本発明は、ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン誘導体に関する。具体的には、本発明は、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４が以下に定義される、式Ｉの化合物に関する。本発明の化合物はＰＤＫ１の阻害剤であり、癌、より詳細には、乳癌、結腸癌、および肺癌などの構成的活性型ＡＣＧキナーゼにより特徴づけられる疾患の治療に有用でありうる。したがって、本発明はまた、本発明の化合物を含んでなる医薬組成物に関する。本発明はまた、ＰＤＫ１活性を阻害する方法およびそれに関連する疾患の治療方法であって、本発明の化合物または本発明の化合物を含んでなる医薬組成物を適用する方法に関する。

【発明の詳細な説明】
【関連出願の参照】
【０００１】
本願は、２００８年８月１２日に出願した米国仮出願第６１／０８８１１３号に基づく優先権を享受する。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、セリン／スレオニンキナーゼ、ＰＤＫ１の活性の阻害剤であるピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン誘導体に関する。本発明はまた、上記化合物を含んでなる医薬組成物および癌の治療において上記化合物を用いる方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ホスホイノシチド−３キナーゼ（ＰＩ−３Ｋ）経路の活性化は、遺伝子発現、細胞周期の進行、細胞成長、および分化などの重要な細胞機能を制御する最も重要な機構の１つである(Dygas and Baranska, Acta Biochim. Pol. 48:541-549 (2001))。サイトゾル中のＡＫＴおよび他のＰＩ−３Ｋ下流キナーゼの修飾は、ＡＫＴ活性化ループのリン酸化および活性化に重要なキナーゼとして元々同定されたセリン／スレオニンキナーゼである、３−ホスホイノシチド依存性キナーゼ１（ＰＤＫ１）により媒介される。
【０００４】
ＰＤＫ１の基質には、ＡＫＴ／ＰＫＢ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、環状ＡＭＰ−依存性プロテインキナーゼ、プロテインキナーゼＣ、血清・グルココルチコイド誘導性キナーゼ（ＳＧＫ）、ｐ９０リボソームプロテインキナーゼ（ＲＳＫ）、ｐ２１−活性化キナーゼ−１（ＰＡＫ１）ＰＲＫ１／２など、ＡＧＣファミリーのプロテインキナーゼの多くがある（ｃＡＭＰ−依存性、ｃＧＭＰ−依存性、およびプロテインキナーゼＣ）(Wick and Liu, Curr. Drug Targets Immune Endocr. Metabol. Disord. 1:209-221 (2001); Mora et al., Semin. Cell Dev. Biol. 15:161-170 (2004))。しかし、ＰＤＫ１（−／−）およびＰＤＫ１（−／＋）マウスを使用した最近のインビボ研究により、ＰＤＫ１の最も生理学的に関連する基質がＡＫＴ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、およびＲＳＫであることが示された(Lawlor et al EMBO J. 21:3728-3738 (2002); Williams et al., Curr. Biol. 10:439-448 (2000))。これらの重要なＰＤＫ１基質の活性化は、グルコース取込みの増加、タンパク質合成、アポトーシス促進タンパク質の阻害につながる。
【０００５】
ＡＫＴの制御は、ＰＤＫ１のＰＩ３Ｋ依存性活性化の最も研究されている例である。ＰＩ３Ｋまたは優性阻害型ＡＫＴ変異体の特定の阻害剤は、成長因子またはサイトカインの生存促進活性を破壊する。ＰＩ３Ｋの阻害剤（ＬＹ２９４００２またはワートマニン）が、上流のキナーゼによるＡＫＴの活性化を遮断することが先に記載されている。さらに、構成的活性型ＰＩ３ＫまたはＡＫＴ変異体の導入は、細胞が通常アポトーシス細胞死を起こす条件下で細胞生存を促進する(Kulik et al., Mol. Cell Biol. 17(3):1595-1606 (1997); Dudek et al, Science 275(5300):661-665 (1997))。
【０００６】
ヒトの腫瘍中のＡＫＴレベルの分析は、ＡＫＴが、数多くの卵巣癌(Cheung et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89:9267-9271 (1992))および膵臓癌(Cheung et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 93:3636-3641 (1996))で過剰発現されていることを明らかにした。また、ＡＫＴは、乳癌および前立腺癌の細胞系でも過剰発現していることが見いだされた(Nakatani et al. J. Biol. Chem. 274:21528-21532 (1999))。
【０００７】
数多くの癌が、ＰＩ３Ｋの産物である、ホスファチジルイノシトール３，４，５−トリホスフェート（ＰＩＰ３）の細胞レベルを上昇させる、遺伝子中の突然変異を有する。ＰＩＰ３のレベルを上昇させる最もよく見られる突然変異の１つは、ＰＩＰ３ ３−ホスファターゼＰＴＥＮ遺伝子にある(Leslie and Downes, Cell Signal. 14:285-295 (2002); Cantley, Science 296:1655-1657 (2002))。ＰＩＰ３のレベル上昇はＡＫＴおよびｐ７０Ｓ６Ｋキナーゼの過剰活性化をもたらし、それがこれらの細胞の制御されない増殖および生存増加の主な推進力として機能していると考えられる。ＰＴＥＮの生殖細胞系突然変異は、カウデン病などのヒトの癌症候群の原因である(Liaw et al., Nature Genetics 16:64-67 (1997))。ＰＴＥＮはヒトの腫瘍中で高いパーセンテージで欠失し、機能性ＰＴＥＮのない腫瘍細胞系は活性化された高レベルのＡＫＴを示す(Li et al. supra, Guldberg et al., Cancer Research 57:3660-3663 (1997), Risinger et al., Cancer Research 57:4736-4738 (1997))。
【０００８】
セカンドメッセンジャー調節性セリン／スレオニンプロテインキナーゼのＡＫＴ／ＰＫＢサブファミリーの３メンバーが同定され、ＡＫＴ１、ＡＫＴ２、およびＡＫＴ３と称されている。これらのアイソフォームは、特に触媒ドメインをコードする領域において相同である。ＡＫＴは、ＰＩ３Ｋシグナル伝達に応答して起こるリン酸化事象により活性化される。ＰＩ３Ｋは、膜イノシトールリン脂質をリン酸化し、セカンドメッセンジャーであるホスファチジルイノシトール３，４，５−トリホスフェート（ＰＩＰ３）およびホスファチジルイノシトール３，４−ジホスフェートが生じるが、これらはＡＫＴのＰＨドメインに結合することが示されている。ＡＫＴ活性化の現在のモデルは、ＰＩＰ３による膜への酵素の補充を提案している。ＰＤＫ１もＰＨドメインを有し、ＡＫＴとＰＤＫ１との膜での同時局在が、ＰＤＫ１および恐らく他のキナーゼによるＡＫＴ修飾および活性化を可能にすると仮定されている(Hemmings, Science 275:628-630 (1997); Hemmings, Science 276:534 (1997); Downward, Science 279:673-674(1998))。
【０００９】
ＡＫＴ１のリン酸化は、２つの調節部位、すなわち触媒ドメイン活性化ループ中のＰＤＫ１によるＴｈｒ３０８およびカルボキシ末端近傍のＳｅｒ４７３（最も可能性が高いのはＴＯＲＣ２ ｍＴＯＲ複合体による）で起こる(Alessi et al., EMBO J. 15:6541-6551 (1996); Meier et al., J. Biol. Chem. 272:30491-30497 (1997))。
【００１０】
ＰＤＫ１の重要なＰＩ３Ｋ非依存性の生理的基質、ｐ９０リボソームプロテインＳ６キナーゼ（ＲＳＫ）は、チロシン受容体誘導性造血形質転換を促進することが最近示唆された(Kang et al., Cancer Cell 12:201-214 (2007))。ＰＤＫ１は、そのアミノ末端キナーゼドメインをＥＲＫ依存的にリン酸化してＲＳＫを活性化する(Cohen et al., Nature Chem. Biol. 3(3):156-160 (2007))。
【００１１】
また、最近の研究は、細胞の運動性および移動など腫瘍形成および転移の間に重要であるかもしれないＰＤＫ１の追加的な役割を明らかにした(Primo et al., J. Cell Biol. 176(7):1035-1047 (2007); Pinner and Sahai, Nature Cell Biol. 10(2):127-137 (2008))。
【００１２】
まとめると、これらの観察は、ＰＤＫ１の阻害剤が、構成的活性型ＡＧＣキナーゼを有する（しかしそれに限定されない）癌細胞の治療に有用である可能性を示している。
【発明の概要】
【００１３】
本発明は、ピリドロ［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン誘導体に関する。具体的には、本発明は、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４が以下で定義される式Ｉの化合物に関する。
【００１４】
【化１】

【００１５】
本発明の化合物はＰＤＫ１の阻害剤であり、癌、より具体的には乳癌、結腸癌、および肺癌などの構成的活性型ＡＣＧキナーゼにより特徴づけられる疾患の治療に有用でありうる。したがって、本発明はさらに、本発明の化合物を含んでなる医薬組成物に関する。本発明は、ＰＤＫ１活性の阻害する方法およびそれに関連する疾患を治療方法であって、本発明の化合物または本発明の化合物を含んでなる医薬組成物を用いる方法に関する。
【発明の具体的説明】
【００１６】
本発明は、式Ｉの化合物に関する：
【００１７】
【化２】

【００１８】
（上記式中、
Ｒ^１は、アリール、−ＣＨ_２−アリール、またはヘテルアリールであり、それぞれは所望により１〜３つのＲ^５により置換されており、
Ｒ^２は、Ｈ、所望により１もしくは２つのＲ^６により置換されているＣ_１−Ｃ_６アルキル、所望により１〜３つのＲ^７により置換されているＣ_３−Ｃ_６シクロアルキル、または所望により１〜３つのＲ^７により置換されているヘテロシクロアルキルであり、かつ、Ｒ^３は、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、またはフェニルであり、あるいは
Ｒ^２およびＲ^３は、それらが結合している窒素原子とともに結合して、追加のＮ、Ｓ、またはＯ原子を１つ含みかつ所望により１つのＯＨ、オキソ、アリール、または−ＮＲ^ａＲ^ｂにより置換されている１〜３つのＣ_１−Ｃ_３アルキル基により所望により置換されている飽和４〜７員ヘテロシクロアルキルを形成し、
Ｒ^４は、Ｈ、ハロ、Ｃ_１−Ｃ_３アルキル、Ｃ_１−Ｃ_３ハロアルキル、シアノ、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ、所望によりＮＲ^ａＲ^ｂ、１〜３つのＲ^５により置換されているアリール、所望により１〜３つのＲ^６により置換されているヘテルアリールであり、
各Ｒ^５は、ハロ、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ、ヘテルアリール、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ａ、−Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ^ａＲ^ｂ、−ＮＲ^ａＳ（Ｏ）_２Ｒ^ａ、−ＮＲ^ｂＣ（Ｏ）Ｒ^ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^ａＲ^ｂ、−ＮＲ^ｂＣ（Ｏ）ＮＲ^ａＲ^ｂ、および所望により−ＮＲ^ａＲ^ｂにより置換されているＣ_１−Ｃ_３アルキルからなる群から独立に選択され、
各Ｒ^６は、ＯＨ、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、−ＮＲ^ｂＣ（Ｏ）Ｒ^ａ、１，１−シクロプロパンジカルボキサミド、ヘテルアリール、ヘテロシクロアルキル、および、所望によりＳ（Ｏ）_２ＮＨ_２により置換されているアリールからなる群から独立に選択され、
各Ｒ^７は、ＯＨ、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、および、所望により−ＮＲ^ａＲ^ｂにより置換されているＣ_１−Ｃ_３アルキルからなる群から独立に選択され、
各Ｒ^ａは、Ｈ、ヘテロシクロアルキル、および、所望により１つの−ＮＨ_２またはＮＨＣＨ_３により置換されているＣ_１−Ｃ_３アルキルからなる群から独立に選択され、
各Ｒ^ｂは独立に、ＨまたはＣ_１−Ｃ_６アルキルである）。
【００１９】
本発明の一態様によれば、Ｒ^１は所望により置換されているアリールであり、好適には、所望により１〜３つのＲ^５基により置換されているフェニルである。具体的には、Ｒ^１は、所望により１〜３つのＲ^５基により置換されているフェニルであって、Ｒ^５が、フルオロ、ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ａ、−Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ^ａＲ^ｂ、−ＮＲ^ｂＣ（Ｏ）Ｒ^ａ、および所望により−ＮＲ^ａＲ^ｂにより置換されているＣ_１−Ｃ_３アルキルであるものである。好適には、Ｒ^１は、所望により１〜３つのＲ^５により置換されている−ＣＨ_２−フェニルである。好適には、Ｒ^１は、所望により１〜３つのＲ^５により置換されているピラゾリルまたはインダゾリルである。
【００２０】
本発明の他の態様によれば、Ｒ^２は、Ｈ、所望により１もしくは２つのＲ^６により置換されているＣ_１−Ｃ_６アルキル、所望により１から３のＲ^７により置換されているＣ_３−Ｃ_６シクロアルキル、または、所望により１〜３つのＲ^７により置換されているヘテロシクロアルキルであり、Ｒ^３は、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、またはフェニルである。好適には、Ｒ^２は、所望により１もしくは２つのＲ^６により置換されているＣ_１−Ｃ_６アルキルである。他の態様によれば、Ｒ^２は、ピロリジニル、ピペリジニル、シクロヘキシル、またはシクロプロピルであり、そのそれぞれは所望により１〜３つのＲ^７により置換されており、Ｒ^３は、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、またはフェニルである。
【００２１】
本発明の他の態様によれば、Ｒ^４は、Ｈ、メチル、またはブロモである。
【００２２】
本発明の例には以下のものが包含される：
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（フェニルメチル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−（フェニルアミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（２−フルオロフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−８−メチル−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−｛［４−（メチルスルホニル）フェニル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−｛［３−（メチルスルホニル）フェニル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−｛［３−（３−アミノプロピル）フェニル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−｛［３−（２−アミノエチル）フェニル］アミノ｝−２−［（３−アミノプロピル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−｛［４−（２−アミノエチル）フェニル］アミノ｝−２−［（３−アミノプロピル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−８−メチル−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−（１Ｈ−ピラゾル−４−イルアミノ）−２−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルアミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（２−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（２，２−ジオキシド−１，３−ジヒドロ−２−ベンゾチエン−５−イル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
Ｎ−［３−（｛２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル｝アミノ）フェニル］−１−ピロリジンカルボキサミド；
Ｎ−｛３−［（２−｛［２−（１Ｈ−イミダゾル−４−イル）エチル］アミノ｝−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］フェニル｝−１−ピロリジンカルボキサミド；
Ｎ−［３−（｛５−オキソ−２−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルアミノ］−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル｝アミノ）フェニル］−１−ピロリジンカルボキサミド；
Ｎ−［４−（｛２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル｝アミノ）フェニル］−１−ピロリジンカルボキサミド；
３−（｛２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル｝アミノ）−Ｎ−エチルベンゼンスルホンアミド；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−（１Ｈ−インダゾル−６−イルアミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−（１Ｈ−インダゾル−５−イルアミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−（｛２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル｝アミノ）ベンゾニトリル；
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−８−ブロモ−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
【００２３】
２−｛［３−（ジメチルアミノ）プロピル］アミノ｝−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［［３−（ジメチルアミノ）プロピル］（メチル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−｛［３−（メチルアミノ）プロピル］アミノ｝−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−｛［３−（４−モルホリニル）プロピル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−｛［２−（４−ピリジニル）エチル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−［（１−メチル−４−ピペリジニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−［２−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）エチル］ベンゼンスルホンアミド；
２−｛［２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）エチル］アミノ｝−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（４−アミノシクロヘキシル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノシクロヘキシル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノ−２，２−ジメチルプロピル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−｛［３−（２−オキソ−１−ピロリジニル）プロピル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（２−アミノ−２−メチルプロピル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−（メチルアミノ）−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−アミノ−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３−アミノ−２−ヒドロキシプロピル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−（シクロプロピルアミノ）−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（４−ピペリジニルアミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−｛［２−（１−ピペラジニル）エチル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−［（４−ピペリジニルメチル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルアミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−［（３Ｒ）−３−ピペリジニルアミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［４−（アミノメチル）−１−ピペリジニル］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
【００２４】
２−［（３Ｒ）−３−アミノ−１−ピロリジニル］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
２−［（３Ｓ）−３−アミノ−１−ピロリジニル］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルアミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−［（３Ｒ）−３−ピペリジニルアミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
Ｎ^１−［３−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）プロピル］−１，１−シクロプロパンジカルボキサミド；
（４Ｒ）−Ｎ−［３−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）プロピル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−４−カルボキサミド；
Ｎ^２−メチル−Ｎ^１−［３−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）プロピル］グリシンアミド；および
Ｎ−［３−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）プロピル］−Ｌ−プロリンアミド。
【００２５】
当業者は、式Ｉの化合物の薬学的に許容可能な塩が製造できることを認識するだろう。実際に、本発明の特定の態様によれば、式Ｉの化合物の薬学的に許容可能な塩は、そのような塩が分子に高い安定性または溶解度を与えて剤形への製剤を容易にするため、それぞれの遊離塩基よりも好ましいことがある。したがって、本発明はさらに、式Ｉの化合物の薬学的に許容可能な塩に関する。
【００２６】
式Ｉの化合物は、１つ以上の不斉中心（キラル中心とも呼ばれる）を含むことがあり、そのため、個々のエナンチオマー、ジアステレオマー、もしくは他の立体異性体、またはそれらの混合物として存在することがある。キラル炭素原子などのキラル中心は、アルキル基などの置換基中に存在することもある。式Ｉまたは本明細書に説明される化学構造中に存在するキラル中心の立体化学が明示されない場合、該構造は個々の立体異性体の全ておよびそれらの混合物の全てを包含するものとする。したがって、１つ以上のキラル中心を含む式Ｉの化合物を、ラセミ混合物としても、エナンチオ濃縮された混合物としても、エナンチオマー的に純粋な個々の立体異性体としても使用できる。
【００２７】
１つ以上の不斉中心を含む式Ｉの化合物の個々の立体異性体は、当業者に公知の方法により分割できる。例えば、そのような分割は、（１）ジアステレオ異性体塩、錯体、もしくは他の誘導体の形成により、（２）立体異性体特異的試薬との選択的反応により、例えば酵素的な酸化または還元により；または（３）キラル環境中での、例えばキラルリガンドが結合したシリカなどのキラル担体で、もしくはキラル溶媒の存在下での気体−液体もしくは液体クロマトグラフィーにより実施できる。当業者は、所望の立体異性体が上述の分離手順の１つにより別の化学物質に転化される場合、所望の形態を遊離するさらなる工程が必要であることを認識するだろう。別法としては、光学活性な試薬、基質、触媒、もしくは溶媒を使用する不斉合成により、または不斉変換により１つのエナンチオマーを他のものに転化することによって、特定の立体異性体を合成できる。
【００２８】
式Ｉの化合物は、二重結合または幾何学的な非対称性の他の中心を含むこともある。式Ｉまたは本明細書に説明される化学構造中に存在する幾何学的な非対称性の中心の立体化学が明示されない場合、該構造は、トランス（Ｅ）幾何異性体、シス（Ｚ）幾何異性体、およびそれらの混合物の全てを包含するものとする。同様に、互変異性体は平衡状態であろうと、１つの形態が優勢に存在しようと、そのような互変異性体の全てがやはり式Ｉに含まれる。
【００２９】
式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、固体で存在することも、液体で存在することもある。固体状態である場合、本発明の化合物は、結晶形もしくは非結晶形またはそれらの混合物としても存在することがある。結晶形にある本発明の化合物では、溶媒分子が結晶化の間に結晶格子に取り込まれる薬学的に許容可能な溶媒和物が形成されうることを、当業者は認識するだろう。溶媒和物は、エタノール、イソプロパノール、ＤＭＳＯ、酢酸、エタノールアミン、および酢酸エチルなどの非水性溶媒を含むことがあり、または結晶格子中に取り込まれた溶媒として水を含むこともある。水が結晶格子中に取り込まれた溶媒である溶媒和物は、典型的には「水和物」と称される。水和物には、化学量論的な水和物ならびに変動する量の水を含む組成物も含まれる。本発明はそのような溶媒和物を全て含む。
【００３０】
当業者は、種々の溶媒和物を含む結晶形で存在する式Ｉの特定の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が多形性（すなわち、異なる結晶構造で存在する能力）を示しうることをさらに認識するだろう。このような異なる結晶形は典型的には「多形体」として知られている。本発明はそのような多形体を全て含む。多形体は、化学組成が同じだが、充填、幾何的な配置、および結晶固体状態の他の記述的性質が異なる。したがって、多形体は、形状、密度、硬さ、変形能力、安定性、および溶解性などの物性が異なることがある。多形体は、典型的には、融点、ＩＲスペクトル、およびＸ線粉末回折パターンが異なり、それを同定に利用することができる。当業者は、例えば、化合物製造に使用される反応条件または試薬を変更または調整することにより、異なる多形体が製造可能なことを認識するだろう。例えば、温度、圧力、または溶媒の変化は多形体を生み出すことがある。さらに、ある多形体がある条件下で自然に他の多形体に転化することがある。
【００３１】
「アルキル」は、明示された数のメンバー原子を有する飽和炭化水素鎖を意味する。例えば、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは、１から６のメンバー原子を有するアルキル基を意味する。アルキル基は、本明細書に定義された１つ以上の置換基により所望により置換されていてよい。アルキル基は直鎖のことも分岐鎖のこともある。代表的な分岐アルキル基は、１つ、２つ、または３つの分岐を有する。アルキルには、メチル、エチル、プロピル（ｎ−プロピルおよびイソプロピル）、ブチル（ｎ−ブチル、イソブチル、およびｔ−ブチル）、ペンチル（ｎ−ペンチル、イソペンチル、およびネオペンチル）、およびヘキシルがある。
【００３２】
「アルコキシ」は、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルが本明細書に定義されたとおりの−Ｏ−Ｃ_１−Ｃ_６アルキル基を意味する。そのような基の例には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペントキシ、およびヘキソキシがある。
【００３３】
「アリールおよびＡｒ」は、芳香族炭化水素環を意味する。アリール基は単環系または二環系である。単環アリール環はフェニルを意味する。二環アリール環はナフチルおよび５、６、または７つのメンバー原子を有するシクロアルキルまたはシクロアルケニル環にフェニルが縮合している環を意味する。アリール基は、本明細書に定義される１つ以上の置換基により所望により置換されていてよい。
【００３４】
「シクロアルキル」は、明示された数のメンバー原子を有する飽和の炭化水素環を意味する。シクロアルキル基は単環系である。例えば、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキルは、３から６のメンバー原子を有するシクロアルキル基を意味する。シクロアルキル基は、本明細書に定義される１つ以上の置換基により所望により置換されていてよい。シクロアルキルには、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルがある。
【００３５】
「ハロ」は、ハロゲン基、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを意味する。
【００３６】
「ハロアルキル」は、アルキル基内のメンバー原子に結合している少なくとも１つの水素原子がハロに置換されているアルキル基を意味する。ハロアルキルには、モノフルオロメチル、ジフルオロエチル、およびトリフルオロメチルがある。
【００３７】
「ヘテルアリール」は、環の中のメンバー原子として１から４つのヘテロ原子を含む芳香環を意味する。２つ以上のヘテロ原子を含むヘテルアリール基は、異なるヘテロ原子を含むことがある。ヘテルアリール基は、本明細書に定義される１つ以上の置換基により所望により置換されていてよい。ヘテルアリール基は、単環系または縮合、スピロ、もしくは架橋二環系である。単環ヘテルアリール環は、５または６つのメンバー原子を有する。二環ヘテルアリール環は、７から１１のメンバー原子を有する。二環ヘテルアリール環には、フェニルと単環ヘテロシクロアルキル環とが結合して縮合、スピロ、もしくは架橋二環系を形成している環および単環ヘテルアリール環と単環シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、もしくはヘテルアリール環とが結合して縮合、スピロ、もしくは架橋二環系を形成している環がある。ヘテルアリールには、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、フラニル、フラザニル、チエニル、トリアゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、テトラジニル、インドリル、イソインドリル、インドリジニル、インダゾリル、プリニル、キノリニル、イソキノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、プテリジニル、シンノリニル、ベンゾイミダゾリル、ベノピラニル(benopyranyl)、ベンゾオキサゾリル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、フロピリジニル、およびナプチリジニル(napthyridinyl)がある。
【００３８】
「ヘテロ原子」は、窒素、硫黄、または酸素原子を意味する。
【００３９】
「ヘテロシクロアルキル」は、環の中のメンバー原子として１から４つのヘテロ原子を含む飽和または不飽和の環を意味する。しかし、ヘテロシクロアルキル環は芳香族ではない。２つ以上のヘテロ原子を含むヘテロシクロアルキル基は、異なるヘテロ原子を含むことがある。ヘテロシクロアルキル基は、本明細書に定義される１つ以上の置換基により所望により置換されていてよい。ヘテロシクロアルキル基は、４から７つのメンバー原子を有する単環系である。特定の態様によれば、ヘテロシクロアルキルは飽和している。他の態様によれば、ヘテロシクロアルキルは不飽和であるが芳香族ではない。ヘテロシクロアルキルには、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、ピラニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロチエニル、ピラゾリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、ピペリジニル、ホモピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、チアモルホリニル、１，３−ジオキソラニル、１，３−ジオキサニル、１，４−ジオキサニル、１，３−オキサチオラニル、１，３−オキサチアニル、１，３−ジチアニル、およびアゼチジニルがある。
【００４０】
「所望により置換されている」は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、またはヘテルアリールなどの基が、非置換でも、本明細書に定義される１つ以上の置換基により置換されてもよいことを示す。ある基に関連する「置換されている」は基の中のメンバー原子に結合している水素原子が置換されていることを示す。「置換されている」という用語が、そのような置換が置換される原子および置換基の許容される原子価に従い、置換が安定な化合物（すなわち、転位、環化、または脱離などの変換を自然に起こさないもの）を生み出すという暗黙の条件を含むことを理解されたい。特定の態様によれば、置換が原子の許容される原子価に従う限り、単一の原子が２つ以上の置換基により置換されることがある。好適な置換基は、置換されている基または所望により置換されている基のそれぞれに対し、本明細書に定義される。
【００４１】
「薬学的に許容可能な」は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、または他の問題もしくは合併症がなく、ヒトおよび動物の組織との接触に使用するのに好適であり、妥当な利益／リスク比と釣り合う化合物、物質、組成物、および剤形を意味する。
【００４２】
本明細書では、プロセス、スキーム、および実施例に使用される記号および慣行は、現代の科学文献、例えばthe Journal of the American Chemical Societyまたはthe Journal of Biological Chemistryに使用されるものと一致している。標準的な１文字または３文字略語が、特記されない限りＬ配置にあると想定されるアミノ酸残基を示すのに一般的に使用される。特記されない限り、出発物質は全て製造業者から入手し、さらに精製することなく使用した。具体的には、以下の略語を実施例および明細書全体で使用した。
Ａｃ（アセチル）；
ＡＴＰ（アデノシン三リン酸）；
ＢＢＤＭ（ｔｅｒｔ−ブトキシビス（ジメチルアミノ）メタン）；
ＢＯＣ（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）；
ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）；
ＣＨ_３ＣＮ（アセトニトリル）；
ＤＣＭ（ジクロロメタン）；
ＤＩＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）；
ＤＩＰＥＡ（ジイソプロピルエチルアミン）；
ＤＭＡ（ジメチルアセトアミド）；
ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）；
ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）；
ＥＤＣ（１−［３−ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩）；
ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）；
ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）；
ＨＡＴＵ（Ｏ−（７アザベンゾベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）；
ＨＥＰＥＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）；
ＨＯＡｃ（酢酸）；
ＨＯＢＴ（１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）；
ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）；
ＬＨＭＤＳ（リチウムヘキサメチルジシラジド）
ｍＣＰＢＡ（メタクロロ過安息香酸）；
ＭｅＯＨ（メタノール）；
ＮＢＳ（Ｎ−ブロモスクシンイミド）；
ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）；および
ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）。
【００４３】
化合物製造
式Ｉの化合物は従来の有機合成を利用して製造される。好適な合成経路は以下の一般反応スキームに示される。
【００４４】
本明細書に記載される置換基が本明細書に記載される合成方法と適合しない場合、そのような置換基を反応条件に対し安定な好適な保護基により保護できることを、当業者は認識するだろう。保護基を反応シーケンス中の好適な時点で除去して、所望の中間体または標的化合物を与えることができる。好適な保護基およびそのような好適な保護基を利用する種々の置換基の保護・脱保護の方法は当分野に周知である：そのような例は、T. Greene and P. Wuts, Protecting Groups in Chemical Synthesis (3rd ed.), John Wiley & Sons, NY (1999)に見いだすことができる。いくつかの場合、利用される反応条件下で反応性であるように置換基が具体的に選択されることがある。そのような状況下では、反応条件により、選択された置換基が、中間体化合物として有用であるか、または標的化合物中の所望の置換基である他の置換基に転化する。
【００４５】
【化３】

【００４６】
条件：ａ）Ｓ−メチルイソチオウロニウムサルフェート、Ｅｔ_３Ｎ、ＥｔＯＨ、還流；ｂ）ＮＢＳ、過酸化ベンゾイル、Ｋ_２ＣＯ_３、ＣＣｌ_４；ｃ）ＰＯＣｌ_３；ｄ）ＡｒＮＨ_２、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ、７０℃；ｅ）ＮａＯＨ、ＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ；ｆ）ＨＡＴＵ、ＤＩＥＡ、ＮＨ_４ＯＨ；ｇ）ＬＨＭＤＳ、ＤＭＦ、１２５℃；ｈ）ＤＭＦ−ＤＭＡ、１１０℃；次いでＨＯＡｃ、還流；ｉ）ｍＣＰＢＡ；アミン（Ｒ^２ＮＨ_２またはＲ^２Ｒ^３ＮＨ）
【００４７】
一般式Ａの置換ジアルキルメチレンマロナートを、還流下エタノール中で適切な塩基の存在下でＳ−メチルイソチオウロニウムサルフェートと反応させて、Ｂを与えることができる。化合物Ｂを、還流している四塩化炭素または他の溶媒（例えばジオキサン）中で適切な塩基の存在下で過酸化ベンゾイルと反応させて、フェノールＣに転化できる。化合物Ｃを還流下でＰＯＣｌ_３で処理するとクロロピリミジンＤが生じ、それを５０℃から１２０℃の温度でＤＭＦ中で塩基の存在下適切なアニリンとカップリングさせる。ピリミジンエステルＥを、二段階のシーケンスでアミドに転化する（加水分解およびアミド形成）。１００℃から１４０℃の温度でＤＭＦ中でアミドＧをリチウムヘキサメチルジシラジドと反応させると、ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン誘導体Ｈを与える。別法としては、化合物Ｇを８０℃から１２０℃の温度でＤＭＦ中でＤＭＦ−ＤＭＡと反応させ、次いで生じたエナミンを酢酸中で還流して、化合物Ｈを製造できる。化合物Ｈのスルフィドを酸化剤（すなわち、ｍＣＰＢＡ、Ｈ_２Ｏ_２−ＴＦＡ）により酸化し、次いで適切なアミンによりスルホンを置換し脱保護すると、所望のピリミドピリドンアナログＩが得られる。
【００４８】
【化４】

【００４９】
条件：ａ）酢酸、９０℃から１４０℃；ｂ）Ｓ−メチルイソチオウロニウムサルフェート、ＮａＯＭｅ、ＣＨ_３ＯＨ；ｃ）ＣｕＣｌ_２、亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチル、ＭｇＳＯ_４、アセトニトリル、８０℃；ｄ）ＡｒＮＨ_２、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ、７５℃；またはＡｒＮＨ_２、濃ＨＣｌ、イソプロパノール、還流；またはＴｓＯＨ、１，４−ジオキサン、９０℃；ｅ）ＤＭＦ−ＤＭＡまたはｔｅｒｔ−ブトキシビス（ジメチルアミノ）メタン（ＢＢＤＭ）、ＤＭＦ、１１０℃；ｆ）３３％ＨＢｒ／ＨＯＡｃ；ｇ）６ＮのＨＣｌ（水溶液）／ＨＯＡｃ、８０℃；ｈ）ｍＣＰＢＡ、ＤＭＦ；次いでアミン（Ｒ^２Ｒ^３ＮＨ）；ｉ）ｍＣＰＢＡ、ＤＭＦ、Ｂｏｃ−保護アミン；ｊ）ＴＦＡ、ＣＨ_２Ｃｌ_２。
【００５０】
スキーム２に示されるとおり、マロノニトリル（Ｊ）とオルト酢酸トリエチル（Ｋ）とを縮合し、得られた（１−エトキシエチリデン）マロノニトリル（Ｌ）とｓ−メチルイソチオウレアヘミサルフェート塩とをメタノール中で反応させて、４−アミノ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリル（Ｍ）を製造できる。
【００５１】
化合物Ｍは、ジアゾ化試薬およびハロゲン化第二銅、例えば、ｔｅｒｔ−ブチルニトリルおよび塩化第二銅の存在下でアミノ官能基を反応させてハロゲン化して、Ｎを与えることができる。化合物Ｎをアニリンまたはヘテルアリールアミンと反応させて、適切な塩基（例えば、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）の存在下、６５℃から１２０℃の温度でＤＭＦ中、還流しているイソプロパノール中の濃塩化水素酸の存在下で、または９０℃の１，４−ジオキサン中のＴｓＯＨの存在下のいずれかで化合物Ｏを与える。化合物Ｏを、９０℃から１２０℃の温度のＤＭＦ中でＤＭＦ−ＤＭＡまたはｔｅｒｔ−ブトキシビス（ジメチルアミノ）メタン（ＢＢＤＭ）により処理すると、エナミンＰを与える。Ｐを３３％ＨＢｒの酢酸溶液と反応させると、臭素化された化合物Ｑが生じるが、酢酸中６Ｎ塩酸を利用し６０℃から１００℃の温度でＲに加水分解する。スルフィドＲを好適な試薬、例えば、ｍＣＰＢＡまたはＨ_２Ｏ_２／ＴＦＡにより酸化し、生じたスルホンを適切なアミンで置換し、脱保護（必要な場合）すると、Ｒ^４がＨである所望のピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン誘導体Ｉが得られる。
【００５２】
使用の方法
式Ｉの化合物およびその薬学的に許容可能な塩はＰＤＫ１の阻害剤である。これらの化合物は、基礎をなす病状が構成的活性型ＡＣＧキナーゼに起因する（しかしそれに限定されない）病態、例えば、癌、より詳細には乳癌、結腸癌、および肺癌などの治療に有用な可能性がある。構成的活性型ＡＣＧキナーゼとは、１種以上のＡＣＧキナーゼが、生理学的な需要または濃度にかかわらず一定の速度で産生されることを意味する。したがって、他の態様において、本発明はそのような病態を治療する方法に関する。
【００５３】
好適には、本発明は、炎症性乳癌、乳管癌、および小葉癌を含む乳癌を治療し、またはその重症度を低減する方法に関する。
【００５４】
好適には、本発明は、結腸癌を治療し、またはその重症度を低減する方法に関する。
【００５５】
好適には、本発明は、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、扁平上皮癌、腺癌、および大細胞癌を含む肺癌を治療し、またはその重症度を低減する方法に関する。
【００５６】
好適には、本発明は、脳（グリオーマ）癌、神経膠芽腫、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、脳室上衣腫、髄芽細胞腫、頭頸部癌、腎臓癌、肝臓癌、メラノーマ、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、骨の巨細胞腫、甲状腺癌、リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、ヘアリー細胞白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性好中球性白血病、急性リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、形質細胞腫、大細胞型免疫芽球性白血病、マントル細胞白血病、多発性骨髄腫、巨核芽球性白血病、多発性骨髄腫、急性巨核芽球性白血病、前骨髄球性白血病、赤白血病、悪性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、リンパ芽球性Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫、神経芽細胞腫、膀胱癌、尿路上皮癌、外陰癌、子宮頸癌、子宮体癌、腎臓癌、中皮腫、食道癌、唾液腺癌、肝細胞癌、胃癌、鼻咽頭癌、頬癌、口腔癌、ＧＩＳＴ（消化管間質腫瘍）、および精巣癌からなる群から選択される癌を治療し、またはその重症度を低減する方法に関する。
【００５７】
本発明の治療方法は、安全で有効な量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、その必要のある患者に投与する工程を含んでなる。
【００５８】
本発明は、医薬療法、特に癌の療法に使用するための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩も提供する。したがって、さらなる態様において、本発明は、構成的活性型ＡＣＧキナーゼにより特徴づけられる、癌などの疾患を治療するための医薬の製造における、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用に関する。
【００５９】
本明細書では、病態に関連する「治療」とは、（１）病態もしくは病態の１つ以上の生物学的発現を改善または予防し、（２）（ａ）病態に通じるか、もしくはその原因である生物学的カスケードにおける１つ以上の点または（ｂ）病態の１つ以上の生物学的発現に干渉し、（３）病態に関連する１つ以上の症状または作用を緩和し、または（４）病態もしくは病態の１つ以上の生物学的発現の進行を遅らせることを意味する。
【００６０】
先に示されたとおり、病態の「治療」には病態の予防を含む。当業者は、「予防」が絶対的な用語でないことを認識するだろう。医学において、「予防」は、病態もしくはその生物学的発現の可能性もしくは重症度を実質的に少なくするための、またはそのような病態もしくはその生物学的発現の発症を遅延するための薬剤の予防投与を意味すると理解される。
【００６１】
本明細書では、「患者」はヒトまたは他の動物を意味する。
【００６２】
式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、全身投与を含む任意の好適な投与経路により投与できる。全身投与には、経口投与および非経口投与がある。非経口投与は、経腸以外の投与経路、経皮、または吸入を意味し、典型的には注射または注入による。非経口投与には、静脈内、筋肉内、および皮下の注射もしくは注入がある。
【００６３】
式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、一度でも、複数の投与量がある期間にわたり様々な間隔で投与される投薬レジメンに従っても投与できる。例えば、投与量を、１日あたり１回、２回、３回、または４回投与できる。投与量は、所望の治療効果が得られるまで、または所望の治療効果を維持するために無期限に投与できる。本発明の化合物の好適な投薬レジメンは、その化合物の薬物動態学的性質、例えば、吸収、分布、および半減期などに依存するが、当業者により決定できる。さらに、本発明の化合物の好適な投薬レジメンは、そのようなレジメンが投与される期間も含めて、治療される病態、治療される病態の重症度、治療される患者の年齢および体調、治療される患者の病歴、同時療法の性質、望まれる治療効果、ならびに当業者の知識および専門技術内にある同様な因子に依存する。投薬レジメンに対する個々の患者の反応を考慮し、または時間が経過して個々の患者のニーズが変化するとともに、好適な投薬レジメンが調整を必要とすることは当業者にはさらに理解されるだろう。
【００６４】
さらに、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩はプロドラッグとして投与してもよい。本明細書では、本発明の化合物の「プロドラッグ」は、患者に投与されると、最後にはインビボで本発明の化合物を遊離させる、化合物の機能的誘導体である。プロドラッグとして本発明の化合物を投与すると、当業者は以下の１つ以上のことを実行できる：（ａ）インビボでの化合物の作用発現の変更；（ｂ）インビボでの化合物の作用持続期間の変更；（ｃ）インビボでの化合物の輸送または分布の変更；（ｄ）インビボでの化合物の溶解度の変更；および（ｅ）副作用または化合物で直面する他の困難の克服または克服。プロドラッグの製造に使用される典型的な機能的誘導体には、インビボで化学的または酵素的に分解する化合物の修飾が含まれる。そのような修飾には、ホスフェート、アミド、エステル、チオエステル、カーボネート、およびカルバマートの製造が含まれ、当業者に周知である。
【００６５】
式Ｉの化合物およびその薬学的に許容可能な塩は、癌の治療に有用であると知られている少なくとも１種の他の有効成分と同時投与してもよい。
【００６６】
本明細書では、「同時投与」という用語は、本明細書で記載されるＰＤＫ１阻害剤および、化学療法および放射線治療を含む、癌の治療に有用であると知られているさらなる有効成分または複数の有効成分の同時の投与または任意の方法の別々な連続な投与のいずれかを意味する。本明細書でのさらなる有効成分または複数の有効成分という用語は、癌の治療を必要とする患者に投与されると有利な性質を示すと知られているか、またはそのような性質を示す任意の化合物または治療薬がある。好ましくは、投与が同時でない場合、複数の化合物は、互いに時間的に近接して投与される。さらに、複数の化合物が同じ剤形で投与されるかどうかは問題でなく、例えば、ある化合物を注射により投与し、他の化合物を経口投与することができる。
【００６７】
典型的には、治療されつつある感受性のある腫瘍に対する活性を有する任意の抗新生物剤を、本発明における癌の治療中に同時投与してよい。そのような薬剤の例は、Cancer Principles and Practice of Oncology by V.T. Devita and S. Hellman (editors), 6th edition (February 15, 2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishersに見いだすことができる。当業者ならば、薬剤の具体的な特性および関与する癌に基いて、どのような薬剤の組み合わせが有用であるか認識できるだろう。本発明に有用な典型的な抗新生物剤には、抗微小管剤、例えばジテルペノイドおよびビンカアルカロイド；白金配位錯体；アルキル化剤、例えば、ナイトロジェンマスタード、オキサアザホスホリン、アルキルスルホナート、ニトロソウレア、およびトリアゼン；抗生剤、例えば、アントラサイクリン、アクチノマイシン、およびブレオマイシン；トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、例えばエピポドフィロトキシン；代謝拮抗剤、例えばプリンおよびピリミジンのアナログならびに抗葉酸化合物；トポイソメラーゼＩ阻害剤、例えばカンプトテシン；ホルモンおよびホルモンアナログ；シグナル伝達経路阻害剤；非受容体型チロシンキナーゼ血管新生阻害剤；免疫療法剤；アポトーシス促進剤；および細胞周期シグナル伝達阻害剤があるが、これらに限定されない。
【００６８】
本発明のＰＤＫ１阻害化合物と組み合わせて使用するか、または同時投与されるさらなる有効成分または複数の有効成分（抗新生物剤）の例は、化学療法剤である。
【００６９】
抗微小管剤または抗有糸分裂剤は、細胞周期のＭ期または有糸分裂期の間の腫瘍細胞の微小管に対して活性のある細胞周期特異性薬剤である。抗微小管剤の例にはジテルペノイドおよびビンカアルカノイドがあるが、これらに限定されない。
【００７０】
ジテルペノイドは、天然源から誘導されるが、細胞周期のＧ_２／Ｍ期で作用する周期特異性抗癌剤である。ジテルペノイドは、微小管のβチューブリンサブユニットとの結合によりこのタンパク質を安定化させると考えられている。タンパク質の脱重合が阻害され、有糸分裂が停止し、細胞死が続くようである。ジテルペノイドの例には、パクリタキセルおよびそのアナログドセタキセルがある。
【００７１】
パクリタキセルは、５β，２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサ−ヒドロキシタキサ−１１−エン−９−オン４，１０−ジアセタート２−ベンゾアート（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−ベンゾイル−３−フェニルイソセリンとの１３−エステルであり、タイヘイヨウイチイ、タキサス・ブレビフォリアから単離された天然ジテルペン生成物であり、注射液TAXOL（登録商標）として市販されている。テルペンのタキサンファミリーの一員である。パクリタキセルは、１９７１年に最初にWani et al.J. Am. Chem, Soc., 93:2325. 1971により単離されたが、Waniらはその構造を化学的方法およびＸ線結晶法により特性化した。その活性の１機構は、パクリタキセルがチューブリンに結合し、それにより癌細胞の成長を阻害する能力に関連している。Schiff et al., Proc. Natl, Acad, Sci. USA, 77:1561-1565 (1980); Schiff et al., Nature, 277:665-667 (1979); Kumar, J. Biol, Chem, 256: 10435-10441 (1981)。数種のパクリタキセル誘導体の合成および抗癌活性の総説には、D. G. I. Kingston et al., Studies in Organic Chemistry vol. 26, entitled "New trends in Natural Products Chemistry 1986", Attaur-Rahman, P.W. Le Quesne, Eds. (Elsevier, Amsterdam, 1986) pp 219-235を参照されたい。
【００７２】
パクリタキセルは、米国で難治性卵巣癌(Markman et al., Yale Journal of Biology and Medicine, 64:583, 1991; McGuire et al., Ann. lntem, Med., 111:273,1989)の治療における臨床使用および乳癌(Holmes et al., J. Nat. Cancer Inst., 83:1797,1991.)の治療に認可された。パクリタキセルは、皮膚の新生物(Einzig et. al., Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 20:46)および頭頸部癌(Forastire et. al., Sem. Oncol., 20:56, 1990)の治療の潜在的な候補薬である。この化合物は、多発性嚢胞腎(Woo et. al., Nature, 368:750. 1994)、肺癌、およびマラリアの治療にも潜在能力を示す。パクリタキセルにより患者を治療すると、閾濃度（５０ｎＭ）を超える投薬の期間に関連した骨髄抑制(複数の細胞系譜、Ignoff, R.J. et. al, Cancer Chemotherapy Pocket Guide, 1998)が起こる(Kearns, C.M. et. al., Seminars in Oncology, 3(6) p.16-23, 1995)。
【００７３】
ドセタキセルは、（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−カルボキシ−３−フェニルイソセリン、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル、５β−２０−エポキシ−１，２α、４，７β、１０β、１３α−ヘキサヒドロキシタキサ−１１−エン−９−オンとの１３−エステル、４−アセタート２−ベンゾアート三水和物であり、TAXOTERE（登録商標）注射液として市販されている。ドセタキセルは乳癌の治療に適応される。ドセタキセルは、ヨーロッパイチイの針状葉から抽出される天然前駆体１０−デアセチル−バッカチンＩＩＩを利用して製造される、パクリタキセル（その項参照）の半合成誘導体である。ドセタキセルの用量規制毒性は好中球減少症である。
【００７４】
ビンカアルカロイドは、ツルニチニチソウから誘導される周期特異性抗新生物剤である。ビンカアルカロイドは、チューブリンとの特異的な結合により、細胞周期のＭ期（有糸分裂）で作用する。その結果、結合されたチューブリン分子は重合して微小管になることができない。有糸分裂は中期で停止しその後細胞死が起こると考えられている。ビンカアルカロイドの例には、ビンブラスチン、ビンクリスチン、およびビノレルビンがある。
【００７５】
ビンブラスチン、ビンカロイコブラスチンサルフェートは、注射液としてVELBAN（登録商標）で市販されている。種々の固形癌の第２選択療法として適応される可能性もあるが、主に精巣癌およびホジキン病を含む種々のリンパ腫；リンパ性および組織球性リンパ腫の治療に適応される。骨髄抑制が、ビンブラスチンの用量規制副作用である。
【００７６】
ビンクリスチン、ビンカロイコブラスチン、２２−オキソ−、サルフェートは、注射液ONCOVIN（登録商標）で市販されている。ビンクリスチンは、急性白血病の治療に適応され、ホジキンおよび非ホジキン悪性リンパ腫の治療レジメンにも効用がある。脱毛および神経作用がビンクリスチンの最もよく見られる副作用であり、程度は低いが骨髄抑制および胃腸粘膜炎作用が起こる。
【００７７】
ビノレルビン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−Ｃ’−ノルビンカロイコブラスチン［Ｒ−（Ｒ^＊，Ｒ^＊）−２，３−ジヒドロキシブタンジオアート（１：２）（塩）］は、ビノレルビン酒石酸塩(NAVELBINE（登録商標）)の注射液として市販されているが、半合成のビンカアルカロイドである。ビノレルビンは、種々の固形腫瘍、特に非小細胞肺癌、進行性乳癌、およびホルモン不応性前立腺癌の治療に、単剤として、またはシスプラチンなどの他の化学療法剤と組み合わせて適応される。骨髄抑制がビノレルビンの最もよく見られる用量規制副作用である。
【００７８】
白金配位錯体は、細胞周期非特異性抗癌剤であり、ＤＮＡと相互作用する。白金錯体は腫瘍細胞に入り、アクア化を起こし、ＤＮＡと鎖内および鎖間架橋を形成し、腫瘍に有害な生物学的作用を起こす。白金配位錯体の例には、シスプラチンおよびカルボプラチンがあるが、これらに限定されない。
【００７９】
シスプラチン、シス−ジアンミンジクロロ白金は、注射液としてPLATINOL（登録商標）で市販されている。シスプラチンは、転移性の精巣癌および卵巣癌ならびに進行性膀胱癌の治療に主に適応される。シスプラチンの主な用量規制副作用は腎毒性であるが、これは水分補給および利尿により制御可能であり、さらに聴覚毒性がある。
【００８０】
カルボプラチン、白金ジアンミン［１，１−シクロブタン−ジカルボキシラート（２−）−Ｏ，Ｏ’］は、注射液としてPARAPLATIN（登録商標）として市販されている。カルボプラチンは主に進行性卵巣癌の第１選択および第２選択治療として適応される。骨髄抑制がカルボプラチンの用量規制毒性である。
【００８１】
アルキル化剤は、細胞周期非特異性抗癌剤であり、強力な求電子剤である。典型的には、アルキル化剤は、リン酸塩、アミノ、スルフヒドリル、ヒドロキシル、カルボキシル、およびイミダゾール基などのＤＮＡ分子の求核性部分を通してアルキル化によりＤＮＡに共有結合を形成する。そのようなアルキル化は核酸機能を破壊し、細胞死に導く。アルキル化剤の例には、ナイトロジェンマスタード、例えばシクロホスファミド、メルファラン、およびクロラムブシル；アルキルスルホナート、例えばブスルファン；ニトロソウレア、例えばカルムスチン；およびトリアゼン、例えばダカルバジンなどがあるが、これらに限定されない。
【００８２】
シクロホスファミド、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］テトラヒドロ−２Ｈ−１，３，２−オキサザホスホリン２−オキシド一水和物は、注射液または錠剤としてCYTOXAN（登録商標）で市販されている。シクロホスファミドは、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、および白血病の治療に、単剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて適応される。脱毛、悪心、嘔吐、および白血球減少症がシクロホスファミドの最もよく見られる用量規制副作用である。
【００８３】
メルファラン、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニンは、注射液または錠剤としてALKERAN（登録商標）で市販されている。メルファランは、多発性骨髄腫および切除不可能な卵巣の上皮癌の待期療法に適応される。骨髄抑制がメルファランの最もよく見られる用量規制副作用である。
【００８４】
クロラムブシル、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゼンブタン酸は、LEUKERAN（登録商標）錠剤として市販されている。クロラムブシルは、慢性リンパ性白血病ならびに悪性リンパ腫、例えばリンパ肉腫、巨大濾胞性リンパ腫、およびホジキン病などの待期治療に適応される。骨髄抑制が、クロラムブシルの最もよく見られる用量規制副作用である。
【００８５】
ブスルファン、１，４−ブタンジオールジメタンスルホナートは、MYLERAN（登録商標）錠剤として市販されている。ブスルファンは、慢性骨髄性白血病の待期治療に適応される。骨髄抑制がブスルファンの最もよく見られる用量規制副作用である。
【００８６】
カルムスチン、１，３−［ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソウレアは、凍結乾燥された物質のシングルバイアルとして、BiCNU（登録商標）で市販されている。カルムスチンは、脳腫瘍、多発性骨髄腫、ホジキン病、および非ホジキンリンパ腫に、単剤として、または他の薬剤と組み合わせて、待期治療のために適応される。遅延性の骨髄抑制がカルムスチンの最もよく見られる用量規制副作用である。
【００８７】
ダカルバジン、５−（３，３−ジメチル−１−トリアゼノ）−イミダゾール−４−カルボキサミドは、物質のシングルバイアルとしてDTIC-Dome（登録商標）で市販されている。ダカルバシンは、転移性悪性メラノーマの治療に適応され、ホジキン病の第２選択治療に他の薬剤と組み合わせて適応される。悪心、嘔吐、および食欲不振がダカルバジンの最もよく見られる用量規制副作用である。
【００８８】
抗生物質抗新生物剤(antibiotic anti-neoplastics)は細胞周期非特異性薬剤であり、ＤＮＡと結合またはＤＮＡに挿入する。典型的には、そのような作用は、安定なＤＮＡ錯体または鎖の崩壊を起こし、核酸の通常の機能を妨害し細胞死に導く。抗生物質抗新生物剤の例には、ダクチノマイシンなどのアクチノマイシン、ダウノルビシンおよびドキソルビシンなどのアントラサイクリン；ならびにブレオマイシンがあるが、これらに限定されない。
【００８９】
ダクチノマイシンは、アクチノマイシンＤとしても知られ、COSMEGEN（登録商標）として注射用形態で市販されている。ダクチノマイシンは、ウィルムス腫瘍および横紋筋肉腫の治療に適応される。悪心、嘔吐、および食欲不振がダクチノマイシンの用量規制副作用である。
【００９０】
ダウノルビシン、（８Ｓ−シス−）−８−アセチル−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−リキソ−ヘキソピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、DAUNOXOME（登録商標）としてリポソーム注射用形態で、またはCERUBIDINE（登録商標）として注射液で市販されている。ダウノルビシンは、急性非リンパ性白血病および進行性ＨＩＶ関連カポジ肉腫の治療における寛解導入に適応される。骨髄抑制がダウノルビシンの最もよく見られる用量規制副作用である。
【００９１】
ドキソルビシン、（８Ｓ，１０Ｓ）−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−リキソ−ヘキソピラノシル）オキシ］−８−グリコロイル、７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、RUBEX（登録商標）またはADRIAMYCIN RDF（登録商標）として注射用形態で市販されている。ドキソルビシンは、急性リンパ芽球性白血病および急性骨髄性白血病の治療に主に適応されるが、数種の固形癌およびリンパ腫の治療にも有用な成分である。骨髄抑制がドキソルビシンの最もよく見られる用量規制副作用である。
【００９２】
ブレオマイシンは、ストレプトマイセス・ベルチシルス(Streptomyces verticillus)の株から単離された細胞毒性グリコペプチド抗生物質の混合物であり、BLENOXANE（登録商標）として市販されている。ブレオマイシンは、扁平上皮癌、リンパ腫、および精巣癌の待期治療に、単剤として、または他の薬剤と組み合わせて適応される。肺毒性および皮膚毒性が、ブレオマイシンの最もよく見られる用量規制副作用である。
【００９３】
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤には、エピポドフィロトキシンがあるが、これに限定されない。
【００９４】
エピポドフィロトキシンは、マンドレークから誘導された周期特異性抗新生物剤である。エピポドフィロトキシンは、典型的には、トポイソメラーゼＩＩとＤＮＡとの三元複合体を形成して細胞周期のＳ期およびＧ_２期にある細胞に影響を与え、ＤＮＡ鎖の切断を起こす。鎖の切断が蓄積し、その後細胞死が起こる。エピポドフィロトキシンの例には、エトポシドおよびテニポシドがあるが、これらに限定されない。
【００９５】
エトポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン９［４，６−０−（Ｒ）−エチリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、VePESID（登録商標）として注射液またはカプセルで市販され、VP-16としても一般に知られている。エトポシドは、精巣癌および非小細胞肺癌の治療に、単剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて適応される。骨髄抑制がエトポシドの最もよく見られる用量規制副作用である。血小板減少症よりも白血球減少症の発生が重症になる傾向がある。
【００９６】
テニポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン９［４，６−０−（Ｒ）−テニリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、VUMON（登録商標）として注射液で市販され、VM-26としても一般的に知られている。テニポシドは、小児の急性白血病の治療において、単剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて適応される。骨髄抑制がテニポシドの最もよく見られる用量規制副作用である。テニポシドは白血球減少症と血小板減少症の両方を起こしうる。
【００９７】
代謝拮抗性抗新生物剤(antimetabolite neoplastic agents)は、ＤＮＡ合成の阻害またはプリンもしくはピリミジン塩基合成を阻害し、それによりＤＮＡ合成を制限する、細胞周期のＳ期（ＤＮＡ合成）で作用する周期特異性抗新生物剤である。したがって、Ｓ期は進行せず、細胞死が起こる。代謝拮抗性抗新生物剤の例には、フロオロウラシル、メトトレキサート、シタラビン、メカプトプリン(mecaptopurine)、チオグアニン、およびゲムシタビンがあるが、これらに限定されない。
【００９８】
５−フルオロウラシル、５−フロオロ−２，４−（１Ｈ，３Ｈ）ピリミジンジオンは、フルオロウラシルとして市販されている。５−フルオロウラシルを投与すると、チミジレート合成が阻害され、ＲＮＡおよびＤＮＡの両方に取り込まれる。その結果典型的には細胞死が起こる。５−フルオロウラシルは、乳癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、および膵臓癌の治療に、単剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて適応される。骨髄抑制および粘膜炎が５−フルオロウラシルの用量規制副作用である。他のフルオロピリミジンアナログには、５−フルオロデオキシウリジン（フロクスウリジン）および５−フルオロデオキシウリジンモノホスフェートがある。
【００９９】
シタラビン、４−アミノ−１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−２（１Ｈ）−ピリミジノンは、CYTOSAR-U（登録商標）として市販されており、Ara-Cとしても一般的に知られている。シタラビンは、成長しているＤＮＡ鎖へのシタラビンの末端取込みによってＤＮＡ鎖伸長を阻害することによりＳ期での細胞周期特異性を示すと考えられている。シタラビンは、急性白血病の治療に、単剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて適応される。他のシチジンアナログには、５−アザシチジンおよび２’，２’−ジフルオロデオキシシチジン（ゲムシタビン）がある。シタラビンは白血球減少症、血小板減少症、および粘膜炎を起こす。
【０１００】
メルカプトプリン、１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオン一水和物は、PURINETHOL（登録商標）として市販されている。メルカプトプリンは、まだ不特定の機構によってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期での細胞周期特異性を示す。メルカプトプリンは、急性白血病の治療に、単剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて適応される。骨髄抑制および胃腸粘膜炎が、高投与量でのメルカプトプリンの予測される副作用である。有用なメルカプトプリンアナログはアザチオプリンである。
【０１０１】
チオグアニン、２−アミノ−１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオンは、TABLOID（登録商標）として市販されている。チオグアニンは、まだ不特定の機構によってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期での細胞周期特異性を示す。チオグアニンは、急性白血病の治療に、単剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて適応される。白血球減少症、血小板減少症、および貧血を含む骨髄抑制が、チオグアニン投与の最もよく見られる用量規制副作用である。しかし、胃腸の副作用も起こり、用量規制的になることがある。他のプリンアナログには、ペントスタチン、エリスロヒドロキシノニルアデニン、フルダラビンホスフェート、およびクラドリビンがある。
【０１０２】
ゲムシタビン、２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン一塩酸塩（β異性体）は、GEMZAR（登録商標）として市販されている。ゲムシタビンは、Ｓ期で、Ｇ１／Ｓ境界を通る細胞の進行阻害により細胞周期特異性を示す。ゲムシタビンは、局所進行性非小細胞肺癌の治療にシスプラチンと組み合わせて、局所進行性膵臓癌の治療に単独で適応される。白血球減少症、血小板減少症、および貧血を含む骨髄抑制が、ゲムシタビン投与の最もよく見られる用量規制副作用である。
【０１０３】
メトトレキサート、Ｎ−［４［［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］メチルアミノ］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸は、メトトレキサートナトリウムとして市販されている。メトトレキサートは、プリンヌクレオチドおよびチミジレートの合成に必要なジヒドロ葉酸レダクターゼの阻害によってＤＮＡ合成、修復、および／または複製を阻害することにより、Ｓ期で特異的に細胞周期効果を示す。メトトレキサートは、絨毛癌、髄膜白血病、非ホジキンリンパ腫、ならびに乳房、頭部、頸部、卵巣、および膀胱の癌の治療に、単剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて適応される。骨髄抑制（白血球減少症、血小板減少症、および貧血）および粘膜炎が、メトトレキサート投与の予測される副作用である。
【０１０４】
カンプトテシンおよびカンプトテシン誘導体を含むカンプトテシンは、トポイソメラーゼＩ阻害剤として利用可能であるか、または開発中である。カンプトテシン細胞毒性活性は、そのトポイソメラーゼＩ阻害剤活性と関連していると考えられている。カンプトテシンの例には、イリノテカン、トポテカン、および以下に記載される７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０−カンプトテシンの種々の光学形態があるが、これらに限定されない。
【０１０５】
イリノテカンＨＣｌ、（４Ｓ）−４，１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−９−［（４−ピペリジノピペリジノ）カルボニルオキシ］−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン塩酸塩は、注射液CAMPTOSAR（登録商標）として市販されている。
【０１０６】
イリノテカンは、その活性代謝物ＳＮ−３８とともにトポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体に結合するカンプトテシンの誘導体である。トポイソメラーゼＩ：ＤＮＡ：イリノテカンまたはＳＮ−３８三元複合体と複製酵素の相互作用により起こる修復できない二重鎖切断の結果として細胞毒性が起こると考えられる。イリノテカンは、結腸または直腸の転移性癌の治療に適応される。イリノテカンＨＣｌの用量規制副作用は、好中球減少症を含む骨髄抑制および下痢を含む消化管作用である。
【０１０７】
トポテカンＨＣｌ、（Ｓ）−１０−［（ジメチルアミノ）メチル］−４−エチル−４，９−ジヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン一塩酸塩は、注射液HYCAMTIN（登録商標）として市販されている。トポテカンは、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体に結合しＤＮＡ分子のねじり歪みに応答するトポイソメラーゼＩにより起こされる一本鎖切断の再連結を防ぐカンプトテシンの誘導体である。トポテカンは、転位性卵巣癌および小細胞肺癌の第２選択治療に適応される。トポテカンＨＣｌの用量規制副作用は、骨髄抑制、主に好中球減少症である。
【０１０８】
現在開発中であり、ラセミ混合物（Ｒ，Ｓ）形態ならびにＲおよびＳのエナンチオマーを含む、以下の式Ａのカンプトテシン誘導体も興味深い：
【０１０９】
【化５】

【０１１０】
これは、化学名、７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｒ，Ｓ）−カンプトテシン（ラセミ混合物）または７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｒ）−カンプトテシン（Ｒエナンチオマー）もしくは７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン（Ｓエナンチオマー）により知られる。そのような化合物ならびに関連する化合物は、その製造方法も含めて、米国特許第６，０６３，９２３号；同第５，３４２，９４７号；同第５，５５９，２３５号；同第５，４９１，２３７号および係属中の１９９７年１１月２４日出願の米国特許出願第０８／９７７，２１７号に記載されている。
【０１１１】
ホルモンおよびホルモンアナログも、ホルモン（複数可）と癌の成長および／または成長の欠如に関連がある癌の治療に有用な化合物である。癌治療に有用なホルモンおよびホルモンアナログの例には、小児の悪性リンパ腫および急性白血病の治療に有用なプレドニゾンおよびプレドニゾロンなどのアドレノコルチコステロイド；副腎皮質癌およびエストロゲン受容体を含むホルモン依存性乳癌の治療に有用なアナストロゾール、レトラゾール(letrazole)、ボラゾール(vorazole)、およびエキセメスタンなどのアミノグルテチミドおよび他のアロマターゼ阻害剤；ホルモン依存性乳癌および子宮体癌の治療に有用な酢酸メゲストロールなどのプロゲストリン(progestrin)；前立腺癌および良性前立腺肥大の治療に有用な、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、酢酸シプロテロンなどのエストロゲン、アンドロゲン、および抗アンドロゲン剤ならびにフィナステリドおよびデュタステライドなどの５α−レダクターゼ；ホルモン依存性乳癌および他の感受性のある癌の治療に有用な、タモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、イオドキシフェンなどの抗エストロゲン剤ならびに米国特許第５，６８１，８３５号、同第５，８７７，２１９号および同第６，２０７，７１６号に記載されるものなど、選択的エストロゲン受容体調節剤（ＳＥＲＭＳ）；前立腺癌の治療のための、黄体形成ホルモン（ＬＨ）および／または卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の放出を刺激するゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）およびそのアナログ、例えば、酢酸ゴセレリンおよびリュープロリドなどのＬＨＲＨ作用剤および拮抗剤があるが、これらに限定されない。
【０１１２】
シグナル伝達経路阻害剤は、細胞内の変化を引き起こす化学プロセスを遮断または阻害する阻害剤である。本明細書では、この変化は細胞増殖または分化である。本発明に有用なシグナル伝達阻害剤には、受容体型チロシンキナーゼ、非受容体型チロシンキナーゼ、ＳＨ２／ＳＨ３ドメイン遮断剤(domain blockers)、セリン／スレオニンキナーゼ、ホスホチジルイノシトール−３−キナーゼ、ミオイノシトールシグナル伝達、およびＲａｓ癌遺伝子の阻害剤がある。
【０１１３】
数種のプロテインチロシンキナーゼは細胞成長の制御に関与する種々のタンパク質中の特定のチロシン残基のリン酸化を触媒する。そのようなプロテインチロシンキナーゼは、受容体型または非受容体型キナーゼに大まかに分類できる。
【０１１４】
受容体型チロシンキナーゼは、細胞外リガンド結合ドメイン、貫膜ドメイン、およびチロシンキナーゼドメインを有する膜貫通型タンパク質である。受容体型チロシンキナーゼは細胞成長の制御に関わり、一般的に成長因子受容体と称される。これらのキナーゼの多くの不適切または制御されない活性化、すなわち、例えば過剰発現または突然変異による異常なキナーゼ成長因子受容体活性は、制御されない細胞成長を起こすことが示されている。したがって、そのようなキナーゼの異常な活性は悪性の組織成長に関連がある。そのため、そのようなキナーゼの阻害剤は、癌治療の方法を提供できるかもしれない。成長因子受容体には、例えば上皮成長因子受容体（ＥＧＦｒ）、血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦｒ）、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ４、血管内皮細胞成長因子受容体（ＶＥＧＦｒ）、免疫グロブリン様および表皮成長因子相同ドメインを持つチロシンキナーゼ（ＴＩＥ−２）、インスリン成長因子−Ｉ（ＩＧＦＩ）受容体、マクロファージコロニー刺激因子（ｃｆｍｓ）、ＢＴＫ、ｃｋｉｔ、ｃｍｅｔ、繊維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）受容体、Ｔｒｋ受容体（ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、およびＴｒｋＣ）、エフリン（ｅｐｈ）受容体、およびＲＥＴ癌原遺伝子がある。成長因子受容体のいくつかの阻害剤が開発中であり、リガンド拮抗剤、抗体、チロシンキナーゼ阻害剤、およびアンチセンスオリゴヌクレオチドがある。成長因子受容体および成長因子受容体機能を阻害する薬剤は、例えば、Kath, John C., Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(6):803-818; Shawver et al DDT Vol 2, No. 2 February 1997; and Lofts, F. J. et al, "Growth factor receptors as targets", New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy, ed. Workman, Paul and Kerr, David, CRC press 1994, Londonに記載されている。
【０１１５】
成長因子受容体型キナーゼでないチロシンキナーゼは、非受容体型チロシンキナーゼと呼ばれる。本発明に使用するための非受容体型チロシンキナーゼは、抗癌剤の標的または可能性のある標的であり、ｃＳｒｃ、Ｌｃｋ、Ｆｙｎ、Ｙｅｓ、Ｊａｋ、ｃＡｂｌ、ＦＡＫ（焦点接着キナーゼ）、ブルトン型チロシンキナーゼ、およびＢｃｒ−Ａｂｌがある。そのような非受容体型キナーゼおよび非受容体型チロシンキナーゼ機能を阻害する薬剤は、Sinh, S. and Corey, S.J., (1999) Journal of Hematotherapy and Stem Cell Research 8 (5): 465-80; and Bolen, J.B., Brugge, J.S., (1997) Annual review of Immunology. 15: 371-404に記載されている。
【０１１６】
ＳＨ２／ＳＨ３ドメイン遮断剤は、ＰＩ３−Ｋｐ８５サブユニット、Ｓｒｃファミリーキナーゼ、アダプター分子（Ｓｈｃ、Ｃｒｋ、Ｎｃｋ、Ｇｒｂ２）、およびＲａｓ−ＧＡＰを含む、種々の酵素またはアダプタータンパク質におけるＳＨ２またはＳＨ３ドメイン結合を妨害する薬剤である。抗癌剤の標的としてのＳＨ２／ＳＨ３ドメインは、Smithgall, T.E. (1995), Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 34(3) 125-32に記載されている。
【０１１７】
Ｒａｆキナーゼ（ｒａｆｋ）、マイトジェンまたは細胞外制御キナーゼ（ＭＥＫ）、および細胞外制御キナーゼ（ＥＲＫ）；およびＰＫＣ(α、β、γ、ε、μ、λ、ι、ζ)の阻害剤を含むプロテインキナーゼＣファミリーのメンバー遮断剤を含むＰＭＡＰキナーゼカスケード遮断剤を含むセリン／スレオニンキナーゼの阻害剤。ＩｋＢキナーゼファミリー（ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ）、ＰＫＢファミリーキナーゼ、ａｋｔキナーゼファミリーメンバー、およびＴＧＦβ受容体キナーゼ。そのようなセリン／スレオニンキナーゼおよびその阻害剤は、Yamamoto, T., Taya, S., Kaibuchi, K., (1999), Journal of Biochemistry. 126 (5) 799-803; Brodt, P, Samani, A., and Navab, R. (2000), Biochemical Pharmacology, 60. 1101-1107; Massague, J., Weis-Garcia, F. (1996) Cancer Surveys. 27:41-64; Philip, P.A., and Harris, A.L. (1995), Cancer Treatment and Research. 78: 3-27, Lackey, K. et al Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, (10), 2000, 223-226; U.S. Patent No. 6,268,391; and Martinez-Iacaci, L., et al, Int. J. Cancer (2000), 88(1), 44-52に記載されている。
【０１１８】
ＰＩ３−キナーゼ、ＡＴＭ、ＤＮＡ−ＰＫ、およびＫｕの遮断剤を含む、ホスホチジルイノシトール−３キナーゼファミリーメンバーの阻害剤も本発明に有用なことがある。そのようなキナーゼは、Abraham, R.T. (1996), Current Opinion in Immunology. 8 (3) 412-8; Canman, C.E., Lim, D.S. (1998), Oncogene 17 (25) 3301-3308; Jackson, S.P. (1997), International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 29 (7):935-8; and Zhong, H. et al, Cancer res, (2000) 60(6), 1541-1545に記載されている。
【０１１９】
ホスホリパーゼＣ遮断剤およびミオイノシトールアナログなどのミオイノシトールシグナル伝達阻害剤も本発明に重要なことがある。そのようなシグナル伝達阻害剤は、Powis, G., and Kozikowski A., (1994) New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy ed., Paul Workman and David Kerr, CRC press 1994, Londonに記載されている。
【０１２０】
シグナル伝達経路阻害剤の他の群は、Ｒａｓ癌原遺伝子の阻害剤である。そのような阻害剤には、ファルネシルトランスフェラーゼ、ゲラニル−ゲラニルトランスフェラーゼ、およびＣＡＡＸプロテアーゼの阻害剤、ならびにアンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、免疫療法がある。そのような阻害剤は、野生型変異体ｒａｓを含む細胞中でｒａｓの活性化を遮断し、抗増殖剤として作用することが示されている。Ｒａｓ癌原遺伝子の阻害は、Scharovsky, O.G., Rozados, V.R., Gervasoni, S.I. Matar, P. (2000), Journal of Biomedical Science. 7(4) 292-8; Ashby, M.N. (1998), Current Opinion in Lipidology. 9 (2) 99-102; and BioChim. Biophys. Acta, (19899) 1423(3):19-30に議論されている。
【０１２１】
上述のとおり、受容体型キナーゼリガンド結合に対する抗体拮抗剤もシグナル伝達阻害剤として作用することがある。この群のシグナル伝達経路阻害剤には、受容体型チロシンキナーゼの細胞外リガンド結合ドメインに対するヒト化抗体の使用がある。例えば、Imclone C225 ＥＧＦＲ特異性抗体 (Green, M.C. et al, Monoclonal Antibody Therapy for Solid Tumors, Cancer Treat. Rev., (2000), 26(4), 269-286参照); Herceptin（登録商標）ｅｒｂＢ２抗体(Tyrosine Kinase Signalling in Breast cancer: erbB Family Receptor Tyrosine Kniases, Breast cancer Res., 2000, 2(3), 176-183参照);および２ＣＢ ＶＥＧＦＲ２特異性抗体(Brekken, R.A. et al, Selective Inhibition of VEGFR2 Activity by a monoclonal Anti-VEGF antibody blocks tumor growth in mice, Cancer Res. (2000) 60, 5117-5124参照)。
【０１２２】
非受容体型キナーゼ血管新生阻害剤も本発明に有用なことがある。血管新生関連ＶＥＧＦＲおよびＴＩＥ２の阻害剤は、シグナル伝達阻害剤に関連して先に議論されている（両受容体とも受容体型チロシンキナーゼである）。ｅｒｂＢ２およびＥＧＦＲの阻害剤は血管新生、主にＶＥＧＦ発現を阻害すると示されているので、血管新生は一般的にｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲシグナル伝達に関連している。したがって、非受容体型チロシンキナーゼ阻害剤は、本発明の化合物と組み合わせて使用できる。例えば、ＶＥＧＦＲ（受容体型チロシンキナーゼ）を認識しないがリガンドに結合する抗ＶＥＧＦ抗体；血管新生を阻害するであろうインテグリン（αｖ、β３）の小分子阻害剤；エンドスタチンおよびアンジオスタチン（非受容体型チロシンキナーゼ)も、開示される化合物と組み合わせて有用であることが分かるかもしれない(Bruns CJ et al (2000), Cancer Res., 60: 2926-2935; Schreiber AB, Winkler ME, and Derynck R. (1986), Science, 232: 1250-1253; Yen L et al. (2000), Oncogene 19: 3460-3469参照)。
【０１２３】
免疫療法レジメンに使用される薬剤も、式（Ｉ）の化合物と組み合わせて有用なことがある。免疫反応を生むための免疫学的戦略が数多くある。これらの戦略は一般的に腫瘍ワクチン接種の範囲内にある。免疫学的アプローチの効能は、小分子阻害剤を利用するシグナル伝達経路の阻害と組み合わせて大きく向上することがある。ｅｒＢ２／ＥＧＦＲに対する免疫学的／腫瘍ワクチンアプローチの議論は、Reilly RT et al. (2000), Cancer Res. 60: 3569-3576; and Chen Y, Hu D, Eling DJ, Robbins J, and Kipps TJ. (1998), Cancer Res. 58: 1965-1971に見いだされる。
【０１２４】
アポトーシス促進レジメンに使用される薬剤（例えば、ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチド)も、本発明と組み合わせて使用してよい。Ｂｃｌ−２ファミリーのメンバーのタンパク質はアポトーシスを遮断する。したがって、ｂｃｌ−２のアップレギュレーションは、化学療法抵抗性に関連している。研究によれば、上皮成長因子（ＥＧＦ）は、ｂｃｌ−２ファミリーの抗アポトーシスメンバー（すなわち、ｍｃｌ−１）を刺激していることが示された。したがって、腫瘍中のｂｃｌ−２の発現をダウンレギュレーションするように計画された戦略は臨床的有用性を示し、現在ＩＩ／ＩＩＩ相試験中であり、すなわち、GentaのG3139 ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチドである。ｂｃｌ−２に対しアンチセンスオリゴヌクレオチド戦略を使用するそのようなアポトーシス促進戦略は、Water JS et al. (2000), J. Clin. Oncol. 18: 1812-1823; and Kitada S et al. (1994), Antisense Res. Dev. 4: 71-79に記載されている。
【０１２５】
細胞周期シグナル伝達阻害剤は、細胞周期の制御に関与する分子を阻害する。サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）と呼ばれるプロテインキナーゼのファミリーおよびサイクリンと称されるプロテインファミリーとのその相互作用は、真核細胞周期の進行を制御する。異なるサイクリン／ＣＤＫ複合体の配位活性化および不活性化が、細胞周期の正常な進行に必要である。細胞周期シグナル伝達の阻害剤がいくつか開発中である。例えば、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、およびＣＤＫ６などのサイクリン依存性キナーゼおよびその阻害剤の例が、例えば、Rosania et al, Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(2):215-230に記載されている。
【０１２６】
組成物
式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、必ずではないが通常は、患者への投与前に医薬組成物に製剤される。したがって、他の態様において、本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩および１種以上の薬学的に許容可能な賦形剤を含んでなる医薬組成物に関する。
【０１２７】
本発明の医薬組成物は、安全で有効な量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を取り出し、散剤またはシロップなどで患者に与えることのできるバルク形態で製造および包装してよい。別法としては、本発明の医薬組成物は、物理的に個別な各単位が、安全で有効な量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む、単位剤形(unit dosage form)に製造および包装してもよい。単位剤形に製造される場合、本発明の医薬組成物は、典型的には、例えば、０．５ｍｇから１ｇ、または１ｍｇから７００ｍｇ、または５ｍｇから１００ｍｇの本発明の化合物を含むことがある。
【０１２８】
本発明の医薬組成物は、典型的には、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を１種含む。しかし、特定の態様によれば、本発明の医薬組成物は、２種以上の式Ｉの化合物を含む。例えば、特定の態様によれば、本発明の医薬組成物は、２種の式Ｉの化合物を含む。さらに、本発明の医薬組成物は、１種以上の追加の薬剤活性化合物を任意にさらに含んでなることがある。
【０１２９】
本明細書では、「薬学的に許容可能な賦形剤」は、医薬組成物に形態または堅さを与えるのに関与する薬学的に許容可能な物質、組成物、またはビヒクルを意味する。各賦形剤は、患者に投与される場合の本発明の化合物の効力を実質的に低下させるだろう相互作用および薬剤的に許容できない医薬組成物を作り出すだろう相互作用が避けられるように、混合される場合に医薬組成物の他の成分と適合性がなくてはならない。さらに、各賦形剤は、もちろん、薬学的に許容可能なように十分に高純度でなくてはならない。
【０１３０】
式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩および薬学的に許容可能な賦形剤または複数の賦形剤は、典型的には、所望の投与経路による患者への投与に適合された剤形に製剤される。例えば、剤形には、（１）錠剤、カプセル、カプレット、丸薬、トローチ、散剤、シロップ、エリキシル、懸濁液、溶液、乳液、サシェ、およびカシェなどの経口投与；（２）滅菌溶液、懸濁液、および再構成用パウダーなどの非経口投与に適合されたものがある。
【０１３１】
薬学的に許容可能な好適な賦形剤は、選択される特定の剤形により変わるだろう。さらに、薬学的に許容可能な好適な賦形剤は、組成物中で果たす特定の機能に対して選択してもよい。例えば、ある薬学的に許容可能な賦形剤は、均一な剤形の製造を容易にする能力で選択できる。ある薬学的に許容可能な賦形剤は、安定な剤形の製造を容易にする能力で選択できる。ある薬学的に許容可能な賦形剤は、患者に投与されると、１つの器官または体のある部分から、他の器官または体の他の部分への本発明の化合物または複数の化合物の運送または輸送を容易にする能力で選択できる。ある薬学的に許容可能な賦形剤は、患者のコンプライアンスを高める能力で選択できる。
【０１３２】
薬学的に許容可能な好適な賦形剤には、以下の種類の賦形剤がある：希釈剤、充填剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、顆粒化剤、コーティング剤、湿潤剤、溶媒、共溶媒、懸濁剤、乳化剤、甘味料、着香料、風味マスキング剤、着色料、固化防止剤、保湿剤、キレート剤、可塑剤、粘度増化剤、酸化防止剤、保存剤、安定剤、界面活性剤、および緩衝剤。当業者は、ある薬学的に許容可能な賦形剤が２つ以上の機能を果たすことがあり、製剤中の賦形剤の量および製剤中の他の成分により、代わりとなる機能を果たしうることを認識するだろう。
【０１３３】
当業者は、本発明での使用に好適な量で薬学的に許容可能な好適な賦形剤を選択できるような、当分野の知識および技術を有する。さらに、薬学的に許容可能な賦形剤を記載し、薬学的に許容可能な好適な賦形剤を選択するのに有用な、当業者が利用できる数多くの情報源がある。その例には、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)、The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited)、and The Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)がある。
【０１３４】
本発明の医薬組成物は、当業者に公知の技術および方法を利用して製造される。当分野に通常利用される方法のいくつかは、Remington’s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)に記載されている。
【０１３５】
一態様において、本発明は、安全で有効な量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩および希釈剤または充填剤を含んでなる、錠剤またはカプセルなどの固体経口剤形に関する。好適な希釈剤および充填剤には、ラクトース、スクロース、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、スターチ（例えば、コーンスターチ、ポテトスターチ、およびα化デンプン）、セルロースおよびその誘導体（例えばミクロクリスタリンセルロース）、硫酸カルシウム、および二塩基性リン酸カルシウムがある。経口固体剤形はさらに結合剤を含んでもよい。好適な結合剤には、スターチ（例えば、コーンスターチ、ポテトスターチ、およびα化デンプン）、ゼラチン、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、トラガカント、グアーガム、ポビドン、ならびにセルロースおよびその誘導体（例えばミクロクリスタリンセルロース）がある。経口固体剤形はさらに崩壊剤を含んでよい。好適な崩壊剤には、クロスポビドン、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカルメロース、アルギン酸、およびカルボキシメチルセルロースナトリウムがある。経口固体剤形はさらに滑沢剤を含んでよい。好適な滑沢剤には、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、およびタルクがある。
【０１３６】
適切な場合、経口投与用の投与量単位製剤(dosage unit formulations)はマイクロカプセル化することができる。組成物は、例えば、ポリマー、ワックスなどに顆粒状物質をコーティングまたは埋め込んで、放出を延長または持続するように製造できる。
【０１３７】
本発明の化合物は、標的設定可能な薬剤キャリア(targetable drug carriers)としての可溶性ポリマーと組み合わせることもできる。そのようなポリマーには、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール、またはパルミトイル基で置換されているポリエチレンオキシドポリリジンがある。さらに、本発明の化合物は、薬剤の持続放出を達成するのに有用なある種の生分解性ポリマーと組み合わせてもよく、例えば、ポリ乳酸、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリラート、およびヒドロゲルの架橋もしくは両親媒性ブロックコポリマーがある。
【０１３８】
他の態様において、本発明は液体経口剤形に関する。溶液、シロップ、およびエリキシルなどの経口液体は、ある量が所定量の本発明の化合物を含むように、投与量単位形態で製造できる。シロップは、本発明の化合物を好適に味付けされた水溶液に溶かして製造でき、エリキシルは、非毒性のアルコール性ビヒクルの使用により製造される。懸濁液は、本発明の化合物を非毒性のビヒクルに懸濁させて製剤できる。エトキシ化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの安定剤および乳化剤、保存剤、着香調味料、例えば、ペパーミントオイルまたは天然の甘味料またはサッカリンもしくは他の人工甘味料なども加えることもできる。
【０１３９】
他の薬学的に許容可能な賦形剤を懸濁液または溶液に加えてよい。本発明の化合物は、無機酸、例えば、塩化水素酸、硝酸、硫酸、および／またはリン酸；有機酸、例えば、アスコルビン酸、クエン酸、酢酸、および酒石酸；錯化剤、例えばＥＤＴＡまたはクエン酸およびその塩；酸化防止剤、例えばビタミンＥまたはアスコルビン酸などの酸化防止剤の添加により安定化できる。これらを、単独または組み合わせて使用し、本発明の化合物を安定化できる。ベンズアルコニウムクロライドまたは安息香酸およびその塩などの保存剤を加えてよい。界面活性剤は、特に懸濁液の物理的安定性を高めるために添加されることがある。界面活性剤には、レシチン、ジオクチルスルホコハク酸二ナトリウム、オレイン酸、およびソルビタンエステルがある。
【０１４０】
本発明の他の態様は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含んでなる非経口投与用の医薬組成物に関する。非経口投与用の医薬組成物には、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、および意図される受容者の血液と製剤とを等張にする溶質を含むことがある水性および非水性の滅菌注射液；ならびに懸濁剤および増粘剤を含むことのある水性および非水性の滅菌懸濁液がある。組成物は、例えば、密栓アンプルおよびバイアルなどの単位用量または多用量容器に呈することができ、使用の直前に、例えば注射用水などの滅菌液体キャリアを添加するだけでよいフリーズドライ（凍結乾燥）状態で貯蔵することもできる。即座の注射液および懸濁液を、滅菌パウダー、顆粒、および錠剤から製造できる。
【実施例】
【０１４１】
以下の実施例は本発明を説明する。これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではなく、当業者が本発明の化合物、組成物、および方法を製造および利用するための手引きを与えるものである。本発明の特定の態様が記載されるが、当業者は、本発明の精神および範囲を逸脱せずに種々の変更および改良が実施可能であることを認識するだろう。
【０１４２】
装置
ＬＣ−ＭＳ：
装置
ＬＣ：島津１０Ａ（コントローラ、ポンプ、およびＵＶ検出器）
ＵＶ：島津１０Ａ（２１４ｎｍ）
ＥＬＳ：Ｓｅｄｅｒｅ Ｓｅｄｅｘ ７５Ｃ
ＭＳ：ＰＥ Ｓｃｉｅｘ Ｓｉｎｇｌｅ Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ １００ＬＣ、１５０ＥＸ、またはＷａｔｅｒｓ ＺＱ
極性（ポジティブ）；モード（プロファイル）；スキャン時間（０．３３秒）；ステップ（０．２ｍ／ｚ）；キャピラリーＶ（５５００）；コーンＶ（２５−４５）
オートサンプラー：ＣＴＣ Ｌｅａｐ；３μＬループ；デフォルト注入体積２μＬ（デフォルト）
カラム：Ｔｈｅｒｍｏ Ｈｙｐｅｒｓｉｌ Ｇｏｌｄ（Ｃ１８、２０×２．１ｍｍ、１．９μ粒径）
ヒーター：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ４５℃
溶媒Ａ：Ｈ_２Ｏ、０．０２％ＴＦＡ
溶媒Ｂ：ＭｅＣＮ、０．０１８％ＴＦＡ
勾配：時間（分）流量（ｍＬ／分）溶媒Ｂ
停止
ＨＰＬＣ条件：
溶媒Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ
溶媒Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ_３ＣＮ
カラム：
Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８（２） １００Ａ ＡＸＩＡ ５０×３０ｍｍ ５ミクロン分取カラム
Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８（２） １００Ａ ＡＸＩＡ ５０×２１．２０ｍｍ ５ミクロン分取カラム
ＵＶ検出２５４ｎｍ
【０１４３】
中間体１
エチル４−メチル−２−（メチルチオ）−６−オキソ−１，４，５，６−テトラヒドロ−５−ピリミジンカルボキシラート
【０１４４】
【化６】

【０１４５】
丸底フラスコに、Ｓ−メチルイソチオウロニウムサルフェート（１４．０ｇ、１００．６ｍｍｏｌ）、ジエチルエチリデンマロナート（１８．７ｇ、１００．６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２０．４ｇ、２０１．２ｍｍｏｌ）、およびエタノール（２００ｍＬ）を入れた。フラスコに還流冷却器を取付け、反応を２０時間還流加熱した。反応を室温に冷却し、エタノールを真空下で除去した。残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶かし、溶液を水、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、蒸発させると、生成物（１２．２ｇ、収率８７％）を与えた。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_９Ｈ_１４Ｎ_２Ｏ_３Ｓ_１）＝２３０．２９、（Ｍ＋Ｈ）^＋＝２３１．０。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ １．０７−１．３６（ｍ，６Ｈ），２．２３−２．４６（ｍ，３Ｈ），２．９８−３．３８（ｍ，１Ｈ），３．９０−４．４５（ｍ，３Ｈ）８．６１（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）。
【０１４６】
中間体２
エチル４−メチル−２−（メチルチオ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−５−ピリミジンカルボキシラート
【０１４７】
【化７】

【０１４８】
丸底フラスコに、エチル４−メチル−２−（メチルチオ）−６−オキソ−１，４，５，６−テトラヒドロ−５−ピリミジンカルボキシラート（１１．２ｇ、４８．７ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（８．６７ｇ、４８．７ｍｍｏｌ）、過酸化ベンゾイル（０．６５ｇ、２．７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（６７ｇ、４８７ｍｍｏｌ）、および四塩化炭素（７００ｍＬ）を入れた。反応を４５分間還流加熱し、室温に冷却した。反応を水（５００ｍＬ）でクエンチし、塩化メチレンで洗浄した。水相を、濃ＨＣｌの滴下により酸性化し、塩化メチレンで抽出した。抽出物をＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発させると、生成物を与えた（８．２ｇ、収率７８％）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_９Ｈ_１２Ｎ_２Ｏ_３Ｓ_１）＝２２８．２７，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝２２８．９。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ｐｐｍ １．４３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）２．５８（ｓ，３Ｈ）２．５９（ｓ，３Ｈ）４．４４（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）１２．４６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）
【０１４９】
中間体３
エチル４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキシラート
【０１５０】
【化８】

【０１５１】
丸底フラスコに、エチル４−メチル−２−（メチルチオ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−５−ピリミジンカルボキシラート（６ｇ）およびオキシ塩化リン（３０ｍＬ）を入れ、３時間還流加熱した。真空下でオキシ塩化リンを除去した。残渣をクロマトグラフ（シリカゲル、塩化メチレンで溶離）にかけると生成物を与えた（５．７３ｇ、収率８７％）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_９Ｈ_１１Ｃｌ_１Ｎ_２Ｏ_２Ｓ_１）＝２４６．７２，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝２４６．８。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ｐｐｍ １．４１（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ），２．５７（ｓ，３Ｈ），４．４４（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）。
【０１５２】
中間体４
エチル４−メチル−６−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキシラート
【０１５３】
【化９】

【０１５４】
丸底フラスコに、エチル４−メチル−６−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキシラート（２．５ｇ、１０．１３ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（２．８８ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）、３−メチルアニリン（１．１９ｇ、１１．１４ｍｍｏｌ）、およびジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）を入れた。反応を７０℃で攪拌しながら一晩加熱した。溶媒を真空下で留去した。残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）に溶かし、溶液を、水、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。この物質をクロマトグラフ（シリカゲル、ヘキサンから塩化メチレンへの勾配で溶離）にかけると生成物を与えた（２．８３ｇ、収率７５％）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１６Ｈ_１９Ｎ_３Ｏ_２Ｓ_１）＝３１７．４１，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝３１８．１。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ｐｐｍ １．４３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），２．５２（ｓ，３Ｈ），２．６４（ｓ，３Ｈ），４．４０（ｑ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．１９−７．３２（ｍ，１Ｈ），７．４１−７．５７（ｍ，２Ｈ），１０．５７（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）。
【０１５５】
中間体５
４−メチル−６−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボン酸
【０１５６】
【化１０】

【０１５７】
１００ｍｌの丸底フラスコに、エチル４−メチル−６−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキシラート（２．８３ｇ、８．９２ｍｍｏｌ）、水酸化ナトリウム（５ｍＬの水に溶解）（０．５３ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）、エタノール（２５ｍＬ）、および水（２５ｍＬ）を加えた。反応を２時間還流しながら攪拌した。室温まで冷却し、真空下で濃縮した。残渣を水（１００ｍＬ）で処理し、酢酸を滴下して酸性化した。次いで、酢酸エチル（５００ｍＬ）を加え、混合物を１０分間攪拌した。有機相を分離した。水相を酢酸エチル（２×）で抽出し、有機抽出物を合わせ、水、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させた。溶媒を真空下で除去すると生成物を与えた（２．６ｇ）。
【０１５８】
別な精製方法：水相を酢酸で酸性化した後、沈殿した生成物を濾過により除き、真空オーブン中で乾燥させた。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１４Ｈ_１５Ｎ_３Ｏ_２Ｓ_１）＝２８９．３６，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝２８９．７。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．９２（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），２．４７（ｓ，３Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．２４（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４２（ｓ，１Ｈ），７．５０（ｓ，１Ｈ），１０．６９（ｓ，１Ｈ），１１．３２−１４．５７（ｍ，１Ｈ）。
【０１５９】
中間体６
４−メチル−６−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキサミド
【０１６０】
【化１１】

【０１６１】
４−メチル−６−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボン酸（１．７１ｇ、５．９０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４０ｍＬ）に溶かした溶液に、ｏ−（７−アザベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（４．８８ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（３．８３ｇ、２９．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１０分間攪拌してから、水酸化アンモニウム（２８％の７．２ｍｌ）を加えた。混合物をさらに２０分間攪拌し、ＤＭＦを真空下で除去した。残渣を酢酸エチルと水との間で分配した。不溶性の生成物を濾過により集め、真空下で乾燥させた（０．５４ｇ）。有機相を分離し、１ＮのＮａＯＨ、水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させた。溶媒を真空下で除去すると追加の生成物（１．０３ｇ）を与えたので、先に得られた沈殿生成物と合わせた（全体で１．２７ｇ、収率７４％）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１４Ｈ_１６Ｎ_４Ｏ_１Ｓ_１）＝２８８．３７，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝２８８．７。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ２．２９（ｓ，３Ｈ），２．３９（ｓ，３Ｈ），２．４６（ｓ，３Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２１（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．８８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．９９（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），９．１６（ｓ，１Ｈ）。
【０１６２】
中間体７
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０１６３】
【化１２】

【０１６４】
丸底フラスコに、４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン（１．６１ｇ、５．５８ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１００ｍＬ）を加えた。リチウムヘキサメチルジシラザンをＴＨＦに溶かした溶液（１Ｍ、３３．４ｍＬ）を加え、反応を１２５℃で一晩攪拌した。およそ２０ｍＬのＴＨＦを留去し、温度を１２５℃にした。反応混合物を氷水浴で冷却し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液を滴下してクエンチした。混合物を真空下で濃縮し、次いで固体物質を酢酸エチルと水との間で分配した。相を分離し、水相を酢酸エチル（２×）で抽出した。有機抽出物を合わせ、水、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させた。溶媒を真空下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン／酢酸エチル勾配で溶離）にかけると、粗生成物を与えた（１．２ｇ）。次いで、酢酸エチルから再結晶させると、純粋な生成物を合わせた（０．５２ｇ、収率３０％）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１５Ｈ_１４Ｎ_４Ｏ_１Ｓ_１）＝２９８．３７，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝２９９．０。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ２．３３（ｓ，３Ｈ），２．５４（ｓ，３Ｈ），６．３３（ｄｄ，Ｊ＝７．２，１．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．５５−７．６６（ｍ，３Ｈ），１１．９２−１１．９７（ｍ，１Ｈ），１１．９９（ｓ，１Ｈ）。
【０１６５】
実施例１
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０１６６】
【化１３】

【０１６７】
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン（０．５２ｇ、１．７４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３０ｍＬ）に溶かした溶液に、ｍ−クロロ過安息香酸（０．８１ｇ、純度７０％−７７％）を加え、反応混合物を一晩攪拌した。１，３−ジアミノプロパン（１．２９ｇ、１７．４ｍｍｏｌ）を加え、反応を１時間攪拌し、次いでＤＭＦを真空下で除去した。残渣をメタノールに溶かし、ＳＣＸカートリッジ（１５ｇのシリカ結合プロピルスルホン酸）の上に加え、クロロ安息香酸が全て出てくるまでメタノールで溶離した。次いで、メタノール中２ＮのＮＨ_３で溶離して、生成物を出した。生成物を含むフラクションを濃縮し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１７Ｈ_２０Ｎ_６Ｏ）＝３２４．３９，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝３２５．０。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．５５−１．７８（ｍ，２Ｈ，２．３２（ｓ，３Ｈ），２．５７−２．７０（ｍ，１Ｈ），２．９１−３．０９（ｍ，１Ｈ），５．８５−６．２６（ｍ，１Ｈ），６．５６−７．８９（ｍ，７Ｈ），１１．４３−１２．１５（ｍ，１Ｈ）。
【０１６８】
以下の２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（置換）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オンは、エチル４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキシラートおよび適切なアニリンから、実施例１に記載されたものと類似の合成経路に従い製造した。
【０１６９】
【化１４】

【０１７０】
【表１】

【０１７１】
実施例５
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−８−メチル−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０１７２】
【化１５】

【０１７３】
この化合物は、ジエチルプロピリデンプロパンジオアートから実施例１に記載されたものと類似の合成経路に従い製造した。
【０１７４】
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１８Ｈ_２２Ｎ_６Ｏ）＝３３８．４１，（Ｍ＋１）^＋＝３３９．０。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ９．１０（１Ｈ，ｍ），７．８７（３Ｈ，ｍ），７．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．６１（１Ｈ，ｓ），７．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｍ），７．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），３．５５（２Ｈ，ｍ），２．９０（２Ｈ，ｍ），２．３６（３Ｈ，ｓ），２．１４（３Ｈ，ｓ），１．９４（２Ｈ，ｍ）。
【０１７５】
中間体８
４−メチル−２−（メチルチオ）−６−｛［４−（メチルチオ）フェニル］アミノ｝−５−ピリミジンカルボキサミド
【０１７６】
【化１６】

【０１７７】
この化合物は、エチル４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキシラートおよび４−（メチルチオ）アニリンから、中間体６に記載されたものと類似の手順を利用して製造した。
ＭＳ：（Ｃ_１４Ｈ_１６Ｎ_４ＯＳ_２）＝３２０．４４，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝３２０．８。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ２．３８（ｓ，３Ｈ），２．４４（ｓ，３Ｈ），２．６９（ｓ，３Ｈ），７．０９−７．３３（ｍ，２Ｈ），７．５０−７．６６（ｍ，２Ｈ），７．８５（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．００（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），９．１５（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）。
【０１７８】
中間体９
５−［（Ｅ）−２−（ジメチルアミノ）エテニル］−７−（メチルチオ）−１−［４−（メチルチオ）フェニル］−ピリミド［４，５−ｄ］ピリミジン−４（１Ｈ）−オン
【０１７９】
【化１７】

【０１８０】
４−メチル−２−（メチルチオ）−６−｛［４−（メチルチオ）フェニル］アミノ｝−５−ピリミジンカルボキサミドベンズアミド（０．５０ｇ、１．５７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２０ｍｌ）に溶かした溶液に、ジメチルホルムアミド−ジメチルアセタール（０．５６ｇ、４．７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を８５℃で１．５時間攪拌した。それを室温に冷却し、ＤＭＦを真空下で除去した。残渣をクロマトグラフ（シリカゲル、ヘキサンから酢酸エチルへの勾配、次いで塩化メチレン中１０％のメタノールで溶離）にかけると、生成物を与えた（０．４３ｇ、収率７２％）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１８Ｈ_１９Ｎ_５Ｏ_１Ｓ_２）＝３８５．５１，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝３８５．９。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ２．２７（ｓ，３Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），２．９７（ｓ，３Ｈ），３．２３（ｓ，３Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｍ，２Ｈ），７．４６（ｍ，２Ｈ），８．２８−８．３８（ｍ，２Ｈ）。
【０１８１】
中間体１０
２−（メチルチオ）−４−｛［４−（メチルチオ）フェニル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０１８２】
【化１８】

【０１８３】
丸底フラスコに、５−［（Ｅ）−２−（ジメチルアミノ）エテニル］−７−（メチルチオ）−１−［４−（メチルチオ）フェニル］ピリミド［４，５−ｄ］ピリミジン−４（１Ｈ）−オン（０．４３ｇ、１．３０ｍｍｏｌ）および酢酸（５０ｍＬ）を加えた。反応を還流しながら１８時間攪拌し、酢酸を真空下で除去した。塩化メチレン（２０ｍＬ）を残渣に加え、生成物を濾過により回収した（０．２７ｇ、収率７５％）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１５Ｈ_１４Ｎ_４Ｏ_１Ｓ_２）＝３３０．４３，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝３３０．８。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ２．４８（ｓ，３Ｈ），２．５２（ｓ，３Ｈ），５．９９−６．４７（ｍ，１Ｈ），７．０４−７．４１（ｍ，２Ｈ），７．５４−７．６４（ｍ，１Ｈ），７．６９−７．７９（ｍ，２Ｈ），１１．６２−１２．１３（ｍ，１Ｈ）。
【０１８４】
実施例６
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−｛［４−（メチルスルホニル）フェニル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０１８５】
【化１９】

【０１８６】
２−（メチルチオ）−４−｛［４−（メチルチオ）フェニル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン（０．２７ｇ、０．８１７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶かした溶液に、メタ−クロロ過安息香酸（０．７７ｇ、３．４３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１８時間攪拌した。１，３−ジアミノプロパン（１０当量）を加え、混合物を２時間攪拌した。ＤＭＦを真空下で除去した。残渣をメタノールに溶かし、ＳＣＸカートリッジ（１５グラムのシリカ結合プロピルスルホン酸）の上に加えた。それを、クロロ安息香酸が全て出てくるまでメタノールで溶離し、次いでメタノール中２ＮのＮＨ_３で生成物を出した。生成物を含むフラクションを合わせ、濃縮した。残渣を逆相ＨＰＬＣで精製すると、生成物を与えた（０．３４ｇ）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１７Ｈ_２０Ｎ_６Ｏ_３Ｓ）＝３８８．４５，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝３８９．１。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ１．７５−１．９７（ｍ，２Ｈ），２．８２−２．９７（ｍ，２Ｈ），３．２２（ｓ，３Ｈ），３．３５−３．５３（ｍ，２Ｈ），６．１５−６．３１（ｍ，１Ｈ），７．４０−７．６２（ｍ，１Ｈ），７．６３−７．７７（ｍ，３Ｈ），７．８２−８．１６（ｍ，４Ｈ），１１．５７−１１．９４（ｍ，１Ｈ），１２．２９−１２．５９（ｍ，１Ｈ）。
【０１８７】
実施例７
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−｛［３−（メチルスルホニル）フェニル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０１８８】
【化２０】

【０１８９】
この化合物は、実施例６に記載のものと類似の合成経路を利用し、中間体３および３−（メチルチオ）アニリンから製造した。
【０１９０】
ＭＳ：（Ｃ_１７Ｈ_２０Ｎ_６Ｏ_３Ｓ）＝３８８．４５，（Ｍ＋１）^＋＝３８８．９。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．７２−１．９７（ｍ，２Ｈ），２．８０−２．９７（ｍ，２Ｈ），３．２６（ｓ，３Ｈ），３．３７−３．５９（ｍ，２Ｈ），６．１７−６．３３（ｍ，１Ｈ），７．５８−７．８６（ｍ，７Ｈ），８．８６−８．９７（ｍ，１Ｈ），１１．４８−１２．１４（ｍ，１Ｈ），１２．３７−１２．６３（ｍ，１Ｈ）。
【０１９１】
中間体１１
エチル４−（｛３−［３−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］フェニル｝アミノ）−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキシラート
【０１９２】
【化２１】

１，１−ジメチルエチル［３−（３−アミノフェニル）プロピル］カルバマート（３９０ｍｇ、１．５５８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶かした溶液に、エチル４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキシラート（３０７ｍｇ、１．２４６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．２９８ｍＬ、１．７１４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を７５℃で一晩攪拌した。次いで反応を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン中０％から５０％のＥｔＯＡｃ勾配）を利用して精製すると、生成物を与えた（２１０ｍｇ、収率２９％）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２３Ｈ_３２Ｎ_４Ｏ_４Ｓ）＝４６０．５９，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝４６１．６。
【０１９３】
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ ｐｐｍ １．４４−１．４７（ｍ，１２Ｈ），１．７７−１．８５（ｍ，３Ｈ），２．５２（ｓ，３Ｈ），２．６２（ｓ，３Ｈ），２．６５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），３．０９（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），４．４５（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），４．６４（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４２（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５５−７．５８（ｍ，１Ｈ）。
【０１９４】
中間体１２
１，１−ジメチルエチル［３−（３−｛［５−（アミノカルボニル）−６−メチル−２−（メチルチオ）−４−ピリミジニル］アミノ｝フェニル）プロピル］カルバマート
【０１９５】
【化２２】

【０１９６】
この化合物は、中間体６に記載されたものと類似の合成経路を利用して、エチル４−（｛３−［３−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］フェニル｝アミノ）−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキシラートから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２１Ｈ_２９Ｎ_５Ｏ_３Ｓ）＝４３１．５５，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝４３２．０。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ｐｐｍ １．４０（ｓ，９Ｈ），１．７８（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），２．４９（ｓ，３Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ），２．６１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），３．０６−３．１３（ｍ，２Ｈ），３．３６（ｄｔ，Ｊ＝３．３，１．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），９．４７−９．５０（ｍ，１Ｈ）。
【０１９７】
中間体１３
１，１−ジメチルエチル［３−（３−｛［２−（メチルチオ）−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］アミノ｝フェニル）プロピル］カルバマート
【０１９８】
【化２３】

【０１９９】
１，１−ジメチルエチル［３−（３−｛［５−（アミノカルボニル）−６−メチル−２−（メチルチオ）−４−ピリミジニル］アミノ｝フェニル）プロピル］カルバマート（１００ｍｇ、０．２３２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶かし、ＤＭＦ−ＤＭＡ（０．０９３ｍＬ、０．６９５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を８０℃で２時間攪拌した。溶媒を除き、酢酸（１ｍＬ）を加え、混合物を攪拌しながら９０℃で一晩加熱した。次いで、反応を減圧下で濃縮し、逆相ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ、Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎソフトウェア使用、ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８（２） １００Ａ、ＡＸＩＡ．５０×３０．００ｍｍ ５ミクロン、７．３分の運転、４７ｍｌ／分：３５％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡから６５％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ、２５４ｎｍでのＵＶ検出）を利用して精製すると、生成物を与えた（１０ｍｇ）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２２Ｈ_２７Ｎ_５Ｏ_３Ｓ）＝４４１．５５（Ｍ＋Ｈ）^＋＝４４２．１。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ ｐｐｍ １．４６（ｓ，９Ｈ），１．８３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），２．０３（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），２．６９（ｓ，３Ｈ），２．７９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），２．９８（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）３．０９（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），６．４０−６．４４（ｍ，１Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ），７．５６（ｓ，１Ｈ），７．６３−７．７４（ｍ，２Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２００】
中間体１４
１，１−ジメチルエチル（３−｛３−［（２−｛［３−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］アミノ｝−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］フェニル｝プロピル）カルバマート
【０２０１】
【化２４】

【０２０２】
１，１−ジメチルエチル［３−（３−｛［２−（メチルチオ）−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］アミノ｝フェニル）プロピル］カルバマート（１９ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍＬ）に溶かし、ｍ−ＣＰＢＡ（２７．３ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間攪拌し、１，１−ジメチルエチル（３−アミノプロピル）カルバマート（６０．０ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を一晩攪拌した。それを次いで濃縮し、残渣を逆相ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ、Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎソフトウェア使用、ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８（２） １００Ａ、ＡＸＩＡ．５０×３０．００ｍｍ ５ミクロン、７．３分の運転、４７ｍｌ／分：２５％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡから６５％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ、２５４ｎｍでのＵＶ検出）を利用して精製すると、生成物を与えた（３９ｍｇ）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２９Ｈ_４１Ｎ_７Ｏ_５）＝５６７．６８，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝５６８．５。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ｐｐｍ １．４０−１．５６（ｍ，１８Ｈ），１．８５（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），２．２８（ｂｒ．ｓ，４Ｈ），２．６７（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），３．１７（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），３．６０（ｍ，２Ｈ），５．１０（ｍ，１Ｈ），６．２４（ｍ，１Ｈ），６．５４（ｍ，１Ｈ），６．７８−６．９４（ｍ，１Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｍ，１Ｈ），７．６１（ｍ，１Ｈ），９．９６（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），１０．８０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），１２．０６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）。
【０２０３】
実施例８
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−｛［３−（３−アミノプロピル）フェニル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０２０４】
【化２５】

【０２０５】
ＴＦＡ（０．５ｍＬ、６．４９ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（０．５ｍＬ）の事前に混合した溶液に、１，１−ジメチルエチル（３−｛３−［（２−｛［３−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］アミノ｝−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］フェニル｝プロピル）カルバマート（３９ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を３０分間攪拌した。次いで、それを濃縮し、生成物を凍結乾燥させた（３０ｍｇ、白色固体）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１９Ｈ_２５Ｎ_７Ｏ）＝３６７．４５（Ｍ＋Ｈ）^＋＝３６８．０。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．８０−１．９３（ｍ，４Ｈ），２．６５−２．７０（ｍ，２Ｈ），２．７６−２．８８（ｍ，４Ｈ），３．５０（ｂｒ．ｓ，４Ｈ），６．３３（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），６．９７（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．０７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２９−７．３６（ｍ，１Ｈ），７．３９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｓ，１Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．９５（ｓ，１Ｈ），８．０２−８．０７（ｍ，１Ｈ），１２．０４（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），１２．３５（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）。
【０２０６】
中間体１５
エチル４−（｛３−［２−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドル−２−イル）エチル］フェニル｝アミノ）−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキシラート
【０２０７】
【化２６】

【０２０８】
この化合物は、中間体１１に記載されたものと類似の合成経路に従い、２−［２−（３−アミノフェニル）エチル］−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオンおよびエチル４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキシラートから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２５Ｈ_２４Ｎ_４Ｏ_４Ｓ）＝４７６．５５，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝４７６．８。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ｐｐｍ １．４２（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），２．５７（ｓ，３Ｈ），２．９７−３．０２（ｍ，２Ｈ），３．１１（ｄｄ，Ｊ＝７．３，４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｄｄ，Ｊ＝９．７，６．２Ｈｚ，２Ｈ），４．４４（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２８−７．３２（ｍ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．６３（ｓ，１Ｈ），７．７２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．８４（ｄｄ，Ｊ＝５．６，３．０Ｈｚ，２Ｈ），１０．８０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）。
【０２０９】
中間体１６
４−（｛３−［２−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドル−２−イル）エチル］フェニル｝アミノ）−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキサミド
【０２１０】
【化２７】

【０２１１】
この化合物は、中間体６に記載のものと類似の合成経路を利用して、エチル４−（｛３−［２−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドル−２−イル）エチル］フェニル｝アミノ）−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボキシラートから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２３Ｈ_２１Ｎ_５Ｏ_３Ｓ）＝４４７．５１（Ｍ＋Ｈ）^＋＝４４８．１。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ２．３９（ｓ，３Ｈ），２．４８（ｓ，３Ｈ），２．９０（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），３．８０（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．６２（ｓ，１Ｈ），７．８０−７．８８（ｍ，５Ｈ），８．００（ｓ，１Ｈ），９．２２（ｓ，１Ｈ）。
【０２１２】
中間体１７
２−［２−（３−｛［２−（メチルチオ）−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］アミノ｝フェニル）エチル］−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン
【０２１３】
【化２８】

【０２１４】
Ｎ−［２−（３−｛［５−（アミノカルボニル）−６−メチル−２−（メチルチオ）−４−ピリミジニル］アミノ｝フェニル）エチル］−１，２−ベンゼンジカルボキサミド（１００ｍｇ、０．２１５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍＬ）に溶かし、ＤＭＦ−ＤＭＡ（０．１４４ｍＬ、１．０７６ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を８０℃で２時間攪拌した。次いで、溶媒を除き、酢酸（１ｍＬ）を加え、混合物を９０℃で一晩攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を逆相ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ、Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎソフトウェア使用、ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８（２） １００Ａ、ＡＸＩＡ．５０×３０．００ｍｍ ５ミクロン、７．３分の運転、４７ｍｌ／分：２８％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡから５０％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ、２５４ｎｍでのＵＶ検出）を利用して精製し、生成物を与えた（３８ｍｇ）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２４Ｈ_１９Ｎ_５Ｏ_３Ｓ）＝４５７．５０，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝４５８．１。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ２．５６（ｓ，３Ｈ），２．９５（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），３．８４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），６．３４（ｄｄ，Ｊ＝７．２，１．１４Ｈｚ，１Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），７．７５（ｓ，１Ｈ），７．８３（ｍ，４Ｈ），１１．９６（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），１２．０１（ｓ，１Ｈ）。
【０２１５】
中間体１８
１，１−ジメチルエチル（３−｛［４−（｛３−［２−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドル−２−イル）エチル］フェニル｝アミノ）−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル］アミノ｝プロピル）カルバマート
【０２１６】
【化２９】

【０２１７】
２−［２−（３−｛［２−（メチルチオ）−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］アミノ｝フェニル）エチル］−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン（３８ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍＬ）に溶かし、ｍ−ＣＰＢＡ（５２．７ｍｇ、０．２０８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を一晩攪拌し、１，１−ジメチルエチル（３−アミノプロピル）カルバマート（１１６ｍｇ、０．６６４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１時間攪拌し、濃縮した。残渣を逆相ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ、Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎソフトウェア使用、ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８（２） １００Ａ、ＡＸＩＡ．５０×３０．００ｍｍ ５ミクロン、７．３分の運転、４７ｍｌ／分：３０％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡから５５％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ、２５４ｎｍでのＵＶ検出）を利用して精製し、生成物を与えた（２４ｍｇ）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_３１Ｈ_３３Ｎ_７Ｏ_５）＝５８３．６４，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝５８４．１。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．３２（ｓ，９Ｈ），１．７３（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），２．９７（ｓ，４Ｈ），３．４４（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），３．５７（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），３．８５（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），６．３５（ｍ，１Ｈ），６．８６（ｍ，１Ｈ），７．０４（ｍ，１Ｈ），７．３４（ｔ，１Ｈ），７．４６（ｓ，１Ｈ），７．６１（ｄ，１Ｈ），７．７２−７．７５（ｍ，１Ｈ），７．８４（ｍ，４Ｈ），１２．３７（ｓ，１Ｈ）。
【０２１８】
中間体１９
１，１−ジメチルエチル｛３−［（４−｛［３−（２−アミノエチル）フェニル］アミノ｝−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ］プロピル｝カルバマート
【０２１９】
【化３０】

【０２２０】
１，１−ジメチルエチル（３−｛［４−（｛３−［２−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドル−２−イル）エチル］フェニル｝アミノ）−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル］アミノ｝プロピル）カルバマート（２４ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）をエタノール（２ｍＬ）に溶かし、ヒドラジン（３０μｌ、０．９５６ｍｍｏｌ）を加えた。反応を９０℃で３時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を逆相ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ、Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎソフトウェア使用、ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８（２） １００Ａ、ＡＸＩＡ．５０×３０．００ｍｍ ５ミクロン、７．３分の運転、４７ｍｌ／分：１０％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡから４０％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ、２５４ｎｍでのＵＶ検出）を利用して精製すると、生成物を与えた（１１ｍｇ）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２３Ｈ_３１Ｎ_７Ｏ_３）＝４５３．５４，（Ｍ＋１）^＋＝４５４．０。
【０２２１】
実施例９
４−｛［３−（２−アミノエチル）フェニル］アミノ｝−２−［（３−アミノプロピル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０２２２】
【化３１】

【０２２３】
ＴＦＡ（０．５ｍＬ、６．４９ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（０．５ｍＬ）の事前に混合した溶液に、１，１−ジメチルエチル｛３−［（４−｛［３−（２−アミノエチル）フェニル］アミノ｝−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ］プロピル｝カルバマート（１１ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を３０分間攪拌した。それを濃縮し、生成物を凍結乾燥させた（４ｍｇ、白色固体）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１８Ｈ_２３Ｎ_７Ｏ）＝３５３．４３，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝３５４．２。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．８４−１．９５（ｍ，２Ｈ），２．８３−２．９５（ｍ，４Ｈ），３．０２−３．１６（ｍ，２Ｈ），３．４０−３．５５（ｍ，２Ｈ），６．３９（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．７４−７．９２（ｍ，６Ｈ），９．０３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），１２．４３（ｓ，１Ｈ），１２．４９（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）。
【０２２４】
実施例１０
４−｛［４−（２−アミノエチル）フェニル］アミノ｝−２−［（３−アミノプロピル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０２２５】
【化３２】

【０２２６】
この化合物は、実施例９に記載されたものと類似の合成経路として手順に従い、中間体３および２−［２−（４−アミノフェニル）エチル］−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオンから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１８Ｈ_２３Ｎ_７Ｏ）＝３５３．４３，（Ｍ＋１）^＋＝３５４．１。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ２．８８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，４Ｈ），２．９８−３．１２（ｍ，２Ｈ），３．３６−３．５７（ｍ，２Ｈ），６．１９−６．３９（ｍ，１Ｈ），７．３４（ｓ，２Ｈ），７．６４−８．１０（ｍ，８Ｈ），１１．４９−１２．５１（ｍ，２Ｈ）。
【０２２７】
実施例１１
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−８−メチル−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０２２８】
【化３３】

【０２２９】
この化合物は、実施例１に記載されたものと類似の合成経路に従い、ジエチルプロピリデンプロパンジオアートから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１８Ｈ_２２Ｎ_６Ｏ）＝３３８．４１，（Ｍ＋１）^＋＝３３９．０。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ９．１０（１Ｈ，ｍ），７．８７（３Ｈ，ｍ），７．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．６１（１Ｈ，ｓ），７．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｍ），７．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），３．５５（２Ｈ，ｍ），２．９０（２Ｈ，ｍ），２．３６（３Ｈ，ｓ），２．１４（３Ｈ，ｓ），１．９４（２Ｈ，ｍ）。
【０２３０】
中間体２０
［１−（メチルオキシ）エチリデン］プロパンジニトリル
【０２３１】
【化３４】

【０２３２】
空気攪拌器、温度計、および蒸留冷却器を備えた１００ｍＬのフラスコに、マロノニトリル（９．１ｇ、０．１３８ｍｏｌ、オルト酢酸トリエチル（２６．８ｇ、０．１６５ｍｏｌ）および氷酢酸（０．４ｍＬ）を連続して加え、混合物を攪拌し、反応中に形成されるエタノールが留去され始めるまで穏やかに加熱した（９０℃）。エタノールが全て留去されると、反応温度をゆっくりと９０℃から１４０℃に３０分間上げ、反応の終了を確実にした。反応混合物を４５℃まで放冷すると凝固した。得られた固体の塊をヘキサン下（２０ｍＬ）で粉砕し、ヘキサンをデカンテーションして除いた。固体をエタノール（５０ｍＬ）で洗浄すると、無色の結晶を与えた。エタノール溶液を濃縮し、室温に放冷した。次いで、結晶を濾過し、エタノールで洗浄し、真空下で乾燥させた（１２．３ｇ、収率６５．９％）。
^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ），δ４．４２（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝１５．８，６．８Ｈｚ），２．４４（３Ｈ，ｓ），１．３２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ）。
【０２３３】
中間体２１
４−アミノ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリル
【０２３４】
【化３５】

【０２３５】
（１−エトキシエチリデン）マロノニトリル（２５ｇ、０．１８４ｍｏｌ）およびｓ−メチルイソチオウレアヘミ硫酸塩（３８．３ｇ、０．２７５ｍｏｌ）をＭｅＯＨ（８００ｍＬ）に加えた混合物に、０℃のＮａＯＭｅ（９．９ｇ、０．１８４ｍｏｌ）を加えた。混合物を室温まで温め、一晩攪拌した。水（１Ｌ）を反応混合物に加え、さらに３０分間攪拌した。得られた沈澱物を濾過し、溶離する水が無色になるまで水で洗浄した。白色（または黄色）固体を真空下で乾燥させた（２６．１ｇ、収率７８．８％）。
【０２３６】
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_７Ｈ_８Ｎ_４Ｓ）＝１８０．２３，（Ｍ＋１）^＋＝１８１．１。
【０２３７】
^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ），δ ７．７５（２Ｈ，ｂｒ．ｓ），２．４３（３Ｈ，ｓ），２．３６（３Ｈ，ｓ）。
【０２３８】
中間体２２
４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリル
【０２３９】
【化３６】

【０２４０】
４−アミノ−６−メチル−２−（メチルチオ）ピリミジン−５−カルボニトリル（５０ｇ、０．２７８ｍｏｌ）を、塩化銅（ＩＩ）無水物（４４．７ｇ、０．３３４ｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルニトリル（５１．６ｍＬ、０．５００ｍｏｌ）およびＭｇＳＯ_４（１０ｍｇ）を８０℃のアセトニトリル（８００ｍＬ）に加えた混合物に攪拌しながら加えた。３時間後、混合物を室温に冷却し、濾過した。濾液を濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶かし、水、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。粗物質のカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝３：１、次いで３：２）を行うと、所望の生成物を白色固体として与えた（３３ｇ、収率５９％）。
【０２４１】
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_７Ｈ_６Ｎ_３ＳＣｌ）＝１９９．６６，（Ｍ＋１）^＋＝２００．１。
【０２４２】
^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ ２．６９（３Ｈ，ｓ），２．６１（３Ｈ，ｓ）。
【０２４３】
中間体２３
４−メチル−６−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリル
【０２４４】
【化３７】

【０２４５】
４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリル（５００ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（６ｍＬ）に溶かした溶液に、３−メチルアニリン（３２２ｍｇ、３．０１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（７１２ｍｇ、５．５２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を７０℃で１．５時間攪拌した。混合物を冷却し、濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）に溶かし、水（１０ｍＬ）で洗浄した。酢酸エチル抽出物をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、０から１００％）を使用して精製すると、生成物を与えた（６５０ｍｇ、収率９６％）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１４Ｈ_１４Ｎ_４Ｓ）＝２７０．３６，（Ｍ＋１）^＋＝２７０．８。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ７．４３（１Ｈ，ｍ），７．２７（１Ｈ，ｍ），７．１０（１Ｈ，ｓ），７．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），２．５５（３Ｈ，ｓ），２．５２（３Ｈ，ｓ），２．３８（３Ｈ，ｓ）。
【０２４６】
中間体２４
４−［（Ｅ）−２−（ジメチルアミノ）エテニル］−６−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリル
【０２４７】
【化３８】

【０２４８】
４−メチル−６−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリル（１．３２ｇ、４．８９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（８ｍＬ）に溶かした溶液に、ＤＭＦジメチルアセチル（１．１６ｇ、９．７５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１１０℃で１．５時間攪拌した。混合物を濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）に溶かした。溶液を水で洗浄し、有機層を集めた。水層をＥｔＯＡｃ（２×）で抽出した。合わせた抽出物をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、濃縮すると、粗エナミン生成物を与えた（１．４７ｇ）。ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１７Ｈ_１９Ｎ_５Ｓ）＝３２５．４４，（Ｍ＋１）^＋＝３２６．１。
【０２４９】
中間体２５
５−ブロモ−Ｎ−（３−メチルフェニル）−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−アミン
【０２５０】
【化３９】

【０２５１】
粗４−［（Ｅ）−２−（ジメチルアミノ）エテニル］−６−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリル（１．４７ｇ）を酢酸（５ｍＬ）に溶かし、３３％ＨＢｒの氷酢酸溶液（１０ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で２０分間攪拌した。次いで、混合物を減圧下で濃縮すると、ブロモピリジンをＨＢｒ塩として与えた。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１５Ｈ_１３ＢｒＮ_４Ｓ）＝３６１．２７，（Ｍ＋１）^＋＝３６０．７，３６２．７。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ８．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ），７．５５（１Ｈ，ｍ），７．４２（２Ｈ，ｍ），７．３１（１Ｈ，ｍ），７．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ），２．５６（３Ｈ，ｓ），２．４１（３Ｈ，ｓ）。
【０２５２】
中間体２６
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０２５３】
【化４０】

【０２５４】
粗中間体２５を酢酸（１０ｍＬ）および６Ｎの塩酸（１５ｍＬ）に溶かし、反応混合物を８０℃で１．５時間攪拌した。混合物を冷却し、減圧下で濃縮した。残渣を飽和ＮａＨＣＯ_３でゆっくりと処理し、固体を濾過により集めた。水溶液をＣＨ_２Ｃｌ_２（５×）で抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。合わせた固体生成物を高真空下でさらに乾燥させると、粗生成物を与えた（１．４８ｇ、純度８４％）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１５Ｈ_１４Ｎ_４ＯＳ）＝２９８．３７，（Ｍ＋１）^＋＝２９８．９。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ７．６０（３Ｈ，ｍ），７．２８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），２．５４（３Ｈ，ｓ），２．３３（３Ｈ，ｓ）。
【０２５５】
中間体２７
１，１−ジメチルエチル［３−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）プロピル］カルバマート
【０２５６】
【化４１】

【０２５７】
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン（４２０ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（６ｍＬ）に溶かした溶液に、ｍＣＰＢＡ（５８２ｍｇ、３．３８）を加え、反応混合物を一晩攪拌した。１，１−ジメチルエチル（３−アミノプロピル）カルバマート（１．００ｇ、８．０６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１時間攪拌した。反応を飽和ＮａＨＣＯ_３でクエンチし、酢酸エチル（３×１５ｍＬ）で抽出した。抽出物をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。逆相ＨＰＬＣを利用して残渣を精製すると、生成物を与えた（３０１ｍｇ）。
ＨＰＬＣ条件：Ｇｉｌｓｏｎ、Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎソフトウェア使用、ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８（２） １００Ａ、ＡＸＩＡ、５０×３０．００ｍｍ ５ミクロン、７．３分の運転（４７ｍＬ／分、２３％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡから５３％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）、ＵＶ検出２５４ｎｍ。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２２Ｈ_２８Ｎ_６Ｏ_３）＝４２４．５０，（Ｍ＋１）^＋＝４２５．１。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ７．８８（１Ｈ， ｓ）， ７．７２ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ）， ７．６２ （１Ｈ， ｍ）， ７．４１ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ）， ６．３５ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ）， ４．５４ （２Ｈ， ｓ）， ４．４８ （２Ｈ， ｓ）， ２．５３ （３Ｈ， ｓ）。
【０２５８】
実施例１
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０２５９】
【化４２】

【０２６０】
１，１−ジメチルエチル［３−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）プロピル］カルバマート（２４５ｍｇ、０．５７７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍＬ）に溶かし、ＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。反応混合物を１時間攪拌し、濃縮した。残渣を高真空下でさらに乾燥させると、生成物をＴＦＡ塩として与えた（２５０ｍｇ）。
【０２６１】
中間体２８
１−（フェニルスルホニル）−１Ｈ−ピラゾル−４−アミン
【０２６２】
【化４３】

【０２６３】
４−ニトロ−１−（フェニルスルホニル）−１Ｈ−ピラゾール（２１．０ｇ、８２．９ｍｍｏｌ）をメタノール（３００ｍＬ）に溶かした溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％ｗｔ、４．０ｇ）を加え、混合物を１２時間室温でＨ_２雰囲気下で攪拌した。濾過の後、濾液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を石油エーテルで洗浄し、乾燥させると、白色固体として生成物を与えた（１５．０ｇ、収率８１．１％）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_９Ｈ_９Ｎ_３Ｏ_２Ｓ）＝２２３．２６，（Ｍ＋１）^＋＝２２４．０。
【０２６４】
中間体２９
４−メチル−２−（メチルチオ）−６−｛［１−（フェニルスルホニル）−１Ｈ−ピラゾル−４−イル］アミノ｝−５−ピリミジンカルボニトリル
【０２６５】
【化４４】

【０２６６】
中間体３０
４−メチル−２−（メチルチオ）−６−（１Ｈ−ピラゾル−４−イルアミノ）−５−ピリミジンカルボニトリル
【０２６７】
【化４５】

【０２６８】
４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）ピリミジン−５−カルボニトリル（６．４５ｇ、３２．２ｍｍｏｌ）および１−（フェニルスルホニル）−１Ｈ−ピラゾル−４−アミン（７．２ｇ、３２．２ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（１５０ｍＬ）に溶かした溶液に、４−メチルベンゼンスルホン酸（３．０６ｇ、１６．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を一晩９０℃で攪拌した。室温に冷却後、沈澱物を濾過し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液、次いで水で洗浄し、乾燥させ、石油および混合溶媒（石油エーテル：酢酸エチル＝４：１）で連続して洗浄すると、４−メチル−２−（メチルチオ）−６−（１Ｈ−ピラゾル−４−イルアミノ）−５−ピリミジンカルボニトリル（中間体３０、３．６ｇ）を色の薄い固体として与えた。ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１０Ｈ_１０Ｎ_６Ｓ）＝２４６．３０，（Ｍ＋１）^＋＝２４７．１；^１ＨＮＭＲ（３００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １２．６９（１Ｈ，ｓ），９．８７（１Ｈ，ｓ），７．９７（１Ｈ，ｓ），３．３３（３Ｈ，ｍ），２．４２（３Ｈ，ｓ）。有機溶離液を減圧下で濃縮し、残渣を上記と同じ方法で処理すると、４−メチル−２−（メチルチオ）−６−｛［１−（フェニルスルホニル）−１Ｈ−ピラゾル−４−イル］アミノ｝−５−ピリミジンカルボニトリル（中間体２９、４．２６ｇ、収率３４．４％）を黄色固体として与えた。ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１６Ｈ_１４Ｎ_６Ｏ_２Ｓ_２）＝３８６．４６，（Ｍ＋１）^＋＝３８７．１；^１ＨＮＭＲ（３００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １０．２２（１Ｈ，ｓ），８．６８（１Ｈ，ｓ），８．１４（１Ｈ，ｓ），７．９６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．８０（１Ｈ，ｍ），７．６８（２Ｈ，ｍ），２．５０（３Ｈ，ｓ），２．４９（３Ｈ，ｓ）。
【０２６９】
中間体３１
４−［（Ｅ）−２−（ジメチルアミノ）エテニル］−２−（メチルチオ）−６−｛［１−（フェニルスルホニル）−１Ｈ−ピラゾル−４−イル］アミノ｝−５−ピリミジンカルボニトリル
【０２７０】
【化４６】

【０２７１】
中間体２９（４．１６ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１００ｍＬ）に溶かした溶液に、ｔｅｒｔ−ブトキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルメタンジアミン（ＢＢＤＭ、５．６３ｇ、３２．３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃で１６時間攪拌した。室温に冷却した後、混合物を氷水（８００ｍＬ）に注ぎ、濾過し、固体を水、石油、および混合溶媒（石油：酢酸エチル＝３：１）で連続して洗浄し、乾燥させると、４．２ｇの生成物を黄色固体として与えた。収率６４．３％。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１９Ｈ_１９Ｎ_７Ｏ_２Ｓ_２）＝４４１．５４，（Ｍ＋１）^＋＝４４２．２。
【０２７２】
中間体３２
２−（メチルチオ）−４−（１Ｈ−ピラゾル−４−イルアミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０２７３】
【化４７】

【０２７４】
中間体３１（４．２ｇ、６．９４ｍｍｏｌ）を酢酸（５０ｍＬ）に加えた懸濁液に、ＨＢｒ（酢酸中３３％、２５ｍＬ）をゆっくりと（約１０分かけて）加え、反応混合物を４０℃で３時間攪拌した。次いで、水（２０ｍＬ）を加え、混合物を８０℃でさらに２時間攪拌した。それを、冷却し、濾過し、固体を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で処理し、水で洗浄して、乾燥させた。次いで、固体を石油エーテル（３×２０ｍＬ）および酢酸エチル（２×１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させると、所望の生成物を薄黄色固体として与えた（０．８ｇ、収率４２．１％）。
【０２７５】
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１１Ｈ_１０Ｎ_６ＯＳ）＝２７４．３１，（Ｍ＋１）^＋＝２７５．１。
【０２７６】
^１ＨＮＭＲ（３００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １２．７８（１Ｈ，ｓ），１１．８９（１Ｈ，ｓ），１１．６２（１Ｈ，ｓ），８．１２（１Ｈ，ｂｒｏａｄ ｓ），７．８７（１Ｈ，ｂｒｏａｄ ｓ），７．５４（１Ｈ，ｍ），６．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），２．４９（３Ｈ，ｓ）。
【０２７７】
実施例１２
４−（１Ｈ−ピラゾル−４−イルアミノ）−２−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルアミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０２７８】
【化４８】

【０２７９】
この化合物は、実施例１（スキーム２）に記載されたものと類似のｍＣＰＢＡ／（Ｒ）−３−アミノ−１−Ｎ−Ｂｏｃ−ピロリジンおよびＴＦＡシーケンスを利用し、中間体３２から製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１４Ｈ_１６Ｎ_８Ｏ）＝３１２．３４，（Ｍ＋１）^＋＝３１３．１。
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．９５−２．０７（ｍ，１Ｈ），２．１７−２．３０（ｍ，１Ｈ），３．１４−３．４１（ｍ，２Ｈ），３．４３−３．５４（ｍ，１Ｈ），４．４７−４．７４（ｍ，２Ｈ），６．１７−６．３０（ｍ，１Ｈ），７．４０−７．７１（ｍ，１Ｈ），７．９７−８．１６（ｍ，２Ｈ），８．６９−８．９４（ｍ，２Ｈ），１１．４４−１２．１７（ｍ，２Ｈ）。
【０２８０】
中間体３３
４−［（２−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０２８１】
【化４９】

【０２８２】
この化合物は、中間体２６に記載されたものと類似の手順に従い、４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリルおよび２−メチルアニリンから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１５Ｈ_１４Ｎ_４ＯＳ）＝２９８．３７，（Ｍ＋１）^＋＝２９９．０。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １１．９１（１Ｈ，ｓ），１１．８３（１Ｈ，ｓ），８．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．２８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．３４（１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），２．４９（３Ｈ，ｓ），２．３４（３Ｈ，ｓ）。
【０２８３】
実施例１３
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（２−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０２８４】
【化５０】

【０２８５】
この化合物は、実施例１（スキーム２）に記載されたものと類似の手順で（ｍＣＰＢＡ／１，１−ジメチルエチル（３−アミノプロピル）カルバマートおよびＴＦＡ）、４−［（２−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オンから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１７Ｈ_２０Ｎ_６Ｏ）＝３２４．３９，（Ｍ＋１）^＋＝３２５．２。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ８．２０（１Ｈ，ｍ），７．７３（４Ｈ，ｍ），７．１５−７．３８（３Ｈ，ｍ），６．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），３．４１（２Ｈ，ｍ），２．８３（２Ｈ，ｍ），２．３６（３Ｈ，ｓ），１．８３（２Ｈ，ｍ）。
【０２８６】
中間体３４
４−［（２，２−ジオキシド−１，３−ジヒドロ−２−ベンゾチエン−５−イル）アミノ］−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリル
【０２８７】
【化５１】

【０２８８】
この化合物は、中間体２３に記載されたものと類似の手順に従い、４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリルおよび（２，２−ジオキシド−１，３−ジヒドロ−２−ベンゾチエン−５−イル）アミンから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１５Ｈ_１４Ｎ_４Ｏ_２Ｓ_２）＝３４６．４３，（Ｍ＋１）^＋＝３４７．０。
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ９．８９（１Ｈ，ｓ），７．６１（１Ｈ，ｓ），７．５５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，４．０Ｈｚ），７．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），４．５０（２Ｈ，ｓ），４．４７（２Ｈ，ｓ），２．４６（３Ｈ，ｓ），２．４９（３Ｈ，ｓ）。
【０２８９】
中間体３５
４−［（２，２−ジオキシド−１，３−ジヒドロ−２−ベンゾチエン−５−イル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０２９０】
【化５２】

【０２９１】
この化合物は、中間体２６に記載された手順を利用して、４−［（２，２−ジオキシド−１，３−ジヒドロ−２−ベンゾチエン−５−イル）アミノ］−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリルから製造した。逆相ＨＰＬＣを使用して生成物を精製した。ＨＰＬＣ条件：Ｇｉｌｓｏｎ、Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎソフトウェア使用、ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８（２） １００Ａ、ＡＸＩＡ、５０×３０．００ｍｍ ５ミクロン、７．３分の運転（４７ｍＬ／分、１４％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡから４４％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）、ＵＶ検出２５４ｎｍ。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１６Ｈ_１４Ｎ_４Ｏ_３Ｓ_２）＝３７３．４４，（Ｍ＋１）^＋＝３７４．７。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ７．８８（１Ｈ， ｓ）， ７．７２ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ）， ７．６２ （１Ｈ， ｍ）， ７．４１ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ）， ６．３５ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ４．０ Ｈｚ）， ４．５４ （２Ｈ， ｓ）， ４．４８ （２Ｈ，ｓ）， ２．５３ （３Ｈ，ｓ）。
【０２９２】
実施例１４
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（２，２−ジオキシド−１，３−ジヒドロ−２−ベンゾチエン−５−イル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０２９３】
【化５３】

【０２９４】
この化合物は、実施例１（スキーム２）に記載されたものと類似のｍＣＰＢＡ／１，１−ジメチルエチル（３−アミノプロピル）カルバマートおよびＴＦＡシーケンスを利用して、４−［（２，２−ジオキシド−１，３−ジヒドロ−２−ベンゾチエン−５−イル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オンから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１８Ｈ_２０Ｎ_６Ｏ_３Ｓ）＝４００．４６，（Ｍ＋１）^＋＝４００．７。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ７．３０−８．００（４Ｈ，ｍ），６．２４（１Ｈ，ｍ），４．４０−４．６０（４Ｈ，ｍ），３．４２（２Ｈ，ｂｓ），２．８８（２Ｈ，ｍ），１．８５（２Ｈ，ｍ）。
【０２９５】
中間体３６
Ｎ−（３−｛［５−シアノ−６−メチル−２−（メチルチオ）−４−ピリミジニル］アミノ｝フェニル）−１−ピロリジンカルボキサミド
【０２９６】
【化５４】

【０２９７】
この化合物は、中間体２３に記載されたものと類似の手順を利用して、４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリルおよびＮ−（３−アミノフェニル）−１−ピロリジンカルボキサミドから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１８Ｈ_２０Ｎ_６ＯＳ）＝３６８．４６，（Ｍ＋１）^＋＝３６８．７。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ９．７３（１Ｈ，ｍ），８．１３（１Ｈ，ｓ），７．８２（１Ｈ，ｓ），７．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．１８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），３．３６（５Ｈ，ｍ），２．４４（３Ｈ，ｓ），２．３９（３Ｈ，ｓ），１．８５（４Ｈ，ｍ）。
【０２９８】
中間体３７
Ｎ−（３−｛［２−（メチルチオ）−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］アミノ｝フェニル）−１−ピロリジンカルボキサミド
【０２９９】
【化５５】

【０３００】
この化合物は、中間体２６に記載のものと類似の手順を利用して、Ｎ−（３−｛［５−シアノ−６−メチル−２−（メチルチオ）−４−ピリミジニル］アミノ｝フェニル）−１−ピロリジンカルボキサミドから製造した。逆相ＨＰＬＣを使用して生成物を精製した。ＨＰＬＣ条件：Ｇｉｌｓｏｎ、Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎソフトウェア使用、ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８（２） １００Ａ、ＡＸＩＡ、５０×３０．００ｍｍ ５ミクロン、７．３分の運転（４７ｍＬ／分、１４％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡから４４％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）、ＵＶ検出２５４ｎｍ。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１９Ｈ_２０Ｎ_６Ｏ_２Ｓ）＝３９６．４７，（Ｍ＋１）^＋＝３９７．７。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ８．１９（１Ｈ，ｓ），７．８２（１Ｈ，ｓ），７．５９（２Ｈ，ｍ），７．２６（２Ｈ，ｍ），６．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），３．３７（４Ｈ，ｍ），２．５４（３Ｈ，ｓ），１．８６（４Ｈ，ｍ）。
【０３０１】
実施例１５
Ｎ−［３−（｛２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル｝アミノ）フェニル］−１−ピロリジンカルボキサミド
【０３０２】
【化５６】

【０３０３】
この化合物は、実施例１（スキーム２）に記載されたものと類似のｍＣＰＢＡ／１，１−ジメチルエチル（３−アミノプロピル）カルバマートおよびＴＦＡシーケンスを利用して、Ｎ−（３−｛［２−（メチルチオ）−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］アミノ｝フェニル）−１−ピロリジンカルボキサミドから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２１Ｈ_２６Ｎ_８Ｏ_２）＝４２２．４９，（Ｍ＋１）^＋＝４２３．４。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ８．２７ （１Ｈ， ｓ）， ８．２１ （１Ｈ， ｓ）， ７．７３ （４Ｈ， ｍ）， ７．２９（３Ｈ，ｍ），６．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），３．６２（２Ｈ，ｍ），３．３８（４Ｈ，ｍ），２．８９（２Ｈ，ｍ），１．８７（６Ｈ，ｍ）。
【０３０４】
実施例１６
Ｎ−｛３−［（２−｛［２−（１Ｈ−イミダゾル−４−イル）エチル］アミノ｝−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）アミノ］フェニル｝−１−ピロリジンカルボキサミド
【０３０５】
【化５７】

【０３０６】
Ｎ−（３−｛［２−（メチルチオ）−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］アミノ｝フェニル）−１−ピロリジンカルボキサミド（８０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍＬ）に溶かした溶液に、ｍ−ＣＰＢＡ（１０２ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を一晩攪拌した。ヒスタミン（２３０ｍｇ、２．０８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を５時間攪拌した。次いで、それを濃縮し、残渣を逆相ＨＰＬＣ精製にかけると、生成物を与えた（７５ｍｇ）。
【０３０７】
ＨＰＬＣ条件：Ｇｉｌｓｏｎ、Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎソフトウェア使用、ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８（２） １００Ａ、ＡＸＩＡ、５０×３０．００ｍｍ ５ミクロン、７．３分の運転（４７ｍＬ／分、３％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡから３３％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）、ＵＶ検出２５４ｎｍ。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２３Ｈ_２５Ｎ_９Ｏ_２）＝４５９．５１，ｍ／ｚ（Ｍ＋１）４６０．１。
【０３０８】
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ８．９６（１Ｈ，ｍ），７．２０−８．５０（５Ｈ，ｍ）），６．３０（１Ｈ，ｍ），３．７８（２Ｈ，ｍ），３．３６（４Ｈ，ｍ），２．９８（２Ｈ，ｍ），１．８６（４Ｈ，ｍ）。
【０３０９】
実施例１７
Ｎ−［３−（｛５−オキソ−２−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルアミノ］−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル｝アミノ）フェニル］−１−ピロリジンカルボキサミド
【０３１０】
【化５８】

【０３１１】
この化合物は、実施例１（スキーム２）に記載されたものと類似のｍ−ＣＰＢＡ／１，１−ジメチルエチル（３−アミノプロピル）カルバマートおよびＴＦＡシーケンスを利用して、Ｎ−（３−｛［２−（メチルチオ）−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］アミノ｝フェニル）−１−ピロリジンカルボキサミドから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２２Ｈ_２６Ｎ_８Ｏ_２）＝４３４．５０，（Ｍ＋１）^＋＝４３５．２。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ７．２０−８．５０（６Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｍ），３．１０−３．８０（９Ｈ，ｍ），２．２０−２．４０（２Ｈ，ｍ），１．８６（４Ｈ，ｍ）。
【０３１２】
中間体３８
Ｎ−（４−｛［５−シアノ−６−メチル−２−（メチルチオ）−４−ピリミジニル］アミノ｝フェニル）−１−ピロリジンカルボキサミド
【０３１３】
【化５９】

【０３１４】
この化合物は、中間体２３に記載されたものと類似の手順に従い、４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリルおよびＮ−（４−アミノフェニル）−１−ピロリジンカルボキサミドから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１８Ｈ_２０Ｎ_６ＯＳ）＝３６８．３６，ｍ／ｚ（Ｍ＋１）^＋＝３６９．０。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ９．６４（１Ｈ，ｓ），８．１３（１Ｈ，ｓ），７．４８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），３．３６（４Ｈ，ｍ），２．４３（３Ｈ，ｓ），２．３７（３Ｈ，ｓ），１．８５（４Ｈ，ｍ）。
【０３１５】
中間体３９
Ｎ−（４−｛［２−（メチルチオ）−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］アミノ｝フェニル）−１−ピロリジンカルボキサミド
【０３１６】
【化６０】

【０３１７】
この化合物は、中間体２６に記載されたものと類似の手順を利用して、Ｎ−（４−｛［５−シアノ−６−メチル−２−（メチルチオ）−４−ピリミジニル］アミノ｝フェニル）−１−ピロリジンカルボキサミドから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１９Ｈ_２０Ｎ_６Ｏ_２Ｓ）＝３９６．４７，ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＝３９７．１および３９８．１。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ８．１６（１Ｈ，ｓ），７．６１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），３．３７（４Ｈ，ｍ），１．８５（４Ｈ，ｍ）。
【０３１８】
実施例１８
Ｎ−［４−（｛２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル｝アミノ）フェニル］−１−ピロリジンカルボキサミド
【０３１９】
【化６１】

【０３２０】
この化合物は、実施例１（スキーム２）に記載されたｍＣＰＢＡ／１，１−ジメチルエチル（３−アミノプロピル）カルバマートおよびＴＦＡシーケンスを利用して、Ｎ−（４−｛［２−（メチルチオ）−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］アミノ｝フェニル）−１−ピロリジンカルボキサミドから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２１Ｈ_２６Ｎ_８Ｏ_２）＝４２２．４９，ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＝４２３．０。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ８．２５（１Ｈ，ｓ），７．５０−７．８０（８Ｈ，ｍ），６．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），３．４７（２Ｈ，ｍ），３．３７（４Ｈ，ｍ），２．８７（２Ｈ，ｍ），１．８６（６Ｈ，ｍ）。
【０３２１】
以下の２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（置換）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オンは、４−クロロ−６−メチル−２−（メチルチオ）−５−ピリミジンカルボニトリルおよび適切なアニリンから、実施例１（スキーム２）に記載されたのと同じ合成経路に従い製造した。
【０３２２】
【化６２】

【０３２３】
【表２】

【０３２４】
中間体４０
８−ブロモ−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０３２５】
【化６３】

【０３２６】
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン（５００ｍｇ、１．６７６ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（８ｍＬ）に溶かし、ＮＢＳ（２９８ｍｇ、１．６７６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌した。それを水（１２ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）を加えた。混合物を濾過して沈澱物を集め、高真空下でさらに乾燥させると、４７０ｍｇの粗生成物を与えた（ＬＣ−ＭＳによる純度８３％）。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１５Ｈ_１３ＢｒＮ_４ＯＳ）＝３７７．２６，（Ｍ＋１）^＋＝３７７．２および３７９．２。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １２．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），１２．０４（１Ｈ，ｓ），８．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），７．６１（１Ｈ，ｓ），７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．９８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），２．５８（３Ｈ，ｓ），２．３３（３Ｈ，ｓ）。
【０３２７】
実施例２３
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−８−ブロモ−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０３２８】
【化６４】

【０３２９】
この生成物は、実施例１（スキーム２）に記載されたものと類似のｍＣＰＢＡ／１，１−ジメチルエチル（３−アミノプロピル）カルバマートおよびＴＦＡシーケンスを利用して、８−ブロモ−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オンかた製造した。逆相ＨＰＬＣを使用して精製した。
【０３３０】
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１７Ｈ_１９ＢｒＮ_６Ｏ）＝４０３．２８，（Ｍ＋１）^＋＝４０２．７および４０４．９。
【０３３１】
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ７．６０−７．８０（６Ｈ，ｍ），７．５５（１Ｈ，ｍ），７．２６（１Ｈ，ｍ），６．９５（１Ｈ，ｍ），３．４７（２Ｈ，ｍ），２．８７（２Ｈ，ｍ），２．３４（３Ｈ，ｓ），１．８８（２Ｈ，ｍ）。
【０３３２】
中間体４１
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルスルホニル）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０３３３】
【化６５】

【０３３４】
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン（０．５００ｇ、１．６ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶かした溶液を、マグネティックスターバーを備えた４０ｍＬのシンチレーションバイアルに入れた。ｍ−ＣＰＢＡ（０．７２３ｇ、４．１９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶かした溶液を５分かけて滴下して加え、反応混合物を室温で４時間攪拌した。ＬＣ−ＭＳ分析により、出発物質は全て所望のスルホン中間体に転化したことが明らかになった。この粗スルホンＤＭＦ溶液を、実験セクションに記載されたものと類似の手順に従い、最終的な生成物形成を続けた。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１５Ｈ_１４Ｎ_４Ｏ_３Ｓ）＝３３０．３６，（Ｍ＋Ｈ）＝３３０．７。
【０３３５】
実施例２４
２−｛［３−（ジメチルアミノ）プロピル］アミノ｝−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０３３６】
【化６６】

【０３３７】
中間体４１（５０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）をＤＭＦに加えたものを、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン（１．７ｍｍｏｌ）およびマグネティックスターバーを含む２０ｍＬシンチレーションバイアルに加えた。反応混合物を１時間攪拌し、次いでＤＭＦを真空下で除去した。残渣をメタノールに溶かし、ＳＣＸカートリッジの上に加えた。それを、クロロ安息香酸が全て出てくるまでメタノールで溶離し、次いでメタノール中２ＮのＮＨ_３で生成物を出した。生成物を含むフラクションを濃縮し、アセトニトリル、水、トリフルオロ酢酸で溶離しＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８カラムを利用する逆相ＨＰＬＣにより精製すると、生成物をＴＦＡ塩として与えた。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_１６Ｈ_２２Ｎ_６Ｏ）＝３５２，（Ｍ＋Ｈ）^＋＝３５３。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．９３−２．０６（ｍ，２Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），２．７６（ｄ，Ｊ＝４．２９Ｈｚ，６Ｈ），３．１１（ｍ，２Ｈ），３．５０（ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），６．３６（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３６（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ，２Ｈ），７．８３（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），９．３９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），１２．３９（ｓ，１Ｈ），１２．５６（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ）。
【０３３８】
以下の４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−｛［アミノ置換｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン化合物は、実施例２４の手順に従い、４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルスルホニル）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン（中間体４１）および対応するアミンから製造した。
【０３３９】
【化６７】

【０３４０】
【表３】

【０３４１】
実施例２８
４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−｛［２−（４−ピリジニル）エチル］アミノ｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン
【０３４２】
【化６８】

【０３４３】
中間体４１（７０ｍｇ、０．２１２ｍｍｏｌ）をＤＭＦに加えたものを、２−（４−ピリジニル）エタンアミン（２５９ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）およびマグティックスターバーを含む２０ｍＬシンチレーションバイアルに加えた。反応混合物を１時間攪拌し、ＤＭＦを真空下で除去した。残渣を、アセトニトリル、水、トリフルオロ酢酸で溶離しＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８カラムを利用する逆相ＨＰＬＣにより精製すると、生成物をＴＦＡ塩として与えた。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２１Ｈ_２０Ｎ_６Ｏ）＝３７２．４３（Ｍ＋Ｈ）^＋＝３７３．０。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ２．３０（ｓ，３Ｈ），２．３４（ｓ，１Ｈ），３．１０（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．７４（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），６．３４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３２（ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５３−７．５８（ｍ，２Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），７．７７（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），８．６８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），８．７４（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），１２．３１（ｓ，１Ｈ）。
【０３４４】
以下の４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−｛［アミノ置換｝ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン化合物を、実施例２８に記載されたものと類似の手順に従い、４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルスルホニル）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オンおよび対応するアミンから製造した。
【０３４５】
【化６９】

【０３４６】
【表４】



【０３４７】
以下の化合物は、実施例１（スキーム２）に記載されたものと類似のｍＣＰＢＡ／１，１−ジメチルエチル（３−アミノプロピル）カルバマートおよびＴＦＡシーケンスを利用して、４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−２−（メチルスルホニル）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オンから製造した。
【０３４８】
【化７０】

【０３４９】
【表５】



【０３５０】
実施例５１
Ｎ^１−［３−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）プロピル］−１，１−シクロプロパンジカルボキサミド
【０３５１】
【化７１】

【０３５２】
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン（６０ｍｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍＬ）に溶かした溶液に、１−（アミノカルボニル）シクロプロパンカルボン酸（１９．４４ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（３１．５ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（４１．９ｍｇ、０．２７４ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（０．０７５ｍＬ、０．６８４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２時間攪拌した。反応を水（２ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×５ｍＬ）で抽出した。抽出物をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。逆相ＨＰＬＣを利用して残渣を精製すると、３５ｍｇの純粋な生成物を与えた。
ＨＰＬＣ条件：Ｇｉｌｓｏｎ、Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎソフトウェア使用、ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８（２） １００Ａ、ＡＸＩＡ、５０×３０．００ｍｍ ５ミクロン、７．３分の運転（４７ｍＬ／分、１０％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡから４０％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０．１％ ＴＦＡ）ＵＶ検出２５４ｎｍ。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２２Ｈ_２５Ｎ_７Ｏ_３）＝４３５．４９，（Ｍ＋１）^＋＝４３６．２。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ７．００−７．９０（１Ｈ，ｍ），６．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），３．４１（２Ｈ，ｍ），３．２１（２Ｈ，ｍ），２．３５（３Ｈ，ｓ），１．７７（２Ｈ，ｍ）。
【０３５３】
実施例５２
（４Ｒ）−Ｎ−［３−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）プロピル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−４−カルボキサミド（Ｎ４５３４−５）
【０３５４】
【化７２】

【０３５５】
この化合物は、実施例５１に記載されたものと類似の手順を利用して、２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オンおよび（４Ｒ）−Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−４−カルボキサミドから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２１Ｈ_２３Ｎ_７Ｏ_３Ｓ）＝４５３．５２，（Ｍ＋１）^＋＝４５４．０。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ８．２９（１Ｈ，ｍ），８．２０（１Ｈ，ｍ），７．７６（１Ｈ，ｍ），７．６４（１Ｈ，ｓ），７．５７（１Ｈ，ｍ），７．３２（１Ｈ，ｍ），７．０５（１Ｈ，ｍ），６．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），２．４５（１Ｈ，ｍ），３．６３（１Ｈ，ｍ），３．４４（２Ｈ，ｍ），３．３４（１Ｈ，ｍ），３．２０（２Ｈ，ｍ），２．３６（３Ｈ，ｓ），１．７７（２Ｈ，ｍ）。
【０３５６】
中間体４２
１，１−ジメチルエチルメチル（２−｛［３−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）プロピル］アミノ｝−２−オキソエチル）カルバマート
【０３５７】
【化７３】

【０３５８】
２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン（５０ｍｇ、０．１１４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（１．５ｍＬ）に溶かした溶液に、Ｎ−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝−Ｎ−メチルグリシン（２５．９ｍｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）、１Ｈ−１，２，３−ベンゾトリアゾール−１−オール水和物（３４．９ｍｇ、０．２２８ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（５７．７ｍｇ、０．５７０ｍｍｏｌ）、およびＮ−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（２８．４ｍｇ、０．１４８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２．５時間攪拌した。次いで、それを濃縮し、残渣を逆相ＨＰＬＣ精製にかけると、３３ｍｇの標題化合物を与えた。
ＭＳ；Ｍ（Ｃ_２５Ｈ_３３Ｎ_７Ｏ_４）＝４９５．５８，（Ｍ＋１）^＋＝４９６．４。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ７．９７（１Ｈ，ｍ），７．７６（１Ｈ，ｍ），７．６４（１Ｈ，ｓ），７．５６（１Ｈ，ｍ），７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），６．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），３．７３（２Ｈ，ｍ），３．４２（２Ｈ，ｍ），３．１７（２Ｈ，ｍ），２．７８（３Ｈ，ｄＪ＝８．０Ｈｚ），２．３５（３Ｈ，ｓ），１．７４（２Ｈ，ｍ），１．３０−１．３９（９Ｈ，ｍ）。
【０３５９】
実施例５３
Ｎ^２−メチル−Ｎ^１−［３−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）プロピル］グリシンアミド
【０３６０】
【化７４】

【０３６１】
１，１−ジメチルエチルメチル（２−｛［３−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）プロピル］アミノ｝−２−オキソエチル）カルバマート（３０ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（ＤＣＭ）（１ｍＬ）に溶かした溶液に、ＴＦＡ（０．５ｍＬ、６．４９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１．５時間攪拌した。それを濃縮し、残渣を高真空下でさらに乾燥させると、３０ｍｇの純粋な生成物を与えた。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２０Ｈ_２５Ｎ_７Ｏ_２）＝３９５．４６，（Ｍ＋１）^＋＝３９６．１。
^１ＨＮＭＲ（４００ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ８．６９（２Ｈ，ｍ），８．４９（１Ｈ，ｍ），７．８０（１Ｈ，ｍ），７．６５（１Ｈ，ｓ），７．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），３．６６（２Ｈ，ｍ），３．４７（２Ｈ，ｍ），３．２４（２Ｈ，ｍ），２．５４（３Ｈ，ｍ），２．３７（３Ｈ，ｓ），１．７９（２Ｈ，ｍ）。
【０３６２】
実施例５４
Ｎ−［３−（｛４−［（３−メチルフェニル）アミノ］−５−オキソ−５，６−ジヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝アミノ）プロピル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３６３】
【化７５】

【０３６４】
この化合物は、実施例５３に記載されたものと類似の手順に従い、２−［（３−アミノプロピル）アミノ］−４−［（３−メチルフェニル）アミノ］ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オンから製造した。
ＭＳ：Ｍ（Ｃ_２２Ｃ_２２Ｎ_７Ｏ_２）＝４２１．５０，（Ｍ＋１）^＋＝４２２．１。
^１ＨＮＭＲ ４ ｍＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ７．５０−７．８０（４Ｈ，ｍ），７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．９０−７．２０（２Ｈ，ｍ），６．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），４．０８（２Ｈ，ｍ），３．４５（２Ｈ，ｍ），３．２２（４Ｈ，ｍ），２．３６（３Ｈ，ｓ），２．２４（１Ｈ，ｍ），１．８２（５Ｈ，ｍ）。
【０３６５】
生物学的活性
ＰＤＫ１酵素アッセイ
ＬＥＡＤｓｅｅｋｅｒＰＤＫ１アッセイ
被験化合物を１００％ＤＭＳＯに１ｍＭで溶かし、３８４ウェルプレートの適切なカラムに分注した。用量反応曲線を得るために、１００％ＤＭＳＯでの３倍希釈をプレートにわたって実施し、被験化合物それぞれに１１の濃度を生み出した。各プレートは、用量反応のため３２の被験化合物を、単一の濃度測定のために３５２の被験化合物を収めることができる。アッセイプレートには、３８４ウェルプレートの適切なウェルに０．１μＬの化合物が含まれていた。２つのカラムには０．１μＬの１００％ＤＭＳＯのみが含まれていた。これらのカラムは、高および低対照値を決定するために使用した。アッセイを始める前に、低対照ウェルに０．５ＭのＥＤＴＡを加えた（１０μＬの反応体積に対し１．５μＬ／ウェル）。２５ｍＭのＭＯＰＳ、ｐＨ ７．５、０．１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ、５０ｍＭのＫＣｌ、０．５ｍＭのＣＨＡＰＳ、５ｍＭのＤＴＴ、および１０ｎＭのＰＤＫ１を含む酵素溶液を、アッセイプレートの各ウェルへの５μＬの添加直前に製造した。アッセイプレートを室温で３０分間インキュベートした。
【０３６６】
２５ｍＭのＭＯＰＳ、ｐＨ ７．５、２０ｍＭのＭｇＣｌ_２、５０ｍＭのＫＣｌ、０．１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ、０．５ｍＭのＣＨＡＰＳ、５ｍＭのＤＴＴ、２μＭのＡＴＰ（冷）、６ｕＣｉ／ｍＬの３３Ｐ−ＡＴＰ、および０．７μＭのＡＫＴ１ビオチン化タンパク質を含む基質溶液を製造し、一般的に酵素と化合物との３０分間のプレインキュベートの間、室温に静置した。チューブを穏やかに反転させて両溶液を混合してから、アッセイプレートに分配した。
【０３６７】
基質溶液を各ウェルに５μＬでアッセイプレートに加え、酵素反応を室温で３時間進行させた。酵素反応中の試薬の最終濃度は、２５ｍＭのＭＯＰＳ、ｐＨ ７．５、１０ｍＭのＭｇＣｌ_２、５０ｍＭのＫＣｌ、０．１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ、０．５ｍＭのＣＨＡＰＳ、１μＭのＡＴＰ（冷）、３ｕＣｉ／ｍＬの３３Ｐ−ＡＴＰ、５ｍＭのＤＴＴ、０．３５μＭのＡＫＴ１ビオチン化タンパク質、および５ｎＭのＰＤＫ１である。ＰＢＳおよびＥＤＴＡを２ｇの乾燥ビーズに加えＰＢＳ中５０ｍＭのＥＤＴＡ４００ｍＬを作ることにより製造した５ｍｇ／ｍＬのＬＥＡＤｓｅｅｋｅｒビーズ溶液を１０μＬ加えて、反応を停止した。
【０３６８】
ビーズを、室温で少なくとも４〜５時間、好ましくは一晩、各ウェル中で沈殿させた。プレートへのビーズ添加後数日はシグナルが安定であった。プレートに蓋をして光への曝露を制限した。各ウェルからのシグナルを、発光モードでViewlux（商標）ultraHTSマイクロプレートイメージャー(PerkinElmer)で測定した。固体から製造したてのＤＴＴが必要である。新鮮な放射性ＡＴＰが最もよいシグナル対バックグラウンド比を生みだす。
【０３６９】
ＰＤＫ１をバキュロウイルス発現システムから発生させ、ニッケルおよび脱塩カラム（ＧＲＩＴＳ＃２４６５２）を利用して８０％に精製されたヒトヒスチジンタグ付き全長タンパク質を生み出した。ＡＫＴ１はバキュロウイルス発現システムから発生させ、ニッケルおよびＱ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅカラム（ＧＲＩＴＳ＃２９０２０）を使用して９０％に精製したヒトタンパク質（ａａ１３６−４８０）を生み出した。このタンパク質を精製後ビオチン化した。
【０３７０】
結果：実施例１、２、１２−１３、２１、２５、２７、３０、５１−５２、および５４は、ＬｅａｄＳｅｅｋｅｒＰＤＫ１アッセイで試験しなかった。残りの実施例はＬｅａｄＳｅｅｋｅｒＰＤＫ１アッセイで試験し、これらの実施例はＰＤＫ１の阻害剤であることが分かった。ＰＤＫ１酵素活性の５０％を阻害するのに要する化合物の濃度（ＩＣ_５０）は、ＬｅａｄＳｅｅｋｅｒＰＤＫ１アッセイにおいて、０．００３μＭから１０μＭであった。
【０３７１】
放射能標識インビトロキナーゼフィルター結合アッセイ
ＰＤＫ１を、キナーゼアッセイバッファ（２５ｍＭのＭＯＰＳ、ｐＨ ７．５；０．５ｍＭのＣＨＡＰＳ；１０ｍＭのＭｇＣｌ_２；５０ｍＭのＫＣｌ；１ｍＭのＤＴＴ；０．１ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ）中で化合物のタイトレーションをしながら、９６ウェル低タンパク質結合プレート（Ｃｏｓｔａｒ ３８８４）中で室温で１時間プレインキュベート（１ｎＭ）した。２μＭのΔ−ＰＨ ＡＫＴ１（ａａ１３６−４８０）および５μＭのＡＴＰ（０．０３ｍＣｉ／ｍｌのγ^３３Ｐ ＡＴＰを含む）を含む８倍濃縮基質プレミックスを加えて、反応を開始した。４時間室温でインキュベートした後、同体積の１％Ｈ_３ＰＯ_４を加えて反応を停止させた。１０分間インキュベートしたあと、クエンチされた反応を、０．５％Ｈ_３ＰＯ_４に事前に浸漬しておいたホスホセルロースフィルタープレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ ＭＡＰＨ）に移した。試料を濾過し、０．５％Ｈ_３ＰＯ_４で洗浄し、乾燥させた。
【０３７２】
５０μｌ／ウェルＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ ２０を加えた後、プレートをＭｉｃｒｏｂｅｔａシンチレーションカウンター(PerkinElmer)で読み取った。
【０３７３】
ＰＤＫ１−ＡＫＴ結合インビトロキナーゼアッセイ
結合アッセイは、ｓｏｘ−ＡＫＴペプチド基質(Invitrogen)を利用する連続蛍光強度アッセイにおいて、Δ−ＰＨ−ＡＫＴ１（ａａ１３６−４８０）の活性のＰＤＫ１依存性増加を測定した。
【０３７４】
ＰＤＫ１（６００ｐＭ）を、化合物のタイトレーションをしながら、キナーゼアッセイバッファ中で１時間室温で、黒色９６ウェルハーフエリアプレート中でプレインキュベートした。２０ｎＭのΔ−ＰＨ−ＡＫＴ１、１０μＭのＡＴＰ、および２０μＭのｓｏｘペプチドを含む同体積の基質プレミックスを加えることにより、反応を開始した。Ｆｕｒａ２ ３８０励起フィルターおよびＣＦＰ ４８６発光フィルターの付いたＬａｎｃｅ／Ｄｅｌｆｉａミラーを使用してＥｎＶｉｓｉｏｎ Ｍｕｌｔｉ Ｌａｂｅｌ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ(PerkinElmer)で蛍光を測定した。進行曲線から６時間のエンドポイントを使用して、阻害剤タイトレーションにわたるＩＣ_５０曲線を生み出した。
【０３７５】
細胞アッセイ
第１日
１０，０００細胞／ウェルを、正午前に透明な平底９６ウェルプレートに播種した（最終体積は１０５μｌであった）。最後のカラムの最後の４ウェルには培地のみ与えた。プレートを３７℃のインキュベーターに一晩おいた。
【０３７６】
化合物プレートを、ポリプロピレン丸底９６ウェルプレートに製造した。プレートあたり８化合物、それぞれに１１ポイントのタイトレーション（３倍連続希釈）、最後のカラムにはＤＭＳＯを与えた（細胞に対する最終濃度０．１５％）。１５μｌのストック化合物を最初のウェルに置き、１０μｌのＤＭＳＯを残りに入れた。最初のウェルから５μｌをとり、次に移して混合し、希釈をプレート全体で続けた（最後のカラムを除く）。ホイルの蓋をプレートにかぶせ、４℃においた。
【０３７７】
第２日
溶解バッファ、阻害剤（４℃／−２０℃）および化合物プレート（４℃）をベンチトップで解凍した。１×のＴｒｉｓ洗浄バッファ（ＷＢ）を作成して、プレートウォッシャーのリサーバーに充填し、ベンチサプライを満たし、遠心機の電源を入れて冷した。
ＭＳＤプレートをブロッキング溶液中でブロックした。３％ブロッキング溶液２０ｍｌを１つのプレートに用意し（２０ｍｌのＷＢ中６００ｍｇのブロッカーＡ）、ウェルあたり１５０μｌを加え、プレートを室温で少なくとも１時間インキュベートした。ウェルあたり３００μｌの生育培地（ＲＰＭＩ、１０％ＦＢＳ）を、各化合物プレートに加えた（化合物の６８２倍希釈）。５μｌの化合物希釈液を二連プレートの各ウェルに加えた（最終体積１１０μｌ）。プレートを３７℃のインキュベーターに３０分間おいた。１０ｍｌのＭＳＤ溶解バッファに対し、２００μｌのプロテアーゼ阻害剤溶液およびそれぞれ１００μｌのホスファターゼ阻害剤ＩおよびＩＩを加えた。インキュベーション後プレートを取り出し、培地をプレートウォッシャーで吸引し、プレートを冷ＰＢＳで１回洗浄し、ウェルあたり８０μｌのＭＳＤ溶解バッファを加えた。プレートを４℃の振盪器上で３０分以上インキュベートし、冷えた遠心機で２５００ｒｐｍで１０分間スピンさせた。
【０３７８】
ＡＫＴ二連アッセイ
プレートを、プレートウォッシャー中で２００μｌ／ウェルの洗浄バッファで４回洗浄した。ウェルあたり６０μｌの溶解物を加え、プレートを振盪器上で室温で１時間インキュベートした。インキュベーションの間、検出抗体を製造した（３ｍｌ／プレート；２ｍｌの洗浄バッファおよび１ｍｌのブロック溶液、１０ｎＭの抗体を含む）。洗浄工程を上記のとおり繰り返した。ウェルあたり２５μｌの抗体を加え、プレートを振盪器上で室温で１時間インキュベートした。洗浄工程を上記のとおり繰り返した。ウェルあたり１５０μｌの１×読み取りバッファを加え（４倍ストックを水で希釈、２０ｍｌ／プレート）、プレートをすぐに読み取った。
【０３７９】
細胞成長／死アッセイ
ＢＴ４７４、ＨＣＣ１９５４、Ｔ−４７Ｄ（ヒトの乳癌）およびＰＣ−３（ヒトの前立腺癌）癌細胞を、１０％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ−１６４０中で、３７℃の５％ＣＯ_２インキュベーターで培養した。アッセイ設定の２から３日前に、アッセイ用の採取の時点でおよそ７０〜８０％コンフルエンスになるような密度で、細胞をＴ７５フラスコ（Ｆａｌｃｏｎ ＃３５３１３６）に分けた。０．２５％トリプシン−ＥＤＴＡ（Ｓｉｇｍａ ＃４０４９）を使用して細胞を採取した。細胞の計数は、トリパンブルー排除染色を利用して細胞懸濁液に対して実施した。次いで、細胞を３８４ウェル黒色平底ポリスチレン（Ｇｒｅｉｎｅｒ ＃７８１０８６）に、１，０００細胞／ウェルでウェルあたり４８μｌの培地に播種した。プレートを全て、５％ＣＯ_２、３７℃に一晩おき、被験化合物を翌日に加えた。０日（ｔ＝０）測定のため、１つのプレートをＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ ＃Ｇ７５７３）で処理し、上述のとおり読み取った。被験化合物を、透明底ポリプロピレン３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ＃７８１２８０）に、連続２倍希釈して製造した。これらの希釈液の４μｌを１０５μｌの培地に加え、溶液を混合後、これらの希釈液の２μｌを細胞プレートの各ウェルに加えた。全てのウェル中のＤＭＳＯの最終濃度は０．１５％であった。細胞を３７℃、５％ＣＯ_２で７２時間インキュベートした。化合物とともに７２時間インキュベートした後、各プレートを展開し読み取った。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬を、ウェル中の細胞培養体積と同じ体積でアッセイプレートに加えた。プレートをおよそ２分間振盪し、室温でおよそ３０分間インキュベートし、化学発光シグナルをＡｎａｌｙｓｔ ＧＴ(Molecular Devices)リーダーで読み取った。結果を、ｔ＝０のパーセントとして表し、化合物濃度に対してプロットした。細胞成長阻害の測定は、ＸＬｆｉｔソフトウェアを使用して４または６パラメータカーブフィットにより用量反応をフィッティングし、Ｙ最低をｔ＝０としＹ最高をＤＭＳＯ対照として細胞成長の５０％を阻害する濃度（ｇＩＣ_５０）を測定して、各化合物に行った。バックグラウンド補正のため、細胞のないウェル由来の値を、全ての試料から差し引いた。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩：
【化１】

（上記式中、
Ｒ^１は、アリール、−ＣＨ_２−アリール、またはヘテルアリールであり、それぞれは１〜３つのＲ^５により所望により置換されており、
Ｒ^２は、Ｈ、所望により１もしくは２つのＲ^６により置換されているＣ_１−Ｃ_６アルキル、所望により１〜３つのＲ^７により置換されているＣ_３−Ｃ_６シクロアルキル、または、所望により１〜３つのＲ^７により置換されているヘテロシクロアルキルであり、かつ、Ｒ^３は、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、またはフェニルであり、あるいは
Ｒ^２およびＲ^３は、それらが結合している窒素原子とともに結合して、追加のＮ、Ｓ、またはＯ原子を１つ含んでいてもよくかつ所望により１つのＯＨ、オキソ、アリール、または−ＮＲ^ａＲ^ｂにより置換されている１〜３つのＣ_１−Ｃ_３アルキル基により所望により置換されている飽和４〜７員ヘテロシクロアルキルを形成し、
Ｒ^４は、Ｈ、ハロ、Ｃ_１−Ｃ_３アルキル、Ｃ_１−Ｃ_３ハロアルキル、シアノ、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ、ＮＲ^ａＲ^ｂ、所望により１〜３つのＲ^５により置換されているアリール、所望により１〜３つのＲ^６により置換されているヘテルアリールであり、
各Ｒ^５は、ハロ、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ、ヘテルアリール、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ａ、−Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ^ａＲ^ｂ、−ＮＲ^ａＳ（Ｏ）_２Ｒ^ａ、−ＮＲ^ｂＣ（Ｏ）Ｒ^ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^ａＲ^ｂ、−ＮＲ^ｂＣ（Ｏ）ＮＲ^ａＲ^ｂ、および、所望により−ＮＲ^ａＲ^ｂにより置換されているＣ_１−Ｃ_３アルキルからなる群から独立に選択され、
各Ｒ^６は、ＯＨ、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、−ＮＲ^ｂＣ（Ｏ）Ｒ^ａ、１，１−シクロプロパンジカルボキサミド、ヘテルアリール、ヘテロシクロアルキル、および、所望によりＳ（Ｏ）_２ＮＨ_２により置換されているアリールからなる群から独立に選択され、
各Ｒ^７は、ＯＨ、Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、および、所望により−ＮＲ^ａＲ^ｂにより置換されているＣ_１−Ｃ_３アルキルからなる群から独立に選択され、
各Ｒ^ａは、Ｈ、ヘテロシクロアルキル、および、所望により１つの−ＮＨ_２またはＮＨＣＨ_３により置換されているＣ_１−Ｃ_３アルキルからなる群から独立に選択され、
各Ｒ^ｂは独立に、ＨまたはＣ_１−Ｃ_６アルキルである）。
【請求項２】
Ｒ^２が、Ｈ、所望により１もしくは２つのＲ^６により置換されているＣ_１−Ｃ_６アルキル、所望により１から３のＲ^７により置換されているＣ_３−Ｃ_６シクロアルキル、または、所望により１〜３つのＲ^７により置換されているヘテロシクロアルキルであり、かつ、Ｒ^３が、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、またはフェニルである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項３】
Ｒ^１が、所望により１〜３つのＲ^５により置換されているフェニルである、請求項２に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項４】
Ｒ^１が、所望により１〜３つのＲ^５により置換されている−ＣＨ_２−フェニルである、請求項２に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項５】
Ｒ^１が、所望により１〜３つのＲ^５により置換されているピラゾリルまたはインダゾリルである、請求項２に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項６】
Ｒ^２が、所望により−ＮＲ^ａＲ^ｂにより置換されているＣ_１−Ｃ_６アルキルであり、かつ、Ｒ^３がＨである、請求項２〜５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項７】
Ｒ^２が、ピロリジニル、ピペリジニル、シクロヘキシル、またはシクロプロピルであり、そのそれぞれが所望により１〜３つのＲ^７により置換されており、かつ、Ｒ^３が、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、またはフェニルである、請求項２〜５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項８】
Ｒ^４が、Ｈ、メチル、またはブロモである、請求項６に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項９】
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、１種以上の薬学的に許容可能な賦形剤とを混合して含んでなる、医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、それを必要のとするヒトに投与することを含んでなる、癌を治療する方法。

【公表番号】特表２０１２−５００２０４（Ｐ２０１２−５００２０４Ａ）
【公表日】平成２４年１月５日（２０１２．１．５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５２３１３０（Ｐ２０１１−５２３１３０）
【出願日】平成２１年８月１２日（２００９．８．１２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０５３５０４
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０１９６３７
【国際公開日】平成２２年２月１８日（２０１０．２．１８）
【出願人】（５９１００２９５７）グラクソスミスクライン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー (341)
【氏名又は名称原語表記】ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ　ＬＬＣ
【Ｆターム（参考）】