１：１００〜１：３５０のモル比のアロブジンおよびジドブジンの組み合わせ
先行技術を有意に上回る比のアロブジンおよびジドブジンの併用投与が、ミトコンドリアＤＮＡ減少実験においてアロブジンのミトコンドリア毒性を完全にまたは実質的に根絶する。よって、本発明は、１：１００〜１：３５０の範囲のモル比のアロブジンおよびジドブジンを含む医薬組成物、および特定のモル比でのアロブジンおよびジドブジンの同時または連続的投与を含む、多剤抵抗性ＨＩＶの治療または予防の方法を提供する。
【発明の詳細な説明】
【発明の開示】
【０００１】
技術分野
本発明は、既知のＨＩＶ抗ウイルス剤アロブジンおよびジドブジンを特定の比率で、場合によってはさらなる抗ウイルス剤と組み合わせて投与するＨＩＶ処置方法および医薬組成物に関する。
【０００２】
背景技術
ジドブジン（ＡＺＴまたは２’３’−ジデオキシ−３’−アジドチミジンとも呼ばれる）は、ＨＩＶの処置において使用するために登録された最初のヌクレオシド誘導体である。ジドブジンは、ウイルスにコードされている逆転写酵素を阻害し、それによりウイルス複製サイクルをブロックし、ＡＩＤＳの進行を効果的に減速させる。当初の導入時に長期単剤療法として処方された際に、ジドブジンは、骨格筋ミオパシー、拡張型心筋症および肝毒性を含む、ミトコンドリア機能障害の症状を特徴とする種々の組織病変を伴っていた。依然として他のＨＩＶウイルスと広く併用されているが、毒性、特に血液毒性、および抵抗性発現の問題により、ジドブジンの臨床使用は制限されている。現在の投与計画は、典型的には３００ｍｇＢＩＤの、１日２回投与（即ち、３００ｍｇ錠剤を朝および夜に分けての６００ｍｇの成人日薬量）である。
【０００３】
コンビビルＴＭ（ジドブジン＋ラミブジン）またはトリジビルＴＭ（ジドブジン＋ラミブジン＋アバカビル）などの組み合わせの単位剤形でさえ、１日に２度服用しなければならない。これは、問題のない場合においても患者のコンプライアンスの観点から都合のよい投薬計画とはいえない。しかし、ジドブジンを処方されている多くの患者は、プロテアーゼ阻害剤および／または非ヌクレオシド阻害剤などのさらなるＨＩＶ抗ウイルス剤、または対症療法的投薬（抗真菌剤、抗ＣＭＶ抗ウイルス剤、抗精神病薬または免疫促進剤など）をさらに服用する必要があるため、ＨＩＶ患者においてはさらに問題となる。これらの追加の医薬はしばしばジドブジンとは異なった周期（毎日（ＱＤ）、１日３回（ＴＩＤ）など）で服用され、服用遵守が低い非常に複雑な投薬計画の原因となっていた。例えば、進行したＨＩＶ患者が、１日のうち種々の時点で、あるものは空腹時であるものは食中で、各々の時点で異なる数の錠剤を、１日１５〜２０錠を上回る投薬負荷を負うことは珍しいことではない。
【０００４】
ＨＩＶ増殖機構のプルーフリーディング能力が低いことに起因して薬剤エスケープ変異体（ｄｒｕｇ ｅｓｃａｐｅ ｍｕｔａｎｔｓ）が容易に発生するというＨＩＶの場合には、投薬計画遵守の欠如は極めて重大である。ＨＩＶ薬の血漿トラフ濃度およびヌクレオシドトリホスフェートの細胞内濃度が特定の閾値を下回れば、薬剤エスケープ変異体の選択および増殖は劇的に促進される。もし処方された投与計画に完全に従っていなければ、ＨＩＶ患者においてこれはすぐに起こる。
【０００５】
アロブジン（ＦＬＴまたは２’，３’−ジデオキシ−３’−フルオロチミジンとも呼ばれる）は、１９９０年代初頭に臨床開発されていた期待のＨＩＶ抗ウイルス剤であった。ウイルス感染患者において薬量依存性の血液毒性が確認された後に、開発は終了となった。Ｓｕｎｄｓｅｔｈら、Ａｎｔｍｉｃｒｏｂ Ａｇ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ、１９９６年、４０（２）：３３１〜３３５頁によれば、当該血液毒性は、細胞培養実験に基づいてＤＮＡフラグメンテーションおよびアポトーシスが原因とされた。しかし、最近の研究において、アロブジンの毒性はミトコンドリアＤＮＡ合成に起因することが明らかにされている。
【０００６】
アロブジンの当初の開発が中止になる前に出願された国際特許出願ＷＯ９１／０１１３７には、ＦＬＴ（現在ＩＮＮアロブジンとして知られている）などの３’−フッ素化抗ウイルス剤およびＡＺＴ（現在ＩＮＮジドブジンとして知られている）を含む特定の２‘，３’−ジデオキシヌクレオチドの組合せの協力的抗ウイルス効果が記載されている。当該特許出願は、インビトロおよび動物実験においてＡＺＴ：ＦＬＴの比が１：１および１：８である組み合わせを例示している。当該特許出願は、ＦＬＴおよびＡＺＴは実質的に等量で投与されることが望ましいことを明確に示している。例えば、当該特許出願５頁１６行には、協力効果を与える好ましいＦＬＴとＡＺＴの比の範囲が１０：１〜１：２０であり、最適な範囲が１：１〜１：１０ ＦＬＴ：ＡＺＴであることが示されている。ＷＯ９１／０１１３７の表１には、１：１の比のＦＬＴおよびＡＺＴが、ＦＬＴ：ＡＺＴの比が１：８と比べて、免疫蛍光アッセイによる測定では優れた治療指数（ＩＣ５０／ＩＣ５０）を、およびＥＬＩＳＡによる測定で同程度の治療指数を有することが示されている。
【０００７】
国際特許出願ＷＯ２００４／００２４３３は、別の組み合わせであるアロブジンおよび別のＮＲＴＩ、即ちアバカビルを記載する。ウイルス抑制についての協力効果は、既存の抗レトロウイルス処置への追加処置としての７．５ｍｇＱＤのアロブジンを患者に処方した、ＨＩＶ感染患者での臨床試験により確認されている。試験設計および全体の結果は、Ｋａｔｌａｍａら、ＡＩＤＳ ２００４年、１８（９）：１２９９〜１３０４に概説されている。アロブジンおよびジドブジンの構造類似性の高さが、さらなる血液毒性をもたらすことが懸念されたために、既にジドブジンによる処置を受けていた患者が除外されたことに特に注意すべきである。典型的にはアバカビルは３００ｍｇＢＩＤまたは６００ｍｇＱＤで投与される。これは、アロブジン：アバカビルが１：７０のモル比に対応する。抗ウイルスの協力効果が、特許出願では１：２００のモル比で細胞培養物中で確認された。しかし、当該組み合わせの細胞毒性およびミトコンドリア毒性のいずれについても測定されていない。本明細書の比較例に示すとおり、これらの値の間のモル比でのアロブジンおよびアバカビルでは、アロブジンのミトコンドリア毒性を解消することはできない。
【０００８】
ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤の相互作用、とりわけミトコンドリア毒性に関しての相互作用は複雑であり、ほとんど理解されていない現象である。Ｖｉｄａｌら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ ２００６年、５０（１１）：３８２４〜３８３２頁に報告された非常に包括的な一連の研究において、ＮＲＴＩテノホビルは、ジダノシン（ｄｄｌ）のミトコンドリア毒性（ｍｔＤＮＡ減少によって測定した）を劇的に高めることが確認された。３μＭジダノシン：３０μＭテノホビル（即ち、モル基準で１：１０）の薬量で、ｍｔＤＮＡの減少は、約８０％であり、より高いモル比では＞９０％であった。対照的に、３０μＭテノホビルに対して３、４０および２００μＭジドブジン（即ち、１：１０、約１：１および約６．５：１）で試験した場合でも、テノホビルはジドブジンのミトコンドリア毒性に影響しなかった。
【０００９】
本発明の簡単な説明
今回我々は、先行技術の比からは明らかにはずれる特定の範囲の比でのアロブジンおよびジドブジンの併用投与がミトコンドリア毒性の驚異的な減少を伴う相互作用を生み出し、その一方でアロブジンとジドブジンの協力的抗ウイルス効果は保持されることを発見した。
【００１０】
本発明の第１の側面によれば、１：１００〜１：３５０の範囲のモル比での、アロブジンおよびジドブジンの同時または連続的投与を含む、ＨＩＶの治療方法または予防方法が提供される。好適には、当該方法は、ＨＩＶを治療または予防するために、当該方法による処置を必要とする対象に、安全であって有効な量のアロブジンおよびジドブジンを投与することを含む。
【００１１】
本発明の関連する側面により、同時または連続的投与のための医薬の製造におけるアロブジンおよびジドブジンの使用であって、前記医薬が、アロブジンがジドブジンに対して１：１００〜１：３５０の比で投与されるように調整されている、前記使用が提供される。関連する側面によれば、ＨＩＶの治療または予防のための同時または連続的投与におけるアロブジンおよびジドブジンの使用が提供される。
【００１２】
本発明の第２の側面により、前記方法に使用されるように調整され、１：１００〜１：３５０の範囲のモル比でアロブジンおよびジドブジンを含む医薬組成物が提供される。
【００１３】
したがって、アロブジンを含む医薬組成物およびジドブジンを含む医薬組成物を含む医薬キット（ｋｉｔ ｏｆ ｐａｒｔｓ）であって、１：１００〜１：３５０の範囲のモル比でアロブジンおよびジドブジンが前記キットに存在することを特徴とする、前記医薬キットもまた提供される。好適には、前記医薬キットは、ＨＩＶの治療または予防のためにアロブジンを含む医薬組成物およびジドブジンを含む医薬組成物の同時または連続的投与を指示する使用説明書をさらに含んでいるであろう。
【００１４】
本発明の組み合わせは、従来技術のジドブジンおよびアロブジン処置およびジドブジン／アロブジンの組み合わせにおいて経験された欠点を、ミトコンドリア毒性の減少、それによる安全性の改善、患者コンプライアンスの改善、１日のトラフレベルの安定性改善および薬剤エスケープ変異体発生の抑制の点において顕著に緩和する。
【００１５】
理論により拘束されることは望まないが、アロブジンおよびジドブジンの間の特徴的比率の採用が、ジドブジンがミトコンドリア輸送システムの阻害を引き起こし、活性な代謝物であるアロブジントリホスフェートが、特に感受性のミトコンドリアＤＮＡポリメラーゼとネガティブに相互作用することを妨げることを、我々の予備的なデータは示唆している。この有益な効果は、従来技術のＡＺＴ／ＦＬＴの組み合わせではこれまでに観察されていない。なぜなら、実質的に等モル量のこの２つのヌクレオシドにより引き起こされる細胞毒性およびミトコンドリアＤＮＡの減少により覆い隠されていたからである。
【００１６】
１〜１０ｍｇ／ｋｇ／日のジドブジン薬量と併せての０．１〜１ｍｇ／ｋｇ／日のアロブジンの薬量を明言するＷＯ９１／０１１３７の先行技術の組み合わせと対照的に、本発明は、対応する量の１〜１０ｍｇ／ｋｇ／日のアロブジンの薬量と併せて、約０．００５〜０．０５ｍｇ／ｋｇ／日のアロブジン薬量を予定している。より最近の臨床試験により、ＷＯ９１／０１１３７で好ましいとされている、ジドブジンの有効薬量に基づいての１：１０の比率は、アロブジンおよび／またはジドブジンの毒性レベルを引き上げることが示唆されている。
【００１７】
本発明の組成物および方法では、適宜、１：１５０〜１：２５０の範囲、例えば、１：１５０〜１：２００の範囲内の比率でアロブジンおよびジドブジンを使用する。
【００１８】
典型的には、アロブジンの最大日薬量は、７０ｋｇの成人に対して約４ｍｇ／日であろう。本発明の方法にしたがった投薬計画は、一般的に１日２〜４mgの範囲のアロブジン薬量および１日３００〜９００ｍｇの範囲のジドブジン薬量を含む。
【００１９】
特に好ましくは、成人の投薬計画は、２〜３ｍｇ／日、例えば、２ｍｇまたは２．５ｍｇの１日のアロブジン投与を含む。一般に好ましくは、成人の投薬計画は、４５０〜６００ｍｇ／日、とりわけ６００ｍｇの１日のジドブジン投与を含む。
【００２０】
２．５ｍｇアロブジンおよび６００ｍｇジドブジンの日薬量は、アロブジンの分子量として２４４を、およびジドブジンの分子量として２６９を使用すると、１：２１８のモル比に対応する。
【００２１】
定義した範囲の比率でのアロブジンおよびジドブジンの併用投与は、例えば、アロブジンおよびジドブジンが別々の投薬単位（典型的には、カプセルまたは錠剤または各々一つづつ）で各々投与される場合、連続的であっても実質的に連続的であってもよい。
【００２２】
典型的にはジドブジンはＢＩＤ、例えば３００ｍｇＢＩＤで投与される。しかし、アロブジンをＱＤで投与することが好ましいことがしばしばあり、そのため、本発明の便宜的な連続的投与の態様は、朝の３００ｍｇ錠剤のジドブジンおよび２、３または４ｍｇの錠剤のアロブジンならびに夜の３００ｍｇ錠剤のジドブジン（またはその逆）を含みうる。錠剤投与計画を簡単にするために、一般に不利ではあるが代替の態様は、３００ｍｇ錠剤またはカプセルのジドブジンおよび１、１．５または２ｍｇのアロブジンを含む錠剤またはカプセルを、朝および夜に一緒にまたは間をおかずに連続で服用する投与を含みうる。
【００２３】
直前のパラグラフで記載したものなどの連続的投与の剤形は、ジドブジン錠剤のブリスターパックまたはアロブジン錠剤のブリスターパックを各々含む個別のカートンなどの、別々のパッケージとして提供されうる。さらなる例は、ジドブジンおよびアロブジンのカプセルまたは錠剤の別々の瓶を含みうる。少なくとも１つの瓶またはカートンは典型的には、アロブジンは特徴的な１：１００〜１：３５０の比でジドブジンと併用投与されるべきものであることを知らせる使用説明書またはその他の印刷された指示書を含むであろう。しかし、通常のカートンは適宜、アロブジンを含むブリスターシートおよびジドブジンを含むブリスターシートの両方を含む。
【００２４】
好ましい連続的投与剤形において、アロブジンおよびジドブジンの錠剤またはカプセルの各々は、各々の成分が正しく服用されるような視覚からの働きかけが与えられる空間配置がされた、同じブリスターシートから提供される。例えば、アロブジンの意図した薬量が２、３または４ｍｇＱＤでありジドブジンの薬量が３００ｍｇＢＩＤである場合、ブリスターシートは、アロブジン錠剤の１列とそれに平行した各々同数のジドブジン錠剤を含む２列を配置していてもよい。それにより、特定の投与機会にアロブジンおよびジドブジンの両方を服用すべきか、ジドブジンのみを服用すべきかを確実にすることが患者にとって容易になるであろう。ブリスターシートの個々のブリスターは、コンプライアンスをさらに支援するために、一週間のうちの何曜日などの印を付してもよい。
【００２５】
しかし、好ましくは、アロブジンおよびジドブジンは、カプセルまたは糖衣錠またはより好ましくは錠剤などの通常の単位剤形で提供される。単位剤形は、ＢＩＤ投与、すなわち、各投与単位（おそらくは、単一の錠剤またはカプセルが任意の一回の投与機会に服用されると考えられる）にアロブジンおよびジドブジン成分の意図した日薬量の半分を含むように調整されていてもよい。この態様に沿った典型的な単位剤形は、３００ｍｇジドブジンおよび１または１．２５ｍｇアロブジンを含むカプセルまたは錠剤を含む。
【００２６】
投薬計画が、複数で同じ投薬単位を同時に摂取することを要する場合（典型的には、各々が１３３ｍｇロピナビルおよび３３ｍｇリトナビルを含む２つのソフトタブレットとして１日に３回投与される、ロピナビル／リトナビルの組み合わせカレトラＴＭの場合のように）、各々の単位投与のアロブジンおよびジドブジンの量はそれにしたがって調節される。
【００２７】
別の単位剤形は、ＱＤ投与のために調整される。ＱＤ投与はコンプライアンスを促進し、同時に毒性を軽減し、協力的抗ウイルス効果をもたらす。よって、成人用を意図した錠剤またはカプセルは、２〜４ｍｇアロブジンおよび３００〜６００ｍｇジドブジンを含みうる。好ましい単位剤形は：２ｍｇアロブジンおよび３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇまたはとりわけ６００ｍｇジドブジン；２．５ｍｇアロブジンおよび３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇまたはとりわけ６００ｍｇジドブジン；３ｍｇアロブジンおよび３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇまたはとりわけ６００ｍｇジドブジン；または４ｍｇアロブジンおよび３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇまたはとりわけ６００ｍｇジドブジンを含む。
【００２８】
組み合わせ療法が例外と言うよりはむしろ標準であるＨＩＶ療法においては通常のことであるが、本発明の方法および医薬組成物は、１または２の追加の医薬、特に追加のＨＩＶ抗ウイルス剤をさらに含みうる。追加のＨＩＶ抗ウイルス剤（複数でもよい）は、ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＲＴＩ）、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＮＲＴＩ）、プロテアーゼ阻害剤（ＰＩ）、インテグラーゼ阻害剤、融合阻害剤、成熟阻害剤（ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）などの作用分類の何れかから選択してもよい。追加のＨＩＶ抗ウイルス剤は、典型的には、それらの慣用の薬量で併用するかまたは同時に服用する。
【００２９】
代表的なＮＲＴＩには、スタブジン（ｄ４Ｔ、ゼリット）、ザルシタビン（ｄｄＣ）、ジダノシン（ｄｄｌ、ヴァイデックス）、アバカビル（ＡＢＣ、ザイアジェン）、ラミブジン（３ＴＣ、エピビル）、エムトリシタビン（ＦＴＣ、エムトリバ）、ラセビル（ラセミＦＴＣ）、アデホビル（ＡＤＶ）、エンタカビル（ＢＭＳ２００４７５）、アロブジン（ＦＬＴ）、テノホビルジソプロキシルフマレート（ＴＮＦ、バイリード（Ｖｉｒｅａｄ））、アムドキサビル（ＤＡＰＤ）、Ｄ−ｄ４ＦＣ（ＤＰＣ−８１７）、（−）ｄＯＴＣ（Ｓｈｉｒｅ ＳＰＤ７５４）、エルブシタビン（Ａｃｈｉｌｌｉｏｎ ＡＣＨ−１２６４４３）、ＢＣＨ１０６８１（Ｓｈｉｒｅ ＳＰＤ７５６）、ラシビル、Ｄ−ＦＤＯＣ、ＧＳ７３４０、ＩＮＫ―２０（チオエーテルホスホリピッドＡＺＴ、Ｋｕｃｅｒａ）、２’３’−ジデオキシ−３’−フルオログアノジン（ＦＬＧ）およびそのプロドラッグ（ＭＩＶ―２１０など）、リバーセット（ＲＶＴ、Ｄ−Ｄ４ＦＣ、ファーマセット ＤＰＣ−８１７）が含まれる。
【００３０】
代表的なＮＲＴＩには、デラビルジン（レスクリプター）、エファビレンツ（ＤＭＰ−２６６、サスティバ）、ネビラピン（ＢＩＲＧ−５８７、ビラミュン）、（＋）カラノリドＡおよびＢ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、カプラビリン（ＡＧ１５４９ｆ Ｓ−１１５３；Ｐｆｉｚｅｒ）、ＧＷ−６９５６３４（ＧＷ−８２４８；ＧＳＫ）、ＭＩＶ−１５０（Ｍｅｄｉｖｉｒ）、ＭＶ０２６０４８（ＭＩＶ−１６０ Ｍｅｄｉｖｉｒ ＡＢ）、ＭＩＶ−１７０（Ｍｅｄｉｖｉｒ）、ＮＶ−０５２２（Ｉｄｅｎｉｘ Ｐｈａｒｍ．）、Ｒ−２７８４７４（Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、ＲＳ−１５８８（Ｉｄｅｎｉｘ Ｐｈａｒｍ．）、ＴＭＣ−１２０／１２５（Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、リルピビリン（ＴＭＣ−２７８，１６５３３５；Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、ＵＣ−７８１（Ｂｉｏｓｙｎ Ｉｎｃ．）およびＹＭ２１５３８９（Ｙａｍａｎｏｕｓｈｉ）が含まれる。
【００３１】
代表的なＨＩＶプロテアーゼ阻害剤には、ＢＥＡ−４０３（Ｍｅｄｉｖｉｒ）、ＰＡ−４５７（Ｐａｎａｃｏｓ）、ＫＰＣ−２（Ｋｕｃｅｒａ Ｐｈａｒｍ．）、５ＨＧＴＶ−４３（Ｅｎｚｏ Ｂｉｏｃｈｅｍ）、アムプレナビル（ＶＸ−４７８、アジェネレース）、アタザナビル（レイアタッツ）、インディナビルスルフェート（ＭＫ−６３９、クリキシバン）、レキシバ（フォサムプレナビルカルシウム、ＧＷ−４３３９０８または９０８、ＶＸ−１７５）、リトナビル（ノルビル）、ロピナビル＋リトナビル（ＡＢＴ−３７８、カレトラ）、チプラナビル、ネルフィナビルメシレート（ビラセプト）、サキナビル（インビレース、フォルトベース）、ＡＧ１７７６（ＪＥ−２１４７、ＫＮＩ−７６４；Ｎｉｐｐｏｎ Ｍｉｎｉｎｇ Ｈｏｌｄｉｎｇｓ）、ＡＧ−１８５９（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＤＰＣ−６８１／６８４（ＢＭＳ）、ＧＳ２２４３３８；Ｇｉｌｅａｄ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＫＮＩ−２７２（Ｎｉｐｐｏｎ Ｍｉｎｉｎｇ Ｈｏｌｄｉｎｇｓ）、Ｎａｒ−ＤＧ−３５（Ｎａｒｈｅｘ）、Ｐ（ＰＬ）−１００（Ｐ−１９４６；Ｐｒｏｃｙｏｎ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ）、Ｐ−１９４６（Ｐｒｏｃｙｏｎ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ）、Ｒ−９４４（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ）、ＲＯ−０３３４６４９（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ）、ＴＭＣ−１１４（Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、ＶＸ−３８５（ＧＷ６４０３８５；ＧＳＫ／Ｖｅｒｔｅｘ）、ＶＸ−４７８（Ｖｅｒｔｅｘ／ＧＳＫ）が含まれる。
【００３２】
その他のＨＩＶ抗ウイルス剤には、融合阻害剤、ＣＤ４レセプターの阻害剤、ＣＣＲ５コレセプターの阻害剤およびＣＸＣＲ４コレセプターの阻害剤、または医薬として許容なその塩またはそのプロドラッグを含む侵入阻害剤が含まれる。侵入阻害剤の例は、ＡＭＤ−０７０（ＡＭＤ１１０７０；ＡｎｏｒＭｅｄ）、ＢｌｏｃｋＡｉｄｅ／ＣＲ（ＡＤＶＥＮＴＲＸ Ｐｈａｒｍ．）、ＢＭＳ８０６（ＢＭＳ−３７８８０６；ＢＭＳ）、エンフビルチド（Ｔ−２０、Ｒ６９８、フューゼオン）、ＫＲＨ１６３６（Ｋｕｒｅｈａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＯＮＯ−４１２８（ＧＷ−８７３１４０、ＡＫ−６０２、Ｅ−９１３；ＯＮＯ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ｐｒｏ−１４０（Ｐｒｏｇｅｎｉｃｓ Ｐｈａｒｍ）、ＰＲＯ５４２（Ｐｒｏｇｅｎｉｃｓ Ｐｈａｒｍ．）、ＳＣＨ−Ｄ（ＳＣＨ−４１７６９０；Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）、Ｔ−１２４９（Ｒ７２４；Ｒｏｃｈｅ／Ｔｒｉｍｅｒｉｓ）、ＴＡＫ−２２０（Ｔａｋｅｄａ Ｃｈｅｍ． Ｉｎｄ．）、ＴＮＸ−３５５（Ｔａｎｏｘ）およびＵＫ−４２７，８５７（Ｐｆｉｚｅｒ）である。インテグラーゼ阻害剤の例は、Ｌ−８７０８１０（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．）、ｃ−２５０７（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．）およびＳ（ＲＳＣ）−１８３８（Ｓｈｉｏｎｏｇｉ／ＧＳＫ）である。
【００３３】
本発明の方法または医薬組成物において使用するために一般に好ましい追加の抗ウイルス剤は、ｃｉｓ−１−（５−シアノピリジン−２−イル）−３−（４，７−ジフルオロ−１，１ａ，２，７ｂ−テトラヒドロシクロプロパ［ｃ］クロメン−１−イル）ウレアとしても知られているＭＩＶ−１６０である。ＭＩＶ−１６０の合成は、ＷＯ０２／０７０５１６に記載されている。好適な成人薬量としては、２５０〜１５００ｍｇ、例えば４００ｍｇまたは８００ｍｇ、典型的にはＱＤまたはＢＩＤが挙げられる。
【００３４】
ＭＩＶ−１６０を含む本発明の態様は、チトクロームアンタゴニスト、とりわけＣｙｐ４５０ ３Ａ４阻害剤、例えばクレープフルーツジュースまたはより好ましくはリトナビルと適宜併用投与される。リトナビルはＨＩＶの処置について既に登録されたプロテアーゼ阻害剤であり、６００ｍｇＢＩＤの成人薬量、しかし追加剤（ｂｏｏｓｔｅｒ）として使用する場合はかなり低薬量、典型的には１００または２００ｍｇＢＩＤが推奨される。追加薬を使用する場合は、典型的にはＭＩＶ−１６０の薬量は低くすることができる。
【００３５】
本発明のこの側面について典型的な単位薬量の態様は、下表に示される錠剤が含まれる：
【００３６】
【表１】
【００３７】
本発明において使用するためにさらに好ましいＮＮＲＴＩは、Ｎ−［（１Ｓ，１ａＲ，７ｂＲ）−４，７−ジフロオロ−１，１ａ，２，７ｂ−テトラヒドロシクロプロパ［ｃ］クロメン−１−イル］−Ｎ’−［５−（４−（スルホンアミド）フェノキシ）−２−ピラジニル］ウレアとしても知られているＭＩＶ−１７０である。ＭＩＶ−１７０の合成はＷＯ０５／０６６１３１に示されている。典型的成人薬量は、約１００〜９００ｍｇ／日、とりわけ３００〜６００ｍｇＱＤである。特定の比でのアロブジンおよびジドブジンとのＭＩＶ−１７０の組み合わせは、一般的には経口のバイオアベイラビリティーが実質的に改善するため、リトナビルの追加を必要としないであろう。
【００３８】
この態様の典型的投薬計画には以下のものが含まれる：
【００３９】
【表２】
【００４０】
ここで本発明の概要に戻ると、一般にアロブジンおよびジドブジンは製剤が困難とは認識されておらず、慣用の製剤方法、賦形剤および担体が広く使用可能である。上述の追加の抗ウイルス剤のいずれかとアロブジンおよびジドブジンの併用製剤は、当業者には明らかであろうが、当該追加抗ウイルス剤に対して適切に製剤を調製することが必要な場合もある。好ましい追加の抗ウイルス剤のＭＩＶ−１６０、ＭＩＶ−１７０およびリトナビルは、製剤に克服できない困難があるとは考えられていない。
【００４１】
上述のよく知られた製剤方法としては、慣用の医薬担体を伴うように、特定の範囲の比率のアロブジンおよびジドブジンならびに任意の追加の抗ウイルス剤を取る工程が挙げられる。一般に、製剤は、液体担体または微粉化された固体担体またはその両方を伴うように活性薬剤を均一かつ緊密にとって、その後必要であれば製剤を形作ることにより調製される。本発明は、特定の範囲の比率のアロブジンおよびジドブジン、ならびに場合によっては１または２の追加の抗ウイルス剤を、医薬として許容される担体またはビークル（ｖｅｈｉｃｌｅ）を伴ってまたは併用して取ることを含む、医薬組成物の調製方法に及ぶ。医薬組成物の製造が医薬賦形剤および塩の形態の活性成分の緊密な混合を含む場合、非塩基性である、即ち酸性または中性のどちらかの賦形剤を使用することが往々にして好ましい。
【００４２】
本発明の経口投与用の製剤は、それぞれが所定の量の活性薬剤を含む、カプセル、カシェ剤または錠剤などの別々の単位として提供されてもよい。あるいは、それらは、粉体または顆粒として；水性液体または非水性液体中の活性薬剤の溶液または懸濁液として；または水中油液体エマルジョンもしくは油中水液体エマルジョンとして；またはボーラスなどとして提供されうる。
【００４３】
経口投与（例えば、錠剤またはカプセル）のための組成物について、用語「好適な担体」には、慣用の賦形剤などのビークル、例えば、結合剤（シロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、ポリビニルピロリドン（ポビドン）、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピル−メチルセルロース、スクロースおよびデンプンなど）；充填剤または担体、例えば、コーンスターチ、ゼラチン、ラクトース、スクロース、微結晶セルロース、カオリン、マンニトール、リン酸ジカルシウム、塩化ナトリウムおよびアルギン酸；ならびに滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウムおよび他の金属ステアリン酸塩、グリセロールステアレート、ステアリン酸、シリコーンオイル、タルクワックス、オイルおよびコロイド状シリカなど）が挙げられる。香味剤、例えばペパーミント、ウインターグリーン油、チェリーフレーバーなどもまた使用されうる。剤形を容易に認識可能にするために、着色剤を加えることが望ましい場合もある。錠剤はまた、当該技術分野においてよく知られた方法によりコーティングされていてもよい。
【００４４】
錠剤は、場合によっては１以上の付帯適性分と共に、圧縮または成型により製造されうる。圧縮錠剤は、場合によっては結合剤、滑沢剤、不活性な希釈剤、保存剤、界面活性剤または分散剤と混合した、自由流動性の形態、例えば粉体または粒状の活性薬剤を、好適な機械にて圧縮することにより調製されうる。成型錠剤は、不活性液体希釈剤でしめらせた粉末の化合物の混合物を好適な機械にて成型することにより調製されうる。錠剤は、コーティングされていても分割用割れ目が入れてあってもよく、活性薬剤の徐放または制御放出を行うための製剤がされていてもよい。
【００４５】
経口投与に好適な別の製剤には、フレーバー基剤、通常はスクロースおよびアカシアまたはトラガカント中に活性薬剤を含むロゼンジ剤；不活性基剤、例えばゼラチンおよびグリシン、またはスクロースおよびアカシア中に活性薬剤を含むトローチ；および好適な液体担体中に活性薬剤を含むマウスウォッシュが挙げられる。
【００４６】
アロブジンおよび／またはジドブジンは、遊離のヌクレオシドまたは慣用の医薬として許容なその塩またはその水和物として投与されうる。慣用の塩としては、酸付加塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、クエン酸塩、トシル酸塩およびマレイン酸塩、およびリン酸または硫酸と形成した塩が挙げられる。別の側面では、好適な塩は塩基性塩、例えばアルカリ金属塩（例えば、ナトリウムまたはカリウム）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウムまたはマグネシウム）、または有機アミン塩（例えば、トリエチルアミン）である。溶媒和物の例としては水和物が挙げられる。
【００４７】
あるいは、アロブジンおよび／またはジドブジンは、生体内で、アロブジン／ジドブジンまたはアロブジン／ジドブジンモノホスフェートを放出するプロドラッグとして投与されうる。当該ヌクレオシドを生体内で放出する慣用のヌクレオシドプロドラッグとしては、５’−アルキルエステル、例えば、アセチル、ピバロイルまたはステアロイル、または５’アミノエステル、例えば、Ｌ−バリル、Ｌ−イソロイシルまたはＬ−ラクチル−Ｌ−バリルエステルが挙げられる。生体内でジドブジンモノホスフェートを放出するプロドラッグとしては、フォシブジンチドキシル（ｆｏｓｉｖｕｄｉｎｅ ｔｉｄｏｘｉｌ）などのフォシブジン（ｆｏｓｉｖｕｄｉｎｅ）が挙げられる。生体内でアロブジンを放出するプロドラッグとしては、フォサルブジンチドキシル（ｆｏｓａｌｖｕｄｉｎｅ ｔｉｄｏｘｉｌ）などの、ＥＰ３５０２８７、ＥＰ５４５９６６、ＥＰ７４１７４０およびＥＰ７６３０４９に記載されたフォシブジン類縁体が挙げられる：
【００４８】
【化１】
【００４９】
［式中、ｎは１１であり、ｍは９であり、ＲはＦである（フォサルブジン）、またはＲはＮ３である（フォシブジン）］。
【００５０】
本明細書およびクレームでのアロブジンおよびジドブジンへの言及は、当該塩、水和物およびプロドラッグもまた意味し、ここで、重量（日薬量など）は、遊離のヌクレオシドに対して分子量の増加に対応して典型的には上方修正される。
【００５１】
ここで、ジドブジンは現在ジェネリックであり、世界中の多くの製造者から医薬グレードで広く入手可能である。アロブジンは、ＥＰ４７０３５５またはＷＯ９４／２６７６２に記載されているかそれに類似する、アルミニウムまたは鉄で触媒される無水ヌクレオシド経路を使用して簡便に合成される。フォシブジンおよびフォサルブジンは既に引用した特許において調製されている。ＭＩＶ−１６０およびＭＩＶ−１７０の合成は既に特定したとおりである。
【００５２】
態様の詳細な説明
ここで、本発明の種々の側面を、例示に過ぎない以下の非限定的実施例により説明する。
【００５３】
細胞系実験でのミトコンドリア毒性の決定
アロブジン、ジドブジンおよびその両方の投与後の、ミトコンドリアＤＮＡ合成の阻害を明らかにするよう設計された実験を以下に説明する。ＨＩＶ増殖をサポートするいくつかの好適な細胞系は容易に入手可能であり、例えば、ＣＥＭｘ１７４細胞系（Ｓｗｅｄｉｓｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ（ＳＭＩ）由来、Ｓｗｅｄｅｎ）、ＭＴ−４（購入により入手可能）およびＨｅｐ Ｇ２（購入により入手可能）などの、ＨＩＶ増殖をサポートする細胞系が挙げられる。
【００５４】
要するに、１００μｌ細胞を９６ウェルプレートに１×１０４細胞／ｍｌの濃度で播種し、指数関数的増殖で、１０％熱不活性化ウシ胎仔血清（Ｇｉｂｃｏ製）およびペニシリン−ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ製）を加えたＲＰＭＩ１６４０培地（Ｇｉｂｃｏ製）中で培養した。３または４日ごとに培地を交換し、細胞を１週間に１度１：１０の希釈度で二次培養する。全ての培養物についてマイコプラズマ感染を定期的に確認し、３７℃で加湿した５％ＣＯ２雰囲気下で増殖させる。
【００５５】
試験した全ての薬剤は、まずジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に１０ｍＭで溶解させ、その後、培養培地中で適当な濃度にさらに希釈した。ミトコンドリアＤＮＡの分析は、修正を加えた、既に報告されている（Ｚｈａｎｇ、Ｈら、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９４年、４６巻：１０６３〜１０６９頁）、タックマンの技術を使用することにより行った。
【００５６】
一連の期間の間、細胞を、試験薬剤、例えば、アロブジン、フォサルブジン、ジドブジン、アバカビルなど、またはアロブジン／フォサルブジンおよびジドブジン／アバカビルの種々の組み合わせにより処理した。各々の表において種々の比率を示した。薬剤の加えて１４日後、細胞を回収した。ＱｉＡａｍｐ ＤＮＡ ｂｌｏｏｄ Ｍｉｎｉ ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ、Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ、ＣＡ）を使用して、Ｑｉａｇｅｎｅ Ｂｌｏｏｄ＆Ｂｏｄｙ Ｆｌｕｉｄ Ｓｐｉｎ Ｐｒｏｔｏｃｏｌについての製造者説明書にしたがって、全細胞ＤＮＡを調製し、ＤＮＡ増幅に付した。
【００５７】
ＤＮＡ増幅中にＴａｑＤＮＡポリメラーゼの５’→３’エキソヌクレアーゼ活性による分光学的応答を発生させるために、蛍光共鳴エネルギー転移（ＦＲＥＴ）を利用する内部クエンチＤＮＡプローブを使用する、ミトコンドリアＤＮＡタックマンおよびヒト核ＤＮＡのプローブは、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓにおいて調製された。この方法は、特別に設計されたタッマンプローブ：Ｄ−ループ、５’フルオロ標識、６−ＦＡＭ−ＡＣＧ ＣＴＧ ＧＡＧ ＣＣＧ ＧＡＧ−ＭＧＢＮＦＱに対応するミトコンドリアＤＮＡプローブ；一対のＤＮＡ増幅プライマー（正方向ミトコンドリアＤＮＡプライマー：５’−ＣＡＣ ＧＣＧ ＡＴＡ ＧＣＡ ＴＴＧ ＣＧＡ−３’および逆方向ミトコンドリアＤＮＡプライマー：５’−ＡＧＧ ＡＡＴ ＣＡＡ ＡＧＡ ＣＡＧ ＡＴＡ ＣＴＧ ＣＧＡ−３’、ならびに正方向核ＤＮＡプライマー：５’−ＧＣＧ ＧＣＧ ＡＣＧ ＡＣＣ ＣＡ−３’ および逆方向細胞核ＤＮＡプライマー：５’−ＧＧＣ ＧＡＣ ＴＡＣ ＣＡＴ ＣＧＡ ＡＡＧ ＴＴＧ−３’）を伴う、１８ＳリボソームＲＮＡ、５’フルオロ標識、６’ＦＡＭ−ＴＣＧ ＡＡＣ ＧＴＣ ＴＧＣ ＣＣ−ＭＧＢＮＦＱに対応する核ＤＮＡのプローブに存在する蛍光色素を励起させるためのレーザースキャンニング技術を用いるＰＣＲ型アッセイを使用する。これは、ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ ７７００および蛍光性５’ヌクレアーゼアッセイのためのタックマン試薬を使用する、ＰＣＲのリアルタイム検出のための、完全に統合されたシステムである。
【００５８】
細胞増殖は、細胞核ＤＮＡ（１６ＳリボソームＤＮＡ）により制御された。ミトコンドリアアッセイの結果は、対照（薬剤を添加しない）との比較でのミトコンドリアＤＮＡおよび細胞核ＤＮＡの阻害のパーセンテージとして示す。
【００５９】
実施例１
上記のアッセイを、Ｔリンパ球由来のＭＴ４細胞系において行った。アロブジンまたはジドブジンの単独療法、またはアロブジンおよびジドブジンの組み合わせによる併用療法を、以下の表１に示したモル濃度で行った：
【００６０】
【表３】
【００６１】
アロブジンの単独療法では、０．１μＭの濃度でも、この実験においてミトコンドリアＤＮＡ複製数の７０％の減少が引き起こされたことが表１から明らかである。この阻害は、モルで１：１００の比でのジドブジンの存在により取り除かれた。
【００６２】
ここで、上述のＷＯ９１／０１１３７の特に好ましい範囲内の比である、１μＭアロブジン：１０μＭジドブジンの組み合わせに注目すると、ミトコンドリアＤＮＡコピー数の顕著な減少を伴う著しい細胞毒性（核ＤＮＡコピー数における６０％の低下に反映している）が存在することがわかる。臨床において、この細胞毒性は、アロブジン単独と比較してのミトコンドリア毒性の減少を覆い隠してしまう。しかし、問題なのは、この先行技術のアロブジン／ジドブジンの組み合わせにおいてもかなり相当のレベルのミトコンドリア毒性が残っていることである。
【００６３】
対照的に、本発明の範囲内の１：１００のモル日（重量：重量で１：１１０に対応する）のアロブジンおよびジドブジンは、完全にミトコンドリアＤＮＡコピー数の減少を根絶した。
【００６４】
実施例２
上述の実験を、追加の濃度のアロブジンおよび／またはジドブジンでＭＴ−４細胞において繰り返した。生データおよび統計データを表２Ａに示す。当該データは以下の表２Ｂに概要を示す。
【００６５】
【表４】
【００６６】
【表５】
【００６７】
このように実験により、アロブジンのミトコンドリア毒性は、顕著に大きなモル濃度のジドブジンの併用投与により回復することができるという実施例１の結果を確認した。
【００６８】
実施例３
ＥＰ７４１７４０の実施例４に記載したように製造した、アロブジンモノホスフェートプロドラッグのフォサルブジンチドキシル、および／またはジドブジンを使用して、ＭＴ−４細胞においてさらなるミトコンドリア減少アッセイを行った。結果を表３に示す。
【００６９】
【表６】
【００７０】
やはり、ｍｔＤＮＡ減少で測定されるように、単独療法でのアロブジン（今回はモノホスフェートプロドラッグとして投与された）は、顕著なミトコンドリア毒性を伴った。この毒性は、１００倍量のジドブジンの併用投与により回復した。
【００７１】
比較例１
アロブジン、アロブジン＋アバカビルのミトコンドリア毒性をＭＴ−４細胞において決定した。
【００７２】
７０：１のモル比のアバカビルおよびアロブジンは、第２相臨床試験において協力活性を示した（ＷＯ２００４／００２４３３を参照）。この特許出願はまた、２００：１のモル比での細胞培養アッセイでの抗ウイルス効果として協力活性を記載する。種々の濃度のアバカビル、アロブジン、またはアバカビルおよびアロブジンを実施例１に記載したように試験した。
【００７３】
【表７】
【００７４】
結果は、アロブジンのミトコンドリア毒性は、低モル比または高モル比（１：１０アロブジン：アバカビルまたは１：１００アロブジン：アバカビル）においてもＮＲＴＩアバカビルの添加によっては回復しなかったことを示す。これより、抗ウイルス効果について達成される協力は、ミトコンドリア毒性についてのアンタゴニズムとは作用的に関連しないことが示唆される。
【００７５】
この出願で言及した特許および特許出願を含むすべての文献は、可能なかぎりの完全な範囲で参照により本明細書に援用される。
【００７６】
本明細書および以下のクレームを通して、文脈が要求しない限り、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」およびその変化形（例えば、ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ、ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）は、特定した整数または工程または整数の群を含むことを意味するが、その他の整数または工程または整数の群および工程の群を除外することを意味するものではない。
【発明の開示】
【０００１】
技術分野
本発明は、既知のＨＩＶ抗ウイルス剤アロブジンおよびジドブジンを特定の比率で、場合によってはさらなる抗ウイルス剤と組み合わせて投与するＨＩＶ処置方法および医薬組成物に関する。
【０００２】
背景技術
ジドブジン（ＡＺＴまたは２’３’−ジデオキシ−３’−アジドチミジンとも呼ばれる）は、ＨＩＶの処置において使用するために登録された最初のヌクレオシド誘導体である。ジドブジンは、ウイルスにコードされている逆転写酵素を阻害し、それによりウイルス複製サイクルをブロックし、ＡＩＤＳの進行を効果的に減速させる。当初の導入時に長期単剤療法として処方された際に、ジドブジンは、骨格筋ミオパシー、拡張型心筋症および肝毒性を含む、ミトコンドリア機能障害の症状を特徴とする種々の組織病変を伴っていた。依然として他のＨＩＶウイルスと広く併用されているが、毒性、特に血液毒性、および抵抗性発現の問題により、ジドブジンの臨床使用は制限されている。現在の投与計画は、典型的には３００ｍｇＢＩＤの、１日２回投与（即ち、３００ｍｇ錠剤を朝および夜に分けての６００ｍｇの成人日薬量）である。
【０００３】
コンビビルＴＭ（ジドブジン＋ラミブジン）またはトリジビルＴＭ（ジドブジン＋ラミブジン＋アバカビル）などの組み合わせの単位剤形でさえ、１日に２度服用しなければならない。これは、問題のない場合においても患者のコンプライアンスの観点から都合のよい投薬計画とはいえない。しかし、ジドブジンを処方されている多くの患者は、プロテアーゼ阻害剤および／または非ヌクレオシド阻害剤などのさらなるＨＩＶ抗ウイルス剤、または対症療法的投薬（抗真菌剤、抗ＣＭＶ抗ウイルス剤、抗精神病薬または免疫促進剤など）をさらに服用する必要があるため、ＨＩＶ患者においてはさらに問題となる。これらの追加の医薬はしばしばジドブジンとは異なった周期（毎日（ＱＤ）、１日３回（ＴＩＤ）など）で服用され、服用遵守が低い非常に複雑な投薬計画の原因となっていた。例えば、進行したＨＩＶ患者が、１日のうち種々の時点で、あるものは空腹時であるものは食中で、各々の時点で異なる数の錠剤を、１日１５〜２０錠を上回る投薬負荷を負うことは珍しいことではない。
【０００４】
ＨＩＶ増殖機構のプルーフリーディング能力が低いことに起因して薬剤エスケープ変異体（ｄｒｕｇ ｅｓｃａｐｅ ｍｕｔａｎｔｓ）が容易に発生するというＨＩＶの場合には、投薬計画遵守の欠如は極めて重大である。ＨＩＶ薬の血漿トラフ濃度およびヌクレオシドトリホスフェートの細胞内濃度が特定の閾値を下回れば、薬剤エスケープ変異体の選択および増殖は劇的に促進される。もし処方された投与計画に完全に従っていなければ、ＨＩＶ患者においてこれはすぐに起こる。
【０００５】
アロブジン（ＦＬＴまたは２’，３’−ジデオキシ−３’−フルオロチミジンとも呼ばれる）は、１９９０年代初頭に臨床開発されていた期待のＨＩＶ抗ウイルス剤であった。ウイルス感染患者において薬量依存性の血液毒性が確認された後に、開発は終了となった。Ｓｕｎｄｓｅｔｈら、Ａｎｔｍｉｃｒｏｂ Ａｇ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ、１９９６年、４０（２）：３３１〜３３５頁によれば、当該血液毒性は、細胞培養実験に基づいてＤＮＡフラグメンテーションおよびアポトーシスが原因とされた。しかし、最近の研究において、アロブジンの毒性はミトコンドリアＤＮＡ合成に起因することが明らかにされている。
【０００６】
アロブジンの当初の開発が中止になる前に出願された国際特許出願ＷＯ９１／０１１３７には、ＦＬＴ（現在ＩＮＮアロブジンとして知られている）などの３’−フッ素化抗ウイルス剤およびＡＺＴ（現在ＩＮＮジドブジンとして知られている）を含む特定の２‘，３’−ジデオキシヌクレオチドの組合せの協力的抗ウイルス効果が記載されている。当該特許出願は、インビトロおよび動物実験においてＡＺＴ：ＦＬＴの比が１：１および１：８である組み合わせを例示している。当該特許出願は、ＦＬＴおよびＡＺＴは実質的に等量で投与されることが望ましいことを明確に示している。例えば、当該特許出願５頁１６行には、協力効果を与える好ましいＦＬＴとＡＺＴの比の範囲が１０：１〜１：２０であり、最適な範囲が１：１〜１：１０ ＦＬＴ：ＡＺＴであることが示されている。ＷＯ９１／０１１３７の表１には、１：１の比のＦＬＴおよびＡＺＴが、ＦＬＴ：ＡＺＴの比が１：８と比べて、免疫蛍光アッセイによる測定では優れた治療指数（ＩＣ５０／ＩＣ５０）を、およびＥＬＩＳＡによる測定で同程度の治療指数を有することが示されている。
【０００７】
国際特許出願ＷＯ２００４／００２４３３は、別の組み合わせであるアロブジンおよび別のＮＲＴＩ、即ちアバカビルを記載する。ウイルス抑制についての協力効果は、既存の抗レトロウイルス処置への追加処置としての７．５ｍｇＱＤのアロブジンを患者に処方した、ＨＩＶ感染患者での臨床試験により確認されている。試験設計および全体の結果は、Ｋａｔｌａｍａら、ＡＩＤＳ ２００４年、１８（９）：１２９９〜１３０４に概説されている。アロブジンおよびジドブジンの構造類似性の高さが、さらなる血液毒性をもたらすことが懸念されたために、既にジドブジンによる処置を受けていた患者が除外されたことに特に注意すべきである。典型的にはアバカビルは３００ｍｇＢＩＤまたは６００ｍｇＱＤで投与される。これは、アロブジン：アバカビルが１：７０のモル比に対応する。抗ウイルスの協力効果が、特許出願では１：２００のモル比で細胞培養物中で確認された。しかし、当該組み合わせの細胞毒性およびミトコンドリア毒性のいずれについても測定されていない。本明細書の比較例に示すとおり、これらの値の間のモル比でのアロブジンおよびアバカビルでは、アロブジンのミトコンドリア毒性を解消することはできない。
【０００８】
ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤の相互作用、とりわけミトコンドリア毒性に関しての相互作用は複雑であり、ほとんど理解されていない現象である。Ｖｉｄａｌら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ ２００６年、５０（１１）：３８２４〜３８３２頁に報告された非常に包括的な一連の研究において、ＮＲＴＩテノホビルは、ジダノシン（ｄｄｌ）のミトコンドリア毒性（ｍｔＤＮＡ減少によって測定した）を劇的に高めることが確認された。３μＭジダノシン：３０μＭテノホビル（即ち、モル基準で１：１０）の薬量で、ｍｔＤＮＡの減少は、約８０％であり、より高いモル比では＞９０％であった。対照的に、３０μＭテノホビルに対して３、４０および２００μＭジドブジン（即ち、１：１０、約１：１および約６．５：１）で試験した場合でも、テノホビルはジドブジンのミトコンドリア毒性に影響しなかった。
【０００９】
本発明の簡単な説明
今回我々は、先行技術の比からは明らかにはずれる特定の範囲の比でのアロブジンおよびジドブジンの併用投与がミトコンドリア毒性の驚異的な減少を伴う相互作用を生み出し、その一方でアロブジンとジドブジンの協力的抗ウイルス効果は保持されることを発見した。
【００１０】
本発明の第１の側面によれば、１：１００〜１：３５０の範囲のモル比での、アロブジンおよびジドブジンの同時または連続的投与を含む、ＨＩＶの治療方法または予防方法が提供される。好適には、当該方法は、ＨＩＶを治療または予防するために、当該方法による処置を必要とする対象に、安全であって有効な量のアロブジンおよびジドブジンを投与することを含む。
【００１１】
本発明の関連する側面により、同時または連続的投与のための医薬の製造におけるアロブジンおよびジドブジンの使用であって、前記医薬が、アロブジンがジドブジンに対して１：１００〜１：３５０の比で投与されるように調整されている、前記使用が提供される。関連する側面によれば、ＨＩＶの治療または予防のための同時または連続的投与におけるアロブジンおよびジドブジンの使用が提供される。
【００１２】
本発明の第２の側面により、前記方法に使用されるように調整され、１：１００〜１：３５０の範囲のモル比でアロブジンおよびジドブジンを含む医薬組成物が提供される。
【００１３】
したがって、アロブジンを含む医薬組成物およびジドブジンを含む医薬組成物を含む医薬キット（ｋｉｔ ｏｆ ｐａｒｔｓ）であって、１：１００〜１：３５０の範囲のモル比でアロブジンおよびジドブジンが前記キットに存在することを特徴とする、前記医薬キットもまた提供される。好適には、前記医薬キットは、ＨＩＶの治療または予防のためにアロブジンを含む医薬組成物およびジドブジンを含む医薬組成物の同時または連続的投与を指示する使用説明書をさらに含んでいるであろう。
【００１４】
本発明の組み合わせは、従来技術のジドブジンおよびアロブジン処置およびジドブジン／アロブジンの組み合わせにおいて経験された欠点を、ミトコンドリア毒性の減少、それによる安全性の改善、患者コンプライアンスの改善、１日のトラフレベルの安定性改善および薬剤エスケープ変異体発生の抑制の点において顕著に緩和する。
【００１５】
理論により拘束されることは望まないが、アロブジンおよびジドブジンの間の特徴的比率の採用が、ジドブジンがミトコンドリア輸送システムの阻害を引き起こし、活性な代謝物であるアロブジントリホスフェートが、特に感受性のミトコンドリアＤＮＡポリメラーゼとネガティブに相互作用することを妨げることを、我々の予備的なデータは示唆している。この有益な効果は、従来技術のＡＺＴ／ＦＬＴの組み合わせではこれまでに観察されていない。なぜなら、実質的に等モル量のこの２つのヌクレオシドにより引き起こされる細胞毒性およびミトコンドリアＤＮＡの減少により覆い隠されていたからである。
【００１６】
１〜１０ｍｇ／ｋｇ／日のジドブジン薬量と併せての０．１〜１ｍｇ／ｋｇ／日のアロブジンの薬量を明言するＷＯ９１／０１１３７の先行技術の組み合わせと対照的に、本発明は、対応する量の１〜１０ｍｇ／ｋｇ／日のアロブジンの薬量と併せて、約０．００５〜０．０５ｍｇ／ｋｇ／日のアロブジン薬量を予定している。より最近の臨床試験により、ＷＯ９１／０１１３７で好ましいとされている、ジドブジンの有効薬量に基づいての１：１０の比率は、アロブジンおよび／またはジドブジンの毒性レベルを引き上げることが示唆されている。
【００１７】
本発明の組成物および方法では、適宜、１：１５０〜１：２５０の範囲、例えば、１：１５０〜１：２００の範囲内の比率でアロブジンおよびジドブジンを使用する。
【００１８】
典型的には、アロブジンの最大日薬量は、７０ｋｇの成人に対して約４ｍｇ／日であろう。本発明の方法にしたがった投薬計画は、一般的に１日２〜４mgの範囲のアロブジン薬量および１日３００〜９００ｍｇの範囲のジドブジン薬量を含む。
【００１９】
特に好ましくは、成人の投薬計画は、２〜３ｍｇ／日、例えば、２ｍｇまたは２．５ｍｇの１日のアロブジン投与を含む。一般に好ましくは、成人の投薬計画は、４５０〜６００ｍｇ／日、とりわけ６００ｍｇの１日のジドブジン投与を含む。
【００２０】
２．５ｍｇアロブジンおよび６００ｍｇジドブジンの日薬量は、アロブジンの分子量として２４４を、およびジドブジンの分子量として２６９を使用すると、１：２１８のモル比に対応する。
【００２１】
定義した範囲の比率でのアロブジンおよびジドブジンの併用投与は、例えば、アロブジンおよびジドブジンが別々の投薬単位（典型的には、カプセルまたは錠剤または各々一つづつ）で各々投与される場合、連続的であっても実質的に連続的であってもよい。
【００２２】
典型的にはジドブジンはＢＩＤ、例えば３００ｍｇＢＩＤで投与される。しかし、アロブジンをＱＤで投与することが好ましいことがしばしばあり、そのため、本発明の便宜的な連続的投与の態様は、朝の３００ｍｇ錠剤のジドブジンおよび２、３または４ｍｇの錠剤のアロブジンならびに夜の３００ｍｇ錠剤のジドブジン（またはその逆）を含みうる。錠剤投与計画を簡単にするために、一般に不利ではあるが代替の態様は、３００ｍｇ錠剤またはカプセルのジドブジンおよび１、１．５または２ｍｇのアロブジンを含む錠剤またはカプセルを、朝および夜に一緒にまたは間をおかずに連続で服用する投与を含みうる。
【００２３】
直前のパラグラフで記載したものなどの連続的投与の剤形は、ジドブジン錠剤のブリスターパックまたはアロブジン錠剤のブリスターパックを各々含む個別のカートンなどの、別々のパッケージとして提供されうる。さらなる例は、ジドブジンおよびアロブジンのカプセルまたは錠剤の別々の瓶を含みうる。少なくとも１つの瓶またはカートンは典型的には、アロブジンは特徴的な１：１００〜１：３５０の比でジドブジンと併用投与されるべきものであることを知らせる使用説明書またはその他の印刷された指示書を含むであろう。しかし、通常のカートンは適宜、アロブジンを含むブリスターシートおよびジドブジンを含むブリスターシートの両方を含む。
【００２４】
好ましい連続的投与剤形において、アロブジンおよびジドブジンの錠剤またはカプセルの各々は、各々の成分が正しく服用されるような視覚からの働きかけが与えられる空間配置がされた、同じブリスターシートから提供される。例えば、アロブジンの意図した薬量が２、３または４ｍｇＱＤでありジドブジンの薬量が３００ｍｇＢＩＤである場合、ブリスターシートは、アロブジン錠剤の１列とそれに平行した各々同数のジドブジン錠剤を含む２列を配置していてもよい。それにより、特定の投与機会にアロブジンおよびジドブジンの両方を服用すべきか、ジドブジンのみを服用すべきかを確実にすることが患者にとって容易になるであろう。ブリスターシートの個々のブリスターは、コンプライアンスをさらに支援するために、一週間のうちの何曜日などの印を付してもよい。
【００２５】
しかし、好ましくは、アロブジンおよびジドブジンは、カプセルまたは糖衣錠またはより好ましくは錠剤などの通常の単位剤形で提供される。単位剤形は、ＢＩＤ投与、すなわち、各投与単位（おそらくは、単一の錠剤またはカプセルが任意の一回の投与機会に服用されると考えられる）にアロブジンおよびジドブジン成分の意図した日薬量の半分を含むように調整されていてもよい。この態様に沿った典型的な単位剤形は、３００ｍｇジドブジンおよび１または１．２５ｍｇアロブジンを含むカプセルまたは錠剤を含む。
【００２６】
投薬計画が、複数で同じ投薬単位を同時に摂取することを要する場合（典型的には、各々が１３３ｍｇロピナビルおよび３３ｍｇリトナビルを含む２つのソフトタブレットとして１日に３回投与される、ロピナビル／リトナビルの組み合わせカレトラＴＭの場合のように）、各々の単位投与のアロブジンおよびジドブジンの量はそれにしたがって調節される。
【００２７】
別の単位剤形は、ＱＤ投与のために調整される。ＱＤ投与はコンプライアンスを促進し、同時に毒性を軽減し、協力的抗ウイルス効果をもたらす。よって、成人用を意図した錠剤またはカプセルは、２〜４ｍｇアロブジンおよび３００〜６００ｍｇジドブジンを含みうる。好ましい単位剤形は：２ｍｇアロブジンおよび３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇまたはとりわけ６００ｍｇジドブジン；２．５ｍｇアロブジンおよび３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇまたはとりわけ６００ｍｇジドブジン；３ｍｇアロブジンおよび３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇまたはとりわけ６００ｍｇジドブジン；または４ｍｇアロブジンおよび３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇまたはとりわけ６００ｍｇジドブジンを含む。
【００２８】
組み合わせ療法が例外と言うよりはむしろ標準であるＨＩＶ療法においては通常のことであるが、本発明の方法および医薬組成物は、１または２の追加の医薬、特に追加のＨＩＶ抗ウイルス剤をさらに含みうる。追加のＨＩＶ抗ウイルス剤（複数でもよい）は、ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＲＴＩ）、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＮＲＴＩ）、プロテアーゼ阻害剤（ＰＩ）、インテグラーゼ阻害剤、融合阻害剤、成熟阻害剤（ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）などの作用分類の何れかから選択してもよい。追加のＨＩＶ抗ウイルス剤は、典型的には、それらの慣用の薬量で併用するかまたは同時に服用する。
【００２９】
代表的なＮＲＴＩには、スタブジン（ｄ４Ｔ、ゼリット）、ザルシタビン（ｄｄＣ）、ジダノシン（ｄｄｌ、ヴァイデックス）、アバカビル（ＡＢＣ、ザイアジェン）、ラミブジン（３ＴＣ、エピビル）、エムトリシタビン（ＦＴＣ、エムトリバ）、ラセビル（ラセミＦＴＣ）、アデホビル（ＡＤＶ）、エンタカビル（ＢＭＳ２００４７５）、アロブジン（ＦＬＴ）、テノホビルジソプロキシルフマレート（ＴＮＦ、バイリード（Ｖｉｒｅａｄ））、アムドキサビル（ＤＡＰＤ）、Ｄ−ｄ４ＦＣ（ＤＰＣ−８１７）、（−）ｄＯＴＣ（Ｓｈｉｒｅ ＳＰＤ７５４）、エルブシタビン（Ａｃｈｉｌｌｉｏｎ ＡＣＨ−１２６４４３）、ＢＣＨ１０６８１（Ｓｈｉｒｅ ＳＰＤ７５６）、ラシビル、Ｄ−ＦＤＯＣ、ＧＳ７３４０、ＩＮＫ―２０（チオエーテルホスホリピッドＡＺＴ、Ｋｕｃｅｒａ）、２’３’−ジデオキシ−３’−フルオログアノジン（ＦＬＧ）およびそのプロドラッグ（ＭＩＶ―２１０など）、リバーセット（ＲＶＴ、Ｄ−Ｄ４ＦＣ、ファーマセット ＤＰＣ−８１７）が含まれる。
【００３０】
代表的なＮＲＴＩには、デラビルジン（レスクリプター）、エファビレンツ（ＤＭＰ−２６６、サスティバ）、ネビラピン（ＢＩＲＧ−５８７、ビラミュン）、（＋）カラノリドＡおよびＢ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、カプラビリン（ＡＧ１５４９ｆ Ｓ−１１５３；Ｐｆｉｚｅｒ）、ＧＷ−６９５６３４（ＧＷ−８２４８；ＧＳＫ）、ＭＩＶ−１５０（Ｍｅｄｉｖｉｒ）、ＭＶ０２６０４８（ＭＩＶ−１６０ Ｍｅｄｉｖｉｒ ＡＢ）、ＭＩＶ−１７０（Ｍｅｄｉｖｉｒ）、ＮＶ−０５２２（Ｉｄｅｎｉｘ Ｐｈａｒｍ．）、Ｒ−２７８４７４（Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、ＲＳ−１５８８（Ｉｄｅｎｉｘ Ｐｈａｒｍ．）、ＴＭＣ−１２０／１２５（Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、リルピビリン（ＴＭＣ−２７８，１６５３３５；Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、ＵＣ−７８１（Ｂｉｏｓｙｎ Ｉｎｃ．）およびＹＭ２１５３８９（Ｙａｍａｎｏｕｓｈｉ）が含まれる。
【００３１】
代表的なＨＩＶプロテアーゼ阻害剤には、ＢＥＡ−４０３（Ｍｅｄｉｖｉｒ）、ＰＡ−４５７（Ｐａｎａｃｏｓ）、ＫＰＣ−２（Ｋｕｃｅｒａ Ｐｈａｒｍ．）、５ＨＧＴＶ−４３（Ｅｎｚｏ Ｂｉｏｃｈｅｍ）、アムプレナビル（ＶＸ−４７８、アジェネレース）、アタザナビル（レイアタッツ）、インディナビルスルフェート（ＭＫ−６３９、クリキシバン）、レキシバ（フォサムプレナビルカルシウム、ＧＷ−４３３９０８または９０８、ＶＸ−１７５）、リトナビル（ノルビル）、ロピナビル＋リトナビル（ＡＢＴ−３７８、カレトラ）、チプラナビル、ネルフィナビルメシレート（ビラセプト）、サキナビル（インビレース、フォルトベース）、ＡＧ１７７６（ＪＥ−２１４７、ＫＮＩ−７６４；Ｎｉｐｐｏｎ Ｍｉｎｉｎｇ Ｈｏｌｄｉｎｇｓ）、ＡＧ−１８５９（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＤＰＣ−６８１／６８４（ＢＭＳ）、ＧＳ２２４３３８；Ｇｉｌｅａｄ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＫＮＩ−２７２（Ｎｉｐｐｏｎ Ｍｉｎｉｎｇ Ｈｏｌｄｉｎｇｓ）、Ｎａｒ−ＤＧ−３５（Ｎａｒｈｅｘ）、Ｐ（ＰＬ）−１００（Ｐ−１９４６；Ｐｒｏｃｙｏｎ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ）、Ｐ−１９４６（Ｐｒｏｃｙｏｎ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ）、Ｒ−９４４（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ）、ＲＯ−０３３４６４９（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ）、ＴＭＣ−１１４（Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、ＶＸ−３８５（ＧＷ６４０３８５；ＧＳＫ／Ｖｅｒｔｅｘ）、ＶＸ−４７８（Ｖｅｒｔｅｘ／ＧＳＫ）が含まれる。
【００３２】
その他のＨＩＶ抗ウイルス剤には、融合阻害剤、ＣＤ４レセプターの阻害剤、ＣＣＲ５コレセプターの阻害剤およびＣＸＣＲ４コレセプターの阻害剤、または医薬として許容なその塩またはそのプロドラッグを含む侵入阻害剤が含まれる。侵入阻害剤の例は、ＡＭＤ−０７０（ＡＭＤ１１０７０；ＡｎｏｒＭｅｄ）、ＢｌｏｃｋＡｉｄｅ／ＣＲ（ＡＤＶＥＮＴＲＸ Ｐｈａｒｍ．）、ＢＭＳ８０６（ＢＭＳ−３７８８０６；ＢＭＳ）、エンフビルチド（Ｔ−２０、Ｒ６９８、フューゼオン）、ＫＲＨ１６３６（Ｋｕｒｅｈａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＯＮＯ−４１２８（ＧＷ−８７３１４０、ＡＫ−６０２、Ｅ−９１３；ＯＮＯ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ｐｒｏ−１４０（Ｐｒｏｇｅｎｉｃｓ Ｐｈａｒｍ）、ＰＲＯ５４２（Ｐｒｏｇｅｎｉｃｓ Ｐｈａｒｍ．）、ＳＣＨ−Ｄ（ＳＣＨ−４１７６９０；Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）、Ｔ−１２４９（Ｒ７２４；Ｒｏｃｈｅ／Ｔｒｉｍｅｒｉｓ）、ＴＡＫ−２２０（Ｔａｋｅｄａ Ｃｈｅｍ． Ｉｎｄ．）、ＴＮＸ−３５５（Ｔａｎｏｘ）およびＵＫ−４２７，８５７（Ｐｆｉｚｅｒ）である。インテグラーゼ阻害剤の例は、Ｌ−８７０８１０（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．）、ｃ−２５０７（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．）およびＳ（ＲＳＣ）−１８３８（Ｓｈｉｏｎｏｇｉ／ＧＳＫ）である。
【００３３】
本発明の方法または医薬組成物において使用するために一般に好ましい追加の抗ウイルス剤は、ｃｉｓ−１−（５−シアノピリジン−２−イル）−３−（４，７−ジフルオロ−１，１ａ，２，７ｂ−テトラヒドロシクロプロパ［ｃ］クロメン−１−イル）ウレアとしても知られているＭＩＶ−１６０である。ＭＩＶ−１６０の合成は、ＷＯ０２／０７０５１６に記載されている。好適な成人薬量としては、２５０〜１５００ｍｇ、例えば４００ｍｇまたは８００ｍｇ、典型的にはＱＤまたはＢＩＤが挙げられる。
【００３４】
ＭＩＶ−１６０を含む本発明の態様は、チトクロームアンタゴニスト、とりわけＣｙｐ４５０ ３Ａ４阻害剤、例えばクレープフルーツジュースまたはより好ましくはリトナビルと適宜併用投与される。リトナビルはＨＩＶの処置について既に登録されたプロテアーゼ阻害剤であり、６００ｍｇＢＩＤの成人薬量、しかし追加剤（ｂｏｏｓｔｅｒ）として使用する場合はかなり低薬量、典型的には１００または２００ｍｇＢＩＤが推奨される。追加薬を使用する場合は、典型的にはＭＩＶ−１６０の薬量は低くすることができる。
【００３５】
本発明のこの側面について典型的な単位薬量の態様は、下表に示される錠剤が含まれる：
【００３６】
【表１】
【００３７】
本発明において使用するためにさらに好ましいＮＮＲＴＩは、Ｎ−［（１Ｓ，１ａＲ，７ｂＲ）−４，７−ジフロオロ−１，１ａ，２，７ｂ−テトラヒドロシクロプロパ［ｃ］クロメン−１−イル］−Ｎ’−［５−（４−（スルホンアミド）フェノキシ）−２−ピラジニル］ウレアとしても知られているＭＩＶ−１７０である。ＭＩＶ−１７０の合成はＷＯ０５／０６６１３１に示されている。典型的成人薬量は、約１００〜９００ｍｇ／日、とりわけ３００〜６００ｍｇＱＤである。特定の比でのアロブジンおよびジドブジンとのＭＩＶ−１７０の組み合わせは、一般的には経口のバイオアベイラビリティーが実質的に改善するため、リトナビルの追加を必要としないであろう。
【００３８】
この態様の典型的投薬計画には以下のものが含まれる：
【００３９】
【表２】
【００４０】
ここで本発明の概要に戻ると、一般にアロブジンおよびジドブジンは製剤が困難とは認識されておらず、慣用の製剤方法、賦形剤および担体が広く使用可能である。上述の追加の抗ウイルス剤のいずれかとアロブジンおよびジドブジンの併用製剤は、当業者には明らかであろうが、当該追加抗ウイルス剤に対して適切に製剤を調製することが必要な場合もある。好ましい追加の抗ウイルス剤のＭＩＶ−１６０、ＭＩＶ−１７０およびリトナビルは、製剤に克服できない困難があるとは考えられていない。
【００４１】
上述のよく知られた製剤方法としては、慣用の医薬担体を伴うように、特定の範囲の比率のアロブジンおよびジドブジンならびに任意の追加の抗ウイルス剤を取る工程が挙げられる。一般に、製剤は、液体担体または微粉化された固体担体またはその両方を伴うように活性薬剤を均一かつ緊密にとって、その後必要であれば製剤を形作ることにより調製される。本発明は、特定の範囲の比率のアロブジンおよびジドブジン、ならびに場合によっては１または２の追加の抗ウイルス剤を、医薬として許容される担体またはビークル（ｖｅｈｉｃｌｅ）を伴ってまたは併用して取ることを含む、医薬組成物の調製方法に及ぶ。医薬組成物の製造が医薬賦形剤および塩の形態の活性成分の緊密な混合を含む場合、非塩基性である、即ち酸性または中性のどちらかの賦形剤を使用することが往々にして好ましい。
【００４２】
本発明の経口投与用の製剤は、それぞれが所定の量の活性薬剤を含む、カプセル、カシェ剤または錠剤などの別々の単位として提供されてもよい。あるいは、それらは、粉体または顆粒として；水性液体または非水性液体中の活性薬剤の溶液または懸濁液として；または水中油液体エマルジョンもしくは油中水液体エマルジョンとして；またはボーラスなどとして提供されうる。
【００４３】
経口投与（例えば、錠剤またはカプセル）のための組成物について、用語「好適な担体」には、慣用の賦形剤などのビークル、例えば、結合剤（シロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、ポリビニルピロリドン（ポビドン）、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピル−メチルセルロース、スクロースおよびデンプンなど）；充填剤または担体、例えば、コーンスターチ、ゼラチン、ラクトース、スクロース、微結晶セルロース、カオリン、マンニトール、リン酸ジカルシウム、塩化ナトリウムおよびアルギン酸；ならびに滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウムおよび他の金属ステアリン酸塩、グリセロールステアレート、ステアリン酸、シリコーンオイル、タルクワックス、オイルおよびコロイド状シリカなど）が挙げられる。香味剤、例えばペパーミント、ウインターグリーン油、チェリーフレーバーなどもまた使用されうる。剤形を容易に認識可能にするために、着色剤を加えることが望ましい場合もある。錠剤はまた、当該技術分野においてよく知られた方法によりコーティングされていてもよい。
【００４４】
錠剤は、場合によっては１以上の付帯適性分と共に、圧縮または成型により製造されうる。圧縮錠剤は、場合によっては結合剤、滑沢剤、不活性な希釈剤、保存剤、界面活性剤または分散剤と混合した、自由流動性の形態、例えば粉体または粒状の活性薬剤を、好適な機械にて圧縮することにより調製されうる。成型錠剤は、不活性液体希釈剤でしめらせた粉末の化合物の混合物を好適な機械にて成型することにより調製されうる。錠剤は、コーティングされていても分割用割れ目が入れてあってもよく、活性薬剤の徐放または制御放出を行うための製剤がされていてもよい。
【００４５】
経口投与に好適な別の製剤には、フレーバー基剤、通常はスクロースおよびアカシアまたはトラガカント中に活性薬剤を含むロゼンジ剤；不活性基剤、例えばゼラチンおよびグリシン、またはスクロースおよびアカシア中に活性薬剤を含むトローチ；および好適な液体担体中に活性薬剤を含むマウスウォッシュが挙げられる。
【００４６】
アロブジンおよび／またはジドブジンは、遊離のヌクレオシドまたは慣用の医薬として許容なその塩またはその水和物として投与されうる。慣用の塩としては、酸付加塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、クエン酸塩、トシル酸塩およびマレイン酸塩、およびリン酸または硫酸と形成した塩が挙げられる。別の側面では、好適な塩は塩基性塩、例えばアルカリ金属塩（例えば、ナトリウムまたはカリウム）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウムまたはマグネシウム）、または有機アミン塩（例えば、トリエチルアミン）である。溶媒和物の例としては水和物が挙げられる。
【００４７】
あるいは、アロブジンおよび／またはジドブジンは、生体内で、アロブジン／ジドブジンまたはアロブジン／ジドブジンモノホスフェートを放出するプロドラッグとして投与されうる。当該ヌクレオシドを生体内で放出する慣用のヌクレオシドプロドラッグとしては、５’−アルキルエステル、例えば、アセチル、ピバロイルまたはステアロイル、または５’アミノエステル、例えば、Ｌ−バリル、Ｌ−イソロイシルまたはＬ−ラクチル−Ｌ−バリルエステルが挙げられる。生体内でジドブジンモノホスフェートを放出するプロドラッグとしては、フォシブジンチドキシル（ｆｏｓｉｖｕｄｉｎｅ ｔｉｄｏｘｉｌ）などのフォシブジン（ｆｏｓｉｖｕｄｉｎｅ）が挙げられる。生体内でアロブジンを放出するプロドラッグとしては、フォサルブジンチドキシル（ｆｏｓａｌｖｕｄｉｎｅ ｔｉｄｏｘｉｌ）などの、ＥＰ３５０２８７、ＥＰ５４５９６６、ＥＰ７４１７４０およびＥＰ７６３０４９に記載されたフォシブジン類縁体が挙げられる：
【００４８】
【化１】
【００４９】
［式中、ｎは１１であり、ｍは９であり、ＲはＦである（フォサルブジン）、またはＲはＮ３である（フォシブジン）］。
【００５０】
本明細書およびクレームでのアロブジンおよびジドブジンへの言及は、当該塩、水和物およびプロドラッグもまた意味し、ここで、重量（日薬量など）は、遊離のヌクレオシドに対して分子量の増加に対応して典型的には上方修正される。
【００５１】
ここで、ジドブジンは現在ジェネリックであり、世界中の多くの製造者から医薬グレードで広く入手可能である。アロブジンは、ＥＰ４７０３５５またはＷＯ９４／２６７６２に記載されているかそれに類似する、アルミニウムまたは鉄で触媒される無水ヌクレオシド経路を使用して簡便に合成される。フォシブジンおよびフォサルブジンは既に引用した特許において調製されている。ＭＩＶ−１６０およびＭＩＶ−１７０の合成は既に特定したとおりである。
【００５２】
態様の詳細な説明
ここで、本発明の種々の側面を、例示に過ぎない以下の非限定的実施例により説明する。
【００５３】
細胞系実験でのミトコンドリア毒性の決定
アロブジン、ジドブジンおよびその両方の投与後の、ミトコンドリアＤＮＡ合成の阻害を明らかにするよう設計された実験を以下に説明する。ＨＩＶ増殖をサポートするいくつかの好適な細胞系は容易に入手可能であり、例えば、ＣＥＭｘ１７４細胞系（Ｓｗｅｄｉｓｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ（ＳＭＩ）由来、Ｓｗｅｄｅｎ）、ＭＴ−４（購入により入手可能）およびＨｅｐ Ｇ２（購入により入手可能）などの、ＨＩＶ増殖をサポートする細胞系が挙げられる。
【００５４】
要するに、１００μｌ細胞を９６ウェルプレートに１×１０４細胞／ｍｌの濃度で播種し、指数関数的増殖で、１０％熱不活性化ウシ胎仔血清（Ｇｉｂｃｏ製）およびペニシリン−ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ製）を加えたＲＰＭＩ１６４０培地（Ｇｉｂｃｏ製）中で培養した。３または４日ごとに培地を交換し、細胞を１週間に１度１：１０の希釈度で二次培養する。全ての培養物についてマイコプラズマ感染を定期的に確認し、３７℃で加湿した５％ＣＯ２雰囲気下で増殖させる。
【００５５】
試験した全ての薬剤は、まずジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に１０ｍＭで溶解させ、その後、培養培地中で適当な濃度にさらに希釈した。ミトコンドリアＤＮＡの分析は、修正を加えた、既に報告されている（Ｚｈａｎｇ、Ｈら、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９４年、４６巻：１０６３〜１０６９頁）、タックマンの技術を使用することにより行った。
【００５６】
一連の期間の間、細胞を、試験薬剤、例えば、アロブジン、フォサルブジン、ジドブジン、アバカビルなど、またはアロブジン／フォサルブジンおよびジドブジン／アバカビルの種々の組み合わせにより処理した。各々の表において種々の比率を示した。薬剤の加えて１４日後、細胞を回収した。ＱｉＡａｍｐ ＤＮＡ ｂｌｏｏｄ Ｍｉｎｉ ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ、Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ、ＣＡ）を使用して、Ｑｉａｇｅｎｅ Ｂｌｏｏｄ＆Ｂｏｄｙ Ｆｌｕｉｄ Ｓｐｉｎ Ｐｒｏｔｏｃｏｌについての製造者説明書にしたがって、全細胞ＤＮＡを調製し、ＤＮＡ増幅に付した。
【００５７】
ＤＮＡ増幅中にＴａｑＤＮＡポリメラーゼの５’→３’エキソヌクレアーゼ活性による分光学的応答を発生させるために、蛍光共鳴エネルギー転移（ＦＲＥＴ）を利用する内部クエンチＤＮＡプローブを使用する、ミトコンドリアＤＮＡタックマンおよびヒト核ＤＮＡのプローブは、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓにおいて調製された。この方法は、特別に設計されたタッマンプローブ：Ｄ−ループ、５’フルオロ標識、６−ＦＡＭ−ＡＣＧ ＣＴＧ ＧＡＧ ＣＣＧ ＧＡＧ−ＭＧＢＮＦＱに対応するミトコンドリアＤＮＡプローブ；一対のＤＮＡ増幅プライマー（正方向ミトコンドリアＤＮＡプライマー：５’−ＣＡＣ ＧＣＧ ＡＴＡ ＧＣＡ ＴＴＧ ＣＧＡ−３’および逆方向ミトコンドリアＤＮＡプライマー：５’−ＡＧＧ ＡＡＴ ＣＡＡ ＡＧＡ ＣＡＧ ＡＴＡ ＣＴＧ ＣＧＡ−３’、ならびに正方向核ＤＮＡプライマー：５’−ＧＣＧ ＧＣＧ ＡＣＧ ＡＣＣ ＣＡ−３’ および逆方向細胞核ＤＮＡプライマー：５’−ＧＧＣ ＧＡＣ ＴＡＣ ＣＡＴ ＣＧＡ ＡＡＧ ＴＴＧ−３’）を伴う、１８ＳリボソームＲＮＡ、５’フルオロ標識、６’ＦＡＭ−ＴＣＧ ＡＡＣ ＧＴＣ ＴＧＣ ＣＣ−ＭＧＢＮＦＱに対応する核ＤＮＡのプローブに存在する蛍光色素を励起させるためのレーザースキャンニング技術を用いるＰＣＲ型アッセイを使用する。これは、ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ ７７００および蛍光性５’ヌクレアーゼアッセイのためのタックマン試薬を使用する、ＰＣＲのリアルタイム検出のための、完全に統合されたシステムである。
【００５８】
細胞増殖は、細胞核ＤＮＡ（１６ＳリボソームＤＮＡ）により制御された。ミトコンドリアアッセイの結果は、対照（薬剤を添加しない）との比較でのミトコンドリアＤＮＡおよび細胞核ＤＮＡの阻害のパーセンテージとして示す。
【００５９】
実施例１
上記のアッセイを、Ｔリンパ球由来のＭＴ４細胞系において行った。アロブジンまたはジドブジンの単独療法、またはアロブジンおよびジドブジンの組み合わせによる併用療法を、以下の表１に示したモル濃度で行った：
【００６０】
【表３】
【００６１】
アロブジンの単独療法では、０．１μＭの濃度でも、この実験においてミトコンドリアＤＮＡ複製数の７０％の減少が引き起こされたことが表１から明らかである。この阻害は、モルで１：１００の比でのジドブジンの存在により取り除かれた。
【００６２】
ここで、上述のＷＯ９１／０１１３７の特に好ましい範囲内の比である、１μＭアロブジン：１０μＭジドブジンの組み合わせに注目すると、ミトコンドリアＤＮＡコピー数の顕著な減少を伴う著しい細胞毒性（核ＤＮＡコピー数における６０％の低下に反映している）が存在することがわかる。臨床において、この細胞毒性は、アロブジン単独と比較してのミトコンドリア毒性の減少を覆い隠してしまう。しかし、問題なのは、この先行技術のアロブジン／ジドブジンの組み合わせにおいてもかなり相当のレベルのミトコンドリア毒性が残っていることである。
【００６３】
対照的に、本発明の範囲内の１：１００のモル日（重量：重量で１：１１０に対応する）のアロブジンおよびジドブジンは、完全にミトコンドリアＤＮＡコピー数の減少を根絶した。
【００６４】
実施例２
上述の実験を、追加の濃度のアロブジンおよび／またはジドブジンでＭＴ−４細胞において繰り返した。生データおよび統計データを表２Ａに示す。当該データは以下の表２Ｂに概要を示す。
【００６５】
【表４】
【００６６】
【表５】
【００６７】
このように実験により、アロブジンのミトコンドリア毒性は、顕著に大きなモル濃度のジドブジンの併用投与により回復することができるという実施例１の結果を確認した。
【００６８】
実施例３
ＥＰ７４１７４０の実施例４に記載したように製造した、アロブジンモノホスフェートプロドラッグのフォサルブジンチドキシル、および／またはジドブジンを使用して、ＭＴ−４細胞においてさらなるミトコンドリア減少アッセイを行った。結果を表３に示す。
【００６９】
【表６】
【００７０】
やはり、ｍｔＤＮＡ減少で測定されるように、単独療法でのアロブジン（今回はモノホスフェートプロドラッグとして投与された）は、顕著なミトコンドリア毒性を伴った。この毒性は、１００倍量のジドブジンの併用投与により回復した。
【００７１】
比較例１
アロブジン、アロブジン＋アバカビルのミトコンドリア毒性をＭＴ−４細胞において決定した。
【００７２】
７０：１のモル比のアバカビルおよびアロブジンは、第２相臨床試験において協力活性を示した（ＷＯ２００４／００２４３３を参照）。この特許出願はまた、２００：１のモル比での細胞培養アッセイでの抗ウイルス効果として協力活性を記載する。種々の濃度のアバカビル、アロブジン、またはアバカビルおよびアロブジンを実施例１に記載したように試験した。
【００７３】
【表７】
【００７４】
結果は、アロブジンのミトコンドリア毒性は、低モル比または高モル比（１：１０アロブジン：アバカビルまたは１：１００アロブジン：アバカビル）においてもＮＲＴＩアバカビルの添加によっては回復しなかったことを示す。これより、抗ウイルス効果について達成される協力は、ミトコンドリア毒性についてのアンタゴニズムとは作用的に関連しないことが示唆される。
【００７５】
この出願で言及した特許および特許出願を含むすべての文献は、可能なかぎりの完全な範囲で参照により本明細書に援用される。
【００７６】
本明細書および以下のクレームを通して、文脈が要求しない限り、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」およびその変化形（例えば、ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ、ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）は、特定した整数または工程または整数の群を含むことを意味するが、その他の整数または工程または整数の群および工程の群を除外することを意味するものではない。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１：１００〜１：３５０の範囲のモル比でアロブジンおよびジドブジンを含む、医薬組成物。
【請求項２】
前記比が１：１５０〜１：２５０，好ましくは１：１５０〜１：２００の範囲にある、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
さらに１または２の追加の薬剤を含む、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
追加の薬剤がＨＩＶ抗ウイルス剤ＭＩＶ−１７０であるか；または追加の薬剤が、単独、もしくは追加剤薬量のリトナビルを伴うＨＩＶ抗ウイルス剤ＭＩＶ−１６０である、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
ＱＤの単位剤形で提供される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
２〜４ｍｇのアロブジン、および３００〜９００ｍｇのジドブジンを含む、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
６００ｍｇのジドブジンを含む、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
アロブジンが、アロブジンモノホスフェートプロドラッグのフォサルブジンチドキシルとして投与される、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
１；１００〜１：３５０の範囲の比でのアロブジンおよびジドブジンの同時または連続的投与を含む、ＨＩＶの治療または予防の方法。
【請求項１０】
前記比が１：１５０〜１：２５０，好ましくは１：１５０〜１：２００の範囲にある、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
さらに１または２の追加の薬剤の同時または連続的投与を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
追加の薬剤がＨＩＶ抗ウイルス剤ＭＩＶ−１７０であるか；または単独、もしくは追加剤薬量のリトナビルを伴うＨＩＶ抗ウイルス剤ＭＩＶ−１６０である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記アロブジンおよびジドブジンがＱＤの単位剤形で提供される、請求項９〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
単位剤形が２〜４ｍｇのアロブジン、および３００〜９００ｍｇのジドブジンを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
単位剤形が６００ｍｇのジドブジンを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
アロブジンの薬量が２〜４ｍｇＱＤであり、ジドブジンの薬量が３００ｍｇＢＩＤである、請求項９〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
アロブジンが、アロブジンモノホスフェートプロドラッグのフォシブジンチドキシルとして投与される、請求項９〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
（ｉ）アロブジンを含む医薬組成物；および
（ｉｉ）ジドブジンを含む医薬組成物；
を含む医薬キットであって、アロブジンおよびジドブジンが１；１００〜１：３５０の範囲のモル比で前記キットに存在することを特徴とする、前記医薬キット。
【請求項１】
１：１００〜１：３５０の範囲のモル比でアロブジンおよびジドブジンを含む、医薬組成物。
【請求項２】
前記比が１：１５０〜１：２５０，好ましくは１：１５０〜１：２００の範囲にある、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
さらに１または２の追加の薬剤を含む、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
追加の薬剤がＨＩＶ抗ウイルス剤ＭＩＶ−１７０であるか；または追加の薬剤が、単独、もしくは追加剤薬量のリトナビルを伴うＨＩＶ抗ウイルス剤ＭＩＶ−１６０である、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
ＱＤの単位剤形で提供される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
２〜４ｍｇのアロブジン、および３００〜９００ｍｇのジドブジンを含む、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
６００ｍｇのジドブジンを含む、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
アロブジンが、アロブジンモノホスフェートプロドラッグのフォサルブジンチドキシルとして投与される、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
１；１００〜１：３５０の範囲の比でのアロブジンおよびジドブジンの同時または連続的投与を含む、ＨＩＶの治療または予防の方法。
【請求項１０】
前記比が１：１５０〜１：２５０，好ましくは１：１５０〜１：２００の範囲にある、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
さらに１または２の追加の薬剤の同時または連続的投与を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
追加の薬剤がＨＩＶ抗ウイルス剤ＭＩＶ−１７０であるか；または単独、もしくは追加剤薬量のリトナビルを伴うＨＩＶ抗ウイルス剤ＭＩＶ−１６０である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記アロブジンおよびジドブジンがＱＤの単位剤形で提供される、請求項９〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
単位剤形が２〜４ｍｇのアロブジン、および３００〜９００ｍｇのジドブジンを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
単位剤形が６００ｍｇのジドブジンを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
アロブジンの薬量が２〜４ｍｇＱＤであり、ジドブジンの薬量が３００ｍｇＢＩＤである、請求項９〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
アロブジンが、アロブジンモノホスフェートプロドラッグのフォシブジンチドキシルとして投与される、請求項９〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
（ｉ）アロブジンを含む医薬組成物；および
（ｉｉ）ジドブジンを含む医薬組成物；
を含む医薬キットであって、アロブジンおよびジドブジンが１；１００〜１：３５０の範囲のモル比で前記キットに存在することを特徴とする、前記医薬キット。
【公表番号】特表２００９−５３６１９２（Ｐ２００９−５３６１９２Ａ）
【公表日】平成２１年１０月８日（２００９．１０．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５０８６２７（Ｐ２００９−５０８６２７）
【出願日】平成１９年５月４日（２００７．５．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００７／０５１６８８
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１２９２７４
【国際公開日】平成１９年１１月１５日（２００７．１１．１５）
【出願人】（５０７２６１４２３）メディヴィル・アクチエボラーグ (6)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年１０月８日（２００９．１０．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年５月４日（２００７．５．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００７／０５１６８８
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１２９２７４
【国際公開日】平成１９年１１月１５日（２００７．１１．１５）
【出願人】（５０７２６１４２３）メディヴィル・アクチエボラーグ (6)
【Ｆターム（参考）】
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