４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン（ローズベンガル）及び関連するキサンテンを合成するプロセス
高純度のヨウ化キサンテンを製造する新規なプロセスは、環化の工程と、それに続くヨウ素化の工程とを含む。抽出工程、クロマトグラフ濃縮又は溶媒濃縮の工程は一切不要であり、中間及び最終化合物には、ろ過又は類似の手段を用いる。このプロセスでは、１種類の有機溶媒の使用を要し、１００℃未満で工程を完了させる。
塩化物イオン、塩化物フリーラジカル、次亜塩素酸イオン、又は次亜塩素酸を、試薬から除外し、また、これらを酸化剤の存在下においてインサイチュで生成しうる試薬から除外することで、不純物の不都合な生成を回避できる。新規な化合物をいくつか想定し、上記方法を用いて単離した。これらの新規な化合物は、新規な薬剤中に処方することもできる。
塩化物イオン、塩化物フリーラジカル、次亜塩素酸イオン、又は次亜塩素酸を、試薬から除外し、また、これらを酸化剤の存在下においてインサイチュで生成しうる試薬から除外することで、不純物の不都合な生成を回避できる。新規な化合物をいくつか想定し、上記方法を用いて単離した。これらの新規な化合物は、新規な薬剤中に処方することもできる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願発明は、高純度のローズベンガル、ローズベンガルラクトン及び関連するキサンテンを調製又は合成及び単離する方法に関し、また、高純度のローズベンガル、ローズベンガルラクトン及び関連するキサンテンにも関する。
本願発明の１つの側面は、個々の有機不純物を最大で２重量％、好ましくは０．１５重量％未満含む、ヨウ化フルオレセイン（ｉｏｄｉｎａｔｅｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ）誘導体を調製するための合成手順に関する。
【０００２】
不純物を０．１５％又は１５００ｐｐｍ以下に調整することは、医薬的な実用性に関わる。なぜならこの値は、医薬品規制調和会議（ＩＣＨ）のガイドラインに適合するための、安全確認の必要な閾値を表しているためである。
そのため本願発明の別の側面は、本明細書に開示する新規化合物の、医薬的な実用性と同定とに関する。上記合成は、この新規化合物の医薬的な実用性と同定とのために、その生成を調整するよう特別に設計されている。
【背景技術】
【０００３】
フルオレセインの構造モチーフ及び、無水フタル酸とレソルシノールからの一工程環化は、１８７１年にＢａｅｙｅｒ（Ｂｅｒｉｃｈｔｅ．１８７１：４，５５５）によって初めて記載されたと考えられている。
Ｇｒａｅｂｅ（Ａｎｎａｌｅｎ．１８８７：１８，３１８）は、その報告書の中で、レソルシノールに対する過剰量（１．３当量）の無水フタル酸の使用に言及しており、ハロゲン化無水フタル酸を、環化の基体として初めて用いた人物であると考えられている。
ジクロロフルオレセインのヨウ素化は、１８８７年のＬｅ Ｒｏｙｅｒの報告書（Ａｎｎａｌｅｎ．１８８７：２３８，３５９）で、初めて文献に登場した。
【０００４】
２０世紀には、フルオレセイン類似体にいくつかの用途が生じた。
これらの化合物は繊維染料、生物学的染料、不揮発性メモリ装置のビルディングブロック、熱画像形成基体、食用及び化粧用着色剤として使用されてきた。
例えば、エリスロシン（ＦＤ＆ＣＮｏ．３）及び部分的にヨウ素化されたエリスロシン（Ｄ＆Ｃ Ｎｏｓ．１１及び１２）は、食用、薬用及び化粧用染料として用いられる。
特定のテトラヨード（ｔｅｔｒａ−ｉｏｄｏ）キサンテン、即ちローズベンガルは、眼疾患の可視化や、また放射標識された形で肝機能の医療診断にも使用されており、１９６５年に米国薬局方に記載されている。
【０００５】
非ハロゲン化類似体の合成や、フルオレセインモチーフの生成についての関心が広まる一方で、ローズベンガルのキサンテン核を作り出す環化の技術は、１８８０年代の技術（ふたの開いたやかんで高温溶融する）から実質的には改良されてこなかった。
周知の合成方法では、残留溶媒と、副反応や分解プロセスに由来する無機及び有機化合物とを含む、予測不能で特性決定もできない雑多な不純物が生産されてしまう。
【０００６】
食用又は診断用の染料など、産業応用における既存の用途においては、多くの場合、不純物は容認できるものであった。
例えば米国連邦規則集（ＣＦＲ）では、ＦＤ＆Ｃ Ｎｏ．３（エリスロシン）について、モノヨード（ｍｏｎｏ−ｉｏｄｉｎａｔｅｄ）不純物１％以下、ヨウ化フルオレセイン９％以下、という不純物レベルを許容している。
ＣＦＲはまた、環化工程に由来する残留不純物、例えば、部分的にヨウ素化されたフタル酸やレソルシノール（例えば、Ｋａｍｉｋｕｒａ，Ｓｈｏｋｕｈｉｎ Ｅｉｓｅｉｇａｋｕ Ｚａｓｓｈｉ１９８５：２６，２４３及び、Ｗａｄａ ｅｔ ａｌ．，Ｆｏｏｄ．Ａｄｄ．Ｃｏｎｔａｍ．２００４：２１，１１３７参照）なども許容している。
【０００７】
こうした従来の着色剤の規格は、現代の医薬品規制調和国際会議（ＩＣＨ）による新原薬についてのガイドラインと著しく性質が異なる。ＩＣＨによる新原薬についてのガイドラインでは、０．０５％以上の不純物を報告すること、０．１％以上のレベルで存在する全ての有機不純物を網羅的に同定すること、及び、０．１５％をこえる全ての不純物について徹底的な毒性試験（ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃ ｑｕａｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ）を行うことを課しており、さらに無機不純物にも制限を設け、残留溶媒には特に厳しい制限を設けている。
そのため、このクラスの化合物を治療量、体内に導入するにあたっては、よく管理された（ｗｅｌｌ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ）予測可能かつ再現可能な合成の実施が、必須かつ最優先の事項となる。
このような規格では、合成工程又は精製の間に雑多な不純物が予測不能な発生をすることは、特に非経口薬となりうる製剤の生成においては認められない。
【０００８】
米国薬局方ＸＸＩＩでは、試薬級のローズベンガルを作製するのに、ＨＣｌを用いて、酸塩基操作によりローズベンガルを精製するよう推奨している。
本願の発明者らは、過酸化水素又はオキソンといった酸化剤の存在下で、ヨウ化フルオレセインを、水溶性塩化物イオンを含む又は発生させる試薬で処理すると、１つ以上のヨウ素（Ｉ）が塩素（Ｃｌ）にトランスハロゲン化（ｔｒａｎｓｈａｌｏｇｅｎａｔｅｄ）される副反応が起こるという、驚くべき事実を発見した。
【０００９】
この副反応は、塩化物フリーラジカル（ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌ）、次亜塩素酸イオン、又は次亜塩素酸が存在するときにも起こる。
ローズベンガル調製中のこの副反応は、以前は報告されていなかった。この不都合な副反応を防ぐためには、環化工程、ヨウ素化工程、及びいかなる精製スキームも慎重に調整しなければならない。
【００１０】
ヨウ化フルオレセイン類似体については以前から記載があり、中にはこれら類似体を“ハロゲン”の語で一般的に（ｇｅｎｅｒｉｃａｌｌｙ）表しているものも多く見られる。しかしこれら先行文献の中で、ヨードレソルシノールから、ヨードキサンテン置換されたフルオレセインを、直接的に合成可能にすると考えられるものはない。
さらに、これら先行文献の中で、分子中に少なくとも１つのヨウ素を含むことを要件とするものはない。また、これらの化合物の医薬的実用性はヨウ素によって確実に左右されるのだが、この医薬的実用性について特許請求しているものもなかった。
【００１１】
フルオレセインの主な用途が非治療目的であったため、この化合物クラスにおいて高純度の有効成分を調製するのに必要な方法や、ヒトの治療や着色剤として実用されうる微量な副生成物を同定、特性決定、及び合成するための方法の、記載や実施化に関する情報が不足してしまっている。
ヨウ化キサンテンは、様々な文献において、実施例として一般的に（ｇｅｎｅｒｉｃａｌｌｙ）含まれており、ローズベンガルは１８８０年代に初めて記載された周知の化合物である。
【００１２】
しかし先行文献では、キサンテン核上で少なくとも１つのヨウ素（Ｉ）と少なくとも１つの塩素（Ｃｌ）が置換されている、トランスハロゲン化（ｔｒａｎｓｈａｌｏｇｅｎａｔｅｄ）された微量生成物を、単離又は同定することについては記載しておらず、その存在可能性すら開示も示唆もしていない。
【００１３】
本願の発明者らは、ローズベンガルの商用見本において、これらの化合物が最大で２重量％まで存在しうるということを発見した。
さらに、先行文献は、低級ヨウ化（ｌｏｗｅｒ ｉｏｄｉｎａｔｅｄ）キサンテン汚染物質（例えば、現行のＣＦＲ ７４．３０３におけるエリスロシンの認定において、９％以上の含有が認められないような物質）について言及しているが、この物質において２’又は４’が水素で置換され、ヨウ素が３つとなった（トリヨードの）ものや、それに対応するアトロプ異性体（下記図１−ｑ−Ｒ及び１−ｑ−Ｓ参照。この骨格を有するアトロプ異性体に関する議論については、[特許文献１]参照）の、構造も名前も提示していない。
またこれらの先行文献は、キサンテン核上のＩ／Ｃｌが独立に置換されているものに関して、その単離や合成を可能とすることについて教示も示唆もしていない。
【００１４】
本願発明は、医薬としての実用に必要な基準をみたすよう、これらの副生成物を同定、特性決定するとともに、その合成を調整する効果的な方法を確立する。
さらに本願発明のプロセスは、これら副生成物の不都合な生成をさけ、多種の溶媒を用いずに済むようにし、試薬に厳しい制限を設けることで、操作性、収率、純度を向上させ、このプロセスの医薬的使用への適用性をより高めている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】米国特許番号６６４９７６９号
【発明の概要】
【００１６】
本願発明は、医薬的使用のために製造される、式３及び式４のヨウ化キサンテン中の不純物レベルを調整する物質と方法、これらのヨウ化キサンテン化合物を製造するプロセス、及び、関連性はあるが従来は想定されてこなかった、トランスハロゲン化された（ｔｒａｎｓｈａｌｏｇｅｎａｔｅｄ）不純物の開示に関する。
【００１７】
本願発明はまた、上記と同様のヨウ化キサンテンを調製するための物質と方法、特に、エリスロシン（ＦＤ＆Ｃ３）、ローズベンガル、及びその他の関連するヨウ化キサンテンを、医薬的な使用に適した純度で調製するプロセスに関する。
１つの実施形態では、このプロセスにおいて有機溶媒を１種類だけ、低温（１００℃未満）で用いる。またこの実施形態では、不純物の生成をさけるため、厳選した添加剤及び調整剤を用いることを課している。
【００１８】
トランスハロゲン化された不純物の生成をさけるには、例えば反応混合物中の、特にヨウ素化工程における反応混合物中の塩化物イオンを、１５００ｐｐｍ未満に制限すればよい。
抽出の工程、クロマトグラフ濃縮又は溶媒濃縮の工程は一切不要であり、ろ過又は類似の手段を用いて、中間及び最終化合物を単離する。
【００１９】
本願発明はまた、特定の類似体及び新規化合物、特に上記に開示した方法によって作製又は回避されるものも対象とする。そしてこれらの化合物を、単離又は同定し、創薬、製薬、化粧品、及び着色剤における使用に適用する。
さらなる実施形態では、式３の化合物：
【００２０】
【化１】
【００２１】
（式中、各Ｒ１は独立にＣ１〜Ｃ４アルキル、ハロゲン又はＨ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＩ、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＩ；各Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）を調製するためのプロセスを提示する。
【００２２】
このプロセスは、式３の化合物（式中、各Ｒ１は独立にＣ１〜Ｃ４アルキル、ハロゲン又はＨ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＦ、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＨ）を、水溶性塩基の存在下でヨウ素（Ｉ２）と反応させ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つをＩで置換することを含む。
【００２３】
別の実施形態では、式３の化合物（式中、各Ｒ１は独立にＣ１〜Ｃ４アルキル、ハロゲン又はＨ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨ；各Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）を作製する方法を対象とする。
この方法は、式１の化合物：
【００２４】
【化２】
（式中、各Ｒ１は独立にハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨ）を、式２の化合物：
【００２５】
【化３】
（式中、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０は独立にＦ、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨ；Ｒ９はＨ）と反応させることを含む。
【００２６】
さらなる実施形態では、式３の誘導体（式中、各Ｒ１は独立にハロゲン又はＨ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＩ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ又はＨで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＣｌ；Ｒ６はＨ）を作製する方法を対象とする。
この方法は、式３の化合物を、塩素ラジカル、塩化物イオン、又はインサイチュ（例、次亜鉛素酸ナトリウム溶液、又は次亜塩素酸など）で発生した塩化物イオンと反応させ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうちＩ又はＢｒであるものを、いずれも独立にＣｌで置換できるようにすることを含む。
【００２７】
別の実施形態は、式３の化合物（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された１つ又は２つはＣｌ；各Ｒ１は独立にＢｒ、Ｆ、Ｃｌ、又はＩ；ただし前提として、Ｃｌ又はＨでないＲ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はいずれもＩで、各Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）に関する。
【００２８】
本明細書に記載される式３の化合物は、創薬、製薬、化粧品、着色剤に関する産業において有用な性質を有している。
したがって本願発明は、局所又は体内投与用の薬剤に含まれる、特許請求された化合物にも関する。これには、特許請求された化合物が、ヒト又は動物の疾患用の、化学療法的又は光力学的治療のための薬剤に有効成分と含まれる場合も該当する。
【００２９】
本明細書の定義における、式３の化合物、その生産方法、薬剤、及び使用は、ラクトン型（式３）からキノイド型（式４）（式中、Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ又は、Ｎａ、Ｋ、Ｌｉ、又は、塩を生成できるその他の対イオン）に変換するためにけん化又は反応させられた、上記化合物の全ての形態を含む。
【００３０】
【化４】
【００３１】
さらなる実施形態では、本願発明は式４の化合物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ）を調製する方法に関する。
式３ａの化合物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＨ）を、実質的に塩化物イオンを含まない溶液中でヨウ素と化合させ、式４の化合物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ）を生成することで、式４の化合物を調製する従来の方法を本質的に改良することができる。
【００３２】
この改良には、式４の化合物のトランスハロゲン化された誘導体（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＣｌで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうちＣｌでないものはいずれもＩ；Ｒ６はＨ）が実質的に存在しない、ということも含まれる。
さらなる実施形態では、本願発明は式３の化合物：
【００３３】
【化５】
【００３４】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ）を調製する方法に関し、この方法は、以下の工程１及び２を含む。
【００３５】
工程１：式１の化合物：
【００３６】
【化６】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ）を、約２当量の式２の化合物：
【００３７】
【化７】
【００３８】
（式中、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０はＨ）と、酸性溶液中で化合させ；
２０℃から２５０℃の温度、好ましくは８５℃から９５℃の温度で撹拌し；
結果として得られる式３ａの環化中間生産物：
【００３９】
【化８】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＨ）を単離する。
【００４０】
工程２：式３ａの中間体を、塩化物イオンを含まない水溶液と化合させ；
式３ａの中間体の溶液をヨウ素（Ｉ２）で処理し、２０℃から１００℃の温度で、式３ａから式３への変換が実質的に完了するまでの間、撹拌し（なお、式３への変換が実質的に完了しているかは、例えばＨＰＬＣ又は類似の手段で測定される）；
式３を含む反応混合物を、塩化物イオンを含まないヨウ素捕捉剤でクエンチし；
クエンチした反応混合物を、塩化物イオンを含まない酸性溶液で、ｐＨ５未満に酸性化し；
式３の最終生産物を単離する。
【００４１】
式３の化合物を調製する上記方法では、工程１において式１と式２の化合物とを化合させる酸性溶液が、塩化物イオンと、塩化物イオンを特に反応混合物中で生産しうる試薬とを、それぞれ実質的に又は完全に含まない、ことがさらに好まれる。
式３の化合物を調製する上記方法では、工程２における式３ａの中間体が、塩化物イオンと、塩化物イオンを特に反応混合物中で生産しうる試薬又は不純物とを、それぞれ実質的に又は完全に含まない、こともさらに好まれる。
【００４２】
式３の化合物を調製する上記方法では、式３ａの中間体とヨウ素とを化合させる溶液が、塩基性ｐＨを有する、こともさらに好まれる。
式３の化合物を調製する上記方法のバリエーションの１つでは、式３の化合物を調製する方法の工程１において、式１の化合物を、２当量未満の式２の化合物と化合させることもありうる。
【００４３】
しかしこの実施形態は、好ましい実施形態の化学量論比を用いた場合より、式３の収率が低くなるため、あまり好ましくない。
さらに別の実施形態では、本願発明は式３の化合物：
【００４４】
【化９】
【００４５】
（式中、Ｒ１は独立にＩ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＩ、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち１つから３つはＩ）を調製する方法に関し、この方法は以下の工程１及び２を含む。
【００４６】
工程１：式１の化合物：
【００４７】
【化１０】
（式中、Ｒ１は独立にＩ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨ）と、１当量の式２の化合物：
【００４８】
【化１１】
【００４９】
（式中、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０は独立にＦ、Ｃｌ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキルで、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０のうち少なくとも２つはH；とＲ９はＨ）とを、塩化物イオンと、塩化物イオンを反応混合物中で生産しうる試薬又は不純物とをそれぞれ実質的に又は完全に含まない酸性溶液中で化合させ；
これを２０℃から２５０℃の温度で撹拌し；
結果として得られる式３ａの環化中間生産物を、例えばろ過又は類似の手段で単離する。
【００５０】
【化１２】
【００５１】
工程２：続いて、塩化物イオンと、塩化物イオンを生産しうる不純物又は不純物とを完全に又は実質的に含まない式３ａの中間体を、塩化物イオンを完全に又は実質的に含まない水溶液と化合させ；
式３ａの中間体の水溶液をヨウ素（Ｉ２）で処理し；
２０℃から１００℃の温度で、式３ａから式３への変換が実質的に完了するのに十分な時間、撹拌し（なお、式３への変換が実質的に完了しているかは、ＨＰＬＣ又は類似の手段で測定される）；
式３の化合物を含む反応混合物を、塩化物イオンを含まないヨウ素捕捉剤でクエンチし；
このクエンチした反応混合物を、塩化物イオンを含まない酸性溶液で、ｐＨ５未満に酸性化し；
最終生産物をろ過又は類似の手段で単離する。
【００５２】
式３の化合物を調製する上記方法では、工程２において、式３ａの中間体とヨウ素とを化合させる水溶液が、塩基性ｐＨを有することが好まれる。
工程２では、式３への変換が少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％、最も好ましくは少なくとも９８％、完了するのに十分な時間、撹拌を続けることがさらに好まれる。この時間は、通常約１から２４時間の範囲で、より好ましくは約２から１８時間の範囲である。
【００５３】
別の実施形態において、本願発明は式４の化合物（式中、Ｒ１は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つの置換基はＩで、他の置換基の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）及び、その全ての（ａ）互変異性体、（ｂ）アトロプ異性体、（ｃ）式３に表されるような閉環ラクトン型、（ｄ）式３に表されるラクトン型のエナンチオマー、（ｅ）医薬的に許容可能な塩に関する。
【００５４】
【化１３】
【００５５】
【化１４】
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１−ａ】４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’，７’−テトラヨードフルオレセイン又はローズベンガルラクトン、を示す。
【図１−ｂ】４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラブロモ−２’，４’，５’，７’−テトラヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｃ】２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−４’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｄ】４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−２’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｅ】２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−４’，５’−ジヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｆ】４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−２’，７’−ジヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｇ】２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−４’，７’−ジヨードフルオレセイン）を示す。
【図１−ｈ】４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｉ】４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，７’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｊ】４，５，６，７−テトラブロモ−２’−クロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’−クロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｋ】４，５，６，７−テトラブロモ−４’−クロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４’−クロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−２’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｌ】４，５，６，７−テトラブロモ−２’，７’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，７’−ジクロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’−ジヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｍ】４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４’，５’−ジクロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−２’，７’−ジヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｎ】４，５，６，７−テトラブロモ−２’，５’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，５’−ジクロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−４’，７’−ジヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｏ】４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラブロモ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｐ】４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラブロモ−２’，４’，７’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｑ】１−ｑ−Ｒは非対称に置換されたキサンテンのアトロプ異性体（ａＲ体の表示）を示し、１−ｑ−Ｓは非対称に置換されたキサンテンのアトロプ異性体（ａＳ体の表示）を示す。
【図１−ｒ】４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−７’−イソプロピル−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：７’−イソプロピル−４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｓ】２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，５，７−テトラヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸二ナトリウム塩、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’，７’−テトラヨードフルオレセイン二ナトリウム又はローズベンガル、を示す。
【発明を実施するための形態】
【００５７】
＜語句の定義＞
“Ｃ１〜Ｃ４アルキル”は、直鎖型及び分岐型の、飽和又は不飽和の炭化水素類を示し、これらは通常、特定の数の炭素原子を有している。“Ｃ１〜Ｃ４アルキル”は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｉ−ブチル、及びｔ−ブチル、を例として含むが、これらに限定はされない。
【００５８】
“ハロ”及び“ハロゲン”という語は、互換的に用いることができ、いずれもフロロ基、クロロ基、ブロモ基、及びヨード基を示しうる。
“塩化物を実質的に含まない”及びこれに類似の表現は、反応条件、試薬、又は中間化合物が、式３、式３ａ、又は式４のトランスハロゲン化された不純物の、０．１５％（例、１５００ｐｐｍ）以上のレベルにおける不都合な生成を十分に回避できる純度において、塩化物イオン、塩化物イオンを含む不純物、又は塩化物イオンを含むこと、あるいは、上記のような反応条件、試薬、又は中間化合物が、塩化物イオン、塩化物イオンを含む不純物、又は塩化物イオンを発生させうる不純物を、１５００ｐｐｍ以下のレベルで含むこと、を示す。
【００５９】
“トランスハロゲン化された不純物を実質的に含まない”及びこれに類似の表現は、式３及び式４の化合物（式中、Ｒ１又は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＣｌで、他はＩ；Ｒ６はＨ）が、０．１５％（例、１５００ｐｐｍ）以下のレベルで存在することを示す。
【００６０】
＜一般的（ｇｅｎｅｒｉｃ）構造の表示＞
簡略化のため、式３、式３ａ、式３ｂ、式４の各種の中間及び最終生産物を、その一般的な（ｇｅｎｅｒｉｃ）ラクトン又はキノイド異性型で図示する。
ただし、ｐＨその他の条件によっては、その代わりとなる異性型（例、ラクトンの代わりにキノイド、キノイドの代わりにラクトン）で図示することもある。
なおこのような一般的（ｇｅｎｅｒｉｃ）表示は、図示した特定の異性型に開示を限定することを意図したものではない。
【００６１】
＜反応スキーム＞
スキームＩは、例えば式３のようなヨウ化キサンテンを作製する方法に関する、本願発明の１つの実施形態を示す。
この方法は、無水フタル酸（式１）を過剰量のレソルシノール（式２）と反応させて、式３ａの化合物（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＩではなく、Ｒ２〜Ｒ５のうち少なくとも１つはＨ）を得ることを含む。
式３ａの化合物を、最低限単離した後にヨウ素化して、式３の化合物（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＩで置換されている）を得る。
【００６２】
【化１５】
【００６３】
環化反応（上記工程１）は、ニート（ｎｅａｔ）から１０％（水中）のメタンスルホン酸（ＭＳＡ）を用いて、０℃から還流温度で実施することができる。
好ましい実施形態では、未希釈のメタンスルホン酸を、８５℃〜９５℃で、１〜１６時間用いる。
【００６４】
さらに好ましい実施形態では、２〜６倍量のＭＳＡ、より好ましくは４〜５倍量のＭＳＡ、さらに好ましくは約４．８倍量のＭＳＡを用いる。
環化を起こすために、代替的にはｐ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、硫酸又はトリフルオロメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酢酸、プロピオン酸、トリフルオロ酢酸、カンファースルホン酸、又は、
【００６５】
以下：融点約２５０℃未満のアルキルスルホン酸又はアリールスルホン酸、融点約２５０℃未満のアルキルカルボン酸又はアリールカルボン酸、塩化物でないブレンステッド酸、塩化物でないか塩素が固定されているルイス酸、のうち１つ以上を含む酸性溶液、又は、
上記物質それぞれの重合体又は塩の調製物、又はその水溶液を、単独で、又はメタンスルホン酸と共に用いることができる。
式３ａへの環化は、実質的に化学量論量の反応物を（例、式１のレソルシノールと式２の無水フタル酸を、２：１の比率で）用いて実施できる。
【００６６】
さらなる実施形態では、無水フタル酸を確実に全て消費するために、過剰量（例、約２．５当量から約３当量以上、より好ましくは約３．２当量以上）のレソルシノールを用いて反応を実施することが好まれる。
式３ａを単離した後、結果として得られる固体は、純度向上のために再懸濁することができる。この際、撹拌はしてもしなくてもよい。
【００６７】
再懸濁においては、好ましくは水及び、アセトンと水又はＤＭＦと水の混合物を、５０℃から７０℃まで加熱して用い、より好ましくはアセトンと水を約６０℃で用いる。
単離と再懸濁は、式３ａの物質が所望の純度となるまで繰り返してよい。
ヨウ素化反応（上記工程２）は、モル過剰量のヨウ素（Ｉ２）を、好ましくは塩基性条件下で用いて実施することができる。
【００６８】
例えば、０．１〜５Ｍの水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、重炭酸ナトリウム、又は重炭酸カリウムを、０℃から還流温度で用いて、この反応を実施することができる。
好ましい実施形態では、０．４〜１．０Ｍ ＮａＯＨを７０〜９５℃で用いて、この反応を実施する。
ヨウ素を反応混合物に溶かすために、ＫＩ、ＮａＩ、又はＫＩとＮａＩの混合物、例えば１〜２．５当量のＮａＩを用いることができる。
反応時間は１〜２４時間で、これはキサンテン環構造に加わったヨウ素原子の数に左右される。
【００６９】
さらなる実施形態では、反応時間、温度、又は塩基濃度を変化させて、ヨウ素化の度合いを調整することができる。
この反応に用いるヨウ素は、例えばオキソンや過酸化水素などの酸化剤と、ヨウ化物塩とを用いて、インサイチュで発生させてもよい。ここで前記ヨウ化物塩は、ヨウ化カリウム、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、又はそれらの混合物から選択されたものである。
【００７０】
この特定の例については、不都合なトランスハロゲン化を引き起こしうる成分、例えば塩化物水溶液、塩素、ＨＣＬ、又はハロゲンイオンを生成しうるその他の成分が、反応混合物中に含まれないようにすることが好まれる。ただし、これらの成分が加わる前に、気体の酸素又はヨウ素を含む、あらゆる酸化剤を除去又はクエンチした場合はこの限りでない。
【００７１】
反応混合物中の成分として、例えば次亜塩素酸ナトリウムは、不安定な塩化物イオンや強力な酸化剤の発生源となるため、特に不都合である。また、塩化物イオン、塩化物ラジカル、その他の次亜塩素酸誘導体、次亜塩素酸、及びそれらの混合物も、不都合な副反応を引き起こしうる。
反応が完了したら、反応混合物を約−２０℃から１０℃、好ましくは１０℃未満に冷ます。そして、ヨウ素捕捉剤、例えばチオ硫酸ナトリウム、チオ硫酸カリウム、チオ硫酸アンモニウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸ナトリウム、又はその混合物、を加えてヨウ素をクエンチする。さらに好ましい実施形態では、クエンチするのに亜硫酸ナトリウムを用いる。
【００７２】
反応混合物を、好ましくは１０℃未満に保ったまま、ニート（ｎｅａｔ）から１％の硫酸水溶液、好ましくは５％の硫酸水溶液でｐＨ１．５から５の間に調節すると、式３が水溶液から沈澱し、これを簡単に単離することができる。好ましい実施例では、ｐＨを１．５から３の間に調節する。
【００７３】
式３ａを単離した結果として得られる固体を、室温で再懸濁してさらに単離し、不純物を除去することができる。これには例えば、水及び、アセトンと水又はＤＭＦと水の混合物、好ましくはアセトンと水の混合物を用いることができる。
また、ｐＨ５以上に調節して、式３を式４として溶かしてから、酸性条件下で単離するため式３に再変換しても良い。
【００７４】
【化１６】
【００７５】
スキームＩＩは、本願発明の別の実施形態を示す。ここで式３の化合物は、ｐＨが実質的に中性又は塩基性ｐＨである場合、キノイド型（式４）としても存在しうる。これらのキノイドは塩として存在することもあり、このときヒドロキシ基の片方又は双方が、Ｎａ、Ｋ、又はＬｉイオンを含む塩基性対イオン（Ｒ１１及び／又はＲ１２）に置換されている。
【００７６】
スキームＩＩＩは、式３の化合物（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つはＩ）を出発物質とし、ＩをＣｌに置換して、式３ｂの化合物（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つはＣｌ）を発生させる方法を示す。
【００７７】
【化１７】
【００７８】
スキームＩＶは、本願発明の別の実施形態を示す。ここで式４の化合物は、このプロセスの生産物として単離することもできる。
これらのキノイドは塩として存在することもあり、このときＲ１１及び／又はＲ１２のヒドロキシル基は、Ｈ、Ｎａ、Ｋ、又はＬｉイオンを含む、医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオンで置換されている。
【００７９】
【化１８】
【００８０】
本願発明の好ましい実施形態は、式３及び式４の化合物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２〜Ｒ５は独立にＣｌ、Ｉ又はＨより選択される；Ｒ２〜Ｒ６に少なくとも３つの水素原子が存在するか、Ｒ２〜Ｒ５に少なくとも１つの塩素原子が存在する）に関し、場合によってはそのアトロプ異性体にも関する。
【００８１】
本願発明の１組の具体的な実施形態は、以下の化合物、及びその医薬的に許容可能な塩を含む。これらに、ラクトン型（式３）及びキノイド型（式４）としての名称を付し、図１に示す：
【００８２】
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’，７’−テトラヨードフルオレセイン（図１−ａ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，５，７−テトラヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸（図１−ｓ参照）。
これらを共通してローズベンガルと呼び、これらの二ナトリウム塩型を、ローズベンガル二ナトリウムと呼ぶ；
【００８３】
４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラブロモ−２’，４’，５’，７’−テトラヨードフルオレセイン（図１−ｂ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，５，７−テトラヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００８４】
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−４’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｃ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（２−クロロ−６−ヒドロキシ−４，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び２，３，４，５−テトラクロロ−６−（７−クロロ−６−ヒドロキシ−２，４，５−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００８５】
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−２’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｄ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（４−クロロ−６−ヒドロキシ−２，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラクロロ−６−（５−クロロ−６−ヒドロキシ−２，４，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００８６】
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−４’，５’−ジヨードフルオレセイン（図１−ｅ参照）、及びそのキノイド型：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（２，７−ジクロロ−６−ヒドロキシ−４，５−ジヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００８７】
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−２’，７’−ジヨードフルオレセイン（図１−ｆ参照）、及びそのキノイド型：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（４，５−ジクロロ−６−ヒドロキシ−２，７−ジヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００８８】
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−４’，７’−ジヨードフルオレセイン（図１−ｇ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（２，５−ジクロロ−６−ヒドロキシ−４，７−ジヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラクロロ−６−（４，７−ジクロロ−６−ヒドロキシ−２，５−ジヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００８９】
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｈ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，５−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−４，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９０】
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，７’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｉ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−２，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９１】
４，５，６，７−テトラブロモ−２’−クロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’−クロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｊ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（２−クロロ−６−ヒドロキシ−４，５，７−トリヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラブロモ−６−（７−クロロ−６−ヒドロキシ−２，４，５−トリヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９２】
４，５，６，７−テトラブロモ−４’−クロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４’−クロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−２’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｋ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（４−クロロ−６−ヒドロキシ−２，５，７−トリヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラブロモ−６−（５−クロロ−６−ヒドロキシ−２，４，７−トリヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９３】
４，５，６，７−テトラブロモ−２’，７’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，７’−ジクロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’−ジヨードフルオレセイン（図１−ｌ参照）、及びそのキノイド型：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（２，７−ジクロロ−６−ヒドロキシ−４，５−ジヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９４】
４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４’，５’−ジクロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−２’，７’−ジヨードフルオレセイン（図１−ｍ参照）、及びそのキノイド型：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（４，５−ジクロロ−６−ヒドロキシ−２，７−ジヨード−３−オキソ−９、９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９５】
４，５，６，７−テトラブロモ−２’，５’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，５’−ジクロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−４’，７’−ジヨードフルオレセイン（図１−ｎ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（２，５−ジクロロ−６−ヒドロキシ−４，７−ジヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラブロモ−６−（４，７−ジクロロ−６−ヒドロキシ−２，５−ジヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９６】
４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラブロモ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｏ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，５−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キセンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラブロモ−６−（６−ヒドロキシ−４，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９７】
４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラブロモ−２’，４’，７’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｐ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、又は、異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（６−ヒドロキシ−２，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９８】
上記化合物の１つにおいて、キサンテン核上で非対照な置換がなされると発生しうる、アトロプ異性体のａＲ型（図１−ｑ−Ｒ参照）及びａＳ型（図１−ｑ−Ｓ参照）；及び
【００９９】
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−７’−イソプロピル−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−７’−イソプロピル−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｒ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（７−イソプロピル−６−ヒドロキシ−２，４，５−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラクロロ−６−（２−イソプロピル−６−ヒドロキシ−４，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸。
【０１００】
本願発明の式３又は式４の化合物は、キラル中心を含むことがあり、そのため各種のエナンチオマー型又はジアステレオマー型で存在することがある。
本願発明は、式３又は式４の化合物の、全ての光学異性体、及び全ての立体異性体、即ち、ラセミ混合物と個別のエナンチオマーの双方、これらの化合物のジアステレオマー、及びこれらの混合物に関する。さらに、本明細書において、これらの化合物をそれぞれ含有又は使用すると定義される、全ての医薬組成物及び治療方法にも関する。
【０１０１】
個々の異性体は、最終又は中間生産物の調製において、光学分割、分別結晶、及び光学的選択性条件又はクロマトグラフィによる分離などの、周知の方法で得られる。
同様に、式３又は式４の化合物のキノイド型であって、対応しあうキサンテンアリール環上の置換基が一致しない（例えば、図１−ｃ、１−ｄ、１−ｇ、１−ｈ、１−ｉ、１−ｊ、１−ｋ、１−ｏ、１−ｐに表されるように、Ｒ３＝Ｒ４のときＲ２≠Ｒ５、Ｒ２＝Ｒ５のときＲ３≠Ｒ４）ため、キサンテン環が非対称となっているものも、図１−ｑ−Ｒ及び図１−ｑ−Ｓに示すように、安定なアトロプ異性体として存在しうる。
【０１０２】
本明細書に記載のこのプロセスは、これらのアトロプ異性体をラセミ混合物として調製すること、及び、ラセミアトロプ異性体対（ｒａｃｅｍｉｃ ａｔｒｏｐｉｓｏｍｅｒｉｃ ｐａｉｒ）が反応不純物として発生しうる場合には、その相対量を最小化することを含む。
【０１０３】
式３の化合物は、それ自体が酸性化合物である限り、様々な無機及び有機塩基を伴って、多種多様な異なる塩を生成することができる。
本願発明における酸性化合物の塩基添加塩は、水性溶媒中、あるいはエタノール又はメタノールなどの適切な有機溶媒中で、指定の無機又は有機塩基を少なくとも１又は２当量用いて式３のラクトンを処理することにより、簡単に調製できる。
溶媒を蒸発させ、その結果として得られる塩の水溶液をろ過するか、又はそのまま用いると、所望の塩が、式４に表わされるようなキノイド型において簡単に得られる。
【０１０４】
医薬的に許容可能な塩は、例えば、ナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、メグルミン、アンモニウム、アルミニウム、亜鉛、ピペラジン、トロメタミン、リチウム、コリン、ジエチルアミン、４−フェニルシクロヘキシルアミン、及びベンザチンを伴って生成されるものを含む。
【０１０５】
本願発明はまた、同位体標識化合物も含む。この同位体標識化合物は、１つ以上の原子が、自然界に通常見られる原子量又は質量数とは異なる原子量又は質量数を有する原子によって置換されている、という点を別にすれば、式３及び式４の化合物と同一である。
本願発明の化合物に組み込める同位体の例には、水素、炭素、酸素、フッ素、塩素、及びヨウ素などの同位体、例えばそれぞれ、２Ｈ、３Ｈ、１４Ｃ、１３Ｃ、１０Ｃ、１１Ｃ、１３Ｏ、１４Ｏ、１５Ｏ、１８Ｏ、１７Ｏ、１７Ｆ、１８Ｆ，３２Ｃｌ、３３Ｃｌ、３４Ｃｌ、３６Ｃｌ、７４Ｂｒ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ、１１７Ｉ、１１８Ｉ、１２０Ｉ、１２１Ｉ、１２２Ｉ、１２４Ｉ、１２６Ｉ、１２８Ｉ、及び１３１Ｉなどが含まれる。
【０１０６】
上述の同位体及び／又はその他の同位体を含む、本願発明の化合物、プロドラッグ、及び前記化合物又はプロドラッグの医薬的に許容可能な塩は、本願発明の範囲内である。本願発明のある種の同位体標識化合物は、薬物及び／又は基質組織分布アッセイにおける診断薬として有用である。
式３及び式４の同位体標識化合物を調製するには、以下のスキーム及び／又は実施例に開示した手順をほぼ実施すればよいが、この際、非標識（ｎｏｎ−ｉｓｏｔｏｐｉｃａｌｌｙ ｌａｂｅｌｅｄ）試薬を、簡単に入手可能な同位体標識試薬に、例えば非標識のヨウ素を１３１Ｉに置換する必要がある。
【０１０７】
本願発明の１つの実施形態において、式４の化合物は、薬剤中に約０．００１重量％から約２０重量％未満含まれる。
本願発明の１つの実施形態は、ヒト又は動物の組織の治療のための、薬剤、及びこうした薬剤のある種の医薬的使用、及びこうした薬剤を用いた治療方法、を対象とする。ここで、こうした薬剤の主要な有効成分は、式３又は式４のハロゲン化キサンテンである。
【０１０８】
こうした薬剤は例えば、化学療法的に、化学的切除剤又は光力学的薬剤として作用しうる。そして、こうした薬剤は、皮膚及び関連器官、口と消化管及び関連器官、泌尿生殖路及び関連器官、呼吸器及び関連器官、循環器系及び関連器官、頭部及び頚部、内分泌系とリンパ網内系及び関連器官、結合組織などのその他様々な組織、手術中に露出される様々な組織表面、及び微生物性、ウイルス性、真菌性、又は寄生虫性感染を呈する様々な組織、を冒す様々な状態の治療に有用である。
【０１０９】
これらの薬剤は、液体、半固体、固体、又はエアロゾルの送達賦形剤を含みうる各種の剤形において利用でき、また静脈内注射（ｉ．ｖ．）、腹膜腔内注射（ｉ．ｐ．）、筋肉内注射（ｉ．ｍ．）、頭蓋内注射（ｉ．ｃ．）、腫瘍内注射（ｉ．ｔ．）、病変内注射（ｉ．ｌ．）、上皮内注射（ｉ．ｅ．）、経皮送達（ｔ．ｃ．）、及び経食道（ｐ．ｏ．）投与を含む、従来の各種の方式や経路により体内投与するのに適している。
【０１１０】
さらにこうした薬剤は、特定の組織への直接的な、又はその組織近辺への、局所的適用を含む慣習的な方式や経路による局所投与に適している。
こうした薬剤の有効成分は、例えば微生物性感染の駆除、組織刺激又は炎症の減少又は除去、過剰増殖性組織の減少又は除去、癌性又は前癌性組織の減少又は除去、表面又は表面下の脂肪細胞又は脂肪沈着物の減少又は除去、及びその他類似の徴候などの望ましい治療反応をもたらす。
【０１１１】
好ましい実施形態では、こうした薬剤は液体、半固体、固体、又はエアロゾルの送達賦形剤及び、タブレット、カプセル、座剤、及びその他類似の形態を含む、各種の剤形において生産される。
別の好ましい実施形態では、少なくとも１つの標的部分が、任意のＲ１からＲ６の位置において、あるいはヒドロキシル基又はカルボニル基での結合を介して、式３又は式４のハロゲン化キサンテンと共役する。
【０１１２】
こうした標的部分は、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、リボ核酸（ＲＮＡ）、アミノ酸、タンパク質、抗体、リガンド、ハプテン、炭水化物受容体、炭水化物錯化剤、脂質受容体、脂質錯化剤、タンパク質受容体、タンパク質錯化剤、キレート剤、封入賦形剤、短鎖脂肪族炭化水素、長鎖脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素、アルデヒド類、ケトン類、アルコール類、エステル類、アミド類、アミン類、ニトリル類、アジド類、親水性成分、及び疎水性成分を含む群より選択できるが、これらに限定はされない。
別の好ましい実施形態では、式４の化合物を、薬剤の製造に用いる。
【実施例】
【０１１３】
以下の実施例は、本願発明の特定の実施形態を表す例示的なもので、限定的なものではない。
＜一般的な方法＞
全ての反応は開放容器内で実施した。環境光から保護するため、時折これらの容器を被覆した。別途記載のない限り、全ての反応は、窒素、アルゴン、又はその他の不活性雰囲気下で実施した。使用した全ての溶媒及び試薬は、商業的供給源から入手したもので、さらなる精製は施していない。
【０１１４】
反応の監視には高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）、質量分析、及び／又は薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）を用いた。
ＨＰＬＣには、Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ Ｓｅｒｉｅｓ Ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ ポンプ／可変波長検出器（検出波長２２５ｎｍ）と、Ｓｕｐｅｌｃｏ Ａｓｃｅｎｔｉｓ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｃ１８カラム（４．６×１５０ｍｍ、２．７μｍ；４０℃で、ＭｅＣＮ／０．５％Ｈ３ＰＯ４水溶液を、６５／３５から９０／１０で３０分超グラジエント溶出）、又はＷａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ Ｓｈｉｅｌｄ ＲＰ−１８カラム（４．６×１５０ｍｍ、５μｍ；４０℃で、ＭｅＣＮ／ｐＨ３の１０ｍＭ Ｋ３ＰＯ４水溶液＋５％ＭｅＣＮを、１０／９０から８０／２０で２５分超グラジエント溶出、又は６５／３５でアイソクラテック溶出）のいずれかを用いた。
【０１１５】
質量分析では、ＨＰＬＣの場合と類似の、ギ酸により調整したクロマトグラフ条件において、Ａｇｉｌｅｎｔ ＬＣ／ＭＳＤ Ｔｒａｐ又はＷａｔｅｒｓ ＬＣＭＳを用いた。
ＴＬＣでは、可視化のために、紫外光及びヨード染色を用いた。
超臨界流体クロマトグラフィ（ＳＦＣ）は、Ｔｈａｒ ＳＦＣ ８０をＲｅｇｉｓＣｅｌｌカラム（３×２５ｃｍ）と用いて、エタノール中４．５ｍｇ／ｍＬの試料を１注入につき２０〜２２ｍｇ充填して行った。
【０１１６】
プロトン核磁気共鳴（１ＨＮＭＲ）スペクトルは、Ｖａｒｉａｎ ＩＮＯＶＡ ３００又はＶａｒｉａｎ Ｇｅｍｉｎｉ ２０００で３００ＭＨｚで、あるいはＶａｒｉａｎ Ｏｘｆｏｒｄ ４００で４００ＭＨｚで記録した。いずれにおいても、それぞれＴＭＳを内部標準として用いた。
化学シフトδ（百万分率、ｐｐｍを単位とする）は、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）を０ｐｐｍとして、２．５０ｐｐｍのＤＭＳＯ−ｄ6のシングレットに関して記載する。
【０１１７】
結合定数（Ｊ）はヘルツ（Ｈｚ）を単位として記載する。
ノイズデカップリングされた（Ｎｏｉｓｅ−ｄｅｃｏｕｐｌｅｄ）炭素−１３核磁気共鳴（１３ＣＮＭＲ）スペクトルは、Ｖａｒｉａｎ ＩＮＯＶＡ ３００分光計において７５ＭＨｚで、又はＶａｒｉａｎ Ｏｘｆｏｒｄ ４００分光計において１００ＭＨｚで、又はＶａｒｉａｎ Ｇｅｍｉｎｉ ２０００分光計において７５ＭＨｚで記録した。
【０１１８】
化学シフトδはｐｐｍを単位とし、ＤＭＳＯ−ｄ６の３９．５ｐｐｍのセプテットの中心線に関して記載する。ＵＶ−ＶＩＳ分光データは、Ｈｉｔａｃｈｉ Ｕ−２８１０ Ｄｏｕｂｌｅ Ｂｅａｍ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ、又はＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ Ｇｅｎｅｓｙｓ ２ Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒを用い、スリット幅１．５ｎｍ、光路長１０．０ｍｍで、２００〜６００ｎｍの波長をスキャンすることにより得た。
【０１１９】
［実施例１］
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３H−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（ローズベンガルラクトン、図１−ａ）
【０１２０】
工程１：環化。５００ｍＬの丸底フラスコに、マントルヒータ、Ｊ−Ｋｅｍ熱電対、磁気撹拌子（大）、窒素導入管、及び磁気スターラを取り付けた。
この装置に、テトラクロロ無水フタル酸（１．００ｅｑ、５０．００ｇ、１７４．９ｍｍｏｌ）、レソルシノール（２．１０ｅｑ、４０．４４ｇ、３６７．３ｍｍｏｌ）及び未希釈のメタンスルホン酸（２５０ｍＬ）を入れた。この結果として得られた反応混合物は、室温で懸濁液のものであった。
【０１２１】
反応混合物を窒素で洗浄し、９０℃まで加熱して、暗赤橙色の溶液を得た。
反応を９０℃で５時間行い、次いで新たに５．７８ｇのレソルシノール（０．３ｅｑ、５２．４７ｍｍｏｌ）を加えた。反応を９０℃で２．５時間、撹拌しながら続けた。
残留するテトラクロロ無水フタル酸の量が、ＨＰＬＣで１．０％未満となったとき、反応が完了したと見なす。
【０１２２】
機械式撹拌機、氷浴、及びＪ−Ｋｅｍ熱電対を取り付けた１Ｌの丸底フラスコ（３口）に、環境温度のＵＳＰ水（５００ｍＬ）を入れた。
１０℃未満のＵＳＰ水に、９０℃の反応混合物を、窒素の正圧を利用し輸送管を介して徐々に加えた。反応混合物を水に移す間、水でクエンチされた混合物の温度が６０℃を超えないように、輸送率を調整した。
新たな１００ｍＬのＵＳＰ水を用いて反応器をすすぎ、次いでこれを、水の入った反応器に移した。この結果として得られた緑褐色の懸濁液を、室温まで徐々に冷まし、室温でさらに３０分間撹拌した。固体を吸引ろ過で単離した。
【０１２３】
反応器をＵＳＰ水（２×２５０ｍＬ アリコート）ですすぎ、このすすぎ液を用いてウェットケーキをすすいだ。
ウェットケーキを６０分間吸引乾燥し、７０℃で一晩真空乾燥して、緑褐色の固体を８８．６０ｇ得た。
この物質を５５０ｍＬのアセトンと共に、機械式撹拌機、Ｊ−Ｋｅｍ熱電対、マントルヒータ、窒素導入管、及び環流冷却器付きＹアダプタを備えた２Ｌの丸底フラスコに入れた。
【０１２４】
この結果として得られる懸濁液を１．５時間加熱環流した。次いでこれを５３０ｍＬのＵＳＰ水（滴下ろう斗で６０分超かけて徐々に加えた）で、温度５６℃以上を保って処理した。水を加えている間に、温度の上昇（最高温度は６２℃に達した）が観察された。
水の添加が完了した後、黄褐色の懸濁液を３時間環流させ、約３０〜４０分超かけて徐々に室温まで冷ました。
【０１２５】
混合物を室温でさらに３０分間撹拌し、それから黄褐色の懸濁液を吸引ろ過で収集した。
反応器を５０％アセトン水溶液（ｖ／ｖ、４×１００ｍＬ）ですすぎ、このすすぎ液を用いてウェットケーキをすすいだ。
ウェットケーキを４８時間超吸引乾燥し、さらに７０℃で一晩真空乾燥して、テトラクロロフルオレセインを黄褐色の固体として７４．４３ｇ（ＡＵＣ純度９６．８％で収率９０．５％）得た。
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１０．２３（Ｓ，２Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），６．６９（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，２Ｈ），６．５７（ｄ ｏｆ ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）．
【０１２６】
工程２：ヨウ素化。５００ｍＬの丸底フラスコ（３口）に、環流冷却器、Ｙアダプタ、Ｊ−Ｋｅｍ熱電対、機械式撹拌機、マントルヒータ、及び窒素導入管を取り付けた。
反応器を窒素で洗浄し、アルミホイルで覆った。
これに１０．００ｇのテトラクロロフルオレセイン（２１．３ｍｍｏｌ）、３０ｍＬの５Ｍ ＮａＯＨ溶液、及び３００ｍＬのＵＳＰ水を入れ、暗赤色の溶液を得た。
【０１２７】
次いで、反応器に７．０３ｇのヨウ化ナトリウム（４６．９ｍｍｏｌ）及び３２．４ｇのヨウ素（１２７．７ｍｍｏｌ）を入れた。
この反応混合物を環境温度で３０分間撹拌し、それから９０℃まで加熱した。
反応混合物のアリコートをＨＰＬＣ分析すると、出発物質の消費が全て完了し、部分的にヨウ素化された中間体はなく、所望の化合物への変換が全て完了しているということが示された。
【０１２８】
反応混合物を９０℃で１．５時間加熱した後、加熱を止め、反応混合物を１．５時間超かけて室温まで徐々に冷ました。
この紫がかったピンク色の反応混合物を、氷浴で１０℃未満に冷ました。反応混合物のｐＨは７．１３であった。
【０１２９】
反応混合物に亜硫酸ナトリウム（６．７０ｇ）を少量ずつ加えた。７５ｍＬのアセトンを１０℃未満で反応器に入れ、混合物を１０℃未満で１０分間撹拌した。
温度が１０℃未満である間に、５％Ｈ２ＳＯ４溶液（２４ｍＬ）を滴下して加え、ｐＨを２．０３に到達させ、ピンク色の懸濁液を得た。この反応懸濁液を吸引ろ過で収集した。
【０１３０】
反応器を２５％アセトン水溶液（ｖ／ｖ、４×１００ｍＬ）ですすぎ、このすすぎ液を用いてウェットケーキをすすいだ。
ウェットケーキを３時間吸引乾燥し、６０℃で一晩真空乾燥して、２５．８１ｇのピンク色の固体を得た。
これらの固体と、２２５ｍＬのアセトンとを、機械式撹拌機、Ｊ−Ｋｅｍ熱電対、及び窒素導入管付きＹアダプタを備えた１Ｌの丸底フラスコ（３口）に入れた。
【０１３１】
この混合物を室温で１０分間撹拌し、それからこれに２５５ｍＬのＵＳＰ水を１０分超かけて加え、懸濁液を得た。
懸濁液を室温で２．２５時間撹拌し、それから吸引ろ過して固体を単離した。
反応器を５０％アセトン水溶液（１×７５ｍＬ）ですすぎ、このすすぎ液を用いてウェットケーキをすすいだ。
【０１３２】
次いでウェットケーキを、５０％アセトン水溶液（２×７５ｍＬ）及びＵＳＰ水（１×７５ｍＬ）ですすぎ、１時間吸引乾燥し、さらに８０℃で乾燥させて、４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、生産物として１８．６８ｇ（収率９０．２％、サンゴ色の固体、ＨＰＬＣ ＡＵＣ純度９９．５％）得た。
【０１３３】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１０．２７（ｓ，２Ｈ），７．５９（ｓ，２Ｈ）。１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．２，１５８．６，１５１．９，１４６．７，１３８．８，１３６．５，１３５．３，１３１．２，１２６．８，１２４．６，１１０．８，８１．８，７９．３，７７．０．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ ９７４．８（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ９７３．６７）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５７ｎｍ（メタノール中）；示差走査熱量測定（ＤＳＣ）により測定された融点（ｍｐ）＝２１５℃．
【０１３４】
［実施例２］
４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（図１−ｂ）
【０１３５】
工程１：実施例１の工程１に記載の手順にしたがって、テトラブロモ無水フタル酸（２８．６３ｇ、６１．７４ｍｍｏｌ）及びレソルシノール（１７ｇ、１５４．４ｍｍｏｌ）を、１４３ｍＬのメタンスルホン酸中で処理し、テトラブロモフルオレセインを、明るいベージュ色の固体（収率８４．１％、ＡＵＣ純度９７．４％）として３３．６４ｇ得た。
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１０．１７（ｓ，２Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝８．６４Ｈｚ，２Ｈ），６．６５（ｄ，Ｊ＝２．３４Ｈｚ，２Ｈ），６．５４（ｄ ｏｆ ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）．
【０１３６】
工程２：実施例１の工程２に記載の手順にしたがって、テトラブロモフルオレセイン（２２ｇ、３３．９６ｍｍｏｌ）、ヨウ素（５１．７１ｇ、２０３．７ｍｍｏｌ）及びヨウ化ナトリウム（１１．２２ｇ、７４．８５ｍｍｏｌ）を処理し、４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、明るいピンク色の固体として単離し、３６．０２ｇ得た。
【０１３７】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１０．２２（ｓ，２Ｈ），７．４９（ｓ，２Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．９，１５８．８，１５２．５，１４９．９，１３７．３，１３６．７，１３３．５，１２７．５，１２４．６，１２１．１，１１１．５，８２．０，８０．３，７７．４．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ １１５２．６（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ １１５１．４８）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５８ｎｍ（メタノール中），ｍｐ（ＤＳＣにより測定）＝２２７℃．
【０１３８】
［実施例３］
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（図１−ｃ）
【０１３９】
工程１：実施例１の工程１に記載の手順にしたがって、テトラクロロ無水フタル酸（５ｇ、１７．４８ｍｍｏｌ）、４−クロロレソルシノール（２．７８ｇ、１９．２３ｍｍｏｌ）、及びレソルシノール（２．１２ｇ、１９．２３ｍｍｏｌ）を処理し、２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、１８．６％の純度で７．２４ｇ得た。これを収集し、次の工程で混合物として用いた。
【０１４０】
工程２：実施例１の工程２に記載の手順にしたがって、２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン（７．２４ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）をヨウ素化した。
【０１４１】
次いで粗生成物（５．４７ｇ）を、ＳＦＣ精製（全流量８０ｇ／ｍｉｎ、ＣＯ２中４０％の補助溶媒（ＥｔＯＨ／０．５％ＴＦＡ）、１４０ｂａｒ、３×２５ｃｍ ５ｍ ＲｅｇｉｓＰａｃｋカラムで２５４ｎｍ）により単離して、２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、ＡＵＣ ＨＰＬＣ純度９５．８％で、明るいピンク色の固体として４２７ｍｇ得た。
【０１４２】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１０．８５（ｓ，１Ｈ），１０．２（ｓ，１Ｈ），７．６０（ｓ，１Ｈ），７．３８（ｓ，１Ｈ）．
１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．４，１５９．０，１５５．８，１５２．３，１５１．２，１４６．９，１３９．１，１３６．９，１３５．７，１３１．６，１２８．２，１２７．１，１２５．１，１１６．９，１１１．０，１０９．７，８２．３，８０．０，７８．４，７８．４，７７．５．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ８８２．７（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ８８２．２）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５４ｎｍ（メタノール中）．
【０１４３】
［実施例４］
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンから、
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、及び、
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンへの分解（図１−ａ，１−ｄ，及び１−ｆ）
【０１４４】
１００ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）の４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンに、１．０ｍＬのアセトニトリル、及び２．０ｍＬの１２．５％次亜塩素酸ナトリウム水溶液を室温で加えた。この反応混合物を室温で１時間撹拌した。
ＨＰＬＣ分析において、保持時間８．３８分及び９．９３分（それぞれ２７．８％及び４５．６％）に新たな不純物（計２つ）が示された。このとき、４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの２６．６％は未反応であった。
【０１４５】
質量分析では、Ｍ−１イオン：ヘキサクロロ不純物に対応するＭ−１＝７９１．７、ペンタクロロ不純物に対応するＭ−１＝８８１．４、及びローズベンガルラクトンに対応するＭ−１＝９７３．２、が見られた。
以下のように（実施例５及び７参照）トランスハロゲン化された化合物を個別に作製して構造帰属を確認し、ＨＰＬＣを用いてこの実施例の生産物との関連付けを行った。
【０１４６】
［実施例５］
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（図１−ｄ）
【０１４７】
工程１：テトラクロロ無水フタル酸（２．５ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）、２−クロロレソルシノール（１．３３ｇ、９．１８ｍｍｏｌ）、及びレソルシノール（１．０１ｇ、９．１８ｍｍｏｌ）を、１２．５ｍＬの未希釈のメタンスルホン酸と化合させた。これを、９０℃まで１９時間加熱し、それから９７℃まで１０時間加熱して、すぐに２５ｍＬの氷水へ慎重に加えた。
【０１４８】
この懸濁液をエチルアセテートで抽出し、水及びブラインで洗浄し、亜硫酸ナトリウム上で乾燥させた。
この生産物を、６６％：１４％：１８％：４％のトルエン：ジオキサン：ヘキサン：酢酸を溶離液に用い、シリカゲルプラグを介して単離した。
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを純度４６．４％で１．９５ｇ得た。これを収集し、さらなる精製は施さずに、次の工程で用いた。
【０１４９】
工程２：実施例１の工程２に記載の手順にしたがって、４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン（１．９５ｇ、４．１５ｍｍｏｌ）をヨウ素化した。粗生成物は混合物中２．７０ｇであった。
【０１５０】
この生成物をＳＦＣ精製（全流量８０ｇ／ｍｉｎ、ＣＯ２中４０％の補助溶媒ＩＰＡ、１４０ｂａｒ、３×２５ｃｍ ５ｍ ＲｅｇｉｓＰａｃｋカラムで２５４ｎｍ）により単離して、４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、ピンク色の固体として６３０ｍｇ（０．７ｍｍｏｌ、収率３８．５％、ＡＵＣ純度９８．７％）得た。
【０１５１】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１１．０５（ｓ，１Ｈ），１０．３（ｓ，１Ｈ），８．３（ｓ，１Ｈ），７．５５（ｄ，２Ｈ）．
１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．２，１５８．６，１５４．７，１５０．７，１４８．０，１４６．７，１３８．７，１３６．５，１３５．３，１３４．５，１３１．３，１２６．８，１２４．６，１１０．５，１１０．４，８２．４，８２．１，７９．３，７７．６．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ８８２．７（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ８８２．２）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５５ｎｍ（メタノール中）．
【０１５２】
［実施例６］
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（図１−ｅ）
【０１５３】
工程１：実施例１の工程１に記載の手順にしたがって、テトラクロロ無水フタル酸（５ｇ、１７．４９ｍｍｏｌ）、及び４−クロロレソルシノール（６．３２ｇ、４３．７３ｍｍｏｌ）を処理し、１０．３１ｇの粗生成物を得た。このうち９．２５ｇをＤＭＦ：水（１：１）中で懸濁し、次いでろ過し、２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、橙色の固体として９．７０ｇ（２：１ ＤＭＦ複合体１７．１６ｍｍｏｌ、収率９２．３％）得た。
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１１．１３（Ｓ，２Ｈ），７．３１（ｓ，２Ｈ），６．８９（ｓ，２Ｈ）．
【０１５４】
工程２：実施例１の工程２に記載の手順にしたがって、２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン（２ｇ、３．７１ｍｍｏｌ）を処理し、２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、ピンクがかった橙色の固体として、ＡＵＣ ＨＰＬＣ純度９７．９％で２．５６ｇ（３．２２ｍｍｏｌ、収率８７．３％）得た。
【０１５５】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１０．９０（ｓ，２Ｈ），７．４８（ｓ，２Ｈ）．
１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．２，１５４．７，１４７．１，１４６．８，１３８．７，１３５．３，１３４．５，１３１．３，１２６．７，１２４．５，１１０．３，１０７．７，８２．６，７９．０．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ７９１．０（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ７９０．７７）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５１ｎｍ（メタノール中）．
【０１５６】
［実施例７］
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（図１−ｆ）
【０１５７】
工程１：実施例１の工程１に記載の手順に従って、テトラクロロ無水フタル酸（５ｇ、１７．４９ｍｍｏｌ）、及び２−クロロレソルシノール（７．５８ｇ、４１．９８ｍｍｏｌ）、を処理し、９．３ｇの粗成生物を得た。
９．３ｇの粗成生物中８ｇをＤＭＦ：水（１：１）で懸濁し、次いでろ過して、４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、橙色の固体として単離し、８．６５ｇ（１６．０５ｍｍｏｌ、ＡＵＣ収率９１．７％）得た。
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１１．０９（Ｓ，２Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），６．８１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）．
【０１５８】
工程２：実施例１の工程２に記載の手順にしたがって、４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン（２ｇ、３．７１ｍｍｏｌ）を処理し、４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、ピンクがかった橙色の固体として２．２０ｇ（２．７８ｍｍｏｌ、収率７５．１％）得た。
【０１５９】
［実施例８］
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（図１−ｇ）
【０１６０】
工程１：実施例１の工程１に記載の手順に従って、テトラクロロ無水フタル酸（５ｇ、１７．４８ｍｍｏｌ）、４−クロロレソルシノール（２．７８ｇ、１９．２３ｍｍｏｌ）、及び２−クロロレソルシノール（２．７８ｇ、１９．２３ｍｍｏｌ）を処理し、粗生成物（ＨＰＬＣで純度約５４％の、２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン）を６．２ｇ得た。これを収集し、次の工程で混合物として用いた。
【０１６１】
工程２：実施例１の工程２に記載の手順にしたがって、２’，４，５，５’，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン（６．２ｇ、うち所望の化合物５４．４％、６．２５ｍｍｏｌ）をヨウ素化し、７．１６ｇ（うち所望の化合物６０．８％、５．５０ｍｍｏｌ、収率８８％）を得た。
【０１６２】
粗生成物（３．３７ｇ、うち所望の化合物６０．８％、２．５９ｍｍｏｌ）を、ＳＦＣ精製（全流量８０ｇ／ｍｉｎ、４０％の補助溶媒（ＣＯ２中、５０／５０のＩＰＡ／ＥｔＯＨ ０．５％ＴＦＡ）、１４０ｂａｒ、３×２５ｃｍ ５ｍ ＲｅｇｉｓＰａｃｋカラムで２５４ｎｍ）により単離して、２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、明るいピンク色の固体として４２７ｍｇ（０．５４ｍｍｏｌ、ＳＦＣからの回収率２０．８％）得た。
【０１６３】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１１．０５（ｓ，１Ｈ），１０．８５（ｓ，１Ｈ），７．６０（ｓ，１Ｈ），７．４０（ｓ，１Ｈ）．
１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．１，１５５．４，１５４．７，１４９．６，１４８．０，１４６．５，１３８．７，１３５．３，１３４．５，１３１．３，１２７．９，１２６．８，１２４．７，１１６．７，１１０．３，１０９．０，１０７．５，８２．４，７９．６，７８．５．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ７９０．７（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ７９０．７）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５２ｎｍ（メタノール中）．
【０１６４】
［実施例９］
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンから、
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンへの分解（図１−ａ及び１−ｉ）
【０１６５】
６．５ｇ（６．６７ｍｍｏｌ）の４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンに、１３０ｍＬのアセトン、３０ｍＬの水、及び６．６ｇ（４４．０ｍｍｏｌ）のヨウ化ナトリウムを加えた。
この混合物を８２．５時間加熱環流したところ、ＨＰＬＣ分析において、標題の化合物が、出発物質との混合物中３５．４％を占めることが示された。
【０１６６】
反応混合物を１３０ｍＬの水及び１５０ｍＬのエチルアセテートで希釈し、室温で一晩放置した。
有機層を除去し、水層を１００ｍＬのエチルアセテートで抽出した。結合した有機層をブラインで洗浄し、亜硫酸ナトリウム上で乾燥させて、ＨＰＬＣで３５．４％の標題の化合物を含む６．７３ｇの粗成物を得た。
【０１６７】
この物質から、６６％：１４％：１８％：４％のトルエン：ジオキサン：ヘキサン：酢酸を用い、シリカゲルクロマトグラフィで単離した。
一連のクロマトグラフィ工程の後、４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを赤色固体（９０ｇ）として単離した。
【０１６８】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１１．２６（ｓ，１Ｈ），１０．１９（ｓ，１Ｈ），７．５６（ｓ，１Ｈ），７．５１（ｓ，１Ｈ），６．８４（ｓ，１Ｈ）．
１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．４，１５９．０，１５８．３，１５１．８，１５０．８，１４７．２，１３８．６，１３６．９，１３５．１，１２６．７，１２４．５，１１０．６，１０８．８，１０１．７，８１．２，８８．７，７７．１．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ８４８．８（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ８４７．７）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５３９ｎｍ（メタノール中）．
【０１６９】
［実施例１０］
不完全なヨウ素化による、４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン、及び関連する化合物の調製（図１−ｈ）
【０１７０】
５００ｍＬの丸底フラスコに、１０ｇ（２１．３ｍｍｏｌ）のテトラクロロフルオレセイン、１３ｍＬの５Ｍ ＮａＯＨ、３００ｍＬの水、７．０８ｇ（４７．２ｍｍｏｌ）のＮａＩ、及び１６．２４ｇ（６４ｍｍｏｌ）のヨウ素を入れた。
この溶液を５０℃まで６．５時間加熱し、それから室温まで冷ました。亜硫酸水素ナトリウムと酢酸を、ｐＨが３．７になるまで順次加えた。
【０１７１】
この混合物を、エチルアセテートで抽出し、水で、次いでブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空でろ過し、濃縮した。
１８．２ｇの赤橙色の泡状体を、ＡＵＣ ＨＰＬＣ純度４６％の４，５，６，７−テトラクロロ−４’，５’−ジヨードフルオレセインと、４３％の標題化合物、すなわち、４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセインとの混合物として、単離した。
ＬＣＭＳ ＭＳ Ｓｃａｎ ８００−１０００：ｍ／ｚ ８４６．５２（Ｍ−１）−（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ８４７．７）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５４０ｎｍ（ＰＢＳ中）．
【０１７２】
実施例１では、６当量のヨウ素を９０℃で用いることで、ほぼ定量的に、ヨウ素を４つ有する化合物への変換が起こるのに対し、３当量のヨウ素をより低温で加熱して用いる、この反応では、より低級のヨウ化不純物の混合物が生じる。
このことは、低級ヨウ化生産物の収率を調整するのに、反応条件を変化させることが有用であることを示している。
【０１７３】
［実施例１１］
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンから、
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−７’−イソプロピル−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンへの分解（図１−ａ及び１−ｒ）
【０１７４】
室温のＴＨＦ中、ＺｎＣｌ２（０．５ｍＬ、０．５０ｍｍｏｌ）、イソプロピルマグネシウムクロリド（０．２３ｍＬ、０．４５ｍｍｏｌ）、及びＢｉｓ（ＰＰｈ３）２ＰｄＣｌ２（触媒量）を入れた丸底フラスコに、ＴＨＦ２ｍＬ中、２００ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）の、４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを加えた。
【０１７５】
この溶液を、室温で３８時間撹拌した。反応を、５ｍＬのＵＳＰ水、０．５ｍＬの酢酸、及び２滴の５Ｍスルホン酸でクエンチした。有機層をＵＳＰ水（３ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空で濃縮させた。
１９５ｍｇの橙赤色の固体を、ＨＰＬＣで、２．３％の標題の化合物、及び４２．９％の４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの混合物として単離した。
構造を確認するために、標題の化合物の単離を、以下の実施例のように行った。
【０１７６】
［実施例１２］
２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，５，７−テトラヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸二ナトリウム塩からの、
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−７’−イソプロピル−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの単離（図１−ｒ及び１−ｓ）
【０１７７】
１１８ｇ（０．１１ｍｏｌ）の商用グレードのローズベンガル二ナトリウム塩を、９８５ｍＬのＵＳＰ水に溶かし、４００ｍＬの１Ｍ ＨＣｌでｐＨ１〜２に酸性化して、スラリーを得た。
スラリーを１８００ｍＬのエチルアセテートで抽出し、有機層を分離した。水層を新たな１００ｍＬのエチルアセテートで抽出し、有機層を分離した。有機層を合わせて、溶媒が約１８００ｍＬ残るまで濃縮した。
【０１７８】
スラリーを５００ｍＬのヘプタンで処理し、ろ過して、ウェットケーキを２５０ｍＬのヘプタンですすいだ。
固体を６０℃で乾燥させ、次いでホイルで覆った窒素雰囲気下のフラスコ内で、７６０ｍＬのジオキサンと化合させた。
この結果として得られたスラリーを９５℃まで加熱し、７０分間この温度を保った。それからスラリーを冷まし、ろ過した。
窒素存在下で、ウェットケーキを２当量のジオキサンですすぎ、乾燥させた。
【０１７９】
この試料を、阻害剤を含まない４５ｍＬのＴＨＦ中に溶かし、１５〜２０ｍＬになるまで濃縮し、アルミナカラム（５１０ｇの中性アルミナ、及び、３００ｍＬのアセトニトリル：イソプロパノール：酢酸：水＝９０：１０：１：１の溶液）に充填した。
同じ溶液を用いてカラムを溶出させ、生産物を含むフラクションを化合させて、減圧濃縮し、ヘプタンから共沸乾燥させた。
【０１８０】
この手順を再度行った後、乾燥させた固体を無水ＴＨＦに溶かし、シリカゲル分取プレート上に載積した。分取プレートを、トルエン：ジオキサン：ヘプタン：酢酸＝６６％：１４％：１８％：４％の溶液を用いて一度溶出した。
上層バンドを分取プレートから削り取り、１０ｍＬの無水ＴＨＦで消化して（ｄｉｇｅｓｔｅｄ）、２０ｍＬのＴＨＦでろ過し、すすいだ。
ろ液を真空濃縮し、標題の化合物をＡＵＣ ＨＰＬＣ純度８５％の橙赤色の固体として、５９ｍｇ得た。
【０１８１】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；アセトンｄ６）δ７．６７（ｓ、１Ｈ）、６．９９（ｓ、１Ｈ）、３．２７（ｍ、１Ｈ）、１．１２（ｄ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、３Ｈ）、１．０６（ｄ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、３Ｈ）．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ ８８８．６（Ｍ−１）−（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ８８７．６５）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５２ｎｍ（メタノール中）．
【０１８２】
この記載は例示を目的としたものにすぎず、本願発明の内容を限定することを意図したものではない。
【技術分野】
【０００１】
本願発明は、高純度のローズベンガル、ローズベンガルラクトン及び関連するキサンテンを調製又は合成及び単離する方法に関し、また、高純度のローズベンガル、ローズベンガルラクトン及び関連するキサンテンにも関する。
本願発明の１つの側面は、個々の有機不純物を最大で２重量％、好ましくは０．１５重量％未満含む、ヨウ化フルオレセイン（ｉｏｄｉｎａｔｅｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ）誘導体を調製するための合成手順に関する。
【０００２】
不純物を０．１５％又は１５００ｐｐｍ以下に調整することは、医薬的な実用性に関わる。なぜならこの値は、医薬品規制調和会議（ＩＣＨ）のガイドラインに適合するための、安全確認の必要な閾値を表しているためである。
そのため本願発明の別の側面は、本明細書に開示する新規化合物の、医薬的な実用性と同定とに関する。上記合成は、この新規化合物の医薬的な実用性と同定とのために、その生成を調整するよう特別に設計されている。
【背景技術】
【０００３】
フルオレセインの構造モチーフ及び、無水フタル酸とレソルシノールからの一工程環化は、１８７１年にＢａｅｙｅｒ（Ｂｅｒｉｃｈｔｅ．１８７１：４，５５５）によって初めて記載されたと考えられている。
Ｇｒａｅｂｅ（Ａｎｎａｌｅｎ．１８８７：１８，３１８）は、その報告書の中で、レソルシノールに対する過剰量（１．３当量）の無水フタル酸の使用に言及しており、ハロゲン化無水フタル酸を、環化の基体として初めて用いた人物であると考えられている。
ジクロロフルオレセインのヨウ素化は、１８８７年のＬｅ Ｒｏｙｅｒの報告書（Ａｎｎａｌｅｎ．１８８７：２３８，３５９）で、初めて文献に登場した。
【０００４】
２０世紀には、フルオレセイン類似体にいくつかの用途が生じた。
これらの化合物は繊維染料、生物学的染料、不揮発性メモリ装置のビルディングブロック、熱画像形成基体、食用及び化粧用着色剤として使用されてきた。
例えば、エリスロシン（ＦＤ＆ＣＮｏ．３）及び部分的にヨウ素化されたエリスロシン（Ｄ＆Ｃ Ｎｏｓ．１１及び１２）は、食用、薬用及び化粧用染料として用いられる。
特定のテトラヨード（ｔｅｔｒａ−ｉｏｄｏ）キサンテン、即ちローズベンガルは、眼疾患の可視化や、また放射標識された形で肝機能の医療診断にも使用されており、１９６５年に米国薬局方に記載されている。
【０００５】
非ハロゲン化類似体の合成や、フルオレセインモチーフの生成についての関心が広まる一方で、ローズベンガルのキサンテン核を作り出す環化の技術は、１８８０年代の技術（ふたの開いたやかんで高温溶融する）から実質的には改良されてこなかった。
周知の合成方法では、残留溶媒と、副反応や分解プロセスに由来する無機及び有機化合物とを含む、予測不能で特性決定もできない雑多な不純物が生産されてしまう。
【０００６】
食用又は診断用の染料など、産業応用における既存の用途においては、多くの場合、不純物は容認できるものであった。
例えば米国連邦規則集（ＣＦＲ）では、ＦＤ＆Ｃ Ｎｏ．３（エリスロシン）について、モノヨード（ｍｏｎｏ−ｉｏｄｉｎａｔｅｄ）不純物１％以下、ヨウ化フルオレセイン９％以下、という不純物レベルを許容している。
ＣＦＲはまた、環化工程に由来する残留不純物、例えば、部分的にヨウ素化されたフタル酸やレソルシノール（例えば、Ｋａｍｉｋｕｒａ，Ｓｈｏｋｕｈｉｎ Ｅｉｓｅｉｇａｋｕ Ｚａｓｓｈｉ１９８５：２６，２４３及び、Ｗａｄａ ｅｔ ａｌ．，Ｆｏｏｄ．Ａｄｄ．Ｃｏｎｔａｍ．２００４：２１，１１３７参照）なども許容している。
【０００７】
こうした従来の着色剤の規格は、現代の医薬品規制調和国際会議（ＩＣＨ）による新原薬についてのガイドラインと著しく性質が異なる。ＩＣＨによる新原薬についてのガイドラインでは、０．０５％以上の不純物を報告すること、０．１％以上のレベルで存在する全ての有機不純物を網羅的に同定すること、及び、０．１５％をこえる全ての不純物について徹底的な毒性試験（ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃ ｑｕａｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ）を行うことを課しており、さらに無機不純物にも制限を設け、残留溶媒には特に厳しい制限を設けている。
そのため、このクラスの化合物を治療量、体内に導入するにあたっては、よく管理された（ｗｅｌｌ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ）予測可能かつ再現可能な合成の実施が、必須かつ最優先の事項となる。
このような規格では、合成工程又は精製の間に雑多な不純物が予測不能な発生をすることは、特に非経口薬となりうる製剤の生成においては認められない。
【０００８】
米国薬局方ＸＸＩＩでは、試薬級のローズベンガルを作製するのに、ＨＣｌを用いて、酸塩基操作によりローズベンガルを精製するよう推奨している。
本願の発明者らは、過酸化水素又はオキソンといった酸化剤の存在下で、ヨウ化フルオレセインを、水溶性塩化物イオンを含む又は発生させる試薬で処理すると、１つ以上のヨウ素（Ｉ）が塩素（Ｃｌ）にトランスハロゲン化（ｔｒａｎｓｈａｌｏｇｅｎａｔｅｄ）される副反応が起こるという、驚くべき事実を発見した。
【０００９】
この副反応は、塩化物フリーラジカル（ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌ）、次亜塩素酸イオン、又は次亜塩素酸が存在するときにも起こる。
ローズベンガル調製中のこの副反応は、以前は報告されていなかった。この不都合な副反応を防ぐためには、環化工程、ヨウ素化工程、及びいかなる精製スキームも慎重に調整しなければならない。
【００１０】
ヨウ化フルオレセイン類似体については以前から記載があり、中にはこれら類似体を“ハロゲン”の語で一般的に（ｇｅｎｅｒｉｃａｌｌｙ）表しているものも多く見られる。しかしこれら先行文献の中で、ヨードレソルシノールから、ヨードキサンテン置換されたフルオレセインを、直接的に合成可能にすると考えられるものはない。
さらに、これら先行文献の中で、分子中に少なくとも１つのヨウ素を含むことを要件とするものはない。また、これらの化合物の医薬的実用性はヨウ素によって確実に左右されるのだが、この医薬的実用性について特許請求しているものもなかった。
【００１１】
フルオレセインの主な用途が非治療目的であったため、この化合物クラスにおいて高純度の有効成分を調製するのに必要な方法や、ヒトの治療や着色剤として実用されうる微量な副生成物を同定、特性決定、及び合成するための方法の、記載や実施化に関する情報が不足してしまっている。
ヨウ化キサンテンは、様々な文献において、実施例として一般的に（ｇｅｎｅｒｉｃａｌｌｙ）含まれており、ローズベンガルは１８８０年代に初めて記載された周知の化合物である。
【００１２】
しかし先行文献では、キサンテン核上で少なくとも１つのヨウ素（Ｉ）と少なくとも１つの塩素（Ｃｌ）が置換されている、トランスハロゲン化（ｔｒａｎｓｈａｌｏｇｅｎａｔｅｄ）された微量生成物を、単離又は同定することについては記載しておらず、その存在可能性すら開示も示唆もしていない。
【００１３】
本願の発明者らは、ローズベンガルの商用見本において、これらの化合物が最大で２重量％まで存在しうるということを発見した。
さらに、先行文献は、低級ヨウ化（ｌｏｗｅｒ ｉｏｄｉｎａｔｅｄ）キサンテン汚染物質（例えば、現行のＣＦＲ ７４．３０３におけるエリスロシンの認定において、９％以上の含有が認められないような物質）について言及しているが、この物質において２’又は４’が水素で置換され、ヨウ素が３つとなった（トリヨードの）ものや、それに対応するアトロプ異性体（下記図１−ｑ−Ｒ及び１−ｑ−Ｓ参照。この骨格を有するアトロプ異性体に関する議論については、[特許文献１]参照）の、構造も名前も提示していない。
またこれらの先行文献は、キサンテン核上のＩ／Ｃｌが独立に置換されているものに関して、その単離や合成を可能とすることについて教示も示唆もしていない。
【００１４】
本願発明は、医薬としての実用に必要な基準をみたすよう、これらの副生成物を同定、特性決定するとともに、その合成を調整する効果的な方法を確立する。
さらに本願発明のプロセスは、これら副生成物の不都合な生成をさけ、多種の溶媒を用いずに済むようにし、試薬に厳しい制限を設けることで、操作性、収率、純度を向上させ、このプロセスの医薬的使用への適用性をより高めている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】米国特許番号６６４９７６９号
【発明の概要】
【００１６】
本願発明は、医薬的使用のために製造される、式３及び式４のヨウ化キサンテン中の不純物レベルを調整する物質と方法、これらのヨウ化キサンテン化合物を製造するプロセス、及び、関連性はあるが従来は想定されてこなかった、トランスハロゲン化された（ｔｒａｎｓｈａｌｏｇｅｎａｔｅｄ）不純物の開示に関する。
【００１７】
本願発明はまた、上記と同様のヨウ化キサンテンを調製するための物質と方法、特に、エリスロシン（ＦＤ＆Ｃ３）、ローズベンガル、及びその他の関連するヨウ化キサンテンを、医薬的な使用に適した純度で調製するプロセスに関する。
１つの実施形態では、このプロセスにおいて有機溶媒を１種類だけ、低温（１００℃未満）で用いる。またこの実施形態では、不純物の生成をさけるため、厳選した添加剤及び調整剤を用いることを課している。
【００１８】
トランスハロゲン化された不純物の生成をさけるには、例えば反応混合物中の、特にヨウ素化工程における反応混合物中の塩化物イオンを、１５００ｐｐｍ未満に制限すればよい。
抽出の工程、クロマトグラフ濃縮又は溶媒濃縮の工程は一切不要であり、ろ過又は類似の手段を用いて、中間及び最終化合物を単離する。
【００１９】
本願発明はまた、特定の類似体及び新規化合物、特に上記に開示した方法によって作製又は回避されるものも対象とする。そしてこれらの化合物を、単離又は同定し、創薬、製薬、化粧品、及び着色剤における使用に適用する。
さらなる実施形態では、式３の化合物：
【００２０】
【化１】
【００２１】
（式中、各Ｒ１は独立にＣ１〜Ｃ４アルキル、ハロゲン又はＨ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＩ、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＩ；各Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）を調製するためのプロセスを提示する。
【００２２】
このプロセスは、式３の化合物（式中、各Ｒ１は独立にＣ１〜Ｃ４アルキル、ハロゲン又はＨ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＦ、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＨ）を、水溶性塩基の存在下でヨウ素（Ｉ２）と反応させ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つをＩで置換することを含む。
【００２３】
別の実施形態では、式３の化合物（式中、各Ｒ１は独立にＣ１〜Ｃ４アルキル、ハロゲン又はＨ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨ；各Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）を作製する方法を対象とする。
この方法は、式１の化合物：
【００２４】
【化２】
（式中、各Ｒ１は独立にハロゲン、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨ）を、式２の化合物：
【００２５】
【化３】
（式中、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０は独立にＦ、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨ；Ｒ９はＨ）と反応させることを含む。
【００２６】
さらなる実施形態では、式３の誘導体（式中、各Ｒ１は独立にハロゲン又はＨ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＩ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ又はＨで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＣｌ；Ｒ６はＨ）を作製する方法を対象とする。
この方法は、式３の化合物を、塩素ラジカル、塩化物イオン、又はインサイチュ（例、次亜鉛素酸ナトリウム溶液、又は次亜塩素酸など）で発生した塩化物イオンと反応させ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうちＩ又はＢｒであるものを、いずれも独立にＣｌで置換できるようにすることを含む。
【００２７】
別の実施形態は、式３の化合物（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された１つ又は２つはＣｌ；各Ｒ１は独立にＢｒ、Ｆ、Ｃｌ、又はＩ；ただし前提として、Ｃｌ又はＨでないＲ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はいずれもＩで、各Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）に関する。
【００２８】
本明細書に記載される式３の化合物は、創薬、製薬、化粧品、着色剤に関する産業において有用な性質を有している。
したがって本願発明は、局所又は体内投与用の薬剤に含まれる、特許請求された化合物にも関する。これには、特許請求された化合物が、ヒト又は動物の疾患用の、化学療法的又は光力学的治療のための薬剤に有効成分と含まれる場合も該当する。
【００２９】
本明細書の定義における、式３の化合物、その生産方法、薬剤、及び使用は、ラクトン型（式３）からキノイド型（式４）（式中、Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ又は、Ｎａ、Ｋ、Ｌｉ、又は、塩を生成できるその他の対イオン）に変換するためにけん化又は反応させられた、上記化合物の全ての形態を含む。
【００３０】
【化４】
【００３１】
さらなる実施形態では、本願発明は式４の化合物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ）を調製する方法に関する。
式３ａの化合物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＨ）を、実質的に塩化物イオンを含まない溶液中でヨウ素と化合させ、式４の化合物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ）を生成することで、式４の化合物を調製する従来の方法を本質的に改良することができる。
【００３２】
この改良には、式４の化合物のトランスハロゲン化された誘導体（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＣｌで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうちＣｌでないものはいずれもＩ；Ｒ６はＨ）が実質的に存在しない、ということも含まれる。
さらなる実施形態では、本願発明は式３の化合物：
【００３３】
【化５】
【００３４】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ）を調製する方法に関し、この方法は、以下の工程１及び２を含む。
【００３５】
工程１：式１の化合物：
【００３６】
【化６】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ）を、約２当量の式２の化合物：
【００３７】
【化７】
【００３８】
（式中、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０はＨ）と、酸性溶液中で化合させ；
２０℃から２５０℃の温度、好ましくは８５℃から９５℃の温度で撹拌し；
結果として得られる式３ａの環化中間生産物：
【００３９】
【化８】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＨ）を単離する。
【００４０】
工程２：式３ａの中間体を、塩化物イオンを含まない水溶液と化合させ；
式３ａの中間体の溶液をヨウ素（Ｉ２）で処理し、２０℃から１００℃の温度で、式３ａから式３への変換が実質的に完了するまでの間、撹拌し（なお、式３への変換が実質的に完了しているかは、例えばＨＰＬＣ又は類似の手段で測定される）；
式３を含む反応混合物を、塩化物イオンを含まないヨウ素捕捉剤でクエンチし；
クエンチした反応混合物を、塩化物イオンを含まない酸性溶液で、ｐＨ５未満に酸性化し；
式３の最終生産物を単離する。
【００４１】
式３の化合物を調製する上記方法では、工程１において式１と式２の化合物とを化合させる酸性溶液が、塩化物イオンと、塩化物イオンを特に反応混合物中で生産しうる試薬とを、それぞれ実質的に又は完全に含まない、ことがさらに好まれる。
式３の化合物を調製する上記方法では、工程２における式３ａの中間体が、塩化物イオンと、塩化物イオンを特に反応混合物中で生産しうる試薬又は不純物とを、それぞれ実質的に又は完全に含まない、こともさらに好まれる。
【００４２】
式３の化合物を調製する上記方法では、式３ａの中間体とヨウ素とを化合させる溶液が、塩基性ｐＨを有する、こともさらに好まれる。
式３の化合物を調製する上記方法のバリエーションの１つでは、式３の化合物を調製する方法の工程１において、式１の化合物を、２当量未満の式２の化合物と化合させることもありうる。
【００４３】
しかしこの実施形態は、好ましい実施形態の化学量論比を用いた場合より、式３の収率が低くなるため、あまり好ましくない。
さらに別の実施形態では、本願発明は式３の化合物：
【００４４】
【化９】
【００４５】
（式中、Ｒ１は独立にＩ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＩ、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち１つから３つはＩ）を調製する方法に関し、この方法は以下の工程１及び２を含む。
【００４６】
工程１：式１の化合物：
【００４７】
【化１０】
（式中、Ｒ１は独立にＩ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＨ）と、１当量の式２の化合物：
【００４８】
【化１１】
【００４９】
（式中、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０は独立にＦ、Ｃｌ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキルで、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０のうち少なくとも２つはH；とＲ９はＨ）とを、塩化物イオンと、塩化物イオンを反応混合物中で生産しうる試薬又は不純物とをそれぞれ実質的に又は完全に含まない酸性溶液中で化合させ；
これを２０℃から２５０℃の温度で撹拌し；
結果として得られる式３ａの環化中間生産物を、例えばろ過又は類似の手段で単離する。
【００５０】
【化１２】
【００５１】
工程２：続いて、塩化物イオンと、塩化物イオンを生産しうる不純物又は不純物とを完全に又は実質的に含まない式３ａの中間体を、塩化物イオンを完全に又は実質的に含まない水溶液と化合させ；
式３ａの中間体の水溶液をヨウ素（Ｉ２）で処理し；
２０℃から１００℃の温度で、式３ａから式３への変換が実質的に完了するのに十分な時間、撹拌し（なお、式３への変換が実質的に完了しているかは、ＨＰＬＣ又は類似の手段で測定される）；
式３の化合物を含む反応混合物を、塩化物イオンを含まないヨウ素捕捉剤でクエンチし；
このクエンチした反応混合物を、塩化物イオンを含まない酸性溶液で、ｐＨ５未満に酸性化し；
最終生産物をろ過又は類似の手段で単離する。
【００５２】
式３の化合物を調製する上記方法では、工程２において、式３ａの中間体とヨウ素とを化合させる水溶液が、塩基性ｐＨを有することが好まれる。
工程２では、式３への変換が少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％、最も好ましくは少なくとも９８％、完了するのに十分な時間、撹拌を続けることがさらに好まれる。この時間は、通常約１から２４時間の範囲で、より好ましくは約２から１８時間の範囲である。
【００５３】
別の実施形態において、本願発明は式４の化合物（式中、Ｒ１は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つの置換基はＩで、他の置換基の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）及び、その全ての（ａ）互変異性体、（ｂ）アトロプ異性体、（ｃ）式３に表されるような閉環ラクトン型、（ｄ）式３に表されるラクトン型のエナンチオマー、（ｅ）医薬的に許容可能な塩に関する。
【００５４】
【化１３】
【００５５】
【化１４】
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１−ａ】４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’，７’−テトラヨードフルオレセイン又はローズベンガルラクトン、を示す。
【図１−ｂ】４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラブロモ−２’，４’，５’，７’−テトラヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｃ】２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−４’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｄ】４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−２’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｅ】２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−４’，５’−ジヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｆ】４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−２’，７’−ジヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｇ】２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−４’，７’−ジヨードフルオレセイン）を示す。
【図１−ｈ】４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｉ】４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，７’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｊ】４，５，６，７−テトラブロモ−２’−クロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’−クロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｋ】４，５，６，７−テトラブロモ−４’−クロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４’−クロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−２’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｌ】４，５，６，７−テトラブロモ−２’，７’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，７’−ジクロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’−ジヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｍ】４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４’，５’−ジクロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−２’，７’−ジヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｎ】４，５，６，７−テトラブロモ−２’，５’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，５’−ジクロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−４’，７’−ジヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｏ】４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラブロモ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｐ】４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラブロモ−２’，４’，７’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｑ】１−ｑ−Ｒは非対称に置換されたキサンテンのアトロプ異性体（ａＲ体の表示）を示し、１−ｑ−Ｓは非対称に置換されたキサンテンのアトロプ異性体（ａＳ体の表示）を示す。
【図１−ｒ】４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−７’−イソプロピル−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：７’−イソプロピル−４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン、を示す。
【図１−ｓ】２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，５，７−テトラヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸二ナトリウム塩、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’，７’−テトラヨードフルオレセイン二ナトリウム又はローズベンガル、を示す。
【発明を実施するための形態】
【００５７】
＜語句の定義＞
“Ｃ１〜Ｃ４アルキル”は、直鎖型及び分岐型の、飽和又は不飽和の炭化水素類を示し、これらは通常、特定の数の炭素原子を有している。“Ｃ１〜Ｃ４アルキル”は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｉ−ブチル、及びｔ−ブチル、を例として含むが、これらに限定はされない。
【００５８】
“ハロ”及び“ハロゲン”という語は、互換的に用いることができ、いずれもフロロ基、クロロ基、ブロモ基、及びヨード基を示しうる。
“塩化物を実質的に含まない”及びこれに類似の表現は、反応条件、試薬、又は中間化合物が、式３、式３ａ、又は式４のトランスハロゲン化された不純物の、０．１５％（例、１５００ｐｐｍ）以上のレベルにおける不都合な生成を十分に回避できる純度において、塩化物イオン、塩化物イオンを含む不純物、又は塩化物イオンを含むこと、あるいは、上記のような反応条件、試薬、又は中間化合物が、塩化物イオン、塩化物イオンを含む不純物、又は塩化物イオンを発生させうる不純物を、１５００ｐｐｍ以下のレベルで含むこと、を示す。
【００５９】
“トランスハロゲン化された不純物を実質的に含まない”及びこれに類似の表現は、式３及び式４の化合物（式中、Ｒ１又は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＣｌで、他はＩ；Ｒ６はＨ）が、０．１５％（例、１５００ｐｐｍ）以下のレベルで存在することを示す。
【００６０】
＜一般的（ｇｅｎｅｒｉｃ）構造の表示＞
簡略化のため、式３、式３ａ、式３ｂ、式４の各種の中間及び最終生産物を、その一般的な（ｇｅｎｅｒｉｃ）ラクトン又はキノイド異性型で図示する。
ただし、ｐＨその他の条件によっては、その代わりとなる異性型（例、ラクトンの代わりにキノイド、キノイドの代わりにラクトン）で図示することもある。
なおこのような一般的（ｇｅｎｅｒｉｃ）表示は、図示した特定の異性型に開示を限定することを意図したものではない。
【００６１】
＜反応スキーム＞
スキームＩは、例えば式３のようなヨウ化キサンテンを作製する方法に関する、本願発明の１つの実施形態を示す。
この方法は、無水フタル酸（式１）を過剰量のレソルシノール（式２）と反応させて、式３ａの化合物（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＩではなく、Ｒ２〜Ｒ５のうち少なくとも１つはＨ）を得ることを含む。
式３ａの化合物を、最低限単離した後にヨウ素化して、式３の化合物（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＩで置換されている）を得る。
【００６２】
【化１５】
【００６３】
環化反応（上記工程１）は、ニート（ｎｅａｔ）から１０％（水中）のメタンスルホン酸（ＭＳＡ）を用いて、０℃から還流温度で実施することができる。
好ましい実施形態では、未希釈のメタンスルホン酸を、８５℃〜９５℃で、１〜１６時間用いる。
【００６４】
さらに好ましい実施形態では、２〜６倍量のＭＳＡ、より好ましくは４〜５倍量のＭＳＡ、さらに好ましくは約４．８倍量のＭＳＡを用いる。
環化を起こすために、代替的にはｐ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、硫酸又はトリフルオロメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酢酸、プロピオン酸、トリフルオロ酢酸、カンファースルホン酸、又は、
【００６５】
以下：融点約２５０℃未満のアルキルスルホン酸又はアリールスルホン酸、融点約２５０℃未満のアルキルカルボン酸又はアリールカルボン酸、塩化物でないブレンステッド酸、塩化物でないか塩素が固定されているルイス酸、のうち１つ以上を含む酸性溶液、又は、
上記物質それぞれの重合体又は塩の調製物、又はその水溶液を、単独で、又はメタンスルホン酸と共に用いることができる。
式３ａへの環化は、実質的に化学量論量の反応物を（例、式１のレソルシノールと式２の無水フタル酸を、２：１の比率で）用いて実施できる。
【００６６】
さらなる実施形態では、無水フタル酸を確実に全て消費するために、過剰量（例、約２．５当量から約３当量以上、より好ましくは約３．２当量以上）のレソルシノールを用いて反応を実施することが好まれる。
式３ａを単離した後、結果として得られる固体は、純度向上のために再懸濁することができる。この際、撹拌はしてもしなくてもよい。
【００６７】
再懸濁においては、好ましくは水及び、アセトンと水又はＤＭＦと水の混合物を、５０℃から７０℃まで加熱して用い、より好ましくはアセトンと水を約６０℃で用いる。
単離と再懸濁は、式３ａの物質が所望の純度となるまで繰り返してよい。
ヨウ素化反応（上記工程２）は、モル過剰量のヨウ素（Ｉ２）を、好ましくは塩基性条件下で用いて実施することができる。
【００６８】
例えば、０．１〜５Ｍの水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、重炭酸ナトリウム、又は重炭酸カリウムを、０℃から還流温度で用いて、この反応を実施することができる。
好ましい実施形態では、０．４〜１．０Ｍ ＮａＯＨを７０〜９５℃で用いて、この反応を実施する。
ヨウ素を反応混合物に溶かすために、ＫＩ、ＮａＩ、又はＫＩとＮａＩの混合物、例えば１〜２．５当量のＮａＩを用いることができる。
反応時間は１〜２４時間で、これはキサンテン環構造に加わったヨウ素原子の数に左右される。
【００６９】
さらなる実施形態では、反応時間、温度、又は塩基濃度を変化させて、ヨウ素化の度合いを調整することができる。
この反応に用いるヨウ素は、例えばオキソンや過酸化水素などの酸化剤と、ヨウ化物塩とを用いて、インサイチュで発生させてもよい。ここで前記ヨウ化物塩は、ヨウ化カリウム、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、又はそれらの混合物から選択されたものである。
【００７０】
この特定の例については、不都合なトランスハロゲン化を引き起こしうる成分、例えば塩化物水溶液、塩素、ＨＣＬ、又はハロゲンイオンを生成しうるその他の成分が、反応混合物中に含まれないようにすることが好まれる。ただし、これらの成分が加わる前に、気体の酸素又はヨウ素を含む、あらゆる酸化剤を除去又はクエンチした場合はこの限りでない。
【００７１】
反応混合物中の成分として、例えば次亜塩素酸ナトリウムは、不安定な塩化物イオンや強力な酸化剤の発生源となるため、特に不都合である。また、塩化物イオン、塩化物ラジカル、その他の次亜塩素酸誘導体、次亜塩素酸、及びそれらの混合物も、不都合な副反応を引き起こしうる。
反応が完了したら、反応混合物を約−２０℃から１０℃、好ましくは１０℃未満に冷ます。そして、ヨウ素捕捉剤、例えばチオ硫酸ナトリウム、チオ硫酸カリウム、チオ硫酸アンモニウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸ナトリウム、又はその混合物、を加えてヨウ素をクエンチする。さらに好ましい実施形態では、クエンチするのに亜硫酸ナトリウムを用いる。
【００７２】
反応混合物を、好ましくは１０℃未満に保ったまま、ニート（ｎｅａｔ）から１％の硫酸水溶液、好ましくは５％の硫酸水溶液でｐＨ１．５から５の間に調節すると、式３が水溶液から沈澱し、これを簡単に単離することができる。好ましい実施例では、ｐＨを１．５から３の間に調節する。
【００７３】
式３ａを単離した結果として得られる固体を、室温で再懸濁してさらに単離し、不純物を除去することができる。これには例えば、水及び、アセトンと水又はＤＭＦと水の混合物、好ましくはアセトンと水の混合物を用いることができる。
また、ｐＨ５以上に調節して、式３を式４として溶かしてから、酸性条件下で単離するため式３に再変換しても良い。
【００７４】
【化１６】
【００７５】
スキームＩＩは、本願発明の別の実施形態を示す。ここで式３の化合物は、ｐＨが実質的に中性又は塩基性ｐＨである場合、キノイド型（式４）としても存在しうる。これらのキノイドは塩として存在することもあり、このときヒドロキシ基の片方又は双方が、Ｎａ、Ｋ、又はＬｉイオンを含む塩基性対イオン（Ｒ１１及び／又はＲ１２）に置換されている。
【００７６】
スキームＩＩＩは、式３の化合物（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つはＩ）を出発物質とし、ＩをＣｌに置換して、式３ｂの化合物（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つはＣｌ）を発生させる方法を示す。
【００７７】
【化１７】
【００７８】
スキームＩＶは、本願発明の別の実施形態を示す。ここで式４の化合物は、このプロセスの生産物として単離することもできる。
これらのキノイドは塩として存在することもあり、このときＲ１１及び／又はＲ１２のヒドロキシル基は、Ｈ、Ｎａ、Ｋ、又はＬｉイオンを含む、医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオンで置換されている。
【００７９】
【化１８】
【００８０】
本願発明の好ましい実施形態は、式３及び式４の化合物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２〜Ｒ５は独立にＣｌ、Ｉ又はＨより選択される；Ｒ２〜Ｒ６に少なくとも３つの水素原子が存在するか、Ｒ２〜Ｒ５に少なくとも１つの塩素原子が存在する）に関し、場合によってはそのアトロプ異性体にも関する。
【００８１】
本願発明の１組の具体的な実施形態は、以下の化合物、及びその医薬的に許容可能な塩を含む。これらに、ラクトン型（式３）及びキノイド型（式４）としての名称を付し、図１に示す：
【００８２】
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’，７’−テトラヨードフルオレセイン（図１−ａ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，５，７−テトラヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸（図１−ｓ参照）。
これらを共通してローズベンガルと呼び、これらの二ナトリウム塩型を、ローズベンガル二ナトリウムと呼ぶ；
【００８３】
４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラブロモ−２’，４’，５’，７’−テトラヨードフルオレセイン（図１−ｂ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，５，７−テトラヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００８４】
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−４’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｃ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（２−クロロ−６−ヒドロキシ−４，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び２，３，４，５−テトラクロロ−６−（７−クロロ−６−ヒドロキシ−２，４，５−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００８５】
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−２’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｄ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（４−クロロ−６−ヒドロキシ−２，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラクロロ−６−（５−クロロ−６−ヒドロキシ−２，４，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００８６】
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−４’，５’−ジヨードフルオレセイン（図１−ｅ参照）、及びそのキノイド型：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（２，７−ジクロロ−６−ヒドロキシ−４，５−ジヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００８７】
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−２’，７’−ジヨードフルオレセイン（図１−ｆ参照）、及びそのキノイド型：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（４，５−ジクロロ−６−ヒドロキシ−２，７−ジヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００８８】
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−４’，７’−ジヨードフルオレセイン（図１−ｇ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（２，５−ジクロロ−６−ヒドロキシ−４，７−ジヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラクロロ−６−（４，７−ジクロロ−６−ヒドロキシ−２，５−ジヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００８９】
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｈ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，５−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−４，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９０】
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，７’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｉ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−２，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９１】
４，５，６，７−テトラブロモ−２’−クロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’−クロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｊ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（２−クロロ−６−ヒドロキシ−４，５，７−トリヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラブロモ−６−（７−クロロ−６−ヒドロキシ−２，４，５−トリヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９２】
４，５，６，７−テトラブロモ−４’−クロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４’−クロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−２’，５’，７’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｋ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（４−クロロ−６−ヒドロキシ−２，５，７−トリヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラブロモ−６−（５−クロロ−６−ヒドロキシ−２，４，７−トリヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９３】
４，５，６，７−テトラブロモ−２’，７’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，７’−ジクロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’−ジヨードフルオレセイン（図１−ｌ参照）、及びそのキノイド型：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（２，７−ジクロロ−６−ヒドロキシ−４，５−ジヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９４】
４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４’，５’−ジクロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−２’，７’−ジヨードフルオレセイン（図１−ｍ参照）、及びそのキノイド型：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（４，５−ジクロロ−６−ヒドロキシ−２，７−ジヨード−３−オキソ−９、９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９５】
４，５，６，７−テトラブロモ−２’，５’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：２’，５’−ジクロロ−４，５，６，７−テトラブロモ−４’，７’−ジヨードフルオレセイン（図１−ｎ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（２，５−ジクロロ−６−ヒドロキシ−４，７−ジヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラブロモ−６−（４，７−ジクロロ−６−ヒドロキシ−２，５−ジヨード−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９６】
４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラブロモ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｏ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，５−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キセンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラブロモ−６−（６−ヒドロキシ−４，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９７】
４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラブロモ−２’，４’，７’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｐ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、又は、異性体：２，３，４，５−テトラブロモ−６−（６−ヒドロキシ−２，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸；
【００９８】
上記化合物の１つにおいて、キサンテン核上で非対照な置換がなされると発生しうる、アトロプ異性体のａＲ型（図１−ｑ−Ｒ参照）及びａＳ型（図１−ｑ−Ｓ参照）；及び
【００９９】
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−７’−イソプロピル−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、別名：４，５，６，７−テトラクロロ−７’−イソプロピル−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン（図１−ｒ参照）、及びそのキノイド型異性体：２，３，４，５−テトラクロロ−６−（７−イソプロピル−６−ヒドロキシ−２，４，５−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸、及び、２，３，４，５−テトラクロロ−６−（２−イソプロピル−６−ヒドロキシ−４，５，７−トリヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸。
【０１００】
本願発明の式３又は式４の化合物は、キラル中心を含むことがあり、そのため各種のエナンチオマー型又はジアステレオマー型で存在することがある。
本願発明は、式３又は式４の化合物の、全ての光学異性体、及び全ての立体異性体、即ち、ラセミ混合物と個別のエナンチオマーの双方、これらの化合物のジアステレオマー、及びこれらの混合物に関する。さらに、本明細書において、これらの化合物をそれぞれ含有又は使用すると定義される、全ての医薬組成物及び治療方法にも関する。
【０１０１】
個々の異性体は、最終又は中間生産物の調製において、光学分割、分別結晶、及び光学的選択性条件又はクロマトグラフィによる分離などの、周知の方法で得られる。
同様に、式３又は式４の化合物のキノイド型であって、対応しあうキサンテンアリール環上の置換基が一致しない（例えば、図１−ｃ、１−ｄ、１−ｇ、１−ｈ、１−ｉ、１−ｊ、１−ｋ、１−ｏ、１−ｐに表されるように、Ｒ３＝Ｒ４のときＲ２≠Ｒ５、Ｒ２＝Ｒ５のときＲ３≠Ｒ４）ため、キサンテン環が非対称となっているものも、図１−ｑ−Ｒ及び図１−ｑ−Ｓに示すように、安定なアトロプ異性体として存在しうる。
【０１０２】
本明細書に記載のこのプロセスは、これらのアトロプ異性体をラセミ混合物として調製すること、及び、ラセミアトロプ異性体対（ｒａｃｅｍｉｃ ａｔｒｏｐｉｓｏｍｅｒｉｃ ｐａｉｒ）が反応不純物として発生しうる場合には、その相対量を最小化することを含む。
【０１０３】
式３の化合物は、それ自体が酸性化合物である限り、様々な無機及び有機塩基を伴って、多種多様な異なる塩を生成することができる。
本願発明における酸性化合物の塩基添加塩は、水性溶媒中、あるいはエタノール又はメタノールなどの適切な有機溶媒中で、指定の無機又は有機塩基を少なくとも１又は２当量用いて式３のラクトンを処理することにより、簡単に調製できる。
溶媒を蒸発させ、その結果として得られる塩の水溶液をろ過するか、又はそのまま用いると、所望の塩が、式４に表わされるようなキノイド型において簡単に得られる。
【０１０４】
医薬的に許容可能な塩は、例えば、ナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、メグルミン、アンモニウム、アルミニウム、亜鉛、ピペラジン、トロメタミン、リチウム、コリン、ジエチルアミン、４−フェニルシクロヘキシルアミン、及びベンザチンを伴って生成されるものを含む。
【０１０５】
本願発明はまた、同位体標識化合物も含む。この同位体標識化合物は、１つ以上の原子が、自然界に通常見られる原子量又は質量数とは異なる原子量又は質量数を有する原子によって置換されている、という点を別にすれば、式３及び式４の化合物と同一である。
本願発明の化合物に組み込める同位体の例には、水素、炭素、酸素、フッ素、塩素、及びヨウ素などの同位体、例えばそれぞれ、２Ｈ、３Ｈ、１４Ｃ、１３Ｃ、１０Ｃ、１１Ｃ、１３Ｏ、１４Ｏ、１５Ｏ、１８Ｏ、１７Ｏ、１７Ｆ、１８Ｆ，３２Ｃｌ、３３Ｃｌ、３４Ｃｌ、３６Ｃｌ、７４Ｂｒ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ、１１７Ｉ、１１８Ｉ、１２０Ｉ、１２１Ｉ、１２２Ｉ、１２４Ｉ、１２６Ｉ、１２８Ｉ、及び１３１Ｉなどが含まれる。
【０１０６】
上述の同位体及び／又はその他の同位体を含む、本願発明の化合物、プロドラッグ、及び前記化合物又はプロドラッグの医薬的に許容可能な塩は、本願発明の範囲内である。本願発明のある種の同位体標識化合物は、薬物及び／又は基質組織分布アッセイにおける診断薬として有用である。
式３及び式４の同位体標識化合物を調製するには、以下のスキーム及び／又は実施例に開示した手順をほぼ実施すればよいが、この際、非標識（ｎｏｎ−ｉｓｏｔｏｐｉｃａｌｌｙ ｌａｂｅｌｅｄ）試薬を、簡単に入手可能な同位体標識試薬に、例えば非標識のヨウ素を１３１Ｉに置換する必要がある。
【０１０７】
本願発明の１つの実施形態において、式４の化合物は、薬剤中に約０．００１重量％から約２０重量％未満含まれる。
本願発明の１つの実施形態は、ヒト又は動物の組織の治療のための、薬剤、及びこうした薬剤のある種の医薬的使用、及びこうした薬剤を用いた治療方法、を対象とする。ここで、こうした薬剤の主要な有効成分は、式３又は式４のハロゲン化キサンテンである。
【０１０８】
こうした薬剤は例えば、化学療法的に、化学的切除剤又は光力学的薬剤として作用しうる。そして、こうした薬剤は、皮膚及び関連器官、口と消化管及び関連器官、泌尿生殖路及び関連器官、呼吸器及び関連器官、循環器系及び関連器官、頭部及び頚部、内分泌系とリンパ網内系及び関連器官、結合組織などのその他様々な組織、手術中に露出される様々な組織表面、及び微生物性、ウイルス性、真菌性、又は寄生虫性感染を呈する様々な組織、を冒す様々な状態の治療に有用である。
【０１０９】
これらの薬剤は、液体、半固体、固体、又はエアロゾルの送達賦形剤を含みうる各種の剤形において利用でき、また静脈内注射（ｉ．ｖ．）、腹膜腔内注射（ｉ．ｐ．）、筋肉内注射（ｉ．ｍ．）、頭蓋内注射（ｉ．ｃ．）、腫瘍内注射（ｉ．ｔ．）、病変内注射（ｉ．ｌ．）、上皮内注射（ｉ．ｅ．）、経皮送達（ｔ．ｃ．）、及び経食道（ｐ．ｏ．）投与を含む、従来の各種の方式や経路により体内投与するのに適している。
【０１１０】
さらにこうした薬剤は、特定の組織への直接的な、又はその組織近辺への、局所的適用を含む慣習的な方式や経路による局所投与に適している。
こうした薬剤の有効成分は、例えば微生物性感染の駆除、組織刺激又は炎症の減少又は除去、過剰増殖性組織の減少又は除去、癌性又は前癌性組織の減少又は除去、表面又は表面下の脂肪細胞又は脂肪沈着物の減少又は除去、及びその他類似の徴候などの望ましい治療反応をもたらす。
【０１１１】
好ましい実施形態では、こうした薬剤は液体、半固体、固体、又はエアロゾルの送達賦形剤及び、タブレット、カプセル、座剤、及びその他類似の形態を含む、各種の剤形において生産される。
別の好ましい実施形態では、少なくとも１つの標的部分が、任意のＲ１からＲ６の位置において、あるいはヒドロキシル基又はカルボニル基での結合を介して、式３又は式４のハロゲン化キサンテンと共役する。
【０１１２】
こうした標的部分は、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、リボ核酸（ＲＮＡ）、アミノ酸、タンパク質、抗体、リガンド、ハプテン、炭水化物受容体、炭水化物錯化剤、脂質受容体、脂質錯化剤、タンパク質受容体、タンパク質錯化剤、キレート剤、封入賦形剤、短鎖脂肪族炭化水素、長鎖脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素、アルデヒド類、ケトン類、アルコール類、エステル類、アミド類、アミン類、ニトリル類、アジド類、親水性成分、及び疎水性成分を含む群より選択できるが、これらに限定はされない。
別の好ましい実施形態では、式４の化合物を、薬剤の製造に用いる。
【実施例】
【０１１３】
以下の実施例は、本願発明の特定の実施形態を表す例示的なもので、限定的なものではない。
＜一般的な方法＞
全ての反応は開放容器内で実施した。環境光から保護するため、時折これらの容器を被覆した。別途記載のない限り、全ての反応は、窒素、アルゴン、又はその他の不活性雰囲気下で実施した。使用した全ての溶媒及び試薬は、商業的供給源から入手したもので、さらなる精製は施していない。
【０１１４】
反応の監視には高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）、質量分析、及び／又は薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）を用いた。
ＨＰＬＣには、Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ Ｓｅｒｉｅｓ Ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ ポンプ／可変波長検出器（検出波長２２５ｎｍ）と、Ｓｕｐｅｌｃｏ Ａｓｃｅｎｔｉｓ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｃ１８カラム（４．６×１５０ｍｍ、２．７μｍ；４０℃で、ＭｅＣＮ／０．５％Ｈ３ＰＯ４水溶液を、６５／３５から９０／１０で３０分超グラジエント溶出）、又はＷａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ Ｓｈｉｅｌｄ ＲＰ−１８カラム（４．６×１５０ｍｍ、５μｍ；４０℃で、ＭｅＣＮ／ｐＨ３の１０ｍＭ Ｋ３ＰＯ４水溶液＋５％ＭｅＣＮを、１０／９０から８０／２０で２５分超グラジエント溶出、又は６５／３５でアイソクラテック溶出）のいずれかを用いた。
【０１１５】
質量分析では、ＨＰＬＣの場合と類似の、ギ酸により調整したクロマトグラフ条件において、Ａｇｉｌｅｎｔ ＬＣ／ＭＳＤ Ｔｒａｐ又はＷａｔｅｒｓ ＬＣＭＳを用いた。
ＴＬＣでは、可視化のために、紫外光及びヨード染色を用いた。
超臨界流体クロマトグラフィ（ＳＦＣ）は、Ｔｈａｒ ＳＦＣ ８０をＲｅｇｉｓＣｅｌｌカラム（３×２５ｃｍ）と用いて、エタノール中４．５ｍｇ／ｍＬの試料を１注入につき２０〜２２ｍｇ充填して行った。
【０１１６】
プロトン核磁気共鳴（１ＨＮＭＲ）スペクトルは、Ｖａｒｉａｎ ＩＮＯＶＡ ３００又はＶａｒｉａｎ Ｇｅｍｉｎｉ ２０００で３００ＭＨｚで、あるいはＶａｒｉａｎ Ｏｘｆｏｒｄ ４００で４００ＭＨｚで記録した。いずれにおいても、それぞれＴＭＳを内部標準として用いた。
化学シフトδ（百万分率、ｐｐｍを単位とする）は、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）を０ｐｐｍとして、２．５０ｐｐｍのＤＭＳＯ−ｄ6のシングレットに関して記載する。
【０１１７】
結合定数（Ｊ）はヘルツ（Ｈｚ）を単位として記載する。
ノイズデカップリングされた（Ｎｏｉｓｅ−ｄｅｃｏｕｐｌｅｄ）炭素−１３核磁気共鳴（１３ＣＮＭＲ）スペクトルは、Ｖａｒｉａｎ ＩＮＯＶＡ ３００分光計において７５ＭＨｚで、又はＶａｒｉａｎ Ｏｘｆｏｒｄ ４００分光計において１００ＭＨｚで、又はＶａｒｉａｎ Ｇｅｍｉｎｉ ２０００分光計において７５ＭＨｚで記録した。
【０１１８】
化学シフトδはｐｐｍを単位とし、ＤＭＳＯ−ｄ６の３９．５ｐｐｍのセプテットの中心線に関して記載する。ＵＶ−ＶＩＳ分光データは、Ｈｉｔａｃｈｉ Ｕ−２８１０ Ｄｏｕｂｌｅ Ｂｅａｍ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ、又はＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ Ｇｅｎｅｓｙｓ ２ Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒを用い、スリット幅１．５ｎｍ、光路長１０．０ｍｍで、２００〜６００ｎｍの波長をスキャンすることにより得た。
【０１１９】
［実施例１］
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３H−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（ローズベンガルラクトン、図１−ａ）
【０１２０】
工程１：環化。５００ｍＬの丸底フラスコに、マントルヒータ、Ｊ−Ｋｅｍ熱電対、磁気撹拌子（大）、窒素導入管、及び磁気スターラを取り付けた。
この装置に、テトラクロロ無水フタル酸（１．００ｅｑ、５０．００ｇ、１７４．９ｍｍｏｌ）、レソルシノール（２．１０ｅｑ、４０．４４ｇ、３６７．３ｍｍｏｌ）及び未希釈のメタンスルホン酸（２５０ｍＬ）を入れた。この結果として得られた反応混合物は、室温で懸濁液のものであった。
【０１２１】
反応混合物を窒素で洗浄し、９０℃まで加熱して、暗赤橙色の溶液を得た。
反応を９０℃で５時間行い、次いで新たに５．７８ｇのレソルシノール（０．３ｅｑ、５２．４７ｍｍｏｌ）を加えた。反応を９０℃で２．５時間、撹拌しながら続けた。
残留するテトラクロロ無水フタル酸の量が、ＨＰＬＣで１．０％未満となったとき、反応が完了したと見なす。
【０１２２】
機械式撹拌機、氷浴、及びＪ−Ｋｅｍ熱電対を取り付けた１Ｌの丸底フラスコ（３口）に、環境温度のＵＳＰ水（５００ｍＬ）を入れた。
１０℃未満のＵＳＰ水に、９０℃の反応混合物を、窒素の正圧を利用し輸送管を介して徐々に加えた。反応混合物を水に移す間、水でクエンチされた混合物の温度が６０℃を超えないように、輸送率を調整した。
新たな１００ｍＬのＵＳＰ水を用いて反応器をすすぎ、次いでこれを、水の入った反応器に移した。この結果として得られた緑褐色の懸濁液を、室温まで徐々に冷まし、室温でさらに３０分間撹拌した。固体を吸引ろ過で単離した。
【０１２３】
反応器をＵＳＰ水（２×２５０ｍＬ アリコート）ですすぎ、このすすぎ液を用いてウェットケーキをすすいだ。
ウェットケーキを６０分間吸引乾燥し、７０℃で一晩真空乾燥して、緑褐色の固体を８８．６０ｇ得た。
この物質を５５０ｍＬのアセトンと共に、機械式撹拌機、Ｊ−Ｋｅｍ熱電対、マントルヒータ、窒素導入管、及び環流冷却器付きＹアダプタを備えた２Ｌの丸底フラスコに入れた。
【０１２４】
この結果として得られる懸濁液を１．５時間加熱環流した。次いでこれを５３０ｍＬのＵＳＰ水（滴下ろう斗で６０分超かけて徐々に加えた）で、温度５６℃以上を保って処理した。水を加えている間に、温度の上昇（最高温度は６２℃に達した）が観察された。
水の添加が完了した後、黄褐色の懸濁液を３時間環流させ、約３０〜４０分超かけて徐々に室温まで冷ました。
【０１２５】
混合物を室温でさらに３０分間撹拌し、それから黄褐色の懸濁液を吸引ろ過で収集した。
反応器を５０％アセトン水溶液（ｖ／ｖ、４×１００ｍＬ）ですすぎ、このすすぎ液を用いてウェットケーキをすすいだ。
ウェットケーキを４８時間超吸引乾燥し、さらに７０℃で一晩真空乾燥して、テトラクロロフルオレセインを黄褐色の固体として７４．４３ｇ（ＡＵＣ純度９６．８％で収率９０．５％）得た。
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１０．２３（Ｓ，２Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），６．６９（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，２Ｈ），６．５７（ｄ ｏｆ ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）．
【０１２６】
工程２：ヨウ素化。５００ｍＬの丸底フラスコ（３口）に、環流冷却器、Ｙアダプタ、Ｊ−Ｋｅｍ熱電対、機械式撹拌機、マントルヒータ、及び窒素導入管を取り付けた。
反応器を窒素で洗浄し、アルミホイルで覆った。
これに１０．００ｇのテトラクロロフルオレセイン（２１．３ｍｍｏｌ）、３０ｍＬの５Ｍ ＮａＯＨ溶液、及び３００ｍＬのＵＳＰ水を入れ、暗赤色の溶液を得た。
【０１２７】
次いで、反応器に７．０３ｇのヨウ化ナトリウム（４６．９ｍｍｏｌ）及び３２．４ｇのヨウ素（１２７．７ｍｍｏｌ）を入れた。
この反応混合物を環境温度で３０分間撹拌し、それから９０℃まで加熱した。
反応混合物のアリコートをＨＰＬＣ分析すると、出発物質の消費が全て完了し、部分的にヨウ素化された中間体はなく、所望の化合物への変換が全て完了しているということが示された。
【０１２８】
反応混合物を９０℃で１．５時間加熱した後、加熱を止め、反応混合物を１．５時間超かけて室温まで徐々に冷ました。
この紫がかったピンク色の反応混合物を、氷浴で１０℃未満に冷ました。反応混合物のｐＨは７．１３であった。
【０１２９】
反応混合物に亜硫酸ナトリウム（６．７０ｇ）を少量ずつ加えた。７５ｍＬのアセトンを１０℃未満で反応器に入れ、混合物を１０℃未満で１０分間撹拌した。
温度が１０℃未満である間に、５％Ｈ２ＳＯ４溶液（２４ｍＬ）を滴下して加え、ｐＨを２．０３に到達させ、ピンク色の懸濁液を得た。この反応懸濁液を吸引ろ過で収集した。
【０１３０】
反応器を２５％アセトン水溶液（ｖ／ｖ、４×１００ｍＬ）ですすぎ、このすすぎ液を用いてウェットケーキをすすいだ。
ウェットケーキを３時間吸引乾燥し、６０℃で一晩真空乾燥して、２５．８１ｇのピンク色の固体を得た。
これらの固体と、２２５ｍＬのアセトンとを、機械式撹拌機、Ｊ−Ｋｅｍ熱電対、及び窒素導入管付きＹアダプタを備えた１Ｌの丸底フラスコ（３口）に入れた。
【０１３１】
この混合物を室温で１０分間撹拌し、それからこれに２５５ｍＬのＵＳＰ水を１０分超かけて加え、懸濁液を得た。
懸濁液を室温で２．２５時間撹拌し、それから吸引ろ過して固体を単離した。
反応器を５０％アセトン水溶液（１×７５ｍＬ）ですすぎ、このすすぎ液を用いてウェットケーキをすすいだ。
【０１３２】
次いでウェットケーキを、５０％アセトン水溶液（２×７５ｍＬ）及びＵＳＰ水（１×７５ｍＬ）ですすぎ、１時間吸引乾燥し、さらに８０℃で乾燥させて、４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、生産物として１８．６８ｇ（収率９０．２％、サンゴ色の固体、ＨＰＬＣ ＡＵＣ純度９９．５％）得た。
【０１３３】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１０．２７（ｓ，２Ｈ），７．５９（ｓ，２Ｈ）。１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．２，１５８．６，１５１．９，１４６．７，１３８．８，１３６．５，１３５．３，１３１．２，１２６．８，１２４．６，１１０．８，８１．８，７９．３，７７．０．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ ９７４．８（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ９７３．６７）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５７ｎｍ（メタノール中）；示差走査熱量測定（ＤＳＣ）により測定された融点（ｍｐ）＝２１５℃．
【０１３４】
［実施例２］
４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（図１−ｂ）
【０１３５】
工程１：実施例１の工程１に記載の手順にしたがって、テトラブロモ無水フタル酸（２８．６３ｇ、６１．７４ｍｍｏｌ）及びレソルシノール（１７ｇ、１５４．４ｍｍｏｌ）を、１４３ｍＬのメタンスルホン酸中で処理し、テトラブロモフルオレセインを、明るいベージュ色の固体（収率８４．１％、ＡＵＣ純度９７．４％）として３３．６４ｇ得た。
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１０．１７（ｓ，２Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝８．６４Ｈｚ，２Ｈ），６．６５（ｄ，Ｊ＝２．３４Ｈｚ，２Ｈ），６．５４（ｄ ｏｆ ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）．
【０１３６】
工程２：実施例１の工程２に記載の手順にしたがって、テトラブロモフルオレセイン（２２ｇ、３３．９６ｍｍｏｌ）、ヨウ素（５１．７１ｇ、２０３．７ｍｍｏｌ）及びヨウ化ナトリウム（１１．２２ｇ、７４．８５ｍｍｏｌ）を処理し、４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、明るいピンク色の固体として単離し、３６．０２ｇ得た。
【０１３７】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１０．２２（ｓ，２Ｈ），７．４９（ｓ，２Ｈ）．１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．９，１５８．８，１５２．５，１４９．９，１３７．３，１３６．７，１３３．５，１２７．５，１２４．６，１２１．１，１１１．５，８２．０，８０．３，７７．４．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ １１５２．６（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ １１５１．４８）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５８ｎｍ（メタノール中），ｍｐ（ＤＳＣにより測定）＝２２７℃．
【０１３８】
［実施例３］
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（図１−ｃ）
【０１３９】
工程１：実施例１の工程１に記載の手順にしたがって、テトラクロロ無水フタル酸（５ｇ、１７．４８ｍｍｏｌ）、４−クロロレソルシノール（２．７８ｇ、１９．２３ｍｍｏｌ）、及びレソルシノール（２．１２ｇ、１９．２３ｍｍｏｌ）を処理し、２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、１８．６％の純度で７．２４ｇ得た。これを収集し、次の工程で混合物として用いた。
【０１４０】
工程２：実施例１の工程２に記載の手順にしたがって、２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン（７．２４ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）をヨウ素化した。
【０１４１】
次いで粗生成物（５．４７ｇ）を、ＳＦＣ精製（全流量８０ｇ／ｍｉｎ、ＣＯ２中４０％の補助溶媒（ＥｔＯＨ／０．５％ＴＦＡ）、１４０ｂａｒ、３×２５ｃｍ ５ｍ ＲｅｇｉｓＰａｃｋカラムで２５４ｎｍ）により単離して、２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、ＡＵＣ ＨＰＬＣ純度９５．８％で、明るいピンク色の固体として４２７ｍｇ得た。
【０１４２】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１０．８５（ｓ，１Ｈ），１０．２（ｓ，１Ｈ），７．６０（ｓ，１Ｈ），７．３８（ｓ，１Ｈ）．
１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．４，１５９．０，１５５．８，１５２．３，１５１．２，１４６．９，１３９．１，１３６．９，１３５．７，１３１．６，１２８．２，１２７．１，１２５．１，１１６．９，１１１．０，１０９．７，８２．３，８０．０，７８．４，７８．４，７７．５．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ８８２．７（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ８８２．２）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５４ｎｍ（メタノール中）．
【０１４３】
［実施例４］
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンから、
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン、及び、
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンへの分解（図１−ａ，１−ｄ，及び１−ｆ）
【０１４４】
１００ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）の４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンに、１．０ｍＬのアセトニトリル、及び２．０ｍＬの１２．５％次亜塩素酸ナトリウム水溶液を室温で加えた。この反応混合物を室温で１時間撹拌した。
ＨＰＬＣ分析において、保持時間８．３８分及び９．９３分（それぞれ２７．８％及び４５．６％）に新たな不純物（計２つ）が示された。このとき、４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの２６．６％は未反応であった。
【０１４５】
質量分析では、Ｍ−１イオン：ヘキサクロロ不純物に対応するＭ−１＝７９１．７、ペンタクロロ不純物に対応するＭ−１＝８８１．４、及びローズベンガルラクトンに対応するＭ−１＝９７３．２、が見られた。
以下のように（実施例５及び７参照）トランスハロゲン化された化合物を個別に作製して構造帰属を確認し、ＨＰＬＣを用いてこの実施例の生産物との関連付けを行った。
【０１４６】
［実施例５］
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（図１−ｄ）
【０１４７】
工程１：テトラクロロ無水フタル酸（２．５ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）、２−クロロレソルシノール（１．３３ｇ、９．１８ｍｍｏｌ）、及びレソルシノール（１．０１ｇ、９．１８ｍｍｏｌ）を、１２．５ｍＬの未希釈のメタンスルホン酸と化合させた。これを、９０℃まで１９時間加熱し、それから９７℃まで１０時間加熱して、すぐに２５ｍＬの氷水へ慎重に加えた。
【０１４８】
この懸濁液をエチルアセテートで抽出し、水及びブラインで洗浄し、亜硫酸ナトリウム上で乾燥させた。
この生産物を、６６％：１４％：１８％：４％のトルエン：ジオキサン：ヘキサン：酢酸を溶離液に用い、シリカゲルプラグを介して単離した。
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを純度４６．４％で１．９５ｇ得た。これを収集し、さらなる精製は施さずに、次の工程で用いた。
【０１４９】
工程２：実施例１の工程２に記載の手順にしたがって、４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン（１．９５ｇ、４．１５ｍｍｏｌ）をヨウ素化した。粗生成物は混合物中２．７０ｇであった。
【０１５０】
この生成物をＳＦＣ精製（全流量８０ｇ／ｍｉｎ、ＣＯ２中４０％の補助溶媒ＩＰＡ、１４０ｂａｒ、３×２５ｃｍ ５ｍ ＲｅｇｉｓＰａｃｋカラムで２５４ｎｍ）により単離して、４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、ピンク色の固体として６３０ｍｇ（０．７ｍｍｏｌ、収率３８．５％、ＡＵＣ純度９８．７％）得た。
【０１５１】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１１．０５（ｓ，１Ｈ），１０．３（ｓ，１Ｈ），８．３（ｓ，１Ｈ），７．５５（ｄ，２Ｈ）．
１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．２，１５８．６，１５４．７，１５０．７，１４８．０，１４６．７，１３８．７，１３６．５，１３５．３，１３４．５，１３１．３，１２６．８，１２４．６，１１０．５，１１０．４，８２．４，８２．１，７９．３，７７．６．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ８８２．７（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ８８２．２）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５５ｎｍ（メタノール中）．
【０１５２】
［実施例６］
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（図１−ｅ）
【０１５３】
工程１：実施例１の工程１に記載の手順にしたがって、テトラクロロ無水フタル酸（５ｇ、１７．４９ｍｍｏｌ）、及び４−クロロレソルシノール（６．３２ｇ、４３．７３ｍｍｏｌ）を処理し、１０．３１ｇの粗生成物を得た。このうち９．２５ｇをＤＭＦ：水（１：１）中で懸濁し、次いでろ過し、２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、橙色の固体として９．７０ｇ（２：１ ＤＭＦ複合体１７．１６ｍｍｏｌ、収率９２．３％）得た。
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１１．１３（Ｓ，２Ｈ），７．３１（ｓ，２Ｈ），６．８９（ｓ，２Ｈ）．
【０１５４】
工程２：実施例１の工程２に記載の手順にしたがって、２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン（２ｇ、３．７１ｍｍｏｌ）を処理し、２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、ピンクがかった橙色の固体として、ＡＵＣ ＨＰＬＣ純度９７．９％で２．５６ｇ（３．２２ｍｍｏｌ、収率８７．３％）得た。
【０１５５】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１０．９０（ｓ，２Ｈ），７．４８（ｓ，２Ｈ）．
１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．２，１５４．７，１４７．１，１４６．８，１３８．７，１３５．３，１３４．５，１３１．３，１２６．７，１２４．５，１１０．３，１０７．７，８２．６，７９．０．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ７９１．０（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ７９０．７７）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５１ｎｍ（メタノール中）．
【０１５６】
［実施例７］
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（図１−ｆ）
【０１５７】
工程１：実施例１の工程１に記載の手順に従って、テトラクロロ無水フタル酸（５ｇ、１７．４９ｍｍｏｌ）、及び２−クロロレソルシノール（７．５８ｇ、４１．９８ｍｍｏｌ）、を処理し、９．３ｇの粗成生物を得た。
９．３ｇの粗成生物中８ｇをＤＭＦ：水（１：１）で懸濁し、次いでろ過して、４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、橙色の固体として単離し、８．６５ｇ（１６．０５ｍｍｏｌ、ＡＵＣ収率９１．７％）得た。
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１１．０９（Ｓ，２Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），６．８１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）．
【０１５８】
工程２：実施例１の工程２に記載の手順にしたがって、４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン（２ｇ、３．７１ｍｍｏｌ）を処理し、４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、ピンクがかった橙色の固体として２．２０ｇ（２．７８ｍｍｏｌ、収率７５．１％）得た。
【０１５９】
［実施例８］
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの調製（図１−ｇ）
【０１６０】
工程１：実施例１の工程１に記載の手順に従って、テトラクロロ無水フタル酸（５ｇ、１７．４８ｍｍｏｌ）、４−クロロレソルシノール（２．７８ｇ、１９．２３ｍｍｏｌ）、及び２−クロロレソルシノール（２．７８ｇ、１９．２３ｍｍｏｌ）を処理し、粗生成物（ＨＰＬＣで純度約５４％の、２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン）を６．２ｇ得た。これを収集し、次の工程で混合物として用いた。
【０１６１】
工程２：実施例１の工程２に記載の手順にしたがって、２’，４，５，５’，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン（６．２ｇ、うち所望の化合物５４．４％、６．２５ｍｍｏｌ）をヨウ素化し、７．１６ｇ（うち所望の化合物６０．８％、５．５０ｍｍｏｌ、収率８８％）を得た。
【０１６２】
粗生成物（３．３７ｇ、うち所望の化合物６０．８％、２．５９ｍｍｏｌ）を、ＳＦＣ精製（全流量８０ｇ／ｍｉｎ、４０％の補助溶媒（ＣＯ２中、５０／５０のＩＰＡ／ＥｔＯＨ ０．５％ＴＦＡ）、１４０ｂａｒ、３×２５ｃｍ ５ｍ ＲｅｇｉｓＰａｃｋカラムで２５４ｎｍ）により単離して、２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを、明るいピンク色の固体として４２７ｍｇ（０．５４ｍｍｏｌ、ＳＦＣからの回収率２０．８％）得た。
【０１６３】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１１．０５（ｓ，１Ｈ），１０．８５（ｓ，１Ｈ），７．６０（ｓ，１Ｈ），７．４０（ｓ，１Ｈ）．
１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．１，１５５．４，１５４．７，１４９．６，１４８．０，１４６．５，１３８．７，１３５．３，１３４．５，１３１．３，１２７．９，１２６．８，１２４．７，１１６．７，１１０．３，１０９．０，１０７．５，８２．４，７９．６，７８．５．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ７９０．７（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ７９０．７）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５２ｎｍ（メタノール中）．
【０１６４】
［実施例９］
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンから、
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンへの分解（図１−ａ及び１−ｉ）
【０１６５】
６．５ｇ（６．６７ｍｍｏｌ）の４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンに、１３０ｍＬのアセトン、３０ｍＬの水、及び６．６ｇ（４４．０ｍｍｏｌ）のヨウ化ナトリウムを加えた。
この混合物を８２．５時間加熱環流したところ、ＨＰＬＣ分析において、標題の化合物が、出発物質との混合物中３５．４％を占めることが示された。
【０１６６】
反応混合物を１３０ｍＬの水及び１５０ｍＬのエチルアセテートで希釈し、室温で一晩放置した。
有機層を除去し、水層を１００ｍＬのエチルアセテートで抽出した。結合した有機層をブラインで洗浄し、亜硫酸ナトリウム上で乾燥させて、ＨＰＬＣで３５．４％の標題の化合物を含む６．７３ｇの粗成物を得た。
【０１６７】
この物質から、６６％：１４％：１８％：４％のトルエン：ジオキサン：ヘキサン：酢酸を用い、シリカゲルクロマトグラフィで単離した。
一連のクロマトグラフィ工程の後、４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを赤色固体（９０ｇ）として単離した。
【０１６８】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１１．２６（ｓ，１Ｈ），１０．１９（ｓ，１Ｈ），７．５６（ｓ，１Ｈ），７．５１（ｓ，１Ｈ），６．８４（ｓ，１Ｈ）．
１３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＤＭＳＯｄ６）δ１６３．４，１５９．０，１５８．３，１５１．８，１５０．８，１４７．２，１３８．６，１３６．９，１３５．１，１２６．７，１２４．５，１１０．６，１０８．８，１０１．７，８１．２，８８．７，７７．１．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ８４８．８（Ｍ＋１）＋（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ８４７．７）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５３９ｎｍ（メタノール中）．
【０１６９】
［実施例１０］
不完全なヨウ素化による、４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセイン、及び関連する化合物の調製（図１−ｈ）
【０１７０】
５００ｍＬの丸底フラスコに、１０ｇ（２１．３ｍｍｏｌ）のテトラクロロフルオレセイン、１３ｍＬの５Ｍ ＮａＯＨ、３００ｍＬの水、７．０８ｇ（４７．２ｍｍｏｌ）のＮａＩ、及び１６．２４ｇ（６４ｍｍｏｌ）のヨウ素を入れた。
この溶液を５０℃まで６．５時間加熱し、それから室温まで冷ました。亜硫酸水素ナトリウムと酢酸を、ｐＨが３．７になるまで順次加えた。
【０１７１】
この混合物を、エチルアセテートで抽出し、水で、次いでブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空でろ過し、濃縮した。
１８．２ｇの赤橙色の泡状体を、ＡＵＣ ＨＰＬＣ純度４６％の４，５，６，７−テトラクロロ−４’，５’−ジヨードフルオレセインと、４３％の標題化合物、すなわち、４，５，６，７−テトラクロロ−２’，４’，５’−トリヨードフルオレセインとの混合物として、単離した。
ＬＣＭＳ ＭＳ Ｓｃａｎ ８００−１０００：ｍ／ｚ ８４６．５２（Ｍ−１）−（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ８４７．７）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５４０ｎｍ（ＰＢＳ中）．
【０１７２】
実施例１では、６当量のヨウ素を９０℃で用いることで、ほぼ定量的に、ヨウ素を４つ有する化合物への変換が起こるのに対し、３当量のヨウ素をより低温で加熱して用いる、この反応では、より低級のヨウ化不純物の混合物が生じる。
このことは、低級ヨウ化生産物の収率を調整するのに、反応条件を変化させることが有用であることを示している。
【０１７３】
［実施例１１］
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンから、
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−７’−イソプロピル−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンへの分解（図１−ａ及び１−ｒ）
【０１７４】
室温のＴＨＦ中、ＺｎＣｌ２（０．５ｍＬ、０．５０ｍｍｏｌ）、イソプロピルマグネシウムクロリド（０．２３ｍＬ、０．４５ｍｍｏｌ）、及びＢｉｓ（ＰＰｈ３）２ＰｄＣｌ２（触媒量）を入れた丸底フラスコに、ＴＨＦ２ｍＬ中、２００ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）の、４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンを加えた。
【０１７５】
この溶液を、室温で３８時間撹拌した。反応を、５ｍＬのＵＳＰ水、０．５ｍＬの酢酸、及び２滴の５Ｍスルホン酸でクエンチした。有機層をＵＳＰ水（３ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空で濃縮させた。
１９５ｍｇの橙赤色の固体を、ＨＰＬＣで、２．３％の標題の化合物、及び４２．９％の４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’，７’−テトラヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの混合物として単離した。
構造を確認するために、標題の化合物の単離を、以下の実施例のように行った。
【０１７６】
［実施例１２］
２，３，４，５−テトラクロロ−６−（６−ヒドロキシ−２，４，５，７−テトラヨード−３−オキソ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）安息香酸二ナトリウム塩からの、
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−７’−イソプロピル−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オンの単離（図１−ｒ及び１−ｓ）
【０１７７】
１１８ｇ（０．１１ｍｏｌ）の商用グレードのローズベンガル二ナトリウム塩を、９８５ｍＬのＵＳＰ水に溶かし、４００ｍＬの１Ｍ ＨＣｌでｐＨ１〜２に酸性化して、スラリーを得た。
スラリーを１８００ｍＬのエチルアセテートで抽出し、有機層を分離した。水層を新たな１００ｍＬのエチルアセテートで抽出し、有機層を分離した。有機層を合わせて、溶媒が約１８００ｍＬ残るまで濃縮した。
【０１７８】
スラリーを５００ｍＬのヘプタンで処理し、ろ過して、ウェットケーキを２５０ｍＬのヘプタンですすいだ。
固体を６０℃で乾燥させ、次いでホイルで覆った窒素雰囲気下のフラスコ内で、７６０ｍＬのジオキサンと化合させた。
この結果として得られたスラリーを９５℃まで加熱し、７０分間この温度を保った。それからスラリーを冷まし、ろ過した。
窒素存在下で、ウェットケーキを２当量のジオキサンですすぎ、乾燥させた。
【０１７９】
この試料を、阻害剤を含まない４５ｍＬのＴＨＦ中に溶かし、１５〜２０ｍＬになるまで濃縮し、アルミナカラム（５１０ｇの中性アルミナ、及び、３００ｍＬのアセトニトリル：イソプロパノール：酢酸：水＝９０：１０：１：１の溶液）に充填した。
同じ溶液を用いてカラムを溶出させ、生産物を含むフラクションを化合させて、減圧濃縮し、ヘプタンから共沸乾燥させた。
【０１８０】
この手順を再度行った後、乾燥させた固体を無水ＴＨＦに溶かし、シリカゲル分取プレート上に載積した。分取プレートを、トルエン：ジオキサン：ヘプタン：酢酸＝６６％：１４％：１８％：４％の溶液を用いて一度溶出した。
上層バンドを分取プレートから削り取り、１０ｍＬの無水ＴＨＦで消化して（ｄｉｇｅｓｔｅｄ）、２０ｍＬのＴＨＦでろ過し、すすいだ。
ろ液を真空濃縮し、標題の化合物をＡＵＣ ＨＰＬＣ純度８５％の橙赤色の固体として、５９ｍｇ得た。
【０１８１】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；アセトンｄ６）δ７．６７（ｓ、１Ｈ）、６．９９（ｓ、１Ｈ）、３．２７（ｍ、１Ｈ）、１．１２（ｄ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、３Ｈ）、１．０６（ｄ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、３Ｈ）．
ＭＳ ＭＳＤ Ｔｒａｐ：ｍ／ｚ ８８８．６（Ｍ−１）−（ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ８８７．６５）．
ＵＶ−ＶＩＳ λｍａｘ＝５５２ｎｍ（メタノール中）．
【０１８２】
この記載は例示を目的としたものにすぎず、本願発明の内容を限定することを意図したものではない。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式４の化合物：
【化１】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ；Ｒ１１及びＲ１２は独立にＨ又は、医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）を調製するプロセスであって、
前記プロセスは、
ａ）式１の化合物：
【化２】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ）と、約２当量の式２の化合物：
【化３】
（式中、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０はＨ）とを、実質的に塩化物イオンと、塩化物イオンを発生させる不純物とを含まない酸性溶液中で化合させて、式３ａの中間化合物：
【化４】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＨ）を生成する工程と、
ｂ）式３ａの中間化合物と、少なくとも約４当量のヨウ素とを、実質的に塩化物イオンと、塩化物を発生させる不純物とを含まない溶液中で化合させて、式４の化合物を生成する工程と、を含み、
ここで式４の化合物は、実質的に、式４の化合物のトランスハロゲン化された（ｔｒａｎｓｈａｌｏｇｅｎａｔｅｄ）不純物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも1つはＣｌで、その他はＩ；Ｒ６はＨ；Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ、Ｎａ、Ｋ、Ｌｉ又は、医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）を含まない、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２】
請求項１に記載のプロセスであって、式４の化合物のトランスハロゲン化された不純物を、約０．１５重量％未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３】
請求項１に記載のプロセスであって、トランスハロゲン化された不純物は、
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’‐トリヨード−３Ｈ‐スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３‐オン；
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’‐ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；そのキノイド型異性体（ｉｓｏｍｅｒｉｃ ｑｕｉｎｏｉｄ）；及びそれらの混合物；からなる群より選択された少なくとも１つの化合物を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４】
請求項１に記載のプロセスであって、酸性溶液は、塩化物を約１５００ｐｐｍ未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５】
請求項１に記載のプロセスであって、酸性溶液は、融点約２５０℃未満のアルキルスルホン酸又はアリールスルホン酸、融点約２５０℃未満のアルキルカルボン酸又はアリールカルボン酸、塩化物でないブレンステッド酸、塩化物でないルイス酸、その重結合調製物（ｐｏｌｙｍｅｒ ｂｏｕｎｄ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）、その塩、その水溶液、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの酸を、単独で、又はメタンスルホン酸を伴って含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６】
請求項１に記載のプロセスであって、酸性溶液は、ｐ‐トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、スルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酢酸、プロピオン酸、トリフルオロ酢酸、カンファースルホン酸、その重結合調製物、 その塩、その水溶液、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの酸を、単独で、又はメタンスルホン酸を伴って含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項７】
請求項１に記載のプロセスであって、酸性溶液はメタンスルホン酸を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項８】
請求項１に記載のプロセスであって、式２と式１の化合物を、約２．５：１から約３．２：１の比率で化合させる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９】
請求項１に記載のプロセスであって、式１と式２の化合物を、酸性溶液中で、約８５℃から約９５℃までの温度で、約１時間から約１６時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１０】
請求項１に記載のプロセスであって、式３ａの中間化合物を単離する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１１】
請求項１０に記載のプロセスであって、単離する工程は、式３ａの中間化合物を懸濁する工程、式３ａの中間化合物を収集する工程、及び式３ａの中間化合物を、実質的に塩化物イオンを含まない溶媒ですすぐ工程を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１２】
請求項１１に記載のプロセスであって、前記溶媒は、約６０℃まで加熱された、アセトンと水の混合物を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１３】
請求項１に記載のプロセスであって、式３ａの中間化合物とヨウ素とを含む溶液は、塩化物を約１５００ｐｐｍ未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１４】
請求項１に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの中間化合物とヨウ素とを、塩基性溶液中で、約２０℃から約１００℃までの温度で、約１時間から２４時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１５】
請求項１４に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの中間化合物とヨウ素とを、溶液中で、約７０℃から約９５℃までの温度で、約１時間から２４時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１６】
請求項１に記載のプロセスであって、塩基性溶液は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの塩基を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１７】
請求項１に記載のプロセスであって、溶液は水酸化ナトリウムを０．４から１．０Ｍの濃度で含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１８】
請求項１に記載のプロセスであって、式３ａの中間化合物とヨウ素とを含む溶液に、少なくとも１つのヨウ素可溶化剤を加える工程をさらに含み、ここで、
ヨウ素可溶化剤は、ヨウ化カリウム、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１９】
請求項１８に記載のプロセスであって、ヨウ素可溶化剤は約１から約２．５当量のヨウ化ナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２０】
請求項１に記載のプロセスであって、実質的に塩化物イオン、塩化物イオンフリーラジカル、次亜塩素酸塩、次亜塩素酸、又はそれらの混合物、を含まない溶液に、酸化剤とヨウ化物塩とを加えて、ヨウ化物をインサイチュで発生させる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２１】
請求項１に記載のプロセスであって、式４の化合物の生成後に、ヨウ素捕捉剤を溶液に加える工程をさらに含み、ここで、
捕捉剤は、チオ硫酸ナトリウム、チオ硫酸カリウム、チオ硫酸アンモニウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２２】
請求項２１に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤は亜硫酸ナトリウムである、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２３】
請求項２２に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤の添加は、約１０℃以下の温度で行われる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２４】
請求項１に記載のプロセスであって、Ｒ１１及びＲ１２はナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２５】
式４の化合物：
【化５】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ；Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ、Ｎａ、Ｋ、Ｌｉ、又は医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）を調製するプロセスであって、このプロセスは、
実質的に塩化物イオン不純物と、塩化物を発生させる試薬とを含まない、式３ａの化合物又はそのキノイド型異性体（ｑｕｉｎｏｉｄ ｉｓｏｍｅｒ）：
【化６】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＨ）と、少なくとも約４当量のヨウ素とを、実質的に塩化物イオンと、塩化物を発生させる不純物とを含まない溶液中で化合させ、式４の化合物を生成する工程を含む、ことを特徴とし、ここで、
式４の化合物は、式４の化合物のトランスハロゲン化された不純物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＣｌで、その他はＩ；Ｒ６はＨ；Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ、Ｎａ、Ｋ、Ｌｉ、又は医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）を実質的に含まない、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２６】
請求項２５に記載のプロセスであって、式４の化合物のトランスハロゲン化された不純物を、約０．１５重量％未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２７】
請求項２５に記載のプロセスであって、トランスハロゲン化された不純物は、
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；そのキノイド型異性体；及びそれらの混合物；からなる群より選択された少なくとも１つの化合物を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２８】
請求項２５に記載のプロセスであって、酸性溶液は、塩化物を約１５００ｐｐｍ未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２９】
請求項２５に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの化合物とヨウ素とを、塩基性溶液中で、約２０℃から約１００℃までの温度で、約１時間から２４時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３０】
請求項２９に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの化合物とヨウ素とを、溶液中で、約７０℃から約９５℃までの温度で、約２時間から約１８時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３１】
請求項２５に記載のプロセスであって、溶液は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの塩基を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３２】
請求項２５に記載のプロセスであって、溶液は水酸化ナトリウムを０．４から１．０Ｍの濃度で含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３３】
請求項２５に記載のプロセスであって、式３ａの化合物とヨウ素とを含む溶液に、少なくとも１つのヨウ素可溶化剤を加える工程をさらに含み、ここで、
ヨウ素可溶化剤は、ヨウ化カリウム、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３４】
請求項３３に記載のプロセスであって、ヨウ素可溶化剤は約１から約２．５当量のヨウ化ナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３５】
請求項２５に記載のプロセスであって、実質的に塩化物イオン、塩化物イオンフリーラジカル、次亜塩素酸塩、次亜塩素酸、及びそれらの混合物を含まない溶液に、酸化剤とヨウ化物塩とを加えることで、ヨウ化物をインサイチュで発生させる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３６】
請求項２５に記載のプロセスであって、式４の化合物の生成後に、ヨウ素捕捉剤を溶液に加える工程をさらに含み、ここで、
捕捉剤は、チオ硫酸ナトリウム、チオ硫酸カリウム、チオ硫酸アンモニウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３７】
請求項３６に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤は亜硫酸ナトリウムである、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３８】
請求項３７に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤を加える工程は、約１０℃以下の温度で行われる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３９】
請求項２５に記載のプロセスであって、Ｒ１１及びＲ１２はナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４０】
式３の化合物：
【化７】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ）を調製するプロセスであって、
ａ）式１の化合物：
【化８】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ）と、約２当量の式２の化合物：
【化９】
（式中、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０はＨ）とを、酸性溶液中で、約２０℃から約２５０℃までの温度で化合させ、式３ａの化合物：
【化１０】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＨ）を生成する工程と；
式３ａの中間化合物を単離する工程と；
ｂ）式３ａの中間化合物と、約４当量のヨウ素とを、実質的に塩化物イオンと、塩化物イオンを発生させる不純物とを含まない溶液中で、約２０℃から約１００℃までの温度で化合させ、式３の化合物を生成する工程と；
ｄ）式３の化合物にヨウ素捕捉剤を加える工程と；
ｅ）式３の化合物を、ｐＨ約５未満に酸性化し、約１０℃未満の温度に冷ます工程と；
ｆ）トランスハロゲン化された不純物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＣｌで、その他はＩ；Ｒ６はＨ）を実質的に含まない、式３の化合物を単離する工程と、を含むことを特徴とするプロセス。
【請求項４１】
請求項４０に記載のプロセスであって、式３の化合物のトランスハロゲン化された不純物を、約０．１５重量％未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４２】
請求項４０に記載のプロセスであって、トランスハロゲン化された不純物は、
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；そのキノイド型異性体；及びそれらの混合物；からなる群より選択された少なくとも１つの化合物を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４３】
請求項４０に記載のプロセスであって、酸性溶液は、塩化物を約１５００ｐｐｍ未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４４】
請求項４０に記載のプロセスであって、酸性溶液は、融点約２５０℃未満のアルキルスルホン酸又はアリールスルホン酸、融点約２５０℃未満のアルキルカルボン酸又はアリールカルボン酸、塩化物でないブレンステッド酸、塩化物でないルイス酸、その重結合調製物、その塩、その水溶液、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの酸を、単独で、又はメタンスルホン酸を伴って含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４５】
請求項４０に記載のプロセスであって、酸性溶液は、ｐ‐トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、硫酸、トリフルオロメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酢酸、プロピオン酸、トリフルオロ酢酸、カンファースルホン酸、その重結合調製物、その塩、その水溶液、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの酸を、単独で、又はメタンスルホン酸を伴って含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４６】
請求項４０に記載のプロセスであって、酸性溶液はメタンスルホン酸を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４７】
請求項４０に記載のプロセスであって、式２と式１の化合物を約２．５：１から約３．２：１の比率で化合させる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４８】
請求項４０に記載のプロセスであって、式１及び式２の化合物を、酸性溶液中で、約８５℃から約９５℃までの温度で、約１時間から約１６時間加熱することをさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４９】
請求項４０に記載のプロセスであって、式３ａの中間化合物を単離する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５０】
請求項４９に記載のプロセスであって、単離する工程は、式３ａの中間化合物を懸濁する工程、式３ａの中間化合物を収集する工程、及び式３ａの中間化合物を、実質的に塩化物イオンを含まない溶媒ですすぐ工程を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５１】
請求項５０に記載のプロセスであって、溶媒は、約６０℃に加熱された、アセトンと水の混合物を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５２】
請求項４０に記載のプロセスであって、式３ａの中間化合物を含む溶液は、塩化物を約１５００ｐｐｍ未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５３】
請求項４０に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの中間化合物とヨウ素とを、塩基性溶液中で、約２０℃から約１００℃までの温度で、約１時間から２４時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５４】
請求項５３に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの中間化合物とヨウ素とを、溶液中で、約７０℃から約９５℃までの温度で、約１時間から２４時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５５】
請求項４０に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの中間化合物とヨウ素の溶液は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの塩基を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５６】
請求項４０に記載のプロセスであって、溶液は水酸化ナトリウムを０．４から１．０Ｍの濃度で含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５７】
請求項４０に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの中間化合物とヨウ素の溶液に、少なくとも１つのヨウ素可溶化剤を加える工程をさらに含み、ここで、
ヨウ素可溶化剤は、ヨウ化カリウム、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５８】
請求項５７に記載のプロセスであって、ヨウ素可溶化剤は、約１から約２．５当量のヨウ化ナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５９】
請求項４０に記載のプロセスであって、式３ａの中間化合物を含み、実質的に塩化物イオン、塩化物イオンフリーラジカル、次亜塩素酸塩、次亜塩素酸、又はそれらの混合物を含まない溶液に、酸化剤とヨウ化物塩とを加えることで、ヨウ化物をインサイチュで発生させる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６０】
請求項４０に記載のプロセスであって、式３の化合物の生成後に、ヨウ素捕捉剤を溶液に加える工程をさらに含み、ここで、
捕捉剤は、チオ硫酸ナトリウム、チオ硫酸カリウム、チオ硫酸アンモニウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６１】
請求項６０に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤は亜硫酸ナトリウムである、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６２】
請求項６１に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤を加える工程は約１０℃以下の温度で行われる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６３】
請求項４０に記載のプロセスであって、酸性化する工程は、塩化物イオンを含まない酸を、式３を含む溶液に加えることを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６４】
請求項６３に記載のプロセスであって、塩化物イオンを含まない酸は、硫酸を約１％から約５％までの濃度で含み、この硫酸は、溶液のｐＨを約２から約５までの範囲に調節するのに十分な量添加される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６５】
請求項６４に記載のプロセスであって、ｐＨは約３に調節される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６６】
請求項４０に記載のプロセスであって、単離する工程は、水、ジメチルホルムアミド、アセトン、及びそれらの混合物、からなる群より選択された溶媒中で、式３の化合物を懸濁する工程と；吸引ろ過する工程と；ろ過の結果得られたろ液を、水、ジメチルホルムアミド、アセトン、及びそれらの混合物、からなる群より選択された溶媒を用いてすすぐ工程と；を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６７】
請求項４０に記載のプロセスであって、式３の化合物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ）を、式４のキノイド型：
【化１１】
（式中、Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ、又は、医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）に変換する、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６８】
請求項６７に記載のプロセスであって、Ｒ１１及びＲ１２はナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６９】
ヒト及び動物の組織の化学療法的治療に好適な、式４の化合物：
【化１２】
（式中、Ｒ１は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つの置喚基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；
Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ又は、医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物。
【請求項７０】
治療に有効な量の式４の化合物：
【化１３】
（式中、Ｒ１は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；
Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ又は、医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物、を含む体内投与用の薬剤であって、
この薬剤は、ヒト及び動物の組織の化学療法的治療に好適である、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７１】
請求項７０に記載の薬剤であって、式４の化合物を、約０．００１重量％から約２０重量％未満含む、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７２】
請求項７１に記載の薬剤であって、式４の化合物は、
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３‐オン；
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−２’−クロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−４’−クロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−２’，５’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３‐オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３‐オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−２’，７’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３‐オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’ −キサンテン］−３−オン；
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’ −キサンテン］−３−オン；その異性体；その塩；及びそれらの混合物；からなる群より選択された化合物を含む、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７３】
請求項７０に記載の薬剤であって、式４の化合物（式中、Ｒ１は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ、又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択される少なくとも１つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物に、Ｒ１１及び／又はＲ１２の位置で結合する少なくとも１つの標的部分をさらに含む、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７４】
請求項７３に記載の薬剤であって、標的部分は、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、リボ核酸（ＲＮＡ）、アミノ酸、タンパク質、抗体、リガンド、ハプテン、炭水化物受容体、炭水化物錯化剤、脂質受容体、脂質錯化剤、タンパク質受容体、タンパク質錯化剤、キレート剤、封入賦形剤、短鎖脂肪族炭化水素、長鎖脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素、アルデヒド類、ケトン類、アルコール類、エステル類、アミド類、アミン類、ニトリル類、アジド類、親水性成分、及び疎水性成分からなる群より選択される、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７５】
請求項７０に記載の薬剤であって、液体、半固体、固体、エアロゾル、及びそれらの混合物、からなる群より選択された送達賦形剤中に処方される、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７６】
請求項７５に記載の薬剤であって、送達賦形剤は、水性懸濁液、非水性懸濁液、溶液、クリーム、軟膏、ゲル、シロップ、座剤、錠剤、カプセル、及び微細液滴スプレー（ｍｉｃｒｏ−ｄｒｏｐｌｅｔ ｓｐｒａｙｓ）、からなる群より選択される、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７７】
請求項７０に記載の薬剤であって、送達賦形剤は、ビルダー（ｂｕｉｌｄｅｒ）、安定剤、乳化剤、分散剤、防腐剤、緩衝剤、電解質、組織浸透剤、組織軟化剤、及びそれらの混合物、からなる群より選択されたアジュバントを含む、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７８】
請求項７０に記載の薬剤であって、皮膚及び関連器官を冒す疾患；口、消化管及び関連器官を冒す疾患；泌尿生殖路及び関連器官を冒す疾患；呼吸器及び関連器官を冒す疾患；循環器系及び関連器官を冒す疾患；頭部及び頚部を冒す疾患；内分泌系、リンパ網内系及び関連器官を冒す疾患；結合組織を冒す疾患；手術中に露出された組織表面を冒す疾患；及び、微生物性、ウイルス性、真菌性、寄生虫性の感染に関する疾患；の化学療法的治療に好適である、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７９】
請求項７８に記載の薬剤であって、化学療法的治療は、静脈内注射、腹膜腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）注射、筋肉内注射、頭蓋内注射、腫瘍内注射、上皮内注射、経皮送達、経食道（ｐｅｒ ｏｅｓｏｐｈａｇｅａｌ）投与、腹腔内投与、虫垂内投与、動脈内投与、関節内投与、気管支内投与、頬内（ｉｎｔｒａｂｕｃｃａｌ）投与、嚢内（ｉｎｔｒａｃａｐｓｕｌａｒ）投与、心臓内投与、軟骨内投与、腔内（ｉｎｔｒａｃａｖｉｔａｒｙ）投与、頭部内（ｉｎｔｒａｃｅｐｈａｌｉｃ）投与、結腸内投与、皮内投与、嚢胞内投与、真皮内投与、管内投与（ｉｎｔｒａｄｕｃｔａｌ）投与、十二指腸内投与、線維束内（ｉｎｔｒａｆａｓｃｉｃｕｌａｔ）投与、脂肪内投与、網状体内（ｉｎｔｒａｆｉｌａｒ）投与、脳溝内（ｉｎｔｒａｆｉｓｓｕｒａｌ）投与、胃内投与、腺内投与、肝内投与、腸内投与、層内（ｉｎｔｒａｌａｍｅｌｌａｒ）投与、病変内投与、靭帯内投与、舌内投与、乳房内投与、髄内（ｉｎｔｒａｍｅｄｕｌｌａｒｙ）投与、髄膜内投与、心筋内投与、鼻腔内投与、眼球内投与、手術中の（ｉｎｔｒａｏｐｅｒａｔｉｖｅ）投与、口腔内投与、骨内投与、卵巣内投与、膵臓内投与、頭頂内投与、骨盤内投与、心膜内投与、会陰内投与、腹膜腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）投与、胎盤内投与、胸膜腔内投与、脳橋内投与、前立腺内投与、肺内投与、脊柱内（ｉｎｔｒａｒａｃｈｉｄｉａｎ）投与、直腸内投与、腎臓内投与、強膜内投与、陰嚢内投与、体節内（ｉｎｔｒａｓｅｇｍｅｎｔａｌ）投与、トルコ鞍内投与、髄腔内投与、脾臓内投与、胸骨内投与、間質内投与、滑液嚢内投与、足根内投与、精巣内投与、胸腔内（ｉｎｔｒａｔｈｏｒａｃｉｃ）投与、扁桃内投与、気管内投与、卵管内投与、鼓室内投与、尿管内投与、尿道内投与、子宮内投与、膣内投与、血管内投与、脳室内又は心室内（ｉｎｔｒａｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ）投与、椎骨内投与、膀胱内投与、硝子体内投与、からなる群より選択された処置様式を含む、ことを特徴とする薬剤。
【請求項８０】
ヒト及び動物の組織の化学療法的治療に好適な薬剤の製造における、式４の化合物：
【化１４】
（式中、Ｒ1は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ、又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択される少なくとも1つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物、の使用。
【請求項８１】
ヒト及び動物の組織の疾患を化学的に治療するのに用いる、式４の化合物：
【化１５】
（式中、Ｒ1は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ、又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択される少なくとも1つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物。
【請求項８２】
薬剤の製造における、式４の化合物：
【化１６】
（式中、Ｒ1は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ、又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択される少なくとも1つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物、の使用であって、ここで、
前記薬剤は、皮膚及び関連器官を冒す疾患；口、消化管及び関連器官を冒す疾患；泌尿生殖路及び関連器官を冒す疾患；呼吸器及び関連器官を冒す疾患；循環器系及び関連器官を冒す疾患；頭部及び頚部を冒す疾患；内分泌系システム、リンパ網内系システム及び関連器官を冒す疾患；結合組織を冒す疾患；手術中に露出された組織表面を冒す疾患；及び、微生物性、ウイルス性、真菌性、寄生虫性の感染に関する疾患；からなる群より選択された医学的疾患の、化学療法的治療に好適である、ことを特徴とする使用。
【請求項８３】
式４の化合物：
【化１７】
（式中、Ｒ1は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ、又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択される少なくとも1つの置換基はＩで、他の少なくとも１つの置換基はＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物、であって、
皮膚及び関連器官を冒す疾患；口、消化管及び関連器官を冒す疾患；泌尿生殖路及び関連器官を冒す疾患；呼吸器及び関連器官を冒す疾患；循環器系及び関連器官を冒す疾患；頭部及び頚部を冒す疾患；内分泌系システム、リンパ網内系システム及び関連器官を冒す疾患；結合組織を冒す疾患；手術中に露出された組織表面を冒す疾患；及び、微生物性、ウイルス性、真菌性、寄生虫性の感染に関する疾患；からなる群より選択された医学的疾患の治療に好適である、ことを特徴とする式４の化合物、その互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物。
【請求項８４】
請求項８１に記載の使用であって、式４の化合物（式中、Ｒ1は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ、又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択される少なくとも1つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物が、約０．００１重量％から約２０重量％未満含まれる、ことを特徴とする使用。
【請求項８５】
請求項８１に記載の使用であって、治療に有効な量の式４の化合物（式中、Ｒ１は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、その全ての互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物を、ヒト又は動物の組織中に、又はその近辺に投与することをさらに含む、ことを特徴とする使用。
【請求項８６】
請求項８５に記載の使用であって、前記投与は、静脈内注射、腹膜腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）注射、筋肉内注射、頭蓋内注射、腫瘍内注射、上皮内注射、経皮送達、経食道（ｐｅｒ ｏｅｓｏｐｈａｇｅａｌ）投与、腹腔内投与、虫垂内投与、動脈内投与、関節内投与、気管支内投与、頬内（ｉｎｔｒａｂｕｃｃａｌ）投与、嚢内（ｉｎｔｒａｃａｐｓｕｌａｒ）投与、心臓内投与、軟骨内投与、腔内（ｉｎｔｒａｃａｖｉｔａｒｙ）投与、頭部内（ｉｎｔｒａｃｅｐｈａｌｉｃ）投与、結腸内投与、皮内投与、嚢胞内投与、真皮内投与、管内投与（ｉｎｔｒａｄｕｃｔａｌ）投与、十二指腸内投与、線維束内（ｉｎｔｒａｆａｓｃｉｃｕｌａｔ）投与、脂肪内投与、網状体内（ｉｎｔｒａｆｉｌａｒ）投与、脳溝内（ｉｎｔｒａｆｉｓｓｕｒａｌ）投与、胃内投与、腺内投与、肝内投与、腸内投与、層内（ｉｎｔｒａｌａｍｅｌｌａｒ）投与、病変内投与、靭帯内投与、舌内投与、乳房内投与、髄内（ｉｎｔｒａｍｅｄｕｌｌａｒｙ）投与、髄膜内投与、心筋内投与、鼻腔内投与、眼球内投与、手術中の（ｉｎｔｒａｏｐｅｒａｔｉｖｅ）投与、口腔内投与、骨内投与、卵巣内投与、膵臓内投与、頭頂内投与、骨盤内投与、心膜内投与、会陰内投与、腹膜腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）投与、胎盤内投与、胸膜腔内投与、脳橋内投与、前立腺内投与、肺内投与、脊柱内（ｉｎｔｒａｒａｃｈｉｄｉａｎ）投与、直腸内投与、腎臓内投与、強膜内投与、陰嚢内投与、体節内（ｉｎｔｒａｓｅｇｍｅｎｔａｌ）投与、トルコ鞍内投与、髄腔内投与、脾臓内投与、胸骨内投与、間質内投与、滑液嚢内投与、足根内投与、精巣内投与、胸腔内（ｉｎｔｒａｔｈｏｒａｃｉｃ）投与、扁桃内投与、気管内投与、卵管内投与、鼓室内投与、尿管内投与、尿道内投与、子宮内投与、膣内投与、血管内投与、脳室内又は心室内（ｉｎｔｒａｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ）投与、椎骨内投与、膀胱内投与、硝子体内投与、からなる群より選択された投与経路による投与を含む、ことを特徴とする使用。
【請求項８７】
体内投与に好適な、化学療法的治療のための医薬組成物であって、式４の化合物：
【化１８】
（式中、Ｒ１はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物を含む、ことを特徴とする医薬組成物。
【請求項８８】
請求項８７に記載の医薬組成物であって、式４の化合物（式中、Ｒ１はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物が、約０．００１重量％より高く約２０質量％より低い濃度で存在する、ことを特徴とする医薬組成物。
【請求項８９】
請求項８７に記載の医薬組成物であって、式４の化合物（式中、Ｒ１はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物に、Ｒ１１及び／又はＲ１２の位置で結合する標的部分をさらに含む、ことを特徴とする医薬組成物。
【請求項９０】
式４の化合物：
【化１９】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はI；Ｒ１１及びＲ１２は独立にＨ、Ｎａ、Ｋ、Ｌｉ、又は医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）を化学合成する方法において、
前記方法は、実質的に塩化物イオンと、塩化物イオンを発生させる不純物とを含まない溶液中において、実質的に塩化物イオン不純物及び、塩化物イオンを発生させる不純物とを含まない、式３ａの化合物：
【化２０】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＨ）をヨウ素と化合させ、式４の化合物を生成する工程を含み、
その改良は、式４の化合物のトランスハロゲン化された誘導体である不純物（Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＣｌで残りはＩ；Ｒ６はＨ；Ｒ１１及び１２は独立にＨ、Ｎａ、Ｋ、Ｌｉ、又は医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）が実質的に存在しないということを含む、ことを特徴とする方法。
【請求項９１】
請求項９０に記載のプロセスであって、式４の化合物のトランスハロゲン化された不純物を、それぞれ約０．１５重量％未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９２】
請求項９０に記載のプロセスであって、トランスハロゲン化された不純物は、
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；そのキノイド型異性体；及びそれらの混合物；からなる群より選択された少なくとも１つの化合物を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９３】
請求項９０に記載のプロセスであって、溶液は、塩化物を約１５００ｐｐｍ未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９４】
請求項９０に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの化合物とヨウ素とを、塩基性溶液中において約２０℃から約１００℃までの温度で、１時間から２４時間の範囲で加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９５】
請求項９４に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの化合物とヨウ素とを、溶液中において約７０℃から約９５℃までの温度で、約２時間から約１８時間の範囲で加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９６】
請求項９０に記載のプロセスであって、溶液は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの塩基を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９７】
請求項９０に記載のプロセスであって、溶液は、水酸化ナトリウムを０．４から１．０Ｍの濃度で含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９８】
請求項９０に記載のプロセスであって、少なくとも１つのヨウ素可溶化剤を、式３ａの化合物とヨウ素とを含む溶液に加える工程をさらに含み、ここで、
ヨウ素可溶化剤は、ヨウ化カリウム、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９９】
請求項９８に記載のプロセスであって、ヨウ素可溶化剤は約１から約２．５当量のヨウ化ナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１００】
請求項９０に記載のプロセスであって、溶液に酸化剤とヨウ化物塩とを加えることで、ヨウ化物がインサイチュで発生し、ここで、
溶液は実質的に、塩化物イオン、塩化物イオンフリーラジカル、次亜塩素酸塩、次亜塩素酸、又はそれらの混合物を含まない、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１０１】
請求項９０に記載のプロセスであって、式４の化合物の生成後に、ヨウ素捕捉剤を溶液に加える工程をさらに含み、ここで、
捕捉剤は、チオ硫酸ナトリウム、チオ硫酸カリウム、チオ硫酸アンモニウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１０２】
請求項１０１に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤は亜硫酸ナトリウムである、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１０３】
請求項１０１に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤を加える工程は約１０℃以下で行われる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１０４】
請求項９０に記載のプロセスであって、Ｒ１１及びＲ１２はナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１】
式４の化合物：
【化１】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ；Ｒ１１及びＲ１２は独立にＨ又は、医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）を調製するプロセスであって、
前記プロセスは、
ａ）式１の化合物：
【化２】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ）と、約２当量の式２の化合物：
【化３】
（式中、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０はＨ）とを、実質的に塩化物イオンと、塩化物イオンを発生させる不純物とを含まない酸性溶液中で化合させて、式３ａの中間化合物：
【化４】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＨ）を生成する工程と、
ｂ）式３ａの中間化合物と、少なくとも約４当量のヨウ素とを、実質的に塩化物イオンと、塩化物を発生させる不純物とを含まない溶液中で化合させて、式４の化合物を生成する工程と、を含み、
ここで式４の化合物は、実質的に、式４の化合物のトランスハロゲン化された（ｔｒａｎｓｈａｌｏｇｅｎａｔｅｄ）不純物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも1つはＣｌで、その他はＩ；Ｒ６はＨ；Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ、Ｎａ、Ｋ、Ｌｉ又は、医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）を含まない、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２】
請求項１に記載のプロセスであって、式４の化合物のトランスハロゲン化された不純物を、約０．１５重量％未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３】
請求項１に記載のプロセスであって、トランスハロゲン化された不純物は、
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’‐トリヨード−３Ｈ‐スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３‐オン；
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’‐ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；そのキノイド型異性体（ｉｓｏｍｅｒｉｃ ｑｕｉｎｏｉｄ）；及びそれらの混合物；からなる群より選択された少なくとも１つの化合物を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４】
請求項１に記載のプロセスであって、酸性溶液は、塩化物を約１５００ｐｐｍ未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５】
請求項１に記載のプロセスであって、酸性溶液は、融点約２５０℃未満のアルキルスルホン酸又はアリールスルホン酸、融点約２５０℃未満のアルキルカルボン酸又はアリールカルボン酸、塩化物でないブレンステッド酸、塩化物でないルイス酸、その重結合調製物（ｐｏｌｙｍｅｒ ｂｏｕｎｄ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）、その塩、その水溶液、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの酸を、単独で、又はメタンスルホン酸を伴って含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６】
請求項１に記載のプロセスであって、酸性溶液は、ｐ‐トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、スルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酢酸、プロピオン酸、トリフルオロ酢酸、カンファースルホン酸、その重結合調製物、 その塩、その水溶液、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの酸を、単独で、又はメタンスルホン酸を伴って含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項７】
請求項１に記載のプロセスであって、酸性溶液はメタンスルホン酸を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項８】
請求項１に記載のプロセスであって、式２と式１の化合物を、約２．５：１から約３．２：１の比率で化合させる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９】
請求項１に記載のプロセスであって、式１と式２の化合物を、酸性溶液中で、約８５℃から約９５℃までの温度で、約１時間から約１６時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１０】
請求項１に記載のプロセスであって、式３ａの中間化合物を単離する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１１】
請求項１０に記載のプロセスであって、単離する工程は、式３ａの中間化合物を懸濁する工程、式３ａの中間化合物を収集する工程、及び式３ａの中間化合物を、実質的に塩化物イオンを含まない溶媒ですすぐ工程を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１２】
請求項１１に記載のプロセスであって、前記溶媒は、約６０℃まで加熱された、アセトンと水の混合物を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１３】
請求項１に記載のプロセスであって、式３ａの中間化合物とヨウ素とを含む溶液は、塩化物を約１５００ｐｐｍ未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１４】
請求項１に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの中間化合物とヨウ素とを、塩基性溶液中で、約２０℃から約１００℃までの温度で、約１時間から２４時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１５】
請求項１４に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの中間化合物とヨウ素とを、溶液中で、約７０℃から約９５℃までの温度で、約１時間から２４時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１６】
請求項１に記載のプロセスであって、塩基性溶液は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの塩基を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１７】
請求項１に記載のプロセスであって、溶液は水酸化ナトリウムを０．４から１．０Ｍの濃度で含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１８】
請求項１に記載のプロセスであって、式３ａの中間化合物とヨウ素とを含む溶液に、少なくとも１つのヨウ素可溶化剤を加える工程をさらに含み、ここで、
ヨウ素可溶化剤は、ヨウ化カリウム、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１９】
請求項１８に記載のプロセスであって、ヨウ素可溶化剤は約１から約２．５当量のヨウ化ナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２０】
請求項１に記載のプロセスであって、実質的に塩化物イオン、塩化物イオンフリーラジカル、次亜塩素酸塩、次亜塩素酸、又はそれらの混合物、を含まない溶液に、酸化剤とヨウ化物塩とを加えて、ヨウ化物をインサイチュで発生させる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２１】
請求項１に記載のプロセスであって、式４の化合物の生成後に、ヨウ素捕捉剤を溶液に加える工程をさらに含み、ここで、
捕捉剤は、チオ硫酸ナトリウム、チオ硫酸カリウム、チオ硫酸アンモニウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２２】
請求項２１に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤は亜硫酸ナトリウムである、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２３】
請求項２２に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤の添加は、約１０℃以下の温度で行われる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２４】
請求項１に記載のプロセスであって、Ｒ１１及びＲ１２はナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２５】
式４の化合物：
【化５】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ；Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ、Ｎａ、Ｋ、Ｌｉ、又は医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）を調製するプロセスであって、このプロセスは、
実質的に塩化物イオン不純物と、塩化物を発生させる試薬とを含まない、式３ａの化合物又はそのキノイド型異性体（ｑｕｉｎｏｉｄ ｉｓｏｍｅｒ）：
【化６】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＨ）と、少なくとも約４当量のヨウ素とを、実質的に塩化物イオンと、塩化物を発生させる不純物とを含まない溶液中で化合させ、式４の化合物を生成する工程を含む、ことを特徴とし、ここで、
式４の化合物は、式４の化合物のトランスハロゲン化された不純物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＣｌで、その他はＩ；Ｒ６はＨ；Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ、Ｎａ、Ｋ、Ｌｉ、又は医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）を実質的に含まない、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２６】
請求項２５に記載のプロセスであって、式４の化合物のトランスハロゲン化された不純物を、約０．１５重量％未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２７】
請求項２５に記載のプロセスであって、トランスハロゲン化された不純物は、
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；そのキノイド型異性体；及びそれらの混合物；からなる群より選択された少なくとも１つの化合物を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２８】
請求項２５に記載のプロセスであって、酸性溶液は、塩化物を約１５００ｐｐｍ未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項２９】
請求項２５に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの化合物とヨウ素とを、塩基性溶液中で、約２０℃から約１００℃までの温度で、約１時間から２４時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３０】
請求項２９に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの化合物とヨウ素とを、溶液中で、約７０℃から約９５℃までの温度で、約２時間から約１８時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３１】
請求項２５に記載のプロセスであって、溶液は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの塩基を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３２】
請求項２５に記載のプロセスであって、溶液は水酸化ナトリウムを０．４から１．０Ｍの濃度で含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３３】
請求項２５に記載のプロセスであって、式３ａの化合物とヨウ素とを含む溶液に、少なくとも１つのヨウ素可溶化剤を加える工程をさらに含み、ここで、
ヨウ素可溶化剤は、ヨウ化カリウム、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３４】
請求項３３に記載のプロセスであって、ヨウ素可溶化剤は約１から約２．５当量のヨウ化ナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３５】
請求項２５に記載のプロセスであって、実質的に塩化物イオン、塩化物イオンフリーラジカル、次亜塩素酸塩、次亜塩素酸、及びそれらの混合物を含まない溶液に、酸化剤とヨウ化物塩とを加えることで、ヨウ化物をインサイチュで発生させる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３６】
請求項２５に記載のプロセスであって、式４の化合物の生成後に、ヨウ素捕捉剤を溶液に加える工程をさらに含み、ここで、
捕捉剤は、チオ硫酸ナトリウム、チオ硫酸カリウム、チオ硫酸アンモニウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３７】
請求項３６に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤は亜硫酸ナトリウムである、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３８】
請求項３７に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤を加える工程は、約１０℃以下の温度で行われる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項３９】
請求項２５に記載のプロセスであって、Ｒ１１及びＲ１２はナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４０】
式３の化合物：
【化７】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ）を調製するプロセスであって、
ａ）式１の化合物：
【化８】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ）と、約２当量の式２の化合物：
【化９】
（式中、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０はＨ）とを、酸性溶液中で、約２０℃から約２５０℃までの温度で化合させ、式３ａの化合物：
【化１０】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＨ）を生成する工程と；
式３ａの中間化合物を単離する工程と；
ｂ）式３ａの中間化合物と、約４当量のヨウ素とを、実質的に塩化物イオンと、塩化物イオンを発生させる不純物とを含まない溶液中で、約２０℃から約１００℃までの温度で化合させ、式３の化合物を生成する工程と；
ｄ）式３の化合物にヨウ素捕捉剤を加える工程と；
ｅ）式３の化合物を、ｐＨ約５未満に酸性化し、約１０℃未満の温度に冷ます工程と；
ｆ）トランスハロゲン化された不純物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＣｌで、その他はＩ；Ｒ６はＨ）を実質的に含まない、式３の化合物を単離する工程と、を含むことを特徴とするプロセス。
【請求項４１】
請求項４０に記載のプロセスであって、式３の化合物のトランスハロゲン化された不純物を、約０．１５重量％未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４２】
請求項４０に記載のプロセスであって、トランスハロゲン化された不純物は、
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；そのキノイド型異性体；及びそれらの混合物；からなる群より選択された少なくとも１つの化合物を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４３】
請求項４０に記載のプロセスであって、酸性溶液は、塩化物を約１５００ｐｐｍ未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４４】
請求項４０に記載のプロセスであって、酸性溶液は、融点約２５０℃未満のアルキルスルホン酸又はアリールスルホン酸、融点約２５０℃未満のアルキルカルボン酸又はアリールカルボン酸、塩化物でないブレンステッド酸、塩化物でないルイス酸、その重結合調製物、その塩、その水溶液、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの酸を、単独で、又はメタンスルホン酸を伴って含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４５】
請求項４０に記載のプロセスであって、酸性溶液は、ｐ‐トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、硫酸、トリフルオロメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酢酸、プロピオン酸、トリフルオロ酢酸、カンファースルホン酸、その重結合調製物、その塩、その水溶液、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの酸を、単独で、又はメタンスルホン酸を伴って含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４６】
請求項４０に記載のプロセスであって、酸性溶液はメタンスルホン酸を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４７】
請求項４０に記載のプロセスであって、式２と式１の化合物を約２．５：１から約３．２：１の比率で化合させる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４８】
請求項４０に記載のプロセスであって、式１及び式２の化合物を、酸性溶液中で、約８５℃から約９５℃までの温度で、約１時間から約１６時間加熱することをさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項４９】
請求項４０に記載のプロセスであって、式３ａの中間化合物を単離する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５０】
請求項４９に記載のプロセスであって、単離する工程は、式３ａの中間化合物を懸濁する工程、式３ａの中間化合物を収集する工程、及び式３ａの中間化合物を、実質的に塩化物イオンを含まない溶媒ですすぐ工程を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５１】
請求項５０に記載のプロセスであって、溶媒は、約６０℃に加熱された、アセトンと水の混合物を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５２】
請求項４０に記載のプロセスであって、式３ａの中間化合物を含む溶液は、塩化物を約１５００ｐｐｍ未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５３】
請求項４０に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの中間化合物とヨウ素とを、塩基性溶液中で、約２０℃から約１００℃までの温度で、約１時間から２４時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５４】
請求項５３に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの中間化合物とヨウ素とを、溶液中で、約７０℃から約９５℃までの温度で、約１時間から２４時間加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５５】
請求項４０に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの中間化合物とヨウ素の溶液は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの塩基を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５６】
請求項４０に記載のプロセスであって、溶液は水酸化ナトリウムを０．４から１．０Ｍの濃度で含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５７】
請求項４０に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの中間化合物とヨウ素の溶液に、少なくとも１つのヨウ素可溶化剤を加える工程をさらに含み、ここで、
ヨウ素可溶化剤は、ヨウ化カリウム、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５８】
請求項５７に記載のプロセスであって、ヨウ素可溶化剤は、約１から約２．５当量のヨウ化ナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項５９】
請求項４０に記載のプロセスであって、式３ａの中間化合物を含み、実質的に塩化物イオン、塩化物イオンフリーラジカル、次亜塩素酸塩、次亜塩素酸、又はそれらの混合物を含まない溶液に、酸化剤とヨウ化物塩とを加えることで、ヨウ化物をインサイチュで発生させる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６０】
請求項４０に記載のプロセスであって、式３の化合物の生成後に、ヨウ素捕捉剤を溶液に加える工程をさらに含み、ここで、
捕捉剤は、チオ硫酸ナトリウム、チオ硫酸カリウム、チオ硫酸アンモニウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６１】
請求項６０に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤は亜硫酸ナトリウムである、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６２】
請求項６１に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤を加える工程は約１０℃以下の温度で行われる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６３】
請求項４０に記載のプロセスであって、酸性化する工程は、塩化物イオンを含まない酸を、式３を含む溶液に加えることを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６４】
請求項６３に記載のプロセスであって、塩化物イオンを含まない酸は、硫酸を約１％から約５％までの濃度で含み、この硫酸は、溶液のｐＨを約２から約５までの範囲に調節するのに十分な量添加される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６５】
請求項６４に記載のプロセスであって、ｐＨは約３に調節される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６６】
請求項４０に記載のプロセスであって、単離する工程は、水、ジメチルホルムアミド、アセトン、及びそれらの混合物、からなる群より選択された溶媒中で、式３の化合物を懸濁する工程と；吸引ろ過する工程と；ろ過の結果得られたろ液を、水、ジメチルホルムアミド、アセトン、及びそれらの混合物、からなる群より選択された溶媒を用いてすすぐ工程と；を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６７】
請求項４０に記載のプロセスであって、式３の化合物（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はＩ；Ｒ６はＨ）を、式４のキノイド型：
【化１１】
（式中、Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ、又は、医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）に変換する、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６８】
請求項６７に記載のプロセスであって、Ｒ１１及びＲ１２はナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項６９】
ヒト及び動物の組織の化学療法的治療に好適な、式４の化合物：
【化１２】
（式中、Ｒ１は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つの置喚基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；
Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ又は、医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物。
【請求項７０】
治療に有効な量の式４の化合物：
【化１３】
（式中、Ｒ１は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；
Ｒ１１、Ｒ１２は独立にＨ又は、医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物、を含む体内投与用の薬剤であって、
この薬剤は、ヒト及び動物の組織の化学療法的治療に好適である、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７１】
請求項７０に記載の薬剤であって、式４の化合物を、約０．００１重量％から約２０重量％未満含む、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７２】
請求項７１に記載の薬剤であって、式４の化合物は、
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３‐オン；
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−２’−クロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−４’−クロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−２’，５’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３‐オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−４’，５’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３‐オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−２’，７’−ジクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３‐オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，５，６，７−テトラブロモ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’ −キサンテン］−３−オン；
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，５’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，５，６，７−テトラクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，４’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’ −キサンテン］−３−オン；その異性体；その塩；及びそれらの混合物；からなる群より選択された化合物を含む、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７３】
請求項７０に記載の薬剤であって、式４の化合物（式中、Ｒ１は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ、又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択される少なくとも１つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物に、Ｒ１１及び／又はＲ１２の位置で結合する少なくとも１つの標的部分をさらに含む、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７４】
請求項７３に記載の薬剤であって、標的部分は、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、リボ核酸（ＲＮＡ）、アミノ酸、タンパク質、抗体、リガンド、ハプテン、炭水化物受容体、炭水化物錯化剤、脂質受容体、脂質錯化剤、タンパク質受容体、タンパク質錯化剤、キレート剤、封入賦形剤、短鎖脂肪族炭化水素、長鎖脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素、アルデヒド類、ケトン類、アルコール類、エステル類、アミド類、アミン類、ニトリル類、アジド類、親水性成分、及び疎水性成分からなる群より選択される、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７５】
請求項７０に記載の薬剤であって、液体、半固体、固体、エアロゾル、及びそれらの混合物、からなる群より選択された送達賦形剤中に処方される、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７６】
請求項７５に記載の薬剤であって、送達賦形剤は、水性懸濁液、非水性懸濁液、溶液、クリーム、軟膏、ゲル、シロップ、座剤、錠剤、カプセル、及び微細液滴スプレー（ｍｉｃｒｏ−ｄｒｏｐｌｅｔ ｓｐｒａｙｓ）、からなる群より選択される、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７７】
請求項７０に記載の薬剤であって、送達賦形剤は、ビルダー（ｂｕｉｌｄｅｒ）、安定剤、乳化剤、分散剤、防腐剤、緩衝剤、電解質、組織浸透剤、組織軟化剤、及びそれらの混合物、からなる群より選択されたアジュバントを含む、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７８】
請求項７０に記載の薬剤であって、皮膚及び関連器官を冒す疾患；口、消化管及び関連器官を冒す疾患；泌尿生殖路及び関連器官を冒す疾患；呼吸器及び関連器官を冒す疾患；循環器系及び関連器官を冒す疾患；頭部及び頚部を冒す疾患；内分泌系、リンパ網内系及び関連器官を冒す疾患；結合組織を冒す疾患；手術中に露出された組織表面を冒す疾患；及び、微生物性、ウイルス性、真菌性、寄生虫性の感染に関する疾患；の化学療法的治療に好適である、ことを特徴とする薬剤。
【請求項７９】
請求項７８に記載の薬剤であって、化学療法的治療は、静脈内注射、腹膜腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）注射、筋肉内注射、頭蓋内注射、腫瘍内注射、上皮内注射、経皮送達、経食道（ｐｅｒ ｏｅｓｏｐｈａｇｅａｌ）投与、腹腔内投与、虫垂内投与、動脈内投与、関節内投与、気管支内投与、頬内（ｉｎｔｒａｂｕｃｃａｌ）投与、嚢内（ｉｎｔｒａｃａｐｓｕｌａｒ）投与、心臓内投与、軟骨内投与、腔内（ｉｎｔｒａｃａｖｉｔａｒｙ）投与、頭部内（ｉｎｔｒａｃｅｐｈａｌｉｃ）投与、結腸内投与、皮内投与、嚢胞内投与、真皮内投与、管内投与（ｉｎｔｒａｄｕｃｔａｌ）投与、十二指腸内投与、線維束内（ｉｎｔｒａｆａｓｃｉｃｕｌａｔ）投与、脂肪内投与、網状体内（ｉｎｔｒａｆｉｌａｒ）投与、脳溝内（ｉｎｔｒａｆｉｓｓｕｒａｌ）投与、胃内投与、腺内投与、肝内投与、腸内投与、層内（ｉｎｔｒａｌａｍｅｌｌａｒ）投与、病変内投与、靭帯内投与、舌内投与、乳房内投与、髄内（ｉｎｔｒａｍｅｄｕｌｌａｒｙ）投与、髄膜内投与、心筋内投与、鼻腔内投与、眼球内投与、手術中の（ｉｎｔｒａｏｐｅｒａｔｉｖｅ）投与、口腔内投与、骨内投与、卵巣内投与、膵臓内投与、頭頂内投与、骨盤内投与、心膜内投与、会陰内投与、腹膜腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）投与、胎盤内投与、胸膜腔内投与、脳橋内投与、前立腺内投与、肺内投与、脊柱内（ｉｎｔｒａｒａｃｈｉｄｉａｎ）投与、直腸内投与、腎臓内投与、強膜内投与、陰嚢内投与、体節内（ｉｎｔｒａｓｅｇｍｅｎｔａｌ）投与、トルコ鞍内投与、髄腔内投与、脾臓内投与、胸骨内投与、間質内投与、滑液嚢内投与、足根内投与、精巣内投与、胸腔内（ｉｎｔｒａｔｈｏｒａｃｉｃ）投与、扁桃内投与、気管内投与、卵管内投与、鼓室内投与、尿管内投与、尿道内投与、子宮内投与、膣内投与、血管内投与、脳室内又は心室内（ｉｎｔｒａｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ）投与、椎骨内投与、膀胱内投与、硝子体内投与、からなる群より選択された処置様式を含む、ことを特徴とする薬剤。
【請求項８０】
ヒト及び動物の組織の化学療法的治療に好適な薬剤の製造における、式４の化合物：
【化１４】
（式中、Ｒ1は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ、又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択される少なくとも1つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物、の使用。
【請求項８１】
ヒト及び動物の組織の疾患を化学的に治療するのに用いる、式４の化合物：
【化１５】
（式中、Ｒ1は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ、又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択される少なくとも1つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物。
【請求項８２】
薬剤の製造における、式４の化合物：
【化１６】
（式中、Ｒ1は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ、又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択される少なくとも1つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物、の使用であって、ここで、
前記薬剤は、皮膚及び関連器官を冒す疾患；口、消化管及び関連器官を冒す疾患；泌尿生殖路及び関連器官を冒す疾患；呼吸器及び関連器官を冒す疾患；循環器系及び関連器官を冒す疾患；頭部及び頚部を冒す疾患；内分泌系システム、リンパ網内系システム及び関連器官を冒す疾患；結合組織を冒す疾患；手術中に露出された組織表面を冒す疾患；及び、微生物性、ウイルス性、真菌性、寄生虫性の感染に関する疾患；からなる群より選択された医学的疾患の、化学療法的治療に好適である、ことを特徴とする使用。
【請求項８３】
式４の化合物：
【化１７】
（式中、Ｒ1は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ、又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択される少なくとも1つの置換基はＩで、他の少なくとも１つの置換基はＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物、であって、
皮膚及び関連器官を冒す疾患；口、消化管及び関連器官を冒す疾患；泌尿生殖路及び関連器官を冒す疾患；呼吸器及び関連器官を冒す疾患；循環器系及び関連器官を冒す疾患；頭部及び頚部を冒す疾患；内分泌系システム、リンパ網内系システム及び関連器官を冒す疾患；結合組織を冒す疾患；手術中に露出された組織表面を冒す疾患；及び、微生物性、ウイルス性、真菌性、寄生虫性の感染に関する疾患；からなる群より選択された医学的疾患の治療に好適である、ことを特徴とする式４の化合物、その互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物。
【請求項８４】
請求項８１に記載の使用であって、式４の化合物（式中、Ｒ1は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ、又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択される少なくとも1つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物が、約０．００１重量％から約２０重量％未満含まれる、ことを特徴とする使用。
【請求項８５】
請求項８１に記載の使用であって、治療に有効な量の式４の化合物（式中、Ｒ１は独立にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、その全ての互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物を、ヒト又は動物の組織中に、又はその近辺に投与することをさらに含む、ことを特徴とする使用。
【請求項８６】
請求項８５に記載の使用であって、前記投与は、静脈内注射、腹膜腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）注射、筋肉内注射、頭蓋内注射、腫瘍内注射、上皮内注射、経皮送達、経食道（ｐｅｒ ｏｅｓｏｐｈａｇｅａｌ）投与、腹腔内投与、虫垂内投与、動脈内投与、関節内投与、気管支内投与、頬内（ｉｎｔｒａｂｕｃｃａｌ）投与、嚢内（ｉｎｔｒａｃａｐｓｕｌａｒ）投与、心臓内投与、軟骨内投与、腔内（ｉｎｔｒａｃａｖｉｔａｒｙ）投与、頭部内（ｉｎｔｒａｃｅｐｈａｌｉｃ）投与、結腸内投与、皮内投与、嚢胞内投与、真皮内投与、管内投与（ｉｎｔｒａｄｕｃｔａｌ）投与、十二指腸内投与、線維束内（ｉｎｔｒａｆａｓｃｉｃｕｌａｔ）投与、脂肪内投与、網状体内（ｉｎｔｒａｆｉｌａｒ）投与、脳溝内（ｉｎｔｒａｆｉｓｓｕｒａｌ）投与、胃内投与、腺内投与、肝内投与、腸内投与、層内（ｉｎｔｒａｌａｍｅｌｌａｒ）投与、病変内投与、靭帯内投与、舌内投与、乳房内投与、髄内（ｉｎｔｒａｍｅｄｕｌｌａｒｙ）投与、髄膜内投与、心筋内投与、鼻腔内投与、眼球内投与、手術中の（ｉｎｔｒａｏｐｅｒａｔｉｖｅ）投与、口腔内投与、骨内投与、卵巣内投与、膵臓内投与、頭頂内投与、骨盤内投与、心膜内投与、会陰内投与、腹膜腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）投与、胎盤内投与、胸膜腔内投与、脳橋内投与、前立腺内投与、肺内投与、脊柱内（ｉｎｔｒａｒａｃｈｉｄｉａｎ）投与、直腸内投与、腎臓内投与、強膜内投与、陰嚢内投与、体節内（ｉｎｔｒａｓｅｇｍｅｎｔａｌ）投与、トルコ鞍内投与、髄腔内投与、脾臓内投与、胸骨内投与、間質内投与、滑液嚢内投与、足根内投与、精巣内投与、胸腔内（ｉｎｔｒａｔｈｏｒａｃｉｃ）投与、扁桃内投与、気管内投与、卵管内投与、鼓室内投与、尿管内投与、尿道内投与、子宮内投与、膣内投与、血管内投与、脳室内又は心室内（ｉｎｔｒａｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ）投与、椎骨内投与、膀胱内投与、硝子体内投与、からなる群より選択された投与経路による投与を含む、ことを特徴とする使用。
【請求項８７】
体内投与に好適な、化学療法的治療のための医薬組成物であって、式４の化合物：
【化１８】
（式中、Ｒ１はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物を含む、ことを特徴とする医薬組成物。
【請求項８８】
請求項８７に記載の医薬組成物であって、式４の化合物（式中、Ｒ１はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物が、約０．００１重量％より高く約２０質量％より低い濃度で存在する、ことを特徴とする医薬組成物。
【請求項８９】
請求項８７に記載の医薬組成物であって、式４の化合物（式中、Ｒ１はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキル；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は独立にＣｌ、Ｈ又はＩで、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５から選択された少なくとも１つの置換基はＩで、他の少なくとも１つはＣｌ又はＨ；Ｒ６は独立にＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル）、及びその全ての、互変異性体、アトロプ異性体、閉環ラクトン誘導体、エナンチオマー、医薬的に許容可能な塩、及びそれらの混合物に、Ｒ１１及び／又はＲ１２の位置で結合する標的部分をさらに含む、ことを特徴とする医薬組成物。
【請求項９０】
式４の化合物：
【化１９】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はI；Ｒ１１及びＲ１２は独立にＨ、Ｎａ、Ｋ、Ｌｉ、又は医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）を化学合成する方法において、
前記方法は、実質的に塩化物イオンと、塩化物イオンを発生させる不純物とを含まない溶液中において、実質的に塩化物イオン不純物及び、塩化物イオンを発生させる不純物とを含まない、式３ａの化合物：
【化２０】
（式中、Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６はＨ）をヨウ素と化合させ、式４の化合物を生成する工程を含み、
その改良は、式４の化合物のトランスハロゲン化された誘導体である不純物（Ｒ１は独立にＣｌ又はＢｒ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５のうち少なくとも１つはＣｌで残りはＩ；Ｒ６はＨ；Ｒ１１及び１２は独立にＨ、Ｎａ、Ｋ、Ｌｉ、又は医薬的に許容可能な塩を生成できる対イオン）が実質的に存在しないということを含む、ことを特徴とする方法。
【請求項９１】
請求項９０に記載のプロセスであって、式４の化合物のトランスハロゲン化された不純物を、それぞれ約０．１５重量％未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９２】
請求項９０に記載のプロセスであって、トランスハロゲン化された不純物は、
２’，４，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，６，７−ペンタクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，５’，７’−トリヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，６，７，７’−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，５’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
４，４’，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−２’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；
２’，４，５，５’，６，７−ヘキサクロロ−３’，６’−ジヒドロキシ−４’，７’−ジヨード−３Ｈ−スピロ［イソベンゾフラン−１，９’−キサンテン］−３−オン；そのキノイド型異性体；及びそれらの混合物；からなる群より選択された少なくとも１つの化合物を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９３】
請求項９０に記載のプロセスであって、溶液は、塩化物を約１５００ｐｐｍ未満含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９４】
請求項９０に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの化合物とヨウ素とを、塩基性溶液中において約２０℃から約１００℃までの温度で、１時間から２４時間の範囲で加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９５】
請求項９４に記載のプロセスであって、化合させた式３ａの化合物とヨウ素とを、溶液中において約７０℃から約９５℃までの温度で、約２時間から約１８時間の範囲で加熱する工程をさらに含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９６】
請求項９０に記載のプロセスであって、溶液は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択された少なくとも１つの塩基を含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９７】
請求項９０に記載のプロセスであって、溶液は、水酸化ナトリウムを０．４から１．０Ｍの濃度で含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９８】
請求項９０に記載のプロセスであって、少なくとも１つのヨウ素可溶化剤を、式３ａの化合物とヨウ素とを含む溶液に加える工程をさらに含み、ここで、
ヨウ素可溶化剤は、ヨウ化カリウム、ヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項９９】
請求項９８に記載のプロセスであって、ヨウ素可溶化剤は約１から約２．５当量のヨウ化ナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１００】
請求項９０に記載のプロセスであって、溶液に酸化剤とヨウ化物塩とを加えることで、ヨウ化物がインサイチュで発生し、ここで、
溶液は実質的に、塩化物イオン、塩化物イオンフリーラジカル、次亜塩素酸塩、次亜塩素酸、又はそれらの混合物を含まない、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１０１】
請求項９０に記載のプロセスであって、式４の化合物の生成後に、ヨウ素捕捉剤を溶液に加える工程をさらに含み、ここで、
捕捉剤は、チオ硫酸ナトリウム、チオ硫酸カリウム、チオ硫酸アンモニウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸ナトリウム、及びそれらの混合物、からなる群より選択される、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１０２】
請求項１０１に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤は亜硫酸ナトリウムである、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１０３】
請求項１０１に記載のプロセスであって、ヨウ素捕捉剤を加える工程は約１０℃以下で行われる、ことを特徴とするプロセス。
【請求項１０４】
請求項９０に記載のプロセスであって、Ｒ１１及びＲ１２はナトリウムを含む、ことを特徴とするプロセス。
【図１−ａ】
【図１−ｂ】
【図１−ｃ】
【図１−ｄ】
【図１−ｅ】
【図１−ｆ】
【図１−ｇ】
【図１−ｈ】
【図１−ｉ】
【図１−ｊ】
【図１−ｋ】
【図１−ｌ】
【図１−ｍ】
【図１−ｎ】
【図１−ｏ】
【図１−ｐ】
【図１−ｑ】
【図１−ｒ】
【図１−ｓ】
【図１−ｔ】
【図１−ｂ】
【図１−ｃ】
【図１−ｄ】
【図１−ｅ】
【図１−ｆ】
【図１−ｇ】
【図１−ｈ】
【図１−ｉ】
【図１−ｊ】
【図１−ｋ】
【図１−ｌ】
【図１−ｍ】
【図１−ｎ】
【図１−ｏ】
【図１−ｐ】
【図１−ｑ】
【図１−ｒ】
【図１−ｓ】
【図１−ｔ】
【公表番号】特表２０１３−５０５２６１（Ｐ２０１３−５０５２６１Ａ）
【公表日】平成２５年２月１４日（２０１３．２．１４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５２９９３７（Ｐ２０１２−５２９９３７）
【出願日】平成２２年９月１７日（２０１０．９．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０４９３４１
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０３５１６１
【国際公開日】平成２３年３月２４日（２０１１．３．２４）
【出願人】（５１２０７１２４８）プロヴェクタス ファーマスーティカルズ，インク． (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２５年２月１４日（２０１３．２．１４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年９月１７日（２０１０．９．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０４９３４１
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０３５１６１
【国際公開日】平成２３年３月２４日（２０１１．３．２４）
【出願人】（５１２０７１２４８）プロヴェクタス ファーマスーティカルズ，インク． (1)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]