本発明は、ＥｒｂＢ３受容体の細胞外ドメインに結合し、かつ種々のＥｒｂＢ３機能を阻害する新しいクラスの抗体およびその抗原結合断片を提供する。例えば、本明細書に記載される抗体および抗原結合断片は、ＥｒｂＢ３と名付けられた受容体と結合して、該受容体のＥＧＦ様リガンドを介したリン酸化を阻害することができる。このような抗体およびその抗原結合断片は、ＥｒｂＢ３を発現する癌細胞の増殖を阻害する有用な特性を有する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＥｒｂＢ３の外部ドメインのドメインＩと結合しかつ
重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の配列を含む重鎖可変領域と；
軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の配列を含む軽鎖可変領域と
を含む、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、
該重鎖ＣＤＲ１配列が配列番号６０または７５を含み、
該重鎖ＣＤＲ２配列が配列番号６１を含み、
該重鎖ＣＤＲ３配列が配列番号６２を含み、
該軽鎖ＣＤＲ１配列が配列番号６６または７７を含み、
該軽鎖ＣＤＲ２配列が配列番号６７を含み、
該軽鎖ＣＤＲ３配列が配列番号６８または７９を含み、
ただし該抗体は、（ｉ）本明細書に開示されるＡｂ＃６ではなく；（ｉｉ）配列番号１および２にそれぞれ示されるＶ_Ｈ配列およびＶ_Ｌ配列を含む抗体ではなく；かつ（ｉｉｉ）配列番号７、８および９にそれぞれ示されるＶ_ＨＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列と、配列番号１０、１１および１２にそれぞれ示されるＶ_ＬＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列とを含む抗体ではない、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２】
配列番号７３の残基９２〜１０４を含むヒトＥｒｂＢ３のエピトープに結合し、かつＥｒｂＢ３を発現する癌細胞の増殖を阻害することによって特徴付けられる、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、ただし該抗体は、（ｉ）本明細書に開示されるＡｂ＃６ではなく；（ｉｉ）配列番号１および２にそれぞれ示されるＶ_Ｈ配列およびＶ_Ｌ配列を含む抗体ではなく；かつ（ｉｉｉ）配列番号７、８および９にそれぞれ示されるＶ_ＨＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列と、配列番号１０、１１および１２にそれぞれ示されるＶ_ＬＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列とを含む抗体ではない、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３】
配列番号７３の残基９２〜１０４を含むヒトＥｒｂＢ３のエピトープに結合し、かつＥｒｂＢ３を発現する癌細胞の増殖を阻害することによって特徴付けられる、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、ただし該抗体は、（ｉ）本明細書に開示されるＡｂ＃６ではなく；（ｉｉ）配列番号１および２にそれぞれ示されるＶ_Ｈ配列およびＶ_Ｌ配列を含む抗体ではなく；（ｉｉｉ）配列番号７、８および９にそれぞれ示されるＶ_ＨＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列と、配列番号１０、１１および１２にそれぞれ示されるＶ_ＬＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列とを含む抗体ではなく；（ｉｖ）本明細書に開示されるＡｂ＃３ではなく；（ｖ）配列番号３および４にそれぞれ示されるＶ_Ｈ配列およびＶ_Ｌ配列を含む抗体ではなく；（ｖｉ）配列番号１３、１４および１５にそれぞれ示されるＶ_ＨＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列と、配列番号１６、１７および１８にそれぞれ示されるＶ_ＬＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列とを含む抗体ではなく；（ｖｉｉ）本明細書に開示されるＡｂ＃１７ではなく；（ｖｉｉｉ）配列番号３５および３６にそれぞれ示されるＶ_Ｈ配列およびＶ_Ｌ配列を含む抗体ではなく；（ｉｘ）配列番号３９、４０および４１にそれぞれ示されるＶ_ＨＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列と、配列番号４２、４３および４４にそれぞれ示されるＶ_ＬＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列とを含む抗体ではなく；（ｘ）本明細書に開示されるＡｂ＃１９ではなく；（ｘｉ）配列番号３７および３８にそれぞれ示されるＶ_Ｈ配列およびＶ_Ｌ配列を含む抗体ではなく；かつ（ｘｉｉ）配列番号４５、４６および４７にそれぞれ示されるＶ_ＨＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列と、配列番号４８、４９および５０にそれぞれ示されるＶ_ＬＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列とを含む抗体ではない、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項４】
前記エピトープが配列番号７３の残基１２９をさらに含む、請求項２または３に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項５】
前記癌細胞がＭＡＬＭＥ−３Ｍ細胞、ＡｄｒＲ細胞、またはＡＣＨＮ細胞であり、前記増殖が対照と比べると少なくとも１０％減少する、請求項２または３または４に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項６】
配列番号７３の残基９３（アスパラギン）、残基１０１（メチオニン）、残基１０２（ロイシン）および残基１０４（チロシン）から選択されるヒトＥｒｂＢ３のアミノ酸残基のいずれか１つがアラニンで置換されて単一アミノ酸置換を有する変異体ＥｒｂＢ３を作製する場合に、配列番号７３のアミノ酸配列を含むヒトＥｒｂＢ３に対する前記抗体またはその抗原結合部分の結合と比較すると、該変異体ＥｒｂＢ３に対する該抗体またはその抗原結合部分の結合が実質的に減少する、請求項１または請求項２または請求項３または請求項４に記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項７】
結合の実質的な減少が結合のＫ_Ｄ値で少なくとも１０倍の変化である、請求項６に記載の抗体またはその抗原結合部分。
【請求項８】
ヒトＥｒｂＢ３の外部ドメインのドメインＩに結合しかつ
重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の配列を含む重鎖可変領域と；
軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の配列を含む軽鎖可変領域と
を含む、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分であって、
該重鎖ＣＤＲ１配列が配列番号６３または７６を含み、
該重鎖ＣＤＲ２配列が配列番号６４を含み、
該重鎖ＣＤＲ３配列が配列番号６５を含み、
該軽鎖ＣＤＲ１配列が配列番号６９または７８を含み、
該軽鎖ＣＤＲ２配列が配列番号７０を含み、
該軽鎖ＣＤＲ３配列が配列番号７１または８０を含み、
ただし該抗体は、（ｉ）本明細書に開示されるＡｂ＃６ではなく；（ｉｉ）配列番号１および２にそれぞれ示されるＶ_Ｈ配列およびＶ_Ｌ配列を含む抗体ではなく；かつ（ｉｉｉ）配列番号７、８および９にそれぞれ示されるＶ_ＨＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列と、配列番号１０、１１および１２にそれぞれ示されるＶ_ＬＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の配列とを含む抗体ではない、単離された抗体またはその抗原結合部分。
【請求項９】
ヒト抗体、ヒト化抗体、二重特異性抗体、またはキメラ抗体である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項１０】
ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体の一部である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗原結合部分。
【請求項１１】
Ｆａｂ、Ｆａｂ’２、ｓｃＦｖ、ＳＭＩＰ、アフィボディ、アビマー、ナノボディ、およびドメイン抗体からなる群から選択される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１２】
ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＡｓｅｃ、ＩｇＤ、およびＩｇＥからなる群から選択されるアイソタイプである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項１３】
薬学的に許容される担体中に請求項１〜１２のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合部分を含む、組成物。
【請求項１４】
被験体において癌を処置する方法であって、請求項１３に記載の組成物の治療有効量を該被験体に投与することを含む方法。
【請求項１５】
前記癌が、ＫＲＡＳ変異またはＰＩ３Ｋ変異のいずれかまたは両方を含む細胞を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記被験体がヒトであり、前記ＫＲＡＳ変異がヒトＫＲＡＳ遺伝子のコドン１２またはコドン１３の変異を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記被験体がヒトであり、前記ＰＩ３Ｋ変異がヒトＰＩＫ３ＣＡ遺伝子のエキソン９またはエキソン２０の変異を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
被験体において癌を処置する方法であって、請求項１〜１２のいずれか１項に記載のモノクローナル抗体またはその抗原結合部分である第１の剤の治療有効量と、該第１の剤以外の抗がん剤である第２の剤の治療有効量とを組み合わせて、該被験体に投与することを含む、方法。
【請求項１９】
前記第２の剤が抗体またはその抗原結合部分を含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記第２の剤が、タンパク質合成阻害剤、ソマトスタチン類似体、 免疫治療剤、および酵素阻害剤から選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記第２の剤が、ＩＧＦ１Ｒを標的とする小分子、ＥＧＦＲを標的とする小分子、ＥｒｂＢ２を標的とする小分子、ｃＭＥＴを標的とする小分子、代謝拮抗薬、アルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤、微小管標的剤、キナーゼ阻害剤、ホルモン療法、グルココルチコイド、アロマターゼ阻害薬、ｍＴＯＲ阻害剤、化学療法薬、プロテインキナーゼＢ阻害剤、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ阻害剤、サイクリン依存性キナーゼ阻害因子、およびＭＥＫ阻害剤から選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記第２の剤がパニツムマブ、トラスツズマブまたはセツキシマブである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記第２の剤がパクリタキセルである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記第２の剤がシスプラチンである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
前記第２の剤がエルロチニブまたはラパチニブである、請求項２１に記載の方法。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図２Ｃ】

【図２Ｄ】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図６Ｄ】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３Ａ】

【図１３Ｂ】

【図１３Ｃ】

【図１４Ａ】

【図１４Ｂ】

【図１５Ａ】

【図１５Ｂ】

【図１５Ｃ】

【図１６Ａ】

【図１６Ｂ】

【図１６Ｃ】

【図１６Ｄ】

【図１７Ａ】

【図１７Ｂ】

【図１７Ｃ】

【図１７Ｄ】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１Ａ】

【図２１Ｂ】

【図２１Ｃ】

【図２２Ａ】

【図２２Ｂ】

【図２３】

【図２４Ａ】

【図２４Ｂ】

【図２４Ｃ】

【図２５】

【図２６Ａ】

【図２６Ｂ】

【図２６Ｃ】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２Ａ】

【図３２Ｂ】

【図３２Ｃ】

【図３３】

【図３４Ａ】

【図３４Ｂ】

【図３４Ｃ】

【図３４Ｄ】

【図３４Ｅ】

【図３５】

【図３６】

【図３７Ａ】

【図３７Ｂ】

【図３８Ａ】

【図３８Ｂ】

【図３８Ｃ】

【図３８Ｄ】

【図３９】

【公表番号】特表２０１３−５０６６２２（Ｐ２０１３−５０６６２２Ａ）
【公表日】平成２５年２月２８日（２０１３．２．２８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５２５７５６（Ｐ２０１２−５２５７５６）
【出願日】平成２２年８月２３日（２０１０．８．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０４６３６４
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０２２７２７
【国際公開日】平成２３年２月２４日（２０１１．２．２４）
【出願人】（５０８０４４８２９）メリマック　ファーマシューティカルズ　インコーポレーティッド (8)
【Ｆターム（参考）】