説明

新規ベンゾチアゾール及びその医薬としての使用

本発明は、新規化学的化合物、特に新規ベンゾチアゾール誘導体に関し、該化合物を含有する組成物に関し、及び医薬としてのこれらの使用に関する。

【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特に新規化学化合物、とりわけ新規ベンゾチアゾール誘導体、前記誘導体を含有する組成物及び医薬品としてのこれらの使用に関する。
【０００２】
より具体的には、本発明は、タンパク質、特にキナーゼの活性の調節による、抗癌活性を有するベンゾチアゾールの新規スルホン酸エステルに関する。
【背景技術】
【０００３】
現在のところ、化学療法で使用される市販の化合物の多くは細胞毒性であり、これが副作用及び患者による耐性という大きな問題をもたらす。使用される医薬品が、正常細胞に対して作用を及ぼさずに、癌細胞に対して選択的に作用する限り、これらの効果は限定的であり得る。化学療法の副作用を制限する解決法の一つは、代謝経路に対して、又は、主に癌細胞中で発現し、正常細胞中には殆ど若しくは全く発現しないこれらの経路の構成成分に対して作用する医薬品を使用することに存するかもしれない。
【０００４】
タンパク質キナーゼは、チロシン残基、セリン残基又はスレオニン残基などの、タンパク質の特異的残基のヒドロキシル基のリン酸化を触媒する酵素のファミリーである。このようなリン酸化は、タンパク質の機能を大きく修飾する可能性があるので、特に代謝、細胞増殖、細胞分化、細胞移動又は細胞生存を含む様々な細胞プロセスの制御において、タンパク質キナーゼが重要な役割を果たす。タンパク質キナーゼの活性が関係する様々な細胞機能のうち、ある種のプロセスは、癌疾患及び他の疾患の治療に対する魅力的な対象である。
【０００５】
従って、本発明の目的の一つは、特にキナーゼに対して作用することにより、抗癌活性を伴う組成物を提案することである。それに対して活性の調節が望まれるキナーゼのうち、サイクリン依存性キナーゼ及びＡｕｒｏｒａ−２が好ましい。
【０００６】
細胞周期の進行は、多くの場合、サイクリンファミリーに属するたんぱく質との相互作用によって活性化され、この活性化が基質のリン酸化で終了し、最後に細胞分裂で終了するサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）によって、支配されている。更に、活性化された内因性ＣＤＫ阻害剤（ＩＮＫ４及びＫＩＰ／ＣＩＰファミリー）が、ＣＤＫの活性を負に制御する。正常細胞の増殖は、ＣＤＫ活性化因子（サイクリン）及び内因性ＣＤＫ阻害剤間のバランスに起因する。数種の癌において、これらの細胞周期制御因子のいくつかの発現又は異常な活性が記載されている。
【０００７】
サイクリンＥは、キナーゼＣｄｋ２を活性化し、次いで、タンパク質ｐＲｂをリン酸化するように作用して、不可逆的な細胞分裂及びＳ期への移行（ＰＬ Ｔｏｏｇｏｏｄ、Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｒｅｖｉｅｗｓ（２００１）、２１（６）４７８−４９８）への関与をもたらす。Ｇ１期における進行及びＳ期への移行にとって、キナーゼＣＤＫ２及び、場合によってＣＤＫ３が必要である。サイクリンＥとの複合体の形成中、それらは、ｐＲｂの高リン酸化を維持し、Ｇ１期のＳ期への進行を補助する。サイクリンＡとの複合体では、ＣＤＫ２は、Ｅ２Ｆを不活化する上で役割を果たし、Ｓ期の生成に対して必要である（Ｔ．Ｄ．Ｄａｖｉｅｓ ｅｔ ａｌ、（２００１）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ９，３８９−３）。
【０００８】
ＣＤＫ１／サイクリンＢ複合体は、Ｇ２期及びＭ期間の細胞周期の進行を制御する。ＣＤＫ／サイクリンＢ複合体の負の制御により、Ｇ２期が正確且つ完全に実施される前に、正常細胞がＳ期に移行するのを妨げる（Ｋ．Ｋ．Ｒｏｙ及びＥ．Ａ．Ｓａｕｓｖｉｌｌｅ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｅｓｉｇｎ，２００１，７，１６６９−１６８７）。
【０００９】
ＣＤＫの活性の制御のレベルが存在する。サイクリン依存性キナーゼ活性化剤（ＣＡＫ）は、ＣＤＫに対して正の制御作用を有する。ＣＡＫは、ＣＤＫのスレオニン残基をリン酸化し、標的酵素を完全に活性化する。
【００１０】
細胞周期に関与する分子に欠損が存在することが、ＣＤＫの活性化及び周期の進行をもたらす。癌細胞の細胞増殖を阻止するために、ＣＤＫ酵素の活性を阻害することを望むのは当然のことである。
【００１１】
染色体分離及び紡錘体集合に関与する多数のタンパク質が、酵母及びショウジョウバエ中で確認されている。これらのタンパク質の分解は、染色体分離の欠如及び単極紡錘体又分解された紡錘体をもたらす。これらのタンパク質のうち、それぞれショウジョウバエ及びＳ．セレビシアエ（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）に由来する、Ａｕｒｏｒａ及びＩｐＩ１を含むある種のキナーゼは、染色体の分離及び中心体の分離にとって必要である。酵母ＩｐＩ１のヒト類似体は、近年クローン化されており、様々な研究室により特徴が決定されている。Ａｕｒｏｒａ ２、ＳＴＫ１５又はＢＴＡＫとして知られるこのキナーゼは、セリン／トレオニンキナーゼファミリーに属する。Ｂｉｓｃｈｏｆｆ ｅｔ ａｌ．は、Ａｕｒｏｒａ２が発癌性であり、ヒト結腸直腸癌において増幅されることを示した（ＥＭＢＯ Ｊ、１９９８、１７、３０５２−３０６５）。また、これは、乳癌などの上皮腫瘍に関与する癌においても示されている。
【００１２】
本発明は、新規ベンゾチアゾール誘導体に関する。従って、本発明は、キナーゼを阻害する薬剤としての、とりわけ抗癌剤としてのベンゾチアゾール誘導体の使用に関する。これらのうち、本発明は、好ましくはベンゾチアゾールのスルホン酸エステルに関する。また、本発明は、ヒトでの治療用の医薬品の調製のための前記誘導体の使用に関する。
【００１３】
ベンゾチアゾールのスルホン酸エステルを記載している、これまでに公知の先行技術のうち、下記の一般式
【化１】

【００１４】
（式中、
Ｙ１は、硫黄原子を表すことができ、
ｎは、ゼロと等しくすることができ、
Ｚは、アシルアミノ基であり得、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３及びＸ４基は、Ｈと等しいか、又はアルキルスルホニルオキシ基を表すことができる。）
を有する誘導体の調製方法を記載する公開特許出願ＪＰ０５３９０３６号を挙げることができる。
【００１５】
上述の特許の一般式中に含まれる大半の化合物のうち、本発明の活性化合物に対応する化合物を記載している実施例は存在せず、ベンゾチアゾールの合成についても記載していない。
【発明の開示】
【００１６】
本発明の化合物は、下記の一般式（Ｉ）：
【００１７】
【化２】

（式中、
Ｘは、共有結合、（ＣＨ２）ｎ（ｎは、１又は２に等しい。）から選択される基を表し、
Ａｒは、アリール又はヘテロアリール基を表し、この基は、アルキル基、ハロゲン、ＮＲ１Ｒ２（Ｒ１及びＲ２は、水素基、アルキル、シクロアルキルから選択され、又は複素環基若しくはヘテロアリール基を両者で形成することができ、これらの基自体が場合により置換される。）、ＳＯ２アルク、Ｓアルキル、アルコキシ、ヘテロアリール又はアリール基から選択される基で場合により置換されており、
Ｒが、水素及びアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、シクロアルコキシ、ヘテロシクロアルコキシ又はアミノ基から選択される基を表し；Ｒは、Ｒに対して定義される基と同一の基から選択される１つ以上の基で場合により置換されることができる。）
に対応する。
【００１８】
基Ｒ１及びＲ２上に存在し得る置換基は、特にヒドロキシル、ヘテロアリール、シクロアルキル及びアミノアルキル基から選択される。
【００１９】
本発明において、「アルキル基」とは、１〜１０個の炭素原子を含有する直鎖又は分枝鎖を意味する。
【００２０】
本発明において、「シクロアルキル基」とは、３〜１０個の炭素原子を含有する環状アルキル鎖を意味する。
【００２１】
本発明において、「ヘテロシクロアルキル基」とは、３〜１０の炭素原子並びにＯ、Ｎ及びＳから選択される少なくとも１つの複素原子を含有する環状アルキル鎖を意味する。
【００２２】
本発明において、「ＮＲ１Ｒ２基」とは、アミノ基、好ましくは二級アミノ基、即ち少なくとも１つの置換基が水素である基を意味する。
【００２３】
これらの基は全て、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリール、アリール、アミノ、ヒドロキシル、アルコキシ又はハロゲン基で場合により置換される。
【００２４】
本発明において、「アリール基」及び「ヘテロアリール基」は、場合によりＯ、Ｎ及びＳから選択される一以上の複素原子を持つ単環の基又は別の５員環若しくは６員環に縮合され場合によりＯ、Ｎ及びＳから選択される１ないし３個の複素原子を含む基を意味する。好ましくは、アリール基及びヘテロアリール基のうち、フェニル、ピリジル、ピリミジン、トリアジン、ピロリル、イミダゾリル、チアゾリル、フリル、チエニル、インドリル、アザインダゾリル、イソベンゾフリル、イソベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、アリールビニレン、アリールアミド、アリールカルボキサミド、アラルキルアミン、キノリル、イソキノリル、シノリル、キナゾリル、ナフチリジル、トリアゾリル又はテトラゾリル基を挙げることができる。
【００２５】
アリール及びヘテロアリール基のうち、場合により置換された、フェニル、チエニル、ピラゾリル又はイミダゾリル基を選択するのが好ましい。
【００２６】
フェニル基の置換基のうち好ましいのは、アミノ基及びハロゲン、特に塩素及びフッ素であり、従って、アリール基のうち、ジフルオロフェニル及びトリフルオロフェニル並びにモノアルキルアミノフェニルが特に最も好ましく、アルキル鎖は、ヒドロキシル又はジアルキルアミノ基で場合により置換される。
【００２７】
また、Ｘが共有結合を表し、Ｒがシクロアルキル基を表す式（Ｉ）の化合物の中から選択するのが好ましい。
【００２８】
式（Ｉ）に対応する化合物のうち、次の化合物を挙げることができる：
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−［（ピペリジン−４−カルボニル）アミノ］ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−フルオロベンゼンスルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−シクロペンチルアミノベンゼンスルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）−ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（３−イミダゾール−１−イルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−メチルアミノベンゼンスルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）−ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−［４−（４−ピリド−３−イルイミダゾール−１−イル）ブチルアミノ］ベンゼンスルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（３−イミダゾール−１−イルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−エチルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−［２−（２−ヒドロキシエチルアミノ）エチルアミノ］ベンゼンスルホン酸２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（８−アミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（３−イミダゾール−１−イルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（８−アミノオクタノイルアミノ）−ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−エチルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（８−アミノオクタノイルアミノ）−ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−［２−（２−ヒドロキシエチルアミノ）エチルアミノ］ベンゼンスルホン酸２−（８−アミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（８−アミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（３−ピペリド−４−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（３−イミダゾール−１−イルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（３−ピペリド−４−イルプロピニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−エチルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（３−ピペリド−４−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−［２−（２−ヒドロキシエチルアミノ）エチルアミノ］ベンゼンスルホン酸２−（３−ピペリド−４−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−イソブチルアミノベンゼンスルホン酸２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−イソブチルアミノベンゼンスルホン酸２−（３−ピペリド−４−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−イソブチルアミノベンゼンスルホン酸２−（８−アミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
チオフェン−２−スルホン酸２−［（ピペリジン−４−カルボニル）アミノ］ベンゾチアゾール−６−イルエステル；トリフルオロ酢酸との化合物；
チオフェン−２−スルホン酸２−（３−ピペリド−４−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；トリフルオロ酢酸との化合物；
チオフェン−２−スルホン酸２−（２−アミノアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
チオフェン−２−スルホン酸２−（２−メチルアミノアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；トリフルオロ酢酸との化合物；
チオフェン−２−スルホン酸２−（３−アミノプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；トリフルオロ酢酸との化合物；
チオフェン−２−スルホン酸２−（８−アミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；トリフルオロ酢酸との化合物；
チオフェン−２−スルホン酸２−（３−ジエチルアミノプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；トリフルオロ酢酸との化合物；
チオフェン−２−スルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−［（アゼチジン−３−カルボニル）アミノ］ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（８−アミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−［（１−アミノシクロペンタンカルボニル）アミノ］ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−アセチルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（２−メトキシアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（シクロペンタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（６−アミノヘキサノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（７−アミノヘプタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−イソブチリルアミノ−ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−プロピルアミノ−ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−プロピオニルアミノ−ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（シクロブタン−カルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−フルオロベンゼンスルホン酸２−（３−ピリジン−３−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（３−ピリジン−３−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（３−ピリジン−３−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（１−オキシル−２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（３−ピペリジン−４−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−ブチリルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−ブチリルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステル；トリフルオロ酢酸との化合物；
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−イソブチリルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステル；トリフルオロ酢酸との化合物；
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−ブチリルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステル；トリフルオロ酢酸との化合物；
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−アセチルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−アセチルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド；
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（２−メトキシアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（シクロペンタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（シクロブタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；トリフルオロ酢酸との化合物；
１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−スルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
５−ピリジン−２−イルチオフェン−２−スルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル；
４−（２−メチル−２−ホスホノオキシプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル。
【００２９】
本発明の化合物を調製する方法の一つは、次のとおりスキームで表すことができる：
１．Ｒ＝アルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロアリールである式（Ｉ）の化合物は、合成スキーム１に従って調製できる。
【００３０】
【化３】

【００３１】
本発明の化合物は、５−メトキシベンゾチアゾール−２−イルアミン（市販化合物）から容易に調製できる。
【００３２】
第１段階では、酸性溶媒中、好ましくは酢酸／臭化水素酸水溶液の混合物中で、出発物質を脱メトキシル化する。
【００３３】
第２段階では、適切な溶媒中、ＨＡＴＵ又はＨＢＴＵなどのカップリング剤及びジイソプロピルエチルアミン又はトリエチルアミンなどの塩基の存在下で、５−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イルアミン（２）及び式（３）の酸（一般式（Ｉ）で定義されるＲ）間の反応により５−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イルアミド（４）が得られる。使用可能な溶媒としては、ジメチルホルムアミド及びジクロロメタンを挙げることができる。この反応を実行するために選択される温度は、室温から還流点の間である。
【００３４】
第３段階では、不活性溶媒（アセトン、ＴＨＦ、ジクロロメタン又はトルエン）中で、トリエチルアミン又はピリジンなどの塩基の存在下で、５−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イルアミド（４）及び式（５）の塩化スルホニル（式（Ｉ）で定義されるＸ及びＡｒ）間の反応により、式のスルホンエステル（６）を得る。
【００３５】
ＸＡｒが４−フルオロフェニルに対応する場合、Ｎ−メチルピロリドン又はジメチルホルムアミドなどの非プロトン性溶媒中、９０〜１３０℃の温度で、密閉管中又はマイクロ波によって、式（７）のアミン（Ｒ１Ｒ２は、一般式（Ｉ）で定義されているとおりである。）によるＦの求核置換を実行して、式（８）の誘導体を得る。
【００３６】
２．Ｒ＝アルコキシ、シクロアルコキシ又はヘテロシクロアルコキシである本発明の化合物は、合成スキーム２に従って調製できる。
【００３７】
【化４】

【００３８】
本発明の化合物は、５−メトキシベンゾチアゾール−２−イルアミン（市販化合物）から容易に調製できる。
【００３９】
第１段階では、酸性媒体中、好ましくは酢酸／臭化水素酸水溶液の混合物中で、出発物質を脱メトキシル化する。
【００４０】
第２段階では、不活性溶媒（アセトン、ＴＨＦ、ジクロロメタン又はトルエン）中で、トリエチルアミン又はピリジンなどの塩基の存在下で、５−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イルアミン（２）及び式（３）の塩化スルホニル（Ｘ及びＡｒは、一般式（Ｉ）で定義されているとおりである。）間の反応により、式（４）のスルホンエステルを得る。
【００４１】
ＸＡｒが４−フルオロフェニルに対応する場合、式の誘導体（７）を得るために、Ｎ−メチルピロリドン又はジメチルホルムアミドなどの非プロトン性溶媒中、９０〜１３０℃の温度で、密閉管中又はマイクロ波によって、式（６）のアミン（Ｒ１Ｒ２は、一般式（Ｉ）で定義されているとおりである。）によるＦの求核置換を実行する。
【００４２】
適切な溶媒中、ピリジン、トリエチルアミン又はジイソプロピルエチルアミンなどの有機塩基又は炭酸カリウムなどの無機塩基の存在下での、式（４）及び（７）のアミン並びに式（５）のクロロホルマート（Ｒ３は、一般式（Ｉ）で定義されているとおりである。）間の反応によってカルバマート（８）を得る。使用可能な溶媒には、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン及びジオキサンを挙げることができる。この反応を実行するために選択される温度は、０℃〜還流点の間である。
【００４３】
３．Ｒ＝アルキルアミノ、シクロアルキルアミノ又はヘテロシクロアミノである本発明の化合物は、合成スキーム３に従って調製できる。
【００４４】
【化５】

【００４５】
Ｎ−メチルピロリドン又はジメチルホルムアミドなどの非プロトン性溶媒中、９０℃〜１３０℃で、密閉管中で又はマイクロ波により、式（８）のカルバマート（好ましくは、Ｒ３＝Ｍｅ）及び式（９）のアミン（Ｒ４及びＲ５は、一般式（Ｉ）で定義されているとおりである。）間の反応によって、式（１０）の尿素を得ることができる。
【００４６】
本発明に記載の化合物は、ヒト治療において、特に癌治療において、とりわけＡｕｒｏｒａ−２阻害剤及びＣｄｋ２阻害剤に対して感受性である癌の治療において使用できる。
【実施例】
【００４７】
以下の実施例の補助を得ながら、本発明をさらに完全に説明するが、以下の実施例は、本発明を限定するものと考えるべきではない。
【００４８】
脱離化学イオン化（反応ガス：アンモニア、Ｆｉｎｎｉｇａｎ ＳＳＱ７０００装置）により、ＤＣＩスペクトルを得た。
【００４９】
Ｐｌａｔｆｏｒｍ ＩＩ（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）装置を使用して、電子スプレー（ＥＳ＋）スペクトルを得た。
【００５０】
ＬＣ／ＭＳ分析
ＬＣ／ＭＳ分析方法（方法Ａ１）
ＬＣ／ＭＳ分析は、ＨＰ１１００装置に接続したＭｉｃｒｏｍａｓｓ ＬＣＴモデル装置上で実行した。２００−６００ｎｍの波長範囲におけるＨＰ Ｇ１３１５Ａダイオードアレイ検出器及びＳｅｄｅｘ ６５光拡散検出器を使用して、生成物の存在量を測定した。質量スペクトルは、１８０〜８００の範囲で得た。Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＭａｓｓＬｙｎｘソフトウェアを使用してこのデータを分析した。３．５分間にわたり、１ｍｌ／分の流速で、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）０．０５％（ｖ／ｖ）を含有する水中のＴＦＡ０．０５％（ｖ／ｖ）を含有する５％〜９０％アセトニトリルの直線勾配で溶出し、Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＢＤＳ Ｃ１８カラム、３μｍ（５０×４．６ｍｍ）上にて、分離を行なった。カラム再平衡化時間を含む合計分析時間は、７分である。
【００５１】
ＬＣ／ＭＳ分析方法（方法Ａ２）
Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍモデル装置上で、ＬＣ／ＭＳ分析を実行した。２００−４００ｎｍの波長範囲におけるＨＰ Ｇ１３１５Ａダイオードアレイ検出器及びＳｅｄｅｘ６５光拡散検出器を使用し、生成物の存在量を測定した。質量スペクトルは、５０〜１５００の範囲で得た。Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＭａｓｓＬｙｎｘソフトウェアを使用して、このデータを分析した。９分間にわたり、０．７ｍｌ／分の流速で、ギ酸０．１％（ｖ／ｖ）を含有する水中の直線勾配５％〜９５％アセトニトリルで溶出し、Ｘｔｅｒｒａｌ３．５μｍ（５０×２．１ｍｍ）カラム上にて、分離を行なった。カラム再平衡化時間を含む合計分析時間は、９分である。
【００５２】
分取ＬＣ／ＭＳ精製（方法Ｂ）：
Ｗａｔｅｒｓモデル６００勾配ポンプ、Ｗａｔｅｒｓモデル５１５再生ポンプ、Ｗａｔｅｒｓ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｍａｎａｇｅｒ希釈ポンプ、Ｗａｔｅｒｓモデル２７００自動注入装置、Ｒｈｅｏｄｙｎｅ ＬａｂＰｒｏモデルバルブを２つ、Ｗａｔｅｒｓモデル９９６ダイオードアレイ検出器、ＷａｔｅｒｓモデルＺＭＤ質量分析計及びＧｉｌｓｏｎモデル２０４フラクションコレクタからなるＷａｔｅｒｓ ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘシステムを使用するＬＣ／ＭＳにより、生成物を精製した。このシステムは、Ｗａｔｅｒｓ ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘソフトウェアで調節した。分離は、２つのＷａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙカラム（Ｃ１８、５μＭ、１９×５０ｍｍ、カタログ参照１８６０００２１０）上で交互に行った。トリフルオロ酢酸０．０７％（ｖ／ｖ）を含有する９５／５（ｖ／ｖ）の水／アセトニトリルの混合物で１つのカラムの再生を行ないながら、別のカラムで分離を行なった。トリフルオロ酢酸０．０７％（ｖ／ｖ）を含有する水中のトリフルオロ酢酸０．０７％（ｖ／ｖ）を含有する直線勾配５％〜９５％アセトニトリルを使用し、１０ｍｌ／分の流速にて、これらのカラムを溶出した。分離カラムの出口で、１０００分の１の流出液を、ＬＣ Ｐａｃｋｉｎｇ Ａｃｃｕｒａｔｅにより分離し、メチルアルコールで希釈して、０．５ｍｌ／分の流速にて検出器へ送るが、７５％の流出液をダイオードアレイ検出器へ、残りの２５％を質量分析計へ送る。流出液の残り（９９９／１０００）は、フラクションコレクターへ送られ、ここでは、ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘソフトウェアによって予測される生成物の質量が検出されない限り、フローは廃棄される。検出された質量シグナルが、イオン［Ｍ＋Ｈ］＋及び／又は［Ｍ＋Ｎａ］＋に対応する場合には、目的生成物の分子式がＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘソフトウェアへ供給され、これによって、生成物の収集が開始される。場合によっては、分析ＬＣ／ＭＳの結果に応じて、［Ｍ＋２Ｈ］＋＋に対応する強度のイオンが検出される場合、算出された分子量の半分（ＭＷ／２）に対応する値もＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘソフトウェアに供給される。これらの状況下では、イオン［Ｍ＋２Ｈ］＋＋及び／又は［Ｍ＋Ｎａ＋Ｈ］＋＋の質量シグナルが検出される際にも収集が開始される。生成物は、風袋計量ガラス管中に収集した。収集後、Ｓａｖａｎｔ ＡＥＳ２０００又はＧｅｎｅｖａｃ ＨＴ８遠心エバポレータ中で、この溶媒を蒸発し、溶媒蒸発後のガラス管を秤量することにより、生成物の質量を決定した。
【００５３】
フラッシュクロマトグラフィーによる精製：
０．５バールのアルゴン圧力下にて、粒径１５−３５μｍのシリカ上のクロマトグラフィーにより、粗生成物を精製する。目的生成物に対応する画分を混合し、ロータリーエバポレータ上で、減圧下にて濃縮する。
【００５４】
本発明を限定することのない以下実施例を用いて、本発明を更に完全に説明する。
【００５５】
中間体１：２−アミノベンゾチアゾール−６−オールの調製
【００５６】
【化６】

【００５７】
酢酸６５ｍｌ中の２−アミノ−６−エトキシベンゾチアゾール（５ｇ、２５．７４ｍｍｏｌ）及び水中の４８％臭化水素酸（１３０ｍｌ、１．１４１ｍｏｌ）の溶液を、１０本の２０ｍｌマイクロ波管に分配し、次いで２００秒間１５０℃で、マイクロ波により加熱する。この反応媒体を濃縮する。水２００ｍｌ中に残留物を採取し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液７５ｍｌを添加することによりｐＨを８に塩基性化して、酢酸エチルで抽出し、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濃縮乾燥させて、２−アミノベンゾチアゾール−６−オール（灰色の粉末）３．４ｇを得る。
【００５８】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝１６７．００、保持時間：１．０７分。
【００５９】
中間体２：４−（６−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
【００６０】
【化７】

【００６１】
ＤＭＦ３ｍｌ中のピペリジン−１，４−ジカルボン酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２７６ｍｇ、１．２０３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（５４９ｍｇ、１．４４４ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（１８７ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１５分間撹拌する。ＤＭＦ３ｍｌ中で溶解した２−アミノベンゾチアゾール−６−オール（中間体１）（２００ｍｇ、１．２０３ｍｍｏｌ）を、一度に添加する。この反応媒体を、室温で２時間撹拌し、水中のＮａ３ＣＯ３の１０％溶液２０ｍｌ中へ注ぎ、酢酸エチルで抽出する。この粗反応生成物を、カラムクロマトグラフィー（溶出剤：ＥｔＯＡｃ／ヘプタン（１／１））により精製し、４−（６−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（白い固体）４０１ｍｇを得る。
【００６２】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ２）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝３７８．０、保持時間３．９分。
【００６３】
（中間体３）
４−［６−（４−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
【００６４】
【化８】

【００６５】
アセトン１０ｍｌ中の４−（６−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体２）（４５４ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）、４−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（２３４ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３２０μｌ）の溶液を、室温で１時間撹拌する。塩酸トリエチルアミンをろ過し、このろ過物を蒸発する。カラムクロマトグラフィー（溶出剤：ＥｔＯＡｃ／ヘプタン（７／３））によって、粗反応生成物を精製し、４−フルオロベンゼンスルホン２−［（ピペリジン−４−カルボニル）アミノ］−ベンゾチアゾール−６−イルエステル（白い固体）４００ｍｇを得る。
【００６６】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ２）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝５３５．９、保持時間４．９分。
【００６７】
中間体４：４−フルオロベンゼンスルホン２−［（ピペリジン−４−カルボニル）アミノ］ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【００６８】
【化９】

【００６９】
ジクロロメタン（４．５ｍｌ）中の４−［６−（４−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体３）（１００ｍｇ、０．１８７ｍｍｏｌ）及びＴＦＡ（０．５ｍｌ）の溶液を、室温で１時間撹拌する。この反応媒体を蒸発乾固する。最低量の水中に残留物を採取し、１０％Ｎａ２ＣＯ３水溶液を添加することによって中和し、酢酸エチルで抽出して、４−フルオロベンゼンスルホン２−［（ピペリジン−４−カルボニル）アミノ］ベンゾチアゾール−６−イルエステル（白い固体）５５ｍｇを得る。
【００７０】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ２）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４３５．９、保持時間３．０分。
【００７１】
（実施例５）
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−［（ピペリジン−４−カルボニル）アミノ］ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【００７２】
【化１０】

【００７３】
ＮＭＰ０．５ｍｌ中の４−フルオロベンゼンスルホン２−［（ピペリジン−４−カルボニル）アミノ］ベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体４）（５０ｍｇ、０．１１４ｍｍｏｌ）及び４−（４−ピリド−３−イル−イミダゾール−１−イル）ブチルアミン（４０．９３ｍｇ、０．４５９ｍｍｏｌ）の溶液を、１３０℃で５分間、マイクロ波により加熱する。この粗反応生成物を、分取ＬＣ／ＭＳ（塩基媒体（ｐＨ９））により精製し、凍結乾燥の４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン２−（シクロ−プロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（淡黄色の固体）２１ｍｇを得る。
【００７４】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ２）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝５０５．２、保持時間２．７０分。
【００７５】
（中間体６）
シクロプロパンカルボン酸（６−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イル）アミドの調製
【００７６】
【化１１】

【００７７】
磁気棒を備えた１００ｍｌの丸底フラスコ内の、ジメチルホルムアミド４０ｍｌ中の２−アミノベンゾチアゾール−６−オール（中間体１）（８５０ｍｇ、４．６ｍｍｏｌ）、シクロプロパンカルボン酸（１．５６４ｇ、１８．１ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．６ｍｌ、２４．４ｍｍｏｌ）及びＨＢＴＵ（４．１ｇ、５．５３ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１６時間撹拌する。水１５０ｍｌをこの反応媒体に添加し、この混合物を酢酸エチルで抽出して、抽出物を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濃縮乾燥させる。取得した残留物を酢酸エチルで洗浄し、シクロプロパンカルボン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル８９３ｍｇを得る。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝３０３．１８、保持時間＝３．５３分。メタノール５０ｍｌ及び水５ｍｌ中の水酸化リチウム一水和物（２００ｍｇ、４．７６８ｍｍｏｌ）の溶液を、この生成物に添加する。反応媒体を、撹拌しながら１時間還流する。前記反応媒体を濃縮し、２Ｎ塩酸溶液でｐＨ１に酸性化し、水１００ｍｌで希釈して、酢酸エチルで抽出する。有機相を水で洗浄し、次いで飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄して、蒸発乾固し、シクロプロパンカルボン酸（６−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イル）アミド（ベージュ色の粉末）５００ｍｇを、収率７２％にて得る。
【００７８】
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ）−δ（ｐｐｍ）−ＤＭＳＯ−ｄ６中：０．９０〜１．００（未分割複合体，４Ｈ）；１．９８（未分割複合体，１Ｈ）；６．８８（ｄｄ，Ｊ＝８．５及び３．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．２７（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．５４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；９．５１（ブロード ｓ，１Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）
【００７９】
（実施例７）
４−フルオロベンゼンスルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製。
【００８０】
【化１２】

【００８１】
磁気棒を備えた１００ｍｌの丸底フラスコ内の、アセトン４３ｍｌ中のシクロプロパンカルボン酸（６−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イル）アミド（中間体６）（１．８１ｇ、７．７２ｍｍｏｌ）、４−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（１．５ｇ、７．７２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２．１４ｍｌ、１５．４５ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１時間撹拌する。取得した沈殿物をろ過し、このろ過物を蒸発する。この残留物をアセトン及びエチルエーテルで洗浄し、６６％の収率にて、４−フルオロベンゼンスルホン酸２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）−ベンゾチアゾール−６−イルエステル（オフホワイトの粉末）１．９２ｇを、収率６６％にて得る。
【００８２】
質量：ＩＥ：ｍ／ｚ３９２［Ｍ＋］，ｍ／ｚ３２４：［Ｍ＋］−ＣＯＣ３Ｈ５，ｍ／ｚ２３３：［Ｍ＋］−ＳＯ２ＰｈＦ，ｍ／ｚ１６５：３２４−ＳＯ２ＰｈＦ，ｍ／ｚ６９（基準ピーク）：［ＣＯＣ３Ｈ５］＋。
【００８３】
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ）−δ（ｐｐｍ）−ＤＭＳＯ−ｄ６中：０．９２〜１．０３（未分割複合体，４Ｈ）；２．０２（未分割複合体，１Ｈ）；７．０４（ｄｄ，Ｊ＝８．５及び２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５４（未分割複合体，２Ｈ）；７．７０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．８０（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．９７（未分割複合体，２Ｈ）；１２．７５（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【００８４】
（実施例８）
４−シクロペンチルアミノベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【００８５】
【化１３】

【００８６】
ＮＭＰ０．５ｍｌ中の４−フルオロベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（実施例７）（５０ｍｇ、１２７．４μｍｏｌ）及びシクロペンチルアミン（５１μｌ、０．５１ｍｍｏｌ）の溶液を、マイクロ波により、１５０℃で５分間加熱する。この粗反応生成物を分取ＬＣ／ＭＳ（塩基媒体（ｐＨ９））により精製し、凍結乾燥後、４−シクロペンチルアミノベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（白い固体）３８ｍｇを得る。
【００８７】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ２）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５８．０、保持時間：４．３９分。
【００８８】
（実施例９）
４−（３−イミダゾール−１−イルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【００８９】
【化１４】

【００９０】
ＮＭＰ２ｍｌ中の４−フルオロベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（実施例７）（１００ｍｇ、０．２５５ｍｍｏｌ）及び３−イミダゾール−１−イル−プロピルミン（１２３μｌ、１．０１９ｍｍｏｌ）の溶液を、マイクロ波により、１５０℃で５分間加熱する。この粗反応生成物を分取ＬＣ／ＭＳ（塩基媒体（ｐＨ９））で精製し、凍結乾燥後、４−（３−イミダゾール−１−イルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（白い固体）６３ｍｇを得る。
【００９１】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ２）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝
【００９２】
（実施例１０）
４−メチルアミノベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【００９３】
【化１５】

【００９４】
ＮＭＰ３００μｌ中の４−フルオロベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（実施例７）（２５ｍｇ、６３．７１μｍｏｌ）及びメチルアミン（ＭｅＯＨ中２Ｎ、２００μｌ）の溶液を、マイクロ波により、１５０℃で３分間加熱する。この粗反応生成物を分取ＬＣ／ＭＳ（塩基媒体（ｐＨ９））により精製し、凍結乾燥後、４−メチルアミノベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（ベージュ色の固体）６．７ｍｇを得る。
【００９５】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ２）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４０４．１、保持時間３．８３分。
【００９６】
（実施例１１）
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【００９７】
【化１６】

【００９８】
ＮＭＰ２ｍｌ中の４−フルオロベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（実施例７）（１００ｍｇ、２５５μｍｏｌ）及び１−アミノ−２−メチル−プロパン−２−オール（９１ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）の溶液を、マイクロ波により、１５０℃で５分間加熱する。この粗反応生成物を分取ＬＣ／ＭＳ（塩基媒体（ｐＨ９））により精製し、凍結乾燥後、４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（ベージュ色の固体）６１ｍｇを得る。
【００９９】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ２）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６２．１、保持時間３．８３分。
【０１００】
（実施例１２）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０１０１】
【化１７】

【０１０２】
ＮＭＰ２ｍｌ中の４−フルオロベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（実施例７）（１００ｍｇ、２５５μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエタン−１，２−ジアミン（１４７ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）の溶液を、マイクロ波により、１１０℃で１０分間加熱する。この粗反応生成物を分取ＬＣ／ＭＳ（塩基媒体（ｐＨ９））により精製し、凍結乾燥後、４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（ベージュ色の固体）６６ｍｇを得る。
【０１０３】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ２）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１７．１、保持時間２．９３分。
【０１０４】
（実施例１３）
４−［４−（４−ピリド−３−イルイミダゾール−１−イル）ブチルアミノ］−ベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０１０５】
【化１８】

【０１０６】
ＮＭＰ０．５ｍｌ中の４−フルオロベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（実施例７）（５０ｍｇ、１２７．４μｍｏｌ）及び４−（４−ピリド−３−イルイミダゾール−１−イル）ブチルアミン（１１０．２ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の溶液を、マイクロ波により、１５０℃で８分間加熱する。この粗反応生成物を分取ＬＣ／ＭＳ（塩基媒体（ｐＨ９））により精製し、凍結乾燥後、４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（ベージュ色の固体）３６ｍｇを得る。
【０１０７】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ２）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝５８９．０、保持時間３．１４分。
【０１０８】
中間体１４：（６−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
【０１０９】
【化１９】

【０１１０】
磁気棒を備えた１００ｍｌの丸底フラスコ内の、ジクロロメタン５０ｍｌ中の２−アミノベンゾチアゾール−６−オール（中間体１）（１．９１ｇ、１１．４９ｍｍｏｌ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナート（７．５２ｇ、３４．４７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４．９ｍｌ、３４．４７ｍｍｏｌ）及び４−ジメチルアミノピリジン（１６８ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で一晩撹拌する。この反応媒体を蒸発乾固し、取得した残留物を、ジクロロメタン及び酢酸エチルで洗浄し、炭酸２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステルｔｅｒｔ−ブチルエステル４．２ｇを、定量収率で得る。
【０１１１】
ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋：３１１．１６、保持時間５．２７分。
【０１１２】
メタノール１１０ｍｌ中の水酸化ナトリウム（９２０ｍｇ、２２．８ｍｍｏｌ）の溶液を、この生成物に添加する。反応媒体を、超音波処理により、室温で２時間撹拌し、次いで２Ｎ塩酸溶液でｐＨ４に酸性化する。
【０１１３】
この反応媒体を蒸発乾固し、取得した残留物をジクロロメタン及び酢酸エチルで洗浄し、（６−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ベージュ色の粉末）２．３５ｇを、収率７７％で得る。
【０１１４】
質量：ＩＥ：ｍ／ｚ２６６［Ｍ＋］，ｍ／ｚ１６６（基準ピーク）：［Ｍ＋］−ＣＯ２ｔＢｕ
ＩＲ：ＫＢｒ
３４２２；３２６３；３０９１；２９８１；１７２５；１６０８；１５６２；１４６８；１２７８；１２４５；１１５４；１０４９；８６２及び８５２ｃｍ−１
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ）−δ（ｐｐｍ）−ＤＭＳＯ−ｄ６中：
１．５２（ｓ，９Ｈ）；６．８５（ｄｄ，Ｊ＝９．０及び３．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．２４（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．４９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）；９．４４（ブロード未分割複合体，１Ｈ）；１１．５（ブロード未分割複合体，１Ｈ）。
【０１１５】
中間体１５：４−フルオロベンゼンスルホン酸２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０１１６】
【化２０】

【０１１７】
磁気棒を備えた１００ｍｌの丸底フラスコ内の、アセトン６５ｍｌ中の（６−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体１４）（３．６１ｇ、１３．０８ｍｍｏｌ）、４−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（２．５６ｇ、１３．０８ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３．６３ｍｌ、２６．１６ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で一晩撹拌する。取得した沈殿物をろ過し、このろ過物を蒸発乾固する。この乾燥残留物を酢酸エチルで洗浄し、４−フルオロベンゼンスルホン酸２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（白い粉末）５．０２ｇを、収率６２％で得る。
【０１１８】
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ）−δ（ｐｐｍ）−ＤＭＳＯ−ｄ６中：
１．５３（ｓ，９Ｈ）；７．０２（ｄｄ，Ｊ＝９．０及び２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５５（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６５（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．７８（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．９８（ｄｄ，Ｊ＝５．０及び９．０Ｈｚ，２Ｈ）；１１．９（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０１１９】
中間体１６：４−フルオロベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０１２０】
【化２１】

【０１２１】
磁気棒を備えた１００ｍｌの丸底フラスコ内の、４−フルオロベンゼンスルホン酸２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体１５）（１．７ｇ、３．６０ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン１０ｍｌ中のトリフルオロ酢酸１０ｍｌ（１３０ｍｍｏｌ）及び水１ｍｌの溶液を、室温で２時間撹拌する。この反応媒体を蒸発乾固し、取得した残留物を酢酸エチルで洗浄し、４−フルオロベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル１．３１ｇを、トリフルオロ酢酸塩（白い粉末）の形態で、収率８３％にて得る。
ＬＣ／ＭＳ（方法１)：[Ｍ＋Ｈ]＋：３２５．１３、保持時間３．１２分。
【０１２２】
中間体１７：４−｛［６−（４−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］メチル｝ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
【０１２３】
【化２２】

【０１２４】
磁気棒を備えた試験管内の、ジメチルホルムアミド１２ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体１６）（５８０ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）、４−カルボキシメチルピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６４０ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１．１ｇ、２．９ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（１．２ｍｌ、６．８９ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で３日間撹拌する。水２００ｍｌをこの反応媒体に添加し、この混合物を酢酸エチルで抽出する。次いで有機相を水で洗浄し、飽和塩化ナトリウムでも洗浄して、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発する。取得した残留物を酢酸エチル中で取り出し、シクロヘキサン中の勾配５％〜３０％酢酸エチルで、空隙率１５−３５μのシリカ５０ｇを含有するＶａｒｉａｎフラッシュカートリッジ上にて、１００分間にわたり精製する。溶媒を蒸発した後、４−｛［６−（４−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］メチル｝ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル７００ｍｇを、収率９６％で得る。
【０１２５】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋：５５０．１１、保持時間４．１４分。
【０１２６】
（実施例１８）
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリドの調製
【０１２７】
【化２３】

【０１２８】
第１段階
磁気棒を備えた試験管内の、ジメチルスルホキシド３ｍｌ中の、４−｛［６−（４−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］メチル｝ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体１７）（１７４ｍｇ、０．３１８ｍｍｏｌ）、Ｎ−イソプロピルエチレンジアミン（９７ｍｇ、０．９５４ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（１０３ｍｇ、０．３１８ｍｍｏｌ）の溶液を、９０℃で一晩撹拌する。水１００ｍｌを、この反応媒体に添加し、この混合物を酢酸エチルで抽出する。次いで有機相を水で洗浄し、飽和塩化ナトリウム溶液でも洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発し、４−（｛６−［４−（３−イミダゾール−１−イルプロピルアミノ）−ベンゼンスルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル｝メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（白い粉末）１０３ｍｇを、収率５０％で得る。
【０１２９】
第２段階
ジオキサン中の４−（｛６−［４−（３−イミダゾール−１−イルプロピルアミノ）−ベンゼンスルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル｝メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１０３ｍｇ、ジオキサン２ｍｌ及び４Ｎ塩酸２ｍｌの溶液を、室温で３時間撹拌する。取得した沈殿物をろ過し、ジオキサン及び酢酸エチルで洗浄し、４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド（白い粉末）１１０ｍｇを、収率８８％で得る。
【０１３０】
質量：ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ５３２［Ｍ＋Ｈ］＋ｍ／ｚ４０７（基準ピーク）：［Ｍ＋Ｈ］＋−Ｃ５Ｈ１０ＮＣＨ２ＣＯ
ＩＲ：ＫＢｒ
３４３２；２９６０；２７９３；２４６４；２５９８；１５６０；１４７０；１３６４；１１６２；１１２０；１０９３；９１５；８５３及び７５３ｃｍ−１
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ）−δ（ｐｐｍ）−ＤＭＳＯ−ｄ６中：
１．２８（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；１．４８（ｍ，２Ｈ）；１．８３（ブロード ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，２Ｈ）；２．１２（未分割複合体，１Ｈ）；２．５２（遮蔽，２Ｈ）；２．９２（ｍ，２Ｈ）；３．１０（未分割複合体，２Ｈ）；３．２８（ブロード ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．３６（ｍｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）；３．５０（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）；６．７８（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．０３（ｄｄ，Ｊ＝８．５及び２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．３０（ブロード未分割複合体，１Ｈ）；７．５６（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．７１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．７８（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．５８（ブロード未分割複合体，１Ｈ）；８．８１（ブロード未分割複合体，１Ｈ）；９．００（ブロード未分割複合体，２Ｈ）；１２．５（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０１３１】
（実施例１９）
実施例１８と同様の方法を使用し、前駆体としての４−｛［６−（４−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］メチル｝ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体１７）を様々なアミンとともに用いて、次の実施例を調製する。次の実施例において、ジクロロメタン中の勾配５％〜１０％メタノールで、流速１０ｍｌ／分にて、Ｉｎｔｅｒｃｈｉｍシリカ（１５−３５μ）５ｇのフラッシュカートリッジ上で、第１段階後に取得した化合物を精製する。これらの実施例を次の表中に示す：
【０１３２】
【表１】



【０１３３】
中間体２０：４−フルオロベンゼンスルホン酸２−（８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０１３４】
【化２４】

中間体１７の方法に従って、４−フルオロベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体１６）をＢｏｃ−８−アミノカプリル酸と混合することにより、４−フルオロベンゼンスルホン酸２−（８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニクアミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルを調製する。
【０１３５】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋：５６６．０１、保持時間：４．２１分。
【０１３６】
（実施例２１）
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（８−アミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリドの調製
【０１３７】
【化２５】

【０１３８】
実施例１８の方法に従って、４−フルオロベンゼンスルホン酸２−（８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体２０）を、Ｎ−イソプロピルエチレンジアミンと混合することにより、４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）−ベンゼンスルホン酸２−（８−アミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリドを調製する。ジクロロメタン中の勾配４％〜１５％メタノールを伴うシリカ上で、第１段階で取得した化合物の（４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルを精製する。
【０１３９】
質量：ＥＩ：ｍ／ｚ４０６：［Ｍ＋］−Ｃ８Ｈ１６Ｏ，ｍ／ｚ３３５：［Ｍ＋］−Ｃ４Ｈ１０Ｎ，ｍ／ｚ７２Ｃ４Ｈ１０Ｎ（基準ピーク）。
【０１４０】
ＣＩ：ｍ／ｚ５４８［Ｍ＋Ｈ］＋（基準ピーク），ｍ／ｚ４０７：［Ｍ＋Ｈ］＋−Ｃ８Ｈ１６ＮＯ
ＩＲ：ＫＢｒ
３４２６；２９２３；２４４８；１７１７；１５９７；１５６３；１４７２；１３７１；１１６５；１０９２；９１１；８５７；７５５；５７４及び５４８ｃｍ−１
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ）−δ（ｐｐｍ）−ＤＭＳＯ−ｄ６中：
１．３０（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；１．３３（未分割複合体，６Ｈ）；１．５８（未分割複合体，２Ｈ）；１．６７（未分割複合体，２Ｈ）；２．５２（遮蔽，２Ｈ）；２．７９（未分割複合体，２Ｈ）；３．０１（未分割複合体，２Ｈ）；３．３６（ｍｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）；３．４８（未分割複合体，２Ｈ）；６．７８（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．０２（ｄｄ，Ｊ＝８．５及び２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．３０（未分割複合体，１Ｈ）；７．５６（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．７０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．７７（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．８２（ブロード未分割複合体，３Ｈ）；９．００（ブロード未分割複合体，２Ｈ）；１２．４５（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０１４１】
（実施例２２）
実施例２１と同様の方法を使用し、前駆体としての４−フルオロベンゼンスルホン酸２−（８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体２０）を様々なアミンとともに使用し、次の実施例を調製する。これらの実施例を次の表中に示す：
【０１４２】
【表２】



【０１４３】
中間体２３：４−｛２−［６−（４−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
【０１４４】
【化２６】

【０１４５】
中間体１７の方法に従って、４−フルオロベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体１６）を、Ｎ−Ｂｏｃ−４−ピペリジンプロピオン酸と混合することにより、４−｛２−［６−（４−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを調製する。ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋：５６４．１６、保持時間：４．２４分。
【０１４６】
（実施例２４）
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（３−ピペリド−４−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド
【０１４７】
【化２７】

【０１４８】
実施例１８の方法に従って、４−｛２−［６−（４−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体２３）を、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミンと混合することにより、４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）−ベンゼンスルホン酸２−（３−ピペリド−４−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリドを調製する。ジクロロメタン中の勾配１％〜１０％メタノールを用い、空隙率１５−３５μのシリカ５ｇのフラッシュカートリッジ上で、第１段階で取得した化合物の（４−（２−｛６−［４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホニルオキシ］−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル｝エチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル）を精製する。
【０１４９】
質量：ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ５４６［Ｍ＋Ｈ］＋，ｍ／ｚ４０７：［Ｍ＋Ｈ］＋−Ｃ５Ｈ１０ＮＣ２Ｈ４ＣＯ，ｍ／ｚ２７４：［Ｍ＋２Ｈ］２＋ｍ／ｚ２９４（基準ピーク）。
【０１５０】
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ）−δ（ｐｐｍ）−ＤＭＳＯ−ｄ６中：
１．２５（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；１．３２（ｍ，２Ｈ）；１．４５〜１．６５（未分割複合体，３Ｈ）；１．８１（ブロード ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，２Ｈ）；２．５２（遮蔽，２Ｈ）；２．８２（ｍ，２Ｈ）；３．０７（未分割複合体，２Ｈ）；３．２５（ブロード ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．３５（遮蔽，１Ｈ）；３．４５（未分割複合体，２Ｈ）；６．７３（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；６．９９（ｄｄ，Ｊ＝８．５及び２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．２０（ブロード未分割複合体，１Ｈ）；７．５２（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．７３（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．４０（ブロード未分割複合体，１Ｈ）；８．６５（ブロード未分割複合体，１Ｈ）；８．８７（ブロード未分割複合体，２Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０１５１】
（実施例２５）
実施例２４と同様の方法を使用し、様々なアミンと共に、前駆体としての４−｛２−［６−（４−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを使用し、次の実施例を調製する。これらの実施例を、次の表中で示す。
【０１５２】
【表３】



【０１５３】
中間体２６：４−イソブチルアミノベンゼンスルホン酸２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０１５４】
【化２８】

【０１５５】
ＤＭＳＯ１２ｍｌ中の４−フルオロベンゼンスルホン酸２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体１５）（１ｇ、２．３２ｍｍｏｌ）、イソブチルアミン（５１７ｍｇ、７．０７ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（８４５ｍｇ、２．５９ｍｍｏｌ）の溶液を、８０℃で一晩撹拌する。水６０ｍｌを、この反応媒体に添加する。この混合物を酢酸エチルで抽出する。有機相を水及び飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、次いで蒸発乾固する。この残留物を酢酸エチルで洗浄し、４−イソブチルアミノベンゼンスルホン酸２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（ベージュ色の固体）８８０ｍｇを、収率８０％で得る。
【０１５６】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋：４７８．０１、保持時間４．３１分。
【０１５７】
中間体２７：４−イソブチルアミノベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０１５８】
【化２９】

【０１５９】
ジクロロメタン６ｍｌ及び水６００μｌ中の４−イソブチルアミノベンゼンスルホン酸２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体２６）（８８０ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（５．７ｍｌ、７４ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で一晩撹拌する。
【０１６０】
この反応媒体を濃縮乾燥させ、残留物をエチルエーテルで洗浄して、４−イソブチルアミノベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル７００ｍｇを、トリフルオロ酢酸塩（白い固体）の形態で、収率５２％にて得る。
【０１６１】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋：３７８．０５、保持時間：３．６０分。
【０１６２】
（実施例２８）
４−イソブチルアミノベンゼンスルホン酸２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリドの調製
【０１６３】
【化３０】

【０１６４】
第１段階：
ジメチルホルムアミド４ｍｌ中の４−イソブチルアミノベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体２７）（３００ｍｇ、０．４９５ｍｍｏｌ）、４−カルボキシメチル−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３６１ｍｇ、１．４８５ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（５６３ｍｇ、１．４８５ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４３２μｌ、２．４７５ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で一晩撹拌する。酢酸エチルで抽出した反応媒体へ水を添加する。有機相を水、次いで飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濃縮乾燥させる。２０ｍｌ／分の流速で、水／アセトニトリルの９５／５の混合物で５分間、水中の５％〜４０％のグラジエントで５分間、水中の４０％〜８０％のアセトニトリルのグラジエントで３０分間、水中の８０％〜９５％のアセトニトリルのグラジエントで５分間、次いで水／アセトニトリルが５／９５の混合物で５分間、Ｄｙｎａｍａｘ Ｃ１８、６０Å、２１×３００ｍｍカラム上のＨＰＬＣにより、取得した残留物を精製する。各溶媒は、トリフルオロ酢酸０．０７％（ｖ／ｖ）を含有する。この画分を３０秒ごとに収集し、流速１ｍｌ／分にて、１０分間にわたり、水中の勾配０〜１００％アセトニトリルを用い、Ｈｙｐｅｒｓｉｌ Ｃ１８、４．６×５０ｍｍカラム上の分析ＨＰＬＣによりモニターする。各溶媒は、トリフルオロ酢酸０．０７％（ｖ／ｖ）を含有する。目的生成物を含有する画分を濃縮乾燥させ、４−｛［６−（４−イソブチルアミノベンゼンスルホニルオキシ）ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］メチル｝ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得る。
【０１６５】
第２段階：
ジオキサン中の４−｛［６−（４−イソブチルアミノベンゼンスルホニルオキシ）ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］メチル｝ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１１０ｍｇ、１８２μｍｏｌ）、ジオキサン（２ｍｌ）及び４Ｎ塩酸の溶液を、室温で２時間撹拌する。この反応媒体を濃縮乾燥させ、取得した残留物を酢酸エチルで洗浄し、４−イソブチルアミノベンゼンスルホン酸２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルヒドロクロリド（白い粉末）１８３ｍｇを、収率６４％にて得る。
【０１６６】
質量：ＩＥ：ｍ／ｚ５０２［Ｍ＋］，ｍ／ｚ３７７：［Ｍ＋］−Ｃ７Ｈ１２ＮＯ，ｍ／ｚ２１２：［ＳＯ２ＰｈＮＨｉＢｕ］＋ｍ／ｚ１６５：［３７７−２１２］＋，ｍ／ｚ１２６：［Ｃ７Ｈ１２ＮＯ］＋（基準ピーク）。
【０１６７】
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ）−δ（ｐｐｍ）−ＤＭＳＯ−ｄ６中：
０．９４（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，６Ｈ）；１．４５（ｍ，２Ｈ）；１．７７〜１．８８（未分割複合体，３Ｈ）；２．１０（ブロード未分割複合体，１Ｈ）；２．５２（遮蔽，２Ｈ）；２．８３（ｍ，２Ｈ）；２．９１（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．２５（ブロード ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，２Ｈ）；６．６７（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．００（ｄｌ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．１５（非常にブロードの未分割複合体，１Ｈ）；７．４５（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６７（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．７３（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．６２（ブロード未分割複合体，１Ｈ）；８．８５（ブロード未分割複合体，１Ｈ）；１２．５（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０１６８】
（実施例２９）
実施例２８と同様の方法を使用し、様々な酸と共に、前駆体としての４−イソブチルアミノベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体２７）を用いて、次の実施例を調製する。これらの実施例を、次の表中に示す。
【０１６９】
【表４】


【０１７０】
中間体３０：チオフェン−２−スルホン酸２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０１７１】
【化３１】

【０１７２】
アセトン１０ｍｌ中の（６−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体１４）（５２７ｍｇ、１．９７９ｍｍｏｌ）、２−チオフェンスルホニルクロリド（４３３ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（６７７μｌ、４．７５ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で一晩撹拌する。この反応媒体を濃縮乾燥させる。取得した残留物を水、アセトン、次いでエチルエーテルで洗浄し、チオフェン−２−スルホン酸２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（薄灰色の粉末）６２１ｍｇを、収率７６％にて得る。
【０１７３】
ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４１２．９８、保持時間：３．９９分。
【０１７４】
中間体３１：チオフェン−２−スルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０１７５】
【化３２】

【０１７６】
ジクロロメタン１５ｍｌ及び水６００μｌ中のチオフェン−２−スルホン酸２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体３０）（１．５ｇ、３．６３ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（１５ｍｌ、１９６ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で２時間撹拌する。この反応媒体を濃縮乾燥させ、チオフェン−２−スルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル９００ｍｇを、トリフルオロ酢酸塩（油）の形態で、収率７６％にて得る。
【０１７７】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋：３１３、保持時間３．１１分。
【０１７８】
（実施例３２）
チオフェン−２−スルホン酸２−［（ピペリジン−４−カルボニル）アミノ］ベンゾチアゾール−６−イルエステル、トリフルオロ酢酸との化合物の調製
【０１７９】
【化３３】

【０１８０】
第１段階：
ジメチルホルムアミド４ｍｌ中のチオフェン−２−スルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体３１）（８０ｍｇ、０．２５６ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−イソニペコチン酸（１７６ｍｇ、０．７６８ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２９１ｍｇ、０．７６８ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２２３μｌ、１．２８ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で３日間撹拌する。酢酸エチルで抽出するこの反応媒体へ水３０ｍｌを添加する。有機相を水及び飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濃縮乾燥させて、４−［６−チオフェン−２−スルホニルオキシ）ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得る。
【０１８１】
ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋：５２３．９６、保持時間４．００分。
【０１８２】
第２段階：
ジクロロメタン１．５ｍｌ及び水１００μｌ中の４−［６−チオフェン−２−スルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル］ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル及びトリフルオロ酢酸（１．５ｍｌ）の溶液を、室温で一晩撹拌する。この反応媒体を濃縮乾燥させ、残留物をＤＭＳＯ５００μｌ中で取り出し、試料を分取ＬＣ／ＭＳ（方法Ｂ）により精製し、チオフェン−２−スルホン酸２−［（ピペリジン−４−カルボニル）アミノ］ベンゾチアゾール−６−イルエステル、トリフルオロ酢酸との化合物３ｍｇを得る。
【０１８３】
ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋：４２３．９７、保持時間：２．７４分。
【０１８４】
（実施例３３）
実施例３２と同様の方法を使用し、様々な酸と共に前駆体としてのチオフェン−２−スルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体３１）を用いて、次の実施例を調製する。これらの実施例を、次の表中で示し、ＬＣＭＳを方法Ａ１に従って実行する。
【０１８５】
【表５】


【０１８６】
（中間体３４）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０１８７】
【化３４】

【０１８８】
ＮＭＰ５ｍｌ中の４−フルオロベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体１６）（１００ｍｇ、０．２２５ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチレンジアミン（３９５μｌ、２．２５ｍｍｏｌ）の溶液を、「ＥｍｒｙｓＴＭＯｐｔｉｍｉｚｅｒ」装置を使用するマイクロ波により、１５０℃にて２０分間加熱する。粗反応生成物を、酢酸エチル５０ｍｌ中で取り出し、生じた溶液を、水５０ｍｌで５回洗浄する。沈殿による相の分離後、有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で蒸発して、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル１００ｍｇを得る。
【０１８９】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４４９．２２、保持時間：２．３６分。
【０１９０】
（中間体３５）
３−｛６−［４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）−ベンゼンスルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル｝アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
【０１９１】
【化３５】

【０１９２】
アゼチジン−１，３−ジカルボン酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル６８ｍｇ、ＨＢＴＵ２５６ｍｇ及びＤＩＥＡ２３５μｌを、ジメチルホルムアミド５ｍｌ中の４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体３４）（１００ｍｇ、０．２２５ｍｍｏｌ）の溶液ヘ添加する。取得した溶液を、室温で２０時間撹拌する。水５０ｍｌを添加した後、この反応媒体を、酢酸エチル２５ｍｌで３回抽出する。この抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で蒸発して、粗油状物７００ｍｇを得る。シリカ２０ｇ上で、流速１０ｍｌ／分にて、９５／５のジクロロメタン／メタノールの混合物における溶出により、この油状物を精製し、３−｛６−［４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）−ベンゼンスルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル｝アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル３９ｍｇを得る。
【０１９３】
ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋：６３２．１１、保持時間３．００分、方法Ａ１。
【０１９４】
（中間体３６）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０１９５】
【化３６】

【０１９６】
８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノオクタン酸１７５ｍｇ、ＨＢＴＵ２５６ｍｇ及びＤＩＥＡ２３５μｌを、ジメチルホルムアミド５ｍｌ中の４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）−ベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体３４）（１００ｍｇ、０．２５５ｍｍｏｌ）の溶液ヘ添加する。取得した溶液を、室温で２０時間撹拌する。水５０ｍｌを添加した後、この反応混合物を、酢酸エチル２５ｍｌで３回抽出する。この抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で蒸発し、粗油状物３３８ｍｇを得る。シリカ１０ｇ上で、流速１０ｍｌ／分にて、９５／５のジクロロメタン／メタノールの混合物における溶出により、この油状物を精製し、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（８−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステル１５３ｍｇを得る。
【０１９７】
ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋：６９０．３３、保持時間３．２５分、方法Ａ１。
【０１９８】
（中間体３７）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロペンタンカルボニル）アミノ］−ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０１９９】
【化３７】

【０２００】
１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロペンタンカルボン酸１５５ｍｇ、ＨＢＴＵ２５６ｍｇ、ＤＩＥＡ２３５μｌを、ジメチルホルムアミド５ｍｌ中の４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体３４）（１００ｍｇ、０．２２５ｍｍｏｌ）の溶液ヘ添加する。取得した溶液を、室温で２０時間撹拌する。水５０ｍｌを添加した後、この反応混合物を、酢酸エチル２５ｍｌで３回抽出する。この抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で蒸発し、粗油状物７２０ｍｇを得る。シリカ１０ｇ上で、流速１０ｍｌ／分にて、９５／５のジクロロメタン／メタノールの混合物における溶出により、この油状物を精製し、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロペンタンカルボニル）アミノ］−ベンゾチアゾール−６−イルエステル１２０ｍｇを得る。
【０２０１】
ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋：６６０．５６、保持時間：３．１１分、方法Ａ１。
【０２０２】
（中間体３８）
４−（｛６−［４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）−ベンゼンスルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−カルバモイル｝メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
【０２０３】
【化３８】

【０２０４】
４−カルボキシメチルピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１６４ｍｇ、ＨＢＴＵ２５６ｍｇ及びＤＩＥＡ２３５μｌを、ジメチルホルムアミド５ｍｌ中の４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−アミノベンゾチアゾール−６−イルエステル（中間体３４）（１００ｍｇ、０．２２５ｍｍｏｌ）の溶液ヘ添加する。取得した溶液を、室温で２０時間撹拌する。水５０ｍｌを添加した後、この反応混合物を、酢酸エチル２５ｍｌで３回抽出する。この抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で蒸発し、粗油状物３８０ｍｇを得る。シリカ１０ｇ上で、流速１０ｍｌ／分にて、９５／５のジクロロメタン／メタノールの混合物における溶出により、この油状物を精製し、４−（｛６−［４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−カルバモイル｝メチル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル９０ｍｇを得る。
【０２０５】
ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋：６７４．５７、保持時間：３．１１分、方法Ａ１。
【０２０６】
（実施例３９）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−［（アセチジン−３−カルボニル）アミノ］ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０２０７】
【化３９】

【０２０８】
塩酸ジオキサン１．５ｍｌを、ジオキサン１．５ｍｌ中の３−｛６−［４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル｝アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体３５）３９ｍｇの溶液ヘ添加する。生じた溶液を、室温で５時間撹拌し、次いで減圧下で蒸発して、油状物４９ｍｇを得ＬＣ／ＭＳにより精製し、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−［（アゼチジン−３−カルボニル）アミノ］ベンゾチアゾール−６−イルエステル９．７ｍｇを得る。
【０２０９】
ＭＳ：ＤＣＩ：ｍ／ｚ＝５３２［Ｍ＋Ｈ］＋
ＥＳ＋：ｍ／ｚ＝５３２［Ｍ＋Ｈ］＋；ｍ／ｚ＝２６６．８［Ｍ＋２Ｈ］＋＋
【０２１０】
（実施例４０）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（８−アミノオクタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルエステルの調製
【０２１１】
【化４０】

【０２１２】
塩酸ジオキサン３ｍｌを、ジオキサン３ｍｌ中の３−｛６−［４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル｝アセチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体３６）１５３ｍｇの溶液へ添加する。生じた溶液を、室温で５時間撹拌し、次いで減圧下で蒸発して、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（８−アミノオクタノイルアミノ）−ベンゾチアゾール−６−イルエステル１５２ｍｇを得る。
【０２１３】
ＭＳ：ＤＣＩ：ｍ／ｚ＝５９０［Ｍ＋Ｈ］＋
ＥＳ＋：ｍ／ｚ＝５９０［Ｍ＋Ｈ］＋；ｍ／ｚ＝２９５．９５［Ｍ＋２Ｈ］＋＋
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ）−δ（ｐｐｍ）−ＤＭＳＯ−ｄ６中：
１．２０〜１．３８（未分離複合体，１６Ｈ）；１．４２〜１．６８（未分離複合体，６Ｈ）；２．２９（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；２．７４（未分離複合体，４Ｈ）；３．１６（未分離複合体，２Ｈ）；３．５０〜３．８０（未分離複合体，２Ｈ）；６．７１（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；６．９６（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．３３（ブロード ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．５１（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．６８（ブロード ｓ，１Ｈ）；７．８５（ブロード未分離複合体，３Ｈ）；９．９８（未分離複合体，１Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０２１４】
（実施例４１）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−［（１−アミノシクロペンタンカルボニル）アミノ］ベンゾチオゾール−６−イル エステルの調製
【０２１５】
【化４１】

【０２１６】
ジオキサン３ｍｌ中の４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−［（１−ｔｅｒｔ−ブトシキカルボニル−アミノシクロペンタンカルボニル）アミノ］ベンゾチオゾール−６−イル エステル（中間体３７））１２０ｍｇの溶液に，塩酸ジオキサン３ｍｌを、加える。得られた溶液を常温で５時間攪拌し、減圧下で蒸発させ、油９０ｍｇを得る。これを、ＬＣ／ＭＳにより精製して、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−［（１−アミノシクロペンタンカルボニル）アミノ］ベンゾチオゾール−６−イル エステル３２ｍｇを得る。
【０２１７】
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ）δ：ｐｐｍ、ＤＭＳＯ−ｄ６中に、 ＡｃＯＤ１滴添加）：
１．２６ （ｄ，Ｊ＝６．５ Ｈｚ， １２Ｈ）；１．８５ ないし ２．０２（未分離複合体， ６Ｈ）； ２．３５（未分離複合体， ２Ｈ）； ３．１９（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ ）；３．５０（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；３．６８（ｍｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）；６．７２（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；６．９８（ｄｄ，Ｊ＝８．５及び２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５５（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．７６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．８５（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２１８】
（実施例４２）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０２１９】
【化４２】

【０２２０】
ジオキサン３ｍｌ中の４−（｛６−［４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−カルバモイル｝−メチル）ピペリジン−１カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体３８）９０ｍｇの溶液に，塩酸ジオキサン３ｍｌを加える。得られる溶液を常温で５時間攪拌し、次いで、減圧下で蒸発させ、油９０ｍｇを得る。これを、ＬＣ／ＭＳにより精製して、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸２−（２−ピペリド−４−イルアセチルアミノ）ベンンゾチアゾール−６−イル エステル１０１ｍｇを得る。
【０２２１】
ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋；５７４．２３、保持時間：２．２４分、方法Ａ１
ＭＳ： ＤＣｌ：ｍ／ｚ＝５７４［ＭＨ＋］
ＥＳ＋：ｍ／ｚ＝５７４［ＭＨ＋］；ｍ／ｚ＝２８７．９［（Ｍ＋２Ｈ）／２］＋
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ）δ：ｐｐｍ、ＤＭＳＯ‐ｄ６中にＡｃＯＤ１滴添加、３８３Ｋ（１１０℃）：
１．３３（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ，１２Ｈ）；１．４２ないし１．５８（未分離複合体，２Ｈ）；１．８５ないし１．９５（未分離複合体，２Ｈ）；２．１５（未分離複合体、１Ｈ）；２．３１（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；２．８７ないし２．９７（未分離複合体，２Ｈ）；３．２２（ｔ，ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．２４ないし３．３２（未分離複合体，２Ｈ）；３．５８（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．６５ないし３．７５（未分離複合体，２Ｈ）；６．７５（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．０８（ｄｄ，ｊ＝８．５及び２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５８（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６２（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．６５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２２２】
（実施例４３）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アセチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０２２３】
【化４３】

【０２２４】
ヂメチルホルムアミド４ｍｌ中の４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体３４）（７０ｍｇ、０．１５６ｍｍｏｌ）の溶液に、酢酸２８ｍｇ、ＨＢＴＵ１７７．５ｍｇ及びＤＩＥＡ１３６μｌを加える。得られた溶液を、常温で２０時間攪拌する。水５０ｍｌの添加後、反応混合物を酢酸エチル２５ｍｌで３回抽出する。抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過して、減圧下で蒸発させて、未精製油１３０ｍｇを得る。この未精製油を、ＬＣ／ＭＳにより、精製し、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アセチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル１５ｍｇを得る。
【０２２５】
ＩＲ：３４２０；２９８９；２６８０；１６７４；１５９９；１５４２；１４５２；１３６７；１２６８；１２０２；１１７６；１１６１；１１３４；１０９４；９１４；８５１；８３１；７５３；７２０及び５７９ｃｍ−１。
【０２２６】
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ）δ：ｐｐｍ、ＤＭＳＯ−ｄ６中：
１．３０（ｄ，ｊ＝６．５Ｈｚ，１２Ｈ）；２．２２（ｓ，３Ｈ）；３．２３（未分離複合体，２Ｈ）；３．５１（未分離複合体，２Ｈ）；３．７２（未分離複合体，２Ｈ），６．７４（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；６．９０（ｂｒａｏｄ 未分離複合体，１Ｈ）；７．０３（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．５６（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６８（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．７０（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）；８．４６（未分離複合体，１Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０２２７】
（実施例４３ａ）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アセチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル 塩酸塩の調製
【０２２８】
【化４４】

【０２２９】
実施例４３ａは、ジクロロメタン１０ｍｌ中に無水酢酸５７ｍｇ（０．５５７ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン２１６ｍｇ（１．６７１ｍｍｏｌ）を有する溶液として、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体３４）２５０ｍｇ（０．５５７ｍｍｏｌ）を合成する。反応媒体を、一晩攪拌し、次に、同量の無水酢酸及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを２回添加し、反応を常温で３日間継続する。次に、ジクロロメタン５０ｍｌを加え、反応媒体を水で洗浄する。２Ｎ塩酸溶液を添加して、有機相をｐＨ３にし、次いで、得られる有機相を飽和塩酸水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、蒸発乾固して、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アセチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル 塩酸塩１４０ｍｇ（収率４８％）を得る。
【０２３０】
Ｍａｓｓ：ＥＳ ｍ／ｚ＝４９１ ＭＨ＋ 基準ピーク
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００分光計（化学シフト、δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ‐ｄ６）２．５０ｐｐｍ基準：
０．９０ないし１．３５（ｍ，１２Ｈ）；２．２０（ｓ，３Ｈ）；３．１８（ブロード ｍ，２Ｈ）；３．５３（ブロード ｍ，２Ｈ）；３．６０ないし３．７７（ブロード ｍ，２Ｈ）；６．７２（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．００（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．０４（ブロード ｍ，１Ｈ）；７．５３（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６６（ｄ，ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．６８（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；９．０９（ブロード ｍ，１Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０２３１】
ＩＲ：ＫＢｒ
３４２７；２９７８；２６５８；１６９３；１５９８；１５４２；１４５２；１３６７；１２６７；１１６０；１０９３；９１３；８５０及び５７８ｃｍ−１．
【０２３２】
（実施例４４）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（２−メトキシアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル
【０２３３】
【化４５】

【０２３４】
ジメチルホルムアミド４ｍｌ中の、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体３４）（７０ｍｇ、０．１５６ｍｍｏｌ）溶液に、メトキシ酢酸４２．１ｍｇ、ＨＢＴＵ１７７．５ｍｇ及びＤＩＥＡ１６３μｌを加える。得られた溶液を、常温で２０時間攪拌する。水５０ｍｌを添加後、反応混合物を酢酸エチル２５ｍｌで、３回抽出する。抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、減圧下で蒸発させ、未精製油９８ｍｇを得る。この油をＬＣ／ＭＳにより精製し、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（２−メトキシアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル４７．８ｍｇを得る。
【０２３５】
ＩＲ：３３９０；２９９３；２６６６；１６７４；１５９９；１５４１；１４５２；１３６５；１２６９；１２０２；１１７５；１１６１；１１２５；１０９４；９１４；８５２；８３０；７５７；７２０及び５７０ｃｍ−１
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ）δ：ｐｐｍ、ＤＭＳＯ−ｄ６中：
１．２９（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１２Ｈ）；３．２３（未分離複合体，２Ｈ）；３．４０（ｓ，３Ｈ）；３．５２（未分離複合体，２Ｈ）；３．７２（ブロード 未分離複合体，２Ｈ）；４．２２（ｓ，２Ｈ）；６．７５（ブロード ｄ，Ｊ＝９，０Ｈｚ，２Ｈ）；６．９０（ブロード ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．０５（ｄｄ，Ｊ＝９．０及び２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５５（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．７０（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．７２（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．４８（未分離複合体，１Ｈ）；１２．３５（ｓ，１Ｈ）。
【０２３６】
（実施例４４ａ）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（２−メトキシアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩の調製
【０２３７】
【化４６】

【０２３８】
実施例４４ａは、実施例４４の方法に従って合成され、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体３４）７５０ｍｇ（１．６７２ｍｍｏｌ）から開始して、未精製の４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（２−メトキシアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルを得る。この生成物を、メタノール１ｍｌ及びジオキサン３ｍｌに溶解する。この溶液にジオキサン／４Ｎ塩酸４ｍｌを加える。反応媒体を一晩、常温で攪拌してから、蒸発乾固する。得られた残渣を、ジクロロメタン中のメタノールの０から１０％までの勾配を用いた、シリカ２０ｇの一次カートリッジ上でのフラッシュクロマトグラフィによって精製する。得られた生成物は、純度９０％であり、ジクロロメタン中のメタノールの０から１０％までの勾配を用いた、シリカ５０ｇのカートリッジ上にて、流速２０ｍｌ／分で１時間３０分以上、二次精製を実施する。生成物を含有する画分を濃縮して乾燥後、収率２２％の、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（２−メトキシアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩２０５ｍｇを得る。
【０２３９】
Ｍａｓｓ：ＥＳ ｍ／ｚ＝５２１ ＭＨ＋ 基準ピーク
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００分光計（化学シフト、δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ‐ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
０．８０ないし１．４０（ｍ，１２Ｈ）；２．９０ないし３．７０（部分遮蔽 ｍ，６Ｈ）；３．３８（ｓ，３Ｈ）；４．２０（ｓ，２Ｈ）；６．６８（ブロード ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．００（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７，４９（ブロード ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．６８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７，７０（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；１２．３５（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０２４０】
ＩＲ：ＫＢｒ
３３８８；２９６５；２６５３；１７０４；１５９８；１５３９；１４５１；１３６３；１１６０；１０９３；９１４；８５２；７５４及び５６７ｃｍ１．
【０２４１】
（実施例４５）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロ−ペンタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル
【０２４２】
【化４７】

【０２４３】
ジメチルホルムアミド４ｍｌ中の４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体３４）（７０ｍｇ、０．１５６ｍｍｏｌ）の溶液に、メトキシ酢酸４２．１ｍｇ、ＨＢＴＵ１７７．５ｍｇ及びＤＩＥＡ１６３μｌを加える。得られた溶液を、常温で２０時間攪拌する。水５０ｍｌを添加後、反応混合物を酢酸エチル２５ｍｌで３回抽出する。抽出物を、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、次いで、減圧下で蒸発させて、未精製油１３５ｍｇを得る。この油をＬＣ／ＭＳにより精製し、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロ−ペンタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル５５．２ｍｇを得る。
【０２４４】
ＩＲ：３４２３；２９６８；２６７２；１６７３；１５９９；１５４１；１４５１；１３６５；１２６１；１２０２；１１７５；１１６１；１１３７；１０９４；９１６；８５２；８２９；７５２；７２０及び５６８ｃｍ−１
１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ）δ：ｐｐｍ、ＤＭＳＯ−ｄ６中にＡｃＯＤ１滴添加：
１．２７（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１２Ｈ）；１，５２ないし１．８０（未分離複合体，７Ｈ）；１．９０（未分離複合体，１Ｈ）；２，９７（ｍｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）；３，２０（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．５０（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．６９（ｍｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）；６．７１（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．０４（ｄｄ，Ｊ＝９．０及び２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５３（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７，５８（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．６４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２４５】
中間体４６：４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（６−ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニルアミノヘキサノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０２４６】
【化４８】

【０２４７】
スターラーバーを備えた２０ｍｌの丸底フラスコ中で、ＤＭＦ２ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体１６、特許ベンゾチアゾール＿Ｖ２）（０．１５ｇ、０．４６ｍｍｏｌ），ＢＯＣ−６−アミノヘキサン酸（０．１２８ｇ、０．５５５ｍｍｏｌ），ＨＡＴＵ（０．２１１ｇ，０．５５５ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（９５μｌ、０．５５５ｍｍｏｌ）の溶液を、約６０℃（ｅｘｔ．）で、５時間加熱する。
【０２４８】
反応媒体を酢酸エチルで抽出し、１Ｎ塩酸で、次いで、水で洗浄する。有機相を、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、次に、蒸発乾固する。残渣を、Ｂｉｏｔａｇｅカートリッジ（シリカ４０ｇ）にてＱｕａｄ １２／２５を用いるクロマトグラフにより精製し、９７／３の塩酸メチレン／イソプロパノール混合物を用いて抽出する。溶媒を蒸発させた後、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（６−ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニルアミノヘキサノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルが、収率８０％で回収される。
【０２４９】
（中間体４７）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノヘキサノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０２５０】
【化４９】

【０２５１】
ＮＭＰ４ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノヘキサノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル（０．１９４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチレンジアミン（０．３３ｍｌ、１．８ｍｍｏｌ）の溶液を、マイクロ波により１５０℃で１０分間加熱する。未精製反応性生物を、ＥｔＯＡｃで抽出し、水で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過し、次に、蒸発させて、黄色液体１．８ｇを得る。この物質を、シリカ６０（４０−６３μｍ）にて、クロマトグラフにかけ、９３／７のＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ混合物を用いて抽出する。抽出物を蒸発させると、粘性物質（０．２１５ｇ）が得られ、これを水で倍散する。水を除去して、粘性物質をトルエン中に溶解し、蒸発乾固すると、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノヘキサノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル０．１３ｇ、すなわち、収率５４％を得る。
【０２５２】
（実施例４９）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（６−アミノヘキサノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩の調製
【０２５３】
【化５０】

【０２５４】
スターラーバーを備えた１０ｍｌの丸底フラスコ中のＥｔＯＡｃ２ｍｌ中に、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノヘキサノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル０．１２ｇを入れ、続いて、ＥｔＯＡｃに溶解した塩酸０．５ｍｌを滴下添加する。粘性物質を形成し、常温で１時間攪拌する。
【０２５５】
反応媒体を水に溶解し、次に、２８％のアンモニア水でｐＨ８にする。混合物を、ＥｔＯＡｃを用いて抽出し、水で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥する。ろ過後、ろ過液を、蒸発乾固して、白色粉末０．１ｇを得る。これを、メタノール５ｍｌに溶解し、ＥｔＯＡｃ中に溶解した塩酸を用いてｐＨ２にする。懸濁液を蒸発乾固して、残渣を水５ｍｌ中に溶かしてから、凍結乾燥すると、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（６−アミノヘキサノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩９１ｍｇ、すなわち、８０％の収率を得る。
【０２５６】
中間体５０：４−フロロベンゼンスルホン酸 ２−（７−ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニルアミノヘプタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０２５７】
【化５１】

【０２５８】
中間体４６の方法により、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体１６、ｂｒｅｖｅｔベンゾチアゾール＿Ｖ２）と、ＢＯＣ−７−アミノヘプタン酸との作用を経て、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（７−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノヘプタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルを調製し、生成物０．１６４ｇを得る。
【０２５９】
中間体５１：４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（７−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノヘプタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０２６０】
【化５２】

【０２６１】
中間体４７の方法により、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（７−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノヘプタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルと、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチレンジアミンとの作用を経て、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（７−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノヘプタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルを調製する。生成物をＢｉｏｔａｇｅカラム（シリカ８ｇ）上でクロマトグラフィにより精製し、９５／５のＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ混合物を用いて溶出し、生成物８６ｍｇ、すなわち、収率４４％を得る。
【０２６２】
（実施例５２）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（７−アミノヘプタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩の調製
【０２６３】
【化５３】

【０２６４】
実施例４９の方法により、ＥｔＯＡｃに溶解した塩酸の存在下で、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（７−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノヘプタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イルの加水分解を経て、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（７−アミノヘプタノイルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩を調整し、塩酸塩４７ｇ、すなわち、７７％の収率を得る。
【０２６５】
（実施例５３）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩
【０２６６】
【化５４】

【０２６７】
ＮＭＰ４．５ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル（実施例５３、特許ベンゾチアゾール＿Ｖ２）（１４５ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）及びＮ−イソプロピルエチレンジアミン（２３３μｌ、１．８５ｍｍｏｌ）溶液を、マイクロ波により１５０℃で、５分間加熱した。未精製の反応生成物を、ＥｔＯＡｃで希釈し、水で３回洗浄し、ＥｔＯＡｃで２回抽出する。有機相を混合して、硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過して、次に、蒸発乾固する。シリカ：８ｇのＡｌＴカラム上で、溶出液：９０／１０／１のＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨを用いて、クロマトグラフにより、未精製生成物１６５ｍｇを、精製する。得られた固体（９６ｍｇ）を、ＥｔＯＡｃに溶解し、ＥｔＯＡｃに溶解した塩酸により、ｐＨ２にする。懸濁液を、蒸発乾固し、水５ｍｌに溶かして、凍結乾燥すると、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩７６ｍｇを得る。
【０２６８】
中間体５４：４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−イソブチリル−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０２６９】
【化５５】

【０２７０】
中間体４６の方法により、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体１６、特許ベンゾチアゾール＿Ｖ２）と、イソ酪酸との作用を経て、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−イソブチリル−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステルを調製する。未精製の反応生成物を、エチルエーテルにて結晶化させ、吸引によるろ過後、無色の固体１７ｇを単離させ、８６％の収率を得る。
【０２７１】
（実施例５５）：４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−イソブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩の調製
【０２７２】
【化５６】

【０２７３】
実施例５３の方法により、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−イソブチルアミノベンゼンチアゾール−６−イル エステルと、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチレンジアミンとの反応を経て、２，４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−イソブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩を調製する。未精製の反応生成物を、ＥｔＯＡｃで抽出し、水で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過し、次いで、蒸発させる。未精製生成物０．３２７ｇを得る。これを、ｂｉｏｔａｇｅシリカ（４０ｇ）のカラム上でクロマトグラフにかけ、９０／１０のＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ混合物を用いて溶出する。得た油をヘプタンで結晶化させる。生成物をＥｔＯＡｃ５ｍｌ中に再溶解し、ＥｔＯＡｃ中の塩酸溶液をｐＨ２まで滴下添加する。塩酸塩を吸引によりろ過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、４０℃、真空下で乾燥する。４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−イソブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩０．１１２ｇを単離する、すなわち、収率４２％を得る。
【０２７４】
中間体５６：４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル
【０２７５】
【化５７】

【０２７６】
中間体４６の方法により、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体１６、特許ベンゾチアゾール＿Ｖ２）と、プロピオン酸との作用を経て、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステルを調製する。９３％の収率で、生成物０．３９７ｇを得る。
【０２７７】
（実施例５７）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩の調製
【０２７８】
【化５８】

【０２７９】
実施例５３の方法により、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステルと、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチレンジアミンとを、マイクロ波により１５０℃、１０分間の加熱による作用を経て、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステルを調製する。精製後、収率４５％で、塩酸塩形態の生成物０．０９ｇを得る。
【０２８０】
（実施例５８）
４−（２−ヒドロキシ−２メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０２８１】
【化５９】

【０２８２】
実施例５３の方法により、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステルと、１−アミノ−２−メチルプロパン−２−オールとを、マイクロ波により１５０℃、２０分間の加熱による作用を経て、４−（２−ヒドロキシ−２メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステルを調製する。精製後、収率５０％で、塩酸塩形態の生成物０．０９６ｇを得る。
【０２８３】
（中間体５９）
４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（シクロブタンカルボニル−アミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル
【０２８４】
【化６０】

【０２８５】
中間体４６の方法により、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステルと、シクロブタンカルボン酸との作用を経て、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（シクロブタンカルボニル−アミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルを調製する。
【０２８６】
（実施例６０）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロブタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩の調製
【０２８７】
【化６１】

【０２８８】
実施例５３の方法により、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステルと、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチレンジアミンとを、マイクロ波により１５０℃で１０分間の加熱による作用を経て、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロブタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルを調製する。精製後、収率１８％で、塩酸塩形態の生成物０．０５４ｇを得る。
【０２８９】
中間体６１：４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（３−ピリジ−３−イル−プロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０２９０】
【化６２】

【０２９１】
中間体４６の方法により、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステルと、３−（３−ピリジル）プロピオン酸との作用を経て、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（３−ピリジ−３−イル−プロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルを調製する。生成物を、定量的な収率で得る。
【０２９２】
（実施例６２）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（３−ピリジ−３−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩の調製
【０２９３】
【化６３】

【０２９４】
実施例７の方法に従って、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（３−ピリジ−３−イル−プロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチレンジアミンとの、１５０℃でのマイクロ波による１０分間の加熱による作用を介して、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（３−ピリジ−３−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルを調製する。精製後、収率２３％で、塩酸塩形態の生成物０．０４５ｇを得る。
【０２９５】
（実施例６３）
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（３−ピリジ−３−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩の調製
【０２９６】
【化６４】

【０２９７】
実施例５３の方法により、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（３−ピリジ−３−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルと、１−アミノ−２−メチルプロパン−２−オールとの、マイクロ波により１５０℃で２０分間の加熱による作用を経て、４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（３−ピリジ−３−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルを調製する。精製後、収率５２％で、塩酸塩形態の生成物０．１０４ｇを得る。
【０２９８】
中間体６４：４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アセチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０２９９】
【化６５】

【０３００】
スターラーバーを備えた試験管に入れた、ジメチルホルムアミド５ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体１６）（１０１．２ｍｇ、０．３１２ｍｍｏｌ），酢酸（５６．２ｍｇ、０．９３６ｍｍｏｌ），ＨＢＴＵ（３５５ｍｇ、０．９３６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（３２６μｌ、１８７２ｍｍｏｌ）溶液を、常温で２０時間攪拌する。水１００ｍｌを入れ、反応媒体を酢酸エチルを用いて抽出する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、蒸発させる。得られた残渣を、酢酸エチルに溶解し、気孔率１５ないし３５μのシリカ５ｇを含有するバリアン・フラッシュカートリッジ上で、ジクロロメタン中の１％メタノール混合物を用いて、精製する。溶媒を蒸発させた後、収率５８％の４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アセチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（黄色油）６６ｍｇを得る。ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋：３６７．１４、保持時間：３．５０分。
【０３０１】
（実施例６５）
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アセチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０３０２】
【化６６】

【０３０３】
スターラーバーを備えた試験管に入れた、ジメチルスルホキシド２ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アセチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体６４）（６６ｍｇ、０．１８０ｍｍｏｌ），Ｎ−イソプロピルエチレンジアミン（５５．２ｍｇ、０．５４０ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（５８．６ｍｇ、０．１８０ｍｍｏｌ）の溶液を、一晩８０℃で攪拌する。水１００ｍｌを加えて、次いで、反応媒体を、酢酸エチルで抽出する。有機相を、水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、蒸発する。ＬＣ／ＭＳにより精製した残渣から、収率５３％の４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アセチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（白色粉末）４３ｍｇを得る。
【０３０４】
ＬＣＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋：４４９．３５、保持時間：３．２８分。
【０３０５】
１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
ＴＦＡで塩化された生成物に対する強い推定の根拠は以下による：
１．２１（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；２．２０（ｓ，３Ｈ）；３．０７（ｍ，２Ｈ）；３．２０ないし３．３５（遮蔽 ｍ，１Ｈ）；３．４１（ｍ，２Ｈ）；６．７２（ブロード ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；６．９３（ブロード ｔ，Ｊ＝６，０Ｈｚ，１Ｈ）；７．０１（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５３（ブロード ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．６８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．６９（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．３０（ブロード ｍ，２Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０３０６】
中間体６６：４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（２−メトキシ−アセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０３０７】
【化６７】

【０３０８】
スターラーバーを備えた試験管に入れた、ジメチルホルムアミド５ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体１６）（１０１．２ｍｇ、０．３１２ｍｍｏｌ），メトキシ酢酸（８４．３ｍｇ、０．９３６ｍｍｏｌ），ＨＢＴＵ（３５５ｍｇ，０．９３６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（３２６μｌ、１．８７２ｍｍｏｌ）の溶液を、常温で２０時間攪拌する。水１００ｍｌを加え、反応媒体を、酢酸エチルを用いて抽出する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、蒸発させる。得られる残渣を酢酸エチルに溶解し、気孔率１５ないし３５μのシリカ５ｇを含有するバリアン・フラッシュカートリッジ上で、ジクロロメタン中の１％メタノール混合物を用いて、精製する。溶媒を蒸発させた後、収率７２％の４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−ブチ−３−エンオイルアミノベンゼンチアゾール−６−イル エステル（黄色油）８９ｍｇを得る。ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋：３９７．１１、保持時間：３．５９分。
【０３０９】
（実施例６７）
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（２−メトキシアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０３１０】
【化６８】

【０３１１】
スターラーバーを備えた試験管に入れた、ジメチルスルホキシド２ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（２−メトキシ−アセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体６６）（８９ｍｇ、０．２２４ｍｍｏｌ），Ｎ−イソプロピルエチレンジアミンアミン（６８．７ｍｇ、０．６７２ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（７３ｍｇ、０．２２４ｍｍｏｌ）の溶液を、一晩８０℃で攪拌する。水１００ｍｌを加え、反応媒体を、酢酸エチルを用いて抽出する。次に、有機相を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、蒸発させる。残渣を、ＬＣ／ＭＳにより精製して、収率４３％で、４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（２−メトキシアセチルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル（白色粉末）４６．６ｍｇを得る。
【０３１２】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋：４７９．３５、保持時間：３．３３分。
【０３１３】
１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００ 分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
ＴＦＡで塩化された生成物に対する強い推定の根拠は以下による：
１．２１（ｄ，Ｊ＝７，０Ｈｚ，６Ｈ）；３．０７（ブロード ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．１５ないし３．３５（遮蔽 ｍ，１Ｈ）；３．３８（ｓ，３Ｈ）；３．４１（ｍ，２Ｈ）；４．２０（ｓ，２Ｈ）；６．７２（ブロード ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；６．９３（ブロード ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ） ； ７．０３ （ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５３（ブロード ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．６９（ｄ，Ｊ＝８，５Ｈｚ，１Ｈ）；７．７１（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．１０ないし８．４５（ブロード ｍ，２Ｈ）；１２．０ないし１２．５（ｖｅｒｙ ブロード ｍ，１Ｈ）。
【０３１４】
中間体６８：４−フロロベンゼンスルホン酸 ２−（シクロペンタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０３１５】
【化６９】

【０３１６】
スターラーバーを備えた試験管に入れた、ジメチルスルホキシド５ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゼンチアゾール−６−イル エステル（中間体１６）（１０１．２ｍｇ、０．３１２ｍｍｏｌ）、シクロペンタンカルボン酸（５３．４ｍｇ、０．９３６ｍｍｏｌ），ＨＢＴＵ（３５５ｍｇ，０．９３６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（３２６μｌ、１．８７２ｍｍｏｌ）の溶液を、常温で２０時間攪拌する。水１００ｍｌを加え、反応媒体を、酢酸エチルを用いて抽出する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、蒸発させる。得られる残渣を、酢酸エチルに溶解し、気孔率１５ないし３５μのシリカ５ｇを含有するバリアン・フラッシュカートリッジ上で、ジクロロメタン中の１％メタノール混合物を用いて、精製する。溶媒を蒸発させた後、収率６８％で、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（シクロペンタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル（黄色油）９０ｍｇを得る。ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋：４２１．１３、保持時間：４．０５分。
【０３１７】
（実施例６９）
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロペンタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０３１８】
【化７０】

【０３１９】
スターラーバーを備えた試験管に入れた、ジメチルスルホキシド２ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（２−メトキシアセチルアミノ）−ベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体６８）（９０ｍｇ、０．２１４ｍｍｏｌ），Ｎ−イソプロピルエチレンジアミン（６５．６ｍｇ、０．６４２ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（６９．７ｍｇ、０．２１４ｍｍｏｌ）の溶液を、一晩８０℃で攪拌する。水１００ｍｌを加え、反応媒体を、酢酸エチルを用いて抽出する。有機相を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、蒸発させる。残渣を、ＬＣ／ＭＳにより精製して、収率２４％で、４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロペンタンカルボニルアミノ）ベンゼンチアゾール−６−イル エステル（白色粉末）２６．２ｍｇを得る。
【０３２０】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋：５０３．３９、保持時間：３．６８分。
【０３２１】
１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００ 分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）付備、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準。
【０３２２】
ＴＦＡと塩を形成した生成物に対する強い推定の根拠は以下による。
【０３２３】
１．２１（ｄ，Ｊ＝７，０Ｈｚ，６Ｈ）；１．５０ないし１．８０（ｍ，６Ｈ）；１．８２ないし１．９８（ｍ，２Ｈ）；２．９８（ｍ，１Ｈ）；３．０４（ｍ，２Ｈ）；３．１５ないし３．５５（ｍ，３Ｈ）；６，７１（ブロード ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；６．９２（ブロード ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．０２（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８，５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５３（ブロード ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．６５ないし７．７０（ｍ，２Ｈ）；８．０５ないし８．４５（ｖｅｒｙ ブロード ｍ，２Ｈ）；１２．４（ブロード ｍ，１Ｈ）。
【０３２４】
中間体７０：４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０３２５】
【化７１】

【０３２６】
ジメチルホルムアミド６．５ｍｌ中の、４−フロロベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体１６）（５００ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ），プロピオン酸（２５３ｍｇ、３．４２ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１．２３ｇ、３．４２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（７３７ｍｇ、５７ｍｍｏｌ）溶液を、常温で一晩攪拌する。反応媒体を蒸発乾固する。乾燥した残渣を、酢酸エチル５０ｍｌを用いて２回抽出し、水で洗浄する。次に、有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、蒸発させる。得られた油を、ジメチルスルホキシド３５ｍｌに溶解し、次に、水中の０．０７％のトリフルオロ酢酸、０．０７％のトリフルオロ酢酸で補充した、５％ないし９５％のアセトニトリルの勾配を５２分以上をかけ、１００Å、１０μｍの逆相カラム、Ｎｕｃｌｅｏｄｕｒ Ｃ１８上で、分取用ＨＰＬＣを用いて、７回精製する。流速は、７０ｍｌ／分。透明な生成物を含有する画分を濃縮して、収率６９％の４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル３００ｍｇを得る。
【０３２７】
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００ 分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
１．１１（ｔ，Ｊ＝７，５Ｈｚ，３Ｈ）；２．５０（部分遮蔽 ｍ，２Ｈ）；７，０１（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５１（ブロード ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．７９（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．９４（ブロード ｄｄ，Ｊ＝５．５及び９．０Ｈｚ，２Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０３２８】
（実施例７１）
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−プロピニルアミノベンゾチオゾール−６−イル エステル；トリフルオロ酢酸との化合物の調製
【０３２９】
【化７２】

【０３３０】
ジメチルスルホキシド４ｍｌ中の、４−フロロベンゼンスルホン酸 ２−プロピオニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体７０）（３００ｍｇ、０．７８９ｍｍｏｌ）、Ｎ−イソプロピルエチレンジアミン（２４２ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（２５６ｍｇ、０．７８９ｍｍｏｌ）の溶液を、攪拌しながら、７時間３０分、８０℃を、次いで、２日間常温を維持する。反応媒体を、ろ過し、ジメチルスルホキシド８ｍｌを用いて、すすぐ。求める生成物を、中間体７０のときと同じ条件下で、分取用ＨＰＬＣにより、３回精製する。収率５６％で、４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−プロピニルアミノベンゾチオゾール−６−イル エステル、フルオロ酢酸を含む化合物２０５ｍｇを得る。
【０３３１】
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００ 分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
１．１１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）：１．２２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，６Ｈ）：２．４５ないし２．５４（部分遮蔽 ｍ，２Ｈ）：３．０７（ｍ，２Ｈ）：３．２２ないし３．４７（部分遮蔽 ｍ，３Ｈ）：６．７２（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）：６．９３（ブロード ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）：７．０２（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）：７．５３（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）：７．６７（ｄ，Ｊ＝８，５Ｈｚ，１Ｈ）：７．６９（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）：８．２２ないし８．３８（ブロード ｍ，２Ｈ）：１２．３５（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０３３２】
中間体７２：４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−ブチルアミノベンゾチアゾール−６−イルの調製
【０３３３】
【化７３】

【０３３４】
中間体７０の方法により、中間体７２を、酪酸を用いて合成する。収率１８％で、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−ブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル８０ｍｇを得る。
【０３３５】
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００ 分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
０．９２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）；１．６４（ｍ，２Ｈ）；２．４８（部分遮蔽 ｍ，２Ｈ）；７．０１（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５１（ブロード ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．７８（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．９３（ブロード ｄｄ，Ｊ＝５．５及び９．０Ｈｚ，２Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０３３６】
（実施例７３）
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−ブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル、フルオロ酢酸を含む化合物、の調製
【０３３７】
【化７４】

【０３３８】
実施例７１の方法により、中間体７２と、Ｎ−イソプロピルエチレンジアミンとを用いて、実施例７３を得る。収率３６％で、４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−ブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル、フルオロ酢酸を含む化合物、３７ｍｇを得る。
【０３３９】
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００ 分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
０．９１（ｔ，Ｊ＝７，５Ｈｚ，３Ｈ）；１．２２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，６Ｈ）；１．６３（ｍ，２Ｈ）；２．４７（部分遮蔽 ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．０７（ｍ，２Ｈ）；３．２０ないし３．３７（遮蔽 ｍ，１Ｈ）；３．４１（ｍ，２Ｈ）；６．７２（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；６．９４（ブロード ｔ ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．０２（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５３（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．６９（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．３２（ブロード ｍ，２Ｈ）；１２，４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０３４０】
中間体７４：４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−イソブチリル−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０３４１】
【化７５】

【０３４２】
中間体７０の方法により、イソ酪酸を用いて、中間体７４を合成する。収率１７％で、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−イソブチリル−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル７５ｍｇを得る。
【０３４３】
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００ 分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
１．１４（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）：２．７９（ｍ，１Ｈ）；７．０２（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）：７．５１（ブロード ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）：７．６８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）：７．７９（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ．１Ｈ）；７．９３（ブロード ｄｄ，Ｊ＝５．５及び９．０Ｈｚ，２Ｈ）：１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０３４４】
（実施例７５）
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−イソブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル、トリフルオロ酢酸を含む化合物、の調製
【０３４５】
【化７６】

【０３４６】
実施例７１の方法により、中間体７４とＮ−イソプロピルエチレンジアミンとを用いて、実施例７５を得る。収率４４％で、４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−イソブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル、トリフルオロ酢酸を含む化合物、４９ｍｇを得る。
【０３４７】
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００ 分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
１．１４（ｄ，Ｊ＝６，５Ｈｚ，６Ｈ）；１．２２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，６Ｈ）；２．７９（ｍ，１Ｈ）；３．０７（ｍ，２Ｈ）；３．２５ないし３．３７（遮蔽 ｍ，１Ｈ）；３．４１（ｍ，２Ｈ）；６．７２（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；６．９３（ブロード ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．０３（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５３（ブロード ｄ，Ｊ＝９，０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６４ないし７．７０（ｍ，２Ｈ）；８．３０（ブロード ｍ，２Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０３４８】
中間体７６：４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（シクロブタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０３４９】
【化７７】

【０３５０】
中間体７０の方法により、シクロブタンカルボン酸を用いて、中間体７６を合成する。収率４０％で、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（シクロブタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル１８５ｍｇを得る。
【０３５１】
（実施例７７）
４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 （２−シクロブタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル、トリフルオロ酢酸との化合物、の調製
【０３５２】
【化７８】

【０３５３】
実施例７１の方法により、中間体７６と、Ｎ−イソプロピルエチレンジアミンを用いて、実施例７７を得る。収率３７％で、４−（２−イソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 （２−シクロブタンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル、トリフルオロ酢酸との化合物、４１ｍｇを得る。
【０３５４】
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００ 分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
１．２２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，６Ｈ）；１．８４（ｍ，１Ｈ）；１．９９（ｍ，１Ｈ）；２．１０ないし２．３０（ｍ，４Ｈ）；３．０７（ｍ，２Ｈ）；３．２０ないし３．４７（遮蔽 ｍ，４Ｈ）；６．７２（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；６．９７（ブロード ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．０１（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８，５Ｈｚ，１Ｈ）；７５３（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．６９（ｄ，Ｊ＝２，５Ｈｚ，１Ｈ）；８．２７ないし８．４４（ブロード ｍ，２Ｈ）；１２．３（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０３５５】
（中間体７８）
４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−ブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル−エステルの調製
【０３５６】
【化７９】

【０３５７】
スターラーバーを備えた２０ｍｌの丸底フラスコに入れた、ジメチルホルムアミド５．５ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体１６）（３５９ｍｇ、１．１０７ｍｍｏｌ）、酪酸（１４６ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（６３１ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２８６ｍｌ、１．６６ｍｍｏｌ）の溶液を、６０℃で８時間攪拌し、次いで、一晩常温放置する。反応媒体を酢酸エチルを用いて抽出し、水で、次に、０．１Ｎ塩酸溶液を用いて洗浄する。有機相を、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、次に、蒸発乾固する。得た残渣（５６７ｍｇ、淡黄色固体）を、４０ｇ Ｂｉｏｔａｇｅ シリカ・カートリッジ上でクロマトグラフィにより精製し、９／１のトルエン／イソプロパノール混合物を用いて溶出する。溶媒を蒸発後、収率５５％で、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−ブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル−エステル（白色固体）２３９ｍｇを得る。
【０３５８】
Ｍａｓｓ：
ＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ ３９５：［Ｍ＋Ｈ］＋，ｍ／ｚ ３９３：［Ｍ＋Ｈ］−
１Ｈ ＮＭＲスペクトル ４００ＭＨｚ、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
０．９ｎｓ １（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）；１．６４（ｍ，２Ｈ）；２．４７（部分遮蔽 ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．０１（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５１（ブロード ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．７９（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．９３（ｄｄ，Ｊ＝６．０及び９．０Ｈｚ，２Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０３５９】
（実施例７９）
４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−ブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩の調製
【０３６０】
【化８０】

【０３６１】
スターラーバーを備えた、５ｍｌのマイクロ波用バイアルに入れた、Ｎ−メチルピロリドン３ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−ブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体７８）（１００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチレンジアミン（１８５μｌ、１．０１ｍｍｏｌ）の溶液を、マイクロ波により、１５０℃で１０分間、加熱する。反応媒体を、酢酸エチルを用いて抽出し、水を用いて洗浄する。有機相を、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、次いで、蒸発乾固する。得た残渣を、Ｍｅｒｃｋシリカ（４０−６３μｍ）上で、クロマトグラフィにより精製する。溶媒を蒸発後、無色の油（乾燥時は、結晶化する）４１ｍｇを得る。生成物を、最小量の酢酸エチルに溶解し、ジオキサン中の溶液として、４Ｎ塩酸を加える。媒質は沈殿して、それを濃縮し、水に溶解し、次に、Ｍｉｌｅｘ ４５μｍフィルタを通して、ろ過する。溶液は沈殿する。それを吸引ろ過後、４０℃、真空下で乾燥すると、４−（２−ジイソプロピルアミノエチルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２ブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩３１ｍｇ（収率２８％）を得る。
【０３６２】
Ｍａｓｓ：
・ＩＥ：ｍ／ｚ １１４：（Ｃ３Ｈ７）２ＮＣＨ２＋（基準ピーク）分子イオン非存在．
・ＩＣ：ｍ／ｚ ５１９［Ｍ＋Ｈ］＋（基準ピーク）。
【０３６３】
・ＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ ５１９［Ｍ＋Ｈ］＋，ｍ／ｚ ５１７：［Ｍ−Ｈ］−
１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
０．９１（ｔ，Ｊ＝７，５Ｈｚ，３Ｈ）；１．２０ないし１．３２（ブロード ｍ，１２Ｈ）；１．６３（ｍ，２Ｈ）；２．４２ないし２．５５（部分遮蔽 ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）；３．１９（ｍ，２Ｈ）；３．５１（ｍ，２Ｈ）；３．６９（ブロード ｍ，２Ｈ）；６，７２（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；６．９７（ブロード ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．０２（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５３（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６３ないし７．６９（ｍ，２Ｈ）；８．７８（ブロード ｍ，１Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０３６４】
（実施例８０）
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−ブチリルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩の調製
【０３６５】
【化８１】

【０３６６】
スターラーバーを備えた、５ｍｌのマイクロ波用バイアルに入れた、Ｎ−メチルピロリドン３ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−ブチリルアミノベンゾチアゾール−６−イル−エステル（中間体７８）（１３５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）及び１−アミノ−２−メチルプロパン−２−オール（１５３ｍｇ、１．７１８ｍｍｏｌ）の溶液を、マイクロ波により、１５０℃で、２０分間加熱する。反応媒体を、酢酸エチル（３ｘ２０ｍｌ）を用いて、抽出し、水（４ｘ２５ｍｌ）で洗浄する。有機相を、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、次いで、蒸発乾固する。得られる残渣を、８ｇ、１５−３５μｍのＡＩＴカラム上のシリカ上で、クロマトグラフィにより精製し、９／１の酢酸エチル／シクロヘキサン混合物を用いて溶出する。溶媒を蒸発後、無色の固体５５ｍｇを得る。生成物を、最小量のジオキサンに溶解し、ジオキサンに溶解した４Ｎ塩酸を加える。得られる沈殿を、吸引ろ過し、ジオキサンを用いて洗浄し、次いで、真空下で、４０℃で、乾燥すると、４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−ブチルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩４２ｍｇ、すなわち、収率２５％、を得る。
【０３６７】
Ｍａｓｓ：
・ ＩＥ：ｍ／ｚ ４６３：［Ｍ＋］，ｍ／ｚ ２２８：［Ｍ＋］−ＳＯ２ＰｈＮＣＨ２Ｃ３Ｈ７Ｏ
・ ＩＣ：ｍ／ｚ ４６４：［Ｍ＋Ｈ］＋
・ ＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ ４６４：［Ｍ＋Ｈ］＋，ｍ／ｚ ４６２：［Ｍ−Ｈ］―
１Ｈ ＮＭＲスペクトル ４００ＭＨｚ（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
０．９３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）；１．１５（ｓ，６Ｈ）；１．６６（ｍ，２Ｈ）；２．４６ないし２．５９（部分遮蔽 ｍ，２Ｈ）；３．０４（ｓ，２Ｈ）；６．７６（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；６．９８（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．４２（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．７０（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０３６８】
（中間体８１）
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０３６９】
【化８２】

【０３７０】
ジメチルスルホキシド５ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体１５）（３００ｍｇ、０．７０７ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（２３０ｍｇ、０．７０７ｍｍｏｌ）及び１−アミノ−２−メチルプロパン−２−オール（１２６ｍｇ、１．４１４ｍｍｏｌ）の溶液を、８０℃で７２時間攪拌する。水を反応媒体に加え、混合物を酢酸エチルを用いて、３回抽出する。有機相を、飽和塩化ナトリウム溶液を用いて洗浄し、次いで、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、最後に、蒸発乾固すると、収率８３％で、４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル２９０ｍｇを得る。
【０３７１】
（中間体８２）
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル、トリフルオロ酢酸を含む化合物、の調製
【０３７２】
【化８３】

【０３７３】
ジクロロメタン１０ｍｌ及び水１００μｌ中の、４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体８１）（１７０ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（１４．９ｇ、１３０．７ｍｍｏｌ）の溶液を、常温で、２時間攪拌する。反応媒体を、蒸発乾固し、酢酸エチルに溶解し、水で洗浄し、次いで、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄する。有機相を、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濃縮して乾燥させると、収率９６％で、４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル、トリフルオロ酢酸を含む化合物、１３０ｍｇを得る。
【０３７４】
ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝３９４．０６，保持時間＝２．９０分。
【０３７５】
（中間体８３）
４−（２−｛６−［４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）−ベンゼンスルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル｝エチル）ピペリジン−１−カルボン酸第三ブチルエステルの調製
【０３７６】
【化８４】

【０３７７】
ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中の、１−Ｂｏｃ−ピペリジン−４−イルプロピオン酸（１７６ｍｇ、０．６８６ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２６０ｍｇ、０．６８６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１８５ｍｇ、１．４３５ｍｍｏｌ）の溶液を、１０分間攪拌する。４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−アミノベンゾチアゾール−６−イル エステル、トリフルオロ酢酸を含む化合物（中間体８２）（１３０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加え、反応媒体を常温で、４８時間、攪拌する。反応媒体に水を加え、得られる混合物を、酢酸エチルを用いて３回抽出する。有機相を、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濃縮乾燥する。０．０７％トリフルオロ酢酸で補充された水中のアセトニトリルが５％ないし４０％の勾配で５分以上かけ、次いで、４０％ないし８０％の勾配で３０分以上かけ、３００×２０ｍｍ Ｄｙｎａｍａｘ Ｃ１８カラム上で、逆相クロマトグラフィにより、乾燥残渣を精製する。生成物を含有する画分を、蒸発乾固し、５１％の収率で、４−（２−｛６−［４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）−ベンゼンスルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル｝エチル）ピペリジン−１−カルボン酸第三ブチルエステル１１１ｍｇを得る。
【０３７８】
ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝６３３．００，保持時間：３．９４分。
【０３７９】
（実施例８４）
４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（３−ピペリジン−４−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩の調製
【０３８０】
【化８５】

【０３８１】
ジオキサン８ｍｌ及びジオキサン／４Ｎ塩酸８ｍｌ中の、４−（２−｛６−［４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）−ベンゼンスルホニルオキシ］ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル｝エチル）ピペリジン−１−カルボン酸 第三ブチルエステル（１１０ｍｇ、０．１７３ｍｍｏｌ）を、一晩常温で攪拌する。生じた沈殿を、ろ過し、メタノールに溶解し、次いで、溶液を蒸発乾固する。残渣を、酢酸エチルを用いて洗浄して、収率９５％で、４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（３−ピペリジン−４−イルプロピオニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル塩酸塩１０３ｍｇを得る。
【０３８２】
ＬＣ／ＭＳ（方法１）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝５３３．０４、保持時間：２．６６分。
【０３８３】
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００ 分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
混合物の８０％に対して、以下のデータがある：
１．１３（ｓ，６Ｈ）；１．２２ないし１．４０（ｍ，２Ｈ）；１．４２ないし１．６５（ｍ，３Ｈ）；１．７５ないし１．８５（ｍ，２Ｈ）；２．４０ないし２．５８（部分遮蔽 ｍ，２Ｈ）；２．７５ないし２．９０（ｍ，２Ｈ）；３．０２（ｓ，２Ｈ）；３．１５ないし３．３０（ｍ，２Ｈ）；６．７３（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；６．９７（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．４１（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．７０（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．３２ないし８．５３（ブロード ｍ，１Ｈ）；８．６５ないし８．８０（ブロード ｍ，１Ｈ）；１２．４（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０３８４】
ＩＲ：ＫＢｒ
３４０５；２９７１；１７２５；１５９７；１５３９；１４７０；１３６５；１１６１；１０９４；９１５；８５６；７４８及び５７８ｃｍ−１
【０３８５】
（実施例８５）
５−ピリジン−２−イルチオフェン−２−スルフォン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０３８６】
【化８６】

【０３８７】
アセトン２ｍｌ中の、シクロプロパンカルボン酸（６−ヒドロキシベンゾチアゾール−２−イル）アミド（中間体６）（６０ｍｇ、０．２５６ｍｍｏｌ）、ピリジン（８０μｌ、０．９９１ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（３ｍｇ、０．２５６ｍｍｏｌ），ピリジン（８０μｌ、０．９９１ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（３ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）及び５−（２−ピリジル）チオフェン−２−塩化スルフォニル（９９ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）の溶液を、４０℃で２４時間、攪拌する。反応媒体を、濃縮乾燥し、ＤＭＳＯ２ｍｌ中に溶解し、分取用ＬＣ／ＭＳ（方法Ｂ）により、４回精製して、５−ピリジン−２−イルチオフェン−２−スルフォン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル１０ｍｇを得る。
【０３８８】
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００ 分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
０．９８ないし１．１０（ｍ，４Ｈ）；１．９０（ｍ，１Ｈ）；７．１５（ブロード ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．３０ないし７．３８（ｍ，２Ｈ）；７．６１（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．６７（ブロード ｓ，１Ｈ）；７．７７（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．８７（ブロード ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．９９（ブロード ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；８．５５（ブロード ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，１Ｈ）；１３．５（ブロード ｍ，１Ｈ）。
【０３８９】
ＭＳ：ＩＥ ｍ／ｚ＝４５７ Ｍ＋
ｍ／ｚ＝３８９ （Ｍ−Ｃ４Ｈ４Ｏ）＋
ｍ／ｚ＝３２５ （ｍ／ｚ＝３８９−ＳＯ２）＋
ｍ／ｚ＝６９ Ｃ４Ｈ５Ｏ＋基準ピーク
【０３９０】
（実施例８７）
４−（１−オキシル−２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）−ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの調製
【０３９１】
【化８７】

【０３９２】
ジメチルスルホキシド３．５ｍｌ中の、４−フルオロベンゼンスルホン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）−ベンゾチアゾール−６−イル エステル（実施例７）（０．３５２ｍｍｏｌ、１３８ｍｇ）、４−アミノ−ＴＥＭＰＯ（０．３８７ｍｍｏｌ，６６ｍｇ）及び炭酸セシウム（０．３５２ｍｍｏｌ，１１４ｍｇ）の溶液を、２４時間、攪拌する。４−アミノ−ＴＥＭＰＯ６６ｍｇを、２回、２４時間後及び４８時間後に加える。４８時間後に、反応を常温で４８時間維持する。次に、溶液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、次いで、蒸発乾固すると、未精製の生成物２５８ｍｇを得る。この生成物を、シリカ５ｇのカートリッジ上で、フラッシュ・クロマトグラフィにより精製する。使用する溶離液は、それぞれ、ジクロロメタン及び７Ｍの０．０１％アンモニアメタノールを１％含むジクロロメタンである。収率１４％で、４−（１−オキシル−２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）−ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル２８ｍｇを得る。
【０３９３】
ＭＳ：ＥＳ ｍ／ｚ＝５４４ ＭＨ＋ 基準ピーク
ＩＲ：ＫＢｒ
３３８８；３２５２；２９２５；１６８６；１５９８；１５４６；１４５１；１３２７；１２６６；１１６７；１０９４；９０７；８５２及び７４７ｃｍ−１
【０３９４】
（中間体８８）
４−［２−（ビス−ベンジルオキシホスホリルオキシ）−２−メチル−プロピルアミノ］ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの合成
【０３９５】
【化８８】

【０３９６】
ジクロロメタン６．４ｍｌ中の、４−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル（実施例１１）（０．８５５ｍｍｏｌ、３９４ｍｇ）、１Ｈテトラゾール（２．５６３ｍｍｏｌ、１７９ｍｇ）及びジベンジルジイソプロピル ホスホルアミダイト（１・７０ｍｍｏｌ、５９０ｍｇ）の溶液を、常温で、２時間、攪拌する。反応媒体を７℃まで冷却し、ジクロロメタン１．２ｍｌ中の、３−クロロペロキシ安息香酸（１．０２５ｍｍｏｌ、２５２ｍｇ）溶液を、ゆっくりと加える。反応媒体を、一晩攪拌する。
【０３９７】
１Ｍメタ重亜硫酸ナトリウム溶液１０ｍｌを加える。有機相を、１Ｍメタ重亜硫酸ナトリウム溶液１０ｍｌで洗浄し、飽和重炭酸ナトリウム溶液１０ｍｌで２回洗浄し、次いで、飽和塩化ナトリウム溶液１０ｍｌで洗浄する。
【０３９８】
有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮して乾燥する。得られる乾燥した残渣を、ジクロロメタンに溶解し、シクロヘキサン中の２０％ないし５０％の酢酸エチルの勾配をもつ、空隙率１５−３５μｍのシリカ５０ｇを含有するｉｎｔｅｒｃｈｉｍフラッシュ・カートリジ上で精製する。求める生成物を含有する画分から溶媒を蒸発させて、収率６８％で、４−［２−（ビス−ベンジルオキシホスホリルオキシ）−２−メチル−プロピルアミノ］ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル４１９ｍｇを得る。
【０３９９】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝７２２．１３，保持時間：４．１３分。
【０４００】
（実施例８９）
４−（２−メチル−２−ホスホノオキシプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステルの合成
【０４０１】
【化８９】

【０４０２】
エタノール１５ｍｌ中の、４−［２−（ビス−ベンジルオキシホスホリルオキシ）−２−メチルプロピルアミノ］ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル（中間体８８）（０．４４１ｍｍｏｌ、３１８ｍｇ）及びギ酸アンモニウム（４．４１ｍｍｏｌ、２７８ｍｇ）の溶液に、１０％活性炭上パラジウム３００ｍｇを加える。
【０４０３】
反応媒体を、一晩、攪拌しながら還流する。ＬＣ／ＭＳ分析は、モノベンゼン生成物が、残存していることを示す。ギ酸アンモニウム２８０ｍｇ（４．４１ｍｍｏｌ）及び１０％活性炭上パラジウム１００ｍｇを加え、反応媒体を６時間還流する。反応媒体をろ過し、次いで、濃縮する。得られる油を、エタノール１５ｍｌ中の、ギ酸アンモニウム２７８ｍｇ（４．４１ｍｍｏｌ）及び１０％活性炭上パラジウム３００ｍｇとの反応に戻す。反応媒体を、１時間２０分攪拌しながら還流する。反応媒体を、ろ過し、濃縮乾燥する。得られる残渣を、分取用ＬＣ／ＭＳ（方法Ｂ）により精製して、収率３％の４−（２−メチル−２−ホスホノオキシプロピルアミノ）ベンゼンスルホン酸 ２−（シクロプロパンカルボニルアミノ）ベンゾチアゾール−６−イル エステル６．２ｍｇを得る。
【０４０４】
ＮＭＲ：１Ｈ ＮＭＲスペクトル ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＰＸ−３００ 分光計、化学シフト（δ：ｐｐｍ）、溶媒：ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６）、２．５０ｐｐｍ基準：
０．９０ないし１．０１（ｍ，４Ｈ）；１．４１（ｓ，６Ｈ）；２．００（ｍ，１Ｈ）；３．１０ないし３．５０（遮蔽 ｍ，２Ｈ）；６．７５（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；６．８９（ブロード ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．９７（ｄｄ，Ｊ＝２．５及び８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．４３（ブロード ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．７０（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）；１２．７（ブロード ｓ，１Ｈ）。
【０４０５】
生化学試験に対するプロトコール
１．プロトコールＣＤＫ２／サイクリンＥ
ＩＭＡＣ（Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ Ｍｅｔａｌ Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）によるＣＤＫ２／サイクリンＥ−（Ｈｉｓ）６複合体の精製
それぞれ、ＣＤＫ２及びサイクリンＥをコードするヒト配列を有する２個の組み換えバキュロウィルス、（後者は、Ｃ末端ヘキサヒスチジン・タグを含む）は、同時感染昆虫Ｓｆ２１細胞に使用される。同時感染して２、３日後、細胞を遠心分離によって集め、使用時まで−４０℃で保管する。細胞の解凍及び機械的な溶解後、溶解した上清中に存在する複合体を、ニッケル上のアフィニティクロマトグラフィ（ＩＭＡＣ）によって精製し、−８０℃で保管する。
【０４０６】
９６ウェルフォーマットにおけるＣＤＫ２／サイクリンＥフラッシュプレート試験
ＣＤＫ２／サイクリンＥのキナーゼ活性についての化合物の活性度を試験するために、ストレプトアビジンをコートした、９６ウェルプレートのフォーマットを使用する。
【０４０７】
この試験を実行するために、１１０μｌ分割量の形態を採る、−２０℃で保管した原液を構成するために、キナーゼ緩衝液（ＨＥＰＥＳ／ＮａＯＨ ５０ｍＭ，ＮＡＣｌ １ｍＭ，ＭｇＣｌ２５ｍＭ，ｐＨ７．５）中に、ビオチン標識したペプチド基質、ｐＲｂタンパク質（ビオチニル−ＳＡＣＰＬＮＬＰＬＱＮＮＨＴＡＡＤＭＹＬＳＰＶＲＳＰＫＫＫＧＳＴＴＲ− ＯＨ）の断片を１ｍＭの濃度で溶解する。実験当日に、この溶液の一定分量を、解凍し、１ｍＭのジチオスレイトールを含有するキナーゼ緩衝液中で希釈し、１４．３μＭの濃度を得るために、その場で緩衝液に加える。１００μｌの反応媒体（以下、参照）の最終容積中で実行される酵素反応の間に、１０μＭの最終基質濃度を得るために、この溶液７０μｌを、フラッシュプレートの各ウェルに加える。
【０４０８】
多様な濃度の阻害剤（本発明の生成物）の中間体希釈溶液を、別々の試験管に原液からＤＭＳＯ中に１０ｍＭで調製する。このようにして、１０００μＭ，３３３．３μＭ，１１１．１μＭ，３７．０３μＭ，１２．３５μＭ，４．１１μＭ及び１．３７μＭの希釈溶液を調製する。これらの溶液のそれぞれ１μｌ（又は対照用として、ＤＭＳＯ１μｌ）を、テストプレートのウェルに移す。
【０４０９】
次に、キナーゼ緩衝液中に、ＡＴＰトータルで５．２６μＭ及び３３Ｐが５２．６μＣｉ／ｍｌの濃度で、アデノシン三リン酸塩（ＡＴＰ）及びＡＴＰｙ３３Ｐの混合物溶液１９μｌを、各ウェルに添加する。１ｍＭのジチオスレイトールを含有するキナーゼ緩衝液中に、２００ｎＭ、ＣＤＫ２／サイクリンＥ溶液を１ウェルあたり１０μｌ（または、反応ブランクに対して、１ｍＭのジチオスレイトール含有するキナーゼ緩衝液１０μｌ）添加することにより、酵素反応を誘発する。
【０４１０】
各試薬を添加後、各ウェルの最終容量は、１００μｌ、最終基質濃度は、１０μＭ、最終阻害剤濃度は、１０μＭ，３．３３μＭ，１．１１μＭ，０．３７μＭ，０．１２３μＭ，０．０４１μＭ及び０．０１４μＭ（中間体希釈溶液の濃度による）、最終ＡＴＰ濃度は、１μＭ、３３Ｐの最終量は、１μＣｉ／ウェル、及び、ＣＤＫ２／サイクリンＥ複合体の最終濃度は、２０ｎＭである。全ての試薬を添加後、プレートを６５０ｒｐｍで、オービタル攪拌しながら、３０℃でインキュベートする。
【０４１１】
インキュベーションが完了したら、３００μ／ウェルのＰＢＳ（リン酸緩衝液食塩水、ｐＨ＝７．４、カルシウム又はマグネシウムを含まず、基準：１００１０−０１５、Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ）を用いて、プレートを３回洗浄する。ペプチドへの３３Ｐの取り込みは、Ｐａｃｋａｒｄ Ｔｏｐｃｏｕｎｔ．ＮＸＴ ｍａｃｈｉｎｅを用いてシンチレーションカウンティングにより定量する。本発明の生成物の阻害活性は、酵素活性において５０％の減少（ＩＣ５０）を与える阻害濃度を測定することにより評価される。
【０４１２】
２．ＣＤＫ４／サイクリンＤ１の手順
ＩＭＡＣ（Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ Ｍｅｔａｌ Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）によるＣＤＫ４−ＨＡ／サイクリンＤ１−（Ｈｉｓ）６複合体の精製
ヒトのシーケンス・コードを担う、２個の組み換えバキュロ・ウィルス、それぞれ、ＣＤＫ４−ＨＡ（ヘマグルチニン・タグをもつＣ末端融合）及びサイクリンＤ１−（Ｈｉｓ）６は、同時感染昆虫Ｓｆ９細胞に使用される。同時感染開始６時間後、細胞を遠心分離により集め、使用時まで−２０℃で凍結する。緩衝液Ａ（ＨＥＰＥＳ：２００ｍＭ、ｐＨ７．０、ＮａＣｌ：５０ｍＭ、ＭｇＣｌ２：２ｍＭ、イミダゾール：２５ｍＭ、ＴＣＥＰ：１ｍＭ、グリセロール：１０％（ｐ／ｖ）、ＮａＦ：１ｍＭ、Ｎａ３ＶＯ４：１ｍＭ）中で解凍後、４℃で１時間攪拌し、遠心分離して、溶解した上澄み中に存在する複合体を、ニッケル（ＩＭＡＣ）上のアフィニティクロマトグラフィにより精製し、−８０℃で保管する。
【０４１３】
９６ウェルフォーマットにおけるＣＤＫ４／サイクリンＤ１フラッシュプレート試験
ストレプトアビジンをコートした、９６ウェル「フラッシュプレート」における試験は、本発明の生成物による、ＣＤＫ４／サイクリンＤ１のキナーゼ複合体の阻害を評価するのに使用する。
【０４１４】
この試験を実行するには、１１０μｌ分割量の形態を採る、−２０℃で保管した原液を構成するために、キナーゼ緩衝液（ＨＥＰＥＳ／ＮａＯＨ：５０ｍＭ，ＮＡＣｌ：１ｍＭ，ＭｇＣｌ２：５ｍＭ，ｐＨ７．５）中に、ビオチン標識したペプチド基質、ｐＲｂタンパク質（ビオチニル−ＲＰＰＴＬＳＰＩＰＨＩＰＲＳＰＹＫＦＰＳＳＰＬＲ−アミド）の断片を２ｍＭの濃度で溶解する。実験当日に、この溶液の一定分量を、解凍し、１ｍＭのジチオスレイトールを含有するキナーゼ緩衝液中で希釈し、２．５７１μＭの最終ペプチド濃度を得るために、その場で緩衝液に加える。１００μｌの反応媒体（以下、参照）の最終容積中で実行される酵素反応の間に、１．８μＭの最終基質濃度を得るために、この溶液７０μｌを、フラッシュプレートの各ウェルに加える。多様な濃度の阻害剤（本発明の生成物）の中間体希釈溶液を、別々の試験管に原液からＤＭＳＯ中に１０ｍＭで調製する。このようにして、１０００μＭ，３３３．３μＭ，１１１．１μＭ，３７．０３μＭ，１２．３５μＭ，４．１１μＭ及び１．３７μＭ．の希釈溶液を調製する。これらの溶液のそれぞれ１μｌ（又は対照用として、ＤＭＳＯ１μｌ）を、テストプレートのウェルに移す。
【０４１５】
次に、キナーゼ緩衝液中に、ＡＴＰトータルで５．２６μＭ及び３３Ｐが７８．９μＣｉ／ｍｌの濃度で、アデノシン三リン酸塩（ＡＴＰ）及びＡＴＰｙ３３Ｐの混合物溶液１９μｌを、各ウェルに添加する。１ｍＭのジチオスレイトールを含有するキナーゼ緩衝液中に、２５０ｎＭ、ＣＤＫ４／サイクリンＤ１溶液を１ウェルあたり１０μｌ（または、反応ブランクに対して、１ｍＭのジチオスレイトールを含有するキナーゼ緩衝液１０μｌ）添加することにより、酵素反応を誘発する。多様な添加後、各ウェルの最終容量は、１００μｌ、最終基質濃度は、１．８μＭ、最終阻害剤濃度は、１０μＭ，３．３３μＭ，１．１１μＭ，０．３７μＭ，０．１２３μＭ，０．０４１μＭ及び０．０１４μＭ（中間体希釈溶液の濃度による）、最終ＡＴＰ濃度は、１μＭ、３３Ｐの最終量は、１．５μＣｉ／ウェル、及び、ＣＤＫ４／サイクリンＤ１複合体の最終濃度は、２５ｎＭである。
【０４１６】
全ての試薬を添加後、テストプレートを６５０ｒｐｍで、オービタル攪拌しながら、３０℃でインキュベートする。インキュベーション後、３００μ／ウェルのＰＢＳ（リン酸緩衝液食塩水、ｐＨ＝７．４、カルシウム又はマグネシウムを含まず、基準：１００１０−０１５、Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ）を用いて、プレートを、３回洗浄する。基質ペプチドへの３３Ｐの取り込みは、Ｐａｃｋａｒｄ Ｔｏｐｃｏｕｎｔ．ＮＸＴ ｍａｃｈｉｎｅを用いてシンチレーションカウンティングにより定量する。本発明の生成物の阻害活性は、酵素活性の５０％の減少（ＩＣ５０）を与える阻害濃度を測定することにより評価される。
【０４１７】
３．Ａｕｒｏｒａ２
キナーゼＡｕｒｏｒａ２に対する化合物の阻害効果は、放射能シンチレーション試験によって決定される。
【０４１８】
完全な組み換えＡｕｒｏｒａ２酵素（そのＮ末端はヒスチジンで標識されていた）を、大腸菌中で発現させ、均質に近い品質まで精製した。
【０４１９】
ＮｕＭＡ（細胞内分裂装置に付随する核タンパク質）のＣ末端断片（Ｑ１６８７−Ｈ２１０１）を、大腸菌中で発現し、ヒスチジンで標識されたＮ末端は、ニッケルキレートを用いて、クロマトグラフィによって精製し、Ａｕｒｏｒａ２キナーゼ試験において、基質として使用した。
【０４２０】
Ａｕｒｏｒａ２のキナーゼ活性は、ニッケルキレート（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ、ＳＭＰ１０７モデル）によって飽和したマイクロプレート上で、シンチレーションにより測定する。各ウェルは、以下の溶液の１００μｌを含有する：０．０２μＭのＡｕｒｏｒａ２；０．５μＭのＮｕＭＡ基質；０．５μＣｉのＡＴＰ−［３３Ｐ］を補充した、１μＭのＡＴＰ。溶液を、３７℃で、４５分間、インキュベートする。次に、試験緩衝液を除去し、キナーゼ３００μｌを用いて、ウェルを２回洗浄する。Ｐａｃｋａｒｄ Ｍｏｄｅｌ Ｔｏｐ Ｃｏｕｎｔ ＮＸＴ ｍａｃｈｉｎｅを用いて、各ウェル中の放射能を測定する。
【０４２１】
バックグラウンドノイズは、他のサンプルに関して同じ方法で処理された緩衝化キナーゼを含有する放射性ＡＴＰのみを含有するウェル中で、二つ組みで測定される。
【０４２２】
対照の活性は、試験化合物の不存在下で、完全な試験混合物（ＡＴＰ、Ａｕｒｏｒａ２及びＮｕＭＡ基質）中での放射能を、二つ組みで測定することによって決定される。
【０４２３】
本発明の化合物によるＡｕｒｏｒａ２の活性の阻害は、試験化合物の不存在下での対照活性の阻害のパーセントとして、表される。阻害対照として、各ウェルには、スタウロスポリンを加える。
【０４２４】
【表６】










【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の一般式（Ｉ）に対応する化合物
【化１】

（式中、
Ｘは、共有結合、（ＣＨ２）ｎ（ｎは、１又は２に等しい。）から選択される基を表し、
Ａｒは、アリール又はヘテロアリール基を表し、この基は、アルキル基、ハロゲン、ＮＲ１Ｒ２（Ｒ１及びＲ２は、水素基、アルキル、シクロアルキルから選択され、又は両者で複素環基若しくはヘテロアリール基を形成することができ、これらの基自体が場合により置換される。）、ＳＯ２アルキル、Ｓアルキル、アルコキシ、ヘテロアリール又はアリール基から選択される基で場合により置換されており、
Ｒが、水素及びアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、シクロアルコキシ、ヘテロシクロアルコキシ又はアミノ基から選択される基を表し；Ｒは、Ｒに対して定義される基と同一の基から選択される１つ以上の基で場合により置換されることができる。）。
【請求項２】
基Ｒ１及びＲ２上に存在し得る置換基が、ヒドロキシル基、ヘテロアリール基、シクロアルキル基及びアミノアルキル基から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
アルキル基が、１ないし１０個の炭素原子を含有する直鎖又は分枝鎖である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
シクロアルキル基が、３ないし１０個の炭素原子を含有する環状アルキル鎖である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
ヘテロシクロアルキル基が、３ないし１０個の炭素原子を含有し、並びにＯ、Ｎ及びＳから選択される少なくとも１つの複素原子を含有する環状アルキル鎖である請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
基ＮＲ１Ｒ２において、基Ｒ１又はＲ２の１つが水素原子である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
基Ｒ、Ｒ１及びＲ２の全てが、アルキル基、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、ヘテロアリール基、アリール基、アミノ基、ヒドロキシル基、アルコキシ基又はハロゲン基で場合により置換されている、請求項１から６に記載の化合物。
【請求項８】
アリール基及びヘテロアリール基が、Ｏ、Ｎ及びＳから選択される１つ以上の複素原子を場合により含む単環基又は別の５員環若しくは６員環に縮合され並びにＯ、Ｎ及びＳから選択される１ないし３個の複素原子を場合により含む基から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
アリール又はヘテロアリール基が、フェニル基、ピリジル基、ピリミジン基、トリアジニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、チアゾリル基、フリル基、チエニル基、インドリル基、アザインダゾリル基、イソベンゾフリル基、イソベンゾチエニル基、ベンゾオキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、アリールビニレン基、アリールアミド基、アリールカルボキサミド基、アラルキルアミン基、キノリル基、イソキノリル基、シンノリル基、キナゾリル基、ナフチリジル基、トリアゾリル基及びテトラゾリル基から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
アリール及びヘテロアリール基が、場合により置換されたフェニル基、チエニル基、ピラゾリル基及びイミダゾリル基から選択される、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
フェニル基が、アミノ基及びハロゲン、特に塩素及びフッ素から選択される基で置換されている、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
アリール基が、ジトリフルオロフェニル及びトリフルオロフェニル並びにモノアルキルアミノフェニルから選択される、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｘが、共有結合を表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒが、シクロアルキル基を表す、請求項１に記載の化合物。
【公表番号】特表２００７−５３０６４４（Ｐ２００７−５３０６４４Ａ）
【公表日】平成１９年１１月１日（２００７．１１．１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５０５５９３（Ｐ２００７−５０５５９３）
【出願日】平成１７年３月３０日（２００５．３．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２００５／０００７６１
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０９７７８７
【国際公開日】平成１７年１０月２０日（２００５．１０．２０）
【出願人】（５００１５２１１９）アバンテイス・フアルマ・エス・アー (65)
【Ｆターム（参考）】

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