口腔及び経肺投与用ミセル薬学的組成物
【課題】混合ミセル形態の高分子薬剤を含む薬学的組成物の提供。
【解決手段】混合ミセルは、アルカリ金属アルキルサルフェートと、ヒアルロン酸ナトリウム、モノオレイン及び飽和リン脂質等の少なくとも３種類の異なるミセル形成化合物から形成される。ミセルのサイズは、約１−１０ナノメータの範囲。組成物を製造及び使用する方法。組成物を投与する方法は、口腔領域を通じて行なうのが望ましい。
【解決手段】混合ミセルは、アルカリ金属アルキルサルフェートと、ヒアルロン酸ナトリウム、モノオレイン及び飽和リン脂質等の少なくとも３種類の異なるミセル形成化合物から形成される。ミセルのサイズは、約１−１０ナノメータの範囲。組成物を製造及び使用する方法。組成物を投与する方法は、口腔領域を通じて行なうのが望ましい。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ミセル形態の高分子薬剤を含む改良された薬学的組成物に関する。薬学的組成物は、特に、口腔及び経肺による投与に有効である。本発明はまた、これらの薬学的組成物の調製及び使用方法に関する。高分子薬剤の吸収速度を高める方法についても開示する。
【背景技術】
【０００２】
ペプチドや蛋白質などの高分子に関して、安全で効果的な経口調製物を得るという目標については、ここ何年もの間、相対的な進歩はほとんどないといってよい。蛋白質及びペプチドの経口調製物を発展させる上で大きな障壁となっているものに、固有浸透性(intrinsic permeability)の不足、ルーメン及び細胞の酵素分解、クリアランスの速さ及び、胃腸(gastrointestinal: GI)管での化学的不安定性などがある。これらの障壁に取り組むための薬学的アプローチは、従来の低分子量の有機薬剤に対しては成功しているが、ペプチドや蛋白質の調製物では成功していない。
【０００３】
蛋白質やペプチドについては、注射以外の様々な投与ルートが研究されているが、殆んど又は全く成功していない。投与ルートは、経口と鼻孔について大いに関心がもたれている。分子が口粘膜を透過する能力は、分子量、脂質溶解度及びペプチド蛋白質のイオン化と関係があると考えられる。１０００ダルトンより小さい分子は、口粘膜を速やかに通過すると考えられる。分子量が増すにつれて、分子の透過性は急激に低下する。脂質溶解性化合物は、非脂質溶解性分子よりも多く浸透する。吸収が最大となるのは、イオン化されていないか、電荷がニュートラルのときである。それゆえ、荷電分子の最大の課題は、口粘膜を通じて吸収させることにある。
【０００４】
蛋白質薬剤分子の多くは、分子量が６０００ダルトンを越える極めて大きな分子である。これら分子は、高分子であることに加え、脂質溶解性が大変乏しく、事実上、不浸透性であることもしばしばである。高分子(例えば、＞１０００ダルトン)の生体膜への吸収又は運搬を容易にする物質は、当該分野において、エンハンサー(enhancers)又は吸収助剤(absorption aids)と称される。これらの化合物として、一般的には、キレート化剤、胆汁酸塩、脂肪酸、合成親水性化合物、合成疎水性化合物、及び生物分解性の重合体化合物などが挙げられる。エンハンサーの多くは、刺激(irritation)に関して満足し得る安全プロファイルの欠如、バリヤー機能の低下、粘膜毛様体クリアランス保護メカニズムの欠陥などの問題がある。
【０００５】
エンハンサーの中でも特に胆汁酸塩や、また蛋白質溶解剤には、極端に苦く不快な味をもたらすものがある。このため、人間が毎日それらを摂取することは殆ど不可能である。胆汁酸塩ベースの送達システムに関して味を改良するために、口腔粘膜用パッチ、二層タブレット、放出制御されたタブレット、プロテアーゼ阻害剤が用いられたり、種々のポリマーマトリックスが用いられている。
しかしながら、これまでの技術では、所望される治療濃度の蛋白質含有薬剤を送達することはできなかった。さらにまた、フィルムパッチは、口内にかなりの組織損傷を生じることがあった。その他に、１種類の胆汁酸又はエンハンサーを、プロテアーゼ阻害剤及び生体分解性ポリマー物質と組み合わせて使用し、高分子を口、鼻、直腸及び膣のルートを経て送達しようとするものもあったが、同じように、蛋白質含有薬剤を患者の治療レベルに到達させることはできなかった。１種類のエンハンサーでは、粘膜を通過するのに必要な時間内で、高分子がさらなる分解を起こすことなく、口、鼻、直腸及び膣などの腔内で強固な細胞結合を分離させることはできない。これらの問題があるため、上記システムの商業的目的での使用を不可能にしている。
それゆえ、治療用調製物、特に口腔投与及び経肺投与として有用な高分子を含む治療用調製物の改良が依然として要請されている。また、このような調製物の製造及び使用する方法もまた要請されている。
【発明の概要】
【０００６】
上記要請に応えるために、本発明は、改良された薬学的組成物を提供するもので、該組成物は、適当な溶媒の中に、高分子薬剤、アルカリ金属アルキルサルフェート及び少なくとも３種類のミセル形成化合物を含んでいる。
薬剤は、１又は２種以上の蛋白質、ペプチド、ホルモン、ワクチン又は薬物(drug)であってよい。高分子薬剤の分子量は、約１０００−２００００００ダルトンの範囲が望ましい。薬剤は混合ミセル形態で存在し、ミセルのサイズは約１−１０ナノメータ(ｎｍ)である。この明細書で用いられる「混合ミセル(mixed micelles)」は、各々が異なるミセル形成化合物を用いて形成された異なる２種類以上のミセルを意味する。例えば、本発明の組成物は、４種類以上の異なるミセル、つまり、薬剤とアルカリ金属アルキルサルフェートとの間で形成されたミセル、薬剤と本明細書に記載した３種類以上の異なる追加のミセル形成化合物との間で形成されたミセルの混合物を含んでいる。
個々のミセルもまた、２種類以上のミセル形成化合物から作られることは理解されるであろう。本発明の混合ミセルは、口腔又はＧＩ管の中の膜の孔よりも小さい傾向がある。それゆえ、本発明の混合ミセルのサイズは極端に小さいため、被包された(encapsulated)高分子が口粘膜を通して効率良く浸透するのを補助する役割を果たすと考えられる。それゆえ本発明の組成物は、当該分野で既知の薬学的調製物と比べて、特に口粘膜を通る活性薬剤の生物学的利用能を高めることができる。
【０００７】
本発明はまた、高分子薬剤の吸収速度を高める方法に関し、該方法は、高分子薬剤を含む組成物を、アルカリ金属アルキルサルフェート及び３種類以上のミセル形成化合物と共に投与することを含んでいる。この方法は、組成物が口腔領域に投与されるときに特に効果的である。
本発明の薬学的組成物を製造及び使用する方法もまた、本発明の範囲内である。
【０００８】
それゆえ、本発明の目的は、高分子薬剤と複数のミセル形成化合物を含む薬学的組成物を提供することである。
本発明のさらなる目的は、高分子薬剤がミセル形態の薬学的組成物を提供することである。
【０００９】
本発明のさらなる目的は、高分子薬剤を、特に患者の口腔及び肺の領域へ投与する方法を提供することである。
本発明のさらなる目的は、高分子薬剤とミセル形成化合物を含む薬学的組成物を製造する方法を提供することである。
本発明のこれらの目的及び他の目的については、以下の説明及び請求の範囲の記載から明らかであろう。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明は、有効量の高分子薬剤と、アルカリ金属アルキルサルフェートと、３種類以上のミセル形成化合物と、適当な溶媒とを含む薬学的組成物に関するもので、前記ミセル化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びその混合物又は組合せからなる群から選択される。
アルカリ金属アルキルサルフェートの濃度は、組成物全体の０.１−２０wt./wt.％であり、各ミセル形成化合物の濃度は、組成物全体の０.１−２０wt./wt.％であり、アルカリ金属アルキルサルフェートとミセル形成化合物の合計濃度は、組成物全体の５０wt./wt.％よりも少ない。
【００１１】
この明細書で用いられる「高分子(macromolecular)」という語は、分子量が約１０００ダルトンよりも大きい薬剤を意味する。本発明の高分子薬剤の分子量は２０００−２００００００ダルトンが望ましいが、さらに大きな分子量であってもよい。
【００１２】
この明細書で用いられる「薬剤(pharmaceutical agent)」という語は、広範囲に亘る物質を含むものであり、人間及び人間以外の動物に用いられる物質で、治療及び研究用のもが挙げられるが、これに限定されるものではない。この語には、蛋白質、ペプチド、ホルモン、ワクチン、ドラッグが含まれる。
【００１３】
望ましい薬剤として、インシュリン、ヘパリン、低分子量ヘパリン(分子量が約５０００よりも少ない)、ヒルログ、ヒルゲン、フリジン、インターフェロン、サイトカイン、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、イムノグロビン、化学治療剤、ワクチン、糖蛋白、細菌トキソイド、ホルモン、カルシトニン、グルカゴン様ペプチド（ＧＬＰ−１）、高分子抗生物質(例えば、約１０００ダルトンよりも多い)、蛋白質基の血栓溶解化合物、血小板阻害剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、遺伝子治療剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド、オピオイド、麻酔薬、鎮痛薬(narcotics)、ステロイド及び鎮痛剤(pain killers)を挙げることができる。
【００１４】
本発明の組成物に含まれるホルモンとして、チロイド、アンドロゲン、エストロゲン、プロスタグランジン、ソマトトロピン、ゴナドトロピン、エリトロポエチン、インターフェロン、ステロイド及びサイトカインを挙げることができるが、これらに限定されるものではない。サイトカインは、小蛋白質で、局部的に作用するホルモンとしての特性を有しており、限定するものではないが、種々の形態のインターロイキン(ＩＬ)及び成長因子を挙げることができる。成長因子には、形質転換成長因子(ＴＧＰ)、線維芽細胞増殖因子(ＦＧＦ)及びインシュリン様成長因子(ＩＧＦ)などの様々な形態を挙げることができる。本発明にかかる組成物に用いられるワクチンには、細菌性ワクチン及びウイルス性ワクチンがあり、例えば、肝炎、インフルエンザ、結核、カナリア痘、水疱瘡、麻疹、流行性耳下腺炎、風疹、肺炎、ＢＣＧ、ＨＩＶ及びＡＩＤＳに対するワクチンがある。細菌トキソイドには、ジフテリア、破傷風、シュードモナス(pseudonomas sp.)及びミコバクテリウム結核(Mycobacterium tuberculosis)が挙げられるが、これらに限定されるものではない。薬物(drug)、より具体的には、血管作動剤又は血栓溶解剤の例として、ヘパリン、ヒルゲン、ヒルロス(hirulos)及びヒルジンを挙げることができる。本発明に含まれる高分子薬剤として、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体及び免疫グロビンがある。なお、この記載は全てを網羅しているわけでないことは理解されるべきである。
【００１５】
本発明にかかる望ましい高分子薬剤はインシュリンである。この明細書で用いられる「インシュリン」は、天然抽出されたヒトインシュリン、又は、ウシ、ブタその他の哺乳類から抽出したインシュリン、ヒト、ウシ、ブタその他の哺乳類から組換え作製されたインシュリン、インシュリンのアナローグ、インシュリンの誘導体、これらインシュリン製品の混合物を含むものである。この「インシュリン」という語は、インシュリンポリペプチドを含んでおり、該インシュリンポリペプチドは、ほぼ精製されたものであってもよいし、追加の賦形剤が加えられた市販のものでもよい。様々な形態のインシュリンは商業的に広く入手可能である。
「インシュリンのアナローグ」は、前記のインシュリンにおいて、ポリペプチド鎖内の１又は２種以上のアミノ酸が代替アミノ酸と置換されたもの、１又は２種以上のアミノ酸が削除されたもの、１又は２種以上のアミノ酸が追加されたものを含むものである。「インシュリンの誘導体」は、少なくとも１種の有機置換基がインシュリン鎖の１又は２種以上のアミノ酸に結合されたインシュリン又はそのアナローグを意味する。
【００１６】
高分子薬剤は、本発明の薬学的組成物の中ではミセル形態で存在する。当該分野の専門家であれば理解されるように、ミセルは、分子の有極親水性部分が外向きに延び、分子の非極親水性部分が内向きに延びる両親媒性分子のコロイド凝集体である。以下で説明するように、本発明の調製物を得るために、ミセル形成化合物の様々な組合せが用いられる。ミセルはすぐれた吸収能力を有し、またサイズが小さいことから、その存在は、高分子薬剤の吸収を著しく向上させる。さらにまた、薬剤をミセルの中に被包すると、薬剤は、ＧＩ環境での急速な劣化から保護される。
【００１７】
ミセルの粒子サイズは、典型的には、１−１０ナノメータの範囲であり、１−５ナノメータの範囲のものが多い。ミセルの形状は、様々で、例えば長細い形状、楕円球、球状などがあるが、球状ミセルがもっとも一般的である。
【００１８】
本発明の組成物には、有効量の高分子薬剤が含まれるべきである。この明細書で用いられる「有効量(effective amount)」という語は、例えば、患者の疾患の治療又は予防を予定とおり達成し、患者の生理学的状態を調節するといった所望の結果をもたらすのに必要な薬剤の量を意味する。それゆえ、この量は、患者に治療及び／又は予防効果を有するものと理解されるであろう。この明細書で用いられる「患者(patient)」は、動物界の動物を意味し、人間に限定されるわけではない。なお、有効量は、用いられる薬剤、薬剤について決められるパラメータ、治療される疾患の性質及び程度、治療される患者、及び投与ルートに応じて異なる。有効量の決定は、当該分野の専門家の能力範囲内で行われる。典型的には、本発明の調製物に含まれる薬剤の濃度は、組成物全体の０.１−２０wt./wt.％であり、１−１０wt./wt.％が望ましい。
【００１９】
適合性(compatibility)の問題が起こらない限り、どんなアルカリ金属アルキルサルフェート(alkali metal alkyl sulgate)であっても、本発明の組成物に用いることができる。アルキルは、Ｃ８−Ｃ２２アルキルが望ましく、ラウリル(Ｃ１２)がより望ましい。どのアルカリ金属を用いてもよいが、ナトリウムが望ましい。アルカリ金属アルキルサルフェートの濃度は、一般的には組成物全体の０.１−２０wt./wt.％であるが、約５wt./wt.％よりも少ない濃度が望ましい。
【００２０】
本発明の組成物は、３種類以上のミセル形成化合物をさらに含んでおり、該ミセル形成化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート及びデオキシコレートからなる群から選択される。これらのうちのどの化合物についても、その薬学的に許容される塩及びアナローグもまた、これら化合物の混合物又は組合せとして本発明の範囲内である。３種類以上の前記ミセル形成化合物の各々は、組成物全体の約０.１−２０wt./wt.％の濃度で存在する。より望ましくは、これらミセル形成化合物の各々の濃度は組成物全体の約５wt./wt.％よりも少ない濃度で存在する。本発明の高分子薬剤、特にインシュリンを送達する場合、ミセル形成化合物を３種類以上用いると、蓄積効果がもたらされる。このため、使用するミセル形成化合物が１種又は２種の場合と比べて、送達可能な薬剤の量は著しく増加する。また、ミセル形成化合物を３種類以上用いると、薬剤組成物の安定性も向上する。
【００２１】
アルカリ金属アルキルサルフェートはミセル形成化合物として機能し、前記の３種類以上のその他ミセル形成化合物に加えて、組成物へ加えられる。アルカリ金属アルキルサルフェートと、３種類以上の追加のミセル形成化合物の合計濃度は、組成物の５０wt./wt.％よりも少ない。
【００２２】
ミセル形成化合物の幾つかは、一般的に、脂肪酸、胆汁酸又はそれらの塩として記載される。使用に最も良いミセル形成化合物は、用いられる薬剤によって異なるが、当該分野の専門家であれば容易に決定できることである。一般的に、胆汁塩は、親水性薬剤との使用に特に適しており、脂肪酸塩は疎水性薬剤との使用に特に適している。本発明で用いる胆汁酸塩は比較的低濃度であるため、これら塩の使用に関連する毒性の問題は、たとえ避けられないまでも、最少にすることができる。
【００２３】
レシチンは、飽和又は不飽和のどちらでもよく、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルエタノールアミン、セファリン及びリゾレシチンからなる群から選択されることが望ましい。
【００２４】
ヒアルロン酸の望ましい塩は、アルカリ金属のヒアルロン酸塩であり、特に、ヒアルロン酸ナトリウム、アルカリ土類のヒアルロン酸塩、ヒアルロン酸アルミニウムが望ましい。本発明の組成物にヒアルロン酸又はその薬学的に許容される塩を用いるとき、濃度は、組成物全体の約０.１−約５wt./wt.％が望ましく、約３.５wt./wt.％より少なくのがより望ましい。
【００２５】
特に適したミセル形成化合物の組合せとして、(i)ヒアルロン酸ナトリウム、モノオレイン及び飽和リン脂質、(ii)飽和リン脂質、モノオレイン及びグリコール酸、(iii)ヒアルロン酸ナトリウム、ポリオキシエチレンエーテル及びレシチン、(iv)ポリオキシエチレンエーテル、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン及びレシチン、(v)ポリドカノール９ラウリルエーテル、ポリリジン及びトリオレイン、(vi)飽和リン脂質、ポリオキシエチレンエーテル及びグリコール酸、(vii)トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、レシチン及びケノデオキシコレート(viii)トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、デオキシコレート及びグリシン、(ix)ポリドカノール１０ラウリルエーテル、ナトリウムオキソコラニルグリシン及びレシチン、(x)ポリドカノール１０ラウリルエーテル、ホスファチジルコリン及びオレイン酸、(xi)ポリドカノール１０ラウリルエーテル、ヒアルロン酸ナトリウム及びレシチン、(xii)ポリドカノール２０ラウリルエーテル、マツヨイグサ油及びレシチン、を挙げることができる。
【００２６】
本発明の組成物の前記成分は、適当な溶媒の中に入れられる。この明細書で用いられる「適当な溶媒(suitable solvent)」は、本発明の成分を安定化させることができ、適合性の問題を起こすことなく、患者に投与することができる溶媒を意味する。溶媒は、水性又は非水性のどちらでも用いることができる。特に望ましい溶媒は水である。その他の適当な溶媒として、アルコール溶液、特にエタノールを挙げることができる。アルコールは、本発明の成分が析出しない濃度で用いられるべきである。なお、組成物中の成分全ての合計が１００wt./wt.％となるように、十分な量の溶媒、つまり十分に足りるだけの量(ｑ.ｓ.)の溶媒が加えられるべきである。ミセル形成化合物の添加前に薬剤を可溶にするために、典型的には、溶媒の一部分が最初に用いられることになるであろう。
【００２７】
本発明は、安定剤及び／又は防腐剤を選択的に含んでいる。フェノール化合物は、組成物を安定化させるだけでなく、細菌増殖から保護し、組成物の吸収を促進する作用を有するから、この目的のために特に適している。フェノール化合物は、１又は２以上のヒドロキシ基がベンゼン環に直接結合した化合物を意味するものと理解されるであろう。本発明に係る望ましいフェノール化合物として、フェノール、メチルフェノール(ｍ−クレゾールとも称される)及びそれらの混合物を挙げることができる。
【００２８】
本発明の組成物は、無機塩、酸化防止剤、プロテアーゼ阻害剤及び等張剤のうちの１種又は２種以上をさらに含むことができる。これらのどの選択的成分についても、本発明の組成物に用いる量は、当該分野の専門家であれば適宜決めることはできるであろう。当該分野の専門家であれば、着色剤、着香剤、及びその他の化合物でも治療的作用をもたらさない量であれば、調製物の中に含まれてもよいことは理解し得るであろう。代表的な着香剤として、メントール、ソルビトール及びフルーツ着香剤がある。従って、メントールをミセル形成化合物の１つとして用いるとき、メントールは、組成物に香りをもたらすことにもなる。
【００２９】
例えば、インシュリンを含む組成物は、少なくとも一種の無機塩を含んでもよい。無機塩は、胃腸管のチャネルを開く作用を有しており、インシュリンを放出するための追加の刺激を与えることもできる。無機塩の例として、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩及び亜鉛塩などを挙げることができ、特に、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化亜鉛及び炭酸水素ナトリウムなどを挙げることができるが、これらに限定されるものではない。
【００３０】
当該分野の専門家であれば、多くの薬学的組成物について、薬学的活性成分の分解と酸化を防止するために、少なくとも一種の酸化防止剤を加えてもよいことは理解されるであろう。酸化防止剤は、トコフェロール、デターオキシムメシレート(deteroxime mesylate)、メチルパラベン、エチルパラベン、アスコルビン酸及びそれらの混合物からなる群から選択することができるが、その他にも薬学分野で既知の酸化防止剤であってよい。望ましい酸化防止剤はトコフェロールである。パラベンは、組成物の防腐効果も有する。
【００３１】
プロテアーゼ阻害剤は、蛋白質分解酵素の作用により薬剤の分解抑制に寄与する。プロテアーゼ阻害剤を用いる場合、組成物の約０.１−３wt./wr.％の濃度が望ましい。蛋白質分解作用を有する物質であれば、適合性の問題がない限り、どんな物質を用いることもできる。プロテアーゼ阻害剤の例として、バシトラシン、バシトラシンメチレンジサリシレートなどのバシトラシン誘導体、大豆トリプシン、アプロチニンを挙げることができるが、これらに限定されるものではない。バシトラシン及びその誘導体は、組成物全体の１.５−２wt./wt.％の濃度で用いるのが望ましい。大豆トリプシンとアプロチニンの場合、組成物全体の約１−２wt./wt.％濃度で用いるのが望ましい。
【００３２】
混合ミセル組成物の調製後、グリセリン又は第二リン酸ナトリウムの如き等張剤を加えることもできる。等張剤は、溶液中のミセルを保持する作用を有する。グリセリンがミセル形成化合物の１つとして用いられる場合、そのグリセリンは等張剤としても作用する。第二リン酸ナトリウムが用いられる場合、細菌の成長阻害作用も有する。
【００３３】
本発明の薬学的組成物のｐＨは、一般的には５−８の範囲であり、６−７が望ましい。組成物を所定のｐＨに調節するのに、塩酸又は水酸化ナトリウムを用いることができる。
【００３４】
本発明の組成物は室温又は低温で保存することができる。蛋白質性薬物は、薬物の劣化を防止し、貯蔵寿命を延ばすために、低温で保存することが望ましい。
【００３５】
それゆえ、本発明は、ミセル形成剤との組合せによって形成された混合ミセルの中に高分子薬剤が封じ込められた薬学的組成物を提供することである。組成物は、口腔又は肺を経て送達されるが、口腔を経た送達が望ましい。口と鼻の粘膜を経て投与された薬物は迅速に吸収され、迅速に作用を開始して、治療血漿レベルに達するので、肝臓での代謝の初回通過効果(first pass effect)が回避され、胃腸管の不適環境にさらされないという送達効果がもたらされる。追加の利点として、膜部位へのアクセスが容易となるので、薬物の適用、特定場所への集中化、除去を容易に行なうことができる。
【００３６】
投与形態は経口ルートが特に有利である。舌下粘膜は、舌の腹面の膜と口の床部を含んでおり、頬粘膜(buccal mucosa)は頬の内層である。舌下粘膜と頬粘膜は、適度に浸透性を有するから、多くの薬物について、迅速な吸収が可能であり、生物学的利用能にすぐれている。さらにまた、舌下粘膜と頬粘膜は、都合が良く、非回避的(non-evasive)であり、利用し易い。胃腸管やその他の器官と比べ、口腔内環境は、酵素活性が低くｐＨは中性であるので、薬物のインビボでの有効時間を長くすることができる。なお、この明細書では、舌下粘膜及び頬粘膜を総称して、「口粘膜(oral mucosae)」として記載する。
【００３７】
本発明の混合ミセル調製物の浸透及び吸収を改善するには、本発明の組成物を噴射剤(propellant)と共に投与することによって達成することができる。噴射剤として、テトラフルオロエタン、ヘプタフルオロエタン、ジメチルフルオロプロパン、テトラフルオロプロパン、ブタン、イソブタン、ジメチルエーテル並びにその他の非ＣＦＣ噴射剤及びＣＦＣ噴射剤を挙げることができる。薬剤と噴射剤の比は、５：９５乃至２５：７５であることが望ましい。望ましい噴射剤は、水素含有クロロフルオロカーボン、水素含有フルオロカーボン、ジメチルエーテル及びジエチルエーテルである。より望ましい噴射剤は、ＨＦＡ−１３４ａ(１,１,１,２−テトラフルオロエタン)である。
【００３８】
本発明の組成物は、計量付き吸入器(metered dose inhaler)又はスプレー装置により送達されることが望ましい。計量付き吸入器は知られており、薬剤の肺への送達形態として普及している。計量付き吸入器を用いる１つの利点は、用法毎に正確な薬剤量を送達できることであり、もう一つの利点は、装置自らが収容されているので汚染可能性が可及的に少なくなることである。
【００３９】
本発明はまた、本発明の薬学的組成物を製造する方法を提供するものである。本発明の組成物は、高分子薬剤の溶液、アルカリ金属アルキルサルフェート、３種類以上のミセル形成化合物、または所望により安定剤及びその他の添加剤を混合することによって調製することができる。薬剤を加える量は、目的に合った有効量とすべきである。ミセル形成化合物は、同時に加えてもよいし、順次加えてもよい。混合ミセルは、ほぼどんな種類の成分混合方法でも形成されるが、約１０ナノメータ以下のサイズを得るには、激しく撹拌を行なうことが望ましい。薬剤、溶媒、アルカリ金属アルキルサルフェート、ミセル形成化合物及び前述した選択的添加剤は全て、本発明の方法の使用に適している。
【００４０】
一方法として、第１ミセル組成物は、薬学的活性剤を含む溶液を、少なくともアルカリ金属アルキルサルフェートと混合することにより調製される。第１ミセル組成物は次に、３種類以上の追加のミセル形成化合物と混合され、混合ミセル組成物を形成する。他の方法として第１ミセル組成物の調製は、薬学的活性剤、アルカリ金属アルキルサルフェート及び少なくとも１種の追加のミセル形成化合物を含む溶液を混合することによって行ない、該組成物に、残りのミセル形成化合物を加え、激しく撹拌する。なお、アルカリ金属アルキルサルフェートと３種類以上のミセル形成化合物の全てを一度に薬剤溶液へ加えるべきでない。
【００４１】
調製物を安定化させ、細菌成長から保護するために、安定剤を混合ミセル組成物に添加することができる。安定剤は、フェノール及び／又はｍ−クレゾールが望ましい。或いはまた、いづれかのミセル形成成分と同時に、安定剤を加えることもできる。混合ミセル組成物の形成後、等張剤を加えることもできる。同様に、この時、前述した他の選択的添加剤を加えることもできる。エアロゾルによる投与形態が所望される場合、調製物は次に、エアロゾルディスペンサーに入れて、ディスペンサーに噴射剤を充填する。噴射剤は、圧力状態にあるとき、ディスペンサーの中では液状である。本発明の組成物がディスペンサーの中にあるとき、液相は、噴射剤相と分離していてもよい。しかしながら、液相と噴射剤相が１つ、つまり一相となるように、成分の比率を簡単な実験により調節することが望ましい。２相である場合、例えば計量弁を通じて内容物の一部を分配する前に、ディスペンサーを振る必要がある。計量弁を通じて、所定量の薬剤が微細なスプレーの状態で送り込まれる。
【００４２】
本発明の具体的一実施例は、薬学的組成物を作る方法を提供するものであって、(ａ) 適当な溶媒の中で、高分子薬剤をアルカリ金属アルキルサルフェートと混合し、該混合物に少なくとも３種類のミセル形成化合物を添加して、混合ミセル高分子薬学的組成物を生成することを含んでおり、前記ミセル形成化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びそれらの混合物又は組合せからなる群から選択される。
【００４３】
アルカリ金属アルキルサルフェートを含むミセル形成化合物の各々は、濃度が組成物全体の０.１−２０wt./wt.％であり、その合計濃度は、組成物全体の５０wt./wt.％よりも少ない。
【００４４】
前記方法は、安定剤を添加するステップをさらに含むことができる。安定剤として、フェノール、ｍ−クレゾール及びそれらの混合物からなる群から選択されるフェノール化合物が挙げられる。安定剤の添加は、アルカリ金属アルキルサルフェートの添加前、添加中又は添加後のいづれでもよいし、ミセル形成化合物の添加前、添加中、添加後のいづれでもよい。
前記方法は、組成物をエアゾールディスペンサーに入れ、ディスペンサーに噴射剤を充填するステップをさらに含むことができる。
【００４５】
本発明の他の実施例において、本発明の方法は、(ａ) 適当な溶媒の中で、高分子薬剤を、アルカリ金属アルキルサルフェート及び少なくとも１種類のミセル形成化合物と混合して、第１の混合ミセル高分子薬学的組成物を生成することを含んでおり、前記ミセル形成化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びそれらの混合物又は組合せからなる群から選択され、(ｂ) ステップ(ａ)で加えたものと同じ群から選択されるが、ステップ(ａ)で加えたものとは異なる少なくとも２種類のミセル形成化合物を第１組成物に加えることを含んでいる。
【００４６】
また、ステップ(ａ)の際、或いはステップ(ａ)の後で、前述した安定剤を組成物に加えることもできる。混合は、激しくてもそうでなくてもよい。激しい混合は、例えば、磁気攪拌機又はプロペラ攪拌機などの高速攪拌機や、ソニケータによって行なうことができる。混合は激しく行なうのが望ましい。
【００４７】
本発明はまた、本発明の組成物及び噴射剤が入れられた計量付きエアロゾルディスペンサーを提供するもので、該ディスペンサーの中で、高分子薬剤及び噴射剤を含む溶液は単相である。
【００４８】
本発明はまた、計量付きスプレー装置を用いて、内部で混合された組成物を口の中へスプレーすることにより、本発明の薬学的組成物を投与する方法を提供するものである。投与は、吸入器なしで口腔内へスプレーすることにより行なう。本発明の薬学的組成物と噴射剤を口腔内へスプレーする前に、ディスペンサーを揺することが必要な場合があり、またそうすることが望ましい。本発明のインシュリン含有組成物を経口投与したときの血漿値(plasma level)と血糖値(blood glucose level)は、インシュリンを注入したときに達成されるレベルと同等である。本発明の方法は、無痛及び無針治療であること、また使い勝手が良いことなど、注射の場合と比べて、生活の質を著しく改善することができる。
【００４９】
口腔を通じて投与されるインシュリンの場合、第１ミセル溶液の調製は、まず水その他の溶媒を、次に塩酸(典型的には５Ｍ)を粉末インシュリンに加え、粉末が溶解し、透明な溶液が得られるまで撹拌することにより行なう。次に、溶液を水酸化ナトリウムで中和する。中和した溶液に、アルキル硫酸ナトリウムを、単独で、又は少なくとも一種のミセル形成化合物と共に加え、低速で撹拌する。アルキル硫酸ナトリウムとしてのラウリル硫酸ナトリウムは、水溶液の一般的な濃度は、溶液の約５wt./wt.％よりも少ない。典型的には、ミセル溶液中に存在するインシュリンは、最終組成物の約０.１−２０wt./wt.％の濃度である。
【００５０】
このようにして作製された溶液を、ソニケータ又は高速撹拌によって激しく混合することにより、ミセル溶液が生成される。前述したように、その他のミセル形成化合物を加えることもできる。組成物の中でミセルの均一な粒子サイズを確実に得るには、混合は、高速ミキサー又はソニケータによって行なえばよい。
【００５１】
望ましい実施例では、本発明のミセル薬学的組成物を調製した後、フェノール及び／又はｍ−クレゾールを添加する。前述したように、他の成分、例えば等張剤、酸化防止剤、塩、プロテアーゼ阻害剤又は薬学的に許容しうる化合物などをエアロゾルディスペンサーに加えることもできる。調製物はエアロゾルディスペンサーに入れられる。ディスペンサーには、公知の要領にて、噴射剤が充填される。
【００５２】
上記成分の具体的濃度については、当該分野の専門家であれば、ここで提供される一般的ガイドラインに基づいて決定することができる。成分の量は、スプレーしたときに、泡が生成するような組成物にならないようにその限界を定め、微細なスプレーとする必要がある。口腔を通じて吸収させるには、注射又は胃腸管を通じて投与するときの通常の薬量の２倍又は３倍に増やすことが望ましいことがある。
【００５３】
エアロゾルディスペンサーからスプレーされるエアロゾル液滴のサイズは、薬剤が送達されるべき場所にその一部は依存している。例えば、肺の中へ送達する場合、粒子サイズは約５μｍよりも小さいサイズが望ましい。一方、口腔に吸収させる場合、粒子サイズは約５−１０μｍが望ましい。
【００５４】
本発明はまた、高分子薬剤の吸収速度を高める方法に関するもので、高分子薬剤を、アルカリ金属アルキルサルフェートと３種類以上の前記ミセル形成化合物と共に投与することを含んでいる。この方法は、組成物を患者の口腔領域に直接投与することが望ましい。
【００５５】
本発明のどの方法の場合にも、口腔への投与は、調製物を口の中へスプレーすることにより行われ、吸入器は用いないので、液滴は肺の中へ引き込まれることなく、口腔内に滞留する。
【００５６】
＜実験＞
次の実験は、発明の例示を目的とするものであって、いかなる意味においても発明を限定するものと解すべきではない。
＜実験１＞
約１０００ｍｇの粉末インシュリンを撹拌器付きガラスビーカの中へ入れた。１０ｍｌの蒸留水を加え、溶液を低速で撹拌した。この溶液に、５Ｍ ＨＣｌ(ｐＨ２)溶液を滴下し、インシュリンを完全に溶解した。次に、この溶液に５Ｍ ＮａＯＨ溶液をゆっくりと撹拌しながら滴下して中和し、ｐＨを約７−８とした。この溶液に、ラウリル硫酸ナトリウム５０ｍｇ、デオキシコレート３６ｍｇ、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン(グリコール酸ナトリウム)５０ｍｇ、及び第二リン酸ナトリウム２０ｍｇを加え、化合物を完全に溶解した。次に、グリセリン２５０ｍｇを、例えば２０００ｒｐｍの高速で撹拌しながら加えた。溶液を３０分間撹拌した後、１０℃で貯蔵した。この混合物に、ｍ−クレゾール４０ｍｇ、フェノール４０ｍｇを加えた。なお、デオキシコレートに代えて、ケノデオキシコレート又はポリオキシエチレンエーテルを加えることもできる。
【００５７】
溶液を、ピペットにて、１０ｍｌ容量のガラス瓶の中へ入れた(１ｍｌ／瓶）。ガラス瓶にはＨＦＡ−１３４ａ噴射剤を充填し、室温で貯蔵した。
インシュリンの吸収能を調べるために、幾人かの糖尿病患者に対してこの調製物を投与した。糖尿病の被験者(ボランティア)１０人には、前夜からの絶食と、投与前に朝食を採らないように依頼した。被験者は、インシュリンの投与後、高カロリーの食事をとった。さらに４時間後、血糖値を測定した。結果を表１に示す。第１日目、被検者には、プラセボパフ(placebo puffs)と経口血糖降下剤(メトフォルミン、錠剤)を施した。第２日目、前述の通り調製した経口インシュリンを７０ユニット投与した。第３日目、本発明の経口インシュリン組成物を７０ユニット投与した。表１に示されるように、本発明の経口インシュリン組成物は、血糖値の制御という点で、経口血糖降下剤よりも遙かに良好な結果を示した。
【００５８】
【表１】
【００５９】
上記の手順を繰り返し行ない、その結果を次に示す。
【表２】
【００６０】
＜実験２＞
実験１と同じ要領にてインシュリンを調製した。この溶液に、ラウリル硫酸ナトリウム７ｍｇ、ポリオキシエチレンエーテル(１０ラウリル)７ｍｇ、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン７ｍｇを加え、完全に溶解させた。次に、水アルコール溶液(７ｍｇ／ｍＬ)に溶解した７ｍｇのレシチンを、例えば２０００ｒｐｍの高速で撹拌しながら加えた。溶液を３０分間撹拌した後、１０℃で貯蔵した。得られた混合ミセル溶液のインシュリンは、約２００ユニットである。この混合物に、フェノール５ｍｇ、ｍ−クレゾール５ｍｇ及びグリセリン１０ｍｇを加えた。
【００６１】
溶液を、ピペットにて、１０ｍｌ容量のガラス瓶の中へ入れた(１ｍｌ／瓶）。自動ガス充填装置(Paramasol 2008)を用いて、ＨＦＡ−１３４ａ噴射剤をガラス瓶に充填した。噴射剤の量は、エアロゾル瓶の１操作につき２ユニットのインシュリンが供給されるように、９ｍＬのショットサイズに調節されている。瓶のバルブは、操作１回につき、２ユニットのインシュリンが含まれる１００μＬのスプレーが供給されるように設計されている。ガラス瓶の中の調製物は、噴射剤を含み、単一相で、均一であった。
【００６２】
空気力学的な粒子サイズは、USP Anderson(登録商標)の８段カスケードインパクタMark IIにより求めた。インパクタはメタノールで清浄化し、３０℃で空気乾燥した。ガラスファイバーフィルタを受け皿の上に載せた。アクチュエータをインパクタのマウスピースに取り付け、ＵＳＰの導入ポート及びジェット台に組み付けた。真空ポンプを接続し、空気の流量を２８.３Ｌ／分に設定した。瓶は１０秒間揺する操作を２回繰り返した後、排出した。ショットの送達は、アクチュエータをマウスピースの中へ排出する操作を２５回繰り返し行なった。水１０ｍＬ中に０.６ｍＬのＥＤＴＡを含むｐＨ８.７の液を用いて、マウスピースを洗浄し、堆積したインシュリンを集めた。フィルターを取り除いて、シンチレーション瓶に入れ、１５分間ソニケータに付した。次に、ＲＰ−ＨＰＬＣを用いて、インシュリンの量を分析した。得られた結果を表３(１操作につき２ユニット)及び表４(１操作につき４ユニット)に示す。
【００６３】
【表３】
【００６４】
【表４】
【００６５】
これらの試験結果では、平均粒子サイズは約７μｍであった。また、３−８ステージでのインシュリン堆積は認められなかった(ステージの全てを示しているわけではない)。これらは、大部分の粒子が約６μｍよりも大きいことを意味する。これは、組成物の大部分は口腔で堆積し、深く肺のところでは堆積しないことを示唆する。
【００６６】
さらに、ショットサイズを正確に求めるための試験を行なった。試験は、ティール管の中へショットを発射し、サンプル収集前後の管の重量を測定することにより行なった。試験の結果は、１操作当たり２ユニットのショットの場合、０.０７５−０.０８３グラムであり、約±５％の範囲内であった。試験の結果は、１操作当たり４ユニットのショットの場合、０.０７６−０.０８３グラムであり、約±５％の範囲内であった。試験の結果は、１操作当たり６ユニットのショットの場合、０.０７０−０.０８２グラムであり、約±８％の範囲内であった。ＨＰＬＣの分析結果では、送達された投与量は、１操作当たり２ユニットの場合、２.０１−２.０７ユニット、１操作当たり４ユニットの場合、３.９−４.４ユニット、１操作当たり６ユニットの場合、５.８−６.３ユニットであった。
【００６７】
糖尿病の被験者１０人に対して、前夜からの絶食と、投与前に朝食を採らないように依頼した。第１日目、被験者に１０ユニットのインシュリン(エリ・リリー(Eli Lilly)から入手した即効性インシュリン)を注射した。第２日目、この実験のインシュリン６０ユニット(６ユニットずつ１０パフ)を、被験者の口の中へ吸入器なしで投与した。ＲＩＡ法により３時間間隔で血漿インシュリン値を測定した。測定結果の平均値(マイクロモル／ｍＬ)を表５に示す。また、バイヤーのグルコメータ・エリート(Bayer's Glucometer Elite)を用いて、血糖値を３時間毎にモニターした。測定結果の平均値(ミリモル／Ｌ)を表６に示す。
【００６８】
【表５】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血漿インシュリン値は略同等の結果を示した。
【００６９】
【表６】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血糖値は略同等の結果を示した。
【００７０】
試験は、１０パフずつ４０ユニットをスプレーしたものと、１０ユニット注射したものについて、前述の血漿値と血糖値を測定し、比較した。試験結果を、表７(血漿)及び表８(血糖)に示す。
【００７１】
【表７】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血漿インシュリンは略同等の結果を示した。
【００７２】
【表８】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血糖値は略同等の結果を示した。
【００７３】
＜実験３＞
実験１と同じ要領にてインシュリンを調製した。この溶液に、インシュリン溶液１ｍｌにつき、ラウリル硫酸ナトリウム３０.４ｍｇ、ポリドカノール９ラウリルエーテル３０.４ｍｇ、ポリリジン１０.０ｍｇを加え、化合物を完全に溶解した。次に、インシュリン溶液１ｍｌにつきトリオレイン１５.２ｍｇを、例えば２０００ｒｐｍの高速で撹拌しながら加えた。溶液を３０分間撹拌した後、１０℃で貯蔵した。得られた溶液は混合ミセル溶液である。この混合物に対し、インシュリン溶液１ｍｌにつき、ｍ−クレゾール１５.２ｍｇを加えた。
【００７４】
溶液を、ピペットにて、ガラス瓶の中へ入れた(１ｍＬ／瓶）。自動ガス充填装置(Paramasol 2008)(なお、Paramasolは登録商標)を用いて、ＨＦＡ−１３４ａ噴射剤１０.８ｇをガラス瓶に充填した。瓶のバルブは、操作１回につき、６ユニットのインシュリンが含まれる１００μＬのスプレーが供給されるように設計されている。ガラス瓶の中の調製物は、噴射剤を含み、単一相で、均一であった。
【００７５】
糖尿病の被験者１０人に対して、前夜からの絶食と、投与前に朝食を採らないように依頼した。第１日目、被験者に１０ユニットのインシュリンを注射した。第２日目、この実験のインシュリン６０ユニット(６ユニットずつ１０パフ)を、被験者の口の中へ吸入器なしで投与した。ＲＩＡ法により３時間間隔で血漿インシュリン値を測定した。測定結果の平均値(マイクロモル／ｍＬ)を表９に示す。また、バイヤーのグルコメータ・エリート(Bayer's Glucometer Elite)を用いて、血糖値を３時間毎にモニターした。測定結果の平均値(ミリモル／Ｌ)を表１０に示す。
【００７６】
【表９】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血漿インシュリン値は略同等の結果を示した。
【００７７】
【表１０】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血糖値は略同等の結果を示した。
【００７８】
＜実験４＞
実験１と同じ要領にてインシュリンを調製した。溶液１ｍｌにつきインシュリンが６００ユニットになるまで、溶液を蒸留水で希釈した。次に、この溶液１ｍｌを１０ｍＬ容量のガラス瓶に移し、半自動ガス充填装置(Paramasol 2008)を用いて、ＨＦＡ−１３４ａ噴射剤１０.８ｇをガラス瓶に充填した。
【００７９】
気相と液相がはっきりと分離していることが観察された。瓶を揺すってみたが、それでも組成物は均質にはならなかった。
ショットサイズを正確に求めるための試験を行なった。試験は、ティール管の中へショットを発射し、サンプル収集前後の管の重量を測定することにより行なった。試験の結果は、１操作当たり６ユニットのショットを５回続けて行なったところ、０.０９４、０.１１０、０.２００、０.１５０及び０.０５０グラムであり、平均値の約±６０％の範囲内であった。これは、実験２(本発明の範囲内の組成物について記載している)の±８％と対比される。
【００８０】
ＨＰＬＣの分析結果による平均送達量は、ショット５〜１０では１操作当たり５.４ユニット、ショット４５〜５０では１操作当たり７.１ユニット、ショット８５〜９０では１操作当たり８.６ユニットであった。
これらの結果によれば、実験２の結果とこの実験の比較により、本発明のミセル形成成分を含むときに均一送達が達成され、該成分なしでは達成できないことを示した。
【００８１】
＜実験５＞
１ｍｌにつき１００００ユニットを含む濃縮インシュリン１０ｍｌを、ガラスビーカの中へ入れた。この溶液に、ラウリル硫酸ナトリウム７ｍｇ、ポリオキシエチレンエーテル(１０ラウリル)７ｍｇ、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン７ｍｇ、レシチン７ｍｇを加えた。それらが完全に溶解するまで、撹拌を行なった。この溶液に、フェノール７ｍｇ及びｍ−クレゾール７ｍｇを加え、十分に撹拌した。
【００８２】
次に、この溶液１ｍｌをピペットにて１０ｍＬ容量のガラス瓶に入れた。次に、ガス充填装置(Paramasol 2008)を用いて、ＨＦＡ−１３４ａ噴射剤をガラス瓶に充填した。噴射剤の量は、バルブ操作１回につき１０ユニット(１操作につき１００μＬのショット)が供給されるように、瓶１本につき９ｍＬに調節されている。ガラス瓶の中の調製物は、噴射剤を含み、単一相で、均一であった。
糖尿病の被験者１０人に対して、前夜からの絶食と、投与前に朝食を採らないようにしてもらった。第１日目、各被験者に７ユニットのインシュリン(エリ・リリー(Eli Lilly)が市販する標準の迅速作用インシュリン)を注射した。第２日目、この実験のインシュリン７０ユニット(１０ユニットずつ７パフ)を、被験者の口の中へ吸入器なしで投与した。血液サンプルを集め、バイヤーのグルコメータ・エリート(Bayer's Glucometer Elite)を用いて、血漿血糖値を３時間毎に測定した。測定結果の平均値(ミリモル／Ｌ)を表１１に示す。また、インシュリン値は、ＲＩＡ法により３時間間隔でモニターした。測定結果の平均値(マイクロモル／Ｌ)を表１２に示す。
【００８３】
【表１１】
【００８４】
【表１２】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、インシュリン値は略同等の結果を示した。
【００８５】
＜実験６＞
１ｍｌにつき１００００ユニットを含む濃縮インシュリン１０ｍｌを、ガラスビーカの中へ入れた。この溶液に、ラウリル硫酸ナトリウム１５ｍｇ、ケノデオキシコレート１５ｍｇ、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン１５ｍｇ、レシチン７ｍｇを加えた。それらが完全に溶解するまで、撹拌を行なった。この溶液に、フェノール７ｍｇ及びｍ−クレゾール７ｍｇを加え、十分に混合した。
【００８６】
次に、この溶液１ｍｌをピペットで採取し、１０ｍＬ容量のガラス瓶に入れた。瓶は、計量計付きバルブを有している。次に、ガス充填装置(Paramasol 2008)を用いて、ＨＦＡ−１３４ａ噴射剤をガラス瓶に充填した。噴射剤の量は、バルブ操作１回につき１０ユニット(１操作につき１００μＬのショット)が供給されるように、瓶１本につき９ｍＬに調節されている。ガラス瓶の中の調製物は、噴射剤を含み、単一相で、均一であった。
【００８７】
糖尿病の被験者１０人に対して、前夜からの絶食と、投与前に朝食を採らないようにしてもらった。第１日目、各被験者に７ユニットのインシュリン(エリ・リリー(Eli Lilly)が市販する標準の迅速作用インシュリン)を注射した。インシュリンを投与して１５分後、各被験者は２５０カロリーのSustacal(登録商標)ドリンクを与えられ、各被験者は１０分以内にこれを飲んだ。第２日目、この実験のインシュリン７０ユニット(１０ユニットずつ７パフ)を、被験者の口の中へ吸入器なしで投与した。インシュリンを投与して１５分後、各被験者は２５０カロリーのSustacal(登録商標)ドリンクを与えられ、各被験者は１０分以内にこれを飲んだ。血液サンプルを集め、バイヤーのグルコメータ・エリート(Bayer's Glucometer Elite)を用いて、血漿血糖値を４時間毎に測定した。測定結果の平均値(ミリモル／Ｌ)を表１３に示す。
【００８８】
【表１３】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血糖値は略同等の結果を示した。
【００８９】
この発明の具体的実施例を例示したが、当該分野の専門家であれば、特許請求の範囲に記載された発明から逸脱することなく、本発明の詳細について種々の変形をなし得ることは明らかであろう。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ミセル形態の高分子薬剤を含む改良された薬学的組成物に関する。薬学的組成物は、特に、口腔及び経肺による投与に有効である。本発明はまた、これらの薬学的組成物の調製及び使用方法に関する。高分子薬剤の吸収速度を高める方法についても開示する。
【背景技術】
【０００２】
ペプチドや蛋白質などの高分子に関して、安全で効果的な経口調製物を得るという目標については、ここ何年もの間、相対的な進歩はほとんどないといってよい。蛋白質及びペプチドの経口調製物を発展させる上で大きな障壁となっているものに、固有浸透性(intrinsic permeability)の不足、ルーメン及び細胞の酵素分解、クリアランスの速さ及び、胃腸(gastrointestinal: GI)管での化学的不安定性などがある。これらの障壁に取り組むための薬学的アプローチは、従来の低分子量の有機薬剤に対しては成功しているが、ペプチドや蛋白質の調製物では成功していない。
【０００３】
蛋白質やペプチドについては、注射以外の様々な投与ルートが研究されているが、殆んど又は全く成功していない。投与ルートは、経口と鼻孔について大いに関心がもたれている。分子が口粘膜を透過する能力は、分子量、脂質溶解度及びペプチド蛋白質のイオン化と関係があると考えられる。１０００ダルトンより小さい分子は、口粘膜を速やかに通過すると考えられる。分子量が増すにつれて、分子の透過性は急激に低下する。脂質溶解性化合物は、非脂質溶解性分子よりも多く浸透する。吸収が最大となるのは、イオン化されていないか、電荷がニュートラルのときである。それゆえ、荷電分子の最大の課題は、口粘膜を通じて吸収させることにある。
【０００４】
蛋白質薬剤分子の多くは、分子量が６０００ダルトンを越える極めて大きな分子である。これら分子は、高分子であることに加え、脂質溶解性が大変乏しく、事実上、不浸透性であることもしばしばである。高分子(例えば、＞１０００ダルトン)の生体膜への吸収又は運搬を容易にする物質は、当該分野において、エンハンサー(enhancers)又は吸収助剤(absorption aids)と称される。これらの化合物として、一般的には、キレート化剤、胆汁酸塩、脂肪酸、合成親水性化合物、合成疎水性化合物、及び生物分解性の重合体化合物などが挙げられる。エンハンサーの多くは、刺激(irritation)に関して満足し得る安全プロファイルの欠如、バリヤー機能の低下、粘膜毛様体クリアランス保護メカニズムの欠陥などの問題がある。
【０００５】
エンハンサーの中でも特に胆汁酸塩や、また蛋白質溶解剤には、極端に苦く不快な味をもたらすものがある。このため、人間が毎日それらを摂取することは殆ど不可能である。胆汁酸塩ベースの送達システムに関して味を改良するために、口腔粘膜用パッチ、二層タブレット、放出制御されたタブレット、プロテアーゼ阻害剤が用いられたり、種々のポリマーマトリックスが用いられている。
しかしながら、これまでの技術では、所望される治療濃度の蛋白質含有薬剤を送達することはできなかった。さらにまた、フィルムパッチは、口内にかなりの組織損傷を生じることがあった。その他に、１種類の胆汁酸又はエンハンサーを、プロテアーゼ阻害剤及び生体分解性ポリマー物質と組み合わせて使用し、高分子を口、鼻、直腸及び膣のルートを経て送達しようとするものもあったが、同じように、蛋白質含有薬剤を患者の治療レベルに到達させることはできなかった。１種類のエンハンサーでは、粘膜を通過するのに必要な時間内で、高分子がさらなる分解を起こすことなく、口、鼻、直腸及び膣などの腔内で強固な細胞結合を分離させることはできない。これらの問題があるため、上記システムの商業的目的での使用を不可能にしている。
それゆえ、治療用調製物、特に口腔投与及び経肺投与として有用な高分子を含む治療用調製物の改良が依然として要請されている。また、このような調製物の製造及び使用する方法もまた要請されている。
【発明の概要】
【０００６】
上記要請に応えるために、本発明は、改良された薬学的組成物を提供するもので、該組成物は、適当な溶媒の中に、高分子薬剤、アルカリ金属アルキルサルフェート及び少なくとも３種類のミセル形成化合物を含んでいる。
薬剤は、１又は２種以上の蛋白質、ペプチド、ホルモン、ワクチン又は薬物(drug)であってよい。高分子薬剤の分子量は、約１０００−２００００００ダルトンの範囲が望ましい。薬剤は混合ミセル形態で存在し、ミセルのサイズは約１−１０ナノメータ(ｎｍ)である。この明細書で用いられる「混合ミセル(mixed micelles)」は、各々が異なるミセル形成化合物を用いて形成された異なる２種類以上のミセルを意味する。例えば、本発明の組成物は、４種類以上の異なるミセル、つまり、薬剤とアルカリ金属アルキルサルフェートとの間で形成されたミセル、薬剤と本明細書に記載した３種類以上の異なる追加のミセル形成化合物との間で形成されたミセルの混合物を含んでいる。
個々のミセルもまた、２種類以上のミセル形成化合物から作られることは理解されるであろう。本発明の混合ミセルは、口腔又はＧＩ管の中の膜の孔よりも小さい傾向がある。それゆえ、本発明の混合ミセルのサイズは極端に小さいため、被包された(encapsulated)高分子が口粘膜を通して効率良く浸透するのを補助する役割を果たすと考えられる。それゆえ本発明の組成物は、当該分野で既知の薬学的調製物と比べて、特に口粘膜を通る活性薬剤の生物学的利用能を高めることができる。
【０００７】
本発明はまた、高分子薬剤の吸収速度を高める方法に関し、該方法は、高分子薬剤を含む組成物を、アルカリ金属アルキルサルフェート及び３種類以上のミセル形成化合物と共に投与することを含んでいる。この方法は、組成物が口腔領域に投与されるときに特に効果的である。
本発明の薬学的組成物を製造及び使用する方法もまた、本発明の範囲内である。
【０００８】
それゆえ、本発明の目的は、高分子薬剤と複数のミセル形成化合物を含む薬学的組成物を提供することである。
本発明のさらなる目的は、高分子薬剤がミセル形態の薬学的組成物を提供することである。
【０００９】
本発明のさらなる目的は、高分子薬剤を、特に患者の口腔及び肺の領域へ投与する方法を提供することである。
本発明のさらなる目的は、高分子薬剤とミセル形成化合物を含む薬学的組成物を製造する方法を提供することである。
本発明のこれらの目的及び他の目的については、以下の説明及び請求の範囲の記載から明らかであろう。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明は、有効量の高分子薬剤と、アルカリ金属アルキルサルフェートと、３種類以上のミセル形成化合物と、適当な溶媒とを含む薬学的組成物に関するもので、前記ミセル化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びその混合物又は組合せからなる群から選択される。
アルカリ金属アルキルサルフェートの濃度は、組成物全体の０.１−２０wt./wt.％であり、各ミセル形成化合物の濃度は、組成物全体の０.１−２０wt./wt.％であり、アルカリ金属アルキルサルフェートとミセル形成化合物の合計濃度は、組成物全体の５０wt./wt.％よりも少ない。
【００１１】
この明細書で用いられる「高分子(macromolecular)」という語は、分子量が約１０００ダルトンよりも大きい薬剤を意味する。本発明の高分子薬剤の分子量は２０００−２００００００ダルトンが望ましいが、さらに大きな分子量であってもよい。
【００１２】
この明細書で用いられる「薬剤(pharmaceutical agent)」という語は、広範囲に亘る物質を含むものであり、人間及び人間以外の動物に用いられる物質で、治療及び研究用のもが挙げられるが、これに限定されるものではない。この語には、蛋白質、ペプチド、ホルモン、ワクチン、ドラッグが含まれる。
【００１３】
望ましい薬剤として、インシュリン、ヘパリン、低分子量ヘパリン(分子量が約５０００よりも少ない)、ヒルログ、ヒルゲン、フリジン、インターフェロン、サイトカイン、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、イムノグロビン、化学治療剤、ワクチン、糖蛋白、細菌トキソイド、ホルモン、カルシトニン、グルカゴン様ペプチド（ＧＬＰ−１）、高分子抗生物質(例えば、約１０００ダルトンよりも多い)、蛋白質基の血栓溶解化合物、血小板阻害剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、遺伝子治療剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド、オピオイド、麻酔薬、鎮痛薬(narcotics)、ステロイド及び鎮痛剤(pain killers)を挙げることができる。
【００１４】
本発明の組成物に含まれるホルモンとして、チロイド、アンドロゲン、エストロゲン、プロスタグランジン、ソマトトロピン、ゴナドトロピン、エリトロポエチン、インターフェロン、ステロイド及びサイトカインを挙げることができるが、これらに限定されるものではない。サイトカインは、小蛋白質で、局部的に作用するホルモンとしての特性を有しており、限定するものではないが、種々の形態のインターロイキン(ＩＬ)及び成長因子を挙げることができる。成長因子には、形質転換成長因子(ＴＧＰ)、線維芽細胞増殖因子(ＦＧＦ)及びインシュリン様成長因子(ＩＧＦ)などの様々な形態を挙げることができる。本発明にかかる組成物に用いられるワクチンには、細菌性ワクチン及びウイルス性ワクチンがあり、例えば、肝炎、インフルエンザ、結核、カナリア痘、水疱瘡、麻疹、流行性耳下腺炎、風疹、肺炎、ＢＣＧ、ＨＩＶ及びＡＩＤＳに対するワクチンがある。細菌トキソイドには、ジフテリア、破傷風、シュードモナス(pseudonomas sp.)及びミコバクテリウム結核(Mycobacterium tuberculosis)が挙げられるが、これらに限定されるものではない。薬物(drug)、より具体的には、血管作動剤又は血栓溶解剤の例として、ヘパリン、ヒルゲン、ヒルロス(hirulos)及びヒルジンを挙げることができる。本発明に含まれる高分子薬剤として、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体及び免疫グロビンがある。なお、この記載は全てを網羅しているわけでないことは理解されるべきである。
【００１５】
本発明にかかる望ましい高分子薬剤はインシュリンである。この明細書で用いられる「インシュリン」は、天然抽出されたヒトインシュリン、又は、ウシ、ブタその他の哺乳類から抽出したインシュリン、ヒト、ウシ、ブタその他の哺乳類から組換え作製されたインシュリン、インシュリンのアナローグ、インシュリンの誘導体、これらインシュリン製品の混合物を含むものである。この「インシュリン」という語は、インシュリンポリペプチドを含んでおり、該インシュリンポリペプチドは、ほぼ精製されたものであってもよいし、追加の賦形剤が加えられた市販のものでもよい。様々な形態のインシュリンは商業的に広く入手可能である。
「インシュリンのアナローグ」は、前記のインシュリンにおいて、ポリペプチド鎖内の１又は２種以上のアミノ酸が代替アミノ酸と置換されたもの、１又は２種以上のアミノ酸が削除されたもの、１又は２種以上のアミノ酸が追加されたものを含むものである。「インシュリンの誘導体」は、少なくとも１種の有機置換基がインシュリン鎖の１又は２種以上のアミノ酸に結合されたインシュリン又はそのアナローグを意味する。
【００１６】
高分子薬剤は、本発明の薬学的組成物の中ではミセル形態で存在する。当該分野の専門家であれば理解されるように、ミセルは、分子の有極親水性部分が外向きに延び、分子の非極親水性部分が内向きに延びる両親媒性分子のコロイド凝集体である。以下で説明するように、本発明の調製物を得るために、ミセル形成化合物の様々な組合せが用いられる。ミセルはすぐれた吸収能力を有し、またサイズが小さいことから、その存在は、高分子薬剤の吸収を著しく向上させる。さらにまた、薬剤をミセルの中に被包すると、薬剤は、ＧＩ環境での急速な劣化から保護される。
【００１７】
ミセルの粒子サイズは、典型的には、１−１０ナノメータの範囲であり、１−５ナノメータの範囲のものが多い。ミセルの形状は、様々で、例えば長細い形状、楕円球、球状などがあるが、球状ミセルがもっとも一般的である。
【００１８】
本発明の組成物には、有効量の高分子薬剤が含まれるべきである。この明細書で用いられる「有効量(effective amount)」という語は、例えば、患者の疾患の治療又は予防を予定とおり達成し、患者の生理学的状態を調節するといった所望の結果をもたらすのに必要な薬剤の量を意味する。それゆえ、この量は、患者に治療及び／又は予防効果を有するものと理解されるであろう。この明細書で用いられる「患者(patient)」は、動物界の動物を意味し、人間に限定されるわけではない。なお、有効量は、用いられる薬剤、薬剤について決められるパラメータ、治療される疾患の性質及び程度、治療される患者、及び投与ルートに応じて異なる。有効量の決定は、当該分野の専門家の能力範囲内で行われる。典型的には、本発明の調製物に含まれる薬剤の濃度は、組成物全体の０.１−２０wt./wt.％であり、１−１０wt./wt.％が望ましい。
【００１９】
適合性(compatibility)の問題が起こらない限り、どんなアルカリ金属アルキルサルフェート(alkali metal alkyl sulgate)であっても、本発明の組成物に用いることができる。アルキルは、Ｃ８−Ｃ２２アルキルが望ましく、ラウリル(Ｃ１２)がより望ましい。どのアルカリ金属を用いてもよいが、ナトリウムが望ましい。アルカリ金属アルキルサルフェートの濃度は、一般的には組成物全体の０.１−２０wt./wt.％であるが、約５wt./wt.％よりも少ない濃度が望ましい。
【００２０】
本発明の組成物は、３種類以上のミセル形成化合物をさらに含んでおり、該ミセル形成化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート及びデオキシコレートからなる群から選択される。これらのうちのどの化合物についても、その薬学的に許容される塩及びアナローグもまた、これら化合物の混合物又は組合せとして本発明の範囲内である。３種類以上の前記ミセル形成化合物の各々は、組成物全体の約０.１−２０wt./wt.％の濃度で存在する。より望ましくは、これらミセル形成化合物の各々の濃度は組成物全体の約５wt./wt.％よりも少ない濃度で存在する。本発明の高分子薬剤、特にインシュリンを送達する場合、ミセル形成化合物を３種類以上用いると、蓄積効果がもたらされる。このため、使用するミセル形成化合物が１種又は２種の場合と比べて、送達可能な薬剤の量は著しく増加する。また、ミセル形成化合物を３種類以上用いると、薬剤組成物の安定性も向上する。
【００２１】
アルカリ金属アルキルサルフェートはミセル形成化合物として機能し、前記の３種類以上のその他ミセル形成化合物に加えて、組成物へ加えられる。アルカリ金属アルキルサルフェートと、３種類以上の追加のミセル形成化合物の合計濃度は、組成物の５０wt./wt.％よりも少ない。
【００２２】
ミセル形成化合物の幾つかは、一般的に、脂肪酸、胆汁酸又はそれらの塩として記載される。使用に最も良いミセル形成化合物は、用いられる薬剤によって異なるが、当該分野の専門家であれば容易に決定できることである。一般的に、胆汁塩は、親水性薬剤との使用に特に適しており、脂肪酸塩は疎水性薬剤との使用に特に適している。本発明で用いる胆汁酸塩は比較的低濃度であるため、これら塩の使用に関連する毒性の問題は、たとえ避けられないまでも、最少にすることができる。
【００２３】
レシチンは、飽和又は不飽和のどちらでもよく、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルエタノールアミン、セファリン及びリゾレシチンからなる群から選択されることが望ましい。
【００２４】
ヒアルロン酸の望ましい塩は、アルカリ金属のヒアルロン酸塩であり、特に、ヒアルロン酸ナトリウム、アルカリ土類のヒアルロン酸塩、ヒアルロン酸アルミニウムが望ましい。本発明の組成物にヒアルロン酸又はその薬学的に許容される塩を用いるとき、濃度は、組成物全体の約０.１−約５wt./wt.％が望ましく、約３.５wt./wt.％より少なくのがより望ましい。
【００２５】
特に適したミセル形成化合物の組合せとして、(i)ヒアルロン酸ナトリウム、モノオレイン及び飽和リン脂質、(ii)飽和リン脂質、モノオレイン及びグリコール酸、(iii)ヒアルロン酸ナトリウム、ポリオキシエチレンエーテル及びレシチン、(iv)ポリオキシエチレンエーテル、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン及びレシチン、(v)ポリドカノール９ラウリルエーテル、ポリリジン及びトリオレイン、(vi)飽和リン脂質、ポリオキシエチレンエーテル及びグリコール酸、(vii)トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、レシチン及びケノデオキシコレート(viii)トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、デオキシコレート及びグリシン、(ix)ポリドカノール１０ラウリルエーテル、ナトリウムオキソコラニルグリシン及びレシチン、(x)ポリドカノール１０ラウリルエーテル、ホスファチジルコリン及びオレイン酸、(xi)ポリドカノール１０ラウリルエーテル、ヒアルロン酸ナトリウム及びレシチン、(xii)ポリドカノール２０ラウリルエーテル、マツヨイグサ油及びレシチン、を挙げることができる。
【００２６】
本発明の組成物の前記成分は、適当な溶媒の中に入れられる。この明細書で用いられる「適当な溶媒(suitable solvent)」は、本発明の成分を安定化させることができ、適合性の問題を起こすことなく、患者に投与することができる溶媒を意味する。溶媒は、水性又は非水性のどちらでも用いることができる。特に望ましい溶媒は水である。その他の適当な溶媒として、アルコール溶液、特にエタノールを挙げることができる。アルコールは、本発明の成分が析出しない濃度で用いられるべきである。なお、組成物中の成分全ての合計が１００wt./wt.％となるように、十分な量の溶媒、つまり十分に足りるだけの量(ｑ.ｓ.)の溶媒が加えられるべきである。ミセル形成化合物の添加前に薬剤を可溶にするために、典型的には、溶媒の一部分が最初に用いられることになるであろう。
【００２７】
本発明は、安定剤及び／又は防腐剤を選択的に含んでいる。フェノール化合物は、組成物を安定化させるだけでなく、細菌増殖から保護し、組成物の吸収を促進する作用を有するから、この目的のために特に適している。フェノール化合物は、１又は２以上のヒドロキシ基がベンゼン環に直接結合した化合物を意味するものと理解されるであろう。本発明に係る望ましいフェノール化合物として、フェノール、メチルフェノール(ｍ−クレゾールとも称される)及びそれらの混合物を挙げることができる。
【００２８】
本発明の組成物は、無機塩、酸化防止剤、プロテアーゼ阻害剤及び等張剤のうちの１種又は２種以上をさらに含むことができる。これらのどの選択的成分についても、本発明の組成物に用いる量は、当該分野の専門家であれば適宜決めることはできるであろう。当該分野の専門家であれば、着色剤、着香剤、及びその他の化合物でも治療的作用をもたらさない量であれば、調製物の中に含まれてもよいことは理解し得るであろう。代表的な着香剤として、メントール、ソルビトール及びフルーツ着香剤がある。従って、メントールをミセル形成化合物の１つとして用いるとき、メントールは、組成物に香りをもたらすことにもなる。
【００２９】
例えば、インシュリンを含む組成物は、少なくとも一種の無機塩を含んでもよい。無機塩は、胃腸管のチャネルを開く作用を有しており、インシュリンを放出するための追加の刺激を与えることもできる。無機塩の例として、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩及び亜鉛塩などを挙げることができ、特に、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化亜鉛及び炭酸水素ナトリウムなどを挙げることができるが、これらに限定されるものではない。
【００３０】
当該分野の専門家であれば、多くの薬学的組成物について、薬学的活性成分の分解と酸化を防止するために、少なくとも一種の酸化防止剤を加えてもよいことは理解されるであろう。酸化防止剤は、トコフェロール、デターオキシムメシレート(deteroxime mesylate)、メチルパラベン、エチルパラベン、アスコルビン酸及びそれらの混合物からなる群から選択することができるが、その他にも薬学分野で既知の酸化防止剤であってよい。望ましい酸化防止剤はトコフェロールである。パラベンは、組成物の防腐効果も有する。
【００３１】
プロテアーゼ阻害剤は、蛋白質分解酵素の作用により薬剤の分解抑制に寄与する。プロテアーゼ阻害剤を用いる場合、組成物の約０.１−３wt./wr.％の濃度が望ましい。蛋白質分解作用を有する物質であれば、適合性の問題がない限り、どんな物質を用いることもできる。プロテアーゼ阻害剤の例として、バシトラシン、バシトラシンメチレンジサリシレートなどのバシトラシン誘導体、大豆トリプシン、アプロチニンを挙げることができるが、これらに限定されるものではない。バシトラシン及びその誘導体は、組成物全体の１.５−２wt./wt.％の濃度で用いるのが望ましい。大豆トリプシンとアプロチニンの場合、組成物全体の約１−２wt./wt.％濃度で用いるのが望ましい。
【００３２】
混合ミセル組成物の調製後、グリセリン又は第二リン酸ナトリウムの如き等張剤を加えることもできる。等張剤は、溶液中のミセルを保持する作用を有する。グリセリンがミセル形成化合物の１つとして用いられる場合、そのグリセリンは等張剤としても作用する。第二リン酸ナトリウムが用いられる場合、細菌の成長阻害作用も有する。
【００３３】
本発明の薬学的組成物のｐＨは、一般的には５−８の範囲であり、６−７が望ましい。組成物を所定のｐＨに調節するのに、塩酸又は水酸化ナトリウムを用いることができる。
【００３４】
本発明の組成物は室温又は低温で保存することができる。蛋白質性薬物は、薬物の劣化を防止し、貯蔵寿命を延ばすために、低温で保存することが望ましい。
【００３５】
それゆえ、本発明は、ミセル形成剤との組合せによって形成された混合ミセルの中に高分子薬剤が封じ込められた薬学的組成物を提供することである。組成物は、口腔又は肺を経て送達されるが、口腔を経た送達が望ましい。口と鼻の粘膜を経て投与された薬物は迅速に吸収され、迅速に作用を開始して、治療血漿レベルに達するので、肝臓での代謝の初回通過効果(first pass effect)が回避され、胃腸管の不適環境にさらされないという送達効果がもたらされる。追加の利点として、膜部位へのアクセスが容易となるので、薬物の適用、特定場所への集中化、除去を容易に行なうことができる。
【００３６】
投与形態は経口ルートが特に有利である。舌下粘膜は、舌の腹面の膜と口の床部を含んでおり、頬粘膜(buccal mucosa)は頬の内層である。舌下粘膜と頬粘膜は、適度に浸透性を有するから、多くの薬物について、迅速な吸収が可能であり、生物学的利用能にすぐれている。さらにまた、舌下粘膜と頬粘膜は、都合が良く、非回避的(non-evasive)であり、利用し易い。胃腸管やその他の器官と比べ、口腔内環境は、酵素活性が低くｐＨは中性であるので、薬物のインビボでの有効時間を長くすることができる。なお、この明細書では、舌下粘膜及び頬粘膜を総称して、「口粘膜(oral mucosae)」として記載する。
【００３７】
本発明の混合ミセル調製物の浸透及び吸収を改善するには、本発明の組成物を噴射剤(propellant)と共に投与することによって達成することができる。噴射剤として、テトラフルオロエタン、ヘプタフルオロエタン、ジメチルフルオロプロパン、テトラフルオロプロパン、ブタン、イソブタン、ジメチルエーテル並びにその他の非ＣＦＣ噴射剤及びＣＦＣ噴射剤を挙げることができる。薬剤と噴射剤の比は、５：９５乃至２５：７５であることが望ましい。望ましい噴射剤は、水素含有クロロフルオロカーボン、水素含有フルオロカーボン、ジメチルエーテル及びジエチルエーテルである。より望ましい噴射剤は、ＨＦＡ−１３４ａ(１,１,１,２−テトラフルオロエタン)である。
【００３８】
本発明の組成物は、計量付き吸入器(metered dose inhaler)又はスプレー装置により送達されることが望ましい。計量付き吸入器は知られており、薬剤の肺への送達形態として普及している。計量付き吸入器を用いる１つの利点は、用法毎に正確な薬剤量を送達できることであり、もう一つの利点は、装置自らが収容されているので汚染可能性が可及的に少なくなることである。
【００３９】
本発明はまた、本発明の薬学的組成物を製造する方法を提供するものである。本発明の組成物は、高分子薬剤の溶液、アルカリ金属アルキルサルフェート、３種類以上のミセル形成化合物、または所望により安定剤及びその他の添加剤を混合することによって調製することができる。薬剤を加える量は、目的に合った有効量とすべきである。ミセル形成化合物は、同時に加えてもよいし、順次加えてもよい。混合ミセルは、ほぼどんな種類の成分混合方法でも形成されるが、約１０ナノメータ以下のサイズを得るには、激しく撹拌を行なうことが望ましい。薬剤、溶媒、アルカリ金属アルキルサルフェート、ミセル形成化合物及び前述した選択的添加剤は全て、本発明の方法の使用に適している。
【００４０】
一方法として、第１ミセル組成物は、薬学的活性剤を含む溶液を、少なくともアルカリ金属アルキルサルフェートと混合することにより調製される。第１ミセル組成物は次に、３種類以上の追加のミセル形成化合物と混合され、混合ミセル組成物を形成する。他の方法として第１ミセル組成物の調製は、薬学的活性剤、アルカリ金属アルキルサルフェート及び少なくとも１種の追加のミセル形成化合物を含む溶液を混合することによって行ない、該組成物に、残りのミセル形成化合物を加え、激しく撹拌する。なお、アルカリ金属アルキルサルフェートと３種類以上のミセル形成化合物の全てを一度に薬剤溶液へ加えるべきでない。
【００４１】
調製物を安定化させ、細菌成長から保護するために、安定剤を混合ミセル組成物に添加することができる。安定剤は、フェノール及び／又はｍ−クレゾールが望ましい。或いはまた、いづれかのミセル形成成分と同時に、安定剤を加えることもできる。混合ミセル組成物の形成後、等張剤を加えることもできる。同様に、この時、前述した他の選択的添加剤を加えることもできる。エアロゾルによる投与形態が所望される場合、調製物は次に、エアロゾルディスペンサーに入れて、ディスペンサーに噴射剤を充填する。噴射剤は、圧力状態にあるとき、ディスペンサーの中では液状である。本発明の組成物がディスペンサーの中にあるとき、液相は、噴射剤相と分離していてもよい。しかしながら、液相と噴射剤相が１つ、つまり一相となるように、成分の比率を簡単な実験により調節することが望ましい。２相である場合、例えば計量弁を通じて内容物の一部を分配する前に、ディスペンサーを振る必要がある。計量弁を通じて、所定量の薬剤が微細なスプレーの状態で送り込まれる。
【００４２】
本発明の具体的一実施例は、薬学的組成物を作る方法を提供するものであって、(ａ) 適当な溶媒の中で、高分子薬剤をアルカリ金属アルキルサルフェートと混合し、該混合物に少なくとも３種類のミセル形成化合物を添加して、混合ミセル高分子薬学的組成物を生成することを含んでおり、前記ミセル形成化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びそれらの混合物又は組合せからなる群から選択される。
【００４３】
アルカリ金属アルキルサルフェートを含むミセル形成化合物の各々は、濃度が組成物全体の０.１−２０wt./wt.％であり、その合計濃度は、組成物全体の５０wt./wt.％よりも少ない。
【００４４】
前記方法は、安定剤を添加するステップをさらに含むことができる。安定剤として、フェノール、ｍ−クレゾール及びそれらの混合物からなる群から選択されるフェノール化合物が挙げられる。安定剤の添加は、アルカリ金属アルキルサルフェートの添加前、添加中又は添加後のいづれでもよいし、ミセル形成化合物の添加前、添加中、添加後のいづれでもよい。
前記方法は、組成物をエアゾールディスペンサーに入れ、ディスペンサーに噴射剤を充填するステップをさらに含むことができる。
【００４５】
本発明の他の実施例において、本発明の方法は、(ａ) 適当な溶媒の中で、高分子薬剤を、アルカリ金属アルキルサルフェート及び少なくとも１種類のミセル形成化合物と混合して、第１の混合ミセル高分子薬学的組成物を生成することを含んでおり、前記ミセル形成化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びそれらの混合物又は組合せからなる群から選択され、(ｂ) ステップ(ａ)で加えたものと同じ群から選択されるが、ステップ(ａ)で加えたものとは異なる少なくとも２種類のミセル形成化合物を第１組成物に加えることを含んでいる。
【００４６】
また、ステップ(ａ)の際、或いはステップ(ａ)の後で、前述した安定剤を組成物に加えることもできる。混合は、激しくてもそうでなくてもよい。激しい混合は、例えば、磁気攪拌機又はプロペラ攪拌機などの高速攪拌機や、ソニケータによって行なうことができる。混合は激しく行なうのが望ましい。
【００４７】
本発明はまた、本発明の組成物及び噴射剤が入れられた計量付きエアロゾルディスペンサーを提供するもので、該ディスペンサーの中で、高分子薬剤及び噴射剤を含む溶液は単相である。
【００４８】
本発明はまた、計量付きスプレー装置を用いて、内部で混合された組成物を口の中へスプレーすることにより、本発明の薬学的組成物を投与する方法を提供するものである。投与は、吸入器なしで口腔内へスプレーすることにより行なう。本発明の薬学的組成物と噴射剤を口腔内へスプレーする前に、ディスペンサーを揺することが必要な場合があり、またそうすることが望ましい。本発明のインシュリン含有組成物を経口投与したときの血漿値(plasma level)と血糖値(blood glucose level)は、インシュリンを注入したときに達成されるレベルと同等である。本発明の方法は、無痛及び無針治療であること、また使い勝手が良いことなど、注射の場合と比べて、生活の質を著しく改善することができる。
【００４９】
口腔を通じて投与されるインシュリンの場合、第１ミセル溶液の調製は、まず水その他の溶媒を、次に塩酸(典型的には５Ｍ)を粉末インシュリンに加え、粉末が溶解し、透明な溶液が得られるまで撹拌することにより行なう。次に、溶液を水酸化ナトリウムで中和する。中和した溶液に、アルキル硫酸ナトリウムを、単独で、又は少なくとも一種のミセル形成化合物と共に加え、低速で撹拌する。アルキル硫酸ナトリウムとしてのラウリル硫酸ナトリウムは、水溶液の一般的な濃度は、溶液の約５wt./wt.％よりも少ない。典型的には、ミセル溶液中に存在するインシュリンは、最終組成物の約０.１−２０wt./wt.％の濃度である。
【００５０】
このようにして作製された溶液を、ソニケータ又は高速撹拌によって激しく混合することにより、ミセル溶液が生成される。前述したように、その他のミセル形成化合物を加えることもできる。組成物の中でミセルの均一な粒子サイズを確実に得るには、混合は、高速ミキサー又はソニケータによって行なえばよい。
【００５１】
望ましい実施例では、本発明のミセル薬学的組成物を調製した後、フェノール及び／又はｍ−クレゾールを添加する。前述したように、他の成分、例えば等張剤、酸化防止剤、塩、プロテアーゼ阻害剤又は薬学的に許容しうる化合物などをエアロゾルディスペンサーに加えることもできる。調製物はエアロゾルディスペンサーに入れられる。ディスペンサーには、公知の要領にて、噴射剤が充填される。
【００５２】
上記成分の具体的濃度については、当該分野の専門家であれば、ここで提供される一般的ガイドラインに基づいて決定することができる。成分の量は、スプレーしたときに、泡が生成するような組成物にならないようにその限界を定め、微細なスプレーとする必要がある。口腔を通じて吸収させるには、注射又は胃腸管を通じて投与するときの通常の薬量の２倍又は３倍に増やすことが望ましいことがある。
【００５３】
エアロゾルディスペンサーからスプレーされるエアロゾル液滴のサイズは、薬剤が送達されるべき場所にその一部は依存している。例えば、肺の中へ送達する場合、粒子サイズは約５μｍよりも小さいサイズが望ましい。一方、口腔に吸収させる場合、粒子サイズは約５−１０μｍが望ましい。
【００５４】
本発明はまた、高分子薬剤の吸収速度を高める方法に関するもので、高分子薬剤を、アルカリ金属アルキルサルフェートと３種類以上の前記ミセル形成化合物と共に投与することを含んでいる。この方法は、組成物を患者の口腔領域に直接投与することが望ましい。
【００５５】
本発明のどの方法の場合にも、口腔への投与は、調製物を口の中へスプレーすることにより行われ、吸入器は用いないので、液滴は肺の中へ引き込まれることなく、口腔内に滞留する。
【００５６】
＜実験＞
次の実験は、発明の例示を目的とするものであって、いかなる意味においても発明を限定するものと解すべきではない。
＜実験１＞
約１０００ｍｇの粉末インシュリンを撹拌器付きガラスビーカの中へ入れた。１０ｍｌの蒸留水を加え、溶液を低速で撹拌した。この溶液に、５Ｍ ＨＣｌ(ｐＨ２)溶液を滴下し、インシュリンを完全に溶解した。次に、この溶液に５Ｍ ＮａＯＨ溶液をゆっくりと撹拌しながら滴下して中和し、ｐＨを約７−８とした。この溶液に、ラウリル硫酸ナトリウム５０ｍｇ、デオキシコレート３６ｍｇ、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン(グリコール酸ナトリウム)５０ｍｇ、及び第二リン酸ナトリウム２０ｍｇを加え、化合物を完全に溶解した。次に、グリセリン２５０ｍｇを、例えば２０００ｒｐｍの高速で撹拌しながら加えた。溶液を３０分間撹拌した後、１０℃で貯蔵した。この混合物に、ｍ−クレゾール４０ｍｇ、フェノール４０ｍｇを加えた。なお、デオキシコレートに代えて、ケノデオキシコレート又はポリオキシエチレンエーテルを加えることもできる。
【００５７】
溶液を、ピペットにて、１０ｍｌ容量のガラス瓶の中へ入れた(１ｍｌ／瓶）。ガラス瓶にはＨＦＡ−１３４ａ噴射剤を充填し、室温で貯蔵した。
インシュリンの吸収能を調べるために、幾人かの糖尿病患者に対してこの調製物を投与した。糖尿病の被験者(ボランティア)１０人には、前夜からの絶食と、投与前に朝食を採らないように依頼した。被験者は、インシュリンの投与後、高カロリーの食事をとった。さらに４時間後、血糖値を測定した。結果を表１に示す。第１日目、被検者には、プラセボパフ(placebo puffs)と経口血糖降下剤(メトフォルミン、錠剤)を施した。第２日目、前述の通り調製した経口インシュリンを７０ユニット投与した。第３日目、本発明の経口インシュリン組成物を７０ユニット投与した。表１に示されるように、本発明の経口インシュリン組成物は、血糖値の制御という点で、経口血糖降下剤よりも遙かに良好な結果を示した。
【００５８】
【表１】
【００５９】
上記の手順を繰り返し行ない、その結果を次に示す。
【表２】
【００６０】
＜実験２＞
実験１と同じ要領にてインシュリンを調製した。この溶液に、ラウリル硫酸ナトリウム７ｍｇ、ポリオキシエチレンエーテル(１０ラウリル)７ｍｇ、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン７ｍｇを加え、完全に溶解させた。次に、水アルコール溶液(７ｍｇ／ｍＬ)に溶解した７ｍｇのレシチンを、例えば２０００ｒｐｍの高速で撹拌しながら加えた。溶液を３０分間撹拌した後、１０℃で貯蔵した。得られた混合ミセル溶液のインシュリンは、約２００ユニットである。この混合物に、フェノール５ｍｇ、ｍ−クレゾール５ｍｇ及びグリセリン１０ｍｇを加えた。
【００６１】
溶液を、ピペットにて、１０ｍｌ容量のガラス瓶の中へ入れた(１ｍｌ／瓶）。自動ガス充填装置(Paramasol 2008)を用いて、ＨＦＡ−１３４ａ噴射剤をガラス瓶に充填した。噴射剤の量は、エアロゾル瓶の１操作につき２ユニットのインシュリンが供給されるように、９ｍＬのショットサイズに調節されている。瓶のバルブは、操作１回につき、２ユニットのインシュリンが含まれる１００μＬのスプレーが供給されるように設計されている。ガラス瓶の中の調製物は、噴射剤を含み、単一相で、均一であった。
【００６２】
空気力学的な粒子サイズは、USP Anderson(登録商標)の８段カスケードインパクタMark IIにより求めた。インパクタはメタノールで清浄化し、３０℃で空気乾燥した。ガラスファイバーフィルタを受け皿の上に載せた。アクチュエータをインパクタのマウスピースに取り付け、ＵＳＰの導入ポート及びジェット台に組み付けた。真空ポンプを接続し、空気の流量を２８.３Ｌ／分に設定した。瓶は１０秒間揺する操作を２回繰り返した後、排出した。ショットの送達は、アクチュエータをマウスピースの中へ排出する操作を２５回繰り返し行なった。水１０ｍＬ中に０.６ｍＬのＥＤＴＡを含むｐＨ８.７の液を用いて、マウスピースを洗浄し、堆積したインシュリンを集めた。フィルターを取り除いて、シンチレーション瓶に入れ、１５分間ソニケータに付した。次に、ＲＰ−ＨＰＬＣを用いて、インシュリンの量を分析した。得られた結果を表３(１操作につき２ユニット)及び表４(１操作につき４ユニット)に示す。
【００６３】
【表３】
【００６４】
【表４】
【００６５】
これらの試験結果では、平均粒子サイズは約７μｍであった。また、３−８ステージでのインシュリン堆積は認められなかった(ステージの全てを示しているわけではない)。これらは、大部分の粒子が約６μｍよりも大きいことを意味する。これは、組成物の大部分は口腔で堆積し、深く肺のところでは堆積しないことを示唆する。
【００６６】
さらに、ショットサイズを正確に求めるための試験を行なった。試験は、ティール管の中へショットを発射し、サンプル収集前後の管の重量を測定することにより行なった。試験の結果は、１操作当たり２ユニットのショットの場合、０.０７５−０.０８３グラムであり、約±５％の範囲内であった。試験の結果は、１操作当たり４ユニットのショットの場合、０.０７６−０.０８３グラムであり、約±５％の範囲内であった。試験の結果は、１操作当たり６ユニットのショットの場合、０.０７０−０.０８２グラムであり、約±８％の範囲内であった。ＨＰＬＣの分析結果では、送達された投与量は、１操作当たり２ユニットの場合、２.０１−２.０７ユニット、１操作当たり４ユニットの場合、３.９−４.４ユニット、１操作当たり６ユニットの場合、５.８−６.３ユニットであった。
【００６７】
糖尿病の被験者１０人に対して、前夜からの絶食と、投与前に朝食を採らないように依頼した。第１日目、被験者に１０ユニットのインシュリン(エリ・リリー(Eli Lilly)から入手した即効性インシュリン)を注射した。第２日目、この実験のインシュリン６０ユニット(６ユニットずつ１０パフ)を、被験者の口の中へ吸入器なしで投与した。ＲＩＡ法により３時間間隔で血漿インシュリン値を測定した。測定結果の平均値(マイクロモル／ｍＬ)を表５に示す。また、バイヤーのグルコメータ・エリート(Bayer's Glucometer Elite)を用いて、血糖値を３時間毎にモニターした。測定結果の平均値(ミリモル／Ｌ)を表６に示す。
【００６８】
【表５】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血漿インシュリン値は略同等の結果を示した。
【００６９】
【表６】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血糖値は略同等の結果を示した。
【００７０】
試験は、１０パフずつ４０ユニットをスプレーしたものと、１０ユニット注射したものについて、前述の血漿値と血糖値を測定し、比較した。試験結果を、表７(血漿)及び表８(血糖)に示す。
【００７１】
【表７】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血漿インシュリンは略同等の結果を示した。
【００７２】
【表８】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血糖値は略同等の結果を示した。
【００７３】
＜実験３＞
実験１と同じ要領にてインシュリンを調製した。この溶液に、インシュリン溶液１ｍｌにつき、ラウリル硫酸ナトリウム３０.４ｍｇ、ポリドカノール９ラウリルエーテル３０.４ｍｇ、ポリリジン１０.０ｍｇを加え、化合物を完全に溶解した。次に、インシュリン溶液１ｍｌにつきトリオレイン１５.２ｍｇを、例えば２０００ｒｐｍの高速で撹拌しながら加えた。溶液を３０分間撹拌した後、１０℃で貯蔵した。得られた溶液は混合ミセル溶液である。この混合物に対し、インシュリン溶液１ｍｌにつき、ｍ−クレゾール１５.２ｍｇを加えた。
【００７４】
溶液を、ピペットにて、ガラス瓶の中へ入れた(１ｍＬ／瓶）。自動ガス充填装置(Paramasol 2008)(なお、Paramasolは登録商標)を用いて、ＨＦＡ−１３４ａ噴射剤１０.８ｇをガラス瓶に充填した。瓶のバルブは、操作１回につき、６ユニットのインシュリンが含まれる１００μＬのスプレーが供給されるように設計されている。ガラス瓶の中の調製物は、噴射剤を含み、単一相で、均一であった。
【００７５】
糖尿病の被験者１０人に対して、前夜からの絶食と、投与前に朝食を採らないように依頼した。第１日目、被験者に１０ユニットのインシュリンを注射した。第２日目、この実験のインシュリン６０ユニット(６ユニットずつ１０パフ)を、被験者の口の中へ吸入器なしで投与した。ＲＩＡ法により３時間間隔で血漿インシュリン値を測定した。測定結果の平均値(マイクロモル／ｍＬ)を表９に示す。また、バイヤーのグルコメータ・エリート(Bayer's Glucometer Elite)を用いて、血糖値を３時間毎にモニターした。測定結果の平均値(ミリモル／Ｌ)を表１０に示す。
【００７６】
【表９】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血漿インシュリン値は略同等の結果を示した。
【００７７】
【表１０】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血糖値は略同等の結果を示した。
【００７８】
＜実験４＞
実験１と同じ要領にてインシュリンを調製した。溶液１ｍｌにつきインシュリンが６００ユニットになるまで、溶液を蒸留水で希釈した。次に、この溶液１ｍｌを１０ｍＬ容量のガラス瓶に移し、半自動ガス充填装置(Paramasol 2008)を用いて、ＨＦＡ−１３４ａ噴射剤１０.８ｇをガラス瓶に充填した。
【００７９】
気相と液相がはっきりと分離していることが観察された。瓶を揺すってみたが、それでも組成物は均質にはならなかった。
ショットサイズを正確に求めるための試験を行なった。試験は、ティール管の中へショットを発射し、サンプル収集前後の管の重量を測定することにより行なった。試験の結果は、１操作当たり６ユニットのショットを５回続けて行なったところ、０.０９４、０.１１０、０.２００、０.１５０及び０.０５０グラムであり、平均値の約±６０％の範囲内であった。これは、実験２(本発明の範囲内の組成物について記載している)の±８％と対比される。
【００８０】
ＨＰＬＣの分析結果による平均送達量は、ショット５〜１０では１操作当たり５.４ユニット、ショット４５〜５０では１操作当たり７.１ユニット、ショット８５〜９０では１操作当たり８.６ユニットであった。
これらの結果によれば、実験２の結果とこの実験の比較により、本発明のミセル形成成分を含むときに均一送達が達成され、該成分なしでは達成できないことを示した。
【００８１】
＜実験５＞
１ｍｌにつき１００００ユニットを含む濃縮インシュリン１０ｍｌを、ガラスビーカの中へ入れた。この溶液に、ラウリル硫酸ナトリウム７ｍｇ、ポリオキシエチレンエーテル(１０ラウリル)７ｍｇ、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン７ｍｇ、レシチン７ｍｇを加えた。それらが完全に溶解するまで、撹拌を行なった。この溶液に、フェノール７ｍｇ及びｍ−クレゾール７ｍｇを加え、十分に撹拌した。
【００８２】
次に、この溶液１ｍｌをピペットにて１０ｍＬ容量のガラス瓶に入れた。次に、ガス充填装置(Paramasol 2008)を用いて、ＨＦＡ−１３４ａ噴射剤をガラス瓶に充填した。噴射剤の量は、バルブ操作１回につき１０ユニット(１操作につき１００μＬのショット)が供給されるように、瓶１本につき９ｍＬに調節されている。ガラス瓶の中の調製物は、噴射剤を含み、単一相で、均一であった。
糖尿病の被験者１０人に対して、前夜からの絶食と、投与前に朝食を採らないようにしてもらった。第１日目、各被験者に７ユニットのインシュリン(エリ・リリー(Eli Lilly)が市販する標準の迅速作用インシュリン)を注射した。第２日目、この実験のインシュリン７０ユニット(１０ユニットずつ７パフ)を、被験者の口の中へ吸入器なしで投与した。血液サンプルを集め、バイヤーのグルコメータ・エリート(Bayer's Glucometer Elite)を用いて、血漿血糖値を３時間毎に測定した。測定結果の平均値(ミリモル／Ｌ)を表１１に示す。また、インシュリン値は、ＲＩＡ法により３時間間隔でモニターした。測定結果の平均値(マイクロモル／Ｌ)を表１２に示す。
【００８３】
【表１１】
【００８４】
【表１２】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、インシュリン値は略同等の結果を示した。
【００８５】
＜実験６＞
１ｍｌにつき１００００ユニットを含む濃縮インシュリン１０ｍｌを、ガラスビーカの中へ入れた。この溶液に、ラウリル硫酸ナトリウム１５ｍｇ、ケノデオキシコレート１５ｍｇ、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン１５ｍｇ、レシチン７ｍｇを加えた。それらが完全に溶解するまで、撹拌を行なった。この溶液に、フェノール７ｍｇ及びｍ−クレゾール７ｍｇを加え、十分に混合した。
【００８６】
次に、この溶液１ｍｌをピペットで採取し、１０ｍＬ容量のガラス瓶に入れた。瓶は、計量計付きバルブを有している。次に、ガス充填装置(Paramasol 2008)を用いて、ＨＦＡ−１３４ａ噴射剤をガラス瓶に充填した。噴射剤の量は、バルブ操作１回につき１０ユニット(１操作につき１００μＬのショット)が供給されるように、瓶１本につき９ｍＬに調節されている。ガラス瓶の中の調製物は、噴射剤を含み、単一相で、均一であった。
【００８７】
糖尿病の被験者１０人に対して、前夜からの絶食と、投与前に朝食を採らないようにしてもらった。第１日目、各被験者に７ユニットのインシュリン(エリ・リリー(Eli Lilly)が市販する標準の迅速作用インシュリン)を注射した。インシュリンを投与して１５分後、各被験者は２５０カロリーのSustacal(登録商標)ドリンクを与えられ、各被験者は１０分以内にこれを飲んだ。第２日目、この実験のインシュリン７０ユニット(１０ユニットずつ７パフ)を、被験者の口の中へ吸入器なしで投与した。インシュリンを投与して１５分後、各被験者は２５０カロリーのSustacal(登録商標)ドリンクを与えられ、各被験者は１０分以内にこれを飲んだ。血液サンプルを集め、バイヤーのグルコメータ・エリート(Bayer's Glucometer Elite)を用いて、血漿血糖値を４時間毎に測定した。測定結果の平均値(ミリモル／Ｌ)を表１３に示す。
【００８８】
【表１３】
この試験は、本発明の組成物を送達する上で、インシュリン直接注入法とスプレー法とでは、血糖値は略同等の結果を示した。
【００８９】
この発明の具体的実施例を例示したが、当該分野の専門家であれば、特許請求の範囲に記載された発明から逸脱することなく、本発明の詳細について種々の変形をなし得ることは明らかであろう。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
薬学的組成物であって、 有効量の高分子薬剤と、 アルカリ金属アルキルサルフェートと、 レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びそれらの混合物又は組合せからなる群から選択される３種類以上のミセル形成化合物と、 適当な溶媒と、を含んでおり、 アルカリ金属アルキルサルフェート及びミセル形成化合物の各々は、濃度が組成物全体の約０.１−２０wt./wt.％で存在しており、アルカリ金属アルキルサルフェートとミセル形成化合物の合計濃度は、組成物全体の５０wt./wt.％よりも少なく、 前記高分子薬剤はミセルの形態である薬学的組成物。
【請求項２】
アルカリ金属アルキルサルフェートの濃度は、組成物全体の約５wt./wt.％よりも少ない請求項１の組成物。
【請求項３】
アルカリ金属アルキルサルフェートは、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートである請求項１の組成物。
【請求項４】
アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートはラウリル硫酸ナトリウムである請求項３の組成物。
【請求項５】
３種類以上のミセル形成化合物の各々は、濃度が、組成物全体の約０.１−５wt./wt.％である請求項１の組成物。
【請求項６】
レシチンは、飽和又は不飽和であり、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルエタノールアミン、セファリン及びリゾレシチンからなる群から選択される請求項１の組成物。
【請求項７】
ミセル形成化合物の１種は、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、ポリドカノールアルキルエーテル、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、トリヒドロキシオキソコラニルグリシンの薬学的に許容される塩、ポリオキシエチレンエーテル、ポリオキシエチレンエーテルのアナローグ、ケノデオキシコレート及びそれらの混合物からなる群から選択され、ミセル形成化合物の濃度は、組成物全体の約０.１−５wt./wt.％である請求項１の組成物。
【請求項８】
ヒアルロン酸の塩は、アルカリ金属のヒアルロン酸塩、アルカリ土類のヒアルロン酸塩及びヒアルロン酸アルミニウムからなる群から選択され、前記塩の濃度は組成物全体の約０.１−５wt./wt.％である請求項７の組成物。
【請求項９】
３種類のミセル形成化合物は、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、ポリオキシエチレンエーテル及びレシチンである請求項４の組成物。
【請求項１０】
３種類のミセル形成化合物は、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、デオキシコレート及びグリセリンである請求項４の組成物。
【請求項１１】
３種類のミセル形成化合物は、ポリドカノール９ラウリルエーテル、ポリリジン及びトリオレインである請求項４の組成物。
【請求項１２】
薬剤は、インシュリン、ヘパリン、低分子量ヘパリン、ヒルログ、ヒルゲン、フリジン、インターフェロン、サイトカイン、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、イムノグロビン、化学治療剤、ワクチン、糖蛋白、細菌トキソイド、ホルモン、カルシトニン、グルカゴン様ペプチド、高分子抗生物質、蛋白質基の血栓溶解化合物、血小板阻害剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、遺伝子治療剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド、オピオイド、麻酔薬、鎮痛薬、ステロイド及び鎮痛剤からなる群から選択される請求項１の組成物。
【請求項１３】
薬剤は、インシュリンである請求項１の組成物。
【請求項１４】
組成物のｐＨは、５乃至８の範囲である請求項１の組成物。
【請求項１５】
ミセルのサイズは、約１〜１０ナノメータである請求項１の組成物。
【請求項１６】
溶媒は、水及びエタノールからなる群から選択される請求項１の組成物。
【請求項１７】
フェノール化合物、酸化防止剤、プロテアーゼ阻害剤及び無機塩からなる群から選択される１又は２種以上の要素をさらに含んでいる請求項１の組成物。
【請求項１８】
組成物は、フェノール、ｍ−クレゾール及びそれらの混合物からなる群から選択されるフェノール化合物を、組成物全体の約０.１−１０wt./wt.％の濃度で含んでいる請求項１７の組成物。
【請求項１９】
酸化防止剤は、トコフェロール、デターオキシムメシレート、メチルパラベン、エチルパラベン、アスコルビン酸及びそれらの混合物からなる群から選択される請求項１７の組成物。
【請求項２０】
プロテアーゼ阻害剤は、バシトラシン、バシトラシン誘導体、大豆トリプシン及びアプロチニンからなる群から選択される請求項１７の組成物。
【請求項２１】
無機塩は、ナトリウム、カリウム、カルシウム及び亜鉛の塩からなる群から選択される請求項１７の組成物。
【請求項２２】
混合ミセルの薬学的組成物であって、アルカリ金属アルキルサルフェート及び少なくとも３種類の化合物を用いて形成されたミセルに被包された高分子薬剤を含んでおり、前記化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びそれらの混合物又は組合せからなる群から選択される、薬学的組成物。
【請求項２３】
薬学的組成物を作る方法であって、 有効量の高分子薬剤組成物を、適当な溶媒の中で、アルカリ金属アルキルサルフェート及び３種類以上ののミセル形成化合物と混合することを含んでおり、前記化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びそれらの混合物又は組合せからなる群から選択され、 アルカリ金属アルキルサルフェート及びミセル形成化合物の各々は、濃度が組成物全体の０.１−２０wt./wt.％で存在し、アルカリ金属アルキルサルフェートとミセル形成化合物の合計濃度は、組成物全体の５０wt./wt.％よりも少ない濃度である、方法。
【請求項２４】
ａ）高分子薬剤は適当な溶媒の中でアルカリ金属アルキルサルフェートと混合され、第１のミセル組成物を生成し、ｂ）３種類以上の追加のミセル形成化合物は、ステップａの第１ミセル組成物と混合される請求項２３の方法。
【請求項２５】
ミセル形成化合物の１種はアルカリ金属アルキルサルフェートと同時に加えられ、第１ミセル組成物を生成する請求項２４の方法。
【請求項２６】
安定剤を加えるステップをさらに含んでいる請求項２３の方法。
【請求項２７】
防腐剤、酸化防止剤、プロテアーゼ阻害剤及び無機塩のうちの１又は２種以上を、混合ミセル薬学的組成物に加えるステップをさらに含んでいる請求項２３の方法。
【請求項２８】
混合は、磁気攪拌機、プロペラ攪拌機及びソニケータからなる群から選択される高速攪拌機を用いて行われる請求項２３の方法。
【請求項２９】
請求項１の有効量の薬学的組成物を患者に投与することを含んでいる患者の治療方法。
【請求項３０】
投与は経口投与である請求項２９の方法。
【請求項３１】
投与は口腔投与である請求項３０の方法。
【請求項３２】
患者における高分子薬剤の吸収速度を高める方法であって、高分子薬剤を含む組成物を、アルカリ金属アルキルサルフェート及び３種類以上のミセル化合物と共に投与することを含んでおり、前記化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びそれらの混合物又は組合せからなる群から選択される、方法。
【請求項３３】
３種類のミセル形成化合物は、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、ケノデオキシコレート及びグリセリンである請求項４の組成物。
【請求項３４】
３種類のミセル形成化合物は、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、ポリオキシエチレンエーテル及びグリセリンである請求項４の組成物。
【請求項３５】
アルカリ金属アルキルサルフェートとミセル形成化合物の合計濃度は、組成物全体の４wt./wt.％よりも少ない濃度である請求項１の組成物。
【請求項３６】
溶媒は水である請求項１の組成物。
【請求項１】
薬学的組成物であって、 有効量の高分子薬剤と、 アルカリ金属アルキルサルフェートと、 レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びそれらの混合物又は組合せからなる群から選択される３種類以上のミセル形成化合物と、 適当な溶媒と、を含んでおり、 アルカリ金属アルキルサルフェート及びミセル形成化合物の各々は、濃度が組成物全体の約０.１−２０wt./wt.％で存在しており、アルカリ金属アルキルサルフェートとミセル形成化合物の合計濃度は、組成物全体の５０wt./wt.％よりも少なく、 前記高分子薬剤はミセルの形態である薬学的組成物。
【請求項２】
アルカリ金属アルキルサルフェートの濃度は、組成物全体の約５wt./wt.％よりも少ない請求項１の組成物。
【請求項３】
アルカリ金属アルキルサルフェートは、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートである請求項１の組成物。
【請求項４】
アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートはラウリル硫酸ナトリウムである請求項３の組成物。
【請求項５】
３種類以上のミセル形成化合物の各々は、濃度が、組成物全体の約０.１−５wt./wt.％である請求項１の組成物。
【請求項６】
レシチンは、飽和又は不飽和であり、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルエタノールアミン、セファリン及びリゾレシチンからなる群から選択される請求項１の組成物。
【請求項７】
ミセル形成化合物の１種は、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、ポリドカノールアルキルエーテル、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、トリヒドロキシオキソコラニルグリシンの薬学的に許容される塩、ポリオキシエチレンエーテル、ポリオキシエチレンエーテルのアナローグ、ケノデオキシコレート及びそれらの混合物からなる群から選択され、ミセル形成化合物の濃度は、組成物全体の約０.１−５wt./wt.％である請求項１の組成物。
【請求項８】
ヒアルロン酸の塩は、アルカリ金属のヒアルロン酸塩、アルカリ土類のヒアルロン酸塩及びヒアルロン酸アルミニウムからなる群から選択され、前記塩の濃度は組成物全体の約０.１−５wt./wt.％である請求項７の組成物。
【請求項９】
３種類のミセル形成化合物は、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、ポリオキシエチレンエーテル及びレシチンである請求項４の組成物。
【請求項１０】
３種類のミセル形成化合物は、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、デオキシコレート及びグリセリンである請求項４の組成物。
【請求項１１】
３種類のミセル形成化合物は、ポリドカノール９ラウリルエーテル、ポリリジン及びトリオレインである請求項４の組成物。
【請求項１２】
薬剤は、インシュリン、ヘパリン、低分子量ヘパリン、ヒルログ、ヒルゲン、フリジン、インターフェロン、サイトカイン、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、イムノグロビン、化学治療剤、ワクチン、糖蛋白、細菌トキソイド、ホルモン、カルシトニン、グルカゴン様ペプチド、高分子抗生物質、蛋白質基の血栓溶解化合物、血小板阻害剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、遺伝子治療剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド、オピオイド、麻酔薬、鎮痛薬、ステロイド及び鎮痛剤からなる群から選択される請求項１の組成物。
【請求項１３】
薬剤は、インシュリンである請求項１の組成物。
【請求項１４】
組成物のｐＨは、５乃至８の範囲である請求項１の組成物。
【請求項１５】
ミセルのサイズは、約１〜１０ナノメータである請求項１の組成物。
【請求項１６】
溶媒は、水及びエタノールからなる群から選択される請求項１の組成物。
【請求項１７】
フェノール化合物、酸化防止剤、プロテアーゼ阻害剤及び無機塩からなる群から選択される１又は２種以上の要素をさらに含んでいる請求項１の組成物。
【請求項１８】
組成物は、フェノール、ｍ−クレゾール及びそれらの混合物からなる群から選択されるフェノール化合物を、組成物全体の約０.１−１０wt./wt.％の濃度で含んでいる請求項１７の組成物。
【請求項１９】
酸化防止剤は、トコフェロール、デターオキシムメシレート、メチルパラベン、エチルパラベン、アスコルビン酸及びそれらの混合物からなる群から選択される請求項１７の組成物。
【請求項２０】
プロテアーゼ阻害剤は、バシトラシン、バシトラシン誘導体、大豆トリプシン及びアプロチニンからなる群から選択される請求項１７の組成物。
【請求項２１】
無機塩は、ナトリウム、カリウム、カルシウム及び亜鉛の塩からなる群から選択される請求項１７の組成物。
【請求項２２】
混合ミセルの薬学的組成物であって、アルカリ金属アルキルサルフェート及び少なくとも３種類の化合物を用いて形成されたミセルに被包された高分子薬剤を含んでおり、前記化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びそれらの混合物又は組合せからなる群から選択される、薬学的組成物。
【請求項２３】
薬学的組成物を作る方法であって、 有効量の高分子薬剤組成物を、適当な溶媒の中で、アルカリ金属アルキルサルフェート及び３種類以上ののミセル形成化合物と混合することを含んでおり、前記化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びそれらの混合物又は組合せからなる群から選択され、 アルカリ金属アルキルサルフェート及びミセル形成化合物の各々は、濃度が組成物全体の０.１−２０wt./wt.％で存在し、アルカリ金属アルキルサルフェートとミセル形成化合物の合計濃度は、組成物全体の５０wt./wt.％よりも少ない濃度である、方法。
【請求項２４】
ａ）高分子薬剤は適当な溶媒の中でアルカリ金属アルキルサルフェートと混合され、第１のミセル組成物を生成し、ｂ）３種類以上の追加のミセル形成化合物は、ステップａの第１ミセル組成物と混合される請求項２３の方法。
【請求項２５】
ミセル形成化合物の１種はアルカリ金属アルキルサルフェートと同時に加えられ、第１ミセル組成物を生成する請求項２４の方法。
【請求項２６】
安定剤を加えるステップをさらに含んでいる請求項２３の方法。
【請求項２７】
防腐剤、酸化防止剤、プロテアーゼ阻害剤及び無機塩のうちの１又は２種以上を、混合ミセル薬学的組成物に加えるステップをさらに含んでいる請求項２３の方法。
【請求項２８】
混合は、磁気攪拌機、プロペラ攪拌機及びソニケータからなる群から選択される高速攪拌機を用いて行われる請求項２３の方法。
【請求項２９】
請求項１の有効量の薬学的組成物を患者に投与することを含んでいる患者の治療方法。
【請求項３０】
投与は経口投与である請求項２９の方法。
【請求項３１】
投与は口腔投与である請求項３０の方法。
【請求項３２】
患者における高分子薬剤の吸収速度を高める方法であって、高分子薬剤を含む組成物を、アルカリ金属アルキルサルフェート及び３種類以上のミセル化合物と共に投与することを含んでおり、前記化合物は、レシチン、ヒアルロン酸、グリコール酸、乳酸、カモミール抽出物、キュウリ抽出物、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、モノオレイン、モノオレエート、モノラウレート、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、メントール、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、グリセリン、ポリグリセリン、リジン、ポリリジン、トリオレイン、ポリオキシエチレンエーテル、ポリドカノールアルキルエーテル、ケノデオキシコレート、デオキシコレート、それらの薬学的に許容される塩、それらのアナローグ、及びそれらの混合物又は組合せからなる群から選択される、方法。
【請求項３３】
３種類のミセル形成化合物は、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、ケノデオキシコレート及びグリセリンである請求項４の組成物。
【請求項３４】
３種類のミセル形成化合物は、トリヒドロキシオキソコラニルグリシン、ポリオキシエチレンエーテル及びグリセリンである請求項４の組成物。
【請求項３５】
アルカリ金属アルキルサルフェートとミセル形成化合物の合計濃度は、組成物全体の４wt./wt.％よりも少ない濃度である請求項１の組成物。
【請求項３６】
溶媒は水である請求項１の組成物。
【公開番号】特開２０１２−６９３４（Ｐ２０１２−６９３４Ａ）
【公開日】平成２４年１月１２日（２０１２．１．１２）
【国際特許分類】
【外国語出願】
【出願番号】特願２０１１−１５７７４４（Ｐ２０１１−１５７７４４）
【出願日】平成２３年７月１９日（２０１１．７．１９）
【分割の表示】特願２００１−５８３７３７（Ｐ２００１−５８３７３７）の分割
【原出願日】平成１３年５月７日（２００１．５．７）
【出願人】（５０１１２０６２７）ジェネレクス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド (3)
【氏名又は名称原語表記】ＧＥＮＥＲＥＸ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年１月１２日（２０１２．１．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−１５７７４４（Ｐ２０１１−１５７７４４）
【出願日】平成２３年７月１９日（２０１１．７．１９）
【分割の表示】特願２００１−５８３７３７（Ｐ２００１−５８３７３７）の分割
【原出願日】平成１３年５月７日（２００１．５．７）
【出願人】（５０１１２０６２７）ジェネレクス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド (3)
【氏名又は名称原語表記】ＧＥＮＥＲＥＸ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】
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