ＣＤ２８と超抗原との相互作用に基づくｉｎ−ｖｉｖｏにて有効な広域スペクトルの超抗原毒素アンタゴニストおよびその使用
本発明は、アミノ酸配列ＨＶＫＧＫＨＬＣＰ（配列番号３でも示される）の一部または全てを含んでなるＣＤ２８分子内の超抗原結合部位に関する。この部位は超抗原と、発熱性外毒素の空間的に保存されているドメイン（このドメインはＭＨＣクラスII分子およびＴＣＲのいずれとの結合にも関係していない）を通じて特異的にかつ直接結合する。この部位でのＣＤ２８分子と超抗原の直接結合はＢ７−２リガンドのＣＤ２８との結合を促進し、かつ、ＩＬ−２および／またはＩＦＮ−ｇ遺伝子発現の誘導により定義されているＴｈ１リンパ球の活性化に必要不可欠である。本発明は、この相互作用を阻害することにより、Ｔｈ１リンパ球の超抗原媒介性活性化を阻害し、そうすることで毒素性ショックから防御し、かつ、防御免疫を誘発もし得る物質を提供する。本発明はさらに、ＣＤ２８分子と特異的に結合し、Ｔｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を拮抗し得る試験物質に関してスクリーニングする方法におけるＣＤ２８分子またはｓ−Ａｇ結合部位を含んでなるその断片の使用に関する。
Notice: Undefined index: DEJ in /mnt/www/gzt_disp.php on line 298
【特許請求の範囲】
【請求項１】
超抗原と特異的にかつ直接結合するＣＤ２８分子内の超抗原結合部位。
【請求項２】
抗ＣＤ２８モノクローナル抗体と結合するＣＤ２８分子内にあるエピトープと少なくとも一部が重複する、請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項３】
該抗ＣＤ２８モノクローナル抗体がＭＡＢ３４２と呼ばれるマウス抗ＣＤ２８モノクローナル抗体（R & D Systems, Inc., Minneapolis, Minnesota, USAのクローン ３７４０７．１１１）である、請求項２に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項４】
該エピトープが配列番号３で示されるアミノ酸配列またはその断片を含んでなる、請求項３に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項５】
配列番号３で示されるアミノ酸配列またはその断片を含んでなる、請求項３に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項６】
該部位での該ＣＤ２８分子と超抗原との直接結合がＢ７−２リガンドとＣＤ２８との結合を促進し、かつ、ＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γ遺伝子発現の誘導により定義されているＴｈ１リンパ球の活性化に必要不可欠である、請求項５に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項７】
該部位での該ＣＤ２８分子と超抗原との直接結合がＢ７−２リガンドとＣＤ２８との結合を促進し、かつ、Ｂ７−２リガンドとＣＤ２８との該結合がＩＬ−４および／またはＩＬ−１０の誘導により定義されているＴｈ２リンパ球の活性化に必要不可欠ではない、請求項６に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項８】
発熱性外毒素の空間的に保存されているドメイン（このドメインはＭＨＣクラスII分子およびＴＣＲのいずれとの結合にも関係していない）と特異的にかつ直接結合する、請求項７に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項９】
該発熱性外毒素の空間的に保存されている該ドメインがその中にＳＥＢのドメイン番号に基づき、β鎖７内から始まり、β鎖７を、短いβ鎖８を介して、α−ヘリックス４へと連結し、α−ヘリックス４内で終わる中央ターンを形成する、請求項８に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項１０】
超抗原関連疾患の治療を必要とする哺乳類被験体における超抗原関連疾患の治療のための方法であって、ＣＤ２８分子と該超抗原との相互作用を阻害する工程を含んでなる、方法。
【請求項１１】
ＣＤ２８分子と該超抗原との直接結合を阻害する該工程が該被験体に、ＣＤ２８分子と該超抗原との直接相互作用を阻害する物質または該物質を含んでなり、所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい組成物の治療上有効な量を投与することを含んでなる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
該相互作用が該超抗原と請求項１〜９のいずれか一項に記載のＣＤ２８超抗原結合部位との結合である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
該超抗原が発熱性外毒素である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害することにより、Ｔｈ１リンパ球の外毒素媒介性活性化の阻害、毒素性ショックに対する防御、および、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫の誘発をもたらす、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
該発熱性外毒素が細菌外毒素である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
該外毒素が黄色ブドウ球菌および化膿連鎖球菌のいずれか１つにより産生される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
該超抗原関連疾患がある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショック、無能力および死のいずれか１つである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
このような治療を必要とする被験体においてＴｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を阻害し、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する方法であって、該被験体に、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害する物質または該物質を含んでなり、所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい組成物の治療上有効な量を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１９】
このような治療を必要とする被験体においてある発熱性外毒素により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発する方法であって、該被験体に、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害する物質または該物質を含んでなり、所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい組成物の治療上有効な量を投与することを含んでなる、方法。
【請求項２０】
超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害する物質。
【請求項２１】
該超抗原が発熱性外毒素である、請求項２０に記載の物質。
【請求項２２】
該発熱性外毒素と該ＣＤ２８超抗原結合部位との結合を阻害することにより、Ｔｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗、および、所望により、該発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫の誘発をもたらす、請求項２１に記載の物質。
【請求項２３】
該結合が請求項１〜９のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位を介する、請求項２２に記載の物質。
【請求項２４】
超抗原関連疾患の治療に用いる、請求項２３に記載の物質。
【請求項２５】
超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造における、請求項２４に記載の物質の使用。
【請求項２６】
超抗原関連疾患の治療および／または予防のための医薬組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害し、それによりＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす請求項２４に記載の物質の治療上有効な量を含んでなる、医薬組成物。
【請求項２７】
所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を有する、単離および精製されたペプチド。
【請求項２９】
抗ＣＤ２８モノクローナル抗体により認識されるＣＤ２８分子内にあるエピトープを含んでなるアミノ酸配列を有する、請求項２８に記載のペプチド。
【請求項３０】
該抗ＣＤ２８モノクローナル抗体がＭＡＢ３４２と呼ばれるマウス抗ＣＤ２８モノクローナル抗体（R & D Systems, Inc., Minneapolis, Minnesota, USAのクローン ３７４０７．１１１）である、請求項２９に記載のペプチド。
【請求項３１】
配列番号３および５のいずれか１つで示されるアミノ酸配列またはその機能的断片および誘導体を含んでなる、請求項３０に記載のペプチド。
【請求項３２】
ｐＴＡと呼ばれ、かつ、配列番号５で示されるアミノ酸配列またはその機能的断片および誘導体を有する、請求項３１に記載のペプチド。
【請求項３３】
ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害する、請求項３２に記載のペプチド。
【請求項３４】
Ｔリンパ球の毒素媒介性活性化のアンタゴニストであり、かつ、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する、請求項３３に記載のペプチド。
【請求項３５】
超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との直接相互作用を阻害する組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を有する単離および精製されたペプチドを、該相互作用を阻害するのに有効な量で含んでなる、組成物。
【請求項３６】
Ｔリンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を阻害し、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を有する単離および精製されたペプチドを、ＩＬ−２、ＩＮＦ−γおよび／またはＴＮＦ−β遺伝子によりコードされるＲＮＡの外毒素誘導性発現を阻害するのに有効な量で含んでなる、組成物。
【請求項３７】
単離および精製された該ペプチドが配列番号３、配列番号４および配列番号５のいずれか１つまたはその組合せからなる群から選択されるアミノ酸配列を有し、また、所望により、医薬上許容される担体、希釈剤、アジュバントおよび／または賦形剤さらに含んでなってもよい、請求項３５および３６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３８】
該ペプチドがｐＴＡと呼ばれ、かつ、配列番号５で示されるアミノ酸配列および／またはその機能的断片および誘導体を有する、請求項３７記載の組成物。
【請求項３９】
哺乳類被験体における超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物であって、請求項２８〜３４のいずれか一項に記載の単離および精製されたペプチドを含んでなる、医薬組成物。
【請求項４０】
このような治療を必要とする患者においてＴリンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を阻害し、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する方法であって、該患者に、請求項２８〜３４のいずれか一項に記載のＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を有する単離および精製されたペプチドまたはそれを含んでなる組成物の阻害に有効な量を投与することを含んでなる、方法。
【請求項４１】
該ペプチドが配列番号３、配列番号４および配列番号５のいずれか１つで示されるアミノ酸配列を有するペプチドから選択される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
超抗原関連疾患を予防および／または治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、請求項２８〜３４のいずれか一項に記載のＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を有する少なくとも１つの単離および精製されたペプチドまたはそれを含んでなる組成物の治療上有効な量を投与する工程を含んでなる、方法。
【請求項４３】
該ペプチドがｐＴＡと呼ばれ、かつ、配列番号５で示されるアミノ酸配列ならびにその機能的断片および誘導体を有する、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
請求項３５および３６のいずれか一項に記載の組成物の製造における、請求項２８〜３４のいずれか一項に記載のペプチドの使用。
【請求項４５】
請求項３９に記載の組成物の製造における、請求項２８〜３４のいずれか一項に記載のペプチドの使用。
【請求項４６】
ＣＤ２８分子と特異的に結合し、Ｔｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を拮抗し、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発し得る試験物質に関してスクリーニングする方法であって、
ａ．ＣＤ２８分子と結合する候補アンタゴニスト物質を得る工程、
ｂ．工程（ａ）で得られたＣＤ２８結合物質からＣＤ２８分子と該超抗原との直接相互作用を阻害する物質を選択する工程、および
ｃ．工程（ｂ）で得られた物質のＴｈ１リンパ球の超抗原媒介性活性化に対する拮抗効果を決定する工程
を含んでなる、方法。
【請求項４７】
該候補アンタゴニスト物質が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片を含む混合物を準備する工程、
ｂ．該混合物を該結合に好適な条件下にて該試験物質と接触させる工程、および
ｃ．評価項目指標に対する試験物質の効果を判定する工程（ここで、該評価項目についての変化がＣＤ２８分子と該試験物質とが結合していることを示す）
により得られる、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
評価項目指標が視覚的に検出可能なシグナルをもたらす抗ＣＤ２８抗体とＣＤ２８分子との結合である、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
請求項１〜９のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位を介してＣＤ２８分子と特異的に結合し、それによりＣＤ２８分子と該超抗原との相互作用を阻止する該候補アンタゴニスト物質の、所望により、請求項５５に記載の方法により得てもよいＣＤ２８が結合する物質からの選択が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片を含む混合物を準備する工程、
ｂ．該混合物を、ＣＤ２８内の超抗原結合部位を介するＣＤ２８分子との特異的相互作用に好適な条件下にて該試験物質と接触させる工程、および
ｃ．評価項目指標に対する試験物質の効果を判定する工程（ここで、該評価項目についての変化が該超抗原結合部位を介してＣＤ２８分子と試験物質とが結合していることを示す）
により行われる、請求項４６に記載のスクリーニング方法。
【請求項５０】
該混合物が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片、
ｂ．ＣＤ２８分子と請求項１〜９のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位にて特異的に結合する相互作用分子、および
ｃ．所望により、該相互作用分子とＣＤ２８分子との相互作用に、および該相互作用分子とＣＤ２８分子との相互作用に関する評価項目指標の検出に好適な条件を提供する溶液、バッファーおよび化合物
を含んでなる、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
ＣＤ２８の該断片が配列番号３で示されるアミノ酸配列を含んでなるＣＤ２８分子内の超抗原結合部位である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
該相互作用分子が抗ＣＤ２８モノクローナル抗体、配列番号１で示されるアンタゴニストペプチドｐ１２ 、配列番号２で示されるアンタゴニストペプチドｐ１４および発熱性外毒素またはその機能的断片のいずれか１つである、請求項５０に記載の方法。
【請求項５３】
評価項目指標が視覚的に検出可能なシグナルをもたらす該相互作用分子とＣＤ２８分子との結合である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
該評価項目における阻害が該試験物質と請求項１〜９のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位とが直接結合していることを示し、その結合が相互作用分子と該部位との結合と競合する、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
該混合物が細胞混合物または細胞フリー混合物である、請求項４７に記載の方法。
【請求項５６】
混合物が細胞フリー混合物である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
該ＣＤ２８分子またはその断片が精製された組換えタンパク質、および該ＣＤ２８分子を発現する形質転換宿主細胞の細胞溶解物または膜調製物のいずれか１つとして提供される、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
該混合物が細胞混合物である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５９】
該細胞混合物がトランスフェクト細胞培養物である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
該トランスフェクト細胞がＣＤ２８分子またはその断片をコードする核酸配列を含んでなる発現ベクターでトランスフェクトされたＢＨＫ−２１細胞である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
該トランスフェクト細胞がＣＤ２８分子と超抗原との相互作用に必要不可欠である内生的または外生的に発現される分子をさらに含む、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
該候補物質がタンパク質系物質、炭水化物系物質、脂質系物質、天然有機物系物質、合成有機物系物質、無機物系物質、およびペプチドミメティックス系物質からなる群から選択される、請求項４６に記載の方法。
【請求項６３】
該物質がペプチドのコンビナトリアルライブラリー、環状ペプチドミメティックのライブラリー、およびランダムまたは特定ファージディスプレイライブラリーののポジショナルスキャニングのいずれかの産物である、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
該候補アンタゴニスト物質がＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化を拮抗する該物質の能力、および、所望により、ある発熱性外毒素またはこのような発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発するその能力を決定する方法により評価され、その評価方法が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片を含んでなる試験系を準備する工程、
ｂ．該系を相互作用に好適な条件下で請求項４６〜５３のいずれか一項に記載の方法により準備、選択された候補アンタゴニストと接触させる工程、および
ｃ．評価項目指標に対する該候補アンタゴニストの効果を対照との比較により決定する工程（ここで、該効果はＣＤ２８分子と発熱性外毒素との直接相互作用を阻害し、それによってＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす該候補の可能性を示す）
を含んでなる、請求項４６に記載のスクリーニング方法。
【請求項６５】
該試験系が細胞フリー混合物、in-vitro／ex-vivo細胞培養物、およびin-vivo動物モデルのいずれか１つである、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
該試験系が、所望により、Ｔ細胞の超抗原誘導性活性化に、および候補アンタゴニストの拮抗効果を決定する評価項目指標の検出に好適な条件を提供する内生および／または外生化合物をさらに含んでなってよい、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
該Ｔ細胞がＴｈ１リンパ球であり、かつ、該活性化がＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γ遺伝子発現の誘導により決定される、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
該試験系が可溶性ＣＤ２８分子（ｓＣＤ２８）および可溶性Ｂ７−２分子（ｓＢ７−２）を含んでなる細胞フリー系である、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
評価項目指標が好適な手段により検出されるｓＣＤ２８分子とｓＢ７−２分子との結合である、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
検出工程において、該候補アンタゴニストの存在下でのＣＤ２８分子とｓＢ７−２との相互作用の増大が、超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害する該候補の可能性を示す、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
該試験系が内生的に発現されるＣＤ２８分子を含んでなるin-vitro／ex-vivo細胞培養物である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７２】
該細胞培養物が哺乳類供与体から単離されたＰＢＭＣ培養物である、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
評価項目指標が視覚的に検出可能なシグナルをもたらすＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γの超抗原誘導性発現である、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
該評価項目の阻害が、該超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害し、その阻害によってＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす該候補の可能性を示す、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
該in-vivo試験系が動物モデルである、請求項６７に記載の方法。
【請求項７６】
該動物モデルが超抗原を投与したＤ−ガラクトサミン感作マウスである、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
評価項目指標が該マウスの致死毒素性ショックからの防御および救済である、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
決定工程において、該評価項目の増大が、超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害する、Ｔｈ１リンパ球の発熱性毒素媒介性活性化を拮抗する、毒素性ショックから防御する、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発する該候補物質の能力を示す、請求項７７に記載の方法。
【請求項７９】
該動物モデルが発熱性外毒素を抗原投与したブタである、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
評価項目指標が該ブタの毒素性ショックおよび無能力からの防御および救済である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
決定工程において、該評価項目の増大が、超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害する、Ｔｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を拮抗する、毒素性ショックおよび無能力から防御する、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発する該候補物質の能力を示す、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
哺乳類被験体における超抗原関連疾患の治療のための治療用組成物の製造方法であって、
ａ．Ｔｈ１リンパ球の超抗原媒介性活性化を拮抗し、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発し得るアンタゴニスト物質を同定する工程、および
ｂ．該アンタゴニスト物質を少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤と混合する工程
を含んでなる、方法。
【請求項８３】
該アンタゴニスト物質が請求項４６に記載のスクリーニング方法により同定される、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
請求項８３に記載の方法による超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造におけるＣＤ２８分子またはその断片の使用。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
超抗原と特異的にかつ直接結合するＣＤ２８分子内の超抗原結合部位であって、該部位はＣＤ２８分子内にあるエピトープと少なくとも一部が重複し、該エピトープは配列番号３で示されるアミノ酸配列またはその断片を含んでなる超抗原結合部位。
【請求項２】
配列番号３で示されるアミノ酸配列またはその断片の全部または一部を含んでなる、請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項３】
該部位での該ＣＤ２８分子と超抗原との直接結合がＢ７−２リガンドとＣＤ２８との結合を促進し、かつ、ＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γ遺伝子発現の誘導により定義されているＴｈ１リンパ球の活性化に必要不可欠である、請求項２に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項４】
該部位での該ＣＤ２８分子と超抗原との直接結合がＢ７−２リガンドとＣＤ２８との結合を促進し、かつ、Ｂ７−２リガンドとＣＤ２８との該結合がＩＬ−４および／またはＩＬ−１０の誘導により定義されているＴｈ２リンパ球の活性化に必要不可欠ではない、請求項３に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項５】
発熱性外毒素の空間的に保存されているドメイン（このドメインはＭＨＣクラスII分子およびＴＣＲのいずれとの結合にも関係していない）と特異的にかつ直接結合する、請求項４に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項６】
該発熱性外毒素の空間的に保存されている該ドメインがその中にＳＥＢのドメイン番号に基づき、β鎖７内から始まり、β鎖７を、短いβ鎖８を介して、α−ヘリックス４へと連結し、α−ヘリックス４内で終わる中央ターンを形成する、請求項５に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項７】
超抗原関連疾患の治療を必要とする哺乳類被験体における超抗原関連疾患の治療のための方法であって、ＣＤ２８分子と該超抗原との相互作用を阻害する工程を含んでなり、該相互作用が該超抗原結合部位と請求項１〜６のいずれか一項に記載のＣＤ２８超抗原結合部位との結合である、方法。
【請求項８】
ＣＤ２８分子と該超抗原との直接結合を阻害する該工程が該被験体に、ＣＤ２８分子と該超抗原との直接相互作用を阻害する物質または該物質を含んでなり（該物質は小分子、酵素、炭水化物系分子、脂質系分子、天然有機物系分子、合成有機物系分子もしくは無機物系分子、請求項１〜６のいずれか一項に記載の超抗原結合部位を含んでなるＣＤ２８分子もしくはその断片、抗ＣＤ２８抗体、可溶性Ｂ７−２分子および抗Ｂ７−２分子抗体からなる群から選択される）、所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい組成物の治療上有効な量を投与することを含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
該超抗原が発熱性外毒素である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害することにより、Ｔｈ１リンパ球の外毒素媒介性活性化の阻害、毒素性ショックに対する防御、および、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫の誘発をもたらす、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
該発熱性外毒素が細菌外毒素である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
該外毒素が黄色ブドウ球菌および化膿連鎖球菌のいずれか１つにより産生される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
該超抗原関連疾患がある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショック、無能力および死のいずれか１つである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
このような治療を必要とする被験体においてＴｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を阻害し、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する方法であって、該被験体に、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害する物質または該物質を含んでなり（該物質は小分子、酵素、炭水化物系分子、脂質系分子、天然有機物系分子、合成有機物系分子もしくは無機物系分子、請求項１〜６のいずれか一項に記載の超抗原結合部位を含んでなるＣＤ２８分子もしくはその断片、抗ＣＤ２８抗体、可溶性Ｂ７−２分子および抗Ｂ７−２分子抗体からなる群から選択される）、所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい組成物の治療上有効な量を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１５】
このような治療を必要とする被験体においてある発熱性外毒素により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発する方法であって、該被験体に、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害する物質または該物質を含んでなり（該物質は小分子、酵素、炭水化物系分子、脂質系分子、天然有機物系分子、合成有機物系分子もしくは無機物系分子、請求項１〜６のいずれか一項に記載の超抗原結合部位を含んでなるＣＤ２８分子もしくはその断片、抗ＣＤ２８抗体、可溶性Ｂ７−２分子および抗Ｂ７−２分子抗体からなる群から選択される）、所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい組成物の治療上有効な量を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１６】
該物質が請求項１〜６のいずれか一項に記載の超抗原結合部位を含んでなるＣＤ２８分子またはその断片である、請求項８、１４および１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
該物質が請求項１〜６のいずれか一項に記載の超抗原結合部位を特異的に認識する抗ＣＤ２８抗体である、請求項８、１４および１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
該物質が可溶性Ｂ７−２分子抗体である、請求項８、１４および１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
該物質が抗Ｂ７−２分子抗体である、請求項８、１４および１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、小分子、酵素、炭水化物系分子、脂質系分子、天然有機物系分子、合成有機物系分子および無機物系分子からなる群から選択される、物質。
【請求項２１】
超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、抗ＣＤ２８抗体および抗Ｂ７−２分子抗体のいずれか１つである、物質。
【請求項２２】
該超抗原が発熱性外毒素である、請求項２０および２１のいずれか一項に記載の物質。
【請求項２３】
該発熱性外毒素と該ＣＤ２８超抗原結合部位との結合を阻害することにより、Ｔｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗、および、所望により、該発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫の誘発をもたらす、請求項２２に記載の物質。
【請求項２４】
該結合が請求項１〜６のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位を介する、請求項２３に記載の物質。
【請求項２５】
超抗原関連疾患の治療に用いる、請求項２４に記載の物質。
【請求項２６】
超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造における、超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、小分子、酵素、炭水化物系分子、脂質系分子、天然有機物系分子、合成有機物系分子および無機物系分子からなる群から選択される物質の使用。
【請求項２７】
超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造における、超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、請求項１〜６のいずれか一項に記載の超抗原結合部位を含んでなるＣＤ２８分子もしくはその断片である物質の使用。
【請求項２８】
超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造における、超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、抗ＣＤ２８分子抗体である物質の使用。
【請求項２９】
超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造における、超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、可溶性Ｂ７−２分子である物質の使用。
【請求項３０】
超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造における、超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、抗Ｂ７−２分子抗体である物質の使用。
【請求項３１】
超抗原関連疾患の治療および／または予防のための医薬組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害し、それによりＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす物質（該物質は請求項２０に記載の通りである）の治療上有効な量を含んでなる、医薬組成物。
【請求項３２】
超抗原関連疾患の治療および／または予防のための医薬組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害し、それによりＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす（該物質は請求項２１に記載の通りである）の治療上有効な量を含んでなる、医薬組成物。
【請求項３３】
所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい、請求項３１および３２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３４】
ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列またはその断片を含んでなる、単離および精製されたペプチド（該結合部位は請求項１に記載の通りである）。
【請求項３５】
配列番号３、配列番号４および配列番号５のいずれか１つで示されるアミノ酸配列またはその機能的断片および誘導体を含んでなる、請求項３４に記載のペプチド。
【請求項３６】
ｐＴＡと呼ばれ、かつ、配列番号５で示されるアミノ酸配列またはその機能的断片および誘導体を有する、請求項３５に記載のペプチド。
【請求項３７】
ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害する、請求項３６に記載のペプチド。
【請求項３８】
Ｔリンパ球の毒素媒介性活性化のアンタゴニストであり、かつ、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する、請求項３７に記載のペプチド。
【請求項３９】
超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との直接相互作用を阻害する組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列またはその断片を含んでなる単離および精製されたペプチドを、該相互作用を阻害するのに有効な量で含んでなる、組成物（該結合部位は請求項１に記載の通りである）。
【請求項４０】
Ｔリンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を阻害し、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列またはその断片を含んでなる単離および精製されたペプチドを、ＩＬ−２、ＩＮＦ−γおよび／またはＴＮＦ−β遺伝子によりコードされるＲＮＡの外毒素誘導性発現を阻害するのに有効な量で含んでなる、組成物（該結合部位は請求項１に記載の通りである）。
【請求項４１】
単離および精製された該ペプチドが配列番号３、配列番号４および配列番号５のいずれか１つまたはその組合せからなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなり、また、所望により、医薬上許容される担体、希釈剤、アジュバントおよび／または賦形剤さらに含んでなってもよい、請求項３９および４０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４２】
該ペプチドがｐＴＡと呼ばれ、かつ、配列番号５で示されるアミノ酸配列および／またはその機能的断片および誘導体を有する、請求項４１記載の組成物。
【請求項４３】
哺乳類被験体における超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物であって、請求項３４〜３８のいずれか一項に記載の単離および精製されたペプチドを含んでなる、医薬組成物。
【請求項４４】
このような治療を必要とする患者においてＴリンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を阻害し、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する方法であって、該患者に、ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列またはその断片を含んでなる単離および精製されたペプチドまたはそれを含んでなる組成物の阻害に有効な量を投与することを含んでなり、該結合部位は請求項１に記載の通りであり、ペプチドは請求項３４〜３８のいずれか一項に記載の通りである、方法。
【請求項４５】
該ペプチドが配列番号３、配列番号４および配列番号５のいずれか１つで示されるアミノ酸配列を有するペプチドから選択される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
超抗原関連疾患を予防および／または治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列またはその断片を含んでなる少なくとも１つの単離および精製されたペプチドまたはそれを含んでなる組成物の治療上有効な量を投与する工程を含んでなり、該結合部位は請求項１に記載の通りであり、ペプチドは請求項３４〜３８のいずれか一項に記載の通りである、方法。
【請求項４７】
該ペプチドがｐＴＡと呼ばれ、かつ、配列番号５で示されるアミノ酸配列ならびにその機能的断片および誘導体を有する、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
請求項３９、４０および４３のいずれか一項に記載の組成物の製造における、請求項３４〜３８のいずれか一項に記載のペプチドの使用。
【請求項４９】
ＣＤ２８分子と特異的に結合し、Ｔｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を拮抗し、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発し得る試験物質に関してスクリーニングする方法であって、
ａ．ＣＤ２８分子と結合する候補アンタゴニスト物質を得る工程、
ｂ．工程（ａ）で得られたＣＤ２８結合物質からＣＤ２８分子と該超抗原との直接相互作用を阻害する物質を選択する工程、および
ｃ．工程（ｂ）で得られた物質のＴｈ１リンパ球の超抗原媒介性活性化に対する拮抗効果を決定する工程
を含んでなる、方法。
【請求項５０】
該候補アンタゴニスト物質が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片を含む混合物を準備する工程、
ｂ．該混合物を該結合に好適な条件下にて該試験物質と接触させる工程、および
ｃ．評価項目指標に対する試験物質の効果を判定する工程（ここで、該評価項目についての変化がＣＤ２８分子と該試験物質とが結合していることを示す）
により得られる、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
評価項目指標が視覚的に検出可能なシグナルをもたらす抗ＣＤ２８抗体とＣＤ２８分子との結合である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位を介してＣＤ２８分子と特異的に結合し、それによりＣＤ２８分子と該超抗原との相互作用を阻止する該候補アンタゴニスト物質の、所望により、請求項５０に記載の方法により得てもよいＣＤ２８が結合する物質からの選択が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片を含む混合物を準備する工程、
ｂ．該混合物を、ＣＤ２８内の超抗原結合部位を介するＣＤ２８分子との特異的相互作用に好適な条件下にて該試験物質と接触させる工程、および
ｃ．評価項目指標に対する試験物質の効果を判定する工程（ここで、該評価項目についての変化が該超抗原結合部位を介してＣＤ２８分子と試験物質とが結合していることを示す）
により行われる、請求項４９に記載のスクリーニング方法。
【請求項５３】
該混合物が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片、
ｂ．ＣＤ２８分子と請求項１〜６のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位にて特異的に結合する相互作用分子、および
ｃ．所望により、該相互作用分子とＣＤ２８分子との相互作用に、および該相互作用分子とＣＤ２８分子との相互作用に関する評価項目指標の検出に好適な条件を提供する溶液、バッファーおよび化合物
を含んでなる、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
ＣＤ２８の該断片が配列番号３で示されるアミノ酸配列を含んでなるＣＤ２８分子内の超抗原結合部位である、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
該相互作用分子が抗ＣＤ２８モノクローナル抗体、配列番号１で示されるアンタゴニストペプチドｐ１２ 、配列番号２で示されるアンタゴニストペプチドｐ１４および発熱性外毒素またはその機能的断片のいずれか１つである、請求項５３に記載の方法。
【請求項５６】
評価項目指標が視覚的に検出可能なシグナルをもたらす該相互作用分子とＣＤ２８分子との結合である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
該評価項目における阻害が該試験物質と請求項１〜６のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位とが直接結合していることを示し、その結合が相互作用分子と該部位との結合と競合する、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
該混合物が細胞混合物または細胞フリー混合物である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５９】
混合物が細胞フリー混合物である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
該ＣＤ２８分子またはその断片が精製された組換えタンパク質、および該ＣＤ２８分子を発現する形質転換宿主細胞の細胞溶解物または膜調製物のいずれか１つとして提供される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
該混合物が細胞混合物である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６２】
該細胞混合物がトランスフェクト細胞培養物である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
該トランスフェクト細胞がＣＤ２８分子またはその断片をコードする核酸配列を含んでなる発現ベクターでトランスフェクトされたＢＨＫ−２１細胞である、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
該トランスフェクト細胞がＣＤ２８分子と超抗原との相互作用に必要不可欠である内生的または外生的に発現される分子をさらに含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
該候補物質がタンパク質系物質、炭水化物系物質、脂質系物質、天然有機物系物質、合成有機物系物質、無機物系物質、およびペプチドミメティックス系物質からなる群から選択される、請求項４９に記載の方法。
【請求項６６】
該物質がペプチドのコンビナトリアルライブラリー、環状ペプチドミメティックのライブラリー、およびランダムまたは特定ファージディスプレイライブラリーののポジショナルスキャニングのいずれかの産物である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
該候補アンタゴニスト物質がＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化を拮抗する該物質の能力、および、所望により、ある発熱性外毒素またはこのような発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発するその能力を決定する方法により評価され、その評価方法が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片を含んでなる試験系を準備する工程、
ｂ．該系を相互作用に好適な条件下で請求項４９〜５７のいずれか一項に記載の方法により準備、選択された候補アンタゴニストと接触させる工程、および
ｃ．評価項目指標に対する該候補アンタゴニストの効果を対照との比較により決定する工程（ここで、該効果はＣＤ２８分子と発熱性外毒素との直接相互作用を阻害し、それによってＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす該候補の可能性を示す）
を含んでなる、請求項４９に記載のスクリーニング方法。
【請求項６８】
該試験系が細胞フリー混合物、in-vitro／ex-vivo細胞培養物、およびin-vivo動物モデルのいずれか１つである、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
該試験系が、所望により、Ｔ細胞の超抗原誘導性活性化に、および候補アンタゴニストの拮抗効果を決定する評価項目指標の検出に好適な条件を提供する内生および／または外生化合物をさらに含んでなってよい、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
該Ｔ細胞がＴｈ１リンパ球であり、かつ、該活性化がＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γ遺伝子発現の誘導により決定される、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
該試験系が可溶性ＣＤ２８分子（ｓＣＤ２８）および可溶性Ｂ７−２分子（ｓＢ７−２）を含んでなる細胞フリー系である、請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
評価項目指標が好適な手段により検出されるｓＣＤ２８分子とｓＢ７−２分子との結合である、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
検出工程において、該候補アンタゴニストの存在下でのＣＤ２８分子とｓＢ７−２との相互作用の増大が、超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害する該候補の可能性を示す、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
該試験系が内生的に発現されるＣＤ２８分子を含んでなるin-vitro／ex-vivo細胞培養物である、請求項７０に記載の方法。
【請求項７５】
該細胞培養物が哺乳類供与体から単離されたＰＢＭＣ培養物である、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
評価項目指標が視覚的に検出可能なシグナルをもたらすＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γの超抗原誘導性発現である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
該評価項目の阻害が、該超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害し、その阻害によってＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす該候補の可能性を示す、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
該in-vivo試験系が動物モデルである、請求項７０に記載の方法。
【請求項７９】
該動物モデルが超抗原を投与したＤ−ガラクトサミン感作マウスである、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
評価項目指標が該マウスの致死毒素性ショックからの防御および救済である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
決定工程において、該評価項目の増大が、超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害する、Ｔｈ１リンパ球の発熱性毒素媒介性活性化を拮抗する、毒素性ショックから防御する、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発する該候補物質の能力を示す、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
該動物モデルが発熱性外毒素を抗原投与したブタである、請求項７８に記載の方法。
【請求項８３】
評価項目指標が該ブタの毒素性ショックおよび無能力からの防御および救済である、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
決定工程において、該評価項目の増大が、超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害する、Ｔｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を拮抗する、毒素性ショックおよび無能力から防御する、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発する該候補物質の能力を示す、請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
哺乳類被験体における超抗原関連疾患の治療のための治療用組成物の製造方法であって、
ａ．請求項４９に記載のスクリーニング方法により、Ｔｈ１リンパ球の超抗原媒介性活性化を拮抗し、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発し得るアンタゴニスト物質を同定する工程、および
ｂ．該アンタゴニスト物質を少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤と混合する工程
を含んでなる、方法。
【請求項８６】
請求項８５に記載の方法による超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造におけるＣＤ２８分子またはその断片の使用。
【請求項１】
超抗原と特異的にかつ直接結合するＣＤ２８分子内の超抗原結合部位。
【請求項２】
抗ＣＤ２８モノクローナル抗体と結合するＣＤ２８分子内にあるエピトープと少なくとも一部が重複する、請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項３】
該抗ＣＤ２８モノクローナル抗体がＭＡＢ３４２と呼ばれるマウス抗ＣＤ２８モノクローナル抗体（R & D Systems, Inc., Minneapolis, Minnesota, USAのクローン ３７４０７．１１１）である、請求項２に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項４】
該エピトープが配列番号３で示されるアミノ酸配列またはその断片を含んでなる、請求項３に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項５】
配列番号３で示されるアミノ酸配列またはその断片を含んでなる、請求項３に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項６】
該部位での該ＣＤ２８分子と超抗原との直接結合がＢ７−２リガンドとＣＤ２８との結合を促進し、かつ、ＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γ遺伝子発現の誘導により定義されているＴｈ１リンパ球の活性化に必要不可欠である、請求項５に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項７】
該部位での該ＣＤ２８分子と超抗原との直接結合がＢ７−２リガンドとＣＤ２８との結合を促進し、かつ、Ｂ７−２リガンドとＣＤ２８との該結合がＩＬ−４および／またはＩＬ−１０の誘導により定義されているＴｈ２リンパ球の活性化に必要不可欠ではない、請求項６に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項８】
発熱性外毒素の空間的に保存されているドメイン（このドメインはＭＨＣクラスII分子およびＴＣＲのいずれとの結合にも関係していない）と特異的にかつ直接結合する、請求項７に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項９】
該発熱性外毒素の空間的に保存されている該ドメインがその中にＳＥＢのドメイン番号に基づき、β鎖７内から始まり、β鎖７を、短いβ鎖８を介して、α−ヘリックス４へと連結し、α−ヘリックス４内で終わる中央ターンを形成する、請求項８に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項１０】
超抗原関連疾患の治療を必要とする哺乳類被験体における超抗原関連疾患の治療のための方法であって、ＣＤ２８分子と該超抗原との相互作用を阻害する工程を含んでなる、方法。
【請求項１１】
ＣＤ２８分子と該超抗原との直接結合を阻害する該工程が該被験体に、ＣＤ２８分子と該超抗原との直接相互作用を阻害する物質または該物質を含んでなり、所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい組成物の治療上有効な量を投与することを含んでなる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
該相互作用が該超抗原と請求項１〜９のいずれか一項に記載のＣＤ２８超抗原結合部位との結合である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
該超抗原が発熱性外毒素である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害することにより、Ｔｈ１リンパ球の外毒素媒介性活性化の阻害、毒素性ショックに対する防御、および、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫の誘発をもたらす、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
該発熱性外毒素が細菌外毒素である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
該外毒素が黄色ブドウ球菌および化膿連鎖球菌のいずれか１つにより産生される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
該超抗原関連疾患がある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショック、無能力および死のいずれか１つである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
このような治療を必要とする被験体においてＴｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を阻害し、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する方法であって、該被験体に、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害する物質または該物質を含んでなり、所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい組成物の治療上有効な量を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１９】
このような治療を必要とする被験体においてある発熱性外毒素により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発する方法であって、該被験体に、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害する物質または該物質を含んでなり、所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい組成物の治療上有効な量を投与することを含んでなる、方法。
【請求項２０】
超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害する物質。
【請求項２１】
該超抗原が発熱性外毒素である、請求項２０に記載の物質。
【請求項２２】
該発熱性外毒素と該ＣＤ２８超抗原結合部位との結合を阻害することにより、Ｔｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗、および、所望により、該発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫の誘発をもたらす、請求項２１に記載の物質。
【請求項２３】
該結合が請求項１〜９のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位を介する、請求項２２に記載の物質。
【請求項２４】
超抗原関連疾患の治療に用いる、請求項２３に記載の物質。
【請求項２５】
超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造における、請求項２４に記載の物質の使用。
【請求項２６】
超抗原関連疾患の治療および／または予防のための医薬組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害し、それによりＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす請求項２４に記載の物質の治療上有効な量を含んでなる、医薬組成物。
【請求項２７】
所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を有する、単離および精製されたペプチド。
【請求項２９】
抗ＣＤ２８モノクローナル抗体により認識されるＣＤ２８分子内にあるエピトープを含んでなるアミノ酸配列を有する、請求項２８に記載のペプチド。
【請求項３０】
該抗ＣＤ２８モノクローナル抗体がＭＡＢ３４２と呼ばれるマウス抗ＣＤ２８モノクローナル抗体（R & D Systems, Inc., Minneapolis, Minnesota, USAのクローン ３７４０７．１１１）である、請求項２９に記載のペプチド。
【請求項３１】
配列番号３および５のいずれか１つで示されるアミノ酸配列またはその機能的断片および誘導体を含んでなる、請求項３０に記載のペプチド。
【請求項３２】
ｐＴＡと呼ばれ、かつ、配列番号５で示されるアミノ酸配列またはその機能的断片および誘導体を有する、請求項３１に記載のペプチド。
【請求項３３】
ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害する、請求項３２に記載のペプチド。
【請求項３４】
Ｔリンパ球の毒素媒介性活性化のアンタゴニストであり、かつ、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する、請求項３３に記載のペプチド。
【請求項３５】
超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との直接相互作用を阻害する組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を有する単離および精製されたペプチドを、該相互作用を阻害するのに有効な量で含んでなる、組成物。
【請求項３６】
Ｔリンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を阻害し、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を有する単離および精製されたペプチドを、ＩＬ−２、ＩＮＦ−γおよび／またはＴＮＦ−β遺伝子によりコードされるＲＮＡの外毒素誘導性発現を阻害するのに有効な量で含んでなる、組成物。
【請求項３７】
単離および精製された該ペプチドが配列番号３、配列番号４および配列番号５のいずれか１つまたはその組合せからなる群から選択されるアミノ酸配列を有し、また、所望により、医薬上許容される担体、希釈剤、アジュバントおよび／または賦形剤さらに含んでなってもよい、請求項３５および３６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３８】
該ペプチドがｐＴＡと呼ばれ、かつ、配列番号５で示されるアミノ酸配列および／またはその機能的断片および誘導体を有する、請求項３７記載の組成物。
【請求項３９】
哺乳類被験体における超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物であって、請求項２８〜３４のいずれか一項に記載の単離および精製されたペプチドを含んでなる、医薬組成物。
【請求項４０】
このような治療を必要とする患者においてＴリンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を阻害し、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する方法であって、該患者に、請求項２８〜３４のいずれか一項に記載のＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を有する単離および精製されたペプチドまたはそれを含んでなる組成物の阻害に有効な量を投与することを含んでなる、方法。
【請求項４１】
該ペプチドが配列番号３、配列番号４および配列番号５のいずれか１つで示されるアミノ酸配列を有するペプチドから選択される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
超抗原関連疾患を予防および／または治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、請求項２８〜３４のいずれか一項に記載のＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を有する少なくとも１つの単離および精製されたペプチドまたはそれを含んでなる組成物の治療上有効な量を投与する工程を含んでなる、方法。
【請求項４３】
該ペプチドがｐＴＡと呼ばれ、かつ、配列番号５で示されるアミノ酸配列ならびにその機能的断片および誘導体を有する、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
請求項３５および３６のいずれか一項に記載の組成物の製造における、請求項２８〜３４のいずれか一項に記載のペプチドの使用。
【請求項４５】
請求項３９に記載の組成物の製造における、請求項２８〜３４のいずれか一項に記載のペプチドの使用。
【請求項４６】
ＣＤ２８分子と特異的に結合し、Ｔｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を拮抗し、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発し得る試験物質に関してスクリーニングする方法であって、
ａ．ＣＤ２８分子と結合する候補アンタゴニスト物質を得る工程、
ｂ．工程（ａ）で得られたＣＤ２８結合物質からＣＤ２８分子と該超抗原との直接相互作用を阻害する物質を選択する工程、および
ｃ．工程（ｂ）で得られた物質のＴｈ１リンパ球の超抗原媒介性活性化に対する拮抗効果を決定する工程
を含んでなる、方法。
【請求項４７】
該候補アンタゴニスト物質が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片を含む混合物を準備する工程、
ｂ．該混合物を該結合に好適な条件下にて該試験物質と接触させる工程、および
ｃ．評価項目指標に対する試験物質の効果を判定する工程（ここで、該評価項目についての変化がＣＤ２８分子と該試験物質とが結合していることを示す）
により得られる、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
評価項目指標が視覚的に検出可能なシグナルをもたらす抗ＣＤ２８抗体とＣＤ２８分子との結合である、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
請求項１〜９のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位を介してＣＤ２８分子と特異的に結合し、それによりＣＤ２８分子と該超抗原との相互作用を阻止する該候補アンタゴニスト物質の、所望により、請求項５５に記載の方法により得てもよいＣＤ２８が結合する物質からの選択が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片を含む混合物を準備する工程、
ｂ．該混合物を、ＣＤ２８内の超抗原結合部位を介するＣＤ２８分子との特異的相互作用に好適な条件下にて該試験物質と接触させる工程、および
ｃ．評価項目指標に対する試験物質の効果を判定する工程（ここで、該評価項目についての変化が該超抗原結合部位を介してＣＤ２８分子と試験物質とが結合していることを示す）
により行われる、請求項４６に記載のスクリーニング方法。
【請求項５０】
該混合物が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片、
ｂ．ＣＤ２８分子と請求項１〜９のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位にて特異的に結合する相互作用分子、および
ｃ．所望により、該相互作用分子とＣＤ２８分子との相互作用に、および該相互作用分子とＣＤ２８分子との相互作用に関する評価項目指標の検出に好適な条件を提供する溶液、バッファーおよび化合物
を含んでなる、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
ＣＤ２８の該断片が配列番号３で示されるアミノ酸配列を含んでなるＣＤ２８分子内の超抗原結合部位である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
該相互作用分子が抗ＣＤ２８モノクローナル抗体、配列番号１で示されるアンタゴニストペプチドｐ１２ 、配列番号２で示されるアンタゴニストペプチドｐ１４および発熱性外毒素またはその機能的断片のいずれか１つである、請求項５０に記載の方法。
【請求項５３】
評価項目指標が視覚的に検出可能なシグナルをもたらす該相互作用分子とＣＤ２８分子との結合である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
該評価項目における阻害が該試験物質と請求項１〜９のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位とが直接結合していることを示し、その結合が相互作用分子と該部位との結合と競合する、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
該混合物が細胞混合物または細胞フリー混合物である、請求項４７に記載の方法。
【請求項５６】
混合物が細胞フリー混合物である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
該ＣＤ２８分子またはその断片が精製された組換えタンパク質、および該ＣＤ２８分子を発現する形質転換宿主細胞の細胞溶解物または膜調製物のいずれか１つとして提供される、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
該混合物が細胞混合物である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５９】
該細胞混合物がトランスフェクト細胞培養物である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
該トランスフェクト細胞がＣＤ２８分子またはその断片をコードする核酸配列を含んでなる発現ベクターでトランスフェクトされたＢＨＫ−２１細胞である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
該トランスフェクト細胞がＣＤ２８分子と超抗原との相互作用に必要不可欠である内生的または外生的に発現される分子をさらに含む、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
該候補物質がタンパク質系物質、炭水化物系物質、脂質系物質、天然有機物系物質、合成有機物系物質、無機物系物質、およびペプチドミメティックス系物質からなる群から選択される、請求項４６に記載の方法。
【請求項６３】
該物質がペプチドのコンビナトリアルライブラリー、環状ペプチドミメティックのライブラリー、およびランダムまたは特定ファージディスプレイライブラリーののポジショナルスキャニングのいずれかの産物である、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
該候補アンタゴニスト物質がＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化を拮抗する該物質の能力、および、所望により、ある発熱性外毒素またはこのような発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発するその能力を決定する方法により評価され、その評価方法が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片を含んでなる試験系を準備する工程、
ｂ．該系を相互作用に好適な条件下で請求項４６〜５３のいずれか一項に記載の方法により準備、選択された候補アンタゴニストと接触させる工程、および
ｃ．評価項目指標に対する該候補アンタゴニストの効果を対照との比較により決定する工程（ここで、該効果はＣＤ２８分子と発熱性外毒素との直接相互作用を阻害し、それによってＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす該候補の可能性を示す）
を含んでなる、請求項４６に記載のスクリーニング方法。
【請求項６５】
該試験系が細胞フリー混合物、in-vitro／ex-vivo細胞培養物、およびin-vivo動物モデルのいずれか１つである、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
該試験系が、所望により、Ｔ細胞の超抗原誘導性活性化に、および候補アンタゴニストの拮抗効果を決定する評価項目指標の検出に好適な条件を提供する内生および／または外生化合物をさらに含んでなってよい、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
該Ｔ細胞がＴｈ１リンパ球であり、かつ、該活性化がＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γ遺伝子発現の誘導により決定される、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
該試験系が可溶性ＣＤ２８分子（ｓＣＤ２８）および可溶性Ｂ７−２分子（ｓＢ７−２）を含んでなる細胞フリー系である、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
評価項目指標が好適な手段により検出されるｓＣＤ２８分子とｓＢ７−２分子との結合である、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
検出工程において、該候補アンタゴニストの存在下でのＣＤ２８分子とｓＢ７−２との相互作用の増大が、超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害する該候補の可能性を示す、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
該試験系が内生的に発現されるＣＤ２８分子を含んでなるin-vitro／ex-vivo細胞培養物である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７２】
該細胞培養物が哺乳類供与体から単離されたＰＢＭＣ培養物である、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
評価項目指標が視覚的に検出可能なシグナルをもたらすＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γの超抗原誘導性発現である、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
該評価項目の阻害が、該超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害し、その阻害によってＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす該候補の可能性を示す、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
該in-vivo試験系が動物モデルである、請求項６７に記載の方法。
【請求項７６】
該動物モデルが超抗原を投与したＤ−ガラクトサミン感作マウスである、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
評価項目指標が該マウスの致死毒素性ショックからの防御および救済である、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
決定工程において、該評価項目の増大が、超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害する、Ｔｈ１リンパ球の発熱性毒素媒介性活性化を拮抗する、毒素性ショックから防御する、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発する該候補物質の能力を示す、請求項７７に記載の方法。
【請求項７９】
該動物モデルが発熱性外毒素を抗原投与したブタである、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
評価項目指標が該ブタの毒素性ショックおよび無能力からの防御および救済である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
決定工程において、該評価項目の増大が、超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害する、Ｔｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を拮抗する、毒素性ショックおよび無能力から防御する、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発する該候補物質の能力を示す、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
哺乳類被験体における超抗原関連疾患の治療のための治療用組成物の製造方法であって、
ａ．Ｔｈ１リンパ球の超抗原媒介性活性化を拮抗し、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発し得るアンタゴニスト物質を同定する工程、および
ｂ．該アンタゴニスト物質を少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤と混合する工程
を含んでなる、方法。
【請求項８３】
該アンタゴニスト物質が請求項４６に記載のスクリーニング方法により同定される、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
請求項８３に記載の方法による超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造におけるＣＤ２８分子またはその断片の使用。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
超抗原と特異的にかつ直接結合するＣＤ２８分子内の超抗原結合部位であって、該部位はＣＤ２８分子内にあるエピトープと少なくとも一部が重複し、該エピトープは配列番号３で示されるアミノ酸配列またはその断片を含んでなる超抗原結合部位。
【請求項２】
配列番号３で示されるアミノ酸配列またはその断片の全部または一部を含んでなる、請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項３】
該部位での該ＣＤ２８分子と超抗原との直接結合がＢ７−２リガンドとＣＤ２８との結合を促進し、かつ、ＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γ遺伝子発現の誘導により定義されているＴｈ１リンパ球の活性化に必要不可欠である、請求項２に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項４】
該部位での該ＣＤ２８分子と超抗原との直接結合がＢ７−２リガンドとＣＤ２８との結合を促進し、かつ、Ｂ７−２リガンドとＣＤ２８との該結合がＩＬ−４および／またはＩＬ−１０の誘導により定義されているＴｈ２リンパ球の活性化に必要不可欠ではない、請求項３に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項５】
発熱性外毒素の空間的に保存されているドメイン（このドメインはＭＨＣクラスII分子およびＴＣＲのいずれとの結合にも関係していない）と特異的にかつ直接結合する、請求項４に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項６】
該発熱性外毒素の空間的に保存されている該ドメインがその中にＳＥＢのドメイン番号に基づき、β鎖７内から始まり、β鎖７を、短いβ鎖８を介して、α−ヘリックス４へと連結し、α−ヘリックス４内で終わる中央ターンを形成する、請求項５に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位。
【請求項７】
超抗原関連疾患の治療を必要とする哺乳類被験体における超抗原関連疾患の治療のための方法であって、ＣＤ２８分子と該超抗原との相互作用を阻害する工程を含んでなり、該相互作用が該超抗原結合部位と請求項１〜６のいずれか一項に記載のＣＤ２８超抗原結合部位との結合である、方法。
【請求項８】
ＣＤ２８分子と該超抗原との直接結合を阻害する該工程が該被験体に、ＣＤ２８分子と該超抗原との直接相互作用を阻害する物質または該物質を含んでなり（該物質は小分子、酵素、炭水化物系分子、脂質系分子、天然有機物系分子、合成有機物系分子もしくは無機物系分子、請求項１〜６のいずれか一項に記載の超抗原結合部位を含んでなるＣＤ２８分子もしくはその断片、抗ＣＤ２８抗体、可溶性Ｂ７−２分子および抗Ｂ７−２分子抗体からなる群から選択される）、所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい組成物の治療上有効な量を投与することを含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
該超抗原が発熱性外毒素である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害することにより、Ｔｈ１リンパ球の外毒素媒介性活性化の阻害、毒素性ショックに対する防御、および、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫の誘発をもたらす、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
該発熱性外毒素が細菌外毒素である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
該外毒素が黄色ブドウ球菌および化膿連鎖球菌のいずれか１つにより産生される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
該超抗原関連疾患がある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショック、無能力および死のいずれか１つである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
このような治療を必要とする被験体においてＴｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を阻害し、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する方法であって、該被験体に、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害する物質または該物質を含んでなり（該物質は小分子、酵素、炭水化物系分子、脂質系分子、天然有機物系分子、合成有機物系分子もしくは無機物系分子、請求項１〜６のいずれか一項に記載の超抗原結合部位を含んでなるＣＤ２８分子もしくはその断片、抗ＣＤ２８抗体、可溶性Ｂ７−２分子および抗Ｂ７−２分子抗体からなる群から選択される）、所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい組成物の治療上有効な量を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１５】
このような治療を必要とする被験体においてある発熱性外毒素により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発する方法であって、該被験体に、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害する物質または該物質を含んでなり（該物質は小分子、酵素、炭水化物系分子、脂質系分子、天然有機物系分子、合成有機物系分子もしくは無機物系分子、請求項１〜６のいずれか一項に記載の超抗原結合部位を含んでなるＣＤ２８分子もしくはその断片、抗ＣＤ２８抗体、可溶性Ｂ７−２分子および抗Ｂ７−２分子抗体からなる群から選択される）、所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい組成物の治療上有効な量を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１６】
該物質が請求項１〜６のいずれか一項に記載の超抗原結合部位を含んでなるＣＤ２８分子またはその断片である、請求項８、１４および１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
該物質が請求項１〜６のいずれか一項に記載の超抗原結合部位を特異的に認識する抗ＣＤ２８抗体である、請求項８、１４および１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
該物質が可溶性Ｂ７−２分子抗体である、請求項８、１４および１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
該物質が抗Ｂ７−２分子抗体である、請求項８、１４および１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、小分子、酵素、炭水化物系分子、脂質系分子、天然有機物系分子、合成有機物系分子および無機物系分子からなる群から選択される、物質。
【請求項２１】
超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、抗ＣＤ２８抗体および抗Ｂ７−２分子抗体のいずれか１つである、物質。
【請求項２２】
該超抗原が発熱性外毒素である、請求項２０および２１のいずれか一項に記載の物質。
【請求項２３】
該発熱性外毒素と該ＣＤ２８超抗原結合部位との結合を阻害することにより、Ｔｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗、および、所望により、該発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫の誘発をもたらす、請求項２２に記載の物質。
【請求項２４】
該結合が請求項１〜６のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位を介する、請求項２３に記載の物質。
【請求項２５】
超抗原関連疾患の治療に用いる、請求項２４に記載の物質。
【請求項２６】
超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造における、超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、小分子、酵素、炭水化物系分子、脂質系分子、天然有機物系分子、合成有機物系分子および無機物系分子からなる群から選択される物質の使用。
【請求項２７】
超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造における、超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、請求項１〜６のいずれか一項に記載の超抗原結合部位を含んでなるＣＤ２８分子もしくはその断片である物質の使用。
【請求項２８】
超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造における、超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、抗ＣＤ２８分子抗体である物質の使用。
【請求項２９】
超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造における、超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、可溶性Ｂ７−２分子である物質の使用。
【請求項３０】
超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造における、超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との結合を阻害し、抗Ｂ７−２分子抗体である物質の使用。
【請求項３１】
超抗原関連疾患の治療および／または予防のための医薬組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害し、それによりＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす物質（該物質は請求項２０に記載の通りである）の治療上有効な量を含んでなる、医薬組成物。
【請求項３２】
超抗原関連疾患の治療および／または予防のための医薬組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害し、それによりＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす（該物質は請求項２１に記載の通りである）の治療上有効な量を含んでなる、医薬組成物。
【請求項３３】
所望により、少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤をさらに含んでなってもよい、請求項３１および３２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３４】
ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列またはその断片を含んでなる、単離および精製されたペプチド（該結合部位は請求項１に記載の通りである）。
【請求項３５】
配列番号３、配列番号４および配列番号５のいずれか１つで示されるアミノ酸配列またはその機能的断片および誘導体を含んでなる、請求項３４に記載のペプチド。
【請求項３６】
ｐＴＡと呼ばれ、かつ、配列番号５で示されるアミノ酸配列またはその機能的断片および誘導体を有する、請求項３５に記載のペプチド。
【請求項３７】
ＣＤ２８分子と該発熱性外毒素との直接相互作用を阻害する、請求項３６に記載のペプチド。
【請求項３８】
Ｔリンパ球の毒素媒介性活性化のアンタゴニストであり、かつ、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する、請求項３７に記載のペプチド。
【請求項３９】
超抗原と請求項１に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位との直接相互作用を阻害する組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列またはその断片を含んでなる単離および精製されたペプチドを、該相互作用を阻害するのに有効な量で含んでなる、組成物（該結合部位は請求項１に記載の通りである）。
【請求項４０】
Ｔリンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を阻害し、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する組成物であって、有効成分として、ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列またはその断片を含んでなる単離および精製されたペプチドを、ＩＬ−２、ＩＮＦ−γおよび／またはＴＮＦ−β遺伝子によりコードされるＲＮＡの外毒素誘導性発現を阻害するのに有効な量で含んでなる、組成物（該結合部位は請求項１に記載の通りである）。
【請求項４１】
単離および精製された該ペプチドが配列番号３、配列番号４および配列番号５のいずれか１つまたはその組合せからなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなり、また、所望により、医薬上許容される担体、希釈剤、アジュバントおよび／または賦形剤さらに含んでなってもよい、請求項３９および４０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４２】
該ペプチドがｐＴＡと呼ばれ、かつ、配列番号５で示されるアミノ酸配列および／またはその機能的断片および誘導体を有する、請求項４１記載の組成物。
【請求項４３】
哺乳類被験体における超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物であって、請求項３４〜３８のいずれか一項に記載の単離および精製されたペプチドを含んでなる、医薬組成物。
【請求項４４】
このような治療を必要とする患者においてＴリンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を阻害し、ある発熱性外毒素または発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックから防御する方法であって、該患者に、ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列またはその断片を含んでなる単離および精製されたペプチドまたはそれを含んでなる組成物の阻害に有効な量を投与することを含んでなり、該結合部位は請求項１に記載の通りであり、ペプチドは請求項３４〜３８のいずれか一項に記載の通りである、方法。
【請求項４５】
該ペプチドが配列番号３、配列番号４および配列番号５のいずれか１つで示されるアミノ酸配列を有するペプチドから選択される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
超抗原関連疾患を予防および／または治療する方法であって、このような治療を必要とする患者に、ＣＤ２８分子内の超抗原結合部位内に含まれるアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列またはその断片を含んでなる少なくとも１つの単離および精製されたペプチドまたはそれを含んでなる組成物の治療上有効な量を投与する工程を含んでなり、該結合部位は請求項１に記載の通りであり、ペプチドは請求項３４〜３８のいずれか一項に記載の通りである、方法。
【請求項４７】
該ペプチドがｐＴＡと呼ばれ、かつ、配列番号５で示されるアミノ酸配列ならびにその機能的断片および誘導体を有する、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
請求項３９、４０および４３のいずれか一項に記載の組成物の製造における、請求項３４〜３８のいずれか一項に記載のペプチドの使用。
【請求項４９】
ＣＤ２８分子と特異的に結合し、Ｔｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を拮抗し、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発し得る試験物質に関してスクリーニングする方法であって、
ａ．ＣＤ２８分子と結合する候補アンタゴニスト物質を得る工程、
ｂ．工程（ａ）で得られたＣＤ２８結合物質からＣＤ２８分子と該超抗原との直接相互作用を阻害する物質を選択する工程、および
ｃ．工程（ｂ）で得られた物質のＴｈ１リンパ球の超抗原媒介性活性化に対する拮抗効果を決定する工程
を含んでなる、方法。
【請求項５０】
該候補アンタゴニスト物質が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片を含む混合物を準備する工程、
ｂ．該混合物を該結合に好適な条件下にて該試験物質と接触させる工程、および
ｃ．評価項目指標に対する試験物質の効果を判定する工程（ここで、該評価項目についての変化がＣＤ２８分子と該試験物質とが結合していることを示す）
により得られる、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
評価項目指標が視覚的に検出可能なシグナルをもたらす抗ＣＤ２８抗体とＣＤ２８分子との結合である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位を介してＣＤ２８分子と特異的に結合し、それによりＣＤ２８分子と該超抗原との相互作用を阻止する該候補アンタゴニスト物質の、所望により、請求項５０に記載の方法により得てもよいＣＤ２８が結合する物質からの選択が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片を含む混合物を準備する工程、
ｂ．該混合物を、ＣＤ２８内の超抗原結合部位を介するＣＤ２８分子との特異的相互作用に好適な条件下にて該試験物質と接触させる工程、および
ｃ．評価項目指標に対する試験物質の効果を判定する工程（ここで、該評価項目についての変化が該超抗原結合部位を介してＣＤ２８分子と試験物質とが結合していることを示す）
により行われる、請求項４９に記載のスクリーニング方法。
【請求項５３】
該混合物が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片、
ｂ．ＣＤ２８分子と請求項１〜６のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位にて特異的に結合する相互作用分子、および
ｃ．所望により、該相互作用分子とＣＤ２８分子との相互作用に、および該相互作用分子とＣＤ２８分子との相互作用に関する評価項目指標の検出に好適な条件を提供する溶液、バッファーおよび化合物
を含んでなる、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
ＣＤ２８の該断片が配列番号３で示されるアミノ酸配列を含んでなるＣＤ２８分子内の超抗原結合部位である、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
該相互作用分子が抗ＣＤ２８モノクローナル抗体、配列番号１で示されるアンタゴニストペプチドｐ１２ 、配列番号２で示されるアンタゴニストペプチドｐ１４および発熱性外毒素またはその機能的断片のいずれか１つである、請求項５３に記載の方法。
【請求項５６】
評価項目指標が視覚的に検出可能なシグナルをもたらす該相互作用分子とＣＤ２８分子との結合である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
該評価項目における阻害が該試験物質と請求項１〜６のいずれか一項に記載のＣＤ２８内の超抗原結合部位とが直接結合していることを示し、その結合が相互作用分子と該部位との結合と競合する、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
該混合物が細胞混合物または細胞フリー混合物である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５９】
混合物が細胞フリー混合物である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
該ＣＤ２８分子またはその断片が精製された組換えタンパク質、および該ＣＤ２８分子を発現する形質転換宿主細胞の細胞溶解物または膜調製物のいずれか１つとして提供される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
該混合物が細胞混合物である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６２】
該細胞混合物がトランスフェクト細胞培養物である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
該トランスフェクト細胞がＣＤ２８分子またはその断片をコードする核酸配列を含んでなる発現ベクターでトランスフェクトされたＢＨＫ−２１細胞である、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
該トランスフェクト細胞がＣＤ２８分子と超抗原との相互作用に必要不可欠である内生的または外生的に発現される分子をさらに含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
該候補物質がタンパク質系物質、炭水化物系物質、脂質系物質、天然有機物系物質、合成有機物系物質、無機物系物質、およびペプチドミメティックス系物質からなる群から選択される、請求項４９に記載の方法。
【請求項６６】
該物質がペプチドのコンビナトリアルライブラリー、環状ペプチドミメティックのライブラリー、およびランダムまたは特定ファージディスプレイライブラリーののポジショナルスキャニングのいずれかの産物である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
該候補アンタゴニスト物質がＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化を拮抗する該物質の能力、および、所望により、ある発熱性外毒素またはこのような発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発するその能力を決定する方法により評価され、その評価方法が
ａ．ＣＤ２８分子またはその断片を含んでなる試験系を準備する工程、
ｂ．該系を相互作用に好適な条件下で請求項４９〜５７のいずれか一項に記載の方法により準備、選択された候補アンタゴニストと接触させる工程、および
ｃ．評価項目指標に対する該候補アンタゴニストの効果を対照との比較により決定する工程（ここで、該効果はＣＤ２８分子と発熱性外毒素との直接相互作用を阻害し、それによってＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす該候補の可能性を示す）
を含んでなる、請求項４９に記載のスクリーニング方法。
【請求項６８】
該試験系が細胞フリー混合物、in-vitro／ex-vivo細胞培養物、およびin-vivo動物モデルのいずれか１つである、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
該試験系が、所望により、Ｔ細胞の超抗原誘導性活性化に、および候補アンタゴニストの拮抗効果を決定する評価項目指標の検出に好適な条件を提供する内生および／または外生化合物をさらに含んでなってよい、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
該Ｔ細胞がＴｈ１リンパ球であり、かつ、該活性化がＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γ遺伝子発現の誘導により決定される、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
該試験系が可溶性ＣＤ２８分子（ｓＣＤ２８）および可溶性Ｂ７−２分子（ｓＢ７−２）を含んでなる細胞フリー系である、請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
評価項目指標が好適な手段により検出されるｓＣＤ２８分子とｓＢ７−２分子との結合である、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
検出工程において、該候補アンタゴニストの存在下でのＣＤ２８分子とｓＢ７−２との相互作用の増大が、超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害する該候補の可能性を示す、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
該試験系が内生的に発現されるＣＤ２８分子を含んでなるin-vitro／ex-vivo細胞培養物である、請求項７０に記載の方法。
【請求項７５】
該細胞培養物が哺乳類供与体から単離されたＰＢＭＣ培養物である、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
評価項目指標が視覚的に検出可能なシグナルをもたらすＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γの超抗原誘導性発現である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
該評価項目の阻害が、該超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害し、その阻害によってＴｈ１リンパ球の毒素媒介性活性化の拮抗をもたらす該候補の可能性を示す、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
該in-vivo試験系が動物モデルである、請求項７０に記載の方法。
【請求項７９】
該動物モデルが超抗原を投与したＤ−ガラクトサミン感作マウスである、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
評価項目指標が該マウスの致死毒素性ショックからの防御および救済である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
決定工程において、該評価項目の増大が、超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害する、Ｔｈ１リンパ球の発熱性毒素媒介性活性化を拮抗する、毒素性ショックから防御する、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発する該候補物質の能力を示す、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
該動物モデルが発熱性外毒素を抗原投与したブタである、請求項７８に記載の方法。
【請求項８３】
評価項目指標が該ブタの毒素性ショックおよび無能力からの防御および救済である、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
決定工程において、該評価項目の増大が、超抗原とＣＤ２８分子との相互作用を特異的に拮抗し、阻害する、Ｔｈ１リンパ球の発熱性外毒素媒介性活性化を拮抗する、毒素性ショックおよび無能力から防御する、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発する該候補物質の能力を示す、請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
哺乳類被験体における超抗原関連疾患の治療のための治療用組成物の製造方法であって、
ａ．請求項４９に記載のスクリーニング方法により、Ｔｈ１リンパ球の超抗原媒介性活性化を拮抗し、また、所望により、ある発熱性外毒素または少なくとも２種の発熱性外毒素の混合物により誘導される毒素性ショックに対する防御免疫を誘発し得るアンタゴニスト物質を同定する工程、および
ｂ．該アンタゴニスト物質を少なくとも１つの医薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または添加剤と混合する工程
を含んでなる、方法。
【請求項８６】
請求項８５に記載の方法による超抗原関連疾患の治療のための医薬組成物の製造におけるＣＤ２８分子またはその断片の使用。
【図７】
【図８Ａ】
【図８Ｂ】
【図８Ｃ】
【図８Ｄ】
【図８Ｅ】
【図８Ｆ】
【図９Ａ】
【図９Ｂ】
【図１０Ａ】
【図１０Ｂ】
【図１１Ａ】
【図１１Ｂ】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７Ａ】
【図１７Ｂ】
【図１７Ｃ】
【図１７Ｄ】
【図１７Ｅ】
【図１８Ａ】
【図１８Ｂ】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図８Ａ】
【図８Ｂ】
【図８Ｃ】
【図８Ｄ】
【図８Ｅ】
【図８Ｆ】
【図９Ａ】
【図９Ｂ】
【図１０Ａ】
【図１０Ｂ】
【図１１Ａ】
【図１１Ｂ】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７Ａ】
【図１７Ｂ】
【図１７Ｃ】
【図１７Ｄ】
【図１７Ｅ】
【図１８Ａ】
【図１８Ｂ】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【公表番号】特表２００６−５０５５００（Ｐ２００６−５０５５００Ａ）
【公表日】平成１８年２月１６日（２００６．２．１６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００３−５８２１８９（Ｐ２００３−５８２１８９）
【出願日】平成１５年４月３日（２００３．４．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＬ２００３／０００２７８
【国際公開番号】ＷＯ２００３／０８４９９５
【国際公開日】平成１５年１０月１６日（２００３．１０．１６）
【出願人】（５０１４７９７２１）イースム、リサーチ、デベロプメント、カンパニー、オブ、ザ、ヘブライ、ユニバーシティー、オブ、イエルサレム (5)
【氏名又は名称原語表記】ＹＩＳＳＵＭ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴ ＣＯＭＰＡＮＹ ＯＦ ＴＨＥ ＨＥＢＲＥＷ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ＯＦ ＪＥＲＵＳＡＬＥＭ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年２月１６日（２００６．２．１６）
【国際特許分類】
【出願日】平成１５年４月３日（２００３．４．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＬ２００３／０００２７８
【国際公開番号】ＷＯ２００３／０８４９９５
【国際公開日】平成１５年１０月１６日（２００３．１０．１６）
【出願人】（５０１４７９７２１）イースム、リサーチ、デベロプメント、カンパニー、オブ、ザ、ヘブライ、ユニバーシティー、オブ、イエルサレム (5)
【氏名又は名称原語表記】ＹＩＳＳＵＭ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴ ＣＯＭＰＡＮＹ ＯＦ ＴＨＥ ＨＥＢＲＥＷ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ＯＦ ＪＥＲＵＳＡＬＥＭ
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]