本発明は、ＢＬｙＳシグナル伝達をブロックするポリペプチドと、そのポリペプチドをコードする核酸分子と、そのポリペプチドを含有する組成物に関する。本発明はまた本発明のポリペプチド及び組成物を使用して免疫関連疾患又は癌を治療するための方法にも関する。本発明はまたＢＬｙＳシグナル伝達の阻害剤を同定するための方法にも関する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
Ｘ_１-Ｃ_Ｎ-Ｘ_３-Ｄ-Ｘ_５-Ｌ-Ｘ_７-Ｘ_８-Ｘ_９-Ｘ_１０-Ｘ_１１-Ｘ_１２-Ｃ_Ｔ-Ｘ_１４-Ｘ_１５-Ｘ_１６-Ｘ_１７（式Ｉ）（配列番号１）の配列を含んでなるポリペプチドであって、
ここで、Ｘ_１、Ｘ_３、Ｘ_５、Ｘ_７、Ｘ_８、Ｘ_９、Ｘ_１０、Ｘ_１１、Ｘ_１２、Ｘ_１４、Ｘ_１５及びＸ_１７はシステイン以外の任意のアミノ酸であり；
Ｘ_１６はＬ、Ｆ、Ｉ及びＶからなる群から選択されるアミノ酸であり；
ポリペプチドは式ＩのＮ末端からＣ_Ｎ（システインＮ末端）及びＣ末端からＣ_Ｔ（システインＣ末端）の７個のアミノ酸残基内にシステインを含まず；
ここでＣ_ＮとＣ_Ｔはジスルフィド結合によって結合されており；
ここでＸ_５ＬＸ_７Ｘ_８の高次構造はＬとＸ_７の間にターンの中心を持つＩ型βターン構造を形成し；
ここでＸ_８が二面角φに対して正の値を持つ、ポリペプチド。
【請求項２】
Ｘ_１０が、Ｗ、Ｆ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｙ、Ｍ及び非極性アミノ酸からなる群から選択される（配列番号２）、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
Ｘ_１０がＷである（配列番号３）、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４】
Ｘ_３が、Ｍ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｗ及び非極性アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸である（配列番号４）、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項５】
Ｘ_５が、Ｖ、Ｌ、Ｐ、Ｓ、Ｉ、Ａ及びＲからなる群から選択される（配列番号５）、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項６】
Ｘ_７が、Ｖ、Ｔ、Ｉ及びＬからなる群から選択される（配列番号６）、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項７】
Ｘ_７がＴ又はＩではない（配列番号７）、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項８】
Ｘ_８が、任意のＲ、Ｋ、Ｇ、Ｎ、Ｈ及び全てのＤ-アミノ酸からなる群から選択される（配列番号８）、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項９】
Ｘ_９が、Ｈ、Ｋ、Ａ、Ｒ及びＱからなる群から選択される（配列番号９）、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
Ｘ_１１が、Ｉ及びＶからなる群から選択される（配列番号１０）、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
Ｘ_１２が、Ｐ、Ａ、Ｄ、Ｅ及びＳからなる群から選択される（配列番号１１）、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
Ｘ_１６がＬである（配列番号１２）、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
式ＩＩ：
Ｘ_１-Ｃ_Ｎ-Ｘ_３-Ｄ-Ｘ_５-Ｌ-Ｖ-Ｘ_８-Ｘ_９-Ｗ-Ｘ_１１-Ｘ_１２-Ｃ_Ｔ-Ｘ_１４-Ｘ_１５-Ｌ-Ｘ_１７（式ＩＩ）（配列番号１８）の配列を含んでなるポリペプチドであって、
ここで、Ｘ_１、Ｘ_３、Ｘ_５、Ｘ_８、Ｘ_９、Ｘ_１０、Ｘ_１１、Ｘ_１２、Ｘ_１４、Ｘ_１５及びＸ_１７はシステイン以外の任意のアミノ酸であり；
ポリペプチドは式ＩＩのＮ末端からＣ_Ｎ（システインＮ末端）及びＣ末端からＣ_Ｔ（システインＣ末端）の７個のアミノ酸残基内にシステインを含まず；
ここでＣ_ＮとＣ_Ｔはジスルフィド結合によって結合されている、ポリペプチド。
【請求項１４】
Ｘ_５-Ｌ-Ｖ-Ｘ_８の高次構造はＬとＶの間にターンの中心を持つＩ型βターン構造を形成し；ここでＸ_８が二面角φに対して正の値を持つ、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１５】
Ｘ_１、Ｘ_３、Ｘ_５、Ｘ_８、Ｘ_９、Ｘ_１４、Ｘ_１５及びＸ_１７が、Ｌ、Ｐ、Ｈ、Ｒ、Ｉ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｖ、Ａ、Ｄ、及びＧからなるアミノ酸の群から選択される（配列番号１９）、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１６】
Ｘ_３が、ノルロイシン、Ｍ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｙ、Ｆ、Ｗ、及び非極性アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸である（配列番号２０）、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１７】
Ｘ_５が、Ｖ、Ｌ、Ｐ、Ｓ、Ｉ、Ａ及びＲからなる群から選択される（配列番号２１）、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１８】
Ｘ_８が、Ｒ、Ｋ、Ｇ、Ｎ、Ｈ及び全てのＤ-アミノ酸からなる群から選択される（配列番号２２）、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１９】
Ｘ_９が、Ｈ、Ｋ、Ａ、Ｒ及びＱからなる群から選択される（配列番号２３）、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項２０】
Ｘ_１１が、Ｉ及びＶからなる群から選択される（配列番号２４）、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項２１】
Ｘ_１２が、Ｐ、Ａ、Ｄ、Ｅ及びＳからなる群から選択される(配列番号２５）、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項２２】
式ＩＩＩ：
Ｅ-Ｃ_Ｎ-Ｆ-Ｄ-Ｘ_５-Ｌ-Ｖ-Ｘ_８-Ｘ_９-Ｗ-Ｖ-Ｘ_１２-Ｃ_Ｔ-Ｘ_１４-Ｘ_１５-Ｘ_１６-Ｘ_１７（式ＩＩＩ）（配列番号２６）の配列を含んでなるポリペプチドであって、
ここで、Ｘ_５、Ｘ_８、Ｘ_９、Ｘ_１２、Ｘ_１４、Ｘ_１５及びＸ_１７はシステイン以外の任意のアミノ酸であり；
ここで、Ｘ_１６はＬ、Ｆ、Ｉ及びＶからなる群から選択されるアミノ酸であり；
ポリペプチドは式ＩＩＩのＮ末端からＣ_Ｎ（システインＮ末端）及びＣ末端からＣ_Ｔ（システインＣ末端）の７個のアミノ酸残基内にシステインを含まず；
ここで、Ｃ_ＮとＣ_Ｔはジスルフィド結合によって結合されている、ポリペプチド。
【請求項２３】
高次構造はＬとＶの間にターンの中心を持つＩ型βターン構造を形成し；ここでＶが二面角φに対して正の値を持つ、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項２４】
Ｘ_５、Ｘ_８、Ｘ_９、Ｘ_１２、Ｘ_１４、Ｘ_１５及びＸ_１７が、Ｌ、Ｐ、Ｈ、Ｒ、Ｉ、Ｔ、Ｎ、Ｓ、Ｖ、Ａ、Ｄ、及びＧからなる群から選択される（配列番号２７）、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項２５】
Ｘ_５がＬであり、Ｘ_８がＲである（配列番号２８）、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項２６】
Ｘ_９が、Ｈ、Ｋ、Ａ、Ｓ、Ｒ及びＱからなる群から選択される(配列番号２９）、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項２７】
Ｘ_１２が、Ｐ、Ａ、Ｄ、Ｅ及びＳからなる群から選択される（配列番号３０）、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項２８】
Ｘ_１２がＰである（配列番号３１）、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項２９】
Ｘ_１６がＬである（配列番号３２）、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項３０】
式ＩＩＩの配列が、ＥＣＦＤＬＬＶＲＡＷＶＰＣＳＶＬＫ（配列番号１３）、ＥＣＦＤＬＬＶＲＨＷＶＰＣＧＬＬＲ（配列番号１４）、ＥＣＦＤＬＬＶＲＲＷＶＰＣＥＭＬＧ（配列番号１５）、ＥＣＦＤＬＬＶＲＳＷＶＰＣＨＭＬＲ（配列番号１６）及びＥＣＦＤＬＬＶＲＨＷＶＡＣＧＬＬＲ（配列番号１７）からなる群から選択される、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項３１】
配列番号１３から配列番号１７及び配列番号６２から配列番号１３７からなる群から選択されるポリペプチド配列を含んでなるポリペプチド。
【請求項３２】
ポリペプチドが式Ｉ又は式ＩＩ又は式ＩＩＩのポリペプチド配列のＮ末端、Ｃ末端又はＮ末端とＣ末端の双方の更なる配列を含み、該更なる配列がＢＲ３ポリペプチドに異種性である、請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチド。
【請求項３３】
式Ｉ又は式ＩＩ又は式ＩＩＩの配列がイムノアドヘシンタンパク質に融合又は抱合した配列である、請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチド。
【請求項３４】
式Ｉ又は式ＩＩ又は式ＩＩＩの配列が抗体に融合又は抱合した配列である、請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチド。
【請求項３５】
抗体がＦ（ａｂ）抗体、Ｆ（ａｂ’）_２抗体及びｓｃＦｖ抗体からなる群から選択される、請求項３４に記載のポリペプチド。
【請求項３６】
抗体がヒト化抗体及び多重特異的抗体からなる群から選択される、請求項３４に記載のポリペプチド。
【請求項３７】
ポリペプチドが、成長阻害剤、細胞傷害剤、検出剤、ポリペプチドの生物学的利用能を改善する薬剤及びポリペプチドの半減期を改善する薬剤からなる群から選択される薬剤に抱合した、請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチド。
【請求項３８】
上記細胞傷害剤が、毒素、抗生物質及び放射性同位元素からなる群から選択される、請求項３７に記載のポリペプチド。
【請求項３９】
請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチドをコードしている核酸分子。
【請求項４０】
請求項３９に記載の核酸分子を含んでなるベクター。
【請求項４１】
請求項３９に記載の核酸分子を含んでなる宿主細胞。
【請求項４２】
請求項４０に記載のベクターを含んでなる宿主細胞を、ベクターからポリペプチドを発現するのに適した条件下で培養することを含む、ポリペプチドを製造する方法。
【請求項４３】
上記ポリペプチドが細菌中で産生される、請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチド。
【請求項４４】
上記ポリペプチドがＣＨＯ細胞中で産生される、請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチド。
【請求項４５】
請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチドを含有し、更に生理学的に許容可能な担体を含んでいてもよい組成物。
【請求項４６】
請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチドがＢＬｙＳに結合するのを防止する阻害剤を検出することを含んでなる、インビトロでのＢＲ３へのＢＬｙＳの結合の阻害剤を検出する方法。
【請求項４７】
哺乳動物におけるＢＲ３へのＢＬｙＳの結合を阻害する方法において、請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチドを、哺乳動物中におけるＢＬｙＳとＢＲ３の間の結合を阻害するのに有効な量で投与することを含む方法。
【請求項４８】
哺乳動物におけるＢＬｙＳシグナル伝達を阻害する方法において、請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチドを、哺乳動物中におけるＢＬｙＳとＢＲ３の間の結合を阻害するのに有効な量で投与することを含む方法。
【請求項４９】
治療を必要とする哺乳動物における免疫関連症状を治療する方法において、請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチドの治療的有効量で哺乳動物を治療することを含む方法。
【請求項５０】
免疫関連疾患が関節リウマチ、多発性硬化症及び全身性エリテマトーデスからなる群から選択される、請求項４８に記載の方法。
【請求項５１】
治療を必要とする哺乳動物における癌を治療する方法において、請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチドの治療的有効量で哺乳動物を治療することを含む方法。
【請求項５２】
上記癌が、白血病、リンパ腫及び骨髄腫からなる群から選択される、請求項５０に記載の方法。
【請求項５３】
抗ＣＤ２０抗体の治療的有効量がまた哺乳動物に投与される、請求項５０に記載の方法。
【請求項５４】
抗ＣＤ２０抗体がリツキサン(登録商標)抗体である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５５】
ポリペプチドが少なくとも一種の非タンパク質性ポリマーに結合されている、請求項１ないし３１の何れか一項に記載のポリペプチド。
【請求項５６】
非タンパク質性ポリマーが親水性合成ポリマーである、請求項５５に記載のポリペプチド。
【請求項５７】
非タンパク質性ポリマーがポリエチレングリコールである、請求項５５に記載のポリペプチド。
【請求項５８】
非タンパク質性ポリマーが２Ｋ-ＰＥＧ、５Ｋ-ＰＥＧ、及び２０Ｋ-ＰＥＧからなる群から選択される、請求項５５に記載のポリペプチド。
【請求項５９】
配列番号１３から配列番号１７及び配列番号６２から配列番号１３７からなる群から選択される少なくとも二種のペプチドを含んでなるポリペプチド。
【請求項６０】
ペプチドが同じ配列であり、ペプチドがリンカーによって結合されている、請求項５９に記載のポリペプチド。
【請求項６１】
ペプチドが異なった配列であり、ペプチドがリンカーによって結合されている、請求項５９に記載のポリペプチド。
【請求項６２】
互いに結合されたペプチドが式：ＰＰ１-Ｌ１-ＰＰ１-Ｌ２-ＰＰ１を有し、ここで、ＰＰ１は請求項５９に記載の群から選択されるペプチドであり、Ｌ１とＬ２が、配列が異なるリンカー配列である、請求項５９に記載のポリペプチド。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１Ａ】

【図１１Ｂ】

【図１２Ａ】

【図１２Ｂ】

【図１２Ｃ】

【図１３】

【図１４Ａ】

【図１４Ｂ】

【図１４Ｃ】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【公表番号】特表２００７−５３６８９６（Ｐ２００７−５３６８９６Ａ）
【公表日】平成１９年１２月２０日（２００７．１２．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５１５１８２（Ｐ２００６−５１５１８２）
【出願日】平成１６年６月４日（２００４．６．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１７６８２
【国際公開番号】ＷＯ２００５／００５４６２
【国際公開日】平成１７年１月２０日（２００５．１．２０）
【出願人】（５９６１６８３１７）ジェネンテック・インコーポレーテッド (372)
【氏名又は名称原語表記】ＧＥＮＥＮＴＥＣＨ，ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】