３−（イミダゾリル）−ピラゾロ［３，４−Ｂ］ピリジン
ＣＣＲ１受容体の有力なアンタゴニストとして作用するとともに、インビボ抗炎症活性を有する化合物を提供する。当該化合物は、３−イミダゾリル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン誘導体であるとともに、医薬組成物、ＣＣＲ１介在型疾患の処置のための方法、及び競合ＣＣＲ１アンタゴニストの同定のためのアッセイにおけるコントロールとして有用である。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、米国仮出願番号60/932,948号の利益を請求し、その内容は全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
連邦政府による資金提供を受けた研究開発によりなされた発明についての権利に関する宣言
適用なし
【０００３】
本発明は、例えばＭＩＰ−１ａ、ロイコタクチン（leukotactin）、ＭＰＩＦ−１及びＲＡＮＴＥＳ等の様々なケモカインのＣＣＲ１受容体への結合の阻害に有効である、化合物又はその医薬的に許容可能な塩を１以上含有する医薬組成物を提供する。この化合物及び組成物は、ＣＣＲ１受容体のアンタゴニスト又は調節因子として、炎症及び免疫障害状態及び疾患の治療に使用されている。
【０００４】
ヒトの健康は、身体が外来の病原体を検出及び破壊する能力に依存し、これがないと外来の病原体が、個人から有価物を奪うとともに／又は病気を誘導する。白血球（leukocytes）（white blood cells（ＷＢＣ）：Ｔ及びＢリンパ球、単球、マクロファージ顆粒球、ＮＫ細胞、マスト細胞、樹状細胞、及び細胞由来の免疫（例えば破骨細胞））、リンパ球組織及びリンパ系脈管を含んでなる免疫系は身体の防御システムである。感染に対抗するため、白血球は体中を循環して病原体を検出する。病原体が検出されると、特に自然免疫細胞及び細胞毒性Ｔ細胞は、感染部位に動員され病原体を破壊する。免疫細胞、例えばリンパ球、単球及び顆粒球の動員及び活性化のための分子指針（molecular beacon）としてケモカインが作用し、病原体が発生する部位を認識する。
【０００５】
病原菌の免疫システム調整にもかかわらず、特定の不適切なケモカインのシグナル伝達が発生し、炎症性障害、例えばリウマチ様関節炎、多発性硬化症等の誘因又は持続に寄与する。例えば、リウマチ様関節炎では、骨関節における無秩序なケモカインの蓄積が、浸潤性マクロファージ及びＴ細胞を誘引及び活性化する。これらの細胞の活性化は、少なくとも一部では炎症そして最終的には骨及び軟骨の損失に導く、髄液細胞の増殖を誘導する（DeVries, M.E., et al., Semin Immunol 11(2):95-104 (1999）を参照）。多発性硬化症等のいくつかの脱髄疾患の特質は、中枢神経系へのケモカイン介在性の単球／マクロファージ及びＴ細胞の動員である（Kennedy, et al., J. Clin. Immunol. 19(5):273-279 (1999)参照）。移植片への破壊性ＷＢＣのケモカイン動員は、その後の拒絶に影響を及ぼした。DeVries, M.E., et al., ibidを参照されたい。ケモカインは、炎症及びリンパ球の発現において重要な役割を担っており、その活性を特異的に操作する能力は、現在満足な治療がない疾患を改善及び停止させることに大きな影響を与える。さらに、コストのかかる免疫抑制医薬の効果を発生及び複雑化させることなく、移植拒絶を最小化できる。
【０００６】
ケモカインは、４０超の小ペプチド（７〜１０ｋＤ）群であり、ＷＢＣ又は免疫性派生細胞で主に発現される受容体に結合するとともに、Ｇタンパク質共役シグナル伝達カスケードを通るシグナルが、その化学誘引物質及び化学刺激物質の機能を媒介する。受容体は１以上のリガンドと結合でき、例えば、受容体ＣＣＲ１は、ＲＡＮＴＥＤ（regulated on activation normal T cell expressed）、ＭＩＰ−１α（マクロファージ炎症性タンパク質）、ＭＰＩＦ−１／ＣＫβ８、及びLeukotactinケモカイン（その他のもの中ではより低い親和性である）と結合する。これまでに２４個のケモカイン受容体が知られている。非常に多くのケモカイン、多リガンド結合受容体、及び免疫細胞上の異なる受容体プロファイルは、厳密に制御され特異的な免疫応答を可能にしている。Rossi, et al., Ann. Rev. Immunol. 18(1):217-242 (2000)を参照されたい。ケモカイン活性は、その対応する受容体の調整を通して制御でき、関連炎症及び免疫疾患を治療するとともに、器官及び組織移植を可能にする。
【０００７】
受容体ＣＣＲ１及びそのケモカインリガンドには、例えばＭＩＰ−１α、ＭＰＩＦ−１／ＣＫβ８、ロイコタクチン及びＲＡＮＴＥＳ等があり、これらは重要な治療標的であるが（Saeki, et al., Current Pharmaceutical Design 9:1201-1208 (2003)を参照）、それはこれらがリウマチ様関節炎、移植拒絶（DeVries, M.E., et al., ibid.参照）、及び多発性硬化症（Fischer, et al., J Neuroimmunol. 110(1-2):195-208 (2000); Izikson, et al., J. Exp. Med. 192(7):1075-1080 (2000); and Rottman, et al., Eur. J. Immunol. 30(8):2372-2377 (2000)）に影響を及ぼすからである。実際、機能ブロック抗体、修飾ケモカイン受容体リガンド及び小有機化合物が発見されており、そのいくつかは、いくつかのケモカイン介在性疾患を予防又は治療することの実証に成功している（Rossi, et al., ibid.に概説されている）。とりわけ、リウマチ様関節炎の実験的モデルにおいて、シグナル伝達のブロッキングする修飾ＲＡＮＴＥＳリガンドを投与した場合に、疾患の発症が消滅する（Plater-Zyberk, et al., Immunol Lett. 57(1-3):117-120 (1997)を参照）。機能ブロッキング抗体及び小ペプチド療法は有望であるが、これらは投与されると極端に短い半減期で分解する危険性、及び多くのタンパク質において典型的な、開発及び製造のための費用が非常に高額であることが難点である。小有機化合物は、インビボでより長い半減期を有することが多く、有効性のためにより少ない用量でよく、しばしば経口投与ができるとともに、結果として高額にならないために好ましい。いくつかのＣＣＲ１の有機類似体が既に報告されている（Hesselgesser, et al., J. Biol. Chem. 273(25):15687-15692 (1998); Ng, et al., J. Med. Chem. 42(22):4680-4694 (1999); Liang, et al., J. Biol. Chem. 275(25):19000-19008 (2000); and Liang, et al., Eur. J. Pharmacol. 389(1):41-49 (2000)を参照）。動物モデルにおける疾患の治療が実証された有効性の視点から（Liang, et al., J. Biol. Chem. 275(25):19000-19008 (2000)を参照）、ＣＣＲ１シグナル伝達に介在される疾患の治療において使用できる追加の化合物を確認する調査が続けられている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、式I
【化１】
を有する化合物、又はその医薬的に許容可能な塩、水和物又はＮ−酸化物に関する。式Ｉにおいて、Ｒ1は、Ｃ1-4アルキル又はＣ1-4ハロアルキルであり、下付き文字のｍは０〜１の整数である。Ｒ2a、Ｒ2c、Ｒ2dは、水素、ハロゲン、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ1-4アルキル、−Ｏ−Ｃ1-4ハロアルコキシ及びＣ1-4ハロアルキルからなる群から各々独立に選択され、Ｒ3は、水素及びＣ1-4アルキルからなる群から選択される。
【０００９】
本明細書で提供される化合物に加えて、本発明は、さらに１以上のこれらの化合物を含有する医薬組成物、並びにＣＣＲ１、ＣＣＲ２及び／又はＣＣＲ３シグナル伝達活性に関連する疾患を主に処置するこれらの化合物の使用のための方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
説明なし
【発明を実施するための形態】
【００１１】
Ｉ．略語及び定義
それ自身又は別の置換基の一部としての「アルキル」なる用語は、特に断りのない限り、指定された炭素原子数の（即ち、Ｃ1-4は１〜４の炭素を意味する）直鎖又は分岐鎖の炭水化物基を意味する。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、及びｓｅｃ−ブチルがある。
【００１２】
「アルコキシ」なる用語は、従来の意味で使用されるとともに、分子の残りの部分に酸素原子を介して結合したアルキル基のことを言う。アルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ等がある。
【００１３】
それ自身又は別の置換基の一部としての「ハロ」又は「ハロゲン」なる用語は、特に断りのない限り、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素原子を意味する。さらに、「ハロアルキル」等の用語は、モノハロアルキル及びポリハロアルキルを含むことを意味する。例えば、「Ｃ1-4ハロアルキル」なる用語は、トリフルオロメチル、２,２,２−トリフルオロエチル、４−クロロブチル、３−ブロモプロピル等を含むことを意味する。
【００１４】
「保護基」はアルキル基以外の部分であって、分子中の反応基に結合し、その反応性を遮蔽、減少又は妨害する部分のことを言う。保護基の例は、T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, New York, 1999, and Harrison and Harrison et al., Compendium of Synthetic Organic Methods, Vols. 1-8 (John Wiley and Sons, 1971-1996)に記載があり、これはその全体が参照により本明細書に組み込まれる。代表的なヒドロキシ保護基としては、アシル基、ベンジル及びトリチルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリアルキルシリル、エーテル及びアリルエーテルがある。代表的なアミノ保護基には、ホルミル、アセチル、トリフルオロアセチル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニルＡ（ＣＢＺ）、tert−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、２−トリメチルシリル−エタンスルホニル（ＳＥＳ）、トリチル及び置換トリチル基、アリルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（ＦＭＯＣ）、ニトロ−ベラトリルオキシカルボニル（ＮＶＯＣ）等がある。
【００１５】
「アミノ酸カップリング試薬」は、ＨＢＴＵ（Ｏ−（ベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロフォスフェート）等の、様々な求核剤、例えば、アミン、アルコール及びチオール等で縮合するために使用できる活性化中間体を形成させる、アミノ酸のカルボン酸基と反応し、他のエステル、チオエステル又はアミド基を作製する試薬のことを言う。
【００１６】
「医薬的に許容可能な塩」なる用語は、本明細書で記載される化合物に見られる特定の置換基に応じて、比較的非毒性の酸又は塩基で調製される活性化合物の塩を含むことを意味する。本発明の化合物が比較的酸性の官能性を有する場合、所望の塩基の十分量と当該化合物の中性型を、そのまま又は不活性溶液中のいずれかで接触させることにより、塩基付加塩を得ることができる。医薬的に許容可能な無機塩基からの誘導された塩の例としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、第二マンガン、第一マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛等の塩がある。医薬的に許容可能な有機塩基から誘導された塩としては、第一級、第二級及び第三級アミンの塩があり、例えば、置換アミン、環状アミン、天然アミン、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ,Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン（piperadine）、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、手及び風呂ミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミン等がある。本発明の化合物が、比較的塩基性の官能性を有する場合、所望の酸の十分量と当該化合物の中性型を、そのまま又は不活性溶液中のいずれかで接触させることにより、酸付加塩を得ることができる。医薬的に許容可能な酸付加塩の例としては、無機酸から誘導されたものとして、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸水素酸、リン酸、リン酸一水素酸等があり、並びに、比較的非毒性の酸から誘導された塩として、炭酸、プロピオン酸、イソブチル酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸等がある。また、アルギン酸塩等のアミノ酸の塩、及びグルクロン酸又はガラクツロナン酸等の有機酸の塩が含まれる（例えば、Berge, S.M., et al, “Pharmaceutical Salts”, Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19を参照）。本発明の特定の化合物は、当該化合物が塩基又は酸付加塩のいずれにも変換できるよう、塩基及び酸両方の官能性を有する。
【００１７】
化合物の中性型を、従来の手法で、塩基又は酸と塩を接触させるとともに、起源化合物を単離することにより再生してもよい。化合物の起源形態は、ある特定の物理的特性の点、例えば極性溶媒中での溶解性が様々な塩の形態とは異なるが、それ以外は、当該塩は本発明の目的に応じて化合物の起源形態と同等である。
【００１８】
塩状態に加え、本発明はプロドラッグ状態で化合物を提供する。本明細書に記載される化合物のプロドラッグは、本発明の化合物を提供するための生理学的条件下で化学変化を受け易い化合物である。さらに、プロドラッグは、生体外（ex vivo）環境において、化学的又は生化学的方法により、本発明の化合物に変換できる。例えば、プロドラッグを、好適な酵素又は化学試薬と共に経皮パッチ貯蔵庫に置いた場合、徐々に本発明の化合物に変換できる。
【００１９】
本発明の特定の化合物は、非溶媒和状態及び溶媒和状態のいずれでも存在できる。一般的には、溶媒和状態は、非溶媒和状態と同等であり、本発明の範囲に包含されることを意図する。本発明の特定の化合物は、多結晶又はアモルファス状態で存在してもよい。一般的には、全ての物理的形態は、本発明により考慮される使用と同等であり、本発明の範囲内であることを意図する。
【００２０】
本発明の特定の化合物は、不斉炭素原子（光学中心）又は二重結合を有し、ラセミ体、ジアステレオマー、幾何異性体、位置異性体及び個々の異性体（例えば、別々のエナンチオマー）は全て、本発明の範囲内に包含される意図である。本発明の化合物はまた、当該化合物を構成する１以上の原子で、非天然的比率の原子同位体を含有する。例えば、化合物は放射活性同位体、例えば、トリチウム（3Ｈ）、ヨウ素−125（125Ｉ）又は炭素−14（14Ｃ）等で放射標識してもよい。本発明の化合物の全ての同位体変化は、放射活性であるか否かに関係なく、本発明の範囲内に包含される意図である。
【００２１】
II．一般
本発明は、式Ｉの化合物が、ＣＣＲ１受容体の強力なアンタゴニストとして作用するという発見から生まれた。本化合物は、インビボ（in vivo）で抗炎症活性を有し、優れた薬物動態特性を有する。従って、本明細書で提供される化合物は、医薬組成物、ＣＣＲ１介在型疾患の処置のための方法、及び競合的ＣＣＲ１アンタゴニストの識別のためのアッセイにおけるコントロールとして有用である。
【００２２】
III．化合物
ある態様によれば、本発明は式Ｉ
【化２】
の化合物、又はその医薬的に許容可能な塩、水和物又はＮ−酸化物を提供する。式Ｉにおいて、Ｒ1は、Ｃ1-4アルキル又はＣ1-4ハロアルキルであり、下付き文字のｍは、０〜１の整数である。式Ｉにおいて、Ｒ2a、Ｒ2c、Ｒ2dは、水素、ハロゲン、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ1-4アルキル、−Ｏ−Ｃ1-4ハロアルコキシ及びＣ1-4ハロアルキルからなる群から各々独立に選択され、Ｒ3は、水素及びＣ1-4アルキルからなる群から選択され、及びＲ4は、Ｃ1-4アルキルであり、及び下付き文字のｎは、０〜２の整数である。ある実施態様によれば、Ｒ3は水素である。別の実施態様によれば、Ｒ3は水素であり、下付き文字ｎは０である。別の実施態様によれば、式ＩにおいてＲ1は、メチル、トリフルオロメチル又はエチルであり、下付き文字のｍは１である。別の実施態様によれば、下付き文字のｍは０である。さらに別の実施態様によれば、Ｒ2a、Ｒ2c、Ｒ2dは、各々独立に、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシ、メチル、エチル、トリフルオロメチル及び２−フルオロエトキシからなる群から選択される。さらに別の実施態様によれば、Ｒ2aは水素であり、Ｒ2c及びＲ2dは、各々独立に、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシ、メチル、エチル、トリフルオロメチル及び２−フルオロエトキシからなる群から選択される。
【００２３】
ある好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式Ｉa又はＩb
【化３】
の化合物である。
【００２４】
ある実施態様によれば、式Ｉa又はＩb中のＲ2a及びＲ2cは、各々独立に、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素からなる群から選択されると共に、Ｒ2dは、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシ、メチル、エチル、トリフルオロメチル及び２−フルオロエトキシからなる群から選択される。
【００２５】
特定の実施態様によれば、式Ｉa又はＩbの化合物は、以下の、
【化４】
からなる群から選択される。
【００２６】
別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式Ｉc又はＩd
【化５】
の化合物である。
【００２７】
式Ｉc又はＩdにおいて、特定の実施態様によれば、Ｒ2cはフッ素、塩素、臭素及びヨウ素からなる群から選択されるとともに、Ｒ2dは、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシ、メチル、エチル、トリフルオロメチル及び２−フルオロエトキシからなる群から選択される。
【００２８】
特定の実施態様によれば、式Ｉc又はＩdの化合物は、以下の
【化６】
からなる群から選択される。
【００２９】
本発明のさらに別の実施態様によれば、式Ｉdの化合物は、以下の構造
【化７】
を有する。
【００３０】
さらに別の実施態様によれば、式Ｉの発明の化合物は、表１に示した化合物からなる群から選択される。
表１
１．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
２．１−［４−（４−クロロ−３−エトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
３．１−｛４−［４−クロロ−３−（２−フルオロ−エトキシ）−フェニル］−ピペラジン−１−イル｝−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
４．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−２−メチル−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
５．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−３−メチル−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
６．１−［４−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
７．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
８．１−［４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
９．１−｛４−［４−クロロ−３−（２−フルオロ−エトキシ）−フェニル］−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１０．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−２−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１１．１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１２．１−［４−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１３．１−［４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシ−フェニル）−２−メチル−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１４．１−［４−（４−クロロ−３−エトキシ−フェニル）−２−メチル−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１５．１−｛４−［４−クロロ−２−フルオロ−５−（２−フルオロ−エトキシ）−フェニル］−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１６．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−３−メチル−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１７．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１８．１−［４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシ−フェニル）−２−メチル−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
【００３１】
化合物の調製
以下のスキームは、本発明の特定の化合物を入手するために従うことができる特定の合成経路を提供する。他の経路又は以下に示す経路の修正は、当業者には容易に明らかになり、本発明の範囲内であるはずである。
【００３２】
スキーム１は、３−イミダゾリル置換ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンの合成を示す。Ｒ'は、非干渉性置換基、例えば保護基、又はカルボキシエステル等を表す。スキーム１に示す通り、ＮＨ2ＯＨと３−シアノピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンｉとの反応により、ヒドロキシルアミジン化合物iiが提供される。水素ガスと触媒（例えば、Ｐｄ／Ｃ又はＰｄ（ＯＨ）2）を用いるiiの還元により、アミジン生成物iiiが作製される。クロロアセトアルデヒドでのiiiの環化により、イミダゾール生成物ivが作製される。
【化８】
【００３３】
スキーム２は、３−イミダゾリル置換ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンの合成を示す。Ｒ'は、非干渉性置換基、例えば保護基、又はカルボキシエステル等を表す。スキーム２において、３−シアノ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンとエチレンジアミン生成物との反応により、環化イミダゾリン生成物ｖが作製され、これが酸化によりイミダゾールviが作製される。
【化９】
【００３４】
スキーム３は、３−イミダゾリル置換ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンの合成を示す。Ｒ'は、非干渉性置換基、例えば保護基、又はカルボキシエステル、又は式Ｉの化合物の残部を表す（実施例１８も参照のこと）。スキーム３に示す通り、トランスメタル化プロセスを用いて、３−ヨード−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンviiを、３−ホルミル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンviiiに変換でき、これをグリオキサールで処理し、環化して３−イミダゾリル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンixが形成される。
【化１０】
【００３５】
本発明の化合物を形成するために使用できるアミノ酸カップリング法をスキーム４に示す。スキーム４において、Ｒ'、Ｒ"は、非干渉性置換基を表す。本発明の化合物は、例えば、３−イミダゾリル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンのカルボン酸誘導体ｘを、任意のアミノ酸カップリング試薬（例えば、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵ、ｐｙＢＯＰ等）を用いてピペラジン誘導体xiとカップリングさせ、本発明の３−イミダゾリル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン（xii）を形成することにより調製できる。
【化１１】
【００３６】
III．医薬組成物
上記で提供される化合物に加え、ヒト及び動物におけるＣＣＲ１、ＣＣＲ２及びＣＣＲ３活性の調節のための組成物は、典型的には医薬担体又は希釈剤を含有する。
【００３７】
本明細書で使用される「組成物」なる用語は、特定の量での特定の成分を含んでなる生成物、及び特定の量での特定の成分の組み合わせから、直接的又は間接的に得られる任意の生成物を包含する意図がある。「医薬的に許容可能な」により、担体、希釈剤又は賦形剤が、製剤の他の成分と適合し、且つその受容者に有害でないことを意味する。
【００３８】
本発明の化合物の投与のための医薬組成物は、単位投薬の形態で都合よく提供されても、薬学及び薬物送達の当業界で既知の任意の方法で調製してもよい。全ての方法は、活性成分を、１以上の補助的成分を構成する担体と関連させるステップを含む。一般的には医薬組成物は、活性成分を、液体担体又は微細分割個体担体又はその両方と、均一及び密接に関連させ、その後必要ならば所望の剤型に成形する。医薬組成物において、活性な目的化合物は、疾病のプロセス又は症状に対する所望の影響を与えるのに十分な量で含まれる。
【００３９】
活性成分を含有する医薬組成物は、経口使用に適する形態、例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性又は油性の懸濁物、分散粉末又は顆粒、米国特許第6,451,339号に記載のエマルション及び自己乳化剤、硬又は軟カプセル、シロップ、エリキシル、溶液、経頬パッチ、口腔ゲル、チューインガム、チュアブル錠、発泡粉末及び発泡錠等の形態であってもよい。経口使用を意図する組成物は、医薬組成物の製造のために、当業界で既知の任意の方法で調製してもよく、当該組成物は、医薬的に洗練され且つ口当たりのよい製剤を提供するため甘味剤、香料、着色剤、抗酸化剤及び防腐剤からなる群から選択される１以上の剤を含有してもよい。錠剤は、活性成分を、錠剤の製造に適する、非毒性の医薬的に許容可能な賦形剤との混合状態で含有する。これらの賦形剤は、例えば、不活性希釈剤、例えば、セルロース、二酸化ケイ素、酸化アルミニウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、グルコース、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウム；造粒剤及び崩壊剤としては、例えば、コーンスターチ、又はアルギン酸；結合剤、例えば、ＰＶＰ、セルロース、ＰＥＧ、スターチ、ゼラチン又はアカシア、及び滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルク等を用いてもよい。錠剤は、経腸的であってもなくてもよいが、消化管で崩壊及び吸収を遅延させ、長期間にわたる持続した作用を提供する既知の技術で被覆してもしなくてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリン又はジステアリン酸グリセリン等の時間遅延物質を使用してもよい。これらはまた、制御放出のための浸透治療錠剤を形成する、米国特許第4,256,108号、4,166,452号及び4,265,874号に記載の技術により被覆してもよい。
【００４０】
経口使用のための製剤はまた、硬ゼラチンカプセルとして提供してもよく、ここで活性成分は、不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリン等と混合される。あるいは、軟ゼラチンカプセルとして提供してもよく、ここで活性成分は、水又は油の媒体、例えばピーナッツ油、液体パラフィン、又はオリーブ油と混合される。さらに、エマルションを、油等の非水混和性成分で調製できるし、モノジグリセリド、ＰＥＧエステル等の界面活性剤で安定化できる。
【００４１】
水性懸濁物は、水性懸濁物の製造に適する賦形剤との混合状態で活性物質を含有する。かかる賦形剤には、懸濁剤、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシ−プロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニル−ピロリドン、トラガカント・ゴム及びアカシア・ゴムがあり；分散剤又は湿潤剤は、例えばレシチン等の天然のホスファチド、又は例えばステアリン酸ポリオキシ−エチレン等のアルケンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、又は例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール等のエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール等のエチレンオキシドと脂肪酸及びヘキシトール由来の部分エステルとの縮合生成物、又は例えばモノオレイン酸ポリエチレンソルビトール等のエチレンオキシドと脂肪酸及び無水ヘキシトール由来の部分エステルとの縮合生成物であってもよい。水性懸濁物は、１以上の保存剤、例えば、エチル、又はｎ−プロピル、ｐ−ヒドロキシベンゾエート、１以上の着色剤、１以上の香料、及び１以上の甘味剤、例えばスクロース又はサッカリン等を含有してもよい。
【００４２】
油性懸濁物は、活性成分を以下の油の中で懸濁することにより製剤化してもよく、油としては植物油、例えばアラキス油、オリーブ油、ゴマ油又はココナッツ油等があり、又は鉱物油、例えば液体パラフィン等がある。油性懸濁物は、濃縮剤、例えば蜜ろう、硬パラフィン又はセチルアルコールを含有してもよい。例えば上記に示したような甘味剤、及び香料を、口当たりの良い経口用製剤を提供するために添加してもよい。これらの組成物は、例えばアスコルビン酸等の抗酸化剤を添加して保存してもよい。
【００４３】
水の添加により水性懸濁製剤に適する分散粉末及び顆粒は、活性成分を、分散又は湿潤剤、懸濁剤及び１以上の保存剤との混合状態で提供する。好適な分散又は湿潤剤及び懸濁剤は、上記既に記載のものにより例示される。さらなる賦形剤、例えば甘味剤、香料及び着色剤を存在させてもよい。
【００４４】
本発明の医薬組成物はまた、水中油エマルションの形態でもよい。油相は、植物油、例えばオリーブ油もしくはアラキス油、又は鉱物油、例えば液体パラフィン又はこれらの混合物でもよい。好適な乳化剤は、例えばアカシア・ゴム又はトラガカント・ゴム等の天然のゴム、例えばダイズ、レシチン等の天然のホスファチド、及び例えばモノオレイン酸ソルビタン等の脂肪酸及び無水ヘキシトール由来のエステルもしくは部分エステル、及び例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン等の前記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物でもよい。エマルションはまた、甘味剤及び香料を含有してもよい。
【００４５】
シロップ及びエリキシルは、甘味剤と共に製剤化してもよく、例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール又はスクロースがある。当該製剤はまた、粘滑薬、保存及び香料及び着色剤を含有してもよい。経口溶液は、例えばシクロデキストリン、ＰＥＧ及び界面活性剤との組み合わせで調製できる。
【００４６】
医薬組成物は、滅菌注射用の水溶液又は油性懸濁物の形態でもよい。この懸濁物は、上記の好適な分散又は湿潤剤及び懸濁剤を用い、既知の技術に従って製剤化してもよい。滅菌注射剤は、非毒性の非経口的許容可能な希釈剤又は溶媒中の滅菌注射用溶液又は懸濁物でもよく、例えば１,３−ブタンジオール中の溶液がある。使用できる許容可能なビヒクル及び溶媒は、水、リンガー溶液及び塩化ナトリウム等張溶液である。さらに、滅菌の固定油は、溶媒又は懸濁媒体として従来から使用されている。本目的に応じて、任意の無菌性固定油は、合成のモノ又はジグリセリド等を使用してもよい。さらに、オレイン酸等の脂肪酸は注入用製剤で使用される。
【００４７】
本発明の化合物はまた、薬物の直腸投与のための坐剤の形態で投与してもよい。これらの組成物は、薬物を適切な非刺激性の賦形剤と混合することにより調製でき、前記賦形剤は通常温度では固体だが直腸温度では液体であるため、直腸内で溶解して薬物を放出させる。当該物質には、ココアバター及びポリエチレングリコールが含まれる。さらに、化合物は、溶液又は軟膏による眼送達を介して投与することができる。さらに、対象化合物の経皮的送達は、イオン導入等により達成できる。局所的使用では、本発明の化合物を含有するクリーム、軟膏、ゼリー、溶液又は懸濁物等を使用する。本明細書で使用されるような、局所塗布は、口中洗浄及びうがいの使用を含むことを意味する。
【００４８】
本発明の化合物は、医療装置に埋め込んで製剤化してもよく、任意の多様な従来のグラフト、ステント、例えば、ステントグラフト、カテーテル、バルーン、バスケット又はその他の身体の内腔内に永久に配置又は永久に埋め込むことができる装置を含んでもよい。特定の例によれば、本発明の化合物を、介入技術により処理される身体の領域に送達できる装置及び方法を有することが望ましい。
【００４９】
例示的な実施態様によれば、本発明の阻害剤は、ステント等の医療装置内に埋め込まれ、身体の部分の処置のために処置部位に送達されてもよい。
【００５０】
ステントは、治療剤（即ち、薬物）のための送達ビヒクルとして使用されてきた。脈管内ステントは一般的に、冠状又は抹消脈管中に永久に移植される。ステントの設計には、米国特許第4,733,655号（Palmaz）、4,800,882号（Gianturco）、又は4,886,062号（Wiktor）等に記載のものがある。当該設計は、金属及びポリマーのステント、及び自己伸長型及びバルーン膨張型ステント等がある。ステントは、脈管と接触する部位に薬物を送達するために使用してもよく、例えば、米国特許第5,102,417号（Palmaz）及び国際公開第91/12779号（Medtronic, Inc.）及び国際公開第90/13332号（Cedars-Sanai Medical Center）、米国特許第5,419,760号（Narciso, Jr.）及び米国特許第5,429,634号（Narciso, Jr.）等に開示されている。ステントは遺伝子送達のために内腔の壁にウイルスを送達するためにも使用されており、米国特許出願第5,833,651号（Donovan等）に開示されている。
【００５１】
「埋め込まれ（deposited）」なる用語は、阻害剤が被覆され、吸着され、置かれ、又はそうでなければ当業界で既知の方法で装置に組み込まれることを意味する。例えば、阻害剤は、医療装置を被覆又は装置に橋架けするポリマー物質に、包埋される（embedded）とともにその中から放出されても（「マトリクス型」）、又は前記ポリマー物質に包囲されるとともにそれを介して放出されてもよい（「貯蔵型（reservoir type）」）。後者の例によれば、当業界で既知の当該物質を生成するための１以上の技術を用いて、阻害剤を、ポリマー物質内に捕捉しても、ポリマー物質と結合させてもよい。他の製剤においては、阻害剤を、取り外し可能な結合及び経時的な放出の手段により、被覆の不要な医療装置の表面に連結させることができるか、活性な機械的又は化学的プロセスにより除去することができるか、又は阻害剤が移植部位に存在するという永久に固定化した状態である。
【００５２】
ある実施態様によれば、阻害剤は、例えばステント等の医薬装置用の生物適合被覆を形成する間、ポリマー組成物に組み込まれてもよい。これらの成分から作製される被覆は、典型的には均一であるとともに、移植のために設計された多数の装置を被覆するのに有用である。
【００５３】
ポリマーは、所望の放出速度又は所望のポリマー安定度に応じで、生体安定性又は生体吸収性のいずれかの性質を有するポリマーであってよいが、本実施態様には生体吸収性ポリマーが好ましく、それは、生体安定性ポリマーとは異なり、移植後に長期間存在しないため、任意の有害な慢性的局所応答を引き起こす。使用できる生体吸収性ポリマーとしては、限定するものではないが、ポリ（Ｌ）−乳酸、ポリカプロラクトン、ポリグリコライド（ＰＧＡ）、ポリ（ラクチド−コグリコライド）（ＰＬＬＡ／ＰＧＡ）、ポリ（ヒドロキシブチレート）、ポリ（ヒドロキシブチレート−コバリレート）、ポリジオキサノン、ポリオルソエステル、ポリアンヒドライド、ポリ（グリコール酸）、ポリ（Ｄ−乳酸）、ポリ（Ｌ−乳酸）、ポリ（Ｄ,Ｌ−乳酸）、ポリ（Ｄ,Ｌ−ラクチド）（ＰＬＧ）、ポリ（Ｌ−ラクチド）（ＰＬＬＡ）、ポリ（炭酸グリコール酸−コトリメチレン）（ＰＧＡ／ＰＴＭＣ）、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリジオキサノン（ＰＤＳ）、ポリホスホエステル、ポリホスホエステルウレタン、ポリ（アミノ酸）、シアノアクリレート、ポリ（炭酸トリメチレン）、ポリ（イミノカルボネート）、コポリ（エーテル−エステル）（例えば、ＰＥＯ／ＰＬＡ）、ポリアルキレンオキサレート、ポリホスファゼン、及び生体分子、例えばフィブリン、フィブリノーゲン、セルロース、スターチ、コラーゲン及びヒアルロン酸、ポリエプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシブチル酸、ポリオルソエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、架橋又は両親媒性のヒドロゲルのブロックコポリマー、及び当業界で既知の他の好適な生体吸収性ポリマーがある。また、比較的低い慢性的組織応答を有する生体安定性ポリマー、例えばポリウレタン、シリコン、及びポリエステルが使用でき、溶解及び曲げられるか、医療装置で重合できる場合、使用できる他のポリマーとしては、例えば、ポリオレフィン、ポリイソブチレン及びエチレン−アルファオレフィンコポリマー；アクリルポリマー及びコポリマー、ビニルハライドポリマー及びコポリマー、例えば塩化ポリビニル；ポリビニルピロリドン；ポリビニルエーテル、例えばポリビニルメチルエーテル、；ポリビニリデンハライド、例えば、フッ化ポリビニリデン及び塩化ポリビニリデン；ポリアクリロニトリル、ポリビニルケトン；芳香性ポリビニル、例えばポリスチレン、ポリビニルエステル、例えば、酢酸ポリビニル；ビニルモノマー互いとオレフィンの共重合体、例えばエチレン−メチルメタクリレート共重合体、；アクリロニトリル−スチレン共重合体、ＡＢＳ樹脂、及びエチレン−ビニル酢酸共重合体；ピラン共重合体、ポリヒドロキシ−プロピル−メタクリルアミド−フェノール；ポリヒドロキシエチル−アスパルトアミド（aspartamide）−フェノール；パルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリジン；ポリアミド、例えば、ナイロン６６及びポリカプロラクタム；アルキド樹脂、ポリカーボネート；ポリオキシメチレン；ポリイミド；ポリエーテル；エポキシ樹脂、ポリウレタン；レーヨン；レーヨン−トリアセテート；セルロース、酢酸セルロース、酪酸セルロース；酢酸酪酸セルロース；セロファン；硝酸セルロース；プロピオン酸セルロース；セルロースエーテル；及びカルボキシメチルセルロースがある。
【００５４】
ポリマー及び半透性ポリマーマトリクスは、成形品として形成してもよく、例えばバルブ、ステント、管類、プロテーゼ等がある。
【００５５】
本発明のある実施態様によれば、本発明の阻害剤は、ステント又はステント−グラフトデバイスとして形成されるポリマー又は半透明ポリマーマトリクスと結合する。
【００５６】
典型的には、ポリマーを移植可能デバイスの表面に、スピンコート、ドリッピング又は噴射により塗布する。さらなる当業界で既知の方法は、本目的のために利用できる。噴射の方法には、従来法と、インクジェット型のディスペンサーを用いる微小成膜技術がある。さらに、ポリマーは、移植可能デバイス上で、ポリマーをデバイスの特定部分のみに置く光パターン形成を用いて成膜できる。このデバイスのコーティングは、デバイス周囲に均一な層を提供し、これはデバイスコーティングを介して様々な検体の拡散を改善させることができる。
【００５７】
本発明の好ましい実施態様によれば、阻害剤をポリマーコーティングから医療デバイスが置かれる環境への放出のために製剤化する。好ましくは、阻害剤は、制御された手順で、延長された時間フレームにわたって（例えば数ヶ月）、溶出を制御するポリマー担体又は層に関連する周知の複数の技術のうち、少なくとも１つを用いて、放出される。これらの技術のいくつかは、米国特許出願20040243225A1で既に報告されている。
【００５８】
さらに、例えば米国特許第6,770,729号に記載の、ポリマー組成物の試薬及び反応条件を、ポリマーコーティングからの阻害剤の放出を制御できるように操作することができる。例えば、１以上のポリマーコーティングの拡散係数を、ポリマーコーティングからの阻害剤の放出を制御するよう調節できる。この主題の変化形によれば、１以上のポリマーコーティングの拡散係数は、ポリマー組成物中の１以上の成分を評価するため（及び、例えば、ポリマーコーティングからの阻害剤の放出を調整するため）、医療デバイスが置かれる環境に存在する検体（例えば、ポリマーのいくつかの部分の崩壊又は加水分解を促進する検体）の能力を調整するよう制御できる。本発明のさらに別の実施態様には、各々が複数の拡散係数を有する、複数のポリマーコーティングを有するデバイスが含まれる。かかる本発明の実施態様によれば、ポリマーコーティングからの阻害剤の放出を、その複数のポリマーコーティングにより調製できる。
【００５９】
本発明のさらに別の実施態様によれば、ポリマーコーティングからの阻害剤の放出は、ポリマー組成物の特性の１以上、例えば、１以上の内因性又は外因性化合物、又はポリマー組成物のｐＨ等を調整することにより制御される。例えば、特定のポリマー組成物を、ポリマー組成物のｐＨの減少に応答して、阻害剤を放出するよう設計できる。あるいは、特定のポリマー組成物を、過酸化水素の存在に応答して、阻害剤を放出するよう設計できる。
【００６０】
IV．ＣＣＲ１、ＣＣＲ２及び／又はＣＣＲ３によって調整される疾患治療方法
さらに別の態様によれば、本発明は、ＣＣＲ１−、ＣＣＲ２−及び／又はＣＣＲ３−介在型の症状又は疾患を治療する方法であって、前記疾患又は症状を有する対象に、上記式Ｉの化合物の治療有効量を投与する方法を提供する。本明細書で「対象」は、哺乳類等の動物を含むものと定義され、限定するものではないが、例えば、霊長類（例えばヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス等がある。
【００６１】
ＣＣＲ１は、免疫細胞機能の特定の態様を干渉又は促進するための標的、又はより一般的には、ヒト等の哺乳類における幅広い細胞タイプでのＣＣＲ１発現に関連する機能を干渉するための標的を提供する。ＣＣＲ１を阻害する化合物は、治療目的で、単球、マクロファージ、リンパ球、顆粒球、ＮＫ細胞、マスト細胞、樹状細胞、及び特定の免疫派生細胞（例えば、破骨細胞）の機能を調整するために特に有用である。従って、本発明は、幅広い炎症及び免疫調節性の障害及び疾患の、予防及び／又は治療において有用な化合物を対象とする（Saeki, et al., Current Pharmaceutical Design 9:1201-1208 (2003)を参照）。
【００６２】
例えば、ＣＣＲ１の１以上の機能を阻害する本化合物を、免疫疾患に関連する炎症又は細胞浸潤を阻害（即ち、減少又は予防）するために投与してもよい。その結果、１以上の炎症プロセス、例えば白血球遊出又は浸潤、走化作用、開口放出（例えば、酵素、ヒスタミンの）又は炎症性媒介物質放出を阻害できる。例えば、炎症部位（例えば、関節炎における罹患関節、又はＭＳにおけるＣＮＳ）への単球浸潤を、本方法に従って阻害できる。
【００６３】
同様に、ＣＣＲ１の１以上の機能を促進する本化合物を、炎症応答、例えば、白血球遊出、走化作用、開口放出（例えば、酵素、ヒスタミンの）又は炎症性媒介物質放出を刺激（誘導又は増強）するために投与してもよく、これにより炎症プロセスにおいて有益な刺激がもたらされる。例えば、単球を細菌性感染に対抗するよう動員できる。
【００６４】
炎症、免疫障害及び感染症に関連する疾患及び症状は、本発明の方法を用いて治療できる。好ましい態様によれば、疾患又は症状は、免疫細胞、例えば単球、マクロファージ、リンパ球、顆粒球、ＮＫ細胞、マスト細胞、樹状細胞等の作用、又は特定の免疫派生細胞（例えば、破骨細胞）が、炎症又は自己免疫応答を調整するために、阻害又は促進されるものである。
【００６５】
実施態様のある１群によれば、疾患又は症状は、ヒト又は他の種の慢性疾患を含み、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２又はＣＣＲ３機能の調整物質で治療できる。これらの疾患又は症状には以下のものが含まれる。（１）アレルギー性疾患、例えば、全身性アナフィラキシー又は過敏症応答、（２）炎症性腸疾患、例えばクローン病、潰瘍性結腸炎、回腸炎及び腸炎、（３）鞘膜炎、（４）乾癬及び炎症性皮膚炎（dermatoses）、例えば皮膚炎（dermatitis）、湿疹、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、じんま疹及びそう痒、（５）脈管炎、（６）脊椎関節症、（７）強皮症、（８）喘息及び呼吸器系アレルギー疾患、例えば、喘息、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、過敏性肺疾患等、（９）自己免疫疾患、例えば線維筋痛症、硬皮症、強直性脊椎炎、若年性ＲＡ、スティル病、多関節若年性ＲＡ、少関節若年性ＲＡ、リウマチ性多発性筋痛、タカヤス関節炎、リウマチ様関節炎、乾癬性関節炎、変形性関節症、多関節性関節炎、多発性硬化症、全身性紅斑性狼瘡、Ｉ型糖尿病、II型糖尿病、Ｉ型糖尿病（最近発症）、視神経炎、糸球体腎炎等、（１０）移植片拒絶、例えば同種移植片拒絶、及び急性及び慢性移植片対宿主病、（１１）線維症（例えば、肺性線維症（即ち、特発性線維症、間質性線維症）、末期腎疾患に関連する線維症、放射による線維症、尿細管間質性線維症、上皮下線維症、硬皮症（進行性全身硬皮症）、肝性線維症（例えば、アルコールが原因のもの又はウイルス性肝炎がある）、一次及び二次肝硬変）、（１２）急性及び慢性肺炎（慢性閉塞性肺疾患、慢性気管支炎、成人呼吸促進症候群、新生児期呼吸促進症候群、免疫複合性肺胞炎）、及び（１３）不所望の炎症性応答又は免疫障害が阻害される他の疾患、例えば、心臓血管疾患、例えばアテローム、組織移植物に由来する又は再狭窄の間の脈管炎症（例えば、限定するものではないが、再狭窄とその後の血管形成及び／又はステント挿入）、他の急性及び慢性炎症症状、例えば、筋炎、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病）、脳炎、髄膜炎、肝炎、腎炎、敗血症、類肉腫症、アレルギー性結膜炎、耳炎、静脈洞炎、間接鏡検査による滑膜炎、高尿毒症、外傷、虚血性再灌流外傷、鼻白毛（nasal polyosis）、子癇前症、口苔癬斑、Guillina-Barre症候群、肉芽腫疾患、レプチン産物に関連する症状、ベーチェット症候群、及び通風及び創傷の治療具、（１４）免疫介在性食物アレルギー、例えばセリアック症。
【００６６】
別の実施態様の群によれば、疾患又は症状を、ＣＣＲ１機能の調整物質で治療できる。ＣＣＲ１機能の調整物質で治療される疾患の例としては、癌（原発性及び転移性の両方）（例えば、多発性骨髄腫；Hata, H., Leukemia & Lymphoma, 2005, 46(7); 967-972）、心臓血管疾患、新脈管形成又は新生血管形成が役割を担う疾患（腫瘍性疾患、網膜症及び黄斑変性症）、感染性疾患（ウイルス性感染、例えばＨＩＶ感染、及び細菌性感染）及び免疫抑制性疾患、例えば器官移植物症状及び皮膚移植物症状がある。「器官移植物症状」なる用語は、骨髄移植物症状及び固形器官（例えば腎臓、肝臓、肺、心臓、膵臓、又はその組み合わせ）移植物症状を含むことを意味する。
【００６７】
本発明の医薬組成物はまた、炎症部位のメタロプロテアーゼ及びサイトカインの機能を直接的又は間接的に阻害することもでき（結果として細胞浸潤を低減する）、これらのサイトカインと関連する疾患又は症状に対する利益を提供することになる。
【００６８】
従って本発明の化合物は、広範な炎症及び免疫調整障害及び疾患の予防及び治療において有用である。
【００６９】
治療される疾患及び対象の症状によって、本発明の化合物は、経口、非経口（例えば、筋肉内、腹腔内、静脈内、ＩＣＶ、槽内の注射又は注入、皮下注射、又は移植）により、吸入スプレー、鼻、膣、直腸、舌下、又は局所経路の投与により投与してもよく、単独でも製剤化しても、各投与経路に適する従来の非毒性の医薬的に許容可能な担体、補助剤及びビヒクルを含有する、好適案投薬単位の製剤として共に製剤化してもよい。
【００７０】
ケモカイン受容体調整物質を要する症状の治療又は予防において、一般的に適切な投薬量レベルは、約0.001〜100 mg／患者体重kg／日で、これを単一又は多数の用量で投与できる。好ましくは、投薬量レベルが、約0.01〜約25 mg／kg／日；より好ましくは、約0.05〜約10 mg／kg／日である。好適な投薬量レベルは、約0.01〜約25 mg／kg／日、約0.05〜約10 mg／kg／日、又は約0.1〜約5 mg／kg／日である。この範囲内で、投薬は、0.005〜0.05、0.05〜0.5又は0.5〜5.0 mg／kg／日で行ってもよい。経口投与については、組成物は、1.0〜1000マイクログラムの活性成分、具体的には1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、150.0、200.0、250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0、及び1000.0マイクログラムの活性成分を含有する錠剤の形態で、治療される患者対して投薬量の症状に合わせて調整して提供されることが好ましい。化合物は、１日１〜４回の投薬計画で投与してもよいが、好ましくは１日１又は２回である。
【００７１】
ただし、特定の用量レベル及び任意の特定の患者のための投薬の頻度は、変動してもよく、且つ様々な因子に依存するであろう。前記因子としては、例えば、使用される特定化合物の活性、その化合物の作用の代謝の安定性及び長さ、対象者の年齢、体重、遺伝的特徴、総体的な健康状態、性別及び食事、並びに投与のモード及び時間、排出速度、薬物組み合わせ、及び治療を受ける対象者の特定の症状の重症度がある。
【００７２】
炎症、免疫疾患、感染症、癌に関連する疾患及び症状は、本化合物、組成物、及び方法によって治療又は予防することができる。
【００７３】
本発明の化合物及び組成物は、注目の症状又は疾患、例えば炎症又は自己免疫障害、症状及び疾患、例えば、炎症性腸疾患、リウマチ様関節炎、変形性関節炎、乾癬関節炎、多関節性関節炎、複数硬化症、アレルギー性疾患、汗腺、アトピー性皮膚炎及び喘息、及び上記の病気のものを予防及び治療する関連用途を有する、他の化合物及び組成物と組み合わせることができる。
【００７４】
例えば、炎症又は自己免疫、又は例えば骨粗鬆関連の関節炎の治療又は予防において、本発明の化合物及び組成物は、抗炎症剤又は鎮痛剤と共に使用してもよく、前記剤として、例えばアヘンアゴニスト、リポオキシゲナーゼ阻害剤、例えば、５リポオキシゲナーゼの阻害剤、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、例えば、シクロオキシゲナーゼ２阻害剤、インターロイキン阻害剤、例えば、インターロイキン１阻害剤、ＮＭＤＡアンタゴニスト、一酸化窒素の阻害剤、又は一酸化窒素の合成阻害剤、非ステロイド抗炎症剤、又はサイトカイン抑制性抗炎症剤、例えば、化合物として、アセトアミノフェン、アスピリン、コデイン、フェンタニル、イブプロフェン、インドメタシン、ケトロラク、モルフィン、ナプロキセン、フェンアセチン、ピロキシカム、ステロイド様類似体、スルフェンタニル、スリンダク（sunlindac）、テニダップ等がある。同様に、本化合物及び組成物は、以下のものと共に投与してもよく、上記の鎮痛剤；増強剤、例えばカフェイン、Ｈ2アンタゴニスト（例えば、ラニチジン）、シメチコン、水酸化アルミニウム又はマグネシウム；鬱血除去剤、例えば、フェニルエフェリン、フェニルプロパノールアミン、偽エフェドリン、オキシメタゾリン、エピネフェリン（ephinephrine）、ナファゾリン、キシロメタゾリン、プロピルヘキセドリン、又はレボデゾキシエフェドリン；鎮咳薬、例えば、コデイン、ヒドロコドン、カラミフェン、カルベタペンタン、又はデキストロメトルファン；利尿薬；及び抗ヒスタミン鎮静又は非鎮静薬がある。
【００７５】
同様に、本発明の化合物及び組成物は、本発明の化合物及び組成物が有用となる疾患又は症状の、治療、予防、抑制又は回復で使用される他の薬物との組み合わせで使用してもよい。かかる他の薬物は、それが通常使用される経路及び量で、本発明の化合物又は組成物と同時又は連続的に投与してもよい。本発明の化合物を、１以上の他の薬物と同時に使用する場合、本発明の化合物又は組成物に加え、当該他の薬物を含有する医薬組成物が好ましい。従って、本発明の医薬組成物には、本発明の化合物又は組成物に加え、１以上の他の活性成分又は治療剤を含有するものが含まれる。本発明の化合物又は組成物と組み合わせてもよい他の治療剤の例としては、別々に投与しても、同じ医薬組成物として投与してもよく、限定するものではないが、以下のものが含まれる。（ａ）ＶＬＡ４アンタゴニスト、（ｂ）コルチコステロイド、例えばベクロメタゾン、メチルプレオドニゾロン、ベータメタゾン、プレドニゾン、プレニゾロン、デキサメタゾン、フルチカゾン、ヒドロコルチゾン、ブデソニド、トリアムシノロン、サルメテロール、サルメテロール、サルブタモール、ホルモテロール（formeterol）；（ｃ）免疫抑制剤、例えばシクロスポリン（シクロスポリンＡ、サンディミュン（Sandimmune（登録商標））ネオーラル（Neoral（登録商標）））、タクロリムス（tacrolirnus）（FK 506、プログラフ（Prograf（登録商標））、ラパマイシン（シロリムス、ラパミューン（Rapamune（登録商標）））及び他のFK 506タイプ免疫抑制剤、及びミコフェノール酸（rnycophenolate）、例えばミコフェノール酸モフェチル（セルセプト（CellCep（登録商標）））；（ｄ）抗ヒスタミン（Ｈ１ヒスタミンアンタゴニスト）例えば、ブロモフェニルアミン、クロルフェニルアミン、デクスクロルフェニラミン（dexchloipheniramine）、トリプロリジン、クレマスチン、ジフェンヒドラミン、ジフェニルミラリン、トリペレナミン、ヒドロキシジン、メトジラジン、プロメタジン、トリメプラジン、アザタジン、シプロヘプタジン、アンタゾリン、フェニラミン ピリラミン、アステミゾール、テルフェナジン、ロラタジン、セチリジン、フェキソフェナジン、デスカルボエトキシロラタジン（descarboethoxyloratadine）等；（ｅ）非ステロイド抗喘息剤（例えば、テルブタリン、メタプロテレノール、フェノテロール、イソエタリン、アルブテロール、ビトルテロール及びピルブテロール）、テオフィリン、クロモグリク酸ナトリウム、アトロピン、イプラトロピウム臭化物、ロイコトリエンアンタゴニスト（例えば、ザフムルカスト（zafmlukast）、モンテルカスト、プランルカスト、イラルカスト（iralukast）、ポビルカスト（pobilukast）及びＳＫＢ106,203）、ロイコトルエン生合成阻害剤（ジロートン、BAY 1005）；（ｆ）非ステロイド抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、例えばプロピオン酸誘導体（例えば、アルミノプロフェン、ベノキサプロフェン、ブクロキシ酸（bucloxic acid）、カプロフェン、フェンブフェン、フェンプロフェン、フルプロフェン、フルビプロフェン、イブプロフェン、インドプロフェン、ケトプロフェン、ミプロフェン（rniroprofen）、ナプロキセン、オキサプロジン、ピルプロフェン、プラノプロフェン、スプロフェン、チアプロフェン酸及びチオキサプロフェン）、酢酸誘導体（例えば、インドメタシン、アセメタシン、アルクロフェナク、クリダナク、ジクロフェナク、フェンクロフェナク（fenclofenac）、フェンクロジン酸（fenclozic acid）、フェンチアザク、フロフェナク、イブフェナク、イソキセパク（isoxepac）、オキシピナク、スリンダク、チオピナク、トルメチン、ジドメタシン（zidometacin）及びゾメピラク）、フェナミン酸誘導体（例えば、フルフェナミン酸、メクロフェナミン酸、メフェナミン酸、ニフルミン酸及びトルフェナミン酸）、ビフェニルカルボキシル酸誘導体（例えば、ジフルニサル及びフルフェニサル）、オキシカム（例えば、イソキシカム、ピロキシカム、スドキシカム及びテノキシカム）、サリチル酸塩（例えば、アセチルサリチル酸及びスルファサラジン）及びピラゾロン（例えば、アパゾン、ベズピペリロン（bezpiperylon）、フェプラゾン、モフェブタゾン、オキシフェンブタゾン及びフェニルブタゾン）；（ｇ）シクロオキシゲナーゼ２（ＣＯＸ−２）阻害剤、例えばセレコキシブ（セレブレックス（Celebrex（登録商標）））、及びロフェコキシブ（バイオックス（Vioxx（登録商標）））；（ｈ）ホスホジエステラーゼIV型（ＰＤＥ IV）の阻害剤；（ｉ）金化合物、オーラノフィン及びオーロチオグルコース等、（ｊ）エタネルセプト（エンブレル（Enbrel（登録商標）））、（ｋ）抗体療法、例えばオルソクローン（ＯＫＴ３）、ダクリズマブ（ゼナパックス（Zenapax（登録商標）））、バシリキシマブ（シムレクト（Simulect（登録商標）））及びインフリキシマブ（レミケード（Remicade（登録商標）））、（ｌ）他のケモカイン受容体のアンタゴニスト、特にＣＣＲ５、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ７、ＣＸＣ３ＣＲ１及びＣＸＣＲ６；（ｍ）潤滑剤又は軟化剤、例えば、ワセリン及びラノリン、（ｎ）角質溶解剤（例えば、タザロテン）、（ｏ）ビタミンＤ３誘導体、例えばカルシポトリエン又はカルシポトリオール（ドボネックス（Dovonex（登録商標）））、（ｐ）ＰＵＶＡ、（ｑ）アントラリン（ドリトロクレメ（Drithrocreme（登録商標）））、（ｒ）エトレチナート（チガソン（Tegison（登録商標）））、及びイソトレチノイン及び（ｓ）多発性硬化症治療剤、例えばインターフェロンｂ １ｂ（ベタセロン（Betaseron（登録商標）））、インターフェロン（ｂ １ａ（アボネックス（Avonex（登録商標）））、アザチオプリン（イムレク（Imurek（登録商標））、イムラン（Imuran（登録商標）））、酢酸グラチラマー（コパクソン（Capoxone（登録商標）））、グルココルチコイド（例えば、プレドニゾロン）及びシクロホスファミド（ｔ）ＤＭＡＲＤＳ、例えばメトトレキサート、（ｕ）他の化合物、例えば５アミノサリチル酸及びそのプロドラッグ；ヒドロキシクロロキノン；Ｄペニシラミン；抗代謝剤、例えばアザチオプリン、６メルカプトプリン及びメトトレキサート；ＤＮＡ合成阻害剤、例えばヒドロキシウレア、及び微小管崩壊剤、例えばコルヒチンである。第二活性成分に対する本発明の化合物の重量比は、変動してもよく、各活性成分の有効用量に依存するだろう。一般的には、各々の有効量を使用するだろう。すなわち、例えば、本発明の化合物をＮＳＡＩＤと組み合わせる場合、ＮＳＡＩＤに対する本発明化合物の重量比は、一般的に、約１０００：１〜約１：１０００、好ましくは約２００：１〜約１：２００である。本発明の化合物と他の活性成分の組み合わせは、一般的には既に記載の範囲内であるが、各事例において各活性成分の有効用量を使用すべきである。
【００７６】
Ｖ．実施例
以下の実施例は例示するために提供されるが、本発明を限定するものではない。
【００７７】
以下で使用した試薬及び溶媒は、市販業者、例えばAldrich Chemical Co. (Milwaukee, Wisconsin, USA)から入手できる。1Ｈ−ＮＭＲをVarian Mercury 400 MHz ＮＭＲ分光器を用いて記録した。重要なピークはＴＭＳと比較して提供され、以下の順に一覧にした：多重度（ｓ、シングレット；ｄ、ダブレット；ｔ、トリプレット；ｑ、カルテット；ｍ、マルチプレット）及びプロトン数。質量分析の結果は、質量電荷比として報告され、その後ろに各イオンの相対的存在量を（括弧内に）示す。表中、一つのｍ／ｅ値は、最も一般的な原子同位体を含有するＭ＋Ｈ（又はＭ−Ｈの記載のように）イオンとして報告される。同位体パターンは、全ての事例において期待される式に対応する。エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）質量分析は、サンプル送達用のAgilent Zorbax SB-C18, 2.1X50 mm、５μカラムを備えるHP1100 HPLCを用い、Hewlett-Packard MSDエレクトロスプレー質量分析機で実行した。通常、検体をメタノールに、0.1mg/mLで溶解させ、１マイクロリットルを、質量分析機に送達溶媒に入れ、これを１００〜１５００ダルトンの範囲でスキャンした。全ての化合物は、アセトニトリル／水に１％ギ酸添加したものを送達溶媒として用いて、ポジティブＥＳＩモードで分析できる。以下に示す化合物は、アセトニトリル／水中の２ｍＭ ＮＨ4ＯＡｃを送達溶媒として用い、ネガティブＥＳＩモードで分析できる。
【００７８】
以下の略語を、実施例及び本発明の記載全体において使用する。
ＨＰＬＣ、高圧液体クロマトグラフィ；ＤＭＦ、ジメチルホルムアミド；ＴＦＡ、トリフルオロ酢酸；ＴＨＦ、テトラヒドロフラン；ＥｔＯＡｃ、酢酸エチル；ＢＯＣ2Ｏ、ジ−tertブチルジカルボネート又はＢＯＣ無水物；ＨＰＬＣ、高圧液体クロマトグラフィ；ＤＩＰＥＡ、ジイソプロピルエチルアミン；ＨＢＴＵ、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート；ｄｐｐｆ、１,１'−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン；Ｐｄ2（ｄｂａ）3、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）；ＤＩＰＥＡ、ジイソプロピルエチルアミン；ＤＭＰ、ジメチルフタレート；Ｍｅ、メチル；Ｅｔ、エチル；ＤＣＭ、ジクロロメタンである。
【００７９】
本発明の範囲内の化合物は、当業者に既知の様々な反応を用いて、以下の記載の通りに合成できる。本発明の標的化合物の合成に代わりの方法が使用されてもよく、また本出願書類内に記載のアプローチは完全ではないが、注目の化合物への応用可能且つ具体的な経路を幅広く提供するものであることを、当業者は認識するだろう。
【００８０】
本特許において請求される特定の分子は、異なるエナンチオマー及びジアステレオマーの形態で存在できると共に、全てのこれらの化合物の変形が請求される。
【００８１】
本文章における重要な化合物を合成するために使用される実験的手法の詳細な記載は、分子を導くが、当該分子はこれらを識別する物理的データ、及びそれらに関連する構造的表現により記載される。
【００８２】
当業者は、有機化学における標準的作業方法で、酸及び塩基を頻繁に使用することを理解するであろう。起源化合物の塩が作製されることもあるが、それは本特許に記載の実験方法でこれらが必要な内在する酸性又は塩基性を有する場合である。
【実施例１】
【００８３】
１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンの合成
【化１２】
【００８４】
ステップ１：ＤＭＦ（200 mL）中の３−インド−７−アザインダゾール（25.50 g）及びＫ2ＣＯ3（41.4 g）を、８５℃に加熱し、ｔ−ブチルクロロ酢酸（14.3 mL）を徐々に添加した。混合物をこの温度で１時間（ｈ）攪拌し、室温まで冷却し、水を添加した（300 mL）。反応混合物を濾過し、（３−インド−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステルを得た。
【００８５】
ステップ２：250 mLのフラスコに、（３−インド−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステル（15.0 g）、ＰｄＣｌ2（ｄｐｐｆ）（3.0 g）、Ｚｎ（ＣＨ）2（4.96 g）、ＤＭＦ（200 mL）及びＨ2Ｏ（14 mL）を充填した。得られた懸濁物を含有するフラスコを脱気し、５分間繰り返して窒素ガスを逆充填（backfille）し、Ｐｄ2（ｄｂａ）3（3.85 g）を反応混合物に添加した。反応混合物を、Ｎ2雰囲気下、９０℃で１６時間加熱し、室温まで冷却し、Ｈ2Ｏで希釈（800 mL）し、濾過した。回収した固体をトルエン（10 mL）で洗浄し、（３−シアノ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステルを黄色固体として得た。
【００８６】
ステップ３：ＥｔＯＨ（120 mL）中の、（３−シアノ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステル、ヒドロキシルアミン塩酸塩（8.28 g）及びＥｔ3Ｎ（22.6 mL）の混合物を、Ｎ2雰囲気下６５℃で一晩加熱した。得られた混合物を室温まで冷却し、濾過して固体を回収し、Ｈ2Ｏ（100 mL）及びＥｔ2Ｏ（50 mL × 2）で洗浄し、［３−（Ｎ−ヒドロキシカルバミミドイル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステルを得た。
【００８７】
ステップ４：100 mLバイアル中の、［３−（Ｎ−ヒドロキシカルバミミドイル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステル（6.17 g）に、ＡｃＯＨ（45 mL）及びＡｃ2Ｏ（4.3 mL）を充填した。得られた混合物を室温で１時間攪拌し、この温度で当初懸濁物のものが、透明な溶液となった。この溶液に、Ｐｄ／Ｃ（10 %, 900 mg）を添加し、１atm、Ｈ2バルーン下で攪拌し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。反応混合物を、セライトパッドを通して濾過し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨで洗浄した。溶媒のエバポレーションにより、（３−アミノ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステルを得て、これをさらなる精製を行わず使用した。
【００８８】
ステップ５：100 mLバイアル中の（３−アミノ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステルに、クロロアセチルアルデヒド（5.72 mL）、ジオキサン（50 mL）及びＫ2ＣＯ3（12.42 g）を充填した。得られた混合物を、８０℃で４時間攪拌し、クロロアセチルアルデヒド（5.72 mL）及びＫ2ＣＯ3（12.42 g）を添加した。混合物をさらに１時間８０℃で攪拌し、120℃で１時間攪拌し、室温まで冷却し、ジクロロメタン（ＤＣＭ）で希釈し、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、真空中でエバポレートした。フラッシュクロマトグラフィでの精製により、２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステルを茶色オイルとして得た。
【００８９】
ステップ６：２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステル（977 mg）を、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（10 mL）中に溶解させ、室温で１時間攪拌した。混合物を真空中でエバポレートし、２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸を茶色オイルとして得て、これをさらなる精製を行わずに使用した。
【００９０】
ステップ７：（プロトコルＡ−ＨＢＴＵカップリング方法）［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸（0.30 M, 0.40 mL, 0.12 mmol）をバイアル中に移した。１−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジンジヒドロクロリド（48 mg, 0.14 mmol）、Ｏ−（ベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）（55 mg, 0.14 mmol）及びｉ−Ｐｒ2ＮＥｙ（0.30 mL）を当該バイアル中に添加し、混合物を大気圧下で攪拌した。３０分後、ＬＣ／ＭＳ分析により、所望産物の形成及びカルボン酸出発物質の完全な消費が示された。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水（１×）及びブライン（１×）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、エバポレートした。残存物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の１％〜８％ＭｅＯＨ）、１−［４−（４−クロロ−５−メトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンを黄褐色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.79 (dd, 0.6 H, J = 8.4, 1.6 Hz), 8.66 (dd, 0.4 H, J = 8.0, 1.6 Hz), 8.57-8.55 (m, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 7.22-7.16 (m, 1H), 7.09-7.05 (m, 2H), 6.50-6.45 (m, 2H), 5.45 (s, 0.6H), 5.43 (s, 1.4H), 4.07-4.01 (m, 2H), 3.81-3.69 (m, 4H), 3.17-3.13 (m, 1.6H), 3.08-3.02 (m, 2.4H), 1.50-1.42 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 484.4。
【実施例２】
【００９１】
１−｛４−［４−クロロ−２−フルオロ−５−（２−フルオロエトキシ）−フェニル］ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化１３】
【００９２】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。１−［４−クロロ−２−フルオロ−５−（２−フルオロエトキシ）フェニル］−ピペラジンジヒドロクロリド及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の２％〜3.5％ＭｅＯＨ）、１−｛４−［４−クロロ−２−フルオロ−５−（２−フルオロエトキシ）−フェニル］−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.79 (dd, 0.6 H, J = 8.0, 1.8 Hz), 8.67 (d, 0.4 H, J = 6.4 Hz), 8.57-8.55 (m, 1H), 7.30-7.25 (m, 1H), 7.11-7.06 (m, 2H), 6.63 (d, 0.6H, J = 7.6 Hz), 6.57 (d, 0.4H, J = 7.6 Hz), 6.54 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 5.45 (s, 0.7H), 5.43 (s, 1.3H), 4.83-4.80 (m, 1H), 4.71-4.68 (m, 1H), 4.31-4.18 (m, 2H), 3.82-3.76 (m, 3H), 3.50 (t, 1H, J = 5.2 Hz), 3.23-3.04 (m, 4H); LC/MS m/z (M+H)+ 502.4。
【実施例３】
【００９３】
１−［４−（４−クロロ−３−エトキシフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化１４】
【００９４】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。１−（４−クロロ−３−エトキシフェニル）ピペラジンジヒドロクロリド及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の4％〜15％ＭｅＯＨ）、１−［４−（４−クロロ−３−エトキシフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た（25 mg）。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.79 (dd, 0.6H), 8.66 (dd, 0.4H), 8.57-8.54 (m, 1H), 7.29-7.19 (m, 4H), 6.49-6.40 (m, 2H), 5.45 (s, 0.7H), 5.43 (s, 1.3 H), 4.10-4.04 (m, 2H), 3.81-3.69 (m, 4H), 3.23-3.16 (m, 4H), 1.50-1.45 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 466.4。
【実施例４】
【００９５】
１−［４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化１５】
【００９６】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。１−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシフェニル）ピペラジンジヒドロクロリド及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の1％〜10％ＭｅＯＨ）、１−［４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシフェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た（27 mg）。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.79 (dd, 0.6H), 8.67 (dd, 0.4H), 8.57-8.55 (m, 1H), 7.31-7.20 (m, 2H), 7.12-7.06 (m, 2H), 6.49-6.45 (m, 1H), 5.45 (s, 0.6H), 5.43 (s, 1.4H), 3.86 (s, 0.9H), 3.85 (s, 2.1 H), 3.81-3.75 (m, 4H), 3.15-3.08 (m, 4H); LC/MS m/z (M+H)+ 470.4。
【実施例５】
【００９７】
１−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化１６】
【００９８】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。（Ｓ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジンジヒドロクロリド及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の1％〜8％ＭｅＯＨ）、１−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.79 (dd, 0.6H), 8.66 (dd, 0.4H), 8.57-8.55 (m, 1H), 7.29-7.19 (m, 4H), 6.44-6.39 (m, 2H), 5.42 (br. s, 2H), 4.83 (br. s, 0.3H), 4.49 (br. s, 0.3H), 4.30 (br. s, 0.3H), 3.89 (s, 1.2H), 3.88 (s, 1.8H), 3.83 (br. s, 0.3H), 3.72-3.69 (m, 1H), 3.54-3.52 (m, 1H), 3.38 (br. s, 1H), 3.19-3.15 (m, 1H), 3.00 (br. s, 1H), 2.80 (br. s, 1H), 1.50-1.43 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 466.4。
【実施例６】
【００９９】
１−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンの合成
【化１７】
【０１００】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。（Ｓ）−４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジンジヒドロクロリド及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の2％〜3％ＭｅＯＨ）、１−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た（29 mg）。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.79 (dd, 1H), 8.55 (dd, 1H), 7.27-7.21 (m, 3H), 7.07 (d, 1H), 6.43 (br. d, 1H), 5.46-5.37 (m, 2H), 4.83 (br. s, 0.3H), 4.51-4.48 (m, 0.6H), 4.28-4.21 (m, 0.6H), 3.86 (s, 0.9H), 3.85 (s, 2.1H), 3.79 (br. s, 0.3H), 3.67 (br. s, 0.3H), 3.33-3.21 (m, 2.5H), 2.95-2.93 (m, 0.9H), 2.83-2.76 (m, 1.6H), 1.48-1.40 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 484.4。
【実施例７】
【０１０１】
１−［（Ｒ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンの合成
【化１８】
【０１０２】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。（Ｒ）−１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の1％〜7.5％ＭｅＯＨ）、１−［（Ｒ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.76 (d, 0.6H), 8.66 (dd, 0.3H), 8.57-8.54 (m, 1H), 7.29-7.19 (m, 4H), 6.48-6.40 (m, 2H), 5.53-5.40 (m, 2H), 4.26 (br. d, 0.6H), 4.00 (br. d, 0.6H), 3.88 (s, 1.3H), 3.86 (s, 1.7H), 3.80-3.49 (m, 3.2H), 3.33 (br. s, 0.6H), 3.17-3.14 (m, 2H), 1.51-1.42 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 466.4。
【実施例８】
【０１０３】
１−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンの合成
【化１９】
【０１０４】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。（Ｓ）−１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の1％〜7％ＭｅＯＨ）、１−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.77 (d, 0.6H), 8.66 (d, 0.3H), 8.57-8.54 (m, 1H), 7.30-7.19 (m, 4H), 6.48-6.40 (m, 2H), 5.54-5.36 (m, 2H), 4.25 (br. d, 0.6H), 4.00 (br. d, 0.6H), 3.88 (s, 1.3H), 3.86 (s, 1.7H), 3.82-3.48 (m, 3.2H), 3.36-3.29 (m, 0.6H), 3.17-3.13 (m, 2H), 1.51-1.43 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 466.4。
【実施例９】
【０１０５】
１−［（Ｒ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンの合成
【化２０】
【０１０６】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。（Ｒ）−１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジン及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の1％〜7.5％ＭｅＯＨ）、１−［（Ｒ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.75 (d, 0.6H), 8.66 (dd, 0.4H), 8.57-8.54 (m, 1H), 7.29-7.18 (m, 4H), 6.44-6.39 (m, 2H), 5.42 (br. s, 2H), 4.82 (br. s, 0.3H), 4.45 (br. s, 0.3H), 4.33 (br. s, 0.3H), 3.88 (s, 1.2H), 3.87 (s, 1.8H), 3.83 (br. s, 0.3H), 3.73-3.67 (m, 1H), 3.54-3.52 (m, 1H), 3.38 (br. s, 1H), 3.17-3.13 (m, 1H), 2.99 (br. s, 1H), 2.80 (br. s, 1H), 1.50-1.42 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 466.4。
【実施例１０】
【０１０７】
２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−１−（（Ｓ）−４−（４−クロロ−３−エトキシフェニル）−２−（メチルピペラジン−１−イル）エタノンの合成
【化２１】
【０１０８】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。（Ｓ）−１−（４−クロロ−３−エトキシフェニル）−３−メチルピペラジンジヒドロクロリド（70 mg, 0.21 mmol）を含有するバイアルに、２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）酢酸（51 mg, 0.21 mmol）、ＨＢＴＵ（81 mg, 0.21 mmol）、ＤＭＦ（0.7 mL）、及びＤＩＰＥＡ（0.15 mL, 0.87 mmol）を添加した。反応混合物を３０℃で２４時間そのままにした。溶液をＥｔＯＡｃ（30 mL）で希釈し、１Ｎ ＨＣｌ（２×10 mL）及び飽和ＮａＣｌ水溶液（２×10 mL）で希釈した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮させた。得られた残存物を調製ＨＰＬＣで精製し（0.1％ＴＦＡ添加のＭｅＣＮ−Ｈ2Ｏの２０→９５％グラジエント）、純フラクションを凍結乾燥させ、所望の化合物（11 mg, 収率11%）を得た。MS (ES) [M+H]+ 予測（expected） 480.2, 測定（found） 480.5; 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 9.94 (br s, 1H), 8.79 (dd, J = 1.6, 8.0, 1H), 8.55 (dd, J = 1.6, 4.4, 1H), 7.19-7.26 (m, 4H), 6.37-6.43 (m, 2H), 5.40 (br s, 2H), 2.78-4.81 (m, 10H), 4.07 (q, J = 6.8, 2H), 1.46 (t, J = 6.8, 3H).
【実施例１１】
【０１０９】
２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−１−（４−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノンの合成
【化２２】
【０１１０】
１−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−クロロフェニル）ピペラジンジヒドロクロリド（70 mg, 0.21 mmol）を含有するバイアルに、２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）酢酸（51 mg, 0.21 mmol）、ＨＢＴＵ（83 mg, 0.22 mmol）、ＤＭＦ（0.7 mL）、及びＤＩＰＥＡ（0.20 mL, 1.2 mmol）を添加した。反応混合物を２０℃で２４時間そのままにした。溶液をＥｔＯＡｃ（30 mL）で希釈し、１Ｎ ＨＣｌ（２×10 mL）及び飽和ＮａＣｌ水溶液（２×10 mL）で希釈した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮させた。得られた残存物を調製ＨＰＬＣで精製し（0.1％ＴＦＡ添加のＭｅＣＮ−Ｈ2Ｏの２０→９５％グラジエント）、純フラクションを凍結乾燥させ、所望の化合物（20 mg, 収率20%）を得た。MS (ES) [M+H]+ 予測（expected） 484.2, 測定（found） 484.4; 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) d 9.94 (br s, 1H), 8.78 (dd, J = 1.2, 8, 1H), 8.55 (dd, J = 1.2, 4.6, 1H), 7.16-7.26 (m, 4H), 6.45-6.53 (m, 2H), 5.44 (s, 2H), 4.77 (dt, J = 4.0, 46.8, 2H), 4.26 (dt, J = 4.0, 26.8, 2H), 3.69-3.78 (m, 4H), 3.10-3.21 (m, 4H)。
【実施例１２】
【０１１１】
２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−１−（（Ｓ）−４−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−クロロフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル）エタノンの合成
【化２３】
【０１１２】
（Ｓ）−１−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−クロロフェニル）−３−メチルピペラジンジヒドロクロリド（80 mg, 0.23 mmol）を含有するバイアルに、２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）酢酸（51 mg, 0.21 mmol）、ＨＢＴＵ（81 mg, 0.21mmol）、ＤＭＦ（0.7 mL）、及びＤＩＰＥＡ（0.2 mL, 1.2 mmol）を添加した。反応混合物を３０℃で２４時間そのままにした。溶液をＥｔＯＡｃ（30 mL）で希釈し、１Ｎ ＨＣｌ（２×10 mL）及び飽和ＮａＣｌ水溶液（２×10 mL）で希釈した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮させた。得られた残存物を調製ＨＰＬＣで精製し（0.1％ＴＦＡ添加のＭｅＣＮ−Ｈ2Ｏの２０→９５％グラジエント）、純フラクションを凍結乾燥させ、所望の化合物（14 mg, 収率13%）を得た。MS (ES) [M+H]+ 予測（expected） 498.2, 測定（found） 498.4; 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 9.95 (br s, 1H), 8.79 (dd, J = 1.6, 8.2, 1H), 8.55 (dd, J = 1.6, 4.4, 1H), 7.19-7.26 (m, 4H), 6.44-6.50 (m, 2H), 5.40 (br s, 2H), 4.77 (dt, J = 4.2, 47.2, 2H), 4.26 (dt, J = 4.2, 27.2, 2H), 2.78-4.42 (m, 10H)。
【実施例１３】
【０１１３】
１−［４−（４−クロロ−３−メチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化２４】
【０１１４】
２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）酢酸（55 mg, 0.226 mmol）、ＨＢＴＵ（125 mg, 0.33 mmol）、１−（４−クロロ−３−メチルフェニル）−ピペラジンジヒドロクロリド（142 mg, 0.50 mmol）、無水ＤＭＦ（2.0 mL）、及びＤＩＰＥＡ（0.5 mL）をバイアルに充填した。バイアルに栓をし、４５℃に加熱し、一晩攪拌した。翌日、真空下で揮発性物質を除去し、調製ｈｐｌｃ（逆相、アセトニトリル−水グラジエント）による分離で、１−［４−（４−クロロ−３−メチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）エタノンを得た。MS (ES) [M+H]+ 測定（found）: 436.4.
【実施例１４】
【０１１５】
１−［４−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化２５】
【０１１６】
２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）酢酸（55 mg, 0.226 mmol）、ＨＢＴＵ（125 mg, 0.33 mmol）、１−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジンジヒドロクロリド（170 mg, 0.50 mmol）、無水ＤＭＦ（2.0 mL）、及びＤＩＰＥＡ（0.5 mL）をバイアルに充填した。バイアルに栓をし、４５℃に加熱し、一晩攪拌した。翌日、真空下で揮発性物質を除去し、調製ｈｐｌｃ（逆相、アセトニトリル−水グラジエント）による分離で、１−［４−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを得た。MS (ES) [M+H]+ 測定（found）: 490.4。
【実施例１５】
【０１１７】
１−［４−（４−クロロ−３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化２６】
【０１１８】
２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）酢酸（55 mg, 0.226 mmol）、ＨＢＴＵ（125 mg, 0.33 mmol）、１−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジンジヒドロクロリド（177 mg, 0.50 mmol）、無水ＤＭＦ（2.0 mL）、及びＤＩＰＥＡ（0.4 mL）をバイアルに充填した。バイアルに栓をし、４５℃に加熱し、一晩攪拌した。翌日、真空下で揮発性物質を除去し、調製ｈｐｌｃ（逆相、アセトニトリル−水グラジエント）による分離で、１−［４−（４−クロロ−３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを得た。MS (ES) [M+H]+ 測定（found）: 506.4。
【実施例１６】
【０１１９】
１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化２７】
【０１２０】
表題化合物は、１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−ヨード−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンから（US 20070010524として公開された、米国特許出願番号11/474,132を参照のこと。参照により組み込まれる）、実施例１のステップ２〜ステップ５での記載と同様の方法により調製した。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 10.22 (br, 1H), 8.82 (dd, 1H), 8.56 (dd, 1H), 7.20-7.30 (m, 3H), 7.11 (s, 1H), 6.47 (d, 1H), 6.42 (dd, 1H), 5.44 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.80 (m, 4H), 3.19 (m, 4H); MS (ES) M+H 予測（expect） 452.2。
【実施例１７】
【０１２１】
１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化２８】
【０１２２】
ＴＨＦ中の１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン（50 mg, 0.11 mmol, 1当量）に、６０％の水素化ナトリウム（5.7 mg, 0.14 mmol, 1.3当量）を添加し、１時間攪拌し、その後ヨードメタン（5.7 mg, 0.14 mmol, 1.3当量）を添加した。２時間後、ＬＣＭＳにより、主要なピークが所望の産物であることが示された。調製ｈｐｌｃ（逆相、アセトニトリル−水グラジエント）による分離で、１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを得た。MS (ES) [M+H]+ 測定（found）: 465.2。
【実施例１８】
【０１２３】
【化２９】
ステップ１：tert−ブチル ４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化３０】
機械的攪拌機、ガスアダプター、加熱マントル及び温度計を備える３首の５Ｌモートンフラスコに、rac−ＢＩＮＡＰ（4.24g, 0.005当量）及びＰｄ2（ｄｂａ）3（3.20g, 0.0025当量）を添加した。フラスコから排出し、窒素で逆充填した。カニューレによりトルエン（100 mL）を添加した。混合物を、室温で１５分間攪拌し、紫の溶液を得た。その後トルエン（2.0Ｌ）を添加した。２−クロロ−５−ブロモアニソール（300.3g, 1.356 mol, 1当量）少しずつ添加した。Boc−ピペラジン（252.4g, 1当量）を少しずつ添加した。ナトリウムtert−ブトキシド（183.0g, 1.4当量）を少しずつ添加した。フラスコから排出し、窒素を逆充填した。その後、混合物を内部温度６０℃まで加熱した。不均一な明オレンジ色のスラリーを得た。１時間後、混合物は均一な茶色溶液になった。さらに１５時間後、混合物を室温まで冷却した。ＥｔＯＡｃ（2.0L）を攪拌しながら混合物に添加した。混合した濾液を１０％Ｋ2ＣＯ3水溶液で洗浄し（１×１Ｌ）、ＭｇＳＯ4で乾燥させた・溶媒を真空下で除去し、オレンジ色固体として生成物を得た（410.3g, 収率93%）。
【０１２４】
ステップ２：１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジンジヒドロクロリド
【化３１】
機械的攪拌機を備えた４Ｌビーカーに、tert−ブチル ４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（500g, 1.53 mol, 1当量）及びＭｅＯＨ（1.50 L）を添加した。室温で攪拌しながら、濃37％ＨＣl（500 mL, 4当量）を５分間添加した。内部温度を４０℃まで上げ、溶液は沈殿物で満たされた。１５分後、ホットプレートで混合物を内部温度６０℃まで加熱した（混合物温度としておよそ５０℃で起泡が始まった）。６０℃で２時間後、溶液を室温まで冷却し、続いて冷蔵庫で５℃にした。生成物を濾過により２バッチ回収した。赤茶色濾液の各バッチを、ＥｔＯＡｃで洗浄し（２×500 mL）、明黄色固体を得た。２つのバッチ組み合わせて生成物を得た（391.3g）。濾液を真空中で濃縮して300 mLの容量にし、熱（５０℃）ＭｅＯＨ（500 mL）で処理した。混合物を冷蔵庫で２４時間、５℃に冷却した。得られた沈殿物を濾過により回収し、ＥｔＯＡｃで洗浄し（２×200 mL）、さらに44.3ｇの生成物を得た（総量435.6 g、収率95％）。
【０１２５】
ステップ３：２−クロロ−１−（４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン
【化３２】
機械的攪拌機を伴う３Ｌフラスコに、１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジンジヒドロクロリド（220 g, 0.73 mol, 1当量）、ＣＨ2Ｃｌ2（100 mL）、及び水（1000 mL）を添加した。二相の混合物を、氷浴を用いて５℃に冷却した。Ｋ2ＣＯ3（506 g, 5当量）を、起泡を最低限に抑えるよう、溶液を勢いよく攪拌しながら少しずつ添加した。ＣＨ2Ｃｌ2（100 mL）中の塩化クロロアセチルの溶液（124.4 g, 1.5当量）を添加筒から少しずつ添加し、その間内部温度を８℃未満に維持した。１時間後、冷却浴を除去し、反応物を室温まで温めた。さらに１時間後、層を分割した。水相をＣＨ2Ｃｌ2（２×300 mL）で抽出し、混合した有機層は、３：１ Ｎａ2ＳＯ4／Ｋ2ＣＯ3で乾燥させた（Ｋ2ＣＯ3添加により溶液相が透明になる）。濾過後、濾液を真空下で濃縮し、残存物を真空下で１６時間乾燥させ、生成物をオフホワイト固体として得た（410 g, 収率92％）。
【０１２６】
ステップ６：７−アザインダゾール−３−カルボキシアルデヒド
【化３３】
デジタル温度計、１Ｌ添加筒及び機械的攪拌機を備える５Ｌの３首フラスコ（全てのガラス製品は使用前にオーブンで乾燥させ、３０分間空気中で冷却した）に、３−ヨード−７−アザインダゾール（196.0 g, 0.80 mol）及び１Ｌの無水ＴＨＦ（Aldrich製のSureSeal ボトルに入っており、そのまま使用した）を充填した。固体を、室温でＴＨＦ中に完全に溶解させ、暗茶色溶液を形成させた。その後フラスコを、穏やかに攪拌しながら、氷／ＮａＣｌ浴で−５℃まで冷却し、塩化ｏ−トリマグネシウム（ＴＨＦ中１Ｍ 溶液、880 mL, 1.1当量）を滴下しながら添加し、内部温度を−５℃から−３℃に維持した（〜820 mLの塩化ｏ−トリマグネシウム溶液を添加後、温度は上昇しなかった）。全ての添加プロセスは２時間２５分を要した。添加の後に、混合物は均一な暗茶色溶液であった。
【０１２７】
添加の１時間後、塩化イソプロピルマグネシウム溶液（ＴＨＦ中２Ｍ、480 mL, 1.2当量）を滴下しながら添加し、内部温度を＜４℃に維持した。２５分後、約200 mLの塩化イソプロピルマグネシウム溶液を添加し、茶色沈殿の形成が開始した。総量380 mLの塩化イソプロピルマグネシウム溶液の添加後、混合物は再び均一になった。全ての添加プロセスは４５分で行われた。さらに１時間２５分後、少量のサンプルを取り出し、Ｄ2Ｏで反応停止した。このサンプルのＬＣＭＳ分析から、ヨウ素−Ｍｇの完全な交換が示された。
【０１２８】
その後、１−ホルミルピペリジン（120 mL, 1.3当量）を滴下しながら添加し、内部温度を＜２℃に維持した。約３０mLのホルミルピペリジン添加後、内部温度はそれ以上上昇せず、残りの１−ホルミルピペリジンは比較的速やかに添加した。全ての添加プロセスは２０分を要した。添加の終了時に、混合物はまだ暗色の均一な溶液であり、ゆっくりと室温まで上昇させ、１８時間穏やかに攪拌した。
【０１２９】
混合物を氷／ＮａＣｌ浴で０℃まで再冷却し、飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液（750 mL）／濃ＨＣｌ溶液（250 mL）の混合物をゆっくりと添加して反応停止させ、この間内部温度を＜35℃に維持した。添加完了後、攪拌を１時間継続させると、黄色沈殿が出現した。混合物を濾過し、固体をＴＨＦ（100 mL）で洗浄した。回収した濾液を分液漏斗に移し、水層のｐＨを、ＮａＨＣＯ3の添加により（およそ５ｇ）５及び６の間に調整した。ＴＨＦ層を分離し、飽和ＮａＣｌ溶液（２×100 mL）で洗浄した。混合した水層（ＮａＣｌ洗浄物及び反応停止水層を含む）をＥｔＯＡｃで抽出した（３×250 mL）。混合した有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、真空中でエバポレートし（浴温度は＜30℃）、茶色様固体を得た。この固体をＥｔ2Ｏ（600 mL）で倍散し、濾過した。回収した固体をＥｔ2Ｏ（２×100 mL）で洗浄し、７−アザインダゾール−３−カルボキシアルデヒドを黄色様固体として得た（86.6 g, 収率73％）。
【０１３０】
ステップ４：１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−ホルミル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノン
【化３４】
５Ｌフラスコ中、ＤＭＦ（0.5Ｌ）中の、７−アザインダゾール−３−カルボキシアルデヒド（86.6 g, 0.59 mol, 1当量）、ＮａＩ（8.8 g, 0.1当量）及びＫ2ＣＯ3（162.5 g, 2当量）の混合物を、８５℃に加熱した（加熱プロセスは約1.5時間）。２−クロロ−１−（４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン（175 g, 1当量）を少量ずつ反応混合物に添加した。全ての添加プロセスは約３０分を要した。その後、混合物を８５℃で３０分間加熱し、ＬＣＭＳで反応の完了を確認した。室温まで冷却後、混合物を２Ｌの氷を入れた４Ｌのフラスコに移した。反応フラスコを少量のアセトン（30 mL）でリンスし、４Ｌフラスコ中のＤＭＦ／氷混合物にまた移した。大量の茶色様固体が凝結した。氷が完全に溶けた後、混合物を濾過した。回収した固体を水（１Ｌ）で洗浄し、混合し、その後水で洗浄していくらかの残存ＤＭＦを除去した。回収した固体は、大量の水を含んでおり、これをＣＨ2Ｃｌ2（４Ｌ）に溶解させ、混合物を５Ｌ分液漏斗に移した。底部ＣＨ2Ｃｌ2層を分離し、丈夫の水層をＣＨ2Ｃｌ2で洗浄した（２×100 mL）。混合したＣＨ2Ｃｌ2層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、真空下でエバポレートし、１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−ホルミル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンを茶色様固体（236.4 g, 97％）として得て、これを精製せずに使用した。
【０１３１】
ステップ５：１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノン
【化３５】
１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−ホルミル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノン（300 g, 723 mmol, 1当量）、グリオキサール三量体二水和物（60.6 g, 0.4当量）、及び酢酸アンモニウム（222.9 g, 4当量）を、磁気攪拌子及び窒素吸入口を装備した５Ｌ丸底フラスコ中の、ＴＨＦ（720 mL）及びＭｅＯＨ（720 mL）混合物に懸濁させた。酢酸（84 mL, 2当量）を添加し、混合物を４５℃のオイルバスで加熱した（加熱時に固体は溶解した）。１２時間後、ＬＣ／ＭＳ分析により、アルデヒド出発物質の完全な消費と、所望の生成物の形成が示された（ＬＣ／ＭＳm/z (M+H)+ 452.1）。ＭｅＯＨ／ＴＨＦを回転エバポレーションにより除去した。残存物をＣＨ2Ｃｌ2中の１０％ＭｅＯＨ（約1.5Ｌ）に溶解させ、混合物を、炭酸カリウム水溶液（約1.5Ｌ水中、約210 gの炭酸カリウム、ｐＨ範囲は８〜９）と共に勢いよく振とうさせた。層を分離させ、水層をＣＨ2Ｃｌ2中の１０％ＭｅＯＨで抽出した（２×100mL）。混合した有機層を濃縮し、茶色の油状固体を得た。粗生成物をＥｔＯＡｃ中の１０％ＭｅＯＨ（約１Ｌ）中に懸濁させた。無水Ｎａ2ＳＯ4（約60ｇ）及びシリカゲル（約100ｇ）を添加し、スラリーをヒートガンで穏やかに加熱し、粗生成物を溶解させた。スラリーを、シリカゲル（約100ｇ、ＥｔＯＡｃ中の１０％ＭｅＯＨで予備平衡化した）ガラスフィルターを装着させた２Ｌの漏斗に移し、生成物を、ＥｔＯＡｃ中の１０％ＭｅＯＨ（約６Ｌ）及びＥｔＯＡｃ中１％Ｅｔ3Ｎ、１０％ＭｅＯＨ（約１０Ｌ）で、シリカゲル栓を通して溶出した。（注意：シリカゲルが交錯した濾過の存在下で、生成物及び／又は生成物の沈殿の不完全な溶解）。溶媒を回転エバポレーションにより除去した。残存物をＭｅＣＮ（１×300 mL）で倍散し、乾燥させ（高真空による回転エバポレーション）、１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンをオフホワイト固体として得た（190 g, 58％、ＬＣ／ＭＳ純度＞98％）。
【０１３２】
ステップ７：２−（３−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−１−（４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン 塩酸塩
【化３６】
磁気攪拌子を入れた２Ｌフラスコに、出発物質（5.1 g, 11.28 mmol）及びＥｔＯＡｃ（900 mL）を充填した。得られた懸濁物を加熱し、透明溶液を形成させ、穏やかに攪拌させながら室温まで冷却した。Ｅｔ2Ｏ中のＨＣｌ（2M, 6.2 mL, 12.42 mmol）を、得られた溶液が室温となるよう、滴下しながら５分間に渡って添加した。添加の後、得られた懸濁物を室温でさらに１時間攪拌した。固体を濾過により回収し、Ｅｔ2Ｏで洗浄し（150 mL×２）、真空下で乾燥させ、5.4ｇのオフホワイト粉末を得た。磁気攪拌子を入れた250 mLのフラスコに、上で得た粉末（5.4g）、アセトン）（100 mL）及び脱イオン水（16 mL）を充填した。得られた懸濁物を加熱し透明溶液を形成させ、冷却のために攪拌した。溶液が曇った（種晶が現れた）場合、アセトン（540 mL）をゆっくりと添加し、２０分かけて懸濁物とした。得られた懸濁物を５０℃に加熱し、２時間攪拌した。熱時濾過し、熱アセトン（50 ｍL×２）で洗浄し、真空下で乾燥させ、3.3g（６０％）の生成物をオフホワイト固体として得た。融点、164〜165℃。偏光顕微鏡の下で、結晶はプリズムのように見えた。
【実施例１９】
【０１３３】
【化３７】
ステップ１：１−｛２−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−オキソ−エチル｝−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−３−カルボニトリルの合成
【化３８】
2000mLのフラスコに、１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−（３−ヨード−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−エタノン（US 20070010524として公開された、米国特許出願番号11/474,132を参照、40 g, 78.1 mmol）、ｄｐｐｆ（3.86 g, 6.96 mmol）、Ｚｎ（ＣＮ）2（9.6 g , 81.6 mmol）、ＤＭＦ（360 ml）及びＨ2Ｏ（20mL）を充填した。得られた懸濁物を、Ｎ2を用いて５分間脱気し、その後Ｐｄ2（ｄｂａ）3（9.6 g , 81.6 mmol）添加した。反応混合物をＮ2雰囲気下、９０℃で２時間加熱した（ＴＬＣ及びＬＣ−ＭＳで監視）。室温まで冷却後、ＥｔＯＡｃ（1500 mL）で希釈し、沈殿物を除去するために濾過し、Ｈ2Ｏ（1000 mL×２）、飽和ＥＤＴＡ.４Ｎａ（800 ml×２）、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒のエバポレーション後、エーテル（150 mL）を添加し、２時間攪拌した。得られた固体を濾過し、所望の生成物を30 g（93％）明黄色粉末として得た。還流ＣＨ3ＣＮ（160 mL）からの再結晶により、26g（80％）の明黄色結晶が得られた。融点、183〜185℃；Ｒｔ＝2.38分、；ＭＳ（ＥＳ）M+H 予測（expect） 411.1, 測定（found） 411.1。
【０１３４】
ステップ２：１−（４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル）−２−（３−（４,５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）エタノンの合成
【化３９】
250 mLフラスコに、１−（２−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−３−カルボニトリル（15.3 g, 37.2 mmol）、ＥｔＯＨ（40 mL、〜１M)を充填した。氷浴で攪拌させながら、ＡｃＯＨ（6.75 mL, 112 mmol）を添加し、エチレンジアミン（25 mL, 372 mmol）をその後に添加した。得られた混合物を、120℃（浴）で、Ｎ2雰囲気下（混合物の還流が観察された）、1.5時間加熱した。ＴＬＣ及びＬＣ−ＭＳは、出発物質の消失及びイミダゾリンの形成を示した。室温まで冷却後、混合物をＤＣＭ（700 mL）で希釈し、Ｈ2Ｏ（350 mL）で洗浄した。Ｈ2Ｏ層をＤＭＣ（150 mL）で逆抽出し、混合した有機層をブライン（350 mL）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた。減圧下で溶媒のエバポレーション後、残存物を熱ＥｔＯＡｃ（80 mL）に懸濁させた。室温まで冷却後、固体を濾過により回収し、ＥｔＯＡｃ（30 mL）で洗浄し、表題化合物を白色粉末として得て（16 g, 95%）、これを直接次のステップで使用した。融点133〜135℃；Ｒｔ＝1.369分、ＭＳ（ＥＳ）M+H 予測（expect） 454.2, 測定（found） 454.4。
【０１３５】
ステップ３：２−（３−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−１−（４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン
【化４０】
500 mLフラスコ中の上記イミダゾリン（12.3 g, 27.1 mmol）に、無水ＤＭＳＯ（108 mL, 〜0.25 M）を添加した。ＤＭＰ（17.2 g, 40.6 mmol）を攪拌しながら少しずつ添加した。獲られた混合物を４５℃でＮ2雰囲気下、２時間攪拌した（ＴＬＣ及びＬＣ−ＭＳで監視した）。室温まで冷却後、飽和Ｎａ2ＣＯ3（100 mL）（氷浴）で反応を停止させ、その後３Ｎ ＮａＯＨ（100 mL）（ｐＨ12〜13）及びＨ2Ｏ（300 mL）が続き、ＤＣＭで抽出した（600 mL + 300 mL）。混合した有機層を飽和ＮａＨＣＯ3（300 mL）、ブライン（300 mL）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ4、120ｇ）。有機層のエバポレーション後、残存黄色固体（〜11ｇ）を熱ＣＨ3ＣＮ（20 mL）に溶解させた。室温まで冷却後、獲られた固体を濾過により回収し、6.7 g (55%)の表題化合物を明黄褐色結晶として得た。融点149〜152℃、Ｒｔ＝1.309分、ＭＳ（ＥＳ）M+H 予測（expect） 452.2, 測定（found） 452.4。母液を濃縮し、さらに0.6ｇ（総単離収率６０％）を得た。
【実施例２０】
【０１３６】
以下の実施例は、本発明の化合物の予期しない優れた医薬特性を、既報の類似する化合物との比較で例示する（米国特許公報2007/0010524A1）。
【０１３７】
比較の目的で、本発明の化合物（即ち、化合物Ｂ、表２Ｂの1.016も参照のこと）及び米国特許公報2007/0010524A1に記載の２つの化合物（即ち、化合物Ａ及びＣ）の医薬特性を、表２Ａに示す。そこに示される通り、化合物Ｂは優れた医薬特性を有する。より具体的には、発明化合物Ｂは、経口吸収（経口バイオアベイラビリティ％により測定された）；Ｃmax、及びＡＵＣ値が、構造類似な化合物Ａ及びＣと比較して実質的に増加するため、より有利である。
【０１３８】
ラットＰＫプロトコル：
薬物動態研究において、各々の化合物を、４匹の未使用の雄のSprague-Dawleyラットに投薬した。２匹の動物に、単一用量の化合物（31.6％のプロピレングリコール／31.6％のＮ,Ｎ−ジメチルアセトアミド／36.8％のＥｔＯＨで処方される）を静脈内（i.v.）に１mg/kgで投与し、２匹の動物に、化合物（水中の１％ＨＰＭＣで処方される）を経口投与で（p.o.）50mg/kgで投与した。血液サンプルを、各投与後既定の時点で（２４時間まで）採取し、化合物の対応する血漿濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を用いて分析した。血漿濃度−時間曲線を作製し、対応する薬物動態パラメータを、非コンパートメント解析を用いて算出した。表に示したＣmax（最大血漿濃度）及びＡＵＣ（曲線下面積）値は、経口用量に従う血漿濃度−時間曲線に基づいて計算された。Ｆ（経口バイオアベイラビリティ）値は、経口用量に従う曲線下面積（１ｍｇ／ｋｇに標準化される）と、ｉｖ用量に従う曲線下面積との比である。
【表１】
※ＳＤラットに対し化合物を経口で50mg/kgの用量投与した。
【実施例２１】
【０１３９】
本サンプルは、本発明の注目の化合物に関連する生物活性の評価を例示する。
【０１４０】
材料と方法
Ａ．細胞
１．ＣＣＲ１発現細胞
ａ）ＴＨＰ−１細胞
ＴＨＰ−１細胞をＡＴＣＣ（ＴＩＢ−２０２）から入手し、ＲＰＭＩ−１６４０培地に、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、1.5 g/L 重炭酸ナトリウム、4.5 g/L グルコース、10 mM HEPES、1 mM ピルビン酸ナトリウム、0.05% ２−メルカプトエタノール及び10％ ＦＢＳを添加した培地中で懸濁液として培養した。細胞を5％ ＣＯ2／95％ 空気、３７℃で100％湿度の下で生育させ、１週間に２回、１：５で継代培養し（細胞を２×１０5〜２×１０6細胞／mLの密度で培養した）、１×１０6細胞／mLで回収した。ＴＨＰ−１細胞は、ＣＣＲ１を発現するとともに、ＣＣＲ１結合及び機能アッセイで使用できる。
【０１４１】
２．走化性（Chemotaxis）アッセイ
走化性アッセイを、走化性バッファー（ハンクス平衡塩溶液（ＨＢＳＳ）及び１％ＦＢＳ）を用いる、９６ウェル走化性チャンバー（Neuroprobe; Gaithersburg, MD）中の５μｍ孔ポリカーボネート、ポリビニルピロリドン被覆フィルターを用いて行った。ＣＣＲ１ケモカインリガンド（即ち、ＭＩＰ−１α、ＣＣＬ１５／Leukotactin；R&D Systems; Minneapolis, MN）を、ＣＣＲ１介在型遊走に対する、化合物介在性阻害を評価するために使用する。他のケモカイン（即ち、ＳＤＦ−１α；R&D Systems; Minneapolis,）を、特異的コントロールとして使用する。低部のチャンバーに、２９μｌのケモカイン（即ち、0.1 nM CCL15/Leukotactin）及び様々な量の化合物をロードし、最上部のチャンバーは、100,000 ＴＨＰ−１又は単球細胞を２０μｌ中に含有させた。チャンバーを、３７℃で１〜２時間インキュベートし、低部のチャンバー中の細胞数を、１ウェル当たり５つの高発現領域（high powered field）中で直接細胞計数か、又は核酸含量を測定する蛍光色素法であるCyQuant アッセイ (Molecular Probes)と顕微鏡観察、のいずれかで定量化した。
【０１４２】
Ｂ．ＣＣＲ１の阻害剤の同定
ケモカインの主要な機能の１つは、ケモカイン受容体発現細胞、例えば白血球細胞等の遊走を媒介できる能力である。注目の化合物がＣＣＲ１特異的結合及びシグナル伝達（少なくともカルシウム動員アッセイにより決定される）ばかりでなく、ＣＣＲ１介在型遊走を阻害することを確認するために、走化性アッセイを使用した。単球と類似するとともに、単球から新鮮に単離できる、ＴＨＰ−１骨髄単球性白血病細胞を、ＣＣＲ１ケモカインリガンド（即ち、ＭＩＰ−１α、CCL15/ロイコタクチン）による化学誘引の標的として使用した。細胞を、微小ウェル遊走チャンバーの最上部の区画に置き、一方ＭＩＰ−１α（又はその他のＣＣＲ１ケモカインリガンド）及び勾配濃度の注目の化合物を、低部のチャンバーにロードした。阻害剤の不存在では、細胞は、ケモカインアゴニストに応答してより低いチャンバーに遊走し、化合物がＣＣＲ１機能を阻害すると、大部分の細胞が、上部チャンバーに留まる。注目の化合物のＣＣＲ１に対する親和性と解明するため、及びＣＣＲ１介在型遊走能力を確認するため、この走化性アッセイにおいては、化合物濃度の範囲を、１×１０-10〜１×１０-4 Ｍとして阻害剤活性を力価測定した。本アッセイにおいて、化合物量は変化させたが、細胞数及びケモカインアゴニスト濃度は一定に保った。走化性チャンバーを３７℃で１〜２時間インキュベート後、低部のチャンバー中の応答細胞を、核酸含量を測定する蛍光色素法である、CyQuant アッセイ (Molecular Probes)で標識するとともに、Spectrafluor Plus (Tecan)で測定することにより、定量化した。GraphPad, Inc. (San Diego, Ca）製の、コンピュータプログラムPrismをＩＣ50値を計算するために使用した。ＩＣ50値は、ＣＣＲ１アゴニストに応答する細胞数の５０％まで阻害するのに必要な化合物濃度である。
【０１４３】
１．インビボ効率
ａ）破壊性関節炎のウサギモデル
ウサギＬＰＳ研究を、本質的にはPodolin, et al. J. Immunol. 169(11):6435-6444 (2002)に記載の通りに実施した。雌ニュージーランドウサギ（およそ２キログラム）に対し、両方の膝の関節内に、ＬＰＳ（10 ng）で処理をした。本発明の化合物の場合、例えば1.016（１％メトセル（methocel）で処方される）又はビヒクル（１％メトセル）を、5 ml/kgの用量で２回（関節内ＬＰＳ注入の２時間前と、関節内ＬＰＳ注入の４時間後）経口投与した。ＬＰＳ注入の１６時間後、膝を洗浄し、細胞の計数を行った。処置の有益な影響を、膝関節の炎症性髄液へ動員された炎症細胞の数の減少により決定した。注目の化合物での処置は、動員された炎症細胞の顕著な低減をもたらす。
【０１４４】
ｂ）コラーゲン誘導性関節炎のラットモデルにおける注目の化合物の評価
１７日間進行させたII型コラーゲン関節炎の研究は、関節炎誘導性臨床的くるぶし膨脹において、注目の化合物の有効性を評価するために行われる。ラットコラーゲン関節炎は、多発性関節炎の実験モデルであり、多数の抗関節炎剤の予備的臨床試験のために幅広く使用されている（Trentham, et al., J. Exp. Med. 146(3):857-868 (1977), Bendele, et al., Toxicologic Pathol. 27:134-142 (1999), Bendele, et al., Arthritis Rheum. 42:498-506 (1999)を参照）。このモデルの特質は、頑丈で、容易に測定可能な多発性関節炎炎症の確実な開始及び進行であり、パンヌス形成に関連する軟骨破壊、及び軽度から中程度の骨吸収及び骨膜骨増殖をマークする。
【０１４５】
雌のLewisラット（およそ0.2キログラム）をイソフルランで麻酔処置するとともに、２mg/mLのウシII型コラーゲンを含有するフロイント不完全アジュバントを、尾の付け根及び背中の２部分に、この１７日間の研究のうち０及び６日目に注入する。注目の化合物を皮下から、有効用量で、０〜１７日まで毎日投与する。くるぶし関節直径のキャリパー計測し、低減した関節膨脹を有効性との測定値として用いる。
【０１４６】
（以下の）表２Ｂに、本明細書に記載の代表的化合物の構造及び活性を示す。活性は上記の走化性アッセイとして、以下の通りに提供される：+, ＩＣ50 > 100 nM; ++, ＩＣ50 < 100 nM。
【表２】
【表３】
【表４】
【背景技術】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、米国仮出願番号60/932,948号の利益を請求し、その内容は全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
連邦政府による資金提供を受けた研究開発によりなされた発明についての権利に関する宣言
適用なし
【０００３】
本発明は、例えばＭＩＰ−１ａ、ロイコタクチン（leukotactin）、ＭＰＩＦ−１及びＲＡＮＴＥＳ等の様々なケモカインのＣＣＲ１受容体への結合の阻害に有効である、化合物又はその医薬的に許容可能な塩を１以上含有する医薬組成物を提供する。この化合物及び組成物は、ＣＣＲ１受容体のアンタゴニスト又は調節因子として、炎症及び免疫障害状態及び疾患の治療に使用されている。
【０００４】
ヒトの健康は、身体が外来の病原体を検出及び破壊する能力に依存し、これがないと外来の病原体が、個人から有価物を奪うとともに／又は病気を誘導する。白血球（leukocytes）（white blood cells（ＷＢＣ）：Ｔ及びＢリンパ球、単球、マクロファージ顆粒球、ＮＫ細胞、マスト細胞、樹状細胞、及び細胞由来の免疫（例えば破骨細胞））、リンパ球組織及びリンパ系脈管を含んでなる免疫系は身体の防御システムである。感染に対抗するため、白血球は体中を循環して病原体を検出する。病原体が検出されると、特に自然免疫細胞及び細胞毒性Ｔ細胞は、感染部位に動員され病原体を破壊する。免疫細胞、例えばリンパ球、単球及び顆粒球の動員及び活性化のための分子指針（molecular beacon）としてケモカインが作用し、病原体が発生する部位を認識する。
【０００５】
病原菌の免疫システム調整にもかかわらず、特定の不適切なケモカインのシグナル伝達が発生し、炎症性障害、例えばリウマチ様関節炎、多発性硬化症等の誘因又は持続に寄与する。例えば、リウマチ様関節炎では、骨関節における無秩序なケモカインの蓄積が、浸潤性マクロファージ及びＴ細胞を誘引及び活性化する。これらの細胞の活性化は、少なくとも一部では炎症そして最終的には骨及び軟骨の損失に導く、髄液細胞の増殖を誘導する（DeVries, M.E., et al., Semin Immunol 11(2):95-104 (1999）を参照）。多発性硬化症等のいくつかの脱髄疾患の特質は、中枢神経系へのケモカイン介在性の単球／マクロファージ及びＴ細胞の動員である（Kennedy, et al., J. Clin. Immunol. 19(5):273-279 (1999)参照）。移植片への破壊性ＷＢＣのケモカイン動員は、その後の拒絶に影響を及ぼした。DeVries, M.E., et al., ibidを参照されたい。ケモカインは、炎症及びリンパ球の発現において重要な役割を担っており、その活性を特異的に操作する能力は、現在満足な治療がない疾患を改善及び停止させることに大きな影響を与える。さらに、コストのかかる免疫抑制医薬の効果を発生及び複雑化させることなく、移植拒絶を最小化できる。
【０００６】
ケモカインは、４０超の小ペプチド（７〜１０ｋＤ）群であり、ＷＢＣ又は免疫性派生細胞で主に発現される受容体に結合するとともに、Ｇタンパク質共役シグナル伝達カスケードを通るシグナルが、その化学誘引物質及び化学刺激物質の機能を媒介する。受容体は１以上のリガンドと結合でき、例えば、受容体ＣＣＲ１は、ＲＡＮＴＥＤ（regulated on activation normal T cell expressed）、ＭＩＰ−１α（マクロファージ炎症性タンパク質）、ＭＰＩＦ−１／ＣＫβ８、及びLeukotactinケモカイン（その他のもの中ではより低い親和性である）と結合する。これまでに２４個のケモカイン受容体が知られている。非常に多くのケモカイン、多リガンド結合受容体、及び免疫細胞上の異なる受容体プロファイルは、厳密に制御され特異的な免疫応答を可能にしている。Rossi, et al., Ann. Rev. Immunol. 18(1):217-242 (2000)を参照されたい。ケモカイン活性は、その対応する受容体の調整を通して制御でき、関連炎症及び免疫疾患を治療するとともに、器官及び組織移植を可能にする。
【０００７】
受容体ＣＣＲ１及びそのケモカインリガンドには、例えばＭＩＰ−１α、ＭＰＩＦ−１／ＣＫβ８、ロイコタクチン及びＲＡＮＴＥＳ等があり、これらは重要な治療標的であるが（Saeki, et al., Current Pharmaceutical Design 9:1201-1208 (2003)を参照）、それはこれらがリウマチ様関節炎、移植拒絶（DeVries, M.E., et al., ibid.参照）、及び多発性硬化症（Fischer, et al., J Neuroimmunol. 110(1-2):195-208 (2000); Izikson, et al., J. Exp. Med. 192(7):1075-1080 (2000); and Rottman, et al., Eur. J. Immunol. 30(8):2372-2377 (2000)）に影響を及ぼすからである。実際、機能ブロック抗体、修飾ケモカイン受容体リガンド及び小有機化合物が発見されており、そのいくつかは、いくつかのケモカイン介在性疾患を予防又は治療することの実証に成功している（Rossi, et al., ibid.に概説されている）。とりわけ、リウマチ様関節炎の実験的モデルにおいて、シグナル伝達のブロッキングする修飾ＲＡＮＴＥＳリガンドを投与した場合に、疾患の発症が消滅する（Plater-Zyberk, et al., Immunol Lett. 57(1-3):117-120 (1997)を参照）。機能ブロッキング抗体及び小ペプチド療法は有望であるが、これらは投与されると極端に短い半減期で分解する危険性、及び多くのタンパク質において典型的な、開発及び製造のための費用が非常に高額であることが難点である。小有機化合物は、インビボでより長い半減期を有することが多く、有効性のためにより少ない用量でよく、しばしば経口投与ができるとともに、結果として高額にならないために好ましい。いくつかのＣＣＲ１の有機類似体が既に報告されている（Hesselgesser, et al., J. Biol. Chem. 273(25):15687-15692 (1998); Ng, et al., J. Med. Chem. 42(22):4680-4694 (1999); Liang, et al., J. Biol. Chem. 275(25):19000-19008 (2000); and Liang, et al., Eur. J. Pharmacol. 389(1):41-49 (2000)を参照）。動物モデルにおける疾患の治療が実証された有効性の視点から（Liang, et al., J. Biol. Chem. 275(25):19000-19008 (2000)を参照）、ＣＣＲ１シグナル伝達に介在される疾患の治療において使用できる追加の化合物を確認する調査が続けられている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、式I
【化１】
を有する化合物、又はその医薬的に許容可能な塩、水和物又はＮ−酸化物に関する。式Ｉにおいて、Ｒ1は、Ｃ1-4アルキル又はＣ1-4ハロアルキルであり、下付き文字のｍは０〜１の整数である。Ｒ2a、Ｒ2c、Ｒ2dは、水素、ハロゲン、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ1-4アルキル、−Ｏ−Ｃ1-4ハロアルコキシ及びＣ1-4ハロアルキルからなる群から各々独立に選択され、Ｒ3は、水素及びＣ1-4アルキルからなる群から選択される。
【０００９】
本明細書で提供される化合物に加えて、本発明は、さらに１以上のこれらの化合物を含有する医薬組成物、並びにＣＣＲ１、ＣＣＲ２及び／又はＣＣＲ３シグナル伝達活性に関連する疾患を主に処置するこれらの化合物の使用のための方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
説明なし
【発明を実施するための形態】
【００１１】
Ｉ．略語及び定義
それ自身又は別の置換基の一部としての「アルキル」なる用語は、特に断りのない限り、指定された炭素原子数の（即ち、Ｃ1-4は１〜４の炭素を意味する）直鎖又は分岐鎖の炭水化物基を意味する。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、及びｓｅｃ−ブチルがある。
【００１２】
「アルコキシ」なる用語は、従来の意味で使用されるとともに、分子の残りの部分に酸素原子を介して結合したアルキル基のことを言う。アルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ等がある。
【００１３】
それ自身又は別の置換基の一部としての「ハロ」又は「ハロゲン」なる用語は、特に断りのない限り、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素原子を意味する。さらに、「ハロアルキル」等の用語は、モノハロアルキル及びポリハロアルキルを含むことを意味する。例えば、「Ｃ1-4ハロアルキル」なる用語は、トリフルオロメチル、２,２,２−トリフルオロエチル、４−クロロブチル、３−ブロモプロピル等を含むことを意味する。
【００１４】
「保護基」はアルキル基以外の部分であって、分子中の反応基に結合し、その反応性を遮蔽、減少又は妨害する部分のことを言う。保護基の例は、T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, New York, 1999, and Harrison and Harrison et al., Compendium of Synthetic Organic Methods, Vols. 1-8 (John Wiley and Sons, 1971-1996)に記載があり、これはその全体が参照により本明細書に組み込まれる。代表的なヒドロキシ保護基としては、アシル基、ベンジル及びトリチルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリアルキルシリル、エーテル及びアリルエーテルがある。代表的なアミノ保護基には、ホルミル、アセチル、トリフルオロアセチル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニルＡ（ＣＢＺ）、tert−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、２−トリメチルシリル−エタンスルホニル（ＳＥＳ）、トリチル及び置換トリチル基、アリルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（ＦＭＯＣ）、ニトロ−ベラトリルオキシカルボニル（ＮＶＯＣ）等がある。
【００１５】
「アミノ酸カップリング試薬」は、ＨＢＴＵ（Ｏ−（ベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロフォスフェート）等の、様々な求核剤、例えば、アミン、アルコール及びチオール等で縮合するために使用できる活性化中間体を形成させる、アミノ酸のカルボン酸基と反応し、他のエステル、チオエステル又はアミド基を作製する試薬のことを言う。
【００１６】
「医薬的に許容可能な塩」なる用語は、本明細書で記載される化合物に見られる特定の置換基に応じて、比較的非毒性の酸又は塩基で調製される活性化合物の塩を含むことを意味する。本発明の化合物が比較的酸性の官能性を有する場合、所望の塩基の十分量と当該化合物の中性型を、そのまま又は不活性溶液中のいずれかで接触させることにより、塩基付加塩を得ることができる。医薬的に許容可能な無機塩基からの誘導された塩の例としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、第二マンガン、第一マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛等の塩がある。医薬的に許容可能な有機塩基から誘導された塩としては、第一級、第二級及び第三級アミンの塩があり、例えば、置換アミン、環状アミン、天然アミン、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ,Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン（piperadine）、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、手及び風呂ミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミン等がある。本発明の化合物が、比較的塩基性の官能性を有する場合、所望の酸の十分量と当該化合物の中性型を、そのまま又は不活性溶液中のいずれかで接触させることにより、酸付加塩を得ることができる。医薬的に許容可能な酸付加塩の例としては、無機酸から誘導されたものとして、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸水素酸、リン酸、リン酸一水素酸等があり、並びに、比較的非毒性の酸から誘導された塩として、炭酸、プロピオン酸、イソブチル酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸等がある。また、アルギン酸塩等のアミノ酸の塩、及びグルクロン酸又はガラクツロナン酸等の有機酸の塩が含まれる（例えば、Berge, S.M., et al, “Pharmaceutical Salts”, Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19を参照）。本発明の特定の化合物は、当該化合物が塩基又は酸付加塩のいずれにも変換できるよう、塩基及び酸両方の官能性を有する。
【００１７】
化合物の中性型を、従来の手法で、塩基又は酸と塩を接触させるとともに、起源化合物を単離することにより再生してもよい。化合物の起源形態は、ある特定の物理的特性の点、例えば極性溶媒中での溶解性が様々な塩の形態とは異なるが、それ以外は、当該塩は本発明の目的に応じて化合物の起源形態と同等である。
【００１８】
塩状態に加え、本発明はプロドラッグ状態で化合物を提供する。本明細書に記載される化合物のプロドラッグは、本発明の化合物を提供するための生理学的条件下で化学変化を受け易い化合物である。さらに、プロドラッグは、生体外（ex vivo）環境において、化学的又は生化学的方法により、本発明の化合物に変換できる。例えば、プロドラッグを、好適な酵素又は化学試薬と共に経皮パッチ貯蔵庫に置いた場合、徐々に本発明の化合物に変換できる。
【００１９】
本発明の特定の化合物は、非溶媒和状態及び溶媒和状態のいずれでも存在できる。一般的には、溶媒和状態は、非溶媒和状態と同等であり、本発明の範囲に包含されることを意図する。本発明の特定の化合物は、多結晶又はアモルファス状態で存在してもよい。一般的には、全ての物理的形態は、本発明により考慮される使用と同等であり、本発明の範囲内であることを意図する。
【００２０】
本発明の特定の化合物は、不斉炭素原子（光学中心）又は二重結合を有し、ラセミ体、ジアステレオマー、幾何異性体、位置異性体及び個々の異性体（例えば、別々のエナンチオマー）は全て、本発明の範囲内に包含される意図である。本発明の化合物はまた、当該化合物を構成する１以上の原子で、非天然的比率の原子同位体を含有する。例えば、化合物は放射活性同位体、例えば、トリチウム（3Ｈ）、ヨウ素−125（125Ｉ）又は炭素−14（14Ｃ）等で放射標識してもよい。本発明の化合物の全ての同位体変化は、放射活性であるか否かに関係なく、本発明の範囲内に包含される意図である。
【００２１】
II．一般
本発明は、式Ｉの化合物が、ＣＣＲ１受容体の強力なアンタゴニストとして作用するという発見から生まれた。本化合物は、インビボ（in vivo）で抗炎症活性を有し、優れた薬物動態特性を有する。従って、本明細書で提供される化合物は、医薬組成物、ＣＣＲ１介在型疾患の処置のための方法、及び競合的ＣＣＲ１アンタゴニストの識別のためのアッセイにおけるコントロールとして有用である。
【００２２】
III．化合物
ある態様によれば、本発明は式Ｉ
【化２】
の化合物、又はその医薬的に許容可能な塩、水和物又はＮ−酸化物を提供する。式Ｉにおいて、Ｒ1は、Ｃ1-4アルキル又はＣ1-4ハロアルキルであり、下付き文字のｍは、０〜１の整数である。式Ｉにおいて、Ｒ2a、Ｒ2c、Ｒ2dは、水素、ハロゲン、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ1-4アルキル、−Ｏ−Ｃ1-4ハロアルコキシ及びＣ1-4ハロアルキルからなる群から各々独立に選択され、Ｒ3は、水素及びＣ1-4アルキルからなる群から選択され、及びＲ4は、Ｃ1-4アルキルであり、及び下付き文字のｎは、０〜２の整数である。ある実施態様によれば、Ｒ3は水素である。別の実施態様によれば、Ｒ3は水素であり、下付き文字ｎは０である。別の実施態様によれば、式ＩにおいてＲ1は、メチル、トリフルオロメチル又はエチルであり、下付き文字のｍは１である。別の実施態様によれば、下付き文字のｍは０である。さらに別の実施態様によれば、Ｒ2a、Ｒ2c、Ｒ2dは、各々独立に、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシ、メチル、エチル、トリフルオロメチル及び２−フルオロエトキシからなる群から選択される。さらに別の実施態様によれば、Ｒ2aは水素であり、Ｒ2c及びＲ2dは、各々独立に、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシ、メチル、エチル、トリフルオロメチル及び２−フルオロエトキシからなる群から選択される。
【００２３】
ある好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式Ｉa又はＩb
【化３】
の化合物である。
【００２４】
ある実施態様によれば、式Ｉa又はＩb中のＲ2a及びＲ2cは、各々独立に、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素からなる群から選択されると共に、Ｒ2dは、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシ、メチル、エチル、トリフルオロメチル及び２−フルオロエトキシからなる群から選択される。
【００２５】
特定の実施態様によれば、式Ｉa又はＩbの化合物は、以下の、
【化４】
からなる群から選択される。
【００２６】
別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式Ｉc又はＩd
【化５】
の化合物である。
【００２７】
式Ｉc又はＩdにおいて、特定の実施態様によれば、Ｒ2cはフッ素、塩素、臭素及びヨウ素からなる群から選択されるとともに、Ｒ2dは、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシ、メチル、エチル、トリフルオロメチル及び２−フルオロエトキシからなる群から選択される。
【００２８】
特定の実施態様によれば、式Ｉc又はＩdの化合物は、以下の
【化６】
からなる群から選択される。
【００２９】
本発明のさらに別の実施態様によれば、式Ｉdの化合物は、以下の構造
【化７】
を有する。
【００３０】
さらに別の実施態様によれば、式Ｉの発明の化合物は、表１に示した化合物からなる群から選択される。
表１
１．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
２．１−［４−（４−クロロ−３−エトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
３．１−｛４−［４−クロロ−３−（２−フルオロ−エトキシ）−フェニル］−ピペラジン−１−イル｝−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
４．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−２−メチル−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
５．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−３−メチル−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
６．１−［４−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
７．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
８．１−［４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
９．１−｛４−［４−クロロ−３−（２−フルオロ−エトキシ）−フェニル］−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１０．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−２−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１１．１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１２．１−［４−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１３．１−［４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシ−フェニル）−２−メチル−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１４．１−［４−（４−クロロ−３−エトキシ−フェニル）−２−メチル−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１５．１−｛４−［４−クロロ−２−フルオロ−５−（２−フルオロ−エトキシ）−フェニル］−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１６．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−３−メチル−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１７．１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
１８．１−［４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシ−フェニル）−２−メチル−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン
【００３１】
化合物の調製
以下のスキームは、本発明の特定の化合物を入手するために従うことができる特定の合成経路を提供する。他の経路又は以下に示す経路の修正は、当業者には容易に明らかになり、本発明の範囲内であるはずである。
【００３２】
スキーム１は、３−イミダゾリル置換ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンの合成を示す。Ｒ'は、非干渉性置換基、例えば保護基、又はカルボキシエステル等を表す。スキーム１に示す通り、ＮＨ2ＯＨと３−シアノピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンｉとの反応により、ヒドロキシルアミジン化合物iiが提供される。水素ガスと触媒（例えば、Ｐｄ／Ｃ又はＰｄ（ＯＨ）2）を用いるiiの還元により、アミジン生成物iiiが作製される。クロロアセトアルデヒドでのiiiの環化により、イミダゾール生成物ivが作製される。
【化８】
【００３３】
スキーム２は、３−イミダゾリル置換ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンの合成を示す。Ｒ'は、非干渉性置換基、例えば保護基、又はカルボキシエステル等を表す。スキーム２において、３−シアノ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンとエチレンジアミン生成物との反応により、環化イミダゾリン生成物ｖが作製され、これが酸化によりイミダゾールviが作製される。
【化９】
【００３４】
スキーム３は、３−イミダゾリル置換ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンの合成を示す。Ｒ'は、非干渉性置換基、例えば保護基、又はカルボキシエステル、又は式Ｉの化合物の残部を表す（実施例１８も参照のこと）。スキーム３に示す通り、トランスメタル化プロセスを用いて、３−ヨード−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンviiを、３−ホルミル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンviiiに変換でき、これをグリオキサールで処理し、環化して３−イミダゾリル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンixが形成される。
【化１０】
【００３５】
本発明の化合物を形成するために使用できるアミノ酸カップリング法をスキーム４に示す。スキーム４において、Ｒ'、Ｒ"は、非干渉性置換基を表す。本発明の化合物は、例えば、３−イミダゾリル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジンのカルボン酸誘導体ｘを、任意のアミノ酸カップリング試薬（例えば、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵ、ｐｙＢＯＰ等）を用いてピペラジン誘導体xiとカップリングさせ、本発明の３−イミダゾリル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン（xii）を形成することにより調製できる。
【化１１】
【００３６】
III．医薬組成物
上記で提供される化合物に加え、ヒト及び動物におけるＣＣＲ１、ＣＣＲ２及びＣＣＲ３活性の調節のための組成物は、典型的には医薬担体又は希釈剤を含有する。
【００３７】
本明細書で使用される「組成物」なる用語は、特定の量での特定の成分を含んでなる生成物、及び特定の量での特定の成分の組み合わせから、直接的又は間接的に得られる任意の生成物を包含する意図がある。「医薬的に許容可能な」により、担体、希釈剤又は賦形剤が、製剤の他の成分と適合し、且つその受容者に有害でないことを意味する。
【００３８】
本発明の化合物の投与のための医薬組成物は、単位投薬の形態で都合よく提供されても、薬学及び薬物送達の当業界で既知の任意の方法で調製してもよい。全ての方法は、活性成分を、１以上の補助的成分を構成する担体と関連させるステップを含む。一般的には医薬組成物は、活性成分を、液体担体又は微細分割個体担体又はその両方と、均一及び密接に関連させ、その後必要ならば所望の剤型に成形する。医薬組成物において、活性な目的化合物は、疾病のプロセス又は症状に対する所望の影響を与えるのに十分な量で含まれる。
【００３９】
活性成分を含有する医薬組成物は、経口使用に適する形態、例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性又は油性の懸濁物、分散粉末又は顆粒、米国特許第6,451,339号に記載のエマルション及び自己乳化剤、硬又は軟カプセル、シロップ、エリキシル、溶液、経頬パッチ、口腔ゲル、チューインガム、チュアブル錠、発泡粉末及び発泡錠等の形態であってもよい。経口使用を意図する組成物は、医薬組成物の製造のために、当業界で既知の任意の方法で調製してもよく、当該組成物は、医薬的に洗練され且つ口当たりのよい製剤を提供するため甘味剤、香料、着色剤、抗酸化剤及び防腐剤からなる群から選択される１以上の剤を含有してもよい。錠剤は、活性成分を、錠剤の製造に適する、非毒性の医薬的に許容可能な賦形剤との混合状態で含有する。これらの賦形剤は、例えば、不活性希釈剤、例えば、セルロース、二酸化ケイ素、酸化アルミニウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、グルコース、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウム；造粒剤及び崩壊剤としては、例えば、コーンスターチ、又はアルギン酸；結合剤、例えば、ＰＶＰ、セルロース、ＰＥＧ、スターチ、ゼラチン又はアカシア、及び滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルク等を用いてもよい。錠剤は、経腸的であってもなくてもよいが、消化管で崩壊及び吸収を遅延させ、長期間にわたる持続した作用を提供する既知の技術で被覆してもしなくてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリン又はジステアリン酸グリセリン等の時間遅延物質を使用してもよい。これらはまた、制御放出のための浸透治療錠剤を形成する、米国特許第4,256,108号、4,166,452号及び4,265,874号に記載の技術により被覆してもよい。
【００４０】
経口使用のための製剤はまた、硬ゼラチンカプセルとして提供してもよく、ここで活性成分は、不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリン等と混合される。あるいは、軟ゼラチンカプセルとして提供してもよく、ここで活性成分は、水又は油の媒体、例えばピーナッツ油、液体パラフィン、又はオリーブ油と混合される。さらに、エマルションを、油等の非水混和性成分で調製できるし、モノジグリセリド、ＰＥＧエステル等の界面活性剤で安定化できる。
【００４１】
水性懸濁物は、水性懸濁物の製造に適する賦形剤との混合状態で活性物質を含有する。かかる賦形剤には、懸濁剤、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシ−プロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニル−ピロリドン、トラガカント・ゴム及びアカシア・ゴムがあり；分散剤又は湿潤剤は、例えばレシチン等の天然のホスファチド、又は例えばステアリン酸ポリオキシ−エチレン等のアルケンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、又は例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール等のエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール等のエチレンオキシドと脂肪酸及びヘキシトール由来の部分エステルとの縮合生成物、又は例えばモノオレイン酸ポリエチレンソルビトール等のエチレンオキシドと脂肪酸及び無水ヘキシトール由来の部分エステルとの縮合生成物であってもよい。水性懸濁物は、１以上の保存剤、例えば、エチル、又はｎ−プロピル、ｐ−ヒドロキシベンゾエート、１以上の着色剤、１以上の香料、及び１以上の甘味剤、例えばスクロース又はサッカリン等を含有してもよい。
【００４２】
油性懸濁物は、活性成分を以下の油の中で懸濁することにより製剤化してもよく、油としては植物油、例えばアラキス油、オリーブ油、ゴマ油又はココナッツ油等があり、又は鉱物油、例えば液体パラフィン等がある。油性懸濁物は、濃縮剤、例えば蜜ろう、硬パラフィン又はセチルアルコールを含有してもよい。例えば上記に示したような甘味剤、及び香料を、口当たりの良い経口用製剤を提供するために添加してもよい。これらの組成物は、例えばアスコルビン酸等の抗酸化剤を添加して保存してもよい。
【００４３】
水の添加により水性懸濁製剤に適する分散粉末及び顆粒は、活性成分を、分散又は湿潤剤、懸濁剤及び１以上の保存剤との混合状態で提供する。好適な分散又は湿潤剤及び懸濁剤は、上記既に記載のものにより例示される。さらなる賦形剤、例えば甘味剤、香料及び着色剤を存在させてもよい。
【００４４】
本発明の医薬組成物はまた、水中油エマルションの形態でもよい。油相は、植物油、例えばオリーブ油もしくはアラキス油、又は鉱物油、例えば液体パラフィン又はこれらの混合物でもよい。好適な乳化剤は、例えばアカシア・ゴム又はトラガカント・ゴム等の天然のゴム、例えばダイズ、レシチン等の天然のホスファチド、及び例えばモノオレイン酸ソルビタン等の脂肪酸及び無水ヘキシトール由来のエステルもしくは部分エステル、及び例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン等の前記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物でもよい。エマルションはまた、甘味剤及び香料を含有してもよい。
【００４５】
シロップ及びエリキシルは、甘味剤と共に製剤化してもよく、例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール又はスクロースがある。当該製剤はまた、粘滑薬、保存及び香料及び着色剤を含有してもよい。経口溶液は、例えばシクロデキストリン、ＰＥＧ及び界面活性剤との組み合わせで調製できる。
【００４６】
医薬組成物は、滅菌注射用の水溶液又は油性懸濁物の形態でもよい。この懸濁物は、上記の好適な分散又は湿潤剤及び懸濁剤を用い、既知の技術に従って製剤化してもよい。滅菌注射剤は、非毒性の非経口的許容可能な希釈剤又は溶媒中の滅菌注射用溶液又は懸濁物でもよく、例えば１,３−ブタンジオール中の溶液がある。使用できる許容可能なビヒクル及び溶媒は、水、リンガー溶液及び塩化ナトリウム等張溶液である。さらに、滅菌の固定油は、溶媒又は懸濁媒体として従来から使用されている。本目的に応じて、任意の無菌性固定油は、合成のモノ又はジグリセリド等を使用してもよい。さらに、オレイン酸等の脂肪酸は注入用製剤で使用される。
【００４７】
本発明の化合物はまた、薬物の直腸投与のための坐剤の形態で投与してもよい。これらの組成物は、薬物を適切な非刺激性の賦形剤と混合することにより調製でき、前記賦形剤は通常温度では固体だが直腸温度では液体であるため、直腸内で溶解して薬物を放出させる。当該物質には、ココアバター及びポリエチレングリコールが含まれる。さらに、化合物は、溶液又は軟膏による眼送達を介して投与することができる。さらに、対象化合物の経皮的送達は、イオン導入等により達成できる。局所的使用では、本発明の化合物を含有するクリーム、軟膏、ゼリー、溶液又は懸濁物等を使用する。本明細書で使用されるような、局所塗布は、口中洗浄及びうがいの使用を含むことを意味する。
【００４８】
本発明の化合物は、医療装置に埋め込んで製剤化してもよく、任意の多様な従来のグラフト、ステント、例えば、ステントグラフト、カテーテル、バルーン、バスケット又はその他の身体の内腔内に永久に配置又は永久に埋め込むことができる装置を含んでもよい。特定の例によれば、本発明の化合物を、介入技術により処理される身体の領域に送達できる装置及び方法を有することが望ましい。
【００４９】
例示的な実施態様によれば、本発明の阻害剤は、ステント等の医療装置内に埋め込まれ、身体の部分の処置のために処置部位に送達されてもよい。
【００５０】
ステントは、治療剤（即ち、薬物）のための送達ビヒクルとして使用されてきた。脈管内ステントは一般的に、冠状又は抹消脈管中に永久に移植される。ステントの設計には、米国特許第4,733,655号（Palmaz）、4,800,882号（Gianturco）、又は4,886,062号（Wiktor）等に記載のものがある。当該設計は、金属及びポリマーのステント、及び自己伸長型及びバルーン膨張型ステント等がある。ステントは、脈管と接触する部位に薬物を送達するために使用してもよく、例えば、米国特許第5,102,417号（Palmaz）及び国際公開第91/12779号（Medtronic, Inc.）及び国際公開第90/13332号（Cedars-Sanai Medical Center）、米国特許第5,419,760号（Narciso, Jr.）及び米国特許第5,429,634号（Narciso, Jr.）等に開示されている。ステントは遺伝子送達のために内腔の壁にウイルスを送達するためにも使用されており、米国特許出願第5,833,651号（Donovan等）に開示されている。
【００５１】
「埋め込まれ（deposited）」なる用語は、阻害剤が被覆され、吸着され、置かれ、又はそうでなければ当業界で既知の方法で装置に組み込まれることを意味する。例えば、阻害剤は、医療装置を被覆又は装置に橋架けするポリマー物質に、包埋される（embedded）とともにその中から放出されても（「マトリクス型」）、又は前記ポリマー物質に包囲されるとともにそれを介して放出されてもよい（「貯蔵型（reservoir type）」）。後者の例によれば、当業界で既知の当該物質を生成するための１以上の技術を用いて、阻害剤を、ポリマー物質内に捕捉しても、ポリマー物質と結合させてもよい。他の製剤においては、阻害剤を、取り外し可能な結合及び経時的な放出の手段により、被覆の不要な医療装置の表面に連結させることができるか、活性な機械的又は化学的プロセスにより除去することができるか、又は阻害剤が移植部位に存在するという永久に固定化した状態である。
【００５２】
ある実施態様によれば、阻害剤は、例えばステント等の医薬装置用の生物適合被覆を形成する間、ポリマー組成物に組み込まれてもよい。これらの成分から作製される被覆は、典型的には均一であるとともに、移植のために設計された多数の装置を被覆するのに有用である。
【００５３】
ポリマーは、所望の放出速度又は所望のポリマー安定度に応じで、生体安定性又は生体吸収性のいずれかの性質を有するポリマーであってよいが、本実施態様には生体吸収性ポリマーが好ましく、それは、生体安定性ポリマーとは異なり、移植後に長期間存在しないため、任意の有害な慢性的局所応答を引き起こす。使用できる生体吸収性ポリマーとしては、限定するものではないが、ポリ（Ｌ）−乳酸、ポリカプロラクトン、ポリグリコライド（ＰＧＡ）、ポリ（ラクチド−コグリコライド）（ＰＬＬＡ／ＰＧＡ）、ポリ（ヒドロキシブチレート）、ポリ（ヒドロキシブチレート−コバリレート）、ポリジオキサノン、ポリオルソエステル、ポリアンヒドライド、ポリ（グリコール酸）、ポリ（Ｄ−乳酸）、ポリ（Ｌ−乳酸）、ポリ（Ｄ,Ｌ−乳酸）、ポリ（Ｄ,Ｌ−ラクチド）（ＰＬＧ）、ポリ（Ｌ−ラクチド）（ＰＬＬＡ）、ポリ（炭酸グリコール酸−コトリメチレン）（ＰＧＡ／ＰＴＭＣ）、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリジオキサノン（ＰＤＳ）、ポリホスホエステル、ポリホスホエステルウレタン、ポリ（アミノ酸）、シアノアクリレート、ポリ（炭酸トリメチレン）、ポリ（イミノカルボネート）、コポリ（エーテル−エステル）（例えば、ＰＥＯ／ＰＬＡ）、ポリアルキレンオキサレート、ポリホスファゼン、及び生体分子、例えばフィブリン、フィブリノーゲン、セルロース、スターチ、コラーゲン及びヒアルロン酸、ポリエプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシブチル酸、ポリオルソエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、架橋又は両親媒性のヒドロゲルのブロックコポリマー、及び当業界で既知の他の好適な生体吸収性ポリマーがある。また、比較的低い慢性的組織応答を有する生体安定性ポリマー、例えばポリウレタン、シリコン、及びポリエステルが使用でき、溶解及び曲げられるか、医療装置で重合できる場合、使用できる他のポリマーとしては、例えば、ポリオレフィン、ポリイソブチレン及びエチレン−アルファオレフィンコポリマー；アクリルポリマー及びコポリマー、ビニルハライドポリマー及びコポリマー、例えば塩化ポリビニル；ポリビニルピロリドン；ポリビニルエーテル、例えばポリビニルメチルエーテル、；ポリビニリデンハライド、例えば、フッ化ポリビニリデン及び塩化ポリビニリデン；ポリアクリロニトリル、ポリビニルケトン；芳香性ポリビニル、例えばポリスチレン、ポリビニルエステル、例えば、酢酸ポリビニル；ビニルモノマー互いとオレフィンの共重合体、例えばエチレン−メチルメタクリレート共重合体、；アクリロニトリル−スチレン共重合体、ＡＢＳ樹脂、及びエチレン−ビニル酢酸共重合体；ピラン共重合体、ポリヒドロキシ−プロピル−メタクリルアミド−フェノール；ポリヒドロキシエチル−アスパルトアミド（aspartamide）−フェノール；パルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリジン；ポリアミド、例えば、ナイロン６６及びポリカプロラクタム；アルキド樹脂、ポリカーボネート；ポリオキシメチレン；ポリイミド；ポリエーテル；エポキシ樹脂、ポリウレタン；レーヨン；レーヨン−トリアセテート；セルロース、酢酸セルロース、酪酸セルロース；酢酸酪酸セルロース；セロファン；硝酸セルロース；プロピオン酸セルロース；セルロースエーテル；及びカルボキシメチルセルロースがある。
【００５４】
ポリマー及び半透性ポリマーマトリクスは、成形品として形成してもよく、例えばバルブ、ステント、管類、プロテーゼ等がある。
【００５５】
本発明のある実施態様によれば、本発明の阻害剤は、ステント又はステント−グラフトデバイスとして形成されるポリマー又は半透明ポリマーマトリクスと結合する。
【００５６】
典型的には、ポリマーを移植可能デバイスの表面に、スピンコート、ドリッピング又は噴射により塗布する。さらなる当業界で既知の方法は、本目的のために利用できる。噴射の方法には、従来法と、インクジェット型のディスペンサーを用いる微小成膜技術がある。さらに、ポリマーは、移植可能デバイス上で、ポリマーをデバイスの特定部分のみに置く光パターン形成を用いて成膜できる。このデバイスのコーティングは、デバイス周囲に均一な層を提供し、これはデバイスコーティングを介して様々な検体の拡散を改善させることができる。
【００５７】
本発明の好ましい実施態様によれば、阻害剤をポリマーコーティングから医療デバイスが置かれる環境への放出のために製剤化する。好ましくは、阻害剤は、制御された手順で、延長された時間フレームにわたって（例えば数ヶ月）、溶出を制御するポリマー担体又は層に関連する周知の複数の技術のうち、少なくとも１つを用いて、放出される。これらの技術のいくつかは、米国特許出願20040243225A1で既に報告されている。
【００５８】
さらに、例えば米国特許第6,770,729号に記載の、ポリマー組成物の試薬及び反応条件を、ポリマーコーティングからの阻害剤の放出を制御できるように操作することができる。例えば、１以上のポリマーコーティングの拡散係数を、ポリマーコーティングからの阻害剤の放出を制御するよう調節できる。この主題の変化形によれば、１以上のポリマーコーティングの拡散係数は、ポリマー組成物中の１以上の成分を評価するため（及び、例えば、ポリマーコーティングからの阻害剤の放出を調整するため）、医療デバイスが置かれる環境に存在する検体（例えば、ポリマーのいくつかの部分の崩壊又は加水分解を促進する検体）の能力を調整するよう制御できる。本発明のさらに別の実施態様には、各々が複数の拡散係数を有する、複数のポリマーコーティングを有するデバイスが含まれる。かかる本発明の実施態様によれば、ポリマーコーティングからの阻害剤の放出を、その複数のポリマーコーティングにより調製できる。
【００５９】
本発明のさらに別の実施態様によれば、ポリマーコーティングからの阻害剤の放出は、ポリマー組成物の特性の１以上、例えば、１以上の内因性又は外因性化合物、又はポリマー組成物のｐＨ等を調整することにより制御される。例えば、特定のポリマー組成物を、ポリマー組成物のｐＨの減少に応答して、阻害剤を放出するよう設計できる。あるいは、特定のポリマー組成物を、過酸化水素の存在に応答して、阻害剤を放出するよう設計できる。
【００６０】
IV．ＣＣＲ１、ＣＣＲ２及び／又はＣＣＲ３によって調整される疾患治療方法
さらに別の態様によれば、本発明は、ＣＣＲ１−、ＣＣＲ２−及び／又はＣＣＲ３−介在型の症状又は疾患を治療する方法であって、前記疾患又は症状を有する対象に、上記式Ｉの化合物の治療有効量を投与する方法を提供する。本明細書で「対象」は、哺乳類等の動物を含むものと定義され、限定するものではないが、例えば、霊長類（例えばヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス等がある。
【００６１】
ＣＣＲ１は、免疫細胞機能の特定の態様を干渉又は促進するための標的、又はより一般的には、ヒト等の哺乳類における幅広い細胞タイプでのＣＣＲ１発現に関連する機能を干渉するための標的を提供する。ＣＣＲ１を阻害する化合物は、治療目的で、単球、マクロファージ、リンパ球、顆粒球、ＮＫ細胞、マスト細胞、樹状細胞、及び特定の免疫派生細胞（例えば、破骨細胞）の機能を調整するために特に有用である。従って、本発明は、幅広い炎症及び免疫調節性の障害及び疾患の、予防及び／又は治療において有用な化合物を対象とする（Saeki, et al., Current Pharmaceutical Design 9:1201-1208 (2003)を参照）。
【００６２】
例えば、ＣＣＲ１の１以上の機能を阻害する本化合物を、免疫疾患に関連する炎症又は細胞浸潤を阻害（即ち、減少又は予防）するために投与してもよい。その結果、１以上の炎症プロセス、例えば白血球遊出又は浸潤、走化作用、開口放出（例えば、酵素、ヒスタミンの）又は炎症性媒介物質放出を阻害できる。例えば、炎症部位（例えば、関節炎における罹患関節、又はＭＳにおけるＣＮＳ）への単球浸潤を、本方法に従って阻害できる。
【００６３】
同様に、ＣＣＲ１の１以上の機能を促進する本化合物を、炎症応答、例えば、白血球遊出、走化作用、開口放出（例えば、酵素、ヒスタミンの）又は炎症性媒介物質放出を刺激（誘導又は増強）するために投与してもよく、これにより炎症プロセスにおいて有益な刺激がもたらされる。例えば、単球を細菌性感染に対抗するよう動員できる。
【００６４】
炎症、免疫障害及び感染症に関連する疾患及び症状は、本発明の方法を用いて治療できる。好ましい態様によれば、疾患又は症状は、免疫細胞、例えば単球、マクロファージ、リンパ球、顆粒球、ＮＫ細胞、マスト細胞、樹状細胞等の作用、又は特定の免疫派生細胞（例えば、破骨細胞）が、炎症又は自己免疫応答を調整するために、阻害又は促進されるものである。
【００６５】
実施態様のある１群によれば、疾患又は症状は、ヒト又は他の種の慢性疾患を含み、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２又はＣＣＲ３機能の調整物質で治療できる。これらの疾患又は症状には以下のものが含まれる。（１）アレルギー性疾患、例えば、全身性アナフィラキシー又は過敏症応答、（２）炎症性腸疾患、例えばクローン病、潰瘍性結腸炎、回腸炎及び腸炎、（３）鞘膜炎、（４）乾癬及び炎症性皮膚炎（dermatoses）、例えば皮膚炎（dermatitis）、湿疹、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、じんま疹及びそう痒、（５）脈管炎、（６）脊椎関節症、（７）強皮症、（８）喘息及び呼吸器系アレルギー疾患、例えば、喘息、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、過敏性肺疾患等、（９）自己免疫疾患、例えば線維筋痛症、硬皮症、強直性脊椎炎、若年性ＲＡ、スティル病、多関節若年性ＲＡ、少関節若年性ＲＡ、リウマチ性多発性筋痛、タカヤス関節炎、リウマチ様関節炎、乾癬性関節炎、変形性関節症、多関節性関節炎、多発性硬化症、全身性紅斑性狼瘡、Ｉ型糖尿病、II型糖尿病、Ｉ型糖尿病（最近発症）、視神経炎、糸球体腎炎等、（１０）移植片拒絶、例えば同種移植片拒絶、及び急性及び慢性移植片対宿主病、（１１）線維症（例えば、肺性線維症（即ち、特発性線維症、間質性線維症）、末期腎疾患に関連する線維症、放射による線維症、尿細管間質性線維症、上皮下線維症、硬皮症（進行性全身硬皮症）、肝性線維症（例えば、アルコールが原因のもの又はウイルス性肝炎がある）、一次及び二次肝硬変）、（１２）急性及び慢性肺炎（慢性閉塞性肺疾患、慢性気管支炎、成人呼吸促進症候群、新生児期呼吸促進症候群、免疫複合性肺胞炎）、及び（１３）不所望の炎症性応答又は免疫障害が阻害される他の疾患、例えば、心臓血管疾患、例えばアテローム、組織移植物に由来する又は再狭窄の間の脈管炎症（例えば、限定するものではないが、再狭窄とその後の血管形成及び／又はステント挿入）、他の急性及び慢性炎症症状、例えば、筋炎、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病）、脳炎、髄膜炎、肝炎、腎炎、敗血症、類肉腫症、アレルギー性結膜炎、耳炎、静脈洞炎、間接鏡検査による滑膜炎、高尿毒症、外傷、虚血性再灌流外傷、鼻白毛（nasal polyosis）、子癇前症、口苔癬斑、Guillina-Barre症候群、肉芽腫疾患、レプチン産物に関連する症状、ベーチェット症候群、及び通風及び創傷の治療具、（１４）免疫介在性食物アレルギー、例えばセリアック症。
【００６６】
別の実施態様の群によれば、疾患又は症状を、ＣＣＲ１機能の調整物質で治療できる。ＣＣＲ１機能の調整物質で治療される疾患の例としては、癌（原発性及び転移性の両方）（例えば、多発性骨髄腫；Hata, H., Leukemia & Lymphoma, 2005, 46(7); 967-972）、心臓血管疾患、新脈管形成又は新生血管形成が役割を担う疾患（腫瘍性疾患、網膜症及び黄斑変性症）、感染性疾患（ウイルス性感染、例えばＨＩＶ感染、及び細菌性感染）及び免疫抑制性疾患、例えば器官移植物症状及び皮膚移植物症状がある。「器官移植物症状」なる用語は、骨髄移植物症状及び固形器官（例えば腎臓、肝臓、肺、心臓、膵臓、又はその組み合わせ）移植物症状を含むことを意味する。
【００６７】
本発明の医薬組成物はまた、炎症部位のメタロプロテアーゼ及びサイトカインの機能を直接的又は間接的に阻害することもでき（結果として細胞浸潤を低減する）、これらのサイトカインと関連する疾患又は症状に対する利益を提供することになる。
【００６８】
従って本発明の化合物は、広範な炎症及び免疫調整障害及び疾患の予防及び治療において有用である。
【００６９】
治療される疾患及び対象の症状によって、本発明の化合物は、経口、非経口（例えば、筋肉内、腹腔内、静脈内、ＩＣＶ、槽内の注射又は注入、皮下注射、又は移植）により、吸入スプレー、鼻、膣、直腸、舌下、又は局所経路の投与により投与してもよく、単独でも製剤化しても、各投与経路に適する従来の非毒性の医薬的に許容可能な担体、補助剤及びビヒクルを含有する、好適案投薬単位の製剤として共に製剤化してもよい。
【００７０】
ケモカイン受容体調整物質を要する症状の治療又は予防において、一般的に適切な投薬量レベルは、約0.001〜100 mg／患者体重kg／日で、これを単一又は多数の用量で投与できる。好ましくは、投薬量レベルが、約0.01〜約25 mg／kg／日；より好ましくは、約0.05〜約10 mg／kg／日である。好適な投薬量レベルは、約0.01〜約25 mg／kg／日、約0.05〜約10 mg／kg／日、又は約0.1〜約5 mg／kg／日である。この範囲内で、投薬は、0.005〜0.05、0.05〜0.5又は0.5〜5.0 mg／kg／日で行ってもよい。経口投与については、組成物は、1.0〜1000マイクログラムの活性成分、具体的には1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、150.0、200.0、250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0、及び1000.0マイクログラムの活性成分を含有する錠剤の形態で、治療される患者対して投薬量の症状に合わせて調整して提供されることが好ましい。化合物は、１日１〜４回の投薬計画で投与してもよいが、好ましくは１日１又は２回である。
【００７１】
ただし、特定の用量レベル及び任意の特定の患者のための投薬の頻度は、変動してもよく、且つ様々な因子に依存するであろう。前記因子としては、例えば、使用される特定化合物の活性、その化合物の作用の代謝の安定性及び長さ、対象者の年齢、体重、遺伝的特徴、総体的な健康状態、性別及び食事、並びに投与のモード及び時間、排出速度、薬物組み合わせ、及び治療を受ける対象者の特定の症状の重症度がある。
【００７２】
炎症、免疫疾患、感染症、癌に関連する疾患及び症状は、本化合物、組成物、及び方法によって治療又は予防することができる。
【００７３】
本発明の化合物及び組成物は、注目の症状又は疾患、例えば炎症又は自己免疫障害、症状及び疾患、例えば、炎症性腸疾患、リウマチ様関節炎、変形性関節炎、乾癬関節炎、多関節性関節炎、複数硬化症、アレルギー性疾患、汗腺、アトピー性皮膚炎及び喘息、及び上記の病気のものを予防及び治療する関連用途を有する、他の化合物及び組成物と組み合わせることができる。
【００７４】
例えば、炎症又は自己免疫、又は例えば骨粗鬆関連の関節炎の治療又は予防において、本発明の化合物及び組成物は、抗炎症剤又は鎮痛剤と共に使用してもよく、前記剤として、例えばアヘンアゴニスト、リポオキシゲナーゼ阻害剤、例えば、５リポオキシゲナーゼの阻害剤、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、例えば、シクロオキシゲナーゼ２阻害剤、インターロイキン阻害剤、例えば、インターロイキン１阻害剤、ＮＭＤＡアンタゴニスト、一酸化窒素の阻害剤、又は一酸化窒素の合成阻害剤、非ステロイド抗炎症剤、又はサイトカイン抑制性抗炎症剤、例えば、化合物として、アセトアミノフェン、アスピリン、コデイン、フェンタニル、イブプロフェン、インドメタシン、ケトロラク、モルフィン、ナプロキセン、フェンアセチン、ピロキシカム、ステロイド様類似体、スルフェンタニル、スリンダク（sunlindac）、テニダップ等がある。同様に、本化合物及び組成物は、以下のものと共に投与してもよく、上記の鎮痛剤；増強剤、例えばカフェイン、Ｈ2アンタゴニスト（例えば、ラニチジン）、シメチコン、水酸化アルミニウム又はマグネシウム；鬱血除去剤、例えば、フェニルエフェリン、フェニルプロパノールアミン、偽エフェドリン、オキシメタゾリン、エピネフェリン（ephinephrine）、ナファゾリン、キシロメタゾリン、プロピルヘキセドリン、又はレボデゾキシエフェドリン；鎮咳薬、例えば、コデイン、ヒドロコドン、カラミフェン、カルベタペンタン、又はデキストロメトルファン；利尿薬；及び抗ヒスタミン鎮静又は非鎮静薬がある。
【００７５】
同様に、本発明の化合物及び組成物は、本発明の化合物及び組成物が有用となる疾患又は症状の、治療、予防、抑制又は回復で使用される他の薬物との組み合わせで使用してもよい。かかる他の薬物は、それが通常使用される経路及び量で、本発明の化合物又は組成物と同時又は連続的に投与してもよい。本発明の化合物を、１以上の他の薬物と同時に使用する場合、本発明の化合物又は組成物に加え、当該他の薬物を含有する医薬組成物が好ましい。従って、本発明の医薬組成物には、本発明の化合物又は組成物に加え、１以上の他の活性成分又は治療剤を含有するものが含まれる。本発明の化合物又は組成物と組み合わせてもよい他の治療剤の例としては、別々に投与しても、同じ医薬組成物として投与してもよく、限定するものではないが、以下のものが含まれる。（ａ）ＶＬＡ４アンタゴニスト、（ｂ）コルチコステロイド、例えばベクロメタゾン、メチルプレオドニゾロン、ベータメタゾン、プレドニゾン、プレニゾロン、デキサメタゾン、フルチカゾン、ヒドロコルチゾン、ブデソニド、トリアムシノロン、サルメテロール、サルメテロール、サルブタモール、ホルモテロール（formeterol）；（ｃ）免疫抑制剤、例えばシクロスポリン（シクロスポリンＡ、サンディミュン（Sandimmune（登録商標））ネオーラル（Neoral（登録商標）））、タクロリムス（tacrolirnus）（FK 506、プログラフ（Prograf（登録商標））、ラパマイシン（シロリムス、ラパミューン（Rapamune（登録商標）））及び他のFK 506タイプ免疫抑制剤、及びミコフェノール酸（rnycophenolate）、例えばミコフェノール酸モフェチル（セルセプト（CellCep（登録商標）））；（ｄ）抗ヒスタミン（Ｈ１ヒスタミンアンタゴニスト）例えば、ブロモフェニルアミン、クロルフェニルアミン、デクスクロルフェニラミン（dexchloipheniramine）、トリプロリジン、クレマスチン、ジフェンヒドラミン、ジフェニルミラリン、トリペレナミン、ヒドロキシジン、メトジラジン、プロメタジン、トリメプラジン、アザタジン、シプロヘプタジン、アンタゾリン、フェニラミン ピリラミン、アステミゾール、テルフェナジン、ロラタジン、セチリジン、フェキソフェナジン、デスカルボエトキシロラタジン（descarboethoxyloratadine）等；（ｅ）非ステロイド抗喘息剤（例えば、テルブタリン、メタプロテレノール、フェノテロール、イソエタリン、アルブテロール、ビトルテロール及びピルブテロール）、テオフィリン、クロモグリク酸ナトリウム、アトロピン、イプラトロピウム臭化物、ロイコトリエンアンタゴニスト（例えば、ザフムルカスト（zafmlukast）、モンテルカスト、プランルカスト、イラルカスト（iralukast）、ポビルカスト（pobilukast）及びＳＫＢ106,203）、ロイコトルエン生合成阻害剤（ジロートン、BAY 1005）；（ｆ）非ステロイド抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、例えばプロピオン酸誘導体（例えば、アルミノプロフェン、ベノキサプロフェン、ブクロキシ酸（bucloxic acid）、カプロフェン、フェンブフェン、フェンプロフェン、フルプロフェン、フルビプロフェン、イブプロフェン、インドプロフェン、ケトプロフェン、ミプロフェン（rniroprofen）、ナプロキセン、オキサプロジン、ピルプロフェン、プラノプロフェン、スプロフェン、チアプロフェン酸及びチオキサプロフェン）、酢酸誘導体（例えば、インドメタシン、アセメタシン、アルクロフェナク、クリダナク、ジクロフェナク、フェンクロフェナク（fenclofenac）、フェンクロジン酸（fenclozic acid）、フェンチアザク、フロフェナク、イブフェナク、イソキセパク（isoxepac）、オキシピナク、スリンダク、チオピナク、トルメチン、ジドメタシン（zidometacin）及びゾメピラク）、フェナミン酸誘導体（例えば、フルフェナミン酸、メクロフェナミン酸、メフェナミン酸、ニフルミン酸及びトルフェナミン酸）、ビフェニルカルボキシル酸誘導体（例えば、ジフルニサル及びフルフェニサル）、オキシカム（例えば、イソキシカム、ピロキシカム、スドキシカム及びテノキシカム）、サリチル酸塩（例えば、アセチルサリチル酸及びスルファサラジン）及びピラゾロン（例えば、アパゾン、ベズピペリロン（bezpiperylon）、フェプラゾン、モフェブタゾン、オキシフェンブタゾン及びフェニルブタゾン）；（ｇ）シクロオキシゲナーゼ２（ＣＯＸ−２）阻害剤、例えばセレコキシブ（セレブレックス（Celebrex（登録商標）））、及びロフェコキシブ（バイオックス（Vioxx（登録商標）））；（ｈ）ホスホジエステラーゼIV型（ＰＤＥ IV）の阻害剤；（ｉ）金化合物、オーラノフィン及びオーロチオグルコース等、（ｊ）エタネルセプト（エンブレル（Enbrel（登録商標）））、（ｋ）抗体療法、例えばオルソクローン（ＯＫＴ３）、ダクリズマブ（ゼナパックス（Zenapax（登録商標）））、バシリキシマブ（シムレクト（Simulect（登録商標）））及びインフリキシマブ（レミケード（Remicade（登録商標）））、（ｌ）他のケモカイン受容体のアンタゴニスト、特にＣＣＲ５、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ７、ＣＸＣ３ＣＲ１及びＣＸＣＲ６；（ｍ）潤滑剤又は軟化剤、例えば、ワセリン及びラノリン、（ｎ）角質溶解剤（例えば、タザロテン）、（ｏ）ビタミンＤ３誘導体、例えばカルシポトリエン又はカルシポトリオール（ドボネックス（Dovonex（登録商標）））、（ｐ）ＰＵＶＡ、（ｑ）アントラリン（ドリトロクレメ（Drithrocreme（登録商標）））、（ｒ）エトレチナート（チガソン（Tegison（登録商標）））、及びイソトレチノイン及び（ｓ）多発性硬化症治療剤、例えばインターフェロンｂ １ｂ（ベタセロン（Betaseron（登録商標）））、インターフェロン（ｂ １ａ（アボネックス（Avonex（登録商標）））、アザチオプリン（イムレク（Imurek（登録商標））、イムラン（Imuran（登録商標）））、酢酸グラチラマー（コパクソン（Capoxone（登録商標）））、グルココルチコイド（例えば、プレドニゾロン）及びシクロホスファミド（ｔ）ＤＭＡＲＤＳ、例えばメトトレキサート、（ｕ）他の化合物、例えば５アミノサリチル酸及びそのプロドラッグ；ヒドロキシクロロキノン；Ｄペニシラミン；抗代謝剤、例えばアザチオプリン、６メルカプトプリン及びメトトレキサート；ＤＮＡ合成阻害剤、例えばヒドロキシウレア、及び微小管崩壊剤、例えばコルヒチンである。第二活性成分に対する本発明の化合物の重量比は、変動してもよく、各活性成分の有効用量に依存するだろう。一般的には、各々の有効量を使用するだろう。すなわち、例えば、本発明の化合物をＮＳＡＩＤと組み合わせる場合、ＮＳＡＩＤに対する本発明化合物の重量比は、一般的に、約１０００：１〜約１：１０００、好ましくは約２００：１〜約１：２００である。本発明の化合物と他の活性成分の組み合わせは、一般的には既に記載の範囲内であるが、各事例において各活性成分の有効用量を使用すべきである。
【００７６】
Ｖ．実施例
以下の実施例は例示するために提供されるが、本発明を限定するものではない。
【００７７】
以下で使用した試薬及び溶媒は、市販業者、例えばAldrich Chemical Co. (Milwaukee, Wisconsin, USA)から入手できる。1Ｈ−ＮＭＲをVarian Mercury 400 MHz ＮＭＲ分光器を用いて記録した。重要なピークはＴＭＳと比較して提供され、以下の順に一覧にした：多重度（ｓ、シングレット；ｄ、ダブレット；ｔ、トリプレット；ｑ、カルテット；ｍ、マルチプレット）及びプロトン数。質量分析の結果は、質量電荷比として報告され、その後ろに各イオンの相対的存在量を（括弧内に）示す。表中、一つのｍ／ｅ値は、最も一般的な原子同位体を含有するＭ＋Ｈ（又はＭ−Ｈの記載のように）イオンとして報告される。同位体パターンは、全ての事例において期待される式に対応する。エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）質量分析は、サンプル送達用のAgilent Zorbax SB-C18, 2.1X50 mm、５μカラムを備えるHP1100 HPLCを用い、Hewlett-Packard MSDエレクトロスプレー質量分析機で実行した。通常、検体をメタノールに、0.1mg/mLで溶解させ、１マイクロリットルを、質量分析機に送達溶媒に入れ、これを１００〜１５００ダルトンの範囲でスキャンした。全ての化合物は、アセトニトリル／水に１％ギ酸添加したものを送達溶媒として用いて、ポジティブＥＳＩモードで分析できる。以下に示す化合物は、アセトニトリル／水中の２ｍＭ ＮＨ4ＯＡｃを送達溶媒として用い、ネガティブＥＳＩモードで分析できる。
【００７８】
以下の略語を、実施例及び本発明の記載全体において使用する。
ＨＰＬＣ、高圧液体クロマトグラフィ；ＤＭＦ、ジメチルホルムアミド；ＴＦＡ、トリフルオロ酢酸；ＴＨＦ、テトラヒドロフラン；ＥｔＯＡｃ、酢酸エチル；ＢＯＣ2Ｏ、ジ−tertブチルジカルボネート又はＢＯＣ無水物；ＨＰＬＣ、高圧液体クロマトグラフィ；ＤＩＰＥＡ、ジイソプロピルエチルアミン；ＨＢＴＵ、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート；ｄｐｐｆ、１,１'−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン；Ｐｄ2（ｄｂａ）3、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）；ＤＩＰＥＡ、ジイソプロピルエチルアミン；ＤＭＰ、ジメチルフタレート；Ｍｅ、メチル；Ｅｔ、エチル；ＤＣＭ、ジクロロメタンである。
【００７９】
本発明の範囲内の化合物は、当業者に既知の様々な反応を用いて、以下の記載の通りに合成できる。本発明の標的化合物の合成に代わりの方法が使用されてもよく、また本出願書類内に記載のアプローチは完全ではないが、注目の化合物への応用可能且つ具体的な経路を幅広く提供するものであることを、当業者は認識するだろう。
【００８０】
本特許において請求される特定の分子は、異なるエナンチオマー及びジアステレオマーの形態で存在できると共に、全てのこれらの化合物の変形が請求される。
【００８１】
本文章における重要な化合物を合成するために使用される実験的手法の詳細な記載は、分子を導くが、当該分子はこれらを識別する物理的データ、及びそれらに関連する構造的表現により記載される。
【００８２】
当業者は、有機化学における標準的作業方法で、酸及び塩基を頻繁に使用することを理解するであろう。起源化合物の塩が作製されることもあるが、それは本特許に記載の実験方法でこれらが必要な内在する酸性又は塩基性を有する場合である。
【実施例１】
【００８３】
１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンの合成
【化１２】
【００８４】
ステップ１：ＤＭＦ（200 mL）中の３−インド−７−アザインダゾール（25.50 g）及びＫ2ＣＯ3（41.4 g）を、８５℃に加熱し、ｔ−ブチルクロロ酢酸（14.3 mL）を徐々に添加した。混合物をこの温度で１時間（ｈ）攪拌し、室温まで冷却し、水を添加した（300 mL）。反応混合物を濾過し、（３−インド−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステルを得た。
【００８５】
ステップ２：250 mLのフラスコに、（３−インド−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステル（15.0 g）、ＰｄＣｌ2（ｄｐｐｆ）（3.0 g）、Ｚｎ（ＣＨ）2（4.96 g）、ＤＭＦ（200 mL）及びＨ2Ｏ（14 mL）を充填した。得られた懸濁物を含有するフラスコを脱気し、５分間繰り返して窒素ガスを逆充填（backfille）し、Ｐｄ2（ｄｂａ）3（3.85 g）を反応混合物に添加した。反応混合物を、Ｎ2雰囲気下、９０℃で１６時間加熱し、室温まで冷却し、Ｈ2Ｏで希釈（800 mL）し、濾過した。回収した固体をトルエン（10 mL）で洗浄し、（３−シアノ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステルを黄色固体として得た。
【００８６】
ステップ３：ＥｔＯＨ（120 mL）中の、（３−シアノ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステル、ヒドロキシルアミン塩酸塩（8.28 g）及びＥｔ3Ｎ（22.6 mL）の混合物を、Ｎ2雰囲気下６５℃で一晩加熱した。得られた混合物を室温まで冷却し、濾過して固体を回収し、Ｈ2Ｏ（100 mL）及びＥｔ2Ｏ（50 mL × 2）で洗浄し、［３−（Ｎ−ヒドロキシカルバミミドイル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステルを得た。
【００８７】
ステップ４：100 mLバイアル中の、［３−（Ｎ−ヒドロキシカルバミミドイル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステル（6.17 g）に、ＡｃＯＨ（45 mL）及びＡｃ2Ｏ（4.3 mL）を充填した。得られた混合物を室温で１時間攪拌し、この温度で当初懸濁物のものが、透明な溶液となった。この溶液に、Ｐｄ／Ｃ（10 %, 900 mg）を添加し、１atm、Ｈ2バルーン下で攪拌し、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。反応混合物を、セライトパッドを通して濾過し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨで洗浄した。溶媒のエバポレーションにより、（３−アミノ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステルを得て、これをさらなる精製を行わず使用した。
【００８８】
ステップ５：100 mLバイアル中の（３−アミノ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステルに、クロロアセチルアルデヒド（5.72 mL）、ジオキサン（50 mL）及びＫ2ＣＯ3（12.42 g）を充填した。得られた混合物を、８０℃で４時間攪拌し、クロロアセチルアルデヒド（5.72 mL）及びＫ2ＣＯ3（12.42 g）を添加した。混合物をさらに１時間８０℃で攪拌し、120℃で１時間攪拌し、室温まで冷却し、ジクロロメタン（ＤＣＭ）で希釈し、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、真空中でエバポレートした。フラッシュクロマトグラフィでの精製により、２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステルを茶色オイルとして得た。
【００８９】
ステップ６：２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸 tert−ブチルエステル（977 mg）を、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（10 mL）中に溶解させ、室温で１時間攪拌した。混合物を真空中でエバポレートし、２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸を茶色オイルとして得て、これをさらなる精製を行わずに使用した。
【００９０】
ステップ７：（プロトコルＡ−ＨＢＴＵカップリング方法）［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−酢酸（0.30 M, 0.40 mL, 0.12 mmol）をバイアル中に移した。１−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジンジヒドロクロリド（48 mg, 0.14 mmol）、Ｏ−（ベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）（55 mg, 0.14 mmol）及びｉ−Ｐｒ2ＮＥｙ（0.30 mL）を当該バイアル中に添加し、混合物を大気圧下で攪拌した。３０分後、ＬＣ／ＭＳ分析により、所望産物の形成及びカルボン酸出発物質の完全な消費が示された。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水（１×）及びブライン（１×）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、エバポレートした。残存物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の１％〜８％ＭｅＯＨ）、１−［４−（４−クロロ−５−メトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンを黄褐色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.79 (dd, 0.6 H, J = 8.4, 1.6 Hz), 8.66 (dd, 0.4 H, J = 8.0, 1.6 Hz), 8.57-8.55 (m, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 7.22-7.16 (m, 1H), 7.09-7.05 (m, 2H), 6.50-6.45 (m, 2H), 5.45 (s, 0.6H), 5.43 (s, 1.4H), 4.07-4.01 (m, 2H), 3.81-3.69 (m, 4H), 3.17-3.13 (m, 1.6H), 3.08-3.02 (m, 2.4H), 1.50-1.42 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 484.4。
【実施例２】
【００９１】
１−｛４−［４−クロロ−２−フルオロ−５−（２−フルオロエトキシ）−フェニル］ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化１３】
【００９２】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。１−［４−クロロ−２−フルオロ−５−（２−フルオロエトキシ）フェニル］−ピペラジンジヒドロクロリド及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の２％〜3.5％ＭｅＯＨ）、１−｛４−［４−クロロ−２−フルオロ−５−（２−フルオロエトキシ）−フェニル］−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.79 (dd, 0.6 H, J = 8.0, 1.8 Hz), 8.67 (d, 0.4 H, J = 6.4 Hz), 8.57-8.55 (m, 1H), 7.30-7.25 (m, 1H), 7.11-7.06 (m, 2H), 6.63 (d, 0.6H, J = 7.6 Hz), 6.57 (d, 0.4H, J = 7.6 Hz), 6.54 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 5.45 (s, 0.7H), 5.43 (s, 1.3H), 4.83-4.80 (m, 1H), 4.71-4.68 (m, 1H), 4.31-4.18 (m, 2H), 3.82-3.76 (m, 3H), 3.50 (t, 1H, J = 5.2 Hz), 3.23-3.04 (m, 4H); LC/MS m/z (M+H)+ 502.4。
【実施例３】
【００９３】
１−［４−（４−クロロ−３−エトキシフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化１４】
【００９４】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。１−（４−クロロ−３−エトキシフェニル）ピペラジンジヒドロクロリド及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の4％〜15％ＭｅＯＨ）、１−［４−（４−クロロ−３−エトキシフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た（25 mg）。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.79 (dd, 0.6H), 8.66 (dd, 0.4H), 8.57-8.54 (m, 1H), 7.29-7.19 (m, 4H), 6.49-6.40 (m, 2H), 5.45 (s, 0.7H), 5.43 (s, 1.3 H), 4.10-4.04 (m, 2H), 3.81-3.69 (m, 4H), 3.23-3.16 (m, 4H), 1.50-1.45 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 466.4。
【実施例４】
【００９５】
１−［４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化１５】
【００９６】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。１−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシフェニル）ピペラジンジヒドロクロリド及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の1％〜10％ＭｅＯＨ）、１−［４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシフェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た（27 mg）。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.79 (dd, 0.6H), 8.67 (dd, 0.4H), 8.57-8.55 (m, 1H), 7.31-7.20 (m, 2H), 7.12-7.06 (m, 2H), 6.49-6.45 (m, 1H), 5.45 (s, 0.6H), 5.43 (s, 1.4H), 3.86 (s, 0.9H), 3.85 (s, 2.1 H), 3.81-3.75 (m, 4H), 3.15-3.08 (m, 4H); LC/MS m/z (M+H)+ 470.4。
【実施例５】
【００９７】
１−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化１６】
【００９８】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。（Ｓ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジンジヒドロクロリド及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の1％〜8％ＭｅＯＨ）、１−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.79 (dd, 0.6H), 8.66 (dd, 0.4H), 8.57-8.55 (m, 1H), 7.29-7.19 (m, 4H), 6.44-6.39 (m, 2H), 5.42 (br. s, 2H), 4.83 (br. s, 0.3H), 4.49 (br. s, 0.3H), 4.30 (br. s, 0.3H), 3.89 (s, 1.2H), 3.88 (s, 1.8H), 3.83 (br. s, 0.3H), 3.72-3.69 (m, 1H), 3.54-3.52 (m, 1H), 3.38 (br. s, 1H), 3.19-3.15 (m, 1H), 3.00 (br. s, 1H), 2.80 (br. s, 1H), 1.50-1.43 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 466.4。
【実施例６】
【００９９】
１−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンの合成
【化１７】
【０１００】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。（Ｓ）−４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジンジヒドロクロリド及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の2％〜3％ＭｅＯＨ）、１−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−２−フルオロ−５−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た（29 mg）。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.79 (dd, 1H), 8.55 (dd, 1H), 7.27-7.21 (m, 3H), 7.07 (d, 1H), 6.43 (br. d, 1H), 5.46-5.37 (m, 2H), 4.83 (br. s, 0.3H), 4.51-4.48 (m, 0.6H), 4.28-4.21 (m, 0.6H), 3.86 (s, 0.9H), 3.85 (s, 2.1H), 3.79 (br. s, 0.3H), 3.67 (br. s, 0.3H), 3.33-3.21 (m, 2.5H), 2.95-2.93 (m, 0.9H), 2.83-2.76 (m, 1.6H), 1.48-1.40 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 484.4。
【実施例７】
【０１０１】
１−［（Ｒ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンの合成
【化１８】
【０１０２】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。（Ｒ）−１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の1％〜7.5％ＭｅＯＨ）、１−［（Ｒ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.76 (d, 0.6H), 8.66 (dd, 0.3H), 8.57-8.54 (m, 1H), 7.29-7.19 (m, 4H), 6.48-6.40 (m, 2H), 5.53-5.40 (m, 2H), 4.26 (br. d, 0.6H), 4.00 (br. d, 0.6H), 3.88 (s, 1.3H), 3.86 (s, 1.7H), 3.80-3.49 (m, 3.2H), 3.33 (br. s, 0.6H), 3.17-3.14 (m, 2H), 1.51-1.42 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 466.4。
【実施例８】
【０１０３】
１−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンの合成
【化１９】
【０１０４】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。（Ｓ）−１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の1％〜7％ＭｅＯＨ）、１−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.77 (d, 0.6H), 8.66 (d, 0.3H), 8.57-8.54 (m, 1H), 7.30-7.19 (m, 4H), 6.48-6.40 (m, 2H), 5.54-5.36 (m, 2H), 4.25 (br. d, 0.6H), 4.00 (br. d, 0.6H), 3.88 (s, 1.3H), 3.86 (s, 1.7H), 3.82-3.48 (m, 3.2H), 3.36-3.29 (m, 0.6H), 3.17-3.13 (m, 2H), 1.51-1.43 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 466.4。
【実施例９】
【０１０５】
１−［（Ｒ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンの合成
【化２０】
【０１０６】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。（Ｒ）−１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−３−メチルピペラジン及び［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］酢酸をカップリング成分として使用した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製し（ＣＨ2Ｃｌ2中の1％〜7.5％ＭｅＯＨ）、１−［（Ｒ）−４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを黄褐色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.75 (d, 0.6H), 8.66 (dd, 0.4H), 8.57-8.54 (m, 1H), 7.29-7.18 (m, 4H), 6.44-6.39 (m, 2H), 5.42 (br. s, 2H), 4.82 (br. s, 0.3H), 4.45 (br. s, 0.3H), 4.33 (br. s, 0.3H), 3.88 (s, 1.2H), 3.87 (s, 1.8H), 3.83 (br. s, 0.3H), 3.73-3.67 (m, 1H), 3.54-3.52 (m, 1H), 3.38 (br. s, 1H), 3.17-3.13 (m, 1H), 2.99 (br. s, 1H), 2.80 (br. s, 1H), 1.50-1.42 (m, 3H); LC/MS m/z (M+H)+ 466.4。
【実施例１０】
【０１０７】
２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−１−（（Ｓ）−４−（４−クロロ−３−エトキシフェニル）−２−（メチルピペラジン−１−イル）エタノンの合成
【化２１】
【０１０８】
表題化合物を、プロトコルＡに従って調製した。（Ｓ）−１−（４−クロロ−３−エトキシフェニル）−３−メチルピペラジンジヒドロクロリド（70 mg, 0.21 mmol）を含有するバイアルに、２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）酢酸（51 mg, 0.21 mmol）、ＨＢＴＵ（81 mg, 0.21 mmol）、ＤＭＦ（0.7 mL）、及びＤＩＰＥＡ（0.15 mL, 0.87 mmol）を添加した。反応混合物を３０℃で２４時間そのままにした。溶液をＥｔＯＡｃ（30 mL）で希釈し、１Ｎ ＨＣｌ（２×10 mL）及び飽和ＮａＣｌ水溶液（２×10 mL）で希釈した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮させた。得られた残存物を調製ＨＰＬＣで精製し（0.1％ＴＦＡ添加のＭｅＣＮ−Ｈ2Ｏの２０→９５％グラジエント）、純フラクションを凍結乾燥させ、所望の化合物（11 mg, 収率11%）を得た。MS (ES) [M+H]+ 予測（expected） 480.2, 測定（found） 480.5; 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 9.94 (br s, 1H), 8.79 (dd, J = 1.6, 8.0, 1H), 8.55 (dd, J = 1.6, 4.4, 1H), 7.19-7.26 (m, 4H), 6.37-6.43 (m, 2H), 5.40 (br s, 2H), 2.78-4.81 (m, 10H), 4.07 (q, J = 6.8, 2H), 1.46 (t, J = 6.8, 3H).
【実施例１１】
【０１０９】
２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−１−（４−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノンの合成
【化２２】
【０１１０】
１−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−クロロフェニル）ピペラジンジヒドロクロリド（70 mg, 0.21 mmol）を含有するバイアルに、２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）酢酸（51 mg, 0.21 mmol）、ＨＢＴＵ（83 mg, 0.22 mmol）、ＤＭＦ（0.7 mL）、及びＤＩＰＥＡ（0.20 mL, 1.2 mmol）を添加した。反応混合物を２０℃で２４時間そのままにした。溶液をＥｔＯＡｃ（30 mL）で希釈し、１Ｎ ＨＣｌ（２×10 mL）及び飽和ＮａＣｌ水溶液（２×10 mL）で希釈した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮させた。得られた残存物を調製ＨＰＬＣで精製し（0.1％ＴＦＡ添加のＭｅＣＮ−Ｈ2Ｏの２０→９５％グラジエント）、純フラクションを凍結乾燥させ、所望の化合物（20 mg, 収率20%）を得た。MS (ES) [M+H]+ 予測（expected） 484.2, 測定（found） 484.4; 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) d 9.94 (br s, 1H), 8.78 (dd, J = 1.2, 8, 1H), 8.55 (dd, J = 1.2, 4.6, 1H), 7.16-7.26 (m, 4H), 6.45-6.53 (m, 2H), 5.44 (s, 2H), 4.77 (dt, J = 4.0, 46.8, 2H), 4.26 (dt, J = 4.0, 26.8, 2H), 3.69-3.78 (m, 4H), 3.10-3.21 (m, 4H)。
【実施例１２】
【０１１１】
２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−１−（（Ｓ）−４−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−クロロフェニル）−２−メチルピペラジン−１−イル）エタノンの合成
【化２３】
【０１１２】
（Ｓ）−１−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−クロロフェニル）−３−メチルピペラジンジヒドロクロリド（80 mg, 0.23 mmol）を含有するバイアルに、２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）酢酸（51 mg, 0.21 mmol）、ＨＢＴＵ（81 mg, 0.21mmol）、ＤＭＦ（0.7 mL）、及びＤＩＰＥＡ（0.2 mL, 1.2 mmol）を添加した。反応混合物を３０℃で２４時間そのままにした。溶液をＥｔＯＡｃ（30 mL）で希釈し、１Ｎ ＨＣｌ（２×10 mL）及び飽和ＮａＣｌ水溶液（２×10 mL）で希釈した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮させた。得られた残存物を調製ＨＰＬＣで精製し（0.1％ＴＦＡ添加のＭｅＣＮ−Ｈ2Ｏの２０→９５％グラジエント）、純フラクションを凍結乾燥させ、所望の化合物（14 mg, 収率13%）を得た。MS (ES) [M+H]+ 予測（expected） 498.2, 測定（found） 498.4; 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 9.95 (br s, 1H), 8.79 (dd, J = 1.6, 8.2, 1H), 8.55 (dd, J = 1.6, 4.4, 1H), 7.19-7.26 (m, 4H), 6.44-6.50 (m, 2H), 5.40 (br s, 2H), 4.77 (dt, J = 4.2, 47.2, 2H), 4.26 (dt, J = 4.2, 27.2, 2H), 2.78-4.42 (m, 10H)。
【実施例１３】
【０１１３】
１−［４−（４−クロロ−３−メチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化２４】
【０１１４】
２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）酢酸（55 mg, 0.226 mmol）、ＨＢＴＵ（125 mg, 0.33 mmol）、１−（４−クロロ−３−メチルフェニル）−ピペラジンジヒドロクロリド（142 mg, 0.50 mmol）、無水ＤＭＦ（2.0 mL）、及びＤＩＰＥＡ（0.5 mL）をバイアルに充填した。バイアルに栓をし、４５℃に加熱し、一晩攪拌した。翌日、真空下で揮発性物質を除去し、調製ｈｐｌｃ（逆相、アセトニトリル−水グラジエント）による分離で、１−［４−（４−クロロ−３−メチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）エタノンを得た。MS (ES) [M+H]+ 測定（found）: 436.4.
【実施例１４】
【０１１５】
１−［４−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化２５】
【０１１６】
２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）酢酸（55 mg, 0.226 mmol）、ＨＢＴＵ（125 mg, 0.33 mmol）、１−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジンジヒドロクロリド（170 mg, 0.50 mmol）、無水ＤＭＦ（2.0 mL）、及びＤＩＰＥＡ（0.5 mL）をバイアルに充填した。バイアルに栓をし、４５℃に加熱し、一晩攪拌した。翌日、真空下で揮発性物質を除去し、調製ｈｐｌｃ（逆相、アセトニトリル−水グラジエント）による分離で、１−［４−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを得た。MS (ES) [M+H]+ 測定（found）: 490.4。
【実施例１５】
【０１１７】
１−［４−（４−クロロ−３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化２６】
【０１１８】
２−（３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）酢酸（55 mg, 0.226 mmol）、ＨＢＴＵ（125 mg, 0.33 mmol）、１−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピペラジンジヒドロクロリド（177 mg, 0.50 mmol）、無水ＤＭＦ（2.0 mL）、及びＤＩＰＥＡ（0.4 mL）をバイアルに充填した。バイアルに栓をし、４５℃に加熱し、一晩攪拌した。翌日、真空下で揮発性物質を除去し、調製ｈｐｌｃ（逆相、アセトニトリル−水グラジエント）による分離で、１−［４−（４−クロロ−３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを得た。MS (ES) [M+H]+ 測定（found）: 506.4。
【実施例１６】
【０１１９】
１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化２７】
【０１２０】
表題化合物は、１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−ヨード−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンから（US 20070010524として公開された、米国特許出願番号11/474,132を参照のこと。参照により組み込まれる）、実施例１のステップ２〜ステップ５での記載と同様の方法により調製した。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 10.22 (br, 1H), 8.82 (dd, 1H), 8.56 (dd, 1H), 7.20-7.30 (m, 3H), 7.11 (s, 1H), 6.47 (d, 1H), 6.42 (dd, 1H), 5.44 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.80 (m, 4H), 3.19 (m, 4H); MS (ES) M+H 予測（expect） 452.2。
【実施例１７】
【０１２１】
１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンの合成
【化２８】
【０１２２】
ＴＨＦ中の１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノン（50 mg, 0.11 mmol, 1当量）に、６０％の水素化ナトリウム（5.7 mg, 0.14 mmol, 1.3当量）を添加し、１時間攪拌し、その後ヨードメタン（5.7 mg, 0.14 mmol, 1.3当量）を添加した。２時間後、ＬＣＭＳにより、主要なピークが所望の産物であることが示された。調製ｈｐｌｃ（逆相、アセトニトリル−水グラジエント）による分離で、１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］−エタノンを得た。MS (ES) [M+H]+ 測定（found）: 465.2。
【実施例１８】
【０１２３】
【化２９】
ステップ１：tert−ブチル ４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート
【化３０】
機械的攪拌機、ガスアダプター、加熱マントル及び温度計を備える３首の５Ｌモートンフラスコに、rac−ＢＩＮＡＰ（4.24g, 0.005当量）及びＰｄ2（ｄｂａ）3（3.20g, 0.0025当量）を添加した。フラスコから排出し、窒素で逆充填した。カニューレによりトルエン（100 mL）を添加した。混合物を、室温で１５分間攪拌し、紫の溶液を得た。その後トルエン（2.0Ｌ）を添加した。２−クロロ−５−ブロモアニソール（300.3g, 1.356 mol, 1当量）少しずつ添加した。Boc−ピペラジン（252.4g, 1当量）を少しずつ添加した。ナトリウムtert−ブトキシド（183.0g, 1.4当量）を少しずつ添加した。フラスコから排出し、窒素を逆充填した。その後、混合物を内部温度６０℃まで加熱した。不均一な明オレンジ色のスラリーを得た。１時間後、混合物は均一な茶色溶液になった。さらに１５時間後、混合物を室温まで冷却した。ＥｔＯＡｃ（2.0L）を攪拌しながら混合物に添加した。混合した濾液を１０％Ｋ2ＣＯ3水溶液で洗浄し（１×１Ｌ）、ＭｇＳＯ4で乾燥させた・溶媒を真空下で除去し、オレンジ色固体として生成物を得た（410.3g, 収率93%）。
【０１２４】
ステップ２：１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジンジヒドロクロリド
【化３１】
機械的攪拌機を備えた４Ｌビーカーに、tert−ブチル ４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（500g, 1.53 mol, 1当量）及びＭｅＯＨ（1.50 L）を添加した。室温で攪拌しながら、濃37％ＨＣl（500 mL, 4当量）を５分間添加した。内部温度を４０℃まで上げ、溶液は沈殿物で満たされた。１５分後、ホットプレートで混合物を内部温度６０℃まで加熱した（混合物温度としておよそ５０℃で起泡が始まった）。６０℃で２時間後、溶液を室温まで冷却し、続いて冷蔵庫で５℃にした。生成物を濾過により２バッチ回収した。赤茶色濾液の各バッチを、ＥｔＯＡｃで洗浄し（２×500 mL）、明黄色固体を得た。２つのバッチ組み合わせて生成物を得た（391.3g）。濾液を真空中で濃縮して300 mLの容量にし、熱（５０℃）ＭｅＯＨ（500 mL）で処理した。混合物を冷蔵庫で２４時間、５℃に冷却した。得られた沈殿物を濾過により回収し、ＥｔＯＡｃで洗浄し（２×200 mL）、さらに44.3ｇの生成物を得た（総量435.6 g、収率95％）。
【０１２５】
ステップ３：２−クロロ−１−（４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン
【化３２】
機械的攪拌機を伴う３Ｌフラスコに、１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジンジヒドロクロリド（220 g, 0.73 mol, 1当量）、ＣＨ2Ｃｌ2（100 mL）、及び水（1000 mL）を添加した。二相の混合物を、氷浴を用いて５℃に冷却した。Ｋ2ＣＯ3（506 g, 5当量）を、起泡を最低限に抑えるよう、溶液を勢いよく攪拌しながら少しずつ添加した。ＣＨ2Ｃｌ2（100 mL）中の塩化クロロアセチルの溶液（124.4 g, 1.5当量）を添加筒から少しずつ添加し、その間内部温度を８℃未満に維持した。１時間後、冷却浴を除去し、反応物を室温まで温めた。さらに１時間後、層を分割した。水相をＣＨ2Ｃｌ2（２×300 mL）で抽出し、混合した有機層は、３：１ Ｎａ2ＳＯ4／Ｋ2ＣＯ3で乾燥させた（Ｋ2ＣＯ3添加により溶液相が透明になる）。濾過後、濾液を真空下で濃縮し、残存物を真空下で１６時間乾燥させ、生成物をオフホワイト固体として得た（410 g, 収率92％）。
【０１２６】
ステップ６：７−アザインダゾール−３−カルボキシアルデヒド
【化３３】
デジタル温度計、１Ｌ添加筒及び機械的攪拌機を備える５Ｌの３首フラスコ（全てのガラス製品は使用前にオーブンで乾燥させ、３０分間空気中で冷却した）に、３−ヨード−７−アザインダゾール（196.0 g, 0.80 mol）及び１Ｌの無水ＴＨＦ（Aldrich製のSureSeal ボトルに入っており、そのまま使用した）を充填した。固体を、室温でＴＨＦ中に完全に溶解させ、暗茶色溶液を形成させた。その後フラスコを、穏やかに攪拌しながら、氷／ＮａＣｌ浴で−５℃まで冷却し、塩化ｏ−トリマグネシウム（ＴＨＦ中１Ｍ 溶液、880 mL, 1.1当量）を滴下しながら添加し、内部温度を−５℃から−３℃に維持した（〜820 mLの塩化ｏ−トリマグネシウム溶液を添加後、温度は上昇しなかった）。全ての添加プロセスは２時間２５分を要した。添加の後に、混合物は均一な暗茶色溶液であった。
【０１２７】
添加の１時間後、塩化イソプロピルマグネシウム溶液（ＴＨＦ中２Ｍ、480 mL, 1.2当量）を滴下しながら添加し、内部温度を＜４℃に維持した。２５分後、約200 mLの塩化イソプロピルマグネシウム溶液を添加し、茶色沈殿の形成が開始した。総量380 mLの塩化イソプロピルマグネシウム溶液の添加後、混合物は再び均一になった。全ての添加プロセスは４５分で行われた。さらに１時間２５分後、少量のサンプルを取り出し、Ｄ2Ｏで反応停止した。このサンプルのＬＣＭＳ分析から、ヨウ素−Ｍｇの完全な交換が示された。
【０１２８】
その後、１−ホルミルピペリジン（120 mL, 1.3当量）を滴下しながら添加し、内部温度を＜２℃に維持した。約３０mLのホルミルピペリジン添加後、内部温度はそれ以上上昇せず、残りの１−ホルミルピペリジンは比較的速やかに添加した。全ての添加プロセスは２０分を要した。添加の終了時に、混合物はまだ暗色の均一な溶液であり、ゆっくりと室温まで上昇させ、１８時間穏やかに攪拌した。
【０１２９】
混合物を氷／ＮａＣｌ浴で０℃まで再冷却し、飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液（750 mL）／濃ＨＣｌ溶液（250 mL）の混合物をゆっくりと添加して反応停止させ、この間内部温度を＜35℃に維持した。添加完了後、攪拌を１時間継続させると、黄色沈殿が出現した。混合物を濾過し、固体をＴＨＦ（100 mL）で洗浄した。回収した濾液を分液漏斗に移し、水層のｐＨを、ＮａＨＣＯ3の添加により（およそ５ｇ）５及び６の間に調整した。ＴＨＦ層を分離し、飽和ＮａＣｌ溶液（２×100 mL）で洗浄した。混合した水層（ＮａＣｌ洗浄物及び反応停止水層を含む）をＥｔＯＡｃで抽出した（３×250 mL）。混合した有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、真空中でエバポレートし（浴温度は＜30℃）、茶色様固体を得た。この固体をＥｔ2Ｏ（600 mL）で倍散し、濾過した。回収した固体をＥｔ2Ｏ（２×100 mL）で洗浄し、７−アザインダゾール−３−カルボキシアルデヒドを黄色様固体として得た（86.6 g, 収率73％）。
【０１３０】
ステップ４：１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−ホルミル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノン
【化３４】
５Ｌフラスコ中、ＤＭＦ（0.5Ｌ）中の、７−アザインダゾール−３−カルボキシアルデヒド（86.6 g, 0.59 mol, 1当量）、ＮａＩ（8.8 g, 0.1当量）及びＫ2ＣＯ3（162.5 g, 2当量）の混合物を、８５℃に加熱した（加熱プロセスは約1.5時間）。２−クロロ−１−（４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン（175 g, 1当量）を少量ずつ反応混合物に添加した。全ての添加プロセスは約３０分を要した。その後、混合物を８５℃で３０分間加熱し、ＬＣＭＳで反応の完了を確認した。室温まで冷却後、混合物を２Ｌの氷を入れた４Ｌのフラスコに移した。反応フラスコを少量のアセトン（30 mL）でリンスし、４Ｌフラスコ中のＤＭＦ／氷混合物にまた移した。大量の茶色様固体が凝結した。氷が完全に溶けた後、混合物を濾過した。回収した固体を水（１Ｌ）で洗浄し、混合し、その後水で洗浄していくらかの残存ＤＭＦを除去した。回収した固体は、大量の水を含んでおり、これをＣＨ2Ｃｌ2（４Ｌ）に溶解させ、混合物を５Ｌ分液漏斗に移した。底部ＣＨ2Ｃｌ2層を分離し、丈夫の水層をＣＨ2Ｃｌ2で洗浄した（２×100 mL）。混合したＣＨ2Ｃｌ2層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、真空下でエバポレートし、１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−ホルミル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンを茶色様固体（236.4 g, 97％）として得て、これを精製せずに使用した。
【０１３１】
ステップ５：１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノン
【化３５】
１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−ホルミル−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノン（300 g, 723 mmol, 1当量）、グリオキサール三量体二水和物（60.6 g, 0.4当量）、及び酢酸アンモニウム（222.9 g, 4当量）を、磁気攪拌子及び窒素吸入口を装備した５Ｌ丸底フラスコ中の、ＴＨＦ（720 mL）及びＭｅＯＨ（720 mL）混合物に懸濁させた。酢酸（84 mL, 2当量）を添加し、混合物を４５℃のオイルバスで加熱した（加熱時に固体は溶解した）。１２時間後、ＬＣ／ＭＳ分析により、アルデヒド出発物質の完全な消費と、所望の生成物の形成が示された（ＬＣ／ＭＳm/z (M+H)+ 452.1）。ＭｅＯＨ／ＴＨＦを回転エバポレーションにより除去した。残存物をＣＨ2Ｃｌ2中の１０％ＭｅＯＨ（約1.5Ｌ）に溶解させ、混合物を、炭酸カリウム水溶液（約1.5Ｌ水中、約210 gの炭酸カリウム、ｐＨ範囲は８〜９）と共に勢いよく振とうさせた。層を分離させ、水層をＣＨ2Ｃｌ2中の１０％ＭｅＯＨで抽出した（２×100mL）。混合した有機層を濃縮し、茶色の油状固体を得た。粗生成物をＥｔＯＡｃ中の１０％ＭｅＯＨ（約１Ｌ）中に懸濁させた。無水Ｎａ2ＳＯ4（約60ｇ）及びシリカゲル（約100ｇ）を添加し、スラリーをヒートガンで穏やかに加熱し、粗生成物を溶解させた。スラリーを、シリカゲル（約100ｇ、ＥｔＯＡｃ中の１０％ＭｅＯＨで予備平衡化した）ガラスフィルターを装着させた２Ｌの漏斗に移し、生成物を、ＥｔＯＡｃ中の１０％ＭｅＯＨ（約６Ｌ）及びＥｔＯＡｃ中１％Ｅｔ3Ｎ、１０％ＭｅＯＨ（約１０Ｌ）で、シリカゲル栓を通して溶出した。（注意：シリカゲルが交錯した濾過の存在下で、生成物及び／又は生成物の沈殿の不完全な溶解）。溶媒を回転エバポレーションにより除去した。残存物をＭｅＣＮ（１×300 mL）で倍散し、乾燥させ（高真空による回転エバポレーション）、１−［４−（４−クロロ−５−エトキシ−２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−２−［３−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル］エタノンをオフホワイト固体として得た（190 g, 58％、ＬＣ／ＭＳ純度＞98％）。
【０１３２】
ステップ７：２−（３−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−１−（４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン 塩酸塩
【化３６】
磁気攪拌子を入れた２Ｌフラスコに、出発物質（5.1 g, 11.28 mmol）及びＥｔＯＡｃ（900 mL）を充填した。得られた懸濁物を加熱し、透明溶液を形成させ、穏やかに攪拌させながら室温まで冷却した。Ｅｔ2Ｏ中のＨＣｌ（2M, 6.2 mL, 12.42 mmol）を、得られた溶液が室温となるよう、滴下しながら５分間に渡って添加した。添加の後、得られた懸濁物を室温でさらに１時間攪拌した。固体を濾過により回収し、Ｅｔ2Ｏで洗浄し（150 mL×２）、真空下で乾燥させ、5.4ｇのオフホワイト粉末を得た。磁気攪拌子を入れた250 mLのフラスコに、上で得た粉末（5.4g）、アセトン）（100 mL）及び脱イオン水（16 mL）を充填した。得られた懸濁物を加熱し透明溶液を形成させ、冷却のために攪拌した。溶液が曇った（種晶が現れた）場合、アセトン（540 mL）をゆっくりと添加し、２０分かけて懸濁物とした。得られた懸濁物を５０℃に加熱し、２時間攪拌した。熱時濾過し、熱アセトン（50 ｍL×２）で洗浄し、真空下で乾燥させ、3.3g（６０％）の生成物をオフホワイト固体として得た。融点、164〜165℃。偏光顕微鏡の下で、結晶はプリズムのように見えた。
【実施例１９】
【０１３３】
【化３７】
ステップ１：１−｛２−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−オキソ−エチル｝−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−３−カルボニトリルの合成
【化３８】
2000mLのフラスコに、１−［４−（４−クロロ−３−メトキシ−フェニル）−ピペラジン−１−イル］−２−（３−ヨード−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−エタノン（US 20070010524として公開された、米国特許出願番号11/474,132を参照、40 g, 78.1 mmol）、ｄｐｐｆ（3.86 g, 6.96 mmol）、Ｚｎ（ＣＮ）2（9.6 g , 81.6 mmol）、ＤＭＦ（360 ml）及びＨ2Ｏ（20mL）を充填した。得られた懸濁物を、Ｎ2を用いて５分間脱気し、その後Ｐｄ2（ｄｂａ）3（9.6 g , 81.6 mmol）添加した。反応混合物をＮ2雰囲気下、９０℃で２時間加熱した（ＴＬＣ及びＬＣ−ＭＳで監視）。室温まで冷却後、ＥｔＯＡｃ（1500 mL）で希釈し、沈殿物を除去するために濾過し、Ｈ2Ｏ（1000 mL×２）、飽和ＥＤＴＡ.４Ｎａ（800 ml×２）、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒のエバポレーション後、エーテル（150 mL）を添加し、２時間攪拌した。得られた固体を濾過し、所望の生成物を30 g（93％）明黄色粉末として得た。還流ＣＨ3ＣＮ（160 mL）からの再結晶により、26g（80％）の明黄色結晶が得られた。融点、183〜185℃；Ｒｔ＝2.38分、；ＭＳ（ＥＳ）M+H 予測（expect） 411.1, 測定（found） 411.1。
【０１３４】
ステップ２：１−（４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル）−２−（３−（４,５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）エタノンの合成
【化３９】
250 mLフラスコに、１−（２−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−３−カルボニトリル（15.3 g, 37.2 mmol）、ＥｔＯＨ（40 mL、〜１M)を充填した。氷浴で攪拌させながら、ＡｃＯＨ（6.75 mL, 112 mmol）を添加し、エチレンジアミン（25 mL, 372 mmol）をその後に添加した。得られた混合物を、120℃（浴）で、Ｎ2雰囲気下（混合物の還流が観察された）、1.5時間加熱した。ＴＬＣ及びＬＣ−ＭＳは、出発物質の消失及びイミダゾリンの形成を示した。室温まで冷却後、混合物をＤＣＭ（700 mL）で希釈し、Ｈ2Ｏ（350 mL）で洗浄した。Ｈ2Ｏ層をＤＭＣ（150 mL）で逆抽出し、混合した有機層をブライン（350 mL）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた。減圧下で溶媒のエバポレーション後、残存物を熱ＥｔＯＡｃ（80 mL）に懸濁させた。室温まで冷却後、固体を濾過により回収し、ＥｔＯＡｃ（30 mL）で洗浄し、表題化合物を白色粉末として得て（16 g, 95%）、これを直接次のステップで使用した。融点133〜135℃；Ｒｔ＝1.369分、ＭＳ（ＥＳ）M+H 予測（expect） 454.2, 測定（found） 454.4。
【０１３５】
ステップ３：２−（３−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｂ］ピリジン−１−イル）−１−（４−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン
【化４０】
500 mLフラスコ中の上記イミダゾリン（12.3 g, 27.1 mmol）に、無水ＤＭＳＯ（108 mL, 〜0.25 M）を添加した。ＤＭＰ（17.2 g, 40.6 mmol）を攪拌しながら少しずつ添加した。獲られた混合物を４５℃でＮ2雰囲気下、２時間攪拌した（ＴＬＣ及びＬＣ−ＭＳで監視した）。室温まで冷却後、飽和Ｎａ2ＣＯ3（100 mL）（氷浴）で反応を停止させ、その後３Ｎ ＮａＯＨ（100 mL）（ｐＨ12〜13）及びＨ2Ｏ（300 mL）が続き、ＤＣＭで抽出した（600 mL + 300 mL）。混合した有機層を飽和ＮａＨＣＯ3（300 mL）、ブライン（300 mL）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ4、120ｇ）。有機層のエバポレーション後、残存黄色固体（〜11ｇ）を熱ＣＨ3ＣＮ（20 mL）に溶解させた。室温まで冷却後、獲られた固体を濾過により回収し、6.7 g (55%)の表題化合物を明黄褐色結晶として得た。融点149〜152℃、Ｒｔ＝1.309分、ＭＳ（ＥＳ）M+H 予測（expect） 452.2, 測定（found） 452.4。母液を濃縮し、さらに0.6ｇ（総単離収率６０％）を得た。
【実施例２０】
【０１３６】
以下の実施例は、本発明の化合物の予期しない優れた医薬特性を、既報の類似する化合物との比較で例示する（米国特許公報2007/0010524A1）。
【０１３７】
比較の目的で、本発明の化合物（即ち、化合物Ｂ、表２Ｂの1.016も参照のこと）及び米国特許公報2007/0010524A1に記載の２つの化合物（即ち、化合物Ａ及びＣ）の医薬特性を、表２Ａに示す。そこに示される通り、化合物Ｂは優れた医薬特性を有する。より具体的には、発明化合物Ｂは、経口吸収（経口バイオアベイラビリティ％により測定された）；Ｃmax、及びＡＵＣ値が、構造類似な化合物Ａ及びＣと比較して実質的に増加するため、より有利である。
【０１３８】
ラットＰＫプロトコル：
薬物動態研究において、各々の化合物を、４匹の未使用の雄のSprague-Dawleyラットに投薬した。２匹の動物に、単一用量の化合物（31.6％のプロピレングリコール／31.6％のＮ,Ｎ−ジメチルアセトアミド／36.8％のＥｔＯＨで処方される）を静脈内（i.v.）に１mg/kgで投与し、２匹の動物に、化合物（水中の１％ＨＰＭＣで処方される）を経口投与で（p.o.）50mg/kgで投与した。血液サンプルを、各投与後既定の時点で（２４時間まで）採取し、化合物の対応する血漿濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を用いて分析した。血漿濃度−時間曲線を作製し、対応する薬物動態パラメータを、非コンパートメント解析を用いて算出した。表に示したＣmax（最大血漿濃度）及びＡＵＣ（曲線下面積）値は、経口用量に従う血漿濃度−時間曲線に基づいて計算された。Ｆ（経口バイオアベイラビリティ）値は、経口用量に従う曲線下面積（１ｍｇ／ｋｇに標準化される）と、ｉｖ用量に従う曲線下面積との比である。
【表１】
※ＳＤラットに対し化合物を経口で50mg/kgの用量投与した。
【実施例２１】
【０１３９】
本サンプルは、本発明の注目の化合物に関連する生物活性の評価を例示する。
【０１４０】
材料と方法
Ａ．細胞
１．ＣＣＲ１発現細胞
ａ）ＴＨＰ−１細胞
ＴＨＰ−１細胞をＡＴＣＣ（ＴＩＢ−２０２）から入手し、ＲＰＭＩ−１６４０培地に、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、1.5 g/L 重炭酸ナトリウム、4.5 g/L グルコース、10 mM HEPES、1 mM ピルビン酸ナトリウム、0.05% ２−メルカプトエタノール及び10％ ＦＢＳを添加した培地中で懸濁液として培養した。細胞を5％ ＣＯ2／95％ 空気、３７℃で100％湿度の下で生育させ、１週間に２回、１：５で継代培養し（細胞を２×１０5〜２×１０6細胞／mLの密度で培養した）、１×１０6細胞／mLで回収した。ＴＨＰ−１細胞は、ＣＣＲ１を発現するとともに、ＣＣＲ１結合及び機能アッセイで使用できる。
【０１４１】
２．走化性（Chemotaxis）アッセイ
走化性アッセイを、走化性バッファー（ハンクス平衡塩溶液（ＨＢＳＳ）及び１％ＦＢＳ）を用いる、９６ウェル走化性チャンバー（Neuroprobe; Gaithersburg, MD）中の５μｍ孔ポリカーボネート、ポリビニルピロリドン被覆フィルターを用いて行った。ＣＣＲ１ケモカインリガンド（即ち、ＭＩＰ−１α、ＣＣＬ１５／Leukotactin；R&D Systems; Minneapolis, MN）を、ＣＣＲ１介在型遊走に対する、化合物介在性阻害を評価するために使用する。他のケモカイン（即ち、ＳＤＦ−１α；R&D Systems; Minneapolis,）を、特異的コントロールとして使用する。低部のチャンバーに、２９μｌのケモカイン（即ち、0.1 nM CCL15/Leukotactin）及び様々な量の化合物をロードし、最上部のチャンバーは、100,000 ＴＨＰ−１又は単球細胞を２０μｌ中に含有させた。チャンバーを、３７℃で１〜２時間インキュベートし、低部のチャンバー中の細胞数を、１ウェル当たり５つの高発現領域（high powered field）中で直接細胞計数か、又は核酸含量を測定する蛍光色素法であるCyQuant アッセイ (Molecular Probes)と顕微鏡観察、のいずれかで定量化した。
【０１４２】
Ｂ．ＣＣＲ１の阻害剤の同定
ケモカインの主要な機能の１つは、ケモカイン受容体発現細胞、例えば白血球細胞等の遊走を媒介できる能力である。注目の化合物がＣＣＲ１特異的結合及びシグナル伝達（少なくともカルシウム動員アッセイにより決定される）ばかりでなく、ＣＣＲ１介在型遊走を阻害することを確認するために、走化性アッセイを使用した。単球と類似するとともに、単球から新鮮に単離できる、ＴＨＰ−１骨髄単球性白血病細胞を、ＣＣＲ１ケモカインリガンド（即ち、ＭＩＰ−１α、CCL15/ロイコタクチン）による化学誘引の標的として使用した。細胞を、微小ウェル遊走チャンバーの最上部の区画に置き、一方ＭＩＰ−１α（又はその他のＣＣＲ１ケモカインリガンド）及び勾配濃度の注目の化合物を、低部のチャンバーにロードした。阻害剤の不存在では、細胞は、ケモカインアゴニストに応答してより低いチャンバーに遊走し、化合物がＣＣＲ１機能を阻害すると、大部分の細胞が、上部チャンバーに留まる。注目の化合物のＣＣＲ１に対する親和性と解明するため、及びＣＣＲ１介在型遊走能力を確認するため、この走化性アッセイにおいては、化合物濃度の範囲を、１×１０-10〜１×１０-4 Ｍとして阻害剤活性を力価測定した。本アッセイにおいて、化合物量は変化させたが、細胞数及びケモカインアゴニスト濃度は一定に保った。走化性チャンバーを３７℃で１〜２時間インキュベート後、低部のチャンバー中の応答細胞を、核酸含量を測定する蛍光色素法である、CyQuant アッセイ (Molecular Probes)で標識するとともに、Spectrafluor Plus (Tecan)で測定することにより、定量化した。GraphPad, Inc. (San Diego, Ca）製の、コンピュータプログラムPrismをＩＣ50値を計算するために使用した。ＩＣ50値は、ＣＣＲ１アゴニストに応答する細胞数の５０％まで阻害するのに必要な化合物濃度である。
【０１４３】
１．インビボ効率
ａ）破壊性関節炎のウサギモデル
ウサギＬＰＳ研究を、本質的にはPodolin, et al. J. Immunol. 169(11):6435-6444 (2002)に記載の通りに実施した。雌ニュージーランドウサギ（およそ２キログラム）に対し、両方の膝の関節内に、ＬＰＳ（10 ng）で処理をした。本発明の化合物の場合、例えば1.016（１％メトセル（methocel）で処方される）又はビヒクル（１％メトセル）を、5 ml/kgの用量で２回（関節内ＬＰＳ注入の２時間前と、関節内ＬＰＳ注入の４時間後）経口投与した。ＬＰＳ注入の１６時間後、膝を洗浄し、細胞の計数を行った。処置の有益な影響を、膝関節の炎症性髄液へ動員された炎症細胞の数の減少により決定した。注目の化合物での処置は、動員された炎症細胞の顕著な低減をもたらす。
【０１４４】
ｂ）コラーゲン誘導性関節炎のラットモデルにおける注目の化合物の評価
１７日間進行させたII型コラーゲン関節炎の研究は、関節炎誘導性臨床的くるぶし膨脹において、注目の化合物の有効性を評価するために行われる。ラットコラーゲン関節炎は、多発性関節炎の実験モデルであり、多数の抗関節炎剤の予備的臨床試験のために幅広く使用されている（Trentham, et al., J. Exp. Med. 146(3):857-868 (1977), Bendele, et al., Toxicologic Pathol. 27:134-142 (1999), Bendele, et al., Arthritis Rheum. 42:498-506 (1999)を参照）。このモデルの特質は、頑丈で、容易に測定可能な多発性関節炎炎症の確実な開始及び進行であり、パンヌス形成に関連する軟骨破壊、及び軽度から中程度の骨吸収及び骨膜骨増殖をマークする。
【０１４５】
雌のLewisラット（およそ0.2キログラム）をイソフルランで麻酔処置するとともに、２mg/mLのウシII型コラーゲンを含有するフロイント不完全アジュバントを、尾の付け根及び背中の２部分に、この１７日間の研究のうち０及び６日目に注入する。注目の化合物を皮下から、有効用量で、０〜１７日まで毎日投与する。くるぶし関節直径のキャリパー計測し、低減した関節膨脹を有効性との測定値として用いる。
【０１４６】
（以下の）表２Ｂに、本明細書に記載の代表的化合物の構造及び活性を示す。活性は上記の走化性アッセイとして、以下の通りに提供される：+, ＩＣ50 > 100 nM; ++, ＩＣ50 < 100 nM。
【表２】
【表３】
【表４】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
を有する化合物。
【請求項２】
式
【化２】
を有する化合物、又はその医薬的に許容可能な塩、水和物又はＮ−酸化物。
【請求項３】
水和物状態の請求項２の化合物。
【請求項４】
医薬的に許容可能な塩状態の請求項２の化合物。
【請求項５】
請求項１の化合物とともに、医薬的に許容可能な賦形剤又は担体を含んでなる、医薬組成物。
【請求項６】
請求項２の化合物とともに、医薬的に許容可能な賦形剤又は担体を含んでなる、医薬組成物。
【請求項７】
請求項１の化合物を調製する方法であって、
（ａ）式
【化３】
を有する化合物を、イミダゾール形成試薬と、請求項１の化合物を形成するのに十分な条件下で接触させるステップ、
を含んでなる方法。
【請求項８】
前記イミダゾール形成試薬が、グリオキサール又はグリオキサール及び同等物からなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記イミダゾール形成試薬がグリオキサールであるとともに、前記接触は酢酸アンモニウムの存在下で行われる、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
請求項１の化合物を調製する方法であって、
（ａ）式
【化４】
を有する化合物を、エチレンジアミンと接触させ、イミダゾリン物質を形成させるステップ、；及び
（ｂ）イミダゾリン物質を酸化し、請求項１の化合物を形成させるステップ、
を含んでなる方法。
【請求項１１】
前記酸化を、ＫＭｎＯ4、ＭｎＯ2、ＰｈＩ（ＯＡｃ）2、Ｓｗｅｒｎ試薬及びＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペルヨージナンからなる群から選択される試薬で実施する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
請求項２の化合物の治療有効量を、それを必要とする対象に投与するステップを含んでなる、ＣＣＲ１−介在型疾患又は症状の治療方法。
【請求項１３】
前記ＣＣＲ−１介在型疾患又は症状が炎症症状である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＣＣＲ−１介在型疾患又は症状が免疫調節性疾患である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＣＣＲ−１介在型疾患又は症状が、リウマチ様関節炎、多発性硬化症、移植拒絶、再狭窄、皮膚炎、湿疹、じんま疹、脈管炎、炎症性腸疾患、食物アレルギー、喘息、アルツハイマー病、パーキンソン病、乾癬、紅斑性狼瘡、変形性関節炎、脳卒中、再狭窄及び脳脊髄炎からなる群から選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記投与するステップが、経口、経直腸、経皮、経舌、経鼻又は局所的である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
前記化合物が、抗炎症剤、鎮痛剤、抗増殖剤、代謝阻害剤、白血球遊走阻害剤、又は免疫調節剤との組み合わせで投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
前記化合物が
【化５】
である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１】
式
【化１】
を有する化合物。
【請求項２】
式
【化２】
を有する化合物、又はその医薬的に許容可能な塩、水和物又はＮ−酸化物。
【請求項３】
水和物状態の請求項２の化合物。
【請求項４】
医薬的に許容可能な塩状態の請求項２の化合物。
【請求項５】
請求項１の化合物とともに、医薬的に許容可能な賦形剤又は担体を含んでなる、医薬組成物。
【請求項６】
請求項２の化合物とともに、医薬的に許容可能な賦形剤又は担体を含んでなる、医薬組成物。
【請求項７】
請求項１の化合物を調製する方法であって、
（ａ）式
【化３】
を有する化合物を、イミダゾール形成試薬と、請求項１の化合物を形成するのに十分な条件下で接触させるステップ、
を含んでなる方法。
【請求項８】
前記イミダゾール形成試薬が、グリオキサール又はグリオキサール及び同等物からなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記イミダゾール形成試薬がグリオキサールであるとともに、前記接触は酢酸アンモニウムの存在下で行われる、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
請求項１の化合物を調製する方法であって、
（ａ）式
【化４】
を有する化合物を、エチレンジアミンと接触させ、イミダゾリン物質を形成させるステップ、；及び
（ｂ）イミダゾリン物質を酸化し、請求項１の化合物を形成させるステップ、
を含んでなる方法。
【請求項１１】
前記酸化を、ＫＭｎＯ4、ＭｎＯ2、ＰｈＩ（ＯＡｃ）2、Ｓｗｅｒｎ試薬及びＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペルヨージナンからなる群から選択される試薬で実施する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
請求項２の化合物の治療有効量を、それを必要とする対象に投与するステップを含んでなる、ＣＣＲ１−介在型疾患又は症状の治療方法。
【請求項１３】
前記ＣＣＲ−１介在型疾患又は症状が炎症症状である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＣＣＲ−１介在型疾患又は症状が免疫調節性疾患である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＣＣＲ−１介在型疾患又は症状が、リウマチ様関節炎、多発性硬化症、移植拒絶、再狭窄、皮膚炎、湿疹、じんま疹、脈管炎、炎症性腸疾患、食物アレルギー、喘息、アルツハイマー病、パーキンソン病、乾癬、紅斑性狼瘡、変形性関節炎、脳卒中、再狭窄及び脳脊髄炎からなる群から選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記投与するステップが、経口、経直腸、経皮、経舌、経鼻又は局所的である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
前記化合物が、抗炎症剤、鎮痛剤、抗増殖剤、代謝阻害剤、白血球遊走阻害剤、又は免疫調節剤との組み合わせで投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
前記化合物が
【化５】
である、請求項１２に記載の方法。
【公表番号】特表２０１０−５２８０３８（Ｐ２０１０−５２８０３８Ａ）
【公表日】平成２２年８月１９日（２０１０．８．１９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５０９５２６（Ｐ２０１０−５０９５２６）
【出願日】平成２０年５月２１日（２００８．５．２１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０６４３７４
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１４７８１５
【国際公開日】平成２０年１２月４日（２００８．１２．４）
【出願人】（５０７４１６２１８）ケモセントリックス，インコーポレイティド (6)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年８月１９日（２０１０．８．１９）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年５月２１日（２００８．５．２１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０６４３７４
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１４７８１５
【国際公開日】平成２０年１２月４日（２００８．１２．４）
【出願人】（５０７４１６２１８）ケモセントリックス，インコーポレイティド (6)
【Ｆターム（参考）】
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