新規化学化合物
本発明は、種々の障害を治療するための新たに同定されたキナーゼ阻害剤に関する。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、新規に同定された、種々の障害を治療するためのキナーゼ阻害剤に関する。
【０００２】
発明の背景
多くのポリペプチド成長因子およびホルモンは、シグナル変換経路を介して、その細胞効果の媒介となる。これらのリガンドに対する細胞表面受容体から細胞内エフェクターへのシグナル変換は、しばしば、調節プロテインセリン／スレオニンキナーゼ（ＰＳＴＫ）およびホスファターゼによる特定蛋白質基質のリン酸化または脱リン酸化を伴う。セリン／スレオニンリン酸化は、多細胞生物におけるシグナル変換の主要なメディエーターである。受容体結合型、膜結合型および細胞内ＰＳＴＫは、多くの細胞型において、細胞増殖、細胞分化およびシグナル伝達過程を調節する。
【０００３】
異常なプロテインセリン／スレオニンキナーゼ活性は、多くの病理、例えば、慢性関節リウマチ、乾癬、敗血症性ショック、骨量減少、多くの癌および他の増殖性疾患に関与しているか、またはその疑いがある。したがって、セリン／スレオニンキナーゼおよびそれらが関与するシグナル変換経路は、薬物設計の潜在的な標的である。
【０００４】
ＰＳＴＫのサブセットは、細胞周期の調節に関与する。これらは、サイクリン依存性キナーゼまたはＣＤＫである（PeterおよびHerskowitz, Cell 1994: 79, 181-184）。ＣＤＫは、サイクリンと呼ばれる調節蛋白質に結合することによって活性化され、特定の細胞周期チェックポイントを介して細胞の通過を制御する。例えば、サイクリンＥと複合体形成したＣＤＫ２は、細胞をＧ１からＳ期へ移行させる。ＣＤＫとサイクリンの複合体は、ＣＤＫ４に結合し、阻害するｐ１６（Serranoら, Nature 1993: 366, 704)のような低分子量蛋白質による阻害を受ける。ｐ１６における欠失または突然変異は、種々の腫瘍に関係している（Kambら, Science 1994: 264, 436-440）。したがって、細胞の増殖状態および該状態に関連する疾患は、ＣＤＫの活性およびその関連する調節分子に依存する。増殖の阻害が望まれる癌などの疾患において、ＣＤＫを阻害する化合物は、有用な治療剤でありうる。逆に言えば、ＣＤＫの活性化物質は、増殖強化が必要な場合、例えば、免疫欠損の治療において有用でありうる。
【０００５】
ＹＡＫ１、ＣＤＫに対する配列相同性を有するＰＳＴＫは、当初、酵母において、ｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼＰＫＡの不活化によって引き起こされる細胞周期停止のメディエーターとして同定された（Garrettら, Mol Cell Biol. 1991: 11, 4045-4052）。ＹＡＫ１キナーゼ活性は、細胞周期が進行している酵母において低いが、細胞がＳ−Ｇ２移行前に停止したとき、著しく増加する。ＹＡＫ１の発現増加は、ＰＫＡが不足した酵母細胞において増殖停止を引き起こす。したがって、ＹＡＫ１は、酵母における細胞周期抑制物質として作用することができる。
【０００６】
発明者らの米国特許第６，３２３，３１８号は、ｈＹＡＫ３−２と名付けられた酵母ＹＡＫ１の２つの新規なヒト相同物（１つは他方より２０アミノ酸長い）を記載する。ｈＹＡＫ３−２蛋白質（あるいは、Blood, 1 May 2000, Vol 95, No. 9, pp2838において、ＲＥＤＫ−ＬおよびＲＥＤＫ−Ｓと報告された）は、主に、核に局在する。ｈＹＡＫ−２蛋白質（以後、単に、ｈＹＡＫ３またはｈＹＡＫ３蛋白質という）は、造血組織、例えば、骨髄および胎児肝臓に存在するが、そのＲＮＡは、赤芽球またはエリトロポイエチン（ＥＰＯ）−応答細胞においてのみ、有意なレベルで発現する。ＲＥＤＫ ｃＤＮＡの２つの形態は、別のスプライス産物であるようである。アンチセンスＲＥＤＫオリゴヌクレオチドは、コロニー形成単位（ＣＦＵ）−ＧＭ、ＣＦＵ−ＧまたはＣＦＵ−ＧＥＭＭ数に影響を及ぼすことなく、ヒト骨髄細胞による赤芽球コロニー形成を促進する。ＣＦＵ−Ｅおよび赤芽球バースト形成単位の最大数は増加し、ＣＦＵ−Ｅは、最適以下のＥＰＯ濃度に対する感受性増加を示した。該データは、ＲＥＤＫがブレーキとして作用して、赤血球生成を妨げることを示す。かくして、ｈＹＡＫ３蛋白質の阻害剤は、その発現細胞の増殖を刺激することが予想される。より詳細には、ｈＹＡＫ３蛋白質の阻害剤は、限定するものではないが、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；および骨髄抑制を包含するｈＹＡＫ３不均衡によって引き起こされる赤芽球および造血系の疾患の治療または予防に有用である。
【０００７】
医学において重要なもう１つ別のＰＳＴＫは、ＭＫ２蛋白質である。サイトカインは、炎症性疾患の重要な特徴の多くを誘導することができ、その産生および作用機序の阻害は、適当な治療的アプローチであるであろう。ｐ３８ ＭＡＰキナーゼの阻害は、ＩＬ−１、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＧＭＣＳＦを包含するプロ炎症性サイトカイン産生を減少させることが明らかにされた。ｐ３８の下流での阻害により、プロ炎症性サイトカインのアップレギュレーションに関与するこれらのキナーゼに対するより大きな選択性が可能となり、改善された安全プロフィールを有する化合物をもたらしうる。ＭＡＰＫＡＰ Ｋ２（ＭＫ２）は下流にあり、ｐ３８ ＭＡＰキナーゼによって直接、活性化される。ＭＫ２およびｐ３８が核において複合体として存在すること、およびｐ３８によるＭＫ２のリン酸化が核から細胞質への該複合体の輸送をもたらすことが確立された（Ben-Levyら, Curr Biol 1998; 8:1049-57）。かくして、ＭＫ２は、基質として作用するだけでなく、ｐ３８の細胞局在化の決定子としても作用する。それは、転写および翻訳事象の両方におけるＭＫ２の役割とも矛盾がない。
【０００８】
ＭＫ２ノックアウトマウス由来のデータは、プロ炎症性サイトカイン産生における該キナーゼの重要な役割を明らかにした。ＭＫ２−／−ノックアウトマウスは、ＬＰＳ−誘導性ＴＮＦ−α産生において９０％の減少を示し、内毒素性ショックに対して耐性であった。ＭＫ２−／−マウス由来の脾臓細胞もまた、ＬＰＳ刺激後のプロ炎症性サイトカインＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＦＮ−γおよびＩＬ−６の有意な阻害を明らかにした（Kotlyarovら, Nature Cell Biology 1999; 1:94-97）。ＭＫ２に対して活性な化合物は、慢性関節リウマチ、ＣＯＰＤ、喘息、乾癬、急性ニューロン損傷、心不全、卒中、骨関節炎、および虚血再潅流傷害の治療または予防において有用であると考えられる。
【０００９】
本発明の化合物は、ｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２蛋白質に対する活性を有することが見出されている。
【００１０】
発明の概要
第１の態様において、本発明は、治療上有効量の式Ｉ
【化１】
【００１１】
［式中、
Ｒ１は、水素、−ＮＨ２、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は、水素であるか；または
Ｒ２は、式
【００１２】
【化２】
（式中、
Ｗは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＣＨ３−、または−ＮＨ−であり；
Ｒは、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、−ＮＨ２、（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣＨ２−、独立して１〜３個のＣ１−６アルキル、ハロゲン、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣ（＝Ｏ）−、アセチル、ＮＨ２Ｃ（＝Ｏ）−、ＦＳＯ２−、−ＣＦ３、ＮＨ２ＳＯ２−、ジメチルアミノ；ＨＯＣＨ２−、ＣＨ３ＮＨＣ（＝Ｏ）−、ヒドロキシ、フェニルで置換されていてもよいフェニルであるか；または
【００１３】
Ｒは、式
【化３】
【化４】
で示される基であり、
【００１４】
但し、Ｗに対するＲの結合点が酸素または窒素である場合、ＷはＣＨ２であることはない）
で示される基である］
で示される化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的な誘導体を哺乳動物に投与することを特徴とする、哺乳動物におけるｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２の阻害方法に関する。
【００１５】
式Ｉの好ましい化合物は、
Ｒ１が水素またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２が水素であるか；または
Ｒ２が式
【化５】
［式中、Ｗは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＣＨ３−、または−ＮＨ−であり；
Ｒは、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、−ＮＨ２、（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣＨ２−、独立して１〜３個のＣ１−６アルキル、ハロゲン、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣ（＝Ｏ）−、−ＣＦ３、ＮＨ２ＳＯ２−、ヒドロキシ、フェニルで置換されていてもよいフェニルであるか；または
Ｒは、式
【化６】
で示される基であり、
但し、Ｗに対するＲの結合点が酸素または窒素である場合、ＷはＣＨ２であることはない］
で示される化合物である。
【００１６】
本発明の第２の態様において、治療上有効量の式Ｉの化合物あるいはその塩、溶媒和物または生理学上許容される誘導体ならびに１以上の医薬上許容される担体、希釈剤および賦形剤を含む医薬組成物が提供される。
【００１７】
本発明の第３の態様において、限定するものではないが、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；骨髄抑制；慢性関節リウマチ；ＣＯＰＤ；喘息；乾癬；急性ニューロン損傷；心不全；卒中；骨関節炎；および虚血再潅流傷害を包含するｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２蛋白質の不均衡または不適当な活性によって媒介される障害の治療または予防における使用のための医薬の製造における、式Ｉの化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的な誘導体の使用が提供される。
【００１８】
第４の態様において、本発明は、治療上有効量の式Ｉの化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的誘導体ならびに１以上の医薬上許容される担体、希釈剤および賦形剤を哺乳動物に投与することを特徴とする、限定するものではないが、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；骨髄抑制；慢性関節リウマチ；ＣＯＰＤ；喘息；乾癬；急性ニューロン損傷；心不全；卒中、骨関節炎；および虚血再潅流傷害を包含するｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２の不均衡または不適当な活性によって引き起こされる疾患の治療または予防法に関する。
【００１９】
第５の態様において、本発明は、治療上有効量の式Ｉの化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的誘導体ならびに１以上の医薬上許容される担体、希釈剤および賦形剤を哺乳動物に投与することを特徴とする、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；骨髄抑制；慢性関節リウマチ；ＣＯＰＤ；喘息；乾癬；急性ニューロン損傷；心不全；卒中、骨関節炎；および虚血再潅流傷害の治療または予防法に関する。
【００２０】
詳細な記載
本明細書中で使用される場合、「有効量」なる語は、例えば、研究者または臨床によって、求められている組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を顕在化するであろう薬物または医薬の量を意味する。さらに、「治療上有効量」なる語は、かかる量を投与されていない対応する対象と比べて、疾患、障害または副作用の改善された治療、治癒、予防または緩和、あるいは疾患または障害の進行速度の減少をもたらすいずれかの量を意味する。該用語は、また、正常な生理学的機能を増強するのに有効な量をその範囲内に包含する。
【００２１】
本明細書中で使用される場合、「アルキル」なる語は、直鎖または分枝鎖炭化水素をいう。かくして、「Ｃ１−６アルキル」は、少なくとも１個、多くとも６個の炭素原子を含有するアルキル基をいう。本発明において有用な「Ｃ１−６アルキル」基の例は、限定するものではないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシルなどを包含する。
【００２２】
本明細書中で使用される場合、「ハロゲン」なる語は、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、またはヨウ素（Ｉ）をいう。
【００２３】
本明細書中で使用される場合、「Ｃ３−６シクロアルキル」なる語は、３〜６個の炭素原子を有する非芳香環炭化水素環をいう。例示的「Ｃ３−６シクロアルキル」基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルを包含する。
【００２４】
本明細書中で使用される場合、「してもよい」なる語は、その記載される事象が起こっても、起こらなくてもよいことを意味し、起こる事象および起こらない事象の両方を包含する。
【００２５】
本明細書中で使用される場合、「生理学上機能的な誘導体」なる語は、哺乳動物への投与時に、本発明の化合物またはその活性な代謝産物を（直接または間接的に）提供することのできる本発明の化合物のいずれかの医薬上許容される誘導体、例えば、エステルまたはアミドをいう。かかる誘導体は、過度の実験を用いることなく、Burger's Medicinal Chemistry And Drug Discovery, 5th Edition, Vol 1: Principles and Practice（出典明示により、生理学上機能的な誘導体を教示する範囲まで、本明細書の一部とされる）の教示を参照して、当業者に明らかである。
【００２６】
本明細書中で使用される場合、「溶媒和物」なる語は、溶質（本発明において、式Ｉまたはその塩もしくは生理学上機能的な誘導体）および溶媒によって形成された変化可能な化学量論的複合体をいう。本発明の目的のためのかかる溶媒は、溶質の生物学的活性を干渉しなければよい。適当な溶媒の例は、限定するものではないが、水、メタノール、エタノールおよび酢酸を包含する。好ましくは、使用される溶媒は、医薬上許容される溶媒である。適当な医薬上許容される溶媒の例は、限定するものではないが、水、エタノール、および酢酸を包含する。最も好ましくは、使用される溶媒は、水である。
【００２７】
本明細書中で使用される場合、「置換された」なる語は、挙げられる置換基での置換をいい、別記しない限り、多置換度が可能である。
【００２８】
本明細書中で記載されるある特定の化合物は、１以上のキラル原子を含有していてもよく、または別法では、２つのエナンチオマーとして存在することが可能である。したがって、本発明の化合物は、エナンチオマーの混合物ならびに精製されたエナンチオマーまたはエナンチオマー的に豊富な混合物を包含する。また、本発明の範囲内には、上記式Ｉによって示される化合物の個々の異性体ならびにそのいずれかの完全または部分的に平衡な混合物が包含される。本発明は、また、上記の式によって示された化合物の個々の異性体を、１以上のキラル中心が逆になったその異性体との混合物として包含する。また、全ての互変体および互変体混合物が式Ｉの化合物の範囲内に包含されると理解される。
【００２９】
典型的には、本発明の塩は、医薬上許容される塩である。「医薬上許容される塩」なる語に包含される塩は、本発明の化合物の非毒性塩をいう。本発明の化合物の塩は、式Ｉの化合物中の置換基上の窒素から由来する酸付加塩を含んでいてもよい。代表的な塩は、下記の塩：酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストラート、エシラート、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレソルシナート、ヒドラバミン（hydrabamine）、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシラート、メチル臭化物、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、マレイン酸一カリウム、ムチン酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミン、シュウ酸塩、パモ酸塩（embonate）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、カリウム、サリチル酸塩、ナトリウム、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシラート、トリエチオジド、トリメチルアンモニウムおよび吉草酸塩を包含する。医薬上許容されない他の塩は、本発明の化合物の調製において有用であり、これらは、本発明のさらなる態様を形成する。
【００３０】
治療において使用するために、治療上有効量の式Ｉの化合物、ならびにその塩、溶媒和物および生理学上機能的な誘導体をそのままの化学物質として投与することも可能であるが、活性成分を医薬組成物として提供することが可能である。したがって、本発明は、さらに、治療上有効量の式Ｉの化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理学上機能的な誘導体、および１以上の医薬上許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む医薬組成物を提供する。式Ｉの化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理学上機能的な誘導体は、上記のとおりである。担体、希釈剤または賦形剤は、該処方の他の成分と適合性であり、そのレシピエントに有害ではないという意味で許容されなければならない。本発明の別の態様によると、式Ｉの化合物、またはその塩、溶媒和物および生理学上機能的な誘導体を１以上の医薬上許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合することを含む医薬処方の調製法も提供される。
【００３１】
医薬処方は、１単位投与量あたり所定量の活性成分を含有する単位投与形態において提供してもよい。かかる単位は、治療されている疾患、投与経路、および患者の年齢、体重および状態にもよるが、例えば、０．５ｍｇ〜１ｇ、好ましくは、１ｍｇ〜７００ｍｇ、より好ましくは、５ｍｇ〜１００ｍｇの式Ｉの化合物を含有しうる。または、医薬処方は、単位投与量あたり所定量の活性成分を含有する単位投与形態において提供されてもよい。好ましい単位投与処方は、上記のしたような活性成分の１日量または分割投与量（sub-dose）、またはその適当な一部を含有するものである。さらに、かかる医薬処方は、薬学分野でよく知られた方法のいずれかによって調製されうる。
【００３２】
医薬処方は、いずれかの適当な経路による、例えば、経口（バッカルまたは舌下を包含する）、直腸、鼻腔、局所（バッカル、舌下または経皮を包含する）、膣または非経口（皮下、筋内、静脈内、または皮内を包含する）経路による投与に適応させてもよい。かかる処方は、薬学分野で知られたいずれかの方法、例えば、活性成分を担体または賦形剤と結合させることによって調製されうる。
【００３３】
経口投与に適応させた医薬処方は、カプセルまたは錠剤のような分離した単位；粉末または顆粒；水性または非水性液体中における溶液または懸濁液；食用泡沫またはホイップ；または水中油型液体エマルジョンまたは油中水型液体エマルジョンとして提供されうる。
【００３４】
例えば、錠剤またはカプセルの形態における経口投与の場合、活性薬物成分を経口で非毒性の医薬上許容される不活性担体、例えば、エタノール、グリセロール、水などと合わせることができる。粉末は、該化合物を適当な微小な大きさに粉砕し、同様に粉砕した医薬担体、例えば、デンプンまたはマンニトールなどの食用炭水化物と混合することによって調製される。フレーバー、保存料、分散剤および着色料もまた、配合することができる。
【００３５】
カプセルは、上記のように粉末混合物を調製し、成形したゼラチンシースに充填することによって製造される。充填操作の前に、コロイド状シリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固体ポリエチレングリコールなどの滑剤（glidant）および滑沢剤（lubricant）を粉末混合物に加えることができる。カプセルを摂取したときの薬剤の利用性を改善するために、寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤を加えることもできる。
【００３６】
さらに、所望または必要により、適当な結合剤、滑沢剤、崩壊剤および着色料を該混合物に配合することもできる。適当な結合剤は、デンプン、ゼラチン、天然糖類、例えば、グルコースまたはベータ−ラクトース、コーン甘味料、天然および合成ゴム、例えば、アラビアゴム、トラガカントゴムまたはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどを包含する。これらの投与形態において使用される滑沢剤は、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどを包含する。崩壊剤は、限定するものではないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどを包含する。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、造粒またはスラッギングし、滑沢剤および崩壊剤を加え、打錠することによって処方される。粉末混合物は、適当に粉砕された化合物を上記のような希釈剤または基剤と、および所望により、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチンまたはポリビニルピロリドンなどの結合剤、パラフィンなどの溶液遅延剤、第４級塩などの吸収促進剤および／またはベントナイト、カオリンまたはリン酸二カルシウムなどの吸収剤と混合することによって調製される。粉末混合物は、シロップ、デンプンペースト、アラビアゴム粘液またはセルロースもしくはポリマー材料の溶液などの結合剤を用いて湿らし、次いで、スクリーンに押し通すことによって造粒することができる。造粒の別法として、粉末混合物を錠剤機に付すことができ、その結果、不完全に成形されたスラッグが砕かれて顆粒になる。該顆粒は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油の添加によって、滑らかにして、錠剤成形ダイへの粘着を防ぐことができる。滑らかになった混合物を次いで、打錠する。本発明の化合物は、また、自由流動性の不活性担体と合わせ、造粒またはスラッギング工程を行うことなく直接、打錠することができる。セラックのシーリングコート、糖またはポリマー材料のコーティング、およびワックスの光沢コーティングからなる透明または不透明な保護コーティングを提供することができる。染料をこれらのコーティングに加えて、異なる単位投与量を識別することができる。
【００３７】
溶液、シロップまたはエリキシルなどの経口流体は、一定量が所定量の化合物を含有するように、単位投与形態において調製することができる。シロップは、化合物を適当に風味付けした水性溶液中に溶解することによって調製することができ、一方、エリキシルは、非毒性アルコール性ビヒクルの使用によって調製される。懸濁液は、化合物を非毒性ビヒクル中に分散することによって処方することができる。エトキシル化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤および乳化剤、保存料、ペパーミント油などのフレーバー添加物、または天然甘味料もしくはサッカリンもしくは他の人工甘味料などを加えることもできる。
【００３８】
適宜、経口投与用の投与単位処方をマイクロカプセルに入れることができる。該処方は、また、例えば、粒状材料をポリマー、ワックスなどでコーティングまたはその中に包埋することによって、放出を延長または抑制するように調製することもできる。
【００３９】
式Ｉの化合物、ならびにその塩、溶媒和物および生理学上機能的な誘導体は、また、リポソーム送達系の形態、例えば、小型単層小胞、大型単層小胞および多層小胞の形態において投与することもできる。リポソームは、種々のリン脂質、例えば、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンから形成することができる。
【００４０】
式Ｉの化合物、ならびにその塩、溶媒和物および生理学上機能的な誘導体は、また、化合物分子が結合する個々の担体として、モノクローナル抗体を使用することによって送達されてもよい。該化合物は、また、目標設定可能な薬物担体として、可溶性ポリマーと結合させてもよい。かかるポリマーは、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルタミドフェノール、またはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシデポリリジンを包含することができる。さらに、化合物は、薬物の放出制御の達成において有用なある種の生体分解性ポリマー、例えば、ポリ乳酸、ポレプシロンカプロラクトン（polepsilon caprolactone）、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレートおよびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポリマーに結合させてもよい。
【００４１】
経皮投与に適応させた医薬処方は、レシピエントの上皮との密接な接触を長時間維持することを意図した分離したパッチとして提供されてもよい。例えば、活性成分は、Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)において一般に記載されるように、イオン導入によってパッチから送達されてもよい。
【００４２】
局所投与に適応させた医薬処方は、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エーロゾルまたは油として処方されてもよい。
【００４３】
目または他の外部組織、例えば、口および皮膚の治療の場合、該処方は、好ましくは、局所軟膏またはクリームとして塗布される。軟膏に処方される場合、活性成分は、パラフィンまたは水のいずれかとの混和性軟膏基剤と共に用いてもよい。別法では、活性成分を水中油型クリーム基剤または油中水型基剤を用いてクリームに処方してもよい。
【００４４】
目への局所投与に適応させた医薬処方は、活性成分が適当な担体、特に水性溶媒中に溶解または懸濁された点眼液を包含する。
【００４５】
口における局所投与に適応させた医薬処方は、ロゼンジ、パステル（pastille）および口内洗浄剤を包含する。
【００４６】
直腸投与に適応させた医薬処方は、座剤または浣腸として提供されてもよい。
【００４７】
担体が固体である鼻腔投与に適応させた医薬処方は、例えば、２０〜５００ミクロンの粒径を有する粗粉末を包含し、それは、鼻から吸うことによって、すなわち、鼻に限りなく近付けて維持した粉末の入った容器からの鼻道を介する迅速な吸入によって、投与される。鼻腔スプレーまたは点鼻液として投与するための担体が液体である適当な処方は、活性成分の水性または油性溶液を包含する。
【００４８】
吸入による投与に適応させた医薬処方は、種々の定量加圧エーロゾル、ネブライザーまたは吸入器によって生じうる微粒子ダストまたはミストを包含する。
【００４９】
膣投与に適応させた医薬処方は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡沫またはスプレー処方として提供されてもよい。
【００５０】
非経口投与に適応させた医薬処方は、抗酸化剤、バッファー、静菌剤、および処方を意図されたレシピエントの血液と等張にする溶質を含有していてもよい水性および非水性滅菌注射溶液；ならびに懸濁化剤および増粘剤を含んでいてもよい水性および非水性滅菌懸濁液を包含する。該処方は、単回投与または複数回投与用容器、例えば、密閉アンプルおよびバイアル中において提供されてもよく、使用直前に、滅菌液体担体、例えば、注射用水の添加のみを必要とする凍結乾燥状態において保管されてもよい。即席の注射溶液および懸濁液は、滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製されうる。
【００５１】
当然のことながら、特に上記した材料の他に、該処方は、目的の処方の型を考慮して、当該分野で慣用の他の薬剤を含んでいてもよい。例えば、経口投与に適当なものには、フレーバー剤がある。
【００５２】
本発明の化合物の治療上有効量は、例えば、動物の年齢および体重、治療を必要としている正確な状態およびその重篤度、処方の性質、および投与経路を包含する多くの因子に依存し、最終的には、担当の内科医または獣医の裁量によるであろう。しかしながら、限定するものではないが、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；骨髄抑制；慢性関節リウマチ；ＣＯＰＤ；喘息；乾癬；急性ニューロン損傷；心不全；卒中、骨関節炎；および虚血再潅流傷害を包含するｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２不均衡または不適当な活性によって引き起こされる疾患の治療または予防のための式Ｉの化合物の有効量は、一般に、１日につき、レシピエント（哺乳動物）の体重１ｋｇあたり０．１〜１００ｍｇ、より普通には、１日につき体重１ｋｇあたり１〜１０ｍｇであろう。かくして、７０ｋｇの成体哺乳動物の場合、１日あたりの実際の量は、通常、７０〜７００ｍｇであり、該量は、１日１回で、またはより普通には、合計した１日量が同一となるように１日複数回（例えば、２回、３回、４回、５回または６回）の分割投与量において投与してもよい。その塩または溶媒和物または生理学上機能的な誘導体の有効量は、式Ｉの化合物自体の有効量の割合として決定すればよい。同様の投与量が、上記した他の状態の治療に適当であると考えられる。
【００５３】
調製法
一般式Ｉの化合物は、下記の合成スキームによって一部示されるような当該分野で既知の有機合成法によって調製されうる。下記のスキームの全てにおいて、所望により、一般的な化学の原理にしたがって、感受性または反応性基のための保護基を用いることは、よく理解されている。保護基は、有機合成の標準的な方法にしたがって扱われる（T. W. Green および P. G. M. Wuts (1991) Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons）。これらの基は、当業者に容易に明らかになる方法を用いて、化合物合成の好都合な段階において除去される。方法ならびに反応条件の選択およびそれらの実行順序は、式Ｉの化合物の調製と調和するものとする。当業者は、立体中心が式Ｉの化合物に存在するか否かを理解するであろう。したがって、本発明は、両方の可能な立体異性体を包含し、ラセミ化合物だけでなく、個々のエナンチオマーも同様に包含する。単一のエナンチオマーとしての化合物が望ましい場合、それは、立体特異的合成または最終産物もしくはいずれかの好都合な中間体の分割によって得てもよい。最終産物、中間体、または出発物質の分割は、当該分野で既知のいずれかの適当な方法によって行えばよい。例えば、E. L. Eliel, S. H. WilenおよびL. N. ManderによるStereochemistry of Organic Compounds（Wiley-Interscience, 1994）を参照のこと。
【００５４】
より特別には、式Ｉの化合物は、スキームＡの製法またはその変形によって製造することができる。下記に、本発明のいくつかの代表的化合物がスキームＡに記載された製法またはその変形にしたがって、どのように製造することができるかを記載する。
【００５５】
スキームＡ
【化７】
【００５６】
スキームＡにおいて、基Ｒ、Ｗ、Ｒ１およびＲ２は、式Ｉにおいて定義されたとおりである。式Ｉの化合物を製造するための製法Ａの変形の一例として、最終工程において、式ＩＩの化合物を式４の化合物に加える必要はなく、むしろ、式ＨＮＲ３Ｒ４の化合物を加えることができる。ここに、基−ＮＲ３Ｒ４は、後で−ＮＲ１Ｒ２に変換可能な基であり；わずかなかかる変形を下記に例示する。
【００５７】
特別な具体例
本明細書中で使用される場合、これらの製法、スキームおよび実施例において使用される記号および慣習は、現代の科学文献、例えば、the Journal of the American Chemical Societyまたはthe Journal of Biological Chemistryにおいて使用されるものと一致する。標準的な１文字または３文字略語は、アミノ酸残基を示すために一般に使用されており、それらは、別記しないかぎり、Ｌ−配置であるとする。別記しないかぎり、全ての出発材料は、商業的供給者から入手し、さらに精製することなく用いた。特に、下記の略語を実施例および本明細書を通して使用する。
【００５８】
ｇ（グラム）； ｍｇ（ミリグラム）；
Ｌ（リットル）； ｍＬ（ミリリットル）；
μＬ（マイクロリットル）； ｐｓｉ（平方インチあたりのポンド）；
Ｍ（モル濃度）； ｍＭ（ミリモル濃度）；
ｉ．ｖ．（静脈内）； Ｈｚ（ヘルツ）；
ＭＨｚ（メガヘルツ）； ｍｏｌ（モル）；
ｍｍｏｌ（ミリモル）； ｒｔ（室温）；
ｍｉｎ（分）； ｈ（時間）；
ｍｐ（融点）； ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）；
Ｔｒ（保持時間）； ＲＰ（逆相）；
ＭｅＯＨ（メタノール）； ｉ−ＰｒＯＨ（イソプロパノール）；
ＴＥＡ（トリエチルアミン）； ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）；
ＴＦＡＡ（無水トリフルオロ酢酸）； ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）；
ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）； ＡｃＯＥｔ（酢酸エチル）；
ＤＭＥ（１，２−ジメトキシエタン）； ＤＣＭ（ジクロロメタン）；
ＤＣＥ（ジクロロエタン）； ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）；
ＤＭＰＵ（Ｎ，Ｎ’−ジメチルプロピレン尿素）；
ＣＤＩ（１，１−カルボニルジイミダゾール）；
ＩＢＣＦ（クロロギ酸イソブチル）； ＨＯＡｃ（酢酸）；
ＨＯＳｕ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）；
ＨＯＢＴ（１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）；
ｍＣＰＢＡ（メタ−クロロ過安息香酸； ＥＤＣ（塩酸エチルカルボジイミド）；
ＢＯＣ（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）；
ＦＭＯＣ（９−フルオレニルメトキシカルボニル）；
ＤＣＣ（ジシクロヘキシルカルボジイミド）；
ＣＢＺ（ベンジルオキシカルボニル）；
Ａｃ（アセチル）； ａｔｍ（気圧）；
ＴＭＳＥ（２−（トリメチルシリル）エチル）；
ＴＭＳ（トリメチルシリル）；
ＴＩＰＳ（トリイソプロピルシリル）； ＴＢＳ（ｔ−ブチルジメチルシリル）；
ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）；ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）
ＡＴＰ（アデノシン三リン酸）； ＨＲＰ（西洋ワサビペルオキシダーゼ）；
ＤＭＥＭ（ダルベッコ修飾イーグル培地）；
ＨＰＬＣ（高圧液体クロマトグラフィー）；
ＢＯＰ（ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸塩化物）；
ＴＢＡＦ（フッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム）；
ＨＢＴＵ（Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）；
ＨＥＰＥＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）；
ＤＰＰＡ（アジ化ジフェニルホスホリル）；
ｆＨＮＯ３（発煙ＨＮＯ３）；および
ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）。
【００５９】
エーテルに関する全ての言及は、ジエチルエーテルであり、ブラインは、ＮａＣｌの飽和水性溶液をいう。別記しないかぎり、全ての温度は℃（摂氏）で表される。全ての反応は、別記しないかぎり、不活性雰囲気下、室温で行われる。
【００６０】
１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｃｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥ−４００で記録された。化学シフトは、百万分率（ｐｐｍ，δ単位）で表される。カップリング定数は、ヘルツ（Ｈｚ）単位である。分裂パターンは、見かけの多重度を示し、ｓ（シングレット）、ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｑ（カルテット）、ｑｕｉｎｔ（クインテット）、ｍ（マルチプレット）、ｂｒ（幅広）として示す。
【００６１】
ＬＣ−ＭＳは、マイクロマスＺＭＤおよびＷａｔｅｒｓ２６９０で記録された。全ての質量スペクトルは、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）法で得られた。反応のほとんどは、ＵＶ光、５％エタノール性燐モリブデン酸またはｐ−アニスアルデヒド溶液を用いて視覚化される０．２５ｍｍ Ｅ．Ｍｅｒｃｋシリカゲルプレート（６０Ｆ−２５４）上の薄層クロマトグラフィーによってモニターされた。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、シリカゲル（２３０−４００メッシュ，Ｍｅｒｃｋ）上で行われた。
【実施例】
【００６２】
実施例１．
２−（２，６−ジメトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉａ）
【化８】
【００６３】
ａ．［２−（３−メトキシ−フェニル）−エチル］−尿素（２）
【化９】
２−（３−メトキシ−フェニル）−エチルアミン（１）（５０．０ｇ，３３１ｍｍｏｌ）および濃ＨＣｌ（２７．６ｍＬ）の水（３５０ｍＬ）中溶液に、シアン酸カリウム（２８．２ｇ，３４８ｍｍｏｌ）を加え、５０℃で２時間、次いで、室温で２日間攪拌した。形成された沈殿をろ過によって収集した。該固体を水で洗浄し、減圧下で乾燥させて、標題化合物を得た（５３．４ｇ，８３％）。
ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋１９５
【００６４】
ｂ．１−［２−（３−メトキシ−フェニル）−エチル］−ピリミジン−２，４，６−トリオン（３）
【化１０】
ＮａＯＥｔ（１４４ｍｍｏｌ，３．３ｇのＮａから新たに調製された）のＥｔＯＨ（８０ｍＬ）中溶液に、マロン酸エチル（２）（２２ｍＬ，１４４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２５０ｍＬ）中溶液を加えた。該混合物を還流し、次いで、［２−（３−メトキシ−フェニル）−エチル］−尿素（２）（２３．３ｇ，１２０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３００ｍＬ）中溶液を加えた。反応混合物を一晩還流し、次いで、室温に冷却した。該混合物を１Ｍ ＨＣｌ水溶液で注意深く酸性化し、次いで、水（１Ｌ）中に注ぎ入れた。形成された沈殿をろ過によって収集し、水で洗浄し、次いで、減圧下で乾燥させて、標題化合物を得た（２３．２ｇ，７４％）。
ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋２６３
【００６５】
ｃ．２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）
【化１１】
１−［２−（３−メトキシ−フェニル）−エチル］−ピリミジン−２，４，６−トリオン（３）（１８．５ｇ，７０．３ｍｍｏｌ）のＰＯＣｌ３（１７５ｍＬ）中懸濁液を８０℃で一晩攪拌した。溶媒を蒸発によって除去した。残渣に、氷水を加え、次いで、ＮａＯＨ水溶液で塩基性化した。該混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、次いで、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。蒸発後、残渣をＭｅＯＨから再結晶化させて、標題化合物を得た（１６．１ｇ，８７％）。
ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋２６３
【００６６】
ｄ．２−（２，６−ジメトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉａ）
【化１２】
２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）（１０５ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中懸濁液に、２，６−ジメトキシアニリン（１５３ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、７５℃で一晩攪拌した。冷却後、混合物をＢｏｎｄＥｌｕｔＲ（登録商標）ＳＣＸ（Varian Incorporated）で精製し、次いで、ＭｅＯＨから再結晶化して、標題化合物を得た（３１．４ｍｇ，２１％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．４８（ｓ，１Ｈ），７．６４（ｂｒ，１Ｈ），７．２６（ｔ，１Ｈ），６．９６（ｓ，２Ｈ），６．７４（ｄ，２Ｈ），６．３２（ｂｒ，１Ｈ），３．９２（ｔ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｓ，６Ｈ）および２．９３（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３８０
【００６７】
実施例２．
２−（１Ｈ−インダゾール−５−イルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｂ）
【化１３】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および１Ｈ−インダゾール−５−イルアミンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１３．００（ｂｒ，１Ｈ），９．６０（ｓ，１Ｈ），８．３６（ｂｒ，１Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），７．６９（ｄ，１Ｈ），７．５１（ｍ，２Ｈ），７．１０−６．９５（２Ｈ），６．３５（ｓ，１Ｈ），３．９９（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９７（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３６０
【００６８】
実施例３．
９−メトキシ−２−（２−メトキシ−６−メチル−フェニルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｃ）
【化１４】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−メトキシ−６−メチル−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．７１（ｂｒ，１Ｈ），７．７１（ｂｒ，１Ｈ），７．３５−６．８０（５Ｈ），６．３９（ｂｒ，１Ｈ），３．９２（ｂｒ，２Ｈ），３．８３（ｂｒ，３Ｈ），３．７４（ｂｒ，３Ｈ），２．９４（ｔ，２Ｈ）および２．１４（ｂｒ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３６４
【００６９】
実施例４．
２−（１Ｈ−インダゾール−６−イルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｄ）
【化１５】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および１Ｈ−インダゾール−６−イルアミンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１２．９５（ｂｒ，１Ｈ），９．７６（ｓ，１Ｈ），８．６０（ｓ，１Ｈ），７．９６（ｓ，１Ｈ），７．７２−７．６０（２Ｈ），７．１５−６．９５（３Ｈ），６．４２（ｓ，１Ｈ），４．０１（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）および２．９８（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３６０
【００７０】
実施例５．
２−（２−ブロモ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｅ）
【化１６】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−ブロモ−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．０６（ｂｒ，１Ｈ），７．７６（ｂｒ，１Ｈ），７．６９（２Ｈ），７．４１（ｔ，１Ｈ），７．１６（ｔ，１Ｈ），７．０５−６．９５（２Ｈ），６．４７（ｂｒ，１Ｈ），３．９６（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３９８，４００
【００７１】
実施例６．
３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−ベンゼンスルホンアミド（Ｉｆ）
【化１７】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および３−アミノ−ベンゼンスルホンアミドから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．９１（ｓ，１Ｈ），８．１７（ｄ，１Ｈ），８．１１（ｓ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．５４（ｔ，１Ｈ），７．４８（ｄ，１Ｈ），７．３９（ｂｒ，２Ｈ），７．０５−６．９８（２Ｈ），６．３７（ｓ，１Ｈ），４．００（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）および２．９８（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３９９
【００７２】
実施例７．
２−（２−クロロ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｇ）
【化１８】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−クロロ−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．１０（ｂｒ，１Ｈ），７．９１（ｂｒｄ，１Ｈ），７．７０（ｂｒｄ，１Ｈ），７．５３（ｄｄ，１Ｈ），７．３７（ｔ，１Ｈ），７．２１（ｔ，１Ｈ），７．０５−６．９５（２Ｈ），６．５５（ｂｒ，１Ｈ），３．９７（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３５４
【００７３】
実施例８．
２−（２，６−ジメチル−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｈ）
【化１９】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２，６−ジメチル−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ ２つの異性体混合物として（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．９６および８．８７（ｂｒ，１Ｈ），７．７５および７．２９（ｄ，１Ｈ），７．２３−６．８０（５Ｈ），６．３７および５．３３（ｂｒ，１Ｈ），３．９６および３．９２（ｔ，２Ｈ），３．８４および３．７８（ｓ，３Ｈ），２．９５（ｔ，２Ｈ）および２．１８および２．１６（ｓ，６Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３４８
【００７４】
実施例９．
２−（２−ブロモ−６−フルオロ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｉ）
【化２０】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−ブロモ−６−フルオロ−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．２６（ｂｒ，１Ｈ），７．７２（ｂｒ，１Ｈ），７．５７（ｂｒｄ，１Ｈ），７．３４（ｂｒ，２Ｈ），７．０５−６．９５（２Ｈ），６．３７（ｂｒ，１Ｈ），３．９４（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋４１６，４１８
【００７５】
実施例１０．
２−（３−メトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｊ）
【化２１】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および３−メトキシアニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．５９（ｓ，１Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ），７．５２（ｂｒ，１Ｈ），７．３０（ｄ，１Ｈ），７．２３（ｔ，１Ｈ），７．０５−６．９５（２Ｈ），６．６３（ｄｄ，１Ｈ），６．３５（ｓ，１Ｈ），３．９８（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．７５（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３５０
【００７６】
実施例１１．
２−（２−ヒドロキシ−６−メチル−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｋ）
【化２２】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−ヒドロキシ−６−メチル−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ，６０℃にて）δ９．３９（ｂｒ，１Ｈ），８．６０（ｂｒ，１Ｈ），７．６１（ｂｒ，１Ｈ），７．０５−６．９５（３Ｈ），６．７５（ｄ，１Ｈ），６．７３（ｄ，１Ｈ），６．３４（ｂｒ，１Ｈ），３．９５（ｔ，２Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），２．９５（ｔ，２Ｈ），および２．１９（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３５０
【００７７】
実施例１２．
９−メトキシ−２−（４−メトキシ−ビフェニル−３−イルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｌ）
【化２３】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および３−アミノ−４−メトキシ−ビフェニルから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．８５（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｂｒ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．６０（ｄ，２Ｈ），７．４６（ｔ，２Ｈ），７．３８（ｄｄ，１Ｈ），７．３３（ｔ，１Ｈ），７．１６（ｄ，１Ｈ），７．０２（ｄｄ，１Ｈ），６．９８（ｄ，１Ｈ），６．７２（ｂｒ，１Ｈ），３．９７（ｔ，２Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋４２６
【００７８】
実施例１３．
３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−安息香酸エチルエステル（Ｉｍ）
【化２４】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および３−アミノ−安息香酸エチルエステルから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．８４（ｓ，１Ｈ），８．２６（ｓ，１Ｈ），８．２１（ｄ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．６２（ｄ，１Ｈ），７．４９（ｔ，１Ｈ），７．０５−６．９７（２Ｈ），６．３６（ｓ，１Ｈ），４．３３（ｑ，２Ｈ），３．９９（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），２．９７（ｔ，２Ｈ）および１．３４（ｔ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３９２
【００７９】
実施例１４．
９−メトキシ−２−（２−メトキシ−フェニルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｎ）
【化２５】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−メトキシ−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．７４（ｓ，１Ｈ），８．２４（ｂｒ，１Ｈ），７．６９（ｄ，１Ｈ），７．１２−６．９２（５Ｈ），６．７０（ｂｒ，１Ｈ），３．９７（ｔ，２Ｈ），３．８７（ｓ，３Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３５０
【００８０】
実施例１５．
９−メトキシ−２−（２−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｏ）
【化２６】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−トリフルオロメチル−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．１０（ｂｒ，１Ｈ），７．９０−７．３５（５Ｈ），６．９８（２Ｈ），６．４２（ｂｒ，１Ｈ），３．９４（ｂｒｔ，２Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ）および２．９５（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３８８
【００８１】
実施例１６．
２−（４−クロロ−２，６−ジメチル−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｐ）
【化２７】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および４−クロロ−２，６−ジメチル−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．７３（ｂｒ，１Ｈ），７．７２（ｂｒ，１Ｈ），７．１９（ｓ，２Ｈ），７．０３−６．９５（２Ｈ），６．３６（ｂｒ，１Ｈ），３．９５（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），２．９６（ｔ，２Ｈ）および２．１８（ｓ，６Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３８２
【００８２】
実施例１７．
９−メトキシ−２−（キノリン−５−イルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｑ）
【化２８】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および５−アミノ−キノリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．６８（ｂｒ，１Ｈ），８．９３（ｄｄ，１Ｈ），８．４７（ｄ，１Ｈ），７．８９（２Ｈ），７．７９（ｔ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．５７（ｄｄ，１Ｈ），７．０３−６．９７（２Ｈ），６．４９（ｂｒ，１Ｈ），３．９７（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９７（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３７１
【００８３】
実施例１８．
２−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｒ）
【化２９】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−クロロ−５−メトキシ−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．９９（ｂｒ，１Ｈ），７．７６−７．６０（２Ｈ），７．４２（ｄ １Ｈ），７．０５−６．９５（２Ｈ），６．８０（ｄｄ，１Ｈ），６．６０（ｓ，１Ｈ），３．９７（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．７６（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３８４
【００８４】
実施例１９．
２−［Ｎ’−（２−ブロモ−フェニル）−ヒドラジノ］−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｓ）
【化３０】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および（２−ブロモ−フェニル）−ヒドラジンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ、６０℃）δ９．１９（ｂｒ，１Ｈ），７．６６（ｂｒｄ，１Ｈ），７．４６（ｄ，１Ｈ），７．４４（ｂｒ，１Ｈ），７．２０（ｔ，１Ｈ），６．９８−６．７５（３Ｈ），６．７１（ｔ，１Ｈ），６．２３（ｓ，１Ｈ），３．９４（ｔ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ）および２．９３（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋４１３，４１５
【００８５】
実施例２０．
９−メトキシ−２−（Ｎ’−メチル−Ｎ’−フェニル−ヒドラジノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｔ）
【化３１】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）およびＮ−メチル−Ｎ−フェニル−ヒドラジンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ、６０℃）δ９．１２（ｂｒ，１Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ），７．２２（ｔ，２Ｈ），６．９５−６．７５（５Ｈ），６．２４（ｓ，１Ｈ），３．９６（ｂｒ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．１６（ｓ，３Ｈ）および２．９４（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３４９
【００８６】
実施例２１．
２−（２−アミノ−エチルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｕ）ＨＣｌ塩
【化３２】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）およびＮ−Ｂｏｃ−エチレンジアミンから、実施例１ｄのように調製され、次いで、ＨＣｌで処理した。
１Ｈ−ＮＭＲ ２つの異性体の混合物として（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．２５−８．４０（１Ｈ），８．３２および７．７０（ｄ，１Ｈ），８．１２および８．０２（ｂｒ，３Ｈ），７．０７−７．００（ｍ，２Ｈ），６．８０および６．３３（ｓ，１Ｈ），４．０４および３．９８（ｔ，２Ｈ），３．８８および３．８５（ｓ，３Ｈ），３．８０および３．６１（ｑ，２Ｈ）および３．０８−２．９４（４Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋２８７。３３３Ｋで得られたスペクトルは、単一の異性体を示した。
【００８７】
実施例２２．
９−メトキシ−２−（２−ピロリジン−１−イル−エチルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｖ）ＨＣｌ塩
【化３３】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−ピロリジン−１−イル−エチルアミンから、実施例１ｄのように調製され、次いで、ＨＣｌで処理した。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．６４（ｄ，１Ｈ），７．５９（ｂｒ，１Ｈ），７．００−６．９２（２Ｈ），６．１８（ｓ，１Ｈ），３．９２（ｔ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｍ，２Ｈ），２．９１（ｔ，２Ｈ），２．９０−２．５０（６Ｈ）および１．７６（４Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３４１
【００８８】
実施例２３．
２−（２−ジメチルアミノ−エチルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｗ）
【化３４】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−ジメチルアミノ−エチルアミンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．８１（ｂｒ，１Ｈ），７．７８（ｄ，１Ｈ），７．０１−６．９５（２Ｈ），６．１６（ｓ，１Ｈ），３．９４（ｔ，２Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），３．６２（ｂｒ，２Ｈ），３．２１（ｂｒ，２Ｈ），２．９３（ｔ，２Ｈ）および２．８３（ｓ，６Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３１５
【００８９】
実施例２４．
２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｘ）
【化３５】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−ヒドロキシ−エチルアミンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．６２（ｄ１Ｈ），７．５４（ｔ，１Ｈ），７．００−６．９３（２Ｈ），６．１７（ｓ，１Ｈ），４．８５（ｔ，１Ｈ），３．９１（ｔ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ）３．５０（ｑ，２Ｈ），２．９１（ｔ，２Ｈ）および２ＨはＨ２Ｏと重複した；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋２８８
【００９０】
実施例２５．
９−メトキシ−２−［（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミノ］−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｙ）ＨＣｌ塩
【化３６】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミンから、実施例１ｄのように調製され、次いで、ＨＣｌで処理した。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ，６０℃）δ８．０７（ｄ，１Ｈ），７．０３−６．９５（２Ｈ），６．５６（ｓ，１Ｈ），４．００（ｔ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），３．８６（２Ｈ 重複），３．５８（ｔ，２Ｈ），３．２９（ｓ，３Ｈ），３．２５（ｓ，３Ｈ）および３．００（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３１６
【００９１】
実施例２６．
９−メトキシ−２−（４−メトキシ−ベンジルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｚ）
【化３７】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および４−メトキシ−ベンジルアミンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．８９（ｔ，１Ｈ），７．６３（ｄ，１Ｈ），７．２５（ｄ，２Ｈ），７．０−６．９３（２Ｈ），６．９０（ｄ，２Ｈ），６．１６（ｓ，１Ｈ），４．４５（ｄ，２Ｈ），３．９２（ｔ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ）および２．９２（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３６４
【００９２】
実施例２７．
９−メトキシ−２−（３−メトキシ−ベンジルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉａａ）
【化３８】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および３−メトキシ−ベンジルアミンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．９５（ｔ，１Ｈ），７．６５（ｄ，１Ｈ），７．２５（ｔ，１Ｈ），７．００−６．８５（４Ｈ），６．８２（ｄｄ，１Ｈ），６．１９（ｓ，１Ｈ），４．５０（ｄ，２Ｈ），３．９２（ｔ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ）および２．９２（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３６４
【００９３】
実施例２８．
３−ブロモ−Ｎ−［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（Ｉａｂ）
【化３９】
【００９４】
ａ．２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（５）
【化４０】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および３−ニトロ−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１０．１０（ｓ，１Ｈ），８．８７（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｄ，１Ｈ），７．８８（ｍ，１Ｈ），７．７３（ｄ，１Ｈ），７．６３（ｔ，１Ｈ），７．０２（ｍ，２Ｈ），６．３８（ｓ，１Ｈ），４．０１（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）および２．９９（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３６５
【００９５】
ｂ．２−（３−アミノ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（６）
【化４１】
２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（５）（５２５．４ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（４０ｍＬ）中溶液に、Ｚｎ粉末（約３００ｍｇ）を加え、室温で３時間、次いで、４０℃で一晩攪拌した。冷却後、ＭｅＯＨを該混合物に加え、不溶性物質をろ過により除去した。該ＭｅＯＨ溶液をＢｏｎｄＥｌｕｔＲ ＳＣＸ（Varian Incorporated）で精製し、次いで、ＢｏｎｄＥｌｕｔＲ ＮＨ２（Variant Incorporated）に通過させた。得られた固体をＭｅＯＨで洗浄して、標題化合物を得た（２１５．１ｍｇ，４６％）。
ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３３５
【００９６】
ｃ．３−ブロモ−Ｎ−［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（Ｉａｂ）
【化４２】
２−（３−アミノ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（６）（２０．０ｍｇ，０．０６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）中混合物に、トリエチルアミン（１３μＬ，０．０９ｍｍｏｌ）および３−ブロモベンゾイルクロリド（１０μＬ，０．０７ｍｍｏｌ）を加え、５０℃で２時間攪拌した。該混合物を濃ＨＣｌでクエンチし、ＢｏｎｄＥｌｕｔＲ ＳＣＸ（Varian Incorporated）で精製した。形成された固体をＣＨ２Ｃｌ２で洗浄して、標題化合物を得た（２５．３ｍｇ，８１％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１０．４３（ｓ，１Ｈ），９．６８（ｓ，１Ｈ），８．１５（ｔ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），７．９７（ｄｔ，１Ｈ），７．８１（ｄｄｄ，１Ｈ），７．７５（ｂｒｄ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．５１（ｔ，１Ｈ），７．３６（ｄｔ，１Ｈ），７．３１（ｔ，１Ｈ），７．０５−６．９８（２Ｈ），６．４２（ｓ，１Ｈ），３．９９（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９７（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋５１７，５１９
【００９７】
実施例２９．
シクロペンタンカルボン酸［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−アミド（Ｉａｃ）
【化４３】
標題化合物は、２−（３−アミノ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（６）およびシクロペンタンカルボニルクロリドから、実施例２８ｃに記載の方法にしたがって調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．９２（ｓ，１Ｈ），９．６６（ｂｒ，１Ｈ），７．９１（ｓ，１Ｈ），７．６９（ｄ，１Ｈ），７．５７（ｂｒ，１Ｈ），７．２８−７．２０（２Ｈ），７．０５−６．９７（２Ｈ），６．４０（ｓ，１Ｈ），３．９８（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），２．９７（ｔ，２Ｈ），２．８０（ｍ，１Ｈ）および１．９２−１．５０（８Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋４３１
【００９８】
実施例３０．
３−ブロモ−Ｎ−［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンゼンスルホンアミド（Ｉａｄ）
【化４４】
標題化合物は、２−（３−アミノ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（６）および３−ブロモ−ベンゼンスルホニルクロリドから、実施例２８ｃに記載の方法にしたがって調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１０．４７（ｂｒ，１Ｈ），９．６２（ｓ，１Ｈ），７．９５（ｔ，１Ｈ），７．９１（ｄｔ，１Ｈ），７．８３（ｄｄｄ，１Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ），７．６２−７．５４（２Ｈ），７．５３（ｔ，１Ｈ），７．１８（ｔ，１Ｈ），７．０５−６．９７（２Ｈ），６．７１（ｄｄ，１Ｈ），６．３４（ｓ，１Ｈ），３．９９（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９７（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋５５３，５５５
【００９９】
実施例３１．
２−メトキシ−Ｎ−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イル）−アセトアミド（Ｉａｅ）
【化４５】
【０１００】
ａ．２−アミノ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（７）
【化４６】
２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（６）（９１９ｍｇ，３．５ｍｍｏｌ）のＮＨ３／ＥｔＯＨ（７ｍＬ）中懸濁液をオートクレーブ中、１２０℃で一晩攪拌した。冷却後、沈殿をろ過し、ＭｅＯＨで洗浄して、標題化合物を得た（８９８．３ｍｇ，定量的）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．９９（ｂ，１Ｈ），７．７１（ｄ，１Ｈ），７．４４（ｂ，１Ｈ），７．０１（ｄｄ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），６．２２（ｓ，１Ｈ），３．９５（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）および２．９７（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋２４３
【０１０１】
ｂ．２，４，６−トリクロロ−Ｎ−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イル）−ベンズアミド（Ｉａｅ）
【化４７】
２−アミノ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（７）（４０ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）のＣＨＣｌ３（３ｍＬ）中懸濁液に、ＤＭＡＰ（３０．１ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）および２，４，６−トリクロロベンゾイルクロリド（３７．５μＬ，０．２４ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で一晩攪拌した。冷却後、混合物をＢｏｎｄＥｌｕｔＲ ＳＣＸ（Varian Incorporated）、次いで、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（溶出液としてＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ＝５０／１）上で精製して、標題化合物を得た（１７．１ｍｇ，２４％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９０（ｄ，１Ｈ），７．４２（ｓ，２Ｈ），６．９５（ｄｄ，１Ｈ），６．８２（ｄ，１Ｈ），４．２７（ｔ，２Ｈ），３．９０（ｓ，３．１７）および３．０３（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋４４９
【０１０２】
実施例３２．
２−メトキシ−Ｎ−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イル）−アセトアミド（Ｉａｆ）
【化４８】
標題化合物は、２−アミノ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（７）およびメトキシ−アセチルクロリドから、実施例３１ｂに記載の製法にしたがって得られた。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．７６（ｄ，１Ｈ），７．６１（ｓ，１Ｈ），７．０３（ｄｄ，１Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），４．１０（ｓ，２Ｈ），４．０６（ｔ，３Ｈ），３．８５（ｓ，１Ｈ）および３．００（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３１５
【０１０３】
生物学的方法およびデータ
表１および２における代表的化合物によって示されるように、本発明の化合物は、そのｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２キナーゼ酵素阻害能のために、価値のある薬理学的性質を有する。下記は、各々、ｈＹＡＫ３およびＭＫ２阻害活性を測定するためのアッセイ法である。
【０１０４】
燐アクセプターとしてミエリン塩基性蛋白質のＳｅｒ１６４を用いるＹＡＫ３シンチレーション近接アッセイ
Ｓｅｒ１６４基質ペプチドの供給源：
ビオチン化したＳｅｒ１６４、Ｓ１６４Ａペプチド（ビオチニル−ＬＧＧＲＤＳＲＡＧＳ＊ＰＭＡＲＲ−ＯＨ）、Ｓｅｒ１６２がＡｌａ１６２に置換されたウシミエリン塩基性蛋白質（ＭＢＰ）のＣ末端由来の配列をCalifornia Peptide Research Inc.（Napa, CA）から購入し、その純度をＨＰＬＣで測定した。１６４位置でリン酸化が起こる（上記Ｓ＊でマークした）。該ペプチドの計算された分子量は、２１６６ダルトンであった。固体試料をＤＭＳＯ中に１０ｍＭで溶解し、アリコートし、使用するまで−２０℃で保管した。
【０１０５】
酵素の供給源：
ｈＹＡＫ３：ヒトＹＡＫ３のアミノ酸残基１２４−５２６（米国特許第６，３２３，３１８号において、配列番号２のａａ１２４−５２６）を含有するグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）−ｈＹａｋ３−Ｈｉｓ６をＳｆ９細胞におけるバキュロウイルス発現系から、グルタチオンセファロース４Ｂカラムクロマトグラフィー、次いで、Ｎｉ−ＮＴＡ−アガロースカラムクロマトグラフィーを用いて精製した。典型的には、６５％以上の純度が達成された。試料を、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１０％グリセロール、０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ、２５０ｍＭイミダゾール、１０ｍＭ β−メルカプトエタノール、ｐＨ８．０中において、使用するまで−８０℃で保管した。
【０１０６】
精製ｈＹＡＫ３のキナーゼアッセイ：
アッセイは、９６ウェル（Costar，カタログＮｏ．３７８９）または３８４ウェルプレート（Costar，カタログＮｏ．３７０５）中において行われた。反応（２０、２５、または４０μｌ容量において）混合物は、最終濃度２５ｍＭのＨｅｐｅｓバッファー、ｐＨ７．４；１０ｍＭ ＭｇＣｌ２；１０ｍＭ β−メルカプトエタノール；０．００２５％ Ｔｗｅｅｎ−２０；０．００１ｍＭ ＡＴＰ、０．１μＣｉの［γ−３３Ｐ］ＡＴＰ；精製ｈＹＡＫ３（７−１４ｎｇ／アッセイ；４ｎＭ最終濃度）；および４μＭ Ｓｅｒ１６４ペプチドを含有した。ＤＭＳＯ中で滴定された化合物は、５０μＭ〜０．５ｎＭの濃度範囲で評価された。ＤＭＳＯの最終的なアッセイ濃度は、５％を越えず、ＤＭＳＯを含有しない対照と比べて、１５％未満のＹＡＫ３活性喪失をもたらした。反応物を室温で２時間インキュベートし、ＰＢＳ、ｐＨ７．４、１０ｍＭ ＥＤＴＡ、０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、１ｍＭ ＡＴＰ中における０．１９μｇのストレプトアビジンシンチレーション近接ビーズ（Amersham Pharmacia Biotech，カタログＮｏ．ＲＰＮＱ０００７）を７５μｌ添加することによって、停止した。上記のアッセイ条件下、ＡＴＰに関するＫｍ（見かけ）は、７．２＋／−２．４μＭであると決定された。
【０１０７】
【表１】
ｐＩＣ５０＝−ｌｏｇ１０（ＩＣ５０）
【０１０８】
ＭＡＰＫＡＰ２キナーゼ（ＭＫ２）酵素アッセイ
γ−リン酸のＡＴＰからビオチン化ペプチド［ＮＨ２−Ｋ（ビオチン）−ＫＬＮＲＴＬＳＶＡ（SynPep Corporation, USA）］のセリン／スレオニン残基へのＭＫ２触媒性移動を測定するアッセイにおいて、化合物をＭＡＰＫＡＰ２キナーゼ（ＭＫ２）阻害活性について試験する。分析下の化合物は、ＤＭＳＯ中に１ｍＭまで溶解し、９６または３８４−ウェルポリプロピレンまたはポリスチレンプレート中において、ＤＭＳＯを用いて３倍連続希釈して、全部で１０−１２種類の濃度にする。１μＬの各濃度を、９６または３８４−ウェルの白色ポリスチレンアッセイプレートの対応するウェルに移す。最終容量２６μＬで、反応を行う。ＡＴＰ溶液（１０μＬ）を各ウェルに加え、ＭＫ２／ペプチド混合物（１５μＬ）の添加によって、反応を開始する。該ＡＴＰ溶液は、Ｈ２Ｏ中で調製し、２．６μＭの非放射性ＡＴＰ（SigmaUltra）および６．５μＣｉ／ｍＬの［γ−３３Ｐ］−ＡＴＰ（Amersham Pharmacia Biotech）から構成される。ＭＫ２／ペプチド混合物は、８６．７ｍＭ ＨＥＰＥＳ（SigmaUltra）、ｐＨ７．５、８．６７ｍＭ ＭｇＣｌ２（SigmaUltra）、０．００４３％Ｔｗｅｅｎ２０、１．７３ｍＭジチオトレイトール（冷凍１Ｍストックから新たに加える）、１．７３μＭペプチドおよび１．７３ｎＭ精製組み換えＭＫ２から構成される。アッセイ成分の最終濃度は、５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．００２５％Ｔｗｅｅｎ２０、１ｍＭジチオトレイトール、１μＭ ＡＴＰ、２．５μＣｉ／ｍＬ［γ−３３Ｐ］−ＡＴＰ、１μＭペプチド基質、および１ｎＭ ＭＫ２である。反応を４０分間進行させ、次いで、「停止溶液」（２０μＬ）の添加によって停止させ、次いで、「ビーズ混合物」（５０μＬ）を添加する。「停止溶液」は、５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ８、２．３０ｍＭ非放射性ＡＴＰ、および０．２３Ｍ ＥＤＴＡからなり、「ビーズ混合物」は、３ｍｇ／ｍＬストレプトアビジン−被覆性ポリビニルトルエンＳＰＡビーズ（Amersham Pharmacia Biotech）を含有するＰＢＳである。阻害剤を含まないこれらの条件下、反応は、約１５％のペプチド基質およびＡＴＰを消費する。プレートを約８時間静置し、次いで、ＴｏｐＣｏｕｎｔ ＮＸＴＴＭ（登録商標）（Packard）を用いて定量する。別法では、プレートを少なくとも約１時間静置させ、９００ｒｐｍで３分間遠心分離し、次いで、ＴｏｐＣｏｕｎｔ ＮＸＴＴＭ（Packard）を用いて定量する。対照は、各アッセイプレートに置かれ、ここに、正の対照（シグナルｍａｘ）は、化合物を含まないＤＭＳＯを１μＬ含有し、負の対照（シグナルｍｉｎ）は、化合物を含まないＤＭＳＯを１μＬ、さらに４．５μＬの０．５Ｍ ＥＤＴＡ、ｐＨ８（Invitrogen Corporation，ＧＩＢＣＯＴＭ）を含有する。ＭＫ２活性の阻害パーセントは、等式［１］
【数１】
［式中、シグナル試料は、化合物を含有する特定の試料ウェルにおいて観察されるシグナルであり、シグナルｍａｘおよびシグナルｍｉｎは、上記のとおりである］
を用いて、各化合物濃度について計算される。シグナルｍａｘおよびシグナルｍｉｎに用いられる値は、各プレート内に含まれる対応する対照ウェルの平均である。各化合物用量応答についてのデータは、阻害パーセント（ｙ） 対 化合物濃度（ｘ）としてプロットし、非線形回帰によって等式［２］
【数２】
［式中、Ｙ２は、ベースラインの阻害パーセントであり、Ｖｍａｘは、正味の最大阻害パーセント（ベースラインを減じた）であり、Ｋは、ＩＣ５０である］
に適合させる。記載のアッセイ条件下、ＡＴＰ濃度は、見かけのＡＴＰ Ｋｍをはるかに下回り、故に、ＩＣ５０値は、Ｋｉ値とほとんど等しい。各化合物に関する結果は、等式［３］
【数３】
を用いて計算されるｐＩＣ５０として記録する。
【０１０９】
【表２】
【０１１０】
本発明の有用性
上記の生物学的データは、明らかに、式Ｉの化合物が、限定するものではないが、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；骨髄抑制；慢性関節リウマチ；ＣＯＰＤ；喘息；乾癬；急性ニューロン損傷；心不全；卒中、骨関節炎；および虚血再潅流傷害を包含するｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２蛋白質が関与する病状の治療または予防に有用であることを示す。
【０１１１】
式Ｉの化合物は、特に、造血系の疾患、特に貧血の治療に有用である。かかる貧血は、無形成性貧血および骨髄異形成症候群からなる群から選択される貧血を包含する。かかる貧血は、また、貧血が癌、白血病およびリンパ腫からなる群から選択される原発性疾患の結果であるものを包含する。かかる貧血は、また、貧血が腎臓疾患、腎不全または腎障害からなる群から選択される原発性疾患の結果であるものを包含する。かかる貧血は、貧血が化学療法または放射能療法の結果であるもの、特に、化学療法が癌のための化学療法またはＨＩＶ感染に対するＡＺＴ治療であるものを包含する。かかる貧血は、貧血が骨髄移植または幹細胞移植の結果であるものを包含する。かかる貧血は、また、新生児の貧血を包含する。かかる貧血は、また、ウイルス、真菌、細菌または寄生虫感染の結果であるものを包含する。
【０１１２】
式Ｉの化合物は、また、正常な赤血球数を増加するために有用である。かかる増加は、種々の目的、特に、医学的目的、例えば、輸血に対する患者の準備および手術に対する患者の準備などの目的に望ましい。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、新規に同定された、種々の障害を治療するためのキナーゼ阻害剤に関する。
【０００２】
発明の背景
多くのポリペプチド成長因子およびホルモンは、シグナル変換経路を介して、その細胞効果の媒介となる。これらのリガンドに対する細胞表面受容体から細胞内エフェクターへのシグナル変換は、しばしば、調節プロテインセリン／スレオニンキナーゼ（ＰＳＴＫ）およびホスファターゼによる特定蛋白質基質のリン酸化または脱リン酸化を伴う。セリン／スレオニンリン酸化は、多細胞生物におけるシグナル変換の主要なメディエーターである。受容体結合型、膜結合型および細胞内ＰＳＴＫは、多くの細胞型において、細胞増殖、細胞分化およびシグナル伝達過程を調節する。
【０００３】
異常なプロテインセリン／スレオニンキナーゼ活性は、多くの病理、例えば、慢性関節リウマチ、乾癬、敗血症性ショック、骨量減少、多くの癌および他の増殖性疾患に関与しているか、またはその疑いがある。したがって、セリン／スレオニンキナーゼおよびそれらが関与するシグナル変換経路は、薬物設計の潜在的な標的である。
【０００４】
ＰＳＴＫのサブセットは、細胞周期の調節に関与する。これらは、サイクリン依存性キナーゼまたはＣＤＫである（PeterおよびHerskowitz, Cell 1994: 79, 181-184）。ＣＤＫは、サイクリンと呼ばれる調節蛋白質に結合することによって活性化され、特定の細胞周期チェックポイントを介して細胞の通過を制御する。例えば、サイクリンＥと複合体形成したＣＤＫ２は、細胞をＧ１からＳ期へ移行させる。ＣＤＫとサイクリンの複合体は、ＣＤＫ４に結合し、阻害するｐ１６（Serranoら, Nature 1993: 366, 704)のような低分子量蛋白質による阻害を受ける。ｐ１６における欠失または突然変異は、種々の腫瘍に関係している（Kambら, Science 1994: 264, 436-440）。したがって、細胞の増殖状態および該状態に関連する疾患は、ＣＤＫの活性およびその関連する調節分子に依存する。増殖の阻害が望まれる癌などの疾患において、ＣＤＫを阻害する化合物は、有用な治療剤でありうる。逆に言えば、ＣＤＫの活性化物質は、増殖強化が必要な場合、例えば、免疫欠損の治療において有用でありうる。
【０００５】
ＹＡＫ１、ＣＤＫに対する配列相同性を有するＰＳＴＫは、当初、酵母において、ｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼＰＫＡの不活化によって引き起こされる細胞周期停止のメディエーターとして同定された（Garrettら, Mol Cell Biol. 1991: 11, 4045-4052）。ＹＡＫ１キナーゼ活性は、細胞周期が進行している酵母において低いが、細胞がＳ−Ｇ２移行前に停止したとき、著しく増加する。ＹＡＫ１の発現増加は、ＰＫＡが不足した酵母細胞において増殖停止を引き起こす。したがって、ＹＡＫ１は、酵母における細胞周期抑制物質として作用することができる。
【０００６】
発明者らの米国特許第６，３２３，３１８号は、ｈＹＡＫ３−２と名付けられた酵母ＹＡＫ１の２つの新規なヒト相同物（１つは他方より２０アミノ酸長い）を記載する。ｈＹＡＫ３−２蛋白質（あるいは、Blood, 1 May 2000, Vol 95, No. 9, pp2838において、ＲＥＤＫ−ＬおよびＲＥＤＫ−Ｓと報告された）は、主に、核に局在する。ｈＹＡＫ−２蛋白質（以後、単に、ｈＹＡＫ３またはｈＹＡＫ３蛋白質という）は、造血組織、例えば、骨髄および胎児肝臓に存在するが、そのＲＮＡは、赤芽球またはエリトロポイエチン（ＥＰＯ）−応答細胞においてのみ、有意なレベルで発現する。ＲＥＤＫ ｃＤＮＡの２つの形態は、別のスプライス産物であるようである。アンチセンスＲＥＤＫオリゴヌクレオチドは、コロニー形成単位（ＣＦＵ）−ＧＭ、ＣＦＵ−ＧまたはＣＦＵ−ＧＥＭＭ数に影響を及ぼすことなく、ヒト骨髄細胞による赤芽球コロニー形成を促進する。ＣＦＵ−Ｅおよび赤芽球バースト形成単位の最大数は増加し、ＣＦＵ−Ｅは、最適以下のＥＰＯ濃度に対する感受性増加を示した。該データは、ＲＥＤＫがブレーキとして作用して、赤血球生成を妨げることを示す。かくして、ｈＹＡＫ３蛋白質の阻害剤は、その発現細胞の増殖を刺激することが予想される。より詳細には、ｈＹＡＫ３蛋白質の阻害剤は、限定するものではないが、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；および骨髄抑制を包含するｈＹＡＫ３不均衡によって引き起こされる赤芽球および造血系の疾患の治療または予防に有用である。
【０００７】
医学において重要なもう１つ別のＰＳＴＫは、ＭＫ２蛋白質である。サイトカインは、炎症性疾患の重要な特徴の多くを誘導することができ、その産生および作用機序の阻害は、適当な治療的アプローチであるであろう。ｐ３８ ＭＡＰキナーゼの阻害は、ＩＬ−１、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＧＭＣＳＦを包含するプロ炎症性サイトカイン産生を減少させることが明らかにされた。ｐ３８の下流での阻害により、プロ炎症性サイトカインのアップレギュレーションに関与するこれらのキナーゼに対するより大きな選択性が可能となり、改善された安全プロフィールを有する化合物をもたらしうる。ＭＡＰＫＡＰ Ｋ２（ＭＫ２）は下流にあり、ｐ３８ ＭＡＰキナーゼによって直接、活性化される。ＭＫ２およびｐ３８が核において複合体として存在すること、およびｐ３８によるＭＫ２のリン酸化が核から細胞質への該複合体の輸送をもたらすことが確立された（Ben-Levyら, Curr Biol 1998; 8:1049-57）。かくして、ＭＫ２は、基質として作用するだけでなく、ｐ３８の細胞局在化の決定子としても作用する。それは、転写および翻訳事象の両方におけるＭＫ２の役割とも矛盾がない。
【０００８】
ＭＫ２ノックアウトマウス由来のデータは、プロ炎症性サイトカイン産生における該キナーゼの重要な役割を明らかにした。ＭＫ２−／−ノックアウトマウスは、ＬＰＳ−誘導性ＴＮＦ−α産生において９０％の減少を示し、内毒素性ショックに対して耐性であった。ＭＫ２−／−マウス由来の脾臓細胞もまた、ＬＰＳ刺激後のプロ炎症性サイトカインＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＦＮ−γおよびＩＬ−６の有意な阻害を明らかにした（Kotlyarovら, Nature Cell Biology 1999; 1:94-97）。ＭＫ２に対して活性な化合物は、慢性関節リウマチ、ＣＯＰＤ、喘息、乾癬、急性ニューロン損傷、心不全、卒中、骨関節炎、および虚血再潅流傷害の治療または予防において有用であると考えられる。
【０００９】
本発明の化合物は、ｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２蛋白質に対する活性を有することが見出されている。
【００１０】
発明の概要
第１の態様において、本発明は、治療上有効量の式Ｉ
【化１】
【００１１】
［式中、
Ｒ１は、水素、−ＮＨ２、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は、水素であるか；または
Ｒ２は、式
【００１２】
【化２】
（式中、
Ｗは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＣＨ３−、または−ＮＨ−であり；
Ｒは、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、−ＮＨ２、（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣＨ２−、独立して１〜３個のＣ１−６アルキル、ハロゲン、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣ（＝Ｏ）−、アセチル、ＮＨ２Ｃ（＝Ｏ）−、ＦＳＯ２−、−ＣＦ３、ＮＨ２ＳＯ２−、ジメチルアミノ；ＨＯＣＨ２−、ＣＨ３ＮＨＣ（＝Ｏ）−、ヒドロキシ、フェニルで置換されていてもよいフェニルであるか；または
【００１３】
Ｒは、式
【化３】
【化４】
で示される基であり、
【００１４】
但し、Ｗに対するＲの結合点が酸素または窒素である場合、ＷはＣＨ２であることはない）
で示される基である］
で示される化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的な誘導体を哺乳動物に投与することを特徴とする、哺乳動物におけるｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２の阻害方法に関する。
【００１５】
式Ｉの好ましい化合物は、
Ｒ１が水素またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２が水素であるか；または
Ｒ２が式
【化５】
［式中、Ｗは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＣＨ３−、または−ＮＨ−であり；
Ｒは、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、−ＮＨ２、（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣＨ２−、独立して１〜３個のＣ１−６アルキル、ハロゲン、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣ（＝Ｏ）−、−ＣＦ３、ＮＨ２ＳＯ２−、ヒドロキシ、フェニルで置換されていてもよいフェニルであるか；または
Ｒは、式
【化６】
で示される基であり、
但し、Ｗに対するＲの結合点が酸素または窒素である場合、ＷはＣＨ２であることはない］
で示される化合物である。
【００１６】
本発明の第２の態様において、治療上有効量の式Ｉの化合物あるいはその塩、溶媒和物または生理学上許容される誘導体ならびに１以上の医薬上許容される担体、希釈剤および賦形剤を含む医薬組成物が提供される。
【００１７】
本発明の第３の態様において、限定するものではないが、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；骨髄抑制；慢性関節リウマチ；ＣＯＰＤ；喘息；乾癬；急性ニューロン損傷；心不全；卒中；骨関節炎；および虚血再潅流傷害を包含するｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２蛋白質の不均衡または不適当な活性によって媒介される障害の治療または予防における使用のための医薬の製造における、式Ｉの化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的な誘導体の使用が提供される。
【００１８】
第４の態様において、本発明は、治療上有効量の式Ｉの化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的誘導体ならびに１以上の医薬上許容される担体、希釈剤および賦形剤を哺乳動物に投与することを特徴とする、限定するものではないが、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；骨髄抑制；慢性関節リウマチ；ＣＯＰＤ；喘息；乾癬；急性ニューロン損傷；心不全；卒中、骨関節炎；および虚血再潅流傷害を包含するｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２の不均衡または不適当な活性によって引き起こされる疾患の治療または予防法に関する。
【００１９】
第５の態様において、本発明は、治療上有効量の式Ｉの化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的誘導体ならびに１以上の医薬上許容される担体、希釈剤および賦形剤を哺乳動物に投与することを特徴とする、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；骨髄抑制；慢性関節リウマチ；ＣＯＰＤ；喘息；乾癬；急性ニューロン損傷；心不全；卒中、骨関節炎；および虚血再潅流傷害の治療または予防法に関する。
【００２０】
詳細な記載
本明細書中で使用される場合、「有効量」なる語は、例えば、研究者または臨床によって、求められている組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を顕在化するであろう薬物または医薬の量を意味する。さらに、「治療上有効量」なる語は、かかる量を投与されていない対応する対象と比べて、疾患、障害または副作用の改善された治療、治癒、予防または緩和、あるいは疾患または障害の進行速度の減少をもたらすいずれかの量を意味する。該用語は、また、正常な生理学的機能を増強するのに有効な量をその範囲内に包含する。
【００２１】
本明細書中で使用される場合、「アルキル」なる語は、直鎖または分枝鎖炭化水素をいう。かくして、「Ｃ１−６アルキル」は、少なくとも１個、多くとも６個の炭素原子を含有するアルキル基をいう。本発明において有用な「Ｃ１−６アルキル」基の例は、限定するものではないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシルなどを包含する。
【００２２】
本明細書中で使用される場合、「ハロゲン」なる語は、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、またはヨウ素（Ｉ）をいう。
【００２３】
本明細書中で使用される場合、「Ｃ３−６シクロアルキル」なる語は、３〜６個の炭素原子を有する非芳香環炭化水素環をいう。例示的「Ｃ３−６シクロアルキル」基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルを包含する。
【００２４】
本明細書中で使用される場合、「してもよい」なる語は、その記載される事象が起こっても、起こらなくてもよいことを意味し、起こる事象および起こらない事象の両方を包含する。
【００２５】
本明細書中で使用される場合、「生理学上機能的な誘導体」なる語は、哺乳動物への投与時に、本発明の化合物またはその活性な代謝産物を（直接または間接的に）提供することのできる本発明の化合物のいずれかの医薬上許容される誘導体、例えば、エステルまたはアミドをいう。かかる誘導体は、過度の実験を用いることなく、Burger's Medicinal Chemistry And Drug Discovery, 5th Edition, Vol 1: Principles and Practice（出典明示により、生理学上機能的な誘導体を教示する範囲まで、本明細書の一部とされる）の教示を参照して、当業者に明らかである。
【００２６】
本明細書中で使用される場合、「溶媒和物」なる語は、溶質（本発明において、式Ｉまたはその塩もしくは生理学上機能的な誘導体）および溶媒によって形成された変化可能な化学量論的複合体をいう。本発明の目的のためのかかる溶媒は、溶質の生物学的活性を干渉しなければよい。適当な溶媒の例は、限定するものではないが、水、メタノール、エタノールおよび酢酸を包含する。好ましくは、使用される溶媒は、医薬上許容される溶媒である。適当な医薬上許容される溶媒の例は、限定するものではないが、水、エタノール、および酢酸を包含する。最も好ましくは、使用される溶媒は、水である。
【００２７】
本明細書中で使用される場合、「置換された」なる語は、挙げられる置換基での置換をいい、別記しない限り、多置換度が可能である。
【００２８】
本明細書中で記載されるある特定の化合物は、１以上のキラル原子を含有していてもよく、または別法では、２つのエナンチオマーとして存在することが可能である。したがって、本発明の化合物は、エナンチオマーの混合物ならびに精製されたエナンチオマーまたはエナンチオマー的に豊富な混合物を包含する。また、本発明の範囲内には、上記式Ｉによって示される化合物の個々の異性体ならびにそのいずれかの完全または部分的に平衡な混合物が包含される。本発明は、また、上記の式によって示された化合物の個々の異性体を、１以上のキラル中心が逆になったその異性体との混合物として包含する。また、全ての互変体および互変体混合物が式Ｉの化合物の範囲内に包含されると理解される。
【００２９】
典型的には、本発明の塩は、医薬上許容される塩である。「医薬上許容される塩」なる語に包含される塩は、本発明の化合物の非毒性塩をいう。本発明の化合物の塩は、式Ｉの化合物中の置換基上の窒素から由来する酸付加塩を含んでいてもよい。代表的な塩は、下記の塩：酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストラート、エシラート、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレソルシナート、ヒドラバミン（hydrabamine）、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシラート、メチル臭化物、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、マレイン酸一カリウム、ムチン酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミン、シュウ酸塩、パモ酸塩（embonate）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、カリウム、サリチル酸塩、ナトリウム、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシラート、トリエチオジド、トリメチルアンモニウムおよび吉草酸塩を包含する。医薬上許容されない他の塩は、本発明の化合物の調製において有用であり、これらは、本発明のさらなる態様を形成する。
【００３０】
治療において使用するために、治療上有効量の式Ｉの化合物、ならびにその塩、溶媒和物および生理学上機能的な誘導体をそのままの化学物質として投与することも可能であるが、活性成分を医薬組成物として提供することが可能である。したがって、本発明は、さらに、治療上有効量の式Ｉの化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理学上機能的な誘導体、および１以上の医薬上許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む医薬組成物を提供する。式Ｉの化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理学上機能的な誘導体は、上記のとおりである。担体、希釈剤または賦形剤は、該処方の他の成分と適合性であり、そのレシピエントに有害ではないという意味で許容されなければならない。本発明の別の態様によると、式Ｉの化合物、またはその塩、溶媒和物および生理学上機能的な誘導体を１以上の医薬上許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合することを含む医薬処方の調製法も提供される。
【００３１】
医薬処方は、１単位投与量あたり所定量の活性成分を含有する単位投与形態において提供してもよい。かかる単位は、治療されている疾患、投与経路、および患者の年齢、体重および状態にもよるが、例えば、０．５ｍｇ〜１ｇ、好ましくは、１ｍｇ〜７００ｍｇ、より好ましくは、５ｍｇ〜１００ｍｇの式Ｉの化合物を含有しうる。または、医薬処方は、単位投与量あたり所定量の活性成分を含有する単位投与形態において提供されてもよい。好ましい単位投与処方は、上記のしたような活性成分の１日量または分割投与量（sub-dose）、またはその適当な一部を含有するものである。さらに、かかる医薬処方は、薬学分野でよく知られた方法のいずれかによって調製されうる。
【００３２】
医薬処方は、いずれかの適当な経路による、例えば、経口（バッカルまたは舌下を包含する）、直腸、鼻腔、局所（バッカル、舌下または経皮を包含する）、膣または非経口（皮下、筋内、静脈内、または皮内を包含する）経路による投与に適応させてもよい。かかる処方は、薬学分野で知られたいずれかの方法、例えば、活性成分を担体または賦形剤と結合させることによって調製されうる。
【００３３】
経口投与に適応させた医薬処方は、カプセルまたは錠剤のような分離した単位；粉末または顆粒；水性または非水性液体中における溶液または懸濁液；食用泡沫またはホイップ；または水中油型液体エマルジョンまたは油中水型液体エマルジョンとして提供されうる。
【００３４】
例えば、錠剤またはカプセルの形態における経口投与の場合、活性薬物成分を経口で非毒性の医薬上許容される不活性担体、例えば、エタノール、グリセロール、水などと合わせることができる。粉末は、該化合物を適当な微小な大きさに粉砕し、同様に粉砕した医薬担体、例えば、デンプンまたはマンニトールなどの食用炭水化物と混合することによって調製される。フレーバー、保存料、分散剤および着色料もまた、配合することができる。
【００３５】
カプセルは、上記のように粉末混合物を調製し、成形したゼラチンシースに充填することによって製造される。充填操作の前に、コロイド状シリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固体ポリエチレングリコールなどの滑剤（glidant）および滑沢剤（lubricant）を粉末混合物に加えることができる。カプセルを摂取したときの薬剤の利用性を改善するために、寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤を加えることもできる。
【００３６】
さらに、所望または必要により、適当な結合剤、滑沢剤、崩壊剤および着色料を該混合物に配合することもできる。適当な結合剤は、デンプン、ゼラチン、天然糖類、例えば、グルコースまたはベータ−ラクトース、コーン甘味料、天然および合成ゴム、例えば、アラビアゴム、トラガカントゴムまたはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどを包含する。これらの投与形態において使用される滑沢剤は、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどを包含する。崩壊剤は、限定するものではないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどを包含する。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、造粒またはスラッギングし、滑沢剤および崩壊剤を加え、打錠することによって処方される。粉末混合物は、適当に粉砕された化合物を上記のような希釈剤または基剤と、および所望により、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチンまたはポリビニルピロリドンなどの結合剤、パラフィンなどの溶液遅延剤、第４級塩などの吸収促進剤および／またはベントナイト、カオリンまたはリン酸二カルシウムなどの吸収剤と混合することによって調製される。粉末混合物は、シロップ、デンプンペースト、アラビアゴム粘液またはセルロースもしくはポリマー材料の溶液などの結合剤を用いて湿らし、次いで、スクリーンに押し通すことによって造粒することができる。造粒の別法として、粉末混合物を錠剤機に付すことができ、その結果、不完全に成形されたスラッグが砕かれて顆粒になる。該顆粒は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油の添加によって、滑らかにして、錠剤成形ダイへの粘着を防ぐことができる。滑らかになった混合物を次いで、打錠する。本発明の化合物は、また、自由流動性の不活性担体と合わせ、造粒またはスラッギング工程を行うことなく直接、打錠することができる。セラックのシーリングコート、糖またはポリマー材料のコーティング、およびワックスの光沢コーティングからなる透明または不透明な保護コーティングを提供することができる。染料をこれらのコーティングに加えて、異なる単位投与量を識別することができる。
【００３７】
溶液、シロップまたはエリキシルなどの経口流体は、一定量が所定量の化合物を含有するように、単位投与形態において調製することができる。シロップは、化合物を適当に風味付けした水性溶液中に溶解することによって調製することができ、一方、エリキシルは、非毒性アルコール性ビヒクルの使用によって調製される。懸濁液は、化合物を非毒性ビヒクル中に分散することによって処方することができる。エトキシル化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤および乳化剤、保存料、ペパーミント油などのフレーバー添加物、または天然甘味料もしくはサッカリンもしくは他の人工甘味料などを加えることもできる。
【００３８】
適宜、経口投与用の投与単位処方をマイクロカプセルに入れることができる。該処方は、また、例えば、粒状材料をポリマー、ワックスなどでコーティングまたはその中に包埋することによって、放出を延長または抑制するように調製することもできる。
【００３９】
式Ｉの化合物、ならびにその塩、溶媒和物および生理学上機能的な誘導体は、また、リポソーム送達系の形態、例えば、小型単層小胞、大型単層小胞および多層小胞の形態において投与することもできる。リポソームは、種々のリン脂質、例えば、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンから形成することができる。
【００４０】
式Ｉの化合物、ならびにその塩、溶媒和物および生理学上機能的な誘導体は、また、化合物分子が結合する個々の担体として、モノクローナル抗体を使用することによって送達されてもよい。該化合物は、また、目標設定可能な薬物担体として、可溶性ポリマーと結合させてもよい。かかるポリマーは、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルタミドフェノール、またはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシデポリリジンを包含することができる。さらに、化合物は、薬物の放出制御の達成において有用なある種の生体分解性ポリマー、例えば、ポリ乳酸、ポレプシロンカプロラクトン（polepsilon caprolactone）、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレートおよびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポリマーに結合させてもよい。
【００４１】
経皮投与に適応させた医薬処方は、レシピエントの上皮との密接な接触を長時間維持することを意図した分離したパッチとして提供されてもよい。例えば、活性成分は、Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)において一般に記載されるように、イオン導入によってパッチから送達されてもよい。
【００４２】
局所投与に適応させた医薬処方は、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エーロゾルまたは油として処方されてもよい。
【００４３】
目または他の外部組織、例えば、口および皮膚の治療の場合、該処方は、好ましくは、局所軟膏またはクリームとして塗布される。軟膏に処方される場合、活性成分は、パラフィンまたは水のいずれかとの混和性軟膏基剤と共に用いてもよい。別法では、活性成分を水中油型クリーム基剤または油中水型基剤を用いてクリームに処方してもよい。
【００４４】
目への局所投与に適応させた医薬処方は、活性成分が適当な担体、特に水性溶媒中に溶解または懸濁された点眼液を包含する。
【００４５】
口における局所投与に適応させた医薬処方は、ロゼンジ、パステル（pastille）および口内洗浄剤を包含する。
【００４６】
直腸投与に適応させた医薬処方は、座剤または浣腸として提供されてもよい。
【００４７】
担体が固体である鼻腔投与に適応させた医薬処方は、例えば、２０〜５００ミクロンの粒径を有する粗粉末を包含し、それは、鼻から吸うことによって、すなわち、鼻に限りなく近付けて維持した粉末の入った容器からの鼻道を介する迅速な吸入によって、投与される。鼻腔スプレーまたは点鼻液として投与するための担体が液体である適当な処方は、活性成分の水性または油性溶液を包含する。
【００４８】
吸入による投与に適応させた医薬処方は、種々の定量加圧エーロゾル、ネブライザーまたは吸入器によって生じうる微粒子ダストまたはミストを包含する。
【００４９】
膣投与に適応させた医薬処方は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡沫またはスプレー処方として提供されてもよい。
【００５０】
非経口投与に適応させた医薬処方は、抗酸化剤、バッファー、静菌剤、および処方を意図されたレシピエントの血液と等張にする溶質を含有していてもよい水性および非水性滅菌注射溶液；ならびに懸濁化剤および増粘剤を含んでいてもよい水性および非水性滅菌懸濁液を包含する。該処方は、単回投与または複数回投与用容器、例えば、密閉アンプルおよびバイアル中において提供されてもよく、使用直前に、滅菌液体担体、例えば、注射用水の添加のみを必要とする凍結乾燥状態において保管されてもよい。即席の注射溶液および懸濁液は、滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製されうる。
【００５１】
当然のことながら、特に上記した材料の他に、該処方は、目的の処方の型を考慮して、当該分野で慣用の他の薬剤を含んでいてもよい。例えば、経口投与に適当なものには、フレーバー剤がある。
【００５２】
本発明の化合物の治療上有効量は、例えば、動物の年齢および体重、治療を必要としている正確な状態およびその重篤度、処方の性質、および投与経路を包含する多くの因子に依存し、最終的には、担当の内科医または獣医の裁量によるであろう。しかしながら、限定するものではないが、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；骨髄抑制；慢性関節リウマチ；ＣＯＰＤ；喘息；乾癬；急性ニューロン損傷；心不全；卒中、骨関節炎；および虚血再潅流傷害を包含するｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２不均衡または不適当な活性によって引き起こされる疾患の治療または予防のための式Ｉの化合物の有効量は、一般に、１日につき、レシピエント（哺乳動物）の体重１ｋｇあたり０．１〜１００ｍｇ、より普通には、１日につき体重１ｋｇあたり１〜１０ｍｇであろう。かくして、７０ｋｇの成体哺乳動物の場合、１日あたりの実際の量は、通常、７０〜７００ｍｇであり、該量は、１日１回で、またはより普通には、合計した１日量が同一となるように１日複数回（例えば、２回、３回、４回、５回または６回）の分割投与量において投与してもよい。その塩または溶媒和物または生理学上機能的な誘導体の有効量は、式Ｉの化合物自体の有効量の割合として決定すればよい。同様の投与量が、上記した他の状態の治療に適当であると考えられる。
【００５３】
調製法
一般式Ｉの化合物は、下記の合成スキームによって一部示されるような当該分野で既知の有機合成法によって調製されうる。下記のスキームの全てにおいて、所望により、一般的な化学の原理にしたがって、感受性または反応性基のための保護基を用いることは、よく理解されている。保護基は、有機合成の標準的な方法にしたがって扱われる（T. W. Green および P. G. M. Wuts (1991) Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons）。これらの基は、当業者に容易に明らかになる方法を用いて、化合物合成の好都合な段階において除去される。方法ならびに反応条件の選択およびそれらの実行順序は、式Ｉの化合物の調製と調和するものとする。当業者は、立体中心が式Ｉの化合物に存在するか否かを理解するであろう。したがって、本発明は、両方の可能な立体異性体を包含し、ラセミ化合物だけでなく、個々のエナンチオマーも同様に包含する。単一のエナンチオマーとしての化合物が望ましい場合、それは、立体特異的合成または最終産物もしくはいずれかの好都合な中間体の分割によって得てもよい。最終産物、中間体、または出発物質の分割は、当該分野で既知のいずれかの適当な方法によって行えばよい。例えば、E. L. Eliel, S. H. WilenおよびL. N. ManderによるStereochemistry of Organic Compounds（Wiley-Interscience, 1994）を参照のこと。
【００５４】
より特別には、式Ｉの化合物は、スキームＡの製法またはその変形によって製造することができる。下記に、本発明のいくつかの代表的化合物がスキームＡに記載された製法またはその変形にしたがって、どのように製造することができるかを記載する。
【００５５】
スキームＡ
【化７】
【００５６】
スキームＡにおいて、基Ｒ、Ｗ、Ｒ１およびＲ２は、式Ｉにおいて定義されたとおりである。式Ｉの化合物を製造するための製法Ａの変形の一例として、最終工程において、式ＩＩの化合物を式４の化合物に加える必要はなく、むしろ、式ＨＮＲ３Ｒ４の化合物を加えることができる。ここに、基−ＮＲ３Ｒ４は、後で−ＮＲ１Ｒ２に変換可能な基であり；わずかなかかる変形を下記に例示する。
【００５７】
特別な具体例
本明細書中で使用される場合、これらの製法、スキームおよび実施例において使用される記号および慣習は、現代の科学文献、例えば、the Journal of the American Chemical Societyまたはthe Journal of Biological Chemistryにおいて使用されるものと一致する。標準的な１文字または３文字略語は、アミノ酸残基を示すために一般に使用されており、それらは、別記しないかぎり、Ｌ−配置であるとする。別記しないかぎり、全ての出発材料は、商業的供給者から入手し、さらに精製することなく用いた。特に、下記の略語を実施例および本明細書を通して使用する。
【００５８】
ｇ（グラム）； ｍｇ（ミリグラム）；
Ｌ（リットル）； ｍＬ（ミリリットル）；
μＬ（マイクロリットル）； ｐｓｉ（平方インチあたりのポンド）；
Ｍ（モル濃度）； ｍＭ（ミリモル濃度）；
ｉ．ｖ．（静脈内）； Ｈｚ（ヘルツ）；
ＭＨｚ（メガヘルツ）； ｍｏｌ（モル）；
ｍｍｏｌ（ミリモル）； ｒｔ（室温）；
ｍｉｎ（分）； ｈ（時間）；
ｍｐ（融点）； ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）；
Ｔｒ（保持時間）； ＲＰ（逆相）；
ＭｅＯＨ（メタノール）； ｉ−ＰｒＯＨ（イソプロパノール）；
ＴＥＡ（トリエチルアミン）； ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）；
ＴＦＡＡ（無水トリフルオロ酢酸）； ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）；
ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）； ＡｃＯＥｔ（酢酸エチル）；
ＤＭＥ（１，２−ジメトキシエタン）； ＤＣＭ（ジクロロメタン）；
ＤＣＥ（ジクロロエタン）； ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）；
ＤＭＰＵ（Ｎ，Ｎ’−ジメチルプロピレン尿素）；
ＣＤＩ（１，１−カルボニルジイミダゾール）；
ＩＢＣＦ（クロロギ酸イソブチル）； ＨＯＡｃ（酢酸）；
ＨＯＳｕ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）；
ＨＯＢＴ（１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）；
ｍＣＰＢＡ（メタ−クロロ過安息香酸； ＥＤＣ（塩酸エチルカルボジイミド）；
ＢＯＣ（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）；
ＦＭＯＣ（９−フルオレニルメトキシカルボニル）；
ＤＣＣ（ジシクロヘキシルカルボジイミド）；
ＣＢＺ（ベンジルオキシカルボニル）；
Ａｃ（アセチル）； ａｔｍ（気圧）；
ＴＭＳＥ（２−（トリメチルシリル）エチル）；
ＴＭＳ（トリメチルシリル）；
ＴＩＰＳ（トリイソプロピルシリル）； ＴＢＳ（ｔ−ブチルジメチルシリル）；
ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）；ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）
ＡＴＰ（アデノシン三リン酸）； ＨＲＰ（西洋ワサビペルオキシダーゼ）；
ＤＭＥＭ（ダルベッコ修飾イーグル培地）；
ＨＰＬＣ（高圧液体クロマトグラフィー）；
ＢＯＰ（ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸塩化物）；
ＴＢＡＦ（フッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム）；
ＨＢＴＵ（Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）；
ＨＥＰＥＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）；
ＤＰＰＡ（アジ化ジフェニルホスホリル）；
ｆＨＮＯ３（発煙ＨＮＯ３）；および
ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）。
【００５９】
エーテルに関する全ての言及は、ジエチルエーテルであり、ブラインは、ＮａＣｌの飽和水性溶液をいう。別記しないかぎり、全ての温度は℃（摂氏）で表される。全ての反応は、別記しないかぎり、不活性雰囲気下、室温で行われる。
【００６０】
１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｃｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥ−４００で記録された。化学シフトは、百万分率（ｐｐｍ，δ単位）で表される。カップリング定数は、ヘルツ（Ｈｚ）単位である。分裂パターンは、見かけの多重度を示し、ｓ（シングレット）、ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｑ（カルテット）、ｑｕｉｎｔ（クインテット）、ｍ（マルチプレット）、ｂｒ（幅広）として示す。
【００６１】
ＬＣ−ＭＳは、マイクロマスＺＭＤおよびＷａｔｅｒｓ２６９０で記録された。全ての質量スペクトルは、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）法で得られた。反応のほとんどは、ＵＶ光、５％エタノール性燐モリブデン酸またはｐ−アニスアルデヒド溶液を用いて視覚化される０．２５ｍｍ Ｅ．Ｍｅｒｃｋシリカゲルプレート（６０Ｆ−２５４）上の薄層クロマトグラフィーによってモニターされた。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、シリカゲル（２３０−４００メッシュ，Ｍｅｒｃｋ）上で行われた。
【実施例】
【００６２】
実施例１．
２−（２，６−ジメトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉａ）
【化８】
【００６３】
ａ．［２−（３−メトキシ−フェニル）−エチル］−尿素（２）
【化９】
２−（３−メトキシ−フェニル）−エチルアミン（１）（５０．０ｇ，３３１ｍｍｏｌ）および濃ＨＣｌ（２７．６ｍＬ）の水（３５０ｍＬ）中溶液に、シアン酸カリウム（２８．２ｇ，３４８ｍｍｏｌ）を加え、５０℃で２時間、次いで、室温で２日間攪拌した。形成された沈殿をろ過によって収集した。該固体を水で洗浄し、減圧下で乾燥させて、標題化合物を得た（５３．４ｇ，８３％）。
ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋１９５
【００６４】
ｂ．１−［２−（３−メトキシ−フェニル）−エチル］−ピリミジン−２，４，６−トリオン（３）
【化１０】
ＮａＯＥｔ（１４４ｍｍｏｌ，３．３ｇのＮａから新たに調製された）のＥｔＯＨ（８０ｍＬ）中溶液に、マロン酸エチル（２）（２２ｍＬ，１４４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２５０ｍＬ）中溶液を加えた。該混合物を還流し、次いで、［２−（３−メトキシ−フェニル）−エチル］−尿素（２）（２３．３ｇ，１２０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３００ｍＬ）中溶液を加えた。反応混合物を一晩還流し、次いで、室温に冷却した。該混合物を１Ｍ ＨＣｌ水溶液で注意深く酸性化し、次いで、水（１Ｌ）中に注ぎ入れた。形成された沈殿をろ過によって収集し、水で洗浄し、次いで、減圧下で乾燥させて、標題化合物を得た（２３．２ｇ，７４％）。
ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋２６３
【００６５】
ｃ．２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）
【化１１】
１−［２−（３−メトキシ−フェニル）−エチル］−ピリミジン−２，４，６−トリオン（３）（１８．５ｇ，７０．３ｍｍｏｌ）のＰＯＣｌ３（１７５ｍＬ）中懸濁液を８０℃で一晩攪拌した。溶媒を蒸発によって除去した。残渣に、氷水を加え、次いで、ＮａＯＨ水溶液で塩基性化した。該混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、次いで、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。蒸発後、残渣をＭｅＯＨから再結晶化させて、標題化合物を得た（１６．１ｇ，８７％）。
ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋２６３
【００６６】
ｄ．２−（２，６−ジメトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉａ）
【化１２】
２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）（１０５ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中懸濁液に、２，６−ジメトキシアニリン（１５３ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、７５℃で一晩攪拌した。冷却後、混合物をＢｏｎｄＥｌｕｔＲ（登録商標）ＳＣＸ（Varian Incorporated）で精製し、次いで、ＭｅＯＨから再結晶化して、標題化合物を得た（３１．４ｍｇ，２１％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．４８（ｓ，１Ｈ），７．６４（ｂｒ，１Ｈ），７．２６（ｔ，１Ｈ），６．９６（ｓ，２Ｈ），６．７４（ｄ，２Ｈ），６．３２（ｂｒ，１Ｈ），３．９２（ｔ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｓ，６Ｈ）および２．９３（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３８０
【００６７】
実施例２．
２−（１Ｈ−インダゾール−５−イルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｂ）
【化１３】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および１Ｈ−インダゾール−５−イルアミンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１３．００（ｂｒ，１Ｈ），９．６０（ｓ，１Ｈ），８．３６（ｂｒ，１Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），７．６９（ｄ，１Ｈ），７．５１（ｍ，２Ｈ），７．１０−６．９５（２Ｈ），６．３５（ｓ，１Ｈ），３．９９（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９７（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３６０
【００６８】
実施例３．
９−メトキシ−２−（２−メトキシ−６−メチル−フェニルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｃ）
【化１４】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−メトキシ−６−メチル−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．７１（ｂｒ，１Ｈ），７．７１（ｂｒ，１Ｈ），７．３５−６．８０（５Ｈ），６．３９（ｂｒ，１Ｈ），３．９２（ｂｒ，２Ｈ），３．８３（ｂｒ，３Ｈ），３．７４（ｂｒ，３Ｈ），２．９４（ｔ，２Ｈ）および２．１４（ｂｒ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３６４
【００６９】
実施例４．
２−（１Ｈ−インダゾール−６−イルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｄ）
【化１５】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および１Ｈ−インダゾール−６−イルアミンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１２．９５（ｂｒ，１Ｈ），９．７６（ｓ，１Ｈ），８．６０（ｓ，１Ｈ），７．９６（ｓ，１Ｈ），７．７２−７．６０（２Ｈ），７．１５−６．９５（３Ｈ），６．４２（ｓ，１Ｈ），４．０１（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）および２．９８（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３６０
【００７０】
実施例５．
２−（２−ブロモ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｅ）
【化１６】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−ブロモ−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．０６（ｂｒ，１Ｈ），７．７６（ｂｒ，１Ｈ），７．６９（２Ｈ），７．４１（ｔ，１Ｈ），７．１６（ｔ，１Ｈ），７．０５−６．９５（２Ｈ），６．４７（ｂｒ，１Ｈ），３．９６（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３９８，４００
【００７１】
実施例６．
３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−ベンゼンスルホンアミド（Ｉｆ）
【化１７】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および３−アミノ−ベンゼンスルホンアミドから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．９１（ｓ，１Ｈ），８．１７（ｄ，１Ｈ），８．１１（ｓ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．５４（ｔ，１Ｈ），７．４８（ｄ，１Ｈ），７．３９（ｂｒ，２Ｈ），７．０５−６．９８（２Ｈ），６．３７（ｓ，１Ｈ），４．００（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）および２．９８（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３９９
【００７２】
実施例７．
２−（２−クロロ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｇ）
【化１８】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−クロロ−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．１０（ｂｒ，１Ｈ），７．９１（ｂｒｄ，１Ｈ），７．７０（ｂｒｄ，１Ｈ），７．５３（ｄｄ，１Ｈ），７．３７（ｔ，１Ｈ），７．２１（ｔ，１Ｈ），７．０５−６．９５（２Ｈ），６．５５（ｂｒ，１Ｈ），３．９７（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３５４
【００７３】
実施例８．
２−（２，６−ジメチル−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｈ）
【化１９】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２，６−ジメチル−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ ２つの異性体混合物として（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．９６および８．８７（ｂｒ，１Ｈ），７．７５および７．２９（ｄ，１Ｈ），７．２３−６．８０（５Ｈ），６．３７および５．３３（ｂｒ，１Ｈ），３．９６および３．９２（ｔ，２Ｈ），３．８４および３．７８（ｓ，３Ｈ），２．９５（ｔ，２Ｈ）および２．１８および２．１６（ｓ，６Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３４８
【００７４】
実施例９．
２−（２−ブロモ−６−フルオロ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｉ）
【化２０】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−ブロモ−６−フルオロ−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．２６（ｂｒ，１Ｈ），７．７２（ｂｒ，１Ｈ），７．５７（ｂｒｄ，１Ｈ），７．３４（ｂｒ，２Ｈ），７．０５−６．９５（２Ｈ），６．３７（ｂｒ，１Ｈ），３．９４（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋４１６，４１８
【００７５】
実施例１０．
２−（３−メトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｊ）
【化２１】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および３−メトキシアニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．５９（ｓ，１Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ），７．５２（ｂｒ，１Ｈ），７．３０（ｄ，１Ｈ），７．２３（ｔ，１Ｈ），７．０５−６．９５（２Ｈ），６．６３（ｄｄ，１Ｈ），６．３５（ｓ，１Ｈ），３．９８（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．７５（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３５０
【００７６】
実施例１１．
２−（２−ヒドロキシ−６−メチル−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｋ）
【化２２】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−ヒドロキシ−６−メチル−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ，６０℃にて）δ９．３９（ｂｒ，１Ｈ），８．６０（ｂｒ，１Ｈ），７．６１（ｂｒ，１Ｈ），７．０５−６．９５（３Ｈ），６．７５（ｄ，１Ｈ），６．７３（ｄ，１Ｈ），６．３４（ｂｒ，１Ｈ），３．９５（ｔ，２Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），２．９５（ｔ，２Ｈ），および２．１９（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３５０
【００７７】
実施例１２．
９−メトキシ−２−（４−メトキシ−ビフェニル−３−イルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｌ）
【化２３】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および３−アミノ−４−メトキシ−ビフェニルから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．８５（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｂｒ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．６０（ｄ，２Ｈ），７．４６（ｔ，２Ｈ），７．３８（ｄｄ，１Ｈ），７．３３（ｔ，１Ｈ），７．１６（ｄ，１Ｈ），７．０２（ｄｄ，１Ｈ），６．９８（ｄ，１Ｈ），６．７２（ｂｒ，１Ｈ），３．９７（ｔ，２Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋４２６
【００７８】
実施例１３．
３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−安息香酸エチルエステル（Ｉｍ）
【化２４】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および３−アミノ−安息香酸エチルエステルから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．８４（ｓ，１Ｈ），８．２６（ｓ，１Ｈ），８．２１（ｄ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．６２（ｄ，１Ｈ），７．４９（ｔ，１Ｈ），７．０５−６．９７（２Ｈ），６．３６（ｓ，１Ｈ），４．３３（ｑ，２Ｈ），３．９９（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），２．９７（ｔ，２Ｈ）および１．３４（ｔ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３９２
【００７９】
実施例１４．
９−メトキシ−２−（２−メトキシ−フェニルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｎ）
【化２５】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−メトキシ−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．７４（ｓ，１Ｈ），８．２４（ｂｒ，１Ｈ），７．６９（ｄ，１Ｈ），７．１２−６．９２（５Ｈ），６．７０（ｂｒ，１Ｈ），３．９７（ｔ，２Ｈ），３．８７（ｓ，３Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３５０
【００８０】
実施例１５．
９−メトキシ−２−（２−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｏ）
【化２６】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−トリフルオロメチル−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．１０（ｂｒ，１Ｈ），７．９０−７．３５（５Ｈ），６．９８（２Ｈ），６．４２（ｂｒ，１Ｈ），３．９４（ｂｒｔ，２Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ）および２．９５（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３８８
【００８１】
実施例１６．
２−（４−クロロ−２，６−ジメチル−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｐ）
【化２７】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および４−クロロ−２，６−ジメチル−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．７３（ｂｒ，１Ｈ），７．７２（ｂｒ，１Ｈ），７．１９（ｓ，２Ｈ），７．０３−６．９５（２Ｈ），６．３６（ｂｒ，１Ｈ），３．９５（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），２．９６（ｔ，２Ｈ）および２．１８（ｓ，６Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３８２
【００８２】
実施例１７．
９−メトキシ−２−（キノリン−５−イルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｑ）
【化２８】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および５−アミノ−キノリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．６８（ｂｒ，１Ｈ），８．９３（ｄｄ，１Ｈ），８．４７（ｄ，１Ｈ），７．８９（２Ｈ），７．７９（ｔ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．５７（ｄｄ，１Ｈ），７．０３−６．９７（２Ｈ），６．４９（ｂｒ，１Ｈ），３．９７（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９７（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３７１
【００８３】
実施例１８．
２−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｒ）
【化２９】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−クロロ−５−メトキシ−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．９９（ｂｒ，１Ｈ），７．７６−７．６０（２Ｈ），７．４２（ｄ １Ｈ），７．０５−６．９５（２Ｈ），６．８０（ｄｄ，１Ｈ），６．６０（ｓ，１Ｈ），３．９７（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．７６（ｓ，３Ｈ）および２．９６（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３８４
【００８４】
実施例１９．
２−［Ｎ’−（２−ブロモ−フェニル）−ヒドラジノ］−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｓ）
【化３０】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および（２−ブロモ−フェニル）−ヒドラジンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ、６０℃）δ９．１９（ｂｒ，１Ｈ），７．６６（ｂｒｄ，１Ｈ），７．４６（ｄ，１Ｈ），７．４４（ｂｒ，１Ｈ），７．２０（ｔ，１Ｈ），６．９８−６．７５（３Ｈ），６．７１（ｔ，１Ｈ），６．２３（ｓ，１Ｈ），３．９４（ｔ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ）および２．９３（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋４１３，４１５
【００８５】
実施例２０．
９−メトキシ−２−（Ｎ’−メチル−Ｎ’−フェニル−ヒドラジノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｔ）
【化３１】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）およびＮ−メチル−Ｎ−フェニル−ヒドラジンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ、６０℃）δ９．１２（ｂｒ，１Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ），７．２２（ｔ，２Ｈ），６．９５−６．７５（５Ｈ），６．２４（ｓ，１Ｈ），３．９６（ｂｒ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．１６（ｓ，３Ｈ）および２．９４（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３４９
【００８６】
実施例２１．
２−（２−アミノ−エチルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｕ）ＨＣｌ塩
【化３２】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）およびＮ−Ｂｏｃ−エチレンジアミンから、実施例１ｄのように調製され、次いで、ＨＣｌで処理した。
１Ｈ−ＮＭＲ ２つの異性体の混合物として（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．２５−８．４０（１Ｈ），８．３２および７．７０（ｄ，１Ｈ），８．１２および８．０２（ｂｒ，３Ｈ），７．０７−７．００（ｍ，２Ｈ），６．８０および６．３３（ｓ，１Ｈ），４．０４および３．９８（ｔ，２Ｈ），３．８８および３．８５（ｓ，３Ｈ），３．８０および３．６１（ｑ，２Ｈ）および３．０８−２．９４（４Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋２８７。３３３Ｋで得られたスペクトルは、単一の異性体を示した。
【００８７】
実施例２２．
９−メトキシ−２−（２−ピロリジン−１−イル−エチルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｖ）ＨＣｌ塩
【化３３】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−ピロリジン−１−イル−エチルアミンから、実施例１ｄのように調製され、次いで、ＨＣｌで処理した。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．６４（ｄ，１Ｈ），７．５９（ｂｒ，１Ｈ），７．００−６．９２（２Ｈ），６．１８（ｓ，１Ｈ），３．９２（ｔ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｍ，２Ｈ），２．９１（ｔ，２Ｈ），２．９０−２．５０（６Ｈ）および１．７６（４Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３４１
【００８８】
実施例２３．
２−（２−ジメチルアミノ−エチルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｗ）
【化３４】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−ジメチルアミノ−エチルアミンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．８１（ｂｒ，１Ｈ），７．７８（ｄ，１Ｈ），７．０１−６．９５（２Ｈ），６．１６（ｓ，１Ｈ），３．９４（ｔ，２Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），３．６２（ｂｒ，２Ｈ），３．２１（ｂｒ，２Ｈ），２．９３（ｔ，２Ｈ）および２．８３（ｓ，６Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３１５
【００８９】
実施例２４．
２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｘ）
【化３５】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および２−ヒドロキシ−エチルアミンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．６２（ｄ１Ｈ），７．５４（ｔ，１Ｈ），７．００−６．９３（２Ｈ），６．１７（ｓ，１Ｈ），４．８５（ｔ，１Ｈ），３．９１（ｔ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ）３．５０（ｑ，２Ｈ），２．９１（ｔ，２Ｈ）および２ＨはＨ２Ｏと重複した；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋２８８
【００９０】
実施例２５．
９−メトキシ−２−［（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミノ］−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｙ）ＨＣｌ塩
【化３６】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミンから、実施例１ｄのように調製され、次いで、ＨＣｌで処理した。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ，６０℃）δ８．０７（ｄ，１Ｈ），７．０３−６．９５（２Ｈ），６．５６（ｓ，１Ｈ），４．００（ｔ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），３．８６（２Ｈ 重複），３．５８（ｔ，２Ｈ），３．２９（ｓ，３Ｈ），３．２５（ｓ，３Ｈ）および３．００（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３１６
【００９１】
実施例２６．
９−メトキシ−２−（４−メトキシ−ベンジルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉｚ）
【化３７】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および４−メトキシ−ベンジルアミンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．８９（ｔ，１Ｈ），７．６３（ｄ，１Ｈ），７．２５（ｄ，２Ｈ），７．０−６．９３（２Ｈ），６．９０（ｄ，２Ｈ），６．１６（ｓ，１Ｈ），４．４５（ｄ，２Ｈ），３．９２（ｔ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ）および２．９２（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３６４
【００９２】
実施例２７．
９−メトキシ−２−（３−メトキシ−ベンジルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（Ｉａａ）
【化３８】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および３−メトキシ−ベンジルアミンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．９５（ｔ，１Ｈ），７．６５（ｄ，１Ｈ），７．２５（ｔ，１Ｈ），７．００−６．８５（４Ｈ），６．８２（ｄｄ，１Ｈ），６．１９（ｓ，１Ｈ），４．５０（ｄ，２Ｈ），３．９２（ｔ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ）および２．９２（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３６４
【００９３】
実施例２８．
３−ブロモ−Ｎ−［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（Ｉａｂ）
【化３９】
【００９４】
ａ．２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（５）
【化４０】
標題化合物は、２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（４）および３−ニトロ−アニリンから、実施例１ｄのように調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１０．１０（ｓ，１Ｈ），８．８７（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｄ，１Ｈ），７．８８（ｍ，１Ｈ），７．７３（ｄ，１Ｈ），７．６３（ｔ，１Ｈ），７．０２（ｍ，２Ｈ），６．３８（ｓ，１Ｈ），４．０１（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）および２．９９（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３６５
【００９５】
ｂ．２−（３−アミノ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（６）
【化４１】
２−（３−ニトロ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（５）（５２５．４ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（４０ｍＬ）中溶液に、Ｚｎ粉末（約３００ｍｇ）を加え、室温で３時間、次いで、４０℃で一晩攪拌した。冷却後、ＭｅＯＨを該混合物に加え、不溶性物質をろ過により除去した。該ＭｅＯＨ溶液をＢｏｎｄＥｌｕｔＲ ＳＣＸ（Varian Incorporated）で精製し、次いで、ＢｏｎｄＥｌｕｔＲ ＮＨ２（Variant Incorporated）に通過させた。得られた固体をＭｅＯＨで洗浄して、標題化合物を得た（２１５．１ｍｇ，４６％）。
ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３３５
【００９６】
ｃ．３−ブロモ−Ｎ−［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド（Ｉａｂ）
【化４２】
２−（３−アミノ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（６）（２０．０ｍｇ，０．０６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）中混合物に、トリエチルアミン（１３μＬ，０．０９ｍｍｏｌ）および３−ブロモベンゾイルクロリド（１０μＬ，０．０７ｍｍｏｌ）を加え、５０℃で２時間攪拌した。該混合物を濃ＨＣｌでクエンチし、ＢｏｎｄＥｌｕｔＲ ＳＣＸ（Varian Incorporated）で精製した。形成された固体をＣＨ２Ｃｌ２で洗浄して、標題化合物を得た（２５．３ｍｇ，８１％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１０．４３（ｓ，１Ｈ），９．６８（ｓ，１Ｈ），８．１５（ｔ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），７．９７（ｄｔ，１Ｈ），７．８１（ｄｄｄ，１Ｈ），７．７５（ｂｒｄ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．５１（ｔ，１Ｈ），７．３６（ｄｔ，１Ｈ），７．３１（ｔ，１Ｈ），７．０５−６．９８（２Ｈ），６．４２（ｓ，１Ｈ），３．９９（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９７（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋５１７，５１９
【００９７】
実施例２９．
シクロペンタンカルボン酸［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−アミド（Ｉａｃ）
【化４３】
標題化合物は、２−（３−アミノ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（６）およびシクロペンタンカルボニルクロリドから、実施例２８ｃに記載の方法にしたがって調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．９２（ｓ，１Ｈ），９．６６（ｂｒ，１Ｈ），７．９１（ｓ，１Ｈ），７．６９（ｄ，１Ｈ），７．５７（ｂｒ，１Ｈ），７．２８−７．２０（２Ｈ），７．０５−６．９７（２Ｈ），６．４０（ｓ，１Ｈ），３．９８（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），２．９７（ｔ，２Ｈ），２．８０（ｍ，１Ｈ）および１．９２−１．５０（８Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋４３１
【００９８】
実施例３０．
３−ブロモ−Ｎ−［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンゼンスルホンアミド（Ｉａｄ）
【化４４】
標題化合物は、２−（３−アミノ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（６）および３−ブロモ−ベンゼンスルホニルクロリドから、実施例２８ｃに記載の方法にしたがって調製された。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１０．４７（ｂｒ，１Ｈ），９．６２（ｓ，１Ｈ），７．９５（ｔ，１Ｈ），７．９１（ｄｔ，１Ｈ），７．８３（ｄｄｄ，１Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ），７．６２−７．５４（２Ｈ），７．５３（ｔ，１Ｈ），７．１８（ｔ，１Ｈ），７．０５−６．９７（２Ｈ），６．７１（ｄｄ，１Ｈ），６．３４（ｓ，１Ｈ），３．９９（ｔ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）および２．９７（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋５５３，５５５
【００９９】
実施例３１．
２−メトキシ−Ｎ−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イル）−アセトアミド（Ｉａｅ）
【化４５】
【０１００】
ａ．２−アミノ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（７）
【化４６】
２−クロロ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（６）（９１９ｍｇ，３．５ｍｍｏｌ）のＮＨ３／ＥｔＯＨ（７ｍＬ）中懸濁液をオートクレーブ中、１２０℃で一晩攪拌した。冷却後、沈殿をろ過し、ＭｅＯＨで洗浄して、標題化合物を得た（８９８．３ｍｇ，定量的）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．９９（ｂ，１Ｈ），７．７１（ｄ，１Ｈ），７．４４（ｂ，１Ｈ），７．０１（ｄｄ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），６．２２（ｓ，１Ｈ），３．９５（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）および２．９７（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋２４３
【０１０１】
ｂ．２，４，６−トリクロロ−Ｎ−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イル）−ベンズアミド（Ｉａｅ）
【化４７】
２−アミノ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（７）（４０ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）のＣＨＣｌ３（３ｍＬ）中懸濁液に、ＤＭＡＰ（３０．１ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）および２，４，６−トリクロロベンゾイルクロリド（３７．５μＬ，０．２４ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で一晩攪拌した。冷却後、混合物をＢｏｎｄＥｌｕｔＲ ＳＣＸ（Varian Incorporated）、次いで、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（溶出液としてＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ＝５０／１）上で精製して、標題化合物を得た（１７．１ｍｇ，２４％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９０（ｄ，１Ｈ），７．４２（ｓ，２Ｈ），６．９５（ｄｄ，１Ｈ），６．８２（ｄ，１Ｈ），４．２７（ｔ，２Ｈ），３．９０（ｓ，３．１７）および３．０３（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋４４９
【０１０２】
実施例３２．
２−メトキシ−Ｎ−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イル）−アセトアミド（Ｉａｆ）
【化４８】
標題化合物は、２−アミノ−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オン（７）およびメトキシ−アセチルクロリドから、実施例３１ｂに記載の製法にしたがって得られた。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ７．７６（ｄ，１Ｈ），７．６１（ｓ，１Ｈ），７．０３（ｄｄ，１Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），４．１０（ｓ，２Ｈ），４．０６（ｔ，３Ｈ），３．８５（ｓ，１Ｈ）および３．００（ｔ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋３１５
【０１０３】
生物学的方法およびデータ
表１および２における代表的化合物によって示されるように、本発明の化合物は、そのｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２キナーゼ酵素阻害能のために、価値のある薬理学的性質を有する。下記は、各々、ｈＹＡＫ３およびＭＫ２阻害活性を測定するためのアッセイ法である。
【０１０４】
燐アクセプターとしてミエリン塩基性蛋白質のＳｅｒ１６４を用いるＹＡＫ３シンチレーション近接アッセイ
Ｓｅｒ１６４基質ペプチドの供給源：
ビオチン化したＳｅｒ１６４、Ｓ１６４Ａペプチド（ビオチニル−ＬＧＧＲＤＳＲＡＧＳ＊ＰＭＡＲＲ−ＯＨ）、Ｓｅｒ１６２がＡｌａ１６２に置換されたウシミエリン塩基性蛋白質（ＭＢＰ）のＣ末端由来の配列をCalifornia Peptide Research Inc.（Napa, CA）から購入し、その純度をＨＰＬＣで測定した。１６４位置でリン酸化が起こる（上記Ｓ＊でマークした）。該ペプチドの計算された分子量は、２１６６ダルトンであった。固体試料をＤＭＳＯ中に１０ｍＭで溶解し、アリコートし、使用するまで−２０℃で保管した。
【０１０５】
酵素の供給源：
ｈＹＡＫ３：ヒトＹＡＫ３のアミノ酸残基１２４−５２６（米国特許第６，３２３，３１８号において、配列番号２のａａ１２４−５２６）を含有するグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）−ｈＹａｋ３−Ｈｉｓ６をＳｆ９細胞におけるバキュロウイルス発現系から、グルタチオンセファロース４Ｂカラムクロマトグラフィー、次いで、Ｎｉ−ＮＴＡ−アガロースカラムクロマトグラフィーを用いて精製した。典型的には、６５％以上の純度が達成された。試料を、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１０％グリセロール、０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ、２５０ｍＭイミダゾール、１０ｍＭ β−メルカプトエタノール、ｐＨ８．０中において、使用するまで−８０℃で保管した。
【０１０６】
精製ｈＹＡＫ３のキナーゼアッセイ：
アッセイは、９６ウェル（Costar，カタログＮｏ．３７８９）または３８４ウェルプレート（Costar，カタログＮｏ．３７０５）中において行われた。反応（２０、２５、または４０μｌ容量において）混合物は、最終濃度２５ｍＭのＨｅｐｅｓバッファー、ｐＨ７．４；１０ｍＭ ＭｇＣｌ２；１０ｍＭ β−メルカプトエタノール；０．００２５％ Ｔｗｅｅｎ−２０；０．００１ｍＭ ＡＴＰ、０．１μＣｉの［γ−３３Ｐ］ＡＴＰ；精製ｈＹＡＫ３（７−１４ｎｇ／アッセイ；４ｎＭ最終濃度）；および４μＭ Ｓｅｒ１６４ペプチドを含有した。ＤＭＳＯ中で滴定された化合物は、５０μＭ〜０．５ｎＭの濃度範囲で評価された。ＤＭＳＯの最終的なアッセイ濃度は、５％を越えず、ＤＭＳＯを含有しない対照と比べて、１５％未満のＹＡＫ３活性喪失をもたらした。反応物を室温で２時間インキュベートし、ＰＢＳ、ｐＨ７．４、１０ｍＭ ＥＤＴＡ、０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、１ｍＭ ＡＴＰ中における０．１９μｇのストレプトアビジンシンチレーション近接ビーズ（Amersham Pharmacia Biotech，カタログＮｏ．ＲＰＮＱ０００７）を７５μｌ添加することによって、停止した。上記のアッセイ条件下、ＡＴＰに関するＫｍ（見かけ）は、７．２＋／−２．４μＭであると決定された。
【０１０７】
【表１】
ｐＩＣ５０＝−ｌｏｇ１０（ＩＣ５０）
【０１０８】
ＭＡＰＫＡＰ２キナーゼ（ＭＫ２）酵素アッセイ
γ−リン酸のＡＴＰからビオチン化ペプチド［ＮＨ２−Ｋ（ビオチン）−ＫＬＮＲＴＬＳＶＡ（SynPep Corporation, USA）］のセリン／スレオニン残基へのＭＫ２触媒性移動を測定するアッセイにおいて、化合物をＭＡＰＫＡＰ２キナーゼ（ＭＫ２）阻害活性について試験する。分析下の化合物は、ＤＭＳＯ中に１ｍＭまで溶解し、９６または３８４−ウェルポリプロピレンまたはポリスチレンプレート中において、ＤＭＳＯを用いて３倍連続希釈して、全部で１０−１２種類の濃度にする。１μＬの各濃度を、９６または３８４−ウェルの白色ポリスチレンアッセイプレートの対応するウェルに移す。最終容量２６μＬで、反応を行う。ＡＴＰ溶液（１０μＬ）を各ウェルに加え、ＭＫ２／ペプチド混合物（１５μＬ）の添加によって、反応を開始する。該ＡＴＰ溶液は、Ｈ２Ｏ中で調製し、２．６μＭの非放射性ＡＴＰ（SigmaUltra）および６．５μＣｉ／ｍＬの［γ−３３Ｐ］−ＡＴＰ（Amersham Pharmacia Biotech）から構成される。ＭＫ２／ペプチド混合物は、８６．７ｍＭ ＨＥＰＥＳ（SigmaUltra）、ｐＨ７．５、８．６７ｍＭ ＭｇＣｌ２（SigmaUltra）、０．００４３％Ｔｗｅｅｎ２０、１．７３ｍＭジチオトレイトール（冷凍１Ｍストックから新たに加える）、１．７３μＭペプチドおよび１．７３ｎＭ精製組み換えＭＫ２から構成される。アッセイ成分の最終濃度は、５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．００２５％Ｔｗｅｅｎ２０、１ｍＭジチオトレイトール、１μＭ ＡＴＰ、２．５μＣｉ／ｍＬ［γ−３３Ｐ］−ＡＴＰ、１μＭペプチド基質、および１ｎＭ ＭＫ２である。反応を４０分間進行させ、次いで、「停止溶液」（２０μＬ）の添加によって停止させ、次いで、「ビーズ混合物」（５０μＬ）を添加する。「停止溶液」は、５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ８、２．３０ｍＭ非放射性ＡＴＰ、および０．２３Ｍ ＥＤＴＡからなり、「ビーズ混合物」は、３ｍｇ／ｍＬストレプトアビジン−被覆性ポリビニルトルエンＳＰＡビーズ（Amersham Pharmacia Biotech）を含有するＰＢＳである。阻害剤を含まないこれらの条件下、反応は、約１５％のペプチド基質およびＡＴＰを消費する。プレートを約８時間静置し、次いで、ＴｏｐＣｏｕｎｔ ＮＸＴＴＭ（登録商標）（Packard）を用いて定量する。別法では、プレートを少なくとも約１時間静置させ、９００ｒｐｍで３分間遠心分離し、次いで、ＴｏｐＣｏｕｎｔ ＮＸＴＴＭ（Packard）を用いて定量する。対照は、各アッセイプレートに置かれ、ここに、正の対照（シグナルｍａｘ）は、化合物を含まないＤＭＳＯを１μＬ含有し、負の対照（シグナルｍｉｎ）は、化合物を含まないＤＭＳＯを１μＬ、さらに４．５μＬの０．５Ｍ ＥＤＴＡ、ｐＨ８（Invitrogen Corporation，ＧＩＢＣＯＴＭ）を含有する。ＭＫ２活性の阻害パーセントは、等式［１］
【数１】
［式中、シグナル試料は、化合物を含有する特定の試料ウェルにおいて観察されるシグナルであり、シグナルｍａｘおよびシグナルｍｉｎは、上記のとおりである］
を用いて、各化合物濃度について計算される。シグナルｍａｘおよびシグナルｍｉｎに用いられる値は、各プレート内に含まれる対応する対照ウェルの平均である。各化合物用量応答についてのデータは、阻害パーセント（ｙ） 対 化合物濃度（ｘ）としてプロットし、非線形回帰によって等式［２］
【数２】
［式中、Ｙ２は、ベースラインの阻害パーセントであり、Ｖｍａｘは、正味の最大阻害パーセント（ベースラインを減じた）であり、Ｋは、ＩＣ５０である］
に適合させる。記載のアッセイ条件下、ＡＴＰ濃度は、見かけのＡＴＰ Ｋｍをはるかに下回り、故に、ＩＣ５０値は、Ｋｉ値とほとんど等しい。各化合物に関する結果は、等式［３］
【数３】
を用いて計算されるｐＩＣ５０として記録する。
【０１０９】
【表２】
【０１１０】
本発明の有用性
上記の生物学的データは、明らかに、式Ｉの化合物が、限定するものではないが、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；骨髄抑制；慢性関節リウマチ；ＣＯＰＤ；喘息；乾癬；急性ニューロン損傷；心不全；卒中、骨関節炎；および虚血再潅流傷害を包含するｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２蛋白質が関与する病状の治療または予防に有用であることを示す。
【０１１１】
式Ｉの化合物は、特に、造血系の疾患、特に貧血の治療に有用である。かかる貧血は、無形成性貧血および骨髄異形成症候群からなる群から選択される貧血を包含する。かかる貧血は、また、貧血が癌、白血病およびリンパ腫からなる群から選択される原発性疾患の結果であるものを包含する。かかる貧血は、また、貧血が腎臓疾患、腎不全または腎障害からなる群から選択される原発性疾患の結果であるものを包含する。かかる貧血は、貧血が化学療法または放射能療法の結果であるもの、特に、化学療法が癌のための化学療法またはＨＩＶ感染に対するＡＺＴ治療であるものを包含する。かかる貧血は、貧血が骨髄移植または幹細胞移植の結果であるものを包含する。かかる貧血は、また、新生児の貧血を包含する。かかる貧血は、また、ウイルス、真菌、細菌または寄生虫感染の結果であるものを包含する。
【０１１２】
式Ｉの化合物は、また、正常な赤血球数を増加するために有用である。かかる増加は、種々の目的、特に、医学的目的、例えば、輸血に対する患者の準備および手術に対する患者の準備などの目的に望ましい。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
［式中、
Ｒ１は、水素、−ＮＨ２、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は、水素であるか；または
Ｒ２は、式
【化２】
（式中、
Ｗは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＣＨ３−、または−ＮＨ−であり；
Ｒは、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、−ＮＨ２、（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣＨ２−、独立して１〜３個のＣ１−６アルキル、ハロゲン、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣ（＝Ｏ）−、アセチル、ＮＨ２Ｃ（＝Ｏ）−、ＦＳＯ２−、−ＣＦ３、ＮＨ２ＳＯ２−、ジメチルアミノ；ＨＯＣＨ２−、ＣＨ３ＮＨＣ（＝Ｏ）−、ヒドロキシ、フェニルで置換されていてもよいフェニルであるか；または
Ｒは、式
【化３】
【化４】
で示される基であり、
但し、Ｗに対するＲの結合点が酸素または窒素である場合、ＷはＣＨ２であることはない）
で示される基である］
で示される化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的な誘導体。
【請求項２】
Ｒ１が水素またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２が水素であるか；または
Ｒ２が式
【化５】
［式中、Ｗは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＣＨ３−、または−ＮＨ−であり；
Ｒは、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、−ＮＨ２、（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣＨ２−、独立して１〜３個のＣ１−６アルキル、ハロゲン、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣ（＝Ｏ）−、−ＣＦ３、ＮＨ２ＳＯ２−、ヒドロキシ、フェニルで置換されていてもよいフェニルであるか；または
Ｒは、式
【化６】
で示される基であり、
但し、Ｗに対するＲの結合点が酸素または窒素である場合、ＷはＣＨ２であることはない］
で示される基である請求項１記載の式Ｉの化合物。
【請求項３】
治療上有効量の請求項１または２記載の化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的な誘導体を哺乳動物に投与することを特徴とする、哺乳動物において、ｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２蛋白質を阻害する方法。
【請求項４】
治療上有効量の請求項１または２記載の化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的な誘導体ならびに１以上の医薬上許容される担体、希釈剤および賦形剤を哺乳動物に投与することを特徴とする、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；骨髄抑制；慢性関節リウマチ；ＣＯＰＤ；喘息；乾癬；急性ニューロン損傷；心不全；卒中、骨関節炎；および虚血再潅流傷害からなる群から選択される障害を治療または予防する方法。
【請求項５】
２−（２，６−ジメトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項６】
２−（１Ｈ−インダゾール−５−イルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項７】
９−メトキシ−２−（２−メトキシ−６−メチル−フェニルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項８】
２−（１Ｈ−インダゾール−６−イルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項９】
２−（２−ブロモ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１０】
３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−ベンゼンスルホンアミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１１】
２−（２−クロロ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１２】
２−（２，６−ジメチル−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１３】
２−（２−ブロモ−６−フルオロ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１４】
２−（３−メトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１５】
２−（２−ヒドロキシ−６−メチル−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１６】
９−メトキシ−２−（４−メトキシ−ビフェニル−３−イルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１７】
３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−安息香酸エチルエステルである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１８】
９−メトキシ−２−（２−メトキシ−フェニルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１９】
９−メトキシ−２−（２−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２０】
２−（４−クロロ−２，６−ジメチル−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２１】
９−メトキシ−２−（キノリン−５−イルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２２】
２−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２３】
２−［Ｎ’−（２−ブロモ−フェニル）−ヒドラジノ］−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２４】
９−メトキシ−２−（Ｎ’−メチル−Ｎ’−フェニル−ヒドラジノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２５】
２−（２−アミノ−エチルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２６】
９−メトキシ−２−（２−ピロリジン−１−イル−エチルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２７】
２−（２−ジメチルアミノ−エチルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２８】
２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２９】
９−メトキシ−２−［（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミノ］−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３０】
９−メトキシ−２−（４−メトキシ−ベンジルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３１】
９−メトキシ−２−（３−メトキシ−ベンジルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３２】
３−ブロモ−Ｎ−［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３３】
シクロペンタンカルボン酸［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−アミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３４】
３−ブロモ−Ｎ−［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンゼンスルホンアミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３５】
２−メトキシ−Ｎ−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イル）−アセトアミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３６】
２，４，６−トリクロロ−Ｎ−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イル）−ベンズアミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３７】
２−メトキシ−Ｎ−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イル）−アセトアミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
［式中、
Ｒ１は、水素、−ＮＨ２、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は、水素であるか；または
Ｒ２は、式
【化２】
（式中、
Ｗは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＣＨ３−、または−ＮＨ−であり；
Ｒは、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、−ＮＨ２、（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣＨ２−、独立して１〜３個のＣ１−６アルキル、ハロゲン、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣ（＝Ｏ）−、アセチル、ＮＨ２Ｃ（＝Ｏ）−、ＦＳＯ２−、−ＣＦ３、ＮＨ２ＳＯ２−、ジメチルアミノ；ＨＯＣＨ２−、ＣＨ３ＮＨＣ（＝Ｏ）−、ヒドロキシ、フェニルで置換されていてもよいフェニルであるか；または
Ｒは、式
【化３】
【化４】
で示される基であり、
但し、Ｗに対するＲの結合点が酸素または窒素である場合、ＷはＣＨ２であることはない）
で示される基である］
で示される化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的な誘導体。
【請求項２】
Ｒ１が水素またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２が水素であるか；または
Ｒ２が式
【化５】
［式中、Ｗは、結合、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＣＨ３−、または−ＮＨ−であり；
Ｒは、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、−ＮＨ２、（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣＨ２−、独立して１〜３個のＣ１−６アルキル、ハロゲン、Ｃ１−６アルキルＯ−、Ｃ１−６アルキルＯＣ（＝Ｏ）−、−ＣＦ３、ＮＨ２ＳＯ２−、ヒドロキシ、フェニルで置換されていてもよいフェニルであるか；または
Ｒは、式
【化６】
で示される基であり、
但し、Ｗに対するＲの結合点が酸素または窒素である場合、ＷはＣＨ２であることはない］
で示される基である請求項１記載の式Ｉの化合物。
【請求項３】
治療上有効量の請求項１または２記載の化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的な誘導体を哺乳動物に投与することを特徴とする、哺乳動物において、ｈＹＡＫ３および／またはＭＫ２蛋白質を阻害する方法。
【請求項４】
治療上有効量の請求項１または２記載の化合物、あるいはその塩、溶媒和物または生理学上機能的な誘導体ならびに１以上の医薬上許容される担体、希釈剤および賦形剤を哺乳動物に投与することを特徴とする、好中球減少症；血球減少症；腎不全による貧血または慢性疾患、例えば、自己免疫または癌による貧血、および薬物誘導性貧血を包含する貧血症；赤血球増加症；骨髄抑制；慢性関節リウマチ；ＣＯＰＤ；喘息；乾癬；急性ニューロン損傷；心不全；卒中、骨関節炎；および虚血再潅流傷害からなる群から選択される障害を治療または予防する方法。
【請求項５】
２−（２，６−ジメトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項６】
２−（１Ｈ−インダゾール−５−イルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項７】
９−メトキシ−２−（２−メトキシ−６−メチル−フェニルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項８】
２−（１Ｈ−インダゾール−６−イルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項９】
２−（２−ブロモ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１０】
３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−ベンゼンスルホンアミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１１】
２−（２−クロロ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１２】
２−（２，６−ジメチル−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１３】
２−（２−ブロモ−６−フルオロ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１４】
２−（３−メトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１５】
２−（２−ヒドロキシ−６−メチル−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１６】
９−メトキシ−２−（４−メトキシ−ビフェニル−３−イルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１７】
３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−安息香酸エチルエステルである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１８】
９−メトキシ−２−（２−メトキシ−フェニルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１９】
９−メトキシ−２−（２−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２０】
２−（４−クロロ−２，６−ジメチル−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２１】
９−メトキシ−２−（キノリン−５−イルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２２】
２−（２−クロロ−５−メトキシ−フェニルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２３】
２−［Ｎ’−（２−ブロモ−フェニル）−ヒドラジノ］−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２４】
９−メトキシ−２−（Ｎ’−メチル−Ｎ’−フェニル−ヒドラジノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２５】
２−（２−アミノ−エチルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２６】
９−メトキシ−２−（２−ピロリジン−１−イル−エチルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２７】
２−（２−ジメチルアミノ−エチルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２８】
２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−９−メトキシ−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２９】
９−メトキシ−２−［（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミノ］−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３０】
９−メトキシ−２−（４−メトキシ−ベンジルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３１】
９−メトキシ−２−（３−メトキシ−ベンジルアミノ）−６，７−ジヒドロ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−４−オンである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３２】
３−ブロモ−Ｎ−［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３３】
シクロペンタンカルボン酸［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−アミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３４】
３−ブロモ−Ｎ−［３−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンゼンスルホンアミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３５】
２−メトキシ−Ｎ−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イル）−アセトアミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３６】
２，４，６−トリクロロ−Ｎ−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イル）−ベンズアミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３７】
２−メトキシ−Ｎ−（９−メトキシ−４−オキソ−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−ピリミド［６，１−ａ］イソキノリン−２−イル）−アセトアミドである請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【公表番号】特表２００７−５２５４７５（Ｐ２００７−５２５４７５Ａ）
【公表日】平成１９年９月６日（２００７．９．６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５１８８６２（Ｐ２００６−５１８８６２）
【出願日】平成１６年７月７日（２００４．７．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２１７０１
【国際公開番号】ＷＯ２００５／００７０９２
【国際公開日】平成１７年１月２７日（２００５．１．２７）
【出願人】（５９１００２９５７）スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション (341)
【氏名又は名称原語表記】ＳＭＩＴＨＫＬＩＮＥ ＢＥＥＣＨＡＭ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年９月６日（２００７．９．６）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年７月７日（２００４．７．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２１７０１
【国際公開番号】ＷＯ２００５／００７０９２
【国際公開日】平成１７年１月２７日（２００５．１．２７）
【出願人】（５９１００２９５７）スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション (341)
【氏名又は名称原語表記】ＳＭＩＴＨＫＬＩＮＥ ＢＥＥＣＨＡＭ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【Ｆターム（参考）】
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