疎水基で官能基化されたコポリヒドロキシアルキルグルタミン、および特に治療におけるその使用
【課題】本発明は、改質ポリアミノ酸に基づき、および活性主成分（ＡＰ）の可送達化に使用することができる新規の生分解性材料に関する。本発明はまた、前記ポリアミノ酸に基づく新規の薬剤用、化粧品用、食事療法用または植物検疫用組成物にも関する。本発明の目的は、活性主成分の可送達化に使用することができ、および前記分野で必要とされるすべての仕様、すなわち、生体適合性、生分解性および多くの活性主成分と容易に会合する、または前記成分を可溶化し同成分を生体内で放出する能力を最適に満たすことができる新規のポリマー原材料を提供することである。
【解決手段】前記目的は、グルタミン単位と、任意選択でグルタメート単位とを含み、および炭素原子を８〜３０個含む疎水基を有する新規のコポリヒドロキシアルキルグルタミンにより実現される。前記コポリヒドロキシアルキルグルタミンは両親媒性であり、活性主成分の可送達化用の粒子に容易にまた経済的に変形することができ、それにより前記粒子は安定な水性コロイド懸濁液を形成することができる。
【解決手段】前記目的は、グルタミン単位と、任意選択でグルタメート単位とを含み、および炭素原子を８〜３０個含む疎水基を有する新規のコポリヒドロキシアルキルグルタミンにより実現される。前記コポリヒドロキシアルキルグルタミンは両親媒性であり、活性主成分の可送達化用の粒子に容易にまた経済的に変形することができ、それにより前記粒子は安定な水性コロイド懸濁液を形成することができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特に活性主成分（ＡＰ）の可送達化（ベクトル化）に有用なコポリアミノ酸に基づく新規の生分解性材料に関する。
【０００２】
本発明はまた、これらの改質ポリアミノ酸に基づく新規の薬剤用、化粧品用、誘電体用または植物保護用組成物にも関する。これらの組成物は、ＡＰの可送達化を可能にし、好ましくはエマルション、ミセル、粒子、ゲル、インプラントまたは被膜の形であるタイプの組成物でよい。
【背景技術】
【０００３】
検討中のＡＰは、有利には、人体または動物体に経口投与、非経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与、脳内投与、口腔投与等することができる生物活性化合物である。
【０００４】
本発明がより詳細に関連するＡＰは、これらに限らないが、タンパク質類、糖タンパク質類、ペプチド類、多糖類、リポ糖類、オリゴヌクレオチド類、ポリヌクレオチド類および有機分子である。しかしながら、これらのＡＰは、化粧製品、または除草剤、殺虫剤、殺菌剤などの植物保護製品でもよい。
【０００５】
活性主成分、特に医薬活性主成分の可送達化の分野では、多くの場合、
・活性主成分がその作用部位に到達するまで、分解（加水分解、その場沈殿、酵素消化等）から活性主成分を保護する、
・および／または定められた期間にわたって治療レベルが維持されるように活性主成分の放出速度を制御する、
・および／または活性主成分を（保護しながら）作用部位まで運搬する必要がある。
【０００６】
これらの目的のために、いくつかのタイプのポリマーが研究されてきており、一部のポリマーは市販もされている。言及することができる例には、ポリ乳酸、ポリ乳酸−グリコール酸、ポリオキシエチレン−オキシプロピレン、ポリアミノ酸または多糖型のポリマーが含まれる。これらのポリマーは、例えば、バルクインプラント、微粒子、ナノ粒子、ベシクル、ミセルまたはゲルを作製するための出発原料を構成する。これらのポリマーは、このような系の作製に適するべきであると共に、生体適合性で、毒性がなく、非免疫原性で、および経済的であるべきであり、また人体から容易に取り除くことができるおよび／または生分解性となることができるべきである。この最後の態様に関しては、人体内での生分解により無毒性の生成物が生成されることがさらに不可欠である。
【０００７】
会合性ポリマーの開発においてやはり重要である別の態様は、その水溶性である。大量のポリマーを溶解させる可能性により、所望の放出プロファイルに適したポリマー／活性主成分比を提供することが可能となる。
【０００８】
ＡＰ可送達化系を調製するための出発材料として使用されるポリマーに関する先行技術の例として、様々な特許または特許出願または科学論文について以下に述べる。
【０００９】
米国特許第４６５２４４１号（特許文献１）には、ホルモンＬＨ−ＲＨをカプセル化するポリラクチドマイクロカプセルが記載されている。これらのマイクロカプセルは、ホルモンと前記ホルモン固定する物質（ゼラチン）とを含む内側水層と、ポリラクチドの油層と、また外側水層（ポリビニルアルコール）とを含む水／油／水エマルションを調製することによって生成される。ＡＰの放出は、皮下注射の後２週間よりも長い期間にわたって行うことができる。
【００１０】
米国特許第６１５３１９３号（特許文献２）には、アドリアマイシンなどの抗癌剤の可送達化用の両親媒性ポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシエチレン）ミセルに基づく組成物が記載されている。
【００１１】
Ａｋｉｙｏｓｈｉら（Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ １９９８、５４、３１３〜３２０；非特許文献１）には、その上にコレステロールをグラフト化することによって疎水性となり、および水中でナノ粒子を形成するプルランが記載されている。インスリンと可逆的に錯体を形成することができるこれらのナノ粒子は、安定なコロイド懸濁液を形成する。
【００１２】
米国特許第４３５１３３７号（特許文献３）には、ロイシンおよびグルタメートに基づく両親媒性コポリアミノ酸が記載されており、これらの両親媒性コポリアミノ酸は、活性主成分の制御放出用にインプラントまたは微粒子の形で使用することができる。これらの活性主成分の放出は、ポリマーの分解速度によっては非常に長い期間にわたって行うことができる。
【００１３】
米国特許第４８８８３９８号（特許文献４）には、ポリグルタメートまたはポリアスパルテートと、任意選択でポイロイシンとに基づく、アルキルオキシカルボニルメチル型の側鎖基がポリアミノ酸鎖上にランダムに配列されているポリマーが記載されている。側基、例えば、メトキシカルボニルメチルでグラフト化されたこれらのポリアミノ酸は、持続放出ＡＰを含む生分解性インプラントの形で使用することができる。
【００１４】
米国特許第５９０４９３６号（特許文献５）には、ポリロイシン−ポリグルタメートブロックポリマーから得られるナノ粒子が記載されている。これらのナノ粒子は、安定なコロイド懸濁液を形成することができ、また生物活性タンパク質を変性させることなくそれら生物活性タンパク質と自発的に結合できる。次いで前記タンパク質を、長期間にわたって、制御して生体内で放出することができる。
【００１５】
米国特許第５４４９５１３号（特許文献６）には、ポリオキシエチレンブロックおよびポリアミノ酸ブロック、例えば、ポリ（ベータ−ベンジル Ｌ−アスパルテート）を含む両親媒性ブロックコポリマーが記載されている。これらのポリオキシエチレン−ポリベンジルアスパルテートポリマーは、アドリアマイシンやインドメタシンなどの疎水性活性分子をカプセル化することができるミセルを形成する。
【００１６】
特許出願国際公開第９９／６１５１２号（特許文献７）には、疎水基（ポリリシンまたはオルニチンと結合しているパルミチン酸）および親水基（ポリオキシエチレン）で官能化されたポリリシンおよびポリオルニチンが記載されている。これらのポリマー、例えば、ポリオキシエチレンおよびパルミトイル鎖でグラフト化されたポリリシンは、コレステロールの存在下で、ドキソルビシンまたはＤＮＡをカプセル化することができるベシクルを形成する。これらポリリシンをベースとするポリマーは、生理的媒体中でカチオン性である。
【００１７】
本出願人による米国特許第６６３０１７１号（特許文献８）には、安定なコロイド懸濁液を形成することができ、また生物活性タンパク質を変性させることなくそれら生物活性タンパク質と自発的に結合できるポリ（グルタミン酸ナトリウム）−ポリ（グルタミン酸メチル、エチル、ヘキサデシルまたはドデシル）ブロックまたはランダムポリマーが記載されている。次いでこれらのタンパク質を、長期間にわたって、制御して生体内で放出することができる。これらの両親媒性線状コポリアミノ酸は、疎水性アルキル側鎖の存在によって改質される。これらのアルキル基は、エステル官能基を介してポリマー上に共有結合的にグラフト化される。これらのポリマーは、生理的媒体中でアニオン性である。
【００１８】
この同じ分野において、関連する概念のポリグルタメートをベースとするポリマー（アニオン性）が、本出願人によりいくつかの特許出願に記載されている。
【００１９】
特許出願国際公開第０３／１０４３０３号（特許文献９）には、アルファトコフェロールで官能化されたアニオン性ポリアミノ酸が記載されている。
【００２０】
特許出願国際公開第２００４／０１３２０６号（特許文献１０）には、疎水基を含むアニオン性ポリアミノ酸であって、これらの基がアミド官能基を２つ含む結合基を介して、より具体的にはリシンまたはオルニチン型のスペーサを介してポリマーと結合していることを特徴とするアニオン性ポリアミノ酸が記載されている。
【００２１】
特許出願国際公開第２００４／０６０９６８号（特許文献１１）には、ロイシンおよび／またはイソロイシンおよび／またはバリンおよび／またはフェニルアラニンに基づく少なくとも１つのオリゴアミノ酸基で官能化されたポリアミノ酸が記載されている。
【００２２】
特許出願国際公開第８７／０３８９１号（特許文献１２）には、枝分かれしたまたは星型の線状両親媒性ポリマーが記載されており、それらポリマーの末端にのみ少なくとも２つの疎水基が結合している。前記特許出願は、前記特許の実施例のすべてからわかるように、基本的にはポリエチレングリコールに基づく中性の親水性ポリマーに関する。しかしながら、このタイプのポリマーは生分解性ではなく、このことは大きな欠点となる。
【００２３】
特許出願国際公開第０２／０９８９５１号（特許文献１３）および国際公開第０２／０９８９５２号（特許文献１４）には、ポリマーの一方の末端に疎水基を１つまたは２つ有するポリアルキルグルタミンが記載されている。これらのポリマーは、リポソームを形成することができ、また水溶性小分子（活性主成分）をカプセル化することができる。
【００２４】
特許出願国際公開第０３／００２０９６号（特許文献１５）には、ポリマーの一方の末端にポリエチレングリコール鎖、および側鎖疎水基の両方を含むポリヒドロキシエチルアスパルトアミドが記載されている。これらのポリマーはナノ粒子を形成することができ、また活性主成分をカプセル化することができる。
【００２５】
特許出願国際公開第０２／２８５２１号（特許文献１６）には、活性主成分（ＡＰ）を可送達化（ＶＰ）するための生体適合性粒子の懸濁液が記載されている。これらのＶＰは、中性の親水性ポリアミノ酸（ｐｏｌｙＮＩＡＡ）／中性の疎水性ポリアミノ酸（ｐｏｌｙＮＯＡＡ）ジブロックコポリマー、例えば、ポリ［（ロイシン）−ブロック−（グルタミン−Ｎ−ヒドロキシエチル）］ｘに基づいている。これらのｐｏｌｙＮＩＡＡ／ｐｏｌｙＮＯＡＡ粒子は、コロイド懸濁液中、溶解されていない形で少なくとも１つのＡＰを組み合わせることができ、また特に生体内で少なくとも１つのＡＰを持続的におよび／または遅延して放出することができる。この発明は、ＶＰが由来する粉体にも関し、またこの粉体の調製およびこのｐｏｌｙＮＩＡＡ／ｐｏｌｙＮＯＡＡをベースとするＶＰの懸濁液の調製にも関する。これら新規のＶＰは、自発的に、また界面活性剤または有機溶媒の助けを借りずに安定な水性懸濁液を形成する。この発明は、乾燥状態にあるＶＰ、ＶＰを調製するための方法、また活性主成分と組み合わせたこれらのＶＰを含む薬剤用組成物（乾燥状態または懸濁状態にある）にも関する。
【００２６】
したがって、医薬活性主成分の可送達化用に非常多くの技術的解決法が先行技術において開発され提案されているが、これらの要件すべてに対する解決策を得ることは困難であり、依然として改善されていない。より具体的には、本発明は、活性主成分と可逆的に結合できるコロイド状可送達化ナノ粒子または微粒子に変換することができる公知の生分解性ポリアミノ酸に関する。
【特許文献１】米国特許第４６５２４４１号
【特許文献２】米国特許第６１５３１９３号
【特許文献３】米国特許第４３５１３３７号
【特許文献４】米国特許第４８８８３９８号
【特許文献５】米国特許第５９０４９３６号
【特許文献６】米国特許第５４４９５１３号
【特許文献７】特許出願国際公開第９９／６１５１２号
【特許文献８】米国特許第６６３０１７１号
【特許文献９】特許出願国際公開第０３／１０４３０３号
【特許文献１０】特許出願国際公開第２００４／０１３２０６号
【特許文献１１】特許出願国際公開第２００４／０６０９６８号
【特許文献１２】特許出願国際公開第８７／０３８９１号
【特許文献１３】特許出願国際公開第０２／０９８９５１号
【特許文献１４】国際公開第０２／０９８９５２号
【特許文献１５】特許出願国際公開第０３／００２０９６号
【特許文献１６】特許出願国際公開第０２／２８５２１号
【非特許文献１】Ａｋｉｙｏｓｈｉら、Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ １９９８、５４、３１３〜３２０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２７】
この状況において、本発明の本質的な目的の１つは、広範囲のｐＨにわたって可溶性である、新規の線状または枝分かれした基本的に中性の両親媒性コポリアミノ酸を提供することである。これらのポリマーは、上記特許または特許出願に記載されているポリマーと比較すると、治療用タンパク質などの活性主成分の可送達化の点で向上を示す。
【００２８】
本発明の別の本質的な目的は、これらのポリマーがＡＰの可送達化に使用することが可能であるべきであること、およびこれらのポリマーにより仕様事項のすべて、すなわち、特に、
・能力：
・安定な水性コロイド懸濁液を容易にまた経済的に形成する能力、
・多くの活性主成分と容易に結合する能力、および
・これらの活性主成分を生体内で放出する能力、
・生体適合性、
・生分解性、
・加水分解に対する安定性
が最適に満たされることが可能となるべきであることである。
【課題を解決するための手段】
【００２９】
中でもこの目的は、本発明によって実現される。本発明はまず、複数の側鎖で同一または異なる疎水基（ＨＧ）を含むコポリヒドロキシアルキルグルタミンに関する。
【００３０】
本発明の目的としては、用語「複数」は、コポリヒドロキシアルキルグルタミンが１分子当たり平均して少なくとも２つの側鎖ＨＧを含むことを意味する。本発明に従って、このコポリヒドロキシアルキルグルタミンが、これらの側鎖ＨＧに加えて、コポリマー鎖の末端の少なくとも１つに付着しているＨＧを含むことが可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３１】
本発明の好ましい一実施形態によれば、このコポリヒドロキシアルキルグルタミンは、コポリマー鎖当たり平均して少なくとも３つの疎水基（ＨＧ）を含む。
【００３２】
このコポリヒドロキシアルキルグルタミンは、ヒドロキシ−アルキルアミン基も有する。これらのヒドロキシアルキルアミン基は、好ましくはアミン結合を介してコポリマーと結合している。
【００３３】
本出願人は、その評価に対して、複数の疎水基で官能化され、安定なコロイド系を形成することができる「基本的に中性の」ポリヒドロキシアルキルグルタミンをベースとするコポリマーの新規の群を開発した。コロイドの表面上のアニオン電荷数を修正する能力により、これらコポリマーのタンパク質および／または生細胞との相互作用を修正することが特に可能となり、したがってこれらポリマーのバイオアベイラビリティ（ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を変更することが可能となる（例えば、Ｆｕｒｕｍｏｔｏらによる論文、Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ ２００４、９７、１３３〜１４１を参照のこと）。
【００３４】
これらの新規のポリマーは、タンパク質類の可送達化に特に適していることがわかっている。さらに、これらのポリマーは、酵素の存在下で、毒性のない異化代謝産物／代謝産物（アミノ酸）に容易に分解される。
【００３５】
本発明の目的としては、また本明細書を通じて、１つまたは複数の活性主成分とコポリヒドロキシアルキルグルタミンとの関係を修飾するために使用する用語「会合（ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）」および「会合させる（ａｓｓｏｃｉａｔｅ）」は、活性主成分が特に疎水性相互作用を介してコポリヒドロキシアルキルグルタミンと結合し、および／またはコポリヒドロキシアルキルグルタミンによってカプセル化されていることを特に意味する。
【００３６】
コポリヒドロキシアルキルグルタミンのグルタメート単位を官能化するために使用することができるヒドロキシアルキルアミン基は、同一または異なるもので、例えば以下の基、２−ヒドロキシエチルアミン、３−ヒドロキシプロピルアミン、２，３−ジ−ヒドロキシプロピルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンおよび６−ヒドロキシヘキシルアミンから選択される。
【００３７】
有利には、疎水基ＨＧの少なくとも１つが、コポリグルタメート鎖（例えば、骨格コポリグルタメート主鎖）に疎水基ＨＧを結合するためのスペーサ結合基（または単位）（「スペーサ」）を少なくとも１つ含む疎水性グラフトに含まれる。この結合基は、例えば、少なくとも１つの直接共有結合および／または少なくとも１つのアミド結合および／または少なくとも１つのエステル結合を含むことができる。例えば、この結合基は、コポリグルタメートの構成単量体単位以外の「アミノ酸」単位、アミノアルコール誘導体、ポリアミン誘導体（例えば、ジアミン類）、ポリオール誘導体（例えば、ジオール類）およびヒドロキシ酸誘導体を特に含む群に属するタイプの結合基でよい。
【００３８】
これらＨＧのコポリグルタメートまたはポリアルキルグルタミン鎖へのグラフト化は、コポリグルタメートまたはコポリヒドロキシアルキルグルタミン鎖に結合することができるＨＧ前駆体を使用することによって行うことができる。
【００３９】
これらＨＧ前駆体は、実際には、アルコール類およびアミン類を含む群からこれに限定されることなく選択される。というのも、これらの化合物は、当業者が容易に官能化することができるからである。ＨＧのグラフト化は、本発明による改質ポリアミノ酸を生成する方法についての説明においてより詳細に以下で説明する。
【００４０】
好ましい一特性によれば、疎水性グラフトの疎水基ＨＧは炭素原子を８〜３０個含む。
【００４１】
これらの疎水基ＨＧは、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子を場合によっては含むＣ８〜Ｃ３０の直鎖または分岐アルキル類
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子を場合によっては含むＣ８〜Ｃ３０のアルキルアリール類またはアリールアルキル類、および
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子を場合によっては含むＣ８〜Ｃ３０の（多）環状物質
を含む群から有利に、また賢明に選択される。
【００４２】
ＨＧと共に疎水性グラフトを形成する結合基は、二価、三価または四価でよい（または五価以上であってもよい）。二価の結合基の場合、疎水性グラフトはＨＧ基を１つだけ含み、一方三価の結合基は、疎水性グラフトに二分性を与える、すなわちグラフトが２本のＨＧの「脚」を有する。言及することができる三価の結合基の例には、とりわけ、「アミノ酸」単位、例えば「グルタミン酸」、またはポリオール残基、例えばグリセロールが含まれる。したがって、二分ＨＧを含む疎水性グラフトの有利ではあるが非限定的な例は、ジアルキルグリセロール類およびジアルキルグルタメートである。
【００４３】
これらの疎水基ＨＧは、例えば、オクタノール、ドデカノール、テトラデカノール、ヘキサデカノール、オクタデカノール、オレイルアルコール、トコフェロールまたはコレステロールを含む群から選択される基から誘導することができる。
【００４４】
好ましくは、本発明によるコポリグルタメートの骨格は、アルファ−Ｌ−グルタメート単位および／またはアルファ−Ｌ−グルタミック単位を含む。
【００４５】
さらにより好ましくは、本発明によるコポリヒドロキシアルキルグルタメートは、以下の一般式（Ｉ）の１つに対応する。
【００４６】
【化１】
式中、
・Ａは独立して、
−Ｒ２がＨ、Ｃ２〜Ｃ１０の直鎖アルキルまたはＣ３〜Ｃ１０の分岐アルキル、またはベンジルを示す基ＮＨＲ２、
−窒素と、それぞれＮＨＲ２およびＯＲ２の定義に対応するアミンまたはアルコールで任意選択で改質された酸官能基とを介して結合している末端アミノ酸単位を示し、
・Ｂは、以下の基、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ５）アルキル−、アミノ酸残基（好ましくは、天然アミノ酸の）、ジオール、トリオール、ジアミン、トリアミン、アミノアルコールまたは炭素原子を１〜６個含むヒドロキシ酸から好ましくは選択される二価、三価または四価の結合基であり、
・Ｃは、モノヒドロキシ、ジヒドロキシまたはトリヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、好ましくはヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピルまたはトリヒドロキシメチルメタンであり、
・Ｄは、Ｈ、Ｃ２〜Ｃ１０の直鎖アルキルまたはＣ３〜Ｃ１０の分岐アシル基、またはピログルタメートであり、
・疎水基ＨＧは互いに独立して、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくはＯおよび／またはＮおよび／またはＳ）を場合によっては含むＣ８〜Ｃ３０の直鎖または分岐アルキル類、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくはＯおよび／またはＮおよび／またはＳ）を場合によっては含むＣ８〜Ｃ３０のアルキルアリール類またはアリールアルキル類、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくはＯおよび／またはＮおよび／またはＳ）を場合によっては含むＣ８〜Ｃ３０の（多）環状物質から選択される基を示し、
・Ｒは、Ｈ、または
−ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムを含む部分群から有利に選択される金属カチオン類、
−・アミンをベースとするカチオン類、
・オリゴアミンをベースとするカチオン類、
・ポリアミンをベースとするカチオン類（ポリエチレンイミンが特に好ましい）、
・リシンまたはアルギニンをベースとするカチオン類を含むクラスから有利に選択されるアミノ酸をベースとするカチオン類を含む部分群から有利に選択される有機カチオン、
−またはポリリシンまたはオリゴリシンを含む部分群から有利に選択されるカチオン性ポリアミノ酸類を含む群から好ましくは選択されるカチオン種を示し、
・ｍ、ｎおよびｑは自然数であり、
・（ｍ）／（ｍ＋ｑ＋ｎ）は、疎水基ＨＧのグラフト化のモル度と定義され、各コポリマー鎖は平均して少なくとも３つの疎水性グラフトを含むという条件で０．５から９０モル％までの範囲であり、
・（ｍ＋ｑ＋ｎ）は１０〜１０００、好ましくは３０〜５００の範囲であり、
・（ｑ）／（ｍ＋ｑ＋ｎ）は、０〜６０モル％の範囲であり、
・ｐは１〜３の範囲に及ぶ整数である。
【００４７】
好ましくは、疎水基ＨＧはランダムに分布している。
【００４８】
本発明によるコポリヒドロキシアルキルグルタミンの疎水性単位によるグラフト化のモル度は、各ポリマー鎖が平均して少なくとも３つの疎水性グラフトを含むという条件で２％〜１００％、好ましくは５％〜５０％であることがさらに好ましい。
【００４９】
本発明によるコポリヒドロキシアルキルグルタミンの比率（ｑ）／（ｍ＋ｑ＋ｎ）は、コポリヒドロキシアルキルグルタミンが０〜約６０モル％のカルボン酸官能基またはカルボキシレート官能基を含むことができることを意味する。
【００５０】
本発明の別の注目に値する特性によれば、本発明によるポリマーは、２０００〜２０００００ｇ／モル、好ましくは５０００〜１０００００ｇ／モルのモル質量を有する。
【００５１】
一変形形態では、本発明によるコポリヒドロキシアルキルグルタミンが、グルタメート単位と結合しているポリアルキレン（好ましくはエチレン）グリコール型のグラフトを少なくとも１つ有する。
【００５２】
当然ながら、本発明は、上で定義したように改質したポリアミノ酸の混合物も網羅する。
【００５３】
極めて注目すべきことに、本発明のコポリヒドロキシアルキルグルタミンは、疎水基の性質およびコポリグルタメートの重合度に応じて、いくつかのやり方で使用することができる。本発明が対象とする様々な形の活性主成分のカプセル化用にポリマーを形成するための方法は、当業者に公知である。さらなる詳細については、例えば、これらの特に関連する選択された参考文献について言及することができる。
【００５４】
「Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ，Ｍｉｃｒｏｃａｐｓｕｌｅｓ ａｎｄ Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ；ｖｏｌ １．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」、Ｅｄ．Ｒ．Ａｒｓｈａｄｙ、Ｃｉｔｕｓ Ｂｏｏｋｓ １９９９。ＩＳＢＮ：０−９５３２１８７−１−６。
【００５５】
「Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ−Ｒｅｌｅａｓｅ Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ」、Ｅｄ．Ｊ．ＳｅｎｉｏｒおよびＭ．Ｒａｄｏｍｓｋｙ、Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ Ｐｒｅｓｓ ２０００。ＩＳＢＮ：１−５７４９１−１０１−５。
【００５６】
「Ｃｏｌｌｏｉｄａｌ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ」、Ｅｄ．Ｊ．Ｋｒｅｕｔｅｒ、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．１９９４。ＩＳＢＮ：０−８２４７−９２１４−９。
【００５７】
「Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」、Ｅｄ．Ｄ．Ｌ．Ｗｉｓｅ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．２０００。ＩＳＢＮ：０−８２４７−０３６９−３。
【００５８】
これらのコポリヒドロキシアルキルグルタミンは、コポリマーの長さ（重合度）および疎水基の性質によっては、ｐＨ７．４（例えば、リン酸緩衝液により）の水に分散して、コポリマーの濃度に応じてコロイド溶液または懸濁液または構造または非構造ゲルを与えるため、極めて有利でもある。さらに、これらのコポリヒドロキシアルキルグルタミン（粒子状または他の形の）は、タンパク質類、ペプチド類、小分子などの活性主成分と容易にカプセル化するまたは結合することができる。好ましい形成作業は、本出願人による米国特許第６６３０１７１号に記載されている作業であり、コポリマーを水に分散させること、およびその溶液を活性主成分（ＡＰ）の存在下でインキュベートすることにある。次いで、本発明によるコポリヒドロキシアルキルグルタミンで構成される可送達化粒子のこのコロイド溶液を、０．２μｍのフィルタを通してろ過し、その後患者に直接注射することができる。
【００５９】
親水性／疎水性の比が低下すると、コポリマーは、ＡＰを会合させるまたはカプセル化することができる微粒子を形成することができる。この状況において、微粒子の形成は、ＡＰおよびポリマーを適切な有機溶解に共に溶解させ、次いでこの混合物を水中で沈殿させることによって行うことができる。次いで、これらの粒子をろ過によって回収し、その後経口投与に（ゲルカプセルの形で、圧縮しおよび／またはコーティングした形で、または油に分散させた形で）、または水に再分散させた後、非経口投与で使用することができる。
【００６０】
一変形形態によれば、Ｎ−メチルピロリドンなどの生体適合性溶媒、エタノールまたはＭｙｇｌｙｏｌ（登録商標）などの適切な油にコポリマーを溶解させ、次いで筋肉注射するまたは皮下注射するまたは腫瘍に注射することができる。溶媒または油の拡散により、注射部位にコポリマーの沈殿がもたらされ、したがって堆積物が形成される。次いで、これらの堆積物を、コポリマーの拡散および／または浸食および／または加水分解もしくは酵素分解によって制御放出する。
【００６１】
本発明によるポリマーの微粒子形が好ましいこととは関係なく、中性のまたはイオン化された形の本発明のコポリマーが水性または有機媒体中単独で、または液体、固体またゲル組成物でより一般的に使用される。
【００６２】
コポリグルタミンをベースとするコポリマーは、ｐＨおよび組成に応じて中性（ＣＯＯＨの形）またはイオン化された（ＣＯＯ−アニオン）残存カルボキシリック官能基を含むことを理解されたい。水溶液では、対カチオンは、ナトリウム、カルシウム、マグネシウムなどの金属カチオン、またはトリエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、ポリエチレンイミンなどのポリアミンなどの有機カチオンでよい。
【００６３】
本発明のコポリマーは、例えば、当業者に公知の方法に従って得られる。まず、アルファ型のポリアミノ酸を得ることを思い起こす。最も一般的な技法は、例えば、論文「Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ」、１９７６、１５、１８６９に、またＨ．Ｒ．Ｋｒｉｃｈｅｌｄｏｒｆによる書籍「ａｌｐｈａ−Ａｍｉｎｏａｃｉｄ−Ｎ−ｃａｒｂｏｘｙ Ａｎｈｙｄｒｉｄｅ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ」Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ（１９８７）に記載されているＮ−カルボキシアミノ酸（ＮＣＡ）無水物の重合に基づく。このＮＣＡ誘導体は、好ましくはＮＣＡ−Ｇｌｕ−Ｏ−Ｂｚ（Ｂｚ＝ベンジル）である。というのもこのベンジル基を、ホモポリマーのまたは疎水基の他の化学官能基に影響を及ぼすことなく選択的に加水分解することができるからである。
【００６４】
本発明に従って使用することができる一定数のポリマー、例えば、可変質量のポリ（アルファ−Ｌ−グルタミック）、ポリ（アルファ−Ｄ−グルタミック）、ポリ（アルファ−Ｄ，Ｌ−グルタメート）およびポリ（ガンマ−Ｌ−グルタミック）型のポリマーが市販されている。
【００６５】
好ましくは、本発明のコポリマーは、２つのルートに従って合成される。第１に、ヒドロキシアルキルアミン（例えば、エタノールアミン）基および基Ｂ−ＨＧ（例えば、ドデシルアミン）を、まずポリ（Ｌ−グルタミン酸）上に同時にまたは順次グラフト化する。この反応は、以下のスキームに従ってＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ＮＭＰなどの溶媒中で行うことができる。
【００６６】
【化２】
このポリ（Ｌ−グルタミン酸）は、フランス特許出願第２８０１２２６号に記載されているルートに従って合成することができる。基ＨＢ−ＨＧがエステル官能基を介して結合されると、アルキルアミンをグラフト化する前にカルボジイミド基を用いた標準的なカップリング反応により基Ｂ−ＨＧをグラフト化することがまずより容易になる。
【００６７】
【化３】
第２に、まずポリ（アルキル−Ｌ−グルタミン）を、まず文献（例えば、国際公開第０２／０９８９５１号を参照のこと）に記載されているルートに従って調製し、このポリマーのアルキルアミドのＯＨ基に疎水基ＨＧをグラフト化する。
【００６８】
重合化学およびこれらの基のカップリング反応は標準的で、当業者には周知である（例えば、先に述べた本出願人による特許および特許出願を参照のこと）。これらの方法は、実施例の説明を通してより明確に理解されるであろう。
【００６９】
重合度は、モノマーのモル比に対する開始剤のモル比と定義されることに留意されたい。
【００７０】
ポリマーの酸官能基を用いる疎水性グラフトＨＧのカップリングは、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）など適切な溶媒中、カップリング剤としてのカルボジイミド、および任意選択で４−ジメチルアミノピリジンなどの触媒の存在下、ポリアミノ酸を反応させることによって容易に行われる。カルボジイミドは、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミドまたはジイソプロピルカルボジイミドである。クロロギ酸エステルなどのカップリング試薬を、アミド結合の形成に使用することもできる（例えば、Ｂｏｄａｎｓｚｋｙによる書籍「Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ １９８４を、例えばカップリング剤について参照のこと）。グラフト化度は、構成成分および試薬の化学量論または反応時間によって化学的に制御される。ポリマーのアミノ酸以外のアミノ酸で官能化された疎水性グラフトは、標準的なペプチドカップリングによって、または直接酸触媒縮合によって得られる。これらの技法は、当業者には周知である。
【００７１】
その別の態様によれば、本発明は、上で定義したコポリヒドロキシアルキルグルタミンを少なくとも１つと、任意選択で活性主成分を少なくとも１つ含む薬剤用、化粧品用、誘電体用または植物保護用組成物を対象とする。この活性主成分は、治療用、化粧品用、誘電体用または植物保護用活性主成分でよい。
【００７２】
本発明の有利な構成によれば、活性主成分を、１つ（または複数の）共有化学結合以外の１つまたは複数の結合で改質されたポリアミノ酸と組み合わせる。
【００７３】
１つまたは複数のＡＰを本発明による改質ポリアミノ酸と組み合わせるための技法は、特に米国特許第６６３０１７１号に記載されている。これらの技法は、１つまたは複数の活性主成分ＡＰを含むまたはＡＰと組み合わせた可送達化粒子（ＶＰ）のコロイド懸濁液が得られるように、ＶＰを含む液体媒体に少なくとも１つの活性主成分を組み込むことにある。ＶＰがＡＰを捕捉することになるこの混入は以下のように行うことができる。
【００７４】
・ＡＰを水溶液に溶解させ、その後、コロイド懸濁液の形で、または孤立したＶＰ（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚａｔｅまたは沈殿）の形でＶＰを添加する。
【００７５】
・または、水など適切な溶媒に乾燥ＶＰを分散させることによって任意選択であらかじめ調製したＶＰ粒子のコロイド懸濁液に、ＡＰを溶液として、ＡＰだけを、または配合した形のＡＰを添加する。
【００７６】
好ましくは、活性主成分は、タンパク質、糖タンパク質、１つまたは複数のポリアルキレングリコール鎖と結合しているタンパク質（好ましくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）：「タンパク質−ＰＥＧｙｌａｔｅｄ」）、多糖、リポ糖、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチドまたはペプチドである。
【００７７】
一変形形態によれば、活性主成分は、疎水性、親水性または両親媒性の有機「小」分子である。
【００７８】
本明細書の目的としては、「小」分子は、特に非タンパク質小分子である。
【００７９】
本発明によるポリアミノ酸と組み合わせることができるＡＰの例として、（ナノまたはマイクロ）粒子の形であるかどうかにかかわらず、
・インスリン、インターフェロン、成長ホルモン、インターロイキン、エリスロポイエチン、サイトカインなどのタンパク質類、
・ロイプロリドやシクロスポリンなどのペプチド類、
・アントラサイクリン類、タキソイド類またはカンプトセシン類の群に属するものなどの小分子、
・およびこれらの混合物を言及することができる。
【００８０】
一実施形態によれば、本発明の組成物は、ゲル、溶液、懸濁液、エマルション、ミセル、ナノ粒子、微粒子、インプラント、粉末または被膜の形である。
【００８１】
その特に好ましい形の１つによれば、活性主成分を含むまたは含まないこの組成物は、水相中におけるポリアミノ酸ミセルおよび／または微粒子および／またはナノ粒子の安定なコロイド懸濁液である。
【００８２】
別の実施形態によれば、本発明の組成物は生体適合性溶媒中で溶液の形であり、皮下注射する、筋肉注射するまたは腫瘍に注射することができる。
【００８３】
本発明による組成物は、薬剤用である場合、経口投与、非経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与、脳内投与または口腔投与することができる。
【００８４】
この組成物が、生体適合性溶媒または溶媒混合物中で溶液の形であり、皮下注射する、筋肉注射するまたは腫瘍に注射することができることも想定することができる。
【００８５】
別の実施形態によれば、この組成物は、ｐＨおよび／または浸透圧を調整するために、および／または安定性（抗酸化）を向上させるために、および／または抗菌剤として賦形剤を任意選択で含むことができる。これらの賦形剤は、当業者には周知である（書籍、Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、Ｐ．Ｋ．Ｇｕｐｔａら、Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ Ｐｒｅｓｓ、デンバー市、コロラド州、１９９９を参照のこと）。
【００８６】
別の変形形態によれば、本発明による組成物は、注射部位に堆積物を形成することができるように調合される。この堆積物は、例えば、生体内に存在する生理的タンパク質によって少なくとも部分的にもたらされることがある。
【００８７】
また本発明は、本発明によるポリアミノ酸および活性主成分を含む組成物であって、
・薬剤、特に、経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与または脳内投与用の薬剤において、これらの薬剤の活性主成分が、場合によっては、特にタンパク質類、糖タンパク質類、１つまたは複数のポリアルキレングリコール鎖と結合しているタンパク質類｛例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）であり、この場合「ＰＥＧｙｌａｔｅｄ」タンパク質と称される｝、ペプチド類、多糖類、リポ糖類、オリゴヌクレオチド類、ポリヌクレオチド類、疎水性、親水性または両親媒性の有機小分子である薬剤、
・および／または栄養素、
・および／または化粧製品または植物保護製品の調製に使用することができる組成物も対象とする。
【００８８】
そのさらに別の態様によれば、本発明は、
・薬剤、特に、経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与または脳内投与用の薬剤において、これらの薬剤の活性主成分が、場合によっては、特にタンパク質類、糖タンパク質類、１つまたは複数のポリアルキレングリコール鎖と結合しているタンパク質類｛例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）であり、この場合「ＰＥＧｙｌａｔｅｄ」タンパク質と称される｝、ペプチド類、多糖類、リポ糖類、オリゴヌクレオチド類、ポリヌクレオチド類、疎水性、親水性または両親媒性の有機小分子である薬剤、
・および／または栄養素、
・および／または化粧製品または植物保護製品を調製する方法を対象とし、
この方法は、本質的に、上で定義した少なくとも１つのホモポリアミノ酸および／またはやはり上で定義した組成物を使用することにあることを特徴とする。
【００８９】
本発明は、本質的に、本明細書中に記載されている組成物を、経口投与、非経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与、脳内投与または口腔投与することにある治療方法にも関する。
【００９０】
本発明の特定の一変形形態によれば、この治療方法は、本質的に、生体適合性溶媒中で溶液の形である上述の組成物を用意し、次いで好ましくは注射部位に堆積物が形成されるようにこの組成物を皮下注射する、筋肉注射するまたは腫瘍に注射することにある。
【００９１】
本発明のポリマーの合成、それらポリマーのＡＰ可送達化系（安定な水性コロイド懸濁液）への変換、およびタンパク質と組み合わさって薬剤用組成物を形成するこのような系の能力の実証を説明する以下の実施例から、本発明がより明確に理解され、その利点および変形実施形態がより明らかになるであろう。
【実施例】
【００９２】
＜実施例１：ポリマー（１）、ｐＨＥＧ Ｃ１２の合成＞
【００９３】
【化４】
指数および基：ｍ＝１０２、ｎ＝１８、Ｌ＝ＣＯＣ１１Ｈ２３（ラウロイル）
重合度（ＤＰ）が１２０のポリ（グルタミン酸）５ｇを、２５０ｍｌの三口丸底フラスコ中のＤＭＦ７７ｍｌに、８０℃に加熱することによって溶解させる。−１５℃まで冷却したこの溶液に、クロロギ酸イソブチル６．３５ｇと、次いでＮ−メチルモルホリン５．３３ｇとを添加する。この反応媒質を、０℃への温度上昇を可能にしながら１５分間撹拌する。反応媒質を再び−１５℃まで冷却し、その後、２−ラウリン酸アミノエチルのトシル塩のＤＭＦ溶液（２５ｍｌ中２．５８ｇ）を添加する。この反応媒質を、０℃への温度上昇を可能にしながら３０分間撹拌する。反応媒質を再び−１５℃まで冷却し、その後、エタノールアミンを９．５ｇ添加する。１．５時間かけて温度が室温まで上昇する。この後、反応媒質を水９２０ｍｌ中で希釈し、次いで５体積の塩水（０．９％ＮａＣｌ）および８体積の水に対してダイアフィルトレーション（ｄｉａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）を行う。次いで、このポリマー溶液を凍結させ、凍結乾燥させる。ポリマー（２）が５．２ｇ、すなわち６８％の収率が得られる。ＴＦＡ−ｄにおける１Ｈ ＮＭＲによって決定されるＣ１２グラフトの百分率は、１４．４％である。ＴＦＡ−ｄにおける１Ｈ ＮＭＲによって決定されるヒドロキヒエチルグルタミンの百分率は、８６．０％である。Ｍｎ（ＧＰＣ ＮＭＰによって決定される）は、ＰＭＭＡ当量で２２．７ｋｇ／モルである。
【００９４】
＜実施例２：ポリマー（２）、ｐＨＥＧ Ｔの合成＞
【００９５】
【化５】
指数および基：ｍ＝２１１、ｎ＝９、Ｔ＝Ｄ，Ｌ−アルファ−トコフェロール（Ｔ）
合成アルファ−トコフェロール（国際公開第０３／１０４３０３号に記載されている手順に従って得られる）で４モル％がランダムにグラフト化され、重合度（ＤＰ）が２２０のポリ（グルタミン酸）５ｇを、２５０ｍｌの三口丸底フラスコ中のＤＭＦ７７ｍｌに、８０℃に加熱することによって溶解させる。０℃まで冷却したこの溶液に、クロロギ酸イソブチル５．３ｍｌと、Ｎ−メチルモルホリン４．５ｍｌとを添加する。この反応媒質を１５分間撹拌し、その後エタノールアミンを８．３ｍｌ添加する。０℃で５分間維持した温度が、その後室温まで上昇し、媒体を２時間撹拌する。この後、反応媒質を１ＮのＨＣｌ２ｍｌで急冷し、次いで水６００ｍｌ中で希釈し、その後、１体積の塩水（０．９％ＮａＣｌ）および３体積の水に対して透析（１ｋＤチューブ）を行う。次いで、このポリマー溶液を凍結させ、凍結乾燥させる。ポリマー（３）が６．１ｇ、すなわち９６％の収率が得られる。ＴＦＡ−ｄにおける１Ｈ ＮＭＲによって決定されるトコフェロールの百分率は、４．５％である。ＴＦＡ−ｄにおける１Ｈ ＮＭＲによって決定されるヒドロキヒエチルグルタミンの百分率は、９５％である。Ｍｎ（ＧＰＣ ＮＭＰによって決定される）は、ＰＭＭＡ当量で１１６ｋｇ／モルである。
【００９６】
＜実施例３：ポリマーＣ１、ＰＨＥＧ−ジステアリルアミンの合成＞
比較ポリマーＣ１を特許出願国際公開第０２／０９８９５２号の実施例４に従って合成した。このポリマーは、４０個のポリヒドロキシエチルグルタミン単位で構成される鎖の末端にジステアリルアミン基を含む。
【００９７】
＜実施例４：インスリンとの組合せの研究＞
ｐＨ７．４で１ミリリットル当たりポリマーを１０ｍｇ含み、２００ＩＵのインスリン（７．４ｍｇ）を含む水溶液を調製する。この水溶液を室温で２時間インキュベートし、限外ろ過（１００ＫＤａで閾値、１８℃、１００００×Ｇで１５分）によって会合インスリンから遊離インスリンを分離する。次いで、ろ過で回収した遊離インスリンを、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィ）によって分析し、会合インスリンの量を推定する。結果を以下の表１に示す。
【００９８】
【表１】
これらの結果により、本発明のポリマーはインスリンを強く会合させて寸法が１００ＫＤａよりも大きいコロイド懸濁液を与えることができ、またインスリンとの会合度が非常に高いことが実証される。鎖の末端にジステアリル疎水基を有するポリマーＣ１は、より効率が悪い。これらのポリマーの会合能により、これらのポリマーが可送達化剤としての使用に適したものとなる。
【００９９】
＜実施例５：ｐＨの関数としてポリマーの溶解度＞
ポリマー２の溶解度を、参照ポリマー、すなわち特許出願国際公開第０３／１０４３０３号に記載されているように合成した、約５モル％のアルファ−トコフェロールでグラフト化されたポリグルタミン酸ナトリウム（ポリマーＣ２）の溶解度と比較した。結果は以下のとおりである。
【０１００】
【表２】
ポリマー２の溶解度は、広範囲のｐＨに及んでいるようである。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特に活性主成分（ＡＰ）の可送達化（ベクトル化）に有用なコポリアミノ酸に基づく新規の生分解性材料に関する。
【０００２】
本発明はまた、これらの改質ポリアミノ酸に基づく新規の薬剤用、化粧品用、誘電体用または植物保護用組成物にも関する。これらの組成物は、ＡＰの可送達化を可能にし、好ましくはエマルション、ミセル、粒子、ゲル、インプラントまたは被膜の形であるタイプの組成物でよい。
【背景技術】
【０００３】
検討中のＡＰは、有利には、人体または動物体に経口投与、非経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与、脳内投与、口腔投与等することができる生物活性化合物である。
【０００４】
本発明がより詳細に関連するＡＰは、これらに限らないが、タンパク質類、糖タンパク質類、ペプチド類、多糖類、リポ糖類、オリゴヌクレオチド類、ポリヌクレオチド類および有機分子である。しかしながら、これらのＡＰは、化粧製品、または除草剤、殺虫剤、殺菌剤などの植物保護製品でもよい。
【０００５】
活性主成分、特に医薬活性主成分の可送達化の分野では、多くの場合、
・活性主成分がその作用部位に到達するまで、分解（加水分解、その場沈殿、酵素消化等）から活性主成分を保護する、
・および／または定められた期間にわたって治療レベルが維持されるように活性主成分の放出速度を制御する、
・および／または活性主成分を（保護しながら）作用部位まで運搬する必要がある。
【０００６】
これらの目的のために、いくつかのタイプのポリマーが研究されてきており、一部のポリマーは市販もされている。言及することができる例には、ポリ乳酸、ポリ乳酸−グリコール酸、ポリオキシエチレン−オキシプロピレン、ポリアミノ酸または多糖型のポリマーが含まれる。これらのポリマーは、例えば、バルクインプラント、微粒子、ナノ粒子、ベシクル、ミセルまたはゲルを作製するための出発原料を構成する。これらのポリマーは、このような系の作製に適するべきであると共に、生体適合性で、毒性がなく、非免疫原性で、および経済的であるべきであり、また人体から容易に取り除くことができるおよび／または生分解性となることができるべきである。この最後の態様に関しては、人体内での生分解により無毒性の生成物が生成されることがさらに不可欠である。
【０００７】
会合性ポリマーの開発においてやはり重要である別の態様は、その水溶性である。大量のポリマーを溶解させる可能性により、所望の放出プロファイルに適したポリマー／活性主成分比を提供することが可能となる。
【０００８】
ＡＰ可送達化系を調製するための出発材料として使用されるポリマーに関する先行技術の例として、様々な特許または特許出願または科学論文について以下に述べる。
【０００９】
米国特許第４６５２４４１号（特許文献１）には、ホルモンＬＨ−ＲＨをカプセル化するポリラクチドマイクロカプセルが記載されている。これらのマイクロカプセルは、ホルモンと前記ホルモン固定する物質（ゼラチン）とを含む内側水層と、ポリラクチドの油層と、また外側水層（ポリビニルアルコール）とを含む水／油／水エマルションを調製することによって生成される。ＡＰの放出は、皮下注射の後２週間よりも長い期間にわたって行うことができる。
【００１０】
米国特許第６１５３１９３号（特許文献２）には、アドリアマイシンなどの抗癌剤の可送達化用の両親媒性ポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシエチレン）ミセルに基づく組成物が記載されている。
【００１１】
Ａｋｉｙｏｓｈｉら（Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ １９９８、５４、３１３〜３２０；非特許文献１）には、その上にコレステロールをグラフト化することによって疎水性となり、および水中でナノ粒子を形成するプルランが記載されている。インスリンと可逆的に錯体を形成することができるこれらのナノ粒子は、安定なコロイド懸濁液を形成する。
【００１２】
米国特許第４３５１３３７号（特許文献３）には、ロイシンおよびグルタメートに基づく両親媒性コポリアミノ酸が記載されており、これらの両親媒性コポリアミノ酸は、活性主成分の制御放出用にインプラントまたは微粒子の形で使用することができる。これらの活性主成分の放出は、ポリマーの分解速度によっては非常に長い期間にわたって行うことができる。
【００１３】
米国特許第４８８８３９８号（特許文献４）には、ポリグルタメートまたはポリアスパルテートと、任意選択でポイロイシンとに基づく、アルキルオキシカルボニルメチル型の側鎖基がポリアミノ酸鎖上にランダムに配列されているポリマーが記載されている。側基、例えば、メトキシカルボニルメチルでグラフト化されたこれらのポリアミノ酸は、持続放出ＡＰを含む生分解性インプラントの形で使用することができる。
【００１４】
米国特許第５９０４９３６号（特許文献５）には、ポリロイシン−ポリグルタメートブロックポリマーから得られるナノ粒子が記載されている。これらのナノ粒子は、安定なコロイド懸濁液を形成することができ、また生物活性タンパク質を変性させることなくそれら生物活性タンパク質と自発的に結合できる。次いで前記タンパク質を、長期間にわたって、制御して生体内で放出することができる。
【００１５】
米国特許第５４４９５１３号（特許文献６）には、ポリオキシエチレンブロックおよびポリアミノ酸ブロック、例えば、ポリ（ベータ−ベンジル Ｌ−アスパルテート）を含む両親媒性ブロックコポリマーが記載されている。これらのポリオキシエチレン−ポリベンジルアスパルテートポリマーは、アドリアマイシンやインドメタシンなどの疎水性活性分子をカプセル化することができるミセルを形成する。
【００１６】
特許出願国際公開第９９／６１５１２号（特許文献７）には、疎水基（ポリリシンまたはオルニチンと結合しているパルミチン酸）および親水基（ポリオキシエチレン）で官能化されたポリリシンおよびポリオルニチンが記載されている。これらのポリマー、例えば、ポリオキシエチレンおよびパルミトイル鎖でグラフト化されたポリリシンは、コレステロールの存在下で、ドキソルビシンまたはＤＮＡをカプセル化することができるベシクルを形成する。これらポリリシンをベースとするポリマーは、生理的媒体中でカチオン性である。
【００１７】
本出願人による米国特許第６６３０１７１号（特許文献８）には、安定なコロイド懸濁液を形成することができ、また生物活性タンパク質を変性させることなくそれら生物活性タンパク質と自発的に結合できるポリ（グルタミン酸ナトリウム）−ポリ（グルタミン酸メチル、エチル、ヘキサデシルまたはドデシル）ブロックまたはランダムポリマーが記載されている。次いでこれらのタンパク質を、長期間にわたって、制御して生体内で放出することができる。これらの両親媒性線状コポリアミノ酸は、疎水性アルキル側鎖の存在によって改質される。これらのアルキル基は、エステル官能基を介してポリマー上に共有結合的にグラフト化される。これらのポリマーは、生理的媒体中でアニオン性である。
【００１８】
この同じ分野において、関連する概念のポリグルタメートをベースとするポリマー（アニオン性）が、本出願人によりいくつかの特許出願に記載されている。
【００１９】
特許出願国際公開第０３／１０４３０３号（特許文献９）には、アルファトコフェロールで官能化されたアニオン性ポリアミノ酸が記載されている。
【００２０】
特許出願国際公開第２００４／０１３２０６号（特許文献１０）には、疎水基を含むアニオン性ポリアミノ酸であって、これらの基がアミド官能基を２つ含む結合基を介して、より具体的にはリシンまたはオルニチン型のスペーサを介してポリマーと結合していることを特徴とするアニオン性ポリアミノ酸が記載されている。
【００２１】
特許出願国際公開第２００４／０６０９６８号（特許文献１１）には、ロイシンおよび／またはイソロイシンおよび／またはバリンおよび／またはフェニルアラニンに基づく少なくとも１つのオリゴアミノ酸基で官能化されたポリアミノ酸が記載されている。
【００２２】
特許出願国際公開第８７／０３８９１号（特許文献１２）には、枝分かれしたまたは星型の線状両親媒性ポリマーが記載されており、それらポリマーの末端にのみ少なくとも２つの疎水基が結合している。前記特許出願は、前記特許の実施例のすべてからわかるように、基本的にはポリエチレングリコールに基づく中性の親水性ポリマーに関する。しかしながら、このタイプのポリマーは生分解性ではなく、このことは大きな欠点となる。
【００２３】
特許出願国際公開第０２／０９８９５１号（特許文献１３）および国際公開第０２／０９８９５２号（特許文献１４）には、ポリマーの一方の末端に疎水基を１つまたは２つ有するポリアルキルグルタミンが記載されている。これらのポリマーは、リポソームを形成することができ、また水溶性小分子（活性主成分）をカプセル化することができる。
【００２４】
特許出願国際公開第０３／００２０９６号（特許文献１５）には、ポリマーの一方の末端にポリエチレングリコール鎖、および側鎖疎水基の両方を含むポリヒドロキシエチルアスパルトアミドが記載されている。これらのポリマーはナノ粒子を形成することができ、また活性主成分をカプセル化することができる。
【００２５】
特許出願国際公開第０２／２８５２１号（特許文献１６）には、活性主成分（ＡＰ）を可送達化（ＶＰ）するための生体適合性粒子の懸濁液が記載されている。これらのＶＰは、中性の親水性ポリアミノ酸（ｐｏｌｙＮＩＡＡ）／中性の疎水性ポリアミノ酸（ｐｏｌｙＮＯＡＡ）ジブロックコポリマー、例えば、ポリ［（ロイシン）−ブロック−（グルタミン−Ｎ−ヒドロキシエチル）］ｘに基づいている。これらのｐｏｌｙＮＩＡＡ／ｐｏｌｙＮＯＡＡ粒子は、コロイド懸濁液中、溶解されていない形で少なくとも１つのＡＰを組み合わせることができ、また特に生体内で少なくとも１つのＡＰを持続的におよび／または遅延して放出することができる。この発明は、ＶＰが由来する粉体にも関し、またこの粉体の調製およびこのｐｏｌｙＮＩＡＡ／ｐｏｌｙＮＯＡＡをベースとするＶＰの懸濁液の調製にも関する。これら新規のＶＰは、自発的に、また界面活性剤または有機溶媒の助けを借りずに安定な水性懸濁液を形成する。この発明は、乾燥状態にあるＶＰ、ＶＰを調製するための方法、また活性主成分と組み合わせたこれらのＶＰを含む薬剤用組成物（乾燥状態または懸濁状態にある）にも関する。
【００２６】
したがって、医薬活性主成分の可送達化用に非常多くの技術的解決法が先行技術において開発され提案されているが、これらの要件すべてに対する解決策を得ることは困難であり、依然として改善されていない。より具体的には、本発明は、活性主成分と可逆的に結合できるコロイド状可送達化ナノ粒子または微粒子に変換することができる公知の生分解性ポリアミノ酸に関する。
【特許文献１】米国特許第４６５２４４１号
【特許文献２】米国特許第６１５３１９３号
【特許文献３】米国特許第４３５１３３７号
【特許文献４】米国特許第４８８８３９８号
【特許文献５】米国特許第５９０４９３６号
【特許文献６】米国特許第５４４９５１３号
【特許文献７】特許出願国際公開第９９／６１５１２号
【特許文献８】米国特許第６６３０１７１号
【特許文献９】特許出願国際公開第０３／１０４３０３号
【特許文献１０】特許出願国際公開第２００４／０１３２０６号
【特許文献１１】特許出願国際公開第２００４／０６０９６８号
【特許文献１２】特許出願国際公開第８７／０３８９１号
【特許文献１３】特許出願国際公開第０２／０９８９５１号
【特許文献１４】国際公開第０２／０９８９５２号
【特許文献１５】特許出願国際公開第０３／００２０９６号
【特許文献１６】特許出願国際公開第０２／２８５２１号
【非特許文献１】Ａｋｉｙｏｓｈｉら、Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ １９９８、５４、３１３〜３２０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２７】
この状況において、本発明の本質的な目的の１つは、広範囲のｐＨにわたって可溶性である、新規の線状または枝分かれした基本的に中性の両親媒性コポリアミノ酸を提供することである。これらのポリマーは、上記特許または特許出願に記載されているポリマーと比較すると、治療用タンパク質などの活性主成分の可送達化の点で向上を示す。
【００２８】
本発明の別の本質的な目的は、これらのポリマーがＡＰの可送達化に使用することが可能であるべきであること、およびこれらのポリマーにより仕様事項のすべて、すなわち、特に、
・能力：
・安定な水性コロイド懸濁液を容易にまた経済的に形成する能力、
・多くの活性主成分と容易に結合する能力、および
・これらの活性主成分を生体内で放出する能力、
・生体適合性、
・生分解性、
・加水分解に対する安定性
が最適に満たされることが可能となるべきであることである。
【課題を解決するための手段】
【００２９】
中でもこの目的は、本発明によって実現される。本発明はまず、複数の側鎖で同一または異なる疎水基（ＨＧ）を含むコポリヒドロキシアルキルグルタミンに関する。
【００３０】
本発明の目的としては、用語「複数」は、コポリヒドロキシアルキルグルタミンが１分子当たり平均して少なくとも２つの側鎖ＨＧを含むことを意味する。本発明に従って、このコポリヒドロキシアルキルグルタミンが、これらの側鎖ＨＧに加えて、コポリマー鎖の末端の少なくとも１つに付着しているＨＧを含むことが可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３１】
本発明の好ましい一実施形態によれば、このコポリヒドロキシアルキルグルタミンは、コポリマー鎖当たり平均して少なくとも３つの疎水基（ＨＧ）を含む。
【００３２】
このコポリヒドロキシアルキルグルタミンは、ヒドロキシ−アルキルアミン基も有する。これらのヒドロキシアルキルアミン基は、好ましくはアミン結合を介してコポリマーと結合している。
【００３３】
本出願人は、その評価に対して、複数の疎水基で官能化され、安定なコロイド系を形成することができる「基本的に中性の」ポリヒドロキシアルキルグルタミンをベースとするコポリマーの新規の群を開発した。コロイドの表面上のアニオン電荷数を修正する能力により、これらコポリマーのタンパク質および／または生細胞との相互作用を修正することが特に可能となり、したがってこれらポリマーのバイオアベイラビリティ（ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）を変更することが可能となる（例えば、Ｆｕｒｕｍｏｔｏらによる論文、Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ ２００４、９７、１３３〜１４１を参照のこと）。
【００３４】
これらの新規のポリマーは、タンパク質類の可送達化に特に適していることがわかっている。さらに、これらのポリマーは、酵素の存在下で、毒性のない異化代謝産物／代謝産物（アミノ酸）に容易に分解される。
【００３５】
本発明の目的としては、また本明細書を通じて、１つまたは複数の活性主成分とコポリヒドロキシアルキルグルタミンとの関係を修飾するために使用する用語「会合（ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）」および「会合させる（ａｓｓｏｃｉａｔｅ）」は、活性主成分が特に疎水性相互作用を介してコポリヒドロキシアルキルグルタミンと結合し、および／またはコポリヒドロキシアルキルグルタミンによってカプセル化されていることを特に意味する。
【００３６】
コポリヒドロキシアルキルグルタミンのグルタメート単位を官能化するために使用することができるヒドロキシアルキルアミン基は、同一または異なるもので、例えば以下の基、２−ヒドロキシエチルアミン、３−ヒドロキシプロピルアミン、２，３−ジ−ヒドロキシプロピルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンおよび６−ヒドロキシヘキシルアミンから選択される。
【００３７】
有利には、疎水基ＨＧの少なくとも１つが、コポリグルタメート鎖（例えば、骨格コポリグルタメート主鎖）に疎水基ＨＧを結合するためのスペーサ結合基（または単位）（「スペーサ」）を少なくとも１つ含む疎水性グラフトに含まれる。この結合基は、例えば、少なくとも１つの直接共有結合および／または少なくとも１つのアミド結合および／または少なくとも１つのエステル結合を含むことができる。例えば、この結合基は、コポリグルタメートの構成単量体単位以外の「アミノ酸」単位、アミノアルコール誘導体、ポリアミン誘導体（例えば、ジアミン類）、ポリオール誘導体（例えば、ジオール類）およびヒドロキシ酸誘導体を特に含む群に属するタイプの結合基でよい。
【００３８】
これらＨＧのコポリグルタメートまたはポリアルキルグルタミン鎖へのグラフト化は、コポリグルタメートまたはコポリヒドロキシアルキルグルタミン鎖に結合することができるＨＧ前駆体を使用することによって行うことができる。
【００３９】
これらＨＧ前駆体は、実際には、アルコール類およびアミン類を含む群からこれに限定されることなく選択される。というのも、これらの化合物は、当業者が容易に官能化することができるからである。ＨＧのグラフト化は、本発明による改質ポリアミノ酸を生成する方法についての説明においてより詳細に以下で説明する。
【００４０】
好ましい一特性によれば、疎水性グラフトの疎水基ＨＧは炭素原子を８〜３０個含む。
【００４１】
これらの疎水基ＨＧは、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子を場合によっては含むＣ８〜Ｃ３０の直鎖または分岐アルキル類
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子を場合によっては含むＣ８〜Ｃ３０のアルキルアリール類またはアリールアルキル類、および
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子を場合によっては含むＣ８〜Ｃ３０の（多）環状物質
を含む群から有利に、また賢明に選択される。
【００４２】
ＨＧと共に疎水性グラフトを形成する結合基は、二価、三価または四価でよい（または五価以上であってもよい）。二価の結合基の場合、疎水性グラフトはＨＧ基を１つだけ含み、一方三価の結合基は、疎水性グラフトに二分性を与える、すなわちグラフトが２本のＨＧの「脚」を有する。言及することができる三価の結合基の例には、とりわけ、「アミノ酸」単位、例えば「グルタミン酸」、またはポリオール残基、例えばグリセロールが含まれる。したがって、二分ＨＧを含む疎水性グラフトの有利ではあるが非限定的な例は、ジアルキルグリセロール類およびジアルキルグルタメートである。
【００４３】
これらの疎水基ＨＧは、例えば、オクタノール、ドデカノール、テトラデカノール、ヘキサデカノール、オクタデカノール、オレイルアルコール、トコフェロールまたはコレステロールを含む群から選択される基から誘導することができる。
【００４４】
好ましくは、本発明によるコポリグルタメートの骨格は、アルファ−Ｌ−グルタメート単位および／またはアルファ−Ｌ−グルタミック単位を含む。
【００４５】
さらにより好ましくは、本発明によるコポリヒドロキシアルキルグルタメートは、以下の一般式（Ｉ）の１つに対応する。
【００４６】
【化１】
式中、
・Ａは独立して、
−Ｒ２がＨ、Ｃ２〜Ｃ１０の直鎖アルキルまたはＣ３〜Ｃ１０の分岐アルキル、またはベンジルを示す基ＮＨＲ２、
−窒素と、それぞれＮＨＲ２およびＯＲ２の定義に対応するアミンまたはアルコールで任意選択で改質された酸官能基とを介して結合している末端アミノ酸単位を示し、
・Ｂは、以下の基、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ５）アルキル−、アミノ酸残基（好ましくは、天然アミノ酸の）、ジオール、トリオール、ジアミン、トリアミン、アミノアルコールまたは炭素原子を１〜６個含むヒドロキシ酸から好ましくは選択される二価、三価または四価の結合基であり、
・Ｃは、モノヒドロキシ、ジヒドロキシまたはトリヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、好ましくはヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピルまたはトリヒドロキシメチルメタンであり、
・Ｄは、Ｈ、Ｃ２〜Ｃ１０の直鎖アルキルまたはＣ３〜Ｃ１０の分岐アシル基、またはピログルタメートであり、
・疎水基ＨＧは互いに独立して、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくはＯおよび／またはＮおよび／またはＳ）を場合によっては含むＣ８〜Ｃ３０の直鎖または分岐アルキル類、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくはＯおよび／またはＮおよび／またはＳ）を場合によっては含むＣ８〜Ｃ３０のアルキルアリール類またはアリールアルキル類、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくはＯおよび／またはＮおよび／またはＳ）を場合によっては含むＣ８〜Ｃ３０の（多）環状物質から選択される基を示し、
・Ｒは、Ｈ、または
−ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムを含む部分群から有利に選択される金属カチオン類、
−・アミンをベースとするカチオン類、
・オリゴアミンをベースとするカチオン類、
・ポリアミンをベースとするカチオン類（ポリエチレンイミンが特に好ましい）、
・リシンまたはアルギニンをベースとするカチオン類を含むクラスから有利に選択されるアミノ酸をベースとするカチオン類を含む部分群から有利に選択される有機カチオン、
−またはポリリシンまたはオリゴリシンを含む部分群から有利に選択されるカチオン性ポリアミノ酸類を含む群から好ましくは選択されるカチオン種を示し、
・ｍ、ｎおよびｑは自然数であり、
・（ｍ）／（ｍ＋ｑ＋ｎ）は、疎水基ＨＧのグラフト化のモル度と定義され、各コポリマー鎖は平均して少なくとも３つの疎水性グラフトを含むという条件で０．５から９０モル％までの範囲であり、
・（ｍ＋ｑ＋ｎ）は１０〜１０００、好ましくは３０〜５００の範囲であり、
・（ｑ）／（ｍ＋ｑ＋ｎ）は、０〜６０モル％の範囲であり、
・ｐは１〜３の範囲に及ぶ整数である。
【００４７】
好ましくは、疎水基ＨＧはランダムに分布している。
【００４８】
本発明によるコポリヒドロキシアルキルグルタミンの疎水性単位によるグラフト化のモル度は、各ポリマー鎖が平均して少なくとも３つの疎水性グラフトを含むという条件で２％〜１００％、好ましくは５％〜５０％であることがさらに好ましい。
【００４９】
本発明によるコポリヒドロキシアルキルグルタミンの比率（ｑ）／（ｍ＋ｑ＋ｎ）は、コポリヒドロキシアルキルグルタミンが０〜約６０モル％のカルボン酸官能基またはカルボキシレート官能基を含むことができることを意味する。
【００５０】
本発明の別の注目に値する特性によれば、本発明によるポリマーは、２０００〜２０００００ｇ／モル、好ましくは５０００〜１０００００ｇ／モルのモル質量を有する。
【００５１】
一変形形態では、本発明によるコポリヒドロキシアルキルグルタミンが、グルタメート単位と結合しているポリアルキレン（好ましくはエチレン）グリコール型のグラフトを少なくとも１つ有する。
【００５２】
当然ながら、本発明は、上で定義したように改質したポリアミノ酸の混合物も網羅する。
【００５３】
極めて注目すべきことに、本発明のコポリヒドロキシアルキルグルタミンは、疎水基の性質およびコポリグルタメートの重合度に応じて、いくつかのやり方で使用することができる。本発明が対象とする様々な形の活性主成分のカプセル化用にポリマーを形成するための方法は、当業者に公知である。さらなる詳細については、例えば、これらの特に関連する選択された参考文献について言及することができる。
【００５４】
「Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ，Ｍｉｃｒｏｃａｐｓｕｌｅｓ ａｎｄ Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ；ｖｏｌ １．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」、Ｅｄ．Ｒ．Ａｒｓｈａｄｙ、Ｃｉｔｕｓ Ｂｏｏｋｓ １９９９。ＩＳＢＮ：０−９５３２１８７−１−６。
【００５５】
「Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ−Ｒｅｌｅａｓｅ Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ」、Ｅｄ．Ｊ．ＳｅｎｉｏｒおよびＭ．Ｒａｄｏｍｓｋｙ、Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ Ｐｒｅｓｓ ２０００。ＩＳＢＮ：１−５７４９１−１０１−５。
【００５６】
「Ｃｏｌｌｏｉｄａｌ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ」、Ｅｄ．Ｊ．Ｋｒｅｕｔｅｒ、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．１９９４。ＩＳＢＮ：０−８２４７−９２１４−９。
【００５７】
「Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」、Ｅｄ．Ｄ．Ｌ．Ｗｉｓｅ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．２０００。ＩＳＢＮ：０−８２４７−０３６９−３。
【００５８】
これらのコポリヒドロキシアルキルグルタミンは、コポリマーの長さ（重合度）および疎水基の性質によっては、ｐＨ７．４（例えば、リン酸緩衝液により）の水に分散して、コポリマーの濃度に応じてコロイド溶液または懸濁液または構造または非構造ゲルを与えるため、極めて有利でもある。さらに、これらのコポリヒドロキシアルキルグルタミン（粒子状または他の形の）は、タンパク質類、ペプチド類、小分子などの活性主成分と容易にカプセル化するまたは結合することができる。好ましい形成作業は、本出願人による米国特許第６６３０１７１号に記載されている作業であり、コポリマーを水に分散させること、およびその溶液を活性主成分（ＡＰ）の存在下でインキュベートすることにある。次いで、本発明によるコポリヒドロキシアルキルグルタミンで構成される可送達化粒子のこのコロイド溶液を、０．２μｍのフィルタを通してろ過し、その後患者に直接注射することができる。
【００５９】
親水性／疎水性の比が低下すると、コポリマーは、ＡＰを会合させるまたはカプセル化することができる微粒子を形成することができる。この状況において、微粒子の形成は、ＡＰおよびポリマーを適切な有機溶解に共に溶解させ、次いでこの混合物を水中で沈殿させることによって行うことができる。次いで、これらの粒子をろ過によって回収し、その後経口投与に（ゲルカプセルの形で、圧縮しおよび／またはコーティングした形で、または油に分散させた形で）、または水に再分散させた後、非経口投与で使用することができる。
【００６０】
一変形形態によれば、Ｎ−メチルピロリドンなどの生体適合性溶媒、エタノールまたはＭｙｇｌｙｏｌ（登録商標）などの適切な油にコポリマーを溶解させ、次いで筋肉注射するまたは皮下注射するまたは腫瘍に注射することができる。溶媒または油の拡散により、注射部位にコポリマーの沈殿がもたらされ、したがって堆積物が形成される。次いで、これらの堆積物を、コポリマーの拡散および／または浸食および／または加水分解もしくは酵素分解によって制御放出する。
【００６１】
本発明によるポリマーの微粒子形が好ましいこととは関係なく、中性のまたはイオン化された形の本発明のコポリマーが水性または有機媒体中単独で、または液体、固体またゲル組成物でより一般的に使用される。
【００６２】
コポリグルタミンをベースとするコポリマーは、ｐＨおよび組成に応じて中性（ＣＯＯＨの形）またはイオン化された（ＣＯＯ−アニオン）残存カルボキシリック官能基を含むことを理解されたい。水溶液では、対カチオンは、ナトリウム、カルシウム、マグネシウムなどの金属カチオン、またはトリエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、ポリエチレンイミンなどのポリアミンなどの有機カチオンでよい。
【００６３】
本発明のコポリマーは、例えば、当業者に公知の方法に従って得られる。まず、アルファ型のポリアミノ酸を得ることを思い起こす。最も一般的な技法は、例えば、論文「Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ」、１９７６、１５、１８６９に、またＨ．Ｒ．Ｋｒｉｃｈｅｌｄｏｒｆによる書籍「ａｌｐｈａ−Ａｍｉｎｏａｃｉｄ−Ｎ−ｃａｒｂｏｘｙ Ａｎｈｙｄｒｉｄｅ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ」Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ（１９８７）に記載されているＮ−カルボキシアミノ酸（ＮＣＡ）無水物の重合に基づく。このＮＣＡ誘導体は、好ましくはＮＣＡ−Ｇｌｕ−Ｏ−Ｂｚ（Ｂｚ＝ベンジル）である。というのもこのベンジル基を、ホモポリマーのまたは疎水基の他の化学官能基に影響を及ぼすことなく選択的に加水分解することができるからである。
【００６４】
本発明に従って使用することができる一定数のポリマー、例えば、可変質量のポリ（アルファ−Ｌ−グルタミック）、ポリ（アルファ−Ｄ−グルタミック）、ポリ（アルファ−Ｄ，Ｌ−グルタメート）およびポリ（ガンマ−Ｌ−グルタミック）型のポリマーが市販されている。
【００６５】
好ましくは、本発明のコポリマーは、２つのルートに従って合成される。第１に、ヒドロキシアルキルアミン（例えば、エタノールアミン）基および基Ｂ−ＨＧ（例えば、ドデシルアミン）を、まずポリ（Ｌ−グルタミン酸）上に同時にまたは順次グラフト化する。この反応は、以下のスキームに従ってＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ＮＭＰなどの溶媒中で行うことができる。
【００６６】
【化２】
このポリ（Ｌ−グルタミン酸）は、フランス特許出願第２８０１２２６号に記載されているルートに従って合成することができる。基ＨＢ−ＨＧがエステル官能基を介して結合されると、アルキルアミンをグラフト化する前にカルボジイミド基を用いた標準的なカップリング反応により基Ｂ−ＨＧをグラフト化することがまずより容易になる。
【００６７】
【化３】
第２に、まずポリ（アルキル−Ｌ−グルタミン）を、まず文献（例えば、国際公開第０２／０９８９５１号を参照のこと）に記載されているルートに従って調製し、このポリマーのアルキルアミドのＯＨ基に疎水基ＨＧをグラフト化する。
【００６８】
重合化学およびこれらの基のカップリング反応は標準的で、当業者には周知である（例えば、先に述べた本出願人による特許および特許出願を参照のこと）。これらの方法は、実施例の説明を通してより明確に理解されるであろう。
【００６９】
重合度は、モノマーのモル比に対する開始剤のモル比と定義されることに留意されたい。
【００７０】
ポリマーの酸官能基を用いる疎水性グラフトＨＧのカップリングは、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）など適切な溶媒中、カップリング剤としてのカルボジイミド、および任意選択で４−ジメチルアミノピリジンなどの触媒の存在下、ポリアミノ酸を反応させることによって容易に行われる。カルボジイミドは、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミドまたはジイソプロピルカルボジイミドである。クロロギ酸エステルなどのカップリング試薬を、アミド結合の形成に使用することもできる（例えば、Ｂｏｄａｎｓｚｋｙによる書籍「Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ １９８４を、例えばカップリング剤について参照のこと）。グラフト化度は、構成成分および試薬の化学量論または反応時間によって化学的に制御される。ポリマーのアミノ酸以外のアミノ酸で官能化された疎水性グラフトは、標準的なペプチドカップリングによって、または直接酸触媒縮合によって得られる。これらの技法は、当業者には周知である。
【００７１】
その別の態様によれば、本発明は、上で定義したコポリヒドロキシアルキルグルタミンを少なくとも１つと、任意選択で活性主成分を少なくとも１つ含む薬剤用、化粧品用、誘電体用または植物保護用組成物を対象とする。この活性主成分は、治療用、化粧品用、誘電体用または植物保護用活性主成分でよい。
【００７２】
本発明の有利な構成によれば、活性主成分を、１つ（または複数の）共有化学結合以外の１つまたは複数の結合で改質されたポリアミノ酸と組み合わせる。
【００７３】
１つまたは複数のＡＰを本発明による改質ポリアミノ酸と組み合わせるための技法は、特に米国特許第６６３０１７１号に記載されている。これらの技法は、１つまたは複数の活性主成分ＡＰを含むまたはＡＰと組み合わせた可送達化粒子（ＶＰ）のコロイド懸濁液が得られるように、ＶＰを含む液体媒体に少なくとも１つの活性主成分を組み込むことにある。ＶＰがＡＰを捕捉することになるこの混入は以下のように行うことができる。
【００７４】
・ＡＰを水溶液に溶解させ、その後、コロイド懸濁液の形で、または孤立したＶＰ（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚａｔｅまたは沈殿）の形でＶＰを添加する。
【００７５】
・または、水など適切な溶媒に乾燥ＶＰを分散させることによって任意選択であらかじめ調製したＶＰ粒子のコロイド懸濁液に、ＡＰを溶液として、ＡＰだけを、または配合した形のＡＰを添加する。
【００７６】
好ましくは、活性主成分は、タンパク質、糖タンパク質、１つまたは複数のポリアルキレングリコール鎖と結合しているタンパク質（好ましくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）：「タンパク質−ＰＥＧｙｌａｔｅｄ」）、多糖、リポ糖、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチドまたはペプチドである。
【００７７】
一変形形態によれば、活性主成分は、疎水性、親水性または両親媒性の有機「小」分子である。
【００７８】
本明細書の目的としては、「小」分子は、特に非タンパク質小分子である。
【００７９】
本発明によるポリアミノ酸と組み合わせることができるＡＰの例として、（ナノまたはマイクロ）粒子の形であるかどうかにかかわらず、
・インスリン、インターフェロン、成長ホルモン、インターロイキン、エリスロポイエチン、サイトカインなどのタンパク質類、
・ロイプロリドやシクロスポリンなどのペプチド類、
・アントラサイクリン類、タキソイド類またはカンプトセシン類の群に属するものなどの小分子、
・およびこれらの混合物を言及することができる。
【００８０】
一実施形態によれば、本発明の組成物は、ゲル、溶液、懸濁液、エマルション、ミセル、ナノ粒子、微粒子、インプラント、粉末または被膜の形である。
【００８１】
その特に好ましい形の１つによれば、活性主成分を含むまたは含まないこの組成物は、水相中におけるポリアミノ酸ミセルおよび／または微粒子および／またはナノ粒子の安定なコロイド懸濁液である。
【００８２】
別の実施形態によれば、本発明の組成物は生体適合性溶媒中で溶液の形であり、皮下注射する、筋肉注射するまたは腫瘍に注射することができる。
【００８３】
本発明による組成物は、薬剤用である場合、経口投与、非経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与、脳内投与または口腔投与することができる。
【００８４】
この組成物が、生体適合性溶媒または溶媒混合物中で溶液の形であり、皮下注射する、筋肉注射するまたは腫瘍に注射することができることも想定することができる。
【００８５】
別の実施形態によれば、この組成物は、ｐＨおよび／または浸透圧を調整するために、および／または安定性（抗酸化）を向上させるために、および／または抗菌剤として賦形剤を任意選択で含むことができる。これらの賦形剤は、当業者には周知である（書籍、Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、Ｐ．Ｋ．Ｇｕｐｔａら、Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ Ｐｒｅｓｓ、デンバー市、コロラド州、１９９９を参照のこと）。
【００８６】
別の変形形態によれば、本発明による組成物は、注射部位に堆積物を形成することができるように調合される。この堆積物は、例えば、生体内に存在する生理的タンパク質によって少なくとも部分的にもたらされることがある。
【００８７】
また本発明は、本発明によるポリアミノ酸および活性主成分を含む組成物であって、
・薬剤、特に、経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与または脳内投与用の薬剤において、これらの薬剤の活性主成分が、場合によっては、特にタンパク質類、糖タンパク質類、１つまたは複数のポリアルキレングリコール鎖と結合しているタンパク質類｛例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）であり、この場合「ＰＥＧｙｌａｔｅｄ」タンパク質と称される｝、ペプチド類、多糖類、リポ糖類、オリゴヌクレオチド類、ポリヌクレオチド類、疎水性、親水性または両親媒性の有機小分子である薬剤、
・および／または栄養素、
・および／または化粧製品または植物保護製品の調製に使用することができる組成物も対象とする。
【００８８】
そのさらに別の態様によれば、本発明は、
・薬剤、特に、経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与または脳内投与用の薬剤において、これらの薬剤の活性主成分が、場合によっては、特にタンパク質類、糖タンパク質類、１つまたは複数のポリアルキレングリコール鎖と結合しているタンパク質類｛例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）であり、この場合「ＰＥＧｙｌａｔｅｄ」タンパク質と称される｝、ペプチド類、多糖類、リポ糖類、オリゴヌクレオチド類、ポリヌクレオチド類、疎水性、親水性または両親媒性の有機小分子である薬剤、
・および／または栄養素、
・および／または化粧製品または植物保護製品を調製する方法を対象とし、
この方法は、本質的に、上で定義した少なくとも１つのホモポリアミノ酸および／またはやはり上で定義した組成物を使用することにあることを特徴とする。
【００８９】
本発明は、本質的に、本明細書中に記載されている組成物を、経口投与、非経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与、脳内投与または口腔投与することにある治療方法にも関する。
【００９０】
本発明の特定の一変形形態によれば、この治療方法は、本質的に、生体適合性溶媒中で溶液の形である上述の組成物を用意し、次いで好ましくは注射部位に堆積物が形成されるようにこの組成物を皮下注射する、筋肉注射するまたは腫瘍に注射することにある。
【００９１】
本発明のポリマーの合成、それらポリマーのＡＰ可送達化系（安定な水性コロイド懸濁液）への変換、およびタンパク質と組み合わさって薬剤用組成物を形成するこのような系の能力の実証を説明する以下の実施例から、本発明がより明確に理解され、その利点および変形実施形態がより明らかになるであろう。
【実施例】
【００９２】
＜実施例１：ポリマー（１）、ｐＨＥＧ Ｃ１２の合成＞
【００９３】
【化４】
指数および基：ｍ＝１０２、ｎ＝１８、Ｌ＝ＣＯＣ１１Ｈ２３（ラウロイル）
重合度（ＤＰ）が１２０のポリ（グルタミン酸）５ｇを、２５０ｍｌの三口丸底フラスコ中のＤＭＦ７７ｍｌに、８０℃に加熱することによって溶解させる。−１５℃まで冷却したこの溶液に、クロロギ酸イソブチル６．３５ｇと、次いでＮ−メチルモルホリン５．３３ｇとを添加する。この反応媒質を、０℃への温度上昇を可能にしながら１５分間撹拌する。反応媒質を再び−１５℃まで冷却し、その後、２−ラウリン酸アミノエチルのトシル塩のＤＭＦ溶液（２５ｍｌ中２．５８ｇ）を添加する。この反応媒質を、０℃への温度上昇を可能にしながら３０分間撹拌する。反応媒質を再び−１５℃まで冷却し、その後、エタノールアミンを９．５ｇ添加する。１．５時間かけて温度が室温まで上昇する。この後、反応媒質を水９２０ｍｌ中で希釈し、次いで５体積の塩水（０．９％ＮａＣｌ）および８体積の水に対してダイアフィルトレーション（ｄｉａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）を行う。次いで、このポリマー溶液を凍結させ、凍結乾燥させる。ポリマー（２）が５．２ｇ、すなわち６８％の収率が得られる。ＴＦＡ−ｄにおける１Ｈ ＮＭＲによって決定されるＣ１２グラフトの百分率は、１４．４％である。ＴＦＡ−ｄにおける１Ｈ ＮＭＲによって決定されるヒドロキヒエチルグルタミンの百分率は、８６．０％である。Ｍｎ（ＧＰＣ ＮＭＰによって決定される）は、ＰＭＭＡ当量で２２．７ｋｇ／モルである。
【００９４】
＜実施例２：ポリマー（２）、ｐＨＥＧ Ｔの合成＞
【００９５】
【化５】
指数および基：ｍ＝２１１、ｎ＝９、Ｔ＝Ｄ，Ｌ−アルファ−トコフェロール（Ｔ）
合成アルファ−トコフェロール（国際公開第０３／１０４３０３号に記載されている手順に従って得られる）で４モル％がランダムにグラフト化され、重合度（ＤＰ）が２２０のポリ（グルタミン酸）５ｇを、２５０ｍｌの三口丸底フラスコ中のＤＭＦ７７ｍｌに、８０℃に加熱することによって溶解させる。０℃まで冷却したこの溶液に、クロロギ酸イソブチル５．３ｍｌと、Ｎ−メチルモルホリン４．５ｍｌとを添加する。この反応媒質を１５分間撹拌し、その後エタノールアミンを８．３ｍｌ添加する。０℃で５分間維持した温度が、その後室温まで上昇し、媒体を２時間撹拌する。この後、反応媒質を１ＮのＨＣｌ２ｍｌで急冷し、次いで水６００ｍｌ中で希釈し、その後、１体積の塩水（０．９％ＮａＣｌ）および３体積の水に対して透析（１ｋＤチューブ）を行う。次いで、このポリマー溶液を凍結させ、凍結乾燥させる。ポリマー（３）が６．１ｇ、すなわち９６％の収率が得られる。ＴＦＡ−ｄにおける１Ｈ ＮＭＲによって決定されるトコフェロールの百分率は、４．５％である。ＴＦＡ−ｄにおける１Ｈ ＮＭＲによって決定されるヒドロキヒエチルグルタミンの百分率は、９５％である。Ｍｎ（ＧＰＣ ＮＭＰによって決定される）は、ＰＭＭＡ当量で１１６ｋｇ／モルである。
【００９６】
＜実施例３：ポリマーＣ１、ＰＨＥＧ−ジステアリルアミンの合成＞
比較ポリマーＣ１を特許出願国際公開第０２／０９８９５２号の実施例４に従って合成した。このポリマーは、４０個のポリヒドロキシエチルグルタミン単位で構成される鎖の末端にジステアリルアミン基を含む。
【００９７】
＜実施例４：インスリンとの組合せの研究＞
ｐＨ７．４で１ミリリットル当たりポリマーを１０ｍｇ含み、２００ＩＵのインスリン（７．４ｍｇ）を含む水溶液を調製する。この水溶液を室温で２時間インキュベートし、限外ろ過（１００ＫＤａで閾値、１８℃、１００００×Ｇで１５分）によって会合インスリンから遊離インスリンを分離する。次いで、ろ過で回収した遊離インスリンを、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィ）によって分析し、会合インスリンの量を推定する。結果を以下の表１に示す。
【００９８】
【表１】
これらの結果により、本発明のポリマーはインスリンを強く会合させて寸法が１００ＫＤａよりも大きいコロイド懸濁液を与えることができ、またインスリンとの会合度が非常に高いことが実証される。鎖の末端にジステアリル疎水基を有するポリマーＣ１は、より効率が悪い。これらのポリマーの会合能により、これらのポリマーが可送達化剤としての使用に適したものとなる。
【００９９】
＜実施例５：ｐＨの関数としてポリマーの溶解度＞
ポリマー２の溶解度を、参照ポリマー、すなわち特許出願国際公開第０３／１０４３０３号に記載されているように合成した、約５モル％のアルファ−トコフェロールでグラフト化されたポリグルタミン酸ナトリウム（ポリマーＣ２）の溶解度と比較した。結果は以下のとおりである。
【０１００】
【表２】
ポリマー２の溶解度は、広範囲のｐＨに及んでいるようである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
側鎖で同一または異なる疎水基（ＨＧ）を複数含むことを特徴とする、コポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項２】
コポリマー鎖当たり平均して少なくとも３つの疎水基（ＨＧ）を含むことを特徴とする、請求項１に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項３】
同一または異なるヒドロキシアルキルアミン基を含み、好ましくは、以下の基：２−ヒドロキシエチルアミン、３−ヒドロキシプロピルアミン、２，３−ジヒドロキシプロピルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンおよび６−ヒドロキシヘキシルアミンから選択されることを特徴とする、請求項１または２に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項４】
前記疎水基（ＨＧ）は炭素原子を８〜３０個含むことを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項５】
前記疎水基ＨＧは、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子を含んでもよいＣ８〜Ｃ３０の直鎖または分岐アルキル類と、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子を含んでもよいＣ８〜Ｃ３０のアルキルアリール類またはアリールアルキル類と、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子を含んでもよいＣ８〜Ｃ３０の（多）環状物質と
を含む群から選択されることを特徴とする、請求項４に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項６】
前記疎水基ＨＧの少なくとも１つは、オクタノール、ドデカノール、テトラデカノール、ヘキサデカノール、オクタデカノール、オレイルアルコール、トコフェロールまたはコレステロールを含む群から選択される前駆体より出発し、グラフト化によって得られることを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項７】
アルファ−Ｌ−グルタメート単位および／またはアルファ−Ｌ−グルタミック単位を含むことを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項８】
以下の一般式（Ｉ）の１つに対応することを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【化１】
（式中、
・Ａは独立して、
−Ｒ２がＨ、Ｃ２〜Ｃ１０の直鎖またはＣ３〜Ｃ１０の分岐アルキルまたはベンジルを示す基ＮＨＲ２と、
−窒素と、それぞれＮＨＲ２およびＯＲ２の定義に対応するアミンまたはアルコールで改変されていてもよい酸官能基とを介して結合されている末端アミノ酸単位と
を示し；
・Ｂは、２価、３価または４価の結合基であり、好ましくは、以下の基：−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ５）アルキル−、アミノ酸残基（好ましくは、天然アミノ酸の）、ジオール、トリオール、ジアミン、トリアミン、アミノアルコールまたは炭素原子を１〜６個含むヒドロキシ酸から選択され；
・Ｃは、モノ−、ジまたはトリヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基であり、好ましくはヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピルまたはトリヒドロキシメチルメタンであり；
・Ｄは、Ｈ、Ｃ２〜Ｃ１０の直鎖またはＣ３〜Ｃ１０の分岐アシル基またはピログルタメートであり；
・前記疎水基ＨＧは、互いに独立して、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくは、Ｏおよび／またはＮおよび／またはＳ）を含んでもよい直鎖または分岐のＣ８〜Ｃ３０のアルキル類、または
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくは、Ｏおよび／またはＮおよび／またはＳ）を含んでもよいＣ８〜Ｃ３０のアルキルアリール類またはアリールアルキル類、または
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくは、Ｏおよび／またはＮおよび／またはＳ）を含んでもよいＣ８〜Ｃ３０の（多）環状物質
から選択される基を示し；
・Ｒは、Ｈまたはカチオン種を示し、好ましくは、
−金属カチオン類と、有利には、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムを含む補助群から選択され；
−有機カチオン類と、有利には、
・アミン系カチオン類と、
・オリゴアミン系カチオン類と、
・ポリアミン系カチオン類（ポリエチレンイミンが特に好ましい）と、
・アミノ酸系カチオン類と、有利には、リシンまたはアルギニン系カチオン類を含む類から選択される、
を含む補助群から選択され、
−または、カチオン性ポリアミノ酸類と、有利には、ポリリシンまたはオリゴリシンを含む補助群から選択され
を含む群から選択され；
・ｍ、ｎおよびｑは、正の整数であり；
・（ｍ）／（ｍ＋ｑ＋ｎ）は前記疎水基ＨＧのグラフト化のモル度と定義され、各コポリマー鎖は平均して少なくとも３つの疎水性グラフトを含むという条件で０．５から９０モル％までの範囲であり；
・（ｍ＋ｑ＋ｎ）は１０〜１０００、好ましくは３０〜５００の範囲であり；
・（ｑ）／（ｍ＋ｑ＋ｎ）は、０〜６０モル％の範囲であり；
・ｐは、１〜３の範囲である整数である。）
【請求項９】
前記疎水基ＨＧがランダムに分布していることを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項１０】
そのモル質量は２０００〜２０００００ｇ／モル、好ましくは５０００〜１０００００ｇ／モルであることを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項１１】
グルタメート単位と結合しているポリアルキレン（好ましくは、エチレン）グリコール型のグラフトを少なくとも１つ有することを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項１２】
請求項１ないし１１のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミンを少なくとも１種類含む、薬剤用、化粧品用、誘電体用または植物保護用組成物。
【請求項１３】
少なくとも１種類の活性主成分を含むことを特徴とする、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記活性主成分は、１つ（または複数）の共有化学結合以外の１つまたは複数の結合を介して前記コポリヒドロキシアルキルグルタミンと組み合わせられていることを特徴とする、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記活性主成分は、タンパク質、糖タンパク質、１つまたは複数のポリアルキレングリコール鎖と結合しているタンパク質、多糖、リポ糖、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチドまたはペプチドであることを特徴とする、請求項１３または１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記活性主成分は、疎水性、親水性または両親媒性の有機小分子であることを特徴とする、請求項１３または１４に記載の組成物。
【請求項１７】
経口投与、非経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与、脳内投与または口腔投与することができることを特徴とする、請求項１２ないし１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
ゲル、溶液、エマルション、ミセル、ナノ粒子、微粒子、粉末または被膜の形であることを特徴とする、請求項１２ないし１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
水相中のコポリヒドロキシアルキルグルタミンのナノ粒子および／または微粒子および／またはミセルのコロイド懸濁液であることを特徴とする、請求項１２ないし１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
生体適合性溶媒中で溶液の形であり、皮下注射する、筋肉注射するまたは腫瘍に注射することが可能であることを特徴とする、請求項１２ないし１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
注射部位に堆積物を形成することができることを特徴とする、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
薬剤、特に、経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与または脳内投与用の薬剤において、これらの薬剤の活性主成分が、特にタンパク質類、糖タンパク質類、１つまたは複数のポリアルキレングリコール鎖と結合していてもよいタンパク質類、ペプチド類、多糖類、リポ糖類、オリゴヌクレオチド類、ポリヌクレオチド類、疎水性、親水性または両親媒性の有機小分子である薬剤；
および／または栄養素；
および／または化粧製品または植物保護製品を調製する方法であって；
本質的に、請求項１ないし１１のいずれか一項に記載の少なくとも１種類のコポリヒドロキシアルキルグルタミンおよび／または請求項１２ないし２１のいずれか一項に記載の組成物を使用することからなることを特徴とする方法。
【請求項１】
側鎖で同一または異なる疎水基（ＨＧ）を複数含むことを特徴とする、コポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項２】
コポリマー鎖当たり平均して少なくとも３つの疎水基（ＨＧ）を含むことを特徴とする、請求項１に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項３】
同一または異なるヒドロキシアルキルアミン基を含み、好ましくは、以下の基：２−ヒドロキシエチルアミン、３−ヒドロキシプロピルアミン、２，３−ジヒドロキシプロピルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンおよび６−ヒドロキシヘキシルアミンから選択されることを特徴とする、請求項１または２に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項４】
前記疎水基（ＨＧ）は炭素原子を８〜３０個含むことを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項５】
前記疎水基ＨＧは、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子を含んでもよいＣ８〜Ｃ３０の直鎖または分岐アルキル類と、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子を含んでもよいＣ８〜Ｃ３０のアルキルアリール類またはアリールアルキル類と、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子を含んでもよいＣ８〜Ｃ３０の（多）環状物質と
を含む群から選択されることを特徴とする、請求項４に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項６】
前記疎水基ＨＧの少なくとも１つは、オクタノール、ドデカノール、テトラデカノール、ヘキサデカノール、オクタデカノール、オレイルアルコール、トコフェロールまたはコレステロールを含む群から選択される前駆体より出発し、グラフト化によって得られることを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項７】
アルファ−Ｌ−グルタメート単位および／またはアルファ−Ｌ−グルタミック単位を含むことを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項８】
以下の一般式（Ｉ）の１つに対応することを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【化１】
（式中、
・Ａは独立して、
−Ｒ２がＨ、Ｃ２〜Ｃ１０の直鎖またはＣ３〜Ｃ１０の分岐アルキルまたはベンジルを示す基ＮＨＲ２と、
−窒素と、それぞれＮＨＲ２およびＯＲ２の定義に対応するアミンまたはアルコールで改変されていてもよい酸官能基とを介して結合されている末端アミノ酸単位と
を示し；
・Ｂは、２価、３価または４価の結合基であり、好ましくは、以下の基：−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ５）アルキル−、アミノ酸残基（好ましくは、天然アミノ酸の）、ジオール、トリオール、ジアミン、トリアミン、アミノアルコールまたは炭素原子を１〜６個含むヒドロキシ酸から選択され；
・Ｃは、モノ−、ジまたはトリヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基であり、好ましくはヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピルまたはトリヒドロキシメチルメタンであり；
・Ｄは、Ｈ、Ｃ２〜Ｃ１０の直鎖またはＣ３〜Ｃ１０の分岐アシル基またはピログルタメートであり；
・前記疎水基ＨＧは、互いに独立して、
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくは、Ｏおよび／またはＮおよび／またはＳ）を含んでもよい直鎖または分岐のＣ８〜Ｃ３０のアルキル類、または
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくは、Ｏおよび／またはＮおよび／またはＳ）を含んでもよいＣ８〜Ｃ３０のアルキルアリール類またはアリールアルキル類、または
・少なくとも１つの不飽和および／または少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくは、Ｏおよび／またはＮおよび／またはＳ）を含んでもよいＣ８〜Ｃ３０の（多）環状物質
から選択される基を示し；
・Ｒは、Ｈまたはカチオン種を示し、好ましくは、
−金属カチオン類と、有利には、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムを含む補助群から選択され；
−有機カチオン類と、有利には、
・アミン系カチオン類と、
・オリゴアミン系カチオン類と、
・ポリアミン系カチオン類（ポリエチレンイミンが特に好ましい）と、
・アミノ酸系カチオン類と、有利には、リシンまたはアルギニン系カチオン類を含む類から選択される、
を含む補助群から選択され、
−または、カチオン性ポリアミノ酸類と、有利には、ポリリシンまたはオリゴリシンを含む補助群から選択され
を含む群から選択され；
・ｍ、ｎおよびｑは、正の整数であり；
・（ｍ）／（ｍ＋ｑ＋ｎ）は前記疎水基ＨＧのグラフト化のモル度と定義され、各コポリマー鎖は平均して少なくとも３つの疎水性グラフトを含むという条件で０．５から９０モル％までの範囲であり；
・（ｍ＋ｑ＋ｎ）は１０〜１０００、好ましくは３０〜５００の範囲であり；
・（ｑ）／（ｍ＋ｑ＋ｎ）は、０〜６０モル％の範囲であり；
・ｐは、１〜３の範囲である整数である。）
【請求項９】
前記疎水基ＨＧがランダムに分布していることを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項１０】
そのモル質量は２０００〜２０００００ｇ／モル、好ましくは５０００〜１０００００ｇ／モルであることを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項１１】
グルタメート単位と結合しているポリアルキレン（好ましくは、エチレン）グリコール型のグラフトを少なくとも１つ有することを特徴とする、前記請求項のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミン。
【請求項１２】
請求項１ないし１１のいずれか一項に記載のコポリヒドロキシアルキルグルタミンを少なくとも１種類含む、薬剤用、化粧品用、誘電体用または植物保護用組成物。
【請求項１３】
少なくとも１種類の活性主成分を含むことを特徴とする、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記活性主成分は、１つ（または複数）の共有化学結合以外の１つまたは複数の結合を介して前記コポリヒドロキシアルキルグルタミンと組み合わせられていることを特徴とする、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記活性主成分は、タンパク質、糖タンパク質、１つまたは複数のポリアルキレングリコール鎖と結合しているタンパク質、多糖、リポ糖、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチドまたはペプチドであることを特徴とする、請求項１３または１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記活性主成分は、疎水性、親水性または両親媒性の有機小分子であることを特徴とする、請求項１３または１４に記載の組成物。
【請求項１７】
経口投与、非経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与、脳内投与または口腔投与することができることを特徴とする、請求項１２ないし１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
ゲル、溶液、エマルション、ミセル、ナノ粒子、微粒子、粉末または被膜の形であることを特徴とする、請求項１２ないし１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
水相中のコポリヒドロキシアルキルグルタミンのナノ粒子および／または微粒子および／またはミセルのコロイド懸濁液であることを特徴とする、請求項１２ないし１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
生体適合性溶媒中で溶液の形であり、皮下注射する、筋肉注射するまたは腫瘍に注射することが可能であることを特徴とする、請求項１２ないし１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
注射部位に堆積物を形成することができることを特徴とする、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
薬剤、特に、経口投与、経鼻投与、膣内投与、眼球投与、皮下投与、静脈投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与または脳内投与用の薬剤において、これらの薬剤の活性主成分が、特にタンパク質類、糖タンパク質類、１つまたは複数のポリアルキレングリコール鎖と結合していてもよいタンパク質類、ペプチド類、多糖類、リポ糖類、オリゴヌクレオチド類、ポリヌクレオチド類、疎水性、親水性または両親媒性の有機小分子である薬剤；
および／または栄養素；
および／または化粧製品または植物保護製品を調製する方法であって；
本質的に、請求項１ないし１１のいずれか一項に記載の少なくとも１種類のコポリヒドロキシアルキルグルタミンおよび／または請求項１２ないし２１のいずれか一項に記載の組成物を使用することからなることを特徴とする方法。
【公表番号】特表２００８−５２８５４３（Ｐ２００８−５２８５４３Ａ）
【公表日】平成２０年７月３１日（２００８．７．３１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５５２６２６（Ｐ２００７−５５２６２６）
【出願日】平成１８年１月２３日（２００６．１．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００６／０５０３６９
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０７９６１４
【国際公開日】平成１８年８月３日（２００６．８．３）
【出願人】（５９３１２５１６０）フラメル・テクノロジー (22)
【氏名又は名称原語表記】ＦＬＡＭＥＬ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年７月３１日（２００８．７．３１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１月２３日（２００６．１．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００６／０５０３６９
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０７９６１４
【国際公開日】平成１８年８月３日（２００６．８．３）
【出願人】（５９３１２５１６０）フラメル・テクノロジー (22)
【氏名又は名称原語表記】ＦＬＡＭＥＬ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＥＳ
【Ｆターム（参考）】
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