＴ１０−１を得た。示された最適化条件を使用する２−ブロモエタノールでのフェノールのアルキル化を行って、ドライパック精製後に所望生成物Ｄｄｚ−Ｔ１０を収率４２％で得た。
ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン １：１、検出：ＵＶ、ニンヒドリン；Ｒf＝０．１７）。
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ ７．１８，ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ；６．５１，ｍ，５Ｈ；６．３４，ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ；５．１９，ｓ，１Ｈ；４．０５，ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．０Ｈｚ；３．９４，ｍ，４Ｈ；３．７５，ｓ，６Ｈ；３．４９，ｄ，２Ｈ Ｊ＝５．２Ｈｚ；１．７３，ｓ，６Ｈ。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ １６０．８５６；δ １６０．１５２；１６０．００５；１５５．４１０；１４９．３０５；１３０．２７９；１０７．４３８；１０７．３１０；１０３．１６３；１０１．８７７；９８．５１７；６９．４８８；６７．３８２；６１．５９５；５５．４２７；４０．４２０；２９．４２７。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR：７．２５分。
ＭＳ：４２０（Ｍ＋Ｈ）。
【００５０】
方法Ｂ
Ｔ１０を得る第二合成経路を、下記のスキーム：
【化１９】
に示す。
【００５１】
レゾルシノールから出発して、２つの連続ミツノブ反応を、図示した適切な２個の炭素シントン（それら自体は、既知の保護法によって、２−アミノエタノールおよびエチレングリコールからそれぞれ誘導される）を使用して行う。最後に、ここでも標準条件下に、シリルエーテルを脱保護してＢｏｃ−Ｔ１０を得た。
【００５２】
２つの方法の収量は同程度であるが、第一の方法は、必要とされる機械操作が少なく、より大きい規模の場合に好ましい。
【００５３】
実施例２０：テザーＴ１１の合成の標準手順
【化２０】
【００５４】
ＴＬＣ（１５：８５ ＴＨＦ／ＤＣＭ；検出：ＵＶ；Ｒf：０．３３）。
1Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ ８．００，ｄ，１Ｈ；７．３２，ｄ，１Ｈ；７．１５，ｍ，１Ｈ；６．４４，ｓ，２Ｈ；６．３３，ｓ，１Ｈ；３．９９，ｔ，２Ｈ；３．７１，ｍ，８Ｈ；２．８９，ｍ＝４，２Ｈ；２．７１，ｔ，２Ｈ；１．７１，ｍ＝５，２Ｈ；１．６１，ｓ，６Ｈ。
13Ｃ ＮＭＲ（溶媒 ＤＭＳＯ−ｄ6）δ １６０．８７９；１５３．２７５；１５１．４０５；１５０．４４７；１４０．７７３；１２２．６６６；１１８．９３４；１０３．３４７；９８．４５６；７９．７７８；７０．４４９；６０．２１２；５５．７１７；５５．５９９；２９．７４０；２８．５９２。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR：５．４分。
ＭＳ：４１９（Ｍ＋Ｈ）。
【００５５】
実施例２６：テザーＴ１２の合成の標準手順
【化２１】
【００５６】
火炎乾燥した３Ｌの三つ口フラスコ中で、脱気したＤＭＦ（１Ｌ、０．４Ｍ）中の（アミノメチル）フェニルチオベンジルアルコール（１２−０、９６ｇ、０．３９ｍｏｌ）の溶液を調製した。この溶液に、ＤｄｚＮ3（０．９５当量）、次にＴＭＧ（０．３９ｍｏｌ、４９ｍＬ）を添加した。反応物を１０分間撹拌し、次に、ＤＩＰＥＡ（６８ｍＬ、０．３９ｍｏｌ）を添加した。ＤｄｚＮ3が残留していないことがＴＬＣによって示されるまで（一般に４８時間）、混合物をＮ2下に５０℃で加熱した（ＴＬＣ溶離剤：ＥｔＯＡｃ：ヘキサン ５０：５０；検出：ニンヒドリン）。終了後に、クエン酸緩衝液３Ｌを反応混合物に添加し、分離した水性相をＥｔ2Ｏ（３×１５００ｍＬ）で抽出した。合わした有機相を、クエン酸緩衝液（２×２００ｍＬ）、水（２×２００ｍＬ）およびブライン（２×２００ｍＬ）で順次に洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濾液を減圧蒸発させた。ダークオレンジの油状物を得、これをドライパックで精製した。この手順のために、油状物をＥｔＯＡｃ：ヘキサン：ＤＣＭ：ＴＥＡ（２０：８０：１：０．５、ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）に先ず溶解させた。ここで、完全な溶解を確実にするために、少し余分のＤＣＭが必要な場合もあった。溶液をカラムに装填し、次に、所望生成物に極めて類似した物質に特に注意を払って、全ての不純物が分離されたことがＴＬＣによって示されるまで、カラムをＥｔＯＡｃ：ヘキサン：ＤＣＭ：Ｅｔ3Ｎ（２０：８０：１：０．５）で溶離した。次に、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：Ｅｔ3Ｎ ３０：７０：０．５（ｖ／ｖ／ｖ）、最後にＥｔＯＡｃ：ヘキサン：Ｅｔ3Ｎ（５０：５０：０．５）で溶離を継続して、所望生成物を得た。生成物を含有する画分から溶媒を減圧除去した後に、残渣を最少量のＤＣＭに溶解させ、３倍の量のヘキサンを添加し、次に、溶媒を再び減圧蒸発させた。この処理を、灰色がかった白色の泡状物が得られるまで繰り返した。該泡状物を、真空乾燥（油ポンプ）しながら凝固させた。または、該物質は、ＤＣＭ（１×）およびヘキサン（２×）での逐次濃縮後に固形物を生じた。テザーＤｄｚ−Ｔ１２を灰色がかった白色の固形物として得た（収率８５〜９０％）。
【００５７】
実施例２９：ミツノブ反応を使用する、テザーの付加の標準手順
実施例２９−Ａ：ＰＰｈ3−ＤＩＡＤ単離アダクトを使用
ＴＨＦまたはＴＨＦ−トルエン（１：１）中の適切なテザー（１．５当量）の０．２Ｍ溶液に、ＰＰｈ3−ＤＩＡＤ（当量の試薬を混合することによって予備形成し、溶媒の蒸発によって単離した；実施例２９−Ｃ参照）アダクト（１．０当量）を添加した。得られた混合物を、手で１０秒間撹拌し（溶液を混濁状に維持した）、次に、樹脂に添加した。または、樹脂を溶液に添加した。反応懸濁液を、Ｏ／Ｎ撹拌した（約５分後に、混合物が清澄になった）。樹脂を濾過し、２×ＤＣＭ、１×トルエン、１×ＥｔＯＨ、１×トルエン、１×（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）、１×（ＴＨＦ／ＭｅＯＨ）、１×（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）、１×（ＴＨＦ／ＭｅＯＨ）、２×ＤＣＭで洗浄し、次に、標準法で乾燥した。
【００５８】
実施例２９−Ｂ：「ＰＰｈ3−ＤＩＡＤインサイチュー手順」を使用
ＴＨＦまたはＴＨＦ−トルエン（１：１）中の適切なテザー（４当量）の０．２Ｍ溶液に、トリフェニルホスフィン（４当量）を添加した。得られた混合物を、均質溶液が得られるまで手でシェイクし、次に、樹脂に添加した。または、樹脂（または樹脂含有ＭｉｎｉＫａｎｓ）を溶液に添加した。次に、この懸濁液に、ＤＩＡＤ（３．９当量）を添加し、反応を撹拌した（Ｏ／Ｎ）。注意：より大きい規模の場合、反応が発熱性である故に、反応を氷浴で冷却すべきである。それに加えて、適切な通気孔を与えて、蓄積された圧力を放出させるべきである。樹脂を濾過し、ＤＣＭ（２×）、トルエン（１×）、ＥｔＯＨ（１×）、トルエン（１×）、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１×）、１×ＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１×）、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１×）、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１×）、２×ＤＣＭで洗浄し、次に、標準法で乾燥した。
【００５９】
実施例２９−Ｃ：ＰＰｈ3−ＤＩＡＤアダクトの合成手順
【化２２】
【００６０】
ＴＨＦ（０．４Ｍ）中のトリフェニルホスフィン（１当量）の十分に撹拌した溶液に、ＤＩＡＤ（１当量）を、窒素下に０℃で滴下した。次に、混合物を、撹拌しながら０℃に３０分間維持した。得られた白色固形物を濾過によって収集し（中型フリット濾過器を使用）、洗液が無色になるまで、冷たい無水ＴＨＦで洗浄し、最後に、無水Ｅｔ2Ｏで１回洗浄した。次に、白色固体生成物を真空乾燥し（油ポンプ）、窒素下に保存した。（注意：ＰＰｈ3−ＤＩＡＤアダクトは、すぐに必要とされる量より多く製造して、窒素下に保存することができ、この試薬を無水条件下に保存することが極めて重要である。）
【００６１】
実施例３０：還元的アミノ化による、テザーの付加の標準手順
実施例２９のミツノブ法は、適用することができないか、またはテザーの組み込みに有効でない場合がある。従って、好ましいテザーの１つについて下記に示すように、テザーの組み込みに使用できる還元的アミノ化が、代替法として開発された。同様の化学を使用して、本発明の他のテザーを組み込むことができる。
【化２３】
【００６２】
ＤＭＳＯ−Ｅｔ3Ｎ−ＤＣＭ中のＳＯ3・ピリジンを使用して、Ｄｄｚ誘導体として保護されたアミンを有するテザー（３０−２）を、対応するアルデヒド３０−２に効率的に酸化した。このアルデヒド（０．１４ｍｍｏｌ、５６ｍｇ、１．５当量、樹脂支持体の添加量に基づく）を、ＴＭＯＦ−ＭｅＯＨの１：３混合物（ＤｒｉＳｏｌｖ、４ｍＬ）に室温で溶解させた。トリペプチドを含有する樹脂（３０−１、末端アミンの脱保護からのそのトリフルオロ酢酸塩として）をこれに添加し、混合物を短時間撹拌して、樹脂を湿らせ、次に、ボラン−ピリジン錯体（商業的に入手可能な８Ｍ溶液として、２３μＬ、２当量）を懸濁液に導入した。反応を撹拌し（Ｏ／Ｎ）、次に、樹脂を濾過し、ＤＣＭ（２×）、ＴＨＦ（１×）、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ［３：１］（１×）、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ［３：１］（１×）、ＤＣＭ（２×）で洗浄し、標準法で乾燥した。所望の樹脂結合生成物３０−３が、ジアルキル化物質で汚染されないよう注意すべきである。しかし、反応が終了まで進まなくても、または少量のジアルキル化副生成物が存在していても、生成物は大環状化反応に十分な純度である。
【００６３】
実施例３２：テザーＴ２８の合成の標準手順
【化２４】
２−ヒドロキシベンズアルデヒド２８−０のヘンリー反応によって、２８−１を収率７９％で得た。次に、先ず水素化硼素ナトリウムで、次に接触水素添加によって、還元して、アミンを得、次に、これをそのＢｏｃ誘導体２８−２として保護した。これらの最初の２つのステップの収率は、より大きい規模の場合、より低かった。２−ブロモエタノールのＴＢＤＭＳエーテル（それ自体は標準法で合成される）での２８−２のアルキル化によって、２８−３を収率７４％で得た。標準条件下でのシリルエーテルの脱保護によって、所望の保護テザーＢｏｃ−Ｔ２８を得た。保護／脱保護ステップを避けるフェノールアルキル化用の炭酸エチレンの代替的使用では、収率７３％を生じた。
【００６４】
実施例３６：テザーＴ３２の合成の標準手順
【化２５】
【００６５】
ＴＬＣ（１００％ ＥｔＯＡｃ；検出：ＵＶ，ＣＭＡ；Ｒf＝０．２４）。
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，ｐｐｍ）：７．７４（１Ｈ，ｄｄ），７．３５（１Ｈ，ｄ），６．７２（１Ｈ，ｄ），６．５３−６．４９（２Ｈ，ｍ），３．６１−３．２９（１Ｈ，ｍ），５．０６（１Ｈ，ｔ），４．２５−４．０１（２Ｈ，ｍ），３．９１−３．８９（２Ｈ，ｍ），３．７３（３Ｈ，ｓ），２．９９（２Ｈ，ｄｄ），２．６３（２Ｈ，ｔ），１．７１（８Ｈ，広幅），１．５３（９Ｈ，ｓ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，ｐｐｍ）：１６３．８，１６２．２，１６１．０，１５９．７，１５５．９，１４９．４，１３０．０，１２９．１，１２８．０，１２６．８，１１０．８，９８．１，８０．９，７９．３，６９．７，６１．３，５５．５，３９．１，２９．３，２８．５，２６．７。
【００６６】
実施例３７：テザーＴ３３ａおよびＴ３３ｂの合成の標準手順
【化２６】
【００６７】
このテザーの（Ｒ）−異性体（Ｔ３３ａ）の合成は、２−ヨードフェノール（３３−０）および（Ｓ）−メチルラクテート（３３−Ａ）から出発して行った。３３−０および３３−Ａのミツノブ反応を、立体配置の反転と共に極めて高い収率で進めて、３３−１を得た。対応するアルコール（３３−２）へのエステルの還元も、高い収率で行われ、次に、Ｄｄｚ−プロパルギルアミンとのソナガシラ（Ｓｏｎａｇａｓｈｉｒａ）反応を行った。得られたカップリング生成物３３−３におけるアルキンを、接触水素添加によって還元した。スカベンジャー樹脂でのワークアップを行って、所望生成物Ｄｄｚ−Ｔ３３ａを得た。
【００６８】
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ（ｐｐｍ）７．１８−７．１１（ｍ，２Ｈ），６．９０（ｍ，２Ｈ），６．５２（ｍ，２Ｈ），６．３３（ｍ，１Ｈ），５．０９（ｂｔ，１Ｈ），４．５２（ｍ，１Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．０８（ｂｑ，２Ｈ），２．６４（ｂｔ，２Ｈ），１．７５（ｍ，８Ｈ）；１．２７（ｂｄ，３Ｈ），13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ １６０．８，１５５．５，１４９．５，１３１．２，１３０．６，１２７．４，１２１．２，１１３．３，１０３．２，９８，４，８０．７，７４．８，６６．５，５５，４，４０．２，３０．６，２９．３，２９．２，２７．４，１６．１。
ＨＰＬＣ（標準勾配）：ｔR：７．９３分
【００６９】
（Ｓ）−鏡像異性体（Ｄｄｚ−Ｔ３３ｂ）の合成は、（Ｒ）−メチルラクテート（３３−Ｂ）で開始して、同じ方法によって行われ、同程度の収率であった。
【化２７】
【００７０】
実施例３８：テザーＴ３４の合成の標準手順
【化２８】
【００７１】
ＴＬＣ（１００％ ＥｔＯＡｃ；検出：ＣＭＡ，Ｒf＝０．５）。
Ｃ24Ｈ35Ｎ3Ｏ7のＭＷ計算値４７７．５５；ＭＳ実測値（Ｍ＋Ｈ）+ ４７８。
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ１．６２（ｍ，２Ｈ），１．７０（ｍ，８Ｈ），２．４３（ｍ，２Ｈ），２．６７（ｍ，２Ｈ），３．０７（ｍ，２Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），３．４３（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｍ，２Ｈ），３．７５（ｓ，６Ｈ），５．４０（ｓｂ，１Ｈ），６．３１（ｓ，１Ｈ），６．４９（ｓ，２Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ２３．２５（ＣＨ2），２５．９７（ＣＨ2），２８．５６（ＣＨ3），３９．３１（ＣＨ3），３０．０９（ＣＨ3），３１．２５（ＣＨ2），３２．１９（ＣＨ2），４０．１６（ＣＨ2），５５．４７（ＣＨ3），６１．３８（ＣＨ2），８０．６５（Ｃｑ），９９．３８（Ｃｑ），１０３．１７（Ｃｑ），１１１．０１（Ｃｑ），１４９，６０（Ｃｑ），１５１．３３（Ｃｑ），１５２．４６（Ｃｑ），１６０．８０（Ｃｑ）。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR：６．６８分。
【００７２】
実施例３９：テザーＴ３５の合成の標準手順
【化２９】
【００７３】
ＴＬＣ（２５／７５ ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ；検出：ＵＶ，ニンヒドリン；Ｒf＝０．０３）
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ ７．０６−７．００（ｂｔ，１Ｈ），６．６１−６．５２（ｍ，４Ｈ），６．３５（ｍ，１Ｈ），５．１２（ｂｔ，１Ｈ），４．０３（ｍ，２Ｈ），３．９５（ｍ，２Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．１１−３．０４（ｂｑ，２Ｈ），２．６０（ｂｔ，２Ｈ），１．７５（ｍ，８Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ １６３．９，１６０．９，１６０．６，１５７．６，１５７．５，１５５．６，１４９．５，１３０．８，１３０．６，１２５．９，１０７．２６，１０６．９，１０３．２，９８，４，８０．８，７７．５，６９．９，６１，３，６０．９，６０．６，５５，４，４０．３，３０．４，２９．３，２６．９。
ＨＰＬＣ（標準勾配）：ｔR＝８．３７分。
【００７４】
実施例４０：テザーＴ３６の合成の標準手順
【化３０】
【００７５】
ＴＬＣ：（２５／７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ，ニンヒドリン；Ｒf＝０．０３）
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ（ｐｐｍ）：６．８４−６．７５（ｍ，３Ｈ），６．５２（ｂｓ，２Ｈ），６．３４（ｍ，１Ｈ），５．１７（ｂｔ，１Ｈ），４．０１（ｍ，２Ｈ），３．９３（ｍ，２Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．１０（ｂｑ，２Ｈ），２．６３（ｂｔ，２Ｈ），１．７４（ｍ，８Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ １６０．９，１５８．９，１５５．８，１５５．６，１５２．９，１５２．９，１４９．５，１３２．４，１３２．３，１１７．１，１１６．８，１１２．７，１１２．６，１０３．２，９８．４，８０．８，７０．４，６１．６，５５．５，４０．２，３０．３，２９．３，２７．４。
ＨＰＬＣ（標準勾配）：ｔR＝８．２９分。
【００７６】
実施例４１：テザーＴ３７の合成の標準手順
【化３１】
【００７７】
ＴＬＣ（２５／７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ，ニンヒドリン；Ｒf＝０．０３）
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ ７．１２−７．０８（ｂｄ，２Ｈ），６．７６−６．７３（ｄ，１Ｈ），６．５２（ｍ，２Ｈ），６．３３（ｂｓ，１Ｈ），５．１５（ｂｔ，１Ｈ），４．０２（ｍ，２Ｈ），３．９５（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｓ，６Ｈ），３．０９（ｂｑ，２Ｈ），２．６１（ｂｔ，２Ｈ），１．７４（ｍ，８Ｈ）。13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ １６０．８，１５５．６，１５５．４，１４９．５，１３２．４，１３０．１，１２７．０，１２６．０，１１２．８，１０３．２，９８．４，８０．８，７０．０，６１．４，５５．５，４０．３，３０．２，２９．３，２４．５，２７．４。
ＨＰＬＣ（標準勾配）：ｔR＝９．６０分。
【００７８】
実施例４２：テザーＴ３８の合成の標準手順
【化３２】
【００７９】
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ ７．２０−７．１０（ｍ，２Ｈ），６．９５−６．８０（ｍ，２Ｈ），６．５５（ｂｓ，２Ｈ），６．３５（ｓ，１Ｈ），５．１８（ｂｔ，１Ｈ），４．１２（ｍ，１Ｈ），３．９５（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｓ，６Ｈ），３．１５（ｂｑ，２Ｈ），２．６５（ｔ，２Ｈ），１．９８（ｂｓ，２Ｈ），１．６５（ｂｓ，６Ｈ），１．２５（ｍ，３Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ１６０．８，１５６．６，１５５．８，１４９．６，１３０．４，１２７．５，１２１．３，１１１．７，１０３．２，９８．４，８０．７，７３．５，６６．６，５５．５，４０．２，３０．５，２９．３，２９．１，２７．３，１９．５。
【００８０】
キラルＴ３８は、文献に記載されている不斉合成法、分解またはキラルクロマトグラフィー法を使用して得ることができる。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝８．４６分。
【００８１】
キラル物質は、キラルエポキシドから出発して得ることができる。例えば、Ｔ３８の（Ｓ）−異性体を、（Ｓ）−プロピレンオキシドから総収率８９％で合成した。
【００８２】
実施例４３：テザーＴ３９の合成の標準手順
【化３３】
【００８３】
ＴＬＣ（５０％ＥｔＯＡｃ，５０％ヘキサン；検出：ＵＶおよびＣＭＡ；Ｒf＝０．２５）
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，ｐｐｍ）：７．１１−７．０８（２Ｈ，ｍ），６．８６（１Ｈ，ｔ），６．７６（１Ｈ，ｄ），５．０５（１Ｈ，広幅），４．２６−３．８５（４Ｈ，ｍ），３．２２−３．０７（２Ｈ，ｍ），２．７１（１Ｈ，広幅），１．６６−１．６０（２Ｈ，ｍ），１．３３（９Ｈ，ｓ），１．１７（３Ｈ，ｄ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，ｐｐｍ）：１５６．１，１３５．０，１２７．１，１２７．０，１２１．４，１１１．７，６９．９，６１．５，３９．８，３８．４，２８．７，２０．７。
【００８４】
キラルＴ３９は、文献に記載されている不斉合成法、分解またはキラルクロマトグラフィー法を使用して得ることができる。
【００８５】
実施例４４：テザーＴ４０の合成の標準手順
【化３４】
【００８６】
ＴＬＣ（５０％ＥｔＯＡｃ，５０％ヘキサン；検出：ＵＶおよびＣＭＡ；Ｒf＝０．２５）
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，ｐｐｍ）：７．１１−７．０８（２Ｈ，ｍ），６．８６（１Ｈ，ｔ），６．７６（１Ｈ，ｄ），５．０５（１Ｈ，広幅），４．２６−３．８５（４Ｈ，ｍ），３．２２−３．０７（２Ｈ，ｍ），２．７１（１Ｈ，広幅），１．６６−１．６０（２Ｈ，ｍ），１．３３（９Ｈ，ｓ），１．１７（３Ｈ，ｄ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，ｐｐｍ）：１５６．１，１３５．０，１２７．１，１２７．０，１２１．４，１１１．７，６９．９，６１．５，３９．８，３８．４，２８．７，２０．７。
【００８７】
キラルＴ４０は、文献に記載されている不斉合成法、分解またはキラルクロマトグラフィー法を使用して得ることができる。
【００８８】
実施例４５：テザーＴ４１の合成の標準手順
【化３５】
【００８９】
ＴＬＣ（１００％ ＥｔＯＡｃ；検出：ＣＭＡ；Ｒf＝０．５）
1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ．１．２３（ｓ，３Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），１．６９（ｓ，３Ｈ），１．７４（ｓ，３Ｈ），１．９０（ｍ，２Ｈ），２．３５（ｍ，１Ｈ），３．３５（ｍ，２Ｈ），３．７６（ｓ，６Ｈ），３．９２（ｍ，２Ｈ），４．４０（ｍ，２Ｈ），５．１０（ｍ，１Ｈ），６．１５（ｓ，１Ｈ），６．２５（ｓ，２Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ２５．５２（ＣＨ3），２７．５３（ＣＨ3），２８．８８（ＣＨ3），２９．６１（ＣＨ3），３５．９２（ＣＨ2），４２．６２（ＣＨ2），５５．４３（ＣＨ3），６０．６０（ＣＨ2），８２．３８（ＣＨ），８３．３３（ＣＨ），８３．６８（ＣＨ），８４．９６（ＣＨ），９８．２６（ＣＨ），１０３．２３（ＣＨ），１１８．３（Ｃｑ），１４９．５０（Ｃｑ），１５６．２０（Ｃｑ），１６０．０２（Ｃｑ）。
ＨＰＬＣ（標準勾配）：ｔR＝６．６４分。
ＭＳ：Ｍ＋Ｈ 実測値：４３９。
【００９０】
実施例４６：テザーＴ４２の合成の標準手順
【化３６】
【００９１】
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ６．８２−６．９８（ｍ，２Ｈ）；６．８０−６．７５（ｍ，１Ｈ）；６．５３（ｓ，２Ｈ）；６．３５（ｔ，１Ｈ，２ Ｈｚ）；５．２３（ｂ，１Ｈ）；４．０８（ｍ，１Ｈ）；３．９０−３．６８（ｍ，８Ｈ）；３．２０−２．９７（ｍ，２Ｈ）；２．９５−５３（ｍ，４Ｈ）；２．０−１．６３（ｍ，１０Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１６０．８５；１５５．５６；１５２．５５；１４９．５６；１２８．１３；１２７．７７；１２０．２８；１０３．２２；９８．４３；８０．７２；７６．８０；６５．７６；５５．４６；４０．２３；３０．４５；２９．３４；２９．２２；２７．１０；２４．９７；２３．９４。
【００９２】
Ｅ．本発明の大環状化合物の合成法の例
スキーム２：本発明の大環状化合物についてのチオエステル法
【化３７】
【００９３】
示したアミノ酸の１つまたはそれ以上を、対応するヒドロキシ酸で置き換えることができ、当業者に既知の方法を使用して、次の構成単位に結合させることができる。
【００９４】
実施例４７：チオエステルリンカーを使用する大環状化の標準手順
環化先駆物質を含有する樹脂を、適切な容器中で、予備洗浄ＭＰ−カーボネート樹脂［Ａｒｇｏｎａｕｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡによって市販されているＭＰ−カーボネート樹脂を３×ＴＨＦ（４００ｇにつき１Ｌ）で処理し、真空炉において、Ｏ／Ｎ ３０℃で乾燥した］（合成樹脂の初期添加量に対して１．４〜１．６当量）と合わす。次に、ＴＨＦ中の０．２Ｍ ＤＩＰＥＡ溶液を、合わした樹脂に添加し（１ｍＬ／６０ｍｇ ＭＰ−カーボネート樹脂）、懸濁液をＯ／Ｎ室温で撹拌した。次に、樹脂を濾過し、２×ＴＨＦで濯いだ。合わした濾液を適切な容器に収集し、次に、揮発性含有物を減圧蒸発させて［標準法に加えて、遠心蒸発（ＴｈｅｒｍｏＳａｖａｎｔ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，ＳｐｅｅｄＶａｃまたは同等物）を使用して、溶媒を真空除去することもできる］、粗大員環を得る。
【００９５】
実施例４８：チオエステルリンカーを使用する、銀補助大環状化の標準手順
環化自体および後のワークアップ除いて、この手順は実施例４７の手順と同じである。環化先駆物質を含有する樹脂を、適切な容器中で、予備洗浄ＭＰ−カーボネート樹脂［Ａｒｇｏｎａｕｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓによって市販されているＭＰ−カーボネート樹脂をＴＨＦ（３×、４００ｇにつき１Ｌ）で処理し、真空炉においてＯ／Ｎ ３０℃で乾燥した］（合成樹脂の初期添加量に対して１．４〜１．６当量）と合わす。これに、ＴＨＦ（樹脂１００ｍｇにつき１ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸銀（樹脂の初期添加量に対して１当量）を添加した。最後に、０．２Ｍ溶液を得るのに十分な量のＤＩＰＥＡを添加した。反応混合物を室温で撹拌した（Ｏ／Ｎ）。次に、溶液を濾過し、樹脂を２×ＴＨＦで洗浄した。濾液を適切な容器に収集し、次に、減圧蒸発させて［揮発性含有物は、遠心蒸発（ＴｈｅｒｍｏＳａｖａｎｔ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，ＳｐｅｅｄＶａｃまたは同等物）を使用して、真空除去することもできる］、粗大員環を得る。この手順のために、トリフルオロ酢酸銀を、使用以外の間は、乾燥器に保存すべきである。それに加えて、酸化銀の形成を最小限にするために、新しいビン（またはＮ2もしくはＡｒ下に最近開封したビン）のＴＨＦを使用することが推奨される。
【００９６】
さらに、Ｇｒｕｂｂｓ ｅｔ ａｌ．によって開発された閉環メタセシス（ＲＣＭ）法を使用して、本発明のいくつかの大環状化合物を得ることができる（例えば、ＵＳ ５，８１１，５１５；Ｇｒｕｂｂｓ，Ｒ．Ｈ．ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００１，６６，５２９１−５３００；Ｆｕｅｒｓｔｎｅｒ，Ａ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０００，３９，３０１２−３０４３参照）。
【００９７】
本発明の化合物の特定の誘導体を得るために、一般スキームにおける反応に付加的な反応が必要であった。いくつかの誘導体について、大環の形成前に、誘導される官能基を反応させることが好都合であった。環構造は、その官能基への試薬の接近を制限することができる。例えば、環の第二級窒素原子が誘導体化部位である大環状化合物のＮ−メチルおよびＮ−アシル誘導体の合成においては、適切な環化プロトコルの適用前に反応を行うのが好ましい。
【００９８】
他の場合、例えば、側鎖官能基の誘導体化の場合、大環の形成後に反応を行うのが最も好ましかった。例えば、側鎖におけるアミノ部分のさらなる反応は、部分的に保護された大員環の反応によって一般に効率的に行われた。このように、アシル化、スルホニル化、アルキル化（還元的アミノ化による）、グアニジンおよび尿素形成を、標準法によって行った。
【００９９】
下記の表１は、代表的であるが限定するものではない、本発明のいくつかの代表的化合物の化学合成の概要を示す。
【０１００】
【表１Ａ】
【表１Ｂ】
【表１Ｃ】
【表１Ｄ】
【表１Ｅ】
【表１Ｆ】
【表１Ｇ】
【０１０１】
Ｄ．本発明の選択化合物についての分析データ
1Ｈおよび13Ｃ ＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ Ｍｅｒｃｕｒｙ ３００ＭＨｚ分光器で記録し、溶媒の残留プロトン信号に関して内部参照する。溶液中の分子の立体配座についての情報は、当業者に既知の適切な二次元ＮＭＲ法を使用して得ることができる。ＨＰＬＣ精製は、Ｗａｔｅｒｓ ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘシステムを使用して、Ｗａｔｅｒｓ ＸＴｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８カラムで行った。自動中圧クロマトグラフィー精製は、１６までの試料を同時に精製することができる使い捨てシリカまたはＣ１８カートリッジを使用するＩｓｃｏ ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ １６ｘシステムで行った。ＭＳスペクトルは、Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍ ＩＩまたはＺＱシステムで記録した。ＨＲＭＳスペクトルは、ＶＧ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＡＢ−ＺＦ分光器で記録した。ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅデータベースソフトウエア（ＩＤＢＳ、Ｇｕｉｌｄｆｏｒｄ，Ｓｕｒｒｅｙ，ＵＫ）を使用して、化学的および生物学的情報を蓄積し、分析した。
【０１０２】
分析用ＨＰＬＣ分析の一般的方法
ＨＰＬＣ分析は、Ｗａｔｅｒｓ Ａｌｌｉａｎｃｅ ｓｙｓｔｅｍ ２６９５を、１ｍＬ／分で操作して、Ｘｔｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８カラム４．６×５０ｍｍ（３．５μｍ）を使用して行う。Ｗａｔｅｒｓ ９９６ ＰＤＡによって、純度評価用のＵＶデータを得た。ＬＣＰａｃｋｉｎｇｓスプリッタ（５０：４０：１０）は、流れを３部分に分離することを可能にした。第一部分（５０％）は、素性確認用のＡＰＣＩプローブを取り付けたＭｉｃｒｏｍａｓｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍ ＩＩ ＭＳに行った。第二部分（４０％）は、純度評価用の蒸発光散乱検出器（ＥＬＳＤ，Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ＰＬ−ＥＬＳ−１０００）に行き、最後の部分（１０％）は、定量化および純度評価用の化学発光窒素検出器（ＣＬＮＤ、Ａｎｔｅｋ Ｍｏｄｅｌ ８０６０）に行った。最新版のＷａｔｅｒｓ Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍソフトウエアパッケージを使用して、データを取り込み、処理した。
【０１０３】
本発明の化合物に好適な例示的ＬＣ法は、溶媒ＡとしてＭｅＯＨ、溶媒ＢとしてＨ2Ｏ、および溶媒Ｄとして１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏを使用する。最初の移動相組成は、Ａ５％、Ｂ８５％およびＤ１０％である。標準勾配法の詳細を下記に示す：
【０１０４】
時間 Ａ％ Ｂ％ Ｄ％ 曲線
０．００ ５ ８５ １０ ６
１．００ ５ ８５ １０ ６
６．００ ５０ ４０ １０ ６
９．００ ５０ ４０ １０ ６
１４．００ ９０ ０ １０ ６
１７．００ ９０ ０ １０ ６
１７．５０ ５ ８５ １０ ６
２０．００ ５ ８５ １０ ６
【０１０５】
化合物２〜６、８〜１０、５６、６５および１４４は、下記の表（３）に規定する通りである。
【０１０６】
化合物２
収量：純粋大環状化合物１２ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ８．８３（ｍ，１Ｈ）；８．５３（ｍ，１Ｈ）；７．６３（ｍ，１Ｈ）；７．４−７．０８（ｍ，７Ｈ）；７．００−６．８４（ｍ，２Ｈ）；６．６０（ｄ，１５Ｈｚ，１Ｈ）；６．４１（ｄｔ，１５Ｈｚ，５．４ Ｈｚ，１Ｈ）；４．３５（ｍ，１Ｈ）；４．２５−４．０５（ｍ，３Ｈ）；３．９４（ｄｔ，１Ｈ，６Ｈｚ，１５Ｈｚ）；３．７９（ｄｄ，１Ｈ，３．６Ｈｚ，８．４ Ｈｚ）；３．６０（ｍ，１Ｈ）；３．５２−３．４０（ｂｄ，１Ｈ）；３．２２−３．０６（ｍ，４Ｈ）；１．８８（ｍ，２Ｈ）；１．５４−１．２８（ｍ，２Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ，４．８Ｈｚ）；１．２２（ｄ，３Ｈ，２．７ Ｈｚ）；０．９２−０．８０（ｍ，６Ｈ）。
Ｃ30Ｈ40Ｎ4Ｏ4に関するＨＲＭＳ 計算値：５２０．３０４９；実測値：５２０．３０５７±０．００１６。
ＨＰＬＣ［標準勾配法（「分析用ＨＰＬＣ分析の一般的方法」において記載した方法を意味する）］ ｔR＝９．５５分。
【０１０７】
化合物４
収量：純粋大環状化合物１２ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．３５（ｂ，１Ｈ）；８．９８（ｂ，１Ｈ）；５．５２（ｄ，１Ｈ，８．４Ｈｚ）；８．３８（ｂ，１Ｈ）；７．２５（ｂ，１Ｈ）；７．１３−７．０７（ｍ，４Ｈ）；６．８６（ｔ，２Ｈ，７．５Ｈｚ）；６．５７（ｄ，２Ｈ，８．７ Ｈｚ）；４．３３（ｂ，１Ｈ）；４．２１−４．０２（ｍ，３Ｈ）；３．７８（ｄｄ，１Ｈ，３．３Ｈｚ；８．１Ｈｚ）；３．６５−３．５４（ｍ，１Ｈ）；３．３１−３．２３（ｍ，１Ｈ）；３．１３−３．０２（ｍ，４Ｈ）；２．７８−２．２．２８−２．１８（ｍ，１Ｈ）；２．０−１．８０（ｍ，２Ｈ）；１．５０−１．３０（ｍ，３Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ，４．５Ｈｚ）；１．２２（ｄ，３Ｈ，４．５Ｈｚ）；１．０１（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）；０．９０（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）；（ｔ，３Ｈ，７．５Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ１７２．２２；１７１．３７；１５７．７７；１５７．４４；１５６．０４；１３１．７６；１３０．８０；１３０．７０；１２７．８８；１２１．８２；１１５．８３；１１１．７１；６２．１３；６０．６２；５４．２１；５２．８１；４７．１３；４２．４７；３３．３１；２９．６９；２９．３０；２８．６１；２０．３６；１９．４４；１８．７２；１７．６０；１３．９７。
Ｃ30Ｈ42Ｎ4Ｏ5についてのＨＲＭＳ 計算値：５３８．３１５５；実測値：５３８．３１４５±０．００１６。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝８．１２分。
【０１０８】
化合物５
収量：純粋大環状化合物１７ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．０２（ｂ，１Ｈ）；８．４７（ｄ，１Ｈ，８．４Ｈｚ）；７．７（ｂ，１Ｈ）；７．５８（ｄ，１Ｈ，５．４Ｈｚ）；７．２８（ｄｄ，１Ｈ，７．８Ｈｚ，０．８Ｈｚ）；７．２０（ｔ，１Ｈ，９．０Ｈｚ，０．８Ｈｚ）；７．１４（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；６．９８−６．９１（ｍ，３Ｈ）；６．６６（ｄ，８．７Ｈｚ）；６．６３（ｄ，１Ｈ，１５．０Ｈｚ）；６．４３（ｄｔ，１Ｈ，６．０Ｈｚ，１５．０Ｈｚ）；４．２８−３．８６（ｍ，６Ｈ）；３．６０−３．４０（ｍ，２Ｈ）；３．２２−３．１２（ｍ，１Ｈ０）；３．０５（ｄ，２Ｈ，５．４Ｈｚ）；１．９２−１．８０（ｍ，１Ｈ）；１．５６−１．４０（ｍ，１Ｈ）；１．３６−１．２０（ｍ，２Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）；０．８４（ｔ，３Ｈ，７．２Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ１７２．５４；１７１．８６；１５８．９７；１５８．５６；１２７．３９；１５５．８４；１３１．６２；１２９．７３；１２９．２０；１２９．０２；１２８．４３；１２６．３０；１２４．５１；１２２．０１；１１５．８５；１１２．８８；６１．２３；５２．９０；５１．２３；４７．０８；４２．６６；３６．１３；３３．３０；２１．１４；１９．５７；１７．０７；１４．１４；１１．４９。
Ｃ28Ｈ36Ｎ4Ｏ5についてのＨＲＭＳ 計算値：５０８．２６８５；実測値：５０８．２６８１±０．００１５。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝７．６７分。
【０１０９】
化合物６
収量：純粋大環状化合物１６ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．３７（ｂ，１Ｈ）；８．８７（ｂ，１Ｈ）；８．６１（ｄ，１Ｈ，８．７Ｈｚ）；７．６２（ｂ，１Ｈ）；７．２７（ｄ，１Ｈ，７．８Ｈｚ）；７．２１（ｔ，１Ｈ，８．４Ｈｚ）；７．１４（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；６．９８−６．８７（ｍ，３Ｈ）；６．６４（ｄ，２Ｈ，８．１Ｈｚ）；６．７０（ｄ，１Ｈ，１５．６Ｈｚ）；６．３９（ｄｔ，１Ｈ，６．３Ｈｚ，１５．６Ｈｚ）；４．４４−４．３６（ｍ，１Ｈ）；４．３４−４．０８（ｍ，２Ｈｚ）；４．４５−３．９２（ｄｔ，１Ｈ，６．９Ｈｚ，１５．６Ｈｚ）；３．７４（ｄｄ，１Ｈ，３．６Ｈｚ，８．４Ｈｚ）；３．５４−３．２６（ｍ，３Ｈ）；３．２２−３．０２（ｍ，３Ｈ）；２．６０−２．３６（ｍ，４Ｈ）；２．２４−２．１４（ｍ，１Ｈ）；２．０２（ｓ，３Ｈ）；１．９６−１．８９（ｍ，１Ｈ）；１．８０−１．６６（ｍ，１Ｈ）；１．０１（ｄ，３Ｈ，６．３Ｈｚ）；０．９０（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ１７１．５１；１７１．２６；１５８．９０；１５８．４９；１５７．３８；１５５．８６；１３１．６３；１２９．８２；１２９．２１；１２８．８６；１２８．６３；１２６．２１；１２１．９８；１１５．８３；１１２．８３；６２．１１；６１．０６；５１．９７；４７．１０；４２．７８；３０．９１；３０．６７；２９．３４；２０．３７；１９．３９；１５．０６。
Ｃ30Ｈ40Ｎ4Ｏ5ＳについてのＨＲＭＳ計算値：５６８．２７１９；実測値：５６８．２７１１±０．００１７。
ＨＰＬＣ Ｒt（一般法）７．９２分。
【０１１０】
化合物８
収量：純粋大環状化合物２７ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．０５（ｂ，１Ｈ）；８．４３（ｂ，１Ｈ）；８．３４（ｄ，１Ｈ，９．３Ｈｚ）；７．４０（ｂ，１Ｈ）；６．９７（ｄ，１Ｈ，７．５Ｈｚ）；６．９２−６．７４（ｍ，９Ｈ）；６．６７−６．５４（ｍ，２Ｈ）；６．３３−６．２５（ｍ，３Ｈ）；６．１０（ｄｔ，１Ｈ，５．７Ｈｚ，１６．２Ｈｚ）；４．２２（ｄｔ，１Ｈ，０．９Ｈｚ，１２Ｈｚ）；３．９４−６．６６（ｍ，４Ｈ）；３．３０（ｄｄ，１Ｈ，３．６Ｈｚ，７．８Ｈｚ）；３．２４（ｍ，１Ｈ）；３．１８（ｍ，１Ｈ）；２．８５−２．６８（ｍ，３Ｈ）；２．４４−２．２３（ｍ，２Ｈ）；１．３２（ｏ，１Ｈ，７．５Ｈｚ）；０．９７−０．８９（ｍ，１Ｈ）；０．４２（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）；０．０１（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ１７１．２０；１５７．３５；１５５．８８；１３９．１２；１３１．６１；１３０．８７；１２９．７４；１２９．２１；１２８．７７；１２８．８８；１２６．８５；１２６．１９；１２１．９７；１１５．８２；１１２．８４；６２．０４；６１．１０；５５．０７；５０．０１；４７．０９；４２．８５；３７．４２；２９．１１。
Ｃ34Ｈ42Ｎ4Ｏ5についてのＨＲＭＳ 計算値：５８６．３１５５；実測値：５８６．３１４５±０．００１７。
ＨＰＬＣ Ｒt（一般法）９．３４分。
【０１１１】
化合物９
収量：純粋大環状化合物１７ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ９．３９（ｂ，１Ｈ）；８．８３（ｂ，１Ｈ）；８．２９（ｄ，１Ｈ，９．３Ｈｚ）；７．６２（ｂ，１Ｈ）；７．２８（ｄ，１Ｈ，６．６Ｈｚ）；７．２０（ｔ，１Ｈ，６．９Ｈｚ）；７．１２（ｄ，２Ｈ，７．８Ｈｚ）；６．９８−６．９１（ｍ，２Ｈ）；６．６３（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；６．５８（ｄ，１Ｈ，１６．２Ｈｚ）；６．４０（ｄｔ，１Ｈ，５．７Ｈｚ，１６．２Ｈｚ）；４．２９−４．１３（ｍ，３Ｈ）；４．０３−３．９２（ｍ，２Ｈ）；３．５２（ｍ，１Ｈ）；３．１５−３．０５（ｍ，３Ｈ）；２．４５−２．３７（ｍ，１Ｈ）；１．９６−１．８８（ｍ，１Ｈ）；１．２５（ｄｄ，２Ｈ，４．５Ｈｚ；６Ｈｚ）；１．０１（ｄ，３Ｈ，６．３Ｈｚ）；０．９１（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）；０．８６（ｄ，３Ｈ，７．２Ｈｚ）；０．８１（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ１７１．８５；１７１．１７；１５７．３７；１５５．８７；１３１．５９；１２９．８８；１２９．１８；１２８．９７；１２８．７８；１２８．５１；１２６．１６；１２１．９７；１１５．８３；１１２．８５；６１．５５；６１．１８；５８．１５；５４．２２；４７．０８；４２．８９；３６．３２；２９．３５；２９．００；２０．３４；１９．５６；１８．７３；１７．４４。
Ｃ30Ｈ40Ｎ4Ｏ5についてのＨＲＭＳ 計算値：５３６．２９９８；実測値：５３６．２９９０±０．００１７。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝８．１５分。
【０１１２】
化合物１０
収量：純粋大環状化合物２４ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ ９．３３（ｂ，１Ｈ）；８．８２（ｂ，１Ｈ）；８．５６（ｄ，１Ｈ，８．３Ｈｚ）；７．６０（ｂ，１Ｈ）；７．２７（ｄ，２Ｈ，７．８Ｈｚ）；７．２０（ｔ，１Ｈ，７．８Ｈｚ）；７．１３（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；６．９５（ｔ，２Ｈ，７．８Ｈｚ）；６．６４（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；６．５７（ｄ，１Ｈ，１５．４Ｈｚ）；６．３８（ｄｔ，１Ｈ，１５．４Ｈｚ，５．８Ｈｚ）；４．２６−４．１０（ｍ，３Ｈ）；３．９６（ｄｔ，１Ｈ，５．４Ｈｚ，８．４Ｈｚ）；３．７７（ｄｄ，１Ｈ，３．７Ｈｚ，７．８Ｈｚ）；３．５１−３．２４（ｍ，３Ｈ）；３．１８−３．０２（ｍ，３Ｈ）；１．９０（ｈ，１Ｈ，６．４Ｈｚ）；１．７３−１．５４（ｍ，２Ｈ）；１．４５（ｄｔ，１Ｈ，６．７Ｈｚ，０．９Ｈｚ）；０．９９（ｄ，３Ｈ，６．６Ｈｚ）；０．８９（ｄ，３Ｈ，６．３Ｈｚ）；０．８７（ｄ，３Ｈ，６．０Ｈｚ）；０．８０（ｄ，３Ｈ，６．３Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ １７２．２３；１７１．１７；１５７．３７；１５５．８８；１３１．６２；１２９．８２；１２９．１９；１２８．９５；１２８．５９；１２６．２４；１２１．９９；１１５．８４；１１２．８８；６４．２３；６１．９８；６１．１４；５１．４３；６１．１４；５１．４３；４７．０７；４２．８１；２９．３８；２４．８５；２４．１１；２１．００；２０．３２；１９．３０。
Ｃ31Ｈ42Ｎ4Ｏ5についてのＨＲＭＳ 計算値：５５０．３１５５；実測値：５５０．３１５０±０．００１６。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝８．９１分。
【０１１３】
化合物５６
収量：純粋大環状化合物１６ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ ９．３９（ｂ，１Ｈ）；８．９０（ｂ，１Ｈ）；８．６７（ｄ，１Ｈ，８．４Ｈｚ）；７．７４（ｂ，４Ｈ）；７．２９−７．０８（ｍ，４Ｈ）；６．９９−６．８７（ｍ，２Ｈ）；６．６４（ｄ，２Ｈ，８．１Ｈｚ）；６．６１（ｄ，１Ｈ，１６．５Ｈｚ）；６．４０（ｄｔ，１Ｈ，５．７Ｈｚ，１６．５Ｈｚ）；４．４０−４．０６（ｍ，４Ｈ）；４．０２−３．９５（ｍ，１Ｈ）；３．７９（ｄｄ，１Ｈ，３．６Ｈｚ，７．８Ｈｚ）；３．５５−３．３０（ｍ，２Ｈ）；３．１６−３．０５（ｍ，３Ｈ）；２．８２−２．６９（ｍ，２Ｈ）；２．０２−１．８５（ｍ，２Ｈ）；１．６４−１．４３（ｍ，３Ｈ）；１．２９−１．２３（ｍ，１Ｈ）；１．０１（ｄ，３Ｈ，６．３Ｈｚ）；０．９１（ｄ，３Ｈ，６．３Ｈｚ）；０．８６−０．８４（ｍ，２Ｈ）。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝５．７１分。
【０１１４】
化合物６５
収量：純粋大環状化合物１７ｍｇを得た（ＣＬＮＤ定量化）。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ ９．６０（ｂ，１Ｈ）；９．３９（ｂ，１Ｈ）；８．８８（ｂ，１Ｈ）；８．７０（ｄ，１Ｈ，７．５Ｈｚ）；８．５７（ｄ，１Ｈ，４．２Ｈｚ）；７．２７（ｔ，６Ｈｚ）；６．９６（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；６．６６（ｄ，２Ｈ，８．４Ｈｚ）；５．７８−５．６８（ｍ，１Ｈ）；５．４２−５．３３（ｍ，１Ｈ）；３．９６−３．８９（ｍ，１Ｈ）；３．８０−３．５７（ｍ，５Ｈ）；３．４１−３．３４（ｍ，１Ｈ）；３．１０−２．９０（ｍ，１Ｈ）；２．７８−２．６６（ｍ，１Ｈ）；２．２１−２．１０（ｍ，１Ｈ）；２．０６−１．９３（ｍ，１Ｈ）；１．７０−１．６０（ｍ，１Ｈ）；１．５２−１．４１（ｍ，１Ｈ）；１．３９−１．２６（ｍ，１Ｈ）；１．２５（ｄ，３Ｈ，４．８Ｈｚ）；１．２３（ｄ，３Ｈ，４．５Ｈｚ）；０．８３（ｄｄ，３Ｈ，３Ｈｚ，４．５Ｈｚ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ １７２．６８；１７２．６３；１５９．１５；１５８．７３；１５７．３８；１５７．２５；１３０．８９；１２４．９９；１１６．０３；６２．５１；６２．１２；５４．２９；４９．２７；４２．４７；３２．７７；３０．４３；２８．８５；２０．４６；１９．５９；１８．７２；１７．３９；１３．９０；１３．０９。
Ｃ24Ｈ36Ｎ4Ｏ4についてのＨＲＭＳ 計算値：４４４．２７３６；実測値：４４４．２７２６±０．００１３。
ＨＰＬＣ（標準勾配）ｔR＝６．８０分。
【０１１５】
化合物１４４
1Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ ７．４（ｍ，１Ｈ）；７．２７（ｄｔ，１Ｈ，１．５ Ｈｚ，６．６ Ｈｚ）；７．２２−７．１４（ｍ，２Ｈ）；７．０８−６．９８（ｍ，２Ｈ）；６．７８ ９ｔ，２Ｈ，６．６ Ｈｚ）；４．４５−４．３９（ｍ，２Ｈ）；４．１５（ｄ，２Ｈ，８．１ Ｈｚ）；７．７４（ｄ，１Ｈ，９．３ Ｈｚ）；３．５４（ｄ，１Ｈ，１０．８ Ｈｚ）；３．３５−３．２２（ｍ，２Ｈ）；３．２０（ｑ，１Ｈ，１．５ Ｈｚ）；２．８２−２．７１（ｍ，１Ｈ）；２．６１−２．５５（ｍ，１Ｈ）；２．２１−２．１１（ｍ，１ｈ）；２．０２−１．９４（ｍ，１Ｈ）；１．７４−１．４０（ｍ，５Ｈ）；１．０４（ｄ，３Ｈ，６．６ Ｈｚ）；０．９３（ｄ，３Ｈ，６．６ Ｈｚ）；０．７４−０．６４ ９ｍ，１Ｈ）；０．４５−０．２８（ｍ，２Ｈ）；０．１５−０．０８（ｍ，１Ｈ）；０．０６――０．０２（ｍ，１Ｈ）。
13Ｃ ＮＭＲ（７５．５ ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ １７３．２９；１７２．１４；１６７．５１；１５５．４７；１３４．８６；１３４．８１；１３０．３８；１３０．３１；１２８．８１；１２８．２５；１２７．４４；１２１．６３；１１０．３９；１０７．７１；１０５．０２；６７．１０；６６．６６；６２．８１；６２．０６；６０．１０；５３．９９；４１．４４；３６．０７；３１．９１；３０．０１；２９．１８；２８．９４；２７．７９；２３．６８；２３．１５；１９．０８；１８．２５；８．１７；４．９８；３．１６。
Ｃ31Ｈ41Ｎ4Ｏ4ＣｌについてのＨＲＭＳ 計算値：５６８．２８１６；実測値：５６８．２８０２±０．００１７。
【０１１６】
Ｆ．選択した本発明化合物の質量スペクトルデータ
【０１１７】
【表２Ａ】
【表２Ｂ】
【表２Ｃ】
【表２Ｄ】
【表２Ｅ】
【表２Ｆ】
【０１１８】
生物学的方法および結果
方法Ｂ１に記載する競合放射性リガンド結合アッセイを使用して、ヒトモチリン受容体における相互作用能力について、本発明の化合物を評価した。方法Ｂ２、Ｂ３およびＢ４に記載する機能アッセイを使用して、相互作用の他の特性決定を行うことができる。必要であれば、これらの方法のいくつかを高スループットな方法で行って、多くの化合物を同時に評価することができる。ヒトモチリン受容体の合成遺伝子の安定発現に基づくアッセイのような、ＨＴＳに好適な他のアッセイも記載されている。
【０１１９】
方法Ｂ１を使用した本発明の代表的化合物の試験についての結果を、表３に示す。結合活性を、下記のレベルの範囲として示す：Ａ＝０．００１〜０．１０μＭ、Ｂ＝０．１０〜１．０μＭ、Ｃ＝１．０〜１０．０μＭ。その他に、この方法を使用した２つの付加的化合物のアッセイ結果を下記に示す。観測されるように、これは、Ｄ−プロリンを第二認識構成単位として組み込むことによって生じる本発明の式ＩＶの代表的二環式化合物の活性を示す。重要なことに、化合物１（Ｋi＝レベルＢ）の直鎖類似体である化合物１２１の場合に生じる結合活性の欠如は、所望の相互作用を得るのに環状構造が極めて重要であることを示す。
【化３８】
【０１２０】
２つの代表的な本発明の化合物（化合物８および１１）の競合結合曲線を下記に示す：
【化３９】
【０１２１】
結合の機能的有意性の決定のために、方法Ｂ２に記載するエクオリンアッセイにおいて化合物を試験するのが好ましいが、方法Ｂ３の手順も適用できる。表４に示すデータからわかるように、試験した代表的化合物は、モチリン受容体において拮抗物質として作用し、試験した濃度において作用活性を有さない。機能的活性を、下記のレベルの範囲として示す：Ａ＝０．００１〜０．１０μＭ、Ｂ＝０．１０〜１．０μＭ。方法Ｂ２のアッセイのより高い感度（方法Ｃのほぼ１００倍）は、それをこの評価に好ましいものにしている。このことは、正の作用物質標準モチリンに関して各方法で得られたＥＣ50値において明らかである。それに加えて、方法Ｂ２は実際のシグナル事象を測定する（これは、該方法を、所望される効能に、より関連性のあるものにする）が、方法Ｂ３のアッセイはＧＴＰ代謝回転を測定するにすぎない。
【０１２２】
【表３】
【０１２３】
その他に、モチリン受容体に対する作用活性または拮抗活性の測定用の、一般的かつ科学的に認められている生体外アッセイは、ウサギ十二指腸または他の胃腸平滑筋組織の収縮である。A2-A4作用物質は、モチリンペプチドと比較して、＞５０％収縮を誘発する化合物として定義され、拮抗物質は、モチリンへの応答の＞５０％阻害を生じる化合物として定義される。本発明の化合物は、このアッセイにおいて、有意な拮抗活性を示した。例えば、方法Ｂ４に記載するように種々の濃度で得た反応のシルドプロットから計算して、化合物１４４はｐＡ2＝６．９５を示し、化合物１６５はｐＡ2＝７．１７を有していた。
【０１２４】
胃の運動性は、臨床的設定において、胃内容物排出に要する時間、およびそれに続くＧＩ管の通過時間として一般に測定される。胃内容物排出スキャンは、当業者によく知られており、簡単に言えば、経口造影剤、例えばバリウム、または放射性標識食の使用を含む。固体および液体を別々に測定することができる。試験食または液体を同位体（99mＴｃ）で放射性標識し、摂取または投与後に、ＧＩ管の通過時間および胃内容物排出時間を、ガンマカメラで可視化することによって測定する。これらの研究を、治療薬の投与前および投与後に行って、化合物の有効性を定量化する。
【０１２５】
方法例Ｂ１：競合放射性リガンド結合アッセイ（モチリン受容体）
材料：
・ ヒトモチリン受容体で安定にトランスフェクションしたＣＨＯ細胞から膜を調製し、１．５μｇ／アッセイポイントの量で使用した。［ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ（商標） ＳｉｇｎａｌＳｃｒｅｅｎ Ｐｒｏｄｕｃｔ ＃６１１０５４４］
・ ［125Ｉ］−モチリン（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，＃ＮＥＸ−３７８）；最終濃度：０．０４〜０．０６ｎＭ
・ モチリン（Ｂａｃｈｅｍ（商標），＃Ｈ−４３８５）；最終濃度：１μＭ
・ マルチスクリーン採取皿−ＧＦ／Ｂ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（商標），＃ＭＡＨＦＢ１Ｈ６０）
・ ポリプロピレン製ディープウェルタイタープレート（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ（商標），＃２６７００６）
・ ＴｏｐＳｅａｌ−Ａ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，＃６００５１８５）
・ ボトムシール（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，＃ＭＡＴＡＨ０Ｐ００）
・ ＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−０（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，＃６０１３６１１）
・ 結合緩衝液：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ ７．４）、１０ｍＭ ＭｇＣｌ2、１ｍＭ ＥＤＴＡ、０．１％ＢＳＡ
【０１２６】
アッセイ容量：
・ 結合緩衝液で希釈した膜１５０μＬ
・ 結合緩衝液で希釈した化合物１０μＬ
・ 結合緩衝液で希釈した放射性リガンド（［125Ｉ］−モチリン）１０μＬ
化合物の最終試験濃度（Ｎ＝１１）：１０、５、２、１、０．５、０．２、０．１、０．０５、０．０２、０．０１、０．００５μＭ
【０１２７】
化合物取り扱い：
化合物を、１００％ＤＭＳＯで希釈した１０ｍＭの保存濃度においてドライアイス上で凍結し、試験日まで−２０℃で保存した。試験日に、化合物を室温で解凍し、次に、アッセイ緩衝液で所望の試験濃度に希釈した。これらの条件下で、アッセイにおける最大最終ＤＭＳＯ濃度は０．５％であった。
【０１２８】
アッセイプロトコル：
ディープウェルプレートにおいて、希釈細胞膜（１．５μｇ／Ｌ）を、１０μＬの、結合緩衝液（全結合、Ｎ＝５）、１μＭ モチリン（非特異的結合、Ｎ＝３）または適切な濃度の被験化合物と合わす。１０μＬの［125Ｉ］−モチリン（最終濃度０．０４〜０．０６ｎＭ）を各ウェルに添加することによって、反応を開始させる。プレートをＴｏｐＳｅａｌ−Ａで密閉し、ゆるやかに渦をまかせ、室温で２時間培養する。Ｔｏｍｔｅｃハーベスターを使用して、予備浸漬した（０．３％ポリエチレンイミン、２時間）マルチスクリーン採取皿で試料を濾過することによって、反応を停止し、冷たい５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）５００μＬで９回洗浄し、次に、皿を換気フードで３０分間空気乾燥する。２５μＬのＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−０を各ウェルに添加する前に、ボトムシールを皿に適用する。次に、皿をＴｏｐＳｅａｌ−Ａで密閉し、ＴｏｐＣｏｕｎｔ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ Ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ Ｃｏｕｎｔｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）で、各ウェルにつき３０秒間カウントし、結果をカウント／分（ｃｐｍ）で表す。
可変勾配（ｖａｒｉａｂｌｅ ｓｌｏｐｅ）非線形回帰分析を使用して、ＧｒａｐｈＰａｄ（商標） Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）によって、データを分析する。Ｋi値は、［125Ｉ］−モチリンについて０．１６ｎＭのＫｄ値（膜特性決定の間に前もって測定）を使用して計算した。
【数１】
［式中、全結合および非特異的結合は、１μＭ モチリンの非存在または存在においてそれぞれ得たｃｐｍを表す］。
【０１２９】
方法例Ｂ２：エクオリン機能アッセイ（モチリン受容体）
材料：
・ ヒトモチリン受容体を発現するＡｅｑｕｏＳｃｒｅｅｎ（商標）（ＥＵＲＯＳＣＲＥＥＮ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）細胞系（細胞系ＥＳ−３８０−Ａ；受容体受け入れ番号ＡＦ０３４６３２）を使用して、膜を調製した。この細胞系は、Ｇα16およびミトコンドリア的に標的にされるエクオリンを共発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞（参照番号ＥＳ−ＷＴ−Ａ５）に、ヒトモチリン受容体をトランスフェクションすることによって構成される。
・ モチリン（Ｂａｃｈｅｍ，＃Ｈ−４３８５）
・ アッセイ緩衝液：ＤＭＥＭ−Ｆ１２（Ｄｕｌｂｅｃｃｏｅ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅｓ Ｍｅｄｉｕｍ）、ならびに１５ｍＭ ＨＥＰＥＳおよび０．１％ＢＳＡ（ｐＨ７．０）
・ セレンテラジン（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ（商標），Ｌｅｉｄｅｎ，Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）
【０１３０】
化合物の最終試験濃度（Ｎ＝５）：１０、３．１６、１、０．３１６、０．１μＭ
【０１３１】
化合物取り扱い：
化合物を、予備構成９６ウェルプレート中に約１．２μｍｏｌの量で、乾燥薄膜として準備した。化合物を１０ｍＭの濃度で１００％ＤＭＳＯに溶解させ、使用まで−２０℃で保存した。娘プレート（ｄａｕｇｈｔｅｒ ｐｌａｔｅｓ）を３０％ＤＭＳＯおよび０．１％ＢＳＡ中に５００μＭの濃度で準備し、試験まで−２０℃で保存した。試験日に、化合物を室温で解凍し、次に、アッセイ緩衝液で所望の試験濃度に希釈した。これらの条件で、アッセイにおける最大最終ＤＭＳＯ濃度は、０．６％であった。
【０１３２】
細胞調製：
５ｍＭ ＥＤＴＡを補充したＣａ2+およびＭｇ2+不含燐酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含有する培養皿から、細胞を収集し、１０００ｘｇで２分間ペレット化し、５×１０6細胞／ｍＬの密度でアッセイ緩衝液（前記参照）に再懸濁し、５μＭセレンテラジンの存在下に一晩培養する。装填後、細胞をアッセイ緩衝液で５×１０5細胞／ｍＬの濃度に希釈した。
【０１３３】
アッセイプロトコル：
作用試験については、細胞懸濁液５０μＬを、適切な濃度の被験化合物またはモチリン（基準作用物質）５０μＬと、９６ウェルプレート中で混合した（二重試料）。受容体活性化によって生じた発光を、Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｄｒｕｇ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ ６０００「ＦＤＳＳ ６０００」（Ｈａｍａｍａｔｓｕ Ｐｈｏｔｏｎｉｃｓ Ｋ．Ｋ．，Ｊａｐａｎ）を使用して記録した。
【０１３４】
拮抗試験については、作用試験の終了から１５〜３０分後に、約ＥＣ８０濃度のモチリン（即ち、０．５ｎＭ；１００μＬ）を、被験化合物を含有する細胞懸濁液に注入し（二重試料）、受容体の活性化によって生じた発光を、前段落に記載したように測定した。
【０１３５】
結果を相対光単位（ＲＬＵ）で示す。濃度応答曲線を、式Ｅ＝Ｅmax／（１＋ＥＣ50／Ｃ）ｎ［式中、Ｅは所定作用物質濃度（Ｃ）における測定ＲＬＵ値であり、Ｅmaxは最大応答であり、ＥＣ50は５０％刺激を生じる濃度であり、ｎは勾配指数である］に基づく非線形回帰分析（Ｓ字状用量−応答）によって、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して分析した。作用試験に関しては、各濃度の被験化合物の結果を、ＥＣ80に等しい濃度（即ち、０．５ｎＭ）でモチリンによって誘発される信号に対するパーセント活性化として表した。拮抗試験に関しては、各濃度の被験化合物の結果を、ＥＣ80に等しい濃度（即ち、０．５ｎＭ）でモチリンによって誘発される信号に対するパーセント阻害として表した。
【０１３６】
方法例Ｂ３：ＦｌａｓｈＰｌａｔｅモチリン［35Ｓ］−ＧＴＰγＳ機能アッセイ
材料：
・ ヒトモチリン受容体で安定にトランスフェクションしたＣＨＯ細胞から膜を調製し、１．５μｇ／アッセイポイントの量で使用した（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ ＳｉｇｎａｌＳｃｒｅｅｎ Ｐｒｏｄｕｃｔ ＃６１１０５４４）
・ ＧＴＰγＳ（Ｓｉｇｍａ，＃Ｇ−８６３４）
・ ［35Ｓ］−ＧＴＰγＳ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，＃ＮＥＸ−０３０Ｈ）
・ モチリン（Ｂａｃｈｅｍ，＃Ｈ−４３８５）
・ ９６ウェルＦｌａｓｈＰｌａｔｅマイクロプレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，＃ＳＭＰ２００）
・ ポリプロピレン製ディープウェルタイタープレート（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ，＃２６７００６）
・ ＴｏｐＳｅａｌ−Ａ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，＃６００５１８５）
・ アッセイ緩衝液：５０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ７．４）、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ2、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１μＭ ＧＤＰ、０．１％ＢＳＡ
【０１３７】
アッセイ容量
・ アッセイ緩衝液で希釈した化合物２５μＬ
・ アッセイ緩衝液２５μＬ（作用アッセイ）、またはアッセイ緩衝液で希釈した０．６μＭモチリン（０．１μＭ最終濃度）（拮抗アッセイ）
・ アッセイ緩衝液で希釈した［35Ｓ］−ＧＴＰγＳ １００μＬ
【０１３８】
化合物の最終試験濃度（Ｎ＝１２）：５０、２０、１０、５、２、１、０．５、０．２、０．１、０．０５、０．０２、０．０１μＭ
【０１３９】
化合物取り扱い：
化合物を、１００％ＤＭＳＯで希釈した１０ｍＭの保存濃度においてドライアイス上で凍結し、試験日まで−２０℃で保存した。試験日に、化合物を室温で解凍し、次に、アッセイ緩衝液で所望の試験濃度に希釈した。これらの条件において、アッセイにおける最大最終ＤＭＳＯ濃度は０．５％であった。
【０１４０】
アッセイプロトコル：
ＣＨＯ膜を、９６ウェルＦｌａｓｈＰｌａｔｅマイクロプレートに固定化した。被験化合物ＧＴＰγＳ、モチリン、および［35Ｓ］−ＧＴＰγＳを、前記のアッセイ容量において各ウェルで合わした。
【０１４１】
作用活性を測定するアッセイについては、２５μＬの、緩衝液（基礎値、Ｎ＝４）、１μＭ（最終濃度）モチリン（Ｅmax値、Ｎ＝３）、２５μＭ（最終濃度）ＧＴＰγＳ（非特異値、Ｎ＝４）または適切な濃度の被験化合物（Ｎ＝３）に加えて、さらに２５μＬの緩衝液を、各ウェルに添加した。
【０１４２】
拮抗活性を測定するアッセイについては、２５μＬの、緩衝液（基礎値、Ｎ＝３）、１μＭ（最終濃度）モチリン（Ｅmax値、Ｎ＝３）、２５μＭ（最終濃度）ＧＴＰγＳ（非特異値、Ｎ＝４）または適切な濃度の被験化合物（Ｎ＝３）に加えて、さらに２５μＬの緩衝液（非刺激対照）またはモチリン（０．１μＭ最終濃度）を、各ウェルに添加する。
【０１４３】
１００ｍＬの［35Ｓ］−ＧＴＰγＳを各ウェルに添加することによって、反応を開始する。各プレートを密閉し（ＴｏｐＳｅａｌ−Ａ）、暗所で室温において１５０分間培養する。次に、ＴｏｐＣｏｕｎｔ ＮＸＴによって、各ウェルにつき３０秒間、プレートをカウントする。
【０１４４】
ＩＣ50／ＥＣ50値の算出のために、非線形回帰分析（Ｓ字状用量−応答）を使用して、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ３．０（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）によって、データを分析した。
【数２】
［式中、最大および最小は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍによって算出した用量−応答曲線の最大値および最小値に対応する］。
【０１４５】
方法例Ｂ４：ウサギ十二指腸収縮性アッセイ
クレブス緩衝液を充填し、等張力変換器（ｉｓｏｔｏｎｉｃ ｆｏｒｃｅ ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ）に接続した１０ｍＬの器官槽に、十二指腸切片を前荷重１ｇで垂直につり下げた。安定化時間後に、筋肉細片を１０-4Ｍアセチルコリンで刺激し、洗浄した。安定最大収縮が得られるまで、少なくとも２０分間の間隔をあけてこれを繰り返した（２〜３回）。
【０１４６】
安定基本線に達した後、被験化合物を浴に添加した。１５分間培養した後、対数的に増加する濃度のモチリンを浴に添加することによって（最終濃度１０-9〜１０-6Ｍ）、モチリンへの用量応答を記録した。空試験（被験化合物の非存在）も行った。用量応答曲線の最後に、超最大用量のアセチルコリン（１０-4Ｍ）を添加し、この応答を基準（１００％収縮）として使用した。
【０１４７】
種々の被験化合物濃度における実験の結果を集め、分析して、シルドプロットからｐＡ2値を得た。
【０１４８】
特定の試験法を、例示目的で、本明細書に記載したが、これらの試験法の種々の変法ならびに代替試験法も、本発明の範囲を逸脱せずに使用し得るものと理解される。
【０１４９】
表３：選択化合物の結合活性
【表４Ａ】
【表４Ｂ】
【表４Ｃ】
【表４Ｄ】
【表４Ｅ】
【表４Ｆ】
【表４Ｇ】
【表４Ｈ】
【表４Ｉ】
【表４Ｊ】
【表４Ｋ】
【表４Ｌ】
【表４Ｍ】
【表４Ｎ】
【表４Ｏ】
【表４Ｐ】
【表４Ｑ】
【表４Ｒ】
【表４Ｓ】
【表４Ｔ】
【表４Ｕ】
【表４Ｖ】
【０１５０】
註：
方法Ｂ１を使用して、放射性リガンド競合結合アッセイを行った。
数値を範囲で示した：Ａ＝０．００１〜０．１００μＭ、Ｂ＝０．１００〜１．０μＭ、Ｃ＝１．０〜１０．０μＭ。
ＸはＮＨであり、但し、
化合物２２３および２２５において、Ｘは、
【化４０】
であり、
化合物２２４において、ＸはＮＭｅであり、
化合物２２６において、Ｘは、
【化４１】
であり、
化合物２２７において、Ｘは、
【化４２】
であり、
Ｚ1、Ｚ2およびＺ3はＮＨであり、但し、化合物３０、１７３および１７４おいてＺ1はＯであり、化合物１１１においてＺ2はＯであり、
Ｒ2、Ｒ4およびＲ5は水素であり、但し、化合物８５において、それは、
【化４３】
であり、
ｍ、ｎ1およびｐは０である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
［式中、
Ｚ1、Ｚ2およびＺ3は、Ｏ、ＮおよびＮＲ10からなる群より独立して選択され、ここで、Ｒ10は、水素、低級アルキルおよび置換低級アルキルからなる群より選択され、
Ｒ1は、アリールで置換された低級アルキル、置換アリールで置換された低級アルキル、ヘテロアリールで置換された低級アルキル、および置換ヘテロアリールで置換された低級アルキルからなる群より独立して選択され、
Ｒ2は、水素であり、
Ｒ3は、アルキルおよびシクロアルキルからなる群より独立して選択され、但し、Ｚ1がＮであるとき、Ｒ3はＺ1と共に４、５、６または７員の複素環を形成し得るものとし、
Ｒ4は、水素であり、
Ｒ5およびＲ6は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群より独立して選択され、但し、Ｒ5およびＲ6の少なくとも１つは水素であるものとし、
Ｘは、Ｏ、ＮＲ8およびＮ（Ｒ9）2+からなる群より選択され、ここで、Ｒ8は、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、スルホニル、スルホンアミドおよびアミジノからなる群より選択され、 Ｒ9は、水素、低級アルキルおよび置換低級アルキルからなる群より選択され、
ｍ、ｎ1およびｐは、０、１または２から独立して選択され、
Ｔは、式ＩＩ：
−Ｕ−（ＣＨ2）d−Ｗ−Ｙ−Ｚ−（ＣＨ2）e− （ＩＩ）
（式中、ｄおよびｅは、０、１、２、３、４または５から独立して選択され、
Ｕは、式（Ｉ）のＸに結合し、−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
ＹおよびＺは、それぞれ、場合により存在し、
Ｗ、ＹおよびＺは、−Ｏ−、−ＮＲ28−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ2−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＳＯ2−ＮＨ−、−ＮＨ−ＳＯ2−、−ＣＲ29Ｒ30−、ＺまたはＥ配置を有する−ＣＨ＝ＣＨ−、および−Ｃ≡Ｃ−からなる群より、または下記の群：
【化２】
から独立して選択される環構造物より、独立して選択され、
前記環構造物に含有される任意の炭素原子は、窒素原子で置換することができ、但し、前記環構造物が単環式環構造物である場合は、４個以下の窒素原子を有し、前記環構造物が２環式環構造物である場合は、６個以下の窒素原子を有すものとし、
Ｇ1およびＧ2は、それぞれ独立して、−Ｏ−、−ＮＲ41−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ2−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＳＯ2−ＮＨ−、−ＮＨ−ＳＯ2−、−ＣＲ42Ｒ43−、ＺまたはＥ配置を有する−ＣＨ＝ＣＨ−、および−Ｃ≡Ｃ−からなる群より選択される共有結合または二価の基を表し、但し、Ｇ1は、Ｇ2より近くでＵに結合するものとし、
Ｋ1、Ｋ2、Ｋ3、Ｋ4、Ｋ6、Ｋ15およびＫ16は、Ｏ、ＮＲ44およびＳからなる群より独立して選択され、
ｆは、１、２、３、４、５または６から選択され、
Ｒ31、Ｒ32、Ｒ38、Ｒ39、Ｒ48およびＲ49は、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドから独立して選択され、
Ｒ33、Ｒ34、Ｒ35、Ｒ36、Ｒ37、Ｒ47、Ｒ50およびＲ51は、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、オキソ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドから独立して選択される）の二価の基である］で示される化合物、および医薬的に許容されるその塩、水化物または溶媒化合物。
【請求項２】
Ｒ1が、−（ＣＨ2）qＲ11および−ＣＨＲ12Ｒ13からなる群より選択され、
ここで、
ｑは、０、１、２または３であり、
Ｒ11およびＲ12は、下記の群：
【化３】
（式中、前記環構造物中の任意の炭素原子は、窒素原子で置換することができ、但し、前記環構造物が単環式環構造物である場合は、４個以下の窒素原子を有し、前記環構造物が２環式環構造物である場合は、６個以下の窒素原子を有すものとし、
Ａ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4およびＡ5は、それぞれ場合により存在し、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より独立して選択され、
Ｂ1、Ｂ2、Ｂ3およびＢ4は、ＮＲ14、ＳまたはＯから独立して選択され、ここで、Ｒ14は、水素、アルキル、置換アルキル、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択される）の環構造物から独立して選択され、
Ｒ13は、Ｒ11およびＲ12と同様に定義されるか、または低級アルキル、置換低級アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリールおよびアミドを含む群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ3が、−（ＣＨ2）sＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）（ＣＨ2）tＣＨ3、−ＣＨ（ＯＲ15）ＣＨ3、−ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3、−（ＣＨ2）uＣＨ（ＣＨ3）2、−Ｃ（ＣＨ3）3および−（ＣＨ2）y−Ｒ21からなる群より選択され、
ここで、
ｓおよびｕは、０、１、２、３、４または５から独立して選択され、
ｔは、１、２、３または４から独立して選択され、
ｙは、０、１、２、３または４から選択され、
Ｒ15は、水素、アルキル、置換アルキル、ホルミルおよびアシルからなる群より選択され、
Ｒ21は、下記群：
【化４】
（式中、前記環構造物中の任意の炭素原子は、窒素原子で置換することができ、但し、前記環構造物が単環式環構造物である場合は、４個以下の窒素原子を有し、前記環構造物が２環式環構造物である場合は、６個以下の窒素原子を有すものとし、
ｚは、１、２、３、４または５から選択され、
Ｅ1、Ｅ2およびＥ3は、それぞれ場合により存在し、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より独立して選択され、
Ｊは、場合により存在し、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、オキソ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択される）から選択される環構造物から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ5またはＲ6の少なくとも１つが水素であることを条件として、Ｒ5およびＲ6が、水素、−（ＣＨ2）aaＣＨ3、−ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3、−（ＣＨ2）bbＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ（ＣＨ3）（ＣＨ2）ccＣＨ3、−（ＣＨ2）dd−ＮＲ22Ｒ23、−（ＣＨ2）eeＲ24、−ＣＨ2ＣＯ2Ｒ25および−ＣＨ2ＣＯＮＲ26Ｒ27
［式中、
ａａおよびｂｂは、０、１、２、３、４または５から独立して選択され、
ｃｃおよびｄｄは、１、２、３、４または５から独立して選択され、
ｅｅは、０、１、２、３または４から選択され、
Ｒ22およびＲ23は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、アミジノ、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より独立して選択され、但し、Ｒ22およびＲ23は、窒素原子と共に、５または６員の置換または非置換の複素環を形成し得るものとし、
Ｒ24は、Ｒ11およびＲ12と同様に定義され、
Ｒ25は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群より独立して選択され、
Ｒ26およびＲ27は、Ｒ17およびＲ18と同様に定義される］からなる群よりそれぞれ独立して選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ａ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4およびＡ5が、それぞれ場合により存在し、ハロゲン、トリフルオロメチル、Ｃ1〜6アルキルまたはＣ1〜6アルコキシから独立して選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ11、Ｒ12およびＲ13が、
【化５】
［式中、ＲaおよびＲbは、Ｃｌ、Ｆ、ＣＦ3、ＯＣＨ3、ＯＨ、ＣＨ3およびＣ（ＣＨ3）3からなる群より選択される］からなる群よりそれぞれ独立して選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項７】
Ｔが、
【化６】
［式中、
Ｌ1は、ＮＨまたはＮＭｅであり、
Ｌ2は、ＣＨまたはＮであり、
Ｌ3は、ＣＨまたはＮであり、
Ｌ4は、ＯまたはＣＨ2であり、
Ｌ5は、ＣＨまたはＮであり、
Ｌ6は、ＣＲ52Ｒ53またはＯであり、
Ｒ46は、ＨまたはＣＨ3であり、
Ｒ52、Ｒ53、Ｒ54、Ｒ55、Ｒ56およびＲ57は、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノおよびオキソから独立して選択されるか、または、Ｒ52とＲ53、またはＲ54とＲ55、またはＲ56とＲ57とが一緒になって、炭素、酸素、硫黄および／または窒素原子を含有する３〜７員環を独立して形成することができ、
（Ｘ）は、式（Ｉ）のＸへの共有結合部位であり、
（Ｚ3）は、式（Ｉ）のＺ3への共有結合部位である］からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
ｍ、ｎおよびｐが０であり、Ｘ、Ｚ1、Ｚ2およびＺ3がＮＨであり、Ｒ2、Ｒ4およびＲ5が水素であり、式（ＩＩＩ）：
【化７】
で示される、請求項１に記載の化合物
【請求項９】
Ｒ3がＺ1と共に４、５、６または７員の複素環を形成し、式（ＩＶ）：
【化８】
［式中、
前記複素環は、第二窒素原子、または酸素原子または硫黄原子を含有してよく、
ｎ2は、０、１、２または３から選択され、
Ｒ7は、場合により存在し、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、オキソ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択される］で示される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
下記：
【化９】
【化１０】
【化１１】
からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の構造を有する、モチリン受容体の拮抗薬。
【請求項１２】
請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の化合物を、治療有効量で投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物におけるモチリン受容体または運動性機能不全に関連した疾患の治療法。
【請求項１３】
請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の化合物を、治療有効量で投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物における運動高進症または高モチリン症に関連した疾患の治療法。
【請求項１４】
請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の化合物を、治療有効量で投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物における過敏性腸症候群および消化不良の治療法。
【請求項１５】
請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の化合物を、治療有効量で投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物における、クローン病、胃食道逆流性疾患、潰瘍性大腸炎、膵臓炎、乳児肥厚性幽門狭窄症、カルチノイド症候群、吸収不良症候群、下痢、真性糖尿病、肥満症、萎縮性結腸炎または胃炎、胃うっ滞、胃腸ダンピング症候群、胃腸切除後症候群、セリアック病、および肥満を生じる摂食障害の治療法。
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
［式中、
Ｚ1、Ｚ2およびＺ3は、Ｏ、ＮおよびＮＲ10からなる群より独立して選択され、ここで、Ｒ10は、水素、低級アルキルおよび置換低級アルキルからなる群より選択され、
Ｒ1は、アリールで置換された低級アルキル、置換アリールで置換された低級アルキル、ヘテロアリールで置換された低級アルキル、および置換ヘテロアリールで置換された低級アルキルからなる群より独立して選択され、
Ｒ2は、水素であり、
Ｒ3は、アルキルおよびシクロアルキルからなる群より独立して選択され、但し、Ｚ1がＮであるとき、Ｒ3はＺ1と共に４、５、６または７員の複素環を形成し得るものとし、
Ｒ4は、水素であり、
Ｒ5およびＲ6は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群より独立して選択され、但し、Ｒ5およびＲ6の少なくとも１つは水素であるものとし、
Ｘは、Ｏ、ＮＲ8およびＮ（Ｒ9）2+からなる群より選択され、ここで、Ｒ8は、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、スルホニル、スルホンアミドおよびアミジノからなる群より選択され、 Ｒ9は、水素、低級アルキルおよび置換低級アルキルからなる群より選択され、
ｍ、ｎ1およびｐは、０、１または２から独立して選択され、
Ｔは、式ＩＩ：
−Ｕ−（ＣＨ2）d−Ｗ−Ｙ−Ｚ−（ＣＨ2）e− （ＩＩ）
（式中、ｄおよびｅは、０、１、２、３、４または５から独立して選択され、
Ｕは、式（Ｉ）のＸに結合し、−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
ＹおよびＺは、それぞれ、場合により存在し、
Ｗ、ＹおよびＺは、−Ｏ−、−ＮＲ28−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ2−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＳＯ2−ＮＨ−、−ＮＨ−ＳＯ2−、−ＣＲ29Ｒ30−、ＺまたはＥ配置を有する−ＣＨ＝ＣＨ−、および−Ｃ≡Ｃ−からなる群より、または下記の群：
【化２】
から独立して選択される環構造物より、独立して選択され、
前記環構造物に含有される任意の炭素原子は、窒素原子で置換することができ、但し、前記環構造物が単環式環構造物である場合は、４個以下の窒素原子を有し、前記環構造物が２環式環構造物である場合は、６個以下の窒素原子を有すものとし、
Ｇ1およびＧ2は、それぞれ独立して、−Ｏ−、−ＮＲ41−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ2−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＳＯ2−ＮＨ−、−ＮＨ−ＳＯ2−、−ＣＲ42Ｒ43−、ＺまたはＥ配置を有する−ＣＨ＝ＣＨ−、および−Ｃ≡Ｃ−からなる群より選択される共有結合または二価の基を表し、但し、Ｇ1は、Ｇ2より近くでＵに結合するものとし、
Ｋ1、Ｋ2、Ｋ3、Ｋ4、Ｋ6、Ｋ15およびＫ16は、Ｏ、ＮＲ44およびＳからなる群より独立して選択され、
ｆは、１、２、３、４、５または６から選択され、
Ｒ31、Ｒ32、Ｒ38、Ｒ39、Ｒ48およびＲ49は、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドから独立して選択され、
Ｒ33、Ｒ34、Ｒ35、Ｒ36、Ｒ37、Ｒ47、Ｒ50およびＲ51は、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、オキソ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドから独立して選択される）の二価の基である］で示される化合物、および医薬的に許容されるその塩、水化物または溶媒化合物。
【請求項２】
Ｒ1が、−（ＣＨ2）qＲ11および−ＣＨＲ12Ｒ13からなる群より選択され、
ここで、
ｑは、０、１、２または３であり、
Ｒ11およびＲ12は、下記の群：
【化３】
（式中、前記環構造物中の任意の炭素原子は、窒素原子で置換することができ、但し、前記環構造物が単環式環構造物である場合は、４個以下の窒素原子を有し、前記環構造物が２環式環構造物である場合は、６個以下の窒素原子を有すものとし、
Ａ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4およびＡ5は、それぞれ場合により存在し、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より独立して選択され、
Ｂ1、Ｂ2、Ｂ3およびＢ4は、ＮＲ14、ＳまたはＯから独立して選択され、ここで、Ｒ14は、水素、アルキル、置換アルキル、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択される）の環構造物から独立して選択され、
Ｒ13は、Ｒ11およびＲ12と同様に定義されるか、または低級アルキル、置換低級アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリールおよびアミドを含む群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ3が、−（ＣＨ2）sＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）（ＣＨ2）tＣＨ3、−ＣＨ（ＯＲ15）ＣＨ3、−ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3、−（ＣＨ2）uＣＨ（ＣＨ3）2、−Ｃ（ＣＨ3）3および−（ＣＨ2）y−Ｒ21からなる群より選択され、
ここで、
ｓおよびｕは、０、１、２、３、４または５から独立して選択され、
ｔは、１、２、３または４から独立して選択され、
ｙは、０、１、２、３または４から選択され、
Ｒ15は、水素、アルキル、置換アルキル、ホルミルおよびアシルからなる群より選択され、
Ｒ21は、下記群：
【化４】
（式中、前記環構造物中の任意の炭素原子は、窒素原子で置換することができ、但し、前記環構造物が単環式環構造物である場合は、４個以下の窒素原子を有し、前記環構造物が２環式環構造物である場合は、６個以下の窒素原子を有すものとし、
ｚは、１、２、３、４または５から選択され、
Ｅ1、Ｅ2およびＥ3は、それぞれ場合により存在し、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より独立して選択され、
Ｊは、場合により存在し、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、オキソ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択される）から選択される環構造物から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ5またはＲ6の少なくとも１つが水素であることを条件として、Ｒ5およびＲ6が、水素、−（ＣＨ2）aaＣＨ3、−ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2Ｓ（＝Ｏ）2ＣＨ3、−（ＣＨ2）bbＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ（ＣＨ3）（ＣＨ2）ccＣＨ3、−（ＣＨ2）dd−ＮＲ22Ｒ23、−（ＣＨ2）eeＲ24、−ＣＨ2ＣＯ2Ｒ25および−ＣＨ2ＣＯＮＲ26Ｒ27
［式中、
ａａおよびｂｂは、０、１、２、３、４または５から独立して選択され、
ｃｃおよびｄｄは、１、２、３、４または５から独立して選択され、
ｅｅは、０、１、２、３または４から選択され、
Ｒ22およびＲ23は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、アミジノ、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より独立して選択され、但し、Ｒ22およびＲ23は、窒素原子と共に、５または６員の置換または非置換の複素環を形成し得るものとし、
Ｒ24は、Ｒ11およびＲ12と同様に定義され、
Ｒ25は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、ヘテロアリールおよび置換ヘテロアリールからなる群より独立して選択され、
Ｒ26およびＲ27は、Ｒ17およびＲ18と同様に定義される］からなる群よりそれぞれ独立して選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ａ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4およびＡ5が、それぞれ場合により存在し、ハロゲン、トリフルオロメチル、Ｃ1〜6アルキルまたはＣ1〜6アルコキシから独立して選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ11、Ｒ12およびＲ13が、
【化５】
［式中、ＲaおよびＲbは、Ｃｌ、Ｆ、ＣＦ3、ＯＣＨ3、ＯＨ、ＣＨ3およびＣ（ＣＨ3）3からなる群より選択される］からなる群よりそれぞれ独立して選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項７】
Ｔが、
【化６】
［式中、
Ｌ1は、ＮＨまたはＮＭｅであり、
Ｌ2は、ＣＨまたはＮであり、
Ｌ3は、ＣＨまたはＮであり、
Ｌ4は、ＯまたはＣＨ2であり、
Ｌ5は、ＣＨまたはＮであり、
Ｌ6は、ＣＲ52Ｒ53またはＯであり、
Ｒ46は、ＨまたはＣＨ3であり、
Ｒ52、Ｒ53、Ｒ54、Ｒ55、Ｒ56およびＲ57は、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノおよびオキソから独立して選択されるか、または、Ｒ52とＲ53、またはＲ54とＲ55、またはＲ56とＲ57とが一緒になって、炭素、酸素、硫黄および／または窒素原子を含有する３〜７員環を独立して形成することができ、
（Ｘ）は、式（Ｉ）のＸへの共有結合部位であり、
（Ｚ3）は、式（Ｉ）のＺ3への共有結合部位である］からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
ｍ、ｎおよびｐが０であり、Ｘ、Ｚ1、Ｚ2およびＺ3がＮＨであり、Ｒ2、Ｒ4およびＲ5が水素であり、式（ＩＩＩ）：
【化７】
で示される、請求項１に記載の化合物
【請求項９】
Ｒ3がＺ1と共に４、５、６または７員の複素環を形成し、式（ＩＶ）：
【化８】
［式中、
前記複素環は、第二窒素原子、または酸素原子または硫黄原子を含有してよく、
ｎ2は、０、１、２または３から選択され、
Ｒ7は、場合により存在し、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、オキソ、アミノ、ハロゲン、ホルミル、アシル、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、アミジノ、メルカプト、スルフィニル、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択される］で示される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
下記：
【化９】
【化１０】
【化１１】
からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の構造を有する、モチリン受容体の拮抗薬。
【請求項１２】
請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の化合物を、治療有効量で投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物におけるモチリン受容体または運動性機能不全に関連した疾患の治療法。
【請求項１３】
請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の化合物を、治療有効量で投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物における運動高進症または高モチリン症に関連した疾患の治療法。
【請求項１４】
請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の化合物を、治療有効量で投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物における過敏性腸症候群および消化不良の治療法。
【請求項１５】
請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の化合物を、治療有効量で投与することを含む、ヒトおよび他の哺乳動物における、クローン病、胃食道逆流性疾患、潰瘍性大腸炎、膵臓炎、乳児肥厚性幽門狭窄症、カルチノイド症候群、吸収不良症候群、下痢、真性糖尿病、肥満症、萎縮性結腸炎または胃炎、胃うっ滞、胃腸ダンピング症候群、胃腸切除後症候群、セリアック病、および肥満を生じる摂食障害の治療法。
【公表番号】特表２００７−５２３８５３（Ｐ２００７−５２３８５３Ａ）
【公表日】平成１９年８月２３日（２００７．８．２３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５１５６０３（Ｐ２００６−５１５６０３）
【出願日】平成１６年６月１８日（２００４．６．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００４／０００９１３
【国際公開番号】ＷＯ２００４／１１１０７７
【国際公開日】平成１６年１２月２３日（２００４．１２．２３）
【出願人】（５０５４６８０６０）トランザイム・ファーマ・インコーポレイテッド (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年８月２３日（２００７．８．２３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年６月１８日（２００４．６．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００４／０００９１３
【国際公開番号】ＷＯ２００４／１１１０７７
【国際公開日】平成１６年１２月２３日（２００４．１２．２３）
【出願人】（５０５４６８０６０）トランザイム・ファーマ・インコーポレイテッド (1)
【Ｆターム（参考）】
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