抗腫瘍活性化合物
【課題】
本発明は、抗腫瘍活性を有する下記一般式（Ｉ）により表される４−ピペリドン誘導体に関する。
【化１】
【解決手段】本発明は一般式（１）で表される４−ピペリドン誘導体及びその酸付加塩に関し、該化合物の合成方法及び抗腫瘍活性を開示する。種々の化合物は、マイクロモル以下の ＩＣ50及びＣＣ50を所持し、結腸癌及び白血病性細胞に対し選択的毒性を有する。さらに、多くの化合物は多剤耐性を反転し得る。
本発明は、抗腫瘍活性を有する下記一般式（Ｉ）により表される４−ピペリドン誘導体に関する。
【化１】
【解決手段】本発明は一般式（１）で表される４−ピペリドン誘導体及びその酸付加塩に関し、該化合物の合成方法及び抗腫瘍活性を開示する。種々の化合物は、マイクロモル以下の ＩＣ50及びＣＣ50を所持し、結腸癌及び白血病性細胞に対し選択的毒性を有する。さらに、多くの化合物は多剤耐性を反転し得る。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗腫瘍活性を有する４−ピペリドン誘導体及びそのその癌治療における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
多くのα，β−不飽和ケトンは細胞毒性及び抗癌作用を示し（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９９年、６巻、１１２５−１１４９頁；Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９９年、４２巻、１３５８−１３６６頁）、そして、核酸中の水酸基及びアミノ基とほとんど又は全く親和性を持たずに、細胞チオールと相互作用すると考えられている（Ｍｕｔｕｓ等、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８９年、１７７巻、２３７−２４３頁；Ｂａｌｕｊａ等、Ｃｈｅｍ．Ｉｎｄ．，１９６４年、２０５３−２０５４頁）。この特性は、特定の抗腫瘍薬において存在する遺伝毒性の特性を失った細胞毒性としてこれらの化合物を開発する可能性を提供する（Ｂｅｖｅｎｕｔｏ等、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１９９３年、８２巻、９８８−９９１頁）。このような化合物のマンニッヒ塩基の形が検討されてきた。例えば、幾つかの共役エノンのマンニッヒ塩基は、チオレーション及びアルキレーションの速度（Ｄｉｍｏｃｌ等、Ｃａｎ Ｊ．Ｃｈｅｍ １９８０年、５８巻、９８４−９９１頁）、そして細胞毒性（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１９７５年、６４巻、２４１−２４９頁）の両方の有意な増加を引き起こすことが示された。しかしながら、下記に示す一般式（Ａ）の共役アリリデンケトンのような化合物は、マウスに対し毒性を有する。
【０００３】
【化１】
Ｒ1＝Ｒ2＝水素原子、Ｃｌ、ＮＯ2、Ｎ（ＣＨ3）2、アルコキシ基又はアルキル基；
Ｒ3＝水素原子又はアルキル基
上記に示した、関連した一般式（Ｂ）の環状類似体が、一般式（Ａ）の化合物の毒性を減少させるために製造された。
【０００４】
化合物Ｂ１（一般式ＢにおいてＲ1＝Ｒ2＝Ｈ）はジエノンの環状マンニッヒ塩基であり、そしてマウスリンパ性白血病Ｐ３８８／ＭＲＩ細胞株について細胞毒性活性を有し、かつ合成ＤＮＡ、ｐｏｌｙ（ｄ（ＡＴ））、と結合する；さらに驚くべきことに、２４０ｍｇ／ｋｇ／日量の５日連続投与はマウスにおける死を誘発しなかった（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、１９９０年、６巻、１８３−１９４頁）。
【０００５】
化合物Ｂ１の種々のＮ−置換誘導体が合成され、検討された：化合物Ｂ１のＮ−３−カルボキシ−２−プロペノイル誘導体が、Ｐ３８８／ＭＲＩ細胞に対して評価された（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ．Ｄｅｌｉｖ．，１９９０年、６巻、１８３−１９４頁）。化合物Ｂ１の、Ｎ−アシル誘導体（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、１９９２年、１０巻、２９１−２９９頁）、Ｎ−アミド誘導体、及びＮ−カ
ルバメート誘導体（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ．Ｄｅｓ．Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、１９９４年、１２巻、１９−２８頁）を、マウスＬ１２１０細胞及び、一連のヒト腫瘍細胞に対してスクリーニングが行われた。
化合物Ｂ１の、Ｎ−アクリロイルアミド（Ｄｉｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００１年、４４巻、５８６−５９３頁）、Ｎ−アミド誘導体（下記一般式Ｃに示す）（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｅｕｒ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００２年、３７巻、９６１−９７２頁）、及びＮ−マレアモイル誘導体（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｅｎｚ．Ｉｎｈｉｂ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００３年、１８巻、３２５−３３２頁）が、マウスＰ３８８及びＬ１２１０細胞株、ヒトＭｏｌｔ ４／Ｃ８及びＣＥＭ Ｔリンパ球に対し評価された。
【０００６】
【化２】
一般式Ｃの化合物はヒトＮ−ミリストイルトランスフェラーゼ及びｆｙｎキナーゼを阻害することが示された。
【特許文献１】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９９年、６巻、１１２５−１１４９頁
【特許文献２】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９９年、４２巻、１３５８−１３６６頁
【特許文献３】Ｍｕｔｕｓ等、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８９年、１７７巻、２３７−２４３頁
【特許文献４】Ｂａｌｕｊａ等、Ｃｈｅｍ．Ｉｎｄ．，１９６４年、２０５３−２０５４頁
【特許文献５】Ｂｅｖｅｎｕｔｏ等、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１９９３年、８２巻、９８８−９９１頁
【特許文献６】Ｄｉｍｏｃｌ等、Ｃａｎ Ｊ．Ｃｈｅｍ １９８０年、５８巻、９８４−９９１頁
【特許文献７】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１９７５年、６４巻、２４１−２４９頁
【特許文献８】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、１９９０年、６巻、１８３−１９４頁
【特許文献９】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、１９９２年、１０巻、２９１−２９９頁
【特許文献１０】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ．Ｄｅｓ．Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、１９９４年、１２巻、１９−２８頁
【特許文献１１】Ｄｉｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００１年、４４巻、５８６−５９３頁
【特許文献１２】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｅｕｒ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００２年、３７巻、９６１−９７２頁
【特許文献１３】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｅｎｚ．Ｉｎｈｉｂ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００３年、１８巻、３２５−３３２頁
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
ヒトの癌のほぼ５０パーセントは、完全に化学療法に抵抗性があるか、または一時的のみの効果であり、その後それらの癌細胞は一般的に用いられている抗癌薬では最早影響を受けない。この現象は多剤耐性（ＭＤＲ）と呼ばれ、そしてある種の腫瘍タイプでは本質的に発現され、その他のものでは化学療法治療に曝露された後にＭＤＲを獲得する。細胞のＭＤＲを抑制又は排除する治療能力は、それゆえに重要な考慮すべき事項である。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の概要
１つの実施態様において、本発明は、現在入手可能な抗癌剤と構造的に相違する新規の抗腫瘍性の化合物を提供する。この構造的多様性は、抗腫瘍性のアルキル化剤を含む現在の薬剤に交差耐性のない化合物を提供し得る。この新規化合物の合成を、腫瘍細胞株に対する細胞毒性（ＩＣ50及びＣＣ50）アッセイにおけるそれ等の活性を証明する実験とともに、ここに開示する。化合物はまた、MDR（多剤耐性）の反転において有用である。
【０００９】
したがって、1つの実施態様において、本発明は、構造一般式（Ｉ）により表される４
−ピペリドン化合物：
【化３】
ここで、
Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立してアルキル基、アルコキシ基、アリール基、又はヘテロアリール基を表し、
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、水素原子、アルキル基、ヒドロキシアルキル基、又はカルボキレートエステル基を表し；
ｍ及びｔはそれぞれ独立して０乃至３の整数であり；
Ａは水素原子又はＡ'を表し、ここで、Ａ'は
【化４】
を表し、
ここで、
ｎは０乃至４の整数を表し、そして、ベンゼン環上の置換基の数を表し；
ｏは０乃至４の整数を表し；
Ｘは（ＣＨ2）r、ＣＯ，ＣＯＯ，ＳＯ，ＳＯ2又はＯを表し、ここでｒは０乃至４の
整数を表し；
ＹはＯ，Ｓ，ＮＨ，Ｎ（アルキル）、Ｎ（アリール）、又は（ＣＨ2）sを表し、ここでｓは０乃至４の整数を表し；Ｚは水素原子、Ｎ（アルキル）2、ＮＨ（アルキル）、Ｎ
（アリール）2、ＮＨ（アリール）、アルキル基、置換されたアルキル基、＋Ｎ（アルキ
ル）3、又は
【化５】
を表し、ここで、ＢはＯ，Ｓ，（ＣＨ2）q、ＮＨ、Ｎ−アルキル、又はＮ−アリール、を表し、そしてｐ及びｑはそれぞれ独立して0乃至４の整数を表し；又はその医薬品として
許容できる塩であるが、ただし、化合物１ａ、１ｂ、及び１ｃの遊離塩基及び塩酸塩は除外されるものを提供する。
【００１０】
その他の実施態様において、本発明は、
一般式（ＩＶ）の化合物を、
【化６】
一般式Ｔ−Ａ'（Ｖ）の化合物と共に塩基の存在下に反応させる工程からなり；
ここで、Ｔはハロゲン原子を表し、そして、Ａ'は
【化７】
を表すところの、本発明の化合物を合成する方法を提供する。
【００１１】
一般式（Ｉ）及び一般式（ＩＶ）は、それぞれ、同じでも異なっていてもよい、２つの置換基Ｒ3を含み、そしてこの明細書に定義されている通りである。一般式（Ｉ）及び一
般式（ＩＶ）は、それぞれ、同じでも異なっていてもよい２つの置換基Ｒ4を含み、そし
てこの明細書に定義されている通りである。
【００１２】
その他の実施態様において、本発明は、癌治療及び多剤耐性を反転させる用途の化合物及びその医薬品としての組成物の使用を提供する。
【００１３】
図面の簡単な説明
図１は、本発明の幾つかの化合物の合成の略図である。
【００１４】
発明の詳細な説明
化学
本発明の化合物は一般式（Ｉ）の化合物を含む。
【００１５】
好ましくは、アルキル基又はアルコキシ基は、置換又は非置換、分枝又は非分枝の炭素原子数１乃至７、好ましくは炭素原子数１乃至５を表す。好ましいアルキル基はメチル基又はエチル基を表す。好ましいアルコキシ基はメトキシ基又はエトキシ基を表す。可能な置換基は当業者に知られ、そしてハロゲン原子、アルコキシ基、アルキル基、フェニル基及び／又はニトロ基を表す。ハロゲン原子はフッ素、塩素、臭素、又はヨウ素であり得、そして好ましくはフッ素又は塩素であり得る。
【００１６】
好ましくは、Ｒ1及びＲ2は、同じでも異なっていても良い置換又は非置換、分枝又は非分枝のアルキル基、アリール基、又はヘテロアリール基を表し、ここで、アルキル基は好ましくは上記に定義したものを表す。アリール基は好ましくは置換又は非置換のフェニル環であり、その置換は好ましくは独立してフェニル環の２，３，４位、又は３，４；２，４；２，３；２，５；、２，６；３，５；３，６；４，６；３，４，５；２，４，６；又は２，３，４位における組み合わせにおいて位置する。置換基は、ハロゲン原子、アルコキシ基、アルキル基、フェニル基、ニトロ基、及びホスホネート基を含み得る。ホスホネート基は、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）2，−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）（Ｏ−アルキル）、−Ｐ（Ｏ）（
Ｏ−アルキル）2、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）（Ｏ−アリール）、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−アリール）2を含む。好ましい置換基は、４−フルオロ、４−クロロ、４−メトキシ、４−ニトロ、４−メチル、３，４−ジメトキシ、３，４−ジクロロ、３，４，５−トリメトキシ、及び２，４，６−トリメトキシである。Ｒ1及びＲ2は願わくばフェニル、４−クロロフェニル、４−ニトロフェニル、及び／又は４−メチルフェニルの何れか１つであり得る。ヘテロアリール基は、好ましくは２，３，又は４−ピリジル、２−チエニル又は２−フリルである。ｍ及びｔの両方は独立して０ないし３から選ばれる如何なる整数でもあり得る。１つの実施態様において、ｍ及びｔは、共に０である。
【００１７】
Ｒ3又はＲ4は独立して、水素原子、アルキル基又はカルボキレートエステル基であり得る。それぞれのＲ3は同じでも異なっていてもよい。それぞれのＲ4は同じでも異なっていてもよい。アルキル基は好ましくは上記に定義したものを表す。カルボキシレートエステル基は、アルキルカルボキシレート基を含み、そして好ましくは、メチル又はエチルカルボキシレート基である。１つの実施態様において、Ｒ3及びＲ4は共に水素原子である。
【００１８】
ここに言及した化合物：一般式（Ｉ）中、Ａが水素原子、Ｒ3＝Ｒ4＝水素原子、そして、ｍ及びｔは０である場合；Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル基（１ａ）；Ｒ1＝Ｒ2＝４−クロロフェニル基（１ｂ）；及びＲ1＝Ｒ2＝４−ニトロフェニル基（１ｃ）である。
【００１９】
本発明の化合物は、以下を含むが、それらに限定されるものではない：
ｉ）一般式（Ｉ）中、Ａ＝水素原子、Ｒ3＝Ｒ4＝水素原子、そして、ｍ及びｔは０である場合：Ｒ1＝Ｒ2＝４−メチルフェニル基（１ｄ）
（ｉｉ）一般式（Ｉ）中、ＡがＡ‘であり、そしてＹ（ＣＨ2）0Ｚがベンゼン環の４−位に位置し、そして、Ｒ3＝水素原子、Ｒ4＝水素原子、Ｘ＝ＣＯ；ｍ及びｔ＝０；ｎ＝１、Y＝０；ｏ＝２である場合：
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；Ｚ＝Ｎ（ＣＨ3）2（３ａ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−クロロフェニル；Ｚ＝Ｎ（ＣＨ3）2（３ｂ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−ニトロフェニル；Ｚ＝Ｎ（ＣＨ3）2（３ｃ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−メチルフェニル；Ｚ＝Ｎ（ＣＨ3）2（３ｄ）
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；Ｚ＝Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2（４ａ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−クロロフェニル；Ｚ＝Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2（４ｂ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−ニトロフェニル；Ｚ＝Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2（４ｃ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−メチルフェニル；Ｚ＝Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2（４ｄ）
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；Ｚ＝１−ピペリジル（５ａ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−クロロフェニル；Ｚ＝１−ピペリジル（５ｂ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−ニトロフェニル；Ｚ＝１−ピペリジル（５ｃ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−メチルフェニル；Ｚ＝１−ピペリジル（５ｄ）
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；Ｚ＝４−モルフォリニル（６ａ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−クロロフェニル；Ｚ＝４−モルフォリニル（６ｂ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−ニトロフェニル；Ｚ＝４−モルフォリニル（６ｃ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−メチルフェニル；Ｚ＝４−モルフォリニル（６ｄ）
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；Ｚ＝＋Ｎ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）2I-（７ａ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−クロロフェニル；Ｚ＝＋Ｎ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）2I-（７ｂ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−ニトロフェニル；Ｚ＝＋Ｎ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）2I-（７ｃ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−メチルフェニル；Ｚ＝＋Ｎ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）2I-（７ｄ）
（ｉｉｉ）一般式（Ｉ）中Ａ＝水素原子、Ｒ3＝Ｒ4＝水素原子、そして、ｍ及びｔは０である場合：
Ｒ1＝Ｒ2＝２−チエニル基（８ｄ）
（ｉｖ）一般式（Ｉ）中、ＡがＡ‘であり、そしてＹ（ＣＨ2）0Ｚがベンゼン環の４−位に位置し、そして、Ｒ3＝Ｒ4＝水素原子、Ｘ＝ＣＯ；ｍ及びｔ＝０；ｎ＝１；Ｙ＝Ｏ；ｏ＝２である場合：
Ｒ1＝Ｒ2＝２−チエニル；Ｚ＝Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2（９ａ）
（ｖ）一般式（Ｉ）中、ＡがＡ‘であり、そしてＹ（ＣＨ2）0Ｚ＝水素原子、そしてｍ及びｔ＝０である場合：
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；及びＲ3＝Ｒ4＝水素原子、Ｘ＝ＣＯ；ｎ＝１（２ａ）
（ｖｉ）一般式（Ｉ）中、ＡがＡ‘であり、そしてＹ（ＣＨ2）0Ｚがベンゼン環の４−位に位置し、そしてＲ3＝Ｒ4＝水素原子、Ｘ＝ＣＯ；ｎ＝１；Ｙ＝Ｏ；ｏ＝０、そして、ｍ及びｔが０である場合：
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；Ｚ＝ＣＨ3（２ｂ）
【００２０】
一般式（Ｉ）の化合物はその酸付加塩を含む。“酸付加塩”というのは、これは、シュウ酸塩のような単離、精製、及び保存のために形成され得る任意の塩、及び塩酸塩、硫酸塩、酢酸塩、及びクエン酸塩のような宿主へ化合物を投与する目的での医薬品として許容できる塩を意味する。
【００２１】
合成
一般式（Ｉ）の化合物は、以下の反応工程により合成し得る：
【化８】
ここで、ＡはＡ‘を表し、この意味は前記に論じられたものと同様のものを表す。Ｔはハロゲン原子を表し、前記において論じられたものと同様のものを有する。
【００２２】
一般式（Ｉ）の化合物は、一般式（ＩＶ）の化合物を一般式（Ｖ）の化合物と共に不活性溶媒中で塩基の存在下反応させることにより得られ得る。用いられる塩基は、炭酸カリウム、炭酸ナトリウムのような無機塩基又はピペリジン、ピロリジン、モルフォリン等のような二級アミン、又はトリエチルアミンのような三級アミンであり得、水素化ナトリウム等のような金属水素化物等が１−５当量の量で用いられ得る。溶媒は、例えば、極性非プロトン性溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、アセトニトリル）又はハロゲン化炭化水素（例えば、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン）であり得、その溶媒は単独で用いても、併用して用いてもよい。反応は、−１０℃乃至反応において採用された溶媒の沸点の温度において行われ、そして０．５乃至２４時以内に完了する。
【００２３】
出発化合物（ＩＶ）は、文献の手順（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００１年、４４巻、５８６−５９３頁）により合成し得る。一般式（ＩＶ）中の置換基は、一般式（Ｉ）の化合物で言及したものの任意のものであり得る。出発化合物（Ｖ）は文献中に記載された方法（Ｊｏｎｅｓ等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ，１９８４年、２７巻、１０５７−１０６６頁）により合成し得る。
【００２４】
上記の工程中の中間体及び所望の化合物は、有機合成化学において用いられる慣用の精製方法、例えば、ろ過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶化及び様々な種類のクロマトグラフィーにより単離及び精製し得る。中間体はまた、単離せずに引き続く反応に用いられ得る。
【００２５】
本発明の酸付加塩は、塩基化合物を、水性溶媒媒体又はメタノール又はエタノールのような好適な有機溶媒中の実質的に当量の選択された無機又は有機酸を用いて処理することにより容易に合成し得る。注意深い溶媒の留去の後、所望の固体塩を得る。
【００２６】
本発明の塩基化合物の医薬品として許容できる酸付加塩を合成するために用いられる酸
は、無毒性の酸付加塩を形成する酸であり、即ち、医薬品として許容できるアニオンを含む塩であり、例えば、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩又は重硫酸塩、リン酸塩又は過リン酸塩（ａｃｉｄ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩又は酸性クエン酸塩、酒石酸塩又は酸性酒石酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、サッカラート、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩及びパモエート［即ち、１，１'−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエート）］塩であり得る。
【００２７】
化合物（Ｉ）の四級塩が所望される場合、遊離塩基の形にある化合物（Ｉ）は、好適な溶媒中に溶解され、次いで、ハロゲン化アルキルの添加により塩を形成する。反応は０℃ないし反応に採用された溶媒の沸点までの温度において行われ、そして反応は０．５ないし２４時間で完了する。
【００２８】
化合物（Ｉ）及びその酸付加塩は水又は種々の溶媒の付加化合物の形であり得、これらもまた、本発明の範疇である。
【００２９】
生物学的活性
本発明の化合物は、癌治療、特に結腸癌及び白血病に用いられ得る。さらに、本化合物は、抗多剤耐性の特性を示す。
【００３０】
本発明の化合物（化合物１−７）を、ヒトＭｏｌｔ ４／Ｃ８及びＣＥＭ Ｔリンパ球を用い処理することによりトランスフェクトしたヒト細胞についてのその細胞毒性を評価した。
さらに、それらを、マウスＬ１２１０細胞の増殖を阻害する能力、即ち多くの臨床的に有用な抗癌剤の能力を評価した。結果を、表１にＩＣ50（マイクロモル）として示す。ＩＣ50（マイクロモル）は、細胞の増殖を５０％まで抑制するために必要な化合物の濃度を示す。結果は化合物１０及びメルファランと比較する。メルファランは、細胞構成要素をアルキル化することによりその効果を発揮する抗がん剤である。ほとんど全ての場合において、本発明の化合物は、Ｍｏｌｔ ４／Ｃ８及びＣＥＭアッセイの両方においてメルファランより強力であった。
【００３１】
本発明の多くの化合物を、さらに種々のヒト悪性細胞株について評価した。９の異なる腫瘍性疾患、即ち、白血病、黒色腫、非小細胞肺癌、結腸癌、中枢神経系癌、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌及び乳癌からの平均して４９細胞株を用いた。細胞株の大部分に対し、試験した化合物は、表２に示すようにメルファランのものより低値の平均ＩＣ50値を有していた。例えば、６ｂ及び６ｄは、それぞれメルファランの４８倍及び３８倍以上の有効性を有していた。特に、それらのＩＣ50は結腸及び白血病性腫瘍について低値であった。
【００３２】
新規の抗腫瘍性剤の大切な特徴は、対応する正常組織よりも悪性腫瘍細胞に対しより高い毒性を示すことである。細胞株についての細胞毒性の違いは、化合物が、一般的な殺生物剤とは対照的に、選択的な毒性を示しており；そのような選択性は、関連非悪性細胞についてよりも腫瘍細胞の選択的な致死を生み出すことなのかもしれない。したがって、各々の化合物の選択的指標（ＳＩ）値は、化合物に対して最も感受性の高い細胞株と最も感受性の低い細胞株との間のＩＣ50値の比として計算した（これもまた表２に示す）。アミド類３ｂ、４ａ、６ａ、６ｂ、６ｄ及び７ｄは、メルファランよりも、より選択的であり、特に４ａ、６ｂ及び６ｄがより選択的であった。
【００３３】
平均ＩＣ50グラフを、既に記載（Ｍ．Ｒ．Ｇｒｅｖｅｒ、Ｓ．Ａ． Ｓｃｈｅｐａｒｔｓｚ，Ｂ．Ａ．Ｃｈａｂｎｅｒ，Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１９巻(１９９２年)６２２−６３８頁）されているように計算した。平均グラフの再検討は、一般的に、化合物のＩＣ50値は、その他の細胞株よりも、結腸及び白血病性腫瘍について、低値であることを明ら
かにした。結腸及び白血病性細胞株の多くのＩＣ50値は全ての細胞株の値よりも低値であったので、これらの悪性腫瘍群への選択的毒性は、表２において明らかである。結腸癌に対する効果的な薬剤は、５−フルオロウラシルである。表２のデータは、表２に示した６種の結腸癌細胞株についての、本検討において合成した化合物のＩＣ50値は、６７％のケースにおいて、５−フルオロウラシルのものよりも低値であること示している。メルファランは、併用化学療法として慢性白血病の治療に用いられており、そして、Ｋ−５６２、ＰＲＭＩ−８２２６．ＨＬ−６０（ＴＢ）及びＳＲ細胞株に対し行われた比較対照の８０％において、シリーズ１，３−７中の化合物はメラルファンよりも低いＩＣ50値を有していた。一連の約４９種のヒト腫瘍細胞株に対しての代表化合物の評価から得られる一般的な結論は、それらの有効性は、実質的に一定の臨床的に用いられる薬剤よりも大きいこと、また、それらが結腸癌及び白血病細胞について特に毒性を有することである。
【００３４】
さらに、化合物をヒト扁平上皮癌（ＨＳＣ−２及びＨＳＣ−４）及びヒト前骨髄球性白血病腫瘍（ＨＬ−６０）について評価し、及び正常細胞、即ち、ヒト歯肉線維芽細胞（ＨＧＦ）、ヒト髄質細胞（ＨＰＣ）及びヒト歯周靭帯線維芽細胞（ＨＰＬＦ）と比較した。これらの３種類の細胞株のＣＣ50値もまた表３に示した。ＣＣ50（マイクロモル）は、細胞の５０％を致死させるのに必要な化合物の濃度を示す。これらのデータを表３に示す。化合物のほとんどはＣＣ50値が１０μモル以下であり、そして３ｃ、４ｃ、５ｃ、及び６ｃの平均ＣＣ50値は、マイクロモル以下である。さらにまた、シリーズ１及び３乃至７の化合物のほとんど全ては、確立された抗癌剤のメルファランよりも、より低い平均ＣＣ50値を有する。
【００３５】
化合物の更なる評価を、これらが多剤耐性（ＭＤＲ）を反転する能力を有するか及び／又は悪性細胞への選択的毒性を示すかについて決定するために行った。シリーズ１及び３−７の化合物の全てを、マウスＬ−５１７８リンパ腫細胞を用いて、それらのＭＤＲの反転能力を試験した。ＭＤＲ反転を測定するためのアッセイは、ヒトＭＤＲ１遺伝子トランスフェクションされたマウスＬ−５１７８リンパ腫細胞を用いた。ローダミン１２３の濃度を、処理及び未処理のトランスフェクト細胞及び親細胞で測定し、蛍光強度の比を蛍光活性比（ＦＡＲ）値とする。ＭＤＲは、細胞からの化合物の流出の増加にとりわけ依存しているため、１以上のＦＡＲ値は、ＭＤＲの反転が生じたことを示す。結果をまた表３に示す。シリーズ３−６の化合物の全てにおいてＭＤＲ反転を示した。非常に大きなＦＡＲ値が、４μｇ／ｍＬの濃度を用いた化合物の多くにおいて得られた。対照薬剤ベラパミル（ｖｅｒａｐａｍｉｌ）１０μｇ／ｍＬの濃度と比較して、本発明の化合物のＦＡＲ値は、ベラパミルのものの８乃至３２倍の範囲であった。
【００３６】
ＭＤＲを反転させ、及び抗腫瘍効果を示す化合物は双峰分布として分類される。それらは、これらの効果の１つのみを有するそれらの化合物よりも優れている。本発明の化合物は、抗腫瘍薬剤、ＭＤＲ反転、又は両方の効能の何れにも用いられ得る。
【００３７】
投与
本発明の組成物は、１以上の医薬品として許容できる担体を用い、慣用の方法により処方され得る。したがって、本発明の活性化合物は、経口、口腔内、鼻腔内、非経口（例えば、静脈内、筋肉内又は皮下）、局所又は直腸投与又は好適な吸入又は吹送による投与の形態に形成し得る。
【００３８】
経口投与のためには、医薬品組成物は、医薬品として許容できる賦形剤例えば、結合剤（例えば、アルファ化したとうもろこしデンプン、ポリビニルピロリドン又はヒドロキシプロピルメチルセルロース）；充填剤（例えば、ラクトース、マイクロクリスタリンセルロース又はリン酸カルシウム）；潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク又はシリカ）；崩壊剤（例えば、ジャガイモデンプン、又はデンプングリコール酸ナトリウ
ム）；又は湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）等と共に慣用の方法により製造されたタブレット（錠剤）又はカプセルの形をとり得る。タブレットは、当業者に良く知られている方法によりコートされ得る。経口投与のための液体剤形は、例えば、溶液、シロップ又は懸濁液の剤形を取り得、又はこれらは、使用前に水又はその他の好適な媒体と共に形成するための乾燥製品として提供し得る。そのような液体製品は、医薬品として許容できる添加物、例えば、懸濁化剤（例えば、ソルビトールシロップ、メチルセルロース又は硬化食用脂）；乳化剤（例えばレシチン又はアラビアゴム）；非水溶性媒体（例えば、アーモンド油、油状エステル又はエチルアルコール）；及び防腐剤（例えば、メチル又はプロピル ｐ−ヒドロキシ安息香酸塩又はソルビン酸）のようなものと共に慣用の方法により、製造し得る。
【００３９】
口腔投与のためには、組成物は、慣用の方法により形成されたタブレット又はトローチの形をとり得る。
【００４０】
本発明の化合物はまた、当業者に良く知られている方法による持続投与のために処方され得る。そのような剤形は、米国特許第３，５３８，２１４号明細書、米国特許第４，０６０，５９８号明細書、米国特許第４，１７３，６２６号明細書、米国特許第３，１１９，７４２号明細書及び米国特許第３，４９２，３９７号明細書に見られ、これらは本明細書に全て参照としてここに取り込まれる。
【００４１】
本発明の化合物は、慣用のカテーテル技術を用いること又は注入を含む注射による非経口投与のために処方され得る。注射のための剤形は投薬形態単位で、例えば、アンプル中又は複数回投与用容器中に添加した防腐剤とともに供し得る。組成物は、油状又は水溶性媒体中の懸濁液、溶液又は乳剤として形成し得、及び懸濁化、安定化及び／又は分散化剤のような配合剤を含有し得る。或いは、活性成分は、使用前に好適な媒体、例えば、滅菌化発熱物質フリーの水を用いて再形成するための粉末形態中に存在し得る。
【００４２】
本発明の化合物はまた、例えば、ココアバター又はその他のグリセリドの慣用基薬を含む坐薬を含むもののような坐薬又は停留浣腸剤のような直腸内投与組成物として処方し得る。
【００４３】
鼻腔内投与又は吸入による投与のために、本発明の活性化合物は、溶液、乾燥粉末剤形、又は患者により押し出す又はポンピングされるポンプ噴霧容器からの懸濁液、又は好適な推進剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、ヘプタフルオロアルカン、二酸化炭素又はその他の好適なガスを用い、加圧容器又はネブライザーからのエアロゾルスプレーとして好適に送達される。加圧されたエアロゾルの場合においては、用量単位は、計算された量を送達するためのバルブを提供することにより決定し得る。加圧された容器又はネブライザーは、活性化合物の溶液又は懸濁液を含み得る。吸入又は吹送に用いるためのカプセル及びカートリッジ（例えば、ゼラチンで製造されたもの）は、本発明の化合物、及びラクトース又はスターチのような好適な粉末基剤の粉末混合物を含有するよう処方され得る。
【００４４】
医薬品として許容できるその塩類及び溶媒和物類を含む本発明の化合物は、単独で使用され得るが、一般的に、化合物（活性成分）が医薬品として許容できる補助剤、希釈剤又は担体と併せたものである医薬品組成物の形で投与されるであろう。投与経路に依存して、医薬品組成物は、全て、全組成に基づく質量パーセントにより、好ましくは０．０５乃至９９％ｗ（質量パーセント）、より好ましくは０．１０乃至７０％ｗの活性成分を含有し、そして、１乃至９９．９５％ｗ、より好ましくは３０乃至９９．９０％ｗの医薬品として許容できる補助剤、希釈剤又は担体を含有するであろう。
【実施例】
【００４５】
合成
一連の１乃至７の化合物の製造において採用した合成化学経路を図１に概説した。シリーズ１中の化合物を、種々のアリールアルデヒド及び４−ピペリドンとの間の酸触媒された縮合により合成した。異なるアロイルクロリドを用いた１ａの反応は、２ａ、ｂの単離に至った。４−ヒドロキシ安息香酸メチルと２−ジメチルアミノエチル塩酸塩とのアルキル化反応は、対応するエーテルを生じ、その加水分解により塩酸塩として単離された４−（２−ジメチルアミノエチルオキシ）安息香酸を合成した。この化合物を、それぞれ３ａ−ｄの生成をもたらす１ａ−ｄを用いて縮合して、対応する酸クロリドへ変換した。同様の合成経路を、２−ジメチルアミノエチル塩酸塩の代わりに、関連するＮ−（２−クロロエチル）アミンの塩酸塩を用いて４ａ−ｄ、５ａ−ｄ及び６ａ−ｄの生成に至った。
ヨウ化メチルを用い４ａ−ｄより派生した遊離塩基の反応は、対応する４級アンモニウム塩７ａ−ｄを生じた。さらに、シリーズ４中の化合物に構造的に関連する、４−（２−ジエチルアミノエトキシ）安息香酸１０の合成を行った。
【００４６】
図１において、シリーズ１、３乃至７中の置換基Ｒは以下の通りである：ａ＝Ｒ＝水素原子；ｂ：Ｒ＝塩素原子；ｃ：Ｒ＝ＮＯ2；ｄ：Ｒ＝ＣＨ3。シリーズ２中のＹ（ＣＨ２）ｏＺ部分の性質は、ａ：Ｙ（ＣＨ2）oＺ＝水素原子；ｂ：Ｙ（ＣＨ2）oＺ＝ＯＣＨ3であ
る。以下の試薬を合成経路中において用いた、即ち、ｉ＝ＨＣｌ／ＣＨ3ＣＯＯＨ；ｉｉ
＝ＣｌＣＯＣ6Ｈ4Ｙ（ＣＨ2）oＺ；ｉｉｉ＝ＣｌＣＨ2ＣＨ2ＺＨＣｌ／Ｋ2ＣＯ3；ｉｖ＝ＮａＯＨ／ＨＣｌ；ｖ＝ＳＯＣｌ2；ｖｉ＝１ａ−ｄ；ｖｉｉ＝ＣＨ3Ｉ／Ｋ2ＣＯ3。
【００４７】
融点は校正しない。元素分析（Ｃ，Ｈ，Ｎ）は１ｄ及び２乃至７において、アルベルタ大学、化学部、微量分析研究室において実施し、そして計算値の０．４％の範囲内であった。化合物３ｂ−ｄ、４ａ、５ａ、ｄ、６ａ、ｃ、ｄ及び７ａ、ｄは半水化物として単離され、７ｂは一水和物として、そして５ｃは１．５モルの水の結晶として得た。シリーズ１−１０の全ての化合物の1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ）及び代表的な化合物
の13Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ）を、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＭ ５００ＦＴ ＮＭＲ機を用いて重水中で測定した。
【００４８】
１ａ−ｄの合成：化合物１ａ−ｄを文献的方法により合成した（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ４４巻、５８６頁（２００１年））。一般的に、適切なアリールアルデヒド（３６．７１ｍｍｏｌ）を酢酸（３５ｍＬ）中の４−ピペリドン塩酸塩一水和物（１３．０３ｍｍｏｌ）の懸濁液に加えた。この混合溶液を乾燥塩化水素を透明な溶液が得られる時間である０．５時間の間通した。室温で２４時間攪拌した後、沈殿物を集め、そしてアセトン（２５ｍＬ）中の飽和炭酸カリウム溶液（２５ｗ／ｖ％、２５ｍＬ）の混合水溶液中へ添加した；得られた混合物を０．５時間攪拌した。遊離塩基を集め、水（５０ｍＬ）で洗浄し、そして乾燥した。化合物を再結晶した。１ｄはクロロホルム−エタノールより再結晶化し目的物を得た。
【００４９】
３，５−ビス（４−メチルフェニルメチレン）−４−ピペリドン（１ｄ）．Ｍ．ｐ．１８０−１８１℃。収率：７９％。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：２．４０（ｓ，６Ｈ），４．１６（ｓ，４Ｈ），７．２４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．７５Ｈｚ），７．３１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．８５Ｈｚ），７．８０（ｓ，２Ｈ）．観測値Ｃ，８２．８７；Ｈ，６．９４；Ｎ，４．６０％．分析値（Ｃ26Ｈ21ＮＯ2）はC,８３．１３；Ｈ，６．９８；Ｎ ４．６２％
を必要とする。
【００５０】
２ａ，ｂの合成のための一般的な方法：アロイルクロリド（０．０１５ｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（５０ｍＬ）溶液を、１ａ（０．０１ｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．０３ｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタンン（３０ｍＬ）の溶液へ５〜６℃において０
．５時間以上かけて添加した。室温で６時間攪拌した後、溶媒を減圧留去した。炭酸カリウム（１０ｗ／ｖ％、５０ｍＬ）水溶液を残渣に加え、そして生じたスラリーを室温で４時間攪拌した。沈殿物を集め、水で洗浄し、そして乾燥した。生成物は、クロロホルム−メタノールから再結晶化によって精製した。
【００５１】
１−ベンゾイル−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン（２ａ）。
融点１６５−１６６℃。収率：８５％。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：４．７２（ｂｓ，２Ｈ），５．０４（ｂｓ，２Ｈ），７．０６（ｔ，２Ｈ），７．２２（ｄ，４Ｈ），７．３８（ｂｓ，９Ｈ），７．９２（ｓ，２Ｈ）．観測値Ｃ，８２．０２；Ｈ，５．４９；Ｎ，３．５６％．分析値（Ｃ26Ｈ21ＮＯ2）はＣ，８２．３０；Ｈ，５．５８；Ｎ ３．６９
％を必要とする。
【００５２】
１−（４−メトキシベンゾイル）−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン（２ｂ）。融点１７７−１７８℃。収率：７２％。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）３．７０（ｓ，３Ｈ），４．８７（ｂｓ，４Ｈ），６．５１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．６２Ｈｚ），７．１７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．６９Ｈｚ），７．４０（ｂｓ，１０Ｈ），１０．０７（ｓ，２Ｈ）．観測値Ｃ，７９．１９；Ｈ，５．７２；Ｎ，３．２５％．分析値（Ｃ27Ｈ33ＮＯ3）はＣ，７９．１９；Ｈ，５．６６；Ｎ ３．４２％を必要とする。
【００５３】
シリーズ３−６の合成の一般的な手順：シリーズ３−６の化合物の合成に用いた一般的な方法を４ａの合成により例示した。１０の混合物（下記参照）（４．１０ｇ、０．０１５ｍｏｌｅ）、塩化チオニル（２３．１０ｇ、２ｍｏｌ）及びジメチルホルムアミド（０．０１ｍＬ）を３時間還流し加熱した。減圧下留去により相当する酸クロリドの単離に至り、これを１，２−ジクロロエタン（５０ｍＬ）に溶解し、そして１ａ（２．７５ｇ、０．０１ｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３．０３ｇ、０．０３ｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン(３０ｍＬ)の溶液に５−６℃において０．５時間かけて加えた。室温で６時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去した。得られた固体を炭酸カリウム（１０ｗ／ｖ％、５０ｍＬ）の水溶液に懸濁させ、そして室温で４時間攪拌した。沈殿物を集め、水で洗浄し、乾燥して１−［４−（２−ジエチルアミノエチルオキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン、即ち対応する４ａの遊離塩基を得た。塩酸塩は、この遊離塩基をイソプロパノール及びクロロホルム（３：２、５０ｍＬ）の混合液中に溶解し、そして活性炭（０．５ｇ）の添加後、混合物を室温で１時間攪拌して合成した。溶液を乾燥塩化水素ガスで酸性にし、そしてその混合液を室温で１時間攪拌した。溶媒を減圧下留去し、粘着性の油状物を得て、そこにアセトン（５０ｍＬ）を加え、そして混合物を０．５時間還流下加熱した。室温まで冷却し、沈殿を集め、そしてアセトンから再結晶化し４ａを得た。類似体の４ｂ−ｄは、イソプロパノールを４ｂ及び４ｃの再結晶化溶媒として用いたことを除いて、同様の手順で合成した。シリーズ３、５及び６は同様の方法で、４−ヒドロキシ安息香酸メチル及び適当な２−クロロ−Ｎ−置換のエチルアミン塩酸塩より得た。３ａ−ｄ、５ａ，ｂ，及び６ａ−ｄの再結晶化に用いた溶媒はイソプロパノールであった。ジエチルエーテル−メタノールを５ｃの精製に用い、一方、５ｄはアセトンより再結晶化した。
【００５４】
［４−（２−ジメチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩（３ａ）．融点２４４−２４５℃．収率：７６％。1
Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：２．８３（ｓ，６Ｈ），３．４６（ｔ，２Ｈ），４．２
２（ｔ，２Ｈ），４．８０（ｂｓ，４Ｈ），６．５５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．５５Ｈｚ），７．０８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．６５Ｈｚ），７．３７（ｂｓ，１０Ｈ），７．７６（ｓ，２Ｈ），１１．０８（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，７１．８０；Ｈ，５．９０；Ｎ，５．５０％，分析値（Ｃ30Ｈ31ＣｌＮ2Ｏ3）はＣ，７１．６３；Ｈ，６．２１；Ｎ ５．５７％を必要とする。
【００５５】
３，５−ビス（４−クロロフェニルメチレン）−１−［４−（２−ジメチルアミノエトキシ）フェニル−カルボニル］−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（３ｂ）。融点２５０−２５１℃．収率：７１％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：２．９２（ｓ，６Ｈ），３．４７（ｔ，２Ｈ），４．２２（ｔ，２Ｈ），４．８１（ｂｓ，４Ｈ），６．５８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．６１Ｈｚ），７．１４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．６５Ｈｚ），７．３９（ｍ，８Ｈ），７．８２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．７５Ｈｚ），１２．８４（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，６２．４５；Ｈ，５．１５；Ｎ，４．８６％．分析値（Ｃ30Ｈ29Ｃｌ3Ｎ2Ｏ3．０．５
Ｈ2Ｏ）はＣ，６２．０２；Ｈ，５．０３；Ｎ ４．８２％を必要とする。
【００５６】
１−［４−（２−ジメチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−ニトロフェニルメチレン）４−ピペリドン塩酸塩半水和物（３ｃ）．
融点２１５−２１７℃．収率：６２％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：２．７８（ｓ，６Ｈ），３．４２（ｔ，２Ｈ），４．２１（ｔ，２Ｈ），４．８５（ｂｓ，４Ｈ），６．７０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．２８Ｈｚ），７．１５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．２５Ｈｚ），７．７２（ｍ，４Ｈ），７．８２（ｓ，２Ｈ），１０．２７（ｂｓ，４Ｈ），１１．０８（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，５９．４５；Ｈ，４．９３；Ｎ，９．０８％．分析値（Ｃ30Ｈ29ＣｌＮ4Ｏ7．０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，５９．８５；Ｈ，４．８５；Ｎ ９．３０％を必
要とする。
【００５７】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−メチルフェニル−メチレン）−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（３ｄ）．融点２２４−２２６℃．収率：６４％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：２．４０（ｓ，６Ｈ），２．９０（ｔ，２Ｈ），３．４３（ｔ，２Ｈ），４．４２（ｔ，２Ｈ），４．８７（ｂｓ，４Ｈ），６．５８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．１０Ｈｚ），７．２３（ｍ，１０Ｈ），７．８８（ｓ，２Ｈ），１３．０８（ｂｒｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，７１．３８；Ｈ，６．７５；Ｎ，５．２１％．分析値（Ｃ32Ｈ35ＣｌＮ2Ｏ3．０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，７１．１６；Ｈ，６．５３
；Ｎ ５．１８％を必要とする。
【００５８】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（４ａ）．融点１８４−１８５℃．収率：７２％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４５（ｔ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．２２（
ｍ，４Ｈ，２ｘＮＣＨ2ＣＨ3），３．４０（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ），４．４１（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ），４．８５（ｂｓ，４Ｈ，２ｘ ピペリジルのＮＣＨ2），６
．５０（ｄ，２Ｈ，アリールのＨ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），７．１７（ｄ，２Ｈ，アリールのＨ，Ｊ＝９．０５Ｈｚ），７．４４（ｂｓ，１０Ｈ，アリールのＨ），７．９２（ｓ，２Ｈ，＝ＣＨ），１２．７０（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１８７
．４１（ＣＯ），１７０．１４（−ＣＯ−Ｎ−），１５８．７７，１３４．８８，１３２．２１，１３０．７７，１３０．０８，１２９．７０，１２９．２５，１２７．９９，１１４．１９，６３．０５（ＯＣＨ2），５０．９５（ＯＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ），４７．３９
（ＮＣＨ2），１０．８９（ＣＨ3）．観測値Ｃ，７１．２２；Ｈ，６．４１；Ｎ，４．７９％．分析値（Ｃ32Ｈ35ＣｌＮ2Ｏ3．０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，７１．１６；Ｈ，６．７１；
Ｎ ５．１８％を必要とする。
【００５９】
３，５−ビス（４−クロロフェニルメチレン）−１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニル−カルボニル］−４−ピペリドン塩酸塩（４ｂ）。融点２１０−２１１℃．収率：６８％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４５（ｔ，６Ｈ），３．２２（ｂｓ，４Ｈ），３．４１（ｔ，２Ｈ），４．４５（ｔ，２Ｈ），４．８１（ｂｓ，４Ｈ），６．５７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．３４Ｈｚ），７．１７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．３０Ｈｚ），７．３１（ｍ，４Ｈ），７．４１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．５４Ｈｚ），７．８４（ｓ，２Ｈ）
，１２．７０（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，６４．２８；Ｈ，５．２６；Ｎ，４．９８％．分析値（Ｃ32Ｈ33Ｃｌ3Ｎ2Ｏ）はＣ，６４．０６；Ｈ，５．５４；Ｎ ４．６７％を必要とする。
【００６０】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−ニトロフェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩（４ｃ）．融点１９７−１９８℃．収率：６１％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４６（ｔ，６Ｈ），３．１９（ｂｓ，２Ｈ），３．２６（ｂｓ，２Ｈ），４．４５（ｔ，２Ｈ），４．４５（ｔ，２Ｈ），４．８２（ｂｓ，４Ｈ），６．６０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．２５Ｈｚ），７．１４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．２５Ｈｚ），７．５１（ｂｓ，４Ｈ），７．８９（ｓ，２Ｈ），１０．２６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．３５Ｈｚ），１２．５７（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，６２．０６；Ｈ，５．３８；Ｎ，９．１９％．分析値（Ｃ32Ｈ35ＣｌＮ4Ｏ7）はＣ，６１．８８；Ｈ，５．３６；Ｎ ９．０２％を必要とする。
【００６１】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−メチルフェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩（４ｄ）．融点２０４−２０５℃．収率：６２％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４５（ｔ，６Ｈ），２．４０（ｓ，６Ｈ），３．２２（ｍ，４Ｈ），３．４０（ｔ，２Ｈ），４．４６（ｔ，２Ｈ），４．８７（ｂｓ，４Ｈ），６．５７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．５３Ｈｚ），７．２３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．３７Ｈｚ），７．３２（ｍ，４Ｈ），７．８８（ｓ，２Ｈ），１２．６２（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ７３．３４；Ｈ，６．８６；Ｎ，５．３６％．分析値（Ｃ34Ｈ39ＣｌＮ2
Ｏ3）はＣ，７３．０４；Ｈ，７．０３；Ｎ ５．０１％を必要とする。
【００６２】
１−［４−｛２−（１−ピペリジニル）エトキシ｝フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−メチルフェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（５ａ）．融点２１４−２１５℃．収率：５２％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４３（ｔ，１Ｈ），１．８８（ｔ，３Ｈ），２．２８（ｑ，２Ｈ），２．７６（ｔ，２Ｈ），３．３４（ｂｓ，２Ｈ），３．６０（ｔ，２Ｈ），４．４４（ｂｓ，２Ｈ），４．８６（ｂｓ，４Ｈ），６．５０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．７５Ｈｚ），７．１６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．３８（ｂｓ，１０Ｈ），７．９０（ｓ，２Ｈ），１２．６１（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ７１．４８；Ｈ，６．３８；Ｎ，５．０４％．分析値（Ｃ33Ｈ35ＣｌＮ2Ｏ3・０．５Ｈ2Ｏ）は
Ｃ，７１．７９；Ｈ，６．３８；Ｎ ５．０７％を必要とする。
【００６３】
３，５−ビス（４−クロロフェニルメチレン）−１−［４−｛２−（１−ピペリジニル）エトキシ｝フェニルカルボニル］−４−ピペリドン塩酸塩（５ｂ）。融点２５７−２５８℃．収率：７５％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４４（ｑ，１Ｈ），１．９２（ｔ，３Ｈ），２．３２（ｑ，２Ｈ），２．８０（ｑ，２Ｈ），３．３８（ｂｓ，２Ｈ），３．６３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．２３Ｈｚ），４．５４（ｂｓ，２Ｈ），４．８０（ｂｓ，４Ｈ），６．５７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．８４Ｈｚ），７．１７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．９９Ｈｚ），７．３４（ｍ，８Ｈ），７．９０（ｓ，２Ｈ）１２．６８（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，６４．３５；Ｈ，５．３９；Ｎ，４．４５％．分析値（Ｃ33Ｈ33Ｃｌ3Ｎ2Ｏ3）はＣ
，６４．７７；Ｈ，５．４４；Ｎ ４．５８％を必要とする。
【００６４】
３，５−ビス（４−ニトロフェニルメチレン）−１−［４−｛２−（ピペリジニル）エトキシ｝フェニルカルボニル］−４−ピペリドン塩酸塩１．５水和物（５c）。融点２２４
−２２６℃．収率：６４％．1Ｈ−ＮＭＲ（DMSO−ｄ6）：１．４２（ｔ，１Ｈ），１．８１（ｔ，３Ｈ），２．０４（ｑ，２Ｈ），２．８６（ｑ，２Ｈ），３．３６（ｄ，２Ｈ），３．４８（ｍ，２Ｈ），４．３２（ｂｓ，２Ｈ），４．７５（ｂｓ，４Ｈ），６．５６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．２５Ｈｚ），７．０７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．１０Ｈｚ），７．６０（ｍ，４Ｈ），７．７８（ｓ，２Ｈ）１０．１６（ｂｓ，４Ｈ），１１．５３（ｓ，
１H）．観測値Ｃ，７１．３８；Ｈ，６．７５；Ｎ，５．２１％．分析値（Ｃ32Ｈ35Ｃｌ
Ｎ2Ｏ3・１．５Ｈ2Ｏ）はＣ，７１．１６；Ｈ，６．５３；Ｎ ５．１８％を必要とする
。
【００６５】
３，５−ビス（４−メチルフェニルメチレン）−１−「４−｛２−（１−ピペリジニル）エトキシ｝フェニルカルボニル」−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（５ｄ）。融点１０５℃（分解）．収率：６５％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４２（ｑ，１Ｈ），１．８９（ｔ，３Ｈ），２．２２（ｑ，２Ｈ），２．８０（ｂｓ，２Ｈ），３．４０（ｂｓ，２Ｈ），３．６５（ｄ，２Ｈ，J=９．５６Ｈｚ），４．４８（ｂｓ，２Ｈ），４．８８（ｂｓ，４Ｈ），５．４４（ｂｓ，２Ｈ）６．５６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．９１Ｈｚ），７．２３（ｍ，１０Ｈ），７．９９（ｓ，２Ｈ），１１．８８（ｂｓ，１H）．観測値Ｃ，７１
．３８；Ｈ，６．７５；Ｎ，５．２１％．分析値（Ｃ32Ｈ35ＣｌＮ2Ｏ3・０．５Ｈ2Ｏ）
はＣ，７１．１６；Ｈ，６．５３；Ｎ ５．１８％を必要とする。
【００６６】
１−［４−｛２−（４−モルフォリニル）エトキシ｝フェニルカルボニル］−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（６ａ）．融点２０８−２０９℃．収率：７３％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：３．０５（ｑ，２Ｈ），３．４０（ｂｓ，２Ｈ），３．５３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１２．０２Ｈｚ），４．０２（ｄｄ，２Ｈ），４．３０（ｔ，２Ｈ），４．４７（ｂｓ，２Ｈ），４．８６（ｂｓ，４Ｈ），６．５１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．５６Ｈｚ），７．１９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．５０Ｈｚ），７．４４（ｂｓ，１０Ｈ），７．９２（ｓ，２Ｈ），１３．６９（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ６９．５４；Ｈ，５．９５；Ｎ，４．９６％．分析値（Ｃ32Ｈ33ＣｌＮ2Ｏ4．０．５Ｈ2Ｏ）はＣ
，６９．３６；Ｈ，６．００；Ｎ ５．０５％を必要とする。
【００６７】
３，５−ビス（４−クロロフェニルメチレン）−１−「４−｛２−（４−モルフォリニル）エトキシ｝フェニルカルボニル」−４−ピペリドン塩酸塩（６ｂ）。融点２４０−２４１℃．収率：７４％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：３．０６（ｂｓ，２Ｈ），３．４０（ｂｓ，２Ｈ），３．５５（ｔ，２Ｈ），４．０４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１１．９７Ｈｚ），４．２９（ｔ，２Ｈ），４．３０（ｔ，２Ｈ），４．５０（ｂｓ，２Ｈ），４．８１（ｂｓ，４Ｈ）６．５９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．３０Ｈｚ），７．１４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．４７Ｈｚ），７．５１（ｍ，４Ｈ），７．９０（ｓ，２Ｈ），１０．２６（ｂｓ，４Ｈ），１３．５９（ｓ，１H）．観測値Ｃ，６２．３９；Ｈ，４．９４；Ｎ，４．４７％．分析値
（Ｃ32Ｈ31Ｃｌ3Ｎ2Ｏ4）はＣ，６２．６０；Ｈ，５．０９；Ｎ ４．５６％を必要とす
る。
【００６８】
１−［４−｛２−（４−モルフォリニル）エトキシ｝フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−ニトロフェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（６ｃ）．融点２２４−２２６℃．収率：６４％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：３．０５（ｑ，２Ｈ），３．４０（ｂｓ，２Ｈ），３．５３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１２．０２Ｈｚ），４．０２（ｄｄ，２Ｈ），４．３０（ｔ，２Ｈ），４．４７（ｂｓ，２Ｈ），４．８６（ｂｓ，４Ｈ），６．５１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．５６Ｈｚ），７．１９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．５０Ｈｚ），７．４４（ｂｓ，１０Ｈ），７．９２（ｓ，２Ｈ），１３．５９（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ５９．５２；Ｈ，４．７２；Ｎ，１０．５１％．分析値（Ｃ32Ｈ31ＣｌＮ4Ｏ8．０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，５９．６７；Ｈ，４．８５；Ｎ １０．６９％を必要とする。
【００６９】
３，５−ビス（４−メチルフェニルメチレン）−１−［４−｛２−（４−モルフォリニル）エトキシ｝フェニルカルボニル］−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（６ｄ）。融点２３５−２３６℃．収率：６６％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：２．４０（ｓ，３Ｈ），３．０３（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｂｓ，２Ｈ），３．５４（ｄ，２Ｈ，J=１１．９８Ｈｚ），４．０２（ｄｄ，２Ｈ），４．２９（ｔ，２Ｈ），４．５０（ｂｓ，２Ｈ），４．８７
（ｓ，４Ｈ）６．５８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．６３Ｈｚ），７．２４（ｍ，１０Ｈ），７．８８（ｓ，２Ｈ），１３．６８（ｂｓ，１H）．観測値Ｃ，７０．３９；Ｈ，６．６９
；Ｎ，４．７９％．分析値（Ｃ34Ｈ37ＣｌＮ2Ｏ4・０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，７０．１５；Ｈ
，６．５７；Ｎ ４．８１％を必要とする。
【００７０】
７ａ−ｄの合成の一般的な手順：活性炭（０．５ｇ）を４ａ（上記参照）（４．９５ｇ、０．０１ｍｏｌ）の遊離塩基のアセトン（２５ｍＬ）溶液へ加え、そしてこの混合物を室温で１時間攪拌した。懸濁液をセライトろ過し、そしてセライトベッドをアセトン（１０ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ液へヨウ化メチル（２．１３ｇ、０．０１５ｍｏｌ）を加え、そしてこの混合物を室温で４−５時間攪拌した。生じた沈殿を集め、乾燥しそしてジエチルエーテル／メタノールより再結晶化し所望の化合物を得た。
【００７１】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン メチオダイド（７ａ）．融点１６１−１６２℃．収率：８５％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４５（ｔ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．３４（
ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ3），３．７０（ｍ，４Ｈ，２ｘ ＮＣＨ2ＣＨ3），４．１７（ｂｓ
，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ），４．３９（ｂｓ，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ），４．８６（ｂｓ，４Ｈ，ピペリジルのＨ），６．５６（ｄ，２Ｈ，アリールのＨ，Ｊ＝１０．５８Ｈｚ），７．１９（ｄ，２Ｈ，アリールのＨ，Ｊ＝１０．０３Ｈｚ），７．３９（ｂｓ，１２Ｈ，アリールのＨ），７．９１（ｓ，２Ｈ，オレフィンのＨ）．観測値Ｃ６１．１１；Ｈ，５．６４；Ｎ，４．２３％．分析値（Ｃ33Ｈ37ＩＮ2Ｏ3・０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，６１．３
９；Ｈ，５．７７；Ｎ ４．３３％を必要とする。
【００７２】
３，５−ビス（４−クロロフェニルメチレン）−１−［４−(ジエチルアミノエトキシ)フェニルカルボニル］−４−ピペリドン メチオダイド（７ｂ）。融点２２０−２２３℃．収率：６９％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：１．３２（ｔ，６Ｈ），３．０７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．９９Ｈｚ），３．４５（ｔ，４Ｈ），３．７４（ｔ，２Ｈ），４．３０（ｂｓ，１Ｈ），４．３９（ｂｓ，１Ｈ），４．６１（ｂｓ，４Ｈ）６．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．２２Ｈｚ），７．１１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．３５Ｈｚ），７．２３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．３６Ｈｚ），７．７１（ｂｓ，１Ｈ），７．８９（ｓ，２H）．観測値Ｃ
，５４．４４；Ｈ，４．７９；Ｎ，３．７５％．分析値（Ｃ33Ｈ35ＩＮ2Ｏ3・０．５Ｈ2
Ｏ）はＣ，５４．７８；Ｈ，４．８７；Ｎ ３．９２％を必要とする。
【００７３】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−ニトロフェニルメチレン）−４−ピペリドン メチオダイド（７ｃ）．融点１９３−１９５℃（分解）．収率：７４％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：１．２４（ｔ，６Ｈ），３．００（ｓ，３Ｈ），３．３８（ｑ，４Ｈ），３．６４（ｔ，２Ｈ），４．２７（ｔ，２Ｈ），４．４０（ｂｓ，４Ｈ），６．７０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．４１Ｈｚ），７．１６（ｄ，２Ｈ，アリールのＨ，Ｊ＝１０．３９Ｈｚ），７．７４（ｂｓ，４Ｈ），７．８３（ｓ，２Ｈ），１０．２７（ｂｓ，４Ｈ）．観測値Ｃ５４．４１；Ｈ，４．７１；Ｎ，７．６０％．分析値（Ｃ33Ｈ35ＩＮ4Ｏ7）はＣ，５４．５５；Ｈ，４．８６；Ｎ ７．７１％を必要とする。
【００７４】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−メチルフェニルメチレン）−４−ピペリドン メチオダイド（７ｄ）．融点２１２−２１３℃．収率：７２％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：１．２４（ｔ，６Ｈ），２．３４（ｓ，６Ｈ），３．０１（ｓ，３Ｈ），３．３９（ｑ，４Ｈ），３．６８（ｔ，２Ｈ），４．３３（ｔ，２Ｈ），４．８７（ｂｓ，４Ｈ），６．７５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．３４Ｈｚ），７．２２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．３０Ｈｚ），７．２８（ｍ，８Ｈ），７．７２（ｓ，２Ｈ）．観測値Ｃ６２．６５；Ｈ，６．２５；Ｎ，４．１０％．分析値（Ｃ35Ｈ41
ＩＮ2Ｏ3．０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，６２．４０；Ｈ，６．１３；Ｎ ４．１５％を必要とす
る。
【００７５】
８ａの合成：３，５−ビス（チオフェン−２−イルメチレン）−ピペリジン−４−オン 塩酸塩（８ａ）：８ａを１ｄと同様な方法で合成した。４−ピペリドン塩酸塩と２−チオフェン−カルボキシアルデヒドを用いた反応で８ａを得た。融点２９７℃（分解）、収率：７２％．δ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：４．４５（ｂｒｓ，４Ｈ，２ｘＮＣＨ2），７．３２（ｔ，２Ｈ，２ｘ Ｃ3−Ｈ），７．７０（ｓ，２Ｈ，２ｘ ＝ＣＨ−イリデンプロトン）
，７．９４−８．０５（ｄ，４Ｈ，２ｘ Ｃ2−Ｈ及び２ｘＣ4−Ｈ）．観測値Ｃ，５５．３６％；Ｈ，４．３０％；Ｎ，４．１９％。分析値（Ｃ15Ｈ14ＣｌＮＯＳ2）は５５．６
３％；Ｈ，４．３６％；Ｎ４．３２％を必要とする。
【００７６】
９ａの合成：１［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（チオフェン−２−イルメチレン）−ピペリジン−４−オン塩酸塩一水和物（９ａ）：化合物４ａで述べた上記手順に従い、３，５−ビス（チオフェン−２−イルメチレン）−ピペリジン−４−オンとＶ塩酸塩（Ｘ＝ＣＯ，Ｔ＝ＯＨ，Ｙ＝０，ｏ＝２，Ｚ＝Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2）（０．０１５ｍｏｌ）の反応で９ａを得た。融点１９３−１９４℃、収率８
２％，δ（ＣＤＣｌ3）：１．４４−１．４７（ｔ，６Ｈ，２ｘ ＣＨ3），３．１７−３．３１（ｍ，４Ｈ，２ｘ ＮＣＨ2），３．５６（ｂｒｓ，２Ｈ，ＮＣＨ2），４．５３（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ2），４．９３（ｂｒｓ，４Ｈ，２ｘ ＮＣＨ2），６．７５−６．７７（ｄ，２Ｈ，Ｃ2−Ｈ及びＣ6−Ｈ），７．１８−７．１９（ｔ，２Ｈ，２ｘ Ｃ3'−Ｈ），７．３８−７．４０（ｄ，４Ｈ，Ｃ3−Ｈ，Ｃ5−Ｈ及び２ｘ Ｃ4'−Ｈ），７．６６−７．６７（ｄ，２Ｈ，Ｃ2'−Ｈ），１２．６７（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．観測値Ｃ５９．９０％，Ｈ ５．７６％，Ｎ ４．８１％．分析値（Ｃ28Ｈ31ＣｌＮ2Ｏ3Ｓ2・Ｈ2Ｏ）はＣ ５９．９２％，Ｈ５．５６％，Ｎ ４．９９％を必要とする。
【００７７】
１０の合成：４−ヒドロキシ安息香酸メチル（１５．２１ｇ、０．１ｍｏｌ）、無水炭酸カリウム（３４．５５ｇ、０．２５ｍｏｌ）、２−クロロ−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミン塩酸塩（２５．８１ｇ、０．１５ｍｏｌ）、ヨウ化カリウム（０．１６６ｇ、０．００１ｍｏｌ）及びアセトン（７５ｍＬ）を還流しながら１０−９時間加熱した。冷却し、固体をろ過により除去し、そして溶媒を蒸散した。残渣をトルエン（７５ｍＬ）に溶解しそして溶液を水酸化ナトリウム溶液（２％ｗ／ｖ、３０ｍＬ）、そして脱イオン水（２ｘ３０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を除去し、油状物として得た４−（２−ジエチルアミノエチルオキシ）安息香酸メチルをエタノール（５０ｍＬ）に溶解し、そして水酸化ナトリウム溶液（１０．０ｇ，０．２ｍｏｌ）の水（５０ｍＬ）溶液に加えた。この混合物を還流しながら２時間加熱した。エタノールを減圧下留去し、そして水溶液を５−６℃において塩酸（１２Ｎ）を用い酸性にした。固体を集め、水(まえもって５−６℃に冷却したもの)を用いて粉砕し、ろ過し、そして５５−６０℃において減圧下乾燥し、そして水を用いて再結晶化し１０を得た。
【００７８】
４−（２−ジメチルアミノエトキシ）安息香酸塩酸塩（１０）．融点１７０−１７２℃，［文献［２２］，融点１７１−１７４℃］。収率：７３％．1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：１．１７−１．２０（ｔ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．１３−３．２４（ｍ，４Ｈ，２ｘＣＨ2），３．４７−３．４８（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ），４．２６−４．２８（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ），６．８９−６．９１（ｄ，２Ｈ，アリール−Ｈ），７．８０−７．８２（ｄ，２Ｈ，アリール−Ｈ）．
【００７９】
生物学的活性
Ｍｏｌｔ４／Ｃ８、ＣＥＭ，及びＬ１２１０細胞に対する細胞毒性の評価：シリーズ１ないし７の全ての化合物は、ヒトＭｏｌｔ ４／Ｃ８及びＣＥＭ Ｔ−リンパ球並びにマウ
スＬ１２１０細胞に対する評価を行った。さらに、化合物１０はこれらのアッセイに含めた。これらのデータを表１に示す。一連の種々ヒト腫瘍細胞株について種々の化合物の細胞障害能を表２に示す。
【００８０】
シリーズ１乃至７及び１０の化合物及びメルファランは、文献の方法（Ｊ Ｂａｌｚａｒｉｎｉ，Ｅ．Ｄｅ Ｃｌｅｒｃｑ、Ｍ．Ｐ．Ｍｅｒｔｅｓ，Ｄ．Ｓｈｕｇａｒ，Ｐ．Ｆ．Ｔｏｒｒｅｎｃｅ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３１巻（１９８２年）３６７３−３６８２頁）によりＭｏｌｔ ４／Ｃ８、ＣＥＭ及びＬ１２１０細胞に対する評価を行った。これらのアッセイにおいて、少なくとも３種の濃度の化合物を、腫瘍細胞と共に３７℃において４８時間インキュベートし、この時間の後の増殖阻害を測定した。
【００８１】
選択された４−ピペリドンを、文献の方法（Ｍ．Ｒ．Ｂｏｙｄ， Ｋ．Ｄ．Ｐａｕｌｌ、Ｄｒｕｇ．Ｄｅｖ Ｒｅｓ．、３４巻（１９９５年）９１−１０９頁）を用いて、一連の４９（３８−５９）のヒト腫瘍細胞株ついて抗腫瘍活性を評価した。さらに、５−フルオロウラシル及びメルファランの両方を５７細胞株について評価した。このアッセイにおいて、化合物群は、１ａ、４ａ（１０-8Ｍ乃至１０-4Ｍ）、５−フルオロウラシル（１０-6.8Ｍ乃至１０-2.6Ｍ）及びメルファラン（１０-7.6Ｍ乃至１０-3.6Ｍ）を除き、１０-10.3Ｍ乃至１０-4.3Ｍの１０倍希釈列において５種類の濃度を用いて４８時間インキュベ
ートした。１ａ、３ｂ、３ｄ、５ｄ、７ｄ及びメルファランについて計算した平均図中点（ＭＧ ＭＩＤ）はＩＣ50を表した。ＭＧ ＭＩＤは約５０種類の腫瘍細胞株に対する化合物の活性の平均値を表す。以下の場合において、ＩＣ50の計算値が得られなかった、全細胞株数に対する細胞株の数は以下の通りであった［最大又は最小濃度（ｍｏｌａｒ）は括弧内］、即ち、４ａ：２／５３（＜１０-10）、５ｂ：２／５０（＜１０-4.3）、６ａ
：３／４８（＞１０-4.3）、６ｂ：１１／３８（＜１０-10.3）、６ｄ：３／４４（＜１
０-10.3）、７ａ：３６／５２（＞１０-4.3）及び５−フルオロウラシル：３／５７（＞
１０-2.6）。
【００８２】
シリーズ３乃至７における化合物の活性の順位：最初の検討は、アリリデン アリール環に同様の置換基を有するシリーズ３乃至７の化合物のＩＣ50値を比較することを含む。Ｍｏｌｔ４／Ｃ８、ＣＥＭ及びＬ１２１０細胞株のそれぞれにおける化合物のスコアは以下のようにして得た。最も高い活性を有する化合物は５の値を充て、次ぎに最も低いＩＣ50の値をもつ化合物に４等の値を充て、そしてそれ以降も同様に続ける；最も低い活性を有するアミドは１の値を充てた。それぞれのＩＣ50値の標準偏差を考慮した。等位の化合物に得られるスコアを当分し、そして全１５ポイントを、それぞれの比較のために付与した。第二の分析は、三種の細胞株中でアリリデンアリール環中の最適な置換基パターンを見出すために策定した。このようにして、シリーズ３乃至７のそれぞれにおいて、最も活性のある化合物は４の値を与え、二番目に活性のある類似体は３等を付与し、そしてそれ以降も同様にした。合計１０ポイントをそれぞれの比較のために用いた。標準偏差を考慮し、そして同様の活性を有する化合物のスコアを当分した。
【００８３】
ＭＤＲ−反転特性の測定：化合物の多剤耐性（ＭＤＲ）を反転させる活性の評価に用いた手順は既に記載されている（Ｋａｗａｓｅ、Ｍ．，Ｓａｋａｇａｍｉ，Ｈ．，Ｍｏｔｏｈａｓｈｉ、Ｎ．，Ｈａｕｅｒ，Ｈ．，Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ，Ｓ．Ｓ．；Ｓｐｅｎｇｌｅｒ，Ｇ．，Ｖｉｇｙｉｋａｎｎｅ，Ａ．Ｖ．；Ｍｏｌｎaｒ，Ａ．；Ｍｏｌｎaｒ，Ｊ．，Ｉｎ Ｖｉｖｏ、２００５年、１９巻、７０５−７１２頁）。簡潔にいうと、Ｌ−５１７８ＭＤＲ及び親細胞の両方を、熱活性化ウマ血清（１０％）、Ｌ−グルタミン及び抗生物質を含有するＭｃＣｏｙ‘ｓ ５Ａ培地で育成した。ジメチルスルホキシド中の試験化合物（２ｍｇ／ｍＬ、１０μＬ）の溶液を、細胞懸濁液の等分液に添加し、そして室温で１０分間インキュベートした。そしてジメチルスルホキシド中のローダミン１２３の１０μＬ溶液を、最終濃度が５．２μＭと成るように加え、そして細胞をさらに３７℃におい
て２０分間インキュベートした。細胞を二度洗浄し、そしてＰＢＳ（ｐＨ７．４）中に再懸濁させ、その後、細胞の蛍光をＢｅｃｋｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ＦＡＣＳｃａｎ装置を用い測定した。細胞の蛍光発光を処理ＭＤＲ細胞（Ｆ１）、未処理ＭＤＲ細胞（Ｆ２）、処理親細胞（Ｆ３）について測定し、そしてＦＡＲ値を以下の数式から得た；即ち（Ｆ１／Ｆ２）／（Ｆ３／Ｆ４）。
【００８４】
種々の細胞株についての細胞毒性の評価：ＨＳＣ−２、ＨＳＥ−４、ＨＧＦ、ＨＰＣ、ＨＬ−６０及びＨＰＬＦ細胞について、シリーズ１及び３乃至７に於ける化合物のＣＣ50（細胞毒性量（ｃｙｔｏｔｏｘｉｔｙ ｄｏｓｅ））値をＭＴＴアッセイが関与する文献的方法を用いて測定した（Ｋａｗａｓｅ、Ｍ．，Ｓａｋａｇａｍｉ，Ｈ．，Ｍｏｔｏｈａｓｈｉ、Ｎ．，Ｈａｕｅｒ，Ｈ．，Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ，Ｓ．Ｓ．；Ｓｐｅｎｇｌｅｒ，Ｇ．，Ｖｉｇｙｉｋａｎｎｅ，Ａ．Ｖ．；Ｍｏｌｎaｒ，Ａ．；Ｍｏｌｎaｒ，Ｊ．，Ｉｎ Ｖｉｖｏ、２００５年、１９巻、７０５−７１２頁、及びＴａｋｅｕｃｈｉ、Ｒ．，Ｈｏｓｈｉｊｉｍａ，Ｈ．；Ｏｎｕｋｉ，Ｎ．，Ｎａｇａｓａｋａ，Ｈ．；Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ、Ｓ．Ａ．；Ｋａｗａｓｅ、Ｍ．，Ｓａｋａｇａｍｉ，Ｈ．，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２００５年、２５巻、４０３７−４０４２頁）（ＭＴＴアッセイは、細胞増殖（細胞の成長）を測定する研究室検査である。ＭＴＴは、３−（４，５−ジメチルチアゾル−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラアゾリウム ブロマイド）を表す。）細胞は、化合物の種々の濃度を用いて未処理の細胞と共に、２４時間インキュベートし、そして５４０ｎｍにおける吸光度を測定した。ＨＬ−６０アッセイの場合において、トリパンブルー色素排除法を更に行い、そして細胞の生存率を血球計を用いて測定した。ＣＣ50値は用量反応曲線から得た（Ｓａｋａｇａｍｉ、Ｔ．，Ｓａｔｏｈ，Ｋ．，Ｏｈａｔａ，Ｈ．，Ｔａｋａｈａｓｈｉ、Ｈ．、Ｙｏｓｈｉｄａ、Ｈ．，Ｉｉｄａ，Ｍ．，Ｋｕｒｉｂａｙａｓｈｉ、Ｎ．，Ｓａｋａｇａｍｉ，Ｔ．，Ｍｏｍｏｓｅ，Ｋ．，Ｔａｋｅｄａ、Ｍ．，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，１９９６年１６巻２６３５−２６４４頁）。これらの細胞毒性試験において用いた細胞の培養における一般的な方法は既に記載されている（Ｋａｗａｓｅ、Ｍ．，Ｓａｋａｇａｍｉ，Ｈ．，Ｍｏｔｏｈａｓｈｉ、Ｎ．，Ｈａｕｅｒ，Ｈ．，Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ，Ｓ．Ｓ．；Ｓｐｅｎｇｌｅｒ，Ｇ．，Ｖｉｇｙｉｋａｎｎｅ，Ａ．Ｖ．；Ｍｏｌｎaｒ，Ａ．；Ｍｏｌｎaｒ，Ｊ．，Ｉｎ Ｖｉｖｏ、２００５年、１９巻、７０５−７１２頁、及びＴａｋｅｕｃｈｉ、Ｒ．，Ｈｏｓｈｉｊｉｍａ，Ｈ．；Ｏｎｕｋｉ，Ｎ．，Ｎａｇａｓａｋａ，Ｈ．；Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ、Ｓ．Ａ．；Ｋａｗａｓｅ、Ｍ．，Ｓａｋａｇａｍｉ，Ｈ．，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２００５年、２５巻４０３７−４０４２頁）。簡潔にいうと、悪性細胞は、日本の昭和大学のＮａｇｕｍｏ教授より入手した。ＨＧＦ、ＨＰＣ及びＨＰＬＦ細胞は、日本の明海大学倫理委員会（Ｎｏ．０２０６）のガイドラインによりインフォームドコンセントを得た後に、ヒトの歯周組織より調製した。正常細胞は寿命が短いため、３−７ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｄｏｕｂｌｉｎｇ ｔｉｍｅにおける細胞を用いた。ＨＬ−６０腫瘍を除き、細胞は、熱不活性化ＦＢＳ（１０％）を含有するＤＭＥＭ中で３７℃において加湿二酸化炭素雰囲気下で培養し、また、トリプシン処理により継代培養した。ＨＬ−６０細胞は、ＲＰＭＩ １６４０培地を用いた以外は同様の方法で培養した。
【００８５】
ここに言及された全ての参考文献は参照として取り込まれる。
【００８６】
表１．ヒトＭｏｌｔ４／Ｃ８及びＣＥＭ Ｔ−リンパ球及びマウスＬ１２１０細胞に対してのシリーズ１乃至７及び１０の化合物の活性a。
【表１】
a バックグラウンド陰影はＩＣ50値として表される活性を示す、即ち、黒（＜１μＭ），暗灰色（１−１０μＭ），灰色（１１−９９μＭ）、及び明灰色（＞１００μＭ）。
【００８７】
表２．ヒト腫瘍細胞株に対しての代表的な化合物の細胞毒性。
【表２】
a ＳＩの文字は選択指数を表す、即ち、化合物の最小及び最大の感受性細胞のＩＣ50値の比である。
b １ａの塩酸塩をこのアッセイにおいて用いた。
【００８８】
表３．シリーズ１及び３乃至７の化合物のＭＤＲ−反転特性及び細胞毒性。
【表３】
a 蛍光活性比（ＦＡＲ）値は、処理及び未処理マウスＬ−５１７８細胞でのローダミ
ン１２３の蛍光強度の比を表す。対照薬物のベラパミルは、１０μｇ／ｍＬの濃度を用いた場合のＦＡＤ値が５．６１であった。
b ＣＣ50値は、細胞の５０％を殺す化合物の濃度を表し、そして２つの独立した測定
の平均値を表す。
c これらの値は、ＨＳＣ−２，ＨＳＣ−４及びＨＬ−６０悪性細胞のＣＣ50値の平均
値を表す。
d ＳＩの文字は、ＨＳＣ−２、ＨＳＣ−４及びＨＬ−６０腫瘍の平均ＣＣ50値により
ＨＧＦ、ＨＰＣ及びＨＰＬＦ細胞の平均ＣＣ50値を割ることにより算出した選択指数を表す。
e ３ｄの４０μｇ／ｍＬの濃度は、細胞に対し毒性を持つものであった。
【図面の簡単な説明】
【００８９】
図面の簡単な説明
図１は、本発明の幾つかの化合物の合成の略図である。
【図１】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗腫瘍活性を有する４−ピペリドン誘導体及びそのその癌治療における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
多くのα，β−不飽和ケトンは細胞毒性及び抗癌作用を示し（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９９年、６巻、１１２５−１１４９頁；Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９９年、４２巻、１３５８−１３６６頁）、そして、核酸中の水酸基及びアミノ基とほとんど又は全く親和性を持たずに、細胞チオールと相互作用すると考えられている（Ｍｕｔｕｓ等、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８９年、１７７巻、２３７−２４３頁；Ｂａｌｕｊａ等、Ｃｈｅｍ．Ｉｎｄ．，１９６４年、２０５３−２０５４頁）。この特性は、特定の抗腫瘍薬において存在する遺伝毒性の特性を失った細胞毒性としてこれらの化合物を開発する可能性を提供する（Ｂｅｖｅｎｕｔｏ等、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１９９３年、８２巻、９８８−９９１頁）。このような化合物のマンニッヒ塩基の形が検討されてきた。例えば、幾つかの共役エノンのマンニッヒ塩基は、チオレーション及びアルキレーションの速度（Ｄｉｍｏｃｌ等、Ｃａｎ Ｊ．Ｃｈｅｍ １９８０年、５８巻、９８４−９９１頁）、そして細胞毒性（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１９７５年、６４巻、２４１−２４９頁）の両方の有意な増加を引き起こすことが示された。しかしながら、下記に示す一般式（Ａ）の共役アリリデンケトンのような化合物は、マウスに対し毒性を有する。
【０００３】
【化１】
Ｒ1＝Ｒ2＝水素原子、Ｃｌ、ＮＯ2、Ｎ（ＣＨ3）2、アルコキシ基又はアルキル基；
Ｒ3＝水素原子又はアルキル基
上記に示した、関連した一般式（Ｂ）の環状類似体が、一般式（Ａ）の化合物の毒性を減少させるために製造された。
【０００４】
化合物Ｂ１（一般式ＢにおいてＲ1＝Ｒ2＝Ｈ）はジエノンの環状マンニッヒ塩基であり、そしてマウスリンパ性白血病Ｐ３８８／ＭＲＩ細胞株について細胞毒性活性を有し、かつ合成ＤＮＡ、ｐｏｌｙ（ｄ（ＡＴ））、と結合する；さらに驚くべきことに、２４０ｍｇ／ｋｇ／日量の５日連続投与はマウスにおける死を誘発しなかった（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、１９９０年、６巻、１８３−１９４頁）。
【０００５】
化合物Ｂ１の種々のＮ−置換誘導体が合成され、検討された：化合物Ｂ１のＮ−３−カルボキシ−２−プロペノイル誘導体が、Ｐ３８８／ＭＲＩ細胞に対して評価された（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ．Ｄｅｌｉｖ．，１９９０年、６巻、１８３−１９４頁）。化合物Ｂ１の、Ｎ−アシル誘導体（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、１９９２年、１０巻、２９１−２９９頁）、Ｎ−アミド誘導体、及びＮ−カ
ルバメート誘導体（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ．Ｄｅｓ．Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、１９９４年、１２巻、１９−２８頁）を、マウスＬ１２１０細胞及び、一連のヒト腫瘍細胞に対してスクリーニングが行われた。
化合物Ｂ１の、Ｎ−アクリロイルアミド（Ｄｉｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００１年、４４巻、５８６−５９３頁）、Ｎ−アミド誘導体（下記一般式Ｃに示す）（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｅｕｒ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００２年、３７巻、９６１−９７２頁）、及びＮ−マレアモイル誘導体（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｅｎｚ．Ｉｎｈｉｂ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００３年、１８巻、３２５−３３２頁）が、マウスＰ３８８及びＬ１２１０細胞株、ヒトＭｏｌｔ ４／Ｃ８及びＣＥＭ Ｔリンパ球に対し評価された。
【０００６】
【化２】
一般式Ｃの化合物はヒトＮ−ミリストイルトランスフェラーゼ及びｆｙｎキナーゼを阻害することが示された。
【特許文献１】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９９年、６巻、１１２５−１１４９頁
【特許文献２】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９９年、４２巻、１３５８−１３６６頁
【特許文献３】Ｍｕｔｕｓ等、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８９年、１７７巻、２３７−２４３頁
【特許文献４】Ｂａｌｕｊａ等、Ｃｈｅｍ．Ｉｎｄ．，１９６４年、２０５３−２０５４頁
【特許文献５】Ｂｅｖｅｎｕｔｏ等、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１９９３年、８２巻、９８８−９９１頁
【特許文献６】Ｄｉｍｏｃｌ等、Ｃａｎ Ｊ．Ｃｈｅｍ １９８０年、５８巻、９８４−９９１頁
【特許文献７】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１９７５年、６４巻、２４１−２４９頁
【特許文献８】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、１９９０年、６巻、１８３−１９４頁
【特許文献９】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、１９９２年、１０巻、２９１−２９９頁
【特許文献１０】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｄｒｕｇ．Ｄｅｓ．Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、１９９４年、１２巻、１９−２８頁
【特許文献１１】Ｄｉｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００１年、４４巻、５８６−５９３頁
【特許文献１２】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｅｕｒ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００２年、３７巻、９６１−９７２頁
【特許文献１３】Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｅｎｚ．Ｉｎｈｉｂ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００３年、１８巻、３２５−３３２頁
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
ヒトの癌のほぼ５０パーセントは、完全に化学療法に抵抗性があるか、または一時的のみの効果であり、その後それらの癌細胞は一般的に用いられている抗癌薬では最早影響を受けない。この現象は多剤耐性（ＭＤＲ）と呼ばれ、そしてある種の腫瘍タイプでは本質的に発現され、その他のものでは化学療法治療に曝露された後にＭＤＲを獲得する。細胞のＭＤＲを抑制又は排除する治療能力は、それゆえに重要な考慮すべき事項である。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の概要
１つの実施態様において、本発明は、現在入手可能な抗癌剤と構造的に相違する新規の抗腫瘍性の化合物を提供する。この構造的多様性は、抗腫瘍性のアルキル化剤を含む現在の薬剤に交差耐性のない化合物を提供し得る。この新規化合物の合成を、腫瘍細胞株に対する細胞毒性（ＩＣ50及びＣＣ50）アッセイにおけるそれ等の活性を証明する実験とともに、ここに開示する。化合物はまた、MDR（多剤耐性）の反転において有用である。
【０００９】
したがって、1つの実施態様において、本発明は、構造一般式（Ｉ）により表される４
−ピペリドン化合物：
【化３】
ここで、
Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立してアルキル基、アルコキシ基、アリール基、又はヘテロアリール基を表し、
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、水素原子、アルキル基、ヒドロキシアルキル基、又はカルボキレートエステル基を表し；
ｍ及びｔはそれぞれ独立して０乃至３の整数であり；
Ａは水素原子又はＡ'を表し、ここで、Ａ'は
【化４】
を表し、
ここで、
ｎは０乃至４の整数を表し、そして、ベンゼン環上の置換基の数を表し；
ｏは０乃至４の整数を表し；
Ｘは（ＣＨ2）r、ＣＯ，ＣＯＯ，ＳＯ，ＳＯ2又はＯを表し、ここでｒは０乃至４の
整数を表し；
ＹはＯ，Ｓ，ＮＨ，Ｎ（アルキル）、Ｎ（アリール）、又は（ＣＨ2）sを表し、ここでｓは０乃至４の整数を表し；Ｚは水素原子、Ｎ（アルキル）2、ＮＨ（アルキル）、Ｎ
（アリール）2、ＮＨ（アリール）、アルキル基、置換されたアルキル基、＋Ｎ（アルキ
ル）3、又は
【化５】
を表し、ここで、ＢはＯ，Ｓ，（ＣＨ2）q、ＮＨ、Ｎ−アルキル、又はＮ−アリール、を表し、そしてｐ及びｑはそれぞれ独立して0乃至４の整数を表し；又はその医薬品として
許容できる塩であるが、ただし、化合物１ａ、１ｂ、及び１ｃの遊離塩基及び塩酸塩は除外されるものを提供する。
【００１０】
その他の実施態様において、本発明は、
一般式（ＩＶ）の化合物を、
【化６】
一般式Ｔ−Ａ'（Ｖ）の化合物と共に塩基の存在下に反応させる工程からなり；
ここで、Ｔはハロゲン原子を表し、そして、Ａ'は
【化７】
を表すところの、本発明の化合物を合成する方法を提供する。
【００１１】
一般式（Ｉ）及び一般式（ＩＶ）は、それぞれ、同じでも異なっていてもよい、２つの置換基Ｒ3を含み、そしてこの明細書に定義されている通りである。一般式（Ｉ）及び一
般式（ＩＶ）は、それぞれ、同じでも異なっていてもよい２つの置換基Ｒ4を含み、そし
てこの明細書に定義されている通りである。
【００１２】
その他の実施態様において、本発明は、癌治療及び多剤耐性を反転させる用途の化合物及びその医薬品としての組成物の使用を提供する。
【００１３】
図面の簡単な説明
図１は、本発明の幾つかの化合物の合成の略図である。
【００１４】
発明の詳細な説明
化学
本発明の化合物は一般式（Ｉ）の化合物を含む。
【００１５】
好ましくは、アルキル基又はアルコキシ基は、置換又は非置換、分枝又は非分枝の炭素原子数１乃至７、好ましくは炭素原子数１乃至５を表す。好ましいアルキル基はメチル基又はエチル基を表す。好ましいアルコキシ基はメトキシ基又はエトキシ基を表す。可能な置換基は当業者に知られ、そしてハロゲン原子、アルコキシ基、アルキル基、フェニル基及び／又はニトロ基を表す。ハロゲン原子はフッ素、塩素、臭素、又はヨウ素であり得、そして好ましくはフッ素又は塩素であり得る。
【００１６】
好ましくは、Ｒ1及びＲ2は、同じでも異なっていても良い置換又は非置換、分枝又は非分枝のアルキル基、アリール基、又はヘテロアリール基を表し、ここで、アルキル基は好ましくは上記に定義したものを表す。アリール基は好ましくは置換又は非置換のフェニル環であり、その置換は好ましくは独立してフェニル環の２，３，４位、又は３，４；２，４；２，３；２，５；、２，６；３，５；３，６；４，６；３，４，５；２，４，６；又は２，３，４位における組み合わせにおいて位置する。置換基は、ハロゲン原子、アルコキシ基、アルキル基、フェニル基、ニトロ基、及びホスホネート基を含み得る。ホスホネート基は、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）2，−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）（Ｏ−アルキル）、−Ｐ（Ｏ）（
Ｏ−アルキル）2、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）（Ｏ−アリール）、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−アリール）2を含む。好ましい置換基は、４−フルオロ、４−クロロ、４−メトキシ、４−ニトロ、４−メチル、３，４−ジメトキシ、３，４−ジクロロ、３，４，５−トリメトキシ、及び２，４，６−トリメトキシである。Ｒ1及びＲ2は願わくばフェニル、４−クロロフェニル、４−ニトロフェニル、及び／又は４−メチルフェニルの何れか１つであり得る。ヘテロアリール基は、好ましくは２，３，又は４−ピリジル、２−チエニル又は２−フリルである。ｍ及びｔの両方は独立して０ないし３から選ばれる如何なる整数でもあり得る。１つの実施態様において、ｍ及びｔは、共に０である。
【００１７】
Ｒ3又はＲ4は独立して、水素原子、アルキル基又はカルボキレートエステル基であり得る。それぞれのＲ3は同じでも異なっていてもよい。それぞれのＲ4は同じでも異なっていてもよい。アルキル基は好ましくは上記に定義したものを表す。カルボキシレートエステル基は、アルキルカルボキシレート基を含み、そして好ましくは、メチル又はエチルカルボキシレート基である。１つの実施態様において、Ｒ3及びＲ4は共に水素原子である。
【００１８】
ここに言及した化合物：一般式（Ｉ）中、Ａが水素原子、Ｒ3＝Ｒ4＝水素原子、そして、ｍ及びｔは０である場合；Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル基（１ａ）；Ｒ1＝Ｒ2＝４−クロロフェニル基（１ｂ）；及びＲ1＝Ｒ2＝４−ニトロフェニル基（１ｃ）である。
【００１９】
本発明の化合物は、以下を含むが、それらに限定されるものではない：
ｉ）一般式（Ｉ）中、Ａ＝水素原子、Ｒ3＝Ｒ4＝水素原子、そして、ｍ及びｔは０である場合：Ｒ1＝Ｒ2＝４−メチルフェニル基（１ｄ）
（ｉｉ）一般式（Ｉ）中、ＡがＡ‘であり、そしてＹ（ＣＨ2）0Ｚがベンゼン環の４−位に位置し、そして、Ｒ3＝水素原子、Ｒ4＝水素原子、Ｘ＝ＣＯ；ｍ及びｔ＝０；ｎ＝１、Y＝０；ｏ＝２である場合：
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；Ｚ＝Ｎ（ＣＨ3）2（３ａ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−クロロフェニル；Ｚ＝Ｎ（ＣＨ3）2（３ｂ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−ニトロフェニル；Ｚ＝Ｎ（ＣＨ3）2（３ｃ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−メチルフェニル；Ｚ＝Ｎ（ＣＨ3）2（３ｄ）
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；Ｚ＝Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2（４ａ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−クロロフェニル；Ｚ＝Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2（４ｂ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−ニトロフェニル；Ｚ＝Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2（４ｃ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−メチルフェニル；Ｚ＝Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2（４ｄ）
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；Ｚ＝１−ピペリジル（５ａ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−クロロフェニル；Ｚ＝１−ピペリジル（５ｂ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−ニトロフェニル；Ｚ＝１−ピペリジル（５ｃ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−メチルフェニル；Ｚ＝１−ピペリジル（５ｄ）
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；Ｚ＝４−モルフォリニル（６ａ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−クロロフェニル；Ｚ＝４−モルフォリニル（６ｂ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−ニトロフェニル；Ｚ＝４−モルフォリニル（６ｃ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−メチルフェニル；Ｚ＝４−モルフォリニル（６ｄ）
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；Ｚ＝＋Ｎ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）2I-（７ａ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−クロロフェニル；Ｚ＝＋Ｎ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）2I-（７ｂ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−ニトロフェニル；Ｚ＝＋Ｎ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）2I-（７ｃ）
Ｒ1＝Ｒ2＝４−メチルフェニル；Ｚ＝＋Ｎ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）2I-（７ｄ）
（ｉｉｉ）一般式（Ｉ）中Ａ＝水素原子、Ｒ3＝Ｒ4＝水素原子、そして、ｍ及びｔは０である場合：
Ｒ1＝Ｒ2＝２−チエニル基（８ｄ）
（ｉｖ）一般式（Ｉ）中、ＡがＡ‘であり、そしてＹ（ＣＨ2）0Ｚがベンゼン環の４−位に位置し、そして、Ｒ3＝Ｒ4＝水素原子、Ｘ＝ＣＯ；ｍ及びｔ＝０；ｎ＝１；Ｙ＝Ｏ；ｏ＝２である場合：
Ｒ1＝Ｒ2＝２−チエニル；Ｚ＝Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2（９ａ）
（ｖ）一般式（Ｉ）中、ＡがＡ‘であり、そしてＹ（ＣＨ2）0Ｚ＝水素原子、そしてｍ及びｔ＝０である場合：
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；及びＲ3＝Ｒ4＝水素原子、Ｘ＝ＣＯ；ｎ＝１（２ａ）
（ｖｉ）一般式（Ｉ）中、ＡがＡ‘であり、そしてＹ（ＣＨ2）0Ｚがベンゼン環の４−位に位置し、そしてＲ3＝Ｒ4＝水素原子、Ｘ＝ＣＯ；ｎ＝１；Ｙ＝Ｏ；ｏ＝０、そして、ｍ及びｔが０である場合：
Ｒ1＝Ｒ2＝フェニル；Ｚ＝ＣＨ3（２ｂ）
【００２０】
一般式（Ｉ）の化合物はその酸付加塩を含む。“酸付加塩”というのは、これは、シュウ酸塩のような単離、精製、及び保存のために形成され得る任意の塩、及び塩酸塩、硫酸塩、酢酸塩、及びクエン酸塩のような宿主へ化合物を投与する目的での医薬品として許容できる塩を意味する。
【００２１】
合成
一般式（Ｉ）の化合物は、以下の反応工程により合成し得る：
【化８】
ここで、ＡはＡ‘を表し、この意味は前記に論じられたものと同様のものを表す。Ｔはハロゲン原子を表し、前記において論じられたものと同様のものを有する。
【００２２】
一般式（Ｉ）の化合物は、一般式（ＩＶ）の化合物を一般式（Ｖ）の化合物と共に不活性溶媒中で塩基の存在下反応させることにより得られ得る。用いられる塩基は、炭酸カリウム、炭酸ナトリウムのような無機塩基又はピペリジン、ピロリジン、モルフォリン等のような二級アミン、又はトリエチルアミンのような三級アミンであり得、水素化ナトリウム等のような金属水素化物等が１−５当量の量で用いられ得る。溶媒は、例えば、極性非プロトン性溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、アセトニトリル）又はハロゲン化炭化水素（例えば、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン）であり得、その溶媒は単独で用いても、併用して用いてもよい。反応は、−１０℃乃至反応において採用された溶媒の沸点の温度において行われ、そして０．５乃至２４時以内に完了する。
【００２３】
出発化合物（ＩＶ）は、文献の手順（Ｄｉｍｍｏｃｋ等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００１年、４４巻、５８６−５９３頁）により合成し得る。一般式（ＩＶ）中の置換基は、一般式（Ｉ）の化合物で言及したものの任意のものであり得る。出発化合物（Ｖ）は文献中に記載された方法（Ｊｏｎｅｓ等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ，１９８４年、２７巻、１０５７−１０６６頁）により合成し得る。
【００２４】
上記の工程中の中間体及び所望の化合物は、有機合成化学において用いられる慣用の精製方法、例えば、ろ過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶化及び様々な種類のクロマトグラフィーにより単離及び精製し得る。中間体はまた、単離せずに引き続く反応に用いられ得る。
【００２５】
本発明の酸付加塩は、塩基化合物を、水性溶媒媒体又はメタノール又はエタノールのような好適な有機溶媒中の実質的に当量の選択された無機又は有機酸を用いて処理することにより容易に合成し得る。注意深い溶媒の留去の後、所望の固体塩を得る。
【００２６】
本発明の塩基化合物の医薬品として許容できる酸付加塩を合成するために用いられる酸
は、無毒性の酸付加塩を形成する酸であり、即ち、医薬品として許容できるアニオンを含む塩であり、例えば、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩又は重硫酸塩、リン酸塩又は過リン酸塩（ａｃｉｄ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩又は酸性クエン酸塩、酒石酸塩又は酸性酒石酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、サッカラート、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩及びパモエート［即ち、１，１'−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエート）］塩であり得る。
【００２７】
化合物（Ｉ）の四級塩が所望される場合、遊離塩基の形にある化合物（Ｉ）は、好適な溶媒中に溶解され、次いで、ハロゲン化アルキルの添加により塩を形成する。反応は０℃ないし反応に採用された溶媒の沸点までの温度において行われ、そして反応は０．５ないし２４時間で完了する。
【００２８】
化合物（Ｉ）及びその酸付加塩は水又は種々の溶媒の付加化合物の形であり得、これらもまた、本発明の範疇である。
【００２９】
生物学的活性
本発明の化合物は、癌治療、特に結腸癌及び白血病に用いられ得る。さらに、本化合物は、抗多剤耐性の特性を示す。
【００３０】
本発明の化合物（化合物１−７）を、ヒトＭｏｌｔ ４／Ｃ８及びＣＥＭ Ｔリンパ球を用い処理することによりトランスフェクトしたヒト細胞についてのその細胞毒性を評価した。
さらに、それらを、マウスＬ１２１０細胞の増殖を阻害する能力、即ち多くの臨床的に有用な抗癌剤の能力を評価した。結果を、表１にＩＣ50（マイクロモル）として示す。ＩＣ50（マイクロモル）は、細胞の増殖を５０％まで抑制するために必要な化合物の濃度を示す。結果は化合物１０及びメルファランと比較する。メルファランは、細胞構成要素をアルキル化することによりその効果を発揮する抗がん剤である。ほとんど全ての場合において、本発明の化合物は、Ｍｏｌｔ ４／Ｃ８及びＣＥＭアッセイの両方においてメルファランより強力であった。
【００３１】
本発明の多くの化合物を、さらに種々のヒト悪性細胞株について評価した。９の異なる腫瘍性疾患、即ち、白血病、黒色腫、非小細胞肺癌、結腸癌、中枢神経系癌、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌及び乳癌からの平均して４９細胞株を用いた。細胞株の大部分に対し、試験した化合物は、表２に示すようにメルファランのものより低値の平均ＩＣ50値を有していた。例えば、６ｂ及び６ｄは、それぞれメルファランの４８倍及び３８倍以上の有効性を有していた。特に、それらのＩＣ50は結腸及び白血病性腫瘍について低値であった。
【００３２】
新規の抗腫瘍性剤の大切な特徴は、対応する正常組織よりも悪性腫瘍細胞に対しより高い毒性を示すことである。細胞株についての細胞毒性の違いは、化合物が、一般的な殺生物剤とは対照的に、選択的な毒性を示しており；そのような選択性は、関連非悪性細胞についてよりも腫瘍細胞の選択的な致死を生み出すことなのかもしれない。したがって、各々の化合物の選択的指標（ＳＩ）値は、化合物に対して最も感受性の高い細胞株と最も感受性の低い細胞株との間のＩＣ50値の比として計算した（これもまた表２に示す）。アミド類３ｂ、４ａ、６ａ、６ｂ、６ｄ及び７ｄは、メルファランよりも、より選択的であり、特に４ａ、６ｂ及び６ｄがより選択的であった。
【００３３】
平均ＩＣ50グラフを、既に記載（Ｍ．Ｒ．Ｇｒｅｖｅｒ、Ｓ．Ａ． Ｓｃｈｅｐａｒｔｓｚ，Ｂ．Ａ．Ｃｈａｂｎｅｒ，Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１９巻(１９９２年)６２２−６３８頁）されているように計算した。平均グラフの再検討は、一般的に、化合物のＩＣ50値は、その他の細胞株よりも、結腸及び白血病性腫瘍について、低値であることを明ら
かにした。結腸及び白血病性細胞株の多くのＩＣ50値は全ての細胞株の値よりも低値であったので、これらの悪性腫瘍群への選択的毒性は、表２において明らかである。結腸癌に対する効果的な薬剤は、５−フルオロウラシルである。表２のデータは、表２に示した６種の結腸癌細胞株についての、本検討において合成した化合物のＩＣ50値は、６７％のケースにおいて、５−フルオロウラシルのものよりも低値であること示している。メルファランは、併用化学療法として慢性白血病の治療に用いられており、そして、Ｋ−５６２、ＰＲＭＩ−８２２６．ＨＬ−６０（ＴＢ）及びＳＲ細胞株に対し行われた比較対照の８０％において、シリーズ１，３−７中の化合物はメラルファンよりも低いＩＣ50値を有していた。一連の約４９種のヒト腫瘍細胞株に対しての代表化合物の評価から得られる一般的な結論は、それらの有効性は、実質的に一定の臨床的に用いられる薬剤よりも大きいこと、また、それらが結腸癌及び白血病細胞について特に毒性を有することである。
【００３４】
さらに、化合物をヒト扁平上皮癌（ＨＳＣ−２及びＨＳＣ−４）及びヒト前骨髄球性白血病腫瘍（ＨＬ−６０）について評価し、及び正常細胞、即ち、ヒト歯肉線維芽細胞（ＨＧＦ）、ヒト髄質細胞（ＨＰＣ）及びヒト歯周靭帯線維芽細胞（ＨＰＬＦ）と比較した。これらの３種類の細胞株のＣＣ50値もまた表３に示した。ＣＣ50（マイクロモル）は、細胞の５０％を致死させるのに必要な化合物の濃度を示す。これらのデータを表３に示す。化合物のほとんどはＣＣ50値が１０μモル以下であり、そして３ｃ、４ｃ、５ｃ、及び６ｃの平均ＣＣ50値は、マイクロモル以下である。さらにまた、シリーズ１及び３乃至７の化合物のほとんど全ては、確立された抗癌剤のメルファランよりも、より低い平均ＣＣ50値を有する。
【００３５】
化合物の更なる評価を、これらが多剤耐性（ＭＤＲ）を反転する能力を有するか及び／又は悪性細胞への選択的毒性を示すかについて決定するために行った。シリーズ１及び３−７の化合物の全てを、マウスＬ−５１７８リンパ腫細胞を用いて、それらのＭＤＲの反転能力を試験した。ＭＤＲ反転を測定するためのアッセイは、ヒトＭＤＲ１遺伝子トランスフェクションされたマウスＬ−５１７８リンパ腫細胞を用いた。ローダミン１２３の濃度を、処理及び未処理のトランスフェクト細胞及び親細胞で測定し、蛍光強度の比を蛍光活性比（ＦＡＲ）値とする。ＭＤＲは、細胞からの化合物の流出の増加にとりわけ依存しているため、１以上のＦＡＲ値は、ＭＤＲの反転が生じたことを示す。結果をまた表３に示す。シリーズ３−６の化合物の全てにおいてＭＤＲ反転を示した。非常に大きなＦＡＲ値が、４μｇ／ｍＬの濃度を用いた化合物の多くにおいて得られた。対照薬剤ベラパミル（ｖｅｒａｐａｍｉｌ）１０μｇ／ｍＬの濃度と比較して、本発明の化合物のＦＡＲ値は、ベラパミルのものの８乃至３２倍の範囲であった。
【００３６】
ＭＤＲを反転させ、及び抗腫瘍効果を示す化合物は双峰分布として分類される。それらは、これらの効果の１つのみを有するそれらの化合物よりも優れている。本発明の化合物は、抗腫瘍薬剤、ＭＤＲ反転、又は両方の効能の何れにも用いられ得る。
【００３７】
投与
本発明の組成物は、１以上の医薬品として許容できる担体を用い、慣用の方法により処方され得る。したがって、本発明の活性化合物は、経口、口腔内、鼻腔内、非経口（例えば、静脈内、筋肉内又は皮下）、局所又は直腸投与又は好適な吸入又は吹送による投与の形態に形成し得る。
【００３８】
経口投与のためには、医薬品組成物は、医薬品として許容できる賦形剤例えば、結合剤（例えば、アルファ化したとうもろこしデンプン、ポリビニルピロリドン又はヒドロキシプロピルメチルセルロース）；充填剤（例えば、ラクトース、マイクロクリスタリンセルロース又はリン酸カルシウム）；潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク又はシリカ）；崩壊剤（例えば、ジャガイモデンプン、又はデンプングリコール酸ナトリウ
ム）；又は湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）等と共に慣用の方法により製造されたタブレット（錠剤）又はカプセルの形をとり得る。タブレットは、当業者に良く知られている方法によりコートされ得る。経口投与のための液体剤形は、例えば、溶液、シロップ又は懸濁液の剤形を取り得、又はこれらは、使用前に水又はその他の好適な媒体と共に形成するための乾燥製品として提供し得る。そのような液体製品は、医薬品として許容できる添加物、例えば、懸濁化剤（例えば、ソルビトールシロップ、メチルセルロース又は硬化食用脂）；乳化剤（例えばレシチン又はアラビアゴム）；非水溶性媒体（例えば、アーモンド油、油状エステル又はエチルアルコール）；及び防腐剤（例えば、メチル又はプロピル ｐ−ヒドロキシ安息香酸塩又はソルビン酸）のようなものと共に慣用の方法により、製造し得る。
【００３９】
口腔投与のためには、組成物は、慣用の方法により形成されたタブレット又はトローチの形をとり得る。
【００４０】
本発明の化合物はまた、当業者に良く知られている方法による持続投与のために処方され得る。そのような剤形は、米国特許第３，５３８，２１４号明細書、米国特許第４，０６０，５９８号明細書、米国特許第４，１７３，６２６号明細書、米国特許第３，１１９，７４２号明細書及び米国特許第３，４９２，３９７号明細書に見られ、これらは本明細書に全て参照としてここに取り込まれる。
【００４１】
本発明の化合物は、慣用のカテーテル技術を用いること又は注入を含む注射による非経口投与のために処方され得る。注射のための剤形は投薬形態単位で、例えば、アンプル中又は複数回投与用容器中に添加した防腐剤とともに供し得る。組成物は、油状又は水溶性媒体中の懸濁液、溶液又は乳剤として形成し得、及び懸濁化、安定化及び／又は分散化剤のような配合剤を含有し得る。或いは、活性成分は、使用前に好適な媒体、例えば、滅菌化発熱物質フリーの水を用いて再形成するための粉末形態中に存在し得る。
【００４２】
本発明の化合物はまた、例えば、ココアバター又はその他のグリセリドの慣用基薬を含む坐薬を含むもののような坐薬又は停留浣腸剤のような直腸内投与組成物として処方し得る。
【００４３】
鼻腔内投与又は吸入による投与のために、本発明の活性化合物は、溶液、乾燥粉末剤形、又は患者により押し出す又はポンピングされるポンプ噴霧容器からの懸濁液、又は好適な推進剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、ヘプタフルオロアルカン、二酸化炭素又はその他の好適なガスを用い、加圧容器又はネブライザーからのエアロゾルスプレーとして好適に送達される。加圧されたエアロゾルの場合においては、用量単位は、計算された量を送達するためのバルブを提供することにより決定し得る。加圧された容器又はネブライザーは、活性化合物の溶液又は懸濁液を含み得る。吸入又は吹送に用いるためのカプセル及びカートリッジ（例えば、ゼラチンで製造されたもの）は、本発明の化合物、及びラクトース又はスターチのような好適な粉末基剤の粉末混合物を含有するよう処方され得る。
【００４４】
医薬品として許容できるその塩類及び溶媒和物類を含む本発明の化合物は、単独で使用され得るが、一般的に、化合物（活性成分）が医薬品として許容できる補助剤、希釈剤又は担体と併せたものである医薬品組成物の形で投与されるであろう。投与経路に依存して、医薬品組成物は、全て、全組成に基づく質量パーセントにより、好ましくは０．０５乃至９９％ｗ（質量パーセント）、より好ましくは０．１０乃至７０％ｗの活性成分を含有し、そして、１乃至９９．９５％ｗ、より好ましくは３０乃至９９．９０％ｗの医薬品として許容できる補助剤、希釈剤又は担体を含有するであろう。
【実施例】
【００４５】
合成
一連の１乃至７の化合物の製造において採用した合成化学経路を図１に概説した。シリーズ１中の化合物を、種々のアリールアルデヒド及び４−ピペリドンとの間の酸触媒された縮合により合成した。異なるアロイルクロリドを用いた１ａの反応は、２ａ、ｂの単離に至った。４−ヒドロキシ安息香酸メチルと２−ジメチルアミノエチル塩酸塩とのアルキル化反応は、対応するエーテルを生じ、その加水分解により塩酸塩として単離された４−（２−ジメチルアミノエチルオキシ）安息香酸を合成した。この化合物を、それぞれ３ａ−ｄの生成をもたらす１ａ−ｄを用いて縮合して、対応する酸クロリドへ変換した。同様の合成経路を、２−ジメチルアミノエチル塩酸塩の代わりに、関連するＮ−（２−クロロエチル）アミンの塩酸塩を用いて４ａ−ｄ、５ａ−ｄ及び６ａ−ｄの生成に至った。
ヨウ化メチルを用い４ａ−ｄより派生した遊離塩基の反応は、対応する４級アンモニウム塩７ａ−ｄを生じた。さらに、シリーズ４中の化合物に構造的に関連する、４−（２−ジエチルアミノエトキシ）安息香酸１０の合成を行った。
【００４６】
図１において、シリーズ１、３乃至７中の置換基Ｒは以下の通りである：ａ＝Ｒ＝水素原子；ｂ：Ｒ＝塩素原子；ｃ：Ｒ＝ＮＯ2；ｄ：Ｒ＝ＣＨ3。シリーズ２中のＹ（ＣＨ２）ｏＺ部分の性質は、ａ：Ｙ（ＣＨ2）oＺ＝水素原子；ｂ：Ｙ（ＣＨ2）oＺ＝ＯＣＨ3であ
る。以下の試薬を合成経路中において用いた、即ち、ｉ＝ＨＣｌ／ＣＨ3ＣＯＯＨ；ｉｉ
＝ＣｌＣＯＣ6Ｈ4Ｙ（ＣＨ2）oＺ；ｉｉｉ＝ＣｌＣＨ2ＣＨ2ＺＨＣｌ／Ｋ2ＣＯ3；ｉｖ＝ＮａＯＨ／ＨＣｌ；ｖ＝ＳＯＣｌ2；ｖｉ＝１ａ−ｄ；ｖｉｉ＝ＣＨ3Ｉ／Ｋ2ＣＯ3。
【００４７】
融点は校正しない。元素分析（Ｃ，Ｈ，Ｎ）は１ｄ及び２乃至７において、アルベルタ大学、化学部、微量分析研究室において実施し、そして計算値の０．４％の範囲内であった。化合物３ｂ−ｄ、４ａ、５ａ、ｄ、６ａ、ｃ、ｄ及び７ａ、ｄは半水化物として単離され、７ｂは一水和物として、そして５ｃは１．５モルの水の結晶として得た。シリーズ１−１０の全ての化合物の1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ）及び代表的な化合物
の13Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ）を、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＭ ５００ＦＴ ＮＭＲ機を用いて重水中で測定した。
【００４８】
１ａ−ｄの合成：化合物１ａ−ｄを文献的方法により合成した（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ４４巻、５８６頁（２００１年））。一般的に、適切なアリールアルデヒド（３６．７１ｍｍｏｌ）を酢酸（３５ｍＬ）中の４−ピペリドン塩酸塩一水和物（１３．０３ｍｍｏｌ）の懸濁液に加えた。この混合溶液を乾燥塩化水素を透明な溶液が得られる時間である０．５時間の間通した。室温で２４時間攪拌した後、沈殿物を集め、そしてアセトン（２５ｍＬ）中の飽和炭酸カリウム溶液（２５ｗ／ｖ％、２５ｍＬ）の混合水溶液中へ添加した；得られた混合物を０．５時間攪拌した。遊離塩基を集め、水（５０ｍＬ）で洗浄し、そして乾燥した。化合物を再結晶した。１ｄはクロロホルム−エタノールより再結晶化し目的物を得た。
【００４９】
３，５−ビス（４−メチルフェニルメチレン）−４−ピペリドン（１ｄ）．Ｍ．ｐ．１８０−１８１℃。収率：７９％。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：２．４０（ｓ，６Ｈ），４．１６（ｓ，４Ｈ），７．２４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．７５Ｈｚ），７．３１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．８５Ｈｚ），７．８０（ｓ，２Ｈ）．観測値Ｃ，８２．８７；Ｈ，６．９４；Ｎ，４．６０％．分析値（Ｃ26Ｈ21ＮＯ2）はC,８３．１３；Ｈ，６．９８；Ｎ ４．６２％
を必要とする。
【００５０】
２ａ，ｂの合成のための一般的な方法：アロイルクロリド（０．０１５ｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（５０ｍＬ）溶液を、１ａ（０．０１ｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．０３ｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタンン（３０ｍＬ）の溶液へ５〜６℃において０
．５時間以上かけて添加した。室温で６時間攪拌した後、溶媒を減圧留去した。炭酸カリウム（１０ｗ／ｖ％、５０ｍＬ）水溶液を残渣に加え、そして生じたスラリーを室温で４時間攪拌した。沈殿物を集め、水で洗浄し、そして乾燥した。生成物は、クロロホルム−メタノールから再結晶化によって精製した。
【００５１】
１−ベンゾイル−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン（２ａ）。
融点１６５−１６６℃。収率：８５％。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：４．７２（ｂｓ，２Ｈ），５．０４（ｂｓ，２Ｈ），７．０６（ｔ，２Ｈ），７．２２（ｄ，４Ｈ），７．３８（ｂｓ，９Ｈ），７．９２（ｓ，２Ｈ）．観測値Ｃ，８２．０２；Ｈ，５．４９；Ｎ，３．５６％．分析値（Ｃ26Ｈ21ＮＯ2）はＣ，８２．３０；Ｈ，５．５８；Ｎ ３．６９
％を必要とする。
【００５２】
１−（４−メトキシベンゾイル）−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン（２ｂ）。融点１７７−１７８℃。収率：７２％。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）３．７０（ｓ，３Ｈ），４．８７（ｂｓ，４Ｈ），６．５１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．６２Ｈｚ），７．１７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．６９Ｈｚ），７．４０（ｂｓ，１０Ｈ），１０．０７（ｓ，２Ｈ）．観測値Ｃ，７９．１９；Ｈ，５．７２；Ｎ，３．２５％．分析値（Ｃ27Ｈ33ＮＯ3）はＣ，７９．１９；Ｈ，５．６６；Ｎ ３．４２％を必要とする。
【００５３】
シリーズ３−６の合成の一般的な手順：シリーズ３−６の化合物の合成に用いた一般的な方法を４ａの合成により例示した。１０の混合物（下記参照）（４．１０ｇ、０．０１５ｍｏｌｅ）、塩化チオニル（２３．１０ｇ、２ｍｏｌ）及びジメチルホルムアミド（０．０１ｍＬ）を３時間還流し加熱した。減圧下留去により相当する酸クロリドの単離に至り、これを１，２−ジクロロエタン（５０ｍＬ）に溶解し、そして１ａ（２．７５ｇ、０．０１ｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３．０３ｇ、０．０３ｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン(３０ｍＬ)の溶液に５−６℃において０．５時間かけて加えた。室温で６時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去した。得られた固体を炭酸カリウム（１０ｗ／ｖ％、５０ｍＬ）の水溶液に懸濁させ、そして室温で４時間攪拌した。沈殿物を集め、水で洗浄し、乾燥して１−［４−（２−ジエチルアミノエチルオキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン、即ち対応する４ａの遊離塩基を得た。塩酸塩は、この遊離塩基をイソプロパノール及びクロロホルム（３：２、５０ｍＬ）の混合液中に溶解し、そして活性炭（０．５ｇ）の添加後、混合物を室温で１時間攪拌して合成した。溶液を乾燥塩化水素ガスで酸性にし、そしてその混合液を室温で１時間攪拌した。溶媒を減圧下留去し、粘着性の油状物を得て、そこにアセトン（５０ｍＬ）を加え、そして混合物を０．５時間還流下加熱した。室温まで冷却し、沈殿を集め、そしてアセトンから再結晶化し４ａを得た。類似体の４ｂ−ｄは、イソプロパノールを４ｂ及び４ｃの再結晶化溶媒として用いたことを除いて、同様の手順で合成した。シリーズ３、５及び６は同様の方法で、４−ヒドロキシ安息香酸メチル及び適当な２−クロロ−Ｎ−置換のエチルアミン塩酸塩より得た。３ａ−ｄ、５ａ，ｂ，及び６ａ−ｄの再結晶化に用いた溶媒はイソプロパノールであった。ジエチルエーテル−メタノールを５ｃの精製に用い、一方、５ｄはアセトンより再結晶化した。
【００５４】
［４−（２−ジメチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩（３ａ）．融点２４４−２４５℃．収率：７６％。1
Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：２．８３（ｓ，６Ｈ），３．４６（ｔ，２Ｈ），４．２
２（ｔ，２Ｈ），４．８０（ｂｓ，４Ｈ），６．５５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．５５Ｈｚ），７．０８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．６５Ｈｚ），７．３７（ｂｓ，１０Ｈ），７．７６（ｓ，２Ｈ），１１．０８（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，７１．８０；Ｈ，５．９０；Ｎ，５．５０％，分析値（Ｃ30Ｈ31ＣｌＮ2Ｏ3）はＣ，７１．６３；Ｈ，６．２１；Ｎ ５．５７％を必要とする。
【００５５】
３，５−ビス（４−クロロフェニルメチレン）−１−［４−（２−ジメチルアミノエトキシ）フェニル−カルボニル］−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（３ｂ）。融点２５０−２５１℃．収率：７１％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：２．９２（ｓ，６Ｈ），３．４７（ｔ，２Ｈ），４．２２（ｔ，２Ｈ），４．８１（ｂｓ，４Ｈ），６．５８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．６１Ｈｚ），７．１４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．６５Ｈｚ），７．３９（ｍ，８Ｈ），７．８２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．７５Ｈｚ），１２．８４（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，６２．４５；Ｈ，５．１５；Ｎ，４．８６％．分析値（Ｃ30Ｈ29Ｃｌ3Ｎ2Ｏ3．０．５
Ｈ2Ｏ）はＣ，６２．０２；Ｈ，５．０３；Ｎ ４．８２％を必要とする。
【００５６】
１−［４−（２−ジメチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−ニトロフェニルメチレン）４−ピペリドン塩酸塩半水和物（３ｃ）．
融点２１５−２１７℃．収率：６２％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：２．７８（ｓ，６Ｈ），３．４２（ｔ，２Ｈ），４．２１（ｔ，２Ｈ），４．８５（ｂｓ，４Ｈ），６．７０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．２８Ｈｚ），７．１５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．２５Ｈｚ），７．７２（ｍ，４Ｈ），７．８２（ｓ，２Ｈ），１０．２７（ｂｓ，４Ｈ），１１．０８（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，５９．４５；Ｈ，４．９３；Ｎ，９．０８％．分析値（Ｃ30Ｈ29ＣｌＮ4Ｏ7．０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，５９．８５；Ｈ，４．８５；Ｎ ９．３０％を必
要とする。
【００５７】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−メチルフェニル−メチレン）−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（３ｄ）．融点２２４−２２６℃．収率：６４％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：２．４０（ｓ，６Ｈ），２．９０（ｔ，２Ｈ），３．４３（ｔ，２Ｈ），４．４２（ｔ，２Ｈ），４．８７（ｂｓ，４Ｈ），６．５８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．１０Ｈｚ），７．２３（ｍ，１０Ｈ），７．８８（ｓ，２Ｈ），１３．０８（ｂｒｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，７１．３８；Ｈ，６．７５；Ｎ，５．２１％．分析値（Ｃ32Ｈ35ＣｌＮ2Ｏ3．０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，７１．１６；Ｈ，６．５３
；Ｎ ５．１８％を必要とする。
【００５８】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（４ａ）．融点１８４−１８５℃．収率：７２％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４５（ｔ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．２２（
ｍ，４Ｈ，２ｘＮＣＨ2ＣＨ3），３．４０（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ），４．４１（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ），４．８５（ｂｓ，４Ｈ，２ｘ ピペリジルのＮＣＨ2），６
．５０（ｄ，２Ｈ，アリールのＨ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），７．１７（ｄ，２Ｈ，アリールのＨ，Ｊ＝９．０５Ｈｚ），７．４４（ｂｓ，１０Ｈ，アリールのＨ），７．９２（ｓ，２Ｈ，＝ＣＨ），１２．７０（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１８７
．４１（ＣＯ），１７０．１４（−ＣＯ−Ｎ−），１５８．７７，１３４．８８，１３２．２１，１３０．７７，１３０．０８，１２９．７０，１２９．２５，１２７．９９，１１４．１９，６３．０５（ＯＣＨ2），５０．９５（ＯＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ），４７．３９
（ＮＣＨ2），１０．８９（ＣＨ3）．観測値Ｃ，７１．２２；Ｈ，６．４１；Ｎ，４．７９％．分析値（Ｃ32Ｈ35ＣｌＮ2Ｏ3．０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，７１．１６；Ｈ，６．７１；
Ｎ ５．１８％を必要とする。
【００５９】
３，５−ビス（４−クロロフェニルメチレン）−１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニル−カルボニル］−４−ピペリドン塩酸塩（４ｂ）。融点２１０−２１１℃．収率：６８％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４５（ｔ，６Ｈ），３．２２（ｂｓ，４Ｈ），３．４１（ｔ，２Ｈ），４．４５（ｔ，２Ｈ），４．８１（ｂｓ，４Ｈ），６．５７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．３４Ｈｚ），７．１７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．３０Ｈｚ），７．３１（ｍ，４Ｈ），７．４１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．５４Ｈｚ），７．８４（ｓ，２Ｈ）
，１２．７０（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，６４．２８；Ｈ，５．２６；Ｎ，４．９８％．分析値（Ｃ32Ｈ33Ｃｌ3Ｎ2Ｏ）はＣ，６４．０６；Ｈ，５．５４；Ｎ ４．６７％を必要とする。
【００６０】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−ニトロフェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩（４ｃ）．融点１９７−１９８℃．収率：６１％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４６（ｔ，６Ｈ），３．１９（ｂｓ，２Ｈ），３．２６（ｂｓ，２Ｈ），４．４５（ｔ，２Ｈ），４．４５（ｔ，２Ｈ），４．８２（ｂｓ，４Ｈ），６．６０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．２５Ｈｚ），７．１４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．２５Ｈｚ），７．５１（ｂｓ，４Ｈ），７．８９（ｓ，２Ｈ），１０．２６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．３５Ｈｚ），１２．５７（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，６２．０６；Ｈ，５．３８；Ｎ，９．１９％．分析値（Ｃ32Ｈ35ＣｌＮ4Ｏ7）はＣ，６１．８８；Ｈ，５．３６；Ｎ ９．０２％を必要とする。
【００６１】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−メチルフェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩（４ｄ）．融点２０４−２０５℃．収率：６２％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４５（ｔ，６Ｈ），２．４０（ｓ，６Ｈ），３．２２（ｍ，４Ｈ），３．４０（ｔ，２Ｈ），４．４６（ｔ，２Ｈ），４．８７（ｂｓ，４Ｈ），６．５７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．５３Ｈｚ），７．２３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．３７Ｈｚ），７．３２（ｍ，４Ｈ），７．８８（ｓ，２Ｈ），１２．６２（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ７３．３４；Ｈ，６．８６；Ｎ，５．３６％．分析値（Ｃ34Ｈ39ＣｌＮ2
Ｏ3）はＣ，７３．０４；Ｈ，７．０３；Ｎ ５．０１％を必要とする。
【００６２】
１−［４−｛２−（１−ピペリジニル）エトキシ｝フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−メチルフェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（５ａ）．融点２１４−２１５℃．収率：５２％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４３（ｔ，１Ｈ），１．８８（ｔ，３Ｈ），２．２８（ｑ，２Ｈ），２．７６（ｔ，２Ｈ），３．３４（ｂｓ，２Ｈ），３．６０（ｔ，２Ｈ），４．４４（ｂｓ，２Ｈ），４．８６（ｂｓ，４Ｈ），６．５０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．７５Ｈｚ），７．１６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．３８（ｂｓ，１０Ｈ），７．９０（ｓ，２Ｈ），１２．６１（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ７１．４８；Ｈ，６．３８；Ｎ，５．０４％．分析値（Ｃ33Ｈ35ＣｌＮ2Ｏ3・０．５Ｈ2Ｏ）は
Ｃ，７１．７９；Ｈ，６．３８；Ｎ ５．０７％を必要とする。
【００６３】
３，５−ビス（４−クロロフェニルメチレン）−１−［４−｛２−（１−ピペリジニル）エトキシ｝フェニルカルボニル］−４−ピペリドン塩酸塩（５ｂ）。融点２５７−２５８℃．収率：７５％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４４（ｑ，１Ｈ），１．９２（ｔ，３Ｈ），２．３２（ｑ，２Ｈ），２．８０（ｑ，２Ｈ），３．３８（ｂｓ，２Ｈ），３．６３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．２３Ｈｚ），４．５４（ｂｓ，２Ｈ），４．８０（ｂｓ，４Ｈ），６．５７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．８４Ｈｚ），７．１７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．９９Ｈｚ），７．３４（ｍ，８Ｈ），７．９０（ｓ，２Ｈ）１２．６８（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ，６４．３５；Ｈ，５．３９；Ｎ，４．４５％．分析値（Ｃ33Ｈ33Ｃｌ3Ｎ2Ｏ3）はＣ
，６４．７７；Ｈ，５．４４；Ｎ ４．５８％を必要とする。
【００６４】
３，５−ビス（４−ニトロフェニルメチレン）−１−［４−｛２−（ピペリジニル）エトキシ｝フェニルカルボニル］−４−ピペリドン塩酸塩１．５水和物（５c）。融点２２４
−２２６℃．収率：６４％．1Ｈ−ＮＭＲ（DMSO−ｄ6）：１．４２（ｔ，１Ｈ），１．８１（ｔ，３Ｈ），２．０４（ｑ，２Ｈ），２．８６（ｑ，２Ｈ），３．３６（ｄ，２Ｈ），３．４８（ｍ，２Ｈ），４．３２（ｂｓ，２Ｈ），４．７５（ｂｓ，４Ｈ），６．５６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．２５Ｈｚ），７．０７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．１０Ｈｚ），７．６０（ｍ，４Ｈ），７．７８（ｓ，２Ｈ）１０．１６（ｂｓ，４Ｈ），１１．５３（ｓ，
１H）．観測値Ｃ，７１．３８；Ｈ，６．７５；Ｎ，５．２１％．分析値（Ｃ32Ｈ35Ｃｌ
Ｎ2Ｏ3・１．５Ｈ2Ｏ）はＣ，７１．１６；Ｈ，６．５３；Ｎ ５．１８％を必要とする
。
【００６５】
３，５−ビス（４−メチルフェニルメチレン）−１−「４−｛２−（１−ピペリジニル）エトキシ｝フェニルカルボニル」−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（５ｄ）。融点１０５℃（分解）．収率：６５％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４２（ｑ，１Ｈ），１．８９（ｔ，３Ｈ），２．２２（ｑ，２Ｈ），２．８０（ｂｓ，２Ｈ），３．４０（ｂｓ，２Ｈ），３．６５（ｄ，２Ｈ，J=９．５６Ｈｚ），４．４８（ｂｓ，２Ｈ），４．８８（ｂｓ，４Ｈ），５．４４（ｂｓ，２Ｈ）６．５６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．９１Ｈｚ），７．２３（ｍ，１０Ｈ），７．９９（ｓ，２Ｈ），１１．８８（ｂｓ，１H）．観測値Ｃ，７１
．３８；Ｈ，６．７５；Ｎ，５．２１％．分析値（Ｃ32Ｈ35ＣｌＮ2Ｏ3・０．５Ｈ2Ｏ）
はＣ，７１．１６；Ｈ，６．５３；Ｎ ５．１８％を必要とする。
【００６６】
１−［４−｛２−（４−モルフォリニル）エトキシ｝フェニルカルボニル］−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（６ａ）．融点２０８−２０９℃．収率：７３％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：３．０５（ｑ，２Ｈ），３．４０（ｂｓ，２Ｈ），３．５３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１２．０２Ｈｚ），４．０２（ｄｄ，２Ｈ），４．３０（ｔ，２Ｈ），４．４７（ｂｓ，２Ｈ），４．８６（ｂｓ，４Ｈ），６．５１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．５６Ｈｚ），７．１９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．５０Ｈｚ），７．４４（ｂｓ，１０Ｈ），７．９２（ｓ，２Ｈ），１３．６９（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ６９．５４；Ｈ，５．９５；Ｎ，４．９６％．分析値（Ｃ32Ｈ33ＣｌＮ2Ｏ4．０．５Ｈ2Ｏ）はＣ
，６９．３６；Ｈ，６．００；Ｎ ５．０５％を必要とする。
【００６７】
３，５−ビス（４−クロロフェニルメチレン）−１−「４−｛２−（４−モルフォリニル）エトキシ｝フェニルカルボニル」−４−ピペリドン塩酸塩（６ｂ）。融点２４０−２４１℃．収率：７４％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：３．０６（ｂｓ，２Ｈ），３．４０（ｂｓ，２Ｈ），３．５５（ｔ，２Ｈ），４．０４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１１．９７Ｈｚ），４．２９（ｔ，２Ｈ），４．３０（ｔ，２Ｈ），４．５０（ｂｓ，２Ｈ），４．８１（ｂｓ，４Ｈ）６．５９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．３０Ｈｚ），７．１４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．４７Ｈｚ），７．５１（ｍ，４Ｈ），７．９０（ｓ，２Ｈ），１０．２６（ｂｓ，４Ｈ），１３．５９（ｓ，１H）．観測値Ｃ，６２．３９；Ｈ，４．９４；Ｎ，４．４７％．分析値
（Ｃ32Ｈ31Ｃｌ3Ｎ2Ｏ4）はＣ，６２．６０；Ｈ，５．０９；Ｎ ４．５６％を必要とす
る。
【００６８】
１−［４−｛２−（４−モルフォリニル）エトキシ｝フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−ニトロフェニルメチレン）−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（６ｃ）．融点２２４−２２６℃．収率：６４％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：３．０５（ｑ，２Ｈ），３．４０（ｂｓ，２Ｈ），３．５３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１２．０２Ｈｚ），４．０２（ｄｄ，２Ｈ），４．３０（ｔ，２Ｈ），４．４７（ｂｓ，２Ｈ），４．８６（ｂｓ，４Ｈ），６．５１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．５６Ｈｚ），７．１９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．５０Ｈｚ），７．４４（ｂｓ，１０Ｈ），７．９２（ｓ，２Ｈ），１３．５９（ｂｓ，１Ｈ）．観測値Ｃ５９．５２；Ｈ，４．７２；Ｎ，１０．５１％．分析値（Ｃ32Ｈ31ＣｌＮ4Ｏ8．０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，５９．６７；Ｈ，４．８５；Ｎ １０．６９％を必要とする。
【００６９】
３，５−ビス（４−メチルフェニルメチレン）−１−［４−｛２−（４−モルフォリニル）エトキシ｝フェニルカルボニル］−４−ピペリドン塩酸塩半水和物（６ｄ）。融点２３５−２３６℃．収率：６６％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：２．４０（ｓ，３Ｈ），３．０３（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｂｓ，２Ｈ），３．５４（ｄ，２Ｈ，J=１１．９８Ｈｚ），４．０２（ｄｄ，２Ｈ），４．２９（ｔ，２Ｈ），４．５０（ｂｓ，２Ｈ），４．８７
（ｓ，４Ｈ）６．５８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．６３Ｈｚ），７．２４（ｍ，１０Ｈ），７．８８（ｓ，２Ｈ），１３．６８（ｂｓ，１H）．観測値Ｃ，７０．３９；Ｈ，６．６９
；Ｎ，４．７９％．分析値（Ｃ34Ｈ37ＣｌＮ2Ｏ4・０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，７０．１５；Ｈ
，６．５７；Ｎ ４．８１％を必要とする。
【００７０】
７ａ−ｄの合成の一般的な手順：活性炭（０．５ｇ）を４ａ（上記参照）（４．９５ｇ、０．０１ｍｏｌ）の遊離塩基のアセトン（２５ｍＬ）溶液へ加え、そしてこの混合物を室温で１時間攪拌した。懸濁液をセライトろ過し、そしてセライトベッドをアセトン（１０ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ液へヨウ化メチル（２．１３ｇ、０．０１５ｍｏｌ）を加え、そしてこの混合物を室温で４−５時間攪拌した。生じた沈殿を集め、乾燥しそしてジエチルエーテル／メタノールより再結晶化し所望の化合物を得た。
【００７１】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（フェニルメチレン）−４−ピペリドン メチオダイド（７ａ）．融点１６１−１６２℃．収率：８５％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１．４５（ｔ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．３４（
ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ3），３．７０（ｍ，４Ｈ，２ｘ ＮＣＨ2ＣＨ3），４．１７（ｂｓ
，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ），４．３９（ｂｓ，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ），４．８６（ｂｓ，４Ｈ，ピペリジルのＨ），６．５６（ｄ，２Ｈ，アリールのＨ，Ｊ＝１０．５８Ｈｚ），７．１９（ｄ，２Ｈ，アリールのＨ，Ｊ＝１０．０３Ｈｚ），７．３９（ｂｓ，１２Ｈ，アリールのＨ），７．９１（ｓ，２Ｈ，オレフィンのＨ）．観測値Ｃ６１．１１；Ｈ，５．６４；Ｎ，４．２３％．分析値（Ｃ33Ｈ37ＩＮ2Ｏ3・０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，６１．３
９；Ｈ，５．７７；Ｎ ４．３３％を必要とする。
【００７２】
３，５−ビス（４−クロロフェニルメチレン）−１−［４−(ジエチルアミノエトキシ)フェニルカルボニル］−４−ピペリドン メチオダイド（７ｂ）。融点２２０−２２３℃．収率：６９％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：１．３２（ｔ，６Ｈ），３．０７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．９９Ｈｚ），３．４５（ｔ，４Ｈ），３．７４（ｔ，２Ｈ），４．３０（ｂｓ，１Ｈ），４．３９（ｂｓ，１Ｈ），４．６１（ｂｓ，４Ｈ）６．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．２２Ｈｚ），７．１１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．３５Ｈｚ），７．２３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．３６Ｈｚ），７．７１（ｂｓ，１Ｈ），７．８９（ｓ，２H）．観測値Ｃ
，５４．４４；Ｈ，４．７９；Ｎ，３．７５％．分析値（Ｃ33Ｈ35ＩＮ2Ｏ3・０．５Ｈ2
Ｏ）はＣ，５４．７８；Ｈ，４．８７；Ｎ ３．９２％を必要とする。
【００７３】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−ニトロフェニルメチレン）−４−ピペリドン メチオダイド（７ｃ）．融点１９３−１９５℃（分解）．収率：７４％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：１．２４（ｔ，６Ｈ），３．００（ｓ，３Ｈ），３．３８（ｑ，４Ｈ），３．６４（ｔ，２Ｈ），４．２７（ｔ，２Ｈ），４．４０（ｂｓ，４Ｈ），６．７０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．４１Ｈｚ），７．１６（ｄ，２Ｈ，アリールのＨ，Ｊ＝１０．３９Ｈｚ），７．７４（ｂｓ，４Ｈ），７．８３（ｓ，２Ｈ），１０．２７（ｂｓ，４Ｈ）．観測値Ｃ５４．４１；Ｈ，４．７１；Ｎ，７．６０％．分析値（Ｃ33Ｈ35ＩＮ4Ｏ7）はＣ，５４．５５；Ｈ，４．８６；Ｎ ７．７１％を必要とする。
【００７４】
１−［４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（４−メチルフェニルメチレン）−４−ピペリドン メチオダイド（７ｄ）．融点２１２−２１３℃．収率：７２％．1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：１．２４（ｔ，６Ｈ），２．３４（ｓ，６Ｈ），３．０１（ｓ，３Ｈ），３．３９（ｑ，４Ｈ），３．６８（ｔ，２Ｈ），４．３３（ｔ，２Ｈ），４．８７（ｂｓ，４Ｈ），６．７５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．３４Ｈｚ），７．２２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０．３０Ｈｚ），７．２８（ｍ，８Ｈ），７．７２（ｓ，２Ｈ）．観測値Ｃ６２．６５；Ｈ，６．２５；Ｎ，４．１０％．分析値（Ｃ35Ｈ41
ＩＮ2Ｏ3．０．５Ｈ2Ｏ）はＣ，６２．４０；Ｈ，６．１３；Ｎ ４．１５％を必要とす
る。
【００７５】
８ａの合成：３，５−ビス（チオフェン−２−イルメチレン）−ピペリジン−４−オン 塩酸塩（８ａ）：８ａを１ｄと同様な方法で合成した。４−ピペリドン塩酸塩と２−チオフェン−カルボキシアルデヒドを用いた反応で８ａを得た。融点２９７℃（分解）、収率：７２％．δ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：４．４５（ｂｒｓ，４Ｈ，２ｘＮＣＨ2），７．３２（ｔ，２Ｈ，２ｘ Ｃ3−Ｈ），７．７０（ｓ，２Ｈ，２ｘ ＝ＣＨ−イリデンプロトン）
，７．９４−８．０５（ｄ，４Ｈ，２ｘ Ｃ2−Ｈ及び２ｘＣ4−Ｈ）．観測値Ｃ，５５．３６％；Ｈ，４．３０％；Ｎ，４．１９％。分析値（Ｃ15Ｈ14ＣｌＮＯＳ2）は５５．６
３％；Ｈ，４．３６％；Ｎ４．３２％を必要とする。
【００７６】
９ａの合成：１［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）フェニルカルボニル］−３，５−ビス（チオフェン−２−イルメチレン）−ピペリジン−４−オン塩酸塩一水和物（９ａ）：化合物４ａで述べた上記手順に従い、３，５−ビス（チオフェン−２−イルメチレン）−ピペリジン−４−オンとＶ塩酸塩（Ｘ＝ＣＯ，Ｔ＝ＯＨ，Ｙ＝０，ｏ＝２，Ｚ＝Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2）（０．０１５ｍｏｌ）の反応で９ａを得た。融点１９３−１９４℃、収率８
２％，δ（ＣＤＣｌ3）：１．４４−１．４７（ｔ，６Ｈ，２ｘ ＣＨ3），３．１７−３．３１（ｍ，４Ｈ，２ｘ ＮＣＨ2），３．５６（ｂｒｓ，２Ｈ，ＮＣＨ2），４．５３（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ2），４．９３（ｂｒｓ，４Ｈ，２ｘ ＮＣＨ2），６．７５−６．７７（ｄ，２Ｈ，Ｃ2−Ｈ及びＣ6−Ｈ），７．１８−７．１９（ｔ，２Ｈ，２ｘ Ｃ3'−Ｈ），７．３８−７．４０（ｄ，４Ｈ，Ｃ3−Ｈ，Ｃ5−Ｈ及び２ｘ Ｃ4'−Ｈ），７．６６−７．６７（ｄ，２Ｈ，Ｃ2'−Ｈ），１２．６７（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．観測値Ｃ５９．９０％，Ｈ ５．７６％，Ｎ ４．８１％．分析値（Ｃ28Ｈ31ＣｌＮ2Ｏ3Ｓ2・Ｈ2Ｏ）はＣ ５９．９２％，Ｈ５．５６％，Ｎ ４．９９％を必要とする。
【００７７】
１０の合成：４−ヒドロキシ安息香酸メチル（１５．２１ｇ、０．１ｍｏｌ）、無水炭酸カリウム（３４．５５ｇ、０．２５ｍｏｌ）、２−クロロ−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミン塩酸塩（２５．８１ｇ、０．１５ｍｏｌ）、ヨウ化カリウム（０．１６６ｇ、０．００１ｍｏｌ）及びアセトン（７５ｍＬ）を還流しながら１０−９時間加熱した。冷却し、固体をろ過により除去し、そして溶媒を蒸散した。残渣をトルエン（７５ｍＬ）に溶解しそして溶液を水酸化ナトリウム溶液（２％ｗ／ｖ、３０ｍＬ）、そして脱イオン水（２ｘ３０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を除去し、油状物として得た４−（２−ジエチルアミノエチルオキシ）安息香酸メチルをエタノール（５０ｍＬ）に溶解し、そして水酸化ナトリウム溶液（１０．０ｇ，０．２ｍｏｌ）の水（５０ｍＬ）溶液に加えた。この混合物を還流しながら２時間加熱した。エタノールを減圧下留去し、そして水溶液を５−６℃において塩酸（１２Ｎ）を用い酸性にした。固体を集め、水(まえもって５−６℃に冷却したもの)を用いて粉砕し、ろ過し、そして５５−６０℃において減圧下乾燥し、そして水を用いて再結晶化し１０を得た。
【００７８】
４−（２−ジメチルアミノエトキシ）安息香酸塩酸塩（１０）．融点１７０−１７２℃，［文献［２２］，融点１７１−１７４℃］。収率：７３％．1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：１．１７−１．２０（ｔ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．１３−３．２４（ｍ，４Ｈ，２ｘＣＨ2），３．４７−３．４８（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ），４．２６−４．２８（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ2Ｎ），６．８９−６．９１（ｄ，２Ｈ，アリール−Ｈ），７．８０−７．８２（ｄ，２Ｈ，アリール−Ｈ）．
【００７９】
生物学的活性
Ｍｏｌｔ４／Ｃ８、ＣＥＭ，及びＬ１２１０細胞に対する細胞毒性の評価：シリーズ１ないし７の全ての化合物は、ヒトＭｏｌｔ ４／Ｃ８及びＣＥＭ Ｔ−リンパ球並びにマウ
スＬ１２１０細胞に対する評価を行った。さらに、化合物１０はこれらのアッセイに含めた。これらのデータを表１に示す。一連の種々ヒト腫瘍細胞株について種々の化合物の細胞障害能を表２に示す。
【００８０】
シリーズ１乃至７及び１０の化合物及びメルファランは、文献の方法（Ｊ Ｂａｌｚａｒｉｎｉ，Ｅ．Ｄｅ Ｃｌｅｒｃｑ、Ｍ．Ｐ．Ｍｅｒｔｅｓ，Ｄ．Ｓｈｕｇａｒ，Ｐ．Ｆ．Ｔｏｒｒｅｎｃｅ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３１巻（１９８２年）３６７３−３６８２頁）によりＭｏｌｔ ４／Ｃ８、ＣＥＭ及びＬ１２１０細胞に対する評価を行った。これらのアッセイにおいて、少なくとも３種の濃度の化合物を、腫瘍細胞と共に３７℃において４８時間インキュベートし、この時間の後の増殖阻害を測定した。
【００８１】
選択された４−ピペリドンを、文献の方法（Ｍ．Ｒ．Ｂｏｙｄ， Ｋ．Ｄ．Ｐａｕｌｌ、Ｄｒｕｇ．Ｄｅｖ Ｒｅｓ．、３４巻（１９９５年）９１−１０９頁）を用いて、一連の４９（３８−５９）のヒト腫瘍細胞株ついて抗腫瘍活性を評価した。さらに、５−フルオロウラシル及びメルファランの両方を５７細胞株について評価した。このアッセイにおいて、化合物群は、１ａ、４ａ（１０-8Ｍ乃至１０-4Ｍ）、５−フルオロウラシル（１０-6.8Ｍ乃至１０-2.6Ｍ）及びメルファラン（１０-7.6Ｍ乃至１０-3.6Ｍ）を除き、１０-10.3Ｍ乃至１０-4.3Ｍの１０倍希釈列において５種類の濃度を用いて４８時間インキュベ
ートした。１ａ、３ｂ、３ｄ、５ｄ、７ｄ及びメルファランについて計算した平均図中点（ＭＧ ＭＩＤ）はＩＣ50を表した。ＭＧ ＭＩＤは約５０種類の腫瘍細胞株に対する化合物の活性の平均値を表す。以下の場合において、ＩＣ50の計算値が得られなかった、全細胞株数に対する細胞株の数は以下の通りであった［最大又は最小濃度（ｍｏｌａｒ）は括弧内］、即ち、４ａ：２／５３（＜１０-10）、５ｂ：２／５０（＜１０-4.3）、６ａ
：３／４８（＞１０-4.3）、６ｂ：１１／３８（＜１０-10.3）、６ｄ：３／４４（＜１
０-10.3）、７ａ：３６／５２（＞１０-4.3）及び５−フルオロウラシル：３／５７（＞
１０-2.6）。
【００８２】
シリーズ３乃至７における化合物の活性の順位：最初の検討は、アリリデン アリール環に同様の置換基を有するシリーズ３乃至７の化合物のＩＣ50値を比較することを含む。Ｍｏｌｔ４／Ｃ８、ＣＥＭ及びＬ１２１０細胞株のそれぞれにおける化合物のスコアは以下のようにして得た。最も高い活性を有する化合物は５の値を充て、次ぎに最も低いＩＣ50の値をもつ化合物に４等の値を充て、そしてそれ以降も同様に続ける；最も低い活性を有するアミドは１の値を充てた。それぞれのＩＣ50値の標準偏差を考慮した。等位の化合物に得られるスコアを当分し、そして全１５ポイントを、それぞれの比較のために付与した。第二の分析は、三種の細胞株中でアリリデンアリール環中の最適な置換基パターンを見出すために策定した。このようにして、シリーズ３乃至７のそれぞれにおいて、最も活性のある化合物は４の値を与え、二番目に活性のある類似体は３等を付与し、そしてそれ以降も同様にした。合計１０ポイントをそれぞれの比較のために用いた。標準偏差を考慮し、そして同様の活性を有する化合物のスコアを当分した。
【００８３】
ＭＤＲ−反転特性の測定：化合物の多剤耐性（ＭＤＲ）を反転させる活性の評価に用いた手順は既に記載されている（Ｋａｗａｓｅ、Ｍ．，Ｓａｋａｇａｍｉ，Ｈ．，Ｍｏｔｏｈａｓｈｉ、Ｎ．，Ｈａｕｅｒ，Ｈ．，Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ，Ｓ．Ｓ．；Ｓｐｅｎｇｌｅｒ，Ｇ．，Ｖｉｇｙｉｋａｎｎｅ，Ａ．Ｖ．；Ｍｏｌｎaｒ，Ａ．；Ｍｏｌｎaｒ，Ｊ．，Ｉｎ Ｖｉｖｏ、２００５年、１９巻、７０５−７１２頁）。簡潔にいうと、Ｌ−５１７８ＭＤＲ及び親細胞の両方を、熱活性化ウマ血清（１０％）、Ｌ−グルタミン及び抗生物質を含有するＭｃＣｏｙ‘ｓ ５Ａ培地で育成した。ジメチルスルホキシド中の試験化合物（２ｍｇ／ｍＬ、１０μＬ）の溶液を、細胞懸濁液の等分液に添加し、そして室温で１０分間インキュベートした。そしてジメチルスルホキシド中のローダミン１２３の１０μＬ溶液を、最終濃度が５．２μＭと成るように加え、そして細胞をさらに３７℃におい
て２０分間インキュベートした。細胞を二度洗浄し、そしてＰＢＳ（ｐＨ７．４）中に再懸濁させ、その後、細胞の蛍光をＢｅｃｋｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ＦＡＣＳｃａｎ装置を用い測定した。細胞の蛍光発光を処理ＭＤＲ細胞（Ｆ１）、未処理ＭＤＲ細胞（Ｆ２）、処理親細胞（Ｆ３）について測定し、そしてＦＡＲ値を以下の数式から得た；即ち（Ｆ１／Ｆ２）／（Ｆ３／Ｆ４）。
【００８４】
種々の細胞株についての細胞毒性の評価：ＨＳＣ−２、ＨＳＥ−４、ＨＧＦ、ＨＰＣ、ＨＬ−６０及びＨＰＬＦ細胞について、シリーズ１及び３乃至７に於ける化合物のＣＣ50（細胞毒性量（ｃｙｔｏｔｏｘｉｔｙ ｄｏｓｅ））値をＭＴＴアッセイが関与する文献的方法を用いて測定した（Ｋａｗａｓｅ、Ｍ．，Ｓａｋａｇａｍｉ，Ｈ．，Ｍｏｔｏｈａｓｈｉ、Ｎ．，Ｈａｕｅｒ，Ｈ．，Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ，Ｓ．Ｓ．；Ｓｐｅｎｇｌｅｒ，Ｇ．，Ｖｉｇｙｉｋａｎｎｅ，Ａ．Ｖ．；Ｍｏｌｎaｒ，Ａ．；Ｍｏｌｎaｒ，Ｊ．，Ｉｎ Ｖｉｖｏ、２００５年、１９巻、７０５−７１２頁、及びＴａｋｅｕｃｈｉ、Ｒ．，Ｈｏｓｈｉｊｉｍａ，Ｈ．；Ｏｎｕｋｉ，Ｎ．，Ｎａｇａｓａｋａ，Ｈ．；Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ、Ｓ．Ａ．；Ｋａｗａｓｅ、Ｍ．，Ｓａｋａｇａｍｉ，Ｈ．，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２００５年、２５巻、４０３７−４０４２頁）（ＭＴＴアッセイは、細胞増殖（細胞の成長）を測定する研究室検査である。ＭＴＴは、３−（４，５−ジメチルチアゾル−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラアゾリウム ブロマイド）を表す。）細胞は、化合物の種々の濃度を用いて未処理の細胞と共に、２４時間インキュベートし、そして５４０ｎｍにおける吸光度を測定した。ＨＬ−６０アッセイの場合において、トリパンブルー色素排除法を更に行い、そして細胞の生存率を血球計を用いて測定した。ＣＣ50値は用量反応曲線から得た（Ｓａｋａｇａｍｉ、Ｔ．，Ｓａｔｏｈ，Ｋ．，Ｏｈａｔａ，Ｈ．，Ｔａｋａｈａｓｈｉ、Ｈ．、Ｙｏｓｈｉｄａ、Ｈ．，Ｉｉｄａ，Ｍ．，Ｋｕｒｉｂａｙａｓｈｉ、Ｎ．，Ｓａｋａｇａｍｉ，Ｔ．，Ｍｏｍｏｓｅ，Ｋ．，Ｔａｋｅｄａ、Ｍ．，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，１９９６年１６巻２６３５−２６４４頁）。これらの細胞毒性試験において用いた細胞の培養における一般的な方法は既に記載されている（Ｋａｗａｓｅ、Ｍ．，Ｓａｋａｇａｍｉ，Ｈ．，Ｍｏｔｏｈａｓｈｉ、Ｎ．，Ｈａｕｅｒ，Ｈ．，Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ，Ｓ．Ｓ．；Ｓｐｅｎｇｌｅｒ，Ｇ．，Ｖｉｇｙｉｋａｎｎｅ，Ａ．Ｖ．；Ｍｏｌｎaｒ，Ａ．；Ｍｏｌｎaｒ，Ｊ．，Ｉｎ Ｖｉｖｏ、２００５年、１９巻、７０５−７１２頁、及びＴａｋｅｕｃｈｉ、Ｒ．，Ｈｏｓｈｉｊｉｍａ，Ｈ．；Ｏｎｕｋｉ，Ｎ．，Ｎａｇａｓａｋａ，Ｈ．；Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ、Ｓ．Ａ．；Ｋａｗａｓｅ、Ｍ．，Ｓａｋａｇａｍｉ，Ｈ．，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２００５年、２５巻４０３７−４０４２頁）。簡潔にいうと、悪性細胞は、日本の昭和大学のＮａｇｕｍｏ教授より入手した。ＨＧＦ、ＨＰＣ及びＨＰＬＦ細胞は、日本の明海大学倫理委員会（Ｎｏ．０２０６）のガイドラインによりインフォームドコンセントを得た後に、ヒトの歯周組織より調製した。正常細胞は寿命が短いため、３−７ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｄｏｕｂｌｉｎｇ ｔｉｍｅにおける細胞を用いた。ＨＬ−６０腫瘍を除き、細胞は、熱不活性化ＦＢＳ（１０％）を含有するＤＭＥＭ中で３７℃において加湿二酸化炭素雰囲気下で培養し、また、トリプシン処理により継代培養した。ＨＬ−６０細胞は、ＲＰＭＩ １６４０培地を用いた以外は同様の方法で培養した。
【００８５】
ここに言及された全ての参考文献は参照として取り込まれる。
【００８６】
表１．ヒトＭｏｌｔ４／Ｃ８及びＣＥＭ Ｔ−リンパ球及びマウスＬ１２１０細胞に対してのシリーズ１乃至７及び１０の化合物の活性a。
【表１】
a バックグラウンド陰影はＩＣ50値として表される活性を示す、即ち、黒（＜１μＭ），暗灰色（１−１０μＭ），灰色（１１−９９μＭ）、及び明灰色（＞１００μＭ）。
【００８７】
表２．ヒト腫瘍細胞株に対しての代表的な化合物の細胞毒性。
【表２】
a ＳＩの文字は選択指数を表す、即ち、化合物の最小及び最大の感受性細胞のＩＣ50値の比である。
b １ａの塩酸塩をこのアッセイにおいて用いた。
【００８８】
表３．シリーズ１及び３乃至７の化合物のＭＤＲ−反転特性及び細胞毒性。
【表３】
a 蛍光活性比（ＦＡＲ）値は、処理及び未処理マウスＬ−５１７８細胞でのローダミ
ン１２３の蛍光強度の比を表す。対照薬物のベラパミルは、１０μｇ／ｍＬの濃度を用いた場合のＦＡＤ値が５．６１であった。
b ＣＣ50値は、細胞の５０％を殺す化合物の濃度を表し、そして２つの独立した測定
の平均値を表す。
c これらの値は、ＨＳＣ−２，ＨＳＣ−４及びＨＬ−６０悪性細胞のＣＣ50値の平均
値を表す。
d ＳＩの文字は、ＨＳＣ−２、ＨＳＣ−４及びＨＬ−６０腫瘍の平均ＣＣ50値により
ＨＧＦ、ＨＰＣ及びＨＰＬＦ細胞の平均ＣＣ50値を割ることにより算出した選択指数を表す。
e ３ｄの４０μｇ／ｍＬの濃度は、細胞に対し毒性を持つものであった。
【図面の簡単な説明】
【００８９】
図面の簡単な説明
図１は、本発明の幾つかの化合物の合成の略図である。
【図１】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造一般式（Ｉ）により表される４−ピペリドン化合物：
【化１】
ここで、
Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立してアルキル基、アルコキシ基、アリール基、又はヘテロアリール基を表し；
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、水素原子、アルキル基、ヒドロキシアルキル基、又はカルボキレートエステル基を表すが、
ここで、それぞれのＲ3及びそれぞれのＲ4は、同じでも異なっていても良く；
ｍ及びｔはそれぞれ独立して０乃至３の整数を表し；
Ａは水素原子又は
【化２】
を表し、
ここで、
ｎは０乃至４の整数を表し、そして、ベンゼン環上のＹ（ＣＨ2）oＺ置換基の数を表し；
ｏは０乃至４の整数を表し；
Ｘは（ＣＨ2）r、ＣＯ，ＣＯＯ，ＳＯ，ＳＯ2又はＯを表すが、ここでｒは０乃至４
の整数を表し；
ＹはＯ，Ｓ，ＮＨ，Ｎ（アルキル）、Ｎ（アリール）、又は（ＣＨ2）sを表すが、ここで、ｓは０乃至４の整数を表し；
Ｚは水素原子、Ｎ（アルキル）2、ＮＨ（アルキル）、Ｎ（アリール）2、ＮＨ（アリール）、アルキル基、置換されたアルキル基、＋Ｎ（アルキル）3、又は
【化３】
を表し、
ここで、ＢはＯ，Ｓ，（ＣＨ2）q、ＮＨ、Ｎ−アルキル、又はＮ−アリール、そしてｐ及びｑはそれぞれ独立して0乃至４の整数を表す、４−ピペリドン化合物
又はその医薬品として許容できる塩であるが、
ただし、Ａ＝水素原子又はＨ・ＨＣｌ、Ｒ3及びＲ4＝水素原子、そしてｍ及びｔが０の
とき、Ｒ1及びＲ2は両方ともフェニル基でなく、両方とも４−クロロフェニル基でなく、又は両方とも4-ニトロフェニル基でもない。
【請求項２】
Ａが水素原子を表し、ｍ及びｔが０であり、そしてＲ3及びＲ4が水素原子である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ａが下記式
【化４】
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｙ（ＣＨ2）oＺがベンゼン環の２，３又は４位に位置するものである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｙ（ＣＨ2）oＺがベンゼン環の４位に位置するものである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ3及びＲ4が水素原子である、請求項３乃至５の何れかに記載の化合物。
【請求項７】
ｍ及びｔが０である、請求項３乃至６の何れか1項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｙ（ＣＨ2）oＺがベンゼン環の４位に位置するものであり、Ｒ3及びＲ4が水素原子であり、ＸがＣＯであり、ｍ及びｔが０であり、ｎが１であり、ＹがＯであり、そしてｏが２である、請求項３に記載の化合物。
【請求項９】
Ｙ（ＣＨ2）oＺがベンゼン環の４位に位置するものであり、Ｒ3及びＲ4が水素原子であり、ＸがＣＯであり、ｍ及びｔが０であり、ｎが１であり、ＹがＯであり、そしてｏが０である、請求項３に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙ（ＣＨ2）oＺが水素原子であり、ｍ及びｔが０であり、そしてＲ3及びＲ4がそれぞれ水素原子である、請求項３に記載の化合物。
【請求項１１】
一般式（ＩＶ）の化合物を、
【化５】
一般式Ｔ−Ａ'（Ｖ）と共に、塩基の存在下、反応させる工程を含有し；
ここで、Ｔはハロゲン原子を表し、そして３Ａ'は
【化６】
を表す、請求項３に記載の化合物を合成する方法。
【請求項１２】
溶媒が極性非プロトン性溶媒又はハロゲン化炭化水素系溶媒である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
極性非プロトン性溶媒がテトラヒドロフラン又はアセトニトリルである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
ハロゲン化炭化水素系溶媒がクロロホルム、ジクロロメタン、又は１，２−ジクロロエタンである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
医薬品として許容できる希釈剤又は担体と共に有する、請求項１乃至１０の何れか１項に記載の化合物を含む医薬品組成物。
【請求項１６】
癌治療用途である、請求項１５に記載の医薬品組成物。
【請求項１７】
その患者が必要とする、請求項１乃至１０の何れか１項に記載の化合物の治療上有効量を投与することを含む癌治療方法。
【請求項１８】
癌が、結腸癌又は白血病である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
多剤耐性を反転させる用途である、請求項１５に記載の医薬品組成物。
【請求項２０】
その患者が必要とする、請求項１ないし１０の何れか1項に記載の化合物の治療上有効量
を投与することを含む多剤耐性を反転させる方法。
【請求項１】
構造一般式（Ｉ）により表される４−ピペリドン化合物：
【化１】
ここで、
Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立してアルキル基、アルコキシ基、アリール基、又はヘテロアリール基を表し；
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、水素原子、アルキル基、ヒドロキシアルキル基、又はカルボキレートエステル基を表すが、
ここで、それぞれのＲ3及びそれぞれのＲ4は、同じでも異なっていても良く；
ｍ及びｔはそれぞれ独立して０乃至３の整数を表し；
Ａは水素原子又は
【化２】
を表し、
ここで、
ｎは０乃至４の整数を表し、そして、ベンゼン環上のＹ（ＣＨ2）oＺ置換基の数を表し；
ｏは０乃至４の整数を表し；
Ｘは（ＣＨ2）r、ＣＯ，ＣＯＯ，ＳＯ，ＳＯ2又はＯを表すが、ここでｒは０乃至４
の整数を表し；
ＹはＯ，Ｓ，ＮＨ，Ｎ（アルキル）、Ｎ（アリール）、又は（ＣＨ2）sを表すが、ここで、ｓは０乃至４の整数を表し；
Ｚは水素原子、Ｎ（アルキル）2、ＮＨ（アルキル）、Ｎ（アリール）2、ＮＨ（アリール）、アルキル基、置換されたアルキル基、＋Ｎ（アルキル）3、又は
【化３】
を表し、
ここで、ＢはＯ，Ｓ，（ＣＨ2）q、ＮＨ、Ｎ−アルキル、又はＮ−アリール、そしてｐ及びｑはそれぞれ独立して0乃至４の整数を表す、４−ピペリドン化合物
又はその医薬品として許容できる塩であるが、
ただし、Ａ＝水素原子又はＨ・ＨＣｌ、Ｒ3及びＲ4＝水素原子、そしてｍ及びｔが０の
とき、Ｒ1及びＲ2は両方ともフェニル基でなく、両方とも４−クロロフェニル基でなく、又は両方とも4-ニトロフェニル基でもない。
【請求項２】
Ａが水素原子を表し、ｍ及びｔが０であり、そしてＲ3及びＲ4が水素原子である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ａが下記式
【化４】
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｙ（ＣＨ2）oＺがベンゼン環の２，３又は４位に位置するものである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｙ（ＣＨ2）oＺがベンゼン環の４位に位置するものである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ3及びＲ4が水素原子である、請求項３乃至５の何れかに記載の化合物。
【請求項７】
ｍ及びｔが０である、請求項３乃至６の何れか1項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｙ（ＣＨ2）oＺがベンゼン環の４位に位置するものであり、Ｒ3及びＲ4が水素原子であり、ＸがＣＯであり、ｍ及びｔが０であり、ｎが１であり、ＹがＯであり、そしてｏが２である、請求項３に記載の化合物。
【請求項９】
Ｙ（ＣＨ2）oＺがベンゼン環の４位に位置するものであり、Ｒ3及びＲ4が水素原子であり、ＸがＣＯであり、ｍ及びｔが０であり、ｎが１であり、ＹがＯであり、そしてｏが０である、請求項３に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙ（ＣＨ2）oＺが水素原子であり、ｍ及びｔが０であり、そしてＲ3及びＲ4がそれぞれ水素原子である、請求項３に記載の化合物。
【請求項１１】
一般式（ＩＶ）の化合物を、
【化５】
一般式Ｔ−Ａ'（Ｖ）と共に、塩基の存在下、反応させる工程を含有し；
ここで、Ｔはハロゲン原子を表し、そして３Ａ'は
【化６】
を表す、請求項３に記載の化合物を合成する方法。
【請求項１２】
溶媒が極性非プロトン性溶媒又はハロゲン化炭化水素系溶媒である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
極性非プロトン性溶媒がテトラヒドロフラン又はアセトニトリルである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
ハロゲン化炭化水素系溶媒がクロロホルム、ジクロロメタン、又は１，２−ジクロロエタンである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
医薬品として許容できる希釈剤又は担体と共に有する、請求項１乃至１０の何れか１項に記載の化合物を含む医薬品組成物。
【請求項１６】
癌治療用途である、請求項１５に記載の医薬品組成物。
【請求項１７】
その患者が必要とする、請求項１乃至１０の何れか１項に記載の化合物の治療上有効量を投与することを含む癌治療方法。
【請求項１８】
癌が、結腸癌又は白血病である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
多剤耐性を反転させる用途である、請求項１５に記載の医薬品組成物。
【請求項２０】
その患者が必要とする、請求項１ないし１０の何れか1項に記載の化合物の治療上有効量
を投与することを含む多剤耐性を反転させる方法。
【公表番号】特表２００９−５１６６５６（Ｐ２００９−５１６６５６Ａ）
【公表日】平成２１年４月２３日（２００９．４．２３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５４０４１８（Ｐ２００８−５４０４１８）
【出願日】平成１８年１１月２２日（２００６．１１．２２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００６／００１９０８
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０５９６１３
【国際公開日】平成１９年５月３１日（２００７．５．３１）
【出願人】（５０８１４４２３３）ユニバーシティ オブ サスカチュワン (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年４月２３日（２００９．４．２３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１１月２２日（２００６．１１．２２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００６／００１９０８
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０５９６１３
【国際公開日】平成１９年５月３１日（２００７．５．３１）
【出願人】（５０８１４４２３３）ユニバーシティ オブ サスカチュワン (1)
【Ｆターム（参考）】
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