３，５−ビスアリールピラゾール化合物及びこれを有効成分として含有するエリスロポエチン産生促進剤
【課題】低分子性のＥＰＯ産生促進作用を有する化合物の提供。
【解決手段】次の一般式（１）：
［式中、Ａ環は、ベンゼン環等を示し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、水素原子等を示す］で表されるピラゾール化合物、若しくはその塩。
【解決手段】次の一般式（１）：
［式中、Ａ環は、ベンゼン環等を示し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、水素原子等を示す］で表されるピラゾール化合物、若しくはその塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なエリスロポエチン産生促進剤に関する。さらに詳細にはエリスロポエチン産生低下に起因する疾患、例えば貧血の予防及び／又は治療剤に関する。また本発明は、エリスロポエチン産生促進作用を有する新規化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
エリスロポエチン（Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ：ＥＰＯ）は、赤芽球前駆細胞から成熟赤血球への成熟と分化に関与する糖タンパク質ホルモンであり、天然に存在する１６５アミノ酸からなる単量体ポリペプチドである（非特許文献１）。
【０００３】
ヒトのＥＰＯは、赤血球の増殖・分化において必須であり、赤血球産生の低下を特徴とする血液疾患の治療に有用である。臨床的には、ＥＰＯは、慢性腎不全（ｃｈｒｏｎｉｃ ｒｅｎａｌ ｆａｉｌｕｒｅ：ＣＲＦ）患者における貧血、自己貯血及び未熟児貧血の治療（非特許文献２〜４）、ＡＩＤＳ及び化学療法を受けている癌患者において使用されている（非特許文献５）。また、ＥＰＯは慢性貧血における有効性も認められている。
【０００４】
ＥＰＯは、成人では主に腎臓で産生されるが、それ以外では、中枢神経系のアストロサイト及びニューロンにおいても産生され、ＥＰＯ及びＥＰＯ受容体は脳−末梢境界の毛細血管において発現している。さらに、ＥＰＯを全身投与すると、ＥＰＯは血液脳関門を通過して、脳及び脊髄虚血、機械的外傷、てんかん、興奮毒及び神経炎症に応答したニューロン細胞の喪失を減少させることが報告されている（非特許文献６〜１０）。
【０００５】
ＥＰＯのようなタンパク質を用いた療法においては、プロテアーゼによる分解を受けやすいことによる血漿半減期の短さ（非特許文献１１、１２）や、循環における化合物の治療有効濃度を維持するために、静脈内注射を頻回行わねばならないなどの問題がある。また、静脈内注射に代わる投与経路として皮下注射があるが、投与部位からの吸収が遅いため、徐放効果は有るものの、血漿中濃度が静脈内注射に比べて有意に低くなる。そこで、同等の治療効果を挙げるためには静脈内注射の場合と同様の回数を注射しなければならず、患者への負担となる。また、ヒト血清ＥＰＯは糖タンパク質であって、ＥＰＯ表面に結合した糖鎖の構造は複雑であり、そのグリコシル化は広範かつ多様であることから、サイズの不均一性を示し、組換えヒトＥＰＯではヒト血清ＥＰＯを再現よく作製することができない、などの問題もある。
【０００６】
従って、上記に示したような貧血を含むＥＰＯ産生低下に起因する疾患の治療において生体利用性の低いＥＰＯでなく、内因性ＥＰＯを増加させる方法及び化合物が当該技術分野において必要とされている。
【０００７】
一方、ＥＰＯの発現量は、転写因子である低酸素誘導性因子（ｈｙｐｏｘｉａ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ：ＨＩＦ）を介して酸素濃度により制御されていることが知られている（非特許文献１３）。すなわち、通常大気下では、２−オキソグルタル酸ジオキシゲナーゼ酵素によりプロリン残基がヒドロキシル化されたＨＩＦサブユニット（ＨＩＦ−１α）がユビキチン−プロテアソーム系により分解され、ＥＰＯの産生は促進されないが、低酸素下では、２−オキソグルタル酸ジオキシゲナーゼ酵素によるＨＩＦ−１αのプロリン残基のヒドロキシル化が抑制され、その結果、安定化されたＨＩＦ−１αは細胞質から核内に移行し、ＨＩＦ−１βと二量体を形成してＥＰＯ遺伝子のｈｙｐｏｘｉａ ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ ｅｌｅｍｅｎｔ（ＨＲＥ）配列に結合して転写を促進し、ＥＰＯの産生を促進する。
【０００８】
このようなＥＰＯ産生機構を利用した２−オキソグルタル酸ジオキシゲナーゼ酵素などのＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼに対する酵素阻害剤が、ＥＰＯ産生促進剤として報告されている（特許文献１〜４）。
【０００９】
しかしながら、ＨＩＦにより産生が制御されている遺伝子には、ＥＰＯをコードする遺伝子だけではなく、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）をコードする遺伝子なども挙げられる。ＶＥＧＦは血管新生促進作用を有しており、この機能を介して悪性腫瘍を悪化させる原因となり得ることも報告されている（非特許文献１４、１５）。また、貧血は癌による化学治療によっても引き起こされ、貧血治療薬はそのような化学療法を受けている癌患者に投与されることも考えられることから（非特許文献６）、癌を悪化させるＶＥＧＦなどの産生も促進する可能性のあるＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ酵素活性阻害作用を有する化合物には、そのような危険性も内包される。
【００１０】
ＥＰＯの産生は、ＥＰＯの５’側に位置するプロモーター及び３’側に位置するエンハンサーにより制御されており、ＨＩＦはエンハンサー中のＨＲＥ配列に結合し、ＥＰＯの発現を促進すると考えられている。加えて、ＧＡＴＡ−２、ＮＦκＢなどもＥＰＯ産生を制御するとされており（非特許文献１６、１７）、ＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ酵素活性阻害以外の作用機構でもＥＰＯ産生促進は達成できると考えられる。このようなことからＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ酵素活性阻害に依存しないＥＰＯ産生促進作用を有する化合物は、貧血治療において有用であると考えられる。
【００１１】
また、前述のように、ＥＰＯは赤芽球前駆細胞の増殖及び成熟を促進するが、ＥＰＯの産生を介さずに赤芽球前駆細胞の成熟・分化を促進する作用を有する化合物も貧血治療薬として有用である。ＥＰＯの有する血球増殖促進作用を増強する活性を有する化合物やＥＰＯのシグナル伝達の重要な制御機構のひとつである脱リン酸化を触媒する造血細胞ホスファターゼに対して阻害作用を有する化合物が報告されているが（特許文献５〜７）、その活性は必ずしも十分とは言えない。また、ＥＰＯ受容体に作用する合成ペプチド、ヘマタイドが報告されているが（非特許文献１８）、ＥＰＯと同等の活性発現には高用量の投与が必要であり、経口投与に適さないという問題点がある。
【００１２】
従って、ＥＰＯ産生促進作用を持つ経口投与可能な低分子性の貧血治療剤が、今後の貧血治療において有用であると考えられる。
【００１３】
一方、本発明に関連する３，５−ビスアリールピラゾール骨格を有する化合物には、種々の薬理作用が報告されている。例えば、糖尿病治療（特許文献８）、尿酸排泄促進（特許文献９）、アルツハイマー症治療（特許文献１０、１１）、癌治療（特許文献１２、１３）、Ｃ型肝炎ウイルス感染症治療（特許文献１４、１５）、抗真菌剤（特許文献１６）、除草剤（特許文献１７）、自己免疫性疾患治療（特許文献１８）、アレルギー性疾患治療（特許文献１９）等に使用できることが報告されている。
【００１４】
また、アリールピラゾール骨格を有する化合物が貧血治療剤として有用であることを記載している文献がある（特許文献２０〜２２）。しかしながら、これらの文献に記載されている化合物は、アリール基上にアミド基又はアミノアルキル基の置換基を持つことを特徴としている点で本発明化合物と異なる。さらに、これら公知文献に記載の化合物は、エリスロポエチンの感受性を増強させることでヘモグロビンの増加をもたらすことが記載されているが、本発明化合物のようなエリスロポエチンの産生自体を促進する作用に関しての記載や示唆はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】特開２００６−１３７７６３号公報
【特許文献２】ＷＯ２００３／５３９９７号パンフレット
【特許文献３】ＷＯ２００５／１１６９６号パンフレット
【特許文献４】ＷＯ２００７／３８５７１号パンフレット
【特許文献５】特表２０００−５３６３６５号公報
【特許文献６】特開平１１−１７１７７４号公報
【特許文献７】特開２００２−２７５１５９号公報
【特許文献８】ＷＯ２００７／０６１９２３号パンフレット
【特許文献９】ＷＯ２００７／０４３４００号パンフレット
【特許文献１０】ＷＯ２００７／０３４２７９号パンフレット
【特許文献１１】特表２００２−５２２４２２号公報
【特許文献１２】ＷＯ２００６／１０９６８０号パンフレット
【特許文献１３】ＥＰ０１３９８０２９号公報
【特許文献１４】ＷＯ２００４／０９９１６４号パンフレット
【特許文献１５】特表２００６−５０１３１２号公報
【特許文献１６】ＷＯ２００４／０３３４３２号パンフレット
【特許文献１７】特開平０４−１２４１７８号公報
【特許文献１８】ＷＯ１９９８／０５６７８５号パンフレット
【特許文献１９】ＷＯ２００４／０８０９７２号パンフレット
【特許文献２０】ＷＯ２０００／０４６２０７号パンフレット
【特許文献２１】ＷＯ２０００／０４６２０６号パンフレット
【特許文献２２】特表２００２−５３６３４８号公報
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】Lin F-K et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 7580-7584 (1985)
【非特許文献２】Eschbach JW, et al., N. Engl. J. Med, 316: 73-78(1987)
【非特許文献３】Eschbach JW, et al., Ann. Intern. Med., 111: 992 (1989)
【非特許文献４】Lim VS, et al., Ann. Intern. Med., 110: 108-114 (1989)
【非特許文献５】Danna RP, et al., Erythropoietin in Clinical Applications-An International Perspective, New York: Marcel Dekker; p301-324 (1990)
【非特許文献６】Sakanaka M, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 95, 4635-4640 (1998)
【非特許文献７】Celik M, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 99, 2258-2263 (2002)
【非特許文献８】Brines ML, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 97, 10526-10531 (2000)
【非特許文献９】Calapai G, et al., Eur. J. Pharmacol., 401, 349-356 (2000)
【非特許文献１０】Siren A-L, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 98, 4044-4049 (2001)
【非特許文献１１】Spivack JL and Hogans BB, Blood, 73: 90 (1989)
【非特許文献１２】McMahon FG, et al., Blood, 76: 1718 (1990)
【非特許文献１３】Jelkman W, Internal Medicine 43, 649-659 (2004)
【非特許文献１４】Maxwell PH, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 94, 15, 8104-8109 (1997)
【非特許文献１５】Fang J, et al., Cancer Res., 61, 15, 5731-5735 (2001)
【非特許文献１６】Imagawa S, et al., Blood 89, 1430-1439 (1997)
【非特許文献１７】La Ferla K, et al., FASEB J, 16, 1811-1813 (2002)
【非特許文献１８】Stead RB, et al., Blood 108, 1830-1834 (2006)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
本発明の目的は、低分子性のＥＰＯ産生促進作用を有する化合物を提供することにある。さらに詳細には、貧血の予防及び／又は治療に有用な医薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
上記実情に鑑み、本発明者らは、ＥＰＯ産生促進作用を持つ化合物を鋭意探索した結果、下記一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物が、ヒト肝臓癌由来のＨｅｐＧ２細胞を用いた試験においてＥＰＯ産生を促進することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１９】
すなわち本発明は、次の一般式（１）：
【００２０】
【化１】
【００２１】
［式中、
Ａ環は、ベンゼン環、ナフタレン環、ピリジン環又はキノリン環を示し、
Ｒ１は、水素原子又はＣ１−６アルキル基を示し、
Ｒ２は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基、Ｃ１−６アルキルアミノ基又はジＣ１−６アルキルアミノ基を示し、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、同一又は異なってもよく、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン原子、水酸基又はカルボキシル基を示す］
で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＥＰＯ産生促進剤に関する。
【００２２】
より詳細には、本発明は次の化合物群：
４−［１−メチル−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸（化１）、
４−［１−メチル−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−５−イル］安息香酸（化２）、
５−メチル−２−（１−メチル−５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール（化３−２）、
５−メチル−２−（１−メチル−３−フェニルピラゾール−５−イル）フェノール（化３−３）、
４−ジメチルアミノ−３,５−ジフェニルピラゾール（化４−２）、
４−メチルアミノ−３,５−ジフェニル−１−メチルピラゾール（化５−２）、
４−アミノ−３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化６）、
４−アミノ−３,５−ビス（4−フルオロフェニル）ピラゾール（化７）、
４−アミノ−３，５−ビス（４−メチルフェニル）ピラゾール（化８）、
４−アミノ−３，５−ビス（４−メトキシフェニル）ピラゾール（化９）、
３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール（化１０）、
４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール（化１１）、
３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール（化１２）、
４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール（化１３）、
５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール（化１４）、
４−アミノ−５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール（化１５）、
３−フェニル−５−（キノリン−４−イル）ピラゾール（化１６）、
４−アミノ−３−フェニル−５−（キノリン−４−イル）ピラゾール（化１７）、
４−アミノ−３−（２−メトキシフェニル）−５−フェニルピラゾール（化１８）、
３−（２−エトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化１９）、
３−（２−メトキシ−５−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化２０）、及び
３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニル−４−プロピルピラゾール（化２１）
からなる群から選択される前記ＥＰＯ産生促進剤を提供するものである。
【００２３】
また、本発明は、前記一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＥＰＯ産生促進剤に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤を提供するものである。
【００２４】
また、本発明は、ＥＰＯ産生促進用の製剤を製造するための、前記一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の使用（ｕｓｅ）に関する。より詳細には、本発明は、ＥＰＯ産生促進用の製剤を製造するための、前記した化合物群から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の使用（ｕｓｅ）を提供するものである。
【００２５】
さらに、本発明は、前記一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を、ＥＰＯの産生促進が必要とされる患者に投与することを特徴とする、ＥＰＯ産生の促進方法（ｍｅｔｈｏｄ）に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を、ＥＰＯの産生促進が必要とされる患者に投与することを特徴とする、ＥＰＯ産生の促進方法（ｍｅｔｈｏｄ）を提供するものである。
【００２６】
また、本発明は、前記一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を細胞に接触させて、当該細胞におけるＥＰＯの産生を促進させる方法に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を細胞に接触させて、該細胞におけるＥＰＯの産生を促進させる方法を提供するものである。ここで、「接触」とは、本明細書中で使用するとき、インビトロ又はインビボにおいて、本発明の２−アルキルアミノキノリン化合物等が、細胞による前記化合物等の取り込み作用又は細胞表面での相互作用などにより、増殖、分化、生理活性物質の分泌などの細胞の機能を調節するように前記化合物等を細胞に添加することを意味する。
【００２７】
別の観点からは、本発明は、次の化合物群：
４−［１−メチル−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸（化１）、
４−［１−メチル−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−５−イル］安息香酸（化２）、
５−メチル−２−（１−メチル−５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール（化３−２）、
５−メチル−２−（１−メチル−３−フェニルピラゾール−５−イル）フェノール（化３−３）、
４−ジメチルアミノ−３,５−ジフェニルピラゾール（化４−２）、
４−メチルアミノ−３,５−ジフェニル−１−メチルピラゾール（化５−２）、
４−アミノ−３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化６）、
４−アミノ−３,５−ビス（4−フルオロフェニル）ピラゾール（化７）、
４−アミノ−３，５−ビス（４−メチルフェニル）ピラゾール（化８）、
４−アミノ−３，５−ビス（４−メトキシフェニル）ピラゾール（化９）、
３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール（化１０）、
４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール（化１１）、
３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール（化１２）、
４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール（化１３）、
５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール（化１４）、
４−アミノ−５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール（化１５）、
３−フェニル−５−（キノリン−４−イル）ピラゾール（化１６）、
４−アミノ−３−フェニル−５‐（キノリン−４−イル）ピラゾール（化１７）、
４−アミノ−３−（２−メトキシフェニル）−５−フェニルピラゾール（化１８）、
３−（２−エトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化１９）、
３−（２−メトキシ−５−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化２０）、及び
３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニル−４−プロピルピラゾール（化２１）
からなる群から選択される、３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を提供するものである。
【００２８】
さらに、本発明は、前記一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物、及び医薬として許容される担体とを含有してなるＥＰＯの産生を促進させるための医薬組成物に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の１種又は２種以上の化合物、及び医薬として許容される担体とを含有してなるＥＰＯの産生を促進させるための医薬組成物を提供するものである。
【発明の効果】
【００２９】
本発明は、優れたＥＰＯ産生促進作用を有している、３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を見出したものであり、ＥＰＯ産生を促進することにより症状が改善される疾患（例えば、慢性腎不全患者における貧血、自己貯血及び未熟児貧血、ＡＩＤＳ及び化学療法を受けている癌患者の貧血、慢性貧血、鉄欠乏性貧血、再生不良性貧血、溶血性貧血、巨赤芽球性貧血などの貧血）の予防及び／又は治療のための医薬組成物として有用である。また、本発明は、ＥＰＯ産生促進作用を有する経口投与可能な低分子性の化合物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤を提供するものである。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００３１】
本発明における用語の定義は以下のとおりである。
【００３２】
本明細書中で使用するとき、「ハロゲン原子」とは、ハロゲノ基を意味し、具体的にはフッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子等である。
【００３３】
本明細書中で使用するとき、「アルキル基」は、直鎖又は分枝状であってもよい。従って、「Ｃ１−６アルキル基」としては、具体的にはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、sec−ブチル基、tert−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、４−メチルブチル基、１−エチルプロピル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、３−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、１−メチルペンチル基、３，３−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、２，３−ジメチルブチル基、１−エチルブチル基、２−エチルブチル基等の炭素数１〜６個の直鎖又は分枝状のアルキル基が挙げられる。
【００３４】
本明細書中で使用するとき、「アルコキシ基」は、直鎖又は分枝状であってもよい。従って、「Ｃ１−６アルコキシ基」としては、具体的にはメチルオキシ基、エチルオキシ基、ｎ−プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ｎ−ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、sec−ブチルオキシ基、tert−ブチルオキシ基、ｎ−ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、ネオペンチルオキシ基、４−メチルブチルオキシ基、１−エチルプロピルオキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基、イソヘキシルオキシ基、３−メチルペンチルオキシ基、２−メチルペンチルオキシ基、１−メチルペンチルオキシ基、３，３−ジメチルブチルオキシ基、２，２−ジメチルブチルオキシ基、１，１−ジメチルブチルオキシ基、１，２−ジメチルブチルオキシ基、１，３−ジメチルブチルオキシ基、２，３−ジメチルブチルオキシ基、１−エチルブチルオキシ基、２−エチルブチルオキシ基等の炭素数１〜６の直鎖又は分枝状のアルコキシ基が挙げられる。
【００３５】
本明細書中で使用するとき、「アルキルアミノ基」とは、前記したアルキル基が窒素原子に１つ結合した基を意味する。従って、「Ｃ１―６アルキルアミノ基」には、メチルアミノ基、エチルアミノ基、ｎ−プロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、ｎ−ブチルアミノ基、sec−ブチルアミノ基、tert−ブチルアミノ基、ｎ−ペンチルアミノ基、イソペンチルアミノ基、ネオペンチルアミノ基、４−メチルブチルアミノ基、１−エチルプロピルアミノ基、ｎ−ヘキシルアミノ基、イソヘキシルアミノ基、３−メチルペンチルアミノ基、２−メチルペンチルアミノ基、１−メチルペンチルアミノ基、３，３−ジメチルブチルアミノ基、２，２−ジメチルブチルアミノ基、１，１−ジメチルブチルアミノ基、１，２−ジメチルブチルアミノ基、１，３−ジメチルブチルアミノ基、２，３−ジメチルブチルアミノ基、１−エチルブチルアミノ基、２−エチルブチルアミノ基等が挙げられる。
【００３６】
本明細書中で使用するとき、「ジアルキルアミノ基」とは、同一であるか又は異なっていてもよい、前述した「アルキル基」の２つが窒素原子に結合した基を意味する。従って、「ジＣ１―６アルキルアミノ基」としては、具体的には、ジメチルアミノ基、メチルエチルアミノ基、ジエチルアミノ基、メチル−ｎ−プロピルアミノ基、エチル−ｎ−プロピルアミノ基、ジ−ｎ−プロピルアミノ基、メチルイソプロピルアミノ基、エチルイソプロピルアミノ基、ジイソプロピルアミノ基、メチル−ｎ−ブチルアミノ基、エチル−ｎ−ブチルアミノ基、ｎ−プロピル−ｎ−ブチルアミノ基、ジ−ｎ−ブチルアミノ基、ジ−sec−ブチルアミノ基、ジ−tert−ブチルアミノ基、ジペンチルアミノ基、ジヘキシルアミノ基等である。
【００３７】
その他、ここに定義のない基については、通常の定義に従う。
【００３８】
一般式（１）中、Ａ環としては、下記で表されるものが好ましい。
【００３９】
【化２】
【００４０】
［式中、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は前記と同じものを示す］
【００４１】
一般式（１）中、Ｒ１における「Ｃ１−６アルキル基」としては、「Ｃ１−４アルキル基」が好ましく、メチル基がより好ましい。
【００４２】
一般式（１）中、Ｒ２における「Ｃ１−６アルキル基」としては、「Ｃ１−４アルキル基」が好ましく、ｎ−プロピル基がより好ましい。
【００４３】
一般式（１）中、Ｒ２における「Ｃ１−６アルキルアミノ基」としては、「Ｃ１−４アルキルアミノ基」が好ましく、メチルアミノ基がより好ましい。
【００４４】
一般式（１）中、Ｒ２における「ジＣ１−６アルキルアミノ基」としては、「ジＣ１−４アルキルアミノ基」が好ましく、ジメチルアミノ基がより好ましい。
【００４５】
一般式（１）中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８における「Ｃ１−６アルキル基」としては、「Ｃ１−４アルキル基」が好ましく、メチル基がより好ましい。
【００４６】
一般式（１）中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８における「Ｃ１−６アルコキシ基」としては、「Ｃ１−４アルコキシ基」が好ましく、メトキシ基、エトキシ基がより好ましい。
【００４７】
一般式（１）中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８における「ハロゲン原子」としては、フッ素原子が好ましい。
【００４８】
本発明の一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物の具体例として、下記化合物を挙げることができる。
【００４９】
【表１】
【００５０】
【表２】
【００５１】
【表３】
【００５２】
本発明の一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物は、本発明の３，５−ビスアリールピラゾール化合物のみならず、その医薬として許容される塩、それらの各種の水和物や溶媒和物、及び結晶多形を有する物質、及びこれらの物質のプロドラッグとなる物質を包含している。
【００５３】
本発明の一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物の医薬として許容される塩としては、具体的には、化合物を塩基性化合物として扱う場合は、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等）や有機酸（例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸等）との酸付加塩等が挙げられ、化合物を酸性化合物として扱う場合には、無機塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、バリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等）や有機塩（例えば、ピリジニウム塩、ピコリニウム塩、トリエチルアンモニウム塩等）が挙げられる。
【００５４】
本発明の一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物やその医薬として許容される塩の溶媒和物としては、水和物や各種の溶媒和物（例えば、エタノールなどのアルコールとの溶媒和物）が挙げられる。
【００５５】
本発明の一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物は、公知の方法により製造することができる。例えば、以下に示す方法、あるいはこれに準じた方法により製造することができるが、これに限定されるものではない。また、必要に応じて官能基を保護して各反応を行ってもよい。保護、脱保護条件としては一般に用いられる方法（Protective Groups in Organic Synthesis Third Edition, John Wiley & Sons, Inc.）を参考にして行うことができる。
【００５６】
［１］Ｒ２が水素原子又はＣ１−６アルキル基である化合物の製造
【００５７】
【化３】
【００５８】
〔式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、前記と同じものを示し、Ｒ２は、水素原子又はＣ１−６アルキル基を示し、Ｒ９は、低級アルキル基を示し、Ｘ１はハロゲン原子、スルホニルオキシ基等の脱離基を示す〕
【００５９】
［工程１］アセトフェノン誘導体（Ｉ）とエステル化合物（ＩＩ）を塩基の存在下、溶媒中でクライゼン反応を行うことにより、１，３−ジケト化合物（ＩＩＩ）を製造することができる。ここで用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、水素化カリウム等の水素化アルカリ金属類、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムメトキシド、カリウムエトキシド、カリウムtert−ブトキシド等のアルカリ金属アルコラート類、ｎ−ブチルリチウム、sec−ブチルリチウム、tert−ブチルリチウム等の有機アルカリ金属類、リチウムジイソプロピルプロピルアミド等のアルカリ金属アミド類が挙げられる。溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジグリム等のエーテル系溶媒が挙げられる。反応条件は、０〜１８０℃、好ましくは８０〜１４０℃で、３０分〜２４時間、好ましくは１時間〜１２時間反応を行えばよい。本反応は、必要に応じて１２−クラウン−４、１５−クラウン−５、１８−クラウン−６、ジベンゾ−１８−クラウン−６等のクラウンエーテル類、テトラブチルアンモニウムクロリド、テトラブチルアンモニウムブロミド、テトラブチルアンモニウムヨーダイド等の４級アンモニウム塩等の触媒を用いることもできる。
【００６０】
［工程２］１，３−ジケト化合物（ＩＩＩ）とヒドラジンとを溶媒中で反応を行うことにより、Ｒ１が水素原子であるピラゾール誘導体（１ａ）を製造することができる。ここで用いる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、２−プロパノール等のアルコール類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、アセトニトリル、酢酸エチル等が挙げられ、アルコール類を溶媒として用いることが好ましい。反応条件は、０〜１８０℃、好ましくは８０〜１４０℃で、３０分〜２４時間、好ましくは１時間〜１２時間反応を行えばよい。
【００６１】
［工程３］ピラゾール誘導体（１ａ）と化合物（ＩＶ）とを、塩基の存在下、溶媒中で反応し、Ｒ１がＣ１−６アルキル基であるピラゾール誘導体（１ｂ）を製造することができる。ここで用いる塩基としては例えばピリジン、ピコリン、トリエチルアミン等の有機アミン類、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム等の水素化アルカリ金属類、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の水酸化アルカリ金属類、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等の炭酸アルカリ金属類、ナトリウムメトキシド、カリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムエトキシド、ナトリウムtert−ブトキシド、カリウムtert−ブトキシド等のアルカリ金属アルコラート類、リチウムジイソプロピルアミド、ナトリウムジイソプロピルアミド、カリウムジイソプロピルアミド、リチウムヘキサメチルジシラジド、ナトリウムヘキサメチルジシラジド、カリウムヘキサメチルジシラジド等のアルカリ金属アミド類、ｎ−ブチルリチウム、sec−ブチルリチウム、tert−ブチルリチウム等のアルキル金属類を使用することができる。溶媒としては、例えば、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、アセトニトリル、酢酸エチル等が挙げられる。反応条件は、−２０〜１２０℃、好ましくは０〜８０℃で、３０分〜２４時間、好ましくは１時間〜１２時間反応を行えばよい。
【００６２】
［２］Ｒ２がアミノ基、Ｃ１−６アルキルアミノ基又はジＣ１−６アルキルアミノ基である化合物の製造
【００６３】
【化４】
【００６４】
〔式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、前記と同じものを示し、Ｒ１０はＣ１−６アルキル基を示し、Ｘ２はハロゲン原子、スルホニルオキシ基等の脱離基を示す〕
【００６５】
［工程４］１，３−ジケト化合物（Ｖ）を酸触媒の存在下、溶媒中で亜硝酸塩と反応することにより、化合物（ＶＩ）を製造することができる。ここで用いる酸触媒としては、酢酸等の有機酸が挙げられる。溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、２−プロパノール等のアルコール類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、アセトニトリル、酢酸エチル、水等を単独又は組み合わせて使用することができる。また、酢酸等の有機酸酸触媒自体を溶媒として用いてもよい。反応条件は、−４０〜１２０℃、好ましくは−２０〜８０℃で、３０分〜２４時間、好ましくは１時間〜１２時間反応を行えばよい。
【００６６】
［工程５］化合物（ＶＩ）とヒドラジンとを溶媒中で反応を行うことにより、Ｒ２がアミノ基であるピラゾール誘導体（１ｃ）を製造することができる。本工程は工程２で記載したものと同様である。
【００６７】
［工程６］ピラゾール誘導体（１ｃ）と化合物（ＶＩＩ）とを、塩基の存在下、溶媒中で反応し、Ｒ２がＣ１−６アルキルアミノ基であるピラゾール誘導体（１ｄ）及びＲ２がジＣ１−６アルキルアミノ基であるピラゾール誘導体（１ｅ）とを製造することができる。ここで用いる塩基としては弱塩基が好ましく、例えばピリジン、ピコリン、トリエチレンアミン等の有機アミン類、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等の炭酸アルカリ金属類、炭酸カルシウム等の炭酸アルカリ土類金属類、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム等の炭酸水素アルカリ金属類を使用することができる。溶媒、反応条件は、工程３で記載したものと同じである。
【００６８】
前記の各反応で得られた中間体及び目的物は、有機合成化学で常用されている精製法、例えば、ろ過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶、各種クロマトグラフィー等に付して必要に応じて単離、精製することができる。また、中間体においては、特に精製することなく次反応に供することもできる。
【００６９】
さらに、各種の異性体は異性体間の物理化学的性質の差を利用した常法を適用して単離できる。例えば、ラセミ混合物は、例えば、酒石酸等の一般的な光学活性酸とのジアステレオマー塩に導き光学分割する方法、又は、光学活性カラムクロマトグラフィーを用いた方法等の一般的ラセミ分割法により、光学的に純粋な異性体に導くことができる。また、ジアステレオマー混合物は、例えば、分別結晶化又は各種クロマトグラフィー等により分割できる。また、光学活性な化合物は適当な光学活性な原料を用いることにより製造することもできる。
【００７０】
本発明のＥＰＯ産生促進剤、又は貧血治療剤は、一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、その塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分として含有するものであって、医薬組成物として使用することができる。その場合、本発明の化合物を単独で用いてもよいが、通常は医薬として許容される担体、及び／又は希釈剤を配合して使用される。
【００７１】
投与経路は、特に限定されないが、治療目的に応じて適宜選択することができる。例えば、経口剤、注射剤、坐剤、吸入剤等のいずれでもよい。これらの投与形態に適した医薬組成物は、公知の製剤方法を利用することによって製造できる。
【００７２】
経口用固形製剤を調製する場合は、一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物に医薬として許容される賦形剤、更に必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を加えた後、常法を利用して、錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。添加剤は、当該技術分野で一般的に使用されているものでよい。例えば、賦形剤としては、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸等が挙げられる。結合剤としては、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。崩壊剤としては、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等が挙げられる。滑沢剤としては、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール等が挙げられる。矯味剤としては、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。
【００７３】
経口用液体製剤を調製する場合は、一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物に矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯臭剤等を加えて常法を利用して内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。矯味剤としては上記に挙げられたものでよく、緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム等が、安定化剤としてはトラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。
【００７４】
注射剤を調製する場合は、一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物にｐＨ調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法を利用して皮下、筋肉及び静脈内注射剤を製造することができる。ｐＨ調製剤及び緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等が挙げられる。安定化剤としてはピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。局所麻酔剤としては塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。等張化剤としては、塩化ナトリウム、ブドウ糖等が挙げられる。
【００７５】
坐薬を調製する場合は、一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物に公知の坐薬用担体、例えば、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセライド等、更に必要に応じて界面活性剤（例えば、ツイーン（登録商標））等を加えた後、常法を利用して製造することができる。
【００７６】
上記以外に、常法を利用して適宜好ましい製剤とすることもできる。
【００７７】
本発明の一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物の投与量は年齢、体重、症状、投与形態及び投与回数等によって異なるが、通常は成人に対して一般式（１）で表わされる化合物として１日あたり１ｍｇから１０００ｍｇを、１回又は数回に分けて経口投与又は非経口投与するのが好ましい。
【実施例】
【００７８】
次に、実施例、試験例を挙げて本発明を更に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００７９】
実施例１：４−［１−メチル−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸（化１）の製造
【００８０】
【化５】
【００８１】
工程１：３’，４’，５’−トリメトキシアセトフェノン５００ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、テレフタル酸ジメチルエステル４６２ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物９６ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ３２ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ８ｍＬ溶媒中、還流下３時間攪拌した。反応終了後、反応液に１Ｎ塩酸を加えてｐＨ５〜６とし、セライトろ過、エタノールで溶出した。有機層を減圧濃縮し、４−［３−オキソ−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパノイル］安息香酸メチル８００ｍｇを得た。
【００８２】
工程２：４−［３−オキソ−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパノイル］安息香酸メチル（２．１ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物０．１１ｍＬ（２．２ｍｍｏｌ）を、エタノール３ｍＬ溶媒中、還流下２時間攪拌した。反応液を０℃に冷却後、析出する結晶をろ取し、４−［５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸メチル５８０ｍｇ（２段階６６％）を得た。
【００８３】
工程３：４−［５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸メチル５８０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物８４ｍｇ（１．８ｍｍｏｌ）、ヨウ化メチル１３０ｍＬ（２．１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ５ｍＬ溶媒中、室温で２時間攪拌した。反応終了後、反応液に１Ｎ塩酸及び水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで除水後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）で精製し、４−［１−メチル−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸メチル２７０ｍｇ（４５％）及び４−［１−メチル−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−５−イル］安息香酸メチル１３０ｍｇ（２２％）を得た。
【００８４】
工程４：４−［１−メチル−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸メチル２７０ｍｇ（０．７１ｍｍｏｌ）、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液１ｍＬをエタノール３ｍＬ溶媒中、還流下5時間攪拌した。反応終了後、溶媒を留去し、残渣に水を加え、エーテルで洗浄した。水層に１Ｎ塩酸を加えてｐＨ５〜６とし、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで除水後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をメタノール−クロロホルム−ヘキサンで結晶化し、表題化合物１８０ｍｇ（６９％）を白色結晶性粉末として得た。
【００８５】
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：3.92 (6 H, s), 3.93 (3 H, s), 3.97 (3 H, s), 6.67 (1 H, s), 6.66 (2 H, s), 7.94 (2 H, d, J = 8.3 Hz), 8.17 (2 H, d, J = 8.3 Hz)
【００８６】
実施例２：４−［１−メチル−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−５−イル］安息香酸（化２）の製造
【００８７】
【化６】
【００８８】
実施例１の工程３で得られた４−［１−メチル−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−５−イル］安息香酸メチル１３０ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）を実施例１の工程４と同様に反応処理し、メタノール−クロロホルム−ヘキサンで結晶化して、表題化合物６５ｍｇ（５２％）を白色結晶性粉末として得た。
【００８９】
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：3.89 (3 H, s), 3.95 (6 H, s), 3.99 (3 H, s), 6.66 (1 H, s), 7.07 (2 H, s), 7.61 (2 H, d, J = 8.3 Hz), 8.23 (2 H, d, J = 8.3 Hz)
【００９０】
実施例３：３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化３−１）、５−メチル−２−（１−メチル−５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール（化３−２）及び５−メチル−２−（１−メチル−３−フェニルピラゾール−５−イル）フェノール（化３−３）の製造
【００９１】
【化７】
【００９２】
工程１：アセトフェノン３．６ｇ（３０ｍｍｏｌ）、４−メチル−２−（メトキシメチル）オキシ安息香酸エチル７．４ｇ（３３ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物１．５ｇ（３１ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ４００ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１３０ｍＬ溶媒中で実施例１の工程１と同様に反応処理し、１−［２−（メトキシメトキシ）−４−メチルフェニル］−３−フェニルプロパン−１，３−ジオンを得た。
【００９３】
工程２：１−［２−（メトキシメトキシ）−４−メチルフェニル］−３−フェニルプロパン−１，３−ジオン、ヒドラジン一水和物１．５ｍＬ（３１ｍｍｏｌ）を、エタノール溶媒中で、実施例１の工程１と同様に反応処理し、３−［２−（メトキシメトキシ）−４−メチルフェニル］−５−フェニルピラゾール３．２ｇ(２段階３６％)を得た。
【００９４】
工程３：３−［２−（メトキシメトキシ）−４−メチルフェニル］−５−フェニルピラゾール３．２ｇ（１１ｍｍｏｌ）、４Ｍ塩化水素／酢酸エチル４．０ｍＬ（１６ｍｍｏｌ）を、メタノール１０ｍＬ溶媒中、６０℃で５時間攪拌した。反応終了後、有機層を減圧濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１０〜）で精製し、５−メチル−２−（５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール１．６ｇ（５９％）を得た。
【００９５】
工程４：５−メチル−２−（５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール５０ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ）、２．０Ｍトリメチルシリルジアゾメタン／ヘキサン０．１４ｍＬ（０．２８ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン０．０５０ｍＬ（０．２８ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル−メタノール（１０：１）２．２ｍＬの混合溶媒中、室温で１２時間攪拌した。反応終了後、反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで除水後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製し、３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化３−１）３３ｍｇ（６２％）を淡黄色無定形粉末として、５−メチル−２−（１−メチル−５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール（化３−２）と５−メチル−２−（１−メチル−３−フェニルピラゾール−５−イル）フェノール（化３−３）の混合物５．３ｍｇ（１０％）を単黄色固体として得た。
【００９６】
［化３−１］1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：2.40 (3 H, s), 3.99 (3 H, s), 6.85 (1 H, br. s), 6.89 (1 H, br. d, J = 7.8 Hz), 6.90 (1 H, s), 7 32 (1 H, tt, J = 7.8, 1.2 Hz), 7.43 (2 H, dd, J = 7.8, 7.8 Hz), 7.62 (2 H, d, J =, 7.8 Hz), 7.88 (2 H, dd, J = 7.8, 1.2 Hz)
【００９７】
［化３−２と３−３］1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：2.34 (3 H, s), 3.91 (3 H, s), 6.63 (1 H, s), 6.73 (1 H, br. d, J = 7.8 Hz), 6.86 (1 H, br. s), 7.44-7.52 (6 H, m), 10.79 (1 H, br. s)
【００９８】
実施例４：４−ジメチルアミノ−１−メチル−３，５−ジフェニルピラゾール（化４−１）及び４−ジメチルアミノ−３，５−ジフェニルピラゾール（化４−２）の製造
【００９９】
【化８】
【０１００】
工程１：１，３−ジフェニル−１，３−プロパンジオン６．７ｇ（３０ｍｍｏｌ）、亜硝酸ナトリウム２．１ｇ（３０ｍｍｏｌ）を、酢酸−水（１：１）４０ｍＬの混合溶液中、室温で６時間攪拌した。反応終了後、反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで除水後、減圧濃縮した。得られた組成生物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１０〜１：２）で精製し、２−ヒドロキシイミノ−１，３−ジフェニルプロパン−１，３−ジオン４．５ｇ（６０％）を得た。
【０１０１】
工程２：２−ヒドロキシイミノ−１，３−ジフェニルプロパン−１，３−ジオン２．０ｇ（７．９ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物４．０ｍＬ（８２ｍｍｏｌ）を、エタノール６０ｍＬ溶媒中で、実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をエタノールで再結晶し、４−アミノ−３，５−ジフェニルピラゾール１．６ｇ（８６％）を白色プリズム晶として得た。
【０１０２】
工程３：４−アミノ−３，５−ジフェニルピラゾール５０ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）、ヨウ化メチル０．１５ｍＬ（２．４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム３００ｍｇ（２．２ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル３ｍＬ溶媒中で、実施例１の工程３と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１）で精製し、４−ジメチルアミノ−１−メチル−３，５−ジフェニルピラゾール（化４−１）２８ｍｇ（４８％）及び４−ジメチルアミノ−３，５−ジフェニルピラゾール（化４−２）８ｍｇ（１４％）をそれぞれ単黄色固体として得た。
【０１０３】
［化４−１］1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：2.52 (6 H, s), 3.64 (3 H, s), 7.30 (1 H, tt, J = 7.8, 1.2 Hz), 7.37-7.53 (7 H, m), 8.04 (2 H, dd, 7.8, 1.2 Hz)
【０１０４】
［化４−２］1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：2.66 (6 H, s), 7.34-7.49 (6 H, m), 7.77 (4 H, br. d, J = 7.8 Hz)
【０１０５】
実施例５：４−アミノ−３，５−ジフェニル−１−メチルピラゾール（化５−１）及び４−メチルアミノ−３，５−ジフェニル−１−メチルピラゾール（化５−２）の製造
【０１０６】
【化９】
【０１０７】
実施例４の工程２で製造した４−アミノ−３，５−ジフェニルピラゾール５０ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物１０ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）、ヨウ化メチル３０ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ２ｍＬ溶媒中で実施例１の工程３と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝２：３）で精製し、４−アミノ−３，５−ジフェニル−１−メチルピラゾール（化５−１）４８ｍｇ（９１％）及び４−メチルアミノ−３，５−ジフェニル−１−メチルピラゾール（化５−２）４ｍｇ（７％）をそれぞれ単黄色固体として得た。
【０１０８】
［化５−１］1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：3.11 (1 H, br. s), 3.81 (3 H, s), 7.32 (1 H, tt, J = 7.8, 1.2 Hz), 7.42-7.48 (5 H, m), 7.53 (2 H, dd, J = 7.8, 7.8 Hz), 7.81 (2 H, dd, J = 7.8, 1.2 Hz)
【０１０９】
［化５−２］1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：2.50 (3 H, s), 3.77 (3 H, s), 7.32 (1 H, br. t, J = 7.8 Hz), 7.41-7.48 (5 H, m), 7.52 (2 H, dd, J = 7.8, 7.8 Hz), 7.87 (2 H, br. d, J = 7.8 hz)
【０１１０】
実施例６：４−アミノ−３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化６）の製造
【０１１１】
【化１０】
【０１１２】
工程１：アセトフェノン３３７ｍｇ（２．８ｍｍｏｌ）、２−メトキシ−４−メチル安息香酸エチル５３０ｍｇ（２．８ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物１３４ｍｇ（２．８ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ３７ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１３ｍＬ溶媒中で実施例１の工程１と同様に反応処理し、１−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−フェニルプロパン−１，３−ジオンを得た。
【０１１３】
工程２：１−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−フェニルプロパン−１，３−ジオン９０ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）、亜硝酸ナトリウム２４ｍｇ（０．３５ｍｍｏｌ）を、酢酸−水（１：１）２ｍＬの混合溶媒中で実施例４の工程１と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製し、２−ヒドロキシイミノ−１−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−フェニルプロパン−１，３−ジオン５０ｍｇ（５１％）を得た。
【０１１４】
工程３：２−ヒドロキシイミノ−１−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−フェニルプロパン−１，３−ジオン５０ｍｇ（７．９ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物１００ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）を、エタノール２ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１）で精製し、表題化合物３８ｍｇ（８０％）を淡黄色無定形粉末として得た。
【０１１５】
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：2.40 (3 H, s), 3.88 (3 H, s), 6.83 (1 H, br. s), 6.88 (1 H, br. d, J = 7.8 Hz), 7.33 (1 H, br. t, J = 7.8 Hz), 7.44 (2 H, dd, J = 7.8, 7.8 Hz), 7.56 (2 H, br. d, J = 7.8 Hz), 7.74 (2 H, br. d, J = 7.8 Hz)
【０１１６】
実施例７：４−アミノ−３，５−ビス（４−フルオロフェニル）ピラゾール（化７）の製造
【０１１７】
【化１１】
【０１１８】
工程１：４−フルオロアセトフェノン６９０ｍｇ（５．０ｍｍｏｌ）、４−フルオロ安息香酸エチル８４０ｍｇ（５．０ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物２４０ｍｇ（５．０ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ６６ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１５ｍＬ溶媒中で実施例１の工程１と同様に反応処理した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：２０）で精製し、１，３−ビス（４−フルオロフェニル）−１，３−プロパンジオン５３０ｍｇ（４１％）を得た。
【０１１９】
工程２：１，３−ビス（４−フルオロフェニル）−１，３−プロパンジオン２００ｍｇ（０．７７ｍｍｏｌ）、亜硝酸ナトリウム５３ｍｇ（０．７７ｍｍｏｌ）を、酢酸−水（１：１）４ｍＬの混合溶媒中で実施例４の工程１と同様に反応処理した。得られた組成生物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：２０〜１：２）で精製し、１，３−ビス（４−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシイミノ−１，３−プロパンジオン６０ｍｇ（２７％）を得た。
【０１２０】
工程３：１，３−ビス（４−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシイミノ−１，３−プロパンジオン６０ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物１００ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）を、エタノール２ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製し、クロロホルム−メタノール−ヘキサンで結晶化して、表題化合物３２ｍｇ（５９％）を淡黄色無定形粉末として得た。
【０１２１】
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：7.15 (4 H, dd, J = 8.5 Hz, 3JHF = 8.5 Hz), 7.64 (4 H, dd, J = 8.5 Hz, 4JHF = 5.4 Hz)
【０１２２】
実施例８：４−アミノ−３，５−ビス（４−メチルフェニル）ピラゾール（化８）の製造
【０１２３】
【化１２】
【０１２４】
工程１：４−メチルアセトフェノン６７１ｍｇ（５．０ｍｍｏｌ）、４−メチル安息香酸エチル８２１ｍｇ（５．０ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物２４０ｍｇ（５．０ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ６６ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１５ｍＬ溶媒中で実施例１の工程１と同様に反応処理した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：５０〜）で精製し、１，３−ビス（４−メチルフェニル）−１，３−プロパンジオン７２０ｍｇ（５７％）を得た。
【０１２５】
工程２：１，３−ビス（４−メチルフェニル）−１，３−プロパンジオン２００ｍｇ（０．７９ｍｍｏｌ）、亜硝酸ナトリウム５５ｍｇ（０．７９ｍｍｏｌ）を、酢酸−水（１：１）４ｍＬの混合溶媒中で実施例４の工程１と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）で精製し、１，３−ビス（４−メチルフェニル）−２−ヒドロキシイミノ−１，３−プロパンジオン４０ｍｇ（１８％）を得た。
【０１２６】
工程３：１，３−ビス（４−メチルフェニル）−２−ヒドロキシイミノ−１，３−プロパンジオン４０ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物７０ｍｇ（１．４ｍｍｏｌ）を、エタノール２ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンで結晶化して、表題化合物１４ｍｇ（３７％）を淡黄色無定形粉末として得た。
【０１２７】
1H-NMR(400MHz, DMSO-d6)δ：2.34 (6 H, s), 3.83 (2 H, s), 7.20-7.30 (4 H, br.), 7.50-7.70 (4 H, br.), 12.60 (1 H, s)
【０１２８】
実施例９：４−アミノ−３，５−ビス（４−メトキシフェニル）ピラゾール（化９）の製造
【０１２９】
【化１３】
【０１３０】
工程１：１，３−ビス（４−メトキシフェニル）−１，３−プロパンジオン２００ｍｇ（０．７０ｍｍｏｌ）、亜硝酸ナトリウム５０ｍｇ（０．７０ｍｍｏｌ）を、酢酸−水（１：１）４ｍＬの混合溶媒中で実施例４の工程１と同様に反応処理し、１，３−ビス（４−メトキシフェニル）−２−ヒドロキシイミノ−１，３−プロパンジオンを得た。
【０１３１】
工程２：１，３−ビス（４−メトキシフェニル）−２−ヒドロキシイミノ−１，３−プロパンジオン、ヒドラジン一水和物３５０ｍｇ（７ｍｍｏｌ）を、エタノール３ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンで結晶化して、表題化合物３８ｍｇ（２ｓｔｅｐ、２９％）を淡黄色無定形粉末として得た。
【０１３２】
1H-NMR(400MHz, DMSO-d6)δ：3.72 (2 H, br. s), 3.79 (6 H, s), 6.95-7.05 (4 H, br.), 7.55-7.75 (4 H, br.), 12.48 (1 H, s)
【０１３３】
実施例１０：３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール（化１０）の製造
【０１３４】
【化１４】
【０１３５】
工程１：アセトフェノン３６０ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）、イソニコチン酸エチル４５５ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物１４４ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ５０ｍｇ（０．１５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１５ｍＬ溶媒中で実施例１の工程１と同様に反応処理した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：５〜１：３）で精製し、１−フェニル−３−（４−ピリジル）−１，３−プロパンジオン４００ｍｇ（５９％）を得た。
【０１３６】
工程２：１−フェニル−３−（４−ピリジル）−１，３−プロパンジオン１００ｍｇ（０．４４ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物２２ｍｇ（０．４４ｍｍｏｌ）を、エタノール３ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、クロロホルム：メタノール＝１０：１）で精製し、メタノール−クロロホルム−ヘキサンで結晶化し、表題化合物７８ｍｇ（８０％）を白色結晶性粉末として得た。
【０１３７】
1H-NMR(400MHz, DMSO-d6)δ：7.19 (1 H, s), 7.34 (1 H, br. t, J = 7.6 Hz), 7.44 (2 H, dd, J = 7.6, 7.6 Hz), 7.48 (2 H, d, J = 5.9 Hz), 7.80 (2 H, br. d, J = 7.6 Hz), 8.59 (2 H, d, J = 5.9 Hz), 13.14 (1 H, br. s)
【０１３８】
実施例１１：４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール（化１１）の製造
【０１３９】
【化１５】
【０１４０】
工程１：実施例１０の工程１で製造した１−フェニル−３−（４−ピリジル）−１，３−プロパンジオン３００ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）、亜硝酸ナトリウム９２ｍｇ（１．３３ｍｍｏｌ）を、酢酸−水（１：１）４ｍＬの混合溶媒中で実施例４の工程１と同様に反応処理し、２−ヒドロキシイミノ−１−フェニル−３−（４−ピリジル）−１，３−プロパンジオン３００ｍｇを得た。
【０１４１】
工程２：２−ヒドロキシイミノ−１−フェニル−３−（４−ピリジル）−１，３−プロパンジオン３００ｍｇ、ヒドラジン一水和物６５０ｍｇ（１３．０ｍｍｏｌ）を、エタノール１０ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１〜３：１）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンで結晶化して、表題化合物を淡黄色針状晶として得た。
【０１４２】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：3.38 (2 H, br. s), 7.39 (1 H, tt, J = 7.5, 1.2 Hz), 7.49 (2 H, dd, J = 7.5, 7.5 Hz), 7.59 (2 H, dd, J = 7.5, 1.2 Hz), 7.69 (2 H, d, J = 6.1 Hz), 8.66 (2 H, d, J = 6.1 Hz)
【０１４３】
実施例１２：３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール（化１２）の製造
【０１４４】
【化１６】
【０１４５】
イソニコチン酸エチルの代わりにニコチン酸エチルを用いて、実施例１０と同様に反応処理し、表題化合物を白色結晶性粉末として得た。
【０１４６】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：6.90 (1 H, s), 7.37 (1 H, ddd, J = 8.0, 4.9, 0.9 Hz), 7.40 (1 H, tt, J = 7.4, 1.3 Hz), 7.47 (2 H, dd, J = 7.4, 7.4 Hz), 7.68 (2 H, br. d, J = 7.4 Hz), 8.11 (1 H, br. d, J = 8.0 Hz), 8.60 (1 H, dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 9.06 (1 H, d, J = 1.8 Hz)
【０１４７】
実施例１３：４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール（化１３）の製造
【０１４８】
【化１７】
【０１４９】
イソニコチン酸エチルの代わりにニコチン酸エチルを用いて、実施例１０の工程１及び実施例１１と同様に反応処理し、表題化合物を白色結晶性粉末として得た。
【０１５０】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：3.30 (2 H, br. s), 7.39 (1 H, br. t, J = 7.7 Hz), 7.40 (1 H, dd, J = 7.8, 4.9 Hz), 7.50 (2 H, dd, J = 7.7, 7.7 Hz), 7.61 (2 H, br. d, J = 7.7 Hz), 8.08 (1 H, br. d, J = 7.8 Hz), 8.60 (1 H, br. d, J = 4.9 Hz), 9.04 (1 H, br. s)
【０１５１】
実施例１４：５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール（化１２）の製造
【０１５２】
【化１８】
【０１５３】
イソニコチン酸エチルの代わりに２−ナフタレンカルボン酸メチルを用いて、実施例１０と同様に反応処理し、表題化合物を白色結晶性粉末として得た。
【０１５４】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：7.00 (1 H, s), 7.39 (1 H, t, J = 7.3 Hz), 7.48 (2 H, dd, J = 7.3, 7.3 Hz), 7.47-7.55 (2 H, m), 7.73-7.80 (2 H, m), 7.85-7.95 (4 H, m), 8.21 (1 H, br. s)
【０１５５】
実施例１５：４−アミノ−５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール（化１５）の製造
【０１５６】
【化１９】
【０１５７】
イソニコチン酸エチルの代わりに２−ナフタレンカルボン酸メチルを用いて、実施例１０の工程１及び実施例１１と同様に反応処理し、表題化合物を赤褐色結晶性粉末として得た。
【０１５８】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：3.49 (1 H, br. s), 7.39 (1 H, br. t, J = 7.4 Hz), 7.50-7.55 (2 H, m), 7.51 (2 H, dd, J = 7.4, 7.4 Hz), 7.70 (2 H, br. d, J = 7.4 Hz), 7.83-7.92 (3 H, m), 7.96 (1 H, br. d, J = 8.6 Hz), 8.16 (1 H, br. s)
【０１５９】
実施例１６：３−フェニル−５−（キノリン−４−イル）ピラゾール（化１６）の製造
【０１６０】
【化２０】
【０１６１】
イソニコチン酸エチルの代わりに４−キノリンカルボン酸メチルを用いて、実施例１０と同様に反応処理し、表題化合物を白色結晶性粉末として得た。
【０１６２】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：6.96 (1 H, s), 7.37-7.42 (1 H, m), 7.44-7.48 (2 H, m), 7.57-7.61 (2 H, m), 7.75 (2 H, dd, J = 8.3, 1.5 Hz), 7.76 (1 H, dd, J = 8.4, 1.5 Hz), 8.17 (1 H, br. d, J = 8.4 Hz), 8.52 (1 H, br. d, J = 4.4 Hz), 8.92 (1 H, d, J = 4.4 Hz)
【０１６３】
実施例１７：４−アミノ−３−フェニル−５−（キノリン−４−イル）ピラゾール（化１７）の製造
【０１６４】
【化２１】
【０１６５】
イソニコチン酸エチルの代わりに４−キノリンカルボン酸メチルを用いて、実施例１０の工程１及び実施例１１と同様に反応処理し、表題化合物を黄色結晶性粉末として得た。
【０１６６】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：2.15 (2 H, br. s), 7.37 (1 H, br. t, J = 7.3 Hz), 7.47 (2 H, dd, J = 7.3, 7.3 Hz), 7.53-7.62 (2 H, m), 7.71 (2 H, br. d, J = 7.3 Hz), 7.76 (1 H, ddd, J = 8.3, 6.8, 1.3 Hz), 8.17 (1H, br. d, J = 8.3 Hz), 8.17 (1H, d, J = 4.3 Hz), 8.92 (1H, br. d, J = 4.3 Hz)
【０１６７】
実施例１８：４−アミノ−３−（２−メトキシフェニル）−５−フェニルピラゾール（化１８）の製造
【０１６８】
【化２２】
【０１６９】
イソニコチン酸エチルの代わりにｏ−アニス酸メチルを用いて、実施例１０の工程１及び実施例１１と同様に反応処理し、表題化合物を淡黄色油状物として得た。
【０１７０】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：3.83 (3 H, s), 7.05 (1 H, br. d, J = 7.7 Hz), 7.11 (1 H, td, J = 7.7, 1.5 Hz), 7.32-7.37 (2 H, m), 7.48 (2 H, dd, J = 7.7, 7.7 Hz), 7.73 (1 H, dd, J = 7.7, 1.5 Hz), 7.75 (2 H, dd, J = 7.7, 1.5 Hz)
【０１７１】
実施例１９：３−（２−エトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化１９）の製造
【０１７２】
【化２３】
【０１７３】
イソニコチン酸エチルの代わりに２−エトキシ−４−メチル安息香酸エチルを用いて、実施例１０と同様に反応処理し、表題化合物を白色結晶性粉末として得た。
【０１７４】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：1.57 (3 H, t, J = 7.0 Hz), 2.39 (3 H, s), 4.23 (2 H, q, J = 7.0 Hz), 6.83 (1 H, br. s), 6.88 (1 H, br. d, J = 7.8 Hz), 6.91 (1 H, s), 7.32 (1 H, br. t, J = 7.4 Hz), 7.43 (2 H, dd, J = 7.4, 7.4 Hz), 7.62 (1 H, d, J = 7.8 Hz), 7.88 (2 H, br. d, J = 7.4 Hz), 11.34 (1 H, br. s)
【０１７５】
実施例２０：３−（２−メトキシ−５−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化２０）の製造
【０１７６】
【化２４】
【０１７７】
イソニコチン酸エチルの代わりに２−メトキシ−５−メチル安息香酸メチルを用いて、実施例１０と同様に反応処理し、表題化合物を黄色結晶性粉末として得た。
【０１７８】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：2.36 (3 H, s), 2.39 (3 H, s), 3.97 (3 H, s), 6.91 (1 H, s), 6.93 (1 H, d, J = 8.6 Hz), 7.11 (1 H, dd, J = 8.6, 1.7 Hz), 7.24 (2 H, d, J = 8.1 Hz), 7.54 (1 H, d, J = 1.7 Hz), 7.77 (2 H, d, J = 8.1 Hz)
【０１７９】
実施例２１：３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニル−４−プロピルピラゾール（化２１）の製造
【０１８０】
【化２５】
【０１８１】
工程１：バレロフェノン４９０ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）、２−メトキシ−４−メチル安息香酸エチル５９０ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物１５０ｍｇ（３．１ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ５０ｍｇ（０．１９ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１０ｍＬ溶媒中、還流下５時間攪拌した。反応終了後、反応液に１Ｎ塩酸及び水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで除水後、減圧濃縮し、２−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−フェニル−２−プロピルプロパン−１，３−ジオン４８０ｍｇを得た。
【０１８２】
工程２：２−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−フェニル−２−プロピルプロパン−１，３−ジオン４８０ｍｇ、ヒドラジン一水和物１００ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）を、エタノール５ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理し、表題化合物１６ｍｇ（２段階２％）を白色固体として得た。
【０１８３】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：0.80 (3 H, t, J = 7.3 Hz), 1.44 (2 H, td, J = 7.3, 7.3 Hz), 2.42 (3 H, s), 2.65-2.69 (2 H, m), 3.87 (3 H, s), 6.84 (1 H, br. s), 6.88 (1 H, br. d, J = 7.8 Hz), 7 35 (1 H, br. t, J = 7.4 Hz), 7.36 (1 H, d, J = 7.8 Hz), 7.44 (2 H, dd, J = 7.4, 7.4 ), 7.65 (2 H, br. d, J = 7.4 Hz)
【０１８４】
［試験例］
試験例に使用した化合物は、実施例記載の方法で製造したものを使用した。
【０１８５】
試験例
本発明の３，５−ビスアリールピラゾール化合物によるＥＰＯ産生促進活性は、ＥＰＯプロモーター活性に基づいて測定した。
【０１８６】
＜材料と方法＞
ｐＧＬ３ ｂａｓｉｃ（プロメガ）のルシフェラーゼ遺伝子にヒトＥＰＯの５’プロモーター領域、及び３’エンハンサー領域を連結したベクターをリポフェクションによってヒト肝臓癌由来である細胞株ＨｅｐＧ２に遺伝子導入した。得られた安定発現株（ＨｅｐＧ２ ＥＰＯ−ｌｕｃ）を被検化合物の評価に使用した。次に、ＨｅｐＧ２ ＥＰＯ−ｌｕｃは、１０％ウシ胎児血清を含む最小必須培地（ＭＥＭ）（シグマ）を用いて９６ウェルプレートの各ウェルに５×１０3細胞ずつ播種した。その後、ＤＭＳＯに溶解した被検化合物を最終濃度１０μＭとなるように各ウェルに添加し、培地量を１ウェルあたり１００μｌとした。酸素濃度を４％としたＣＯ2インキュベーターで２４時間インキュベート後、ＥＰＯプロモーター活性として、Ｂｒｉｇｈｔ―Ｇｌｏ（商標）Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍ（プロメガ）を１００μｌ／ウェルで添加し、直ちに、ＡＲＶＯ（パーキンエルマー）を用いてルシフェラーゼ活性を測定した。上記方法は、Ｂｒｉｇｈｔ−Ｇｌｏ（商標）Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍに添付された取扱説明書に準じた。
【０１８７】
化合物を添加しない未刺激状態でのＥＰＯプロモーター活性を１００％とし、各化合物により誘導されたＥＰＯプロモーター活性（％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ）を求めた。結果を表１に示す。
【０１８８】
【表４】
【０１８９】
＜結果＞
被検化合物を濃度１０μＭ添加することにより、最大で２９６７％（化合物６）のＥＰＯ産生促進が認められた（表１参照）。このことから、これらの化合物にはＥＰＯ産生促進作用があることが明らかとなり、貧血治療剤として有用であることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【０１９０】
本発明は、一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物が、優れたＥＰＯ産生促進作用を有していることを初めて見出し、優れたＥＰＯ産生促進作用を有する経口投与可能な低分子性の貧血の予防及び／又は治療剤を提供するものである。本発明は、低分子性の新たな貧血の予防及び／又は治療剤を提供し、製薬工業において有用であり、産業上の利用可能性を有している。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なエリスロポエチン産生促進剤に関する。さらに詳細にはエリスロポエチン産生低下に起因する疾患、例えば貧血の予防及び／又は治療剤に関する。また本発明は、エリスロポエチン産生促進作用を有する新規化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
エリスロポエチン（Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ：ＥＰＯ）は、赤芽球前駆細胞から成熟赤血球への成熟と分化に関与する糖タンパク質ホルモンであり、天然に存在する１６５アミノ酸からなる単量体ポリペプチドである（非特許文献１）。
【０００３】
ヒトのＥＰＯは、赤血球の増殖・分化において必須であり、赤血球産生の低下を特徴とする血液疾患の治療に有用である。臨床的には、ＥＰＯは、慢性腎不全（ｃｈｒｏｎｉｃ ｒｅｎａｌ ｆａｉｌｕｒｅ：ＣＲＦ）患者における貧血、自己貯血及び未熟児貧血の治療（非特許文献２〜４）、ＡＩＤＳ及び化学療法を受けている癌患者において使用されている（非特許文献５）。また、ＥＰＯは慢性貧血における有効性も認められている。
【０００４】
ＥＰＯは、成人では主に腎臓で産生されるが、それ以外では、中枢神経系のアストロサイト及びニューロンにおいても産生され、ＥＰＯ及びＥＰＯ受容体は脳−末梢境界の毛細血管において発現している。さらに、ＥＰＯを全身投与すると、ＥＰＯは血液脳関門を通過して、脳及び脊髄虚血、機械的外傷、てんかん、興奮毒及び神経炎症に応答したニューロン細胞の喪失を減少させることが報告されている（非特許文献６〜１０）。
【０００５】
ＥＰＯのようなタンパク質を用いた療法においては、プロテアーゼによる分解を受けやすいことによる血漿半減期の短さ（非特許文献１１、１２）や、循環における化合物の治療有効濃度を維持するために、静脈内注射を頻回行わねばならないなどの問題がある。また、静脈内注射に代わる投与経路として皮下注射があるが、投与部位からの吸収が遅いため、徐放効果は有るものの、血漿中濃度が静脈内注射に比べて有意に低くなる。そこで、同等の治療効果を挙げるためには静脈内注射の場合と同様の回数を注射しなければならず、患者への負担となる。また、ヒト血清ＥＰＯは糖タンパク質であって、ＥＰＯ表面に結合した糖鎖の構造は複雑であり、そのグリコシル化は広範かつ多様であることから、サイズの不均一性を示し、組換えヒトＥＰＯではヒト血清ＥＰＯを再現よく作製することができない、などの問題もある。
【０００６】
従って、上記に示したような貧血を含むＥＰＯ産生低下に起因する疾患の治療において生体利用性の低いＥＰＯでなく、内因性ＥＰＯを増加させる方法及び化合物が当該技術分野において必要とされている。
【０００７】
一方、ＥＰＯの発現量は、転写因子である低酸素誘導性因子（ｈｙｐｏｘｉａ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ：ＨＩＦ）を介して酸素濃度により制御されていることが知られている（非特許文献１３）。すなわち、通常大気下では、２−オキソグルタル酸ジオキシゲナーゼ酵素によりプロリン残基がヒドロキシル化されたＨＩＦサブユニット（ＨＩＦ−１α）がユビキチン−プロテアソーム系により分解され、ＥＰＯの産生は促進されないが、低酸素下では、２−オキソグルタル酸ジオキシゲナーゼ酵素によるＨＩＦ−１αのプロリン残基のヒドロキシル化が抑制され、その結果、安定化されたＨＩＦ−１αは細胞質から核内に移行し、ＨＩＦ−１βと二量体を形成してＥＰＯ遺伝子のｈｙｐｏｘｉａ ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ ｅｌｅｍｅｎｔ（ＨＲＥ）配列に結合して転写を促進し、ＥＰＯの産生を促進する。
【０００８】
このようなＥＰＯ産生機構を利用した２−オキソグルタル酸ジオキシゲナーゼ酵素などのＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼに対する酵素阻害剤が、ＥＰＯ産生促進剤として報告されている（特許文献１〜４）。
【０００９】
しかしながら、ＨＩＦにより産生が制御されている遺伝子には、ＥＰＯをコードする遺伝子だけではなく、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）をコードする遺伝子なども挙げられる。ＶＥＧＦは血管新生促進作用を有しており、この機能を介して悪性腫瘍を悪化させる原因となり得ることも報告されている（非特許文献１４、１５）。また、貧血は癌による化学治療によっても引き起こされ、貧血治療薬はそのような化学療法を受けている癌患者に投与されることも考えられることから（非特許文献６）、癌を悪化させるＶＥＧＦなどの産生も促進する可能性のあるＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ酵素活性阻害作用を有する化合物には、そのような危険性も内包される。
【００１０】
ＥＰＯの産生は、ＥＰＯの５’側に位置するプロモーター及び３’側に位置するエンハンサーにより制御されており、ＨＩＦはエンハンサー中のＨＲＥ配列に結合し、ＥＰＯの発現を促進すると考えられている。加えて、ＧＡＴＡ−２、ＮＦκＢなどもＥＰＯ産生を制御するとされており（非特許文献１６、１７）、ＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ酵素活性阻害以外の作用機構でもＥＰＯ産生促進は達成できると考えられる。このようなことからＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ酵素活性阻害に依存しないＥＰＯ産生促進作用を有する化合物は、貧血治療において有用であると考えられる。
【００１１】
また、前述のように、ＥＰＯは赤芽球前駆細胞の増殖及び成熟を促進するが、ＥＰＯの産生を介さずに赤芽球前駆細胞の成熟・分化を促進する作用を有する化合物も貧血治療薬として有用である。ＥＰＯの有する血球増殖促進作用を増強する活性を有する化合物やＥＰＯのシグナル伝達の重要な制御機構のひとつである脱リン酸化を触媒する造血細胞ホスファターゼに対して阻害作用を有する化合物が報告されているが（特許文献５〜７）、その活性は必ずしも十分とは言えない。また、ＥＰＯ受容体に作用する合成ペプチド、ヘマタイドが報告されているが（非特許文献１８）、ＥＰＯと同等の活性発現には高用量の投与が必要であり、経口投与に適さないという問題点がある。
【００１２】
従って、ＥＰＯ産生促進作用を持つ経口投与可能な低分子性の貧血治療剤が、今後の貧血治療において有用であると考えられる。
【００１３】
一方、本発明に関連する３，５−ビスアリールピラゾール骨格を有する化合物には、種々の薬理作用が報告されている。例えば、糖尿病治療（特許文献８）、尿酸排泄促進（特許文献９）、アルツハイマー症治療（特許文献１０、１１）、癌治療（特許文献１２、１３）、Ｃ型肝炎ウイルス感染症治療（特許文献１４、１５）、抗真菌剤（特許文献１６）、除草剤（特許文献１７）、自己免疫性疾患治療（特許文献１８）、アレルギー性疾患治療（特許文献１９）等に使用できることが報告されている。
【００１４】
また、アリールピラゾール骨格を有する化合物が貧血治療剤として有用であることを記載している文献がある（特許文献２０〜２２）。しかしながら、これらの文献に記載されている化合物は、アリール基上にアミド基又はアミノアルキル基の置換基を持つことを特徴としている点で本発明化合物と異なる。さらに、これら公知文献に記載の化合物は、エリスロポエチンの感受性を増強させることでヘモグロビンの増加をもたらすことが記載されているが、本発明化合物のようなエリスロポエチンの産生自体を促進する作用に関しての記載や示唆はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】特開２００６−１３７７６３号公報
【特許文献２】ＷＯ２００３／５３９９７号パンフレット
【特許文献３】ＷＯ２００５／１１６９６号パンフレット
【特許文献４】ＷＯ２００７／３８５７１号パンフレット
【特許文献５】特表２０００−５３６３６５号公報
【特許文献６】特開平１１−１７１７７４号公報
【特許文献７】特開２００２−２７５１５９号公報
【特許文献８】ＷＯ２００７／０６１９２３号パンフレット
【特許文献９】ＷＯ２００７／０４３４００号パンフレット
【特許文献１０】ＷＯ２００７／０３４２７９号パンフレット
【特許文献１１】特表２００２−５２２４２２号公報
【特許文献１２】ＷＯ２００６／１０９６８０号パンフレット
【特許文献１３】ＥＰ０１３９８０２９号公報
【特許文献１４】ＷＯ２００４／０９９１６４号パンフレット
【特許文献１５】特表２００６−５０１３１２号公報
【特許文献１６】ＷＯ２００４／０３３４３２号パンフレット
【特許文献１７】特開平０４−１２４１７８号公報
【特許文献１８】ＷＯ１９９８／０５６７８５号パンフレット
【特許文献１９】ＷＯ２００４／０８０９７２号パンフレット
【特許文献２０】ＷＯ２０００／０４６２０７号パンフレット
【特許文献２１】ＷＯ２０００／０４６２０６号パンフレット
【特許文献２２】特表２００２−５３６３４８号公報
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】Lin F-K et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 7580-7584 (1985)
【非特許文献２】Eschbach JW, et al., N. Engl. J. Med, 316: 73-78(1987)
【非特許文献３】Eschbach JW, et al., Ann. Intern. Med., 111: 992 (1989)
【非特許文献４】Lim VS, et al., Ann. Intern. Med., 110: 108-114 (1989)
【非特許文献５】Danna RP, et al., Erythropoietin in Clinical Applications-An International Perspective, New York: Marcel Dekker; p301-324 (1990)
【非特許文献６】Sakanaka M, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 95, 4635-4640 (1998)
【非特許文献７】Celik M, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 99, 2258-2263 (2002)
【非特許文献８】Brines ML, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 97, 10526-10531 (2000)
【非特許文献９】Calapai G, et al., Eur. J. Pharmacol., 401, 349-356 (2000)
【非特許文献１０】Siren A-L, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 98, 4044-4049 (2001)
【非特許文献１１】Spivack JL and Hogans BB, Blood, 73: 90 (1989)
【非特許文献１２】McMahon FG, et al., Blood, 76: 1718 (1990)
【非特許文献１３】Jelkman W, Internal Medicine 43, 649-659 (2004)
【非特許文献１４】Maxwell PH, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 94, 15, 8104-8109 (1997)
【非特許文献１５】Fang J, et al., Cancer Res., 61, 15, 5731-5735 (2001)
【非特許文献１６】Imagawa S, et al., Blood 89, 1430-1439 (1997)
【非特許文献１７】La Ferla K, et al., FASEB J, 16, 1811-1813 (2002)
【非特許文献１８】Stead RB, et al., Blood 108, 1830-1834 (2006)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
本発明の目的は、低分子性のＥＰＯ産生促進作用を有する化合物を提供することにある。さらに詳細には、貧血の予防及び／又は治療に有用な医薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
上記実情に鑑み、本発明者らは、ＥＰＯ産生促進作用を持つ化合物を鋭意探索した結果、下記一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物が、ヒト肝臓癌由来のＨｅｐＧ２細胞を用いた試験においてＥＰＯ産生を促進することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１９】
すなわち本発明は、次の一般式（１）：
【００２０】
【化１】
【００２１】
［式中、
Ａ環は、ベンゼン環、ナフタレン環、ピリジン環又はキノリン環を示し、
Ｒ１は、水素原子又はＣ１−６アルキル基を示し、
Ｒ２は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基、Ｃ１−６アルキルアミノ基又はジＣ１−６アルキルアミノ基を示し、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、同一又は異なってもよく、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン原子、水酸基又はカルボキシル基を示す］
で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＥＰＯ産生促進剤に関する。
【００２２】
より詳細には、本発明は次の化合物群：
４−［１−メチル−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸（化１）、
４−［１−メチル−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−５−イル］安息香酸（化２）、
５−メチル−２−（１−メチル−５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール（化３−２）、
５−メチル−２−（１−メチル−３−フェニルピラゾール−５−イル）フェノール（化３−３）、
４−ジメチルアミノ−３,５−ジフェニルピラゾール（化４−２）、
４−メチルアミノ−３,５−ジフェニル−１−メチルピラゾール（化５−２）、
４−アミノ−３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化６）、
４−アミノ−３,５−ビス（4−フルオロフェニル）ピラゾール（化７）、
４−アミノ−３，５−ビス（４−メチルフェニル）ピラゾール（化８）、
４−アミノ−３，５−ビス（４−メトキシフェニル）ピラゾール（化９）、
３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール（化１０）、
４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール（化１１）、
３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール（化１２）、
４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール（化１３）、
５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール（化１４）、
４−アミノ−５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール（化１５）、
３−フェニル−５−（キノリン−４−イル）ピラゾール（化１６）、
４−アミノ−３−フェニル−５−（キノリン−４−イル）ピラゾール（化１７）、
４−アミノ−３−（２−メトキシフェニル）−５−フェニルピラゾール（化１８）、
３−（２−エトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化１９）、
３−（２−メトキシ−５−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化２０）、及び
３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニル−４−プロピルピラゾール（化２１）
からなる群から選択される前記ＥＰＯ産生促進剤を提供するものである。
【００２３】
また、本発明は、前記一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＥＰＯ産生促進剤に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤を提供するものである。
【００２４】
また、本発明は、ＥＰＯ産生促進用の製剤を製造するための、前記一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の使用（ｕｓｅ）に関する。より詳細には、本発明は、ＥＰＯ産生促進用の製剤を製造するための、前記した化合物群から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の使用（ｕｓｅ）を提供するものである。
【００２５】
さらに、本発明は、前記一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を、ＥＰＯの産生促進が必要とされる患者に投与することを特徴とする、ＥＰＯ産生の促進方法（ｍｅｔｈｏｄ）に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を、ＥＰＯの産生促進が必要とされる患者に投与することを特徴とする、ＥＰＯ産生の促進方法（ｍｅｔｈｏｄ）を提供するものである。
【００２６】
また、本発明は、前記一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を細胞に接触させて、当該細胞におけるＥＰＯの産生を促進させる方法に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を細胞に接触させて、該細胞におけるＥＰＯの産生を促進させる方法を提供するものである。ここで、「接触」とは、本明細書中で使用するとき、インビトロ又はインビボにおいて、本発明の２−アルキルアミノキノリン化合物等が、細胞による前記化合物等の取り込み作用又は細胞表面での相互作用などにより、増殖、分化、生理活性物質の分泌などの細胞の機能を調節するように前記化合物等を細胞に添加することを意味する。
【００２７】
別の観点からは、本発明は、次の化合物群：
４−［１−メチル−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸（化１）、
４−［１−メチル−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−５−イル］安息香酸（化２）、
５−メチル−２−（１−メチル−５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール（化３−２）、
５−メチル−２−（１−メチル−３−フェニルピラゾール−５−イル）フェノール（化３−３）、
４−ジメチルアミノ−３,５−ジフェニルピラゾール（化４−２）、
４−メチルアミノ−３,５−ジフェニル−１−メチルピラゾール（化５−２）、
４−アミノ−３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化６）、
４−アミノ−３,５−ビス（4−フルオロフェニル）ピラゾール（化７）、
４−アミノ−３，５−ビス（４−メチルフェニル）ピラゾール（化８）、
４−アミノ−３，５−ビス（４−メトキシフェニル）ピラゾール（化９）、
３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール（化１０）、
４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール（化１１）、
３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール（化１２）、
４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール（化１３）、
５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール（化１４）、
４−アミノ−５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール（化１５）、
３−フェニル−５−（キノリン−４−イル）ピラゾール（化１６）、
４−アミノ−３−フェニル−５‐（キノリン−４−イル）ピラゾール（化１７）、
４−アミノ−３−（２−メトキシフェニル）−５−フェニルピラゾール（化１８）、
３−（２−エトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化１９）、
３−（２−メトキシ−５−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化２０）、及び
３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニル−４−プロピルピラゾール（化２１）
からなる群から選択される、３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を提供するものである。
【００２８】
さらに、本発明は、前記一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物、及び医薬として許容される担体とを含有してなるＥＰＯの産生を促進させるための医薬組成物に関する。より詳細には、本発明は、前記した化合物群から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の１種又は２種以上の化合物、及び医薬として許容される担体とを含有してなるＥＰＯの産生を促進させるための医薬組成物を提供するものである。
【発明の効果】
【００２９】
本発明は、優れたＥＰＯ産生促進作用を有している、３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を見出したものであり、ＥＰＯ産生を促進することにより症状が改善される疾患（例えば、慢性腎不全患者における貧血、自己貯血及び未熟児貧血、ＡＩＤＳ及び化学療法を受けている癌患者の貧血、慢性貧血、鉄欠乏性貧血、再生不良性貧血、溶血性貧血、巨赤芽球性貧血などの貧血）の予防及び／又は治療のための医薬組成物として有用である。また、本発明は、ＥＰＯ産生促進作用を有する経口投与可能な低分子性の化合物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤を提供するものである。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００３１】
本発明における用語の定義は以下のとおりである。
【００３２】
本明細書中で使用するとき、「ハロゲン原子」とは、ハロゲノ基を意味し、具体的にはフッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子等である。
【００３３】
本明細書中で使用するとき、「アルキル基」は、直鎖又は分枝状であってもよい。従って、「Ｃ１−６アルキル基」としては、具体的にはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、sec−ブチル基、tert−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、４−メチルブチル基、１−エチルプロピル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、３−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、１−メチルペンチル基、３，３−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、２，３−ジメチルブチル基、１−エチルブチル基、２−エチルブチル基等の炭素数１〜６個の直鎖又は分枝状のアルキル基が挙げられる。
【００３４】
本明細書中で使用するとき、「アルコキシ基」は、直鎖又は分枝状であってもよい。従って、「Ｃ１−６アルコキシ基」としては、具体的にはメチルオキシ基、エチルオキシ基、ｎ−プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ｎ−ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、sec−ブチルオキシ基、tert−ブチルオキシ基、ｎ−ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、ネオペンチルオキシ基、４−メチルブチルオキシ基、１−エチルプロピルオキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基、イソヘキシルオキシ基、３−メチルペンチルオキシ基、２−メチルペンチルオキシ基、１−メチルペンチルオキシ基、３，３−ジメチルブチルオキシ基、２，２−ジメチルブチルオキシ基、１，１−ジメチルブチルオキシ基、１，２−ジメチルブチルオキシ基、１，３−ジメチルブチルオキシ基、２，３−ジメチルブチルオキシ基、１−エチルブチルオキシ基、２−エチルブチルオキシ基等の炭素数１〜６の直鎖又は分枝状のアルコキシ基が挙げられる。
【００３５】
本明細書中で使用するとき、「アルキルアミノ基」とは、前記したアルキル基が窒素原子に１つ結合した基を意味する。従って、「Ｃ１―６アルキルアミノ基」には、メチルアミノ基、エチルアミノ基、ｎ−プロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、ｎ−ブチルアミノ基、sec−ブチルアミノ基、tert−ブチルアミノ基、ｎ−ペンチルアミノ基、イソペンチルアミノ基、ネオペンチルアミノ基、４−メチルブチルアミノ基、１−エチルプロピルアミノ基、ｎ−ヘキシルアミノ基、イソヘキシルアミノ基、３−メチルペンチルアミノ基、２−メチルペンチルアミノ基、１−メチルペンチルアミノ基、３，３−ジメチルブチルアミノ基、２，２−ジメチルブチルアミノ基、１，１−ジメチルブチルアミノ基、１，２−ジメチルブチルアミノ基、１，３−ジメチルブチルアミノ基、２，３−ジメチルブチルアミノ基、１−エチルブチルアミノ基、２−エチルブチルアミノ基等が挙げられる。
【００３６】
本明細書中で使用するとき、「ジアルキルアミノ基」とは、同一であるか又は異なっていてもよい、前述した「アルキル基」の２つが窒素原子に結合した基を意味する。従って、「ジＣ１―６アルキルアミノ基」としては、具体的には、ジメチルアミノ基、メチルエチルアミノ基、ジエチルアミノ基、メチル−ｎ−プロピルアミノ基、エチル−ｎ−プロピルアミノ基、ジ−ｎ−プロピルアミノ基、メチルイソプロピルアミノ基、エチルイソプロピルアミノ基、ジイソプロピルアミノ基、メチル−ｎ−ブチルアミノ基、エチル−ｎ−ブチルアミノ基、ｎ−プロピル−ｎ−ブチルアミノ基、ジ−ｎ−ブチルアミノ基、ジ−sec−ブチルアミノ基、ジ−tert−ブチルアミノ基、ジペンチルアミノ基、ジヘキシルアミノ基等である。
【００３７】
その他、ここに定義のない基については、通常の定義に従う。
【００３８】
一般式（１）中、Ａ環としては、下記で表されるものが好ましい。
【００３９】
【化２】
【００４０】
［式中、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は前記と同じものを示す］
【００４１】
一般式（１）中、Ｒ１における「Ｃ１−６アルキル基」としては、「Ｃ１−４アルキル基」が好ましく、メチル基がより好ましい。
【００４２】
一般式（１）中、Ｒ２における「Ｃ１−６アルキル基」としては、「Ｃ１−４アルキル基」が好ましく、ｎ−プロピル基がより好ましい。
【００４３】
一般式（１）中、Ｒ２における「Ｃ１−６アルキルアミノ基」としては、「Ｃ１−４アルキルアミノ基」が好ましく、メチルアミノ基がより好ましい。
【００４４】
一般式（１）中、Ｒ２における「ジＣ１−６アルキルアミノ基」としては、「ジＣ１−４アルキルアミノ基」が好ましく、ジメチルアミノ基がより好ましい。
【００４５】
一般式（１）中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８における「Ｃ１−６アルキル基」としては、「Ｃ１−４アルキル基」が好ましく、メチル基がより好ましい。
【００４６】
一般式（１）中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８における「Ｃ１−６アルコキシ基」としては、「Ｃ１−４アルコキシ基」が好ましく、メトキシ基、エトキシ基がより好ましい。
【００４７】
一般式（１）中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８における「ハロゲン原子」としては、フッ素原子が好ましい。
【００４８】
本発明の一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物の具体例として、下記化合物を挙げることができる。
【００４９】
【表１】
【００５０】
【表２】
【００５１】
【表３】
【００５２】
本発明の一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物は、本発明の３，５−ビスアリールピラゾール化合物のみならず、その医薬として許容される塩、それらの各種の水和物や溶媒和物、及び結晶多形を有する物質、及びこれらの物質のプロドラッグとなる物質を包含している。
【００５３】
本発明の一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物の医薬として許容される塩としては、具体的には、化合物を塩基性化合物として扱う場合は、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等）や有機酸（例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸等）との酸付加塩等が挙げられ、化合物を酸性化合物として扱う場合には、無機塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、バリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等）や有機塩（例えば、ピリジニウム塩、ピコリニウム塩、トリエチルアンモニウム塩等）が挙げられる。
【００５４】
本発明の一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物やその医薬として許容される塩の溶媒和物としては、水和物や各種の溶媒和物（例えば、エタノールなどのアルコールとの溶媒和物）が挙げられる。
【００５５】
本発明の一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物は、公知の方法により製造することができる。例えば、以下に示す方法、あるいはこれに準じた方法により製造することができるが、これに限定されるものではない。また、必要に応じて官能基を保護して各反応を行ってもよい。保護、脱保護条件としては一般に用いられる方法（Protective Groups in Organic Synthesis Third Edition, John Wiley & Sons, Inc.）を参考にして行うことができる。
【００５６】
［１］Ｒ２が水素原子又はＣ１−６アルキル基である化合物の製造
【００５７】
【化３】
【００５８】
〔式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、前記と同じものを示し、Ｒ２は、水素原子又はＣ１−６アルキル基を示し、Ｒ９は、低級アルキル基を示し、Ｘ１はハロゲン原子、スルホニルオキシ基等の脱離基を示す〕
【００５９】
［工程１］アセトフェノン誘導体（Ｉ）とエステル化合物（ＩＩ）を塩基の存在下、溶媒中でクライゼン反応を行うことにより、１，３−ジケト化合物（ＩＩＩ）を製造することができる。ここで用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、水素化カリウム等の水素化アルカリ金属類、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムメトキシド、カリウムエトキシド、カリウムtert−ブトキシド等のアルカリ金属アルコラート類、ｎ−ブチルリチウム、sec−ブチルリチウム、tert−ブチルリチウム等の有機アルカリ金属類、リチウムジイソプロピルプロピルアミド等のアルカリ金属アミド類が挙げられる。溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジグリム等のエーテル系溶媒が挙げられる。反応条件は、０〜１８０℃、好ましくは８０〜１４０℃で、３０分〜２４時間、好ましくは１時間〜１２時間反応を行えばよい。本反応は、必要に応じて１２−クラウン−４、１５−クラウン−５、１８−クラウン−６、ジベンゾ−１８−クラウン−６等のクラウンエーテル類、テトラブチルアンモニウムクロリド、テトラブチルアンモニウムブロミド、テトラブチルアンモニウムヨーダイド等の４級アンモニウム塩等の触媒を用いることもできる。
【００６０】
［工程２］１，３−ジケト化合物（ＩＩＩ）とヒドラジンとを溶媒中で反応を行うことにより、Ｒ１が水素原子であるピラゾール誘導体（１ａ）を製造することができる。ここで用いる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、２−プロパノール等のアルコール類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、アセトニトリル、酢酸エチル等が挙げられ、アルコール類を溶媒として用いることが好ましい。反応条件は、０〜１８０℃、好ましくは８０〜１４０℃で、３０分〜２４時間、好ましくは１時間〜１２時間反応を行えばよい。
【００６１】
［工程３］ピラゾール誘導体（１ａ）と化合物（ＩＶ）とを、塩基の存在下、溶媒中で反応し、Ｒ１がＣ１−６アルキル基であるピラゾール誘導体（１ｂ）を製造することができる。ここで用いる塩基としては例えばピリジン、ピコリン、トリエチルアミン等の有機アミン類、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム等の水素化アルカリ金属類、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の水酸化アルカリ金属類、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等の炭酸アルカリ金属類、ナトリウムメトキシド、カリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムエトキシド、ナトリウムtert−ブトキシド、カリウムtert−ブトキシド等のアルカリ金属アルコラート類、リチウムジイソプロピルアミド、ナトリウムジイソプロピルアミド、カリウムジイソプロピルアミド、リチウムヘキサメチルジシラジド、ナトリウムヘキサメチルジシラジド、カリウムヘキサメチルジシラジド等のアルカリ金属アミド類、ｎ−ブチルリチウム、sec−ブチルリチウム、tert−ブチルリチウム等のアルキル金属類を使用することができる。溶媒としては、例えば、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、アセトニトリル、酢酸エチル等が挙げられる。反応条件は、−２０〜１２０℃、好ましくは０〜８０℃で、３０分〜２４時間、好ましくは１時間〜１２時間反応を行えばよい。
【００６２】
［２］Ｒ２がアミノ基、Ｃ１−６アルキルアミノ基又はジＣ１−６アルキルアミノ基である化合物の製造
【００６３】
【化４】
【００６４】
〔式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、前記と同じものを示し、Ｒ１０はＣ１−６アルキル基を示し、Ｘ２はハロゲン原子、スルホニルオキシ基等の脱離基を示す〕
【００６５】
［工程４］１，３−ジケト化合物（Ｖ）を酸触媒の存在下、溶媒中で亜硝酸塩と反応することにより、化合物（ＶＩ）を製造することができる。ここで用いる酸触媒としては、酢酸等の有機酸が挙げられる。溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、２−プロパノール等のアルコール類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、アセトニトリル、酢酸エチル、水等を単独又は組み合わせて使用することができる。また、酢酸等の有機酸酸触媒自体を溶媒として用いてもよい。反応条件は、−４０〜１２０℃、好ましくは−２０〜８０℃で、３０分〜２４時間、好ましくは１時間〜１２時間反応を行えばよい。
【００６６】
［工程５］化合物（ＶＩ）とヒドラジンとを溶媒中で反応を行うことにより、Ｒ２がアミノ基であるピラゾール誘導体（１ｃ）を製造することができる。本工程は工程２で記載したものと同様である。
【００６７】
［工程６］ピラゾール誘導体（１ｃ）と化合物（ＶＩＩ）とを、塩基の存在下、溶媒中で反応し、Ｒ２がＣ１−６アルキルアミノ基であるピラゾール誘導体（１ｄ）及びＲ２がジＣ１−６アルキルアミノ基であるピラゾール誘導体（１ｅ）とを製造することができる。ここで用いる塩基としては弱塩基が好ましく、例えばピリジン、ピコリン、トリエチレンアミン等の有機アミン類、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等の炭酸アルカリ金属類、炭酸カルシウム等の炭酸アルカリ土類金属類、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム等の炭酸水素アルカリ金属類を使用することができる。溶媒、反応条件は、工程３で記載したものと同じである。
【００６８】
前記の各反応で得られた中間体及び目的物は、有機合成化学で常用されている精製法、例えば、ろ過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶、各種クロマトグラフィー等に付して必要に応じて単離、精製することができる。また、中間体においては、特に精製することなく次反応に供することもできる。
【００６９】
さらに、各種の異性体は異性体間の物理化学的性質の差を利用した常法を適用して単離できる。例えば、ラセミ混合物は、例えば、酒石酸等の一般的な光学活性酸とのジアステレオマー塩に導き光学分割する方法、又は、光学活性カラムクロマトグラフィーを用いた方法等の一般的ラセミ分割法により、光学的に純粋な異性体に導くことができる。また、ジアステレオマー混合物は、例えば、分別結晶化又は各種クロマトグラフィー等により分割できる。また、光学活性な化合物は適当な光学活性な原料を用いることにより製造することもできる。
【００７０】
本発明のＥＰＯ産生促進剤、又は貧血治療剤は、一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、その塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分として含有するものであって、医薬組成物として使用することができる。その場合、本発明の化合物を単独で用いてもよいが、通常は医薬として許容される担体、及び／又は希釈剤を配合して使用される。
【００７１】
投与経路は、特に限定されないが、治療目的に応じて適宜選択することができる。例えば、経口剤、注射剤、坐剤、吸入剤等のいずれでもよい。これらの投与形態に適した医薬組成物は、公知の製剤方法を利用することによって製造できる。
【００７２】
経口用固形製剤を調製する場合は、一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物に医薬として許容される賦形剤、更に必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を加えた後、常法を利用して、錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。添加剤は、当該技術分野で一般的に使用されているものでよい。例えば、賦形剤としては、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸等が挙げられる。結合剤としては、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。崩壊剤としては、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等が挙げられる。滑沢剤としては、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール等が挙げられる。矯味剤としては、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。
【００７３】
経口用液体製剤を調製する場合は、一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物に矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯臭剤等を加えて常法を利用して内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。矯味剤としては上記に挙げられたものでよく、緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム等が、安定化剤としてはトラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。
【００７４】
注射剤を調製する場合は、一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物にｐＨ調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法を利用して皮下、筋肉及び静脈内注射剤を製造することができる。ｐＨ調製剤及び緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等が挙げられる。安定化剤としてはピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。局所麻酔剤としては塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。等張化剤としては、塩化ナトリウム、ブドウ糖等が挙げられる。
【００７５】
坐薬を調製する場合は、一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物に公知の坐薬用担体、例えば、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセライド等、更に必要に応じて界面活性剤（例えば、ツイーン（登録商標））等を加えた後、常法を利用して製造することができる。
【００７６】
上記以外に、常法を利用して適宜好ましい製剤とすることもできる。
【００７７】
本発明の一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物の投与量は年齢、体重、症状、投与形態及び投与回数等によって異なるが、通常は成人に対して一般式（１）で表わされる化合物として１日あたり１ｍｇから１０００ｍｇを、１回又は数回に分けて経口投与又は非経口投与するのが好ましい。
【実施例】
【００７８】
次に、実施例、試験例を挙げて本発明を更に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００７９】
実施例１：４−［１−メチル−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸（化１）の製造
【００８０】
【化５】
【００８１】
工程１：３’，４’，５’−トリメトキシアセトフェノン５００ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、テレフタル酸ジメチルエステル４６２ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物９６ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ３２ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ８ｍＬ溶媒中、還流下３時間攪拌した。反応終了後、反応液に１Ｎ塩酸を加えてｐＨ５〜６とし、セライトろ過、エタノールで溶出した。有機層を減圧濃縮し、４−［３−オキソ−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパノイル］安息香酸メチル８００ｍｇを得た。
【００８２】
工程２：４−［３−オキソ−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）プロパノイル］安息香酸メチル（２．１ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物０．１１ｍＬ（２．２ｍｍｏｌ）を、エタノール３ｍＬ溶媒中、還流下２時間攪拌した。反応液を０℃に冷却後、析出する結晶をろ取し、４−［５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸メチル５８０ｍｇ（２段階６６％）を得た。
【００８３】
工程３：４−［５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸メチル５８０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物８４ｍｇ（１．８ｍｍｏｌ）、ヨウ化メチル１３０ｍＬ（２．１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ５ｍＬ溶媒中、室温で２時間攪拌した。反応終了後、反応液に１Ｎ塩酸及び水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで除水後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）で精製し、４−［１−メチル−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸メチル２７０ｍｇ（４５％）及び４−［１−メチル−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−５−イル］安息香酸メチル１３０ｍｇ（２２％）を得た。
【００８４】
工程４：４−［１−メチル−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸メチル２７０ｍｇ（０．７１ｍｍｏｌ）、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液１ｍＬをエタノール３ｍＬ溶媒中、還流下5時間攪拌した。反応終了後、溶媒を留去し、残渣に水を加え、エーテルで洗浄した。水層に１Ｎ塩酸を加えてｐＨ５〜６とし、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで除水後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をメタノール−クロロホルム−ヘキサンで結晶化し、表題化合物１８０ｍｇ（６９％）を白色結晶性粉末として得た。
【００８５】
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：3.92 (6 H, s), 3.93 (3 H, s), 3.97 (3 H, s), 6.67 (1 H, s), 6.66 (2 H, s), 7.94 (2 H, d, J = 8.3 Hz), 8.17 (2 H, d, J = 8.3 Hz)
【００８６】
実施例２：４−［１−メチル−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−５−イル］安息香酸（化２）の製造
【００８７】
【化６】
【００８８】
実施例１の工程３で得られた４−［１−メチル−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−５−イル］安息香酸メチル１３０ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）を実施例１の工程４と同様に反応処理し、メタノール−クロロホルム−ヘキサンで結晶化して、表題化合物６５ｍｇ（５２％）を白色結晶性粉末として得た。
【００８９】
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：3.89 (3 H, s), 3.95 (6 H, s), 3.99 (3 H, s), 6.66 (1 H, s), 7.07 (2 H, s), 7.61 (2 H, d, J = 8.3 Hz), 8.23 (2 H, d, J = 8.3 Hz)
【００９０】
実施例３：３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化３−１）、５−メチル−２−（１−メチル−５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール（化３−２）及び５−メチル−２−（１−メチル−３−フェニルピラゾール−５−イル）フェノール（化３−３）の製造
【００９１】
【化７】
【００９２】
工程１：アセトフェノン３．６ｇ（３０ｍｍｏｌ）、４−メチル−２−（メトキシメチル）オキシ安息香酸エチル７．４ｇ（３３ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物１．５ｇ（３１ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ４００ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１３０ｍＬ溶媒中で実施例１の工程１と同様に反応処理し、１−［２−（メトキシメトキシ）−４−メチルフェニル］−３−フェニルプロパン−１，３−ジオンを得た。
【００９３】
工程２：１−［２−（メトキシメトキシ）−４−メチルフェニル］−３−フェニルプロパン−１，３−ジオン、ヒドラジン一水和物１．５ｍＬ（３１ｍｍｏｌ）を、エタノール溶媒中で、実施例１の工程１と同様に反応処理し、３−［２−（メトキシメトキシ）−４−メチルフェニル］−５−フェニルピラゾール３．２ｇ(２段階３６％)を得た。
【００９４】
工程３：３−［２−（メトキシメトキシ）−４−メチルフェニル］−５−フェニルピラゾール３．２ｇ（１１ｍｍｏｌ）、４Ｍ塩化水素／酢酸エチル４．０ｍＬ（１６ｍｍｏｌ）を、メタノール１０ｍＬ溶媒中、６０℃で５時間攪拌した。反応終了後、有機層を減圧濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１０〜）で精製し、５−メチル−２−（５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール１．６ｇ（５９％）を得た。
【００９５】
工程４：５−メチル−２−（５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール５０ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ）、２．０Ｍトリメチルシリルジアゾメタン／ヘキサン０．１４ｍＬ（０．２８ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン０．０５０ｍＬ（０．２８ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル−メタノール（１０：１）２．２ｍＬの混合溶媒中、室温で１２時間攪拌した。反応終了後、反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで除水後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製し、３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化３−１）３３ｍｇ（６２％）を淡黄色無定形粉末として、５−メチル−２−（１−メチル−５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール（化３−２）と５−メチル−２−（１−メチル−３−フェニルピラゾール−５−イル）フェノール（化３−３）の混合物５．３ｍｇ（１０％）を単黄色固体として得た。
【００９６】
［化３−１］1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：2.40 (3 H, s), 3.99 (3 H, s), 6.85 (1 H, br. s), 6.89 (1 H, br. d, J = 7.8 Hz), 6.90 (1 H, s), 7 32 (1 H, tt, J = 7.8, 1.2 Hz), 7.43 (2 H, dd, J = 7.8, 7.8 Hz), 7.62 (2 H, d, J =, 7.8 Hz), 7.88 (2 H, dd, J = 7.8, 1.2 Hz)
【００９７】
［化３−２と３−３］1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：2.34 (3 H, s), 3.91 (3 H, s), 6.63 (1 H, s), 6.73 (1 H, br. d, J = 7.8 Hz), 6.86 (1 H, br. s), 7.44-7.52 (6 H, m), 10.79 (1 H, br. s)
【００９８】
実施例４：４−ジメチルアミノ−１−メチル−３，５−ジフェニルピラゾール（化４−１）及び４−ジメチルアミノ−３，５−ジフェニルピラゾール（化４−２）の製造
【００９９】
【化８】
【０１００】
工程１：１，３−ジフェニル−１，３−プロパンジオン６．７ｇ（３０ｍｍｏｌ）、亜硝酸ナトリウム２．１ｇ（３０ｍｍｏｌ）を、酢酸−水（１：１）４０ｍＬの混合溶液中、室温で６時間攪拌した。反応終了後、反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで除水後、減圧濃縮した。得られた組成生物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１０〜１：２）で精製し、２−ヒドロキシイミノ−１，３−ジフェニルプロパン−１，３−ジオン４．５ｇ（６０％）を得た。
【０１０１】
工程２：２−ヒドロキシイミノ−１，３−ジフェニルプロパン−１，３−ジオン２．０ｇ（７．９ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物４．０ｍＬ（８２ｍｍｏｌ）を、エタノール６０ｍＬ溶媒中で、実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をエタノールで再結晶し、４−アミノ−３，５−ジフェニルピラゾール１．６ｇ（８６％）を白色プリズム晶として得た。
【０１０２】
工程３：４−アミノ−３，５−ジフェニルピラゾール５０ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）、ヨウ化メチル０．１５ｍＬ（２．４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム３００ｍｇ（２．２ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル３ｍＬ溶媒中で、実施例１の工程３と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１）で精製し、４−ジメチルアミノ−１−メチル−３，５−ジフェニルピラゾール（化４−１）２８ｍｇ（４８％）及び４−ジメチルアミノ−３，５−ジフェニルピラゾール（化４−２）８ｍｇ（１４％）をそれぞれ単黄色固体として得た。
【０１０３】
［化４−１］1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：2.52 (6 H, s), 3.64 (3 H, s), 7.30 (1 H, tt, J = 7.8, 1.2 Hz), 7.37-7.53 (7 H, m), 8.04 (2 H, dd, 7.8, 1.2 Hz)
【０１０４】
［化４−２］1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：2.66 (6 H, s), 7.34-7.49 (6 H, m), 7.77 (4 H, br. d, J = 7.8 Hz)
【０１０５】
実施例５：４−アミノ−３，５−ジフェニル−１−メチルピラゾール（化５−１）及び４−メチルアミノ−３，５−ジフェニル−１−メチルピラゾール（化５−２）の製造
【０１０６】
【化９】
【０１０７】
実施例４の工程２で製造した４−アミノ−３，５−ジフェニルピラゾール５０ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物１０ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）、ヨウ化メチル３０ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ２ｍＬ溶媒中で実施例１の工程３と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝２：３）で精製し、４−アミノ−３，５−ジフェニル−１−メチルピラゾール（化５−１）４８ｍｇ（９１％）及び４−メチルアミノ−３，５−ジフェニル−１−メチルピラゾール（化５−２）４ｍｇ（７％）をそれぞれ単黄色固体として得た。
【０１０８】
［化５−１］1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：3.11 (1 H, br. s), 3.81 (3 H, s), 7.32 (1 H, tt, J = 7.8, 1.2 Hz), 7.42-7.48 (5 H, m), 7.53 (2 H, dd, J = 7.8, 7.8 Hz), 7.81 (2 H, dd, J = 7.8, 1.2 Hz)
【０１０９】
［化５−２］1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：2.50 (3 H, s), 3.77 (3 H, s), 7.32 (1 H, br. t, J = 7.8 Hz), 7.41-7.48 (5 H, m), 7.52 (2 H, dd, J = 7.8, 7.8 Hz), 7.87 (2 H, br. d, J = 7.8 hz)
【０１１０】
実施例６：４−アミノ−３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化６）の製造
【０１１１】
【化１０】
【０１１２】
工程１：アセトフェノン３３７ｍｇ（２．８ｍｍｏｌ）、２−メトキシ−４−メチル安息香酸エチル５３０ｍｇ（２．８ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物１３４ｍｇ（２．８ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ３７ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１３ｍＬ溶媒中で実施例１の工程１と同様に反応処理し、１−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−フェニルプロパン−１，３−ジオンを得た。
【０１１３】
工程２：１−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−フェニルプロパン−１，３−ジオン９０ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）、亜硝酸ナトリウム２４ｍｇ（０．３５ｍｍｏｌ）を、酢酸−水（１：１）２ｍＬの混合溶媒中で実施例４の工程１と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製し、２−ヒドロキシイミノ−１−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−フェニルプロパン−１，３−ジオン５０ｍｇ（５１％）を得た。
【０１１４】
工程３：２−ヒドロキシイミノ−１−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−フェニルプロパン−１，３−ジオン５０ｍｇ（７．９ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物１００ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）を、エタノール２ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１）で精製し、表題化合物３８ｍｇ（８０％）を淡黄色無定形粉末として得た。
【０１１５】
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：2.40 (3 H, s), 3.88 (3 H, s), 6.83 (1 H, br. s), 6.88 (1 H, br. d, J = 7.8 Hz), 7.33 (1 H, br. t, J = 7.8 Hz), 7.44 (2 H, dd, J = 7.8, 7.8 Hz), 7.56 (2 H, br. d, J = 7.8 Hz), 7.74 (2 H, br. d, J = 7.8 Hz)
【０１１６】
実施例７：４−アミノ−３，５−ビス（４−フルオロフェニル）ピラゾール（化７）の製造
【０１１７】
【化１１】
【０１１８】
工程１：４−フルオロアセトフェノン６９０ｍｇ（５．０ｍｍｏｌ）、４−フルオロ安息香酸エチル８４０ｍｇ（５．０ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物２４０ｍｇ（５．０ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ６６ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１５ｍＬ溶媒中で実施例１の工程１と同様に反応処理した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：２０）で精製し、１，３−ビス（４−フルオロフェニル）−１，３−プロパンジオン５３０ｍｇ（４１％）を得た。
【０１１９】
工程２：１，３−ビス（４−フルオロフェニル）−１，３−プロパンジオン２００ｍｇ（０．７７ｍｍｏｌ）、亜硝酸ナトリウム５３ｍｇ（０．７７ｍｍｏｌ）を、酢酸−水（１：１）４ｍＬの混合溶媒中で実施例４の工程１と同様に反応処理した。得られた組成生物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：２０〜１：２）で精製し、１，３−ビス（４−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシイミノ−１，３−プロパンジオン６０ｍｇ（２７％）を得た。
【０１２０】
工程３：１，３−ビス（４−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシイミノ−１，３−プロパンジオン６０ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物１００ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）を、エタノール２ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製し、クロロホルム−メタノール−ヘキサンで結晶化して、表題化合物３２ｍｇ（５９％）を淡黄色無定形粉末として得た。
【０１２１】
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：7.15 (4 H, dd, J = 8.5 Hz, 3JHF = 8.5 Hz), 7.64 (4 H, dd, J = 8.5 Hz, 4JHF = 5.4 Hz)
【０１２２】
実施例８：４−アミノ−３，５−ビス（４−メチルフェニル）ピラゾール（化８）の製造
【０１２３】
【化１２】
【０１２４】
工程１：４−メチルアセトフェノン６７１ｍｇ（５．０ｍｍｏｌ）、４−メチル安息香酸エチル８２１ｍｇ（５．０ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物２４０ｍｇ（５．０ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ６６ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１５ｍＬ溶媒中で実施例１の工程１と同様に反応処理した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：５０〜）で精製し、１，３−ビス（４−メチルフェニル）−１，３−プロパンジオン７２０ｍｇ（５７％）を得た。
【０１２５】
工程２：１，３−ビス（４−メチルフェニル）−１，３−プロパンジオン２００ｍｇ（０．７９ｍｍｏｌ）、亜硝酸ナトリウム５５ｍｇ（０．７９ｍｍｏｌ）を、酢酸−水（１：１）４ｍＬの混合溶媒中で実施例４の工程１と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）で精製し、１，３−ビス（４−メチルフェニル）−２−ヒドロキシイミノ−１，３−プロパンジオン４０ｍｇ（１８％）を得た。
【０１２６】
工程３：１，３−ビス（４−メチルフェニル）−２−ヒドロキシイミノ−１，３−プロパンジオン４０ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物７０ｍｇ（１．４ｍｍｏｌ）を、エタノール２ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンで結晶化して、表題化合物１４ｍｇ（３７％）を淡黄色無定形粉末として得た。
【０１２７】
1H-NMR(400MHz, DMSO-d6)δ：2.34 (6 H, s), 3.83 (2 H, s), 7.20-7.30 (4 H, br.), 7.50-7.70 (4 H, br.), 12.60 (1 H, s)
【０１２８】
実施例９：４−アミノ−３，５−ビス（４−メトキシフェニル）ピラゾール（化９）の製造
【０１２９】
【化１３】
【０１３０】
工程１：１，３−ビス（４−メトキシフェニル）−１，３−プロパンジオン２００ｍｇ（０．７０ｍｍｏｌ）、亜硝酸ナトリウム５０ｍｇ（０．７０ｍｍｏｌ）を、酢酸−水（１：１）４ｍＬの混合溶媒中で実施例４の工程１と同様に反応処理し、１，３−ビス（４−メトキシフェニル）−２−ヒドロキシイミノ−１，３−プロパンジオンを得た。
【０１３１】
工程２：１，３−ビス（４−メトキシフェニル）−２−ヒドロキシイミノ−１，３−プロパンジオン、ヒドラジン一水和物３５０ｍｇ（７ｍｍｏｌ）を、エタノール３ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンで結晶化して、表題化合物３８ｍｇ（２ｓｔｅｐ、２９％）を淡黄色無定形粉末として得た。
【０１３２】
1H-NMR(400MHz, DMSO-d6)δ：3.72 (2 H, br. s), 3.79 (6 H, s), 6.95-7.05 (4 H, br.), 7.55-7.75 (4 H, br.), 12.48 (1 H, s)
【０１３３】
実施例１０：３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール（化１０）の製造
【０１３４】
【化１４】
【０１３５】
工程１：アセトフェノン３６０ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）、イソニコチン酸エチル４５５ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物１４４ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ５０ｍｇ（０．１５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１５ｍＬ溶媒中で実施例１の工程１と同様に反応処理した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：５〜１：３）で精製し、１−フェニル−３−（４−ピリジル）−１，３−プロパンジオン４００ｍｇ（５９％）を得た。
【０１３６】
工程２：１−フェニル−３−（４−ピリジル）−１，３−プロパンジオン１００ｍｇ（０．４４ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物２２ｍｇ（０．４４ｍｍｏｌ）を、エタノール３ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をプレパラティブ薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、クロロホルム：メタノール＝１０：１）で精製し、メタノール−クロロホルム−ヘキサンで結晶化し、表題化合物７８ｍｇ（８０％）を白色結晶性粉末として得た。
【０１３７】
1H-NMR(400MHz, DMSO-d6)δ：7.19 (1 H, s), 7.34 (1 H, br. t, J = 7.6 Hz), 7.44 (2 H, dd, J = 7.6, 7.6 Hz), 7.48 (2 H, d, J = 5.9 Hz), 7.80 (2 H, br. d, J = 7.6 Hz), 8.59 (2 H, d, J = 5.9 Hz), 13.14 (1 H, br. s)
【０１３８】
実施例１１：４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール（化１１）の製造
【０１３９】
【化１５】
【０１４０】
工程１：実施例１０の工程１で製造した１−フェニル−３−（４−ピリジル）−１，３−プロパンジオン３００ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）、亜硝酸ナトリウム９２ｍｇ（１．３３ｍｍｏｌ）を、酢酸−水（１：１）４ｍＬの混合溶媒中で実施例４の工程１と同様に反応処理し、２−ヒドロキシイミノ−１−フェニル−３−（４−ピリジル）−１，３−プロパンジオン３００ｍｇを得た。
【０１４１】
工程２：２−ヒドロキシイミノ−１−フェニル−３−（４−ピリジル）−１，３−プロパンジオン３００ｍｇ、ヒドラジン一水和物６５０ｍｇ（１３．０ｍｍｏｌ）を、エタノール１０ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理した。得られた組成生物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１〜３：１）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンで結晶化して、表題化合物を淡黄色針状晶として得た。
【０１４２】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：3.38 (2 H, br. s), 7.39 (1 H, tt, J = 7.5, 1.2 Hz), 7.49 (2 H, dd, J = 7.5, 7.5 Hz), 7.59 (2 H, dd, J = 7.5, 1.2 Hz), 7.69 (2 H, d, J = 6.1 Hz), 8.66 (2 H, d, J = 6.1 Hz)
【０１４３】
実施例１２：３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール（化１２）の製造
【０１４４】
【化１６】
【０１４５】
イソニコチン酸エチルの代わりにニコチン酸エチルを用いて、実施例１０と同様に反応処理し、表題化合物を白色結晶性粉末として得た。
【０１４６】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：6.90 (1 H, s), 7.37 (1 H, ddd, J = 8.0, 4.9, 0.9 Hz), 7.40 (1 H, tt, J = 7.4, 1.3 Hz), 7.47 (2 H, dd, J = 7.4, 7.4 Hz), 7.68 (2 H, br. d, J = 7.4 Hz), 8.11 (1 H, br. d, J = 8.0 Hz), 8.60 (1 H, dd, J = 4.9, 1.8 Hz, 9.06 (1 H, d, J = 1.8 Hz)
【０１４７】
実施例１３：４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール（化１３）の製造
【０１４８】
【化１７】
【０１４９】
イソニコチン酸エチルの代わりにニコチン酸エチルを用いて、実施例１０の工程１及び実施例１１と同様に反応処理し、表題化合物を白色結晶性粉末として得た。
【０１５０】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：3.30 (2 H, br. s), 7.39 (1 H, br. t, J = 7.7 Hz), 7.40 (1 H, dd, J = 7.8, 4.9 Hz), 7.50 (2 H, dd, J = 7.7, 7.7 Hz), 7.61 (2 H, br. d, J = 7.7 Hz), 8.08 (1 H, br. d, J = 7.8 Hz), 8.60 (1 H, br. d, J = 4.9 Hz), 9.04 (1 H, br. s)
【０１５１】
実施例１４：５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール（化１２）の製造
【０１５２】
【化１８】
【０１５３】
イソニコチン酸エチルの代わりに２−ナフタレンカルボン酸メチルを用いて、実施例１０と同様に反応処理し、表題化合物を白色結晶性粉末として得た。
【０１５４】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：7.00 (1 H, s), 7.39 (1 H, t, J = 7.3 Hz), 7.48 (2 H, dd, J = 7.3, 7.3 Hz), 7.47-7.55 (2 H, m), 7.73-7.80 (2 H, m), 7.85-7.95 (4 H, m), 8.21 (1 H, br. s)
【０１５５】
実施例１５：４−アミノ−５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール（化１５）の製造
【０１５６】
【化１９】
【０１５７】
イソニコチン酸エチルの代わりに２−ナフタレンカルボン酸メチルを用いて、実施例１０の工程１及び実施例１１と同様に反応処理し、表題化合物を赤褐色結晶性粉末として得た。
【０１５８】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：3.49 (1 H, br. s), 7.39 (1 H, br. t, J = 7.4 Hz), 7.50-7.55 (2 H, m), 7.51 (2 H, dd, J = 7.4, 7.4 Hz), 7.70 (2 H, br. d, J = 7.4 Hz), 7.83-7.92 (3 H, m), 7.96 (1 H, br. d, J = 8.6 Hz), 8.16 (1 H, br. s)
【０１５９】
実施例１６：３−フェニル−５−（キノリン−４−イル）ピラゾール（化１６）の製造
【０１６０】
【化２０】
【０１６１】
イソニコチン酸エチルの代わりに４−キノリンカルボン酸メチルを用いて、実施例１０と同様に反応処理し、表題化合物を白色結晶性粉末として得た。
【０１６２】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：6.96 (1 H, s), 7.37-7.42 (1 H, m), 7.44-7.48 (2 H, m), 7.57-7.61 (2 H, m), 7.75 (2 H, dd, J = 8.3, 1.5 Hz), 7.76 (1 H, dd, J = 8.4, 1.5 Hz), 8.17 (1 H, br. d, J = 8.4 Hz), 8.52 (1 H, br. d, J = 4.4 Hz), 8.92 (1 H, d, J = 4.4 Hz)
【０１６３】
実施例１７：４−アミノ−３−フェニル−５−（キノリン−４−イル）ピラゾール（化１７）の製造
【０１６４】
【化２１】
【０１６５】
イソニコチン酸エチルの代わりに４−キノリンカルボン酸メチルを用いて、実施例１０の工程１及び実施例１１と同様に反応処理し、表題化合物を黄色結晶性粉末として得た。
【０１６６】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：2.15 (2 H, br. s), 7.37 (1 H, br. t, J = 7.3 Hz), 7.47 (2 H, dd, J = 7.3, 7.3 Hz), 7.53-7.62 (2 H, m), 7.71 (2 H, br. d, J = 7.3 Hz), 7.76 (1 H, ddd, J = 8.3, 6.8, 1.3 Hz), 8.17 (1H, br. d, J = 8.3 Hz), 8.17 (1H, d, J = 4.3 Hz), 8.92 (1H, br. d, J = 4.3 Hz)
【０１６７】
実施例１８：４−アミノ−３−（２−メトキシフェニル）−５−フェニルピラゾール（化１８）の製造
【０１６８】
【化２２】
【０１６９】
イソニコチン酸エチルの代わりにｏ−アニス酸メチルを用いて、実施例１０の工程１及び実施例１１と同様に反応処理し、表題化合物を淡黄色油状物として得た。
【０１７０】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：3.83 (3 H, s), 7.05 (1 H, br. d, J = 7.7 Hz), 7.11 (1 H, td, J = 7.7, 1.5 Hz), 7.32-7.37 (2 H, m), 7.48 (2 H, dd, J = 7.7, 7.7 Hz), 7.73 (1 H, dd, J = 7.7, 1.5 Hz), 7.75 (2 H, dd, J = 7.7, 1.5 Hz)
【０１７１】
実施例１９：３−（２−エトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化１９）の製造
【０１７２】
【化２３】
【０１７３】
イソニコチン酸エチルの代わりに２−エトキシ−４−メチル安息香酸エチルを用いて、実施例１０と同様に反応処理し、表題化合物を白色結晶性粉末として得た。
【０１７４】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：1.57 (3 H, t, J = 7.0 Hz), 2.39 (3 H, s), 4.23 (2 H, q, J = 7.0 Hz), 6.83 (1 H, br. s), 6.88 (1 H, br. d, J = 7.8 Hz), 6.91 (1 H, s), 7.32 (1 H, br. t, J = 7.4 Hz), 7.43 (2 H, dd, J = 7.4, 7.4 Hz), 7.62 (1 H, d, J = 7.8 Hz), 7.88 (2 H, br. d, J = 7.4 Hz), 11.34 (1 H, br. s)
【０１７５】
実施例２０：３−（２−メトキシ−５−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール（化２０）の製造
【０１７６】
【化２４】
【０１７７】
イソニコチン酸エチルの代わりに２−メトキシ−５−メチル安息香酸メチルを用いて、実施例１０と同様に反応処理し、表題化合物を黄色結晶性粉末として得た。
【０１７８】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：2.36 (3 H, s), 2.39 (3 H, s), 3.97 (3 H, s), 6.91 (1 H, s), 6.93 (1 H, d, J = 8.6 Hz), 7.11 (1 H, dd, J = 8.6, 1.7 Hz), 7.24 (2 H, d, J = 8.1 Hz), 7.54 (1 H, d, J = 1.7 Hz), 7.77 (2 H, d, J = 8.1 Hz)
【０１７９】
実施例２１：３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニル−４−プロピルピラゾール（化２１）の製造
【０１８０】
【化２５】
【０１８１】
工程１：バレロフェノン４９０ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）、２−メトキシ−４−メチル安息香酸エチル５９０ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）、５０％水素化ナトリウム鉱油分散物１５０ｍｇ（３．１ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６ ５０ｍｇ（０．１９ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１０ｍＬ溶媒中、還流下５時間攪拌した。反応終了後、反応液に１Ｎ塩酸及び水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで除水後、減圧濃縮し、２−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−フェニル−２−プロピルプロパン−１，３−ジオン４８０ｍｇを得た。
【０１８２】
工程２：２−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−フェニル−２−プロピルプロパン−１，３−ジオン４８０ｍｇ、ヒドラジン一水和物１００ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）を、エタノール５ｍＬ溶媒中で実施例１の工程２と同様に反応処理し、表題化合物１６ｍｇ（２段階２％）を白色固体として得た。
【０１８３】
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ：0.80 (3 H, t, J = 7.3 Hz), 1.44 (2 H, td, J = 7.3, 7.3 Hz), 2.42 (3 H, s), 2.65-2.69 (2 H, m), 3.87 (3 H, s), 6.84 (1 H, br. s), 6.88 (1 H, br. d, J = 7.8 Hz), 7 35 (1 H, br. t, J = 7.4 Hz), 7.36 (1 H, d, J = 7.8 Hz), 7.44 (2 H, dd, J = 7.4, 7.4 ), 7.65 (2 H, br. d, J = 7.4 Hz)
【０１８４】
［試験例］
試験例に使用した化合物は、実施例記載の方法で製造したものを使用した。
【０１８５】
試験例
本発明の３，５−ビスアリールピラゾール化合物によるＥＰＯ産生促進活性は、ＥＰＯプロモーター活性に基づいて測定した。
【０１８６】
＜材料と方法＞
ｐＧＬ３ ｂａｓｉｃ（プロメガ）のルシフェラーゼ遺伝子にヒトＥＰＯの５’プロモーター領域、及び３’エンハンサー領域を連結したベクターをリポフェクションによってヒト肝臓癌由来である細胞株ＨｅｐＧ２に遺伝子導入した。得られた安定発現株（ＨｅｐＧ２ ＥＰＯ−ｌｕｃ）を被検化合物の評価に使用した。次に、ＨｅｐＧ２ ＥＰＯ−ｌｕｃは、１０％ウシ胎児血清を含む最小必須培地（ＭＥＭ）（シグマ）を用いて９６ウェルプレートの各ウェルに５×１０3細胞ずつ播種した。その後、ＤＭＳＯに溶解した被検化合物を最終濃度１０μＭとなるように各ウェルに添加し、培地量を１ウェルあたり１００μｌとした。酸素濃度を４％としたＣＯ2インキュベーターで２４時間インキュベート後、ＥＰＯプロモーター活性として、Ｂｒｉｇｈｔ―Ｇｌｏ（商標）Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍ（プロメガ）を１００μｌ／ウェルで添加し、直ちに、ＡＲＶＯ（パーキンエルマー）を用いてルシフェラーゼ活性を測定した。上記方法は、Ｂｒｉｇｈｔ−Ｇｌｏ（商標）Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍに添付された取扱説明書に準じた。
【０１８７】
化合物を添加しない未刺激状態でのＥＰＯプロモーター活性を１００％とし、各化合物により誘導されたＥＰＯプロモーター活性（％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ）を求めた。結果を表１に示す。
【０１８８】
【表４】
【０１８９】
＜結果＞
被検化合物を濃度１０μＭ添加することにより、最大で２９６７％（化合物６）のＥＰＯ産生促進が認められた（表１参照）。このことから、これらの化合物にはＥＰＯ産生促進作用があることが明らかとなり、貧血治療剤として有用であることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【０１９０】
本発明は、一般式（１）で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物が、優れたＥＰＯ産生促進作用を有していることを初めて見出し、優れたＥＰＯ産生促進作用を有する経口投与可能な低分子性の貧血の予防及び／又は治療剤を提供するものである。本発明は、低分子性の新たな貧血の予防及び／又は治療剤を提供し、製薬工業において有用であり、産業上の利用可能性を有している。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（１）：
【化１】
［式中、
Ａ環は、ベンゼン環、ナフタレン環、ピリジン環又はキノリン環を示し、
Ｒ１は、水素原子又はＣ１−６アルキル基を示し、
Ｒ２は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基、Ｃ１−６アルキルアミノ基又はジＣ１−６アルキルアミノ基を示し、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、同一又は異なってもよく、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン原子、水酸基又はカルボキシル基を示す］
で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＥＰＯ産生促進剤。
【請求項２】
一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤。
【請求項３】
一般式（１）中、Ａ環が下式：
【化２】
［式中、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は前記と同じものを示す］
から選択される化合物である、請求項１又は２に記載の剤。
【請求項４】
次の化合物群、
４−［１−メチル−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸、
４−［１−メチル−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−５−イル］安息香酸、
５−メチル−２−（１−メチル−５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール、
５−メチル−２−（１−メチル−３−フェニルピラゾール−５−イル）フェノール、
４−ジメチルアミノ−３,５−ジフェニルピラゾール、
４−メチルアミノ−３,５−ジフェニル−１−メチルピラゾール、
４−アミノ−３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール、
４−アミノ−３,５−ビス（4−フルオロフェニル）ピラゾール、
４−アミノ−３，５−ビス（４−メチルフェニル）ピラゾール、
４−アミノ−３，５−ビス（４−メトキシフェニル）ピラゾール、
３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール、
４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール、
３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール、
４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール、
５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール、
４−アミノ−５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール、
３−フェニル−５−（キノリン−４−イル）ピラゾール、
４−アミノ−３−フェニル−５‐（キノリン−４−イル）ピラゾール、
４−アミノ−３−（２−メトキシフェニル）−５−フェニルピラゾール、
３−（２−エトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール、
３−（２−メトキシ−５−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール、及び
３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニル−４−プロピルピラゾール
から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物。
【請求項５】
請求項４記載の化合物群から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の１種又は２種以上の化合物、及び医薬として許容される担体とを含有してなる医薬組成物。
【請求項６】
ＥＰＯの産生を促進させるためのものである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
貧血の予防及び／又は治療用である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項１】
次の一般式（１）：
【化１】
［式中、
Ａ環は、ベンゼン環、ナフタレン環、ピリジン環又はキノリン環を示し、
Ｒ１は、水素原子又はＣ１−６アルキル基を示し、
Ｒ２は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、アミノ基、Ｃ１−６アルキルアミノ基又はジＣ１−６アルキルアミノ基を示し、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、同一又は異なってもよく、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン原子、水酸基又はカルボキシル基を示す］
で表される３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＥＰＯ産生促進剤。
【請求項２】
一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする貧血の予防及び／又は治療剤。
【請求項３】
一般式（１）中、Ａ環が下式：
【化２】
［式中、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は前記と同じものを示す］
から選択される化合物である、請求項１又は２に記載の剤。
【請求項４】
次の化合物群、
４−［１−メチル−５−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−３−イル］安息香酸、
４−［１−メチル−３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）ピラゾール−５−イル］安息香酸、
５−メチル−２−（１−メチル−５−フェニルピラゾール−３−イル）フェノール、
５−メチル−２−（１−メチル−３−フェニルピラゾール−５−イル）フェノール、
４−ジメチルアミノ−３,５−ジフェニルピラゾール、
４−メチルアミノ−３,５−ジフェニル−１−メチルピラゾール、
４−アミノ−３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール、
４−アミノ−３,５−ビス（4−フルオロフェニル）ピラゾール、
４−アミノ−３，５−ビス（４−メチルフェニル）ピラゾール、
４−アミノ−３，５−ビス（４−メトキシフェニル）ピラゾール、
３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール、
４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−４−イル）ピラゾール、
３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール、
４−アミノ−３−フェニル−５−（ピリジン−３−イル）ピラゾール、
５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール、
４−アミノ−５−（ナフタレン−２−イル）−３−フェニルピラゾール、
３−フェニル−５−（キノリン−４−イル）ピラゾール、
４−アミノ−３−フェニル−５‐（キノリン−４−イル）ピラゾール、
４−アミノ−３−（２−メトキシフェニル）−５−フェニルピラゾール、
３−（２−エトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール、
３−（２−メトキシ−５−メチルフェニル）−５−フェニルピラゾール、及び
３−（２−メトキシ−４−メチルフェニル）−５−フェニル−４−プロピルピラゾール
から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物。
【請求項５】
請求項４記載の化合物群から選ばれる３，５−ビスアリールピラゾール化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の１種又は２種以上の化合物、及び医薬として許容される担体とを含有してなる医薬組成物。
【請求項６】
ＥＰＯの産生を促進させるためのものである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
貧血の予防及び／又は治療用である、請求項５に記載の医薬組成物。
【公開番号】特開２０１１−４２５９１（Ｐ２０１１−４２５９１Ａ）
【公開日】平成２３年３月３日（２０１１．３．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１９０１１２（Ｐ２００９−１９０１１２）
【出願日】平成２１年８月１９日（２００９．８．１９）
【出願人】（０００１６３００６）興和株式会社 (618)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年３月３日（２０１１．３．３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年８月１９日（２００９．８．１９）
【出願人】（０００１６３００６）興和株式会社 (618)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]